WO1998012212A1 - Complexes nucleo-peptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations - Google Patents

Complexes nucleo-peptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations Download PDF

Info

Publication number
WO1998012212A1
WO1998012212A1 PCT/FR1997/001669 FR9701669W WO9812212A1 WO 1998012212 A1 WO1998012212 A1 WO 1998012212A1 FR 9701669 W FR9701669 W FR 9701669W WO 9812212 A1 WO9812212 A1 WO 9812212A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
ala
nle
nucleo
arg
dhomophé
Prior art date
Application number
PCT/FR1997/001669
Other languages
English (en)
Inventor
Lucien Dussourd D'hinterland
Anne-Marie Pinel
Original Assignee
Societe D'etude Et De Recherche De Pathologie Appliquee - Serpa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Societe D'etude Et De Recherche De Pathologie Appliquee - Serpa filed Critical Societe D'etude Et De Recherche De Pathologie Appliquee - Serpa
Priority to AU43883/97A priority Critical patent/AU4388397A/en
Publication of WO1998012212A1 publication Critical patent/WO1998012212A1/fr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4953—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom containing pyrimidine ring derivatives, e.g. minoxidil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/10—Preparations for permanently dyeing the hair
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C07K14/68—Melanocyte-stimulating hormone [MSH]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention relates to nucleo-peptide molecular complexes obtained by chemical synthesis, in the form of peptide conjugates, physically or chemically linked to puric acids, in particular xanthic acids and their derivatives. .
  • the physiological activity of the nucleo-peptides which are the subject of the present invention is preferably oriented towards the synthesis and stimulation of epidermal melanins and their dispersion in the surface layers of the skin - thus ensuring very wide melanization of the epidermis and high level protection against erythema induced by solar radiation (UVA-UVB).
  • melanocytes secreted by the cells of the human epidermis "the melanocytes", as well as their dispersion in the eratinocytic cells of the skin, has the function essential physiological protection of the dermis, epidermis and cutaneous immune system against solar radiation, in particular UVA and UVB.
  • analogues of cyclic AMP such as dibutyryl cAMP, prostaglandins El and in particular xanthic derivatives (Halaban R, Pomerantz SH, Marshal S., Lambert DT and Lerner AB, J. Cell. Biol. 97 , 480-488 (1983); Ko ichi, Jimbow, Thomas B. Fitzpatrick Mick, M. Wick Biochemistry and Physiology of Melanin Pigmentation Oxfort U. Press (1991)).
  • One of the objects of the present invention relates to molecular complexes in the form of nucleo-peptides comprising melanotropic peptide conjugates, specific inducers of cellular melanogenesis, chemically linked to puric acids or their derivatives, preferably xanthic acids, stimulating melanosomal Tyrosinase by activation of cyclic AMP (2nd messenger) whose role is to amplify the activity of melanocytic cellular systems, and in particular the dispersion of melanins at the level of keratinocytes by activation of growth factors.
  • cyclic AMP (2nd messenger)
  • peptide complexes composing the nucleo-peptides according to the invention there are preferably peptides comprising a sequence of at least 3 amino acids, said amino acids being in D, L or DL form, that is to say natural or not .
  • Said sequence is chemically or physically associated or linked, in the form of salts, esters or amides, to puric acids or their derivatives of general formula I:
  • N represents a purine base comprising from 5 to 10 carbon atoms
  • RI represents an alkyl radical in Cj or C3.
  • the acids of general formula (I) are chosen from puric acids or derived from purines for which RI represents a C 1 or C 3 alkyl radical, and are preferably chosen from: - hypoxanthic acid (C 7 H5N. O3) ,
  • the peptide complexes of the invention preferably comprise a sequence of 3 amino acids, in particular one of the following sequences:
  • A is a puric acid of general formula (I) as defined above;
  • X represents a Norleucine group (Nie), or one of its derivatives in acetylated (Acyl-Nle) or methylated form (MeNle), the Nle-Ala or Ala group;
  • Y represents an ArgZ or Z group in which Z is Trp-Gly-OH, Trp-OH, OH,
  • Trp-Gly-NH 2 Trp-NH 2 or NH 2 ; Hrism represents dihydro.vy-DPhenylalanine or DhomoPhenylalanine.
  • the present invention relates more particularly to the following peptide derivatives:
  • the present invention also relates to pharmaceutical, pharmaceutical or cosmeiological compositions comprising, as active substance, at least one nucleo-peptide complex as defined above, in association with a pharmaceutically or cosmetologically acceptable support.
  • compositions can be produced in the form of an emulsion, cream, spray, solution, lotion or gel, and contain known excipients as well as possibly other active ingredients.
  • the present invention advantageously comprises preparations for pharmaceutical use, usable by injection or topically, for the medical treatment of melanogenesis disorders, it is preferably peptide conjugates with carbo ylic acids.
  • cosmetic and / or hair compositions used in the form of solutions, lotions, sprays or creams or gels, used as activator of cutaneous melanogenesis, in the absence of any erythema phenomenon, protecting thus the epidermis against trauma induced by solar radiation (UV).
  • the cosmetic compositions in accordance with the present invention can also be used for the preventive and curative treatment of solar erythemas.
  • the invention will be better understood in view of the following examples which are given purely by way of illustration.
  • the syntheses of the peptide complexes according to the invention were carried out according to Merrifield techniques adapted to the different peptide structures of the complexes which are the subject of the invention.
  • an MBHA resin is used as a protective group: the FMOC derivatives (Fluoroenyl, Methoxy Carbonyl), and as a coupling agent: BOP.
  • the amino acids used in the form of FMOC derivatives are the following in progressive order: FMOC-Gly-OH, Trp-OH, Arg-OH, DhomoPhe- OH, His-OH, Ala-OH and Nle-OH.
  • the compound obtained with a yield of 75% is taken up in 95.5% acetic acid and dried by lyophilization.
  • Retention time 17 min, column C 18, UV 210 nm, solvent: triethylamine phosphate buffer, acetonitrile.
  • M2 MeNle-Ala-His-DhomoPhé- ⁇ rg-Trp-NH 2
  • M4 Nie - Ala - His - DHomo-Phe - NH 2 .
  • Theobromoacetic acid is salified with the peptide.
  • the peptide No. 3 is obtained.
  • DOSAGES Determination of Melanin according to Abdel Malek at 436 nm.
  • Cloudman murine melanoma melanocytes the property of which is to secrete naturally Tyrosinase and Melanin.
  • the molecular weight of the tested peptides must be taken into account compared to the molecular weight of the control ⁇ MSH.
  • ⁇ MSH at ÎO -7 M independently of its ubiquitous action, cannot be used in therapy given the high cost price of its synthesis which comprises 14 steps, while the peptide Ml comprises only 7 at the same power 10 -7 M for an activity 9 times more intense.
  • the M4Be Melanocytes are tumor cells originating from Unit U 436/218 of INSERM of Lyon. These cells are characterized by their deficiency in Tyrosinase (Menkes syndrome).
  • the M3 peptide stimulates the secretion of Tyrosinase by 96% at the dose of 10-9 M, compared to the untreated controls and to ⁇ MSH at the dose of 109 M.
  • the animals After application, the animals are exposed to UVA and UVB radiation delivering 10.75 W / cm 2, each window being subjected to an exposure of increasing duration in geometric progression of 1.25.
  • the irradiation time causing the first net erythema (DEM) is evaluated.
  • the DEM ratios (treated area / untreated area) are then calculated.
  • the application of the M2 peptide by the topical route highly prevents the appearance of solar erythema.
  • the products studied were applied daily, twice a day, to the flexion side of the forearms (one product per forearm) for two consecutive weeks.
  • the statistical analysis focused on the one hand, on the values obtained at the level of each of the treated zones in comparison with the values obtained on the level of the control zone and on the other hand, on the differences calculated between the values obtained on each of the treated or control zones of the value obtained on the control zone specific to each of the different zones, in order to compare the two products studied with the control zone.
  • the ITA ° Individual Typological Angle defined by Chardon & Col. to determine the level of melanization of the skin, was calculated as follows:
  • PRODUCT LIGHT 10 PRODUCT 11 med / min / cm2
  • PRODUCT INDICATOR 10 PRODUCT 11 Med / min / cm2

Abstract

L'invention concerne des complexes nucléo-peptidiques obtenus par synthèse, comprenant une séquence d'au moins trois acides aminés sous la forme D, L ou DL, ladite séquence étant liée physiquement ou chimiquement à des acides puriques, ou leurs dérivés de la formule générale (I): N-R1 - COOH, dans laquelle N représente une base purique comprenant de 5 à 10 atomes de carbone, R1 représente un radical alkyl en C1 ou C3.

Description

COMPLEXES NUCLEOPEPTIDIQUES, COMPOSITIONS COSMETOLOGIQUES ET PHARMACEUTIQUES LES CONTENANT ET UTILISATIONS La présente invention a pour objet des complexes moléculaires nucléo- peptidiques obtenus par synthèse chimique, sous forme de conjugués peptidiques, liés physiquement ou chimiquement à des acides puriques en particulier des acides xanthiques et leurs dérivés.
L'activité physiologique des nucléo-peptides faisant l'objet et de la présente invention est préférentiellement orientée vers la synthèse et la stimulation des mélanines épidermiques et leur dispersion au niveau des couches superficielles de la peau - assurant ainsi une melanisation très large de l'épiderme et une protection de haut niveau contre les "érythèmes" induits par les radiations solaires (UVA-UVB).
Il est connu de l'homme de l'art, que le rôle des pigments mélanocytair es, sécrétés par les cellules de l'épiderme humain "les mélanocytes", ainsi que leur dispersion au niveau des cellules ératinocytaires de la peau, a pour fonction physiologique essentielle la protection du derme, de l'épiderme et du système immunitaire cutané contre les radiations solaires, en particulier les UVA et UVB.
Il est également connu que le système mélanocytaire humain (coloration de la peau, cheveux, etc..) fonctionne de façon différente de celui des animaux. En particulier la sécrétion des mélanines par les mélanocytes et la dispersion de ces mélanines en surface de l'épiderme exige chez l'homme une coopération cellulaire entre les mélanocytes et les kératinocytes, qui s'exprime par un nombre défini de mélanocytes pour un kératinocyte, formant ainsi une entité physiologique fonctionnelle appelée "Epidermal Melanin Unit" spécifique de chaque type racial. "Dubertret L. et coll., J. Invest. Dermatol. (8) suppl. 2s-lOs-1983 - Dubertret L. et coll. J. Invest. Dermatol. 0022-202X-1986 - TB Fitzpatrick, G. Szabo, Michael M. Wick, Biochemistry and Physiology of Melanin Pigmentation 687, vol. II, Lowell A. Goldsmith,1991 - Jimbow K, Uesugi T (1992), J. Invest. Der ato. 78-108-115, Lerch K. (1988) Avances in Pigment Cell Research 85-88". L'activité du système mélanocytaire est sous la dépendance de facteurs physiologiques tels que les hormones peptidiques, les facteurs de croissance, et en particulier, les facteurs d'induction et d'activation de la tyrosinase mélanocytaire et l'AMP cyclique Protéine Kinase dépendante.
Il est connu de l'homme de l'art que le métabolisme cellulaire des peptides, hormonaux ou non (neurotransmetteurs ou médiateurs), est sous la dépendance du cycle cellulaire de l'AMP cyclique appelé 2ème messager hormonal dont le rôle est d'amplifier la réponse cellulaire induite par un facteur peptidique spécifique (Rail et al. J. Biol. Chem. 224-463 ( 1957), Sutherland, Rail. IBID 232-1077 ( 1958)).
Il a été également démontré que certaines substances sont capables de potentialiser fortement l'action de l'AMP cyclique prolongeant ainsi la stimulation de la Tyrosinase dans le métabolisme intracellulaire de la mélanogénèse.
Parmi ces susbtances figurent des analogues de l 'AMP cyclique tels que le dibutyryl AMPc, les prostaglandines El et en particulier les dérivés xanthiques (Halaban R, Pomerantz SH, Marshal S., Lambert DT et Lerner AB, J. Cell. Biol. 97, 480-488 (1983) ; Ko ichi, Jimbow, Thomas B. Fitzpatrick Mick, M. Wick Biochemistry and Physiology of Melanin Pigmentation Oxfort U. Press (1991)).
Un des objets de la présente invention concerne des complexes moléculaires sous forme de nucléo-peptides comprenant des conjugués peptidiques mélanotropes, inducteurs spécifiques de mélanogénèse cellulaire, liés chimiquement à des acides puriques ou leurs dérivés, de préférence à des acides xanthiques, stimulant la Tyrosinase mélanosomale par activation de l'AMP cyclique (2ème messager) dont le rôle est d'amplifier l'activité des systèmes cellulaires mélanocytaires, et en particulier la dispersion des mélanines au niveau des kératinocytes par activation des facteurs de croissance.
Parmi les complexes peptidiques composant les nucléo-peptides selon l'invention, figurent préférentiellement des peptides comprenant une séquence d'au moins 3 acides aminés, lesdits acides aminés étant sous forme D, L ou DL c'est-à-dire naturelle ou non.
Ladite séquence est associée ou liée chimiquement ou physiquement, sous forme de sels, d'esters ou d'amides, à des acides puriques ou leurs dérivés de formule générale I :
N - Rl - COOH (I) dans laquelle N représente une base purique comprenant de 5 à 10 atomes de carbone, RI représente un radical alkyl en Cj ou C3.
Les acides de formule générale (I) sont choisis parmi les acides puriques ou dérivant des purines pour lesquels RI représente un radical alkyl en Cj ou C3, et sont de préférence choisis parmi : - l'acide hypoxanthique (C7H5N. O3),
- l'acide acétyl xanthique (C7H8N4O4), - l'acide théobromine acétique (C9H8N4O4), et
- l'acide théophyline acétique (C9H11N4O4).
Les complexes peptidiques de l'invention comprennent de préférence une séquence de 3 acides aminés, cn particulier l'une des séquences suivantes :
Ala-His-HPhé His-HPhé-Arg dans laquelle Hphé représente la dihydro.vy-DPhénylalanine ou la DhomoPhénylalanine.
D'une manière générale, les complexes peptidiques selon l'invention répondent à la formule générale :
AX-His-HPhé-Y dans laquelle :
A est un acide purique de formule générale (I) telle que définie ci-dessus ; X représente un groupe Norleucine (Nie), ou l'un de ses dérivés sous forme acétylée (Acyl-Nle) ou méthylée (MeNle), le groupe Nle-Ala ou Ala ; Y représente un groupe ArgZ ou Z dans lequel Z est Trp-Gly-OH, Trp-OH, OH,
Trp-Gly-NH2, Trp-NH2 ou NH2 ; Hphé représente la dihydro.vy-DPhénylalanine ou la DhomoPhénylalanine.
La présente invention concerne plus particulièrement les dérivés peptidiques suivants :
1 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-Gly-NH2
2 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trρ-NH2
3 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-NH2
4 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-NH2
5 A-Ala-His-DhomoPhé-NH2
6 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-Gly-OH 7 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-OH 8 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-OH 9 A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-OH
10 A-Ala-His-DhomoPhé-OH 1 1 A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-Gly-NM2
12 A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-NH2
13 A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-NH2
14 A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-NH2 15) A-Ala-His-DihydroxyDPhé-NIh
16) A-Nle-Ala-His-Dihydroxy DPhé-Arg-Trp-Gly-OH
17) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-OH
18) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-OH 19) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-OH
20) A-Ala-His-DihydroxyDPhé-OH. Il est également possible que certains de ces acides aminés comportent des fonctions de glycosylation.
II doit être entendu que la présente invention concerne l'ensemble de ces structures comprises dans la présente description.
La présente invention concerne également des compositions galéniques, pharmaceutiques ou cosméiologiques comprenant, en tant que substance active, au moins un complexe nucléo-peptidique tel que défini précédemment, en association avec un support pharmaceutiquement ou cosmétologiquement acceptable.
Ces compositions peuvent être réalisées sous forme d'émulsion, de crème, de spray, de solution, de lotion ou de gel, et comporter des excipients connus ainsi qu'éventuellement d'autres principes actifs.
La présente invention comprend avantageusement des préparations à usage pharmaceutique, utilisables par voie injectable ou par voie topique, pour le traitement médical des troubles de la mélanogénèse, il s'agit de préférence des conjugués peptidiques avec des acides carbo yliques .
Elle a également pour objet des compositions cosmétologiques et/ou capillaires utilisées sous forme de solutions, de lotions, de sprays ou de crèmes ou de gels, utilisées comme activateur de la mélanogénèse cutanée, en l'absence de tout phénomène d'érythème, protégeant ainsi l'épiderme contre les traumatismes induits par les radiations solaires (UV). Les compositions cosmétologiques conformes à la présente invention peuvent également être utilisées pour le traitement préventif et curatif des érythèmes solaires. L'invention sera mieux comprise au vu des exemples suivants qui ne sont donnés qu'à titre purement illustratif.
Exemple 1 : Synthèse du Peptidc N" 1 - Code M l A = Acétyl Xanthique MW = 211,11
Ml = Peptide 1 = Nie - Ala - I lis - DhomoPhé - Arg - Trp - Gly - NH2 Les synthèses des complexes peptidiques selon l'invention ont été réalisées selon les techniques de Merrifield adaptées aux différentes structures peptidiques des complexes faisant l'objet de l'invention.
Le principe général de la technique de Merrifield étant connu de l'homme de l'art, seules les phases spécifiques de chaque séquence peptidique seront décrites.
D'une façon générale, on utilise une résine MBHA, comme groupement protecteur : les dérivés FMOC (Fluoroényl, Méthoxy Carbonyl), et comme agent de couplage : le BOP. Les acides aminés utilisés sous forme de dérivés FMOC sont les suivants dans l'ordre progressif : FMOC-Gly-OH, Trp-OH, Arg-OH, DhomoPhé- OH, His-OH, Ala-OH et Nle-OH.
Chaque acide aminé est utilisé en excès, ainsi que le BOP et les couplages répétés deux fois. L'acide acétyl xanthique est couplé de façon similaire.
La déprotection est effectuée en deux phases :
1 - Acide trifluoroacétique,
2 - Acide fluorhydrique anydre/para-crésol.
Le composé obtenu avec un rendement de 75 % est repris dans l'acide acétique à 95,5 % et desséché par lyophilisation.
Le conjugué N° 1 est obtenu avec un rendement de 82 % de pureté HPLC.
100 mg de ce conjugué sont à nouveau purifiés par HPLC sur colonne Cl 8 et l'on obtient 70 mg de produit pur. Analytique
Temps de rétention : 17 min, colonne C l 8, UV 210 nm, solvant : tampon de phospate triéthylamine, acétonitrile.
Acides aminés : Ala - 1 ; Gly 1,01 ; His - 1,00 ; Arg - 0,94 ; Dh.Phé - 1,03. Spectre de masse (FAB+) 1075.
Exemple 2 : Synthèse du Pcptidc N" 2 - Code M2 A = Acide Théophyline acétique (C9HUN O4)
M2 = MeNle-Ala-His-DhomoPhé-Λrg-Trp-NH2 En opérant selon les techniques de Merrifield de l'exemple N° 1 , on obtient le peptide M2 après traitement par HPLC avec un rendement de 65 %. Analytique
MW ≈ 1036
HPLC = 98 % - Nucléosil C18 - 250
Acides aminés : MeNle = + +, His ≈ 1,03/1, Arg = 1 ,01/1, Ala = 0,96/1, Dh-Phé ≈ l,05.
+ + = MeNle = détecté.
Exemple 3 : Synthèse du Peptide N" 4 - Code M4 A = Acide acétique CH3COOH MW = 60,05
M4 = Nie - Ala - His - DHomo-Phé - NH2.
En opérant selon les techniques décrites précédemment dans l'exemple N° 1, on obtient le peptide N° 4. Analytiq ue MW- 645
HPLC = 95 % - Nucléosil Cl 8 - 244
Acides aminés : Nie = + +, His = 1,03/1 , Arg = 1,01/1, Ala = 0,96/1, Dh- Phé ≈ 1,05.
++ = Nie = détecté.
Exemple 4 : Synthèse du Peptide N° 3 - Code M3 A = acide Théobromoacétique (C9H10N4O4)
M3 = Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-NH2
L'acide Théobromoacétique est salifié avec le peptide. En opérant selon les techniques décrites précédemment dans l'exemple N" 1, on obtient le peptide N° 3. Analytique
MW Peptide = 745 MW Théobromoacétique = 238,20 « 3,7 diméthyl purine acétique »
HPLC Peptide = 95 % Nucléosil Cl 8 - 244
Acides aminés : His = 1,05, Arg = 1/1 ,02, Ala = 0,96, Hydr oxyDh-Phé = 1,18. Nie = détecté. Exemple 5 : Etude in vitro de l'activité du Peptide Ml sur la stimulation de la Mélanine et de la Tyrosinase, sur Mélanocytes en culture comparativement à l'αM S II
MATÉRIEL
1. Peptide Ml
PM = 1075
10-7 M ; 10-9M ; 10-" M
2. αMSH - Sigma
10-7
3. Mélanocytes de Cloudman - Clone M3.
• MÉTHODE
Cultures de Mélanocytes en présence des solutions de Peptide M l , et de l'αMSH comme témoin culture sous 5 % de C02 dans milieu de Ham F.10 supplémenté en sérum de cheval ( 15 %) et SVF ( 2, 5 %) en présence de Pénicilline-Streptomycine.
• DOSAGES = Dosage de la Mélanine selon Abdel Malek à 436 nm.
= Dosage de la Tyrosinase/Ldopa à 475 nm. = Dosage des Protéines selon technique de Lo ry.
• RÉSULTATS ≈ Dosages de la Mélanine Le peptide Ml provoque une augmentation du taux de Mélanine de
92 % à la dilution de 10"7 M, et l'αMSH provoque une augmentation de la Mélanine de 1 1 % à la dilution de 10"7 M.
• RÉSULTATS ≈ Dosages de la Tyrosinase
% d'augmentation de Mélanine et de Tyrosinase
αMSH Ml Ml Ml 107 M 107 M 10-9 M 1011 M
Mélanine 11 % 92 % 80 % 51 %
Tyrosinase 28 % 30 % 58 % 90 % • COMMENTAIRES
I - Mélanocytes de Cloudman
Mélanocytes du Mélanome Murin de Cloudman, dont la propriété est de sécréter naturellement de la Tyrosinase et de la Mélanine. L'utilisation du Mélanome de Cloudman pour l'étude en screening primaire des substances mélanotropes, réside dans la réponse exponentielle de ce modèle expérimental, qui permet de différencier les activités des peptides mélanotropes dont les structures sont relativement proches.
II - Relations doses/effets des peptides mélanotropes Dans le modèle expérimental par cultures monocellulaires, la réponse des peptides dépend de l'encombrement des récepteurs cellulaires qui répondent de façon plus intense, à des doses faibles et filées.
Par ailleurs, on observe un décalage entre la réponse mélanotrope optimale du peptide Ml aux doses de 10-7 M et 10-9 M, et la réponse de la synthèse de la Tyrosinase, qui atteint son optimum à 10-n.
Ce phénomène s'explique par la libération de la Mélanine stockée dans les mélanosomes, alors que la synthèse de la Tyrosinase est induite après cette libération, pour compenser la sécrétion de Mélanine.
Par ailleurs, il faut tenir compte du poids moléculaire des peptides testés comparativement au poids moléculaire de l'αMSH témoin.
Par exemple, l'αMSH à ÎO-7 M indépendamment de son action ubiquitaire, n'est pas utilisable en thérapeutique compte tenu du prix de revient élevé de sa synthèse qui comprend 14 étapes, alors que le peptide Ml n'en comprend que 7 à la même puissance 10-7 M pour une activité 9 fois plus intense.
Exemple 6 : Etude in vitro de la synthèse de la Tyrosinase induite dans les mélanocytes en culture par le peptide M3 Mélanocytes humains clone M4Be INSERM U. 436
• MATÉRIEL 1. Peptide M3
PM = 745 Employé aux dilutions de 10-7 M, 10-9 M, ion M dans H2O. 2. Peptide témoin de référence αMSH Sigma employé à la dilution de 10-7 M dans H20.
3. Mélanocytes humains clone M4Be - INSERM U.436.
4. Les Mélanocytes M4Be sont des cellules tumorales provenant de l'Unité U 436/218 de l 'INSERM de Lyon. Ces cellules sont caractérisées par leur déficience en Tyrosinase (syndrome de Menkes).
Elles représentent un modèle expérimental permettant d'apprécier l'activité des peptides, sur la synthèse de la Tyrosinase chez des sujets génétiquement déficients.
Culture
Témoin αMSH Lot 085 H 12461 Peptide M3 Cellules : - Type : S9 1 CD
- N° passage : 21
- Inoculation, date : 72
- Inoculation, quantité : 1 x 10 5/puits, 3 plaques 6 puits Milieu : Ham F10 + ( 10 % Sch, 2 % SVF, Péni-Strepto (I00U-100 μg/ml)).
Contact produit ( 100 μl + 0,9 ml milieu) :
- Durée : 24 heures
- Rinçage : 2 Récupération cellules après : 24h
Dosages
Dosage de la Tyrosinase Ldopa à 475 nm.
Dosage des Protéines selon la technique de Lo ry.
• RÉSULTATS Dosage de l'activité tyrosine oxydase et des protéines au niveau de mélanocytes cultivés en présence d'α-MSH ou du peptide M3
Produit Tyrosinase Protéines Tvros./Prot. Moyenne Ecart-Type Stimulation U/ml μg/ml ' x lOOO Tyros./prot. Tyros./prot. en %
0,178 48,4 3.68
Témoin 0,190 47,2 4,03 3,70 0,26 / 0,165 48,8 3,38
0,225 48,91 4,60
MSH ( 10- M) 0,237 47,12 5,03 4,63 0,54 25 0.206 48,70 4,23
0,287 66,6 4,31
10-5 M 0,262 66,0 3,97 4,23 019 15 0,266 60,3 4,41
0,270 53,9 5,01
10-7 M 0,245 56,8 4,31 4,67 0,28 27 0,254 54,3 4,68
0,304 46,3 6,57
M3 10-9 M 0,329 48,4 6,80 7,25 0,81 % 0,371 44,2 8,39
0,2% 66.9 4,42
10-H M 0,207 49,7 4,16 4,29 0,11 16 0,224 52,2 4,29
0,241 57,0 4,23
10-12 M 0,254 62.1 4,09 4,13 0,07 12 0,283 69,5 4,07
Dosages de la Tyrosinase
Le peptide M3 stimule la sécrétion de la Tyrosinase de 96 % à la dose de 10-9 M, comparativement aux témoins non traités et à l'αMSH à la dose de 109 M.
Exemple 9 : Etude du pouvoir préventif des Peptides M2 contre l'érythème solaire Objectif :
Evaluer le pouvoir protecteur du Peptide M2 en application topique, contre l'érythème solaire.
• MATÉRI ELS
1. Peptide M2 en solution à 50 mg/1 et 100 mg/1 dans un gel de PEG.
2. Cobayes mâles « Dunkin-Hartley » de 300 g, 10 animaux par lot.
• MÉTHODE
Epilation des flancs des animaux à J- l, un côté reçoit le traitement, l'autre sert de témoin. Les animaux sont recouverts de papier métallique percé de 4 fenêtres au niveau des flancs. On applique sur un côté 1 ml de Gel de chacune des solutions de peptide M2.
Après application, on expose les animaux à un rayonnement UVA et UVB délivrant 10,75 W/cm?, chaque fenêtre étant soumise à une exposition de durée croissante en progression géométrique de 1,25.
Après 24 heures, on évalue le niveau d'érythème de chaque fenêtre.
• RÉSULTATS
Pour chaque animal, on évalue le temps d'irradiation provoquant le premier érythème net (DEM). On calcule ensuite les rapports de DEM (zone traitée/zone non traitée).
La moyenne de ces rapports constitue l'indice d'élévation du seuil d'érythème pour chaque dose. Gammes de
Traitements temps DEM Indices d'élévations d'irradiation moyennes du seuil érylhémal
Ecart-
Témoins non traités 60 à l l7 s 83,95 Moyenne type
M2 50 mg/1 240 à 468 s 324,40 3,96 0,66
M2 100 mg/1 360 à 702 s 495,6 5,94 0,99
• CONCLUSION
L'application du peptide M2 par voie topique prévient de façon hautement significative l'apparition de l'érythème solaire.
En effet, des expositions 6 fois (pour 100 mg/1) et 4 fois (pour 50 mg/1) plus longues sont nécessaires pour donner un érythème équivalent à celui observé sur la partie non traitée.
Aucun signe d'intolérance n'a été observé sur les zones ayant reçu M2 puis exposées aux rayons UV.
Exemple 10 : Etude clinique d 'objcctivation de l 'activité comparative de deux formules galéniques de la série peptidique « MELITΛNE »
• RÉSUME
Etudier comparativement l'action mélantotrope et anti- érythémateuse de deux formules galéniques de peptides de la série MEUTANE, en application topique.
• MATÉRIEL
Formule N° 10 = A-Peptide N° 4 Acyl-MeNle-Ala-His-DhomoPhé-NH2
Formule N° 1 1 = A-Peptide N° 3
3,7 - diméthyl purine acétique-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Λrg-NH2
Forme Galénique == gel de carbo.vyméthyl cellulose à 5 mg de peptide pour
100 g de gel. • MÉTHODOLOGIE
L'analyse des résultats a porté sur un panel de 25 volontaires adultes de deux sexes, âgés de 18 à 50 ans.
Les produits étudiés ont été appliqués quotidiennement, deux fois par jour, sur la face de flexion des avant-bras (un seul produit par avant- bras) pendant deux semaines consécutives.
L'analyse statistique a porté d'une part, sur les valeurs obtenues au niveau de chacune des zones traitées en comparaison aux valeurs obtenues au niveau de la zone témoin et d'autre part, sur les différences calculées entre les valeurs obtenues sur chacune des zones traitées ou témoin de la valeur obtenue sur la zone témoin propre à chacune des différentes zones, afin de comparer les deux produits étudiés à la zone témoin.
Les moyennes des différences des coordonnées de chromaticité ont été également calculées pour l'ensemble de chacune des zones traitées et témoin.
Une analyse de variance et le test de la différence la moins significative (« L.S.D. ») ont également permis d'effectuer les comparaisons multiples entre les valeurs obtenues au niveau de chacune des zones traitées et témoin. Les valeurs moyennes et les écarts obtenus par rapport à la moyenne (S.E.M.) des Doses Erythémateuses Minimales ( D.E.M.), obtenues sur l'ensemble des volontaires, pour chacun des produits étudiés, sont répertoriées dans le tableau I. Les différences statistiques y sont également mentionnées, ainsi que le type de test effectué. Les valeurs moyennes et les écarts obtenus par rapport à la moyenne (S.E.M.) des différences de la coordonnée de chromaticité « b* » et de l'Angle Typologique Individuel (ITA°), obtenues sur l'ensemble des volontaires ayant participé à l'essai, pour chacun des produits étudiés, sont répertoriées dans les tableaux II, 111, IV et V. Les différences statistiques y sont également mentionnées, ainsi que le type de test effectué.
L'Angle Typologique Individuel ITA°, défini par Chardon & Col. pour déterminer le niveau de melanisation de la peau, a été calculé de la façon suivante :
ITA° = (arc tangente (L*-50)/b*) 180/3.14159 avec : L* = variable de clarté et b* = coordonnée de chromaticité du bleu au jaune. TABLEAU I
DOSES ERYTHEMATEUSES MINIMALES APRES UNE EXPOSITION
AUX UV A ET B
(moyennes et S.E.M., n ≈ 25)
DOSE EN J/cm2
ZONES TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 11
T 24 heures 1,5 ±0,1 1,8 ± 0,1*° 2,5 ± 0,1*°
valeur statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de la zone témoin, au même temps de l'étude (test «t» de Student en séries non appariées, « one-tail », significativité : p < 0,05). valeur statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de l'autre zone traitée, au même temps de l'étude (LS.D. et test «t» de Student en séries appariées, « onetail », significativité : p < 0,05).
TABLEAU II
VARIATION DE LA COORDONNEE DE CHROMATICITE « b* »
APRES EXPOSITION SOLAIRE AUX UV Λ ET B
T72 Heures
(moyennes et S.E.M., n = 25)
Δb*
Zones
FLUX en TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 11 med/min/cm2
0,82 0,3 ±0,1 0,7 ± 0,2 0,9 ±0,2
1,02 0,4 ±0,1 0,9 ±0.2 1,4 ±0,2
1,28 0,3 ±0,1 1,3 ±0,2 1,6 ±0,2
1,60 0,5 ±0,1 1,5 ±0,2 1,9 ±0,2
2,00 0,4 ±0,1 2,1 ±0,2 2,6 ±0,2
2.50 0,5 ±0,1 2,5 ±0,2 2,9 ±0,2
MOYENNE 0,4 ±0,1 1,5 ± 0,2*° 1,8 ± 0,2*° différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de l'autre zone traitée, pour le même flux (ANOVA et L.S.D., significativité : p < 0,05). différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de la zone témoin, pour le même flux (test «t» de Student en séries appariées, « one-tail », significativité : p < 0,05).
TABLEAU III VARIATION DE L'I.T.A.° APRES EXPOSITION SOLAIRE AUX UV A ET B
T24 Heures
(moyennes et S.E.M., n = 25)
Δ I. T. Λ.
Zones
FLUX en TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 11 Med/min/cm2
0,82 -1,5 ±0.3 - 2,8 ± 0,6 -3,6 ±0,5
1,02 -1,9 ±0,7 - 4,7 ± 0,6 -5,8 ±0.7
1,28 - 1,5 ±0,6 - 4,9 ± 0,5 -5,8 ±0.6
1,60 - 1,7 ±0,6 -5,5 ±0,7 - 7,0 ± 0,7
2,00 -1,9 ±0,7 -6,8 ±0,8 -7,5 ±0,9
2,50 -2 ±0,7 -7,5 ± 1,0 - 8 ± 0,9
MOYENNE - 1,75 ±0,6 - 5,37 ± 0,7*° -6,29 ±0,72*°
différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de l'autre zone traitée, pour le même flux (ANOVA et L.S.D., significativité : p < 0,05). différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de la zone témoin, pour le même flux (test «t» de Student en séries appariées, « one-tail », significativité : p < 0,05). TABLEAU IV VARIATION DE L'I.T.Λ." APRES EXPOSITION SOLAIRE AUX UV A ET B
T72 Heures
(moyennes et S.E.M., n = 25)
Δ I. T. A."
Zones
FLUX en TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 11 Med/min/cm2
0,82 - 1 ± 0,4 -2,5 ±0,6 - 3 ± 0,7
1,02 - 1 ± 0,5 -3,3 ±0,6 - 5 ± 0,8
1,28 - 1 ± 0,5 -4,4 ±0,7 -6* 1,0
1,60 -2 ±0,5 -5,5 ±0,9 - 7 ± 0,8
2,00 - 2 ± 0,6 - 7,9 ± 0.8 -8 ±0,9
2,50 - 3 ± 0.5 -8,1 ±0,9 - 10 ±0,7
MOYENNE - 1,66 ±0,5 -5,29 ±0,75*° - 6,5 ± 0,82*°
différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de l'autre zone traitée, pour le même flu (ANOVA et L.S.D., significativité : p < 0,05). différence statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de la zone témoin, pour le même flux (test «t» de Student en séries appariées, « one-tail », significativité : p < 0,05).
TABLEAU V VARIATION DE LA COORDONNEE DE CHROMATICITE «b*» et de l ' I.T. Λ.0 AU TEMPS DE 72 Heures
(moyennes et S.E.M., n = 25)
DOSE EQUIVALEN TE Λ 0,75 D.EM.
PARAM ETRE TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 1 1
Δb 0,5 ± 0,1 2,5 ± 0, 1 *° 3,8 ± 0,2*°
Δ I. T. A." - 2,2 ± 0,4 - 3,5 ± 0,4*° - 4,9 ± 0,6*°
DOSE EQUIVALENTE Λ 1 D.EM.
PARAM ETRE TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 1 1
Δb 0,6 ± 0,1 1,7 ± 0,2*° 2,9 ± 0,2*°
Δ I. T. A." - 1 ,6 ± 0,5 - 2,9 ± 0,6*° - 3,4 ± 0,6*°
DOSE EQUIVALENTE Λ 1,25 D.EM.
PA RAMETRE TEMOIN PRODUIT 10 PRODUIT 1 1
Δb 0,8 ± 0,1 1 ,9 ± 0,2*° 2,6 ± 0,2*°
Δ I. T. A.β - 3,8 ± 0,6 - 2,6 ± 0,7*° - 1 ,5 ± 0,6*°
valeur statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de la zone témoin, au même temps de l'étude (test «t» de Student en séries appariées, « one-tail », significativité : p < 0,05). valeur statistiquement significative par rapport à la valeur obtenue au niveau de l'autre zone traitée, au même temps de l'étude (ANOVA et L.S.D., significativité : p < 0,05).
• RÉSULTATS
Les applications topiques des produits «formule 10 et formule 1 1 » pendant 15 jours consécutifs et dans les conditions expérimentales définies par le protocole ont donné les résultats suivants :
1. Augmentation hautement significative sur le plan statistique de la dose érythémateuse minimale chez le volontaire adulte, exprimant une activité anti-érythémateuse hautement significative en particulier pour la formule 11. 2. On observe également pour l'ensemble des panélistes une augmentation statistiquement significative des indices de chromaticité traduisant une élévation de haut niveau du degré de melanisation de la peau après exposition solaire unique aux UV A et B. 3. La diminution hautement significative de l'I.T.A. confirme également l'intensité de melanisation de la peau particulièrement marquée pour la formule 11.

Claims

REVENDICATIONS
1 / Complexes nucléo-peptidiques obtenus par synthèse, comprenant une séquence d'au moins trois acides aminés sous la forme D, L ou DL, ladite séquence étant liée physiquement ou chimiquement à des acides puriques, ou leurs dérivés de formule générale I :
N-Rl - COOH (I) dans laquelle N représente une base purique comprenant de 5 à 10 atomes de carbone, RI représente un radical alkyl en ou C3. 2/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 1 , caractérisés en ce que les dérivés des acides puriques sont des acides xanthiques.
3 / Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que la séquence d'acides aminés est liée à l'acide sous forme de sel, d'ester ou d'amide.
4/ Complexes nucléo-peptidiques selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que les acides puriques sont choisis dans le groupe comprenant :
- l'acide hypoxanthique (C7H5N4O3) - l'acide acétyl xanthique (C7H8N θ4)
- l'acide théobromine acétique (C9H8 4O )
- l'acide théophyline acétique (C9H1 1 N4O4).
5/ Complexes nucléo-peptidiques selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisés en ce que la séquence est constituée de 3 acides aminés, et est choisie dans le groupe comprenant :
Ala-His-HPhé His-HPhé-Arg où Hphé représente la dihydroxy-DPhénylalanine, la DhomoPhénylalanine. 6/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 5, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale :
AX-His-HPhé-Y dans laquelle A est un acide purique de formule générale I telle que définie ci-dessus ;
X représente un groupe Norleucine (Nie), ou l'un de ses dérivés sous forme cétylée (Acyl-Nle) ou méthylée (MeNle), le groupe Nlc-Λla ou Ala ; Y représente un groupe ArgZ ou Z dans lequel Z est Trp-Gly-OII, Trp-OH, OH, rp-Gly-NH2, Trp-NH2 ou NH2 ;
Hphé représente la dihydroxy-DPhénylalaninc ou la DhomoPhénylalanine.
7/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 6, caractérisés en ce qu'ils sont choisis dans le groupe comprenant : 1) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trρ-Gly-NH2 2) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-NH2
3) A- Nle-Ala-His-DhomoPhé-Λrg-NH2
4) A-Nle-Ala-His-Dhomophé-NH2
5) A-Ala-His-DhomoPhé-NH2
6) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-Gly-OH 7) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-Trp-OH
8) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-Arg-OH
9) A-Nle-Ala-His-DhomoPhé-OH
10) A-Ala-His-DhomoPhé-OH
11) A-Nle-AIa-His-Dihy droxyDPhé-Arg-Trp-Gly-NH2 12) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-NH2
13) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-NH2
14) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-NI l2
15) A-Ala-His-DihydroxyDPhé-NH2
16) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-Gly-OH 17) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-Trp-OH
18) A-NIe-Ala-His-DihydroxyDPhé-Arg-OH
19) A-Nle-Ala-His-DihydroxyDPhé-OH
20) A-Ala-His-DihydroxyDPhé-OH.
8/ Complexes nucléo-peptidiques selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisés cn ce que au moins un acide aminé constitutif de la séquence est glycosylé.
9/ Compositions cosmétologiques ou pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles comprennent, à titre de substance active, au moins un complexe nucléo-peptidique selon l'une des revendications 1 à 8, en association avec un support pharmaceutiquement acceptable. 10/ Compositions cosmétologiques ou pharmaceutiques selon la revendication 9, caractérisées en ce qu'elles sont sous forme de solutions, de lotions, de sprays, de crèmes ou de gel.
1 1/ Compositions pharmaceutiques selon la revendication 9, caractérisées en ce qu'elles sont sous forme de préparations injectables.
12/ Utilisation des compositions cosmétologiques selon la revendication 9 ou 10, comme activateur de la mélanogénèse cutanée.
13/ Utilisation des complexes selon l'une des revendications 1 à 8 pour la préparation d'une composition pharmaceutique selon l'une des revendications 9 à 1 1 pour le traitement médical des troubles de la mélanogénèse.
14/ Compositions cosmétologiques, caractérisées en ce qu'elles comprennent, à titre de substance active, au moins un complexe nucléo- peptidique selon l'une des revendications 1 à 8, en association avec un support cosmétologiquement acceptable.
15/ Compositions cosmétologiques selon la revendication 14, caractérisées en ce qu'elles sont sous forme de solutions, de lotions, de sprays, de crèmes ou de gel.
16/ Utilisation des compositions cosmétologiques selon la revendication 14 ou 15, par voie topique en vue de l'accélération de la mélanogénèse de la peau et des cheveux.
17/ Utilisation des compositions cosmétologiques selon la revendication 14 ou 15, par voie topique pour le traitement préventif et curatif des érythèmes solaires.
REVENDICATIONS MODIFIEES
[reçues par le Bureau international le 27 février 1998 ( 27.02.98) ; revendication 1 modif iée ;autres revendications inchangées ( 1 page) ]
1/ Complexes nucléo-peptidiques à activité mélanotrope obtenus par synthèse, comprenant une séquence d'au moins trois acides aminés sous la forme D, L ou DL, ladite séquence étant liée physiquement ou chimiquement à des acides puriques, ou leurs dérivés de formule générale I :
N-Rl - COOH (I) dans laquelle N représente une base purique comprenant de 5 à 10 atomes de carbone, RI représente un radical alkyl en Cl ou C3. 2/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 1, caractérisés en ce que les dérivés des acides puriques sont des acides xanthiques.
3/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que la séquence d'acides aminés est liée à l'acide sous forme de sel, d'ester ou d'amide. 4/ Complexes nucléo-peptidiques selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que les acides puriques sont choisis dans le groupe comprenant : l'acide hypoxanthique (C H5N4θ3) l'acide acétyl xanthique (C7H8N4O4) l'acide théobromine acétique (C-9H8N4O4) - l'acide théophyline acétique (C HΠN O4)
5/ Complexes nucléo-peptidiques selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisés en ce que la séquence est constituée de 3 acides aminés, et est choisie dans le groupe comprenant :
Ala-His-HPhé His-HPhé-Arg où Hphé représente la dihydroxy-DPhénylalanine, la DhomoPhénylalanine.
6/ Complexes nucléo-peptidiques selon la revendication 5, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule générale :
AX-His-HPhé-Y dans laquelle
PCT/FR1997/001669 1996-09-23 1997-09-23 Complexes nucleo-peptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations WO1998012212A1 (fr)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU43883/97A AU4388397A (en) 1996-09-23 1997-09-23 Nucleopeptide complexes, cosmetic and pharmaceutical compositions containing them and their uses

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR96/11556 1996-09-23
FR9611556A FR2753707B1 (fr) 1996-09-23 1996-09-23 Complexes nucleopeptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1998012212A1 true WO1998012212A1 (fr) 1998-03-26

Family

ID=9495967

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR1997/001669 WO1998012212A1 (fr) 1996-09-23 1997-09-23 Complexes nucleo-peptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations

Country Status (3)

Country Link
AU (1) AU4388397A (fr)
FR (1) FR2753707B1 (fr)
WO (1) WO1998012212A1 (fr)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10150412A1 (de) * 2001-10-11 2003-04-17 Beiersdorf Ag Verwendung einer oder mehreren Substanzen, gewählt aus der Gruppe der Pyrimidine und Purine in kosmetischen Zubereitungen zur Bräunung der Haut
EP1754513A2 (fr) 2005-08-17 2007-02-21 L'oreal Utilisation de l'acide 8-hexadécène-1,16-dicarboxylique comme agent de soin destiné à favoriser la cohésion de la couche cornée
US7268108B2 (en) 2002-02-01 2007-09-11 Institut European De Biologie Cellulaire Alpha-melanocyte stimulating hormone derivatives and cosmetic application thereof
US7439231B2 (en) * 2003-02-14 2008-10-21 Provid Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of antigen presentation by MHC class II molecules and methods of use thereof
CN109134608A (zh) * 2017-06-19 2019-01-04 刘玉春 刺激黑色素生成的胜肽

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2857581B1 (fr) * 2003-07-18 2007-11-30 Inst Europ Biolog Cellulaire Association utile dans le traitement preventif et curatif de l'alopecie d'un agent anti-inflammatoire et d'un filtre uvb
WO2008015342A2 (fr) * 2006-08-03 2008-02-07 Societe D'extraction Des Principes Actifs Sa (Vincience) Utilisation d'un extrait vegetal en tant qu'agent actif pour augmenter la synthese de melanine dans les melanocytes

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2624374A1 (fr) * 1987-12-09 1989-06-16 Induchem Ag Preparation, notamment cosmetique antisolaire, et procede pour faire passer une substance active dans la peau
WO1989005818A1 (fr) * 1987-12-24 1989-06-29 Co Pharma Corporation S.R.L. Derives de purine ayant une action pharmacologique

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2624374A1 (fr) * 1987-12-09 1989-06-16 Induchem Ag Preparation, notamment cosmetique antisolaire, et procede pour faire passer une substance active dans la peau
WO1989005818A1 (fr) * 1987-12-24 1989-06-29 Co Pharma Corporation S.R.L. Derives de purine ayant une action pharmacologique

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A VON DUNGEN ET AL.: "Synthese von Strukturanalogen des Tetragastrins", JUSTUS LIEBIGS ANNALEN DER CHEMIE, no. 5, 1976, WEINHEIM DE, pages 860 - 875, XP002034383 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10150412A1 (de) * 2001-10-11 2003-04-17 Beiersdorf Ag Verwendung einer oder mehreren Substanzen, gewählt aus der Gruppe der Pyrimidine und Purine in kosmetischen Zubereitungen zur Bräunung der Haut
US7270804B2 (en) 2001-10-11 2007-09-18 Beiersdorf Ag Use of one or several substances selected from the group of pyrimidines and purines in cosmetic preparations for tanning the skin
US7268108B2 (en) 2002-02-01 2007-09-11 Institut European De Biologie Cellulaire Alpha-melanocyte stimulating hormone derivatives and cosmetic application thereof
US7439231B2 (en) * 2003-02-14 2008-10-21 Provid Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of antigen presentation by MHC class II molecules and methods of use thereof
US8222215B2 (en) 2003-02-14 2012-07-17 Provid Pharmaceuticals, Inc. Methods for the use of inhibitors of antigen presentation by MHC class II molecules
US8598312B2 (en) 2003-02-14 2013-12-03 Provid Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of antigen presentation by MHC class II molecules
EP1754513A2 (fr) 2005-08-17 2007-02-21 L'oreal Utilisation de l'acide 8-hexadécène-1,16-dicarboxylique comme agent de soin destiné à favoriser la cohésion de la couche cornée
CN109134608A (zh) * 2017-06-19 2019-01-04 刘玉春 刺激黑色素生成的胜肽
CN109134608B (zh) * 2017-06-19 2021-10-12 刘玉春 刺激黑色素生成的胜肽

Also Published As

Publication number Publication date
FR2753707A1 (fr) 1998-03-27
FR2753707B1 (fr) 1998-12-11
AU4388397A (en) 1998-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2008327932B2 (en) Compositions for reducing oxidative stress and uses thereof
EP0586303B1 (fr) Composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant en association une peroxydase et un agent anti-oxygène singulet
US8802117B2 (en) Melatonin and immunostimulating substance-based compositions
EP1753781B1 (fr) Peptides ou conjugues peptidiques derives de la msh et leur utilisation dans le traitement cosmetique de la canitie
WO1998009611A1 (fr) Utilisation cosmetique de composes a structure lipoaminoacide et compositions cosmetiques a activite apaisante incorporant certains de ces composes
FR2998570A1 (fr) Peptides, compositions les comprenant et utilisations notamment cosmetiques propigmentantes
FR3029782A1 (fr) Composes peptidiques, compositions les comprenant et utilisations notamment cosmetiques
KR101413939B1 (ko) 펩타이드가 결합된 아스코르빈산 유도체
EP1581177A2 (fr) Bio-activateur metabolique cutane
JP4783436B2 (ja) 皮膚の美白のための黒色酵母からの抽出物
EP0281435A1 (fr) Produit thérapeutique à base de dérivés organiques du silicium
WO1998012212A1 (fr) Complexes nucleo-peptidiques, compositions cosmetologiques et pharmaceutiques les contenant et utilisations
FR2582306A1 (fr) Sels d&#39;acides n-acyl-thiazolidine-4-carboxyliques et de 6-piperidino-2,4-diaminopyrimidine-3-oxyde et compositions a usage cosmetique-dermatologique les contenant
FR3029915A1 (fr) Tripeptides, compositions les comprenant et utilisations notamment cosmetiques
JP2013531053A (ja) ヘアケアにおけるステビオール又は誘導体の局所使用
EP1348418A1 (fr) Composition cosmétique ou dermatologique contenant l&#39;association d&#39;un tetrahydrocurcuminoide et d&#39;une huile amidée
CA2532679C (fr) Utilisation de conjugues peptidiques pour la preparation de compositions destinees au traitement preventif et curatif de l&#39;alopecie
EP2086564B1 (fr) Composition pharmaceutique et/ou cosmetique contenant des peptides
EP2086565B1 (fr) Composition cosmetique et/ou pharmaceutique comprenant comme principe actif au moins un peptide et utilisation de ce peptide
EP0595949B1 (fr) Compositions pour la pigmentation de la peau ou des cheveux contenant un extrait de marrubium vulgare
EP1754513A2 (fr) Utilisation de l&#39;acide 8-hexadécène-1,16-dicarboxylique comme agent de soin destiné à favoriser la cohésion de la couche cornée
FR2904532A1 (fr) Composition dermatologique et/ou cosmetique contenant des polypeptides ou des peptides
EP2414382B1 (fr) Peptides eclaircissants activateurs du proteasome et compositions les contenant
FR2994656A1 (fr) Extrait de lin et composition cosmetique comprenant ledit extrait pour augmenter le niveau de coenzyme q10 intracellulaire
JP3260467B2 (ja) 白髪の防止及び白髪黒色化用毛髪化粧料

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU JP US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP

Ref document number: 1998514362

Format of ref document f/p: F

122 Ep: pct application non-entry in european phase