UA24468U - Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae - Google Patents
Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae Download PDFInfo
- Publication number
- UA24468U UA24468U UA20040604661U UA20040604661U UA24468U UA 24468 U UA24468 U UA 24468U UA 20040604661 U UA20040604661 U UA 20040604661U UA 20040604661 U UA20040604661 U UA 20040604661U UA 24468 U UA24468 U UA 24468U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- pigments
- extract
- extraction
- lipid
- lipids
- Prior art date
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 46
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000000049 pigment Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 20
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000006004 Quartz sand Substances 0.000 claims abstract description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 3
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 3
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 abstract 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 2
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 2
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 2
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 229910052573 porcelain Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 description 1
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000032798 delamination Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000009364 mariculture Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 229940082787 spirulina Drugs 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 210000001768 subcellular fraction Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Передбачувана корисна модель відноситься до прикладної гідробіології й альгології і може бути використана 2 для оцінки ролі ліпідів у метаболізмі мікроводоростей у природному середовищі і при культивуванні.The proposed useful model relates to applied hydrobiology and algology and can be used 2 to evaluate the role of lipids in the metabolism of microalgae in the natural environment and during cultivation.
Одним з найважливіших компонентів живої органічної речовини є ліпіди, які в значній мірі визначають структурно-функціональні особливості й енергетичний потенціал, як клітини, так і організму в цілому. У складі ліпідів можна виділити велику групу речовин - поліненасичені жирні кислоти, що синтезуються тільки мікроводоростями і є вкрай необхідними для людини і тварин. Винятково важлива біологічна роль синтезованих 710 мікроводоростями поліненасичених жирних кислот сприяє активному розвитку у світі нових біотехнологій культивування цих організмів з метою одержання і використання в промислових масштабах високоцінних медичних препаратів, продуктів харчування, живих кормів для марикультури і т.д. У цьому зв'язку, вивчення ліпідів (загальних ліпідів, фракційного і жирнокислотного складу) мікроводоростей представляє значний практичний інтерес. 12 Відомий спосіб екстракції ліпідів із тканин тварин і людини (печінки, серця, легень, нирок, суспензії субклітинних фракцій і еритроцитів плазми крові) |див. Верболович В.П., Подгорньій Ю.К., Теплова Л.Л., КуркаеєевOne of the most important components of living organic matter are lipids, which largely determine the structural and functional features and energy potential of both cells and the organism as a whole. In the composition of lipids, a large group of substances can be distinguished - polyunsaturated fatty acids, which are synthesized only by microalgae and are absolutely necessary for humans and animals. The exceptionally important biological role of the 710 polyunsaturated fatty acids synthesized by microalgae contributes to the active development of new biotechnologies of cultivation of these organisms in the world for the purpose of obtaining and using on an industrial scale high-value medical preparations, food products, live feed for mariculture, etc. In this regard, the study of lipids (total lipids, fractional and fatty acid composition) of microalgae is of considerable practical interest. 12 A known method of lipid extraction from animal and human tissues (liver, heart, lungs, kidneys, suspension of subcellular fractions and erythrocytes of blood plasma) | see Verbolovych V.P., Podgornyi Y.K., Teplova L.L., Kurkaeeev
Р.А. Зкстракция липидов для количественной оценки свободнорадикального окисления. Лабораторное дело. -1989. - 12. - 0. 57 - 59) Для виділення ліпідів бг сирої тканини гомогенізують Зхв. з 5Омл суміші гексан:'изопропиловий спирт (2:1) при 30009. Кількість необхідної для екстракції суміші підбирається в співвідношенні тканина:екстрагуюча суміш (г/мл) 1:10. Надосадову рідину зливають у ділильну лійку, додаютьR.A. Extraction of lipids for quantitative assessment of free radical oxidation. Laboratory work. -1989. - 12. - 0. 57 - 59) To isolate lipids, raw tissue is homogenized by Zkhv. with 5 ml of a mixture of hexane: isopropyl alcohol (2:1) at 30009. The amount of the mixture required for extraction is selected in the ratio tissue: extracting mixture (g/ml) 1:10. The supernatant liquid is poured into a separatory funnel and added
ЗОмл 0,2М Ма»5О, і струшують протягом бОс. Після поділу фаз відбирають гексановий шар і проводять визначення вмісту ліпідів і т.д. Недоліком даного способу є його неадаптованість до роботи з одноклітинними водоростями, присутність в отриманому екстракті ліпідів пігментів, що стають на заваді при визначенні вмісту ліпідів, а також трудомісткість способу.ZOml of 0.2M Ma»5O, and shake for 10 minutes. After phase separation, the hexane layer is taken and the lipid content, etc., is determined. The disadvantage of this method is its lack of adaptability to work with unicellular algae, the presence of pigments in the obtained lipid extract that interfere with the determination of lipid content, as well as the time-consuming nature of the method.
Найбільш близьким за технічною суттю є спосіб екстракції ліпідів з мікроводоростей класу тThe closest in terms of technical essence is the method of lipid extraction from microalgae of the class t
Еизвіїдтаюрнусеае (МоїЇКтап 9.К., Вгомуп М.К., Оипвіап О.А., Уейтеу 5.МУ. Тпе Біоспетіса! сотрозйоп ої тагіпе тісгоаідае їот іїйе сіазз Еизвідтаюрпусеае // 9). РпусоІї. - 1993. - 29. - Р. 69-78). У способі 10-20мг висушених у сублімаційній установці мікроводоростей поміщають у пробірки обсягом 5мл. Додають у пробірку 0,2мл диметилсульфоксида і оброблюють ультразвуком бхв. Після цього, у пробірку доливають 2мл суміші со хлороформ:метанол:вода в співвідношенні 2:4:1. Вміст пробірки перемішують і центрифугують. Супернатант «о переносять в іншу пробірку, осад повторно екстрагують 2мл суміші хлороформ:метанол:вода в співвідношенні 2:4:1 до знебарвлення екстракту. Усі зібрані в одну пробірку ектсракти розділлють на шар хлороформу і З водно-метанольний шар шляхом додавання 5мл води і мл хлороформу. Шар хлороформу промивають бмл «І води, концентрують під вакуумом і далі визначають вміст ліпідів. 325 Відомому способу властивий ряд недоліків: с - не повний вихід ліпідів, тому що застосовувана екстрагуюча суміш (хлороформ:метанол:вода) не дає повної екстракції ліпідів різної природи з одноклітинних водоростей; - відсутність можливості звільнення від домішок неліпідної природи при поділі ліпідної і неліпідної фракцій; « - недостатня повнота очищення ліпідного екстракту (мутний ліпідний екстракт, окремі краплі невідомої З 50 природи, які важко збирати, по всьому обсязі пробірки і т.д.) с - метанол і хлороформ є надзвичайно токсичними речовинами.Eizvidtayurnuseae (MoiYiktap 9.K., Vgomup M.K., Oipviap O.A., Uiteu 5.MU. Tpe Biospetisa! sotrozyop oi tagipe tisgoaidae iot iiiye siazz Eizvidtayurpuseae // 9). RpusoIi - 1993. - 29. - R. 69-78). In the method, 10-20 mg of sublimation-dried microalgae are placed in test tubes with a volume of 5 ml. Add 0.2 ml of dimethylsulfoxide to the test tube and treat with ultrasound. After that, 2 ml of a mixture of chloroform:methanol:water in a ratio of 2:4:1 is added to the test tube. The contents of the tube are mixed and centrifuged. The supernatant is transferred to another test tube, the sediment is re-extracted with 2 ml of a mixture of chloroform:methanol:water in a ratio of 2:4:1 until the extract becomes colorless. All extracts collected in one test tube are separated into a chloroform layer and a water-methanol layer by adding 5 ml of water and ml of chloroform. The chloroform layer is washed with 1 ml of water, concentrated under vacuum, and then the lipid content is determined. 325 The known method is characterized by a number of disadvantages: c - not a complete yield of lipids, because the used extracting mixture (chloroform:methanol:water) does not provide a complete extraction of lipids of different nature from unicellular algae; - lack of possibility of getting rid of impurities of a non-lipid nature during the separation of lipid and non-lipid fractions; « - insufficient purification of the lipid extract (turbid lipid extract, individual drops of unknown nature, which are difficult to collect, throughout the entire volume of the test tube, etc.) c - methanol and chloroform are extremely toxic substances.
Із» В основу корисної моделі "Спосіб екстракції ліпідів і пігментів з одноклітинних водоростей поставлена задача шляхом розробки нової технології, забезпечити дослідників простим, технологічним і надійним способом максимально повної екстракції ліпідів і пігментів з одноклітинних водоростей.From" The basis of the useful model "The method of extraction of lipids and pigments from single-celled algae is the task, through the development of a new technology, to provide researchers with a simple, technological and reliable method for the maximum complete extraction of lipids and pigments from single-celled algae.
Поставлена задача досягається наступним шляхом. У Способі екстракції ліпідів і пігментів з одноклітинних о водоростей, що включає екстракцію ліпідів і пігментів з мікроводоростей з використанням як екстрагуюча суміш «» розчинників гексан:ізопропіловий спирт (2:1). Сухі одноклітинні водорості розтирають із кварцовим піском, з'єднують з сумішшю для екстракції в співвідношенні 1:1 (мг/мл). Отриманий екстракт, фільтрують, збирають у шк мірну пробірку, куди, для деструкції пігментів, додають концентровану соляну кислоту (НС) до досягненняThe set task is achieved in the following way. In the method of extraction of lipids and pigments from unicellular algae, which includes the extraction of lipids and pigments from microalgae using hexane:isopropyl alcohol (2:1) as an extracting mixture of solvents. Dry unicellular algae are ground with quartz sand, combined with the mixture for extraction in a ratio of 1:1 (mg/ml). The obtained extract is filtered, collected in a measuring tube, where, for the destruction of pigments, concentrated hydrochloric acid (HC) is added until reaching
Ге»! 20 прозорості і збліднення екстракту. Для кращого розшарування фаз додають 1-3 мл 595 Масі.Gee! 20 transparency and paleness of the extract. For better phase separation, add 1-3 ml of 595 Mass.
Пропонований спосіб реалізується таким чином. со Мікроводорості розтирають у порцеляновій ступці з кварцовим піском і додають екстрагуючу суміш гексан:ізопропіловий спирт (2:1) при співвідношенні суха маса мікроводоростей:екстрагуюча суміш 1:1 (мг/мл).The proposed method is implemented as follows. Co. Microalgae are ground in a porcelain mortar with quartz sand and an extracting mixture of hexane: isopropyl alcohol (2:1) is added at a ratio of dry weight of microalgae: extracting mixture of 1:1 (mg/ml).
Екстракцію ведуть поступово, доливаючи по 1-1,5мл суміші для екстракції. Кожну порцію переносять у мірну 29 пробірку, відокремлюючи екстракт ліпідів і пігментів від осаду фільтруванням. Після повного знебарвлення с останньої порції екстракту, процес екстракції ліпідів і пігментів вважається закінченим. Для руйнування пігментів у сумарний ліпідний екстракт додають концентровану соляну кислоту (НС) поки екстракт не набуде солом'яного кольору. Після деструкції пігментів доливають їмл 595 Масі, а після розшарування видаляють нижню фазу екстракту, що містить неліпідні компонентиі. Вимірюють отриманий обсяг ліпідного екстракту. бо Приклад. бмг сухої маси одноклітинної мікроводорості спирулина Зрігиїїпа ріагепвзіз розтирали в порцеляновій ступці з кварцовим піском і додавали бмл екстрагуючої суміші гексан:ізопропіловий спирт (2:11). Екстракцію вели поступово, доливаючи по 1,5мл екстрагенту. Кожну порцію переносили в мірну пробірку, відокремлюючи екстракт ліпідів і пігментів фільтруванням. Після повного знебарвлення останньої порції екстракту, екстракція бо ліпідів і пігментів закінчена. Для подальшого визначення вмісту ліпідів руйнували пігменти. В сумарний ліпідний екстракт додавали З краплі концентрованої соляної кислоти до набуття екстрактом світло-солом'яного кольору. Після деструкції пігментів для розшарування доливали їмл 595 Масі і видаляли неліпідну фазу.The extraction is carried out gradually, adding 1-1.5 ml of the mixture for extraction. Each portion is transferred to a measuring tube 29, separating the extract of lipids and pigments from the sediment by filtration. After complete decolorization of the last portion of the extract, the process of extraction of lipids and pigments is considered complete. Concentrated hydrochloric acid (HC) is added to the total lipid extract to destroy the pigments until the extract acquires a straw color. After the destruction of pigments, 595 ml of Mass is added to them, and after stratification, the lower phase of the extract containing non-lipid components is removed. The obtained volume of lipid extract is measured. because Example bmg of dry weight of single-celled microalgae Spirulina Zrigiipa riagepvzyz was ground in a porcelain mortar with quartz sand and bml of the extracting mixture of hexane:isopropyl alcohol (2:11) was added. The extraction was carried out gradually, adding 1.5 ml of the extractant. Each portion was transferred to a measuring tube, separating the extract of lipids and pigments by filtration. After complete decolorization of the last portion of the extract, the extraction of lipids and pigments is finished. To further determine the lipid content, the pigments were destroyed. A drop of concentrated hydrochloric acid was added to the total lipid extract until the extract acquired a light straw color. After the destruction of pigments for delamination, 595 ml of Mass was added to them and the non-lipid phase was removed.
Вимірювали отриманий обсяг ліпідного екстракту - він склав 4мл.The obtained volume of lipid extract was measured - it was 4 ml.
Після витягу ліпідів і пігментів з мікроводоростей, можна досліджувати якісний і кількісний склад їх різними методами. Запропонований спосіб має ряд переваг: - запропонований новий ефективний спосіб повної екстракції ліпідів і пігментів з мікроводоростей; - забезпечує екстракцію 97-9895 ліпідів; - виключає ряд трудомістких операцій (поділ у ділильній лійці, центрифугування), простий, доступний і 70 технологічний; - використовувані для екстракції розчинники менш токсичні, ніж хлороформ і метанол.After the extraction of lipids and pigments from microalgae, it is possible to study their qualitative and quantitative composition by various methods. The proposed method has a number of advantages: - a new effective method of complete extraction of lipids and pigments from microalgae is proposed; - provides extraction of 97-9895 lipids; - excludes a number of time-consuming operations (separation in a separatory funnel, centrifugation), simple, affordable and 70 technological; - solvents used for extraction are less toxic than chloroform and methanol.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20040604661U UA24468U (en) | 2004-06-14 | 2004-06-14 | Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20040604661U UA24468U (en) | 2004-06-14 | 2004-06-14 | Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA24468U true UA24468U (en) | 2007-07-10 |
Family
ID=38469333
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA20040604661U UA24468U (en) | 2004-06-14 | 2004-06-14 | Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA24468U (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014027871A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Uab Unera | Method and system of algal cells disruption and isolation of bioproducts therefrom |
| MD4360C1 (en) * | 2013-09-23 | 2016-02-29 | Государственный Университет Молд0 | Process for producing myxoxanthophyll from Spirulina platensis cyanobacterium biomass |
-
2004
- 2004-06-14 UA UA20040604661U patent/UA24468U/en unknown
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014027871A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Uab Unera | Method and system of algal cells disruption and isolation of bioproducts therefrom |
| LT6018B (en) | 2012-08-13 | 2014-04-25 | Uab "Unera" | The method and system of algae cell disturbance and isolation of bioproduts |
| MD4360C1 (en) * | 2013-09-23 | 2016-02-29 | Государственный Университет Молд0 | Process for producing myxoxanthophyll from Spirulina platensis cyanobacterium biomass |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100516203C (en) | In vitro cell culturing method | |
| Pelka et al. | A new screening test for toxicity testing of dental materials | |
| JP4201349B2 (en) | Microbial preparations containing omega-3-fatty acids for use as preventive or therapeutic agents for animal parasitic diseases | |
| US9458429B2 (en) | Mesenchymal stem cell attractant and method for attracting mesenchymal stem cell | |
| CN112315984B (en) | Application of marine-derived phospholipid in promoting angiogenesis | |
| CN112142867B (en) | Extraction method and application of cistanche polysaccharide | |
| CN101731284A (en) | Method for extracting alga-inhibiting active ingredients from Artemisia annua L. and alga-inhibiting method | |
| CN104745526B (en) | A kind of zebra fish primary embryonic cells vitro differentiation is the new method of cardiac muscle cell | |
| JP2023525526A (en) | Method for producing plant-derived exosomes | |
| CN114891130A (en) | Preparation and application of two polygonum multiflorum anti-inflammatory polysaccharides | |
| RU2543360C1 (en) | Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial | |
| UA24468U (en) | Method for extraction of lipids and pigments from unicellular algae | |
| CN106221887B (en) | A kind of method of the total rouge of high efficiency extraction ocean ballstone frustule | |
| CN112481133A (en) | Culture medium for separating thraustochytrid and purification method thereof | |
| CN114577763B (en) | Kunxian capsule quality control method based on biological effect and application | |
| EP3288644B1 (en) | Cosmetic use of extracts derived from somatic embryo enriched plant cell cultures and cosmetic compositions containing those extracts | |
| CN114561294B (en) | Screening of high-temperature-resistant and high-light-resistant tetrad algae | |
| Clarke | On securing large quantities of diatoms from the sea for chemical analysis | |
| CN115671169B (en) | A composition with sleep improving effect | |
| RU2778480C1 (en) | Method for obtaining biologically active substance from oyster crassostrea gigas | |
| Argüello | New paleoparasitological techniques | |
| UA134550U (en) | A METHOD OF OBTAINING Dense Fecal Culture of Trichuris Helminths Selected from Sheep | |
| CN116410865A (en) | Screening of high-temperature-resistant and high-light-resistant tetrad algae | |
| RU2373947C1 (en) | Method for making diagnostic allergen of plant pollen | |
| CN115887274A (en) | Extraction process and application of madecassoside with acne skin repairing effect |