WO2005097813A1

WO2005097813A1 - Isomeres complexes de platine demethyl-cantharidine et leur utilisation

Info

Publication number: WO2005097813A1
Application number: PCT/CN2005/000463
Authority: WO
Inventors: Yee-Ping Ho; Steve C. F. Au-Yeung; Kin Wah To; Xinning Wang
Original assignee: The Chinese University Of Hong Kong
Priority date: 2004-04-08
Filing date: 2005-04-08
Publication date: 2005-10-20
Also published as: EP1749831A4; US20070293467A1; JP2007532494A; EP1749831A1; CN1680384A

Description

去甲基斑蟊素铂配合物异构体及其用途技术领域

本发明涉及去甲基斑蟊素铂配合物的单一异构体及其用于抑制肿瘤细胞生长的用途。背景技术

去甲基斑蟊素 (DMC , demethylcantharidin)是斑蟊素 (cantharidin)经修饰的结构，其是"芫菁 (blister beetles)"的活性组分。芫菁已被用作中药 (TCM)来治疗肝、肺及消化道肿瘤。

顺铂及卡铂二者都是铂 (Pt)基药物，并已在世界范围内用于在临床上治疗癌症。与这些药物有关的常见问题包括毒副作用及耐药性。

在授予本发明的发明人的美国专利 6， 110,907中，披露了包括结构式 I 在内的 DMC铂配合物具有良好的抗肿瘤活性。

结构式 I 在本发明的申请人申请的 PCT/CN01/00885中，则公开了 DMC与上述包括结构式 I所示的铂配合物或其它铂配合物如顺铂、卡铂、奥沙利铂一起使用具有良好的协同作用。但上述现有技术中并没有公开结构式 I 所示的铂配合物的单一异构体的活性情况。

本发明的发明人意外地发现，上述结构式 I所示的铂配合物的某些立体异构体具有优异的抗肿瘤活性。由此提出本发明。发明内容

本发明一方面提供具有如下结构式 I 所示的去甲基斑蟊素 (DMC)铂配合物，包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R(-)异构体、及反式外消旋体。

结构式 I

本发明另一方面提供具有结构式 I所示的去曱基斑蟊素 (DMC)铂配合物在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的用途，其中所述的配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R，R (-)异构体及反式外消旋体。

在本发明用途的优选实施方案中，所述的肿瘤细胞包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤细月包。

在本发明用途的进一步优选实施方案中，所述的瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

本发明另一方面提供一种药物组合物，包括具有如上结构式 I所示的去曱基斑蟊素 (DMC)铂配合物和药物上可接受的载体，其中所述的配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R，R (-)异构体及反式外消旋体。

本发明的药物组合物优选用于治疗肿瘤。所述的肿瘤包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤，所述的肿瘤优选包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

本发明的组合物优选制备成适合局部给药、口服给药、静脉内给药或肌肉内给药等形式。

本发明还提供抑制肿瘤细胞生长的方法，包括将所述肿瘤细胞与结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物接触。所述的配合物包括其顺式异构体、反式 -S，S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体。所述的肿瘤细胞优选包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤细胞，较优选地，所述的肿瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

本发明中，抑制肿瘤细胞包括体外抑制和体内抑制。

本发明还提供治疗个体肿瘤的方法，所述方法包括对所述个体以治疗有效量的结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物或含结枸式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物的组合物给药。其中所述的配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R，R(-)异构体及反式外消旋体。所述的肿瘤优选包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的 t瘤。具体地，所述的肿瘤可包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。附图说明

图 1是 DMC铂配合物立体异构体的圆二色谱；

图 2是 1,2-DACH立体异构体的圆二色谱；

图 3是 S，S-DMC铂配合物 (0.25mg/ml)的圆二色谱，表明其具有重现性；

图 4是 DMC(0.1mg/ml)的圆二色谱，表明其不具有旋光性。具体实施方式

本发明提供具有如下结构式 I所示的 DMC铂配合物，包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体、及反式外消旋体。

结构式 I 本发明还提供具有如上结构式 I 所示的去甲基斑蟊素 (DMC)铂配合物在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的用途。

上述的肿瘤细胞包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和其有耐药性的肿瘤细胞，及所述的肿瘤细胞来源于肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。 ·

本发明还提供一种药物组合物，包括治疗有效量的具有如上结构式 I 所示的去甲基斑蟊素 (DMC)铂配合物和药物上可接受的载体。

"治疗有效量"是可有效抑制个体体内肿瘤细胞或肿瘤生长的任何量。 "个体" 通常包括动物或人。

确定有效量的方法对于本领域所属技术人员是公知的，并取决于如下因素：包括但不限于，涉及的个体类型如性别、年龄、体质等，所需治疗病症情况，制剂形式等。例如在组合物中，有效量可以为占組合物重量的 0.01-99.99%, 优选为 0.5-99.95, 更优选为 1-99%。

本发明的组合物可制成用于治疗性给药的各种给药途径的各种制剂。例如制备成适合局部给药的形式、口服给药的形式、静内给药的形式及肌肉内给药的形式。所述制剂，可通过包括口服、口腔、直肠、非肠道、腹腔内、皮内、透皮、气管内等等不同的给药途径对需要该药物的个体或患者给药。

局部给药制剂可以是透皮贴、栓剂、糊剂、洗剂、膏剂、胶剂等等的形式。局部制剂可包括一种或多种渗透剂、增稠剂、稀释剂、乳化剂、分散剂或结合剂。当所述组合物^^备成为透皮传输时，所述组合物可与渗透增强剂一同组方或与其一同使用。渗透增强剂包括化学渗透增强剂和物理渗透增强剂，能促进所迷组合物通过皮肤传输。化学和物理渗透增强剂例如 Transdermal Delivery of Drugs, A. F. Kydonieus (ED) 1987 CRL Press; Percutaneous Penetration Enhancers, eds. Smith et al. (CRC

Press, 1995); Lenneruas et al. , J Pliarm Pharmacol 2002; 54 (4): 499-508;

Karande et al., Pharm Res 2002; 19 (5): 655-60; Vaddi et al. , J Pharm Sci

2002 July; 91 (7): 1639-51 ； Vent職 et al. , J Drug Target 2001; 9 (5):

379-93; Shokri et al. , Int J Pharm 2001; 228 (1-2): 99-107; Suzuki et al. , Biol Pharm Bull 2001; 24 (6): 698-700; Alberti et al. , J Control Release

2001; 71 (3): 319- 27; Goldstein et al., Urology 2001; 57 (2): 301-5;

Kiijavainen et al. , Eur J Pharm Sci 2000; 10 (2): 97- 102;及 Tenjarla et al. ,

Int J Pharm 1999; 192 (2): 147-58 ^所述。

当所述组合物与化学渗透增虽剂组方时，所述的渗透增强剂选自与所述配合物匹配的并以满足促进^†述配合物通过个体皮肤传输的剂量存在，例如用于将该配合物对该个 ^全身循环的传输。

对于口服制剂，所述的配合可单独或与适合的添加剂组合来制备片剂、粉剂、颗粒和胶嚢，例如，与常规的添加剂，诸如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉; 与混合齐， J，诸如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；与^解剂，诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠；与润滑剂，诸如滑石或硬脂酸镁；如需要，与稀释剂、緩冲剂、润湿剂、防腐剂及调味^组合。特别有益的是，所述配合物与緩冲剂的组方可提供所述配合物牙低 pH的胃酸环境的保护的作用。也可优选提供一种肠包被来避免通过 ^时产生所述配合物的沉淀。

本发明所述的配合物可通过^^其在水溶性或非水溶性溶液 (诸如植物或其它类似的油、合成脂肪酸甘酯、高级脂肪酸酯或丙烯乙二醇）中溶解、悬浮或乳化组方到注射制剂。如果需要，可与常规的添加剂（诸增溶剂、等渗剂、悬浮剂、乳化^、稳定剂及防腐剂）组合。特别有益的增溶剂包括维生素 E TPGS (d-a-生育酚聚乙烯乙二醇 1000琥珀酸酯)、环糊精等等。本发明提供抑制肿瘤细胞生长的方法，包括将所述肿瘤细胞与结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物接触。其中所述的配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体。其中所述的肿瘤细胞包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤细胞，及所述的肿瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

本发明中，抑制肿瘤细胞包括体外抑制和体内抑制。

本发明还提供治疗个体肿瘤的方法，所述方法包括对所述个体以治疗有效量的结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物或含结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物的组合物给药。其中所述的肿瘤包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

本发明合成 DMC铂配合物的方法通过方式进行。

1. DMC配体的制备

用有机溶剂如四氢呋喃 (THF)作为溶剂使呋喃与顺丁烯二酸酐反应制得中间体，加入 Pd-C 催化剂。回流反应混合物，并通入氢气，制得 DMC配体。

2. II)硝酸盐衍生物的制备

将 K₂PtCl₄溶解在水中，使其与二氨基环己烷 (DACH)反应。然后向反应产物中加入硝酸 ■，制得 Pt(II)硝酸盐衍生物。

1)反式-外消旋 DACH

2)反式 -R,R- (-) -DACH

3) 反式 -S,S-(+)-DACH

4)顺式- DACH

3. DMC铂配合物的制备

向步骤 2中制得的 Pt(II)硝酸盐衍生物中口入步驟 1 中制得的 DMC 配体，然后加入 NaOH, 制得 DMC铂配合物。

铂配合物 iv) DMC 2)反式 -R,R- (-) - DMC铂配合物

或 3 ) 反式 -S，S- (+)- DMC铂配合物暗

铂配合物

以上合成步骤中所用的呋喃从 RDH Company购得，顺丁烯二酸酐和硝酸银从 Farco Chemical Supplies 购得， Pd-C(10% 活性炭）从 BDH Laboratory Supplies购得， K₂PtCl₄(II)和二氨基环己烷的各种立体异构体从 Aldrich Chemical Company购得。

以下用具体实施例对本发明进行详细说^。实施例 1 反式-外消旋 DMC铂配合物的制备

将呋喃（5.4ml, 0.073mol)与顺丁烯二酸酐（6g, 0.061mol)置于盛有 THF(8ml)的干燥烧杯中，室温搅拌 60分钟。真空除溶剂，粗品用乙酸乙酯重结晶。得到白色结晶中间体 (9.1g, 88.4%产率）。将该中间体 (2g， O.O mol)溶解在乙酸乙酯（³0ml)中，加入 Pd-C 催化剂（10% 活性炭， 0.2g：)。搅拌下回流反应混合物，将氢气在常压下鼓泡通入反应瓶达 16小时，过滤掉 Pd-C , 真空除溶剂，制得 DMC 配体 (98%产率），熔点 116.9~117.3。C。

IR (KBr, cm^-1): 1843, 1784 (C=0), 1237, 1099, 890 (C-0-C)。将 K₂PtCl₄(lg, 2.410mmol)溶解在水 (5ml)中，逐滴加入反式 -夕卜消旋二氨基环己烷 (DACH) (0.2747g，2.410mmol，溶解在 1ml H₂0中），形成黄色沉淀物。混合物在室温搅拌 6~8小时，然后过滤，用水 (5ml)、乙醇 (5ml) 和乙醚 (5ml)洗涤，于 65。C烘箱中干燥。

将 AgNO₃(0.3579g, 2.1053mmol)和 Pt(DACH)Cl₂(0.4g， 1.0526mmol) 放置在含水 (5ml)的反应烧瓶中，避光搅拌 18h。然后过滤混合物除掉固体 AgCl。向含有 Pt(DACH)(N0₃)₂的滤出液中加入制得的 DMC 配体 (0.1768g, 1.0526mmol)和 NaOH(0.0842g, 1.1053mmol), 并在室温下搅拌混合物 16h。得到灰白色固体，真空除去水。固体用冰水 (5ml)、乙醇 (5ml) 和乙醚 (5ml)洗涤，于 65。C烘箱中干燥。得到产物 0.22g (72%)。

IR(KBr, cm-¹): 3195, 3150 (N-H), 1642, 1608 (C=0), 1396 (COO ), 1267, 1214, 1066, 940 (C-C-C；)。

实施例 2 反式 -R,R- (-) -DMC铂配合物的制备

除了用反式 -R,R- (-) -DACH替换实施例 1中的反式-外消旋 DACH外按与实施例 1相似的方法制得反式 -R,R- (-) -DMC铂配合物，收率 73%，产物于 200~250。C分解。

实施例 3 反式 -S,S-(+)-DMC铂配合杨的制备

除了用反式 -S,S-(+)-DACH替换实施例 1中的反式-夕卜消旋 DACH夕卜，按与实施例 1相似的方法制得反式 -S,S-(+)-DMC铂配合物，收率 73%, 产物于 200~250。C分解。实施例 4

顺式 -DMC铂配合物的饰 >j备

除了用顺式 -DACH替换实施例 1 中的反式-夕卜消旋 DACH外，按与实施例 1 相似的方法制得顺式 -DMC 铂配合物，收率 33% , 产物于 200~250。C分解。实施例 5

本发明配合物的鉴 t

(1) 反式 -R,R-DMC/-S,S-DMC铂配合物^ ί比旋光度

在下列条件下测定反式 -R,R-DMC/-S,S-D IC铂配合物的比旋光度，结果如表 1所示。

温度： 20°C;

浓度：反式 -R,R-DMC 铂配合物和反 A -S^-DMC 铂配合物为 0.25mg/ml;

反式 -R,R-1,2-二氨基环己烷和反式 -S,S-1,2-二氨基环己烷为 lmg/lml;

样品池长： 10cm;

溶剂：水；

单色光：波长为 589.3nm的钠 D光线；

表 1

试验反式 -R,R-DMC铂配合物 [a]_D ^_式-3，8-0¾ 0：铂配合物 [a]_D

1 +58.508° -56.242°

2 +54.878° -59.849°

3 +59.611° -60.785°

4 +61.311° -57.540°

5 +48.613° -56.590°

6 +49.923° -52.991°

7 +57.603° -56.190°

8 +54.156° -61.100°

平均值 +55.575° -57.661°

反式 -R,R-1,2- -二氨基环己烷的 [a]_D: -32.949°; Aldrich参者值： -25

反式 -S,S-1,2-二氨基环己烷的 [a]_D: +34.197°; Aldrich参考值： +25 (2) DMC铂配合物的立体异构体、 2-二氨基环己烷的立体异构体及 DMC的圆二色谱

上述各化合物的圆二色谱如图 1、图 2、图 3、图 4所示，圆二色谱的测定条件如下：

仪器： JASCO J-715圆二色谱分光仪

样品池长： 1.0cm

溶剂：水

温度： 20°C

数据模式： CD

Ch2-模式： HT

波长范围： 225-375nm

带宽： l.Onm

灵敏度： 200mdeg

分辨率： O.lnm

响应时间： lsec

积聚： 1

速度： 50nm/min。

(3) DMC铂配合物的立体异构体的溶解度

DMC铂配合物的立体异构体的溶解度如表 2所示。

表 2

(4) 结论

从上述的比旋光度值和圆二色谱中可得出如下结 :

1)在起始原料 DACH和产物之间旋光度符号发转换，如下表 3所示。

2) 反式 -S,S-DACH 或反式 -R，R-DACH 及反式 -S，S-DMC 或反式 -R,R-DMC铂配合物的数据都是可重现的。

3) 所有的光学非活性化合物如 DMC、反式 -DACH、顺式 -DACH、反式 -DMC铂配合物、顺式 -DMC铂配合物都位于基截上而没有表现出任何信号。 (5) DMC铂配合物异构体的 NMR谱

实施例 1-4中制得的 DMC铂配合物各种异构体的 NMR谱如下面表所示。

测试条件

溶剂： D₂0

仪器： Bruker ARX-500高分辨率超导 FT-NMR仪 (装有 5mm长的 Z梯度探针头）

频率： 500.131 MHz

记录条件

1-D实验：

Ή: D1 lsec, Pl=6 sec, DE=88.75 sec

2-D实验:

lU: D1 4 sec, Pl=8.50 sec， DE=237.14 sec

DO ^:3 sec, P0=8.50 sec

顺式异构体反式异构体

DMC铂配合物 Hei, He₂ He₃, He₄ Hfi, Hf₂ Hf_3; Hf₄ Ha Ha₂,Ha₃, Hb Hb₂ Hc_b Hc₂ Hd Hd₂ δ/ppm

顺式异构体 1.82-1.85(m) 1.59-1.61(m) 1.82-1.85(m) 1.39-1.43 (m) 1.75 (m) 4.93 (s) 3.99 (s) 2.91 (m)

J Hz

δ/ppm 3.98(d) 4.01(d) 反式外消旋体 2.06 (m) 1.31 (m) 1.59 (m) 1.18 (m) 1.76 (m) 4.85 (m) 2.38 (m)

J Hz 10.8, 10.8

δ/ppm 3.97(d) 4.01(d) 反式- (R,R)- 2.05 (m) 1.31 (m) 1.59 (m) 1.17 (m) 1.76 (m) · 4.85 (m) 2.37 (m)

J Hz 10.9, 10.9

3.97(d) 4.01(d) 反式 -(S，S)- δ/ppm 2.04 (m) 1.31 (m) 1.59 (m) 1.17 (m) 1.74 (m) 4.85 (m) 2.37 (m)

J/Hz 10.9, 10.9

s=单重锋； _m=：多重锋； d-双重"¹

实施例 6

体外抗肿瘤试验

使用噻唑蓝微量培养分析方法筛选 DMC铂配合物以及对照的顺铂、卡铂、奥沙利铂、 DMC, 测定其对一系列癌细胞系的体外抗肿瘤活性。

药物：将欲被检测的药物以两倍于欲使用的最高浓度溶解在完全培养基中，然后过滤 (0.22μηι)杀菌。使用完全培养基由每种药物溶液制成一系列对数稀释液。所有药物溶液是在加入到细胞之前的 10分钟内制备的。

体外药物接触：对于每种欲被检测的药物将完全培养基中的胰蛋白酶化细胞浓度调整为 2χ 10⁵细胞 /ml, 并将 0.1ml的细胞悬浮液加入到 96 孔微量培养板中 24个孔中的每个孔中。然后将此培养板在标准条件下培养 24小时以使细胞贴到孔的底部并重新开始指数级生长。在对照培养基和药物 /浓度组合物的每个孔中分别加入 0.1ml完全培养基与药物溶液。每个药物 /浓度组合物重复 4次，而对照培养基重复 12次。将含有 0.2ml 完全培养基的 12次重复空白样放置一旁以用于计算本底。将培养基再培养 72小时。所有试验在不同情况下至少重复 3次。

MTT分析: 使用 MTT (噻唑蓝)分析确定不同药物的生长-抑制作用。在磷酸盐緩冲盐水 (pH7.4)中制备 5mg/ml的 MTT(3-(4, 5-二甲基 -2-噻唑基) -2, 5-二苯基溴化四唑)溶液，过滤 (0.22μτη)除菌, 并在 -20 °C下储存。向每个孔中加入 0.02ml的 MTT溶液，并将培养板在标准条件下培养 4 小时。然后除去每个孔中的培养基，再向每个孔中加入 0.1ml的 DMSO (二甲基亚砜)以溶解由 MTT代谢减少所生成的着色染料。通过分光光度方法 (570nm)确定减少的 MTT数量。

数据分析：确定所有 12个对照孔的平均 OD。对于每种药物的每一浓度而言，确定 4个孔的平均 OD。从空白中减去所有平均 OD以计算本底。确定"对照百分数"并绘制曲线。使用 Prism 3.0软件通过将此图调整成 S型的剂量效应曲线来确定可导致 50%生长抑制 (IC50)的药物浓度。结果如表 5所示。表 5

顺铂、卡铂、奥沙利铂、 DMC：、 DMC铂配合物及其类似物对癌细胞系平均生长抑制活性 (Ι(¾₀/μΜ)

(每一个独立组实 _ 中 n=24, 括号 ¹ 的数字表明实验编号）

顺式 -DMC 反式- DMC 反式 -S,S(+)- 反式 -R,R(- )- 细胞系顺铂卡铂奥沙利铂 DMC

铂配合物铂配合物 DMC铂配合物 DMC铂配合物

SK-Hep 13.45±1.84(3) 134.23±10.33(3) 9.09±4.24(2) 18.96±2.01(5) 19.41±2.23(1) 4.27±1.03(3) 6.15±1.00(4) 6.63±2.21(3)

SK-He 耐药性 51.78士7.01(2) 357.65士 27.98(2) 25.47±1.69(2) 22.73±1.11(4) 5.01±0.68(4) 8.09±0.89(6) 4.70±0.95(5)

Huh-7 11.71±1.21(4) 116.83±9.82(4) 8.97±4.56(1) 32.93±3.68(4) 18.96±1.46(3) 4.47±0.79(3) 8.46±1.51(3) 3.65±1.10 3)

Hu -7耐药性 25.64±3.50(2) 175.60±53.95(1) 26.95±3.03(2) 17.06士 0.77(1) 5.99±0.52(1) 16.22士 2.60(1) 26.93±6.14(1)

PLC/5 6.92±1.46(4) 80.25±15.78(4) 6.48士 3.19(2) 25.32±1.98(4) 17.06±1.18(2) 4.64±1.01(3) 6.26±1.87(3) 3.23±1.13(3)

Colo320 2.54±0.48 (2) 41.69±5.44(2) 1.00±0.31(1) 23.90±1.42(2) 5.98±0.97(4) 2.54±0.95(7) 4.96±1.32(7) 2.45±0.83(5)

L1210 0.82±0.14(2) 12.80士 2.14(2) 31.23±1.79(7) 0.14±0.06(3) 0.11±0.05(3) 0.76士 0.09(3)

L1210耐药性 13.95士 1.49(5) 126.30±17.23(2) 45.53±3.69(5) 0.17±0.05(3) 0.12±0.06(3) 0.99士 0.10(3；)

HCT-116 4.14±0.80(10) 69.43±14.74(10) 23.20±2.06(7) 12.55±1.67(3) 0.81±0.29(9) 2.04±0.41(8) 0.45±0.27(7)

HT-29 12.08±2.25(7) 133.88±15.02(6) 32.67±2.57(5) 2.09±0.69(9) 3.07±0.73(8) 0.92士 0.57(6)

表 5中的 IC₅₍₎数据表明：

与 DMC铂配合物的反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体 1反式外消旋体相比， DMC铂配合物的顺式异构体抵抗肝癌细胞系的效低 2~3 倍；

SK-Hep细胞系对顺铂表现出 4倍的耐药性，对卡铂表现出 2.7倍的耐药性， DMC铂配合物的反式 -S，S(+)异构体、反式 -R，R (-)异枸体及反式外消旋体对 SK-Hep细胞系均有有效的体外抗肿瘤活性；

Huh-7对顺铂和卡铂均表现出 1.5倍的耐药性，在实验误差^ 围内， Huh-7没有对 DMC铂配合物的顺式异构体和反式外消旋体表现出交叉耐药性， DMC铂配合物的反式 -S，S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体对 Huh-7细胞系均有有效的体外抗肿瘤活性；

L1210对顺铂和卡铂具有较高的耐药性，但没有对 DMC铂配合物的反式 -S,S(+)异构体、反式 -R，R (-)异构体或反式外消旋体表现出交叉耐药性；

DMC铂配合物的各种立体异构体对直肠癌细胞系 Colo320均有有效的抵抗性，其中反式 -R,R (-)异构体和反式外消旋体比顺式异构体 φ反式 -S,S(+)异构体更有效；

DMC铂配合物的反式 -S，S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体均有有效的抗肝癌细胞系 PLC/5活性， DMC铂配合物的反式 -R,R(-) 异构体抗肝癌细胞系 PLC/5的效力与顺铂、卡铂、奥沙利铂相同；

反式 -R，R (-)异构体抵抗 HCT-116和 HT-29细胞系的效力比顺 4白高约 10倍。

尽管以上已描述了本发明，但根据前述本发明的详细描述对本发明进行的变化和修饰对于本领域所属技术人员是显而易见的。所有这些变化、修饰及其等同物都应包括在所附的权利要求的范围之内。

Claims

权利要求

1. 一种具有结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂合物，包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体、 I反式外消旋体

结构式 I

2. 如权利要求 1的配合物选自反式 -S，S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体、及反式外消旋体。

3. 具有结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物在制备抑制肿瘤细胞生长的药物中的用途，

结构式 I 其中结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物^括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋。

4. 如权利要求 3的用途，其中所述的配合物沩反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体、及反式外消旋体。

5.如权利要求 3或 4所述的用途，其中所述妗肿瘤细胞包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤细包。

6. 如权利要求 3或 4或 5所述的用途，其中所述的肿瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

7. 一种药物组合物，包括具有结构式 I所示白去甲基斑蟊素铂配合物和药物上可接受的载体，

结构式 I

其中结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体。

8. 如权利要求 7 所述的组合物，其中所述的配合物为反式 -S,S(+) 异构体、反式 -R,R (-)异构体、及反式外消旋体。

9. 如权利要求 7或 8所述的组合物，其中所述的组合物用于治疗肿瘤。

10. 如权利要求 9所述的组合物，其中所述的肿瘤包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤。

11. 如权利要求 9或 10所述的组合物，所述肿瘤包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

12. 如权利要求 7-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述的组合物制备成适合局部给药的形式。

13. 如权利要求 7-11 中任一权利要求所述的组合物，其中所述的组合物制备成适合口服给药的形式。

14. 如权利要求 7-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述的组合物制备成适合静脉内给药的形式。

15. 如权利要求 7-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述的组合物制备成适合肌肉内给药的形式。

16. 抑制肿瘤细胞生长的方法，所述方法包括将所述肿瘤细胞与结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物接触，

结构式 I

其中结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物包括其顺式异构体、反式 - S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体。

.

17. 如权利要求 16所述的方法，其中所述的肿瘤细胞包括对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤细胞。

18. 如权利要求 16或 17所述的方法，其中所述的肿瘤细胞包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。

19. 如权利要求 16或 17或 Γ8所述的方法，其中所述的配合物为反式 -S，S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体、及反式外消旋体。

20. 如权利要求 16到 19任一权利要求所述的方法，其中所述的方法在体外进行。

21. 治疗个体肿瘤的方法, 所述方法包括对所述个体以治疗有效量的结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物或含结构式 I所示的去曱基斑蟊素铂配合物的组合物给药，

结构式 I 其中结构式 I所示的去甲基斑蟊素铂配合物包括其顺式异构体、反式 -S,S(+)异构体、反式 -R,R (-)异构体及反式外消旋体。

22. 如权利要求 21所述的方法，其中所述的肿瘤包括其肿瘤细胞对顺铂、卡铂或奥沙利铂敏感的和对其有耐药性的肿瘤。

23. 如权利要求 21或 22所述的方法，其中所述的肿瘤包括肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、宫颈癌、白血病、淋巴瘤或鼻咽癌。