UA22947U - Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent - Google Patents

Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent Download PDF

Info

Publication number
UA22947U
UA22947U UAU200701794U UAU200701794U UA22947U UA 22947 U UA22947 U UA 22947U UA U200701794 U UAU200701794 U UA U200701794U UA U200701794 U UAU200701794 U UA U200701794U UA 22947 U UA22947 U UA 22947U
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
drying
producer
temperature
culture liquid
cultivation
Prior art date
Application number
UAU200701794U
Other languages
Ukrainian (uk)
Inventor
Valentyna Antonivn Bolokhovska
Maia Volodymyrivna Voloshyna
Vladyslav Viktoro Bolokhovskyi
Liudmyla Romanivna Bobkova
Liudmyla Ivanivna Bolokhovska
Olha Volodymyrivna Nahorna
Original Assignee
Btu Ct Privately Owned Entpr
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Btu Ct Privately Owned Entpr filed Critical Btu Ct Privately Owned Entpr
Priority to UAU200701794U priority Critical patent/UA22947U/en
Publication of UA22947U publication Critical patent/UA22947U/en

Links

Landscapes

  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

A process for the preparation of biological activating agent involves the cultivation of microorganism-producer and drying of culture broth. A strain of Azotobacter chroococcum 3064 deposited in Depositary of Institute of Microbiology and Virology of NAS of Ukraine as Azotobacter chroococcum IMB V-7090 is used as a microorganism-producer. The cultivation is carried out with airing and permanent stirring in a sterile nutrient medium.

Description

Опис винаходуDescription of the invention

Корисна модель належить до мікробіологічної промисловості, до галузі виробництва препаратів для 2 рослинництва. Біоактиватор Азотофіт може бути використаний у сільському господарстві в рослинництві для передпосівної обробки насіння зернових, зернобобових, круп'яних, олійних, овочевих культур та коренеплодів, обробки розсади та підживлення овочевих, технічних культур, квітів, ягідників молодих саджанців плодових дерев, лісових культур з метою прискорення росту рослин, підвищення урожаю та поліпшення його якості, пригнічення фітопатогенної мікрофлори - збудників хвороб рослин, а також для покращення природної 70 родючості.The useful model belongs to the microbiological industry, to the field of production of preparations for 2 crop production. Bioactivator Azotophyt can be used in agriculture in crop production for pre-sowing treatment of seeds of cereals, legumes, cereals, oilseeds, vegetable crops and root crops, processing of seedlings and feeding of vegetables, industrial crops, flowers, berries, young seedlings of fruit trees, forest crops for the purpose of acceleration of plant growth, increase of yield and improvement of its quality, suppression of phytopathogenic microflora - pathogens of plant diseases, as well as for improvement of natural fertility.

Врожай сільськогосподарських культур формується в результаті всіх факторів життя рослин, які регулюються агротехнічними заходами землеробства, такими як створення оптимальних умов живлення рослин, водного і повітряного режимів грунту, надійного захисту рослин від хвороб, шкідників і бур'янів. Технології одержання високих врожаїв передбачають також створення нових сортів за рахунок селекції і біоінженерії. 12 Ще одним резервом підвищення врожайності і покращення якості продукції рослинництва є використання мікробіологічних технологій, які вже визнані і серйозно втілюються як частина національної політики в багатьох країнах світу. Широке застосування цих технологій може внести значний вклад в загальне покращення екологічного стану планети, в цілому, і досягнення економічно ефективного забезпечення продуктами харчування при дбайливому використанні природних ресурсів.The yield of agricultural crops is formed as a result of all factors of plant life, which are regulated by agrotechnical measures of farming, such as the creation of optimal conditions for plant nutrition, water and air regimes of the soil, reliable protection of plants from diseases, pests and weeds. Technologies for obtaining high yields also involve the creation of new varieties due to selection and bioengineering. 12 Another reserve for increasing yield and improving the quality of crop production is the use of microbiological technologies, which are already recognized and seriously implemented as part of national policy in many countries of the world. The wide application of these technologies can make a significant contribution to the general improvement of the ecological state of the planet, as a whole, and the achievement of economically efficient provision of food products with careful use of natural resources.

Мікробіологічні технології передбачають бактеризацію (примусове внесення) і створення відповідних умов для розвитку в грунті анабіотичних мікроорганізмів, що приймають участь в регенеративних процесах грунту, стимуляції росту і розвитку рослин, пригніченні патогенної грунтової мікрофлори.Microbiological technologies involve bacteriization (forced application) and the creation of suitable conditions for the development of anabiotic microorganisms in the soil, which participate in the regenerative processes of the soil, stimulation of plant growth and development, suppression of pathogenic soil microflora.

Сучасні технології вирощування сільськогосподарських культур, як показує наука і практика, повинні базуватись не тільки на добре збалансованому використанні макро- і мікроелементів живлення рослин та хімічних засобів їх захисту від шкідників та хвороб, але й на використанні біологічних та фізіологічно пт») активних речовин, які, завдяки специфічності та вибірковості їх дії на процеси росту розвитку рослин, можуть значно підвищити продуктивність та якість продукції сільськогосподарських культур.Modern technologies for growing agricultural crops, as shown by science and practice, should be based not only on the well-balanced use of macro- and microelements of plant nutrition and chemical means of protecting them from pests and diseases, but also on the use of biological and physiologically active substances that , due to the specificity and selectivity of their action on the processes of growth and development of plants, can significantly increase the productivity and quality of agricultural crops.

До таких речовин і відноситься біоактиватор Азотофіт, який складається з живих клітин азотфіксуючих мікроорганізмів та комплексу біологічно - активних сполук, що активізують у рослинах основні життєві процеси в 30. стимулюють проростання насіння, нарощування зеленої маси і кореневої системи рослин та пригнічують «Її розвиток фітопатогенної мікрофлори - збудників кореневої гнилі, парші, головні та інш. Біоактиватор Азотофіт одержують на основі грунтових бактерій, які сприяють збагаченню та відновленню родючості грунтів. оSuch substances include the bioactivator Azotofit, which consists of living cells of nitrogen-fixing microorganisms and a complex of biologically active compounds that activate the main life processes in plants in 30. stimulate the germination of seeds, the growth of green mass and the root system of plants and suppress "Its development of phytopathogenic microflora - causative agents of root rot, scab, head rot, etc. Azotofit bioactivator is obtained on the basis of soil bacteria, which contribute to the enrichment and restoration of soil fertility. at

Біоактиватор Азотофіт - екологічно чистий препарат, нешкідливий для людини, тварин, птиці, бджіл та інших Га комах. 3о Відомі й інші продуценти із роду А?лоїорасіег, які синтезують бактерії, здатні фіксувати азот із сч атмосферного повітря та синтезувати ростостимулюючі речовини. Це А міпеїйапаійї і А. адіїв, які мають деякі недоліки та переваги.Azotophyt bioactivator is an environmentally friendly drug, harmless to humans, animals, birds, bees and other insects. 3o Other producers from the genus Aloiorasieg are also known, which synthesize bacteria capable of fixing nitrogen from atmospheric air and synthesizing growth-stimulating substances. These are A mipeiyapaiiyi and A. adiiv, which have some disadvantages and advantages.

Головним критерієм у відборі продуценту прийнято підвищену стабільність штаму - продуценту із « збереженням всіх властивостей біологічно - активних сполук (вітамінів та стимуляторів росту) та стійкість до З 70 умов культивування, що забезпечує максимальне накопичення бактеріальної маси. с Відомий штам Агоіобрасіег міпеіапаїй 56, продуцент азотфіксуючих бактерій, обробка суспензією яких насінняThe main criterion in the selection of the producer is the increased stability of the producer strain with "the preservation of all the properties of biologically active compounds (vitamins and growth stimulants) and resistance to C 70 cultivation conditions, which ensures the maximum accumulation of bacterial mass." c Known strain Agoiobrasieg mipeiapaii 56, a producer of nitrogen-fixing bacteria, the treatment of which seed suspension

Із» овочевих культур, зокрема, томатів збільшила енергію проростання насіння на 17,695, а кількість нормально сформованих паростків виросла на 6,795. Проте ці показники підвищують свою ефективність в присутності асоціації бактерій продуцента А. міпеіапай 56 з іншими мікроорганізмами, наприклад фосфатмобілізуючими бактеріями роду ВасіПив. о Найбільш близьким штамом - найближчим аналогом до заявленого є штам Агоїобасіег спгоососсут 20, який ко в умовах глибинного культивування синтезує азотфіксуючі бактерії з титром життєздатних клітин со 1Х109КУО/см? |Мишустин В "Ассоциации почвенньїх микроорганизмов", М. Наука, 1979 стор 41-47).Among vegetable crops, in particular, tomatoes increased the energy of seed germination by 17,695, and the number of normally formed sprouts increased by 6,795. However, these indicators increase their effectiveness in the presence of the association of the producer bacteria A. mipeiapai 56 with other microorganisms, for example, phosphate-mobilizing bacteria of the genus VasiPiv. o The closest strain - the closest analogue to the declared one is the Agoiobasieg spgoosossut 20 strain, which in the conditions of deep cultivation synthesizes nitrogen-fixing bacteria with a viable cell titer of 1X109CUO/cm? |Myshustin In "Association of Soil Microorganisms", M. Nauka, 1979 p. 41-47).

Суттєвим недоліком вказаного штаму є: т» - вимогливість до умов середовища, зокрема до підвищеної концентрації солей в грунті;A significant disadvantage of the specified strain is: t" - demanding to environmental conditions, in particular to the increased concentration of salts in the soil;

І - понижена продуктивність бактерійної маси (титр 1х1ОКУО/см3).And - reduced productivity of the bacterial mass (titre 1x1 OKUO/cm3).

Традиційний спосіб одержання сухих (товарних) форм бактерійних препаратів включає стадії одержання культуральної рідини, стандартизації її та висушування. При цьому загальні втрати продукту складають 20-2590 5Б Найбільш поширений спосіб висушування культуральної рідини в промисловості - це сушка розпилюючим методом в потоці гарячого повітря на вході в сушарку 130-1402С і на виході з сушарки 60-702С. Враховуючи, що в с даному випадку культуральна рідина - це суспензія живих клітин бактерій, в процесі такого сушіння бактерій багато гине, руйнуються біологічно активні та ростостимулюючі речовини, крім цього, вище названий спосіб має значні недоліки: во - забруднення навколишнього середовища викидом відпрацьованого повітря з клітинами бактерій; - великі втрати препарату із-за впливу високої температури та виносу бактерій з відпрацьованим повітрям.The traditional method of obtaining dry (commercial) forms of bacterial preparations includes the stages of obtaining culture fluid, standardizing it and drying it. At the same time, the total losses of the product are 20-2590 5B. The most common method of drying culture liquid in industry is spray drying in a stream of hot air at the entrance to the dryer at 130-1402C and at the exit from the dryer at 60-702C. Taking into account that in this case the culture liquid is a suspension of living cells of bacteria, in the process of such drying bacteria many die, biologically active and growth-stimulating substances are destroyed, in addition, the above-mentioned method has significant disadvantages: in - pollution of the environment by the emission of exhaust air from bacterial cells; - large losses of the drug due to the effect of high temperature and removal of bacteria with the exhaust air.

Останнім часом в виробничу практику впроваджують метод нанесення культуральної рідини на природний носій, який утримує біологічно активну основу на своїй поверхні, зберігаючи всі властивості препарату.Recently, a method of applying a culture liquid on a natural carrier has been introduced into production practice, which keeps the biologically active base on its surface, preserving all the properties of the drug.

Найбільш близьким за технічною сутністю є винахід | Спосіб одержання препарату на основі азотофіксуючих 65 бульбочкових бактерій" патент України Мо53187 А, оп. 15.01.2003 р.Ї, що включає вирощування азотофіксуючих бактерій, підготовку стерильного вермикулітного субстрата-наповювача, уведення у наповнювач азотофіксуючих бактерій і поживних речовин, вирощування бактерій за відомими технологіями. Одержують титр (5-6) х10Укл/кг.The closest in terms of technical essence is the invention | The method of obtaining a preparation based on nitrogen-fixing 65 nodule bacteria" patent of Ukraine Mo53187 A, op. 15.01.2003, which includes the cultivation of nitrogen-fixing bacteria, the preparation of a sterile vermiculite substrate-filler, the introduction of nitrogen-fixing bacteria and nutrients into the filler, the cultivation of bacteria according to known technologies.

Препарат поліпшуж мінеральне харчування сільськогосподарських культур і підвищує їх продуктивність. Проте є і суттєві недоліки такого способу, а саме: вермикуліт, як носій, характеризується нестандартністю, нерідко вThe drug improves the mineral nutrition of agricultural crops and increases their productivity. However, there are significant disadvantages of this method, namely: vermiculite, as a carrier, is characterized by non-standardity, often in

Ньому містяться токсичні речовини, які є інгібіторами для росту рослин, його доставка та підготовка потребує додаткових витрат; є проблеми з стерилізацією самого субстрата, яка потрібна для усунення грибів і бактерій, здатних знизити титр життєздатних клітин, суспензія яких змішується зі стерильним носієм.It contains toxic substances that are plant growth inhibitors, its delivery and preparation require additional costs; there are problems with the sterilization of the substrate itself, which is required to eliminate fungi and bacteria capable of reducing the titer of viable cells, the suspension of which is mixed with a sterile carrier.

Метою даної корисної моделі є розробка вище описаного препарату. Задача вирішується тим, що одержання біоактиватора Азот офіту здійснюється шляхом культивування мікроорганізма-продуцента та сушіння 70 культуральної рідини, при цьому як мікроорганізм-продуцент використовують штам Агоїюобрасіег спгоососсут 3064, депонований в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології НАН України як Агоїорасіег спгоососсутThe purpose of this useful model is the development of the drug described above. The problem is solved by the fact that the production of the bioactivator Nitrogen ophit is carried out by cultivating the producer microorganism and drying 70 of the culture liquid, while the strain Agoiyuobrasieg spgoosossut 3064, deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine as Agoiyuobrasieg spgoosossut, is used as the producer microorganism

ІМВ 8-7090, культивування проводять в аеробних умовах за температури 29 -192С, при постійному перемішуванні, водневому показнику 6,5-7,0 протягом 24-50 годин на стерильному поживному середовищі, яке містись, мас бо: амоній молібденовокислий 0,0001-0,0010 калій фосфорнокислий однозаміщений 0,02-0,08 магній сірчанокислий 0,01-0,06 залізо сірчанокисле 0,0002-0,0008 марганець сірчанокислий 0,0001-0,0010 кислота борна 0,0001-0,0010 крейда 0,2-0,6 меляса бурякова 2,0-6,0 сіль кухонна 0,01-0,10, - при цьому одержана культуральна рідина є рідкою товарною формою препарату з титром життєздатних клітин продуцента не менше 1,0х10 9КУС/см?3, а суху товарну форму одержують сушінням суміші культуральної рідини з речовинами-стабілізаторами (цеоліт природний молотий, глина бентонітова порошкоподібна неактивована, торф верховий) в сушильній шафі за температури 20-40 протягом 20-24 годин або іншими їч- відомими методами сушіння з оптимально підібраними для цього параметрами (температура, тривалість). «IMV 8-7090, cultivation is carried out under aerobic conditions at a temperature of 29-192C, with constant stirring, a hydrogen index of 6.5-7.0 for 24-50 hours on a sterile nutrient medium containing, mass: ammonium molybdenum 0.0001 -0.0010 monosubstituted potassium phosphate 0.02-0.08 magnesium sulfate 0.01-0.06 iron sulfate 0.0002-0.0008 manganese sulfate 0.0001-0.0010 boric acid 0.0001-0.0010 chalk 0.2-0.6 beet molasses 2.0-6.0 table salt 0.01-0.10, - at the same time, the resulting culture liquid is a liquid commercial form of the drug with a titer of viable producer cells of at least 1.0x10 9CUS/ cm?3, and the dry commercial form is obtained by drying a mixture of culture liquid with stabilizer substances (ground natural zeolite, powdered non-activated bentonite clay, peat) in a drying cabinet at a temperature of 20-40 for 20-24 hours or by other known drying methods with optimally selected parameters for this (temperature, duration). "

Спільними з найближчим аналогом ознаками є: - використання в якості мікроорганізму - продуценту штаму Агоїобрасіег спгоососсит; (о) - використання природного носія - стабілізатора. счCommon features with the closest analog are: - use as a microorganism - the producer of the Agoiobrasieg spgoosossit strain; (o) - use of natural carrier - stabilizer. high school

Відмінними ознаками є: - використання нового удосконаленого штаму Агоїорасіег спгоососсит ІМВ-В-7090, що характеризується Ге підвищеною здатністю фіксувати молекулярний азот і покращувати азотне живлення рослин, більш високою активністю продукувати бактерійну масу (титр не менше 1х10'ЯКУО/см?) та біологічно - активні сполуки (вітаміни і стимулятори росту), солетолерантністю; « - використання природного носія - стабілізатора, до складу якого входять мінеральні сполуки кальцію, магнію, фосфору, натрію, калію та біля 40 макро -та мікроелементів (мідь, срібло, нікель, цинк, хром, т с молібден, кобальт, бор та інші) для утримування біологічно - активної основи на своїй поверхні, зберігаючи "» всі властивості препарату; " - значне зниження трудових, матеріальних та енерговитрат на виробництво бактерійного препарату, в зв'язку з нанесенням стабілізованої культуральної рідини на поверхню природного носія, виключаючи розпилюючу сушарку іме) - одержання більш стабільного при зберіганні препарату, в зв'язку з висушуванням при достатньо низькій г) температурі.Distinctive features are: - the use of a new improved strain of Agoyorasieg spgoosossit IMV-B-7090, which is characterized by an increased ability to fix molecular nitrogen and improve nitrogen nutrition of plants, a higher activity to produce bacterial mass (titre not less than 1x10'ЯКУО/cm?) and biologically - active compounds (vitamins and growth stimulants), salt tolerance; "- the use of a natural carrier - a stabilizer, which includes mineral compounds of calcium, magnesium, phosphorus, sodium, potassium and about 40 macro and micro elements (copper, silver, nickel, zinc, chromium, molybdenum, cobalt, boron and others ) to keep the biologically active base on its surface, preserving "» all the properties of the preparation; " - a significant reduction in labor, material and energy costs for the production of a bacterial preparation, in connection with the application of a stabilized culture liquid to the surface of a natural carrier, excluding the spray dryer ) - obtaining a more stable drug during storage, due to drying at a sufficiently low d) temperature.

Одержаний штам Агоіорасіег спгоососсит депонований в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології ре) НАН України в березні 2003 р. з реєстраційним номером Агоіорасіег спгоососсит ІМВ В-7090. Штам виділений їз 20 методом направленої селекції із зразків грунту, непатогенний і має слідуючі характеристики: 1. Культурально-морфологічні особливості штаму: На середовищі Ешбі, агаризованому середовищі "м Федорова, МПА колонії випуклі, круглі, блискучі, гладенькі, непрозорі, слизисті. Край колонії рівний.The obtained strain Agoiorasieg spgoosossit was deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine in March 2003 with the registration number Agoiorasieg spgoosossit IMV B-7090. The strain was isolated from soil samples by the method of directed selection, is non-pathogenic and has the following characteristics: 1. Cultural and morphological features of the strain: On Ashby's medium, Fedorov's agar medium, MPA, the colonies are convex, round, shiny, smooth, opaque, slimy. Edge colony is equal.

Клітини паличкоподібні З3,ї1х2мкм, довжина змінюється майже до кокоподібних форм, розташовуються поодиноко, парами і неправильними групами.The cells are rod-shaped, 3, 1x2 μm, the length varies almost to cocoon-like forms, they are located singly, in pairs, and in irregular groups.

Утворює товстостінні цисти, якщо бракує поживних речовин. Рухливі. Жгутики перитрихальні. Утворюють с капсульний слиз. Гетеротроф. Здатний фіксувати молекулярний азот в присутності молібдену, який можливо замінити ванадієм. Аероб. Каталозопозитивний. Використовує глюкозу, сахарозу, крохмаль, маніт. Не використовує рамнозу. Мезофіл. Оптимальна температура росту 20-3020. Межі рН для росту 5,5-8,5. Оптимум рН б5 -- 7,0. 60 Галузь застосування штаму: біотехнологія. Продукт, який синтезується штамом: біомаса життєздатних бактерій.Forms thick-walled cysts if there is a lack of nutrients. Mobile Flagella are peritrichous. They form capsule mucus. Heterotroph. Able to fix molecular nitrogen in the presence of molybdenum, which can be replaced with vanadium. Aerobe. Catalose positive. Uses glucose, sucrose, starch, mannitol. Does not use rhamnose. Mesophyll. The optimal growth temperature is 20-3020. The pH limits for growth are 5.5-8.5. Optimum pH b5 -- 7.0. 60 Field of application of the strain: biotechnology. The product synthesized by the strain: biomass of viable bacteria.

Активність штаму (з вказівкою умов культивування та способу визначення активності): при культивуванні на середовищі Федорова слідуючого складу (г/л): калій фосфорнокислий однозаміщений - 0,5; магній сірчанокислий - 0,3; марганець сірчанокислий - 0,005; залізо сірчанокисле - 0,005; амоній молібденовокислий - 0,005; крейда 69. 3,5; кислота борна - 0,005; меляса - 30,0 або цукор - 20,0 після культивування на качалці приActivity of the strain (with indication of cultivation conditions and method of activity determination): when cultivated on Fedorov's medium of the following composition (g/l): monosubstituted potassium phosphate - 0.5; magnesium sulfate - 0.3; manganese sulfate - 0.005; iron sulfate - 0.005; ammonium molybdenum acid - 0.005; chalk 69. 3.5; boric acid - 0.005; molasses - 30.0 or sugar - 20.0 after cultivation on a rocker at

200-220об/хв,; температурі 28-12 протягом 48-60 год накопичення біомаси 1 х1ОУкл/мл. Титр культури визначають методом посіву на агаризоване середовище Федорова.200-220 rpm; at a temperature of 28-12 during 48-60 hours of accumulation of biomass 1 x1OUcl/ml. The titer of the culture is determined by the method of inoculation on Fedorov's agar medium.

Спосіб, умови і склад середовищ для зберігання: скошене агаризоване середовище (г/л): магнійMethod, conditions and composition of media for storage: mowed agar medium (g/l): magnesium

Сірчанокислий - 0,3; натрій хлористий - 0,3; калій фосфорнокислий однозаміщений - 0,5; марганець сірчанокислий - 0,005; залізо сірчанокисле - 0,005; амоній молібденовокислий - 0,005; кальцій вуглекислий - 3,5; меляса - 20, або цукор - 10; кислота борна - 0,005; агар - 20,0; температура плюс 42С, термін зберігання - 6 міс.Sulfuric acid - 0.3; sodium chloride - 0.3; monosubstituted potassium phosphate - 0.5; manganese sulfate - 0.005; iron sulfate - 0.005; ammonium molybdenum acid - 0.005; calcium carbonate - 3.5; molasses - 20, or sugar - 10; boric acid - 0.005; agar - 20.0; temperature plus 42C, shelf life - 6 months.

Умови і склад середовищ для ферментації: аерація, перемішування, температура 28 -192С; тривалість 70 культивування 48-60 год, рН - 6,5 -- 7.0, середовище (г/л): калій фосфорнокислий однозаміщений - 0,5; магній сірчанокислий - 0,3; марганець сірчанокислий - 0,005; залізо сірчанокисле -0,005; сіль кухонна - 0,3; амоній молібденовокислий - 0,005; кислота борна -0,005; крейда - 3,5; меляса - 30; пропінол - 0,3.Conditions and composition of fermentation media: aeration, stirring, temperature 28 -192C; duration of 70 cultivation 48-60 h, pH - 6.5 - 7.0, medium (g/l): monosubstituted potassium phosphate - 0.5; magnesium sulfate - 0.3; manganese sulfate - 0.005; iron sulfate -0.005; table salt - 0.3; ammonium molybdenum acid - 0.005; boric acid -0.005; chalk - 3.5; molasses - 30; propinol - 0.3.

Генетичні особливості: Не підлягав дії мутагенних факторів. Непатогенний. Ауксотрофність, стійкість до антибіотиків не встановлені.Genetic features: Not subject to mutagenic factors. Non-pathogenic. Auxotrophy, resistance to antibiotics have not been established.

Культивування в виробництві здійснюють в аеробних умовах, при постійному перемішуванні, за температури 28-12, протягом 38-60 годин на стерильному поживному середовищі, що містить: калій фосфорнокислий однозаміщений, магній сірчанокислий, сіль кухонну, залізо сірчанокисле, марганець сірчанокислий, амоній молібденовокислий, кислоту борну, крейду, мелясу, пропінол.Cultivation in production is carried out in aerobic conditions, with constant stirring, at a temperature of 28-12, for 38-60 hours on a sterile nutrient medium containing: monosubstituted potassium phosphate, magnesium sulfate, table salt, iron sulfate, manganese sulfate, ammonium molybdenum, boric acid, chalk, molasses, propinol.

В одержаній культуральній рідині титр життєздатних клітин продуценту не менше 1х10 ЯКУО/см3.,In the obtained culture liquid, the titer of viable cells of the producer is not less than 1x10 CFU/cm3.,

Для стабілізації в культуральну рідину вносять природні стабілізатори, суміш, розмішують в пристрої з механічним перемішуванням типу турбозмішувача і розміщують тонким шаром на піддонах, підсушують у сушильній шафі з систематичним перемішуванням за температури 20-402С протягом 20-24 годин до вологості не більше 1095. В готовому препараті визначають загальне число життєздатних мікроорганізмів продуцента.For stabilization, natural stabilizers are added to the culture liquid, the mixture is mixed in a device with mechanical stirring such as a turbo mixer and placed in a thin layer on pallets, dried in a drying cabinet with systematic stirring at a temperature of 20-402C for 20-24 hours to a humidity of no more than 1095. the total number of viable microorganisms of the producer is determined in the finished preparation.

Вихід готового продукту складає в середньому 80-90905. 29 Ефективність дії бактерійного препарату біоактиватора Азотофіт випробовували в дослідах на рослинах щ- огірка, при розсадному і безрозсадному способах вирощування, на рослинах капусти цвітної, в залежності від способів застосування біоактиватора, на рослинах салату при замочуванні насіння до висіву. Підтверджено, що застосування біоактиватора Азотофіт в рослинництві прискорює ріст рослин, ефективно підвищує урожай та значно поліпшує його якість. -The yield of the finished product is on average 80-90905. 29 The effectiveness of the bacterial preparation of the bioactivator Azotophyt was tested in experiments on cucumber plants, with seedling and seedling-free growing methods, on cauliflower plants, depending on the methods of bioactivator application, on lettuce plants when soaking seeds before sowing. It has been confirmed that the use of Azotophyt bioactivator in crop production accelerates the growth of plants, effectively increases the yield and significantly improves its quality. -

Технічне розв'язання поставлених завдань пояснюється наступними прикладами. «ІThe technical solution of the given tasks is explained by the following examples. "AND

Приклад 1Example 1

З метою одержання бактерійного препарату приготували рідке поживне середовище, що містить калій Ф фосфорнокислий однозаміщений, магній сірчанокислий, сіль кухонну, залізо сірчанокисле, марганець СМ сірчанокислий, амоній молібденовокислий, кислоту борну, крейду, мелясу, пропінол.In order to obtain a bacterial preparation, a liquid nutrient medium was prepared containing monosubstituted potassium F phosphate, magnesium sulfate, table salt, iron sulfate, manganese CM sulfate, ammonium molybdenum, boric acid, chalk, molasses, propinol.

Культуральну рідину вирощували на качалці з числом обертів 200-220хв"! за температури 29-12 протягом сч 48-60 годин, рН 6,5 - 7,0. В одержану культуральну рідину (об'єм 10л) з накопиченням біомаси 1х10'ЗКУО/см3.,The culture liquid was grown on a rocker with a rotation speed of 200-220 min"! at a temperature of 29-12 °C for 48-60 hours, pH 6.5 - 7.0. In the resulting culture liquid (volume 10 l) with the accumulation of biomass 1x10'ZKUO /cm3.,

Культуральну рідину змішали з природним стабілізатором, помістили тонким шаром на піддони і підсушили в сушильній шафі за температури 20-252С протягом 20-24 годин до вологості 795. «The culture liquid was mixed with a natural stabilizer, placed in a thin layer on pallets and dried in an oven at a temperature of 20-252C for 20-24 hours to a humidity of 795.

З операції одержано 20кг готового продукту з титром життєздатних клітин продуценту 4х109КУС/г. Вихід -0 с препарату по відношенню до культуральної рідини склав 80905. ц Приклад 2 -» Препарат одержували, як описано вище, але в виробничих умовах - в ферментаторі ємністю 1,0м. Процес культивування здійснювали при постійному перемішуванні мішалкою в аеробних умовах з витратою повітря 1,0 45-11 на 1м3 поживного середовища за 1 хвилину, за температури 29-12С, надлишковому тиску 0,03-0,05МПа о протягом 38-60 годин. Одержано 500л культуральної рідини з титром життєздатних клітин 1,1х10 ЯКУОС/см?У, рН ко 6,0-7,0-7,6, без сторонньої мікрофлори. Із стабілізованої культуральної рідини одержали 986бкг готового с продукту з титром життєздатних клітин 5х109КУО/г і вологістю 6,595. Вихід препарату по відношенню до культуральної рідини склав 89,6905. ї 50 Приклад З -ч Вивчення впливу препарату біоактиватора Азотофіт на продуктивність рослин огірка, капусти цвітної, салату, томатів проводились на дослідних ділянках.The operation yielded 20 kg of finished product with a titer of viable producer cells of 4x109 CFU/g. The yield of -0 s of the drug in relation to the culture liquid was 80905. ц Example 2 -» The drug was obtained as described above, but under production conditions - in a fermenter with a capacity of 1.0 m. The cultivation process was carried out with constant stirring with a stirrer in aerobic conditions with an air flow rate of 1.0 45-11 per 1 m3 of nutrient medium in 1 minute, at a temperature of 29-12C, an excess pressure of 0.03-0.05MPa for 38-60 hours. 500 liters of culture fluid with a viable cell titer of 1.1x10 YAKUOS/cm?U, pH 6.0-7.0-7.6, without extraneous microflora was obtained. From the stabilized culture fluid, 986 bkg of the finished product with a viable cell titer of 5x109 CFU/g and a moisture content of 6.595 were obtained. The yield of the drug in relation to the culture liquid was 89.6905. 50 Example 3-h The study of the effect of the bioactivator drug Azotophyt on the productivity of cucumber, cauliflower, lettuce, and tomato plants was carried out on experimental plots.

Встановлено, що найбільший ефект від застосування препарату при обробці насіння та обприскуванні рослин за вегетацією. Біоактиватор Азотофіт здатний замінити хімічні протруйники та заощадити на внесенні 50-7Окг/га 59 аміачної селітри. с Ефект від застосування препарату полягає у підвищенні схожості насіння, стимуляції розвитку кореневої системи та рослини загалом, прискоренні цвітіння і дозрівання урожаю, покращенні мінерального живлення рослини, підвищення стійкості їх до хвороб та абіотичних факторів, підвищенні урожайності овочевих на 40905, зменшенні витрат на протруєння насіння та захист рослин від хвороб у 5-10 раз та доз азотних добрив на бо 60-7096. Урожайність овочевих культур при застосуванні біоактиватора Азотофіт суттєво зростає, про що свідчать дані наведеної Таблиці. бо 1 2 З 4 о ви іIt has been established that the greatest effect of the drug is applied during seed treatment and spraying of plants during the growing season. Azotophyt bioactivator can replace chemical poisons and save on application of 50-7Okg/ha 59 of ammonium nitrate. c The effect of using the drug consists in increasing the germination of seeds, stimulating the development of the root system and the plant in general, accelerating the flowering and ripening of the crop, improving the mineral nutrition of the plant, increasing their resistance to diseases and abiotic factors, increasing the yield of vegetables by 40905, reducing the costs of seed poisoning and protection of plants from diseases in 5-10 times and doses of nitrogen fertilizers per bo 60-7096. The yield of vegetable crops when using the Azotophyt bioactivator increases significantly, as evidenced by the data in the Table. because 1 2 Z 4 o you and

Отже, під впливом біоактиватора Азотофіт урожайність томатів підвищується до 895, салату головчастого до 12,3, листкового - до 1890, огірків до 3590, цвітної капусти до 3290. -оSo, under the influence of the bioactivator Azotophyt, the productivity of tomatoes increases to 895, lettuce to 12.3, leaf lettuce to 1890, cucumbers to 3590, cauliflower to 3290.

Щодо економічної ефективності застосування біоактиватора Азотофіт: вартість передпосівної обробки традиційними хімічними протруйниками 140-18Огрн/т, біосактиватором Азотофіт - приблизно 42грн/т.; вартість підживлення аміачною селітрою - 10Огрн/т, бісактиватором Азотофіт - 45грн/т. чаRegarding the economic efficiency of using the Azotofit bioactivator: the cost of pre-sowing treatment with traditional chemical poisons is UAH 140-18/t, the Azotophyt bioactivator is approximately UAH 42/t; the cost of fertilizing with ammonium nitrate - 10 UAH/t, bisactivator Azotophyt - 45 UAH/t. Cha

Claims (1)

Формула винаходу «The formula of the invention " Спосіб одержання біоактиватора шляхом культивування мікроорганізму-продуцента та сушіння культуральної рідини, який відрізняється тим, що як мікроорганізм-продуцент використовують штам Агоіорасіег спгоососсут см 3064, депонований в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології НАН України як Агоїюбасіег спгоососсит с 1мМв в-7090, культивування проводять в аеробних умовах за температури 29 я | о ; при постійному перемішуванні, при водневому показнику . протягом годин на стерильному 6,5- 7,0 20-24 « 470 поживному середовищі, яке містить, мас. 90: - с амоній молібденовокислий 0,0001-0,0010 ;з» калій фосфорнокислий однозаміщений 0,02-0,08 магній сірчанокислий 0,01-0,06 залізо сірчанокисле 0,0002-0,0008 ке марганець сірчанокислий 0,0001-0,0010 кислота борна 0,0001-0,0010 о крейда 0,2-0,6 І«е) меляса бурякова 2,0-6,0 їз 50 сіль кухонна 0,01-0,10, "і при цьому одержана культуральна рідина з титром життєздатних клітин продуцента не менше 10 КУО/см? є рідкою товарною формою препарату, а суху товарну форму одержують сушінням 1х10 с суміші культуральної рідини з речовинами-стабілізаторами (цеоліт природний молотий, глина бентонітова порошкоподібна неактивована, торф верховий) в сушильній шафі за температури 20 40 о протягом годин або іншими відомими методами сушіння з оптимально підібраними для цього параметрами ю 20-24 (температура, тривалість). Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2007, М 5 25.04.2007. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки 65 України.The method of obtaining a bioactivator by cultivating a producer microorganism and drying the culture liquid, which differs in that the strain Agoiorasieg spgoosossut cm 3064, deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine as Agoiyubasieg spgoosossit c 1mMv v-7090, is used as a producer microorganism, cultivation is carried out in aerobic conditions at a temperature of 29 and | about; with constant stirring, with a hydrogen index of . for hours on a sterile 6.5-7.0 20-24 « 470 nutrient medium, which contains, wt. 90: - ammonium molybdenum acid 0.0001-0.0010 ; potassium phosphate monosubstituted 0.02-0.08 magnesium sulfate 0.01-0.06 iron sulfate 0.0002-0.0008 ke manganese sulfate 0.0001 -0.0010 boric acid 0.0001-0.0010 o chalk 0.2-0.6 I«e) beet molasses 2.0-6.0 iz 50 table salt 0.01-0.10, "and at the resulting culture liquid with a titer of viable producer cells of at least 10 CFU/cm is the liquid commercial form of the drug, and the dry commercial form is obtained by drying a 1x10 s mixture of the culture liquid with stabilizer substances (ground natural zeolite, bentonite clay powdered inactivated, peat) in a drying cabinet at a temperature of 20-40 o for hours or by other known methods of drying with optimally selected parameters of 20-24 for this (temperature, duration). Official Bulletin "Industrial Property". Book 1 "Inventions, useful models, topographies of integrated microcircuits" , 2007, M 5 04/25/2007. State Department of Intellectual Property of the Ministry of Department of Education and Science 65 of Ukraine.
UAU200701794U 2007-02-21 2007-02-21 Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent UA22947U (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200701794U UA22947U (en) 2007-02-21 2007-02-21 Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAU200701794U UA22947U (en) 2007-02-21 2007-02-21 Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA22947U true UA22947U (en) 2007-04-25

Family

ID=38137237

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAU200701794U UA22947U (en) 2007-02-21 2007-02-21 Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA22947U (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2628411C2 (en) Microbial inoculants and fertilisers composition containing them
AU2007355202B2 (en) Stable organic-carrier-based microbial inoculants and method for producing the same
RU2626543C2 (en) Paenibacillus mucilaginosus bacteria strain, method for plants growth stimulation and protection against diseases and application of paenibacillus mucilaginosus bacteria strain as fertiliser and biological control agent (antipatogenic means) in prevention and/or treatment of plant disease
CN109456105A (en) A kind of microbial bacterial agent method of preparation and use for alleviating solanaceous crops continuous cropping obstacle
MX2015002639A (en) Method of increasing abiotic stress resistance of a plant.
BR112020006362A2 (en) large-scale production of liquid and solid trichoderma products
CN106577772A (en) Novel biological seed coating and application thereof
Giri et al. A comparative study on phyllosphere nitrogen fixation by newly isolated Corynebacterium sp. & Flavobacterium sp. and their potentialities as biofertilizer
KR20050111367A (en) A pgpr growing-promoter and it's growing method for crops
AU774111B2 (en) Methods for enhancing plant growth using hydrogen gas
KR102068090B1 (en) Commposition for accelerating growth of plants using bacillus amyloliquefaciens and use thereof
JPH0569801B2 (en)
JPH10276579A (en) Plant growth promoting agent using bacillus genus micro-organisms and method for promoting growth
JP5833893B2 (en) Sterilization method of organic fertilizer
RU2465256C2 (en) Bacterial fertiliser
RU2625967C2 (en) BEIJERINCKIA FLUMINENSIS Bf 2806 BACTERIA STRAIN, ITS APPLICATION AS FERTILISER AND BIOLOGICAL CONTROL AGENT FOR PREVENTION AND/OR TREATMENT OF PLANT DISEASES AND METHOD FOR STIMULATION OF GROWTH AND PLANTS PROTECTION AGAINST DISEASES
RU2736340C1 (en) Agricultural growth stimulant
CN107602278A (en) The preparation method of tobacco breeding and seedling nursing with equipment matrix
RU2551968C2 (en) Bacillus pumilus A 1.5 BACTERIA STRAIN AS AGENT FOR INCREASING PLANT PRODUCTIVITY AND PLANT PROTECTION FROM DISEASES CAUSED BY PHYTOPATHOGENIC MICROORGANISMS
RU2662992C1 (en) Method of pre-plant treatment of seeds of agricultural plants
UA22947U (en) Process for the preparation of "azotofit", biological activating agent
Hussein et al. Effects of several effective microorganisms (EM) on the growth of Chinese cabbage (Brassica rapa)
RU2640286C1 (en) Fibre flax growing method
RU2735509C1 (en) Method of stimulating nitrogen-fixing capacity of legume grasses
CN110628685B (en) Bacillus subtilis strain and application thereof in agricultural production