UA94138U - METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION - Google Patents
METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION Download PDFInfo
- Publication number
- UA94138U UA94138U UAU201406471U UAU201406471U UA94138U UA 94138 U UA94138 U UA 94138U UA U201406471 U UAU201406471 U UA U201406471U UA U201406471 U UAU201406471 U UA U201406471U UA 94138 U UA94138 U UA 94138U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- followed
- prevention
- treatment
- obtaining
- antigens
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 title abstract description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 13
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 abstract description 20
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 abstract description 18
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 abstract 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 abstract 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000012449 sabouraud dextrose agar Substances 0.000 description 4
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 4
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010062575 Muscle contracture Diseases 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 208000006111 contracture Diseases 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000004237 neck muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000009979 protective mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Спосіб одержання імунобіологічного препарату для попередження та лікування кандидозної інфекції на основі С. albicans та С. tropicalis, при якому антигени вивільнені дією на клітини ультразвуковою дезінтеграцією при довжині хвилі 20-24 кГц та інтенсивності 5-20 Вт/см протягом 15-60 хв. при температурі 25-, з подальшим розділенням рідкої та твердої фаз переважно центрифугуванням при швидкості обертання 3000-5000 об./хв, з подальшою попередньою та стерилізуючою фільтрацією, ультрафільтрацією та виділенням цільового продукту у діапазоні 1-50 кДа, з подальшим концентруванням білка 1-10 мг/мл у розчинах одержаних антигенів грибів С. albicans та С. tropicalis та їх змішуванням.A method of obtaining an immunobiological preparation for the prevention and treatment of candidiasis infection based on C. albicans and C. tropicalis, in which antigens are released by the action of cells by ultrasonic disintegration at a wavelength of 20-24 kHz and an intensity of 5-20 W / cm for 15-60 min. at a temperature of 25-, followed by separation of the liquid and solid phases, preferably by centrifugation at a rotation speed of 3000-5000 rpm, followed by pre-sterilization and filtration, ultrafiltration and separation of the target product in the range of 1-50 kDa, followed by concentration of 1- 1- kDa 10 mg / ml in solutions of the obtained antigens of the fungi C. albicans and C. tropicalis and mixing them.
Description
Корисна модель належить до фармації, медицини та ветеринарії, а саме імунобіологічних препаратів для попередження та лікування кандидозної інфекції.A useful model belongs to pharmacy, medicine and veterinary medicine, namely immunobiological drugs for the prevention and treatment of candidal infection.
За останні роки різко зросла кількість хворих на кандидоз серед людей та тварин, який викликається дріжджоподібними грибами роду Сападіда. Зростання захворюваності на кандидоз пов'язане з нераціональним використанням антибіотиків, гормонів, стероїдних препаратів, імунодепресантів та інших препаратів, а також посиленням патогенності самих дріжджоподібних грибів роду Сапаіїда. Кандидоз проявляється у різних формах, з яких найбільшу небезпеку представляють системний та вісцеральний кандидоз. Вони характеризуються тривалим протіканням хвороби, мають різноманітні клінічні прояви та часті рецидиви. Такі форми кандидозу важко піддаються лікуванню сучасними медикаментозними засобами, у тому числі і протигрибковими антибіотиками. У зв'язку з цим, для терапії кандидозних захворювань рекомендується використання специфічної стимуляції захисних механізмів. Для цього використовуються вакцини на основі грибів роду Сапаїйда.In recent years, the number of patients with candidiasis among people and animals, which is caused by yeast-like fungi of the genus Sapadida, has increased dramatically. The increase in the incidence of candidiasis is associated with the irrational use of antibiotics, hormones, steroid drugs, immunosuppressants, and other drugs, as well as the increased pathogenicity of the yeast-like fungi of the genus Sapaiida. Candidiasis manifests itself in various forms, of which systemic and visceral candidiasis represent the greatest danger. They are characterized by a long course of the disease, have various clinical manifestations and frequent relapses. Such forms of candidiasis are difficult to treat with modern drugs, including antifungal antibiotics. In this regard, the use of specific stimulation of protective mechanisms is recommended for the treatment of candidal diseases. For this, vaccines based on mushrooms of the Sapaiida genus are used.
Відомий спосіб одержання вакцини проти кандидозу сільськогосподарських тварин, який полягає у культивуванні штаму гриба С. аЇрісапе Мо 253 у матрацах протягом 10 діб та подальшому виділенні за допомогою ультразвуку розчинного антигену зі штаму гриба с. аірісап5 Мо 253 з активністю спор 4,5-108-5,5-108 в 1 см3 та індексом агломерації 6-10 95, котрий уявляє собою цитоплазматичну фракцію гриба та ад'ювант (11.There is a known method of obtaining a vaccine against candidiasis of farm animals, which consists in the cultivation of the strain of the fungus S. ayrisape Mo 253 in mattresses for 10 days and the subsequent isolation with the help of ultrasound of a soluble antigen from the strain of the fungus p. airisap5 Mo 253 with spore activity of 4.5-108-5.5-108 in 1 cm3 and an agglomeration index of 6-10 95, which represents the cytoplasmic fraction of the fungus and adjuvant (11.
Недоліком наведеного способу є довготривале культивування штаму грибів, що призводить до старіння культури та втрати активності, а також відсутність методів очищення та стандартизації препарату.The disadvantage of this method is the long-term cultivation of the mushroom strain, which leads to aging of the culture and loss of activity, as well as the lack of methods of purification and standardization of the preparation.
Відомий спосіб одержання вакцини проти кандидозу людини, який полягає у культивуванні штаму гриба С. аЇрісап5 Мо 253 протягом 28-36 годин та подальшому виділенні за допомогою ультразвуку розчинного антигену зі штаму гриба С. аІрісапе Мо 253 з концентрацією клітин грибів 1,85-108-2,5-108 в 1 см дистильованої води, індексом імуногенності 6-9 95 та вмістом ліпідів - до 0,2 95, полісахаридів - 50-76 95, пептидів з м.м. менше 10 Кд - 80-87 95, засіб містить як інактиватор - формалін, а як розчинник дистильовану воду |21.There is a known method of obtaining a vaccine against human candidiasis, which consists in the cultivation of the strain of the fungus S. airisape Mo 253 for 28-36 hours and the subsequent isolation with the help of ultrasound of a soluble antigen from the strain of the fungus S. airisape Mo 253 with a concentration of fungal cells of 1.85-108- 2.5-108 in 1 cm of distilled water, with an immunogenicity index of 6-9 95 and the content of lipids - up to 0.2 95, polysaccharides - 50-76 95, peptides with m.m. less than 10 Kd - 80-87 95, the agent contains formalin as an inactivator, and distilled water as a solvent |21.
Недоліком наведеного способу є нераціональне використання ресурсів тому, що одержана вакцина має недостатньо високу активність, забезпечує формування імунітету тільки протиThe disadvantage of this method is the irrational use of resources because the vaccine obtained is not sufficiently active and provides the formation of immunity only against
Зо гриба С. аїІрісапо і не може бути використана для лікування, а використовується тільки для попередження кандидозів.The mushroom S. aiIrisapo cannot be used for treatment, but is used only for the prevention of candidiasis.
Відомий спосіб одержання вакцини проти вісцеральних мікозів кроликів, який полягає у культивуванні штаму гриба Мисог гасетовив 195 та С. аІрісапе Мо 253 і подальшому виділенні складових антигенів за допомогою ультразвуку зі штаму гриба Мисог гасето5ив 195 та штаму гриба С. аїЇрісап5 Мо 253, які культивували зі швидкістю культивування 28-36 годин та концентрацією клітин гриба 1,85-108-2,5-1089 в 1 см3 в 1 см3 дистильованої води |З.There is a known method of obtaining a vaccine against visceral mycoses of rabbits, which consists in the cultivation of the Mysog gasetoviv 195 and S. aiIrisape Mo 253 mushroom strains and the subsequent isolation of component antigens using ultrasound from the Mysog gaseto5iv 195 mushroom strain and the S. aiIrisape Mo 253 mushroom strain, which were cultivated with with a cultivation rate of 28-36 hours and a concentration of mushroom cells of 1.85-108-2.5-1089 in 1 cm3 in 1 cm3 of distilled water |Z.
Недоліком наведеного способу є нераціональне використання ресурсів тому, що одержана вакцина має недостатньо високу активність та забезпечує формування імунітету тільки проти гриба С. аіІрісапз і не може бути використана для лікування кандидозів.The disadvantage of this method is the irrational use of resources, because the vaccine obtained has insufficiently high activity and ensures the formation of immunity only against the fungus S. aiIrisapz and cannot be used for the treatment of candidiasis.
За прототип вибрано відомий спосіб одержання асоційованої вакцини проти кандидозу тварин, яка як антигени містить інактивовані бластоспори штамів С. аІрісапе Мо 95 и С. ігорісаїївAs a prototype, the well-known method of obtaining an associated vaccine against animal candidiasis, which as antigens contains inactivated blastospores of strains S. aIrisape Mo 95 and S. igorisaii
Мо 87, взяті у рівних співвідношеннях по 10-40 млн бластоспор в 1 см З 0,8-1 95 розчину сірчанокислого натрію |4|.Mo 87, taken in equal proportions of 10-40 million blastospores in 1 cm of 0.8-1 95 sodium sulfate solution |4|.
Недоліком наведеного способу є нераціональне використання ресурсів тому, що одержана вакцина має недостатньо високу активність.The disadvantage of this method is the irrational use of resources because the vaccine obtained is not sufficiently active.
Задачею корисної моделі є розробка ефективного способу одержання імунобіологічного препарату для попередження та лікування кандидозної інфекції, який має протективні властивості та діє одночасно у відношенні кандидозних захворюваннях, викликаних різними видами грибів роду Сапаїйда.The task of the useful model is the development of an effective method of obtaining an immunobiological drug for the prevention and treatment of candidal infection, which has protective properties and acts simultaneously in relation to candidal diseases caused by various species of fungi of the Sapaiida genus.
Поставлена задача вирішується таким чином, що спосіб одержання імунобіологічного препарату для попередження та лікування кандидозної інфекції на основі С. аїрісап5 та с. їгорісаїййє, згідно з корисною моделлю, здійснюється дією на клітини ультразвуковою дезінтеграцією при довжині хвилі 20-24 кГц та інтенсивності 5-20 Вт/см протягом 15-60 хв при температурі 25-30"С, з подальшим розділенням рідкої та твердої фаз переважно центрифугуванням при швидкості обертання 3000-5000 об/хв, з подальшою попередньою та стерилізуючою фільтрацією, ультрафільтрацією та виділенням цільового продукту у діапазоні 1- 50 кДа, з подальшим концентруванням білка 1-10 мг/мл у розчинах одержаних антигенів грибівThe task is solved in such a way that the method of obtaining an immunobiological preparation for the prevention and treatment of candidal infection based on S. airisap5 and p. according to a useful model, it is carried out by acting on cells by ultrasonic disintegration at a wavelength of 20-24 kHz and an intensity of 5-20 W/cm for 15-60 min at a temperature of 25-30"C, followed by separation of the liquid and solid phases mainly by centrifugation at a rotation speed of 3000-5000 rpm, followed by preliminary and sterilizing filtration, ultrafiltration and isolation of the target product in the range of 1-50 kDa, followed by protein concentration of 1-10 mg/ml in solutions of the obtained fungal antigens
С. аіІрісапз та С. Морісаїї5 та їх змішуванням.S. aiIrisapz and S. Morisaii5 and their mixing.
Заявлений спосіб здійснюється наступним чином. Культури дріжджоподібного гриба роду С. бо аірісапе та С. Морісайв окремо висівають у пробірки з агаром Сабуро та культивують у термостаті протягом 2-х діб. Одержані культури окремо висівають у матраци з агаром Сабуро.The claimed method is carried out as follows. Cultures of the yeast-like fungus of the genus S. bo airisape and S. Morisive are sown separately in tubes with Sabouraud agar and cultivated in a thermostat for 2 days. The resulting cultures are sown separately in mattresses with Sabouraud agar.
Далі проводять культивування у термостаті протягом 4-12 діб. Клітини грибів С. аїІрісап5 та С. ігорісаійє окремо руйнують ультразвуковою дезінтеграцією з подальшим розділенням рідкої та твердої фаз центрифугуванням, далі проводять попередню, стерилізуючу фільтрацію та ультрафільтрацією, здійснюють змішування одержаних антигенів грибів С. аїЇрісапе та С іорісаїїз. Одержаний препарат стандартизують за вмістом білка.Then cultivation is carried out in a thermostat for 4-12 days. The cells of the fungi C. aiIrisap5 and S. igorisaii are destroyed separately by ultrasonic disintegration followed by separation of the liquid and solid phases by centrifugation, then preliminary, sterilizing filtration and ultrafiltration are carried out, mixing of the obtained antigens of the mushrooms C. aiIrisape and C. iorisiiaz is carried out. The resulting preparation is standardized by protein content.
Імунобіологічний препарат для попередження та лікування кандидозної інфекції, отриманий за заявленим способом, містить суміш білків та полісахаридів. Полісахариди представлені моносахаридними елементами: манозою, у меншій кількості глюкозою.The immunobiological preparation for the prevention and treatment of candidiasis infection, obtained by the claimed method, contains a mixture of proteins and polysaccharides. Polysaccharides are represented by monosaccharide elements: mannose, in smaller amounts glucose.
Новий імунобіологічний препарат для попередження та лікування кандидозної інфекції може бути використаний безпосередньо або у ліофілізованій формі.A new immunobiological drug for the prevention and treatment of candidal infection can be used directly or in a lyophilized form.
Усі параметри заявленого способу визначенні експериментальним шляхом, спосіб може бути здійснений за допомогою стандартного обладнання.All parameters of the claimed method are determined experimentally, the method can be carried out using standard equipment.
Корисна модель ілюструється прикладами.A useful model is illustrated by examples.
Приклад 1.Example 1.
Культури дріжджоподібного гриба роду С. аірбісапє штам ССМ 335-867 та С ІМорісаїв штамCultures of the yeast-like fungus of the genus S. airbisapye strain SCM 335-867 and S IMorisaiv strain
АТТС 20336 окремо висівають у пробірки з агаром Сабуро та культивують у термостаті при температурі 25:42 "С протягом 2-х діб. Одержану культуру змивають розчином ізотонічного стерильного 0,995 натрію хлориду та окремо висівають у матраци з агаром Сабуро. Далі проводять культивування у термостаті при температурі 25:22 "С протягом 4-12 діб. Кожні 2 доби культуру з кожного матраца перевіряють на мікробіологічну чистоту шляхом мікроскопування.ATTS 20336 is sown separately in tubes with Sabouraud agar and cultivated in a thermostat at a temperature of 25:42 "C for 2 days. The resulting culture is washed with a solution of isotonic sterile 0.995 sodium chloride and separately sown in mattresses with Sabouraud agar. Further, cultivation is carried out in a thermostat at at a temperature of 25:22 "C for 4-12 days. Every 2 days, the culture from each mattress is checked for microbiological purity by microscopy.
Одержану культури окремо змивають розчином ізотонічного стерильного 0,9 95 натрію хлориду.The obtained culture is washed separately with a solution of isotonic sterile 0.9 95 sodium chloride.
Проводять окремо руйнування клітин грибів С. аїЇрбісапе та С. Морісаїв ультразвуковою дезінтеграцією при довженні хвилі 20-24 кГц та інтенсивності 5-20 Вт/сме протягом 15-60 хвилин при температурі 25-30"С, з подальшим розділенням рідкої та твердої фаз переважно центрифугуванням при швидкості обертання 3000-5000 об/хв. протягом 10-20 хв, проводять попередню та стерилізуючу фільтрацію на мембранних фільтрах з діаметром пор 0,45 мкм та 0,22 мкм, проводять ультрафільтрацією та виділяють цільовий продукт у діапазоні 10 кДа, стандартизують розчини антигенів за вмістом білку С. аІрісап5 з концентрацією З мг/мл та С.The destruction of the cells of S. aiYirbisape and S. Morisai mushrooms is carried out separately by ultrasonic disintegration at a wave length of 20-24 kHz and an intensity of 5-20 W/sme for 15-60 minutes at a temperature of 25-30"C, with further separation of the liquid and solid phases mainly by centrifugation at a rotation speed of 3000-5000 rpm for 10-20 minutes, perform preliminary and sterilizing filtration on membrane filters with pore diameters of 0.45 μm and 0.22 μm, perform ultrafiltration and isolate the target product in the 10 kDa range, standardize solutions of antigens according to the protein content of C. aIrisap5 with a concentration of 3 mg/ml and C.
Зо іорісаїї з концентрацією 5 мг/мл, змішують одержані антигени грибів С. аїІрісапв та С. орісаїїв у співвідношенні 1:11 за допомогою електромішалки при швидкості обертання 100 об/хв., у випадку багатодозових контейнерів додають консервант.With a concentration of 5 mg/ml, the obtained antigens of the mushrooms S. aiIrisapv and S. orisaii are mixed in a ratio of 1:11 using an electric mixer at a rotation speed of 100 rpm, in the case of multi-dose containers, a preservative is added.
Приклад 2. Визначення протективної дії заявленого препарату проводили на білих мишах.Example 2. Determination of the protective effect of the claimed drug was carried out on white mice.
Для оцінки здатності заявленого імунобіологічного препарату викликати протективні реакції проводили дослідження на здорових білих мишах двохмісячного віку масою 18-22 г по 6 тварин у контрольних та дослідних групах, які утримувалися в однакових умовах на стандартному раціоні. Перед дослідженнями тварини проходили акліматизацію в умовах експериментальної кімнати. Мишам внутрішньом'язово у верхню частину задньої правої лапи вводили одержаний імунобіологічний препарат у об'ємі по 0,2 мл. Через 14 днів, повторно, в верхню частину задньої лівої лапи вводили одержаний імунобіологічний препарат у об'ємі по 0,2 мл. Тваринам у контрольній групі вводили фізіологічний розчин. Через 1 місяць після імунізації проводили внутрішньочеревне зараження дослідних тварин. Для цього використовували суспензію грибівTo assess the ability of the declared immunobiological preparation to cause protective reactions, research was conducted on healthy two-month-old white mice weighing 18-22 g, 6 animals each in control and experimental groups, which were kept under the same conditions on a standard diet. Before the research, the animals underwent acclimatization in the conditions of the experimental room. The obtained immunobiological preparation in a volume of 0.2 ml was injected into the mice intramuscularly in the upper part of the right hind paw. After 14 days, the received immunobiological preparation in a volume of 0.2 ml was again injected into the upper part of the rear left paw. Animals in the control group were injected with physiological saline. 1 month after immunization, experimental animals were infected intraperitoneally. A suspension of mushrooms was used for this
С. аірбісапе штам ССМ 335-867 у кількості 20 млн. клітин та С. ігорісаїє штам АТТС20336 у кількості 60 млн. клітин в об'ємі 1 мл.S. airbisape strain SCM 335-867 in the amount of 20 million cells and S. igorisaie strain ATTS20336 in the amount of 60 million cells in a volume of 1 ml.
Результати проб ураховували за кількістю різних проявів хвороби та оцінювали за наступною системою: (-) - відсутність проявів захворювання; слабка форма захворювання (тк) - неохайний вигляд, відмова від їжі, падіння ваги тіла, порушення функції вивідних органів; середня форма захворювання (5 ж) - адинамія, неохайний вигляд, відмова від їжі, падіння ваги тіла, контрактури шийних м'язів, бокове розташування тіла, порушення функції вивідних органів, під час розтину при дослідженні слизових оболонок природних отворів були виявлені ознаки патологічних процесів, висівання грибів з фекалій тварин; розвинута форма захворювання (ж -) - адинамія, неохайний вигляд, відмова від їжі, падіння ваги тіла, контрактури шийних м'язів, параліч кінцівок, судоми, бокове розташування тіла, порушення функції вивідних органів, при дослідженні слизових оболонок природних отворів, внутрішніх органів тварин були виявлені ознаки патологічних процесів: мікроабсцеси у корковому шарі нирок, у легенях, селезінці, печені та інших, виділення ретрокультур грибів з органів тварин (табл. 1).The results of the samples were counted according to the number of different manifestations of the disease and evaluated according to the following system: (-) - absence of disease manifestations; weak form of the disease (tk) - unkempt appearance, refusal to eat, loss of body weight, impaired function of excretory organs; the average form of the disease (5 women) - adynamia, untidy appearance, refusal to eat, loss of body weight, neck muscle contractures, lateral position of the body, impaired function of the excretory organs, during the autopsy, when examining the mucous membranes of natural openings, signs of pathological processes were found , sowing mushrooms from animal feces; advanced form of the disease (f -) - adynamia, unkempt appearance, refusal to eat, loss of body weight, neck muscle contractures, paralysis of the limbs, convulsions, lateral position of the body, impaired function of excretory organs, when examining the mucous membranes of natural openings, internal organs animals showed signs of pathological processes: microabscesses in the cortical layer of the kidneys, lungs, spleen, liver, and others, the release of retrocultures of fungi from animal organs (Table 1).
Таблиця 1Table 1
Протективна дія імунобіологічного препаратуProtective effect of an immunobiological drug
Препарати 1 121 з 144151 6 мунобіологічнийпрепарат! ЇЇ Її Її Її її 11100111 РезультатичерезЗмісяці//-:/ / |/ мунобіологічнийпрепарат! ЇЇ Її Її Її їїPreparations 1 121 of 144151 6 immunobiological preparation! Her Her Her Her Her 11100111 Results through Mixtures//-:/ / |/ immunobiological drug! Her Her Her Her Her
В результаті проведених досліджень встановлено, що одержаний імунобіологічний препарат забезпечує 100 95 тварин, протективні властивості протягом З місяців.As a result of the conducted research, it was established that the immunobiological preparation obtained provides 100 95 animals with protective properties for 3 months.
Таким чином, одержаний препарат може використовуватися для попередження та лікування різних форм кандидозу, у тому числі вісцеральної форми, яка важко піддається діагностиці та лікуванню.Thus, the obtained drug can be used to prevent and treat various forms of candidiasis, including the visceral form, which is difficult to diagnose and treat.
Джерела інформації: 1. 1. Пат. 2217163 Российская Федерация, МПК" А 61 К 39/00, С12М1/14. Вакцина против кандидоза сельскохозяйственньїх животньїх / Агольцов В. А., Ласкавьйшй В.Н. (РФ). - 2002104050/13; заяв. 19.02.2002; опубл. 27.11.2003. 2. Пат. 2281110 Российская Федерация, МПК" А 61 К 36/06. Лекарственное средство против кандидоза человека для иньекций / Ласкавьй В. Н., Шуманов В. М. (РФ). - 2005103460/15; заяв. 10.02.2005; опубл. 10.08.2006.Sources of information: 1. 1. Pat. 2217163 Russian Federation, IPC" A 61 K 39/00, C12M1/14. Vaccine against candidiasis of agricultural animals / V. A. Agoltsov, V. N. Laskavyysh (RF). - 2002104050/13; application. 02.19.2002; publ. 27.11.2003. 2. Pat. 2281110 Russian Federation, IPC" A 61 K 36/06. Medicine against human candidiasis for injections / Laskavy V. N., Shumanov V. M. (RF). - 2005103460/15; statement 10.02.2005; published 10.08.2006.
З. Пат. 2352355 Российская Федерация, МПК" А 61 К 39/00, А 61 Р 31/00. Ассоциированная вакцина против висцеральньх микозов кроликов / Ласкавьій В. Н., Панферов В. И., Малахова Е.Z. Pat. 2352355 Russian Federation, MPK" А 61 K 39/00, А 61 Р 31/00. Associated vaccine against visceral mycoses of rabbits / Laskavyi V. N., Panferov V. I., Malakhova E.
А. (РФ). - 2007139596/13; заяв. 25.10.2007; опубл. 25.10.2007. 4. Пат. 2445109 Российская Федерация, МПК" А 61 К 36/062, А 61 К 47/02, С 12 М 1/14.A. (RF). - 2007139596/13; statement 25.10.2007; published 25.10.2007. 4. Pat. 2445109 Russian Federation, IPC" A 61 K 36/062, A 61 K 47/02, C 12 M 1/14.
Ассоциированная вакцина против кожного кандидоза плотоядньїх, способ изготовления ассоциированной вакциньі против кожного кандидоза плотоядньїх, способ профилактики и терапии кожного кандидоза плотоядньїх / Литвинов А. М., Апанасенко Н. А. (РФ). - 2010127796/10; заяв. 07.07.2010; опубл. 07.07.2010.Associated vaccine against each candidiasis of carnivores, method of preparation of associated vaccine against each candidiasis of carnivores, method of prevention and therapy of each candidiasis of carnivores / Lytvynov A. M., Apanasenko N. A. (RF). - 2010127796/10; statement 07.07.2010; published 07.07.2010.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UAU201406471U UA94138U (en) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UAU201406471U UA94138U (en) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA94138U true UA94138U (en) | 2014-10-27 |
Family
ID=56285509
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UAU201406471U UA94138U (en) | 2014-06-11 | 2014-06-11 | METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
UA (1) | UA94138U (en) |
-
2014
- 2014-06-11 UA UAU201406471U patent/UA94138U/en unknown
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH06508103A (en) | Benzopyranphenol derivatives for use as antibacterial, antiviral or immunostimulants | |
CN102816740A (en) | Avian influenza virus, inactivated vaccine and method for preparing same | |
DE69021761T3 (en) | Vaccine against tinea. | |
CN105106946B (en) | A kind of cattle and sheep foot rot oil emulsion vaccine and preparation method thereof | |
CN102805864A (en) | Newcastle disease and H9N2 subtype avian influenza bivalent inactivated vaccine and preparation method thereof | |
CN101766644A (en) | Fungus polysaccharide composition with anticancer effect and preparation method thereof | |
UA94138U (en) | METHOD OF OBTAINING AN IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATION FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF CANDIDOSIS INFECTION | |
RU2378011C1 (en) | Method for prophylactics of cattle brucellosis | |
CN111569059B (en) | Antigen-antibody complex vaccine for poultry and preparation method thereof | |
Vakhidova et al. | FUNGI OF THE GENUS PAECILOMYCES AND THEIR ROLE IN DEVELOPMENT ECHINOCOCCOSIS | |
CN101463079A (en) | Calf chondroprotein, preparation and use thereof | |
CN102770452B (en) | An IgY for a PA-MSHA bacterial strain, and preparation method and application thereof | |
CN109414486A (en) | For treating and preventing the composition of hoof and pawl disease | |
Tavakkoli et al. | Investigation on the using of linco-spectin solution for in ovo administration in chicken embryo | |
RU2404770C1 (en) | Method for production of complex immunotropic preparation for animals | |
CN105941308B (en) | A method of cleaning grade is cultivated by drug purification and screening method and tests tree shrew | |
Savina et al. | The effect of synthetic adjuvant on the formation of the immune response | |
TW200920387A (en) | Composition of mushroom beta-glucan for anti-cancer and preparation method thereof | |
RU2478399C2 (en) | Method of obtaining specific immunomodulator | |
RU2622746C2 (en) | Method for hyperimmune serum preparation for farm animals necrobacillosis treatment and prevention | |
Tripathi | Pharmaceutical from Animals | |
Rybalkin et al. | The study of protective properties of associated antigens of Candida albicans and Candida tropicalis | |
CN101686992A (en) | Application and injection and the preparation method of BCG polysaccharide nucleic acid extractive in the medicine of preparation treatment allergic skin disease | |
Rybalkin | The study of the therapeutic action of the cell-associated antigens of Candida albicans and Candida tropicalis fungi | |
MÃƒÆ et al. | In vitro behavior of Mycoplasmagallisepticum live-type nosode |