UA39746U - Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин - Google Patents
Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин Download PDFInfo
- Publication number
- UA39746U UA39746U UAU200811904U UAU200811904U UA39746U UA 39746 U UA39746 U UA 39746U UA U200811904 U UAU200811904 U UA U200811904U UA U200811904 U UAU200811904 U UA U200811904U UA 39746 U UA39746 U UA 39746U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- strain
- culture
- againts
- bacillus anthracis
- bacteria bacillus
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title abstract description 14
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 title abstract description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 10
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 10
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 10
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 8
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 8
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 8
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 7
- -1 introconazole Chemical compound 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 7
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UNJFKXSSGBWRBZ-BJCIPQKHSA-N ceftibuten Chemical compound S1C(N)=NC(C(=C\CC(O)=O)\C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=CCS[C@@H]32)C(O)=O)=O)=C1 UNJFKXSSGBWRBZ-BJCIPQKHSA-N 0.000 description 6
- 229960004086 ceftibuten Drugs 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N (2R,4S)-ketoconazole Chemical compound C1CN(C(=O)C)CCN1C(C=C1)=CC=C1OC[C@@H]1O[C@@](CN2C=NC=C2)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)OC1 XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 4
- 229960004125 ketoconazole Drugs 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 3
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 3
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 3
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 3
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 3
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 3
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 3
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 2
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N (4s,4ar,5s,5ar,6r,12ar)-4-(dimethylamino)-1,5,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2[C@H](C)[C@@H]([C@H](O)[C@@H]3[C@](C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@H]3N(C)C)(O)C3=O)C3=C(O)C2=C1O SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 3,7-bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 RBTBFTRPCNLSDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 description 1
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229960005361 cefaclor Drugs 0.000 description 1
- QYIYFLOTGYLRGG-GPCCPHFNSA-N cefaclor Chemical compound C1([C@H](C(=O)N[C@@H]2C(N3C(=C(Cl)CS[C@@H]32)C(O)=O)=O)N)=CC=CC=C1 QYIYFLOTGYLRGG-GPCCPHFNSA-N 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 229960000988 nystatin Drugs 0.000 description 1
- VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N nystatin A1 Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/CC/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 VQOXZBDYSJBXMA-NQTDYLQESA-N 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical class [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Вакцинний штам бактерій Bacillus anthracis СБ належить до біотехнології, а саме до ветеринарної мікробіології, зокрема до вакцинного штаму для виробництва бактерійного препарату - вакцини проти сибірки тварин.
Description
Сигнали, пов'язані з хазяїном, які впливають на транскрипцію генів токсину та капсули, включають температуру та концентрацію СО».
Характеристика штаму СБ за наявністю плазмідних та хромосомних маркерів методом полімеразної ланцюгової реакції: рХО17 (РА", ГЕ, ЕРУ; рхо2 (Сар). Штам СБ не несе плазміду рхо2 і, таким чином, не здатний синтезувати капсулу.
Для виявлення плазміди рхХОї (гени білкових факторів сибіркового токсину) були використані олігонуклеотидні праймери З послідовністю, на повний ген РА: прямий - 5-
СТАТАТОААДААААСОСААААСТаТТТААТАСОС-3" та зворотній - 5- САТСОСТАСАААСААТСТСАААСО-3.
Для виявлення генів капсули були використані олігонуклеотидні праймери з послідовністю: прямий - 5'-
СстТаАасССАТТААТССАТАТО-3: та зворотній - -ТСССАСТТАСОИТААТСТОада-3.
Для перевірки (верифікації) отриманих результатів з геном РА додатково був ампліфікований фрагмент гена
РА розміром Обп.н. з праймерами: прямий - 5-ТССТААСАСТААСОСАА(ТОС(-3 та зворотній - 5- вАаатТАСААдОасСАТАТАСОСТ-В' з наступним проведенням рестрикаційного аналізу ферментом Мбро 1/Розмір і кількість (три) отриманих фрагментів в СБ, 55 та 34 Е співпадали.
Вакцинний штам бактерій Васійи5 апіпгасіє СБ, який пропонується, характеризуються такими фізіологічними ознаками:
Морфологія клітин: при мікроскопії пофарбованих за Грамом препаратів виготовлених з культур на МПА - прямі палички фіолетового кольору (5-8х0,8-1мкм), поодинокі або у ланцюжках різної довжини; без капсул; спори овальні, безбарвні, утворюються у центрі клітин.
Рухливість: палички нерухомі.
Морфологія колоній на твердих поживних середовищах: колонії А-форми, сірувато-білі, округлі, опуклі, з хвилястим краєм і зернистою масою всередині.
Культуральні особливості на рідких поживних середовищах: за візуальною оцінкою добової культури штаму в
МПБ (рН 7,2-7,4): на дні пробірки утворюється білуватий пухкий осад, бульйон над осадом прозорий, плівка і пристінне кільце не утворюються. На середовищі з сироваткою крові великої рогатої худоби: ріст по всьому стовпчику у вигляді хмарок; утворюється значніший осад, ніж на МПБ.
Ферментативна активність: ферментує цукрозу, глюкозу з виділенням кислоти без виділення газу; не ферментує маніт, лактозу, мальтозу; знебарвлює метиленову синьку протягом З0 і більше хвилин. При висіванні на кров'яному агарі через 24 години гемоліз відсутній, згодом - наявність зон гемолізу.
Чутливість до антибіотиків: найбільш чутливий до ампіциліну, еритроміцину, тетрацикліну, левоміцитину, гентаміцину, цефаклору, амікацину, доксіцикліну, імпенему, менш чутливий до неоміцину, стрептоміцину, ністатину, олендоміцину. Нечутливий до амфотеріцину В, інтроконазолу, кетоконазолу, поліміксину, цефепіну, цефтібутену.
Біологічні властивості: при внутрішньочеревному введенні білим мишам масою 18-20г І О5о складає 12,4- 12,6х106 живих мікробних клітин. Підшкірне введення 1см3 кролям масою 2-2,5кг: 170млн. живих мікробних клітин не викликає їх загибелі, а у місці введення спостерігається підвищення температури протягом перших трьох діб і набряки 1х1,5см, які згодом зникають.
Капсулоутворення: в органах уражених тварин і на середовищах ГКІ з 4095 вмістом сироватки ГКІ відсутнє.
Капсули навколо вегетативних клітин відсутні. При культивуванні штаму Васій5 апійгасіз СБ поверхневим методом в 4-х літрових бутлях накопичення досягає 2,0-2,4млрд. спор на бутель.
Зберігання: культуру запропонованого штаму зберігають у ліофілізованому стані або у вигляді суспензії спор на гліцерині.
Запропонований штам має особливі властивості: низьку вірулентність, яка характеризується значенням ІЮ5о вище 5,0х102 мікробних живих клітин, а саме: 12,4-12,6х109 живих мікробних клітин при значній імуногенності. При цьому продуктивність штаму при поверхневому культивуванні досягає 2,4млрд. спор на бутель, при цьому масова частка спор складає 99-10095. Як показали дослідження, поряд з низьким рівнем вірулентності і, відповідно, низьким рівнем реактогенності, новий штам володіє вираженою резистентністю до антибіотиків - амфотеріцину В, інраконазолу, кетоконазолу, поліміксину, цефепіну, цефтібутену, тобто йому не властива чутливість до цих антибіотиків. Такі властивості штаму дозволяють поліпшити якість вакцини проти сибірки, розширити спектр можливостей використання вакцини, використовувати в необхідних випадках вакцинацію тварин у поєднанні з їх лікуванням антибіотиками, при цьому відкривається можливість сполучення нечутливості культури штаму до визначених антибіотиків.
Приклади відтворення штаму.
Приклад 1. Спорову культуру штаму Васіїше апіпгасіє СБ отримують шляхом культивування бактерій ВасшШив апіпгасіє СБ на стерильному живильному середовищі - м'ясо-пептонному агарі в 4-літровому бутлі. Бутель заповнюють живильним середовищем у кількості 150см на бутель. Таке середовище розподіляють по внутрішній поверхні бутля тонким шаром з одночасним охолоджуванням середовища. Потім живильне середовище витримують протягом 24 годин при температурі 3724170 з метою перевірки на стерильність, після чого засівають бактеріальною суспензією Васіїше апіпгасі5 СБ і витримують дві доби при температурі 3731"С, а потім п'ять діб при температурі 325217С. Спори, що утворились, змивають з поверхні агару 100мл стерильної дистильованої води і концентрують до необхідного рівня. Накопичення біомаси нового штаму складає 2,0-2,4млрд. спор на бутель, при цьому масова частка спор складає 99-10095. Для стабілізації кількості мікробних клітин суспензію спор змішують з 30-3395 гліцерином. Готову вакцину зберігають при температурі 2-1576.
Отриману культуру штаму Васійн5 апінгасіз СБ випробовують на типовість, однорідність, капсулоутворення, залишкову вірулентність, нешкідливість, імуногенність, чутливість до антибіотиків. Ця культура характеризується такими параметрами: типовість - типовими для штаму культурально-морфологічними властивостями; однорідність - за типом колоній, кількість дисоційованих колоній А-форм не перевищує 5905, відсутність капсул у мазках - відбитках з органів тварин, що загинули від введення підвищених доз штаму ВасшШивє апіпгасіє СБ.
Вірулентність отриманої культури, яка визначена на білих мишах масою 18-20г, характеризується значенням І О5о 12,5х106 живих мікробних клітин. Чутливість до пеніциліну визначають методом паперових дисків з антибіотиками. Цей штам найбільш чутливий до еритроміцину, тетрацикліну, левоміцитину, менше чутливий - до неоміцину, стрептоміцину, нечутливий до амфотеріцину, інраконазолу, кетокопазолу, цефепіну, цефтібутену,
поліміксину. Імуногенність штаму визначають на морських свинках масою 380-400г, щеплених штамом Васіййв5 апінгасіє СБ, з наступним контрольним зараженням другою вакциною Ценковського М-71 в летальній дозі.
Введення культури штаму ВасШивз апіпгасіє СБ у вказаних дозах забезпечує захист 90-10095 тварин при 10095 загибелі контрольних не щеплених тварин.
Приклад 2. Спорову культуру штаму Васіїше апіпгасіз СБ отримують шляхом культивування бактерій ВасшШив апінгасів СБ як у прикладі 1, але на стерильному живильному середовищі - дріжжево-пептонновому, за таким прописом: дріжжевий екстракт очищений - 2г, калій фосфорнокислий двозаміщений - 0,5г, кальцій хлористий - 0,4г, цинк сірчанокислий - 0,01г, мідь сірчанокисла - 0,01г, залізо сірчанокисле - 0,01г, амоній сірчанокислий - 2г, антивспінювач 0,2см3, або поліпропіленгліколь - 0,1см3, вода дистильована 1000см3. При вирощуванні 24 години і постійній аерації - З, бммолей Ог/л/год., рН середовища - 7,4-7,6.
Культура штаму, яка одержана, характеризується такими параметрами: типовість - типовими для штаму культурально-морфологічними властивостями; однорідність - за типом колоній, кількість дисоційованих колоній В- форм не перевищує 4,892, відсутність капсул у мазках - відбитках з органів тварин, що загинули від введення підвищених доз штаму Васіїшв5 апінгасіз СБ. Вірулентність отриманої культури, яка визначена на білих мишах масою 18-20г, характеризується значенням І Ово 12,6х106 живих мікробних клітин. Накопичення біомаси нового штаму складає 2,0-2,4млрд. спор на бутель, при цьому масова частка спор складає 99-10095. Культура штаму, яка одержана, найбільш чутлива до еритроміцину, тетрацикліну, левоміцитину, менш чутлива - до неоміцину, стрептоміцину, нечутлива до амфотеріцину В, інраконазолу, кетоканазолу, полімексину, цефепіну, цефтібутену, поліміксину.
Імуногенність штаму визначають на морських свинках масою 380-400г, щеплених культурою штаму Васіййв5 апінгасіє СБ, з наступним контрольним зараженням другою вакциною Ценковського М-71 в летальній дозі.
Введення культури штаму ВасШивз апіпгасіє СБ у вказаних дозах забезпечує захист 90-10095 тварин при 10095 загибелі контрольних не щеплених тварин.
Приклад 3. Спорову культуру штаму Васіїше апіпгасіз СБ отримують шляхом культивування бактерій ВасшШив апінгасів СБ як у прикладі 1, але на стерильному живильному середовищі - ферментативний гідролізат сухого білкового концентрату з побічних продуктів м'ясо-молочних виробництв (ферментативний гідролізат СБК) у співвідношенні з водою, об'єм.9о : ферментативний гідролізат СБК - 25, вода - останнє.
Культура штаму, яка одержана, характеризується такими параметрами: типовість - типовими для штаму культурально-морфологічними властивостями; однорідність - за типом колоній, кількість дисоційованих колоній В- форм не перевищує 4,895, відсутність капсул у мазках - відбитках з органів тварин, що загинули від введення підвищених доз штаму Васіїйв5 апіпгасіз СБ. Вірулентність отриманої культури, яка визначена на білих мишах масою 18-20г, характеризується значенням І Ово 12,4х106 живих мікробних клітин. Накопичення біомаси нового штаму складає 2,0-2,4млрд. спор на бутель, при цьому масова частка спор складає 99-10095. Культура штаму, яка одержана, найбільш чутлива до неоміцину, стрептоміцину, нечутливий до амфотерицину, інраконазолу, кетоконазолу, цефепіну, цефтібутену, поліміксину.
Імуногенність штаму визначають на морських свинках масою 380-400г, щеплених штамом ВасшШив апінгасів
СБ, з наступним контрольним зараженням другою вакциною Ценковського М-71 в летальній дозі. Введення культури штаму Васіїйнв5 апіпгасіз СБ у вказаних дозах забезпечує захист 90-10095 тварин при 10095 загибелі контрольних не щеплених тварин.
Порівняльні характеристики нового штаму, якій одержали, як показано у прикладах 1, 2, З, і відомих штамів наведені у таблицях 2, 3, на діаграмі (Фіг.) та пояснювальній таблиці 4 до неї, при цьому дані для табл.2 отримані методами проб і регресійного аналізів.
Таблиця 2
Порівняльна оцінка вірулентності запропонованого та відомих штамів
Кількість Загибель одну дозу клітин в см3 ' млн. лаб 176 | 4
СТИ нале в рт 17777760 би шин ши и ПЕ ши: ши ли о Прототит в аб | 8 1 80 | 50 5о (прототип) і
Св бапропонований) " в щ
Таблиця З
Характеристика чутливості штамів до антибіотиків
Стерильна зона
АмфотеріцинВ./: | 77777771
МПнтроканазол.о//|Ї 77777771
Кетоюназол../://|Ї 77777711
Еритроміцин
Поліміксін.//////СЇГ71г
Пеніцилн./////// Їх
Цефклін./////// ЇЇ
Цефтібутен ниию"шишшшжияжяияяяяияижйжяияишяпи ши ншшш
Таблиця 4
Спектр чутливості штамів до антибіотиків ши -,. й й Кількість антибіотиків з 54, до яких штами чутливі
Найбільший діаметр зони відсутності росту штаму, мм 11111111 6 16 в1111111111111111171г1111и1111171|16 115. шин жити ши ши сш
Джерела інформації: 1. ТУУ 46.15.201.97. ГОСТ 15 991-86. Вакцина СТІ жива проти сибірки тварин. 2. Патент Ме2173342, Российская Федерация, МПК С12М1/12, Аб1К39/07, заявл. 19.01.2000, опубл. 10.09.2001. 3. ТУ-1009-3-87. ОСТ 10-19-002-00 Штамм 55-ВНИЙВВИМ сибиреязвенньй вакцинньй. стат 2-22 л 45-А Я 5 ' 7
Е Н в В і Ї
ВЕ. пох, ше
Є, го ва
Ди Состе-сто)
ЕВ І пиши ша ' Ше в я в чи у ! ія З в Ж Я т З за до.
ШИ діемете стерилчної зоКи, М шо і
Фіг.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200811904U UA39746U (uk) | 2008-10-07 | 2008-10-07 | Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200811904U UA39746U (uk) | 2008-10-07 | 2008-10-07 | Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA39746U true UA39746U (uk) | 2009-03-10 |
Family
ID=74306210
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200811904U UA39746U (uk) | 2008-10-07 | 2008-10-07 | Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA39746U (uk) |
-
2008
- 2008-10-07 UA UAU200811904U patent/UA39746U/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rahman et al. | Development of experimental oil based inactivated HS vaccine from field Isolates of Pasteurella multocida from Cattle in Bangladesh | |
| RU2687488C1 (ru) | Формолвакцина полиштаммная против пневмоний телят стрептококковой этиологии | |
| CN115887631A (zh) | 一种副猪嗜血杆菌和猪链球菌二联疫苗 | |
| CN111944028B (zh) | 产气荚膜梭菌β毒素突变体蛋白及其制备方法、应用和疫苗 | |
| UA39746U (uk) | Вакцинний штам бактерій bacillus anthracis сб проти сибірки тварин | |
| RU2538158C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
| RU2288002C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2316345C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий | |
| US9132183B2 (en) | Modified live (JMSO strain) Haemophilus parasuis vaccine | |
| KR101210082B1 (ko) | 돼지 다발성 장막염 예방용 백신 조성물 및 그 제조방법 | |
| RU2325183C1 (ru) | Способ получения вакцины против эшерихиоза животных | |
| RU2406532C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
| RU2804137C1 (ru) | Штамм Streptococcus pneumoniae серотип 19F | |
| RU2544951C1 (ru) | АТТЕНУИРОВАННЫЙ ШТАММ Bacillus anthracis ДЛЯ РАЗРАБОТКИ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ | |
| H MAHROUS et al. | Some microbiological studies on Pasteurella multocida in rabbits | |
| RU2085584C1 (ru) | Способ получения рекомбинантных туляремийных микроорганизмов - продуцентов факторов вирулентности, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica shu, рекомбинантный штамм francisella tularensis holarctica rn4 - продуцент фактора вирулентности pseudomonas pseudomallei c 141, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies holarctica r1a - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica b 399 a cole | |
| RU2761379C1 (ru) | Поливалентная инактивированная вакцина против стрептококкозов свиней, способ ее получения и применения | |
| RU2301077C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий | |
| RU2707289C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота | |
| RU2722668C1 (ru) | Способ получения инактивированной вакцины против легочных заболеваний молодняка продуктивных животных | |
| RU2406530C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против стрептококкоза, псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2723711C1 (ru) | Способ получения вакцины гидроокисьалюминиевой против мастита коров стрептококковой этиологии | |
| Philip et al. | Isolation and characterization of Bacillus anthracis from livestock from different areas of Karnataka and their phylogenetic analysis. | |
| RU2429880C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против стрептококкоза и вирусной геморрагической болезни кроликов | |
| RU2292914C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий |