WO2003102167A1 - Procede destine a cultiver des animaux planctoniques - Google Patents

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WO2003102167A1
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dha
chlorella
euglena
zooplankton
enhanced
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PCT/JP2002/005393
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French (fr)
Inventor
Masahiro Hayashi
Bong Sun Park
Original Assignee
Itochu Techno-Chemical Inc.
Usc Limited
Bio-Link Co. Ltd.
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor

Definitions

  • the present invention provides a method for culturing zooplankton, which comprises culturing zooplankton by adding chlorella and DHA-enhanced Nudarena at a specific weight ratio to seawater containing zooplankton.
  • the present invention relates to a method for culturing animal blankton, comprising chlorella and DHA-enhanced eudarena in a specific weight ratio.
  • worms larvae and larvae immediately after breeding are similar to larvae (Brachionus plicatUis, hereafter referred to as worms) and Artemia (Artemia saliiia), which are tens of days after hatching. The evening comes with zooplankton as food.
  • planktons usually feed on baker's yeast and chlorella, but fish that grow on prey on plankton that are nutritionally biased using only these as feeds will have deformation, abnormal coloration (whitening), There are problems such as low yield. Therefore, to solve these problems, DHA (docosahexaenoic acid), EPA (eicosapenic acid), vitamin E and vitamin B ! 2 are used as nutritional supplements for zooplankton.
  • DHA docosahexaenoic acid
  • EPA eicosapenic acid
  • vitamin E and vitamin B ! 2 are used as nutritional supplements for zooplankton.
  • DHA is considered to be particularly important for fortifying the blankton because it has a significant effect on the biological activity of fish, and is used by emulsifying DHA in the form of microcapsules.
  • microcapsules tend to adhere to the outer surface of plankton due to the lipophilic nature of DHA, and it is doubtful that plankton does indeed take up DHA.
  • DHA may be removed from the water and degrade water quality. Therefore, in recent years, DHA was previously incorporated into Euglena, a unicellular eukaryote rich in high quality proteins and vitamins (Oil Chemistry, Vol. 42, No. (1993) ⁇ .265-271 and Biosci. Biotech. Biochem. ,? 57 (2), p.352'353 , 1993), a method of providing the zooplankton is proposed as a fortification agent.
  • DHA-enhanced euglena C1 rela and DHA-containing euglena (hereinafter referred to as “DHA-enhanced euglena”) are used at a specific weight and ratio, they are not given in excessive amounts. Also found that zooplankton could be cultured to the same extent as before, and completed the present invention.
  • chlorella and]) HA-enhanced euglena are added to seawater in the presence of zooplankton at a dry weight ratio of 1.5: 1 to 4.5: 1.
  • the composition used for cultivation of the work blank ton is provided.
  • Figure 1 is a graph showing the population (A) and the DH content (B) of the bugs fed by feeding Kurela and DHA enriched euglena in various combination ratios. Density 840 individuals / ml).
  • Fig. 2 is a graph showing the population (A) and the DHA content (B) of the insects cultured by feeding Chlorella and DHA-enhanced euglena at the combined ratio of the ears (Emperor initial density) 100 individuals / mi).
  • Fig. 3 is a graph showing the population (A) and the DHA content (B) of the insects fed by feeding Chlorella and Euglena enriched with DHA in various combinations (the initial density of insects was 1100 individuals / ml). Best mode for implementing
  • the chlorella may be any single-cell algae belonging to the order Chlorococcal, and its type is not particularly limited. Specifically, Chlorella 'Purugarisu (Chlorella vulgaris), Chlorella - Birenoi Dosa (Chlorella pyrenoidsa) s Chlorella' Sadzukarofui La (Chlorella sacharophila), and the like chlorella 'Regiyurarisu (Chlorella regularise Black these' Soroki two Ana (Chlorella sorokiniaiia) However, a commercially available product such as raw chlorella ⁇ 2 (manufactured by Ku Cirrella Kogyo Co., Ltd.) may also be used. Euglena, which contains a higher proportion of DHA than normal wild-type euglena, which contains DHA.
  • Such euglena are of the order Eugleiia, for example Euglena gracilis (Euglena gracilis), euglena 'Eglena gracilis var.bacillaris) s euglena * Euglena viridis can be obtained by culturing Euglena in a DHA-containing medium using Astasia-longa (Astasia longa) or the like, or by a method known in the art such as gene recombination. However, the method by culturing in a DHA-containing medium is simple and efficient.
  • DHA may be added in advance to the medium before culturing or may be added to the medium during culturing, but preferably]) HA is in the form of free fatty acids, and is used in a medium such as Koren's Hattoner's medium or a Vietnamese medium. It is added to a normal medium in advance at a concentration of 0.5 to 1%, and cultured by aeration and stirring at pH 2.0 to 7.5 at 20 to 35 ° C for several hours to 10 minutes. In this way, DHA enriched euglena with more than 60% of the total fatty acids in euglena can be obtained.
  • DHA Kyo-Dai-I-Grena may be a commercially available product.
  • D-ho-Gura-D-I-Grena a docosa-Grena having DHA incorporated into Gracilis (manufactured by Harima Chemicals, Inc.), may be used. Good.
  • Such chlorella and DHA enriched euglena can be used in seawater where zooplankton exists in a dry weight ratio of 1.5: 1 to 4,5: 1 regardless of the type of animal blankton and the temperature conditions of culture. By adding zooplankton, zooplankton can be efficiently cultured without providing these in excess.
  • Chlorella's Infanjujuro is 1.5, 1.6, 1, 7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2, 7, 2.8, 2.9, 3.0, 3, 1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3-7, 3, 8, 3.9, 4.0, 4.1, 4, 2, 4.3, 4.4, 4.5 times
  • chlorella and DHA enriched grena are in the range of 2.5: 1 to 3,5: 1, particularly preferably 3: 1 weight! : Ratio is preferred.
  • chlorella and DHA-enhanced euglena may be changed as appropriate depending on the scale of culture and the initial density of plankton.
  • the initial density of plankton is 840 individuals / ml in a 1 L culture scale
  • Under normal zooplankton culture conditions ie 25-30.
  • Under conditions of C and a pH of 8,0 to 8,3, 65 mg of dry heavy halo and 20 m of dry heavy water can be used. This allows cultivation of plankton to a level equivalent to that given only chlorella with a dry weight of 30 mg, a common use in the art.
  • Chlorella and DHA-enhanced euglena may be added at the same time, or may be added separately.However, from the viewpoint of simplicity of operation and rapid culturing, both are added simultaneously. It is preferred to add.
  • chlorella and DHA-enhanced euglena is not particularly limited, but it is preferable that chlorella is a cell suspension and DHA-enhanced euglena is a solid such as a paste or a dry powder.
  • Plankton existing in seawater to which chlorella and DHA-enhanced euglena are added include freshwater fish such as eel, marine fish such as red sea bream, hamachi, flounder, and soy, and crustaceans such as shrimp Zooplankton that can be used as a feed for organisms that require highly unsaturated fatty acids as essential fatty acids, such as molluscs such as squid and squid, such as pit worms, artemia, water flies, and cohopods. And Artemia. Animal blanktons obtained by the method of the present invention contain 2% or more DHA by dry weight.
  • zooplankton obtained by the method of the present invention not is hindered be subjected to further fortification usually fortification agent, if example embodiment other DHA, EPA, vitamin E and vitamin B 12, appropriately, It can be added to seawater in the usual way and given to plankton.
  • fortification agent if example embodiment other DHA, EPA, vitamin E and vitamin B 12, appropriately, It can be added to seawater in the usual way and given to plankton.
  • chlorella and DHA-enhanced grena which have been stored separately, may be used at the same time.However, the use of a composition prepared in advance in the form of the composition described below is convenient. .
  • Chlorella and DHA-enhanced Euglena have a specific ratio, that is, 1.5 ::!
  • a composition for use in cultivating animal blankton combined in a dry weight ratio of ⁇ 4.5: 1.
  • Chlorella and DHA enriched euglena can be formulated into compositions according to methods known in the art, for example, by mixing a chlorella cell suspension with a DM enriched euglena paste. A composition can be obtained.
  • composition of the present invention may be appropriately blended vitamin E and bicycloalkyl evening Min B 12 such Nozomu Tokoro things ⁇ .
  • Example 1 The optimal feeding amount of D. cholera to the worm is generally 130 mg / 100,000 worms. Therefore, the amount of chlorella added was reduced using 100,000 Chlorella Oing / plum as a control, and the decrease was supplemented with DHA-enhanced euglena, and the optimal combination ratio of both was examined.
  • the initial density of the insect was 840 insects / ml.
  • the raw D-rela used was raw clara V12 (manufactured by Kuguchi Rera Kogyo Co., Ltd.), and the DHA-enhanced euglena used was docosagurena (manufactured by Harima Chemicals, Inc.).
  • 1L of seawater as a medium worms were cultured for 1 to 4 days after feeding Chlorella and DHA enriched Euglena at 28 ⁇ 0.5 ° C and pH 8.0-8.3.
  • DHA-enhanced euglena is considered to have about three times the food value of Chlorella.
  • Example 2 A method similar to that of Example 1 was repeated, except that the initial density of the insect was reduced to a low density of 100 individuals / l.
  • Example 2 The same method as in Example 1 was repeated except that the initial density of the insect was set at a high density of 1100 individuals / ml, and seawater It used for actual cultivation of animal plankton was used as a medium.
  • Table 5 and Fig. 3A show the results of the cultivation of the insects. Are shown in Table 6 and Figure 3B.
  • Table 5
  • Example 2 As in Example 2, in the experimental group to which 65 m of chlorella and 20 mg of DHA-enhanced euglena were added, good growth of plum was observed, and P was able to contain a sufficient amount of DHA in the plum.
  • a method for culturing zooplankton more specifically, culturing zooplankton by adding chlorella and DHA-enriched euglena at a specific weight ratio to seawater where animal blankton exists.
  • the present invention also provides a method for culturing zooplankton, and a composition used for culturing zooplankton, wherein chlorella and DHA-enhanced euglena are blended in a specific ratio of bi-agar.
  • the method according to the present invention can reduce the use of feed for plankton: and can incorporate DH necessary for fish growth into zooplankton.

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Description

明 細 碧
動物プランクトンの培養方法 技術分野
この究明は、動物プランクトンの培養方法に関する。さらに詳しくは、 この発明は、 動物プランクトンの存在する海水に、 クロレラと DHA強化 ュ一ダレナを特定の重量比で添加して動物プランク卜ンを培養すること を特徴とする、 動物ブランクトンの培養方法、 及びクロレラと DHA強化 ユーダレナが特定の重量比で配合されてなる動物ブランクトンの培養に 用いられる組成物に闋する。 背景技術
一般に、 海洋魚において、 毈化直後の仔稚魚は、 孵化から数十日のあ いだシォミズヅボヮムシ（Brachionus plicatUis、 以下 「ヮムシ」 とす る）やアルテミァ（Artemia saliiia)のような動物プランクトンを餌料とし て成宵する。
これらプランクトンは通常パン酵母やクロレラを餌料とするが、 これ らのみを餌料とした栄養上の片寄りがあるプランクトンを捕食して成育 した魚類には、 変形や体色異常（白化)、 肉の歩留まり低下などの問題が 見られる。 このため、 これらの問題の解決を目的として、 DHA (ドコサへ キサェン酸)、 EPA (エイコサペン夕ェン酸)、 ビタミン E及びビタミン B!2 などが動物プランクトンの栄養強化剤として使用されている。
これらのうち、 DHAは、魚類の生理活性に大きな影響を及ぼすことから ブランクトンの栄養強化に特に重要と考えられており、 乳化した DHA を マイクロカプセルの形態にするなどして使用されている。 しかし、 このようなマイクロカプセルは、 DHAが親油性であるためにプ ランクトンの外表面に付着する傾向にあり、 プランクトンが実際に DHA を取り込んでいるかどうか疑わしい。 また、 プランクトンに DHAが取り 込まれないと、 DHAが水中で酸ィヒきれ、 水質を劣化させる恐れがある。 そこで、 近年、 良質のタンパク質やビタミンを豊富に含有する単細胞 真核生物であるユーグレナにあらかじめ DHAを取り込ませ (油化学、第 42 卷第 号（1993) ρ.265-271 及び Biosci. Biotech. Biochem, ? 57(2) , p.352'353, 1993)、 これを栄養強化剤として動物プランクトンに与える 方法が提案されている。
しかしながら、 このような栄養強化剤が開発されても、 栄養不良など のリスクを回避する観点から、 動物プランクトンの培養では、 ク Dレラ など通常の餌料と栄養強化剤をそれそれ大蛩に、 しかも異なる時点で与 えるという従来からのニ段階の方法が採用されている（特！)平 3 277241 号)。
この従来法では、 クロレラなどの餌料と栄養強化剤の ¾方を大量に必 要とするのみならず、 プランクトンの培養が長期閭にわたるという問題 があることが指摘されている。 発明の開示
発明者らは、ク C1レラと DHAを含有させたュ一グレナ (以下、 「DHA強化 ュ一グレナ」 とする）とを特定の重&比で用いると、 これらを過剰な量で 与えなくても、 従来と同程度に動物プランクトンを培養し得ることを見 出し、 本発明を完成するに至った。
したがって、 本発明によれば、 動物プランクトンの存在する海水に、 クロレラと ]) HA強化ユーグレナを 1.5： 1〜4.5 : 1の乾燥重量比で添加し て動物プランクトンを培養することを特徴とする、 動物プランクトンの 培養方法、 及びク Dレラと DHA強化ュ一グレナが、 1.5 ; 1〜4.5:1の乾燥 重跫比で配合されてなることを特徴とする、 勤物ブランクトンの培養に 用いられる組成物が提供される。 図面の簡単な説明
図 1は、 種々の組合せ比のク Dレラと DHA強化ュ一グレナを給餌する ことにより培養したヮムシの個体数 (A)及びヮムシ中の DH 含量 (B)を示 すグラフである（ヮムシ初期密度 840個体/ ml )。
図 2は、 穗々の組合せ比のクロレラと DHA強化ュ一グレナを給餌する ことにより培養したヮムシの個体数 (A)及びヮムシ中の DHA含量 (B)を示 すグラフである（ヮムシ初期密度 100個体 /mi )。
図 3は、 種々の組合せ比のクロレラと DHA強化ユーグレナを給餌する ことにより培養したヮムシの個体数 (A)及びヮムシ中の DHA含量 (B)を示 すグラフである（ヮムシ初期密度 1100個体/ ml )。 明を実施するための最良の形態
この発明において、 クロレラは、 ク Dレラ目（Chlorococcal ）に属す る単細胞緣藻であればよく、その種類は特に限定されなレ、。具体的には、 クロレラ ' プルガリス（Chlorella vulgaris)、 クロレラ -ビレノィ ドサ (Chlorella pyrenoidsa) s クロレラ ' サヅカロフイ ラ (Chlorella sacharophila), クロレラ ' レギユラリス (Chlorella regularise クロ レラ 'ソロキ二ァーナ (Chlorella sorokiniaiia)などが挙げられるが、 生 クロレラ Π2(ク ciレラ工業 (株)製)のような市販品を用いてもよい。 また、 DHA強化ュ一グレナとは、 その総脂肪酸に対し 2〜3%の割合で DHA を含有する通常の野生型ユーグレナよりも高い割合で DHAを含有す るュ一グレナを意味する。
このようなュ一グレナは、 ユーグレナ目（Eugleiia)に属するもの、 例え ばュ一グレナ 'グラシリス（Euglena gracilis), ュ一グレナ 'グラシリ ス ·ノ シラス変種（Euglena gracilis var.bacillaris)s ュ一グレナ * ビ リデイス（Euglena viridis). ァスタシァ -ロンガ (Astasia longa)など を用いて、 DHA含有培地でユーグレナを培養するか、又は遗伝子組換えな ど当該技術分野で公知の方法によって得ることができるが、 DHA含有培地 での培養による方法が簡便であり、 効率的である。
この場合、 DHAは培養前の培地に予め加えてもよく、培養中に培地に加 えてもよいが、 好ましくは ]) HA を遊離脂肪酸の形態で、 コーレン 'ハツ トナー培地ゃハヅトナ一培地等の通常の培地に 0.5〜1%の滠度で予め添 加し、 pH 2.0〜7, 5、 20〜35°Cで数時間〜一晚、通気攪拌培養することに より行われる。 このようにして、 ユーグレナ中の総脂肪酸の 60%以上が DHAの DHA強化ュ一グレナを得ることができる。
なお、クロレラと同様に、 DHA強ィ匕ュ一グレナは市販品であってもよく、 例えばュ一グレナ 'グラシリスに DHAを取り込ませたドコサュ一グレナ (ハリマ化成 (株)製)を用いてもよい。
このようなクロレラ及び DHA強化ュ一グレナは、 動物ブランクトンの 種類、 培養の温度条件などにかかわらず、 乾燥重量比で 1.5 : 1〜4, 5 : 1の 範囲で動物プランクトンの存在する海水に添加することにより、 これら を過剰量で与えなくとも、 動物プランクトンを効率的に培養することが できる。
すなわち、 クロレラの乾煥重蛩は、 DHA強化ュ一グレナ 1重量に対して 1.5、 1.6、 1 , 7、 1.8、 1.9、 2.0、 2.1、 2.2、 2.3、 2.4、 2.5、 2.6、 2,7、 2.8、 2. 9、 3.0、 3，1、 3.2, 3.3、 3.4、 3.5、 3.6、 3- 7、 3，8、 3.9、 4.0、 4.1、 4, 2、 4.3、 4.4、 4.5倍であってもよく、 好ましくは、 クロレラ及び DHA強化ュ一グレナを 2.5 : 1〜3, 5 : 1の範囲、 特に好ましくは 3:1の重！： 比で用いることが好ましい。
クロレラ及び DHA強化ユーグレナの実際の使用黛は、 培養の規模及び プランクトンの初期密度などにより適宜変更されるが、例えば 1 Lの培養 規模でプランクトンの初期密度がヮムシ 840個体/ mlである場合には、通 常の動物プランクトンの培義条件下、すなわち 25〜30。Cかつ pH 8, 0〜8，3 の条件下、 乾燥重暈 65mgのクロレラ及び乾燥重跫 20m の DHA強化ュ一 グレナを用いることができる。 これにより、 当該技術分野で一般的な使 用量である、 乾燥重量 I30mgのクロレラのみを与えた場合と同等レベル までプランクトンを培養することができる。
上記の重量比である限り、 クロレラと DHA強化ュ一グレナは、 同時に 添加してもよく、 又は個別に添加してもよいが、 操作の簡便性及び培養 の迅速化の観点から、 両者を同時に添加することが好ましい。
また、クロレラ及び DHA強化ュ一グレナの形態は特に限定されないが、 クロレラは細胞懸濁液、 DHA強化ュ一グレナはペースト又は乾燥粉末など の固体であることが好ましい。
このようなクロレラと DHA強化ユーグレナが添加される海水中に存在 するプランクトンとしては、 ァュなどの淡水魚、 マダイ、 ハマチ、 ヒラ メ、 ソィなどの海洋魚のほか、 ェビ■力二などの甲殻類、 イカ '夕コな どの軟体動物など、 高度不飽和脂肪酸を必須脂肪酸として要求する生物 の餌料となり得る動物プランクトン、 例えばヮムシ、 アルテミア、 ミジ ンコ、 コぺホ一ダ類等が挙げられ、 特にヮムシ及びアルテミアであるこ とが好ましい。 この発明の方法により得られる動物ブランクトンは、乾燥重量で 2%以 上の DHAを含有する。 一般に、 DHAが海洋魚に 1.5〜2% (乾燥重螢)必要 とされていることを考慮すると、 この発明の方法でクロレラと DBA強化 ュ―グレナを同時に添加することにより、 魚類の成育に十分な萤の DM を動物プランクトンに取り込ませることができ、 原則としてさらなる栄 養強化は必ずしも必要ではない。
しかしながら、 本発明の方法で得られた動物プランクトンをさらなる 栄養強化に付すことは妨げられるものではなく、 通常の栄養強化剤、 例 えば DHAのほか、 EPA、 ビタミン E及びビタミン B12を、 適宜、 通常の方 法で海水に添加し、 プランクトンに与えることができる。
なお、 上記の方法では個別に保管しておいたクロレラと DHA強化ュ一 グレナを同時に用いてもよいが、 以下に説明する組成物の形態に予め調 製したものを用いると操作が簡便である。
すなわち、 この発明によれば、 クロレラと DHA強化ユーグレナが特定 の比率、 つまり 1.5 :：！〜 4.5 : 1の乾焼重量比で組み合わさった、 動物ブラ ンクトンの培養に用いられる組成物が提供される。
クロレラと DHA強化ュ一グレナは、 当該技術分野で公知の方法にした がって組成物とすることができ、 例えば DM強化ュ一グレナのペースト にクロレラの細胞懸濁液を混合させて、 かかる組成物を得る とができ る。
また、 本発明の組成物には、 EPA、 ビタミン E及びビ夕ミン B12など所 望の物贾を適宜配合してもよい。
以 、 実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、 本発明はこ れらの実施例に限定されるものではない。
実施例 1 ： ヮムシに対するク Dレラの最適給餌量は、一般に 130mg/ヮムシ 10万個 体である。そこで、 クロレラ Oing/ヮムシ 10万個体を対照としてクロレ ラの添加量を減少させ、 DHA強化ユーグレナでその減少分を補填し、両者 の最適な組合せ比を検討した。 ヮムシの初期密度は、 ヮムシ 840個体/ ml とした。
ク Dレラとして生ク レラ V12(ク口レラ工業 (株)製)、 DHA強化ユーグ レナとしてはドコサュ一グレナ (ハリマ化成 (株)製)を用いた。 媒体に海 水 1L を用い、 28±0.5°Cの温度、 pH 8.0-8.3 の条件下で、 クロレラと DHA強化ユーグレナを給餌してから 1〜4日間、 ヮムシを培養した。
その結果を、 表 1及び図 1 Aに示す。 表 1
Figure imgf000008_0001
表 1及び図 1 Aから明らかなように、クロレラ最適給餌料の半萤を DHA 強化ユーグレナで代替したところ、 クロレラ 65m 及び DHA強化ユーグレ ナ 20mgの組合せで、 クロレラ 130m を単独で与えた場合とほぼ同等のレ ベルまで、 ヮムシを培養することができた。
したがって、 DHA強化ュ一グレナは、 クロレラの約 3倍の餌料価値を有 すると考えられる。
また、 上記の各条件で培養したヮムシを、 その乾燥細胞の約 50倍量の クロ口ホルム-メタノール (2: lv/v)で 3回抽出して、 その総脂肪酸を抽出 し、ガスクロマトグラフィ一で脂肪酸成分を分析して DHA含萤を調べた。 その結果を、 表 2及び図 I Bに示す。 表 2
Figure imgf000009_0001
表 2及び図 1 Bから明らかなように、 DHA強化ュ一グレナを与えた夷験 区ではいずれもゥムシ中に DHAが検出され、 クロレラ 65in 及ぴ DHA強化 ュ一グレナ 20m を与えた実験 では、 これらの給餌から 1日後に十分な 量の DHAが含有されていた。 それに対し、 クロレラ pみを与えた実験区 では、 ヮムシ中に DHAが検出されず、 栄養強化が必要であった。
実施例 2 ：
ヮムシの初期密度をヮムシ 100個体/ lの低密度とする以外は、実施例 1と同様の方法を繰り返した。
ヮムシの培養の結果を峩 3と図 2 Αに、 各実験区のヮムシ中における DHA含量を表 4と図 2 Bに示す。 表 3
Figure imgf000010_0001
衷 4
ヮムシ中の DHA含 JS (乾燥篥 S%)
卖騍区
3
4
S
Figure imgf000010_0002
峩 3及び図 2 Aから明らかなように、 クロレラ 65ing及び DHA強化ュ一 グレナ 20mgを与えた実験区で、 ヮムシが良好に培養された。
まだ、 表 4及び図 2 Bから明らかなように、 ヮムシ中の DHAは、 上記 の実験区で栄蓥強化不要なレベルに達した。
実施例 3 ：
ヮムシの初期密度をヮムシ 1100個体/ mlの高密度とし、 媒体として動 物プランクトンの実際の培養に使用される海水 Itを用いる以外は、 実施 例 1と同様の方法を繰り返した。
ヮムシの培養の結果を表 5と図 3 Aに、 各実験区のヮムシ中における DHA含！:を表 6と図 3 Bに示す。 表 5
Figure imgf000011_0001
表 6
ヮムシ中の DHA含量 (お燥重 ft%)
薬験区
1
2
3
4
5
Figure imgf000011_0002
実施例 2と同様に、 クロレラ 65m 及び DHA強化ュ一グレナ 20mgを与 えた実験区で良好なヮムシの増殖が見られ、 十分な量の DHAをヮムシに 含有させることができた P
本発明によれば、 動物プランクトンの培養方法、 さらに詳しくは、 動 物ブランクトンの存在する海水に、 クロレラと DHA強化ユーグレナを特 定の重量比で添加して動物プランクトンを培養することを特徴とする、 動物プランクトンの培養方法、 及びクロレラと DHA強化ユーグレナが特 定の重蛩比で配合されてなる動物プランクトンの培養に用いられる組成 物が提供される。
本発明における方法は、 プランクトン用の餌料の使用： を節減でき、 しかも魚類の成育に必要な DH を動物プランクトン中に取り込ませるこ とができる。

Claims

請求の範囲
1. 動物プランクトンの存在する海水に、 クロレラと DHA強化ユーグ レナを 1.5： 1〜4.5:1の乾燥重量比で添カ卩して動物プランクトンを培養 することを特徴とする、 動物プランクトンの培養方法。
2. クロレラと]) HA強化ユーグレナが、 2.5:1〜3.5:1の乾燥重: E比で 用いられる請求項 1に記載の方法。
' 3. 動物プランクトンが、 ヮムシ、 アルテミア、 ミジンコ又はコべホ —ダである請求項 1又は 2に記載の方法。
4. クロレラと DHA強化ュ一グレナが、 1-5:1〜4.5:1の乾燥重量比で 配合されてなることを特徴とする、 動物プランクトンの培養に用いられ る組成物。
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