RU2543360C1 - Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial - Google Patents
Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial Download PDFInfo
- Publication number
- RU2543360C1 RU2543360C1 RU2013144081/15A RU2013144081A RU2543360C1 RU 2543360 C1 RU2543360 C1 RU 2543360C1 RU 2013144081/15 A RU2013144081/15 A RU 2013144081/15A RU 2013144081 A RU2013144081 A RU 2013144081A RU 2543360 C1 RU2543360 C1 RU 2543360C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hexane
- pesticides
- biomaterial
- sample
- sulfuric acid
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к способам подготовки проб и может быть использовано в биологии, экологии, медицине для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов, а именно α-ГХЦГ, β-ГХЦГ, γ-ГХЦГ, ДДТ, ДДД, ДДЕ в различном биоматериале, содержащем липиды, - внутренних органах и тканях, крови, молоке. Кроме того, в качестве биоматериала можно использовать перья птиц.The invention relates to methods for sample preparation and can be used in biology, ecology, medicine for gas chromatographic determination of organochlorine pesticides, namely α-HCH, β-HCH, γ-HCH, DDT, DDD, DDE in various biomaterials containing lipids, internal organs and tissues, blood, milk. In addition, bird feathers can be used as biomaterial.
Известен способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови, включающий экстракцию пестицидов из крови n-гексаном, очистку от соэкстративных веществ концентрированной серной кислотой, концентрирование n-гексанового экстракта (см. патент РФ №2414711, МПК G01N 33/50, G01N 33/48, дата публикации 20.03.2011).A known method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine pesticides in the blood, including extraction of pesticides from blood with n-hexane, purification of coextractive substances with concentrated sulfuric acid, concentration of n-hexane extract (see RF patent No. 2414711, IPC G01N 33/50, G01N 33 / 48, publication date 03/20/2011).
Недостатком технического решения является ограниченная область применения из-за невозможности исследований внутренних органов и тканей.The disadvantage of the technical solution is the limited scope due to the impossibility of studies of internal organs and tissues.
В качестве ближайшего аналога принят способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в биоматериале, включающий их отбор, измельчение и последующую экстракцию пестицидов n-гексаном, после чего полученный материал очищают от соэкстративных веществ концентрированной серной кислотой, формируют концентрат n-гексанового экстракта пестицидов (см. Клисенко М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов. - М.: Колос. - 1977. - С.15, 19).As the closest analogue, the method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine pesticides in biomaterial was adopted, including their selection, grinding and subsequent extraction of pesticides with n-hexane, after which the resulting material was purified from coextractive substances with concentrated sulfuric acid, an n-hexane pesticides extract concentrate was formed (see Klisenko MA Methods for the determination of micro quantities of pesticides. - M .: Kolos. - 1977. - P.15, 19).
Недостатком ближайшего аналога является низкая эффективность и точность исследования из-за неполной экстракции n-гексаном связанных с липидами пестицидов, а также длительности анализа из-за многократности этапов экстракции и очистки экстракта серной кислотой.The disadvantage of the closest analogue is the low efficiency and accuracy of the study due to incomplete extraction of pesticides associated with lipids with n-hexane, as well as the duration of the analysis due to the multiple stages of extraction and purification of the extract with sulfuric acid.
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка эффективного способа подготовки пробы для газохроматографического определения пестицидов в различном биоматериале.The problem to which the invention is directed is the development of an effective method of sample preparation for gas chromatographic determination of pesticides in various biomaterials.
Технический результат, достигаемый при решении поставленной задачи, выражается в повышении эффективности и точности исследований за счет проведения более полной экстракции n-гексаном связанных с липидами пестицидов и уменьшения количества этапов экстракции и очистки от соэкстративных веществ концентрированной серной кислотой.The technical result achieved in solving the problem is expressed in increasing the efficiency and accuracy of studies by conducting more complete extraction of pesticides associated with lipids with n-hexane and reducing the number of extraction and purification steps from coextractive substances with concentrated sulfuric acid.
Поставленная задача решается тем, что в способе подготовки пробы для газохроматографического определения пестицидов в биоматериале, включающем его отбор, измельчение и последующую экстракцию пестицидов n-гексаном, после чего полученный материал очищают от соэкстративных веществ концентрированной серной кислотой, формируют концентрат n-гексанового экстракта пестицидов, используют измельченный биоматериал в представительном объеме, содержащий липиды, который подвергают как минимум двукратной экстракции липидов путем обработки биоматериала n-гексаном с объединением фильтратов, полученных на различных этапах экстракции, причем в первый раз экстрагируют не менее 20 минут, а в последующие - не менее 10 минут, далее объединенный фильтрат выпаривают при температуре 69-70°, образовавшийся жир взвешивают и растворяют в n-гексане, после чего названный материал заливают концентрированной серной кислотой до разрушения соэкстративных веществ и отбирают гексансодержащий слой, далее материал гексансодержащего слоя отбирают и отмывают от концентрированной серной кислоты до достижения pH=6, затем выпаривают n-гексан при температуре меньшей температуры его кипения, после чего формируют пробу, растворяя полученный материал в фиксированном объеме n-гексана, предпочтительно 0,5-1 мл.The problem is solved in that in the method of preparing a sample for gas chromatographic determination of pesticides in a biomaterial, including sampling, grinding and subsequent extraction of pesticides with n-hexane, after which the material obtained is purified from coextractive substances with concentrated sulfuric acid, an n-hexane extract concentrate of pesticides is formed, use crushed biomaterial in a representative volume containing lipids, which is subjected to at least twice the extraction of lipids by processing biomes terial with n-hexane with a combination of filtrates obtained at various stages of extraction, the first time being extracted for at least 20 minutes and the next for at least 10 minutes, then the combined filtrate is evaporated at a temperature of 69-70 °, the resulting fat is weighed and dissolved in n-hexane, after which the aforementioned material is poured with concentrated sulfuric acid until the coextractive substances are destroyed and a hexane-containing layer is selected, then the material of the hexane-containing layer is selected and washed from concentrated sulfuric acid until Nia pH = 6, then n-hexane was evaporated at a temperature below its boiling point, then the sample is formed by dissolving the resulting material in a fixed volume of n-hexane, preferably 0.5-1 ml.
Кроме того, в качестве биоматериала используют внутренние органы, преимущественно печень, массой не менее 10 г, и/или ткани, например мышцы, массой не менее 10 г, и/или кровь, молоко объемом не менее 20 мл. Кроме того, в качестве биоматериала можно использовать перья птиц массой не менее 5 г.In addition, internal organs, mainly the liver, weighing at least 10 g, and / or tissues, for example muscles, weighing at least 10 g, and / or blood, milk, at least 20 ml in volume, are used as biomaterial. In addition, bird feathers weighing at least 5 g can be used as biomaterial.
Сопоставительный анализ существенных признаков предлагаемого технического решения с существенными признаками аналогов свидетельствует о его соответствии критерию «новизна».A comparative analysis of the essential features of the proposed technical solution with the essential features of analogues indicates its compliance with the criterion of "novelty."
При этом отличительные признаки формулы изобретения решают следующие функциональные задачи.In this case, the distinguishing features of the claims solve the following functional tasks.
Признак «используют измельченный биоматериал в представительном объеме, содержащий липиды» обеспечивает возможность исследования и позволяет расширить область применения благодаря использованию в качестве биоматериала не только крови, но и органов, тканей. Кроме того, в качестве биоматериала можно использовать перья птиц.The sign “use crushed biomaterial in a representative volume containing lipids” provides the opportunity for research and allows you to expand the scope due to the use of not only blood, but also organs and tissues as biomaterial. In addition, bird feathers can be used as biomaterial.
Признак «биоматериал… подвергают как минимум двукратной экстракции липидов путем обработки биоматериала n-гексаном с объединением фильтратов, полученных на различных этапах экстракции, причем в первый раз экстрагируют не менее 20 минут, а в последующие не менее 10 минут» обеспечивает возможность выделения липидов из измельченного биоматериала.The sign “biomaterial ... is subjected to at least two-fold extraction of lipids by treating the biomaterial with n-hexane and combining the filtrates obtained at various stages of extraction, the extract being extracted for at least 20 minutes for the first time and at least 10 minutes for the next” allows lipids to be isolated from the crushed biomaterial.
Признак «объединенный фильтрат выпаривают при температуре 69-70°» позволяет удалить лишний n-гексан при сохранении липидов.The sign "the combined filtrate is evaporated at a temperature of 69-70 °" allows you to remove excess n-hexane while maintaining lipids.
Признак «образовавшийся жир взвешивают и растворяют в n-гексане» позволяет получить навеску жира известного веса с липидами для последующего выделения из нее пестицидов методом газовой хроматографии.The sign "the resulting fat is weighed and dissolved in n-hexane" allows you to get a sample of fat of known weight with lipids for subsequent isolation of pesticides from it by gas chromatography.
Признак «материал заливают концентрированной серной кислотой до разрушения соэкстративных веществ и отбирают гексансодержащий слой» обеспечивает возможность эффективного удаления липидов при сохранении в материале пестицидов.The sign “the material is poured with concentrated sulfuric acid until the coextractive substances are destroyed and the hexane-containing layer is selected” provides the ability to effectively remove lipids while preserving pesticides in the material.
Признак «материал гексансодержащего слоя отбирают и отмывают от концентрированной серной кислоты до достижения pH=6» позволяет удалить остатки концентрированной серной кислоты при достижении оптимального уровня кислотности и обеспечить более надежную и длительную эксплуатацию оборудования, а именно хроматографической колонки.The sign “the material of the hexane-containing layer is selected and washed from concentrated sulfuric acid to achieve pH = 6” allows you to remove residual concentrated sulfuric acid when the optimum acidity level is reached and to ensure more reliable and long-term operation of the equipment, namely the chromatographic column.
Признак «выпаривают n-гексан при температуре меньшей температуры его кипения» позволяет удалить n-гексан при сохранении материала, содержащего пестициды.The sign “n-hexane is evaporated at a temperature lower than its boiling point” allows you to remove n-hexane while maintaining the material containing pesticides.
Признак «формируют пробу, растворяя полученный материал в фиксированном объеме n-гексана, предпочтительно 0,5-1 мл» позволяет легко контролировать объем пробы для анализа.The sign “form a sample by dissolving the obtained material in a fixed volume of n-hexane, preferably 0.5-1 ml” makes it easy to control the sample volume for analysis.
На фиг.1 изображена хроматограмма смеси стандартных растворов пестицидов.Figure 1 shows a chromatogram of a mixture of standard solutions of pesticides.
Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.
Предварительно производят отбор биоматериала - внутренних органов, преимущественно печени, массой не менее 10 г, и/или ткани, например мышц, массой не менее 10 г, и/или крови, молока объемом не менее 20 мл. Кроме того, в качестве биоматериала можно использовать перья птиц массой не менее 5 г.Preliminary selection is made of biomaterial - internal organs, mainly the liver, weighing at least 10 g, and / or tissue, for example muscles, weighing at least 10 g, and / or blood, milk with a volume of at least 20 ml. In addition, bird feathers weighing at least 5 g can be used as biomaterial.
Отобранный биоматериал измельчают путем растирания в фарфоровой ступке с безводным сульфатом натрия (Na2SO4 безв.) для удаления влаги. После этого подготавливают первую порцию, для чего измельченный биоматериал переносят в коническую колбу, заливают 40-50 мл n-гексана и экстрагируют не менее 20 мин. После этого жидкую часть фильтруют в грушевидную колбу, предварительно высушенную и взвешенную на аналитических весах до четвертого знака. Далее готовят вторую порцию, для этого измельченный биоматериал в отдельной конической колбе заливают 20 мл n-гексана и экстрагируют в течение 10 мин, после чего полученную жидкую часть соединяют с первой порцией фильтрата в грушевидной колбе.The selected biomaterial is ground by grinding in a porcelain mortar with anhydrous sodium sulfate (Na 2 SO 4 anhydrous) to remove moisture. After that, the first portion is prepared, for which the crushed biomaterial is transferred to a conical flask, 40-50 ml of n-hexane is poured and extracted for at least 20 minutes. After that, the liquid part is filtered into a pear-shaped flask, previously dried and weighed on an analytical balance to the fourth digit. Then a second portion is prepared, for this, the crushed biomaterial in a separate conical flask is filled with 20 ml of n-hexane and extracted for 10 minutes, after which the resulting liquid portion is combined with the first portion of the filtrate in a pear-shaped flask.
Затем объединенный фильтрат выпаривают на водяной бане с температурой 69-70°C (температура кипения n-гексана - 68,742°C), отбирают навеску образовавшегося жира и определяют ее вес.Then the combined filtrate is evaporated in a water bath with a temperature of 69-70 ° C (the boiling point of n-hexane is 68.742 ° C), a sample of the resulting fat is taken and its weight is determined.
После взвешивания жир в грушевидной колбе растворяют в n-гексане (25 мл), далее полученный материал заливают концентрированной серной кислотой (5-7 мл), осторожно встряхивают и оставляют на несколько часов (2-4 часа). После разрушения соэкстративных веществ, когда смесь расслоилась, отбирают гексансодержащий слой стеклянным шприцом в делительную воронку объемом 250 мл.After weighing, the fat in a pear-shaped flask is dissolved in n-hexane (25 ml), then the resulting material is poured with concentrated sulfuric acid (5-7 ml), gently shaken and left for several hours (2-4 hours). After the destruction of coextractive substances, when the mixture exfoliated, the hexane-containing layer was removed with a glass syringe into a 250 ml separatory funnel.
Далее гексансодержащий слой в делительной воронке очищают концентрированной серной кислотой до получения бесцветного слоя серной кислоты. После этого гексансодержащий слой отмывают дистиллированной водой до нейтральной реакции pH=6 по универсальному бумажному индикатору. Затем отмытый гексансодержащий слой сушат, фильтруя через сернокислый натрий в остродонную колбу с одним горлом со шлифом (объем 25-100 мл). Далее из остродонной колбы выпаривают n-гексан при температуре меньшей температуры его кипения, например на роторном испарителе, или оставляют на несколько дней до полного испарения n-гексана. После этого формируют пробу, растворяя полученный материал в фиксированном объеме n-гексана, предпочтительно 0,5-1 мл, и проводят газохроматографическое определение содержания хлорорганических пестицидов на оборудовании известной конструкции при стандартных режимах. Если пики на хроматограмме слишком большие, то к материалу пробы добавляют некоторое контролируемое количество n-гексана.Next, the hexane-containing layer in the separatory funnel is purified with concentrated sulfuric acid to obtain a colorless layer of sulfuric acid. After that, the hexane-containing layer is washed with distilled water until neutral pH = 6 according to a universal paper indicator. Then, the washed hexane-containing layer is dried, filtering through sodium sulfate into a sharpened single-neck flask with a thin section (volume 25-100 ml). Next, n-hexane is evaporated from a sharp-bottomed flask at a temperature lower than its boiling point, for example on a rotary evaporator, or left for several days until the n-hexane is completely evaporated. After that, a sample is formed by dissolving the obtained material in a fixed volume of n-hexane, preferably 0.5-1 ml, and gas chromatographic determination of the content of organochlorine pesticides is carried out on equipment of known design under standard conditions. If the peaks in the chromatogram are too large, then a certain controlled amount of n-hexane is added to the sample material.
Claims (2)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013144081/15A RU2543360C1 (en) | 2013-10-01 | 2013-10-01 | Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013144081/15A RU2543360C1 (en) | 2013-10-01 | 2013-10-01 | Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2543360C1 true RU2543360C1 (en) | 2015-02-27 |
Family
ID=53290088
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013144081/15A RU2543360C1 (en) | 2013-10-01 | 2013-10-01 | Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2543360C1 (en) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2713661C1 (en) * | 2019-11-06 | 2020-02-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas-chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2727589C1 (en) * | 2019-11-06 | 2020-07-22 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2741368C1 (en) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2741367C1 (en) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2414711C2 (en) * | 2008-12-26 | 2011-03-20 | Государственное учреждение здравоохранения "Центр функциональной хирургической гастроэнтерологии" департамента здравоохранения Краснодарского края | Method for preparing blood sample for gas chromatography of organochlorine pesticides |
-
2013
- 2013-10-01 RU RU2013144081/15A patent/RU2543360C1/en active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2414711C2 (en) * | 2008-12-26 | 2011-03-20 | Государственное учреждение здравоохранения "Центр функциональной хирургической гастроэнтерологии" департамента здравоохранения Краснодарского края | Method for preparing blood sample for gas chromatography of organochlorine pesticides |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
C1. . * |
Minelli E.V. Quantitive method for the determination of organochlorine pesticides in serum / Anal. Toxicol. - 1996. - 1. - P.23-26. Химическая энциклопедия, том 2, под. ред. И.Л. Кнунянц, "Советская Энциклопедия", 1990 * |
Клисенко М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов. - М.: Колос. - 1977. - С.15, 19. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2713661C1 (en) * | 2019-11-06 | 2020-02-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas-chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2727589C1 (en) * | 2019-11-06 | 2020-07-22 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2741368C1 (en) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
RU2741367C1 (en) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Method of sample preparation for gas chromatographic determination of organochlorine compounds in biomaterial |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Tsygankov et al. | Sample preparation method for the determination of organochlorine pesticides in aquatic organisms by gas chromatography | |
Ribeiro et al. | Acaricidal properties of the essential oil and precocene II obtained from Calea serrata (Asteraceae) on the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) | |
RU2482863C1 (en) | Method for preparing dry extract of herbal raw material possessing biological activity | |
RU2543360C1 (en) | Method of preparing sample for gas-chromatographic identification of pesticides in biomaterial | |
Saqib et al. | Rationalizing ethnopharmacological uses of Alternanthera sessilis: A folk medicinal plant of Pakistan to manage diarrhea, asthma and hypertension | |
CN103054907B (en) | Propolis flavonoid extractive and preparation method thereof | |
Anil et al. | Anti-obesity (Pancreatic lipase inhibitory) activity of Everniastrum cirrhatum (Fr.) Hale (Parmeliaceae) | |
Ranjan et al. | Phytochemical analysis of leaves and roots of Mimosa pudica collected from Kalingavaram, Tamil Nadu | |
Baby et al. | Phytochemical Screening and Invitro Anti-Inflamatory Activity Of Ethanolic Extract Of Centella Asiatica | |
Chavada et al. | EFFECT OF FLAVANOID RICH FRACTION OF CITRUS MEDICA LINN.(RUTACEA) ON ETHYLENE GLYCOL INDUCED UROLITHIASIS IN RATS. | |
CN104622937A (en) | Plant mosquito-repelling itch-relieving external medicament, applications and preparation method thereof | |
CN103044240A (en) | Process for extracting 10-oxhydryl-2-caproleic acid from royal jelly | |
CN105712844A (en) | Cadinane sesquiterpene Saliciforliusin A and preparation method and application thereof | |
Sultana et al. | Analgesic and antidiarrhoeal activities of Lawsonia inermis | |
RU2707300C2 (en) | Method of producing drug having thyrotropic and antioxidant activity | |
CN108129538B (en) | Method for extracting antibacterial compound from scorpion | |
CN102755359B (en) | Hippophae extract and preparation method and application thereof for inhibiting activity of fatty acid synthase | |
Gurmessa et al. | Comparison of Potassium content of Moringa Stenopetala and Banana sold at local market in Jimma Town, Oromia, South Eest Ethiopia | |
Nagar et al. | Evaluation of antihyperglycemic and antihyperlipidemic activity of leaf extracts of Breynia vitis-idaea in alloxan induced diabetic rats | |
RU2784435C1 (en) | Method for obtaining an agent with neuroprotective, immunomodulatory activity | |
CN103288826B (en) | Alkaloidal constituent in nigella glandulifera Freyn seed and its production and use | |
CN101270134B (en) | Method for preparing pericarpium lagenariae theine | |
Bonewendé Belemlilga et al. | Ovicidal and larvicidal activities of Saba senegalensis (A. DC) Pichon (Apocynaceae) extracts and fractions on heligmosomoides bakeri (Nematoda, Heligmosomatidae) | |
RU2557990C1 (en) | Method for preparing medicinal product possessing choleretic, anti-inflammatory activities | |
Salih et al. | Alkaloid contents and anti-oxidant effectiveness of extracts of the Orobanche aegyptiaca L. and Orobanche ramosa L.(Orobanchaceae) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD4A | Correction of name of patent owner | ||
QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20170531 |