TWI734736B

TWI734736B - Ｆｘｒ受體激動劑

Info

Publication number: TWI734736B
Application number: TW106102742A
Authority: TW
Inventors: 吳永謙
Original assignee: 大陸商軒竹生物科技有限公司
Priority date: 2016-02-01
Filing date: 2017-01-24
Publication date: 2021-08-01
Also published as: WO2017133521A1; TW201728581A; CN108602811B; CN108602811A

Abstract

本發明提供下述通式(1)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，本發明還提供上述化合物的製備方法以及在製備用於預防和/或治療非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤的藥物中的用途。

其中，R¹、R²、R³、R⁴、m、n、W、A、Z、E、F、X、Y如說明書中所定義。

Description

FXR受體激動劑

本發明涉及FXR受體激動劑、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物，含有這些化合物的藥物製劑，以及該化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物在製備治療和/或預防由FXR受體介導的非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤等相關疾病的藥物中的用途。

FXR受體(法尼醇X受體)屬於配體啟動轉錄因子核受體家族成員，具有典型的核受體結構，即胺基末端高度保守的DNA結合區(DBD)、羧基末端配體結合區(LBD)、胺基末端配體非依賴性轉錄啟動功能區(AF1)、羧基末端配體依賴性轉錄啟動功能區(AF2)和腳鏈區。FXR可與視黃醇類X受體(RXR)形成異二聚體，當配體與FXR的LBD區域結合後，FXR構象可發生改變，DNA的結合區結合到靶基因啟動子的FXR反應元件(IR-1)上面，釋放輔抑制因數(如NCOR)，招募了輔啟動因數，從而發揮轉錄調控作用。

FXR在多個器官組織中均有表達，包括脂肪組織、肝臟、胃腸道、腎臟等，其中肝臟中表達量最為豐富。FXR信號通路，可直接或間接調節多個下游基因的表達，如BSEP、SHP、 CYP7A1、FGFR4、OSTα/β、SREBP-1C等基因，進而調節多種代謝途徑，如：甘油三酯、膽固醇、血糖及能量穩定性代謝膽酸的代謝，具有治療癌症、非酒精性脂肪肝、代謝紊亂、炎症等疾病的功能。通過抑制膽酸的合成、結合及轉運，調節其代謝，是體內膽酸平衡的主要調節者。

部分天然膽酸類化合物可激動FXR受體，如鵝去氧膽酸(CDCA)、去氧膽酸(DCA)、石膽酸(LCA)及牛磺酸和這些膽酸的甘胺酸結合物。除去天然的化合物，目前國際上研發的FXR激動劑可主要分為兩大類，一類是甾體類，以Intercept公司的奧貝膽酸為代表(obeticholic acid，OCA)，針對非酒精性脂肪肝適應症，處於臨床III期；另一類是新型分子實體，早期研發的化合物如GW4604(WO2000/037077)，雖然具有較強的激動活性，但其對光不穩定且生物利用度較低，另外，Phenex公司研發的PX-104(WO2011020615A1)已轉讓給Gilead公司，目前處於臨床II期研究階段。

但是，目前依然希望能夠開發出高效、低毒、且穩定性較好的新型FXR受體激動劑。

本發明的課題在於提供具有新型分子結構的化合物，其可有效激動FXR受體，提升BSEP及SHP基因表達水準，同時有效抑制CYP7A1基因的表達。另外，為了達到更好的治療效果的目的，更好的滿足市場需求，還希望能夠提供高效、低毒、且穩定性較好的FXR受體激動劑。

具體而言，本發明的目的在於提供一種新型結構的FXR受體激動劑，其具有很好的藥效，為FXR受體激動劑用於治療非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤提供了可能性。

本發明的其他目的在於提供上述FXR受體激動劑的製備方法。

本發明的另一目的在於提供含有上述FXR受體激動劑的藥物組合物和製劑。

本發明的再一目的在於提供上述FXR受體激動劑在製備用於預防和/或治療非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤的藥物中的用途。

本發明人為了實現上述目的持續悉心研究，結果發現下述通式(I)表示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物可有效激動FXR受體，從而完成了本發明。

具體而言，本發明涉及下述技術方案：

方案1、通式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：

其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、鹵素原子、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基胺基、二C1-6烷基胺基、C_1-6烷基硫基、C_1-6烷基羰基、鹵代C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基氧基、C_1-6烷基磺醯基、C_1-6烷基胺基磺醯基、二C_1-6烷基胺基磺醯基、C_1-6烷基磺醯胺基、C_1-6烷基磺醯氧基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；R³選自氫原子，氰基，鹵素原子，硝基，胺基，羥基，羧基，或任選被一個或多個取代基P取代的C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷基、羥基C_1-6烷基、羧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵代C_1-6烷氧基、羥基C_1-6烷氧基、羧基C_1-6烷氧基、C_1-6烷基磺醯基、C_1-6烷基胺基磺醯基、二C_1-6烷基胺基磺醯基、C_1-6烷基磺醯胺基、C_1-6烷基磺醯氧基、3-8元環烷基、3-8元環烷基C_1-6烷基、3-8元雜環基、3-8元雜環基C_1-6烷基；P選自羥基、胺基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基胺基、二C_1-6烷基胺基、鹵代C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷基羰基氧基、C_1-6烷基磺醯基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基、羥基C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷基、羧基C_1-6 烷基、羧基氧基C_1-6烷基、羧基胺基C_1-6烷基、胺基C_1-6烷基、胺基羰基C_1-6烷基、羥基C_1-6烷氧基、鹵代C_1-6烷氧基、羧基C_1-6烷氧基、C_2-8烯基、C_2-8炔基、C_1-6烷基胺基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷基羰基胺基、C_1-6烷基磺醯基、C_1-6烷基磺醯胺基羰基、C_1-6烷基胺基磺醯基、二C_1-6烷基胺基、5-8元雜芳基或3-8元雜環基；W選自CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的芳基、5-8元雜芳基、3-8元環烷基或3-8元雜環基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基胺基、二C_1-6烷基胺基、鹵代C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；E選自CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；F選自不存在、CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；m選自0-3的整數；n選自0-4的整數。

方案2、如方案1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中， R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、鹵素原子、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基硫基、C_1-4烷基羰基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_1-4烷基羰基氧基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基磺醯基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R³選自氫原子，氰基，鹵素原子，硝基，胺基，羥基，羧基，或任選被一個或多個取代基P取代的C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、3-6元環烷基、3-6元環烷基C_1-4烷基、3-6元雜環基、3-6元雜環基C_1-4烷基；P選自羥基、胺基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基氧基、C_1-4烷基磺醯基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、羧基C_1-4烷基、羧基氧基C_1-4烷基、羧基胺基C_1-4烷基、胺基C_1-4烷基、胺基羰基C_1-4烷基、羥基C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、羧基C_1-4烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基胺基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基磺醯胺基羰基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基、5-6元雜芳基或4-7元雜環基；W選自CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；A選自NH、O或S； Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的芳基、5-6元雜芳基、3-6元環烷基或4-7元雜環基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、C_2-6烯基或C_2-6炔基；E選自CH₂、NH、O、S或CO；F選自不存在、CH₂、NH、O或S；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH、O或S；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；m選自0-2的整數；n選自0-3的整數。

方案3、如方案2所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、鹵素原子、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基硫基、C_1-4烷基羰基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基或C_1-4烷氧基C_1-4烷基；R³選自氰基，任選被一個或多個取代基P取代的C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、3-6元環烷基、3-6元環烷基C_1-4烷基、3-6元雜環基或3-6元雜環基C_1-4烷基；P選自羥基、胺基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、羧基C_1-4烷基、羧基氧基C_1-4烷基、羧基胺基C_1-4烷基、胺基C_1-4烷基、胺基羰基C_1-4烷基、羥基C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、羧基C_1-4烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基胺基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基磺醯胺基羰基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基、5-6元雜芳基或5-6元雜環基；W選自CH₂、NH、O、S、SO、SO₂或CO；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基，含1-2個N、O和/或S原子的5-6元雜芳基，5-6元環烷基，或含1-2個N、O和/或S原子的5-6元雜環基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E選自CH₂、NH、O或CO；F選自不存在、CH₂、NH或O；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；m選自0-2的整數； n選自0-3的整數。

方案4、如方案3所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，R³選自氰基，任選被一個或多個取代基P取代的C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基或C_3-6環烷基C_1-4烷基；P選自羥基、胺基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；W選自NH、O或S；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基，或者含1-2個N、O和/或S原子的5-6元雜芳基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：苯并二氫吡咯基、苯并二氫呋喃基、苯并二氫吡喃基、苯并1,3-二氧雜環戊烯基、苯并1,4-二氧雜環己烯基、苯并1,3-二氧雜環己烯基、苯并四氫吡啶基、苯并二氫噁嗪基、苯并四氫吡嗪基、1,2,3,4-四氫喹唑啉基、1,2,3,4-四氫噌啉基、二氫茚基、四氫萘基、四氫萘酮；n選自0-3的整數。

方案5、如方案4所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基、三氟乙基或三氟甲氧基；R³選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、三氟甲基、三氟乙基、三氟丙基、氰基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基甲基、環己基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙炔基、甲胺基、乙胺基、乙醯基、乙醯胺基、甲磺醯基、二甲胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、呋喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

n選自0-2的整數。

方案6、如方案5所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

、

、

、

、

、

或

；n選自1或2。

方案7、如方案6所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基或三氟甲氧基；R³選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、三氟甲基、三氟乙基、氰基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基或環丁基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙醯基、乙醯胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；W選自NH、O或S；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、呋喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙胺基、二甲胺基、三氟甲基或三氟甲氧基；n選自1。

方案8、如方案1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，具有下式(I-1)的結構：

其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、鹵素原子、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基硫基、C_1-4烷基羰基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基或C_1-4烷氧基C_1-4烷基；R³選自氰基，任選被一個或多個取代基P取代的C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、3-6元環烷基或3-6元環烷基C_1-4烷基；P選自羥基、胺基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、羧基C_1-4烷基、胺基C_1-4烷基、胺基羰基C_1-4烷基、羥基C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、羧基C_1-4烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基胺基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基磺醯胺基羰基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基或5-6元雜芳基；W選自CH₂、NH、O、S、SO或SO₂；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或5-6元雜芳基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基； E選自CH₂、NH、O或CO；F選自不存在、CH₂、NH或O；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自0-3的整數。

方案9、如方案8所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基、三氟乙基或三氟甲氧基；R³選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、三氟甲基、三氟乙基、三氟丙基、氰基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環丙基甲基、環丙基乙基、環丁基甲基、環戊基甲基或環己基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、異丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙炔基、甲胺基、乙胺基、乙醯基、乙醯胺基、甲磺醯基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、二甲胺基、吡唑、咪唑、噁唑、異噁唑、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；W選自CH₂、NH、O或S；A選自NH、O或S； Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或5-6元雜芳基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E選自CH₂、NH、O或CO；F選自不存在、CH₂、NH或O；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1或2。

方案10、如方案9所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基或三氟甲氧基；R³選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、三氟甲基、三氟乙基、氰基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基或環丁基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙醯基、乙醯胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；W選自NH、O或S；A選自NH、O或S； Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或吡啶基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E選自CH₂、NH、O或CO；F選自CH₂、NH或O；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1或2。

方案11、如方案10所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：苯并二氫吡喃基、苯并1,4-二氧雜環己烯基、苯并1,3-二氧雜環己烯基、苯并四氫吡啶基、苯并二氫噁嗪基、苯并四氫吡嗪基、1,2,3,4-四氫喹唑啉基、1,2,3,4-四氫噌啉基、四氫萘基、四氫萘酮。

方案12、如方案11所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

、

、

、

、

、

或

。

方案13、如方案12所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，W選自O；A選自O；Z選自被1-2個取代基Q取代或未被取代的苯基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲胺基、二甲胺基、三氟甲基或三氟甲氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

n選自1。

方案14、如方案9所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基或三氟甲氧基；R³選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、三氟甲基、三氟乙基、氰基、環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基或環丁基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙醯基、乙醯胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；W選自NH、O或S；A選自NH、O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或吡啶基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E選自CH₂、NH或O；F選自不存在；X選自CH或N；Y選自CH₂或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1或2。

方案15、如方案14所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E、X、Y共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：苯并二氫吡咯基、苯并二氫呋喃基、苯并1,3-二氧雜環戊烯基或二氫茚基。

方案16、如方案15所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，W選自O；A選自O；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

方案17、如方案9所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基；Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、甲基、乙基、丙基、甲氧基、乙氧基、甲胺基、乙胺基、二甲胺基、三氟甲基或三氟甲氧基；E選自CH₂、O或CO；F選自不存在、CH₂或O； X選自CH或N；Y選自CH₂；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1或2。

方案18、如方案17所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E選自O或CH₂；F選自不存在、CH₂或O；X選自CH；Y選自CH₂；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1。

方案19、如方案18所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E選自O；F選自不存在或CH₂；X選自CH；Y選自CH₂；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1。

方案20、如方案19所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：

方案21、如方案17所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E選自CH₂；F選自不存在或CH₂；X選自N；Y選自CH₂；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1。

方案22、如方案17所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物：其中，E、X、Y、F分別獨立地選自CH₂；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自1。

上述方案之間的基團可以任意組合，所得到的技術方案均記載於本文中。

本發明的部分化合物

本發明所述的“鹵素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。

本發明所述的“C_1-6烷基”表示直鏈或支鏈的含有1-6個碳原子的烷基，包括例如“C_1-4烷基”、“C_1-3烷基”等，具體實例包括但不限於：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、或1,2-二甲基丙基等。

本發明所述的“C_1-4烷基”表示直鏈或支鏈的含有1-4個碳原子的烷基，包括例如“C_1-4烷基”、“C_1-3烷基”等，具體實例包括但不限於：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、或1,1-二甲基乙基等。

本發明所述的“C_2-8烯基”是指含有至少一個雙鍵的碳原子數為2-8的直鏈或支鏈的烯基，包括例如“C_2-6烯基”、“C_2-4烯基”、“C_2-3烯基”等，具體實例包括但不限於：乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、4-辛烯基、1,3-丁二烯基、2,4-戊二烯基、1,4-己二烯基、2,4-己二烯基、1,5-庚二烯基、2,5-庚二烯基、或2,6-辛二烯基等。

本發明所述的“C_2-8炔基”是指含有三鍵的碳原子數為2-8的直鏈或支鏈的炔基，其中包括例如“C_2-6炔基”、“C_2-4炔基”、“C_2-3炔基”等，具體實例包括但不限於：乙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-甲基-2-己炔基、5-甲基-2-己炔基、2-甲基-3-己炔基、5-甲基-3-己炔基、2-甲基-4-己炔基、4-甲基-5-己炔基、2-辛炔基、 3-辛炔基、4-辛炔基、4-甲基-2-庚炔基、5-甲基-3-庚炔基、6-甲基-3-庚炔基、2-甲基-4-庚炔基、2-甲基-5-庚炔基、或3-甲基-6-庚炔基等。

本發明所述的“C_1-6烷氧基、C_1-6烷基胺基、二C_1-6烷基胺基、C_1-6烷基硫基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷基羰基氧基、C_1-6烷基磺醯基、C_1-6烷基胺基磺醯基、二C_1-6烷基胺基磺醯基、C_1-6烷基磺醯胺基、C_1-6烷基磺醯氧基、C_1-6烷基磺醯胺基羰基”，是指以C_1-6烷基-O-、C_1-6烷基-NH-、(C_1-6烷基)₂-N-、C_1-6烷基-S-、C_1-6烷基-C(O)-、C_1-6烷基-C(O)-O-、C_1-6烷基-SO₂-、C_1-6烷基-NH-SO₂-、(C_1-6烷基)₂-N-SO₂-、C_1-6烷基-SO₂-NH-、C_1-6烷基-SO₂-O-、C_1-6烷基-SO₂-NH-C(O)-方式形成的基團，其中“C_1-6烷基”的定義如前文所述。

本發明所述的“C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基硫基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基氧基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基磺醯基、C_1-4烷基磺醯胺基、C_1-4烷基磺醯氧基、C_1-4烷基磺醯胺基羰基”，是指以C_1-4烷基-O-、C_1-4烷基-NH-、(C_1-4烷基)₂-N-、C_1-4烷基-S-、C_1-4烷基-C(O)-、C_1-4烷基-C(O)-O-、C_1-4烷基-SO₂-、C_1-4烷基-NH-SO₂-、(C_1-4烷基)₂-N-SO₂-、C_1-4烷基-SO₂-NH-、C_1-4烷基-SO₂-O-、C_1-4烷基-SO₂-NH-C(O)-方式形成的基團，其中“C_1-4烷基”的定義如前文所述。

本發明所述的“鹵代C_1-6烷基、羥基C_1-6烷基、羧基C_1-6烷基、胺基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、鹵代C_1-6烷氧基、羥基C_1-6烷氧基、羧基C_1-6烷氧基、羧基氧基C_1-6烷基、羧基胺基C_1-6烷基、胺基羰基C_1-6烷基”，是指一至多個，例如1~4個、1~3個、1~2個鹵素原子、羥基、胺基、C_1-6烷氧基、羧基、羧基氧基、羧基胺基、胺基羰基分別取代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基中的氫原子所形成的基團。

本發明所述的“鹵代C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、羧基C_1-4烷基、胺基C_1-4烷基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基、羥基C_1-4烷氧基、羧基C_1-4烷氧基、羧基氧基C_1-4烷基、羧基胺基C_1-4烷基、胺基羰基C_1-4烷基”，是指一至多個，例如1~4個、1~3個、1~2個鹵素原子、羥基、胺基、C_1-4烷氧基、羧基、羧基氧基、羧基胺基、胺基羰基分別取代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基中的氫原子所形成的基團。

本發明所述的“3-8元環烷基C_1-6烷基、3-8元雜環基C_1-6烷基”，是指3-8元環烷基、3-8元雜環基”取代C_1-6烷基中的氫原子所形成的基團。

本發明所述的“3-6元環烷基C_1-4烷基、3-6元雜環基C_1-4烷基”，是指3-6元環烷基、3-6元雜環基”取代C_1-4烷基中的氫原子所形成的基團。

本發明所述“芳基”是指芳香族環，例如苯基、萘基、蒽基等。

本發明所述“5-8元雜芳基”是指含有至少一個雜原子的不飽和的環原子數為5~8個的環狀基團，所述的雜原子有氮、氧和硫等，同時包括碳原子、氮原子和硫原子被氧代的情況。包括例如“5-7元雜芳基”、“5-6元雜芳基”、“7-8元雜芳基”，具體可以為“含1~3個O、S和/或N的5-8元雜芳基”、“含1~2個O、 S和/或N的5-8元雜芳基”、“含2~3個O、S和/或N的5-8元雜芳基”、“含1-2個N、O和/或S原子的5-6元雜芳基”、“含1-2個N、O和/或S原子的6元雜芳基”。具體實例包括但不僅限於呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮、4-吡啶酮、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、或1,2,4,5-四嗪基等。

“3-8元環烷基”，是指3-8個碳原子的烷烴部分去除一個氫原子衍生的部分飽和或飽和的單環環狀烷基，包括例如“3-6元環烷基”、“4-7元環烷基”、“4-6元環烷基”、“5-6元環烷基”等。具體可以為“3-8元飽和環烷基”、“3-8元部分飽和環烷基”、“5-6元飽和環烷基”、“5-6元部分飽和環烷基”。3-8元飽和環烷基包括但不限於：環丙烷基、環丁烷基、環戊烷基、環己烷基、環庚烷基、環辛烷基、甲基環丙烷基、二甲基環丙烷基、甲基環丁烷基、二甲基環丁烷基、甲基環戊烷基、二甲基環戊烷基、甲基環己烷基、二甲基環己烷基等；3-8元部分飽和環烷基包括但不限於：環戊烯基、1,3-環戊二烯基、環己烯基、1,4-環己二烯基、環庚烯基、1,4-環庚二烯基、或環辛烯基。

“3-8元雜環基”是指含有3-8個環原子、且含有至少一個雜原子(例如1、2、3、4或5個雜原子)的飽和或部分飽和的單環雜環化合物除去一個氫原子得到的基團。包括例如“3-7元雜環基”、“3-6元雜環基”、“3-5元雜環基”、“4-7元雜環基”、 “4-6元雜環基”、“5-6元雜環基”、6-7元雜環基”、“6-8元雜環基”等。具體可以為：“含1-2個N、O和/或S原子的3-8元雜環基”、“含1-2個N、O和/或S原子的3-8元飽和雜環基”、“5-6元飽和雜環基”、“含1-2個N、O和/或S原子的5-6元雜環基”、“含1-2個N、O和/或S原子的5-6元飽和雜環基”。3-8元部分飽和單雜環基，是指含有雙鍵、雜原子的環狀基團。3-8元飽和單雜環基，是指全部為飽和鍵的含有雜原子的環狀基團。實例包括但不僅限於：氮雜環丙烷基、2H-氮雜環丙烷基、二氮雜環丙烷基、3H-二氮雜環丙烯基、氮雜環丁烷基、1,4-二氧雜環己烷基、1,3-二氧雜環己烷基、1,3-二氧雜環戊烷基、1,4-二氧雜環己二烯基、四氫呋喃基、二氫吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氫咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氫吡唑基、2,5-二氫噻吩基、四氫噻吩基、4,5-二氫噻唑基、呱啶基、呱嗪基、嗎啉基、4,5-二氫噁唑基、4,5-二氫異噁唑基、2,3-二氫異噁唑基、2H-1,2-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氫-2H-吡喃基、2,5-二氫噻吩基、3,4-二氫-2H-吡喃基、5,6-二氫-4H-1,3-噁嗪基、1,2,3,6-四氫吡啶基、1,2,3,4-四氫吡啶基、或2,3,4,5-四氫吡啶基等。

本發明所述的“雜原子”是指N、O、S、SO和/或SO₂等，優選N、O、S。

本發明所述的“部分飽和”是指環部分包括至少一個雙鍵或三鍵。

本發明所述的“F選自不存在”，是指Y直接與苯基連接。

E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環可以一起形成以下的結構：

、

、

、

、

、

、

、

或

，其中，優選

、

、

、

、

、

或

，進一步優選

、

、

、

、

或

。

另外，本發明還提供上述通式(I)表示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物的製備方法。

具體而言，所述製備方法，其包括但不限於下述工藝路線(其中，各縮寫所代表的定義如下：DCM：二氯甲烷；DMF：N,N二甲基甲醯胺；DMSO：二甲基亞碸；EA：乙酸乙酯；MeOH：甲醇；NBS：N-溴代丁二醯亞胺；NCS：N-氯代丁二醯亞胺；PE：石油醚；THF：四氫呋喃；DIBAL-H：二異丁基氫化鋁；Pd(dppf)Cl₂：[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀)；PPTS：對甲苯磺酸吡啶鹽；DHP：3,4-2H-二氫吡喃；TFAA：三氟乙酸酐；LiHMDS：二(三甲基矽基)胺基鋰；TBSCl：第三丁基二甲基氯矽烷；TBAF：四丁基氟化銨三水合物；DEAD：偶氮二甲酸二乙酯)：

R¹、R²、R³、R⁴、m、n、W、A、Z、E、F、X、Y如前文所述，A'代表氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。

具體的示例性步驟如下：

1、中間體1的製備

將起原料1溶於有機溶劑(例如乙醇等低級醇等)中，分批緩慢加入起始原料2，加畢，加入鹼性溶液(例如NaOH溶液等)，加熱到60℃-90℃反應5-48小時。反應完畢，反應液減壓除去溶劑，固體用水洗滌，乾燥，得中間體1。

2、中間體2的製備

將中間體1溶於有機溶劑(例如DMF等)中，分批緩慢加入親電取代試劑(例如N-氯代丁二醯亞胺等)，加完後，攪拌0.2-5小時，將反應液倒入水中。用有機溶劑(例如乙酸乙酯等)萃取，有機用水和飽和氯化鈉溶淬洗滌，乾燥，除去溶劑得中間體2。

3、中間體3的製備

將中間體2溶於有機溶劑(例如三乙胺等)中，加入起始原料3，反應5-20小時。反應完畢，減壓脫除溶劑，柱色譜分離(例如PE：EA=10：1)得中間體3。

4、中間體4的製備

將中間體3溶於有機溶劑(例如四氫呋喃等)中，冰浴冷卻，加入二異丁基氫化鋁(DIBAL-H)的甲苯溶液，加入完畢升溫至20-30℃反應5-20小時，反應完畢，冰浴，加入飽和的鹵化劑(例如氯化銨溶液等)淬滅反應，用有機溶劑(例如乙酸乙酯等)萃取，有機相用飽和的鹵化劑(例如氯化銨溶液和氯化鈉溶液等)洗滌，乾燥，除去溶劑得中間體4。

5、中間體5的製備

將中間體4溶於有機溶劑(例如二氯甲烷等)中，加入三乙胺，然後加入鹵化物(例如三氯化磷，三溴化磷等)，20-40℃反應0.5-5小時。反應完畢後除去溶劑，柱層析分離(例如PE：EA=10：1)得中間體5。

6、中間體6的製備

製備或購買中間體6。

7、中間體7的製備

將中間體6溶於有機溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、乙腈、甲苯等)中，加鹼性試劑(例如碳酸鉀、碳酸銫、碘化鈉等)和中間體5，在0-100℃撹拌(0.5-24小時)。加入有機溶劑(例如乙酸乙酯等)稀釋，用飽和的鹵化劑(例如氯化鈉溶液等)或水洗，乾燥，濃縮，經矽膠柱層析(例如乙酸乙酯：石油醚=1：1-10，二氯甲烷：甲醇=15：1)純化得中間體7。

8、式(I)化合物的製備

將中間體7溶於有機溶劑(例如甲醇/水，四氫呋喃，甲醇，四氫呋喃/甲醇，甲醇/四氫呋喃/水等)中，加入鹼性化合物(例如一水合氫氧化鋰，氫氧化鈉等)，15-60℃攪拌8-72小時。反應液加入水稀釋，酸性溶液(例如檸檬酸，鹽酸等)調節pH值至2-7，加入有機溶劑(例如乙酸乙酯等)，分液，有機相用飽和的鹵化劑(例如氯化鈉溶液等)洗，乾燥，濃縮，經純化(純化方式優選為：製備高效液相層析，矽膠柱層析等)得式(I)化合物。

本發明式(I)所示化合物的"藥學上可接受的鹽"是指式(I)化合物中存在的酸性官能團與適當的無機或有機陽離子(鹼)形成的鹽，包括與鹼金屬或鹼土金屬形成的鹽、銨鹽，以及與含氮有機鹼形成的鹽；以及式(I)化合物中存在的鹼性官能團(例如-NH₂等)與適當的無機或有機陰離子(酸)形成的鹽，包括與無機酸、與有機羧酸。

本發明式(I)所示化合物的"酯"是指，當式(I)化合物存在羧基時，可以與醇發生酯反應而形成的酯，當式(I)化合物存在羥基時，可以與有機酸、無機酸、有機酸鹽等發生酯化反應而形成的酯。酯在酸或鹼存在的條件下，可以發生水解反應生成相應的酸或醇。

本發明化合物的“立體異構”分為構象和構型異構，而構型異構還分為順反異構和旋光異構。構象異構是指具有一定構型的有機物分子由於碳、碳單鍵的旋轉或扭曲而使得分子各原子或原子團在空間產生不同的排列方式的一種立體異構現象，常見的有烷烴和環烷烴類化合物的結構，如環己烷結構中出現的椅式構象和船式構象。“立體異構物”，指當本發明化合物含有一個或多個不對稱中心，因而可作為外消旋體和外消旋混合物、單一對映異構物、非對映異構物混合物和單一非對映異構物。本發明化合物有不對稱中心，這類不對稱中心各自會獨立地產生兩個光學異構物，本發明的範圍包括所有可能的光學異構物和非對映異構物混合物和純的或部分純的化合物。本發明所述的化合物若含有烯烴雙鍵，除非特別說明，本發明包括順式異構物和反式異構物。本發明所述的化合物可以以互變異構物形式存在，其通過一個或多個雙鍵位移而具有不同的氫的連接點。

本發明還提供一種藥物組合物，其含有上述式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及他們的立體異構物。特別是，本發明提供一種用於治療和/或預防FXR介導的疾病的藥物組合物，其含有上述式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及他們的立體異構物。

本發明進一步提供包括上述式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及他們的立體異構物與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物製劑，其可以製成藥學上可接受的任一劑型。以口服、腸胃外、直腸或經肺給藥等方式施用於需要這種治療的患者。用於口服給藥時，可製成傳統的固體製劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可製成口服液體製劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。製成口服製劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。用於腸胃外給藥時，可製成注射劑，包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。製成注射劑時，可採用現有製藥領域中的傳統方法生產，配製注射劑時，可以不加入附加劑，也可根據藥物的性質加入適宜的附加劑。用於直腸給藥時，可製成栓劑等。用於經肺給藥時，可製成吸入劑或噴霧劑等。

本發明還提供了本發明式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物在製備用於治療和/或預防FXR介導的疾病及相關疾病的藥物中的應用。所述的疾病包括：(1)慢性肝內或一些形式的肝外膽汁鬱積病症，或慢性膽汁鬱積病症或急性肝內膽汁鬱積病症導致的肝纖維化，肝硬化，肝的梗阻性或慢性炎性紊亂，脂肪肝及其併發症，與酒精有關的脂肪肝及其併發症，急性肝衰竭，膽石病，和/或炎性腸道疾病，原發性膽汁性肝硬化；由於強迫脂質，特別是甘油三酯蓄積，然後促進肝纖維化啟動導致的慢性脂肪性和纖維性變性引起的病症和疾病，如非酒精性脂肪肝病或非酒精性脂肪肝炎；脂質或脂蛋白紊亂，如動脈粥樣硬化、血脂異常、血栓。(2)I型或II型糖尿病的臨床併發症，包括糖尿病性腎病、糖尿病性神經病變、糖尿病性視網膜病、及其臨床顯性長期糖尿病的其他觀察到的結果。(3)非惡性過度增殖性疾病或過度增殖性疾病，選自：肝細胞癌、結腸腺瘤和息肉病、結腸腺癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌和其他形式的胃腸道和肝臟腫瘤性疾病。(4)血脂代謝異常性疾病包括動脈粥樣硬化、膽汁酸紊亂、良性肝內膽汁淤積、進行性家族性肝內膽汁淤積、原發性膽汁性肝硬化、原發性硬化性膽管炎、膽固醇結石、血脂異常、纖維化相關疾病、慢性肝炎、非病毒性肝炎、炎症性腸病、腸道菌群失調、肝臟移植、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝臟衰竭、膽汁鬱積、膽石病、非酒精性脂肪性肝病、酒精性脂肪性肝病、糖尿病、心肌梗塞、中風、血栓、癌症等。

本發明還提供治療和/或預防FXR介導的疾病的方法，包括將上述式(I)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物給予需要此治療的哺乳動物的步驟。

本發明化合物具有以下優點：(1)本發明式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物具有優異的FXR受體激動活性，能被安全的用於治療和/或預防非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤等相關疾病；(2)本發明式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物顯示出良好的生物穩定性，作用更持久，生物利用度高；(3)本發明式(I)化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯以及它們的立體異構物顯示出較低的毒性，耐藥性好，安全性高。

以下通過生物學實驗進一步闡述本發明化合物有益效果，但不應將此理解為本發明化合物僅具有下列有益效果。

實驗例1：本發明化合物體外生化分析

(1)測試物：本發明化合物，其化學名稱和製備方法見各個化合物的製備實施例。

(2)實驗方法：

檢測化合物溶解在100% DMSO中，稀釋1000倍後，取160nL，然後加入3.84μL檢測緩衝液；Target/Antibody混合物，稀釋2倍後，再加入8μL溶液；加入4.0μL稀釋4倍的共啟動肽；在室溫孵育60分鐘；孵育後在螢光酶標儀檢測並分析資料。

(3)實驗結果和結論：

由表1可見，本發明化合物對FXR均有不同程度的激動作用，對於治療非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤等相關疾病具有重要的意義，尤其是化合物1，化合物2，化合物4，化合物5，化合物6，化合物7，化合物9。

實驗例2：本發明化合物體外細胞水準的檢測

測試物：本發明化合物，其化學名稱和製備方法見各個化合物的製備實施例。

(2)實驗方法：

本實驗用的是聚苯乙烯-TC處理的微孔反應板(康寧Cat.#3712)。

1000×化合物40nL和4μL的分析介質一起添加到實驗板上；在分析介質中加入32μL的細胞稀釋到合適的細胞密度後加入到實驗板上；將4μL分析介質加入到所有孔中最終的分析體積是40μL；將實驗板放在37℃/5% CO₂加濕的培養箱中孵育16-24h；之後在實驗板上加入8μL底物；實驗板在室溫孵育2h，避光；孵育後在螢光酶標儀檢測(Tecan Safire²)並分析資料。

(3)實驗結果和結論：

由表2可見，本發明化合物對UAS-bla HEK 293T細胞均有不同程度的激動作用，對於治療非酒精性脂肪肝、原發性膽汁性肝硬化、脂質代謝紊亂、糖尿病併發症及惡性腫瘤等相關疾病具有重要的意義，尤其是化合物2、化合物4和化合物9。

實驗例3：本發明化合物對HepG2細胞和人源肝細胞BSEP，CYP7A1和SHP mRNA相對表達量的影響

PBS代表磷酸鹽緩衝液。

對照藥：PX-104，具體結構見背景技術；PX-102，為PX-104的消旋體。

(2)實驗方法：

鋪細胞，加化合物和收集細胞

使用胰酶消化、收集細胞，測定細胞濃度；根據計數結果，重懸細胞至7.5 e5 cell/mL密度；6孔細胞培養板，每孔接種2mL細胞；將培養板至於培養箱中，於37℃，5% CO₂條件培養24小時。

使用DMSO稀釋待測化合物至12150，4050，1350，450，150，50，16.67，5.56以及1.85μM；取上一步稀釋得到的儲液5μL分別加到5mL培養基中。得到的工作液濃度分別為12150，4050，1350，450，150，50，16.67，5.56，1.85nM。對照組培養基使用等體積的DMSO代替儲液配製；從培養箱中取出細胞培養板，移除培養基，加入工作液和對照培養基；將培養板放回培養箱，於37℃，5% CO₂條件培養24小時。

處理24小時後，從培養箱中取出細胞培養板，移除培養基，用預冷(4℃)的PBS潤洗細胞3次；每孔加入200μL胰酶(預熱至37℃)，輕輕晃動使得胰酶均勻覆蓋板底。將培養板放回培養箱溫育直至細胞脫離板底。加入1mL培養基終止消化。用移液器輕輕吹打幾次後，將孔中所有物質吸入到1.5mL的Rnase-free的離心管中，200×g離心5分鐘；移除上清，收集細胞樣品。

從細胞樣品中提取和純化RNA

細胞裂解：準備新鮮的RNA裂解液(1mL裂解液加10μL 2-巰基乙醇)；向細胞樣品加入600μL裂解液；劇烈渦旋1-2分鐘，使細胞完全裂解；將細胞裂解液於12,000×g離心5分鐘；取上清轉移至RNase-free的1.5mL離心管中。

RNA提取純化：添加等量的70%的乙醇到細胞裂解液中；劇烈震盪離心管，充分混合，儘量分散加入乙醇後可能形成的微粒沉澱；將吸附柱置於收集管上，轉移混合物至吸附柱中。每次最多轉移700μL；室溫12,000×g離心15秒。棄掉收集管中的溶液，並將吸附柱重新放置於收集管上；將剩餘的混合物全部轉移到吸附柱中。加700μL洗脫液I至吸附柱中；室溫12,000×g離心15秒。將吸附柱放置於新的收集管上；加500μL洗脫液II到吸附柱中；室溫12,000×g離心15秒。棄掉收集管中的溶液，並將吸附柱重新放置於收集管上；加500μL洗脫液II到吸附柱中；室溫12,000×g離心1-2分鐘，將吸附柱放置於RNA收集管上；加入50μL RNase-free水至吸附柱的中心位置，室溫孵育1分鐘；室溫14,000×g離心2分鐘，將RNA洗脫至收集管中。

測量提取的RNA的濃度和質量。RNA儲存於-80℃。

RNA逆轉錄為cDNA

將第二步驟中提取的RNA在70℃孵育5分鐘使RNA變性。處理後將樣品置於冰上；使用RNAse-free水稀釋RNA樣品至200ng/μL；按照下表配製10μL的逆轉錄溶液，並和10μL變性RNA混合。逆轉錄反應中RNA的總量為2μg。實驗過程中，所有試劑均放置於冰上。

逆轉錄在G-Storm GS1 thermal cycler PCR熱循環儀上進行。逆轉錄過程設置如下：25℃10分鐘→37℃120分鐘→85℃5分鐘→4℃∞。逆轉錄產物(cDNA)儲存於-20℃。

樣品qPCR實驗

根據qPCR擴增效率，選擇合適的cDNA濃度進行樣品的qPCR實驗。第三步驟逆轉錄得到的cDNA樣品，取10μL加60μL Rnase-free水稀釋7倍。

按照下表準備80μL的反應混合物，用移液器取20μL到96孔PCR反應板中，3個重複(每個反應孔加7μL 100ng)cDNA樣品。

qPCR在ABI7500即時定量PCR儀上進行，程式設置如下：50℃ 2分鐘→95℃ 10分鐘→95℃ 15秒→60℃ 60秒，其中95℃ 15秒與60℃ 60秒之間設置40個循環。

(3)實驗結果和結論：

(PX-102或PX-104)]

由表3可知，本發明化合物1對BSEP(EC50nM)和SHP(EC50nM)有較好的激動作用，對CYP7A1有較好的抑制作用；由表4-表9可知，本發明化合物對HepG2細胞中BSEP mRNA有較好的表達作用，對於治療非酒精性脂肪肝具有重要的意義。

實驗例4：本發明化合物的Beagle犬藥代動力學實驗

供試品：本發明實施例化合物，自製，其化學名稱和製備方法見各化合物的製備實施例。

本發明實施例化合物供試品溶液製備：

本發明實施例化合物靜脈注射(iv)給藥處方為5% DMSO+10% PEG400+85%(28% HP-β-CD)。

28% HP-β-CD的配製：稱取HP-β-CD(羥丙基β環糊精)2.8g，加入少量滅菌注射用水超音波溶解，再用滅菌注射用水定容至10ml，渦旋混勻即得。

稱取本發明實施例化合物18.10mg，加入1.65ml DMSO，渦旋溶解，再加入3.3ml PEG400，渦旋混合，再加入28.05ml 28% HP-β-CD，渦旋混勻，50℃保溫20分鐘，即得濃度為0.5mg/mL靜脈注射給藥溶液。

本發明實施例化合物口服給藥(po)處方為0.1%吐溫80+2% HPC。

0.1%吐溫80+2% HPC的配製：稱取HPC(羥丙基纖維素)2g，加入純化水至100ml，持續攪拌使溶解，再加入0.1ml吐溫80，攪拌溶解後，搖勻，即得0.1%吐溫80+2% HPC的空白溶媒。

精密稱定本發明實施例化合物35.04mg，加入64ml上述溶媒，組織研磨器研磨5分鐘使分散均勻，研磨為細膩均勻的混懸液，即得濃度為0.5mg/mL灌胃給藥混懸溶液。

實驗方法

將供試品藥液按照下表方法進行給藥：

採血時間點：

iv：藥後0.083h,0.25h,0.5h,1h,2h,4h,6h,8h,24h,48h.

po：藥後0.167h,0.5h,1h,2h,4h,6h,8h,24h,48h,72h.

血漿採集：固定動物，每個時間點通過前肢靜脈採集400μl左右的血液，放置到含有EDTA-K₂抗凝管中，混勻血液樣品在4℃條件下8000轉/分鐘離心6分鐘分離血漿，於-80℃冰箱凍存。

血漿樣品分析：

血漿樣品分析採用蛋白沉澱法：吸取20μl血漿，加入200μl內標含Tolbutamide(甲苯磺丁脲)50ng/ml的乙腈溶液)，1000轉/分鐘渦旋10分鐘，4000轉/分鐘離心20分鐘，吸取上清液100μl，再加入100μl水，渦旋混勻，LC-MS/MS分析。

實驗結果：

本發明實施例化合物暴露量高、半衰期較長，生物利用度在50%以上。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的範圍僅限於以下實施例。凡基於本發明上述內容所實現的技術均屬於本發明的範圍。

製備例1：(E)-2,6-二氯苯甲醛肟的製備

將2,6-二氯苯甲醛(25g,0.14mol)溶於乙醇(200mL)中，分批緩慢加入鹽酸羥胺(11g,0.16mol)，加入完畢，加入NaOH溶液(6.4g,0.16mol，溶於100mL水)，加熱到90℃反應24小時。反應完畢，反應液減壓除去溶劑，固體用水(200mL)洗滌，乾燥，得標題化合物25.9g，產率97%。

製備例2：(Z)-2,6-二氯-N-羥基亞氨苄基氯的製備

將(E)-2,6-二氯苯甲醛肟(25.9g,0.136mol)溶入到DMF(300mL)，分批緩慢加入N-氯代丁二醯亞胺(18.2g,0.136mol)，加完後，25℃攪拌一小時，將反應液倒入水(500mL)中。用乙酸乙酯(500mL)萃取，有機相用水(200mL)和飽和氯化鈉溶液(200mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，除去溶劑得標題化合物28g，粗產物不純化，進行下一步。

製備例3：5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯的製備

將(Z)-2,6-二氯-N-羥基亞氨苄基氯(28g,0.125mol)溶於三乙胺中(100mL)，加入3-環丙基-3-氧代丙酸乙酯(19.5g,0.125mol)，25℃反應12小時。反應完畢，減壓脫除溶劑，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物24.4g，兩步產率55.1%。

製備例4：(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇的製備

將5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯(20g,61.3mmol)溶於四氫呋喃(300mL)中，冰浴冷卻，加入二異丁基氫化鋁(DIBAL-H)的甲苯溶液(1.5mol/L,123mL,0.184mol)，加入完畢，升溫至25℃反應12小時，反應完畢，冰浴，加入飽和氯化銨溶液(200mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(500mL)萃取，有機相用飽和氯化銨溶液(200mL)和飽和氯化鈉溶液(200mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，除去溶劑得標題化合物16g，產率92.0%。

製備例5-1：4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備

將(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇(5.0g,17.6mmol)加入到二氯甲烷(30mL)中，加入三乙胺(1.78g,17.6 mmol)，然後加入三溴化磷(4.77g,17.6mmol)，30℃反應2小時。反應完畢後除去溶劑，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物4.3g，產率70.4%。

製備例5-2：4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備

將(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇(5.0g,17.6mmol)加入到二氯甲烷(30mL)中，加入三乙胺(1.78g,17.6mmol)，然後加入三氯化磷(2.42g,17.6mmol)，30℃反應2小時。反應完畢後除去溶劑，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物3.60g，產率67.7%。

實施例1 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備(化合物1)

(1)(E)-1-(5-溴-2-羥基苯基)-3-(2-氯-4-羥基苯基)丙烷-2-烯-1-酮的製備

將1-(5-溴-2-羥基苯基)乙酮(40.7g,189.26mmol)和2-氯-4-羥基苯甲醛(30g,191.61mmol)溶於乙醇(1000mL)中，加入氫氧化鉀(42.56g,760mmol)。反應液室溫攪拌24小時，加入冰水淬滅(5L)，用2mol/L鹽酸調節pH值至2，析出固體過濾，得標題化合物(42g粗品)。

(2)6-溴-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-4-酮的製備

將(E)-1-(5-溴-2-羥基苯基)-3-(2-氯-4-羥基苯基)丙烷-2-烯-1-酮(42g粗品)溶於醋酸(500mL)，加入濃鹽酸(100mL)，加熱至迴流反應4天。冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(2L)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗(500mL×4)，無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮得標題化合物(34g粗品)。

(3)4-(6-溴-苯并二氫吡喃-2-基)-3-氯苯酚的製備

將二氯化汞(39.4g,0.1449mol)溶於5mol/L鹽酸(500mL)中，分批加入鋅粉(92.7g,1.449mol)，控制溫度小於20℃，加完後室溫攪拌30分鐘，倒掉液體，固體加入5mol/L鹽酸(500mL)，室溫下攪拌5分鐘，倒掉液體。向殘餘固體中加入5mol/L鹽酸(1000mL)和6-溴-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-4-酮(34g粗品)的甲苯溶液(500mL)，加完後加熱至80℃反應4小時，冷卻至室溫，乙酸乙酯萃取(400mL×2)，有機相合併，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：5)純化，得標題化合物11g，3步產率16.9%。

(4)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲腈的製備

將4-(6-溴-苯并二氫吡喃-2-基)-3-氯苯酚(11g,32.5mmol)溶於N-甲基吡咯烷酮(200mL)中，加入氰化鋅(2g,17mmol)和四(三苯基膦)鈀(1.87g,1.62mmol)，氮氣保護下加熱至110℃反應過夜。冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(500mL)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗(200mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：5)純化，得標題化合物3.1g，產率33%。

(5)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)-苯并二氫吡喃-6-甲腈(3.1g,10.85mmol)溶於甲醇(100mL)中，室溫攪拌下滴加濃硫酸(10mL)，加完後加熱至迴流反應4天。降溫到室溫後加入乙酸乙酯(500mL)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗(200mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，粗品經矽膠柱層析(EA：PE=1：5)純化，得標題化合物(2g粗品)。

(6)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(2g粗品)溶於N,N-二甲基甲醯胺(30mL)中，加入碘化鈉(1.89g,12.60mmol)、碳酸鉀(2.61g,18.90mmol)和4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(2.27g,7.50mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(20mL)，升溫至60℃攪拌過夜。加入乙酸乙酯(200mL)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗(50mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：5)純化，得產物(1.2g粗品)。

(7)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(1.2g,2.00mmol)溶於甲醇/水(100mL/20mL)，加入一水合氫氧化鋰(252mg,6.00mmol)，室溫攪拌過夜。反應液加入水(100mL)稀釋，檸檬酸水溶液調節pH值至3，加入乙酸乙酯(500mL)，分液，有機相用飽和氯化鈉溶液洗(100mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，粗品經製備高效液相層析純化，得標題化合物45mg，3步產率0.73%。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS(negative，m/z)：570(M+H)⁺

¹H-NMR(300MHz,CD₃OD)δ：7.82-7.77(m,2H),7.54-7.38(m, 4H),6.90-6.79(m,3H),4.94-4.85(m,2H),3.09-2.98(m,1H),2.86-2.81(m,2H),2.37-2.25(m,2H),1.97-1.90(m,1H),1.30-1.19(m,4H).

實施例2 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(化合物2)

(1)2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯甲醛的製備

2-氯-4-羥基苯甲醛(1.0g,6.38mmol)，3,4-二氫吡喃(1.1g,13.1mmol)和對甲苯磺酸吡啶鹽(0.8g,3.18mmol)依次加入到二氯甲烷(100mL)，25℃反應4小時，反應完畢後，濃縮，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)，得標題化合物1.2g，產率78.1%。

(2)2-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯的製備

將2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯甲醛(1.1g,4.57mmol)，3-甲基-4-硝基苯甲酸甲酯(1.07g,5.48mmol)，N,N- 二異丙基乙胺(1.24g,9.6mmol)和四丁基氟化銨(8.2mL,8.2mmol,1M四氫呋喃溶液)依次加入到四氫呋喃(10mL)中，80℃反應16小時，反應完畢後除去溶劑，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20：1)，得標題化合物1.1g，產率61.9%。

(3)2-(2-氯-4-羥基苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(1.1g,2.83mmol)和對甲苯磺酸(0.2g,1.16mmol)加入到甲醇(20mL)中，25℃反應2小時，反應完畢後，除去溶劑，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)，得標題化合物0.54g，產率62.6%。

(4)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯的製備

製備過程參照實施例1，反應步驟(6)。

(5)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸的製備

製備過程參照實施例1，反應步驟(7)。

分子式：C₂₈H₂₀Cl₃NO₅ 分子量：556.8 LC-MS(m/z)：556.2(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ：7.90(d,J=4.4Hz,1H),7.86(s,1H),7.42-7.51(m,3H),7.27(d,J=8.8Hz,1H),6.89(d,J=4.4Hz,1H),6.86(s,1H),6.73(d,J=8.8Hz,1H),6.06(t,J=8.8Hz,1H),4.90(s,2H),3.74-3.81(m,1H),3.01-3.07(m,1H),2.32(t,J=6.0Hz,1H),1.18-1.21(m,4H).

實施例3 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸的製備(化合物3)

(1)2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯甲醛的製備

將2-氯-4-羥基苯甲醛(2g,12.77mmol)和3,4-2H-二氫吡喃(1.5g,17.83mmol)加至二氯甲烷(50mL)中，加入對甲苯磺酸吡啶鹽(0.3g,1.19mmol)，25℃攪拌反應6小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=50：1)純化，即得標題化合物2.6g，產率83.9%。

(2)2-(3-氯-4-乙烯基苯氧基)四氫-2H-吡喃的製備

將甲基三苯基溴化膦(4g,11.17mmol)和第三丁醇鉀(1.5g,13.37mmol)加至四氫呋喃(80mL)中，氮氣保護下冷卻至0℃，加入2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯甲醛(2.5g,10.4mmol)的四氫呋喃(20mL)溶液，25℃攪拌反應3小時。加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，分液，水相用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=50：1)純化，即得標題化合物2g，產率80.6%。

(3)1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙烷-1,2-二醇的製備

將2-(3-氯-4-乙烯基苯氧基)四氫-2H-吡喃(1.6g,6.7mmol)溶於第三丁醇(20mL)和水(20mL)混合溶劑中，冷卻至0℃，加入AD-mix-beta(2g)，25℃攪拌反應6小時。加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=3：1)純化，即得標題化合物1.2g，產率65.7%。

(4)2-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙醇的製備

將1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙烷 -1,2-二醇(1g,3.67mmol)和咪唑(0.5g,7.34mmol)溶於二氯甲烷(20mL)中，加入第三丁基二甲基氯矽烷(0.7g,4.64mmol)，25℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)純化，即得標題化合物1.2g，產率84.7%。

(5)4-(2-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙氧基)-3-碘苯甲酸甲酯的製備

將2-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙醇(1g,2.58mmol)，4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯(0.7g,2.52mmol)和三苯基磷(0.8g,3.05mmol)溶於四氫呋喃(20mL)中，冷卻至0℃，氮氣保護下加入偶氮二甲酸二乙酯(0.6g,3.44mmol),25℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)純化，即得標題化合物0.9g，產率55.2%。

(6)4-(1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2-羥基乙氧基)-3-碘苯甲酸甲酯的製備

將4-(2-((第三丁基二甲基矽基)氧基)-1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)乙氧基)-3-碘苯甲酸酯(0.9g,1.39 mmol)溶於四氫呋喃(20mL)中，加入四丁基氟化銨三水合物(0.44g,1.39mmol)，25℃攪拌反應2小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)純化，即得標題化合物0.7g，產率94.6%。

(7)2-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸甲酯的製備

將4-(1-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2-羥基乙氧基)-3-碘苯甲酸甲酯(0.6g,1.13mmol)溶於1,4-二氧六環(10mL)中，加入第三丁醇鈉(0.11g,1.14mmol)，1,10-菲囉啉(25mg,0.13mmol)，碘化亞銅(24mg,0.13mmol)，氮氣保護下加熱至100℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=5：1)即得標題化合物0.25g，產率54.4%。

(8)2-(2-氯-4-羥基苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸酯(0.25g,0.62mmol)溶於無水乙醇(5mL)中，加入對甲苯磺酸吡啶鹽(20mg,0.08mmol)，加熱至80℃攪拌反應2小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，即得標題化合物0.16g，產率80.0%。

(9)4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備

將(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇(0.5g,1.76mmol)和三苯基磷(0.6g,2.29mmol)溶於四氫呋喃(5mL)中，冷卻至0℃，加入四溴化碳(0.76g,2.29mmol)，25℃攪拌反應2小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=5：1)，即得標題化合物0.5g，產率81.9%。

(10)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二氧六環-6-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸甲酯(0.12g,0.37mmol)和4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(0.13g,0.37mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中，加入碳酸鉀(0.1g,0.72mmol)，加熱至80℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，即得標題化合物0.15g，產率68.2%。

(11)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸的製備

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-6-甲酸甲酯(0.12g,0.2mmol)溶於四氫呋喃(3mL)和甲醇(3mL)中，加入一水氫氧化鋰(12mg,0.28mmol)水(1mL)溶液，25℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)和Combiflash(乙腈/水10%-35%-80%)純化，即得標題化合物20mg，產率17.1%。

分子式：C₂₈H₂₀Cl₃NO₆ 分子量：572.8 LC-MS(m/z)：572.1,574.1(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ：7.41-7.61(m,6H),6.95(d,J=8.4Hz,1H),6.89(s,1H),6.85(dd,J1=8.8Hz,J=2.6Hz,1H),5.42(dd,J1=8.4Hz,J=2.0Hz,1H),4.96(s,2H),4.45(dd,J1=11.6Hz,J=2.4Hz,1H),3.90-3.95(m,1H),2.32-2.42(m,1H),1.22-1.24(m,4H).

實施例4 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲酸的製備(化合物4)

(1)4-((4-溴-3-氯苯氧基)甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備

將4-溴-3-氯苯酚(11g,53.02mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(150mL)中，加入碘化鈉(16g,106.74mmol)、碳酸鉀(44g,318.36mmol)和4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(17.6g,58.17mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(50mL)，升溫至60℃攪拌過夜。冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(1L)稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗(200mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，粗品經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10)純化，得標題化合物(19.6g,2步產率78.5%)。

(2)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲酸甲酯的製備

將4-((4-溴-3-氯苯氧基)甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(2.1g,4.43mmol)溶於1,4-二氧六環(60mL)，加入1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲酸甲酯鹽酸鹽(1g,4.39mmol)、碳酸銫(4.3g,13.20mmol)和Brettphos-Pd(100mg,0.11mmol)，加熱至迴流反應3天。反應液加入水(20mL)和乙酸乙酯(300mL)，用飽和氯化鈉溶液洗(50mL×3)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，真空濃縮，殘餘物經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：5)純化，得標題化合物(180mg粗品)。

(3)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲酸的製備

參考實施例1步驟(7)的製備方法，加入2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-甲酸甲酯(180mg粗品)，得標題化合物(8mg,2步產率0.3%)。

分子式：C₂₉H₂₃Cl₃N₂O₄ 分子量：569.86 LC-MS(positive，m/z)：571(M+H)⁺

¹H-NMR(300MHz,CD₃OCD₃)δ：7.86-7.81(m,2H),7.60-7.52(m,3H),7.28-7.25(m,1H),7.16(d,J=8.7Hz,1H),6.95(d,J=2.7Hz,1H),6.82(dd,J1=3Hz,J2=8.7Hz,1H),4.96(s,2H),4.21(s,2H),3.30-3.26(m,2H),3.08-2.95(m,2H),2.47-2.38(m,1H),1.23-1.17(m,4H).

實施例5 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸的製備(化合物5)

(1)4-(2-胺基乙基)苯甲酸甲酯的製備

將4-(氰基甲基)苯甲酸甲酯(6.0g,34.2mmol)溶於二氧六環的氯化氫飽和溶液(10mL)中，加入甲醇(10mL)，鈀碳(10%)(0.6g)，置換氫氣後，25℃下反應24小時，過濾，濾餅用甲醇(20mL)沖洗，濾液濃縮後，經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)，得標題化合物(1.5g，產率24.6%)。

(2)4-(2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基)苯甲酸甲酯的製備

將4-(2-胺基乙基)苯甲酸甲酯(1.5g,8.4mmol)加入到三氟乙酸酐(10mL)中，25℃下攪拌反應3小時，然後將反應液倒入20mL冰水中，繼續攪拌30分鐘，將析出的固體過濾，用正己烷(10mL)洗滌，乾燥得標題化合物(1.5g，產率65.2%)。

(3)2-(2,2,2-三氟乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯的製備

冰浴下，向冰醋酸(6mL)和濃硫酸(9mL)的混合溶液中加入4-(2-(2,2,2-三氟乙醯胺基)乙基)苯甲酸甲酯(1.5g,5.5mmol)，多聚甲醛(250mg,8.3mmol)，25℃下攪拌16小時後，將反應液倒入150mL冰水中，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合併有機相，經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)，得標題化合物(1.3g，產率82.3%)。

(4)1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯的製備

將2-(2,2,2-三氟乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯(1.2g,4.2mmol)溶於甲醇(10mL)和水(4mL)的混合溶液中，加入碳酸鉀(0.9g,6.5mmol)，25℃下攪拌反應3小時，減壓蒸除甲醇後，加入水(50mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)，得標題化合物(0.6g，產率75%)。

(5)1-溴-2-氯-4-甲氧基苯的製備

將4-溴-3-氯苯酚(0.3g,1.4mol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中，加入碳酸鉀(0.3g,2.2mol)，碘甲烷(0.3g,2.1mmol)，25℃下攪拌反應2小時，加入乙酸乙酯(50mL)，加水(50mL)洗滌，飽和氯化鈉溶液(50mL)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)，得標題化合物(0.3g，產率93.7%)。

(6)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸的製備

將1-溴-2-氯-4-甲氧基苯(0.3g,1.4mmol)，1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯(0.3g,1.6mmol)溶於甲苯(10mL)中，加入1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯基膦(87mg,0.14mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(130mg,0.14mmol)，第三丁醇鈉(270mg,2.8mmol)，升溫至100℃反應8小時，反應完畢將反應液濃縮，剩餘物經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，得標題化合物(80mg，產率18%)。

(7)2-(2-氯-4-羥基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸的製備

冰浴下，將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸(80mg,0.26mmol)溶於二氯甲烷(5mL)，加入三溴化硼(125mg,0.5mmol)，升至25℃攪拌反應6小時，冷卻至0℃，向反應液中加入飽和碳酸氫鈉溶液2mL，分離得有機相，無水硫酸鈉乾燥後蒸乾溶液，得標題化合物(75mg，產率98.8%)。

(8)2-(2-氯-4-羥基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸(75mg,0.24mmol)溶於甲醇(5mL)中，滴加二氯亞碸(60mg,0.50mmol)，升溫至90℃反應2小時，將反應液濃縮，經柱層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)，得標題化合物(60mg，產率78.6%)。

(9)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯的製備

將4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(66mg,0.19mmol)，2-(2-氯-4-羥基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯(60mg,0.19mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中，加入碳酸銫(130mg,0.4mmol)，升溫至40℃攪拌反應3小時後，加入水(20mL)，乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合併有機相，經柱層析(二氯甲烷：甲醇=15：1)，得標題化合物(70mg，產率63.1%)。

(10)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸的製備

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-甲酸甲酯(70mg,0.12mmol)，溶於四氫呋喃(5mL)中，加入氫氧化鈉(10mg,0.25mmol)，25℃下攪拌反應12小時後，加入1N HCl溶液調節pH至6，將溶液蒸乾，剩餘物經柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)，得標題化合物(40mg，產率58.5%)。

分子式：C₂₉H₂₃Cl₃N₂O₄ 分子量：569.9 LC-MS(m/z)：571.1(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：7.90(d,J=8.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.42(d,J=7.2Hz,1H),7.32-7.36(m,1H),7.28(s,1H),7.00(d,J=8.8Hz,1H),6.90(d,J=2.4Hz,1H),6.71(dd,J1=8.8Hz,J2=6.0Hz,1H),4.79(s,2H),4.23(s,2H),3.30-3.33(m,2H),3.02-3.09(m,2H),2.11-2.19(m,1H),1.27-1.32(m,2H),1.14-1.16(m,2H).

實施例6 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲酸的製備(化合物6)

(1)5-氰基異喹啉的製備

將5-溴異喹啉(2.0g,9.6mmol)，氰化鋅(0.68g,5.8mmol)加入到N,N-二甲基甲醯胺(100mL)中，氮氣保護下加入四(三苯基膦)鈀(0.45g,0.39mmol)，升溫至100℃反應16小時，TLC檢測反應完全，降溫至25℃，加入水(200mL)，抽濾，濾餅用水(100mL)洗滌，真空乾燥得標題化合物(0.9g，產率60.8%)。

(2)異喹啉-5-羧酸的製備

將5-氰基異喹啉(0.9g,5.8mmol)加入到50%硫酸溶液(30mL)中，升溫至100℃反應16小時，降溫至25℃，倒入冰水(100mL)中，攪拌，析出白色沉澱，抽濾，濾餅真空乾燥，得標題化合物(0.8g，產率80%)。

(3)異喹啉-5-羧酸甲酯的製備

將異喹啉-5-羧酸(0.8g,4.62mmol)加入到甲醇(30mL)中，攪拌下加入濃硫酸(0.5mL)，升溫至83℃反應24小時，TLC檢測反應完全，減壓濃縮，粗品直接用於下一步。

(4)1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯的製備

將異喹啉-5-羧酸甲酯(粗品)加入到冰乙酸(30mL)中，攪拌下加入二氧化鉑(86mg)，置換氫氣，25℃下反應4小時。TLC檢測反應完全，抽濾，濾液濃縮，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)和乙酸乙酯(100mL)，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液濃縮，得標題化合物(0.87g，產率98.9%)。

(5)2-(2-氯-4-硝基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯的製備

將1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯(0.84g,4.4mmol)、2-氯-1-氟-4-硝基苯(0.85g,4.8mmol)和碳酸銫(2.87g,8.8mmol)加入到N,N-二甲基乙醯胺(50mL)中，升溫至70℃反應16小時，TLC檢測反應完全，加水(150mL)和乙酸乙酯(150mL)，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，抽濾，真空濃縮，粗品經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，得標題化合物(860mg，產率56.2%)。

(6)2-(4-胺基-2-氯苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-硝基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯(0.86g,2.5mmol)加入到四氫呋喃(20mL)中，氮氣保護下加入雷尼鎳(86mg，質量比10%)，置換氫氣，25℃反應1.5小時。TLC檢測反應完全，抽濾，濾液濃縮得標題化合物(730mg，產率92.2%)。

(7)2-(2-氯-4-羥基苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯的製備

將2-(4-胺基-2-氯苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-羧酸甲酯(700mg,2.2mmol)加入到1mol/L硫酸(10mL)和甲醇(2mL)的混合溶劑中，降溫至0℃，加入亞硝酸鈉(167mg,2.42mmol)，反應1小時後加入50%硫酸(10mL)，升溫至100℃反應2小時，用1mol/L氫氧化鈉水溶液調節pH為7，加入乙酸乙酯(200mL)萃取，有機相真空濃縮，粗品經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：3)，得標題化合物(130mg，產率18.6%)。

(8)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲酸甲酯的製備

製備過程參照實施例5，反應步驟(9)。

(9)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-甲酸的製備

製備過程參照實施例5，反應步驟(10)。

分子式：C₂₉H₂₃Cl₃N₂O₄ 分子量：569.9 LC-MS(m/z)：569.1(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ：7.99-7.96(m,1H),7.43-7.41(m,2H),7.36-7.29(m,3H),7.00(d,J=8.8Hz,1H),6.90(d,J=2.8Hz,1H),6.72-6.69(m,1H),4.78(s,2H),4.22(s,2H),3.43-3.41(m,2H),3.30-3.27(m,2H),2.19-2.15(m,1H),1.19-1.14(m,4H).

實施例7 6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸的製備(化合物7)

(1)6-溴-3,4-二氫萘-2-基三氟甲磺酸酯

氮氣保護下，在三口瓶中加入6-溴-3,4-二氫萘-2(1H)-酮(10g,44.43mmol)和四氫呋喃(250mL)，冷至-78℃，然後滴加二(三甲基矽基)胺基鋰(89.2mL,89.2mmol)。-78℃攪拌1小時，滴加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺醯)甲烷磺醯胺(19.1g,53.46mmol)的四氫呋喃溶液(50mL)，攪拌30分鐘，恢復至室溫攪拌30分鐘。加入30mL的水淬滅反應，用乙酸乙酯 (3×200mL)萃取，合併有機相，用水(3×50mL)洗滌，無水硫酸鎂乾燥濃縮，剩餘物經矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1：100-1：50)，得4.6g標題化合物，產率為29%。

(2)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷的製備

在三口瓶中加入1-溴-2-氯-4-甲氧基苯(10g,45.15mmol)，1,4-二氧六環(200mL)，聯硼酸頻那醇酯(12g,47.24mmol)，醋酸鉀(13.4g,136.54mmol)，Pd(dppf)Cl₂二氯甲烷複合物(1.86g,2.28mmol)。氮氣置換三次，然後加熱至90℃反應過夜。反應混合物冷卻，用乙酸乙酯(50mL)稀釋，加入水(3×100mL)洗滌。無水硫酸鎂乾燥濃縮得殘餘物，過矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1：100-1：20)，得7g的標題化合物，產率為58%。

(3)7-溴-3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-1,2-二氫萘的合成

三口瓶中加入2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(3g,11.17mmol)、1,4-二氧六環(40mL)、6-溴-3,4-二氫萘-2-基三氟甲烷磺酸酯(4.39g,12.29mmol)和碳酸鈉(2.97g,27.76mmol)的水溶液(5mL)、Pd(dppf)Cl₂ DCM(89.9mg)，置換氮氣三次，加熱至80℃反應過夜。冷卻，加入乙酸乙酯(50mL)稀釋。混合物用水(3×20mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物過矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚= 1：100-1：30)得1.5g的標題化合物，產率為38%。

(4)6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-7,8-二氫萘-2-甲腈的製備

在單口瓶中加入7-溴-3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-1,2-二氫萘(1.5g,4.29mmol)、DMF(30mL)、二氰基鋅(748mg,6.37mmol)和四(三苯基膦)鈀(497mg,0.43mmol)，抽換氮氣三次，125℃反應過夜。冷卻，濾除不溶固體，加入乙酸乙酯(50mL)稀釋。混合物用水(3×20mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物過矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1：50-1：20)。得0.9g的標題化合物，產率為71%。

(5)6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-7,8-二氫萘-2-甲酸甲酯的製備

在單口瓶中加入6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-7,8-二氫萘-2-甲腈(900mg,3.04mmol)和甲醇(15mL)，然後0℃滴加H₂SO₄(5mL)，滴加完畢，80℃反應過夜，冷卻，加入乙酸乙酯(50mL)稀釋。混合物用水(3×20mL)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物過矽膠柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1：50-1：30)得0.7g的標題化合物，產率為70%。

(6)6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

在50mL單口瓶中加入6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-7,8-二氫萘-2-甲酸甲酯(700mg,2.13mmol)、乙酸乙酯(20mL)、PtO₂(96mg)於0℃氫化1小時。濾除不溶的固體，濾液濃縮得到690mg產物，產率98%。

(7)6-(2-氯-4-羥基苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

在50mL單口瓶中加入6-(2-氯-4-甲氧基苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(680mg,2.06mmol)、二氯甲烷(30mL)，然後冷至0℃滴加BF₃(Me₂S)(2.68g)。反應液0℃攪拌5小時。然後加入二氯甲烷(50mL)稀釋，用水(3×30mL)洗滌。分出有機層乾燥，濃縮，剩餘物過柱純化(乙酸乙酯：石油醚=1：20-1：5)，得到390mg的產物，產率為60%。

(8)(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

在50mL的單口瓶中加入(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇(524mg,1.84mmol)和二氯甲烷(10mL)，然後0℃滴加入SOCl₂(871mg,7.32mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(2滴)，保持0℃攪拌30分鐘，濃縮加入6-(2-氯-4-羥基苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(390mg,1.23mmol)，N,N-二甲基甲醯胺(10mL)，碘化鈉(55mg,0.369mmol)和K₂CO₃(1.02g,7.33mmol)。混合物60℃攪拌過夜。反應混合物冷卻，加入乙酸乙酯(30mL) 稀釋，然後用水(3×30mL)洗滌。分出有機層乾燥，濃縮得到750mg的標題化合物。

(9)6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸的製備

在50mL的單口瓶中加入6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(750mg,1.29mmol)、甲醇(20mL)和氫氧化鈉(103mg,2.58mmol)的水溶液(1mL)，加熱至60℃攪拌過夜，冷卻濃縮，剩餘物用prep-HPLC純化，得到標題化合物100mg。

分子式：C₃₀H₂₄Cl₃NO_4，分子量：568.87 LC-MS(ES,m/z)：566(M+H)⁺

¹H-NMR(DMSO,ppm)：δ：7.5-7.7(m,5H),7.25-7.3(m,3H),6.91(s,1H),6.7-6.8(m,1H),4.9(s,2H),2.8-2.99(m,5H),1.8-1.9(m,2H),1.11-1.29(m,5H).

實施例8 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)二氫異吲哚-5-甲酸製備(化合物8)

(1)3,4-二甲基苯甲酸甲酯的製備

將3,4-二甲基苯甲酸(5.0g，33.3mmol)溶於甲醇(50 mL)中，冰水浴下逐滴加入氯化亞碸(7.9g,66.4mmol)，升至25℃，繼續攪拌6小時，除去溶劑，剩餘物繼續用於下一步。

(2)3,4-二(溴甲基)苯甲酸甲酯的製備

將3,4-二甲基苯甲酸甲酯(5.4g,32.9mmol)，N-溴代丁二醯亞胺(12.8g,71.9mmol)和催化量的過氧化苯甲醯(100mg,0.4mmol)溶於四氯化碳(50mL)中，加熱至80℃，反應12小時。冷卻至25℃，過濾，濾液用飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，得標題化合物10.6g，產率100.0%。

(3)2-(4-甲氧基苄基)異吲哚-5-甲酸甲酯的製備

將3,4-二(溴甲基)苯甲酸甲酯(10.6g,32.9mmol)溶於四氫呋喃(50mL)中，加入對甲氧基苄胺(4.5g,32.8mmol)和三乙胺(6.6g,65.3mmol)，25℃下攪拌16小時，除去溶劑，加入乙酸乙酯(100mL)和水(30mL)，分液，除去有機相，剩餘物經柱層析分離(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，得標題化合物4.5g，產率46%。

(4)二氫異吲哚啉-5-甲酸甲酯的製備

將2-(4-甲氧基苄基)異吲哚-5-甲酸甲酯(1.7g,5.7mmol)溶於二氯甲烷(50mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸酯(5.7g, 39.9mmol)，25℃下攪拌反應30小時，加入甲醇(5mL)，繼續攪拌1小時。將溶劑除去，加入乙酸乙酯(100mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(20mL)，分液，濃縮，剩餘物經柱層析分離(二氯甲烷：甲醇=20：1)，得標題化合物0.7g，產率70%。

(5)1-溴-2-氯-4-甲氧基苯的製備

將4-溴-3-氯苯酚(2.0g,9.6mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中，加入碳酸鉀(2.0g,14.5mol)，碘甲烷(1.6g,11.3mmol)，25℃下攪拌反應2小時，加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾。濃縮，剩餘物經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)，得標題化合物1.7g，產率80%。

(6)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯的製備

將1-溴-2-氯-4-甲氧基苯(0.62g,2.8mmol)，二氫異吲哚-5-甲酸甲酯(0.5g,2.8mmol)溶於甲苯(10mL)中，加入1,1'-聯萘-2,2'-雙二苯膦(0.35g,0.56mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀(0.26g,0.28mmol)，第三丁醇鈉(0.82g,8.5mmol)，升溫至100℃反應8小時，將反應液濃縮，剩餘物經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)，得產物0.15g，產率16.9%。

(7)2-(2-氯-4-羥基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸的製備

冰浴下，將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯(0.15g,0.47mmol)溶於二氯甲烷(5mL)，加入三溴化硼(1.9mL,1.9mmol)，升至25℃攪拌反應6小時，冷卻至0℃，向反應液中加入飽和碳酸氫鈉溶液(2mL)，濃縮，剩餘物經柱層析(二氯甲烷：甲醇=30：1)，得標題化合物0.07g，產率50%。

(8)2-(2-氯-4-羥基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸(0.07g,0.24mmol)溶於甲醇(5mL)中，滴加二氯亞碸(0.06g,0.50mmol)，升溫至90℃反應2小時，將反應液濃縮，剩餘物經柱層析(二氯甲烷：甲醇=30：1)，得標題化合物0.05g，產率68.5%。

(9)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯的製備

參考實施例5步驟(9)中的製備方法，加入將4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(0.055g,0.16mmol)，2-(2-氯-4-羥基苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯(0.05g,0.16mmol)得產物0.03g，產率33.0%。

(10)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)二氫異吲哚-5-甲酸的製備

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)二氫異吲哚-5-甲酸甲酯(0.03g,0.05mmol)，溶於甲醇(5mL)中，加入一水氫氧化鋰(21mg,0.5mmol)，25℃下攪拌反應48小時，濃縮，加入水(5mL)，加入1N HCl溶液調pH至6，濃縮，剩餘物經柱層析(二氯甲烷：甲醇=15：1)，得標題化合物15mg，產率53.9%。

分子式：C₂₈H₂₁Cl₃N₂O₄ 分子量：555.8 LC-MS(m/z)：555.1(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ：7.94(s,2H),7.48-7.53(m,3H),7.37(d,J=8.4Hz,1H),7.12(d,J=9.2Hz,1H),6.81(d,J=2.8Hz,1H),6.72(dd,J=9.2Hz,2.8Hz,1H),4.67(s,2H),4.58(s,4H),2.31-2.37(m,1H),0.88-0.92(m,4H).

實施例9 (R)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備(化合物9)

(1)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

具體製備方法參考實施例1步驟(1)-(5)的製備。

(2)(R)-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯和(S)-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的拆分

將2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的粗品(4.5g)通過手性製備柱(Chiral-Prep-HPLC)進行分離：手性柱，DAICEL CHIRALPAK AD-H；流動相，流動相A：正己烷(0.1% TFA)，流動相B：異丙醇，A：B=80：20。得到(R)-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(2.3g，粗品)和(S)-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(1.2g)。

(3)(R)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

將(5-環丙烷基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲醇(1.066g,3.75mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)加到一個50mL的圓底燒瓶中，然後在室溫攪拌的條件下向溶液中緩慢滴加亞磺醯氯(10mL)，加料完全後，室溫攪拌2.5小時，減壓濃縮得到粗品。另取一個100mL的三口燒瓶，依次加入(R)-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(1g,3.14mmol)的DMF溶液(40mL)，碳酸鉀(2.167g)，碘化鈉(1.4g)。室溫攪拌下，向其中緩慢滴加上面得到的粗品的DMF溶液，加料完全後，60℃攪拌18h。向反應液中加入乙酸乙酯(200mL)，然後用飽和食鹽水(50mL×3)洗滌，分出有機相用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，得到產物(粗品，1.6 g)。

(4)(R)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備

將(R)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(1.6g，粗品)的甲醇/水(20/5mL)溶液加到一個50mL的圓底燒瓶中，0℃條件下，向其中分批加入氫氧化鋰(328.8mg)，加料完全後，室溫攪拌2天。用檸檬酸將反應液的pH值調至4-5，然後加入乙酸乙酯(100mL)，用飽和食鹽水(50mL×2)洗滌，有機相用無水硫酸鎂乾燥，減壓濃縮。殘留物經過快速分離(乙腈，水，1%氨水)，得到標題化合物270mg，兩步產率為15.1%。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS：(ES,m/z)：568.1(M-1)^-

¹H-NMR(300MHz,DMSO,ppm)：δ 12.5(brs,1H),7.52-7.75(m,5H),7.37-7.40(d,J=8.7Hz,1H),6.97-6.97(d,J=2.4Hz,1H),6.82-6.89(m,2H),5.32-5.36(m,1H),4.94(s,2H),2.98-3.02(m,1H),2.79-2.84(m,1H),2.44(m,1H),2.14-2.19(m,1H),1.95-2.07(m,1H),1.10-1.23(m,4H).

實施例10 (S)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備(化合物10)

(1)(S)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

製備方法參考實施例9步驟(3)，得到標題化合物粗品。

(2)(S)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備

製備方法參考實施例9步驟(4)，得到標題化合物(150mg)，兩步產率為16.7%。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS：568.1(M-1)^-

¹H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ 7.52-7.73(m,5H),7.37-7.40(d,J=8.4Hz,1H),6.96-6.97(d,J=2.4Hz,1H),6.82-6.87(m,2H),5.31-5.35(m,1H),4.94(s,2H),2.97-3.01(m,1H),2.73-2.83(m,1H),2.43(m,1H),2.18-2.27(m,1H),1.94-1.99(m, 1H),1.12-1.21(m,4H).

實施例11 (S)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸的製備(化合物11)

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(291mg,0.52mmol，製備方法見實施例2，步驟1-5)進行拆分，拆分條件：層析柱DAICEL CHIRALPAK AD-3(4.6mm×50mm,3.0μm),column temp：25℃,phase A：n-Hexane(0.1%TFA)，phase B：Ethanlol，total flow：1.0mL/min，Wavelength：from 190nm to 500nm，得產物60mg，產率20.6%，ee值為99.66%。

分子式：C₂₈H₂₀Cl₃NO₅ 分子量：556.8 LC-MS(m/z)：554(M-H⁺)

¹H-NMR(300MHz,DMSO)δ：7.80(d,J=5.1Hz,2H),7.59-7.63(m,2H),7.52-7.56(m,1H),7.27(d,J=9.0Hz,1H),7.01(d,J=2.7Hz,1H),6.96(d,J=3.9Hz,1H),6.78(dd,J₁=2.7Hz,J₂=5.7Hz,1H),6.03-6.09(m,1H),4.93(s,2H),3.71-3.80(m,1H),3.04-3.13(m,1H),2.43-2.45(m,1H),1.10-1.22(m,4H).

實施例12 (R)-2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸的製備(化合物12)

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(291mg,0.52mmol，製備方法見實施例2，步驟1-5)進行拆分，拆分條件與實施例11中的拆分條件相同，得到產物90mg，產率30.9%，ee值為90.48%。

分子式：C₂₈H₂₀Cl₃NO₅ 分子量：556.8 LC-MS(m/z)：556(M+H⁺)

¹H-NMR(300MHz,DMSO)δ：7.80(d,J=5.7Hz,2H),7.59-7.63(m,2H),7.52-7.56(m,1H),7.27(d,J=9.0Hz,1H),7.01(d,J=2.7Hz,1H),6.96(d,J=3.6Hz,1H),6.78(dd,J₁=2.7Hz,J₂=5.7Hz,1H),6.03-6.09(m,1H),4.93(s,2H),3.71-3.80(m,1H),3.04-3.13(m,1H),2.43-2.45(m,1H),1.10-1.22(m,4H).

實施例13 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸的製備(化合物13)

(1)2-甲醯基-3-羥基苯甲酸甲酯的製備

將3-羥基苯甲酸甲酯(30.00g,197.2mmol)，加入到三氟乙酸(500mL)中，慢慢加入HMTA(33.20g,236.8mmol)，加完，升溫至80℃下反應6小時，反應液傾入到1.5L冰水中，加入1L乙酸乙酯萃取，有機相依次用水和飽和食鹽水各800mL洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=8：1)得標題化合物20.30g，產率57.1%。

(2)1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙-1-酮的製備

0℃下將間氯苯甲醚(30.00g,210.4mmol)滴加到含有乙醯氯(19.80g,252.2mmol)和無水氯化鋁(36.45g,273.4mmol)的DCM(200mL)溶液中，滴畢，繼續反應2小時。將反應液傾入到冰水(500mL)中，加入1M的HCl(300mL)和DCM(800mL)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=10：1)得標題化合物13.7g，產率35.3%。

(3)2-溴-1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙-1-酮的製備

將1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙-1-酮(8.01g,43.4mmol)溶解於二氯甲烷(200mL)中，冰水浴下滴加溴素(6.94g,43.4mmol)，滴畢，繼續反應2小時。反應液直接濃縮經柱層析(PE：EA=8：1)得產物8.34g，產率73.0%。

(4)(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)膦酸二乙酯的製備

將2-溴-1-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙-1-酮(8.34g,31.7mmol)和亞磷酸三乙酯(7.89g,47.6mmol)加入到甲苯(100mL)中，升溫至110℃反應24小時。反應液直接濃縮經柱層析(PE：EA=5：1)得產物4.40g，產率43.3%。

(5)2-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-3-羥基苯甲酸甲酯的製備

將(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)膦酸二乙酯(4.40g,13.7mmol)，2-甲醯基-3-羥基苯甲酸甲酯(4.90g,27.4mmol)和DBU(4.20g,27.4mmol)，加入到THF(100mL)中，反應3小時。加入水和乙酸乙酯各200mL萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=5：1)得標題化合物2.08g，產率43.7%。

(6)2-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-3-羥基苯甲酸甲酯的製備

將2-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-3- 羥基苯甲酸甲酯(1.50g,4.3mmol)，加入到THF(50mL)中，加入Pt/C(150mg)，氫氣氛下反應2小時。抽濾，濾餅用THF(10mL)洗，濾液直接用於下一步反應。

(7)2-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-3-羥基苯甲酸甲酯的製備

將上步所得濾液(60mL)置於250mL燒瓶中，加入硼氫化鈉(197mg,5.2mmol)，加完攪拌1小時。加入水和乙酸乙酯各100mL萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經柱層析(PE：EA=1：1)得標題化合物1.45g，兩步產率95.6%。

(8)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯的製備

將2-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-3-羥基苯甲酸甲酯(1.45g,4.1mmol)，三苯基膦(5.37g,20.5mmol)和DEAD(3.57g,20.5mmol)加入到THF(50mL)中反應2小時。反應液直接旋乾，剩餘物經柱層析(PE：EA=25：1)得標題化合物800mg，產率58.1%。

(9)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯的製備

2-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯(800mg,2.4mmol)溶於DCM(20ml)中，-10℃下滴加1M的三溴化硼的DCM溶液(7.2mL)，滴畢，繼續反應2小時。加入5mL水淬滅。加入水(50mL)和DCM(80mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(60mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=10：1)得標題化合物90mg，產率11.7%。

(10)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯(90mg,0.28mmol)，4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(145mg,0.42mmol)和碳酸鉀(77mg,0.56mmol)加入到DMF(5mL)中，反應2小時。加入水和乙酸乙酯各80mL萃取，有機相用飽和食鹽水(60mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=3：1)得標題化合物120mg，產率72.7%。

(11)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸的製備

將甲基2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-5-羧酸甲酯(120mg,0.2mmol)加入到THF(2mL)中，加入甲醇(2mL)，水(2mL)，再加入一水合氫氧化鋰(51mg,1.2mmol)，反應6小時。用1M的HCl調節pH至2，加入水(30mL)和乙酸乙酯(60mL)萃取，有機相用飽和食鹽水(30mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(DCM：MeOH=20：1)得標題化合物28mg，產率23.9%。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS(M/e)：570.1(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ：7.65-7.60(m,2H),7.59-7.51(m,1H),7.48-7.39(m,2H),7.25-7.17(m,1H),7.03(d,J=1.2Hz,1H),7.01(d,J=1.2Hz,1H),6.90-6.80(m,1H),5.30-5.25(m,1H),4.94(s,2H),3.20-3.10(m,2H),2.49-2.40(m,1H),2.22-2.10(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.23-1.17(m,2H),1.17-1.11(m,2H).

實施例14 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸的製備(化合物14)

(1)(E)-1-(4-溴-2-羥基苯基)-3-(2-氯-4-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮的製備

參考實施例1步驟(1)中的製備方法製備，加入1-(4-溴-2-羥基苯基)乙-1-酮(27.4g,127.42mmol)，2-氯-4-羥基苯甲醛(20g,127.74mmol)，得產物36g(產率80%)。

(2)7-溴-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-4-酮的製備

3L的四口燒瓶中，將(E)-1-(4-溴-2-羥基苯基)-3-(2-氯-4-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮(36g,101.81mmol)溶於甲醇(720mL)和鹽酸(12N,720mL)混合溶劑中，升溫至73℃反應72小時。將反應液倒入3L冰水中攪拌出現大量沉澱，抽濾，濾餅乾燥得產物21g(產率58%)。

(3)4-(7-溴色滿-2-基)-3-氯苯酚的製備

參考實施例1步驟(3)的製備方法，加入7-溴-2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-4-酮(21g,59.39mmol)得產物13g(產率64%)。

(4)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-甲腈的製備

250mL三口圓底瓶中加入4-(7-溴色滿-2-基)-3-氯苯酚(13g,38.28mmol)，參考實施例1步驟(4)的製備方法，得產物6.0g(產率55%)。

(5)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-甲酸甲酯的製備

參考實施例1步驟(5)的製備方法，加入2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-甲腈(6g,21.00mmol)，得產物2.5g(產率37%)。

(6)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸甲酯的製備

參考實施例1步驟(6)的製備方法，加入2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-甲酸甲酯(2.5g,7.84mmol)，4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(2.84g,9.39mmol)，得產物1.2g(產率26%)。

(7)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸的製備

向100mL三口瓶中加入2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸甲酯(1.2g,2.05mmol)的甲醇和水的混合溶劑，降溫至0℃，分批加入氫氧化鋰一水合物(260mg,6.19mmol)，升溫至30℃反應2天。用鹽酸(1mol/L)調節pH=4，加入乙酸乙酯(500mL)和飽和食鹽水(500mL)，分出有機相用飽和食鹽水洗滌(2×500mL)，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，剩餘物經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=4：1~1：1)得產物0.28g(產率24%)。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS：(ES,m/z)：570(M+1)⁺

¹H NMR：(300MHz,DMSO-d₆,ppm)：δ 12.82(brs,1H),7.64-7.39(m,5H),7.32-7.31(d,J=1.2Hz,1H),7.26-7.23(m,1H),6.70-6.69(d,J=2.4Hz,1H),6.86-6.85(m,1H),5.31-5.28(d,J=9.0Hz,1H),4.93(s,2H),3.07-2.73(m,2H),2.47-2.45(m,1H),2.19-2.14(m,1H),1.99-1.90(m,1H),1.23-1.134(m,4H).

實施例15 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸的製備(化合物15)

(1)水楊酸甲酯的製備

將水楊酸(20.0g,0.14mol)加入到甲醇(100ml)中，25℃下向該體系分批滴加氯化亞碸(20.7g,0.17mol)，升至50℃攪拌反應12小時，將反應液旋乾，向該反應體系中加入二氯甲烷(500ml)，用碳酸氫鈉調節pH值至7，分出有機相，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到標題化合物(20.0g，產率90.9%)。

(2)3-醛基-2-羥基苯甲酸甲酯的製備

將水楊酸甲酯(20.0g,0.13mol)加入到三氟乙酸(200mL)中，向此體系中加入烏洛托品(28.0g,0.2mol)，氧化亞銅(14.8g,0.13mol)，加熱至60℃攪拌反應24小時，反應液倒入水(1000ml)中，加入二氯甲烷(500ml)，分出有機相，旋轉蒸發除去溶劑，剩餘物經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10)純化，得到標題化合物(7.0g，產率29.5%)。

(3)二乙基(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧乙基)膦酸酯的製備

將間氯苯甲醚(15.0g,0.11mol)加入到三氟乙酸酐(115.5g,0.55mol)中，再加入二乙基磷乙酸(25.5g,0.13mol)，25℃下滴加磷酸(15.0g)，25℃攪拌反應24小時，反應液倒入冰水(500ml)中，用二氯甲烷(500ml)萃取，分出有機相，將反應液濃縮，剩餘物經柱層析(二氯甲烷：甲醇=50：1)純化，得到標題化合物(18.0g，粗品)。

(4)(E,Z)-3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-羥基苯甲酸甲酯的製備

將二乙基(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧乙基)膦酸酯(5.9g,18.5mmol)，3-醛基-2-羥基苯甲酸甲酯(3.0g,16.6mmol)，1,5-二氮雜二環[5.4.0]十一-5-烯(3.4g,22.2mmol)加入到四氫呋喃(50ml)中，25℃下攪拌反應24小時，將反應液濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(乙酸乙酯：石油醚=1：10)純化，得到標題化合物(2.0g，產率34.7%)。

(5)3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-2-羥基苯甲酸甲酯的製備

將(Z)-3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-羥基苯甲酸甲酯(1.0g,2.9mmol)，加入到四氫呋喃(20ml)中，用氫氣置換3次，25℃下氫化反應12小時，反應液過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(900mg，產率90%)。

(6)3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥丙基)-2-羥基苯甲酸甲酯的製備

將3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-2-羥基苯甲酸甲酯(900mg,2.6mmol)加入到四氫呋喃(20ml)中，加入硼氫化鈉(97.5mg,2.6mmol)，25℃下攪拌反應2小時，將反應液加入水(50ml)、乙酸乙酯(30ml)，分出有機相，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到產物(900mg，粗品)。

(7)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸甲酯的製備

將3-(3-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥丙基)-2-羥基苯甲酸甲酯(900mg,2.6mmol)加入到四氫呋喃(20ml)中，加入三苯基膦(1.3g,5.0mmol)，偶氮二甲酸二乙酯(0.89g,5.13mmol)，25℃攪拌反應12小時，反應液濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20：1)得到產物(300mg，產率35.0%)。

(8)2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-8甲酸甲酯(300.0mg,0.9mmol)加入到二氯甲烷(20ml)中，降溫至-25℃，滴加三溴化硼(1.1g,4.5mmol)，反應1小時，將反應液中滴加甲醇(10ml)，用碳酸氫鈉水溶液調節pH至7，分出有機相經柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20：1)得到標題化合物(120mg，產率41.8%)。

(9)2-(2-氯-4-(5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸甲酯(120.0mg,0.38mmol)，4-溴甲基-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(131.9mg,0.38mmol)，加入到N,N-二甲基甲醯胺(10ml)和碳酸銫(245.3mg,0.75mmol)中，加熱至50℃，反應1小時，將反應液倒入水(50ml)中，用乙酸乙酯(100ml)萃取，分出有機相，用無水硫酸鈉乾燥，旋轉蒸發除去溶劑得標題化合物(100mg，產率45.5%)。

(10)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸的製備

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-8-甲酸甲酯(100mg,0.17mmol)，加入氫氧化鋰(20.5mg,0.85mmol)，四氫呋喃(1ml)，水(1ml)，25℃下攪拌12小時，加入乙酸乙酯(100ml)分出有機相，無水硫酸鈉乾燥，旋轉蒸發除去溶劑，得到標題化合物(60.8mg，產率62.0%)。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：570.85 LC-MS(M/e)：569.8,571.7(M+H⁺)

¹H NMR(CDCl₃)δ：8.05-8.06(d,J=6.4Hz,1H),7.32-7.43(m,5H),7.05-7.09(m,1H),6.88(s,1H),6.77-6.80(m,1H),5.59-5.62(d,J=10.4Hz,1H),4.84(s,2H),2.87-3.15(m,2H),2.05-2.17(m,3H),1.16-1.33(m,5H)。

實施例16 3-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸的製備(化合物16)

(1)3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯的製備

稱取3-羥基-4-甲基苯甲酸(5.0g,32.8mmol)加入到100mL乙醇中，滴加0.5mL濃硫酸，升溫至81℃反應24小時，濃縮，加入水和乙酸乙酯各100mL，分層得有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得產物(5.17g，產率87.5%)。

(2)1-(溴甲基)-2-氯-4-甲氧基苯的製備

將2-氯-4-甲氧基-1-甲基苯(4.46g,28.5mmol)加入到60mL四氯化碳中，加入NBS(5.06g,28.4mmol)和AIBN(468mg,2.85mmol)，升溫至80℃反應2.0小時，降溫至25℃，抽濾，濾液濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=10：1)得產物(5.52g，產率82.3%)。

(3)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙腈的製備

將1-(溴甲基)-2-氯-4-甲氧基苯(5.52g,23.4mmol)和碳酸鉀(6.46g,46.8mmol)加入到100mL乙腈中，攪拌下加入TMSCN(2.78g,28.0mmol)。升溫至60℃反應8.0小時，TLC檢測反應完全，濃縮，加入水(100mL)和乙酸乙酯(150mL)，分層得有機相，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=5：1)得產物(4.1g，產率96.5%)。

(4)3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基苯甲酸乙酯的製備

將3-羥基-4-甲基苯甲酸乙酯(5.17g,28.7mmol)溶於DCM(100mL)，降溫至0℃，加入DIPEA(8.14g,63.1mmol)和氯甲基甲醚(4.62g,57.4mmol)，升溫至25℃反應24小時，TLC檢測反應完全，濃縮，加入水和乙酸乙酯各150mL，分層得乙酸乙酯相，EA相用水洗，飽和氯化鈉水溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得產物(5.8g，產率90.1%)。

(5)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酸的製備

將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙腈(4.1g,22.6mmol)加入到HAc(60mL)和水(60mL)的混合溶劑中，攪拌下滴加濃硫酸(20mL)，升溫至100℃反應8.0小時，將反應液倒入冰水中，攪拌出現白色沉澱，抽濾，濾餅乾燥得產物(3.84g，產率84.8%)。

(6)2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酸乙酯的製備

將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酸(3.84g,19.1mmol)和乙醇(2.64g,57.4mmol)加入到60mL二氯甲烷中，加入三乙胺(1.93g,19.1mmol)和EDCi(3.67g,19.1mmol)，攪拌下加入DMAP(93mg,0.76mmol)，25℃反應4.0小時，TLC檢測反應完全，濃縮，加水和乙酸乙酯各100mL，分層得乙酸乙酯相，乙酸乙酯相用1N HCl(50mL)洗，飽和氯化鈉水溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得產物(4.1g，產率93.8%)。

(7)4-(溴甲基)-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸乙酯的製備

將3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基苯甲酸乙酯(2.24g,10mmol)加入到40mL四氯化碳中，加入NBS(1.78g,10mmol)和AIBN(164mg,1.0mmol)，升溫至80℃反應2.0小時，降溫至25℃，抽濾，濾液濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=5：1)得產物(2.7g，產率89.1%)。

(8)4-(2-(2-氯-4-甲基苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸乙酯的製備

將2-(2-氯-4-甲氧基苯基)乙酸乙酯(1.1g,4.81mmol)溶於20mL四氫呋喃中，降溫至0℃，加入NaHMDS(2.0M,4.8mL,9.6mmol)，0℃下攪拌1.0小時後加入4-(溴甲基)-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸乙酯(1.46g,4.82mmol)，升溫至25℃反應18小時，加入水(50mL)和EA(100mL)，分層得EA相，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=2：1)得產物(1.5g，產率69.1%)。

(9)4-(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)-3-羥基苯甲酸乙酯的製備

將4-(2-(2-氯-4-甲基苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸乙酯(1.5g,3.33mmol)加入到10mL TFA和DCM(20mL)混合溶劑中，25℃下反應4.0小時，LC-MS檢測反應完全，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：DCM=1：3)得產物(620mg，產率45.9%)。

(10)4-(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-3-羥基苯甲酸乙酯的製備

將4-(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-乙氧基-3-氧代丙基)-3-羥基苯甲酸乙酯(620mg,1.52mmol)加入到20mL四氫呋喃中，降溫至0℃，緩慢加入四氫鋁鋰(58mg,1.53mmol)。0℃反應40min後加入1ml水淬滅反應，抽濾，濾液濃縮，剩餘物經柱層析(EA：DCM=1：4)得產物(130mg，產率23.5%)。

(11)3-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯的製備

將4-(2-(2-氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-3-羥基苯甲酸乙酯(130mg,0.36mmol)加入到20mL四氫呋喃中，降溫至 0℃，加入三苯基膦(283mg,1.08mmol)和DEAD(188mg,1.08mmol)，25℃下反應18小時，LC-MS檢測反應完全，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=25：1)得產物(120mg，產率96.0%)。

(12)3-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯的製備

將3-(2-氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯(120mg,0.35mmol)加入到5mL DCM中，降溫至0℃，加入1M BBr₃的二氯甲烷溶液(1.4mL,1.4mmol)，升溫至10℃反應1.5小時，LC-MS檢測反應完全，加入1mL甲醇，濃縮，剩餘物經柱層析(PE：EA=9：1)得產物(100mg，產率85.8%)。

(13)3-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯的製備

將3-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯(100mg,0.30mmol)和4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(114mg,0.33mmol)加入到10mL DMF中，攪拌下加入碳酸鉀(83mg,0.60mmol)，升溫至50℃反應2.0小時，LC-MS檢測有產物生成，降溫至25℃，加入30mL水，超音波出現沉澱，抽濾，濾餅乾燥得產物(130mg，產率72.2%)。

(14)3-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸的製備

將3-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-7-羧酸乙酯(130mg,0.22mmol)溶於THF(4mL)，MeOH(2mL)和水(1mL)的混合溶劑中，25℃下加入一水合氫氧化鋰(37mg,0.88mmol)，反應18小時，LC-MS檢測反應完全，加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，分層得乙酸乙酯相，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(DCM：MeOH=10：1)得產物(80mg，產率63.7%)。

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ：7.52-7.42(m,5H),7.20(d,J=8.0Hz,1H),7.13(d,J=8.8Hz,1H),6.86(d,J=2.8Hz,1H),6.72(dd,J₁=2.8Hz,J₂=8.8Hz,1H),4.90(s,2H),4.30(dd,J₁=3.2Hz,J₂=10.4Hz,1H),4.06(t,1H),3.63-3.61(m,1H),3.05(d,J=7.6Hz,2H),2.34-2.30(m,1H),1.21-1.19(m,4H)。

實施例17 2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備(化合物17)

(1)4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯的製備

將4-羥基苯甲酸甲酯(3.55g,23.3mmol)溶於乙酸(20mL)中，滴加入氯化碘(3.78g,23.3mmol)的乙酸(5mL)溶液，加熱至65℃攪拌反應16小時。將反應液過濾，濾餅用水(20mL)洗滌，乾燥即得標題化合物(4.0g，產率61.7%)。

(2)1-(4-甲氧基苯基)乙烷-1-酮的製備

將1-(4-羥基苯基)乙烷-1-酮(5g,36.8mmol)溶於乙腈(50mL)中，加入碳酸鉀(10g,72.3mmol)，冷卻至0℃，加入碘甲烷(6.3g,44.4mmol)，升溫至25℃攪拌反應3小時。將反應液過濾，濾液濃縮即得標題化合物(5.2g，產率94.5%)。

(3)1-(4-甲氧基苯基)-2-丙烯基-1-酮的製備

將1-(4-甲氧基苯基)乙烷-1-酮(5g,33.3mmol)，N-甲基三氟乙酸苯胺(11g,49.7mmol)和多聚甲醛(10g,333.3mmol)加至四氫呋喃(100mL)中，加熱至80℃攪拌反應24小時。將反應液過濾，濾液中加入乙酸乙酯(100mL)和水(150mL)，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮即得標題化合物粗品(3.9g)，直接用於下一步反應。

(4)甲基4-羥基-3-(3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基-1-烯-1-基)苯甲酸酯的製備

將1-(4-甲氧基苯基)-2-丙烯基-1-酮(3.5g，粗品)，4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯(6g,21.6mmol)，三乙胺(7g,69.2mmol)，三苯基膦(0.3g,1.14mmol)，乙酸鈀(0.4g,1.78mmol)加至乙腈(100mL)中，加熱至90℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)純化即得標題化合物(0.9g，兩步產率8.6%)。

(5)甲基4-羥基-3-(3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)苯甲酸酯的製備

將甲基4-羥基-3-(3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基-1-烯-1-基)苯甲酸酯(0.9g,2.88mmol)溶於甲醇(10mL)中，加入鈀碳(0.1g)，25℃氫氣加壓下攪拌反應16小時。將反應液過濾，濾液濃縮即得標題化合物(0.85g，產率94.4%)。

(6)甲基4-羥基-3-(3-羥基-3-(4-甲氧基苯基)丙基)苯甲酸酯的製備

將甲基4-羥基-3-(3-(4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)苯甲酸酯(0.85g,2.7mmol)溶於無水乙醇(10mL)中，加入硼氫化鈉(0.2g,5.3mmol)，25℃攪拌反應16小時。加入稀鹽酸(20mL， 1M)淬滅反應，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物(0.5g，產率58.1%)。

(7)甲基2-(4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯的製備

將甲基4-羥基-3-(3-羥基-3-(4-甲氧基苯基)丙基)苯甲酸酯(0.5g,1.58mmol)和三苯基膦(0.5g,1.91mmol)溶於四氫呋喃(10mL)中，冷卻至0℃，加入偶氮二甲酸二乙酯(0.4g,2.3mmol)，氮氣保護下25℃攪拌反應16小時。加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)分液，水相用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20：1)純化即得標題化合物(0.37g，產率78.7%)。

(8)2-(4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將甲基2-(4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯(0.37g,1.24mmol)溶於二氯甲烷(10mL)中，冷卻至-60℃，加入三溴化硼(0.93g,3.71mmol)，升溫至25℃攪拌反應6小時。將反應液用水(20mL)淬滅，加入乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮即得標題化合物(0.3g，產率89.5%)。

(9)甲基2-(4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯的製備

將2-(4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸(0.3g,1.11mmol)溶於無水甲醇(10mL)中，滴加入氯化亞碸(0.13g,1.1mmol)，加熱至60℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，加入乙酸乙酯(50mL)，用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)洗滌，加入無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=5：1)即得標題化合物(0.2g，產率63.4%)。

(10)甲基2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯的製備

將甲基2-(4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯(0.15g,0.53mmol)和4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(0.2g,0.58mmol)溶於乙腈(10mL)中，加入碳酸鉀(0.15g,1.1mmol)，加熱至80℃攪拌反應6小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯=1：1)即得標題化合物(0.1g，產率34.5%)。

(11)2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將甲基2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸酯(0.1g,0.18mmol)溶於四氫呋喃(3mL)和甲醇(3mL)中，加入一水合氫氧化鋰(15mg,0.36mmol)水(1mL)溶液，25℃攪拌反應16小時。將反應液濃縮，所得粗品用矽膠柱層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)純化即得標題化合物(50mg，產率51.5%)。

分子式：C₂₉H₂₃Cl₂NO₅ 分子量：536.41 LC-MS(M/e)：536.2(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ：7.71(s,1H),7.66(d,J=8.4Hz,1H),7.61(d,J=8Hz,2H),7.53-7.58(m,1H),7.27(d,J=8.8Hz,2H),6.80-6.85(m,3H),5.08(d,J=10Hz,1H),4.86(s,1H),2.91-3.00(m,1H),2.73-2.80(m,1H),2.42-2.50(m,1H),2.08-2.15(m,1H),1.95-2.02(m,1H),1.10-1.23(m,4H).

實施例18 2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備(化合物18)

(1)1-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)乙酮的製備

將1-(6-羥基吡啶-3-基)乙酮(3.0g,21.9mmol)溶於甲苯(30mL)，加入碳酸銀(9.1g,33.3mmol)，緩慢滴加溴化苄(3.8g,22.2mmol)，滴加完畢，升溫至100℃，攪拌反應12小時，將反應液過濾，濾液濃縮得標題化合物(3.9g，產率78.3%)。

(2)1-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮的製備

將1-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)乙酮(3.8g,16.7mmol)，N-甲基三氟乙酸苯胺(5.5g,24.9mmol)和多聚甲醛(5.0g,166.7mmol)加至四氫呋喃(50mL)中，升溫至80℃攪拌反應24小時。將反應液過濾，濾液中加入乙酸乙酯(100mL)和水(150mL)，分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥後濃縮，得標題化合物粗品(2.0g)，直接用於下一步反應。

(3)(E)-3-(3-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

將1-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮粗品(2.0g)，4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯(2.3g,8.4mmol)，三乙胺(2.6g,25.7 mmol)，三苯基膦(100mg,0.38mmol)，乙酸鈀(128mg,0.57mmol)加至乙腈(30mL)中，升溫至90℃攪拌反應12小時。將反應液濃縮，經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)純化，得標題化合物(0.5g，兩步產率7.7%)。

(4)4-羥基-3-(3-(6-羥基吡啶-3-基)-3-氧代丙基)苯甲酸甲酯的製備

將(E)-3-(3-(6-(苄基氧基)吡啶-3-基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4-羥基苯(0.5g,1.3mmol)溶於甲醇(5mL)中，加入鈀碳10%(50mg)，25℃氫氣加壓下攪拌反應12小時。過濾，濾液濃縮得產物(0.3g，產率77.5%)。

(5)4-羥基-3-(3-羥基-3-(6-羥基吡啶-3-基)丙基)苯甲酸甲酯的製備

將4-羥基-3-(3-(6-羥基吡啶-3-基)-3-氧代丙基)苯甲酸甲酯(0.3g,1.0mmol)溶於無水甲醇(5mL)中，加入硼氫化鈉(115mg,3.0mmol)，25℃攪拌反應1小時後，降溫至0℃加入稀鹽酸(1M)調節pH=7，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：1)得標題化合物(290mg，產率96.7%)。

(6)2-(6-羥基吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將4-羥基-3-(3-羥基-3-(6-羥基吡啶-3-基)丙基)苯甲酸甲酯(290mg,0.96mmol)和三苯基膦(0.76g,2.9mmol)溶於四氫呋喃(10mL)中，冷卻至0℃，加入偶氮二甲酸二乙酯(0.5g,2.9mmol)，氮氣保護下25℃攪拌反應12小時。加入水(10mL)和乙酸乙酯(20mL)分液，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，粗品經矽膠柱層析(二氯甲烷：甲醇=40：1)得標題化合物(112mg，產率41.0%)。

(7)2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將2-(6-羥基吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(100mg,0.35mmol)，4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(122mg,0.35mmol)，碳酸銀(193mg,0.7mmol)，溶於甲苯(5mL)，升溫至100℃，攪拌反應12小時，將反應液過濾，粗品經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=3：1)得標題化合物(127mg，產率65.8%)。

(8)2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(120mg,0.22mmol)溶於四氫呋喃(3mL)和甲醇(3mL)中，加入一水合氫氧化鋰(47mg,1.1mmol)的水溶液(1mL)，25℃攪拌反應16小時。加入稀鹽酸(1M)調節pH=7，將反應液濃縮，經矽膠柱層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)，得標題化合物(40mg，產率33.8%)。

分子式：C₂₈H₂₂C_l2N₂O₅ 分子量：537.39 LC-MS(M/e)：537.1(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：8.08(s,1H),7.89(d,J=7.2Hz,2H),7.61(dd,J₁=8.8Hz,J₂=6.4Hz,1H),7.38-7.41(m,2H),7.28-7.34(m,1H),6.91(d,J=8.8Hz,1H),6.67(d,J=8.8Hz,1H),5.31(s,2H),5.09(dd,J₁=10.0Hz,J₂=2.0Hz,1H),3.01-3.04(m,1H),2.86-2.90(m,1H),2.32-2.36(m,1H),2.20-2.25(m,1H),2.09-2.12(m,1H),1.28-1.31(m,2H),1.13-1.18(m,2H).

實施例19 (2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-基)甲醇的製備(化合物19)

將2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸(220mg,0.39mmol)加入到 50mL三口圓底燒瓶中，氮氣保護下溶於20mL四氫呋喃，降溫至0℃，滴加硼烷(1mol/L的THF溶液)(1.94mL)後升至25℃攪拌1.0小時。將反應液降溫至0℃，加入鹽酸(2N)淬滅反應。加入100mL乙酸乙酯稀釋，飽和食鹽水洗滌(2×30mL)，分層得乙酸乙酯相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，高壓製備分離得產物(203mg，產率93.5%)。

分子式：C₂₉H₂₄Cl₃NO₄ 分子量：556.86 LC-MS：(ES,m/z)：578(M+Na)

¹H NMR：(CD₃OD,ppm)δ：7.38-7.54(m,4H),7.09-7.11(m,2H),6.77-6.85(m,3H),5.27-5.31(dd,J₁=2.1Hz,J₂=10.2Hz,1H),4.93(s,2H),4.51(s,2H),2.76-3.00(m,2H),2.21-2.37(m,2H),1.86-1.89(m,1H),1.20-1.23(m,4H).

實施例20 2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-N-(甲基磺醯基)苯并二氫吡喃-6-甲醯胺的製備(化合物20)

在一支100-mL的三口瓶中加入2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-苯并二氫吡喃-6-甲酸(200mg,0.35mmol)，溶於二氯甲烷(50mL)，加入EDCI(134mg,0.70mmol)，4-二甲基胺基吡啶(128mg,1.05mmol)，甲磺醯胺(66.5mg,0.70mmol)。在氮氣保護下室溫攪拌過夜。反應混合物加入二氯甲烷(100mL)，然後加入飽和食鹽水(3×50mL)洗滌，分出有機層，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，經柱層析純化得到產物168mg，產率74%。

分子式：C₃₀H₂₅Cl₃N₂O₆S 分子量：647.95 LC-MS：(ES,m/z)：647(M+1)⁺

¹HNMR(DMSO,ppm)：δ 11.89(brs,1H),7.82(s,1H),7.71-7.74(dd,J₁=2.1Hz,J₂=8.4Hz,1H),7.61-7.64(m,2H),7.52-7.57(m,1H),7.38-7.40(d,J=8.7Hz,1H),6.98-6.99(d,J=2.7Hz,1H),6.85-6.92(m,1H),6.82-6.83(m,1H),5.35-5.38(m,1H),4.94(s,2H),3.32-3.34(d,J=6.6Hz,3H),2.71-3.06(m,2H),1.93-2.49(m,3H),1.13-1.21(m,4H).

實施例21 4-((4-(6-(2H-四唑-5-基)苯并二氫吡喃-2-基)-3-氯苯氧基)甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備(化合物21)

(1)2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲腈的製備

參考實施例1步驟(6)的製備方法，加入2-(2-氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲腈(3g,10.50mmol)，4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(3.802g,12.57mmol)。得產物2.8 g，產率為48.4%。

(2)4-((4-(6-(2H-四唑-5-基)苯并二氫吡喃-2-基)-3-氯苯氧基)甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑的製備

在一支50mL的圓底瓶中加入2-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲腈(500mg,0.91mmol)，氯化銨(975mg,18.23mmol)，N,N-二甲基甲醯胺(15mL)，NaN₃(900mg,13.84mmol)。反應混合物加熱至120℃反應12小時，體系加入NaHSO₃(30mL)淬滅反應。加入乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合併有機相濃縮得到標題化合物261mg，產率為48.4%。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₃N₅O₃ 分子量：594.88 LC-MS(ES,m/z)：594(M+1)⁺

¹HNMR(DMSO-d₆,ppm)：δ：7.79(s,1H),7.75(d,J=8.4Hz,1H),7.61-7.64(m,2H),7.52-7.57(m,1H),7.43(d,J=8.7Hz,1H),6.97(d,J=2.4Hz,1H),6.82-6.88(m,2H),5.32(d,J=8.4Hz,1H),4.94(s,2H),3.03-3.10(m,1H),2.80-2.88(m,1H),2.45(d,J=3.3Hz,1H),2.14-2.19(m,1H),1.92-2.00(m,1H),1.10-1.22(m,4H).

實施例22 2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備(化合物23)

(1)6-氧代-2-(三氟甲基)-1,6-二氫吡啶-3-甲酸乙酯的製備

在一支2000mL的三口瓶中加入6-氧代-2-(三氟甲基)-1,4,5,6-四氫吡啶-3-甲酸乙酯(90g,379.5mmol),CCl₄(900mL),NBS(81.88g,460.05mmol)。反應混合物升溫至80℃反應24小時，降至室溫，濾除固體，濾液加入二氯甲烷(1000mL)，用飽和食鹽水(3×2000mL)洗滌。分出有機層用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，剩餘物經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：10)純化得標題化合物50g，產率56%。

(2)6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)煙酸乙酯的製備

在一支1000mL的三口瓶中加入6-氧代-2-(三氟甲基)-1,6-二氫吡啶-3-羧酸乙酯(50g,212.6mmol)，甲苯(500mL)，Ag₂CO₃(76g,276.7mmol)和BnBr(43.7g,255.5mmol)。反應混合物加熱至50℃反應12小時，冷至室溫，加入乙酸乙酯(1000mL)稀釋，飽和食鹽水(3×1000mL)洗滌，分出有機層用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，剩餘物經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：20~1：10)純化得標題化合物37.5g，產率54%。

(3)(6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲醇的製備

在一支2000mL的三口瓶中加入6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)煙酸乙酯(30g,92.23mmol)的四氫呋喃(300mL)溶液，氮氣保護下，溫度降至-78℃，然後滴加DIBAL-H(1M in toluene,277mL)，滴加完畢繼續保持-78℃攪拌3小時。滴加甲醇(140mL)淬滅反應，升溫至室溫反應5分鐘，滴加酒石酸鈉鉀(280mL水溶液)，濾除固體，濾液加入乙酸乙酯(2000mL)稀釋，加入飽和食鹽水(3×2000mL)洗滌。分出有機層用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，剩餘物經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：6~1：4)純化得標題化合物24g，產率92%。

(4)6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)煙醛的製備

在一支1000mL的三口瓶中加入(6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲醇(24g,84.73mmol)的二氯甲烷(500mL)溶液。溫度降至0℃，分批加入Dess-Martin periodinane(43.1g,101.6mmol)。反應混合物室溫攪拌18小時。濾除固體，濾液加入二氯甲烷(500mL)稀釋，加入飽和食鹽水(3×1000mL)洗滌。分出有機層無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，殘餘物經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：8~1：6)純化得產物23g，產率97%。

(5)(E)-3-(6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(5-溴-2-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮的製備

在一支2000mL的三口瓶中加入6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)煙醛(23g,81.78mmol)的乙醇溶液(460mL)和1-(5-溴-2-羥基苯基)乙-1-酮(17.5g,81.38mmol)。然後分批加入KOH(32.1g,572.2mmol)溶液，60℃加熱攪拌48小時，反應液加入冰/水(1000mL)淬滅反應。用鹽酸(6mol/L)調節溶液的pH值為7。過濾得固體，減壓乾燥得36g產物，產率為92%。

(6)6-溴-2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-4-酮的製備

在一支2000mL的三口瓶中加入(E)-3-(6-(苄氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(5-溴-2-羥基苯基)丙-2-烯-1-酮(36g,75.27mmol)，醋酸(360mL)，鹽酸(12N,360mL)，硫酸(1mL)。反應液88℃反應16小時，冷至室溫，倒入冰水(2000mL)中，過濾，得固體，減壓烘乾得23.6g標題化合物，產率81%。

(7)5-(6-溴色烯-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-醇的製備

在一支250-mL的三口瓶中加入HgCl₂(6.96g)和鹽酸(5N)(150mL)，然後溫度降至0℃，分批加入Zn(16.4g)。體系室溫攪拌30分鐘，分去液相，向餘下的固體加入鹽酸(5N,100mL)，室溫攪拌10分鐘，分去液相，向餘下的固體加入加入鹽酸(5N,150mL)和6-溴-2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-4-酮(6.6g,17.00mmol)的甲苯(100mL)溶液。反應混合物80℃攪拌16小時，冷卻，加入乙酸乙酯(500mL)，有機層用飽和食鹽水(3×500mL)洗滌。分出有機相，加入無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，剩餘物經柱層析(乙酸乙酯/石油醚=1：10~1：5)純化，分離得到3g產物，產率47%。

(8)2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲腈的製備

在一支100mL的三口瓶中加入5-(6-溴苯并二氫吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-醇(3g,8.02mmol)，NMP(30mL)，ZnCN₂(1.12g,9.5mmol)，Pd(PPh₃)₄(930mg,0.81mmol)。在氮氣保護下，120℃反應16小時。反應液冷至室溫，加入乙酸乙酯(200mL)稀釋，濾除固體，濾液用飽和食鹽水(3×200mL)洗滌，分出有機相，加入無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮，剩餘物經柱層析純化(乙酸乙酯/石油醚=1：10~1：6)得到1.7g產物，產率66%。

(9)2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

在一支100mL的三口瓶中加入2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-甲腈(1.7g,5.31mmol)，甲醇(30mL)，然後室溫滴加濃硫酸(3mL)。反應液加熱迴流三天，冷至室溫，倒入冰水(200mL)中，收集固體，用水(3×50mL)洗滌，固體減壓烘乾，得到標題化合物1.3g，產率69%。

(10)2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

在一支100mL的三口瓶中加入2-(6-羥基-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(1.3g,3.68mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(30mL)，K₂CO₃(2.55g,18.45mmol)，NaI(1.66g,11.07mmol)，4-(氯甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基1)-異噁唑(1.33g,4.40mmol)。反應液60℃反應16小時，冷至室溫，加入乙酸乙酯(200mL)稀釋，用飽和食鹽水(3×200mL)洗滌。分出有機相，加入無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到0.7g產物，產率31%。

(11)2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備

在一支250mL的三口瓶中加入2-(6-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(700mg,1.13mmol)的甲醇(100mL)溶液，水(10mL)和LiOH.H₂O(143mg,3.40mmol)。反應液室溫攪拌3天。減壓濃縮，剩餘物加入冰水(100mL)，用鹽酸(1mol/L)調節pH至7。過濾得固體，該固體用水(3×100mL)和正己烷(3×100mL)洗滌得到210mg標題化合物，產率31%。

分子式：C₂₉H₂₁Cl₂F₃N₂O₅ 分子量：605.39 LC-MS：(ES,m/z)：605.1(M+1)⁺

¹HNMR(300MHz,DMSO-d₆,ppm)：δ 12.60(brs,1H),8.08-8.05(d,J=9.0Hz,1H),7.77(s,1H),7.71-7.68(m,1H),7.57-7.46(m,3H),7.00-6.98(d,J=8.7Hz,1H),6.90-6.87(d,J=8.7Hz,1H),5.40-5.27(m,3H),3.11-3.00(m,1H),2.90-2.85(m,1H),2.57-2.55(m,1H),2.09-2.00(m,2H),1.23-1.14(m,4H).

實施例23 2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-氟苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備(化合物24)

(1)1-(2-氟-4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的製備

參考實施例17步驟(3)中的製備方法，加入1-(2-氟-4-甲氧基苯基)乙-1-酮(1.7g,10.1mmol)，得產物2.0g(粗品)。

(2)(E)-3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

參考實施例17步驟(4)中的製備方法得到產物(0.9g，兩步產率27.0%)。

(3)3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

參考實施例17步驟(5)的製備方法，加入(E)-3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4-羥基苯甲酸甲酯(0.83g,2.51mmol)，得到產物0.8g，產率95.8%。

(4)3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

將3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯(800mg,2.41mmol)溶於甲醇(20mL)中，降至0℃，然後加入NaBH₄(146mg,3.86mmol)，0℃反應2小時。將反應液倒入水(50mL)中，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得產物1.1g(粗品)。

(5)2-(2-氟-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將3-(3-(2-氟-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯(1.1g，粗品)加入到磷酸(10mL)中，加熱至90℃反應30分鐘。然後倒入水(50mL)中，用碳酸鈉中和至中性，然後用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合併有機層，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)得到產物700mg，兩步產率91.9%。

(6)2-(2-氟-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氟-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(700mg,2.21mmol)溶於DCM(30mL)中，降至-20℃，N₂保護下緩慢加入BBr₃(2.7g,10.77mmol)，反應4小時。反應完畢後，緩慢加入水(20mL)，再用DCM(50mL×3)萃取，合併有機層，濃縮，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=3：1)得到產物350mg，產率52.3%。

(7)2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-氟苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將2-(2-氟-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(0.3g,0.99mmol)和4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(0.35g,1.0mmol)和碳酸鉀(0.28g,2.02mmol)依次加入到DMF(20mL)中，加熱至60℃反應4.6小時，然後倒入水(100mL)中，析出固體，過濾，濾餅經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)得產物0.43g，產率76.2%。

(8)2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-氟苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-氟苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(0.3g,0.528mmol)溶於THF(10mL)中，再加入水(10mL)和氫氧化鋰一水合物(110mg,2.62mmol)，加熱至50℃攪拌24小時。蒸去THF，再加水(10mL)，降至0℃，用稀鹽酸(1M)調節pH=2-3，析出固體，過濾，濾餅依次用水(20mL)，乙腈(20mL)洗滌，乾燥得產物(200mg，產率68.4%)。

分子式：C₂₉H₂₂Cl₂FNO₅ 分子量：554.40 LC-MS(M/e)：555.2(M⁺)

¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ：12.55(s,1H),7.73(s,1H), 7.67(d,J=8.4Hz,1H),7.61-7.64(m,2H),7.52-7.55(m,1H),7.34(t,J=8.4Hz,1H),6.85(d,J=8.4Hz,1H),6.76(d,J=10.8Hz,1H),6.68(d,J=8.4Hz,1H),5.29(d,J=10.0Hz,1H),4.86(s,2H),2.96-3.05(m,1H),2.78-2.82(m,1H),2.33-2.42(m 1H),1.95-2.10(m 1H),1.11-1.21(m,4H)。

實施例24 2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備(化合物26)

(1)4-甲氧基-2-三氟甲基苯甲醛的製備

將化合物1-溴-4-甲氧基-2-三氟甲苯(12.7g,49.8mmol)置於250ml三口燒瓶中，加入150ml THF溶解，密封後N₂換氣3次。反應瓶置於-78℃的乾冰條件下攪拌。將22ml正丁基鋰(2.5M)加入到上述反應瓶，-78℃下攪拌30min後將4g DMF緩慢加入其中，繼續反應約15min後移至室溫下反應，TLC監測反應進程。待反應結束，溶劑濃縮後倒入150ml飽和NaCl水溶液中，乙酸乙酯萃取3次(150ml×3)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮後經矽膠柱層析(EA：PE=1：30)，得產物(4.8g，產率47.1%)。

(2)1-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)丙-2-烯-1-醇的製備

將化合物4-甲氧基-2-三氟甲基苯甲醛(4.7g,23.0mmol)置於250ml三口瓶中，加入100ml THF溶解，密封後N₂換氣3次。將27.6ml乙烯基溴化鎂(1M)於冰浴條件下緩慢加入到上述反應瓶，反應約15min後移至室溫下繼續反應約2h反應結束。反應液用飽和NH₄Cl溶液淬滅，乙酸乙酯萃取3次(150ml×3)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，溶劑濃縮後得粗品(5.75g)，未經純化繼續用於下一步反應。

(3)1-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)丙-2-烯-1-酮的製備

將上步所得化合物1-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)丙-2-烯-1-醇粗品溶於二氯甲烷中，室溫攪拌下加入戴斯馬丁氧化劑(12.7g,30.0mmol)，室溫攪拌12小時。待反應結束，反應液濃縮，剩餘物經柱層析得產物(2.7g，兩步產率51.0%)。

(4)4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯的製備

參考實施例17步驟(1)的製備方法，加入4-羥基苯甲酸甲酯(11.8g,77.6mmol)，得產物(7.6g，產率35.2%)。

(5)(E)-4-羥基-3-(3-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-苯甲酸甲酯的製備

將1-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)丙-2-烯-1-酮(2.7g,11.7mmol)和4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯(3.3g,11.7mmol)參照實施例17的步驟(4)進行反應，得到產物(3.8g，產率85.4%)。

(6)4-羥基-3-(3-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)-3-氧代丙基)-苯甲酸甲酯的製備

參考實施例17的步驟(5)的製備方法得到粗品，直接用於下一步反應。

(7)4-羥基-3-(3-羥基-3-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)-丙基)-苯甲酸甲酯的製備

參考實施例23步驟(4)的製備方法，得產物(3.50g，兩步產率91.1%)。

(8)2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將化合物4-羥基-3-(3-羥基-3-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)丙基)-苯甲酸甲酯(1.92g,5mmol)，三苯基膦(1.57g,6mmol)，偶氮二甲酸二乙酯(1.04g,6mmol)溶於四氫呋喃(30mL)中，混合物於0℃下攪拌。待反應結束，溶劑濃縮，加入100ml清水後用乙酸乙酯萃取3次(100mL×3)，合併有機層，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析得產物(1.29g，產率70.5%)。

(9)2-(4-羥基-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將化合物2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(550mg,1.5mmol)溶於二氯甲烷(10mL)中，緩慢滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(1M,7.5mL)，待滴加完畢繼續於-78℃下反應3小時。待反應結束將反應液移至室溫，並將反應液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次(50ml×3)，飽和氯化鈉水溶液洗滌有機相，合併有機相，濃縮後經柱層析得產物(200mg，產率37.9%)。

(10)2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯的製備

將2-(4-羥基-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(100mg,0.28mmol)溶於DMF(5mL)中，加入碳酸鉀(58mg,0.42mmol)，25℃攪拌10分鐘，然後加入4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(97mg,0.28mmol)，25℃下反應6小時。反應完畢後，緩慢倒入冰水中，析出固體，過濾，濾餅用水(20mL)洗滌，收集濾餅，乾燥得產物粗品(154mg)，直接用於下一步反應。

(11)2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸的製備

將2-(4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)-2-(三氟甲基)苯基)苯并二氫吡喃-6-甲酸甲酯(154mg)溶於THF(2mL)中，加入甲醇(2mL)和水(1mL)，再加入氫氧化鋰一水合物(32mg,0.75mmol)，置於30℃反應2小時。反應完畢後，將反應液倒入50mL清水中，乙酸乙酯萃取三次(50ml×3)，飽和氯化鈉溶液洗滌有機相，無水硫酸鈉乾燥，有機相濃縮，經矽膠柱層析得終產物(50mg，兩步產率30%)。

分子式：C₃₀H₂₂Cl₂F₃NO₅ 分子量：604.40 LC-MS(M/e)：604.1(M+H)⁺

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：7.91(s,1H),7.88(d,J=2.0Hz,1H),7.59(d,J=8.8,1H),7.41-7.43(m,2H),7.32-7.36(m,1H),7.23(s,1H),7.09(d,J=2.0Hz,1H),7.04(dd,J₁=2.4Hz,J₂=8.4Hz,1H),5.38(d,J=10.4Hz,1H),4.89(s,2H),2.91-3.08(m, 1H),2.85-2.87(m,1H),2.15-2.19(m,1H),1.90-1.99(m,1H),1.16-1.24(m,4H)。

實施例25 2-(2,6-二氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備(化合物27)

(1)4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯的製備

參考實施例17步驟(1)的製備方法，加入4-羥基苯甲酸甲酯(10.1g,66.4mol)，得到產物(15.0g，產率81.3%)。

(2)(3,5-二氯苯氧基)三異丙基矽烷的製備

將3,5-二氯苯酚(11.5g,70.6mmol)，DIPEA(13.7g,106.2mmol)，DMAP(861mg,7.06mmol)加入到DCM(200mL)中，在冰浴下分批次加入TIPSCl(16.33g,84.7mmol)，然後升到25℃持續反應8小時。體系加入1N HCl(126mL)，萃取分液，依次用NaHCO₃(120mL)和NaCl溶液(150mL)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，旋轉蒸發除去溶劑得到產物(20.0g，產率88.8%)。

(3)2,6-二氯-4-羥基苯甲醛的製備

將(3,5-二氯苯氧基)三異丙基矽烷(20.0g,62.7mmol)加入到無水THF(200mL)中，在-78℃下滴加nBuLi(2.4mol/L,28.7mL,68.9mmol)，持續攪拌1小時。再滴加DMF(6.87g,94.1mmol)，-78℃下持續反應1小時。回到25℃下反應6小時。體系加入1N HCl 100mL和EA(200mL)萃取分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，旋轉蒸發除去溶劑。加入DCM(100mL)析出固體，減壓抽濾，得到產物(9.5g，產率79.3%)。

(4)2,6-二氯-4-甲氧基苯甲醛的製備

將2,6-二氯-4-羥基苯甲醛(9.5g,49.7mmol)加入到DMF(200mL)中，向該體系中加入碳酸鉀(20.6g,149.3mmol)，然後冰浴下滴加碘甲烷(14.1g,99.3mmol)，體系回到25℃下反應12小時。體系倒入400mL水中，減壓抽濾，濾餅用水(10mL)洗滌，烘乾得到產物(8.0g，產率78.5%)。

(5)1-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-醇的製備

將2,6-二氯-4-甲氧基苯甲醛(8.0g,39.0mmol)，加入100ml THF中，冰浴下滴加乙烯基溴化鎂(1M/L,46.8mL,46.8mmol)，滴加完畢回到25℃下繼續反應約6小時。然後加入飽和NH₄Cl溶液淬滅(30mL)，用乙酸乙酯(200mL)和水(100mL)萃取分液，有機相用無水硫酸鈉乾燥，旋轉蒸發除去溶劑得到產物(7.5g，產率82.5%)。

(6)1-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的製備

將1-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-醇(7.5g,32.2mmol)溶於二氯甲烷(200mL)中，冰浴下分批次加入戴斯馬丁氧化劑(16.4g,38.7mmol)，在25℃下持續反應12小時。體系減壓抽濾，濾液旋乾，剩餘物經柱層析(PE：EA=10：1)，得到產物(3.6g，產率48.4%)。

(7)(E)-3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

將1-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(3.6g,15.6mmol)，4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯(4.77g,17.2mmol)，三乙胺(3.15g,31.2mmol)，三苯基膦(409mg,1.56mmol)，乙酸鈀(175mg,0.78mmol)依次加入到乙腈(150mL)中，氮氣保護，加熱至90℃反應12小時。反應完畢後，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(PE：EA=3：1)得到產物(3.0g，產率50.5%)。

(8)3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯的製備

將(E)-3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙-1-烯 -1-基)-4-羥基苯甲酸甲酯(3.0g,7.9mmol)，PtO₂(300mg)加入到甲醇(100mL)中，氫氣環境下25℃反應4小時。反應完畢後，過濾，旋轉蒸發除去溶劑，剩餘物經矽膠柱層析(PE：EA=4：1)得到產物(2.2g，產率72.7%)。

(9)3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯製備

將3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-氧代丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯(1.0g,2.6mmol)溶於THF(20mL)中，冰浴下緩慢加入NaBH₄(290mg,7.8mmol)，25℃反應約6小時。體系加入1mL水淬滅反應，經矽膠柱層析(PE：EA=5：1)得到產物(850mg，產率84.9%)。

(10)2-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

將3-(3-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)-3-羥基丙基)-4-羥基苯甲酸甲酯(850mg,2.2mmol)，偶氮二甲酸二乙酯(957mg,5.5mmol)溶於四氫呋喃(40mL)中，在冰浴下加入三苯基膦(1.44g,5.5mmol)，升到25℃下反應12小時，旋轉蒸發除去溶劑，剩餘物經矽膠柱層析(PE：EA=20：1)，得到產物(600mg，產率74.3%)。

(11)2-(2,6-二氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯的製備

將2-(2,6-二氯-4-甲氧基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(600mg,1.6mmol)溶於二氯甲烷(20mL)中，-78℃下緩慢滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液(1M/L,8.2mL,8.2mmol)的DCM溶液，然後緩慢升至25℃，反應2小時。體系加入1mL甲醇淬滅反應，經矽膠柱層析(PE：EA=3：1)得到產物(60mg，產率10.6%)。

(12)2-(2,6-二氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并吡喃-6-羧酸甲酯的製備

將2-(2,6-二氯-4-羥基苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(60mg,0.17mmol)，4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(59mg,0.17mmol)，碳酸銫(111mg,0.34mmol)加入到DMF(10mL)中，50℃下反應2小時。體系加入乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)萃取分液，旋轉蒸發除去有機相，剩餘物經柱層析(PE：EA=3：1)，得到產物(70mg，產率66.5%)。

(13)2-(2,6-二氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸的製備

將2-(2,6-二氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)苯并二氫吡喃-6-羧酸甲酯(70mg,0.11mmol)加入到甲醇(4mL)和THF(4mL)中，再加入氫氧化鋰一水合物(24mg,0.57mmol)的2mL水溶液，50℃反應12小時，體系降至25℃，用1M HCl調節pH至3-4。體系加入乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)萃取分液，旋轉蒸發除去有機相，剩餘物經柱層析(DCM：MeOH=40：1)得到產物(15mg，產率22.5%)。

分子式：C₂₉H₂₁Cl₄NO₅ 分子量：605.29 LC-MS(M/e)：606.1(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：7.95-7.70(m,2H),7.50-7.25(m,3H),6.90-6.62(m,3H),5.85-5.65(m,1H),4.80(s,2H),3.55-3.45(m,1H),3.16-2.45(m,3H),2.20-1.83(m,2H),1.38-1.02(m,4H).

實施例26 6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸的製備(化合物28)

(1)2-(4-溴-3-氯苯氧基)四氫-2H-吡喃的製備

參考實施例2步驟(1)中的製備方法，加入4-溴-3- 氯苯酚(10.0g,48.2mmol)，3,4-二氫吡喃(10.5g,124.8mmol)得產物12g，產率85.4%。

(2)5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-基三氟甲磺酸酯的製備

將6-羥基-3,4-二氫萘-1(2H)-酮(11g,67.8mmol)溶於二氯甲烷(150mL)中，降至-5℃，滴入三乙胺(10.3g,101.8mmol)，再緩慢加入三氟甲磺酸(23g,153.3mmol)，加入完畢，25℃反應4小時，反應完畢後，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=20：1)得產物13g，產率：65.2%。

(3)5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

將5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-基三氟甲磺酸酯(10g,34mmol)溶於DMF(70mL)和甲醇(20mL)中，依次加入三乙胺(7g,69.2mmol)，DPPP(450mg,1.09mmol)，乙酸鈀(450mg,2.0mmol)，一氧化碳氣球，70℃反應16小時，反應完畢後，將反應液倒入水中，過濾，濾餅經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)得產物6.2g，產率：89.3%。

(4)6-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

將5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(0.6g,2.94mmol)，2-(4-溴-3-氯苯氧基)四氫-2H-吡喃(1.17g,4.0mmol)，Pd₂(dba)₃(270mg,0.29mmol)，Xantphos(340mg,0.58mmol)，碳酸銫(1.9g,5.8mmol)，依次加入到甲苯(30mL)中，氮氣保護，120℃反應20小時，濃縮，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1)得產物200mg，產率：16.4%。

(5)6-(2-氯-4-羥基苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

將6-(2-氯-4-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(0.2g,0.48mmol)溶於二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，25℃，反應2小時。濃縮，殘餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1)得產物100mg，產率：63.0%。

(6)6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯的製備

將6-(2-氯-4-羥基苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(0.1g,0.3mmol)和4-(溴甲基)-5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑(0.125g,0.36mmol)和碳酸鉀(83mg,0.6mmol)依次加入到DMF(10mL)中，60℃反應4小時，反應完畢後，倒入水中，過濾，濾餅經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=5：1-2：1)，得產物145mg，產率81.0%。

(7)6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸的製備

將6-(2-氯-4-((5-環丙基-3-(2,6-二氯苯基)異噁唑-4-基)甲氧基)苯基)-5-氧代-5,6,7,8-四氫萘-2-甲酸甲酯(140mg,0.23mmol)溶於甲醇(4mL)，四氫呋喃(8mL)，水(8mL)，加入氫氧化鋰一水合物(50mg,1.19mmol)，25℃攪拌16小時。反應完畢後減壓蒸去甲醇和四氫呋喃，再向剩餘物加入水(10mL)，用稀鹽酸(1M)調pH=2，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合併有機層，濃縮，剩餘物經矽膠柱層析(石油醚：乙酸乙酯=1：1)得產物(40mg，產率：29.8%)。

分子式：C₃₀H₂₂Cl₃NO₅ 分子量：582.86 LC-MS(M/e)：582.2(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,CDCl3)δ：8.16(s,1H),8.04(d,J=8.8Hz,2H),7.42(d,J=7.6Hz,2H),7.32-7.37(m,1H),7.03(d,J=8.8Hz,1H),6.90(d,J=2.0Hz,1H),6.73(dd,J=2.0Hz,J=8.8Hz,1H), 4.79(s,2H),4.21(dd,J=4.0Hz,J=12.8Hz,1H),3.12-3.26(m,2H),2.31-2.42(m,2H),2.10-2.21(m,1H),1.21-1.32(m,2H),1.16-1.19(m,2H).

Claims

一種具有下列通式(I-1)所示的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，
其中R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、鹵素原子、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基硫基、C_1-4烷基羰基、鹵代C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷氧基或C_1-4烷氧基C_1-4烷基；R³選自3-6元環烷基或3-6元環烷基C_1-4烷基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基、羥基C_1-4烷基、鹵代C_1-4烷基、羧基C_1-4烷基、胺基C_1-4烷基、胺基羰基C_1-4烷基、羥基C_1-4烷氧基、鹵代C_1-4烷氧基、羧基C_1-4烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_1-4烷基胺基、C_1-4烷基羰基、C_1-4烷基羰基胺基、C_1-4烷基磺醯基、C_1-4烷基磺醯胺基羰基、C_1-4烷基胺基磺醯基、二C_1-4烷基胺基或5-6元雜芳基；W選自O或S；A選自O或S；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或5-6元雜芳基； Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、鹵素原子、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基胺基、二C_1-4烷基胺基、鹵代C_1-4烷基或鹵代C_1-4烷氧基；E選自CH₂、NH、O或CO；F選自不存在、CH₂、NH或O；X選自CH或N；Y選自CH₂、NH或O；E、X、Y、F之間的連接方式分別獨立地選自單鍵；n選自0-3的整數。
如請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基、三氟乙基或三氟甲氧基；R³選自環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環丙基甲基、環丙基乙基、環丁基甲基、環戊基甲基或環己基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、異丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙炔基、甲基胺基、乙基胺基、乙醯基、乙醯胺基、甲磺醯基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、二甲胺基、吡唑、咪唑、噁唑、異噁唑、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑； n選自1或2。
如請求項2所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基或三氟甲氧基；R³選自環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基或環丁基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙醯基、乙醯胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或吡啶基；F選自CH₂、NH或O。
如請求項3所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：苯并二氫吡喃基、苯并1,4-二氧雜環己烯基、苯并1,3-二氧雜環己烯基、苯并四氫吡啶基、苯并二氫噁嗪基、苯并四氫吡嗪基、1,2,3,4-四氫喹唑啉基、1,2,3,4-四氫噌啉基、四氫萘基、四氫萘酮。
如請求項4所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
如請求項5所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中，E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
如請求項5所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中W選自O；A選自O；Z選自被1-2個取代基Q取代或未被取代的苯基，所述的取代基Q選自氰基、胺基、羥基、羧基、硝基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、甲胺基、二甲胺基、三氟甲基或三氟甲氧基；E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
n選自1。
如請求項7所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中，E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
如請求項2所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中R¹、R²分別獨立地選自氫原子、氰基、氟原子、氯原子、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、甲基胺基、乙醯基、三氟甲基或三氟甲氧基；R³選自環丙基、環丁基、環戊基、環丙基甲基或環丁基甲基；R⁴選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、胺基、羥基、羧基、甲基、乙基、丙基、羥基甲基、羥基乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、乙醯基、乙醯胺基、甲基磺醯胺基羰基、乙基磺醯胺基羰基、噁二唑、噻唑、異噻唑、噻二唑、三氮唑或四氮唑； Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基或吡啶基；E選自CH₂、NH或O；F選自不存在；Y選自CH₂或O。
如請求項9所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中E、X、Y共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：苯并二氫吡咯基、苯并二氫呋喃基、苯并1,3-二氧雜環戊烯基或二氫茚基。
如請求項10所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中W選自O；A選自O；Z選自被一個或多個取代基Q取代或未被取代的苯基；E、X、Y共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
如請求項11所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中E、X、Y共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：
如請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中所述化合物選自：
如請求項1所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，其中所述化合物選自：
一種藥物組合物，其含有如請求項1至14中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物，與一種或多種藥用載體。
一種如請求項1至14中任一項所述的化合物、其藥學上可接受的鹽、其酯或其立體異構物在製備用於治療和/或預防法尼醇X受體(FXR)介導的疾病及相關疾病的藥物的用途，所述的疾病包括肝纖維化，肝硬化，脂肪肝，急性肝衰竭，膽石病，炎性腸道疾病，動脈粥樣硬化，血脂異常，血栓，糖尿病性腎病，糖尿病性神經病變，糖尿病性視網膜病，肝細胞癌，息肉病，結腸腺癌，乳腺癌，胰腺癌或食管癌。
如請求項16所述的用途，其中，所述脂肪肝選自非酒精性脂肪肝炎。
如請求項16所述的用途，其中，所述脂肪肝選自非酒精性脂肪肝病。
一種如式(II)所示的用於製備請求項1的通式(I-1)所示化合物過程中的中間體，
其中，m為1；A、Z如請求項1中所述，E、X、Y、F共同構成的環狀基團與苯環一起形成以下的結構：