WO2009131486A2 - Photosensitiser and a method for the production thereof - Google Patents
Photosensitiser and a method for the production thereof Download PDFInfo
- Publication number
- WO2009131486A2 WO2009131486A2 PCT/RU2008/000715 RU2008000715W WO2009131486A2 WO 2009131486 A2 WO2009131486 A2 WO 2009131486A2 RU 2008000715 W RU2008000715 W RU 2008000715W WO 2009131486 A2 WO2009131486 A2 WO 2009131486A2
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- chlorin
- methyl
- glucamine
- chlorine
- cryostabilizer
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
Definitions
- the invention relates to the field of pharmacology, in particular to the production of biologically active compounds of the chlorin series, in particular, derivatives of chlorin eb, and can be used to produce salts of chlorin eb, which can find real application as highly effective photosensitizers
- FS for the photodynamic therapy of cancer and other neoplasms of various genesis, as well as fluorescence diagnostics of cancer cells.
- chlorin eb derivatives Among the numerous derivatives of the chlorin series obtained from natural chlorophyll a and studied as PS, only chlorin eb derivatives (Fig. 1) have found a real embodiment in medical practice and are widely used as approved drugs for PDT cancer and other neoplasms.
- RADACHLORIN is a mixture of sodium salts of at least two to three related chlorins, among which chlorin eb accounts for about 80-90% of the total mass of PS, the rest: purpurin 5 and chlorine rb.
- the presence of chlorine impurities contributes to its greater effectiveness as a FS, compared to pure chlorine eb.
- the presence of chlorine impurities in the RADACHLORIN preparation is due to the very method of producing chlorin eb from pheophorbide a, which, in principle, cannot ensure the formation of high purity chlorin eb.
- PS - PHOTOLON is a complex of trisodium salt of chlorin eb with polyvinylpyrrolidone (PVP), and the mutual content of chlorin eb and PVP can vary very widely.
- PVP polyvinylpyrrolidone
- numerous chlorine and porphyrin derivatives were found in the preparation, the formation of which is also determined by the method of isolation of the initial intermediate pheophytin a from spirulina with a basic substance content not higher than 90-95%.
- the use of such pheophytin a as a feedstock for the synthesis of chlorin eb from it inevitably leads to the production of a final preparation containing, in addition to chlorin eb, a number of other related chlorins.
- PHOTODITAZINE is a bis-N-methyl-D-glucamine salt of chlorin eb in the form of a sterile 0.5% solution, which is an aqueous 0.5% aqueous solution of N-methyl-D-glucamine salt of chlorin eb containing polyvinylpyrrolidone.
- This PS contains high purity chlorin eb (97% and higher) with a chlorine content of not more than 2-2.5%.
- TALAPORFIN is a tetrasodium salt of N-aspartyl-chlorin eb.
- This drug is obtained from chlorin eb in two stages: 1) treatment of chlorin eb with carbodiimide with the release of intermediate anhydride; 2) the interaction of chlorine eb anhydride with an aqueous solution of sodium aspartate and the selection of the target product.
- All known FSs based on chlorin eb for intravenous use are either aqueous solutions (concentration - 35 mg of chlorin eb in 10 ml of water, i.e. 0.35% solution for RADACHLORIN or 0.5% solution for PHOTODITAZINE followed by dilution to 100 ml), or FOTOLON, a prepared solution of a powder of 100 mg of trisodium salt of chlorin eb together with polyvinylpyrrolidone in 100 ml of water.
- concentration of PS calculated by the content of chlorin eb in the injection solution does not exceed 0.3-1.0 mg / ml.
- chlorin eb has the most pronounced photosensitizing effect, and associated impurities, which for the most part easily aggregate in aqueous media, have a lower quantum yield of singlet oxygen generation.
- the effectiveness of the drug as FS is determined by the coefficient of tropism or contrast. Therefore, the impurities of concomitant chlorins present in the FOTOLON and RADACHLORIN preparations blur the clear boundary between the cancerous tumor and the adjacent healthy tissue, which significantly reduces the effectiveness of PDT when working with this drug because there is a noticeable photo-destruction and healthy tissue. Thus, the presence of impurities even of chlorin nature significantly reduces the effectiveness of the drug as a FS.
- FOTOLON has the maximum storage stability, but at the same time relatively low tropicity, the RADACHLORIN preparation has approximately the same consumer properties as photolon, and the PHOTODITAZINE preparation with high tropicity has low storage stability.
- the most significant drawback of dosage forms of drugs based on the use of aqueous solutions is their relatively low stability during long-term storage even at a temperature of 8-12 0 C, due to the occurrence of radical processes leading to partial destruction and transformation of the tetrapyrrole macrocycle.
- the most promising for the preparation of drug formulations based on chlorins is, of course, the creation of freeze-dried forms.
- the closest to the proposed photosensitizer is the PHOTODITAZINE photosensitizer for photodynamic therapy, containing chlorin eb in an amount of not less than 98%, N-methyl-D-glucamine in a 1: 2 molar ratio and polyvinylpyrrolidone with a molecular weight of 9600 up to 11500, while chlorin eb has a certain structural formula (see Pat. RU N ° 2 276 976, Cl. AblK 31/409, dated 10.08.2004).
- the closest to the proposed method is a method for producing a photosensitizer for PDT, which consists in treating spirulina with an inorganic acid, stirring, filtering, followed by derivation of pheophorbide a derivatives, dissolving them in acetone, adding an inorganic base in the form of an aqueous solution by heating, cooling, neutralization with hydrochloric acid, centrifugation, separation of the precipitate containing the target product and washing it with distilled water, and by centrifugation, the precipitate containing chlorin eb, after washing with distilled water, is suspended under sterile conditions in pyrogen-free water, re-centrifuged, the precipitate obtained is dissolved in an aqueous solution of N-methyl-D-glucamine, the pH is adjusted to a certain value, the required amount of pyrogen-free water is added, the solution is filtered and polyvinylpyrrolidone is added. (see Pat. RU N ° 2
- the basis of the invention is the task of developing a FS more stable during long-term storage even at room temperature, with improved performance and consumer qualities, increased shelf life of it as a medical product and simplification of its practical use in medical institutions, as well as the development of a method for its production (manufacture ), allowing to obtain a FS having the above operational and consumer properties.
- the photosensitizer for photodynamic therapy contains chlorin eb with N-methyl-D-glucamine and sodium, in the following molar ratios: 1: 2: 1, and a cryostabilizer, while the photosensitizer has the structural formula:
- a cryostabilizer is taken in an amount of l: l (weight parts) relative to the aforementioned chlorine eb with N-methyl-D-glucamine and sodium, with maltose being taken as a cryostabilizer.
- chlorin eb is taken and suspended in pyrogen-free water, the calculated amount of N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide is added with stirring ( (Na OH), the resulting solution of chlorin eb salts is filtered, the calculated amount of cryostabilizer is added to it and lyophilized.
- chlorin eb, N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide are taken in the following molar ratios: 1: 2: 1, while the cryostabilizer is taken in a weight ratio of 1: 1 to the salts of chlorin eb, and maltose is taken as the cryostabilizer.
- a new method for producing FS based on chlorin eb is proposed.
- This method is characterized in that for the production of PS, a composition of chlorin eb is used, which is obtained by chemical modification of methylpheophorbide a, N-methyl-D-glucamine (C 7 H 17 NOs), sodium hydroxide and cryostabilizer (maltose), taken in certain ratios, which is a freeze-dried powder, stable when stored at room temperature.
- This method is implemented by first obtaining methylpheophorbide and a high degree of purity and then obtaining a photosensitizer by the following methods.
- the photosensitizer has the following structural formula (Figure 2)
- cryostabilizer improves the lyophilization conditions (increases the porosity of the resulting tablet, significantly accelerates the lyophilization process, reduces the dissolution time when preparing the injection solution, and significantly increases
- Lyophilization of FS can significantly increase the preservation of the medicinal product and leforms prepared from it.
- powdered FS greatly simplifies the preparation of 15 different formulations of ointments, creams and gels used for PDT of surface forms of cancer and other diseases in ophthalmology, otolorology, dentistry, gynecology, etc.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
The inventions relate to pharmacology, in particular, to the production of biologically active chlorine compounds. The inventive photosensitiser for photodynamic therapy exhibits long storage- stability, increased operational properties and consumer characteristics and has an extended storage life as a medicinal preparation. The photosensitiser contains e6 chlorine with N-methyl-D-glucamine and sodium at a molar ratio of 1:2:1, and a cryostabiliser, wherein the photosensitiser structure corresponds to structural formula (I). According to the second invention, the method for producing a photosensitiser for photodynamic therapy involves suspending e6 chlorine in apyrogenic water, adding, while agitating, a calculated quantity of N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide (NaOH), filtering the thus produced e6 chlorine salt solution, adding a calculated quantity of cryostabiliser therein and lyophilizing it.
Description
ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОР И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ PHOTOSENSIBILIZER AND METHOD FOR PRODUCING IT
Область техникиTechnical field
Изобретение относится к области фармакологии, а именно к получению биологически активных соединений хлоринового ряда, в частности, производных хлорина еб, и может быть использовано для производства солей хлорина еб, которые могут найти реальное применение в качестве высокоэффективных фотосенсибилизаторовThe invention relates to the field of pharmacology, in particular to the production of biologically active compounds of the chlorin series, in particular, derivatives of chlorin eb, and can be used to produce salts of chlorin eb, which can find real application as highly effective photosensitizers
(далее ФС) для фотодинамической терапии рака и других новообразований различного генезиса, а также флюоресцентной диагностики раковых клеток.(hereinafter FS) for the photodynamic therapy of cancer and other neoplasms of various genesis, as well as fluorescence diagnostics of cancer cells.
Предшествующий уровень техникиState of the art
Среди многочисленных производных хлоринового ряда, получаемых из природного хлорофилла а и изученных в качестве ФС, только производные хлорина еб (Фиг.l) нашли реальное воплощение в медицинской практике и широко применяются в качестве разрешенных препаратов для ФДТ рака и других новообразований.Among the numerous derivatives of the chlorin series obtained from natural chlorophyll a and studied as PS, only chlorin eb derivatives (Fig. 1) have found a real embodiment in medical practice and are widely used as approved drugs for PDT cancer and other neoplasms.
В настоящее время известны несколько способов получения таких ФС, на базе которых разработана технология создания медицинских препаратов . РАДАХЛОРИН (пат.РФ JN<.2183956 от 27.06.2002) и (пат.US Ns6969765 от 29.11.2005), ФОТОЛОН (пат.РФ X° 2152790 от 20.07.2000), ФОТОДИТАЗИН (пат.РФ JY22144538 от 20.01.1998), а
также N-аспартил-хлорин еб (US Раt Аррl. N°20080021210) {препарат прошедший регистрацию в Японии NРеб или синонимы, Lаsеrрhуriп, Таlароrfiп, Таlароrfiп Sоdium).Currently, several methods are known for producing such FSs, on the basis of which a technology for creating medical preparations has been developed. RADACHLORIN (Pat. RF JN <.2183956 from 06.27.2002) and (Pat. US Ns6969765 from 11.29.2005), PHOTOLON (Pat. RF X ° 2152790 from 07.20.2000), PHOTODITAZINE (Pat. RF JY22144538 from 01.20.1998 ), but also N-aspartyl-chlorin eb (US Pat Arrl. N ° 20080021210) {a drug registered in Japan NReb or synonyms, Lasherhurip, Talarofip, Talarofip Sodium).
Так, РАДАХЛОРИН представляет собой смесь натриевых солей по крайней мере двух-трех родственных хлоринов, среди которых хлорин еб составляет около 80-90% от всей массы ФС, все остальное: пурпурин 5 и хлорин рб. Присутствие примесей хлоринового ряда, по мнению авторов препарата, способствует большей эффективности его как ФС, по сравнению с чистым хлорином еб. Наличие примесей хлоринового ряда в препарате РАДАХЛОРИН обусловлено самим методом получения хлорина еб из феофорбида а, который в принципе не может обеспечить образование хлорина еб высокой степени чистоты. Другой ФС - ФОТОЛОН представляет собой комплекс тринатриевой соли хлорина еб с поливинилпирролидоном (ПВП), причем взаимное содержание хлорина еб и ПВП может варьировать в очень широких пределах Помимо хлорина еб в препарате обнаружены многочисленные хлориновые и порфириновые производные, образование которых также обусловлено методом выделения исходного полупродукта феофитина а из спирулины с содержанием основного вещества не выше 90-95%. Использование такого феофитина а, как исходного сырья для синтеза из него хлорина еб, неизбежно приводит к получению конечного препарата, содержащего помимо хлорина еб также и ряда других родственных хлоринов. Изобретение, по мнению авторов патента, позволяет повысить выход и чистоту продукта до 90-95%. Средство обладает стабильностью при длительном хранении в лиофилизированном состоянии при комнатной температуре и, как предполагают авторы препарата, более высокой специфической активностью по сравнению с чистым хлорином еб и его солями.
Препарат ФОТОДИТАЗИН представляет собой бис- N-метил-D- глюкаминовую соль хлорина еб в виде стерильного 0.5%-нoгo раствора, который представляет собой водный 0.5%-ный водный раствор N- метил-D-глюкаминовой соли хлорина еб, содержащий поливинилпирролидон. Этот ФС содержит хлорин еб высокой степени чистоты (97% и выше) с содержанием примесей хлоринового ряда не более 2-2.5%. Однако, этот водный раствор не достаточно устойчив и обладает ограниченным сроком хранения (не более 1 года) при хранении в холодильнике при 4-80C. И, наконец, ТАЛАПОРФИН, представляет собой тетранатриевую соль N-аспартил-хлорина еб. Этот препарат получают из хлорина еб в две стадии : 1) обработка хлорина еб с помощью карбодиимида с выделением промежуточного ангидрида; 2) взаимодействие ангидрида хлорина еб с водным раствором аспартата натрия и выделение целевого продукта. Добавление в молекулу хлорина еб остатка аспарагиновой кислоты повидимому привносит какой-то положительный вклад в биораспределение ФС по органам и тканям во время проведения ФДТ, однако он не такой существенный, чтобы кардинально изменить область применения данного ФС по сравнению с другими ФС на основе хлорина еб.So, RADACHLORIN is a mixture of sodium salts of at least two to three related chlorins, among which chlorin eb accounts for about 80-90% of the total mass of PS, the rest: purpurin 5 and chlorine rb. The presence of chlorine impurities, according to the authors of the drug, contributes to its greater effectiveness as a FS, compared to pure chlorine eb. The presence of chlorine impurities in the RADACHLORIN preparation is due to the very method of producing chlorin eb from pheophorbide a, which, in principle, cannot ensure the formation of high purity chlorin eb. Another PS - PHOTOLON is a complex of trisodium salt of chlorin eb with polyvinylpyrrolidone (PVP), and the mutual content of chlorin eb and PVP can vary very widely. Besides chlorin eb, numerous chlorine and porphyrin derivatives were found in the preparation, the formation of which is also determined by the method of isolation of the initial intermediate pheophytin a from spirulina with a basic substance content not higher than 90-95%. The use of such pheophytin a as a feedstock for the synthesis of chlorin eb from it inevitably leads to the production of a final preparation containing, in addition to chlorin eb, a number of other related chlorins. The invention, according to the authors of the patent, allows to increase the yield and purity of the product up to 90-95%. The product has stability during prolonged storage in a lyophilized state at room temperature and, as the authors of the drug suggest, a higher specific activity compared to pure chlorine eb and its salts. PHOTODITAZINE is a bis-N-methyl-D-glucamine salt of chlorin eb in the form of a sterile 0.5% solution, which is an aqueous 0.5% aqueous solution of N-methyl-D-glucamine salt of chlorin eb containing polyvinylpyrrolidone. This PS contains high purity chlorin eb (97% and higher) with a chlorine content of not more than 2-2.5%. However, this aqueous solution is not stable enough and has a limited shelf life (not more than 1 year) when stored in a refrigerator at 4-8 0 C. And finally, TALAPORFIN, is a tetrasodium salt of N-aspartyl-chlorin eb. This drug is obtained from chlorin eb in two stages: 1) treatment of chlorin eb with carbodiimide with the release of intermediate anhydride; 2) the interaction of chlorine eb anhydride with an aqueous solution of sodium aspartate and the selection of the target product. The addition of an aspartic acid residue to the chlorin eb molecule apparently makes some positive contribution to the biodistribution of FS in organs and tissues during PDT, but it is not so significant as to radically change the scope of this FS compared to other FS based on chlorin eB.
Все известные ФС на основе хлорина еб для внутривенного использования представляют собой или водные растворы (концентрация - 35 мг хлорина еб в 10 мл воды, т.е. 0.35% раствор для РАДАХЛОРИНА или 0.5% раствор для ФОТОДИТАЗИНА с последующим разведением до 100 мл), или ФОТОЛОН, приготовленный раствор порошка 100 мг тринатриевой соли хлорина еб совместно с поливинилпирролидоном в 100 мл воды. Таким образом, концентрация ФС, рассчитанная по содержанию хлорина еб, в инъекционном растворе не превышает 0.3-1.0 мг/мл.
Специальными исследованиями показано, что максимально выраженным фотосенсибилизирующим эффектом обладает хлорин еб, а сопутствующие примеси, которые в основной своей массе легко агрегируют в водных средах, имеют более низкий квантовый выход генерации синглетного кислорода. Эффективность препарата как ФС определяется коэффициэнтом тропности или контрастности. Поэтому, присутствующие в препаратах ФОТОЛОН и РАДАХЛОРИН примеси сопутствующих хлоринов размывают четкую границу между раковой опухолью и близ расположенной здоровой тканью, что заметно снижает эффективность ФДТ при работе с данным препаратом поскольку происходит заметная фото деструкция и здоровой ткани. Таким образом, наличие примесей даже хлориновой природы заметно снижает эффективность препарата как ФС.All known FSs based on chlorin eb for intravenous use are either aqueous solutions (concentration - 35 mg of chlorin eb in 10 ml of water, i.e. 0.35% solution for RADACHLORIN or 0.5% solution for PHOTODITAZINE followed by dilution to 100 ml), or FOTOLON, a prepared solution of a powder of 100 mg of trisodium salt of chlorin eb together with polyvinylpyrrolidone in 100 ml of water. Thus, the concentration of PS calculated by the content of chlorin eb in the injection solution does not exceed 0.3-1.0 mg / ml. Special studies have shown that chlorin eb has the most pronounced photosensitizing effect, and associated impurities, which for the most part easily aggregate in aqueous media, have a lower quantum yield of singlet oxygen generation. The effectiveness of the drug as FS is determined by the coefficient of tropism or contrast. Therefore, the impurities of concomitant chlorins present in the FOTOLON and RADACHLORIN preparations blur the clear boundary between the cancerous tumor and the adjacent healthy tissue, which significantly reduces the effectiveness of PDT when working with this drug because there is a noticeable photo-destruction and healthy tissue. Thus, the presence of impurities even of chlorin nature significantly reduces the effectiveness of the drug as a FS.
Из всех выше представленных препаратов, ФОТОЛОН обладает максимальной устойчивостью при хранении, но в то же время относительно невысокой тропностью, препарат РАДАХЛОРИН обладает примерно такими же потребительскими свойствами как фотолон, а препарат ФОТОДИТАЗИН при высокой тропности обладает низкой устойчивостью при хранении. Наиболее существенным недостатком лекарственных форм препаратов, основанных на использовании водных растворов, является их относительно невысокая устойчивость при длительном хранении даже при температуре 8-120C, за счет протекания радикальных процессов, приводящих к частичной деструкции и трансформации тетрапиррольного макроцикла.Of all the preparations presented above, FOTOLON has the maximum storage stability, but at the same time relatively low tropicity, the RADACHLORIN preparation has approximately the same consumer properties as photolon, and the PHOTODITAZINE preparation with high tropicity has low storage stability. The most significant drawback of dosage forms of drugs based on the use of aqueous solutions is their relatively low stability during long-term storage even at a temperature of 8-12 0 C, due to the occurrence of radical processes leading to partial destruction and transformation of the tetrapyrrole macrocycle.
Поэтому наиболее перспективным для приготовления лекформ препаратов на основе хлоринов является, безусловно, создание лиофильно высушенных форм.
По технической сущности (по своим свойствам) наиболее близким к предлагаемому фотосенсибилизатору является фотосенсибилизатор ФОТОДИТАЗИН для фотодинамической терапии, содержащий хлорин еб в количестве не менее 98%, N-метил-D- глюкамин в мольном соотношении 1 :2 и поливинилпирролидон с молекулярным весом от 9600 до 11500, при этом хлорин еб имеет определённую структурную формулу ( см. пат.RU N°2 276 976, Кл.АбlК 31/409, от 10.08.2004 ).Therefore, the most promising for the preparation of drug formulations based on chlorins is, of course, the creation of freeze-dried forms. By technical nature (by its properties), the closest to the proposed photosensitizer is the PHOTODITAZINE photosensitizer for photodynamic therapy, containing chlorin eb in an amount of not less than 98%, N-methyl-D-glucamine in a 1: 2 molar ratio and polyvinylpyrrolidone with a molecular weight of 9600 up to 11500, while chlorin eb has a certain structural formula (see Pat. RU N ° 2 276 976, Cl. AblK 31/409, dated 10.08.2004).
Однако этот фотосенсибилизатор (ФОТОДИТАЗИН) недостаточно устойчив и обладает ограниченным сроком хранения.However, this photosensitizer (PHOTODITAZINE) is not stable enough and has a limited shelf life.
По технической сущности наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения фотосенсибилизатора для ФДТ, заключающийся в обработке спирулины неорганической кислотой, перемешивании, фильтрации, с последующим получением производных феофорбида а, растворением их в ацетоне, добавлением неорганического основания в виде водного раствора при нагревании, охлаждением, нейтрализацией соляной кислотой, центрифугированием, отделением осадка, содержащего целевой продукт и промывки его дистиллированной водой, приэтом полученный центрифугированием осадок, содержащий хлорин еб, после промывки дистиллированной водой суспензируют в стерильных условиях в апирогенной воде, рецентрифугируют, растворяют полученный осадок в водном растворе N-метил-D-глюкамина, доводят рН до определённого значения, добавляют нужное количество апирогенной воды, фильтруют раствор и добавляют поливинилпирролидон. ( см. пат.RU N°2 276 976, Кл.АбlК 31/409, от 10.08.2004 ).By technical essence, the closest to the proposed method is a method for producing a photosensitizer for PDT, which consists in treating spirulina with an inorganic acid, stirring, filtering, followed by derivation of pheophorbide a derivatives, dissolving them in acetone, adding an inorganic base in the form of an aqueous solution by heating, cooling, neutralization with hydrochloric acid, centrifugation, separation of the precipitate containing the target product and washing it with distilled water, and by centrifugation, the precipitate containing chlorin eb, after washing with distilled water, is suspended under sterile conditions in pyrogen-free water, re-centrifuged, the precipitate obtained is dissolved in an aqueous solution of N-methyl-D-glucamine, the pH is adjusted to a certain value, the required amount of pyrogen-free water is added, the solution is filtered and polyvinylpyrrolidone is added. (see Pat. RU N ° 2 276 976, Cl. AblK 31/409, dated 08/10/2004).
Однако использование этого способа позволяет получить только водный раствор ФС, который недостаточно устойчив и обладает ограниченным сроком хранения.
Раскрытие изобретенияHowever, the use of this method allows to obtain only an aqueous solution of FS, which is not stable enough and has a limited shelf life. Disclosure of invention
В основу изобретения поставлена задача разработки ФС, более устойчивого при длительном хранении даже при комнатной температуре, обладающего повышенными эксплуатационными свойствами и потребительскими качествами, увеличенным сроком хранения его как медицинского препарата и упрощения его практического использования в медицинских учреждениях, а также разработки способа его получения (изготовления), позволяющего получить ФС, обладающий вышеописанными эксплуатационными и потребительскими свойствами.The basis of the invention is the task of developing a FS more stable during long-term storage even at room temperature, with improved performance and consumer qualities, increased shelf life of it as a medical product and simplification of its practical use in medical institutions, as well as the development of a method for its production (manufacture ), allowing to obtain a FS having the above operational and consumer properties.
Эта задача решается тем, что Фотосенсибилизатор для фотодинамической терапии, согласно изобретению, содержит хлорин еб с N-метил-D-глюкамином и натрием, в следующих мольных соотношениях: 1 :2:1, и криостабилизатор, при этом фотосенсибилизатор имеет структурную формулу:This problem is solved in that the photosensitizer for photodynamic therapy, according to the invention, contains chlorin eb with N-methyl-D-glucamine and sodium, in the following molar ratios: 1: 2: 1, and a cryostabilizer, while the photosensitizer has the structural formula:
Кроме того, криостабилизатор берут в количестве l :l(вecoвыx частей ) по отношению к вышеупомянутым хлорину еб с N-метил-D- глюкамином и натрием, при этом в качестве криостабилизатора берут мальтозу.In addition, a cryostabilizer is taken in an amount of l: l (weight parts) relative to the aforementioned chlorine eb with N-methyl-D-glucamine and sodium, with maltose being taken as a cryostabilizer.
Согласно второму техническому решению в способе получения фотосенсибилизатора для фотодинамической терапии берут хлорин еб и суспензируют его в апирогенной воде, добавляют при перемешивании вычисленное количество N-метил-D-глюкамина и гидроокиси натрия (
(Na ОН ), полученный раствор солей хлорина еб фильтруют, добавляют в него вычисленное количество криостабилизатора и лиофилизуют. Кроме того, хлорин еб, N-метил-D-глюкамин и гидроокись натрия берут в следующих мольных соотношениях: 1:2:1, при этом криостабилизатор берут в весовом количестве 1 : 1 к солям хлорина еб, а в качестве криостабилизатора берут мальтозу.According to the second technical solution, in the method for producing a photosensitizer for photodynamic therapy, chlorin eb is taken and suspended in pyrogen-free water, the calculated amount of N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide is added with stirring ( (Na OH), the resulting solution of chlorin eb salts is filtered, the calculated amount of cryostabilizer is added to it and lyophilized. In addition, chlorin eb, N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide are taken in the following molar ratios: 1: 2: 1, while the cryostabilizer is taken in a weight ratio of 1: 1 to the salts of chlorin eb, and maltose is taken as the cryostabilizer.
Лучший вариант осуществления изобретенияThe best embodiment of the invention
По существу предлагается новый способ получения ФС на базе хлорина еб. Данный способ отличается тем, что для получения ФС используется композиция из хлорина еб, который получается химической модификацией метилфеофорбида а, N-метил-D-глюкамина (C7H17NOs), гидроокиси натрия и криостабилизатора (мальтозы), взятых в определенных соотношениях, которая представляет собой лиофильно высушенный порошок, устойчивый при хранении при комнатной температуре. Этот способ реализуется путем предварительного получения метилфеофорбида а высокой степени чистоты и затем получения фотосенсибилизатора по ниже приведенным методикам.Essentially, a new method for producing FS based on chlorin eb is proposed. This method is characterized in that for the production of PS, a composition of chlorin eb is used, which is obtained by chemical modification of methylpheophorbide a, N-methyl-D-glucamine (C 7 H 17 NOs), sodium hydroxide and cryostabilizer (maltose), taken in certain ratios, which is a freeze-dried powder, stable when stored at room temperature. This method is implemented by first obtaining methylpheophorbide and a high degree of purity and then obtaining a photosensitizer by the following methods.
Фотосенсибилизатор имеет следующую структурную формулу (Фиг.2)The photosensitizer has the following structural formula (Figure 2)
1. Лиофилизация натриевых и N-метил-D-глюкаминовых солей хлорина еб, взятых в определенных соотношениях по отношению к хлорину еб способствует повышению устойчивости ФС при хранении и 5 облегчает процесс лиофилизации.1. Lyophilization of sodium and N-methyl-D-glucamine salts of chlorin eb, taken in certain proportions with respect to chlorin eb, enhances the stability of PS during storage and 5 facilitates the lyophilization process.
2. Добавление криостабилизатора улучшает условия лиофилизации (увеличивает пористость образующейся таблетки, заметно ускоряет процесс лиофилизации, сокращает время растворения при приготовлении инъекционного раствора и заметно повышает2. The addition of a cryostabilizer improves the lyophilization conditions (increases the porosity of the resulting tablet, significantly accelerates the lyophilization process, reduces the dissolution time when preparing the injection solution, and significantly increases
10 устойчивость препарата даже при хранении при комнатной температуре).10 drug stability even when stored at room temperature).
3. Лиофилизация ФС позволяет значительно увеличить сохранность медицинского препарата и приготовленных из него лекформ .3. Lyophilization of FS can significantly increase the preservation of the medicinal product and leforms prepared from it.
4. Использование порошкообразного ФС значительно упрощает 15 приготовление разнообразных рецептур мазей, кремов и гелей, применяемых для ФДТ поверхностных форм рака и других заболеваний в офтальмологии, отолорингологии, стоматологии, гинекологии и др.4. The use of powdered FS greatly simplifies the preparation of 15 different formulations of ointments, creams and gels used for PDT of surface forms of cancer and other diseases in ophthalmology, otolorology, dentistry, gynecology, etc.
Пример . К раствору 4 г метилфеофорбида а в 700 мл ацетона при 40-An example. To a solution of 4 g of methylpheophorbide a in 700 ml of acetone at 40-
20 45°C добавляют 150 мл 10%-нoro раствора гидроксида калия (KOH) при интенсивном барбатировании аргона, через 0.5 часа температуру раствора доводят до 6O0C , прибавляют 650 мл 10%-нoгo раствора KOH20 45 ° C add 150 ml of a 10% potassium hydroxide (KOH) solution with intensive argon sparging, after 0.5 hours the temperature of the solution is adjusted to 6O 0 C, 650 ml of a 10% KOH solution are added
, выдерживают 1 ч под аргоном, контролируя процесс превращения метилфеофорбида а в хлорин еб методом ЖХВД (жидкостной, incubated for 1 h under argon, controlling the process of conversion of methylpheophorbide a to chlorin eb by HPLC (liquid
25 хромотографии высокого давления) и, после завершения процесса, раствор охлаждают до 15-20 0C, нейтрализуют реакционную смесь разбавленной соляной кислотой до рН 4.5-5, выпавший осадок
отделяют центрифугированием, промывают 5 раз апирогенной дистиллированной водой с последующим рецентрифугированием, затем в стерильных условиях суспендируют осадок в апирогенной воде, к суспензии добаляют 0.5 л раствора N-метил-D-глкжамина и NaOH (вычисленное количество), затем 3.5 г мальтозы и полученный раствор фильтруют через фильтр 0.22 ммк, лиофилизуют во флаконах по 5 мл. Получают ФС (фиг. 2) в виде пористой таблетки, содержащей во флаконе 35 мг основного вещества (в пересчете на хлорин еб).25 chromatography of high pressure) and, after completion of the process, the solution is cooled to 15-20 0 C, the reaction mixture is neutralized with dilute hydrochloric acid to pH 4.5-5, precipitated separated by centrifugation, washed 5 times with pyrogen-free distilled water, followed by re-centrifugation, then, under sterile conditions, the precipitate was suspended in pyrogen-free water, 0.5 L of a solution of N-methyl-D-glycamine and NaOH (calculated amount) was added to the suspension, then 3.5 g of maltose and the resulting solution filtered through a 0.22 micron filter; lyophilized in 5 ml vials. Receive FS (Fig. 2) in the form of a porous tablet containing in a bottle of 35 mg of the main substance (in terms of chlorin eb).
Промышленная применимостьIndustrial applicability
Изложенные преимущества предложенных технических решений обеспечивают возможность широкого использования в области фармакологии для получения биологически активных соединений хлоринового ряда, в частности для производства солей хлорина еб, которые могут найти применение в качестве высокоэффективных фотосенсибилизаторов для фотодинамической терапии рака и других новообразований различного генезиса, а также для флюоресцентной диагностики раковых клеток.
The stated advantages of the proposed technical solutions provide the possibility of widespread use in the field of pharmacology for the production of biologically active compounds of the chlorin series, in particular for the production of chlorin eb salts, which can be used as highly effective photosensitizers for the photodynamic therapy of cancer and other neoplasms of various genesis, as well as for fluorescent diagnosis of cancer cells.
Claims
1. Фотосенсибилизатор для фотодинамической терапии, характери з у ю щ и й с я тем, что он содержит хлорин еб с N-метил-D- глюкамином и натрием, в следующих мольных соотношениях: 1:2:1, и 5 криостабилизатор, при этом фотосенсибилизатор имеет структурную формулу:1. A photosensitizer for photodynamic therapy, characterized in that it contains chlorin eb with N-methyl-D-glucamine and sodium, in the following molar ratios: 1: 2: 1, and 5 cryostabilizer, with This photosensitizer has the structural formula:
2. Фотосенсибилизатор по п.1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что криостабилизатор берут в количестве 1:1 ( весовых частей ) по2. The photosensitizer according to claim 1, on the basis of the fact that the cryostabilizer is taken in an amount of 1: 1 (weight parts) according to
10 отношению к вышеупомянутым в п.l хлорину еб с N-метил-D- глюкамином и натрием.10 with respect to the chlorine eb mentioned in Claim 1 with N-methyl-D-glucamine and sodium.
3. Фотосенсибилизатор по п.2, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в качестве криостабилизатора берут мальтозу.3. The photosensitizer according to claim 2, with the fact that maltose is taken as a cryostabilizer.
4. Способ получения фотосенсибилизатора для фото динамической 15 терапии, х а р а к т е р и з у ю щ и й с я тем, что берут хлорин еб и суспензируют его в апирогенной воде, добавляют при перемешивании вычисленное количество N-метил-D-глюкамина и гидроокиси натрия ( Na ОН ), полученный раствор солей хлорина еб фильтруют, добавляют в него вычисленное количество криостабилизатора и лиофилизуют. 204. A method of obtaining a photosensitizer for photo-dynamic therapy 15, which is characterized by the fact that they take chlorin eb and suspend it in pyrogen-free water, add the calculated amount of N-methyl- with stirring D-glucamine and sodium hydroxide (Na OH), the resulting solution of chlorin salts eb is filtered, the calculated amount of cryostabilizer is added to it and lyophilized. twenty
5. Способ по п.4, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что хлорин еб, N- метил-D-глюкамин и гидроокись натрия берут в следующих мольных соотношениях: 1:2:1.5. The method according to claim 4, with the fact that chlorin eb, N-methyl-D-glucamine and sodium hydroxide are taken in the following molar ratios: 1: 2: 1.
6. Способ по п. 4, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что криостабилизатор берут в весовом количестве 1:1 к солям хлорина еб. 6. The method according to p. 4, with the fact that the cryostabilizer is taken in a weight quantity of 1: 1 to chlorine salts eb.
7. Способ по п.6, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в качестве криостабилизатора берут мальтозу. 7. The method according to claim 6, with the fact that the maltose is taken as a cryostabilizer.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008115234/15A RU2367434C1 (en) | 2008-04-22 | 2008-04-22 | Photosensitiser and method for preparing thereof |
| RU2008115234 | 2008-04-22 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2009131486A2 true WO2009131486A2 (en) | 2009-10-29 |
| WO2009131486A3 WO2009131486A3 (en) | 2009-12-17 |
Family
ID=41167767
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/RU2008/000715 WO2009131486A2 (en) | 2008-04-22 | 2008-11-21 | Photosensitiser and a method for the production thereof |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2367434C1 (en) |
| WO (1) | WO2009131486A2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101138437B1 (en) * | 2011-08-05 | 2012-04-26 | 다이아텍코리아 주식회사 | Methods for Preparing Powder Chlorophyll a and Photosensitizer from Spirulina |
| KR101332319B1 (en) * | 2011-05-04 | 2013-11-22 | 다이아텍코리아 주식회사 | Methods for Preparing Powder Chlorophyll a and Photosensitizer from Spirulina |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2523380C1 (en) * | 2013-05-21 | 2014-07-20 | Общество с ограниченной ответственностью "ГЕЛИОХЛОРИН" | Photosensitiser and method of its obtaining |
| RU2548726C2 (en) * | 2013-12-25 | 2015-04-20 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК") | Photosensitiser for photodynamic therapy |
| RU2576025C1 (en) * | 2014-07-30 | 2016-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича" Российской академии медицинских наук (ФГБУ "ИБМХ" РАМН) | Method for producing composition for photodynamic therapy in form of phospholipid nanoparticles based on glucamine chlorine e6 salt, maltose and phosphatidylcholine |
| RU2568597C1 (en) * | 2014-11-27 | 2015-11-20 | Общество с ограниченной ответственностью "РЕВИКСАН" (ООО "РЕВИКСАН") | Photosensitiser and method for producing it |
| RU2646477C1 (en) * | 2017-04-05 | 2018-03-05 | Елена Вячеславовна Филоненко | Photosensitiser for treatment of cancer diseases and method of its obtaining |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5002962A (en) * | 1988-07-20 | 1991-03-26 | Health Research, Inc. | Photosensitizing agents |
| RU2144538C1 (en) * | 1998-01-22 | 2000-01-20 | Закрытое акционерное общество "Вета" | Method of preparing water-soluble chlorines |
| RU2152790C1 (en) * | 1999-05-12 | 2000-07-20 | Мещерякова Аделия Леонидовна | Agent for photodynamic diagnosis and therapy of oncological diseases |
| RU2183956C1 (en) * | 2001-03-30 | 2002-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "РАДА-ФАРМА" | Photosensibilizer agent and method for producing it |
| WO2002083097A2 (en) * | 2001-04-11 | 2002-10-24 | Qlt Inc. | Drug delivery system for hydrophobic drugs |
| RU2276976C2 (en) * | 2004-08-10 | 2006-05-27 | Открытое акционерное общество "Группа компаний "ГРАНД" | Photosensibilizator and method for its preparing |
-
2008
- 2008-04-22 RU RU2008115234/15A patent/RU2367434C1/en active
- 2008-11-21 WO PCT/RU2008/000715 patent/WO2009131486A2/en active Application Filing
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5002962A (en) * | 1988-07-20 | 1991-03-26 | Health Research, Inc. | Photosensitizing agents |
| RU2144538C1 (en) * | 1998-01-22 | 2000-01-20 | Закрытое акционерное общество "Вета" | Method of preparing water-soluble chlorines |
| RU2152790C1 (en) * | 1999-05-12 | 2000-07-20 | Мещерякова Аделия Леонидовна | Agent for photodynamic diagnosis and therapy of oncological diseases |
| RU2183956C1 (en) * | 2001-03-30 | 2002-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью "РАДА-ФАРМА" | Photosensibilizer agent and method for producing it |
| WO2002083097A2 (en) * | 2001-04-11 | 2002-10-24 | Qlt Inc. | Drug delivery system for hydrophobic drugs |
| RU2276976C2 (en) * | 2004-08-10 | 2006-05-27 | Открытое акционерное общество "Группа компаний "ГРАНД" | Photosensibilizator and method for its preparing |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101332319B1 (en) * | 2011-05-04 | 2013-11-22 | 다이아텍코리아 주식회사 | Methods for Preparing Powder Chlorophyll a and Photosensitizer from Spirulina |
| KR101138437B1 (en) * | 2011-08-05 | 2012-04-26 | 다이아텍코리아 주식회사 | Methods for Preparing Powder Chlorophyll a and Photosensitizer from Spirulina |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2367434C1 (en) | 2009-09-20 |
| WO2009131486A3 (en) | 2009-12-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Yang et al. | Light-activatable dual-source ROS-responsive prodrug nanoplatform for synergistic chemo-photodynamic therapy | |
| WO2009131486A2 (en) | Photosensitiser and a method for the production thereof | |
| EP1420824B1 (en) | Sulfonated chlorines as photosensitizer | |
| CN103450199B (en) | Theanine modify carboline acyl aminoacid benzyl ester, its preparation, anti-tumor activity and application | |
| JP2019511442A (en) | Carbon dots for diagnostic analysis and drug delivery | |
| CN105233283B (en) | Targeted nano photosensitizer for photodynamic therapy of deep tumor and preparation method thereof | |
| JP2020536914A (en) | Autophagy inhibitors and their preparation methods and applications | |
| RU2712266C9 (en) | Atropisomers of halogenated tetraphenylbacteriochlorins and chlorins and their use in photodynamic therapy | |
| JP2021512849A (en) | Derivatives in which both the peri-position and 2-position of hypoclerin are amino-substituted, their preparation method and use. | |
| CN113384709A (en) | Preparation and application of glucan-protoporphyrin prodrug nano-micelle | |
| CN110251672B (en) | Nano diagnosis and treatment agent and preparation method and application thereof | |
| RU2523380C1 (en) | Photosensitiser and method of its obtaining | |
| Ghosh et al. | Self-assembled porphyrin–peptide cages for photodynamic therapy | |
| AU2005330277A1 (en) | Photosensitizers and MRI enhancers | |
| CN112870356B (en) | Series of medicines for photodynamic therapy of tumor and application thereof | |
| JP2021528482A (en) | Oxazine compounds and their use | |
| RU2276976C2 (en) | Photosensibilizator and method for its preparing | |
| CN106083872A (en) | C.I. Natural Red 8 18 ether derivative and its production and use | |
| RU2568597C1 (en) | Photosensitiser and method for producing it | |
| CN116143792B (en) | Active oxygen response non-light source photodynamic therapy photosensitive molecule and preparation method and application thereof | |
| CN117717615A (en) | Nanometer biological material based on protein and porphyrin photosensitive drug co-assembly, and preparation method and application thereof | |
| CN112704685B (en) | Cisplatin ligand and application thereof in preparation of tumor nano diagnosis and treatment agent | |
| CN112891555B (en) | Conjugate of hydroxyethyl starch grafted chlorin e6, preparation and application thereof | |
| CN100439372C (en) | Porphyrin derivatives | |
| CN110841073B (en) | Preparation method of MS2 protein nanoparticle coupled monocarboxyl zinc phthalocyanine and application of MS2 protein nanoparticle coupled monocarboxyl zinc phthalocyanine in resisting breast cancer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NENP | Non-entry into the national phase in: |
Ref country code: DE |
|
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 08873978 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A2 |