WO2011034088A1 - 急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別方法および発症予測方法 - Google Patents

急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別方法および発症予測方法 Download PDF

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cerebral infarction
glycoalbumin
hemoglobin
ratio
onset
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昌史 吉田
正文 加計
正舒 川上
恵子 安川
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旭化成ファーマ株式会社
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    • G01N33/721—Haemoglobin
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    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2871—Cerebrovascular disorders, e.g. stroke, cerebral infarct, cerebral haemorrhage, transient ischemic event

Definitions

  • the present invention relates to a method for measuring glycoalbumin and hemoglobin A1c in a biological sample of a patient with acute cerebral infarction, and accurately, simply, rapidly and inexpensively distinguishing the type of acute cerebral infarction from the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio,
  • the present invention relates to a method for measuring the occurrence of atherothrombotic cerebral infarction accurately, simply, quickly and inexpensively by measuring glycoalbumin and hemoglobin A1c in a biological sample of a subject and determining the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c and / or its change with time.
  • the present invention relates to a device for identifying the type of atherothrombotic cerebral infarction in an acute stage cerebral infarction patient or predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction in a subject, and atherothrombotic cerebral infarction in an acute stage cerebral infarction patient
  • the present invention relates to a kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction or for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction in a subject.
  • Cerebral infarction is classified into four clinical types (NINDS “Classification of Cerebrovascular Disorders III”) in the acute phase, although it is classified clinically as atherothrombotic cerebral infarction, cardiogenic cerebral embolism, lacunar infarction. It is very important to identify these disease types as early as possible in cerebral infarction because the applicable drugs and treatment methods differ depending on the disease type (Non-patent Document 1). For example, among the acute cerebral infarctions, ozagrel, an anticoagulant drug that is indicated for atherothrombotic cerebral infarction, and argatroban, an antiplatelet drug, are contraindicated for cardiogenic cerebral infarction. Is important.
  • Non-Patent Document 2 in the diagnosis of atherothrombotic cerebral infarction, findings characteristic of atherothrombotic cerebral infarction (histologic risk factors, other atherosclerotic diseases, etc.) are obtained through medical history, examination, and imaging. It is important whether or not it is possible to obtain complications, TIA precedent, staged symptom progression after onset, cervical vascular noise, disturbance of consciousness, cortical symptoms, borderline or cortical branch infarction, but cerebral infarction is necessary for definitive diagnosis It is necessary to prove the existence of a stenosis (more than 50% of the blood vessel diameter) or occlusion of the main artery that causes the above-mentioned cause.
  • NVAF non-valvular atrial fibrillation
  • hemoglobin A1c is a substance in which glucose is bound to hemoglobin in erythrocytes, and the amount of hemoglobin A1c is determined by the blood glucose state of hemoglobin for about 4 months, mainly 2 months.
  • glycoalbumin is a substance in which glucose is bound to serum and plasma albumin, and the amount of albumin is determined by the blood glucose state of about 1 month, mainly 2 weeks, during the period in which albumin is present in the blood. That is, glycoalbumin is an index that represents a more recent blood glucose state than hemoglobin A1c.
  • the values of hemoglobin A1c and glycoalbumin are characteristic values in which the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is about 3 when blood sugar is stable (Non-patent Document 3).
  • glycoalbumin fluctuates in advance, and the ratio changes from a characteristic value of about 3.
  • Glycoalbumin rises in advance in a state in which the blood sugar state is worsening, so that the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is larger than the characteristic value of about 3 when blood sugar is stable, and the blood sugar state is improved
  • the ratio is smaller than a characteristic value of about 3. Therefore, it is possible to determine whether the latest blood glucose level is rising or falling based on the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c.
  • Glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio changes from a characteristic value of about 3 not only when blood sugar fluctuates but also when blood sugar is stable, even when the daily blood sugar fluctuation is large. For example, it has been reported that glycoalbumin / hemoglobin A1c is high in the former in patients with type 1 diabetes with severe blood glucose fluctuations and in patients with type 2 diabetes with relatively little fluctuations (Non-patent Document 4). In addition, since glycoalbumin more closely reflects postprandial hyperglycemia and hemoglobin A1c more reflects fasting blood glucose, there is also a report that blood sugar fluctuation width can be predicted from the difference between the two (Non-patent Document 5).
  • Non-patent Document 8 Even in diseases such as cirrhosis, renal failure, thyroid disease, anemia, etc., which affect the life span of hemoglobin and the half-life of albumin, the characteristic of having a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio of about 3 regardless of blood glucose fluctuations It has also been reported that the value deviates (Non-patent Document 8).
  • Non-patent Document 9 Non-patent Document 9
  • Non-patent Document 10 a study focusing on the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c, the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c There is no research on the use of disease type discrimination, determination of the presence or absence of onset, and prediction of onset.
  • the present invention relates to a method for performing disease type differentiation of atherothrombotic cerebral infarction in acute cerebral infarction accurately, simply, quickly and inexpensively, an apparatus for performing disease type differentiation, and an atheroma for disease type differentiation. It is an object to be solved to provide a kit for diagnosing thrombotic cerebral infarction. Furthermore, the present invention relates to a method for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction accurately, simply, quickly and inexpensively, a measuring apparatus for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, and an atherothrombotic brain It is an object to be solved to provide an atherothrombotic cerebral infarction diagnostic kit for predicting the onset of infarction.
  • glycoalbumin / hemoglobin A1c was atherothrombotic. It was found that there was a time series deviation from a characteristic value of about 3 from about 3 months before the onset of cerebral infarction. Based on the experience of this case, diagnosis of disease type was performed by 99 specialists such as neurologists, emergency physicians, radiologists, diabetics, etc. from images of medical history, physical findings, CT, MRI, etc. for 99 patients with acute cerebral infarction. Comprehensively conducted, classified into disease types, and cross-sectionally examined the relationship with the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c. In atherothrombotic cerebral infarction among acute cerebral infarction, glycoalbumin / hemoglobin A1c is about 3 It was found that the value was statistically significantly higher than the characteristic value.
  • the present inventors measure glycoalbumin and hemoglobin A1c in a biological sample, and determine the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and / or its change over time, thereby accurately and simply distinguishing the cerebral infarction from disease type. It has been found that it can be carried out at a low cost and that it is possible to predict the onset of atherothrombotic cerebral infarction. To date, there has been no report showing a correlation between the diagnosis of cerebral infarction or prediction of the onset of acute cerebral infarction and the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c. In the present invention, the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c and / or its change over time has not been reported.
  • the atherothrombosis when the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is equal to or higher than the cut-off value for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction A method of differentiating a disease type of atherothrombotic cerebral infarction in an acute cerebral infarction patient, characterized in that the cerebral infarction is determined.
  • a method for differentiating the type of atherothrombotic cerebral infarction in an acute cerebral infarction patient comprising the following steps (1) to (3); (1) A step of measuring glycoalbumin and hemoglobin A1c in a biological sample of a patient with acute cerebral infarction; (2) a step of calculating a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio from the measurement value obtained in step (1); and (3) a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio calculated in step (2) and atherothrombotic cerebral infarction. A step of comparing the cut-off value for disease type discrimination.
  • a method for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction comprising the following steps (1) to (3); (1) a step of measuring glycoalbumin and hemoglobin A1c in the biological sample of the subject's biological sample; (2) a step of calculating a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio from the measured value obtained in step (1); and (3) a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio calculated in step (2) and the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • a kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction comprising a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent, obtained by measurement with a glycoalbumin value obtained by measurement with a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent
  • a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent obtained by measurement with a glycoalbumin value obtained by measurement with a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent
  • a method for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction using the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and its change over time in a biological sample of a subject as an index, and satisfying the following criteria, atherothrombotic cerebral infarction A prediction method characterized by determining that there is a high possibility of developing 1) The ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is not less than the cutoff value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, and 2) The amount of change per day in the ratio of 1) is within the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • [12] (a) Glycoalbumin measurement part, (b) Hemoglobin A1c measurement part, (c) Glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and change over time based on the measured glycoalbumin value and hemoglobin A1c value And (d) an atherothrombosis in the subject, comprising: (d) a determination portion for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction in the subject based on the calculated glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and its change over time For predicting the onset of cerebral infarction.
  • a kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction comprising a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent, which is obtained by measurement using a glycoalbumin value obtained by measurement with a glycoalbumin measurement reagent and a hemoglobin A1c measurement reagent
  • a kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction in a subject using as an index the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio calculated from the hemoglobin A1c value and its change over time.
  • Method for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction in patients with acute cerebral infarction according to the present invention, apparatus for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction in patients with acute cerebral infarction, and kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction According to the present invention, it is possible to accurately, simply, quickly and inexpensively identify the disease type of acute cerebral infarction, which conventionally required complicated determinations by expensive devices and experts.
  • the predictive device for determining the onset of atherothrombotic cerebral infarction and the kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction, the onset prediction of atherothrombotic cerebral infarction is accurate and simple. Can be implemented quickly and inexpensively.
  • Glycoalbumin in the present invention is albumin in which albumin and glucose are bound non-enzymatically, and is sometimes called glycoalbumin or glycated albumin.
  • Glycoalbumin can be measured by, for example, HPLC method, immunization method, enzyme method.
  • the enzyme method is widely used as a method for measuring glycoalbumin.
  • the measurement of glycoalbumin in the present invention includes not only the measurement of the glycoalbumin concentration in the biological sample but also the measurement of the percentage of the glycoalbumin concentration in the biological sample with respect to the total albumin.
  • glycoalbumin in a biological sample is decomposed with a protease to produce a glycated amino acid.
  • ketoamine oxidase is reacted with the glycated amino acid, and the resulting hydrogen peroxide is reacted with peroxidase in the presence of a hydrogen donor and a dye to quantify the glycated amino acid.
  • the glycoalbumin concentration in the biological sample can be obtained from the quantified glycated amino acid using a calibrator with a known glycoalbumin concentration.
  • the percentage (%) of glycoalbumin to the total albumin can also be determined by determining the albumin concentration of the same biological sample by an albumin assay method such as the BCP improvement method and dividing the glycoalbumin concentration.
  • an albumin assay method such as the BCP improvement method
  • the Japanese Society for Clinical Chemistry recommends a standard method for measuring glycoalbumin (Takei et al.) “JSCC Recommended Method for Measuring Glycoalbumin”, Clinical Chemistry, 2008, 37, 2, p178-191), and a measurement method having sufficient accuracy and accuracy in accordance with the standard method of glycoalbumin measurement.
  • hemoglobin A1c is hemoglobin in which glucose is non-enzymatically bound to the N-terminal valine of the hemoglobin ⁇ chain, and is sometimes called hemoglobin A1c, HbA1c, glycohemoglobin, glycohemoglobin A1c, or the like.
  • Hemoglobin A1c can be measured by, for example, HPLC method, immunological method, enzymatic method and the like.
  • HPLC method, the immunization method, and the enzymatic method are all commonly used hemoglobin A1c measurement methods.
  • the measurement of glycoalbumin in the present invention includes not only the measurement of the hemoglobin A1c concentration in the biological sample but also the measurement of the percentage of the hemoglobin A1c concentration in the biological sample with respect to the total hemoglobin.
  • the HPLC method uses a cation exchange column to separate and measure hemoglobin A1c in which ⁇ -chain N-terminal valine has been glycated from a biological sample, and obtain the percentage (%) of hemoglobin A1c with respect to the total hemoglobin in the biological sample.
  • the immunological method is a method in which a peptide in which glucose is bound to ⁇ -chain N-terminal valine is used as an antigen, and the obtained antibody is used for measurement.
  • the enzyme method may be a method of using a protease that cleaves a ⁇ -chain N-terminal peptide, and quantifying the cleaved glycated peptide by introducing it into a color development system using fructosipeptide oxidase.
  • the measured value of hemoglobin A1c is standardized by the Japan Diabetes Society, the Japanese Society for Clinical Chemistry, etc., and is preferably a measurement method having sufficient accuracy and accuracy in accordance with the standardization.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio means a numerical value obtained by dividing the measured value of glycoalbumin by the measured value of hemoglobin A1c.
  • Acute cerebral infarction is atherothrombotic cerebral infarction, cardiogenic cerebral embolism, lacunar infarction, etc. It is classified into four clinical types (NINDS “Classification of Cerebrovascular Diseases Version III”).
  • the disease type differentiation of atherothrombotic cerebral infarction in acute cerebral infarction is an act of determining whether or not the patient with acute cerebral infarction is classified as atherothrombotic cerebral infarction or the degree of probability And predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction means the act of determining whether or how likely a person will develop atherothrombotic cerebral infarction in the future.
  • a method for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction in acute cerebral infarction simply and accurately using the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio in a biological sample derived from an acute cerebral infarction patient as an index. It is more preferable to perform the discrimination by using a conventional discrimination method from the viewpoint of further improving the discrimination accuracy.
  • a comprehensive method using a medical history, physical findings, CT, MRI images, etc. by a plurality of specialists such as a neurologist, an emergency doctor, a radiologist, a diabetic, etc. can be exemplified.
  • a medical history hypertension, diabetes, hyperlipidemia, smoking, drinking habits, presence or absence of heart disease, etc. are important for conventional discrimination. For example, if there is a risk factor for atherosclerosis such as hypertension, diabetes, hyperlipidemia, smoking, etc., if there is complication of other atherosclerotic diseases, TIA precedent, cervical vascular noise, etc., atherothrombotic cerebral infarction Suspected.
  • Atherothrombotic cerebral infarction arteriosclerosis gradually progresses, so there are many mild cases such as mild paralysis at the beginning of the onset.
  • cardiogenic cerebral infarction is suspected if there is a heart disease of embolism, sudden onset type onset, severe consciousness disturbance at the time of onset, and the like.
  • CT and MRI are used to check for bleeding and to distinguish between bleeding and infarction and the range of the infarct.
  • Cardiogenic cerebral infarction may present with extensive or hemorrhagic infarction. Lacunar infarction is defined as a small infarction with a major axis of less than 1.5 cm that can explain neurological symptoms. In recent years, it is diagnosed by DWI.
  • Cutoff value for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction, cutoff value for predicting onset of atherothrombotic cerebral infarction, and time-dependent cut-off range for predicting onset of atherothrombotic cerebral infarction Atherothrombotic cerebral infarction
  • the cut-off value for disease type discrimination and the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction are described in detail below.
  • the amount ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in the blood of a diabetic patient becomes a characteristic value of about 3 in a state where blood sugar is stable (Non-patent Document 3).
  • An albumin / hemoglobin A1c ratio of 2.90 was determined. Therefore, the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in a state where blood sugar is stable may be 2.90.
  • the characteristic value of about 3 of glycoalbumin / hemoglobin A1c in diabetic patients with stable blood sugar is the race, gender, age, population of cases, and unit of measurement by international standardization in the future. May change depending on the change.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction means a reference value of the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in order to obtain whether or not the patient has atherothrombotic cerebral infarction or the degree of probability.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction means a reference value of the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c to obtain whether or not the patient will suffer from atherothrombotic cerebral infarction in the future. Any cutoff value can be a single or multiple numerical values.
  • Any cutoff value can be any numerical value between 2.9-6, 3-6, preferably 3.2-6, more preferably 3.2-4.
  • Glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio of a diabetic patient in a stable blood glucose state is characteristically about 3.0 (2.9 in the present embodiment), and deviates from this characteristic value in the process of completing atherothrombotic cerebral infarction. Therefore, for example, it can be a numerical value of 1 or more selected from 2.9, 3.0, 3.2, 3.22.
  • 20 or more (preferably 30, more preferably 50 or more, most preferably 70 or more) acute cerebral infarction patients are treated with atherothrombotic cerebral infarction patients, cardiogenic cerebral infarction or lacunar infarction.
  • Glycoalbumin is identified for patients of various categories such as atherothrombotic cerebral infarction, cardiogenic cerebral infarction, lacunar infarction, etc., as distinguished from patients by conventional methods (eg, medical history, physical findings, CT, MRI images, etc.) And hemoglobin A1c may be measured, and the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c may be determined for each disease type to obtain a cutoff value. Further, a cutoff value may be obtained by a known statistical method (ROC curve or the like) (Example). In the examples of the present application, 3.2 and 3.22 were obtained as the disease type discrimination cut-off value for atherothrombotic cerebral infarction by such a method. Therefore, for the disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the cutoff value or the cutoff value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is preferably 3.2 or 3.22.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction is one numerical value
  • the ratio of the measured values of glycoalbumin and hemoglobin A1c in a biological sample of a patient with acute cerebral infarction is greater than or equal to the cut-off value
  • patients with acute cerebral infarction can be identified as having or likely to have atherothrombotic cerebral infarction, and conversely, if they are less than the cut-off value, they are not affected or likely Can be identified as low.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction is 3.2 or 3.22
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c measured using a biological sample is 3.2 or 3.22 or more
  • the patient with acute cerebral infarction who provided the biological sample in the case of is an atherothrombotic cerebral infarction patient or is highly likely, and if it is less than 3.2 or 3.22, the patient is not an atherothrombotic cerebral infarction patient Or it can be identified that the probability is low.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is a single numerical value, if the ratio of the measured value of glycoalbumin to hemoglobin A1c in a biological sample of the person is greater than or equal to the cut-off value, the person will It can be predicted that the patient will suffer from or is highly likely to have thrombotic cerebral infarction, and conversely, if the person is less than the cut-off value, the person is predicted not to suffer from or suffer from atherothrombotic cerebral infarction in the future. can do.
  • the cutoff value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is 2.9 or 3.0
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c measured using a biological sample is 2.9 or 3.0 or more
  • the person who provided the biological sample in the future will suffer from or is likely to suffer from atherothrombotic cerebral infarction patients in the future, and if it is less than 2.9 or 3.0, it will not or will not suffer from future atherothrombotic cerebral infarction patients Can be expected to be low.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction is a plurality of numerical values
  • the presence or absence of atherothrombotic cerebral infarction or its probable degree can be differentiated in multiple stages. For example, if the cutoff value is set to A1, A2, A3, ..., An, and less than A1, A1 to A2, A2 to A3, ..., An-1 to An, and greater than An It is also possible to set a range of glycoalbumin / hemoglobin A1c ratios in multiple stages and predict that the probability of onset is higher as the numerical range is larger.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction is 3.00, 3.22, and the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c measured using a biological sample is 3.22 or more has developed or The probability is high, 3.00 to 3.22 is likely to be onset, and 3.00 or less can be identified as low probability of onset.
  • the cutoff value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is a plurality of numerical values
  • the possibility of the onset of atherothrombotic cerebral infarction can be predicted in multiple stages. For example, if the cutoff value is set to A1, A2, A3, ..., An, and less than A1, A1 to A2, A2 to A3, ..., An-1 to An, and greater than An It is also possible to set a range of glycoalbumin / hemoglobin A1c ratios in multiple stages and predict that the possibility of future onset is higher as the numerical range is larger.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is 3.00, 3.22, and if the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c measured using a biological sample is 3.22 or higher, or will be possible in the future It is possible to predict that 3.00 to 3.22 is likely to develop in the future, and 3.00 or less is unlikely to develop in the future.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio measured using a biological sample was compared with the cut-off for determining the disease type of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the presence or absence of atherothrombotic cerebral infarction or the possibility thereof The method for differentiating the degree of is not limited to the above method, the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c measured using a biological sample and the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, The method for predicting the future development of atherothrombotic cerebral infarction is not limited to the above method.
  • the acute brain Whether an infarcted patient corresponds to cardiogenic cerebral infarction, lacunar infarction, or other acute phase cerebral infarction can be differentiated using a method known per se (such as CT or other image diagnosis).
  • the subject providing the biological sample in the method for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction From the viewpoint of prediction accuracy and the like, it is preferable that the patient has sclerosis and a patient having risk factors for atherothrombotic cerebral infarction such as a diabetic patient.
  • the time-varying cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is described in detail below.
  • the onset of atherothrombotic cerebral infarction can be predicted based on the contrast between the measured glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the onset of atherothrombotic cerebral infarction can also be predicted based on the contrast between the measured time-dependent change in glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is a criterion for the time-dependent change in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c to obtain whether or not the patient will suffer from atherothrombotic cerebral infarction in the future.
  • the temporal change in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c means a temporal change in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in samples of the same living tissue derived from the same subject.
  • the temporal change can be, for example, an increase / decrease value of the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c per hour, day, or month.
  • the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is, for example, 0.005 to 0.03 / day, preferably 0.008 to 0.02 / day, and more preferably 0.01 to 0.015. / Day.
  • a sample of the same living tissue can be continuously or irregularly collected from a certain person, and the change over time in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in the sample can be observed.
  • Is included in the time-dependent cut-off range for predicting the development of atherothrombotic cerebral infarction it can be predicted that the person will suffer from or is likely to have atherothrombotic cerebral infarction in the future. If not in the cut-off range, it can be predicted that the person will not suffer from or is unlikely to suffer from atherothrombotic cerebral infarction in the future.
  • a blood sample of a person is periodically collected every 30 days, and the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in the blood sample changes to A, B, C, D,. , (AB) / 30 days, (BC) / 30 days, (CD) / 30 days, the maximum value (time-dependent change) and time for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction
  • the change cut-off range if the time course is 0.005 to 0.03 / day, one can predict that the person will suffer from or is likely to have atherothrombotic cerebral infarction in the future .
  • the time-dependent changes in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c in the biological sample of a certain person at a certain time point and the ratio up to that time point are used for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction and for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction Contrast with the time-varying cut-off range 1)
  • the ratio is equal to or greater than the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, and the time-varying cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction Can be predicted that the person will or will likely have atherothrombotic cerebral infarction in the future, 2) the ratio is less than the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, or If the change over time is outside the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction, the person will It can be predicted without suffering from sexual cerebral infar
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio in the blood sample changes to A, B, C, D, (A ⁇ B) / 30 days, (BC) / 30 days, (CD) /
  • the maximum value of 30 days is a time-dependent change
  • D is not less than the cutoff value for predicting the onset of atherothrombotic infarction
  • the said time-dependent change is contained in the time-dependent cut-off range for the onset prediction of an atherothrombotic cerebral infarction, it can be estimated that the person will suffer from an atherothrombotic cerebral infarction in the future or its possibility is high.
  • the apparatus for distinguishing the type of atherothrombotic cerebral infarction according to the present invention or the apparatus for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction is a measurement unit of glycoalbumin, measurement of hemoglobin A1c. And a calculation unit for calculating the measured glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio (and / or its change over time), and differentiation or prediction based on the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio (and / or its change over time) Any device can be used as long as the device includes a determination unit for performing the above.
  • the glycoalbumin measurement unit is a site for measuring glycoalbumin in a biological sample introduced into the apparatus.
  • the measurement part of hemoglobin A1c is a site
  • the conventional use of glycoalbumin or hemoglobin A1c described above is not limited. It can be done with a measuring method.
  • glycoalbumin in addition to HPLC method, immunization method, enzyme method, etc., electrophoresis method, electrode method, etc. may be used, and other methods may be used.
  • the measurement of glycoalbumin may use an enzyme method that is widely used. Enzymatic methods are, for example, by decomposing glycoalbumin of a target sample with a protease, then reacting ketoamine oxidase with glycated lysine and reacting with a dye to determine the concentration of glycoalbumin, and determining the concentration of glycoalbumin.
  • glycoalbumin (%) can be measured by measuring the albumin concentration and dividing by the albumin concentration.
  • hemoglobin A1c may use the HPLC method and the immunization method which are widespread.
  • HPLC method for example, hemoglobin A1c is separated and fractionated by an ion exchange column, and the concentration (%) can be calculated.
  • the calculation unit is a part that divides the glycoalbumin value obtained by measurement by the glycoalbumin measurement unit by the hemoglobin A1c value obtained by measurement by the hemoglobin A1c measurement unit, for example, a central processing unit provided in the apparatus (CPU).
  • the glycoalbumin value and the hemoglobin A1c value may be stored in a storage device provided in the device such as a memory or a hard disk after both measurements and before the calculation, or the division value in the calculation unit is temporarily stored in the storage device. May be memorized.
  • the determination unit Based on the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio (and / or temporal change in the ratio) obtained by the calculation unit, the determination unit distinguishes the type of atherothrombotic cerebral infarction in patients with acute cerebral infarction or atherothrombotic cerebral infarction This is a site for predicting the onset.
  • Atherothrombotic cerebral infarction disease type discrimination can be carried out by comparing the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained at the calculation unit with the atherothrombotic cerebral infarction disease type discrimination cut-off value.
  • the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction may be stored in the device in advance, or may be input from the input site of the device at the time of discrimination.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained by the calculation unit is equal to or higher than the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction, the person who provided the biological sample becomes atherothrombotic cerebral infarction.
  • the person who provided the biological sample is suffering from atherothrombotic cerebral infarction if it can be identified as being affected or likely to be affected, and conversely, if it is less than the cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction It can be discriminated that there is no or low probability.
  • Cutoff values for atherothrombotic cerebral infarction disease type discrimination can be set to a single device or multiple devices, and when multiple cut-off values are set, differentiation is performed in multiple stages as described above. It can also be done.
  • the onset prediction of atherothrombotic cerebral infarction can be performed by comparing the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained by the calculation unit with the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction may be stored in advance in the apparatus, or may be input from an input site of the apparatus at the time of prediction.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction can be set to a single device or multiple devices, and the prediction when multiple cut-off values are set is multistage as described above. You can also do it.
  • the onset prediction of atherothrombotic cerebral infarction may be performed by comparing the time-dependent change in glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained by the calculation unit with the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the time-varying cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction may be stored in advance in the apparatus, or may be input from an input site of the apparatus at the time of prediction.
  • the time-dependent change in the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c obtained in the calculation unit is included in the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction
  • the person who provided the biological sample Who is expected to develop or is likely to develop atherothrombotic cerebral infarction in the future and conversely, who is not included in the time-dependent cut-off range for predicting the development of atherothrombotic cerebral infarction Can be predicted not to develop or be unlikely to develop atherothrombotic cerebral infarction in the future.
  • the onset prediction of atherothrombotic cerebral infarction is carried out by determining the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained by the calculation unit and the change over time of the ratio, the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction and the atheroma, respectively. This can be done by comparing with a time-dependent cutoff range for predicting the onset of thrombotic cerebral infarction.
  • the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction and the time-dependent cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction may be stored in advance in the device, or input from the input site of the device at the time of prediction May be.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio obtained in the calculation unit and the change over time of the ratio are each equal to or higher than the cut-off value for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction and the onset of atherothrombotic cerebral infarction If included in the predictive chronological cut-off range, it can be predicted that the person who provided the biological sample will develop or is likely to develop atherothrombotic cerebral infarction in the future, and conversely, the ratio is atherothrombotic cerebral infarction.
  • the person who provided the biological sample may It can be predicted that atherothrombotic cerebral infarction will not develop or is less likely to develop.
  • This device may include an output unit.
  • the output unit performs processing such as displaying or outputting the disease type discrimination or onset prediction result on a display device such as a display or a printing device such as a printer.
  • This apparatus is preferably a POC inspection apparatus (generally, an apparatus for inspecting immediately next to a patient (for example, at the bedside) at a clinical site) from the viewpoint of convenience and the like.
  • a POC inspection apparatus generally, an apparatus for inspecting immediately next to a patient (for example, at the bedside) at a clinical site) from the viewpoint of convenience and the like.
  • the glycoalbumin measuring reagent contained in the kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction of the present invention can be measured as long as it is a reagent capable of measuring glycoalbumin in a biological sample.
  • the method (HPLC method, immunization method, enzyme method, etc.) and the composition of the reagent are not particularly limited.
  • an enzyme method can be preferably exemplified.
  • lucica GA or lucica GA-L both manufactured by Asahi Kasei Co., Ltd.
  • employing an enzymatic method can be preferably exemplified as a glycoalbumin measurement reagent.
  • the hemoglobin A1c measurement reagent contained in the kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction of the present invention is a reagent capable of measuring hemoglobin A1c in a biological sample, a measurement method (HPLC method, immunization method, enzyme method, etc.) or reagent
  • a measurement method HPLC method, immunization method, enzyme method, etc.
  • the measurement of hemoglobin A1c is standardized by the Japan Diabetes Society or related societies, and is preferably a measurement adapted to this standardization.
  • a thunk HbA1c manufactured by Arkray
  • employing an enzyme method can be mentioned.
  • the kit for diagnosing atherothrombotic cerebral infarction of the present invention is measured using glycoalbumin in a biological sample measured using a glycoalbumin measuring reagent contained in this kit and a hemoglobin A1c measuring reagent contained in this kit.
  • the ratio of hemoglobin A1c in a biological sample is used as an index to identify the type of atherothrombotic cerebral infarction or to predict its onset.
  • the disease type discrimination or the onset prediction thereof may be compared with the atherothrombotic cerebral infarction cut-off value or atherothrombotic cerebral infarction cut-off value or atherothrombotic cerebral infarction It can be implemented by comparison with the time course cut-off range for predicting the onset.
  • the biological sample to be measured according to the present invention may be any sample as long as it is a test solution containing at least hemoglobin and glycated protein.
  • Preferred types of test liquid include blood components such as serum, plasma, blood cells, whole blood, or separated red blood cells. Serum and plasma may be separated by a normal method.
  • the biological sample can be easily obtained by a method known per se, and the biological sample may be pretreated by a conventional method.
  • Example 1 A total of 99 patients with acute cerebral infarction were evaluated by neurologists, emergency physicians, radiologists, and diabetics based on medical history, physical findings, CT, MRI images, and the like. As a result of identifying 99 cases, there were 38 patients with atherothrombotic cerebral infarction, 37 cases with cardiogenic cerebral infarction, and 24 cases with lacunar infarction.
  • FIG. 1 shows the age, sex, BMI, presence / absence of smoking, and other data.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio of patients with atherothrombotic cerebral infarction was 3.2, which was significantly higher than that of patients with cardiogenic cerebral infarction and lacunar infarction (P ⁇ 0.001).
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c was P ⁇ 0.001, which is an explanatory variable for atherothrombotic cerebral infarction. It turned out to be. Furthermore, as a result of binomial logistic analysis for the explanatory variable showing P value ⁇ 0.2, it was found that the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is an independent explanatory variable (FIG. 3). From the above results, it was found that atherothrombotic cerebral infarction can be identified by the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c.
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c for differentiating atherothrombotic cerebral infarction was determined from the ROC curve.
  • the results of the ROC curve are shown in FIG. From FIG. 4, 3.22 was obtained as a judgment value for distinguishing atherothrombotic cerebral infarction (a cut-off value for disease type discrimination of atherothrombotic cerebral infarction).
  • the sensitivity is 91.7% and the sensitivity is high, and the specificity is 95.0% and the efficiency of the false positive is low. A good judgment was possible.
  • FIG. 5 shows the relationship between glycoalbumin and hemoglobin A1c in 105 diabetic patients who do not have cerebral infarction and diseases related to the lifetime of hemoglobin and the half-life of albumin.
  • the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio for these patients was 2.90.
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is 2.90, and it may be higher than 2.90 in the completion process of atherothrombotic cerebral infarction. In the target patient, it is possible to predict the onset of atherothrombotic cerebral infarction by the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio.
  • the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c at the time of onset of a patient with atherothrombotic cerebral infarction is 4.30, which is significantly higher than the characteristic value of about 3;
  • the hemoglobin A1c ratio was 4.15, and the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio 3 months before the onset was 3.39, which increased as it approached the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the onset can be predicted using the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c as an index. Specifically, a glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio of 3.22 or higher is likely to develop, 3.00 to 3.22 is likely to develop, 3.00 or less is less likely to develop, etc. Evaluation evaluation may be performed.
  • the onset can also be predicted using the time course of the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio itself as an index. That is, it can be determined that the possibility of onset is high when the change over time is in the cut-off range for predicting the onset of atherothrombotic cerebral infarction.
  • the change in the ratio is included in the range of 0.005 to 0.03 / day, preferably 0.008 to 0.02 / day, more preferably 0.01 to 0.015 / day, It can be determined that the possibility is high.
  • the onset can be predicted using the combination of glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio and its change over time as an index. For example, when the ratio is 3.22 or more and the temporal change is included in the range of 0.1 to 0.15 / day, it can be determined that the possibility of onset is high. As explained in the above example, the glycoalbumin / hemoglobin A1c ratio 3 months before the onset is 3.39, which is high, so doctors etc. start regular monitoring of this patient from this point or earlier Preferably, the patient can then be determined to be more likely to develop atherothrombotic cerebral infarction when the increase in ratio per day reaches 0.1-0.15 / day.
  • glycoalbumin and hemoglobin A1c are measured, and the ratio of glycoalbumin / hemoglobin A1c is determined, whereby the disease type differentiation of acute cerebral infarction can be performed with good sensitivity and specificity, simply, quickly and inexpensively. It can be carried out. Further, in the present invention, the onset prediction of atherothrombotic infarction can be performed with good sensitivity and specificity, simply, quickly and inexpensively.
  • the methods, devices and reagents of the present invention are useful in clinical testing.

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Abstract

　本発明の目的は、正確、簡便、迅速かつ安価に急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別を行うための方法、および正確、簡便、迅速かつ安価にアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測するための方法を提供することである。本発明によれば、急性期脳梗塞患者由来試料におけるグリコアルブミンおよびヘモグロビンＡ１ｃを測定し、算出したグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比からアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別を行うことができる。さらに動脈硬化を有する患者、ならびに糖尿病患者などアテローム血栓性脳梗塞の危険因子を有する患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比および／またはその経時変化からアテローム血栓性脳梗塞の発症の予測を行うことができる。

Description

急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別方法および発症予測方法
　本発明は、急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミンおよびヘモグロビンＡ１ｃを測定し、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比から、正確、簡便、迅速かつ安価に急性期脳梗塞の病型鑑別を行う方法、並びに被験者の生体試料におけるグリコアルブミンおよびヘモグロビンＡ１ｃを測定し、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比および／またはその経時変化から、正確、簡便、迅速かつ安価にアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法に関する。更に本発明は、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者のアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための装置、並びに急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者のアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キットに関する。
　脳梗塞は、臨床分類としてアテローム血栓性脳梗塞、心原性脳塞栓、ラクナ梗塞、その他の４つの臨床病型に分類されるが（ＮＩＮＤＳ「脳血管障害の分類第III版」）、急性期脳梗塞においてこれら病型鑑別をなるべく早期に行うことは、病型により適応薬剤、治療法も異なるため非常に重要である（非特許文献１）。例えば、急性期脳梗塞のうち、アテローム血栓性脳梗塞に適応される抗凝固薬剤のオザグレル、抗血小板薬剤のアルガトロバンは心原性脳梗塞には禁忌であるので、これらの病型を鑑別することは重要である。
　従来、これら急性期脳梗塞の病型鑑別は病歴、身体所見、臨床症状やＣＴ・ＣＴＡ、ＭＲＩ・ＭＲＡなどの画像診断、心電図、血小板機能、凝固・線溶系の血液検査、脳の局所血流量の検査等の結果を総合的に判定し行われている。現在、最も汎用されているＣＴによる判定では早期においては判定者により判定が異なり、熟練医以外の正診率が低いため、近年ではＤＷＩによる診断等も普及している。しかし、いずれの方法も高価な装置を必要とするうえに高度に専門的で複雑であり、確定診断が困難な場合が多く、正確かつ、簡便、迅速、安価な病型鑑別の方法が求められていた。
　非特許文献２によれば、アテローム血栓性脳梗塞の診断においては、病歴聴取、診察、画像診断によりアテローム血栓性脳梗塞に特徴的な所見（アテローム硬化の危険因子、他のアテローム硬化性疾患の合併、ＴＩＡの先行、発症後の段階状の症状進行、頚部血管雑音、意識障害、皮質症候、境界領域または皮質枝領域梗塞）が得られるかどうかが重要であるが、確定診断には脳梗塞の原因となるような主幹動脈の狭窄（血管径の５０％以上）または閉塞の存在を証明することが必要であるとされている。しかしながら、ＣＴ、ＣＴＡ、ＭＲ、ＭＲＡを用いても確定診断に必要な主幹動脈の狭窄や閉塞の存在を証明することは困難なケースも多く、これら高価な装置を有する施設以外では検査の実施すら不可能である。
　また、心原性脳梗塞の診断において、最も頻度の高い非弁膜症性心房細動（ＮＶＡＦ）は心電図検査が必須であるとされているが、ＮＶＡＦの１／３は発作性であり、長時間記録でなければ異常を見逃す可能性がある。また、突発性完成型の発症が「８～９割の頻度」であり、発症時より意識障害を伴うことも「少なくなく」、経過中の意識障害も「しばしば高度」となり、失語や失認などの皮質障害も「呈しやすく」とあり、これらの身体症状からただちに病型を確定できるものではない。
　上述のように、急性期脳梗塞においては、病型の鑑別は治療法も異なるため大変重要であるにもかかわらず、病型鑑別に統一したルールはなく、高価な装置と専門医の総合的な判断が必要なうえ、それらを満たした状況でも困難を伴う場合が多い。
　ところで、糖尿病の診断および血糖管理を行う上で、ヘモグロビンＡ１ｃ、グリコアルブミン等の糖化タンパク質は臨床において日常的に測定され、血糖管理指標として汎用されている。ヘモグロビンＡ１ｃは赤血球中のヘモグロビンにグルコースが結合した物質で、ヘモグロビンの寿命の期間、約４ヶ月、主として２ヶ月の血糖状態によりその多寡が決定される。一方、グリコアルブミンは、血清および血漿アルブミンにグルコースが結合した物質でアルブミンが血中に存在する期間、約１ヶ月、主として２週間の血糖状態によりその多寡が決定される。すなわち、グリコアルブミンは、ヘモグロビンＡ１ｃと比べて、より直近の血糖状態を表す指標である。
　ヘモグロビンＡ１ｃとグリコアルブミンの値は、血糖が安定した状態でグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比率が約３程度の特徴的な値になることが知られている（非特許文献３）が、血糖状態が変化した場合、グリコアルブミンが先行して変動するため、その比が３程度の特徴的な値から変化する。血糖状態が悪化している状態ではグリコアルブミンが先行して上昇するため、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は血糖安定時の３程度の特徴的な値よりも大きくなり、血糖状態が改善している状態においてはその比は３程度の特徴的な値よりも小さくなる。従って、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比により、直近の血糖が上昇しているか、低下しているかを判定することが可能である。
　血糖変動時のみならず血糖安定時においても、日々の血糖振れ幅が大きい場合などもグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は３程度の特徴的な値から変化する。例えば、血糖変動の激しい１型糖尿病患者と比較的変動が少ない２型糖尿病患者でのグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃは前者において高いことが報告されている（非特許文献４）。また、グリコアルブミンは食後の高血糖をより反映し、ヘモグロビンＡ１ｃは空腹時の血糖をより反映することから、両者の乖離から血糖振れ幅を予測できるとの報告もある（非特許文献５）。この報告から２型糖尿病患者においても血糖振れ幅が大きい場合もグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は３程度の特徴的な値よりも大きくなることが推定される。糖尿病合併症との関連においては、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は網膜症の重症度と関係があるとの報告（非特許文献６）や、グリコアルブミンと冠動脈疾患の有無、重症度との関連も報告されている（非特許文献７）。肝硬変、腎不全、甲状腺疾患、貧血、他等、ヘモグロビンの寿命やアルブミンの半減期に影響を与える疾患においても、血糖の変動に関わらず、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が約３程度の特徴的な値と乖離することも報告されている（非特許文献８）。
　上述のように、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が単なる血糖状態に関する指標としてではなく、種々の病態により約３程度の特徴的な値から乖離することが報告され、その乖離の度合いにより各種病態を判定できる場合があることが報告されているが（非特許文献９）、急性期脳梗塞における病型、あるいはアテローム血栓性脳梗塞とグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の関係に関する報告は今までに無い。また、急性期脳梗塞の発症時の血糖状態と予後が関連することについては報告されているが（非特許文献１０）、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比に着目した研究、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を用いて病型鑑別、発症の有無の判定、発症予測を行うことに関する研究は皆無である。
ＮＩＮＤＳ（ナショナルインスティチュート オブ ニューロロジカルディスオーダー アンド ストローク）「クラシフィケーション　オブ　セレブロバスキュラーディシーズ III (Classification of cerebrovascular diseases III)」、ストローク（Stroke）１９９０年、第２１巻、ｐ637－676 高木誠、「アテローム血栓性脳梗塞」（脳卒中ナビゲーター　小林祥泰監修）メディカルレビュー社　２００２年６／１出版　ｐ126-127 田原保宏、「IV‐Ｂ．グリコアルブミン（ＧＡ）」（血糖値をみる・考える　島健二編集） 南光堂　２０００年１／２０出版 ｐ62-69 吉内和富等（Yoshiuchi et. al ）「グリケイティドアルブミン　イズ　ア　ベターインディケーション　フォア　グルコース　イクスカージョン　ザン　グリケイティドヘモグロビン　イン　タイプ１　アンド　タイプ２　ダイアビーティズ（Glycated Albumin is a better Indication for Glucose Excursion than Glycated Hemoglobin in Type 1 and Type 2 Diabetes）」、エンドクリン　ジャーナル（Endcrine Journal）、２００８年、１５５、p503-507 佐久間伸子等「食後血糖や血糖変動の推定は？」、肥満と糖尿病、２００８年、7巻、第2号、p818-820 今井孝俊等（Imai et al.）「インプルーブド　モニタリング　オブ　ザ　ハイパーグライセミック　ステート　イン　タイプ１　ダイアビーティーズ　ペイシェンツ　バイ　ユース　オブ　ザ　グリコアルブミン／ヘモグロビンエイワンシー　レイショ（Improved Monitoring of the Hyperglycemic State in Type1 Diabetes Patients by Use of the Glycoalbuminn/HbA1c Ratio）」、ザ　レビュー　オブ　ダイアビティック　スタディーズ（The Review of Diabetic Studies）、２００７年、４巻、1号、p44-48 Li Jin Pu et.al.「インクリースド　セイラム　グリケイティドアルブミン　レベル　イズ　アソシエイティド　ウィズ　ザ　プレゼンス　アンド　シビアリティ　オブ　コロナリー　アテリイ　ディシーズ　イン　タイプ２　ディアベティック　ペイシェンツ（Increased Serum Glycated Albumin Level is Associated with the Presence and Severity of Coronary Artery Disease in Type 2 diabetic Patients.）」、サーキュレーション　ジャーナル(Circulation Journal)、２００７年、第７１巻、７号、p1067-1073 古賀正史「グリコアルブミン・フルクトサミン」、総合臨床、２００８年第５７巻７号、ｐ1922-1927 古賀正史等（Koga et. al. ）[グリコアルブミンをめぐる話題]、総合臨床、２００６年、５５巻、１０号、p2513-2514 Stesd LG et.al.「ハイパーグライセミア　アズ　アン　インディペンデント　プレディクター　オブ　ワース　アウトカム　イン　ノン‐ディアベティック　ペイシェンツ　プレゼンティング　ウイズ　アキュート　イシェミック　ストローク（Hyperglycemia as an independent predictor of worse outcome in non-diabetic patients presenting with acute ischemic stroke）」、ニューロクリット　ケア（Neurocrit Care）、２００９年、１０、p181-186 第５２回日本糖尿病学会年次学術集会ポスターセッション要旨Ｉ－Ｐ－１３０ 函館医学誌第２８巻第１号(２００４)ｐ１２
　本発明は、正確、簡便、迅速かつ安価に急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別を行うための方法、および病型鑑別を行うための装置、および病型鑑別のためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キットを提供することを解決すべき課題とする。さらに、本発明は、正確、簡便、迅速かつ安価にアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測するための方法、およびアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測をするための測定装置、およびアテローム血栓性脳梗塞の発症の予測をするためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キットを提供することを解決すべき課題とする。
　本発明者らは偶然、当施設で数年に亘ってグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定した患者がアテローム血栓性脳梗塞を発症した場に遭遇し、該患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がアテローム血栓性脳梗塞発症の約３ヶ月前より約３程度の特徴的な値から時系列的に乖離してきていることを見出した。この症例の経験を契機に、急性期脳梗塞患者９９名に関して、病歴、身体所見、ＣＴ、ＭＲＩ等の画像から神経内科医、救急医、放射線医、糖尿病医等の専門医により病型の診断を総合的に行い、病型分類し、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比との関係を横断的に検討したところ、急性期脳梗塞のうちアテローム血栓性脳梗塞においては、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃが約３程度の特徴的な値よりも統計的に有意に高値を示すことを見出した。
　即ち、本発明者らは、生体試料中のグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定し、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比および／またはその経時変化を求めることにより脳梗塞の病型鑑別を正確、簡便、迅速かつ安価に実施できること、更にアテローム血栓性脳梗塞の発症予測が可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。現在までに、急性期脳梗塞の病型鑑別または発症予測とグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の相関を示す研究は報告されておらず、本発明において、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比および／またはその経時変化により、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別及びアテローム血栓性脳梗塞の発症予測が正確、簡便、迅速かつ安価に実施できることが初めて見出されたことは画期的である。本発明によれば、以下の発明が提供される。
［１］　急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として、該グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値以上の場合にアテローム血栓性脳梗塞であると判定することを特徴とする、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法。
［２］　下記の（１）～（３）の工程を含む、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法；
（１）急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定する工程；
（２）工程（１）で得た測定値よりグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を算出する工程；及び
（３）工程（２）で算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比と、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値とを比較する工程。
［３］　病型鑑別用カットオフ値が３から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、［１］又は［２］に記載の鑑別方法。
［４］　病型鑑別用カットオフ値が３．２から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、［１］又は［２］に記載の鑑別方法。
［５］　被験者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として、該グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上の場合にアテローム血栓性脳梗塞を発症する可能性が高いと判定することを特徴とする、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法。
［６］　下記の（１）～（３）の工程を含む、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法；
（１）被験者の生体試料の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定する工程；
（２）工程（１）で得た測定値よりグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を算出する工程；及び
（３）工程（２）で算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値とを比較する工程。
［７］　発症予測用カットオフ値が３から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、［５］又は［６］に記載の予測方法。
［８］　発症予測用カットオフ値が３．２から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、［５］又は［６］に記載の予測方法。
［９］　（ａ）グリコアルブミンの測定部、（ｂ）ヘモグロビンＡ１ｃの測定部、（ｃ）測定されたグリコアルブミン値及びヘモグロビンＡ１ｃ値に基づいて、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比の算出を行う演算部、及び（ｄ）算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比に基づいて、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための判定部を有する、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための装置。
［１０］　グリコアルブミン測定試薬及びヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬を含むアテローム血栓性脳梗塞診断用キットであって、グリコアルブミン測定用試薬による測定で得られたグリコアルブミン値とヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬による測定で得られたヘモグロビンＡ１ｃ値により算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標とし、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キット。
［１１］　被験者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比及びその経時変化を指標とするアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法であって、下記の判定基準を満たす場合にアテローム血栓性脳梗塞を発症する可能性が高いと判定することを特徴とする予測方法；
１）グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上の場合であること、かつ、
２）１）の比の一日あたりの変化量がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲であること。
［１２］　（ａ）グリコアルブミンの測定部、（ｂ）ヘモグロビンＡ１ｃの測定部、（ｃ）測定されたグリコアルブミン値及びヘモグロビンＡ１ｃ値に基づいて、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比とその経時変化の算出を行う演算部、及び（ｄ）算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とその経時変化に基づいて、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための判定部を有する、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための装置。
［１３］　グリコアルブミン測定試薬及びヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬を含むアテローム血栓性脳梗塞診断用キットであって、グリコアルブミン測定用試薬による測定で得られたグリコアルブミン値とヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬による測定で得られたヘモグロビンＡ１ｃ値により算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比およびその経時変化を指標とし、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キット。
　本発明による急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別方法、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別を行うための装置、及びアテローム血栓性脳梗塞診断用キットによれば、従来、高価な装置と専門家による複雑な判定を必要としていた急性期脳梗塞の病型鑑別が正確、簡便、迅速かつ安価に実施可能となる。更に本発明によるアテローム血栓性脳梗塞の発症予測方法、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測判定装置、及びアテローム血栓性脳梗塞診断用キットによれば、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測が正確、簡便、迅速かつ安価に実施可能となる。
本発明の実施例に基づく９９名の急性期脳梗塞の患者の病型分類と検査値である。 本発明の実施例に基づくアテローム血栓性脳梗塞を推定する因子についての単回帰分析結果である。 本発明の実施例に基づくアテローム血栓性脳梗塞を推定する因子についての二項ロジスティック解析結果である。 本発明の実施例に基づくアテローム血栓性脳梗塞を病型鑑別するためのグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比のカットオフ値を求めるＲＯＣ曲線である。 本発明の実施例に基づく１０５名のヘモグロビンの寿命、およびアルブミンの半減期に関わる疾患、脳梗塞を有しない糖尿病患者におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃの関係を示す図である。
　以下、本発明についてさらに具体的に説明する。
（１）グリコアルブミン
　本発明におけるグリコアルブミンとは、アルブミンとグルコースが非酵素的に結合したアルブミンであり、グリコアルブミン、あるいは糖化アルブミンと呼称されることもある。グリコアルブミンは、例えば、ＨＰＬＣ法、免疫法、酵素法で測定できる。現在、例えば、酵素法はグリコアルブミン測定法として汎用されている。本発明におけるグリコアルブミンの測定は、生体試料中のグリコアルブミン濃度の測定のみならず、生体試料中のグリコアルブミン濃度の全アルブミンに対する百分率を測定することも含まれる。
　酵素法は、例えば、先ず、生体試料中のグリコアルブミンをプロテアーゼで分解し、糖化アミノ酸を生成させる。次いで糖化アミノ酸にケトアミンオキシダーゼを反応させ、生じた過酸化水素を水素供与体、色素存在下、ペルオキシダーゼを反応させ糖化アミノ酸を定量する。さらに、グリコアルブミン濃度が既知のキャリブレータ等を用い、定量された糖化アミノ酸から生体試料中のグリコアルブミン濃度を求めることができる。同一生体試料のアルブミン濃度をＢＣＰ改良法等のアルブミン定量法で求め、グリコアルブミン濃度を除することにより、グリコアルブミンの全アルブミンに対する百分率（％）を求めることもできる。日本においては日本臨床化学会がグリコアルブミン測定の標準法を勧告しているが（武井泉等（Takei et. al.）「グリコアルブミン測定のＪＳＣＣ勧告法」、臨床化学、２００８年、３７巻、２号、p178-191）、グリコアルブミン測定の標準法に則った、十分な精度と正確度を有す測定法であることが好ましい。
（２）ヘモグロビンＡ１ｃ
　本発明におけるヘモグロビンＡ１ｃとはヘモグロビンβ鎖のＮ末端バリンにグルコースが非酵素的に結合したヘモグロビンであり、ヘモグロビンＡ１ｃ、ＨｂＡ１ｃ、グリコヘモグロビン、グリコヘモグロビンＡ１ｃ等と呼称されることもある。ヘモグロビンＡ１ｃは、例えば、ＨＰＬＣ法、免疫的方法、酵素法等で測定することができる。現在、ＨＰＬＣ法、免疫法、酵素法はいずれも汎用されているヘモグロビンＡ１ｃ測定方法である。本発明におけるグリコアルブミンの測定は、生体試料中のヘモグロビンＡ１ｃ濃度の測定のみならず、生体試料中のヘモグロビンＡ１ｃ濃度の全ヘモグロビンに対する百分率を測定することも含まれる。
　ＨＰＬＣ法は例えば、陽イオン交換カラムを用いて、β鎖Ｎ末バリンが糖化されたヘモグロビンＡ１ｃを生体試料中から分離・測定し、生体試料中の全ヘモグロビンに対するヘモグロビンＡ１ｃの百分率（％）で求めることができる。免疫的方法は、β鎖Ｎ末バリンにブドウ糖を結合したペプチドを抗原とし、得られた抗体を用い、測定する方法である。また、酵素法はβ鎖Ｎ末端のペプチドを切り出すプロテアーゼを用い、切り出した糖化ペプチドをフロクトシペプチドオキシダーゼにより発色系に導き、定量する方法であることができる。ヘモグロビンＡ１ｃの測定値は日本糖尿病学会、日本臨床化学会等により標準化されており、標準化に則った、十分な精度と正確度を有す測定法であることが好ましい。グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とは、グリコアルブミン測定値をヘモグロビンＡ１ｃ測定値で除算して得られる数値を意味する。
（３）急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、及びアテローム血栓性脳梗塞の発症予測
　急性期脳梗塞は、アテローム血栓性脳梗塞、心原性脳塞栓、ラクナ梗塞、その他の４つの臨床病型に分類される（ＮＩＮＤＳ「脳血管障害の分類第III版」）。従って、本発明において、急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別とは、急性期脳梗塞患者がアテローム血栓性脳梗塞に分類されるか否かまたはその蓋然性の程度を判定する行為を意味し、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測とは、ある者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症するか否かまたはその可能性の程度を判定する行為を意味する。
　本発明において、急性期脳梗塞患者由来の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として簡易かつ正確に急性期脳梗塞におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別方法を提供するが、本方法と慣用の鑑別方法を併用して鑑別を行うことは、鑑別精度をさらに高める意味などの観点から、より好ましい。
　慣用の鑑別方法として、神経内科医、救急医、放射線医、糖尿病医等、複数の専門医による、病歴、身体所見、ＣＴ、ＭＲＩ画像等を用いた総合的な方法を例示することができる。病歴としては高血圧、糖尿病、高脂血症、喫煙、飲酒習慣、心疾患の有無等が慣用の鑑別に重要である。例えば、高血圧、糖尿病、高脂血症、喫煙等、アテローム硬化の危険因子を有し、他のアテローム硬化性疾患の合併、ＴＩＡの先行、頚部血管雑音等がある場合はアテローム血栓性脳梗塞が疑われるとされている。アテローム血栓性脳梗塞は動脈硬化が除々に進行するため発症当初は軽い麻痺など軽症例が多い。一方、塞栓原の心疾患、突発完成型発症、発症時の高度な意識障害等があれば、心原性脳梗塞が疑われるとされている。ＣＴやＭＲＩで出血の有無を調べ、出血と梗塞の鑑別や梗塞巣の範囲を調べる。心原性脳梗塞では広範梗塞や出血梗塞を呈することがある。ラクナ梗塞は神経症候を説明しうる部位に長径１．５ｃｍ未満の小梗塞を認めることと定義されている。近年はＤＷＩにより診断される。
（４）アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値、およびアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲
　アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値およびアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値について以下に詳述する。
　一般的に、血糖が安定した状態で、糖尿病患者血液中のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの量比は約３程度の特徴的な値になることが知られている（非特許文献３）。本発明においては、肝疾患、腎疾患、甲状腺疾患、貧血、タンパクの合成に影響を与える、ステロイドまたはエリスロポエチン等の薬剤の投与の無い、少なくとも３ヶ月間は血糖が安定した１０５名の糖尿病患者（３ヶ月のヘモグロビンＡ１ｃの変動が０．５％以下の患者）の血糖安定期（上記安定した期間の中間月）のグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃの測定値より血糖が安定した状態での特徴的なグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比、２．９０を求めた。従って、血糖が安定した状態でのグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比を２．９０としてもよい。なお、血糖の安定した状態の糖尿病患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの約３程度の特徴的な値は人種、性別、年齢、症例の母集団、更に将来、国際的な標準化によって測定の単位等が変更されること等によって変わることもあり得る。
　アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値とは、アテローム血栓性脳梗塞に罹患しているか否かまたはその蓋然性の程度を得るための、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の基準値を意味する。アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値とは、将来アテローム血栓性脳梗塞に罹患するか否かまたは可能性の程度を得るための、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の基準値を意味する。いずれのカットオフ値も単一または複数の数値であることができる。
　いずれのカットオフ値も、２．９～６、３～６、好ましくは３．２～６、より好ましくは３．２～４の間の任意の数値であることができる。血糖が安定した状態の糖尿病患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は特徴的に約３．０（本願実施例では２．９）を示し、アテローム血栓性脳梗塞完成過程においてこの特徴的な値から乖離していくことから、例えば、２．９、３．０、３．２、３．２２から選ばれる１以上の数値であることができる。あるいは、例えば、２０名以上（好ましくは３０名、さらに好ましくは５０名以上、最も好ましくは７０名以上）の急性期脳梗塞患者を、アテローム血栓性脳梗塞患者、心原性脳梗塞又はラクナ梗塞患者等に慣用方法（例えば、病歴、身体所見、ＣＴ、ＭＲＩ画像等）にて鑑別し、さらに、アテローム血栓性脳梗塞、心原性脳梗塞、ラクナ梗塞等の各分類の患者について、グリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定し、病型毎にグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を求め、カットオフ値を得てもよい。さらに、公知の統計手法（ＲＯＣ曲線など）によりカットオフ値を得てもよい（実施例）。本願実施例では、このような手法で、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値として、３．２および３．２２が得られたことから、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値またはアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値として３．２または３．２２とすることが好ましい。
　測定により得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比と血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値またはアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値とを比較すること、さらにその比較に基づいて鑑別または発症予測を行うことについて、以下に詳述する。
　アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値が１つの数値である場合、ある急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃの測定値の比が、当該カットオフ値以上の場合にその急性期脳梗塞患者はアテローム血栓性脳梗塞に罹患しているまたはその可能性が高いと鑑別することができ、逆に当該カットオフ値未満の場合には罹患していない又はその可能性が低いと鑑別することができる。
　例えば、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値が３．２または３．２２の場合、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、３．２または３．２２以上の場合に生体試料を提供した急性期脳梗塞患者はアテローム血栓性脳梗塞患者であるまたはその蓋然性が高く、３．２または３．２２未満の場合には該患者はアテローム血栓性脳梗塞患者でないまたはその蓋然性が低いと鑑別することができる。
　アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値が１つの数値である場合、ある者の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃの測定値の比が、当該カットオフ値以上の場合将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患するまたはその可能性が高いと予測することができ、逆に当該カットオフ値未満の場合に将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患しないまたはその可能性が低いと予測することができる。例えば、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値が２．９または３．０の場合、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が２．９または３．０以上の場合に生体試料を提供した者は将来アテローム血栓性脳梗塞患者に罹患するまたはその可能性が高く、２．９または３．０未満の場合には将来アテローム血栓性脳梗塞患者に罹患しないまたはその可能性が低いと予想することができる。
　アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値が複数の数値である場合、多段階的にアテローム血栓性脳梗塞罹患の有無またはその蓋然性の程度を鑑別することができる。例えば、カットオフ値を、A1、A2、A3、・・・・・、Aｎと設定した場合、A1未満、A1～A2、A2～A3、・・・、An-1～An、Anより大きいと多段階にグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の範囲を設定し、その数値範囲が大きければ大きいほど発症蓋然性が高いと予測することも可能である。例えば、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値を３．００、３．２２とし、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が３．２２以上は発症しているまたはその蓋然性が高い、３．００～３．２２は発症の蓋然性がある、３．００以下は発症の蓋然性が低いと鑑別することができる。
　アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値が複数の数値である場合、多段階的にアテローム血栓性脳梗塞の発症可能性を予測することができる。例えば、カットオフ値を、A1、A2、A3、・・・・・、Aｎと設定した場合、A1未満、A1～A2、A2～A3、・・・、An-1～An、Anより大きいと多段階にグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の範囲を設定し、その数値範囲が大きければ大きいほど将来の発症可能性が高いと予測することも可能である。例えば、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値を３．００、３．２２とし、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が３．２２以上は将来発症するまたはその可能性が高い、３．００～３．２２は将来発症可能性がある、３．００以下は将来発症可能性が低いと予測することができる。
　なお、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフを比較して、その結果、アテローム血栓性脳梗塞の罹患の有無またはその可能性の程度を鑑別する方法は上記の方法に限定されず、生体試料を用いて測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値を比較して、その結果、将来のアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法も上記の方法に限定されるものではない。
　さらに、本発明に係る「急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法」を利用して、急性期脳梗塞患者の鑑別を実施することもできる。すなわち、アテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法を実施して、ある急性期脳梗塞患者がアテローム血栓性脳梗塞でないまたはその可能性が低いと鑑別された場合、さらに、その急性期脳梗塞患者が、心原性脳梗塞、ラクナ梗塞、またはその他の急性期脳梗塞のいずれに相当するかを、自体公知の方法（ＣＴ等の画像診断等）を用いて鑑別することができる。また、糖尿病患者血液中のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの量比は約３程度の特徴的な値になることから、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法において、生体試料を提供する被験者は動脈硬化を有した患者、ならびに糖尿病患者などアテローム血栓性脳梗塞の危険因子を有する患者であることが予測精度等の観点から好ましい。
　アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲について以下に詳述する。
　上記の通り、測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値の対比に基づいて、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測することもできるが、別の態様として、測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲の対比に基づいてアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測することもできる。
　アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲とは、将来アテローム血栓性脳梗塞に罹患するか否かまたは可能性の程度を得るための、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化の基準値を意味する。グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化とは、同一被験者由来の同一生体組織の試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の時間的変化を意味する。時間的変化は、例えば、１時間、１日、または１ヶ月あたりの、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の増減値とすることができる。
　アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲は、例えば、０．００５～０．０３／日、好ましくは０．００８～０．０２／日、さらに好ましくは０．０１～０．０１５／日とすることができる。
　ある者に対して同一生体組織（例えば血液試料）の試料を定期的または不定期的に連続して採取し、その試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化を観察することができ、その変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれる場合には、将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患するまたはその可能性が高いと予測することができ、逆に当該カットオフ範囲に含まれない場合に将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患しないまたはその可能性が低いと予測することができる。その者から連続して３回以上試料を採取する場合には、理論的には経時変化値が複数認められることになるがその場合にはそのうちの最大値をグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化とすることができる。
　具体的には、例えば、ある者の血液試料を３０日毎に定期的に採取し、血液試料中のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、・・・と変化したとすると、（Ａ－Ｂ）／３０日、（Ｂ－Ｃ）／３０日、（Ｃ－Ｄ）／３０日・・のうち最大となる値（経時変化）とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲を対比させ、当該経時変化が０．００５～０．０３／日の場合には、将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患するまたはその可能性が高いと予測することができる。
　また、ある時点のある者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とその時点までの比の経時変化をそれぞれアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値およびアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲と対比させ、１）当該比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上であり、かつ、当該経時変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれる場合には、将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患するまたはその可能性が高いと予測でき、２）当該比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値未満、または、当該経時変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲外である場合には、将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患しないまたはその可能性が低いと予測することができる。
　具体的には、例えば、ある者の血液試料を３０日毎に定期的に採取し、血液試料中のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄと変化したとすると、（Ａ－Ｂ）／３０日、（Ｂ－Ｃ）／３０日、（Ｃ－Ｄ）／３０日の最大値を経時変化とすれば、Ｄがアテローム血栓性梗塞の発症予測用カットオフ値以上であり、かつ、当該経時変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれる場合には、将来その者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患するまたはその可能性が高いと予測できる。
（５）本発明の装置
　本発明によるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別のための装置またはアテローム血栓性脳梗塞の発症の予測をするための装置は、グリコアルブミンの測定部、ヘモグロビンＡ１ｃの測定部、測定されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比（および／またはその比の経時変化）の算出を行う演算部、及びグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比（および／またはその比の経時変化）に基づき鑑別または予測を行うための判定部を備えた装置であれば、任意の装置を用いることができる。
　グリコアルブミンの測定部は、装置に導入された生体試料中のグリコアルブミンを測定する部位である。ヘモグロビンＡ１ｃの測定部は、装置に導入された生体試料中のヘモグロビンＡ１ｃを測定する部位である。これらの部位の大きさや構成等は特に限定されず、これらの測定についても生体試料におけるそれぞれの蛋白質が測定される限りにおいて特に限定されず、例えば、先に述べたグリコアルブミンまたはヘモグロビンＡ１ｃの慣用の測定方法でされ得る。
　グリコアルブミンの測定方法としては、ＨＰＬＣ法、免疫法、酵素法等に加えて、電気泳動法、電極法等を用いてもよく、それ以外の方法を用いてもよい。例えば、グリコアルブミンの測定は広く普及している、酵素法を用いてもよい。酵素法は、例えば、対象試料のグリコアルブミンをプロテアーゼで分解した後、ケトアミンオキシダーゼを糖化リジンに反応させて生成する過酸化水素を色素で反応させて定量しグリコアルブミン濃度を求め、同じ対象試料のアルブミン濃度を測定し、アルブミン濃度で除することにより、グリコアルブミン（％）を測定する方法であることができる。その他の市販試薬、公知の方法、試薬を用いてもよい。また、ヘモグロビンＡ１ｃの測定は広く普及している、ＨＰＬＣ法、免疫法を用いてもよい。ＨＰＬＣ法は、例えば、イオン交換カラムにより、ヘモグロビンＡ１ｃを分離・分画し、その濃度（％）を算出することができる。
　演算部はグリコアルブミン測定部で測定されて得られたグリコアルブミン値をヘモグロビンＡ１ｃ測定部で測定されて得られたヘモグロビンＡ１ｃ値で除算する部位であって、例えば、装置に備えられた中央処理装置（ＣＰＵ）で行われる。なお、両測定後で演算前に、グリコアルブミン値とヘモグロビンＡ１ｃ値はメモリやハードディスクなど装置に備えられた記憶装置に記憶されていてもよいし、演算部での除算値がかかる記憶装置に一時的に記憶されてもよい。
　判定部は、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比（および／またはその比の経時変化）に基づき、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別またはアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行う部位である。
　本装置において、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別は、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値を比較することにより実施され得る。アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値は装置に予め記憶されていてもよいし、鑑別の際に、装置の入力部位から入力されてもよい。比較の結果、例えば、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値以上の場合に、生体試料を提供した者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患しているまたはその可能性が高いと鑑別でき、逆にアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値未満の場合に、生体試料を提供した者がアテローム血栓性脳梗塞に罹患していないまたはその蓋然性が低いと鑑別することができる。アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値は、単一にまたは複数に装置に設定することができ、複数のカットオフ値を設定した際の鑑別は、先に述べたように多段階に行うようにすることもできる。
　本装置において、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測は、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値を比較することにより実施され得る。アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値は装置に予め記憶されていてもよいし、予測の際に、装置の入力部位から入力されてもよい。比較の結果、例えば、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上の場合に、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症するまたはその可能性が高いと予測でき、逆にアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値未満の場合に、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症しないまたは発症可能性が低いと予測することができる。アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値は、単一にまたは複数に装置に設定することができ、複数のカットオフ値を設定した際の予測は、先に述べたように多段階に行うようにすることもできる。
　あるいは、本装置において、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測は、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化をアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲と対比することにより実施され得る。アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲は装置に予め記憶されていてもよいし、予測の際に、装置の入力部位から入力されてもよい。比較の結果、例えば、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化が、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれる場合には、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症するまたはその可能性が高いと予測でき、逆にアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれない場合には、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症しないまたは発症可能性が低いと予測することができる。
　また、本装置において、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測は、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比およびその比の経時変化をそれぞれアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値およびアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲と対比することにより実施され得る。アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値およびアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲は装置に予め記憶されていてもよいし、予測の際に、装置の入力部位から入力されてもよい。比較の結果、例えば、演算部で得られたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比およびその比の経時変化が、それぞれアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上でありかつアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれる場合には、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症するまたはその可能性が高いと予測でき、逆に当該比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値未満であるか、または、当該比の経時変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に含まれない場合には、生体試料を提供した者が将来アテローム血栓性脳梗塞を発症しないまたは発症可能性が低いと予測することができる。
　本装置は、出力部を備えていてもよい。出力部では、病型鑑別または発症予測結果をディスプレイなどの表示装置やプリンターなどの印刷装置に表示または出力させるなどの処理が行われる。
　本装置は、ＰＯＣ検査装置（一般的には、臨床の現場において患者のすぐそば（例えばベッドサイド）で検査するための装置）であることが、利便性等の観点から好ましい。
（６）本発明のアテローム血栓性脳梗塞診断用キット
　本発明のアテローム血栓性脳梗塞診断用キットに含まれるグリコアルブミン測定試薬は、生体試料中のグリコアルブミンを測定可能な試薬である限り、測定方法（ＨＰＬＣ法、免疫法、酵素法など）や試薬の構成等は特に限定されるものでない。測定方法としては酵素法を好ましく例示できる。例えば、酵素法を採用したルシカＧＡまたはルシカＧＡ－Ｌ（いずれも旭化成社製）をグリコアルブミン測定試薬として好ましく例示できる。
　本発明のアテローム血栓性脳梗塞診断用キットに含まれるヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬は、生体試料中のヘモグロビンＡ１ｃを測定可能な試薬である限り、測定方法（ＨＰＬＣ法、免疫法、酵素法など）や試薬の構成等は特に限定されるものでない。ヘモグロビンＡ１ｃの測定は、日本糖尿病学会または関連学会により標準化されており、この標準化に適合した測定であることが好ましい。例えば、酵素法を採用したサンクHbA1c（アークレイ社製）を挙げることができる。
　本発明のアテローム血栓性脳梗塞診断用キットは、本キットに含まれるグリコアルブミン測定試薬を用いて測定された生体試料中のグリコアルブミンと、本キットに含まれるヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬を用いて測定された生体試料中のヘモグロビンＡ１ｃの比（グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比）（および／またはその比の経時変化）を指標として、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別またはその発症の予測の用途として使用される。病型鑑別またはその発症の予測は、上述の通り、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値またはアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値との比較あるいはアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲との比較により実施され得る。
　本発明の測定対象となる生体試料は少なくともヘモグロビン、糖化タンパク質を含有する被検液であればいかなるものを用いてもよい。好ましい被検液の種類としては血液成分、例えば血清、血漿、血球、全血、もしくは分離された赤血球等が挙げられる。また、血清、血漿は通常の方法で分離されたものを用いてよい。生体試料は、自体公知の方法等により容易に入手可能であり、生体試料は慣用の方法により前処理されたものであってもよい。
　本発明を以下の実施例により更に具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。
[実施例１]
　９９名の急性期脳梗塞の患者に関して神経内科医、救急医、放射線医、糖尿病医により、病歴、身体所見、ＣＴ、ＭＲＩ画像等により総合的に判定を行った。９９例を鑑別した結果、アテローム血栓性脳梗塞患者は３８例、心原性脳梗塞は３７例、ラクナ梗塞は２４例であった。図１にそれらの年齢、性別、ＢＭＩ、喫煙の有無、その他のデータを示す。アテローム血栓性脳梗塞患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は３．２と心原性脳梗塞患者、ラクナ梗塞患者と比較して有意に高かった（Ｐ＜０．００１）。
　図２に示す各種測定結果からアテローム血栓性脳梗塞を推定する因子を単回帰分析により求めたところ、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がＰ＜０．００１を示し、アテローム血栓性脳梗塞の説明変数であることが判明した。さらに、Ｐ値＜０．２を示した説明変数につき、二項ロジスティック解析を行った結果、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が独立の説明変数であることが判明した（図３）。以上の結果より、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比により、アテローム血栓性脳梗塞を鑑別できることを見出した。
　９９名の急性期脳梗塞患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比のデータを用いて、アテローム血栓性脳梗塞を鑑別するためのグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比をＲＯＣ曲線より求めた。ＲＯＣ曲線の結果を図４に示す。図４より、アテローム血栓性脳梗塞を鑑別するための判定値（アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値）として３．２２が得られた。グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比３．２２を判別値として急性期脳梗塞患者の病型判別をした場合、感度９１．７％と高感度であり、また特異度９５．０％と擬陽性の少ない効率の良い判定が可能であった。
　以上のことから、急性期脳梗塞患者においてグリコアルブミン及びヘモグロビンＡ１ｃを測定し、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を求めることにより、アテローム血栓性脳梗塞の鑑別が感度、特異度、ともに良好に行うことが可能で、従来、高度に専門的、複雑かつ高価な装置を必要とした急性期脳梗塞の病型鑑別が簡便、迅速かつ安価に行うことができた。
　ヘモグロビンの寿命およびアルブミンの半減期に関わる疾患を有しない糖尿病患者１０５名の血液を通常の採血管で採血し、グリコアルブミン及びヘモグロビンＡ１ｃを測定した。グリコアルブミンの測定は酵素法、ヘモグロビンＡ１ｃの測定はＨＰＬＣ法を用いた。　図５に、ヘモグロビンの寿命およびアルブミンの半減期に関わる疾患及び脳梗塞を有しない糖尿病患者１０５名におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃの関係を示す。これらの患者のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は２．９０であった。
　血糖状態が安定している状態ではグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は２．９０であり、アテローム血栓性脳梗塞の完成過程においては２．９０より高値になることが考えられる。対象患者において、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比によりアテローム血栓性脳梗塞発症の予測を行なうことが可能である。
　例えば、あるアテローム血栓性脳梗塞発症患者の発症時点のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は４．３０と約３程度の特徴的な値と比較して著しく高値であり、発症１ヶ月前のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は４．１５、発症３ヶ月前のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は３．３９であり、アテローム血栓性脳梗塞発症時に近づくにつれ上昇していた。
　グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を定期的にモニターすることにより、アテローム血栓性脳梗塞の発症の予測が可能である。
　例えば、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として発症予測することができる。具体的には、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比３．２２以上は発症の可能性が高い、３．００～３．２２は発症の可能性がある、３．００以下は発症の可能性が低い等、評価判定すればよい。
　あるいは、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比の経時変化自体を指標として発症を予測することもできる。すなわち、経時変化がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲に存在する場合には発症の可能性が高いと判定することができる。例えば、比の時間変化が、０．００５～０．０３／日、好ましくは０．００８～０．０２／日、さらに好ましくは０．０１～０．０１５／日に含まれる場合には発症の可能性が高いと判定できる。上記の例で説明すれば、発症３ヶ月前～発症１ヶ月前において、（４．１５－３．３９）／約６０日＝約０．０１３／日のペースで比の増大がみられることから、発症３ヶ月前から発症１ヶ月前まで間で比をモニターすることで発症可能性が高いと判定することができる。
　また、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とその経時変化の組合せを指標として発症を予測することもできる。例えば、比３．２２以上であって、かつ、その時間変化が０．１～０．１５／日に含まれる場合には、発症の可能性が高いと判定できる。上記の例で説明すれば、発症３ヶ月前のグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比は３．３９であり高値であることから、医師等はこの時点あるいはそれ以前からこの患者への定期的なモニタリングを開始することが好ましく、その後、１日あたりの比の増加が０．１～０．１５／日に達するとそこでこの患者はアテローム血栓性脳梗塞発症の可能性が高いと判定することができる。
　あるいは、その他の評価判定方法を用いてもよい。
　本発明においては、グリコアルブミン及びヘモグロビンＡ１ｃを測定し、そのグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を求めることにより、急性期脳梗塞の病型鑑別を良好な感度及び特異度で、かつ簡便、迅速、安価に行うことができる。また、本発明においては、アテローム血栓性梗塞の発症予測を、良好な感度及び特異度で、かつ簡便、迅速、安価に行うことができる。本発明の方法、装置及び試薬は、臨床検査において有用である。

Claims (13)

  1. 急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として、該グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値以上の場合にアテローム血栓性脳梗塞であると判定することを特徴とする、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法。
  2. 下記の（１）～（３）の工程を含む、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型を鑑別する方法；
    （１）急性期脳梗塞患者の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定する工程；
    （２）工程（１）で得た測定値よりグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を算出する工程；及び
    （３）工程（２）で算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比と、アテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別用カットオフ値とを比較する工程。
  3. 病型鑑別用カットオフ値が３から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、請求項１又は２に記載の鑑別方法。
  4. 病型鑑別用カットオフ値が３．２から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、請求項１又は２に記載の鑑別方法。
  5. 被験者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標として、該グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比が、アテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上の場合にアテローム血栓性脳梗塞を発症する可能性が高いと判定することを特徴とする、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法。
  6. 下記の（１）～（３）の工程を含む、アテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法；
    （１）被験者の生体試料の生体試料におけるグリコアルブミンとヘモグロビンＡ１ｃを測定する工程；
    （２）工程（１）で得た測定値よりグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を算出する工程；及び
    （３）工程（２）で算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値とを比較する工程。
  7. 発症予測用カットオフ値が３から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、請求項５又は６に記載の予測方法。
  8. 発症予測用カットオフ値が３．２から６の間で任意に設定された数値であり、生体試料が血液試料である、請求項５又は６に記載の予測方法。
  9. （ａ）グリコアルブミンの測定部、（ｂ）ヘモグロビンＡ１ｃの測定部、（ｃ）測定されたグリコアルブミン値及びヘモグロビンＡ１ｃ値に基づいて、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比の算出を行う演算部、及び（ｄ）算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比に基づいて、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための判定部を有する、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための装置。
  10. グリコアルブミン測定試薬及びヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬を含むアテローム血栓性脳梗塞診断用キットであって、グリコアルブミン測定用試薬による測定で得られたグリコアルブミン値とヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬による測定で得られたヘモグロビンＡ１ｃ値により算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比を指標とし、急性期脳梗塞患者におけるアテローム血栓性脳梗塞の病型鑑別、又は被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キット。
  11. 被験者の生体試料におけるグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比及びその経時変化を指標とするアテローム血栓性脳梗塞の発症を予測する方法であって、下記の判定基準を満たす場合にアテローム血栓性脳梗塞を発症する可能性が高いと判定することを特徴とする予測方法；
    １）グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用カットオフ値以上の場合であること、かつ、
    ２）１）の比の一日あたりの増加量がアテローム血栓性脳梗塞の発症予測用経時変化カットオフ範囲であること。
  12. （ａ）グリコアルブミンの測定部、（ｂ）ヘモグロビンＡ１ｃの測定部、（ｃ）測定されたグリコアルブミン値及びヘモグロビンＡ１ｃ値に基づいて、グリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃの比とその経時変化の算出を行う演算部、及び（ｄ）算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比とその経時変化に基づいて、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための判定部を有する、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うための装置。
  13. グリコアルブミン測定試薬及びヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬を含むアテローム血栓性脳梗塞診断用キットであって、グリコアルブミン測定用試薬による測定で得られたグリコアルブミン値とヘモグロビンＡ１ｃ測定試薬による測定で得られたヘモグロビンＡ１ｃ値により算出されたグリコアルブミン／ヘモグロビンＡ１ｃ比およびその経時変化を指標とし、被験者においてアテローム血栓性脳梗塞の発症予測を行うためのアテローム血栓性脳梗塞診断用キット。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017200025A1 (ja) * 2016-05-17 2017-11-23 国立大学法人大阪大学 糖尿病を判定するための血液試料の分析方法及びシステム
WO2018084242A1 (ja) * 2016-11-02 2018-05-11 国立大学法人九州大学 アルツハイマー病のリスクの決定方法
WO2020013230A1 (ja) * 2018-07-11 2020-01-16 株式会社Ｐｒｏｖｉｇａｔｅ ヘルスケア管理方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008232775A (ja) * 2007-03-20 2008-10-02 Asahi Kasei Pharma Kk 肝疾患における正確な血糖コントロール状態および肝機能を算出する方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008232775A (ja) * 2007-03-20 2008-10-02 Asahi Kasei Pharma Kk 肝疾患における正確な血糖コントロール状態および肝機能を算出する方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KIRTI KAIN ET AL.: "Increased fibrinogen, von Willebrand factor and tissue plasminogen activator levels in insulin resistant South Asian patients with ischaemic stroke", ATHEROSCLEROSIS, vol. 163, 2002, pages 371 - 376 *
MASASHI YOSHIDA ET AL.: "Glycated albumin to HbAlc ratio differentates atherothrombotic brain infarction", THE 42ND ANNUAL SCIENTIFIC MEETING OF THE JAPAN ATHEROSCLEROSIS SOCIETY PROGRAM SHOROKUSHU, vol. 42, 15 July 2010 (2010-07-15), pages 268 *
MASASHI YOSHIDA ET AL.: "The ratio of glycated albumin to glycohemoglobin on admission is increased in atherothrombotic - stroke patients", ENDOCRINE JOURNAL, vol. 57, no. SUPP.2, March 2010 (2010-03-01), pages S359 - ABSTR..P1-3-2 *
TAKATOSHI IMAI ET AL.: "Improved Monitoring of the Hyperglycemic State in Type 1 Diabetes Patients by Use of the Glycoalbumin/HbAlc Ratio", THE REVIEW OF DIABETIC STUDIES, vol. 4, no. 1, 2007, pages 44 - 48 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017200025A1 (ja) * 2016-05-17 2017-11-23 国立大学法人大阪大学 糖尿病を判定するための血液試料の分析方法及びシステム
JP2017207490A (ja) * 2016-05-17 2017-11-24 国立大学法人大阪大学 糖尿病を判定するための血液試料の分析方法及びシステム
JP2019191192A (ja) * 2016-05-17 2019-10-31 国立大学法人大阪大学 糖尿病を判定するための血液試料の分析方法及びシステム
EP3460478A4 (en) * 2016-05-17 2020-01-08 Osaka University METHOD AND SYSTEM FOR BLOOD SAMPLING FOR DETERMINING DIABETES
WO2018084242A1 (ja) * 2016-11-02 2018-05-11 国立大学法人九州大学 アルツハイマー病のリスクの決定方法
WO2020013230A1 (ja) * 2018-07-11 2020-01-16 株式会社Ｐｒｏｖｉｇａｔｅ ヘルスケア管理方法
JP7477875B2 (ja) 2018-07-11 2024-05-02 株式会社Provigate ヘルスケア管理方法

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