本申請案主張2015年10月30日申請之美國臨時申請案第62/248,810號及2016年7月6日申請之美國臨時申請案第62/358,698號之權利，該等案件之全部內容以引用的方式併入本文中。 在數個態樣中，提供組合物用於二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之固定劑量組合(FDC)。亦提供製造本發明之固定劑量組合的方法，其克服與當前方法相關的問題。已經設計製造方法以解決包括藥物-藥物相互作用、藥物-賦形劑相互作用及各藥物組分之摻合均勻性的問題。因此，本發明之固定劑量組合可用於最小化局部及/或全身性副效應、提供更加有效的治療、改良多重用藥且提供更好的患者順應性。
I. 家族性腺瘤性息肉病
過量聚胺形成一直涉及上皮癌發生，尤其結直腸癌發生。多胺為較小的普遍存在分子，其涉及各種過程，包括(例如)轉錄、RNA穩定及離子通道選通(Wallace，2000)。在聚胺合成中之第一酶鳥氨酸去羧酶(ODC)對哺乳動物中之正常發育及組織修復為至關重要的，但在大部分成體組織中下調(Gerner及Meyskens，2004)。控制聚胺代謝及輸送中的多種異常導致聚胺水準增加，其可在數種組織中促進腫瘤發生(Thomas及Thomas，2003)。 家族性腺瘤性息肉病(FAP)為與結腸及其他癌症高危相關的症候群。 FAP係由結腸腺瘤息肉病(
APC
)腫瘤抑制基因的突變導致，且APC信號傳遞展示調節人類細胞(Fultz及Gerner，2002)及FAP之小鼠模型(Erdman等人，1999)中的ODC表現。聚胺代謝在患有FAP之人類的腸道上皮組織中上調(Giardiello等人，1997)。 野生型
APC
表現導致ODC表現減少，同時突變APC導致ODC表現增加。 ODC之APC依賴性調節機制涉及E框轉錄因子，包括轉錄活化因子
c-MYC
及轉錄抑制因子
MAD1
(Fultz及Gerner，2002；Martinez等人，2003)。
c-MYC
係藉由其他展示調節ODC轉錄(Bellofernandez等人，1993)。涉及聚胺代謝之數個基因在大部分生物體中為進行最佳生長的必不可少基因，且在非增殖及/或成體細胞及組織中下調(Gerner及Meyskens，2004)。如其他處所回顧，多胺藉由部分影響基因表現之模式來影響特定細胞表現型(Childs等人，2003)。 作為遺傳性息肉病症候群的家族性腺瘤性息肉病(FAP)為結腸腺瘤息肉病(APC)腫瘤抑制基因之生殖系突變的結果(Su等人，1992)。此具有可變表現之常染色體顯性病狀係與數百個結腸腺瘤發育相關，其在四十歲時均發展為腺癌，比偶發性結腸癌的平均診斷年齡早二十年(Bussey，1990)。在對患有FAP之症狀前個人的先前研究中，當與正常的家族成員對照相比時，在看起來正常的結腸直腸生檢中偵測到多胺亞精胺及精胺以及其二胺前驅體腐胺之水準增加(Giardiello等人，1997)。在哺乳動物聚胺合成中的第一及限速酶鳥氨酸去羧酶(ODC)之活性在來自FAP患者之表面上正常的結腸黏膜生檢中亦升高(Giardiello等人，1997；Luk及Baylin，1984)。隨著多胺為最佳細胞增殖所必要，此等研究結果受到關注(Pegg，1986)。另外，使用酶活化不可逆抑制劑DFMO遏制ODC活性在經致癌物處理之嚙齒動物中抑制結腸癌發生(Kingsnorth等人，1983；Tempero等人，1989)。 共有患有FAP之突變型
APC
/
apc
基因型的Min (多個腸道瘤形成)小鼠充當用於人類FAP患者的適用實驗動物模型(Lipkin，1997)。 Min小鼠在整個胃腸道中在120天壽命時可發育大於100個腸胃腺瘤/腺癌，由此導致GI出血、阻塞及死亡。 DFMO與舒林酸之組合療法在此等小鼠中展示有效減少腺瘤。參看美國專利第6,258,845號以及Gerner及Meyskens，2004，其以引用之方式併入本文中。
II. 二氟甲基鳥氨酸
當自身供使用且沒有上下文時，術語「二氟甲基鳥氨酸」係指以其任何形式之2,5-二胺-2-(二氟甲基)戊酸，包括非鹽及鹽形式(例如二氟甲基鳥氨酸HCl)、非鹽及鹽形式之無水及水合物形式(例如二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物)、非鹽及鹽形式之溶劑合物、其對映異構體(
R
及
S
形式，其亦可鑑別為
d
及
l
形式)及此等對映異構體之混合物(例如外消旋混合物)。「實質上光學上純的製劑」意謂含有約5重量%或更少相反對映異構體之第一對映異構體的製劑。二氟甲基鳥氨酸之特定形式包括二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物(亦即CAS ID: 96020-91-6；MW: 236.65)、二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽(亦即CAS ID: 68278-23-9；MW: 218.63)及無水游離鹼二氟甲基鳥氨酸(亦即CAS ID: 70052-12-9；MW: 182.17)。若必需，進一步指定二氟甲基鳥氨酸之特定形式。在一些實施例中，本發明之二氟甲基鳥氨酸為二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物(亦即CAS ID: 96020-91-6)。術語「二氟甲基鳥氨酸」及「DFMO」在本文中可互換地使用。 DFMO為二氟甲基鳥氨酸之縮寫。二氟甲基鳥氨酸及DFMO之其他同義語包括：α-二氟甲基鳥氨酸、2-(二氟甲基)-DL-鳥氨酸、2-(二氟甲基)-
dl
-鳥氨酸、2-(二氟甲基)鳥氨酸、DL-α-二氟甲基鳥氨酸、
N-
二氟甲基鳥氨酸、αδ-二胺-α-(二氟甲基)戊酸及2,5-二胺-2-(二氟甲基)戊酸。 二氟甲基鳥氨酸為鳥氨酸去羧酶(ODC) (聚胺生物合成路徑之限速酶)之酶活化不可逆抑制劑。由於此聚胺合成抑制，化合物有效在諸多器官系統中預防癌症形成、抑制癌症生長且減小腫瘤大小。其亦與其他抗腫瘤劑具有協同作用。 二氟甲基鳥氨酸展示減少小鼠中APC依賴性腸道腫瘤發生(Erdman等人，1999)。每天向人類經口投與二氟甲基鳥氨酸抑制多個上皮組織中之ODC酶活性及聚胺含量(Love等人，1993；Gerner等人，1994；Meyskens等人，1994；Meyskens等人，1998；Simoneau等人，2001；Simoneau等人，2008)。二氟甲基鳥氨酸以及非類固醇消炎藥(NSAID)舒林酸據報導當與隨機臨床試驗中的安慰劑相比時，明顯降低患有結腸腺瘤之個人中的腺瘤復發率(Meyskens等人，2008)。 二氟甲基鳥氨酸藉由Centre de Recherche Merrell，Strasbourg初始合成。目前美國食品藥物管理局(U.S. Food and Drug Administration；FDA)批准包括： ˙ 非洲睡眠疾病。高劑量全身性IV劑型，不出售(Sanofi/WHO) ˙ 多毛症(男性荷爾蒙誘導之過度毛髮生長)局部劑型 儘管FDA未批准二氟甲基鳥氨酸之口服調配物，但已經批准局部及可注射形式。 Vaniqa®為乳膏，其含有15% w/w二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物，分別對應於用於局部投與之乳膏中11.5% w/w無水二氟甲基鳥氨酸(EU)、13.9% w/w無水二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽(U.S.)。 Ornidyl®為適用於注射或輸注之二氟甲基鳥氨酸HCl溶液。其以每毫升200 mg二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物(20 g/100 mL)之強度供應。 二氟甲基鳥氨酸及其在治療良性前列腺肥大中的用途描述於美國專利4,413,141及4,330,559中。'141專利描述二氟甲基鳥氨酸作為試管內及活體內對ODC之強力抑制劑。投與二氟甲基鳥氨酸據報導使得此等多胺通常主動產生之細胞中的腐胺及亞精胺濃度減小。另外，當在標準腫瘤模型中測試時，二氟甲基鳥氨酸展示能夠減緩贅生性細胞增殖。'559專利描述二氟甲基鳥氨酸及二氟甲基鳥氨酸衍生物用於治療良性前列腺肥大。良性前列腺肥大，如特徵為快速細胞增殖之諸多疾病狀態伴隨聚胺濃度異常升高。 二氟甲基鳥氨酸可潛在地連續給與而伴隨顯著的抗腫瘤效應。此藥物以每天0.4 g/m
2
之低劑量對人類相對無毒，同時產生抑制腫瘤中之腐胺合成。大鼠腫瘤模型之研究展現二氟甲基鳥氨酸輸注可產生腫瘤腐胺水準降低90%而不遏制周邊血小板數。 以二氟甲基鳥氨酸觀測到之副效應包括以每天4 g/m
2
之高劑量對聽覺的效應，當中斷二氟甲基鳥氨酸時即消失。當投與至多一年時，以每天0.4 g/m
2
之較低劑量未觀測到對聽覺之此等效應(Meyskens等人，1994)。另外，發現當停止藥物時，幾個眩暈/頭暈情況消失。血小板減少症在使用高「治療性」劑量之二氟甲基鳥氨酸(每天＞1.0 g/m
2
)的研究中主要報導且在先前進行化學療法之癌症患者或患有骨髓受損之患者中初次報導。儘管與二氟甲基鳥氨酸療法相關之毒性一般而言不與其他類型之化學療法一樣嚴重，但在有限的臨床試驗中發現其促進劑量相關之血小板減少症。此外，大鼠中之研究展示與對照相比，連續輸注二氟甲基鳥氨酸12天顯著減少血小板數。其他研究獲得類似觀測，其中血小板減少症為連續靜脈內二氟甲基鳥氨酸療法之主要毒性。此等研究結果表明二氟甲基鳥氨酸可顯著抑制巨核細胞之骨髓前驅體之ODC活性。二氟甲基鳥氨酸可抑制增殖性修復方法，諸如上皮創傷癒合。 階段III臨床試驗評定用DFMO加上舒林酸或相配安慰劑治療36個月之後的腺瘤息肉復發。暫時性的聽覺喪失為用DFMO治療的已知毒性，因此研發全面的方法來分析連續空氣傳導聲波圖。通用估算等式方法評估在治療組之間關於空氣傳導純音臨限值之改變的平均差，同時計算由於在頻率下重複量測的個體內相關性。基於290名個體，調節基線值、年齡及頻率，與用安慰劑治療之個體相比(95%信賴區間，-0.64至1.63 dB；P=0.39)，在用DFMO加上舒林酸治療之個體之間存在0.50 dB之平均差與用安慰劑治療之患者相比，用DFMO加上舒林酸治療之患者的平均臨限值存在＜2 dB的差值。此研究之結果更詳細地論述於McLaren等人，2008中，其以全文引用之方式併入本文中。
III. NSAID
NSAID為非類固醇的抗發炎劑。除了抗發炎效應以外，據報導其亦具有鎮痛、解熱及抑制血小板效應。其用於例如治療慢性關節炎病狀及與疼痛及發炎相關的某些軟組織病症。據報導其藉由抑制將二十碳四烯酸轉化成環狀內過氧化物(前列腺素之前驅體)的環加氧酶而阻斷前列腺素合成來起作用。抑制前列腺素合成解釋其鎮痛、解熱及抑制血小板作用；其他機制可有助於其抗發炎效應。某些NSAID亦可抑制脂肪加氧酶或磷脂酶C，或可調整T細胞功能。參看AMA Drug Evaluations Annual，1814-5，1994。 非類固醇抗炎藥(NSAID)，包括阿司匹林、布洛芬、吡羅昔康(Reddy等人，1990；Singh等人，1994)、吲哚美辛(Narisawa，1981)及舒林酸(Piazza等人，1997；Rao等人，1995)有效地抑制AOM處理之大鼠模型中的結腸癌發生。NSAID亦抑制具有活化Ki-ras之腫瘤發育(Singh及Reddy，1995)。 NSAID似乎經由在腫瘤細胞中誘導細胞凋亡來抑制癌發生(Bedi等人，1995；Lupulescu，1996；Piazza等人，1995；Piazza等人，1997b)。多個研究表明NSAID之化學預防特性(包括誘導細胞凋亡)為其抑制前列腺素合成能力的功能(在DuBois等人，1996；Lupulescu，1996；Vane及Botting，1997中回顧)。然而，研究指示NSAID可經由前列腺素依賴性及非依賴性機制起作用(Alberts等人，1995；Piazza等人，1997a；Thompson等人，1995；Hanif，1996)。 NSAID舒林酸之代謝物舒林酸碸缺乏COX抑制活性，又在腫瘤細胞中誘導細胞凋亡(Piazza等人，1995；Piazza等人，1997b)，且在癌發生之數個嚙齒動物模型中抑制腫瘤發育(Thompson等人，1995；Piazza等人，1995，1997a)。 已經檢測數種NSAID在人類臨床試驗中的效應。完成布洛芬之階段IIa試驗(一個月)，且發現甚至在300毫克/天之劑量下，在平坦黏膜中之前列腺素E
2
(PGE
2
)水準顯著降低。 300 mg布洛芬之劑量極低(治療性劑量範圍介於1200-3000毫克/天或更大)，且甚至歷經長期仍不大可能發現毒性。然而，在動物化學預防模型中，布洛芬與其他NSAID相比較不有效。
A. 阿司匹林
亦稱為乙醯水楊酸之阿司匹林為水楊酸酯藥物，常常用作鎮痛劑以減輕少量疼痛及痛苦，用作解熱劑以減少發熱且用作抗發炎藥物療法。阿司匹林在1897年首次由德國公司Bayer的化學工作者Felix Hoffmann分離出。阿司匹林之主要代謝物柳酸為人類及動物代謝之整體部分。儘管人類中許多可歸因於膳食，但相當大部分經內源性合成。當今，阿司匹林為全球使用最廣泛藥劑之一，估計每年消耗40,000噸。在阿司匹林為由Bayer擁有之註冊商標的國家中，通用術語為乙醯水楊酸(ASA)。 阿司匹林藉由抑制血栓素產生亦具有抗血小板效應，血栓素在正常情況下將血小板分子結合在一起以在血管之受損壁上產生補片。因為血小板補片可在局部及下游變得過大且亦阻斷血流，所以阿司匹林亦以低劑量長期使用以在罹患血液凝塊高危的人類中幫助防止心臟病發作、中風及血液凝塊形成。其亦確立緊接在心臟病發作之後可給與低劑量之阿司匹林以降低再次心臟病發作或心臟組織死亡的風險。阿司匹林可有效預防某些類型之癌症，尤其結腸直腸癌。 經口服用阿司匹林的不良副效應包括腸胃潰瘍、胃出血及耳鳴，尤其以較高劑量時。在兒童及青少年中，由於雷伊氏症候群(Reye's syndrome)風險，不再指定阿司匹林以控制流感類症狀或水痘或其他病毒性疾病之症狀。 阿司匹林為稱作非類固醇抗炎藥(NSAID)之一組藥劑的一部分，但在作用機制上不同於大部分其他NSAID。雖然阿司匹林及在其群組中稱作水楊酸酯之其他藥物具有與其他NSAID類似的效應(解熱、抗發炎、鎮痛)，且抑制相同的酶環加氧酶，但阿司匹林(但不為其他水楊酸酯)的確以不可逆方式如此，且不同於其他藥物，影響酶之COX-1變異體而非COX-2變異體。
B. 舒林酸及其主要代謝物 ， 舒林酸碸及舒林酸硫化物
舒林酸為具有以下化學名稱之非類固醇、抗發炎劑茚衍生物：(Z)-5-氟-2-甲基-1-((4-(甲亞磺醯基)苯基)亞甲基)-1H-茚-3-乙酸(Physician's Desk Reference，1999)。在不受理論束縛的情況下，亞碸基部分藉由可逆的還原成硫化物代謝物且藉由不可逆的氧化成碸代謝物(依昔舒林(exisulind))在活體內轉化。參看美國專利6,258,845，其以引用之方式併入本文中。亦抑制Ki-ras活化之舒林酸代謝成兩種不同分子，其抑制COX之能力不同，但均能夠經由誘導細胞凋亡來施加化學預防效應。舒林酸碸缺乏COX抑制活性，且最可能以與前列腺素合成無關的方式促進誘導細胞凋亡。可獲得的跡象指示硫化物衍生物為生物學活性化合物中之至少一者。基於此，舒林酸可視為前藥。 舒林酸(Clinoril®)可呈例如150 mg及200 mg錠劑形式獲得。成年人之最常見劑量為150至200 mg一日兩次，最大日劑量為400 mg。在經口投與之後，吸收約90%藥物。峰值血漿水準在空腹患者中在約2小時內達到，且當與食品一起投與時3至4小時達到。舒林酸之平均半衰期為7.8小時：硫化物代謝物之平均半衰期為16.4小時。美國專利第3,647,858號及第3,654,349號涵蓋舒林酸之製劑；兩個專利均以全文引用之方式併入本文中。 指示舒林酸用於急性及長期緩解骨關節炎、類風濕性關節炎、僵直性脊椎炎、急性痛風及急性疼痛肩部之病徵及症狀。藉由舒林酸(每天400 mg)施加之鎮痛及抗發炎效應與藉由阿司匹林(每天4 g)、布洛芬(每天1200 mg)、吲哚美辛(indometacin)(每天125 mg)及苯基丁氮酮(每天400至600 mg)達到的效應相當。舒林酸之副效應包括在幾乎20%患者中的輕度腸胃效應，腹痛及噁心為最頻繁的不適。在至多10%患者中發現CNS副效應，最常報導嗜眠、頭痛及緊張。皮疹及搔癢病在5%患者中發生。用舒林酸之慢性治療可導致嚴重的腸胃毒性，諸如出血、潰瘍及穿孔。 已很好地研究用於化學預防癌症且尤其結腸直腸息肉的舒林酸之潛在用途。舉例而言，均以引用之方式併入本文中的美國專利5,814,625及5,843,929報導舒林酸在人類中的潛在化學預防用途。儘管偶發性腺瘤中的至少一個研究展示無此類效應(Ladenheim等人，1995)，但舒林酸展示在家族性腺瘤性息肉病(FAP)患者中產生腺瘤消退(Muscat等人，1994)。舒林酸及其碸代謝物依昔舒林經測試，且繼續針對預防及治療數個癌症類型進行臨床上測試。
C. 吡羅昔康
吡羅昔康為非類固醇消炎劑，其用以下化學名稱在治療類風濕性關節炎及骨關節炎中良好確立：1,1-二氧化4-羥基-2-甲基-
N
-2-吡啶基-2
H
-1,2-苯并噻嗪-3-甲醯胺。在治療肌肉骨胳病症、痛經及手術後疼痛中亦展現其有用性。其較長半衰期使得其能夠每天投與一次。若經直腸投與，則藥物展示為有效的。腸胃不適為最常報導之副效應。 儘管吡羅昔康在最近的IIb試驗中展現副效應，但吡羅昔康在動物模型(Pollard及Luckert，1989；Reddy等人，1987)中展示為有效的化學預防劑。對NSAID之副效應的大型綜合分析亦指示吡羅昔康比其他NSAID具有更多的副效應(Lanza等人，1995)。 儘管當各藥劑分別投與時，與吡羅昔康相比，DFMO對Ki-ras突變及腫瘤發生施加更大的抑止效應(Reddy等人，1990)，但DFMO與吡羅昔康之組合在結腸癌發生之AOM處理之大鼠模型中展示具有協同性化學預防效應(Reddy等人，1990)。在一個研究中，向AOM處理之大鼠投與DFMO或吡羅昔康將具有Ki-ras突變之腫瘤數目自90%分別降低至36%及25% (Singh等人，1994)。藥劑亦降低現有腫瘤中生物化學活性p21 ras之量。
D. 塞內昔布 (Celecoxib)
塞內昔布為非類固醇消炎劑，其用以下化學名稱在治療骨關節炎、類風濕性關節炎、急性疼痛、僵直性脊椎炎且減少患有FAP之患者中結腸及直腸息肉數目中良好確立：4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺醯胺。塞內昔布以品牌名稱Celebrex、Celebra及Onsenal由Pfizer出售。塞內昔布為選擇性COX-2抑制劑。塞內昔布之副效應包括心臟及血管疾病率增加30%。另外，腸胃副效應之風險大於80%。
E. NSAID 之組合
在一些實施例中，亦可使用各種NSAID之組合。藉由使用較低劑量之兩種或更多種NSAID，在一些實施例中有可能減少與較高劑量之個別NSAID相關的副效應或毒性。舉例而言，在一些實施例中，舒林酸可與塞內昔布一起使用。可彼此組合使用之NSAID的實例包括(但不限於)：布洛芬、萘普生(naproxen)、非諾洛芬(fenoprofen)、酮基布洛芬(ketoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、奧沙普嗪(oxaprozin)、吲哚美辛(indomethacin)、舒林酸、依託度酸(etodolac)、雙氯芬酸(diclofenac)、吡羅昔康(piroxicam)、美洛昔康(meloxicam)、替諾昔康(tenoxicam)、屈噁昔康(droxicam)、氯諾昔康(lornoxicam)、伊索昔康(isoxicam)、甲芬那酸(mefenamic)、甲氯芬那酸(meclofenamic)、氟芬那酸(flufenamic)、托芬那酸(tolfenamic)、塞內昔布(rofecoxib)、羅非考昔(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)、帕瑞考昔(parecoxib)、盧米羅可(lumiracoxib)及依他昔布(etoricoxib)。
IV. 二氟甲基鳥氨酸 / 舒林酸組合療法
在一些實施例中，可使用本文所提供之組合物減少患者中癌細胞數目、抑制患者中癌細胞生長及/或預防患者中癌細胞發生。目標癌細胞包括肺癌、腦癌、前列腺癌、腎臟癌、肝癌、卵巢癌、乳房癌、皮膚癌、胃癌、食道癌、頭頸癌、睾丸癌、結腸癌、子宮頸癌、淋巴系統癌及血液癌。在一些實施例中，組合物可用於治療及/或預防結腸癌、家族性腺瘤性息肉病(FAP)、胰臟癌及/或神經母細胞瘤。 在一些實施例中，本文所提供之組合物可用於治療展現癌前症狀之患者，且因此預防癌症發作。關於此類防治性治療的目標細胞及組織包括息肉及其他癌前病變、惡性疾病前、瘤前或指示可能進展為癌症狀態的其他異常表現型。舉例而言，本文所提供之組合物可用於預防具有極少額外毒性的腺瘤。共有患有FAP之突變型
APC/apc
基因型的Min (多個腸道瘤形成)小鼠充當用於人類FAP患者的適用實驗動物模型(Lipkin，1997)。 Min小鼠在整個胃腸道中在120天壽命時可發育大於100個腸胃腺瘤/腺癌，由此導致GI出血、阻塞及死亡。 DFMO與舒林酸之組合療法在此等小鼠中展示有效減小腺瘤。參看美國專利6,258,845，其以全文引用之方式併入本文中。
V. 固定劑量組合及投與途徑
在一個態樣中，本發明提供包含醫藥學上有效量之二氟甲基鳥氨酸及醫藥學上有效量之非類固醇消炎藥(NSAID)或其代謝物之固定劑量組合的組合物。在一些實施例中，固定劑量組合為醫藥學上有效量之二氟甲基鳥氨酸及醫藥學上有效量之舒林酸。 在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸為二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸為二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物外消旋體。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物為其兩種對映異構體之外消旋混合物。 在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約10 mg至約1000 mg之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約250 mg至約500 mg之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約300 mg至約450 mg之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約350 mg至約400 mg之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約35重量%至約60重量%之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約40重量%至約55重量%之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約50重量%至約55重量%之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約52重量%至約54重量%之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物外消旋體之量為52重量%至54重量%。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約375 mg之量存在。在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物外消旋體之量為375 mg。 在一些實施例中，舒林酸以約10 mg至約1500 mg之量存在。在一些實施例中，舒林酸以約50 mg至約100 mg之量存在。在一些實施例中，舒林酸以約70 mg至約80 mg之量存在。在一些實施例中，舒林酸以約75 mg之量存在。在一些實施例中，舒林酸之量為75 mg。在一些實施例中，舒林酸以約5重量%至約20重量%之量存在。在一些實施例中，舒林酸以約8重量%至約15重量%之量存在。在一些實施例中，舒林酸以約10重量%至約12重量%之量存在。在一些實施例中，舒林酸之量為10重量%至11重量%。 在一些實施例中，二氟甲基鳥氨酸以約375 mg之量存在，且舒林酸以約75 mg之量存在。 在一些實施例中，調配物進一步包含賦形劑。在一些實施例中，賦形劑為澱粉、膠態二氧化矽或矽化微晶纖維素。在一些實施例中，賦形劑為膠態二氧化矽。在一些實施例中，調配物進一步包含第二賦形劑。在一些實施例中，第二賦形劑為矽化微晶纖維素。 在一些實施例中，調配物進一步包含潤滑劑。在一些實施例中，潤滑劑為硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸鋁、聚乙二醇、硼酸或苯甲酸鈉。在一些實施例中，潤滑劑為硬脂酸鎂。在一些實施例中，硬脂酸鎂以約0.25重量%至約2重量%之量存在。在一些實施例中，硬脂酸鎂之量為約0.75重量%至約2重量%。在一些實施例中，硬脂酸鎂之量為約1重量%至約1.5重量%。在一些實施例中，硬脂酸鎂之量為約1.1重量%。在一些實施例中，硬脂酸鎂以約1.5重量%之量存在。 在一些實施例中，組合物係呈膠囊、錠劑、微型錠劑、顆粒、丸粒、溶液、凝膠、乳膏、泡沫或貼片形式。在一些實施例中，組成物係呈錠劑，例如單層錠劑形式。 在一些實施例中，錠劑之重量為約650 mg至約1,000 mg。在一些實施例中，錠劑之重量為約675 mg至約725 mg。在一些實施例中，錠劑之重量為約700 mg。 在一些實施例中，錠劑進一步包含包衣。在一些實施例中，包衣為調節釋放包衣或腸溶包衣。在一些實施例中，包衣為pH反應性包衣。在一些實施例中，包衣包含鄰苯二甲酸乙酸纖維素(CAP)、苯偏三酸乙酸纖維素(CAT)、聚(乙酸乙烯酯)鄰苯二甲酸酯(PVAP)、鄰苯二甲酸羥基丙基甲基纖維素(HP)、聚(甲基丙烯酸酯丙烯酸乙酯)(1:1)共聚物(MA-EA)、聚(甲基丙烯酸酯甲基丙烯酸甲酯)(1:1)共聚物(MA MMA)、聚(甲基丙烯酸酯甲基丙烯酸甲酯)(1:2)共聚物或丁二酸乙酸羥基丙基甲基纖維素(HPMCAS)。在一些實施例中，包衣掩蓋二氟甲基鳥氨酸之味道。在一些實施例中，包衣包含羥丙基甲基纖維素、二氧化鈦、聚乙二醇及氧化鐵黃。 在一些實施例中，包衣之量為約1重量%至約5重量%。在一些實施例中，包衣之量為約2重量%至約4重量%。在一些實施例中，包衣之量為約3重量%。在一些實施例中，包衣之量為約5 mg至約30 mg。在一些實施例中，包衣之量為約15 mg至約25 mg。在一些實施例中，包衣之量為約21 mg。 在一些實施例中，包含包衣之錠劑的重量為約675 mg至約750 mg。在一些實施例中，包含包衣之錠劑的重量為約700 mg至約725 mg。在一些實施例中，包含包衣之錠劑的重量為約721 mg。 在一個態樣中，本發明提供包含醫藥學上有效量之二氟甲基鳥氨酸及醫藥學上有效量之舒林酸之固定劑量組合的組合物。在一些實施例中，組合物係呈膠囊、錠劑、微型錠劑、顆粒、丸粒、溶液、凝膠、乳膏、泡沫或貼片形式。在一些實施例中，組合物為固體且採取錠劑，例如單層錠劑形式。在一些實施例中，錠劑經膜包覆。 在一些態樣中，本發明提供二氟甲基鳥氨酸及NSAID之口服固定劑量組合調配物。在一些實施例中，提供包含醫藥學上有效量之二氟甲基鳥氨酸及醫藥學上有效量之NSAID的醫藥組合物。在一些實施例中，NSAID為舒林酸、阿司匹林、吡羅昔康或塞內昔布。在一些較佳實施例中，NSAID為舒林酸。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物及調配物用於腸內，諸如口服，且亦用於經直腸或非經腸，其中組合物包含單獨或與醫藥輔助物質(賦形劑)一起之藥學上活性化合物。用於腸內或非經腸投與之醫藥製劑呈例如單位劑型形式，諸如包衣錠劑、錠劑、膠囊或栓劑以及安瓿。其以本身已知的方式，例如使用習知混合、粒化、包覆、溶解或凍乾方法製備。因此，口服使用之醫藥製劑可藉由將活性化合物與固體賦形劑組合，若需要粒化所獲得之混合物，且在需要或必需時，在添加適合輔助物質之後，將混合物或顆粒加工成錠劑或包衣錠劑核來獲得。在一個較佳實施例中，活性成分及賦形劑之混合物調配成錠劑形式。可塗覆適當包衣以增加可口性或延遲吸收。舉例而言，包衣可塗覆於錠劑以掩蓋活性化合物(諸如DFMO)為人厭惡的味道，或維持及/或延遲活性分子在胃腸道中釋放至特定區域。 治療性化合物可例如與惰性稀釋劑或可吸收可食載劑一起經口投與。治療性化合物及其他成分亦可圍封於硬或軟外殼明膠膠囊中、壓縮成錠劑或直接併入個體膳食中。對於經口治療性投與，治療性化合物可與賦形劑組合且以可攝取錠劑、經頰錠劑、糖衣錠、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿或粉片形式使用。 在某些實施例中，本文所提供之錠劑及/或膠囊包含活性成分及粉狀載劑，諸如乳糖、澱粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂及硬脂酸。類似稀釋劑可用於製備壓縮錠劑。在其他實施例中，可製造錠劑及膠囊以用於立即或調節釋放。在一些實施例中，錠劑及/或膠囊製造為持續釋放產物以經數小時時段提供持續釋放之藥物。在一些實施例中，壓縮錠劑經糖包覆及/或經膜包覆以掩蓋令人不愉快的味道及/或防止錠劑與大氣接觸。在一些實施例中，錠劑包覆腸溶包衣以用於在胃腸道中選擇性崩解。 在一些實施例中，錠劑或膠囊能夠崩解或溶解以釋放包含不同數量之第一組分及第二組分的粒子的多顆粒，例如包覆調節釋放包衣之多粒子。在一些此等實施例中，錠劑或膠囊可崩解或溶解於口腔、胃、小腸、末端迴腸或結腸中。在一些此等實施例中，錠劑或膠囊可釋放具有經調節釋放特性之多顆粒。 在一些實施例中，本發明提供一種呈多層錠劑形式之醫藥口服固定劑量組合。多層錠劑具有至少兩個層(雙層錠劑)或可具有三個、四個、五個或更多個層。在一些實施例中，層中之每一者含有不超過一種活性醫藥成分(API)。舉例而言，在一些實施例中，錠劑具有兩個層，其中API中之一者在兩個層中之每一者中。在一些實施例中，除了此兩個層以外，錠劑亦含有其他僅含有載劑之層，且其可例如作為分離層或外部包衣層起作用。在一些實施例中，若存在多於兩個層，則組分可存在於超過一個層中，只要其不在同一層中一起存在。在某些實施例中，單層錠劑為較佳的，但以下詳述的所有資訊同樣適用於多層錠劑。 在一些實施例中，可調配固定劑量組合以提供在約0.1 μM至約1000 μM範圍內且較佳在約1 μM至100 μM範圍內且更佳在約1 μM至約50 μM範圍內的總體二氟甲基鳥氨酸及/或舒林酸之平均穩定狀態血漿濃度水準。
A. 醫藥學上可接受之賦形劑
在一些實施例中，組合物進一步包含醫藥學上可接受之賦形劑。在一些此等實施例中，醫藥學上可接受之賦形劑可包括醫藥學上可接受之稀釋劑、醫藥學上可接受之崩解劑、醫藥學上可接受之黏合劑、醫藥學上可接受之穩定劑、醫藥學上可接受之潤滑劑、醫藥學上可接受之顏料或醫藥學上可接受之助滑劑。在本發明之固定劑量組合調配物中，活性成分可與醫藥學上可接受之賦形劑以1:0.25至1:20之重量比混合。 可用於本發明之醫藥調配物的稀釋劑包括(但不限於)微晶纖維素(「MCC」)、矽化MCC (例如PROSOLV™ HD 90)、微細纖維素、乳糖、澱粉、預糊化澱粉、糖、甘露糖醇、山梨糖醇、葡萄糖結合劑、糊精、麥芽糊精、右旋糖、碳酸鈣、硫酸鈣、二水合磷酸氫鈣、磷酸三鈣、碳酸鎂、氧化鎂及其任何混合物。較佳地，稀釋劑為矽化MCC。稀釋劑以調配物之總重量計以約5重量%至約95重量%之量使用，且較佳以約25重量%至約40重量%之量，諸如以約30重量%至約35重量%之量使用。在某些態樣中，稀釋劑可為可溶稀釋劑。當使用稀釋劑時，在各離散層中其與活性成分之比率極其重要。術語「可溶稀釋劑」係指溶解於以下中之稀釋劑：水、類乳糖、Ludipress (BASF，乳糖、交聯聚維酮(crospovidone)及聚維酮(povidone) (93:3.5:3.5，w/w(%))之混合物)、甘露糖醇及山梨糖醇。 崩解劑用於促進錠劑在口腔及/或胃腸道中暴露於流體之後膨脹且崩解。適用於本發明之固定劑量組合調配物的崩解劑之實例包括交聯聚維酮、羥基乙酸澱粉鈉、交聯羧甲纖維素鈉、經低取代之羥基丙基纖維素、澱粉、海藻酸或其鈉鹽及其混合物。可用於本發明之醫藥調配物的其他崩解劑包括(但不限於)甲基纖維素、微晶纖維素、羧基甲基纖維素鈣、羧基甲基纖維素鈉(例如AC-DI-SOL™、PRIMELLOSE™)、聚維酮、瓜爾豆膠、矽酸鎂鋁、膠態二氧化矽(例如AEROSIL™、CARBOSIL
TM
)、波拉克林鉀(polacrilin potassium)、澱粉、預糊化澱粉、羥基乙酸澱粉鈉、(例如EXPLOTAB™)、海藻酸鈉及其任何混合物。較佳地，崩解劑為膠態二氧化矽。崩解劑可以調配物之總重量計以約0.1重量%至約30重量%之量使用，且較佳以約0.2重量%至約5重量%之量使用。 本發明之組合物可包含潤滑劑。當顆粒自身附著至壓錠機衝頭面時，可發生黏附。潤滑劑用於促進粉末流動，且減少錠劑衝頭面與錠劑衝頭之間及錠劑表面與模具壁之間的摩擦。舉例而言，潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸、硬脂醯反丁烯二酸鈉、聚乙二醇、硫酸月桂酯鈉、硫酸月桂酯鎂及苯甲酸鈉。較佳地，潤滑劑為硬脂酸鎂。在本發明中，潤滑劑較佳包含固體劑型之0.25重量%至2重量%，且較佳約1.5重量%之量。在例示性調配物中，潤滑劑為以約1.5重量%之量存在之硬脂酸鎂以預防黏附。 黏合劑可用於本發明之醫藥組合物中以幫助壓縮後將錠劑固持在一起。適用於本發明之黏合劑之實例為阿拉伯膠、瓜爾豆膠、海藻酸、卡波姆(carbomers)(例如Carbopol™產品)、糊精、麥芽糊精、甲基纖維素、乙基纖維素、羥基乙基纖維素、羥基丙基纖維素(例如KLUCEL™)、羥基丙基甲基纖維素(例如METHOCEL™)、羧基甲基纖維素鈉、液體葡萄糖、矽酸鎂鋁、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯吡咯啶酮(例如聚維酮K-90 D，KOLLIDON™)、共聚維酮(copovidone)(PLASDONE™)、明膠、澱粉及其任何混合物。較佳地，黏合劑為澱粉。在本發明中，黏合劑較佳包含固體劑型之約1重量%至約15重量%。在其他實施例中，固體劑型不包含黏合劑。 在某些實施例中，可用於本發明之固定劑量組合調配物的穩定劑可為抗氧化劑。使用抗氧化劑促進活性成分之穩定性以抵抗與其他醫藥學上可接受之添加劑產生不良反應且抵抗隨著時間由熱量或濕氣引起之改變。舉例而言，抗氧化劑為抗壞血酸及其酯、丁基化羥基甲苯(BHT)、丁基化羥基大茴香醚(BHA)、α-生育酚、半胱胺酸、檸檬酸、沒食子酸丙酯、硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、乙二胺四乙酸(EDTA)及其任何混合物。
B. 錠劑製造方法
本發明之另一態樣為提供製造本文揭示之錠劑，包括包含二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之錠劑的方法。在一些實施例中，活性劑藉由以下步驟製備：經由所需網目大小篩網篩分至少一種活性劑及一或多種賦形劑，且隨後使用快速混合器粒化機、行星混合器、質量混合器、條帶混合器、流化床處理器或任何其他適合裝置混合。摻合物可諸如藉由添加具有或不具有黏合劑之醇或水醇或水性的溶液或懸浮液在低或高剪切混合器、流體化床粒化機以及其類似裝置中進行粒化或藉由乾式粒化進行粒化。顆粒可使用盤式乾燥器、流化床乾燥器、旋轉錐形真空乾燥器以及其類似裝置進行乾燥。顆粒可使用振盪粒化機或粉碎研磨機或裝備有適合篩網之任何其他習知設備設定大小。替代地，顆粒藉由擠製且滾圓或碾壓製備。另外，製造含有活性劑之顆粒可包括與可直接壓縮賦形劑混合或碾壓。 在本發明之其他實施例中，小錠劑(微錠劑)可藉由使用各種尺寸及形狀(按需要)之模具及衝頭壓縮顆粒來製造。視情況，若需要可利用熟習此項技術者已知的技術，諸如噴塗、浸塗、流體化床包衣及其類似技術將包衣應用於錠劑。在本發明之某些實施例中，可使用適合的溶劑系統，諸如醇、水醇、水性或有機溶劑系統以促進處理。
1. 粒化
粒化為其中製造彼此黏附之粉末粒子，由此產生較大、多粒子實體或顆粒的方法。在本發明之實施例中，藉由乾式或濕式技術所獲得之顆粒可與一或多種潤滑劑及/或抗黏附劑一起摻合，且隨後填充入單一膠囊中或填充入不同尺寸之不同膠囊中，以使得較小膠囊可填充入另一較大膠囊中。 在某一實施例中，藉由壓製進行之乾式粒化係用於製備固體劑量組合物。在乾式粒化中，粉末摻合物藉由將常用力施加至粉末上壓製，由此導致相當大的尺寸增大。在一些態樣中，壓錠用於乾式粒化方法，其中壓錠機用於壓製方法。在其他態樣中，輥壓機用於包括進料系統、壓製單元及尺寸縮小單元之乾式粒化。在此方法中，粉末在兩個輥之間藉由施加力來壓製，該力為乾式粒化方法中最重要的參數。施加力以kN/cm為單位表示，其為每公分輥寬度的力。按壓力偶爾亦以巴為單位指示。然而，此僅代表液壓系統中之壓力，且實際上不為施加至粉末上之力的合適量測單位。在視傳送至輥之粉末量而定的所給與力下，粉末將壓製到預定義的條帶厚度。 在其他實施例中，濕式粒化用於製備固體劑量組合物。濕式粒化粉末改良壓縮混合物之流動性及壓塑性。在濕式粒化中，顆粒係由將粒化液體添加至粉末床上形成，該粉末床受葉輪(在高剪切製粒機中)、螺桿(在雙螺桿製粒機中)或空氣(在流體化床製粒機中)影響。在系統中產生攪動以及潤濕調配物內之組分使得初步的粉末粒子凝集以產生濕顆粒。粒化液體(流體)含有必須為揮發性以使得其可藉由乾燥移除，且無毒之溶劑。典型液體包括單獨或以組合形式之水、乙醇及異丙醇。液體溶液可為水性類或溶劑類。水溶液具有比有機溶劑處理更安全的優勢。 錠劑亦可由基本上如Maejima等人，1997 (其以引用之方式併入本文中)中所描述翻滾熔融粒化(TMG)形成。翻滾熔融粒化可用於製備熔融顆粒。其可在翻滾混合器中完成。將熔融低熔點化合物噴灑至摻合器中之結晶醣及粉末醣上，且混合直至顆粒形成。在此情況下，低熔點成分為黏合劑且結晶醣為晶種。替代方法為在翻滾混合器中合併未熔融低熔點成分、結晶糖(例如蔗糖或麥芽糖)及呈粉末形式之水溶性成分(例如甘露糖醇或乳糖)，且混合，同時加熱至低熔點黏合劑之熔點或更高熔點。晶種應為結晶或粒狀水溶性成分(醣)，例如粒狀甘露糖醇、結晶麥芽糖、結晶蔗糖或任何其他糖。翻滾混合器之實例為雙殼摻合器(V形摻合器)或任何其他形狀之翻滾混合器。可經由粒化機腔室循環熱空氣且藉由加熱腔室之底部表面達成加熱。當晶種材料及粉末錠劑成分在經加熱腔室中循環時，低熔點化合物熔融且黏附至晶種。未熔融粉末材料黏附至晶種黏合、熔融低熔點材料。接著冷卻由此方法形成之球狀珠粒，且將其經篩網篩分以移除未黏附粉末。 噴霧凝結或造粒亦可用於形成本發明之錠劑組合物。噴霧凝結包括霧化組合物之熔融液滴，其包括表面上之低熔點化合物或較佳為其他錠劑成分。可用於噴霧凝結之設備包括噴霧乾燥器(例如Nero噴霧乾燥器)及具有頂部噴霧之流化床塗佈機/粒化(例如Glatt流化床塗佈機/粒化機)。在較佳實施例中，較佳水溶性賦形劑，更佳醣懸浮於熔融低熔點成分中且噴霧凝結形成速溶顆粒。在噴霧凝結之後，使所得組合物冷卻且凝結。凝結混合物之後，其經篩檢或篩分且與其餘錠劑成分混合。使包含低熔點化合物及其他錠劑成分之任何組合的速溶顆粒熔融且噴霧凝結至其他錠劑成分上的噴霧凝結方法在本發明之範疇內。混合包括低熔點化合物之所有錠劑成分，熔融低熔點化合物且將混合物噴霧凝結至表面上的噴霧凝結方法亦在本發明之範疇內。
2. 摻合
在某些實施例中，混合物在粒化之後摻合。在固體劑量製造中之摻合達成摻合均勻性且分配潤滑劑。在某些態樣中，摻合步驟經設計以在潤滑劑之最終摻合物之前達成所有組分之均質性。然而，摻合粉末由於粒徑、水分含量、結構、容積密度及流動特性而成為難題。成功配方的關鍵為添加次序。通常組分及醫藥學上可接受之添加劑分配至適合容器，諸如擴散摻合器或擴散混合器中。翻滾混合器之實例為雙殼摻合器(V形摻合器)或任何其他形狀之翻滾混合器。
3. 壓縮
當製備錠劑組合物時，其可形成各種形狀。在較佳實施例中，錠劑組合物壓成形狀。此方法可包含將錠劑組合物放入形式中，且施加壓力至組合物以使組合物呈現組合物接觸之形式的表面形狀。壓縮成錠劑形式可藉由壓錠機完成。壓錠機包括適合底部模具的下衝頭及在製錠材料落入模具空腔之後進入頂部模具空腔的具有對應形狀及尺寸之上衝頭。錠劑由施加在下衝頭及上衝頭上的壓力而形成。本發明之錠劑一般具有約20 kP或更少之硬度；較佳地錠劑具有約15 kP或更少之硬度。典型壓縮壓力為約5 kN至約40 kN，且將基於所需尺寸及錠劑硬度改變。在一些態樣中，壓縮壓力為約25 kN至約35 kN。在特定態樣中，壓縮壓力小於約37 kN，諸如小於約30 kN，諸如小於約25 kN。液壓機(諸如Carver Press)或旋轉錠劑壓力機(諸如Stokes Versa Press)為壓縮本發明之錠劑組合物的適合方式。例示性壓縮力參數展示於表3中。 在某些實施例中，潤滑摻合物可使用適合裝置(諸如旋轉機器)壓縮以形成錠塊，其通過裝備有適合篩網之研磨機或流體能研磨機或球磨機或膠體研磨機或輥研磨機或錘研磨機及其類似裝置，獲得經研磨之活性劑錠塊。 可使用預壓縮步驟以便預防錠劑頂裂。頂裂係指來自錠劑主體之錠劑之頂蓋或頂部的裂口或裂縫。頂裂可由在壓縮期間推出空氣時遷移的不可壓縮精細粒子導致。舉例而言，預壓縮可以約5%、10%或15%之主壓縮力。在較佳實施例中，錠劑以不超過約10 kN、較佳小於5 kN之壓力預壓縮成形式。舉例而言，以小於1 kN、1.5 kN、2 kN、2.1 kN、2.2 kN、2.5 kN、3 kN、3.5 kN、4 kN、4.5 kN、5 kN、6 kN、7 kN、8 kN、9 kN或10 kN按壓錠劑在本發明之範疇內。在特定態樣中，預壓縮力為約2.5 kN至約3.5 kN。例示性預壓縮力參數展示於表3中。
4. 膜衣
根據本發明之組合物或固體劑型亦可包覆有膜衣、腸溶包衣、調節釋放包衣、保護性包衣或抗黏附包衣。 本發明之組合物可經包覆腸溶包衣。藉由包覆腸溶包衣或包衣意謂預防活性劑在胃中釋放且允許在腸道上部釋放的醫藥學上可接受之包衣。在其他實施例中，應用腸溶包衣以延遲活性劑釋放至末端迴腸或釋放至結腸。腸溶包衣可作為外塗層在調節釋放包衣時添加。腸溶包衣聚合物可在腸溶包衣調配物中單獨或以組合形式使用。腸溶包衣可設計為單層或設計為多層包衣實施例。用於本發明之組合物的較佳腸溶包衣包含選自以下之成膜劑：鄰苯二甲酸乙酸纖維素；苯偏三酸乙酸纖維素；甲基丙烯酸共聚物、衍生自甲基丙烯酸及其酯之共聚物，含有至少40%甲基丙烯酸；鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素；丁二酸乙酸羥基丙基甲基纖維素或聚乙酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯。適用於腸溶包衣之聚合物之實例包括例如鄰苯二甲酸乙酸纖維素(CAP)、苯偏三酸乙酸纖維素(CAT)、聚(乙酸乙烯酯)鄰苯二甲酸酯(PVAP)、鄰苯二甲酸羥基丙基甲基纖維素(HP)、聚(甲基丙烯酸酯丙烯酸乙酯)(1:1)共聚物(MA-EA)、聚(甲基丙烯酸酯甲基丙烯酸甲酯)(1:1)共聚物(MA MMA)、聚(甲基丙烯酸酯甲基丙烯酸甲酯)(1:2)共聚物、EUDRAGIT™ L 30D (MA-EA，1:1)、EUDRAGIT™ 100 55 (MA-EA，3:1)、丁二酸乙酸羥基丙基甲基纖維素(HPMCAS)、SURETERIC (PVAP)、AQUATERIC™ (CAP)、蟲膠或AQOAT™ (HPMCAS)。可與本發明一起使用之靶向結腸遞送系統為吾人所知且使用諸如以下材料：羥基丙基纖維素；微晶纖維素(MCE，來自FMC Corp.之AVICEL™)；聚(乙烯-乙酸乙烯酯)(60:40)共聚物(來自Aldrich Chemical Co.之EVAC)；甲基丙烯酸2-羥基乙酯(HEMA)；MMA；在N,N'-雙(甲基丙烯醯基氧基乙基氧基羰基胺基)-偶氮苯存在下合成之HEMA:MMA:MA三元共聚物；偶氮聚合物；包覆腸溶包衣定時釋放系統(來自Pharmaceutical Profiles, Ltd., UK之TIME CLOCK®)及果膠酯酸鈣及滲透小型泵系統(ALZA corp.)。 在一些實施例中，膜衣包含諸如以下聚合物：羥基丙基纖維素(HPC)、乙基纖維素(EC)、羥基丙基甲基纖維素(HMPC)、羥基乙基纖維素(HEC)、鈉羧基甲基纖維素(CMC)、聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)(PEG)、甲基丙烯酸二甲基胺基乙酯-甲基丙烯酸酯共聚物或丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物(EA-MMA)。 在一些實施例中，組合物具有調節釋放包衣。調節釋放包衣可為pH反應性包衣，其當曝露於特定pH時，將遞送活性劑(例如遞送至結腸直腸道)。在一些實施例中，pH反應性包衣為pH反應性聚合物，其當曝露於大於或等於約6之pH時將溶解；儘管pH反應性聚合物可在大於或等於約5之pH下溶解。 pH反應性聚合物可為例如聚合化合物，諸如EUDRAGIT™ RS及EUDRAGIT™ RL。 EUDRAGIT™產品形成約30D重量之乳膠分散液。由於EUDRAGIT™ RS 30D作為包衣透水性不佳，所以其經設計用於緩慢釋放，由於EUDRAGIT™ RS 30D作為包衣透水性相對較佳，所以其經設計用於快速釋放。此等兩種聚合物一般組合使用。如本文中所涵蓋，EUDRAGIT™ RS 30D/EUDRAGIT™ RL 30D之容許比率為約10:0至約8:2。經設計用於腸或結腸直腸釋放之乙基纖維素或S100或其他等效聚合物亦可取代以上EUDRAGIT™ RS/EUDRAGIT™ RL組合使用。 視情況，方法包含對錠劑進行膜包覆之步驟。可使用任何適合之方式完成膜衣。適合膜衣為吾人所知且可商購或可根據已知方法製造。通常膜衣材料為包含諸如聚乙二醇、滑石及著色劑之材料的聚合膜包衣材料。適合包衣材料為甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥基丙基纖維素、丙烯酸聚合物、乙基纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、聚乙酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、聚乙烯醇、鈉羧基甲基纖維素、乙酸纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素、明膠、甲基丙烯酸共聚物、聚乙二醇、蟲膠、蔗糖、二氧化鈦、巴西棕櫚蠟(camauba wax)、微晶蠟及玉米蛋白。在一些態樣中，膜衣為羥丙基甲基纖維素、二氧化鈦、聚乙二醇及氧化鐵黃。舉例而言，膜衣為OPADRY® Yellow (Colorcon)。通常，膜衣材料以該量施加以便提供在1重量%至6重量%之包覆膜衣錠劑範圍內，諸如2重量%至4重量%，諸如約3重量%的膜衣。可將塑化劑及其他成分添加於包衣材料中。相同或不同活性物質亦可添加於包衣材料中。 在一些實施例中，錠劑之包衣可改良可口性以掩蓋諸如DFMO之活性成分令人不喜的味道。舉例而言，錠劑包衣組合物可包括纖維素聚合物、塑化劑、甜味劑或粉末香料組合物，粉末香料組合物包括與固體載劑相關的調味劑。
C. 投與時程及方案
在一些實施例中，藥劑可按常規時程投與。如本文所用，常規時程係指預定的指定時間段。只要時程經預定，常規時程可涵蓋時長相同或不同的時段。舉例而言，常規時程可涉及一日投與兩次、每日投與、每兩天投與、每三天投與、每四天投與、每五天投與、每六天投與、每週投與、每月投與或任何設定數目之天或週之間投與。替代地，預定常規時程可涉及每天兩次投與持續第一週，接著每天投與持續數月等。在其他實施例中，本發明提供可經口服用之藥劑及依賴或不依賴於食物攝入的時序。因此，例如，藥劑可每天早晨及/或每天晚上服用，與個體吃飯與否無關。
VI. 對患者之診斷及治療
在一些實施例中，治療方法可補充有診斷性方法以改良功效及/或最小化抗癌療法毒性，包含投與本文所提供之組合物。此類方法描述於例如美國專利8,329,636及9,121,852、美國專利公開案US2013/0217743及US2015/0301060以及PCT專利公開案WO2014/070767及WO2015/195120中，其均以引用之方式併入本文中。 在一些實施例中，本發明之組合物及調配物可向個體投與，其中在ODC1基因啟動子之至少一個對偶基因之位置+316處的基因型為G。在一些實施例中，患者之ODC1基因啟動子之兩個對偶基因之位置+316處的基因型可為GG。在一些實施例中，患者之ODC1基因啟動子之兩個對偶基因之位置+316處的基因型可為GA。在關於腺瘤復發之完整模型中偵測到關於
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基因型及治療的統計顯著相互作用，使得安慰劑患者中腺瘤復發模式為：GG 50%、GA 35%、AA 29%相對於二氟甲基鳥氨酸/舒林酸患者：GG 11%、GA 14%、AA 57%。與先前報導展示接受阿司匹林帶有至少一個A對偶基因之CRA患者中的復發性腺瘤風險減小相比，二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之腺瘤抑制性效應在具有主要G同型接合
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基因型之彼等患者中較大(Martinez等人，2003；Barry等人，2006；Hubner等人，2008)。此等結果展現與GG基因型患者相比，位置+316處的
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A對偶基因載體在回應長期暴露於二氟甲基鳥氨酸及舒林酸時不同，其中A對偶基因載體在腺瘤復發方面具有較少有益效果，且尤其在AA同型接合子中，有可能罹患耳毒性的風險升高。 在一些實施例中，本發明提供用於預防性或治癒性治療患者中結腸直腸癌的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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啟動子基因對偶基因之位置+316處的患者基因型；及(b)若結果指示
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啟動子基因之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則向患者投與本文所提供之組合物。在一些實施例中，本發明提供用於治療患者中結腸直腸癌風險因素的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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啟動子基因對偶基因之位置+316處的患者基因型；及(b)若結果指示
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啟動子基因之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則向患者投與本文所提供之組合物，其中該等方法預防患者中形成新的異常腺管病灶、新的腺瘤息肉或新的發育不良腺瘤。參看美國專利8,329,636，以引用之方式併入本文中。 在一些實施例中，本發明提供用於預防性或治癒性治療患者中家族性腺瘤性息肉病(FAP)或神經母細胞瘤的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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啟動子基因對偶基因之位置+316處的患者基因型；及(b)若結果指示
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啟動子基因之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則向患者投與本文所提供之組合物。在一些實施例中，本發明提供用於治療患者中家族性腺瘤性息肉病或神經母細胞瘤風險因素的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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啟動子基因對偶基因之位置+316處的患者基因型；及(b)若結果指示
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啟動子基因之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則向患者投與本文所提供之組合物，其中該等方法預防患者中形成新的異常腺管病灶、新的腺瘤息肉或新的發育不良腺瘤。參看美國專利9,121,852，其以引用之方式併入本文中。 在一些實施例中，本發明提供用於治療患有癌瘤之患者的方法，其包含向患者投與本文所提供之組合物，其中已經測定患者具有不高的膳食聚胺攝入及/或組織聚胺水準及/或組織聚胺通量。在一些此等實施例中，不高的膳食聚胺攝入為每天300 μM聚胺或更低。在一些此等實施例中癌瘤為結腸直腸癌。參看美國專利公開案US2013/0217743，其以引用之方式併入本文中。 在一些實施例中，本發明提供用於預防性或治癒性治療患者中癌症的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定來自患者之癌細胞中
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非編碼RNA、HMGA2蛋白質及/或LIN28蛋白質之表現水準；及(b)若結果指示患者癌症展現與參考
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非編碼RNA表現水準相比
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非編碼RNA表現水準降低，與參考HMGA2蛋白質表現水準相比HMGA2蛋白質表現水準升高及/或與參考LIN28蛋白質表現水準相比LIN28蛋白質表現水準升高，則向患者投與本文所提供之組合物。在一些此等實施例中，參考含量為非患病個體中觀測到的水準或來自患者之非癌細胞中觀測到的水準。在一些此等實施例中，「獲得」包含提供來自患者的癌症樣品且評定來自樣品之癌細胞中
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非編碼RNA、HMGA2蛋白質或LIN28蛋白質的表現水準。在一些此等實施例中，「評定
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-7非編碼RNA之表現水準」包含定量PCR或諾瑟墨點法(Northern blotting)。在一些此等實施例中，「評定HMGA2蛋白質或LIN28蛋白質之表現水準」包含免疫組織化學或ELISA。在一些此等實施例中，樣品為血液或組織，諸如腫瘤組織。在一些此等實施例中，患者為人類。在一些此等實施例中，癌症為結腸直腸癌、神經母細胞瘤、乳癌、胰臟癌、腦癌、肺癌、胃癌、血液癌、皮膚癌、睪丸癌、前列腺癌、卵巢癌、肝癌、食道癌、子宮頸癌、頭頸癌、非黑素瘤皮膚癌或神經膠母細胞瘤。在一些此等實施例中，方法進一步包含(c)自測試獲得結果，該測試測定來自該患者之第二癌細胞中在第二時間點時的
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非編碼RNA之表現，接著投與至少一個劑量之ODC抑制劑。在一些此等實施例中，方法進一步包含若觀測到
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非編碼RNA無增加或增加較少，則增加向患者投與的ODC抑制劑之量。在一些此等實施例中，方法進一步包含自測試獲得結果，該測試測定來自該患者之第二癌細胞中在第二時間點時HMGA2蛋白質或LIN28蛋白質之表現，接著投與至少一個劑量之ODC抑制劑。在一些此等實施例中，方法進一步包含若觀測到HMGA2蛋白質或LIN28蛋白質無下降或下降較少，則增加向患者投與的ODC抑制劑之量。在一些此等實施例中，方法進一步包含(i)自測試獲得結果，該測試測定
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基因啟動子之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型；及(ii)若結果指示
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基因啟動子之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則向患者投與本文所提供之組合物。在一些實施例中，方法包含診斷患者中癌症或癌前病狀，其包含獲得來自患者之樣品及(b)測定選自由樣品中
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非編碼RNA、LIN28蛋白質及HMGA2蛋白質組成之群的至少兩個標記物之表現水準，其中若相對於參照水準，樣品中
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非編碼RNA之表現水準下降或LIN28蛋白質或HMGA2蛋白質增加，則患者診斷為具有癌症或癌前病狀。在一些實施例中，本發明之固定劑量組合向具有低細胞或組織
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水準之患者投與。在其他態樣中，本發明組合物向具有高細胞或組織HMGA2水準之患者投與。在其他態樣中，本發明之組合物向具有高細胞或組織LIN28水準之患者投與。參看美國專利公開案US2015/0301060，其以引用之方式併入本文中。 在一些實施例中，提供用於預防性或治癒性治療患者中癌瘤的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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對偶基因之位置+263處的患者基因型；及(b)若結果指示
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基因之至少一個對偶基因之位置+263處的患者基因型為T，則向患者投與本文所提供之組合物。在一些此等實施例中，測試可測定患者中
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基因之一個對偶基因之位置+263處的核苷酸鹼基。在一些實施例中，測試可測定患者中
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基因之兩個對偶基因之位置+263處的核苷酸鹼基。在一些實施例中，結果可指示
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基因之兩個對偶基因之位置+263處的患者基因型為TT。在一些實施例中，結果可指示
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基因之兩個對偶基因之位置+263處的患者基因型為TG。在一些此等實施例中，方法可進一步包含自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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對偶基因之位置+316處的患者基因型，且若結果指示
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基因之至少一個對偶基因之位置+316處的患者基因型為G，則僅向患者投與本文所提供之組合物。在另一態樣中，提供用於治療患者中結腸直腸癌風險因素的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
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對偶基因之位置+263處的患者基因型；及(b)若結果指示
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基因之至少一個對偶基因之位置+263處的患者基因型為T，則向患者投與本文所提供之組合物，其中該方法防止患者中形成新的異常腺管病灶、新的腺瘤息肉或新的發育不良腺瘤。在另一態樣中，提供用於預防有其對應風險之患者中癌瘤發育或復發的方法，其包含：(a)自測試獲得結果，該測試測定至少一個
ODC1
對偶基因之位置+263處的患者基因型；及(b)若結果指示
ODC1
基因之至少一個對偶基因之位置+263處的患者基因型為T，則向患者投與本文所提供之組合物。參看PCT專利公開案WO2015/195120，其以引用之方式併入本文中。 在任一以上實施例之變化形式中，癌瘤可為結腸直腸癌、神經母細胞瘤、乳癌、胰臟癌、腦癌、肺癌、胃癌、血液癌、皮膚癌、睪丸癌、前列腺癌、卵巢癌、肝癌、食道癌、子宮頸癌、頭頸癌、非黑素瘤皮膚癌或神經膠母細胞瘤。在一些實施例中，癌瘤可為結腸直腸癌。在一些實施例中，結腸直腸癌可為I期。在一些實施例中，結腸直腸癌症可為II期。在一些實施例中，結腸直腸癌可為III期。在一些實施例中，結腸直腸癌可為IV期。在任一以上實施例之變化形式中，方法可預防患者內形成新的晚期結腸直腸贅瘤。在一些實施例中，方法可預防形成新的右側晚期結腸直腸贅瘤。在一些實施例中，方法可預防形成新的左側晚期結腸直腸贅瘤。 在任一以上實施例之變化形式中，患者可鑑別為在結腸、直腸或闌尾中具有一或多個腺瘤息肉。在一些實施例中，患者可鑑別為具有一或多個晚期結腸直腸贅瘤。在一些實施例中，患者可鑑別為具有一或多個左側晚期結腸直腸贅瘤。在一些實施例中，患者可鑑別為具有一或多個右側晚期結腸直腸贅瘤。在一些實施例中，患者可診斷患有家族性腺瘤性息肉病。在一些實施例中，患者可診斷患有林赤症候群(Lynch syndrome)。在一些實施例中，患者可診斷患有家族性結腸直腸癌類型X。在一些實施例中，患者可滿足阿姆斯特丹準則(Amsterdam Criteria)或阿姆斯特丹準則II。在一些實施例中，患者可具有切除一或多個結腸直腸腺瘤之病史。在一些實施例中，患者可具有上皮內瘤形成或癌前病變相關ODC機能亢進。在一些實施例中，患者可具有上皮內瘤形成或癌前病變及升高的細胞聚胺水準。 在任一以上實施例之變化形式中，患者為人類。
VII. 定義
如本說明書中所用，「一(a/an)」可意謂一或多個。如本文申請專利範圍中所用，當與詞語「包含」結合使用時，詞語「一(a/an)」可意謂一個或多於一個。 在本申請案通篇，術語「約」用於指示值包括裝置、用以測定該值之方法之誤差的固有變化或研究個體當中存在的變化。 如本文所使用，術語「生物可用性」表示藥物或其他物質在投與之後對目標組織可用的程度。在本上下文中，術語「適合的生物可用性」欲意謂投與根據本發明之組合物將導致與在投與普通錠劑中活性物質之後所獲得的生物可用性相比，生物可用性得以改良；或與在投與含有以相同量之相同活性物質的市售產品之後所獲得的生物可用性相比，生物可用性至少相同或得以改良。特定言之，需要獲得更快速且更大及/或更加澈底的捕捉活性化合物，且由此提供投與劑量減少或每天投與次數減少。 術語「組合物」、「醫藥組合物」、「調配物」及「製劑」在本文中同義及互換地使用。 術語「包含」、「具有」及「包括」為開放式連系動詞。此等動詞中之一或多者之任何形式或時態，諸如「包含(comprises)」、「包含(comprising)」、「具有(has)」、「具有(having)」、「包括(includes)」及「包括(including)」亦為開放式的。舉例而言，「包含」、「具有」或「包括」一或多個步驟之任何方法不限於僅擁有彼等一或多個步驟且亦涵蓋其他未列舉步驟。 術語「其衍生物」係指任何化學改性多醣，其中單體醣單元中之至少一者藉由取代原子或分子基團或鍵而改性。在一個實施例中，其衍生物為其鹽。鹽為例如與適合無機酸(諸如氫鹵酸、硫酸或磷酸)之鹽，例如氫氯酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽或磷酸氫鹽；與以下適合羧酸之鹽，諸如視情況羥基化之低級烷酸，例如乙酸、乙醇酸、丙酸、乳酸或特戊酸，視情況羥基化及/或側氧基經取代之低級烷二羧酸，例如草酸、丁二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、丙酮酸、蘋果酸、抗壞血酸，以及與以下芳族、雜芳族或芳脂族羧酸之鹽，諸如苯甲酸、菸鹼酸或杏仁酸；及與適合脂族或芳族磺酸或N取代之胺磺酸之鹽，例如甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽或
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環己基胺磺酸鹽(賽克拉美(cyclamate))。 如本文所用術語「崩解」係指醫藥口服固定劑量組合通常藉助於流體散落成各別粒子且經分散的過程。當固體口服劑型處於以下狀態，其中除了測試設備篩網上殘留的不可溶包衣或膠囊外殼碎片(若存在)以外的任何固體口服劑型殘餘物根據USP＜701＞均為無可感覺硬心的軟塊時，則達到崩解。用於測定崩解特性之流體為水，諸如自來水或去離子水。崩解時間利用熟習此項技術者已知的標準方法量測，參看藥典USP ＜701＞及EP 2.9.1及JP中所闡述的協調程序。 如本文所用術語「溶解」係指固體物質，此處為活性成分在介質中呈分子形式分散的方法。本發明之醫藥口服固定劑量組合之活性成分之溶解速率由在液體/固體界面、溫度及溶劑組合物之標準化條件下原料藥每單位時間進入溶液中的量定義。溶解速率利用熟習此項技術者已知的標準方法量測，參看藥典USP ＜711＞及EP 2.9.3及JP中所闡述的協調程序。出於本發明之目的，用於量測個別活性成分之溶解的測試按照藥典USP ＜711＞在如本文針對不同實施例所闡述之pH下進行。特定言之，測試使用以75 rpm(旋轉/分鐘)之槳葉攪拌元件進行。溶解介質較佳為緩衝液，通常為磷酸鹽緩衝液(例如在pH 7.2下)。緩衝液之莫耳濃度較佳為0.1 M。 「活性成分」(Al)(亦稱為活性化合物、活性物質、活性劑、醫藥劑、藥劑、生物學活性分子或治療性化合物)為生物學活性藥物或殺蟲劑中的成分。類似術語活性醫藥成分(API)及散裝活性亦用於藥品，且術語活性物質可用於殺蟲劑調配物。 「藥物(pharmaceutical drug)」(亦稱為醫藥、醫藥製劑、醫藥組合物、醫藥調配物、醫藥產品、藥品(medicinal product)、藥品(medicine)、藥物(medication)、藥劑或簡單地藥物(drug))為用於診斷、治癒、治療或預防疾病之藥物。活性成分(Al)(如上文所定義)為生物學活性藥物或殺蟲劑中的成分。類似術語活性醫藥成分(API)及散裝活性亦用於藥品，且術語活性物質可用於殺蟲劑調配物。某些藥劑及殺蟲劑產品可含有超過一種活性成分。相比於活性成分，惰性成分通常在醫藥情境中稱作賦形劑。 如在本說明書及/或申請專利範圍中所使用，術語「有效」意謂足以實現所要的、期待的或預期的結果。當用於用化合物治療患者或個體之上下文中時，「有效量」、「治療有效量」或「醫藥學上有效量」意謂當向個體或患者投與以治療或預防疾病時，足以影響疾病之此類治療或預防的化合物量。 「預防(Prevention/preventing)」包括：(1)抑制個體或患者中之疾病發作，該個體或患者可有風險及/或易患該疾病但又尚未經歷或顯示該疾病之任何或所有病理學或症候學，及/或(2)減緩個體或患者中之疾病的病理學或症候學發作，該個體或患者可有風險及/或易患該疾病但又尚未經歷或顯示該疾病之任何或所有病理學或症候學。 「治療(Treatment/treating)」包括(1)抑制經歷或顯示疾病之病理學或症候學之個體或患者中的疾病(例如遏制病理學及/或症候學進一步發育)，(2)改善經歷或顯示疾病之病理學或症候學之個體或患者中的疾病(例如逆轉病理學及/或症候學)及/或(3)使得經歷或顯示疾病之病理學或症候學之個體或患者中的疾病出現任何可量測的減弱。 「前藥」意謂活體內以代謝方式可轉化成根據本發明之抑制劑的化合物。前藥本身可亦具有或可不具有相對於所給與目標蛋白之活性。舉例而言，包含羥基之化合物可作為藉由活體內水解轉化成羥基化合物的酯來投與。可在活體內轉化成羥基化合物的適合酯包括乙酸酯、檸檬酸酯、乳酸酯、磷酸酯、酒石酸酯、丙二酸酯、草酸酯、水楊酸酯、丙酸酯、丁二酸酯、反丁烯二酸酯、順丁烯二酸酯、亞甲基-雙-β-羥基萘甲酸酯、龍膽酸酯(gentisate)、羥乙基磺酸酯、二對甲苯甲醯基酒石酸酯、甲磺酸酯、乙烷磺酸酯、苯磺酸酯、對甲苯磺酸酯、環己基胺磺酸酯、奎尼酸酯(quinate)、胺基酸之酯及其類似酯。類似地，包含胺基之化合物可作為藉由活體內水解轉化成胺化合物的醯胺投與。 「賦形劑」為與藥物之活性成分、醫藥組合物、調配物或藥物遞送系統一起調配的醫藥學上可接受之物質。可使用賦形劑例如以使組合物穩定、使組合物膨脹(因此當用於此目的時常常稱為「膨化劑」、「填充劑」或「稀釋劑」)或使最終劑型中之活性成分療效增強，諸如促進藥物吸收、減小黏度或增強溶解度。賦形劑包括抗黏劑、黏合劑、包衣、顏色、崩解劑、調味劑、助滑劑、潤滑劑、防腐劑、吸附劑、甜味劑及媒劑之醫藥學上可接受版本。充當傳達活性成分之介質的主要賦形劑通常稱作媒劑。賦形劑亦可用於製造方法中例如除了輔助活體外穩定性，諸如預防超過預期存放期後變性或凝集以外，亦可諸如藉由促進粉末流動性或非黏附性而輔助活性物質操作。賦形劑之適合性將通常取決於投藥途徑、劑型、活性成分以及其他因素而變化。 術語「水合物」當用作對化合物之修飾語時意謂化合物具有小於一個(例如半水合物)、一個(例如單水合物)或大於一個(例如二水合物)與各化合物分子相關之諸如呈化合物之固體形式的水分子。 術語「二氟甲基鳥氨酸」當本身供使用時係指2,5-二胺-2-(二氟甲基)戊酸為其形式中之任一者，包括非鹽及鹽形式(例如二氟甲基鳥氨酸HCl)、非鹽及鹽形式之無水及水合物形式(例如二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物)、非鹽及鹽形式之溶劑合物、其對映異構體(
R
及
S
形式，其亦可鑑別為
d
及
l
形式)及此等對映異構體之混合物(例如外消旋混合物或對映異構體中之一者相對於另一者增濃之混合物)。二氟甲基鳥氨酸之特定形式包括二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物(亦即CAS ID: 96020-91-6；MW: 236.65)、二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽(亦即CAS ID: 68278-23-9；MW: 218.63)及游離二氟甲基鳥氨酸(亦即CAS ID: 70052-12-9；MW: 182.17)。若必需，已進一步指定二氟甲基鳥氨酸之形式。在一些實施例中，本發明之二氟甲基鳥氨酸為二氟甲基鳥氨酸鹽酸鹽單水合物(亦即CAS ID: 96020-91-6)。術語「二氟甲基鳥氨酸」及「DFMO」在本文中可互換地使用。二氟甲基鳥氨酸及DFMO之其他同義語包括：α-二氟甲基鳥氨酸、2-(二氟甲基)-DL-鳥氨酸、2-(二氟甲基)鳥氨酸、DL-α-二氟甲基鳥氨酸、
N-
二氟甲基鳥氨酸、奧尼迪(ornidyl)、αδ-二胺-α-(二氟甲基)戊酸及2,5-二胺-2(二氟)戊酸。 如本文所用，關於指定組分「基本上游離」在本文中用於意謂指定組分中無一者有目的地調配入組合物中及/或僅作為污染物或以痕量存在。由組合物之任何非預期污染產生的指定組分總量因此遠低於0.05%，較佳低於0.01%。最佳為用標準分析方法未偵測到指定組分之量的組合物。 術語「固定劑量組合」或「FDC」係指以單一劑量單元(例如錠劑或膠囊)形式呈現且因此投與之經界定劑量之兩種藥物或活性成分組合；進一步如本文所用，「游離劑量組合」係指同時投與但呈兩種不同劑量單元形式之兩種藥物或活性成分組合。 「粒化」係指將粉末粒子聚結成含有活性醫藥成分之較大顆粒的方法。「乾式粒化」係指包含不將液體添加至粉末起始材料、攪動且乾燥以得到固體劑型之步驟的任何方法。所得粒化藥品可進一步處理成各種最終劑型，例如膠囊、錠劑、粉片、凝膠、口含錠等。 儘管本發明支持指僅替代及「及/或」之定義，但除非明確指示為指僅替代或替代相互排斥，否則術語「或」在申請專利範圍中用於意謂「及/或」。如本文所用，「另一」可意謂至少第二個或更多個。 如本文所使用，術語「患者」或「個體」係指活的哺乳動物生物體，諸如人類、猴、母牛、綿羊、山羊、狗、貓、小鼠、大鼠、天竺鼠或其轉殖基因種類。在某些實施例中，患者或個體為靈長類。人類患者之非限制性實例為成年人、青少年、嬰兒及胎兒。 如本文一般所使用，「醫藥學上可接受」係指在合理的醫學判斷範疇內，適合與人類及動物之組織、器官及/或體液接觸而無過度毒性、刺激、過敏性反應或其他問題或併發症，與合理益處/風險比相稱的彼等化合物、材料、組合物及/或劑型。 「藥學上可接受之載劑」、「藥物載劑」或僅「載劑」為與涉及運載、遞送及/或傳輸化學劑之活性成分藥物一起調配的醫藥學上可接受之物質。藥物載劑可用於改良藥物之遞送及有效性，包括例如控制釋放技術以調整藥物生物可用性、減少藥物代謝及/或降低藥物毒性。某些藥物載劑可增加藥物遞送至特定目標位點之有效性。載劑之實例包括：脂質體、微粒(例如由聚(乳酸-共-乙醇酸)酸製成)、白蛋白微粒、合成聚合物、奈米纖維、奈米管、蛋白質-DNA複合物、蛋白質共軛物、紅血球、病毒顆粒及樹枝狀聚合物。 如本文所定義，術語「物理上分離」係指含有經調配使得彼此不在同一載劑中混合但分離之組分a)及b)的醫藥口服固定劑量組合。此分離有助於最小化兩種組分之間尤其在其釋放時的相互作用。通常物理分離意謂兩種組分a)及b)存在於不同區室，諸如層中，或呈調配物之不同實體形式呈現，諸如顆粒或細粒。兩種組分a)及b)不必要進一步由額外層或包衣分離，儘管此視情況可為合適的。在一個劑型中兩種組分a)及b)之此物理分離可藉由此項技術中已知的各種方式達到。在一個實施例中，此藉由將各別組分a)及b)調配入分離層，例如多層或雙層調配物中達到。本文描述此類調配技術之特定實例。 術語「黏附」係指顆粒黏附至包括在衝頭面上之字母、標識或設計內的壓錠機衝頭面。 術語「頂裂」係指來自錠劑主體之錠劑之頂蓋或頂部的裂口或裂縫。頂裂可由在壓縮期間推出空氣時遷移的不可壓縮精細粒子導致。 術語「易脆性」在本文中係指壓縮之後錠劑碎裂、破碎或斷裂的趨勢。其可由多個因素導致，包括不良的錠劑設計(過於銳利的邊緣)、低水分含量、不充足的黏合劑等。在一些態樣中，錠劑樣品之易脆性根據重量損失%給與(亦即表示為初始樣品重量之百分比的重量喪失)。一般而言，不超過1%之最大重量損失對於大部分錠劑而言視為可接受的。 如本文所用，術語「釋放」係指使醫藥口服固定劑量組合與流體接觸且該流體將藥物傳輸到劑型外而進入包圍該劑型之流體中的方法。患者中藉由給與劑型展現的遞送速率及遞送持續時間之組合可描述為其活體內釋放曲線。劑型之釋放曲線可展現釋放之不同速率及持續時間且可為連續的。連續釋放曲線包括一或多種活性成分以恆定或可變速率連續釋放的釋放曲線。當具有不同釋放曲線之兩種或更多種組分合併於一個劑型中時，兩種組分之所得個別釋放曲線與僅具有該等組分中之一者的劑型相比可相同或不同。因此，兩種組分可影響彼此的釋放曲線，由此導致各個別組分的釋放曲線不同。 二組分劑型可展現彼此相同或不同的兩種組分之釋放曲線。各組分具有不同釋放曲線之二組分劑型之釋放曲線可描述為「異步」。此類釋放曲線涵蓋(1)不同的連續釋放，其中較佳地組分b)以比組分a)更慢的速率釋放，及(2)曲線，其中組分a)及b)中之一者，較佳為組分b)連續釋放，且組分a)及b)中之另一者，較佳為組分a)經調節以伴隨時間延遲連續釋放。一種藥物之兩種釋放曲線組合亦為可能的(例如50%藥物連續釋放且50%相同藥物伴隨時間延遲連續釋放)。 立即釋放：出於本申請案之目的，立即釋放調配物為展示活性物質之釋放的調配物，其不藉由特定調配物設計或製造方法而經有意地調節。 調節釋放：出於本申請案之目的，調節釋放調配物為展示活性物質之釋放的調配物，其藉由特定調配物設計或製造方法而經有意地調節。此調節釋放可通常藉由延遲組分中之一者或兩者(較佳為組分a))之釋放時間獲得。通常出於本發明之目的，調節釋放係指釋放超過5 h，諸如釋放超過3 h或甚至更短。如本文所用，調節釋放意謂涵蓋兩種組分隨時間推移之不同的連續釋放，或延遲釋放，其中該等組分中之一者，較佳為組分a)僅在滯後時間之後釋放。此類調節釋放形式可藉由向原料藥或含有原料藥之核心施加釋放調節包衣，例如擴散包衣，或藉由形成包埋原料藥之釋放調節基質來製備。 術語「錠劑」係指呈任何形狀之小型基本上固體丸粒形式的藥理學組合物。錠劑形狀可為圓柱形、球形、長方形、囊狀或不規則的。術語「錠劑組合物」係指包括於錠劑中之物質。「錠劑組合物成分」或「錠劑成分」係指包括於錠劑組合物中的化合物或物質。此等可包括(但不限於)活性劑及任何賦形劑以及低熔點化合物及水溶性賦形劑。 以上定義替代以引用之方式併入本文中的參考中任一者中之任何有衝突的定義。然而，事實上界定某些術語不應視為表明未經界定之任何術語為不確定的。確切而言，所使用之所有術語咸信描述本發明使得一般熟習此項技術者可理解範疇且實踐本發明。 本文中所用之單位縮寫包括結果平均值(ar)、千克力(kp)、千牛頓(kN)、百分比重量/重量(%w/w)、磅每平方吋(psi)、相對濕度(RH)、色差δE (dE)及旋轉每分鐘(rpm)。
VIII. 實例
包括以下實例以展示本發明之較佳實施例。熟習此項技術者應瞭解，以下實例中所揭示之技術代表本發明人發現在本發明實施中起良好作用之技術，且因此可視為構成其較佳實施方式。然而，根據本發明，熟習此項技術者應瞭解，在不背離本發明之精神及範疇的情況下可對所揭示之特定實施例作出許多改變且仍獲得相同或類似結果。
實例 1- 研發二氟甲基鳥氨酸 HCl 及 舒林酸組合表
在包含二氟甲基鳥氨酸HCl及舒林酸之固定劑量組合(FDC)錠劑的研發方法中，測試數種調配物(表1)。測試之參數包括錠劑崩解時間、錠劑硬度及錠劑易脆性百分比。 調配物I藉由將1/3之矽化MCC (PROSOLV®)與二氟甲基鳥氨酸HCl在1夸脫v形摻合器中首次混合而製造成900 mg錠劑。隨後，舒林酸及1/3之矽化MCC (PROSOLV®)在聚乙烯(PE)袋中進行預混合且與膠態二氧化矽(CARBOSIL®)及預膠凝玉米澱粉(STARCH 1500®)一起添加至摻合器中。 PE袋用剩餘的1/3之矽化MCC (PROSOLV®)沖洗且添加至摻合器中。在添加手工篩檢之硬脂酸鎂之前，混合物以約25 rpm摻合10分鐘且隨後再次摻合3分鐘。發現此調配物有一些黏附在衝頭表面上且導致粗糙的錠劑表面。因此，對於調配物II，硬脂酸鎂自0.5%增加至1%且矽化MCC自38.57%減少至38.07%。 調配物II係藉由在PE袋中預混合CARBOSIL®、STARCH 1500®及舒林酸而製造成900 mg錠劑。隨後，½之PROSOLV®及二氟甲基鳥氨酸HCl與預混物一起添加至8夸脫v形摻合器中。剩餘的½之PROSOLV®用於沖洗PE袋且添加至摻合器中。混合物以約25 rpm摻合10分鐘。接著混合物自摻合器移出，且經由Comill 039R篩網除塊(delumped)，接著返回至v形摻合器中再摻合10分鐘。隨後，經由30個網目(亦即590 µm)篩網手工篩檢之硬脂酸鎂藉由手動混合添加至v形摻合器中且以約25 rpm摻合混合物3分鐘。將混合物在Key Model BBTS 10工作台上壓縮成錠劑。測定所得錠劑具有約29-32秒之崩解時間、在4分鐘時0.077%易脆性及在8分鐘時0.17392%易脆性以及約28 kp之硬度(表1)。錠劑接著使用O'Hara Labcoat，12''盤經膜包覆2.913重量%的OPADRY® Yellow (Colorcon)，產生927 mg錠劑。膜包覆錠劑具有約36.0-42.1 kp之硬度及1分27秒至1分53秒之崩解時間。 調配物III係藉由在PE袋中預混合CARBOSIL®、PROSOLV®之部分2及舒林酸而製造成650 mg錠劑。隨後，½之PROSOLV®部分1及二氟甲基鳥氨酸與預混物一起添加至8夸脫v形摻合器中。剩餘的½之PROSOLV®部分1用於沖洗PE袋且添加至v形摻合器中。混合物以約25 rpm摻合10分鐘。接著混合物自摻合器移出，且經由Comill 039R篩網除塊，接著返回至v形摻合器中再摻合10分鐘。隨後，經由30個網目(亦即590 µm)篩網手工篩檢之硬脂酸鎂藉由手動混合添加至v形摻合器中且以約25 rpm摻合混合物3分鐘。將混合物在Key Model BBTS 10工作台上壓縮成錠劑。測定所得錠劑具有約51-57秒之崩解時間、在4分鐘時0.2607%-0.3373%易脆性及在8分鐘時0.8988%-1.008%易脆性以及約13 kp之硬度。錠劑接著使用O'Hara Labcoat，12''盤經膜包覆2.913重量%的OPADRY® Yellow (Colorcon)，產生669.5 mg錠劑。膜包覆錠劑具有約36.0-42.1 kp之硬度及1分27秒至1分53秒之崩解時間。此調配物之重量自900 mg降低至650 mg且STARCH 1500®替換為PROSOLV®以增加錠劑強度。然而，在易脆性測試期間以及在膜包覆過程期間觀測到頂裂。 調配物IV使用與調配物III相同的方法製造成700 mg錠劑。測定所得錠劑具有1分10秒至約1分34秒之崩解時間、在4分鐘時0.1424%-0.1567%易脆性及在8分鐘時0.3186%-0.5166%易脆性以及約20 kp硬度。錠劑接著使用O'Hara Labcoat，12''盤經膜包覆有2.913重量%的OPADRY® Yellow (Colorcon)，產生721 mg錠劑。膜包覆錠劑具有1分43秒至2分7秒之崩解時間。在此調配物中，增加PROSOLV®之量且表格重量自650 mg增加至700 mg。儘管在易脆性測試期間未觀測到頂裂，但三個錠劑在膜包覆期間確實具有頂裂。
表 1 ： 二氟甲基鳥氨酸 HCL 及 舒林酸固定劑量組合錠劑之調配物 I-IV 。 表 2 ：二氟甲基鳥氨酸 HCL 及 舒林酸固定劑量組合錠劑之例示性調配物。 表 3 ：例示性錠劑製造參數。 表 4 ：用於實例 1 中所描述之調配物的材料。 實例 2- 研發調配物 IV
自實例1進一步測試調配物IV以測定參數可變化以預防頂裂及黏附。所測試之第一參數為壓縮力及以約5-15%之壓縮力添加預壓縮力(表5)。為了評價達到約20 kp硬度而用於調配物IV 700 mg錠劑之壓縮力及預壓力，進行數個試驗。在第一個試驗中，使用設備C製造調配物IV 700 mg錠劑之最終摻合物(表9)。製造方法涉及在PE袋中預混合CARBOSIL®、PROSOLV®之部分2及舒林酸。隨後，½之PROSOLV®部分1及二氟甲基鳥氨酸與預混物一起添加至10夸脫v形摻合器。剩餘的½之PROSOLV®部分1用於沖洗PE袋且添加至v形摻合器。混合物以約7 rpm摻合35分鐘。接著自摻合器移除混合物，且將其經由Frewitt TC150 1.0 mm篩網進行粉碎，接著返回至v形摻合器再次摻合35分鐘。隨後，硬脂酸鎂經由500 µm篩網進行手工篩檢，且添加至v形摻合器藉由以7 rpm手動混合10分鐘以獲得最終摻合物。壓縮步驟在裝備有五個17.5x8 mm雕刻及鍍鉻之衝頭的Courtoy Modul P製錠壓力機上進行。設定參數以便獲得在17.0 kp與22.5 kp之間的硬度。發現在無預壓力的情況下，觀測到頂裂。然而，使用預壓力增加硬度且避免頂裂(表10)。另外，由預壓力形成之錠劑更加抗磨損(亦即較低易脆性)。另外，用於實例1中之Key BBTS 10工作台製錠壓力機之16.5x8 mm衝頭似乎更加易於磨損。
表 5 ：測試調配物 IV 之 壓縮參數。
NA：未施加 (*)在無預壓縮的情況下可達到的最大硬度 在第二個試驗中，改變衝頭表面以測定其對調配物IV錠劑之影響(表11)。在此試驗中使用設備B製造調配物IV 700 mg錠劑之最終摻合物。製造方法涉及在PE袋中預混合CARBOSIL®、PROSOLV®之部分2及舒林酸。隨後，½之PROSOLV®部分1及二氟甲基鳥氨酸與預混物一起添加至10夸脫v形摻合器。剩餘的½之PROSOLV®部分1用於沖洗PE袋且添加至v形摻合器。以每分鐘約30個循環摻合混合物8分30秒。接著自摻合器移除混合物，且將其經由CMA 1.0 mm篩網進行粉碎，接著返回至v形摻合器再次摻合8.5分鐘。隨後，經由500µm篩網手工篩檢硬脂酸鎂，且將其添加至v形摻合器藉由以每分鐘30個循環手動混合2分20秒以獲得最終摻合物。壓縮步驟在裝備有兩個17.5x8 mm雕刻及抗黏附鍍鉻之衝頭的Korsch XL100製錠壓力機上進行。預壓力設定為5-10%之約30 kN主壓縮力。亦測試數個不同衝頭表面，包括鉻、碳、鎢及鐵氟龍(Teflon)相對於不鏽鋼。在一些實施例中，鐵氟龍可用於減少黏附。 為了避免黏附，測試數個額外變量，且在壓縮剛開始時施加高約束。既不用1.1%硬脂酸鎂潤滑亦不將70次旋轉增加至140次旋轉的潤滑次數以防止黏附(表11及表12)。然而，將硬脂酸鎂之比率增加至1.5%確實預防黏附(表12)以及錠劑硬度稍微下降約20%，但在4分鐘之後易脆性小於0.1%仍極低。在用兩種類型之裝備有不同種類斷裂線(17×9 mm及16.5×7 mm)的衝頭時，可斷裂性結果順應所測試之衝頭。因此，將硬脂酸鎂增加至1.5%防止黏附且預壓縮防止調配物IV頂裂。
表 6 ：試驗 1 及 試驗 2 中 調配物 IV 之批次重量。 表 7 ：調配物 IV 之 硬脂酸鎂之變化量。
(*)在稀釋以增加硬脂酸鎂百分比之後所獲得的配方。API濃度因此稍微低於目標。
表 8 ： 調配物 IV 之包衣。 表 9 ：用於研發調配物 IV 之 設備。 表 10 ：測試預壓縮力對調配物 IV 之影響的第一次試驗參數及結果。 表 11 ： 測試衝頭表面對調配物 IV 之影響的第二次試驗參數及結果。 表 12 ： 測試最終混合持續時間及硬脂酸鎂對調配物 IV 之影響的第二次試驗參數及結果。
(*)在10個錠劑上
表 13 ： 測試壓縮參數對調配物 IV 之影響的試驗參數及結果。
(*)在30個錠劑上 (**)在10個錠劑上 NA：未施加 測試調配物IV組合錠劑、二氟甲基鳥氨酸單一錠劑及舒林酸單一錠劑之穩定性。對調配物IV錠劑之穩定性分析在6個月時使用卡爾費歇爾滴定法(Karl Fischer titration method)測定含水量進行(圖1)。圖1中，展示調配物IV之組合錠劑與二氟甲基鳥氨酸單一錠劑相比歷經六個月後具有更低的吸水量。水可影響藥物效能及藥物溶解；例如水可藉由水解增加藥物降解速率(Gerhardt，2009)。因此，在一些實施例中，本文提供之組合錠劑比單一活性劑錠劑中之一者或兩者更加穩定。 最終，亦測試調配物IV之溶解曲線。溶解研究在50 mM磷酸鈉緩衝液介質中以7.2 pH使用槳葉攪拌元件以75 rpm (USP ＜711＞溶解設備II (槳葉))進行(圖2A至圖2B)。驗證方法關於溶解二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之水準II。在活性醫藥成分二氟甲基鳥氨酸及舒林酸自身與溶解介質、磷酸鹽緩衝溶液或賦形劑之間未觀測到相互干擾。出人意料地，觀測到與單一藥劑錠劑相比，調配物IV之固定劑量組合具有重疊的活體外溶解曲線。
實例 3- 藥物賦形劑及包衣相容性
進行關於二氟甲基鳥氨酸HCl/舒林酸組合錠劑之非cGMP藥物賦形劑相容性研究。使用一系列樣品評價外形、HPLC分析及XRPD特性。測試包括PVP、HPMC、乳糖、EXPLOTAB
TM
、Ac-Di-Sol®、PROSOLV®、STARCH 1500®及OPADRY® Yellow之賦形劑。用於賦形劑相容性製備的樣品除了二氟甲基鳥氨酸HCl:舒林酸製劑為5:1且二氟甲基鳥氨酸HCl:舒林酸:H
2
O製劑為約6:1:0.3以外，均為API與賦形劑之1:1物理混合物。大部分樣品之總質量為約750 mg。製備涉及將組分稱重入20cc閃爍小瓶中，封閉且渦旋約30秒。樣品接著儲存於40℃/75% RH穩定性腔室中四週。鬆散地緊固小瓶上之蓋，且將小瓶儲存於腔室中避光。 外形觀測藉由視覺檢查用於HPLC分析而製備之小瓶進行。用含50%乙腈之緩衝液(50 mM磷酸鹽緩衝液pH 2.55)萃取賦形劑相容性樣品。僅含有舒林酸之樣品藉由稱重出樣品部分(約150 mg)且以預定體積進行萃取使得二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之最終濃度分別為9.5 mg/mL及0.1 mg/mL來製備。相容性樣品之其餘部分藉由使用預定體積之萃取溶劑使得二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之最終濃度與以上大約相同進行定量轉移製備。使用能夠偵測活性劑、二氟甲基鳥氨酸及舒林酸之方法分析賦形劑相容性樣品(圖4A)。該方法採用具有195 nm紫外線(UV)偵測之梯度逆相HPLC。 XRPD分析在具有布拉格-布倫塔諾組態(Bragg-Brentano configuration)之Bruker AXS D8 Advance系統上使用CuKα輻射進行。在室溫下使用以下參數分析樣品：40 kV；40 mA；1°發散度；及防散射狹縫；以連續模式進行量測方法，2 - 40°2Θ，0.05°梯度及1秒/步驟時間。使用九個位置自動取樣器配件中之旋轉、頂部填充鋼鐵樣品固持器分析3 mg與25 mg之間樣品。使用可追蹤的標準物校準系統。結果展示於圖4B至圖4C中。 具有PVP K30之二氟甲基鳥氨酸HCl在2週樣品中開始展示潮濕，且在4週後變成液體。具有PVPK30之舒林酸在2週後展示樣品黏附且在4週後繼續。 PVPK30賦形劑僅在2週樣品中開始展示濕氣且在4週後變成液體。觀測到二氟甲基鳥氨酸HCl樣品具有相同現象，但未觀測到舒林酸樣品具有相同現象。所測試之大部分樣品的HPLC分析結果歷經不同的時間點未展示獨特的趨勢(增加或減少)。儘管多個樣品具有異常較低的分析值，但分析水準歷經4週時段展示更多增加趨勢或保持相對恆定。觀測到舒林酸/二氟甲基鳥氨酸ProSolv SMCC90樣品在分析結果中具有最高變化。在4週時間點處之分析值比初始分析結果高10.0%。此變化可歸因於在不同時間點下方法(未驗證)及樣品一致性。儘管驗證方法之可接受的隨機分析誤差為2%，但此方法之變化性為未知的。除一些樣品以外，歷經不同時間點測試之樣品中之每一者的分析值在分析方法之正常可接受的2%隨機誤差內。在所測試之受應力條件下API、二氟甲基鳥氨酸及舒林酸不存在獨特的趨勢。此研究結果表明API (二氟甲基鳥氨酸HCl/舒林酸)均與潛在的賦形劑相容。 藥物賦形劑相容性研究藉由XRPD分析進行以測定針對二氟甲基鳥氨酸HCl/舒林酸組合產物之具有潛在調配物賦形劑的API之結晶度。 XRPD結果展示在40℃/75% RH下在四週之後API與賦形劑之間無相互作用。此指示API (二氟甲基鳥氨酸HCl/舒林酸)均與潛在賦形劑相容。 包衣試驗在錠劑上進行以測定在1個月及3個月時在25℃/60% RH或40℃/75% RH之水分含量下對穩定性的影響。包衣包括以3%或4%重量增加的OPADRY® Yellow (Colorcon，03B92557)、OPADRY® White (Colorcon Y-1-7000)、OPADRY® II White (Colorcon 85F18422)及OPADRY® Clear (Colorcon YS-3-7413)。採取顏色目測以評價在穩定錠劑與初始包衣錠劑之間的總體色差或DE。 使用Datacolor Spectraflash 600系列分光光度計測試錠劑顏色。使用Commission Internationale de l'Eclairage (CIE) L* a* b*系統分析資料。在L* a* b*系統中，顏色表示為三維空間中之座標。亮度及暗度繪製在L*軸上，其中L=100代表純白色且L=0表示純黑色。 a*及b*軸分別代表紅色/綠色及藍色/黃色之兩種互補顏色對。藉由以幾何形狀繪製顏色，在兩種顏色之間的差值(總體色差=E*)可藉由使用以下等式計算兩個點之間的距離來測定。 DE* = [(L*1 - L*2)2 + (a*1 - a*2)2 + (b*1 - b*2)2]1/2 使用Datacolor，分析在各種包衣調配物之各重量增加下的各錠劑。 DE值愈接近零，則所測試錠劑顏色愈接近顏色標準物(初始樣品)。白色包衣(通過QC測試)之Colorcon標準物光譜將為小於1.5之DE值。所有具有白色膜衣之穩定性樣品超過1.5 DE，且因此將不能通過Colorcon標準QC測試(表14)。透明包衣錠劑亦遠高於值1.5。
表 14 ：處於穩定性之包衣錠劑之 DE 值。
最佳DE結果發現為包覆有黃色調配物之錠劑。 DE值遠低於1.5。 1或低於1之DE值(總體色差)視為人眼不可感知的。黃色包衣之Colorcon典型內部規格傾向於為2.5-3之DE值。因此，OPADRY® Yellow用於包覆組合錠劑。
實例 4- 固定共調配二氟甲基鳥氨酸 / 舒林酸之生物等效性研究
進行預備試驗以比較在經口投與含有二氟甲基鳥氨酸/舒林酸之共調配錠劑之後，與在空腹條件下正常健康個體中單獨服用或共投與之含有二氟甲基鳥氨酸或舒林酸之個別錠劑相比，血漿中二氟甲基鳥氨酸、舒林酸舒林酸硫化物及舒林酸碸之藥物動力學參數。此研究之第二目標為測定與在正常健康個體中單獨服用或共投與個別調配物相比，二氟甲基鳥氨酸/舒林酸共調配錠劑之安全性及耐受性。 研究包含十二個個體，雄性或雌性，至少18歲但不大於60歲。主要包括準則為：輕度吸菸者、不吸菸者或前吸菸者；身體質量指數(BMI) ≥18.50 kg/m
2
且＜30.00 kg/m
2
；所進行之12導聯ECG (在ECG之前個體必須處於仰臥位置10分鐘，且在所有所請求血液抽取之前進行ECG)中未發現臨床上顯著異常；雌性個體懷孕測試陰性；及根據病史、全面身體檢查(包括生命體征)及實驗室測試(一般生物化學、血液學及驗尿)為健康的。 個體在包含以下之四個處理組中經處理： • 處理1：共調配二氟甲基鳥氨酸375 mg/舒林酸75 mg錠劑(2 x 375/75 mg錠劑)之單一750/150 mg劑量 • 處理2：二氟甲基鳥氨酸250 mg錠劑(3 x 250 mg錠劑)之單一750 mg劑量 • 處理3：單一150 mg劑量舒林酸150 mg錠劑(1 x 150 mg錠劑) • 處理4：同時投與舒林酸150 mg錠劑(1 x 150 mg錠劑)之單一150 mg劑量及二氟甲基鳥氨酸250 mg錠劑(3 x 250 mg錠劑)之單一750 mg劑量 指派各個體歷經28天時段接受4種不同的處理。指派處理之單一口服劑量在各研究時段中在空腹條件下投與。處理投與由7個曆日之清除期(wash-out)間隔開。各個體在80個時刻收集總計120個血液樣本。第一次血液樣本在藥物投與之前收集，同時其他血液樣本在藥物投與0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、8、10、12、16、24、36及48小時之後收集。分析物藉由具有MS/MS偵測之HPLC量測。分析範圍為二氟甲基鳥氨酸35.0 ng/mL至35000.0 ng/mL、舒林酸30.0 ng/mL至15000.0 ng/mL以及舒林酸碸及舒林酸硫化物10.0 ng/mL至8000.0 ng/mL。經由評定不良事件(AE)、標準實驗室評價、生命體征及ECG評價安全性。
藥物動力學參數之數學模型及統計方法
：主要吸收及分佈參數使用非室方法以對數線性末期假設計算。梯形規則用於評估曲線下面積。末期評估基於最大化確定係數。此試驗之藥物動力學參數為C
max
、T
max
、AUC
0-T
、AUC
0-∞
、AUC
0-T/∞
、λ
Z
及T
half
。統計分析基於藥物動力學參數之參數ANOVA模型；用於C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何方法比率之兩側90%信賴區間基於ln轉換資料；T
max
經排序轉換。 ANOVA模型使用順序、時段及處理之固定因素；隨機因素為順序內嵌套之個體。 藥物動力學參數包括C
max
(最大觀測血漿濃度)；T
max
(最大觀測血漿濃度之時間，若其在超過一個時間點出現，則T
max
定義為具有此值之第一時間點)；T
LQC
(最後觀測到之可定量血漿濃度之時間)；AUC
0-T
(使用線性梯形方法自0至T
LQC
計算之血漿濃度時間曲線下累計面積)；AUC
0-∞
(血漿濃度時間曲線趨近無限下面積，計算為AUC
0-T
+ C
LQC
/λz，其中C
LQC
為時間T
LQC
下之估計濃度)；AUC
0-T/∞
(AUC
0-T
相對於AUC
0-∞
之相對百分比)；T
LIN
(對數線性消除期開始時的時間點)；λz (明顯的消除速率常數，藉由對數濃度對時間曲線之末端線性部分之線性回歸估計)；及T
half
(最終消除半衰期，計算為ln(2)/ λz)。
表 15 ：二氟甲基鳥氨酸之藥物動力學參數
*中值(範圍)
表 16 ：舒林酸之藥物動力學參數
*中值(範圍) **用於AUC
0-∞
、λ
Z
及T
half
之n=7 ***用於AUC
0-∞
、λ
Z
及T
half
之n=8
用於生物等效性之準則
：二氟甲基鳥氨酸之統計推斷基於生物等效性方法，使用幾何LSmeans之比率，其中自針對ln轉換參數C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之處理1相對於處理2、處理2相對於處理4及處理1相對於處理4之間的差值指數計算之對應90%信賴區間均與80.00%至125.00%範圍進行比較。舒林酸之統計推斷基於生物等效性方法，使用幾何LSmeans之比率，其中針對ln轉換參數C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之處理1相對於處理3、處理3相對於處理4及處理1相對於處理4之間的差值指數計算之對應90%信賴區間均與80.00%至125.00%範圍進行比較。相同準則應用於舒林酸硫化物及舒林酸碸，且結果呈現為相當治療性結果之支持性證據。
安全性結果
：總計12名個體進入研究，且所有個體接受研究下的4個處理。參與此研究的任何個體未報導嚴重不良事件(SAE)及死亡。無個體出於安全原因由研究者撤出。參與此研究的12名個體中4名(33%)個體報導總計4個處理引發不良事件(TEAE)。此等事件中，在投與處理1之後出現2個，在處理3投與之後出現1個且在處理4投與之後出現剩餘的一個。以處理2給藥之個體確實未報導任何TEAE。在研究期間所經歷之一半TEAE視為與藥物投與有關。 此研究中之TEAE具有低發生率；每處理組1名個體(8%)經歷TEAE。在處理4投與後報導口乾，在處理3投與後報導上呼吸道感染且在處理1投與後各報導血管穿刺位點擦傷及頭痛。 TEAE發生率對於用處理3及處理4 (8%)給藥之個體相同，且稍微低於用處理1 (17%)給藥之個體報導的TEAE發生率。報導藥物相關TEAE具有與用處理1及處理4 (8%)給藥之個體相同的發生率，然而用處理3給藥之個體未經歷藥物相關TEAE。在研究期間經歷之TEAE認為在強度上為輕度(3/4，75%)及中等(1/4，25%)。個體中無一者在研究期間經歷嚴重的TEAE。 所有異常臨床實驗室值或多或少地高於或低於其參考範圍，且無一者由研究者視為臨床上顯著的。另外，在此研究中個體之生命體征及ECG中無臨床上顯著異常。所有體檢判定為正常。總體而言，所測試藥物為總體上安全的且此研究中所包括個體對所測試藥物具有良好耐受性。
在處理 1 與處理 2 之間的二氟甲基鳥氨酸比較
：藥物動力學結果展現二氟甲基鳥氨酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間均包括在80.00%至125.00%範圍內。此比較結果指示當處理1及處理2在空腹條件下投與時，滿足生物等效性準則，且展現二氟甲基鳥氨酸生物可用性在含有二氟甲基鳥氨酸/舒林酸之共調配錠劑與僅含有二氟甲基鳥氨酸之錠劑之間相當。
表 17 ：在處理 1 相對於處理 2 中二氟甲基鳥氨酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL
在處理 2 與處理 4 之間的二氟甲基鳥氨酸比較
：藥物動力學結果展現二氟甲基鳥氨酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間均包括在80.00%至125.00%範圍內。此比較結果指示當處理2及處理4在空腹條件下投與時，滿足生物等效性準則，且展現共投與舒林酸與二氟甲基鳥氨酸之個別錠劑不影響單獨投與時之二氟甲基鳥氨酸的生物可用性。
表 18 ：在處理 2 相對於處理 4 中二氟甲基鳥氨酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL
在處理 1 與處理 4 之間的二氟甲基鳥氨酸比較
：藥物動力學結果展現二氟甲基鳥氨酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間均包括在80.00%至125.00%範圍內。此比較結果指示當處理1及處理4在空腹條件下投與時滿足生物等效性準則，且展現用於含有二氟甲基鳥氨酸/舒林酸之共調配錠劑與共投與含有各二氟甲基鳥氨酸或舒林酸之個別錠劑的二氟甲基鳥氨酸之生物可用性類似。
表 19 ：在處理 1 相對於處理 4 中二氟甲基鳥氨酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL
在處理 1 與處理 3 之間的舒林酸比較
：藥物動力學結果展現舒林酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間(90CI)並非均包括在80.00%至125.00%範圍內。C
max
之90CI之下限低於80.00%限度。由於比率在所有PK參數之80.00%至125.00%範圍內，所以個體內變化性可說明C
max
之下限超出BE範圍之情況。關於此比較所獲得之結果展現用於此預備試驗中之樣品大小不足以展現共調配錠劑及單獨舒林酸的舒林酸生物可用性之等效性。
表 20 ：在處理 1 相對於處理 3 中舒林酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL **對於AUC
0-∞
，n=7 基於該等資料，併入所有比較之間變化性的個體內改變，C
max
為約24.6%，且AUC
0-T
為約12%。統計上，鑒於幾何LSmeans之預期處理1與處理3比率感覺應在90%及110%內，估計滿足80.00%至125.00%生物等效性範圍(統計先驗功效為至少80%)之個體數目對於未來關鍵研究將為約54。包括60名個體應足以說明關於所估計個體內CV的漏失及變化的可能性。
在處理 3 與處理 4 之間的舒林酸比較
：藥物動力學結果展現舒林酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間均包括在80.00%至125.00%範圍內。此比較結果指示當處理3及處理4在空腹條件下投與時，滿足生物等效性準則，且展現共投與含有二氟甲基鳥氨酸或舒林酸之個別錠劑不影響單獨投與時的舒林酸生物可用性。
表 21 ：在處理 3 相對於處理 4 中舒林酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL **對於AUC
0-∞
，n=7
在處理 1 與處理 4 之間的舒林酸比較
：藥物動力學結果展現舒林酸之C
max
、AUC
0-T
及AUC
0-∞
之幾何LSmean比率及對應90%信賴區間(90CI)並非均包括在80.00%至125.00%範圍內。 C
max
之90CI之下限低於80.00%限度。由於比率在所有PK參數之80.00%至125.00%範圍內，所以個體內變化性可說明C
max
之下限超出BE範圍之情況。關於此比較所獲得之結果展現用於此預備試驗中之樣品大小不足以展現共調配錠劑及共投與含有二氟甲基鳥氨酸或舒林酸之個別錠劑的舒林酸生物可用性之生物等效性。
表 22 ：在處理 1 相對於處理 4 中舒林酸之統計分析概述
* C
max
單位為ng/mL且AUC
0-T
及AUC
0-∞
單位為ng·h/mL **對於AUC
0-∞
，n=8 基於該等資料，併入所有比較之間變化性的個體內改變，C
max
為約24.6%，且AUC
0-T
為約12%。統計上，鑒於幾何LSmeans之預期處理1與處理4比率感覺應在92.5%及107.5%內，估計滿足80.00%至125.00%生物等效性範圍(統計先驗功效為至少80%)之個體數目對於未來關鍵研究將為約36。包括40名個體應足以說明關於所估計個體內CV的漏失及變化的可能性。
* * *
本文中所揭示及主張之所有組合物及/或方法均可根據本發明製備及執行，無需過多實驗。雖然已根據較佳實施例描述本發明之組合物及方法，但熟習此項技術者應清楚變化可在不背離本發明之概念、精神及範疇的情況下應用於本文所述之方法中及方法之步驟或步驟順序中。更特定言之，顯而易知在化學上及生理上相關之某些藥劑可取代本文所描述之藥劑，同時獲得相同或類似結果。對熟習此項技術者顯而易見的所有該等類似取代及修改視為在由隨附申請專利範圍所定義之本發明之精神、範疇及概念內。
參考文獻
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