WO2007071856A2 - Traitements therapeutiques associes au procede de caracterisation d'un element biochimique presentant une activite biologique, par analyse des signaux electromagnetiques de basses frequences - Google Patents

Traitements therapeutiques associes au procede de caracterisation d'un element biochimique presentant une activite biologique, par analyse des signaux electromagnetiques de basses frequences Download PDF

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Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N37/00—Details not covered by any other group of this subclass
    • G01N37/005—Measurement methods not based on established scientific theories

Definitions

  • the present invention relates to the field of therapeutic treatments associated with the characterization of biochemical material, responsible for biological activity, by analysis of low frequency electromagnetic signals. These treatments are aimed at the substantial modification or destruction of these biochemical materials.
  • PCR polymerase chain reaction
  • the European Patent EP0701695 describes a method and a transmission device in the form of a signal characteristic of the manifestation of biological activity or biological behavior specific to a specific substance. It also describes a treatment of such a signal, from a first carrier material having said biological activity to a second material physically separated from the first material and initially free from any physical presence of said determined substance, and a material obtained by such a method.
  • This method of the prior art comprises the amplification of the electrical or electromagnetic signal emitted by the first substance, and captured by a sensor, and the transmission to a transmitter, of a signal characteristic of the manifestation of the biological activity or the biological behavior presented by the first material, then the detection in the second material of a signal characteristic of the manifestation of the biological activity specific to said determined substance and transmitted to this second material via the amplification means at high gain.
  • the object of the present invention makes it possible to neutralize the forms that will have been detected, according to the protocols described in the patent application No. 0511582 of the same author. These forms will be named later in this document "nanoforms"
  • the present invention proposes to deepen, after detection, the treatment of infectious agents in latent forms in a large number of pathologies including, in the presence of treatments that will lead to the selection of these forms.
  • the present invention is based on the detection technique described in application 0511582, concerning a "METHOD OF CHARACTERIZING A BIOCHEMICAL ELEMENT HAVING BIOLOGICAL ACTIVITY, IN PARTICULAR PATHOGENIC ACTIVITY, BY ANALYZING ELECTROMAGNETIC SIGNALS OF LOW FREQUENCY".
  • This technology new capable of detecting and characterizing, not molecules, but microorganisms and / or their infectious traces by the emission of low frequency electromagnetic signals (SEM), both in vitro cultures and in biological fluids, from humans, animals or plants.
  • the invention relates to a method for characterizing a biochemical element having a biological activity, being in a biological medium, said method comprising the following steps: a. prediluting a sample of biological medium to obtain a diluted medium; b. filtering the diluted medium at least once to obtain a filtered medium; vs. dilute the filtered medium to obtain a dilute solution; d. homogenizing said diluted solution by strong stirring e. acquiring the low frequency electromagnetic signals emitted by said diluted and homogenized solution, f. recording said signals on a suitable computer medium; boy Wut. analyze said signals.
  • Biochemical element exhibiting biological activity means any form capable of manifesting, in a given medium (generally in water or an aqueous solution), the characteristic biological properties of a molecule or a cell or a microorganism, source, in the absence of the latter or the latter.
  • the sample is filtered through a filter having a porosity of less than 100 nanometers, and in particular a porosity of between 20 nanometers and 100 nanometers.
  • step c dilution is a dilution of between 1U “2 and 10" and 20 in particular between 10 "2 and 10" 9.
  • the method comprises a centrifugation step after the strong stirring step d.
  • Said acquisition step e of said low frequency electromagnetic signals emitted by said diluted solution comprises a step of exciting said solution by a defined excitation electromagnetic signal which is of known fixed amplitude and frequency.
  • an excitation of the solution is carried out by a white noise or a signal of determined frequency and amplitude, during the acquisition of the electromagnetic signals.
  • the method according to the invention makes it possible to record the signature characterizing a given biochemical element, and to compare it with the previously recorded signatures of known biochemical elements.
  • the known fixed frequency is filtered during the reading of said electromagnetic signals emitted by said diluted solution.
  • subtraction of the captured ambient signal is carried out.
  • the method according to the invention further comprises:
  • ⁇ ⁇ and a step of comparing said signature with signatures of known biochemical elements, previously recorded; a step of decomposition of the signature obtained in frequency-amplitude pairs by Fourier transform; a step of sorting said frequency-amplitude pairs in inverse order of importance according to their amplitude; the comparison step only compares the first n frequency-amplitude pairs with the first ⁇ frequency-amplitude pairs of signatures previously recorded;
  • the invention which is the subject of the present application, relates to the use of this method of detection and characterization, to obtain a biological inhibition effect on a given biochemical element, by the application to said element of an inhibition signal. random, determined or function of the signature of the known biochemical element.
  • the inhibition signal is composed of the signal of the biochemical element whose phase is shifted by z degrees, with z being able to range from 0 to 2 ⁇ (3.1416).
  • said inhibition signal consists of the main frequencies emitted by the biochemical element in phase inversion.
  • said inhibition signal is an inhibition signal recorded from this same element diluted to a dilution level 10 " ⁇ , with Y strictly less than X .
  • the inhibition signal is a synthetic inhibition signal produced by applying the same amplitude level to all the frequencies of the spectrum considered.
  • the inhibition signal is an electromagnetic inhibition signal recorded from an antibiotic, chemotherapy or chemical treatment.
  • said inhibition signal is a synthetic inhibition signal produced by applying a random amplitude level at all frequencies of the spectrum considered.
  • the inhibition effect according to the invention is obtained by the application, by alternative periods, to a known chemical element, of a signa! synthetic inhibition produced by application of the signals according to a type mentioned above, followed by a measurement step, until their disappearance, electromagnetic signals emitted back by said biochemical element.
  • the invention also relates to equipment for carrying out the method according to the invention, comprising a sensor for acquiring the electromagnetic signals emitted by a solution obtained in step d of the method, a circuit for processing signal signals for the signal. calculating a signature of a biochemical element analyzed and a comparison circuit of the signature thus calculated with signatures previously recorded and contained in a database; a circuit for producing inhibition signals.
  • the equipment according to the invention further comprises at least one of the following characteristics, taken alone or in combination:
  • the sensors are located opposite the different layers of sedimentation of the biological medium to be recorded; one of the sensors, called the control sensor, is remote from the biochemical element to be characterized;
  • control sensor is connected to the left channel of the sound card of the computer
  • Another sensor said sensor for the acquisition of electromagnetic signals emitted by an element, is connected to the right channel of the computer's sound card;
  • the capture equipment for acquiring the electromagnetic signals emitted by a biochemical element is separated from the remote signal comparison equipment; the electromagnetic signals received from the capture equipment are compared with a signature database previously recorded in said remote equipment;
  • the remote equipment is provided with a module for issuing commands to the capture equipment
  • the sensor for acquiring the electromagnetic signals emitted by a biochemical element is connected to the micro channel of a mobile telephone terminal;
  • the circuit intended to produce muting signals is connected to the listener channel of a mobile telephone terminal
  • FIG. 1 shows schematically the preparatory protocol of a sample
  • FIG. 2 represents a schematic view of the signal acquisition equipment
  • FIGS. 3 and 4 represent views of the electrical signals generated by the solenoid in the presence of an emitting source (M. Pirum) after fetration of 0.02 micrometer and 0.1 micrometer, respectively;
  • M. Pirum emitting source
  • FIG. 5 represents a three-dimensional histogram of the distribution of the wavelengths detected by the solenoid in the absence of emitting source (background noise);
  • FIG. 6 represents a three-dimensional histogram of the wavelength distribution detected by the solenoid in the presence of an emitting source (M. Pirum) after filtration of 0.02 micrometer;
  • FIG. 7 represents the Fourier analysis of the background noise (unfiltered power supply harmonics) of FIG. 5;
  • FIG. 8 represents the Fourier analysis of the signal generated by the solenoid in the presence of a transmitting source (M. Pirum) of FIG. 6;
  • FIG. 9 represents a schematic view of the amplification device for the application of a previously recorded signal.
  • FIG. 10 represents, in tabular form, the main frequencies and their respective amplitudes emitted by the filtered medium of a pathogenic organism (HIV).
  • FIG. 11 represents the amplitudes compared of the different dilutions of the same medium having been filtered from a substantially pathogenic organism such as the HIV virus.
  • FIG. 12 represents the comparative histogram of the sum of the amplitudes of all the frequencies included in a given dilution of a filtered medium of HIV, from the undiluted dilution denoted ND, at the dilution
  • FIG. 13 represents a decomposition of this same signal, under a logarithmic scale, and in particular over the very low frequency range.
  • FIG. 14 represents a spectral decomposition of a synthetically generated mono-frequency file (28 Hz).
  • FIGS. 15 to 17 show, in the form of a block diagram, the cascade of successive filtering and reading operations of the electromagnetic activity of the different solutions of the same filtered medium of a pathogenic microorganism, in order to identify its family of origin, and its approximate size.
  • FIG. 18 represents the comparative histogram of the hemolysis of red blood cells subjected to the different solutions of the same filtered medium of pathogenic microorganisms.
  • the biological medium within the meaning of the invention comprises the in vitro culture medium of microorganisms (mycoplasmas, bacteria such as Escherichia coli, virus such as HIV 7 influenza virus, aviasre influenza, as well as the microorganisms presumed to (origin of rheumatoid arthritis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, multiple sclerosis) or, for in vivo samples: heparin plasma, urine, sperm, saliva, lachrymal fluid, placental fluid, or any other aqueous medium of natural origin (water, physiological fluid, milk products), or of industrial origin (cosmetics, paints).
  • the biochemical elements exhibiting biological activity are kept in filtered culture media to remove any living organism (0.45 ⁇ m filters, then 0.1 ⁇ m or 0.02 ⁇ m for the bacteria, respectively 0.45 ⁇ m and 0.02 ⁇ m). for viruses).
  • Electromagnetic signals are recorded on a computer and give rise to various forms of representations:
  • the biological medium for example a plasma derived from human blood
  • a physiological liquid RPMI 16/40 medium or physiological medium
  • a filter for example a 0.45 ⁇ m filter
  • the filtrate is filtered again, on 0.1 ⁇ m filters, or by filters of 0.02 ⁇ m (20 nm).
  • the resulting filtrate is then diluted (step c) from 10 to 10, for example 0.1 ml filtrate + 0.9 ml of the medium already used for the first dilution to one hundredth, for example in sterile and closable 1.5 ml plastic tubes. by a plug.
  • the tube of the preceding dilution is homogenized (step d) for at least 15 seconds in a Vortex type apparatus at maximum power.
  • each tube containing a dilution is deposited on the sensitive reading cell from 0 to 20000 hertz, placed on a table in a non-conductive material.
  • Each sample is read for 6 seconds (step e) twice in succession, each reading being entered separately to allow duplication of results ( Figure 4).
  • an activation signal composed of a known frequency and a known amplitude. This frequency will be filtered at the time of reading.
  • the electrical signals produced by the reading cell, and from the electromagnetic waves that have passed through the tube are recorded (step 0 on a computer using an audio card, compressed and amplified 500 times, before being recorded and measured on the next computer.
  • This software is capable of recording and representing in different graphic forms, a global compression of the signals (Figure 4) that can show a difference in amplitude compared to an ambient background noise ( Figure 3). This difference in amplitude can reach a ratio of two or three compared to the background noise.
  • the main frequencies composing the signal are then classified, in three dimensions, with display in arbitrary shades of gray according to the frequency ranges (Figure 5). Finally, by a Fourier decomposition, allowing to highlight the main harmonic components of the signal ( Figures 7 and 8).
  • the digital information from the fourier transformation is stored in a database. In order to reduce the background noise and to increase the specificity of the signals, it is recommended to carry out measurements in a room that is not too much disturbed by radio signals, for example from mobile phones.
  • electromagnetic activity sensors 1 facing each of the sedimentation strata in the tube that is to be recorded. These different sensors will be selected by the switch 4 depending on the layer of biological fluid that we want to record after centrifugation.
  • toroidal sensors placed on a specific support opposite the sixteen tubes containing the successive dilutions of the same filtered medium. This is to facilitate the preparation by an industrial machine of these sixteen tubes and to avoid any error of manipulation by the operator.
  • the different toroidal sensors being successively connected by the electromagnetic signal capture software, from the smallest (undiluted) to the highest reported dilution, advantageously 10 ⁇ 13 , as well as control and undiluted undiluted tubes.
  • electronic transmission fiiaires such as computer network (LAN, Internet) or wireless, including those of the cellular network (GPRS, GSM Data, UMTS) or computer (biuetooth, WI-FI, WIMAX).
  • diagnosis or the possible messages of correction or treatment could also use this local module, to be displayed or to apply for information purposes of the patient and / or his therapist, of administration to neutralization or correction of the original medium.
  • the acquisition and treatment application sensor may be directly carried by the living organism (person, animal, plant) for example in the form of a bracelet, a collar, a belt, patches on or under the skin, these examples not being limiting.
  • This sensor will record, through local electromagnetic induction, through the tissues of the body, the radiation emitted by blood, urine, or any other physiological liquid, opposite one of its natural containers.
  • a remote sensor 5 of the medium to be recorded will be added to the device, so that the final signal which will be recorded on the recording media of the computer 3 will consist of the difference between the signal acquired on one of the sensors of 1 and the collected ambient noise 5.
  • LAI strain IHB
  • a culture of M.pirum in CEM cells is prepared in a culture medium rpm 1640 + 10% fetal calf serum. Cells in good condition, show the presence of typical aggregates related to the presence of M.pirum.
  • the suspension is centrifuged at low speed to remove the cells.
  • the supernatant is filtered through a 0.45 ⁇ Millipore PEVD filter, and the filtrate is then filtered again on Whatman 0.02 ⁇ filter or Millipore 0.1 ⁇ filter.
  • FIG. 2 represents a schematic view.
  • the equipment comprises a reading cell (1) sensitive from 0 to 20000 hertz, placed on a wooden table.
  • the solutions to be read are distributed in plastic tubes (2) Eppendorf (trade name) of 1.5 ml.
  • the volume of liquid is in general of ImI, in some cases from 0.3 to 0.5 ml, without a difference in response being noted.
  • Each sample is read for 6 seconds, twice in succession, each reading being entered separately.
  • the origin of the signals is selected according to the switch (4).
  • the electromagnetic signals are converted into electrical signals before being amplified by means of an audio card (6). located in the computer (3).
  • the ambient electromagnetic noise is picked up by a cell (5) remote from the tube containing the source to be recorded (2).
  • Suitable software located in the computer (3) performs the necessary filtering treatments (for example subtraction of the ambient noise obtained on (5) and deduced from the signal recorded on (1), give a visual representation of the recordings thus obtained;
  • FIG. 4 An overall gross amplitude representation (FIG. 4).
  • a background noise (-) (FIG. 3) is observed, transformed into an average.
  • An electromagnetic signal is detected, defined as (+), when the amplitude exceeds at least 1.5 times the background noise.
  • the amplitude detected is double the background noise (++), sometimes the triple; it will be called electromagnetic signal or electromagnetic signature (SEM).
  • FIG. 6 A 3d histogram analysis (FIG. 6); a decomposition into individual frequencies (f 1, a 1) by Fourier transformation (FIG. 8),
  • Centrifugation is carried out for 2 hours at 35,000 rpm at + 40 ° C. The first 0.02 ⁇ filtrate is kept overnight at + 4 ° C. It is checked that it is always positive just before centrifugation. After this centrifugation, 12 fractions are collected from the bottom of the tube.
  • the measurement of the refractive indices makes it possible to determine the density gradient.
  • Fractions 2 is then bundles 2. They are diluted to 10 "7 in RPMI medium + 16/40 calf serum concentration of 10%.
  • the negativity of the less diluted fractions can be explained by an auto-interference of the signals emitted by too many sources. This self-inhibition is verified by mixing 0.1 milliliter of the undiluted with 0.4 ml of the 10 ' dilution: after vortexing, the signal is effectively turned off and becomes negative.
  • the source of the electromagnetic signals behaves like a large polymer (but ⁇ 0.02 ⁇ ) and density between 1.16 and 1.26.
  • This experiment concerns a CEM cell culture infected with HIV1 / IIIB, prepared in two culture times:
  • CPE cyto-pathogenic effect
  • the operating protocol comprises the following steps:
  • the supernatant of the 0.02 micron filtered positive culture is centrifuged at the 20-70% sucrose gradient density equilibrium at 35000 rpm in BECKMANN (trade name) rotor SW56 at 4 ° C.
  • a control supernatant of uninfected CEM cells is treated in the same way.
  • the 400 ml fractions are diluted in RPMI 16/40 medium plus calf serum. Successive dilutions are made 10 to 10 from these fractions.
  • Density group 1.23 - 1.24 and density 1.19-1.21 are very positive until dilution 10 ⁇ 7 .
  • Density group 1.15-1.16 gives positive signals up to IQ- 7 dilution.
  • the top group of the tube gives no signals, regardless of the dilution.
  • the basic fraction groups of the tube (density 1.25 to 1.28) give positive signals at only a few dilutions.
  • the size of the bacteria is very clearly greater than 500 nm, and is on average around 1000 nm, ie 1 ⁇ m. This is particularly the case with the bacterium Co ⁇ ,
  • the size of mycoplasmas is around 300 nm on average.
  • viruses have a size less than 200 nm, located on average around 100 nm. HIV for example has a size of 120 nm.
  • a dilute plasma solution of an infected patient whose family of origin is not known, is filtered in cascade through a filter of 500 nm and 150 nm.
  • the organisms whose size is greater than 500 nm will therefore be naturally filtered, which will not be the case for microorganisms such as mycoplasmas and viruses that will remain in the environment.
  • the characteristic signal does not appear, it is assuredly that it is a microorganism whose size is certainly smaller than the diameter of the pores of the filter used.
  • the electromagnetic activity emitted by the different solutions is recorded twice, as previously. We observe the result. If the signal appears significantly active, compared to the first dilutions, the patient is certainly infected with a bacterial disease. If this is not the case, then if the signal is negative, we continue to proceed to a new filtration stage of the previously filtered plasma, in him now applying a 200 nm filter (0.2 ⁇ m). If the signal appears in high dilution ranges, it is that we had to deal with a microorganism whose size is less than 500 nm, and greater than 200 nm, very likely a mycoplasma. This was filtered by the 200 nm filter, and it is its absence and the absence of other smaller microorganisms that makes positive the signal of the solution in the high dilutions.
  • Experiment 5 Plasma analysis of subjects with different infections (HIV, ureaplasma urolyticum urethritis, rheumatoid arthritis, parkinso ⁇ disease, Alzheimer's disease, multiple sclerosis, probably viral cancers).
  • Neutrophil polynuclear is the body's first defense barrier against bacteria that are phagocytosed and killed (1). Activation of PMN can be initiated by different stimuli such as bacteria, TNF ⁇ (tumor necrosis factor ⁇ ) and chemotactic peptides: fMLP (N-Formyl-methyl-leucyl-phenylalanine) and PMA (4-phorbol-12 - ⁇ -myristate-13-acetate).
  • the active frequencies of the PMN can be recorded over the course of the experiments, so that when it is exposed to the electromagnetic signal of a new product, or a diluted and filtered solution of a microorganism, will react similarly when one or more of its "active frequencies" or close to these reference active frequencies, will appear in the spectral decomposition of the signal.
  • these active frequencies have no harmonics in the spectrum. This means that a frequency that has harmonics can not be an active frequency of natural origin, and therefore very likely results from a local electromagnetic interference, as is often the case in urban areas heavily parasitized by electromagnetic radiation ambient.
  • FIGS. 3,4,5,6,7,8,9,10 and 11 we can see how the frequencies related to the electromagnetic radiation of the electrical current of the sector appear, as well as the associated harmonic lines. .
  • the potential effect of the signals is compared to a negative control (Buffer) and a positive control (weight dose of the product inducing neutrophil activation).
  • Activation of PMNs is evaluated in vitro by the measurement of their adherence and by measuring the expression of activation markers.
  • an index is incremented, which is a concordance index, denoted from 1 to 50.
  • PMN is likely to be activated, by the application of the electromagnetic signatures of a diluted and filtered medium, until saturation.
  • the different series confirm the correlation between the activation of the PMN, and the presence of the active frequencies in the electromagnetic signature of the filtered and diluted solutions
  • the human basophile is a key cell for the study of immediate hypersensitivity reactions since it releases a variety of mediators (such as histamine, leukotriene C4, interleukin IL-4 and IL-13) following activation by allergens.
  • mediators such as histamine, leukotriene C4, interleukin IL-4 and IL-13
  • the activation of basophils is evaluated in vitro by measuring the expression of the markers of activation by means of flow cytometry.
  • Activation of basophils can be triggered by the Immunoglobulin E (anti-IgE), ie fMLP and inter-leukine 3 (IL-3).
  • anti-IgE Immunoglobulin E
  • IL-3 inter-leukine 3
  • the potential effect of the signals is compared to a negative control (Buffer) and a positive control (weight dose of the product inducing activation of the neutrophil).
  • the activation of basophils is evaluated in vitro by measuring the expression of activation markers.
  • the experiment implements a complementary test to measure the direct impact of filtered and diluted solutions of a significantly pathogenic organism, such as Escherichia CoIi, on the anti-alkaline defense potential of a living organism.
  • a significantly pathogenic organism such as Escherichia CoIi
  • KRL Free Radical Kit, patent Spiral
  • Mr Michel PROST its inventor
  • H ° FR2861463 (2003) "Method for determining the anti-free radical defense potential and use in particular therapeutic preventive human and veterinary.”
  • This test is also perfectly suited to the dynamic determination pro or anti-oxidant properties of many compounds such as drugs, foods, products industry.
  • the radical activity continues, while the microorganism, has been filtered from the medium. Notably for the undiluted filtered solution (Soi ND F) but also for high dilutions of the medium, such as 10 "8 ICT 10 10 " 12 . For other high dilutions, on the contrary, the radical activity is lower than the control.
  • Soi ND F undiluted filtered solution
  • high dilutions of the medium such as 10 "8 ICT 10 10 " 12 .
  • the radical activity is lower than the control.
  • the experiment implements a complementary test to measure the impact of antibiotic treatments on filtered and diluted solutions of a significantly pathogenic organism, such as Escherichia CoIi, on the free radical defense potential of a living organism.
  • signals from chemotherapy-like treatment such as those from lacto-gold, lactofluor, lacto-copper.
  • Microorganisms of a different nature such as retroviruses
  • HAV bacteria without rigid walls close to Gram + (M.pirum), Gram - (E.coli) rigid wall bacteria produce persistent nanostructures in aqueous solutions.
  • these nanostructures After the indispensable filtration step, which will eliminate the physical particles of the micro-organisms, these nanostructures (less than 1OQ nanometers in size) emit complex electromagnetic signals of low frequencies that can be recorded and digitized.
  • nanostructures differ from the microorganisms that generated them by their broad density spectrum, and their susceptibility to freezing.
  • the signals they emit may be neutralized by auto-interference with signals previously recorded and inverted in phase, or by interference with signals from other micro-organisms.
  • the present invention can usefully be used to detect these new pathogenic forms in natural environments, as well as for their elimination, by a suitable prophylactic treatment, such as an antibiotic in the case of the identification of a bacterial origin.
  • a pathogenic risk warning device in aqueous media when used in food, cosmetic or industrial substances.

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Abstract

Utilisation soit directement, soit après modification, du signal électromagnétique émis par un milieu biologique dilué et filtré, aux fins d'inhibition ou de modification substantielle du dit signal, par exposition, à l' aide d' un solénoïde, dudit milieu au dit signal électromagnétique amplifié. Equipement pour la mise en œuvre de ladite utilisation comprenant un ou plusieurs solénoïdes pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par le milieu biologique, un circuit de traitement desdits signaux pour leur décomposition par transformée de fourrier en fréquences principales et un circuit de production de signaux d'inhibition.

Description

TRAITEMENTS THERAPEUTIQUES ASSOCIES AU PROCEDE DE
CARACTERISATION DON ELEMENT BIOCHIMIQUE PRESENTANT UNE
ACTIVITE BIOLOGIQUE, PAR ANALYSE DES SIGNAUX
ELECTROMAGNETIQUES DE BASSES FREQUENCES
La présente invention concerne le domaine des traitements thérapeutiques associés à la caractérisation de matériel biochimique, responsable d'activité biologique, par analyse des signaux électromagnétiques de basses fréquences. Ces traitements visent la modification substantielle ou Ia destruction de ces matériels biochimiques.
Etat de l'art :
Les techniques actuelles de détection de virus et de bactéries reposant sur le principe de détection de la reconnaissance d'antigènes par des anticorps sont bien connues (billes de latex, kit elisa).
Plus récemment, les méthodes dites de PCR (polymérase chain reaction) permettent d'identifier de manière extrêmement sensible, l'ADN ou TARJM de germes, par la duplication à grande échelle de certaines de leurs séquences d'ADN caractéristiques,
Par contre ces deux méthodes s'avèrent impuissantes à la détection des formes nouvelles d'infection, notamment celles portées par les mycoplasmes telles que décrites notamment dans le brevet WO O2/089744. Ces formes inédites d'infectivité ont fait par ailleurs l'objet de publications Montagnier L, Berneman D, Guetard D et al."ïnhibition de l'infectiosite de souches prototypes du VIH par des anticorps dirigés contre une séquence peptidique de mycoplasme. "Comptes Rendus de L'Académie des Sciences 1990; 311(111) : 425-430; Balter M. "Montagnier pursues the Mycoplasma-AIDS link." Research News. Science 1991: 251-271. Par ailleurs, il est connu d'après les travaux du Professeur Jacques BENVENISTE d'enregistrer et de numériser avec une carte-son d'ordinateur l'activité spécifique d'une molécule à activité biologique. Les molécules analysées dans l'art antérieur sont une substance naturelle (histamine, caféine, nicotine, adrénaline...) ou des médicaments.
On a proposé dans l'art antérieur de capter ce signal, et de le transmettre sous une forme analogique ou de préférence numérique.
Dans le cadre de ces travaux, le brevet européen EP0701695 décrit un procédé et un dispositif de transmission sous forme d'un signal caractéristique de la manifestation de l'activité biologique ou du comportement biologique spécifique à une substance déterminée. Il décrit également un traitement d'un tel signal, à partir d'une première matière porteuse présentant ladite activité biologique à une deuxième matière physiquement séparée de la première matière et initialement exempte de toute présence physique de ladite substance déterminée, et d'une matière obtenue par un tel procédé. Ce procédé de l'art antérieur comporte l'amplification du signal électrique ou électromagnétique émis par la première substance, et capté par un capteur, et la transmission à un émetteur, d'un signal caractéristique de la manifestation de l'activité biologique ou du comportement biologique présentée par la première matière, puis la détection dans la seconde matière d'un signal caractéristique de la manifestation de l'activité biologique spécifique à ladite substance déterminée et transmis à cette deuxième matière par l'intermédiaire des moyens d'amplification à haut gain.
On connaît également le brevet français FR2811591 décrivant un procédé pour produire des signaux, notamment des signaux électriques, caractéristiques de l'activité biologique et/ou chimique d'une substance étudiée, pour traiter une substance réceptrice ne présentant initialement aucune activité biologique particulière, notamment de l'eau, de telle sorte qu'elle présente après traitement une activité biologique. La substance réceptrice après traitement est appelée ci- après la "Substance Traitée" (ou encore Matière Informée). Quand la substance réceptrice est de l'eau, la Substance Traitée est appelée de l"'Eau Traitée" (ou encore de l'Eau Informée). La substance ayant une activité biologique peut également se présenter sous la forme de préparation ou de granules homéopathiques.
La demande de brevet internationale WO0001412 décrit un procédé pour activer une solution inactîve et à très faible concentration d'une substance déterminée biologique et/ou chimique dans un solvant, consistant à placer ladite solution dans un champ d'excitation mécanique et à soumettre ladite solution à une agitation pour créer ledit champ d'excitation mécanique. La concentration de ladite substance déterminée dans ladite solution est inférieure à 10"6 moles par litre.
Le but de la présente invention permet de neutraliser les formes que l'on aura détectées, selon les protocoles décrits dans Ia demande de brevet N°0511582 du même auteur. Ces formes seront baptisées dans la suite de ce document « nanoformes » La présente invention se propose d'approfondir, après détection, le traitement d'agents infectieux sous des formes latentes dans un grand nombre de pathologies notamment, en présence de traitements qui vont conduire à la sélection de ces formes.
Typiquement, dans le cas du suivi du traitement d'un patient HÏV, notamment traité sous trithérapie, ces méthodes sont inopérantes pour connaître précisément l'état de séropositivité.
Cette carence constitue une perte substantielle de fiabilité dans les tests de détection de virus ou de leur activité virale associée, notamment, et par exemple, dans les processus de collecte du sang pour les instances hospitalières. En outre, tout laisse penser que ces formes infectieuses pourraient parfaitement s'avérer être à l'origine ou la cause des maladies dites nosocomiaies
La présente invention s'appuie sur la technique de détection décrite dans la demande 0511582, concernant un « PROCEDE OE CARACTERISATION D'UN ELEMENT BIOCHIMIQUE PRESENTANT UNE ACTIVITE BIOLOGIQUE, NOTAMMENT PATHOGENE, PAR ANALYSE DES SIGNAUX ELECTROMAGNETIQUES DE BASSES FREQUENCE ». Cette technologie nouvelle capable de détecter et caractériser, non pas des molécules, mais des micro-organismes et/ou leurs traces infectieuses par l'émission de signaux électromagnétiques de basse fréquence (SEM), aussi bien dans des cultures in vitro que dans des fluides biologiques, provenant de l'homme, d'animaux ou de plantes.
Ces technologies s'appliquent notamment à la détection de germes infectieux impliqués dans des maladies chroniques, aussi bien qu'au suivi thérapeutique de patients dont le traitement aboutit à la sélection et au maintien de ces germes. La technique décrite permet de détecter et caractériser des agents infectieux présents sous des formes latentes dans un grand nombre de pathologies (notamment HIV), y compris en présence de traitements qui vont conduire à la sélection de ces formes.
Selon un premier aspect, l'invention concerne un procédé de caractérisation d'un élément biochimique présentant une activité biologique, se trouvant dans un milieu biologique, ledit procédé comportant les étapes suivantes: a. prédiluer un échantillon de milieu biologique pour obtenir un milieu dilué; b. filtrer au moins une fois le milieu dilué pour obtenir un milieu filtré; c. diluer le milieu filtré pour obtenir une solution diluée ; d. homogénéiser ladite solution diluée par agitation forte e. acquérir les signaux électromagnétiques de basse fréquence émis par ladite solution diluée et homogénéisée, f. enregistrer lesdits signaux sur un support informatique approprié ; g. analyser lesdits signaux. On entend, dans le cadre de la présente invention, par l'expression
« élément biochimique présentant une activité biologique » toute forme apte à manifester, dans un milieu donné (en général dans l'eau ou une solution aqueuse), les propriétés biologiques caractéristiques d'une molécule ou d'une cellule ou d'un mîcroorganisme, source, en l'absence de cette dernière ou ce dernier. L'échantillon est filtré à travers un filtre présentant une porosité inférieure à 100 nanomètres, et en particulier une porosité comprise entre 20 nanomètres et 100 nanomètres.
Avantageusement, l'étape c de dilution consiste en une dilution comprise entre 1Û"2 et 10"20 et en particulier comprise entre 10"2 et 10"9.
Selon un mode de réalisation préféré, le procédé comporte une étape de centrifugation après i'étape d'agitation forte d.
Ladite étape d'acquisition e desdits signaux électromagnétiques de basse fréquence émis par ladite solution diluée comprend une étape d'excitation de ladite solution par un signal électromagnétique d'excitation défini qui est d'amplitude et de fréquence fixes connues.
On procède selon un mode de réalisation préféré à une excitation de la solution par un bruit blanc ou un signal de fréquence et d'amplitude déterminées, pendant l'acquisition des signaux électromagnétiques. Le procédé selon l'invention permet d'enregistrer la signature caractérisant un élément biochimique donné, et à la comparer avec les signatures préalablement enregistrées d'éléments biochimiques connus.
Pour obtenir une signature caractéristique d'un élément biochimique, on procédé, dans un mode de réalisation du procédé, au filtrage de la dite fréquence fixe connue pendant la lecture desdits signaux électromagnétiques émis par ladite solution diluée. Dans un autre mode de réalisation, on procède à fa soustraction du signal ambiant capté.
Le procédé selon l'invention comprend en outre :
~ une étape d'enregistrement de ladite signature obtenue pour ledit élément biochimique;
~ et une étape de comparaison de ladite signature avec des signatures des éléments biochimiques connus, préalablement enregistrées ; - une étape de décomposition de la signature obtenue en couples fréquence- amplitude par transformation de Fourier ; - une étape de tri desdits couples fréquence-amplitude par ordre inverse d'importance selon leur amplitude ; l'étape de comparaison ne compare que les n premiers couples fréquence-amplitude avec les π premiers couples fréquence-amplitude des signatures préalablement enregistrées ;
- étape de production d'un indice de rapprochement correspondant à la moyenne des amplitudes pour la liste des fréquences considérées ; - une étape d'identification des plages de dilution dans lesquelles ledit signa! est positif ;
- une étape d'identification des plages de dilution dans lesquelles ledit signal est positif h heures après la réalisation de l'étape d'identification, avec h allant de 1 à 24.
L'invention, objet de la présente demande, concerne l'utilisation de ce procédé de détection et de caractérisation, pour obtenir un effet d'inhibition biologique sur un élément biochimique donné, par l'application audit élément d'un signal d'inhibition aléatoire, déterminé ou fonction de la signature dudït élément biochimique connu.
Dans un mode de réalisation préféré, le signal d'inhibition est composé par le signal de l'élément biochimique dont la phase est décalée de z degrés, avec z pouvant aller de 0 à 2 π (3,1416).
Dans un autre mode de réalisation, ledit signal d'inhibition est constitué par les principales fréquences émises par l'élément biochimique en inversion de phase.
Lorsque l'élément biochimique est dilué à un niveau de dilution 10"x, ledit signal d'inhibition est un signal d'inhibition enregistré à partir de ce même élément dilué à un niveau de dilution 10"γ, avec Y strictement inférieur à X.
Dans une variante de réalisation, Ie signal d'inhibition est un signal d'inhibition synthétique produit par application d'un même niveau d'amplitude à toutes les fréquences du spectre considéré.
Dans une autre variante de l'invention, le signal d'inhibition est un signal d'inhibition électromagnétique, enregistré à partir d'un traitement antibiotique, chimiothérapie ou chimique. Dans une autre variante de réalisation, ledit signal d'inhibition est un signal d'inhibition synthétique produit par application d'un niveau d'amplitude aléatoire à toutes les fréquences du spectre considéré, L'effet d'inhibition selon l'invention est obtenu par l'application, par périodes alternatives, à un élément chimique connu, d'un signa! d'inhibition synthétique produit par application des signaux selon un type précité, suivie d'une étape de mesure, jusqu'à leur disparition, des signaux électromagnétiques émis en retour par ledit élément biochimique.
L'invention concerne encore un équipement pour la mise en œuvre du procédé selon l'invention, comportant un capteur pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par une solution obtenue à l'étape d du procédé, un circuit de traitement desdïts signaux pour fe caîcul d'une signature d'un élément biochimique analysé et un circuit de comparaison de la signature ainsi calculée avec des signatures enregistrées préalablement et figurant dans une base de données ; un circuit de production de signaux d'inhibition.
L'équipement selon l'invention comprend en outre au moins une des caractéristiques suivantes, prise isolée ou en combinaison :
- les capteurs sont situés en regard des différentes strates de sédimentation du milieu biologique à enregistrer ; - l'un des capteurs, dit capteur de contrôle, est éloigné de l'élément biochimique à caractériser ;
- le capteur de contrôle est connecté au canal gauche de la carte son de l'ordinateur ;
» un autre capteur, dit capteur pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par un élément, est connecté au canal droit de la carte son de l'ordinateur ;
- l'équipement de capture pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par un élément biochimique, est séparé de l'équipement distant de comparaison des signaux ; - les signaux électromagnétiques reçus de l'équipement de capture sont comparés à une base de signatures enregistrées préalablement dans ledit équipement distant ;
- l'équipement distant est muni d'un module d'émission de commandes vers l'équipement de capture ;
- le capteur pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par un élément biochimique est connecté au canal micro d'un terminal de téléphonie mobile ;
- le circuit destiné à produire des signaux d'inhibition est connecté au canal écouteur d'un terminal de téléphonie mobile,
L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description détaillée qui suit et des dessins annexés correspondant à des exemples non limitatifs de réalisation, dans lesquels :
- la figure 1 représente schématiquement le protocole préparatoire d'un échantillon ;
- la figure 2 représente une vue schématique de l'équipement d'acquisition des signaux ;
- les figures 3 et 4 représentent des vues des signaux électriques générés par le solénoïde en présence d'une source émettrice (M. Pirum) après fdtration respectivement de 0,02 micromètre et de 0,1 micromètre ;
- la figure 5 représente un histogramme en trois dimensions de la distribution des longueurs d'onde détectées par le solénoïde en l'absence de source émettrice (bruit de fond) ;
- la figure 6 représente un histogramme en trois dimensions de la distribution des longueurs d'onde détectées par le solénoïde en présence d'une source émettrice (M. Pirum) après filtration de 0,02 micromètre ;
- la figure 7 représente l'analyse de Fourier du bruit de fond (les harmoniques du courant électrique d'alimentation non filtrées) de la figure 5 ;
- la figure 8 représente l'analyse de Fourier du signal généré par le solénoïde en présence d'une source émettrice (M. Pirum) de la figure 6 ;
- la figure 9 représente une vue schématique du dispositif d'amplification pour l'application d'un signal précédemment enregistré.
- Ia figure 10 représente, sous forme de tableau, les principales fréquences et de leurs amplitudes respectives émises par le milieu filtré d'un organisme pathogène (HIV). la figure Ii représente, les amplitudes comparées des différentes dilutions d'un même milieu ayant été filtré d'un organisme notablement pathogène comme le virus HIV.
La figure 12 représente l'histogramme comparatif de la somme des amplitudes de toutes !es fréquences comprises dans une dilution donnée d'un milieu filtré du HIV, de la dilution non diluée notée ND, à la dilution
10-15
La figure 13 représente une décomposition de ce même signal, sous une échelle logarithmique, et notamment sur la plage des très basses fréquences. La figure 14 représente une décomposition spectrale d'un fichier mono fréquentiei (28 Hz) généré synthétiquement.
Les figures 15 à 17 représentent sous forme de synoptique, la cascade d'opérations successives de filtrage et de lecture de l'activité électromagnétique des différentes solutions d'un même milieu filtré d'un micro organisme pathogène, afin d'identifier sa famille d'origine, et sa taille approximative.
La figure 18 représente l'histogramme comparatif de l'hémolyse de globules rouges soumis aux différentes solutions d'un même milieu filtré de micro organismes pathogènes. Dans ce qui suit, on conviendra que :
- le milieu biologique au sens de l'invention comprend le milieu de culture in vitro des microorganîsmes (mycoplasmes, bactéries telles que Escherichia coli, virus tel que HIV7 virus de la grippe, de la grippe aviasre, ainsi que les micro organismes présumés à ('origine de la polyarthrite rhumatoïde, de la maladie d'Alzheimer, de la maladie de Parkinson, de la Sclérose en plaques) ou, pour les prélèvements effectués in vivo : le plasma prélevé sur héparine ; l'urine ; le sperme ; la salive ; le liquide lacrymal ; le liquide placentaire, ou tout autre milieu aqueux d'origine naturelle (eaux, liquide physiologique, produits lactés), ou d'origine industrielle (cosmétiques, peintures).
- les éléments biochimiques présentant une activité biologiques sont gardés dans des milieux de culture filtrés pour enlever tout organisme vivant (filtres de 0,45μm, puis 0,iμm ou 0,02μm pour les bactéries, respectivement de 0,45μm, puis 0,02μm pour les virus).
Les signaux électromagnétiques sont enregistrés sur ordinateur et donnent lieu à diverses formes de représentations :
- globaux, en amplitude sur 6 secondes ; - positifs (+), s'ils comprennent deux fois le bruit de fond ;
- en analyse de Fourier (histogramme en 2D) ;
- en analyse de Fourier (histogramme en 3D).
Le principe de la méthode est le suivant : le milieu biologique (par exemple un plasma provenant du sang humain) est d'abord prédilué au centième dans un liquide physiologique (milieu RPMI 16/40 ou milieu physiologique), il est ensuite filtré (étape b) par un filtre, par exemple un filtre de 0,45 μm
(micromètre) pour éliminer toutes bactéries de taille classique.
Le filtrat est filtré à nouveau, sur des filtres de 0,1 μm, ou par des filtres de 0,02 μm (20nm). Le filtrat résultant est ensuite dilué (étape c) de 10 en 10, par exemple 0,1 ml filtrat + 0,9 ml du milieu déjà utilisé pour la première dilution au centième, par exemple dans tubes plastique de 1,5ml stériles et obturables par un bouchon. Entre chaque dilution, le tube de la dilution précédente est homogénéisé (étape d) pendant minimum 15 secondes dans un appareil de type Vortex, à la puissance maximum.
Toutes ces opérations sont effectuées dans une hotte à flux laminaire de classe 100, l'opérateur portant vêtements et gants stériles pour éviter toute contamination extérieure.
Puis chaque tube contenant une dilution, est déposé sur la cellule de lecture sensible de 0 à 20000 hertz, placée sur une table en un matériau non conducteur. Chaque échantillon est lu pendant 6 secondes (étape e) deux fois de suite, chaque lecture étant saisie séparément afin de permettre une duplication des résultats (figure 4). Afin de rendre le plus lisible possible le signal caractéristique émis par l'échantillon, on peut avantageusement émettre un signal d'activatîon, composé d'une fréquence et d'une amplitude connues. Cette fréquence sera filtrée au moment de la lecture. Les signaux électriques produits par la cellule de lecture, et issus des ondes électromagnétiques qui ont traversé le tube, sont enregistrés (étape 0 sur ordinateur grâce à une carte audio, compressés puis amplifiés 500 fois, avant d'être enregistrés et mesurés sur ordinateur suivant un logiciel original spécifiquement adapté. Ce logiciel est capable d'enregistrer et de représenter sous différentes formes graphiques, une compression globale des signaux (Figure 4) pouvant montrer une différence d'amplitude par rapport à un bruit de fond ambiant (Figure 3). Cette différence d'amplitude pouvant atteindre un rapport de deux ou trois par rapport au bruit de fond.
Les principales fréquences composant le signal sont ensuite classées, en trois dimensions, avec affichage en nuances de gris arbitraires en fonction des plages de fréquences (Figure 5). Enfin, par une décomposition de Fourier, permettant de mettre en évidence les principales harmoniques composantes du signal (Figures 7 et 8). Les informations numériques issues de la transformation de fourrier sont stockées dans une base de données. Afin de diminuer le bruit de fond et d'augmenter la spécificité des signaux, il est recommandé d'effectuer les mesures, dans un local qui ne soit pas trop perturbé par des signaux radio électriques, par exemple provenant de téléphones portables.
Dans une variante avantageuse de l'invention décrite en figure 2, on disposera de capteurs d'activité éiectromagnétique 1 en regard de chacune des strates de sédimentation dans le tube que l'on veut enregistrer. Ces différents capteurs seront sélectionnés par le commutateur 4 en fonction de la couche de liquide biologique que l'on voudra enregistrer après centrifugation.
Dans une autre variante avantageuse de l'invention, on pourra disposer de seize capteurs toriques, placés sur un support spécifique en regard des seize tubes contenant les dilutions successives du même milieu filtré. Ceci afin de faciliter la préparation par un automate industriel de ces seize tubes et d'éviter toute erreur de manipulation par l'opérateur. Les différents capteurs toriques étant connectés successivement par le logiciel de capture du signal électromagnétique, de la plus petite (non diluée) à la plus haute dilution déclarée, avantageusement 10~13, ainsi que les tubes contrôle et non filtré non dilué.
Dans une autre variante avantageuse de l'invention, on pourra disposer sur place du ou des capteurs d'acquisition, de la cellule d'application des traitement, tels que décrits ci-dessus, et d'une unité de traitement distante des signaux, reliée au capteur par des moyens de transmission électronique fiiaires tels que réseau informatique (LAN, Internet) ou hertziens, notamment ceux du réseau de téléphonie cellulaire (GPRS, GSM Data, UMTS) ou informatique (biuetooth, WI-FI, WIMAX).
Dans une variante plus sophistiquée de l'invention, on pourra décomposer localement, grâce à la capacité de traitement de certains micro contrôleurs de type Digital Signal Processor - DSP, le signal brut recueilli du patient, procéder localement à une transformation de fourrier, et ne transmettre, au centre d'analyse distant, que les couples fréquences / amplitudes de la décomposition spectrale par ordre inverse d'amplitude (fi, ai). Ceci afin de ne transmettre qu'un volume d'information très réduit, (fréquence, amplitude, phase), limitée à quelques octets par fréquence principale, permettant un réponse plus rapide du centre, et un acheminement des informations sur des réseaux à faible débit tels que le GPRS ou même le SMS.
En retour, le diagnostic ou les messages éventuels de correction ou de traitement, pourront également utiliser ce module local, pour s'afficher ou s'appliquer à des fins d'information du patient et/ou de son thérapeute, d'administration à des fins de neutralisation ou de correction du milieu d'origine.
Dans une autre variante avantageuse de l'invention, le capteur d'acquisition et d'application du traitement pourra être directement porté par l'organisme vivant (personne, animal, plante) par exemple sous forme de bracelet, de collier, de ceinture, de patch sur ou sous la peau, ces exemples n'étant pas limitatifs.
Ce capteur, enregistrera, par induction électromagnétique locale, à travers les tissus de l'organisme, les rayonnements émis par le sang, l'urine, ou tout autre liquide physiologique, en regard de l'un de ses contenants naturels
(veine, artère, poche urinaire, poche placentaire) duquel il aura été placé. De même l'applicateur du signal.
Afin de filtrer plus facilement Ie bruit électromagnétique ambiant, on ajoutera au dispositif un capteur distant 5 du milieu à enregistrer, de sorte que le signal final qui sera enregistré sur les supports d'enregistrement de l'ordinateur 3 sera constitué de la différence entre le signal acquis sur l'un des capteurs de 1 et le bruit ambiant capté 5.
La description est complétée par les essais de réalisation suivants, relatifs: - au mycoplasme Mycoplasma pirum ;
- au virus du SIDA, souche IHB (LAI) ;
- à la bactérie Escherichia CoIi K12 ;
- au plasma d'un patient souffrant d'une maladie neurologique dont l'origine supposée, mais non prouvée, serait l'agent de Lyme, Borrelia Borgendorfi. - à l'action des milieux dilués, des signaux enregistrés en provenance de ceux-ci, et des traitements thérapeutiques associés sur des micro organismes responsables de l'activité immunitaire d'un organisme vivant, tels que neutrophîles et basophiles ainsi que les défenses radïcalaîres.
Expérience 1 : Application à une culture de M.pirum en cellules CSM,
Une culture de M.pirum en cellules CEM est préparée dans un milieu de culture rpmî 1640+10% de sérum de veau foetal. Les cellules en bon état, montrent la présence d'agrégats typiques liés à la présence de M.pirum.
La suspension est centrifugée en basse vitesse pour éliminer les cellules. Le surnageant est filtré sur filtre Millipore PEVD 0,45μ, puis le filtrat est filtré à nouveau sur filtre Whatman 0,02μ ou Millipore 0,lμ.
On compare avec un surnageant de cellules CEM non infectées, filtré dans les mêmes conditions. Les solutions sont diluées de 10 en 10 en rpmi complet sous hotte à flux laminaire jusqu'à 10"7. On traite au Vortex (puissance maximum) pendant 15 secondes chaque solution avant la dilution suivante.
La détection des signaux est réalisée avec un équipement dont la figure 2 représente une vue schématique. L'équipement comprend une cellule de lecture (1) sensible de 0 à 20000 hertz, placée sur une table en bois. Les solutions à lire sont distribuées dans des tubes en plastique (2) Eppendorf (nom commercial) de 1,5 ml. Le volume de liquide est en général de ImI, dans quelques cas de 0,3 à 0,5 ml, sans qu'une différence de réponse soit notée. Chaque échantillon est lu pendant 6 secondes, deux fois de suite, chaque lecture étant saisie séparément.
L'origine des signaux, correspondant aux différents niveaux de sédimentation dans le tube, est sélectionnée selon le commutateur (4). En effet, à chaque strate de sédimentation, correspond une cellule de lecture composée d'un fil en cuivre émaiflé de longueur et de diamètre similaire, Les signaux électromagnétiques sont transformés en signaux électriques avant d'être amplifiés grâce à une carte audio (6) située dans l'ordinateur (3). Le bruit électromagnétique ambiant est capté par une cellule (5) éloignée du tube contenant la source à enregistrer (2), Des logiciels appropriés situés dans l'ordinateur (3) effectuent tes traitements de filtrage nécessaires (par exemple soustraction du bruit ambiant obtenu sur (5) et déduit du signal enregistré sur (1), donnent une représentation visuelle des enregistrements ainsi obtenus ;
- Une représentation globale brute en amplitude (figure 4), Un bruit de fond (-) (figure 3) est observé, transformé en moyenne. Un signal électromagnétique est détecté, défini alors comme (+), lorsque l'amplitude dépasse au moins 1,5 fois le bruit de fond. En général l'amplitude détectée est le double du bruit de fond (++), parfois le triple ; il sera appelé signal électromagnétique ou signature électromagnétique (SEM).
- Une analyse par histogramme en 3d (figure 6) - Une décomposition en fréquences individuelles (fï,ai) par transformation de Fourier (figure 8),
Expérience 2 : Comportement de la source de SEM en centrifuqation à l'équilibre de densité en gradient de saccharose 20-70% en PBS sans Ca++ ni Mq++,
On procède à une centrifugation pendant 2h à 35000 tours par minute à +40C On part du premier filtrat 0.02μ conservé pendant une nuit à +4°C. On vérifie qu'il est toujours positif juste avant la centrifugation. Après cette centrifugation, on collecte 12 fractions à partir du fond du tube.
La mesure des indices de réfraction permet de déterminer le gradient de densité.
On regroupe ensuite les fractions 2 à 2. On les dilue jusqu'à 10"7 en milieu RPMI 16/40 + sérum de veau à concentration de 10%.
Figure imgf000016_0001
10"3 (-)
104 (++)
10"5 (++)
10"6 (++)
10'7 (-)
La négativité des fractions les moins diluées peut s'expliquer par une auto-interférence des signaux émis par des sources trop nombreuses. On vérifie cette auto-inhibition en mélangeant 0,1 millilitre du non dilué à 0,4 ml de Ia dilution 10'4 : après vortex, on observe effectivement une extinction du signal qui devient négatif.
Pool 5-6 Pool 7-8 densité 1, 21-1,225 densité 1, 165- 1,194
Non dilué (-) Non dilué (-)
10"1 (-) 10 1 (-) lO"2 (-) 10"2 (O
10"3 (-) ÎO"3 (O
ÎO"4 (-) io-4 (-) io-5 (++) lO"5 C++)
10"6 C++) 10"6 (++) lu"7 (+) io-7
Pool 9-10 densité 1,112-1,114 Pool 11-12-13 (haut)
On constate que la source des signaux électromagnétiques se comporte comme un polymère de grande taille (mais <0,02μ) et de densité située entre 1,16 et 1,26.
Il existe par ailleurs un effet de zone qui n'avait pas été vu avec la préparation brute non centrifugée. Il y a auto interférence pour les dilutions jusqu'à 1(F au pic d'activité (5-6 et 7-8).
Expérience 3 : Application à une culture de cellules CEM infectées VIH1/IHB
Cette expérience porte sur une cuiture de cellules CEM infectées par le VIH1/IIIB, préparé en deux temps de culture :
- 4 jours : début de l'effet cyto-pathogène (CPE) - 6 jours : effet CPE ++
Elle est comparée avec une culture témoin de CEM non infectée. Le protocole opératoire comporte les étapes suivantes :
- filtration du surnageant à 0,45 micromètre - puis filtration à 0,02 micromètre
- dilution du filtrat de 10 en 10 jusqu'à 1Û"7 en milieu RPMI + sérum de veau
- agitation forte au vortex 15 secondes à chaque étape de dilution.
Résultats :
1) avec la culture de 4 jours, on n'observe aucun signai au-dessus du bruit de fond. Il n'y a pas de différence avec le témoin CEM non infecté jusqu'à dilution 10"7
2 ) avec la culture infectée de 6 jours : 10"1 à 10"5 (-) 10"6 (++) 10 '7 (++) 10*8 (++)
10"9 10"15 (-) On refait une expérience d'auto interférence :
0,1 mi de la solution 10"1 (négative) + 0,4 ml de la solution 10"7 (positive) : cette dernière devient négative. Il y a donc bien auto interférence aux faibles dilutions. 3) Analyse en gradient de densité
Le surnageant de la culture positive filtré à 0,02 micromètre est centrifugé à l'équilibre de densité en gradient de saccharose 20-70% à 35000 tours par minute en rotor BECKMANN (nom commercial) SW56 à 4° C.
Un surnageant témoin de cellules CEM non infectées est traité de la même façon.
Après centrifugation, 13 fractions sont collectées et regroupées 2 à 2. Les indices de réfraction de certaines fractions sont déterminées avec un réfractomètre ABBE (nom commercial) pour déterminer le gradient de densité.
Les fractions de 400 ml sont diluées en milieu RPMI 16/40 plus sérum de veau. Des dilutions successives sont effectuées de 10 en 10 à partir de ces fractions.
On constate que les groupes de densité 1,23 - 1,24 et densité 1,19-1,21 sont très positifs jusqu'à la dilution 10~7. Le groupe de densité 1,15-1,16 donne des signaux positifs jusqu'à la dilution IQ"7, Le groupe du haut du tube ne donne pas de signaux, quelle que soit la dilution.
Les groupes de fraction de base du tube (densité 1,25 à 1,28) donnent de signaux positifs à seulement quelques dilutions.
Contrairement à M. pirum, il y a auto-interférence pour le filtrat de départ et pas d'auto-interférence à partir des fractions du gradient. La majorité des signaux dans ce cas se concentre, comme chez M. pirum, dans les fractions de densité de 1,19 à 1,26, avec cependant une épaule vers les fractions plus légères de 1,16. Expérience 4 : Identification de la famille du micro organisme
On sait que la taille des bactéries est très nettement supérieure à 500 nm, et avoisine en moyenne plutôt 1000 nm, soit lμm. C'est le cas notamment, de la bactérie Coϋ,
La taille des mycoplasmes avoisine quant à elle, 300 nm en moyenne.
Enfin, les virus, ont une taille inférieure à 200 nm, située plutôt en moyenne autour de 100 nm. Le HIV par exemple a une taille de 120 nm.
Compte tenu de Ia taille notablement différente de ces microorganismes en provenance des différentes familles, on se propose d'utiliser cette caractéristique physique, pour différentier l'origine de la famille du micro organisme responsable de la présence des signaux éiectromagnétiques dans le plasma.
On a vu plus haut, dans l'expérience précédente, que la seule présence du micro organisme dans le milieu « éteignait » le signal électromagnétique caractéristique dans la plage active (10"5 à 10 n) des hautes dilutions.
A ces fins, on filtre en cascade une solution diluée du plasma d'un patient infecté dont on ne connaît pas la famille d'appartenance, à travers un filtre de 500 nm et de 150 nm. Les organismes dont ia taille est supérieure à 500 nm, vont donc être naturellement filtrés, ce qui ne sera pas le cas de micro organismes tels que mycoplasmes et virus qui resteront dans le milieu.
En diluant donc ce milieu filtré à 500 nm jusqu'aux plages de dilutions potentiellement actives, typiquement de 10"5 à 10"n, on est alors en mesure de constater très vite, si le milieu porte ou non, le signal actif. Si tel est le cas, c'est que le micro organisme responsable de ce signal, était bien d'une taille supérieure à 500 nm, soit très vraisemblablement une bactérie, ne pouvant assurément s'agir de mycoplasme ou de virus qui auraient, par leur seule présence, éteint le signal,
A l'inverse, si le signal caractéristique n'apparaît pas, c'est qu'assurément il s'agit d'un micro organisme dont la taille est assurément plus petite que le diamètre des pores du filtre utilisé.
En déroulant les opérations de filtrage jusqu'à des niveaux très fins, on peut identifier la famille d'appartenance du micro-organisme responsable de la présence du signal. Cette capacité de sélectionner la famille des micro-organismes à l'origine de la présence du signal, permet notamment de choisir le type de traitement à appliquer au patient pour supprimer l'infection. A titre d'exemple, on pourra appliquer des traitements antibiotiques dans le cas d'une origine bactérienne, ce qui n'a aucun intérêt ni effet dans le cas d'une origine virale. On pourra également appliquer en parallèle, afin d'accélérer le choix thérapeutique, sur plusieurs échantillons du milieu filtré et dilué, des traitements antibiotiques variés afin de sélectionner le ou les traitements les plus efficaces pour un patient donné.
Description de l'expérience :
On place dans un tube Eppendorf un mϋlilitre d'un filtrat 500 nm (0,5 μm) du plasma d'un patient infecté par une pathologie dont on ne connaît pas l'origine. On dilue le milieu jusqu'aux plages de dilution de 10"13
On enregistre à deux reprises, comme précédemment, l'activité électromagnétique émise par les différentes solutions. On observe le résultat. Si le signal apparaît notablement actif, par rapport aux premières dilutions, le patient est assurément infecté par une maladie d'origine bactérienne. Si ce n'est pas le cas, donc si le signal est négatif, on continue de procéder à une nouvelle étape de filtration du plasma préalablement filtré, en lui appliquant dorénavant un filtre de 200 nm (0,2 μm). Si le signai apparaît, dans les plages de hautes dilutions, c'est que nous avions bien à faire à un micro organisme dont la taille est inférieure à 500 nm, et supérieure à 200 nm, très vraisemblablement un mycoplasme. Celui-ci a été filtré par le filtre 200 nm, et c'est son absence et l'absence d'autres micro organismes plus petit qui rend positif le signal de la solution dans les hautes dilutions.
Il va de soit, qu'en disposant de la taille exacte des différents micro organismes susceptibles d'être rencontrés, et des filtres intermédiaires entre chacune de ces tailles, on peut, en généralisant la présente méthode à une cascade d'étapes de flltration, identifier encore plus finement les bactéries, mycoplasmes ou virus et autres organismes formellement responsables de l'activatîon du signal et aider à caractériser le traitement thérapeutique le plus adapté.
Expérience 5 : analyse du plasma de sujets atteints par différentes infections (VIH, urétrite à Uréaplasma urolyticum. polyarthrite rhumatoïde, maladie de parkinsoπ, maladie d'Alzheimer, sclérose en plaque, cancers probablement d'origine virale^.
L'analyse des sangs de patients atteints des pathologies suivantes (VIH, urétrite à Uréaplasma urolyticum, polyarthrite rhumatoïde, maladie de parkinson, maladie d'Alzheimer, sclérose en plaque, cancers probablement d'origine virale) révèlent toutes que ces plasmas, une fois filtrés et dilués convenablement, sont émetteurs de signaux analogues à ceux émis par les mêmes micro-organismes in vitro, à l'exception de la polyarthrite, de la maladie de Parkinson, de la maladie d'Alzheimer, de la Sclérose en plaques, où la cause infectieuse n'a pas encore été identifiée.
En particulier, dans le cas de sujets atteints de Sida et traités par trithérapie anti-rétrovirale, ces signaux sont émis par de hautes dilutions du plasma (jusqu'à ICT16), suggérant qu'ils existent en abondance après disparition de la charge virale plasmatique et pourraient contribuer à l'infection résiduelle persistant au traitement. C'est ce que nous avons étudié dans les expériences suivantes, 6, 7 et 8. On peut également étudier si l'éradication de ces signaux dans le piasma d'un patient HIV sous tri thérapie est de nature à définitivement inhiber la réapparition de la charge plasmatique du patient, en cas d'abandon du traitement. En d'autres termes, si un patient, après avoir été séro-positif serait devenu séro-négatif par éradication du signal électromagnétique,
Ces résultats nous poussent à croire que i'élément causal de maladies telles que la polyarthrite rhumatoïde, la maladie de Parkinson, la maladie d'Aîzheimer, la sclérose en plaques, et certains cas de cancers, seraient des micro organismes d'origine virale, bactérienne, ou mycoplasmiques.
L'analyse même des signaux électromagnétiques, tout particulièrement ceux retrouvés dans les plasma de patients infectés par les pathologies telles que SIDA, (HIV I & II), grippe, sclérose en plaques, Parkinson, Alzheimer, Polyarthrite rhumatoïde, et ce, dans des plages de dilutions supérieures à IQ"4 et inférieures à 10"13, présentent une activité électromagnétique extrêmement intense (amplitude double ou triple au moins par rapport au signal de contrôle) et sur un nombre de fréquences bien supérieur, notamment sur les très basses fréquences. Les différentes décompositions de fourrier des signaux électromagnétiques en mode logarithmique, recueillies sur les hautes dilutions (10" 5 à 10"13) font l'objet de l'illustration 9.
En revanche, ii a été observé que les micro-organismes relativement peu pathogènes ne laissaient dans le plasma duquel ils avaient été filtrés, qu'une activité électromagnétique faible, quelque soit le niveau de dilution de ce piasma. Cette propriété particulière, très intéressante, nous amène à pratiquer les expériences suivantes, pour voir si il y a corrélation ou non, entre activité pathogène et activité électromagnétique dans le milieu filtré et dilué. Expérience 7 : Activation des neutrophiles soumis aux différentes solutions d'un même milieu filtré de micro organismes pathogènes et à leurs signaux électromagnétiques associés
Le polynucléaire neutrophile (PMN) représente la première barrière de défense de î'organisme contre les bactéries qui sont phagocytées et tuées (1). L'activation des PMN peut être initiée par différents stimuli tel que les bactéries, le TNFα (tumor necrosis factor α) et les peptides chimiotactiques : fMLP (N-Formyl-methîonyl-leucyl-phenylalanine) et le PMA (4-phorbol-12-β- myristate-13-acetate).
En recherche fondamentale, l'activation des PMN est évaluée in vitro par la mesure de leur adhésion, de la libération des radicaux libres d'oxygène et/ou l'expression des marqueurs d'activation grâce à la cytométrie en flux.
Avant de tester l'effet des solutions filtrées et diluées d'un microorganisme, nous avons souhaité identifier formellement les fréquences sur lesquelles ies PMN s'activaient. Pour ce faire, nous avons appliquer une méthode simple mais inédite, non connue de l'art antérieur, et propre à être utilisée sur toutes substances ou toutes solutions de micro-organisme afin d'en déterminer les fréquences actives.
Nous savons que le Neutrophile s'active au contact du PMA, Nous avons donc enregistré, sur support informatique, l'activité électromagnétique du PMA, et décomposé son spectre en principales fréquences. Celles-ci apparaissent dans le graphique de l'illustration 13. Après un tri de ces fréquences, par ordre d'importance inverse, donc de la plus grande amplitude à la petite, on crée un nouveau fichier informatique, totalement synthétique, pour chacune des fréquences identifiées. Chaque fichier ne possède donc qu'une seule fréquence, et on fixe arbitrairement son amplitude, à l'amplitude maximale obtenue précédemment dans la décomposition du signai PMA.
On peut s'assurer de ces deux points, en décomposant par transformée de fourrier, chacun des différents fichiers « mono fréquentiels » ainsi crées. En effet, une seule « pic » les caractérise comme en témoigne l'illustration
14, « pic » calée sur la valeur de fréquence qui a été choisie, en l'occurrence 28
Hz.
En appliquant successivement et individuellement chacun de ces fichiers sur les PMN, on en déduit rapidement quelles sont les fréquences, qui, à eux seuls, « activent » le PMN. Afin de s'assurer que les fréquences identifiées sont rigoureusement correctes, on synthétise, au pas de 0,1 Hz, les fréquences environnantes, et on les applique de manière similaire au PMN. Dans un groupe de fréquences environnantes, on finit par choisir celle qui active le plus fortement le PMN, on la sélectionne.
Ainsi, lorsque dans les prochaines expériences, le PMN rencontrera l'une de ces fréquences dites « d'activation », il s'activera.
On peut donc consigner, au fil des expériences, les fréquences actives du PMN, de sorte que lorsque celui-ci sera exposé au signal électromagnétique d'un nouveau produit, ou d'une solution diluée et filtrée d'un micro-organisme, il réagira pareillement quand une ou plusieurs de ses « fréquences actives » ou proches de ces fréquences actives de référence, apparaîtront dans la décomposition spectrale du signal.
On pourra donc caractériser un micro-organisme, tel que le PMN, par ses fréquences actives de référence, et déduire par simple décomposition de fourrier de la signature électromagnétique d'un produit ou d'une solution diluée qui le fait réagir, , quelles fréquences sont susceptibles de figurer parmi ses fréquences « actives ». On peut, si besoin est, renouveler l'expéricence avec toutes les substances susceptibles d'activer le PMN, pour connaître la quantité maximale de ses fréquences « actives ».
Il convient de remarquer plusieurs points caractéristiques importants de cette découverte.
D'une part, ces fréquences actives n'ont pas d'harmoniques dans le spectre. Ce qui signifie qu'une fréquence qui présenterait des harmoniques ne peut être une fréquence active d'origine naturelle, et donc résulte très vraisemblablement d'une interférence électromagnétique locale, comme c'est souvent le cas en milieu urbain fortement parasité par les rayonnements électromagnétiques ambiants. Dans la plupart des décompositions présentées dans les figures 3,4,5,6,7,8,9,10 et 11 on voit comment apparaissent par exemple les fréquences liées aux rayonnement électromagnétique du courant électrique du secteur, ainsi que les raies harmoniques associées.
D'autre part, lorsque l'on adjoint artificiellement à ces fréquences actives fondamentales, quelques harmoniques, de rang 2, 3, 4 par exemple, l'effet d'activation des PMN ne s'en trouve pas augmenté d'autant. Il s'en trouve même plutôt diminué.
Maintenant que nous connaissons les « fréquences actives » du PMN, comme le 28 Hz, il convient de passer aux parties II et III de l'expérience.
C'est ainsi que nous avons testé l'effet de solutions filtrées et diluées d'Escherichia CoIi jusqu'à 10"15 ainsi que leurs signaux électromagnétiques associés sur le neutrophile.
Pour valider les résultats, l'effet potentiel des signaux est comparé à un témoin négatif (Tampon) et un témoin positif (dose pondérale du produit induisant l'activation du neutrophile).
L'activation des PMN est évaluée in vitro par la mesure de leur adhésion et par la mesure de l'expression des marqueurs d'activation.
Les expériences sont faites en tripiicate. 18 mesures (dont témoin) sont réalisées sur le neutrophile pour chaque série. Soit 54 points de mesure par série. II y a donc 162 points de mesure pour les dilutions, et 162 points de mesure pour les signaux électromagnétiques de ces solutions soit au total 324 points de mesure.
A chaque fois que l'une des fréquences émise par la signature électromagnétique des solutions correspond à l'une des fréquences « actives » du PMN, on incrémente un indice, dît indice de concordance, noté de 1 à 50.
Celui-ci est donc constitué par le nombre de fréquences communes au micro organisme à l'origine de la dilution et à chaque micro organisme décomposé dans la base de référence. Plus son indice est élevé, plus le
PMN est susceptible d'être activé, par l'application des signatures électromagnétique d'un milieu dilué et filtré, jusqu'à saturation.
Au dépouillement, les différentes séries confirment la corrélation entre l'activation des PMN, et la présence des fréquences actives dans la signature électromagnétique des solutions filtrées et diluées,
Expérience 8 ; Activation des basoohtles soumis aux différentes solutions d'un même milieu filtré de micro organismes pathogènes ainsi qu'à leur signatures électromagnétiques.
Le basophile humain est une cellule clé pour l'étude des réactions d'hypersensibilité immédiate puisqu'il libère toute une variété de médiateurs (tel que l'histamine, leukotriène C4, Interleukine IL-4 et IL- 13) suite à une activation par les allergènes.
L'activation des basophiles est évaluée in vitro par la mesure de l'expression des marqueurs d'actîvation grâce à la cytométrie en flux.
L'activation des basophiles peut être déclenchée par l'anti- Imrnunoglobulîne E (anti-IgE), ie fMLP et l'interieukine 3 (IL-3). Nous avons testé l'effet du signal électromagnétique de i'anti-IgE, le fMLP et IL-3 sur le basophile.
Après avoir identifié formellement et consignées, pour les basophiles, les « fréquences actives » par ia même méthode d'identification que pour îes neutrophiles, en utilisant le signal électromagnétique de l'anti-IgE, du fMLP, et de l'IL-3, et stocké ces fréquences dans un tableau, nous passons à la phase II de l'expérience.
Elle consiste à tester, en triplicate, sur le basophile, l'effet de solutions d' Escherîchia CoIi, de la solution non filtrée non diluée (ND NF) jusqu'à la solution diluée à 10'15 ainsi que leurs signaux électromagnétiques respectifs associés.
18 mesures (dont témoin) sont réalisées sur le Basophile pour chaque série. Soit 54 points de mesure par série. Il y a donc 162 points de mesure pour les dilutions, et 162 points de mesure pour les signaux électromagnétiques de ces solutions soit au total 324 points de mesure.
Pour valider les résultats, l'effet potentiel des signaux est comparé à un témoin négatif (Tampon) et un témoin positif (dose pondérale du produit induisant i'activation du neutrophile).
L'activation des basophiles est évaluée in vitro par la mesure de l'expression des marqueurs d'activation.
La décomposition des signaux électromagnétiques en provenance des différentes solutions filtrées du milieu, est comparée aux fréquences identifiées comme « actives » chez les basophiles,
Au dépouillement, les différentes séries confirment la corrélation entre i'activation (dé granulation) des Basophiles, et la présence de leurs fréquences actives dans la signature électromagnétique des solutions diluées. Expérience 9: hémolyse de globules rouges soumis aux différentes solutions d'un même milieu filtré de micro organismes pathogènes.
L'expérience met en œuvre un test complémentaire permettant de mesurer l'impact direct des solutions filtrées et diluées d'un organisme notablement pathogène, tel que Escherichia CoIi, sur ie potentiel de défense antiradîcalaîre d'un organisme vivant
Le test utilisé KRL (Kit Radicaux Libres, brevet Spiral) est un test biologique simple, développé par les Laboratoires Spiral, permettant de mesurer la résistance globale chez l'homme vis-à-vis de ('agression des radicaux libres, II est décrit par Monsieur Michel PROST, son inventeur, dans la demande de Brevet H° FR2861463 (2003) "Procédé de détermination du potentiel de défense antiradicaiaire et utilisation notamment thérapeutique préventive humaine et vétérinaire". Ce test est de plus parfaitement également adapté à la détermination dynamique des propriétés pro- ou anti-oxydantes de nombreux composés comme les médicaments, les aliments, les produits de l'industrie.
En effet, il apparaît qu'un nombre croissant d'études soulignent que les radicaux libres sont impliqués non seulement dans des phénomènes aigus tels que traumatisme ou ischémie, mais aussi dans la genèse et le développement de nombreuses pathologîes comme les maladies cardiovasculaires, ie diabète, le cancer, les maladies inflammatoires et le déclin du système immunitaire.
II apparaît donc très pertinent de pouvoir évaluer de façon précise l'état de défense des individus vis-à-vis de l'agression des radicaux libres, dans le cas des activités biologiques produites par des solutions diluées et filtrées d'organismes hautement pathogènes, comme Echeria CoIi ou le virus HIV.
Pour cela, les différentes solutions diluées d'un milieu filtré de la bactérie Escherichia colî, de la solution non diluée notée ND à la solution diluée à ICT15' ont été soumises au test KRL, selon 8 répiicattons, selon le protocole décrit dans la demande de brevet sus référencée,
Les valeurs (en minute), rendent compte du temps de demi hémolyse, donc du temps nécessaire à la destruction de la moitié de la population de globules rouges exposés au milieu dilué.
Les résultats sont donnés dans le tableau suivant :
Figure imgf000030_0001
L'histogramme, affichant la moyenne des 6 répiications et la variabilité associée pour chacune des dilutions jusqu'à 10"ÎS est présenté figure 18.
On constate d'une part que la présence du micro organisme dans le milieu déclenche, par rapport au témoin, une très importante défense radicalaire (Soi ND NF - Solution non diluée, non filtrée). Ce qui est parfaitement conforme aux résultats connus en routine opératoire.
Mais ce qui est particulièrement intéressant et nouveau de constater, c'est que l'activité radicalaire continue, alors que le micro organisme, a été filtré du milieu. Notablement pour la solution filtrée non diluée (Soi ND F) mais également pour des hautes dilutions du milieu, telles que 10"8 ICT10 10"12. Pour d'autres hautes dilutions, au contraire, l'activité radicalaire est plus basse que le témoin.
Il y a donc, à certaines dilutions, une activité biologique qui continue d'agresser l'organisme et qui mobilise ses défenses immunitaires alors que le milieu a été, par fiitration, débarrassé du micro organisme d'origine. Cette agression constante, même de faible importance, épuise à la longue les réserves immunitaires de l'organisme, de sorte que celui-ci présentera une fragilité notable lorsqu'il sera de nouveau agressé par l'arrivée d'un nouveau organisme pathogène, fragilité permettant à ce micro-organisme de prospérer rapidement sans grande résistance chez un être vivant à la capacité défensive alors diminuée. A travers les expériences 6 à 8, on constate donc une corrélation entre la perturbation des défenses immunitaires de l'organisme et l'activité électromagnétique, notamment dans les basses et très basses fréquences du signal de la solution diluée et filtrée d'un organisme pathogène. II convient de conclure comment ce phénomène hautement énergétique déclenche l'apparition de nouvelles fréquences qui donnent probablement lieu à une mise en résonance partielle des organismes chargés des défenses immunitaires, ce phénomène étant vraisemblablement la clé de compréhension de leur inhibition dans le cas de certaines pathologies.
Expérience 10: neutralisation des effets pathogènes de solutions diluées de CoIi, par application de traitements antibiotiques en dose pondérale ou par application de leur signature électromagnétique.
L'expérience met en œuvre un test complémentaire permettant de mesurer l'impact de traitements antibiotiques sur des solutions filtrées et diluées d'un organisme notablement pathogène, tel que Escherichia CoIi, sur le potentiel de défense antiradicalaire d'un organisme vivant.
Lorsque l'on réitère les expériences 8, 9 et 10, avec une solution diluée d'un organisme notablement pathogène, tel que Escherichia CoIi, l'activation des neutrophïles, Ia dégranulation des basophiles, et l'actîvation des défenses radicalaires se trouve progressivement réduite, dans les heures qui suivent l'application d'un traitement antibiotique au milieu dilué, soit par application de doses pondérales, soit par application du signal électromagnétique du dit traitement.
Il en va de même pour l'application des signaux en provenance de traitement de type chimiothérapie, comme ceux en provenance du lacto-or, lacto- fer, lacto-cuivre.
Il semble que les fréquences actives de ces produits agissent sur les solutions diluées au point de diminuer sensiblement leur capacité de faire réagir les micro organismes en charge des défenses immunitaires de l'organisme.
On vérifie par analyse du spectre électromagnétique du milieu, qu'après l'application du traitement, en effet, les signaux actifs de la solution diluée ont été supprimés pour la plupart. On comprend alors pourquoi les organismes de défense immunitaire présentent une activation moindre.
CONCLUSION GENERALE
Des micro-organismes de nature différente, tels que des rétrovirus
(VIH), des bactéries sans parois rigides proches des Gram + (M.pirum), des bactéries avec parois rigides Gram - (E.coli) produisent des nanostructures persistant dans des solutions aqueuses.
Après l'étape indispensable de filtration, qui va éliminer les particules physiques des micro-organismes, ces nanostructures (de taille inférieure à 1OQ nanomètres) émettent des signaux électromagnétiques complexes de basses fréquences qui peuvent être enregistrés et numérisés.
Les mêmes résultats peuvent être obtenus à partir du plasma de sujets infectés par ces micro-organismes.
Ces nanostructures diffèrent des micro-organismes qui les ont générés par leur large spectre de densité, et leur sensibilité à la congélation. Les signaux qu'elles émettent peuvent être neutralisés par auto-interférence avec les signaux préalablement enregistrés et inversés en phase, ou par allo-tnterférence avec les signaux provenant d'autres micro-organismes.
Enfin, on a vu comment, cette activité électromagnétique intense, très caractéristique et seulement présente sur certaines plages de haute dilution d'un milieu filtré d'un micro organisme, n'apparaissait que pour les microorganismes notablement pathogènes.
Cette activité électromagnétique intensive, se traduit par un renforcement notable de l'activation des neutrophiies et des basophiles ainsi que par une augmentation sensible de l'activité des défenses antiradicalaires. Ces signaux électromagnétiques se sont révélés particulièrement intenses dans certaines plages de haute dilution d'un milieu filtré et dilué, alors que ies différents micro-organismes composant les défenses immunitaires de l'organisme étaient particulièrement agressés,
A la lecture de ces résultats, il apparaît donc établit qu'il existe une certaine corrélation entre l'intensité e des signaux électromagnétiques de basses fréquences émis par des solutions diluées et filtrées de micro organismes pathogènes, ET l'activation des défenses immunitaires d'un organisme vivant, typiquement sur certaines des plages de hautes dilutions. Et que cette activité électromagnétique particulière est facilement identifiable par la mise en œuvre d'outils de capture simples.
On pourra utilement mettre à profit la présente invention pour la détection de ces nouvelles formes pathogènes dans les milieux naturels, ainsi que pour leur élimination, par un traitement prophylactique adapté, tel que antibiotique dans le cas de l'identification d'une origine bactérienne.
Il semble donc que cette activité électromagnétique particulièrement élevée et de spectre large sur certaines plages de haute dilution du milieu filtré constitue :
- Un marqueur fort d'une agression immunitaire, préparant le terrain à l'émergence d'une pathologie lourde opportuniste.
- un marqueur utile de l'efficacité d'un traitement prophylactique, pendant l'évolution de la pathologique et l'application du traitement.
- Un avertisseur de risque pathogène dans des milieux aqueux, lorsqu'il est utilisé dans des substances alimentaires, cosmétiques, ou industrielles.
Elle peut être combattue par des traitements électromagnétiques ou allopathiques, notamment de type antibiotique ou chimiothérapique.

Claims

REVENDICATIONS
1 - Utilisation soit directement, soit après modification, du signal électromagnétique émis par un milieu biologique dilué et filtré, aux fins d'inhibition ou de modification substantielle du dit signai, par exposition, à l'aide d'un solénoïde, dudit milieu au dit signal électromagnétique amplifié,
2 - Utilisation selon la revendication 1 dans laquelle la modification du dit signal électromagnétique consiste à décaler les phases des principales fréquences qui le compose de z degrés, avec z pouvant aller de 0 à 2 π (pi)(3,1416).
3 - Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que la modification du dit signal électromagnétique consiste à inverser la phase des principales fréquences qui le constitue.
4 - Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que, ledit milieu biologique étant dilué à un niveau de dilution 10"x, ledit signal électromagnétique est un signal enregistré à partir de ce même milieu dilué à un niveau de dilution 10"γ, avec Y strictement inférieur à X, X étant égal ou inférieur à 20, Y étant supérieur ou égal à 2.
5 - Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit signal électromagnétique est un signal produit par enregistrement des signaux électromagnétiques émis par un traitement antibiotique, chimiothérapique ou chimique.
6 - Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend une étape d'application, par périodes alternatives, au milieu biologique, dudit signal électromagnétique, et une étape de mesure, jusqu'à la disparition ou la modification substantielle du dit signal émis en retour par ledit milieu.
7 - Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 dans laquelle le temps d'alimentation du solénoicle par la signature caractéristique d'un élément biochimique est d'environ dix minutes. 8 - Equipement pour la mise en œuvre de l'utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 caractérisé en ce qu'il comprend : un ou plusieurs solénoïdes pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par ie milieu biologique ; un circuit de traitement desdits signaux pour leur décomposition par transformée de fourrier en fréquences principales ; un circuit de production de signaux d'inhibition.
9 - Equipement selon la revendication 8 caractérisé en ce que les solénoïdes sont situés en regard des différentes strates de sédimentation du milieu biologique à enregistrer.
10 - Equipement selon la revendication 9 caractérisé en ce que l'un des solénoïdes formant capteur, dit capteur de contrôle, est éloigné de l'élément biochimique à caractériser. 11 - Equipement selon la revendication 10 consistant à ce que le capteur de contrôle est connecté au canal gauche de la carte son de l'ordinateur. 12 - Equipement selon la revendication 8 consistant à ce qu'un autre solénoïde, dit capteur pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par un milieu, est connecté au canai droit de la carte son de l'ordinateur. 13 - Equipement selon l'une au moins des revendications 8 à 12, caractérisé en ce que l'équipement de capture pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par le milieu biologique, est séparé de l'équipement distant de comparaison des signaux.
14 - Equipement selon ia revendication 13 caractérisé en ce que les signaux électromagnétiques reçus de l'équipement de capture sont comparés à une base de signatures enregistrées préalablement dans ledit équipement distant.
15 - Equipement selon l'une des revendications 13 à 14 caractérisé en ce que l'équipement distant est muni d'un module d'émission de commandes vers l'équipement de capture. 16- Equipement selon l'une des revendications 8 à 15 consistant à ce que le capteur pour l'acquisition des signaux électromagnétiques émis par un élément biochimique est connecté au canal micro d'un terminai de téléphonie mobile. 17 - Equipement selon la revendication 8 consistant en ce que le circuit destiné à produire des signaux d'inhibition est connecté au canal écouteur d'un terminal de téléphonie mobile.
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