UA72227C2 - Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood - Google Patents
Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood Download PDFInfo
- Publication number
- UA72227C2 UA72227C2 UA2001053642A UA2001053642A UA72227C2 UA 72227 C2 UA72227 C2 UA 72227C2 UA 2001053642 A UA2001053642 A UA 2001053642A UA 2001053642 A UA2001053642 A UA 2001053642A UA 72227 C2 UA72227 C2 UA 72227C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- plasminogen
- sorbent
- photocopolymer
- lysine
- human blood
- Prior art date
Links
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 title claims abstract description 19
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 title claims abstract description 19
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 4
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 3
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 15
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 claims description 6
- 238000005469 granulation Methods 0.000 claims description 6
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 5
- 230000003179 granulation Effects 0.000 claims description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 238000006552 photochemical reaction Methods 0.000 abstract 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 13
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 7
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 4
- -1 polyethylenesiloxane Polymers 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 3
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBRVSVVVWCFQMG-UHFFFAOYSA-N 4,4'-diaminodiphenylmethane Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1CC1=CC=C(N)C=C1 YBRVSVVVWCFQMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 101100010166 Mus musculus Dok3 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000963 caseinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical class [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229960005337 lysine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000013021 overheating Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 230000008925 spontaneous activity Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229920001169 thermoplastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004416 thermosoftening plastic Substances 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
Description
Винахід відноситься до біохімтехнологічних процесів, спрямованих на отримання ферментних препаратів, і може бути використаний як хімічною, так і фармацевтичною промисловістю при виробництві афінних сорбентів, призначених для виділення ферментів певної групи.
Найбільш близьким за технічною суттю і практичним призначенням є відомий спосіб отримання нерозчинного гранульованого кополімеру (матриці) при кополімеризації М-вінілпіролідону з малеїновим ангідридом шляхом термохімічного ініціювання, наступного гранулювання (зшивки), що здійснюється в двох незмішуючих між собою рідинах органічної (диметилформамід) і кремнійорганічної (поліетиленсилоксанова рідина) природи при 70-80" протягом 2-3Згод. і, нарешті, приєднання ліганду, що і означає утворення, власне, сорбенту (11.
Недоліком найбільш близького з відомих способів отримання афінного сорбенту є малий ступінь відтворюваності властивостей кополімеру на основі М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду, що є наслідком термохімічного радикально-ланцюгового методу. Так, наприклад, не спостерігається постійності у відтворенні такого параметру, як молекулярна маса від одного напрацювання до іншого, що характерно для термополімеризації за рахунок локальних областей перегріву реакційної маси в об'ємі (21. Цей недолік є типовим для термохімічної ( 460-807, «-6-8год.), гомо- і кополімеризації різних ненасичених мономерів (табл.1).
Вказана мета досягається тим, що процес кополімеризації М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду в мольному співвідношенні 4:1 відповідно здійснюється методом фотохімічного ініціювання при кімнатній температурі 18-257С протягом (6--1)год.
Таблиця 1
Умови термохімічного синтезу кополімерів" і їх фізико-хімічна характеристика
Умовне Реакційне середовище Середня й й позначення вакційне середовищ Середня (п), мопекулярна Час синтезу (УФ- Вихід кополімеру, кополімеру фото-кополімеру г/дл маса кополімеру опромінення), год ше кл» | діоккан.//// | 060 | 1832000 | щ-:Й 7 | 70 2 "Співвідношення М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду 4:1; термоініціатор - динітрил-азо-біс-ізомасляної кислоти; температура кополімеризації 7070.
Сутність винаходу пояснюється прикладами виконання.
Приклад 1. а) Фотохімічний спосіб отримання лінійного фотокополімеру на основі М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду.
У плоскодонну колбу ємністю 0,1л, забезпечену мішалкою, завантажують 10г (0,091моля) М-вінілпіролідону, 2,23г (0,02З3моля) малеїнового ангідриду, 0,45г (0,0027моля або 2,Омас.95) фотоініціатора (Дарокурі 173) і 10мл розчинника (діоксана).
Вміст колби ретельно перемішують до повного розчинення і гомогенізації всіх компонентів реакційного середовища. Потім отриману реакційну масу піддають УФ-опроміненню при Хмакс.-300-400нм у режимі періодичного перемішування протягом бгод. при температурі 18-2570.
У результаті фотокополімеризації отримують лінійний термопластичний фотокополімер (ФКП-1) на основі М- вінілпіролідону і малеїнового ангідриду в діоксані. Фотокополімер з розчину діоксану висаджують сумішшю розчинників ацетон:гексан-2:4. Декантацією видаляють розчинники (ацетон, гексан) від ФКП-1, додатково промивають діетиловим ефіром і висушують на повітрі. Після цих операцій отримують ФКП-1 у вигляді пластівцеподібного порошку білого кольору. Вихід ФКП-1 за початковою сировиною становив 11,62г (95мас.95).
Молекулярна маса ФКП-1, визначена за величиною характеристичної в'язкості (п)20,69г/дл. (табл.2) і становить 233900. б) Гранулювання (поперечна зшивка) ФКП-1.
У тригорлий реактор ємністю 0,5л, забезпечений механічною мішалкою, зворотним холодильником і термометром, завантажують О,Зл поліетиленсилоксану (ПЕС-5) і при інтенсивному перемішуванні практично одночасно додають розчин-1 (10г ФКП-1 в бОмл диметилформаміду) і розчин-2 (0,52г або 5,2мас.95 від ваги ФКП- 1 4,4-діамінодифенілметана в Змл диметилформаміду). Протягом 1 год температуру підвищують від 18-257С до 70-757"С0 і при цій температурі реакційну масу витримують ще протягом 1год., після чого протягом 2год. температуру в реакторі підвищують до 80-857С. Потім нагрів припиняють і реакційну масу повільно охолоджують протягом 2,5год. при постійному перемішуванні.
Отриманий зшитий гранульований фотокополімер ФКП-1 (ГФКП-1) відділяють фільтруванням від поліетиленсилоксану і диметилформаміду і промивають спочатку декількома порціями гексану, а потім, для повного видалення залишків поліетиленсилоксанового масла (ПЕС-5), сірчаним ефіром. ГФКП-1 сушать при температурі 25-30 і зберігають в герметичному посуді. Вихід гранульованого фотокополімеру ГФКП-1 - 9Змас.Оо (9,8г) (табл.3).
Таблиця 2
Умови фотохімічного синтезу фотокополімерів і їх фізико-хімічна характеристика позначення (розчинник) синтезу пі, г/дл |молекулярна маса| опромінення), |фотокополімеру, фотокополімеру фотокополімеру фотокополімеру год. о, о 1 ФКПЯ | 7 діоксган// 069 | 2339900. | щ- 6 щЩщ | 95 ж Ж«(«
ФК? 0 17111лдіоксан// | 0.74 | 251200 | (б г щДщ МюЯЖВ 97 2 і ФКПЗ | діоксган/ | 068 | 232200 | (6 | 9
Таблиця З
Деякі фізико-хімічні параметри фотокополімерів і афінних сорбентів (СФКП) 1 1 г)
Умовне | мобннонннн | Вйносна ступінь позначення : : набухання по : гранульованого | афінного о сФкпа | 77778 177771717171717707777171717171717197. 17... .90 2 | 6 і сФкп3 | 77/80 17771717171750. | ...ю.93 5 ЮЩщ | 9 | є в) Імобілізація І -лізину на гранульований фотокополімер-1.
Отримання сорбенту СФКП-1.
В круглодонну колбу ємністю 0,5л вносять 250 мл дистильованої води, 10г ГФКП-1 і 1,0г І -лізинхлоргідрату (1Омас.бо від маси фотокополімеру), підтримуючи при цьому рнН.-7,0-7,2. Прищеплення (Імобілізація) І- лізинхлоргідрату до ГФКП-1 проводять при температурі 25"7С і постійному перемішуванні, підтримуючи рнН-7,0 протягом 4год. Через 14-16бгод., отриманий афінний сорбент відділяють фільтруванням і промивають 0,2М розчином Мансо»з, потім зливають розчин 0,2М Мансо»з і остаточно промивають сорбент дистильованою водою до рн-7,6-8,0.
В результаті мобілізації І -лізину отримано сорбент СФКП-1 на основі фотокополімеру (ФКП-1).
Дані аналізу першої промивної проби розчину після прищеплення І -лізину за методом реакції с-аміногрупи з нінгідрином показують, що концентрація прищепленого І-лізину на гранульованому фотокополімері дорівнює 8,Змас.95. Вихід сорбенту СФКП-1 після ретельної промивки складає 6б2мас.Оо (6,82г) (табл.3).
Приклад 2. а) Фотохімічний спосіб отримання лінійного фотокополімеру на основі М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду.
У плоскодонну колбу ємністю 0,25л, забезпечену мішалкою, завантажують 25г (0,228моля) М-вінілпіролідону, 5,6г (0,057моля) малеїнового ангідриду, 1,15г (0,007моля або 2,Омас.95) фотоініциатора (Дарокурі 173) і 25мл розчинника (діоксана).
Далі як в Прикладі та.
Вихід ФКП-2 за початковою сировиною становить 30,8г (97мас.9о). Молекулярна маса ФКП-2, визначена по величині характеристичної в'язкості |п)50,74г/дл, складає 251900 (табл.г). б) Гранулювання (поперечна зшивка) ФКП-2.
Все, як в Прикладі 16. Вихід гранульованого фотокополімеру-2 (ГФКП-2) складає 9,Зг (9Змас.9о) (табл.3). в) Імобілізація І -лізину на гранульований фотокополімер-2.
Отримання сорбенту СФКП-2.
Все, як в Прикладі 1в. Дані аналізу першої промивної проби розчину після прищеплення І -лізину по методу реакції сх-аміногрупи з нінгідрином показують, що концентрація прищепленого І-лізину на гранульованому фотокополімері дорівнює 7,9мас.9о. Вихід сорбенту СФКП-2 після ретельної промивки складає б5мас.9о (7,15г) (табл.3).
Приклад 3. а) Фотохімічний спосіб отримання лінійного фотокополімеру на основі М-вінілпіролідону і малеїнового ангідриду.
У плоскодонну колбу ємністю 0,5л, забезпечену мішалкою, завантажують 50г (0,45моля) М-вінілпіролідону, 11,18г (0,114моля) малеїнового ангідриду, 3,22г (0,02моля або 2,0мас.9о) фотоініциатора (Дарокур 1173) і 100мл розчинника (діоксана).
Далі все, як в Прикладі та.
Вихід ФКП-3 по вихідній сировині становить 59,9г (9Змас.95). Молекулярна маса ФКП-3, визначена по величині характеристичної в'язкості (1)-0,68г/дл, дорівнює 232200 (табл.г). б) Гранулювання (поперечна зшивка) ФКП-3.
Все, як в Прикладі 16. Вихід гранульованого фотокополимеру-3 (ГФКП-3) дорівнює 9,8г (95мас.9о) (табл.3). в) Імобілізація І -лізину на гранульований фотокополімер-3.
Отримання сорбенту СФКП-3.
Все, як в Прикладі 1в. Дані аналізу першої промивної проби розчину після прищеплення І -лізину за методом реакції сх-аміногрупи з нінгідрином показують, що концентрація прищепленого І-лізину на гранульованому фотокополімері дорівнює 8,О0мас.9о. Вихід сорбенту СФКП-3 після ретельної промивки складає бімас.9о (6,71г) (табл.3).
Експериментальні результати, приведені в таблиці 2 і 3, свідчать про те, що в процесі фотохімічного ініціювання різних за концентраційним вмістом в реакційній масі комономерів отримані фотокополімери з хорошою відтворюваністю значень молекулярних мас і досить високим виходом кінцевого фотокополімеру з вузьким молекулярно-масовим розподілом, а також афінні сорбенти на їх основі.
Отримані афінні сорбенти випробовували на здатність виділяти з плазми людської крові такий фермент як плазміноген. Як приклад для виділення плазміногену з плазми взято сорбент СФКП-2.
Виділення плазміногену з пасти людської крові фракції І! по Кону сорбентом СФКП-2.
До 200мл 0,14М розчину масі у 0,05М фосфатному буфері рн-7,4 суспендують 40г пасти фракції ІІ! по Кону і потім центрифугують протягом З0хв. при 80009. Надосадову рідину збирають і суспендують в ній 4г (200мл) підготовленого сорбенту СФКП-2 при співвідношенні сировина:сорбент -10:1. Після перемішування протягом 7 год при 4"С сорбент відділяють декантуванням і переносять його у колонку. Неспецифічне адсорбовані білки виділяють 0,5М розчином Масі в 0,05М фосфатному буфері рн-7,4 доти, поки поглинання (оптична густина) при
Хл-280нм елюата не стане меншим за 0,05. Плазміноген злюють на колонці 0,2М розчином є-амінокапронової кислоти в 0,05М фосфатному буфері рн-7,4. Видалення є-амінокапронової кислоти здійснюють на холоду (47С) осадженням білка з розрахунку 0,41г сульфату амонію на 1мл розчину білка. Після центрифугування протягом 15хв. при 80009 цільовий продукт (плазміноген) отримують шляхом розчинення осаду в 0,1М МНаНсСО». Розчин діалізують при 4"С проти 0,0114М МНАНСО»з при рн-8,0. Отриманий розчин піддають ліофільній сушці. Вихід електрофоретично" гомогенного плазміногену складає бЗмг або 15,8мг на 1г сорбенту СФКП-2 з активністю 17 казеінолітичних одиниць (к.о.)"" на 1мг плазміногену.
Результати біоспецифічної сорбції плазміногену з плазми людської крові афінними сорбентами, отриманими на основі фотокополімерів, наведені в таблиці 4. Ці афінні сорбенти характеризували кількістю імобілізованого на них І-лізину, а також активністю, виходом виділеного плазміногену (табл.4). Виділений препарат проферменту має питому активність, що узгоджується з активністю препаратів плазміногену, отриманих на інших афінних сорбентах. Однак, позитивною характерною особливістю виділених новими сорбентами препаратів плазміногену є відсутність спонтанної активності. Крім того, сорбенти на основі СФКГТ можуть бути використані протягом тривалого часу, тобто можливе неодноразове регенерування сорбентів, при якому не втрачаються їх хроматографічні властивості.
Примітка: х електрофорез ліофілізованих препаратів плазміногену проводять в гелі поліакриламіду в системі тріс- боратного буферу рн-7 4. Аналізували розчини, що містять 25-30мкг плазміногену. ях За 1ко. приймають таку кількість ферменту, яка звільнює 450мкМ тирозину, розчиненого в 1595-ній трихлороцтовій кислоті в умовах аналізу.
Таблиця 4
Біоспецифічні сорбційні властивості сорбентів, отриманих на основі фотокополімерів, для виділення плазміногену з плазми крові людини
Відносна ступінь !
Умовне г. набрякання Питома афінна Активність
Імобілізованого | зшиваючого реагенту ємність сорбенту, мг й позначення : рої сорбенту за й плазміногену, й Ї -лізину у (4,4-діаміно- ; плазміногену на 1г й сорбентів : : об'ємом, 1хО к.о./мг білка разів сорбенту і сФкп3 | 80 | щХ 525 «Б | 50 2 2 Щ | 158 | 7160
Джерела інформації 1. Рогожин С.В., Давьдович Ю.А., Андреєв С.М., Юртанов А.И. / Полимерньй макросетчатьй М- оксисукцинимид для синтеза пептидов // Докл. АН СССР, 1973. Т.2П.-Моб. С.1356-1358. 2. С.Е. Бреслер, Б.Л. Ерусалимский. Физика и химия макромолекул. М.-Л.: Наука, 1965. 510.
Claims (1)
- Спосіб отримання афінного сорбенту для виділення плазміногену з крові людини методом фотоініційованої радикально-ланцюгової кополімеризації М-вінілпіролідону з малеїновим ангідридом, наступним зшиванням - гранулюванням і прищепленням ліганду І. -лізину, який відрізняється тим, що процес кополімеризації М-вінілпіролідону з малеїновим ангідридом здійснюють методом фотоініціювання під впливом УФ-випромінювання при " макс. - 300- 400 нм і температурі 18-257С з наступним зшиванням-гранулюванням і прищепленням І .- лізину.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001053642A UA72227C2 (en) | 2001-05-29 | 2001-05-29 | Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2001053642A UA72227C2 (en) | 2001-05-29 | 2001-05-29 | Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA72227C2 true UA72227C2 (en) | 2005-02-15 |
Family
ID=34618365
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2001053642A UA72227C2 (en) | 2001-05-29 | 2001-05-29 | Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA72227C2 (uk) |
-
2001
- 2001-05-29 UA UA2001053642A patent/UA72227C2/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3775253A (en) | Water-insoluble carrier-bound proteins | |
| Kikuchi et al. | Intelligent thermoresponsive polymeric stationary phases for aqueous chromatography of biological compounds | |
| Hart et al. | Synthetic peptide receptors: Molecularly imprinted polymers for the recognition of peptides using peptide− metal interactions | |
| EP0392735B1 (en) | Polymeric supports | |
| CN102811805B (zh) | 结合蛋白质和肽的特异性吸附剂及使用所述吸附剂的分离方法 | |
| US6852818B1 (en) | Molecularly imprinted polymers produced by template polymerization | |
| EP0354909B1 (en) | Variable crosslinked polymeric supports | |
| US5403902A (en) | Polymeric supports | |
| Pang et al. | Bovine serum albumin-imprinted polyacrylamide gel beads prepared via inverse-phase seed suspension polymerization | |
| CA1238626A (en) | Phase supports for the partition chromatography of macromolecules, a process for their preparation and their use | |
| US4192784A (en) | Hydrophilic copolymers, their preparation and their use in separation techniques | |
| CA1223859A (en) | Surface-grafted particulate support, process for its preparation and adsorbants for affinity chromatography incorporating such support, and their use, particularly in biology | |
| JPS59112260A (ja) | クロマトグラフイ−の担体材料 | |
| JPS6356501A (ja) | アフイニテイークロマトグラフイー用カラム充填剤及びその製造方法 | |
| Wang | Development of new polycations for cell encapsulation with alginate | |
| Armutcu et al. | Purification of Fab and Fc using papain immobilized cryogel bioreactor separator system | |
| JP3722842B2 (ja) | Ｐｔｈ−アミノ酸の分離方法 | |
| Boschetti | Polyacrylamide derivatives to the service of bioseparations | |
| Kobos et al. | A novel fluorocarbon-based immobilization technology | |
| WO1994015951A1 (en) | Affinity purification by the use of a complexed ligand | |
| Porath | Development of modern bioaffinity chromatography (A review) | |
| UA72227C2 (en) | Method for producing affine sorbent for extracting plasminogen from human blood | |
| AU610734B2 (en) | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography | |
| Yilmaz et al. | The noncovalent approach | |
| Pittner et al. | Immobilization of protein on aldehyde-containing gels—II. Activation of pyridine rings with cyanogen bromide |