UA53979A - A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar - Google Patents
A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar Download PDFInfo
- Publication number
- UA53979A UA53979A UA2002042976A UA200242976A UA53979A UA 53979 A UA53979 A UA 53979A UA 2002042976 A UA2002042976 A UA 2002042976A UA 200242976 A UA200242976 A UA 200242976A UA 53979 A UA53979 A UA 53979A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- agar
- strains
- selective
- medium
- sorbitol
- Prior art date
Links
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 title claims abstract description 11
- 239000008272 agar Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 title abstract 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 6
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 6
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 5
- NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K iron(III) citrate Chemical compound [Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 4
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 11
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GLMQHZPGHAPYIO-UHFFFAOYSA-L azanium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;iron(2+) Chemical compound [NH4+].[Fe+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O GLMQHZPGHAPYIO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 abstract description 2
- 229960002413 ferric citrate Drugs 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 7
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 3
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000009699 differential effect Effects 0.000 description 2
- 239000006160 differential media Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 235000000011 iron ammonium citrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004313 iron ammonium citrate Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 244000000074 intestinal pathogen Species 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L thiosulfate(2-) Chemical compound [O-]S([S-])(=O)=O DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Галузь техніки до якої належить винахід: медична, ветеринарна мікробіологія, ветеринарно-санітарна 2 експертиза, лабораторна діагностикаThe field of technology to which the invention belongs: medical, veterinary microbiology, veterinary and sanitary 2 examination, laboratory diagnostics
Аналогом є Мак-Каша сорбітол агар |1) - селективне і диференційне середовище для визначення коліформних мікроорганізмів і кишкових патогенів в якому замість лактози використовується сорбіт. Але це слабо селективне середовище, оскільки інгібіція росту конкурентної мікрофлори лише часткова і у випадку невеликої кількості клітин 0157 : Н7 в мікробній асоціації виділення чистої культури цих ешерихій ускладнене.An analogue is Mackasha sorbitol agar |1) - a selective and differential medium for the determination of coliform microorganisms and intestinal pathogens in which sorbitol is used instead of lactose. But this is a weakly selective environment, since the inhibition of the growth of competitive microflora is only partial and in the case of a small number of 0157 : H7 cells in the microbial association, the isolation of a pure culture of these escherichia is difficult.
Прототипом технічного рішення є сухий поживний агар, який використовують для виділення і культивування різних груп мікроорганізмів (21.The prototype of the technical solution is dry nutrient agar, which is used for isolation and cultivation of various groups of microorganisms (21.
В основу винаходу поставлена задача розробки селективного диференційного живильного середовища для виділення із клінічного матеріалу Е. соїї серовару 0157: Н7.The invention is based on the task of developing a selective differential nutrient medium for the isolation of E. soya serovar 0157: H7 from clinical material.
Селективне й диференційне живильне середовище для виділення штамів ентерогеморагічних Е. сої, які 72 належать до серовару 0157 : Н7 з фекалій, патологічного матеріалу, продуктів харчування, води, об'єктів навколишнього середовища і містить згідно винаходу в своєму складі: м'ясо-пептонний агар - ЗБгр, сорбіт - 12гр, жовч великої рогатої худоби - 4,5гр, гіпосульфіт натрію - 5,Огр, цитрат-аміачне залізо - 1,5гр, нейтральний червоний - О,ОЗгр, кристал-віолет - 0,001гр.Selective and differential nutrient medium for isolation of strains of enterohemorrhagic E. soy, which 72 belong to serovar 0157: H7 from feces, pathological material, food products, water, environmental objects and contains, according to the invention, in its composition: meat-peptone agar - ZBgr, sorbitol - 12g, cattle bile - 4.5g, sodium hyposulfite - 5.Ogr, iron ammonium citrate - 1.5g, neutral red - O.OZgr, crystal violet - 0.001g.
Е. соїї 0157 : Н7 має домінуюче значення в групі ентерогеморагічних ешерихій (|З). Характерною особливістю штамів цього серовару є відсутність здатності ферментувати сорбіт, в той час як 9495 всіх Е. соїї ферментують сорбіт на протязі 24 год. Диференційні властивості даного середовища заключаються в комбінацій сорбіту і нейтрального червоного. При зброджуванні цукру утворюється кислота, яка обумовлює зміну кольору індикатору, в результаті чого формуються рожево-червоні колонії, якщо ізолят не ферментує сорбіт - колонії безбарвні. Концентрація карбогідрату в даному середовищі вища, ніж в інших диференційних середовищах з метою кращої візуалізації патогенів і мінімізації проблеми уповільненого ферментування. «E. soii 0157 : H7 has a dominant value in the group of enterohemorrhagic escherichia (|Ж). A characteristic feature of the strains of this serovar is the lack of ability to ferment sorbitol, while 9495 of all E. soy ferment sorbitol within 24 hours. The differential properties of this medium are combinations of sorbitol and neutral red. During the fermentation of sugar, an acid is formed, which causes a change in the color of the indicator, as a result of which pink-red colonies are formed, if the isolate does not ferment sorbitol - the colonies are colorless. The concentration of carbohydrate in this medium is higher than in other differential media in order to better visualize pathogens and minimize the problem of delayed fermentation. "
Селективні властивості даного середовища забезпечуються додаванням бичої жовчі, яка є інгібітором ростуThe selective properties of this medium are provided by the addition of ox bile, which is a growth inhibitor
Грам-позитивних мікроорганізмів, особливо ентеро- і стрептококів. Концентрація жовчі вища, ніж у вихідному середовищі, що забезпечує більш інтенсивне пригнічення росту супутньої мікрофлори. Для інгібування росту цих бактерій також використано кристал-віолет. Для підвищення диференційних властивостей в середовище о введено цитрат заліза і тіосульфат натрію, які дають можливість визначити продукування сірководню - формуванням колоній з чорним центром.Gram-positive microorganisms, especially enterococci and streptococci. The concentration of bile is higher than in the original medium, which provides a more intense inhibition of the growth of accompanying microflora. Crystal violet was also used to inhibit the growth of these bacteria. To increase the differential properties, iron citrate and sodium thiosulfate were introduced into the medium, which make it possible to determine the production of hydrogen sulfide - the formation of colonies with a black center.
Технічний результат. Дослідження росту тест-штамів Е. сої 0157 : Н7, Е. соїї 09 : КО9, ЗаІтопеїІа оTechnical result. Research on the growth of test strains of E. soya 0157 : H7, E. soya 09 : KO9, ZaItopeiia o
ТУрпітигішт, Зігеріососсив Таесаїв, Зіарпуіососсив ацгеив, Ргоївеив уцідагів показало високу чутливість і с9 селективність середовища. Ростові властивості штамів Е. соїї 0157 : Н7 на середовищ Мак-Канкі і на 0157 : Н7TUrpitigisht, Zigeriosossiv Taesaiv, Ziarpuiosossiv atsgeiv, Rgoiveiv ucsidagiv showed high sensitivity and c9 selectivity of the medium. Growth properties of E. soybean strains 0157 : H7 on McCunkey and 0157 : H7 environments
Зо агарі не відрізнялися. Обидва середовища забезпечували ріст всіх досліджуваних штамів при посіві О,1мл о мікробної суспензії з розведення 1079 через 24год інкубування при Т 37 ж 12С у вигляді круглих, безколірних гладеньких колоній діаметром 2 ж 0,2мм. 0157 : Н7 агар характеризується більш ефективним інгібуванням росту колоній мікробів-асоціантів, зокрема Грам-позитивні стафілококи і стрептококи не росли при посіві 0,1 мл « чистої мікробної культури на протязі 48 я 2год інкубування при 37 ж 17С. На сорбітол Мак-Канкі агарі -о 79 спостерігався ріст Зігеріососсив Таєсаїїв та Зіарпуіососсив ацгейв при посіві культури з розведення 10 7. Ріст с сальмонел характеризувався формуванням темно-рожевивих, дещо червоновуватих, гладеньких, блискучих з :з» чорним центром колоній діаметром 1,9 хх 0,2мм.They did not differ from the agars. Both media ensured the growth of all studied strains when inoculating 0.1 ml of microbial suspension from dilution 1079 after 24 hours of incubation at T 37 and 12C in the form of round, colorless smooth colonies with a diameter of 2 and 0.2 mm. 0157: H7 agar is characterized by more effective inhibition of the growth of colonies of associated microbes, in particular, Gram-positive staphylococci and streptococci did not grow when 0.1 ml of pure microbial culture was inoculated during 48 and 2 hours of incubation at 37 and 17C. On sorbitol McKankey agar -o 79, the growth of Zigeriosossiv Taesaiiv and Ziarpuiosossiv atsgeiv was observed when culture was inoculated from a dilution of 10 7. The growth of Salmonella was characterized by the formation of dark pinkish, slightly reddish, smooth, shiny colonies with a black center with a diameter of 1.9 x 0.2 mm.
Проведені дослідження засвідчили високу чутливість, диференційність і селективність створеногоThe conducted studies proved the high sensitivity, differentiation and selectivity of the created
Середовища. Значні інгібуючі властивості у відношенні мікробів-асоціантів забезпечують ефективність сл середовища при дослідженні зразків з фекалій, патологічного матеріалу, об'єктів навколишнього середовища, продуктів харчування. Вища концентрація цукру і комбінація цитрату заліза та гіпосульфіту забезпечують високі і95) диференціюючі властивості при дослідженні різних видів мікроорганізмів. Відомості, які підтверджують со можливість здійснення винаходу. В якості білкової основи середовища можна використовувати будь-який сухий поживний агар виробництва підприємств біологічної промисловості (при проведенні досліджень було -і використано сухий поживний агар НПО "Питательньсе средь!"). Всі компоненти середовища є доступними для с придбання без обмежень в організаціях по реалізації продукції хімічної промисловості ("Макрохим", "Укрреахим", "Укрхимзакспо", "Укрлаборреактив"). Середовище просте в приготуванні і легко може бути освоєне на виробництво. При виготовленні середовища відважені згідно пропису формули інгредієнти: м'ясо-пептонний вв агар - ЗБгр, сорбіт - 12гр, жовч великої рогатої худоби - 4,5гр, гіпосульфіт натрію - 5,Огр, цитрат-аміачне залізо - 1,5гр, нейтральний червоний - 0,0Згр, кристал-віолет - 0,001гр розмішували в ступці до гомогенного в. стану, вносили до іл дистильованої води, кип'ятили бхв, фільтрували через ватно-марлевий фільтр, автоклавували при 1217С 15хв, охолоджували до 45 - 50"С й розливали на ч. Петрі. Готове середовище має світло--ервонуватий колір, прозоре. Міцність студня забезпечує посів досліджуваних матеріалів без бр / Пошкодження поверхні.Environments. Significant inhibitory properties in relation to associated microbes ensure the effectiveness of the medium in the study of samples from feces, pathological material, environmental objects, and food products. The higher concentration of sugar and the combination of iron citrate and hyposulfite provide high i95) differentiating properties in the study of different types of microorganisms. Information that confirms the possibility of implementing the invention. Any dry nutrient agar produced by enterprises of the biological industry can be used as the protein base of the medium (dry nutrient agar of the NGO "Pytatelnse sred!" was and is used during the research). All components of the environment are available for purchase without restrictions in organizations for the sale of products of the chemical industry ("Makrokhim", "Ukrreakhim", "Ukrkhymzakspo", "Ukrlaborreaktiv"). The medium is easy to prepare and can easily be mastered for production. When preparing the medium, the ingredients are weighed according to the prescription of the formula: meat-peptone vv agar - ZBgr, sorbitol - 12g, cattle bile - 4.5g, sodium hyposulfite - 5.Ogr, iron ammonium citrate - 1.5g, neutral red - 0.0Zgr, crystal violet - 0.001gr was mixed in a mortar until homogeneous. state, added to a slurry of distilled water, boiled BHV, filtered through a cotton-gauze filter, autoclaved at 1217C for 15 minutes, cooled to 45-50"C and poured into a Petri dish. The finished medium has a light purple color and is transparent. The strength of the jelly ensures seeding of the studied materials without damage / surface damage.
Бібліографічні дані 1. Магспи 5. В., Каїпат 5. бБогріоІ-МасСопКеу тейдіцт їог дефесіоп ої ЕвзсПегіспіа соїї 0157: Н7 азвосіаїед мййп петоггпадіс соїйів // 9. ої Сііп. Місгобіо!. - 1986. - М.23, Моб. - Р. 869 - 872. 2. Справочник специалиста ветеринарной лаборатории. Под редакцией Ю. П. Смияна. - К.: Урожай, 1987. - в5 363 с.Bibliographical data 1. Magspy 5. V., Kaipat 5. bBogrioI-MasSopKeu teiditst yog defesiop oi EvzsPegispia soii 0157: H7 azvosiaied myyp petogpadis soiiiv // 9. oi Siip. Misgobio!. - 1986. - M.23, Mob. - R. 869 - 872. 2. Directory of a veterinary laboratory specialist. Edited by Yu. P. Smyan. - K.: Urozhai, 1987. - v5 363 p.
З. Маїаго К., Карег у. В. Оіаітпеадепіс Е. сої // Сііп. Місгобвіо!. Кеу. - 1988. - М.11. - Р. - 164 - 178.Z. Maiago K., Careg u. V. Oiaitpeadepis E. soy // Siip. Misgobvio!. Kew. - 1988. - M.11. - R. - 164 - 178.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002042976A UA53979A (en) | 2002-04-12 | 2002-04-12 | A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA2002042976A UA53979A (en) | 2002-04-12 | 2002-04-12 | A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA53979A true UA53979A (en) | 2003-02-17 |
Family
ID=74305852
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002042976A UA53979A (en) | 2002-04-12 | 2002-04-12 | A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA53979A (en) |
-
2002
- 2002-04-12 UA UA2002042976A patent/UA53979A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH09511917A (en) | Salmonella identification method and culture medium | |
| JPH074272B2 (en) | Specific medium for detecting microorganisms | |
| JP7084719B2 (en) | Microbial growth medium and method of using it | |
| RU2342435C2 (en) | Selective culture medium for separatng and detecting types of streptococcus | |
| US4279995A (en) | Selective salmonella carbohydrate and medium constructed therefrom | |
| ES2294004T3 (en) | NUTRITIVE MIXING AND PROCEDURE FOR THE QUICK IDENTIFICATION AND COUNT OF GRAM-NEGATIVE ORGANISMS. | |
| Moats et al. | Factors affecting selectivity of brilliant green-phenol red agar for salmonellae | |
| JP2013031456A (en) | Method for detecting streptococcus agalactiae using esterase activity | |
| Mandal et al. | Isolation and characterization of multi-drug resistance proteus vulgaris from clinical samples of UTI infected patients from midnapore, west bengal | |
| US6555333B1 (en) | Broad spectrum fastidious organism culture medium | |
| UA53979A (en) | A selective and DIFFERENTIAL life-giving medium for separating the strains of entero haemorrhagic Е.соlі 0157:Н7 agar | |
| US20140295473A1 (en) | Method and test mixtures for detecting the presence or absence of target microbes in a test sample | |
| RU2518304C2 (en) | TWO-PHASE NUTRITIONAL MEDIUM FOR THIN LAYER CULTIVATION OF Helicobacter pylori AND METHOD OF ITS REALISATION | |
| CA2421436A1 (en) | Culture medium and method for identifying gram-negative microorganisms | |
| RU2416635C2 (en) | Chromogenic culture medium for detecting and identifying klebsiella | |
| EP1196625B1 (en) | Composition and method for detecting and early and differentiated counting of gram-negative microorganisms | |
| JP2001128666A (en) | Chromogen indicator-containing culture medium containing blood or hemin | |
| RU2827840C1 (en) | Elective-differential nutrient medium for klebsiella species recovery | |
| RU2827845C1 (en) | Elective nutrient medium for pseudomonas aeruginosa recovery | |
| CN109706214A (en) | A kind of identification of resistance to quinolone antibiotics Salmonella strains and separation method | |
| RU2233885C2 (en) | Nutrient medium for isolation of shigella and salmonella | |
| RU2715329C1 (en) | Nutrient medium for separation and identification of non-fermenting bacteria | |
| RU2709136C1 (en) | Nutrient medium for pseudomonas aeruginosa release | |
| RU2265056C2 (en) | Selective nutrient medium for isolation of klebsiella | |
| Alagoa et al. | Surface bacterial flora of Tilapia (Oreochromis niloticus) in open markets of Yenagoa, Bayelsa state |