UA114255C2 - METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS - Google Patents

METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS Download PDF

Info

Publication number
UA114255C2
UA114255C2 UAA201601194A UAA201601194A UA114255C2 UA 114255 C2 UA114255 C2 UA 114255C2 UA A201601194 A UAA201601194 A UA A201601194A UA A201601194 A UAA201601194 A UA A201601194A UA 114255 C2 UA114255 C2 UA 114255C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
preparation
hours
lactic acid
staphylococcus
acid bacteria
Prior art date
Application number
UAA201601194A
Other languages
Ukrainian (uk)
Inventor
Світлана Григорівна Даниленко
Ліана Павлівна Недорізанюк
Олена Анатоліївна Семенівська
Original Assignee
Інститут Продовольчих Ресурсів Наан
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Інститут Продовольчих Ресурсів Наан filed Critical Інститут Продовольчих Ресурсів Наан
Priority to UAA201601194A priority Critical patent/UA114255C2/en
Publication of UA114255C2 publication Critical patent/UA114255C2/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Винахід належить до біотехнології, стосується способу одержання бактеріального препарату для посолу м'ясної сировини, який включає сумісне культивування молочнокислих бактерій видів Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei ssp. paracasei та Lactobacillus plantarum і стафілококу виду Staphylococcus carnosus при співвідношенні культур 1:0,5:0,5:1 у поживному середовищі на основі води з пептоном протягом 14-15 годин при періодичній аерації при температурі 32 ± 2 ºC при постійному рН 6,4-6,6, відокремлювання біомаси, змішування з захисним середовищем, заморожування, сушіння суспензії клітин та подрібнення препарату.The invention relates to biotechnology, relates to a method for producing a bacterial preparation for the salting of raw meat, which includes the joint cultivation of lactic acid bacteria of the species Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei ssp. paracasei and Lactobacillus plantarum and staphylococcus Staphylococcus carnosus at a culture ratio of 1: 0.5: 0.5: 1 in a nutrient medium based on water with peptone for 14-15 hours with periodic aeration at a temperature of 32 ± 2 ºC at constant pH 6, 4-6.6, separation of biomass, mixing with a protective medium, freezing, drying the cell suspension and grinding the drug.

Description

Винахід належить до біотехнології, а саме до способів одержання бактеріальних препаратів для посолу м'ясної сировини.The invention belongs to biotechnology, namely to methods of obtaining bacterial preparations for salting meat raw materials.

Відомим є спосіб отримання бактеріального препарату для приготування м'ясних продуктів (патент России Мо 22754231, опубл. 27.04.2006), який передбачає глибинне культивування штаму Рагасосси5 адепійіїсап5 К-3 за умов аерації у поживному середовищі, яке містить органічний джерело амінного азоту, джерело азоту на основі дріжджів, глюкозу, магній сірчанокислий, марганець сірчанокислий і воду. До складу поживного середовища додатково вводять натрій хлористий, калій фосфорнокислий однозаміщений, калій фосфорнокислий двозаміщений і калій нітрит, лужний гідролізат крові великої рогатої худоби, компонент, що знижує окислювально-відновної потенціал. Джерело амінного азоту - панкреатичний гідролізат казеїну - використовують з вмістом амінного азоту 600 мгУо або панкреатичний гідролізат знежиреного молока з вмістом амінного азоту 600 мг9о, джерело азоту на основі дріжджів - автолізат пекарських дріжджів за певного співвідношення компонентів. Спосіб дозволяє отримати бактеріальний препарат, який 8-9 міс. зберігає денітрифікуючу активність.There is a known method of obtaining a bacterial preparation for the preparation of meat products (patent of Russia Mo 22754231, publ. 27.04.2006), which involves the deep cultivation of the strain Ragasossi5 adepiiisap5 K-3 under conditions of aeration in a nutrient medium containing an organic source of amino nitrogen, a source nitrogen based on yeast, glucose, magnesium sulfate, manganese sulfate and water. Sodium chloride, mono-substituted potassium phosphate, di-substituted potassium phosphate and potassium nitrite, alkaline hydrolyzate of cattle blood, a component that reduces redox potential are additionally introduced into the nutrient medium. A source of amino nitrogen - pancreatic hydrolyzate of casein - is used with an amino nitrogen content of 600 mgUo or pancreatic hydrolyzate of skimmed milk with an amino nitrogen content of 600 mg9o, a source of nitrogen based on yeast - an autolysate of baker's yeast with a certain ratio of components. The method makes it possible to obtain a bacterial preparation that lasts for 8-9 months. retains denitrifying activity.

Недоліком цього способу є трудомісткість приготування посівного матеріалу та довготривале нагромадження біомаси штаму - (36-48) год. Залучення до складу бактеріального препарату лише одного штаму мікроорганізмів, який володіє нітритредукувальною активністю та отримують м'ясний продукт з невисоким рівнем органолептичних та фізіолого-біохімічних показників.The disadvantage of this method is the time-consuming preparation of the seed material and the long-term accumulation of biomass of the strain - (36-48) hours. The inclusion of only one strain of microorganisms in the composition of the bacterial preparation, which has nitrite-reducing activity, results in a meat product with a low level of organoleptic and physiological-biochemical indicators.

Відомо спосіб приготування сухого бактеріального препарату ПБ-МП для виробництва сирокопчених та сиров'ялених ковбас, до складу якого входять два штами лактобактерій:There is a known method of preparing the dry bacterial preparation PB-MP for the production of raw-smoked and raw-cured sausages, which includes two strains of lactobacilli:

І асорасійи5 ріапіагит (ГНЦА Ме 21654), І астобасіїнв5 сазеї (ГНЦА Ме 2163) та денітрифікуючого мікрокока Містососсиз магіап5 (ГНЦА Мо 2165) (Патент России Мо 2083665, опубл. 10.07.1997).I asorasia5 riapiagite (HNSCA Me 21654), I astobasiinv5 sasei (HNSCA Me 2163) and denitrifying micrococcus Mystosossis magiap5 (HNSCA Mo 2165) (Patent of Russia Mo 2083665, publ. 10.07.1997).

Недоліком цього способу є те що вказаний бактеріальний препарат використовується лише для виробництва сирокопчених та сиров'ялених ковбас.The disadvantage of this method is that the specified bacterial preparation is used only for the production of raw-smoked and raw-cured sausages.

Найбільш близьким технічним рішенням, яке вибрано як прототип є склад суміші мікроорганізмів для виробництва сирокопчених та сиров'ялених м'ясних продуктів (патентThe closest technical solution, which was chosen as a prototype, is the composition of a mixture of microorganisms for the production of raw-smoked and raw-cured meat products (patent

України Мо 102931, опубл. 27.08.2013) з наступним співвідношенням культур, мас. Зо: (50-55): (30-25): (10-7): (5-8): (2,5-3,5): (2,5-1,5) І асюбасійив5 ріапіагит, І асіобасіїїи5 сазеї, Містососсивб мапапв, Редіососси5 сегемівіає, Ргоріопі Басієтіит 5Пептапії, Віїідобасієгіит Іюопдит.of Ukraine Mo 102931, publ. 27.08.2013) with the following ratio of crops, mass. Zo: (50-55): (30-25): (10-7): (5-8): (2.5-3.5): (2.5-1.5) I asyubasiiv5 riapiagite, I asiobasiiii5 sazei, Mistosossivb mapapv, Radiosossi5 segemiviae, Rgoriopi Basietiit 5Peptapii, Viiiidobasiegiit Iyuopdit.

Недоліком прототипу є застосування даної композиції для виготовлення лише сирокопчених та сиров'ялених м'ясних продуктів. Для створення вказаної суміші не проведено відбір штамів, які спроможні функціонувати у м'ясній сировині, та не вказані за рахунок чого відбувається збереження співвідношення між штамами композиції.The disadvantage of the prototype is the use of this composition for the production of only raw-smoked and raw-cured meat products. To create the specified mixture, the selection of strains capable of functioning in meat raw materials was not carried out, and it is not specified, due to which the ratio between the strains of the composition is preserved.

Для посолу м'ясної сировини використовуються культури які проявляють свої технологічні властивості за відносно низької температури посолу - (2-6)"С.Cultures that show their technological properties at a relatively low temperature of salting are used for salting meat raw materials - (2-6)"С.

В основу винаходу поставлена задача розробки способу одержання бактеріального препарату "ЛСт" посиленої біологічної активності прямого внесення, що забезпечить контрольований посол м'ясних продуктів, скорочення їх терміну виготовлення та подовження терміну зберігання. В способі, що заявляється, пропонується використання мікроорганізмів видів Іасіорасійш5 ріапіагит, І асіобасійй5 "татпов5ив5, І асіобасіїйй5 рагасазеї 55р. рагасазвеїі, еарпуососсив сагтозиє у такому співвідношенні 1:0,5:0,5:1 відповідно. Скорочені назви мікроорганізмів: І асіобасіїййи5 ріапіагит-!. ріапіагит, Іасюобвасійш5 гппатпозив-Ї. "Татпов5ив,The basis of the invention is the task of developing a method of obtaining the bacterial preparation "LSt" of enhanced biological activity by direct administration, which will ensure the controlled release of meat products, shortening their production period and extending their storage period. In the claimed method, it is proposed to use microorganisms of the species Iasiorasiysh5 riapiagit, I asiobasiiy5 "tatpov5iv5, I asiobasiiy5 ragasazei 55r. -!.

І асюбрасійсз5 рагасазеї 55р. рагасазеїі-І. рагасазеї, тарпуіососсив5 сатовив-5. сагтовзив.And asyubrasiysz5 ragasazei 55 years. ragasazeii-I. ragasazei, tarpuiosossiv5 satoviv-5. sagtovzyv

Напівсичтетичне поживне середовище на основі пептону з додаванням мінеральних компонентів та стимуляторів росту створювали з врахуванням потреб кожного складника бактеріального препарату. Ці прийоми дозволяють підвищити чисельність життєздатних клітин молочнокислих бактерій та стафілококу, біологічну активність бактеріального препарату, завдяки чому прискорюється процес дозрівання м'ясної сировини і підвищується санітарний стан готового продукту.A semi-synthetic nutrient medium based on peptone with the addition of mineral components and growth stimulants was created taking into account the needs of each component of the bacterial preparation. These techniques make it possible to increase the number of viable cells of lactic acid bacteria and staphylococcus, the biological activity of the bacterial preparation, thanks to which the ripening process of meat raw materials is accelerated and the sanitary condition of the finished product is improved.

Поставлена задача вирішується тим, що в способі одержання бактеріального препарату "ЛОСт" для посолу м'ясної сировини передбачають такі стадії виробництва: приготування поживного середовища, поживне середовище готують шляхом розчинення у воді пептону, вуглеводів, дріжджового екстракту, солей органічних та неорганічних кислот, а як посівний матеріал використовують культури молочнокислих бактерій та стафілококу, окреме культивування молочнокислих бактерій і стафілококу, змішування їх та сумісне культивування, відокремлення біомаси, змішування з захисним середовищем, заморожування та сушіння суспензії, подрібнення бактеріального препарату, фасування, відповідно до винаходу, проводять окреме культивування молочнокислих бактерій видів ГІ. ріапіагит, І. "/патпо5из та |. бо рагасазеї на середовищі МРС за температури 32:22 "С в статичних умовах протягом 18-20 год.,The task is solved by the fact that the method of obtaining the bacterial preparation "LOSt" for salting meat raw materials involves the following stages of production: preparation of the nutrient medium, the nutrient medium is prepared by dissolving peptone, carbohydrates, yeast extract, salts of organic and inorganic acids in water, and cultures of lactic acid bacteria and staphylococcus are used as seed material, separate cultivation of lactic acid bacteria and staphylococcus, their mixing and co-cultivation, separation of biomass, mixing with a protective medium, freezing and drying of the suspension, grinding of the bacterial preparation, packaging, according to the invention, separate cultivation of lactic acid bacteria is carried out bacteria of GI species. Riapiagit, I. "/patpo5iz and |. bo ragasazei on the medium of MRS at a temperature of 32:22 "C in static conditions for 18-20 hours,

культивують стафілокок виду 5.сагто5их на МП А за температури 3252 "С в аеробних умовах протягом 46-48 год., а нагромадження біомаси у поживному середовищі на основі води з пептоном та стимуляторами росту проводять протягом 14-15 годин при періодичній аерації за температури 32:22 "С, через 7-8 годин додають 1,0 956 глюкози, при постійному рН 6,4-6,6. Як вуглеводи використовують глюкозу та лактозу, як солі органічних кислот ацетат натрію і цитрат натрію, солі неорганічних кислот - сульфат магнію, сульфат марганцю та хлорид натрію.Staphylococcus species 5.sagto5yh are cultivated on MPA at a temperature of 3252 "C in aerobic conditions for 46-48 hours, and the accumulation of biomass in a nutrient medium based on water with peptone and growth stimulants is carried out for 14-15 hours with periodic aeration at a temperature of 32 :22 "С, after 7-8 hours add 1.0 956 of glucose, at a constant pH of 6.4-6.6. Glucose and lactose are used as carbohydrates, sodium acetate and sodium citrate are organic acid salts, and inorganic acid salts are magnesium sulfate, manganese sulfate, and sodium chloride.

Особливістю запропонованого способу є використання спеціально підібраної заквашувальної композиції, до складу якої залучені молочнокислі бактерії І. ріапіагит, І.A feature of the proposed method is the use of a specially selected leavening composition, which includes lactic acid bacteria I. riapiagit, I.

Патпозив Ї. рагасазеій, та штам стафілококу виду 5. сагтто5ив при співвідношенні культур 1:0,5:0,5:1, відповідно.Y. ragasazeii and strain of staphylococcus species 5. sagto5iv were isolated at a culture ratio of 1:0.5:0.5:1, respectively.

Всі штами молочнокислих бактерій та стафілококу є власними штамами ІПР НААН і задепоновані в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАНAll strains of lactic acid bacteria and staphylococcus are the own strains of IPR NAAS and are deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology named after D.K. Zabolotny National Academy of Sciences

України. Вони відбиралися на основі ретельних лабораторних досліджень з врахуванням вимог, що висуваються до штамів, які функціонують у м'ясній сировині, за наступними критеріями: солестійкість, висока антагоністична, протеолітична, нітритредукуюча, каталазна, ароматоутворююча активності, резистентність до жовчі, фенолу. Всі використані культури мікроорганізмів, які входять до складу бактеріального препарату "ЛСт" є непатогенними і спроможні функціонувати за умов посолу м'ясної сировини.of Ukraine. They were selected on the basis of thorough laboratory studies, taking into account the requirements for strains that function in raw meat, according to the following criteria: salt resistance, high antagonistic, proteolytic, nitrite-reducing, catalase, aroma-forming activity, resistance to bile, phenol. All used cultures of microorganisms that are part of the bacterial preparation "LSt" are non-pathogenic and able to function under the conditions of the salt environment of meat raw materials.

Підбір складу інгредієнтів до поживного середовища на немолочній основі - пептон, солі органічних та неорганічних кислот, а також окремих стерильних розчині в вуглеводів і стимуляторів росту - дріжджовий екстракт, разом з використанням штамів /. ріапіагит, Г.Selection of ingredients for a non-dairy nutrient medium - peptone, salts of organic and inorganic acids, as well as separate sterile solutions of carbohydrates and growth stimulants - yeast extract, together with the use of strains /. Riapiagite, H.

Патповзив, ГІ. рагасазеї, 5. сатовзив забезпечує одержання бактеріального препарату прямого внесення з високою концентрацією живих клітин молочнокислих бактерій та стафілококу.Patpovzyv, GI. ragasazei, 5. satovzyv provides a bacterial preparation for direct application with a high concentration of live cells of lactic acid bacteria and staphylococcus.

Спосіб одержання бактеріального препарату "ЛСт" для посолу м'ясної сировини виконують таким чином.The method of obtaining the bacterial preparation "LSt" for salting meat raw materials is carried out as follows.

Поживне середовище для нагромадження біомаси складають з основи, яка включає пептон, кукурудзяний екстракт, солі органічних і мінеральних кислот, та окремо стерилізованих розчинів глюкози, аскорбінової кислоти, дріжджового екстракту. Після підготування основи поживного середовища встановлюють рН 7,5:0,05 шляхом додавання 40 95-ного розчину гідроксидуThe nutrient medium for accumulating biomass consists of a base that includes peptone, corn extract, salts of organic and mineral acids, and separately sterilized solutions of glucose, ascorbic acid, and yeast extract. After preparing the base of the nutrient medium, set the pH to 7.5:0.05 by adding a 40% solution of hydroxide

Зо натрію, стерилізують за температури 121-411 "С протягом 30 хв і охолоджують до температури 50-16.From sodium, sterilized at a temperature of 121-411 "C for 30 minutes and cooled to a temperature of 50-16.

Окремо готують і вносять розчини аскорбінової кислоти, глюкози. Стерильний розчин глюкози вносять у два етапи: на 1 годину культивування в кількості 0,5 9о та на 7-8 годину росту при сумісному культивуванні в кількості 0,5 95 від об'єму поживного середовища у ферментері.Solutions of ascorbic acid and glucose are prepared and introduced separately. Sterile glucose solution is introduced in two stages: for 1 hour of cultivation in the amount of 0.5 90 and for 7-8 hours of growth with simultaneous cultivation in the amount of 0.5 95 of the volume of the nutrient medium in the fermenter.

Інокуляти кожного із штамів Ї. ріапіагит, Її. "патповзив та І. рагасазеї, готують окремо шляхом внесення добових бульйонних культур в кількості 5 906 до об'єму поживного середовищаInoculates of each of the strains of Y. riapiagit, Her. "patpovzyv and I. ragasazei, prepared separately by adding daily broth cultures in the amount of 5,906 to the volume of the nutrient medium

МРС ї подальшого вирощування за температури 3222 "С протягом 18-20 год. Інокулят 5. сатозив готують шляхом вирощування в аеробних умовах за температури 32522 "С протягом 46-48 год. на поверхні м'ясо-пептонного агару площиною близько 800 см? змивають в 1 дм м'ясо-пептонного бульйону.MRS and further cultivation at a temperature of 3222 "C for 18-20 hours. Inoculum 5. satozyve is prepared by cultivation in aerobic conditions at a temperature of 32522 "C for 46-48 hours. on the surface of meat-peptone agar with a plane of about 800 cm? washed in 1 dm of meat-peptone broth.

В підготовлене поживне середовище у ферментер вносять інокулят суміші молочнокислих бактерій видів штамів /. ріапіагит, Її. "патповив та |. рагасазеї у кількості 4 об. 95 та 5. сагтовзив-2 об.9о і що дає співвідношення між ними 1:0,5:0,5:1, і проводять процес нагромадження біомаси.An inoculum of a mixture of lactic acid bacteria of strains / is introduced into the prepared nutrient medium in the fermenter. Riapiagite, Her. "patpovyv and |. ragasazei in the amount of 4 vol. 95 and 5. sagtovzyv-2 vol. 9o and which gives a ratio between them of 1:0.5:0.5:1, and carry out the process of biomass accumulation.

Нагромадження бактеріальної маси бактеріального препарату "ЛСт" проводять за температури 32ж2 "С протягом 14-15 год. з періодичною або безперервною нейтралізацією культурального середовища 25 95-ним водним розчином аміаку до активної кислотності 6,4-6,6 од. рН з періодичною аерацією. У разі періодичної нейтралізації першу нейтралізацію здійснюють через З години, потім через кожні 2 години.Accumulation of the bacterial mass of the bacterial preparation "LSt" is carried out at a temperature of 32°C for 14-15 hours with periodic or continuous neutralization of the culture medium with a 25-95% aqueous ammonia solution to an active acidity of 6.4-6.6 pH units with periodic aeration In the case of periodic neutralization, the first neutralization is carried out every 3 hours, then every 2 hours.

Після закінчення процесу нагромадження біомаси культуральну рідину охолоджують до температури (12252)"С. Відокремлення біомаси від культурального середовища проводять на суперцентрифугах за температури (12ж22)"С, після чого змішують у співвідношенні 1:2 зі стерильним захисним середовищем, яке містить 15 956 сахарози, 5 96 лимоннокислого натрію, 5 96 сухого знежиреного молока.After the end of the process of accumulation of biomass, the culture liquid is cooled to a temperature of (12252)"C. Separation of biomass from the culture medium is carried out on supercentrifuges at a temperature of (12x22)"C, after which it is mixed in a ratio of 1:2 with a sterile protective medium containing 15,956 sucrose , 5 96 sodium citric acid, 5 96 skim milk powder.

Одержану таким чином суспензію клітин, що утворилась розливають у стерильні кювети шаром не більше (6:21) см, заморожують при мінус 4022 "С протягом 16-18 годин і висушують в сублімаційній сушарці за таких режимів: температура на початку сушіння - мінус 25:52 "С, в кінці - плюс 3022 "С. Тривалість сушіння - 18-20 годин. Висушену суспензію подрібнюють в дрібнодисперсний порошок.The resulting cell suspension is poured into sterile cuvettes with a layer of no more than (6:21) cm, frozen at minus 4022 "C for 16-18 hours and dried in a freeze dryer under the following conditions: the temperature at the beginning of drying is minus 25: 52 "C, at the end - plus 3022 "C. Duration of drying - 18-20 hours. The dried suspension is ground into a fine powder.

Застосування цих технологічних прийомів дозволяє за 14-15 годин культивування одержати з 1 дм? середовища 7,5 г сухого препарату, 1 г якого містить 2,0-3,0-1019 життєздатних клітин молочнокислих бактерій та 1,0-109 клітин стафілококу. Препарат не потребує активізації.The use of these technological methods allows for 14-15 hours of cultivation to obtain from 1 dm? medium of 7.5 g of dry preparation, 1 g of which contains 2.0-3.0-1019 viable cells of lactic acid bacteria and 1.0-109 cells of staphylococcus. The drug does not require activation.

Приклад 1. Спосіб одержання бактеріального препарату "ЛСт" для посолу м'ясної сировини.Example 1. The method of obtaining the bacterial preparation "LSt" for salting meat raw materials.

Готували поживне середовище: в 70 л водопровідної води розчиняли 700 г пептону, 500 г лимоннокислого натрію, 300 г оцтовокислого натрію, 30 г Мо95О», 12 г Мп5О»,7 г Рег(504)з, 200 г лактози, 350 г дріжджового екстракту, 1400 см3 екстракту кукурудзяного, розведеного водою у співвідношенні 1:11, 350 г хлористого натрію. Встановлювали рН 7,4-50,1 шляхом додавання 40 Ус-ного розчину гідроксиду натрію, стерилізували за 121-1"С протягом 300,1 хв і охолоджували до температури 55:41 "С.A nutrient medium was prepared: 700 g of peptone, 500 g of sodium citric acid, 300 g of sodium acetic acid, 30 g of Mo95O", 12 g of Mp5O", 7 g of Reg(504)z, 200 g of lactose, 350 g of yeast extract were dissolved in 70 l of tap water. , 1400 cm3 of corn extract diluted with water in a ratio of 1:11, 350 g of sodium chloride. The pH was set at 7.4-50.1 by adding 40% sodium hydroxide solution, sterilized at 121-1°C for 300.1 min and cooled to a temperature of 55:41°C.

Окремо готували і вносили до основи стерильні розчини: 700 г та 700 г глюкози, розчиненої в 2 дм" дистильованої води, у двох ємкостях; 15 г аскорбінової кислоти, розчиненої в 200 см дистильованої води.Separately, sterile solutions were prepared and added to the base: 700 g and 700 g of glucose dissolved in 2 dm" of distilled water in two containers; 15 g of ascorbic acid dissolved in 200 cm of distilled water.

Після внесення всіх компонентів та стерилізації середовища активна кислотність повинна бути 6,8:0,1 од. рН. В підготовлене середовище вносили 2 дм3 м'ясо-пептонного бульйону з інокулятом 5. сагтобзи5 та по 1 дм3 завчасно приготовленого інокуляту І. "патповзив та І. рагасазеї та 2 дм І. ріапіагит з концентрацією клітин кожного не менше 108 КУО/см3 разом зі стерильним розчином глюкози 350 г в 2 дм? дистильованої води. Нагромадження бактеріальної маси вели при сумісному культивуванні за 32252 "С протягом 14-15 годин. Через 7-8 годин культивування ще додавали стерильний розчин глюкози - 350 г в 2 дм? дистильованої води, і продовжували культивування 6-7 год. з періодичною нейтралізацією середовища 25 уо-ним водним розчином аміаку до активної кислотності рН 6,4-6,6 і частковою нейтралізацією. Потім культуральну рідину охолоджували і центрифугували на суперцентрифузі при 15000 об/хв.After adding all the components and sterilizing the medium, the active acidity should be 6.8:0.1 units. pH 2 dm3 of meat-peptone broth with inoculum 5. sagtobzy5 and 1 dm3 each of pre-prepared inoculum of I. "patpovzyv and I. ragasazei and 2 dm of I. riapiagitis with a cell concentration of at least 108 CFU/cm3 were added to the prepared medium, together with with a sterile glucose solution of 350 g in 2 dm? of distilled water. The accumulation of bacterial mass was carried out with simultaneous cultivation at 32252 "C for 14-15 hours. After 7-8 hours of cultivation, a sterile glucose solution was added - 350 g in 2 dm? of distilled water, and continued cultivation for 6-7 hours. with periodic neutralization of the medium with a 25% aqueous solution of ammonia to an active pH of 6.4-6.6 and partial neutralization. Then the culture liquid was cooled and centrifuged on a supercentrifuge at 15,000 rpm.

Одержану біомасу змішували у співвідношенні 1:2 із стерильним захисним середовищем, 1 л якого готували з окремих стерильних розчинів із розрахунку: 150 г цукрози, розчиненої в 300 мл дистильованої води і стерилізованої за 10551 С протягом 155-0,1 хвилин; 50 г лимоннокислого натрію - у 200 мл дистильованої води та 50 г сухого знежиреного молока - у 500 см3 водопровідної води, стерилізованих за 121541 "С протягом 300,1 хвилин. Суспензію клітин розливали у стерильні кювети шаром не більше б мм, заморожували мінус 40ж1 СThe resulting biomass was mixed in a ratio of 1:2 with a sterile protective medium, 1 liter of which was prepared from separate sterile solutions based on: 150 g of sucrose dissolved in 300 ml of distilled water and sterilized at 10551 C for 155-0.1 minutes; 50 g of sodium citric acid - in 200 ml of distilled water and 50 g of dry skimmed milk - in 500 cm3 of tap water, sterilized at 121541 "С for 300.1 minutes. The cell suspension was poured into sterile cuvettes with a layer of no more than b mm, frozen at minus 40х1 С

Зо протягом 16-41 годин і висушували сублімаційній сушарці КС-30 за температури від - 25 "С до -30 "С та масовою часткою вологи в сухому препараті не більше 5 95; тривалість сушіння - 18:41 годин.For 16-41 hours and dried in a sublimation dryer KS-30 at temperatures from -25 "C to -30 "C and a mass fraction of moisture in the dry product no more than 5 95; drying time - 18:41 hours.

Висушений бактеріальний препарат в асептичних умовах подрібнювали у дрібнодисперсний порошок в кульовому млині протягом 20-40,1 хв. Вивантажували препарат в боксі в полієтиленові пакети та запаювали.The dried bacterial preparation was ground into a fine powder in a ball mill under aseptic conditions for 20-40.1 minutes. The drug was unloaded in a box into polyethylene bags and sealed.

Одержаний бактеріальний препарат містить 2,0-3,0-40'0 КУО молочнокислих бактерій, та 1,0-109 КУО стафілококу, з 1 дм? середовища 7,5 г сухого препарату.The obtained bacterial preparation contains 2.0-3.0-40'0 CFU of lactic acid bacteria and 1.0-109 CFU of staphylococcus, with 1 dm? medium 7.5 g of dry drug.

Приклад 2. Спосіб одержання бактеріального препарату "ЛСт" для посолу м'ясної сировини.Example 2. The method of obtaining the bacterial preparation "LSt" for salting meat raw materials.

Технологічні операції приготування поживного середовища для нарощування бактеріальної маси, підготовки інокуляту, відокремлення біомаси від культуральної рідини, змішування її з захисним середовищем, висушування та подрібнення препарату ведуть аналогічно за прикладом 1, а процес культивування молочнокислих бактерій та стафілококу проходив по стадійно: у ферментер спочатку вносили інокулят 5. сагттовив5 у кількості 2 об. 95 і нарощували протягом З годин при постійній аерації, потім додавали 4 об. 95 суміші молочнокислих бактерій видів інокуляту І. "татповиз та І. рагасазеї та 2 дм" І. ріапіагит що дає співвідношення між ними 1:0,5:0,5:1, і продовжували процес нагромадження біомаси за температури 32527 протягом 12-13 год. Його вели з періодичною аерацією та контролем активної кислотності до рн 6б,4-6,6.The technological operations of preparing a nutrient medium for increasing the bacterial mass, preparing the inoculum, separating the biomass from the culture liquid, mixing it with a protective medium, drying and grinding the drug are carried out similarly to example 1, and the process of cultivating lactic acid bacteria and staphylococcus was carried out in stages: first, the fermenter was introduced inoculum 5. sagttovyv5 in the amount of 2 vol. 95 and increased for 3 hours with constant aeration, then added 4 vol. 95 mixtures of lactic acid bacteria of the inoculum species I. "tatpoviz and I. ragasazei and 2 dm" I. riapiagitis, which gives a ratio between them of 1:0.5:0.5:1, and continued the process of biomass accumulation at a temperature of 32527 for 12-13 hours It was conducted with periodic aeration and control of active acidity to pH 6b.4-6.6.

Одержаний бактеріальний препарат містить 7,8-109КУО молочнокислих бактерій, та 2,1-109The obtained bacterial preparation contains 7.8-109 CFU of lactic acid bacteria, and 2.1-109

КУО стафілококу, з 1 дм3 середовища 5,7 г сухого препарату.Staphylococcus CFU, 5.7 g of dry drug from 1 dm3 of medium.

Приклад 3. Спосіб використання бактеріального препарату "ЛСт" для посолу м'ясної сировиниExample 3. The method of using the bacterial preparation "LSt" for salting meat raw materials

Одна порція препарату "ЛСт", одержаного за прикладами 1, складає 50 г на 100 кг сировини.One portion of the drug "LSt" obtained according to examples 1 is 50 g per 100 kg of raw material.

Сухий бактеріальний препарат розчиняють у стерильній або кип'яченій воді, охолодженій до температури (30-353"С у співвідношенні 1:5. Препарат "ЛСт" вносять разом з посолочними інгредієнтами. Показники якості м'ясної сировини через 72 годин посолу, наведено у табл. 1 -The dry bacterial preparation is dissolved in sterile or boiled water, cooled to a temperature of (30-353"C in a ratio of 1:5. The preparation "LSt" is added together with the salting ingredients. The quality indicators of the meat raw material after 72 hours of salting are given in table 1 -

Характеристика м'ясної сировини до та після посолу.Characteristics of meat raw materials before and after curing.

Бактеріальний препарат "ЛСт", одержаний способом за прикладом 1 має високий індекс розчинності і значний ступінь виживання молочнокислих бактерій та стафілококу, що дозволяє бо застосовувати його без попередньої активізації прямим внесенням до розсолу при виробництві м'ясних продуктів. Бактеріальні препарати, одержані за прикладами 2 та 3, не задовольняють вимогам, які висуваються до культур прямого внесення внаслідок низької чисельності молочнокислих бактерій.The bacterial preparation "LSt", obtained by the method according to example 1, has a high solubility index and a significant degree of survival of lactic acid bacteria and staphylococcus, which allows it to be used without prior activation by direct addition to brine during the production of meat products. Bacterial preparations obtained according to examples 2 and 3 do not meet the requirements for direct application cultures due to the low number of lactic acid bacteria.

Такий спосіб дозволяє отримати значну концентрацію як молочнокислих бактерій, так і стафілококів у поживному середовищі наприкінці культивування та, відповідно, високу їх чисельність і активність у готовому бактеріальному препараті "ЛСт" Це дає змогу використовувати бактеріальний препарат " ЛСт" для посолу м'ясної сировини, що забезпечує санітарно-епідеміологічну безпеку готового продукту.This method allows you to obtain a significant concentration of both lactic acid bacteria and staphylococci in the nutrient medium at the end of cultivation and, accordingly, their high number and activity in the finished bacterial preparation "LSt". This makes it possible to use the bacterial preparation "LSt" for salting meat raw materials, which ensures the sanitary and epidemiological safety of the finished product.

Таблиця 1Table 1

Характеристика м'ясної сировини до та після посолуCharacteristics of meat raw materials before and after curing

Назва показника 701 7 | 0 | 72 мг/100гName of the indicator 701 7 | 0 | 72 mg/100g

Claims (1)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ Спосіб одержання бактеріального препарату для посолу м'ясної сировини, який включає приготування поживного середовища, сумісне культивування молочнокислих бактерій і стафілококу, їх змішування та сумісне культивування, відокремлювання біомаси, змішування з захисним середовищем, заморожування та сушіння суспензії клітин, подрібнення препарату, який відрізняється тим, що інокулят молочнокислих бактерій видів / асіобасійи5 гпатпозив, Іасіобасійи5 рагасавзеї 55р. рагасавзеї! та І асіобасіи»5 ріапіагит культивують на середовищі МРС при температурі 32ж522С в статичних умовах протягом 18-20 год., окремо культивують стафілокок виду ЄїТарну!ососсиз сатовив в аеробних умовах протягом 46-48 год., далі проводять нагромадження біомаси заквашувальної композиції, яка містить молочнокислі бактерії / асіюбасійив ріапіагит, І асіорбасПив гнатповиз та І асіобастПиз рагасазеї 55р. рагасавзеї, та штам стафілококу виду Єїарпу!ососсив сатовив при співвідношенні культур 1:0,5:0,5:1 відповідно, при сумісному культивуванні у поживному середовищі на основі води з пептоном протягом 14-15 годин при періодичній аерації при температурі 32:22 "С при постійному рн 6,4-FORMULA OF THE INVENTION The method of obtaining a bacterial preparation for salting meat raw materials, which includes preparation of a nutrient medium, co-cultivation of lactic acid bacteria and staphylococcus, their mixing and co-cultivation, separation of biomass, mixing with a protective medium, freezing and drying of the cell suspension, grinding of the preparation, which differs in that the inoculum of lactic acid bacteria of the species / asiobasiiy5 gpatpozyv, Iasiobasiyi5 ragasavzei 55r. Ragasavzei! and I asiobasii»5 Riapiagite is cultured on MRS medium at a temperature of 32x522C in static conditions for 18-20 hours, separately cultured staphylococcus of the YeiTarnu!ososis satoviv species in aerobic conditions for 46-48 hours, then the accumulation of biomass of the leavening composition is carried out, which contains lactic acid bacteria / asiyubasiiyiv riapiagit, I asiorbasPyv gnatpoviz and I asiobastPys ragasazei 55r. ragasavzei, and a strain of Staphylococcus of the species Yeyarpu!osossiv sat at a culture ratio of 1:0.5:0.5:1, respectively, during simultaneous cultivation in a nutrient medium based on water with peptone for 14-15 hours with periodic aeration at a temperature of 32:22 "C at a constant pH of 6.4- 6,6. 00 КомпютернаверсткаГ. Паяльніково (00000000 Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 016016.6. 00 Computer keyboardG. Payalnikovo (00000000 State Intellectual Property Service of Ukraine, 45 Vasyl Lypkivskyi St., Kyiv, MSP, 03680, Ukraine SE "Ukrainian Institute of Industrial Property", 1 Glazunova St., Kyiv - 42, 01601
UAA201601194A 2016-02-12 2016-02-12 METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS UA114255C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAA201601194A UA114255C2 (en) 2016-02-12 2016-02-12 METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAA201601194A UA114255C2 (en) 2016-02-12 2016-02-12 METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA114255C2 true UA114255C2 (en) 2017-05-10

Family

ID=74306493

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201601194A UA114255C2 (en) 2016-02-12 2016-02-12 METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA114255C2 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102429539B1 (en) Composition for cryoprotecting lactic acid bacteria containing citrate
US7326558B2 (en) Process for treating spirulina
KR20100059719A (en) Method for manufacturing fermented tea using bacillus sp. strains
CN107312732A (en) A kind of probiotic feed additive
CN112251371B (en) Lactococcus lactis, microecological preparation and application
KR20130063253A (en) The alcohol resistant strain of lactic acid bacteria, pediococcus acidilactici and its use
Polyanskaya et al. Quasicapsulation of probiotics.
CN108004177A (en) A kind of lactobacillus paracasei and its characteristic research of degradable nitrite
Nedelcheva et al. Probiotic strain Lactobacillus plantarum NBIMCC 2415 with antioxidant activity as a starter culture in the production of dried fermented meat products
CN109182397B (en) Method for improving yield of reuterin
KR101665888B1 (en) Microorganism additives compositions using glutinous rice paste as a cryoprotectant for fermentation of foods with enhanced survival rate of the microorganisms and method of preparing the same
CN108208317B (en) Live bacterium preservative and application thereof in preservation of cultured fishes
Serna-Cock et al. Effects of fermentation substrates and conservation methods on the viability and antimicrobial activity of Weissella confusa and its metabolites
Urbański et al. Influence of whey on viability of Lactobacillus gasseri during freeze-drying process
RU2646109C1 (en) Food stuff preserving agent production method
JP6261664B2 (en) Lyophilized product containing Lactobacillus plantarum LLP5193, which is excellent in acid resistance, bile resistance and cell adhesion ability, as an active ingredient
RU2475535C1 (en) Method to produce probiotic preparation lacto-amylovorin
CN115161216A (en) Novel biological preservative and application thereof
UA114255C2 (en) METHOD OF PREPARATION OF BACTERIAL PREPARATION "LST" FOR AMBASSADOR OF RAW MATERIALS
CN112175834B (en) Application of lactobacillus plantarum in preservation of bacillus subtilis solid microbial inoculum and method for prolonging preservation period of bacillus subtilis
RU2607023C1 (en) Dry bacterial starter for production of fermented milk products and production method thereof
KR100381912B1 (en) kimchi Starter with Lactic Acid Bacteria in the Cryoprotective Garlic Paste and The Kimchi Composite
JP2003219862A (en) Method for improving storage stability of freeze-dried bacterium
KR20150012449A (en) Microorganism additives compositions using soy powder as a cryoprotectant for fermentation of foods with enhanced survival rate of the microorganisms and method of preparing the same
Sumarsih et al. Characteristics, stability and antimicrobial activity of lactic acid bacteria (Leuconostoc sp) isolated from broiler’s caecum during storage