WO2007119724A1

WO2007119724A1 - 薬物送達粒子及びその製造方法

Info

Publication number: WO2007119724A1
Application number: PCT/JP2007/057912
Authority: WO
Inventors: Kimiko Makino; Takehisa Nakajima; Hiroshi Terada; Yusaku Kawai; Motoko Nishiwaki
Original assignee: Tokyo University Of Science Educational Foundation Administrative Organization
Priority date: 2006-04-13
Filing date: 2007-04-10
Publication date: 2007-10-25
Also published as: JP2007284362A

Abstract

　本発明は、被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の１質量％～５質量％のリン脂質とを含み、噴霧乾燥によって調製された薬物送達粒子である。また本発明は、被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の１質量％～５質量％のリン脂質とを含む分散液又は溶液を噴霧乾燥する薬物送達粒子の製造方法である。本発明の薬物送達粒子は、被送達薬物の経肺投与に使用することができる。

Description

明細書

薬物送達粒子及びその製造方法

技術分野

[0001] 本発明は、薬物を投与するための薬物送達粒子及びその製造方法に関する。

背景技術

[0002] 薬剤の全身性投与方法として経肺吸収が注目されて、る。薬物を経肺吸収させるには、薬物含有粒子を肺胞まで到達させることが必要である。吸気中の異物粒子が肺胞まで到達するには、適切な空気力学的粒子径を有していることが必要であり、肺胞へ到達する最適の空気力学的粒子径は 0. 5 μ m〜5 μ m程度である。これ以上の大きさの粒子は気道において捕捉されて粘液絨毛輸送系によって排出されるし、これよりも小さな粒子は肺胞に沈着することなく呼気と共に排出される。肺胞に到達した粒子に対しては、肺胞マクロファージが防御系として作用する。マクロファージは約 3 mの幾何学的粒子径を有する異物粒子を貪食して、分解消化してしまう。従って、肺胞を吸収部位とした薬物輸送システムの開発においては、肺胞マクロファージの捕捉を回避する方法に研究開発の焦点が当てられてきた。

[0003] 例えば特許文献 1には、薬物を包含するナノ粒子を含み、リン脂質と糖質からなるハイブリッド粒子が開示されている。適切な空気力学的粒子径を有するハイブリッド粒子が肺胞に達した後、前記ハイブリッド粒子力肺胞マクロファージの貪食を回避し得るほど幾何学的粒子径が小さい薬物含有ナノ粒子が放出される薬物輸送システムが開示されている。

[0004] また、特許文献 2及び 3には、薬物とリン脂質とを含む低密度粒子が開示されている。前記低密度粒子は経肺投与に適する空気力学的粒子径を有しながら、肺胞マクロファージの貪食を回避し得るほど大きな幾何学的粒子径を有することが開示されている。

[0005] 一方、結核菌、エイズウイルス、マラリア原虫、レジオネラ等のある種の病原体は、肺胞マクロファージに取り込まれても、分解吸収を回避して肺胞マクロファージ細胞内に感染する。例えば結核菌は肺胞マクロファージに取り込まれても、分解吸収を受けることなく肺胞マクロファージ内で増殖した後、病原性を発揮する。結核の根本治療法が確立しないのは、肺胞マクロファージ内の結核菌に対して有効なレベルに到達、維持できるように抗結核薬を投与することが困難だ力である。従って、選択的に肺胞マクロファージ内に十分なレベルの抗結核薬を投与することが可能であれば、結核治療法として極めて有効であると考えられる。例えば、特許文献 4には、薬物を含有させた微粒子を肺胞マクロファージに貪食させることで、肺胞マクロファージ内の薬物濃度の選択的な上昇と肺胞マクロファージ自体の活性化を図る薬物含有粒子が開示されている。

[0006] 特許文献 1 :特表 2005— 511629号公報

特許文献 2：特表 2001— 526634号公報

特許文献 3：特表 2003 - 507410号公報

特許文献 4:国際公開第 04Z019982号パンフレット

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0007] 特許文献 1〜3に開示されている薬物含有粒子では、経肺投与された粒子が肺胞に到達したとしても、その幾何学的粒子径により肺胞マクロファージの貪食が回避され、肺胞マクロファージに前記薬物含有粒子を取り込ませることはできない。すなわち、前記薬物含有粒子を用いても選択的に肺胞マクロファージ内に薬物を投与することは困難である。また、特許文献 4に開示されている薬物含有粒子を肺胞まで到達させることができれば、選択的に肺胞マクロファージ内に薬物を投与することは可能である。しかし、前記薬物含有粒子を経肺的に効率よく肺胞まで到達せしめる方法につ!ヽてはなんらの記載も示唆もされてヽな、。

[0008] 本発明は上記課題に鑑みてなされたものであり、経肺的に肺胞まで効率よく到達することでき、かつ、肺胞マクロファージに選択的に薬物を投与することが可能な薬物送達粒子を提供することを目的とする。

課題を解決するための手段

[0009] 本発明の第 1の態様は、被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の 1質量 %〜5質量％のリン脂質とを含む薬物送達粒子である。また、本発明の第 2の態様は、被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の 1質量％〜5質量％のリン脂質とを含む分散液又は溶液を噴霧乾燥する薬物送達粒子の製造方法である。

前記薬物送達粒子の幾何学的粒子径は 1〜4 mであることが好ましい。また、前記薬物送達粒子は経肺投与用の薬物送達粒子であることが好ましい。

また、前記生分解性ポリマーは、ポリエステル化合物、ポリアミドィ匕合物、ポリビュル化合物及び多糖類力なる群力選択される少なくとも 1種を含む生分解性ポリマーであることが好ましい。また、前記リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルェタノールァミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール及びスフインゴミエリンカもなる群力も選択される少なくとも 1種を含むリン脂質であることが好ましい。また、前記被送達薬物は、生理活性物質であることが好ましぐ呼吸器系薬物又は診断薬であることがより好ましい。

更に、前記薬物送達粒子は、標識された薬物送達粒子であることが好ましい。発明の効果

[0010] 本発明によれば、経肺的に効率よく肺胞まで到達することができ、かつ、肺胞マクロファージに選択的に被送達薬物を送達可能な薬物送達粒子を提供することができる図面の簡単な説明

[0011] [図 1]サンプル（I 1)〜（1 9)のカプセル内粒子残量（mg)を縦軸に、 DPPC含有量（％)を横軸にとって示した図である。

[図 2]サンプル (I 1)〜（I 9)のステージ 0〜2の沈積粒子質量 (mg)を縦軸に、 D PPC含有量（％)を横軸にとって示した図である。

[図 3]サンプル (I— 1)〜（1— 9)の FPF (%)を縦軸に、 DPPC含有量（％)を横軸にとつて示した図である。

発明を実施するための最良の形態

[0012] 以下、本発明の実施の形態について詳しく説明する。

本発明は、被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の 1質量％〜5質量％のリン脂質とを含む薬物送達粒子である。本発明における被送達薬物としては、生理活性物質と診断薬とを挙げることができる。生理活性物質とは生体内で所望の生物学的活性、例えば治療、予防的活性及び z又は診断的活性を有する化学物質である。また、診断薬とは疾病の診断や臓器の機能検査に用いられる化学物質である。これらの薬物は単独又は 2種以上を混合して用いることができる。

[0013] 前記生理活性物質の例としては、治療、診断及び Z又は予防的活性を有する、無機化合物、有機化合物、タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、核酸、多糖等を挙げることができる。前記生理活性物質の治療及び予防的活性としては、抗菌活性、抗真菌活性、抗腫瘍活性、抗ウィルス活性、アンチセンス活性、ホルモン活性、免疫調節活性等を挙げることができるが、これらに限定されない。

また、本発明の薬物送達粒子には、診断のために、分析対象物を検出するための生理活性物質を含有させることができる。例えば、抗原、抗体 (モノクローナル又はポリクローナル）、レセプター、ハプテン、酵素、タンパク質、ポリペプチド、核酸 (たとえば、 DNA又は RNA)、ホルモン、ポリマーを挙げることができ、これらのうち少なくとも 1種を含有させることができる。また、前記薬物送達粒子を容易に検出することができるように、前記薬物送達粒子自体を標識することができる。標識の例としては、種々の酵素、蛍光物質、発光物質、生物発光物質及び放射性物質を挙げることができるが、これらに限定されない。適当な酵素の例には、西洋ヮサビペルォキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、 β ガラクトシダーゼ、及びアセチルコリンエステラーゼを挙げることができる。適当な蛍光物質の例としては、ゥンベリフエロン、フルォレセイン、フルォレセインイソチオシアナート、ローダミン、ジクロロトリアジ-ルァミンフルォレセィン、ダンシルクロリド及びフィコエリスリンを挙げることができる。発光物質の例としては、ルミノールを挙げることができる。生物発光物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリン及びェクオリンを挙げることができる。適当な放射性物質の例としては、 ¹²⁵ι、 ¹³ 、 ³⁵S、及び³ Hを挙げることができる。

[0014] 特に有用な前記生理活性物質としては、全身性、局所性治療の点から、呼吸器系薬物を挙げることができる。ここで呼吸器系薬物とは呼吸器疾患の治療及び Z又は予防に用いることができる薬物をいう。呼吸器疾患としては呼吸不全、呼吸器感染症、閉塞性，拘束性疾患 (気管支喘息，気管支拡張症)、肺循環障害 (肺塞栓，肺梗塞）、異常呼吸 (過換気症候群)、胸膜、縦隔、横隔膜疾患（自然気胸、胸膜炎)及び肺ガンを挙げることができる。呼吸器系薬物の具体例としては、喘息の治療薬 (例えば、アルブテロール等）、結核等の好酸菌症の治療薬 (例えば、リファンピシン、ェタンブトール、イソ-アジド、ピラジンアミド、ストレプトマイシン、パラアミノサリチル酸等）、クラジミア肺炎、トキソプラズマ肺炎、レジオネラ肺炎、カリニ肺炎等の各種肺炎症の治療薬 (例えば、エリスロマイシン、リファンピシン、ニューキノロン、テトラサイクリン、マクロライド等）、肺がんの治療薬 (例えば、シスブラチン、カーボブラチン、アドリアマイシン、 5— FU、パクリタキセル等）、免疫不全症候群の治療薬 (例えば、ジドブシン、ジダノシン、ラミブジン、サキナビル、リトナビル、インジナビル、イセチオン酸ペンタミジン、ガンシクロビル、レノグラスチム、フィルグラスチム、ホスカルネットナトリウム、レガビルマブ、クラリスロマイシン、ソマトロピン、クロトリマゾール等）等を挙げることができるが、これらに限定されない。これらの治療薬はそれぞれ単独又は 2種以上を混合して用いてもよい。呼吸器系薬物は目的に応じて選択することが可能であるが、肺胞マクロファージを被送達薬物の送達ターゲットとすることができることから、好酸菌症の治療薬、肺がんの治療薬、免疫不全症候群の治療薬が好ましぐ好酸菌症の治療薬がより好ましぐリファンピシンがより好ましい。

[0015] 本発明の薬物送達粒子には任意の診断薬を包含させることができる。診断薬の具体的な例としては、造影剤を挙げることができるが、これに限定されない。造影剤としては、ポジトロン断層撮影法 (PET)、コンピュータ連動断層撮影法 (CT)、シングルフォトンェミッションコンピュータ断層撮影法、 X線、 X線透視、磁気共鳴画像法 (MRI

)に使用される市販の薬剤を挙げることができる。診断薬は、当該分野で利用可能な標準技術及び市販の装置を用いて検出することができる。

[0016] 本発明における薬物送達粒子全体に対する被送達薬物の含有量としては、特に制限はなぐ所望の効果、被送達薬物の放出速度、放出期間に依存して変化させることができる。特に薬物送達粒子の安定性と被送達薬物の安定性との点から、薬物送達粒子全体に対する被送達薬物の含有量としては 50質量％以下が好ましぐ 20 質量％以下がより好ましぐ 10質量％以下が更に好ましい。 [0017] 本発明の薬物送達粒子は生分解性ポリマーを含有する。前記生分解性ポリマーは、生体適合性の高い物質である必要がある。加えてマクロファージを送達ターゲットとする場合には、マクロファージに取り込まれるまでは粒子の形態を保持する一方で、マクロファージに取り込まれた後に、または取り込まれな力つた場合にも、生体内で生体にとって無害な成分にまで分解されて代謝され得る物質であることが好ましい。前記生分解性ポリマーは、前記条件を満足するものであれば任意のものを選択することができる。具体的には、ポリエステル化合物、ポリアミドィ匕合物、ポリカーボネート化合物、ポリビ-ルイ匕合物及び多糖類を挙げることができるが、これらに限定されない。これらの生分解性ポリマーは単独又は 2種以上を混合して用いることができる。特に、生体適合性の点から、ポリエステル化合物、ポリアミドィ匕合物、ポリビニルイ匕合物及び多糖類力なる群力選択される少なくとも 1種を用いることが好ましい。

[0018] ポリエステルィ匕合物の具体例としては、ポリ乳酸、ポリダリコール酸、ポリ力プロラクトン及びこれらの共重合体、並びに、ポリブチレンサクシネート、ポリエチレンサクシネート、ポリ（ブチレンサクシネート Zアジペート）、ポリ (ブチレンサクシネート Zカーボネ一ト)、ポリ (ブチレンサクシネート Zテレフタレート)、ポリ (ブチレンアジペート Zテレフタレート)、ポリ (テトラメチレンアジペート Zテレフタレート)及びポリ (ブチレンサクシネート Zアジペート Zテレフタレート)を挙げることができるが、これらに限定されない。ポリアミド化合物の具体例としてはポリロイシン、ポリリジンのような単一のアミノ酸残基力もなるポリアミド化合物、インスリンや成長ホルモンのような生理活性ペプチド、ァルブミンのような水溶性タンパク質、ポリアミド化合物であるタンパク質が糖と結合した糖タンパク質等を挙げることができる。

特に、ポリアミドィ匕合物が生理活性を有する場合には、被送達薬物と生分解性ポリマーとを兼用して用いることができる。

ポリビニルイ匕合物の具体例としてはポリシァノアクリレートを挙げることができる。多糖類の具体的な例としてはセルロース、キトサン、セルロースをィ匕学修飾したヒドロキシプロピノレセノレロース、ヒドロキシプロピノレメチノレセノレロース、メチノレセノレロース及びカルボキシメチルセルロース、並びに多糖類と脂質とを含有するリポ多糖を挙げることができる。 [0019] これらの生分解性ポリマーのうち、生体適合性、生分解性、水分散液中での安定性等の点から、ポリエステル化合物、ポリビニルイ匕合物からなる群カゝら選ばれる少なくとも 1種を用いることが好ましぐポリ乳酸、ポリダリコール酸、ポリ（乳酸ーグリコール酸） (PLGA)、ポリシァノアクリレートから選ばれる少なくとも 1種を用いることがより好ましぐ PLGAを用いることが更に好ましい。

[0020] 前記生分解性ポリマーの種類及び分子量を適宜選択することで、薬物の放出速度、粒子の生分解速度を制御することができる。例えば、前記生分解性ポリマーが PL GAである場合、好ましい分子量は 1500〜150000であり、より好ましくは 1500〜7 5000である。これにより薬物を放出しやす、薬物送達粒子を提供することができる。また、前記生分解性ポリマーが共重合体である場合には、モノマーの組成比率を適宜選択することで薬物の放出速度、粒子の生分解速度を制御することができる。

[0021] 本発明の薬物送達粒子はリン脂質を含有する。前記リン脂質はその分子内にリン酸残基と脂肪酸残基とを含む化合物である。生体適合性の点から、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールァミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール及びスフインゴミエリンカもなる群力も選択される少なくとも 1種を含むリン脂質を用いることが好ましい。

[0022] リン脂質の具体的な例としては、ジラウロイルホスファチジルコリン (DLPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン（DMPC)、ジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC)、ジステアロイルホスファチジルコリン（DSPC)、ジォレオイルホスファチジルコリン（D OPC)、ジラウロイルホスファチジルグリセロール（DLPG)、ジミリストイルホスファチジルグリセロール（DMPG)、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（DPPG)、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（DSPG)、ジォレオイルホスファチジルグリセロール（DOPG)、ジラウロイルホスファチジン酸（DLPA)、ジミリストイルホスファチジン酸（DMPA)、ジパルミトイルホスファチジン酸（DPPA)、ジパルミトイルホスファチジン酸（DPPA)、ジミリストイルホスファチジルエタノールァミン（DMPE)、ジパルミトィルホスファチジルエタノールァミン（DPPE)、ジミリストイルホスファチジルセリン（D MPS)、ジパルミトイルホスファチジルセリン（DPPS)、パルミトイルスフィンゴミエリン及びステアロイルスフィンゴミエリン等を挙げることができる力これらに限定されない。これらのリン脂質は単独又は 2種以上を混合して用いることもできる。

[0023] 本発明におけるリン脂質としては、これらのリン脂質のうち、肺胞に対する親和性の点から、肺サーファタタントに含有されるリン脂質であることがより好ましい。肺サーファクタントとは、肺胞腔にぉヽて肺胞被覆層を形成して肺胞の虚脱を防止することで換気能力を維持する役割を担う生理活性物質で、肺胞 II型細胞で産生され、肺胞腔に分泌されるリン脂質'蛋白質複合体である。従って本発明に用いられるリン脂質としては、肺サーファタタントの主成分であるジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC) 、ジパルミトイルホスファチジルエタノールァミン（DPPE)、ジパルミトイルホスファチジルセリン（DPPS)が好ましぐジパルミトイルホスファチジルコリン（DPPC)がより好ましい。

[0024] リン脂質の含有量は、目的に応じて適宜選択することが可能であるが、薬物送達粒子の飛翔性の点から、全粒子質量の 1質量％以上であることが必要である。リン脂質の含有量を 1質量％未満では、十分な飛翔性を得ることができず、経肺的に投与できる効率が低くなる。また、空気力学的粒子径分布の点から、全粒子重量の 5質量％以下であることが必要である。リン脂質の含有量が 5質量％を超えると、調製される薬物送達粒子の形態が変形しやすくなり、肺胞到達に適する空気力学的粒子径を有する粒子の割合が低下する。従って、本発明の薬物送達粒子が効率よく肺胞まで到達するためには、リン脂質の含有量が全粒子質量の 1質量％〜5質量％であることが必要である。

[0025] また、本発明の薬物送達粒子には、必要に応じて各種の添加剤を含有させることができる。添加剤の例としては、ポリビュルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリエチレンォキシド、緩衝塩、デキストラン、シクロデキストリン、多糖類、脂肪酸、脂肪酸エステル、無機化合物、リン酸塩等を挙げることができる。

[0026] 本発明の薬物送達粒子が肺胞に到達するためには、その空気力学的粒子径が 0.

5〜7 μ mであることが好ましぐ 0. 5〜5 μ mであることがより好ましい。また、本発明の薬物送達粒子が、肺胞マクロファージに効率よく貪食されるためには、幾何学的粒子径が 0. 5〜5 mであることが好ましぐ 1〜4 /ζ πιであることがより好ましい。

空気力学的粒子径は当該分野で公知の方法によって測定することができる。例えば、重力沈降法を用いて直接的に測定することができる。また、空気力学的分級機構を利用したカスケードインパクターを用いて間接的に測定することができる。一方、幾何学的粒子径は、例えば、走査電子顕微鏡を用いて直接的に測定することができる。また、市販の粒子径分布測定装置を用いて測定することができる。

[0027] 本発明の薬物送達粒子は、噴霧乾燥法、膜乳化法、液中乾燥法、溶媒蒸散法、凍結乾燥等の公知の方法によって調製することができるが、粒子径制御の容易さと操作性の点で、噴霧乾燥法を用いることが好まし、。

[0028] 通常用いられる一般的な噴霧乾燥技術は、例えば、マスターズ (K. Masters)による「噴霧乾燥ハンドブック（Spray Drying Handbook)」， John Wiley & Sons, New York, 1 984に記載されている。噴霧乾燥法は、加熱空気又は加熱窒素等の熱ガス由来の熱を利用して、噴霧化装置によって形成された液滴から液滴由来の溶媒を蒸発させて乾燥粒子を調製する方法である。本発明に用いられる噴霧化装置としては、遠心性噴霧化装置、液圧プレスノズル噴霧化装置、 2流体噴霧化装置、音波噴霧化装置を挙げることができるが、これらに限定されない。熱ガスは、例えば、空気、窒素またはアルゴンを用いることができる力これらに限定されない。

[0029] 本発明にお、ては、薬物と生分解性ポリマーとリン脂質とを含む分散液又は溶液を噴霧化装置に供給し、噴霧化後の液滴力熱ガスによって液状物質を蒸発乾燥させることで、薬物と生分解性ポリマーとリン脂質とを含む薬物送達粒子を製造することができる。本発明に用いることができる噴霧化装置としては前述の噴霧化装置を挙げることができ、また、熱ガスとしては前述の熱ガスを挙げることができる。

[0030] 噴霧乾燥に供する分散液又は溶液の調製には、水性溶媒又は有機溶媒を用いることができる。水性溶媒としては水及び緩衝液を挙げることができる。水性溶媒の pH は中性、酸性、アルカリ性のいずれであってもよい。更に水性溶媒は有機溶媒を含有することもできる。水性溶媒に含有される有機溶媒及び分散液又は溶液の調製に直接用いる有機溶媒としては、アルコール (例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等）、パーフルォロカーボン、ジクロロメタン、クロロホノレム、エーテノレ、酢酸ェチノレ、メチノレー tert—ブチノレエーテノレ、ァセトニトリル、アセトン等を挙げることができる力これらに限定されない。 [0031] 前記分散液又は溶液は、当該分野で公知の任意の方法で調製することができる。分散液又は溶液の調製方法を生分解性ポリマーが（1)水溶性の場合と (2)非水溶性の場合に分けて説明する。

(1)生分解性ポリマーが水溶性ポリマーの場合

'リン脂質を有機溶媒 (例えば、ジクロロメタンなど）に溶解する（O層）。水溶性ポリマーと水溶性薬物とを水又は緩衝液に溶解し (W層）、 WZOエマルシヨンとすることができる。

•水溶性ポリマーと水溶性薬物とを水又は緩衝液に溶解し (W層）、リン脂質を固体のまま分散して (s層）、 szw分散液とすることができる。

•水溶性ポリマーを水あるいは緩衝液に溶解し (W層）、油溶性薬物とリン脂質を固体のまま分散して (s層）、 szw分散液とすることができる。

•水溶性ポリマーを水あるいは緩衝液に溶解し (W層）、油溶性薬物とリン脂質を有機溶媒 (例えば、ジクロロメタンなど）に溶解して (o層）、 oZwエマルシヨンとすることができる。

[0032] (2)生分解性ポリマーが非水溶性ポリマーの場合

•油溶性薬物と非水溶性ポリマーとリン脂質とを有機溶媒 (例えば、ジクロロメタンなど）に溶解して、溶液とすることができる。

•水溶性薬物を水あるいは緩衝液に溶解し (W層）、非水溶性ポリマーとリン脂質を有機溶媒 (例えば、ジクロロメタンなど）に溶解して (o層）、有機溶媒中に水層を分散させて、 wZoエマルシヨンとすることができる。

'非水溶性ポリマーとリン脂質を有機溶媒 (例えば、ジクロロメタンなど）に溶解して（ o層）、有機溶媒中に水溶性薬物を固体 (s層）のまま分散させて、 szo分散液とすることがでさる。

本発明の薬物送達粒子は、市販の噴霧乾燥装置を用いて調製することができる。噴霧乾燥条件は使用する噴霧乾燥装置、噴霧乾燥する噴霧乾燥用分散液又は溶液の組成等に応じて適宜選択できる。

以下に本発明の具体的な実施例を示し、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。実施例

[0033] (実施例 1)

[噴霧乾燥法による薬物送達粒子の調製]

リファンピシン (RFP) O. 10gと、表 1に示した量のポリ（乳酸ーグリコール酸）（PLG A7510)とをジクロロメタン 99mLに溶解し、表 1に示した量のジパルミトイルホスファチジルコリン (DPPC)をクロ口ホルム lmLに溶解したものを混ぜ合わせて噴霧乾燥用溶液を調製した。

上述のようにして得られた溶液をスプレードライヤー（BUCHI社製、ミニスプレードライヤ一 B290型)を用いて噴霧乾燥粒子 (サンプル番号 I— 1〜1 9)を調製した。噴霧乾燥の条件は、使用スプレーガンの口径が 0. 75mm,吸気温度が 56〜58°C、乾燥空気量が 22m³Zhr、噴霧空気量が 500LZhr、試料供給速度が 2. OmL/mi πであった。

[表 1]

[0034] (実施例 2)

[膜乳化法による薬物送達粒子の調製]

リファンピシン lOOmgと、ポリ（乳酸一グリコール酸）（PLGA7510) 890mgと、 DP PC lOmgとをジクロロメタン 2mLに溶カゝした液 (O相）と、 PVA (和光純薬工業 (株）製、重合度約 500) 1 %水溶液 40ml (W層）とを膜透過式乳化装置 (清本鉄工製）に入れ、膜透過式乳化装置のマグネチックスターラーを廻して（lOOOrpm) 1分間混合した後、窒素ガスを用いて 0. 5MPaの圧力で装置に装着した孔径 10. の MP G膜 (伊勢ィ匕学工業 (株)）を通して押し出し、 OZW型エマルシヨンを調製した。エマルシヨンをビーカーに移し、マグネチックスターラーを用いて回転速度 250rpmで 12 時間攪拌することにより、 O相のジクロロメタンが蒸散し固化して懸濁液が得られた。この懸濁液を遠心分離 (3000rpm、 5分間）し、上清を除いて粒子を得た。粒子に精製水 lOOmLを加えてマグネチックスターラーで 5分間攪拌した後、遠心分離して上清を除き、粒子表面に付着した PVAを洗浄除去した (洗浄操作を 3回繰り返した)。得られた粒子に 5% (w/v)トレハロース水溶液 10mlを加え、—30°C下で凍結させた後、凍結乾燥器 (FD— 1000型、東京理化器械製)を用いて乾燥し、乾燥粒子 (サンプル番号 II 2)を得た。

[0035] (比較例 1)

リファンピシン 50mgと、ポリ（乳酸ーグリコール酸）（PLGA7510) 450mgとをジクロロメタン 10mLに溶解した液 (O相）を、孔径 1. O /z mの MPG膜 (伊勢ィ匕学工業 (株） )を装着した膜乳化装置 (清本鉄工製）に入れ、窒素ガスを用いて 0. 025MPaの圧力で PVA (和光純薬工業 (株)製、重合度約 500) 2%水溶液200mL (W層）中に押し出し、 O/W型エマルシヨンを調製した。エマルシヨンをビーカーに移し、マグネチックスターラーを用いて回転速度 250rpmで 12時間攪拌することにより、 O相のジクロロメタンが蒸散し固化して懸濁液が得られた。この懸濁液を遠心分離（3000rpm、 5分間）し、上清を除いて粒子を得た。粒子に精製水 50mLを加えてマグネチックスタ一ラーで 5分間攪拌した後、遠心分離して上清を除き、粒子表面に付着した PVAを洗浄除去した (洗浄操作を 3回繰り返した)。得られた粒子に 5% (w/v)トレハロース水溶液 5mLを加え、 30°C下で凍結させた後、凍結乾燥器 (FD— 1000型、東京理化器械製)を用いて乾燥し、乾燥粒子 (サンプル番号 II- 1)を得た。

[0036] 経肺吸収製剤の空気力学的粒子径分布は、アメリカ薬局方に準拠して評価することができる。例えば、アンダーセン型カスケードインパクターを用いる方法は、ポンプで吸引しつつ、装置上部から入れた微粉末がステージ 0〜7のどのステージまで到達する力を測定することで空気力学的粒子径分布を評価する方法である。上部のステージほどふるいの目開きが大きぐ下部のステージに行くほど目開きは小さくなる。したがって上部のステージに沈積する粒子ほど空気力学的粒子径が大きいことになる。具体的にはステージ 0〜2には、 4. 7 mより大きい空気力学的粒子径を有する粒子が沈積し、ステージ 3〜7には 0. 13 m〜4. 7 μ mの空気力学的粒子径を有する粒子が沈積する。

[0037] 具体的には以下の手順で空気力学的粒子径分布を評価した。

(1)測定サンプルを真空乾燥機で 2時間真空乾燥し、測定サンプル 30mgを測定用カプセル内に秤量した。

(2)アンダーセン型カスケードインパクター (東京ダイレック (株)製、 AN— 200)とドラィパウダー吸入器 (DPI、（株）日立製作所製、 Jethaler)を用いて、流速 28. 31/mi nにて 5秒間吸引した。

(3)各ステージの上の粒子沈積量を、沈積粒子をクロ口ホルムに溶解し、クロ口ホルム中における RFPの吸光度 (波長 475nm)を測定することにより、算出した。

(4)カプセル重量を再測定することでカプセル内粒子残量を算出した。

(5)下部のステージであるステージ 3〜ステージ 7に沈積した粒子質量の和の、全粒子質量に対する割合である FPF (Fine Particle Fraction) (%)を算出した。

(6)上部のステージであるステージ 0〜2に沈積した粒子質量を算出した。

各サンプルの幾何学的粒子経分布を乾式粒子径測定装置 (東日コンピュータアブリケーシヨンズ社製、 LDSA— 3500A)を用いて、空気中での粒子経分布を測定し、幾何学的平均粒子経（ μ m)を算出した。

[0038] 表 2に、各サンプルの DPPC含有量（％)、カプセル内粒子残量（mg)、ステージ 0 〜2の沈積粒子質量 (mg)、 FPF (%)、幾何学的平均粒子径（ μ m)を示した。

[表 2]

DPPC カプセル内ステージ 0~ 2

サンプル FPF 幾何学的

調製方法含有量粒子残量

番号沈積粒子平均粒子径備考

(%) (mg 質 (%)

星 (mg) ( ju m)

1- 1 噴霧乾燥 0.0 6.8 0.539 1 1.8 1.42 比較例

1- 2 噴霧乾燥 0.1 12.4 0.288 8.1 1.53 比較例

1- 3 噴霧乾燥 0.5 14.4 0.214 5.4 1.73 比較例

1- 4 噴霧乾燥 1.0 1.6 1.524 13.1 1.68 実施例

1- 5 噴霧乾燥 2.0 0.3 2.505 1 1.8 1.35 実施例

1- 6 噴霧乾燥 3.0 0.3 3.736 15.7 1.34 実施例

1- 7 噴霧乾燥 5.0 1.5 3.332 18.9 1.44 実施例

1- 8 噴霧乾燥 7.0 0.3 12.455 1.9 1.34 比較例

1-9 噴霧乾燥 10.0 1.0 7.545 8.4 1.70 比較例

II一 1 膜乳化 0.0 1.4 7.510 0.3 1.92 比較例

II- 2 膜乳化 1.0 0.0 6.882 0.8 2.23 実施例

[0039] サンプル番号 (I一 1)〜（I一 9)の DPPC含有量（％)とカプセル内粒子残量 (mg) の関係を図 1に示す。 DPPC含有量が 1質量％以上のサンプルのカプセル内粒子残量が少なぐ良好な飛翔性を示すことがわかる。また、サンプル (Π—1)、（Π— 2)も力プセル内粒子残量が少なぐ良好な飛翔性を示すことがわかる。

サンプル (I一：!）〜（I一 9)の DPPC含有量（％)とステージ 0〜2の沈積粒子質量（ mg)の関係を図²に示す。 DPPC含有量が⁵質量⁰ /₀を超えるとステージ 0〜2の沈積粒子質量が増力！]、すなわち、空気力学的粒子径が 4. 7以上の肺胞到達に適さない粒子が増加することがわかる。

[0040] また、サンプル (II— 1)と（Π— 2)を比較すると DPPCを含有量したサンプル (II— 2 )の方がステージ 0〜2の沈積粒子質量が少な、ことがわかる。

前記 FPFは肺胞への到達度を評価するのに適した数値で、 FPFが大きヽほど肺胞到達性に優れて、ることを示す数値である。サンプル (I— 1)〜 (1— 9)の DPPC含有量 (％)と FPF (%)の関係を図 3に示す。 DPPC含有量が 1質量％〜5質量％の範囲内で良好な FPFを示していることがわかる。すなわち空気力学的粒子径が 0. 13 μ m〜4. 7 μ mである肺胞到達に適する粒子の割合が多、ことがわかる。

また、サンプル (Π— 1)と（Π— 2)を比較すると DPPCを含有量したサンプル (II一 2 )の方の FPFが大き、ことがわ力る。

サンプル (I一 1)〜 (1— 9)の幾何学的平均粒子径は、 DPPCの含有量に関係なく約 1. 5 mであることがわかる。サンプル (Π—1)、（Π— 2)の幾何学的粒子経は DP PCの含有量に関係なく約 2 μ mであることがわかる。

以上をまとめると、本発明の、被送達薬物であるリファンピシンと生分解性ポリマーである PLGAとリン脂質である DPPCを含む薬物送達粒子にお!、て、 DPPCの全粒子質量に対する含有量が 1質量％〜5質量％である薬物送達粒子が、効率よく肺胞に到達し得る。また、前記薬物送達粒子の幾何学的粒子径は約 1. 5〜2 /ζ πιである。従って本発明の薬物送達粒子は肺胞マクロファージの貪食を受けやすぐ肺胞マクロファージ内に選択的に薬物を投与することが可能である。

Claims

請求の範囲

[I] 被送達薬物と、生分解性ポリマーと、全粒子質量の 1質量％〜5質量％のリン脂質とを含む薬物送達粒子。

[2] 前記薬物送達粒子の幾何学的粒子径は、 1 μ m〜4 μ mである請求項 1に記載の薬物送達粒子。

[3] 前記薬物送達粒子は、経肺投与用の薬物送達粒子である請求項 1又は請求項 2 に記載の薬物送達粒子。

[4] 前記生分解性ポリマーは、ポリエステル化合物、ポリアミドィ匕合物、ポリビニル化合物及び多糖類カゝらなる群カゝら選択される少なくとも 1種を含む生分解性ポリマーである請求項 1〜請求項 3のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子。

[5] 前記リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールァミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール及びスフインゴミエリン力もなる群力選択される少なくとも 1種を含むリン脂質である請求項 1〜請求項 4の、ずれか 1項に記載の薬物送達粒子。

[6] 前記被送達薬物は、生理活性物質である請求項 1〜請求項 5のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子。

[7] 前記被送達薬物は、呼吸器系薬物である請求項 1〜請求項 6のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子。

[8] 前記被送達薬物は、診断薬である請求項 1〜請求項 6のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子。

[9] 前記薬物送達粒子は、標識された薬物送達粒子である請求項 1〜請求項 8の、ずれか 1項に記載の薬物送達粒子。

[10] 被送達薬物と生分解性ポリマーとリン脂質とを含む分散液又は溶液を噴霧乾燥して得られる請求項 1〜請求項 9のいずれか 1項に記載の薬物送達粒子。

[II] 被送達薬物と生分解性ポリマーと全粒子質量の 1質量％〜5質量％のリン脂質とを含む分散液又は溶液を噴霧乾燥する薬物送達粒子の製造方法。

[12] 前記生分解性ポリマーは、ポリエステル化合物、ポリアミドィ匕合物、ポリビニル化合物及び多糖類カゝらなる群カゝら選択される少なくとも 1種を含む生分解性ポリマーである請求項 11に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[13] 前記リン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールァミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール及びスフインゴミエリン力なる群力選択される少なくとも 1種を含むリン脂質である請求項 11又は請求項 12に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[14] 前記被送達薬物は、生理活性物質である請求項 11〜請求項 13のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[15] 前記被送達薬物は、呼吸器系薬物である請求項 11〜請求項 14のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[16] 前記被送達薬物は、診断薬である請求項 11〜請求項 14のいずれ力 1項に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[17] 前記薬物送達粒子は、標識された薬物送達粒子である請求項 11〜請求項 16の、ずれか 1項に記載の薬物送達粒子の製造方法。

[18] 前記薬物送達粒子は、幾何学的粒子径が 1 μ m〜4 μ mである請求項 11〜請求項 17のいずれか 1項に記載の薬物送達粒子の製造方法。