UA54382C2 - Аміногуанідинкарбоксилати - Google Patents

Abstract

Даний винахід представляє нові сполуки формули I і II для лікування інсулінозалежного цукрового діабету.

Description

Опис винаходу

Данная заявка является частичньм продолжением заявки США с серийньм номером 08/344274, 2 зарегистрированной 23 ноября 1994, находящейся в настоящее время на стадии рассмотрения.

Данное изобретение представляет новьіе соединения и новьій способ лечения: инсулиннезависимого сахарного диабета (ИНСД); осложнений диабета, происходящих в результате избьіточного неферментативного гликозирования белков при инсулиннезависимом и инсулинзависимом сахарном диабете; нарушенной толерантности к глюкозе и ожирения. 70 Инсулиннезависимьїй сахарньїй диабет, или ИНСД и диабет типа ІЇ являются синонимами. Больнье ИНСД имеют необьічайно вьісокие концентрации глюкозьі в крови на голодньій желудок и замедленное клеточное поглощение глюкозьі после едьй или после диагностического теста, известного как тест на толерантность к глюкозе. ИНСД диагностируется на оснований общепризнанньїх критериев (Атегісап Оіаресфез Авззосіайоп,

РПпузісіап'з СЗціде юю Іпзшіп-Оерепдепі (Туре І) Оіарейез, 1988; Атегісап Оіаре(ез Аввзосіайоп, РНувзісіап'є 72. (Зціде Моп-Іпзцііп-Оерепадепі (Туре І) Оіабейев, 1988).

Инсулинзависимьй сахарньй диабет, ИЗСД и диабет типа | являются синонимами. Больньіе ИЗСД имеют ненормально вьсокие концентрации глюкозьі в крови на голодньй желудок и замедленное клеточное поглощение глюкозьі после приема пищи или после диагностического теста, известного как тест на толерантность к глюкозе. ИЗСД диагностируется на основе общепринятьх критериев (Атегісап Оіарей(ез

Аввосіайоп, Рпузісіап'є сціде (о Іпзиіп-Оерепаепі (Туре І) Оіаре(ез, 1988).

Нарушенная толерантность к глюкозе появляется, когда степень метаболического клиренса глюкозь! из крови меньше чем обьічно существующая в основном у населения после того, как стандартная доза глюкозь! бьіла принята перорально или введена парентерально (Атегісап Оіаре(ез Аззосіайоп, РНузісіап'є Сціде ю

Моп-Іпзиїп-Оерепаенпі (Туре ІІ) Оіаре(ез, 1988). Нарушенная толерантность к глюкозе может также наблюдаться с при ИНСД, ИЗСД диабете беременньїх и ожирении. Нарушенная толерантность Кк глюкозе может также Ге) встречаться у лиц не отвечающим критериям для зтих заболеваний. Нарушенная толерантность к глюкозе у лиц без диабета является фактором, предрасполагающим к развитию ИНСД.

Ожирение является состоянием, при котором происходит увеличение содержания жировой ткани в теле, приводя к избьіточному весу тела вьіше норм, принятьїх для возраста, пола, роста и телосложения данного с деловека (Вгау, Орезйу, ап Епдосгіпе Регересіїме, р. 2303, МиЩНогтопа! Зувіетв апа Оізогадегз (1989)). с

Принятье нормьї определялись смертностью по данньім страхования жизни и заболеваемостью в связи со строением тела. Чрезмерная смертность, которая наблюдаєтся среди лиц с ожирением, происходит в о результате заболеваний, к которьім предрасполагаєт зто состояниє. Они включают рак, сердечно-сосудистье /-«ф заболевания, заболевания пищеварительной системьі, респираторнье заболевания и сахарньй диабет.

Зо У больньїх с хронической гипергликемией, такой, которая присутствует при инсулиннезависимом сахарном о диабете и инсулинзависимом диабете, глюкозозависимое перекрестное связьвание белков происходит со скоростью свьіше нормальной (Випп, Атегісап Хдоигпа! ої Медісіпе, Мої. 70, р. 325, 1981), приводя к измененной структуре белков (Вгомупієе, СПпаріеєг 18, Оіарейфез Меїїйив, р. 279, 1990). Избьточное неферментативное « гликозирование белков способствует осложнениям при диабете и осложнениям при старений людей без З 740 диабета, таким как нейропатии, нефропатии, ретинопатия, гипертензия и атеросклероз (Вгом/піве, 1990, вьіше). с Гипергликемия определяется как концентрация глюкозьі в крови, превьішающая принятую норму для

Із» основного населения (Атегісап Оіарейфез Аввзосіайоп, РПузісіап'з (зціде (о Моп-Іпзціп-Оерепдепі (Туре Ії) ріабеїйез, 1988).

В то время как взаимоотношение между зтими состояниями известно, бьіло бьії целесообразно иметь лекарственньй препарат, которьім можно лечить или предотвращать все из них. і-й В ОР 54128523 (Спет. Абвіг. 92: 758991 сообщается о том, что 3-(1--(аминометил)гидразино))пропановая «їз» кислота является фунгицидом и инсектицидом. О синтезе М-(гидразиноиминометил)-глицина сообщается у:

Сапіе, У.Спет. Вег. 1968, 101, 1195. Некоторье алкилид-аминогуанидиновье производнье описаньі в патенте о США 5272165, с названием "Подавление повьішенного гликозирования белков в организме - применение о 20 2-алкилиденаминогуанидиновьх производньйх, используемьх, например, для лечения сопутствующих диабету зффектов или, особенно, предотвращения окрашивания зубов". Аминогуанидиновье аналоги аргинина із раскрьтьь в ОЕ 4244539-А1 и УУО 9104-023А. В патенте США 5132453 раскрьто, что

Мб-(гидразино:имино:метил)-лизин применим в качестве ингибитора образования окиси азота и для лечения гипертензимй. В ЕР-230-037-А раскрьть некоторье нове 2-замещеннье гуанидиновье производньє, 29 обладающие противоишемической и кардиопротекторной активностью. В патенте США 3412105

ГФ) раскрьіваєтся р-арил-М-гуанидино-(дД-аланиньі или о-карбокси-д-аланинь), как ингибитори МАО и 7 пролонгированнье гипотензивнье средства.

Данное изобретение, в частности, представляет: во (І) Соединение формульі І или ІІ: до-(сно, сов или б5

Ас-сн-совВ!" з: или их фармакологически приемлемьсе соли, где АС является а) М-аминогуанидин,

Б) М, М'і'-диаминогуанидин или с) М, М, М" - триаминогуанидин; где п является цельім числом из 1 - 5; где В является а) водородом,

В) фенилом, с) С1-Св алкилом или а) С--Сз алкилфенилом и где В? является а) водородом,

В) фенилом, с) С1-С13о алкилом или а) С4-Св алкилфенилом при следующих условиях: а) в формуле І, когда п равно 2, В! не являєтся водородом;

БВ) в формуле І, когда п равно 1, ВК! не является метилом; с с) в формуле ІЇ, когда В2 являєтся зтилом, В! не являєтся водородом; о 4) в формуле ІЇ, когда 22 являєтся фенилом, ВЕ! не является водородом и е) в формуле І, когда п равно 3, Е! не являєтся водородом. 2) способ лечения или профилактики инсулиннезависимого сахарного диабета у пациента, подверженного диабету или заболевшего ИНСД включающий системное введение количества, зффективного для лечения и с предотвращения ИНСД соединения формульї! І: со

НН М сон ни ми Ух о н ї т в Іо) где ВЗ является водородом, метилом, зтилом, СН»-фенилом или н-гексилом.

Для общих формул І и ІІ связьівание фрагмента АС не является принципиальнь/м, т.е. связь с примьікающим атомом углерода может находиться у любого одного атома азота фрагмента Аб. Оставшиеся атомь! азота « дю фрагмента АС не замещень. -

Количество атомов углерода в содержащих углерод заместителях указьівается префиксом "С |-С/", где і с является наименьшим числом атомов углерода, а | является самьмм большим числом атомов углерода. :з» Примерьї алкильньїх групп, имеющих от 71 до 10 атомов углерода, включают, например, метил, зтил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, т-бутил, н-пентил, изоамил, н-гексил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил и другие их изомернье формь!. сл 35 Примерьї фармацевтически приемлемьх солей с присоединением кислоть! включают: ацетат, адипат, алгинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, комфорсульфонат, т» циклопентан-пропионат, диглюконат, додецилсульфат, зтансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, с глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидройиодид, 2-гидроксизтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, 2-нафталенсульфонат, никотинат, оксалат, (ее) 50 пальмоат, пектинат, персульфат, З-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, "з тозилат и ундеканоат.

Доза соединение по формуле І-І, которая должна применяться, находится между 0,1 и 100мг/кг веса тела в сутки. Предпочтительная доза составляет 1 - 50мг/кг/сут. Введение может бьіть пероральньім, парентеральньм, интраназальньм, буккальньмм, сублингвальньм, интраректальньім или трансдермальньм путем. Пероральньй путь введения предпочтителен.

ГФ) Новье соединение зтого изобретения представлень общими формулами і! и Ії. Известнье соединения,

ГФ заявляемье для использования при лечений ИНСД представленьі формулой ПІ.

Из соединений зтого изобретения, представленньїх общими формулами | и ІІ, сосединения, перечисленньєе в таблице 1, являются особенно предпочтительньми, и предпочтительно их применение при лечениий ИНСД и его бо осложнений.

В таблице 2 содержится перечень родственньіїх соединений, которье не заявленьі. Они включень, чтобь продемонстрировать удивительное действие заявляемьх соединений путем демонстрации того, что зти соединения, которье близко родственньї заявляемьм соединениям, не считаются активньми в самой вьісокой испьітанной дозе. 65 В таблице З содержится список соединений в рамках общего обьема, заключенного в общих формулах | и ЇЇ,

которье не проявляют активности в самьїх вьісоких испьтанньх дозах и, таким образом, составляют исключение, что видно по условиям пункта 1, формули.

Таблица 4 содержит список новьїх соединений, конкретно заявляемьх в изобретении. Методики их получения дань в разделе 4.

Таблица 5 содержит перечень известньїх соединений, которне заявлень! в изобретений для применения при лечениий ИНСД.

Таким образом, зто изобретение представляет новье и известньіе соединения, обладающие неожиданньми и удивительньїми противодиабетическими свойствами. 70 Введение соединений зтого изобретения мьішам ККАу в дозе, равной примерно 100 - 50Омг/кг/сут., пПриводит к частичному улучшению или полному устранению гипергликемиий на зтой модели инсулиннезависимого сахарного диабета у грьізунов (конкретнье соединения перечислень! в таблицах 4 и 5; смотрите, Спапо, УУузе,

Сореїапа, Регїегзоп, апа І едребег, Оіареїсез 1985, р. 466, 1986). Мьішки ККАу являются инсулинорезистентньіми (Сапа, еї а!., вниіше), и обнаружение того, что уровень глюкозь! в крови у неголодающих мьішей снижен у зтих /5 Животньх, указьівает на то, что инсулиновая резистентность, найболее вероятно, меньше после лечения заявляемьми соединениями. Мьіши ККАу имеют избьтточньїйй вес по сравнению с нормальньми, аутбредньми мьішами (Спапа, еї а!., виіше), и введение соединений зтого изобретения приводит к потере веса.

Введение М-(дигидразинметилен)-глицина, предпочтительного соединения в зтой серии, мьішам ККАУ с диабетом в течение 4 дней снижало уровень глюкозь! в крови у не голодньїх животньїх (см. таблицу 6). Доза, 2о равная бОмг/кг/сутки, вьізьівала 3596 снижение уровня глюкозь! в крови, что бьіло статистически значимо по сравнению с контролем. Более вьісокие дозьі давали еще большее снижение концентраций глюкозь! в крови.

З-Гуанидинпропионовая кислота в дозе 50Омг/кг/сутки давала примерно такое же снижение концентрации глюкозь! в крови, которое достигалось при дозе бомг/кг/сутки М-(дигидразинметилен)-глицина.

Введение М-(дигидразинметилен)-глицина мьшам ККАу с диабетом в течение 4 дней снижало вес тела сч об ЖИВОТтНЬХх (см. таблицу 6). Доза, равная 1ООмг/кг/сутки вьізьшала 495 снижение веса тела, что бьло статистически значимо по сравнению с контролем. Более вьісокие дозь! вьізььвали еще большее снижение і) избьіточного веса тела у мьішей ККАу. 3-гуанидинпропионовая кислота в дозе 500мг/кг/сутки давала примерно такое же снижение веса тела у мьшей ККАу, которое достигалось при помощи дозь! 1ООмг/кг/сутки

М-(дигидразинметилен)-глицина. с зо Введение М-(дигидразинметилен)--лицина нормальньм мьшам С57/ВІ в дозе 1О0Омг/кг снижало концентрацию глюкозь в крови на голодньій желудок у зтих животньх (таблица 7). со

Введение М-(дигидразинметилен)-глицина мьішам ККАуУ с диабетом или нормальньм мьішам С57ВІ в дозе с 100мг/кг приводит к улучшенной глюкозной толерантности, что демонстрируется более низкими уровнями глюкозь! после иньекции стандартной дозь! глюкозь! для исследования (таблица 7). -

Неферментативное гликозирование белков является первоначальной стадией в глюкозависимом ю перекрестном связьшаниий белков (Вгом/пієє, вьше). Неферментативное гликозирование человеческого сьівороточного альбумина снижается іп Де) М-(дигидразинметилен)-глицином,

М-(гидразиниминометил)-глицином и (2--аминоиминометил)гидразин|і-уксусной кислотьі моногидрохлоридом (таблица 8). Аминогуанидин, которьй, как бьіло показано ранее, подавляет неферментативное гликозирование « белков іп мйго (Кпаїаті, Зцідап, ЮОамід, Її апа Коскеу, Ме Зсієпсев5, моіЇ. 43, р. 1725 - 1731, 1988) и іп п-ш) с мімо (Вгожмпієе, виіше) также зффективен и в зтом исследований (таблица 8). 3-гГуанидинпропионовая кислота не действовала на неферментативное гликозирование альбумина в зтом исследований. ;» У пациентов с сахарньім диабетом присутствует несколько метаболических нарушений, которье бьло бь целесообразно скорректировать: ненормально повьішенньій уровень глюкозь! в крови после приема пищи и на голодньій желудок, замедленньїй клиренс глюкозь! из кровотока (Атегісап Оіаре(ез Авзосіайоп, Рпузісіапз Сиціде с То Іпзшіп-Оерепдепі (Туре І) Оіарефез, 1988; Атегісап Оіаре(ез Аввосіайоп, РНувзісіапз Сціде ю

Моп-Іпзийп-Оерепдепі (Туре !І) Оіаре(ез, 1988) и избьточное гликозирование белков, которое способствует о развитию диабетических осложнений (Вгожмпіее, вьіше). Кроме того, с инсулиннезависимьм сахарньім диабетом оо часто связано ожирение и оно отягощает нарушенньй метаболизм глюкозьі у зтих больньїх (Нопоп апа 5ор деапгепаца, Спаріег 27, Орезйу апа Оіаребез Меїйиз, 1990). При оптимальном лечений инсулиннезавнсимого со сахарного диабета должнь! корректироваться все зти нарушения. Избьточное гликозированние белков, такое,

Із которое может происходить при инсулиннезависимом сахарном диабете и инсулинзависимом сахарном диабете, можно предотвратить путем блокирования химической реакции глюкозь! и молекул белка (Вгом/піее, вьше) и снижения ненормального повьішения концентрации глюкозьі в крови при диабетическом состояний (Ноїтап апа Тигпег, Оіарейс Меадісіпе, 5: 582 - 588, 1988; Вепіатіп апа ЗасКв5, Сіп. Спет., 4015: 683 - 687, 1994). Найболее желательное лечение должно действовать двумя путями, так чтобьі более полно снизить (Ф, степень неферментативного гликозирования белков. ка Заявляемье соединения обладают способностью положительно воздействовать на многие метаболические дефектьії, сопровождающие сахарньій диабет, и предотвращать метаболические нарушения с помощью более бр чем одного механизма, что четко отличает их фармакологическое действие от действия других гуанидиновьх соединений, которье ранее бьіли заявленьі в качестве средств лечения сахарного диабета. Заявляемье соединения неожиданно превосходят аминогуанидин, диаминогуанидин, З-гуанидинпропионовую кислоту и метформин при лечении инсулиннезависимого сахарного диабета, так как они проявляют более полньіїй спектр желаемой активности и зффективнь! в более низких дозах. 65 Заявляемье соединения представляют неожиданнье преймущества при лечении сахарного диабета по сравнению с диамингуанидином и аминогуанидином, так как заявляемье соединения действуют метаболически со снижением избьточньх концентраций глюкозьі в крови, а также блокированием неферментативного гликозирования белков. Заявляемье соединения неожиданно превосходят амино- и диаминогуанидин при лечении нарушенной толерантности к глюкозе или ожирения, так как у аминогуанидина и диаминогуанидина Отсутствует зффективность в зтом отношений. Аминогуанидин и диаминогуанидин подавляют неферментативное гликозирование белков іп омйго и образование конечньїх продуктов усиленного гликозирования іп мімо (Китагі, Стаг, Вапгзаї, апа Запіда, Оіабеїйев, 40; 1079 - 1084, 1991). На оснований зтого подавления неферментативного гликозирования белков, предположили, что аминогуанидин будет полезен при лечении диабета (Вгом/"піее, вьіше). Аминогуанидин не действует на уровень глюкозьі в крови у нормальньх 7/0 Грьїзунов или крьс, которьім создали диабет с помощью иньекции аллоксана или стрептозотоцина (Кипагїі,

Отаг, Вапзаї, Запіб, вьіше; Мадіпавзні, Каті, ВаБра, Мадіназні, апа Мадаї, Оіаре(ез, 41:47 - 52, 1992;

Едеївівїп апа Вгомупієе, Оіарефоіодіа, 35:95 - 97, 1992; Охішпа апа Апагеаззеп, Оіабейфегоіодіа, 35:19 - 25, 1992). Диаминогуанидин не действует на уровень глюкозьі в крови нормальньх крьс и с диабетом, вьізванньім аллоксаном (Китагі, Штаг, Вапзаї, Запібр, вьіше). Аминогуанидин не влияет на вес тела нормальньїх крьіс или /5 Ккрьс с диабетом (Киптагі, Штаг, Вапзаї, Запір, вьіше; Мадіназнпі, Каті), Вабра, Мадіназні, апа Мадаї, вьіше;

Охіцпа апа Апагеаззеп, Оіарейої|діа, 35:19 - 25, 1992) или приводит к увеличению веса тела человека и крьс (Вауїйп, Ногакома, апа Веамеп, Ехрегіепііа, 31:562, 1975). Диаминогуанидин не влияет на вес тела нормальньх крьсс и крьсс с диабетом, вьізванньім аллоксаном (Китагі, Штаг, Вапгзаї, Запіб, виіше). Действие аминогуанидина или диаминогуанидина на толерантность к глюкозе еще нужно вьіявить.

Заявляемье соединения неожиданно превосходят 3-гуанидинпропионовую кислоту при лечениий сахарного диабета, так как последняя менее активна в отношений регуляции гипергликемии, и у нее отсутствует способность подавлять неферментативное гликозирование белков. Заявляемье соединения неожиданно превосходят 3-гуанидинпропионовую кислоту при лечениий нарушенной толерантности к глюкозе или ожирения благодаря большей активности зтих соединений. Ранее бьіло показано, что 3-гуанидинпропионовая кислота с бснижаєт гипергликемию и избьточньй вес тела и улучшает толерантность к глюкозе у грьізунов с диабетом (Медіаззоп, МУМівоп, Ми, Кобріпвоп, МУузе, апа де Боцга, 9У.Рпапт. Апа Ехр. Тпегареціїсв, 266: 1454 - 1462, (8) 1933). Предпочтительное соединение в о зтом пункте, (М-дигидразинметилен)-глицин, активнее

З-гуанидинпропионовой кислоть! по снижению ненормально повьішенньх уровней глюкозь в крови и веса тела у мьшей ККАу. Для снижения уровня глюкозьі в крови у мьшей ККАу на 2095 необходимо 1ЗОмг/кг/сутки с зо последнего соединения. Сходное снижение уровня глюкозь! в крови могло достигаться с помощью дозь, равной

ЗОмг/кг/сутки, М-(гидразинметилен)-глицина. М-(дигидразинметилен)-глицин, введенньій мьшам ККАу в дозе со бОмг/кг/сутки, біл примерно также зффективен, как и З-гуанидинпропионовая кислота в дозе Б50Омг/кг/сутки. с

З-Гуанидинпропионовая кислота улучшает толерантность к глюкозе у мьішей ККАу с диабетом при введений с пищей в виде 195 примеси, которая должна поставлять дозу, равную примерно 100Омг/кг/сутки (патент США « 5132324). Для сравнения, М-(дигидразинметилен)-глицин улучшал толерантность к глюкозе у нормальньх ю мьішей С57ВІ. и мьішей ККАу с диабетом при введений в дозе 100мг/кг/сутки. В отношений снижения веса тела доза 1ООмг/кг/сутки М-(дигидразинметилен)-глицина бьла примерно также зффективна, как и 5ООмг/кг/сутки

З-гуанидинпропионовой кислотьі. З3-Гуанидинпропионовая кислота не подавляет неферментативное гликозилирование альбумина іп міго в противоположность заявляемьім соединениям. «

Заявляемье соединения неожиданно превосходят метформин при лечении сахарного диабета, в с непереносимости глюкозьі, ожирения, так как последний менее активен при испьшитании на той же модели на животньх, что и заявляемье соединения. К тому же, в отношений его зффективности по снижению веса тела и ;» предотвращению неферментативного гликозирования белков, даннье, опубликованнье для метформина являются противоречивьми и не демонстрируют стабильньх результатов. Как бьло показано ранее,

Мметформин снижает гипергликемию у больньїх с инсулиннезависимьмм диабетом при введений в дозе 1000 - с Зб0ООмг/сутки и повьішает скорость клиренса глюкозьі у таких больньїх при введений в дозе 1500 - 2500мг/сутки (Вайу, Оіаре(ез Саге, 15:755 - 772, 1992). Грьізуньї менее чувствительньії к метформину, чем люди, и позтому пи необходимь! более вьісокие дозьі, чтобьї продемонстрировать гликемические зффектиь! (Вайу, Ріай, УМісоскК, апа 2) ОБау, Егопійеге іп Оіарефез Кезеагсі, рр. 277 - 282, 1990; Репісаца, Нійег, Рее, апа бСігага, Віоспет. 4. бо 252:881 - 885, 1989). Хроническое пероральное введение метформина снижает гипергликемию при введений бо новорожденньм мьішам с вьізванньм стрептозотоцином диабетом в дозе 1О0Омг/кг/сутки (Коззейці, Юенгоплго,

Ге ОпПеггі, іеїп, еї аїЇ.,, Мей(ароїїзт, 39:425 - 435, 1990), мьшам ОВМ в дозе 4О0Омг/кг/сутки (Вайу, Ріайб,

ММісоскК, апа ЮОау, вьше), крьісам 2исКег Тала в дозе З5БОмг/кг/сутки (Репісаца, Нікцег, Реїте, апа бігага, вьіше) и мьшам ККАу в дозе ЗООмг/кг/сутки или более (Медіаззоп, МУМізоп, Ми, Кобріпзоп, де Зоцлга, вьіше). в Хроническое пероральное введение метформина не влияло на концентрацию глюкозь! в крови у нормальньх мьшей, получающих 25Омг/кг/сутки, у мьшей с диабетом, вьізванньм стрептозотоцином, получающим

Ф) 25Омг/кг/сутки (Ваїйу, Ріай, УМісосК, апа ЮОау, вьіше) или мьішей ор/об с диабетом, получающих 25О0мг/кг/сутки ка (Вайу, Ріабй, апа Ємжап, Агсй. Іпї. Рпаптасодуп., 282:233 - 239, 1986). Острое введение 264мг/кг метформина или его аналога буформина в дозе 132мг/кг не влияло на уровень глюкозь! в крови у крьіс (Тийміег апа Вгіаї, во Біабрегйез, 27:868 - 876, 1978). Когда предпочтительное соединение по зтой формуле,

М-(дигидразинметилен)-глицин испьітьшали на мьшах ККАу, он бьл более активен, чем метформин в отношений снижения ненормально повьішенного уровня глюкозьі в крови на зтой модели. Чтобь! снизить уровень глюкозьі в крови у мьішей ККАУу на 2595 требовалось Зб0Омг/кг/сутки метформина и (Медіазвоп, УМіївоп,

Ми, Кобіпвоп, УУузе, апа де Боцза, вьіше). Сходное снижение уровня глюкозьі в крови могло достигаться с 65 помощью ДдОоЗЬ ЗО - бомг/кг/сутки М-(дигидразинметилен)-глицина. В отношении повьішения толерантности к глюкозе, сообщалось, что метформин не влиял на толерантность к глюкозе у нормальньїх мьішей, когда его давали в дозе 7Б5Омг/кг (Тиймег апа Вгіді, вьіше) или у нормальньїх мьішей, которьім давали 5Омг/кг (Ваїйу,

Ріай, ММісосК, апа Оау, вьше). Когда его давали нормальньм омьшам или крьсам с вьізванньм стрептозотоцином диабетом в дозе 250мг/кг толерантность к пероральному приему глюкозь! повьішалась (Ваїйу,

Ріай, УМіїсосК, апа ау, вьіше). Для сравнения, М-(дигидразинметилен)-глицин повьішал толерантность к глюкозе при введений нормальньм мьшам С57ВІ или мьшам ККАу с диабетом в более низкой дозе, 10Омг/кг. В отношений снижения веса тела, бьло сообщено, что метформин вьізьшает потерю веса у больньх инсулиннезависимьм диабетом, лечившимся в течение одного года (ВаїйуУ, вьіше) или не имеет значительного действия на вес тела больньїх инсулиннезависимьм диабетом с ожирением, лечившихся в течение того же 7/0 брока (Миї-сепіге зічау, Оіареюіодіа, 24:404 - 411, 1983). Метформин не вьізьівал потери веса у мьішей ор/ор с диабетом при введений в дозе 24Омг/кг/сутки или у мьішей с вьізванньмм стрептозотоцином диабетом при введений в дозе бОмг/кг/сутки (І ога, АїКіпз, апа Ваїу, Оіарефіодіа 25:108 - 113, 1983). Метформин вьїзьівал статистически значимую потерю веса у мьшей ККАу, леченньїх 17ООмг/кг/сутки зтого соединения, но не оказьівал зтого действия, когда его давали в более низких дозах (Медіаззоп, УМіїзоп, Ми, Кобіпзоп, УУузе, апа де зЗоцга, вьіше). Для сравнения, когда М-(дигидразинметилен)-глицин вводили мьішам ККАу в дозе 10Омг/кг/сутки, он бьіл примерно также зффективен, как и метформин в дозе 170Омг/кг/сутки в отношений получения потери веса у линии мьішей с ожирением (Медіаззоп, УМізоп, Ми, Кобріпзоп, УуУузе, апа де 5оцга, вьіше). Сообщалось, что метформин подавляет неферментативное гликозирование зритроцитньїх плазменньх мембран в концентрациях, равньїх 0,5 и 5 микромолей на литр на основе его способности предотвращать снижение основньх параметров плазменньїх мембран, при спектроскопий с использованием злектронного парамагнитного резонанса, инкубированньїх с глюкозой іп мійго (Егеізіереп, КисКеї, Уміегпзрегдег, апа 7ттег, Віоспетіса

РПпаптасоЇоду, 43:1185 - 1194, 1992). При вьісоких концентрациях, 50 и 100 микромолей на литр, метформин обладал обратньім зффектом и давал очень низкий основной показатель. Следовательно, можно бьіло ожидать, что то, что уменьшит или усилит ли метформин неферментативное гликозирование белков у пациентов с с ов диабетом, должно зависеть от концентрации метформина в сьіворотке лечившихся пациентов. У людей с диабетом, которне получали 1 грамм метформина перорально, среднее значение Стах Концентрации в плазме і) составляет 3,24 микрограмм на миллилитр (или 25 микромолей на литр) (ТисКег, Сазеу, РАШірв, Соппог, еї аї.,

Вг. 9У.Сііп. Ріагтасої., 2:235 - 246, 1981) и позтому находится в промежутке между найвьісшей концентрацией, которая, как показано, снижаєет неферментативное гликозирование зритроцитов, и самой низкой концентрацией, су зо Которая, как показано, стимулирует зтот процесс. На оснований опубликованньїх значений уровня метформина в плазме у пациентов с диабетом, нельзя сделать заключение, будет ли метформин подавлять со неферментативное гликозирование белков или будет усиливать процесс тем же путем при назначений в (У качестве терапий для больньх.

Основнье методь получения соединений зтого изобретения представлень! на схемах 1 - 4. Конкретнье - з5 примерь для ряда зтих методик можно найти в зкспериментальньїх методиках, представленньїх в описаний ю предпочтительного осуществления. Путем применения других исходньїх материалов и реагентов могут бьть полученьї разнообразнье соединения зтого изобретения. В следующих источниках изложень! методики, касающиеся основньїх методов синтеза соединений зтого изобретения.

Схема 1: Сапіве, У.Спет. Вег. 1968, 101, 1195. Аптпагедо, МУ... Корауавпі, Т.ОУ.Спет.5Бос.(С) 1971, 238. «

Емапе, О.А. ВгЩоп, Т.С.; Оогому, К.С.; Оейагіа, УР. У. Ат. Спет. Зос. 1986, 108, 6395. Емапе, О.А.; пт) с Вгіноп, Т.С.; Оогому, К.І..; ЮОеїПагіа, 9У.Р. Теігапедгоп 1988, 44, 5525.

Схема 3: Ці, У.» Незоцп, Ю.; Момасек, А. СоїЇ. Слесп. Спет. Сотт. 1966, 31, 2014. Міга, К.; ІКеда, М.; з Копао, Т.; Зеодамжа, К. Спет. Арзіг. 1962, 56: 47675. РапКазКіе, М.; АрдеІ-Мопет, М.М. У. Рпагт. Зсі. 1980, 69, 1000.

Схема 4: ее, К.; Кіт, 5.; От, Н.; Бупіпезіз 1989, 638. Кейдау, Т.І; Врамжа!ї, В.М. Каї|арра, 5. с Теїгапедгоп 1993, 49, 2101.

Методь отбора іп мімо и іп міго. о Следующие зкспериментальнье процедурь являются конкретньімми примерами, в которьїх описьівается оо получение ряда соединений зтого изобретения:

ПРИМЕР 1: |(2--аминоиминометил)гидразин|-уксусная кислота со Зтилгидразинацетата гидрохлорид (7,73г, 50 ммолей) омьіляли с помощью нагревания в колбе с обратньм

Ге холодильником в 17ОО0мл 1М МаоОонН в течение 2 часов. Затем к горячему раствору добавляли сульфат 2-метил-2-тиопсевдомочевиньі (6,95г, 50 ммолей) и раствор нагревали в колбе с обратньм холодильником дополнительно в течение 2 часов. Смесь концентрировали до «1/2 обьема, во время чего осаждалось более св твердое вещество. Раствор охлаждали и фильтровали с получением 3,34г белого твердого вещества.

Перекристаллизация из водьі давала 2,41г (3695) (2-аминоиминометил)гидразин|-уксусной кислоть! в виде

Ф, белого твердого вещества с вьісокой концентрацией. Т. пл.: 247 - 2482С (разл.); "Н ЯМР: (050) 5 3,40 (в, 2Н). ко ПРИМЕР 2: Моногидрохлорид (2--аминоиминометил)гидразин)|-уксусной кислоть

К перемешиваемому раствору моногидрата монохлорида ((аминоиминометил)гидразон|-уксусной кислоть бо (10г, 60 ммолей) в метаноле (З0ОО0мл) добавляли 1095 Ра-С (0,25г), и смесь гидрогенизировали при давлений 206,7 0 л10Зн/м2 (ЗОфунт/дюйм?). Смесь фильтровали и растворитель вьішпаривали до сухости. Остаток перекристаллизовьвали из ЕЮН с получением 4,2г (4296) вещества, названного в заголовке, в виде белого твердого вещества (т. пл. 163 - 1652). "Н ЯМР (020) 5 3,68 (с, 2Н).

ПРИМЕР 3: |(2--аминоиминометил)гидразині|-уксусной кислотьї фенилметилового зфира моногидрохлорид б5 НОЇ (г) пропускали через суспензию (2--аминоиминометил)гидразині|-уксусной кислоть (2,00г, 15,2 ммоля) в бензиловом спирте (ЗОмл). Реакционную смесь перемешивали в течение примерно часа до тех пор пока все не перейдет в раствор. Неочищенньй продукт осаждали путем добавления Еї 50. Зто вещество перекристаллизовьвали из МеоОнН/ЕБЮАс с о получением монохлорида фенилметилового зфира (2-«-«аминоиминометил)гидразин|-уксусной кислоть (3,20г, 8295) в виде твердого кристаллического вещества.

Т. пл.: 162 - 1647

Т"Н ЯМР (СО3О0): 5 3,69 (с, 2Н), 5,24 (с, 2Н), 7,34 - 7,42(м, 5Н).

ПРИМЕР 4: у-гидразинбензолпропановая кислота

Раствор ЛДА (5Омл 1,5М раствора в ТГФ) в 250мл безводного ТГФ охлаждали до -787С. К зтому раствору по 70 каплям добавляли раствор зтилгидроциннамата (12,0мл, 68,2 ммоля) в 250мл безводного ТГФ. Раствор перемешивали при -78"С в течение ЗОмин. Затем по каплям добавляли раствор ди-трет-бутилазокарбоксилата (18,84г, 81,8 ммоля) в 100мл безводного ТГФ. Через 10мин. реакцию останавливали путем добавления 14мл

НОАс и давая нагреться до комнатной температурь. Смесь разделяли между Ей 20 и водой. Водньй слой зкстрагировали ЕББО (3 х 100мл). Обьединеннье органические слой промьмвали насьщенньм водньм 75 раствором МанСоО»з (2 х 100мл) и рассолом (1 х 100мл), сушили сульфатом натрия и конденсировали.

Неочищенньій продукт подвергали хроматографии на двуокиси кремния (90/10 гексан/Е(ОАс) с получением 15,33г (5595) бис-БОК-защищенного гидразинового зфира. Зфир собирали в 200мл СНоСі». К зтому раствору добавляли 120О0мл тиофторуксусной кислотьі. Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. После удаления растворителя неочищенньій продукт собирали в 7бмл 1М Маон и нагревали в колбе с ообратньм холодильником в отечение 2 часов. Раствор охлаждали, озкстрагировали ЕБО, нейтрализовали, конденсировали до половинь! обьема, охлаждали и фильтровали. Полученное коричневатое твердое вещество перемешивали в кипящем 1-РГОН в течение б5мин. для удаления окрашенньїх примесей.

Фильтрация и внісушивание давали 3,35г (2790) о-гидразинбензолпропановой кислоть! в виде белого твердого вещества. с

Т. пл.: 198 - 2012 (разл.) "Н ЯМР (020) 5 7,41 - 7,29 (м, 5Н), 3,89 (дд, у - 7,6Гц, 1Н), 3,23 - 3,08 (м, 2Н). ге)

ПРИМЕР 5: Моногидрат «-(2--аминоиминометил)гидразин|ібензолпропановой кислоть

Раствор о-гидразинбензолпропановой кИслОтьІ (3,00г, 16,7 МмМмоля) и сульфата 2-метил-2-тиопсевдомочевинь (2,55г, 18,3 ммоля) в 17мл 1М Маон нагревали до кипения в колбе с обратньм холодильником в течение 2 часов. Смесь нейтрализовали ЗМ Нсі и концентрировали до тех пор, пока не см начиналось осаждение (примерно, 1/2 обьема). Неочищенньій продукт фильтровали и перекристаллизовьвали с из водьї с получением 1,81г (4995) моногидрата «-(2--аминоиминометил)гидразин|бензолпропановой кислоть. со

Т. пли 127 - 1302С (разл). "Н ЯМР: (020) 5 7,40 - 7,27 (м, 5Н), 3,60 (дд, У - 8,6Гц, 1Н), 3,04 (дд, У - 14,6Гц, 1Н), 2,86 (дд, у - 14,8Гц, 1Н). « 2--2--Аминоиминометил)гидразин|пропановая кислота. ю

Смесь 10,0г (554 ммоля) гидрохлорида 2-Каминоиминометил)гидразин|пропановой кислоть! (.).РіІїагтасеці.

Зсі. 1980, 69, 1000 - 1004), 1,5г 1095 палладия на угле и ЗбООмл дистиллированной водьі! встряхивали при давлении водорода 344,5 7 10Зн/м2 (5Офунт/дюйм?) в течение 16 часов при 257. Смесь фильтровали. К фильтрату добавляли 75г сильно кислотной катионобменной смоль! Ооугех ІК118Н в водородной форме. Смесь « 770 перемешивали 1 час и затем смесь фильтровали. Смолу промьмшвали три раза 150мл порциями 8 с дистиллированной водьі. Обьединенньй фильтрат и промьівнье водьії отбрасьвали и смолу промьівали пятью ц 200мл порциями 2095 (обьеем/обьем) пиридина в дистиллированной воде. Зти промьівнье водьі обьединяли и "» растворитель вьіпаривали при пониженном давлениий (25"С, 1 торр). Полученньій бельій порошок растворяли в

ЗОмл кипящей в колбе с обратньім холодильником дистиллированной водь! и полученньій раствор разбавляли ЗОмл горячего абсолютного спирта. Смеси давали охладиться до 25"С и через 24 часа осадок, которьій при 4! зтом образовьівался, собирали фильтрованием. Твердое вещество сушили (20 торр/50"С/24 часа) с получением 3,в8г вещества, названного в заголовке, в виде белого твердого вещества, т. пл. 239 - 24176. шк ПРИМЕР 6: Моногидробромид (|1--(аминоиминометил)гидразині|уксусной кислоть! со К перемешиваемой суспензии бикарбоната аминогуанидина (100г, 734 ммоля) в воде (200мл) добавляли бромуксусную кислоту (100г, 720 ммолей). После первоначального вспенивания гомогенньй раствор нагревали со в колбе с обратньм холодильником в течение ночи, охлаждали до комнатной температурь и растворитель

Кз вьіпаривали до сухости. Остаток суспендировали в ЕЮН (200мл) и диспергировали с помощью ультразвука.

Твердое вещество отфильтровьівали с получением 13,6бг (995) вещества, названного в заголовке, в виде белого твердого вещества (т. пл. 163 - 1652С). "Н ЯМР (020) 5 4,25 (с, 2Н).

ПРИМЕР 7: 3-Пимино|(1-метилзтилиден)гидразин|метилІамино|пропановая кислота о р-аланин (6,00г, 67,5 ммоля) растворяли в 6б7,5мл 1 М Маон. К зтому раствору добавляли гидройодид

М-амино-5-метилизотиомочевиньі (15,69г, 67,5 ммоля). Смесь нагревали до кипения в колбе с обратньм ко холодильником в течение 1,5 часов. Растворитель удаляли. Неочищенньй продукт собирали в примерно 5Омл водьії и добавляли 5О0мл ацетона. Удаление растворителя давало оранжевое твердое вещество, которое 60 подвергали хроматографии на двуокиси кремния (80/20 СНСЇ 3з3/Меон, затем 60/40 СНСЇ з3/меон) с получением 5,88г (4796) 3-Пимино|(1-метилотилиден)гидразин|метилІіамино)| пропановой кислоть! в виде бледно-оранжевого твердого вещества. Т. пл.: - 1257 (разл.). "Н ЯМР: (050) 5 3,36 (т, у - 6Гц, 2Н), 2,35 (т, У - 6Гц, 2Н), 1,87 (с, ЗН), 1,80 (с, ЗН).

ПРИМЕР 8: М-(гидразиниминометил)-р-аланин бо З-Димино((1-метилотилиден)гидразиніметил|Іамино| пропановую кислоту (5,88г, 31,61 ммоля) растворяли в

125мл водь и нагревали при 60"С в течение 72час. Растворитель вьіпаривали и продукт перемешивали в смеси 4:11 ЕЮН и Меон. Полученньій бледно-оранжевьй осадок отфильтровьівали, промьівали зтанолом и сушили с получением З,16г (6895) М-(гидразиниминометил)-д-аланина в виде бледно-оранжевого твердого вещества. Т. пл.177 - 17926. "Н ЯМР: (020) 5 3,39 (т, У - 6Гц, 2Н), 2,42 (т, У - 6бГЦц, 2Н),

ПРИМЕР 9: М-(дигидразинметилен)-1-аланин

К суспензии І -аланина (10,Ог, 0,11 моля) и тризтиламина (33,5мл, 0,24 моля) в ЕЮН (9Омл) и НО (бмл) добавляли дисульфид углерода (7,2мл, 0,12 моля). После перемешивания в течение ночи к желтому раствору добавляли метилйиодид (7,5мл, 0,12 моля). Смесь перемешивали в течение 1 часа и концентрировали до густой 70 суспензии. Остаток растворяли в НьО (25мл) и добавляли НСЇІ до кислой реакции. Смесь зкстрагировали Еб»О (3 х 100мл) и органическую фазу сушили (М9505) и концентрировали с получением 18,4г (93965) соответствующего дитиокарбамата в виде бледно-желтого твердого вещества с хорошей чистотой.

Аналитически чистьій образец получали путем перекристаллизации из ЕбО/гексана: т. пл. 90 - 922с; "ЯН ЯМР (0.09) 5 4,89 (кв, У - 7Гцу, 1Н), 2,59 (с, ЗН), 1,52 (д, У - 7Гц, ЗН).

К раствору дитиокарбамата (5,00г, 28 ммолей) в метиленхлориде (5Омл) при 0"С добавляли метилтрифторметансульфонат (3,5мл, 31 ммоль). Смесь нагревали до комнатной температурь! и перемешивали в течение 20 часов. Смесь концентрировали под пониженньм давлением до получения бесцветного масла.

Полученное масло растворяли в НоО (5мл) и добавляли 1,0М Маон (28 ммолей). Смесь зкстрагировали ЕЮАс (З х 100мл) и органическую фазу сушили (М95О5). После фильтрации растворитель удаляли под вакуумом с получением густого вязкого масла. Зто масло растворяли в абсолютном ЕЮН (25мл) и добавляли безводньй гидразин (4,4мл, 0,14 моля). Смесь перемешивали в течение 1,5 часа и твердое вещество (2,5), которое при зтом образовьшалось, собирали путем фильтрации. Бельй порошок дополнительно очищали путем кристаллизации из НоО/ИФК с получением 2,2г (4995) диамингуанидина в виде белого порошка: т. пл. 174 - 1762С (разд.); "Н ЯМР (020) 5 3,69 (кв., У - 7Гц, 1Н), 1,20 (д, У - 7Гц, ЗН). с 29 ПРИМЕР 10: М-(дигидразинметилен)-р-аланин Ге) с помощью процедурь, аналогичной примененной для получения

М-(дигидразинметилен)-1-аланина, р-аланин превращали в М-(дигидразинметилен)-р-аланин (т. пл. 19270, разл.). "Н ЯМР (020) 3,40 (т. 2Н, У - 7Гц), 2,48 (т, 2Н, У - 7ГЦ). Га

ПРИМЕР 11: М-(дигидразинметилен)-глицин

Раствор метилированного тиокарбогидразида (25,0г, 101 ммоль) и глицина (6,314г, 83,р98 ммоля) в воде со (5Омл) и 12,5 М Маон (8,89мл, 111 ммолей) перемешивали в атмосфере азота при 75 - 80"С в течение З часов. («З

Раствор охлаждали на льду, в то время как он все еще находился в атмосфере азота, перед добавлением порциями абсолютного зтанола (550мл 5О0мл порциями), перемешивая после каждого добавления до тех пор, в пока не завершалось осаждениє. Затем смесь перемешивали в течение 15 минут при 0"С перед (З фильтрованием. Собранное твердое вещество тщательно промьшвали абсолютньм спиртом. Вьісушивание давало легкий розовьій порошок (8,04г). Неочищенное твердое вещество растворяли в воде (ЗОмл), фильтровали для удаления некоторого количества тонко измельченного нерастворимого вещества и затем разводили до обьема, равного 250мл, абсолютньм зтанолом. Осаждение начиналось почти сразу же и « ускорялось с помощью обработки ультразвуком в течение нескольких секунд. После стояния при комнатной 8 с температуре в течение 1Омин. смесь фильтровали с получением бледно-розового порошка (5,25г, 4290, т. пл. ц 2002 С, разд.). "Н ЯМР (020) 3,78 (с). ,» ПРИМЕР 12: (2-гидразиниминометил)гидразиніуксусная кислота

Зтилгидразинацетата гидрохлорид (9,28г, 60 ммолей) омьіляли путем нагревания в колбе с обратньм холодильником в 120мл 1 М МаоН в течение 2 часов. К горячему раствору затем добавляли гидройодид с М-амино-5-метилизотиомочевинь (13,98г, 60 ммолей) и раствор нагревали в колбе с обратньім холодильником дополнительно в течение 2 часов. Растворитель удаляли. Неочищенньій продукт растворяли в метаноле и е фильтровали для удаления Масі. Фильтрат конденсировали и сушили при вьісоком вакууме. Остаток затем (95) перемешивали со 150мл МеонН в течение ночи. Полученное белое твердое вещество отфильтровьівали. Зто твердое вещество затем кипятили в колбе с обратньмм холодильником в 100мл Меон в течение 2 часов для бо удаления загрязняющих примесей. Затем смесь охлаждали и фильтровали. Полученное твердое вещество до) сушили под вакуумом с получением 2,14г (2490) |2-гидразиниминометил)гидразин)уксусной кислоть! в виде не совсем белого твердого вещества. Т. пл.: 201 - 2032 (разл.) "Н ЯМР: (020) 5 3,39 (с, 2Н).

ПРИМЕР 13: М-(дигидразинметилен)-а-аланин оо К суспензии О-аланина (1,8г, 20 ммолей) и тризтиламина (б,1мл, 44 ммоля) в ЕЮН (15мл) и НьЬО (мл) о добавляли дисульфид углерода (1,3мл, 22 ммоля). После перемешивания в течение ночи к желтому раствору добавляли метилйиодид (1,4мл, 22 ммоля). Смесь перемешивали в течение 1 часа и концентрировали до густой ю взвеси. Остаток растворяли в НьО и добавляли концентрированную НСІ до кислой реакции раствора. Смесь зкстрагировали метил-т-бутиловьім зфиром (З х 5Омл) и органическую фазу сушили (М9504) и концентрировали 60 с получением желтого масла, которое с помощью обработки ультразвуком и добавления небольшого количества гексана превращалось в твердое вещество. При дальнейшем вьісушивании получали 2,9г желтого твердого вещества. Продукт дополнительно очищали путем перекристаллизации (Е(О»о/гексан) с получением 1,67г (4795) соединения, идентифицированного как соединение А из таблиць! 9, в виде кремового твердого вещества: т. пл. 89 - 9170; ІН ЯМР (0290) 5 4,67 (ср, 1Н), 2,39 (с, ЗН), 1,32 (д, У - 7,0Гц, ЗН). бо К раствору дитиокарбамата соединения А из таблиць 9 (15,1г, 84,3 ммоля) в метиленхлориде (17Омл) при

ОС добавляли метилтрифторметансульфонат (10,5мл, 92,7 ммоля). Смесь нагревали до комнатной температурьі и перемешивали в течение 20 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлений до бесцветного масла. Полученное масло растворяли в НоО (40мл) и добавляли 1,0М Маон (84,3 ммоля). Смесь

Зкстрагировали ЕЮАс (3 х 200мл) и органическую фазу сушили (Ма5ЗО)). После фильтрации растворитель удаляли под вакуумом с получением густого вязкого масла. Масло растворяли в абсолютном ЕЮН (85мл) и добавляли безводньій гидразин (13,2мл, 0,42 моля). Смесь перемешивали в течение 1,5 часов и образовавшееся твердое вещество (7,5г) собирали фильтрованием. Бельій порошок дополнительно очищали путем перекристаллизации из НоО/ИФК с получением 6,48г (4895) соединения, названного в заголовке, в виде 70 белого порошка: т. пл. 175 - 17775; ІН ЯМР (029) 5 3,69 (кв., У - 7,0ГЦ, 1Н), 1,20 (д, У - 7Гц, ЗН).

ПРИМЕР 14: М-(дигидразинметилен)-валин

К суспензии І -валина (5,0г, 42,7 ммоля) и тризтиламина (13,1мл, 93,9 ммоля) в ЕЮН (ЗОмл) и Н 20 (2мл) добавляли дисульфид углерода (2, мл, 47,0 ммолей). После перемешивания в течение ночи к желтому раствору добавляли метилйиодид (2,9мл, 47,0 ммолей). Микстуру перемешивали в течение 2 часов и концентрировали до 75 густой взвеси. Остаток растворяли в НО (1О0мл) и добавляли концентрированную НСІ до кислой реакции раствора. Смесь зкстрагировали ЕБО (З х 100мл) и органическую фазу сушили (М95О)) и концентрировали с получением желтого масла, которое после внесения затравки давало желтое твердое вещество. Твердое вещество суспендировали в гексане и фильтровали с получением 7,7г соединения В из таблиць 9, в виде не совсем белого твердого вещества. Фильтрат охлаждали до 0"С с получением второй порции, равной 0,27г 20 соединения В из таблиць 9 (7,97г всего, 9095) в виде белого твердого вещества: т. пл. 76 - 782; ТН яЯМР (СОСІ5) 5 530 (м, 1Н), 2,40 (м, 1Н), 1,08 (д, У - 7,0Гу, ЗН), 1,04 (д, У - 7,0Гу, ЗН).

К раствору соединения В из таблиць 9 (8,0г, 38,6 ммоля) в метиленхлориде (бОмл) при 0"С добавляли метилтрифторметансульфонат (4,8мл, 42,бммоля). Смесь о нагревали до комнатной температурь и перемешивали в течение 20 часов. Смесь концентрировали под пониженньім давлением до бесцветного масла. СМ 25 Полученное масло растворяли в Но (1Омл) и добавляли 1,0М Маон (38,бмл). Смесь зкстрагировали ЕЮАс (З х Ге) 10Омл) и органическую фазу сушили (Ма5О)). После фильтрации растворитель удаляли под вакуумом с получением густого вязкого масла. Масло растворяли в изопропиловом спирте (150мл) и добавляли моногидрат гидразина (94мл, 0,19 моля). Смесь перемешивали в течение 2 часов и добавляли ТГФ, что давало в результате более фильтруемое твердое вещество. Фильтрация давала 2,4г (3390) соединения, указанного в с 30 заголовке, в виде слегка гигроскопичного белого твердого вещества: т. пл,: 112 - 1167; ІН ЯМР (020)5 3,70 со (д, У - 5,0ГЦ, 1Н), 2,20 (м, 1Н), 0,97 (д, У - 7,0Гц, ЗН), 0,94 (д, У - 7,0Гц, ЗН).

ПРИМЕР 15: (1-(аминогидразонметил)гидразиніуксусная кислота о (Пожалуйста, обратитесь к схеме 5). «І

ПОЛУЧЕНИЄЕ СОЕДИНЕНИЯ 9 35 К перемешиваемой суспензии гидрохлорида зтилгидразинацетата (5,0г, 32,34 ммоля) и М-метилморфолина юю (3,26г, 32,34 ммоля) добавляли при 0"С твердьй М-(бензилоксикарбонилокси)сукцинимид (8,06г, 32,34 ммоля).

Смеси давали нагреться до комнатной температурьі в течение ночи и растворитель удаляли под вакуумом.

Остаток суспендировали между Е(ОАс/НоО, слои встряхивали, органические вещества отделяли и сушили над «

Ма»ЗО). Растворитель удаляли и остаток хроматографировали с помощью тонкослойной хроматографии на

БІО» (злюент гексан/Е(ОАс) с получением 5,7г (7095) вещества заголовка в виде белого твердого вещества, т. не с пл. 95 - 977"С. Остаток при последующих реакциях очищали путем перекристаллизации из Е(Ас/гексана с :з» получениєм вещества, названного в заголовке со слегка более низким вьїходом. "Н ЯМР (СОСІ5) 5 1,27 (т, 9 - 7,0Гц, ЗН), 3,66 (с, 2Н), 4,19 (кв., У - 7,0ГцЦ, 2Н), 5,13 (с, 2Н), 6,77 (уш. с., 1Н), 7,33 (м, 5Н).

ПОЛУЧЕНИЄЕ СОЕДИНЕНИЯ 10 сл К перемешиваемой суспензии препарата 9 (3,0г, 11,89 ммоля) в ЕЮН (ЗОмл) при комнатной температуре добавляли водньй раствор МаОН (1М, 11,89мл). К смеси дополнительно добавляли Н 250 (1Омл) и т. перемешивали в течение 1 часа (смесь становилась гомогенньм раствором, а затем осаждалось твердое с вещество). Затем добавляли водньій раствор НСІ (1 М, 11,89мл), зтанол удаляли под вакуумом и водньй 5р раствор зкстрагировали с помощью ЕЮОдАс (2 х 100мл). Органические слой обьединяли, сушили над Ма»ЗОу и со растворитель удаляли с получением 2,31г (8795) вещества заголовка в виде белого твердого вещества. Т. пл.

ГІ 131 - 13320. "Н ЯМР (СОЗО0) 5 3,59 (с, 2Н), 5,15 (с, 2Н), 7,37 (м, 5Н).

ПОЛУЧЕНИЄЕ СОЕДИНЕНИЯ 11

К перемешиваемой суспензии препарата 10 (25,44г, 112,7 ммоля) в ЕЮАс 5Б0Омл) добавляли Ттриметилсилилизотиоцианат (14,79г, 112,7 ммоля) и смесь нагревали при легком нагреваний (80"С) в колбе с обратньм холодильником в течение ночи. Полученньй раствор охлаждали до комнатной температурь и

Ф) промьівали Н2оО (2 х 100мл). Огранический слой отделяли, сушили над Ма»ЗО,) и растворитель вьіпаривали до ко сухости. Маслянистьй остаток растворяли в СН 5Сі» и оставляли стоять при комнатной температуре на З минуть), на срок, во время которого образуется твердое вещество. Твердое вещество отфильтровьівали, бо промьвшвали СНоСі» (100мл) и сушили под вакуумом. Твердое вещество суспендировали в горячем ЕЮАс (З00мл), чтобьі растворить какое-то количество серьі, связанной с побочньми продуктами, и растирали с гексаном (200мл) с получением 17,1г вещества заголовка (5395) в виде твердого белого вещества. Т. пл. 148 - 14926. "Н ЯМР (СО3О0) 5 5,20 (с, 2Н), 7,30 (м, 5Н) оставшиеся СН» не наблюдаются.

ПОЛУЧЕНИЄЕ СОЕДИНЕНИЯ 12 65 К перемешиваемому раствору препарата 11 (5,0г, 17,64 ммоля) в ЕЮН (15 мл) при комнатной температуре добавляли метилйодид (2,73г, 19,41 ммоля) и полученньй раствор перемешивали в течение ночи.

Растворитель удаляли под вакуумом с получением 7,50г (количест.) вещества заголовка в виде желтой пень. "Н ЯМР (СО53О0) 5 2,69 (ушир, с., 6 Н), 2,84 (ушир. с., 0,4Н), 4,40 - 4,70 (м, 2Н), 5,31 (ушир. с., 2Н), 7,46 (м, 5Н).

ПОЛУЧЕНИЄЕ СОЕДИНЕНИЯ 13

К знергично перемешиваемому раствору препарата 12 (25,5г, 60 ммолей) в Н»О (100мл) при комнатной температуре медленно добавляли гидразина гидрат (6,06бг, 120 ммолей), до тех пор, пока не будет добавлена 1/2. К образовавшейся твердой массе добавляли Н 50 (1О0мл) и твердое вещество разбивали механически с помощью шпателя. Затем добавляли оставшийся гидразин и раствор знергично перемешивали в течение 1 70 часа. Гетерогенную смесь обрабатьвали ультразвуком и перемешивание продолжали до тех пор, пока не образовьівалась густая масса. Добавляли ЕН (50мл), твердое вещество отфильтровьівали, промьівали ЕЮН и сушили под вакуумом с получением 9,24г (5595) вещества, названного в заголовке, в виде белого твердого вещества, т. пл. 168 - 1702С. "Н ЯМР (0290) 5 3,86 (ушир. с, 1Н), 4,21 (ушир. с., 1Н), 5,17 (с, 2Н), 7,39 (с. 5Н).

П1-(гидразиниминометил)гидразині|уксусная кислота

К раствору препарата 13 (9,20г, 32,71 ммоля) в Меон/ноо (40Омл, «2,1 обьем/обьем) добавляли 1095 Ра-с (1,0г) и смесь гидрогенизировали при 206,7 0 10Зн/м? (ЗОфунтов/дюйм?) в течение 4 часов. Катализатор отфильтровьівали через диатомовую землю и снова добавляли 1095 Ра-С (1,0г). Смесь гидрогенизировали при 206,7 с 10Зн/м2 (ЗОфунтов/дюйм?) в течение 2,5 часов и определяли завершение гидрогенизации с помощью

ТОХ (злюент СНЬСІ /Меон/НСООН 85:14:11). Смесь фильтровали через диатомовую землю и растворитель удаляли до -50мл, и в зто время осаждалось твердое вещество. Твердое вещество отфильтровьвали, промьівали минимальньм количеством Н»О и сушили под вакуумом с получением 3,бОг (7595) соединения, названного в заголовке, в виде не совсем белого твердого вещества. Т. пл. 196 - 1987С. Вторую порцию получали путем концентрации фильтрата до образования твердого вещества. Фильтрование давало дополнительно 0,90г (1995, общий вьход: 9495) вещества, имеющего идентичную температуру плавления. "/Н см 2 ЯМР (0,0) 84,06 (с, 2 Н). о

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ИСПЬІТАНИЕ

Соединения зтого изобретения бьіли испьітаньі! на их способность снижать уровень глюкозь! в крови и вес тела следующим образом: сч

Мьїши ККАу служат моделями ИНСД и ожирения на грьізунах (Спапо, УУузе, Сореїапа, Рейеггоп апа І едрецег, 1986). Образец крови до лечения получали из ретроорбитального синуса, и мьішей распределяли на группььпо 00 6 животньмх, так что средний уровень глюкозь! в крови до лечения бьіл в среднем одинаковь!м во всех группах. с

Испьітуемье соединения смешивали с пищей до концентрации 0,595, и мьішам давали потреблять пищу по желанию. Контрольнье мьши получали питание без добавок. В день 0 мьшей взвешивали и давали ХЕ зв Контрольную пищу или пищу с добавкой испьітуемьїх соединений. Через З дня после потребления контрольной ою пищи или пищи с добавками испьітуемьїх соединений получали образец крови для определения концентрации глюкозьІ, и животньїх взвешивали для определения потери веса. Потребление пищи определяли путем взвешивания корма, предоставленного в начале испьтания, и остатка корма в конце испьітания. Потребление корма рассчитьівали путем вьічитания веса остатка из веса предоставленного корма. Потребление лекарства « 70 рассчитьввали путем умножения потребления пищи на 0,595. С использованием зтого метода определено, что -в прием лекарства составил примерно 500мг/кг/сутки. Даннье по уровню глюкозьі в крови представлень! в виде с средней концентрации глюкозь! в крови в испьітуемой группе, деленной на средний уровень глюкозь! в крови в :з» контрольной группе (лечившаяся/контрольная или Л/К). Соединения, дающие в результате Л/К значения, равнье или менее 0,90 считаются активньми противогликемическими средствами. Даннье по потере веса 5 Віражень! в виде процента изменения веса тела. Соединения, дающие в результате снижение на 195 или более сл по сравнению с контролем веса тела через три дня, считаются активньіми средствами против ожирения. щ» (95) о 50

Ко)

Ф) іме) 60 б5

ТАБЛИЦА 1

Предпочтительнуг соєдинения зтого изобретения м-о-мн-МН-СнУ-о- Й на й з ІЙ он Асейіс асід, (2-(агіпоітіпотеєву|)-

Мі 5 ВудгагіпоЇ- . (2-(амиксимино- метил)гилразин | Уксусная кислоте.

Нем-о-мномнона-п7он Асейіс асій, (2-(ашіпоітіпотеєу|)-

Мн 9 Вуйказіпої поповудгосіогіде

Не - НОЇ (2-«амикоимино- метил)гидразин |."

Уксусная кислота, монохлорид 9)

НІ М | Сусіпе, М(Буйгалгідоїті. ву). на ма ра оон усіде, удгагідоїтідотеєну!)-

ІЇ М-(гидразин имикнометил)-

Мн

Глицин, о н ЦІ І 15 н он СпПусіпе, М««вуйгазіпойтіроюеєну1)-, г

Ця Вудгосьіогіде (2:11) он М-(гидразин иминометил)-,

Глицин, гидрохлорид (82:1)

Ге)

Ко 20 нат те а тон МА(Оінуйгатівоютеєву епе)-віусіпе нд М-«Дигидразин метилен) -глицик наі-с-мн-мноно-с-он

Й ї Асеніс асій, (2-(вудгагіпоїтіпотеввуї- с зо й Вудгазіпої- 25 (2-(гидрезин - Ге) иминометил)гидоазин 1-

Уксусналя кислота, мн, мн, 9

КІ п Її Г1(Буйгахіпойвівощесьу Вудгагідоасеіс зн ТЕ тон ма , 1-(гидразин имичокетил)гилоазин

Мн уксускал кислота 1 с

ТАБЛИЦА є

Родственнье невективнне согдинения, которне не заявлени т Асеціс асід, Кашівоїтіпошеєну)- ч;Е наг-с-М-месн-о-он 5 Мн ІД тейуїнуйсагопо), змІбасе (2:1) о - Ї«амикойми. ю -05 но, кометил)метилгидогзон

Уксуснал КИСЛОТУ, сульфат (2:1) 1 о м о « м чі Мн-месн ї он Асейс асід, Цітіво( пісгоаштіпо)- нам-4--мн-Ммесн--о-- ес шесу|НуйгахопоЇ- шщ

І (| (имино- с (нитроамино)метил) гилоазон. 1-

Уксусная кислота,

ГІ з» 15 щі НоМ-0-кн-мабн-0-ОН Асейс асій, Цітіпо( тесу ащіпо)-

ІІ

До 1 тшейбу І пудгахопоЇї- не (Ї ( имино(ме- тиламино)метилІгидразон 1- 1 Уксусная кислота, с» (а) нн но ні нен и ор (95) їн ге» ШИ (в)

Із А

Моди о, он он

МН бо б5

ТАБЛИЦА З

Неактивнме псключения к общему обвему

МН

І Ргорапоїс ясід, 3-(1. ії мни-б--мн-мн--снесн,--о--он те (іЧавіпо, 5 и іківотеєьу )Будгалтіпо)- (в) 3-(1-«(аминоиминометил) - гидразин 4-

Нам-е-Мн-Мносн-б-ОсН Пропаковая кислота,

Мн о сна 70 Г Викаооїє за І нам-с-мн-мн-сн--с--он шгапоїс асій, 2-(2-(атіпо-

Ів ї Й ішіпотеєву Мвуйгахівої. 2-(2- (аминоиминометил) - гидразин 1-

Бутановая кислота, нм-о-мн-мн-Сн-о-он 15 І п

Мн в) м Мно

Ж Вшисапоїс асій, 4-(Вуйгатіво- ня ми т осоюН іштіпошеєу )ашівої- н 20 4-Г(гидразин иминометил)- аминоЇ-

Бутановая кислота,

ТАБЛИЦА 4

Конкретно заявляемне соединекия зтого изобретения се -с-мн-Мн-сн,-о-он НИ

Нам її й І Асейс асій, (2«(аштідоіїтіпотеєу)» о 5 Буйгахіпої (2- (емино яминометил) гидразині -6-МН- -о- Уксуснах кислота,

Нам й МНонНсн,х Й он дсшшс ас, (2-(атіпопліпотеєнуї)-

Мн (в) неї ВуйгалхіпоЇ., топобуйкосвіогіде и (2-(аминоими нометил) гидразик! см

Укоусная кислота, мокогидро- юю хлорид нм гр н-нн-ониво--сниі У Асейіс асід, (2-атіпоїгівотесу)- (ге)

Мн о Вуйхазіво)-, рнепуіїтеу! евієг, « но твоповудгосвІогіде со (Р-(амикоиминометил) гидразий)

Укосусная кислота," « 15 Фенилметиловий зфир, моногидрохлорид

Зо Вепгецергорапоїс асід4, агова(2- ; » фе (ашіпоіїшіпотейну )Нудгатіпо), нашео-мнАМНАСн--о-оН піоповучга 20 Мн 9 альфа |(2- (амиколминометил) - «но гидразин| Бензолпропановгя - « кислота, моногидрет 40 -

Мн с Й Ж ссоон 25 ва М ва в! К сн. - З п гасетаїе рацемат 45 ре ІЙ Асейіс асід, (1«(атіпоїтіпотеєу!)» «сл зо Нам р пон Будгахіло)-, топовудгоьгошіде

Й (1 -схаминоиминометил) гидоезині

М не; Уксусвая кислота, т» моногидробромид і Нам-бо-мн-сносн.-с-оН шк 2,

ЦІ ІЦ В-АІапіпе, М-(Будгатіпої шіпошеєну!)» н. о й

Ге | тем, М-(гидсазинойимико- метил)- Д-алакин, бо б5

ТАБЛИЦА 4 (ПРОДОЛЕЖНИЄ) о

М шк нм Ка З "он М-Оївудгахіпотеєву епе)-віусіпе 5 нд М-(Дисидразин метилак)-глицин намос-мн-Ммнона-б-он Асейіс всій, (2-(Будхахівоїтіпотвеєту! р 5 Буйгахіпо|. мно (2-(гидразин - имикометил)сидразин )-

Уксусная кислота, 10 Н ни ей ооо 0 В-Ааліве, М (Яінудгагівотеєту вве)»

Ін М-(дигидразинометилен)- вк з -Кхакин, нам. мн 15 | сна Т-А1апіве, М-(ОїБудгагівослесь у епе)- ач чи М -«дигидразин-метилен)- н І.-дланин, н ій сн М.(діБудкатіпотеєву епе)-4-а1апі

Я х удкатіпотесву епе)-й-аіапіпе ном. го 2 оон М-(дигидразин матилен)-йд-аланин 20.5 н н ще ва М-(дібудгазіпошеє уіепе)-уайвпе

М-(дигидразин метилен)-валин чад шо сон зо н Ге

Мн. мн. о - Й . о

Ї І ІТ П«(атіповудгагопотесьу )нудгагіпоасебс нин асій з5 Ця П1-(аминогидразон метил)сидразин 1-

Ухсусняя кислота

ТАВЛИЦА 5 с

Зо со

Известкне соєединения, заявляємне для лечения ИНСД -о--МНАМЕСНА-С-- со 5 Нам ї мн-мисн НІ он Асейс асій, й 9 МКащіпоїпіпотеєну!)вудгахопо)», Й - но топобудгосвіогіде, тововудгаса 35 . ної Ї«аминоиминометил) гипразоні1- юю ,Уксусная кислота,

Мн моносидрохлорид, моногидрат г дж АХ, м сон Ргорапвоїс асій, 2-Каштіво- 2 н т ітіпотшесву! Шуйгатопої», «на з топовуйгосніогіде « 2- ((аминонминометил) гидразок|-

Пропеновая кислота, Й 40 МН «НС мокогидрохлорид шщ 15 її Ма сон Вшапоїс асід, 2-Катівйо- с нам М Зо 8

Н Її ішщіпошесву Мнудхагової-, п СНУ топопуйгосвогіде и т о 2- Г«аминоиминометил) гидразоні н Н Й Бутановал кислота,

М М. моногидрохлоги, 20 нт ой он Сіусіпе, М (пуйга поітіпотенту 45 їн М -«гидразин ймино- с метил)- Глицин, о н н ІЙ

Сг» ни ог Оіусіпе, М-(вудгаліпоітіпощтеєьуїх., 25 ня Буйхосіокіде (2:1) (95) «05 НС М-(гидразик имино- 20 й матил)- Глицин и гидрохлоридій: (ее) й

Кз нж б Баки сон Вепгепергорацоїс асід, а-(атіво- 80 н ітівотесву )удгахогої- "З ог- Ї(аминоиминометил) гидразоні-

Бензолпропановая кислота,

Мн 59 Т.д сон Осгапоїс асід, 2-Патіпоїщі. нами 4 сапоїс асід, 2-(атіпоїшіпотеєву! у» н Будгаговпої-, товобуйгосніогіде (Ф) сНіснІсніснІснаснз 2- Каминоиминометил) гидразоні-

Октановая кислота, ке моногидрохлорид

ТАБЛИЦА 6 во Доза-ответ в отношений гипергликемиий и ожирения у мьішей ККАу с помощью перорального введения

М-(дигидразинметилен)-глицина

Мьішей ККАу лечили М-(дигидразинметилен)-глицином, как описано вьше, за исключением того, что соединение примешивали к корму в количестве 0,03, 0,06, 0,10, 0,20, 0,30 и 0,4095, так чтобь! суточнье дозь составили примерно 30, 60, 100, 300 и 400Омг/кг. Контрольнье мьіши получали корм без добавок. Для сравнения 65. 5 М-(дигидразинметилен)-глицином давали З3-гуанидинпропионовую кислоту (3-ГПК) в виде 0,595 примеси к корму (примерная доза 50Омг/кг/сутки). Даннье представлень в виде процентного изменения концентрации глюкозь! в крови и веса тела на 3-й день по сравнению с 1-ьім днем испьітания. Средние значения «х С.К. О. для п - 6 мьішей/группу. Статистическое значение определяли с помощью анализа дисперсии с использованием программного обеспечения МР 3.0.2 (ЗАЗ Іпвійціе).", Р « 0,05 при сравнений с нулем; й , значительно меньше,

Чем З-ГФК(Р « 0,05).

Добавка Уо Изменения уровня глюкозь в крови в 95 Изменения веса тела

Нет (0) -БВЕТИ -0,71 5 0,65

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,0390 - 13,5 х 10,5 - 0,92 ж 0,35 70 М-(дигидразинметилен)-глицин 0,065 -34,9 1717 -1,51 5 2,11

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,1095 -452 5647 -4,04 5 0,76"

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,295 -69,9 ж 3,27, в -8,22 5 1,057

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,395 -7Т0А 15, щі -9,94 ж 1,627,

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,495 -70,3 жк 3,97, ЩІ -10,3 х 0,977, ЩІ 0,596 3-ГФК -ЗВА жа -БА 0817 ",Р « 0,05 по сравнению с нулем ш, значительно меньше, чем 3-ГФК (Р « 0,05).

ТАБЛИЦА 7

Улучшение толерантности к глюкозе при внутрибрюшинном введений

Толерантность к глюкозе определяли у мьішей без диабета С57ВІ и мьішей с диабетом ККАУу. Животньм вводили перорально через зонд дистиллированную воду (контроль) или 10Омг/кг

М-(дигидразинметилен)-глицина, затем их не кормили в течение 16 - 17 часов. Образцьі крови для определения концентрации глюкозьі получали из ретроорбитального синуса. Образцьі отбирали непосредственно перед сч ов введением 2г/кг глюкозь! в/в (время - 0) и через ЗО, 60 и 90 минут после иньекции. Уровень глюкозь! в крови определяли используя автоанализатор на глюкозу. Даннье вніражали как среднее значение 5 С.К.О. для группь! (8) из 5 - б мьішей. Статистическое значение определяли с помощью анализа дисперсии с использованием программного обеспечения МР 3.02 (ЗАЗ Іпвійшіе). ", Р « 0,05 при сравнений с контролем.

Линия мьішей Группа Время (мин) Уровень глюкозь в крови (мг/дл) см

С57ВІ. Контрольная 0) 1435 8 (ге)

Кв) 233 х 14 во 2408 о 90 22659 «

М-(дигидра-зинметилен)-глицина |в) 114 ж 97 ю

Кв) 1741" во 1537 90 161 х 197

ККАуУ Контрольная 0) 188 хз 43 « зо 487 х 10 шщ с во 469 ж 20 90 486 ж 26 ;» М-(дигидра-зинметилен)-глицина |в) 115 5 16 (Р - 0,12 при сравнений с контр.)

Кв) 383 жк 38" 1 во 396 х 63 ї» 90 392 х 67

Га ТАБЛИЦА 8

Подавление неферментативного гликозирования белков со Неферментативное гликозирование белков определяли, используя общепринятье методь! (ЮоіІпоїтег апа з М/іеїапа, 1979; Кнайаті, Зцідап, Оамід, її апа Коску, 1988). Включение 100мМ (|14С1-О-глюкозь! в человеческий сьівороточньій альбумин определяли путем растворения человеческого сьівороточного альбумина (Зідта

Спетіса! Со.), (14С1-Ю-глюкозьі и глюкозьі в физиологическом растворе соли и инкубирования при 37"С в дв течение 8 дней. МИспьтуемье соєединения добавляли к раствору в концентрации 19,1мМ. Гликозирование альбумина определяли путем осаждения белка с помощью 1 обьема 1295 трихлоруксусной кислоть,

Ф) центрифугирования и промьівания осадка дваждь бо трихлоруксусной кислотой с центрифугированием после ка каждого промьвания. Промьїтьй осадок солюбилизировали, добавляли сцинтиллирующее вещество, и включение радиомеченной глюкозь! определяли путем подсчета сцинтилляций в жидкости. Даннье вьіражень! в бо процентах (14С1-О-глюкозьі, включенной в альбумин (среднее из 2 измерений). Статистическое значение определяли с помощью анализа дисперсии с использованием программного обеспечения МР 3/0/2 (БА

Іпвійше).

Добавленное вещество Уо включенной (14С1-0-глюкозь 65 Контроль 1,50

Аминогуанидин 0,96 (Р « 0,05 при сравнении с контролем)

3-Гуанидинпропионовая кислота 1,52

М-(дигидразинметилен)-глицин 0,81 (Р « 0,05 при сравнениий с контролем)

М-(дигидразинметилен)-глицин 1,21 (Р «0,05 при сравнениий с контролем)

Моногидрохлорид уксусной кислоть 1,29 (Р « 0,10 при сравнений с контролем)

Claims (3)

Формула винаходу 70 І

1. Аминогуанидинкарбоксилать! формульі І или І: Ас - - 525 3сС5 5 Х-- со ' (у до--сн- сою МІ) Е- где АС является (а) М-аминогуанидином, (в) М,М'-диаминогуанидином, или (с) М,М';М"-триаминогуанидином, где п является цельім числом от 1 до 5, В является (а) водородом, Га (в) фенилом, (с) С--Сво алкилом или о (4) С4-Сз алкилфенилом, и В? является (а) фенилом, с (5) С4-С3о алкилом или со (с) С--Сь алкилфенилом, при следующих условиях: (а) в формуле І, когда п равно 2 или 3, ВК! не являєтся водородом, о (Б) в формуле І, когда п равно 1, В! не являєтся водородом или метилом, « (с) в формуле ІЇ, когда 22 являєтся зтилом или фенилом, В! не является водородом, и (а) соединение не является М-аминогуанилглицином или М-аминогуанил-О,Ї -фенилаланином. юю

2. Соединение по пункту 1, вьібранное из: (2--аминоиминометил)гидразино)уксусной кислотьі, ее моногидрата и ее о фенилметилового зфира, моногидрохлорида, « с -І2--аминоиминометил)гидразино|бензолпропановой кислоть! моногидрата, З т0 П1-(аминоиминометил)гидразино)уксусной кислоть! моногидробромида, с М-(гидразиноиминометил)- й -аланина, ;» М-(дигидразинометилен)глицина, (2-«гидразиноиминометил)гидразино|уксусной кислоть, М-(дигидразинометилен)- й -аланина, о М-(дигидразинометилен)-І -аланина, їз рацемической НМАС(МН»)-МН-МН-СН(СН 3)-СООН, М-(дигидразинометилен)-4а-аланина и о М-(дигидразинометилен)валина. о 50

3. Соединение по п. 1, вьібранное из (2--аминоиминометил)гидразино)уксусной кислоть! и ее моногидрохлорида, кі» М-(дигидразинометилен) глицина, (2-«гидразиноиминометил)гидразино|уксусной кислоть и П1-(гидразиноиминометил)гидразино|уксусной кислоть. Ф) іме) 60 б5