WO2005097091A1 - 還元型補酵素ｑ10およびカロチノイド類を含有した組成物 - Google Patents

Abstract

　本発明は、抗酸化力、とりわけ活性酸素及び／又はフリーラジカルの消去作用に優れた組成物の提供するを目的とする。 　本発明は、還元型補酵素Ｑ10およびカロチノイド類を含有し、活性酸素及び／又はフリーラジカルの消去作用が相乗的に高めら組成物である。また本発明は、還元型補酵素Ｑ10とカロチノイド類を共に含有する組成物を用いる活性酸素及び／又はフリーラジカルの消去方法でもある。                                                                                     

Description

明 細 書

還元型補酵素 Q10およびカロチノイド類を含有した組成物

技術分野

[0001] 本発明は、還元型補酵素 Q およびカロチノイド類を含有した抗酸化力に優れた組

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成物および当該組成物を用いる活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去方法に 関する。還元型補酵素 Q およびカロチノイド類は、食品、栄養機能食品、特定保健

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用食品、栄養補助剤、栄養剤、動物薬、飲料、飼料、化粧品、医薬品、治療薬、予 防薬等として有用な化合物である。 背景技術

[0002] 補酵素 Qは細菌から哺乳動物まで広く生体に分布する必須成分であり、生体内の 細胞中におけるミトコンドリアの電子伝達系構成成分として知られている。補酵素 Qは 、ミトコンドリア内において酸化と還元を繰り返すことで、電子伝達系における伝達成 分としての機能を担って!/、る。ヒトでは補酵素 Qの側鎖が繰り返し構造を 10個持つ補 酵素 Q

10が主成分であり、生体内においては、酸化型補酵素 Q

10と還元型補酵素 Q

10 の比が一定の範囲に保たれながら機能を発揮しており、通常、 40〜90%程度が還 元型として存在していると言われている。補酵素 Qの生理的作用としては、ミトコンドリ ァ賦活作用によるエネルギー生産の活性化、心機能の活性化、細胞膜の安定化効 果、抗酸化作用による細胞の保護効果などが挙げられて 、る。

[0003] このように、補酵素 Q には、酸ィ匕型と還元型が存在している力 還元型補酵素 Q

10 10 は抗酸化作用を持っため、血中に十分量の還元型補酵素 Q

10を送り込むことにより、 血中の抗酸ィ匕力を効果的に増加させることが可能となる。血中の抗酸ィ匕力を増加さ せることは、虚血再還流時の血管障害、動脈効果の再狭窄防止、脳梗塞後の血管 障害の防止、動脈硬化の予防、糖尿病の合併症の予防などの、活性酸素種によつ て増悪が示唆されている多くの疾患に対して幅広い有用性が考えられる。

[0004] 一方、カロチノイド類は自然界の植物の葉や果実、野菜等、あるいは藻類に広く存 在する色素である。カロチノイド類は植物や藻類の細胞内でクロロフィルが光合成を 行う際に発生する活性酸素から生体を守っていると考えられている。また、これらの植 物を摂取する動物にも広く分布しており、力-やェビの甲殻やサケの筋肉中、ゥ-、 スケトウダラの卵等にも含まれて 、る。カロチノイド類の含量の少な 、卵の孵化率が 著しく低くなるとの報告もあることから、明確なことは分かっていないが、やはり動物で も活性酸素等力 の障害力 生体を保護して 、ると言われて 、る。

[0005] カロチノイドの種類としては、トマトに多く含まれるリコピンや、ニンジンに多く含まれ る /3一力口テンを始め、 α—力口テン、ァスタキサンチン、クリプトキサンチン、ゼアキ サンチン、ルティン、カンタキサンチン、フコキサンチン、ビタミン Α等があり、これらを 含んだ食物を食するヒトにおいても、カロチノイドは非常に重要な働きをしていると考 えられている。

[0006] 例えば、 13一力ロチンが癌の発症を抑えるとの報告（M. M. Mathews-Roth, Pure Appl. Chem., 57, 717-722, 1984:非特許文献 1)、リコペンが大腸癌を抑制するとの 報告（T. Narisawa, et al; Jpn. J. Cancer Res., 89, 1003-1008, 1998 :非特許文献 2) 、ルチンゃゼアキサンチンが加齢性網膜黄斑変性症のリスクを低減させるとの報告（ J. M. Seddon, et al; JAMA, 272, 1413-1420, 1994:非特許文献 3)、ァスタキサンチ ンが目の調節機能障害を改善したり（WO02Z094253：特許文献 1)、白内障の予 防、改善に効果がある (特開平 10— 276721 :特許文献 2)との報告などがある。これ らのカロチノイド類は分子内にイソプレンを持つテトラテルペン類であり、その類似し た構造から、生体内では同じような働きが期待される。

[0007] 上記の種々の効果の多くは、還元型補酵素 Q およびカロチノイド類が有する抗酸

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化力、とりわけ、生体内で発生した活性酸素及び Z又はフリーラジカルを消去する効 果に起因すると考えられている。従って、還元型補酵素 Q 又は、上記のカロチノイド

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類は生体内で非常に重要な働きを担っており、それらを体内に取り入れることは生体 にとつて有益と考えられる。

[0008] ここで、還元型補酵素 Q は空気酸化に対して非常に不安定であるため、非常に使

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Vヽづら 、側面を有して 、る。そこで、本発明者らは還元型補酵素 Q と種々の抗酸化

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剤を含み、還元型補酵素 Q を安定に保持しうる製剤を発明した (特開 2003— 1191

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27 :特許文献 3)。しカゝしながら、このような安定化された還元型補酵素 Q でも、上記

10 種々の効果を発揮するための抗酸化力、つまり、活性酸素及び Z又はフリーラジカ ルを消去する効果は不十分な場合があり、当該効果を向上させるさせる方法、ならび に、当該効果が向上された製剤が求められている。

[0009] 一方、カロチノイド類も同様であり、生体にとって有用な効果を示すと期待されるが 生体内で発生した活性酸素及び Z又はフリーラジカルを消去する効果は十分では なぐ従って、生体内で発揮される上記効果も十分満足されるものではな力つた。 特許文献 1： WO02/094253

特許文献 2 :特開平 10— 276721号公報

特許文献 3：特開 2003— 119127号公報

非特許文献 1 : M. M. Mathews— Roth, Pure Appl. Chem., 57, 717-722, 1984 非特許文献 2 : T. Narisawa, et al; Jpn. J. Cancer Res., 89, 1003-1008, 1998 非特許文献 3 : J. M. Seddon, et al; JAMA, 272, 1413-1420, 1994

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0010] 本発明は、還元型補酵素 Q

10またはカロチノイド類が有する活性酸素及び Z又はフ リーラジカルを消去する効果をさらに効果的に発揮させる組成物および、これら組成 物を用いた活性酸素及び Z又はフリーラジカルを消去する方法の提供を目的として いる。

課題を解決するための手段

[0011] 本発明者らは、上記課題を解決すベぐ鋭意検討した結果、還元型補酵素 Q と力

10 口チノイド類が共存した場合には、それぞれが単独の場合と比較して、相乗的に活性 酸素及び Z又はフリーラジカルを消去する効果が高まるという注目すべき新知見を 見出し、本発明を完成させた。

[0012] すなわち、本発明は還元型補酵素 Q 及びカロチノイド類を含有することを特徴とす

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る活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去作用が相乗的高められた組成物に関 する。

[0013] また、本発明は、還元型補酵素 Q 及びカロチノイド類を含有する組成物を用いる

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活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去方法にも関する。 発明の効果

[0014] 本発明により、活性酸素及び Z又はフリーラジカルを消去する効果の高い組成物 を提供することができる。

発明を実施するための最良の形態

[0015] 以下、本発明を詳細に説明する。本発明の組成物は、必須成分として還元型補酵 素 Q およびカロチノイド類を含有する。還元型補酵素 Q とカロチノイド類を共に含

10 10

有することにより、抗酸化力、すなわち、活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去 作用が相乗的に高められた組成物とすることができる。

[0016] ここで、「活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去作用が相乗的に高められた」と は、実施例の項で詳述する方法にて還元型補酵素 Q

10とカロチノイド類が共存する場 合の抗酸ィ匕力 (A)を測定した際に、その値が、同方法により測定した還元型補酵素 Q 単独の抗酸化力（B)とカロチノイド単独の抗酸ィ匕力（C)の和を上回ることを意味

10

する。具体的には、各々の抗酸ィ匕力の測定結果を下記評価式 a :

A/ (B + C) X 100 (評価式 a)

にあてはめた場合に、 100を超える、好ましくは 105以上、より好ましくは 110以上と なることを意味する。

[0017] または、還元型補酵素 Q とカロチノイド類が共存する場合の還元型補酵素 Q の

10 10 持つ抗酸化力が、還元型補酵素 Q

10を単独で用いた場合の抗酸ィ匕力を上回ることを 意味する。具体的には、各々の抗酸ィ匕力の測定結果を下記評価式 b _:

(A-O/B X 100 (評価式 b)

にあてはめた場合に、 100を超える、好ましくは 105以上、より好ましくは 110以上、 更に好ましくは 120以上、特に好ましくは 130以上となることを意味する。

[0018] 本発明で使用する還元型補酵素 Q

10は、例えば、合成、発酵、天然物からの抽出 等の従来公知の方法により得ることができるが、好ましくは、既存の高純度補酵素 Q

10 などの酸化型補酵素 Q

10、あるいは酸化型補酵素 Q

10と還元型補酵素 Q

10の混合物を

、一般的な還元剤、例えば、ハイドロサルファイトナトリウム (次亜硫酸ナトリウム）、水 素化ホウ素ナトリウム、ァスコルビン酸等を用いて還元することにより得ることができる [0019] 組成物中の還元型補酵素 Q 割合が少なすぎる場合には期待する抗酸化力が得

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られないため、組成物中の還元型補酵素 Q の割合は、普通 0. 01重量％以上、好

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ましくは 0. 1重量％以上、さらに好ましくは 1重量％以上、なお好ましくは 10重量％ 以上、とりわけ 30重量％以上、なかんずく 60重量％以上である。上限は特に制限さ れないが、経済的な観点等より、普通 90重量％以下、好ましくは 80重量％以下、より 好ましくは 70重量％以下である。

[0020] 本発明で用いる還元型補酵素 Q は単独でも良ぐ又、酸ィ匕型補酵素 Q との混合

10 10 物であっても良いが、補酵素 Q 全量中、還元型補酵素 Q の割合が 60重量％以上

10 10

のものが好ましぐ 70重量％以上のものがより好ましぐ 80%重量以上のものが更に 好ましぐとりわけ 90重量％以上のものが好ましぐ最も好ましくは 95重量％以上であ る。上限は 100重量％であり、特に限定はされないが、普通、 99. 9重量％以下であ る。

[0021] カロチノイド類としては、ァスタキサンチン、 j8—カロチン、 a—カロチン、リコピン、 クリプトキサンチン、ゼアキサンチン、ノレティン、カンタキサンチン、フコキサンチン、ビ タミン A等をあげることができる。中でも、ァスタキサンチン、 13—カロチン、 _a—カロ チン、リコピン、クリプトキサンチン、ルティン、ビタミン Aが好ましぐァスタキサンチン 、 β—カロチン、 _α—カロチン、リコピン、ルティン、ビタミン Αがより好ましぐァスタキ サンチン、 13一力ロチン、リコピン、ビタミン Aが更に好ましく、ァスタキサンチン、 13 カロチン、リコピンが特に好ましい。最も好ましくはァスタキサンチンである。これらの カロチノイド類は化学合成されたものでも良いし、天然物から抽出、さら〖こは精製され たものでも良い。

[0022] これらのカロチノイド類を含む天然物としては、藻類、酵母菌、植物プランクトン、果 実、野菜、ハーブ、甲殻類、卵等がある。

[0023] 本発明は還元型補酵素 Q 及びカロチノイド類を含有した組成物を用いることを特

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徴とする力 この時、還元型補酵素 Q に対するカロチノイド類の重量比は、普通 0. 0

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01以上、好ましくは 0. 01以上、さらに好ましくは 0. 05以上である。上限は特に制限 されないが、通常は、 10以下、好ましくは 1以下、さらに好ましくは 0. 1以下である。

[0024] また、本発明では組成物中に油脂を含んでも良い。本発明で使用する油脂として は、動植物からの天然油脂であってもよぐ合成油脂や加工油脂であってもよい。植 物油脂としては、例えば、ヤシ油、パーム油、パーム核油、アマ二油、つばき油、玄米 胚芽油、菜種油、米油、落花生油、コーン油、小麦胚芽油、大豆油、エゴマ油、綿実 油、ヒマヮリ種子油、カポック油、月見草油、シァ脂、サル脂、カカオ脂、ゴマ油、サフ ラヮー油、オリーブ油等を挙げることができる。動物油脂としては、例えば、豚脂、乳 脂、魚油、牛脂等を挙げることができる。更に、これら天然油脂を分別、水素添加、ェ ステル交換等により加工した油脂（例えば、硬化油)も挙げることができる。言うまでも なぐ中鎖脂肪酸トリグリセリド (MCT)、脂肪酸の部分グリセリド、プロピレングリコー ル脂肪酸エステル、リン脂質等も使用しうる。また、これらの混合物を使用しても良い

[0025] 中鎖脂肪酸トリグリセリドとしては、例えば、脂肪酸の炭素数が各々 6〜12、好ましく は 8〜12のトリグリセリドを挙げることができる。脂肪酸の部分グリセリドとしては、例え ば、脂肪酸の炭素数が各々 6〜18、好ましくは 6〜12のモノグリセリドゃジグリセリド を挙げることができる。

[0026] プロピレングリコール脂肪酸エステルとしては、例えば、脂肪酸の炭素数が、各々 6 〜18、好ましくは 6〜12のモノグリセリドゃジグリセリドを挙げることができる。

[0027] リン脂質としては、例えば、卵黄レシチン、精製大豆レシチン、ホスファチジルコリン 、ホスファチジルエタノールァミン、ホスファチジルセリン、スフインゴミエリン、ジセチル リン酸、ステアリルァミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチ ジルイノシトールァミン、カルジォリピン、セラミドホスホリルエタノールァミン、セラミド ホスホリルグリセロール、及び、これらの混合物等を挙げることができる。

[0028] 上記油脂のうち、取り扱い易さ、臭気等の面から植物油脂、合成油脂や加工油脂、 リン脂質が好ましい。これらは油脂の価格、還元型補酵素 Q およびカロチノイド類の

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安定性等を考慮して選定するのが好ましい。例えば、ヤシ油、パーム油、パーム核油

、菜種油、米油、大豆油、綿実油、ォリーブ油、サフラワー油、 MCT、リン脂質等が 好ましぐ米油、大豆油、菜種油、サフラワー油、 MCT、リン脂質等が特に好ましい。

[0029] これらの油脂の重量に対する還元型補酵素 Q の重量比は、普通、 0. 1%以上で

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あり、好ましくは 1%以上、さらに好ましくは 10%以上である。上限は特に制限されな いが、普通 90%以下、好ましくは 80%以下、さらに好ましくは 70%以下である。

[0030] 本発明の組成物には還元型補酵素 Q およびカロチノイド類の他に、他の素材が

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適宜添加されていてもよい。このようなものとしては、特に制限されず、例えば、賦形 剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、有 効成分の溶解補助剤、安定化剤等が挙げられる。

[0031] 上記賦形剤としては特に制限されないが、例えば、白糖、乳糖、ブドウ糖、コーンス ターチ、マン-トール、結晶セルロース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等を挙げ ることがでさる。

[0032] 上記崩壊剤としては特に制限されな 、が、例えば、でんぷん、寒天、クェン酸カル シゥム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン、結晶セルロース、カルボ キシメチルセルロース、トラガント等を挙げることができる。

[0033] 上記滑沢剤としては特に制限されな 、が、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシゥ ム、ポリエチレングリコール、シリカ、硬ィ匕植物油等を挙げることができる。

[0034] 上記結合剤としては特に制限されな 、が、例えば、ェチルセルロース、メチルセル ロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、トラガント、シェラック、ゼラチン、ァラビ ァゴム、ポリビュルピロリドン、ポリビュルアルコール、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸

、ソルビトール等を挙げることができる。

[0035] 上記酸ィ匕防止剤としては、特に制限されな!、が、例えば、ァスコルビン酸、トコフエ ロール、亜硫酸水素ナトリウム、チォ硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、クェン酸 等を挙げることができる。

[0036] 上記着色剤としては特に制限されないが、例えば、医薬品、食品に添加することが 許可されて ヽるもの等を挙げることができる。

[0037] 上記凝集防止剤としては特に制限されないが、例えば、ステアリン酸、タルク、軽質 無水ケィ酸、含水二酸ィ匕ケィ酸等を挙げることができる。

[0038] 上記吸収促進剤としては特に制限されな!、が、例えば、高級アルコール類、高級 脂肪酸類、ショ糖脂肪酸エステルゃソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソ ルビタン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の界面活性剤等を挙げる ことができるが、還元型補酵素 Q やカロチノイド類の安定性等の観点より、ポリグリセ リン脂肪酸エステルが特に好ましい。なかでも、 HLBが下限として、通常 4以上、好ま しくは 5以上、より好ましくは 6以上、さらに好ましくは 7以上、特に好ましくは 8以上で あり、また、上限として通常 12以下、好ましくは 11以下、より好ましくは 10以下のもの が好適である。

[0039] ポリグリセリン脂肪酸エステルの好ま 、具体例は、ジグリセリンモノ力プレート、ジ グリセリンモノラウレート、テトラグリセリンモノラウレート、ジグリセリンモノォレエート、ジ グリセリンジォレエート、テトラグリセリンモノォレエート、デカグリセリンペンタォレエ一 トであり、さらには、ジグリセリンモノラウレート、ジグリセリンモノォレエートが好ましぐ 最も好ましくはジグリセリンモノォレエートである。

[0040] 上記有効成分の溶解補助剤としては特に制限されな!ヽが、例えば、フマル酸、コハ ク酸、リンゴ酸等の有機酸等を挙げることができる。

[0041] 上記安定化剤としては特に制限されないが、例えば、安息香酸、安息香酸ナトリウ ム、パラォキシ安息香酸ェチル等が挙げられる。

[0042] また、本発明の組成物中には還元型補酵素 Q およびカロチノイド類以外の活性成

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分を含んでも良い。これらの活性成分としては、例えば、アミノ酸、ビタミン、ミネラル、 ポリフエノール、有機酸、糖類、ペプチド、タンパク質等を挙げることができる。

[0043] 上記素材のなかでも、吸収促進剤、とりわけポリグリセリン脂肪酸エステルを添加し た場合には、還元型補酵素 Q およびカロチノイド類の生体吸収性を大きく高めること

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ができ、本発明の組成物が有する抗酸ィ匕作用を効率的に発揮させることができる。

[0044] 還元型補酵素 Q およびカロチノイド類を含有する組成物は、そのまま使用すること

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ができる力 それらをカプセル剤（ノヽードカプセル、ソフトカプセル、マイクロカプセル )、錠剤、シロップ、飲料等の経口投与形態に更に加工して、経口剤として使用する こともできる。また、練り歯磨き等のための形態に更に加工しても使用しうる。特に好ま しくは、カプセル剤であり、とりわけ、ソフトカプセルである。

[0045] カプセル基材としては特に制限されず、牛骨、牛皮、豚皮、魚皮等を由来とするゼ ラチンをはじめとして、他の基材、例えば、食品添加物として使用しうるカラギーナン 、アルギン酸等の海藻由来品やローカストビーンガムやグァーガム等の植物種子由 来品、プルラン、カードラン等の微生物由来品やセルロース類を含む製造用剤も使 用しうる。

[0046] また、本発明の還元型補酵素 Q およびカロチノイド類を含有する組成物は、一般

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的な食品に加えることもできる。例えば、パン、パスタ、雑炊、米飯、ビスケット、クラッ カー、ケーキ、菓子、ガム、キャンディ一等に適宜添加して用いることもできる。言うま でもなぐ他の食品形態として利用することも妨げない。

[0047] さらに、本発明の還元型補酵素 Q およびカロチノイド類を含有する組成物は、皮

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膚に直接塗布する形態として、皮膚用剤として使用することもできる。この場合、剤型 は、特に限定されるものではなぐ例えば、適当な基剤中に上記組成物を溶解または 混合分散させて、クリーム状、ペースト状、ジ リー状、ゲル状、乳液状、液状の形状 になされたもの（軟膏剤、リニメント剤、ローション剤、スプレー剤など）、基剤中に上記 薬物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したもの (パップ剤など)、 粘着剤中に上記組成物を溶解または混合分散させたものを支持体上に展延したも の（プラスター剤、テープ剤など）が挙げられる。

[0048] 本発明の組成物、並びに、当該組成物を有効成分とする経口剤あるいは皮膚用剤 は、相乗的に高められた活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去作用を有し、生 体を活性酸素またはフリーラジカルが原因となる障害がら防護するのに有用である。

[0049] また、還元型補酵素 Q 10とカロチノイドの共存により発揮される相乗的に高められ た活性酸素及び Z又はフリーラジカルの消去作用は、食品、医薬製品または化粧品 の酸ィ匕防止にも有用である。すなわち、食品、医薬製品または化粧品中に還元型補 酵素 Q とカロチノイド類を共に含有させることにより、食品、医薬製品または化粧品

10

の酸ィ匕を効果的に抑制することができる。

[0050] 本方法によって酸化が抑制される食品、医薬製品または化粧品としては特に制限 されないが、酸化されやすい油脂を含有する食品、医薬製品または化粧品の場合が 特に有効である。

[0051] 食品、医薬製品または化粧品中に還元型補酵素 Q とカロチノイド類を共に含有さ

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せる方法としては特に制限されず、これら製品の製造過程において還元型補酵素 Q 及びカロチノイド類を添加しても良いし、できあがった製品に、別途調整した還元型

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補酵素 Q 及びカロチノイド類を含有する組成物を添加してもよ ヽ。 実施例

[0052] 以下に実施例を揚げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例の みに限定されるものではない。

[抗酸化力の測定法]

(測定法 1)

抗酸ィ匕力測定の第 1法として、酸ィ匕反応により生じるチォバルビツール酸反応性物 質（TBARS)の量を測定する手法を用いた（Buege J. A. and Aust S.D.; Methods EnzymoL, 1978, 52, 302)。

[0053] すなわち、本方法では、まず、ラット脳を約 2. 5倍重量の生理食塩水中でホモジナ ィズし、脳ホモジネートを得る。この脳ホモジネート 80 1に、試料として抗酸化物質 を含んだエタノール溶液 30 μ 1、イーグル MEM培地 120 μ 1、 CuSO (240 M)お

4

よび FeCl (240 ;ζ Μ)を添加し、 37。Cに保った。 27時間後、 20%TCA溶液 0. 9ml

3

と 0. 67%チォバルビツール溶液 0. 9mlを添カ卩し、 100°Cで 30分間加熱した。水冷 、更に遠心分離後、上清を分取し、 532nmの吸光度を測定した。本測定系では抗 酸ィ匕物質の抗酸ィ匕力が強いほど TBARSの量が少なくなる力 抗酸ィ匕物質を添カロし な 、場合の TBARS量に対し、抗酸ィ匕物質を添カ卩した場合に減少した TBARS量の 割合を、その抗酸化物質の抗酸化力（％)とした。

[0054] (測定法 2)

TBARSは赤色物質のため、カロチノイドの種類によっては、上記測定法 1では、正 確な吸光度を測定することができない場合がある。そこで、 DPPH

(U-diphenyl-2-picrylhydrazyl)を用 ヽた分光測定法も用!、た (篠原和毅 鈴木建夫 ；食品機能研究法, 2000,218)。

[0055] 本測定法 2では、まず、 400 μ Μの DPPHエタノール溶液 12mlに 200mMの ME S緩衝液 (pH6. 0) 12mlをカ卩え、さらに 12mlのエタノールをカ卩えた混合液を調製し た。この混合液 0. 9mlに抗酸ィ匕物質を含んだエタノール溶液 0. 6mlを添カ卩し、 20 分後、 510nmでの吸光度を測定した。本測定系では抗酸化物質の抗酸化力が強い ほど吸光度が小さくなる力 カテキンを用いて作成した検量線より各抗酸ィ匕物質の抗 酸ィ匕カを定量した。すなわち、まず、十分量のカテキンにより DPPHラジカルを消去 して最も低い値の吸光度を示した場合の抗酸ィ匕力を 100%とし、カテキンを添加しな い場合、つまり DPPHラジカルが全量残存している場合の吸光度を抗酸ィ匕力が 0% とした。そして、この 2点より作成した検量線を用い、各抗酸化物質を添加した場合の 吸光度から抗酸化力（％)を求めた。

[評価式]

上記の測定法によって、還元型補酵素 Q

10とカロチノイドを併用した場合の抗酸ィ匕 力（Aとする）、還元型補酵素 Q 単独での抗酸化力（Bとする）、及び、カロチノイド単

10

独での抗酸化力（Cとする）を測定する。そして、併用時の抗酸化力と、還元型補酵 素 Q

10単独の抗酸ィ匕力とカロチノイド単独の抗酸ィ匕力の和 (相加効果)を比較し、併 用による相乗効果の有無を判定する。

[0056] 本発明においては、還元型補酵素 Q とカロチノイドの併用による相乗効果の有無

10

は、正確を期すために下記の 2通りの方法により評価した。

(評価式 a) A/ (B + C) X 100

(評価式 b) (A-O/B X 100

式中、 Aは還元型補酵素 Q 10とカロチノイドを併用した場合の抗酸ィ匕力、 Bは還元型 補酵素 Q

10単独での抗酸化力、 Cはカロチノイド単独での抗酸ィ匕力を表す。

[0057] 評価式 aは、還元型補酵素 Q 及びカロチノイドの併用時の抗酸化と、個々の単独

10

の抗酸ィ匕力の和とを比較するものである。相加的な効果の場合、理論値は 100となり 、 100を超える結果となれば、相乗効果があると判断できる。

[0058] 一方、評価式 bは、還元型補酵素 Q とカロチノイドを併用した場合の還元型補酵素

10

Q

10の抗酸化力と、還元型補酵素補酵素 Q

10単独の抗酸化力と比較するものである。 式の分子において、還元型補酵素 Q 10とカロチノイドを併用した場合の抗酸化力か らカロチノイド単独の抗酸ィ匕力を減じており、相加的な効果しかない場合には、この 値は還元型補酵素補酵素 Q 単独の抗酸化と等しくなる。従って、式の理論値は 10

10

0となり、 100を超える結果となれば、相乗効果があると判断できる。

[0059] (参考例）

lOOOgのエタノール中〖こ、 100gの酸化型補酵素 Q 、 60gの L—ァスコルビン酸を

10

加え、 78°Cにて撹拌し、還元反応を行った。 30時間後、 50°Cまで冷却し、同温を保 持しながらエタノール 400g、水 100gを添カロした。このエタノール溶液を撹拌しながら 、 10°CZ時間の冷却速度で 2°Cまで冷却し、生成した結晶を濾別した。得られた湿 結晶を冷エタノール、冷水の順で洗浄した後に圧乾燥することにより、白色の乾燥結 晶 95gを得た (有姿収率 95モル％；)。なお、減圧乾燥を除くすべての操作は窒素雰 囲気下で実施した。得られた結晶の還元型補酵素 Q

10 Z酸化型補酵素 Q の重量比

10 は 99. 5/0. 5であった。

[0060] (実施例 1)

参考例 1で得た還元型補酵素 Q 及び 又はカロチノイド類の一つであるァスタキ

10

サンチンのエタノール溶液 (各々 lOOmM)を試料とし、上記測定法 1にて、抗酸化力 を測定した。各々の測定結果を上記評価式 aおよび評価式 bに当てはめ、相乗効果 の有無を判定した。表 1に示す通り、評価式 aでは 135、評価式 bでは 205となり、還 元型補酵素 Q

10およびカロチノイド類が共存した場合の明らかな抗酸ィ匕力の相乗効 果が確認された。

[0061] [表 1]

A ： 還元型補酵素 Q₁₀とァスタキサンチンを合わせて用いた場合の抗酸化力 B ： 還元型補酵素 Q₁₀単独の抗酸化力

C ： ァスタキサンチン単独の抗酸化力

[0062] (実施例 2)

参考例 1で得た還元型補酵素 Q 及び 又は

10 |8—力ロチン、還元型補酵素 Q 及

10 び Z又はリコペンのエタノール溶液 (各々 25 μ M)を試料とし、測定法 2にて、抗酸 化力を測定した。各々の測定結果を上記評価式 aおよび評価式 bにあてはめ、相乗 効果の有無を判定した。表 2に示す通り、還元型補酵素 Q と /3一力ロチンの場合、

10

評価式 aでは 107、評価式 bでは 114と算出された。また、還元型補酵素 Q とリコべ

10 ンの場合、評価式 aでは 105、評価式 bでは 105と算出された。以上より、還元型補酵 素 Q と —カロチン、あるいは、還元型補酵素 Q とリコペンが共存した場合の明ら 力な抗酸ィ匕力の相乗効果が確認された。

[0063] [表 2]

A：還元型補酵素 Q₁₀と 一カロチン又は、還元型補酵素 Q₁₀とリコピンを合わせて用いた場合の抗酸化力

B：還元型補酵素 Q₁₀単独の抗酸化力

C： jS—力ロチン又はリコピン単独の抗酸化力

[0064] (比較例 1)

参考例 1で得た還元型補酵素 Q およびビタミン Eを使用し、実施例 1と全く同様の

10

検討を行った。その結果、評価式 aでは 90、評価式 bでは 82となり、還元型補酵素 Q とビタミン Eの場合には、相乗効果は認められな力つた。

[0065] (実施例 3)

米油、硬化油、蜜蠟、レシチン、ジグリセリンモノォレエートの混合物に参考例 1で 得た還元型補酵素 Q およびァスタキサンチンを添加し、常法により下記成分より成 るゼラチンのソフトカプセル製剤を得た。

[0066] 還元型補酵素 Q 60重量部

10

ァスタキサンチン 10重量部

米油 500重量部

ジグリセリンモノォレエート 180重量部

硬化油 170重量部

蜜蠟 60重量部

レシチン 20重量部

[0067] (実施例 4)

中鎖脂肪酸トリグリセリド (MCT、炭素数 8 :炭素数 10 = 6 :4)に参考例 1で得た還 元型補酵素 Q およびビタミン Aを添加し、常法により下記成分より成るゼラチンのソ フトカプセル製剤を得た。 [0068] 還元型補酵素 Q 60重量部

10

ビタミン A 5重量部

中鎖脂肪酸トリグリセリド 935重量部

[0069] (実施例 5)

参考例 1で得た還元型補酵素 Q およびリコピン（トマト抽出物）をプロパノールに溶

10

解し、これを微結晶セルロースに吸着させた後、減圧下で乾燥した。これに、窒素雰 囲気下でトウモロコシ澱粉、乳糖、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸マグネ シゥムを混合し、次いでポリビュルピロリドンの水溶液を結合剤としてカロえ、常法により 顆粒ィ匕した。これに滑沢剤としてタルクを加えて混合した後、錠剤に打錠した。

[0070] 還元型補酵素 Q 150重量部

10

リコピン 10重量部

トウモロコシ澱粉 200重量部

乳糖 120重量部

カノレボキシメチノレセノレロース 80重量部

微結晶セルロース 300重量部

ポリビュルピロリドン 40重量部

ステアリン酸マグネシウム 20重量部

タルク 80重量部

[0071] (実施例 6)

参考例 1で得た還元型補酵素 Q およびァスタキサンチンを含有する下記組成のク

10

リームを常法により調製した。

[0072] 還元型補酵素 Q 10重量部

10

ァスタキサンチン 1重量部

グリセロールソルビタン脂肪酸エステル 60重量部

微結晶性ワックス 10重量部

ォリーブオイル 30重量部

流動パラフィン 180重量部

ステアリン酸マグネシウム 10重量部 プロピレングリコーノレ 37重量部 硫酸マグネシウム 7重量部 脱塩水 655重量部

Claims

請求の範囲

[1] 還元型補酵素 Q

10及びカロチノイド類を含有し、活性酸素及び Z又はフリーラジカル の消去作用が相乗的に高められた組成物。

[2] 還元型補酵素 Q に対するカロチノイド類の重量比が 0. 001〜： LOである請求項 1記

10

載の組成物。

[3] さらに油脂を含有する請求項 1記載の組成物。

[4] 油脂の重量に対する還元型補酵素 Q の重量比が 0. 1%以上である請求項 3記載

10

の組成物。

[5] 経口投与形態に加工された請求項 1〜4の 、ずれかに記載の組成物。

[6] 皮膚に直接塗布する形態を有する請求項 1〜4の 、ずれかに記載の組成物。

[7] 請求項 1〜4の 、ずれかに記載の組成物を有効成分とする経口投与剤。

[8] 請求項 1〜4のいずれかに記載の組成物を有効成分とする皮膚用剤。

[9] 請求項 1〜4の ヽずれかに記載の組成物を用いることを特徴とする活性酸素及び Z 又はフリーラジカルの消去方法。

[10] 食品、医薬製品または化粧品の酸ィ匕防止方法であって、食品、医薬製品または化粧 品に、還元型補酵素 Q とカロチノイド類を共に含有させることを特徴とする方法。