WO1999057965A1 - Mutants de betterave sucriere tolerants a la sulfonyluree - Google Patents

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WO1999057965A1
WO1999057965A1 PCT/EP1999/003348 EP9903348W WO9957965A1 WO 1999057965 A1 WO1999057965 A1 WO 1999057965A1 EP 9903348 W EP9903348 W EP 9903348W WO 9957965 A1 WO9957965 A1 WO 9957965A1
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WO
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alkyl
alkoxy
substituted
halogen
unsubstituted
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PCT/EP1999/003348
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German (de)
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Inventor
Hermann Stuebler
Arno Schulz
Günter Donn
Hermann Bieringer
Erwin Hacker
Lothar Willms
Original Assignee
Aventis Cropscience Gmbh
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Publication date
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Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/12Leaves
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/02Amaranthaceae or Chenopodiaceae, e.g. beet or spinach
    • A01H6/024Beta vulgaris [beet]

Definitions

  • the present invention relates to a process for the preparation of herbicide-tolerant cells, sulfonylurea-tolerant sugar beet mutants, processes for their preparation and processes for controlling unwanted vegetation in crops of sulfonylurea-tolerant sugar beet mutants.
  • herbicidal agents e.g. Sulfonylureas
  • Sulfonylureas for controlling undesirable plant growth in crops
  • herbicides are widely used in agriculture.
  • the possibility of controlling the harmful plants by the herbicides is not always satisfactory.
  • highly effective herbicides are applied to control harmful plants, the growth of crops is often impaired. For this reason, herbicide-tolerant crops are of particular interest for agriculture.
  • EP-A-0360750 describes e.g. the production of AHAS inhibitor-tolerant plants by selection or by genetic engineering.
  • the herbicide tolerance of the plants to certain ortho-substituted N-arylsulfonyl-N'-pyrimidinyl ureas is generated here by an increased AHAS content in the plants.
  • ßtSl ibUNGSKÜPIE which have been obtained by selection processes and have, inter alia, a tolerance to chlorosulfuron, bensulfuron, chlorimuron, thifensulfuron and sulfometuron.
  • US 5,013,659; US 5,141, 870 and US 5,378,824 the introduction of a modified acetolactate synthase (ALS) gene from yeast in sugar beets by means of genetic engineering processes and the production of herbicide-tolerant plant mutants based on this resistance principle on appropriate herbicide-containing nutrient media.
  • Saunders et al. (Crop Science, 1992, 32, 1317-1320) described the production of sulfonylurea-resistant sugar beet by somatic cell selection.
  • WO 98/02527 also mentions sugar beets which are resistant to certain sulfonylureas and herbicides of the imidazolinone type.
  • the principle of resistance described in WO 98/02527 is based on two point mutations within the ALS gene in positions 337 and 562, which lead to the amino acid substitutions Ala 113 Thr and Pro 188 Ser in the enzyme.
  • sugar beet mutants described to date in the prior art do not always enable adequate control of all harmful plants or do not always show a satisfactory tolerance towards newer sulfonylurea herbicide generations, in particular one or more sulfonylurea herbicides from group A, consisting of
  • Q is oxygen, sulfur or -N (R 4 ) -; Y is CH or N;
  • R is hydrogen (H), (C 1 -C 12 ) alkyl; (C 2 -C 10 ) alkenyl; (C 2 -C 10 ) alkynyl; (C r C 6 ) - alkyl, which is one to four times by residues from the group halogen, (C, - ⁇ ) -
  • Halogen group (C 1 -C 4 ) alkyl, (C 1 -C 4 alkoxy, (C r C 4 ) haloalkyl, (C, -C 4 ) thioalkyl, (C 2 -C 5 ) alkoxycarbonyl, ( C 2 -C 5 ) -alkylcarbonyloxy, carbonamide, (C 2 -C 5 ) -alkylcarbonylamino, (C 2 -C 5 ) -alkylaminocarbonyl, di - [(C 1 -C 4 ) -aikyl] - carbonyl and nitro or a radical of the formulas A-1 to A-10
  • R 1 is hydrogen or (CC 3 ) alkyl
  • R 2 is hydrogen, halogen, (C 1 -C 3 ) -alkyl or (C r C 3 ) -alkoxy, the latter two radicals being unsubstituted or substituted by one or more halogen or (CC 3 ) -alkoxy groups;
  • R 3 is hydrogen, halogen, (C r C 3 ) -alkyl, (C 1 -C 3 ) -alkoxy or (C r C 3 ) -alkylthio, the abovementioned alkyl-containing radicals being unsubstituted or singly or multiply by halogen or mono- or are substituted twice by (C 1 -C 3 ) alkoxy or (C 1 -C 3 ) alkylthio; or a radical of the formula NR 5 R 6 , (C 3 -C 6 ) cycloalkyl, (C 2 -C 4 ) alkenyl, (C 2 -C 4 ) alkynyl, (C 3 -C 4 ) alkenyloxy or (C 3 - C 4 ) alkynyloxy;
  • R 4 is hydrogen, (C r C 4 ) alkyl or (C 1 -C 4 ) alkoxy and
  • R 5 and R 6 are independently hydrogen, (C 1 -C 4 ) alkyl, (C 3 -C 4 ) alkenyl, (C 1 -C 4 ) haloalkyl or (CC 4 ) alkoxy;
  • R 2 and R 3 are independently H or (C r C 4 ) alkyl;
  • R 5 (C r C 4 ) alkylsulfonyi, CHO, [(C r C 4 ) alkyl] carbonyl which is unsubstituted or substituted by one or more halogen atoms, [(C 1 -C 4 ) alkoxy] oxalyl, [( C 3 -C 6 ) cycloalkyl] carbonyl or a group of the formula WWW
  • W is an oxygen or sulfur atom (O or S);
  • R 9 H, (C 1 -C 4 ) alkyl which is unsubstituted or by one or more halogen atoms or by (C 1 -C 4 ) alkoxy, ( ⁇ -C ⁇ alkylthio, [(C 1 -C 4 ) alkoxy] - carbonyl and [(C 1 -C 4 ) alkyl] carbonyl is substituted, R 10 and R 11 independently of one another are H, (C 1 -C 4 ) alkyl which is unsubstituted or substituted by one or more halogen atoms, or (C 3 -C 4 ) alkenyl or (C 3 -C 4 ) alkynyl, where at least one of the radicals R 10 and R 1 is different from hydrogen; the radicals R 12 together with the N atom form a heterocyclic ring with 5 or 6 ring members, which is another heteroatom from the group N, O and S in can contain the various oxidation states and is unsubstitute
  • Halogen atoms is substituted, or (C 3 -C 4 ) alkenyl or (C 3 -C 4 ) alkynyl; A3) Compounds of the general formula III, their N-oxides and their inorganic or organic salts
  • Halogen is substituted, (C r C 4 ) alkoxy, (CC 4 ) alkylthio;
  • R 2 is H or methyl
  • R 3 is methyl or methoxy
  • R 4 H (C 1 -C ⁇ ) alkyl which is unsubstituted or one or more times by halogen
  • Alkylthio is substituted
  • R 9 Rio. Marg. R12.
  • R 25 > R 26 and R 27 are each independently H, (CC 4 ) alkyl, (C 3 -C 6 ) alkenyl or (C 3 -C 6 ) alkynyl; or
  • R 10 and R 20 each independently of one another are the groups -C (O) -X 5 - (CC 4 ) -alkyl or -C (O) - (CC 4 ) -alkyl, which can be partially substituted by halogen; or R 10 and R ⁇ or R 12 and R 13 or R 16 and R 17 or R 20 and R 21 or R 23 and R 24 or R 25 and R 9 or R 26 and R 27 together form a (C 4 -C 5 ) Form alkylene chain, which may be partially interrupted by oxygen or NR 14 , wherein R 14 is H, (CC 4 ) alkyl, (C 3 -C 6 ) alkenyl or (C 3 -C 6 ) alkynyl; R 15 and R ⁇ are each independently of one another (C ⁇ C -alkyl or (C 1 -C 4 ) haloalkyl; R 18 and R 30 are each independently substituted by COOR 28 (C ⁇ C-alkyl; R 19.
  • ⁇ And R 28 each independently of one another H or (C 1 -C 4 ) alkyl, X, and X 3 each independently of one another S, SO or SO 2 ; X 2 and X 4 each independently of one another O or S and X 5 O or NR 14 ; A4) amidosulfuron (21, p.37); A5) ethoxysulfuron (287, p.488); A6) triasulfuron (723, p.1222);
  • the object of the present invention is to overcome these disadvantages.
  • the object is achieved by the present invention by providing sugar beet mutants which, compared to one or more sulfonylureas of the abovementioned (above) general formulas I to III, amidosulfuron, ethoxysulfuron, triasulfuron, metsulfuron, tribenuron, flupyrsulfuron, nicosulfuron, rimsulfuron, sulfosulfuron, sulfosuron , Oxasulfuron, etametsulfuron, imazosulfuron and / or compounds of the above Formula V has a very good tolerance, ie a high tolerance.
  • Another object of the present invention is also to improve methods for controlling unwanted plant growth in the sugar beet crops according to the invention.
  • sugar beet mutants By selection on nutrient media containing sulfonylurea, in particular nutrient media additionally containing safeners, sugar beet mutants have now been found which surprisingly have the desired resistance to sulfonylurea herbicides of the general formulas I to III, amidosulfuron, ethoxysulfuron triasulfuron, metsulfuron, tribenulfuron, flupyrsulfuron, flup Prosulfuron, sulfosulfuron, oxasulfuron, etametsulfuron, imazosulfuron and / or compounds of the above Have formula V.
  • sugar beet mutants according to the invention have further surprising advantages, for example by are promoted by the said sulfonylureas in their growth or a changed content of
  • Carbohydrates or nitrogen-containing compounds e.g. amino acid content, proteins.
  • the present invention also has other advantages because it enables a broader spectrum of
  • Harmful plants in the sugar beet crops according to the invention so that a faster and safer activity against the harmful plants and / or considerably simplified control of the harmful plants is made possible, for example by requiring a single or only a few applications.
  • the post-emergence application is particularly preferred, particularly in the period between the cotyledon and 12-leaf stage of the harmful plants and / or in the period between piercing the sugar beets and their 12-leaf stage.
  • the present invention therefore relates to sulfonylurea tolerants
  • Sugar beet mutants their seeds or propagation material and their cells, selected from group A consisting of one or more sulfonylureas
  • prosulfuron (613, p.1041)
  • sulfosulfuron (668, p.1130)
  • sulfonylureas selected from group A consisting of A1 to A18.
  • the sulfonylurea-tolerant sugar beet mutants, their seeds or propagation material and their cells can e.g. through conventional crossing methods, in addition to the feature of the sulfonylurea resistance according to the invention, also have a further herbicide resistance (e.g. against glufosinates or glyphosates) or contain a further genetic modification, e.g. be modified by the introduction of insect, fungus or virus resistance (eg by expression of a Bt toxin, a chitinase, glucanase) or also in their metabolic properties, so that a qualitative and / or quantitative change in ingredients (eg the energy carbohydrate -, fatty acid or nitrogen metabolism or with the
  • plant mutants or cell lines can also be selected by e.g. Seed or cell cultures (callus or suspension cultures) are grown in a suitable medium in the presence of increasing herbicide concentrations.
  • a suitable mutagen see e.g. US 4,443,971
  • Another object of the present invention is also a method for the selection of herbicide-tolerant cells (mutants), preferably of eu or prokaryotic cells, in particular those from plants, bacteria or yeasts, by cultivating said cells in the presence of at least one herbicidally active compound and at least a safener under suitable conditions.
  • the method according to the invention for the selection of herbicide-tolerant mutants leads to an improved quality and / or quantity of the herbicide-resistant cells, in particular when selecting in the presence of herbicide concentrations which are> 50%, preferably> 90%, particularly preferably> 95 % and very particularly preferably> 99% are lethal for the respective cell population.
  • a particularly suitable method for qualitatively and / or quantitatively improving the mutant yield consists, for example, of cells, preferably cell suspensions, in the presence of one or more herbicides and one or more safeners in a concentration range from 10 "3 M to 10 '7 M, preferably in the range of 10 "4 M to 10 " 6 M to treat and after a period of about a day to 2 weeks, preferably about 3-10 days, for example a week, the cells with fresh cell culture medium without herbicide, but with safener and continue this subculture step for about 3-5 cycles.
  • the cell suspensions are then applied, for example, to agar media with the respective herbicidal active ingredient (in the concentration range from 10 "3 M to 10" 7 M, preferably 10 "4 M to 10 " 6 M) with and without safener (in the concentration range 10 "3 M to 10 7 M, preferably 10 "4 M to 10 " 6 M.
  • the concentration ratio of safener to herbicidal active ingredient in the mixture can differ in a ratio of 100: 1 to 1: 100, preferably in the range 10: 1 to 1: 10.
  • the herbicide-resistant cell clones can be transferred to fresh selection medium, either maintaining the herbicide concentration or by a factor of 2-100, preferably around by a factor of 2 to 10.
  • Plant mutants with a herbicide resistance that is significantly higher than that of wild-type cells are used for the subsequent plant regeneration utanten subcultivated on / in culture media which have the content of cytokinins and / or auxins necessary for the respective genotype.
  • Plant regeneration can be carried out in the presence or absence of a herbicide or, if appropriate, a herbicide / safener mixture.
  • safener means a compound by means of which the damage to a crop plant possibly caused by a herbicide can be reduced or avoided.
  • suitable safeners are those which, in combination with sulfonylurea herbicides, preferably phenylsulfonylureas, have a safener action.
  • Suitable safeners are known from WO-A-96/14747 and the literature cited therein.
  • the following groups of compounds are suitable, for example, as safeners for the herbicidal active compounds (A) mentioned above: a) compounds of the dichlorophenylpyrazoline-3-carboxylic acid type, preferably compounds such as 1- (2,4-dichlorophenyl) -5- (ethoxycarbonyl) -5-methyl-2-pyrazoline-3-carboxylic acid ethyl ester, and related compounds as described in WO 91/07874, b) derivatives of dichlorophenylpyrazole carboxylic acid, preferably Compounds such as ethyl 1 - (2,4-dichlorophenyl) -5-methyl-pyrazole-3-carboxylate,
  • active substances of the phenoxyacetic or propionic acid derivative or aromatic carboxylic acid type e.g. 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (ester) (2,4-D), 4-chloro-2-methylphenoxy-propionester (mecoprop), MCPA or 3,6-dichloro-2-methoxy-benzoic acid (ester) (dicamba) .
  • an object of the present invention is a method for producing sulfonylurea-tolerant plants by cultivation on / in a sulfonylurea-containing nutrient medium in the presence of a suitable safener, by a) selecting callus or cell suspension cultures while maintaining their embryogenic and morphogenic competence, b) the cultures obtained under a) are cultivated and selected on / in a sulfonylurea-containing nutrient medium and c) intact plants are regenerated from the cultures obtained under b).
  • Another object of the present invention is a
  • Process for producing the sugar beet mutants according to the invention by culturing on / in a sulfonylurea-containing nutrient medium, preferably in the presence of a suitable safener, by a) selecting callus or cell suspension cultures while maintaining their embryogenic and morphogenic competence, b) the cultures obtained under a) on / cultivated and selected in a nutrient medium containing sulfonylurea and c) intact plants are regenerated from the cultures obtained under b).
  • an object of the invention is the use of sugar beet mutants according to the invention which can be obtained by the process according to the invention in agriculture, e.g. as animal feed or for the food industry, especially for sugar production.
  • Yet another object of the present invention is also a method for controlling undesirable plant growth in crops of the sugar beet mutants according to the invention, characterized in that one or more sulfonylureas selected from group A consisting of A1 are added to the plants, their seeds or propagation material or their cultivated area to A18, optionally in combination with one or more herbicides selected from group B consisting of B1) herbicides from the class of the imidazolinones, preferably imazethapyr (415, p. 701), imazamethapyr (2, p.
  • imazapyr 413, p.697), imazaquin (414, p.699), imazamox (412, p.696);
  • herbicides from the class of inhibitors of photosynthetic electron transport preferably biscarbamates, particularly preferably phenmedipham (563, p.948), desmedipham (206, p.349);
  • B3) a herbicide from the class of the PPO inhibitors for example the diphenyl ether or the azoles, preferably Azifluorfen (7, S.12), Oxyfluorfen (547, S.919), Pyraflufen (617, S.1048), Carfentrazone (112 , P.191), lactofen (442, p.747), nitrofen (S1193, p.1343), oxadiargyl (538, p.904), fluoroglycofen (344, p.580), sulfentrazone (665, p.1126) or also a CF 3 uracil of the formula IV as disclosed in US Pat. No. 5,183,492: Formula IV:
  • HPPDO hydroxyphenyl pyruvate dioxygenase
  • B4 a herbicide from the class of the hydroxyphenyl pyruvate dioxygenase (HPPDO) inhibitors, e.g. the triketones, preferably isoxaflutole (436, p.737), isoxachlortole (RPA-201735) or sulcotrione (664, p.1124);
  • B5 a herbicide from the class of herbicidally active, optionally synthetic auxins or their transport inhibitors, preferably Quinmerac (636, S.1080), clopyralide (153, S.260), diflufenzopyr (50, S.81, BAS 65400H);
  • B6) a herbicide from the class of lipid or fatty acid synthesis inhibitors, preferably aryloxyphenoxycarboxylic acids or cyclohexanedione oximes, particularly preferably fenoxaprop (309, p.
  • B8) a herbicide from the class of 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase inhibitors, preferably glyphosate (383, p. 646); B9) a herbicide from the class of benzofuranylalkanesulfonates, preferably ethofumesate (285, p.484) or herbicidal compositions containing these active ingredients from group A or B can be applied simultaneously or in succession.
  • an object of the invention is also the use of one or more sulfonylureas selected from group A (A1 to A18) as defined, optionally in combination with one or more herbicides selected from group B, consisting of B1 to B9, or containing them Herbicidal agents on the areas under cultivation of sugar beet crops according to the invention.
  • the active substances mentioned under A1 to A18 and under B1 to B9 include both their racemic mixtures and their active enantiomers.
  • the salts of the active ingredients mentioned under A1 to A18 and under B1 to B9 with organic or inorganic acids or bases are included, provided that they are salt formers.
  • the esters of the active ingredients mentioned under A1 to A18 and under B1 to B9 are also included, if they are herbicidally active.
  • the advantages are e.g. in a positive growth regulatory effect, a reduced number of applications or a reduction in the application rates (compared to the conventional use of herbicides), a generally good biodegradability, a low burden in post-cultivation and / or good protection of beneficial organisms.
  • herbicidal active ingredients from group A i.e. sulfonylureas A1 to A18
  • herbicides from group B i.e. herbicides B1 to B9
  • herbicide-tolerant means that the herbicide-tolerant sugar beet mutants are present in the presence of a or several sulfonylureas of group A, possibly in combination with one or more herbicides of group B, do not show any apparent impairment of their physiological functions, the same sulfonylureas showing non-tolerant plants, a growth-impairing or phytotoxic effect.
  • the type and extent of herbicide tolerance depend on the particular herbicide, the respective dosage and general growth conditions.
  • the sugar beet mutants, their seeds or propagation material or their cells particularly preferably have a tolerance to compounds of the general formula I in a concentration range of 0.5-40, in particular 1-20 and very particularly 3-10 g ai / ha, to compounds of the general formula II in a concentration range of 1-40, in particular 2-20 and very particularly 6-10 g ai / ha, compared to compounds of the general formula III in a concentration range of 0.5-50, in particular 1-25 and very particularly 3-12.5 g ai / ha, compared to amidosulfuron in a concentration range of 1-60, in particular 2-30 and very particularly 6-15 g ai / ha, compared to ethoxysulfuron in a concentration range of 5-120, especially 10-60 and very particularly 20-30 g ai / ha, compared to triasulfuron in a concentration range of 1-80, in particular 2-40 and very particularly 6-20 g ai / ha, compared to metsulfuron in a concentration range of
  • seed or propagation material includes both vegetative and sexual propagation material such as fruits, seeds, tubers, rhizomes, seedlings, cuttings, calli, protoplasts, cell cultures etc.
  • sugar beet is not only to be understood as whole plants which can be obtained or produced by selection, but also, if appropriate, their parts such as roots, leaves, stems, tubers and other cell assemblies and generations or cells derived from these plants.
  • sulfonylurea-resistant sugar beet mutants according to the invention can also be found in e.g. transgenic sugar beets are crossed using conventional breeding methods known to those skilled in the art.
  • transgenic plants which can be particularly preferred, for example, for a cross, are generally distinguished by particularly advantageous properties, for example by an increased yield, resistance to certain pesticides, especially to certain herbicides or insect pests, resistance to plant diseases or pathogens such as certain insects or mites or microorganisms such as fungi, bacteria or viruses.
  • Other properties concern e.g. B. also the crop in terms of quantity, quality, shelf life, composition or special ingredients.
  • transgenic plants which have modified properties compared to previously naturally occurring plants exist, for example, in the use of genetic engineering processes (see, for example, EP-A-0221044, EP-A-0131624 ).
  • genetic engineering processes see, for example, EP-A-0221044, EP-A-0131624 .
  • the production of genetically modified plants with respect to modifications of the vegetable carbohydrate metabolism e.g. WO 94/28146, WO 92/11376, WO 92/14827, WO 91/19806
  • resistance to certain herbicides e.g. of the glufosinate type (see e.g. EP-A-0242236, EP-A-242246) or glyphosate (e.g.
  • WO 92/00377 resistance to certain pests, e.g. due to the ability to produce certain Bacillus thuringiensis toxins (Bt toxins) or protease inhibitors (e.g. EP-A-0142924, EP-A-0193259).
  • Bt toxins Bacillus thuringiensis toxins
  • protease inhibitors e.g. EP-A-0142924, EP-A-0193259
  • transgenic sugar beet with an altered sucrose content through modifications of the gene expression of the enzymes ADP-glucose pyrophosphorylase, sucrose phosphate synthase and sucrose synthase are known from WO 94/28146.
  • a wide range of economically important monocotyledonous and dicotyledonous harmful plants can be combated excellently with the methods according to the invention for controlling (controlling) undesired plant growth.
  • Perennial weeds which are difficult to control and which sprout from rhizomes, rhizomes or other permanent organs are also recorded with excellent results. It does not matter whether the substances or agents are used in pre-sowing,
  • the spectrum of activity extends to species such as Galium, Viola, Veronica, Lamium, Stellaria, Amaranthus, Sinapis, Matricaria, Abutilon, Polygonum, Galinsoga, Mercurialis, Solanum, Chinopodium, Kochia, Anthemis and Sonchus on the annual side as well as Convolvulus, Cirsium and Rumex for the perennial weeds and also crops such as Potato, rapeseed etc.
  • the existing growth stage stands or dies completely after a certain time, so that weed competition which is harmful to the crop plants is eliminated very early and sustainably.
  • the herbicidal active compounds or combinations thereof by suitable application of the herbicidal active compounds or combinations thereof, the following harmful plants, such as Anthemis, agropyron, Chinopodium, cirsium, kochia, polygonum, matriciaria, as well as growth / failure crops and generally weeds in later growth stages well, ie preferably> 80% and especially> 90% to be controlled.
  • harmful plants such as Anthemis, agropyron, Chinopodium, cirsium, kochia, polygonum, matriciaria, as well as growth / failure crops and generally weeds in later growth stages well, ie preferably> 80% and especially> 90% to be controlled.
  • the compounds or agents used in the process according to the invention can be used in the form of wettable powders, emulsifiable concentrates, sprayable solutions, dusts or granules in the customary formulations and can be formulated in various ways, depending on the biological and / or chemical-physical parameters specified are.
  • Possible formulation options include: wettable powder (WP), water-soluble powder (SP), water-soluble concentrates, emulsifiable concentrates (EC), emulsions (EW), such as oil-in-water and water-in-oil emulsions, sprayable solutions , Suspension concentrates (SC), dispersions based on oil or water, oil-miscible solutions, capsule suspensions (CS), dusts (DP), mordants, granules for spreading and soil application, granules (GR) in the form of micro, spray, elevator - and adsorption granules, water-dispersible granules (WG), water-soluble granules (SG), ULV formulations, microcapsules and waxes.
  • WP wettable powder
  • SP water-soluble powder
  • EC emulsifiable concentrates
  • EW emulsions
  • SC Suspension concentrates
  • SC dispersions based on oil or water, oil-
  • combinations with other pesticidally active substances e.g. Apply insecticides, acaricides, fungicides, safeners, fertilizers and / or growth regulators, e.g. in the form of a finished formulation or as a tank mix.
  • the agrochemical preparations generally contain 0.1 to 99% by weight, in particular 1 to 95% by weight, of active ingredients or their salts.
  • the active substance concentration in wettable powders is e.g. about 10 to 90 wt .-%, the rest of 100 wt .-% consists of conventional formulation ingredients.
  • the active substance concentration can be about 1 to 90, preferably 5 to 80,% by weight.
  • Dust-like formulations contain 1 to 30, preferably mostly 5 to 20% by weight of active ingredient, sprayable solutions about 0.05 to 80, preferably 2 to 50% by weight of active ingredient.
  • the active ingredient content depends in part on whether the active compound is in liquid or solid form and which granulating aids, fillers, etc. are used.
  • the active ingredient content of the water-dispersible granules is, for example, between 1 and 95% by weight, preferably between 10 and 80% by weight.
  • active ingredient formulations mentioned may contain the usual adhesive, wetting, dispersing, emulsifying, penetrating,
  • Preservatives Preservatives, antifreeze and solvents, fillers, carriers and dyes, defoamers, evaporation inhibitors and the pH value and viscosity influencing means.
  • the herbicidal combination partners of group B (B1 to B9) with the sulfonylureas of group A (A1 to A18) can be used in mixture formulations or in a tank mix, for example known active compounds, such as those e.g. in Weed Research 26, 441-445 (1986) or "The Pesticide Manual", 11th edition, The British Crop Protection Council, 1997, Bracknell, England, and the literature cited therein.
  • the individual compounds listed under A4 to A17 and B1 to B9 are generally designated with the "common name" according to the International Organization for Standardization (ISO).
  • the formulations present in the commercial form are optionally diluted in the customary manner, e.g. in the case of wettable powders, emulsifiable concentrates, dispersions and water-dispersible granules by means of water, and then applied to the plants, parts of plants or the agricultural soil on which the plants stand or in which they grow or are present as seeds.
  • Preparations in the form of dust, ground granules or scattering granules and sprayable solutions are usually no longer diluted with other inert substances before use.
  • the required application rate of the herbicidal compounds varies within wide limits, e.g. between 0.001 and 10.0 kg / ha or more of active substance, but it is preferably between 0.005 and 5 kg / ha.
  • Example 1 Establishment of morphogenic sugar beet cell cultures on amino acid-free nutrient medium
  • Ripe sugar beet seeds were germinated after the disinfection of the seed surface on hormone-free medium under aseptic conditions.
  • the modified Murashige-Skoog medium (MS medium) used for the experiments is shown in Table 1.
  • the pH of the medium was adjusted to 5.8 before autoclaving.
  • the vitamins were added to the medium before autoclaving (120 ° C; 15 min).
  • the phytohormone concentrations were varied for callus initiation, callus subculture and plant regeneration as described in the text.
  • the explants were cultivated on MS medium with a content of 0.05-0.5 mg naphthylacetic acid per liter medium at 25 ⁇ 2 ° C in a 12 hour light / dark rhythm at approx. 500-2000 lux. Under these conditions, explants from some seedlings formed morphogenic callus within 2-3 weeks, which could be subcultured on the respective medium for months while maintaining its regenerative capacity.
  • Example 2 In vitro mutagenesis
  • Morphogenic sugar beet callus pieces are in MS medium with 0.1 to 1% ethyl methanesulfonate for 10 to 120 min. incubated, washed 3 times and cultivated in the medium. The surviving morphogenic callus segments are subcultured on fresh medium after 2 to 4 weeks. After a further 2 to 4 weeks, the calli can be used for selection experiments.
  • calli are transferred to the herbicidal (LD 98 ) agar media (0.8% agar) and evaluated after 6 to 8 weeks.
  • the Petri dishes are incubated at 12 to 2000 lux and 25 ° C per day. Calli are formed in the media with the herbicides, which grow with the formation of shoot primordia.
  • Example 5 Selection of sulfonylurea tolerant sugar beet mutants in the presence of herbicide and safener.
  • the cells were washed twice with safener-free and herbicide-free medium, taken up in 20 ml of MS medium and plated out on agar medium.
  • the agar medium contained MS salts, vitamins and usual trace elements, 20 g sucrose, 0.8% agar, 0.5 mg / l BAP and 0.5 mg / l 2.4.-D pH 5.8.
  • the following additives were added to the medium:
  • the herbicide-tolerant cell clones were induced on regeneration medium (MS medium with 1 mg / l BAP and 0.05 mg / l naphthylphenoxyacetic acid (NAA)) for sprout formation.
  • the in vitro shoots were induced on medium with 0.05 mg / l NAA in a second step for root formation.
  • the rooted plants could be transferred into soil after approx. 8 - 12 weeks.
  • Example 6 Herbicide Application In the 4th and 5th leaf stages, the plants are sprayed with herbicide solutions in customary application rates. The herbicides are applied as 0.1 to 1% aqueous solutions. The treated plants are rated visually after 14 to 28 days. The test for herbicide resistance is carried out under conditions which lead to serious damage (degree of damage> 80%) in commercial (control plants).
  • the regenerated plants show a good tolerance towards the applied sulfonylureas, i.e. comparatively little damage.
  • herbicidal effectiveness is assessed at intervals of 3-6 weeks as the growth progresses in order to assess the selectivity of the various active compounds and their herbicidal activity.

Abstract

L'invention concerne un procédé pour la fabrication de cellules tolérantes aux herbicides, des mutants de betterave sucrière tolérants à la sulfonylurée, un procédé pour leur fabrication ainsi qu'un procédé pour lutter contre la croissance végétale parasite dans des cultures de mutants de betterave sucrière tolérants à la sulfonylurée.
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