UA112630C2 - Пептидні кон'югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування - Google Patents

Пептидні кон'югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування Download PDF

Info

Publication number
UA112630C2
UA112630C2 UAA201213478A UAA201213478A UA112630C2 UA 112630 C2 UA112630 C2 UA 112630C2 UA A201213478 A UAA201213478 A UA A201213478A UA A201213478 A UAA201213478 A UA A201213478A UA 112630 C2 UA112630 C2 UA 112630C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
gastrin
exendin
peptide
siv
sequence
Prior art date
Application number
UAA201213478A
Other languages
English (en)
Inventor
Тріне Сковлунд Рюге Нєеруп
Торбен Естерлунд
Якоб Лінд Толборг
Кельд Фосгерау
Ульріка Мартєнссон
Маріанна Брорсон
Камілла Ролстед
Original Assignee
Зіленд Фарма А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Зіленд Фарма А/С filed Critical Зіленд Фарма А/С
Priority claimed from PCT/DK2011/050133 external-priority patent/WO2011134471A1/en
Publication of UA112630C2 publication Critical patent/UA112630C2/uk

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Даний винахід належить до пептидних кон'югатів, що мають формулу:H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-YGWLDF-NH2;H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-GWLDF-NH2;H-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKN-Peg3-Peg3-AGWLDF-NH2 абоH-HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNYGWTDF-NH2,та їх застосування при лікуванні різноманітних захворювань або розладів, включаючи діабет (1 типу і/або 2 типу), і захворювань або розладів, викликаних діабетом.

Description

при неогенезі острівців, тобто стимуляції росту інсулін-секретуючих ВДВ-клітин острівців підшлункової залози |дивіться, наприклад, Когс, М., 9. Сііп. Іпмеві., 92: 1113-1114 (1993); Ноотап сеї аї. Юіареїезв 51: 686-690 (2002)|, і завдяки цьому сприяти регуляції рівня глюкози в крові.
Гастрин має один рецептор з іншим пептидним шлунково-кишковим гормоном, холецистокініном (ССК). Рецептори ССК-А К і ССК-В Е мають різні афінності до варіантів гастрину і ССК. ССК-А К (або
ССК КІ) виступає переважно рецептором для сульфатованого ССК, тоді як ССК-В ЕК (або ССК 2) зв'язує однаковою мірою добре ССК і гастрин. Вважається, що ССК-В К являє собою "рецептор гастрину" через більш високий рівень гастрину в порівнянні з ССК у плазмі (Боисаца еї аїЇ. Кед.
Рерііде5 145: 17-23 (2008).
ССК-В К може запускати декілька внутрішньоклітинних шляхів після зв'язування ліганда, що вважається причиною різних фізіологічних функцій ССК. Ключовими шляхом, який регулюється ССК-В
Е, є шлях МАРК (мітоген-активовані протеїнкінази) або ЕКК (позаклітинні регульовані кінази), який також активується декількома гормонами росту. Це є ключовою особливістю функції проліферації клітин гастрину. Оскільки ССК-В К експресується в підшлунковій залозі, гастрин може брати участь у проліферації клітин і регенерації острівців у даній тканині.
У людей гастрин зустрічається в основному в трьох формах, а саме: Гастрин-34, Гастрин-17 і
Гастрин-14 (в залежності від загальної кількості амінокислот у послідовності, що розглядається).
Також виявили Гастрин-б6. Більш короткі форми виходять при розщепленні С-кінцевого амідованого
Гастрину-34, таким чином, Гастрин-17 складається з С-кінцевих останніх 17 залишків Гастрину-34 (які відповідають залишкам прогастрину (55-71)), Гастрин-14 з С-кінцевих останніх 14 залишків (які відповідають залишкам прогастрину (58-71)) і Гастрин-б6 складається тільки з С-кінцевих останніх 6 залишків (які відповідають залишкам прогастрину (66-71)). Вони являють собою амідовані форми гастрину, які зв'язуються з високою спорідненістю з СОК-В Е і виконують функцію проліферації клітин.
У Гастрині-17 людини М-кінцевий амінокислотний залишок являє собою залишок піроглутамінової кислоти (РугосСіІмй). Амідовані С-кінцеві 6 амінокислот є ключовими рецептор-зв'язуючими залишками гастрину.
У публікації УМО 2005/072045 описані, зокрема, комбінації "агоністів СІ Р-1" і "сполук гастрину", які ймовірно виявляють сприятливу дію на профілактику і/або лікування станів і/або захворювань, при яких була показана терапевтична дія "агоніста СІ Р-1" або "сполуки гастрину". У публікації УМО 2007/095737 описані, між іншим, аналогічні комбінації "агоністів ексендину" і "сполук гастрину", які також імовірно виявляють сприятливу дію на профілактику і/або лікування станів і/або захворювань, при яких була показана терапевтична дія "агоністів ексендину" або "сполуки гастрину".
Дані (одержувані з досліджень із застосуванням мишей із діабетом без ожиріння (МОБ), які широко використовуються як тваринна модель діабету людини 1 типу), представлені в публікації М/О 2005/072045, очевидно вказують на те, що деякі комбінації "агоніста СІ Р-1" і "сполуки гастрину" згідно з описом можуть виявляти сприятливу дію з нормалізації рівнів глюкози в крові на моделі мишей із гострим діабетом МОЮ у порівнянні з дією, яка спостерігається при застосуванні розглянутого "агоніста СІ Р-1" (або "сполуки гастрину") окремо. Дані (також отримані в результаті досліджень із застосуванням діабетичних мишей без ожиріння (МОБ)|, представлені в публікації УМО 2007/095737, очевидно вказують на те, що деякі комбінації "агоніст ексендину"/"сполука гастрину" згідно з описом виявляють сприятливу дію стосовно нормалізації рівнів глюкози й інсуліну в крові на моделі мишей із гострим діабетом МОЮ у порівнянні з дією, яка спостерігається при застосуванні розглянутого "агоніста ексендину" (або "сполуки гастрину") окремо, і що деякі комбінації "агоніст рецептора сі рР- 1"/тастрин" згідно з описом можуть виявляти сприятливу дію стосовно індукції регенерації клітин острівців у порівнянні з дією, яка спостерігається при використанні "агоніста рецептора СІ Р-1" окремо.
У публікаціях УМО 2005/072045 ії УМО 2007/095737 також описана можливість утворення кон'югатів, що містять "агоніст СІ Р-1" або "агоніст ексендину" відповідно і "сполуку гастрину", ковалентно спарені або зв'язані (тобто кон'юговані)) один із одною можливо за допомогою проміжного лінкера або спейсера. Підходящим спейсером є моно- або дисахарид, амінокислота, сульфат, сукцинат, ацетат або олігомерний полімерний спейсер чи лінкер, який містить одну або декілька таких груп. Також описані передбачувані способи, за допомогою яких можна одержати розглянуті типи кон'югатів. Проте, у жодному з останніх розглянутих документів не наведені препаративні або інші дані для обгрунтування того, що будь-який розглянутий тип кон'югата був насправді приготований і охарактеризований або були перевірені його біологічні/фізіологічні властивості чи активність - на момент подачі відповідної міжнародної заявки.
Також можна відзначити, що ні в публікації ММО 2005/072045, ні в публікації МО 2007/095737 не наведені дані іп мімо, іп міго або інші дані, які підтверджують, що комбінації "агоніст СІ Р-1"/"сполука гастрину" або "агоніст ексендину"/"сполука гастрину" згідно з описом і використані в даному описі можуть бути корисними при лікуванні, наприклад, діабету 2 типу.
КОРОТКИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Згідно з даним винаходом було виявлено, що деякі кон'югати, які містять дві ковалентно спарені або зв'язані пептидні групи, можуть проявляти несподівано високу терапевтичну активність при лікуванні, наприклад, діабету (діабету 1 типу і/або 2 типу) або різних захворювань чи станів, викликаних діабетом, у порівнянні з терапевтичною активністю комбінації двох окремих пептидів, що розглядаються.
У більш широкому аспекті даний винахід забезпечує пептидний кон'югат агоніста рецептора СІ Р-1 і гастрину, зокрема, гастрину із заміною в положенні 15, обраною з Ге, Мієе, Рпе і ТНг. Більш конкретно, даний винахід забезпечує пептидні кон'югати Ексендину-4 і гастрину, а також пептидні кон'югати СІ Р-1 і гастрину.
Згідно з першим аспектом даний винахід, таким чином, забезпечує пептидний кон'югат, який має формулу І:
В1-2-І-х-82 (І), у якій
К1 являє собою Н, Сі. алкіл, ацетил, форміл, бензоїл або трифторацетил;
В2 являє собою ОН або МН2; 2 містить послідовність ексендину-4 (1-39), яка має послідовність
Нібз-Спу-спти-спу- Гпіи-Ріпе-Тниг-Зег-Азр-І еи-Зег-І уз-СІТп-Меї-Сспи-спти-спти-Аіа-Ма!І-Аг9-Геи-РНе-Пе-С1и-
Тр-Гец-Г ув-Авп-Спу-Спту-Рго-Зег-Зег-Спу-АІа-Рго-Рго-Рго-5ег (ЗЕО ІО МО: 115), або його аналог 74;
Ї являє собою необов'язкову лінкерну групу; і
У містить послідовність Гастрину-17, яка має послідовність
Сіп-Спу-Рго-Ттр-Геи-с1и-спти-сп1и-с1и-с1и-Аїа- Тук-Спу- Ггр-М15-Авр-Рпе (З5ЕО ІО МО: 116), у якій У15 обраний із І ем, Міє, Ре і ТНг, або його аналог Уа.
Також даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: () 7а має до 10 замін у положеннях і/або містить укорочення на С-кінці на 1-12 амінокислот у порівнянні з послідовністю ексендину; і/або (ії) Ма має до 5 замін у порівнянні з послідовністю Гастрину-17 і/або містить укорочення на М-кінці на 1-13 амінокислот у порівнянні з послідовністю Гастрину- 17.
Згідно з одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому 7а являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Іа:
Нів-22-23-С1у- Гпі-Рпе- ТНг-Зег-29-210-211-212-713-2714-с21и-216-217-2718-719-220- (па) 221-222-7223-724-725-7265-727-728-729-730-2731-2и 32-72 33-734-735-736-737-238-739 й в якій 22 обраний із су, Аа, 5ег, АБ, ТАг, І ем і Пе; 23 обраний із Сім і А5р; 29 обраний із А5р і Сім; 2710 обраний із І ем, Маї, Пе ії АІа; 211 обраний із Зег і АіБ; 2712 обраний із Зег, Сп, Агоу, Сув, І ув, Сім і Огп; 713 обраний із Аго, Зег, Сіп, Тугі Сім; 214 обраний із Су, Су, Ре, Туг, Тгр, Гув, Меї, Гей, Міє і Пе; 2716 обраний із Ар, Су, Аіб, Сім, Гуз і Сув; 2717 обраний із Сім, Суб, І ув, Зег і Сп; 718 обраний із Айа і АіБ; 2719 обраний із Маї, І ей, Пе і Аа; 220 обраний із Аго, Гу, Суб, От і Сім; 2721 обраний із І еи і Сім; 222 обраний із РНе і Аа; 223 обраний із Пе і І еи; 224 обраний із Сім, Суб, І ув, Аа і Аго; 225 обраний із Тгр, Сув, І уз і Рпе; 226 обраний із І еи і Пе; 227 обраний із Пе, Маї, СіІп, Гу, Сув, Аго і Огп; 228 обраний із Авп, 5ег, А5р, АБ, Сп, Гу, Суб, Аго, Туг, БАїа, Сім, От і І еи або він відсутній; 229 обраний із Су, АЇБ і БАйа або він відсутній; 230 обраний із Су, Сув, І уз і Агд або він відсутній; 231 обраний із Рго, Зег і А5р або він відсутній; 232 обраний із Зег і І ух або він відсутній; 233 являє собою 5Зег або він відсутній;
234 обраний із Су і Гуз або він відсутній; 235 являє собою Аа або він відсутній; 236 являє собою Рго або він відсутній; 237 являє собою Рго або він відсутній; 238 являє собою Рго або він відсутній; 239 являє собою 5Зег або він відсутній;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Пр:
І1-і12-І5-14 (ПБ), у якій
Ї1 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАїа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Сузх і СіІп або він відсутній;
Ї2 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАПІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Сузх і СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАПІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Сузх і СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАПІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Сузх і СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Пс:
У1-м2-У3-у4-у5-У6-у7-У8-У9-У10-у11-у12-у13-у14-у15-А5р-Уу17 (Пс), у якій
У1 являє собою сп або він відсутній;
У2 являє собою су або він відсутній;
УЗ являє собою Рго або він відсутній;
У4 являє собою Тгр або він відсутній;
У5 являє собою І еи або він відсутній;
У6 являє собою сСіи або він відсутній;
У7 являє собою сСіи або він відсутній;
У8 являє собою сСіи або він відсутній;
У9 являє собою сСіи або він відсутній;
У10 являє собою Си або він відсутній;
У11 являє собою А|Па або він відсутній;
У12 обраний із АПа і Туг або він відсутній;
У13 обраний із Су і Аіа або він відсутній;
У14 обраний із Тгр, Ре, 1 Маї і Меї;
У15 обраний із І ем, Міє, Рпе і ТАг, і
У17 обраний із Ре і 3-(З-піридил)-аланіну.
Згідно з іншим варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому 7а являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Ша:
Нібз-Спу-спти-спу- Гпг-Рпе-ТНі-5ег-29-І еи-5еї-212-213-214-С1и-216-с1и-АІа-Ма!І-220-І еи- (Ша)
РНе-ІІе-224-225-ІЇ еи-227-228 " в якій 29 обраний із А5р і Сім; 712 обраний із Гу, Аго і Огп; 713 обраний із Сіп і Туг; 214 обраний із Меї і І еи; 2716 обраний із Сім, Суз і І ув; 220 обраний із Аго, Гуз і Огп; 224 обраний із І ув і См; 225 обраний із Тгр, Гу, Суз і Ре; 221 обраний із Гу, Аго і Огп; 2728 обраний із Авп і Азр або він відсутній;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ПШБ:
І1-і12-І5-14 (ПІБ), в якій
Ї1 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СІп або він відсутній;
Ї2 обраний із От, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Пс:
У12-413-уУ14-У15-Авр-у17 (Ше), в якій
У12 обраний із Туг і Аа або він відсутній;
У13 обраний із Су і Аіа або він відсутній;
У14 обрано з Тгр, 1 Маї і Ре;
У15 обраний із І еи, Міє, Тиг та РНе; і
У17 обраний із Ре і 3-(З-піридил)-аланіну.
Згідно з іншим варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому 7а являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІМа:
Нібз-Спу-спти-спу- Гпи-Ріпе-Тнг-5ег-29-І еи-5ег-212-С1п-Меї-Спи-216-с1и-Аїа-Ма!І-Аг9-І еи- (Ма)
РПе-Пе-Спи-Тгр-Ї еи-227-228 ' в якій 29 обраний із Сім і А5р; 712 обраний із Гуз і Огп; 2716 обраний із Сім і Г ув; 221 обраний із ГІ уз і Огп; 2728 обраний із Авп і Азр або він відсутній;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІМБ:
Ї1-і2-І 3-14 (ІМБ), в якій
Ї1 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СІп або він відсутній;
Ї2 обраний із От, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІМс:
У12-Ж413-Тр-І еи-А5р-Рпе (ІМс), в якій
У12 являє собою Туг або він відсутній; і
У13 являє собою су або він відсутній.
Згідно зі ще одним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому 7а являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Ма:
Нібз-Спу-спти-спу- Гп-Ріпе-Тні-5ег-29-І еи-5ег-212-Туі-І еш-С1и-216-С1и-АІа-Ма!І-Агод-І еи- (ма)
РПе-Пе-СИШ-РНе-ЇІ еи-227-228 ' в якій 29 обраний із Сім і А5р; 712 обраний із І уз і Оп; 2716 обраний із Сім і Г ув; 221 обраний із ГІ уз і Огп; 2728 обраний із Авп і Азр або він відсутній;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу МБ:
Ї1-і2-І 3-14 (МБ), в якій
Ї1 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СІп або він відсутній;
Ї2 обраний із От, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Мс:
У12-Ж13-Тр-І еи-А5р-РнНе (Ус), в якій
У12 являє собою Туг або він відсутній; і
У13 являє собою су або він відсутній.
Більше того, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому пептидна послідовність формули І містить один або більше внутрішньомолекулярних містків.
Також даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, згідно 3 яким зазначений внутрішньомолекулярний місток утворюється між бічними ланцюгами двох амінокислотних залишків, які розділені трьома амінокислотами, в лінійній амінокислотній послідовності згідно з формулою І.
Згідно з певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому внутрішньомолекулярний місток утворюється між бічними ланцюгами пар залишків х та х3, х4, х5 і т.д.
Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому зазначений внутрішньомолекулярний місток являє собою лактамне кільце.
Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому зазначений внутрішньомолекулярний місток включає пари залишків, при цьому: 712 являє собою І ув, і 716 являє собою си; 212 являє собою си, і 216 являє собою І ув; 716 являє собою си, і 220 являє собою І ув; 716 являє собою | ув, і 220 являє собою СІи; 220 являє собою Си, і 724 являє собою І ув; 2720 являє собою | ув, і 224 являє собою си.
Згідно з іншим аспектом даного винаходу забезпечується пептидний кон'югат, який має формулу
МІ:
В" Х-І -х-8е (МІ), в якій
ВАВ" являє собою Н, С. алкіл, ацетил, форміл, бензоїл або трифторацетил;
В2 являє собою ОН або МНе;
Х містить послідовність СІ Р-1 (7-36), яка має послідовність:
Нібз-АІа-СІТи-С1ту- Гиг-Рпе-Тнг-5ег-Авзр-Ма!І-Зег-Зег- Туг-Геи-Сспти-спту-с1п-Аїа-Аїа-Ї ув-СИи-Рпе-ППе-Аїа-Тгр-
Геи-Ма!І-Гув-Спу-Агу (ЗЕО 10 МО: 114), або його аналог Ха;
Ї являє собою лінкер, який містить до 4 природних або неприродних амінокислот чи їх комбінацію, або він відсутній;
У містить послідовність Гастрину-17, яка має послідовність:
Спп-Спу-Рго-Ттр-Ї еи-Сти-сти-с1и-с1и-с1и-Аїа- Туг-Спу- Ггр-У15-Авр-РнНе, при цьому У15 обраний із І ем, Міє, Ре і ТНг, або його аналог Уа.
Згідно з одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: (Ї) Ха має до 5 замін у положеннях і/або має укорочення на С-кінці на 1-2 амінокислоти в порівнянні з послідовністю СІ Р-1; і/або (ї) Ма має до 5 замін у положеннях у порівнянні з послідовністю Гастрину-17 і/або містить укорочення на М-кінці на 1-13 амінокислот у порівнянні з послідовністю Гастрину- 17.
Згідно з іншим варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому:
Ха являє собою пептидну послідовність, яка має формулу МіІа:
Ніб-Х8-Спи-Сс1у- Гпі-Рпе- Тиі-Зег-Азр-Ма!І-Зег-Зег- Туг-Г еи-Ссти-сСпту-сІп-Аїа-Аїа- (іа) х26-С1и-РПе-ІПе-АїІа-Ттр-І еи-МаІ-Х34-Сст1у-х36 " в якій
ХВ обраний із Аа, АБ і су;
Х26 обраний із Ага і І ув;
Х34 обраний із Агу і І ув;
Х36 обраний із Ага і І ув;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу МІІБ:
Г1-12-І5-14 (МБ), в якій
Ї1 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАїІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Су», СіІп або він відсутній;
Ї2 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАїІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Сув, СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАїІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Су», СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Зег, Аа, Гу, Огп, БАїІа, вАсс, ОВЕ, Ред3, Су», СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу Міс:
У1-42-73-у4-у5-6-у7-8-У9-У1.0-у11-м412-у13-у14-и15-А5р-у17 (Міс), в якій
У1 являє собою сіп або він відсутній;
У2 являє собою су або він відсутній;
УЗ являє собою Рго або він відсутній;
У4 являє собою Тгр або він відсутній;
У5 являє собою І ем або він відсутній;
У6 являє собою сСіи або він відсутній;
У7 являє собою сСіи або він відсутній;
У8 являє собою сСіи або він відсутній;
У9 являє собою сСіи або він відсутній;
У10 являє собою Си або він відсутній;
У1 1 являє собою АЇа або він відсутній;
У12 обраний із Аа, Туг або він відсутній;
У13 обраний із Су, Аа або він відсутній;
У14 обраний із Тгр, Ре, 1 Маї і Меї;
У15 обраний із І ем, Міє, Ре і ТНг, і
У17 обраний із Ре і 3-(З-піридил)-аланіну.
Згідно зі ще одним варіантом реалізації, даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому:
Ха являє собою пептидну послідовність, що має формулу МПа:
Ніб-Х8-Спи-Сс1у- Гпг-Рпе- Тиі-Зег-Авзр-Ма!-Зег-Зег- Тут-Геи-Ссти-сСпту-сІп-АІа-Аіа-Х26- (МПа) суі-Рпе-Пе-АІа-Ттр-І еи-МаІ-Х34-Спу-Х36 ' в якій
ХВ обраний із Аа, АБ і су;
Х26 обраний із Ага і І ув;
Х34 обраний із Ага і І ув;
Х36 обраний із Ага і І ув;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу МБ:
І1-і12-І5-14 (МПІБ), в якій
Ї1 обраний із Ред3, От, Сух, І ув, СіІп або він відсутній;
Ї2 обраний із Зег, Аа, Огп, Су, І у, СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із І ух, Аа, Су, Оп, СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із І ух, Опт, Аа, Ред3, Сув, Гу, СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу МПс:
У12-413-уУ14-У15-А5р-РНе (МП), в якій
У12 обраний із Туг, Аа або він відсутній;
У13 обраний із Су, Аа або він відсутній;
У14 обраний із Тгр і Ре; і
У15 обраний із І еи, ТНг і Ре.
Згідно з певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому:
Ха являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІХа:
Ніб-Х8-Спи-Сс1у- Гпі-Рпе- Тиі-Зег-Азр-Ма!І-Зег-Зег- Туг-Г еи-Ссти-сСпту-сІп-Аїа-Аїа- (ха) х26-С1и-РПе-ІПе-АїІа-Ттр-І еи-МаІ-Х34-Сст1у-х36 " в якій
ХВ обраний із Аа, АБ і су;
Х26 обраний із Ага і І ув;
Х34 обраний із Ага і І ув;
Х36 обраний із Ага і І ув;
Ї являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІХБ:
І1-і12-І5-14 (ІХБ),
в якій
Ї1 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СІп або він відсутній;
Ї2 обраний із От, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
ЇЗ обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
І 4 обраний із Опт, Ред3, Суб, І уз і СіІп або він відсутній;
Ма являє собою пептидну послідовність, яка має формулу ІХс:
У12-Ж413-Тр-І еи-А5р-Рпе (ІХс), в якій
У12 являє собою Туг або він відсутній; і
У13 являє собою су або він відсутній.
Згідно з іншим певним варіантом реалізації даний винахід забезпечує пептидний кон'югат, у якому: щонайменше один із І ух або Сух також кон'югований із ліпофільним замісником.
Згідно з іншим аспектом, даний винахід відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу:
Ексендин-4(1-39)-Реа93-Реа3-|СіІп1,Геи15|Гастрин-17, (1)
Ексендин-4(1-39)-(СІп1,Геи15|Гастрин-17, (2)
Ексендин-4(1-39)-К-І(СіІп1,Гец15|Гастрин-17, (3)
Ексендин-4(1-39)-ААА-|(Сіп1,Геи15|Гастрин-17, (4)
Ексендин-4(1-39)-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (5)
Ексендин-4(1-39)-Ре93-5КК-|(СІп1,Г ей15|Гастрин-17, (6)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-5КК-|СІп1 ГГ еи15|Гастрин-17, (7)
Ексендин-4(1-39)-ОВЕ-З5КК-|СІп1, І ен15|Гастрин-17, (8)
Ексендин-4(1-39)-в8Аос-вАос-|СіІп1, еи15|Гастрин-17, (9)
Ексендин-4(1-39)-(Геш4|Гастрин-б, (10)
Ексендин-4(1-39)-К-(Гец4|Гастрин-6, (11)
Ексендин-4(1-39)-ААА-(Геш4|Гастрин-6, (12)
Ексендин-4(1-39)-5КК-І(Гец4|Гастрин-6, (15)
Ексендин-4(1-39)-Реа3-5КК-( ец4|Гастрин-6, (14)
Ексендин-4(1-39)-Реа3-Ре93-(Геи4|Гастрин-6, (15)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-5КК-| ец4|Гастрин-6б, (16)
Ексендин-4(1-39)-ОВЕ-5КК-|Гец4|Гастрин-б, (17)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-в8Аос-І ец4|Гастрин-6, (18)
Ексендин-4(1-28)-|(СІп1,Геи15|Гастрин-17, (19)
Ексендин-4(1-28)-К-ІСіІп1,Гец15|Гастрин-17, (20)
Ексендин-4(1-28)-ААА-|СІп1 І еи15|Гастрин- 17, (21)
Ексендин-4(1-28)-5КК-|СІп1 І еи15|Гастрин-1 7 (22)
Ексендин-4(1-28)-Ре93-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17 (23)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Реа3-|СіІп1,Геи15|Гастрин-17, (24)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-5КК-|СІп1 ГГ еи15|Гастрин-17 (25)
Ексендин-4(1-28)-ОВЕ-ЗКК-|СІп1, І ен15|Гастрин-17 (26)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-в8Аос-|СіІп1,еи15|Гастрин-17 (27)
Ексендин-4(1-28)-(Геч4|Гастрин-б (28)
Ексендин-4(1-28)-К-(Гец4|Гастрин-6 (29)
Ексендин-4(1-28)-ААА-І(Геши4| Гастрин-б, (30)
Ексендин-4(1-28)-5КК-І(Гец4|Гастрин-6, (31)
Ексендин-4(1-28)-Ре93-5КК-І(Геч4|Гастрин-6, (32)
Ексендин-4(1-28)-Реа3З-Ре93-(Геи4|Гастрин-6, (33)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-5КК-| ец4|Гастрин-6б, (34)
Ексендин-4(1-28)-ОВЕ-5КК-|Гец4|Гастрин-б, (35)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-в8Аос-І ец4|Гастрин-6, (36) а Р-1(7-36)-(СІп1, Ген15|Гастрин-17, (37) а Р-1(7-36)-К-(СІп1,Ї ен15|Гастрин-17, (38)
С, Р-1(7-36)-ААДА-|СІпП1, І еи15|Гастрин- 17, (39)
Сі Р-1(7-36)-5КК-|СІп1, ей15|Гастрин-17, (40) а, Р-1(7-36)-Ред3-5КК-|СІпП1 І еи15|Гастрин- 17, (41) а, Р-1(7-36)-Ред3-Реаз-|СІп1,І еи15|Гастрин-17, (42) а Р-1(7-36)-8Аос-5КК-|СІп1, ей15|Гастрин-17, (43) а Р-1(7-36)-ОВЕ-5КК-|СІп1,еи15|Гастрин-17, (44)
Сі Р-1(7-36)-8Аос-8Аос-|(СіІп1,Геи15|Гастрин-17, (45)
Сі Р-1(7-36)-(Гец4|Гастрин-б, (46)
С, Р-1(7-36)-К-(ец4|Гастрин-6, (47)
СІ Р-1(7-36)-ААА-( ец4|Гастрин-6, (48) а Р-1(7-36)-5КК-( ец4|Гастрин-6, (49)
Сі Р-1(7-36)-Ре93-5КК-( ец4|Гастрин-б, (50)
СІ Р-1(7-36)-Ред3-Ре93-Іеш4|Гастрин-6, (51) а Р-1(7-36)-8Аос-5КК-( ец4|Гастрин-6, (52) а Р-1(7-36)-ОВЕ-ЗКК-|Гец4|Гастрин-6 (53) або
С Р-1(7-36)-8Аос-8Аос-|(Гец4|Гастрин-6, (54) при цьому кожна пептидна група з Ексендину-4(1-39), Ексендину-4(1-28) і СІ Р-1(7-36) ковалентно приєднана (тобто зв'язана або спарена) до частини, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її С-термінальну частину, і кожна пептидна група з (Сіп1,еи15|Гастрину-17 і |ей4|Гастрину-6б ковалентно приєднана (тобто зв'язана або спарена) до частини, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її М-термінальну частину; або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату.
Згідно з певним аспектом, пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можна одержати за допомогою стандартних синтетичних методів із застосуванням рекомбінантних систем експресії або будь-якого іншого підходящого методу. Таким чином, кон'югати можна синтезувати різними шляхами, включаючи, наприклад, методи, які включають: (а) синтез пептидного кон'югата за допомогою стандартної твердофазної чи рідкофазної методології, поетапно або за допомогою складання фрагментів, і виділення й очищення кінцевого продукту пептидного кон'югата; (б) експресію конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, у хазяйській клітині й виділення продукту експресії або культури хазяйських клітин; або (в) здійснення експресії іп міго в безклітинній системі конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, і виділення продукту експресії; або за допомогою будь-якої комбінації зазначених методів (а), (б) або (в) для одержання фрагментів пептидного кон'югата, наступного легування фрагментів для одержання пептидного кон'югата й виділення пептидного кон'югата.
Серед інших аспектів даного винаходу перебувають способи лікування різних станів, захворювань або розладів (включаючи діабет (тип 1 і тип 2) і різні стани, захворювання і розлади, пов'язані з діабетом), які включають введення пептидного кон'югата згідно з даним винаходом (у вільній формі або у вигляді його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату), а також фармацевтичних композицій, що містять пептидний кон'югат або його фармацевтично прийнятну сіль чи сольват згідно з даним винаходом.
Згідно з конкретним аспектом, пептидні кон'югати згідно з даним винаходом також можна використовувати як фармацевтичні агенти для лікування резистентності до інсуліну, непереносимості глюкози, предіабетів, підвищених рівнів глюкози натщесерце, діабетів 1 і 2 типів, гіпертензії і/або дисліпідемії (або комбінації зазначених метаболічних факторів ризику), атеросклерозу, артеріосклерозу, хвороби коронарних артерій серця, хвороби периферичних артерій та інсульту. Їх також можна застосовувати для профілактики збільшення ваги, сприяння втраті ваги, зниження надлишкової маси тіла і/або лікування ожиріння (наприклад, завдяки контролю апетиту, харчування, споживання їжі, споживання калорій і/або витрат енергії), включаючи патологічне ожиріння, а також пов'язані з ним захворювання, розлади і стани здоров'я, включаючи, але не обмежуючись ними, запалення, пов'язане з ожирінням, пов'язану з ожирінням хворобу жовчного міхура і викликане ожирінням апное сну. Дія пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом на зазначені стани може бути опосередкована в цілому або частково впливом на масу тіла або може не залежати від цього.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР
Фігура 1. Середня концентрація в плазмі в залежності від часу (прямо пропорційна) після внутрішньовенного й підшкірного введення мишам 100 нмоль/кг. А: Сполуки 33, В: Сполуки 1. Дані представлені у вигляді середнє ж 50, п-З/гочка вимірювання.
Фігура 2. Середня концентрація в плазмі в залежності від часу (прямо пропорційна) після підшкірного введення мишам 100 нмоль/кг Сполуки 33, 74, 76, 77, 78 і 80. п-2/гочка вимірювання.
На Фігурі З представлені дані загального вмісту панкреатичного інсуліну (у мкг) у мишей ЯБ/аБ з діабетом після введення (ї) трьох концентрацій (1,10 ї 50 нмоль/кг)у Сполуки 1 згідно з даним винаходом ІЕксендин-4(1-39)-Редз-Реад3-|(СІп1,Геи15|Гастрин-17; див. нижче), (ії) трьох відповідних концентрацій 1:1 адитивної комбінації пептидів Ексендину-4(1-39) ії п еи15|Гастрину-17 (1, 10 ї 50 нмоль/кг кожного пептиду) і (іїї) носія.
Фігура 4. Д-глюкози в крові у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, "р « 0,001. Порівняння
Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та п еи15|Гастрину-17 і носія відповідно; п-16- 19 у групі.
Ексендин-4(1-39)-Реа93-Реа3-|СіІп1,Геи15|Гастрин-17, (1)
Ексендин-4А(1-39)-(СІп1,Г еи 15|Гастрин-17, (2)
Ексендин-4(1-39)-К-І(СіІп1,Гец15|Гастрин-17, (3)
Ексендин-4(1-39)-ААА-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (4)
Ексендин-4(1-39)-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (5)
Ексендин-4(1-39)-Ре93-5КК-|(СІп1,Г ей15|Гастрин-17, (6)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-5КК-|СІп1 ГГ еи15|Гастрин-17, (7)
Ексендин-4(1-39)-ОВЕ-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (8)
Ексендин-4(1-39)-в8Аос-вАос-|СіІп1, еи15|Гастрин-17, (9)
Ексендин-4(1-39)-(Геш4|Гастрин-б, (10)
Ексендин-4(1-39)-К-(Гец4|Гастрин-6, (11)
Ексендин-4(1-39)-ААА-(Геш4|Гастрин-6, (12)
Ексендин-4(1-39)-5КК-І(Гец4|Гастрин-6, (15)
Ексендин-4(1-39)-Реа3-5КК-( ец4|Гастрин-6, (14)
Ексендин-4(1-39)-Реа3-Ре93-(Геи4|Гастрин-6, (15)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-5КК-| ец4|Гастрин-6б, (16)
Ексендин-4(1-39)-ОВЕ-5КК-|Гец4|Гастрин-б, (17)
Ексендин-4(1-39)-8Аос-в8Аос-І ец4|Гастрин-6, (18)
Ексендин-4(1-28)-|(СІп1,Геи15|Гастрин-17, (19)
Ексендин-4(1-28)-К-ІСіІп1,Гец15|Гастрин-17, (20)
Ексендин-4(1-28)-ААА-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (21)
Ексендин-4(1-28)-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (22)
Ексендин-4(1-28)-Ре93-5КК-|СІп1,Г ей15|Гастрин-17, (23)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Реа3-|СіІп1,Геи15|Гастрин-17, (24)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-5КК-|СІп1 ГГ еи15|Гастрин-17, (25)
Ексендин-4(1-28)-ОВЕ-5КК-|СІп1, Геи15|Гастрин-17, (26)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-вАос-|СіІп1,еи15|Гастрин-17, (27)
Ексендин-4(1-28)-(Геш4|Гастрин-б, (28)
Ексендин-4(1-28)-К-(ІГец4|Гастрин-6, (29)
Ексендин-4(1-28)-ААА-(Геш4|Гастрин-6, (30)
Ексендин-4(1-28)-5КК-І(Гец4|Гастрин-6, (31)
Ексендин-4(1-28)-Ре93-5КК-І(Геч4|Гастрин-6, (32)
Ексендин-4(1-28)-Реа3З-Ре93-(Геи4|Гастрин-6, (33)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-5КК-| ец4|Гастрин-6б, (34)
Ексендин-4(1-28)-ОВЕ-5КК-|Гец4|Гастрин-б, (35)
Ексендин-4(1-28)-8Аос-в8Аос-І ец4|Гастрин-6, (36)
СГ Р-1(7-36)-(ІСІп1,Гей15|Гастрин-17, (37)
С Р-1(7-36)-К-(СІп1,Геи15|Гастрин-17, (38)
Сі Р-1(7-36)-ААДА-|СІп1,Гей15|Гастрин-17, (39)
Сі Р-1(7-36)-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (40)
СІ Р-1(7-36)-Ред3-5КК-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (41)
СГ Р-1(7-36)-Ред3-Ре93-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (42)
Сі Р-1(7-36)-8Аос-5КК-|(СІп1,Сеи15|Гастрин-17, (43)
Сі Р-1(7-36)-ОВЕ-5КК-|(СІп1,Сеи15|Гастрин-17, (44)
Сі Р-1(7-36)-8Аос-в8Аос-|СІп1,Геи15|Гастрин-17, (45)
Сі Р-1(7-36)-(СГей4|Гастрин-6, (46)
Сі Р-1(7-36)-К-(Ген4|Гастрин-6, (47)
СІ Р-1(7-36)-ААА-|Геи4|Гастрин-6, (48)
Сі Р-1(7-36)-5КК-ІГеи4|Гастрин-6, (49)
СІ Р-1(7-36)-Ред93-5КК-І(Гец4|Гастрин-б, (50)
СІ Р-1(7-36)-Ред3-Ре93-Іеш4|Гастрин-6, (51)
СІ Р-1(7-36)-8Аос-5КК-(Гец4|Гастрин-6, (52)
Сі Р-1(7-36)-ОВЕ-5КК-І(Геш4|Гастрин-6 (53) або
С Р-1(7-36)-8Аос-8Аос-|(Гец4|Гастрин-6, (54)
Фігура 5. А-інсуліну в плазмі у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, "р « 0,001. Порівняння
Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та п еи15|Гастрину-17 і носія відповідно; п-16- 19 у групі.
Фігура 6. Вміст панкреатичного інсуліну у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію
Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, "р « 0,01.
Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та п еи15|Гастрину-17 і носія відповідно; п-16-19 у групі.
Фігура 7. Д-НрБАЇсС у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, "р « 0,01, р « 0,001.
Порівняння Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та п еи15|Гастрину-17 і носія відповідно; п-16-19 у групі.
Фігура 8. Д-С-пептиду в плазмі у мишей. Дані обробляли із застосуванням критерію Крускала-
Уолліса з наступним множинним порівнянням із застосуванням критерію Данна, "р « 0,05. Порівняння
Сполуки 33, Ексендину-4, комбінації Ексендину-4(1-39) та п еи15|Гастрину-17 і носія відповідно; п-16- 19 у групі.
Фігура 9. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на переносимість глюкози за результатами вимірювання площі під кривою (АС) після навантаження глюкозою мишей ар/аЬ. Застосовували три режими введення (А) Профілактика, (Б) Лікування або (С) Канікули. Дані представлені у вигляді середнього і ЗЕМ (п-8-13З/група). Статистика: дані порівнювали із застосуванням двохфакторного аналізу АМОМА з наступною поправкою Бонферроні: "р « 0,05; "р « 0,01; р « 0,001 проти носія.
Фігура 10. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на рівень глюкози в крові натщесерце через 8 годин після останнього приймання їжі у мишей др/йдБ. Застосовували три режими введення: (А) Профілактика, (Б) Лікування або (С) Канікули. Дані представлені у вигляді середнього і ЗЕМ (п-8-13/група). Статистика: дані порівнювали із застосуванням двохфакторного аналізу АМОМА з наступною поправкою Бонферроні: "р «0,05; рак 0,01; р « 0,001 проти носія.
Фігура 11. Вплив підшкірного введення Ексендину-4, Ліраглутиду або Сполуки 33 на кінцеві значення (93 день) рівня (А) С-пептиду в плазмі, (Б) інсуліну в плазмі або (С) НЬАТ с (95). Дані представлені у вигляді середнього і 5ЕМ (п-8-13/група)». Статистика: дані порівнювали з використанням однофакторного аналізу АМОМА, тесту Крускала-Уолліса з наступним аналізом Данна: хр 0,001,р«0,01, "р « 0,05 проти носія.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Як уже показане вище, один аспект даного винаходу відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу: при цьому кожна з пептидних груп Ексендину-4(1-39), Ексендину-4(1-28) і СІ Р-1(7-36) ковалентно з'єднана з частиною, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її С-кінець, і кожна з пептидних груп |СіІп1,Геи15|Гастрину-17 і (Ген4|Гастрину-б6 ковалентно з'єднана з частиною, що залишилася, відповідної молекули кон'югата через її М-кінець; або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату.
Згідно з іншим аспектом даний винахід відноситься до пептидного кон'югата, який має формулу:
Ексендин-4(1-28)-РеаЗз-Ре93-(ГеизЗ|Гастрин-5 (55)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Реаз3-|Аіа1,Г ец4|Гастрин-6 (56)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Реаз-|Аіа2,Г ец4|Гастрин-6 (57)
Ексендин-4(1-27)-РеаЗз-Ре93-(Гей4|Гастрин-б (58)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Реа3-|(Геп2|Гастрин-4 (59)
ІСен14|Ексендин-4(1-28)-Редз3-Реаз3-(Гей4|Гастрин-6 (60)
ІОгп12|Ексендин-4(1-28)-Реаз-Реа3-(Геш4|Гастрин-6 (61) (ІОгп27|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-(Гешй4|Гастрин-6 (62)
ІРпе25|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-(Гец4|Гастрин-б (63)
ІА5зр28|Ексендин-4(1-28)-Реа3з-Ре93-(Гей4|Гастрин-б (64) (Туг13)Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-(Ген4|Гастрин-б (65)
ІОгтп29|Ексендин-4(1-28)-Реаз-Реа3-(Геш4|Гастрин-6 (66)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-(Геш4|Гастрин-б (67)
Ексендин-4(1-28)-(Геч4|Гастрин-б (68)
Ексендин-4(1-27)-(Геч4|Гастрин-11 (69)
Ексендин-4(1-27)-Реа3-(Геш4|Гастрин-б (70)
Ексендин-4(1-27)-Реа3-(ГеизЗ|Гастрин-5 (71)
Ексендин-4(1-26)-Реа3-(ГеизЗ|Гастрин-5 (72)
Ексендин-4(1-27)-Реа3-(Геш2|Гастрин-4 (73)
ІТуУг13,ГСеи14|Ексендин-4(1-27)-Ред3з-Ре93-(Гец4|Гастрин-6 (74) (Туг13,Рпе25|Ексендин-4(1-27)-Ред3з-Ре93-(Ген4|Гастрин-6 (75)
ІСеи14,Рпе25|Ексендин-4А(1-27)-Ред3з-Ре93-(Ген4|Гастрин-6 (76)
ІТУг13,Сеи14, Рпе25|Ексендин-А(1-27)-Ред3з-Ре93-(Гец4|Гастрин-6 (77)
Бічний ланцюг-цикло (СГ уз12,051и16|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-|(Ген4|Гастрин-б (78)
Бічний ланцюг-циклоЦ(ОІш16,Г уз29|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-|(Ген4|Гастрин-б (79)
Бічний ланцюг-цикло((Гуз20,1024|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-|(Ген4|Гастрин-б (80)
ІСуз16|Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ре93-|(Г ен4|Гастрин-б (81)
Ексендин-4(1-28)-Реа3-К-Ре93-(Геш4|Гастрин-б (82)
Ексендин-4(1-28)-(Тпг4|Гастрин-б (83)
Ексендин-4(1-28)-ІРпе4|Гастрин-б (84)
ІСен14|Ексендин-4(1-28)-П1 МаїІЗ,Геч4|Гастрин-6 (85)
ІСеи14|Ексендин-4(1-28)-ІМІеє4|Гастрин-6 (86)
ІСен14|Ексендин-4(1-28)-( еи4(3-(3-Піридил)-АІа|б|Гастрин-б (87)
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Редз-Ре93-(Геш4|Гастрин-6 (88)
ІСеи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ред3з-Реаз-(Геш4,Рпез|Гастрин-6 (89)
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ред3з-Реаз-І(Геш4,Рпез|Гастрин-6 (90)
ІАгд927 І еи14 Рпе25,Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ре93-( ец4|Гастрин-6 (91)
ІАг912,27,І ей14 І ух16,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ре93-(ец4|Гастрин-б (92)
ІАг912,27,І ей14 І у520,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ре93-(ец4|Гастрин-б (93)
ІАг912,27,І ей14 І уз24, Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ре93-(ец4|Гастрин-б (94)
ІАг912,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Ре93-(ец4|Гастрин-6 (95)
ІСіШ9 І еи14,Рпе25,Туп13|Ексендин-4(1-27)-(ІГец2|Гастрин-4 (96)
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Ре93-ІГеи2|Гастрин-4 (97)
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ог-Ре93-( еи2|Гастрин-4 (98)
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Реа3-От-|( еи2|Гастрин-4 (99)
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Огп-Огп-І еи2|Гастрин-4 (100)
ІСІн9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-(ІГец4|Гастрин-б (101)
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Ре93-І(Геш4|Гастрин-б (102)
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ог-Ре93-( ец4|Гастрин-б (103)
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Реа3-От-|( ец4|Гастрин-б (104)
ІСІш9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Огп-Огп-І( ен4|Гастрин-б (105)
Ісуз(Гексадеканоїл-ізосІм)З4|С Р-1(7-37)-РедЗз-Реа93-(Геи4|Гастрин-6 (106)
ІАго34 Гуз(Гексадеканоїл-ізос1Іи)26|І Р-1(7-37)-Реа3-Реа93-(Гей4|Гастрин-б (107)
ІАго926,34 І уз(Гексадеканоїл-ізосіІи)36|СІ Р-1(7-37)-Ред3-Ре93-(ІГей4|Гастрин-б (108)
Ісуз(Гексадеканоїл-ізо1І1)26|СІ Р-1(7-37)-РедЗз-Реа93-(Геи4|Гастрин-6 (109)
ІАго26,34, Сув, І уз(Гексадеканоїл-ізосіІи)36|СІ Р-1(7-37)-Ред3-Ре93-(ІГей4|Гастрин-б (110)
ІАІЬВ,Аго34 І уз(Гексадеканоїл-ізос1Ій)26|С І Р-1(7-37)-Редз-Ре93-(ешй4|Гастрин-6 (111)
ІАіЬ8,АгазаАаї Р-1(7-37)-Реа3-Реа3-(ец4|Гастрин-б (112)
ІАгаЗзЦаї Р-1(7-37)-Ред3-Ре93-( ен4|Гастрин-6, (113) або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату.
Наведені вище формули для пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом, які записані з використанням традиційних і широко використовуваних скорочень/позначень для різних розглянутих пептидних груп (гобто Ексендин-4(1-39), Ексендин-4(1-28) і СІ Р-1(7-36)), можуть бути записані у вигляді традиційної повної амінокислотної послідовності, як представлено нижче (лінкерні групи виділені жирним шрифтом): (ЗЕО ІО МО: 1) Н-НаЕСТЕТ5ОІ ЗБКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМССРЗЗОАРРРО-РедЗ-Редаз-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 2) н-
НОаєЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМССРЗЗИАРРРБЗОСТРУМ ЕЕЕЕЕАМСУМІ ОБ-МНА (без лінкера) (ЗЕО ІО МО: З) Н-НСЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІБЄМІ КМ РЗБОАРРРБ-К-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 4) Н-НОЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ РБЗБОАРРРБО-АДА-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 5) Н-НОЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ РОБОАРРРУБ-5КК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: б) Н-НаЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІБЕМІ КМСД РЗЗОАРРРО-Ред3-5КК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 7) Н-НСОЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМСРОЗИАРРРО-вАос-КК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 8) Н-НаЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІБЕМІ КМСД РЗБЗОАРРРОІ-ОЮОВЕ-БКК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 9) Н-НаЕСТЕТ5ОЇ ЗБКОМЕЕЕАМВІ РІБМІ КМ РЗБЗОАРРРО-8Аос-вАос-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕБЕО І МО: 10) Н-НСЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМССРЗБСАРРРБОЗУСУУІ ОБ-МНО2 (без лінкера) (ЗЕО ІЮ МО: 11) НННЕЕСТЕТ5ОІ 5КОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ РЗБОАРРРІ-К-МСУМІ ОБ-МН2
(ЗЕО І МО: 12) НННОЕєСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ РЗБОАРРРО-АДА-УСМ ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 13) НННЕЕєЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ РЗБОАРРРІ-ЗКК-УСУ ОБ-МН2 (ЗЕО 10 МО: 14) НАНСЕЄСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУІ КМаСсРОБИАРРРІ-Реа3-ЗКК-МСММІ ОБ-
Мна (ЗЕО 10 МО: 15) Н-НЕЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕЄМІ КМ РОБОАРРРІ-Ред3-Ред3-МСсУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО І МО: 16) Н-НОЕСаТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМССРЗБОАРРРУО-8Аос-ЗКК-МСУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО І МО: 17) Н-НОЕаТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ(ІДаРЗБОАРРРОІ-ОЮОВЕ-ЗКК-МОММІ ОБ-
Мна (ЗЕО 10 МО: 18) Н-НСЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕМ/І КМ РОЗИАРРРУО-вАос-8Аос-МСсУМІ ОБ-
Мна (ЗЕБЕО І МО: 19) Н-НОаЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РЕМ КМОСТРУУЛ ЕЕЕЕЕАМОУУІ ОБ-МНа2 (без лінкера) (ЗЕО І МО: 20) НННЕЕСТЕТ5ОІ 5КОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ-К-ОСРУ/Л ЕЕЕЕЕАМСУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 21) НННЕЕєЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУІ КМ-ААА-ОСРУМІ ЕЕЕЕЕАМСаУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 22) НННОЕєЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУІ КМ-5КК-ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМСаУМ ОБ-МН2 (ЗЕО 10 МО: 23) Н-НЕЕСаТЕТ5ОЇ ЗБКОМЕЕЕАМВІ РІЄУММІ КМ-Ред3-5КК-ОСРУУЛ ЕЕЕЕЕАМСУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО ІЮ МО: 24) Н-НСЕСаТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ-Реа3-Реа3-ОСРУ/Л ЕЕЕЕЕАМСУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО 10 МО: 25) Н-НОЕСаТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ-8Аос-5КК-ОСРУ/Л ЕЕЕЕЕАМСОУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО 10 МО: 26) Н-НОЕСаСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ-ОВЕ-5КК-ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМСОУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО 10 МО: 27) Н-«НЕЕСТЕТ5ОЇ ЗБКОМЕЕЕАМВІ РІЄММІ КМ-вАос-в8Аос-ОС РУМ ЕЕЕЕЕАМСОУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО І МО: 28) НННЕЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ-УСУМІ ОБ-МНА (без лінкера) (ЗЕО ІЮ МО: 29) НННИ ЄС ТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВАІ РІЕУ КМ-К-УСУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 30) НННЕ ЄС ТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РЕМ КМ-ААА-УСУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 31) Н-Н-НЕБЄСаИТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУ КМ-5КК-УСУМ ОБ-МНа (ЗЕО Ір МО: 32) НННЕЕєЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУІ КМ-Ред3З3-5КК-МСУМІ ОБ-МНа (ЗЕО Ір МО: 33) НННЕЕСТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУІ КМ-РедЗз-Ред3-ЖаУМ ОБ-МН2 (ЗЕО Ір МО: 34) НННЕЕЄЕСТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУУІ КМ-ВАос-5КК-УСаУ ОБ-МНа2 (ЗЕО Ір МО: 35) НН-НЕЕСТЕТ5ОІ 5КОМ ЕЕЕАМВІ РІ ЕМ КМ-ОВЕ-5КК-МСаУМ ОБ-МН2 (ЗЕО Ір МО: 36) Н"-НЕЕСТЕТ5ОІ 5КОМ ЕЕЕАМВІ РІ ЕІ КМ-вАос-8Аос-мсаУМІ ОБ-МНа. (ЗЕО ІЮ МО: 37) Н-НАЕСТЕТЗОУ55МУІ ЕСОААКЕРІАМІ УКЕВОСРУМ ЕЕЕЕЕАМСУМ ОБ-МНЕа (без лінкера) (ЗЕО І МО: 38) НН"ННАЕЄСТЕТЗОМ55МІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКаВ-К-ОСРУУЛ ЕЕЕЕЕАМСаУМ ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 39) НННАЕСТЕТЗОУ55ЗМІ ЕСОАДАКЕРІАМІ УКаВ-ААА-ОСРУЛ ЕЕЕЕЕАМОИаУ ОБ-МНа (ЗЕО ІЮ МО: 40) НННАЕЄСТЕТЗОМ55МІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКаВ-5КК-ОСРУ/Л ЕЕЕЕЕАМОИаУ ОБ-МНа (ЗЕО ІО МО: 441) Н-НАЕСТЕТ5ОУ5ЗМУІ ЕСОААКЕРІАМІ УКаВ-Реаз-5КК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 42) Н-НАЕСТЕТ5ОУ5ЗМУІ ЕСОААКЕРІАМІ УКОаВ-Реаз-Реаз-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 43) Н-НАЕСТЕТ5ОУ5ЗМУІ ЕСОААКЕРІАМІ УКОаВ-вАос-5КК-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО І МО: 44) НН НАЕСТЕТЗОУ5З5МІ ЕСОАДАКЕРІАМ/І УКаВ-ОВЕ-5КК-ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМСОУМІ ОБ-
Мна (ЗЕО ІО МО: 45) Н-НАЕСТЕТЗОУБЗЗМІ ЕСОААКЕРІАМІ УКИа В-вАос-8Аос-
ОСРУМ ЕЕЕЕЕАМОаУ ЮБ-МН2 (ЗЕО І О МО: 46) Н"НАЄСТЕТЗОУ5ЗМУІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКа ВМС ОБ-М На (без лінкера; (ЗЕО ІЮ МО: 47) НННАЄСТЕТЗОМ55ЗМІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКав-к-Мау оБ-МНа (ЗЕО ІЮ МО: 48) НННАЕЄСТЕТЗОМ5ЗМІ ЕСОААКЕРІАМ УКав-ААА-УСУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 49) НННАЄСТЕТЗОМ5ЗМІ ЕСОААКЕРІАМ УКав-ЗкК-иаУ ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 50) НН"ННАЕЄСТЕТЗОМ55МІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКаВ-РедЗ3-5КК-УСУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 51) НН"ННАЕЄСТЕТЗОМ55МУІ ЕСОАДАКЕРІАМІ УКаВ-Ред3-РедіЗ-мСаУ ОБЕ-МНа2 (ЗЕО І МО: 52) НН"ННАЕСТЕТЗОМ55МІ ЕСОАДАКЕРІАУМІ УКаВ-8Аос-5КК-УСУМІ ОБ-МНа (ЗЕО ІЮ МО: 53) НННАЄСТЕТЗОУ5ЗМІ ЕСОААКЕРІАМ УКИав-ОВЕ-ЗКК-МаУм ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 54) НННАЕЄСТЕТЗОМ55МУІ ЕСОДАКЕРІАМІ УКаВ-8Аос-вАос-уСсУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО Ір МО: 55) НННЕЕСТЕТ5ОІ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІ ЕММІ КМ-Реа3-Реа3-СММІ ОБ-МН2 (ЗЕО І МО: 56) НН-НЕЕСТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІ ЕІ КМ-Реа3-Реа3-АСМУ ОБ-МН2
(5ЕО ІО МО: 57) НН-НОЕСТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІ ЕМ КМ-РедЗз-Ре93-МАММІ ОБ-М Н2 (5ЕО ІО МО: 58) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІ ЕМ К-РедЗз-Реа3-МСУМІ ОБ-М На (5ЕО ІО МО: 59) НН-НОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМЛІ КМ-Ред3-Ред3-ЖМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 60) Н-НОЕСТЕТ5ОЇІ 5КОЇ ЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМ-Реаз3-Ред3-ХСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 61) Н-Н-НОЕСТЕТ5ОІ 5-От-ОМЕЕЕАМВІ РІЕМ/ЛІ КМ-РедЗз-Ред3-мМаУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 62) НННОЕСТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ «Огп-М-РедЗз-Ред3-МаУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 63) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕРІ КМ-Редз3-РедЗз-Ж СУМІ ОБ-МНа (5ЕО ІО МО: 64) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КО-Ред3-Ред93-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 65) Н-Н-НОЕСТЕТ5ОЇ 5БКУМЕЕЕАМВІ РЕМ КМ-РедЗ3-РедЗз-МСсУМІ ЮБ-МНа. (5ЕО ІО МО: 66) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМ-Оттп- І РІЕММІ КМ-Ред3-Ред3-МСУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 67) НННОЄСТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ ГРІЄ КМ-Ред3-МаУМГ ОБ-МНа (ЗЕО ІЮ МО: 68) Н-ННЕ ЄС ТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУ КММОаМУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 69) Н-"НОЕЄСТЕТ50І 5КО ЕЕЕАМВІ РІЕМІ КЕЕЕЕАМОаУмМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 70) НННОЄСТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ К-Редз-МаУМ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 71) НН"НОЄСТЕТ50ОІ БКОМЕЕЕАМВІ ГРІЄ К-Ред3-СУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 72) Н-"НОЄСТЕТ50ОІ БКОМЕЕЕАМВІ ГРІЄ -Ред3-СУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 73) НННОЄСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМ К-Ред3-ЖМ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 74) Н-НОЕСТЕТ5ОЇІ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕММІ К-РедЗз-Ред3-МСсУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 75) Н-Н-НОЕСТЕТ5ОІ 5БКУМЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-Ре93-ЖСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 76) Н-Н-НОЕСТЕТ5ОЇІ 5КОЇ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-Ред3-МаУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 77) Н-НОЕСТЕТ5ОЇІ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Реа3-Ре93-ХСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 78) Н-НОЕСТЕТ5ОЇІ 5-К()-ОМЕ-Е()-ЕАМВІ РІЕММІ КМ-Реді3-РедЗз-ЖСУМІ ОБ-МНа. (5ЕО ІО МО: 79) Н-Н-НОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕ-Е()-ЕАМ-К(О-СЕІЕУМІ КМ-РедЗ-РедЗз-МаУМ ОБ-МНа. (ЗЕО ІО МО: 80) Н"НОЕЄСТЕТ5ОІ БКОМЕЕЕАМ-КО)-І РІ-ЕО-У/Л КМ-РедЗз-Реа3-МОУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 81) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕКЕАМВІ РІЕМІ КМ-Реа3-Ред3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 82) НННОЕСТЕТ5ОЇ БКОМЕЕЕАМВІ РІЕМІ КМ-Ред3-К-Ред3-ЖС УМ ОБ-МН2 (5ЕО ІЮ МО: 83) НННОЕСТЕТ5ОІ 5КО ЕЕЕАМВІ РІЕУМІ КМУСУМТОБ-МН2 (ЗЕО ІЮ МО: 84) Н-ННЕ ЄС ТЕТ5ОЇ ЗКОМЕЕЕАМВІ РІЕУ КМУ РО Б-МНа2 (ЗЕО ІО МО: 85) Н-"НЕЕСТЕТ5ОІ 5КОЇ ЕЕЕАМВІ ІЕМ КММа-1 МаІ- ОБ-МНа (ЗЕО ІЮ МО: 86) Н-ННЕЕЄСТЕТ5ОІ 5КОЇ ЕЕЕАМВІЕТЕУММІ КММСМУ-Міе-ОБ-МНа (5ЕО ІО МО: 87) Н-НОЕСТЕТ5ОІ 5КОЇ ЕЕЕАМВІ РІТЕУІ КММСУМІ О-(3-(3-Піридил)-аланіл|-МН2. (5ЕО ІО МО: 88) Н-НСЕСТЕТ5ЕЇ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-РедЗ-МСУМІ ОБ-МНа (5ЕО 10 МО: 89) Н-НОЕСТЕТ5ОІ КМ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-Ред3-Жаг ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 90) Н-НОЕСТЕТ5ЕЇ 5КМУІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-РедЗз-МавгРІ ОБ-МН2 (5ЕО 0 МО: 91) Н-НОЕСТЕТ5ОІ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ре93-ХСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 92) Н-НОЕСТЕТ5ОЇ 5АМІ ЕКЕАМВІ РІЕРІ В-РедЗз-Ж СУМ ОБ-МНа (5ЕО ІО МО: 93) Н-НОЕСТЕТ5ОІ ЗАМ ЕЕЕАМКІ РІЕРІ В-Ред3-МаУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 94) Н-НСЕСТЕТ5ОЇ ЗАМ ЕЕЕАМВІ РІКРІ В-РедЗз-Ж СУМ ОБ-МНа (5ЕО ІО МО: 95) Н-НОЕСТЕТ5ОЇ ЗАМ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-МСУМ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 96) Н-НОЕСТЕТ5ЕЇ 5КМУІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ КУМ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 97) Н-НОЕСТЕТ5ЕЇ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-МІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 98) Н-НСЕСТЕТ5ЕЇ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Огп-Ред3-УМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 99) Н-НСЕСТЕТ5ЕЇ 5КМІ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-Огп-УМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 100) Н"НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Огт-Огп-МмІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 101) НН-НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ КМСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 102) НН-НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 103) Н"НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Огт-Ред3-МсУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 104) Н-НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ред3-Огп-УСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО ІО МО: 105) Н"-НОЕСТЕТ5ЕЇ ЗКУ ЕЕЕАМВІ РІЕРІ К-Ог-Огп-МаУМ ОБ-МН2 (ЗЕБЕО 10 МО: 106) Н-НАЕСТЕТ5ОУБЗБМІ ЕСОАА-К(Гексадеканоїл-ізосІш)-СсвАа-РедзЗ-Редз-
МУСУ ОБ-МНа2 (5ЕБЕО І МО: 107) Н-"НАЕСТЕТ5ОМ55УІ ЕСОАА-К(Гексадеканоїл-ізосІ0)-ЕРІАМІ УВаАВОИ-Редз-
Реа3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕБЕО І МО: 108) Н-НАЕСТЕТ5ОУ55УІ ЕСОААВЕРІАМІ УВО-К(Гексадеканоїл-ізос1Ій)-с-Редява-
Реа3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕБЕО 10 МО: 109) Н-НАЕСТЕТ5ОМУ55УІ ЕСОАА-К(Гексадеканоїл-ізосІй)-ЕРІАУМЛІ УКаВа-Редз-
Реа3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕБЕО 10 МО: 110) Н-НОЕСТЕТ5ОУ55УІ ЕСОААВЕРІАМІ УВО-К(Гексадеканоїл-ізос1Ій)-с-Редява-
Реа3-МСУМІ ОБ-МН2 (5ЕО І МО: 111) Н-Н-АЇБ-ЕСТЕТ5ОМ55МІ ЕСОАА-К(Гексадеканоїл-ізосіІш)-ЕРІАМІ МНаНО-Редз-
Реа3-МСУМІ ОБ-МН2 (ЗЕО ІО МО: 112) Н-Н-АЇ-ЕСТЕТ5ОМ55МУ ЕСОАДАКЕРІАМІ УВаВа-Редз-Ред3-МаУмІ ОБ-МН2
(ЗЕО ІЮ МО: 113) НННАЄСТЕТЗОУ55ЗМІ ЕСОААКЕРІАМІ Уа Ва-Реаз-Реа3-УСаУМІ ОБ-МНа, при цьому скорочення Ред3, вАос, ОВЕ, 1 Маї, рБАїа, Огп, ОРК, ОБи, Саба і Аіб позначають наступні амінокислотні групи, які не зустрічаються в природі:
Редз: -«МН-СН2-СН2-0-СН2-СН2г-0-СН2-С(0)- (отриманий від 8-аміно-3,6-диоксаоктанової кислоти); вАос: -«МН-СН2-СН2-СН2г-СН2-СН2г-СН2г-СН2г-О(0)- (отриманий від 8-амінооктанової кислоти);
ОВЕ: «МН - о (отриманий від 4-(2-аміноетил)-6-дибензофуранпропанової кислоти); 1 Ма!: 1-нафтилаланін; рАїа: бета-аланін;
Саба: у-амінобутанова кислота; дір: а-аміно-ізобутанова кислота; рБи: диамінобутанова кислота;
ОРЕ: диамінопропіонова кислота;
От: орнітин.
Таким чином, беручи до уваги розташування лінкерної групи в пептидному кон'югаті згідно з даним винаходом, лінкерна група -Ред3з-Редз3-, наприклад, позначає наступну хімічну групу: -МнН-СН2г-СнНг-о-Снг-СНг-о-СНг-с(0)-МН-СН2г-СнНг-о-СнН2г-СнНг-о-СН2г-С(О)-, при цьому група -МН-.... ліворуч від лінкерної групи, що розглядається, ковалентно приєднана до групи, отриманої від Ексендину-4- або СІ Р-1, - пептидного кон'югата, що розглядається; і група ...-
С(О)- праворуч від лінкерної групи, що розглядається, приєднана до групи, отриманої від гастрину, пептидного кон'югата, що розглядається.
У позначених лінкерних групах, що залишилися, -К- позначає залишок амінокислоти лізину, -АДА- позначає трипептидний залишок -АІа-АІа-Аїа-, і -«ЗКК- позначає трипептидний залишок -5е1-І ув-ї ув-.
Слід розуміти, що в деяких пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом, перерахованих вище, група пептидної послідовності СІ Р-1(7-36) отримана від послідовності СІ Р-1 людини (ПС Р-1) або його аналога.
Слід розуміти, що в деяких пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом, перерахованих вище, група пептидної послідовності Ексендину-4(1-39) отримана від послідовності Ексендину-4 НеІодегтта зизресішт або являє собою її аналог.
Аналогічно групи (СіІп1, еи15|Гастрину-17 і (Геч4|ІГастрину-6 у зазначених кон'югатах отримані від гастрину людини.
Слід розуміти, що 5ЕО ІЮ МО: 1 рівнозначна Сполуці 1, ЗЕО ІЮО МО: 2 рівнозначна Сполуці 2 і т.д.
Слід розуміти, що кожний із зазначених вище пептидних кон'югатів 1-54 окремо, тобто Сполука 1 або Сполука 2, або Сполука З (і т.д. до Сполуки 54), і, крім того, кожний із пептидних кон'югатів 55-113, перерахованих нижче (дивіться Таблицю 2 і З у Прикладі 2), окремо, тобто Сполука 55 або Сполука 56 «.. (і т.д. до Сполуки 113) або її фармацевтично прийнятна сіль чи сольват складають також окремий аспект даного винаходу.
У контексті даного винаходу, якщо амінокислоти не позначені за допомогою їхнього повного найменування (наприклад, аланін, аргінін і т.д.), вони позначені за допомогою своїх традиційних трибуквених і/або однобуквених скорочень (наприклад, Аїа або А для аланіну, Агу або К для аргініну і т.д.).
Термін "пептидний кон'югат" у контексті даного винаходу позначає молекулу, в якій перша пептидна група приєднана (тобто зв'язана або з'єднана) безпосередньо або за допомогою лінкерної хімічної групи (тобто містка або спейсера) за допомогою ковалентного хімічного зв'язку з другою пептидною групою.
Сполуки згідно з даним винаходом можуть нести один або декілька внутрішньомолекулярних лактамних кілець у пептидній послідовності. Кожний такий місток у сполуках, перерахованих у Таблиці 2 (позначений за допомогою приставки "бічний ланцюг-цикло"), утворюється між бічним ланцюгом, який містить карбонову кислоту, й іншим бічним ланцюгом, який містить амін. Два амінокислотні залишки зазвичай розділені трьома амінокислотами в лінійній послідовності.
У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом Ексендин-4 або 74 може збігатися щонайменше на 75 95 із природним Ексендином-4, наприклад, щонайменше на 80, 85, 90 або 95 9.
У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом гастрин або Уа може збігатися щонайменше на 7095 із природним гастрином, наприклад, щонайменше на 75, 80, 85, 90 або 95 95. У пептидних кон'югатах згідно з даним винаходом сі Р-1 або Ха може збігатися щонайменше на 85 95 із природним
СІ Р-1, наприклад, щонайменше на 90 або 95 9.
Згідно з одним варіантом реалізації поліпептид згідно 3 даним винаходом може містити амінокислотну послідовність, представлену на одній із «»ЕО ІЮ МО: 1,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, Аб, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 ї 113, або її функціональний фрагмент/варіант, який щонайменше приблизно на 80 ос, 85 95, 90 Фо, 95 95, 97 Ус, 98 95, 99 Фо, 99,5 90 збігається з однією або декількома зазначеними послідовностями чи їх функціональними фрагментами/варіантами, яка має не більше, ніж 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1 заміну амінокислот у порівнянні з однією або декількома зазначеними послідовностями, без сигнальної послідовності або з нею, без заміни одного або декількох залишків цистеїну на інший залишок, такий як серин, або з нею, і їхніми безперервними сегментами, що мають щонайменше 2 амінокислотні залишки за довжиною.
Згідно з одним варіантом реалізації, поліпептид згідно з даним винаходом (ії) збігається за амінокислотною послідовністю щонайменше на 99 95 з однією з ЗЕО ІЮО МО: 1,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12,13, 14,15, 16,17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26,27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, АЗ, 44, 45, Аб, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 ї 113 або її частиною; або (ії) містить щонайменше 31, 32, 33, 34, 35,36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, Аб, А7, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 або 60 безперервних амінокислот будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 1,2,3,4,5,6, 7, 8, 9, 1 0, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, З8, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, Аб, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112 ї 113; або (іїї) і те, і інше.
Термін "фармацевтично прийнятна сіль" у контексті даного винаходу (фармацевтично прийнятна сіль пептидного кон'югата згідно з даним винаходом) позначає сіль, яка є безпечною для пацієнта або людини, якій вводять зазначену сіль. Вона може являти собою сіль, обрану з кислотно-адитивних солей і основних солей. Приклади кислотно-адитивних солей включають хлориди, цитрати й ацетати.
Приклади основних солей включають солі, в яких катіон вибирають серед лужних металів, таких як йони натрію або калію, катіонів лужно-земельних металів, таких як кальцій або магній, а також йони амонію, такі як йони типу М(К1ХК2)(КЗ3)(К4), де КІ, К2, КЗ і К4 незалежно зазвичай позначають водень, можливо заміщений С:-є алкіл або можливо заміщений Сг-є алкеніл. Приклади Сі-є алкільних груп включають метил, етил, 1-пропіл і 2-пропіл. Приклади важливих Сг-є алкенільних груп включають вініл, 1-пропеніл і 2-пропеніл. Інші приклади фармацевтично прийнятних солей описуються в публікації 17 видання "Кептіпдіоп'є Рпаптасеціїса! Зсіеєпсе5", АМопзо В. Сеппаго (Еда.), Магк Рибіїзніпа
Сотрапу, Еазіоп, РА, О5А, 1985 (і її більш ранніх виданнях), у третьому виданні "Епсусіораєдіа ої
Рпаптасешіса! Тесппоїоду", дчатев булагргіск (Еа.), Іптотпта Неайнсаге ОА (Іпс.), ММ, ОА, 2007, і 9.
Ріагт. 5сі. 66:2 (1977).
Термін "сольват" у контексті даного винаходу позначає комплекс із певною стехіометрією, утворений між розчиненою речовиною (у цьому випадку, пептидним кон'югатом або фармацевтично прийнятною сіллю згідно з даним винаходом) і розчинником. Розчинник у даному випадку може являти собою, наприклад, воду, етанол або інші фармацевтично прийнятні, зазвичай із малою молекулярною вагою органічні речовини, такі як, але не обмежуючись ними, оцтова кислота або молочна кислота.
Якщо розглянутий розчинник являє собою воду, то сольват зазвичай позначають терміном гідрат.
Інший аспект даного винаходу відноситься до пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі згідно з даним винаходом для застосування як лікарського засобу. Згідно з іншим аспектом розглянутий лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування при лікуванні пацієнта, що цього потребує, від одного з наступних захворювань або розладів, або пов'язаних станів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (ІСТ), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, атероскларезу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК).
Інші захворювання або розлади, що мають можливу актуальність у зв'язку з цим, включають ожиріння, патологічне ожиріння, запалення, викликане ожирінням, викликане ожирінням захворювання жовчного міхура і апное сну, викликане ожирінням.
Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для індукування у пацієнта, що цього потребує, неогенезу острівців підшлункової залози (наприклад, для сприяння формуванню нових рД-клітин у острівцях підшлункової залози).
Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для індукування у пацієнта, що цього потребує, виживання рВ-клітин у острівцях підшлункової залози (наприклад, для запобігання втрати р-клітин у острівцях підшлункової залози).
Згідно зі ще одним аспектом, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для запобігання у пацієнта, що цього потребує, апоптозу В-клітин у острівцях підшлункової залози (наприклад, для запобігання втрати р-клітин у острівцях підшлункової залози).
Згідно зі ще одним аспектом даного винаходу, зазначений лікарський засіб являє собою лікарський засіб для застосування для зниження у пацієнта, що цього потребує, рівнів гемоглобіну. Б1ТАс (глікозильованого гемоглобіну; НЬА с) у крові.
Згідно зі ще одним аспектом, даний винахід відноситься до пептидного кон'югата згідно з даним винаходом для виготовлення лікарського засобу для лікування пацієнта, що цього потребує, від одного або декількох наступних станів, захворювань або розладів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (ІСТ), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, атероскларезу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК).
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом можна застосовувати для: виготовлення лікарського засобу для індукування неогенезу острівців підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує; виготовлення лікарського засобу для запобігання апоптозу В-клітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує; або виготовлення лікарського засобу для зниження рівнів гемоглобіну р1Ас (глікозильованого гемоглобіну; НЬБАТс) в крові пацієнта, що цього потребує.
Серед інших родинних аспектів, додаткові аспекти даного винаходу являють собою відповідні способи лікування станів, захворювань або розладів, окрім зазначених вище. Таким чином, один такий додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу лікування пацієнта, що цього потребує, від одного або декількох наступних захворювань або розладів: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу, предіабет, синдром інсулінорезистентності, розлад толерантності до глюкози (ІСТ), хворобливі стани, пов'язані з підвищеним рівнем глюкози в крові, гіперглікемія, гіпертензія, атерогенна дисліпідемія, артеріосклероз (наприклад, атероскларезу), ішемічна хвороба серця, захворювання периферичних артерій, інсульт, мікроангіопатія, захворювання шлунка, метаболічний синдром, рак (наприклад, рак товстої кишки), запальна хвороба кишечника (ЗХК) і синдром подразненого кишечника (СПК), зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом.
Крім того, інші можливі актуальні стани, захворювання або розлади в контексті способів лікування згідно з даним винаходом включають ожиріння, патологічне ожиріння, запалення, викликане ожирінням, хворобу жовчного міхура, викликану ожирінням, і викликане ожирінням апное сну.
Інший аспект даного винаходу відноситься до способу індукування неогенезу острівців підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом.
Додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу забезпечення виживання В-клітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом.
Додатковий аспект даного винаходу відноситься до способу зниження або запобігання апоптозу р- клітин у острівцях підшлункової залози у пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або фармацевтично прийнятної солі чи її сольвату згідно з даним винаходом.
Інший аспект даного винаходу відноситься до способу зниження рівнів гемоглобіну Б1Ас (глікозильований гемоглобін; НЬАТс) у крові пацієнта, що цього потребує, зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом.
Інші аспекти даного винаходу відносяться до наступного: спосіб лікування пацієнта, що цього потребує, від хворобливого стану, викликаного підвищеними рівнями глюкози;
спосіб зниження рівнів глюкози у пацієнта, що цього потребує; спосіб стимуляції вивільнення інсуліну у пацієнта, що цього потребує; спосіб регуляції спорожнення шлунка у пацієнта, що цього потребує; і спосіб зниження рівнів ліпідів у плазмі у пацієнта, що цього потребує.
У кожному з останніх способів згідно з даним винаходом зазначений спосіб включає введення пацієнтові терапевтично ефективної кількості пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату згідно з даним винаходом.
Термін "терапевтично ефективна кількість" при використанні в контексті описаних вище способів лікування або інших терапевтичних втручань відповідно до винаходу відноситься до кількості, достатньої для того, щоб вилікувати, покращити, полегшити або частково зупинити клінічні прояви певного захворювання, розладу або стану, який є об'єктом лікування або іншого терапевтичного втручання, що розглядається. Кількість, достатня для досягнення цієї мети, визначається як терапевтично ефективна кількість. Кількість, що вводиться, і спосіб введення можна адаптувати для досягнення оптимальної ефективності. Ефективна для даної мети кількість буде залежати, зокрема, від тяжкості захворювання, розладу або стану, який є об'єктом певного лікування або іншого терапевтичного втручання, ваги тіла й загального стану пацієнта, що розглядається, харчування, можливого супутнього лікування й від інших факторів, добре відомих фахівцям у даній області медицини. Визначити підходящий розмір дози й режим дозування, найбільш підходящий для введення пептидного кон'югата або його фармацевтично прийнятної солі чи сольвату відповідно до винаходу людині, можна за результатами, отриманими за допомогою даного винаходу, і їх можна підтвердити в ході правильно розроблених клінічних випробувань. Ефективну дозу й протокол лікування можна визначити за допомогою традиційних способів, починаючи з низької дози на лабораторних тваринах, а потім збільшуючи дозу, контролюючи при цьому ефекти, а також систематично змінюючи режим дозування. Численні фактори можуть бути прийняті до уваги лікарем при визначенні оптимального дозування для даного об'єкта. Такі міркування добре відомі фахівцеві в даній області.
Терміни "лікування" та його граматичні варіанти (наприклад, "який виліковується", "лікування", "лікувати" при вживанні в даному контексті відносяться до підходу для одержання корисних або бажаних клінічних результатів. Для цілей даного винаходу, корисні або бажані клінічні результати включають, але не обмежуються ними, полегшення симптомів, зниження ступеня захворювання, стабілізацію (тобто не погіршення) стану захворювання, затримку або вповільнення прогресування захворювання, покращення або тимчасове покращення хворобливого стану і ремісію (часткову або повну), як помітну, так і непомітну. "Лікування" може також означати продовження виживаності в порівнянні з очікуваною тривалістю життя при відсутності лікування. "Лікування" в деяких варіантах реалізації винаходу може являти собою втручання, яке здійснюється з метою попередження розвитку або зміни патології стану, захворювання або розладу. Відповідно, термін "лікування" може відноситися як до терапевтичного втручання, так і до профілактичних або превентивних заходів. Суб'єкт (наприклад, людина), що потребує лікування, таким чином, може являти собою суб'єкт, який уже страждає від хвороби або розладу, про який іде мова, або суб'єкт, у якого слід попередити розлад.
Термін "лікування", таким чином, включає придушення або зниження посилення тяжкості патологічного стану або симптомів (наприклад, збільшення ваги або гіперглікемії) в порівнянні з відсутністю лікування і необов'язково повинен означати повне припинення відповідного захворювання, розладу або стану.
Термін "агоніст" у контексті даного винаходу позначає речовину (ліганд), яка активує тип рецептора, про який іде мова.
Термін "агоніст рецептора сі Р-1" у контексті даного винаходу означає речовину (ліганд) (який іноді позначається як "агоніст СІ Р-1"), яка активує рецептор ОСІ Р-1, такий як рецептор СІ Р-1 людини.
Речовини, які активують рецептор СІ Р-1 людини, включають природні пептидні гормони СІ Р-1: СІ Р- 1017-37), СІ Р-1(7-36)амід, оксинтомодулін, Ексендин-3, Ексендин-4, глюкагон, шлунковий інгібіторний поліпептид (СІР) і їхні функціональні аналоги й похідні.
Термін "антагоніст" при вживанні в контексті даного винаходу відноситься до речовини (ліганда), яка блокує, нейтралізує або протидіє впливу іншої речовини (ліганда), яка функціонує як агоніст стосовно розглянутого типу рецептора.
У контексті даного винаходу пацієнт, який потребує певного лікування або іншого терапевтичного втручання і згаданий у зв'язку з різними аспектами даного винаходу, описаними вище, переважно являє собою ссавця і, більш точно, людину. Додатковий аспект даного винаходу відноситься до фармацевтичної композиції, яка містить пептидний кон'югат або його фармацевтично прийнятну сіль чи сольват згідно з даним винаходом разом із фармацевтично прийнятним носієм, наповнювачем або основою.
Синтез пептидних кон'югатів
Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути виготовлені за допомогою стандартних методів синтезу, за допомогою застосування систем рекомбінантної експресії або за допомогою будь-
якого іншого підходящого методу. Таким чином, кон'югати можна синтезувати різними способами, включаючи, наприклад, спосіб, який включає: (а) синтез пептидного кон'югата за допомогою стандартної твердофазної або рідинно-фазної методики, як поетапно, так і за допомогою складання фрагментів і виділення й очищення кінцевого продукту пептидного кон'югата; (б) експресію конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, у клітині-хазяїні та виділення продукту експресії з культури клітин-хазяїнів; або (в) здійснення експресії конструкції нуклеїнової кислоти, яка кодує пептидний кон'югат, іп міго у безклітинній системі й очищення продукту експресії; або будь-яку комбінацію способів (а), (б) або (в) для одержання фрагментів пептидного кон'югата, наступного лігування фрагментів для одержання пептидного кон'югата й виділення пептидного кон'югата.
Часто може бути переважним синтезувати кон'югати згідно з даним винаходом за допомогою твердофазного або рідкофазного пептидного синтезу. У зв'язку з цим можна навести як посилання публікацію МО 98/11125 або, в тому числі, РієЇїд5, С.В. еї аї. "Ргіпсіріе5 апа Ргасіїсе ої бЗоїїа-Рназе
Рерііде Зупіпевів"; в: Зупіпеїййс Рерііде5, Сгедогу А. сгапі (еа.), Охтога Опімегейу Рге55 (2 видання, 2002) і приклади синтезу в них.
Одна або декілька бічних амінокислотних ланцюгів у сполуці згідно з даним винаходом можуть бути також кон'юговані з ліпофільним замісником. Зазначений ліпофільний замісник може бути ковалентно зв'язаний із атомом у бічному ланцюзі амінокислоти або, в іншому випадку, може бути кон'югований із бічним ланцюгом амінокислоти за допомогою спейсера. Амінокислота може являти собою частину пептиду 2 або частину пептиду У.
Не бажаючи бути зв'язаними теорією, вважають, що ліпофільний замісник зв'язує альбумін у кровотоці, захищаючи, таким чином, сполуку згідно з даним винаходом від ферментативного руйнування, що підвищує період напіврозпаду сполуки. Спейсер за наявності використовується для забезпечення інтервалу між сполукою та ліпофільним замісником.
Зазначений ліпофільний замісник може бути приєднаний до бічного амінокислотного ланцюга або спейсера у вигляді складного ефіру, сульфонового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду.
Відповідно буде ясно, що переважно ліпофільний замісник включає ацильну групу, сульфонільну групу, атом М, атом О або атом 5, який утворює частину складного ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду.
Переважно ацильна група в ліпофільних замісниках утворює частину аміду або складного ефіру з бічним ланцюгом амінокислоти чи спейсером.
Ліпофільний замісник може включати вуглеводневий ланцюг, який включає 4-30 атомів.
Переважно він має щонайменше 8 або 12 атомів С, і переважно він має 24 атомів С або менше чи 20 атомів С або менше. Вуглеводневий ланцюг може бути лінійним або розгалуженим чи може бути насиченим або ненасиченим. Буде ясно, що переважно вуглеводневий ланцюг заміщений на групу, яка утворює частину приєднання до бічного ланцюга амінокислоти або спейсера, наприклад, ацильну групу, сульфонільну групу, атом М, атом О або атом 5. Найбільш переважно вуглеводневий ланцюг заміщений на ацил і, відповідно, вуглеводневий ланцюг може являти собою частину алкільної групи, наприклад, пальмітил, капроїл, лауроїл, мірістоїл або стеароїл.
Відповідно, зазначений ліпофільний замісник може мати формулу, показану нижче:
КТ
Ліпофільний замісник може являти собою, наприклад, ацильну групу, сульфонільну групу, МН, М- алкіл, атом О або атом 5, переважно ацил. п являє собою ціле число від З до 29, переважно щонайменше 7 або щонайменше 11, і переважно 23 або менше, або більш переважно 19 або менше.
Вуглеводневий ланцюг може бути додатково заміщеним. Наприклад, він може додатково мати до трьох замісників, обраних із МН2, ОН ї СООН. Якщо вуглеводневий ланцюг є додатково заміщеним, переважно він додатково заміщений тільки одним замісником. У іншому випадку, вуглеводневий ланцюг може включати циклоалкан або гетероциклоалкан, наприклад, показаний нижче:
Кк МУ
Переважно циклоалкан або гетероциклоалкан являє собою шестичленне кільце. Більш переважно він являє собою піперидин.
У іншому випадку, ліпофільний замісник може мати в основі остов циклопентанофенантрену, який може бути частково або повністю ненасиченим або насиченим. Кожний атом вуглецю в остові може бути заміщений Ме або ОН. Наприклад, ліпофільний замісник може являти собою холіл, дезоксихоліл або літохоліл.
Як згадано вище, ліпофільний замісник може бути кон'югованим із бічним ланцюгом амінокислоти за допомогою спейсера. За наявності, спейсер приєднаний до ліпофільного замісника й до бічного ланцюга амінокислоти. Спейсер може бути приєднаний до ліпофільного замісника й бічного ланцюга амінокислоти незалежно у вигляді складного ефіру, сульфонілового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду. Відповідно він може включати дві групи, незалежно обрані з ацилу, сульфонілу, атома
М, атома О або атома 5. Спейсер може мати наступну формулу: во
При цьому кожний із В і О незалежно обирають із ацилу, сульфонілу, МН, М-алкілу, атома О або атома 5, переважно з ацилу і МН. Переважно п являє собою ціле число від 1 до 10, переважно від 1 до 5. Спейсер може бути можливо заміщеним одним або декількома замісниками, обраними з Со-6 алкілу, Со-є алкіламіну, Со-є гідроксиалкілу й Со-є карбоксиалкілу.
У іншому випадку спейсер може мати дві або декілька повторюваних одиниць згідно з формулою вище. Кожний із В, 0 і п вибирають незалежно для кожної повторюваної одиниці. Суміжні повторювані одиниці можуть бути ковалентно з'єднані одна з одною через їхні відповідні В і О групи. Наприклад, групи В і О суміжних повторюваних одиниць разом можуть утворювати складний ефір, сульфоніловий ефір, тіоефір, амід або сульфонамід. Вільні одиниці В ії Ю на кожному кінці спейсера приєднані до бічного ланцюга амінокислоти й ліпофільного замісника згідно з описом вище.
Переважно спейсер має п'ять або менше, чотири або менше чи три або менше повторюваних одиниць. Більш переважно спейсер має дві повторювані одиниці або являє собою окрему одиницю.
Спейсер (або одна чи декілька повторюваних одиниць спейсера, якщо він має повторювані одиниці) може являти собою, наприклад, природну або неприродну амінокислоту. Слід розуміти, що у випадку амінокислот, що мають функціональні бічні ланцюги, В і/або Ю можуть являти собою групу в бічному ланцюзі амінокислоти. Спейсер може являти собою природну або неприродну амінокислоту.
Наприклад, спейсер (або одна чи декілька повторюваних одиниць спейсера, якщо він має повторювані одиниці) може являти собою су, Рго, Аа, МаїЇ, Геи, Не, Меї, Суб, Ре, Туг, Тгр, Ні, Гув, Аго, Сп,
Авп, "С-Сім, у-С1ми, Авр, бег ТНг, Сава, АЇб, БАйа, 5-амінопентаноїл, б-аміногексаноїл, 7-аміногептаноїл, 8-амінооктаноїл, 9-амінонаноїл або 10-амінолдеканоїл.
Наприклад, спейсер може являти собою одну амінокислоту, обрану серед у-Сіи, Сава, Б-Аїа і ос- су.
Ліпофільний замісник може бути кон'югований із бічним ланцюгом амінокислоти в сполуках згідно з даним винаходом. Переважно бічний ланцюг амінокислоти включає карбокси-, гідрокси-, тіол-, амідну або аміно групу для утворення складного ефіру, сульфонового ефіру, тіоефіру, аміду або сульфонаміду зі спейсером чи ліпофільним замісником. Наприклад, ліпофільний замісник може бути кон'югований із Ар, СІМ, іп, Ні, Г ув, Агуд, 5ег, ТАг, Туг, Тгтр, Су5 або Юри, Орг або От. Переважно ліпофільний замісник кон'югований із І ух або Су. Проте, будь-яка амінокислота, позначена як Гуз у формулах, наведених у даному описі, може бути заміщена на ЮОБби, Юрг або От, якщо доданий ліпофільний замісник.
Приклад ліпофільного замісника і спейсера показаний на формулі нижче: о доля днини
ВІ о
ЩО й
На ній Гуз із сполуки згідно з даним винаходом (наприклад, від Х) коваленто приєднаний до у-Сіи (спейсера) через амідну групу. Пальмітил ковалентно приєднаний до спейсера у-СіІш через амідну групу.
Альтернативно або додатково один чи декілька бічних ланцюгів амінокислот у сполуці згідно з даним винаходом можуть бути кон'юговані з полімерною групою, наприклад, із метою збільшення розчинності і/або періоду напіврозпаду іп мімо (наприклад, у плазмі) і/або біодоступності. Такі модифікації, також відомо, знижують кліренс (наприклад, нирковий кліренс) терапевтичних білків і пептидів.
Полімерна група є переважно розчинною у воді (амфіфільна або гідрофільна), нетоксичною і фармацевтично інертною. Підходящі полімерні групи включають поліетиленгліколь (РЕС), гомо-або співполімери РЕС, монометил-заміщений полімер РЕС (тРЕС) або поліоксиетиленгліцерин (РО).
Див., наприклад, публікації в Іл. У. Нетаїйоіоду 68:1 (1998); Віосопійдаге Спет. 6:150 (1995); і Стії. Кем.
Тпегар. Огид Сатієг Зув. 9:249 (1992).
Інші підходящі полімерні групи включають поліамінокислоти, такі як полілізин, поліаспарагінова кислота й поліглутамінова кислота (дивіться, наприклад, публікації сзотрбої»х еї аї. (1995), Віосопішдаїє
СНнет., мої. 6: 332-351; Нидесл, вї аї. (1992), Віосопійдаїє Спет., мої. 3, 49-57; ТвиКкада, єї а!. (1984), у.
Маї!. Сапсег Іпві., мо! 73, 721-729; і Ргаїезі, еї а. (1985), Вг. 9. Сапсег, мої. 52: 841-848).
Полімерна група може бути лінійною або розгалуженою. Вона може мати молекулярну масу 500- 40000 Да, наприклад, 500-10000 Да, 1000-5000 Да, 10000-20000 Да або 20000-40000 Да.
Сполука може містити дві або більше таких груп, у цьому випадку загальна молекулярна маса всіх таких груп зазвичай буде перебувати в межах, зазначених вище.
Полімерна група може бути зв'язана (за допомогою ковалентного зв'язку) з аміно-, карбокси- або тіол-групами бічного ланцюга амінокислоти. Переважними прикладами є тіолові групи залишків Сузх і епсілон-аміногрупи залишку Гу, і також можуть бути використані карбоксильні групи залишків А5р і сим.
Фахівець буде добре обізнаний про підходящі методи, які можуть бути використані для виконання реакції конденсації. Наприклад, група РЕС, що має метоксигрупу, може бути пов'язана з тіоловою групою Су5 за допомогою малеїімідного зв'язку із застосуванням реагентів, комерційно доступних у
Мекіаг Тпегарешіїсз АГ. Див. також УМО 2008/101017 і посилання, наведені вище, для більш докладного опису підходящої хімії.
Терапевтичні способи застосування
Надалі слід розуміти, що посилання на використання пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом також включає використання їхньої фармацевтично прийнятної солі або сольвату.
Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть забезпечити привабливий варіант лікування метаболічних захворювань або розладів, у тому числі цукрового діабету, зокрема 1-го типу і/або цукрового діабету 2 типу й, можливо, ожиріння.
Цукровий діабет являє собою групу метаболічних захворювань, які характеризуються гіперглікемією, що виникає в результаті розладів у секреції інсуліну і/або дії інсуліну. Гострі симптоми діабету включають надмірне вироблення сечі, наслідкову компенсаційну спрагу і збільшення споживання рідини, розлад зору, непоясниму втрату ваги, млявість, а також зміни в енергетичному обміні. Хронічна гіперглікемія діабету пов'язана з розладами макро- і мікросудин, які можуть призвести до довгострокового пошкодження, дисфункції і - в деяких випадках - до відмови в результаті різних органів, зокрема очей (особливо у вигляді діабетичної ретинопатії), нирок (у вигляді діабетичної нефропатії), нервів (у вигляді діабетичної нейропатії), серця і кровоносних судин. Діабет можна розділити на три класи, а саме: цукровий діабет 1 типу, цукровий діабет 2 типу й гестаційний діабет, на основі їхніх патогенетичних особливостей.
Діабет 1 типу складає 5-10 95 від усіх випадків діабету й викликається аутоїмунним руйнуванням інсулін-секретуючих панкреатичних ВД-клітин.
Діабет 2 типу складає 90-95 95 випадків діабету і є результатом складного комплексу метаболічних розладів. Цукровий діабет 2 типу є наслідком того, що продукція власного інсуліну і/або чутливість до інсуліну всього організму стає недостатньою для підтримки рівня глюкози в плазмі крові нижче діагностичного порога.
Гестаційний діабет означає будь-який ступінь толерантності до глюкози, виявлений під час вагітності.
Також визнається існування стану, відомого як предіабет. Він включає, наприклад, порушений рівень глюкози натщесерце й порушену толерантність до глюкози і в цілому відноситься до тих станів, які виникають, коли рівень глюкози в крові підвищений, але знаходиться нижче рівнів, установлених для клінічного діагнозу цукрового діабету.
Велика частина пацієнтів із цукровим діабетом 2 типу й предіабетом має підвищений ризик захворюваності та смертності в зв'язку з високою поширеністю додаткових метаболічних факторів ризику, включаючи абдомінальне ожиріння (надлишкова жирова тканина навколо внутрішніх органів черевної порожнини), атерогенну дисліпідемію (розлад рівня жирів у крові, включаючи високі рівні тригліцеридів, низький рівень холестерину ЛПВЩ і/або високі рівні холестерину ЛИНЩ, що сприяє утворенню бляшок у стінках артерій), підвищений кров'яний тиск (гіпертонія), протромботичні стани
(наприклад, високі рівні фібриногену або інгібітора активатора плазміногена-1 у крові) і прозапальні стани (наприклад, підвищений рівень С-реактивного білка в крові).
У свою чергу, ожиріння призводить до підвищеного ризику розвитку, наприклад, предіабету, діабету 2 типу, деяких видів раку, обструктивного апное сну й захворювань жовчного міхура.
Дисліпідемія пов'язана з підвищеним ризиком серцево-судинних захворювань. Ліпопротеїни високої щільності (ЛОВЩ) мають клінічне значення, оскільки існує зворотна кореляція між концентраціями ЛІПВЩ в плазмі та ризиком атеросклерозу. Більша частина холестерину, відкладеного в атеросклеротичних бляшках, походить від ліпопротеїнів низької щільності (ЛІНЩ) і, отже, підвищені концентрації ЛОІНЩ тісно пов'язані з атеросклерозом. Співвідношення ЛІВЩ/ЛІПНЩ параметрів використовується для оцінки клінічного ризику розвитку атеросклерозу й коронарного атеросклерозу зокрема.
Без зв'язку з якою-небудь конкретною теорією, представляється, що пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть несподівано поєднувати фізіологічну дію агоністів рецептора СІ Р-1 з дією пептидів гастрину, див. вище, таким чином, що спостережувана активність може бути значно більшою, ніж при використанні відповідної адитивної комбінації (некон'югованих) окремих пептидних компонентів. Отже, вважається, що пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути особливо корисними при лікуванні предіабету, діабету (особливо цукрового діабету 1 типу і/або 2 типу) і викликаних діабетом станів, хвороб або розладів, таких як ті, що розглянуті вище, включаючи лікування для забезпечення утворення Вр-клітин панкреатичних острівців (регенерації острівців) і завдяки цьому виробництва інсуліну, що буде корисним стосовно регуляції концентрації глюкози в крові. Тому пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть мати значення, зокрема, для обмеження або гальмування прогресування захворювання цукрового діабету 1 і/або 2 типу.
Пептиди згідно з даним винаходом можуть додатково бути корисними для сприяння виживанню й придушенню апоптозу Д-клітин у панкреатичних острівцях. Дія СІ Р-1 і гастрину включає не тільки вплив на проліферацію та дозрівання В-клітин, але й запобігання апоптозу ДВ-клітин і підвищення неогенезу, таким чином, дія пептидів згідно з даним винаходом може включати такі ефекти і їх вплив на покращену регуляцію інсуліну й глюкози.
Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом, таким чином, можуть бути корисними як лікарські засоби для лікування резистентності до інсуліну, розладу толерантності до глюкози, предіабету, підвищеного рівня глюкози натщесерце, діабету 1 і/або 2 типу, гіпертонії і/або дисліпідемії (або комбінації цих метаболічних факторів ризику), атеросклерозу, артеріосклерозу, ішемічної хвороби серця, захворювання периферичних артерій та інсульту. Вони також можуть бути корисними для запобігання набиранню ваги, забезпечення зниження ваги, зниження надлишкової маси тіла і/або лікування ожиріння (наприклад, контролю апетиту, харчування, приймання їжі, споживання калорій і/або витрат енергії), включаючи патологічне ожиріння, а також супутніх захворювань, розладів і станів здоров'я, включаючи, але не обмежуючись ними, запалення, викликане ожирінням, захворювання жовчного міхура, викликані ожирінням, і апное сну, викликане ожирінням. Вплив пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом на ці умови може бути опосередкований у цілому або частково впливом на масу тіла або може не залежати від них.
Фармацевтичні композиції
У описі нижче слід розуміти, що включення одного або декількох пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом до фармацевтичних композицій включає також фармацевтично прийнятну сіль або сольват пептидного кон'югата згідно з даним винаходом.
Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом можуть бути приготовані у вигляді фармацевтичних композицій, які підходять для застосування з або без зберігання і які зазвичай містять терапевтично ефективну кількість щонайменше одного пептидного кон'югата згідно з даним винаходом, разом із фармацевтично прийнятним носієм, наповнювачем або основою.
Термін "фармацевтично прийнятний носій" включає будь-які стандартні фармацевтичні носії.
Фармацевтично прийнятні носії для терапевтичного застосування добре відомі в області фармацевтики й описані, наприклад, у "Кетіпдіоп'є Рпаптасеціїса! Зсіепсев", 17-е видання, Айопзо К.
Сеппаго (Еа.), Мак Рибіїзніпд Сотрапу, Еавіоп, РА, О5А, 1985. Наприклад, можна застосовувати стерильний фізіологічний розчин і фосфатно-сольовий буфер при злегка кислих або фізіологічних значеннях рН. Прийнятні рН-буферні агенти можуть являти собою, наприклад, фосфат, цитрат, ацетат, трис(гідроксиметил)амінометан (ТКІ5), М-трис(гідроксиметил)метил-3- амінопропансульфонову кислоту (ТАРбБ), бікарбонат амонію, диетаноламін, гістидин, аргінін, лізин або оцтову кислоту (наприклад, у вигляді ацетату натрію), або їх суміші. Термін також включає будь-які носії, перераховані в Фармакопеї США для використання для тварин, включаючи людину.
Фармацевтична композиція згідно з винаходом може перебувати в одиничній лікарській формі. У такій формі композиція розділена на одиничні дози, які містять відповідні кількості активного компонента або компонентів. Одинична лікарська форма може бути представлена у вигляді упакованого препарату, при цьому упаковка містить дискретні кількості препарату, наприклад, упаковані таблетки, капсули або порошки у флаконах чи ампулах. Одинична лікарська форма може являти собою, наприклад, капсули, облатки чи таблетки самі по собі або вона може являти собою відповідну кількість будь-якої з цих упакованих форм. Одинична лікарська форма також може бути надана у вигляді форми для ін'єкції однієї дози, наприклад, у формі ручки, яка містить рідкофазну композицію (зазвичай водну). Композиції можуть бути сформульовані для будь-якого підходящого шляху й засобу введення. Фармацевтично прийнятні носії або розріджувачі включають ті, які використовуються в композиціях, підходящих для, наприклад, перорального, інтравітреального, ректального, вагінального, назального, місцевого, ентерального або парентерального (включаючи підшкірне, внутрішньом'язове, внутрішньовенне, внутрішньошкірне й трансдермальне) введення або введення шляхом інгаляції. Композиції можуть бути представлені у вигляді одиничної лікарської форми і можуть бути отримані будь-яким способом з добре відомих способів у області фармацевтичного препарату.
Підшкірний або трансдермальний способи введення можуть бути особливо підходящими для пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом.
Ще один аспект даного винаходу відноситься до пристроїв, лікарських форм і упаковки, які використовуються для доставки фармацевтичних препаратів даного винаходу. Таким чином, принаймні один зазначений пептидний кон'югат або його частина чи варіант у стабільних або консервованих складах або розчинах згідно із даним описом може бути введений пацієнтові відповідно до даного винаходу за допомогою різних методів, включаючи підшкірні або внутрішньом'язові ін'єкції; трансдермальний, легеневий, трансмукозальний шляхи введення, імплантацію, осмотичний насос, картридж, мікронасос або інші засоби, відомі фахівцеві в даній області, а також відомі в даній області.
Ще один аспект винаходу відноситься до композицій для перорального введення. Препарати для перорального введення можуть включати сумісне введення допоміжних речовин (наприклад, резорцинів і нейонних поверхнево-активних речовин, таких як поліоксиетиленолеїловий ефір і н- гексадецилполіетиленовий ефір) щоб того, щоб штучно підвищити проникність стінки кишечника, а також одночасне введення ферментативних інгібіторів (наприклад, інгібіторів трипсину підшлункової залози, диіїзопропілфторфосфату (ОБЕРЕ) і тразилолу) для придушення деградації ферментами.
Активна сполука лікарської форми твердого типу для перорального введення може бути змішана щонайменше з однією добавкою, включаючи лактозу, целюлозу, маніт, трегалозу, рафінозу, мальтит, декстран, крохмаль, агар, аргінати, хітини, хітозани, пектини, трагакант, гуміарабік, желатин, колаген, казеїн, альбумін, синтетичний або напівсинтетичний полімер і гліцерид. Ці лікарські форми можуть також містити інший тип (типи) добавок, наприклад, неактивний розріджувач, змащувачі, такі як стеарат магнію, парабени, консерванти, такі як сорбінова кислота, аскорбінова кислота, альфа- токоферол, антиоксиданти, такі як цистеїн, дезінтегратор, зв'язуючу речовину, загущувач, буферний агент, підсолоджувач, ароматизатор, ароматизуючий агент і т.д.
Дози
Звичайна доза пептидного кон'югата згідно з даним винаходом, використана в контексті даного винаходу, може перебувати в діапазоні від 0,001 до 100 мг/кг маси тіла на день, наприклад, від приблизно 0,01 до приблизно 50 мг/кг маси тіла на день, наприклад, від близько 0,05 до близько 10 мг/кг маси тіла на день, яку вводять у вигляді однієї або декількох доз, наприклад, від однієї до трьох доз. Як уже вказувалося до деякої міри вище, точна використовувана доза буде залежати, зокрема, від характеру й тяжкості захворювання або розладу, статі, віку, маси тіла й загального стану суб'єкта, що підлягає лікуванню; можливих інших супутніх захворювань або розладів, які піддаються лікуванню або повинні піддаватися лікуванню, а також інших факторів, які будуть відомі практикуючому фахівцю в даній області.
Комбінована терапія
Як відмічалося вище, слід розуміти, що посилання на наступні пептидні кон'югати винаходу поширюється також на його фармацевтично прийнятну сіль або сольват, а також композицію, яка містить більше одного з різних пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом.
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом можна вводити як частину комбінованої терапії разом із іншим активним агентом для лікування захворювання або розладу, що розглядається, наприклад, цукрового діабету, ожиріння, метаболічного синдрому, дисліпідемії або гіпертонії, і в таких випадках два активні агенти можна вводити разом або окремо, наприклад, як складові в тій же фармацевтичній композиції або лікарській формі, або у вигляді окремих лікарських форм.
Таким чином, пептидний кон'югат можна використовувати в поєднанні з анти-діабетичним агентом відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, метформін, сульфонілсечовину, глініт, інгібітори ОРР-ЇМ, глітазон або інсулін, або аналог інсуліну. У переважному варіанті реалізації винаходу пептидний кон'югат згідно з даним винаходом вводять у комбінації з інсуліном або його аналогом, інгібітором ОРР-ІМ, сульфонілсечовиною або метформіном, зокрема сульфонілсечовиною або метформіном для досягнення адекватного контролю глікемії. У більш переважному варіанті реалізації пептидний кон'югат вводять у комбінації з інсуліном або аналогом інсуліну для досягнення адекватного контролю глікемії. Приклади прийнятних аналогів інсуліну включають, але не обмежуються ними, Лантус"М, Новорапід'м, Хумалог"М, НовоМікс"Мм, Актрафан"м НМ, Левемір М,
Деглюдек"мМ і Апідра м, Інші значимі в цьому випадку антидіабетичні препарати включають агоністи рецептора СІ Р-1, такі як екзенатид (Буетта "м; Ексендин-4) і ліраглутид (Віктоза "М),
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна застосовувати в комбінації з засобом проти ожиріння відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, пептид УУ або його аналог, нейропептид М (МРУ) або його аналог, антагоніст канабіноїдних рецепторів 1, інгібітор ліпази, преострівцевий пептид людини (НІР), агоніст рецептора меланокортину 4 або антагоніст рецептора меланін-концентруючого гормону 1.
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в поєднанні з засобом проти гіпертензії відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, інгібітор ангіотензин- перетворюючого ферменту, блокатор рецептора ангіотензину ІЇ, діуретик, бета-блокатор або блокатор кальцієвих каналів.
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в поєднанні з засобом проти дисліпідемії відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, статин, фібрат, ніацин і/або інгібітор усмоктування холестерину.
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом також можна використовувати в комбінації з інгібітором протонного насоса (тобто фармацевтичним агентом, який має фармакологічну активність як інгібітор Н7К:я--АТРавзе) відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними, агент типу похідної бензімідазолу або імідазопіридину, наприклад, Омепразол"М, Ланзопразол"М, Декслансопразол")|,
Езомепразол "М, Пантопразол "М, Рабепразол "м, Золпідем "М, Алпідем М, Сарипідем "М або Некопідем "М,
Пептидний кон'югат згідно з даним винаходом, більше того, можна використовувати в поєднанні з протизапальним агентом відомого типу, включаючи, але не обмежуючись ними: - стероїди й кортикостероїди, такі як беклометазон, метилпреднізолон, бетаметазон, преднізолон, дексаметазон і гідрокортизон; - нестероїдні протизапальні засоби (МЗАЇЮ), такі як похідні пропіонової кислоти (наприклад, альмінопрофен, беноксапрофен, буклоксова кислота, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флупрофен, флурбіпрофен, ібупрофен, індопрофен, кетопрофен, міропрофен, напроксен, оксапрозин, пірпрофен, пранопрофен, супрофен, тіапрофенова кислота і тіоксапрофен); похідні оцтової кислоти (наприклад, індометацин, ацеметацин, алклофенак, кліданак, диклофенак, фенклофенак, фенклозова кислота, фентіазак, фурофенак, ібуфенак, ізоксепак, оксипінак, суліндак, тіопінак, толметин, зидометацин і зомепірак); фенамової кислоти (наприклад, флуфенамова кислота, меклофенамова кислота, мефенамова кислота, ніфлумова кислота і толфенамова кислота); біфенілкарбонової кислоти (наприклад, дифлунізал і флуфенізал); оксиками (наприклад, ізоксикам, піроксикам, судоксикам і теноксикам); саліцилати (наприклад, ацетилсаліцилова кислота і сульфасалазин) і піразолони (наприклад, апазон, безпіперилон, фепразон, мофебутазон, оксифенбутазон і фенілбутазон); інгібітори ЦОГ ІЇ, такі як рофекоксиб і целекоксиб; - препарати інтерферону бета (наприклад, інтерферон бета-1а або інтерферон бета-16); і - деякі інші сполуки, такі як 5-аміносаліцилова кислота і проліки, і їх рармацевтично прийнятні солі.
Було показано, що метформін має протизапальні властивості |(дивіться Найпег еї аї., Оіареїезв 54: 1566-1572 (2005)| і тому також може бути корисним у даному контексті.
Кожна з наведених публікацій і патентних заявок включена до даного опису за допомогою посилання в повному об'ємі.
Наступні приклади демонструють деякі конкретні варіанти здійснення даного винаходу. Наступні приклади проводилися з використанням стандартних методик, які добре відомі фахівцям у даній області, за винятком випадків, описаних докладно. Слід розуміти, що ці приклади надані тільки для ілюстрації й не обмежують умови або масштаб винаходу. Тому їх не слід тлумачити як такі, що обмежують об'єм даного винаходу.
ПРИКЛАДИ
Скорочення, які використовуються в даних прикладах, включають:
ММР: М-метилпіролідон
ОСМ: дихлорметан
ОМЕ: М, М-диметилформамід
НАТИ: 2-(7-аза-1 Н-бензотріазол-1-іл)-1,1,3,3-тетраметилуроніум гексафторфосфат
ОІ РЕА: диізопропілетиламін
ЕЮН: етанол
ЕФО: диетил ефір
Редз: 8-аміно-3,6-диоксаоктаноїл вАос: 8-амінооктаноїл
ОВЕ: 4-(2-аміноетил)-6б-дибензофуранпропаноїл
ТЕА: трифтороцтова кислота месм: ацетонітрил
ВЕРХ: високоефективна рідинна хроматографія
МС: мас-спектрометрія
ІВМХ: 3-ізобутил-1-метилксантин
ВЗА: бичачий сироватковий альбумін
САМР: циклічний аденозинимонофосфат
ОМЕМ: середовище Ігла в модифікації Дульбекко
ЕС5: фетальна теляча сироватка
НЕРЕ5: М-2-гідроксиетипіперазин-М'-2-етансульфонова кислота р-ЕКК: фосфорильована позаклітинна регульована кіназа
РВ5: фосфатно-сольовий буфер
Вос: І-бутоксикарбоніл
МЕР: М-метилпіролідон
Ліраглутид: (Аг9о34 ГГ уз(гексадеканоїл-ізосіІц)26|І Р-1(7-37)
ПРИКЛАД 1: Синтез сполуки і властивості пептидів
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
Якщо не зазначено інакше, реагенти й розчинники, використані нижче, були комерційно доступні у вигляді класу стандартних лабораторних реагентів або аналітичного класу, і їх використовували без додаткового очищення.
Загальна методика синтезу пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом
Твердофазний синтез пептидів здійснювали на СЕМ Гірепу Реріїде Зупіпезігег з використанням стандартної хімії Етос. Смолу Тепіасе! м 5 Кат (1 г; 0,25 ммоль/г) вимочували в ММР (10 мл) перед застосуванням і переносили з пробірки до реакційної посудини з використанням ЮОСМ і ММР.
Псевдопроліни, які являють собою дипептиди, що використовуються для мінімізації агрегації під час синтезу пептидів, такі як Етос-Рпе-Тпг(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН і Етос-Азр-Зег(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН, використовували за необхідності, і штучні амінокислоти, що утворюють лінкерні групи Ред3, в8Асс і
ОВЕ (див. вище), використовували як Етос-захищені амінокислоти (тобто Етос-Реа3-ОН, Етос-вАос-
ОН їі Гітос-ОВЕ-ОН відповідно) без зміни загальної методики.
Конденсація:
Амінокислоту-Єтос у ММР/ОМЕ/ОСМ (1:1:1; 0,2 М; 5 мл) додавали до смоли в мікрохвильовій печі
СЕМ бі5сомег разом із НАТО/ММР (0,5 М; 2 мл) і ОІРЕА/МР (2,0 М; 1 мл). Суміш нагрівали до 757 протягом 5 хвилин при пропусканні пухирців азоту через суміш. Потім суміш промивали ММР (4 х 10
МЛ).
Зняття захисту:
Піперидин/ММР (20 95; 10 мл) додавали до смоли для початкового зняття захисту й нагрівали суміш у мікрохвильовій печі (40 "С; 30 сек). Осушували реакційну посудину й додавали другу порцію піперидину/ММР (20 90; 10 мл) і нагрівали ще раз (75 "С; З хв). Смолу потім промивали ММР (6 х 10
МЛ).
Розщеплення:
Смолу промивали ЕН (3 х 10 мл) та Е20О (З х 10 мл) і висушували до постійної ваги при кімнатній температурі (г). Сирий пептид відщеплювали від смоли за допомогою обробки ТЕА/етандитіолом (95/5, 40 мл, 2 год.; г-). Більшу частину ТЕА видаляли при зниженому тиску й сирий пептид осаджували, тричі промивали Еї20 і висушували до постійної ваги при кімнатній температурі.
Очищення і характеристика:
Сирий пептид очищали до ступеня чистоти більше 90 956 за допомогою препаративної зворотно- фазової ВЕРХ із використанням робочої станції Регзеріїме Віозувіет5 МІБІОМ, оснащеної відповідною колонкою та колектором фракцій, і пропускали через неї градієнт буфера А (0,1 95 ТЕА, водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА, 90 95 Месм, водний).
Фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС і відповідні фракції накопичували й ліофілізували. Кінцевий продукт характеризували методом ВЕРХ та МС.
Приклад синтезу
Ексендин-4(1-39)-Реа3-Ре93-|СІп1,Геи15|Гастрин-17 (Сполука 1) синтезували на синтезаторі пептидів СЕМ ГГ ірегу Рерііде Зупіпе5хі7ег з використанням смоли Тепіасеї 5 Кат (0,67 г; 0,23 ммоль/г) і хімії Етос згідно з описом вище. Використовували Ріптос-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопроліни Етос-Рпе-Тиг(ф -Ме, Ме-Рго)-ОН і Етос-зеціВи)-Зег(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН.
Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці Септіпі-
МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 95 до 95 протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (122 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 58 95 чистий.
Продукт очищали повторно на колонці І ипа (1 х 25 см; 5 мкм; С8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 95 до 50 95 протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (63 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 82 95 чистий.
Іншу частину Сполуки 1 синтезували із застосуванням смоли Тепіасеї! 5 Кат (0,70 г; 0,23 ммоль/г) і використовували ті ж умови для синтезу й відщеплення, як описано вище.
Очищення проводили на колонці Сетіпі-МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 2095 до 50 95 протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (113 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 57 95 чистий.
Продукт очищали повторно на колонці І ипа (1 х 25 см; 5 мкм; С8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 95 до 55 95 протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (29 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 77 95 чистий.
Продукти першого синтезу (63 мг; 82 965) і другого синтезу (29 мг; 77 90) об'єднували і ще раз очищали на колонці Кгопавбвії (1 х 25 см; 10 мкм; С8) при пропусканні 4 мл/хв суміші буфера А (0,1 95
ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 95 до 65 95 протягом 47 хв і збирали фракції (2 мл) за допомогою колектора фракцій.
Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (33 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 94 95 чистий. Маса склала 6553,39 Да за результатами МС (розрахована 6553,06 Да).
Ексендин-4(1-28)-Реа3-Ре93-(Геи4|Гастрин-б6 (Сполука 33) синтезували на синтезаторі пептидів
СЕМ репу Рерііде Зупіпезігег з використанням смоли Тепіасе! 5 Кат (0,55 г; 0,23 ммоль/) і хімії
Етос згідно з описом вище. Використовували Етос-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопролін Етос-РНпе-Тиг(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН.
Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці Септіпі-
МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 95 до 55 95 протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (70 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 90 95 чистий. Маса склала 4364,08 Да за результатами МС (розрахована 4364,11 Да).
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-(Ген4|Гастрин-б6 (Сполука 101) синтезували на синтезаторі пептидів СЕМ Гірбегпу Рерііде Зупіпе5і7ег з використанням смоли Тепіасеї 5 Кат (1,15 г; 0,25 ммоль/г) і хімії ЕРтос згідно з описом вище. Використовували Етос-Рпе- Тпг(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН.
Використовували МЕР замість ММР під час спряження і зняття захисту.
Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці сСетіпі-
МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 20 95 до 50 95 протягом 47 хв і збирали фракції (ЗУ мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (50 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 85 95 чистий. Маса склала 3952.00.08 Да за результатами МС (розрахована 3951,97 Да). а, Р-1(7-36)-Ред3-Реаз-|СІп1, І ем15|Гастрин-17 (Сполука 42) синтезували на синтезаторі пептидів
СЕМ Пбрепу Рерііде Зупіпезі7ег з використанням смоли Тепіасе! 5 Кат (1,16 г; 0,23 ммоль/г) і хімії
Етос згідно з описом вище. Використовували Етос-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопролін Етос-5еціВи)-5ег(Рзі Ме, Ме-Рго)-ОН.
Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище і проводили очищення на колонці Зетіпі-
МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 25 95 до 95 протягом 47 хв і збирали фракції (ЗУ мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (172 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 86 95 чистий. Маса склала 5664,72 Да за результатами МС (розрахована 5664,70 Да).
ІАго34 І уз(гексадеканоїл-ізос1Ій)26|С Р-1(7-37)-Ред3-Ре93-(ей4|Гастрин-б (Сполука 107) синтезували на синтезаторі пептидів СЕМ ГГ Ірегіу Реріїде Зупіпезі2ег з використанням смоли Тепіасеї
З Кат (1,30 г; 0,25 ммоль/) і Етос-хімії згідно з описом вище. МЕР використовували замість ММР під час конденсації та зняття захисту. Використовували Етос-8-аміно-3,6-диоксаоктанову кислоту і псевдопролін Етос-Рпе-Тпг(ф-Ме, Ме-Рго)-ОН, а також Етос-І ув(рає)-ОН на стадії прикріплення для ацилювання.
М-кінець пептиду, прикріпленого до твердої фази, захищали Вос із використанням Вос20 (330 мг) і
ПІРЕА (54 мкл) у ОСМ. Потім захисну групу Оде відщеплювали з використанням гідразингідрату/МЕР (4 90; 2 х 15 хв) і смолу промивали МЕР (8 х 2 хв), ОІЕА/МЕР (10 90; 5 х 5 хв) і МЕР (8 х 2 хв). Синтез здійснювали на СЕМ І ірепу Рерііде Зупіпевзіег згідно з описом вище з використанням Етос-С1и-ОїВи і гексадеканоєвої кислоти. МЕР використовували замість ММР під час конденсації та зняття захисту.
Пептид відщеплювали від смоли згідно з описом вище й проводили очищення на колонці сСетіпі-
МХ (5 х 25 см; 10 мкм; С18) при пропусканні 35 мл/хв суміші буфера А (0,1 95 ТЕА; водний) і буфера В (0,1 95 ТЕА; 90 95 Месм; водний). Продукт елюювали за лінійним градієнтом буфера В від 30 95 до 70 95 протягом 47 хв і збирали фракції (9 мл) за допомогою колектора фракцій. Відповідні фракції аналізували методами аналітичної ВЕРХ та МС, накопичували й ліофілізували з одержанням білого порошку (60 мг), який за результатами аналітичної ВЕРХ характеризували як на 88 95 чистий. Маса склала 4819,95 Да за результатами МС (розрахована 4819,45 Да).
ПРИКЛАД 2: Активація (ЕСво) рецептора СІ Р-1 і рецептора гастрину ССК-В іп міго пептидними кон'югатами згідно з даним винаходом
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
Аналіз ефективності рецептора СІ Р-1 (С Р-1 К) людини:
Іп міго дію пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом оцінювали за допомогою вимірювання індукції САМР після стимуляції рецептора СІ Р-1(7-36), Ексендином-4(1-39) або досліджуваними кон'югатами згідно з даним винаходом з використанням набору БіазпРіаїетм сСАМР виробництва
Рекіп-ЕІтег. Якщо коротко, клітини НЕК293, які експресують СІ Р-1 К людини (стабільна клітинна лінія, отримана за допомогою трансфекції КкДНК СІ Р-1 К і відбору стабільних клонів), сіяли в концентрації 40000 клітин/лунка в 9б-лункові мікротитрувальні планшети, покриті 0,01 95 полі-1- лізином, і культивували протягом одного дня в 100 мкл поживного середовища |ОМЕМ, 10 95 ЕС5, пеніцилін (100 МЕ/мл), стрептоміцин (100 мкг/мл))Ї. У день проведення аналізу видаляли поживне середовище і клітини однократно промивали 200 мкл буфера Тирод (сіль Тирод (9,6 г/л), 10 мМ
НЕРЕФХ, рн 7.41. Клітини інкубували в 100 мкл буфера Тирод, який містить концентрації досліджуваних сполук, що підвищуються, 100 мкМ ІВМХ і 0,1 95 В5А протягом 15 хв при 37 "С. Реакцію зупиняли додаванням 25 мкл 0,5 М НОСІ та інкубували на льоді протягом 60 хв. Для одержання деталей методології дивіться публікацію УМО 2008/152403.
Аналіз ефективності ССК-В рецептора (ССК-В В):
Для дослідження зв'язування і активації ССК-В К ми одержали стабільні лінії клітин, які експресують один із рецепторів ССК людини або миші тим же чином, яким були отримані клітинні лінії паї Р-1 К (див. вище). Якщо коротко, автори використовували клітини НЕК293 для трансфекції КДНК
ССК-А К або ССК-В В (ПССК-А К (ідентифікатор гена: 19315), НССК-В В (ММ 1 76875), тоСК-А В (ММ 009827) і тоСК-В КЕ (ММ 007627)| людини або миші, всі клоновані в плазміду трансфекції рІКЕ5- пеогамМмоОвгкК. Клітини культивували за стандартним протоколом у поживному середовищі й трансфікували плазмідою з використанням Іі іроїесіатіп (Іпийгодеп). Клітини, які стабільно експресують рецептори ССК, відбирали з додаванням (418 до поживного середовища (виживали тільки ті клітини, які поглинули та вбудували плазміду з експресією КкДНК) і культивували їх. Стокові суспензії клітин заморожували для наступного використання.
Іп міїго дії пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом оцінювали за допомогою вимірювання р-
ЕКК (із використанням аналізу АіІрпазЗсгееп'"Мм ЗиугеРіге р-ЕКК) у клітинах НЕК293, які стабільно експресували ССК-В К (рецептор гастрину з високою спорідненістю) людини й миші відповідно.
Аналізи ефективності рецепторів гастрину (аналізи АІрпазсгтееп"м 5угегіге р-ЕКК) проводили згідно з наступним описом:
День 1: посів клітин
Описувані клітини, які експресували ССК-В К, висівали в концентрації 20000 клітин/лунка в 100 мкл поживного середовища |ОМЕМ, 10 95 ЕС5, пеніцилін (100 МЕ/мл), стрептоміцин (100 мкг/мл)) у 96- лункові планшети, покриті полі-О-лізином. Клітини інкубували в інкубаторі (37 "С, 5 95 СО») протягом двох днів.
День 3: зміна середовища на безсивороткове
Поживне середовище міняли на 80 мкл безсивороткового середовища |ОМЕМ, пеніцилін (100
МЕ/мл), стрептоміцин (100 мкг/мл))| на лунку і продовжували інкубувати клітини протягом 19 годин у інкубаторі (37 "С, 5 95 СО»).
День 4: стимуляція пептидним кон'югатом і аналіз АІірпазсгеєп м ЗугегБіге р-ЕВК 1. Через 19 годин додавали 20 мкл безсивороткового середовища, яке містило одну з 5 різних концентрацій пептидного кон'югата (в трьох повтореннях для кожної концентрації), і клітини інкубували протягом 5 хв при кімнатній температурі. 2. Середовище для стимуляції видаляли, швидко перевертаючи планшет догори ногами, і до кожної лунки додавали 60 мкл їх лізуючого буфера (з набору для аналізу 5игеріге).
3. Планшет перемішували на шейкері для планшетів протягом 5 хв і поміщали на лід. 4. Аналіз БЗигеБіє Р-ЕКК: 4 мкл кожного супернатанта переносили до 384-лункового проксіпланшета (Регкіп ЕІтег). 5. 4 мкл кожного з двох лізатів контролів (нестимульований і стимульований) додавали до проксіпланшета в двох повтореннях. б. Змішували 60 частин реакційного буфера, 10 частин буфера для активації, 1 частину акцепторних бусин і 1 частину донорських бусин (реакційний буфер я буфер для активації «- бусини). 7 мкл отриманого реакційного буфера - активаційного буфера ж- бусин додавали до лунок проксіпланшета, перед додаванням до лунок суміш ретельно ресуспендували. 7. Планшет інкубували протягом 2 годин у темному боксі при 22 "С в інкубаторі. 8. Планшет аналізували на світло-емісійному рідері планшетів Епмізіоп'м (РегКіп-ЕІтег) з використанням відповідної програми зчитування (РегкКкіп-ЕІтег).
Пептидні кон'югати згідно з даним винаходом досліджували в описаних вище аналізах (тобто ефективність активації З Р-1 К людини, ефективність активації ССК-В К людини й ефективність активації ССК-В К миші).
СІ Р-1(7-36) людини та Ексендин-4(1-39у використовували як позитивний контроль у аналізі ефективності активації рецептора СІ Р-1 людини (ПО Р-1 К), і Н(ІСІп1, І еи15|Гастрин-17 та ССК-8 (який складається з С-термінальних 8 активних амінокислотних залишків ССК) використовували як позитивні контролі при аналізі ефективності рецептора ССК-В людини (ПССК-В К) та аналізі рецептора ССК-В миші (тСссСкК-В В).
У даному дослідженні активації рецептора ССК, пІСІп1,Ї еи15|Гастрин-17 (який має послідовність
Н-ОСРУ/Л ЕЕЕЕЕАМСУМІ ОБ-МН2) використовували як контрольну сполуку. Залишок глутаміну (Сп) міг бути змінений до деякої міри до РугосСіим, але без втрати звязуючої активності рецептора.
Результати (значення ЕСбзо у моль/л) представлені нижче в Таблицях 1, Та і 2.
Таблиця 1
Іп міго ефективність (ЕСво, моль/л) сполук (пептидних кон'югатів) згідно з даним винаходом у активації п Р-1 В, ПССК-В К і тоСсК-В В й , ЕСво ЕСво ЕСво
Ексендин-4(1-39)-Ред3-Редз3- ло в 5,4 х 108 ! (СІп1 і ем15)Гастрин-17 5,8 х 10 1,90 х 10
Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ред3- ло в 7,15 х 108
З3 П еи4|Гастрин-6 7,714 х 10 3,8 х 10
СИ Р-1(7-36)-(Сіп1, Геш15|Гастрин-17 1,45 х 1070 | 2,59 х 108 7,31 х 108
СИ Р-1(7-36)-К-(СІп1,Геи15|Гастрин-17 | 8,42 х 10-! 7,73 х 108 1,14 х 107 а, Р-1(7-36)-АДА-(СІ1Й1, ло в в 39 Гем15ІГастрин-17 1,14 х 10 1,88 х 10 5,41 х 10
ВІРИ 96) ВКК ВІЙ еит5)Гастрин- злв'х 107 | 1,56 х 108 5,86 х 109
СІ Р-1(7-36)-Ред3-5КК- лі 9 в
А (СІп1 і еш151Гастрин-17 9,26 х 10 8,76 х 10 5,11 х 10
С, Р-1(7-36)-Ред3-Реаз- лі 9 в 42 (СІп1 еш151Гастрин-17 7,718 х 10 8,20 х 10 5,83 х 10 а Р-1(7-36)-8Аос-5КК- ло в в 43 сІп1,сеш15|Гастрин-17 тзбхлог р вляхлот | вав хто а Р-1(7-36)-ОВЕ-5КК- ло в в 44 (СІп1 ем 5)Гастрин-17 1,37 х 10 2,57 х 10 8,69 х 10
СІ Р-1(7-36)-ВАос-8Аос- ло в в (СІп1 і еш151Гастрин-17 1,22 х 10 1,28 х 10 7,14 х 10
СІ-Р-1Ц(7-36 ївбхтот 7171111
Ексендин-4(1-39 ївзхтою 77711111 пІСІпП1,Геи15|Гастрин-17 0001 489х109 1,82 х 108 сеК-В 77717171 вхо | Т6зхто7
Таблиця Та
Іп міго ефективність (ЕСво, моль/л) сполук (пептидних кон'югатів) згідно з даним винаходом у активації п Р-1 В, ПССК-В К і тоСсК-В В
Мо . й ЕСво ЕСво ЕСзо
Ексендин-4(1-39)-Ред3-Редз3- Й . 5,4 х 1038 7 Пептемвуастн оон | воює МИТ
Ексендин-4(1-28)-Ред3-Ред3- Й Й 7,1х107 ва (реа озвюн | мою
Таблиця 2
Іп міго ефективність (ЕСво, моль/л) наступних сполук (пептидних кон'югатів) згідно з даним винаходом у активації пої Р-1 К і пССсК-В В
Мо . й ЕСво ЕСво 60 ЦСеш14Ексендин-4(1-28)-Ре93-Реа3-(Геш4|Гастрин-6б
ІОгп12)Ексендин-4(1-28)-Ре93-Реа3З-(Сеи4|Гастрин-6
ІРпе25|Ексендин-4(1-28)-РеаЗ3-Ре93-І(Сеч4|Гастрин-6
ІАзр281Ексендин-(1-28)-Ред3-Рео3-І(Сец4|Гастрин-6 (Туг13|Ексендин-4(1-28)-Реа3-Ре93-(Геш4|Гастрин-6 66 ЦОгт209|Ексендин-4(1-28)-РеаЗ-Реа3-(Сеш4|Гастрин-6б 68 |Ексендин-4(1-28)-Іеш4|Гастрин-6ї /-:/ | бихлом | 14х1о8 69 |Ексендин-4(1-27)-Шей4|Гастрин-їїї -:/ | їохло"м | 43х109
ІТУг13, еи14)Ексендин-4(1-27)-Ред3-Редз-
ІСен4|Гастрин-б
ІТуг13,Рпе25|Ексендин-4(1-27)-Ре93-Ред3-
ІСен4|Гастрин-б
Іеи14,Рпе25|Ексендин-4(1-27)-Ред3-Редз-
ІСен4|Гастрин-б
ІТУГ13,Г еи14,Рпе25|Ексендин-4(1-27)-Ред3-Ре9д3-
І енм4ІГастрин-б
Бічний ланцюг-цикло (І уз12,1и16|Ексендин-4(1-28)-
Ре93-Ре93-І(Геий4|Гастрин-б '
Бічний ланцюг-цикло((СІм16,І ух201Ексендин-4(1-28)-
Ре93-Ре93-І(Геий4|Гастрин-б ' во Бічний ланцюг-цикло((уз20,Іч24|Ексендин-4(1-28)-
Ре93-Ре93-І(Геий4|Гастрин-б '
ІСуз16)Ексендин-4(1-28)-Ред3-Рео3-І(Гечц4|Гастрин-6б
ІСеи14Ексендин-4(1-28)-Г1 МаїЗ,Геш4|Гастрин-6 86 2 ЦСей14Ексендин-4(1-28)-(Міе4|Гастрин-6
І еи14Ексендин-4(1-28)-(І ец4,(3-(З-піридил)-
АїІа|б|Гастрин-б '
ІСІн9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Редз-
Реа3-(Сец4|Гастрин-б '
Ї емн14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ред3-Ред3- Й Й ве |демрпезатриня
ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Редз- лі в во Реа3-П-еш4,Рпез|Гастрин-б Зах 10 1,3 хо
ІАг927,Геи14,Рпе25,Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ред3- що 1,8 х 1039 91 6,8 х 10
ІСен4|Гастрин-б до ІАго12,27 І еи14 І уз16,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)- 17 х 1070 2,6 х 1039
Реа3-(Сец4|Гастрин-б ' (Аго12,27, еи14,-уз20,Рпе25, Туг1З)Ексендин-4(1-27)-| 5 вх 101 2,6 х 1038
Реаз-(Сец4|Гастрин-б ' 94 ІАго912,27 І еи14 І уз24, Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)- 13 х 1070 3,6 х 1038
Реа3-(Сец4|Гастрин-б ' 95 ІАг912,Геи14, Рпе25,Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ред3- 79 х 10-71 1,4 х 1038
ІСен4|Гастрин-б '
ІСІн9, І еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)- 12 х 109 211 х 107
Іей2|Гастрин-4 97 ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Редз- 6,0 х 10-" 1,3 х 103
Іей2|Гастрин-4
ІСІш9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ог-Редз- 46 х 10-! 1,0 х 103
Іей2|Гастрин-4
ІСІш9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Реа3-Огп- 41 х 10-1 БИ х 108
І ен2|Гастрин-4
ІСІШ9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ог-Огп- ло 7 100 І еиг|Гастрин-4 1,1 х 10 8,6 х 10 101 ІСІн9, І еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)- 11 х 1070 3,0 х 103
ІСен4|Гастрин-б 102 ІСІн9,Геи14,Рпе25, Туг13|)Ексендин-4(1-27)-Редз- 91 х 107! 5,4 х 108
ІСен4|Гастрин-б
ІСІш9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Ог-Редз- з 1,0 х 107 103 1,2 х 1070
ІСен4|Гастрин-б 104 ІСІш9, еи14,Рпе25, Туг13|Ексендин-4(1-27)-Реа3-Огп- 87 х 10 8,8 х 109
І енм4|ІГастрин-б
ІСіШ9 І еи14,Рпе25,Туг13|Ексендин-4(1-27)-Огт-Огп- ло в 105 | еца|Гастрин-б Тл хо 16хто
Таблиця З
Іп міго ефективність (ЕСво, моль/л) сполук СІ Р-1 (пептидних кон'югатів) згідно з даним винаходом у активації ПО Р-1 В, НССК-В Е і тоСК-В В (включені тільки в застосування СІ Р-1)
ЕСво
М , ЕСво ЕСво
С Р-1(7-36)-(Сіп1, Геи15|Гастрин-17 3,0 х 107! 2,6 х 1038 7,3 х 108
СІ Р-1(7-36)-К-(СІп1,Сеши15|Гастрин-17 3,0 х 107! 7,7 х 108 1,1 х 107 -8
СІ Р-1(7-36)-ААА-|СІПІ І еи15|Гастрин-17 | ЗА хо | л1ехлов | 5410 що в 5,9 х 1038
СГ Р-1(7-36)-5КК-|СІп1 ГГ ей15|Гастрин-17 3,1 х 10 1,6 х 10 - - - - - - -8 пір 1(7-36)-Ред3-ЗККАІСІпт І еи151Гастрин-| 25 3х40и | вхо | 5110
СІ Р-1(7-36)-Ред3-Редз- і 9 5,8 х 108 42 іп еш15)Гастрин-17 28х1о 8,2 х10 - - - - - - -8 вір 1(7-36)-ВАос-5КК-ІВІпт ет 5|Гастрин-| 4 9 х4071 | вохлоє | 8310 - - - - - - -8 вір 1(7-36)-ОВЕ-5КК-|СІп1,Г ей15|Гастрин вхо | 2вх108 8,7 х 10
С, Р-1(7-36)-8Аос-вАос- що в 7,1х108 45. Сі сец15)ІГастрин-17 ча хо 13 хло
ІГуз(гексадеканоїл-ізосіІм) 341 Р-1(7-37)- ах
Ред3-Ре93-(Геш4|Гастрин-б '
ІАго34,І уз(гексадеканоїл- ізосіІш)26|СІ Р- лахлою | Я 1(7-37)-Ред93-Реаз- (еи4|Гастрин-б '
ІАгд26,34.І ух(гексадеканоїл- ізосіІм) 36) Р- лихо В 1(7-37)-Ред3-Реаз- (Геши4|Гастрин-б '
ІС уз(гексадеканоїл-ізосіІм) 261 Р-1(7-37)- вах 6
Ред3-Ре93-(Геш4|Гастрин-б ' о ЯКЕ ен 110 ізосіІи)З6 | Р-1(7-37)-Ред3-Редз- 1,2 х 10710 '
ІСен4|Гастрин-6б ом ютер 111 ізосІм)26|СІ Р-1(7-37)-Ред3-Редз- 8,8 х 107 '
ІСен4|Гастрин-6б
ІСен4|Гастрин-6б
ІАгоаЗАаї Р-1(7-37)-РеаЗ3-Реаз- лі 2,4 х 108 оз ема 00000 І
МТ: не перевіряли
Результати
Результати, представлені в Таблицях 1, Та, 2 і З вище, показують, що зазвичай усі пептидні кон'югати згідно з даним винаходом є потужними агоністами всіх трьох розглянутих рецепторів і що вони проявляють дуже схожі рівні ефективності.
ПРИКЛАД 3: Відсіюючий аналіз Сполуки 73 на 92 відібраних пептидних СРС
Сполуку 73 було обрано для дослідження великої вибірки пептидних рецепторів типу ОРСК для того, щоб на ранньому етапі виявити будь-яку неспецифічність рецептора. Ці рецептори належать до сімейств ОРСК класів А та В, і аналіз проводили за допомогою Міїйїроге з використанням платформи для скринінгу ОРСК. Кожний СРСК активували своїм контрольним пептидним лігандом (відомим активатором відповідних рецепторів) або Сполукою 73 в концентрації 100 нМ. Агонізм рецептора виражений у бо у порівнянні з контрольним пептидом (який дає 100 95 активації за визначенням).
Тільки очікуваний рецептор СІ Р-1 і рецептор ССКВ (ССК2) активувалися суттєво (100 ї 95 95 відповідно) Сполукою 73, що показує, що пептид є специфічним стосовно цих двох рецепторів.
ПРИКЛАД 4: Фармакокінетика (РК) Сполук 1 і 33 на мишах
Методика
Трьом мишам С57ВІ давали 100 нмоль Сполуки 1 або 33 на кілограм у вигляді внутрішньовенної або підшкірної болюсної ін'єкції та одержували зразки плазми через 240 хв після введення дози.
Зразки одержували від трьох мишей у кожну точку часу. Зразки плазми аналізували на наявність
Сполуки 33 з використанням І С/МС/МС (10-1000 нм).
Результати
Таблиця 4
Параметри після внутрішньовенного й підшкірного введення 100 нмоль/кг мишам 77111111111111171111111Сполуказ3/// | /////// Сполума7//: 17711611 лов | 7777-1111 9796 | 7-1
Обидві сполуки проявляли відмінну біодоступність (ЕР) після підшкірного введення, при цьому
Сполука 33 показувала підвищений профіль РК, ймовірно через більш тривалий період напіврозпаду (Фігура 1А, 18 і Таблиця 4).
ПРИКЛАД 5: РК Сполуки 33 і 74-80
Методика
Двом мишам С57ВІ вводили однократну підшкірну дозу 100 нмоль/кг кожного пептиду. Зразки крові одержували через 5 і 30 хв і через 1, 2, 4, 6, 16 і 24 години. У кожний момент часу забирали зразки від двох мишей. Зразки плазми аналізували після твердофазного виділення (5РЕ) методом рідинної хроматографії мас-спектрометрії (-С-МС/МО).
Таблиця 5
То після підшкірного введення 100 нмоль/кг миші ни шишшишшЕЕ ши
Пептиди показують багатообіцяючі профілі ТУ», при цьому Сполуки 74 і 77 перевершували за періодом напіврозпаду та дією інші сполуки (Таблиця 5 і Фігура 2).
ПРИКЛАД 6: Іп мімо активність пептидних кон'югатів згідно з даним винаходом на мишах аБ/ар
МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ
Мишачу модель ар/аЬ раніше використовували для оцінки дії можливих терапевтичних кандидатів на збереження В-клітин |Коїїп, В. еї аїЇ., Ат. У. РпузіоЇ. ЕпдосгіпоЇ. Мейар. 283: Е745-Е752 (2002))|. У декількох дослідженнях була показана кореляція між вмістом панкреатичного інсуліну й маси р-клітин
ІВоїп, В. еї аї. (Іос.сії.); Зцагег-Ріп2оп, МУ.Ї. еї аї., Оіабеїез 54: 2596-2601 (2005); Зйцаге2-Ріпгоп М/.Ї.. єї а!., Оіареїтез 57: 3281-3288 (2008).
У даному дослідженні, б-тижневих самок мишей ар/ав (ВК5.Сд-т --/-- І ерг5/у) (Тасопіс Епгоре А/5,
І Ше 5Кепзмед, ЮОептагКк) акліматизували до нових умов проживання й забезпечували необмежений доступ до нормального корму і води. Мишей розміщали по парах у кімнаті з контрольованим освітленням, температурою і вологістю. За розвитком діабету спостерігали протягом 2 тижнів за допомогою вимірювання рівня глюкози в крові і перед лікуванням діабетичних мишей випадковим чином розподіляли по групах лікування в залежності від рівнів глюкози у них у крові (п-10/група).
Потім тваринам робили удавані ін'єкції підшкірно 100 мкл носія (один раз на добу) протягом трьох днів для того, щоб тварини звикли до поводження та ін'єкцій. Після рандомізації та удаваної ін'єкції потім тварин обробляли (5с, двічі на добу) протягом 16 днів комбінаціями пІГеи15|Гастрину-17 (1, 10 ї 50 нмоль/кг) і Ексендину-4(1-39) (1, 10 ї 50 нмоль/кг) або Сполукою 1 (пептидний кон'югат згідно з даним винаходом) |гобто ексендин-4(1-39)-РеаЗз-Реаз-|СІп1, І ен15|Гастрин-17| (1, 10 ї 50 нмоль/кг), або носієм (буфер РВ5; об'єм ін'єкції 5 мл/кг). Щоденні ін'єкції проводили між 8:00 і 9:00 годинами і між 15:00 і 16:00 годинами, при цьому свіжі розчини готували безпосередньо перед введенням.
Зразки крові (200 мкл) одержували з орбітального сплетення й поміщали в пробірки з ЕДТА перед введенням дози (день 1) і на 8 та 16 добу лікування. Кожний зразок крові центрифугували й плазму (100 мкл) зберігали при -80 "С для подальшого аналізу. Зразки крові для визначення рівня глюкози в крові одержували з хвостової вени. Після заключного дня введення дози, тварин забивали (16 день) під дією анестезії СО з наступною цервікальною дислокацією. Підшлункову залозу кожної тварини негайно вилучали, зважували і зберігали для подальшого аналізу вмісту інсуліну.
Вимірювання
Концентрації глюкози в цільній крові (ММ) визначали оксидазним методом іммобілізованої глюкози (Еійе Ашоапаїузег, Вауег, ОептагкК). Рівень С-пептиду в плазмі визначали з використанням набору для радіоїмуноаналізу С-пептиду (Гіпсо/МіПіроге, КЕ КСР-21 К). Вміст панкреатичного інсуліну визначали з використанням набору для радіоіїмуноаналізу інсуліну пацюка (І іпсо/МійПроге, набір К1-13).
Результати
Як ясно випливає з Фігури З спостерігали значно підвищений вміст панкреатичного інсуліну у тварин, оброблених пептидним кон'югатом згідно з даним винаходом (Сполука 1) у порівнянні з тваринами, обробленими простою комбінацією Ексендину-4(1-39) і НІ еши15|Гастрину-17 або обробленими носієм.
Таким чином, вочевидь, дія на рівні панкреатичного інсуліну, яка виникає в результаті ковалентної конденсації або зв'язування (кон'югації) групи Ексендину-4 і групи Гастрину в складі пептидного кон'югата згідно з даним винаходом, може бути несподівано більшою, ніж при використанні відповідної адитивної комбінації двох окремих пептидних компонентів.
ПРИКЛАД 7: Шеститижневе дослідження
Протокол 125 самок мишей ар/аЬ (ВК5.Сд-т «/-- І ергар/у)) (на момент надходження 6б-тижневі) були отримані від Тасопіс Еигоре А/5. На 4 добу одержували кров тварин, яких утримували на напівголодній дієті, для визначення базового рівня С-пептиду в плазмі, інсуліну в плазмі, глюкози в крові й рівнів НЬАТс.
Потім тварин розподіляли по 5 групах лікування, п-20, в залежності від базового рівня С-пептиду й
НЬАТс в плазмі. Тваринам робили підшкірні ін'єкції 100 мкл носія двічі на добу протягом щонайменше
З днів для акліматизації тварин до умов утримування й експериментальних процедур.
Потім тваринам робили підшкірні ін'єкції двічі на добу пептидів або носія протягом 42 днів згідно з
Таблицею 6. Денні ін'єкції робили в період 08:00-09:00 їі 15:00-16:00 свіжоприготовленими розчинами.
Останній день введення дози був ранок 42 дня.
Таблиця 6
Групи й дози нн
Підшкірно два рази на добу
Дослідження припиняли на 42-й день. Тварин утримували на напівголодній дієті, і вони одержували останню дозу вранці. Забирали проби крові для визначення С-пептиду плазми, інсуліну в плазмі крові, глюкози в крові й НВАТс. Після забору крові тварин піддавали евтаназії з використанням
Со» з наступною дислокацією шийних хребців. Одержували підшлункову залозу, її зважували, ділили на З частини і переносили до пробірок, які містять 2 мл холодного кислого спирту, і проводили аналіз вмісту інсуліну.
Сполука 33 знижувала рівень глюкози в крові (Фігура 4) і підвищувала концентрацію інсуліну в плазмі в порівнянні з носієм у мишей Яар/аЬ (Фігура 5). Крім того, обробка Сполукою 33 викликала статистично значуще зниження рівнів НВАТс в порівнянні з тваринами, яким вводили носій і Гастрин- 17 ж Ексендин-4 (Фігура 6). Ці результати показують, що Сполука 33 покращувала глікемічний контроль у крові мишей із діабетом.
Крім того, Сполука 33 викликала статистично значуще збільшення вмісту панкреатичного інсуліну в порівнянні з носієм (Фігура 7). Крім того, як Сполука 33, так і ексендин-4 призводили до значного збільшення дельти рівня С-пептиду в плазмі, що вказує на покращення функції підшлункової залози в усіх групах (Фігура 8).
Сумісне введення Ексендину-4 і Гастрину не перевершувало Ексендин-4 за покращенням глікемічного контролю у мишей ар/4р. Таким чином, дози, використані в даному дослідженні, не виявляли синергетичної дії Ексендину-4 і Гастрину на глікемію.
Наші дані показують, що пептидний кон'югат Сполуки 33 значно підвищує вміст панкреатичного інсуліну й покращує контроль глікемії у мишей аБ/дб, що випливає зі зниження НВАТбс.
ПРИКЛАД 8: Дослідження лікарського засобу в режимі "канікули"
Протокол
Одержували 150 самців мишей ар/ар у віці 5-6 тижнів. Тварин утримували (5 мишей/клітка). у контрольованих умовах (20-22 "С, 55-85 95 вологості) з дотриманням циклу 12:12 год. світло/гемрява, світло вмикали о 05.00 ранку. Тварин годували досхочу, утримували на стандартній дієті Айготіп Мо 1324, і вони мали вільний доступ до підкисленої водопровідної води. На момент початку дослідження тварини були у віці 8-9 тижнів. Усі тварини були акліматизовані й оброблялися щодня мінімум за один тиждень до початку експерименту.
Зразки крові: Перед початком лікування й у день 93 (перед припиненням) у голодних мишей (17 годин) були отримані проби крові (150 мкл) з орбітальних сплетень за допомогою покритої ЕДТА мікропіпетки. Зразки крові поміщали в пробірки, покриті ЕДТА, і зберігали на льоді. Зразки крові центрифугували й отриману плазму (принаймні 50 мкл) зберігали (при -80 "С) для наступного аналізу рівня С-пептиду й інсуліну. Також у день -10/12 (до початку лікування) і день 93 (до закінчення) проводили аналіз зразків крові (50 мкл), отриманих із орбітальних сплетень, на глюкозу крові (палички) і НВАТс.
Поділ:
За 6 - 4 дні до введення першої дози препарату тваринам, яким влаштовували голодування (17 годин), проводили пероральний тест на переносимість глюкози (ОПТ, див. нижче). Площу під кривою концентрації глюкози в крові, отриману за 240-хвилинний період (АОС, одиниця вимірювання: мМ'хв), використовували для поділу тварин на 5 груп (А-Е) по 26 тварин у кожній, щоб одержати схожу переносимість глюкози в кожній із груп. Через перші 50 днів приймання препарату (період 1) проводили другий тест на переносимість глюкози. На основі цього другого ОГТТ кожну групу мишей ділили за АС (як зазначено вище) на дві підгрупи, які відображають схожу переносимість глюкози.
Введення доз:
Тваринам вводили один раз на день підшкірно дозу носія (2"п-26), Ексендин-4 (п-:26) або Сполуку 33 (п-26) і вводили ці дози відповідно до Таблиці б протягом 50 днів. Дози вводили між 02.00 їі 3.00 вечора щодня у вигляді ін'єкції об'ємом 5 мл/кг. Через 50 днів введення дози тварин ділили на 7 груп, як показано в Таблиці 1. Цей режим дозування продовжували протягом 40 днів, тварин забивали на 93 день.
Пероральний тест на переносимість глюкози (0ГТТ): ОГТТ проводили в дні -6/4, 50, 65, 78 і 91 періоду лікування на тваринах, яким влаштовували голодування протягом ночі (17 годин) після останньої ін'єкції носія або сполуки. Зразки крові брали з кінчика хвоста й вимірювали рівень глюкози в крові. Для запобігання змішаного приймання їжі тваринам влаштовували голодування протягом усього оГТТ. Відразу ж після початкової проби крові (1-0, рівня глюкози в крові натщесерце) давали пероральну дозу (1 г/кг) глюкози (глюкозамоногідрат, АЮ 500 г/л), розчинену у воді МО (5 мл/кг, 0,2 г/мл), і тварин повертали до їхніх домашніх кліток (1-0). Потім визначали рівні глюкози в крові в момент часу 1-15, 30, 60, 120 і 240 хвилин.
Глюкоза натщесерце: Для подальшого спостереження за статусом діабету у тварин вимірювали рівень глюкози натщесерце в крові після 8 годин голодування в день 0, 37, 44, 58, 72 і 85. Щоб звести до мінімуму стрес, тварини голодували протягом дня (з 06.00 ранку, коли звичне споживання їжі було низьким), і рівень глюкози в крові натщесерце визначали о 02.00 дня.
Таблиця 6
Групи дослідження
Період 1 Період 2 підшкірно 1 разнадобу/ 79051007.
Носій: РВ5: Фосфатно-сольовий буфер сірсо (Мо 70011, рн-7,4).
Сполука 33 - подвійний агоніст І Р-1-гастрину - зменшувала площу під кривою глюкози (АС) після перорального тесту на глюкозу, а також знижувала рівень глюкози в крові натщесерце в порівнянні з контролем, який одержував носій, незалежно від того, чи була парадигма лікування профілактичною, лікуванням або "канікулами" (Фігура 9-10). Крім того, рівні інсуліну й С-пептиду в плазмі та рівні НБАЇ у крові були значно нижчими у мишей, що одержували Сполуку 33, в порівнянні з тими, які одержували носій (Фігура 11). Ці дані показують, що Сполука 33 покращує контроль глікемії у мишей із цукровим діабетом аБ/йбБ і більшою мірою, ніж Ексендин-4 і ліраглутид. Примітно, що ефект сполук на глікемічний контроль зберігався протягом декількох днів після припинення лікування, при цьому він був найбільш вираженим у мишей, що одержували Сполуку 33.
ПЕРЕЛІК. ПОСЛІДОВНОСТЕЙ «1» ЗІЛЕНД ФАРМА ДКС «1505 ПЕНТИДНІ КОН'ЮГАТИ АГОНІСТІВ РЕПЕНТОРА СТРА ТА ЇХ
ЗАСТОСУВАННЯ
«1305 0612 ОЇ «150» ОК РА 2010 00379 «151 2010-04-27 «160 16 «170» Раїпв уетвівв 33 «и» 1 «115 55 «а» РЕТ «РІЗ» ЦШЕгучна «ЗИ» «лю» Послідовність синтетичного пептиду «ДО» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Ва» АЙ ЬЯ «МОУ» Жваа сх Рер3 «хх 1
Тв СПУ Сів СЛУ Твг РНе Те Веї Акр ее Бує бій Месбів Сів і х 10 Те
СПИ Айе Уві Ахе ем РНе Пе Ста то Бех Гу Ак Сіу Су Ро 5ег 2а 53 в ет Су Ану Рів Рто Ро баг Ха Ха Сів СПУ Рго Тер би Сів СИ 85 40 45
Сів Сп Сі Аа Тут СБУ Тр ев Ар Ре «Дій» «пІ115 30 «212» РЕТ
«213» Штучна «223» Цослідовність синтетичного пейтилу «Мр
НІВ бі Сіи бі Тв РВЄ ТВ бег Ар Сеи сх Тв Сів Мессі Ой
Ї З НВ 15
Он Аза Уві Агв Сех Рів Пе Ом Ттробей ук Аво СТУ СПУ Ріко Бех
З бек Сну Аг Рто Рго Рго бек Сів Оіу Рго Рер бен ОТ Сів Св ОН
За 40 45
СП Аза Ту СІК Тер ТГев Ар Ре 50 55 ка» З «ії» 57 «12» ЕК «2153» ЦШНучна «20 «З25» Послідовність синтетичного пептиду «НКх З
Ні Сх Ом СтТу Ток Рае Ту Зсг ляр ен Зег бух Оп Ме С Св і З 10 15 ої АВ Ма Ага Ген Рне Ле Си Ттрец ух Аа СТУ СПУ Ро ет 20 25 за
Зег Су Аа Ро Рго Рго Зег Гух Сів Су Рго ТтрСев ОТ Се Спи
Спи ма Ада Ту СПУ Ттр Гец Акр РНе 5а 58 «2105 4 «11» 559 «й» РЕТ
«213» Штучна. «223» Послідбеність синтетичного певтицу «Ах 4 вих СИу Сів Су Твг Рбе. пт бег Авроїви ет Гуз Сів Ме Ос бів 1 5 ю 15
Ой Аа МагАте Гечп Ре Це Си Тер ев ух Ап Оу СЛУ. Рго Зег 20 35 зо бек Оіу Ав Рго Рго Рго хех Аа Аа Аа Сів Сіу Ріо Тер Гей Ой 33 40 45
Сів Сів Си Сто ДІВ Гук СИу Ттр їси Ар Ре 50 35 «2» 5 «ої» 59 «812» РЕТ «213» Штучна «Р «28» Послідовність синтетичного пептиду «а» 5
Ні СУ си бі1х Те Ве Тнг бе Ар си вег і ув Сі Месбів СІВ 1 5 Ю 15
Сів Ав Ма! Аг бе Ріе Не СлЛю Ттр Бец (Се5 Аби Сп у Су ро Зег 2 25 30 бег СПу Аа Рго Рго Рго Зег 5ет ух Му Сів Сбу Ре Тер Гев'Єїи 35. Я0 45
Сів СЯ Соч Айа Туг Су Тер ес Ахр Ре 535 «2105 6 «МІ» 60 «212» РЕТ
«213» Штучна «ЗД» «йй3» Послідовність синтетичного пептиду «ВД «дл РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ло (АПК) вда Май т Рем «400» б
Ні Оу Спа СПУ Те Рє Те 5ег Авр Гчевег Гук Сі Ме Сім Сн
З З 10 15
Си Аа Уві Ата Тен Рпе Пе Си Ттр Бец Гу Ап Су Су Рго Зег р.) 28 30 вет Сну Ада Рго Ро Ргб 5ег Хав Зет Гуз Суб Сіл СЛУ Рго Тр бе 3а 45
Сів спо сце Се Спо Айва Туг Су Ттр ем Ар оре 50. 53 Ге; «ЦІ 7 «112» 60 «212» РЕТ «3» Штучна «М «23» Послідевність синтетичного пептиду «ох «2212. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «оо» (401440) «ла» Хай ж ЗАОЄС «КО» 7
Нів СИ» Сів біх Тву Ре Тв 5ег Ар Бен бет Бу Сію Ме бів Сів
З 5 10 ІХ
Сни Ав УВІ Атгв без Ре Не СПИ тр Бен бує Аби СПУ Сп у Ріо Бех
А) т5 за зет СТУ Аа Рго Рг Ред ве Хва Бег ук Гук Сп Сіу Ро Тр Гео 35 ов, 45
С бін Си Стос Аза Гує Су тр Ген Авр рве 50 55 0 «0» 8 «1» 60 «212» РЕТ «5135 Штучна «ех «203» Послідовність синтетичного пептиду «ко «221 ВІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «ра» СО) «ода» Хай є ОВЕ х 42 аміноєстил)-о-дибензофуран-пропанс «00» 8
Нів Сіу тб у Тс Ре ТА 5сї Ар бе: бет Бу Ота Ме От Си
Н З 10 15
Сів Аа Уві Аге беп Рпє Пе Ттроїбео Су Абп бу Су Рто вет
Б) 25 30
ЗекОїу Аа Рто Рго Рго Бет Ха вт Гу Гуз Се Оу Ріо Перси 33 40 45
Опеоч бів бів бій АЄтує Оу Тер бен Аер Рне 60 «Ох 5 «ел1рх 58 «212» РЕТ «13» НШиучна «220 «2232» Послідовність сннтетичного пейтиду «г» «ді РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ.
«вал» (40 «ОЗ» Ха ВАС. «АЮ» 9
Ні Сі бів Су Тв Ре Те бег Авр еп ет ув СИ МебСіо Сів
ІК: 15
Сів Аве Уві Ате еп Ріє Пе Су Ттр Гец Гу5 Ав Су Сіу Ріо бег зе СПУ Аа Рго Ріо Рі Бек Хва Хаа О1п 1 Ро То вв Ой Со 4а 45
Си ОБеста А! Тут СТУ Тер Гей Авр. Ре 35 «З» 10 «кіїз» 45 «До» РЕ «Іа» Штучна «одОх «Й2Аз. Послідовність сннтетичного пептилу «00 10
Мк Оу Сі Оу ТВ Рне Пе Зет Авр ви Бег Бук СТ Меї Сію СЯ в і 5 юЮ 15
Сів Ада Уві Ате еп Ре Пе Сі Ттр ев був Ав Сну Сну Рго- ет 20 ра Зо ек СПУ Ав Рго Рго Ріо бБег Тук СПУ Гтріси Ахр Ре
Ба о 45 «вій» і «2115 «б «125 РК «13» Штучна и» «293» Послідовність синтетичного пехтичу «0» 11
Ніх Спу Спи СПУ Те Ре Те Бег Ар Гей бег Бук бів Ме сів С 1 З то 15
Сів Аа Уа Атро со Ріє Це См Тер Гео Гук Авв Су Оу Ріо 9ег
У 30
Беє Оу Айа Рго Рго Ро бег Су Рут Су Тер беи АкроРве ву 45 «ЦІ» «їх 48 «2125 ВЕТ «13» Штучна. «ла» «23» Посидовність синтетичного пептиду «Аз 13
Ні сіу СТИ У ТК РВЄ ТВ беї Ахр вн ет мук ОЇв Ме їн Со
І З Іо 15
Сів Аа Ма! Ат Цев.Рне Пе і Ттр Геи бух Авко СТУ Су Рто Зеї 20 23 30
Бе Оу Аа Рго Ро Ро 5ег Аа Аа Аа Туг СНУ Тр бен Аз» Ре 35 0 43 «Ох 13 «11» ав «213» РЕТ «2135 Штучна «2295 «223» Послідоввість синтетичного пептиду «400х 13
Ні біу Сів Су Твх Бе Те бег Авр Ти Зег Тк СТя Мессте СПй
І 5 їй ІЗ
Сн Аа Маг Ате Сее Рве Пе Сів Ттр бе ух Ап Су Сіу Ро Зег 20 25 30
Зег Ох Ада Рго Ріо Рго ет бсг у5 Бук Тук Су Тер Гео Ар рве 3 В) 45 «210» 14 «211» 4 «а12и РЕТ «213» Шкучна «220» «ой» Послідовність синтетичного пептиду «2» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ад (401.30) «иа» Жвах Ре «А» ТЯ
Оу Сто Су ТВх РБеЄ Тв Зег Ар Гев БЕК Сук сів Ме См СТІ
І 5 юЮ 15
Сп Аа МагАге Ге Ріє Не Си Тер Гев Гук Аби СНУ СПу Рг бет
КО, 5ег Сіу Аа Рго Рго Рго бегт Хаа Зег ув Гу ТУ Оу Тер ви Ар
Ріе «ЖНіз 15 «2112 47 «212» РЕТ «215». Штучна; «рах «33 Послідовність сивтетичного цейтидУ «РО» «21» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дод (40 «бе» Хаа - Реві «ЦЮ» 15
НОТУ ОБеСТу Тіт Ре ТВ Бех Ар Ген бет ув Сів Ме сів Со і 5 10 І5
См Аза У Ага Геп Ре фе Сів Тер Бви Г.у5 Акп Су Сіу Рго бег 95 Зо зег біт Аа Рго.Рго Рго Зег Хна Хна Тут СПУ Тр ев Авр Ре «МО» 16. «2115 49 «12» РА «135 Штучна «Др «дб». Посліловність снвтегичного пептиду «2» «221» РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «222» (4.40) «3» Хай «ЗАС «4300» 16
Нів сЯу Сб ОХ ТВі Ріє Тв 5ег Ар бен 5еї Гуз бів Ме Обі С 1 5 Ю 15
Сів Аа Ма! Агр Геи Ріє Де Оїк Тер бе бух Ап ОТ Оу Ріо ех 20 га 30 «век Оу Аа Ро Рто Ро зет Ха ет Був Був Гук СТУ Ітр бен Ар 35 40 45
Ріє «о» 17 «211ж 45 «12» РЕ «213» Штучна «ол» «223». Послідовність синтетичного пептилу
«М» «2212 РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «2од» (40)-40) «ка Хаа х ВВЕ х 4402-аміноєтнл-б-дибензофуран-пропаноїя «НЮ» 17
Ніксту Ми Спу Тег Ріє. Тіт Зег Ахр Ген ет Гуз Но Мега СЛ 1 5 Ю 15
Сто Ача Уві Агр Сеи Р Пе Ой Тр еп 1 у5 Авп Су СПУ Вго бег зо
Зег СПУ Аа Ріо Рго Ріо Бех Хаз бе Гу Був Рут Лу Тр Сей Акр 0 45
Ре «21» 185 «Її» 47 «21225 РКТ «213» Штучна «ех «доЗ» Послідовність синтетичного пептиду «ва «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «доз (СН) «203» Ха х ВЛОС «ІВ
Ніб Спу Сів Су сг Ре Те Зег Авр Гепбег Був Сі Ме Сі Ох і 5 юю 15
Сн Ай Ма Атге Пец РНе Не Ов Тер цезв Суб Аа СНУ СПУ Рго ех 20 2 30 бег СОІУ Аа Рго Рге Рго Зех Хна Хна Тут СПУ Тр. бен Ар Ре 33 в 45
«20» 19 «211 45 «ох ВТ «243» Штучна коа0» «ОЗ» Послідовність синтетичного пентиду «00» 19
Ні Сту Спи СТУ Тв Ре Ну бех Ар їев Зег бух Ов Ме бі бій і 3 Ю 15
Сів Аз Уві Ат еп Ре Пе біо Тр ев Гу Аза бій СПУ Ріо Тір 20 25 зв
Гек іч спа 1 Сн Се Айа тує Су Тер ев Авр Ре 40 45 «2» 50 «Із Ав «2125 РЕТ «13» Штучна «М «223» МПосліпцовність сивтетичного пептнлу «ах 20
РН ОТ се ЄИУ Те РН Тіг бег Ар ви бе Бук Ме От ОТ ї 5 10 15
Сів Аа Уа Ате еп Реве Пе СЛ тр ев ух Авв Гу Сів Су Бгто
БІ 23 30
Ттр во Сів Ом Си Сів Аа ух СТУ Тур ев Авр Ре «402 «15 48 «12» РЕ кл» Штучна «220» «023» Послідовність синуетичного петиснду
«МЮ» 21
Пе СТУ СТ Су, Твх Рве Тит бе Авр Бев 5ег 1у8 бій Ме! Ов бій 1 5 юЮ 15
Сів АЧе Уві Ате Ге Рне Це Су Ттр Бе ух Ав Аа Аа Аа бій
З
СИЖ Ро Тер Геч Сі Сів бів Се СтИ Аа Гуго Тгр бе Ар Рв
За с 45 «0» 22 «21» Я «оз РТ «213» Штучна «ЗД» «од Послідовність витер чного пентиду «я» 2
Нік СЛУ Сів Су Те Ре Твг бег Авр Гей Зет Гук Сп Меєбів Об
З ІЙ 15
СПИ Аа Ма! Ате еп Ре Пе ОВ Тер ре бух яп Зег Суб Гук сп 20 28 30
СИу Рео Тер бев Сі Сів бів Сів Си Аа Тут СЯу Тер Ге Авр Ре «ій» 23 «211» 49 «12» РАТ «ІЗ» Штучна «220» «2232» Послідовність синтетичного пешяду «БА» «2215 ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «02» (29)(29) «во» Хай х РерЗ «300» 23
Ніх Оїх Січ Спу Тіт Ре Те бет Авр Ген бег ув Сіп Ме! Сів Ов і З 1 5
Ой Ав Уяі, Ахд БепоРпе Пе Ом Ттр еп ух Ако Хва ве Гу Гу
За 25 т,
Сів СЯу Ро тр Бео СЯв Сів СЯ бо Си Аа Гук СпПу тр Сен Авр 35 40 45
Ре «210» 24 «215 47 «Іа» ЕТ «233 Пітучна «в» «бий» Послідовність синтетичного пептиду «а «221 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Ло» (29).(30) «223» Хяй х Рері «АЮ о
Ні СПУ Сів Лу ве Рве Те Бег Авр Ген бег Був Сп Меї Сі СТО 1 5 юЮ 15
Ст Ав Уві Аїв без РНе Це бів Тер без 1.у5 Аби Хва Хаз Сія Слу
Зо
Рг Тр еп сти СТЕ Сни бів сли Аа Ту Су Тер ев Ар Ріє «2105 25 «їх 49 «2» РЕТ «2135 Штучна «220». «223» Послідовність синтетичного пептилу
«Й» «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «23» 429)-(29) «ДЗ» ХМив х АОС «00 25
Нік Сіу Сів СЯ У Те РНе То бег Акв ео Бе гу Сіл Ме Оїч О16 1 їх Ю 15 біз Аз Уа! Атв со Ре Це во Ттр Гео Був Аби Хаа бек Гує Був
За
Сів Спу Рто Ттр Сев Оп су Сів ОЗ СТч Аа Тут Сну Тер Гей Ар 33 40 45
Ріє «10» а «і» 49 «12» РЕТ «З13х Штучна «20» «235 Нослідовність синтетичного пептиду «ДМ «бої» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ро» (29). (29) «кдз3» Хай ВЕ - 4-(2-яМиоєтиз)-е-дибенчофурав-пропаноїл «Аж да
Ніх Сх Сів СТУ ТВ ве Ті бе Авр Пец бе? Су СЯ Ме Ото СТИ і З 10 І5 си Аа Ма Ага Гео Ре Пе Он ГерТві Су йо Хва зег Бук ув 20 ах КО)
Сів Сіу Рго Ттр Сем Сів Сів Сів Спи сте Аа Тухг СПУ Тер Г.еп Авр
ТБе «20 27 «із 47 «212» РЕТ «21325 Штучна «ДМ» «а» Послідовність синтетичного пептиду «ем» «їх РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «под» (29230) «223» Хва ех ЗАОС «А» 37
Нів СПУ Сів Су Таг Рве ГВт Бех Ар Ген ет бух Сів Мей Сів СТИ і 5 10 ІВ
Сів Аза Ма! Агр Сев Ре Пе Се Терен Гук Ав Хаа Хав сів СТУ зо
Ро То Бен Спо Сі ЄТЧ ЄЛО Си Аа Тук СПУ Ттробен АвроРне «гід» 25 «-24112 34 «212» РКЕТ «213» ЦЕгучна «вх «033» Послідовцість синтетичного пептиду «Ой» 25 іх С1у Сім Су Хв РНе Твіт бег Акр Ген ес Тує СТ Ме От Єв 1 5 ТО) 15
Сів Аа Ма! Атебеи Рре Це СВ) Ттр ем Був Аво Тут Су Ттр Ген 20 25 36
Авр Ре
«21» 29 «8115 38 «12» РЕТ «3» Штучна; «ой «223» Мослідовність синтетичного пептиду «ах 29
Ніз Су Сім Су ТЕ Ре Те бег Ар Ген ет 15 16 Мессі Св 1 2 юю 15
Си Аа Уа Аго Бе Ріє Це Сі Ттр їси Гу кв бує Тут О1У Тер 2 З 30
Тем Авр Ре: 35 «ою 3 коі15 37 «ліз РКТ «13» Цітучна. «А «2235 Послідовність синтетичного пептиду «00» 30
Нів Сі; Сів О1У Те Рне Тін бег Ар си Жеї бух Сіл Меси сте 1 5 юЮ 15
Сни Лів УА Ага еп Ра Не ОИ Тер Сен Гл Авв Лів Ага Ада ух
МУ 30
ОК Тер Тео Ахро Ре «ЩО 31 «М». 57 «2» РЕ «ВЗ» Пітучна.
«Ох «723» Послідовність синтетичного пептиду «Ох 31
Нік сту Сн СТу Те Ріє Тіг бек Аяр ви Бех Гуз бій Меєбтй Сів ! 5 юю 15
Сів'Авв Маг Ате Бей Ре Не О би Ттр Беб Ї у5 Ан бе Гуя ух Тує
Оу тр бен Ар Роє «під» 35 «1 38 «42» РЕ «213» Пітучна «В «203» Послідовність синтетичного пептиду «ох «дії» ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «бриз» (29)(29) «223» Хваах Реві «ЩО» 32
Ніх Су Си СПу Тк Рве Тве бех Ар. Ген бег Гуз бів Месспв спи 1 ж 10 15
ОІо Ав Уві Ате Сен РБє Пе бін Терен Суб Ахй Хва ве був Був
За 23 30
Туг слу Ттр Цез Акр.Рве 33 «2105 33 «11» 36 «12» РЕТ «8135» Штучна «ее» «Зл3» Послідовність синтетичного пептиду
«00» «р ж РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «апою (293.30) ка» Хай т Рева «400» 33
Не СПУ Сто С1у Ту РНе Гн бе Аврісв бебі хв Ов Мес отв С
З 5 10 15
Сіє Аїв Уа Ате Гви Роє Пе СТИ Тер ев ух Аква Хав Хва Тує СОІУ
ЗІ 28 За
Тер ев Авр. Ріє «2105 З «КІ» «12» РТ «13» Штучна «230» «аа» Послідовність синтетичного пептиду «2» «вії» ВРІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Й (29429) «23» Жавт ВАЄ «М» зі
Ні ОР Ст СТУ ТВх Ріє Тве бег Авр Ген зет Сук Сів Место СТИ 1 5 16 15
Ст Аа Уві Ате Ген Рае Пе Сів Тір еп Гу АвпоХва бег Бук Бук 2 а зо
Туг Сіу Ттр Геле Аве РВЕ «10» За. «дії» 35 «2122 РЕТ
«віз» Штучна «ДО» «223» Послідовність синтетичного пептилу «а «рах РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ЙО» (29429 «аа» Жай с ВВЕ з 4 -яМностил)-б-дибензобуранчїронаноїй «аю». 35
Ні пу Сб СТУ Те Рне Те Зег Авр Ге ех Дух Ся МегОосїе
Н 5 іо 15
Спи Аба Уві Ате; без Ре Пе СТи Тер бен Гув Аво Хва ет Був ув
Зо
Туг СИХ Тірїев Ахр Ре «10» Зо «211» 36 «212» РЕТ «2135 Шнтувва «М» «и3» Послідовність синтетичного пеутиду «оо» «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дод» (21.30) «За» Ха - ВДОС «Зо
НЕ СТУ Сів Су ТБ Ре Ту бет Ахр Ге ех 1у5 біп Ме бів Сій
І 5 юЮ 15
Сів Аїв Маї Аке Се Рпе Не СТи Тр бен Гуз Аа Хав Хаа Туг Су 20 25 30
Тто бен Авр Ріє
«2105 37 «2115 47 «12» РЕТ «15» МНучна «Р» «ой» Послідовність синтетичного пептилу «02 37
Нє Ата біш Сі» Тре Ре Гребех Авр Уа Зег бе Тут ви Св Оу
І є 1 15
Сп Айва АТа Су Обі Рве Це Аза Ттр ги Маї Гу Ту Аге бів Су 28 Б
Рг Ттрев Он бів Сів Спа Сто Аа Тух ОТу Тер ен Авр. Ріє «2102 38 «1» 45 «із РЕТ «213» Штучна «МАЕ» «223» Послідовність синтетичного пептиду «4005 35
Нів Ав бід Су Те Ріє Те бег Авр Уві Зет Бег Тує Гей Ие Су
І 5 56) 15 бів Аіз Аа ух Си Ре Пе Айва Тр со ма) ук Су Ате Бук Оп
ЩІ 5 Зо
Оу Ріо Тер їв Сів Об стю Сто бів Ада Тук су Ттр ви Ар Ре
За я 45 «а «і 30 «2102 РКК «213 Штучна «20» «223» Послілювнсть синтетичного пептиду
«КюЮ» 39
Ніх Аза бій Спу Те Ре ТВг Зех Ахр Ма! Бесбег Тує Тен сти бу 1 ві 10 її
Сіп Аа Аа Був Со Ре Пе Аз ТтрГем Уві Був Су Атя Ав Аа 20 25 ке
Аа СТ су Рго Тр Гео в ОВ Се Сів Сів Аіа Ту О1У Ттрівн
За 40 45
Авр Ріє «10 40 «іх 50 «Від» РЕ «213» Штучна «2205 «223» Послідовність синтетичного пептиду «я
Нів Аіз Сів Спу Твг Ре Тох 5схг АвроУН Зег ет Тут Гем Сі Су 5 ІЮ ІЗ
Сів Аз Аїв І хх Сід рве Пе Аза Троє Ма ув Су Атр зегі де
Зо тує біп Су Ріо То еп Со бів Сів Сім Сів Ава Гуг С1У трі єм
ОЗ 45
Авр Ре «і» 41 «2115 51 «оз РЕТ «ІЗ» ШЕручна «2» «23» Послідовність синтетичного пептиду
«Й» «р2ї12 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «аа» (331 «233» Хва- РевЗ «005 Я.
ЕВ АВ СТИ су ТВ РАе ТВ зе Ахр Ма! вет зе Тут Ге Обід Су
Н 5 ів 15
Сип Ай Аз Був Су Рпе Це Аза Ттр ей Уві Суб СТУ Ат Хва бе
Глк був бів Сіу Рез Тер ев ОТ Сів Сію Сім Сі Ав Тух Су Ттр хо Ахр Рре «2105 43 «21ї» 49 «125 РЕ «13» Штучна «вх «ЯЗ» Послідовність синтетичного пептицчу «г» «221 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ра» (31).32) «роз» Май х Рез «щЮь 42
Нів Аза Со Сіу Те Ріє Те бех Авр Уві бе бег Гуго Сів Су і 5 юю 15
Оп Аїя Ав бує Сі Ре Пе Аа Тер Сез Уа Був СТУ хе Хаа Хай 20 28 30 сія слу Ро Ттр бен Сім Січ Сів Сів Ов Ала Тук СТУ Тр Ген Авр 35 40 45
Рне «З» 43 «21» 51 «12» РЕ «3» Штучна «Дух кг» Послідовність синієтичного пептиду «зх «231» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дра» (3 «23» Жаве ЗАС «ах 43
Ніс Аа Си Су Те Ре ТВ бек Ар Маї баг бег Туг Гео Сів СПУ 1 5 10 15
Сп Аза Ай Був ств Рає Пе АВ Ттрівн ув гу Оу Аг Хв Бог
Зо
Ту уз ОЇп Оу Ріо Періс пе Ов Сів Сі О1а Ана Ту СПУ Тр 45 іст Авр рве за «105 8 «211» 51 ко» РЕТ «2135 Штучна «ох да» Послідовність синтетичного нентиду «М» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «2225 (31323 «ДОЗ» Ха х ВВЕ «8-(5-аміноетил і о-пибензофуран-пропаном «005 й
Ні Аа бів Су Гог Рбе Твг о 5ет Ахр Мі бег Зег Туг ви Сім б1у і 5 10 15
Сів Аа АТа Гу Сі РНе Це Аа Ттр оби У Був СПУ Аго Хва бе
Зо
Гм Був Сп Оу Ріо Тер Сео біб Сб сін тв бів Аа Те Су Тр 0 45
І си Авр Ре «ж 45 «2115 49 «212» РЕК «213» Штучна «Дах «23» Послідовність синтетичного нептиду «ад» «ей1ї» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ал (3143) «23» Хай - ЗАС. «НКЮ» 45
НІВ Аа СВ СТУ Ті Ве Ту ех Ар узі Бегзек Тут Гео Спи Су і 2 Но ІЗ
Ст Аа Аа Бук ОТо Ріє Пес Аба Тер Бей Уа Бук Су Аг Хва Хна 20 25 30 сів Сіу Рго Тер ем Ом Сів Сів Сб О19 Абу Тут СЛУ Тер Ге Авр 35 40 Як
Ре «0» 46 «І» к2ідз РЕТ «д13У» НШітучна
«оо3» Послідовність ситегианого пептиду «0» 46
Ні Аза Св Лу Твг Рне ТвВг бег яр Уві бег бе Туг ев Ов Су
З 10 15
Сів Ав Аа бує Сім РНе Пе Аза Тер ев Ма Б Су Ати Ту Су о) 75 З
Тер Сен Ар Ре 35 «2 47 «3115 37 «12» КТ «213»: Штучна «а» «аа». Послідовність синтетичного пептиду «АЮ» 7
Ніз Аа бів біу Твіт Ріе Те бек Ар Узі Зег ех Тут Бе Сів Су
І 5 10 І5
Оп АВ Аа 1 у5 0 Рпе Ле Аза Ттріви Ма бу Оу Ат Був Ту 23 зо су Тр бен АхроРве
За «ЩО» 46 «іх 39 «Мом РЕЖ «ВРТ3» ПЕГУучНИа «22» «Іа» Послідовність СИцТетичнНОгО пептиду «4005» 4К "Ніз Аа Сів СіуУ ТНе Ріє Трек бег Акр Уві Бех ет Буг Ген Ом біу 1 5 Ю 15 бій Аза Ат Гук Сі Ре Не Аз Тер Гей Мі Гу Су йо Аа Аа 29 25 30
Аз Тут СЛу Тер еп Авр Ре. 35 «З» 49 «211 39 «Оу» РКТ «ДУ» Штучна ед0х «ага» Послідовність синтетичного пептиду «МИ 49
НІВ А Оіш Оіу Те Рбе Тв бет Ар Уві бек ст Гут Сев Си біх 1 5 юю 15
Оп Аа Аа Сук ОТа Ра Пе Аа стр бен УВІ Гу СПУ Ат бот Гу їх Гук СЛУ Тер Гей Ав Ре «МО» 50 «11» 80 «лід» РЕТ «213» Штучна «00 «723» Послідовність синтетичного зептилу «ж койі» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «аа» (313) «Ро3» Хай х Рея «МО» 50
Ні Аз Си Су Те Рве Твг бЗег Ар Уа бет бе Тут Ген с СТУ 1 5 юю 15
Сп Аза Аза Бує Сів Не Пе Аа Тер Тен Маі Бу Су Ах Хав вет
28 30
Був Був Гук Сту Тер Ген Авр Ріє 40 «215 5 «1» 38 «212» РК «21У» Штучна «М» «га» МПосвловність синтетичного пептиду. «ех «22125 ВЗН ОСОБЛИВОСТІ «аю (У) «23» Хаз - РЕВЗ «4005 51,
Нів Аїх Ст Сіу Те Рре Тв Зет Ахр Уві бег Беї Тут Ген ОТО Су 1 З 10 із
Сів Ав Ав Бук Сім Ре Пе Аа Три Уві Був СПУ Ат Ха Хай 28 25 30
ТуєСпу Ттр Ген Дер Рре
За «ДМ» 52 «ДІ» І «ла РЕТ «ВІЗ» Штучна «А» «23» Послідовність синІСТИЧНОГО ПЕНТЯДУ «ам» «2012. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Хай (3133 «223» Хва 5 АОС «4005 55
ЕНя Аа Сів Лу Те РБе: Те бе Авр Уві Зет вег Тує Ген Си СПу
У 10 15
Св Айва Аа Сух СЯ Ре Пе Аа Тер Тен Ма! жк СО Ате Хай вег ув цуб Тут СТУ Тер їео Акр рве 30 «21» 53 «їз 4) «ЛЮх РКТ «ТЯ» Штучна «дО» «223» Послідовність синтетичного пептиду ких «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «лад (131) «дез» Хва ПВЕ з 44 2саміноєтил і о-дибензофуран-пропаноші: «ЦЮ» 53
Ні Ада Сів СПУ Тк Ре Тв бег Авро Уві беє баб Гук Бей Сів Су а 10 І5 бій Аг Аїз бує біс Рне іє Аа Тгр.Геи Уві Був Сіу Атр Хай бе 2 а 30
Гу бує Туг Су Тер Без Ар Рве 33 во «38105 54 «115 3 «2122 РЕТ «піЗ» Штучна «ох «03» Послідовність синтетичного пептиду «дах «22» ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «аа» 4333 «2232 Ха ВАС
«НИ» 5
Нів Аа Сів Сіу Тпт Ре Тйх беї Ар Уві беї бег Туг пев бів бу і З ЩІ) 15
Сп Ах Аз Був Сто Ре Не Аа Ттр беч УаїСує СТУ Ато Ха Хаа 29 25 ЗО
Тут СПУ Тр Еви Авр Ріє «2105 :35 «й1ї1» 35 «217» РЕТ «213» Штучна «2» «223» Послідовність синтетичного пептиду «205 «алі» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «б» (293.430) кра» Кай ех РерЗ «Я» 55
Нік Стж Сів СПУ Тре Ре Тбг бег Авр беи Зег Гу біп Ме бін бів
Н З 10 15
Св Аа Ма! Аг бен Ре Це бів Тер ве Гу Ав Хаа Хав 15 Тр з2а 28 30
Тен-Аяр РНе 35 «0» 56 «7115 36 «212» ЕТ «213» Нітучна «Од» «223» Мослідовність синтетичного пептиду
«ат» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «232 (201.30) «232 Хай х РеюЗ «М» 56
Ні Сну Он Слу ТВу Ре Тв бБег Ар ев ет Суб Сів Мей Сів бій 1 5 10 15
Оп Аїа УВІ Ат рез Рає Пе Січ Тур їй Був Або Хва Хай Аа Су 2 25 Зо
Тр Цен Авр.РНе
ЗУ
«АЮ» 27 «2115 36 «212» РЕТ «13» Штучна «З» «З» Послідовність синтетичного пептиду «20» «21 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «202» (29).(303 «о» Хв х Рерд «409» 57
Ні Сту Си біх Те Рве ТвВг бе Ар Сей бек Су іп Ме Ст і 5 10 Іо
Сів Аа Ма! Ат во РаЄ е Си Ттр бен Бук ко Хва Хаз Туг Ав ща 25 30
Тр Гей Ахр Ре «2 5К «Рі» 35 «2» РЕТ «215» Штучна
«а» «232 Посвідовність синтетичного пептиду «2» «га» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «200» (28).429) «223» Хна хх Реб3 «АПОх 58
Ні Су Си СПУ Ті Ре Тіг бегАяр Гец Бе у Сто Меси Сів 1 5 10 ІЗ
Св Ак Ма! Ат Геч Ре Пе ОТа Тер ем ув Хва Хва тує О1у тр
Ву і вип Авр Рпе «21 55. «І За «2155 РКК «213» Піхучна «Ді «223» Послідовність синтетичного пептилу «лу» «кг2ї» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «232» 42931 «и3» Хай Рері «а» 59
НСКУ Та СТУ Те РБЄ тТЬ 5ег Ар ев бек Був іп МегОів Ор і 5 Ів 15
Сів Аза Уаї Атв ен РБеліє Січ Тер бе Гу зо Хва Хад Ттр Бей 20 25 30 дер Ре «25 6
«1» 36 «2125 РЕТ «2135 Штучна «М «ол» Послідовність СИВУЄТНенОогО пептиду «о» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «йо» (ОК «о» Хай: Роб «ЦЮ» 60
Не СУ ОТ Сіу Те Реве ТВ ет Ар бен Зег Гу Ся Се) Со ОВ 1 5 10 13
Си Лід Уві Атр ви Рпе Це Сто гр Гец Гу А хи Хая Ха Тут СП
Тер Га Ахр Ре «105 ві «21Ї» 36 «12» РЕТ «135 Штучна «МО» «03» Послідонність синтетичного пептиду «ау» «321» РІЗНЕ ОСОБЛИВОСТІ «ооо» (1232) «аа3З» Хай Оп «А» «2212 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «222» (293.(30) «225» Хазве Рер3 «а о
Ні Спу Си Су Ту Ре Ті ЗегАврТеи ет Хав ЄП Меї Сіо Сів 1 5 Іо; 15
Си Ах Мар Ате Гей Ра Пе СН ТтроГеи ув Акй Хаа Хаа Тук су
Тер Гей Ар Ре
Ку «0» 62 «2115 Зб «2125 РЕК «213» Штучна «й» «ди» Послідовність синтетичного вептиду. «22И» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ кооо» (273,02) «а2У» Хай г «220 клі» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «вай» (29). «АЙУ» Хв - РеО «4005 82
Ніє С1уУ Ов Оу ТЕ РВЕ Тв Бех Ахр ев зе ув біп Мес Осо і З 10 15
Ст Аїя Уві Аго Гео Ріє Не ни Ттз Бен Хав Ази Хаа Хва Тут СУ. 20 25 30
Тер ец Авр Ре «2105 63 «2115 36 «д12з РЕТ «213» Штучна «ах «2283» Послідовність сп нтетичного пептиду «о» «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ
«кидав (29) (30) «23» Ма Рева хо» 63 нів ту Сій СІу Тег РН Таг беу Азр ген Зег у СІВ Ме Сі Сів 1 5 юЮ 15
СішАіе Уві Атв Тел Ріє Пе Спи Ре Ген Бук Ави Хай Хаа Тут Су 70 25 за
ТерІги Ар. Ріє за «2105 654 «Її» 36 «2132» РКЕТ «313» Штучна «код» «03» Послідовність синтетичного пептиду «ДО» «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «лай» (29). «203» Хай - Рева «МЮх б
Ні С1У Си бу Тв Рве Те ех Авр Гео бек бух Ота Ме Ото Сто 1 5 3) ІЗ
Ом Аза Уаї Аго Ген Ре Пе Сів Ттр ем ув Авр.Хаз Хва Тут Сіу зх зо
Треки Авр Ріє «210» 65 «211» 36 «роз РКТ «213» Штучна «ех «223» Цослідовність синтетичного пептиду
«АД» «221» РІЗНЕ ОСОБЛИВОСТІ «222» 429430) «МОУ» Май « Реру «43005 05
Ні Су Сів Су Тбг Рбе. ГВт 5ет Авр Без Зеу Був Тут Мей Сів Со 1 5 Ю І5 бів Аа Ма Асв Пе РБЄ Пе Ох Тер во Був Ав Хай Хай Тут СЯ у як) 25 Зо)
Тер Се Ар Ре 35 «210» об «11» 36 «122 ЕТ «213» Штучна «ВО» «во3» Послідовність синтетичного пептиду «2 «221» РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «йо» ОО «са» Хай х Оп «М» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «рай» (29).430) «й» Маша Рев3 «ЩО» об
Вк СПУ Ош СТУ ТВ Рпе Те Зег Акр їеи ет Суб бів Ме Са СИ і 3 І 15
Св Айа Уа! Хвя Пе Ріє Пе С16Лтр ей Був Ах Хаа Хна Туг Оу за
Тер Ген Ар Ре
«М 67 «215 35 «ма РАК 213» Цітучна «вах «сюеоа МПосліДОВВІСТЬ СИНТеТИЧчЧНОГО ЛеНтТИлЛУ «а» «215. ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «20 (2).(29) «03» Хай - Рері «НО 7
Нів СЛУ Св Сі Тім Ре Трест Авр Бей Зег Був Сів Ме сін ій і 5 10 15
Он Аа УагАто Ге Ре Не сб гр Гео ув Ав Хаз Туг СПУ р
Теч АЗр рве
За «210» 68 «2115 38 «12 РЕТ «213» Штучна «220» «ау». Послідовність синтетичного пептилу «НО ОВ
Ні Оу Со Оу Тв Ре ТВх Бех Лер ем век Сук Сі Меї СТ ОТО 1 в. 159) 15
САТ УВІ те Сен Ре Не Тер бен Гуз Аби Тут СТУ Ттрісм 20 25 30
Дер рве
«210» 69 «115 38 «2125 РЕТ «213» Штучна «220» «до» Послідовність синтетичного пептицу «ню» 69
Ні Су Ст СТРУ Єві РБе Твгбег Ар Бен Зег ув Сів Мебов бін 1 5 18 15
Спо Аа Уві Ате Пен Реле бів Теробей Су Си бів Сп Спб А в За
Туг Оу Тер во Авр Рое «1 «і» За кві» РК «2132 Пікучна «ВА «23» Послідовність синтетичного пептиду каДх «ді» ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «202» (28). (ОКІ «иа» Хан - РедЗ «0»
Нас СОУ ТВ Ре ТВ ЗегАврген век ув ств МесОто Ох 1 х Ю 15 бін Аів Узі Атр Гем Ріє Пе Си Тер Ген Схув Хаа Гук Су Тер Тем 20 25 Зо
Авр. Ре «21057 «211 33
«12» РЕТ «213» Штучна «ОЙ» «йаУ» Послідовність синтетичного пептиду «А» «22157 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ кий» (08) (ОН) «223» Хай хх Бевз «005 71
Ще спу Сів СТУ Те РНЄ Те 5ех Авр Гей БегТук Сів Мег Ом Сів
І. 5 Ю 15
Спи Аза Ма Ате Те Ре Пе Сів Ттр. Це Був Хая С1у Тер Ге Авр | 25 30
Риеє «210 7 «15 «а» РЕК «и» ПУЗна кох «2235 Послідовність синтетичного пептиду «ОО» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Во (ІЛЛІ «2232 Хаз РерЗ «ЩІ» 72
Ні іу Спа пу Те Ріє Тіт Бех Авр еп бет Був Но Ме Ов СЯ 1 5 10 із
Сів Аве Уві Ате Бей Ріє Не спе Три Хаа Оу Ттр ви АхроРве 20 25 За «2102 73 «їх 3
«12 РК «21525 Штучна «22» «223». Песліловність синтетичного пептиду «2» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ад» (28)428) «ка» жайт РевЗ «А» 73
Ніж ОТУ Сів СИ ж Те Рів. Твг Зег Авр еп бег ув Ся Мег Ов Со
І З Ю 15
Сіс Аа Уві Ати їви Ріє Не Спо Тгр без Гу Хай Тер ев Ар Ре зо «МО» 74 «РЕ» 35 «212» РЕТ «2135 Штучна. «йо» «У» Послідовність смитетиенно пептиду «о» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ом (285:429) «203» Май х Рев3 «МК»
Нік спу бів 'С1у ТВі вве Те бег Ахр Гео Чег Був Тує Бе Со Сб
Ї 5 І 15
Сів Айа Маі Аг ем Рне Не Та тр бец Був Хай жа Туг СНУ Тер 25 за їй дер РНе 35. «20» 75 «11» 35
«212» РЕТ «Іл» Штучна «ЛИХ «223» Послідовність синтетичного пентиду «паЬ «2212. РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «22 (28).2 «ай» Хва - Рерд «ЗО 75
Нів Счу Спо Су Твг Ре Те бех Ар без Зет Був Тут Ме бів Ой 1 і 53) 15
Спо Аза Уві Акр Сев Ре Пе Су Реве Гео Був Ха Ха Гук О1у Тр св Ахо Ре 33 «ох 76 «із 5 «о КТ «215» Штучна «дах «ОА» Послідовність синтетичного пептиду «220 «21» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дай» (281.(29) «22У» Май х Бер «МО» 76
Нів С1У 16 СТУ Пі Ре Те Зеї Авр Геп бе Сув Сів Гей СТО СНИ 1 5 10 15
Сів Аа Узі Ат еп Роє Пе СНИ Рпе Гей Бук Хва Хза Буг СПУ Тр 20 23 За
Ге Ар ве
«20» 77 «115 35 «212» АТ «2132 Штучна «ко» «225» МПосліловнсть синтетичного пентнду «ох «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Ло» (28329) «ВІЗ» Ха Рев3 «Ав 77
Ні СТУ СТи СОІУ Те РВе Тв ет Авр Геи бет ув Ту Бешбію Он 1 5 10 15
Стій Аа Уві Аг Бей Рне Пе Сію Ріє ен ух Хав ха Тут СПУ Тр
Ка зо
ГекАвр Ре «1 78 «вії» 36 «2» РКТ «213» Штучна «В» «д2У» Послідовність синтетичного пептиду «22» кР2125. ВІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Вод» (291.30) «аа» Хай РевЗ ещЦЮх В
НксІу Оін Сіу ТЕ рве Твгбек Авр бен еп ув СТА Ме бів бій і 2 юю 15
СПИ Аа Уві Ате Ген Рне Пе біз Зтр Тен ув Аа Ха Хвя Тут біу 20 25 0
Теріем Авр Ріє «20» 79 «211236 «12» РКТ «візаж Штучна «ка» «ла3» Послідовність синтетичного пептиду «б» «гаї РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ кава» (29140) «ОДА» ай Рева сМюОх 79
Нік Сіу Сім СТУ ГВт Ре Тве баг Ар еи бек у Сів Месбвбе сти і З 10 ІВ
ОСІБ АТа Май був Бей Рнє Пе бій Тео Був Аве Хаз Хаа Туг СТУ
Тр ен Авр Ре «2105 50 «її» Зв «122 РКТ «213» Штучна «200» «223» Послідовність синтетичного пентилу «Зх» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «22» (29).430) «23» Хадосх Рерд «а00» ВО
Ні Су Сів слу ГТ РНе Тв бет Ар Ген ет ув Сія Месоїнсти і ві юЮ 15
С АВ Маг Був без РНе Пе СЛо тр бен Був Ако Хай Хай Туг СП у 2О Бе Зо
Хр Ген Або Ре «Й й «Ані Зв «12» РЕТ «с13» Штучна «230» «Й23» Послідовність синтетичнаго пептиду «а шо «2312 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ о» (291.30) «223» Хав хх Реву «0» ВІ
Нв су сівОоїу Те Рве Те беї Ар бен 5еї Був СЯ Мессі Гу
І 5 Ю 15 сій Аз МагАте Гей Рве Це Ото Ттр Ген бух Аа Хва Хай Ту Су а 23 30
Тер Гео Авр Ре 35 «г» вх «1» 37 «12» РК «2135 Штучна «220» «Рой» Послідовність синтетичного пентиду «и» «21» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «320» (29)429) «да» Хай Ред
«ау» «2213 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ла» (3131) «РАД» Мав х Ред «00 що
Нікчслу Спр счу ТВх РБе Тв: бе Ар Те бек Су Сп Ме Сів СТИ 1 5 1 15
Сів Аа Ма Ате Тем Ріє Пе Стир Геб ї ує Або Хва Гу Хай ТУ 2 зо
Су Тер бен Ахр Ріє «21» 83 «211 «12» РЕТ «ій» ЦШітучна «Р» «23» Послідовність синтетичного пептиду «ДО 83
Ні СПпу СЯ СЛУ ТВі Ре Тве бЗег Ар Тени ве бух ія Мессі Оу
І 5 Но! 15
Ов Ав Ма! Ате Геи Ре Не Стр беч Ся Аза Бут СТУ Ттрогвї 2 З Зо
Азр Ре «102 Ва «11» 34 «2122 РКТ «3» Пітучна. «ХА» «23» Послідовність синтетичного пептиду х4005 Я
Ні СІК Он Оу Тв Ре ТвВЕ бек Ако ев Бек Гу Св Ме они і 5 19 І5
Св А МН Атге Ге Ре Пе біб Ттр Ге Гу Ав Тут СТУ Тр Ре 2а 5 Б.) кр Ре «А 85 «и» 3 «212» РЕТ «2132» Штучна «21» «да» Посліловність синтетичного чцептиду «2» «ах РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ кода» (313,3) «203» Ха: 1Мві «кю» В
Нів біу Си Су Те Ре ТВі 5ег Ар еп бег Гуз Співи бів Сій
Її 5 та 15
См Аа Уа Аго Ге Рлде Пе и Тр бе Бук Ави ТуєСпу Жав Ген за
Акр Ре «105 б. «2115 34 «212» РЕТ «ВІ» Штучна «о» «23» Послідовність синтетичного центиду «20 «2212. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ВА» 321,32) «203» Жан Ме
«А». Бе
Ніс СчЯи СПУ Таг Ре ТЕ 5ет АвроГен Зег Гм Сів Гев Ой ОТ і 5 їй ІВ
Сів Аа Маг Ат Ген Ре ПЕ СВ Хто Сен Бук Ави Тут СЯ» Ттр Хай 20 25 БІВ
Авр РНе «ЗМ» 57 «ЛІ» 35 «222 РЕК «213» Штучна «а «да» Послідовність синтетичного пецутиду «ДО «221» РІЗНЕ ОСОБЛИВОСТІ «а» (ЗМІ «У» Хна ЗАЗАПРИДИЛИУАЛАНІЛ «А» 87
Б СТУ Сів Су Тік Ре Те Зет Ахр ен ет Бу о Гео Сто Су
Ск Ага Ма Ате Се Рце Не Си тр бер ув Ахи Тут СУ Тв ви ді 25 ВІН
Авр.Хва «310» 8 «51» 35 «а» РЕТ «135 Штучна «Щі» «223» Посліловність синтетичного пептиду
«о» ка» ВІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «о» (25).(29) «2235 Хай х Рері «АП» 58
Нів Су Сів слу ГВт Ре Тк Зег Си Ге бег ук Тут ев бін Со 1 5 юю 15
Олі Айва Маг Ате ем Ре Пе бій Рвбе Тез Бу Хва Хай Туг ТУ То 2 30 14и Ар ре 35. «вій» 89 «11» 35 «2» РЕТ «213» Штучна «Й» «АХ» Посліловність синтетичного пептилу «ДМ» «212. РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ кдд (08) (29) «2» Жаай - Реб3 «АП» 89
Ні бу Сів Су Тіт Ре Тіт бег Ахрї ев Бех Дух Туг Ген Ов Ов і 5 юю з
СЯ Ада Уві Ах бе Ве Не б Р ев Гук Ха Хаа Тут Сіу пе: 20 25 3)
Іва л5р Ре «2» 90 «211» 35 «212 РЕТ «3» Пігечна
«ДМ «й» Послідовність сипістичного пептиду «вах «21» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дж (25).429) «223» Хваа хх Ред «з 90
Ні су Спи сту ТВг РБе Тв бе Св Бен ех Бу Тут ев СТ СТО 1 5 Ю 15
Сі Аа Ма Ате Гей Рв Пе іш РБЄ бео ух Хав Хав Ту Ох Ріє 23 зо
Ген Азр Ре 33 «ДО» 9 «1» 34 «1» РК «213» Штучна «2005 «223» Посліловність сйнтетичного пептилу «М» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ жайо (28 (28) «203» Ха х Рев3 «400» 91
Ні СХ Сів Сіу ТБ РЕ Те ке Авр ген бої Гу Ту Геи Сів ОВ і 5 10 І5
Си Лів Уа! ев Гео РБе Де Сб Ре Бей Аг Хай Туг Су три хо 25 30
Авр рве «10» 55
«Мі» 34 «2з РЕТ «213». Штучна «им» «ДУ» Послідовність синтетичного пептиде ке» «2212» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ода» (283428) «дО» Хаа є Рева «800 92
Ні Спу Св Су ТП Рве Ті ет Ар Т.еи Зег Ат Тут Ге СК Був: 1 КІ Ів 15
СТ Аїз Уа Ате Сен Ре Ше Ох Рпе Гей Аге Хва Ту СПУ Тер Бей лер РН «105 93 «піз З «212» РЕТ «13» Штучна «2» «ой» Послідовність сихтетичного пептиду «2205 «дві» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Рол» (28).428) «223» Хай: Реої «ВЩЮх 95.
ЕБ5 ТУ Св Спу ре Ре ну Зет Авроїев Бех Аго Тут Тем Сів бів і 5 І 15
Си Аж Уві був Бен Рне Ле Сі Ре Ген те Хва Туг Сіу Тр Бей 20 25 30
Азр РБе
«НІ» 94 «Ні» «ліз» РКТ «2152 Штучна «йо» -йй3» Послідовність синтетичного пептиду «220» «рЗ1» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «га» (2828) краЗ» Жива х РерЗ «8005 94
Ні СТУ Сів Сіу Тік РНе Гвг бет Авр Теч бет Ага Тугієи ОЇ Ов
І З 10 15
Си Аза Уа Аг си Ре Пе бує Ро їед Ате Хаа Туг СіуУ Тер ей зо дер Ре «210» 95 «ЛІ» 34 «2125 РЕТ «213» Штучна «ОО «фах» МПосліповність синтетичного пелтте «ол «315 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «до» (253.48) «Оо3» Жана т РевЗ «Ой» 95
Ніх Оу Сів Су Те Рбе Твг бек Ахрією ет Атр Тут Ге бів Са 3 То 15
Сн Аа Узі Аго беж Рне Пе Сів Ре Геп Гуз Хаа Туг С1у Тер Гео
28 30
Авр не «2» 96 «із М «212» РКТ «3» Штучна «ДО» «Дай» Послідовність синтетичного пептиду «НО 96:
Ні Сни СНУ Тв Рі Те бег ОТО с беї Гув тує бео Об СТИ
І З ІК. їх
Сів Аа Уві Ате Ге Рпє Не со Ре Гео Гук р ема Авр Ре 20 23 0 «й» 97 «2115» 33 «212» РК «213» Штучна «2» «23» Поспідевність сннтетичного пептиду «ах «2212. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ жайй» (351.8 «203» Хай х Рерд «40» 97
Нік Су Сів СТУ ТВ Рве. Трсбег Ом Ге бет ув Тут Те Сб С в ! 5 НВ ІВ
Сів Аз Ма! Ате Ге Ре Це Сів ве Се Гу Хав То Бен оляр РН в; 2 ЗІ «ОО» 98 «211 35 «щ125» КТ
«213» Штучна «ММ «й» Послідовність синтетичного пептиду «ФО» «221» РІЗНЕ ОСОБЛИВОСТІ «вах (28328) «2О3» Хаах Огл «А» «о» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ай (2929 «МОЗ» Хва т Рей «НК» 98
Ні СТУ Сі слу Тв РНе Твт Зех Сп ви бег Гек Тубїви Сів Ст 1 5 10 15 сли Аа МагАте ей Ре Не Си Ре ев ух Хна Хай Тер ви хр 23 Б те «ДМ 99 «711 33 «212» РЕТ «213» Штучна «РО» «23» Послідовність синтетичного пептиду «2 «ді» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «23 (281.18) «23» Хаа ері «20» «212 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ди» (29) «иа» Хай Огв «ЩО» 99
Ні СУ ОпеОТУ Тв Ріє Тв бег Со ев ет бу Тут Сем ОБ Ов
! 5 10 І5
Сів Ай Ма Ат ет рве Пе Ста Ре Г би б у5 Хва Хвя Тв оо Ахор 20 а 30
Ре «Ох ЩО «2115 33 «213» РАТ «2132 Штечна «2» «223» Послідовність синтетичного пептиду «их «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «йод (25). (29) «ЗЛ» Хав к СТВ «Ай ЦЮ
Ні СЛУ сш Оу Твг РВЕ Те Бег Сів бео бе Сл Буг ев ОЇ Си сіє Аа УагАте ев Ре Пе бів Рбе Бе Гуз Ха Хва Ттр Гео Дер
Ріє «1 Ю1 «Ф1їх 33 «12» РЕТ «13» Штучна «ох «йа3ж Цослідовність синтетичного пептиду «Юр» ЛО
Ні слу Спо Сім Тіт Ре Тк ет Сів Сечобет Гех Тут Бен Сію Ом 1 5 т іх
Січ Аїа Ул Ак Сет Рве Пе Ти Ре Ге бу Туг Су Тер Гео Дер
РО 75 за
Ре «Ов 102 «ії х За «212» РТ «1Уз ННКучна са «Вода» Послідовність синтетичного пептиду «2» «2231» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Кей (28).28) «Йо» Хай х ЕКЗ «4005 105
НіЕСТУ Спи Сп у Тв Ре ТНБ СТЮ Тем чес бує Гуг ви Сів Сб 1 В 160 5
Сі Аа Маїс Аг Без Ріє Пе Стіни Рв Сей ух Хаа Тус Су Тер ев та 25 З дер Рке. «2105 3 «Ії» 35 «М» РКК «213» Штучна «ам» «ага» Послідовність синтетичного пентиду «2 «221» ВРІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «во» (95М(ОХ) «823» Хаах Огп «ках
«2212 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «222» (29429) «Па» Хай РевЗ «43002 103.
Ні СПУ СТОЛУ Твт Рве Те беєбій ви бег Був ТУ Пе СО ОЇІ і З 10 15 сш Аїв Уві Аго Геа Рне Не сли Ріє Ге ух Хаз Ха Тук О1уУ Тр
НАЦ; А ЗО
Гев Абр РНе 35 «2102». 104 «211» 35 «212» РТ «2135 Штучна «а» «3» Послідовність синтетичного пептиду «Ох «231» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ой» (28128) «Ва3» Хай ех РевЗ «ЕМ» «2215. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ай (293.29) «паЗ» Ха х От «Юх 104
Зі слу пасту Те Ре Тве Зее СТИ Гевобет бух Тух Бем СТЬ 1 З 10 ІЗ сів Аа МагАте еп РВЄ Це Ох Ріє без ув Хав Жай гуг Су тр
Тени А5р РІ «лі йж 105
«Мі» 35 «212» РЕ «213» Штучна «ах «до» Нослідовність синтетичного пептиду «2» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «Ха» (28),429) «ва» Хай (В «ЩЮ» 105.
Нів Сіу Сів СЛУ Тв Ре Тв бех Сів І си бег Тл Гуг би біб 1 5 юю 15
Січ Аа Маг Ат Бечм Ре Не Сім РНе Пец Гу Хаз Хаз Тут СТУ Тер за
Сем Авр Впе 25 «ох 6 «л1ї» 39 «кеід2 РКК «2135 Штучна «пох «реа» Посліловність синтетичного пептиду ко» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дж (28)428) «ВАЗ» Хва х К(Гексадеканоїт-ізоств «дах «22Ї» РІЗНЕ ОСОБЛИВОСТІ «222» (32).(33) «Зх Хаа- рері «Ю» 6
Ні Аа Ов Оіу Ті Ре ТВ беє Ар Ма! бек ет Тут Сеи Си СНУ і 5 10 ІЗ
Сів Ав Аа ух Спи Ре Че Абе Тер Ген Мар Ха Су Ав Оу Хав. за
Хай Тут СНУ Три дер Ре «Я» ЦІ «21ї2 39 «2122 РВТ «213 Штучна «А» «З2а» Послідовність синтетичного пептиду «А» «221» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «222» (2010203. «323з Хва к КИ ексалеканот- ізоси) «М» «2212 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «бай» 1233 «ше» Хай Рода «нюх 107
Ніх Аа Сів Оу тні РВЄ ВУ Бек Авр Уа) Бесзег Тут Сов Со СОУ ! 5 30 І5
Сіл Ав АТ Хвалои Ре Пе АТа Тгр бе Уві Атго СЛУ Атв Спу Хва 2 2х З
Хва Гук Сіу ТгрГео ер РНе 35 «ах 108 «іх ща «іа» РЕТ «213» Штучна «о «23» Послідовність синтетичного пептиду «В» «0215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ кла (30.30) «225» Хай - К(Гексалеканоїл-зосне) «А» «21» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «222» (321433) «303» ХЖай х Рера «00» ШЕ
Нв Аза От Оу Тв Ре Тв ет Авр Уві 5ет бег Туг ев С ОТУ
І 5 ІЮ І»
Сп Аа Аа Аго Ста Рпе Пе Аза Ттрїев Ма Ат С1у Хаа СПУ Хаа 2 25 ЗО
Хан Тут СЯу Тр Ге Ар вве «2105 109 «ВР» 39 «12» РЕТ «213» Цреучна «ДЯ «223» Послідовність синтетичного пептиду «ра «2215 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «дало» (201.20) «23» Хая г К(Гексалеканоіязоюта) «по» «231» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «302» (323.33 «дах» Жай ех Рерї «МО 109:
Ні Аза Св біу Те Ре Тв Зет Авр Ма! Зег ет Гух Сен С. Оу 1 З 16 15
Стів Аз Аз Хна Св Ре Це Аа Тгр Гей ат у с Ат Сіу Хай 2 25 Зо жва Гуг СПУ Терез Ар Ре
«10» ЦО «1» 39 «12» РЕТ «213» Штучна «220» «ЛоЗж Послідовність синтетичного пептиду «ее «2» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «202» (30343) «ба» Жаа ш К(Гексадеканоїл-зоств «ах. «2212 РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «да» (372).433) «23» Хаа - Рер3 «Ме» По
Нів ОЇУ Сів СПу Те Бе: Тв бет Авр Уві бег бег Туг Геп Сн СПУ і 5 іо 15
Сів Аз Аа: ато Сто Рве Пе Аза то Гео Уа Ате СПу хна Су Жва. 2У 30
Хав ут СУ тр Де А хр ре 3 «Мох 111 «112 39 «аа» РТ «142 Штучна «902 «лада» Цослідонність сиутетичного пептилу «г» «22» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «па» (2 «293» Хай х ДІВ «М» «і» РІ ОСОБЛИВОСТІ
«223» (20)-(2)) «ДОЗ» Хай х КО ексадеканомнізосій) «ОД» «раї РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «пов (3235033)
ОЗ» Хва е Рер3 «МК
Вів Хан бів СИу Те Ре Те бег Ар Уві Бег бог Тугіви Сі О1у сів Аза Аа Хай Спи Ре Не Аа Тр Гей Уві Аве Сіу Аго Спу Кая 2 25 за
Хаз Тут СТУ Тер Цев Акр Ре 35 «й ПЗ «1» 39 «12 РЕТ «215» Штучна код» «паз Послідовність синієтичного пептиду «З» «291» РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «Од ж (22) «ва» Хай АВ «ВЕ» «з21» РІЗНІ. ОСОБЛИВОСТІ «За» (323-433) «823» Хай Ревз «00 2
НЕ Хаз Спа біх Те Ре Тв Зег Ар Уві Бет Заг Буг Те бів С1у 1 5 о Б
Сп Аа Аїв ув Сів Ре ПеоАда Тур ев Маї Аге Спу Аге Оу Хва 28 0
Хаз ТУг О1уУ Тер Ге Ар рве
«2» 115 «21» 39 «12» РКТ «213» Штучна «арх «223» МПосліловність синтетичного пептиду «ЙО «т» РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ. «2225 (323 «д23» Хай - Ред «АП» 13
Нів Аів Сів СИу ТЬг Рпе Те Зег Ахр Уа бе бет Тут Гео С1В Оу ! З 16 І:
СТИ АтаАва ру Сів ве Це ліз ТерТев УарАте Су Ате СЯу Хва зо
Хаа Ту Оу Етрїев Ар Ре «Ні» 114 «А» ЗІ «212» РАК «13» Штучна кох «да» Послідовність синтетичного пептиду «00» 114
Ні АЙ Сі СТУ Ту пе тв бет Ар Уа! бе век Ту Пев Со СТУ 1 їх 10 15
Сі Ат Аза Гу Св Ре Пе Ліда Ттрбев Магтід су Ах Оу 20 25 30 «0» 115 «2115 38 «2» РЕТ
«213» Штучна «ах «ДО3» Послідовність синтехичного пептиду «002 115
СТУ Сі СТУ Тву РБе Пі 5ет Ахр Гей Гу бів Мебоїш Єв Ст 1 З 10 І5 діа Уа Ате Беи Ре Пе Си Тур Ге ГТ ув Ако Сіу Оу Ро бек беї і 25 за
Спу Аа Рго Ріо Рто бе «22 116 «І» 17 «212» РВТ «13» Штучна «Му» «223» Цосліловність свитетичного пептиду «А» «2212. РІЗНІ ОСОБЛИВОСТІ «ро» (1515) «по3» Май обрано Сем, Міє, Рбе ії Гн «а І
Сів Су Рго бор без Са біз Сну Се Спи Аа Тут СНУ Тер Хва Ар 1 в) 10 15
Ре ко це ке и; зі" ЧІ іх, ОН тн ; в Ї ех й ко не - б не
Ф ШИ
Е і З внутрішньовенне
Ф ! - ТюМмИилКка внутрішньовенного щ : Я лідшкірне ч ве ! - помилка підшкірного
ТЗ !
Б і; а 5 чо БІ Ко ою
Час номінальний (хв)
Фіг. Та т ві ей (У й кв - ІН з ї м а м Шо «д- "внутрішньовенне д те е чик пОоМмИЛКа внутрішньовенного ря "В й Я підшкірне в о | Ша щ-е-- Тюомилка підшкірного 8. : : о Е
У а 5 че чо х о
Час номінальний (хв)
Фіг. 16 то той зи Бе ння гео ів Я. с | Ше і ма питне» повна я та
Ж | ета т
Що ч я 1 жо їх ре іч й р 0 5 о 15 р 5
Час (години)
Фіг. 2 г . ж ре ; М Носій в, ЩО Комбінація (1 нмоль/кг кожної)
Е Е ЕВ ШИ Комбінанія (10 нмоль/кг кожної) я жін КУ Комбінація (50 нмоль/кг кожної)
ЕОЗ : | ШО Слолука 1 (1 нмоль/кг) яв й 44 п НЯ р й ще
З | и: ШИ! Мо Сполука 1 (10 нмоль/кг) жо Є ай | | Ї - ШИ Сполука 1 (50-нмоль/кг) я ! я НИНЕ ренн і - МУ | тех :
Ж г статистика: "р. 0,05 методом.однофакторного аналізу
Гая - Й - - а АМОХА з множинним порівнянням тестованої речовини проти носія з використанням критерію Данна
Фіг. З
З що З я Н Й
І вий ШЕ Носій
НИ ие я ШЕ Гксендин-ї
ОО Ексендин-Я я Гастрин-17
В Сполука 33
В їй З в ше пееатжжтя 5 Б ши зввитянвих довів
Е ПН БО 0 уомннйнанє я пот ДН ЩЕ Енн,
То ! НН о беомм я ж ші т м щ - Б ке БО З ж щ т п га хм ж щ ш що
Фіг. 4 й з Й Й тк сірій Я сист.
І: жену ВИ Носій
Ох 0 ше ЩІ пен ЩА Єксендин-й - ЗЕ ЯК Я - Е сечі й 4 ще Ге у 17 реа 4 по ШЕ ехоткеюк, ВЕ вх зе КееНДиИНеЯ т І СТИ - с Бо зр дритннсллини - рони 33
Е НН Б полука
ФАО рр пін ВВ в т Кк я .
В і :
З | й й «г е- су х- ще; їа : - Кк
З В я х шк 5 ї- їх г ї- о 2 о щі Її- хе.
Ж
- 5 в - її о
Ж ї-
Фіг. 5 щ
ОЖ бою чик Ех я - ! Ї дуанкінн Вт Носій
З дв повне Ен ШИ скосндинії
НЕ нн ПОС ШО сксендиняї в І астрин-ії7 не ж р: 5; ШИНИ нн вк отут й п ш Ї лен поро сек В Сполука 33
МИТИ пасисе еко кі реостат
Е ! Шо ох В те й о ШВИ ее ей п Ши се о сш: ню Ор
В ж Я оф і-й ЕЕ ке . і й т- ее 1 - о сх М ї 5 я реж : з дх
З зв в Е х г зе - Ген ра щ Ех. -
КЕ) 5. т о - я в о
З
М
Е
Ф
С мя ке кі
Фіг. 6 і ке ШИ ЧПосій а жк ЩЕ Ексендин-4 я й Без Ексендин-Я Гастрин-17
С зиоиеи ! ши. тре 0 ДН З Сполука 33 - ни Боеотс ШЕ мак
Я ї Бош й ки
У п піні пд Ом вен й де. Я Копил Ох палелеєтіечтть, 4 а) п ЩЕ есе В ; ; пок ми ОО ї. Е ВЕН тек ки х ПЕК ДО вору ших Я й те че м
І; г з КЕ З с ща Глас щ ке А
Ки
Биск й і.
Ук щ
Я ж ю
Є
ЕЯна
Фіг. 7
С! Що ШЕ Носій
С. - ШЕ Ексендин-4 о ий шейшни ШЖЖ Єксендин-4- 5 Гастрин-17 г полі ши ЕД. Сполука 33
НН І і ее м . |. печаль кусання і п. Ессе ЕЕ
Е Я й С о В ЕЕ з я Й 7 жи жи ее є я 0025 ЩЕ Ех
Зх Не ла давнина ььнь
Ов і І От МИ се В
К ї с т ре нію: а . їз Е ш В в 8 ге а е щі о о
А
5 ш п ч ісевй щ
Ж см.
Фіг. 8 че Носій-носій ек Ексендин-і- Ексендин-ї і ' ко Ліраглутид-ніраглутид х , й і т роко Сполука 33-Снолука 33 о ою ти ци и щк сани ой яю. а | ренні аж зай я « ЩЕ Я й жк «кефкекчя ї й
ЗА т, ; зіханяних щу жа й ми ск ен в з а «є твти
Дні лікування в зара Носій-носій «і Ексендин-4- Ексендин-4 за Ліраглутид-ліраглутид дай ! | «йо Сполука 33-Сполука 33 стек, ВЕЖ «й фони і кА.
Е іх й А - -Ю - я ; й й зі й з т х, Н Й й ї й же А и Я
Мак мя вжхив жЖЮ 3 лай
З ін | Н ик ук жи « зав з й з
З
3 ще з рені ще ь ві н нед, м ї з а мм Кк в хх ам
Дні лікування с то Носій-носій чайка Ексендин-4ї- Ексендин-Я
Що ; ож Ліваглутид-ліраглутид
Я , ж яко Сполука 33-Снолука 33 то хе ра т ; 5 ре Й Ї г З як й зале 1 ЕН й 2 ул й і Же -- і Я и М, та се р що я -Я й но І ре ов і ж « Я джин ре
Кк и ДІЙ з Я а а ай «є в п"
Дні лікування
Фіг. 9 ее Носій-носій «ех Ексендин-4- Бксендин-ї
І ' сао Ліраглутиделіраглутид і як Сполука 33-Сполука 33 ж сь : ЩЕ Си і. ще й ! яї» ай і яка З я я сш МИ а ес НН: си
Фо од бер Увк р
ОМ фейки яю Є всипати
Дні лікування о Носій-носій зах Ексендин-4- Ексендин-ї зв» . КО Ліраглукид-ліраєлутид -о Я й Снолука 33-Сполука 33 в дух ей К М
НЯ | ай Ж дж же "ре чи Клен в й і Я ик жйе що фожкє жаж же шо З і щи я 2 зв ж «кх а пи
Дні лікування с еко Носій-носій ча: Ексендивн-Я» Екоенднии-Я в. і зако Ліратлутвд-ліраклутих й : че ЄСпопука 33-Сполука 35 х ї зе іх Б й : а Е й я й Е з Кене "щ ; є. зу, Ен
Що фон ж ву ВВ
Мо Ши 5 і а ку 6 миша» и
Дині кування
Фіг. 10 б є
ЖЕ я Б
М. : рових Ж жк вм сзииев їни ші зе М. дек Щр ак ші КЕ з КО В рев ВЕ В В ж тя як шо - в ШИХ. ше. - ШЕ Же че Би я іш: Б сао К й НН у Як 5 «ШЕ еВ поки - ВЕ: Во ьо КУ К М ше 5 ЩЕ ВНІ - З й" вк Ба а око ші с ШИ Носій-восій
КО БЕксендин-4- Єксендин-Я з ШК раглутил-ліраєлутид ее ЩО Сполука 33-Сполука 33 зе ЩЕ Носій- ЄксендиноЯ
ЧЕ |; ! - ЩО Носій- ліраглутий о, 33 Її: ". : авіа "Жече Е тях що Н се тк в В жа ей же в ши Носій- Сполука ЗА 2 ЗШ з за жим в Но ой роів х ! т ЕВ о 000 М Єксендин-4- носій в ШЕ... 5 Я Б Ліраглутид-носій щоб В ЗОБУ 5 Сполука 33-носій 3 Вих: ЩІ веЩя Бо І ШЕ Я Зичу а ке В Леся,
Фіг. 11
UAA201213478A 2010-04-27 2011-04-27 Пептидні кон'югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування UA112630C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA201000379 2010-04-27
PCT/DK2011/050133 WO2011134471A1 (en) 2010-04-27 2011-04-27 Peptide conjugates of glp-1 receptor agonists and gastrin and their use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA112630C2 true UA112630C2 (uk) 2016-10-10

Family

ID=57219178

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201213478A UA112630C2 (uk) 2010-04-27 2011-04-27 Пептидні кон'югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування

Country Status (1)

Country Link
UA (1) UA112630C2 (uk)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI523659B (zh) 肽結合物
ES2901386T3 (es) Análogos de la amilina
AU2016232218B2 (en) Amylin analogues
US9861706B2 (en) GLP-1 receptor agonist peptide gastrin conjugates
WO2015040182A2 (en) Amylin analogues
SK1432004A3 (sk) Liečivo na znižovanie mortality a morbidity súvisiacich s kritickými ochoreniami
US7423019B2 (en) Agent for inducing conversion of intestinal cells into insulin-producing cells and antidiabetic drug
WO2013098408A1 (en) Glucagon and cck receptor agonist peptide conjugates
UA112630C2 (uk) Пептидні кон'югати агоністів рецептора glp-1 і гастрину та їх застосування
EA042757B1 (ru) Аналоги амилина