WO2011010715A1 - Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤 - Google Patents

Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2011010715A1
WO2011010715A1 PCT/JP2010/062402 JP2010062402W WO2011010715A1 WO 2011010715 A1 WO2011010715 A1 WO 2011010715A1 JP 2010062402 W JP2010062402 W JP 2010062402W WO 2011010715 A1 WO2011010715 A1 WO 2011010715A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
atom
inhibitor
set7
formula
Prior art date
Application number
PCT/JP2010/062402
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
龍彦 児玉
十志也 田中
猛 川村
洋一郎 和田
暁 杉山
快文 福西
Original Assignee
国立大学法人 東京大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 国立大学法人 東京大学 filed Critical 国立大学法人 東京大学
Priority to JP2011523702A priority Critical patent/JPWO2011010715A1/ja
Publication of WO2011010715A1 publication Critical patent/WO2011010715A1/ja

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/52—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D263/54—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles
    • C07D263/56—Benzoxazoles; Hydrogenated benzoxazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5428—Acyclic unsaturated phosphonium compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5442—Aromatic phosphonium compounds (P-C aromatic linkage)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5456—Arylalkanephosphonium compounds

Definitions

  • the present invention relates to a specific inhibitor for Pr-Set7 which is a histone methylase.
  • Eukaryotic chromosomal DNA has a higher-order structure in which the repeating structure of nucleosomes is connected in a spiral, and this structure is called chromatin.
  • the nucleosome has a structure in which DNA of 146 base pairs is wound around a histone octamer in which two kinds of histone proteins (core histones: H2A, H2B, H3, and H4) are gathered each two times.
  • the histones that make up the nucleosome are proteins with many basic amino acids such as lysine, and are strongly bound to acidic DNA. Histones undergo various modifications mainly at the N-terminal part (histone tail).
  • a transcriptional coactivator having histone acetyltransferase (HAT) activity is recruited to acetylate surrounding histones.
  • HAT histone acetyltransferase
  • This acetylation triggers the chromatin remodeling complex to be recruited onto the promoter, and transcription by basic transcription factors and RNA polymerase begins.
  • histones are controlled for chromatin structure and gene expression by phosphorylation, ubiquitination, and methylation modification.
  • Histone methylation is catalyzed by histone methyltransferase ( ⁇ ⁇ HMT) to lysine or arginine residues of histones.
  • Methyl groups added to specific lysine residues in histones are chemically stable and are thought to play a central role in epigenetics through control of chromatin conformation.
  • HP1 heterochromatin protein ⁇ 1
  • HP1 recognizes and binds to methylated K9
  • HP1 recruits DNA methylase and HDAC
  • HP1 aggregates to form peripheral chromatin. Convert the region to a closed state. It is known that gene silencing occurs through such a mechanism.
  • histone H3K4 methylation is known to correlate with transcriptional activation.
  • Pr-Set7 forms a 70-90 kDa homodimer, and the N-terminal part is responsible for nucleosome specificity.
  • this enzyme has a SET domain that is a consensus of histone methylase, and this domain is responsible for the site specificity of methylation.
  • Pr-Set7 is cell cycle-dependent transcriptional silencing (Mol.olCell, 9, pp.1201-1213, 2002) and control of mitosis in animals (Genes Dev., 19, pp.431-435, 2005) RHRKVLRDN (17-25) sequence in the SET domain of Pr-Set7 is essential for enzyme function (Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005; Genes Dev ., 19, pp.1455-1465, 2005). Recently, it has been reported that this enzyme is deeply involved in cancer and lifestyle-related diseases in mammals including humans (for cancer, Mol. Cell Biol., 28, pp.4459- 4468, 2008; For lifestyle-related diseases, see Mol. Cell Biol., 29, pp.3544-3555, 2009).
  • methylase requires a cofactor S-adenosylmethionine (AdoMet) as a methyl group donor for methylation.
  • AdoMet S-adenosylmethionine
  • AdoHcy S-adenosylhomocysteine
  • Pr-Set7 the mode of binding to the inhibitor AdoHcy is shown in detail in the above-mentioned document (Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005) together with the structural analysis results for protein crystals.
  • these inhibitors have an inhibitory action on methylating enzymes other than Pr-Set7, their specificity is low, and there is concern about the appearance of side effects when applied as pharmaceuticals.
  • An object of the present invention is to provide a substance having a specific inhibitory action on Pr-Set7 and useful as an active ingredient of a medicament for the prevention and / or treatment of cancer and lifestyle-related diseases It is in.
  • R 1 and R 2 each independently represent a C 1-6 alkyl group, a C 2-6 alkenyl group, a C 2-6 alkynyl group, a C 1-6 alkoxy group, or a cyano group
  • R 3 , R 4 , and R 5 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, or a C 1-6 alkyl group
  • Ar represents a phenyl group, a pyridyl group, a pyrimidyl group, a pyrazinyl group, a pyridazinyl group, or a pyranyl group.
  • R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 , R 16 , and R 17 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, or a C 1-6 alkyl group; An atom or a sulfur atom is shown.
  • R 21 , R 22 and R 23 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom or a C 1-6 alkyl group; R 24 and R 25 each independently represent a C 3-6 alkyl group Or a trialkylsilyl group is shown.
  • An inhibitor for histone methylase Pr-Set7 is provided.
  • the above inhibitor which is a specific inhibitor against histone methylase Pr-Set7; has substantially no inhibitory activity against histone methylase G9a or histone methylation
  • the above inhibitor having a weak inhibitory activity against the enzyme G9a; the inhibitor having a weak inhibitory activity against the methylation of the histone methylase G9a than the inhibitory activity of S-adenosylhomocysteine on the methylation of the enzyme;
  • the above-described inhibitors are provided in which the inhibitory activity against the methylation of the enzyme Pr-Set7 is stronger than the inhibitory activity of S-adenosylhomocysteine on the methylation of the enzyme.
  • R 1 and R 2 are each independently an ethyl group, vinyl group, ethynyl group, methoxy group, or cyano group, and R 3 , R 4 , and R 5 are hydrogen
  • the above-mentioned inhibitor, which is an atom or a fluorine atom, Ar is a phenyl group or a pyridyl group; in formula (I), R 1 and R 2 are both cyano groups, and R 3 , R 4 , and R 5 are hydrogen atoms; And the above inhibitor wherein Ar is a pyridyl group; in formula (I), R 1 and R 2 are both cyano groups, R 3 , R 4 and R 5 are hydrogen atoms, and Ar is 3-
  • the above-mentioned inhibitor which is a pyridyl group; in the formula (II), R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 , R 16 and R 17 are each independently a
  • a medicament for the prevention and / or treatment of cancer or lifestyle-related diseases which is represented by the above general formula (I), (II), or (III)
  • a pharmaceutical comprising the compound or a salt thereof as an active ingredient, and the above general formula (I), (II), or (III) for the production of the pharmaceutical for the prevention and / or treatment of cancer or lifestyle-related diseases Or a salt thereof is provided.
  • Yet another aspect is a method for preventing and / or treating cancer or lifestyle-related diseases, wherein the compound represented by the above general formula (I), (II), or (III) or a salt thereof is prevented. And / or a method comprising administering to a mammal, including a human, a therapeutically effective amount.
  • the Pr-Set7 inhibitor provided by the present invention has a strong inhibitory effect on Pr-Set7, and has higher specificity for Pr-Set7 than conventional histone methylase inhibitors. Therefore, for example, even when used as an active ingredient of a medicament for the prevention and / or treatment of cancer or lifestyle-related diseases, a desired pharmacological effect can be reliably exerted while reducing side effects.
  • FIG. 4 is a graph showing the results of evaluating the action of the inhibitor of the present invention with no inhibitor added (control), dimethyl sulfoxide (DMSO) alone, and S-adenosylhomocysteine (AdoHcy) added as controls.
  • FIG. 3 is a graph showing the concentration dependency of methylation inhibitory activity by the inhibitor of the present invention (EBI099). It is the figure which showed the result of having investigated the specificity of methylase inhibition about the inhibitor (EBI099) of this invention.
  • G9a shows the result of histone methyltransferase G9a
  • BIX is BIX01294 (2- (hexahydro-4-methyl-1H-1,4-diazepin-1-yl) -6,7-dimethoxy-N- [1- ( Phenylmethyl) -4-piperidinyl] -4-quinazolinamine ⁇ trihydrochloride ⁇ hydrate)
  • AdoHcy indicates the results for S-adenosylhomocysteine. It is the figure which showed the leukemia cell proliferation inhibitory effect of EBI099. It is the figure which showed the expression induction effect with respect to various genes of EBI099.
  • the inhibitor for histone methyltransferase Pr-Set7 of the present invention contains the compound represented by the above general formula (I), (II), or (III) or a salt thereof.
  • the inhibitor of the present invention is characterized by having a specific inhibitory action on the histone methylase Pr-Set7.
  • specific inhibitory action or a synonym thereof is Has a sufficient inhibitory action on the histone methylase Pr-Set7 and is a methylase other than Pr-Set7, preferably a histone methylase other than Pr-Set7 (eg, histone methylase G9a)
  • it means having an inhibitory action weaker than the inhibitory activity of S-adenosylhomocysteine, which is a conventionally known methylase inhibitor.
  • the inhibitor of the present invention has a stronger inhibitory effect on the histone methylase Pr-Set7 than the inhibitory activity of S-adenosylhomocysteine, and on histone methylases other than Pr-Set7. It is preferable that the inhibitory activity is weaker than the inhibitory activity of S-adenosylhomocysteine. Although it is particularly preferable that it has substantially no inhibitory action on histone methylases other than Pr-Set7, for example, for a histone methylase other than Pr-Set7, a non-inhibitor is present at a substrate concentration of about 10 ⁇ M.
  • methylation activity of about 90% or more with respect to the methylation activity in the presence, and / or about 50% or more of the methylation activity in the absence of an inhibitor at a substrate concentration of about 25 ⁇ M. It is preferred to provide methylation activity.
  • Pr-Set7 can be easily obtained by the method described in publications such as Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005, and the methylation activity is also specifically described in the above publication. Those skilled in the art can easily confirm by the method described in (1).
  • the examples of the present specification also provide specific and detailed explanations on the method for measuring methylation activity and the method for determining the inhibitory action of methylation activity. Therefore, those skilled in the art will recognize the above publications and examples of the present specification. Thus, it is possible to easily confirm the specific Pr-Set7 inhibitory action of the inhibitor of the present invention.
  • alkyl group means an alkyl group composed of a straight chain, a branched chain, a ring, or a combination thereof unless otherwise specified. The same applies to the alkyl moiety in other substituents containing an alkyl moiety (for example, an alkoxy group).
  • halogen atom means a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, or an iodine atom.
  • an alkyl group, an alkenyl group, an alkynyl group, an alkoxy group, a trialkylsilyl group, a phenyl group, a pyridyl group, a pyrimidyl group, a pyrazinyl group, a pyridazinyl group, or a pyranyl group referred to in this specification is located at a substitutable position.
  • One or more arbitrary substituents may be present. When it has two or more substituents, they may be the same or different.
  • an alkyl group or an alkoxy group may be substituted with one or more halogen atoms, preferably a fluorine atom, and one or two or more alkyl groups on the ring of a phenyl group or a pyridyl group ,
  • halogen atoms preferably a fluorine atom
  • alkyl groups on the ring of a phenyl group or a pyridyl group
  • An alkoxy group, a hydroxyl group, an amino group, a carboxyl group and the like may be substituted.
  • R 1 and R 2 each independently represent a C 1-6 alkyl group, a C 2-6 alkenyl group, a C 2-6 alkynyl group, a C 1-6 alkoxy group, or a cyano group.
  • the C 1-6 alkyl group represented by R 1 and R 2 is preferably a methyl group, an ethyl group, or an n-propyl group
  • the C 2-6 alkenyl group represented by R 1 and R 2 is a vinyl group, 1-propenyl.
  • the C 2-6 alkynyl group represented by R 1 and R 2 is preferably an ethynyl group, 1-propynyl group, or 2-propynyl group, and R 1 and R 2
  • the C 1-6 alkoxy group represented by is preferably a methoxy group or an ethoxy group.
  • the C 1-6 alkyl group is preferably an ethyl group
  • the C 2-6 alkenyl group is more preferably a vinyl group
  • the C 2-6 alkynyl group is more preferably an ethynyl group
  • the C 1-6 alkoxy group is a methoxy group. Groups are more preferred.
  • a trifluoroethyl group a pentafluoroethyl group, a trifluoromethoxy group, and the like are also preferable.
  • a cyano group is particularly preferable, and the case where both R 1 and R 2 are cyano groups is most preferable.
  • R 3 , R 4 , and R 5 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, or a C 1-6 alkyl group.
  • the halogen atom is preferably a fluorine atom
  • the C 1-6 alkyl group is preferably a methyl group.
  • a trifluoromethyl group may be preferred.
  • R 3 , R 4 , and R 5 are preferably hydrogen atoms.
  • Ar represents a phenyl group, a pyridyl group, a pyrimidyl group, a pyrazinyl group, a pyridazinyl group, or a pyranyl group, but the bonding position of the pyridyl group, the pyrimidyl group, the pyrazinyl group, the pyridazinyl group, or the pyranyl group is not particularly limited.
  • the pyridyl group may be a 2-pyridyl group, a 3-pyridyl group, or a 4-pyridyl group, but a 3-pyridyl group may be preferable.
  • Examples of the case where a substituent is present on the ring of the phenyl group, pyridyl group, pyrimidyl group, pyrazinyl group, pyridazinyl group, or pyranyl group include, for example, a fluorophenyl group, a toluyl group, an aminophenyl group, a hydroxyphenyl group, Examples thereof include, but are not limited to, a methylpyridyl group.
  • Ar is preferably a pyridyl group, more preferably a 3-pyridyl group.
  • R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 , R 16 , and R 17 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, or a C 1-6 alkyl group.
  • the halogen atom is preferably a fluorine atom
  • the C 1-6 alkyl group is preferably a methyl group.
  • a trifluoromethyl group may be preferred.
  • R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 , R 16 , and R 17 are preferably hydrogen atoms.
  • X represents a phosphorus atom or a sulfur atom, preferably a sulfur atom.
  • R 21 , R 22 , and R 23 each independently represent a hydrogen atom, a halogen atom, or a C 1-6 alkyl group.
  • the halogen atom is preferably a fluorine atom
  • the C 1-6 alkyl group is preferably a methyl group.
  • a trifluoromethyl group may be preferred.
  • R 21 , R 22 , and R 23 are hydrogen atoms is preferred.
  • R 24 and R 25 each independently represent a C 3-6 alkyl group or a trialkylsilyl group, and the C 3-6 alkyl group includes a branched alkyl group, a cyclic alkyl group, or an alkyl group containing a cyclic alkyl moiety.
  • cyclopropyl, cyclopropylmethyl, 1-methylcyclopropyl, 2-methylcyclopropyl, cyclobutyl, or cyclobutylmethyl Etc. can also be used.
  • An alkyl group in which one or two or more fluorine atoms are substituted on these alkyl groups may be preferable.
  • the trialkylsilyl group for example, a trimethylsilyl group can be used.
  • R 24 and R 25 are preferably both tert-butyl groups.
  • the compound represented by the general formula (I), (II), or (III) may exist in the form of a salt such as an acid addition salt or a base addition salt.
  • the salt can be used.
  • Acid addition salts include mineral acid salts such as hydrochloride or hydrobromide, or organic acid salts such as p-toluenesulfonate, methanesulfonate, oxalate, or tartrate.
  • a metal salt such as sodium salt, potassium salt, magnesium salt, or calcium salt, an ammonium salt, or an organic amine salt such as triethylamine salt or ethanolamine salt can be used. It can also exist as an amino acid salt such as a glycine salt.
  • the compound represented by the above general formula (I), (II), or (III) may have one or more asymmetric carbons depending on the type of the substituent.
  • Inhibitors of the present invention include any optical isomer based on asymmetric carbon, any mixture of optical isomers, racemate, diastereoisomer based on two or more asymmetric carbons, any mixture of diastereoisomers, etc. Can also be used.
  • any hydrate or solvate of a free compound or a compound in the form of a salt may be used as the inhibitor of the present invention.
  • particularly preferred compounds include those in general formula (I) wherein R 1 and R 2 are both cyano groups, R 3 , R 4 and R 5 are hydrogen atoms, and Ar is 3 A compound having a pyridyl group, a compound in which R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 , R 16 , and R 17 are hydrogen atoms and X is a sulfur atom in the general formula (II), and Examples thereof include compounds in which R 21 , R 22 , and R 23 are hydrogen atoms and R 24 and R 25 are tert-butyl groups in the formula (III), but the inhibitor of the present invention is not limited thereto. None happen.
  • the inhibitor of the present invention fits into the ligand binding site of Pr-Set7 and binds to the ligand binding site mainly by the following binding mode.
  • the following information is based on the above general formula (I) using the results of the three-dimensional structural analysis of the ligand binding site of Pr-Set7 described in Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005, for example. ), (II), and (III) can be easily obtained by those skilled in the art by conducting a docking experiment in consideration of the conformation of the compound represented by (III).
  • Bonding mode of the compound a hydrogen bond between the ring-constituting nitrogen atom constituting the six-membered ring containing X and the phenolic hydroxyl group of Tyr336 and the carbonyl group of the carboxyl group in Glu259, and the benzene of the phenol group on the benzene ring and Tyr336 Bonding by ⁇ - ⁇ interaction with the ring.
  • the compounds represented by the above general formulas (I), (II), and (III) have a specific inhibitory action on Pr-Set7, abnormal methylation by Pr-Set7, In particular, it can be used as an active ingredient of a pharmaceutical effective for the prevention and / or treatment of various diseases and syndromes involving abnormal hypermethylation.
  • Diseases that can be prevented and / or treated by inhibiting Pr-Set7 methylation include, for example, cancer (Mol.olCell Biol., 28, pp.4459-4468, 2008, etc.) and lifestyle diseases (Mol. Cell Biol., 29, pp.3544-3555, 2009, etc.).
  • the type of cancer that can be prevented and / or treated by the medicament of the present invention is not particularly limited.
  • non-solid cancer such as leukemia and malignant lymphoma, stomach cancer, lung cancer, liver cancer, pancreatic cancer, kidney cancer, colon cancer
  • solid cancers such as rectal cancer, esophageal cancer, skin cancer, and malignant brain tumor, but are not limited thereto.
  • lifestyle-related diseases include dyslipidemias such as hypertension and hyperlipidemia, hyperuricemia, fatty liver, arteriosclerosis, diabetes, ischemic heart diseases such as myocardial infarction, and ischemic brain diseases such as cerebral infarction However, it is not limited to these.
  • a drug containing the compounds represented by the above general formulas (I), (II), and (III) having a specific inhibitory action against Pr-Set7 as an active ingredient has an effect on these diseases.
  • the indication is readily understood by those skilled in the art based on the teachings and suggestions of the above publications.
  • the medicament of the present invention contains the compound represented by the above general formula (I), (II), or (III) or a physiologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • a hydrate or a solvate may be used.
  • the above substance itself may be administered as the medicament of the present invention, it can be preferably administered as an oral or parenteral pharmaceutical composition that can be produced by methods well known to those skilled in the art.
  • the pharmaceutical composition suitable for oral administration include tablets, capsules, powders, fine granules, granules, liquids, and syrups.
  • the pharmaceutical composition suitable for parenteral administration includes Examples include, but are not limited to, injections, suppositories, inhalants, eye drops, and nasal drops.
  • the above pharmaceutical composition can be produced by adding pharmacologically and pharmaceutically acceptable additives.
  • pharmacologically and pharmaceutically acceptable additives include, for example, excipients, disintegrants or disintegration aids, binders, lubricants, coating agents, dyes, diluents, bases, and dissolution.
  • examples include, but are not limited to, agents or solubilizers, isotonic agents, pH adjusters, stabilizers, propellants, and adhesives.
  • the dosage of the pharmaceutical agent of the present invention is not particularly limited, and can be appropriately selected according to the type of disease, the purpose of prevention or treatment, the type of active ingredient, etc., and the patient's weight and age, symptoms, administration route, etc. It can be increased or decreased as appropriate according to various factors that should be normally considered. For example, in the case of oral administration, it can be used in the range of about 0.01 to 1,000 mg per day for an adult, but the dose can be appropriately selected by those skilled in the art and is not limited to the above range.
  • Six kinds of relaxation structures were made using dynamic simulation.
  • ⁇ Sievgene '' Journal of Molecular Graphics and Modeling, 24, pp.34-45, 2005
  • multiple target screening (MTS) method for these 7 types of target protein structures Were screened and narrowed down to 100,000 compounds for each target protein structure (100,000 x 7 target protein structures).
  • MTS target screening
  • Families with SET domains including PR-set7 are known to methylate specific lysine residues using S-adenosylmethionine (AdoMet) as a cofactor and the cofactor binding pocket is the SET family
  • AdoMet S-adenosylmethionine
  • the complex protein containing Pr-Set7 and S-adenosylhomo-cysteine is used in this screening.
  • the structure we searched for compounds that bind to parts other than the pocket to which the cofactor binds. Since this region is a pocket containing a large amount of tyrosine, the compound was limited to a molecule containing a ring in consideration of the attractive force between the rings.
  • Example 2 In vitro test of inhibitors against Pr-Set7
  • a Construction of Pr-Set7 protein expression vector Primer (SEQ ID NO: 1) that uses a human Pr-Set7 gene (Invitrogen) as a template and adds a HindIII site on the 5 ′ end side and an EcoRI site on the 3 ′ end side by PCR.
  • Fw primer, SEQ ID NO: 2: Rv primer was used to amplify the amino acid sequence 195-353 aa containing the SET domain.
  • treatment was performed with restriction enzymes HindIII and EcoRI. The sample treated with the restriction enzyme was subjected to gel purification after electrophoresis.
  • the pPAL7 vector (manufactured by BIO-RAD) was subjected to enzyme treatment and gel purification.
  • the purified vector and PCR product were ligated by the designated method using 2 ⁇ Rapid Ligation Buffer and T4DNA Polymerase (both Promega). Transformation of E. coli was performed by adding 2 microliters of ligation product to 50 microliters of DH5 ⁇ competent cell (manufactured by TOYOBO). Plasmid extraction was performed using Miniprep Kit (manufactured by QIAGEN), and the sequence of the obtained plasmid was confirmed by sequence analysis.
  • the protein was stained with SimplyBlue SafeStain (manufactured by Invitrogen) to confirm the purity of the purification.
  • the purified protein was subjected to centrifugal concentration by Vibaspin ultrafiltration (GE Healthcare).
  • Inhibitory activity was measured by adding an inhibitor S-adenosylhomocysteine at a concentration of 5 mM or an inhibitor candidate compound at a concentration of 100 ⁇ g / ml and performing an enzyme reaction.
  • the inhibitor candidate compound was dissolved in dimethyl sulfoxide at a concentration of 10 mg / ml and added to the reaction solution in an amount of 1/100.
  • the enzyme reaction was stopped by adding an equal amount of 2.5% trifluoroacetic acid to the reaction solution, and desalting was performed using a desalting chip. After desalting, the sample was resolubilized in 2% acetonitrile and 0.1% trifluoroacetic acid so that the peptide concentration was 2.5 pmol / ⁇ l, and 1 ⁇ l was matrix-assisted laser desorption / ionization time-of-flight mass spectrometer (Matrix Assisted It was used for measurement by Laser (Desorption) Ionization (Timer of Flight (Mass) Spectrometry (MALDI-TOF MS)).
  • Matrix Assisted It was used for measurement by Laser (Desorption) Ionization (Timer of Flight (Mass) Spectrometry (MALDI-TOF MS)
  • FIG. 2 shows the results of examining the concentration dependency of methylation inhibitory activity for S-099 (hereinafter referred to as “EBI099”).
  • FIG. 3 shows the results of examining the specificity of methylase inhibition for EBI099.
  • histone methylase G9a (Molecular Cell, 25, 473pp.473-481, 2007) was used as the methylating enzyme, and the inhibitory activity at substrate concentrations of 10 ⁇ M and 25 ⁇ M was examined.
  • EBI099 has high specificity for Pr-Set7.
  • Example 3 The inhibitory effect of EBI099 on leukemia cell proliferation was examined. Put a dimethyl sulfoxide (DMSO) solution (0, 25, 50, 75, and 100 ⁇ g / ml) of EBI099 in K562 cells (3 ⁇ 10 4 cells / ml) and count the number of cells after 20 and 60 hours with a hemocytometer Counted. The results are shown in FIG. EBI099 was shown to have a growth inhibitory effect on leukemia cells.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • Example 4 The expression induction of various genes of EBI099 was examined.
  • EBI099 100 ⁇ g / ml dissolved in DMSO was added to K562 cells, and RNA was extracted 24 hours later.
  • Affymetrix microarray Human Genome U133 Plus 2.0 array is hybridized with a target cDNA incorporating a fluorescent label from RNA by reverse transcription according to the protocol attached to the product, and then a signal is detected with a fluorescence image analyzer did. Fold change was calculated using a DMSO-treated specimen as a control, and gene expression fluctuations due to EBI-099 were evaluated. The results are shown in FIG. Since it has an expression-inducing activity for each gene shown in FIG. 5, it is considered to have efficacy against diseases such as cancer and lifestyle-related diseases.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

式(I)、(II)、又は(III)〔式(I)中、R1 及びR2 はアルキル基等を示し；R3、R4、及びR5 は水素原子等を示し；Ar はフェニル基等を示す。式(II)中、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17 はそれぞれ独立に水素原子等を示し；X はリン原子等を示す。式(III)中、R21、R22、及びR23 はそれぞれ独立に水素原子等を示し；R24 及びR25 はそれぞれ独立にC3-6 アルキル基等を示す〕で表される化合物又はその塩などを含み、がんや生活習慣病の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用なヒストンメチル化酵素Pr-Set7 に対する阻害剤。

Description

Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤
　本発明はヒストンメチル化酵素であるPr-Set7に対する特異的な阻害剤に関するものである。
　真核生物の染色体DNAはヌクレオソームの繰り返し構造がらせん状につながった高次構造をとっており、この構造はクロマチンと呼ばれている。ヌクレオソームは4種のヒストンタンパク質(コアヒストン：H2A、H2B、H3、及びH4)がそれぞれ2分子ずつ集合したヒストンオクタマーに146塩基対のDNAが約2回転巻き付いた構造をとっている。ヌクレオソームを構成するヒストンはリジンなどの塩基性アミノ酸を多数もつタンパク質であり、酸性を示すDNAと強固に結合している。ヒストンは主としてN末端の部分(ヒストンテール)で様々な修飾を受ける。
　例えば、転写因子が標的遺伝子に結合すると、ヒストンアセチル化酵素(histone acetyl transferase: HAT)活性を有する転写コアクチベーターがリクルートされ周辺のヒストンをアセチル化する。このアセチル化が引き金となってクロマチン・リモデリング複合体がプロモーター上にリクルートされ、基本転写因子とRNAポリメラーゼによる転写が開始する。さらに、ヒストンはリン酸化、ユビキチン化、及びメチル化修飾によりクロマチン構造や遺伝子発現の制御を受けている。ヒストンのメチル化は、ヒストンのリジン残基又はアルギニン残基に対してヒストンメチル化酵素(Histone methyltransferase: HMT)によって触媒される。ヒストンにおける特定のリジン残基に付加されるメチル基は化学的に安定であり、クロマチン高次構造の制御を介したエピジェネティクスの中心的役割を担うものと考えられている。
　現在、よく解析されているのはヒストンH3K9やH3K4のメチル化である。ヒストンH3K9のメチル化では、メチル化されたK9をHP1（heterochromatin protein 1）が認識して結合し、HP1はDNAメチル化酵素やHDACをリクルートし、さらにHP1同士が集合化することにより、周辺クロマチン領域を閉じた状態に変換する。このような機構により、遺伝子座のサイレンシングが起こることが知られている。一方、ヒストンH3K4のメチル化は、転写の活性化と相関することが知られている。
　また、ヌクレオソ－ム結晶構造の解析結果からヒストンH4の16から20番目の残基が隣接する他のヌクレオソ－ムと相互作用してクロマチンの高次構造形成に直接関与する可能性が示唆されており、このうち特に20番目のリジン残基へのメチル化がクロマチン高次構造形成の中心的役割を担うものとしてその重要性が強く示唆されていたが、ヌクレオソ－ム中のヒストンH4の20番目のリジン残基を特異的にメチル化する酵素が見出され(Curr. Biol., 12, pp.1086-1099, 2002)、その機能が解明されつつある(Genes Dev., 16, pp.2225-2230, 2002: 以下、本明細書においてこの酵素を「Pr-Set7」と呼ぶ場合があるが、この酵素は「SET8」と呼ばれる場合もある)。
　Pr-Set7は70－90kDaのホモ二量体を形成しており、N末端部分がヌクレオソ－ム特異性を担っている。また、この酵素はヒストン・メチル化酵素のコンセンサスであるSETドメインを有しているが、このドメインがメチル化の部位特異性を担っている。Pr-Set7は細胞周期に依存した転写サイレンシング(Mol. Cell, 9, pp.1201-1213, 2002)及び動物における有糸分裂の制御(Genes Dev., 19, pp.431-435, 2005)に関与しているが、Pr-Set7のSETドメイン中のRHRKVLRDN(17-25)配列が酵素機能に必須であるとされている(Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005; Genes Dev., 19, pp.1455-1465, 2005)。また、最近、この酵素がヒトを含む哺乳類動物におけるがんや生活習慣病に深く関与しているとの知見が報告されている(がんについてはMol. Cell Biol., 28, pp.4459-4468, 2008; 生活習慣病についてはMol. Cell Biol., 29, pp.3544-3555, 2009などを参照のこと)。
　一方、メチル化酵素はメチル化を行うためのメチル基供与体として補因子S-アデノシルメチオニン(AdoMet)を必要とする。AdoMetはメチル基を与えるとS-アデノシルホモシステイン(AdoHcy)に変化することから、このAdoHcyを反応系内に存在させることによりメチル化酵素は競合阻害を受け、ほとんどのメチル化酵素は強力に阻害される(総説としてGenome Biology, 26, p.227, 2005などを参照のこと)。Pr-Set7については、タンパク質結晶についての構造解析結果とともに阻害剤AdoHcyとの結合の様式が上記文献(Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005)に詳細に示されている。しかしながら、これらの阻害剤はPr-Set7以外のメチル化酵素に対しても阻害作用を示すことから特異性が低く、医薬として適用する場合には副作用の発現が懸念される。
Curr. Biol., 12, pp.1086-1099, 2002 Genes Dev., 16, pp.2225-2230, 2002 Mol. Cell, 9, pp.1201-1213, 2002 Genes Dev., 19, pp.431-435, 2005 Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005 Genes Dev., 19, pp.1455-1465, 2005 Mol. Cell Biol., 28, pp.4459-4468, 2008 Mol. Cell Biol., 29, pp.3544-3555, 2009 Genome Biology, 26, p.227, 2005
　本発明の課題は、Pr-Set7に対して特異的な阻害作用を有しており、がんや生活習慣病の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として有用な物質を提供することにある。
　本発明者らは上記の課題を解決すべく、上記刊行物(Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005)に記載されたPr-Set7についての結晶構造解析の結果(タンパク質構造データバンク(PDB)、ID＝1zkk)を基にしてPr-Set7のリガンド結合部位に結合可能な約3500種類の阻害剤候補化合物をイン・シリコ・スクリーニングにより選抜し、それらのなかから、Pr-Set7に対して強い阻害活性を有しており、かつ他のヒストンメチル化酵素(例えばヒストンメチル化酵素G9aなど)に対しては阻害活性が弱いか、又は実質的に阻害活性を有しない化合物をイン・ビトロ試験により選択することに成功した。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。
　すなわち、本発明により、下記の一般式(I)、(II)、又は(III)：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 〔式(I)中、R1及びR2はそれぞれ独立にC1-6アルキル基、C2-6アルケニル基、C2-6アルキニル基、C1-6アルコキシ基、又はシアノ基を示し；R3、R4、及びR5はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；Arはフェニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基を示す。式(II)中、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；Xはリン原子又はイオウ原子を示す。式(III)中、R21、R22、及びR23はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；R24及びR25はそれぞれ独立にC3-6アルキル基又はトリアルキルシリル基を示す。〕で表される化合物又はその塩を含むヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対する阻害剤が提供される。
　上記発明の好ましい態様によれば、ヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対する特異的阻害剤である上記の阻害剤；ヒストンメチル化酵素G9aに対して実質的に阻害活性を有しないか、又はヒストンメチル化酵素G9aに対する阻害活性が弱い上記の阻害剤；ヒストンメチル化酵素G9aのメチル化に対する阻害活性が該酵素のメチル化に対するS-アデノシルホモシステインの阻害活性よりも弱い上記の阻害剤；ヒストンメチル化酵素Pr-Set7のメチル化に対する阻害活性が該酵素のメチル化に対するS-アデノシルホモシステインの阻害活性よりも強い上記の阻害剤が提供される。
　さらに好ましい態様によれば、式(I)においてR1及びR2がそれぞれ独立にエチル基、ビニル基、エチニル基、メトキシ基、又はシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子又はフッ素原子であり、Arがフェニル基又はピリジル基である上記の阻害剤；式(I)においてR1及びR2が共にシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子であり、Arがピリジル基である上記の阻害剤；式(I)においてR1及びR2が共にシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子であり、Arが3-ピリジル基である上記の阻害剤；式(II)において、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17がそれぞれ独立に水素原子又はフッ素原子であり、Xがイオウ原子である上記の阻害剤；式(II)において、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17が水素原子であり、Xがイオウ原子である上記の阻害剤；式(III)において、R21、R22、及びR23がそれぞれ独立に水素原子又はフッ素原子であり、R24及びR25がそれぞれ独立にイソプロピル基、tert-ブチル基、sec-ブチル基、イソブチル基、又はトリメチルシリル基である上記の阻害剤；及び式(III)において、R21、R22、及びR23が水素原子であり、R24及びR25がtert-ブチル基である上記の阻害剤が提供される。
　別の観点からは、本発明により、がん又は生活習慣病の予防及び／又は治療のための医薬であって、上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又はその塩を有効成分として含む医薬、及びがん又は生活習慣病の予防及び／又は治療のための上記医薬の製造のための上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又はその塩の使用が提供される。
　さらに別の観点からは、がん又は生活習慣病の予防及び／又は治療方法であって、上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又はその塩の予防及び／又は治療有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法が本発明により提供される。
　本発明により提供されるPr-Set7阻害剤はPr-Set7に対して強い阻害作用を有しており、従来のヒストンメチル化酵素阻害剤に比べてPr-Set7に対して高い特異性を有していることから、例えば、がん又は生活習慣病の予防及び／又は治療のための医薬の有効成分として用いる場合にも副作用を軽減しつつ所望の薬理効果を確実に発揮させることができる。
阻害剤無添加(control)、ジメチルスルホキシド(DMSO)単独、S-アデノシルホモシステイン(AdoHcy)添加を対照として本発明の阻害剤の作用を評価した結果を示した図である。 本発明の阻害剤(EBI099)によるメチル化阻害活性の濃度依存性を示した図である。 本発明の阻害剤(EBI099)についてメチル化酵素阻害の特異性を調べた結果を示した図である。G9aはヒストンメチル化酵素G9aの結果を示し、BIXはBIX01294 (2-(ヘキサヒドロ-4-メチル-1H-1,4-ジアゼピン-1-イル)-6,7-ジメトキシ-N-[1-(フェニルメチル)-4-ピペリジニル]-4-キナゾリンアミン・3塩酸塩・水和物)、AdoHcyはS-アデノシルホモシステインの結果を示す。 EBI099の白血病細胞増殖抑制効果を示した図である。 EBI099の各種遺伝子に対する発現誘導作用を示した図である。
　本発明のヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対する阻害剤は上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又はその塩を含んでいる。本発明の阻害剤は、ヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対して特異的な阻害作用を有することを特徴としているが、本明細書において用いられる「特異的な阻害作用」又はその同義語は、ヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対して十分な阻害作用を有しており、かつPr-Set7以外のメチル化酵素、好ましくはPr-Set7以外のヒストンメチル化酵素（例えばヒストンメチル化酵素G9aなど）に対して、従来知られているメチル化酵素阻害剤であるS-アデノシルホモシステインの阻害活性よりも弱い阻害作用を有することを意味する。
　例えば、本発明の阻害剤は、ヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対してS-アデノシルホモシステインの阻害活性より強い阻害作用を有しており、かつPr-Set7以外のヒストンメチル化酵素に対してS-アデノシルホモシステインの阻害活性よりも弱い阻害作用を有することが好ましい。Pr-Set7以外のヒストンメチル化酵素に対して実質的に阻害作用を有しないことが特に好ましいが、例えばPr-Set7以外のヒストンメチル化酵素に対しては基質濃度10μM程度の濃度で阻害剤非存在下におけるメチル化活性に対して約90%以上のメチル化活性を与えることが好ましく、及び／又は基質濃度25μM程度の濃度で阻害剤非存在下におけるメチル化活性に対して約50%以上のメチル化活性を与えることが好ましい。
　Pr-Set7は、例えばGenes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005などの刊行物に記載された方法により容易に入手することが可能であり、メチル化活性についても上記刊行物に具体的に説明された方法により当業者は容易に確認を行うことができる。本明細書の実施例にもメチル化活性の測定方法及びメチル化活性の阻害作用の判定方法について具体的かつ詳細な説明がなされているので、当業者は上記刊行物及び本明細書の実施例を参照することにより、本発明の阻害剤の特異的Pr-Set7阻害作用を容易に確認することが可能である。
　本明細書において「アルキル基」の用語は特に言及しない場合には直鎖状、分枝鎖状、環状、又はそれらの組み合わせからなるアルキル基を意味している。アルキル部分を含む他の置換基(例えばアルコキシ基など)におけるアルキル部分についても同様である。本明細書において「ハロゲン原子」とはフッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。また、本明細書において言及するアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、トリアルキルシリル基、フェニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基は、置換可能な位置に任意の置換基を1個又は2個以上有していてもよい。2個以上の置換基を有する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい。例えば、アルキル基やアルコキシ基には1個又は2個以上のハロゲン原子、好ましくはフッ素原子が置換していてもよく、フェニル基やピリジル基の環上には1個又は2個以上のアルキル基、アルコキシ基、水酸基、アミノ基、カルボキシル基などが置換していてもよい。
　式(I)中、R1及びR2はそれぞれ独立にC1-6アルキル基、C2-6アルケニル基、C2-6アルキニル基、C1-6アルコキシ基、又はシアノ基を示す。R1及びR2が示すC1-6アルキル基としてはメチル基、エチル基、又はn-プロピル基が好ましく、R1及びR2が示すC2-6アルケニル基としてはビニル基、1-プロペニル基、又は2-プロペニル基(アリル基)が好ましく、R1及びR2が示すC2-6アルキニル基としてはエチニル基、1-プロピニル基、又は2-プロピニル基が好ましく、R1及びR2が示すC1-6アルコキシ基としてはメトキシ基又はエトキシ基が好ましい。C1-6アルキル基としてはエチル基が好ましく、C2-6アルケニル基としてはビニル基がより好ましく、C2-6アルキニル基としてはエチニル基がより好ましく、C1-6アルコキシ基としてはメトキシ基がより好ましい。例えば、トリフルオロエチル基、ペンタフルオロエチル基、トリフルオロメトキシ基なども好ましい。これらのうち、特に好ましいのはシアノ基であり、R1及びR2が共にシアノ基である場合が最も好ましい。
　R3、R4、及びR5はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示す。ハロゲン原子としてはフッ素原子が好ましく、C1-6アルキル基としてはメチル基が好ましい。トリフルオロメチル基が好ましい場合もある。R3、R4、及びR5としては水素原子が好ましい。
　Arはフェニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基を示すが、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基の結合位置は特に限定されない。例えば、ピリジル基については2-ピリジル基、3-ピリジル基、又は4-ピリジル基のいずれであってもよいが、3-ピリジル基が好ましい場合がある。フェニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基の環上に置換基が存在する場合の例としては、例えば、フルオロフェニル基、トルイル基、アミノフェニル基、ヒドロキシフェニル基、メチルピリジル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。Arとしてはピリジル基が好ましく、3-ピリジル基がさらに好ましい。
　式(II)中、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示す。ハロゲン原子としてはフッ素原子が好ましく、C1-6アルキル基としてはメチル基が好ましい。トリフルオロメチル基が好ましい場合もある。R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17が水素原子であることが好ましい。Xはリン原子又はイオウ原子を示すが、イオウ原子であることが好ましい。
　式(III)中、R21、R22、及びR23はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示す。ハロゲン原子としてはフッ素原子が好ましく、C1-6アルキル基としてはメチル基が好ましい。トリフルオロメチル基が好ましい場合もある。R21、R22、及びR23が水素原子である場合が好ましい。R24及びR25はそれぞれ独立にC3-6アルキル基又はトリアルキルシリル基を示すが、C3-6アルキル基としては分枝鎖アルキル基、環状アルキル基、又は環状アルキル部分を含むアルキル基が好ましい。例えば、イソプロピル基、イソブチル基、tert-ブチル基、ネオペンチル基などのほか、シクロプロピル基、シクロプロピルメチル基、1-メチルシクロプロピル基、2-メチルシクロプロピル基、シクロブチル基、又はシクロブチルメチル基などを用いることもできる。これらのアルキル基に1個又は2個以上のフッ素原子が置換したアルキル基が好ましい場合もある。トリアルキルシリル基としては、例えばトリメチルシリル基などを用いることができる。R24及びR25がともにtert-ブチル基であることが好ましい。
　上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物は、酸付加塩又は塩基付加塩などの塩の形態で存在する場合があるが、本発明の阻害剤として任意の塩を使用することができる。酸付加塩としては、塩酸塩若しくは臭化水素酸塩などの鉱酸塩、又はp-トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、シュウ酸塩、若しくは酒石酸塩などの有機酸塩を挙げることができる。塩基付加塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、若しくはカルシウム塩などの金属塩、アンモニウム塩、又はトリエチルアミン塩若しくはエタノールアミン塩などの有機アミン塩などを用いることができる。また、グリシン塩などのアミノ酸塩として存在することもできる。
　上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物は、置換基の種類に応じて1個または2個以上の不斉炭素を有する場合があるが、これらの不斉炭素に基づく任意の光学異性体、光学異性体の任意の混合物、ラセミ体、2個以上の不斉炭素に基づくジアステレオ異性体、ジアステレオ異性体の任意の混合物などを本発明の阻害剤として用いることもできる。また、遊離化合物又は塩の形態の化合物の任意の水和物又は溶媒和物を本発明の阻害剤として用いてもよい。
　本発明の阻害剤のうち、特に好ましい化合物としては、一般式(I)においてR1及びR2が共にシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子であり、Arが3-ピリジル基である化合物、一般式(II)においてR11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17が水素原子であり、Xがイオウ原子である化合物、及び一般式(III)においてR21、R22、及びR23が水素原子であり、R24及びR25がtert-ブチル基である化合物を挙げることができるが、本発明の阻害剤はこれらに限定されることはない。これらの化合物は、例えば、Chem Cupid (Namiki Shoji Co., Ltd.: http://www.namiki-s.co.jp/chemcupid/)により検索し、試薬メーカーから研究用試薬として入手することが可能である。また、一般式(I)、(II)、及び(III)に包含される化合物は、例えば、試薬メーカーのカタログに収載された刊行物に記載されている上記の好ましい化合物の製造方法を参照しつつ、出発原料、反応試薬、及び反応条件などを適宜改変し、必要に応じて適宜の反応を付加することにより、いずれも容易に製造することが可能である。
　いかなる特定の理論に拘泥するわけではないが、本発明の阻害剤はPr-Set7のリガンド結合部位に嵌まり込み、主として以下の結合様式によりリガンド結合部位に結合するものと考えられる。下記の情報は、例えば、Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005に記載されたPr-Set7のリガンド結合部位についての3次元構造解析の結果を利用しつつ、上記の一般式(I)、(II)、及び(III)で表される化合物のコンフォーメーションを考慮したドッキング実験を行うことにより当業者に容易に入手可能である。従って、当業者は、上記の一般式(I)、(II)、及び(III)で表される化合物がいずれもPr-Set7のリガンド結合部位の空間内に入り込むことができ、阻害剤として機能するために好適なコンフォーメーションでリガンド結合部位に結合できることを容易に理解することができる。
(a)一般式(I)で表される化合物、及びその具体例としてR1及びR2が共にシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子であり、Arが3-ピリジル基である化合物の結合様式：R1に隣接するアミノ基とGlu259におけるカルボキシル基のカルボニル基との水素結合、R1に隣接するアミノ基とTyr274のフェノール性水酸基との水素結合、及びR3などが置換するベンゼン環とTyr274におけるフェノール基のベンゼン環とのπ-π相互作用による結合。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
(b)一般式(II)で表される化合物、及びその具体例としてR11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17が水素原子であり、Xがイオウ原子である化合物の結合様式：Xを含む6員環を構成する環構成窒素原子とそれぞれTyr336のフェノール性水酸基及びGlu259におけるカルボキシル基のカルボニル基との水素結合、及びベンゼン環とTyr336におけるフェノール基のベンゼン環とのπ-π相互作用による結合。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
(c)一般式(III)で表される化合物、及びその具体例としてR21、R22、及びR23が水素原子であり、R24及びR25がtert-ブチル基である化合物の結合様式：ナフタレン環に置換する水酸基とTyr271のカルボニル基及びTyr245のフェノール性水酸基との水素結合、及びオキサゾリジン環における環構成窒素原子とMet272のカルボニル基との水素結合。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
　上記の一般式(I)、(II)、及び(III)で表される化合物はPr-Set7に対して特異的な阻害作用を有していることから、Pr-Set7によるメチル化の異常、特にメチル化の異常亢進が関与する各種の疾患や症候群の予防及び／又は治療に有効な医薬の有効成分として利用することができる。Pr-Set7のメチル化を阻害することにより予防及び／又は治療可能な疾患としては、例えば、がん(Mol. Cell Biol., 28, pp.4459-4468, 2008など)及び生活習慣病（Mol. Cell Biol., 29, pp.3544-3555, 2009など）を挙げることができる。本発明の医薬により予防及び／又は治療可能ながんの種類は特に限定されないが、例えば、白血病、悪性リンパ腫などの非固形癌、胃癌、肺癌、肝臓癌、膵臓癌、腎臓癌、大腸癌、直腸癌、食道癌、皮膚癌、悪性脳腫瘍などの固形癌を挙げることができるが、これらに限定されることはない。生活習慣病としては、例えば、高血圧、高脂血症などの脂質異常症、高尿酸血症、脂肪肝、動脈硬化、糖尿病、心筋梗塞などの虚血性心疾患、脳梗塞などの虚血性脳疾患などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。Pr-Set7に対して特異的な阻害作用を有する上記の一般式(I)、(II)、及び(III)で表される化合物を有効成分として含む医薬がこれらの疾患に対して有効性を示すことは、上記の刊行物の教示及び示唆を基にして当業者に容易に理解される。
　本発明の医薬は、上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩を有効成分として含んでいるが、有効成分としては、上記の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又はその塩のほか、水和物又は溶媒和物を用いてもよい。本発明の医薬としては上記物質それ自体を投与してもよいが、好ましくは、当業者に周知の方法によって製造可能な経口用あるいは非経口用の医薬組成物として投与することができる。経口投与に適する医薬用組成物としては、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、及びシロップ剤等を挙げることができ、非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、坐剤、吸入剤、点眼剤、点鼻剤等を挙げることができるが、これらに限定されることはない。
　上記の医薬組成物は、薬理学的、製剤学的に許容しうる添加物を加えて製造することができる。薬理学的、製剤学的に許容しうる添加物の例としては、例えば、賦形剤、崩壊剤ないし崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、基剤、溶解剤ないし溶解補助剤、等張化剤、pH調節剤、安定化剤、噴射剤、及び粘着剤等を挙げることができるが、これらに限定されることはない。
　本発明の医薬の投与量は特に限定されず、疾患の種類、予防又は治療の目的、有効成分の種類などに応じて適宜選択することができ、さらに患者の体重や年齢、症状、投与経路など通常考慮すべき種々の要因に応じて、適宜増減することができる。例えば、経口投与の場合には成人一日あたり 0.01 ～1,000 mg程度の範囲で用いることができるが、投与量は当業者に適宜選択可能であり、上記の範囲に限定されることはない。
　以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。
例1：Pr-Set7阻害剤のイン・シリコ・スクリーニング
　Genes Dev., 19, pp.1444-1454, 2005において報告されているPr-Set7の結晶構造(タンパク質構造データバンク、ID＝1zkk)から分子動力学シミュレーションを用いて6種類の緩和構造物を作成した。ドッキングソフトとして「Sievgene」(Journal of Molecular Graphics and Modeling, 24, pp.34-45, 2005)を用いて、Multiple target screening (MTS)法にてこれら7種類の標的タンパク質構造に対して200万個の化合物をスクリーニングし、各標的タンパク質構造に対して10万個の化合物に絞り込んだ (10万個×7種類の標的タンパク質構造)。その際、データ量が膨大であることから、200万化合物を1万個ずつの200グループに分けた後、並列化して計算を行い、各グループについて上位500個を抽出することで10万個の化合物を取得した。
　PR-set7を含むSETドメインを有するファミリーはコファクターとしてS-アデノシルメチオニン(AdoMet)を用いて特定のリジン残基をメチル化することが知られており、コファクターとの結合ポケットはSETファミリータンパク間に共通性が認められる。従って、コファクター結合領域をドッキングモデルに用いるとスクリーニングにより得られる薬物の特異性が低下することが予想されることから、本スクリーニングではPr-Set7とS-アデノシルホモ-システインとを含んだ複合体タンパク質構造を用いて、コファクターが結合するポケット以外の部分に結合する化合物を探索した。なお、この領域はチロシンを多く含むポケットであることから、環同士の引力を考えて化合物は環を含む分子に限定した。
　次に、絞り込んだ10万化合物で構成される相互作用行列を標的タンパク構造毎に作成し、上位1,000個のリストを作成した(1,000個×7種類の標的タンパク質構造)。重複している化合物を除いた4,802化合物についてMTS法にて順位付けを行った後、フィルターツール(「最新創薬化学-探索研究から開発まで-上巻」、C.G. Wermuth著、長瀬博翻訳、テクノミック発行、2006年7月)にて医薬の有効成分としての適格を有しないと判断される1,258化合物を除き、得られた3,554化合物をイン・シリコ・スクリーニング結果とした。これらの化合物のなかから、入手可能な上位161化合物についてイン・ビトロ試験を行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000010
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000011
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000013
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000014
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000015
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000016
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000017
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000018
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000019
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000020
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000021
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000022
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000023
例2：Pr-Set7に対する阻害剤のイン・ビトロ試験
(a)Pr-Set7タンパク質発現ベクターの構築
　ヒトPr-Set7遺伝子(Invitrogen社)を鋳型にし、5'端側にHindIIIサイト、3'端側にEcoRIサイトをPCRにより付加するプライマー(配列番号1：Fwプライマー、配列番号2：Rvプライマー)を用いてSETドメインを含むアミノ酸配列195-353 aa部分の増幅を行った。PCR後、制限酵素HindIII、EcoRIにて処理を行った。制限酵素処理をしたサンプルを電気泳動の後にゲル精製した。同様にpPAL7ベクター(BIO-RAD社製)も酵素処理を実施し、ゲル精製を行った。精製したベクター及びPCR産物は2×Rapid Ligation BufferとT4DNA Polymerase(ともにPromega社)を用いて指定の方法でライゲーションを実施した。大腸菌のトランスフォーメーションは50マイクロリットルのDH5αコンピテントセル(TOYOBO社製)に対し、2マイクロリットルのライゲーション産物を添加し実施した。プラスミドの抽出はMiniprep Kit(QIAGEN社製)を用いて実施し、得られたプラスミドについてシーケンス解析により配列の確認を実施した。
(b)組換えタンパク質の発現
　ワイルドタイプストレプトアビジン及びミュータントストレプトアビジンの遺伝子配列を組み込んだpPAL7発現ベクターを常法に従い大腸菌BL21(BIO-RAD社)にトランスフェクションした。各タンパク質の発現は以下のように実施した。すなわち、大腸菌培養液の細胞密度がOD(600nm)0.5-0.7となるまで37℃にて培養を行い、適当な密度になったところに最終濃度1 mMになるようにIPTG(isopropyl-β-D-thiogalactopyanoside)を添加し、タンパク質発現を誘導し、20℃にて24時間の培養を行った。24時間の培養の後、菌体を遠心分離により細胞を集め、タンパク質精製まで-20℃で保存した。
(c)組換えタンパク質の精製
　組換えタンパク質の精製は、Profinity eXact Protein Purification System(BIO-RAD社製)の方法を用い実施した。BugBuster(Novagen社)を培養容量の1/20添加し細胞の溶解を行った。遠心分離後上清を総可溶性タンパク質とした。回収した可溶性画分は、Profiniaタンパク精製システム(BIO-RAD)の用法容量に従い処理を行った。総可溶性タンパク質、カラム通過画分、洗浄画分、溶出画分を10-20%　レディーゲルJ(BIO-RAD社製)を用いてSDS-PAGE電気泳動した。泳動後、タンパク質をSimplyBlue SafeStain(Invitrogen社製)で染色し精製純度の確認を実施した。精製したタンパク質はVibaspin限外ろ過(GE Healthcare社)による遠心濃縮を行った。
(d)質量分析計によるヒストンメチル化酵素活性測定
　精製した大腸菌発現ヒストンメチル化酵素Pr-Set7を用いて酵素活性測定を行った。100 mM HEPSE、1 mM ジチオスレイトール緩衝液中に2μM Pr-Set7、1 mM S-アデノシルメチオニン、100 μMヒストンH4ペプチド(ヒストンH4 の15-24アミノ酸の合成ペプチドのN末端をアセチル化、C末端をアミド化したペプチド：Ac-AKRHRKVLRD-NH2)を加え30℃で反応させ、30分及び60分でサンプリングを行った。阻害活性の測定には阻害剤S-アデノシルホモシステインを5 mM又は阻害剤候補化合物を100 μg/mlの濃度で加えて酵素反応を行った。阻害剤候補化合物は10 mg/mlの濃度でジメチルスルホキシドに溶解して反応液中に1/100量加えた。
　酵素反応を反応液と等量の2.5%トリフルオロ酢酸を加えることによって停止し、脱塩チップを使用して脱塩を行った。脱塩後の試料はペプチド濃度が2.5 pmol/μlになるように2%アセトニトリル、0.1%トリフルオロ酢酸に再可溶化し、1 μlをマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析計（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight Mass Spectrometry : MALDI-TOF MS）での測定に使用した。
　脱塩後の試料1 μlをMALDI-TOF MSのサンプルプレートにスポットし風乾後1.5 mg/mlのα-シアノ-4-ヒドロキシケイ皮酸1 μlを上層し測定試料とした。リフレクトロンモード、ポジティブイオンモードで測定を行い基質ペプチドのm/z値1319.81とメチル化ペプチドのm/z値1333.83のピーク面積を計算しメチル化比率を求めた。メチル化比率を計算した後、阻害剤無添加、ジメチルスルホキシド単独、S-アデノシルホモシステイン添加を対照として阻害効果の評価を行った。結果を図1に示す。表中のS-079、S-099、S-141、S-167、S-225、S-383、S-435、及びS-455にPr-Set7に対する強い阻害活性が認められ、特にS-099(1-アミノ-3-(3-ピリジル)-3,10-ジヒドロピリジノ[2,1-b]ベンゾチアゾール-2,4-ジカルボニトリル)、S-435(スピロ[5H-ジベンゾ[b,e]1,4-アザホスフィン-10,10'-5H-ジベンゾ[b,e]1,4-アザホスフィン])、及びS-455(1-[5,7-ビス(tert-ブチル)-2,3-ジヒドロベンゾオキサゾール-2-イル]ナフタレン-2-オール)は陽性対照として用いたS-アデノシルホモシステイン(AdoHcy)に比べて強い阻害作用を示した。
　S-099（以下、「EBI099」と呼ぶ）についてメチル化阻害活性の濃度依存性を調べた結果を図2に示す。また、EBI099についてメチル化酵素阻害の特異性を調べた結果を図3に示す。図3においてはメチル化酵素としてヒストンメチル化酵素G9a(Molecular Cell, 25, pp.473-481, 2007)を用いて、基質濃度10μM及び25μMにおける阻害活性を調べた。この結果、EBI099はPr-Set7に対して高い特異性を有していることが示された。
例3
　EBI099の白血病細胞増殖抑制効果を調べた。K562細胞(3×104 cells/ml)にEBI099のジメチルスルホキシド(DMSO)溶液(0、25、50、75、及び100μg/ml)を入れて20時間及び60時間後の細胞数を血球計算盤にてカウントした。結果を図4に示す。EBI099は白血病細胞に対して増殖抑制効果を有していることが示された。
例4
　EBI099の各種遺伝子に対する発現誘導を調べた。K562細胞にDMSOに溶解したEBI099 (100μg/ml)を添加し、24時間後にRNAを抽出した。アフィメトリックス社製マイクロアレイ(Human Genome U133 Plus 2.0 array)にて製品添付のプロトコールに従いRNAより逆転写反応にて蛍光標識を取り込ませたターゲットcDNAをハイブリダイズさせた後、蛍光イメージアナライザーにてシグナルを検出した。DMSO処理した検体を対照としてfold changeを算出し、EBI-099による遺伝子発現変動を評価した。結果を図5に示す。図5に示す各遺伝子に対して発現誘導活性を有していることから、例えばがんや生活習慣病などの疾患に対する有効性を有するものと考えられる。

Claims (10)

  1. 下記の一般式(I)、(II)、又は(III)：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     〔式(I)中、R1及びR2はそれぞれ独立にC1-6アルキル基、C2-6アルケニル基、C2-6アルキニル基、C1-6アルコキシ基、又はシアノ基を示し；R3、R4、及びR5はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；Arはフェニル基、ピリジル基、ピリミジル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、又はピラニル基を示す。式(II)中、R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；Xはリン原子又はイオウ原子を示す。式(III)中、R21、R22、及びR23はそれぞれ独立に水素原子、ハロゲン原子、又はC1-6アルキル基を示し；R24及びR25はそれぞれ独立にC3-6アルキル基又はトリアルキルシリル基を示す。〕で表される化合物又はその塩を含むヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対する阻害剤。
  2. ヒストンメチル化酵素Pr-Set7に対する特異的阻害剤である請求項１に記載の阻害剤。
  3. R1及びR2がそれぞれ独立にエチル基、ビニル基、エチニル基、メトキシ基、又はシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子又はフッ素原子であり、Arがフェニル基又はピリジル基である請求項１又は２に記載の阻害剤。
  4. R1及びR2が共にシアノ基であり、R3、R4、及びR5が水素原子であり、Arが3-ピリジル基である請求項３に記載の阻害剤。
  5. R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17がそれぞれ独立に水素原子又はフッ素原子であり、Xがイオウ原子である請求項１又は２に記載の阻害剤。
  6. R11、R12、R13、R14、R15、R16、及びR17が水素原子であり、Xがイオウ原子である請求項５に記載の阻害剤。
  7. R21、R22、及びR23がそれぞれ独立に水素原子又はフッ素原子であり、R24及びR25がそれぞれ独立にイソプロピル基、tert-ブチル基、sec-ブチル基、イソブチル基、又はトリメチルシリル基である請求項１又は２に記載の阻害剤。
  8. R21、R22、及びR23が水素原子であり、R24及びR25がtert-ブチル基である請求項７に記載の阻害剤。
  9. 請求項１に記載の一般式(I)、(II)、又は(III)で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩を有効成分として含む医薬。
  10. がん又は生活習慣病の予防及び／又は治療のための請求項９に記載の医薬。
PCT/JP2010/062402 2009-07-24 2010-07-23 Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤 WO2011010715A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2011523702A JPWO2011010715A1 (ja) 2009-07-24 2010-07-23 Ｐｒ−Ｓｅｔ７阻害剤

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2009-172912 2009-07-24
JP2009172912 2009-07-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2011010715A1 true WO2011010715A1 (ja) 2011-01-27

Family

ID=43499187

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2010/062402 WO2011010715A1 (ja) 2009-07-24 2010-07-23 Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JPWO2011010715A1 (ja)
WO (1) WO2011010715A1 (ja)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017054832A1 (en) * 2015-10-02 2017-04-06 University Of Copenhagen Small molecules blocking histone reader domains
CN106604731A (zh) * 2014-07-10 2017-04-26 科罗拉多大学董事会法人团体 靶向ral gtp酶的抗癌化合物和使用它的方法
CN110964851A (zh) * 2019-12-17 2020-04-07 武汉大学 组蛋白修饰酶基因setd8在抗dna病毒中的应用
US10689392B2 (en) 2011-12-21 2020-06-23 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting ral GTPases and methods of using the same

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4020165A (en) * 1975-08-20 1977-04-26 Uniroyal Inc. Control of acarids using certain benzothiazoles or benzothiazolines
WO2006060654A2 (en) * 2004-12-01 2006-06-08 Divergence, Inc. Pesticidal compositions and methods
WO2008001391A2 (en) * 2006-06-27 2008-01-03 Jawaharlal Nehru Centre For Advanced Scientific Research Site-specific inhibitors of histone methyltransferase [hmtase] and process of preparation thereof
US20090163545A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 University Of Rochester Method For Altering The Lifespan Of Eukaryotic Organisms

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4020165A (en) * 1975-08-20 1977-04-26 Uniroyal Inc. Control of acarids using certain benzothiazoles or benzothiazolines
WO2006060654A2 (en) * 2004-12-01 2006-06-08 Divergence, Inc. Pesticidal compositions and methods
WO2008001391A2 (en) * 2006-06-27 2008-01-03 Jawaharlal Nehru Centre For Advanced Scientific Research Site-specific inhibitors of histone methyltransferase [hmtase] and process of preparation thereof
US20090163545A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 University Of Rochester Method For Altering The Lifespan Of Eukaryotic Organisms

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LAKSHMI GALAM ET AL.: "High-throughput assay for the identification of Hsp90 inhibitors based on Hsp90-dependent refolding of firefly luciferase", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 15, 2007, pages 1939 - 1946, XP005867161, DOI: doi:10.1016/j.bmc.2007.01.004 *
N. M. FATHYA ET AL.: "Nitriles in Heterocyclic Synthesis: Navel Synthesis of Pyrido-[2,1-b] benzothiazoles and 1,3-Benzothiazole Derivatives", ARCH. PHARM., vol. 321, no. 9, 1998, (WEINHEIM)', pages 509 - 512 *
RODGER N. JENKINS ET AL.: "Dihydrophenophosphazine Ring System", J. ORG. CHEM., vol. 40, no. 6, 1975, pages 766 - 769 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10689392B2 (en) 2011-12-21 2020-06-23 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting ral GTPases and methods of using the same
US11964985B2 (en) 2011-12-21 2024-04-23 The Regents of the University of Colorado, a body corporate. Anti-cancer compounds targeting Ral GTPases and methods of using the same
US10202397B2 (en) 2014-07-10 2019-02-12 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting Ral GTPases and methods of using the same
US10676480B2 (en) 2014-07-10 2020-06-09 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting Ral GTPases and methods of using the same
EP3166609A4 (en) * 2014-07-10 2017-12-27 The Regents of The University of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds target ral gtpases and methods of using the same
EP3686202A1 (en) * 2014-07-10 2020-07-29 The Regents of the University of Colorado, a body corporate 6-amino-1,3-dimethyl-4-(4-(trifluoromethyl)phenyl)-1,4-dihydropyrano [2,3-c]pyrazole-5-carbonitrile and related compounds as ral gtpase inhibitors for treating cancer metastasis
USRE48557E1 (en) 2014-07-10 2021-05-18 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting Ral GTPases and methods of using the same
CN106604731B (zh) * 2014-07-10 2021-05-18 科罗拉多大学董事会法人团体 靶向ral gtp酶的抗癌化合物和使用它的方法
AU2020277293B2 (en) * 2014-07-10 2021-10-21 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting ral gtpases and methods of using the same
US11472812B2 (en) 2014-07-10 2022-10-18 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Anti-cancer compounds targeting Ral GTPases and methods of using the same
CN106604731A (zh) * 2014-07-10 2017-04-26 科罗拉多大学董事会法人团体 靶向ral gtp酶的抗癌化合物和使用它的方法
WO2017054832A1 (en) * 2015-10-02 2017-04-06 University Of Copenhagen Small molecules blocking histone reader domains
US10961289B2 (en) 2015-10-02 2021-03-30 The University Of Copenhagen Small molecules blocking histone reader domains
CN110964851A (zh) * 2019-12-17 2020-04-07 武汉大学 组蛋白修饰酶基因setd8在抗dna病毒中的应用
CN110964851B (zh) * 2019-12-17 2021-08-03 武汉大学 组蛋白修饰酶基因setd8在抗dna病毒中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2011010715A1 (ja) 2013-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3555105B1 (en) 7-phenylethylamino-4h-pyrimido[4,5-d][1,3]oxazin-2-one compounds as mutant idh1 and idh2 inhibitors
Bhat et al. Epigenetics and beyond: targeting writers of protein lysine methylation to treat disease
EP3609889B1 (en) Small molecules
McLure et al. RVX-208, an inducer of ApoA-I in humans, is a BET bromodomain antagonist
EP3572400B1 (en) Ezh2 inhibitor and use thereof
EP2825161B1 (en) Inhibitors of human ezh2, and methods of use thereof
WO2013033688A1 (en) Treatment of cancer
US20200108060A1 (en) Inhibiting mutant idh-1
US11738018B2 (en) Inhibiting mutant isocitrate dehydrogenase 1 (mIDH-1)
Hu et al. Discovery of a series of dihydroquinoxalin-2 (1H)-ones as selective BET inhibitors from a dual PLK1-BRD4 inhibitor
WO2011010715A1 (ja) Ｐr－Ｓｅｔ７阻害剤
Ross et al. Targeting MYC: from understanding its biology to drug discovery
Zheng et al. Targeting arginine methyltransferase PRMT5 for cancer therapy: updated progress and novel strategies
Zhang et al. Recent advances in nuclear receptor-binding SET domain 2 (NSD2) inhibitors: An update and perspectives
Hu et al. Precise conformational control yielding highly potent and exceptionally selective BRD4 degraders with strong antitumor activity
Tong et al. Overview of the development of protein arginine methyltransferase modulators: Achievements and future directions
Kim et al. Identification of novel class inhibitors of NSD3 methyltransferase showing a unique, bivalent binding mode in the SET domain
CN112638881A (zh) 用于治疗转移性和化疗耐受性癌症的四氢喹啉衍生物
WO2015013256A1 (en) Non-ribose containing inhibitors of histone methyltransferase dot1l for cancer treatment
JP2018508577A (ja) 新しいキャップ基ラルガゾールの類似体の合成及び使用
JP2022521452A (ja) Ｐｉｎ１活性のモジュレータおよびその使用
Bellany et al. Design and synthesis of Coenzyme A analogues as Aurora kinase A inhibitors: An exploration of the roles of the pyrophosphate and pantetheine moieties
JP2022526844A (ja) 筋肉量及び酸化的代謝を増加させるための組成物及び方法
CN108698984B (zh) 用作药物、特别是用于治疗帕金森氏病的双环化合物
US20240316043A1 (en) Bromodomain inhibitors for cancer therapy

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 10802335

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2011523702

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 10802335

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1