WO2010095970A1 - Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов - Google Patents

Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов Download PDF

Info

Publication number
WO2010095970A1
WO2010095970A1 PCT/RU2009/000092 RU2009000092W WO2010095970A1 WO 2010095970 A1 WO2010095970 A1 WO 2010095970A1 RU 2009000092 W RU2009000092 W RU 2009000092W WO 2010095970 A1 WO2010095970 A1 WO 2010095970A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
paraffin
washing
water
detergent
liquid
Prior art date
Application number
PCT/RU2009/000092
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Илья Борисович ИЗВОЗЧИКОВ
Original Assignee
Izvozchikov Ilya Borisovich
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Izvozchikov Ilya Borisovich filed Critical Izvozchikov Ilya Borisovich
Priority to PCT/RU2009/000092 priority Critical patent/WO2010095970A1/ru
Publication of WO2010095970A1 publication Critical patent/WO2010095970A1/ru

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/36Embedding or analogous mounting of samples
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
    • G01N1/31Apparatus therefor

Definitions

  • the invention relates to research methods, namely to methods for preparing biological and histological samples for microscopic examinations, and, in particular, to maintaining in working condition devices in which this preparation is carried out.
  • the samples taken for research before they can be microtomized must be fixed, for example, with an aqueous or aqueous-alcohol solution of formaldehyde, then dehydrated with a liquid miscible with water, then clarified with an organic liquid miscible with water and paraffin (or other wax), then waxed.
  • a waxed sample is suitable for microtomation.
  • the preparation of samples for microscopic studies is carried out in special devices in which the samples are placed in a chamber connected by pipelines to containers for processing and impregnating liquids. These liquids (fixing solution, alcohols, xylene and paraffin melt) are sequentially fed into the sample chamber, and after processing they are returned to the appropriate container.
  • a method for purifying paraffin from a device for processing and impregnating biological samples of VIP from Japanese Japanese company Sakura includes sequential treatment with xylene, then alcohol and water.
  • the device includes three additional containers for xylene, alcohol and water (p. 3-7 ⁇ leap Retort) connected to the chamber for processing samples.
  • the method is as follows. A paraffin melt having a temperature of 60 ° C. is returned via a control valve and a pipe to an appropriate container. Xylene used for cleaning is fed from an additional container through the same control valve and pipeline into the working chamber of the tissue processing apparatus, heated to 60 ° C, mixed and returned to the same additional container. Washing is repeated 5-15 times. Then the system is washed 3-15 times with alcohol. Then rinse up to 15 times with water.
  • the method of cleaning the ASP 300 apparatus of Leisa AG, Germany also includes the sequential supply from storage containers, heating to 60 ° C, mixing and draining of xylene up to 9 times, alcohol up to 6 times and water up to 2 times, moreover, the water may contain a detergent. All liquids are returned to the same containers in which they are stored.
  • Xylene dissolves the residues of paraffin in the apparatus for processing samples, alcohol leaches the residues of the solution of paraffin in xylene, and water removes the residues of alcohol. In this case, the used organic liquids must be disposed of.
  • the invention is based on the task of reducing the consumption of organic liquids requiring disposal.
  • the basis of the invention is also the task of separating the paraffin washed during the cleaning of the device, and the return of the washing liquid to the system.
  • the basis of the invention is also the task of improving the quality of cleaning the system, especially communications, from paraffin residues.
  • the only washing liquid is water heated to a temperature higher than the paraffin melting point, which is cooled and filtered before returning to the storage tank branches of the laden paraffin.
  • Rinsing water contains at least 0.1% by weight of detergent.
  • water may contain nonionic or ionic surfactants.
  • the paraffin remaining on the walls of the device that is, the chamber in which the treatment is carried out, of pipes and valves, melts and is washed off by the flow of hot water.
  • the molten paraffin cures in water in the form of crumbs (grains), which can be filtered by passing through a woven, knitted or non-woven material, through a metal mesh, paper filters, etc.
  • an intermediate tank for cooling water for example, instead of tanks containing xylene and alcohol used for washing.
  • This container may be equipped with a removable filter element located in front of the communication, returning water from the cooling tank to the washing water storage tank.
  • Example 1 The processing and impregnation of histological samples was carried out in a closed device, including a chamber for processing and impregnation of samples, connected to containers for storing processing fluids and paraffin melt. Communications for the supply and return of process fluids and The paraffin melt is equipped with a control valve through which they enter the working chamber.
  • the melting point of paraffin is 56 ° C; prior to feeding it into the process chamber is heated to a temperature of 60 0 C, in the chamber during the impregnation temperature is maintained at 60 0 C.
  • the paraffin melt was returned to the tank for storage and removal of the processed samples from the working chamber from the tank containing the washing water, water heated to 60 ° C was supplied through the distribution valve to the washing chamber.
  • the washing water contained 0.1% non-ionic surfactant octyl phenol ethoxyalate (Tritop X-100 from Dow Chemical Company, USA) taken as a detergent.
  • the chamber was washed for 10 minutes with stirring. After washing, the washing water through the control valve was discharged into an intermediate tank to cool it to a temperature of 35 ° C. When cooling the washing water, the paraffin washed out of the chamber, the distribution valve and the pipe connecting the chamber to the valve, is deposited in the form of crumbs.
  • the washing operation was repeated 3 times, each time returning the washing water to the intermediate tank.
  • the washing water is pumped (drained) from the intermediate tank to the storage tank.
  • a filter made of knitted nylon fabric that traps the crushed paraffin wax.
  • the device for processing and impregnation was washed by the claimed method for 10 days, despite the fact that 1 cycle of treatment per day was performed. Purification of paraffin was of high quality, paraffin accumulation in communications was not observed.
  • Example 3 Purification was carried out as in Example 1, but 3.0% of the mass of a cationic surfactant, cetyltrimethylammonium bromide (CTAB), was taken as a detergent.
  • a cationic surfactant cetyltrimethylammonium bromide (CTAB)
  • the washing water after separation of the precipitated paraffin, can be used without replacement longer than the washing solvents, since it does not accumulate the washed paraffin; after replacement, the washing water can be drained into the sewer; the filter with paraffin crumb can be changed or cleaned after 3-5 cleaning cycles.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)

Abstract

Способ включает подачу нагретой промывающей жидкости из емкости для ее хранения в устройство, промывку его и возврат жидкости в емкость ля хранения. Единственной промывающей жидкостью является вода, нагретая до температуры, выше температуры плавления парафина, содержащая по крайней мере 0,1% масс детергента. Перед возвратом в емкость промывающую воду охлаждают и фильтруют для отделения высадившегося парафина.

Description

Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов
Область техники Изобретение относится к методам исследования, а именно к методам подготовки биологических и гистологических образцов для микроскопических исследований, и, в частности, к поддержанию в рабочем состоянии устройств, в которых осуществляется указанная подготовка.
Взятые для исследования образцы, прежде чем их можно микротомировать, должны быть зафиксированы, например, водным или водно- спиртовым раствором формальдегида, затем обезвожены жидкостью, смешивающейся с водой, затем просветлены органической жидкостью, смешивающейся с водой и парафином (или другим воском), затем парафинированы. Парафинированный образец пригоден для микротомирования. В лабораториях, специализирующихся на исследованиях биологических и гистологических образцов, подготовку образцов к микроскопическим исследованиям проводят в специальных устройствах, в которых образцы помещают в камеру, соединенную трубопроводами с емкостями для обрабатывающих и пропитывающих жидкостей. Указанные жидкости (фиксирующий раствор, спирты, ксилол и расплав парафина) последовательно подают в камеру с образцами, а после обработки возвращают в соответствующую емкость.
Обрабатывающие жидкости хорошо смешиваются друг с другом, очищая систему (камеру, трубопроводы, клапаны) от предшествующей жидкости. Но после возврата расплава парафина в соответствующую емкость перед новым циклом обработки и пропитки система (особенно трубопроводы и клапаны) нуждается в очистке от следов парафина. Без проведения такой очистки система может быть закупорена накапливающимся парафином.
Предшествующий уровень техники Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических образцов VIP японской фирмы Sаkurа (копия инструкции пользователя прилагается) включает последовательную обработку ксилолом, затем спиртом и водой. С этой целью устройство включает три дополнительные емкости для ксилола, спирта и воды (п. 3-7 Сlеап Rеtоrt), соединенные с камерой для обработки образцов.
Способ осуществляется следующим образом. Расплав парафина, имеющий температуру 60°C возвращают через распределительный клапан и трубопровод в соответствующую емкость. Ксилол, используемый для очистки, подают из дополнительной емкости через тот же распределительный клапан и трубопровод в рабочую камеру аппарата для обработки тканей, нагревают до 60°C, перемешивают и возвращают в ту же дополнительную емкость. Промывку повторяют 5 — 15 раз. Затем систему промывают 3-15 раз спиртом. Затем до 15 раз споласкивают водой.
Способ очистки аппарата ASP 300 фирмы Lеiса AG, Германия (копия инструкции пользователя прилагается), также включает последовательную подачу из емкостей для хранения, нагрев до 60°C, перемешивание и слив ксилола до 9 раз, спирта до 6 раз и воды до 2 раз, причем вода может содержать детергент. Все жидкости возвращаются в те же емкости, в которых они хранятся. Ксилол растворяет остатки парафина в аппарате для обработки образцов, спирт вымывает остатки раствора парафина в ксилоле, вода смывает остатки спирта. При этом используемые органические жидкости должны утилизироваться.
Известные способы продолжительны и требуют достаточно большого количества дорогостоящих органических жидкостей, требующих утилизации; при несвоевременном обновлении растворителей, загрязненных парафином, полная очистка коммуникаций (труб, клапанов) не достигается. В ряде случаев наблюдается накапливание остатков парафина в коммуникациях и их закупорка.
Раскрытие изобретения В основу изобретения поставлена задача снижения расхода органических жидкостей, требующих утилизации.
В основу изобретения поставлена также задача отделения парафина, вымываемого при очистке устройства, и возврата промывающей жидкости в систему. В основу изобретения поставлена также задача повышения качества очистки системы, особенно коммуникаций, от остатков парафина.
Согласно изобретению, в способе очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов путем подачи нагретой промывающей жидкости из емкости для ее хранения в устройство для обработки, промывки устройства нагретой жидкостью и возврата ее в емкость для хранения единственной промывающей жидкостью является вода, нагретая до температуры, превышающей температуру плавления парафина, которую перед возвратом в емкость для хранения охлаждают и фильтруют для отделения высадившегося парафина. Промывающая вода содержит по крайней мере 0,1% масс детергента. В качестве последнего вода может содержать неионогенные или ионогенные поверхностно-активные вещества (ПАВ). В качестве неионогенных ПАВ могут использоваться производные полиэтиленоксида, алкилполиглюкозиды, цетиловый или олеиловый спирты, полисорбаты и т.п.; в качестве катионогенных ПАВ могут использоваться производные аммония, например, алкилтриметиламмониевые соли, цетипиридиний хлорид, алкилбетаины и др.; в качестве анионогенных ПАВ могут использоваться производные сульфат-, сульфонат- или карбоксилатанионов, такие как соли алкилсульфатов или алкилсульфонатов, мыла или соли жирных кислот и др. Промывающая вода может содержать 0,1 — 3,0% масс детергента. При наполнении горячей водой системы парафин, оставшийся на стенках устройства, то есть камеры, в которой проводится обработка, труб и клапанов, плавится и смывается потоком горячей воды. При охлаждении воды расплавленный парафин отверждается в воде в форме крошки (зерен), которую можно отфильтровать при пропускании через тканый, трикотажный или нетканый материал, через металлическую сетку, бумажные фильтры и т.п. Для осуществления способа достаточно поставить промежуточную емкость для охлаждения воды, например, вместо емкостей, содержащих ксилол и спирт, используемые для промывки. Эта емкость может быть снабжена съемным фильтрующим элементом, размещенным перед коммуникацией, возвращающей воду из емкости для охлаждения в емкость для хранения промывающей воды. Далее заявляемый способ поясняется примерами, но не ограничен ими. Пример 1. Обработку и пропитку гистологических образцов проводили в устройстве закрытого типа, включающем камеру для обработки и пропитки образцов, соединенную с емкостями для хранения обрабатывающих жидкостей и расплава парафина. Коммуникации для подачи и возврата обрабатывающих жидкостей и расплава парафина снабжены распределительным клапаном, через который они поступают в рабочую камеру.
Температура плавления парафина составляет 56°C; перед подачей в рабочую камеру его нагревали до температуры 600C, в камере в процессе пропитки поддерживали температуру 600C.
После возврата расплава парафина в емкость для его хранения и удаления обрабатываемых образцов из рабочей камеры из емкости, содержащей промывающую воду, через распределительный клапан в камеру подавали воду, нагретую до 600C. Промывающая вода содержала 0,1% неионогенного поверхностно-активного вещества октилфенолэтоксиалата (Тritоп X-100 фирмы Dоw Сhеmiсаl Со, США) взятого в качестве детергента. Промывку камеры проводили в течение 10 мин при перемешивании. После промывки промывающую воду через распределительный клапан выводили в промежуточную емкость для охлаждения ее до температуры 35°C. При охлаждении промывающей воды парафин, вымытый из камеры, распределительного клапана и трубы, соединяющей камеру с клапаном, высаждается в виде крошки.
Операцию промывки повторяли 3 раза, каждый раз возвращая промывающую воду в промежуточную емкость. После охлаждения промывающую воду перекачивают (сливают) из промежуточной емкости в емкость для хранения. На выходе из промежуточной емкости размещен фильтр, выполненный из трикотажной нейлоновой ткани, который задерживает крошку высадившегося парафина.
Устройство для обработки и пропитки промывали заявляемым способом в течении 10 дней, при том, что выполняли 1 цикл обработки в сутки. Очистка от парафина была качественной, накопление парафина в коммуникациях не наблюдалось.
Пример 2.
Очистку проводили как в примере 1, но в качестве детергента брали 1,0% масс анионогенного поверхностно-активного вещества - додецил сульфата натрия.
Пример 3. Очистку проводили как в примере 1, но в качестве детергента брали 3,0% масс катионогенного поверхностно-активного вещества - цетилтриметиламмония бромида (ЦТАБ).
Промывающая вода, после отделения высадившегося парафина, может использоваться без замены дольше, чем промывающие растворители, так как она не накапливает вымываемого парафина; после замены промывающую воду можно сливать в канализацию; фильтр с крошкой парафина можно менять или очищать после 3-5 циклов очистки.
Это является дополнительным преимуществом заявляемого способа.

Claims

Формула изобретения
1. Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов, включающий подачу нагретой промывающей жидкости из емкости для хранения в устройство, промывку устройства и возврат жидкости в емкость для хранения, отличающийся тем, что в качестве единственной промывающей жидкости используют воду, нагретую до температуры, превышающей температуру плавления парафина, содержащую по крайней мере 0,1% масс детергента, которую перед возвратом в емкость охлаждают вне указанной емкости и фильтруют для отделения высадившегося парафина.
2. Способ по п.l, отличающийся тем, что в качестве детергента используют неионогенное поверхностно-активное вещество.
3. Способ по п.l, отличающийся тем, что в качестве детергента используют катионогенное поверхностно-активное вещество.
4. Способ по п.l, отличающийся тем, что в качестве детергента используют анионогенное поверхностно-активное вещество.
5. Способ по п.l, отличающийся тем, что промывающая вода содержит 0,1 — 3,0% масс детергента.
PCT/RU2009/000092 2009-02-19 2009-02-19 Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов WO2010095970A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2009/000092 WO2010095970A1 (ru) 2009-02-19 2009-02-19 Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/RU2009/000092 WO2010095970A1 (ru) 2009-02-19 2009-02-19 Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2010095970A1 true WO2010095970A1 (ru) 2010-08-26

Family

ID=42634079

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2009/000092 WO2010095970A1 (ru) 2009-02-19 2009-02-19 Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2010095970A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015072876A1 (ru) * 2013-11-14 2015-05-21 Илья Борисович ИЗВОЗЧИКОВ Устройство для очистки гистологического тканевого процессора

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4377476A (en) * 1981-02-25 1983-03-22 Ferrara Louis T Tissue filtering bath for histology
RU94026106A (ru) * 1994-07-15 1996-06-10 Производственное объединение "Ноябрьскнефтегеофизика" Способ и устройство для удаления гидратно-парафиновых пробок в насосно-компрессорных трубах нефтяных и газовых скважин
RU2256064C1 (ru) * 2003-10-27 2005-07-10 Институт проблем транспорта энергоресурсов "ИПТЭР" Способ удаления парафиновых отложений в насосно-компрессорных трубах нефтяных скважин
US20060019332A1 (en) * 1994-03-11 2006-01-26 Guangrong Zhang Deparaffinization compositions for dewaxing tissue specimens

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4377476A (en) * 1981-02-25 1983-03-22 Ferrara Louis T Tissue filtering bath for histology
US20060019332A1 (en) * 1994-03-11 2006-01-26 Guangrong Zhang Deparaffinization compositions for dewaxing tissue specimens
RU94026106A (ru) * 1994-07-15 1996-06-10 Производственное объединение "Ноябрьскнефтегеофизика" Способ и устройство для удаления гидратно-парафиновых пробок в насосно-компрессорных трубах нефтяных и газовых скважин
RU2256064C1 (ru) * 2003-10-27 2005-07-10 Институт проблем транспорта энергоресурсов "ИПТЭР" Способ удаления парафиновых отложений в насосно-компрессорных трубах нефтяных скважин

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015072876A1 (ru) * 2013-11-14 2015-05-21 Илья Борисович ИЗВОЗЧИКОВ Устройство для очистки гистологического тканевого процессора

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN203333412U (zh) 厨房污水处理装置
CN105229017A (zh) 水处理系统
JP5536933B2 (ja) グリストラップの排液処理ポンプと排液処理装置
JP7102441B2 (ja) 油の浄化
HUE028196T2 (en) Washing equipment and procedure for cleaning objects
CN101294877B (zh) 一种染片机
US8992773B2 (en) Mobile oil filtration unit
DE102007062953A1 (de) Geschirrspülmaschine in Form eines Programmautomaten und Verfahren zu deren Betrieb
AU2006246037B2 (en) Process and system for the disposal of excretion containers
CN103249897A (zh) 用于处理废水的设备
JP2010149101A5 (ru)
DE102011054558A1 (de) Geschirrspüler mit Wiederverwendungstank
WO2010095970A1 (ru) Способ очистки от парафина устройства для обработки и пропитки биологических и гистологических образцов
JP5997587B2 (ja) オイルタンクの洗浄方法及びスラッジ処理方法
CN103740517A (zh) 一种砂缸清洗剂
EP3152511B1 (en) An apparatus for recovering heat from a liquid flowing out of an industrial plant
CN201199209Y (zh) 一种全自动染片机
CN207877272U (zh) 一种自动清洗净水机
US4377476A (en) Tissue filtering bath for histology
WO2015072876A1 (ru) Устройство для очистки гистологического тканевого процессора
DE102017116759A1 (de) Ultrafeiner mikron-filter für einen geschirrspüler
CN103304057A (zh) 厨房污水处理装置
KR101410910B1 (ko) 역삼투압 멤브레인모듈 세정장치 및 세정방법
KR20080080849A (ko) 내연기관의 냉각계통 플러싱장치 및 그 플러싱방법
DE102008028304A1 (de) Transportspülmaschine, insbesondere gewerbliche Korbtransportspülmaschine, und Verfahren zu deren Betrieb

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09840492

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 09840492

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1