TWI725027B - 檢測癌症之方法 - Google Patents
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Abstract
本發明係關於檢測個體之癌症且詳言之乳癌的方法及套組，其藉由相較於不具有癌症之對照樣本，量測一系列生物標記物中之至少一者之含量來實現。相較於無癌症之個體中之表現量，在來自患有癌症之個體之樣本中生物標記物之表現增加或降低。該樣本最佳為眼部樣本，諸如經分離淚液樣本或眼部洗液，但亦可來自唾液或其他體液。套組可包括收集管及蛋白酶抑制劑或蛋白質穩定劑。
Description
本申請案涵蓋蛋白質及彼等蛋白質之肽片段，該等肽片段藉由蛋白質之蛋白水解消化而製備，且蛋白質及肽片段兩者適用於診斷癌症或用於監測癌症在個體中之存在。
篩檢的乳房X線照片典型地具有75%之靈敏性及約98%之特異性，導致大致5%/乳房X線照片之假陽性率(Brown,Houn,Sickles,& Kessler,1995；Kolb,Lichy,& Newhouse,2002；Luftner & Possinger,2002)。乳房組織類型，更具體言之密度亦大大影響乳房攝影術之效能。使用美國放射學會的乳房成像報告及資料系統(the American College of Radiology Breast Imaging Reporting and Data System，BI-RADS)對乳房密度之程度進行分類。此系統由四類1-4構成；其中類別1為大部分脂肪(<25%緻密)；類別2為分散之纖維腺體密度(25-50%緻密)；類別3為非均相緻密的(51-75%緻密)且類別4極其緻密(>75%緻密)(Bigenwald,2008；Klifa,2010；Scheel,2014)。
當患者遵從每年篩檢時，對於具有乳房組織之女性，乳房攝影術可為有效篩檢工具(Tabar,2001；Pisano,2005)。然而，乳房密度增加時，乳房攝影術之效果降低，產生增加之跟蹤成像且更重要地錯過癌症診斷。對高風險患者而言，已顯示乳房攝影之靈敏性對於類別1低至31%，對於類別2為27%，對於類別3為20%，且對於類別4為12.5%(Bigenwald,2008)。考慮緻密乳房組織，大約50%女性群體處於
類別3及4(Vachon,2007)。目前，針對此等女性之最好的篩檢選項為MRI，其可比乳房攝影術貴達10倍(Beignwald,2008)。由於具有75%或75%以上緻密組織之女性比具有較少緻密組織之女性具有四至六倍的罹患乳癌的更大風險，因此缺乏優良的篩檢選項為一嚴重問題(Boyd,2007)。
跟蹤成像以評估假陽性使得美國花費40億美元，其中僅針對活檢體額外耗費16億美元。在160萬所進行活檢體之2010年，發現少至16%(僅261,000)患有癌症(Grady,2012)。對增加成像之診斷參數之解答可發現於聚焦於基因及蛋白質組資訊、更具體言之生物標記物之影像前後診斷中(Armstrong,Handorf,Chen,& Bristol Demeter,2013；Li,Zhang,Rosenzweig,Wang,& Chan,2002)。
組織及血清通常為用於開始生物標記物研究之最合理地方，然而兩種介質之大動態範圍使探索相當困難(Schiess,Wollscheid,& Aebersold,2009)。答案可在較不複雜之生物體液諸如唾液及淚液中。使用淚液作為診斷介質不為新穎應用，因為此前淚液蛋白質組已得到廣泛研究(Böhm等人.,2012；2011；Lebrecht,Boehm,Schmidt,Koelbl,& Grus,2009a；Lebrecht等人，2009b；Wu & Zhang,2007)。在本申請案中，揭示一種回應於癌症而檢測一組基於淚液之生物標記物之定量分析。自此定量資訊，將定義經鑑定實驗室改進修正(CLIA)方案之框架。
本文提供判定個體是否患有癌症之方法。方法包括自個體獲得樣本且進行檢測選自以下且如表1中所列之標記物中之至少一者的含量之步驟：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(Lipocalin-1)(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細
胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(Galectin-3)(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(Rootlein)(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(Profilin-1)(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大
腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)。若此等標記物之含量相較於來自不患有癌症之個體之對照樣本的含量而變化，則個體很可能患有癌症。該樣本最佳為眼部樣本，諸如經分離淚液樣本或眼部洗液，但亦可來自唾液或其他體液。眼部樣本指示涵蓋來自淚液腺及與淋巴系統相關之其他組織之分泌物的淚液樣本。
亦提供用於進行本文中所描述之方法之套組。套組可含有樣本收集平台、用於收集及萃取之可包含蛋白酶抑制劑或其他蛋白質穩定劑之管子、樣本萃取試劑及測試設備。
圖1：實驗1中所鑑定之以下蛋白質之光譜強度的ANOVA：(A)Ig重鏈V-IV區HiL、(B)Ig重鏈區V-III區BRO、(C)Ig重鏈V-III區VH26、
(D)抗白細胞蛋白酶、(E)β2微球蛋白、(F)鈣調蛋白樣蛋白5、(G)脂質運載蛋白1、(H)胱抑素B、(I)半乳糖凝集素3、(J)鋅-α 2糖蛋白。
圖2：來自實驗1之癌症、良性及對照之ROC曲線，使用Ig重鏈V-IV區HiL、Ig重鏈區V-III區BRO、Ig重鏈V-III區VH26、抗白細胞蛋白酶、β2微球蛋白、鈣調蛋白樣蛋白5、脂質運載蛋白1、胱抑素B、半乳糖凝集素3、鋅-α 2糖蛋白。
圖3：對於實驗1中所測試之75個樣本中之66者的乳房密度分佈之馬賽克繪圖。
圖4：實驗2中所鑑定之蛋白質之光譜強度的ANOVA。所展示蛋白質為：(A)14-3-3蛋白σ、(B)去羧之6-磷酸葡糖酸去氫酶、(C)α輔肌動蛋白-4、(D)視黃醛去氫酶、(E)精胺基琥珀酸合成酶、(F)β-2-微球蛋白、(G)鈣調蛋白、(H)血漿銅藍蛋白、(I)絲切蛋白(Cofilin)、(J)胱抑素SN、(K)烯醇酶1、(L)膠溶素、(M)熱休克蛋白β-1、(N)Ig α-1鏈C區、(O)催淚蛋白、(P)溶菌酶、(Q)基底膜特異性硫酸肝素蛋白聚糖核心蛋白、(R)聚合免疫球蛋白受體、(S)肌動蛋白抑制蛋白1、(T)S100A8、(U)S100A9、(V)食道鱗癌分泌素家族1D成員1、(W)VEGF共調節之趨化細胞素1、(X)組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1、(Y)防禦素1、(Z)L-乳酸去氫酶A鏈、(AA)SPARC樣蛋白1、(BB)磷脂結合蛋白5、(CC)Ig重鏈V-III區TIL、(DD)互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈1、(EE)α-1B-糖蛋白、(FF)α-1-抗胰蛋白酶。
圖5：比較如藉由ELISA所測定乳癌與對照樣本中之S100A9之表現量的ANOVA。
圖6：比較如藉由ELISA所測定乳癌與對照樣本中之LG3BP之表現量的ANOVA。
圖7：S100A9之ROC曲線
圖8：LG3BP之ROC曲線
圖9：所組合之S100A9及LG3BP之ROC曲線。
圖10：基於乳房組織類別，S100A9表現之ANOVA。
圖11：基於乳房組織類別，LG3BP表現之ANOVA。
本文提供來自眼部樣本之藉由胰蛋白酶消化獲得之蛋白質及肽片段。經產生多肽選自以下各者且如表1中所列：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體
(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)。在附錄I中提供鑑定為在癌症樣本中下調之蛋白質之胰蛋白酶序列及全長胺基酸序列。
蛋白及肽展示於實例中，以相較於對照回應於乳癌之存在於生
物樣本中增加或降低。此等蛋白質及肽為生物標記物且將用以確定患者或其他個體之疾病病況。
個體包括人類、馴養動物，諸如貓、狗、牛、豬或其他易受癌症之動物。「患者」表示診斷有疾病或癌症或因患有癌症而測試之個體。因此，本文中術語個體及患者可互換使用。個體可疑似患有癌症。個體可疑似患有癌症，包括乳癌、聽神經瘤、急性淋巴母細胞白血病、急性骨髓性白血病、腎上腺腫瘤、AIDS相關癌、基底細胞癌、良性血液病症、膀胱癌、骨癌、腦瘤(轉移性且原發性)、乳癌、未知主要病因之癌症、宮頸癌、慢性淋巴細胞白血病、慢性骨髓性白血病、結直腸癌、食道癌、膽囊及膽管癌、腸胃神經內分泌腫瘤、GERD、巴雷斯特氏(Barrett's)食道症及弛緩不能、妊娠期滋養層疾病、頭頸癌、卡堡氏肉瘤(Kaposi sarcoma)、腎癌、白血病、肝癌、肝轉移、低級神經膠瘤、肺癌、淋巴瘤、男性乳癌、黑素瘤、梅克爾細胞癌(Merkel cell carcinoma)、間皮瘤、多發性骨髓瘤、骨髓發育不良症候群、卵巢癌、胰臟癌、胰臟囊腫、垂體腫瘤、前列腺癌、肺神經內分泌腫瘤、罕見血液病症、皮膚癌、軟組織肉瘤、脊柱腫瘤、鱗狀細胞癌、腹(胃)癌、睪丸癌(生殖細胞腫瘤)、胸腺瘤及其他胸腺腫瘤、氣管疾病、子宮(子宮內膜)癌、子宮肉瘤。個體可具有罹患乳癌之增加風險。舉例而言，藉由檢測乳房中之腫塊，測試已知增加癌症(諸如BRCA)風險之基因的陽性，個體歸因於陽性乳房攝影術結果可為癌症之風險增加，或疑似患有癌症，或已經進行割除、生檢或其他程序以移除癌症。個體可進行或此前已進行癌症治療，且本文中之方法及套組用以監測治療進展或替代地監測癌症之復發或擴散。
本文亦提供收集眼部樣本以用於確定經鑑定蛋白質或多肽在淚液分泌物中之表現量的方法及套組。揭示含有蛋白酶抑制劑或蛋白質穩定劑之收集條帶及管子之用途。套組進一步含有緩衝液或試劑以用
於自收集條帶溶離乳癌生物標記物，該等收集條帶已與眼睛接觸以收集淚液分泌物。揭示自眼腔收集蛋白質之裝置之設計，以及具有容納收集裝置及溶離緩衝液之容器之此裝置的封裝。
本文所揭示之方法涵蓋此等癌症生物標記物單獨或以多種方式在基於CLIA的方案中之用途，該方案使用將在集中式實驗室測試機構進行之三重四極LC-MS/MS平台。在此實施例中自個體收集之眼部樣本可運送至測試機構。如附錄I中所展示，經鑑定蛋白質及其後續蛋白水解片段用於triple quad中所產生之診斷肽的定量分析。可定義關於多肽濃度直接與選自以下且如表1中所列之多肽相關之臨限值或相對或實際值：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇
(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ
(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)，或樣本可直接與非癌對照比較。可向醫師提供以報告形式之定量資訊，以關於患者護理之路徑幫助做出決策。醫師可把治療決策建立在此等結果上，且最終步驟可包括向個體投與合適抗癌療法。
在一替代實施例中，選自以下且如表1中所列之多肽：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體
(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)可藉由實施結合劑(例如抗體、類肽或經包覆表面)及試劑檢測，該等試劑供應特定於此等蛋白質之結合相互作用，以產生可基於可檢測訊號諸如螢光、顏色變化或UV吸
收率之產生而定量的反應。在具有合作讀數儀之筒中實施此等組分，亦提供諸如可在護理現場使用之現場護理裝置。用於此等蛋白質及多肽之結合劑亦可用於側流裝置中之檢測。因此，在免疫分析中，使用結合搭配物(諸如抗體)檢測樣本中之蛋白表現量的方法可用以檢測本文中所提供之標記物。
免疫分析典型地包括與具有特異性結合至生物標記物或另外識別生物標記物之抗體或抗原之測試樣本接觸，及檢測樣本中結合至生物標記物之抗體或抗原複合物之存在。免疫分析程序可選自涉及識別抗體/抗原複合物之此項技術中已知之多種免疫分析程序，包括酶聯免疫吸附分析(ELISA)、放射免疫分析(RIA)及西方墨點，及使用多重分析，包括使用抗體陣列，其中若干所需抗體置放於諸如玻璃珠粒或板之載體上，且與測試樣本反應或另外與其接觸。該等分析為熟習此項技術者所熟知。
在樣本中檢測本文中所描述之生物標記物可依多種方式進行。在一個實施例中，該方法提供來自獲自樣本之mRNA之互補DNA的反轉錄。標記螢光染料之互補RNA可由互補DNA轉錄，隨後與寡核苷酸探針之陣列雜交。可由諸如SureScan微陣列掃描儀(Agilent Technologies)之機器及所獲得資料讀取由雜交產生之螢光顏色，且使用諸如Agilent Feature Extraction軟體(9.1)軟體之軟體處理。該等基於陣列之方法包括微陣列分析，以產生基因表現圖譜。如本文中所使用，術語「基因表現圖譜」係指個體中的一組基因之mRNA或蛋白質之表現量。如本文中所使用，術語「診斷組」係指具有可依賴以診斷或預測疾病狀態之表現量之一組基因、肽或蛋白質。此組中包括選自以下且如表1中所列之基因、肽及蛋白質：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白
(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大
腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)以及其任何組合，如本文中所提供。
在其他實施例中，藉由即時PCR，互補DNA自獲自樣本之mRNA反轉錄、擴增且同時定量，藉此使得能夠檢測且定量(當按DNA輸入或額外標準化基因標準化時，作為複本之絕對數或相對量)互補DNA樣本以及原始mRNA樣本中之特異基因產物。
本發明型式之方法包括檢測至少一種生物標記物。然而，可檢測任何數目的生物標記物。較佳地在分析中檢測至少兩種生物標記物。然而，意識到在分析中可採用三種、四種或四種以上、包括所有本文中所描述之生物標記物。因此，不僅可檢測一或多種標記物，而且標記物之任何數目或組合可用於檢測。另外，本文中未描述之其他
生物標記物可與任何當前經揭示生物標記物組合以輔助診斷癌症。此外，以上生物標記物中之任何組合可根據本發明型式檢測。
選自以下且如表1中所列之標記物：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B(CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋
白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)相對於對照樣本中之標記物之含量可增加或降低至少1.5倍、2倍、4倍、5倍、8倍、10倍或10倍以上。對照樣本可為來自不患有癌症之個體之樣本、來自不患有癌症之個體之彙集樣本，或可為已知為無癌症之個體之平均表現量的對照或基線表現量。
在整個本發明中使用若干術語，且應如此項技術中所通常使用
或如具體言之本文中所提供而定義。如本文中所提供，質譜分析或MS係指產生電或磁場以測定肽與化合物之質荷比以便鑑定或確定肽序列及化學結構的分析性技術。LC-MS/MS光譜法係指將高效液相層析(HPLC)之分離能力與質譜分析之質量分析組合之分析性技術。三重四極質譜分析係指具有三個電離室(Q1、Q2及Q3)之串聯質譜儀。此技術考慮到所關注分子之標靶檢測。離子對係指在Q1中以兩次或三次電荷形式檢測之親本肽，及如由Q2產生且在三重四極質譜分析儀器之Q3中檢測之所得y或b離子。SIS內部肽係指合成同位素標記肽，其具有與在Q1中待監測且用作參照內標以定量所關注肽之肽相同之序列。-y離子係指自肽片段之C-末端產生之離子。-b離子係指自肽片段之N-末端產生之離子。定量離子係指用以確定其親本蛋白在生物樣本中之數量之經選擇最高強度y或b離子。定性離子係指選擇用於確認針對所選擇之所關注蛋白質之定性離子及針對所選擇標準物之已標記肽之完整性之離子/離子群。
CLIA係指臨床實驗室改進修正，其為應用於對人類進行之所有臨床實驗室測試(除臨床試驗及基礎研究外)之美國聯邦監管標準。(CLIA related Federal Register and Code of Federal Regulation Announcements)。CLIA審批實驗室係指對人類標本進行實驗室測試以診斷、預防或治療疾病或損傷且藉由食品與藥物管理局(FDA)審批之監管組織審批且監測之臨床實驗室(CLIA Laws and Regulations,2013)。CLIA放棄測試係指符合針對如由FDA所定義之風險、錯誤及複雜性之特定準則的臨床實驗室測試。
現場護理裝置係指在患者及醫師護理之場所處可用之儀器或筒，其含有與生物標記物或所關注生物標記物系列之結合劑，且其可產生關於經檢測生物標記物之存在、不存在及一些情況下濃度之資訊。分析物係指任何可量測生物標記物，其可為蛋白質、肽、大分
子、代謝物、小分子或自身抗體。如本文中所使用之生物體液係指淚液、全血、血清、尿及唾液。生物標記物係指任何物質(例如，蛋白質、肽、代謝物、多核苷酸序列)，其濃度水準作為疾病或病狀之結果在體內變化，例如增加或降低。標記物及生物標記物可在本文中互換使用。
側流測試係指使用燒結聚合物之多孔紙量測分析物在生物體液中之存在之裝置。ELISA係指酶聯免疫吸附分析，其使用抗體或抗原以檢測所關注分析物之存在及濃度。診斷組係指一群分子，例如蛋白質或肽，其組合濃度用以診斷疾病病況，例如癌症。乳癌標記物係指分子：例如蛋白質、肽、代謝物、多核苷酸序列，其濃度水準作為存在或不存在癌症之結果在體內變化：例如增加或降低。
除適用於在個體中診斷癌症且詳言之乳癌以外，本文中所提供之套組及方法可用以監測癌症在此前診斷有癌症之個體中之治療或復發。因此若選自以下且如表1中所列之標記物：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免
疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌
旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)之含量在治療後之同一個體中隨時間推移增加或降低，則可投與靶向癌症之其他化學治療劑。
方法及套組亦可用以監測化學治療劑治療之效果。在此替代實施例中，若治療方案有效，則選自以下且如表1中所列之生物標記物：Ig λ鏈V-IV區Hil(LV403)、Ig重鏈V-III BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、β-2-微球蛋白(B2MG)、脂質運載蛋白1(LCN1)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、胱抑素B CYTB)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、半乳糖凝集素3(LEG3)、組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原
(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白
(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)之含量可隨時間推移增加或降低，且若治療方案在單一個體中不有效，則將不變化或可隨時間推移增加或降低，此視生物標記物在個體中檢測而定。
治療癌症包括但不限於減少個體中之癌細胞數目或腫瘤或腫塊尺寸，將癌症進展降低至較少攻擊性形式，降低癌細胞之增殖或降低腫瘤生長之速度，殺滅癌細胞，減少癌細胞之轉移或降低個體中之癌症復發之可能性。如本文中所使用，治療個體係指任何類型之治療：向罹患疾病或處於罹患疾病之風險下之個體賦予益處，包括改良個體之病狀，例如改良一或多個症狀，延緩疾病進展，延緩症狀發作，或延緩症狀進展等。
本發明不限於構築體之特定細節、組件之配置或本文中所闡述之方法步驟。本文中所揭示之組合物及方法能夠以多種方式製備、實踐、使用、進行及/或形成，根據下文揭示之揭露內容，該多種方式將對熟習此項技術者而言顯而易見。本文所使用之措詞及術語僅出於描述之目的且不應視為限制申請專利範圍之範疇。如實施方式及申請專利範圍中所使用以提及多種結構或方法步驟之序數指標，諸如第一、第二及第三，不意欲解釋為指示任何特定結構或步驟，或該等結構或步驟之任何特別次序或組態。除非本文中另外指示或另外與上下文明顯矛盾，否則本文中所描述之所有方法可以任何適合之次序進行。除非另外主張，否則使用本文中所提供之任何及所有實例或例示性語言例如「諸如」僅期望有助於本發明且不暗含對本發明範疇之任何限制。本說明書中之語言及展示於圖式中之結構不應視為表明任何非主張要素對本發明標的物之實踐必不可少。本文中所使用之術語「包括」、「包含」或「具有」及其變化形式意欲涵蓋此後所列之要素及其等效物以及額外要素。敍述為「包括」、「包含」或「具有」某些要素之實施例亦涵蓋為「主要由」彼等某些要素「組成」及「由」彼
等某些要素「組成」。
除非本文中另外指示，否則本文中數值範圍之敍述僅意欲充當個別提及屬於該範圍之各獨立值之速記方法，且各獨立值併入本說明書中，如同在本文中個別敍述一般。舉例而言，若濃度範圍規定為1%至50%，則意圖在於諸如2%至40%、10%至30%或1%至3%等之值在本說明書中明確地列舉。此等僅為特別預定之實例，且所列舉之最低值及最高值之間且包括最低值及最高值之數值的所有可能組合視為明確地規定於本發明中。使用描述量之特定敍述量或範圍之字「約」意欲指示敍述量附近之值包括於該量中，諸如歸因於製造公差、形成量測值時之儀器及人類錯誤及其類似者而可或自然地考慮之值。除非另外指示，否則涉及量之所有百分比按重量計。
不承認任何參考文獻，包括本說明書中所引用之任何非專利或專利文件，構成先前技術。詳言之，將理解，除非另外規定，否則對本文中任何文件之提及不承認在美國或任何其他國家任何此等文件形成此項技術中之公共常識的部分。對參考文獻之任何論述陳述了其原創者的觀點，且本申請人保留對本文中所引用之任何文件之精確性及相關性的質疑之權利。除非另外明確指示，否則本文中所引用之所有參考文獻以引用之方式完全併入。在任何定義及/或所引用參考文獻中所見之描述之間存在任何差別的情況下，以本發明為準。不承認提及之任何參考文獻為關於本發明之先前技術。
以下實例僅意欲為說明性的且不意欲為限制本發明之實施例或所附申請專利範圍之範疇。
在機構審查委員會批准下自乳房保健及手術中心AR、OK、TN
及WA處所見之患者招募研究參與者。在樣本收集或完成患者資訊卡片之前，所有患者經同意且提供知情同意書之複本。樣本藉由臨床工作人員(亦即護士及技術員)及/或Ascendant Dx工作人員收集。用於患者選擇之入選/排除準則如下：
在18-100歲年齡之間的個體，呈現日常檢查，或呈現不正常測驗或測試之評估，或呈現對可觸腫塊之評估，或只要腫塊部分剩餘，在生檢之前或之後呈現腫塊，或近期已診斷有乳癌但未進行任何種類之治療。
18歲以下或100歲以上之個體
經歷並行之眼睛感染或外傷，或當前經歷急性結膜炎，或已診斷有乳癌且已進行治療。
對照樣本自針對日常篩檢乳房X線照片所見之患者收集，且針對額外程序不接受回撥。在生檢時收集良性樣本且確定病變結果後將其包括於良性組中。亦在生檢時自手術之前具有MRI之患者及自手術之前進行前哨節點程序之患者收集癌症樣本，且在病變結果已知後將其包括於癌症組中。
自參與者收集之資料包含以下各者：年齡、性別、人種、當前採用計劃生育或進行激素替代治療、眼科感染、當前或最近化學治療、癌症之家族病史、基因測試(BRAC1/2)(若可用)、癌症期(I、II、III、IV)、癌症類型(乳腺管原位癌、侵襲性乳腺管癌、侵襲性小葉癌、小葉原位癌及未知的)、激素受體狀態(ER+/-、PR+/-、HER2+/-)、腫塊
尺寸、腫瘤級別(I、II、III)、乳房密度得分(鑑定為類別1、2、3或4之密度)及癌症之先前病史。
獲得機構審查委員會批准以使用Schirmer條帶(GuldenOpthalmics Elkins Park,PA)收集淚液。對於收集，在形成唇緣之0mm線上摺疊Schirmer條帶之圓頂端。將摺疊部分置放於參與者之下眼瞼中，且要求參與者閉上其眼睛且將摺疊部分保持在閉合位置中，持續5分鐘時間段。五分鐘後，將條帶移出且置放於無菌1.5mL預標記之搭扣頂端管中且視可用性而定置放在-20℃或-80℃下。收集準則規定若35mm標記物在五分鐘時間之前達至，則可移出條帶。參與診所處收集之樣本藉由Ascendant Dx工作人員基於每週擷取且在乾冰上轉移至Ascendant Dx之實驗室機構。
藉由首先使用無菌鑷子及剪刀將條帶切割至乾淨無菌之1.5mL搭扣頂端管中來進行蛋白質溶離。將200μL 1×磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)添加至分割條帶中，且在4℃下在輕度震盪下培育樣本3小時。溶離後，將樣本在台面離心機中短暫旋轉，以收集管底部處之條帶片段，且將清液層轉移至新的乾淨之1.5mL搭扣頂端管中。使用標準雙金雞納酸(BCA)分析確定總蛋白質含量，且將樣本儲存在-80℃下直至進一步使用。
在37℃下在1：20(v/v)之標準品及未知品與工作試劑比及30分鐘之培育時間下，使用BCA分析套組(Pierce)確定各集區之總蛋白質含量。為確保可靠之總蛋白質含量計算值，對各樣本進行一系列稀釋，例如1：2、1：4、1：6，且所有稀釋液一式三份地塗覆。產生使用經稀釋
白蛋白(2mg/ml、1.5mg/ml、1mg/ml、0.75mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.025mg/ml及0mg/ml)之標準曲線，且空白扣除應用於所有標準品及未知品。使用標準曲線之四參數擬合計算各未知品之蛋白濃度。濃度乘以稀釋因數且平均，得到精確之總蛋白質含量計算值。若變異係數(%CV)為15%或15%以下，則分析視為有效。
實驗1：藉由阿肯色大學醫學院(UAMS)之蛋白質組中心對25個乳癌樣本、25個良性樣本及25個對照樣本進行溶液中胰蛋白酶消化，隨後進行LC MS/MS。在100mM碳酸氫銨(Sigma-Aldrich)中對所有75個樣本進行溶液消化，之後藉由添加100ng豬胰蛋白酶(Promega)在10mM參[2-羧基乙基]膦(Pierce)中還原且在50mM碘乙醯胺(Sigma-Aldrich)中烷化，且在37℃下培育12-16小時。隨後在0.1%甲酸(Fluka)中酸化肽產物。藉由反相Jupiter蛋白樹脂(Phenomenex)在100×0.075mm柱上使用nanoAcquity UPLC系統(水)分離胰蛋白酶肽。使用80分鐘梯度自97：3至35：65緩衝液A：B比率溶離肽。[緩衝液A=0.1%甲酸、0.05%乙腈；緩衝液B=0.1%甲酸、75%乙腈]。藉由電噴射(1.8kV)電離經溶離肽，隨後使用碰撞誘導之分解在LTQ Orbitrap Velos質譜儀(Thermo)上進行MS/MS分析。使用FTMS分析器以圖譜模式在60,000之分辨率下在375至1500m/z範圍內獲取MS資料。使用離子阱分析器，以質心模式及正常質量範圍，在35.0之標準化碰撞能量下，自各MS掃描獲取頂部15個峰之MS/MS資料。藉由搜索Mascot搜索引擎(Matrix Science)或MaxQuant定量蛋白質組研究軟體(馬克斯普朗克研究所(Max Planck Institute))之資料庫，從MS/MS光譜鑑定蛋白質。使用Scaffold(蛋白質組軟體(Proteome Software))匯整Mascot搜索結果。
設定以下準則以選擇可指示已改變之乳房生理之一群蛋白質：1)
倍數變化為1.5或大於1.5之蛋白質(在癌症方面，在陽性或陰性方向上)。2)倍數變化應伴隨有<0.05之p值。3)25個癌症樣本中有12個樣本有蛋白質存在。使用此等準則，超過500項之清單減少至以下蛋白質：α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、抗白細胞蛋白酶(SLP1)、絲切蛋白(COF1)、抗凝血酶III(ANT3)、β-2-微球蛋白(B2MG)、蛋白-麩醯胺酸-γ-麩胺醯轉化酶(B4DIT7)、未分類蛋白質(B8ZZQ6)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、胱抑素B(CYTB)、嗜中性白血球防禦素1(DEF1)、消去蛋白(Destrin)(DEST)、乳鐵蛋白抗體(Kaliocin-1)(E7ER44)、Rab GDP分解抑制劑β簇(E7EU23)、伸長因子1-α(EF1A1)、埃茲蛋白(Ezrin)(EZRI)、血紅素結合蛋白2(HEB2)、熱休克同源物71(HSP7C)、熱休克蛋白β 1(HSPB1)、Ig重鏈V-III(HV303)、Ig重鏈V-III區BRO簇(HV305)、脂質運載蛋白1(Lipocalin-1)(LCN1)、半乳糖凝集素3(Galectin-3)(LEG3)、Ig λ鏈V-IV(LV403)、Ig μ鏈c區之同功異構物2(P01871)、同功異構物2熱休克蛋白簇(P07900-2)、14-3-3蛋白ζ△簇(P63104)、圍脂滴蛋白3(Perilipin-3)之同功異構物3(PLIN3)、蛋白酶體活化劑複合物次單元1(Q06323)、UMP-CMP激酶(Q5T0D2)、蛋白S100-A4(S10A4)、S100-A8(S10A8)、蛋白S100-A9(S10A9)、蛋白S100-A11(S10AB)、頜下腺雄激素調節之蛋白(SMR3B)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)、酶原顆粒蛋白16同系物B(ZG16B)。
實驗2：每組(乳癌、良性、對照)使用五十個樣本重複進行溶液中胰蛋白酶消解，繼之進行LC MS/MS。實驗2採用如實驗1所描述之相同方法。樣本大小增加會引起實驗1中所觀測之一些傾向消失，而使得實驗1中出現之傾向在實驗2中更顯著。自此資料進一步將實驗1中描述之500種蛋白質之清單精簡至103種所關注蛋白質。此清單包括：組胺酸三聯體核苷酸結合蛋白1(D6RD60)、S100A9(S10A9)、S100A8(S10A8)、半乳糖凝集素3結合蛋白(LG3BP)、Ig α-1鏈C區簇
(IGHA1)、Ig κ鏈V-III區HAH簇(KV312)、VEGF共調節之趨化細胞素1(VCC1)、L-乳酸去氫酶A鏈(LDHA)、醛酮還原酶家族1成員C(AKR1C1)、小根蛋白(B1AKD8)、L-乳酸去氫酶B鏈(LDHB)、視黃醛去氫酶1(AL1A1)、未分類蛋白質(B4E1Z4)、α-1-抗胰凝乳蛋白酶(AACT)、超氧化歧化酶[Cu-Zn](SODC)、SPARC樣蛋白1(SPRL1)、Ig重鏈V-III區TIL(HV304)、角蛋白(K1C9)、胱抑素SN(CYTN)、α-輔肌動蛋白4(ACTN4)、Ig λ-3鏈C區(片段)(IGLC3)、免疫球蛋白λ樣多肽5(IGLL5)、醇去氫酶1C(ADHIG)、粒線體蘋果酸去氫酶(MDHM)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)、α-1B-糖蛋白(A1BG)、富白胺酸α-2-糖蛋白(A2GL)、小泛素相關之修飾因子3(A8MU27)、前梯度蛋白2同系物(AGR2)、肌動蛋白抑制蛋白1(PROF1)、Ig λ鏈V-III區LOI簇(LV302)、凝血酶原(E9PIT3)、凝血酵素(HEMO)、Ig γ-2鏈C區(IGHG2)、泛素40S核糖體蛋白S27a(RPS27A)、α白蛋白(AFAM)、載脂蛋白A-I(APOA1)、載脂蛋白A-IV(APOA4)、黃素還原酶(NADPH)(BLVRB)、saposin前體(PSAP)、催淚蛋白(LACRT)、60S酸式核糖體蛋白P1(RLA1)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H2(ITIH2)、黏蛋白樣蛋白1(MUCL1)、S100 A6(S100A6)、Na(+)/H(+)交換調節輔因子NHE-RF1(NHRF1)、含硫氧還蛋白域之蛋白17(I3L0K2)、淋巴細胞特異性蛋白(LSP1)、結合球蛋白簇(H3BS21)、肌凝蛋白調節之輕鏈12A(J2QRS3)、核糖核酸酶抑制劑(RINI)、α烯醇酶(ENOA)、Ig κ鏈V-I區EU簇(KV106)、醇去氫酶級4 μ/σ鏈(ADH7)、蛋白AMBP(AMBP)、血管緊縮素原(ANGT)、抗凝血酶III(ANT3)、載脂蛋白A-II(APOA2)、鈣蛋白酶抑素(B7Z574)、大腦酸可溶性蛋白1(BASP1)、α-2-HS-糖蛋白(C9JV77)、鈣網蛋白(CALR)、鈣蛋白酶-1催化次單元(CAN1)、細胞分裂控制蛋白42同系物(CDC42)、補體C3(CO3)、冠蛋白1A(COR1A)、漸進式細胞死亡6-
相互作用蛋白(DCD)、防禦素1(DEF1)、僅F盒蛋白50(FBX50)、γ-麩胺醯環化轉移酶(GGCT)、粒線體麩胱甘肽還原酶(GSHR)、角蛋白II型細胞骨架1(K2C1)、UMP-CMP激酶(KCY)、間皮素(MSLN)、N-乙醯胞壁醯-L-丙胺酸醯胺酶(PGRP2)、菸醯酸磷酸核糖轉移酶(PNCB)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H1(ITIH1)、核糖核酸酶T2(RNASET2)、粒線體超氧化歧化酶[Mn](SODM)、富小脯胺酸之蛋白3(SPRR3)、Src受質皮動蛋白(SRC8)、微管蛋白β-4B鏈簇(TBB4B)、肌旋蛋白α-3鏈(TPM3)、血清鐵傳遞蛋白(TRFE)、麩胱甘肽S-轉移酶P(THIO)、玻璃連結蛋白(VTNC)、維生素D結合蛋白(Q6LDC6)、互連α胰蛋白酶抑制劑重鏈H4(ITIH4)、金屬蛋白酶抑制劑(TIMP1)、熱休克蛋白90(HSP90)、組織蛋白酶B(CATB)、血漿銅藍蛋白(CERU)、鈣衛蛋白、14-3-3 σ(1433S)、α-2-hs-糖蛋白(FETUA)、α-2-巨球蛋白(A2MG)、甲狀腺素運載蛋白(TTHY)(Appendix 1)。自架構軟體導出所鑑定蛋白質之全部清單以使用JMPpro11統計套裝軟體來分析。
實驗1：藉由使用所有75個樣本之此前經鑑定蛋白質中之每一者之光譜強度，使用微軟Excel®試算表軟體來組織資料。亦包括於試算表中的為樣本狀態(癌症、良性、對照)、癌症類型、腫瘤尺寸分組(1=0.1mm-1cm、2=1.1-2.9cm、3=3cm或大於3cm)及腫瘤級別狀態。將此試算表上傳至JMPpro11套裝軟體以用於分析。
在癌症與對照樣本之間施用直線回歸。六種蛋白質基於其S形曲線及p值鑑定為顯著的，其為Ig λ鏈V-IV(LV403)、Ig重鏈V-III區BRO(HV305)、Ig重鏈V-III VH26(HV303)、脂質運載蛋白1(LCN1)、β-2-微球蛋白(B2MG)、鋅-α-2-糖蛋白(ZA2G)。在癌症方面，所有六種蛋白質看起來經下調。為確定此等蛋白質之下調是否特定於乳癌，在良
性與對照之間重複二元直線回歸。此比較指示六種此前經鑑定蛋白質亦在良性樣本中下調，且額外四種蛋白質鑑定為在良性與對照之間顯著；抗白細胞蛋白酶(SLP1)、鈣調蛋白樣蛋白5(CALL5)、胱抑素B(CYTB)及半乳糖凝集素3(LEG3)。
使用所有三個組及所有十種蛋白質進行標稱邏輯回歸，以確定所有組之間的差異程度。十種蛋白質之組之錯分類程度為12%。各類別之接受者操作曲線產生以下AUC值：針對癌症為0.96，針對良性為0.94，且針對對照為0.98(圖1)。進行單因子ANOVA分析，以確保由各蛋白之三種類別樣本之移位均值(圖3)。
實驗2：使用針對所有經鑑定蛋白質自質譜分析記錄之光譜強度，來進行單因子ANOVA分析。分析所有蛋白質之胰蛋白酶肽產物。以三種方式比較蛋白質：1)對照相較於癌症，2)癌症相較於良性，3)良性相較於對照。0.05之α含量用作組之間的顯著表現變化之指標。比較胰蛋白酶片段之光譜強度之變化形式。鑑定相對於對照，表現量在乳癌樣本中增加之蛋白質系列。亦鑑定相對於對照，表現在乳癌樣本中降低之蛋白質。為確保實驗有效性，經確立的為蛋白質以其表現剩餘常數遍及所有所測試組之形式存在(圖4)。
500種蛋白質之初始清單減少至103種所關注蛋白質。在此蛋白質之組內為在乳癌方面表現增加之蛋白質，以及在乳癌方面表現降低之蛋白質(圖4)。對全部之蛋白序列、胰蛋白酶肽及可作為疾病之結果存在之序列異常的診斷能力均關注。
藉由質譜分析觀測相對於對照樣本，表現量在癌症樣本中增加之蛋白質系列，且選擇若干候選物以使用ELISA進一步驗證。將S100A9選擇為相對於對照，表現在乳癌患者之淚液中增加的代表實
例。LG3BP展示為相對於對照樣本，表現量在乳癌樣本中降低之蛋白質之代表。標準之ELISA方案用以評估淚液中之表現量。使用以DuoSets自R&D Systems(Minneapolis,MN)購買之套組獲得S100A9及LG3BP之資料。根據R&D systems提供之說明書進行ELISA程序。簡言之，將100微升/孔之在1×PBS中稀釋至經推薦工作濃度(GAL3BP 1.0μg/ml；S100A9 0.5μg/ml)之捕捉抗體添加至高結合96孔培養盤中，且在室溫下培育隔夜(~16小時)。用具有0.05%吐溫之1×PBS沖洗培養盤四次，且抵靠著乾淨吸收劑紙吸取以移除各自沖洗後之任何痕量的液體。各分析步驟後，進行沖洗循環。將阻斷緩衝液(具有1% BSA之1×PBS)添加至所有孔(~200微升/孔)中，且在室溫下將培養盤培育兩小時。使用具有1% BSA之1×PBS，在針對S100A9 1：10及1：50及針對半乳糖凝集素3結合蛋白1：100及1：500的稀釋下，稀釋淚液樣本。已知處於各分析之標準曲線之直線區域內之稀釋基於先前最佳化分析之結果選擇。將樣本及標準品使用100微升/孔一式兩份地測試，且在室溫下培育2小時。將檢測抗體稀釋至經推薦工作濃度(GAL3BP 2ug/ml及S100A9 1ug/ml)，將100μl添加至各孔中，且在室溫下使培養盤培育2小時。將抗生蛋白鏈菌素-HRP溶液添加至各孔(100微升/孔)中且在室溫下使其培育15分鐘。藉由添加TMB受質溶液實現觀測。15分鐘後，將50μL 1M H2SO4添加至各孔中，且測定450nm之吸收率。使用可購自GraphPad之Prism6.0版分析ELISA資料。
ELISA資料之統計分析：如藉由Prism軟體所計算，將各蛋白之濃度導入JMP Pro11中以用於統計評估。選擇諸多候選物以使用ELISA分析在對照、癌症或良性樣本上研究。展示兩種蛋白質(S100A9及半乳糖凝集素3結合蛋白)之結果(分別為圖5及圖6)，以提供相對於對照，蛋白表現在乳癌淚液樣本中增加及降低之代表實例。當評估所有三個組時，針對63個乳癌樣本、79個對照樣本及92個良性樣本，
S100A9之ANOVA產生0.0005之p值。S100A9之組平均值為：乳癌=5673.02pg/ml；對照=2130.18pg/ml；良性=6179.10pg/ml。與對照樣本相比，S100A9表現在癌症樣本中增加2.6倍，且與對照相比在良性樣本中增加2.9倍。當評估所有三個組時，針對66個乳癌樣本、55個對照樣本及54個良性樣本，半乳糖凝集素3結合蛋白之ANOVA產生<0.0001之p值。LG3BP之組平均值為：乳癌=24448.1pg/ml；對照=70242.2pg/ml；良性=62329.7pg/ml。與癌症樣本相比，LG3BP在對照樣本中增加2.8倍，且與癌症相比在良性樣本中增加2.5倍。
使用兩種代表蛋白質進行乳癌及對照樣本之標稱邏輯回歸分析。S100A9之所產生ROC曲線之AUC為0.78220(圖7)，且LG3BP之AUC為0.76088(圖8)。使用兩種蛋白質重複分析，且獲得0.84250之AUC(圖9)。
樣本群體特徵：在儘可能多的樣本上獲得諸如乳房密度、癌症類型及腫瘤尺寸之臨床資料。
實驗1：出自75個所測試樣本，獲得41個樣本之乳房密度得分。樣本群體由乳房密度分為14%類別1、36.6%類別2、43.9%類別3、4.7%類別4(圖2)。自診斷有導管內癌(IDC)之患者收集二十五個癌症樣本中之十八個。兩名患者診斷有乳腺管原位癌(DCIS)，一名患者診斷有小葉原位癌(LCIS)，且一名患者診斷有小葉內癌(ILC)。
針對分類，設計等級，其中「小」之分類給至<20mm之腫瘤，「中等」之分類指派至21mm-99mm之間的腫瘤，且「大」之分類指派至>1cm之腫瘤。自乳癌患者收集之十七個樣本分類為大腫瘤，兩個樣本分類為中等，且六個分類為小。獲得八個癌症樣本之受體類型之病變資訊。一個樣本為ER-/HER2-，一個樣本為ER-/PR-，兩個樣本為ER+/HER2-，三個樣本為ER+/HER2+，且一個樣本為ER+/PR-。
實驗2：在此研究中分析之樣本集區由5.9%類別1乳房組織、50%
類別2、37.8%類別3及5.4%類別4組成。對藉由ELISA評估之若干蛋白質進行ANOVA分析，以確定乳房組織類型是否影響蛋白表現量。提供兩種所研究蛋白質之代表資料(圖10及圖11)。對於展示於圖10及11中之以ELISA評估之每種蛋白質，針對四種類型之乳房組織之平均值，使用0.05之α含量未觀測到統計上顯著差異。
自多種乳癌類型收集樣本，產生17個來自診斷有DCIS之患者之樣本、44個來自診斷有IDC之患者之樣本，4個來自患有DCIS及IDC兩者之患者之樣本，及5個來自患有ILC之患者之樣本。腫瘤尺寸極大地變化。使用對實驗1所描述之分類系統，對於提供腫瘤尺寸之樣本，測試33個來自具有較大腫瘤之患者之樣本，9個來自具有中等腫瘤尺寸之患者之樣本，及來自12個具有小腫瘤尺寸之患者之樣本。在提供受體類型之38個樣本中，1個樣本為ER-，2個樣本為ER-/HER2-，2個樣本為三陰性的(ER-/HER2-/PR-)，1個樣本為ER-/HER2+，11個樣本為ER+、ER+/HER2 16，且5個樣本為ER+/HER2+。到目前為止，針對已經研究之蛋白質，基於腫瘤尺寸、癌症類型或受體狀態未觀測到區別性傾向。
Armstrong, K., Handorf, E. A., Chen, J., & Bristol Demeter, M. N. (2013). Breast cancer risk prediction and mammography biopsy decisions: a model-based study. American Journal of Preventive Medicine, 44(1), 15-22. doi:10.1016/j.amepre.2012.10.002
Bigenwald, R.Z., Warner, E., Gunasekara, A., Hill, K.A., Causer, P.A., Messner, S.J., Eisen, A., Plewes, D.B., Narod, S.A., Zhang, L., Yaffe, M.J. (2008) Is Mammography Adequate for Screening Women with Inherited BRCA Mutations and Low Breast Density？. Cancer Epidemiology Biomarkers Prevention. 17(3); 707-711.
Böhm, D., Keller, K., Pieter, J., Boehm, N., Wolters, D., Siggelkow, W., et al. (2012). Comparison of tear protein levels in breast cancer patients and healthy controls using a de novo proteomic approach. Oncology Reports, 28(2), 429-438. doi:10.3892/or.2012.1849
Böhm, D., Keller, K., Wehrwein, N., Lebrecht, A., Schmidt, M., Kölbl, H., & Grus, F.-H. (2011). Serum proteome profiling of primary breast cancer indicates a specific biomarker profile. Oncology Reports, 26(5), 1051-1056. doi:10.3892/or.2011.1420
Boyd, N.F, Guo, H., Martin, L.J., Sun, L., Stone, J., Fishell, E., Jong, R.A., Hislop, G., Chiarelli, A., Minkin, S., Yaffee, M.J., (2007) Mammographic Density and the Risk and Detection of Breast Cancer. The New England Journal of Medicine. 356(3): 227-236.
Brown, M. L., Houn, F., Sickles, E. A., & Kessler, L. G. (1995). Screening Mammography in Community Practice: Positive Predictive. American Journal of Radiology, 165, 1373-1377.
CLIA Laws and Regulations, 2013, http://wwwn.cdc.gov/CLIA/Regulatory/default.aspx.
Grady, D. (2012). Study of Breast Biopsies Finds Surgery Used Too Extensively. New York Times, 1-4.
Klifa, C., Carballido-Gamio, J., Wilmes, L., Laprie, A., Shepherd, J., Gibbs, J., Fan, B., Noworolski, S., Hylton, N. (2010) Magnetic resonance imaging for secondary assessment of breast density in a high-risk cohort. Magnetic Resonance Imaging. 28;8-15.
Kolb, T., Lichy, J., & Newhouse, J. (2002). Comparison of the performance of screening mammography, physical examination, and breast US and evaluation of factors that influence them: an analysis of
27,825 patient evaluations. Radiology, 225(1), 165-175.
Lebrecht, A., Boehm, D., Schmidt, M., Koelbl, H., & Grus, F. H. (2009a). Surface-enhanced Laser Desorption/Ionisation Time-of-flight Mass Spectrometry to Detect Breast Cancer Markers in Tears and Serum. Cancer Genomics & Proteomics, 6(2), 75-83.
Lebrecht, A., Boehm, D., Schmidt, M., Koelbl, H., Schwirz, R. L., & Grus, F. H. (2009b). Diagnosis of breast cancer by tear proteomic pattern. Cancer Genomics & Proteomics, 6(3), 177-182.
Li, J., Zhang, Z., Rosenzweig, J., Wang, Y., & Chan, D. (2002). Proteomics and bioinformatics approaches for identification of serum biomarkers to detect breast cancer. Clin Chem, 48(8), 1296-1304.
Luftner, D., & Possinger, K. (2002). Nuclear matrix proteins as biomarkers for breast cancer. Expert Rev Mol Diagn, 2(1), 23-31. doi:ERM020106 [pii]
10.1586/14737159.2.1.23
Pisano, E.D., Gatsonis, C., Hendrick E., Yaffe, M., Baum, J.K., Acharyya, S., Conant, E.F. Fajardo, L.L., Bassett, L., D'Orsi, C. Jong, R., Rebner., M. (2005). Diagnostic Performance of Digital versus Film Mammography for Breast-Cancer Screening. The New England Journal of Medicine. 17(353). 1773-1783.
Scheel, J.R., Lee, J.M., Sprague, B.L., Lee, C.I., Lehman, C.D. (2015) Screening ultrasound as an adjunct to mammography in women with mammographically dense breasts. Gynecology. 212(1);9-17.
Schiess, R., Wollscheid, B., & Aebersold, R. (2009). Targeted proteomic strategy for clinical biomarker discovery. Molecular Oncology, 3(1), 33-44. doi:10.1016/j.molonc.2008.12.001
Tabar, L., Vitak, B., Chen, T.H., Yen, A.M., Cohen, A., Tot, T., Chiu, S., Chen, S. Fann, J. Rosell, J., Fohlin, H., Smith, R. A. , Duffy, S.W., (2011) Swedish Two-County Trial: Impact of Mammographic Screening on Breast Cancer Mortality during 3 Decades. Radiology, 3(260), 658-663.
Vachon, C.M., van Gils, C. H., Sellers, T.A., Ghosh, K., Pruthi, S., Brandt, K.R., Pankratz, V.S., (2007) Mammographic density, breast cancer risk and risk prediction. Breast Cancer Research 9:2017 (doi:10.1186/bcr1829).
Wu, K., & Zhang, Y. (2007). Clinical application of tear proteomics: Present and future prospects. Proteomics. Clinical Applications, 1(9), 972-982. doi:10.1002/prca.200700125
經由實驗1選擇之蛋白質：
選自實驗2之蛋白質：
<110> 美商優勢醫療有限責任公司(ASCENDANT DIAGNOSTICS,LLC)
<120> 檢測癌症之方法
<140> TW105114245
<141> 2016-0506
<150> US14/707,089
<151> 2015-05-08
<150> US14/879,982
<151> 2015-10-09
<160> 1162
<170> PatentIn version 3.5
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Claims (19)
- 一種判定個體是否患有乳癌之活體外方法，其包含：提供來自該個體之淚液腺樣本；進行檢測該樣本中如下所提供之標記物中之至少二者之含量的步驟
- 如請求項1之方法，其中該個體為人類。
- 如請求項1或2之方法，其中該LG3BP標記物相對於該對照樣本中之該標記物之含量降低至少1.5倍、2倍、4倍或4倍以上。
- 如請求項1或2之方法，其中該S100A9標記物相對於該對照樣本中之該標記物之含量增加至少1.5倍、2倍、4倍或4倍以上。
- 如請求項1或2之方法，包含檢測來自請求項1之表中所提供的標記物列表中之第三標記物的含量，及若該第三標記物之含量相較於不具有癌症之對照樣本之含量有變化，則確定該個體患有或很可能患有乳癌，其中該第三標記物包含S100A8，且其中該S100A8之含量係增加。
- 如請求項5之方法，其中該S100A8標記物相對於該對照樣本中之 該標記物之含量增加至少1.5倍、2倍、4倍或4倍以上。
- 如請求項1或2之方法，其中該等標記物之含量藉由液相層析-質譜分析(LC-MS)檢測。
- 如請求項1或2之方法，其中該等標記物之含量藉由基於抗體之檢測方法來檢測。
- 如請求項1或2之方法，其中該等標記物之含量藉由多重蛋白質檢測方法來檢測。
- 如請求項1或2之方法，其中該等標記物之含量藉由mRNA檢測方法來檢測。
- 如請求項1或2之方法，其中該個體疑似患有癌症。
- 如請求項1或2之方法，其中該個體處於發展成癌症之高風險。
- 如請求項1或2之方法，其中該個體具有疑似為癌腫之可觸腫塊。
- 如請求項1或2之方法，其中該個體之乳房密度為類別1、類別2、類別3或類別4。
- 如請求項1或2之方法，其中該癌症檢測為乳癌階段。
- 一種免疫分析，其包含：(a)來自人類個體之淚液分泌物樣本，其中該個體疑似患有乳癌或具有疑似為癌腫之可觸腫塊，其中該淚液分泌物樣本包含至少兩種蛋白質標記物，該至少兩種蛋白質標記物包含S100A9及LG3BP；及(b)結合劑及試劑，該等試劑供應特定於(a)中之該至少兩種蛋白質標記物之結合相互作用，以產生可基於可檢測訊號之產生而定量的反應，其中相較於不具有癌症之對照樣本，該S100A9之含量係增加且LG3BP之含量係降低。
- 如請求項16之免疫分析，其中該淚液分泌物樣本包含第三蛋白質標記物，該第三蛋白質標記物包含S100A8，且其中該結合劑包含特異性結合該S100A8蛋白質標記物之抗體，且其中該S100A8之含量相較於不具有癌症之對照樣本係增加。
- 如請求項16或17之免疫分析，其中該淚液分泌物樣本係眼部洗液。
- 如請求項16或17之免疫分析，其中該個體之乳房密度為類別1、類別2、類別3或類別4。
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|---|---|---|---|
| TW105114245A TWI725027B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 檢測癌症之方法 |
Applications Claiming Priority (1)
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| TW105114245A TWI725027B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 檢測癌症之方法 |
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| TW201740109A TW201740109A (zh) | 2017-11-16 |
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| TW105114245A TWI725027B (zh) | 2016-05-06 | 2016-05-06 | 檢測癌症之方法 |
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| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI725027B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20140213467A1 (en) * | 2011-03-18 | 2014-07-31 | Anthony T. Yeung | Mucin 5B as a Pancreatic Cyst Fluid Specific Biomarker for Accurate Diagnosis of Mucinous Cysts and Other Markers Useful for Detection of Pancreatic Malignancy |
| US20160003786A1 (en) * | 2014-05-09 | 2016-01-07 | Ascendant Diagnostics, LLC | Methods Of Detecting Cancer |
-
2016
- 2016-05-06 TW TW105114245A patent/TWI725027B/zh active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20140213467A1 (en) * | 2011-03-18 | 2014-07-31 | Anthony T. Yeung | Mucin 5B as a Pancreatic Cyst Fluid Specific Biomarker for Accurate Diagnosis of Mucinous Cysts and Other Markers Useful for Detection of Pancreatic Malignancy |
| US20160003786A1 (en) * | 2014-05-09 | 2016-01-07 | Ascendant Diagnostics, LLC | Methods Of Detecting Cancer |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Cross, S. S., et al. "Expression of S100 proteins in normal human tissues and common cancers using tissue microarrays: S100A6, S100A8, S100A9 and S100A11 are all overexpressed in common cancers." Histopathology 46.3 (2005): 256-269. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW201740109A (zh) | 2017-11-16 |
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