WO2007048974A2 - Heterooligomeres de d-glucosamine et n-acetyl-d-glucosamine, leur procede de preparation et leur utilisation - Google Patents

Heterooligomeres de d-glucosamine et n-acetyl-d-glucosamine, leur procede de preparation et leur utilisation Download PDF

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WO2007048974A2
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Alain Domard
Nadine Barroca
Stéphane TROMBOTTO
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Universite Claude Bernard Lyon I
Centre National De La Recherche Scientifique
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Definitions

  • the present invention relates to novel glycosidic oligomers, monomers useful for their preparation, and a process for the preparation of such oligomers.
  • Chitosan is a biodegradable and bioabsorbable natural fiber obtained after deacetylation of chitin.
  • Chitin is a biopolymer of high molecular weight, non-toxic, biodegradable and bioabsorbable, and it is with cellulose, the most common polysaccharide in nature.
  • Chitin consists of a linear copolymer chain whose structure contains D-glucosamine monomers and N-acetyl-D-glucosamine monomers linked by a ⁇ - (1-4) bond.
  • Chitin and chitosan are known to have multiple biological properties, and are likely to be used in many fields, such as water treatment, in pharmacy or cosmetics, or in agriculture, agri-food or biotechnology.
  • One of the objectives of the present invention is thus to overcome the drawbacks of the prior art and to provide oligomers of ⁇ acetyl-D-glucosamine and D-glucosamine, in which the -OH, -NH 2 or -NHAc functions are optionally in protected form, in pure form, whatever their degree of polymerization (DP), their degree of acetylation (DA) and the distribution of the units / V-acetyl-D-glucosamine and D-glucosamine along the chain polymer.
  • DP degree of polymerization
  • DA degree of acetylation
  • the subject of the invention is oligomers of formula (I): R 5 -PR 4 in which P consists of at least two glycosyl units chosen from the units of formula:
  • R 1, R 2 , R ' 1 and R' 2 represent, each independently, a hydrogen atom or a group protecting the alcohols
  • R - R 3 and R ' 3 each independently represent:
  • a group protecting the amines making it possible to orient the linkage (1 ⁇ 4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function, under conditions that do not modify a protected amino group likely to lead in other deprotection conditions to a -NHAc group,
  • R 3 and R ' 3 each independently represent a hydrogen atom or an acetyl group, it being understood that at least R 3 or R' 3 present in the oligomer is different from the acetyl group,
  • R 4 is a hydroxyl group, or a hydroxyl group in protected form, preferably in the ⁇ -position, or a group preferably leaving in the ⁇ -position, said leaving group being capable of forming an oxy-bridge according to a ⁇ - (1-4) bond with a free -OH located at the 4-position of another glycosyl group,
  • R 5 is a hydrogen atom or a group protecting the alcohols.
  • the subject of the invention is the hetero-oligomers of formula (I), that is to say the oligomers of formula (I) as defined above which comprise:
  • At least one (Mi) glucosamine units that is to say that R 3 represents H or an amine protecting group, making it possible to orient the link (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function, under conditions which do not modify a protected amino group likely to lead under other deprotection conditions to a -NHAc group, and
  • At least one (M 2 ) -acetyl-D-glucosamine units that is to say that R ' 3 represents Ac or an amino-protecting group, which makes it possible to orient the link (1 ⁇ 4), when glycosidic coupling, at ⁇ and leading, after deprotection, to an -NHAc function, under conditions which do not modify a protected amino group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NH 2 group,
  • the oligomers as defined above according to the invention have one or other of the following characteristics, or any combination of these characteristics, when they are not mutually exclusive. the other :
  • the oligomer responds to one or the other of the formulas below
  • glycosyl units are linked together by a ⁇ - (1-4) bond
  • R 1, R 2, R '1, R' 2, R 3, R '3, R 4 and R 5 are as defined above for the compounds of formula (I),
  • R 3 is a protective group of amines, for orienting the bond (1 ⁇ 4), during a glycoside coupling, to ⁇ and leading after deprotection to a function -NH 2 , under conditions that do not change a protected amine group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NHAc group, preferably a -C (O) ORd group, with Rd chosen from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl and para-bromobenzyl groups, para-chlorobenzyl, 2,4-dichlorobenzyl, R 3 preferably being a benzyloxycarbonyl group;
  • - R ' 3 is a protective group of amines, to guide the binding (1--4), during a glycoside coupling, to ⁇ and leading after deprotection to a function -NHAc, under conditions that do not change a protected amino group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NH 2 group, preferably a dichloroacetyl or chloroacetyl group, or preferably trichloroacetyl;
  • R 1, R 1 , R 2 and R ' 2 which are identical or different, are chosen from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl, para-bromobenzyl, para-chlorobenzyl and 2,4-dichlorobenzyl groups;
  • R 2 , R'i and R ' 2 represent a benzyl group
  • R 5 is an acetyl group
  • R 5 is a hydrogen atom
  • R 4 is a te / t-butyldimethylsilyloxy group in the ⁇ position
  • R 4 is a trichloroacetimidate group (-OC (NH) CCI 3 ) in the ⁇ position;
  • the oligomer has a DP equal to 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8;
  • the oligomer is in the form of an alternating copolymer, a random copolymer or a block copolymer.
  • the oligomers according to the invention are in pure form, that is to say that they are not in the form of a mixture of oligomers but in the form of a single oligomer of DP and DA given.
  • the only impurities are compounds of low molecular weight, such as solvents used in the synthesis or purification and present at less than 1% by weight.
  • the oligomers of formula (I), (Ia) and (Ib), and in particular dimers or trimers, in which the amine and -OH functions are in protected form may, in particular, serve as an intermediate for the synthesis of other oligomers.
  • the present invention proposes to provide monomers useful for the preparation of such oligomers.
  • R “ 3 represents a protecting group of amines, making it possible to orient the linkage (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function, under conditions that would not modify another protected amino group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NHAc group,
  • R “ 4 is a hydroxyl group in protected form, preferably in the ⁇ -position, or a leaving group, preferably in the ⁇ -position, said leaving group being capable of forming an oxy-bridge according to a ⁇ - (1 ⁇ 4) bond with a free -OH located in position 4 of another glycosyl group,
  • the monomers (IIa) according to the invention one or the other of the following characteristics when they s. do not exclude each other:
  • R ⁇ 3 is a group -C (O) ORd, with Rd selected from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl, para-bromobenzyl, para-chlorobenzyl, 2,4-dichlorobenzyl, R M 3 being preferably a benzyloxycarbonyl group,
  • R 1 and R 2 which are identical or different, are chosen from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl, para-bromobenzyl, para-chlorobenzyl and 2,4-dichlorobenzyl groups,
  • R "i and R" 2 represent a benzyl group
  • R " 3 is a benzyloxycarbonyl group
  • R " 4 is a group preferably leaving in position ⁇ , said leaving group being capable of forming an oxy bridge with a free -OH located in position 4 of another glycosyl group, and R" 5 is a group protecting the alcohols ; in particular R " 4 is -OC (NH) CCI 3 and R" 5 is acetyl;
  • R " 4 is a hydroxyl group in protected form, preferably in position ⁇ , and R" 5 is a hydrogen atom or an alcohol protecting group; in particular R " 4 is a tert-butyldimethylsilyloxy group in the ⁇ position.
  • the invention also proposes to provide a process which makes it possible to prepare oligomers, and in particular hetero-oligomers of D-glucosamine and / V-acetyl-D-glucosamine, by controlling the size, the degree of acetylation and the architecture of the oligomers obtained.
  • the subject of the present invention is a process for preparing dimers of formula:
  • R-ii / R12 / R'n and R'12 each independently represent a protective group of alcohols, for example, selected from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl, para-bromobenzyl, p-chlorobenzyl, 2,4-dichlorobenzyl,
  • R 3 and R '13 are each independently:
  • a protecting group of the amines making it possible to orient the linkage (1 ⁇ 4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function, under conditions that do not modify a protected amino group which can lead under other deprotection conditions to an -NHAc group, for example chosen from -C (O) ORd groups, with Rd chosen from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl and para-bromobenzyl groups, para chlorobenzyl, 2,4-dichlorobenzyl, R 3 being preferably a benzyloxycarbonyl group,
  • Ri 4 is a leaving group, preferably in the ⁇ -position, said leaving group being capable of forming an oxy-bridge with a free -OH located at the 4-position of another glycosyl group, for example chosen from the -SPh groups or - SEt in position ⁇ , or preferably -OC (NH) CCb, in position ⁇ ,
  • Ra -CH 3 , -CH 2 Cl, -CHCl 2 , -CCI 3 , -CF 3 , -CH 2 OMe, -CH 2 OCPh 3 , -CH 2 OC 6 H 4 -P-Cl, -C (CH 3 ) 3 , -Ph, -C 6 H 4 (P-MeO).
  • the above process is used to form heterodimers, that is to say that:
  • R 1 is a protecting group of the amines, as defined above, making it possible to orient the link (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to a function -NH 2
  • R 3 is an amine protecting group, as defined above, for orienting the linkage (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NHAc function
  • R 1 is a protective group of the amines, as defined above, making it possible to orient the link (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to a function -NHAc
  • R ' i 3 is a protecting group for amines, as defined above, making it possible to orient the link (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function.
  • the subject of the present invention is also a process for the preparation of a controlled DP / DA hetero-oligomer / Aacetyl-D-glucosamine and D-glucosamine comprising the following steps: A coupling, so as to form a ⁇ - (1 ⁇ 4) bond, between a monomer or a donor oligomer of formula:
  • Rn, R 1 2, R'n and R'12 represent, each independently, a group protecting the alcohols, for example selected from benzyl, para-methoxybenzyl, para-nitrobenzyl, para-bromobenzyl, para-chlorobenzyl, 2 groups; , 4-dichlorobenzyl,
  • Ri 6 and R ' represent, each independently:
  • a protective group of the amines for orienting the linkage (1-4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to a function -NHAc, under conditions which do not do not modify a protected amino group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NH 2 group, for example chosen from the dichloroacetyl, chloroacetyl and trichloroacetyl groups,
  • Ri 4 is a leaving group capable of forming an oxy-bridge with a free -OH located in the 4-position of another glycosyl group, for example chosen from the groups -SPh or -SEt in position ⁇ , or preferably -OC ( NH) CCI 3 , in position ⁇ ,
  • Pi and P 2 are each independently constituted by one or more identical or different glycosyl units linked together by a ⁇ - (1-4) bond, and chosen from glucosamine units of formula: and the acyl-D-glucosamine units of formula:
  • Ri 7 represents a protecting group of the amines, making it possible to orient the linkage (1 ⁇ 4), during a glycosidic coupling, to ⁇ and leading after deprotection to an -NH 2 function, under conditions that do not modify a protected amine group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NHAc group, and for example one of the groups mentioned in the definition of Ri 6 and R'i 6
  • R '17 represents an amino protective group, to guide the (1 ⁇ 4), during a glycosidic coupling in ⁇ and leading after deprotection to a -NHAc function under conditions that do not alter a protected amine group capable of leading, under other deprotection conditions, to an -NH 2 group, and for example one of the groups mentioned in the definition of Ri 6 and R'i 6
  • the method uses: or a coupling between two monomers (VI) and (VII) each having a protective group of the amines of the two different categories (protection of the NH 2 function or protection of the NHAc function), that is to say between two monomers (VI) and (VII), one of which comprises a protecting group (Ri 6 or R'i 6 ) leading after deprotection to NH 2 and the other a protecting group (R'i 6 or Rie) leading after deprotection to NHAc ,
  • one of the oligomers has at least one unit of the protected D-glucosamine type and at least one unit of the protected ⁇ acetyl-D-glucosamine type, or one of the two oligomers (VI) or (VII) has only protected D-glucosamine type units, the other having only protected V-acetyl-D-glucosamine type units
  • the preparation method according to the invention thus makes it possible to prepare, in a perfectly controlled manner, all the possible structures of pure oligomers consisting of / V-acetyl-D-glucosamine and D-glucosamine, with a degree of polymerization included between 2 and 8.
  • the process according to the invention is particularly suitable for the manufacture of oligomers derived from chitin and chitosan, that is to say, involving two different units, ⁇ -acetyl-D-glucosamine and D-glucosamine, Ce process makes it possible to constitute a whole library of oligomers with dimensions and architectures perfectly controlled, as to their composition and as to the position of the two constituent entities along the oligomeric chain.
  • the oligomers are prepared by multi-step chemical syntheses involving three phases. The first is the synthesis of four monomers, some of whose chemical functions are specifically protected, in order to act as donors or acceptors of / V-acetyl-D-glucosamine or D-glucosamine.
  • the second phase shows all the possible combinations of couplings between a donor and an acceptor of ⁇ acetyl-D-glucosamine or D-glucosamine leading to the production of so-called protected oligomers.
  • dimers Four different dimers are first prepared, then these dimers will serve as a building block, the couplings can then be made between a monomer and a dimer or two dimers, the only condition being to implement a donor (characterized by a leaving group -LG in position 1 of glycosyl) and an acceptor (characterized by a free -OH function at position 4 of glycosyl), and so on.
  • the newly synthesized oligomers can be converted to acceptors or donors by simple chemical modifications, and then used as such for the preparation of oligomers of higher degrees of polymerization.
  • the third phase consists in selectively eliminating the different protections of the chemical functions introduced during the first phase, in order ultimately to lead to the desired oligomers.
  • the process according to the invention thus comprises three phases: ol st stage: preparation of four elementary patterns o 2nd phase couplings of elementary patterns o 3rd phase cleavage of the protective groups and obtain oligomers
  • a first step consists in preparing donor and acceptor monomers which will be used for the construction of the oligomers.
  • Four monomers are needed to perform all possible constructions. These monomers will subsequently be used as elementary units to prepare the first oligomers of DP 2, then of higher DP. Two of these monomers act as a donor and acceptor of / V-acetyl-D-glucosamine, and the other two of donor and acceptor of D-glucosamine.
  • four monomers of the monosaccharide type are synthesized from a single common and commercial molecule, the hydrochloride of D-glucosamine.
  • These monomers are characterized by protective groups of very specific alcohol and amine functions. There are two types of protective groups, temporary and permanent. These groups are preferably chosen in such a way as to satisfy various criteria such as the ease of introduction / deletion, the compatibility between them and their effectiveness in orienting glycoside coupling (1 ⁇ 4) to ⁇ .
  • the protective groups of the alcohol functions are chosen from:
  • the protective groups of the amine functions are chosen from trichloroacetyl (TCA) which leads after deprotection to the -NHAc group and benzyloxycarbonyl (Z) which leads after deprotection to the -NH 2 group.
  • TCA trichloroacetyl
  • Z benzyloxycarbonyl
  • a hydroxyl function, in protected form which denotes a group which after deprotection leads to a -OH function, can in particular be in the form -OR, but also -SR.
  • the groups -SPh, -SEt, and in particular -OC (NH) CCI 3 may serve as a leaving group.
  • Fig. 1 illustrates a synthesis of monomers derived from GIcNAc.
  • Fig. 2 illustrates a synthesis of monomers derived from GIcN.
  • Fig. 3 illustrates a synthesis of disaccharide GICN-GICNAC.
  • Fig. 4 illustrates a synthesis of the GIcN-GIcN disaccharide.
  • Fig. 5 illustrates a synthesis of the disaccharide GICNAC-GICN.
  • Fig. Figure 6 illustrates a synthesis of the GIcNAc-GIcNAc disaccharide.
  • the preparation of the acceptor and donor of / V-acetyl-D-glucosamine follows a common multi-step reaction scheme given in FIG. 1 attached.
  • a first step the amine function of the hydrochloride of D-glucosamine is converted into a trichloroacetamide function by reaction with trichloroacetyl chloride in a basic medium.
  • the hydroxyl functions are then acetylated under standard conditions (acetic anhydride / pyridine) without prior purification.
  • the two following steps consist in protecting the anomeric position with a tert-butyldimethylsilyl group in the ⁇ -position, firstly by reaction with hydrazine acetate in ⁇ -dimethylformamide allowing the selective cleavage of the acetate function in position 1, then by reaction of the hemiacetal intermediate with ert-butyldimethylsilyl chloride, in the presence of imidazole in N, N-dimethylformamide.
  • the hydrochloride of D-glucosamine is converted to compound 1 in four steps.
  • the donor of / V-acetyl-D-glucosamine (compound 5) is, for its part, synthesized from the compound 4 in 3 steps. Firstly, the hydroxyl function at position 3 is acetylated by the acetic anhydride / pyridine mixture with a yield of 85%. The tert-butyldimethylsilyl group is then cleaved in the presence of tetrabutylammonium and acetic acid to give a hemiacetal intermediate, which reacts with trichloroacetonitrile under basic conditions to yield the ⁇ -configuration imidate (compound 5).
  • the two monomers which will act as acceptor (4 'compound) and D-glucosamine donor (5' compound) are synthesized according to a multi-step reaction scheme shown in FIG. 2 annexed. It is very similar to that described in the case of the synthesis of the two monomers of N-acetyl-D-glucosamine. Two points differ, however.
  • the first is the use of a novel amino protecting group, benzyloxycarbonyl (Z), introduced by reaction with benzyl chloroformate under basic conditions.
  • the second concerns the reaction conditions of benzylation of the compound 2 '. Since the carbamate NH 2 function is sensitive to very basic conditions, the conventional method of benzylation (benzyl bromide / sodium hydride) can not be employed. The benzyl group was therefore introduced under mild basic conditions (benzyl bromide / barium oxide, barium hydroxide).
  • the coupling of monomers consists in reacting an 'acceptor' monomer with a 'donor' monomer to yield a protected oligomer of DP 2.
  • This reaction is advantageously carried out under anhydrous conditions and catalyzed by a Lewis acid, preferably trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (TMSOTf) or ethereal boron trifluoride (BFs-Et 2 O).
  • TMSOTf trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate
  • BFs-Et 2 O ethereal boron trifluoride
  • the first step of deprotection consists of converting the trichloroacetamide functions, as a function of acetamide. This deprotection is carried out by reduction, advantageously using triethyltin hydride, in the presence of 2,2'-azobisisobutyronitrile (AIBN) in benzene.
  • AIBN 2,2'-azobisisobutyronitrile
  • the acetyl group at the 4-position of the ring is then removed by reaction, in particular with a sodium methanolate / methanol mixture to give free hydroxyl. It is also possible to envisage deprotection under milder basic conditions (for example K 2 CO 3 / MeOH / H 2 O, Guanidine / EtOH / CH 2 Cl 2 , NEt 3 / MeOH / H 2 O), or even under acidic conditions. (eg HCI sat / MeOH).
  • milder basic conditions for example K 2 CO 3 / MeOH / H 2 O, Guanidine / EtOH / CH 2 Cl 2 , NEt 3 / MeOH / H 2 O
  • acidic conditions eg HCI sat / MeOH.
  • the next step is to cleave the tert-butyldimethylsilyl protecting group from the hemiacetal function, preferably employing tetrabutylammonium fluoride in the presence of acetic acid in tetrahydrofuran. This deprotection is carried out with a yield of 88%.
  • the deprotection of the -OH functions by the benzyl groups can be carried out simultaneously with the deprotection of the -NHZ functions by palladium-carbon catalyzed hydrogenolysis.
  • the method according to the invention therefore makes it possible, for each application envisaged, to prepare a given oligomer which will provide an answer. biological selection and may be used at low doses.
  • the method according to the invention therefore makes it possible to create the oligomers, in a manner, for each biological requirement, and thus to reduce the quantities employed, in particular in the case of elicitric properties.
  • the possible applications of the oligomers according to the invention, and in particular those in unprotected form, concern the entire life sciences sector: pharmaceutical (active ingredients), biomedical (medical devices), food, cosmetics, dietetics, phytosanitary, food packaging.
  • the 2D NMRs and 13 C NMRs were carried out by the NMR center of the Lyon University 1.
  • the calibration of the chemical shifts is done by centering the residual peak of the water at 4.79 ppm, chloroform at 7.26 ppm and methanol at 3.31 ppm.
  • the electrospray mass spectrometry (ES) analyzes were carried out on a MicroMass-Waters LCT spectrometer by the CNRS Central Analysis Service in Vernaizon (69).
  • the elementary analyzes were carried out by the CNRS Central Analysis Service in Vernaizon (69) on microanalysers of their design.
  • Hydrazine acetate (9.8 g, 106 mmol) is added to a solution of 1,3,4,6-tetra-O-acetyl-2-benzyloxycarbonyl-2-deoxy-D-glucopyranose (33.6%). g, 70 mmol) obtained from commercial glucosamine hydrochloride in anhydrous DMF (130 ml). The solution is stirred for 30 min at room temperature and then poured into ice water. The organic phase is extracted with EtOAc (3 ⁇ 350 mL), washed successively with water, saturated aqueous NaHCO 3 solution and then with water, dried (MgSO 4 ) and concentrated under reduced pressure.
  • Compound 8d is prepared following the experimental protocol described for compound 8a.

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Abstract

La présente invention a pour objet de nouveaux oligomères glycosidiques, des monomères utiles pour leur préparation, ainsi qu'un procédé de préparation de tels oligomères et en particulier d'hétéro-oligomères de D-glucosamine et N-acétyl-D-glucosamine, permettant de contrôler la taille, le degré d'acétylation et l'architecture des oligomères obtenus.

Description

HETEROOLIGOMERES DE D-GLUCOSAMINE ET N-ACETYL-D- GLUCOSAMINE, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LEUR
UTILISATION
La présente invention a pour objet de nouveaux oligomères glycosidiques, des monomères utiles pour leur préparation, ainsi qu'un procédé de préparation de tels oligomères.
Les biopolymères, tel que le chitosane, présentent des propriétés biologiques intéressantes. Le chitosane est une fibre d'origine naturelle biodégradable et biorésorbable, obtenue après désacétylation de la chitine. La chitine est un biopolymère de haut poids moléculaire, non toxique, biodégradable et biorésorbable, et c'est avec la cellulose, le polysaccharide le plus répandu dans la nature. La chitine est constituée d'une chaîne co- polymère linéaire dont \a structure contient des monomères de type D- glucosamine et des monomères N-acétyl-D-glucosamine liés par une liaison β-(l-*4). L'extraction de la chitine à partir de carapace de crustacés et/ou de calamars, se fait usuellement par voie chimique, puis la transformation par désacétylation de la chitine dans de la soude concentrée permet d'obtenir du chitosane. Le chitosane est donc obtenu en enlevant suffisamment de groupements acétyle pour permettre à la macromolécule d'être soluble dans la plupart des acides dilués.
La chitine et le chitosane sont connus pour avoir de multiples propriétés biologiques, et sont susceptibles d'applications dans de nombreux domaines, tels que le traitement de l'eau, en pharmacie ou cosmétique, ou encore en agriculture, agroalimentaire ou biotechnologie.
Des applications thérapeutiques de la chitine et du chitosane ont été explorées, ce qui a permis de mettre en évidence leur activité anti-tumorale, anti-bactérienne, hypocholestérolémique ou encore anti-hypertensive. Cependant, leur haut poids moléculaire et leur viscosité élevée pourraient réduire leur absorption dans l'intestin chez l'homme.
C'est pourquoi, des travaux ont été menés pour l'obtention d'oligomères de ΛAacétyl-D-glucosamine et D-glucosamine qui présentent de plus faible poids moléculaire, une plus faible viscosité, ce qui devrait faciliter leur absorption in vivo, ainsi que leur solubilité dans les solutions aqueuses neutres.
La préparation de tels oligomères a, le plus souvent, été réalisée par hydrolyse chimique ou enzymatique de chitine ou chitosane comme décrit par Y-J. Jeon, F. Shahidi, S-K Kim, Food Rev. M, 16(2), 159-176 (2000). De telles techniques conduisent à des mélanges d'oligomères constitués d'unités /V-acétyl-D-glucosamine et D-glucosamine, avec des degrés de polymérisation moyens, mais ne permettent pas un contrôle de la dimension, ni de la distribution le long de la chaîne des deux unités constitutives. Des études ont montré que de tels mélanges d'oligomères de ΛAacétyl-D- glucosamine et/ou D-glucosamine présentaient des propriétés biologiques intéressantes (activités anti-tumorales, activités fongistatiques, activités antimicrobiennes, propriétés élicitrices ...). Pour plus de détails, on pourra se référer à la publication Y-J. Jeon, F. Shahidi, S-K Kim, Food Rev. Int, 16(2), 159-176 (2000).
Une approche par synthèse chimique totale a également été utilisée pour préparer deux oligomères de /V-acétyl-D-glucosamine, de degrés de polymérisation 4 et 6 (cf la publication M. AIy et al., Carbohydr. Res., 331(2001), 129-142). Ce procédé de fabrication décrit dans cette publication ne conduit qu'à des oligomères constitués d'un seul motif élémentaire, nommés homo-oligomères et n'est nullement adapté à la synthèse d'hétéro- oligomères.
Un des objectifs de la présente invention est donc de pallier aux inconvénients de l'art antérieur et de fournir des oligomères de ΛAacétyl-D- glucosamine et de D-glucosamine, dans lesquelles les fonctions -OH, -NH2 ou -NHAc sont éventuellement sous forme protégée, sous forme pure, et ce quelque soit leur degré de polymérisation (DP), leur degré d'acétylation (DA) et la répartition des motifs /V-acétyl-D-glucosamine et D-glucosamine le long de la chaîne polymère.
Selon un de ses aspects l'invention a pour objet des oligomères de formule (I) : R5-P-R4 dans laquelle P est constitué d'au moins deux motifs glycosyle choisis parmi les motifs de formule :
Figure imgf000004_0001
et les motifs de formule :
Figure imgf000004_0002
liés entre eux par une liaison β-(l— 4), dans lesquelles :
- Ri, R2, R'i et R'2 représentent, chacun indépendamment, un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools,
- R3 et R'3 représentent chacun indépendamment :
• un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc,
• ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2,
- ou bien R3 et R'3 représentent chacun indépendamment un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle, étant entendu qu'au moins R3 ou R'3 présent dans l'oligomère est différent du groupe acétyle,
- R4 est un groupe hydroxyle, ou un groupe hydroxyle sous forme protégée de préférence en position β, ou un groupe partant de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy selon une liaison β-(l— 4) avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle,
- et R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools. De façon préférée, l'invention a pour objet les hétéro-oligomères de formule (I), c'est-à-dire les oligomères de formule (I) tels que définis ci- dessus qui comprennent :
- au moins un motifs (Mi) glucosamine, c'est-à-dire que R3 représente H ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, et
- au moins un motifs (M2) ΛAacétyl-D-glucosamine, c'est-à-dire que R'3 représente Ac ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2,
Selon des aspects préférés, les oligomères tels que définis ci-dessus selon l'invention présentent l'une ou l'autre des caractéristiques ci-dessous, ou une combinaison quelconque de ces caractéristiques, lorsqu'elles ne s'excluent pas l'une l'autre :
- l'oligomère répond à l'une ou l'autre des formules ci-dessous
Figure imgf000005_0001
(Ia)
Figure imgf000006_0001
dans lesquelles :
• les motifs glycosyle sont liés entre eux par une liaison β- (1-4)
• Ri, R2, R'i, R'2, R3, R'3, R4 et R5 sont tels que définis précédemment pour les composés de formule (I),
• n et m représentent, chacun indépendamment, 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 et p est égal à 1, 2, 3 ou 4, étant entendu que p*(n+m) est inférieur ou égal à 8, les composés (Ia) et (Ib) dans lesquels n=m=p=l constituent un aspect particulier de l'invention ;
- R3 = H et R'3 = Ac ;
- R3 est un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, de préférence un groupe -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para- chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle ;
- R'3 est un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1--4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, de préférence un groupe dichloroacétyle, chloroacétyle, ou de préférence trichloroacétyle ;
- R5 est choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI, -CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, - Ph ou -C6H4(P-MeO) ;
- R4 est choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CH3)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh, -SEt, -OC(NH)CCI3 ;
- Ri, R'i, R2 et R'2, identiques ou différents, sont choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle ;
- Ri = R2 = R'i = R'2 ;
- Ri, R2, R'i et R'2 représentent un groupe benzyle ;
- R5 est un groupe acétyle ;
- R5 est un atome d'hydrogène ;
- R4 est un groupe te/t-butyldiméthylsilyloxy en position β ;
- R4 est un groupe trichloroacétimidate (-OC(NH)CCI3) en position α ;
- R1 = R2 = R3 = R5 = H, R4 = OH et R'3 = Ac ;
- l'oligomère présente un DP égale à 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 ;
- l'oligomère se présente sous la forme d'un copolymère alterné, d'un copolymère statistique ou d'un copolymère à bloc.
Les oligomères conformes à l'invention sont sous une forme pure, c'est- à-dire qu'ils ne se trouvent pas sous la forme de mélange d'oligomères mais sous la forme d'un unique oligomère de DP et DA donné. Les seules impuretés sont des composés de bas poids moléculaires, tels que des solvants utilisés dans la synthèse ou la purification et présents à moins de 1% en masse.
Les oligomères de formule (I), (Ia) et (Ib) et notamment les dimères ou trimères, dans lesquels les fonctions aminé et -OH sont sous forme protégée pourront, notamment, servir d'intermédiaire pour la synthèse d'autres oligomères. Les oligomères de formule (I), (Ia) et (Ib) dans lesquels Ri = R2 = R3 = R5 = H, R4 = -OH et R'3 = Ac pourront directement être utilisés dans des applications biologiques ou autres.
Selon un autre de ses aspects, la présente invention se propose de fournir des monomères utiles pour la préparation de tels oligomères.
L'invention a donc pour objet un monomère de formule :
Figure imgf000008_0001
dans laquelle :
- R"i et R"2 identiques ou différents sont des groupes protecteurs des alcools,
R"3 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (l-*4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifieraient pas un autre groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc,
- R"4 est un groupe hydroxyle sous forme protégée, de préférence en position β, ou un groupe partant, de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy selon une liaison β-(l→4) avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle,
- et R"5 est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools. Selon des aspects préférés, les monomères (lia) selon l'invention présentent l'une ou l'autre des caractéristiques ci-dessous lorsqu'elles ne s'excluent pas l'une l'autre :
- Rπ 3 est un groupe -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, RM 3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
- R"5 est choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI, -CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-p-CI, -C(CH3)3, - Ph, -C6H4(P-MeO),
- R"4 est choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CH3)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh, -SEt, -OC(NH)CCI3,
- R"i et R"2, identiques ou différents, sont choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle,
- R"i et R"2 représentent un groupe benzyle ;
- R"3 est un groupe benzyloxycarbonyle ;
- R"4 est un groupe partant de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, et R"5 est un groupe protecteur des alcools ; en particulier R"4 est un groupe -OC(NH)CCI3 et R"5 est un groupe acétyle ;
- R"4 est un groupe hydroxyle sous forme protégée, de préférence en position β, et R"5 est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools ; en particulier R"4 est un groupe te/t-butyldiméthylsilyloxy en position β.
L'invention se propose également de fournir un procédé qui permette de préparer des oligomères, et en particulier des hétéro-oligomères de D- glucosamine et /V-acétyl-D-glucosamine, en contrôlant la taille, le degré d'acétylation et l'architecture des oligomères obtenus.
Dans ce contexte, la présente invention a pour objet un procédé de préparation de dimères de formule :
Figure imgf000009_0001
par couplage des monomères suivants :
Figure imgf000010_0001
dans lesquelles :
- R-ii/ R12/ R'n et R'12 représentent, chacun indépendamment, un groupe protecteur des alcools, par exemple, choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle,
- Ri3 et R'13 représentent chacun indépendamment :
" un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, par exemple choisi parmi les groupes -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
" ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, par exemple choisi parmi les groupes dichloroacétyle, chloroacétyle et trichloroacétyle, - Ri4 est un groupe partant, de préférence en position a, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, par exemple choisi parmi les groupements -SPh ou -SEt en position β, ou de préférence -OC(NH)CCb, en position α,
- R'14 est un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh et -SEt,
- et Ri5 est un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(P-MeO).
Selon une de ses variantes, le procédé ci-dessus est mis en oeuvre pour former des hétéro-dimères, c'est-à-dire que :
- soit Ri3 est un groupe protecteur des aminés, tel que précédemment défini, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, et R'i3 est un groupe protecteur des aminés, tel que précédemment défini, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc,
- soit Ri3 est un groupe protecteur des aminés, tel que précédemment défini, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, et R'i3 est un groupe protecteur des aminés, tel que précédemment défini, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2.
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation d'un hétéro-oligomère de /\Aacétyl-D-glucosamine et de D- glucosamine de DP et de DA contrôlés comprenant les étapes suivantes : • un couplage, de façon à former une liaison β-(l→4), entre un monomère ou un oligomère donneur de formule :
««"H (VI) et un monomère ou un oligomère accepteur de formule :
Figure imgf000012_0001
dans lesquelles :
- Rn, R12, R'n et R'12 représentent, chacun indépendamment, un groupe protecteur des alcools, par exemple choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para- chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle,
- Ri6 et R'ie représentent, chacun indépendamment :
• un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, par exemple choisi parmi les groupes -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
• ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, par exemple choisi parmi les groupes dichloroacétyle, chloroacétyle et trichloroacétyle,
- Ri4 est un groupe partant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, par exemple choisi parmi les groupements -SPh ou -SEt en position β, ou de préférence -OC(NH)CCI3, en position α,
- Zi représente un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, - CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(P-MeO) ou bien Z1 représente un résidu glycosyle de formule -Pi-Z3, liés par une liaison β-(l— 4) au motif glycosyle du composé (VI)
- Z2 représente un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, - SPh et -SEt, ou bien Z2 représente un résidu glycosyle de formule -Pi-Z4, liés par une liaison β-(l→4) au motif glycosyle du composé (VII),
- Z3 représente un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(p-MeO),
- Z4 représente un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, - SPh et -SEt,
- Pi et P2 sont, chacun indépendamment constitué d'un motif ou de plusieurs motifs glycosyle, identiques ou différents, liés entre eux par une liaison β- (1—4), et choisis parmi les motifs glucosamine de formule :
Figure imgf000014_0001
et les motifs /\Aacétyl- D-glucosamine de formule :
Figure imgf000014_0002
dans lesquelles Rn, R12, R'n et R'12 sont tels que définis précédemment pour (VI) et (VII), et
• Ri7 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, et par exemple un des groupes cités dans la définition de Ri6 et R'i6
• R'17 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, et par exemple un des groupes cités dans la définition de Ri6 et R'i6
• une déprotection des fonctions aminé pour conduire aux fonctions -NH2 et -NHAc souhaitées et une déprotection des fonctions -OH, selon une stratégie multi-étapes.
Bien entendu, pour que le procédé conduise à la préparation d'hétéro- oligomères de /V-acétyl-D-glucosamine et de D-glucosamine, il est implicite qu'il doit conduire à un oligomère comportant au moins un motif /V-acétyl-D- glucosamine et au moins un motif D-glucosamine. Par conséquent, le procédé met en oeuvre : - soit un couplage entre deux monomères (VI) et (VII) présentant chacun un groupe protecteur des aminés des deux différentes catégories (protection de la fonction NH2 ou protection de la fonction NHAc), c'est-à-dire entre deux monomères (VI) et (VII) dont l'un comprend un groupe protecteur (Ri6 ou R'i6) conduisant après déprotection à NH2 et l'autre un groupe protecteur (R'i6 ou Rie) conduisant après déprotection à NHAc,
- soit un couplage entre un monomère (VI) et un oligomère (VII), l'oligomère (VII) présentant un groupe protecteur (R'i6 ou Ri7 ou R'17) d'une catégorie différente du groupe protecteur (Ri6) du monomère (VI), soit un couplage entre un oligomère (VI) et un monomère (VII), l'oligomère (VI) présentant un groupe protecteur (Ri6 ou Ri7 ou R'i7) d'une catégorie différente du groupe protecteur (R'i6) du monomère
(VII),
- soit un couplage entre deux oligomères (VI) et (VII), et dans ce cas : l'un des oligomères présente au moins un motif du type D- glucosamine protégé et au moins un motif du type ΛAacétyl-D- glucosamine protégé, ou bien un des deux oligomères (VI) ou (VII) ne présente que des motifs du type D-glucosamine protégés, l'autre ne présentant que des motifs du type /V-acétyl-D-glucosamine protégés
L'invention a également pour objet les variantes de ces procédés telles que définies aux revendications 21 à 36.
Le procédé de préparation selon l'invention, permet donc de préparer, de manière parfaitement contrôlée, toutes les structures possibles d'oligomères purs constitués de /V-acétyl-D-glucosamine et de D- glucosamine, avec un degré de polymérisation compris entre 2 et 8.
Le procédé selon l'invention est particulièrement adapté à la fabrication d'oligomères dérivés de chitine et chitosane, c'est-à-dire, impliquant deux motifs différents, la /V-acétyl-D-glucosamine et la D-glucosamine, Ce procédé permet de constituer toute une bibliothèque d'oligomères à dimensions et architectures parfaitement contrôlées, quant à leur composition et quant à la position des deux entités constitutives le long de la chaîne oligomère. En effet, les oligomères sont préparés par synthèses chimiques multi-étapes impliquant trois phases. La première correspond à la synthèse de quatre monomères, dont certaines fonctions chimiques sont spécifiquement protégées, afin de jouer le rôle de donneurs ou accepteurs de /V-acétyl-D- glucosamine ou D-glucosamine. La deuxième phase présente toutes les combinaisons possibles de couplages entre un donneur et un accepteur de ΛAacétyl-D-glucosamine ou D-glucosamine conduisant à l'obtention d'oligomères dits protégés. Quatre dimères différents sont tout d'abord préparés, ensuite ces dimères vont servir de brique de construction, les couplages pouvant alors être réalisés entre un monomère et un dimère ou deux dimères, la seule condition étant de mettre en œuvre un donneur (caractérisé par un groupe partant -LG en position 1 du glycosyle) et un accepteur (caractérisé par une fonction -OH libre en position 4 du glycosyle), et ainsi de suite. Les oligomères nouvellement synthétisés peuvent être convertis en accepteurs ou donneurs par simples modifications chimiques, pour être ensuite utilisés en tant que tels pour la préparation d'oligomères de degrés de polymérisation supérieurs. Enfin, la troisième phase consiste à supprimer sélectivement les différentes protections des fonctions chimiques introduites au cours de la première phase, pour conduire, in fine, aux oligomères souhaités.
Le procédé selon l'invention comprend donc trois phases : o lere phase : préparation de quatre motifs élémentaires o 2eme phase : couplages des motifs élémentaires o 3eme phase : clivage des groupements protecteurs et obtention des oligomères
Quelle que soit la taille des oligomères à préparer, une première étape consiste à préparer des monomères donneurs et accepteurs qui vont servir à la construction des oligomères. Quatre monomères sont nécessaires pour effectuer toutes les constructions possibles. Ces monomères seront, par la suite, utilisés comme motifs élémentaires pour préparer les premiers oligomères de DP 2, puis de DP supérieurs. Deux de ces monomères jouent le rôle de donneur et d'accepteur de /V-acétyl-D-glucosamine, et les deux autres de donneur et d'accepteur de D-glucosamine. De façon avantageuse, quatre monomères de type monosaccharide sont synthétisés à partir d'une seule molécule commune et commerciale, le chlorhydrate de la D- glucosamine. Ces monomères se caractérisent par des groupements protecteurs des fonctions alcool et aminé très spécifiques. On distinguera deux types de groupements protecteurs, les temporaires et les permanents. Ces groupements, sont de préférence, choisis de manière à répondre à différents critères comme la facilité d'introduction/suppression, la compatibilité entre eux et leur efficacité à orienter le couplage glycosidique (1→4) en β.
De façon préférée, les groupements protecteurs des fonctions alcool sont choisis parmi :
- les groupements protecteurs temporaires : acétyle (Ac), benzylidène (PhCH), -C(NH)CCI3, te/f-butyldiméthylsilyle (TBS)
- les groupements protecteurs permanents : benzyle (Bn).
De façon préférée, les groupements protecteurs des fonctions aminé sont choisis parmi le trichloroacétyle (TCA) qui conduit après déprotection au groupe -NHAc et le benzyloxycarbonyle (Z) qui conduit après déprotection au groupe -NH2.
D'autres types de protection peuvent, bien entendu être envisagée. La protection de la fonction alcool en position 4 (4-OH) peut encore être réalisée sous la forme d'une fonction ester (OC(O)Ra), telle que : o Ra = -CH3 : ester acétate o Ra = -CH2CI = ester chloroacétate o Ra = -CHCI2 : ester dichloroacétate o Ra = -CCI3 : ester trichloroacétate o Ra = -CF3 : ester trifluoroacétate o Ra = -CH2OMe : ester méthoxyacétate o Ra = -CH2OCPh3 : ester tri phenyl méthoxyacétate o Ra = -CH2OC6H4-p-CI : ester p-chlorophenoxyacétate o Ra = (CH3)3C- : ester pivaloate o R' = -Ph : ester benzoate o Ra = P-MeOCeH4- : ester p-méthoxybenzoate Concernant la fonction alcool en position anomérique, elle peut encore être protégée sous la forme Rb : o Rb = -OSi(CH3)2C(CH3)3 : éther de t-buty Idi méthylsi IyIe, en position béta o Rb = -OSiPh2C(CH3)3 : éther de t-butyldiphénylsilyle, en position béta o Rb = -OC6H4-p-OMe : éther de p-méthoxyphényle, en position béta o Rb = -OCH2CH=CH2 : éther d'allyle, en position béta o Rb = -OCH2CH2CH2CH=CH2 : éther de n-pentényle, en position béta o Rb = -SPh : thiophényle, en position béta o Rb = -SEt : thioéthyle, en position béta o Rb = -OC(NH)CCI3, en position alpha
II apparaît donc que dans le cadre de l'invention, une fonction hydroxyle, sous forme protégée, qui désigne un groupement qui après déprotection conduit à une fonction -OH, peut notamment se trouver sous la forme -OR, mais également -SR.
Les groupes -SPh, -SEt, et en particulier -OC(NH)CCI3, pourront servir de groupe partant.
La protection des deux fonctions alcool en positions 3 (3-OH) et 5 (5- OH) peut encore être réalisée sous la forme d'une fonction ether (-ORc), telle que : o Rc = C6H4CH2- : groupe benzyle o Rc = P-MeOCoH4CH2- : groupe para-méthoxybenzyle o Rc = P-NOzCeH4CH2- : groupe para-nitrobenzyle o Rc = P-BrCeH4CH2- : groupe para-bromobenzyle o Rc = P-CIC6H4CH2- : groupe para-chlorobenzyle o Rc = 2,4-CI2COH4CH2- : groupe 2,4-dichlorobenzyle La fonction aminé (-NH2) peut être protégée sous la forme d'une fonction carbamate (-NHC(O)ORd), telle que : o Rd = COH4CH2- : groupe benzyle o Rd = P-MeOCoH4CH2- : groupe para-méthoxybenzyle o Rd = P-NO2C6H4CH2- : groupe para-nitrobenzyle o Rd = p-BrC6H4CH-2 : groupe para-bromobenzyle o Rd = P-CIC6H4CH2- : groupe para-chlorobenzyle o Rd = 2,4-CI2C6H4CH2- : groupe 2,4-dichlorobenzyle La fonction acétamide (-NHAc) peut être protégée sous la forme d'une fonction amide (-NHRe), telle que : o Re = CCI3CO- : groupe trichloroacétyle o Re = CHCI2CO- : groupe dichloroacétyle o Re = CH2CICO- : groupe chloroacétyle
Pour les méthodes de déprotections, on pourra se référer à T. W. Greene, P. G. M. Wuts, protective groups in organic synthesis (3ème Ed.), Edition Wiley & Sons, 1999, 779 pages.
La description qui va suivre, en référence aux fïg. 1 à 6, détaille la synthèse des quatre monomères protégés avec ces groupes protecteurs préférés.
La fig. 1 illustre une synthèse des monomères dérivés de GIcNAc. La fig. 2 illustre une synthèse des monomères dérivés de GIcN. La fig. 3 illustre une synthèse de disaccharide GICN-GICNAC. La fig. 4 illustre une synthèse du disaccharide GIcN-GIcN. La fig. 5 illustre une synthèse du disaccharide GICNAC-GICN. La fig. 6 illustre une synthèse du disaccharide GIcNAc-GIcNAc. La préparation de l'accepteur et du donneur de /V-acétyl-D-glucosamine suit un schéma réactionnel multi-étapes commun donné sur la fig. 1 annexée.
Dans un premier temps, la fonction aminé du chlorhydrate de la D-glucosamine est transformée en fonction trichloroacétamide par réaction avec du chlorure de trichloroacétyle en milieu basique. Les fonctions hydroxyle sont ensuite acétylées dans les conditions classiques (anhydride acétique/pyridine) sans purification préalable. Les deux étapes suivantes consistent à protéger la position anomérique par un groupement tert- butyldiméthylsilyle en position β, d'abord par réaction avec de l'acétate d'hydrazine dans du Λ^/V-diméthylformamide permettant le clivage sélectif de la fonction acétate en position 1, puis par réaction de l'intermédiaire hémiacétal avec du chlorure de ήert-butyldiméthylsilyle, en présence d'imidazole dans du N,N-diméthylformamide. Ainsi, le chlorhydrate de la D- glucosamine est converti en composé 1 en quatre étapes.
Le composé 1 subit, ensuite, une désacétylation totale en présence de méthanolate de sodium dans du méthanol. Les fonctions hydroxyle en positions 4 et 6 du triol obtenu après neutralisation sur résine acide sont protégées par un groupe benzylidène par réaction avec du 2,2- diméthoxybenzaldéhyde dans des conditions acides, pour conduire au composé 2 avec un rendement de 85 % sur les deux étapes. La benzylation de la fonction hydroxyle en position 3 par du bromure de benzyle en présence d'hydrure de sodium conduit au composé 3 avec un rendement de 73%. La réaction du composé 3 avec du triéthylsilane en présence d'acide trifluoroacétique provoque l'ouverture régiosélective du cycle benzylidène en position 4 et l'obtention du composé 4. Ce composé jouera le rôle d'accepteur de /V-acétyl-D-glucosamine dans la suite du procédé de fabrication.
Le donneur de /V-acétyl-D-glucosamine (composé 5) est, quant à lui, synthétisé à partir du composé 4 en 3 étapes. Tout d'abord, la fonction hydroxyle en position 3 est acétylée par le mélange anhydride acétique/pyridine avec un rendement de 85%. Le groupe tert- butyldiméthylsilyle est ensuite clivé en présence de fluorure de tétrabutylammonium et d'acide acétique pour donner un intermédiaire hémiacétal, qui réagi avec du trichloroacétonitrile dans des conditions basiques pour conduire à l'imidate de configuration α (composé 5).
Les deux monomères qui joueront le rôle d'accepteur (composé 4') et de donneur de D-glucosamine (composé 5') sont synthétisés selon un schéma réactionnel multi-étapes présenté sur la fig. 2 annexée. Il est très similaire à celui décrit dans le cas de la synthèse des deux monomères de N- acétyl-D-glucosamine. Deux points diffèrent cependant. Le premier concerne l'utilisation d'un nouveau groupement protecteur de la fonction aminé, le benzyloxycarbonyle (Z), introduit par réaction avec du chloroformate de benzyle dans des conditions basiques. La seconde concerne les conditions réactionnelles de benzylation du composé 2'. Etant donné que la fonction carbamate NHZ est sensible aux conditions très basiques, la méthode classique de £>benzylation (bromure de benzyle/hydrure de sodium) ne peut être employée. Le groupe benzyle a donc été introduit dans des conditions basiques douces (bromure de benzyle/oxyde de baryum, hydroxyde de baryum).
Le couplage de monomères consiste à faire réagir un monomère 'accepteur' avec un monomère 'donneur' pour conduire à un oligomère protégé de DP 2. Cette réaction est, avantageusement, réalisée dans des conditions anhydres et catalysée par un acide de Lewis, de préférence le trifluorométhanesulfonate de triméthylsilyle (TMSOTf) ou le trifluorure de bore éthéré (BFs-Et2O). En combinant, les accepteurs et les donneurs de N- acétyl-D-glucosamine et D-glucosamine, quatre structures différentes d'oligomères protégés sont ainsi obtenues, comme mentionné dans le TABLEAU 1 ci-après. TABLEAU 1
Figure imgf000022_0001
Carbohydr. Res. 337 (21-23), 2002, 1893-1916 et par Ratner D. ét al, dans Org. Lett. 5 (24), 2003, 4717-4720 et le composé 5 par Ratner D. et al. dans Org. Lett. 5 (24), 2003, 4717-4720.
La préparation des composés 6a, 6b et 6c se fait, avantageusement en présence de BF3.Et2Û, la préparation du composé 6d, se faisant avantageusement en présence de TMSOTf.
Dans le cadre de l'invention, une fois que les oligomères souhaités, de DP 2 ou de DP supérieur, sont obtenus sous forme protégée, cette forme protégée comportant à la fois des fonctions aminé et alcool spécifiquement protégées, les dernières étapes vont consister à déprotéger cesdites fonctions. L'obtention des oligomères cibles implique donc, dans une dernière phase, de supprimer les différentes protections en employant des réactions spécifiques selon une stratégie multi-étapes. Les fig. 3 à 6 annexées illustrent ces étapes de déprotection dans le cas des composés 6a, 6b, 6c et 6d respectivement.
Dans le cas où l'oligomère présente des fonctions -NHTCA, la première étape de déprotection consiste à convertir les fonctions trichloroacétamide, en fonction acétamide. Cette déprotection est effectuée par réduction, avantageusement en utilisant de l'hydrure de triéthylétain, en présence de 2,2'-azobisisobutyronitrile (AIBN) dans le benzène.
Le groupe acétyle sur la position 4 du cycle est ensuite enlevé par réaction, notamment avec un mélange méthanolate de sodium / méthanol pour conduire à l'hydroxyle libre. On peut également envisager une déprotection dans des conditions basiques plus douces (par exemple K2CO3 / MeOH /H2O ; Guanidine / EtOH / CH2CI2 ; NEt3 / MeOH / H2O), voire dans des conditions acides (par exemple HCI sat. / MeOH).
L'étape suivante consiste à cliver le groupe protecteur tert- butyldiméthylsilyle de la fonction hémiacétal, en employant, de préférence, du fluorure de tétrabutylammonium en présence d'acide acétique dans du tétrahydrofurane. Cette déprotection est réalisée avec un rendement de 88%.
Enfin, la déprotection des fonctions -OH, par les groupes benzyle, peut être réalisée simultanément avec la déprotection des fonctions -NHZ, par hydrogénolyse catalysée par du palladium sur charbon.
Etant donné que des groupes protecteurs orthogonaux et des réactions de déprotection sélectives sont utilisés, l'ordre des étapes de déprotection peut être modifié et adapté aux groupes protecteurs choisis. Cependant, il est préférable de conserver l'étape d'hydrogénolyse à la fin de la synthèse.
Le procédé selon l'invention permet donc, pour chaque application envisagée, de préparer un oligomère donné qui apportera une réponse biologique sélectionnée et pourra être utilisé à faible dose. Le procédé selon l'invention permet donc de créer, à façon, les oligomères pour chaque besoin biologique, et ainsi de diminuer les quantités employées, notamment dans le cas de propriétés élicitrices. Les applications possibles des oligomères selon l'invention, et en particulier, ceux sous forme non protégée, concernent tout le secteur des sciences de la vie : pharmaceutique (principes actifs), biomédicale (dispositifs médicaux), agroalimentaire, cosmétique, diététique, phytosanitaires, emballages alimentaires.
Les exemples qui suivent permettent d'illustrer l'invention, et n'ont aucun caractère limitatif.
Tous les réactifs et les solvants ont été obtenus chez Aldrich et Acros. Les réactions ont été suivies par chromatographies sur couche mince, en utilisant un gel de silice déposé sur plaque d'aluminium (Merck 60 F254). La révélation a été réalisée par pulvérisation d'une solution alcoolique d'acide sulfurique (10% en volume dans l'éthanol) suivie d'un chauffage à 180 0C. Une révélation par UV a également été utilisée pour certains composés. Les purifications par chromatographies ont été effectuées sur colonne de gel de silice (Merck Gerudan silica gel Si 60, 40-60 μm). Les analyses par RMN ont été réalisées sur un spectromètre Brucker AC, à 75 MHz pour la RMN 13C et à 300 MHz pour la RMN 1H. Les RMN 2D et les RMN 13C ont été réalisées par le Centre de RMN de l'Université Lyon 1. Pour la description des spectres RMN 1H, la calibration des déplacements chimiques est faite en centrant le pic résiduel de l'eau sur 4,79 ppm, du chloroforme sur 7,26 ppm et du méthanol sur 3,31 ppm. Les analyses de spectrométrie de masse en mode électrospray (ES) ont été réalisées sur un spectromètre MicroMass-Waters LCT par le Service Central d'Analyse du CNRS à Vernaizon (69). Les analyses élémentaires ont été réalisées par le Service Central d'Analyse du CNRS à Vernaizon (69) sur des microanalyseurs de leur conception.
Composé 1
(3,4,6-Tri- *>-acétyl-2-désoxy- 1- O- te/t-butyldiméthylsîlyl-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranose
De l'acétate d'hydrazine (4,7 g, 50,6 mmol) est ajouté à une solution de l,3,4,6-tetra-O-acétyl-2-désoxy-2-trichloroacétamido-D-glucopyranose (16,2 g, 32,9 mmol) obtenu selon Carbohydr. Res., 1994, 260, 189-202, dans du DMF anhydre (100 ml_). La solution est agitée pendant 30 min à température ambiante, puis versée dans de l'eau glacée. La phase organique est extraite avec de l'acétate d'éthyle (EtOAc, 3x250 mL), lavée successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NAHCO3 puis de l'eau, séchée (MgSO4), et concentrée sous pression réduite.
Un mélange contenant l'hémiacétal obtenu, de l'imidazole (9,0 g, 132,0 mmol), et du chlorure de fe/t-butyldiméthylsilyl (9,9 g, 65,9 mmol) dans du DMF anhydre (120 mL) est agité pendant 8 h à température ambiante, puis dilué dans EtOAc (3x250 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse de HCL (5%) puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (1:1) et cristallisé dans un mélange EtOAc- Heptane pour donner le composé 1, sous la forme d'une poudre blanche (11,0 g, 60% 2 étapes) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,74 (d, IH,
Figure imgf000025_0001
Hz, WH)1 5,30 (dd, IH,
Figure imgf000025_0002
Hz, H-3), 5,09 (dd, IH, 74/5=10,0 Hz, H-4), 4,88 (d, IH, Λ,2=7,9 Hz, H-I), 4,23 (dd, IH, Λeb=5,7 Hz,
Figure imgf000025_0003
Hz, H-6a), 3,95 (m, IH, H-2), 3,74 (m, IH, H-5), 2,08 (s, 3H, CMCO), 2,04 (s, 3H, CM∞), 2,03 (s, 3H, CZT3CO), 0,88 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,13 (s, 3H, CMSi), 0,10 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 171,30 (CO, Ac), 170,75 (CO, Ac), 169,44 (CO, Ac), 161,97 ((X)NH), 95,89 (C-I), 92,47 ((XI3), 72,13 (C-3), 71,81 (C-5), 68,92 (C-4), 62,58 (C-6), 57,96 (C-2), 25,62 ((CHs)3CSi), 20,86 (CH3CO), 20,84 (CH3CO), 20,79 (CH3CO), 17,96 ((CHs)3CSi), -4,13 (CH3Si), -5,13 (CH3Si); ISMS /77/z 604, [MH-K+], 588, [M+Na+], 434, [M-OTBDMS]+ pour 35CI; Anal. CaIc. pour C2C^Cl3NO9Si: C, 42,52; H, 5,71; N, 2,49; trouvé C, 42,89; H, 5,76; N, 2,42. Composé 2
4,6-0-Benzylîdene-2-deoxy-l-^te/f-butyldiméthylsilyl-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranose
Une suspension du composé 1 (10,7 g, 18,9 mmol) dans le méthanol (100 ml_) est traitée pendant 1 h à température ambiante avec NaOMe (IM, 3 ml_). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR- 120 (H+), filtrée et concentrée pour donner le triol correspondant. De l'acide camphorsulfonique (88 mg, 0,4 mmol) est ajouté à une solution contenant le triol et du 2,2-diméthoxybenzaldéhyde (3,4 mL, 22,6 mmol) dans de l'acétonitrile (120 mL). La solution est agitée pendant 1 h à température ambiante. De la triéthylamine est ajoutée (160 μL) et le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (2:1), pour donner le composé 2, sous la forme d'une huile incolore (8,25 g, 83% à partir du composé 1) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,65-7,36 (m, 5H, Ph), 6,94 (d, IH, Jι,m 7,4 Hz, HH)1 5,53 (s, IH, PhCH), 5,09 (d, IH, Λ,2 7,7 Hz, H-I), 4,31 (dd, IH, Λeeq 4,6 Hz, J6eq,6ax 10,5 Hz, H-6eq), 4,26 (m, IH, J1 Λ 8,6 Hz, JιtZ 10,1 Hz, H-3), 3,77 (dd, IH, *>&&£ Hz), 3,53-3,48 (m, 3H, H-4, H-5, H-2), 3,01 (si, IH, Orf3), 0,89 (s, 9H, (CZTs)3CSi), 0,13 (s, 3H, CMSi), 0,11 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 162,29 (COCCI3), 137,09 (C aromatique), 129,48 - 126,46 (CH aromatique), 102,01 (CHPh), 95,34 (C-I), 92,59 (CCI3), 81,73 (C-4), 69,74 (C-3), 68,66 (C-6), 66,31 (C-5), 61,61 (C-2), 25,71 ((CHs)3CSi), 17,94 ((CH3)3CSi), -4,04 (CH3Si), -5,04 (CH3Si); ISMS (maldi) m/z. 548,07 [M+Na+]; Anal. CaIc. pour C2IH30CI3NO6Sr. C, 47,87; H, 5,74; N, 2,67; trouvé C, 47,51; H, 5,53; N, 2,47.
Composé 3
3-0-Benzyl-4,6-0-benzylidène-2-désoxy-l-0-fe/f- butyldiméthylsilyl-2-trichloroacétamido-β-D-glucopyranose
De l'hydrure de sodium (60% dans de l'huile minéral, 1,2 g, 29,3 mmol) est additionné par fraction à O0C à une solution du composé 2 (7,4 g, 14,1 mmol) dans du DMF anhydre (55 mL). Le mélange est agité pendant 30 min à cette température. Du bromure de benzyle (2,2 mL, 18,4 mmol) est ensuite ajouté, et le mélange est agité pendant 30 min à O0C, puis pendant 90 min à température ambiante. Du méthanol (5 mL) est ajouté avec précaution, puis le mélange est dilué dans EtOAc (400 mL), lavé deux fois avec de l'eau, séché (MgSO^ et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane- EtOAc (5:1) et cristallisé dans un mélange EtOAc-Heptane pour donner le composé 3, sous la forme d'une poudre blanche (6,4 g, 73%); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,53-7,27 (m, 1OH, Ph), 6,86 (d, IH, _£,NH 7,9 Hz, HH), 5,59 (s, IH, PhCH)1 5,18 (d, IH, Jlr2 7,9 Hz, H-I), 4,79 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,32 (dd, IH, Λeeq 4,9 Hz, J6eq,6ax 10,6 Hz, H-6eq), 4,23 (m, IH, J&,4 8,9 Hz, jfe,3 10,3 Hz, H-3), 3,81 (dd, IH, ^,6ax 10,2 Hz, H-6ax), 3,90 (dd, IH, J4,5 9,6 Hz, H-4), 3,58-3,45 (m, 2H, H-2, H-5), 0,91 (s, 9H, (CHs)3CSl), 0,11 (s, 3H, CH3Sl), 0,09 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 161,83 (COCCI3), 137,98, 137,35 (C aromatique), 129,18-126,15 (CH aromatique), 101,38 (CHPh), 95,15 (C-I), 92,58 (CCI3), 82,84 (C-4), 75,79 (C-3), 74,75 (CH2Ph), 68,79 (C-6), 66,25 (C-5), 60,99 (C-2), 25,72 ((CH3)3CSi), 17,95 ((CH3)3C5i), - 4,07 (CH3Si), -5,06 (CH3Si); ISMS (maldi) m/z. 638,13 [M+Na+]; Anal. CaIc. pour C28H36CI3NO5Si: C, 54,45; H, 5,88; N, 2,28; trouvé C, 54,46; H, 5,97; N, 2,38.
Composé 4
3,6-Dî-^benzyl-2-désoxy-l-0-fe/*-butyldiπiéthy.silyl-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranose
Un mélange constitué du composé 3 (17,4 g, 28,2 mmol), de tamis moléculaire (3Â) et de triéthylsilane (45 mL, 282 mmol) dans CH2CI2 anhydre (250 mL) est refroidi à O0C. De l'acide trifluoroacétique (22 mL, 285 mmol) est ajouté et le mélange est agité pendant 1 h à 00C. De la triéthylamine (3,3 mL) est additionnée et le mélange est dilué dans du CH2CI2 (150 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (5:2) pour donner le composé 4, sous la forme d'une huile incolore qui cristallise lentement. Une poudre blanche est obtenu par cristallisation du résidu dans un mélange EtOAc-Heptane (14,19 g, 81%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,35-7,24 (m, 1OH, Ph), 6,98 (d, IH, _£,NH 8,1 Hz, NAfl, 5,02 (d, IH, Jlι2 7,9 Hz, H-I), 4,75 (ABq, 2H, CMPh), 4,56 (ABq, 2H, CMPh), 3,92 (dd, IH, ^4 8,5 Hz, Ji1I 10,5 Hz, H-3), 3,71-3,64 (m, 3H, H-4, H-6a, H-6b), 3,58-3,48 (m, 2H, H-2, H-5), 2,95 (si, IH, O/f4), 0,88 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,12 (s, 3H, CMSi), 0,09 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 161,78 (O)CCI3), 138,22, 137,78 (C aromatique), 128,73-127,84 (OH aromatique), 94,72 (C- 1), 92,69 ((XI3), 79,69 (C-3), 74,60, 73,92 (CH2Ph), 73,79 (C-5), 73,65 (C- 4), 70,84 (C-6), 60,41 (C-2), 25,78 ((OH3)3CSi), 18,00 ((CH3)3C5i), -4,02 (OH3Si), -5,04 (OH3Si); ISMS (maldi) m/z. 642,05 [M+Na+]; Anal. CaIc. pour C28H38CI3NO6Si: C, 54,33; H, 6,19; N, 2,26; trouvé C, 54,53; H, 6,21; N, 2,16.
Composé 5
^^Acétyl-B^-di-^-benzyl-Z-désoxy-Z-trichloroacétamido-l- 0-trichloroacétimidoyl- α-D-glucopyranose
L'acétylation menée sur le composé 4 dans les conditions classiques (Ac2O dans la pyridine), suivie par la concentration du mélange sous pression réduite et la cristallisation du résidu dans un mélange EtOAc-Heptane donne le composé 4-£>-acétyl-3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-l-0-.îe/"f- butyldiméthylsilyl-2-trichloroacétamido-β-D-glucopyranose (3,1 g, 95%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,34-7,21 (m, 1OH, Ph), 6,96 (d, IH, Jι,m 7,5 Hz, HH)1 5,06 (d, IH, 71/2 7,7 Hz, H-I), 5,06 (dd, IH, J4,s 9,8 Hz, j&,4 8,9 Hz, H-4), 4,60 (ABq, 2H, CMPh), 4,52 (s, 2H, CMPh), 4,29 (dd, IH, J1^ 10,5 Hz, H-3), 3,67 (m, IH, J5^ 4,8 Hz, ^,6a 4,8 Hz, H-5), 3,55 (d, 2H, -/6a,6b<0,5 Hz, H-6b, H-6a), 3,44 (m, IH, H-2), 1,87 (s, 3H, CMCO), 0,89 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,14 (s, 3H, CMSi), 0,11 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 169,91 (CO, Ac), 161,87 ((X)CCI3), 138,00, 137,73 (C aromatique), 128,62-127,78 (CH aromatique), 94,14 (C-I), 92,51 (CCI3), 77,15 (C-3), 74,16, 73,68 (CH2Ph), 73,43(C-5), 71,77 (C-4), 69,86 (C-6), 60,94 (C-2), 25,76 ((CH3)3CSi), 21,01 (CH3CO), 17,99 ((CHs)3CSi), -4,05 (CH3Si), -5,11 (CH3Si); ISMS (maldi) m/z. 682,15 [Mn-Na+]; Anal. CaIc. pour C30H40CI3NO7Si: C, 54,50; H, 5,97; N, 2,13; trouvé C, 54,09; H, 6,08; N, 2,16.
Un mélange comprenant le composé isolé ci-dessus (1,37 g, 2,1 mmol), de l'acide acétique (145 μl_, 2,5 mmol) et du Bu4NF.3H2O (785 mg, 2,5 mmol) dans du THF anhydre (18 ml_) est agité à 00C pendant 14 h. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (60 ml_), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Un mélange de l'hémiacétal obtenu, de CCI3CN (2 mL, 20 mmol.) et de DBU (77 μl_, 0,5 mmol) dans CH2CI2 anhydre (10 mL) est agité pendant 1 h à 00C, puis concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane- EtOAc (5:2) et de Et3N (0,2 %) pour donner le composé 5, sous la forme d'une huile incolore (1,34 g, 94%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 8,77 (s, IH, NZ/imidate), 7,35-7,27 (m, 1OH, Ph), 6,60 (d, IH, _£,NH 8,5 Hz, WH)1 6,47 (d, IH, Jlι2 3,4 Hz, H-I), 5,38 (dd, IH, J4,5 9,8 Hz, Jξ»,4 9,6 Hz, H-4), 4,65 (ABq, 2H, CZT2Ph), 4,51 (ABq, 2H, CZT2Ph), 4,46 (m, IH, jfe,3 10,7 Hz, H-2), 4,06 (m, IH, H-5), 4,03 (dd, IH, H-3), 3,60 (dd, IH, J5^ 3,3 Hz, 76a,6b 10,8 Hz, H-6a), 3,56 (dd, IH, ^,6b 4,2 Hz, H-6b), 1,96 (s, 3H, CZr3CO); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 169,40 (CO, Ac), 161,87 (COCCI3), 160,01 (C=NH), 137,66, 137,09 (C aromatique), 128,86-127,90 (CH aromatique), 94,47 (C-I), 92,13 (CCI3 trichloroacetamido), 90,83 (CCI3 imidate), 76,09 (C-3), 73,72, 73,01 (CH2Ph), 72,26 (C-5), 70,00 (C-4), 68,54 (C-6), 53,50 (C-2), 20,95 (CH3CO); ES+MS m/z. 530, [M-CCI3CONH]+; Anal. CaIc. pour C26H26CI6N2O7: C, 45,18; H, 3,79; N, 4,05; trouvé C, 45,09; H, 3,84; N, 4,12. Composé l'
3λ4,6-Trî-Oacétyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l-0- te/?-butyldîméthylsilyl-β-D-glucopyranose
L'acétate d'hydrazine (9,8 g, 106 mmol) est ajouté à une solution de l,3,4,6-tetra-0-acétyl-2-benzyloxycarbonyl-2-désoxy-D-glucopyranose (33,6 g, 70 mmol) obtenu à partir du chlorhydrate de glucosamine commercial, dans du DMF anhydre (130 ml_). La solution est agitée pendant 30 min à température ambiante, puis versée dans de l'eau glacée. La phase organique est extraite avec EtOAc (3x350 mL), lavée successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NAHCO3 puis de l'eau, séchée (MgSO4), et concentrée sous pression réduite. Un mélange contenant l'hémiacétal obtenu, de l'imidazole (14,3 g, 209 mmol), et du chlorure de tert- butyldiméthylsilyl (15,8 g, 105 mmol) dans du DMF anhydre (120 mL) est agité pendant 5 h à température ambiante, puis dilué dans EtOAc (3x300 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse de HCL (5%) puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane- EtOAc (2:1) et cristallisé dans un mélange EtOAc-Heptane pour donner le composé V1 sous la forme d'une poudre blanche (23,2 g, 60% sur les 2 étapes) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,39-7,29 (m, 5H, Ph), 5,21 (m, IH, HH), 5,07-5,01 (m, 3H, H-3, H-4, H-I), 4,98 (m, 2H, CMO); 4,19 (dd, IH, J;,6b=5,8 Hz, 76a,6b=12,l Hz, H-6b), 4,11 (dd, IH, ^,6a=2,6 Hz, H-6a), 3,68 (m, IH, H-2), 3,57 (m, IH, H-5), 2,07 (s, 3H, CMCO), 2,02 (s, 3H, CH3CO)1 1,97 (s, 3H, CM∞), 0,86 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,09 (s, 3H, CMSi), 0,06 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 170,89 (CD, Ac), 170,78 ((X), Ac), 169,65 ((X), Ac), 155,81 ((ONH), 136,36 (C aromatique), 128,59, 128,24 (Oi aromatique), 96,36 (C-I), 72,19 (C-3), 71,86 (C-5), 69,23 (C-4), 66,99 (OH2O), 62,64 (C-6), 58,16 (C-2), 25,61 ((CHs)3CSi), 20,84 (CH3CO), 20,79 (OH3CO), 20,74 (OH3CO), 18,01 ((CH3)3CSi), -4,23 (CH3Si), -5,29 (OH3Si); ISMS (maldi) m/z. SIb1Tl1 [M+Na+]; Anal. CaIc. pour C26H39NOi0Si: C, 56,40; H, 7,09; N, 2,54; trouvé C, 56,03; H, 7,05; N, 2,89. Composé 2'
4,6-OBenzylidene-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l- Ote/t-buty.diméthylsilyl-β-D-glucopyranose
Une suspension du composé l' (23,2 g, 42 mmol) dans le méthanol (250 ml_) est traitée pendant 1 h à température ambiante avec NaOMe (IM, 5 mL). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR- 120 (H+), filtrée et concentrée pour donner le triol correspondant. De l'acide camphorsulfonique (395 mg, 1,7 mmol) est ajouté à une solution contenant le triol et du 2,2-diméthoxybenzaldéhyde (7,6 mL, 50,6 mmol) dans de l'acétonitrile (260 mL). La solution est agitée pendant 18 h à température ambiante. De la triéthylamine (240 μL) est ajoutée et le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu cristallise dans un mélange Heptane-EtOAc, pour donner le composé 2', sous la forme d'une poudre blanche (19,82 g, 91% à partir du composé 1) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,51-7,32 (m, 10H, Ph), 5,50 (s, IH, PhC^, 5,08 (m, 2H, CMO); 4,99 (d, IH, _&,NH 7,5 Hz, HH), 4,83 (m, IH, H-I), 4,27 (dd, IH, J5^ 4,9 Hz, J6eq,6ax 10,4 Hz, H-6eq), 4,04 (m, IH, H-3), 3,75 (dd, IH, ^,6aχ 10,2 Hz, H-6ax), 3,54 (dd, IH, As 9,2 Hz, J3n 9,1 Hz, H-4), 3,46 (m, IH, H-5), 3,34 (m, IH, H-2), 3,18 (si, IH, OH- 3), 0,87 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,09 (s, 3H, CMSi), 0,06 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 156,57 ((O2CH2PH), 137,26, 136,28 (C aromatique), 129,34-126,51 (CH aromatique), 100,71 (CHPh), 96,39 (C-I), 81,59 (C-4), 70,94 (C-3), 68,75 (C-6), 67,15 CH2O, 66,34 (C-5), 60,85 (C-2), 25,65 ((CH3)3CSi), 17,99 ((CH3)3CSi), -4,11 (CH3Si), -5,23 (CH3Si); ISMS (maldi) m/?. 538,22 [MH-Na+]; Anal. CaIc. pour C27H37NO7Si: C, 62,89; H, 7,23; N, 2,73; trouvé C, 62,56; H, 7,33; N, 2,71.
Composé 3'
3-O-Benzyl-4f6-O-benzylîdène-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2- désoxy-1-O-fe/t-butyldiméthylsilyl-β-D-glucopyranose
Une solution du composé 2' (7,33 g, 14,2 mmol) dans du DMF anhydre (100 mL) est agitée pendant 7 h à température ambiante en présence d'oxyde de baryum (8,72 g, 56,9 mmol), d'hydroxyde de baryum octahydraté (2,36 g, 7,5 mmol) et de bromure de benzyle (2,2 mL, 18,5 mmol). De la célite est ajoutée et le mélange est agité pendant 30 min puis filtré. Le résidu est lavé avec EtOAc (3x100 mL). La phase organique est ensuite successivement lavée avec de l'eau, une solution aqueuse de HCI (5%) puis de l'eau, séchée (MgSO4), et concentrée. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (3:1) pour donner le composé 3 qui cristallise dans un mélange Et2O-Heptane (5,54 g, 64%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,53-7,28 (m, 15H, Ph), 5,55 (s, IH, PhQH)1 5,15-5,05 (m, 4H, H-I, CH1O1 HH)1 4,74 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,29 (dd, IH, Jj,6eq 4,9 Hz, J6eq,6aχ 10,5 Hz, H-6eq), 4,08 (m, IH, H-3), 3,79 (dd, IH, _£,6ax 10,2 Hz, H-6ax), 3,71 (dd, IH, J4,5 9,4 Hz, JiΛ 9,2 Hz, H-4), 3,47 (m, IH, H-5); 3,22 (m, IH, H-2), 0,86 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,07 (s, 3H, CZ)3Si), 0,04 (s, 3H, CZT3SJ); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 155,72 ((X)2CH2PH), 138,42, 136,52 (C aromatique), 129,08-126,19 (CH aromatique), 101,30 (CHPh), 95,98 (C-I), 82,72 (C-4), 76,56 (C-3), 74,44 (OH2Ph), 68,91 (C-6), 66,79 (OH2O), 66,15 (C-5), 60,29 (C-2), 25,67 ((OH3)3CSi), 18,02 ((CH3)3CSi), -4,21 (OH3Si), -5,27 (OH3Si); ES+MS m/z. 628, [M+Na+], 606, [M+l]+; Anal. CaIc. pour C34H43NO7Si: C, 67,41; H, 7,15; N, 2,32; trouvé C, 67,19; H, 7,36; N, 2,26.
Composé 4'
3,6-Di-Obenzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l-*> te/f-butyldiméthylsilyl-β-D-glucopyranose
Un mélange comprenant le composé 3' (7,95 g, 13,1 mmol), du tamis moléculaire 3Â (5 g) et du triéthylsilane (21 mL, 132 mmol) dans CH2CI2 anhydre (150 mL) est refroidi à 00C. De l'acide trifluoroacétique (10 mL, 130 mmol) est ajouté et le mélange est agité pendant 1 h à O0C. De la triéthylamine (3 mL) est additionnée et le mélange est dilué dans CH2CI2 (100 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (5:2) pour donner le composé 4', sous la forme d'une huile incolore (5,97 g, 75%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,41-7,25 (m, 15H, Ph), 5,08 (m, 2H, NZ/, H-I), 4,88 (m, 2H, CH2O); 4,71 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,57 (ABq, 2H, CH2Ph)1 3,81 (m, IH, H-3), 3,72 (d, 2H, J6a,6b 4,9 Hz, H-6a, H-6b), 3,66 (dd, IH, \s 9,9 Hz, JS,4 8,5 Hz, H-4), 3,45 (m, 2H, H-5, H-2), 2,95 (m, IH, OZM), 0,86 (s, 9H, (CZTs)3CSi), 0,08 (s, 3H, CMSi), 0,05 (s, 3H, CZT3Si); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 155,85 (CO2CH2PH), 138,52, 136,54 (C aromatique), 128,61-127,76 (CH aromatique), 95,60 (C-I), 80,51 (C-3), 74,14, 73,88 (CH2Ph), 73,76 (C-5), 73,05 (C-4), 70,80 (C-6), 66,83 (OH2O), 59,45 (C-2), 25,70 (((^)3CSi), 18,05 ((CH3)3CSi), -4,11 (CH3Si), -5,27 (OH3Si); ES+MS m/z. 630, [M+Na+], 608, [M+ 1]+, 477, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C34H45NO7Si: C, 67,19; H, 7,46; N, 2,30; trouvé C, 66,96; H, 7,57; N, 2,35.
Composé 5'
4-*λAcétyl-3,6-di-0-benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2- désoxy-1-O-trïchloroacétimidoyl-α-D-glucopyranose
L'acétylation menée sur le composé 4' (1,51 g, 2,48 mmol) dans les conditions classiques (Ac2O dans la pyridine), suivie par la concentration du mélange sous pression réduite et la cristallisation du résidu dans un mélange EtOAc-Heptane donne le composé 4-0-acétyl-3,6-di-0-benzyl-2- (benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l-0-te/t-butyldiméthyl silyl-β- D-glucopyranose (1,47 g, 91%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,37-7,16 (m, 15H, Ph), 5,06-4,97 (m, 5H, JΛβ 9,3 Hz, J^4 9,3 Hz, H-4, H-I, CZr2O, HH)1 4,55 (ABq, 2H, CH2Ph)1 4,51 (s, 2H, CZr2Ph), 4,05 (m, IH, H-3), 3,60 (m, IH, Js1Q0 4,5 Hz, ^,6a 4,8 Hz, H-5), 3,53 (d, 2H, 76a,6b<0,5 Hz, H-6b, H-6a), 3,25 (m, IH, H-2), 1,87 (s, 3H, CZr3CO), 0,87 (s, 9H, (CZTg)3CSi), 0,11 (s, 3H, CZr3Si), 0,07 (s, 3H, CZr3Si); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 169,93 ((X), Ac), 155,75 ((X)2CH2PH), 138,16, 136,49 (C aromatique), 128,64-127,69 (CH aromatique), 95,09 (C-I), 77,90 (C-3), 73,73, 73,62 (CH2Ph), 73,41 (C-5), 71,82 (C-4), 70,05 (C-6), 66,83 (6H2O), 59,93 (C-2), 25,70 ((OH3)3CSi), 21,02 (OH3CO), 18,05 ((CH3)3<Si), -4,15 (CH3SV), -5,27 (OH3Si); ES+MS m/z. 673, [M+Na+], 519, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C36H47NO8Si: C, 66,54; H, 7,29; N, 2,16; trouvé C, 66,65; H, 7,42; N, 2,21.
Une solution de Bu4NF.3H2O (1,1 g, 3,5 mmol) et d'acide acétique (200 μl_, 3,5 mmol) dans du THF anhydre (8 ml_) est ajouté à une solution du composé obtenu ci-dessus (1,9 g, 2,9 mmol) dans du THF anhydre (30 ml_) et agitée pendant 7 h à température ambiante. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (30 ml_), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Un mélange de l'hémiacétal obtenu, de CCI3CN (2,9 ml_, 28,9 mmol) et de DBU (109 μl_, 0,73 mmol) dans CH2CI2 anhydre (20 ml_) est agité pendant 1 h à température ambiante, puis concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange Heptane-EtOAc (5:2) et Et3N (0,2 %) pour donner le composé 5', sous la forme d'une huile incolore (1,87 g, 95%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 8,69 (s, IH, NH imidate), 7,35-7,19 (m, 15H, Ph), 6,37 (d, IH, 71/2 3,2 Hz, H-I), 5,31 (dd, IH, 74,5 9,7 Hz, J3A 9,7 Hz, H-4), 5,07 (m, 3H, CH2O, NH), 4,67- 4,45 (m, 4H, 2XCH2Ph), 4,26 (m, IH, Jz,3 10,2 Hz, J2^H 10,2 Hz, H-2), 4,02 (m, IH, J^b 6,8 Hz, £,& 6,8 Hz, H-5), 3,83 (t, IH, H-3), 3,55 (m, 2H, H-6a, H-6b), 1,93 (s, 3H, CH3CO); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 169,45 (CO, Ac), 160,28 (C=NH), 155,74 (CO2CH2PH), 138,09, 137,74, 137,50, 136,20 (C aromatique), 128,59-127,77 (Ot aromatique), 95,72 (C-I), 91,00 (CCl3 imidate), 76,41 (C-3), 73,59, 73,03 (OH2Ph), 72,09 (C-5), 70,22 (C-4), 68,74 (C-6), 66,83 (OH2O), 53,53 (C-2), 20,93 (CH3CO); ES+MS m/r. 519 [M- CCI3CONH]+; Anal. CaIc. pour C32H33CI3N2O8: C, 56,52; H, 4,89; N, 2,06; trouvé C, 56,64; H, 4,92; N, 2,01. Composé 6a re/t-butyldiméthylsilyl 0-(4- 0-acétyl-3,6-di- 0-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)- 3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-2-trîchloiOacetamîdo-β-D- glucopyranoside
Un mélange composé du donneur 5' (922 mg, 1,36 mmol), de l'accepteur 4 (560 mg, 0,9 mmol) et de tamis moléculaire 3Â dans CH2CI2 anhydre (20 ml_) est agité pendant Ih à température ambiante sous argon. BF3.Et2O (26 μl_, 0,21 mmol) est additionné, et le mélange est agité pendant 3 h. Et3N (100 μl_) est ajouté et le mélange est filtré sur célite, puis concentré sous pression réduite. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange toluène-EtOAc (9:1) contenant Et3N (0,2 %) pour donner le disaccharide 6a, sous la forme d'une mousse blanche (720 mg, 70%); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,45-7,22 (m, 25H, Ph), 6,91 (d, IH, Λ,NH 7,4 Hz, NΛb), 5,09-4,85 (m, 5H, CH1O, H-Ia, NHb, H-Ib), 4,97 (t, IH, J^4 9,2 Hz, H-4a), 4,70-4,41 (m, 6H, 3XCH2Ph), 4,26 (ABq, 2H, C^2Ph), 4,07-3,90 (m, 2H, H-3b, H-3a), 3,70-3,25 (m, 9H, H- 4b, H-2b, H-2a, H-5a, H-5b, H-6a, H-6b, H-6a, H-6b), 1,82 (s, 3H, CMCO), 0,88 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,14 (s, 3H, CMSi), 0,08 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 170,24 (CO, Ac), 169,89 (OD2CH2Ph), 162,13 (COCCI3), 138,91, 138,83, 138,44, 138,41, 138,34(C aromatique), 129,04-127,88 (CΗ aromatique), 100,02 (C-Ia), 95,10 (C-Ib), 93,06 (CCI3), 79,10 (C-3a), 78,28 (C-4b), 76,57 (C-3b), 75,57 (C-5a), 74,95, 74,72, 74,21, 73,95 (CH2Ph), 73,55 (C-5b), 72,27 (C-4a), 70,27 (C-6a), 68,44 (C-6b), 67,21(CH2O), 60,10 (C-2b), 58,33 (C-2a), 26,11 (CΗ3)3CSi, 21,31 (CH3CO), 18,34 (CH3)3C5i, - 3,74, -4,65 (CH3Si); ES+MS m/z. 1159, [M+Na+], 1137, [M+l]+, 1005, [M- OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C58H69CI3N2O13Si: C, 61,29; H, 6,12; N, 2,46; trouvé C, 61,13; H, 6,45; N, 2,40. Composé 6b
7e/ï-butyldiméthylsilyl 0-(4-0-acétyl-3,6-di-0-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)- 3,6-di-0-benzyl-2-benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D- glucopyranoside
Un mélange composé du donneur 5' (1,9 g, 2,8 mmol), de l'accepteur 4' (1,13 g, 1,86 mmol) et de tamis moléculaire 3Â dans CH2CI2 anhydre (38 ml_) est agité pendant Ih à température ambiante sous argon. BF3.Et2O (53 μl_, 0,42 mmol) est additionné, et le mélange est agité pendant 3 h. Et3N (100 μl_) est ajouté et le mélange est filtré sur célite, puis concentré sous pression réduite. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange toluène-EtOAc (9:1) contenant Et3N (0,2 %) pour donner le disaccharide 6b, sous la forme d'une mousse blanche (1,46 g, 70%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,38-7,15 (m, 3OH, Ph), 5,09-5,02 (m, 4H, CH1O), 5,00 (t, IH, J3^ 9,3 Hz, \s 9,3 Hz, H-4a), 4,85-4,40 (m, 10H, H- Ia, NZra, HHo1 H-Ib, 3XCZr2Ph), 4,32 (ABq, 2H, CH1Ph)1 3,95 (t, IH, J3^ 8,8 Hz, J1^ 8,8 Hz, H-3b), 3,74-3,63 (m, 2H, H-3a, H-4b), 3,52-3,25 (m, 8H, H- 2b, H-2a, H-5b, H-5a, H-6a, H-6b, H-6a, H-6b), 1,88 (s, 3H, CZT3CO), 0,87 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,09 (s, 3H, CZT3Si), 0,04 (s, 3H, CZr3Si); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 169,78 (CO, Ac), 157,48, 155,75 ((X)2CH2Ph), 138,96, 138,19, 138,08, 138,00, 136,60 (C aromatique), 128,70-127,29 (CH aromatique), 99,86 (C-Ia), 95,61 (C-Ib), 78,73 (C-4b), 78,62 (C-3b), 76,50 (C-3a), 74,40 (C-5b), 73,81, 73,60, 73,55, 73,26 (CH2Ph), 73,10 (C-5a), 71,74 (C-4a), 69,82 (C-6b), 68,15 (C-6a), 66,74, 66,56 (CH2O), 59,17 (C-2b), 57,83 (C-2a), 25,66 (CHs)3CSi, 20,88 (OH3CO), 17,98 (CHs)3CSi, -4,21, -5,25 (CH3Si).
Composé 6c re/t-butyldiméthylsilyl 0-(4-£>-acétyl-3,6-di-0-benzyl-2- désoxy-2-trichloroacétamido-β-D-glucopyranosyl)-(l->4)-3,6-di-0 benzyl-2-(benzyIoxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside
Un mélange composé du donneur 5 (1,2 g, 1,74 mmol), de l'accepteur 4' (705 mg, 1,16 mmol) et de tamis moléculaire 3Â dans CH2CI2 anhydre (30 mL) est agité pendant Ih à température ambiante sous argon. BF3-Et2O (35 μL, 0,28 mmol) est additionné, et le mélange est agité pendant 3 h. Et3N (120 μL) est ajouté et le mélange est filtré sur célite, puis concentré sous pression réduite. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange toluène-EtOAc (9:1) contenant Et3N (0,2 %) pour donner le disaccharide 6c, sous la forme d'une mousse blanche (958 mg, 73%); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,33-7,11 (m, 25H, Ph), 6,80 (d, IH, J&,NH 7,7 Hz, HHa), 5,05 (t, IH, J3n 9,7 Hz, 74/5 9,7 Hz, H-4a), 4,95 (s, 2H, CzS2O), 4,87 (d, IH, Ji,2 8,3 Hz, H-Ia), 4,76 (d, IH, -£,NH 8,3 Hz, HHo), 4,72 (d, IH, Ji,2 8,4 Hz, H-Ib), 4,65-4,43 (m, 6H, 3XCH1Ph)1 4,28 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,03 (t, IH, jξ,,4 8,9 Hz, J1^ 8,9 Hz, H-3b), 3,95 (dd, IH, J^3 10,4 Hz, H-3a), 3,63-3,50 (m, 4H, H-4b, H-5a, H-6a, H-6b), 3,45-3,26 (m, 5H, H-2b, H-2a H-5b, H-6a, H-6b), 1,76 (s, 3H, CH3CO), 0,78 (s, 9H, (CM)3CSi), -0,02 (s, 3H, CMSi), -0,08 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 169,78 (60, Ac), 168,72 ((X) 2CH2Ph), 162,02 (O)CCI3), 138,81, 138,19, 138,05, 137,59 (C aromatique), 128,58-127,45 (CH aromatique), 100,01 (C-Ib), 98,19 (C-Ia), 92,51 (CCI3), 77,73 (C-4b), 76,16 (C-3a), 74,46 (C-3b), 73,95, 73,62 (CH2Ph), 73,39 (C-5b), 73,32, 72,30 (CH2Ph), 71,81 (C-5a), 70,23 (C- 4a), 69,62 (G-6b), 68,41 (C-6a), 66,63 (CH2O), 58,67 (C-2b), 49,56 (C-2a), 25,66 (CH3)3CSi, 20,89 (CH3CO), 17,97 (CH3)3CSi, -4,18, -5,22 (CH3Si); ES+MS m/z. 1159, [M+Na+], 1137, [M+l]+, 1005, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C58H69CI3N2Oi3Si: C, 61,29; H, 6,12; N, 2,46; trouvé C, 61,35; H, 6,39; N, 2,41.
Composé βd re/t-butyldiméthylsilyl 0-(4- 0-acétyl-3,6-di- 0-benzyl-2- désoxy-2-trichloroacétamido-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-dî-O- benzyl-2-désoxy-2-tπchloroacétamido-β-D-glucopyranoside
Un mélange composé du donneur 5 (390 mg, 0,56 mmol), de l'accepteur 4 (233 mg, 0,38 mmol) et de tamis moléculaire 3Â (0,5 g) dans CH2CI2 anhydre (5 ml_) est agité pendant Ih à température ambiante sous argon. TMSOTf (13 μl_, 0,07 mmol) est additionné, et le mélange est agité pendant 2 h. Et3N (30 μl_) est ajouté et le mélange est filtré sur célite, puis concentré sous pression réduite. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange toluène-EtOAc (9:1) contenant Et3N (0,2 %) pour donner le disaccharide 6d, qui recristallise dans le mélange EtOAc-Heptane (410 mg, 90%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,39-7,21 (m, 2OH, Ph), 6,87 (d, IH, J2^ 7,9 Hz, HHo)1 6,77 (d, IH, J2^ 7,7 Hz, HHa), 5,05 (t, IH, JhΛ 9,3 Hz, As 9,3 Hz, H-4a), 5,04 (d, IH, 7U 7,5 Hz, H-Ib), 4,96 (d, IH, Jlr2 8,3 Hz, H-Ia), 4,73 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,62 (ABq, 2H, CZ)2Ph), 4,57 (ABq, 2H, CH2PU), 4,34 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,14 (t, IH, ^4 8,7 Hz, Ji1I 8,7 Hz, H-3b), 4,05 (dd, IH, J3n 8,9 Hz, ^3 10,4 Hz, H-3a), 4,01 (dd, IH, JiΛ 9,8 Hz, 74,s 8,3 Hz, H-4b), 3,67 (m, 2H, H-θa, H-6b), 3,57 (m, IH, H-2a), 3,52-3,42 (m, 4H, H-2b, H-5a, H-5b, H-6b), 3,55 (dd, IH, J5^ 5,3 Hz, ^,6b 10,7 Hz, H-6b), 1,87 (s, 3H, CMCO), 0,87 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,11 (s, 3H, CH3Sx)1 0,07 (s, 3H, CMSi); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,12 (6O, Ac), 162,22, 162,02 (COCCI3), 138,73, 138,45, 138,40, 137,88 (C aromatique), 128,97-128,02 (CH aromatique), 98,55 (C-Ia), 94,93 (C-Ib), 92,98, 92,81 ((XI3), 77,99 (C-3a), 77,97 (C-4b), 76,05 (C-3b), 74,96 (C-5b), 74,75, 74,54, 74,06 (OH2Ph), 73,84 (C-5a), 73,73 (CH2Ph), 72,32 (C-4a), 70,07 (C-6a), 68,70 (C-6b), 60,27 (C-2b), 59,21 (C-2a), 26,07 (CH3)3CSi, 21,27 (CH3CO), 18,29 (CH3)3CSi, -3,76, -4,69 (CH3Si); ES+MS m/z. 1170, [M-I-Na+], 1016, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C52H62CI6N2Oi2Si: C, 54,45; H, 5,45; N, 2,45; trouvé C, 54,62; H, 5,38; N, 2,41.
Composé 7a rerf-butyldiméthylsilyl O-(3,6-di- Obenzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amîno~2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2- acétamîdo-3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranosïde
Un mélange constitué du composé 6a (837 mg, 0,74 mmol), de Bu3SnH (1,2 mL, 4,5 mmol) et de AIBN (30 mg) dans du benzène anhydre (16 ml_) est agité pendant 1 h à température ambiante sous argon, puis chauffé pendant 2 h à 800C, refroidi et concentré. Le résidu est agité dans de l'heptane (40 mL), et les cristaux obtenus sont filtrés. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane- EtOAc (1:1) pour donner le composé fe/f-butyldiméthylsilyl O-(4-O- acétγl-3f6-di-C?-benzyl-2-(benzγloxγcarbonyl)amîno-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-di-^>-ben2yl-2-désoxy-β-D- glucopyranoside, qui recristallise dans le mélange CH2Cl2-heptane sous la forme d'une poudre blanche (571 mg, 75%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,39-7,16 (m, 25H, Ph), 5,74 (m, IH, HHo), 5,07 (m, 3H, CH1O1 UHa), 5,03 (t, IH, J3,4 9,1 Hz, 74,5 9,1 Hz, H-4a), 4,93 (d, IH, Λ,z 6,6 Hz, H-Ib), 4,71 (ABq, 2H, C^Ph), 4,59 (d, IH, Ji,2 8,8 Hz, H-Ia), 4,52 (m, 2H, CH2Ph), 4,47- 4,30 (m, 4H, 2XCH1Ph), 3,99 (m, IH, H-4b), 3,91 (t, IH, ^3 7,8 Hz, hΛ 7,8 Hz, H-3b), 3,70 (m, IH, H-3a), 3,56 (m, 2H, H-6b, H-6a), 3,53-3,37 (m, 6H, H-5a, H-6b, H-6a, H-5b, H-2b, H-2a), 1,89 (s, 3H, CMCONH), 1,87 (s, 3H, CH3CO), 0,86 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,09 (s, 3H, CZ)3Si), 0,07 (s, 3H, CMSi) ; 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,12 (CO, Ac), 169,87 (CONH), 156,00 (CO2CH2Ph), 139,11, 138,31, 138,06, 137,92, 136,57 (C aromatique), 128,66-127,47 (CH aromatique), 100,09 (C-Ia), 95,04 (C-Ib), 78,63 (C-3a), 77,97 (C-3b), 76,13 (C-4b), 74,33 (C-5b), 73,73, 73,72, 73,71, 73,39 (CH2Ph), 73,20 (C-5a), 71,57 (C-4a), 69,82 (C-6b), 68,86 (C-6a), 66,96 (CH2O), 57,50 (C-2b), 55,94 (C-2a), 25,75 (CH3)3CSi, 23,54 (CH3CONH), 21,02 (CH3CO), 18,06 (CH3)3C5i, -4,15, -5,14 (CH3Si); ES+MS m/∑. 1055, [M+Na+], 1033, [M+l]+, 901, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C58H72N2Oi3Si: C, 67,42; H, 7,02; N, 2,71; trouvé C, 67,94; H, 7,36; N, 2,68.
Une suspension du composé obtenu ci-dessus (507 mg, 0,49 mmol) dans le méthanol (20 mL) est traitée pendant 4 h de 00C à température ambiante avec NaOMe (IM, 0,6 mL). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR-120 (H+), filtrée et concentrée. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane-EtOAc (1:1), pour donner le composé 7a sous la forme d'une mousse blanche (460 mg, 95%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,46-7,19 (m, 25H, Ph), 5,71 (si, IH, NHD), 5,07 (s, 2H, CMO), 4,90 (d, IH, 71/2 6,4 Hz, H- Ib), 4,70 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,73-4,35 (m, 8H, H-Ia, NHa, 3XCZr2Ph), 3,92 (t, IH, _£,3 6,8 Hz, h,Λ 6,8 Hz, H-3b), 3,84 (dd, IH, 74,s 7,4 Hz, H-4b), 3,68 (t, IH, Ji1Z 9,1 Hz, J3,4 9,1 Hz, H-3a), 3,65-3,40 (m, 8H, H-2b, H-6b, H-6b, H-6a, H-4a, H-2a, H-6a, H-5b), 3,27 (m, IH, 74,s 9,7 Hz, Js,6a 5,1 Hz, ^,6b 5,1 Hz, H-5a), 2,99 (si, IH, OZf4), 1,89 (s, 3H, CZr3CONH), 0,87 (s, 9H, (CZTs)3CSi), 0,12 (s, 3H, CZT3SJ), 0,07 (s, 3H, CZT3SJ); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,14 (O)NH), 156,24 ((X)2CH2Ph), 139,04, 138,89, 138,16, 137,60, 136,60 (C aromatique), 128,57-127,34 (UH aromatique), 100,48 (C-Ia), 95,09 (C-Ib), 80,92 (C-5b), 77,86 (C-4b), 75,20 (C-3b), 74,26 (C-3a), 73,73, 73,72 (OH2Ph), 73,69 (C-4a), 73,38 (OH2Ph), 73,12 (C-5a), 70,94 (OH2Ph), 69,40 (C-6a), 69,03 (C-6b), 66,83 (OH2O), 56,89 (C-2a), 55,68 (C-2b), 25,70 (OH3)3CSi, 23,39 (OH3CONH), 17,98 (CH3)3£3i, -4,21, -5,17 (OH3Si); ES+MS m/z. 1013, [M+Na+], 991, [M+l]+, 859, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C56H70N2Oi2Si: C, 67,85; H, 7,12; N, 2,83; trouvé C, 67,62; H, 7,48; N, 2,70.
Composé 7b re/t-butyldiméthylsilyl £>-(3,6-di- 0-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)- 3Λ6-di-O-benzyl-2-benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D- glucopyranoside
Une suspension du composé 6b (1,42 g, 1,26 mmol) dans le méthanol (30 ml_) est traitée pendant 4 h de 00C à température ambiante avec NaOMe (IM, 0,6 ml_). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR-120 (H+), filtrée et concentrée. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane- EtOAc (2:1), pour donner le composé 7b sous la forme d'une mousse blanche (1,08 g, 79%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,38-7,16 (m, 3OH, Ph), 5,10 (m, 2H, CZT2O), 5,02 (s, 2H, CMO), 4,83-4,50 (m, 1OH, NHa, NZrb, H-Ia, H-Ib, 3XCZr2Ph), 4,39 (s, 2H, CZr2Ph), 3,90(t, IH, Jzι3 8,9 Hz, J3^ 8,9 Hz, H-3a), 3,73 (m, IH, H-4b), 3,63 (t, IH, J3n 8,7 Hz, jfe,3 8,7 Hz, H-3b), 3,54 (dd, IH, J5^ 4,8 Hz, J6a,6b 9,9 Hz, H-6a), 3,44 (dd, IH, J5^ 6,1 Hz, Jfea,6b 9,9 Hz, H-6a), 3,42-3,30 (m, 3H, H-2b, H-2a, H-4a), 3,25 (m, IH, 74,5 9,7 Hz, H-5a), 3,22-3,13 (m, 2H, H-6a, H-6b), 3,03 (m, IH, H-5b), 2,66 (s, IH, OM4), 0,86 (s, 9H, (CM)3CSi), 0,08 (s, 3H, CMSi), 0,04 (s, 3H, CMSi). 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 156,03, 155,90 ((X) 2CH2Ph), 138,94, 138,44, 137,98, 137,66, 136,58, 136,50 (C aromatique), 128,47-127,09 (CH aromatique), 100,32 (C-Ia), 95,65 (C-Ib), 81,19, 78,86, 78,66, 76,38, 76,38, 76,22, 74,32, 73,90, 73,45, 73,31, 73,21, 70,68, 68,12, 66,55, 58,81, 57,14 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-6, 06H2Ph), 25,57 (OH3)3CSi, 17,85 (CH3)3CSi, -4,27, - 5,30 (Ot3Si).
Composé 7c re/f-butyldiméthylsilyl 0(2-acétamido-3,6-di- Obenzyl-2- désoxy-β-D-g.ucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-{>-benzyl-2- (benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside
Un mélange constitué du composé 6c (792 mg, 0,7 mmol), de Bu3SnH (1,1 ml_, 4,1 mmol) et de AIBN (30 mg) dans du benzène anhydre (15 ml_) est agité pendant 1 h à température ambiante sous argon, puis chauffé pendant 2 h à 800C, refroidi et concentré. Le résidu est agité dans de l'heptane (40 mL), et les cristaux obtenus sont filtrés. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane- EtOAc (1:1) pour donner le composé te/t-butyldiméthylsilyl O-Ç2- acétamido-4-0-acétyI~3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranosylMl→4)-3,6-di-0-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside sous la forme d'une mousse blanche (592 mg, 82%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,35-7,05 (m, 25H, Ph), 5,15 (d, IH, J2^ 7,5 Hz, NHa), 4,96 (s, 2H, CMO), 4,94 (t, IH, JιΛ 9,6 Hz, Jk,5 9,6 Hz, H-4a), 4,81 (d, IH, Λι2 8,3 Hz, H-Ia), 4,80-4,40 (m, 8H, 3xCMPh, H-Ib, N/τb), 4,25 (ABq, 2H, CMPh), 3,91 (m, 2H, H-3b, H-3a), 3,57 (m, 2H, H-4b, H-5a), 3,42-3,26 (m, 7H, H-6b, H-6b, H-6a, H-δa, H-5b, H-2b, H-2a), 1,78 (s, 3H, CZT3CONH), 1,66 (s, 3H, CH3CO), 0,77 (s, 9H, (C^)3CSi), 0,12 (s, 3H, CZT3SJ), 0,07 (s, 3H, CZ73Si); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,55 ((X), Ac), 169,95 ((X)NH), 155,70 (O)2CH2Ph), 138,91, 138,34, 138,19, 136,61 (C aromatique), 128,60-127,41 (CH aromatique), 99,21 (C-Ia), 95,73 (C-Ib), 78,56 (C-3b), 78,40 (C-3a), 74,59 (C-4b), 74,40 (C-5b), 73,68 (C-5a), 73,57, 73,54, 73,37 ((3H2Ph), 73,12 (C- 4a), 71,98 (CH2Ph), 69,81 (C-6a), 68,60 (C-6b), 66,62 (OH2O), 58,88 (C-2b), 57,37 (C-2a), 25,68 (OH3)3CSi, 23,52 (OH3CONH), 20,99 (OH3CO), 18,02 (CH3)3O5i, -4,17, -5,24 (OH3Si); ES+MS m/z. 1055, [M+Na+], 1033, [M+l]+, 901, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C58H72N2Oi3Si: C, 67,42; H, 7,02; N, 2,71; trouvé C, 67,82; H, 7,35; N, 2,59.
Une suspension du composé obtenu ci-dessus (681 mg, 0,66 mmol) dans le méthanol (20 ml_) est traitée pendant 4 h de 00C à température ambiante avec NaOMe (IM, 0,5 ml_). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR-120 (H+), filtrée et concentrée. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane-EtOAc (1:1) et pour donner le composé 7c, qui cristallise dans le mélange EtOAc-heptane, sous la forme d'une poudre blanche (614 mg, 87%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,39-7,21 (m, 25H, Ph), 5,05 (s, 2H, CZT2O), 4,90 (d, IH, ΛNH 7,9 Hz, WHd)1 4,85 (m, IH, HHo)1 4,82 (d, IH, 71/2 8,8 Hz, H-Ia), 4,72 (ABq, 2H, CMPh), 4,70 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,63 (d, IH, J1>2 7,9 Hz, H-Ib), 4,60 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,43 (s, 2H, CH2Ph), 3,94 (t, IH, J1^ 8,7 Hz, J3,4 8,7 Hz, H-3b), 3,82 (m, IH, H-3a), 3,69 (t, IH, J3n 8,8 Hz, J4/5 8,8 Hz, H-4a), 3,65 (dd, IH, J5^ 2,8 Hz, 76a,6b 8,2 Hz, H-6b), 3,60-3,49 (m, 4H, H-6b, H-6a, H-4b, H-2a), 3,47 (dd, IH, J^a 6,4 Hz, 76a,6b 9,6 Hz, H-6a), 3,44 (m, IH, H-5b), 3,33 (m, IH, J4,s 10,1 Hz, J5^ 4,0 Hz, H-5a), 3,29 (m, IH, H- 2b), 3,12 (si, IH, OZf4), 1,75 (s, 3H, CZT3CONH), 0,86 (s, 9H, (CZ^CSi), 0,11 (s, 3H, CH3Sl), -0,03 (s, 3H, CH3Si); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,18 (ODNH), 155,70 (O)2CH2Ph), 139,03, 138,78, 138,21, 137,59, 136,61 (C aromatique), 128,74-127,36 (CH aromatique), 100,01 (C-Ia), 96,53 (C- Ib), 81,10 (C-4b), 77,36 (C-3a), 76,70 (C-3b), 74,61 (C-4a), 74,51, 74,03 (OH2Ph), 73,90 (C-5b), 73,83, 73,66 (OH2Ph), 72,70 (C-Sa)7 71,49 (C-6a), 68,70 (C-6b), 66,70 (OH2O), 59,15 (C-2b), 56,05 (C-2a), 25,73 (OH3)SCSi, 23,63 (OH3CONH), 18,07 (CH3)3O3i, -4,13, -5,20 (OH3Si); ES+MS m/z. 1013, [M+Na+], 991, [M+l]+, 859, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C56H70N2O12Si: C, 67,85; H, 7,12; N, 2,83; trouvé C, 67,70; H, 7,27; N, 2,73.
Composé 7d
Tert- butyldîméthylsilyl α-(2-acétamido-3,6-di-O-benzyl-2- désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-dï-0-benzyl-2- désoxy-β-D-glucopyranoside
Un mélange constitué du composé 6d (690 mg, 0,6 mmol), de Bu3SnH (1,9 ml_, 7,2 mmol) et de AIBN (30 mg) dans du benzène anhydre (17 ml_) est agité pendant 1 h à température ambiante sous argon, puis chauffé pendant 2 h à 800C, refroidi et concentré. Le résidu est agité dans de l'heptane (40 mL), et les cristaux obtenus sont filtrés. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane- EtOAc (1:1) pour donner le composé fe/f-butyldiméthγlsilyl £>-(2- acétamido-4-0-acétyl-3,6-dî-0-benzyI-2~désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétarnido-3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranoside, qui cristallise dans le mélange EtOAc-Heptane (592 mg, 82%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,35-7,19 (m, 2OH, Ph), 5,98 (si, HHo)1 5,21 (d, IH, Λ,m 7,9 Hz, NZrâ), 5,07 (t, IH, ύΛ 9,1 Hz, As 9,1 Hz, H-4a), 4,92 (d, IH, Ji,2 6,3 Hz, H-Ib), 4,74 (d, IH, Jlι2 7,3 Hz, H-Ia), 4,70 (ABq, 2H, CZi2Ph), 4,61 (ABq, 2H, CMPh), 4,57 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,41 (ABq, 2H, CZ^2Ph), 4,04 (t, IH, Js,4 6,8 Hz, jfc,3 6,8 Hz, H-3b), 3,95-3,90 (m, 2H, H-3a, H-4b), 3,78 (dd, IH, J5^ 4,7 Hz, J6a,6b 10,4 Hz, H-6a), 3,70-3,65 (m, 2H, H- 6a, H-2b), 3,64-3,56 (m, 2H, H-2a, H-5a), 3,53-3,49 (m, 2H, H-6b, H-5b), 3,44 (dd, IH, jfe/6b 6,3 Hz, 76a,6b 11,7 Hz, H-6b), 1,88 (s, 3H, CZT3CONH), 1,86 (s, 3H1 CZr3CONH), 1,75 (s, 3H, CZr3CO ), 0,83 (s, 9H, (CZr3)BCSi), 0,08 (s, 3H, CZr3Si), 0,06 (s, 3H, CZr3Si); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 170,68 (CO, Ac), 170,22, 169,91 ((X)NH), 138,93, 138,37, 138,05, 137,99 (C aromatique), 128,65-127,49 (CH aromatique), 99,54 (C-Ia), 95,15 (C-Ib), 78,31 (C-4b), 77,82 (C-3a), 77,36 (C-3b), 74,99 (C-5a), 74,58 (C-5b), 73,69, 73,46, 73,18, 72,80 (CH2Ph), 71,72 (C-4a), 69,73 (C-6a), 69,41 (C-6b), 56,51 (C-2a), 55,76 (C-2b), 25,73 (OHs)3CSi, 23,60, 23,47 (CH3CONH), 21,03 (CH3CO), 18,04 (CH3)3C5i, -4,20, -5,16 (CH3Si); ES+MS m/z 963, [M+Na+], 941, [M+l]+, 809, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C52H68N2Oi2Si: C, 66,36; H, 7,28; N, 2,98; trouvé C, 66,52; H, 7,06; N, 2,90.
Une suspension du composé obtenu ci-dessus (738 mg, 0,78 mmol) dans le méthanol (20 ml_) est traitée pendant 4 h de 00C à température ambiante avec NaOMe (IM, 1 ml_). La solution est ensuite neutralisée en utilisant la résine Amberlite IR-120 (H+), filtrée et concentrée. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange heptane-EtOAc (1:2), pour donner le composé 7d sous la forme d'une mousse blanche (585 mg, 83%) ; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,40-7,19 (m, 2OH, Ph), 5,95 (d, JZ,NH 8,7 Hz, WHu)1 4,84 (d, IH, Λ,m 8,7 Hz, WHd), 4,79 (d, IH, 7i,2 5,7 Hz, H-Ib), 4,65 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,62 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,56 (d, IH, Ji/2 8,8 Hz, H-Ia), 4,45-4,35 (m, 4H, IyCH2Ph)1 3,88 (t, IH, J3n 6,0 Hz, J2J 6,0 Hz, H-3b), 3,73 (t, IH, j&,4 6,2 Hz, jfe,3 6,2 Hz, H-3a), 3,72- 3,54 (m, 7H, H-4a, H-4b, H-6a, H-6b, H-2b, H-2a, H-5b), 3,50 (dd, IH, Js,6b 5,9 Hz, 76a,6b 9,7 Hz, H-6b), 3,38 (dd, IH, Js,6a 8,5 Hz, 76a,6b 10,6 Hz, H-6a), 3,26 (dd, IH, Js,6a 4,7 Hz, 74,s 9,4 Hz, H-5a), 3,02 (si, IH, OZf4), 1,91 (s, 3H, CZT3CONH), 1,83 (s, 3H, CZT3CONH), 0,86 (s, 9H, (CZTs)3CSi), 0,12 (s, 3H, CZr3Si), 0,10 (s, 3H, CZr3Si); ES+MS m/z. 921, [M+Na+], 899, [M+l]+, 767, [M-OTBDMS]+; Anal. CaIc. pour C50H66N2OnSi: C, 66,79; H, 7,40; N, 3,13; trouvé C, 67,44; H, 7,80; N, 3,01.
Composé 8a
(2-Amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido- 2-désoxy-β-D-glucopyranose
Un mélange constitué du composé 7a (469 mg, 0,47 mmol), d'acide acétique (68 μL, 1,2 mmol) et de Bu4NF.3H2O (383 mg, 1,2 mmol) dans du THF anhydre (20 mL) est agité à température ambiante pendant 16 h. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (30 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCÛ3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange CH2CI2-MeOH (9:1) pour donner le composé (3,6-dï-<>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2- désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-dï-0-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranose, sous la forme d'une poudre blanche (370 mg, 89%) ; 1H RMN (500 MHz, MeOD): δ 7,45-7,22 (m, 25H, Ph), 5,11 (m, 2H, CZT2O), 5,10 (d, IH, 7i,2 3,4 Hz, H-Ib), 4,80 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,70-4,50 (m, 4H, 2XCZT2Ph), 4,61 (d, IH, J1/2 8,2 Hz, H-Ia), 4,37 (ABq, 2H, CZr2Ph), 4,12 (dd, IH, J2J 10,4, H-2b), 4,04 (t, IH, \s 8,8 Hz, jξ,,4 8,8 Hz, H-4b), 4,00 (m, IH, H-3a), 3,81 (dd, IH, ^4 8,5 Hz, H-3b), 3,76 (dd, IH, J5^ 1,7 Hz, 76a,6b 11,2 Hz, H-6b), 3,72 (m, IH, H-6a), 3,60-3,47 (m, 4H, H-4a, H-2a, H-6a, H- 5a), 3,43 (dd, IH, Λι6a 6,1 Hz, H-6b), 3,32 (m, IH, H-5b), 1,97 (s, 3H, CMCONH); 13C RMN (125 MHz, MeOD): δ 173,97 (O)NH), 159,32 (O)2CH2Ph), 141,85, 140,91, 140,67, 140,46, 139,21 (C aromatique), 130,33-128,86 (CH aromatique), 102,88 (C-Ia), 93,28 (C-Ib), 84,68 (C-4b), 80,49 (C-3b), 78,45 (C-3a), 78,02 (C-5b), 76,78, 75,96, 75,34, 74,94 (UH2Ph), 73,27 (C-5a), 72,29 (C-4a), 71,51 (C-6a), 70,60 (C-6b), 68,22 (OH2O), 59,76 (C-2a), 55,39 (C-2b), 23,53 (OH3CONH).
Une solution du composé obtenu ci-dessus (226 mg, 0,26 mmol) dans un mélange AcOEt-MeOH-H2O (5 :10 :4 ; 10 mL) est hydrogéné en présence de 10% Pd-C (100 mg) pendant 48 h à température ambiante. Le mélange est filtré sur célite. Le résidu est ensuite élue avec de l'eau sur une colonne de chromatographie sur LH-20, puis lyophilisé pour donner le composé 8a (73 mg, 0,19 mmol) ; 1H RMN (500 MHz, D2O): δ 5,15 (d, IH, J1/2 2,2 Hz, H- locb), 4,64 (d, IH, J1/2 7,9 Hz, H-lβb), 4,43 (d, IH, J1/2 7,9 Hz, H-Ia), 3,90 (m, IH, H-3b), 3,87-58 (m, 8H, H-2b, H-4b, H-5ab, H-6ab) ; 3,46-3,28 (m, 2H, H-4a, H-3a), 2,62 (m, IH, H-2a), 2,05 (s, 3H, CZ^NHCO) ; 13C RMN (125 MHz, D2O): δ 175,10, 174,83 (O)NH), 102,84 (C-Ia), 95,19 (C-lβb), 90,87 (C-I(Xb)7 78,99, 78,60, 76,54, 75,78, 75,75, 75,06, 72,71, 70,47, 70,32, 69,92, 69,49, 60,97, 60,63, 60,53, 57,03, 56,72, 54,20 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-6),22,55, 22,26 (CH3CONH).
Composé 8b
(2-Amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-amino-2- désoxy-β-D-glucopyranose
Un mélange constitué du composé 7b (502 mg, 0,52 mmol), d'acide acétique (67 μl_, 1,16 mmol) et de Bu4NFJH2O (366 mg, 1,16 mmol) dans du THF anhydre (20 ml_) est agité à température ambiante pendant 16 h. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (30 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange CH2CI2-MeOH (9:1) pour donner le composé (3,6-di-0-benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2- désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-0-benzyl-2- benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranose, sous la forme d'une poudre blanche (385 mg, 86%) ; 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,41-7,14 (m, 3OH, Ph), 5,27 (m, IH, H-Ib), 5,20-4,30 (m, 1OH, 4XCZv2Ph, N/τa, N/ώ), 4,28 (d, IH, 71/2 7,9 Hz, H-Ia), 4,02 (m, IH, H-4b), 3,88 (m, 2H, H-2b, H-3b), 3,75-3,58 (m, 2H, H-3a, H-6a), 3,52 (m, IH, H-6b), 3,50-3,33 (m, 4H, H-2a, H-4a, H-6a, H-6b), 3,25 (m, IH, H-5b), 3,19 (m, IH, H-5a); 13C RMN (125 MHz, CDCI3): δ 156,32, 156,31 (CO2CH2Ph), 139,27, 138,61, 137,90, 137,59, 136,66, 136,50 (C aromatique), 129,16-127,19 (CH aromatique), 100,79 (C-Ia), 92,84 (C-Ib), 77,82 (C-5a), 77,12 (C-3b), 74,57 (C-3a), 74,35, 74,18, 73,80, 73,52 (OH2Ph), 72,86 (C-4a), 72,45 (C-5b), 71,52 (C-6b), 70,31 (C-4b), 67,72 (C-6a), 67,43 (CH2O), 66,91 (CH2O), 55,84 (C-2b), 54,82 (C-2a).
Le composé 8b est préparé en suivant le protocole expérimental décrit pour le composé 8a. Composé 8c
(2-Acétamido-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-amino- 2-désoxy-β-D-glucopyranose
Un mélange constitué du composé 7c (480 mg, 0,48 mmol), d'acide acétique (69 μL, 1,2 mmol) et de Bu4NF.3H2O (382 mg, 1,2 mmol) dans du THF anhydre (20 ml_) est agité à température ambiante pendant 16 h. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (30 ml_), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange CH2CI2-MeOH (9:1) pour donner le composé (2-acétamido-3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-0-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranose sous la forme d'une poudre blanche (369 mg, 87%) ; 1H RMN (500 MHz, MeOD): δ 7,42-7,21 (m, 25H, Ph), 5,19 (d, IH, J1)2 8,9 Hz, H-Ib), 5,14 (ABq, 2H, CH2O), 4,90 (ABq, 2H, CMPh), 4,83 (ABq, 2H, CZ72Ph), 4,80 (d, IH, _A,2 8,2 Hz, H-Ia), 4,68 (ABq, 2H, CH2Ph), 4,47 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,11 (dd, IH, J2^ 7,9 Hz, J3,4 9,9 Hz, H-3a), 4,07 (dd, IH, J2^ 8,2 Hz, J3n 10,1 Hz, H-3b), 3,91 (m, 6H, H-2b, H-2a, H-4a, H-6a, H-6b, H-6b), 3,60 (m, 2H, H-4a, H-5b), 3,49 (dd, IH, Λea 6,0 Hz, J6a,6b 11,0 Hz, H-6a), 3,39 (m, IH, H-5b), 1,98 (s, 3H, CA3CONH); 13C RMN (125 MHz, MeOD): δ 174,19 (O)NH), 159,45 (O)2CH2Ph), 141,68, 141,06, 140,75, 140,57, 139,11 (C aromatique), 130,25-128,83 (OH aromatique), 102,27 (C-Ia), 93,74 (C-Ib), 84,67 (C-4a), 80,56 (C-4b), 78,21 (C-3a), 78,15 (C-5a), 76,52, 76,10, 75,34, 75,07 (OH2Ph), 73,32 (C-3b), 72,46 (C-5b), 71,46 (C-6b), 70,83 (C-6b), 68,30 (OH2O), 58,21 (C-2a), 57,55 (C-2b), 23,99 (0I3CONH).
Le composé 8c est préparé en suivant le protocole expérimental décrit pour le composé 8a. Composé 8d
(2-Acétamido-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2- acétamido-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose
Un mélange constitué du composé 7d (556 mg, 0,62 mmol), d'acide acétique (92 μL, 1,5 mmol) et de Bu4NF.3H2O (490 mg, 1,5 mmol) dans du THF anhydre (23 mL) est agité à température ambiante pendant 16 h. Le mélange est concentré, puis dilué dans EtOAc (30 mL), lavé successivement avec de l'eau, une solution aqueuse saturée en NaHCO3, puis de l'eau, séché (MgSO4), et concentré. Le résidu est élue sur une colonne de chromatographie sur gel de silice avec un mélange CH2CI2-MeOH (9:1) pour donner le composé (2-acétamido-3,6-di-0-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-di-<P-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranose sous la forme d'une poudre blanche (434 mg, 89%) ; 1H RMN (300 MHz, MeOD): δ 7,41-7,18 (m, 2OH, Ph), 5,09 (d, IH, Jlι2 3,5 Hz, H-Ib), 5,00 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,76 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,72 (d, IH, J1/2 8,5 Hz, H-Ia), 4,63 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,40 (ABq, 2H, CH1Ph), 4,13 (dd, IH, J1? 10,4 Hz, H-2b), 4,05 (m, 2H, H-3a, H-4b), 3,85-3,70 (m, 5H, H-2a, H-3b, H- 6a, H-6b, H-6b), 3,55 (m, 2H, H-4a, H-5a), 3,45 (dd, IH, J^a 6,1 Hz, 76a,6b 11,7 Hz, H-6b), 3,35 (m, IH, H-5b), 1,92 (s, 3H, CMCONH), 1,91 (s, 3H, CMCONH); 13C RMN (75 MHz, MeOD): δ 174,18, 174,02 ((X)NH), 141,81, 141,03, 140,69, 140,53 (C aromatique), 130,24-128,88 (CH aromatique), 102,33 (C-Ia), 93,27 (C-Ib), 84,68 (C-4b), 80,05 (C-3b), 79,62 (C-5b), 78,09 (C-3a), 76,51, 75,88, 75,34, 75,07 (CH2Ph), 73,29 (C-5a), 72,56 (C-4a), 71,46 (C-6a), 70,77 (C-6b), 58,11 (C-2b), 55,42 (C-2a), 24,03, 23,54 (CH3CONH).
Le composé 8d est préparé en suivant le protocole expérimental décrit pour le composé 8a.

Claims

REVENDICATIONS
1 - Oligomère de formule (I) : Rs-P-R4 dans laquelle P est constitué d'au moins deux motifs glycosyle choisis parmi les motifs de formule :
Figure imgf000049_0001
et les motifs de formule :
Figure imgf000049_0002
liés entre eux par une liaison β-(l→4), dans lesquelles : Ri, R2, R'i et R'2 représentent, chacun indépendamment, un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools, R3 et R'3 représentent, chacun indépendamment : " un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc,
• ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, ou bien R3 et R'3 représentent chacun indépendamment un atome d'hydrogène ou un groupe acétyle, étant entendu qu'au moins R3 ou R'3 présent dans l'oligomère est différent du groupe acétyle, R4 est un groupe hydroxyle, ou un groupe hydroxyle sous forme protégée de préférence en position β, ou un groupe partant de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy selon une liaison β-(l-*4) avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, et R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools. 2- Oligomère selon la revendication 1 de formule :
Figure imgf000050_0001
ou
Figure imgf000050_0002
dans lesquelles :
- les motifs glycosyle sont liés entre eux par une liaison β-(l— 4)
- Ri, R2, R'i, R'2, R3, R'3, R4 et R5 sont tels que définis à la revendication 1,
- n et m représentent, chacun indépendamment, 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 et p est égal à 1, 2, 3 ou 4, étant entendu que p*(n+m) est inférieur ou égal à 8.
3- Oligomère selon la revendication 2, caractérisé en ce que n=m=p=l.
4- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que R3 = H et R'3 = Ac.
5- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que :
- R3 est un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, de préférence un groupe -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
- R'3 est un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, de préférence un groupe dichloroacétyle, chloroacétyle, ou de préférence trichloroacétyle.
6- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que
- R5 est choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI, -CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, - Ph ou -C6H4(P-MeO),
- R4 est choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh, -SEt, -OC(NH)CCI3,
- Ri, R'i, R2 et R'2, identiques ou différents, sont choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle.
7- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que
Ri = R2 = R'i = R'2.
8- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que Ri, R2, R'i et R'2 représentent un groupe benzyle.
9- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 8 caractérisé en ce que R5 est un groupe acétyle ou un atome d'hydrogène.
10- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que R4 est un groupe fert-butyldiméthylsilyloxy en position β ou un groupe -OC(NH)CCI3 en position α.
11- Oligomère selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que Ri = R2 = R3 = R5 = H, R'3 = Ac et R4 = OH. 12- Oligomère selon la revendication 1 choisi parmi :
7e/f-butyldiméthylsilyl <9-(4- O-acétyl-3,6-di- Ο-benzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-(-> benzyl-2-désoxy-2-trichloroacetamido-β-D-glucopyranoside
7e/t-butyldiméthylsilyl α(4-(9-acétyl-3,6-di-αbenzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-0- benzyl-2-benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside
7e/t-buty Idi méthylsi IyI C>-(4-C>-acétyl-3,6-di-O-benzyl-2-désoxy-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-Οbenzyl-2- (benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside re/t-butyldiméthylsilyl 0-(4-αacétyl-3,6-di-<9-benzyl-2-désoxy-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-C>-benzyl-2-désoxy-2- trichloroacétamido-β-D-glucopyranoside
7e/t-butyldiméthylsilyl O-(3,6-di-(>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino- 2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-di-C>-benzyl-2-désoxy- β-D-glucopyranoside
7e/t-butyldiméthylsilyl α(4-αacétyl-3,6-di-αbenzyl-2-
(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2- acétamido-3,6-di-6>-benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranoside
7e/t-butyldiméthylsilyl 0-(3,6-di-i>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino- 2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-{>benzyl-2- benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside re/t-butyldiméthylsilyl D-(2-acétamido-3,6-di-Obenzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-6>-benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2- désoxy-β-D-glucopyranoside
7e/t-butyldiméthylsilyl α(2-acétamido-4-αacétyl-3,6-di-O-benzyl-2- désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-<_>benzyl-2- (benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside re/t-butyldiméthylsilyl (>(2-acétamido-3,6-di-6>-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-di-C>-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranoside re/t-butyldiméthylsilyl O-(2-acétamido-4-Oacétyl-3,6-di-α-benzyl-2- désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-3,6-di-6>-benzyl-2-désoxy-β- D-glucopyranoside
(2-Amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-acétamido-2-désoxy-β -D-glucopyranose
(3,6-Di-O-benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l-→4)-2-acétamido-3,6-di-(>benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranose
(2-Amino-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-amino-2-désoxy-β-D- glucopyranose
(3,6-Di-£>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D- glucopyranosyl)-(l→4)-3,6-di-<>benzyl-2-benzyloxycarbonyl)annino-2- désoxy-β-D-glucopyranose
(2-Acétamido-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)-2-amino-2-désoxy-β -D-glucopyranose
(2-acétamido-3,6-di-(>benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l→4)- 3,6-di-0-benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-β-D-glucopyranose
(2-acétamido-3,6-di-f>benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranosyl)-(l->4)-2- acétamido-3,6-di-Obenzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranose. 13- Monomère de formule :
Figure imgf000053_0001
dans laquelle :
- R"i et Rπ 2 identiques ou différents sont des groupes protecteurs des alcools,
- R"3 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1→4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifieraient pas un autre groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc,
- R"4 est un groupe hydroxyle sous forme protégée, de préférence en position β, ou un groupe partant, de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy selon une liaison β-(l— 4) avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, et
- R"5 est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools. 14 - Monomère selon la revendication 13, caractérisé en ce que :
- Rπ 3 est un groupe -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R"3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
- R'Η est choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI, -CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, - Ph, -C6H4(P-MeO),
- R!I 4 est choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh, -SEt, -OC(NH)CCI3,
- R"i et R"2, identiques ou différents, sont choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle.
15 - Monomère selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que R"i et R"2 représentent un groupe benzyle.
16 - Monomère selon l'une des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que R"3 est un groupe benzyloxycarbonyle.
17 - Monomère selon l'une des revendications 13 à 16, caractérisé en ce que R"4 est un groupe partant de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, et R"s est un groupe protecteur des alcools.
18 - Monomère selon la revendication 17, caractérisé en ce que R"4 est un groupe -OC(NH)CCI3, en position α et R"5 est un groupe acétyle.
19 - Monomère selon l'une des revendications 13 à 18, caractérisé en ce que R"4 est un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, de préférence un groupe te/t-butyldiméthylsilyloxy, et R"s est un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur des alcools.
20 - Monomère selon la revendication 13, choisi parmi : 3,6-Di-<>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l-<3-ή-?/£- butyldiméthylsilyl-β-D-glucopyranose
4-(>Acétyl-3,6-di-<>benzyl-2-(benzyloxycarbonyl)amino-2-désoxy-l-<3- trichloroacétimidoyl-α-D-glucopyranose
21 - Procédé de préparation de dimères de formule :
Figure imgf000055_0001
par couplage des monomères suivants
Figure imgf000055_0002
dans lesquelles : - Rn, R12, R'u et R'12 représentent, chacun indépendamment, un groupe protecteur des alcools, par exemple choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle,
- R13 et R'13 représentent chacun indépendamment :
• un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, par exemple choisi parmi les groupes -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
" ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, par exemple choisi parmi les groupes dichloroacétyle, chloroacétyle et trichloroacétyle,
- Ri4 est un groupe partant, de préférence en position α, ledit groupe partant étant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle ; Ri4 est par exemple choisi parmi les groupements -SPh ou -SEt en position β, ou de préférence -OC(NH)CCI3, en position α,
- R'14 est un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CH3)B, -OC5H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, -SPh et -SEt,
- et Ri5 est un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(p-MeO).
22 - Procédé selon la revendication 21 caractérisé en ce que Ri3 et/ou R'i3 représentent un groupe benzyloxycarbonyle.
23 - Procédé selon la revendication 21 caractérisé en ce que Ri3 et/ou R'i3 représentent un groupe trichloroacétyle.
24 - Procédé selon l'une des revendications 21 à 23 caractérisé en ce que Ri4 représente un groupe -OC(NH)CCI3, en position α.
25 - Procédé selon l'une des revendication 21 à 24 caractérisé en ce que :
- R'14 représente le groupe te/t-butyldiméthylsilyloxy,
- Ri5 représente un groupe acétyle,
- Rn, R'n, R12 et R'i2 représentent un groupe benzyle.
26 - Procédé selon l'une des revendication 21 à 25 caractérisé en ce que le couplage est réalisé en présence d'un acide de Lewis, dans des conditions anhydres, de préférence, en présence de TMSOTf ou BF3-Et2O.
27 - Procédé de préparation d'un hétéro-oligomère de /\£acétyl-D- glucosamine et de D-glucosamine de DP et de DA contrôlés comprenant les étapes suivantes :
• un couplage, de façon à former une liaison β-(l→4), entre un monomère ou un oligomère donneur de formule :
Figure imgf000057_0001
et un monomère ou un oligomère accepteur de formule :
Figure imgf000058_0001
dans lesquelles :
- Ru, R12, R'n et R'12 représentent, chacun indépendamment, un groupe protecteur des alcools, par exemple choisis parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para-bromobenzyle, para- chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle,
- Rie et R'i6 représentent, chacun indépendamment :
• un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NH2, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc, par exemple choisi parmi les groupes -C(O)ORd, avec Rd choisi parmi les groupements benzyle, para-méthoxybenzyle, para-nitrobenzyle, para- bromobenzyle, para-chlorobenzyle, 2,4-dichlorobenzyle, R3 étant de préférence un groupe benzyloxycarbonyle,
• ou un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, par exemple choisi parmi les groupes dichloroacétyle, chloroacétyle et trichloroacétyle,
- R14 est un groupe partant susceptible de former un pont oxy avec un -OH libre situé en position 4 d'un autre groupe glycosyle, par exemple choisi parmi les groupements -SPh ou -SEt en position β, ou de préférence -OC(NH)CCI3, en position α,
- Zi représente un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, - CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(P-MeO) ou bien Zi représente un résidu glycosyle de formule -Pi-Z3, liés par une liaison β-(l— 4) au motif glycosyle du composé (VI)
- Z2 représente un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CH3)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, - SPh et -SEt, ou bien Z2 représente un résidu glycosyle de formule -P2-Z4, liés par une liaison β-(l— 4) au motif glycosyle du composé (VII),
- Z3 représente un groupe protecteur des alcools, par exemple choisi parmi les groupements -C(O)Ra, avec Ra = -CH3, -CH2CI ,-CHCI2, -CCI3, -CF3, -CH2OMe, -CH2OCPh3, -CH2OC6H4-P-CI, -C(CH3)3, -Ph, -C6H4(p-MeO),
- Z4 représente un groupe protecteur des alcools, de préférence en position β, par exemple choisi parmi les groupements -OSi(CH3)2C(CH3)3, -OSiPh2C(CHs)3, -OC6H4-P-OMe, -OCH2CH=CH2, -OCH2CH2CH2CH=CH2, - SPh et -SEt,
- Pi et P2 sont, chacun indépendamment constitué d'un motif ou de plusieurs motifs glycosyle, identiques ou différents, liés entre eux par une liaison β- (1—4), et choisis parmi les motifs glucosamine de formule :
Figure imgf000059_0001
et les motifs /\Aacétyl-D-glucosamine de formule :
Figure imgf000059_0002
dans lesquelles Ru, Ri2, R'π et R'i2 sont tels que définis précédemment pour (VI) et (VII), et "Ri7 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHh, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NHAc,
"R'i7 représente un groupe protecteur des aminés, permettant d'orienter la liaison (1—4), lors d'un couplage glycosidique, en β et conduisant après déprotection à une fonction -NHAc, dans des conditions qui ne modifient pas un groupement aminé protégé susceptible de conduire dans d'autres conditions de déprotection à un groupe -NH2, une déprotection des fonctions aminé pour conduire aux fonctions -NH2 et -NHAc souhaitées et une déprotection des fonctions -OH, selon une stratégie multi-étapes.
28 - Procédé selon la revendication 27 caractérisé en ce que Ri6 ou R'i6 et, éventuellement, Ri7 et/ou R'17 représentent un groupe benzyloxycarbonyle ou un groupe trichloroacétyle.
29 - Procédé selon la revendication 27 ou 28 caractérisé en ce que Rii/ R'ii/ R12 et R'i2 représentent un groupe benzyle.
30 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 29 caractérisé en ce que Ri4 est un groupe -OC(NH)CCI3.
31 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 30 caractérisé en ce que Zi représente un oligomère, -Pi-Ac, avec Pi tel que défini à la revendication 25 et Z2 représente un oligomère -P2-OTBS avec OTBS = tert-butyldiméthylsilyloxy et P2 tel que défini à la revendication 25.
32 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 31 caractérisé en ce que le couplage est réalisé en présence d'un acide de Lewis, dans des conditions anhydres, de préférence en présence de TMSOTf ou BF3. Et2O.
33 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 32 caractérisé en ce que la dernière déprotectioπ est réalisée par hydrogénolyse, de préférence catalysée par du palladium sur charbon
34 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 32 caractérisé en ce que la première étape de couplage met en œuvre un oligomère tel que défini à la revendication 12.
35 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 32 caractérisé en ce que la première étape de couplage met en œuvre un dimère obtenu selon l'une des revendications 21 à 26.
36 - Procédé selon l'une des revendications 27 à 32 caractérisé en ce que la première étape de couplage met en œuvre un monomère selon l'une des revendications 13 à 20.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012080772A1 (fr) 2010-12-17 2012-06-21 Universite Claude Bernard Lyon I Copolymères à blocs chitine-chitosane
KR20180125583A (ko) * 2016-03-30 2018-11-23 아유비스 리서치, 인코포레이티드 신규한 조성물 및 치료 방법

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8877170B2 (en) * 2009-02-21 2014-11-04 Sofradim Production Medical device with inflammatory response-reducing coating

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2640627A1 (fr) * 1988-12-16 1990-06-22 Commissariat Energie Atomique Nouveaux fluorures d'aldosaminyle, leur preparation et leur utilisation pour la fabrication d'oligosaccharides amines lies (1 -> 4)

Non-Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALY M. R. E. ET AL.: "Synthesis of chitotetraose and chitohexaose based on dimethylmaleoyl protection" CARBOHYDRATE RESEARCH, vol. 331, 2001, pages 129-142, XP002404116 *
BLATTER G. ET AL.: "The use of 2-deoxy-2-trichloroacetamido-D-glucopyrano se derivatives in syntheses of oligosaccharides" CARBOHYDRATE RESEARCH, vol. 260, 1994, pages 189-202, XP002404114 *
DATABASE CA [Online] CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; 1999, KERWIN, JAMES L. ET AL: "Mass spectrometric profiling of glucosamine, glucosamine polymers and their catecholamine adducts. Model reactions and cuticular hydrolysates of Toxorhynchites amboinensis (Culicidae) pupae" XP002404128 extrait de STN Database accession no. 131:272110 & INSECT BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY , 29(7), 599-607 CODEN: IBMBES; ISSN: 0965-1748, 1999, *
DATABASE CA [Online] CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; 22 juin 1990 (1990-06-22), DEFAYE, JACQUES ET AL: "Preparation of aldosaminyl fluorides and their conversion into oligosaccharide amines" XP002404129 extrait de STN Database accession no. 114:185933 -& FR 2 640 627 A1 (COMMISSARIAT A L'ENERGIE ATOMIQUE, FR.; CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCH) 22 juin 1990 (1990-06-22) *
LOHMAN, GREGORY J. S. ET AL: "A Stereochemical Surprise at the Late Stage of the Synthesis of Fully N-Differentiated Heparin Oligosaccharides Containing Amino, Acetamido, and N-Sulfonate Groups" JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY , 69(12), 4081-4093 CODEN: JOCEAH; ISSN: 0022-3263, 2004, XP002404119 *
MELEAN L G ET AL: "Toward the automated solid-phase synthesis of oligoglucosamines: systematic evaluation of glycosyl phosphate and glycosyl trichloroacetimidate building blocks" CARBOHYDRATE RESEARCH, ELSEVIER SCIENTIFIC PUBLISHING COMPANY. AMSTERDAM, NL, vol. 337, no. 21-23, 19 novembre 2002 (2002-11-19), pages 1893-1916, XP004392186 ISSN: 0008-6215 cité dans la demande *
QIAN X. ET AL.: "Use of the p-nitrobenzyloxycarbonyl group as an orthogonal amine protecting group in the synthesis of beta-GlcNAc terminating glycosides" CHEMICAL COMMUNICATIONS, 1997, pages 1059-1060, XP002404117 *
RATNER D. M. ET AL.: "Automated Synthesis of a Protected N-Linked Glycoprotein Core Pentasaccharide" ORGANIC LETTERS, vol. 5, no. 24, 2003, pages 4717-4720, XP002404115 cité dans la demande *
SCHMIDT R.R.: "New Approaches to glycoconjugates synthesis" PURE & APPLIED CHEMISTRY, vol. 70, no. 2, 1998, pages 397-402, XP002404118 *
SPIVEY A.C. ET AL.: "2 Synthetic methods Part (v) Protecting groups" ANNUAL REPORTS ON THE PROGRESS OF CHEMISTRY, SECTION B, vol. 95, 1999, pages 83-95, XP002404120 *
YANG, GUANGBIN ET AL: "Studies on the synthesis of di- and trisaccharide analogues of moenomycin A. Modifications in unit E and in the lipid part" HELVETICA CHIMICA ACTA , 87(7), 1807-1824 CODEN: HCACAV; ISSN: 0018-019X, 2004, XP002404113 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012080772A1 (fr) 2010-12-17 2012-06-21 Universite Claude Bernard Lyon I Copolymères à blocs chitine-chitosane
KR20180125583A (ko) * 2016-03-30 2018-11-23 아유비스 리서치, 인코포레이티드 신규한 조성물 및 치료 방법
CN108884121A (zh) * 2016-03-30 2018-11-23 阿尤维斯研究有限公司 新组合物和治疗方法
EP3436467A4 (fr) * 2016-03-30 2020-03-18 Ayuvis Research, Inc. Nouvelles compositions et méthodes thérapeutiques
KR102306956B1 (ko) * 2016-03-30 2021-10-01 아유비스 리서치, 인코포레이티드 신규한 조성물 및 치료 방법
KR20210122865A (ko) * 2016-03-30 2021-10-12 아유비스 리서치, 인코포레이티드 신규한 조성물 및 치료 방법
US11207343B2 (en) 2016-03-30 2021-12-28 Ayuvis Research, Inc. Compositions and therapeutic methods
CN108884121B (zh) * 2016-03-30 2022-05-31 阿尤维斯研究有限公司 新组合物和治疗方法
KR102532825B1 (ko) 2016-03-30 2023-05-17 아유비스 리서치, 인코포레이티드 신규한 조성물 및 치료 방법

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