UA75233C2 - Method of preparing the biomass of lactobacteria - Google Patents
Method of preparing the biomass of lactobacteria Download PDFInfo
- Publication number
- UA75233C2 UA75233C2 UA20040504102A UA20040504102A UA75233C2 UA 75233 C2 UA75233 C2 UA 75233C2 UA 20040504102 A UA20040504102 A UA 20040504102A UA 20040504102 A UA20040504102 A UA 20040504102A UA 75233 C2 UA75233 C2 UA 75233C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- biomass
- nutrient medium
- differs
- cultivation
- glucose
- Prior art date
Links
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 14
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 6
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 claims description 6
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 abstract 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 abstract 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 abstract 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N (1-carboxy-2-sulfanylethyl)azanium;chloride;hydrate Chemical compound O.Cl.SCC(N)C(O)=O QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000721662 Juniperus Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- BDKZHNJTLHOSDW-UHFFFAOYSA-N [Na].CC(O)=O Chemical compound [Na].CC(O)=O BDKZHNJTLHOSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N azanium;hydron;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate Chemical compound [NH4+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC([O-])=O BWKOZPVPARTQIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- 229960001305 cysteine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- SCVOEYLBXCPATR-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SCVOEYLBXCPATR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 150000004684 trihydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід відноситься до області мікробіології, зокрема, до одержання біомаси лактобактерій (І асіорасіШив5 2 ріапіагит), і може бути використаний у медицині для отримання активних препаратів з мікробів-антагоністів та у харчовій промисловості при виробництві кисломолочних продуктів.The invention relates to the field of microbiology, in particular, to the production of lactobacilli biomass (I asiorasiShiv5 2 riapiagit), and can be used in medicine to obtain active preparations from antagonistic microbes and in the food industry in the production of fermented milk products.
Лікувально-профілактичний кисломолочний продукт на основі лактобактерій використовується у медичній практиці і харчовій промисловості для підвищення іммунорезистентності організму людини і профілактики шлунково-кишкових захворювань.The curative and preventive fermented milk product based on lactobacteria is used in medical practice and the food industry to increase the immune resistance of the human body and prevent gastrointestinal diseases.
Відомий спосіб одержання біомаси лактобактерій включає внесення до живильного середовища інокуляту, культивування біомаси у живильному середовищі протягом 15-16 годин (ОА, патент 37714 А, кл. А23С 21/02, 15.05.2001) | 1 ). При цьому, як живильне середовище використовують молочну сироватку з додаванням кукурудзяного екстракту, молока, екстракту пшеничних висівок, сульфату марганцю і буферних солей.A known method of obtaining the biomass of lactobacilli includes adding an inoculum to the nutrient medium, cultivating the biomass in the nutrient medium for 15-16 hours (OA, patent 37714 A, class A23C 21/02, 15.05.2001) | 1). At the same time, whey with the addition of corn extract, milk, wheat bran extract, manganese sulfate, and buffer salts is used as a nutrient medium.
Недоліками відомого способу є велика тривалість вирощування біомаси бактерій та наявність в біомасі 72 значної кількості баластних речовин.The disadvantages of the known method are the long duration of growing biomass of bacteria and the presence of a significant amount of ballast substances in biomass 72.
Найбільш близьким е спосіб одержання біомаси лактобактерій, що включає внесення до живильного середовища інокуляту, культивування біомаси у живильному середовищі |Методьі общей бактериологии. 11 /The closest is the method of obtaining the biomass of lactobacilli, which includes the introduction of the inoculum into the nutrient medium, the cultivation of biomass in the nutrient medium | Methods of general bacteriology. 11 /
Под ред. Ф.Герхардта. - М.: Мир, 1983) | 2 |). При цьому, як живильне середовище використовують комплексне середовище, що містить глюкозу, олеїнову кислоту, твін 40, ферментативний гідролізат казеїну, неорганічні солі (МагНРО, 2Н20, Масі, КСІ, МпСіІ»:НьО, МаЗО,-7Н»О), а також амінокислоти, кислотний гідролізат казеїну, пурини та вітаміни. Культивування проводять при температурі 37 С і рН 6,5 (ІІ, сс. 219, 251-253).Ed. F. Gerhardt. - M.: Mir, 1983) | 2|). At the same time, a complex medium containing glucose, oleic acid, Tween 40, enzymatic hydrolyzate of casein, inorganic salts (MagHRO, 2H20, Masi, KSI, MpSiI»:NhO, MaZO,-7H»O) is used as a nutrient medium, as well as amino acids, casein acid hydrolyzate, purines and vitamins. Cultivation is carried out at a temperature of 37 C and a pH of 6.5 (II, pp. 219, 251-253).
Недоліками відомого способу є тривалість вирощування біомаси бактерій та наявність в біомасі баластних речовин. Тривалість процесу вирощування займає 15-20 годин. счThe disadvantages of the known method are the duration of growing bacterial biomass and the presence of ballast substances in the biomass. The duration of the growing process takes 15-20 hours. high school
Задачею винаходу є удосконалення способу одержання біомаси лактобактерій, в якому завдяки підбору елективного середовища та умов вирощування скорочується тривалість процесу нарощування біомаси та (8) зменшується кількість баластних речовин.The task of the invention is to improve the method of obtaining biomass of lactobacilli, in which, thanks to the selection of selective environment and growing conditions, the duration of the process of building up biomass is reduced and (8) the amount of ballast substances is reduced.
Поставлена задача вирішується запропонованим способом одержання біомаси лактобактерій, що включає внесення до живильного середовища інокуляту, культивування біомаси у живильному середовищі при со зо коригуванні рН, в якому як інокулят використовують культуру другої генерації маточної культури І асіорбасійив ріапіагит, як живильне середовище використовують казеїново-дріжджове середовище КД-5. Культивування о біомаси проводять в атмосфері повітря чи аргону при тиску не більш як 0,3 атм та при додаванні глюкози. сThe task is solved by the proposed method of obtaining the biomass of lactobacilli, which includes the introduction of the inoculum into the nutrient medium, the cultivation of biomass in the nutrient medium with pH adjustment, in which the culture of the second generation of the mother culture I asorbasiiv riapiagite is used as the inoculum, and the casein-yeast medium is used as the nutrient medium KD-5. Cultivation of biomass is carried out in an air or argon atmosphere at a pressure of no more than 0.3 atm and with the addition of glucose. with
Причому при коригуванні рН, яке підтримують на рівні 5,0 - 6,8 за допомогою 5-10 9Фо-ного розчину аміаку, та/або додаванні глюкози здійснюють перемішування протягом З - 7 хв. при 70 - 100 об./хв. Глюкозу додають у іт) вигляді 40 Фо-ного водного розчину. їм-Moreover, when adjusting the pH, which is maintained at the level of 5.0 - 6.8 with the help of 5-10 9% ammonia solution, and/or adding glucose, stirring is carried out for 3 - 7 minutes. at 70 - 100 rpm. Glucose is added in the form of a 40% aqueous solution. them-
Для одержання інокуляту першу та другу генерації маточної культури І асіорасійив5 ріапіагит вирощують у живильному середовищу, де як таке використовують МРО-1.In order to obtain the inoculum of the first and second generation of the mother culture I asiorasiiv5 riapiagite is grown in a nutrient medium, where MPO-1 is used as such.
Культивування біомаси здійснюють при температурі 38--1 20.Cultivation of biomass is carried out at a temperature of 38--1 20.
Експериментально нами були виявлені умови, що є найбільш сприятливими для нарощування біомаси « бактерій І асіорасіїшз ріапіагит та використання живильного середовища. Було встановлено, що нарощування з с біомаси у казеїново-дріждовому середовищі КД-5 при тиску не більш як 0,3 атм та додаванні глюкози і обмеженому перемішуванні проходить енергійно і продуктивно без утворення баластних речовин. з Спосіб здійснюється таким чином.Experimentally, we discovered the conditions that are most favorable for the growth of biomass of bacteria and asioraciis riapiagitis and the use of a nutrient medium. It was established that the growth of c biomass in the casein-yeast medium KD-5 at a pressure of no more than 0.3 atm and the addition of glucose and limited mixing proceeds energetically and productively without the formation of ballast substances. with The method is carried out as follows.
Ліофілізований штам І асіорасійшз ріапіагит М 38 з ампули розводять поживним середовищем МРО-1The lyophilized strain I asiorasiyshz riapiagit M 38 from the ampoule is diluted with MPO-1 nutrient medium
Методом десятикратних розведень. -І До складу поживного середовища МРО-1 входять наступні компоненти: марганець сірчанокислий п'ятиводний - 0,05 г, цистеїн солянокислий - 0,2 г, магній сірчанокислий семиводний - 0,2 г, калій фосфорнокислий 1 двохзаміщений триводневий - 2,0 г, амоній лимонокислий - 2,0 г, натрій оцтовокислий триводневий - 5,0 г, ко печінковий екстракт- 100,0 мл, дріжджовий автолізат - 50,0 мл, пептон сухий ферментативний - 100 г, гідролізат знежиреного молока - 330,0 мл, твін 80-1,0 мл, глюкоза - 20,0 г, вода очищена - до 1 л. о Посіви у вигляді окремих ізольованих колоній витримують у скляній ємності, наповненій на чверть живильним 4) середовищем МРО-1, при температурі 38--0,5 «С протягом 24 - 36 годин.By the method of tenfold dilutions. -I The nutrient medium MPO-1 includes the following components: manganese sulfate pentahydrate - 0.05 g, cysteine hydrochloride - 0.2 g, magnesium sulfate heptahydrate - 0.2 g, potassium phosphate 1 disubstituted trihydrate - 2.0 g, ammonium citric acid - 2.0 g, sodium acetic acid trihydrogen - 5.0 g, liver extract - 100.0 ml, yeast autolysate - 50.0 ml, dry fermentative peptone - 100 g, skim milk hydrolyzate - 330.0 ml, tween 80-1.0 ml, glucose - 20.0 g, purified water - up to 1 l. o Sowings in the form of separate isolated colonies are kept in a glass container filled with a quarter of nutrient 4) MPO-1 medium at a temperature of 38--0.5 "C for 24-36 hours.
При відсутності сторонньої мікрофлори в мазках і контрольних середовищах, типові колонії першої генерації пересівають у балон, наповненому на чверть живильним середовищем МРО-1. Посіви витримують при температурі З8-1 С протягом 24 - 36 годин.In the absence of extraneous microflora in smears and control media, typical colonies of the first generation are transplanted into a balloon filled to a quarter of MPO-1 nutrient medium. The crops are kept at a temperature of 38-1 C for 24-36 hours.
Використовують готове або готують казеїново-дріждове середовище КД-5, що містить: нативний дріжджовий і) автолізат із дріжджів (150 мг 95) - 650 мл, триптичний гідролізат казеїну (з вмістом амінного азоту 150 мг 90) ко - З50 мл, лактоза- 10,0 г, натрію хлорид - 5,0 г, 1--цистеіїн-0,1 г, агар мікробіологічний - 0, 75 г, відвар із печінки ялової (1 : 2) - 100 мл. 60 До біору у підготовлене живильне середовище - казеїново-дріжджове середовище КД-5 (маса 60 - 110 л, температура 38-41 "С) вносять інокулят -культуру другої генерації маточної культури І асіобасіїїиз ріапіагит М З8.Ready-made or prepared casein-yeast medium KD-5 is used, containing: native yeast i) yeast autolysate (150 mg 95) - 650 ml, casein tryptic hydrolyzate (with amino nitrogen content 150 mg 90) ko - 350 ml, lactose- 10.0 g, sodium chloride - 5.0 g, 1-cysteine - 0.1 g, microbiological agar - 0.75 g, decoction of juniper liver (1:2) - 100 ml. 60 In the prepared nutrient medium - casein-yeast medium KD-5 (weight 60 - 110 l, temperature 38-41 "С) to the bior, inoculum - culture of the second generation of the mother culture I asiobasii from Riapiagite M Z8 is introduced.
Інокулят подається за допомогою тиску чи вакууму. Культивування біомаси проводять при температурі 38--1 «С, додаванні глюкози у вигляді 4095-ного водного розчину і коригуванні рН. Тиск підтримують не більш як 0,3 атм очищеним атмосферним повітрям чи аргоном. Перемішування, яке здійснюють під час коригування рн, 65 додаванні розчину глюкози та відбору проб, триває протягом 3-7 хв. при 70-100 об./хв. В процесі культивування біомаси рН підтримують на рівні 5-6,8. Коригування рН здійснюють 5-1095-им розчином аміаку. Кінець процесу культивування встановлюють за оптичною щільністю.The inoculum is delivered by pressure or vacuum. Cultivation of biomass is carried out at a temperature of 38--1 "C, adding glucose in the form of a 4095 aqueous solution and adjusting the pH. The pressure is maintained at no more than 0.3 atm with purified atmospheric air or argon. Mixing, which is carried out during pH adjustment, addition of glucose solution and sampling, lasts for 3-7 minutes. at 70-100 rpm. In the process of biomass cultivation, pH is maintained at the level of 5-6.8. The pH is adjusted with a 5-1095 ammonia solution. The end of the cultivation process is set by optical density.
Нарощування біомаси займає 7-10 годин. Кількість біомаси після концентрування становить - 5 - 10 кг.Biomass build-up takes 7-10 hours. The amount of biomass after concentration is 5-10 kg.
Приклад 1Example 1
Ліофілізований штам І асіорасійшз ріапіагит М 38 з ампули розводять поживним середовищем МРО-1 методом десятикратних розведень.The lyophilized strain I asiorasiyshz riapiagit M 38 from the ampoule is diluted with nutrient medium MPO-1 by the method of tenfold dilutions.
Посіви у вигляді окремих ізольованих колоній витримують у скляній ємності, наповненій на чверть живильним середовищем МРО-1, при температурі 38 «С протягом 28 годин.Sowings in the form of separate isolated colonies are kept in a glass container filled to a quarter of nutrient medium MPO-1 at a temperature of 38 °C for 28 hours.
При відсутності сторонньої мікрофлори в мазках і контрольних середовищах, типові колонії першої генерації 7/0 пересівають у балон, наповненому на чверть живильним середовищем МРО-1. Посіви витримують при температурі 38 «С протягом 24 годин.In the absence of extraneous microflora in smears and control media, typical colonies of the first generation 7/0 are transplanted into a flask filled with a quarter of MPO-1 nutrient medium. The crops are kept at a temperature of 38 °C for 24 hours.
До біору у підготовлене живильне середовище - казеїново-дріжджове середовище КД-5 (маса 60 л, температура 38 С) вносять інокулят - культуру другої генерації маточної культури І асіорасійив ріапіагит М 38.In the prepared nutrient medium - casein-yeast medium KD-5 (weight 60 l, temperature 38 C), inoculum - culture of the second generation of mother culture I asiorasiyiv riapiagit M 38 is added to the bior.
Інокулят подається за допомогою тиску. Культивування біомаси проводять при температурі 38 С, додаванні 75 глюкози у вигляді 4095-ного водного розчину і коригуванні рН. Тиск підтримують 0,2 атм очищеним атмосферним повітрям. Перемішування, яке здійснюють під час коригування рнН, додаванні розчину глюкози та відбору проб, триває протягом 5 хвилин при 100 об./хв. В процесі культивування біомаси рН підтримують на рівні 5,3-5,8.The inoculum is applied by pressure. Cultivation of biomass is carried out at a temperature of 38 C, adding 75 g of glucose in the form of a 4095 aqueous solution and adjusting the pH. The pressure is maintained at 0.2 atm with purified atmospheric air. Agitation, which is carried out during pH adjustment, addition of glucose solution and sampling, continues for 5 minutes at 100 rpm. In the process of biomass cultivation, pH is maintained at the level of 5.3-5.8.
Коригування рН здійснюють 1095-им розчином аміаку. Кінець процесу культивування встановлюють за оптичною щільністю.The pH is adjusted with a 1095 ammonia solution. The end of the cultivation process is set by optical density.
Нарощування біомаси займає 9 годин.Building biomass takes 9 hours.
Кількість біомаси після концентрування становить - 8,5 кг.The amount of biomass after concentration is 8.5 kg.
Приклад 2Example 2
Ліофілізований штам І асіорасійшз ріапіагит М 38 з ампули розводять поживним середовищем МРО-1 методом десятикратних розведень. Ге!The lyophilized strain I asiorasiyshz riapiagit M 38 from the ampoule is diluted with nutrient medium MPO-1 by the method of tenfold dilutions. Gee!
Посіви у вигляді окремих ізольованих колоній витримують у скляній ємності, наповненій на чверть живильним (5) середовищем МРО-1, при температурі 38 «С протягом 34 годин.Sowings in the form of separate isolated colonies are kept in a glass container filled to a quarter of the nutrient medium (5) MPO-1 at a temperature of 38 °C for 34 hours.
При відсутності сторонньої мікрофлори в мазках і контрольних середовищах, типові колонії першої генерації пересівають у балон, наповненому на чверть живильним середовищем МРО-1. Посіви витримують при температурі 38 «С протягом 29 годин. соIn the absence of extraneous microflora in smears and control media, typical colonies of the first generation are transplanted into a balloon filled to a quarter of MPO-1 nutrient medium. The crops are kept at a temperature of 38 °C for 29 hours. co
До біору у підготовлене живильне середовище - казеїново-дріжджове середовище КД-5 (маса 110 л, со температура 38 С) вносять інокулят -культуру другої генерації маточної культури І асіорасійив ріапіагит М 38.In the prepared nutrient medium - casein-yeast medium KD-5 (weight 110 l, so temperature 38 C), an inoculum - culture of the second generation of mother culture I asiorasiyiv riapiagit M 38 is added to the bior.
Інокулят подається за допомогою вакууму. Культивування біомаси проводять при температурі 38 (9, с додаванні глюкози у вигляді 40906-ного водного розчину і коригуванні рН. Тиск підтримують 0,3 атм аргоном. оюThe inoculum is delivered using a vacuum. Cultivation of biomass is carried out at a temperature of 38 (9), with the addition of glucose in the form of a 40906 aqueous solution and pH adjustment. The pressure is maintained by 0.3 atm argon.
Перемішування, яке здійснюють під час коригування рН, додаванні розчину глюкози та відбору проб, триває 3о протягом 7 хв. при 70 об./хв. В процесі культивування біомаси рН підтримують на рівні 6,0- 6,4. Коригування в рН здійснюють 595-им розчином аміаку. Кінець процесу культивування встановлюють за оптичною щільністю.Mixing, which is carried out during pH adjustment, addition of glucose solution and sampling, lasts 3 hours for 7 minutes. at 70 rpm In the process of biomass cultivation, pH is maintained at the level of 6.0-6.4. The pH is adjusted with a 595% ammonia solution. The end of the cultivation process is set by optical density.
Нарощування біомаси займає 10 годин.Building biomass takes 10 hours.
Кількість біомаси після концентрування становить - 9,5 кг. «The amount of biomass after concentration is 9.5 kg. "
Таким чином, запропоновано ефективний спосіб вирощування біомаси бактерій І асіорбасіїиз ріапіагит, який З 0 дозволяє скоротити тривалість процесу нарощування біомаси та зменшити кількість баластних речовин у с отриманій біомасі.Thus, an effective method of growing the biomass of bacteria and assorbation from riapiagite is proposed, which allows to reduce the duration of the biomass growth process and reduce the amount of ballast substances in the obtained biomass.
Claims (4)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UA20040504102A UA75233C2 (en) | 2004-05-28 | 2004-05-28 | Method of preparing the biomass of lactobacteria |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
UA20040504102A UA75233C2 (en) | 2004-05-28 | 2004-05-28 | Method of preparing the biomass of lactobacteria |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA75233C2 true UA75233C2 (en) | 2006-03-15 |
Family
ID=37456037
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UA20040504102A UA75233C2 (en) | 2004-05-28 | 2004-05-28 | Method of preparing the biomass of lactobacteria |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
UA (1) | UA75233C2 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103103145A (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-15 | 光明乳业股份有限公司 | Lactobacillus plantarum somatomedin as well as raw material composition, preparation method and application thereof |
-
2004
- 2004-05-28 UA UA20040504102A patent/UA75233C2/en unknown
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103103145A (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-15 | 光明乳业股份有限公司 | Lactobacillus plantarum somatomedin as well as raw material composition, preparation method and application thereof |
CN103103145B (en) * | 2011-11-11 | 2015-05-27 | 光明乳业股份有限公司 | Lactobacillus plantarum somatomedin as well as raw material composition, preparation method and application thereof |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA3164332A1 (en) | Microorganism-derived protein hydrolysates, and methods of preparation and use thereof | |
CN114981406A (en) | Method for preparing lactobacillus culture | |
JP2023139253A (en) | Medium supplement for high-yield culture of fastidious anaerobes and medium composition containing the same | |
JP4762987B2 (en) | Antihypertensive agent obtained by lactic acid bacteria culture | |
JP3017456B2 (en) | High-concentration culture method and culture product of propionic acid bacteria and processed product thereof | |
JP4780565B2 (en) | Lactic acid bacteria culture medium | |
JP4115181B2 (en) | Method for enhancing immunostimulatory effect of lactic acid bacteria | |
RU2415923C1 (en) | Method for production of fermentative hydrolysate of fresh white cabbage and nutritive medium for cultivation lactobacteria based thereon | |
UA75233C2 (en) | Method of preparing the biomass of lactobacteria | |
JP6330237B2 (en) | Lactobacillus lactic acid bacteria culture-grade culture medium, Lactobacillus lactic acid bacteria culture method, and Lactobacillus lactic acid bacteria culture production method | |
JP2000093162A (en) | Culture of sporogenous lactic acid bacterium | |
RU2475535C1 (en) | Method to produce probiotic preparation lacto-amylovorin | |
JP3587536B2 (en) | Calcium reinforcing agent and method for producing the same | |
RU2169472C2 (en) | Method of preparing bacterial ferment for fermented-milk product | |
JP7544461B2 (en) | Composition for improving survival of bifidobacteria | |
RU2366699C2 (en) | Method for making bifidus bacteria biomass | |
JPH01157395A (en) | Method for culturing microorganism | |
JPS60188060A (en) | Live mold powder of bacterium belonging to genus bifidobacterium, having high resistance to acid in stomach, and its preparation | |
Kongo et al. | Development of a chemically defined medium for growth of Bifidobacterium animalis | |
RU2154386C1 (en) | Method of whey processing | |
RU2083665C1 (en) | Method of preparing the bacterial preparation for meat products making | |
RU2517734C1 (en) | Method to prepare medicated product from live strains and microorganisms of lactobacilli and bifidobacteria "lb-complex plus" | |
JP2011250756A (en) | Method for producing polysaccharide derived from lactic bacterium | |
RU2260041C2 (en) | Method for probiotic production, two strains streptococcus salivarius subsp thermophilus used for probiotic production | |
RU2207019C1 (en) | Biologically active food additive and a method of preparation thereof |