UA66567A - IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) - Google Patents
IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) Download PDFInfo
- Publication number
- UA66567A UA66567A UA2003076992A UA2003076992A UA66567A UA 66567 A UA66567 A UA 66567A UA 2003076992 A UA2003076992 A UA 2003076992A UA 2003076992 A UA2003076992 A UA 2003076992A UA 66567 A UA66567 A UA 66567A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- rubella virus
- igg
- rubella
- blood serum
- human blood
- Prior art date
Links
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 title claims abstract description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 11
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 title abstract description 3
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 title abstract 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 14
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 4
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000002313 adhesive film Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід належить до біотехнології, імунохімії та медицини і може бути використаний для виявлення 2 імуноглобулінів класу С у сироватці крові людини, визначення їх концентрації, титру антитіл проти вірусу червонички і може бути використаний в клініці для постановки та підтвердження діагнозу червонички (особливо вагітним жінкам та немовлятам, оцінки їх імунного статусу), а також для проведення сероепідемічних досліджень та скринінгу сироваток при контролі результатів вакцинопрофілактики.The invention belongs to biotechnology, immunochemistry and medicine and can be used to detect 2 immunoglobulins of class C in human blood serum, determine their concentration, the titer of antibodies against the rubella virus and can be used in the clinic to establish and confirm the diagnosis of rubella (especially in pregnant women and infants , evaluation of their immune status), as well as for conducting sero-epidemic studies and screening of sera when monitoring the results of vaccine prophylaxis.
В Україні тест-системи для виявлення зараженості людей вірусом червонички не виробляються. В Росії 70 випускається тест-система "ВектоРубелла-Ідсос-стрип" (ЗАО "Вектор-Бест", Новосибірськ), в складі якої на твердій фазі використовуються білки-антигени вірусу червонички, сироватки досліджуються після попереднього розведення 1:100, а як кон'югат беруть антивидов! антитіла проти імуноглобулінів класу З людини, мічені пероксида- зою (1). 19 В основу винаходу покладено завдання створити імуноферментну тест-систему на основі імуносорбенту з очищеними поверхневими білками-антигенами вірусу червонички. Антигени сорбують на поверхні полістиролових планшетів. Досліджувані сироватки використовують без попереднього розведення. В складі кон'югатів беруть моноклональні антитіла проти імуноглобулінів людини класу (3, мічені ферментом.In Ukraine, test systems for detecting infection of people with the rubella virus are not produced. In Russia, in 1970, the test system "VektoRubella-Idsos-strip" (JSC "Vektor-Best", Novosibirsk) was produced, in which proteins-antigens of the rubella virus are used in the solid phase, sera are examined after a preliminary dilution of 1:100, and as a con "Yugat take anti-species! antibodies against human class C immunoglobulins labeled with peroxidase (1). 19 The invention is based on the task of creating an immunoenzymatic test system based on an immunosorbent with purified surface proteins-antigens of the rubella virus. Antigens are adsorbed on the surface of polystyrene tablets. The studied sera are used without prior dilution. Conjugates include monoclonal antibodies against human immunoglobulins of class (3, labeled with an enzyme.
Ферментативну реакцію визначають за допомогою субстратного розчину з хромогеном. За одну постановку (2 години) можна проаналізувати 88 сироваток.The enzymatic reaction is determined using a substrate solution with a chromogen. 88 sera can be analyzed in one setup (2 hours).
Приклад 1Example 1
Визначення антитіл проти вірусу червонички у сироватці кровіхворої М., 1980 року народження.Determination of antibodies against the rubella virus in the blood serum of patient M., born in 1980.
Визначення проводять за відомою методикою |2| твердофазного імуноферментного аналізу. Для цього вносять у лунки планшета-імуносорбенту з фіксованими на ньому білками-антигенами вірусу червонички по ооОмкл розчину для розведення сироваток та по 1Омкл сироватки кровіхворої для виявлення антитіл класу о « (Ід).Determination is carried out according to the known method |2| solid-phase enzyme immunoassay. To do this, put into the wells of the immunosorbent tablet with the rubella virus antigen proteins fixed on it, ooOmcl of the solution for diluting serums and 1Omcl of the patient's blood serum for the detection of antibodies of class O (Id).
В чотири лунки вносять по 9Омкл розчину для розведення сироваток та контрольні зразки, а в три лунки - по 1Омкл позитивних контрольних зразків - сироваток з визначеними титрами антитіл (щоб побудувати калібрувальну криву), а в одну - 1Омкл негативної контрольної сироватки. вIn four wells, add 9 Ωcl of serum dilution solution and control samples, and in three wells - 1 Ωcl of positive control samples - sera with determined antibody titers (to construct a calibration curve), and in one well - 1 Ωcl of negative control serum. in
Накривають планшет клейкою плівкою або кришкою та інкубують при температурі 37"С протягом 60 хв. Ге)Cover the tablet with an adhesive film or a lid and incubate at a temperature of 37"C for 60 min.
Після закінчення інкубації видаляють вміст лунок за допомогою промивача або 8-канальної піпетки та промивають лунки чотири рази розчином для промивання планшетів. оAt the end of the incubation, remove the contents of the wells using a washer or an 8-channel pipette and wash the wells four times with a solution for washing tablets. at
В лунки планшета вносять по 100мкл розчину моноклонального кон'югату проти імуноглобулінів людини, Ге) мічених пероксидазою, та інкубують планшет при 37"С у термостаті ЗОхв. 3о Після закінчення інкубації промивають лунки шість разів і вносять по 1О0Омкл розчину проявника ее, (субстратний розчин з хромогеном) та інкубують при 18-227С у темряві ЗОхв.100 μl of a solution of a monoclonal conjugate against human immunoglobulins (He) labeled with peroxidase is added to the wells of the tablet, and the tablet is incubated at 37"C in a 3°C thermostat. After incubation, the wells are washed six times and 100 μl of the developer solution (substrate solution) is added with a chromogen) and incubate at 18-227C in the dark ЗОхв.
Зупиняють кольорову реакцію, вносячи до всіх проб по 100мкл стоп-реагента.The color reaction is stopped by adding 100 μl of stop reagent to all samples.
Не більш як через 1хв. після зупинення кольорової реакції визначають оптичну густину (ОГ) в лунках у « двохвильовому режимі за допомогою спектрофотометра. Значення ОГ зразка прямо пропорційне кількості З антитіл у сироватці. с Значення кількості антитіл проти вірусу червонички у сироватці хворої, визначене при застосуванні нашої з» тест-системи, порівнювали зі значеннями, отриманими при використанні тест-системи виробництва ЗАО "Вектор-Бест" (Росія).No more than 1 minute later. after stopping the color reaction, determine the optical density (OD) in the wells in the "two-wave mode" using a spectrophotometer. The OG value of the sample is directly proportional to the amount of C antibodies in the serum. c The value of the number of antibodies against the rubella virus in the patient's serum, determined when using our "c" test system, was compared with the values obtained when using the test system manufactured by ZAO "Vektor-Best" (Russia).
Досліджені сироватки хворої було ідентифіковано як позитивні на наявність антитіл проти антигенів вірусу дервонички.The studied sera of the patient were identified as positive for the presence of antibodies against the antigens of the rubella virus.
Ме Приклад 2Example 2
Ге») Визначення чутливості та специфічності пропонованої тест-системи.Ge") Determination of sensitivity and specificity of the proposed test system.
Використовуючи названі тест-системи, досліджували сироватки крові (по 20 достеменно позитивних та 100 і-й достеменно негативних сироваток). Усі сироватки досліджували у двох повторностях кожною тест-системою заUsing the named test systems, blood sera were examined (20 definitely positive and 100 definitely negative sera each). All sera were tested in duplicate with each test system according to
Ге»! 20 описаною методикою. Усі 20 позитивних сироваток показали наявність антитіл проти вірусу червонички, що складає 10095 чутливості. З 100 негативних сироваток виявилися справді негативними всі 100 (специфічність - т 10095) у пропонованій тест-системі. В порівнюваній тест-системі з Росії з 20 достеменно позитивних сироваток 20 були позитивними (чутливість 10095), але з 100 негативних сироваток 2 сироватки були виявлені як хибно-позитивні. Специфічність порівняльної тест-системи становила 9896. 25 Таким чином, пропонована тест-система забезпечує виявлення антитіл класу (ДО проти антигенів вірусу в. червонички у сироватках людей. Проста і надійна в роботі, проявляє високу чутливість та специфічність.Gee! 20 by the described method. All 20 positive sera showed the presence of antibodies against rubella virus, which is 10095 sensitivity. Out of 100 negative sera, all 100 turned out to be truly negative (specificity - t 10095) in the proposed test system. In the compared test system from Russia, out of 20 definitely positive sera, 20 were positive (sensitivity 10095), but out of 100 negative sera, 2 sera were detected as false-positive. The specificity of the comparative test system was 9896. 25 Thus, the proposed test system provides detection of antibodies of the class (DO) against rubella virus antigens in human sera. Simple and reliable in operation, it shows high sensitivity and specificity.
Використана література 1. Инструкция по применению тест-системьі! "ВектоРубелла-ІдО-стрип" производства ЗАО "Вектор-Бест", п.References 1. Instructions for using the test system! "VektoRubella-IdO-strip" produced by ZAO "Vektor-Best", p.
Кольцове, Новосибирской обл., 2003, Зс. 60 2. А.Т. Михайлов, В.Н. Симирский "Методьі иммунохимического анализа в биологии развития". М. "Наука",Koltsevo, Novosibirsk region, 2003, Zs. 60 2. A.T. Mikhailov, V.N. Simirsky "Methods of immunochemical analysis in developmental biology". M. "Science",
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2003076992A UA66567A (en) | 2003-07-24 | 2003-07-24 | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2003076992A UA66567A (en) | 2003-07-24 | 2003-07-24 | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA66567A true UA66567A (en) | 2004-05-17 |
Family
ID=34517726
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2003076992A UA66567A (en) | 2003-07-24 | 2003-07-24 | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA66567A (en) |
-
2003
- 2003-07-24 UA UA2003076992A patent/UA66567A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1268419A (en) | Immunoassay for htlv-iii antigens | |
| Voiler | Heterogeneous enzyme-immunoassays and their applications | |
| Voller et al. | Enzyme immunoassays in diagnostic medicine: theory and practice | |
| JPS632348B2 (en) | ||
| CN103837674A (en) | Method for detecting specific IgE antibody, kit used in method and preparation and using methods for kit | |
| Yolken et al. | Enzyme immunoassays for measurement of cytomegalovirus immunoglobulin M antibody | |
| Lee et al. | Evaluation of an immunochromatographic assay for the detection of anti-hepatitis A virus IgM | |
| JP3472929B2 (en) | Detection of antibody production | |
| UA66567A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR QUANTIFYING IgG AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgG) | |
| US9606120B2 (en) | Interfering peptides and method for detecting microorganisms | |
| Kiefer et al. | Normalized enzyme-linked immunosorbent assay for determining immunoglobulin G antibodies to cytomegalovirus | |
| UA66096A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgG AGAINST TOXOPLASMA GONDII IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-TOXO-IgG) | |
| UA66095A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgG AGAINST HERPES VIRUSES TYPES I AND II IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-HSV 1/2-IgG) | |
| UA66098A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IGM AGAINST RUBELLA VIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-RUBELLA-IgM) | |
| UA66100A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgM AGAINST TOXOPLASMA GONDII IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-TOXO-IgM) | |
| Halbert et al. | Detection of infectious mononucleosis heterophil antibody by a rapid, standardized enzyme-linked immunosorbent assay procedure | |
| UA66099A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgM AGAINST CYTOMEGALOVIRUS IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-CMV-IgM) | |
| UA66097A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgM AGAINST HERPES SIMPLEX VIRUSES TYPES I AND II IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-HSV 1/2-IgM) | |
| Numazaki et al. | Comparison of enzyme linked immunosorbent assay and enzyme linked fluorescence immunoassay for detection of antibodies against Chlamydia trachomatis. | |
| UA10590U (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING IgM AGAINST TREPONEMA PALLIDUM (DIA-IgM-SYPH) | |
| UA67972A (en) | IMMUNOENZYME ASSAY KIT FOR DETECTING ANTI-CYTOMEGALOVIRUS IgG IN HUMAN BLOOD SERUM (DIA-CMV- IgG) | |
| UA68755A (en) | EIA KIT FOR DETECTION OF SURFACE ANTIGEN (HBsAg) OF HEPATITIS B VIRUS (DIA-HBV) | |
| Soleimani et al. | Usefulness of a multiplex immunodot in case of discordant results between automated COVID-19 serological assays | |
| RU2596794C1 (en) | Method of determining avidity of immunoglobulin g to herpes virus type 6 | |
| UA61538A (en) | Diagnostic eia system for detecting antibodies against bovine leukemia virus in blood serum and cow milk |