UA134550U

UA134550U - A METHOD OF OBTAINING Dense Fecal Culture of Trichuris Helminths Selected from Sheep

Info

Publication number: UA134550U
Application number: UAU201812231U
Authority: UA
Inventors: Віталій Васильович Мельничук; Ігор Дмитрович Юськів
Original assignee: Львівський Національний Університет Ветеринарної Медицини Та Біотехнологій Імені С.З. Ґжицького
Priority date: 2018-12-10
Filing date: 2018-12-10
Publication date: 2019-05-27

Abstract

Спосіб отримання щільної фекальної культури яєць гельмінтів роду Trichuris, виділених від овець, включає відбір проб калу, внесення наважки калу у склянку, розведення, перемішування та поступове доведення об'єму рідиною до 50 см3, фільтрування через подвійне ситечко, центрифугування при 1000 об./хв., промивання яєць трихурисів. Для отримання щільної фекальної культури яєць Trichuris sp. використовують фекалії від тварин з певним показником інтенсивності інвазії, для чого попередньо визначають кількість яєць трихурисів в пробі калу за методом Котельникова-Хренова з насиченим розчином аміачної селітри в 3-х краплинах флотаційної рідини, при цьому середня кількість яєць в 1 краплині флотаційної рідини повинна становити мінімум 10 екземплярів.A method of obtaining a dense fecal culture of Trichuris helminth eggs isolated from sheep includes the sampling of feces, bringing the feces into the glass, diluting, stirring and gradually bringing the volume up to 50 cm3 with liquid, filtered through a double strainer, centrifuged at 1000 rpm. min., washing of trichuris eggs. To obtain a dense fecal culture of eggs of Trichuris sp. use faeces from animals with a certain rate of invasion intensity, which is pre-determined by the number of trichuris eggs in the stool sample by the Kotelnikov-Hrenov method with a saturated solution of ammonium nitrate in 3 drops of flotation fluid, with the average number of eggs in 1 drop of flotation minimum of 10 copies.

Description

Корисна модель належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної паразитології, а саме до способів отримання щільної фекальної культури яєць гельмінтів родуThe useful model belongs to the field of veterinary medicine, in particular veterinary parasitology, namely to methods of obtaining a dense fecal culture of helminth eggs

Тиіспигі5, виділених від овець, і може бути використана для вивчення ембріональних стадій розвитку збудників трихурозу овець в лабораторних умовах, визначення дезінвазійних властивостей дезінвазійних та дезінфікуючих речовин та засобів, випробування ефективності антигельмінтних препаратів, та для створення експериментальних моделей паразитозів.Tiispigi5, isolated from sheep, and can be used to study the embryonic stages of development of causative agents of sheep trichurosis in laboratory conditions, to determine the disinfestation properties of disinfestation and disinfectant substances and agents, to test the effectiveness of anthelmintic drugs, and to create experimental models of parasitosis.

Культури яєць гельмінтів як у ветеринарній, так й у гуманній медицині мають досить важливе значення. Саме за допомогою останніх у лабораторних умовах можна провести експериментальні дослідження, що пов'язані з вивченням ефективності дезінвазійних препаратів, які пропонуються виробниками для знищення ембріональних стадій паразитів у навколишньому середовищі та на виробництві Одночасно їх використовують для експериментального відтворення паразитарних захворювань задля вивчення особливостей патогенезу хвороб. Досить часто при вивченні ефективності антигельмінтних засобів використовують культури яєць паразитів для відтворення хвороб, проти яких препарат застосовують.Cultures of helminth eggs are very important in both veterinary and human medicine. It is with the help of the latter in laboratory conditions that it is possible to conduct experimental studies related to the study of the effectiveness of disinfestation drugs, which are offered by manufacturers to destroy the embryonic stages of parasites in the environment and in production. At the same time, they are used for experimental reproduction of parasitic diseases in order to study the peculiarities of the pathogenesis of diseases. Quite often, when studying the effectiveness of anthelmintics, parasite egg cultures are used to reproduce the diseases against which the drug is used.

У більшості джерел відсутні самі методики отримання культур яєць гельмінтів, особливо з фекалій, проте є ті, що містять фрагменти з накопичення маси яєць. Так, відомий спосіб культивування яєць Ттгіспигіє тигіх описаний у посібнику (Б.А. Астафьев, Л.С. Яроцкий, М.Н.Most sources do not have methods for obtaining helminth egg cultures, especially from feces, but there are those that contain fragments from the accumulation of egg masses. Thus, the well-known method of cultivation of Ttgispygie eggs is described in the manual (B.A. Astafyev, L.S. Yarotsky, M.N.

Лебедева. Зкспериментальнье модели паразитозов в биологии и медицине. - М.: Наука, 1989. - 280 с.), в якому запропоновано методику отримання яєць гельмінтів. Згідно з методикою, яйця гельмінтів отримують із фекалій інвазованих збудником Тгіспигіє типів флотаційно - центрифужним методом. Для цього використовують насичений розчин кухонної солі. Фекалії ретельно розмішують у цьому розчині в співвідношенні 1:10. Отриману суміш розливають у центрифужні пробірки і центрифугують впродовж 5-7 хвилин зі швидкістю 1500 обертів/хв. Яйця, що піднімаються, разом з поверхневою плівкою знімають металевою петлею і струшують у стаканчик з дистильованою водою, після їх осідання на дно, ще 7-8 разів промивають дистильованою водою, переносять на годинникове скло, яке поміщають у чашку Петрі.Lebedev. Experimental models of parasitosis in biology and medicine. - M.: Nauka, 1989. - 280 p.), in which a method of obtaining helminth eggs is proposed. According to the method, helminth eggs are obtained from feces infested with the causative agent of Tgispygie types by the flotation-centrifugation method. For this, a saturated solution of table salt is used. Feces are thoroughly mixed in this solution in a ratio of 1:10. The resulting mixture is poured into centrifuge tubes and centrifuged for 5-7 minutes at a speed of 1500 rpm. The rising eggs, together with the surface film, are removed with a metal loop and shaken in a beaker with distilled water, after they settle to the bottom, they are washed 7-8 more times with distilled water, transferred to a watch glass, which is placed in a Petri dish.

Недоліком вказаної методики є використання як флотанту розчин кухонної солі, оскільки вона має питому вагу в межах 1,18-1,22. Саме низька густина розчину зумовлює спливанняThe disadvantage of this technique is the use of table salt solution as a floatant, since it has a specific gravity in the range of 1.18-1.22. It is the low density of the solution that causes floating

Зо малої кількості яєць трихурисів навіть при центрифугуванні.From a small number of eggs trichuris even with centrifugation.

Найбільш близьким по суті до способу, що заявляється, є спосіб культивування яєцьThe closest in essence to the claimed method is the method of egg cultivation

Тиспигів тигів (патент України Мо 76434), в якому описана методика отримання яєць гельмінтів та згідно з яким проводять відбір проб калу для дослідження у полієтиленові пакети, розміром 5х7 см. Із загальної проби калу беруть наважку масою 1 г та переносять у склянку, додають 30 см3 дистильованої води та ретельно перемішують скляною палицею. Загальний об'єм поступово доводять до 50 см3. Завись фільтрують через подвійне ситечко в іншу склянку. Потім завись переносять в центрифугальну склянку, додають розчин нітрату амонію та центрифугують 10 хвилин при 1000 об./хв. Яйця, що знаходяться у поверхневій плівці, збирають скляною піпеткою, переносять у чашку Петрі, промивають 2-3 рази стерильним фізіологічним розчином, та переносять на годинникові скельця для подальшого культивування.Tispygiv tigiv (patent of Ukraine Mo 76434), which describes the method of obtaining helminth eggs and according to which stool samples are collected for research in polyethylene bags, size 5x7 cm. From the total stool sample, take a weight of 1 g and transfer it to a glass, add 30 cm3 of distilled water and mix thoroughly with a glass rod. The total volume is gradually brought up to 50 cm3. The suspension is filtered through a double strainer into another glass. Then the suspension is transferred to a centrifuge glass, ammonium nitrate solution is added and centrifuged for 10 minutes at 1000 rpm. Eggs located in the surface film are collected with a glass pipette, transferred to a Petri dish, washed 2-3 times with sterile physiological solution, and transferred to watch glasses for further cultivation.

Заявлений спосіб і найближчий аналог мають суттєві спільні ознаки: включає відбір проб калу, внесення наважки калу у склянку, розведення, перемішування та поступове доведення об'єму рідиною до 50 см3, фільтрування через подвійне ситечко, центрифугування при 1000 об./хв., промивання яєць трихурисів.The claimed method and the closest analogue have essential features in common: it includes the collection of stool samples, introduction of a weight of stool into a glass, dilution, mixing and gradual adjustment of the volume with a liquid to 50 cm3, filtration through a double strainer, centrifugation at 1000 rpm, washing eggs of trichuris.

Недоліком вказаного способу є використання фекалій у кількості 1 г, така кількість є досить малою для отримання щільної культури яєць, а також те, що використання проб без встановлення мінімальних показників інтенсивності трихурозної інвазії суттєво впливає на кількісний показник отримуваної культури яєць.The disadvantage of this method is the use of feces in the amount of 1 g, this amount is small enough to obtain a dense culture of eggs, as well as the fact that the use of samples without establishing the minimum indicators of the intensity of trichurosis invasion significantly affects the quantitative indicator of the obtained egg culture.

Заявлений спосіб усуває недоліки найближчого аналога та забезпечує отримання щільної фекальної культури - від 22 до 36 яєць трихурисів в одній пробі, протягом 30-40 хв.The proposed method eliminates the shortcomings of the closest analogue and ensures obtaining a dense fecal culture - from 22 to 36 Trichuris eggs in one sample, within 30-40 minutes.

В основу корисної моделі поставлена задача розробити новий ефективний спосіб отримання щільної фекальної культури яєць гельмінтів роду Тгіспигіх виділених від овець за відносно короткий проміжок часу, простий та зручний у використанні.The basis of a useful model is the task of developing a new effective method of obtaining a dense fecal culture of eggs of helminths of the genus Tgispygi isolated from sheep in a relatively short period of time, simple and convenient to use.

Поставлена задача вирішується тим, що для отримання щільної фекальної культури яєцьThe task is solved by the fact that to obtain a dense fecal culture of eggs

Тпіспигі5 5р. використовують фекалії від тварин з певним показником інтенсивності інвазії, для чого попередньо визначають кількість яєць трихурисів в пробі калу за методом Котельникова-Tpispygi5 5yr. use feces from animals with a certain indicator of the intensity of infestation, for which the number of Trichuris eggs in a stool sample is preliminarily determined by the Kotelnikov method

Хренова з насиченим розчином аміачної селітри в 3-х краплинах флотаційної рідини, при цьому середня кількість яєць в 1 краплині флотаційної рідини повинна становити мінімум 10 екземплярів; при цьому для отримання щільної фекальної культури беруть наважку калу масою 60 3-4 г, яку розводять та доводять до об'єму 50 см3 насиченим розчином аміачної селітри та після фільтрації суспензію калу відстоюють 10-20 хвилин, відбирають поверхневий шар рідини, розбавляють дистильованою водою, відстоюють, зливають надосадову рідину, залишок рідини центрифугують, отриманий осад промивають дистильованою водою та переносять у чашкуHorseradish with a saturated solution of ammonium nitrate in 3 drops of flotation liquid, while the average number of eggs in 1 drop of flotation liquid should be at least 10 specimens; at the same time, to obtain a dense fecal culture, take a sample of feces weighing 60 3-4 g, which is diluted and brought to a volume of 50 cm3 with a saturated solution of ammonium nitrate, and after filtering, the feces suspension is allowed to stand for 10-20 minutes, the surface layer of the liquid is removed, diluted with distilled water , settle, pour off the supernatant, centrifuge the rest of the liquid, wash the precipitate with distilled water and transfer it to a cup

Петрі, після чого культура готова для використання; при цьому для ущільнення культури, отриманий осад з яйцями трихурисів з різних проб зливають в одну чашку Петрі до бажаної кількості, яку встановлюють шляхом мікроскопії зразка.Petri dish, after which the culture is ready for use; at the same time, to compact the culture, the resulting sediment with Trichuris eggs from different samples is poured into one Petri dish to the desired amount, which is determined by microscopy of the sample.

Технічний результат способу обумовлений тим, що відбираються проби калу від тварин з високим показником інтенсивності інвазії та масою не менше 3-4 г, при цьому суспензію калу перед центрифугуванням надосадової рідини з насиченим розчином аміачної селітри залишають для максимальної флотації яєць трихорусів на 10-20 хвилин. Окрім цього запропонований спосіб включає можливість ущільнення фекальної культури трихорусів.The technical result of the method is determined by the fact that samples of feces are taken from animals with a high indicator of the intensity of invasion and a weight of at least 3-4 g, while the suspension of feces before centrifugation of the supernatant with a saturated solution of ammonium nitrate is left for maximum flotation of trichorus eggs for 10-20 minutes . In addition, the proposed method includes the possibility of compacting the fecal culture of Trichorus.

Таким чином, наведені відомості пояснюють технічний результат заявленого способу.Thus, the given information explains the technical result of the claimed method.

При проведенні патентно-інформаційного пошуку заявником виявлено (Спосіб культивування яєць Тгіспигі5 тигі5, патент України Мо 76434), які містять суттєві ознаки, спільні із заявленим способом, а саме: включає відбір проб калу, внесення наважки калу у склянку, розведення, перемішування та поступове доведення об'єму рідиною до 50 см", фільтрування через подвійне ситечко, центрифугування при 1000 об./хв., промивання яєць трихурисів.When conducting a patent information search, the applicant found (Method of cultivation of Tgispygi5 tigi5 eggs, patent of Ukraine Mo 76434), which contain essential features common to the claimed method, namely: it includes stool sampling, adding a weight of feces into a glass, dilution, mixing and gradual bringing the liquid volume up to 50 cm", filtering through a double strainer, centrifugation at 1000 rpm, washing the eggs of Trichuris.

Проте, наявність зазначених, спільних із найближчим аналогом ознак недостатня для отримання технічного результату, який забезпечує заявлений спосіб, та які за сукупністю ознак повністю співпадають із заявленим способом, не виявлено. Це дозволяє зробити висновок про відповідність заявленої корисної моделі критерію винаходу (корисної моделі) - "Новизна".However, the presence of the specified features in common with the closest analogue is not sufficient to obtain the technical result provided by the claimed method, and which by the set of features completely coincide with the claimed method, was not found. This allows us to draw a conclusion about the conformity of the declared useful model with the criterion of the invention (useful model) - "Novelty".

У патентній і науково-теоретичній інформації не знайдено ознак, що відрізняють заявлений спосіб від найближчого аналога і забезпечують досягнення технічного результату тим, що для отримання щільної фекальної культури яєць Тгіспигіз 5р. використовують фекалії від тварин з певним показником інтенсивності інвазії для чого попередньо визначають кількість яєць трихурисів в пробі калу за методом Котельникова-Хренова з насиченим розчином аміачної селітри в 3-х краплинах флотаційної рідини, при цьому середня кількість яєць в 1 краплині флотаційної рідини повинна становити мінімум 10 екземплярів; при цьому для отримання щільної фекальної культури беруть наважку калу масою 3-4 г, яку розводять та доводять доIn the patent and scientific-theoretical information, there are no signs that distinguish the claimed method from the closest analogue and ensure the achievement of the technical result by the fact that to obtain a dense fecal culture of Tgispygiz eggs 5 years. use feces from animals with a certain indicator of the intensity of invasion, for which the number of Trichuris eggs in a stool sample is preliminarily determined by the Kotelnikov-Khrenov method with a saturated solution of ammonium nitrate in 3 drops of flotation liquid, while the average number of eggs in 1 drop of flotation liquid should be a minimum 10 copies; at the same time, to obtain a dense fecal culture, a sample of feces weighing 3-4 g is taken, which is diluted and brought to

Зо об'єму 50 см3 насиченим розчином аміачної селітри та після фільтрації суспензію калу відстоюють 10-20 хвилин, відбирають поверхневий шар рідини, розбавляють дистильованою водою, відстоюють, зливають надосадову рідину, залишок рідини центрифугують, отриманий осад промивають дистильованою водою та переносять у чашку Петрі, після чого культура готова для використання; при цьому для ущільнення культури, отриманий осад з яйцями трихурисів з різних проб зливають в одну чашку Петрі до бажаної кількості, яку встановлюють шляхом мікроскопії зразка.From a volume of 50 cm3 with a saturated solution of ammonium nitrate and after filtration, the stool suspension is settled for 10-20 minutes, the surface layer of the liquid is removed, diluted with distilled water, settled, the supernatant liquid is poured off, the remaining liquid is centrifuged, the precipitate obtained is washed with distilled water and transferred to a Petri dish , after which the culture is ready for use; at the same time, to compact the culture, the resulting sediment with Trichuris eggs from different samples is poured into one Petri dish to the desired amount, which is determined by microscopy of the sample.

Заявлений спосіб належить до галузі ветеринарної медицини, зокрема ветеринарної паразитології, а саме до способів отримання щільної фекальної культури яєць гельмінтів родуThe claimed method belongs to the field of veterinary medicine, in particular veterinary parasitology, namely to methods of obtaining a dense fecal culture of helminth eggs

Тііспигіє виділених від овець і може бути використана для вивчення ембріональних стадій розвитку збудників трихурозу овець в лабораторних умовах, визначення дезінвазійних властивостей дезінвазійних та дезінфікуючих речовин та засобів, випробування ефективності антигельмінтних препаратів, та для створення експериментальних моделей паразитозів, а тому відповідає критерію корисної моделі - "промислова придатність".Tiispygie isolated from sheep and can be used to study the embryonic stages of development of causative agents of sheep trichurosis in laboratory conditions, to determine the disinfestation properties of disinfestation and disinfectant substances and agents, to test the effectiveness of anthelmintic drugs, and to create experimental models of parasitosis, and therefore meets the criterion of a useful model - " industrial suitability".

Для отримання фекальної культури яєць Тгіспигі5 5р. використовують фекалії від тварин, уражених збудником трихурозу.To obtain a fecal culture of Tgispigi eggs5 5yr. use feces from animals affected by the causative agent of trichurosis.

Для підготовки зразка попередньо проводять визначення кількості яєць трихурисів в пробі за методом Котельникова-Хренова з насиченим розчином аміачної селітри в 3-х краплинах флотаційної рідини, при цьому середня кількість яєць в 1 краплині флотаційної рідини повинна становити мінімум 10 екземплярів. Після відбору необхідних проб проводять отримання яєць трихурисів. Для цього беруть пробу фекалій масою 3-4 г, поміщають її у склянку об'ємом 50 мл та додають до неї 20 мл насиченого розчину аміачної селітри ретельно розмішують паличкою або пестиком до отримання гомогенної суспензії. Далі об'єм рідини в склянці доводять до 50 мл.To prepare the sample, the number of Trichuris eggs in the sample is determined by the Kotelnikov-Khrenov method with a saturated solution of ammonium nitrate in 3 drops of flotation liquid, while the average number of eggs in 1 drop of flotation liquid should be at least 10 specimens. After taking the necessary samples, the eggs of trichuris are obtained. To do this, take a sample of feces weighing 3-4 g, place it in a glass with a volume of 50 ml and add 20 ml of a saturated solution of ammonium nitrate to it, mix thoroughly with a stick or pestle until a homogeneous suspension is obtained. Next, the volume of liquid in the glass is brought up to 50 ml.

Отриману фекальну суспензію фільтрують через ситечко в іншу склянку й залишають в спокої на 10-20 хвилин. За цей час яйця трихурисів у максимальній кількості підіймаються до поверхневого шару рідини. В подальшому за допомогою піпетки комплектованої спринцівкою (об'ємом 10 мл) відсмоктують поверхневий шар рідини по всій площині склянки та переносять в іншу склянку аналогічного об'єму. До отриманої рідини додають воду та відстоюють 5 хв., після чого надосадову рідину зливають таким чином, щоб у склянці залишилося максимум 2 мл рідини, яку в подальшому переносять в центрифугальну пробірку об'ємом 10 мл, додають воду бо та центрифугують 5 хв. при 1000 об./хв. Отриману надосадову рідину в пробірці зливають, осад добре розмішують та переносять в склянку об'ємом 50 мл, додають невелику кількість води й ретельно розмішують скляною паличкою, поступово доливаючи воду до об'єму 50 мл, залишають у спокої на 5 хвилин, після чого надосадовий шар рідини зливають, а до осаду додають воду. Таких маніпуляцій загалом необхідно зробити 4, що забезпечує добре відмивання яєць від флотаційного розчину. Після останнього відстоювання надосадову рідину зі склянки зливають, осад ретельно розмішують скляною паличкою та переносять в чашку Петрі, після чого культура готова до використання.The resulting fecal suspension is filtered through a strainer into another glass and left alone for 10-20 minutes. During this time, the maximum number of trichuris eggs rise to the surface layer of the liquid. Later, with the help of a pipette equipped with a syringe (volume 10 ml), the surface layer of the liquid is sucked over the entire plane of the glass and transferred to another glass of similar volume. Water is added to the resulting liquid and allowed to stand for 5 minutes, after which the supernatant liquid is drained so that a maximum of 2 ml of liquid remains in the beaker, which is then transferred to a centrifuge tube with a volume of 10 ml, water is added and centrifuged for 5 minutes. at 1000 rpm The resulting supernatant liquid in the test tube is drained, the precipitate is well stirred and transferred to a 50 ml beaker, a small amount of water is added and thoroughly mixed with a glass rod, gradually adding water to a volume of 50 ml, left alone for 5 minutes, after which the supernatant the liquid layer is drained, and water is added to the sediment. A total of 4 such manipulations must be done, which ensures good washing of the eggs from the flotation solution. After the last settling, the supernatant liquid is drained from the glass, the sediment is thoroughly stirred with a glass rod and transferred to a Petri dish, after which the culture is ready for use.

Для ущільнення культури, отримані яйця трихурисів з різних проб можна зливати в одну чашку Петрі до бажаної кількості, яку встановлюють шляхом мікроскопії зразка за малого збільшення.To consolidate the culture, the obtained Trichuris eggs from different samples can be poured into one Petri dish to the desired amount, which is determined by microscopy of the sample at low magnification.

Ефективність заявленого способу і його переваги перед найближчим аналогом підтверджені прикладом конкретного виконання корисної моделі.The effectiveness of the claimed method and its advantages over the nearest analog are confirmed by an example of a specific implementation of a useful model.

Для визначення ефективності запропонованого способу отримання культури яєць трихурисів проведено експериментальне дослідження. З цією для відбирали 50 проб фекалій від овець інвазованих збудником трихурозу з бажаною інтенсивністю: середня інтенсивність трихурозної інвазії в одній краплині флотаційної рідини становила 12,31:0,22 яєць (від 10,33 до 17,00 яєць).An experimental study was conducted to determine the effectiveness of the proposed method of obtaining a culture of Trichuris eggs. With this, 50 fecal samples were taken from sheep infested with the causative agent of trichurosis with the desired intensity: the average intensity of trichurosis infestation in one drop of flotation liquid was 12.31:0.22 eggs (from 10.33 to 17.00 eggs).

Отримання культури яєць трихурисів проводили двома способами: 1. Найближчий аналог (Спосіб культивування яєць Ттгіспигів тигів, патент України Ме76434); 2. Запропонованій спосіб з різними термінами відстоювання фекальної суспензії (10, 15 та 20 хвилин).Obtaining the culture of Trichuris eggs was carried out in two ways: 1. The closest analogue (Method of Cultivation of Ttgispygi tig eggs, patent of Ukraine Me76434); 2. The proposed method with different periods of fecal suspension settling (10, 15 and 20 minutes).

Ефективність способів визначали за показниками кількості отриманих яєць трихурисів та затраченим часом на виконання способу. Отримані результати досліджень відображені в таблиці.The effectiveness of the methods was determined by the number of eggs obtained by Trichuris and the time spent on performing the method. The obtained research results are shown in the table.

ТаблицяTable

Порівняльна ефективність способів отримання яєць роду Тгіспигі5 з фекалій овець, п-50 . Кількість отриманих яєць Час затрачений наComparative effectiveness of methods of obtaining eggs of the genus Tgispygi5 from sheep feces, p-50. Number of eggs obtained Time spent on

Час відстоювання, й й й й й тах Хв. (Найближийаналог | - 2... 77171711 19,7440,74/728.4.юЮю-.-/ | 3744023Time of defense, y y y y y tach Min. (The closest analog | - 2... 77171711 19,7440,74/728.4.yuYyu-.-/ | 3744023

ПропонованийOffered

За використання способу, який вибрано як найближчий аналог, встановлено, що середня кількість отриманих яєць становила 19,74:0,74 екземплярів за коливань від 7 до 28 яєць в одній пробі. На одну процедуру відмивання в середньому затрачається 37,44520,23 хв.Using the method chosen as the closest analogue, it was established that the average number of eggs obtained was 19.74:0.74 specimens, ranging from 7 to 28 eggs in one sample. One washing procedure takes an average of 37.44520.23 minutes.

Зо Використання запропонованого способу з терміном відстоювання фекальної суспензії 10 хв призводило до отримання в середньому 22,66:0,59 екземплярів яєць трихурисів за коливань від 11 до 29 яєць з однієї проби, на що в середньому затрачалося 31,16:20,17 хвилин.The use of the proposed method with a settling time of the fecal suspension of 10 minutes led to obtaining an average of 22.66:0.59 specimens of Trichuris eggs with fluctuations from 11 to 29 eggs from one sample, which took an average of 31.16:20.17 minutes .

Збільшення терміну відстоювання фекальної суспензії до 15 хвилин призводило до збільшення кількості отримуваних яєць - 36,18:-41,50 екземплярів, за коливань від 27 до 58 екземплярів у пробі, при затратах часу на одну маніпуляцію 35,6820,23 хв. Вказаний режим виконання запропонованого способу за показниками ефективності перевищував найближчий аналог за кількістю отриманих яєць на 45,44 9595, за показниками затрат часу на 4,70 95 відповідно.Increasing the settling time of the fecal suspension to 15 minutes led to an increase in the number of eggs obtained - 36.18:-41.50 specimens, for fluctuations from 27 to 58 specimens in the sample, with a time expenditure of 35.6820.23 minutes for one manipulation. The specified mode of execution of the proposed method exceeded the closest analogue in terms of efficiency by 45.44 9595 in terms of the number of eggs obtained, and by 4.70 95 in terms of time spent, respectively.

Встановлено, що виконання запропонованого способу з 20 хвилинним відстоюванням фекальної суспензії дещо знижує його ефективність. Так кількість отриманих яєць зменшилася (на 22,34 95) порівняно з попереднім режимом виконання способу в середньому до 28,1020,90 екземплярів за коливань від 18 до 42 яєць з однієї проби. На одну процедуру відмивання в середньому затрачається 40,8220,20 хв. Одночасно, встановлено, що спосіб за показниками ефективності перевищував найближчий аналог за кількістю отриманих яєць на 29,75 95 відповідно. Проте, в порівнянні з найближчим аналогом, запропонована методика виконання способу виявилася довшою у виконанні на 3,38 хв (8,28 Об).It was established that the implementation of the proposed method with a 20-minute settling of the fecal suspension slightly reduces its effectiveness. Thus, the number of obtained eggs decreased (by 22.34 95) compared to the previous mode of performing the method to an average of 28.1020.90 specimens with fluctuations from 18 to 42 eggs from one sample. One washing procedure takes an average of 40.8220.20 minutes. At the same time, it was established that the method in terms of efficiency exceeded the closest analogue in terms of the number of eggs obtained by 29.75 95, respectively. However, in comparison with the closest analogue, the proposed method of performing the method turned out to be longer in execution by 3.38 min (8.28 RPM).

Таким чином, позитивний ефект заявленої корисної моделі полягає у тому, що: - спосіб дозволяє концентрувати велику кількість яєць трихурисів за всіх запропонованих режимів виконання;Thus, the positive effect of the declared useful model is that: - the method allows concentrating a large number of Trichuris eggs under all proposed execution modes;

- ефективність способу за показником кількості отриманих яєць з 10-ти, 15-ти та 20-ти хвилинним відстоюванням фекальної суспензії виявилася вищою за спосіб що вибрано як найближчий аналог (на 12,65, 45,44 та 29,75 95 відповідно), за всіх запропонованих режимів виконання;- the effectiveness of the method in terms of the number of eggs obtained with 10-, 15- and 20-minute settling of fecal suspension was higher than the method chosen as the closest analogue (by 12.65, 45.44 and 29.75 95, respectively), for all proposed execution modes;

- ергономічність способу доведено кількісним показником затраченого часу на виконання однієї маніпуляції з отримання культури яєць; - ефективність способу за показниками затраченого часу за режимів з 10-ти, 15-ти та 20-ти хвилинним відстоюванням фекальної суспензії виявилася вищою за спосіб, що вибрано як найближчий аналог - лише за режимів з 10-ти та 15-ти хвилинним відстоюванням фекальної суспензії 16,77 та 4,70 95.- the ergonomics of the method is proven by the quantitative indicator of the time spent on performing one manipulation for obtaining egg culture; - the effectiveness of the method in terms of the time spent in the regimes with 10-, 15- and 20-minute settling of fecal suspension turned out to be higher than the method chosen as the closest analogue - only in the regimes with 10- and 15-minute settling of fecal suspension 16.77 and 4.70 95 suspensions.

Claims

USEFUL MODEL FORMULA

1. The method of obtaining a dense fecal culture of eggs of helminths of the genus Tgispygi5, isolated from sheep, which includes the collection of feces samples, introduction of a weight of feces into a glass, dilution, mixing and gradual adjustment of the volume with a liquid to 50 cm, filtering through a double strainer, centrifugation at 1000 rev./min., washing of Trichuris eggs, which differs in that to obtain a dense fecal culture of Tgispygi eggs5 5yr. use feces from animals with a certain indicator of the intensity of invasion, for which the number of Trichuris eggs in a stool sample is preliminarily determined by the Kotelnikov-Khrenov method with a saturated solution of ammonium nitrate in 3 drops of flotation liquid, while the average number of eggs in 1 drop of flotation liquid should be minimum 10 copies.

2. The method according to claim 1, which differs in that a weight of feces weighing 3-4 g is introduced into a glass, which is diluted and made up to a volume of 50 cm3 with a saturated solution of ammonium nitrate, and after filtration, the feces suspension is allowed to stand for 10-20 minutes, the surface liquid layer, dilute with distilled water, settle, pour off the supernatant, centrifuge the remaining liquid, wash the precipitate with distilled water and transfer it to a Petri dish, after which the culture is ready for use.

C. The method according to claim 1, which differs in that, for compaction of the culture, the obtained sediment with Zo eggs of Trichuris from different samples is poured into one Petri dish to the desired amount, which is determined by microscopy of the sample.