UA34468C2 - Complex of insulin analogue and protamine, pharmaceutical composition for parenteral administration (variants), method for its preparing (variants), method for preparing crystals of lys b28 pro b29-human insulin and protamine complex, method for preparing crystals - Google Patents
Complex of insulin analogue and protamine, pharmaceutical composition for parenteral administration (variants), method for its preparing (variants), method for preparing crystals of lys b28 pro b29-human insulin and protamine complex, method for preparing crystals Download PDFInfo
- Publication number
- UA34468C2 UA34468C2 UA95062796A UA95062796A UA34468C2 UA 34468 C2 UA34468 C2 UA 34468C2 UA 95062796 A UA95062796 A UA 95062796A UA 95062796 A UA95062796 A UA 95062796A UA 34468 C2 UA34468 C2 UA 34468C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- protamine
- insulin
- solution
- crystals
- analog
- Prior art date
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical class N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 142
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 title abstract description 82
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 title abstract description 73
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 title abstract description 73
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 title abstract description 45
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title abstract description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 25
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 title 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 74
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 abstract description 52
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 abstract description 52
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 47
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 abstract description 45
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 26
- 239000011701 zinc Substances 0.000 abstract description 25
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 abstract description 25
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 61
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 20
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 20
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 14
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 13
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 229940061607 dibasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 10
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 8
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 6
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 5
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 4
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001202975 Isophanes Species 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N caninsulin Chemical compound [Zn].C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC3N=CN=C3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1C=NC=N1 LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 3
- -1 insulin MPO analog Chemical class 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 2
- 108010081368 Isophane Insulin Proteins 0.000 description 2
- 102000005237 Isophane Insulin Human genes 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 2
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 2
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 description 2
- VNDYJBBGRKZCSX-UHFFFAOYSA-L zinc bromide Chemical compound Br[Zn]Br VNDYJBBGRKZCSX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 2
- BHHYHSUAOQUXJK-UHFFFAOYSA-L zinc fluoride Chemical compound F[Zn]F BHHYHSUAOQUXJK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UAYWVJHJZHQCIE-UHFFFAOYSA-L zinc iodide Chemical compound I[Zn]I UAYWVJHJZHQCIE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 108010092217 Long-Acting Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000016261 Long-Acting Insulin Human genes 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010054805 Macroangiopathy Diseases 0.000 description 1
- 241000514450 Podocarpus latifolius Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010061168 Ultralente Insulin Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000011094 buffer selection Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002933 immunoreactive insulin Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229940006445 isophane insulin Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 125000003717 m-cresyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(O*)=C([H])C(=C1[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 206010062198 microangiopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000020079 raki Nutrition 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003979 response to food Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- SETMGIIITGNLAS-UHFFFAOYSA-N spizofurone Chemical compound O=C1C2=CC(C(=O)C)=CC=C2OC21CC2 SETMGIIITGNLAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001870 spizofurone Drugs 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940102001 zinc bromide Drugs 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к мономерньім аналогам человеческого инсулина. В частности, настоящее изобретение относится к различньмм парентеральньм композициям, которне включают аналог мономерного инсулина, цинк, протамин и фенольное производное. Композиции обеспечивают пролонги- рующее действие. Также описьівается способ получения композиций инсулиновьй аналог - протамин.The present invention relates to monomeric analogues of human insulin. In particular, the present invention relates to various parenteral compositions that include a monomeric insulin analog, zinc, protamine, and a phenolic derivative. The compositions provide a prolonging effect. Also described is the method of obtaining insulin analogue compositions - protamine.
Со времени введения инсулина в 1920-х годах, непрерьівно предпринимаются шаги для улучшения лечения сахарного диабета. Основнье успехи достигнуть! в чистоте инсулина и его доступности в связи с разработкой технологий с использованием рекомбинантной ДНК. Разработаньі различнье композиции с различньіми временами действия. В настоящеєе время, вообще говоря, существуют семь коммерчески дос- тупньїх инсулиновьїх композиций: регулярньїй инсулин, инсулин семиленте, глобин инсулин, изофан инсу- лин, суспензия цинк инсулина, протамин-цинк-инсулин, инсулин ультраленте.Since the introduction of insulin in the 1920s, continuous steps have been taken to improve the treatment of diabetes. The main thing is to achieve success! in the purity of insulin and its availability in connection with the development of technologies using recombinant DNA. Development of various compositions with different durations of action. Currently, generally speaking, there are seven commercially available insulin compositions: regular insulin, semilente insulin, globin insulin, isophane insulin, zinc insulin suspension, protamine-zinc insulin, ultralente insulin.
Несмотря на множество пригодньїх композиций, при лечений с помощью подкожньїх иньекций па- циент все еще нуждается в удобном регулирований и нормализованном гликемическом контроле. Частье переходь от нормальньїх гликемических уровней на протяжений жизни пациентов ведут к гипер- или гипог- ликемии, и отдаленньмм осложнениям, включая ретинопатию, нейропатию, нефропатию, и микро- и мак- роангиопатию.Despite the variety of convenient compositions, when treated with the help of subcutaneous injections, the patient still needs convenient regulated and normalized glycemic control. Frequent transitions from normal glycemic levels to prolonged life of patients lead to hyper- or hypoglycemia and remote complications, including retinopathy, neuropathy, nephropathy, and micro- and macroangiopathy.
Чтобь! помочь избежать зкстремальньїх гликемических уровней, диабетики часто практикуют тера- пию с помощью многократньїх иньекций, посредством введения инсулина перед каждьмм приемом пищи.So! to help avoid extreme glycemic levels, diabetics often practice therapy with the help of multiple injections, by introducing insulin before each meal.
Однако зта терапия все же неоптимальна. Коммерчески доступньій самьй бьістродействующий инсулин дает пик слишком поздно после иньекции и его действие продолжаєтся слишком долго до оптимальньх уровней глюкозьі. Позтому значительнье уровни направлень! на создание инсулиновьїх композиций и ком- позиций инсулинового аналога, которне изменяют кинетику процесса подкожной абсорбции.However, this therapy is still suboptimal. The fastest-acting commercially available insulin peaks too late after injection and lasts too long until optimal glucose levels are reached. That's why there are significant levels of referrals! on the creation of insulin compositions and insulin analogue compositions, which change the kinetics of the subcutaneous absorption process.
Поскольку все коммерческие фармацевтические композиции инсулина содержат инсулин в самоассо- циированном состояниий и преимущественно в гексамерной форме, полагают, что стадия, лимитирующая скорость абсорбции инсулина из депо при подкожной иньекции в кровоток, представляет собой диссоциа- цию самоагрегированного гексамера инсулина. Недавно разработань! мономернье инсулиновье аналоги, которье менее склонньї к ассоциации с образованием форм с более вьісокой молекулярной массой, чем человеческий инсулин. Зта потеря самоассоциации обусловлена модификациями аминокислотной после- довательности человеческого инсулина, которие уменьшают ассоциацию с помощью, главньмм образом, разрушения образования димеров. Смотри, например, Вге!тв еї аї., Ргоїєїп Епдіпеегіпд 5:6, 527-533 (1992), и Вгапде еї аї., Майшге, 333:679-682 (1988). В соответствий с зтим мономернье инсулиновье аналоги обла- дают относительно более бьістриьм началом активности при сохранений биологической активности природ- ного человеческого инсулина. Зти инсулиновье аналоги обеспечивают бьіструю абсорбцию, устанавливая время иньекции и пик действия инсулина в большей близости к возникающему после приєма пищи измене- нию уровня глюкозь, связанному с ответом на прием пищи.Since all commercial pharmaceutical compositions of insulin contain insulin in a self-associated state and mainly in the hexameric form, it is believed that the rate-limiting stage of insulin absorption from the depot during subcutaneous injection into the bloodstream is the dissociation of the self-aggregated insulin hexamer. Recently developed! monomeric insulin analogues, which are less prone to association with the formation of forms with a higher molecular weight than human insulin. This loss of self-association is caused by modifications of the amino acid sequence of human insulin, which reduce association by, mainly, destroying the formation of dimers. See, e.g., Vge!tv ei ai., Rgoieip Epidipeegipd 5:6, 527-533 (1992), and Vgapde ei ai., Maishge, 333:679-682 (1988). Accordingly, monomeric insulin analogues have a relatively faster onset of action while preserving the biological activity of natural human insulin. These insulin analogues provide rapid absorption, setting the time of injection and the peak of insulin action closer to the postprandial change in glucose level associated with the response to food intake.
Физические свойства и характеристики мономерньїх аналогов не аналогичньі! инсулину. Например,The physical properties and characteristics of monomeric analogues are not analogous! insulin For example,
Вгетз еї аї!., раскрьіваєт, что различнье мономернье аналоги имеют небольшую или не имеют вообще ск- лонность к ассоциации, вьізьіваемую 7п. Любая ассоциация, которая наблюдаєтся, представляет собой множество образований с более вьісокой молекулярной массой. Зто сильно отличаєтся от инсулина, кото- рьій находится почти в исключительно упорядоченной гексамерной конформации в присутствий цинка.Vgetz ei ai!., reveals that various monomeric analogues have a small or no tendency at all to association, visible 7p. Any association that is observed is a set of compounds with a higher molecular weight. This is very different from insulin, which is almost exclusively in an ordered hexameric conformation in the presence of zinc.
Вгапде еї а. Оіабегез 13: 923-954 (1990). Биістро- действующие характеристики аналогов приписьївают от- сутствие ассоциации. Поскольку аналоги имеют меньшую тенденцию ассоциировать, то совсем удивитель- но, что мономерньй инсулиновьй аналог может бьїіть приготовлен таким образом, чтобьії обеспечить сред- нюю продолжительность действия.Vgapde her a. Oiabegez 13: 923-954 (1990). Fast-acting characteristics of analogues are attributed to the absence of association. Since analogs have a smaller tendency to associate, it is quite surprising that a monomeric insulin analog can be prepared in such a way as to provide an average duration of action.
Настоящее изобретение предлагаєт композицию, содержащую мономерньй инсулиновьй аналог, ко- торая обещает при использований средней продолжительностью действия. Кроме того, изобретение обес- печиваєт новьій протаминовьїй кристалл, назьіваемьй инсулиновьїм МРО-аналогом. Настоящее изобрете- ние также обеспечиваєт смесь инсулинового МРО-аналога и растворимого мономерного инсулинового ана- лога. Зта смесь обеспечиваєт бьістрое начало действия и промежуточную продолжительность действия. В соответствий с зтим, смесь обладаєт преимуществами как перед инсулином, так и перед мономерньм ана- логом. Кроме того, настоящеєе изобретение обеспечиваєт способ получения однородньїх кристаллов инсу- линового аналога-МРО.The present invention offers a composition containing a monomeric insulin analog, which is promising when used with a medium duration of action. In addition, the invention provides a new protamine crystal called an insulin MPO analog. The present invention also provides a mixture of an insulin MPO analogue and a soluble monomeric insulin analogue. This mixture provides a rapid onset of action and an intermediate duration of action. Accordingly, the mixture has advantages both over insulin and over the monomer analog. In addition, the present invention provides a method for obtaining homogeneous crystals of the insulin analog-MPO.
Зто изобретение предлагает композицию, содержащую систему инсулиновьй аналог - протамин, ко- торая включаєт мономерньй инсулиновьй аналог, протамин, цинк и фенольное производное.Therefore, the invention offers a composition containing an insulin analog-protamine system, which includes a monomeric insulin analog, protamine, zinc, and a phenolic derivative.
Кроме того, изобретение обеспечивает комплекс из кристаллического инсулинового аналога и прота- мина. Зтот комплекс определяют как инсулиновьй аналог-МРО. І уз828Ргов82з-человеческий инсулин-МРО вк- лючает І узв28Ргов29-чеповеческий инсулин, 0,27-0,32 мг протамина 100 единиц инсулинового аналога, 0,35-0,995 цинка по весу, и фенольное производное.In addition, the invention provides a complex of crystalline insulin analogue and protamine. This complex is defined as an insulin analog-MPO. I uzv828Rgov82z-human insulin-MRO includes I uzv28Rgov29-chepevechesky insulin, 0.27-0.32 mg of protamine 100 units of insulin analogue, 0.35-0.995 zinc by weight, and a phenolic derivative.
Зто изобретениє, кроме того, обеспечиваєт способ получения комплекса І узе28Ргов23-человеческий инсулин-МРО, которьй включает: смешениє водного раствора І узв28Рго823-человеческого инсулина в гексамерном ассоциированном состояниий, и раствора протамина при температуре от около 82С до около 2290; указанньїйй водньйй раствор включаєт от 0,35 до 0,995 цинка по весу, І узв28Рго829-человеческий инсу- лин, и фенольное производное при рН от около 7,1 до около 7,6; указанньій раствор протамина включает протамин при рН от 7,1 до 7,6, такой что финальная кон- центрация протамина составляет около 0,27 до около 0,32 мг протамина/100 Е инсулинового аналога.This invention, in addition, provides a method for obtaining the complex I uzv28Rho23-human insulin-MPO, which includes: mixing an aqueous solution of I uzv28Rho823-human insulin in the hexameric associated state, and a solution of protamine at a temperature from about 82C to about 2290; the specified aqueous solution includes about 0.35 to 0.995 zinc by weight, and uzv28Rho829-human insulin, and a phenolic derivative at a pH of about 7.1 to about 7.6; the specified solution of protamine includes protamine at a pH of 7.1 to 7.6, such that the final concentration of protamine is about 0.27 to about 0.32 mg of protamine/100 U of insulin analog.
Изобретение также обеспечиваєт композиции, обещающие как бьістрь!м, так и средним действием.The invention also provides compositions promising both rapid and medium action.
Композиции представляют собой смеси мономерного инсулинового аналога и кристаллического инсулино- вого аналога-МРО, в которьїх весовое отношение двух компонентов составляет около 1-99:99-1.The compositions are mixtures of a monomeric insulin analog and a crystalline insulin analog-MPO, in which the weight ratio of the two components is about 1-99:99-1.
Наконец, изобретение обеспечивает способ лечения пациента, страдающего сахарньімм диабетом, которьій включает введение указанному пациенту фармацевтической композиции, содержащей кристалль! комплекса инсулиновьй аналог - протамин.Finally, the invention provides a method of treating a patient suffering from diabetes mellitus, which includes the introduction of a pharmaceutical composition containing a crystal to the specified patient! insulin analogue of the complex - protamine.
Рисунок 1 представляет собой графическое изображение профиля действия І! узвг8Ргов829-НІ-МРО и человеческого инсулина - МРН. График представляєт собой зависимость дДЕ/мл от времени вливания. Ри- сунок демонстрирует преимущества настоящего изобретения.Figure 1 is a graphic representation of the action profile of I! uzvg8Rgov829-NI-MRO and human insulin - MRN. The graph represents the dependence of dDE/ml on the infusion time. The figure demonstrates the advantages of the present invention.
Рисунок 2 представляєт собой изображение кристаллов Азре28-человеческий инсулин-протамин нас- тоящего изобретения. Изображение приводится при 1000х увеличений с дифференциальньмм фазовьм контрастом.Figure 2 is an image of Azre28-human insulin-protamine crystals of the present invention. The image is shown at 1000x magnification with differential phase contrast.
Рисунок 3 представляєт собой изображениє кристаллов І узв28Ргов29-нІ-протамин настоящего изоб- ретения. Изображение приводится при 1000х увеличений с дифференциальньїм фазовьм контрастом.Figure 3 is an image of crystals of I uzv28Rgov29-nI-protamine of the present invention. The image is shown at 1000x magnification with differential phase contrast.
Как отмечалось вьіше, изобретение обеспечиваєт различнье композиции мономерного инсулинового аналога. Используемьй здесь термин "мономерньй инсулиновьй аналог" или "инсулиновьй аналог" озна- чает бьістродействующий инсулиновьїйй аналог, которьій менее склонен к димеризации или самоассоциа- ции. Мономерньй инсулиновьй аналог представляет собой человеческий инсулин, в котором Рго в положе- ний В28 замещен на Авзр, Гуз, Гей, Ма! или Аа и Гуз в положении В29 есть лизин или Пролин; де5 (828-As noted above, the invention provides various compositions of a monomeric insulin analog. As used herein, the term "monomeric insulin analog" or "insulin analog" means a fast-acting insulin analog that is less prone to dimerization or self-association. A monomeric insulin analog is human insulin, in which Rgo is replaced by Avzr, Guz, Hey, Ma! or Aa and Guz in position B29 are lysine or proline; de5 (828-
В30); или дез (827). Мономернье инсулиновье аналоги описань! Спапсе еї аі!., ЕРО рибіїсайоп питрег 383 472, и Вгапде еїга!., ЕРО рибіїсайноп 214 826, на которне здесь ссьілаются.B30); or des (827). Monomeric insulin analogs description! Spapse ei ai!., ERO ribiisaiop pitreg 383 472, and Vgapde eiga!., ERO ribiisainop 214 826, which are referred to here.
Специалисту в данной области должно бьть известно, что возможнь! другие модификации для моно- мерного инсулинового аналога. Зти модификации широко известнь! в данной области и включают замеще- ние гистидинового остатка в положенийи В10 на аспарагиновую кислоту; замещение остатка фенилаланина в положениий В1 на аспарагиновую кислоту; замещение остатка треонина в положении В30 на аланин; за- мещение остатка серина в положениий ВУ на аспарагиновую кислоту; утрату аминокислот только в положе- ний ВІ или в комбинации с потерей в положений 82; и потерю треонина в положений В30.A specialist in this field should know what is possible! other modifications for a monomeric insulin analog. Zty modifications widely lime! in this region, they include the replacement of the histidine residue in position B10 with aspartic acid; substitution of the phenylalanine residue in position B1 with aspartic acid; replacement of the threonine residue in position B30 with alanine; replacement of the serine residue in the VU position with aspartic acid; loss of amino acids only in position VI or in combination with loss in position 82; and loss of threonine in prescribed B30.
Используемьсе в зтом описаний аббревиатурь! всех аминокислот являются аббревиатурами, приня- тьми Опкей 5іагез Раїепі «5 Тгадетагк Опйісе как указано в 37 С.Р.Е. 51.822(р) (2). Особенно предпочтитель- ньїми мономерньми инсулиновьми аналогами являются І узв28Рго82з-человеческий инсулин (В28 есть Гуз;We will use the abbreviation described in that! all amino acids are recognized by abbreviations adopted Opkey 5iagez Raiepi "5 Tgadetagk Opyise as specified in 37 S.R.E. 51.822(r) (2). Particularly preferred monomeric insulin analogs are I uzv28Rho82z-human insulin (B28 is Huz;
В29 есть Рго) и Азр828-человеческий инсулин (В28 есть Авр).B29 is Rgo) and Azr828 is human insulin (B28 is Avr).
Термин "мономерньй инсулиновьй аналог-МРО" или "инсулиновьйй аналог-МРО" означает суспензию кристаллического инсулинового аналога и протамина в композиции. МРО представляет собой композицию протамина согласно Ое Реїїррі5. Композицию получают в соответствий с заявляемьм способом, описанньм здесь. Родственньій термин "кристалль! инсулинового аналога МРО", "кристаллический инсулиновьй ана- лог-МРО", или кристалль І уз828Рго823-человеческий инсулин-протамин относится к кристаллам инсулино- вьій аналог-протамин в МРО композиции.The term "monomeric insulin analog-MPO" or "insulin analog-MPO" means a suspension of a crystalline insulin analog and protamine in the composition. MPO is a composition of protamine according to Oe Reilly5. The composition is obtained in accordance with the claimed method, described here. The related term "insulin analogue MPO crystal", "insulin analogue MPO crystal", or crystal I uz828Rho823-human insulin-protamine refers to insulin analogue-protamine crystals in the MPO composition.
Используемьй здесь термин "лечение" описьвшвает оказание помощи и уход за пациентом с целью борьбьї с болезнью, состоянием или расстройством, и включаєт введение соединения настоящего изобре- тения с целью предотвратить начало наступления заболевания или осложнений, облегчения симптомов или осложнений, или ликвидации заболевания, состояния или нарушения.As used herein, the term "treatment" describes the provision of assistance and care to a patient for the purpose of combating a disease, condition or disorder, and includes the administration of a compound of the present invention for the purpose of preventing the onset of a disease or complication, alleviating symptoms or a complication, or eliminating a disease, condition or violations.
Термин "изотонический агент" относится к агенту, которьій является физиологически толерантньм и которьій придаєт подходящий тонус композиции, чтобь! предотвратить сеточньй поток водьі через клеточ- ную мембрану. Соединения, такие как глицерин, обьічно используют для таких целей в известньїх концент- рациях. Концентрация изотонического агента лежит в диапазоне, известном в области применения для композиций инсулина.The term "isotonic agent" refers to an agent that is physiologically tolerant and that gives a suitable tone to the composition, so that! to prevent net flow of water through the cell membrane. Compounds such as glycerin are commonly used for such purposes in lime concentrations. The concentration of the isotonic agent lies in the range known in the field of application for insulin compositions.
Термин "фенольное производное" обозначаєт м-крезол, фенол или предпочтительно смесь м-крезо- ла и фенола.The term "phenol derivative" means m-cresol, phenol or preferably a mixture of m-cresol and phenol.
Термин "в расчете на свободное основание" указьвваєет на количество протамина в композиции. Рас- чет на свободное основание корректирует содержание водь! и содержание солей протамина, коммерчески приемлемьїх и обьічно используемьх в парентеральньїх композициях. Предпочтительньй протамин, суль- фат протамина, составляет приблизительно 8095 протамина.The term "on a free base basis" refers to the amount of protamine in the composition. Calculation on a free basis corrects the content of water! and the content of protamine salts, commercially acceptable and commonly used in parenteral compositions. A preferred protamine, protamine sulfate, is about 8095 protamine.
Термин "І" или "Оу" означает международную единицу.The term "I" or "Ou" means an international unit.
Термин "изофановое отношение" означаеєт равновесное количество протамина, необходимое для комплексования с аналогом инсулина, установленное Кгауеприйі и Козепрегуд, 5іепі Метогіа! НозріаїThe term "isophane ratio" means the equilibrium amount of protamine necessary for complexation with an insulin analog, established by Kgauepriyi and Kozepregud, 5iepi Metogia! Nozriai
Верогі (Сореппадеп), 1:60 (1946). Изофановое отношение определяют путем титрования по способу, хоро- шо известному в данной области техники и описанному Кгауепррипйі, еї а.Verogi (Soreppadep), 1:60 (1946). The isophane ratio is determined by titration according to a method well known in this field of technology and described by Kgaueprripia, ei a.
Настоящее изобретение обеспечиваєт композицию инсулиновьй аналог-протамин, которая вклю- чает: мономерньй инсулиновьй аналог, протамин, цинк, и фенольное производное. Концентрация прота- мина составляет предпочтительно от 0,2 до 1,5 мг протамина на 100 Единиц инсулинового аналога в рас- чете на свободное основание. Наийболее предпочтительно, чтобь! диапазон протамина составлял от 0,27 мг/100 Единиц до 0,35 мг/100 Единиц. Концентрация цинка составляеєт от 0,35 до 0,995 по весу. Предпочти- тельно, концентрация цинка составляет около 0,795.The present invention provides an insulin analog-protamine composition, which includes: a monomeric insulin analog, protamine, zinc, and a phenolic derivative. The concentration of protamine is preferably from 0.2 to 1.5 mg of protamine per 100 units of the insulin analog based on the free base. It is most preferable that! the range of protamine was from 0.27 mg/100 Units to 0.35 mg/100 Units. The zinc concentration ranges from 0.35 to 0.995 by weight. Preferably, the zinc concentration is about 0.795.
Фенольное производное представляет собой м-крезол, фенол или смесь м-крезола и фенола. Пред- почтительньми фенольньіми производньіми является м-крезол и фенол. Концентрация фенольного произ- водного известна специалисту в данной области. Концентрации должнь! бьїть достаточнь/ми для того, что-The phenol derivative is m-cresol, phenol or a mixture of m-cresol and phenol. Preferred phenol derivatives are m-cresol and phenol. The concentration of the phenolic derivative is known to a specialist in this field. Concentration of duties! beat enough for that-
бьї сохранять зффективность консервации, т.е., затормозить микробньїйй рост. Вообще, концентрация фе- нольного производного, например, находится в диапазоне от 1,0 мг/мл до 6,0 мг/мл; предпочтительно вь- ше, чем около 2,5 мг/мл. Наийболее предпочтительна концентрация около З мг/мл. Присутствие фенольного производного является существенньім, поскольку оно воздействует на комплексообразование аналога, протамина и цинка, помимо функционирования в качестве консерванта. Однако, полагают, что в кристал- лической структуре на молекулу инсулинового аналога приходится только одна молекула фенола.they will preserve the effectiveness of preservation, i.e., slow down microbial growth. In general, the concentration of the phenol derivative, for example, is in the range from 1.0 mg/ml to 6.0 mg/ml; preferably more than about 2.5 mg/ml. The most preferred concentration is about 3 mg/ml. The presence of a phenolic derivative is essential, as it affects the complexation of the analogue, protamine and zinc, in addition to functioning as a preservative. However, it is believed that in the crystal structure there is only one molecule of phenol per molecule of the insulin analog.
Предпочтительно, изотонический агент добавляют к композиции. Предпочтительньї!м изотоническим агентом является глицерин. Концентрация изотонического агента составляеєт, например, от 14 мг/мл до 18 мг/мл, предпочтительно около 16 мг/мл. рН композиции может бьіть установлена с помощью физиологически толерантного буфера, предпоч- тительно фосфатного буфера, такого как двуосновньій фосфат натрия. К другим физиологически толерант- ньім буферам относятся ТРЕІ5, ацетат натрия или цитрат натрия. Вьібор буфера и концентрация буфера из- вестньі в данной области. Обьічно концентрация составляєт, например, от около 1,5 мг/мл до около 5,0 мг/мл; предпочтительно 3,8 мг/мл.Preferably, an isotonic agent is added to the composition. The preferred isotonic agent is glycerin. The concentration of the isotonic agent is, for example, about 14 mg/ml to 18 mg/ml, preferably about 16 mg/ml. The pH of the composition can be adjusted using a physiologically tolerant buffer, preferably a phosphate buffer such as dibasic sodium phosphate. Other physiologically tolerant buffers include TREI5, sodium acetate, or sodium citrate. Buffer selection and buffer concentration are known in this area. Generally, the concentration is, for example, about 1.5 mg/ml to about 5.0 mg/ml; preferably 3.8 mg/ml.
Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает специфические условия, при которьїх инсулино- вьій аналог-протамин существует в виде стабильного кристалла. Композиции зтих кристаллов определяют как инсулиновьйй аналог-МРО. Инсулиновьй аналог-МРО представляет собой сформулированную суспен- зию кристаллов инсулиновьйй аналог-МРО и он при использований проявляет промежуточное действие.In addition, the present invention provides specific conditions under which insulin analogue protamine exists in the form of a stable crystal. The composition of these crystals is defined as an insulin analog-MPO. Insulin analog-MPO is a formulated suspension of insulin analog-MPO crystals, and when used, it exhibits an intermediate effect.
Профиль активности инсулинового аналога-МРО достаточно неожидан с точки зрения отсутствия самоас- социации мономерного аналога.The activity profile of the insulin analog MPO is quite unexpected from the point of view of the lack of self-association of the monomeric analog.
Способность композиции с мономерньмм аналогом проявлять промежуточное действиє демонстри- руется на рисунке 1. Рисунок 1 иллюстрирует профиль действия для І узв28Ргов29-НІ-МРО и человеческого инсулина-МРН. МРО профиль подобен профилю инсулина-МРН. Продолжительность действия для МРО композиции и инсулин-МРН композиции приблизительно одинаковь!. Однако, найболее важно, что настоя- щая композиция повьішает более бьістро и остаєтся стабильной в течение более длительного периода, чем инсулин-МРН. Зто различие достаточно неожиданно с точки зрения бьістродействующего профиля мо- номерного аналога.The ability of a composition with a monomeric analog to show an intermediate effect is demonstrated in Figure 1. Figure 1 illustrates the profile of action for I uzv28Rgov29-NI-MPO and human insulin-MRN. The MPO profile is similar to the insulin-MRN profile. The duration of action for MPO composition and insulin-MRN composition is approximately the same!. However, the most important thing is that this composition increases faster and remains stable for a longer period than insulin-MRN. So the difference is quite unexpected from the point of view of the high-performance profile of the monomeric analog.
Особенно, предпочтительная композиция инсулиновьй аналог-протамин, І узе28Ргов823- человеческий инсулин-МРО, включаєет: І уз828Ргов29-чеповеческий инсулин, от 0,27 до 0,32 мг протамина/100 Единиц инсу- линового аналога, от 0,35 до 0,990 цинка по весу, и фенольное производное. Концентрация протамина предпочтительно составляеєт 0,3 мг/100 Единиц в расчете на свободное основание.Especially, the preferred composition of insulin analogue-protamine, I uze28Rgov823-human insulin-MRO, includes: I uze828Rgov29-human insulin, from 0.27 to 0.32 mg of protamine/100 units of insulin analogue, from 0.35 to 0.990 zinc by weight, and the phenol derivative. The concentration of protamine is preferably 0.3 mg/100 Units based on the free base.
Изобретениє также обеспечиваеєет способ получения ІГузвг8Рго829-человеческий инсулин-протамин кристаллов, которьійй включаєеєт: смешениеє водного раствора І уз828Рго82з-человеческого инсулина в состояний гексамерного ассоциа- та и раствора протамина при температуре от около 82С до около 222; указанньй водньй раствор включаєт от 0,35 до 0,995 цинка по весу, І уз828Рго823-человеческий инсу- лин, и фенольное производное при рН от 7,1 до 7,6; указанньйй раствор протамина включаеєт протамин при рнН от 7,1 до 7,6 так, чтобьї его финальная кон- центрация составляла от 0,27 до 0,32 мг протамина/100 Единиц инсулинового аналога.The invention also provides a method for obtaining IGuzvg8Rho829-human insulin-protamine crystals, which includes: mixing an aqueous solution of Iuz828Rho82z-human insulin into a hexameric associate and a protamine solution at a temperature from about 82C to about 222; the specified aqueous solution includes from 0.35 to 0.995 zinc by weight, and uz828Rho823-human insulin, and a phenolic derivative at a pH of from 7.1 to 7.6; the specified protamine solution includes protamine at a pH of 7.1 to 7.6 so that its final concentration was 0.27 to 0.32 mg of protamine/100 units of insulin analog.
До создания изобретения бьло известно, что мономернье инсулиновье аналоги менее склоннь к ас- социации и образованию гексамеров. Условия, необходимьсе для того, чтобь! вьізвать ассоциацию моно- мерньїх инсулиновьїх аналогов с протамином с образованием кристаллов, ранее бьіли неизвестнь! в дан- ной области. Ранние исследования относились к инсулину. Указания относительно получения инсулина-Before the creation of the invention, it was known that monomeric insulin analogs are less prone to association and formation of hexamers. Conditions necessary for that! to cause the association of monomeric insulin analogs with protamine with the formation of crystals, previously unknown! in this region. Early studies were related to insulin. Instructions regarding receiving insulin-
МРН (нейтральная композиция протамина согласно (Надедогп) или изофан инсулиновьїх композиций сог- ласно Кгауеприйі и Козепрегуд, 2іега Метогіа! Нозрйа! Керогп (Сореппадеп), 1:60 (1946) не уместнь с точки зрения различия в свойствах мономерньїх инсулиновьїх аналогов. В действительности, коммерческий спо- соб получения Нитіїйп-МТМ (инсулин-МРН), кислотно-нейтральньй способ, не приводит к получению крис- таллического инсулинового аналога-МРО.MRN (neutral composition of protamine according to (Nadedogp) or isophane of insulin compositions according to Kgauepryi and Kozepregud, 2iega Metogia! Nozrya! Kerogp (Soreppadep), 1:60 (1946) is not appropriate from the point of view of the difference in the properties of monomeric insulin analogs. In fact , a commercial method of obtaining Nityl-MTM (insulin-MPH), an acid-neutral method, does not lead to the production of a crystalline insulin analogue-MPO.
Найиболее важно установление того, что параметрь! настоящего изобретения - а именно, температу- ра кристаллизации и образования гексамерного комплекса инсулинового аналога, цинка, и фенольного производного, являются существенньми признаками для образования стабильньх Іузе28Рго829-п|І-МРО кристаллов.The most important thing is to establish that parameter! of the present invention - namely, the temperature of crystallization and formation of a hexameric complex of an insulin analogue, zinc, and a phenolic derivative, are essential features for the formation of stable Iuse28Rho829-p|I-MPO crystals.
Температура кристаллизации должна находиться в пределах от около 82С до около 222С, предпочти- тельно от 139С до 17260. Если температура находится за пределами зтого диапазона, то получаєтся глав- ньім образом, аморфная композиция инсулиновьй аналог-протамин.The temperature of crystallization should be in the range from about 82C to about 222C, preferably from 139C to 17260. If the temperature is outside this range, the main form is an amorphous insulin analog-protamine composition.
Также существенно, что инсулиновьйй аналог трансформируется в гексамерное состояние до крис- таллизации. Кристаллизация приводит к аморфному продукту в случає, когда способ осуществляют в сос- тоянии мономерного ассоциирования. Кристалль! образуются без перемешивания в течение от пяти до тридцати-шестидесяти часов. Кристалль! вьісокого качества образуются обьічно в течение 24 часов.It is also important that the insulin analog transforms into a hexameric state before crystallization. Crystallization leads to an amorphous product when the method is carried out in the state of monomer association. Crystal! are formed without mixing within five to thirty-sixty hours. Crystal! of high quality are formed randomly within 24 hours.
Растворимьй мономерньй инсулиновьй аналог комплексуется в гексамерньй ассоциат при суспен- дирований твердого мономерного аналога в растворителе, содержащем фенольное производное, и при до- бавлений цинка до тех пор, пока концентрация цинка не составит от 0,3595 до 0,995 по весу. Цинк предпоч- тительно добавляют в виде соли. К иллюстрирующим примерам солей цинка относятся ацетат цинка, бро- мид цинка, хлорид цинка, фторид цинка, иодид цинка и сульфат цинка. Специалисту в данной области должно бьть известно, что существуют и другие соли цинка, которне также могут бьіть использовань в способе настоящего изобретения. Предпочтительно использование ацетата цинка и хлорида цинка.The soluble monomeric insulin analog is complexed into a hexameric associate when the solid monomeric analog is suspended in a solvent containing a phenol derivative, and when zinc is added until the zinc concentration is 0.3595 to 0.995 by weight. Zinc is preferably added in the form of salt. Illustrative examples of zinc salts include zinc acetate, zinc bromide, zinc chloride, zinc fluoride, zinc iodide, and zinc sulfate. A specialist in this field should know that there are other zinc salts that can also be used in the method of the present invention. Zinc acetate and zinc chloride are preferably used.
Растворению инсулинового аналога в растворителе, как зто известно, может способствовать подкис- ление. При кислом растворенийи для повьішения растворимости аналога рН понижают до около 3-3,5 с по- мощью физиологически толерантной кислотьії, предпочтительно НСІ. К другим физиологически толерант- ньім кислотам относятся уксусная кислота, лимонная кислота, и фосфорная кислота. рН затем подводят физиологически толерантньім основанием, предпочтительно Маон, до около 7,1-7,6 для кристаллизации.It is known that acidification can contribute to the dissolution of an insulin analog in a solvent. When dissolved in an acidic solution, to increase the solubility of the analogue, the pH is lowered to about 3-3.5 s using physiologically tolerant acidity, preferably NCI. Other physiologically tolerant acids include acetic acid, citric acid, and phosphoric acid. The pH is then adjusted with a physiologically tolerant base, preferably Mahon, to about 7.1-7.6 for crystallization.
Другими физиологически толерантньіми основаниями являются КОН и гидрохлорид аммония.The second physiologically tolerant bases are KOH and ammonium hydrochloride.
Найболее важно то, что способ получения І узв28Рго829-НІ-МРО комплекса чувствителен к концентра- ции Масі. Если концентрация превосходит приблизительно 4 мг/мл, кристалльі! инсулиновьй аналог-МРО оказьіяваются смешанньми с аморфньм продуктом. Таким образом, предпочтительно, для того чтобь избе- жать образования ионов соли, мономерньй аналог растворяют при нейтральном рН. Наконец, аналог мож- но растворить в растворителе при кислом рН до добавления буфера. Зто уменьшает концентрацию солей, генерируемьїх вследствие подведения рН. Однако порядок, при котором добавляются компоненть, не яв- ляется существенньїм для образования гексамера или для аморфного образования.The most important thing is that the method of obtaining the I uzv28Rho829-NI-MRO complex is sensitive to Mass concentration. If the concentration exceeds approximately 4 mg/ml, crystals! insulin analog-MPO occurs as a mixture with an amorphous product. Thus, preferably, in order to avoid the formation of salt ions, the monomeric analogue is dissolved at neutral pH. Finally, the analog can be dissolved in a solvent at an acidic pH before adding a buffer. This reduces the concentration of salts generated as a result of lowering the pH. However, the order in which the component is added is not essential for the formation of the hexamer or for the amorphous formation.
Как указьівалось вьіше, к композициям настоящего изобретения может бьіть добавлен изотонический агент. Изотонический агент можно добавлять к раствору аналога, к раствору протамина, или к финальной инсулиновьій аналог-МРО композиции. Аналогично, добавление физиологически толерантного буфера можно проводить к раствору аналога, к раствору протамина, или к финальной инсулиновьй аналог-МРО композиции. Однако, предпочтительно, чтобь! как раствор аналога, так и раствор протамина содержали изотонический агент и буфер до смешения водного раствора и протамина. Из-за влияния Масі на способ получения кристаллического инсулинового аналога-МРО глицерин является предпочтительнь!м изотони- ческим агентом.As indicated above, an isotonic agent may be added to the compositions of the present invention. The isotonic agent can be added to the analog solution, to the protamine solution, or to the final insulin analog-MPO composition. Similarly, the addition of a physiologically tolerant buffer can be carried out to the analog solution, to the protamine solution, or to the final insulin analog-MPO composition. However, it is preferable that! both the analogue solution and the protamine solution contained an isotonic agent and a buffer before mixing the aqueous solution and protamine. Due to the influence of Mass on the method of obtaining the crystalline insulin analog-MPO, glycerin is the preferred isotonic agent.
Изобретение также обеспечиваєт композиции инсулиновьїх аналогов, которне включают смеси инсу- линового аналога - в виде кристаллического твердого вещества и растворимого инсулинового аналога. Зти смеси получают в диапазоне от около 1:99 до 99:1, по обьему, суспендированного инсулинового аналога-The invention also provides compositions of insulin analogues, which include mixtures of an insulin analogue - in the form of a crystalline solid and a soluble insulin analogue. These mixtures are obtained in the range from about 1:99 to 99:1, by volume, of the suspended insulin analog-
МРО к растворимому инсулиновому аналогу. Растворимьй инсулиновьй аналог представляет собой моно- мерньй инсулиновьй аналог, растворимьй в водном растворителе, содержащий: цинк, фенольное произ- водное, изотонический агент, и буфер. Концентрации в растворителе такие же, как здесь ранее указанньє.MPO to soluble insulin analogue. Soluble insulin analogue is a monomeric insulin analogue, soluble in an aqueous solvent, containing zinc, a phenolic derivative, an isotonic agent, and a buffer. Concentrations in the solvent are the same as previously indicated here.
Предпочтительно, чтобьї отношение инсулиновьй аналог-МРО к растворимому инсулиновому аналогу сос- тавляло 25:75-75:25; и более предпочтительно, 50:50. Смеси легко получают смешением индивидуальньх компонентов.Preferably, the ratio of insulin analog-MPO to soluble insulin analog was 25:75-75:25; and more preferably, 50:50. Mixtures are easily obtained by mixing individual components.
Смешаннье композиции настоящего изобретения особенно пригоднь! для лечения сахарного диабе- та благодаря сочетанию бьістрого начала действия и пролонгированного действия. Зти смеси позволяют осуществлять "прекрасньй контроль" путем варьирования количества каждого индивидуального компо- нента исходя из потребностей, диетьі! и физической нагрузки пациента. Преимущество смесей суспенди- рованного инсулинового аналога-МРО и растворимого инсулинового аналога заключаєтся также в том, что они гомогеннь, т.е. при любом равновесном обмене между суспендированньми кристаллами и раст- воримь/м инсулиновьм аналогом они прозрачнь!.Mixing the composition of the present invention is especially adventurous! for the treatment of diabetes thanks to the combination of rapid onset of action and prolonged action. These mixtures allow you to exercise "perfect control" by varying the amount of each individual component based on your needs, diet! and physical activity of the patient. The advantage of mixtures of suspended insulin analog-MPO and soluble insulin analog also lies in the fact that they are homogeneous, i.e. at any equilibrium exchange between the suspended crystals and the soluble insulin analogue, they become transparent!
Инсулиновье аналоги настоящего изобретения могут бьїть полученьї при помощи любой из ряда признанньїх технологий синтеза пептидов, включая классические (растворнье) способьі, твердо-фазнье способьї, полусинтетические способьі, и более современньюе способьї при помощи рекомбинантной ДНК.Insulin analogs of the present invention can be obtained using any of a number of recognized peptide synthesis technologies, including classical (solvent) methods, solid-phase methods, semisynthetic methods, and more modern methods using recombinant DNA.
Например, Спапсе еїаїІ., ЕРО 214 826, раскрьівают получение различньїх мономерньх аналогов.For example, Spapse et al., ERO 214 826, disclose the preparation of various monomeric analogs.
Следующие примерь! приведень! для более подробной иллюстрации получения инсулиновьх анало- гов и настоящего изобретения. Обьем изобретения не ограничиваєтся только нижеследующими примера-Try the following! bring it! for a more detailed illustration of the production of insulin analogs and the present invention. The scope of the invention is not limited to the following examples
Ми.We.
Пример 1.Example 1.
Получение ГІ уз828Ргов29-пІ-МРОObtaining GI uz828Rgov29-pI-MRO
Раствор І уз828Рго829-человеческого инсулина (І уз828Ргов29-нІ) с концентрацией 200 МЕ/мл (Е200) по- лучают путем растворения цинк-содержащих кристаллов І узв28Рго829-р| в системе консервант/буфер, со- держащий: 1,6 мг/мл м-крезола, 0,73 мг/мл фенола (зквивалентное 0,65 мг/мл фенола, рассчитанное как 8995), 16 мг/мл глицерина, и 3,78 мг/мл двуосновного фосфатного натриевого буфера. Зндогенньй (возник- ший внутри организма) уровень цинка в кристаллах дополняют путем добавления соответствующего обье- ма кислого раствора 2п0 (10 мг/мл) до достижения конечной концентрации 0,025 мг/100 МЕ (0,795). Раство- рениеє Гузв28Ргов2з-р| осуществляют при температуре окружающей средь! путем понижения рН до около З мкл-овьіми обьемами 5М НОЇ. После того, как раствор просветлеет, рН вновь доводят до 7,5 при помощи мкл-вьїх обьемов 5М Ммаон.A solution of I uz828Rho829-human insulin (I uz828Rho829-nI) with a concentration of 200 IU/ml (E200) is obtained by dissolving zinc-containing crystals of I uzv28Rho829-r| in the system a preservative/buffer containing: 1.6 mg/ml m-cresol, 0.73 mg/ml phenol (equivalent to 0.65 mg/ml phenol, calculated as 8995), 16 mg/ml glycerol, and 3 .78 mg/ml of dibasic sodium phosphate buffer. The endogenous (inside the body) level of zinc in the crystals is supplemented by adding the corresponding volume of an acid solution of 2p0 (10 mg/ml) until the final concentration of 0.025 mg/100 IU (0.795) is reached. Dissolves Guzv28Rgov2z-r| carried out at ambient temperature! by lowering the pH to about 3 μl volumes of 5M NOI. After the solution becomes clear, the pH is again adjusted to 7.5 with the help of microliter volumes of 5M Mmaon.
Раствор протамина получают растворением достаточно твердого сульфата протамина в растворе консервант/буфер до достижения конечной концентрации 0,6 мг/100 МЕ в расчете на свободное основа- ние. рН зтого раствора доводят до 7,5 и стабилизируют при 1526.The protamine solution is obtained by dissolving sufficiently solid protamine sulfate in a preservative/buffer solution to reach a final concentration of 0.6 mg/100 IU based on the free base. The pH of this solution is adjusted to 7.5 and stabilized at 1526.
Оба раствора разбавляют до конечной концентрации водой для иньекции и фильтруют. 5 мл аликво- ть Гузв28ргов29-Д| составляющей заполняют в отдельнье чистье стеклянньє ампуль, и образцьї инкуби- руют в водяной бане при 1520. После соответствующего времени стабилизации (15 минут), вьізьівают осаждение путем бьістрого добавления 5 мл раствора протамина к І узв28Ргов29-п| образцам. Кристаллиза- цию проводят в течение около 24 часов при 1596.Both solutions are diluted to the final concentration with water for injection and filtered. 5 ml aliquot Guzv28rgov29-D| components are filled in a separate clean glass ampoule, and the samples are incubated in a water bath at 1520. After the appropriate stabilization time (15 minutes), the sediment is precipitated by rapidly adding 5 ml of protamine solution to I uzv28Rgov29-p| samples Crystallization is carried out for about 24 hours at 1596.
Пример 2.Example 2.
Получение ГІ уз828Ргов29-пІ-МРОObtaining GI uz828Rgov29-pI-MRO
Способ идентичен примеру 1, за исключениєм того, что растворение І узв28Ргов29-пІ происходит при нейтральном рН. Способ осуществляют так, чтобьі конечное рН составляло 7 4.The method is identical to example 1, except that the dissolution of I uzv28Rgov29-pI occurs at neutral pH. The method is carried out so that the final pH was 74.
Пример 3.Example 3.
Получение ГГ узв28Ргов29-п|І-МРОObtaining GG uzv28Rgov29-p|I-MRO
Инсулиновьйй аналог-МРО получают по способу, аналогичному примеру 1, но растворение в кислой среде І узвг8Ргов29-п| вьіполняют в присутствийи всех наполнителей, за исключением двуосновного натрие- вого фосфатного буфера. Твердьй двуосновной натрий фосфат добавляют после того, как раствор инсу- линового аналога возвращают к рН 7,4. Добавление двуосновного натрий фосфата приводит к осветвле- нию раствора.Insulin analog-MPO is obtained by a method similar to example 1, but dissolution in an acidic medium I uzvg8Rgov29-p| filled in the presence of all fillers, with the exception of dibasic sodium phosphate buffer. Solid dibasic sodium phosphate is added after the insulin analog solution is brought back to pH 7.4. The addition of dibasic sodium phosphate leads to the clarification of the solution.
Пример 4.Example 4.
Получение смешанньмх композиций инсулинового аналогаPreparation of mixed insulin analogue compositions
Смеси Гузв28Ргов2гз-н| композиций промежуточного и бьістрого действия получают следующим обра- зом. Суспензионную композицию промежуточного действия получают при помощи способов, описанньмх в примере 3, и зта композиция служит в качестве составляющей промежуточного действия для смеси. От- дельньй раствор І узвг8Ргов29-п| (100 МЕ) получают путем растворения цинксодержащих ІГГузв28Ргов829-ДІ кристаллов при температуре окружающей средь! в растворителе, описанном в примере 1. Зндогенньй уро- вень цинка Гузвг8Рго829-п| в зтом растворе дополняют путем добавления кислого раствора 2пО до соот- ветствия уровню в суспензионной составляющей (т.е., 0,025 мг/100 МЕ (0,7965)). После того, как рН доводят до 7,4, используя 1095 растворь! НСІ и/или Маон, для разбавления раствора до конечной концентрации ис- пользуют воду для иньекций. Зтот раствор представляет собой бьістродействующую составляющую сме- сей. Конечную смесь получают смешением соответствующих обьемов составляющих промежуточного и бьістрого действия, получая требуемое отношение. 50/50 смесь получают путем смешения 1 части состав- ляющей промежуточного действия с 1 частью составляющей бьістрого действия по обьему.Mixtures Guzv28Rgov2gz-n| compositions of intermediate and rapid action are obtained as follows. A suspension composition of intermediate action is obtained using the methods described in example 3, and this composition serves as a component of intermediate action for the mixture. Separate solution I uzvg8Rgov29-p| (100 IU) is obtained by dissolving zinc-containing IGGuzv28Rgov829-DI crystals at ambient temperature! in the solvent described in example 1. The endogenous level of zinc Guzvg8Rgo829-p| in this solution, it is supplemented by adding an acidic solution of 2pO to match the level in the suspension component (i.e., 0.025 mg/100 ME (0.7965)). After the pH is adjusted to 7.4 using 1095 solution! NSI and/or Maon use water for injections to dilute the solution to the final concentration. This solution is an effective component of mixtures. The final mixture is obtained by mixing the corresponding volumes of the components of intermediate and rapid action, obtaining the required ratio. A 50/50 mixture is obtained by mixing 1 part of the intermediate-acting component with 1 part of the fast-acting component by volume.
Пример 5.Example 5.
Влияние ионной силь на кристаллизацию ГІ уз828Рго829-рІ| протаминThe influence of ionic forces on the crystallization of GI uz828Rho829-rI| protamine
Влияние ионной силь на кристаллизацию оценивают путем добавления Масі к І уз828Ргов29-н| состав- ляющей до смешения с протамином. Масі добавляют так, чтобьї общая концентрация составляла 20, 30, и 40 мМ (1,2; 1,8; и 2,3 мг/мл). Распределение частиц по обьему демонстрирует полимодальное поведение (дополнительнье пики для частиц малого размера), по мере повьішения концентрации Масі. Средний об- ьемньій размер частиц уменьшается по мере увеличения концентрации Масі, указьвая на увеличение аморфного вещества. Результать! размера частиц в зависимости от концентрации Масі вьіглядят следую- щим образом: масі) Средний размер частиц по обьему (мкм) 13 мМ 3,9The influence of ionic forces on crystallization is estimated by adding Mass to I uz828Rgov29-n| component before mixing with protamine. Masses are added so that the total concentration was 20, 30, and 40 mM (1.2, 1.8, and 2.3 mg/ml). The distribution of particles by volume shows polymodal behavior (additional peaks for small-sized particles) as the Mass concentration increases. The average volume size of the particles decreases as the Mass concentration increases, indicating an increase in the amorphous substance. The result! of the particle size depending on the concentration Masses are viewed as follows: mass) Average particle size by volume (μm) 13 mm 3.9
ММ 3,5MM 3.5
ММ 3,3 мМ 3,2MM 3.3 mm 3.2
Анализ с помощью микроскопии показал, что все образць! содержали смесь аморфного и кристалли- ческого вещества. Образец, содержащий 40 мм масі, представлял собой, в основном, аморфное вещество и содержал очень мало кристаллов.Microscopy analysis showed that all samples! contained a mixture of amorphous and crystalline matter. The sample containing 40 mm of mass was mainly an amorphous substance and contained very few crystals.
Пример 6.Example 6.
Сравнительньсе динамики ГІ уз828Ргов829-нІ-МРО и человеческого инсулинаComparative dynamics of GI uz828Rgov829-nI-MRO and human insulin
Зто исследование проводят на модели соп5сіои5 собаки. Перед началом исследования делают вли- вание соматостатина (0,3 мкг/кг-мин). После 10 минутного перерьіва вводят подкожную иньекцию либоTherefore, the study is conducted on a model of a social dog. Before the start of the study, an infusion of somatostatin (0.3 μg/kg-min) is made. After a 10-minute break, a subcutaneous injection of either
МРО, либо МРН. Проводят частьй мониторинг глюкозь! в плазме и вливают переменное количество глюко- зьі (2095), для того чтобьї поддержать гликемию вблизи нормь!. Пробь! берут все время и анализируют на иммунореактивньй инсулин (Гіпсо антитело) и глюкозу. Результать! иллюстрируются рисунком 1.MRO or MRN. They conduct frequent monitoring of glucose! in the plasma and inject a variable amount of glucose (2095) in order to maintain glycemia close to the norm! Try it! they take all the time and analyze it for immunoreactive insulin (Gypso antibody) and glucose. The result! are illustrated in Figure 1.
Пример 7.Example 7.
Получение кристаллов Азр (828) аналог. ПротаминObtaining Azr crystals (828) analog. Protamine
Составляющую Азр(В28)-пІ при концентрации 200 МЕ/мл (Е 200) получают путем растворения лио- филизированного блока (9595 чистота) в системе консервант/буфер, содержащей: 1,6 мг/мл м-крезола, 0,73 мг/мл фенола (зквивалент для 0,65 мг/мл фенола, рассчитанного как 8995), 16 мг/мл глицерина, и 3,78 мг/мл двухосновного фосфата натрия. К системе добавляют цинк, используя соответствующий обьем кис- лого 2пО раствора (10 мг/мл), получая финальную концентрацию 0,025 мг/100 МЕ. Растворение Азр(В28) проводят при температуре окружающей средь при нейтральной рн. Конечная рН составляющей равна 7 4.The constituent Azr(B28)-pi at a concentration of 200 IU/ml (E 200) is obtained by dissolving the lyophilized block (9595 purity) in a preservative/buffer system containing: 1.6 mg/ml m-cresol, 0.73 mg /ml phenol (equivalent to 0.65 mg/ml phenol calculated as 8995), 16 mg/ml glycerol, and 3.78 mg/ml sodium phosphate dibasic. Zinc is added to the system using an appropriate volume of an acidic 2pO solution (10 mg/ml), resulting in a final concentration of 0.025 mg/100 IU. Solving Azr(B28) is carried out at ambient temperature at neutral pH. The final pH of the component is equal to 7 4.
Кристаллизацию проводят как описано в примере 2. Получают конечнье концентрации протамина 0,3Crystallization is carried out as described in example 2. The final concentration of protamine is 0.3
Мг/ЛО0Е, 0,35 мг/100Е и 0,4 мг/100Е. Зти концентрации протамина соответствуют 2,995, 9,395 и 10,595, соот- ветственно в расчете вес/вес. Инкубационнье температурь! составляют 520 (0,3 мг/100Е только), 15902 и 2226. После вьідержки в течение 24 час при зтих температурах образцьі анализируют на образование крис- таллов. Результать, определеннье с помо- щью микроскопии, дают смесь небольшого количества кристаллов и аморфного продукта.Mg/LO0E, 0.35 mg/100E and 0.4 mg/100E. The concentrations of protamine correspond to 2.995, 9.395 and 10.595, respectively, in the weight/weight calculation. Incubation temperatures! are 520 (0.3 mg/100E only), 15902 and 2226. After holding for 24 hours at these temperatures, the samples are analyzed for the formation of crystals. The result, determined by microscopy, is a mixture of a small amount of crystals and an amorphous product.
Пример 8.Example 8.
Получение кристаллов А5р(В28) аналог. ПротаминObtaining crystals A5p(B28) analog. Protamine
Кристаллизацию Азр(В28) Протамин проводят как описано в примере 7 за исключением того, что бе- лок растворяют первьїм в растворителе, свободном от буфера. Добавление кислой 2пО смеси бьло доста- точно, чтобь! подкислить образец до рН 2,0-2,5. После того, как раствор осветлится, рН доводят до приб- лизительно 7 с помощью мкл-вьїх обьемов 5М Маон. Фосфат натрия, двухосновньй, добавляют, используя концентрированньй раствор смеси при 47,25 мг/мл, получая финальную концентрацию 3,78 мг/мл. Зту сос- тавляющую доводят до рН 7,4, используя мкл-вне количества НС.Crystallization of Azr(B28) Protamine is carried out as described in Example 7, with the exception that the protein is first dissolved in a buffer-free solvent. The addition of an acidic 2pO mixture was enough to! acidify the sample to pH 2.0-2.5. After the solution is clarified, the pH is adjusted to approximately 7 using microliter volumes of 5M Mahon. Sodium phosphate, dibasic, is added using a concentrated solution of the mixture at 47.25 mg/ml, obtaining a final concentration of 3.78 mg/ml. This component is adjusted to pH 7.4, using a microliter amount of NS.
Кристаллизацию инициируют путем комбинации составляющих Азр(В28) и протамина, как описано в предьдущих примерах. Получают финальнье концентрации протамина 0,3 мг/100Е, 0,35 мг/ЛО0Е и 04 мг/100Е. Температурь! инкубации составляют 152 и 2220. После вьідержки в течение 24 час при зтих тем- пературах, образць! анализируют на образование кристаллов. Результатьі, определеннье с помощью мик- роскопии, дают смесь кристаллов и аморфного продукта.Crystallization is initiated by combining the components Azr(B28) and protamine, as described in previous examples. Final protamine concentrations of 0.3 mg/100E, 0.35 mg/LO0E and 04 mg/100E are obtained. The temperature! incubations are 152 and 2220. After holding for 24 hours at those temperatures, the samples! analyzed for the formation of crystals. The results, determined by microscopy, give a mixture of crystals and an amorphous product.
Пример 9.Example 9.
Получение кристаллов ГГ еи (828) Рго(В29) аналог. ПротаминObtaining crystals of HH ei (828) Pho(B29) analog. Protamine
Составляющую ГГ ец(В28) Рго(В29) (93965 чистота) при концентрации 200 МЕ/мл (Е 200) получают как описано в примере 8, используя растворение блока в кислоте с последующим доведений рН с помощью 5МConstituent GH ec(B28) Pho(B29) (93965 purity) at a concentration of 200 IU/ml (E 200) is obtained as described in example 8, using the dissolution of the block in acid followed by pH adjustment with 5M
Ммаон до рн 7,4. Кристаллизацию проводят как описано вьіше. Исследуют конечнье концентрации прота- мина 0,3 мг/1О0Е, 0,35 мг/100Е и 0,4 мг100Е. Температурьі инкубации включают 52С, 15902 и 2226. После 24 часов при зтих температурах все образць! содержат некоторое количество кристаллов, но, в основном, они бьіли аморфньми, как зто определено с помощью микроскопии.Mmaon to pH 7.4. Crystallization is carried out as described above. The final protamine concentrations of 0.3 mg/1O0U, 0.35 mg/100U and 0.4 mg100U are being studied. Temperature incubations include 52C, 15902 and 2226. After 24 hours at those temperatures, all samples! contain some crystals, but mostly they are white, amorphous, as determined by microscopy.
Пример 10.Example 10.
Оез(ва27)пПІ-протамин кристалль!Oez(va27)pPI-protamine crystal!
Составляющую Оезтпг((В27) (97,3795 чистота) при концентрации 200 МЕ/мл (Е 200) получают, как описано в примере 8, используя кислое растворение блока с последующим доведением рН с помощью 5МConstituent Oeztpg ((B27) (97.3795 purity) at a concentration of 200 IU/ml (E 200) is obtained as described in example 8, using an acid solution of the block followed by pH adjustment with 5M
Ммаон до рн 7,4. Кристаллизацию проводят как описано в примере 8. Исследуют конечнье концентрации протамина 0,3 мг/100Е, 0,35 мг/100Е и 0,4 мг/100Е. Температурь! инкубации включают 152С и 2226. После 24 часов, при зтих температурах, все образць, в основном, бьіли аморфньми, как определено с помощью микроскопии. Качественно, наблюдаются кристалль!.Mmaon to pH 7.4. Crystallization is carried out as described in example 8. Final protamine concentrations of 0.3 mg/100E, 0.35 mg/100E and 0.4 mg/100E are investigated. The temperature! incubations include 152C and 2226. After 24 hours, at these temperatures, all samples were mostly white, amorphous, as determined by microscopy. Qualitatively, crystals are observed!
Пример 11.Example 11.
Оез(в28-830)пІ-протаминOez(v28-830)pi-protamine
Составляющую Оев(28-30) (96,395 чистота) при концентрации 200 МЕ/мл (Е 200) получают, как опи- сано в примере 8, используя кислое растворение блока с последующим доведением рН с помощью 5МConstituent Oev (28-30) (96.395 purity) at a concentration of 200 IU/ml (E 200) is obtained as described in example 8, using an acid solution of the block followed by pH adjustment with 5M
Маон до рнН 7,4. Кристаллизацию проводят, используя способ нейтральное/нейтральное смешение белко- вой и протаминовой составляющих, как описано вьіше. Исследуют конечнье концентрации протамина 0,3 мМг/100Е, 0,35 мг/100Е и 0,4 мг/100Е. Температурь! инкубации включают 152С и 2220. После 24 часов, при зтих температурах, все образць, в основном, они били аморфньми, как определено с помощью микроско- пий. Качественно, наблюдаются кристалль. Зти кристалль! хорошо определяются.Mahon to pH 7.4. Crystallization is carried out using the method of neutral/neutral mixing of protein and protamine components, as described above. Endpoint protamine concentrations of 0.3 mg/100U, 0.35 mg/100U and 0.4 mg/100U are being studied. The temperature! incubations include 152C and 2220. After 24 hours, at these temperatures, all samples were mostly amorphous, as determined by microscopy. Qualitatively, a crystal is observed. You are a crystal! are well defined.
Пример 12.Example 12.
Азр(В28) аналог-протаминAzr(B28) analog-protamine
Раствор инсулин Азр(В28)-человеческого инсулинового аналога получают путем растворения 16,6 мг белка в 1 мл раствора, содержащего 3,2 мг/мл м-крезола, 1,3 мг/мл фенола и 32 мг/мл глицерина. Добави- ли 14,4 мкл аликвота раствора смеси подкисленного цинка (10 мг/мл в 7п", полученньйй растворением 0,311 гоксида цинка в 5 мл 1095 НСІ и разбавлением до 25 мл водой). рН раствора составлял 2,3, что обес- печивало полное растворение белка. Добавляют 10 мкл аликвоту 1095 Маон, чтобь довести рН до 7,06. К раствору добавляют 100 мкл 0,28 М двуосновного фосфата натрия, рН 7,0, которьйй повьішаєт рН раствора до 7,27. К раствору добавляют 870 мкл аликвоту водьі! для иньекции. Дополнительно добавляют 1095 НОСІ (1 мкл) и Ман (0,7 мкл) и конечньйй обьем раствора доводят до 2 мл водой для иньекции, получая конеч- ную рН 7,26. Раствор фильтруют через 0,2 мкм Зипрог" Асгодівс" 13, СеІтап бсіепсе5) фильтр перед ис- пользованием.A solution of Azr(B28)-human insulin analogue is obtained by dissolving 16.6 mg of protein in 1 ml of a solution containing 3.2 mg/ml of m-cresol, 1.3 mg/ml of phenol and 32 mg/ml of glycerol. 14.4 μl of an aliquot of a solution of acidified zinc mixture (10 mg/ml in 7p", obtained by dissolving 0.311 zinc oxide in 5 ml of 1095 HCI and diluting it to 25 ml with water) was added. The pH of the solution was 2.3, which ensured complete protein dissolution. Add 10 μl of an aliquot of 1095 Mahon to bring the pH to 7.06. Add 100 μl of 0.28 M sodium phosphate dibasic, pH 7.0, which raises the pH of the solution to 7.27. Add 870 µl aliquot of water for injection. 1095 NOSI (1 µl) and Mann (0.7 µl) are additionally added, and the final volume of the solution is adjusted to 2 ml with water for injection, obtaining a final pH of 7.26. The solution is filtered through 0.2 µm Zyprog "Asgodivs" 13, SeItap bsiepse5) filter before use.
Протаминовьсе смесевье растворьї получают путем растворения сульфата протамина в растворе, содержащем 1,6 мг/мл м-крезола, 0,65 мг/мл фенола, 16 мг/мл глицерина и 14 мМ двуосновного фосфата натрия. Конечное значение рН раствора доводят до 7,3. Конечная концентрация протамина составляла 0,60 мг/100Е в расчете на свободное основание. Оба раствора фильтруют через 0,22 мкм (МіПірогеProtamine mixed solutions are obtained by dissolving protamine sulfate in a solution containing 1.6 mg/ml of m-cresol, 0.65 mg/ml of phenol, 16 mg/ml of glycerol and 14 mM of dibasic sodium phosphate. The final pH value of the solution is adjusted to 7.3. The final concentration of protamine was 0.60 mg/100U based on the free base. Both solutions are filtered through 0.22 μm (MiPiroge
Зіепмех"М-У) фильтрующий злемент перед использованием.Ziepmekh"M-U) filter element before use.
Кристаллизация достигается путем смешения раствора Азр(В28)-человеческого инсулина в 1:1 отно- шений при контролируемой температуре, указанной в таблице. Конечнье условия смеси бьіли 3,94 мг/млCrystallization is achieved by mixing a solution of Azr(B28)-human insulin in a ratio of 1:1 at the controlled temperature specified in the table. The final conditions of the white mixture were 3.94 mg/ml
Азр(В28)-человеческого инсулина, 0,0359 мг/мл (0,995) ионов цинка, 1,6 мг/мл м-крезола, 0,65 мг/мл фено- ла, 16 мг/мл глицерина, 14 мМ двуосновного фосфата натрия и 0,30 мг100Е протамина при рн 7,3. В част- ности, 50-200 мкл порции раствора Авре28-человеческого инсулина переносят в стекляннье ампуль и тем- пературу образцов доводят до 4, 8, 15 или 232С (температура окружающей средьї). Части обоих протами- новьїх растворов также доводят до зтих температур. Через 15-20 минут зквивалентньій обьем любого про- таминового раствора переносят с помощью пипетки в образцьї Азр(В28)-человеческого инсулина. Смесь мягко взбалтьввают при вращений, накрьівают и затем оставляют неподвижной при контролируемой темпе- ратуре в течение периода кристаллизации. Все образцьі исследуют микроскопии через 24 часа и, как обна- ружено, они являются, в основном, аморфньми. Через 48 часов, образцьі, содержащие 0,30 мг/100Е прота- мина и инкубированньсе при 152С, показьівают значительное количество иглоподобньх кристаллов и неко- торое количество аморфного вещества.Azr(B28)-human insulin, 0.0359 mg/ml (0.995) zinc ions, 1.6 mg/ml m-cresol, 0.65 mg/ml phenol, 16 mg/ml glycerol, 14 mM dibasic phosphate sodium and 0.30 mg 100U of protamine at pH 7.3. In particular, 50-200 μl portions of Avre28-human insulin solution are transferred to a glass ampoule and the temperature of the samples is adjusted to 4, 8, 15 or 232C (ambient temperature). Portions of both protamine solutions are also brought to these temperatures. After 15-20 minutes, an equivalent volume of any protamine solution is transferred using a pipette into a sample of Azr(B28)-human insulin. The mixture is gently shaken while rotating, covered and then left motionless at a controlled temperature during the crystallization period. All samples are examined by microscopy after 24 hours and, as found, they are mostly amorphous. After 48 hours, samples containing 0.30 mg/100U of protamine and incubated at 152C showed a significant amount of needle-like crystals and some amount of amorphous substance.
Пример 13.Example 13.
Раствор инсулин Азр(В28)-человеческий инсулиновьїйй аналог получают путем растворения 10,62 мг белка в 0,71 мл раствора, содержащего 3,2 мг/мл м-крезола, 1,3 мг/мл фенола и 32 мг/мл глицерина. Доба- вили 10,2 мкл аликвота смесевого раствора кислого цинка (10 мг/мл в 7п", полученном растворением 0,311 гоксида цинка в 5 мл 1095 НСІ и разбавлением до 25 мл водой). рН раствора составлял 2,3, что обес- печивало полное растворение белка. Добавляют 6,5 мкл аликвоту 1095 Маон, чтобь довести рН до 7,00. К раствору добавляют 71 мкл 0,28 М двуосновного фосфата натрия, рН 7,0, которьйй повьішаєт рН раствора до 7,26. К раствору добавляют 620 мкл аликвоту водьі! для иньекции. Дополнительно добавляют 1095 НОСІ (0,2 мкл) и Маон (0,2 мкл) и Маон (0,6 мкл), и конечньйй обьем раствора доводят до 1,42 мл водой для ин- ьекции, получая конечную рН 7,42. Раствор фильтруют через 0,2 мкм БЗирог" Асгодібс" 13, Сеїтап зЗсіепсе5) фильтр перед использованием.A solution of insulin Azr(B28)-human insulin analogue is obtained by dissolving 10.62 mg of protein in 0.71 ml of a solution containing 3.2 mg/ml of m-cresol, 1.3 mg/ml of phenol and 32 mg/ml of glycerol. A 10.2 μl aliquot of a mixed solution of acidic zinc (10 mg/ml in 7p", obtained by dissolving 0.311 zinc oxide in 5 ml of 1095 NCI and diluting it to 25 ml with water) was added. The pH of the solution was 2.3, which ensured complete protein dissolution. Add 6.5 μl of an aliquot of 1095 Mahon to bring the pH to 7.00. Add 71 μl of 0.28 M dibasic sodium phosphate, pH 7.0, which increases the pH of the solution to 7.26. To the solution add a 620 μl aliquot of water for injection. In addition, add 1095 NOSI (0.2 μl) and Mahon (0.2 μl) and Mahon (0.6 μl), and the final volume of the solution is adjusted to 1.42 ml with water for injection. injections, obtaining a final pH of 7.42. The solution is filtered through a 0.2 micron BZyrog" Asgodibs" 13, Seitap zZsiepse5) filter before use.
Протаминовьй смесевой раствор получают путем растворения сульфата протамина в растворе, со- держащем 1,6 мг/мл м-крезола, 0,65 мг/мл фенола, 16 мг/мл глицерина и 14 мМ двуосновного фосфата натрия. Конечное значение рН раствора доводят до 7,4 и конечная концентрация протамина составляла 0,60 мг/100Е в расчете на свободное основаниє. Раствор фильтруют через 0,22 мкм (МіПіроге 5іегімех"М-The protamine mixture solution is obtained by dissolving protamine sulfate in a solution containing 1.6 mg/ml m-cresol, 0.65 mg/ml phenol, 16 mg/ml glycerol, and 14 mM dibasic sodium phosphate. The final pH of the solution was adjusted to 7.4 and the final concentration of protamine was 0.60 mg/100E based on the free base. The solution is filtered through 0.22 μm (MiPiroge 5iegimekh"M-
СУ) фильтрующий злемент перед использованием.SU) filter element before use.
Кристаллизация достигается путем смешения раствора Азр(В28)-человеческого инсулина в 1:1 отно- шении с раствором протамина, как описано в примере 12, при контролируемьхх температурах 132С, 1596, 179С и 2320. Результать! представлень! в таблице. Конечнье условия смеси бьли 3,74 мг/мл Азр(В28)-че- ловеческого инсулина, 0,0359 мг/мл (0,995) ионов цинка, 1,6 мг/мл м-крезола, 0,65 мг/мл фенола, 16 мг/мл глицерина, 14 мМ двуосновного фосфата натрия и 0,30 мг/100Е протамина при рН 7,4. Оценивают четьіре различнье температурь! кристаллизации. 1 мл аликвоту Азр(В28)-человеческого инсулина стабилизиро- ванную при 152С, смешивают с 1 мл протаминового раствора, доведенного до той же самой температурь.Crystallization is achieved by mixing a solution of Azr(B28)-human insulin in a 1:1 ratio with a solution of protamine, as described in example 12, at controlled temperatures of 132С, 1596, 179С and 2320. The result! presentations! in the table. The final conditions of the mixture were 3.74 mg/ml Azr(B28)-human insulin, 0.0359 mg/ml (0.995) zinc ions, 1.6 mg/ml m-cresol, 0.65 mg/ml phenol, 16 mg/ml glycerol, 14 mM dibasic sodium phosphate and 0.30 mg/100U protamine at pH 7.4. They rate four different temperatures! crystallization. 1 ml of an aliquot of Azr(B28)-human insulin stabilized at 152C is mixed with 1 ml of protamine solution brought to the same temperature.
После мягкого взбалтьівания при вращений композицию оставляют неподвижной при 15202. Другой образец получают путем стабилизации раствора 100 мкл Азр(В28)-человеческого инсулина при 132С, и затем сме- шения со 100 мкл протаминового раствора, доведенного до той же самой температурьі. Финальную смесь инкубируют при 132С. Третий образец получают аналогичньїм путем, за исключением того, что две 100 мкл аликвоть! стабилизируют, смешивают и затем инкубируют при 172С. Финальньй раствор получают путем смешения стабилизированньх при температуре окружающей средь растворов 80 мкл аликвот Азр(В28)-че- ловеческого инсулина и протамина, и инкубирования при температуре окружающей средь (232С). Все об- разцьї оценивают с помощью микроскопии через 24 часа и другие более поздние временнье интервальі, перечисленньє в таблице.After gentle shaking while rotating, the composition is left stationary at 15202. The second sample is obtained by stabilizing a solution of 100 μl of Azr(B28)-human insulin at 132С, and then mixing it with 100 μl of a protamine solution brought to the same temperature. The final mixture is incubated at 132C. The third sample is obtained in a similar way, except that two 100 μl aliquots! stabilize, mix and then incubate at 172C. The final solution is obtained by mixing 80 μl aliquots of Azr(B28)-human insulin and protamine stabilized at ambient temperature, and incubating at ambient temperature (232С). All samples are evaluated with the help of microscopy after 24 hours and other later time intervals, listed in the table.
Условия кристаллизацииг и результать! микроскопийCrystallization conditions and results! microscopic
ІАзре28) (мг/мл) (ІПротамині Температура Время (час) Результать! микроскопий? (мг/1000) (ес) 11717811 ристаллічесюй 17177721 ристаллічесюй 10000011 1179611 кристаллячесюй 1 1112ю0 7 кристаллический/// 11717811 вмореннй 01717777. вмореннйIAzre28) (mg/ml) (IProtamines Temperature Time (time) Result! microscopic? (mg/1000) (es) 11717811 crystalline 17177721 crystalline 10000011 1179611 crystalline 1 1112ю0 7 crystalline/// 11717811 vmorenny7 0177 вн771
Продолжение таблиць 11117011 чристаллчвоюй 01117781 нристалличеоюй 11111690 кристаллический//Continuation of tables 11117011 crystalline 01117781 crystalline 11111690 crystalline//
С 110мю0 |, кристаллический/аморфньй аВсе растворьі! также содержат 0,995 ионов цинка, 1,6 мг/мл м-крезола, 0,65 мг/мл фенола, 16 мг/мл глицерина и 14 мМ двуосновного фосфата натрия, рН 7 4.С 110мю0 |, crystalline/amorphous and All solutions! also contain 0.995 zinc ions, 1.6 mg/ml m-cresol, 0.65 mg/ml phenol, 16 mg/ml glycerin and 14 mM dibasic sodium phosphate, pH 7 4.
БРезультат кристаллизации оценивают с помощью микроскопии при увеличениях 6б0Ох (Мікоп Оріїрпої 66 тісгозсоре) или 1000х (2еіз5 Ахіоріап Місгозсоре с дифференциальньм интерференционньїм контрас- том). Оба микроскопа снабженьі! приспособлениями для фотографирования.The result of crystallization is evaluated with the help of microscopy at magnifications of 6x0Ox (Mikop Oriirpoi 66 Tisgossore) or 1000x (2eiz5 Achioriap Misgossore with differential interference contrast). Both microscope supplies! devices for photography.
Кристалль, полученньсе в соответствии с виішеуказанньми примерами, иллюстрируются рисунком 2 и рисунком 3.The crystal obtained in accordance with the above examples is illustrated in Figure 2 and Figure 3.
є ! чеis ! what
ФF
Б: / чи / 2B: / or / 2
І в. ) 5 щ / щу Я / ше Ж 5 е БВ ) ово / -And in ) 5 sh / schu I / sh Ж 5 e BV ) ovo / -
І щи з я хх / ЗЕ в й т / 88 5 ши гI shchi z i xx / ZE v y t / 88 5 shi g
І оAnd about
ФF
) | е - - У - я - інш 7) | e - - U - i - others 7
ІТ? 8 8 8 ев аIT? 8 8 8 ev a
З щ з.From
помd
КОЗА щих Мом ен тGOAT schih Mom en t
КУ ее еТЯЕ що. ПК, у є її їй лики РАКИ КУ МК ще є Хижке Го У т я п: че те щОх оKU ee eTYAE what. PC, there are her faces RAKI KU MK there is also a predatory Go U t ia p: che te schoh o
С ї що Аню С винWhat is Anya's fault?
К СЕУ попав Ме Дж ГАК КК, Хоте ще М дев ек я п РАН Оля тK SEU got Me J GAK KK, I want M dev ek i p RAN Olya t
ШО її й шк ХК з при Дей СВ я ие жи ШИН ди Ух: н У яр ск зеSHO her and shk ХК with pri Dey SV i ie zhi ШYN di Uh: n U yar sk ze
ННо і Юа ся реж ПК п п пд ек Ки ЗНЕУКК Кри ях же шої А их я пу у о нки Брі А ря Б З ач Я кру їх к М» 5зх й и я 0.NNo and Yua sya rezh PK p p pd ek Ky ZNEUKK Kry yah same shoi A ih ya pu u o nki Bri A rya B Z ach Ya kru ih k M» 5zhh y i ia 0.
За, Ой в БУ СА ПОНІ. пом оо у с й пи ін ТИ Б з о Ай МАХ КІ с ке ЩО и. Оу а щ пе й такий Є ой І М се ооБрНн ї КА аа Ж, ж х КН УеЯй ж я Ми : шеFor, Oh in BU SA PONY. pom oo u s y pi in TI B z o Ai MAH KI s ke SCHO i. Ow a sh pe y such Ye oy I M se ooBrNn y KA aa Ж, ж х KN UeYay zh I We: ше
ПОМ м жPOM m
ЦВ Я Й ЕВ жTsV I and EV same
ПІК Хо. МИРОВАPEAK Ho. MIROVA
КО, СА СпАя йKO, SA SpAya and
ПО ДК 2 чих. 7 іPO DK 2 ch. 7 and
ХІТИ ее зе я ше Фиг. поши що ок ; Зх п я ме и шк ке я Ки ущ п оHIT ee ze i she Fig. posh that's ok; Zh p ia me i shk ke i Ky usch p o
ПК КуЄЯ АНА у ДО ВАХ УКВ око ях ВИ Ме Ух с НЯ заевквьс п я МеPK KuYEYA ANA u TO VAH UKV oko yah YOU Me Uh s NYA zaevkvs p ia Me
У ВХ мА де ее ов лу щі М и сх МАННЯ сдоекру фе 0. десь п Я МАМ хи а чи д дх СЯ дух у Кук ой ГИ С Му ил сек х с МУК неши за еаня я ще яко КИ ІН У дру: у ху ї фени Кодак, му у кВ Му п ще Ле о ; пек о що 0 х й й я Ж: гу Ен Ж Я: й ДНЗ КАК уХ Кия їйIN VH MA de ee ovlu schi M My sh MANNYA sdoekru fe 0. somewhere p I MAM hi a chi d dh SYA duh u Kuk oi GY S Mu il sec h s MUK neshi for eanya i also as KI IN U dru: u hu and hair dryers Kodak, mu u KV Mu p even Le o ; pek o what 0 x y y I F: hu En F I: y DNZ HOW yH Kiya to her
МКК цоЗа КА Я УК дви ЗЕ ТОНИ о » я У ДЯ АКА ТАКО СБ, лк Я Х Я тн Се ха ру МОЯ ї д З Се У нс КОЛЕ, 5 : ну да ря СА ЕВ я и су ме 7 ця М Кеш ; яMKK tsoZa KA I UK two ZE TONY o » i U DYA AKA TAKO SB, lk I X I tn Se ha ru MY i d Z Se U ns KOLE, 5 : nu darya SA EV i i su me 7 tia M Kesh ; I
Не ОВНА, в ЗК У СКУ Б р х 5 йNot OVNA, in ZK U SKU B r x 5 y
Я рин Ж СУК л к Є щи чи. пох поI rin Z SUK l k Ye shchi chi. poh po
Адм НИ тм; хи МО НУК вк хе же з м а ох тік тихAdm NI tm; hi MO NUK vk he same z m a oh tik tih
ВИ т ди Ко с о х ще щ- я п де З ДІ о В о ПоYOU t dy Ko s o h still sh- ia p de Z DI o V o Po
ММ подо о КО Ех КТ ЯК Фк ХА У с хо с Вк ре що ж. Ми пн ФАК ЦИ й Я дос дея ОК о й І кое КХ Ки де у 23 ПЕПоКя, че Си Ся 85 Яр ПУ о м ше Зо й Ки во) Ка ті кА іх ту са ме КУ песен літіMM podo o KO Eh KT JAK Fk HA U s ho s Vk re what. We mon FAK CY and I do dos deya OK o y I koe KH Ky de u 23 PEPOKya, che Si Sya 85 Yar PU o mshe Zo y Ky vo) Ka ti kA ih tu sa me KU pesen liti
НК ТАКУ У о ек че КН Ях ЗК Ух х ВІН ТУ я ВВ ми ЕТО, КА в я Кі НВ я,NK TAKU U o ek che KN Yah ZK Uh x WIN TU i VV we ETO, KA v i Ki NV i,
ІЗ ПУин пк су. дн СЯ м, ТЗ ет ди Ж КУ нт о. У щК ; ої а пи УК х САКЕ ля Гена: А я ДО ЗК ТАС : дл Ах ко ОКХ ни НЕК ре Фе Кн Деу гIZ PUyn pk su. dn SYA m, TZ et di Zh KU nt o. In ShK; oi a pi UK x SAKE la Gena: A i DO ZK TAS : dl Ah ko OKH ni NEK re Fe Kn Deu g
КЕ опе нх п Ку м. и х ноу НО Оу Я є тя пок КЕ і ко А СКKE open nh p Ku m. і x nou BUT Oh I am tya pok KE and ko A SK
КН шин я АН, ме щ вKN shin i AN, me sh v
НИК гг ї сх їх жи їе пеня на ме йо З ке чу с і : дя у ве ; нк й Ух хе УйНИК гги шх их жи и е пеня на ме є З ке чу s і: дя у ве; nk and Uh he Ui
КИ Кен ; р РОЙ, Те Сх Кял А, МО К ТЯ дит пл Аа пОшКу з Ак» до ч шо о й о зKI Ken; r ROY, Te Shh Kyal A, MO K TYA dit pl Aa pOshKu z Ak" to ch sho o i o z
ОК шов - вх мм Ваг мих і» УНН ее, ЖЕНOK seam - вх mm Ваг мих и» UNN ee, FEMALE
УК ОЙ М ТУ кити ОО: Я ! й ОК ОБ ее З В макет пу ук пив ех А Ж я УВА Тк о о НКUK OY M TU whales OO: I ! y OK OB ee Z V layout pu uk pyv eh A J I UVA Tk o o NK
КАК, ЕМ у УКВ; ХК ря ВК З сх Ба а Совеос МЕН я й ПК о що уро; в, сі у ста ек Ко иHOW, EM in VHF; ХК ря ВК З ш Ba a Soveos MEN I and PC o what uro; in, si u sta ek Ko i
ОБУ 4 ТТлИ Ку вка во ТЯ тод й ох КУА , ПІКИ МИ СИ ще А ке ГА 5 я и с кОм пак пи йон Кат ї пек є. ЗО ен не ве ке о. жкня ке ей ОМ Ше с. ЕBOTH 4 TTlY Ku vka vo TYA tod y oh KUA , WHILE WE ARE still A ke HA 5 i i s kOm pak pi ion Kat i pek is. ZO en ne ve ke o. zhknya ke ey OM She s. IS
Кен ЗЕ м а й ЗМ кре ОК их Ко я ех КВ нта ох у СО я я ЗМ Я у М Кк ому ложе, и Юа со Аох кедKen ZE m a i ZM kre OK ih Ko i eh KV nta oh u SO i i ZM I u M Kk omu bed, and Yua so Aoh ked
КН М ему ще ОН в у нот Ея по пот ЗKN M emu still ON v u not Eya po pot Z
Яся Б Я ся уче я. я. ВН пеня ДЕД тих ТЯYasya B I'm learning. I. VN penya DED those TY
Ем ОК ДМС Х МАЕ А і» ку А ек ло йо у и Мох ПЕ ох м щу с ко УМ в ОБ Ба пе п шинEm OK DMS X MAE A i» ku A ek lo yo u y Moh PE oh m schu s ko UM v OB Ba pe p shin
Дж Те ВК ООН НИХ т. НН :J Te VC UNO NIH vol. NN:
Ме Сх и я скунва ор сниMe Shh and I skunva or sny
Кум тиж хх шо УК ТВ иKum tizh xx sho UK TV and
ВДИХ ву п по півняBREATH in the cock
С ИМЕНИ в Фиг. З че КЕC NAMES in Fig. Z che KE
Ж Її, СHer, S
Тираж 50 екз.Circulation of 50 copies.
Відкрите акціонерне товариство «Патент»Open joint-stock company "Patent"
Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03122) 3-72 -89 (03122)2-57- 03Ukraine, 88000, Uzhgorod, str. Gagarina, 101 (03122) 3-72 -89 (03122)2-57- 03
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/260,633 US5461031A (en) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | Monomeric insulin analog formulations |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA34468C2 true UA34468C2 (en) | 2001-03-15 |
Family
ID=22989963
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA95062796A UA34468C2 (en) | 1994-06-16 | 1995-06-14 | Complex of insulin analogue and protamine, pharmaceutical composition for parenteral administration (variants), method for its preparing (variants), method for preparing crystals of lys b28 pro b29-human insulin and protamine complex, method for preparing crystals |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5461031A (en) |
| JP (1) | JP3812962B2 (en) |
| KR (1) | KR100386038B1 (en) |
| CN (1) | CN1145641C (en) |
| AT (1) | AT408611B (en) |
| BE (1) | BE1009409A5 (en) |
| BR (1) | BR9502797A (en) |
| CA (1) | CA2151564C (en) |
| CH (2) | CH693019A5 (en) |
| CO (1) | CO4410204A1 (en) |
| CZ (1) | CZ294556B6 (en) |
| DE (1) | DE19521753B4 (en) |
| DK (1) | DK176213B1 (en) |
| ES (1) | ES2091728B1 (en) |
| FI (1) | FI118208B (en) |
| FR (1) | FR2721215B1 (en) |
| GB (1) | GB2290294B (en) |
| GR (1) | GR1002494B (en) |
| HU (1) | HU218943B (en) |
| IE (1) | IE68852B1 (en) |
| IL (1) | IL114153A (en) |
| IT (1) | IT1276722B1 (en) |
| LU (1) | LU88627A1 (en) |
| MY (1) | MY116831A (en) |
| NL (2) | NL1000565C2 (en) |
| NO (1) | NO320808B1 (en) |
| NZ (1) | NZ272360A (en) |
| PE (1) | PE34496A1 (en) |
| PL (1) | PL183284B1 (en) |
| PT (1) | PT101723B (en) |
| RO (1) | RO115124B1 (en) |
| SE (1) | SE509295C2 (en) |
| SI (1) | SI9500199A (en) |
| TW (1) | TW347334B (en) |
| UA (1) | UA34468C2 (en) |
| YU (1) | YU39795A (en) |
| ZA (1) | ZA954941B (en) |
Families Citing this family (98)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6131567A (en) * | 1993-01-29 | 2000-10-17 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
| US6024090A (en) * | 1993-01-29 | 2000-02-15 | Aradigm Corporation | Method of treating a diabetic patient by aerosolized administration of insulin lispro |
| US5888477A (en) * | 1993-01-29 | 1999-03-30 | Aradigm Corporation | Use of monomeric insulin as a means for improving the bioavailability of inhaled insulin |
| EP1607086A1 (en) * | 1993-01-29 | 2005-12-21 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
| DK72793D0 (en) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | NEW PRODUCT |
| US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
| US5547929A (en) * | 1994-09-12 | 1996-08-20 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
| YU18596A (en) * | 1995-03-31 | 1998-07-10 | Eli Lilly And Company | Analogous formulations of monomer insulin |
| DE69630527T2 (en) * | 1995-06-30 | 2004-08-05 | Novo Nordisk A/S | PREVENTING DISEASE WITH A DIABETES CHARACTER |
| ATE208208T1 (en) * | 1996-06-20 | 2001-11-15 | Novo Nordisk As | INSULIN PREPARATIONS CONTAINING HALOGENIDES |
| US5898067A (en) * | 1997-02-07 | 1999-04-27 | Novo Nordisk A/S | Crystallization of proteins |
| ES2242270T3 (en) * | 1997-02-07 | 2005-11-01 | Novo Nordisk A/S | CRYSTALLIZATION OF PROTEINS. |
| CO4750643A1 (en) | 1997-06-13 | 1999-03-31 | Lilly Co Eli | STABLE FORMULATION OF INSULIN CONTAINING L-ARGININ AND PROTAMINE |
| DK1283051T3 (en) * | 1997-06-13 | 2006-10-16 | Lilly Co Eli | Stable insulin formulations |
| KR20010024556A (en) * | 1997-10-24 | 2001-03-26 | 피터 지. 스트링거 | Insoluble Insulin Compositions |
| CO4970787A1 (en) * | 1997-12-23 | 2000-11-07 | Lilly Co Eli | INSOLUBLE COMPOSITIONS OF INSULIN AND INSULIN DERIVATIVES THAT CONTROL BLOOD GLUCOSE |
| US20010053761A1 (en) * | 1998-01-08 | 2001-12-20 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering aspb28-human insulin |
| US20040214747A1 (en) * | 1999-01-06 | 2004-10-28 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering monomeric insulin |
| US6624141B1 (en) * | 1999-03-17 | 2003-09-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Protamine fragment compositions and methods of use |
| US7169889B1 (en) | 1999-06-19 | 2007-01-30 | Biocon Limited | Insulin prodrugs hydrolyzable in vivo to yield peglylated insulin |
| US7678364B2 (en) | 1999-08-25 | 2010-03-16 | Alkermes, Inc. | Particles for inhalation having sustained release properties |
| US20030054015A1 (en) * | 2000-12-25 | 2003-03-20 | Shinichiro Haze | Sympathetic-activating perfume composition |
| BR0207422A (en) * | 2001-02-09 | 2005-04-19 | Genentech Inc | Igf-1 crystal, composition, method of treating mammals suffering from agonist dysfunction, crystallization of igf-1, crystalline igf-1, identification methods of indirect igf-1 agonists, co-crystalline complex , igf-1 three-dimensional structure determination method, machine readable data storage medium, igf-1 crystal, igf-1 three-dimensional structure use method, igf-1 agonist or antagonist identification method, compound design method, peptidomimetic identification method, method for determining at least a three-dimensional structure part of a molecular complex, method for assessing the ability of a chemical entity to associate with igf-1, chemical entity, derivative of heavy atom, method of experimental or computational evaluation of a chemical entity and use of a composition |
| US6867183B2 (en) | 2001-02-15 | 2005-03-15 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US7060675B2 (en) | 2001-02-15 | 2006-06-13 | Nobex Corporation | Methods of treating diabetes mellitus |
| US6835802B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-12-28 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing substantially monodispersed mixtures of polymers having polyethylene glycol moieties |
| US7713932B2 (en) | 2001-06-04 | 2010-05-11 | Biocon Limited | Calcitonin drug-oligomer conjugates, and uses thereof |
| US6828297B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of insulin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6858580B2 (en) * | 2001-06-04 | 2005-02-22 | Nobex Corporation | Mixtures of drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6713452B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-03-30 | Nobex Corporation | Mixtures of calcitonin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6828305B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of growth hormone drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| WO2003020201A2 (en) * | 2001-08-28 | 2003-03-13 | Eli Lilly And Company | Pre-mixes of glp-1 and basal insulin |
| US7196059B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-03-27 | Biocon Limited | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US7030082B2 (en) * | 2001-09-07 | 2006-04-18 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of drug-oligomer conjugates and methods of treating disease therewith |
| US7166571B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-01-23 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US6913903B2 (en) | 2001-09-07 | 2005-07-05 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing insulin polypeptide-oligomer conjugates, and proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US6770625B2 (en) | 2001-09-07 | 2004-08-03 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of calcitonin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US7312192B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-12-25 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US20030068361A1 (en) * | 2001-10-09 | 2003-04-10 | Rimona Margalit | Liposome-encapsulated insulin formulations |
| JP2005508360A (en) * | 2001-10-19 | 2005-03-31 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | GLP-1 and insulin biphasic mixture |
| AU2002346491A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-09 | Eli Lilly And Company | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| WO2003105768A2 (en) * | 2002-06-13 | 2003-12-24 | Nobex Corporation | Methods of reducing hypoglycemic episodes in the treatment of diabetes mellitus |
| US20060258561A1 (en) * | 2003-03-13 | 2006-11-16 | Novo Nordisk A/S | Novel NPH insulin preparations |
| EP1959017A1 (en) | 2003-06-17 | 2008-08-20 | SemBioSys Genetics Inc. | Methods for the production of insulin in plants |
| US20050054818A1 (en) * | 2003-07-02 | 2005-03-10 | Brader Mark Laurence | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| WO2005012346A1 (en) * | 2003-07-25 | 2005-02-10 | Conjuchem, Inc. | Long lasting insulin derivatives and methods thereof |
| US7658721B2 (en) * | 2004-01-16 | 2010-02-09 | Biodel Inc. | Sublingual drug delivery device |
| US20080090753A1 (en) | 2004-03-12 | 2008-04-17 | Biodel, Inc. | Rapid Acting Injectable Insulin Compositions |
| US20080248999A1 (en) * | 2007-04-04 | 2008-10-09 | Biodel Inc. | Amylin formulations |
| US20080096800A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-24 | Biodel, Inc. | Rapid mucosal gel or film insulin compositions |
| US20080085298A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-10 | Biodel, Inc. | Rapid Mucosal Gel or Film Insulin Compositions |
| ES2398838T3 (en) * | 2004-03-12 | 2013-03-22 | Biodel, Inc. | Fast-acting drug delivery compositions |
| US7875700B2 (en) | 2004-07-19 | 2011-01-25 | Biocon Limited | Cation complexes of insulin compound conjugates, formulation and uses thereof |
| US7597884B2 (en) * | 2004-08-09 | 2009-10-06 | Alios Biopharma, Inc. | Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use |
| JP2008513356A (en) * | 2004-08-09 | 2008-05-01 | アリオス バイオファーマ インク． | Synthetic advanced glycosylated protease resistant polypeptide variants, oral formulations and methods using the same |
| ES2774354T3 (en) * | 2004-10-05 | 2020-07-20 | Novo Nordisk As | A pharmaceutical formulation |
| JP4874989B2 (en) | 2004-11-22 | 2012-02-15 | ノヴォ ノルディスク アー／エス | Soluble and stable insulin-containing formulation |
| US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
| US7713929B2 (en) * | 2006-04-12 | 2010-05-11 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| US8084420B2 (en) * | 2005-09-29 | 2011-12-27 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| CN100371346C (en) * | 2005-12-14 | 2008-02-27 | 浙江大学 | Artificial synthesized insulin-simulated peptide and its application |
| EP2256129B1 (en) * | 2006-02-27 | 2012-05-09 | Novo Nordisk A/S | Insulin derivatives |
| WO2007121318A2 (en) | 2006-04-12 | 2007-10-25 | Emisphere Technologies, Inc. | Formulations for delivering insulin |
| MX2008013165A (en) * | 2006-04-12 | 2009-01-29 | Biodel Inc | Rapid acting and long acting insulin combination formulations. |
| CN101062948B (en) * | 2006-04-29 | 2010-05-12 | 上海生物泰生命科学研究有限公司 | Monomer quick-effective insulin and preparation method and usage thereof |
| US20080260820A1 (en) * | 2007-04-19 | 2008-10-23 | Gilles Borrelly | Oral dosage formulations of protease-resistant polypeptides |
| MX2010003979A (en) | 2007-10-16 | 2010-06-02 | Biocon Ltd | An orally administerable solid pharmaceutical composition and a process thereof. |
| WO2009089181A1 (en) * | 2008-01-04 | 2009-07-16 | Blodel, Inc. | Insulin formulations for insulin release as a function of tissue glucose levels |
| JP2012502048A (en) | 2008-09-08 | 2012-01-26 | ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティ | Modulators of aldehyde dehydrogenase activity and methods of use thereof |
| KR20110082180A (en) | 2008-10-28 | 2011-07-18 | 더 보드 오브 트러스티스 오브 더 리랜드 스탠포드 쥬니어 유니버시티 | Modulators of aldehyde dehydrogenase and methods of use thereof |
| PE20120583A1 (en) * | 2009-01-28 | 2012-05-19 | Smartcells Inc | CONJUGATE-BASED SYSTEMS FOR CONTROLLED PHARMACOLOGICAL DELIVERY |
| EP2391217A4 (en) | 2009-01-28 | 2015-05-20 | Smartcells Inc | Synthetic conjugates and uses thereof |
| AU2010212794A1 (en) | 2009-02-12 | 2011-08-11 | Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. | Use of cardiotrophin- 1 for the treatment of metabolic diseases |
| US9060927B2 (en) * | 2009-03-03 | 2015-06-23 | Biodel Inc. | Insulin formulations for rapid uptake |
| JP2012520879A (en) | 2009-03-20 | 2012-09-10 | スマートセルズ・インコーポレイテツド | End-functionalized conjugates and uses thereof |
| HUP0900482A2 (en) * | 2009-08-03 | 2011-03-28 | Cera Med Kft | Pharmaceutical formulation for oral administration |
| AU2011282988A1 (en) | 2010-07-28 | 2013-01-31 | Smartcells, Inc. | Recombinantly expressed insulin polypeptides and uses thereof |
| KR20140015266A (en) * | 2010-11-24 | 2014-02-06 | 듀렉트 코퍼레이션 | Biodegradable drug delivery composition |
| AR085086A1 (en) | 2011-01-20 | 2013-09-11 | Zealand Pharma As | USE OF ACILATED GLUCAGON ANALOGS |
| WO2012149106A1 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Compositions and methods for increasing proliferation of adult salivary stem cells |
| EP2925345B1 (en) | 2012-12-03 | 2018-09-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method for making o-glycosylated carboxy terminal portion (ctp) peptide-based insulin and insulin analogues |
| EP2970124B1 (en) | 2013-03-14 | 2019-05-22 | The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University | Mitochondrial aldehyde dehydrogenase-2 modulators and methods of use thereof |
| BR112016007176A2 (en) | 2013-10-04 | 2018-01-23 | Merck Sharp & Dohme | conjugate, composition, uses of a conjugate and composition, and method for treating an individual having diabetes |
| WO2015088990A1 (en) | 2013-12-09 | 2015-06-18 | Durect Corporation | Pharmaceutically active agent complexes, polymer complexes, and compositions and methods involving the same |
| CN105899191B (en) * | 2014-01-09 | 2020-06-16 | 赛诺菲 | Stabilized glycerol-free pharmaceutical formulations of insulin analogues and/or insulin derivatives |
| EP3094343A4 (en) | 2014-01-13 | 2017-10-18 | Thermalin Diabetes, LLC | Rapid action insulin formulations and pharmaceutical delivery systems |
| AR099569A1 (en) | 2014-02-28 | 2016-08-03 | Novo Nordisk As | INSULIN DERIVATIVES AND THE MEDICAL USES OF THESE |
| EP3006045B3 (en) | 2014-10-07 | 2021-03-17 | Cyprumed GmbH | Pharmaceutical formulations for the oral delivery of peptide or protein drugs |
| WO2017163159A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Wockhardt Limited | Biphasic pharmaceutical composition of insulin human |
| CN111050750A (en) | 2017-08-24 | 2020-04-21 | 诺沃挪第克公司 | GLP-1 compositions and uses thereof |
| US11110063B2 (en) | 2017-08-25 | 2021-09-07 | MAIA Pharmaceuticals, Inc. | Storage stable sincalide formulations |
| EP3740212A4 (en) | 2017-12-18 | 2021-10-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Conjugate based systems for controlled insulin delivery |
| EP3727424A4 (en) | 2017-12-18 | 2021-10-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Conjugate based systems for controlled insulin delivery |
| CN110063932A (en) * | 2019-04-12 | 2019-07-30 | 浙江大学 | A kind of slow releasing composition preparation of polypeptide protein class drug and preparation method thereof |
| EP4106727A1 (en) | 2020-02-18 | 2022-12-28 | Novo Nordisk A/S | Pharmaceutical formulations |
| JP2023520049A (en) | 2020-03-31 | 2023-05-15 | プロトマー・テクノロジーズ・インコーポレイテッド | Conjugates for selective responsiveness to vicinal diols |
| PE20231948A1 (en) | 2020-11-19 | 2023-12-05 | Protomer Tech Inc | AROMATIC COMPOUNDS CONTAINING BORON AND INSULIN ANALOGUES |
| WO2023225534A1 (en) | 2022-05-18 | 2023-11-23 | Protomer Technologies Inc. | Aromatic boron-containing compounds and related insulin analogs |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2538018A (en) * | 1944-04-04 | 1951-01-16 | Nordisk Insulinlab | Crystalline product of insulin and alkaline protein and process of making it |
| US2801953A (en) * | 1952-02-28 | 1957-08-06 | Hoechst Ag | Process of preparing crystallized insulin preparations |
| US2849370A (en) * | 1953-06-04 | 1958-08-26 | Novo Terapeutisk Labortorium A | Injectable insulin preparations with protracted effect and process of producing same |
| US3060093A (en) * | 1957-07-18 | 1962-10-23 | Nordisk Insulinlab | Slowly acting insulin preparation in crystalline form and method of preparation |
| US3868358A (en) * | 1971-04-30 | 1975-02-25 | Lilly Co Eli | Protamine-insulin product |
| DE3326473A1 (en) * | 1983-07-22 | 1985-01-31 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | PHARMACEUTICAL AGENT FOR TREATING THE DIABETES MELLITUS |
| DE3327709A1 (en) * | 1983-07-29 | 1985-02-07 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | INSULIN DERIVATIVE CRYSTAL SUSPENSIONS, METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF |
| DK119785D0 (en) * | 1985-03-15 | 1985-03-15 | Nordisk Gentofte | INSULIN PREPARATION |
| PH25772A (en) * | 1985-08-30 | 1991-10-18 | Novo Industri As | Insulin analogues, process for their preparation |
| IE62879B1 (en) * | 1987-02-25 | 1995-03-08 | Novo Nordisk As | Novel insulin derivatives |
| DE3717370A1 (en) * | 1987-05-22 | 1988-12-01 | Hoechst Ag | MIXED CRYSTALS FROM INSULIN AND INSULINE DERIVATIVES, METHOD FOR THE PRODUCTION OF THESE MIXED CRYSTALS, PHARMACEUTICAL AGENTS CONTAINING THESE MIXED CRYSTALS AND THEIR USE FOR TREATING DIABETES MELLITUS |
| EP0425482B1 (en) * | 1988-07-20 | 1993-08-18 | Novo Nordisk A/S | Human insulin analogs and preparations containing them |
| KR910700262A (en) * | 1988-12-23 | 1991-03-14 | 안네 제케르 | Human insulin analogues |
| PT93057B (en) * | 1989-02-09 | 1995-12-29 | Lilly Co Eli | PROCESS FOR THE PREPARATION OF INSULIN ANALOGS |
| US5514646A (en) * | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
| DK72793D0 (en) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | NEW PRODUCT |
| WO1995000550A1 (en) * | 1993-06-21 | 1995-01-05 | Novo Nordisk A/S | Aspb28 insulin crystals |
| US5474978A (en) * | 1994-06-16 | 1995-12-12 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
| US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
-
1994
- 1994-06-16 US US08/260,633 patent/US5461031A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-24 TW TW083105766A patent/TW347334B/en not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-01 US US08/458,150 patent/US5650486A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-01 US US08/458,151 patent/US5747642A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-12 CA CA002151564A patent/CA2151564C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-13 HU HU9501717A patent/HU218943B/en unknown
- 1995-06-13 YU YU39795A patent/YU39795A/en unknown
- 1995-06-14 CH CH02083/99A patent/CH693019A5/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CH CH01764/95A patent/CH689934A5/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 FR FR9507095A patent/FR2721215B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 CN CNB95106567XA patent/CN1145641C/en not_active Ceased
- 1995-06-14 MY MYPI95001592A patent/MY116831A/en unknown
- 1995-06-14 IT IT95MI001277A patent/IT1276722B1/en active IP Right Grant
- 1995-06-14 NL NL1000565A patent/NL1000565C2/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 NO NO19952356A patent/NO320808B1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 LU LU88627A patent/LU88627A1/en unknown
- 1995-06-14 DK DK199500676A patent/DK176213B1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 UA UA95062796A patent/UA34468C2/en unknown
- 1995-06-14 RO RO95-01141A patent/RO115124B1/en unknown
- 1995-06-14 IE IE950435A patent/IE68852B1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 KR KR1019950015781A patent/KR100386038B1/en active IP Right Grant
- 1995-06-14 SE SE9502168A patent/SE509295C2/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CO CO95026236A patent/CO4410204A1/en unknown
- 1995-06-14 GR GR950100228A patent/GR1002494B/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 NZ NZ272360A patent/NZ272360A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 DE DE19521753A patent/DE19521753B4/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 ZA ZA954941A patent/ZA954941B/en unknown
- 1995-06-14 JP JP14729695A patent/JP3812962B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 BR BR9502797A patent/BR9502797A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 ES ES09501196A patent/ES2091728B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-14 PT PT101723A patent/PT101723B/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 AT AT0101795A patent/AT408611B/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CZ CZ19951543A patent/CZ294556B6/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 BE BE9500527A patent/BE1009409A5/en active
- 1995-06-14 PE PE1995271265A patent/PE34496A1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 PL PL95309100A patent/PL183284B1/en unknown
- 1995-06-14 SI SI9500199A patent/SI9500199A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 FI FI952932A patent/FI118208B/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 IL IL11415395A patent/IL114153A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 GB GB9512105A patent/GB2290294B/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-11-29 NL NL1004643A patent/NL1004643C2/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA34468C2 (en) | Complex of insulin analogue and protamine, pharmaceutical composition for parenteral administration (variants), method for its preparing (variants), method for preparing crystals of lys b28 pro b29-human insulin and protamine complex, method for preparing crystals | |
| US5547929A (en) | Insulin analog formulations | |
| CA2295140C (en) | Stable insulin formulations | |
| EP0705275B1 (en) | Asp-b28 insulin crystals | |
| US5834422A (en) | AspB28 insulin compositions | |
| CZ305297A3 (en) | Parameteral pharmaceutical preparation based on monomer analog of insulin | |
| US20050176621A1 (en) | Crystalline compositions for controlling blood glucose | |
| RO113529B1 (en) | Process for preparing human insulin-like crystals | |
| CA2258099A1 (en) | Insulin preparations containing carbohydrates | |
| US2538018A (en) | Crystalline product of insulin and alkaline protein and process of making it | |
| EP1283051A1 (en) | Stable insulin formulations | |
| RU2154494C2 (en) | Complex of insulin analog and protamine, method of preparing, pharmaceutical composition and method of diabetic treatment | |
| AU711428B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
| AU738101B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
| GB2327424A (en) | Insulin analog protamine complexes | |
| Balschmidt et al. | Asp B28 insulin compositions |