UA148893U - Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах - Google Patents
Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах Download PDFInfo
- Publication number
- UA148893U UA148893U UAU202101656U UAU202101656U UA148893U UA 148893 U UA148893 U UA 148893U UA U202101656 U UAU202101656 U UA U202101656U UA U202101656 U UAU202101656 U UA U202101656U UA 148893 U UA148893 U UA 148893U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- glimepiride
- carried out
- solution
- detection
- extracts
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- WIGIZIANZCJQQY-RUCARUNLSA-N glimepiride Chemical compound O=C1C(CC)=C(C)CN1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)N[C@@H]2CC[C@@H](C)CC2)C=C1 WIGIZIANZCJQQY-RUCARUNLSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 229960004346 glimepiride Drugs 0.000 claims abstract description 49
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 7
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 5
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 claims abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 11
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 abstract description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 3
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N methyl cyanide Natural products CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 2
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 2
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 2
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- DOBUSJIVSSJEDA-UHFFFAOYSA-L 1,3-dioxa-2$l^{6}-thia-4-mercuracyclobutane 2,2-dioxide Chemical compound [Hg+2].[O-]S([O-])(=O)=O DOBUSJIVSSJEDA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZFWAHZCOKGWUIT-UHFFFAOYSA-N 1-anilino-3-phenyliminourea Chemical compound C=1C=CC=CC=1N=NC(=O)NNC1=CC=CC=C1 ZFWAHZCOKGWUIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJCVRTZCHMZPBD-UHFFFAOYSA-N 3-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 XJCVRTZCHMZPBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000226657 Clarkia concinna Species 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 206010022523 Intentional overdose Diseases 0.000 description 1
- VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N N-[[(5S)-2-oxo-3-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)-1,3-oxazolidin-5-yl]methyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C1O[C@H](CN1C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010042464 Suicide attempt Diseases 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 244000275904 brauner Senf Species 0.000 description 1
- 229940006460 bromide ion Drugs 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N chloroform;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.ClC(Cl)Cl OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;ethyl acetate Chemical compound ClCCl.CCOC(C)=O WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 229910000370 mercury sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- OSZNNLWOYWAHSS-UHFFFAOYSA-M neostigmine methyl sulfate Chemical compound COS([O-])(=O)=O.CN(C)C(=O)OC1=CC=CC([N+](C)(C)C)=C1 OSZNNLWOYWAHSS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003538 oral antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 229940127209 oral hypoglycaemic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229930185790 proserin Natural products 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Спосіб визначення глімепіриду в біологічних об'єктах включає ізолювання глімепіриду з крові, очищення одержаного вилучення від домішок з подальшим виявленням та кількісним визначенням в ньому глімепіриду методами хроматографії. При цьому ізолювання глімепіриду з крові проводять 10 % розчином кислоти трихлорацетатної з подальшим центрифугуванням; очищення первинних вилучень від біогенних домішок та екстрактів від співекстрактивних речовин проводять н-гексаном; екстракцію проводять хлороформом; виявлення глімепіриду в одержаних екстрактах проводять методом ТШХ з використанням систем розчинників: етилацетату та суміші метиленхлорид-етилацетат-кислота ацетатна льодяна (50:50:1), та специфічних реагентів: 1 % розчину ваніліну та 5 % розчину хлоралгідрату, кількісне визначення глімепіриду в одержаних екстрактах проводять методом ВЕРХ з УФ-детектуванням.
Description
Корисна модель належить до медицини, зокрема до судово-токсикологічних досліджень, і стосується способів визначення глімепіриду в біологічних об'єктах.
Глімепірид - пероральний гіпоглікемічний засіб групи похідних сульфонілсечовини другого покоління (1-3). Згідно з даними сайтів раїєпізмШе.сот та е-пеайнте.сот у багатьох країнах світу в період 2015-2020 рр. зареєстровано близько 18000 випадків проявів побічних ефектів при застосуванні глімепіриду. Летальні отруєння у більшості обумовлені навмисним передозуванням глімепіридом у дозах, що перевищують терапевтичні в десятки разів.
Відповідно даних сайтів, зареєстровано більше 200 випадків суїциду при застосуванні глімепіриду за аналізований період |4-6)Ї. Збільшення кількості випадків отруєнь глімепіридом при спробі самогубства або випадковому вживання, а також відсутність надійних, специфічних та доступних методів виявлення і кількісного визначення глімепіриду в біологічних матрицях обумовлює потребу в розробці нових аналітичних методик для потреб хіміко-токсикологічного аналізу.
Аналогом корисної моделі є спосіб визначення глімепіриду в біологічних об'єктах (крові), який включає гідроліз розведеною хлористоводневою кислотою та екстракцію хлороформом.
Ідентифікацію препарату проводили методом тонкошарової хроматографії (ТШХ). Як рухому фазу застосовували хлороформ-ацетон (9: 1). Візуалізацію зон адсорбції здійснювали загальноалкалоїдними реагентами або розчином дифенілкарбазону в хлороформі з подальшим додаванням ртуті сульфату І71.
Недоліками вищенаведеного способу визначення похідних сульфонілсечовини є застосування ацетону, обіг якого підлягає контролю; відсутність запропонованих методів для очищення первинних вилучень від органічних домішок; застосування неселективної системи розчинників; застосування токсичних та неспецифічних детектуючих реагентів.
Задачею корисної моделі є розробка способу визначення глімепіриду в біологічних об'єктах, придатного для судово-токсикологічних досліджень направленого характеру, що включає спеціальний метод ізолювання глімепіриду з біологічних об'єктів доступними екстрагентами; методи очищення первинних вилучень від домішок біогенної природи; методики виявлення глімепіриду хроматографічними методами з використанням селективних систем розчинників, специфічних і високочутливих реагентів; методики кількісного визначення глімепіриду селективним та високочутливим методом ВЕРХ.
Поставлена задача вирішується тим, що в способі визначення глімепіриду в біологічних об'єктах, що включає застосування спеціального методу ізолювання глімепіриду з біологічних об'єктів підкисленим органічним розчинником, методи очищення первинних вилучень та екстрактів, одержаних з цих біологічних об'єктів, від біогенних домішок та співекстрактивних речовин, методик виявлення та кількісного визначення глімепіриду в екстрактах з біологічних об'єктів. Згідно з корисною моделлю, ізолювання глімепіриду з біологічних об'єктів проводять 1095 розчином трихлорацетатної кислоти з подальшим центрифугуванням, очищенням одержаного вилучення н-гексаном від органічних співекстрактивних речовин та екстрагуванням хлороформом; виявлення даної речовини в хлороформному екстракті та додаткове очищення даного екстракту від співекстрактивних речовин методом ТШХ; далі виконують виявлення та кількісне визначення глімепіриду в метанольних елюатах методом високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ).
Корисна модель ілюструється прикладом.
Приклад 1 10 мл крові поміщають в колбу об'ємом 50 мл, додають 1 мл метанол-метиленхлоридного (171) розчину глімепіриду, що містить 20 мкг речовини, перемішують та витримують протягом б год. До вмісту колби додають 20 мл води дистильованої, підкисленої 1 М розчином кислоти хлоридної до рН 2,0-2,5 та 10,0 мл 1095 розчину кислоти трихлорацетатної. Вміст колби настоюють протягом 10 хв. при періодичному перемішуванні, центрифугують протягом 5 хв. при швидкості 3000-5000 об./хв., зливають надосадову рідину у ділильну колбу та екстрагують 50 мл п-гексану протягом 5 хв. з використанням механічного струшувача. Після розшарування вміст колби переносять у ділильну лійку та відділяють органічний шар, який у подальшому не досліджують. Водний шар підкислюють 1 М розчином кислоти хлоридної до рН 3,0, поміщають у ділильну колбу та тричі по 20,0 мл екстрагують хлороформом по 10 хв з використанням механічного струшувача. Після розшарування вміст колби переносять у ділильну лійку, органічний шар відділяють, фільтрують через паперовий фільтр з 5,0 г безводного натрій сульфату. Одержані хлороформні екстракти об'єднують, упарюють в потоці теплого повітря до об'єму 25 мл.
Виявлення глімепіриду в одержаному екстракті проводять методом ТШХ на бо хроматографічних пластинках МегсК взійса де! 60 Р254 (Німеччина) розміром 10х10 см з використанням етилацетату, як загальної для похідних сульфонілсечовини системи розчинників, а також суміші метиленхлорид-етилацетат-кислота ацетатна льодяна (50:50:71), як індивідуальної для глімепіриду системи розчинників, а також специфічних реагентів: 1 Фо розчину ваніліну та 5 95 розчину хлоралгідрату. Перед елююванням хроматографічні пластинки попередньо відмивають метанолом та активують в сушильній шафі при температурі 110-420 70 протягом 0,5 год. Висушену хроматографічну пластинку ділять на три частини, на лінію старту якої у вигляді точки в зону 1 та 2 наносять 10 мкл (1 мкг/мл) стандартних розчинів глімепіриду та кофеїну. У зону З смугою завтовшки 2 см наносять 74 частини хлороформного екстракту глімепіриду, одержаного з крові. При обробці 2-ої та 3-ої зон хроматографічної пластинки 1 95 розчином ваніліну або 5595 розчином хлоралгідрату на хроматографічній пластинці візуалізуються індивідуальні плями зі значеннями Вії, зіставними зі стандартним зразком глімепіриду (табл. 1). При цьому в першому випадку забарвлення плями має бути коричневим, а в другому - червоним, що переходить у рожеве.
Очищення екстракту проводять методом ТШХ на хроматографічних пластинках Мегек віїса де! 60 ГРгва (Німеччина) розміром 10х10 см. Хроматографічну пластинку ділять на три частини, на лінію старту якої у вигляді точки в зону 1 наносили 10 мкл (1 мкг/мл) стандартного розчину глімепіриду. У зони 2 і З смугою завтовшки 2 см наносять 72 частини хлороформного екстракту глімепіриду, одержаного з крові. Після хроматографування в етилацетаті пластинку сушать, а зони 1 і 2 обробляють специфічними проявниками: 1 95 розчином ваніліну або 5 95 розчином хлоралгідрату. У необробленій проявником зоні 3, в області відповідного глімепіриду значення
ВІ, з пластинки скальпелем знімають шар сорбенту площею 3х1 см, який поміщають в скляний флакон, що містить 10 мл метилового спирту, струшують протягом 5 хв і фільтрують через фільтр марки "червона стрічка". Одержаний елюат використовують для ВЕРХ досліджень.
Таблиця 1
Параметри хроматографичиої рухливості досліджуваних речовин глімепіриду екстракт
Метиленхлорид- етилацетат-кислота 0,50520,01 0495003 0,26 ацетатна льодяна (50:50:1)
Примітка: "7 - хроматографічна система вважається придатною, якщо на хроматограмі чітко видно пляму кофеїну.
Виявлення глімепіриду в метанольному елюаті та його кількісне визначення проводять методом ВЕРХ з Уф-детектуванням на рідинному хроматографі "Міліхром-А-02" з УФ- детектуванням (ЗАТ "Еконова", Новосибірськ). Для розділення речовин використовують обернено-фазову колонку Ргопіові-120-5-С18-АО розміром б2х75 мм, зерніння 5 мкм ("Візспоїї
Зо Апаїузеїеснипік па Сегаїє СтрнН", Німеччина). Градієнтне елюювання виконують шляхом змішування двох елюентів: елюент А - (0,2М ГіСІО-0,005М НСІОЗ4|, елюент Б - ацетонітрил кваліфікації "для ВЕРХ". Швидкість рухомої фази - 100 мкл/хв. Температура термостата колонки "С. УФ-спектрофотометричне детектування проводять одночасно при 8 довжинах хвиль: 210, 220, 230, 240, 250, 260, 280 ї 300 нм. Аналіз та обробку хроматограм здійснюють програмою 35 "Аналітика-Спто т". Правильність методики періодично контролюють шляхом хроматографування контрольного багатокомпонентного розчину, що складається з бромід-іона, уридину, кофеїну, прозерину, м-нітроаніліну, п-нітроаніліну і трифтазину.
Виявлення глімепіриду здійснюють за часом утримування. На фіг. 1 (Хроматограма стандартного зразка глімепіриду) та фіг. 2 (Хроматограма елюату, одержаного з біологічного матеріалу) наведено хроматограми метанольного розчину стандартного зразка глімепіриду та метанольного елюату, одержаного з тонкого шару. Піки речовин на відповідних хроматограмах мають бути співвідносними за часом утримування (івн-10,64).
Для кількісного визначення глімепіриду будують градуювальний графік (фіг. З - Графік градуювальної залежності площі піка метанольного розчину глімепіриду від концентрації) залежності площі піка метанольного розчину стандартного зразка глімепіриду від концентрації (мкг/мл), визначеної за довжини хвилі 230 нм.
Лінійність наведеного градуювального графіка в координатах (5, ум. од.) - (С, мкг/мл) має бути в інтервалі 0,1-20,0 мкг/мл.
Методом лінійної регресії виведено рівняння градуювальної прямої залежності площі піка (у) від концентрації (х) загального вигляду: у-рха.
Метрологічні характеристики одержаної градуювальної залежності наведено в табл. 2.
Таблиця 2
Метрологічні характеристики градуювальної залежності площі піка від концентрації 61617 1а 1711156 | За | А | ла 0,9999 0,011408 -0,00037 2,1108:105 0,000217 0,000558 7,12-105
Методом найменших квадратів розраховують коефіцієнти регресії градуювального графіка: 5-0,0114-6-0,00037, де 5 - площа піка, ум. од.;
С - концентрація речовини, мкг/мл.
Встановлено, що вільний член рівняння градуювального графіка при визначенні значущості істотно не відрізняється від нуля. Це обумовлює перехід рівняння до вигляду: у-р:х. Тому для визначення концентрації глімепіриду в об'єктах дослідження застосовують рівняння вигляду:
З-0,01146.
Результати кількісного визначення глімепіриду у вилученнях з крові наведено в табл. 3.
Таблиця З
Метрологічні характеристики ізолювання глімепіриду з крові (п-5, Р-0,95) во, 13,08 0,513 229-107 0,637
Таким чином, заявлений спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в крові є чутливим, селективним, специфічним та може бути використаним для потреб хіміко- токсикологічного аналізу.
Джерела інформації: 1. Сахарньй диабет 2 типа у взросльїх / И.И. Дедов и др. // Сахарньй диабет. - 2020. - Мо 23. - б. 4-102. пИрв//дої.ога/10.14341/ОМ12507. 2. Шаронова Л.А., Вербовой А.Ф., Косарева О.В. Роль препаратов сульфонилмочевинь в лечении сахарного диабета 2-го типа // Медицинский Совет. - 2016. - Мо (3). - С. 6-9. перз//дої.огд/10.21518/2079-701Х-2016-3-6-9.
З. ЕмаІчаїйоп, ейПісасу апа юїегаріїйу ої СсСіисоМомах їарбієї іп їуре 2 аіабеїс раїепів / 2. АЇі еї аї. // Рак. У Ріапт 5сі. - 2016. - Мої. 29. - Р. 1443-1449. 4. ВаїКулаг М., Мізнга А. Ргєдісйоп Апаїузів ої Рпаптасокіпеїіс, Ююхісоіодіса! апа агидіїкеїїпев5 рагатеїегв ої 5емегаї! ога! пуродіусетіс адепів ої ЗИ Мопу! Огеаз зесопа депегаїйоп ивіпд іп-віїйсо теїнодз // ІПТетаїйіопаї дошгпаї ої Ситепі Везеагсі іп Меадісіпез 4. Медіса! Зсієпсе. - 2020. - Мої. З,
Ів5. 1-Р. 4-10. 5. Раїа! юхіс ерідепта! песгоїувзіє ргобабріу теїаїей юю діїтерігде іп а раїепі мйй а теадісаї пПівіогу ої пурегзепвійймйу о зйиМатеїпохаго!іе-інітейшйоргіт / В. О!цпівї аї. // Вг у Сіїп Рпаптасої. - 2021. - Мої. 87(3). - Р. 1591-1593. доі:10.1111/оср.14499. б. ппрз/Ллимулму.епеайпте.сот/аз/дітерігіде/5цісіде-анетрі/. 7. Ібгадітома М.М., ІКгатом І.Т. Апаїувів ої діїтерійде іп питап Біоса апа ипгіпе Бу ШПіп-Іауег спотаїйодгарну апа уМ-5ресіторпоїотегїгу // Адії Тір ВаКепі. - 2015. - Мо 20(2). - б. 71-75.
Claims (1)
- ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб визначення глімепіриду в біологічних об'єктах, що включає ізолювання глімепіриду з45 крові, очищення одержаного вилучення від домішок з подальшим виявленням та кількісним визначенням в ньому глімепіриду методами хроматографії, який відрізняється тим, що ізолювання глімепіриду з крові проводять 1095 розчином кислоти трихлорацетатної з подальшим центрифугуванням; очищення первинних вилучень від біогенних домішок та екстрактів від співекстрактивних речовин проводять н-гексаном; екстракцію проводять хлороформом; виявлення глімепіриду в одержаних екстрактах проводять методом ТШХ з використанням систем розчинників: етилацетату та суміші метиленхлорид-етилацетат-кислота ацетатна льодяна (50:50:1), та специфічних реагентів: 1 95 розчину ваніліну та 5 95 розчину хлоралгідрату, кількісне визначення глімепіриду в одержаних екстрактах проводять методом ВЕРХ з УФ-детектуванням. І г ща е ї «г Н Е х ; 4 Її Й ! Н і ; ; я і ; о ус ЧИ ВА лк - Е ; «і в Кене них пен ня нини пи пп нн нина ник вони зи пон ин ин пив Ве м.Фіг. 1 т --ї щ- 4 Х дом к Ко їх ма 4 лому ужелнмвх є нан НН ее І х. «ЕХ У ЖК кт в в Кк кв в в В ОВ В КВН ї Е ЗМ А емо вні вуст ква ов зе й Пот, дик - 1 !Е. Ь : А урну рр ру рр ртуть Го Е: й я х фе минФіг. 205.ві. | Кк даю! й 05 К « Й : КУ ма : У : Я : Мей Бо й я : НЕ п ни (о І «В ЗС. МЕМФіг. З
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU202101656U UA148893U (uk) | 2021-03-29 | 2021-03-29 | Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU202101656U UA148893U (uk) | 2021-03-29 | 2021-03-29 | Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA148893U true UA148893U (uk) | 2021-09-29 |
Family
ID=77892968
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU202101656U UA148893U (uk) | 2021-03-29 | 2021-03-29 | Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA148893U (uk) |
-
2021
- 2021-03-29 UA UAU202101656U patent/UA148893U/uk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chen et al. | Liquid chromatography of active principles in Sophora flavescens root | |
| Woolf et al. | Determination of L-735 524, an human immunodeficiency virus protease inhibitor, in human plasma and urine via high-performance liquid chromatography with column switching | |
| Liu et al. | Characterization of compounds and potential neuraminidase inhibitors from the n-butanol extract of Compound Indigowoad Root Granule using ultrafiltration and liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| Sioufi et al. | Chromatography of benzodiazepines | |
| Masatake | Automatic column chromatographic method for insect-moulting steroids | |
| CN104034826A (zh) | 一种银杏叶提取物中萜类内酯的检测方法 | |
| Appleton et al. | A simple method for high-throughput extract prefractionation for biological screening | |
| Chawla et al. | A review of HPLC technique covering its pharmaceutical, environmental, forensic, clinical and other applications | |
| CN102125594A (zh) | 一种中药冻干注射剂中活性化合物含量的测定方法 | |
| Tang et al. | Analysis of ginkgolides and bilobalide in Ginkgo biloba L. extract injections by high-performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection | |
| CN102288686A (zh) | 一种中药冻干注射剂中有机溶剂残留的测定方法 | |
| Manion et al. | High-presure liquid chromatographic assay of theophylline in biological fluids | |
| CN102068656B (zh) | 一种中药制剂羊痫疯癫丸的检测方法 | |
| UA148893U (uk) | Спосіб хроматографічного визначення глімепіриду в біологічних об'єктах | |
| Hayball et al. | Enantiospecific analysis of ketoprofen in plasma by high-performance liquid chromatography | |
| Salari | Solid-phase extraction and reversed-phase high-performance liquid chromatographic technique for isolation and estimation of platelet activating factor in plasma | |
| Jansen et al. | The assay of cyanocobalamin in pharmaceutical preparations by solid-phase extraction and HPLC | |
| UA123009U (uk) | Спосіб визначення гліклазиду в біологічних об'єктах | |
| Brown-Thomas et al. | Determination of glycyrrhetinic acid in human plasma by high-performance liquid chromatography | |
| AU777927B2 (en) | Method and device for detecting and isolating pharmacological compounds being contained in substance mixtures | |
| Rosenfeld et al. | Development of an impregnated reagent and automation of solid-phase analytical derivatization for carbonyls: Proof of principle | |
| CN101352558A (zh) | 一种治疗不畏寒型胃炎颗粒剂的质量控制方法 | |
| Banes | A new partition chromatographic procedure for the assay of pharmaceuticals | |
| Sim et al. | Sensitive high-performance anion-exchange chromatographic determination of paeoniflorin and albiflorin by pulsed amperometric detection after solid-phase extraction | |
| Kutymovna et al. | Optimization of Isolation and Identification Conditions of Glibenclamide Annotation |