UA68755A - EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) - Google Patents
EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) Download PDFInfo
- Publication number
- UA68755A UA68755A UA2003109457A UA2003109457A UA68755A UA 68755 A UA68755 A UA 68755A UA 2003109457 A UA2003109457 A UA 2003109457A UA 2003109457 A UA2003109457 A UA 2003109457A UA 68755 A UA68755 A UA 68755A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- hepatitis
- virus
- surface antigen
- hbsag
- hbv
- Prior art date
Links
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 4
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 claims abstract description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 238000011891 EIA kit Methods 0.000 abstract 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 239000002313 adhesive film Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід належить до біотехнології, імунохімії та медицини і може бути використаний для дослідження 2 сироватки або плазми крові людини на наявність поверхневого антигену вірусу гепатиту В методом імуноферментного аналізу.The invention belongs to biotechnology, immunochemistry and medicine and can be used for research 2 of human serum or blood plasma for the presence of surface antigen of the hepatitis B virus by enzyme-linked immunosorbent assay.
Відома тест-система "Мопоїїза Ад НВз РІ О5" виробництва "Запоїї Оіадпозіїсв Разіеийг" (Франція) для детекції НВзАд вірусу гепатиту В методом імуноферментного аналізу (1), в якій на полістироловий планшет сорбовані моноклональні анти-НВз антитіла, а як кон'югат використовують анти-НВ5е антитіла, мічені 70 пероксидазою.The well-known test system "Mopoiiza Ad NVz RI O5" manufactured by "Zapoiy Oiadpoziisv Razieig" (France) for the detection of NVzAd of the hepatitis B virus by the method of immunoenzymatic analysis (1), in which monoclonal anti-NVz antibodies are sorbed on a polystyrene tablet, and as a conjugate use anti-HB5e antibodies labeled with 70 peroxidase.
В основу винаходу покладено завдання створити вітчизняну імуноферментну тест-систему на основі імуносорбенту з сорбованими моноклональними антитілами проти поверхневого антигену вірусу гепатиту В.The invention is based on the task of creating a domestic immunoenzymatic test system based on an immunosorbent with sorbed monoclonal antibodies against the surface antigen of the hepatitis B virus.
Досліджувані матеріали використовують без розведення. Позитивний контроль - рекомбінантний НВзАд з відомою концентрацією. До складу кон'югату входять моноклональні антитіла до інших епітопів НВзАд, мічені 19 ферментом. Ферментативну реакцію визначають за допомогою субстратного розчину з хромогеном. За одну постановку (2,5 години) можна проаналізувати 91 пробу досліджуваного матеріалу.The studied materials are used without dilution. The positive control is recombinant HBsAg with a known concentration. The conjugate includes monoclonal antibodies to other epitopes of HBV, labeled with 19 enzyme. The enzymatic reaction is determined using a substrate solution with a chromogen. 91 samples of the researched material can be analyzed in one setup (2.5 hours).
Приклад 1Example 1
Визначення НВзАа вірусу гепатиту В у сироватці крові хворої И., 1977 року народження.Determination of HBsAa of the hepatitis B virus in the blood serum of the patient I., born in 1977.
Визначення проводять за відомою методикою |2| твердофазного імуноферментного аналізу. Для цього вносять у лунки імуносорбенту з фіксованими на ньому моноклональними антитілами проти НВзАд по 100мкл досліджуваних зразків сироватки від хворої для виявлення поверхневого антигену вірусу гепатиту В та контрольні зразки (2 позитивних з відомою концентрацією НВзАа і З негативних). Витримують 10Охв. при кімнатній температурі, а потім вносять в усі лунки по 5О0мкл кон'югату моноклональних антитіл до інших епітопів НВзАад, мічених ферментом. Накривають планшет клейкою плівкою або кришкою та інкубують при температурі 377С 29 протягом 2 годин. «Determination is carried out according to the known method |2| solid-phase enzyme immunoassay. To do this, put 100 μl of tested serum samples from the patient to detect the surface antigen of the hepatitis B virus and control samples (2 positive with a known concentration of HBvAa and 3 negative) into the wells of the immunosorbent with fixed monoclonal antibodies against HBsAb. Withstand 10 Ohv. at room temperature, and then 5O0μl of conjugate of monoclonal antibodies to other epitopes of HBzAad, labeled with the enzyme, are introduced into all wells. Cover the tablet with an adhesive film or a lid and incubate at a temperature of 377C 29 for 2 hours. "
Після закінчення інкубації промивають лунки шість разів і вносять по 1О0Омкл розчину проявника (субстратний розчин з хромогеном) та інкубують при 18-227С у темряві ЗОхв.After the end of the incubation, the wells are washed six times and 1O0Oml of the developer solution (substrate solution with chromogen) is added and incubated at 18-227C in the dark at 3°C.
Зупиняють кольорову реакцію, вносячи до всіх проб по 100мкл стоп-реагенту.The color reaction is stopped by adding 100 μl of stop reagent to all samples.
Не більш як через 1хв. після зупинення кольорової реакції визначають оптичну густину (ОГ) в лунках у о двохвильовому режимі за допомогою спектрофотометра. Значення ОГ зразка прямо пропорційне кількості юNo more than 1 minute later. after stopping the color reaction, determine the optical density (OD) in the wells in a two-wave mode using a spectrophotometer. The value of OG of the sample is directly proportional to the amount of ю
НВзАаЯ вірусу гепатиту В у сироватці.Antibiotic resistance of hepatitis B virus in serum.
Результати визначення НВзАд в сироватці хворої, визначене при застосуванні нашої тест-системи, в порівнювали з даними, отриманими при використанні тест-системи "Мопоїїза Ад НВзв РІ ОБ". сThe results of determination of NVzAd in the patient's serum, determined using our test system, were compared with the data obtained when using the test system "Mopoiiza Ad NVzv RI OB". with
Досліджені сироватки хворої було ідентифіковано як позитивні на наявність НВзАд вірусу гепатиту В; 3о концентрація НВзАд перевищує 20Опкг/мл. ее,The studied sera of the patient were identified as positive for the presence of HBV antibodies to the hepatitis B virus; 3o concentration of NVzAd exceeds 20 Opkg/ml. eh
Приклад 2Example 2
Визначення чутливості та специфічності пропонованої тест-системи.Determination of sensitivity and specificity of the proposed test system.
Використовуючи названі тест-системи, досліджували сироватки крові (по 20 достеменно позитивних та 100 « достеменно негативних сироваток). Усі сироватки досліджували у двох повторностях кожною тест-системою за З описаною методикою. Обидві тест-системи показали однакові результати: в 20 позитивних сироватках виявлено с НВзАа вірусу гепатиту В з концентрацією від 20Опкг/мл та більше, що складає 10095 чутливості. З 100 негативнихBlood sera were examined using the named test systems (20 definitely positive and 100 definitely negative sera). All sera were tested in duplicate with each test system according to the described method. Both test systems showed the same results: in 20 positive sera, HBVzAa of the hepatitis B virus was detected with a concentration of 20Opkg/ml and more, which is 10095 sensitivity. Out of 100 negative
Із» сироваток від донорів, вагітних жінок та хворих на алергічні та імунні захворювання виявилися справді негативними 99 (специфічність - 99965).Of the sera from donors, pregnant women and patients with allergic and immune diseases, 99 were truly negative (specificity - 99965).
Таким чином, пропонована тест-система забезпечує виявлення поверхневого антигена вірусу гепатиту В у досліджуваному матеріалі. Проста і надійна в роботі, проявляє високу чутливість та специфічність. б Використана література:Thus, the proposed test system provides detection of the surface antigen of the hepatitis B virus in the material under study. Simple and reliable in operation, shows high sensitivity and specificity. b Used literature:
Ге | 1. Инструкция по применению тест-системи "Мопоїїза Ад НВз РІ 05" виробництва "Запоїї Оіадповіїсв Равіеиг" (Франція), 2002, 17с. 7 2. А.Т. Михайлов, В.Н. Симирский "Методьї иммунохимического анализа в биологии развития". М. "Наука", сло 7О 01981. слGe | 1. Instructions for use of the test system "Mopoiiza Ad NVz RI 05" produced by "Zapoii Oiadpoviisv Ravieig" (France), 2002, 17p. 7 2. A.T. Mikhailov, V.N. Simirskyi "Methods of immunochemical analysis in developmental biology". M. "Nauka", slo 7O 01981. sl
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2003109457A UA68755A (en) | 2003-10-20 | 2003-10-20 | EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2003109457A UA68755A (en) | 2003-10-20 | 2003-10-20 | EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA68755A true UA68755A (en) | 2004-08-16 |
Family
ID=34519141
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2003109457A UA68755A (en) | 2003-10-20 | 2003-10-20 | EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA68755A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2616236C1 (en) * | 2016-05-05 | 2017-04-13 | Закрытое акционерное общество научно-производственная компания "Комбиотех" | METHOD FOR ASSESSING ANTIBODY LEVEL SPECIFIC TO DIFFERENT VARIANTS OF HEPATITIS B VIRUS HBsAg |
-
2003
- 2003-10-20 UA UA2003109457A patent/UA68755A/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2616236C1 (en) * | 2016-05-05 | 2017-04-13 | Закрытое акционерное общество научно-производственная компания "Комбиотех" | METHOD FOR ASSESSING ANTIBODY LEVEL SPECIFIC TO DIFFERENT VARIANTS OF HEPATITIS B VIRUS HBsAg |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1268419A (en) | Immunoassay for htlv-iii antigens | |
| Voiler | Heterogeneous enzyme-immunoassays and their applications | |
| JPS632348B2 (en) | ||
| ES2098744T3 (en) | SOLID PHASE IMMUNOLOGICAL TEST. | |
| Liu et al. | Magnetic microbead-based enzyme-linked immunoassay for detection of Schistosoma japonicum antibody in human serum | |
| JPH04503109A (en) | Avidin-biotin assisted immunoassay | |
| Lee et al. | Evaluation of an immunochromatographic assay for the detection of anti-hepatitis A virus IgM | |
| JP3472929B2 (en) | Detection of antibody production | |
| Zgair | Involvement of (IgG and IgM)-secreting B lymphocytes in severity of autoimmune hepatitis type 1 | |
| UA68755A (en) | EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) | |
| WO1987006620A1 (en) | Diagnostic kit for sexually transmitted diseases | |
| Hosoda et al. | Detection of autoantibody against carbonic anhydrase II in various liver diseases by enzyme-linked immunosorbent assay using appropriate conditions | |
| JPH02503951A (en) | assay | |
| UA21168U (en) | HIGHLY SENSITIVE ENZYME IMMUNOASSAY SYSTEM FOR QUANTIFICATION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBsAg-sensitive) | |
| Ayodeji et al. | Comparative evaluation of chromatographic immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay in the diagnosis of hepatitis B viral infection in pregnancy | |
| UA71147A (en) | Eia kit for confirmation of surface antigen (hbsag) of hepatitis b virus (dia-c-hbv) | |
| UA66567A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) | |
| UA68145A (en) | IMMUNOENZYME KIT FOR ASSAYING IgG- AND IgM ANTIBODIES AGAINST CORE ANTIGEN OF HEPATITIS B VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM OR PLASMA (DIA-HBCORE) | |
| RU1780006C (en) | Method for diagnosing tuberculosis | |
| UA57639A (en) | Diagnostic immunoenzyme kit for assaying antibodies against hepatitis c virus in human blood serum or plasma ("dia-hcv") | |
| UA10590U (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgM AGAINST TREPONEMA PALLIDUM (DIA-IgM-SYPH) | |
| UA48811A (en) | Diagnostic immunoenzyme kit for assaying antibrucellosis antibodies in human and cattle blood serum | |
| RU2156467C2 (en) | Immunoenzyme test system for detecting antibodies to syphilis pathogen | |
| UA66098A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IGM AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgM) | |
| UA66096A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgG AGAINST TOXOPLASMA GONDII IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-TOXO-IgG) |