WO1996002500A1 - Technetium-sulphonamide complexes, their use, pharmaceutical agents containing them, and process for producing the complexes and agents - Google Patents

Technetium-sulphonamide complexes, their use, pharmaceutical agents containing them, and process for producing the complexes and agents Download PDF

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Definitions

  • the invention relates to the subject matter characterized in the claims, that is to say new chelating agents containing sulfonamide groups, their metal complexes, pharmaceutical compositions containing these compounds, their use in radiodiagnostics and radiotherapy, methods for producing these compounds and compositions, and conjugates of these compounds with them in diseased tissue selectively enriching substances, especially peptides.
  • radiopharmaceuticals for diagnostic and therapeutic purposes has long been known in the field of biological and medical research.
  • radiopharmaceuticals are used to represent certain structures such as the skeleton, organs or tissues.
  • the diagnostic application presupposes the use of such radioactive agents that, after application, accumulate specifically in the structures in the patient that are to be examined. These locally accumulating radioactive agents can then be tracked down, plotted or scintigraphed using suitable detectors, such as scintillation cameras or other suitable recording methods.
  • suitable detectors such as scintillation cameras or other suitable recording methods.
  • the distribution and relative intensity of the detected radioactive agent characterizes the location of a structure in which the radioactive agent is located and can represent the presence of abnormalities in structure and function, pathological changes etc.
  • radiopharmaceuticals can be used as therapeutic agents to irradiate certain pathological tissues or areas.
  • Such treatment requires the production of radioactive therapeutic agents that accumulate in certain structures, tissues or organs. By enriching these agents, the therapeutic radiation is carried directly to the pathological tissue.
  • metallic radionuclides are used as diagnostics or therapeutic agents, it being possible for the metal to be present in free form, as an ion or in the form of a metal complex.
  • Technetium-99m and various rhenium isotopes are examples of metallic radionuclides that can form complexes.
  • the former is used in diagnostics, the latter in therapy.
  • radiopharmaceuticals In addition to the metal (complex), radiopharmaceuticals generally also contain suitable carriers and additives which permit injection, inhalation or ingestion by the patient, such as physiological buffers, salts, etc.
  • suitable carriers and additives which permit injection, inhalation or ingestion by the patient, such as physiological buffers, salts, etc.
  • the most frequently used radionuclide for nuclear medicine questions is technetium-99m, which due to its favorable physical properties (no corpuscular radiation, 6 h physical half-life, 140 KeV gamma radiation) and the resulting low radiation exposure is particularly suitable as a radioisotope for in vivo Diagnostics are suitable.
  • Technetium-99m can be easily obtained from nuclide generators as pertechnetate and can be used directly in this form for the production of kits for routine clinical needs.
  • the production of radiopharmaceuticals first requires the synthesis of a suitable ligand.
  • the complex is then produced in the clinic immediately before use from the respective complexing agent (hereinafter also referred to as ligand or chelator) and the desired radionuclide (labeling).
  • the complexing agent which is always in the form of a lyophilized kit, is reacted with a solution containing the radionuclide under complexing conditions.
  • the ligand produced is mixed with a pertechnetate solution with the addition of a suitable reducing agent and the corresponding technetium complex is produced under suitable reaction conditions.
  • the solution containing the radionuclide can, as in the case of technetium-99m, be obtained from a commercially available Mo-99 / Tc-99m nuclide generator or, as in the case of rhenium-186, can be obtained directly from a manufacturer.
  • the complex formation reaction is carried out under suitable temperatures (for example 20 ° -100 ° C.) within a few minutes to several hours. To ensure complete complex formation, a large excess (more than 100-fold excess) of the ligand produced and an amount of reducing agent (for example SnCl 2 , S 2 O 4 etc.) sufficient for a complete reduction of the radionuclide used are required.
  • technetium can exist in a number of oxidation states (+7 to -1) that can change the pharmacological properties by changing the charge of a complex, it is necessary to provide chelators that can stably bind technetium in a defined oxidation state in order to prevent an in vivo redox processes or technetium releases from the corresponding radio diagnostics Biodistribution takes place, which complicates the safe diagnosis of corresponding diseases.
  • radionuclides in in vivo diagnostics as well as therapy depends on the specificity and the selectivity of the labeled chelates to the target cell. These properties can be improved by coupling the chelates to biomolecules according to the "drug targeting" principle. Antibodies, their fragments, hormones, growth factors and substrates of receptors and enzymes are suitable biomolecules.
  • the British patent application GB 2,109,407 describes the use of radioactively labeled monoclonal antibodies against tumor-associated antigens for tumor diagnosis in vivo.
  • direct protein labels via donor groups (amino, amide, thiol, etc.) of the protein (Rhodes, BA et al., J. Nukl. Med. 1986, 27, 685-693) or by introducing complexing agents (US 4,479,930 and Fritzberg, AR et al., J. Nucl. Med. 1986, 27, 957) with Technetium-99m.
  • Suitable complexing agents for technetium and rhenium isotopes are, for. B. cyclic amines, as described by Volkert et al. (Appl.Radiol.Isot. 1982, 33; 891) and Troutner et al. (J. Nucl. Med. 1980, 21; 443), which have the disadvantage, however, that they are only able to bind technetium-99m in good yields from a pH> 9.
  • N2 ⁇ 2 systems are in clinical use, but have the disadvantage that the corresponding metal complexes are not very stable in vivo. According to studies by Pillai and Troutner, the complexes in the plasma lose up to 30% of the complexed metal after 1 hour (Pillai, MRA, Troutner, DE et al .; Inorg. Chem. 1990, 29; 1850).
  • Non-cyclic N 4 systems such. B. the HM-PAO have a major disadvantage of their low complex stability. Tc-99m-HM-PAO must because of its instability (Ballinger, JR et al., Appl. Radiat. Isot. 1991, 42; 315), Billinghurst, MW et al., Appl. Radiat. Isot. 1991, 42; 607) can be applied within 30 minutes after its labeling, so that the proportion of decay products that have a different pharmacokinetics and excretion can be kept low. Such radiochemical contaminants complicate the detection of diagnosing diseases. A coupling of these chelates or chelating agents to other substances that selectively accumulate in foci of disease cannot be solved with simple means, so that they are generally distributed nonspecifically in the organism.
  • NS 2 chelators (Bormans, G. et al .; Nucl. Med. Biol. 1990, 17; 499), such as e.g. B. ethylenedicysteine (EC; Verbruggen, AM et al .; J. Nucl. Med. 1992, 33; 551) meet the requirement for sufficient stability of the corresponding technetium-99m complex, but only form from a pH value of the complexing medium > 9 radio diagnostics with a purity of more than 69%.
  • B. ethylenedicysteine ethylenedicysteine
  • NßS systems (Fritzburg, A.; EP 0 173 424 and EP 0 250 013) form stable technetium-99m complexes, but must be heated to temperatures of approximately 100 ° C. in order to form a uniform radiopharmaceutical.
  • bifunctional complexing agents which carry both functional groups for binding the desired metal ion and one (other, several) functional group for binding the selectively enriching molecule.
  • Such bifunctional ligands enable a specific, chemically defined binding of technetium or rhenium isotopes to a wide variety of biological materials, even if so-called pre-labeling is carried out.
  • EP 0 247 866 EP 0 188 256 and EP 0 200 492 describe some chelating agents which are coupled to monoclonal antibodies or fatty acids.
  • N2S2 systems are used as chelating agents, which are not very suitable due to their low stability. Since both the selectively enriching substances in their properties, as well as the mechanisms, after to which they are enriched are very different, it is still necessary to vary the couplable chelating agent and the physiological
  • the invention is therefore based on the object of finding complexes or complexing agents which overcome the disadvantages of the prior art, i.e. the
  • the corresponding complexing agent and the respective metal oxide / salt can be prepared at low temperatures, preferably at room temperature, from the corresponding complexing agent and the respective metal oxide / salt, show high complex stability even under in vivo conditions , - Show a high selectivity or tissue / organ specificity.
  • the complexes must meet the requirements that are generally placed on pharmaceuticals, such as good tolerance (i.e. no side effects), good solubility and complete elimination.
  • the object is achieved by the present invention.
  • V 1 , V 2 , V 3 , V 4 independently of one another represent a carbonyl,> CH (COOH) or -CH2 group, ⁇ l for a hydrogen atom, one optionally with a
  • Carboxyl an amino or a thiocyanate group substituted C 1 -C ⁇ alkyl radical or a metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of atomic number 43, 45, 46, 75, 82 or 83,
  • X 2 , X 3 independently of one another for a hydrogen atom or a
  • U stands for a direct bond, a straight-chain or branched, saturated or unsaturated C 1 -C 2 -alkylene radical which, if desired, a maleimide, a succinimide, an optionally substituted by 1 to 5 fluorine atoms, an amino or nitro group
  • Phenyl radical one or two imino, phenylene, phenyleneoxy, phenylenamino, amide, hydrazide, carbonyl, ureido, thiourido-, thioamide, ester group (s), 1 to 2 oxygen, sulfur and / or nitrogen atom (s) and optionally 1 to 5 hydroxy,
  • R 2 a straight-chain or branched C ⁇ -C alkyl radical, which optionally contains a -COOH group, a C7-C12 - aralkyl radical or an aromatic, optionally substituted with one
  • R 4 represents a hydrogen atom or a carboxyl group or in the event that R 1 represents a hydrogen atom or a
  • Carboxyl group means additionally also represents a group -UZ, in which U and Z have the meanings given, R 3 represents a hydrogen atom, a metal ion equivalent of an element of the atomic numbers mentioned, a trifluoroacetate, acetate, benzoate, - acyl, a benzoyl, a hydroxyacetyl, an acetamidomethyl, if desired with a chlorine or bromine atom, a methyl, ethyl, carboxyl and / or methoxy group substituted benzoic acid residue, a p-methoxybenzyl, one
  • R 4 have the meanings given, where at least one and at most two radicals V 1 , V 2 , V 3 , V 4 stand for a carbonyl group, are outstandingly suitable as or for the production of radiodiagnostics and therapeutics.
  • complexing agents ie compounds of the general formula I with X 1 , X 2 , X 3 and R 3 in the meanings indicated, with the exception of one metal ion equivalent, meet the requirement profile mentioned. They are characterized in particular by the fact that they have the desired metal 3 complex quickly at physiological pH and low temperatures. They are therefore particularly suitable for routine use in the clinic.
  • the dimeric chelators with R 3 as a radical of the general formula ⁇ become monomeric metal complexes of the formula I with R 3 as a metal ion equivalent.
  • Radioactive metal ions of elements of atomic numbers 43, 45, 46, 75, 82 or 83 such as e.g. the radioisotopes technetium-99m, rhodium-103, palladium-109, rhenium-186, lead-212 and bismuth-212 use, the choice of the metal isotope depending on the desired field of application. According to the invention, metal complexes of the elements technetium and rhenium are preferred.
  • ⁇ -radiation-emitting isotopes e.g. Tc-99m
  • these can be used in single photon emission tomography (SPECT).
  • SPECT single photon emission tomography
  • ⁇ -particle-emitting isotopes such as e.g. Bi-211, Bi-212, Bi-213, Bi-214 or ß-emitting
  • Isotopes such as Re-186 or Re-188, these can be used in radiotherapy.
  • V 1 and V 4 each represent a carbonyl group
  • V 2 and V 3 each represent a -CH group
  • p represents the number 0.
  • Suitable radicals R 1 are hydrogen or a carboxylic acid group and in particular a group -UZ in which Z is a hydrogen atom, but preferably for the rest of a biomolecule with tissue or structure-specific properties or a functional group which may be present in activated form via the desired such a biomolecule can be stands.
  • biomolecules are residues of an amino acid, a peptide or a steroid, such as the known steroid hormones (androgens, gestagens, estrogens, cholesterol, cholic acid derivatives, Pregnane, etc.), and polynucleotides such as RNA or DNA.
  • Examples of functional groups that can be used to bind a biomolecule are a -COOH, a -SCN, a -OH, a -Cl or an -NH 2 group.
  • Such groups can also be present in their activated form, for example as succinimide esters or acid chloride.
  • U can preferably represent a direct bond, however, a straight-chain or branched, saturated or unsaturated C 1 -C 2 o -alkylene radical which, if desired, a succimide, a phenyl radical which is optionally substituted by 1 to 5 fluorine atoms, an amino or a nitro group, one or two imino, phenylene, phenyleneoxy, phenylenamino, amide, hydrazide, carbonyl, ureido, thiourido-, thioamide, ester group (s), 1 to 2 oxygen, sulfur and / or nitrogen atom (e) and optionally 1 to 5 hydroxyl, mercapto, oxo, thioxo, carboxy, alkyl carboxylic acid, ester, thiocyanate and / or amino groups.
  • a succimide a phenyl radical which is optionally substituted by 1 to 5 fluorine atoms, an amino or
  • the radicals -UZ with Z in the meaning of hydrogen are -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 2 -COO-C 6 F 5 , -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 2 -C 6 H 5 , -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 3 , -CH 2 -C 6 H 4 -OC 6 H 3 , -CH 2 -C 6 H 4 -OC 12 H 25 or a -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO-C 15 H 31 group.
  • radicals -UZ with Z meaning an optionally activated functional group are -CH 2 - (CH 2 ) -NCS, -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO- (CH 2 ) 2 -COOH,
  • -COO-N ie Z stands for an -NCS, -COOH, -NH 2 , -NO 2 , -OH or an S ⁇ group
  • radicals R 2 are a -C 6 H 4 -NCS - or a - C $ H 4 -COOH group, but in particular a -CH 3 group or a phenyl ring.
  • R 3 may be mentioned as examples, a) in the case of the complexing agents: -SH protective groups, such as, for example, a -CO-CH 3 ,
  • R 3 can also represent a metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of the atomic numbers mentioned.
  • X 2 , X 3 represent a hydrogen atom and X 1 represents a hydrogen atom or an optionally substituted C r C 12 alkyl radical; in the case of the complexes, depending on the oxidation state of the metal in the complex, at least 2 of the radicals X 1 , X 2 , X 3 or R 3 the meaning of a metal ion equivalent.
  • R 4 represents hydrogen or a carboxyl group. However, R 4 can also stand for a group -UZ with U and Z in the meanings given above, it always being true that at most one of the two radicals R 1 or R 4 denotes a group -UZ. Compounds with R 4 in the meaning of hydrogen are preferred according to the invention.
  • indices m and n stand for the digits 0 or 1. Since isomers can be obtained in the synthesis of the complexing agents according to the invention, the sum of m and n is always 1.
  • the invention also relates to processes for the preparation of the complexing agents and complexes according to the invention, different reaction paths advantageously being followed in the synthesis of the complexing agent depending on the desired target structure.
  • Some typical syntheses are described below by way of example.
  • Further complexing agents can be prepared analogously to the synthetic routes described.
  • ligands are to be prepared which contain an —O — CgH 4 —CH 2 - group in R 1 , then a tyrosine ester, whose II amino group is initially protected in a manner known to the person skilled in the art by reaction with a reagent Z 1 -Cl, in which Z 1 stands for any amino protective group, preferably for benzyloxycarbonyl group (hereinafter also referred to as Z group).
  • Z 1 stands for any amino protective group, preferably for benzyloxycarbonyl group (hereinafter also referred to as Z group).
  • the phenolic hydroxyl group is then alkylated with an alkyl iodide in a manner known per se, the amino protecting group is split off acidically and then tosylated, for example, with toluenesulfonyl chloride.
  • T-butyl bromoacetate alkylated and the amino protecting group split off in a conventional manner The tosylation and aminolysis of the ester function with ethylenediamine is carried out as described under 1, but the reaction is then carried out with chloroacetyl chloride. Chlorine is substituted in a manner known per se by reaction with potassium or sodium thioacetate and the t-butyl ester is saponified with acid. If desired, the resulting carboxylic acid group can be activated with hydroxysuccinimide and then reacted with the desired biomolecule.
  • Ligands according to the invention in which R 1 is an SCN-C 6 H -CH 2 radical can be obtained by first tosylating the amino group of a p-nitrophenylalanine ester in a manner known per se. The nitro group is then hydrogenated and the resulting aromatic amino group is protected, for example by reaction with benzyl chloroformate. As described in the preceding cases, this reaction step is followed by aminolysis of the ester function with ethylenediamine, followed by reaction with S-protected mercaptoacetic acid. This is followed by the elimination of the benzyloxycarbonyl group. The isothiocyanate group is introduced by reaction with thiophosgene.
  • Toluene sulfonyl chloride is tosylated.
  • the ester function is then reacted with ethylenediamine in an aminolysis.
  • the resulting free amino group is identified with a tert-butoxycarbonyl group (hereinafter referred to as the BOC group protected and the nitrogen substituted with a tosyl radical is N-alkylated with an alkyl iodide in a manner known per se.
  • the reaction with 2-acetylmercapto-succinic anhydride follows, again giving a mixture of isomers.
  • Ligands according to the invention with R 1 in the meaning of an aminobutyl radical can be obtained by first tosylating the LOC sine ester protected on a nitrogen atom on the remaining unprotected primary amino group and then reacting it with ethylenediamine in an aminolysis. The reaction is then carried out with 2-acetylmercapto-succinic anhydride (forming an isomer mixture) and the amino protecting group is split off by known methods.
  • the preparation of ligands according to the invention which contain an isomiocyanate phenyl radical as R 2 is carried out by reacting a glycine methyl ester with nitrobenzenesulfonyl chloride, then reducing the nitro group and protecting the resulting amino group.
  • the intermediate compound thus obtained is reacted in an aminolysis with ethylenediamine and then with S-protected mercaptoacetic acid.
  • the (BOC) protective group is subsequently split off in a known manner.
  • the free amino group is then reacted with thiophosgene to form the corresponding isothiocyanate group.
  • the metal complexes of the general formula I according to the invention with at least two radicals X 1 , X 2 , X 3 and / or R 3 in the meaning of a metal ion equivalent are prepared in a manner known per se by the complexing agents according to the invention (which can be obtained as described above) ) with the addition of a reducing agent, preferably tin salts, such as tin chloride or tartrate - and optionally with the addition of the additives customary in galenics, such as physiologically acceptable buffers (e.g. tromethamine), small additions of electrolytes (e.g. sodium chloride), stabilizers (e.g. gluconate , Phosphates or phosphonates) etc.
  • a reducing agent preferably tin salts, such as tin chloride or tartrate -
  • the additives customary in galenics such as physiologically acceptable buffers (e.g. tromethamine), small additions of electrolytes (e.
  • the complexing agent is generally added in at least a 100-fold excess, ie the agents according to the invention contain, in addition to the 3 desired metal complex additionally also the metal-free complexing agent, which is advantageously added in the form of its potassium salt.
  • reaction solutions containing the metal complex described above can in principle be applied directly without further workup.
  • auxiliary ligands are gluconheptonic acid, tartaric acid, citric acid (including the salts thereof) or other substances known to the person skilled in the art.
  • the metal complexes obtained can be mixed with pharmacologically acceptable radiological carriers.
  • This radiological carrier should have favorable properties for the application of the radiopharmaceutical in the form of an injection, inhalation or ingestion.
  • excipients are HSA, aqueous buffer solutions such as tris (hydroxymethyl) aminoethane (or their salts), phosphate, citrate, bicarbonate etc., sterile water, physiological saline, isotonic chloride or dicarbonate ion solutions or normal plasma ions like Ca 2 +, Na +, K + ; and Mg +.
  • the agents according to the invention are dosed in amounts of 10 " 5 to 5 x 10 4 nmol / kg body weight, preferably in amounts between 10" 3 to 5 x 10 2 nmol / kg body weight (based on the metal complex) .
  • the radioactivity required for diagnostic applications is between 1.85 MBq and 1.85 GBq per application.
  • the application is usually carried out by intravenous, intraarterial, peritoneal or intratumoral injection of 0.1 to 2 ml of a solution of the agent according to the invention. Intravenous administration is preferred.
  • the metal complexes according to the invention with metal ions of the elements mentioned and the pharmaceutical compositions prepared from them are notable for good Compatibility and high stability in vivo.
  • the complexing agents according to the invention are notable for easy labeling, ie they complex the desired metals in high yields at room temperature and neutral pH.
  • Np-toluenesulfonyl-2 [(4-hexyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 8.38 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example lc) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g Toluene sulfonyl chloride in 30 ml dichloromethane. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane.
  • the catalyst is filtered off and the solvent is stripped off.
  • Np-toluenesulfonyl-2 [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 6.28 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 2b) are dissolved in 50 ml of dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g of toluenesulfonic acid chloride 30 ml dichloromethane added. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHC03 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is removed. Yield: 76%
  • Np-toluenesulfonyl-2 [(4-dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 10.91 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 3b) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g toluenesulfonic acid chloride added in 30 ml dichloromethane. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour.
  • the thiophosgene was added dropwise in a little dichloromethane and the mixture was stirred at room temperature for 4 h.
  • Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] - 2-aminoacetic acid methyl ester 19.53 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 9d) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g toluenesulfonyl chloride in 30 ml dichloromethane added. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane.
  • Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzylJ-2-aminoacetic acid [N- (2-aminoethyl)] amide.
  • a solution slowly becomes a solution of 1.2 g of ethylenediamine (20 mmol) in 1 ml of anhydrous dichloromethane 806 mg of the tosylglycine ester (1 mmol) prepared according to Example 9e in 1 ml of anhydrous dichloromethane were added dropwise and the mixture was boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is chromatographed (silica gel, MeOH). Yield: 85% Ber. : C 70.55% H 9.06% N 5.04% O 11.51% S 3.84%
  • 50 ⁇ l of this solution are added to 250 ⁇ l of a 0.1 M phosphate buffer (pH 8.5) and then with 50 ⁇ l of a citrate solution (50 mg of trisodium citrate in 1.0 ml of water) and 2.5 ⁇ l of a tin (TI) chloride Solution (5.0 mg of tin (II) chloride in 1 ml of 0.1 N HCl) was added. 50 ⁇ l of a Tc-99m generator eluate are then added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by means of HPLC.
  • a solution of 27 g (100 mmol) of the amino compound prepared according to Example 10a) in 500 ml of dioxane is mixed with 74 g of di-tert-butyl dicarbonate (340 mmol) in one portion.
  • the solution is stirred for 3 hours at room temperature, then poured onto ice water and extracted 3 times with ethyl acetate.
  • the combined organic phases are washed 3 times with water and once with saturated sodium chloride solution, dried (MgSO.j.), concentrated and recrystallized. There remain 27.9 g of white crystals.
  • N-a-toluenesulfonyl-lysine [N- (2- (piperonylmercapto) acetylaminoethyl)] amide 651 mg N- ⁇ -toluenesulfonyl-N- ⁇ -tert-butyloxycarbonyllysine
  • 50 ⁇ l of this solution are added to 250 ⁇ l of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and with 50 ⁇ l of a citrate solution (50 mg of trisodium citrate in 1.0 ml of water) and 2.5 ⁇ l of a tin (III) chloride Solution (5.0 mg of tin (II) chloride in 1.0 ml of 0.1 N HCl) was added. 50 ⁇ l of a Tc-99m generator eluate is then added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by HPLC (> 95%).
  • Trifluoroacetic acid removed in vacuo, the residue taken up in tetrahydrofuran, concentrated and chromatographed.
  • N-Toluenesulfonyl-0-t-butyloxycarbonylmethyltyrosine [N. (2- (benzoylmercapto) - acetylaminoethyl)] amide 2 mmol S-benzoyl-2-mercaptoacetic acid (394 mg) and 4 mmol NEt 3 (560 ⁇ l) and 2 5 ml of dichloromethane are added to mmol (982 mg) of the compound obtained according to Example 8d) and the mixture is cooled to 10 ° C.
  • the precipitate is filtered off and washed with plenty of water. Then over
  • Trißuoressigklad ⁇ 10 g (18.19 mmol) of the title compound from Example 25c) are stirred for 1 mouth in 100 ml of trifluoroacetic acid at room temperature. It is evaporated to dryness in a vacuum. 9.95 g of a glassy foam are obtained, which solidifies on standing. Yield: 97%

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Abstract

The invention relates to novel chelate formers containing sulphonamide groups and their metallic chelates of general formula (I) in which n, m, p, V?1, V2, V3, V4, X1, X2, X3, R1, R2, R3 and R4¿ have different meanings, pharmaceutical agents containing these compounds, their use in X-ray diagnosis and therapy, processes for producing these compounds and agents, and conjugates of these compounds with substances which selectively concentrate themselves in diseased tissue, especially peptides.

Description

Technetium-Sulfonamid-Kompiexe, deren Verwendung, diese enthaltende Pharmazeutische Mittel, sowie Verfahren zur Herstellung der Komplexe und Mittel Technetium sulfonamide complexes, their use, pharmaceutical compositions containing them, and processes for the preparation of the complexes and compositions
Die Erfindung betrifft den in den Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand, daß heißt neue Sulfonamidgruppen enthaltende Chelatbildner, deren Metall-Komplexe, diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Mittel, ihre Verwendung in der Radiodiagnostik und Radiotherapie, Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen und Mittel, sowie Konjugate dieser Verbindungen mit sich in erkranktem Gewebe selektiv anreichernden Substanzen, insbesondere Peptiden.The invention relates to the subject matter characterized in the claims, that is to say new chelating agents containing sulfonamide groups, their metal complexes, pharmaceutical compositions containing these compounds, their use in radiodiagnostics and radiotherapy, methods for producing these compounds and compositions, and conjugates of these compounds with them in diseased tissue selectively enriching substances, especially peptides.
Die Anwendung von Radiopharmaka für diagnostische und therapeutische Zwecke ist seit langem im Bereich der biologischen und medizinischen Forschung bekannt. Insbesondere werden Radiopharmaka dazu benutzt, um bestimmte Strukturen wie beispielsweise das Skelett, Organe oder Gewebe, darzustellen. Die diagnostische Anwendung setzt den Gebrauch solcher radioaktiver Mittel voraus, die sich nach Applikation spezifisch in den Strukturen im Patienten anreichern, die untersucht werden sollen. Diese sich lokal anreichernden radioaktiven Mittel können dann mit geeigneten Detektoren, wie beispielsweise Szintilationskameras oder anderer geeigneter Aufnahmeverfahren, aufgespürt, geplottet oder szintigraphiert werden. Die Verteilung und relative Intensität des detektierten radioaktiven Mittels kennzeichnet die Stelle einer Struktur, in der sich das radioaktive Mittel befindet und kann die Anwesenheit von Anomalien in Struktur und Funktion, pathologische Veränderungen etc. darstellen. In ähnlicher Weise können Radiopharmaka als therapeutische Mittel angewendet werden, um bestimmte krankhafte Gewebe oder Bereiche zu bestrahlen. Solche Behandlung erfordert die Herstellung radioaktiver therapeutischer Mittel, die sich in bestimmten Strukturen, Geweben oder Organen anreichern. Durch Anreicherung dieser Mittel wird die therapeutische Strahlung direkt an das pathologische Gewebe herangetragen.The use of radiopharmaceuticals for diagnostic and therapeutic purposes has long been known in the field of biological and medical research. In particular, radiopharmaceuticals are used to represent certain structures such as the skeleton, organs or tissues. The diagnostic application presupposes the use of such radioactive agents that, after application, accumulate specifically in the structures in the patient that are to be examined. These locally accumulating radioactive agents can then be tracked down, plotted or scintigraphed using suitable detectors, such as scintillation cameras or other suitable recording methods. The distribution and relative intensity of the detected radioactive agent characterizes the location of a structure in which the radioactive agent is located and can represent the presence of abnormalities in structure and function, pathological changes etc. Similarly, radiopharmaceuticals can be used as therapeutic agents to irradiate certain pathological tissues or areas. Such treatment requires the production of radioactive therapeutic agents that accumulate in certain structures, tissues or organs. By enriching these agents, the therapeutic radiation is carried directly to the pathological tissue.
In der Regel werden als Diagnostika bzw. Therapeutika metallische Radionuklide verwendet, wobei das Metall in freier Form, als Ion oder in Form eines Metallkomplexes vorliegen kann. Beispiele für metallische Radionuklide, die Komplexe bilden können, sind Technetium-99m und verschiedene Rheniumisotope. Ersteres wird in der Diagnostik, letzteres in der Therapie verwendet. DieAs a rule, metallic radionuclides are used as diagnostics or therapeutic agents, it being possible for the metal to be present in free form, as an ion or in the form of a metal complex. Technetium-99m and various rhenium isotopes are examples of metallic radionuclides that can form complexes. The former is used in diagnostics, the latter in therapy. The
Radiopharmaka enthalten neben dem Metall (Komplex) im allgemeinen zusätzlich geeignete Träger und Zusatzstoffe, die eine Injektion, Inhalation oder Ingestion durch den Patienten erlauben, wie z.B. physiologische Puffer, Salze etc. Das für nuklearmedizinische Fragestellungen am häufigsten verwendete Radionuklid ist Technetium-99m, das sich aufgrund seiner günstigen physikalischen Eigenschaften (keine Korpuskularstrahlung, 6 h physikalische Halbwertszeit, 140 KeV gamma- Strahlung) und der daraus folgenden geringen Strahlenbelastung besonders gut als Radioisotop für die in vivo-Diagnostik eignet. Technetium-99m läßt sich problemlos aus Nuklidgeneratoren als Pertechnetat gewinnen und ist in dieser Form direkt für die Herstellung von Kits für den klinischen Routinebedarf zu verwenden.In addition to the metal (complex), radiopharmaceuticals generally also contain suitable carriers and additives which permit injection, inhalation or ingestion by the patient, such as physiological buffers, salts, etc. The most frequently used radionuclide for nuclear medicine questions is technetium-99m, which due to its favorable physical properties (no corpuscular radiation, 6 h physical half-life, 140 KeV gamma radiation) and the resulting low radiation exposure is particularly suitable as a radioisotope for in vivo Diagnostics are suitable. Technetium-99m can be easily obtained from nuclide generators as pertechnetate and can be used directly in this form for the production of kits for routine clinical needs.
Die Herstellung von Radiopharmaka erfordert zunächst die Synthese eines geeigneten Liganden. In der Klinik wird dann unmittelbar vor der Verwendung der Komplex aus dem jeweiligen Komplexbildner (nachfolgend auch Ligand oder Chelator genannt) und dem gewünschten Radionuklid hergestellt (Markierung). Dazu wird der Komplexbildner, der stets in Form eines lyophilisierten Kits vorliegt, mit einer das Radionuklid enthaltenen Lösung unter Komplexbildungsbedingungen umgesetzt. Ist beispielsweise die Herstellung eines Technetium-99m Radiopharmakons gewünscht, so wird der hergestellte Ligand unter Zusatz eines geeigneten Reduktionsmittels mit einer Pertechnetat-Lösung versetzt und unter geeigneten Reaktionsbedingungen der entsprechende Technetium-Komplex hergestellt. Diese Komplexe werden dann dem Patienten in geeigneter Weise durch Injektion, Inhalation oder Ingestion verabreicht.The production of radiopharmaceuticals first requires the synthesis of a suitable ligand. The complex is then produced in the clinic immediately before use from the respective complexing agent (hereinafter also referred to as ligand or chelator) and the desired radionuclide (labeling). For this purpose, the complexing agent, which is always in the form of a lyophilized kit, is reacted with a solution containing the radionuclide under complexing conditions. If, for example, the production of a technetium-99m radiopharmaceutical is desired, the ligand produced is mixed with a pertechnetate solution with the addition of a suitable reducing agent and the corresponding technetium complex is produced under suitable reaction conditions. These complexes are then suitably administered to the patient by injection, inhalation or ingestion.
Die das Radionuklid enthaltene Lösung kann, wie im Falle von Technetium-99m, aus einem kommerziell erhältlichen Mo-99/Tc-99m Nuklidgenerator gewonnen werden, oder - wie im Falle von Rhenium- 186 - direkt von einem Hersteller bezogen werden. Die Komplexbildungsreaktion wird unter geeigneten Temperaturen (z.B. 20°-100°C) innerhalb weniger Minuten bis mehreren Stunden durchgeführt. Um eine vollständige Komplexbildung zu gewährleisten, ist ein großer Überschuß (mehr als 100-facher Überschuß) des hergestellten Liganden und eine für eine vollständige Reduktion des eingesetzten Radionuklids ausreichende Menge an Reduktionsmittel (z.B. SnCl2, S2O4 etc.), erforderlich.The solution containing the radionuclide can, as in the case of technetium-99m, be obtained from a commercially available Mo-99 / Tc-99m nuclide generator or, as in the case of rhenium-186, can be obtained directly from a manufacturer. The complex formation reaction is carried out under suitable temperatures (for example 20 ° -100 ° C.) within a few minutes to several hours. To ensure complete complex formation, a large excess (more than 100-fold excess) of the ligand produced and an amount of reducing agent (for example SnCl 2 , S 2 O 4 etc.) sufficient for a complete reduction of the radionuclide used are required.
Da Technetium in einer Reihe von Oxidationsstufen (+7 bis -1) vorliegen kann, die die pharmakologischen Eigenschaften durch Veränderungen der Ladung eines Komplexes stark verändern können, ist es notwendig, Chelatoren bereitzustellen, die Technetium stabil in einer definierten Oxidationsstufe binden können, um zu verhindern, daß durch in vivo ablaufende Redoxprozesse bzw. Technetiumfreisetzungen aus dem entsprechenden Radiodiagnostika eine unerwünschte Biodistribution stattfindet, die eine sichere Diagnostik entsprechender Erkrankungen erschwert.Since technetium can exist in a number of oxidation states (+7 to -1) that can change the pharmacological properties by changing the charge of a complex, it is necessary to provide chelators that can stably bind technetium in a defined oxidation state in order to prevent an in vivo redox processes or technetium releases from the corresponding radio diagnostics Biodistribution takes place, which complicates the safe diagnosis of corresponding diseases.
Die Effizienz von Radionukliden in der in vivo Diagnostik, als auch der Therapie hängt von der Spezifität und der Selektivität der markierten Chelate zur Targetzelle ab. Eine Verbesserung dieser Eigenschaften ist durch Kopplung der Chelate an Biomoleküle nach dem "Drug-Targeting "-Prinzip zu erreichen. Als Biomoleküle bieten sich Antikörper, deren Fragmente, Hormone, Wachstumsfaktoren und Substrate von Rezeptoren und Enzymen an. So wird in der britischen Patentanmeldung GB 2,109,407 die Verwendung radioaktiv markierter monoklonaler Antikörper gegen tumorassoziierte Antigene, für die in vivo Tumordiagnostik beschrieben. Ebenso wurden direkte Proteinmarkierungen über Donor-Gruppen (Amino-, Amid-, Thiol-, etc.) des Proteins (Rhodes, B.A. et al., J. Nukl. Med. 1986, 27, 685-693) oder durch Einführen von Komplexbildnern (US 4,479,930 und Fritzberg, A.R. et al., J. Nucl. Med. 1986, 27, 957) mit Technetium-99m beschrieben. Diese experimentellenThe efficiency of radionuclides in in vivo diagnostics as well as therapy depends on the specificity and the selectivity of the labeled chelates to the target cell. These properties can be improved by coupling the chelates to biomolecules according to the "drug targeting" principle. Antibodies, their fragments, hormones, growth factors and substrates of receptors and enzymes are suitable biomolecules. The British patent application GB 2,109,407 describes the use of radioactively labeled monoclonal antibodies against tumor-associated antigens for tumor diagnosis in vivo. Likewise, direct protein labels via donor groups (amino, amide, thiol, etc.) of the protein (Rhodes, BA et al., J. Nukl. Med. 1986, 27, 685-693) or by introducing complexing agents (US 4,479,930 and Fritzberg, AR et al., J. Nucl. Med. 1986, 27, 957) with Technetium-99m. This experimental
Methoden stehen jedoch für die klinische Anwendung nicht zur Verfügung, da zum einen die Selektivität zu niedrig und zum anderen die "Backgroundaktivität" im Organismus zu hoch ist, um ein in vivo Imaging zu ermöglichen.However, methods are not available for clinical use, because on the one hand the selectivity is too low and on the other hand the "background activity" in the organism is too high to enable in vivo imaging.
Als geeignete Komplexbildner für Technetium und Rheniumisotope gelten z. B. cyklische Amine, wie sie von Volkert et al. (Appl.Radiol.Isot. 1982, 33; 891) und Troutner et al. (J. Nucl. Med. 1980, 21; 443) beschrieben werden, die aber den Nachteil haben, daß sie erst ab einem pH-Wert > 9 in der Lage sind, Technetium-99m in guten Ausbeuten zu binden.Suitable complexing agents for technetium and rhenium isotopes are, for. B. cyclic amines, as described by Volkert et al. (Appl.Radiol.Isot. 1982, 33; 891) and Troutner et al. (J. Nucl. Med. 1980, 21; 443), which have the disadvantage, however, that they are only able to bind technetium-99m in good yields from a pH> 9.
N2θ2-Systeme befinden sich in der klinischen Anwendung, sind jedoch mit dem Nachteil behaftet, daß die entsprechenden Metallkomplexe in vivo nicht sehr stabil sind. Gemäß Untersuchungen von Pillai und Troutner verlieren die Komplexe im Plasma bereits nach 1 Stunde bis 30 % des komplexierten Metalls (Pillai, M.R.A., Troutner, D.E. et al.; Inorg. Chem. 1990, 29 ; 1850).N2θ 2 systems are in clinical use, but have the disadvantage that the corresponding metal complexes are not very stable in vivo. According to studies by Pillai and Troutner, the complexes in the plasma lose up to 30% of the complexed metal after 1 hour (Pillai, MRA, Troutner, DE et al .; Inorg. Chem. 1990, 29; 1850).
Nichtcyklische N4-Systeme wie z. B. das HM-PAO haben als großen Nachteil ihre geringe Komplexstabilität. Tc-99m-HM-PAO muß wegen seiner Instabilität (Ballinger, J.R. et al. , Appl. Radiat. Isot. 1991, 42; 315), Billinghurst, M.W. et al., Appl. Radiat. Isot. 1991 , 42; 607) innerhalb von 30 Minuten nach seiner Markierung appliziert werden, damit der Anteil an Zerfallsprodukten, die eine andere Pharmakokinetik und Ausscheidung besitzen, klein gehalten werden kann. Solche radiochemischen Verunreinigungen erschweren die Erkennung von zu diagnostizierenden Erkrankungen. Eine Kopplung dieser Chelate bzw. Chelatbildner an andere, sich selektiv in Krankheitsherden anreichernde Substanzen ist nicht mit einfachen Mitteln zu lösen, so daß sich diese im allgemeinen unspezifisch im Organismus verteilen.Non-cyclic N 4 systems such. B. the HM-PAO have a major disadvantage of their low complex stability. Tc-99m-HM-PAO must because of its instability (Ballinger, JR et al., Appl. Radiat. Isot. 1991, 42; 315), Billinghurst, MW et al., Appl. Radiat. Isot. 1991, 42; 607) can be applied within 30 minutes after its labeling, so that the proportion of decay products that have a different pharmacokinetics and excretion can be kept low. Such radiochemical contaminants complicate the detection of diagnosing diseases. A coupling of these chelates or chelating agents to other substances that selectively accumulate in foci of disease cannot be solved with simple means, so that they are generally distributed nonspecifically in the organism.
N S2- Chelatoren (Bormans, G. et al.; Nucl. Med. Biol. 1990, 17; 499), wie z. B. Ethylendicystein (EC; Verbruggen, A. M. et al.; J. Nucl. Med.1992, 33; 551) erfüllen zwar die Forderung nach hinreichender Stabilität des entsprechenden Technetium-99m- Komplexes, bilden aber erst ab einem pH-Wert des Komplexierungsmediums > 9 Radiodiagnostika mit einer Reinheit von größer 69%.NS 2 chelators (Bormans, G. et al .; Nucl. Med. Biol. 1990, 17; 499), such as e.g. B. ethylenedicysteine (EC; Verbruggen, AM et al .; J. Nucl. Med. 1992, 33; 551) meet the requirement for sufficient stability of the corresponding technetium-99m complex, but only form from a pH value of the complexing medium > 9 radio diagnostics with a purity of more than 69%.
Die bislang bekannten NßS-Systeme (Fritzburg, A. ; EP 0 173 424 und EP 0 250 013) bilden zwar stabile Technetium-99m-Komplexe, müssen aber zur Bildung eines einheitlichen Radiopharmakons auf Temperaturen von ca. 100°C erhitzt werden.The previously known NßS systems (Fritzburg, A.; EP 0 173 424 and EP 0 250 013) form stable technetium-99m complexes, but must be heated to temperatures of approximately 100 ° C. in order to form a uniform radiopharmaceutical.
In den letzten Jahren ist das Verlangen nach sich spezifisch in erkrankten Geweben anreichernden Radiodiagnostika gestiegen. Dies kann erreicht werden, wenn Komplexbildner leicht an sich selektiv anreichernde Substanzen gekoppelt werden können und dabei ihre günstigen Komplexierungseigenschaften nicht verlieren. Da es aber sehr häufig dazu kommt, daß nach Kopplung eines Komplexbildners unter Nutzung einer seiner funktioneilen Gruppen an ein solches Molekül eine Abschwächung der Komplexstabilität beobachtet wird, erscheinen die bisherigen Ansätze zur Kopplung von Chelatbildnern an sich selektiv anreichernde Substanzen wenig zufriedenstellend, da ein diagnostisch nicht tolerierbarer Anteil des Isotops aus dem Konjugat in vivo freigesetzt wird (Brechbiel, M. W. et al. ; Inorg. Chem. 1986, 25. 2772). Es ist deswegen notwendig bifunktionelle Komplexbildner darzustellen, die sowohl funktioneile Gruppen zur Bindung des gewünschten Metallions als auch eine (andere, mehrere) funktioneile Gruppe zur Bindung des sich selektiv anreichernden Moleküls tragen. Solche bifunktionellen Liganden ermöglichen eine spezifische, chemische definierte Bindung von Technetium- oder Rhenium-Isotopen an verschiedenste biologische Materialien, auch dann, wenn ein sogenanntes Pre-labeling durchgeführt wird.In recent years, the need for radio-diagnostic agents specifically enriching in diseased tissues has increased. This can be achieved if complexing agents can easily be coupled to selectively enriching substances and do not lose their favorable complexing properties. However, since it is very common that after coupling a complexing agent using one of its functional groups to such a molecule a weakening of the complex stability is observed, the previous approaches for coupling chelating agents to substances that selectively enrich themselves are not very satisfactory, since a diagnostically not tolerable proportion of the isotope from the conjugate is released in vivo (Brechbiel, MW et al.; Inorg. Chem. 1986, 25, 2772). It is therefore necessary to prepare bifunctional complexing agents which carry both functional groups for binding the desired metal ion and one (other, several) functional group for binding the selectively enriching molecule. Such bifunctional ligands enable a specific, chemically defined binding of technetium or rhenium isotopes to a wide variety of biological materials, even if so-called pre-labeling is carried out.
In der EP 0 247 866 EP 0 188 256 und EP 0 200 492 werden einige Chelatbildner beschrieben, die an monoklonale Antikörper bzw. Fettsäuren gekoppelt sind. AlsEP 0 247 866 EP 0 188 256 and EP 0 200 492 describe some chelating agents which are coupled to monoclonal antibodies or fatty acids. As
Chelatbildner werden jedoch die bereits erwähnten N2S2-Systeme verwendet, die auf Grund ihrer geringen Stabilität wenig geeignet sind. Da sowohl die sich selektiv anreichernden Substanzen in ihren Eigenschaften, sowie auch die Mechanismen, nach denen sie angereichert werden, sehr unterschiedlich sind, ist es weiterhin notwendig, den kopplungsfähigen Chelatbildner zu variieren und den physiologischenHowever, the previously mentioned N2S2 systems are used as chelating agents, which are not very suitable due to their low stability. Since both the selectively enriching substances in their properties, as well as the mechanisms, after to which they are enriched are very different, it is still necessary to vary the couplable chelating agent and the physiological
Anforderungen des Kopplungspartners hinsichtlich seiner Lipophilie,Requirements of the coupling partner regarding his lipophilicity,
Membranpermeabilität etc. anpassen zu können.To be able to adapt membrane permeability etc.
Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, Komplexe bzw. Komplexbildner zu finden, die die Nachteile des Standes der Technik überwinden, d.h. dieThe invention is therefore based on the object of finding complexes or complexing agents which overcome the disadvantages of the prior art, i.e. the
bei einem physiologischen pH-Wert aus dem entsprechenden Komplexbildner und dem jeweiligen Metalloxid/salz herstellbar sind, bei niedrigen Temperaturen, bevorzugt bei Raumtemperatur, aus dem entsprechenden Komplexbildner und dem jeweiligen Metalloxid/salz herstellbar sind, eine hohe Komplexstabilität auch unter in-vivo Bedingungen zeigen, - eine hohe Selektivität bzw. Gewebe-/Organspezifität zeigen.can be prepared at a physiological pH from the corresponding complexing agent and the respective metal oxide / salt, can be prepared at low temperatures, preferably at room temperature, from the corresponding complexing agent and the respective metal oxide / salt, show high complex stability even under in vivo conditions , - Show a high selectivity or tissue / organ specificity.
Darüber hinaus müssen die Komplexe die Anforderungen erfüllen, die allgemein an Phaπnazeutika zu stellen sind, wie z.B. eine gute Verträglichkeit (d.h. keine Nebenwirkungen), eine gute Löslichkeit und eine vollständige Ausscheidung.In addition, the complexes must meet the requirements that are generally placed on pharmaceuticals, such as good tolerance (i.e. no side effects), good solubility and complete elimination.
Die Aufgabe wird durch die vorliegende Erfindung gelöst.The object is achieved by the present invention.
Es wurde gefunden, daß Verbindungen der allgemeinen Formel IIt has been found that compounds of the general formula I
Figure imgf000007_0001
Figure imgf000007_0001
R (I) R (I)
worinwherein
V1, V2, V3, V4unabhängig voneinander für eine Carbonyl-, > CH(COOH) - oder -CH2 -Gruppe stehen, χl für ein Wasserstoffatom, einen gegebenenfalls mit einerV 1 , V 2 , V 3 , V 4 independently of one another represent a carbonyl,> CH (COOH) or -CH2 group, χl for a hydrogen atom, one optionally with a
Carboxyl-, einer Amino- oder eine Thiocyanatgruppe substi ierten C1-C^-Alkylrest oder ein Metallionenäquivalent eines radioaktiven Metallions eines Elementes der Ordnungszahl 43, 45, 46, 75, 82 oder 83 steht,Carboxyl, an amino or a thiocyanate group substituted C 1 -C ^ alkyl radical or a metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of atomic number 43, 45, 46, 75, 82 or 83,
X2, X3 unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder einX 2 , X 3 independently of one another for a hydrogen atom or a
Metallionenäquivalent eines radioaktiven Metallions eines Elementes der genannten Ordnungszahlen stehen, n, m, p für die Ziffern 0 oder 1 stehen, wobei gilt m + n = 1 R1 für ein Wasserstoffatom eine Carboxylgruppe oder eine GruppeMetal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of the atomic numbers mentioned, n, m, p stand for the digits 0 or 1, where m + n = 1 R 1 for a hydrogen atom, a carboxyl group or a group
-U-Z steht, worin U für eine direkte Bindung, einen geradkettigen oder verzweigten, gesättigten oder ungesättigten Cι-C2o-Alkylenrest steht, der gewünschtenfalls einen Maleimid-, einen Succinimid- , einen gegebenenfalls durch 1 bis 5 Fluoratome, eine Amino- oder Nitrogruppe substituierten Phenylrest, eine oder zwei Imino-, Phenylen-, Phenylenoxy-, Phenylenamino-, Amid-, Hydrazid-, Carbonyl-, Ureido-, Thioureido-, Thioamid-, Estergruppe(n), 1 bis 2 Sauerstoff-, Schwefel- und/oder Stickstoff-Atom(e) sowie gegebenenfalls 1 bis 5 Hydroxy-,-UZ stands in which U stands for a direct bond, a straight-chain or branched, saturated or unsaturated C 1 -C 2 -alkylene radical which, if desired, a maleimide, a succinimide, an optionally substituted by 1 to 5 fluorine atoms, an amino or nitro group Phenyl radical, one or two imino, phenylene, phenyleneoxy, phenylenamino, amide, hydrazide, carbonyl, ureido, thiourido-, thioamide, ester group (s), 1 to 2 oxygen, sulfur and / or nitrogen atom (s) and optionally 1 to 5 hydroxy,
Mercapto-, Oxo-, Thioxo-, Carboxy-, Alkylcarbonsäure-, Ester-, Thiocyanat- und/oder Aminogruppen enthält und Z für ein Wasserstoff atom, einen Rest einer Aminosäure, eines Peptids, eines Polynucleotids oder Steroids oder eine funktionelle Gruppe über die gegebenenfalls der Rest einerMercapto, oxo, thioxo, carboxy, alkyl carboxylic acid, ester, thiocyanate and / or amino groups and Z for a hydrogen atom, a residue of an amino acid, a peptide, a polynucleotide or steroid or a functional group via the optionally the rest of one
Aminosäure, eines Peptids, eines Polynucleotids oder eines Steroids gebunden ist, steht, R2 für einen geradkettigen oder verzweigten Cι-C υ-Alkylrest, der gegebenenfalls eine -COOH -Gruppe enthält, einen C7-C12 - Aralkylrest oder einen Aromaten, der gegebenenfalls mit einemAmino acid, a peptide, a polynucleotide or a steroid is bound, R 2 υ a straight-chain or branched Cι-C alkyl radical, which optionally contains a -COOH group, a C7-C12 - aralkyl radical or an aromatic, optionally substituted with one
Chlor- oder Bromatom, einer Thiocyanat-, einer Methyl-, Ethyl-, Carboxyl- und/oder Methoxygruppe substituiert ist, steht, R4 für ein Wasserstoffatom oder eine Carboxylgruppe steht oder für den Fall, daß R1 ein Wasserstoffatom oder eineChlorine or bromine atom, a thiocyanate, a methyl, ethyl, carboxyl and / or methoxy group is substituted, R 4 represents a hydrogen atom or a carboxyl group or in the event that R 1 represents a hydrogen atom or a
Carboxylgruppe bedeutet, zusätzlich auch für eine Gruppe -U-Z steht, worin U und Z die angegebenen Bedeutungen haben, R3 für ein Wasserstoffatom, ein Metallionenäquivalent eines Elementes der genannten Ordnungszahlen, einen Trifluoracetat-, Acetat-, Benzoat-, - -Acyl-, einen Benzoyl-, einen Hydroxyacetyl-, einen Acetamidomethyl-, einen gewünschtenfalls mit einem Chlor- oder Bromatom, einer Methyl-, Ethyl-, Carboxyl- und/oder Methoxygruppe substituierten Benzoesäurerest, einen p-Methoxybenzyl-, einenCarboxyl group means additionally also represents a group -UZ, in which U and Z have the meanings given, R 3 represents a hydrogen atom, a metal ion equivalent of an element of the atomic numbers mentioned, a trifluoroacetate, acetate, benzoate, - acyl, a benzoyl, a hydroxyacetyl, an acetamidomethyl, if desired with a chlorine or bromine atom, a methyl, ethyl, carboxyl and / or methoxy group substituted benzoic acid residue, a p-methoxybenzyl, one
Ethoxyethylrest, eine SH-Schutzgruppe, einenEthoxyethyl, an SH protecting group, a
Rest oder,
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für den Fall daß X2, X3 für ein Wasserstoff und X1 für ein Wasserstoff oder einen gegebenfalls substituierten
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Alkylrest steht, für einen Rest der Formel URest or,
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in the event that X 2 , X 3 for a hydrogen and X 1 for a hydrogen or an optionally substituted
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Alkyl radical stands for a radical of the formula U
RR
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steht, worin Vi, V2, V3, V4, χl, X2, X3, n, m, p, R1, R2 und, where Vi, V 2 , V 3 , V 4 , χl, X 2 , X 3 , n, m, p, R 1 , R 2 and
R4 die angegebenen Bedeutungen haben, wobei mindestens ein und höchstens zwei Reste V1, V2, V3, V4 für eine Carbonylgruppe stehen, hervorragend als bzw. zur Herstellung von Radiodiagnostika und -therapeutika geeignet sind.R 4 have the meanings given, where at least one and at most two radicals V 1 , V 2 , V 3 , V 4 stand for a carbonyl group, are outstandingly suitable as or for the production of radiodiagnostics and therapeutics.
Die erfindungsgemäßen Komplexbildner (Chelatoren), d.h. Verbindungen der allgemeinen Formel I mit X1, X2, X3 und R3 in den angegebenen Bedeutungen mit Außnahme eines Metallionenequivalents, erfüllen das genannte Anforderungsprofil. Sie zeichnen sich insbesonderere dadurch aus, daß sie das jeweils gewünschte Metall 3 schnell bei physiologischem pH-Wert und niedrigen Temperaturen komplexieren. Sie sind daher für den routinemäßigen Einsatz in der Klinik besonders geeignet.The complexing agents (chelators) according to the invention, ie compounds of the general formula I with X 1 , X 2 , X 3 and R 3 in the meanings indicated, with the exception of one metal ion equivalent, meet the requirement profile mentioned. They are characterized in particular by the fact that they have the desired metal 3 complex quickly at physiological pH and low temperatures. They are therefore particularly suitable for routine use in the clinic.
Während des Komplexierungsvorganges werden aus den dimeren Chelatoren mit R3 in der Bedeutung eines Restes der allgemeinen Formel π, monomere Metallkomplexe der Formel I mit R3 in der Bedeutung eines Metallionenäquivalents.During the complexation process, the dimeric chelators with R 3 as a radical of the general formula π become monomeric metal complexes of the formula I with R 3 as a metal ion equivalent.
Als Metallion finden radioaktive Metallionen der Elemente der Ordnungszahlen 43, 45, 46, 75, 82 oder 83, wie z.B. die Radioisotope Technetium-99m, Rhodium-103, Palladium- 109, Rhenium-186, Blei-212 und Wismuth-212 Verwendung, wobei die Wahl des Metallisotops von dem gewünschten Anwendungsgebiet abhängt. Erfindungsgemäß bevorzugt sind Metallkomplexe der Elemente Technetium und Rhenium.Radioactive metal ions of elements of atomic numbers 43, 45, 46, 75, 82 or 83, such as e.g. the radioisotopes technetium-99m, rhodium-103, palladium-109, rhenium-186, lead-212 and bismuth-212 use, the choice of the metal isotope depending on the desired field of application. According to the invention, metal complexes of the elements technetium and rhenium are preferred.
Enthalten die erfindungsgemäßen Komplexe der allgemeinen Formel I γ-Strahlung emittierende Isotope wie z.B. Tc-99m, so können diese bei der Single-Photon- Emissions-Tomographie (SPECT) eingesetzt werden.Do the complexes of the general formula I according to the invention contain γ-radiation-emitting isotopes, e.g. Tc-99m, these can be used in single photon emission tomography (SPECT).
Enthalten die erfindungsgemäßen Komplexe der allgemeinen Formel I α-Teilchen emittierende Isotope wie z.B. Bi-211, Bi-212, Bi-213, Bi-214 oder ß-emittierendeDo the complexes of the general formula I according to the invention contain α-particle-emitting isotopes such as e.g. Bi-211, Bi-212, Bi-213, Bi-214 or ß-emitting
Isotope wie z.B. Re-186 oder Re-188, so können diese in der Radiotherapie eingesetzt werden.Isotopes such as Re-186 or Re-188, these can be used in radiotherapy.
Erfindungsgemäß bevorzugt sind Verbindungen der Formel I bei denen V1 und V4 jeweils für eine Carbonylgruppe, V2 und V3 jeweils für eine -CH - Gruppe und p für die Ziffer 0 stehen.According to the invention, preference is given to compounds of the formula I in which V 1 and V 4 each represent a carbonyl group, V 2 and V 3 each represent a -CH group and p represents the number 0.
Als Rest R1 kommen infrage Wasserstoff oder eine Carbonsäuregruppe und insbesondere eine Gruppe -U-Z worin Z ein Wasserstoffatom, bevorzugt aber für den Rest eines Biomoleküls mit gewebe- oder strukturspezifischen Eigenschaften oder eine gegebenenfalls in aktivierter Form voliegenden funktioneile Gruppe über die gewünschtenfalls ein derartiges Biomolekül gebunden werden kann, steht. Als Beispiele für Biomoleküle seien genannt Reste einer Aminosäure, eines Peptids, oder eines Steriods, wie z.B. die bekannten Steroid-Hormone (Androgene, Gestagene, Estrogene, Cholesterin, Cholsäurederivate, Pregnane u.s.w.), sowie Polynucleotide wie RNA oder DNA.Suitable radicals R 1 are hydrogen or a carboxylic acid group and in particular a group -UZ in which Z is a hydrogen atom, but preferably for the rest of a biomolecule with tissue or structure-specific properties or a functional group which may be present in activated form via the desired such a biomolecule can be stands. Examples of biomolecules are residues of an amino acid, a peptide or a steroid, such as the known steroid hormones (androgens, gestagens, estrogens, cholesterol, cholic acid derivatives, Pregnane, etc.), and polynucleotides such as RNA or DNA.
Als Beispiele für funktionelle Gruppen über die gewünschtenfalls die Bindung eines Biomoleküls erfolgen kann, seien genannt eine-COOH, eine -SCN, eine -OH, eine -Cl oder eine -NH2 -Gruppe. Derartige Gruppen können auch in ihrer aktivierten Form z.B. als Succinimidester oder Säurechlorid vorliegen.Examples of functional groups that can be used to bind a biomolecule, if desired, are a -COOH, a -SCN, a -OH, a -Cl or an -NH 2 group. Such groups can also be present in their activated form, for example as succinimide esters or acid chloride.
U kann für eine direkte Bindung bevorzugt aber einen geradkettigen oder verzweigten, gesättigten oder ungesättigten C1-C2o-Alkylenrest steht, der gewünschtenfalls einen SuccÜTimid-, einen gegebenenfalls durch 1 bis 5 Fluoratome eine Amino- oder eine Nitrogruppe substituierten Phenylrest, eine oder zwei Imino-, Phenylen-, Phenylenoxy-, Phenylenamino-, Amid-, Hydrazid-, Carbonyl-, Ureido-, Thioureido-, Thioamid-, Estergruppe(n), 1 bis 2 Sauerstoff-, Schwefel- und/oder Stickstoff-Atom(e) sowie gegebenenfalls 1 bis 5 Hydroxy-, Mercapto-, Oxo-, Thioxo-, Carboxy-, Alkylcarbonsäure-, Ester-, Thiocyanat- und/oder Aminogruppen enthält.U can preferably represent a direct bond, however, a straight-chain or branched, saturated or unsaturated C 1 -C 2 o -alkylene radical which, if desired, a succimide, a phenyl radical which is optionally substituted by 1 to 5 fluorine atoms, an amino or a nitro group, one or two imino, phenylene, phenyleneoxy, phenylenamino, amide, hydrazide, carbonyl, ureido, thiourido-, thioamide, ester group (s), 1 to 2 oxygen, sulfur and / or nitrogen atom (e) and optionally 1 to 5 hydroxyl, mercapto, oxo, thioxo, carboxy, alkyl carboxylic acid, ester, thiocyanate and / or amino groups.
Als Beispiele für U seien genannt für den Fall, daß Z für ein Biomolekül steht, eine -CH2-C6H4-O-CH2-C6H4-, -CH2-C6H4-O-CO-Cι5H30-, -CH2-C6H4-O-CO-(CH2)2-COO-, -C^-C^-O-C^-COO-Cg^-NH-, -CH2-C6H4-O-CH2-COO-, -(CH2)5-COO-, oder eine -CH2-C6H4-O-(CH2)2-O-(CH2)2-O- -Gruppe .As examples of U, in the case that Z stands for a biomolecule, a -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH2-C 6 H 4 -, -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO- Cι 5 H 30 -, -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO- (CH 2 ) 2 -COO-, -C ^ -C ^ -OC ^ -COO-Cg ^ -NH-, -CH 2 - C 6 H 4 -O-CH 2 -COO-, - (CH 2 ) 5 -COO-, or a -CH 2 -C 6 H 4 -O- (CH 2 ) 2 -O- (CH 2 ) 2 - O group.
Als Reste -U-Z mit Z in der Bedeutung von Wasserstoff seien genannt eine -CH2-C6H4-O-CH2-COO-C6F5, -CH2-C6H4-O-CH2-C6H5, -CH2-C6H4-O-CH3, -CH2-C6H4-O-C6H3, -CH2-C6H4-O-C12H25 oder eine -CH2-C6H4-O-CO-C15H31 Gruppe.The radicals -UZ with Z in the meaning of hydrogen are -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 2 -COO-C 6 F 5 , -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 2 -C 6 H 5 , -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 3 , -CH 2 -C 6 H 4 -OC 6 H 3 , -CH 2 -C 6 H 4 -OC 12 H 25 or a -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO-C 15 H 31 group.
Als Reste -U-Z mit Z in der Bedeutung einer gegebenenfalls aktivierten funktionellen Gruppe seien genannt eine -CH2-(CH2) -NCS, -CH2-C6H4-O-CO-(CH2)2-COOH,The radicals -UZ with Z meaning an optionally activated functional group are -CH 2 - (CH 2 ) -NCS, -CH 2 -C 6 H 4 -O-CO- (CH 2 ) 2 -COOH,
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-CH2-C6H4-O-(CH2)2-O-(CH2)2-OH oder eine -CH2-C6H4-O-CH2-COOH -Gruppe, o-CH 2 -C 6 H 4 -O- (CH 2 ) 2 -O- (CH 2 ) 2 -OH or a -CH 2 -C 6 H 4 -O-CH 2 -COOH group, o
-COO-N d.h. Z steht für eine -NCS, -COOH, -NH2, -NO2, -OH oder eine S^ Gruppe-COO-N ie Z stands for an -NCS, -COOH, -NH 2 , -NO 2 , -OH or an S ^ group
'/ o'/ o
Als Beispiele für Reste R2 seien genannt ein -C6H4-NCS - oder eine - C$H4-COOH -Gruppe, insbesondere aber eine -CH3 Gruppe oder ein Phenylring. Als Reste R3 seien beispielhaft genannt, a) im Falle der Komplexbildner: -SH Schutzgruppen, wie z.B. eine -CO-CH3,Examples of radicals R 2 are a -C 6 H 4 -NCS - or a - C $ H 4 -COOH group, but in particular a -CH 3 group or a phenyl ring. R 3 may be mentioned as examples, a) in the case of the complexing agents: -SH protective groups, such as, for example, a -CO-CH 3 ,
. .CH.. .CH.
OO
| > , -CO-C6H5, -CO-CF3 oder eine -C(C6H5)3 Gruppe \^-^-o oder ein Rest der allgemeinen Formel π, worin V1, V2, V3, V4, X1, X2, X3, n, m, p, R1. R2 und R4 die angegebenen Bedeutungen haben,| >, -CO-C 6 H 5 , -CO-CF 3 or a -C (C 6 H 5 ) 3 group \ ^ - ^ - o or a radical of the general formula π, in which V 1 , V 2 , V 3 , V 4 , X 1 , X 2 , X 3 , n, m, p, R 1 . R 2 and R 4 have the meanings given,
b) im Falle der erfindungsgemäßen Komplexe: Einer der zuvor genannten Reste, mit der Außnahme eines Restes der allgemeinen Formel II: Zusätzlich kann R3 aber auch für ein Metallionenäquivalent eines radioaktiven Metallions eines Elementes der genannten Ordnungszahlen stehen.b) in the case of the complexes according to the invention: one of the radicals mentioned above, with the exception of a radical of the general formula II: In addition, R 3 can also represent a metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of the atomic numbers mentioned.
Im Falle der Komplexbildner stehen X2, X3 für ein Wasserstoffatom und X1 für ein Wasserstoffatom oder einen gegebenenfalls substituierten CrC12 Alkylrest, im Falle der Komplexe haben je nach Oxidationsstufe des Metalls im Komplex mindestens 2 der Reste X1, X2, X3 oder R3 die Bedeutung eines Metallioneäquivalents.In the case of the complexing agents, X 2 , X 3 represent a hydrogen atom and X 1 represents a hydrogen atom or an optionally substituted C r C 12 alkyl radical; in the case of the complexes, depending on the oxidation state of the metal in the complex, at least 2 of the radicals X 1 , X 2 , X 3 or R 3 the meaning of a metal ion equivalent.
R4 steht für Wasserstoff oder eine Carboxylgruppe. R4 kann aber auch für eine Gruppe -U-Z mit U und Z in den zuvor angegebenen Bedeutungen stehen, wobei stets gilt, daß maximal einer der beiden Reste R1 oder R4 eine Gruppe -U-Z bedeutet. Erfindungsgemäß bevorzugt sind Verbindungen mit R4 in der Bedeutung von Wasserstoff.R 4 represents hydrogen or a carboxyl group. However, R 4 can also stand for a group -UZ with U and Z in the meanings given above, it always being true that at most one of the two radicals R 1 or R 4 denotes a group -UZ. Compounds with R 4 in the meaning of hydrogen are preferred according to the invention.
Die Indizes m und n stehen für die Ziffern 0 oder 1. Da bei der Synthese der erfindungsgemäßen Komplexbildner Isomere Verbindungen anfallen können, gilt daß die Summe aus m und n stets 1 ist.The indices m and n stand for the digits 0 or 1. Since isomers can be obtained in the synthesis of the complexing agents according to the invention, the sum of m and n is always 1.
Die Erfindung betrifft auch Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Komplexbildner und Komplexe, wobei bei der Synthese des Komplexbildners in Abhängigkeit der gewünschten Zielstruktur zweckmäßigerweise unterschiedliche Reaktionswege beschritten werden. Einige typische Synthesen sind nachfolgend beispielhaft beschrieben. Weitere Komplexbildner lassen sich analog zu den beschriebenen Synthesewegen herstellen.The invention also relates to processes for the preparation of the complexing agents and complexes according to the invention, different reaction paths advantageously being followed in the synthesis of the complexing agent depending on the desired target structure. Some typical syntheses are described below by way of example. Further complexing agents can be prepared analogously to the synthetic routes described.
1. Sollen Liganden hergestellt werden, die in R1 eine -O-CgH4-CH2- Gruppe enthalten, so wird vorteilhafterweise von einem Tyrosinesters ausgegangen, dessen II Aminogruppe zunächst in dem Fachmann bekannter Weise durch Umsetzung mit einem Reagenz Zl-Cl, worin Z1 für eine beliebige Aminoschutzgruppe, bevorzugt für Benzyloxycarbonyl-Gruppe (nachfolgend auch Z-Gruppe genannt) steht, geschützt wird. Anschließend wird die phenolischen Hydroxylgruppe mit einem Alkyliodid in an sich bekannter Weise alkyliert, die Aminoschutzgruppe wird sauer abgespalten und anschließend z.B. mit Toluolsulfonsäurechlorid tosyliert. Das so erhaltene Zwischenprodukt wird in einer Aminolyse der Esterfunktion mit Ethylendiamin umgesetzt. Abschließend wird mit 2-Acetylmercaptobernsteinsäure-anhydrid zu den erfindungsgemäßen Komplexbildnern umgesetzt, wobei im letzten Reaktionsschritt stets beide Isomeren erhalten werden.1. If ligands are to be prepared which contain an —O — CgH 4 —CH 2 - group in R 1 , then a tyrosine ester, whose II amino group is initially protected in a manner known to the person skilled in the art by reaction with a reagent Z 1 -Cl, in which Z 1 stands for any amino protective group, preferably for benzyloxycarbonyl group (hereinafter also referred to as Z group). The phenolic hydroxyl group is then alkylated with an alkyl iodide in a manner known per se, the amino protecting group is split off acidically and then tosylated, for example, with toluenesulfonyl chloride. The intermediate product thus obtained is reacted with ethylenediamine in an aminolysis of the ester function. Finally, reaction with 2-acetylmercapto-succinic anhydride to give the complexing agents according to the invention, both isomers always being obtained in the last reaction step.
2. Die Herstellung von erfindungsgemäßen Liganden enthaltend in R1 eine -O-CO-CH2-O-CgH4-CH2- Gruppe erfolgt, indem zunächst, wie zuvor beschrieben - ausgehend von Tyrosinester - die entsprechende Z^geschützte Verbindung hergestellt wird. Die phenolische Hydroxylgruppe wird anschließend mit2. The preparation of ligands according to the invention containing a -O-CO-CH 2 -O-CgH 4 -CH 2 - group in R 1 is carried out by first, as described above - starting from tyrosine ester - the corresponding Z ^ protected compound is prepared . The phenolic hydroxyl group is then with
Bromessigsäure-t-butylester alkyliert und die Aminoschutzgruppe in an sich bekannter Weise abgespalten. Tosylierung und Aminolyse der Esterfunktion mit Ethylendiamin erfolgt wie unter 1 beschrieben, anschließend wird jedoch mit Chloracetylchlorid umgesetzt. Chlor wird in an sich bekannter Weise durch Umsetzung mit Kalium- oder Natriumthioacetat substituiert und der t-Butylesters sauer verseift. Gewünschtenfalls kann die resultierende Carbonsäuregruppe mit Hydroxysuccinimid aktiviert und anschließend mit dem jeweils gewünschten Biomolekül umgesetzt werden.T-butyl bromoacetate alkylated and the amino protecting group split off in a conventional manner. The tosylation and aminolysis of the ester function with ethylenediamine is carried out as described under 1, but the reaction is then carried out with chloroacetyl chloride. Chlorine is substituted in a manner known per se by reaction with potassium or sodium thioacetate and the t-butyl ester is saponified with acid. If desired, the resulting carboxylic acid group can be activated with hydroxysuccinimide and then reacted with the desired biomolecule.
3. Erfindungsgemäße Liganden bei denen R1 für einen SCN-C6H -CH2- Rest steht, können erhalten werden, indem zunächst die Aminogruppe eines p-Nitrophenylalaninesters in an sich bekannter Weise tosyliert wird. Anschließend hydriert man die Nitrogruppe und schützt die resultierende aromatischen Aminogruppe z.B. durch Umsetzung mit Chlorameisensäurebenzylester Diesem Reaktionsschritt schließt sich, wie in den vorangegangenen Fällen beschrieben, die Aminolyse der Esterfunktion mit Ethylendiamin an, gefolgt von einer Umsetzung mit S-geschützter Mercaptoessigsäure. Dieser folgt die Abspaltung der Benzyloxycarbonylgruppe. Die Einführung der Isothiocyanat-Gruppe erfolgt durch Reaktion mit Thiophosgen.3. Ligands according to the invention in which R 1 is an SCN-C 6 H -CH 2 radical can be obtained by first tosylating the amino group of a p-nitrophenylalanine ester in a manner known per se. The nitro group is then hydrogenated and the resulting aromatic amino group is protected, for example by reaction with benzyl chloroformate. As described in the preceding cases, this reaction step is followed by aminolysis of the ester function with ethylenediamine, followed by reaction with S-protected mercaptoacetic acid. This is followed by the elimination of the benzyloxycarbonyl group. The isothiocyanate group is introduced by reaction with thiophosgene.
4. Die Herstellung der erfindungsgemäßen Liganden mit X1 in der Bedeutung eines Alkylrestes erfolgt, indem zunächst die Aminogruppe eines Glycinesters mit4. The preparation of the ligands according to the invention with X 1 in the meaning of an alkyl radical is carried out by first using the amino group of a glycine ester
Toluolsulfonylchlorid tosyliert wird. Anschließend wird die Esterfunktion in einer Aminolyse mit Ethylendiamin umgesetzt. Die resultierende freie Aminogruppe wird mit einer tert.-Butoxycarbonyl-Gruppe (nachfolgend als BOC-Gruppe bezeichnet geschützt und der mit einem Tosylrest substituierte Stickstoff mit einem Alkyliodid in an sich bekannter Weise N-alkyliert. Nach der Abspaltung der BOC-Gruppe, folgt die Umsetzung mit 2-Acetylmercaptobernsteinsäureanhydrid wobei wieder ein Isomerengemisch erhalten wird.Toluene sulfonyl chloride is tosylated. The ester function is then reacted with ethylenediamine in an aminolysis. The resulting free amino group is identified with a tert-butoxycarbonyl group (hereinafter referred to as the BOC group protected and the nitrogen substituted with a tosyl radical is N-alkylated with an alkyl iodide in a manner known per se. After the BOC group has been split off, the reaction with 2-acetylmercapto-succinic anhydride follows, again giving a mixture of isomers.
5. Erfindungsgemäße Liganden mit R1 in der Bedeutung eines Aminobutylrestes können erhalten werden, indem der an einem Stickstoffatom BOC-geschützte L sinester zunächst an der verbleibenden ungeschützten primären Aminogruppe tosyliert und anschließend mit Ethylendiamin in einer Aminolyse umgesetzt wird. Nachfolgend wird mit 2-Acetylmercaptobernsteinsäureanhydrid umgesetzt (wobei ein Isomerengemisch entsteht) und die Aminoschutzgruppe nach bekannten Methoden abgespalten.5. Ligands according to the invention with R 1 in the meaning of an aminobutyl radical can be obtained by first tosylating the LOC sine ester protected on a nitrogen atom on the remaining unprotected primary amino group and then reacting it with ethylenediamine in an aminolysis. The reaction is then carried out with 2-acetylmercapto-succinic anhydride (forming an isomer mixture) and the amino protecting group is split off by known methods.
6. Die Herstellung von erfindungsgemäßen Liganden die als R2 einen Isomiocyanatphenylrest enthalten, erfolgt durch Umsetzung eines Glycinmethylesters mit Nitrobenzolsulfonylchlorid, anschließender Reduktion der Nitrogruppe und Schutz der resultierenden Aminogruppe. Die so erhaltene Zwischenverbindung wird in einer Aminolyse mit Ethylendiamin und anschließend mit S-geschützter Mercaptoessigsäure umgesetzt. Die nachfolgende Abspaltung der (BOC-) Schutzgruppe erfolgt in bekannter Weise. Die freie Aminogruppe wird abschließend mit Thiophosgen zur entsprechenden Isothiocyanatgruppe umgesetzt.6. The preparation of ligands according to the invention which contain an isomiocyanate phenyl radical as R 2 is carried out by reacting a glycine methyl ester with nitrobenzenesulfonyl chloride, then reducing the nitro group and protecting the resulting amino group. The intermediate compound thus obtained is reacted in an aminolysis with ethylenediamine and then with S-protected mercaptoacetic acid. The (BOC) protective group is subsequently split off in a known manner. The free amino group is then reacted with thiophosgene to form the corresponding isothiocyanate group.
Die Herstellung der erfϊndungsgemäßen Metallkomplexeder allgemeinen Formel I mit mindestens zwei Resten X1, X2, X3 und/oder R3 in der Bedeutung eines Metallionenequivalents erfolgt in an sich bekannter Weise, indem man die erfindungsgemäßen Komplexbildner (die wie zuvor beschrieben erhalten werden können) unter Zusatz eines Reduktionsmittels, vorzugsweise Zinn^salzen, wie Zinnchlorid oder -tartrat - und gegebenenfalls unter Zugabe der in der Galenik üblichen Zusätze, wie physiologisch unbedenkliche Puffer (z.B. Tromethamin), geringe Zusätze von Elektrolyten (z.B. Natriumchlorid), Stabilisatoren (z.B. Gluconat, Phosphate oder Phosphonate) u.s.w. - in wäßrigem Medium löst und anschließend sterilfiltriert. Diese Lösung wird im Falle von kurzlebigen Metall isotopen wie z.B. dem Tc-99m unmittelbar vor der Applikation mit einer wäßrigen Lösung des jeweilig gewünschten Metallions umgesetzt. Im Falle von langlebigeren Isotopen kann die Umsetzung mit dem Metallsalz/oxid auch bereits beim Radiopharmakahersteller durchgeführt werden. Um eine vollständige Komplexierung des Metallisotops sicherzustellen wird der Komplexbildner in der Regel in mindestens 100-fachem Überschuß zugesetzt, d.h. die erfindungsgemäßen Mittel enthalten neben dem ' 3 gewünschten Metallkomplex zusätzlich auch den metallfreien Komplexbildner, der vorteilhafterweise in Form seines Kaliumsalzes zugegeben wird.The metal complexes of the general formula I according to the invention with at least two radicals X 1 , X 2 , X 3 and / or R 3 in the meaning of a metal ion equivalent are prepared in a manner known per se by the complexing agents according to the invention (which can be obtained as described above) ) with the addition of a reducing agent, preferably tin salts, such as tin chloride or tartrate - and optionally with the addition of the additives customary in galenics, such as physiologically acceptable buffers (e.g. tromethamine), small additions of electrolytes (e.g. sodium chloride), stabilizers (e.g. gluconate , Phosphates or phosphonates) etc. - dissolved in an aqueous medium and then sterile filtered. In the case of short-lived metal isotopes such as the Tc-99m, this solution is reacted with an aqueous solution of the desired metal ion immediately before application. In the case of longer-lived isotopes, the reaction with the metal salt / oxide can also be carried out at the radiopharmaceutical manufacturer. In order to ensure complete complexation of the metal isotope, the complexing agent is generally added in at least a 100-fold excess, ie the agents according to the invention contain, in addition to the 3 desired metal complex additionally also the metal-free complexing agent, which is advantageously added in the form of its potassium salt.
Die vorgenannt beschriebenen Metallkomplex enthaltenden Reaktionslösungen können prizipiell ohne weitere Aufarbeitung direkt appliziert werden.The reaction solutions containing the metal complex described above can in principle be applied directly without further workup.
Da insbesondere das Technetium in einer Reihe von Oxidationsstufen (+7 bis -1) vorliegen kann, ist es zweckmäßig den Komplexbildnern Stabilisatoren beizufügen. Diese halten das Radionuklid in einer stabilen Form, bis es vollständig mit dem Komplexbildner (Liganden) reagiert hat. Die Stabilisatoren, die als Transfer- oder Hilfsliganden bekannt sind, komplexieren zunächst das Metall in einer genau definierten Oxidationsstufe und geben es dann an den Zielliganden (Komplexbildner) in einer Ligandenaustauschreaktion ab. Beispiele für Hilfsliganden sind Gluconheptonsäure, Weinsäure, Zitronensäure (einschließlich deren Salzen) oder andere dem Fachmann bekannte Substanzen.Since the technetium in particular can exist in a number of oxidation states (+7 to -1), it is advisable to add stabilizers to the complexing agents. These keep the radionuclide in a stable form until it has completely reacted with the complexing agent (ligand). The stabilizers, known as transfer or auxiliary ligands, first complex the metal in a precisely defined oxidation state and then release it to the target ligand (complexing agent) in a ligand exchange reaction. Examples of auxiliary ligands are gluconheptonic acid, tartaric acid, citric acid (including the salts thereof) or other substances known to the person skilled in the art.
Gewünschtenfalls werden die erhaltenen Metalkomplexe mit pharmako logisch akzeptablen radiologischen Trägerstoffen versetzt. Dieser radiologische Trägerstoff sollte günstige Eigenschaften für die Applikation des radiopharmazeutisches Mittels in Form einer Injektion, Inhalation oder Ingestion aufweisen. Als Trägerstoffe seien beispielhaft genannt HSA, wäßrige Puffer-Lösungen wie z.B. Tris(hydroxymethyl)aminoethan (bzw. deren Salze), Phosphat, Citrat, Bicarbonat usw., steriles Wasser, physiologische Kochsalzlösung, isotonische Chlorid-, oder Dicarbonationenlösungen oder normale Plasma-Ionen wie Ca2 + , Na+, K+; und Mg +.If desired, the metal complexes obtained can be mixed with pharmacologically acceptable radiological carriers. This radiological carrier should have favorable properties for the application of the radiopharmaceutical in the form of an injection, inhalation or ingestion. Examples of excipients are HSA, aqueous buffer solutions such as tris (hydroxymethyl) aminoethane (or their salts), phosphate, citrate, bicarbonate etc., sterile water, physiological saline, isotonic chloride or dicarbonate ion solutions or normal plasma ions like Ca 2 +, Na +, K + ; and Mg +.
Bei der nuklearmedizinischen in-vivo Anwendung werden die erfindungsgemäßen Mittel in Mengen von 10"5 bis 5 x 104 nmol/kg Körpergewicht, vorzugsweise in Mengen zwischen 10"3 bis 5 x 102 nmol/kg Körpergewicht (bezogen auf den Metallkomplex) dosiert. Ausgehend von einem mittleren Körpergewicht von 70 kg beträgt die erforderliche Radioaktivitätsmenge für diagnostische Anwendungen zwischen 1,85 MBq und 1,85 GBq pro Applikation. Die Applikation erfolgt normalerweise durch intravenöse, intraarterielle, peritoneale oder intratumorale Injektion von 0,1 bis 2 ml einer Lösung der erfindungsgemäßen Mittel. Bevorzugt ist die intravenöse Applikation.When used in nuclear medicine in vivo, the agents according to the invention are dosed in amounts of 10 " 5 to 5 x 10 4 nmol / kg body weight, preferably in amounts between 10" 3 to 5 x 10 2 nmol / kg body weight (based on the metal complex) . Based on an average body weight of 70 kg, the radioactivity required for diagnostic applications is between 1.85 MBq and 1.85 GBq per application. The application is usually carried out by intravenous, intraarterial, peritoneal or intratumoral injection of 0.1 to 2 ml of a solution of the agent according to the invention. Intravenous administration is preferred.
Die erfindungsgemäßen Metallkomplexe mit Metallionen der genannten Elemente und die aus ihnen bereiteten pharmazeutischen Mittel zeichen sich durch eine gute Verträglichkeit und eine hohe Stabilität in vivo aus. Die erfindungsgemäßen Komplexbildner zeichnen sich durch eine leichte Markierungsfähigkeit aus, d.h. sie komplexieren die gewünschten Metalle in hohen Ausbeuten bei Raumtemperatur und neutralem pH-Wert.The metal complexes according to the invention with metal ions of the elements mentioned and the pharmaceutical compositions prepared from them are notable for good Compatibility and high stability in vivo. The complexing agents according to the invention are notable for easy labeling, ie they complex the desired metals in high yields at room temperature and neutral pH.
Die nachfolgenden Beispiele dienen der näheren Erläuterung der Erfindungsgegenstandes, ohne ihn auf diese beschränken zu wollen. The following examples serve to explain the subject matter of the invention in more detail, without wishing to restrict it to them.
Beispiel 1example 1
a) N-Benz loxycarbonyl-tyrosinmethylestera) N-Benz loxycarbonyl-tyrosine methyl ester
Eine Suspension von 97,6 g (0.5 mol) Tyrosinmethylester in 500-1000 ml Dichlormethan wird bei Raumtemperatur mit einer Lösung von 86 gA suspension of 97.6 g (0.5 mol) of tyrosine methyl ester in 500-1000 ml of dichloromethane is mixed with a solution of 86 g at room temperature
Chlorameisensäurebenzylester in 100 ml Dichlormethan versetzt. Anschließend werden 51 g Triethylamin unter Kühlung langsam zugetropft und über Nacht gerührt.Benzyl chloroformate in 100 ml dichloromethane. 51 g of triethylamine are then slowly added dropwise with cooling and the mixture is stirred overnight.
Das Gemisch wird am Rotationsverdampfer bei 40°C eingeengt, der Rückstand inThe mixture is concentrated on a rotary evaporator at 40 ° C, the residue in
750 ml EtOAc aufgenommen und vom ungelösten abfiltriert. Das Filtrat wird 3x gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und eingeengt und umkristallisiert.750 ml of EtOAc were taken up and filtered off from undissolved. The filtrate is washed 3 times saturated sodium chloride solution, dried and concentrated and recrystallized.
Ausbeute: 72%Yield: 72%
Ber. : C 65,64% H 5,82% N 4,25% 0 24,29%Ber. : C 65.64% H 5.82% N 4.25% 0 24.29%
Gef. : C 65,47% H 5,98% N 4,02%Found: C 65.47% H 5.98% N 4.02%
b) N-Benzyloxycarbonyl-2-f(4-hexyloxy)benzylJ-2-aminoessigsäuremethylester Zu einer Lösung von 3,29 g der Verbindung hergestellt nach Beispiel la) (10 mmol) in 50 ml DMF werden bei Raumtemperatur 1,12 g Kalium-tert.butylat (lOmmol) gegeben und anschließend die Lösung von 2,12 g Hexyliodid (10 mmol) in 10 ml DMF zugetropft und 3 h auf 110°C erhitzt. Nach Abkühlung auf Raumtemperatur, wird auf Eis gegossen, mit Dichlormethan extrahiert, mehrmals mit Wasser gewaschen, getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Chromatograpie über eine Kieselgelsäule (CH2CI2 EE 19: 1) verbleiben 1,8 g eines schwach gelben Öls. Ausbeute: 44% Ber.: C 69,71 % H 7,56% N 3,39% 0 19,35% Gef. : C 69,54% H 7,69% N 3,13%b) N-Benzyloxycarbonyl-2-f (4-hexyloxy) benzylJ-2-aminoacetic acid, methyl ester To a solution of 3.29 g of the compound prepared according to Example la) (10 mmol) in 50 ml of DMF, 1.12 g of potassium are added at room temperature added tert.butylate (10 mmol) and then the solution of 2.12 g of hexyl iodide (10 mmol) in 10 ml of DMF was added dropwise and the mixture was heated to 110 ° C. for 3 h. After cooling to room temperature, it is poured onto ice, extracted with dichloromethane, washed several times with water, dried, filtered and concentrated. After chromatography on a silica gel column (CH2CI2 EE 19: 1), 1.8 g of a pale yellow oil remain. Yield: 44% Calc .: C 69.71% H 7.56% N 3.39% 0 19.35% Found: C 69.54% H 7.69% N 3.13%
c) 2-[(4-Hexyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester 4,14 g (10 mmol) der Z1 -geschützten Verbindung hergestellt nach Beispiel lb) werden in 50 ml Essigester in Gegenwart von 1,5 g Palladium auf Aktivkohle (10%) bei 50CC mit Wasserstoff hydriert. Nach beendeter Reaktion wird vom Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen.Es verbleiben 2,7 g farbloses Öl. Ausbeute: 97% 16c) 2 - [(4-Hexyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 4.14 g (10 mmol) of the Z 1 -protected compound prepared according to Example 1b) are in 50 ml of ethyl acetate in the presence of 1.5 g of palladium on activated carbon (10%) hydrogenated at 50 C C with hydrogen. When the reaction is complete, the catalyst is filtered off and the solvent is stripped off, leaving 2.7 g of colorless oil. Yield: 97% 16
Be:.: C 68,79% H 9,02% N 5,01 % O 17,18%Be:.: C 68.79% H 9.02% N 5.01% O 17.18%
Gef. : C 68,64% H 9,l l % N 5,09%Found: C 68.64% H 9, l l% N 5.09%
d) N-p-Toluolsulforτyl-2[(4-hexyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester 8,38 g des Arnins (30 mmol) hergestellt nach Beispiel lc) werden in 50 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 5,72 g Toluolsulfonsäurechlorid in 30 ml Dichlormethan versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0°C 3,0 g Triethylamin zugetropft und lh bei Raumtemperatur gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wird mit Eiswasser versetzt und mehrmals mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HC1, 3x mit 10%iger NaHCθ3- und 2x mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmittel abgezogen und Chromatographien (Kieselgel, CH2CI2). Ausbeute: 60% Ber.: C 63,72% H 7,21% N 3,23% 0 18,45% S 7,40% Gef. : C 63,48% H 7,52% N 3,02% S 7,25%d) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-hexyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 8.38 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example lc) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g Toluene sulfonyl chloride in 30 ml dichloromethane. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HC1, 3x with 10% NaHCθ3 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is stripped off and chromatographies (silica gel, CH2Cl2). Yield: 60% Calc .: C 63.72% H 7.21% N 3.23% 0 18.45% S 7.40% Found: C 63.48% H 7.52% N 3.02% S 7.25%
e) N-p-Toluolsulforryl-2[(4-hexyloxy)benzylJ-2-a inoessigsäure{N-(2-amino- ethyl)Jamide) N-p-Toluenesulforryl-2 [(4-hexyloxy) benzylJ-2-a inoacetic acid {N- (2-aminoethyl) Jamid
Zu einer Lösung von 1 ,2 g Ethylendiamin (20 mmol) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 433 mg des Tosylglycinesters (1 mmol) hergestellt nach Beispiel ld) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und unter Ruckfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, MeOH). Ausbeute: 42%A solution of 433 mg of the tosylglycine ester (1 mmol) prepared according to Example ld) in 1 ml of anhydrous dichloromethane is slowly added dropwise to a solution of 1.2 g of ethylenediamine (20 mmol) in 1 ml of anhydrous dichloromethane and the mixture is boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is chromatographed (silica gel, MeOH). Yield: 42%
Ber.: C 62,45% H 7,64% N 9,10% 0 13,864% S 6,95% Gef.: C 62,36% H 7,81 % N 8,94% S 6,80%Calc .: C 62.45% H 7.64% N 9.10% 0 13.864% S 6.95% Found: C 62.36% H 7.81% N 8.94% S 6.80%
f) N-p-Toluolsulfortyl-2[(4-hexyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure- N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)]aminoethyl}amidf) N-p-toluenesulfortyl-2 [(4-hexyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl} amide
Zu einer Lösung von 1,00 g des Amins (2,2 mmol) hergestellt nach Beispiel le) in 10 ml Pyridin/DMF (50:50) werden 0,38 g (2,2 mmol) 2-Acetylmercapto- bernsteinsäureanhydrid gegeben und 4 h bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in 0.5N HC1 aufgenommen und mit CH2CI2 extrahiert. Nach Flash-Chromatographie verbleiben 420 mg eines gelben Öls. Ausbeute: 31 % Ber. : C 56,67% H 6,50% N 6,61 % 0 20,13% S 10,09%0.38 g (2.2 mmol) of 2-acetylmercapto-succinic anhydride are added to a solution of 1.00 g of the amine (2.2 mmol) prepared according to Example le) in 10 ml of pyridine / DMF (50:50) and Stirred for 4 h at room temperature. The solvent is then stripped off, the residue is taken up in 0.5N HC1 and extracted with CH2CI2. After flash chromatography, 420 mg of a yellow oil remain. Yield: 31% Ber. : C 56.67% H 6.50% N 6.61% 0 20.13% S 10.09%
Gef.: C 56,41 % H 7,01 % N 6,43% S 9,90%Found: C 56.41% H 7.01% N 6.43% S 9.90%
g) Tc-99m-Komplex von N-p-Toluolsulfonyl-2f(4-hexyloxy)benzylJ-2- aminoessigsäure-N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl- 1 -oxopropyl)]aminoethyl}amid 1 mg der Verbindung hergestellt nach Beispiel lf) werden in 100 μl EtOH gelöst. 50 μl dieser Lösung werden zu 250 μl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 8.5 gegeben und anschließend mit 100 μl einer 99m-Tc-Gluconat-Lösung versetzt und 15 min stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt.g) Tc-99m complex of Np-toluenesulfonyl-2f (4-hexyloxy) benzylJ-2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-1-oxopropyl)] aminoethyl} amide 1 mg the compound prepared according to Example lf) are dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are added to 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and then 100 μl of a 99 m Tc gluconate solution are added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by means of HPLC.
Beispiel 2Example 2
a) N-Benzyloxycarbonyl-2-[(4-Methyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester Zu einer Lösung von 3,29 g des Alkohols (10 mmol) hergestellt nach Beispiel la) in 50 ml DMF werden bei Raumtemperatur 1,12 g Kalium-tert.butylat (lOmmol) gegeben und anschließend die Lösung von 1,42 g Methyliodid (10 mmol) in 10 ml DMF zugetropft und auf 110°C erhitzt. Nach vollständiger Umsetzung läßt man auf Raumtemperatur abkühlen, gießt auf Eis, extrahiert mit Dichlormethan, wäscht mehrmals mit Wasser, trocknet, filtriert und eng ein. Nach Säulenchromatographie (Kieselgel, CH2CI2 EE 19:1) verbleiben 1,92 g eines Öls. Ausbeute: 56% Ber. : C 66,46% H 6,16% N 4,08% 0 23,30% Gef. : C 66,18% H 6,41% N 3,97%a) N-Benzyloxycarbonyl-2 - [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester To a solution of 3.29 g of the alcohol (10 mmol) prepared according to Example la) in 50 ml of DMF, 1.12 g Potassium tert.butylate (10mmol) was added and the solution of 1.42 g of methyl iodide (10 mmol) in 10 ml of DMF was added dropwise and the mixture was heated to 110.degree. After the reaction is complete, the mixture is allowed to cool to room temperature, poured onto ice, extracted with dichloromethane, washed several times with water, dried, filtered and concentrated. After column chromatography (silica gel, CH2Cl2 EA 19: 1), 1.92 g of an oil remain. Yield: 56% calc. : C 66.46% H 6.16% N 4.08% 0 23.30% Found: C 66.18% H 6.41% N 3.97%
b) 2-[(4-Methyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester 3.43 g (10 mmol) der Z ^geschützten Verbindung hergestellt nach Beispiel 2a) werden in 50 ml Essigester in Gegenwart von 1,5 g Palladium auf Aktivkohle (10%) beib) 2 - [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 3.43 g (10 mmol) of the Z ^ protected compound prepared according to Example 2a) are in 50 ml of ethyl acetate in the presence of 1.5 g of palladium on activated carbon (10% ) at
Raumtemperatur mit Wasserstoff hydriert. Nach beendeter Reaktion wird vomHydrogenated room temperature with hydrogen. After the reaction is over,
Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen.The catalyst is filtered off and the solvent is stripped off.
Ausbeute: 98% Ber. : C 63,14% H 7,23% N 6,69% 0 22,94%Yield: 98% calc. : C 63.14% H 7.23% N 6.69% 0 22.94%
Gef.: C 62,91 % H 7,36% N 6,50% c) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-methyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester 6.28 g des Amins (30 mmol) hergestellt nach Beispiel 2b) werden in 50 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 5,72 g Toluolsulfonsäurechlorid in 30 ml Dichlormethan versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0°C 3,0 g Triethylamin zugetropft und lh bei Raumtemperamr gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wird mit Eiswasser versetzt und mehrmals mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HCl, 3x mit 10%iger NaHC03- und 2x mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmitel abgezogen. Ausbeute: 76%Found: C 62.91% H 7.36% N 6.50% c) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 6.28 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 2b) are dissolved in 50 ml of dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g of toluenesulfonic acid chloride 30 ml dichloromethane added. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHC03 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is removed. Yield: 76%
Ber.: C 59,49% H 5,82% N 3,85% 0 22,01 % S 8,82% Gef.: C 59,32% H 6,03 % N 3,66% S 8,64%Calc .: C 59.49% H 5.82% N 3.85% 0 22.01% S 8.82% Found: C 59.32% H 6.03% N 3.66% S 8.64 %
d) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-methyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure- [N- (2-aminoethyl)]amidd) N-p-toluenesulfonyl-2 [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid- [N- (2-aminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 600 mg Ethylendiamin (10 mmol) in 1 ml wasserfreiemTo a solution of 600 mg of ethylenediamine (10 mmol) in 1 ml of anhydrous
Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 363 mg des Esters (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 2c) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt, mit ethanolischer HCl versetzt und 2h bei Raumtemperamr gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand umkristallisiert.Dichloromethane is slowly added dropwise a solution of 363 mg of the ester (1 mmol) prepared according to Example 2c) in 1 ml of anhydrous dichloromethane and boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo, mixed with ethanolic HCl and stirred at room temperature for 2 hours. The solvent is removed and the residue is recrystallized.
Ausbeute: 49%Yield: 49%
Ber. : C 58,29% H 6,44% N 10,73% 0 16,35% S 8,19% Gef. : C 57,89% H 6,84% N 10,01 % S 7,52%Ber. : C 58.29% H 6.44% N 10.73% 0 16.35% S 8.19% Found: C 57.89% H 6.84% N 10.01% S 7.52%
e) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-methyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure-e) N-p-toluenesulfonyl-2 [(4-methyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid-
N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxoprop l)]aminoethyl}amid Zu einer Lösung von 941 mg des Amins (2,2 mmol) hergestellt nach Beispiel 2d) in 10 ml Pyridin DMF (50:50) werden 0,38 g (2,2 mmol) 2-Acetylmercapto- bernsteinsäureanhydrid gegeben und 4 h bei Raumtemperamr gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in 0.5N HCl aufgenommen und mit CH2CI2 extrahiert. Nach Flash-Chromatographie verbleiben 905 mg eines gelben Öls. Ausbeute: 73 %N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxoprop l)] aminoethyl} amide To a solution of 941 mg of the amine (2.2 mmol) prepared according to Example 2d) in 10 ml pyridine DMF ( 50:50), 0.38 g (2.2 mmol) of 2-acetylmercapto-succinic anhydride are added and the mixture is stirred at room temperature for 4 h. The solvent is then stripped off, the residue is taken up in 0.5N HCl and extracted with CH2Cl2. Flash chromatography leaves 905 mg of a yellow oil. Yield: 73%
Ber.: C 53,08% H 5,52% N 7,43% 0 22,63% S 11,34% Gef. : C 52,31 % H 5,45% N 7,06% S 11,61 % f) Tc-99m Komplex von N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-methyloxy)benzyl]-Calc .: C 53.08% H 5.52% N 7.43% 0 22.63% S 11.34% Found: C 52.31% H 5.45% N 7.06% S 11.61 % f) Tc-99m complex of Np-toluenesulfonyl-2 [(4-methyloxy) benzyl] -
2-aminoessigsäure-N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl- l-oxopropyl)] minoethyl}amid 1 mg der Verbindung hergestellt nach Beispiel 2e) werden in 100 μl EtOH gelöst.50 μl dieser Lösung werden mit 250 μl EtOH verdünnt, mit 50 μl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 8.5 versetzt und anschließend mit 100 μl einer 99m-Tc-Gluconat- Lösung versetzt und 15 min stehen gelassen. Nach Filtration wird die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt.2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] minoethyl} amide 1 mg of the compound prepared according to Example 2e) are dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are mixed with Diluted 250 ul EtOH, mixed with 50 ul of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and then mixed with 100 ul of a 99m-Tc gluconate solution and allowed to stand for 15 min. After filtration, the labeling yield is determined by means of HPLC.
Beispiel 3Example 3
a) N-Benzyloxyc rbonyl-2-f(4-Dodecyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester Zu einer Lösung von 3,29 g des Alkohols (10 mmol) hergestellt nach Beispiel la) ina) N-Benzyloxyc rbonyl-2-f (4-dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester To a solution of 3.29 g of the alcohol (10 mmol) prepared according to Example la) in
50 ml DMF werden bei Raumtemperatur 1,12 g Kalium-tert.butylat (lOmmol) gegeben und anschließend die Lösung von 3,55 g Dodecyliodid (12 mmol) in 10 ml DMF zugetropft und 3 h auf 110°C erhitzt. Anschließend läßt man auf Raumtemperamr abkühlen, gießt auf Eis, extrahiert mit Dichlormethan, wäscht mehrmals mit Wasser, trocknet, filtriert und eng ein. Nach SC (Kieselgel, CH2CI2/EE 19: 1) verbleiben 2,2 g der gewünschten Substanz. Ausbeute: 44%50 ml of DMF are added at room temperature, 1.12 g of potassium tert-butoxide (10 mmol) and then the solution of 3.55 g of dodecyl iodide (12 mmol) in 10 ml of DMF is added dropwise and the mixture is heated to 110 ° C. for 3 h. Then allowed to cool to room temperature, poured onto ice, extracted with dichloromethane, washed several times with water, dried, filtered and concentrated. After SC (silica gel, CH2CI2 / EE 19: 1), 2.2 g of the desired substance remain. Yield: 44%
Ber. : C 72,40% H 8,71 % N 2,81 % 0 16,07% Gef.: C 72,08% H 8,85% N 2,68%Ber. : C 72.40% H 8.71% N 2.81% 0 16.07% Found: C 72.08% H 8.85% N 2.68%
b) 2-[(4-Dodecyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylesterb) 2 - [(4-Dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester
4,98 g (10 mmol) der Z1 -geschützten Verbindung hergestellt nach Beispiel 3a) werden in 50 ml Essigester in Gegenwart von 1,5 g Palladium auf Aktivkohle (10%) bei 50CC mit Wasserstoff hydriert. Nach beendeter Reaktion (4 h) wird vom Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen.4.98 g (10 mmol) of the Z 1 -protected compound prepared according to Example 3a) are hydrogenated in 50 ml of ethyl acetate in the presence of 1.5 g of palladium on activated carbon (10%) at 50 ° C. with hydrogen. When the reaction has ended (4 h), the catalyst is filtered off and the solvent is stripped off.
Ausbeute: 91 %Yield: 91%
Ber.: C 72,69% H 10,26% N 3,85% 0 13,20%Calc .: C 72.69% H 10.26% N 3.85% 0 13.20%
Gef. : C 72,53 % H 9,98% N 3,82% 10 c) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-dodecyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester 10.91 g des Amins (30 mmol) hergestellt nach Beispiel 3b) werden in 50 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 5,72 g Toluolsulfonsäurechlorid in 30 ml Dichlormethan versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0°C 3,0 g Triethylamin zugetropft und lh bei Raumtemperamr gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wird mit Eiswasser versetzt und mehrmals mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HCl, 3x mit 10%iger NaHC03- und 2x mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmittel abgezogen und chromatographiert (Kieselgel, CH2CI2). Ausbeute: 75%Found: C 72.53% H 9.98% N 3.82% 10 c) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester 10.91 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 3b) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g toluenesulfonic acid chloride added in 30 ml dichloromethane. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHC03 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is drawn off and chromatographed (silica gel, CH2Cl2). Yield: 75%
Ber. : C 67,28% H 8,37% N 2,71 % 0 15,45% S 6,19% Gef. : C 66,96% H 8,26% N 2,60% S 6,11 %Ber. : C 67.28% H 8.37% N 2.71% 0 15.45% S 6.19% Found: C 66.96% H 8.26% N 2.60% S 6.11%
d) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-dodecyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure[N- (2-amino- ethyl)]amid Zu einer Lösung von 1,92 g Ethylendiamin (31 ,9 mmol) in 20 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 3,3 g des Esters (6,38 mmol) hergestellt nach Beispiel 3c) in 10 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und 4 h unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand umkristallisiert. Es verbleiben 2,3 g weiße Kristalle. Ausbeute: 80%d) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid [N- (2-aminoethyl)] amide To a solution of 1.92 g of ethylenediamine (31.9 mmol) in 20 ml of anhydrous Dichloromethane, a solution of 3.3 g of the ester (6.38 mmol) prepared according to Example 3c) in 10 ml of anhydrous dichloromethane is slowly added dropwise and the mixture is boiled under reflux for 4 h. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is recrystallized. 2.3 g of white crystals remain. Yield: 80%
Ber. : C 66,02% H 8,68% N 7,70% 0 11,73% S 5,86% Gef.: C 65,88% H 8,80% N 7,59% S 5,76%Ber. : C 66.02% H 8.68% N 7.70% 0 11.73% S 5.86% Found: C 65.88% H 8.80% N 7.59% S 5.76%
e) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-dodecyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure-e) N-p-toluenesulfonyl-2 [(4-dodecyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid-
N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacety!-l-oxopropyl)]aminoethyl}amid Zu einer Lösung von 1,00 g des Amins (1,8 mmol) hergestellt nach Beispiel 3d) in 10 ml Pyridin/DMF (50:50) werden 0,32 g (1 ,8 mmol) 2-Acetylmercapto- bernsteinsäureanhydrid gegeben und 4 h bei Raumtemperamr gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in 0.5N HCl aufgenommen und mit CH2CI2 extrahiert. Nach Flash-Chromatographie (Kieselgel, EtOAc/MeOH 9: 1) verbleiben 420 mg eines gelben Öls. Ausbeute: 32%N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacety! -L-oxopropyl)] aminoethyl} amide To a solution of 1.00 g of the amine (1.8 mmol) prepared according to Example 3d) in 10 ml of pyridine / DMF (50:50) 0.32 g (1.8 mmol) of 2-acetylmercapto-succinic anhydride are added and the mixture is stirred at room temperature for 4 h. The solvent is then stripped off, the residue is taken up in 0.5N HCl and extracted with CH2Cl2. After flash chromatography (silica gel, EtOAc / MeOH 9: 1) 420 mg of a yellow oil remain. Yield: 32%
Ber. : C 60,06% H 7,42% N 5,84% 0 17,78% S 8,91 % Gef. : C 59,76% H 7,61 % N 5,77% S 8,78% 2.1Ber. : C 60.06% H 7.42% N 5.84% 0 17.78% S 8.91% Found: C 59.76% H 7.61% N 5.77% S 8.78% 2.1
f) Tc-99m-Komplex von N-p-Toluolsulfonyl-2f(4-dodecyloxy)benzylJ-f) Tc-99m complex of N-p-toluenesulfonyl-2f (4-dodecyloxy) benzylJ-
2-aminoessigsäure-N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl- l-oxopropyl)]aminoethyl}amid 1 mg der Verbindung hergestellt nach Beispiel 3e) werden in 100 μl EtOH gelöst.50 μl dieser Lösung werden zu 250 μl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 8.5 gegeben und anschließend mit 100 μl einer 99m-Tc-Gluconat-Lösung versetzt und 15 min stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt.2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl} amide 1 mg of the compound prepared according to Example 3e) are dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are added 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 were added and then 100 μl of a 99 m Tc gluconate solution were added and the mixture was left to stand for 15 min. The labeling yield is determined by means of HPLC.
Beispiel 4Example 4
a) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-benzyloxy)benzyl]-2-aminoessigsäure-a) N-p-toluenesulfonyl-2 [(4-benzyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid -
N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)]aminoethyl}amid Zu einer Lösung von 3,48 g Acetylmercaptobernsteinsäureanhydrid (20 mmol) in 50 ml THF wird bei Raumtemperamr die Lösung von 4,68 g (10 mmol) der Aminoverbindung hergestellt nach Beispiel 16b) in 150 ml THF langsam zugetroft und über Nacht gerührt. Anschließend läßt man bei -20°C auskristallisieren. Es verbleiben 2,8 g weiße Kristalle. Ausbeute: 44%N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl} amide. To a solution of 3.48 g of acetylmercapto-succinic anhydride (20 mmol) in 50 ml of THF, add the solution of 4.68 at room temperature g (10 mmol) of the amino compound prepared according to Example 16b) slowly added in 150 ml of THF and stirred overnight. Then allowed to crystallize at -20 ° C. 2.8 g of white crystals remain. Yield: 44%
Ber.: C 58,02% H 5,50% N 6,55% 0 19,95% S 9,99% Gef.: C 57,80% H 5,72% N 6,51 % S 9,85%Calc .: C 58.08% H 5.50% N 6.55% 0 19.95% S 9.99% Found: C 57.80% H 5.72% N 6.51% S 9.85 %
b) Tc-99m-Komplex von N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-benzyloxy)benzyl]-2-amino- essigsäure-N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)]aminoethyl}amid 1 mg hergestellt nach Beispiel 4a) werden in 100 μl EtOH gelöst.50 μl dieser Lösung werden zu 250 μl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 8.5 gegeben und anschließend mit 100 μl einer 99m-Tc-Gluconat-Lösung versetzt und 15 min stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt.b) Tc-99m complex of Np-toluenesulfonyl-2 [(4-benzyloxy) benzyl] -2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl } Amide 1 mg prepared according to Example 4a) are dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are added to 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and then mixed with 100 μl of a 99m Tc gluconate solution and left to stand for 15 min . The labeling yield is determined by means of HPLC.
Beispiel 5Example 5
a) N-p-Toluolsulfonyl-(4-nitrophenyl)alaninmethylestera) N-p-toluenesulfonyl- (4-nitrophenyl) alanine methyl ester
7.56 g 4-Nitrophenylalaninmethylester (30 mmol) werden in 30 ml Wasser suspendiert und bei 0°C mit 5,72 g Toluolsulfonsäurechlorid in 20 ml Diethylether versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0CC 3,0 g wasserfreies Natriumcarbonat innerhalb 1Z einer Smnde portionsweise zugegeben und über Nacht bei Raumtemperamr gerührt. Es wird mit Wasser versetzt und mehrmals mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HCl, 3x mit 10%iger NaHCθ3- und 2x mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmitel abgezogen. Es verbleiben 8,6 g gelbliche Kristalle. Ausbeute: 76%7.56 g of 4-nitrophenylalanine methyl ester (30 mmol) are suspended in 30 ml of water, and 5.72 g of toluenesulfonic acid chloride in 20 ml of diethyl ether are added at 0 ° C. With intensive stirring, 3.0 g of anhydrous sodium carbonate are added at 0 ° C. 1Z of a mouth added in portions and stirred overnight at room temperature. Water is added and the mixture is extracted several times with ethyl acetate. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHCθ3 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is removed. 8.6 g of yellowish crystals remain. Yield: 76%
Ber. : C 53,96% H 4,80% N 7,40% 0 25,37% S 8,47% Gef. : C 53,79% H 4,99% N 7,29% S 8,30%Ber. : C 53.96% H 4.80% N 7.40% 0 25.37% S 8.47% Found: C 53.79% H 4.99% N 7.29% S 8.30%
b) N-p-Toluolsulfonyl- (4-aτninophenyl)alaninmethylesterb) N-p-toluenesulfonyl- (4-aτninophenyl) alanine methyl ester
Zu der Suspension von 500 mg Pd/C (10%) in 25 ml Methanol wird die Lösung von 2,0 g N-p-Toluolsulfonyl-(4-nitrophenyl)alaninmethylester in Methanol gegeben und bei 55 °C mit Wasserstoff hydriert. Nach Filtration und Einengen verbleiben 1,4 g weißliche Kristalle. Ausbeute: 76%The solution of 2.0 g of N-p-toluenesulfonyl- (4-nitrophenyl) alanine methyl ester in methanol is added to the suspension of 500 mg of Pd / C (10%) in 25 ml of methanol and hydrogenated at 55 ° C. with hydrogen. After filtration and concentration, 1.4 g of whitish crystals remain. Yield: 76%
Ber.: C 58,60% H 5,79% N 8,04% 0 18,37% S 9,20% Gef. : C 58,09% H 5,99% N8,80% S 9,01 %Calc .: C 58.60% H 5.79% N 8.04% 0 18.37% S 9.20% Found: C 58.09% H 5.99% N8.80% S 9.01%
c) N-p-Toluols lfonyl- {4- [N- (tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}- alaninmethylesterc) N-p-toluenesfonyl- {4- [N- (tert-butyloxycarbonyl)] aminophenyl} - alanine methyl ester
Eine Lösung von 3,78 g (10 mmol) der Aminoverbindung hergestellt nach Beispiel 5b) und 3 g Triethylamin (30 mmol) in 50 ml Dioxan wird mit 7,4 g Di-tert.-butyl- dicarbonat (34 mmol) in einer Portion versetzt. (Gasentwicklung!). Die Lösung wird 3 h bei Raumtemperamr gerührt, anschließend auf Eiswasser gegossen und mit Essigester 3x extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden 3x mit Wasser und lx mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgSθ4), eingeengt und urnkristallisiert. Ausbeute: 89%A solution of 3.78 g (10 mmol) of the amino compound prepared according to Example 5b) and 3 g of triethylamine (30 mmol) in 50 ml of dioxane is mixed with 7.4 g of di-tert-butyl dicarbonate (34 mmol) in one Portion added. (Gas evolution!). The solution is stirred for 3 hours at room temperature, then poured onto ice water and extracted 3 times with ethyl acetate. The combined organic phases are washed 3 times with water and once with saturated sodium chloride solution, dried (MgSO 4), concentrated and recrystallized. Yield: 89%
Ber. : C 58,91 % H 6,29% N 6,25% 0 21,40 S 7,15%Ber. : C 58.91% H 6.29% N 6.25% 0 21.40 S 7.15%
Gef. : C 58,12% H 6,69% N 6,21 % S 6,59%Found: C 58.12% H 6.69% N 6.21% S 6.59%
d) N-p-Toluolsulfonyl-{4-[N-(tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}- alaninfN- (2-amino-ethyl)]amid Zu einer Lösung von 450 mg Ethylendiamin (7,5 mmol) in 5 ml wasserfreiem Dichlormethan wird die Lösung von 700 mg des N-p-Toluolsulfonyl-{4-[N-(tert. 13» butyloxycarbonyl)]aminophenyl}-alaninmethylester (1,6 mmol) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und 8 h unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand Chromatographien (Kieselgel, Ethylacetat/MeOH 9:l). Ausbeute: 85%d) Np-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert-butyloxycarbonyl)] aminophenyl} - alaninfN- (2-amino-ethyl)] amide To a solution of 450 mg of ethylenediamine (7.5 mmol) in 5 ml of anhydrous dichloromethane the solution of 700 mg of Np-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert. 13 »butyloxycarbonyl)] aminophenyl} alanine methyl ester (1.6 mmol) in 1 ml of anhydrous dichloromethane was added dropwise and the mixture was boiled under reflux for 8 h. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is chromatographed (silica gel, ethyl acetate / MeOH 9: 1). Yield: 85%
Ber.: C 57,97% H 6,77% N 11,76% 0 16,79% S 6,73% Gef. : C 57,08% H 6,12% N 12,33% S 6,41 %Calc .: C 57.97% H 6.77% N 11.76% 0 16.79% S 6.73% Found: C 57.08% H 6.12% N 12.33% S 6.41 %
e) N-p-Toluolsulfonyl- {4-[N- (tert. butyloxyc rbonyl)]aminophenyl}- alanin[N-(chloracetylaminoethyl)]amld Zu einer Lösung von 4,77 g des Amins (10 mmol) hergestellt nach Beispiel 5d in 10 ml Dichlormethan wird bei 0°C die Lösung von 1,24 g Chloracetylchlorid (11 mmol) in 5 ml Dichlormethan zugetropft, anschließend wird die Lösung von 2,02 g Triethylamin in 5 ml Dichlormethan langsam zugetropft (Achmng: starkee) Np-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert-butyloxycrbonyl)] aminophenyl} - alanine [N- (chloroacetylaminoethyl)] amld To a solution of 4.77 g of the amine (10 mmol) prepared according to Example 5d in 10 ml of dichloromethane is added dropwise at 0 ° C, the solution of 1.24 g of chloroacetyl chloride (11 mmol) in 5 ml of dichloromethane, then the solution of 2.02 g of triethylamine in 5 ml of dichloromethane is slowly added dropwise (Achmng: strong
Wärmeentwicklung) und über Nacht gerührt. Anschließend wird mit Wasser versetzt, mit EtOAc extrahiert, mit Wasser neutral gewaschen, getrocknet und eingeengt. Es verbleiben 2,77 g weiße Kristalle. Ausbeute: 50% Ber. : C 54,29% H 6,01 % N 10,13% 0 17,38% S 5,80% Gef. : C 53,76% H 5,78% N 9,66% S 5,92%Heat development) and stirred overnight. Water is then added, the mixture is extracted with EtOAc, washed neutral with water, dried and concentrated. 2.77 g of white crystals remain. Yield: 50% calc. : C 54.29% H 6.01% N 10.13% 0 17.38% S 5.80% Found: C 53.76% H 5.78% N 9.66% S 5.92%
f) N-p-Toluolsulfonyl- {4-[N- (tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}- alaninfN- (2- (acetylmercapto)acetylaminoethyl)]amidf) N-p-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert-butyloxycarbonyl)] aminophenyl} - alanineN- (2- (acetylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 553 mg des Derivats (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 5e und einer katalytische Menge NaI wird in 5 ml wasserfreiem DMF unter Stickstoffatmosphäre eine Lösung von 238 mg Kaliumthioacetat (2 mmol) in wasserfreiem DMF zugetropft und 3 h auf 110°C erhitzt. Die heiße Lösungläßt man auf Raumtemperamr abkühlen und gießt sie in IN HCl (50 ml). Anschließend wird mit EtOAc extrahiert, mit Wasser neutral gewaschen, getrocknet, eingeengt und Chromatographien (Kieselgel, EtOAc/MeOH 9: 1). Ausbeute: 35 % Ber.: C 54,71 % H 6,12% N 9,45% 0 18,90% S 10,82% Gef. : C 54,40% H 6,45% N 9,25% S 10,04% g) N-p-Toluolsulfonyl- {4-aminophenyl}-alanin-A solution of 238 mg of potassium thioacetate (2 mmol) in anhydrous DMF is added dropwise to a solution of 553 mg of the derivative (1 mmol) prepared according to Example 5e and a catalytic amount of NaI in 5 ml of anhydrous DMF under a nitrogen atmosphere and at 110 ° C. for 3 h heated. The hot solution is allowed to cool to room temperature and poured into IN HCl (50 ml). The mixture is then extracted with EtOAc, washed neutral with water, dried, concentrated and chromatographies (silica gel, EtOAc / MeOH 9: 1). Yield: 35% Calc .: C 54.71% H 6.12% N 9.45% 0 18.90% S 10.82% Found: C 54.40% H 6.45% N 9.25% S 10.04% g) Np-toluenesulfonyl- {4-aminophenyl} alanine
[N- (2-(acetylmercapto)acetylaminoethyl)]amid, Hydrochlorid[N- (2- (acetylmercapto) acetylaminoethyl)] amide, hydrochloride
85 mg N-p-Toluolsulfonyl-{4-[N-(tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}- ala_o [ I-(2-(acetylmercapto)acetylaminoef-hyl)]amid werden in 2 ml 3 M HCl in Ethylacetat gelöst und 6 h bei Raumtemperamr gerührt. Nach Abziehen des85 mg of Np-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert. Butyloxycarbonyl)] aminophenyl} - ala_o [I- (2- (acetylmercapto) acetylaminoef-hyl)] amide are dissolved in 2 ml of 3 M HCl in ethyl acetate and 6 h stirred at room temperature. After subtracting the
Lösungsmittels verbleiben 70 mg weiße Kristalle.Solvent 70 mg of white crystals remain.
Ausbeute: 100%Yield: 100%
Ber. : C 49,95% H 5,53% N 10,59% O 15,12% S 12,12%Ber. : C 49.95% H 5.53% N 10.59% O 15.12% S 12.12%
Gef.: C 49,32% H 5,76% N 10,20% S 11,77%Found: C 49.32% H 5.76% N 10.20% S 11.77%
h) N-p-Toluolsulfonyl- {4-isothiocyanatophenyl}-alanln- [N- (2- (acetylmercapto)acetylaminoethyl)]amidh) N-p-Toluenesulfonyl- {4-isothiocyanatophenyl} alanln- [N- (2- (acetylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 53 mg N-p-Toluolsulfonyl-{4-aminophenyl}-alanin- [N-(2-(acetylmercapto)acetylaminoethyl)]amid, Hydrochlorid und 20 μl Triethylamin in 4 ml Dichlormethan wird unter Feuchtigkeitsausschluß die Lösung von 11,5 mgTo a solution of 53 mg of Np-toluenesulfonyl- {4-aminophenyl} -alanine [N- (2- (acetylmercapto) acetylaminoethyl)] amide, hydrochloride and 20 μl of triethylamine in 4 ml of dichloromethane, the solution of 11.5 mg
Thiophosgen in wenig Dichlormethan zugetropft und 4 h bei Raumtemperamr gerührt.The thiophosgene was added dropwise in a little dichloromethane and the mixture was stirred at room temperature for 4 h.
Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleiben 45 mg gelbliche Kristalle.After the solvent has been stripped off, 45 mg of yellowish crystals remain.
Ausbeute: 84% Ber.: C 51,67% H 4,90% N 10,48% 0 14,96% S 17,99%Yield: 84% Calc .: C 51.67% H 4.90% N 10.48% 0 14.96% S 17.99%
Gef.: C 50,99% H 5,15% N 10,21 % S 18,56%Found: C 50.99% H 5.15% N 10.21% S 18.56%
Beispiel 6Example 6
a) N-p-Toluolsulfonyl-{4-[N-(tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}-alanin- [N-(2-(benzoylmercapto)acetylaminoethyl)]amida) N-p-Toluenesulfonyl- {4- [N- (tert-butyloxycarbonyl)] aminophenyl} alanine [N- (2- (benzoylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
2 mmol S-Benzoyl-2-mercaptoessigsäure (394 mg) und 4 mmol NEt3 (560 μl) und 2 mmol N-p-Toluolsulfonyl- {4-[N-(tert. butyloxycarbonyl)]aminophenyl}-alanin-2 mmol S-benzoyl-2-mercaptoacetic acid (394 mg) and 4 mmol NEt3 (560 μl) and 2 mmol N-p-toluenesulfonyl- {4- [N- (tert. Butyloxycarbonyl)] aminophenyl} alanine
[N-(2-aminoethyl)]amid (953 mg) werden mit 5 ml Dichlormethan versetzt und auf 10°C gekühlt. Anschließend werden 2 mmol (509 mg) 1-Benzotriazolyloxy-tris- (dιmethylamino)-phosphonium-hexafluorophosphat-Chlorid (nachfolgend als BOP-Cl bezeichnet) zugegeben und unter Wasserkühlung 4 Stunden gerührt, dann mit Wasser versetzt und mit 4 N HCl auf pH 1-1.5 gebracht. Anschließend wird mit Dichlormethan extrahiert, die vereinigten organischen Extrakte mit NaHC03 und Wasser gewaschen, getrocknet, eingeengt und chromatographiert. Ausbeute: 60% 265 ml of dichloromethane are added to [N- (2-aminoethyl)] amide (953 mg) and the mixture is cooled to 10 ° C. Then 2 mmol (509 mg) of 1-benzotriazolyloxy-tris (dimethylamino) phosphonium hexafluorophosphate chloride (hereinafter referred to as BOP-Cl) are added and the mixture is stirred with water cooling for 4 hours, then mixed with water and adjusted to pH with 4 N HCl 1-1.5 brought. The mixture is then extracted with dichloromethane, the combined organic extracts washed with NaHC03 and water, dried, concentrated and chromatographed. Yield: 60% 26
Ber. : C 58,70% H 5,85% N 8,56% O 17,10% S 9,79%Ber. : C 58.70% H 5.85% N 8.56% O 17.10% S 9.79%
Gef.: C 58,04% H 6,03% N 8,39% S 9,30%Found: C 58.04% H 6.03% N 8.39% S 9.30%
b) N-p-Toluolsulfonyl-{4-aminophenyl}-alanin-[N-(2-(benzoyl-mercapto)acetyl- aminoethyl)]amid, Hydrochlorid Zu einer Lösung von 654 mg des geschützten Amins hergestellt nach Beispiel 6a) (1 mmol) in 5 ml EtOAc wird eine frisch hergestellte Lösung von 3M HCl in EtOAc (10 ml, 30 mmol) zugegeben. Es wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand im Vakuum bei Raumtemperatur getrocknet.b) Np-toluenesulfonyl- {4-aminophenyl} alanine [N- (2- (benzoyl-mercapto) acetylaminoethyl)] amide, hydrochloride To a solution of 654 mg of the protected amine prepared according to Example 6a) (1 mmol ) in 5 ml EtOAc, a freshly prepared solution of 3M HCl in EtOAc (10 ml, 30 mmol) is added. The mixture is stirred at room temperature for 30 minutes. The solvent is stripped off and the residue is dried in vacuo at room temperature.
Ausbeute: 9 988%%Yield: 9,988 %%
Ber. : C 54,86 H 5,29% N 9,48% O 13,53% S10,85%Ber. : C 54.86 H 5.29% N 9.48% O 13.53% S10.85%
Gef. : C 53,90% H 5,52% N 9,09% S 9,97%Found: C 53.90% H 5.52% N 9.09% S 9.97%
c) N-p-Toluolsulfonyl-{4-isothiocyanatophenyl}-alanin-[N-(2-(ben∑oylmercapto)- acetylam inoethyl)]aτnid Zu einer Lösung von 296 mg der Titelverbindung aus Beispiel 6b) (0.5 mmol) und 200 μl Triethylamin in 4 ml Dichlormethan wird unter Feuchtigkeitsausschluß diec) Np-toluenesulfonyl- {4-isothiocyanatophenyl} alanine [N- (2- (ben∑oylmercapto) - acetylam inoethyl)] aidide To a solution of 296 mg of the title compound from Example 6b) (0.5 mmol) and 200 μl Triethylamine in 4 ml dichloromethane is the exclusion of moisture
Lösung von 115 mg Thiophosgen in wenig Dichlormeman zugetropft und 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleibt ein Rückstand, der in Chloroform aufgenommen wird und mit 0.1% iger Zitronensäure gewaschen, 2x mit NaHCθ3-Lösung und lx mit Wasser gewaschen. Nach Trocknen und Einengen verbleiben 45 mg gelbliche Kristalle. Ausbeute: 85%Solution of 115 mg of thiophosgene added dropwise in a little dichloromeman and stirred for 4 hours at room temperature. After the solvent has been stripped off, a residue remains which is taken up in chloroform and washed with 0.1% citric acid, washed twice with NaHCO 3 solution and once with water. After drying and concentration, 45 mg of yellowish crystals remain. Yield: 85%
Ber.: C 56,36 H 4,73% N 9,39% O 13,14% S 16,12%Calc .: C 56.36 H 4.73% N 9.39% O 13.14% S 16.12%
Gef.: C 56,31 % H 4,98% N 9,08% S 17,01 %Found: C 56.31% H 4.98% N 9.08% S 17.01%
Beispiel 7Example 7
a) N- (3-Nitrobenzolsulfonyl)glycinmethylestera) N- (3-Nitrobenzenesulfonyl) glycine methyl ester
25,11 g Glycinmethylester (0.2 mol) werden in 500 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 44.32 g 3-Νitrobenzolsulfonsäurechlorid in 100 ml Dichlormethan tropfenweise versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0°C 40 g Triemylaminin 50 ml Dichlormethan zugetropft und lh bei Raumtemperamr gerührt. Nach vollständiger Umsetzung (DC-Kontrolle) wird mit Eiswasser versetzt und mehrmals IG mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HCl, 3x mit 10%iger NaHCθ3- und -x it gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmitel abgezogen. Ausbeute: 82% Ber. : C 39,42% H 3,68% N 10,22% 0 35,00% S 11,69% Gef. : C 40,31 % H 3,37% N 9,89% S 11,04%25.11 g of glycine methyl ester (0.2 mol) are dissolved in 500 ml of dichloromethane and 44.32 g of 3-itrobenzenesulfonyl chloride in 100 ml of dichloromethane are added dropwise at 0 ° C. With intensive stirring, 40 g of triemylamine in 50 ml of dichloromethane are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After complete implementation (DC control), ice water is added and several times IG extracted with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHCO 3 and - x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is removed. Yield: 82% calc. : C 39.42% H 3.68% N 10.22% 0 35.00% S 11.69% Found: C 40.31% H 3.37% N 9.89% S 11.04%
b) N- (3-Aminobenzolsulfonyl)glycinmethylester 2,74 g (10 mmol) der Νitro- Verbindung hergestellt nach Beispiel 7a) werden in 50 ml Eisessig in Gegenwart von 1,5 g Palladium auf Aktivkohle (10%) bei Raumtemperamr mit Wasserstoff hydriert. Nach beendeter Reaktion wird vom Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen. Ausbeute: 90% Ber. : C 44,26% H 4,95% N 11,47% 0 26,20% S 13,13 % Gef.: C 44,01 % H 5,ll % N 12,08% S 12,76%b) N- (3-aminobenzenesulfonyl) glycine methyl ester 2.74 g (10 mmol) of the Νitro compound prepared according to Example 7a) are in 50 ml of glacial acetic acid in the presence of 1.5 g of palladium on activated carbon (10%) at room temperature with hydrogen hydrated. When the reaction is complete, the catalyst is filtered off and the solvent is stripped off. Yield: 90% calc. : C 44.26% H 4.95% N 11.47% 0 26.20% S 13.13% Found: C 44.01% H 5, ll% N 12.08% S 12.76%
c) N-[(3-Aminobenzolsulfonyl)Jglycyl-[N'- (2-aminoethyl)]amidc) N - [(3-aminobenzenesulfonyl) jglycyl- [N'- (2-aminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 2,2 g Ethylendiamin (36 mmol) in 2,5 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 1 g des N-(3-Aminobenzolsulfonyl)- glycinmethylesters (3,6 mmol) in 2,5 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft unterA solution of 1 g of the N- (3-aminobenzenesulfonyl) glycine methyl ester (3.6 mmol) in 2.5 ml of anhydrous dichloromethane is slowly added to a solution of 2.2 g of ethylenediamine (36 mmol) in 2.5 ml of anhydrous dichloromethane dropped under
Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und derReflux cooked. After the reaction is concentrated in vacuo and the
Rückstand chromatographiert (Kieselgel, CH2Cl2/MeOH 9: 1).Chromatograph the residue (silica gel, CH2Cl2 / MeOH 9: 1).
Ausbeute: 76% Ber. : C 44,11 % H 5,92% N 20,57% 0 17,63% S 11 ,78%Yield: 76% calc. : C 44.11% H 5.92% N 20.57% 0 17.63% S 11.78%
Gef.: C 43,09% H 6,41% N 21,82% S 10,68%Found: C 43.09% H 6.41% N 21.82% S 10.68%
d) N-[(3-Aminobenzolsulfonyl)]gtycyl- {N '-[(acetylmercapto)acetyl (2-aminoethyl)}amidd) N - [(3-aminobenzenesulfonyl)] gtycyl- {N '- [(acetylmercapto) acetyl (2-aminoethyl)} amide
Zu einer Lösung von 272 mg Amin (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 7c) in wasserfreiem THF wird bei 0°C 250mg (1,08 mmol) SATA (SIGMA Chemie, 1994; A 9043) in THF unter Argon und Feuchtigkeitsausschluß langsam zugetropft und 2h bei 0°C, anschließend 12 h bei Raumtemperamr gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, CH2θ2/MeOH 9: 1). Ausbeute: 60%250 mg (1.08 mmol) of SATA (SIGMA Chemie, 1994; A 9043) in THF is slowly added dropwise to a solution of 272 mg of amine (1 mmol) prepared according to Example 7c) in anhydrous THF at 0 ° C. and in argon and with exclusion of moisture and 2 h at 0 ° C, then stirred for 12 h at room temperature. The solvent is stripped off and the residue is chromatographed (silica gel, CH 2 O 2 / MeOH 9: 1). Yield: 60%
Ber.: C 43,29% H 5,19% N 14,42% 0 20,59% S 16,51 % Gef.: C 42,45% H 5,23% N 15,64% S 15,36% e) N-f(3-Isothiocyanatobenzolsulfonyl)Jglycyl-{N'-[(acetylmercapto)acetylJ- (2-aminoethyl)}amid Zu einer Lösung von 200 mg N-[(3-Aminobenzolsulfonyl)]glycyl-Calc .: C 43.29% H 5.19% N 14.42% 0 20.59% S 16.51% Found: C 42.45% H 5.23% N 15.64% S 15.36 % e) Nf (3-isothiocyanatobenzenesulfonyl) Jglycyl- {N '- [(acetylmercapto) acetylJ- (2-aminoethyl)} amide To a solution of 200 mg N - [(3-aminobenzenesulfonyl)] glycyl-
{N -[(acetylmercapto)-acetyl]-(2-aminoethyl)}amid und 20 μl Trie ylamin in 4 ml Dichlormethan wird unter Feuchtigkeitsausschluß die Lösung von 65 mg Thiophosgen in wenig Dichlormethan zugetropft und 4 h bei Raumtemperamr gerührt. Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleibt ein Rückstand, der in Chloroform aufgenommen wird und mit 0.1 % iger Zitronensäure gewaschen, 2x mit NaHCθ3- Lösung und lx mit Wasser gewaschen. Nach Trocknen und Einengen verbleiben 197 mg gelbliche Kristalle. Ausbeute: 89% Ber. : C 41,85% H 4,21% N 13,01 % 0 18,58% S 22,35% Gef. : C 40,44% H 3,93% N 12,57% S 23,66%{N - [(acetylmercapto) acetyl] - (2-aminoethyl)} amide and 20 μl trie ylamine in 4 ml dichloromethane, the solution of 65 mg thiophosgene in a little dichloromethane is added dropwise with exclusion of moisture and the mixture is stirred for 4 hours at room temperature. After the solvent has been stripped off, a residue remains which is taken up in chloroform and washed with 0.1% citric acid, washed twice with NaHCO 3 solution and once with water. After drying and concentration, 197 mg of yellowish crystals remain. Yield: 89% calc. : C 41.85% H 4.21% N 13.01% 0 18.58% S 22.35% Found: C 40.44% H 3.93% N 12.57% S 23.66%
Beispiel 8Example 8
a) N-Benzyloxycarbonyl-O-t-Butyloxycarbonylmethyl- (tyrosinmethylester)a) N-benzyloxycarbonyl-O-t-butyloxycarbonylmethyl (tyrosine methyl ester)
3.29 g des Z1 -geschützten Tyrosinmethylesters hergestellt nach Beispiel la) werden in wasserfreiem DMF gelöst und mit 1,12 g Kalium-t-butylat versetzt. Nach 30 min wird die Lösung von 1,95 g Bromessigsäure-t-butylester zugetropft und 4 h auf 110°C erhitzt, anschließend nch 4h bei Raumtemperamr gerührt. Das emisch wird auf Wasser gegeben, mit CH2CI2 extrahiert, gewaschen, getrocknet und eingeengt. Nach Säulenchromatographie (Kieselgel, CH2CI2/EE 19: 1) verbleiben 2.5 g gelbes Öl. Ausbeute: 57%3.29 g of the Z 1 -protected tyrosine methyl ester prepared according to Example la) are dissolved in anhydrous DMF and mixed with 1.12 g of potassium t-butoxide. After 30 min, the solution of 1.95 g of t-butyl bromoacetate is added dropwise and the mixture is heated at 110 ° C. for 4 h and then stirred at room temperature for 4 h. The mixture is poured into water, extracted with CH2Cl2, washed, dried and concentrated. After column chromatography (silica gel, CH2Cl2 / EA 19: 1), 2.5 g of yellow oil remain. Yield: 57%
Ber.: C 65,00% H 6,59% N 3,16% 0 25,25% Gef.: C 64,65% H 6,82% N 3,09%Calc .: C 65.00% H 6.59% N 3.16% 0 25.25% Found: C 64.65% H 6.82% N 3.09%
b) O- (t-Butyloxyc rbonylmethyl)-tyrosinmethylesterb) O- (t-Butyloxycarbonylmethyl) tyrosine methyl ester
1.5 g (3,4 mmol) der Z ^geschützten Verbindung hergestellt nach Beispiel 8a) werden in 50 ml Essigester in Gegenwart von 1,5 g Palladium auf Aktivkohle (10%) bei 50°C mit Wasserstoff hydriert. Nach beendeter Reaktion wird vom Katalysator abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen.Es verbleiben 1,0 g farbloses Öl. Ausbeute: 99% 181.5 g (3.4 mmol) of the Z ^ protected compound prepared according to Example 8a) in 50 ml of ethyl acetate in the presence of 1.5 g of palladium on activated carbon (10%) at 50 ° C with hydrogen. When the reaction is complete, the catalyst is filtered off and the solvent is stripped off, leaving 1.0 g of colorless oil. Yield: 99% 18th
Ber. : C 62,12% H 7,49% N 4,53% 0 25,86%Ber. : C 62.12% H 7.49% N 4.53% 0 25.86%
Gef. : C 61,88% H 7,67% N 4,47%Found: C 61.88% H 7.67% N 4.47%
c) N-Toluolsulfonyl-O-t-butyloxycarboπylmethyl-tyrosinmethylesterc) N-toluenesulfonyl-O-t-butyloxycarboπylmethyl-tyrosine methyl ester
Zu einer Lösung von 920 mg O-(t-Butyloxycarbonyhnemyl)-tyrosmmethylester in CH2CI2 wird bei 0°C die Lösung von 570 mg Toluolsulfonylchlorid in CH2CI2 zugetropft und anschließend langsam mit 300 mg Triethylamin versetzt und über Nacht gerührt. Es wird auf Eiswasser gegossen, mit CH2CI2 extrahiert, die organischen Phase 2x mit 10% HCl, 2x mit 10% NaHCθ3 und 2x mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und eingeengt. Nach Behandlung mit Ether erhält man 900 mg weiße Kristalle. Ausbeute: 65 % Ber. : C 59,60% H 6,31 % N 3,02% 0 24,16% S 6,92% Gef.: C 59,38% H 6,55 % N 3,08% S 6,66%The solution of 570 mg of toluenesulfonyl chloride in CH2CI2 is added dropwise to a solution of 920 mg of O- (t-butyloxycarbonylnemyl) tyrosmethyl ester in CH2CI2 at 0 ° C. and 300 mg of triethylamine are then slowly added and the mixture is stirred overnight. It is poured onto ice water, extracted with CH2CI2, the organic phase is washed twice with 10% HCl, 2x with 10% NaHCθ3 and 2x with saturated sodium chloride solution, dried and concentrated. After treatment with ether, 900 mg of white crystals are obtained. Yield: 65% calc. : C 59.60% H 6.31% N 3.02% 0 24.16% S 6.92% Found: C 59.38% H 6.55% N 3.08% S 6.66%
d) N-Toluolsulfonyl-0-t-butyloxycarbonylmethyl-N-(2-aminoethyl)tyrosinamidd) N-toluenesulfonyl-0-t-butyloxycarbonylmethyl-N- (2-aminoethyl) tyrosinamide
Zu einer Lösung von 5 g Ethylendiamin in 50 ml CH2CI2 wird die Lösung von 3,0 g N-Toluolsulfonyl-O-t-butyloxycarbonylmethyl-ryrosinmethylester (6,5 mmol) inThe solution of 3.0 g of N-toluenesulfonyl-O-t-butyloxycarbonylmethyl-ryrosine methyl ester (6.5 mmol) is added to a solution of 5 g of ethylenediamine in 50 ml of CH 2 Cl 2
CH2CI2 zugetropft. Anschließend wird 4 h unter Rückfluß gekocht. Nach Abkühlung wird mit Wasser versetzt, die organische Phase abgetrennt und mehrmals mit CH2CI2 extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden gewaschen, getrocknet und eingeengt. Nach Säulenchromatographie (Kieselgel MeOH) verbleiben 1 ,5 g farbloses Öl.CH2CI2 added dropwise. The mixture is then boiled under reflux for 4 h. After cooling, water is added, the organic phase is separated off and extracted several times with CH2Cl2. The combined organic extracts are washed, dried and concentrated. After column chromatography (silica gel MeOH), 1.5 g of colorless oil remain.
Ausbeute: 47%Yield: 47%
Ber.: C 58,64% H 6,77% N 8,55% 0 19,53% S 6,52%Calc .: C 58.64% H 6.77% N 8.55% 0 19.53% S 6.52%
Gef.: C 58,39% H 6,91 % N 8,38% S 6,56%Found: C 58.39% H 6.91% N 8.38% S 6.56%
e) N-Toluolsulfonyl-0-carboxymethyl[-N-(2-aminoethyl)tyrosinamid]e) N-toluenesulfonyl-0-carboxymethyl [-N- (2-aminoethyl) tyrosinamide]
2 ml Trifluoressigsäure werden bei Raumtemperamr zu einer Lösung von 491 mg des teπ.-Butylesters (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 8d) in 25 ml Dichlormethan gegeben und bei Raumtemperamr gerührt. Nach beendeter Reaktion wird die Trifluoressigsäure im Vakuum abgezogen, der Rückstand in Chloroform aufgenommen, mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Ausbeute: 83 % Z92 ml of trifluoroacetic acid are added at room temperature to a solution of 491 mg of the t-butyl ester (1 mmol) prepared according to Example 8d) in 25 ml of dichloromethane and stirred at room temperature. When the reaction has ended, the trifluoroacetic acid is stripped off in vacuo, the residue is taken up in chloroform, washed with water, dried and concentrated. Yield: 83% Z9
Ber.: C 55, 16% H 5,79% N 9,65% O 22,04% S 7,36%Calc .: C 55, 16% H 5.79% N 9.65% O 22.04% S 7.36%
Gef.: C 53,88% H 5,64% N 10,02% S 7,44%Found: C 53.88% H 5.64% N 10.02% S 7.44%
f) N-Toluolsulfonyl-0-carboxymethyl-tyrosin-[N- (2- (piperonylmercapto)- acetylaminoethyl)]amid Zu einer Lösung von 435 mg Amin (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 8e) in wasserfreiem THF wird bei 0°C 350 mg Piperonylmercaptoessigsäure- N-hydroxysucciiϋmidoester (1,08 mmol) in THF unter Argon und Feuchtigkeitsausschluß langsam zugetropft und 2h bei 0°C, anschließend 12 h bei Raumtemperamr gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel,
Figure imgf000031_0001
9:1:0.1). Ausbeute: 58% Ber.: C 55,98% H 5,17% N 6,53% 0 22,37% S 9,96% Gef.: C 55,38% H 5,04% N 6,68% S 9,09%f) N-toluenesulfonyl-0-carboxymethyl-tyrosine [N- (2- (piperonylmercapto) acetylaminoethyl)] amide. To a solution of 435 mg of amine (1 mmol) prepared according to Example 8e) in anhydrous THF at 0 ° C. 350 mg of Piperonylmercaptoessigsäure- N-hydroxysucciiϋmidoester (1.08 mmol) in THF slowly added dropwise under argon and exclusion of moisture and stirred for 2 hours at 0 ° C., then for 12 hours at room temperature. The solvent is stripped off and the residue is chromatographed (silica gel,
Figure imgf000031_0001
9: 1: 0.1). Yield: 58% Calc .: C 55.98% H 5.17% N 6.53% 0 22.37% S 9.96% Found: C 55.38% H 5.04% N 6.68% S 9.09%
g) N-Toluolsulfonyl-O-carboxymethyl-tyrosin- {N-[2- (mercaptoacetyl)- aminoethyljjamid Zu 10 ml Trifluoressigsäure werden bei Raumtemperamr 644 mg der geschützten S-Verbindung (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 8f) und eine Spur Anisol gegeben und kurz zum Sieden erhitzt. Nach beendeter Reaktion wird die Trifluoressigsäure im Vakuum abgezogen, der Rückstand in einem geeigneten Lösungsmittel aufgenommen, mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt und chromatographiert. Ausbeute: 34%g) N-toluenesulfonyl-O-carboxymethyl-tyrosine {N- [2- (mercaptoacetyl) aminoethyljjamid To 10 ml of trifluoroacetic acid 644 mg of the protected S-compound (1 mmol) are prepared according to Example 8f) and a trace of anisole at room temperature given and briefly heated to boiling. When the reaction has ended, the trifluoroacetic acid is stripped off in vacuo, the residue is taken up in a suitable solvent, washed with water, dried and concentrated and chromatographed. Yield: 34%
Ber.: C 51,85% H 5,34% N 8,25% 0 21,98% S 12,59 Gef.: C 51,62% H 5,53% N 8,65% S 13,61%Calc .: C 51.85% H 5.34% N 8.25% 0 21.98% S 12.59 Found: C 51.62% H 5.53% N 8.65% S 13.61%
h) Tc-99m-Komplex von N-Toluolsulfonyl-O-carboxymethyl-tyrosin- {N-[2-(mercaptoacetyl)aminoethyl]}amid 1 mg der Verbindung hergestellt nach Beispiel 8g) werden in 100 μl EtOH gelöst. 50 μl dieser Lösung werden zu 250 μl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 8.5 gegeben und mit 50μl einer Citratlösung (50 mg Trinatriumcitrat in 1 ml Wasser) und 2,5 μl einer Zinn(II)chlorid-Lösung (5,0 mg Zinn(II)chlorid in 1 ml 0,1 N HCl) versetzt.h) Tc-99m complex of N-toluenesulfonyl-O-carboxymethyl-tyrosine {N- [2- (mercaptoacetyl) aminoethyl]} amide 1 mg of the compound prepared according to Example 8g) are dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are added to 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and with 50 μl of a citrate solution (50 mg trisodium citrate in 1 ml water) and 2.5 μl of a tin (II) chloride solution (5.0 mg tin (II ) chloride in 1 ml 0.1 N HCl) added.
Anschließend mit 100 μl einer 99m-Tc-Generatoreluats versetzt und 15 Minuten stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt. Beispiel 9Then 100 μl of a 99m Tc generator eluate were added and the mixture was left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by means of HPLC. Example 9
a) Cholesteryldiethylenglykol (DEG-Cholesterin) Eine Lösung von 54,1 g Cholesteryltoluolsulfonat (100 mmol) und 106 ga) Cholesteryl diethylene glycol (DEG cholesterol) A solution of 54.1 g cholesteryltoluenesulfonate (100 mmol) and 106 g
Diethylenglykol in 250 ml wasserfreiem Dioxan wird unter einer Stickstoffatmosphäre unter Rückfluß erhitzt (DC-Kontrolle). Nach vollständiger Umsetzung wird mitDiethylene glycol in 250 ml of anhydrous dioxane is heated under reflux under a nitrogen atmosphere (TLC control). After the implementation is complete with
Wasser versetzt und mit CH2CI2 extrahiert. Nach Säulenchromatographie (KieselgelWater was added and extracted with CH2CI2. After column chromatography (silica gel
CH2θ2/MeOH 9:1) verbleibt ein farbloser Feststoff. Ausbeute: 81 %CH2θ2 / MeOH 9: 1) remains a colorless solid. Yield: 81%
Ber. : C 78,43% H 11,46% O 10,ll %Ber. : C 78.43% H 11.46% O 10, ll%
Gef. : C 76,99% H 12,32%Found: C 76.99% H 12.32%
b) Cholesteryl-2-chlorethyl(ethylenglykol)b) cholesteryl-2-chloroethyl (ethylene glycol)
Eine Lösung von 4,75 g DEG-Cholesterin (10 mmol) hergestellt nach Beispiel 9a) in 50 ml wasserfreiem Tetrachlorkohlenstoff werden unter einer Stickstoffatmosphäre mit 3,14 g pulverisiertem Triphenylphosphin (12 mmol) versetzt und unter Rückfluß erhitzt. Nach Abkühlung wird mit 50 ml Petrolether oder Hexan verdünnt und einige Zeit bei -20CC aufbewahrt. Der Niederschlag wird abgesaugt und erneut wie oben verfahren, bis kein Niederschlag mehr ausfällt. Anschließend wird getrocknet und eigeengt. Nach Säulenchromatographie (Kieselgel CH2Cl2 MeOH 9:1) verbleiben 3,70 g eines Öls. Ausbeute: 75 % Ber. : C 75,49% H 10,83% 0 6,49% Gef. : C 74,73% H 11,74%A solution of 4.75 g of DEG cholesterol (10 mmol) prepared according to Example 9a) in 50 ml of anhydrous carbon tetrachloride is mixed with 3.14 g of powdered triphenylphosphine (12 mmol) under a nitrogen atmosphere and heated under reflux. After cooling, it is diluted with 50 ml of petroleum ether or hexane and kept at -20 C for some time. The precipitate is suctioned off and the procedure is repeated as above until no further precipitation occurs. Then it is dried and concentrated. After column chromatography (silica gel CH2Cl2 MeOH 9: 1), 3.70 g of an oil remain. Yield: 75% calc. : C 75.49% H 10.83% 0 6.49% Found: C 74.73% H 11.74%
c) N-Benzyloxycarbonyl-2-[(4-cholesteryldiethylenglykolyl)benzyl]- 2-aminoessigsäuremethylesterc) N-Benzyloxycarbonyl-2 - [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] - 2-aminoacetic acid, methyl ester
Zu einer siedenen Lösung von 295 mg des N-Benzyloxycarbonyl-tyrosinmethylesters (1 mmol) (hergestellt nach Beispiel la) und 183 mg Kaliumkarbonat (1 mmol) in 10 ml Toluol, wird die Lösung von 493 mg des Cholesterinderivats (1 mmol) (hergestellt nach Beispiel 9b) in 10 ml Toluol gegeben und 6 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Nach vollständiger Umsetzung läßt man auf Raumtemperamr abkühlen, engt ein und chromatographiert (Kieselgel Petrolether/Ethylacetat 1: 1) Ausbeute: 29% Ber.: C 73,46% H 9,78% N 1,86% O 14,89%To a boiling solution of 295 mg of the N-benzyloxycarbonyl-tyrosine methyl ester (1 mmol) (prepared according to Example la) and 183 mg of potassium carbonate (1 mmol) in 10 ml of toluene, the solution of 493 mg of the cholesterol derivative (1 mmol) is (prepared according to Example 9b) in 10 ml of toluene and heated under reflux for 6 hours. After the reaction is complete, the mixture is allowed to cool to room temperature, concentrated and chromatographed (silica gel, petroleum ether / ethyl acetate 1: 1). Yield: 29%. Calc .: C 73.46% H 9.78% N 1.86% O 14.89%
Gef.: C 73,28% H 10,01 % N 1,70%Found: C 73.28% H 10.01% N 1.70%
d) 2-[(4-Cholesteryldiethylenglykolyl)benzyl]-2-aminoessigsäuremethylester Hydrochloridd) 2 - [(4-Cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] -2-aminoacetic acid methyl ester hydrochloride
7,52 g (10 mmol) der Z-geschützten Verbindung hergestellt nach Beispiel 9c) werden in 50 ml 3 M HCl in Ethylacetat gelöst und 6 h bei Raumtemperamr gerührt. Nach abziehen des Lösungsmittels verbleiben 6,02 g weiße Kristalle. Ausbeute: 93%7.52 g (10 mmol) of the Z-protected compound prepared according to Example 9c) are dissolved in 50 ml of 3 M HCl in ethyl acetate and stirred for 6 hours at room temperature. After the solvent has been stripped off, 6.02 g of white crystals remain. Yield: 93%
Ber.: C 71,53% H 9,66% N 2,04% 0 11,62%Calc .: C 71.53% H 9.66% N 2.04% 0 11.62%
Gef.: C 71,82% H 9,39% N 2,01 %Found: C 71.82% H 9.39% N 2.01%
e) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-cholesteryldiethylenglykolyl)benzyl]- 2-aminoessigsäuremethylester 19.53 g des Amins (30 mmol) hergestellt nach Beispiel 9d) werden in 50 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 5,72 g Toluolsulfonsäurechlorid in 30 ml Dichlormethan versetzt. Unter intensivem Rühren werden bei 0°C 3,0 g Triethylamin zugetropft und lh bei Raumtemperamr gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wird mit Eiswasser versetzt und mehrmals mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden 2x mit kalter 10%iger HCl, 3x mit 10%iger NaHCÜ3- und 2x mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmittel abgezogen und chromatographiert (Kieselgel, CH2CI2). Ausbeute: 77%e) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] - 2-aminoacetic acid methyl ester 19.53 g of the amine (30 mmol) prepared according to Example 9d) are dissolved in 50 ml dichloromethane and at 0 ° C. with 5.72 g toluenesulfonyl chloride in 30 ml dichloromethane added. With intensive stirring, 3.0 g of triethylamine are added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour. After the reaction is complete, ice water is added and the mixture is extracted several times with dichloromethane. The combined organic extracts are washed 2x with cold 10% HCl, 3x with 10% NaHCÜ3 and 2x with saturated NaCl solution. After drying, the solvent is drawn off and chromatographed (silica gel, CH2Cl2). Yield: 77%
Ber. : C 71,52% H 8,88% N 1,74% 0 13,89% S 3,98% Gef.: C 70,89% H 9,02% N 1,66% S 3,70%Ber. : C 71.52% H 8.88% N 1.74% 0 13.89% S 3.98% Found: C 70.89% H 9.02% N 1.66% S 3.70%
f) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-cholesteryldiethylenglykolyl)benzylJ- 2-aminoessigsäure[N-(2-aminoethyl)]amid Zu einer Lösung von 1,2 g Ethylendiamin (20 mmol) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 806 mg des Tosylglycinesters (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 9e in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, MeOH). Ausbeute: 85% Ber. : C 70,55% H 9,06% N 5,04% O 11 ,51 % S 3,84%f) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzylJ-2-aminoacetic acid [N- (2-aminoethyl)] amide. A solution slowly becomes a solution of 1.2 g of ethylenediamine (20 mmol) in 1 ml of anhydrous dichloromethane 806 mg of the tosylglycine ester (1 mmol) prepared according to Example 9e in 1 ml of anhydrous dichloromethane were added dropwise and the mixture was boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is chromatographed (silica gel, MeOH). Yield: 85% Ber. : C 70.55% H 9.06% N 5.04% O 11.51% S 3.84%
Gef. : C 69,24% H 9,31 % N 4,83 % S 3,71 %Found: C 69.24% H 9.31% N 4.83% S 3.71%
g) N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-cholesteryldiethylenglykolyl)benzyl]-2-aminoessigsäure- N- {2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l -oxopropyl)]aminoethyl}amid Zu einer Lösung von 1,83 g des Amins (2,2 mmol) hergestellt nach Beispiel 9f) in 10 ml Pyridin/DMF (50:50) werden 0,38 g (2,2 mmol) 2-Acetylmercapto- bernsteinsäureanhydrid gegeben und 4 h bei Raumtemperamr gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen, der Rückstand in 0.5N HCl aufgenommen und mit CH2CI2 extrahiert. Nach Flash-Chromatographie verbleiben 887 mg eines gelben Öls. Ausbeute: 40%g) Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] -2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl} amide To a solution of 1, 83 g of the amine (2.2 mmol) prepared according to Example 9f) in 10 ml of pyridine / DMF (50:50) are added 0.38 g (2.2 mmol) of 2-acetylmercapto-succinic anhydride and stirred for 4 h at room temperature. The solvent is then stripped off, the residue is taken up in 0.5N HCl and extracted with CH2Cl2. Flash chromatography leaves 887 mg of a yellow oil. Yield: 40%
Ber. : C 65,51 % H 8,10% N 4,17% 0 15,87% S 6,36% Gef. : C 63,66% H 7,58% N 3,99% S 7,41 %Ber. : C 65.51% H 8.10% N 4.17% 0 15.87% S 6.36% Found: C 63.66% H 7.58% N 3.99% S 7.41%
h) Tc-99m-Komplex von N-p-Toluolsulfonyl-2[(4-cholesteryldiethylenglykolyl)- benzyl]-2-aminoessigsäure-N-{2-N[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)J- aminoethyljamid 1 mg des Liganden hergestellt nach Beispiel 9g werden in 100 μl Ethanol gelöst. 50 μl dieser Lösung werden zu 250μl eines 0,1 M Phosphatpuffers (pH 8,5) gegeben und anschließend mit 50 μl einer Citratlösung (50 mg Trinatriumcitrat in 1,0 ml Wasser) und 2,5 μl einer Zinn(TI)-chlorid-Lösung (5,0 mg Zinn(II)-chlorid in 1 ml 0,1 N HCl) versetzt. Anschließend wird mit 50 μl eines Tc-99m-Generatoreluats versetzt und 15 Minuten stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt.h) Tc-99m complex of Np-toluenesulfonyl-2 [(4-cholesteryldiethylene glycolyl) benzyl] -2-aminoacetic acid-N- {2-N [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl) J-aminoethyljamide 1 mg of the ligand prepared according to Example 9g is dissolved in 100 ul ethanol. 50 μl of this solution are added to 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer (pH 8.5) and then with 50 μl of a citrate solution (50 mg of trisodium citrate in 1.0 ml of water) and 2.5 μl of a tin (TI) chloride Solution (5.0 mg of tin (II) chloride in 1 ml of 0.1 N HCl) was added. 50 μl of a Tc-99m generator eluate are then added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by means of HPLC.
Beispiel 10Example 10
a) 1 - Tosyl- 1 , 4, 7-triaz heptan-3-ona) 1 - Tosyl-1, 4, 7-triaz heptan-3-one
Zu einer Lösung von 30 g Ethylendiamin (0,5 mol) in 50 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 25,73 g des Tosylglycinmethylesters (0.1 mol) in wasserfreiem Dichlormethan zugetropft. Es wird 12 h bei Raumtemperamr gerührt und anschließend im Vakuum eingeengt. Es verbleiben 24 g eines gelben Öls. Ausbeute: 88%A solution of 25.73 g of the tosylglycine methyl ester (0.1 mol) in anhydrous dichloromethane is slowly added dropwise to a solution of 30 g of ethylenediamine (0.5 mol) in 50 ml of anhydrous dichloromethane. The mixture is stirred at room temperature for 12 h and then concentrated in vacuo. 24 g of a yellow oil remain. Yield: 88%
Ber. : C 48,69% H 6,32% N 15,49% 0 17,69% S 11,82% Gef. : C 47,23% H 6,67% N 15,34% S 11,54% b) 7-N-tert. -Butoxycarbonyl-l-tosyl-1, 4, 7-triazaheptan-3-onBer. : C 48.69% H 6.32% N 15.49% 0 17.69% S 11.82% Found: C 47.23% H 6.67% N 15.34% S 11.54% b) 7-N-tert. -Butoxycarbonyl-l-tosyl-1, 4, 7-triazaheptan-3-one
Eine Lösung von 27 g (100 mmol) der Aminoverbindung hergestellt nach Beispiel 10a) in 500 ml Dioxan werden mit 74 g Di-tert.-butyl-dicarbonat (340 mmol) in einer Portion versetzt. Die Lösung wird 3 h bei Raumtemperamr gerührt, anschließend auf Eiswasser gegossen und mit Essigester 3x extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden 3x mit Wasser und lx mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO.j.), eingeengt und umkristallisiert. Es verbleiben 27,9 g weiße Kristalle.A solution of 27 g (100 mmol) of the amino compound prepared according to Example 10a) in 500 ml of dioxane is mixed with 74 g of di-tert-butyl dicarbonate (340 mmol) in one portion. The solution is stirred for 3 hours at room temperature, then poured onto ice water and extracted 3 times with ethyl acetate. The combined organic phases are washed 3 times with water and once with saturated sodium chloride solution, dried (MgSO.j.), concentrated and recrystallized. There remain 27.9 g of white crystals.
Ausbeute: 75%Yield: 75%
Ber.: C 51,74% H 6,78% N 11,31 % 0 21,54% S 8,63 %Calc .: C 51.74% H 6.78% N 11.31% 0 21.54% S 8.63%
Gef.: C 51 ,41 % H 6,96% N 11,12% S 8,91 %Found: C 51, 41% H 6.96% N 11.12% S 8.91%
c) 1-N-t-Butyloxycarbonyl-l -n-hexyl-l-tosyl-1, 4, 7-triazaheptan-3-onc) 1-N-t-Butyloxycarbonyl-1-n-hexyl-1-tosyl-1, 4, 7-triazaheptan-3-one
Zu einer Lösung von 3,71 g des Sulfonamids (10 mmol) hergestellt nach Beispiel 10b) in 50 ml DMF werden bei Raumtemperamr 5 g Kaliumcarbonat gegeben und anschließend die Lösung von 2,54 g Hexyliodid (12 mmol) in 10 ml DMF zugetropft und 3 h auf 110°C erhitzt. Nach vollständiger Umsetzung läßt man auf5 g of potassium carbonate are added to a solution of 3.71 g of the sulfonamide (10 mmol) prepared according to Example 10b) in 50 ml of DMF at room temperature, and the solution of 2.54 g of hexyl iodide (12 mmol) in 10 ml of DMF is then added dropwise and Heated to 110 ° C for 3 h. After completion of the implementation, one leaves
Raumtemperamr abkühlen, gießt auf Eis, extrahiert mit CH2CI2, wäscht mehrmals mit Wasser, trocknet, filtriert und eng ein. Der Rückstand wird aus Ethylacetat umkristallisiert. Ausbeute: 89% Ber.: C 58,00% H 8,19% N 9,22% 0 17,56% S 7,04% Gef. : C 57,37% H 7,87% N 9,01 % S 6,95%Cool to room temperature, pour on ice, extract with CH2CI2, wash several times with water, dry, filter and tight. The residue is recrystallized from ethyl acetate. Yield: 89% Calc .: C 58.00% H 8.19% N 9.22% 0 17.56% S 7.04% Found: C 57.37% H 7.87% N 9.01% S 6.95%
d) 1-n-Hexyl-l-tosy 1-1,4, 7-triazaheptan-3-on Zu 10 ml Trifluoressigsäure werden bei 0°C 456 mg des Sulfonamids (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 10c) gegeben und anschließend 2 h bei Raumtemperamr gerührt. Nach beendeter Reaktion wird auf Eis gegossen, schwach alkalisiertd) 1-n-hexyl-l-tosy 1-1,4, 7-triazaheptan-3-one 456 mg of the sulfonamide (1 mmol) prepared according to Example 10c) are added to 10 ml of trifluoroacetic acid and then 2 h stirred at room temperature. After the reaction is poured onto ice, weakly alkalized
(NaHCθ3), extrahiert, eingeengt und getrocknet.(NaHCO 3), extracted, concentrated and dried.
Ausbeute: 94% Ber. : C 57,44% H 8,22% N 11,82% 0 13,50% S 9,02%Yield: 94% calc. : C 57.44% H 8.22% N 11.82% 0 13.50% S 9.02%
Gef. : C 57,96% H 8,01 % N 11,63% S 8,75% e) 10-Acetyl-9-carboxymetkyl-l-n-hexyl-l-tosyl-10-thia-l,4, 7-triazadecan-3 , 8-dion Zu einer Lösung von 1,91 g Acetylmercaptobernsteinsäureanhydrid (20 mmol) inFound: C 57.96% H 8.01% N 11.63% S 8.75% e) 10-acetyl-9-carboxymethyl-ln-hexyl-l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecane-3, 8-dione to a solution of 1.91 g of acetylmercapto-succinic anhydride (20 mmol) in
20 ml DMF wird bei Raumtemperamr die Lösung von 3,55 g (10 mmol) der Aminoverbindung in 10 ml DMF langsam zugetropft und über Nacht gerührt. Anschließend wird auf halbkonzentrierter HCl gegossen, mit CH2CI2 extrahiert und chromatographiert (Kieselgel, EtOAc/MeOH von 9: 1 nach 1:1). Ausbeute: 66%20 ml of DMF, the solution of 3.55 g (10 mmol) of the amino compound in 10 ml of DMF is slowly added dropwise at room temperature and the mixture is stirred overnight. The mixture is then poured onto half-concentrated HCl, extracted with CH2Cl2 and chromatographed (silica gel, EtOAc / MeOH from 9: 1 to 1: 1). Yield: 66%
Ber. : C 52,16% H 6,66% N 7,93% 0 21 ,15% S 12,11 % Gef. : C 52,85% H 6,87% N 7,52% S 11,66%Ber. : C 52.16% H 6.66% N 7.93% 0 21.15% S 12.11% Found: C 52.85% H 6.87% N 7.52% S 11.66%
f) Tc-99m-Komplex von 10-Acetyl-9-carboxymethyl-l-n-hexyl-l-tosyl-10-thia- 1,4, 7-triazadecan-3, 8-dion lmg N,N [Hexyl-p-Toluolsulfonyl]glycyl-N-[(3-carboxy-2-mercaptoacetyl- l-oxopropyl)]aminoethyl}amid wird in 100 μl EtOH gelöst. 50 μl dieser Lösung werden mit 100 μl EtOH verdünnt und mit lOOμl eines 0.1 M Phosphatpuffers pH 7,5 und 100 μl einer Tc-99m-Gluconat-Lösung versetzt. Die Markierungsausbeute ist > 95 % (Kieselgel, 95% EtOH)f) Tc-99m complex of 10-acetyl-9-carboxymethyl-In-hexyl-1-tosyl-10-thia-1,4,7-triazadecane-3,8,8-dione lmg N, N [Hexyl-p- Toluene sulfonyl] glycyl-N - [(3-carboxy-2-mercaptoacetyl-l-oxopropyl)] aminoethyl} amide is dissolved in 100 μl EtOH. 50 μl of this solution are diluted with 100 μl EtOH and 100 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 7.5 and 100 μl of a Tc-99m gluconate solution are added. The labeling yield is> 95% (silica gel, 95% EtOH)
Beispiel 11Example 11
a) N- -Toluolsulfonyl-N-ε-tert. -butyloxycarbonyllysinmethylestera) N- -Toluenesulfonyl-N-ε-tert. -butyloxycarbonyllysine methyl ester
Zu einer Lösung von 2,60 g N-ε-ten.-butyloxycarbonyllysinmethylester (10 mmol) in 50 ml wasserfreiem Pyridin wird bei 0°C portionsweise 1,91 mgTo a solution of 2.60 g of N-ε-butyloxycarbonyllysine methyl ester (10 mmol) in 50 ml of anhydrous pyridine is added 1.91 mg at 0 ° C. in portions
Toluolsulfonylchlorid zugegeben und läßt 24 h bei 4°C stehen. Anschließend wird auf Eiswasser gegossen und der Niederschlag abgetrennt und umkristallisiert. Ausbeute: 78% Ber.: C 55,05 % H 7,30% N 6,76% 0 23,16% S 7,74% Gef. : C 54,67% H 7,42% N 6,64% S 7,54%Toluene sulfonyl chloride is added and the mixture is left to stand at 4 ° C. for 24 h. It is then poured onto ice water and the precipitate is separated off and recrystallized. Yield: 78% Calc .: C 55.05% H 7.30% N 6.76% 0 23.16% S 7.74% Found: C 54.67% H 7.42% N 6.64% S 7.54%
b) N- -Toluolsulfonyl-N-ε-tert. -butyloxyc rbonyllysin-[N- (2-aminoethyl)]amid Zu einer Lösung von 600 mg Ethylendiamin (10 mmol) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan wird langsam eine Lösung von 415 mg des Tosyllysinesters (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 11a) in 1 ml wasserfreiem Dichlormethan zugetropft und unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand umkristallisiert. Ausbeute: 59%b) N- toluenesulfonyl-N-ε-tert. -butyloxyc rbonyllysin- [N- (2-aminoethyl)] amide To a solution of 600 mg of ethylenediamine (10 mmol) in 1 ml of anhydrous dichloromethane, a solution of 415 mg of the tosyllysine ester (1 mmol) is slowly prepared according to Example 11a) in 1 ml of anhydrous dichloromethane were added dropwise and the mixture was boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is recrystallized. Yield: 59%
Ber.: C 54,28% H 7,74% N 12,66% O 18,08% S 7,25%Calc .: C 54.28% H 7.74% N 12.66% O 18.08% S 7.25%
Gef. : C 54,54% H 7,57% N 12,18% S 7,06%Found: C 54.54% H 7.57% N 12.18% S 7.06%
c) N- -Toluolsulfonyl-N-ε-tert. -butyloxycarbonyllysin-[N- (2- (piperonylmercapto)- acetylaminoethy Jamidc) N- toluenesulfonyl-N-ε-tert. -butyloxycarbonyllysine [N- (2- (piperonylmercapto) acetylaminoethyl Jamid
Zu einer Lösung von 443 mg Amin (1 mmol) hergestellt nach Beispiel 11b) in wasserfreiem THF wird bei 0°C 350 mg Piperonylmercaptoessigsäure- N-hydroxysuccinimidoester (1,08 mmol) in THF unter Argon und350 mg of piperonylmercaptoacetic acid-N-hydroxysuccinimido ester (1.08 mmol) in THF under argon and to a solution of 443 mg of amine (1 mmol) prepared according to Example 11b) in anhydrous THF
Feuchtigkeitsausschluß langsam zugetropft und 2h bei 0°C, anschließend 12 h beiExclusion of moisture slowly added dropwise and for 2 hours at 0 ° C., then for 12 hours at
Raumtemperamr gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, CH2C.2/MeOH 9:1).Room temperature stirred. The solvent is stripped off and the residue is chromatographed (silica gel, CH2C.2 / MeOH 9: 1).
Ausbeute: 54% Ber. : C 55,37% H 6,51 % N 8,61 % 0 19,67% S 9,85%Yield: 54% calc. : C 55.37% H 6.51% N 8.61% 0 19.67% S 9.85%
Gef. : C 55,22% H 6,85% N 8,41 % S 9,66%Found: C 55.22% H 6.85% N 8.41% S 9.66%
d) N-a-Toluolsulfonyl-lysin-[N- (2- (piperonylmercapto)acetylaminoethyl)]amid 651 mg N-α-Toluolsulfonyl-N-ε-tert.-butyloxycarbonyllysin-d) N-a-toluenesulfonyl-lysine [N- (2- (piperonylmercapto) acetylaminoethyl)] amide 651 mg N-α-toluenesulfonyl-N-ε-tert-butyloxycarbonyllysine
[N-(2-(piperonylmercapto)-acetylaminoethyl)]amid werden in 5 ml 3 M HCl in[N- (2- (piperonylmercapto) acetylaminoethyl)] amide are dissolved in 5 ml of 3 M HCl in
Ethylacetat gelöst und 6 h bei Raumtemperamr gerührt. Nach Abziehen desDissolved ethyl acetate and stirred at room temperature for 6 h. After subtracting the
Lösungsmittels verbleiben 530 mg weiße Kristalle.Solvent 530 mg of white crystals remain.
Ausbeute: 96% Ber. : C 54,63% H 6,05% N 10,19% 0 17,46% S 11,67Yield: 96% calc. : C 54.63% H 6.05% N 10.19% 0 17.46% S 11.67
Gef. : C 54,40% H 6,47% N 10,01 % S 11,84%Found: C 54.40% H 6.47% N 10.01% S 11.84%
Beispiel 12Example 12
a) N-a-Toluolsulfonyl-N-ε-tert.-butyloxycarbonyllysin-[N-(2-benzoylmercapto)- acetylaminoethyl)]amid Zu einer Lösung von 443 mg Amin hergestellt nach Beispiel 1 lb) in wasserfreiem Tetrahydrofuran wird bei 0° C 316 mg Benzoylmercaptoessigsäure-N-hydroxysuccin- imidoester (1 ,08 mmol) in Tetrahydrofuran unter Argon und Feuchtigkeitsausschluß langsam zugetropft und 2 Stunden bei 0° C, anschließend 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, CH2Cl2/MeOH 9:1). -3(a) Na-toluenesulfonyl-N-ε-tert-butyloxycarbonyllysine [N- (2-benzoylmercapto) - acetylaminoethyl)] amide To a solution of 443 mg amine prepared according to Example 1 lb) in anhydrous tetrahydrofuran is 316 at 0 ° C. mg of benzoylmercaptoacetic acid-N-hydroxysuccinimidoester (1.08 mmol) in tetrahydrofuran was slowly added dropwise under argon and with the exclusion of moisture and the mixture was stirred at 0 ° C. for 2 hours and then at room temperature for 12 hours. The solvent is stripped off and the residue is chromatographed (silica gel, CH 2 Cl 2 / MeOH 9: 1). -3 (
Ausbeute: 65 %Yield: 65%
Ber.: C 56,11 % H 6,50 % N 9,03% 0 18,04 % S 10,33 %Calc .: C 56.11% H 6.50% N 9.03% 0 18.04% S 10.33%
Gef.: C 55,98 % H 6,86 % N 8,88 % S 10,05 %Found: C 55.98% H 6.86% N 8.88% S 10.05%
b) N-a-Toluolsulfonyl-lysin-[N-(2-benzoylmercapto)acetylaminoethyl)]amid 621 mg der Titelverbindung aus Beispiel 12a) werden in 5 ml 3 M HCl in Ethylacetat gelöst und 6 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleiben 500 mg weiße Kristalle. Ausbeute: 90 %b) N-a-toluenesulfonyl-lysine [N- (2-benzoylmercapto) acetylaminoethyl)] amide 621 mg of the title compound from Example 12a) are dissolved in 5 ml of 3 M HCl in ethyl acetate and stirred at room temperature for 6 hours. After the solvent has been stripped off, 500 mg of white crystals remain. Yield: 90%
Ber.: C 51,74 % H 5,97 % N 10,06 % O 14,36 % S 11,51 % Gef.: C 51,40 % H 6,14 % N 10,10 % S 11,48 %Calc .: C 51.74% H 5.97% N 10.06% O 14.36% S 11.51% Found: C 51.40% H 6.14% N 10.10% S 11.48 %
c) Tc-99m-Komplex von N-a-Toluolsulfonyl-lysin-[N-(2-(benzoylmercapto)- acetylaminoethyl)]amid 10 rng Amid hergestellt nach Beispiel 12b) werden mit 500 μl IN NaOH versetzt und 15 Minuten stehen gelassen. 50 μl dieser Lösung werden zu 250 μl eines 0,1 M Phosphatpuffers pH 8,5 gegeben und mit 50 μl einer Citratlösung (50 mg Trinatrium- citrat in 1,0 ml Wasser) und 2,5 μl einer Zinn(lI)-chlorid-Lösung (5,0 mg Zinn(II)- chlorid in 1,0 ml 0,1 N HCl) versetzt. Anschließend wird mit 50 μl eines Tc-99m- Generatoreluats versetzt und 15 Minuten stehen gelassen. Die Markierungsausbeute wird mittels HPLC bestimmt (>95 %).c) Tc-99m complex of N-a-toluenesulfonyl-lysine [N- (2- (benzoylmercapto) - acetylaminoethyl)] amide 10 rng amide prepared according to Example 12b) are mixed with 500 μl IN NaOH and left to stand for 15 minutes. 50 μl of this solution are added to 250 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and with 50 μl of a citrate solution (50 mg of trisodium citrate in 1.0 ml of water) and 2.5 μl of a tin (III) chloride Solution (5.0 mg of tin (II) chloride in 1.0 ml of 0.1 N HCl) was added. 50 μl of a Tc-99m generator eluate is then added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield is determined by HPLC (> 95%).
Beispiel 13Example 13
a) N-[3-(N-tert.-butyloxycarbonyl)aminobenzolsulfonyl]-glycinmethylestera) N- [3- (N-tert-butyloxycarbonyl) aminobenzenesulfonyl] glycine methyl ester
Eine Lösung von 2,12 g (10 mmol) der Aminoverbindung hergestellt nach Beispiel 7b) und 3 g Triethylamin (30 mmol) in 50 ml Dioxan wird mit 7,4 g Di-tert.-butyl- dicarbonat (34 mmol) in einer Portion versetzt. (Gasentwicklung!). Die Lösung wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, anschließend auf Eiswasser gegossen und mit Essigester dreimal extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden dreimal mit Wasser und einmal mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgS0 ), eingeengt und umkristallisiert. Ausbeute: 85 %A solution of 2.12 g (10 mmol) of the amino compound prepared according to Example 7b) and 3 g of triethylamine (30 mmol) in 50 ml of dioxane is mixed with 7.4 g of di-tert-butyl dicarbonate (34 mmol) in one Portion added. (Gas evolution!). The solution is stirred for 30 minutes at room temperature, then poured onto ice water and extracted three times with ethyl acetate. The combined organic phases are washed three times with water and once with saturated sodium chloride solution, dried (MgS0), concentrated and recrystallized. Yield: 85%
Be:.: C 48,83 % H 5,85 % N 8,13 % 0 27,88 % S 9,31 % Ge:.: C 47,44 % H 5,93 % N 8,57 % S 9,66 % 39-Be:.: C 48.83% H 5.85% N 8.13% 0 27.88% S 9.31% Ge:.: C 47.44% H 5.93% N 8.57% S 9 , 66% 39-
b) N-[3-(N-tert. -butyloxycarbonyl)aminobenzolsulfonyl]-glycyl-[N'-(2- aminoethyl)amid Zu einer siedenden Lösung von 42 g Ethylendiamin (700 mmol) in 100 ml wasserfreiem Toluol wird langsam eine Lösung von 12,11 g des Glycinesters hergestellt nach Beispiel 13a) (35 mmol) in 250 ml wasserfreiem Toluol/Dioxan oder gegebenenfalls nur Dioxan zugetropft und unter Rückfluß gekocht. Nach beendeter Reaktion wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Chloroform aufgenommen und mit Wasser gewaschen. Ausbeute: 78 %b) N- [3- (N-tert-butyloxycarbonyl) aminobenzenesulfonyl] glycyl- [N '- (2-aminoethyl) amide. Slowly add a boiling solution of 42 g of ethylenediamine (700 mmol) in 100 ml of anhydrous toluene Solution of 12.11 g of the glycine ester prepared according to Example 13a) (35 mmol) in 250 ml of anhydrous toluene / dioxane or optionally only dioxane was added dropwise and the mixture was boiled under reflux. When the reaction is complete, the mixture is concentrated in vacuo and the residue is taken up in chloroform and washed with water. Yield: 78%
Ber.: C 44,06 % H 6,16 % N 13,70 % 0 19,56 % S 7,84 % Gef.: C 45,44 % H 6,63 % N 14,57 % S 7,66 %Calc .: C 44.06% H 6.16% N 13.70% 0 19.56% S 7.84% Found: C 45.44% H 6.63% N 14.57% S 7.66 %
c) N-[3-(N-tert. -butyloxycarbonyl)aminobenzolsulfonyl]-glycyl-{N'-[(S-benzoyl- mercapto)acetyl]-(2-aminoethyl)}amidc) N- [3- (N-tert-Butyloxycarbonyl) aminobenzenesulfonyl] glycyl- {N '- [(S-benzoyl-mercapto) acetyl] - (2-aminoethyl)} amide
5 mmol der S-Benzoylmercaptoessigsäure (0,98 g) und 10 mmol NEt3 (1,4 ml) und 5 mmol des Amins hergestellt nach Beispiel 13b) (1,86 g) werden mit 50 ml5 mmol of S-benzoylmercaptoacetic acid (0.98 g) and 10 mmol of NEt 3 (1.4 ml) and 5 mmol of the amine prepared according to Example 13b) (1.86 g) are mixed with 50 ml
Dichlormethan versetzt und auf 10° C gekühlt. Anschließend werden 5,5 mmol (1,375 g) BOP-Cl zugegeben und unter Wasserkülilung gerührt. (Nach 10-20 Minuten erhält man eine klare Lösung). Anschließend rührt man noch 1 Smnde gerührt, versetzt mit Wasser und bringt mit 4 n HCl auf pH 1-1,5.Dichloromethane added and cooled to 10 ° C. 5.5 mmol (1.375 g) of BOP-Cl are then added and the mixture is stirred with water rinsing. (A clear solution is obtained after 10-20 minutes). The mixture is then stirred for a further 1 hours, water is added and the pH is brought to 1-1.5 with 4N HCl.
Ausbeute: 62 %Yield: 62%
Ber.: C 52,16 % H 5,84 % N 10,14 % 0 20,27 % S 1 1,60 % Gef.: C 53,44 % H 6,63 % N 10,57 % S 11,66 %Calc .: C 52.16% H 5.84% N 10.14% 0 20.27% S 1 1.60% Found: C 53.44% H 6.63% N 10.57% S 11, 66%
d) N-[3-aminobenzolsulfonyl]-glycyl-{N'-[(S-benzoylmercapto)acetyl]-(2-amino- ethyl)}amid Zu einer Lösung von 552 mg des geschützten Amins hergestellt nach Beispiel 13c) (1 mmol) in 5 ml EtOAc wird eine frisch hergestellte Lösung von 3M HCl in EtOAc (10 ml, 30 mmol) zugegeben. Es wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand im Vakuum bei Raumtemperatur getrocknet. Ausbeute: 93 %d) N- [3-aminobenzenesulfonyl] glycyl- {N '- [(S-benzoylmercapto) acetyl] - (2-aminoethyl)} amide To a solution of 552 mg of the protected amine prepared according to Example 13c) (1 mmol) in 5 ml EtOAc, a freshly prepared solution of 3M HCl in EtOAc (10 ml, 30 mmol) is added. The mixture is stirred at room temperature for 30 minutes. The solvent is stripped off and the residue is dried in vacuo at room temperature. Yield: 93%
Ber. : C 46,86 % H 4,76 % N 11 ,51 % O 16,43 % S 13 , 17 % Gef.: C 45,44 % H 5,33 % N 10,57 % S 13,66 % e) N-[3-isothiocyanatobenzolsulfonyl]-glycyl-{N'-[(S-ben∑oylmercapto)acetyl]-Ber. : C 46.86% H 4.76% N 11, 51% O 16.43% S 13, 17% Found: C 45.44% H 5.33% N 10.57% S 13.66% e) N- [3-isothiocyanatobenzenesulfonyl] glycyl- {N '- [(S-ben∑oylmercapto) acetyl] -
(2-aminoethyl)}amid Zu einer Lösung von 200 mg N-[(3-Aminosulfonyl)]glycyl-{N'-[(acetyrnercapto)- acety](2-aminoethyl)}amid hergestellt nach Beispiel 13d) und 20 μl Triethylamin in 4 ml Dichlormethan wird unter Feuchtigkeitsausschluß die Lösung von 65 mg Thiophosgen in wenig Dichlormethan zugetropft und 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleibt ein Rückstand, der in Chloroform aufgenommen wird und mit 0,1 %iger Zitronensäure gewaschen, zweimal mit Natriumchlorid-Lösung und einmal mit Wasser gewaschen, getrocknet, eingeengt und chromatographiert. Ausbeute: 66 %(2-aminoethyl)} amide To a solution of 200 mg of N - [(3-aminosulfonyl)] glycyl- {N '- [(acetyrnercapto) - acety] (2-aminoethyl)} amide prepared according to Example 13d) and 20 μl Triethylamine in 4 ml dichloromethane, the solution of 65 mg thiophosgene in a little dichloromethane is added dropwise with exclusion of moisture and the mixture is stirred for 4 hours at room temperature. After the solvent has been stripped off, a residue remains which is taken up in chloroform and washed with 0.1% citric acid, washed twice with sodium chloride solution and once with water, dried, concentrated and chromatographed. Yield: 66%
Ber.: C 48,77 % H 4,09 % N 11,37 % O 16,24 % S 19,53 % Gef.: C 48,44 % H 4,63 % N 11,75 % S 20,06 %Calc .: C 48.77% H 4.09% N 11.37% O 16.24% S 19.53% Found: C 48.44% H 4.63% N 11.75% S 20.06 %
Beispiel 14Example 14
a) N-Toluolsulfonyl-0-methoxycarbm-ιylmcihyl[-N-(2-aminoethyl)tyrosinamid] In eine Lösung von 4,35 g Amin hergestellt nach Beispiel 8e) (10 mmol) in 100 ml wasserfreies Methanol wird HCl-Gas bis zur Sättigung eingeleitet und über Nacht gerührt. Nach Abziehen des Lösungsmittels verbleibt ein kristalliner Rückstand. Ausbeute: 92 %a) N-toluenesulfonyl-0-methoxycarbm-ιylmcihyl [-N- (2-aminoethyl) tyrosinamide] In a solution of 4.35 g of amine prepared according to Example 8e) (10 mmol) in 100 ml of anhydrous methanol is HCl gas until initiated to saturation and stirred overnight. After the solvent has been stripped off, a crystalline residue remains. Yield: 92%
Be:.: C 51,90 % H 5,81 % N 8,65 % 0 19,75 % S 6,60 % Gef.: C 51,59 % H 5,93 % N 8,47 % S 6,49 %Be:.: C 51.90% H 5.81% N 8.65% 0 19.75% S 6.60% Found: C 51.59% H 5.93% N 8.47% S 6, 49%
b) N-Toluolsulfonyl-0-methoxycarbonylmethyltyrosin-[N-(2-tritylmercapto)- acetylaminoethyl)]amidb) N-toluenesulfonyl-0-methoxycarbonylmethyltyrosine [N- (2-tritylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 4,35 g Amin hergestellt nach Beispiel 14a) (10 mmol) und 2,02 g Triethylamin in Tetrahydrofuran/Wasser wird bei 0° C 4,66 gTo a solution of 4.35 g of amine prepared according to Example 14a) (10 mmol) and 2.02 g of triethylamine in tetrahydrofuran / water is 4.66 g at 0 ° C
S-Tritylmercaptoessigsäure-N-hydroxysuccinimidoester (10,8 mmol) in Tetrahydrofuran unter Argon langsam zugetropft und 2 Stunden bei 0° C, anschließend 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird abgezogen und der Rückstand chromatographiert (Kieselgel, CH2C12). Ausbeute: 68 %S-Tritylmercaptoacetic acid-N-hydroxysuccinimidoester (10.8 mmol) in tetrahydrofuran was slowly added dropwise under argon and the mixture was stirred at 0 ° C. for 2 hours and then at room temperature for 12 hours. The solvent is stripped off and the residue is chromatographed (silica gel, CH 2 C1 2 ). Yield: 68%
Ber.: C 65,86 % H 5,66 % N 5,49 % O 14,62 % S 8,37 % Gef.: C 65,66 % H 5,71 % N 5,36 % S 8,21 % 36Calc .: C 65.86% H 5.66% N 5.49% O 14.62% S 8.37% Found: C 65.66% H 5.71% N 5.36% S 8.21 % 36
c) N-Toluolsulfonyl-0-carboxymethyltyrosin-[N-(2-tritylmercapto)acetyl- aminoethyl)]amid Die Lösung von 766 mg des Methylesters hergestellt nach Beispiel 14b) (1 mmol) in 2,5 ml Methanol wird zu einer methanolischen KOH-Lösung gegeben und beic) N-toluenesulfonyl-0-carboxymethyltyrosine [N- (2-tritylmercapto) acetylaminoethyl)] amide The solution of 766 mg of the methyl ester prepared according to Example 14b) (1 mmol) in 2.5 ml of methanol becomes a methanolic Given KOH solution and at
Raumtemperatur gerührt. Nach beendeter Reaktion wird das Lösungsmittel abgezogen, das Kaliumsalz in Wasser aufgenommen, schwach angesäuert und mit Chloroform extrahiert. Der organische Extrakt wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Ausbeute: 63 %Room temperature stirred. When the reaction is complete, the solvent is stripped off, the potassium salt is taken up in water, slightly acidified and extracted with chloroform. The organic extract is washed with water, dried and concentrated. Yield: 63%
Ber.: C 65,49 % H 5,50 % N 5,59 % 0 1490 % S 8,53 % Gef.: C 65,26 % H 5,72 % N 5,43 % S 8,43 %Calc .: C 65.49% H 5.50% N 5.59% 0 1490% S 8.53% Found: C 65.26% H 5.72% N 5.43% S 8.43%
d) N-Toluolsulfonyl-[(HOOC-Trp-lle-Ile Asp-Leu-His Gly-NH)- carbonylmethyltyrosin-[N-(2-tritylmercapto)acetylaminoethyl)]amid Zu einer Lösung von 1 mmol der Säure (980 mg) hergestellt nach Beispiel 14c) und 115 mg N-Hydroxysuccinimid (1 mmol) in 2 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei 0° C 206 mg Dicyclohexylcarbodiimid (1 mmol) gelöst in 2 ml Dimethylformamid innerhalb von 5 Minuten zugetropft. Es wird zunächst weitere 30 Minuten bei 0° C gerührt, anschließend die Lösung von 1 mmol des Peptids (853 mg) H2N-Gly-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp (hergestellt in Analogie zu Barany und Merrifield, The Peptides: Analysis, Biology, Academic Press New York, 1980; Steward und Young, Solid Phase Peptides Syntheses, 2nd ed.; Pierce Chemical W., Rockford, II, 1984) und 304 mg (3 mmol) Triethylamin in 10 ml wasserfreiem Dimethylformamid unterd) N-Toluenesulfonyl - [(HOOC-Trp-lle-Ile Asp-Leu-His Gly-NH) - carbonylmethyltyrosine [N- (2-tritylmercapto) acetylaminoethyl)] amide To a solution of 1 mmol of the acid (980 mg ) prepared according to Example 14c) and 115 mg of N-hydroxysuccinimide (1 mmol) in 2 ml of anhydrous dimethylformamide, 206 mg of dicyclohexylcarbodiimide (1 mmol) dissolved in 2 ml of dimethylformamide are added dropwise at 0 ° C. in the course of 5 minutes. It is first stirred for a further 30 minutes at 0 ° C., then the solution of 1 mmol of the peptide (853 mg) H2N-Gly-His-Leu-Asp-Ile-Ile-Trp (prepared in analogy to Barany and Merrifield, The Peptides : Analysis, Biology, Academic Press New York, 1980; Steward and Young, Solid Phase Peptides Syntheses, 2nd ed .; Pierce Chemical W., Rockford, II, 1984) and 304 mg (3 mmol) of triethylamine in 10 ml of anhydrous dimethylformamide
Argonatmosphäre innerhalb von 30 Minuten zugegeben. Es wird noch 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, 200 μl Eisessig zugegeben, nochmals 30 Minuten gerührt, das Produkt vom N,N'-Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und der Rückstand eingeengt. Nach Verrühren mit Diethylether verbleibt ein weißer Rückstand, der aus Dimethylformamid / Ether umkristallisiert wird. Ausbeute: 35 %Argon atmosphere added within 30 minutes. The mixture is stirred for a further 12 hours at room temperature, 200 μl glacial acetic acid are added, the mixture is stirred for another 30 minutes, the product is filtered off from the N, N'-dicyclohexylurea and the residue is concentrated. After stirring with diethyl ether, a white residue remains which is recrystallized from dimethylformamide / ether. Yield: 35%
Ber.: C 62,07 % H 6,29 % N 4,04 % 0 16,13 % S 4,04 % Gef.: C 61,77 % H 6,52 % N 4,32 % S 4,34 % e) N-Toluolsulfonyl-[(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu-His Gly-NH)carbonylJ- methyltyrosin-[N-(mercapto)acetylaminoethyl)]amidCalc .: C 62.07% H 6.29% N 4.04% 0 16.13% S 4.04% Found: C 61.77% H 6.52% N 4.32% S 4.34 % e) N-Toluenesulfonyl - [(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu-His Gly-NH) carbonylJ-methyltyrosine [N- (mercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu 10 ml Trifluoressigsäure werden unter einer Argonatmosphäre bei Raumtemperatur10 ml of trifluoroacetic acid are added under an argon atmosphere at room temperature
53 ö mg der geschützten S-Verbindung hergestellt nach Beispiel 14d) (0,3 mmol) und eine Spur Anisol gegeben und kurz zum Sieden erhitzt. Anschließend wird die53 mg of the protected S-compound prepared according to Example 14d) (0.3 mmol) and a trace of anisole and briefly heated to boiling. Then the
Trifluoressigsäure im Vakuum abgezogen, der Rückstand in Tetrahydrofuran aufgenommen, eingeengt und chromatographiert.Trifluoroacetic acid removed in vacuo, the residue taken up in tetrahydrofuran, concentrated and chromatographed.
Ausbeute: 59 %Yield: 59%
Ber.: C 56,67 % H 6,32 % N 13,42 % O 18,87 % S 4,73 % Gef.: C 56,14 % H 6,48 % N 12,98 % S 4,81 %Calc .: C 56.67% H 6.32% N 13.42% O 18.87% S 4.73% Found: C 56.14% H 6.48% N 12.98% S 4.81 %
f) Tc-99m-Komplex von N-Toluolsulfonyl-[(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu-His Gly- NH)carbonylmethyltyrosin-[N-(mercaptoacetyl)aminoethyl)]amid 1 rag der vorgenannten Verbindung (Beispiel 14e) wird in 100 μl EtOH/Wasser 1 : 1 gelöst. 50 μl dieser Lösung werden mit 100 μl eines 0,1 M Phosphatpuffers pH 9,5 und 100 μl einer Tc-99m-Gluconat-Lösung versetzt. Die Markierungsausbeute ist > 95 %. (HPLC, LiChrospher RP18, H2O/MeCN + 0,1 % TFA).f) Tc-99m complex of N-toluenesulfonyl - [(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu-His Gly-NH) carbonylmethyltyrosine [N- (mercaptoacetyl) aminoethyl)] amide 1 rag of the aforementioned compound (Example 14e ) is dissolved in 100 μl EtOH / water 1: 1. 50 μl of this solution are mixed with 100 μl of a 0.1 M phosphate buffer pH 9.5 and 100 μl of a Tc-99m gluconate solution. The labeling yield is> 95%. (HPLC, LiChrospher RP18, H 2 O / MeCN + 0.1% TFA).
Beispiel 15Example 15
a) N-Toluolsulfonyl-0-t-butyloxycarbonylmethyltyrosin-[N.(2-(benzoylmercapto)- acetylaminoethyl)]amid 2 mmol S-Benzoyl-2-mercaptoessigsäure (394 mg) und 4 mmol NEt3 (560 μl) und 2 mmol (982 mg) der nach Beispiel 8d) erhaltenen Verbindung werden mit 5 ml Dichlormethan versetzt und auf 10° C gekühlt. Anschließend werden 2 mmol (509 mg) BOP-Cl zugegeben und unter Wasserkühlung 12 Stunden gerührt, dann mit Wasser versetzt und mit 4 N HCl auf pH 1-1,5 gebracht. Anschließend wird mit Dichlormethan extrahiert, die vereinigten organischen Extrakte mit NaHCO3 und Wasser gewaschen, getrocknet, eingeengt und chromatographiert. Ausbeute: 76 %a) N-Toluenesulfonyl-0-t-butyloxycarbonylmethyltyrosine [N. (2- (benzoylmercapto) - acetylaminoethyl)] amide 2 mmol S-benzoyl-2-mercaptoacetic acid (394 mg) and 4 mmol NEt 3 (560 μl) and 2 5 ml of dichloromethane are added to mmol (982 mg) of the compound obtained according to Example 8d) and the mixture is cooled to 10 ° C. Then 2 mmol (509 mg) BOP-Cl are added and the mixture is stirred under water cooling for 12 hours, then water is added and the pH is brought to 1-1.5 with 4 N HCl. The mixture is then extracted with dichloromethane, the combined organic extracts washed with NaHCO 3 and water, dried, concentrated and chromatographed. Yield: 76%
Be:.: C 59,18 % H 5,87 % N 6,27 % 0 19,1 1 % S 9,58 % Gef.: C 60,88 % H 5,89 % N 5,63 % S 8,74 % b) N-Toluolsulfonyl-0-carboxymethyltyrosin-[N-(2-ben∑oylmercapto)acetyl- aminoethyl)]amidBe:.: C 59.18% H 5.87% N 6.27% 0 19.1 1% S 9.58% Found: C 60.88% H 5.89% N 5.63% S 8 , 74% b) N-toluenesulfonyl-0-carboxymethyltyrosine [N- (2-benzoylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu 10 ml Trifluoressigsäure werden bei Raumtemperatur 644 mg der geschützten S-644 mg of the protected S- are added to 10 ml of trifluoroacetic acid at room temperature.
Verbindung hergestellt nach Beispiel 15a) (1 mmol) gegeben und bei Raumtemperatur gerührt. Nach beendeter Reaktion wird die Trifluoressigsäure im Vakuum abgezogen, der Rückstand in Ethylcetat aufgenommen, mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt und chromatographiert.Compound prepared according to Example 15a) (1 mmol) and stirred at room temperature. When the reaction has ended, the trifluoroacetic acid is stripped off in vacuo, the residue is taken up in ethyl acetate, washed with water, dried and concentrated and chromatographed.
Ausbeute: 77 %Yield: 77%
Ber.: C 56,76 % H 5,09 % N 6,85 % 0 20,86 % S 10,45 % Gef.: C 57,14 % H 5,68 % N 7,23 % S 11,31 %Calc .: C 56.76% H 5.09% N 6.85% 0 20.86% S 10.45% Found: C 57.14% H 5.68% N 7.23% S 11.31 %
c) N-Toluolsulfonyl-[(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu-(D-Trp)-NH)carbonylmethyl- tyrosin-[N-(2-ben∑oylmercapto)acetylaminoethyl)]amidc) N-Toluenesulfonyl - [(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu- (D-Trp) -NH) carbonylmethyl-tyrosine [N- (2-ben∑oylmercapto) acetylaminoethyl)] amide
Zu einer Lösung von 1 mmol der Säure (614 mg) hergestellt nach Beispiel 15b) und 115 mg N-Hydroxysuccinimid (1 mmol) in 2 ml wasserfreiem Tetrahydofuran werden bei 0° C 206 mg Dicyclohexylcarbodiimid (1 mmol) gelöst in 2 ml Tetrahydrofuran innerhalb von 5 Minuten zugetropft. Es wird zunächst weitere 30 Minuten bei 0° C gerührt, anschließend die Lösung von 1 mmol des Peptids (845 mg) H2N-(D-Trp)-Leu- Asp-Ile-Ile-Trp (hergestellt in Analogie zu Barany und Merrifield, The Peptides: Analysis, Biology, Academic Press, New York, 1980; Steward und Young, Solid Phase Peptides Syntheses, 2nd ed.; Pierce Chemical W., Rockford, II 1984) und 304 mg (3 mmol) Triethylamin in 10 ml wasserfreiem Dimethylformamid unter Argonatmosphäre innerhalb von 30 Minuten zugegeben. Es wird noch 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, 200 μl Eisessig zugegeben, nochmals 30 Minuten gerührt, das Produkt vom N,N'-Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und der Rückstand zweimal mit siedendem Tetrahydrofuran extrahiert. Die vereinigten Filtrate werden zur Trockne eingeengt und chromatographiert. (Kieselgel, CH2C12) Ausbeute: 40 %To a solution of 1 mmol of the acid (614 mg) prepared according to Example 15b) and 115 mg of N-hydroxysuccinimide (1 mmol) in 2 ml of anhydrous tetrahydofuran are 206 mg of dicyclohexylcarbodiimide (1 mmol) dissolved in 2 ml of tetrahydrofuran at 0 ° C within added dropwise of 5 minutes. It is initially stirred for a further 30 minutes at 0 ° C., then the solution of 1 mmol of the peptide (845 mg) H 2 N- (D-Trp) -Leu-Asp-Ile-Ile-Trp (prepared in analogy to Barany and Merrifield, The Peptides: Analysis, Biology, Academic Press, New York, 1980; Steward and Young, Solid Phase Peptides Syntheses, 2nd ed .; Pierce Chemical W., Rockford, II 1984) and 304 mg (3 mmol) triethylamine in 10 ml of anhydrous dimethylformamide are added under an argon atmosphere within 30 minutes. The mixture is stirred for a further 12 hours at room temperature, 200 μl of glacial acetic acid are added, the mixture is stirred for a further 30 minutes, the product is filtered off from the N, N'-dicyclohexylurea and the residue is extracted twice with boiling tetrahydrofuran. The combined filtrates are evaporated to dryness and chromatographed. (Silica gel, CH 2 C1 2 ) yield: 40%
Ber.: C 60,86 % H 6,23 % N 10,69 % 0 17,77 % S 4,45 % Gef.: C 60,77 % H 6,42 % N 10,32 % S 4,65 %Calc .: C 60.86% H 6.23% N 10.69% 0 17.77% S 4.45% Found: C 60.77% H 6.42% N 10.32% S 4.65 %
d) Tc-99m-Komplex von N-Toluolsulfonyl-[(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu- (D-Trp) - NH)carbonylmethyltyrosin-[N-(2-mercaptoacetyl)aminoethyl)]amid 2 mg der Verbindung hergestellt nach Beispiel 15c) wird in 100 μl EtOH gelöst und mit 100 μl IN NaOH versetzt. Nach 15 Minuten werden 50 μl dieser Lösung zu 250 μl eines 0,1 M Phosphatpuffers pH 8,5 gegeben und mit 50 μl einer Citratlösung (50 mg Trinatriumcitrat in 1,0 ml Wasser) und 2,5 μl einer Zinn(II)-chlorid-Lösung (5,0 mg Zinn(II)chlorid in 1,0 ml 0,1N HCl) versetzt. Anschließend wird mit 50 μl eines Tc-99m-Generatoreluats versetzt und emeut 15 Minuten stehen gelassen. Die Markierungsausbeute (>95 %) wird mittels HPLC bestimmt.d) Tc-99m complex of N-toluenesulfonyl - [(HOOC-Trp-Ile-Ile Asp-Leu- (D-Trp) - NH) carbonylmethyltyrosine [N- (2-mercaptoacetyl) aminoethyl)] amide 2 mg of the Compound prepared according to Example 15c) is dissolved in 100 μl EtOH and mixed with 100 μl IN NaOH. After 15 minutes, 50 μl of this solution become 250 μl a 0.1 M phosphate buffer pH 8.5 and mixed with 50 μl of a citrate solution (50 mg trisodium citrate in 1.0 ml water) and 2.5 μl of a tin (II) chloride solution (5.0 mg tin (II ) chloride in 1.0 ml 0.1N HCl) added. Then 50 μl of a Tc-99m generator eluate is added and the mixture is left to stand for 15 minutes. The labeling yield (> 95%) is determined by HPLC.
Beispiel 16Example 16
a) N-Tosyl-tyrosinmethylester-4-benzylethera) N-Tosyl-tyrosine methyl ester 4-benzyl ether
Zu 50 g (155,37 mmol) Tyrosinmethylester-4-benzylether Hydrochlorid in 300 mlTo 50 g (155.37 mmol) tyrosine methyl ester 4-benzyl ether hydrochloride in 300 ml
Pyridin tropft man bei 0°C eine Lösung aus 32.58 g (171 mmol) p-Toluolsulfonsäurechlorid in 100 ml Pyridin zu und rührt 3 Stunden bei 0°C. Es wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 500 ml Methylenchlorid gelöst. Man schüttelt die organische Phase 2 mal mit 300 ml 5 N Salzsäure aus. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft.A solution of 32.58 g (171 mmol) of p-toluenesulfonyl chloride in 100 ml of pyridine is added dropwise to pyridine at 0 ° C. and the mixture is stirred at 0 ° C. for 3 hours. It is evaporated to dryness in vacuo and the residue is dissolved in 500 ml of methylene chloride. The organic phase is shaken out twice with 300 ml of 5N hydrochloric acid. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo.
Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 68,29 g eines farblosen kristallinen Pulvers erhalten.The residue is recrystallized from a little methanol. 68.29 g of a colorless crystalline powder are obtained.
Ausbeute: 93 % Ber.: C 65,58% H 5.73% N 3,19% S 7,29%Yield: 93% Calc .: C 65.58% H 5.73% N 3.19% S 7.29%
Gef.: C 65,30% H 5,81% N 3,02% S 7,18%Found: C 65.30% H 5.81% N 3.02% S 7.18%
b) 2-(4-Benzyloxybenzyl)-l-tosyl-l,4, 7 -triazaheptan-3-on 45 g (102,38 mmol) der Titelsubstanz aus Beispiel 16a) werden innerhalb 1 Stunde in 1 1b ) 2- (4-benzyloxybenzyl) -l-tosyl-l, 4,7-triazaheptan-3-one 45 g (102.38 mmol) of the title substance from Example 16a) are dissolved in 1 l within 1 hour
1.2 Diaminoethan eingetragen und anschließend 3 Stunden bei 80°C gerührt. Man dampft den Rückstand zur Trockene ein und rührt den Rückstand in 200 ml Wasser aus.1.2 introduced diaminoethane and then stirred at 80 ° C for 3 hours. The residue is evaporated to dryness and the residue is stirred in 200 ml of water.
Der Niederschlag wird abgesaugt und mit viel Wasser nachgewaschen. Dann wird überThe precipitate is filtered off and washed with plenty of water. Then over
Nacht im Vakuum bei 60°C getrocknet.Es werden 46,91 g eines cremefarbenen, amorphen Pulvers erhalten.Dried overnight in vacuo at 60 ° C. 46.91 g of a cream-colored, amorphous powder are obtained.
Ausbeute: 98 %Yield: 98%
Ber.: C 64,22% H 6.25% N 8,95% S 6,86%Calc .: C 64.22% H 6.25% N 8.95% S 6.86%
Gef.: C 64,05% H 6,17% N 9,05% S 6.78%Found: C 64.05% H 6.17% N 9.05% S 6.78%
c) 9-Chloro-2-(4-benzyloxyben∑yl)-l-tosyl-l, 4, 7-triaza-nonan-3,8-dionc) 9-Chloro-2- (4-benzyloxyben∑yl) -l-tosyl-l, 4, 7-triaza-nonane-3,8-dione
10 g (21,39 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16b) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 2,38 g (23,53 mmol) Triethylamin zugesetzt. Bei 0°C werden 2,66 g (23,53 mmol) Chloracetylchlorid in 20 ml Chloroform innerhalb 30 Minuten zugetropft. Man rührt 30 Minuten bei 0°C. Es werden 200 ml 1 N Salzsäure zugesetzt und kräftig durchgeschüttelt. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 10,36 g eines cremefarbenen, kristallinen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 89 %10 g (21.39 mmol) of the title compound from Example 16b) are dissolved in 100 ml of chloroform and 2.38 g (23.53 mmol) of triethylamine are added. At 0 ° C, 2.66 g (23.53 mmol) of chloroacetyl chloride in 20 ml of chloroform was added dropwise within 30 minutes. The mixture is stirred at 0 ° C. for 30 minutes. 200 ml of 1N hydrochloric acid are added and shaken vigorously. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 10.36 g of an off-white, crystalline solid are obtained. Yield: 89%
Ber.: C 59,61% H 5,56% N 7,72% S 5,89% Cl 6,52%Calc .: C 59.61% H 5.56% N 7.72% S 5.89% Cl 6.52%
Gef.: C 59,50% H 5,69% N 7,55% S 5,71% Cl 6,38%Found: C 59.50% H 5.69% N 7.55% S 5.71% Cl 6.38%
d) 10-Benzoyl-2-(4-benzyloxybenzyl)-l-tosyl-10-thia-l,4, 7-tria∑adeean-3,8-dion 9 g (16,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16c) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 1,67 g (16,54 mmol) Triethylamin zugesetzt. Anschließend gibt man 2,29 g (16.54 mmol) Thiobenzoesäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und schüttelt einmal mit 2 N Salzsäure und einmal mit einer 5 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 9,61 g eines farblosen, kristallinen Pulvers erhalten. Ausbeute: 90 %d) 10-benzoyl-2- (4-benzyloxybenzyl) -l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-tria∑adeean-3,8-dione 9 g (16.54 mmol) of the title compound from Example 16c ) are dissolved in 100 ml of chloroform and 1.67 g (16.54 mmol) of triethylamine are added. Then 2.29 g (16.54 mmol) of thiobenzoic acid are added and the mixture is refluxed for 10 minutes. The mixture is cooled to room temperature and shaken once with 2N hydrochloric acid and once with a 5% sodium carbonate solution. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 9.61 g of a colorless, crystalline powder are obtained. Yield: 90%
Ber.: C 63,24% H 5,46% N 6,51% S 9,93% Gef.: C 63,15% H 5,57% N 6,40% S 9,81%Calc .: C 63.24% H 5.46% N 6.51% S 9.93% Found: C 63.15% H 5.57% N 6.40% S 9.81%
Beispiel 17Example 17
a) 10-Acetyl-2-(4-ben∑yloxyben∑yl)-l-tosyl-10-thia-l,4, 7-triazadecan-3,8-dion 9 g (16,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16c) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 1,67 g (16,54 mmol) Triethylamin zugesetzt. Anschließend gibt man 1,28 g (16.54 mmol) Thioessigsäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperatur, schüttelt mit 2 N Salzsäure und anschließend mit einer 5 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Aceton umkristallisiert. Es werden 8,20 g cremefarbene Kristalle erhalten. Ausbeute: 85 %a) 10-Acetyl-2- (4-ben∑yloxyben∑yl) -l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3,8-dione 9 g (16.54 mmol) of the title compound Example 16c) are dissolved in 100 ml of chloroform and 1.67 g (16.54 mmol) of triethylamine are added. Then 1.28 g (16.54 mmol) of thioacetic acid are added and the mixture is refluxed for 10 minutes. It is cooled to room temperature, shaken with 2 N hydrochloric acid and then with a 5% sodium carbonate solution. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little acetone. 8.20 g of cream-colored crystals are obtained. Yield: 85%
Ber.: C 59,67% H 5,70% N 7,20% S 10,98% Gef.: C 59,51% H 5,81% N 7,05% S 10,80% HCalc .: C 59.67% H 5.70% N 7.20% S 10.98% Found: C 59.51% H 5.81% N 7.05% S 10.80% H
Beispiel 18Example 18
a) 10- Trifluoracetyl-2-(4-benzyloxybenzyl) - 1 -tosyl- 10-thia- 1 , 4, 7-tria∑adecan- 3,8-diona) 10- Trifluoroacetyl-2- (4-benzyloxybenzyl) -1-tosyl-10-thia-1, 4, 7-tria∑adecan- 3,8-dione
9 g (16,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16c) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 1,67 g (1654 mmol) Trifluormethylthioessigsäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperamr, schüttelt mit 2 N Salzsäure und anschließend mit einer 1 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Aceton Ether umkristallisiert. Es werden 8,75 g farbloser Kristalle erhalten. Ausbeute: 83 %9 g (16.54 mmol) of the title compound from Example 16c) are dissolved in 100 ml of chloroform and 1.67 g (1654 mmol) of trifluoromethylthioacetic acid and boiled under reflux for 10 minutes. It is cooled to room temperature, shaken with 2N hydrochloric acid and then with a 1% sodium carbonate solution. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little acetone ether. 8.75 g of colorless crystals are obtained. Yield: 83%
Ber.: C 54,62% H 4,74% N 6,59% S 10,05% F 8,94% Gef.: C 54,47% H 4,61% N 6,50% S 9,90% F 8,81%Calc .: C 54.62% H 4.74% N 6.59% S 10.05% F 8.94% Found: C 54.47% H 4.61% N 6.50% S 9.90 % F 8.81%
Beispiel 19Example 19
a) N-Mesyl-tyrosinmethylester-4-ben∑ylether Zu 50 g (155,37 mmol) Tyrosinmethylester-4-benzylether Hydrochlorid in 300 ml Pyridin tropft man bei 0°C 19,58 g (171 mmol) Methansulfonsäurechlorid und rührt 3 Stunden bei 0°C. Es wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand in 500 ml Methylenchlorid gelöst. Man schüttelt die organische Phase 2 mal mit 300 ml 5 N Salzsäure aus. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 53,64 g eines farblosen, kristallinen Pulvers erhalten. Ausbeute: 95 %a) N-Mesyl-tyrosine methyl ester 4-benzyl ether To 50 g (155.37 mmol) tyrosine methyl ester 4-benzyl ether hydrochloride in 300 ml pyridine are added dropwise at 0 ° C 19.58 g (171 mmol) methanesulfonic acid chloride and stirred 3 Hours at 0 ° C. It is evaporated to dryness in vacuo and the residue is dissolved in 500 ml of methylene chloride. The organic phase is shaken out twice with 300 ml of 5N hydrochloric acid. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 53.64 g of a colorless, crystalline powder are obtained. Yield: 95%
Ber.: C 59,49% H 5,82% N 3,85% S 8,82% Gef.: C 59,30% H 5,95% N 3,71% S 8,70%Calc .: C 59.49% H 5.82% N 3.85% S 8.82% Found: C 59.30% H 5.95% N 3.71% S 8.70%
b ι 2-(4-Benzyloxybenzyl)-l-mesyl-l, 4, l-triazaheptan-3-onb ι 2- (4-Benzyloxybenzyl) -l-mesyl-l, 4, l-triazaheptan-3-one
3 ".2 g (102,38 mmol) der Titelsubstanz aus Beispiel 19a) werden innerhalb 1 Stunde in 1 Liter 1,2 Diaminoethan eingetragen und anschließend 3 Stunden bei 80°C gerührt. Man dampft den Rückstand zur Trockene ein und rührt den Rückstand in 200 ml Wasser aus. Der Niederschlag wird abgesaugt und mit viel Wasser nachgewaschen. Dann wird über Nacht im Vakuum bei 60°C getrocknet. Es werden 37,68 g eines cremefarbenen, amorphen Pulvers erhalten. Ausbeute: 97 %3 " .2 g (102.38 mmol) of the title substance from Example 19a) are introduced into 1 liter of 1,2 diaminoethane within 1 hour and then stirred for 3 hours at 80 ° C. The residue is evaporated to dryness and the residue is stirred in 200 ml of water, the precipitate is filtered off with suction and washed with plenty of water, then dried overnight in vacuo at 60 ° C. 37.68 g of an off-white, amorphous powder are obtained. Yield: 97%
Ber.: C 56,97% H 6,64% N 11,07% S 8,45%Calc .: C 56.97% H 6.64% N 11.07% S 8.45%
Gef.: C 56,81% H 6,72% N 10,93% S 8,32%Found: C 56.81% H 6.72% N 10.93% S 8.32%
c) 9-Chloro-2-(4-benzyloxybenzyl)-l-mesyl-l, 4, 7-triaza-nonan-3,8-dionc) 9-Chloro-2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-1,4,4,7-triaza-nonane-3,8-dione
10 g (26,35 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19b) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 2,93 g (28,99 mmol) Triethylamin zugesetzt. Bei 0°C werden 3,27 g10 g (26.35 mmol) of the title compound from Example 19b) are dissolved in 100 ml of chloroform and 2.93 g (28.99 mmol) of triethylamine are added. At 0 ° C, 3.27 g
(28,99 mmol) Chloracetylchlorid in 20 ml Chloroform innerhalb 30 Minuten zugetropft. Man rührt 30 Minuten bei 0°C. Es werden 200 ml 1 N Salzsäure zugesetzt und kräftig durchgeschüttelt. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 10,93 g eines cremefarbenen kristallinen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 91 %(28.99 mmol) chloroacetyl chloride in 20 ml chloroform added dropwise within 30 minutes. The mixture is stirred at 0 ° C. for 30 minutes. 200 ml of 1N hydrochloric acid are added and shaken vigorously. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 10.93 g of a cream-colored crystalline solid are obtained. Yield: 91%
Ber.: C 52,68% H 5,75% N 9,22% S 7,03% Cl 7,78% Gef.: C 52,51% H 5,82% N 9,13% S 6,90% Cl 7,68%Calc .: C 52.68% H 5.75% N 9.22% S 7.03% Cl 7.78% Found: C 52.51% H 5.82% N 9.13% S 6.90 % Cl 7.68%
d) 10-Benzoyl-2-(4-benzyloxybenzyl)-l-mesyl-10-thia-l,4, 7 -triaza-decan- ,8-dion 7,54 g (16,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16c) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 1,67 g (16,54 mmol) Triethylamin zugesetzt. Anschließend gibt man 2,29 g (16,54 mmol) Thiobenzoesäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und schüttelt einmal mit 2 N Salzsäure und einmal mit einer 5 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Die organische Phase wird überd) 10-benzoyl-2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-10-thia-l, 4,7,7-triaza-decan-, 8-dione 7.54 g (16.54 mmol) of the title compound from example 16c) are dissolved in 100 ml of chloroform and 1.67 g (16.54 mmol) of triethylamine are added. Then 2.29 g (16.54 mmol) of thiobenzoic acid are added and the mixture is refluxed for 10 minutes. The mixture is cooled to room temperature and shaken once with 2N hydrochloric acid and once with a 5% sodium carbonate solution. The organic phase is over
Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 8,1 1 g eines farblosen, kristallinen Pulvers erhalten. Ausbeute: 88 % Ber.: C 58,15% H 5,60% N 7,53% S 11.50% Gef.: C 58,03% H 5,71% N 7,61% S 11,38%Magnesium sulfate dried and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 8.1 1 g of a colorless, crystalline powder are obtained. Yield: 88% Calc .: C 58.15% H 5.60% N 7.53% S 11.50% Found: C 58.03% H 5.71% N 7.61% S 11.38%
Beispiel 20Example 20
a) 9-Chloro-2-(4-hydroxybenzyl)-l-tosyl-l, 4, 7-triazanonan-3, 8-dion 20 g (36,76 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16c) werden in 200 ml Methylenchlorid gelöst und 2 ml Eisessig zugegeben. Dann werden 3 g Palladium- Katalysator (10 % Pd C) zugesetzt und über Nacht hydriert. Man filtriert vom Katalysator ab und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Es werden 16,52 g eines amorphen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 99 % Be:.: C 52,92% H 5,33% N 9,26% S 7,06% Cl 7,81%a) 9-Chloro-2- (4-hydroxybenzyl) -l-tosyl-l, 4, 7-triazanonan-3, 8-dione 20 g (36.76 mmol) of the title compound from Example 16c) are dissolved in 200 ml of methylene chloride dissolved and 2 ml of glacial acetic acid added. Then 3 g of palladium Catalyst (10% Pd C) added and hydrogenated overnight. The catalyst is filtered off and evaporated to dryness in vacuo. 16.52 g of an amorphous solid are obtained. Yield: 99% Be:.: C 52.92% H 5.33% N 9.26% S 7.06% Cl 7.81%
Gef.: C 52,81% H 5,26% N 9,l l% S 6,93% Cl 7,72%Found: C 52.81% H 5.26% N 9.1 l% S 6.93% Cl 7.72%
b) 9-Chloro-2-(4-palmitoyloxybenzyl)-l -tosyl-1 , 4, 7-tria∑anonan-3, 8-dion 10 g (22,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20a) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 2,45 g (23,53 mmol) Triethylamin zugesetzt. Bei 0°C tropft man innerhalb 10 Minuten 6,66 g (24,23 mmol) Palmitinsäurechlorid zu und rührt 2 Stunden bei dieser Temperatur nach. Man schüttelt mit 200 ml 2 N Salzsäure aus, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid Aceton=20:l). Es werden 11,90 g eines wachsartigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 78 %b) 9-chloro-2- (4-palmitoyloxybenzyl) -1-tosyl-1,4,7-tria∑anonan-3,8-dione 10 g (22.03 mmol) of the title compound from Example 20a) are dissolved in 100 ml of chloroform dissolved and 2.45 g (23.53 mmol) of triethylamine added. At 0 ° C., 6.66 g (24.23 mmol) of palmitic acid chloride are added dropwise in the course of 10 minutes and the mixture is subsequently stirred at this temperature for 2 hours. It is shaken with 200 ml of 2N hydrochloric acid, the organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride acetone = 20: 1). 11.90 g of a waxy solid are obtained. Yield: 78%
Be:.: C 62,45% H 7,86% N 6,07% S 4,63% Cl 5,12%Be:.: C 62.45% H 7.86% N 6.07% S 4.63% Cl 5.12%
Gef.: C 62,28% H 7,70% N 5,89% S 4,54% Cl 4,98%Found: C 62.28% H 7.70% N 5.89% S 4.54% Cl 4.98%
c) 10-Benzoyl-2-(4-palmitoyloxybenzyl)-l-tosyl-10-thia-l,4, 7-triazadecan-3,8-dion 8 g (11,55 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20b) werden in 100 ml Chloroform gelöst und 1,17 g (11,55 mmol) Triethylamin zugesetzt. Anschließend gibt man 1,60 g (1 1 ,55 mmol) Thiobenzoesäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und schüttelt einmal mit 2 N Salzsäure und einmal mit einer 5 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Nach Trocknung über Magnesiumsulfat wird die organische Phase im Vakuum eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Hexan/Aceton: 20:10:1). Es werden 8,53 g farbloser Blättchen (aus Ether) erhalten. Ausbeute: 93 %c) 10-Benzoyl-2- (4-palmitoyloxybenzyl) -l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3,8-dione 8 g (11.55 mmol) of the title compound from Example 20b) dissolved in 100 ml of chloroform and 1.17 g (11.55 mmol) of triethylamine added. Then 1.60 g (11.55 mmol) of thiobenzoic acid are added and the mixture is boiled under reflux for 10 minutes. The mixture is cooled to room temperature and shaken once with 2N hydrochloric acid and once with a 5% sodium carbonate solution. After drying over magnesium sulfate, the organic phase is evaporated in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: methylene chloride / hexane / acetone: 20: 10: 1). 8.53 g of colorless leaflets (from ether) are obtained. Yield: 93%
Be:.: C 65,04% H 7,49% N 5,29% S 8,07% Gef.: C 64,90% H 7,55% N 5,17% S 7,91% Beispiel 21Be:.: C 65.04% H 7.49% N 5.29% S 8.07% Found: C 64.90% H 7.55% N 5.17% S 7.91% Example 21
a) Phenolester vom 3-Cholesterinbernsteinsάurehalbester mit 9-Chlor- 2-(4-hydroxybenzyl)-l-tosyl-l,4, 7-triazanonan 3,8-dion 10 g (22,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 20a) und 10,72 g (22,03 mmol) Cholesterinbernsteinsäurehalbester werden in 49 ml Dimethylformamid gelöst und auf 0°C abgekühlt. Dann werden 300 mg 4-DimethyIaminopyridin und 5,45 g (26,44 mmol) Dicyclohexylcarbonyl zugesetzt und 3 h bei 0°C gerührt. Über Nacht läßt man bei Raumtemperatur rühren. Es werden 50 ml Ether zugesetzt und vom ausgefallenen Harnstoff abfiltriert, das Filtrat wird mit 250 ml Essigester verdünnt und 5 mal mit 200 ml Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel (Laufrnittel: MethylenchloridVHexan/Essigester= 10:5:1) chromatographiert. Es werden 17,60 g eines wachsartigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 78 %a) phenol ester of 3-cholesterol succinic acid half-ester with 9-chloro-2- (4-hydroxybenzyl) -l-tosyl-l, 4, 7-triazanonane 3,8-dione 10 g (22.03 mmol) of the title compound from Example 20a) and 10.72 g (22.03 mmol) of cholesterol succinic acid semiesters are dissolved in 49 ml of dimethylformamide and cooled to 0 ° C. Then 300 mg of 4-dimethylaminopyridine and 5.45 g (26.44 mmol) of dicyclohexylcarbonyl are added and the mixture is stirred at 0 ° C. for 3 h. The mixture is stirred overnight at room temperature. 50 ml of ether are added and the precipitated urea is filtered off, the filtrate is diluted with 250 ml of ethyl acetate and extracted 5 times with 200 ml of water. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (running medium: methylene chloride / hexane / ethyl acetate = 10: 5: 1). 17.60 g of a waxy solid are obtained. Yield: 78%
Ber.: C 66,39% H 7,87% N 4,55% S 3.48% Cl 3,84%Calc .: C 66.39% H 7.87% N 4.55% S 3.48% Cl 3.84%
Gef.: C 66,28% H 7,95% N 4,47% S 3,31% Cl 3,70%Found: C 66.28% H 7.95% N 4.47% S 3.31% Cl 3.70%
b) Phenolester vom Cholesterinbernsteinsäurehalbester mit 10-Benzoyl-2- (4-hydroxybenzyl) 1 -tosyl-10-lhicι-l , 4, 7-iria∑adecan-3, 8-dion 6 g (6,50 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 21a) werden in 50 ml Chloroform gelöst und 0,66 g (6,50 mmol) Triethylamin zugesetzt. Anschließend gibt man 0,9 g (6.50 mmol) Thiobenzoesäure zu und kocht 10 Minuten unter Rückfluß. Man kühlt auf Raumtemperatur ab und schüttelt einmal mit 2 N Salzsäure und einmal mit einer 5 %igen Natriumcarbonatlösung aus. Die organische Phase wird abgetrennt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Eindampfen im Vakuum wird der Rückstand aus Methyl-tert.-butylether umkristallisiert. Es werden 6,06 g wachsartiger Blättchen erhalten. Ausbeute: 91 %b) Phenolester from cholesterol succinic acid half-ester with 10-benzoyl-2- (4-hydroxybenzyl) 1 -tosyl-10-lhicι-l, 4, 7-iriaecadecan-3, 8-dione 6 g (6.50 mmol) of the title compound from Example 21a) are dissolved in 50 ml of chloroform and 0.66 g (6.50 mmol) of triethylamine are added. Then 0.9 g (6.50 mmol) of thiobenzoic acid are added and the mixture is boiled under reflux for 10 minutes. The mixture is cooled to room temperature and shaken once with 2N hydrochloric acid and once with a 5% sodium carbonate solution. The organic phase is separated off and dried over magnesium sulfate. After evaporation in vacuo, the residue is recrystallized from methyl tert-butyl ether. 6.06 g of waxy flakes are obtained. Yield: 91%
Ber.: C 68,01% H 7,58% N 4,10% S 6.26% Gef.: C 67,85% H 7,43% N 3,98% S 6,17% Beispiel 22Calc .: C 68.01% H 7.58% N 4.10% S 6.26% Found: C 67.85% H 7.43% N 3.98% S 6.17% Example 22
a) 7-N-(tert. -Butoxycarbonyl)-2-(4-benzyloxyben∑yl)-l-tosyl-l, 4, 7 -triazaheptan- 3-on 20 g (42,77 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 16b) werden in 200 ml Chloroform gelöst und 4,76 g (47,05 mmol) Triethylamin zugegeben. Bei 0°C wird eine Lösung aus 10-27 g (47,05 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat in 50 ml Chloroform zugetropft und 30 Minuten bei 0°C gerührt. Anschließend wird 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man schüttelt 3 mal mit 5 %iger Natriumcarbonatlösung aus, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum ein. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 22,34 g farblose Kristalle erhalten. Ausbeute: 92 %a) 7-N- (tert -Butoxycarbonyl) -2- (4-benzyloxyben∑yl) -l-tosyl-l, 4, 7 -triazaheptan- 3-one 20 g (42.77 mmol) of the title compound from Example 16b) are dissolved in 200 ml of chloroform and 4.76 g (47.05 mmol) of triethylamine are added. A solution of 10-27 g (47.05 mmol) of di-tert-butyl dicarbonate in 50 ml of chloroform is added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at 0 ° C. for 30 minutes. The mixture is then stirred at room temperature for 5 hours. It is shaken 3 times with 5% sodium carbonate solution, the organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 22.34 g of colorless crystals are obtained. Yield: 92%
Be:.: C 63,47% H 6,57% N 7,40% S 5,65% Ge:.: C 63,31% H 6,42% N 7,45% S 5,49%Be:.: C 63.47% H 6.57% N 7.40% S 5.65% Ge:.: C 63.31% H 6.42% N 7.45% S 5.49%
b) 7-N-tert. -Butoxycarbonyl-2-(4-hydroxybenzyl)-l-tosyl-l,4, 7 -tria∑aheptan-3-on 21 g (36,99 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22a) werden in 300 ml Methylen- chiorid gelöst und 4 g Palladium-Katalysator ( 10 % Pd/C) zugegeben. Man hydriert über Nacht. Der Katalysator wird abfiltriert und das Filüat zur Trockene eingeengt. Es werdenb) 7-N-tert. -Butoxycarbonyl-2- (4-hydroxybenzyl) -l-tosyl-l, 4, 7 -tria∑aheptan-3-one 21 g (36.99 mmol) of the title compound from Example 22a) are dissolved in 300 ml of methylene chloride and 4 g of palladium catalyst (10% Pd / C) added. One hydrates overnight. The catalyst is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness. It will
16.39 g eines glasigen Schaumes erhalten, der nach kurzer Zeit erstarrt.Obtained 16.39 g of a glassy foam which solidifies after a short time.
Ausbeute: 99 %Yield: 99%
Be:.: C 57,84% H 6,54% N 8,80% S 6,71%Be:.: C 57.84% H 6.54% N 8.80% S 6.71%
Gef.: C 57,70% H 6,61% N 8,69% S 6,54%Found: C 57.70% H 6.61% N 8.69% S 6.54%
c) 7-N-tert. Butoxycarbonyl-2-[4-(benzyloxycarbonylmethyloxy)-benzyl]-l-tosyl- 1,4, 7-tria∑aheptan-3-onc) 7-N-tert. Butoxycarbonyl-2- [4- (benzyloxycarbonylmethyloxy) benzyl] -l-tosyl-1,4, 7-tria traheptan-3-one
15 g (33,51 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22b), 7,68 g (33,51 mmol) Bromessigsäurebenzylester und 13,8 g (100 mmol) Kaliumcarbonat werden in 300 ml Acetonitril 24 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Man filtriert von den Salzen ab und engt das Filtrat zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 200 ml Methylenchlorid gelöst und 2 ma mit 100 ml Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid Hexan/Aceton: 20/10/1). Es werden 10.69 g eines farblosen Öls erhalten. Ausbeute: 51% Be:.: C 61,42% H 6,28% N 6,72% S 5,12% Gef.: C 61,27% H 6,09% N 6,68% S 5.03%15 g (33.51 mmol) of the title compound from Example 22b), 7.68 g (33.51 mmol) of benzyl bromoacetate and 13.8 g (100 mmol) of potassium carbonate are heated under reflux in 300 ml of acetonitrile for 24 hours. The salts are filtered off and the filtrate is evaporated to dryness. The residue is dissolved in 200 ml of methylene chloride and extracted 2 times with 100 ml of water. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride hexane / acetone: 20/10/1). 10.69 g of a colorless oil are obtained. Yield: 51% Be:.: C 61.42% H 6.28% N 6.72% S 5.12% Found: C 61.27% H 6.09% N 6.68% S 5.03%
d) l-Tosyl-2-(4-(ben∑yloxycarbonylmethyloxy)-ben∑yl)-l,4, 7-tria∑aheptan-3-on (als Trifluoracetat-Sal∑) 10 g (15,98 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22c) werden 1 Stunde in 100 ml Trifluoressigsäure bei Raumtemperatur gerührt. Man engt im Vakuum zur Trockene ein. Es werden 10,22 g eines glasigen Schaumes erhalten, der beim Stehenlassen erstarrt. Ausbeute: 100 %d) l-tosyl-2- (4- (ben∑yloxycarbonylmethyloxy) -ben∑yl) -l, 4, 7-tria∑aheptan-3-one (as trifluoroacetate sal∑) 10 g (15.98 mmol) the title compound from Example 22c) are stirred for 1 hour in 100 ml of trifluoroacetic acid at room temperature. It is evaporated to dryness in a vacuum. 10.22 g of a glassy foam are obtained, which solidifies on standing. Yield: 100%
Ber.: C 54,45% H 5,04% N 6,57% S 5,01% F 8,91%Calc .: C 54.45% H 5.04% N 6.57% S 5.01% F 8.91%
Gef.: C 54,51% H 5,10% N 6,43% S 4,89% F 9,15%Found: C 54.51% H 5.10% N 6.43% S 4.89% F 9.15%
e) 9-chloro-2-(4-(benzyloxycarbonylmethyloxy)-ben∑yl)-l-tosyl-l,4, 7-tria∑anonan- 3,8-dion 10 g (15,63 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22d) und 4,75 g (46,90 mmol) Triethylamin werden in 200 ml Chloroform gelöst. Bei 0°C werden 1,94 g (17,19 mmol) Chloracetylchlorid innerhalb 30 Minuten zugetropft und anschließend 2 Stunden bei 0°C gerührt. Die organische Phase wird 2 mal mit 5 %iger Salzsäure und 2 mal mit Wasser ausgeschüttelt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel:
Figure imgf000051_0001
20:1). Es werden 7,62 g eines wachsartigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 81 %e) 9-chloro-2- (4- (benzyloxycarbonylmethyloxy) -ben∑yl) -l-tosyl-l, 4, 7-tria∑anonan- 3,8-dione 10 g (15.63 mmol) of the title compound Example 22d) and 4.75 g (46.90 mmol) of triethylamine are dissolved in 200 ml of chloroform. 1.94 g (17.19 mmol) of chloroacetyl chloride are added dropwise at 0 ° C. in the course of 30 minutes and the mixture is then stirred at 0 ° C. for 2 hours. The organic phase is extracted twice with 5% hydrochloric acid and twice with water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent:
Figure imgf000051_0001
20: 1). 7.62 g of a waxy solid are obtained. Yield: 81%
Ber.: C 57,85% H 5,36% N 6,98% S 5,32% Cl 5,89% Gef.: C 57,70% H 5,49% N 6,82% S 5,25% Cl 5,78%Calc .: C 57.85% H 5.36% N 6.98% S 5.32% Cl 5.89% Found: C 57.70% H 5.49% N 6.82% S 5.25 % Cl 5.78%
f) 9-Chloro-2-(4-(carboxymethyloxy)-benzyl)-l -tosyl-1 ,4, 7 -triazanonan- ,8-dionf) 9-chloro-2- (4- (carboxymethyloxy) benzyl) -l-tosyl-1, 4, 7 -triazanonan-, 8-dione
7 g (11,63 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22e) werden in 150 ml Methylenchlorid gelöst und mit 2 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) versetzt. Man hydriert über Nacht. Der Katalysator wird abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingedampft. Es werden 5,89 g eines glasigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 99 %7 g (11.63 mmol) of the title compound from Example 22e) are dissolved in 150 ml of methylene chloride and 2 g of palladium catalyst (10% Pd / C) are added. One hydrates overnight. The catalyst is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness in vacuo. 5.89 g of a glassy solid are obtained. Yield: 99%
Ber.: C 51,61% H 5,12% N 8,21% S 6,26% Cl 6,92%Calc .: C 51.61% H 5.12% N 8.21% S 6.26% Cl 6.92%
Gef.: C 51,45% H 5,03% N 8,13% S 6,1 1% Cl 6,79% g) 10-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-ben∑yl)-l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-tria∑adecan-3,8- dionFound: C 51.45% H 5.03% N 8.13% S 6.1 1% Cl 6.79% g) 10-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) -ben∑yl) -l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-tria∑adecan-3,8-dione
5 g (9,77 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22f) werden in 80 ml Chloroform gelöst und 1 ,98 g (19,53 mmol) Triethylamin zugesetzt. Man gibt 0,74 g (9,77 mmol)5 g (9.77 mmol) of the title compound from Example 22f) are dissolved in 80 ml of chloroform and 1.98 g (19.53 mmol) of triethylamine are added. 0.74 g (9.77 mmol) is added
Thioessigsäure zu und erhitzt 10 Minuten unter Rückfluß. Die Lösung wird in 200 ml eisgekühlte 5 %ige Salzsäure gegossen und kräftig gerührt. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Chromatographische Aufreinigung an Kieselgel (Laufmittel: Hexan Essigsäureethylester= 3: 1) ergibt 4,47 g der Titelverbindung als glasigenThioacetic acid and heated under reflux for 10 minutes. The solution is poured into 200 ml of ice-cooled 5% hydrochloric acid and stirred vigorously. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. Chromatographic purification on silica gel (mobile phase: hexane / ethyl acetate = 3: 1) gives 4.47 g of the title compound as a glassy one
Feststoff.Solid.
Ausbeute: 83 %Yield: 83%
Ber.: C 52,26% H 5,30% N 7,62% S 1 1 ,62%Calc .: C 52.26% H 5.30% N 7.62% S 1 1.62%
Gef.: C 52,1 1% H 5,39% N 7,50% S 1 1.49%Found: C 52.1 1% H 5.39% N 7.50% S 1 1.49%
h) N-Hydroxysuccinimidester von 10-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-benzyl)-l-tosyl- 10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8-dionh) N-hydroxysuccinimide ester of 10-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) benzyl) -l-tosyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8-dione
4 g (7,25 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22g), 1,65 g (7,98 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid, 30 mg 4-Dimethylaminopyridin und 0,92 g (7,98 mmol)4 g (7.25 mmol) of the title compound from Example 22g), 1.65 g (7.98 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide, 30 mg of 4-dimethylaminopyridine and 0.92 g (7.98 mmol)
N-Hydroxysuccinimid werden bei 0°C in 20 ml Chloroform gelöst und 1 Stunde bei dieser Temperatur gerührt. Anschließend wird 24 Stunden bei Raumtemperatur weiter gerührt. Man setzt 20 ml Ether zu, saugt den ausgefallenen Dicyclohexylhamstoff ab und engt das Filtrat im Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Dioxan= 10: 1). Es werden 4,09 g eines farblosenN-hydroxysuccinimide are dissolved in 20 ml of chloroform at 0 ° C. and stirred at this temperature for 1 hour. Then stirring is continued for 24 hours at room temperature. 20 ml of ether are added, the precipitated dicyclohexylurea is filtered off with suction and the filtrate is concentrated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: methylene chloride / dioxane = 10: 1). There are 4.09 g of a colorless
Feststoffes erhalten.Get solid.
Ausbeute: 87 %Yield: 87%
Ber.: C 51,84% H 4,97% N 8,64% S 9,88%Calc .: C 51.84% H 4.97% N 8.64% S 9.88%
Gef.: C 51,68% H 4,80% N 8,53% S 9,68%Found: C 51.68% H 4.80% N 8.53% S 9.68%
Beispiel 23Example 23
a) 4-Nitrophenolester von 10-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-ben∑yl)-l-tosyl-10- thia- 1 , 4, 7-tria∑adecan-3, 8-diona) 4-nitrophenol esters of 10-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) -ben∑yl) -l-tosyl-10-thia-1, 4, 7-tria∑adecan-3, 8-dione
4 g (7,25 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22g), 1,1 1 g (7,97 mmol) 4-Nitrophenol, 30 mg 4-Dimethylaminopyridin und 1,65 g (7,97 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid werden bei 0°C in 20 ml Chloroform gelöst und 3 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Dann wird 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man setzt 20 ml Ether zu, saugt vom ausgefallenen Niederschlag ab und dampft das Filtrat im4 g (7.25 mmol) of the title compound from Example 22g), 1.1 1 g (7.97 mmol) of 4-nitrophenol, 30 mg of 4-dimethylaminopyridine and 1.65 g (7.97 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are at 0 ° C dissolved in 20 ml of chloroform and at 3 hours this temperature stirred. Then the mixture is stirred at room temperature for 24 hours. 20 ml of ether are added, the precipitate which has separated out is filtered off with suction and the filtrate is evaporated in
Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel:Vacuum on. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent:
Methylenchlorid/Dioxan= 15: 1). Es werden 3,85 g eines cremefarbenen Feststoffes erhalten.Methylene chloride / dioxane = 15: 1). 3.85 g of an off-white solid are obtained.
Ausbeute: 79 %Yield: 79%
Ber.: C 53,56% H 4,79% N 8,33% S 9,53%Calc .: C 53.56% H 4.79% N 8.33% S 9.53%
Gef.: C 53,41% H 4,63% N 8,17% S 9,38%Found: C 53.41% H 4.63% N 8.17% S 9.38%
Beispiel 24Example 24
a) Pentaßuorphenolester von 10-A cetyl-2-(4- (carboxymethyloxy) -benzyl) - 1 -tosyl- 10-thia-l, 4, 7-tria∑adecan-3, -dion 4 g (7,25 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22g), 1,47 g (7,97 mmol) Pentafluor- phenol, 30 mg 4-Dimethylaminopyridin und 1,65 g (7,97 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid werden bei 0°C in 20 ml Chloroform gelöst und 3 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Dann wird 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man setzt 20 ml Ether zu, saugt vom ausgefallenen Niederschlag ab und dampft das Filtrat im Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel:a) Pentassuorphenolester of 10-A cetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) benzyl) -1-tosyl-10-thia-l, 4, 7-tria -adecan-3, -dione 4 g (7.25 mmol ) of the title compound from Example 22g), 1.47 g (7.97 mmol) of pentafluorophenol, 30 mg of 4-dimethylaminopyridine and 1.65 g (7.97 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are dissolved in 20 ml of chloroform at 0 ° C. and Stirred at this temperature for 3 hours. Then the mixture is stirred at room temperature for 24 hours. 20 ml of ether are added, the precipitate which has precipitated is filtered off and the filtrate is evaporated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent:
Methylenchlorid/Dioxan= 15:1). Es werden 3,95 g eines farblosen Feststoffes erhalten.Methylene chloride / dioxane = 15: 1). 3.95 g of a colorless solid are obtained.
Ausbeute: 76 %Yield: 76%
Ber.: C 50,20% H 3,93% N 5,85% S 8,93% F 13,24%Calc .: C 50.20% H 3.93% N 5.85% S 8.93% F 13.24%
Gef: C 50,05% H 3,87% N 5,69% S 8,71% F 13,03%Found: C 50.05% H 3.87% N 5.69% S 8.71% F 13.03%
Beispiel 25Example 25
a) 7-N-tert. Butoxycarbonyl-2-(4-benzyloxybenzyl)-l-mesyl-l,4, 7-triazaheptan-3-on 16.23 g (42,77 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19b) werden in 200 mla) 7-N-tert. Butoxycarbonyl-2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-l, 4, 7-triazaheptan-3-one 16.23 g (42.77 mmol) of the title compound from Example 19b) are in 200 ml
Chloroform gelöst und 4,76 g (47,05 mmol) Triethylamin zugegeben. Bei 0°C wird eine Lösung aus 10,27 g (47,05 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat in 50 ml Chloroform zugetropft und 30 Minuten bei 0°C gerührt. Anschließend wird 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man schüttelt 3 mal mit 5 %iger Natriumcarbonatlösung aus, trocknet die organische Phase über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum ein. Der Rückstand wird aus wenig Methanol umkristallisiert. Es werden 20,19 g eines schaumigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 96 % 51 Be:.: C 58,64% H 6,77% N 8,55% S 6,52% Gef.: C 58,48% H 6,59% N 8,41% S 6,42%Chloroform dissolved and 4.76 g (47.05 mmol) triethylamine added. A solution of 10.27 g (47.05 mmol) of di-tert-butyl dicarbonate in 50 ml of chloroform is added dropwise at 0 ° C. and the mixture is stirred at 0 ° C. for 30 minutes. The mixture is then stirred at room temperature for 5 hours. It is shaken 3 times with 5% sodium carbonate solution, the organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is recrystallized from a little methanol. 20.19 g of a foamy solid are obtained. Yield: 96% 51 Be:.: C 58.64% H 6.77% N 8.55% S 6.52% Found: C 58.48% H 6.59% N 8.41% S 6.42%
b) 7-N-tert.-Butoxycarbonyl-2-(4-hydroxybenzyl)-l-mesyl-l,4, 7-triazάheptan-3-on 20 g (40,68 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25a) werden in 300 ml Methylenchlorid gelöst und 4 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) zugegeben. Man hydriert über Nacht. Der Katalysator wird abfiltriert und das Filtrat zur Trockene eingeengt. Es werden 16,17 g eines glasigen Schaumes erhalten, der nach kurzer Zeit erstarrt.b) 7-N-tert-butoxycarbonyl-2- (4-hydroxybenzyl) -l-mesyl-l, 4, 7-triazάheptan-3-one 20 g (40.68 mmol) of the title compound from Example 25a) are in 300 ml of methylene chloride dissolved and 4 g of palladium catalyst (10% Pd / C) added. One hydrates overnight. The catalyst is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness. 16.17 g of a glassy foam are obtained, which solidifies after a short time.
Ausbeute: 99 %Yield: 99%
Ber.: C 50,86% H 6,78% N 10,47% S 7,99%Calc .: C 50.86% H 6.78% N 10.47% S 7.99%
Gef.: C 50,70% H 6,69% N 10,31% S 7,78%Found: C 50.70% H 6.69% N 10.31% S 7.78%
c) 7-N-tert,-Butoxycarbonyl-2-(4-benzyloxycarbonylmethyloxy)-benzyl)-l-mesyl-c) 7-N-tert, -butoxycarbonyl-2- (4-benzyloxycarbonylmethyloxy) -benzyl) -l-mesyl-
1,4, 7-tria∑aheptan-3-on 15 g (37,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25b), 8,56 g (37,36 mmol) Bromessigsäurebenzylester und 13,8 g (100 mmol) Kaliumcarbonat werden in 300 ml Acetonitril 24 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Man filtriert von den Salzen ab und engt das Filtrat zur Trockene ein. Der Rückstand wird in 200 ml Methylenchlorid gelöst und 2 mal mit 100 ml Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Hexan/ Aceton= 20/10/1). Es werden 10.06 g schaumiger Feststoff erhalten. Ausbeute: 49 %1,4, 7-tria∑aheptan-3-one 15 g (37.36 mmol) of the title compound from Example 25b), 8.56 g (37.36 mmol) of benzyl bromoacetate and 13.8 g (100 mmol) of potassium carbonate heated in reflux in 300 ml of acetonitrile for 24 hours. The salts are filtered off and the filtrate is evaporated to dryness. The residue is dissolved in 200 ml of methylene chloride and extracted twice with 100 ml of water. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride / hexane / acetone = 20/10/1). 10.06 g of foamy solid are obtained. Yield: 49%
Ber.: C 56,82% H 6,42% N 7,64% S 5,83% Gef.: C 56,65% H 6,35% N 7,51% S 5,72%Calc .: C 56.82% H 6.42% N 7.64% S 5.83% Found: C 56.65% H 6.35% N 7.51% S 5.72%
d~> 2-(4-(Benzyloxycarbonylmethyloxy)-ben∑yl)-l-mesyl-l,4, -triazaheptan-3-on (alsd ~> 2- (4- (Benzyloxycarbonylmethyloxy) -ben∑yl) -l-mesyl-l, 4, -triazaheptan-3-one (as
Trißuoressigsäuresal∑) 10 g (18,19 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25c) werden 1 Smnde in 100 ml Trifluoressigsäure bei Raumtemperamr gerührt. Man engt im Vakuum zur Trockene ein. Es werden 9,95 g eines glasigen Schaumes erhalten, der bei Stehenlassen erstarrt. Ausbeute: 97 %Trißuoressigsäuresal∑) 10 g (18.19 mmol) of the title compound from Example 25c) are stirred for 1 mouth in 100 ml of trifluoroacetic acid at room temperature. It is evaporated to dryness in a vacuum. 9.95 g of a glassy foam are obtained, which solidifies on standing. Yield: 97%
Ber.: C 49,02% H 5,01% N 7,46% S 5,69% F 10,11%Calc .: C 49.02% H 5.01% N 7.46% S 5.69% F 10.11%
Gef.: C 48,91% H 4,90% N 7,30% S 5,51% F 9,96% e) 9-Chlor-2-(4-(ben∑yloxycarbonylmethyloxy)-ben∑yl)-l-mesyl-l, 4, 7-triazanonan- 3,8-dion 9 g (15,97 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25d), 1,78 g (17,57 mmol)Found: C 48.91% H 4.90% N 7.30% S 5.51% F 9.96% e) 9-Chloro-2- (4- (ben∑yloxycarbonylmethyloxy) -ben∑yl) -l-mesyl-l, 4, 7-triazanonan- 3,8-dione 9 g (15.97 mmol) of the title compound Example 25d), 1.78 g (17.57 mmol)
Triethylamin werden in 200 ml Chloroform gelöst. Bei 0°C werden 1,98 g (17,57 mmol) Chloracetylchlorid innerhalb 30 Minuten zugetropft und anschließend 2 Stunden bei 0°C gerührt. Die organische Phase wird 2 mal mit 5 %iger Salzsäure und 2 mal mit Wasser ausgeschüttelt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Essigester= 20:1). Ausbeute: 83 %Triethylamine are dissolved in 200 ml of chloroform. 1.98 g (17.57 mmol) of chloroacetyl chloride are added dropwise at 0 ° C. in the course of 30 minutes and the mixture is then stirred at 0 ° C. for 2 hours. The organic phase is extracted twice with 5% hydrochloric acid and twice with water, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: methylene chloride / ethyl acetate = 20: 1). Yield: 83%
Ber.: C 52,52% H 5,37% N 7,99% S 6,09% Cl 6,74%Calc .: C 52.52% H 5.37% N 7.99% S 6.09% Cl 6.74%
Gef.: C 52,37% H 5,43 N 7,81 S 5,93% Cl 6,58%Found: C 52.37% H 5.43 N 7.81 S 5.93% Cl 6.58%
f) 9-Chlor-2-(4-(carboxymethyloxy)-benzyl)-l -mesyl-1 , 4, 7-triazanonan-3,8-dion 6.5 g (12,36 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25e) werden in 150 ml Methylenchlorid gelöst und mit 2 g Palladium-Katalysator (10 % Pd/C) versetzt. Man hydriert über Nacht. Der Katalysator wird abfiltriert und das Filtrat im Vakuum zur Trockene eingedampft. Es werden 5,33 g eines glasigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 99 %f) 9-chloro-2- (4- (carboxymethyloxy) benzyl) -1 mesyl-1,4,7-triazanonane-3,8-dione (6.5 g (12.36 mmol) of the title compound from Example 25e) dissolved in 150 ml of methylene chloride and mixed with 2 g of palladium catalyst (10% Pd / C). One hydrates overnight. The catalyst is filtered off and the filtrate is evaporated to dryness in vacuo. 5.33 g of a glassy solid are obtained. Yield: 99%
Ber.: C 44,09% H 5,09% N 9,64% S 7,36% Cl 8,13%Calc .: C 44.09% H 5.09% N 9.64% S 7.36% Cl 8.13%
Gef.: C 43,93% H 4,95% N 9,52% S 7,22% Cl 8,03%Found: C 43.93% H 4.95% N 9.52% S 7.22% Cl 8.03%
g) / 0-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-ben∑yl)-l-mesyl-l 0-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8- diong) / 0-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) -ben∑yl) -l-mesyl-l 0-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8-dione
5 g (11,47 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 22f) werden in 80 ml Chloroform gelöst und 1,98 g (19,53 mmol) Triethylamin zugesetzt. Man gibt 0,74 g (9,77 mmol) Thioessigsäure zu und erhitzt 10 Minuten unter Rückfluß. Die Lösung wird in 200 ml eisgekühlte 5 %ige Salzsäure gegossen und kräftig gerührt. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Chromatographische Aufreinigung an Kieselgel (Laufmittel: Hexan/Essigsäureethylester= 3:1) ergibt 4,64 g der Titelverbindung als glasigen Feststoff. Ausbeute: 85 % Be:.: C 45,46% H 5,30% N 8,84% S 13,48% Gef.: C 45,28% H 5,17% N 8,61% S 13.38%5 g (11.47 mmol) of the title compound from Example 22f) are dissolved in 80 ml of chloroform and 1.98 g (19.53 mmol) of triethylamine are added. 0.74 g (9.77 mmol) of thioacetic acid are added and the mixture is heated under reflux for 10 minutes. The solution is poured into 200 ml of ice-cooled 5% hydrochloric acid and stirred vigorously. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. Chromatographic purification on silica gel (mobile phase: hexane / ethyl acetate = 3: 1) gives 4.64 g of the title compound as a glassy solid. Yield: 85% Be:.: C 45.46% H 5.30% N 8.84% S 13.48% Found: C 45.28% H 5.17% N 8.61% S 13.38%
h) N-Hydroxysuccinimidester von 10-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-benzyl)-l- mesyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8-dionh) N-hydroxysuccinimide ester of 10-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) benzyl) -l-mesyl-10-thia-l, 4, 7-triazadecan-3, 8-dione
4 g (8,41 mmol) 4 g (7,25 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25g), 1,91 g (9.25 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid, 30 mg 4-Dimethylaminopyridin und 1,06 g (9.25 mmol) N-Hydroxysuccinimid werden bei 0°C in 20 ml Chloroform gelöst und 1 Stunde bei dieser Temperatur gerührt. Anschliessend wird 24 Stunden bei Raumtemperatur weitergerührt. Man setzt 20 ml Ether zu, saugt vom ausgefallenen Dicyclohexylhamstoff ab und engt das Filtrat im Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Dioxan= 10:1). Man erhält 3,47 g eines cremefarbenen Feststoffes. Ausbeute: 72 %4 g (8.41 mmol) 4 g (7.25 mmol) of the title compound from Example 25g), 1.91 g (9.25 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide, 30 mg of 4-dimethylaminopyridine and 1.06 g (9.25 mmol) of N-hydroxysuccinimide are dissolved in 20 ml of chloroform at 0 ° C. and stirred at this temperature for 1 hour. The mixture is then stirred at room temperature for 24 hours. 20 ml of ether are added, the precipitated dicyclohexylurea is filtered off with suction and the filtrate is concentrated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: methylene chloride / dioxane = 10: 1). 3.47 g of a cream-colored solid are obtained. Yield: 72%
Ber.: C 46,15% H 4,93% N 9,78% S 11,20% Gef.: C 46,03% H 4,83% N 9,64% S 1 1,05%Calc .: C 46.15% H 4.93% N 9.78% S 11.20% Found: C 46.03% H 4.83% N 9.64% S 1 1.05%
Beispiel 26Example 26
a) 3-Glycerin-Ester von 10-Acetyl-2-(4-(carboxymethyloxy)-ben∑yl)-l -mesyl-10-thia- 1,4, 7-triazadecan-3,8-dion mit Glycerin-1 ,2-dipalmitat 2 g (5,27 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 25g), 20 mg 4-Dimethylaminopyridin, 3.30 g (5,80 mmol) Glycerin-l,2-dipalmitinsäureester und 1,20 g (5,80 mmol) Dicyclo¬ hexylcarbodiimid werden bei 0°C in 5 ml Chloroform gelöst und 3 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Dann rührt man 24 Stunden bei Raumtemperatur. Es werden 20 ml Ether zugesetzt und vom Niederschlag abfiltriert. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Hexan/Essigsäureethylester= 30:1). Man erhält 3,35 g eines wachsartigen Feststoffes. Ausbeute: 62 %a) 3-glycerol ester of 10-acetyl-2- (4- (carboxymethyloxy) -ben∑yl) -l-mesyl-10-thia-1,4, 7-triazadecane-3,8-dione with glycerol 1,2-dipalmitate 2 g (5.27 mmol) of the title compound from Example 25g), 20 mg of 4-dimethylaminopyridine, 3.30 g (5.80 mmol) of glycerol-1, 2-dipalmitic acid ester and 1.20 g (5.80 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are dissolved in 5 ml of chloroform at 0 ° C. and stirred for 3 hours at this temperature. Then stirred for 24 hours at room temperature. 20 ml of ether are added and the precipitate is filtered off. The filtrate is evaporated to dryness in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: hexane / ethyl acetate = 30: 1). 3.35 g of a waxy solid are obtained. Yield: 62%
Ber.: C 62,02% H 8,94% N 4,09% S 6,25% Gef.: C 61,91% H 8,75% N 3,91% S 6,18% Beispiel 27Calc .: C 62.02% H 8.94% N 4.09% S 6.25% Found: C 61.91% H 8.75% N 3.91% S 6.18% Example 27
a) 4-Benzylether von N-Mesyl-Tyrosina) 4-Benzyl ether of N-mesyl tyrosine
10 g (27,5 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19a) und 5,50 g (137,6 mmol) Natriumhydroxid werden in einer Mischung aus 50 ml Wasser/150 ml Ethanol 3 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockene ein, nimmt den Rückstand in 200 ml10 g (27.5 mmol) of the title compound from Example 19a) and 5.50 g (137.6 mmol) of sodium hydroxide are refluxed in a mixture of 50 ml of water / 150 ml of ethanol for 3 hours. It is evaporated to dryness, the residue is taken in 200 ml
3 Salzsäure auf und rührt 2 Stunden bei Raumtemperatur. Die ausgefallene Säure wird abgesaugt, mit Wasser gewaschen und im Vakuum bei 70°C getrocknet. Es werden3 hydrochloric acid and stir for 2 hours at room temperature. The precipitated acid is filtered off, washed with water and dried in vacuo at 70 ° C. It will
9,42 g cremefarbenen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 98 %9.42 g of cream-colored solid are obtained. Yield: 98%
Ber.: C 58,44% H 5,48% N 4,01% S 9,18%Calc .: C 58.44% H 5.48% N 4.01% S 9.18%
Gef.: C 58,28% H 5,37% N 3,91% S 9,02%Found: C 58.28% H 5.37% N 3.91% S 9.02%
b) 6, 6'-Bis-[l-N-tert. butoxycarbonyl-1, 4-diaza-hexan-3-onJ-disulßdb) 6, 6'-bis- [l-N-tert. butoxycarbonyl-1,4-diaza-hexan-3-oneJ-disulßd
10 g (65,67 mmol) Cystamin, 11,50 g (65,67 mmol) N-Boc-Glycin und 14,90 g (72.24 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid werden bei 0°C in 50 ml Tetrahydrofuran gelöst und 2 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Anschließend wird 12 Stunden bei Raum¬ temperatur gerührt. Man setzt 50 ml Ether zu und saugt von ausgefallenen Niederschlag ab. und dampft das Filtrat zur Trockene ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Hexan/Aceton= 6:1). Es werden 20,84 g eines glasigen10 g (65.67 mmol) of cystamine, 11.50 g (65.67 mmol) of N-Boc-Glycine and 14.90 g (72.24 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are dissolved in 50 ml of tetrahydrofuran at 0 ° C. and for 2 hours Temperature stirred. The mixture is then stirred at room temperature for 12 hours. 50 ml of ether are added and the precipitate which has precipitated is filtered off with suction. and evaporate the filtrate to dryness. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: hexane / acetone = 6: 1). There are 20.84 g of a glassy
Feststoffes erhalten.Get solid.
Ausbeute: 68 %Yield: 68%
Ber.: C 46,33% H 7,34% N 12,01% S 13,74% Gef.: C 46,15% H 7,28% N 1 1,93% S 13,67%Calc .: C 46.33% H 7.34% N 12.01% S 13.74% Found: C 46.15% H 7.28% N 1 1.93% S 13.67%
c) 6, 6'-Bis-[l, 4-Diaza-hexan-3-on]-disulfidc) 6, 6'-bis- [1,4-diaza-hexan-3-one] disulfide
20 g (42,86 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 27b) werden in 100 ml Trifluoressigsäure gelöst und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man dampft zur20 g (42.86 mmol) of the title compound from Example 27b) are dissolved in 100 ml of trifluoroacetic acid and stirred for 2 hours at room temperature. You steam to
Trockene ein, nimmt den Rückstand mit 300 ml 10 %iger Natriumcarbonat-Lösung auf und extrahiert 6 mal mit 50 ml Chloroform. Die vereinigten Chloroform-Phasen werden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft. Es werden 10,96 g eines leicht gelb gefärbten Feststoffes erhalten. Ausbeute: 96 %Dry, take up the residue with 300 ml of 10% sodium carbonate solution and extract 6 times with 50 ml of chloroform. The combined chloroform phases are dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. 10.96 g of a slightly yellow-colored solid are obtained. Yield: 96%
Ber.: C 36,07% H 6,81% N 21,03% S 24,07%Calc .: C 36.07% H 6.81% N 21.03% S 24.07%
Gef.: C 35,91% H 6,90% N 20,89% S 23,89% d) 9,9'-Bis[2-(4-benzyloxyben∑yl)-l-mesyl-l, 4, 7-tria∑anonan-3, 6-dionJdisulfid 9 g (25,76 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 27a), 3,43 g (12,87 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 27c) und 6,19 g (30 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid werden bei 0°C in 40 ml Tetrahydroduran gelöst und 2 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Anschliessend wird 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man setzt 30 ml Ether zu und saugt vom Niederschlag ab. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der Rückstand an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/ Aceton= 20:1). Es werden 5,59 g eines cremefarbenen Feststoffes erhalten.Found: C 35.91% H 6.90% N 20.89% S 23.89% d) 9,9'-bis [2- (4-benzyloxyben∑yl) -l-mesyl-l, 4, 7-tria∑anonan-3, 6-dione disulfide 9 g (25.76 mmol) of the title compound from Example 27a), 3.43 g (12.87 mmol) of the title compound from Example 27c) and 6.19 g (30 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are dissolved in 40 ml of tetrahydroduran at 0 ° C. and the mixture is stirred at this temperature for 2 hours. The mixture is then stirred at room temperature for 12 hours. 30 ml of ether are added and the precipitate is filtered off with suction. The filtrate is evaporated to dryness in vacuo and the residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride / acetone = 20: 1). 5.59 g of a cream-colored solid are obtained.
Ausbeute: 48 % [bezogen auf 27c)]Yield: 48% [based on 27c)]
Be:.: C 53,08% H 5,79% N 9,28% S 14,17%Be:.: C 53.08% H 5.79% N 9.28% S 14.17%
Gef.: C 52,93% H 5,84% N 9,13 S 14,02%Found: C 52.93% H 5.84% N 9.13 S 14.02%
Beispiel 28Example 28
a) 4-Ben∑ylether vom N-Mesyl-Tyrosinamida) 4-benzyl ether of N-mesyl-tyrosine amide
20 g (55,03 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19a) werden in 300 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei 0°C 3 Smnden ein Ammoniak-Strom eingeleitet. Man dampft zur Trockene ein und kristallisiert den Rückstand aus Methanol um. Es werden20 g (55.03 mmol) of the title compound from Example 19a) are dissolved in 300 ml of tetrahydrofuran and an ammonia stream is passed in at 0 ° C. for 3 hours. It is evaporated to dryness and the residue is recrystallized from methanol. It will
18.6 g farblose Blättchen erhalten.Obtained 18.6 g of colorless leaves.
Ausbeute: 97 %Yield: 97%
Be:.: C 58,60% H 5,79% N 8,04% S 9,20% Gef.: C 58,47% H 5,88% N 7,91% S 9,05%Be:.: C 58.60% H 5.79% N 8.04% S 9.20% Found: C 58.47% H 5.88% N 7.91% S 9.05%
b) 2-(4-Benzyloxybenzyl)-l-mesyl-l, 4-dia∑abutanb) 2- (4-Benzyloxybenzyl) -l-mesyl-l, 4-dia∑abutane
18 g (51,66 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28a) werden in 200 ml Tetrahydrofuran gelöst und unter einer Stickstoffatmosphäre 310 ml IM Diboran in THF zugesetzt. Man erhitzt 24 Stunden unter Rückfluß. Man kühlt auf 0°C im Eisbad und setzt 70 ml konzentrierter Salzsäure zu. Anschließend wird 5 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Es wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand mit 300 ml gesättigter Natriumcarbonat-Lösung aufgenommen. Man extrahiert 3 mal mit 100 ml Methylenchlorid, trocknet die vereinigten Phasen über Magnesiumsulfat und dampft im Vakuum zur Trockene ein. Die chromatographische Aufreinigung erfolgt an Kieselgel (Laufmittel: Methylenchlorid/Ethanol= 10:1). Es werden 15,38 g eines cremefarbenen Feststoffes erhalten. 5 Ausbeute: 89 %18 g (51.66 mmol) of the title compound from Example 28a) are dissolved in 200 ml of tetrahydrofuran and 310 ml of 1M IM diborane in THF are added under a nitrogen atmosphere. The mixture is heated under reflux for 24 hours. The mixture is cooled to 0 ° C. in an ice bath and 70 ml of concentrated hydrochloric acid are added. The mixture is then heated under reflux for 5 hours. It is evaporated to dryness and the residue is taken up in 300 ml of saturated sodium carbonate solution. It is extracted 3 times with 100 ml of methylene chloride, the combined phases are dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. The chromatographic purification is carried out on silica gel (mobile phase: methylene chloride / ethanol = 10: 1). 15.38 g of an off-white solid are obtained. 5 Yield: 89%
Be:.: C 61,05% H 6,63% N 8,38% S 9,59%Be:.: C 61.05% H 6.63% N 8.38% S 9.59%
Gef.: C 60,91% H 6,54% N 8,27% S 9,41%Found: C 60.91% H 6.54% N 8.27% S 9.41%
c) 4-N-Butoxycarbonyl-2-(4-benzyloxyben∑yl)-l -mesyl-1 , 4, 7-triazaheptan-5-on 15 g (44,85 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28b) werden in 200 ml Chloroform gelöst und bei 0°C 5 g (49,34 mmol) Triethylamin und 12,84 g (49,34 mmol) N-tert.- Butoxycarbonyl-glycin-N-hydroxysuccinimidester zugegeben. Man rührt 12 Stunden bei Raumtemperatur. Es wird 2 mal mit kalter 5 %iger Salzsäure extrahiert und einmal mit Wasser. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Es werden 20,51 g eines amorphen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 93 % Ber.: C 58,64% H 6,77% N 8,55% S 6,52% Gef.: C 58,47% H 6,85% N 8,43% S 6,41%c) 4-N-Butoxycarbonyl-2- (4-benzyloxyben∑yl) -l-mesyl-1, 4, 7-triazaheptan-5-one 15 g (44.85 mmol) of the title compound from Example 28b) are in 200 ml of chloroform dissolved and 5 g (49.34 mmol) of triethylamine and 12.84 g (49.34 mmol) of N-tert-butoxycarbonyl-glycine-N-hydroxysuccinimide ester added at 0 ° C. The mixture is stirred at room temperature for 12 hours. It is extracted twice with cold 5% hydrochloric acid and once with water. The organic phase is dried over magnesium sulfate and evaporated to dryness in vacuo. 20.51 g of an amorphous solid are obtained. Yield: 93% Calc .: C 58.64% H 6.77% N 8.55% S 6.52% Found: C 58.47% H 6.85% N 8.43% S 6.41%
d) 2-(4-Ben∑yloxybenzyl)-l -mesyl-1 ,4, 7-tr'a∑aheptan-5-ond) 2- (4-Ben∑yloxybenzyl) -l-mesyl-1, 4, 7-tr'a∑aheptan-5-one
20 g (40,68 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28c) werden in 100 ml Trifluoressigsäure gelöst und 5 Stunden bei Raumtemperamr gelöst. Man dampft im Vakuum zur Trockene ein, nimmt den Rückstand in 200 ml gesättigter Natriumcarbonatlösung auf und extrahiert 3 mal mit 100 ml Chloroform. Die organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Es werden 15,61 g eines glasigen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 98 %20 g (40.68 mmol) of the title compound from Example 28c) are dissolved in 100 ml of trifluoroacetic acid and dissolved for 5 hours at room temperature. It is evaporated to dryness in vacuo, the residue is taken up in 200 ml of saturated sodium carbonate solution and extracted 3 times with 100 ml of chloroform. The organic phases are dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo. 15.61 g of a glassy solid are obtained. Yield: 98%
Ber.: C 58,29% H 6,44% N 10,73% S 8,19% Gef.: C 58,13% H 6,60% N 10,61% S 8,05%Calc .: C 58.29% H 6.44% N 10.73% S 8.19% Found: C 58.13% H 6.60% N 10.61% S 8.05%
e) 9-Chloτo-2-(4-Benzyloxybenz}>l)-l -mesyl-1 ,4, 7-tria∑anonan-5,8-dione) 9-Chloτo-2- (4-benzyloxybenz}> l) -l -mesyl-1, 4, 7-tria∑anonan-5,8-dione
10 g (25,54 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28d) und 2,58 g (25,54 mmol) Triethylamin werden in 200 ml Chloroform gelöst. Bei 0°C tropft man innerhalb 30 Minuten 2,88 g (25,54 mmol) Chloracetylchlorid zu. Man rührt 3 Stunden bei 0°C. Es wird auf 200 ml 5 %ige kalte Salzsäure gegossen und kräftig gerührt. Die organische Phase wird abgetrennt, über Magnesium getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird aus Methanol umkristallisiert. Es werden 11,36 g eines cremefarbenen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 95 % 5 ~10 g (25.54 mmol) of the title compound from Example 28d) and 2.58 g (25.54 mmol) of triethylamine are dissolved in 200 ml of chloroform. At 0 ° C., 2.88 g (25.54 mmol) of chloroacetyl chloride are added dropwise within 30 minutes. The mixture is stirred at 0 ° C. for 3 hours. It is poured onto 200 ml of 5% cold hydrochloric acid and stirred vigorously. The organic phase is separated off, dried over magnesium and evaporated to dryness in vacuo. The residue is recrystallized from methanol. 11.36 g of an off-white solid are obtained. Yield: 95% 5 ~
Be:.: C 53,90% H 5,60% N 8,98% S 6,85% Cl 7,58% Gef.: C 53,80% H 5,71% N 8,91% S 6,73% Cl 7,44%Be:.: C 53.90% H 5.60% N 8.98% S 6.85% Cl 7.58% Found: C 53.80% H 5.71% N 8.91% S 6, 73% Cl 7.44%
f) 10-Benzoyl-2-(4-ben∑yloxyben∑yl)-l -mesyl-1, 4, 7-triaza-l 0-thiadecan-5,8-dionf) 10-benzoyl-2- (4-ben∑yloxyben∑yl) -l-mesyl-1, 4, 7-triaza-l 0-thiadecane-5,8-dione
5 g (10,68 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28e), 1,08 g (10,68 mmol) Triethylamin und 1,48 g (10,68 mmol) Thiobenzoesäure werden in 50 ml Chloroform 10 Minuten unter Rückfluß erhitzt. Man dampft zur Trockene ein und chromatographiert der Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Methylenchlorid/ Aceton= 15:1). Es werden 4,93 g eines cremefarbenen amorphen Feststoffes erhalten. Ausbeute: 81 %5 g (10.68 mmol) of the title compound from Example 28e), 1.08 g (10.68 mmol) of triethylamine and 1.48 g (10.68 mmol) of thiobenzoic acid are refluxed in 50 ml of chloroform for 10 minutes. It is evaporated to dryness and the residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride / acetone = 15: 1). 4.93 g of an off-white amorphous solid are obtained. Yield: 81%
Ber.: C 59,03% H 5,48% N 7,38% S 1 1,26% Gef.: C 58,87% H 5,31% N 7,25% S 11,04%Calc .: C 59.03% H 5.48% N 7.38% S 1 1.26% Found: C 58.87% H 5.31% N 7.25% S 11.04%
Beispiel 29Example 29
a) 9,9'-Bis-[2-(4-benzyloxyben∑yl)-l -mesyl-1, , 7-triazanonan-3-on]-disulfid Zu 10 g (26,35 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19b) und 10,92 g (79 mmol) Kaliumcarbonat in 100 ml Acetonitril tropft man in der Siedehitze 2,00 g (13,17 mmol) l,6-Dichlor-3,4-dithiahexan (in 20 ml Acetonitril gelöst) innerhalb 1 Stunde zu. Es wird 12 h unter Rückfluß erhitzt. Man filtriert von den Salzen ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Methylenchlorid/Isopropanol= 10:1). Man erhält 2,19 g eines leicht gelbge- färbten kristallinen Pulvers.a) 9,9'-bis- [2- (4-benzyloxyben∑yl) -l-mesyl-1, 7-triazanonan-3-one] disulfide To 10 g (26.35 mmol) of the title compound from Example 19b) and 10.92 g (79 mmol) of potassium carbonate in 100 ml of acetonitrile are added dropwise at the boiling point 2.00 g (13.17 mmol) of l, 6-dichloro-3,4-dithiahexane (dissolved in 20 ml of acetonitrile) within 1 hour too. The mixture is heated under reflux for 12 h. The salts are filtered off, the filtrate is evaporated to the dry state in a vacuum and the residue is chromatographed on silica gel (mobile phase: methylene chloride / isopropanol = 10: 1). 2.19 g of a slightly yellow-colored crystalline powder are obtained.
Ausbeute: 19 % (bezogen auf l,6-Dichlor-3,4-dithiahexan) Ber.: C 54,77% H 6,43% N 9,58% S 14,62% Gef.: C 54,61% H 6,53% N 9,41% S 14,51%Yield: 19% (based on 1,6-dichloro-3,4-dithiahexane) Calc .: C 54.77% H 6.43% N 9.58% S 14.62% Found: C 54.61% H 6.53% N 9.41% S 14.51%
Beispiel 30Example 30
a) 6-Chloro-2-(4-ben∑yloxybenzyl)-l -mesyl-1, 4-diazahexan-5-ona) 6-Chloro-2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-1,4-diazahexan-5-one
10 g (25,54 mmol) der Titel Verbindung aus Beispiel 28b) werden zusammen mit 3,03 g (29.90 mmol) Triethylamin in 200 ml Chloroform gelöst. Bei 0°C tropft man 3,38 g10 g (25.54 mmol) of the title compound from Example 28b) are dissolved together with 3.03 g (29.90 mmol) of triethylamine in 200 ml of chloroform. 3.38 g are added dropwise at 0.degree
(29.90 mol) Choracetylchlorid zu und rührt 2 Stunden bei dieser Temperatur. Man gießt auf 200 ml 5 %ige kalte Salzsäure und rührt gut durch. Die organische Phase wird absetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird aus Me anol umkristallisiert. Man erhält 11,67 g farblose Kristalle. Ausbeute: 95 %(29.90 mol) of chloroacetyl chloride and stirred at this temperature for 2 hours. It is poured onto 200 ml of 5% cold hydrochloric acid and stirred well. The organic phase is separated off, dried over magnesium sulfate and dried to dryness in vacuo evaporated. The residue is recrystallized from Me anol. 11.67 g of colorless crystals are obtained. Yield: 95%
Ber.: C 55,54% H 5,64% N 6,82% S 7,80% Cl 8,63% Gef.: C 55,38% H 5,71% N 6,67% S 7,63% Cl 8,51%Calc .: C 55.54% H 5.64% N 6.82% S 7.80% Cl 8.63% Found: C 55.38% H 5.71% N 6.67% S 7.63 % Cl 8.51%
b) 9,9'-Bis-[2-(4-benzyloxybenzyl)-l -mesyl-1, 4, 7-tria∑anonan-5-on]-disulfidb) 9,9'-bis- [2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-1, 4, 7-tria∑anonan-5-one] disulfide
10 g (24,34 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 30a), 1,52 g (10 mmol) Cystamin und 8,29 g (60 mol) Kaliumcarbonat werden in 150 ml Tetrahydrofuran 8 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Man filtriert von den Salzen ab, dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockene ein und chromatographiert den Rückstand an Kieselgel (Laufmittel: Methylenchlorid/Ethanol= 15:1). Man erhält 2,02 g eines leicht gelblichen Feststoffes. Ausbeute: 23 % (bezogen auf Cystamin) Be:.: C 54,77% H 6,43% N 9,58% S 14,62% Gef.: C 54,61% H 6,52% N 9,47% S 14,48%10 g (24.34 mmol) of the title compound from Example 30a), 1.52 g (10 mmol) of cystamine and 8.29 g (60 mol) of potassium carbonate are heated under reflux in 150 ml of tetrahydrofuran for 8 hours. The salts are filtered off, the filtrate is evaporated to the dry state in a vacuum and the residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride / ethanol = 15: 1). 2.02 g of a slightly yellowish solid are obtained. Yield: 23% (based on cystamine) Be:.: C 54.77% H 6.43% N 9.58% S 14.62% Found: C 54.61% H 6.52% N 9.47 % S 14.48%
Beispiel 31Example 31
a) Cystamin-bis-(chloracetamid)a) Cystamine-bis- (chloroacetamide)
10 g (65,67 mmol) Cystamin und 13,29 g (131,34 mmol) Triethylamin werden in 100 ml10 g (65.67 mmol) of cystamine and 13.29 g (131.34 mmol) of triethylamine are dissolved in 100 ml
Chloroform bei 0°C gelöst. Man tropft 14,38 g (131,34 mol) Chloracetylchlorid zu und rührt 3 Stunden bei 0°C. Die Lösung wird in 200 ml kalte 5 %ige Salzsäure gegossen und kräftig gerührt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und imChloroform dissolved at 0 ° C. 14.38 g (131.34 mol) of chloroacetyl chloride are added dropwise and the mixture is stirred at 0 ° C. for 3 hours. The solution is poured into 200 ml of cold 5% hydrochloric acid and stirred vigorously. The organic phase is dried over magnesium sulfate and in
Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird aus wenig Aceton umkristallisiert. Man erhält 17,04 g eines cremefarbenen Feststoffes.Evaporated vacuum. The residue is recrystallized from a little acetone. 17.04 g of a cream-colored solid are obtained.
Ausbeute: 85 %Yield: 85%
Ber.: C 31,48% H 4,62% N 9,18% S 21,01% Cl 23,23% Gef.: C 31,27% H 4,51% N 9,09% S 20,93% Cl 23,12%Calc .: C 31.48% H 4.62% N 9.18% S 21.01% Cl 23.23% Found: C 31.27% H 4.51% N 9.09% S 20.93 % Cl 23.12%
b) 9, 9 '-Bi [2-(4-benzyloxybenzyl)-l -mesyl-1, 4, 7-triazanonan-6-on]-disulfid 5 g (16,38 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 31a), 13,69 g (40,95 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 28b) und 20,73 g (150 mmol) Kaliumcarbonat werden in 200 ml Ethanol 8 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Man setzt 200 ml Methylenchlorid zu, saugt von den Salzen ab und engt das Filtrat im Vakuum ein. Der Rückstand wird an SO Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Ethanol= 15: 1). Man erhält 4,74 g eines glasigen Feststoffes. Ausbeute: 33 %b) 9, 9 '-Bi [2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl-1, 4, 7-triazanonan-6-one] disulphide 5 g (16.38 mmol) of the title compound from Example 31a), 13.69 g (40.95 mmol) of the title compound from Example 28b) and 20.73 g (150 mmol) of potassium carbonate are refluxed in 200 ml of ethanol for 8 hours. 200 ml of methylene chloride are added, the salts are filtered off with suction and the filtrate is concentrated in vacuo. The backlog is on SO silica gel chromatographed (eluent: methylene chloride / ethanol = 15: 1). 4.74 g of a glassy solid are obtained. Yield: 33%
Ber.: C 54,77% H 6,43% N 9,58% S 14,62% Gef.: C 54,65% H 6,37% N 9,41% S 14,53%Calc .: C 54.77% H 6.43% N 9.58% S 14.62% Found: C 54.65% H 6.37% N 9.41% S 14.53%
Beispiel 32Example 32
a) 2-[4-Benzyloxyben∑yl]-l -mesyl-1, 4, 7-triazaheptana) 2- [4-Benzyloxyben∑yl] -l-mesyl-1, 4, 7-triazaheptane
5 g (13,18 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 19b) werden in 50 ml Tetrahydrofuran gelöst und 80 ml 1 M-Diboran-Lösung (1 M in THF) zugesetzt. Man erhitzt 24 Stunden unter Rückfluß. Es wird auf 0°C abgekühlt und 20 ml konzentrierter Salzsäure zugegeben. Anschließend 5 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Die Lösung wird zur Trockene eingedampft und mit 200 ml gesättigter Natriumcarbonatlösung aufgenommen. Dann wird 5 mal mit 100 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid/Isopropanol = 8: 1 , +2 % NH4OH). Man erhält 4,19 g eines glasigen Feststoffes.5 g (13.18 mmol) of the title compound from Example 19b) are dissolved in 50 ml of tetrahydrofuran and 80 ml of 1 M diborane solution (1 M in THF) are added. The mixture is heated under reflux for 24 hours. It is cooled to 0 ° C. and 20 ml of concentrated hydrochloric acid are added. Then heated under reflux for 5 hours. The solution is evaporated to dryness and taken up in 200 ml of saturated sodium carbonate solution. Then it is extracted 5 times with 100 ml of chloroform. The combined organic phases are dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride / isopropanol = 8: 1, +2% NH 4 OH). 4.19 g of a glassy solid are obtained.
Ausbeute: 87 %Yield: 87%
Ber.: C 59,15% H 7,45% N 11,50% S 8,77%Calc .: C 59.15% H 7.45% N 11.50% S 8.77%
Gef.: C 59,03% H 7,28% N 11,37% S 8,61%Found: C 59.03% H 7.28% N 11.37% S 8.61%
b) 9,9'-Bis-[2-(4-benzyloxybenzyl)-l -mesyl 1, 4, 7-triazanonan-8-on]-disulfid 4 g (10,94 mmol) der Titelverbindung aus Beispiel 32a), 0,67 g (3,65 mmol) 2,2'-Dithio- diessigsäure und 2,48 g (12,04 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid werden bei 0°C in 20 ml Tetrahydrofuran gelöst und 3 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Anschließend rührt man 24 Stunden bei Raumtemperatur. Man gibt 20 ml Ether zu, filtriert vomb) 9,9'-bis- [2- (4-benzyloxybenzyl) -l-mesyl 1, 4, 7-triazanonan-8-one] disulfide 4 g (10.94 mmol) of the title compound from Example 32a), 0.67 g (3.65 mmol) of 2,2'-dithio-diacetic acid and 2.48 g (12.04 mmol) of dicyclohexylcarbodiimide are dissolved in 20 ml of tetrahydrofuran at 0 ° C. and stirred at this temperature for 3 hours. The mixture is then stirred at room temperature for 24 hours. 20 ml of ether are added and the
Niederschlag ab und engt das Filtrat im Vakuum ein. Der Rückstand wird an Kieselgel chromatographiert (Laufmittel: Methylenchlorid Ethanol = 15:1). Man erhält 0,99 g eines amorphen Feststoffes. Ausbeute: 31 % (bezogen, auf die Dicarbonsäure) Ber.: C 54,77% H 6,43% N 9,58% S 14,62% Gef.: C 54,58% H 6,38% N 9,47% S 14,51% Precipitation and the filtrate is concentrated in vacuo. The residue is chromatographed on silica gel (mobile solvent: methylene chloride ethanol = 15: 1). 0.99 g of an amorphous solid are obtained. Yield: 31% (based on the dicarboxylic acid) Calc .: C 54.77% H 6.43% N 9.58% S 14.62% Found: C 54.58% H 6.38% N 9, 47% S 14.51%

Claims

Patentansprüche claims
1. Verbindungen der allgemeinen Formel I1. Compounds of the general formula I
Figure imgf000063_0001
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woπnwoπn
V1, V2, V3, V unabhängig voneinander für eine Carbonyl-, > CH(COOH) - oder -CH2 -Gruppe stehen, X1 für ein Wasserstoffatom, einen gegebenenfalls mit einerV 1 , V 2 , V 3 , V independently of one another represent a carbonyl,> CH (COOH) or -CH2 group, X 1 represents a hydrogen atom, one optionally with a
Carboxyl-, einer Amino- oder eine Thiocyanatgruppe substituierten C C^-Alkylrest oder ein Metallionenäquivalent eines radioaktiven Met lions eines Elementes der Ordnungszahl 43, 45, 46, 75, 82 oder 83 steht, X2, X3 unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom oder einCarboxyl, an amino or a thiocyanate group substituted CC ^ alkyl radical or a metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of atomic number 43, 45, 46, 75, 82 or 83, X 2 , X 3 independently of one another represents a hydrogen atom or a
Metallionenäquivalent eines radioaktiven Metallions eines Elementes der genannten Ordnungszahlen stehen, n, m, p für die Ziffern 0 oder 1 stehen, wobei gilt m + n = 1Metal ion equivalent of a radioactive metal ion of an element of the atomic numbers mentioned, n, m, p stand for the digits 0 or 1, where m + n = 1
R1 für ein Wasserstoffatom eine Carboxylgruppe oder eine Gruppe -U-Z steht, worin U für eine direkte Bindung, einen geradkettigen oder verzweigten, gesättigten oder ungesättigten C1-C20-Alkylenrest steht, der gewünschtenfalls einen Maleimid, einen Succuiimid-, einen gegebenenfalls durch 1 bis 5 Fluoratome, eine Amino- oder Nitrogruppe substituierten Phenylrest, eine oder zweiR 1 represents a hydrogen atom, a carboxyl group or a group -UZ, in which U stands for a direct bond, a straight-chain or branched, saturated or unsaturated C 1 -C 20 -alkylene radical, which if desired is a maleimide, a succuiimide, one optionally 1 to 5 fluorine atoms, an amino or nitro group substituted phenyl radical, one or two
Imino-, Phenylen-, Phenylenoxy-, Phenylenamino-, Amid-, Hydrazid-, Carbonyl-, Ureido-, Thioureido-, Thioamid-, Estergruppe(n), 1 bis 2 Sauerstoff-, Schwefel- und/oder Stickstoff- Atom(e) sowie gegebenenfalls 1 bis 5 Hydroxy-, Mercapto-, Oxo-, Thioxo-, Carboxy-, Alkylcarbonsäure-, Ester-, Thiocyanat- und/oder Aminogruppen enthält und Z für ein Wasserstoffatom, einen Rest einer Aminosäure, eines Peptids, eines Polynucleotids oder eines Steroids oder eine funktioneile Gruppe über die gegebenenfalls der Rest einerImino, phenylene, phenyleneoxy, phenylenamino, amide, hydrazide, carbonyl, ureido, thiourido-, thioamide, ester group (s), 1 to 2 oxygen, sulfur and / or nitrogen atom ( e) and optionally 1 to 5 hydroxy, Mercapto, oxo, thioxo, carboxy, alkyl carboxylic acid, ester, thiocyanate and / or amino groups and Z for a hydrogen atom, a residue of an amino acid, a peptide, a polynucleotide or a steroid or a functional group via the optionally the rest of one
Aminosäure, eines Peptids, eines Polynucleotids oder eines Steroids gebunden ist, steht, R2 für einen geradkettigen oder verzweigten Cj-CjQ-Alkylrest, der gegebenenfalls eine -COOH -Gruppe enthält, einen C7-Cj2 - Aralkylrest oder einen Aromaten, der gegebenenfalls mit einemAmino acid, a peptide, a polynucleotide or a steroid is attached, R 2 is a straight-chain or branched Cj-C j Q-alkyl radical, which optionally contains a -COOH group, a C 7 -C j2 aralkyl radical or an aromatic who, if necessary, with a
Chlor- oder Bromatom, einer Thiocyanat-, einer Methyl-, Ethyl-, Carboxyl- und/oder Methoxygruppe substituiert ist, steht, R4 für ein Wasserstoffatom oder eine Carboxylgruppe steht oder für den Fall, daß R1 ein Wasserstoffatom oder eineChlorine or bromine atom, a thiocyanate, a methyl, ethyl, carboxyl and / or methoxy group is substituted, R 4 represents a hydrogen atom or a carboxyl group or in the event that R 1 represents a hydrogen atom or a
Carboxylgruppe bedeutet, zusätzlich auch für eine Gruppe -U-Z steht, worin U und Z die angegebenen Bedeutungen haben, R3 für ein Wasserstoffatom, ein Metallionenäquivalent einesCarboxyl group also means a group -UZ, in which U and Z have the meanings given, R 3 represents a hydrogen atom, a metal ion equivalent of one
Elementes der genannten Ordnungszahlen, einen Trifluoracetat-, Acetat-, Benzoat-, Cι-C6-Acyl-, einenElement of the atomic numbers mentioned, a trifluoroacetate, acetate, benzoate, C 1 -C 6 acyl, one
Benzoyl-, einen Hydroxyacetyl-, einen Acetamidomethyl-, einen gewünschtenfalls mit einem Chlor- oder Bromatom, einer Methyl-, Ethyl-, Carboxyl- und/oder Methoxygruppe substituierten Benzoesäurerest, einen p-Methoxybenzyl-, einen SH-Schutzgruppe, einenBenzoyl, a hydroxyacetyl, an acetamidomethyl, a benzoic acid residue, optionally substituted with a chlorine or bromine atom, a methyl, ethyl, carboxyl and / or methoxy group, a p-methoxybenzyl, an SH protecting group, a
Rest oder,
Figure imgf000064_0001
für den Fall daß X2, X3 für ein Wasserstoff und X1 für ein Wasserstoff oder einen gegebenfalls substituierten CrCι2- Alkylrest steht, für einen Rest der Formel II RRest or,
Figure imgf000064_0001
in the event that X 2 , X 3 is a hydrogen and X 1 is a hydrogen or an optionally substituted C r -C 2 alkyl radical, for a radical of the formula II R
Figure imgf000065_0001
ÖD
Figure imgf000065_0001
PS
steht, worin V*. V2, V3, V4, χi, X2, χ3, n, m, p, RI, R2 ^dwhere V *. V 2 , V 3 , V 4 , χi, X 2 , χ3, n , m , p , RI, R 2 ^ d
R4 die angegebenen Bedeutungen haben, wobei mindestens ein und höchstens zwei Reste V1, V2, V3, V4 für eine Carbonylgruppe stehen.R 4 have the meanings given, where at least one and at most two radicals V 1 , V 2 , V 3 , V 4 represent a carbonyl group.
2. Verbindungen der allgemeinen Formel I, dadurch gekennzeichnet, daß mindestens zwei der Reste X1, X2, X3 oder R3 für ein Metallionenequivalent eines radioaktiven Metallisotops der Ordnungszahlen 43, 45, 46, 75, 82 oder 83 steht.2. Compounds of the general formula I, characterized in that at least two of the radicals X 1 , X 2 , X 3 or R 3 represent a metal ion equivalent of a radioactive metal isotope of atomic numbers 43, 45, 46, 75, 82 or 83.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß Z für eine Aminosäure oder ein Peptid steht.Compound according to one of the preceding claims, characterized in that Z represents an amino acid or a peptide.
4. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin Z für ein Polynucleotid steht.4. A compound according to any one of the preceding claims, wherein Z is a polynucleotide.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß V1 und V4 jeweils für eine Carbonylgruppe, V2 und V3 jeweils für eine -CH2- Gruppe und p für die Ziffer 0 steht.Compound according to one of the preceding claims, characterized in that V 1 and V 4 each represent a carbonyl group, V 2 and V 3 each represent a -CH 2 - group and p represents the number 0.
Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß als radioaktives Metallion ein 99m-Technetium enthalten ist.Compound according to one of the preceding claims, characterized in that a 99m technetium is contained as the radioactive metal ion.
7. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß R4 Wasserstoff oder eine Carbonsäuregruppe ist. 7. Compound according to one of the preceding claims, characterized in that R 4 is hydrogen or a carboxylic acid group.
8. Verbindung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß R2 ein p-CH3-C6H - Rest ist.8. A compound according to any one of the preceding claims, characterized in that R 2 is a p-CH 3 -C 6 H radical.
9. Verbindung nach Anspruchl, dadurch gekennzeichnet, daß X1, X2 und X3 für ein Wasserstoffatom und R3 für einen Rest der Formel II stehen.9. A compound according to claim 1 , characterized in that X 1 , X 2 and X 3 represent a hydrogen atom and R 3 represents a radical of formula II.
10. Pharmazeutische Mittel, enthaltend mindestens einen Metallkomplex der Formel I worin mindestens zwei der Reste X1, X2, X3 und/oder R3 für ein Metallionenequivalent stehen.10. Pharmaceutical compositions containing at least one metal complex of the formula I in which at least two of the radicals X 1 , X 2 , X 3 and / or R 3 are equivalent to a metal ion.
11. Verwendung eines Metallkomplexes nach Anspruch 1 in der Radiodiagnostik oder Radiotherapie.11. Use of a metal complex according to claim 1 in radio diagnosis or radiotherapy.
12. Verfahren zur Herstellung eines pharmazeutischen Mittels gemäß Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel I mit X2 und X3 in der Bedeutung eines Wasserstoffatoms und X1 in der Bedeutung von Wasserstoff oder einem gegebenenfalls substituierten C C^-Alkylrest und ein Reduktionsmittel, unter Zugabe der in der Galenik üblichen Zusätze im wäßrigem Medium gelöst wird und anschließend, gegebenfalls unter Zugabe eines Transferliganden, mit einem Metallsalz oder Metalloxid des gewünschten Metallions umgesetzt und gewünschtenfalls mit einem pharmakologisch akzeptablen radiologischen Trägerstoff versetzt wird, wobei der Komplexbildner im Übeschuß, gegebenenfalls in Form seines Alkalisalzes, zugesetzt wird. 12. A process for the preparation of a pharmaceutical composition according to claim 10, characterized in that a compound of formula I with X 2 and X 3 in the meaning of a hydrogen atom and X 1 in the meaning of hydrogen or an optionally substituted CC ^ alkyl radical and a Reducing agent is dissolved in the aqueous medium with the addition of the additives customary in galenics and then, if appropriate with the addition of a transfer ligand, reacted with a metal salt or metal oxide of the desired metal ion and, if desired, mixed with a pharmacologically acceptable radiological carrier, the complexing agent being in excess, optionally in the form of its alkali salt.
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