TWI667030B

TWI667030B - 用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法

Info

Publication number: TWI667030B
Application number: TW105127067A
Authority: TW
Inventors: 黃俊勇; 吳典秋; 官艾葳
Original assignee: 國立高雄科技大學
Priority date: 2016-08-24
Filing date: 2016-08-24
Publication date: 2019-08-01
Also published as: TW201806607A

Abstract

本案係為明膠之製備方法，用於促進傷口癒合及對抗氧化之用途，該製備方法係包含下列步驟：(a)以一台灣鯛魚鱗為原料，經乾燥及粉碎後取得一魚鱗碎片或薄片；(b)對該魚鱗碎片或薄片進行一水分調整之前處理；(c)以單軸擠壓機擠壓水分調整後之該魚鱗碎片或薄片後取得一魚鱗擠出物；(d)將該魚鱗擠出物進行乾燥、粉碎及過篩後取得魚鱗擠出物粉末；(e)將該魚鱗擠出物粉末以熱水進行萃取後取得一明膠萃取液；(f)將該明膠萃取液進行冷凍乾燥，以製成一明膠粉末。

Description

用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法

本案係關於一種明膠之用途，尤指一種明膠用於促進傷口癒合及對抗氧化之用途及其製備方法。

膠原蛋白是動物體內含量最豐富、分佈最廣泛的蛋白質。膠原蛋白具有獨特的三螺旋結構、低抗原性、無毒性、良好的生物相容性和生物可降解性等特點，已被廣泛應用於組織工程支架材料、止血海綿、藥物控緩釋系統、基因傳遞載體、美容外科等生物醫用領域。

明膠為動物的皮、骨、腱與韌帶中含有的膠原蛋白經部分水解後得到的一種製品。明膠是一種重要的天然高分子物質，因具有水溶性高分子所特有的增稠性和對生物組織的高安全性等特點，被廣泛應用於食品及醫藥領域。明膠在食品上的應用在於它具有親水性質，可影響食品之結構、質地及其相關特性，例如應用於各類點心與食品中作為增稠劑、安定劑、發泡劑、結合劑、凝膠劑及澄清劑等。而明膠在醫藥上則可應用於微細膠囊之製造，用以包裹有機或無機之氣體，可作為錠劑用之結著劑和調製劑、止血棉、血漿替代品，及以明膠水解液製備血管收縮素轉化酶抑制劑等用途。

目前，明膠的製備主要是使用來自豬和牛的皮、骨、腱等，但隨著狂牛症和口蹄疫等疾病的發生，使人們對它們的安全性產生了質疑；另外，由於宗教和習俗等原因，豬來源的明膠在某些地區的應用也受到了限制。因此，有必要尋求品質和安全性更好的明膠來源。

我國每年魚鱗等水產品廢棄物數量不少，這些水產品廢棄物含有豐富的膠原蛋白和明膠，且不存在人畜共患的傳染性疾病，具有極大的開發和利用價值，但這些廢棄物除小部分被用於生產飼料外，大部分卻被丟棄。因此，開發魚鱗等水產品廢棄物的利用新途徑，不僅可提高水產品加工的附加價值，而且能減少環境污染，具有良好的經濟和社會效益。

除此之外，採用不同的原料及不同的製備方法所取得的明膠內含的總蛋白及胺基酸組成是不同的，是以運用在食品或是醫藥、美容用途上的製備方法亦有所不同，然如何透過簡便、可有效萃取大量明膠，且此明膠組成成份可有效運用於醫藥品止血劑、傷口癒合劑、生物科技材料及美妝保養品之素材之用，實為本領域重要的課題之一。

本案之目的在於以台灣鯛魚鱗做為原料，擠壓大量製備出明膠粉末，以作為新的明膠來源，並運用於醫藥品止血劑、傷口癒合劑、生物科技材料及美妝保養品之素材之用，進而提高水產品加工的附加價值。

本案之另一目的在於以台灣鯛魚鱗做為原料，透過水份調整前處理、擠壓製備、加熱萃取及冷凍乾燥等程序以製備出具備高總蛋白及胺基酸成份之明膠粉末，進而作為促進傷口癒合及對抗氧化之用途。

為達上述目的，本案之一較佳實施態樣為提供一種明膠之製備方法，用於促進傷口癒合及對抗氧化之用途，該製備方法係包含下列步驟：(a)以一台灣鯛魚鱗為原料，經乾燥及粉碎後取得一魚鱗碎片或薄片；(b)對該魚鱗碎片或薄片進行一水分調整之前處理；(c)以單軸擠壓機擠壓水分調整後之該魚鱗碎片或薄片後取得一魚鱗擠出物；(d)將該魚鱗擠出物進行乾燥、粉碎及過篩後取得一魚鱗擠出物粉末；(e)將該魚鱗擠出物粉末以熱水進行萃取，並取得一明膠萃取液；(f)將該明膠萃取液進行冷凍乾燥，以製成一明膠粉末。

於一實施例中，其中步驟(a)中係以一熱風乾燥機以50℃之溫度將台灣鯛魚鱗乾燥至水分含量低於15%，並以一大型粉碎機進行粉碎，由於魚鱗中含有大量具有強韌結構的磷灰石，經此粉碎步驟後僅可取得魚鱗碎片或薄片。

於一實施例中，其中步驟(b)中之該水分調整之前處理係將該魚鱗碎片或薄片調整為濕重27%。

於一實施例中，其中步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之二次水與魚鱗碎片或薄片混合而成，並調整為濕重27%。

於一實施例中，步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之檸檬酸溶液與魚鱗碎片或薄片混合而成，並調整為濕重27%，且該檸檬酸溶液之濃度係為1.26%。

於一實施例中，步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之醋酸溶液與魚鱗碎片或薄片混合而成，並調整為濕重27%，且該醋酸溶液之濃度係為9.37%。

於一實施例中，其中步驟(c)以單軸擠壓機擠壓水分調整後之該魚鱗碎片或薄片的目的係為利用單軸擠壓機的溫度、壓力及剪切力將魚鱗中的磷灰石與膠原蛋白緊密結合的結構進行破壞，以利後續魚鱗擠出物的粉末化作業，同時將魚鱗中磷灰石與膠原蛋白緊密結合的結構進行破壞後可以有效提高明膠之萃取率。

於一實施例中，其中步驟(d)中之該魚鱗擠出物粉末之粒徑係小於40網目。

於一實施例中，其中步驟(e)係為加入該魚鱗擠出物粉末之重量的10倍體積量(W：V=1：10)的二次水，並以50℃水浴振盪萃取1小時。

於一實施例中，其中步驟(e)更包含步驟(e1)：以10,200g離心10分鐘，取一上清液，以作為該明膠萃取液，並進行步驟(f)之冷凍乾燥程序。

於一實施例中，其中該明膠粉末相較於該台灣鯛魚鱗之重量萃取率係介於8~11%之間。

於一實施例中，其中該明膠粉末係用以促進人類表皮角質細胞之細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護及傷口癒合之反應。

S10~S15‧‧‧明膠之製備步驟

第1圖為本案明膠之製備方法流程圖。

第2A圖為明膠樣品A對HaCaT細胞附著能力之影像圖片。

第2B圖為明膠樣品B對HaCaT細胞附著能力之影像圖片。

第2C圖為明膠樣品C對HaCaT細胞附著能力之影像圖片。

第3圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞附著能力之分析圖。

第4圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞增生能力之分析圖。

第5圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞經過過氧化氫24小時誘導的毒性作用結果之分析圖。

第6A圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞傷口癒合12小時之測試影像圖片。

第6B圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞傷口癒合24小時之測試影像圖片。

第7圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT傷口癒合測試結果之分析圖。

體現本案特徵與優點的一些典型實施例將在後段的說明中詳細敘述。應理解的是本案能夠在不同的態樣上具有各種的變化，其皆不脫離本案的範圍，且其中的說明及圖示在本質上係當作說明之用，而非架構於限制本案。

請參閱第1圖，其係為本案明膠之製備方法流程圖。如第1圖所示，首先，如步驟S10所述，本案所採用之萃取原料係為台灣鯛魚鱗，且經乾燥、粉碎後可取得一魚鱗碎片或薄片；於此步驟中，作為原料的台灣鯛魚鱗先經清水洗淨，以去除其表面髒污及異物，漂洗完成後再以熱風乾操機以50℃之溫度將台灣鯛魚鱗乾燥至水分含量低於15%，以去除多餘的水份，最後再以一大型粉碎機對乾燥後的魚鱗進行粉碎，以取得磨碎之魚鱗碎片或薄片。取得磨碎之魚鱗碎片或薄片後，再如步驟S11所述，對該魚鱗碎片或薄片進行水分調整的前處理程序。於此步驟中，該水分調整之前處理係將該魚鱗碎片或薄片調整為濕重27%，以利後續擠壓機之作業，但不以此為限。當魚鱗碎片或薄片完成水分調整的前處理程序之後，再如步驟S12所述，以單軸擠壓機擠壓水分調整後之該魚鱗碎片或薄片，以取得一魚鱗擠出物，於此步驟中，透過單軸擠壓機的溫度、壓力及剪切力對魚鱗碎片或薄片進行連續式、且大量的擠壓處理，可以將魚鱗中磷灰石與膠原蛋白緊密結構進行破壞，使得磷灰石與膠原蛋白的結構變得鬆散，不只可有效提升魚鱗明膠的萃取率，同時有利於後續魚鱗擠出物的粉末化作業。當完成擠壓製備後，再如步驟S13所述，對擠壓製備後的魚鱗擠出物進行乾燥、粉碎及過篩後，以取得粒徑小於40網目(mesh)之魚鱗擠出物粉末，該魚鱗擠出物粉末之粒徑減少也有利於萃取率的提升，若減少了擠壓製備此步驟，將無法取得粒徑小於40網目之魚鱗擠出物粉末，接著再如步驟S14所述，對該小粒徑之魚鱗擠出物粉末以熱水進行萃取，於此步驟中，該熱水萃取之方式及條件係為加入魚鱗擠出物粉末重量的10倍體積量(W：V=1：10)的二次水，並以50℃之溫度進行水浴振盪，萃取1小時之後，再以10,200g之轉速離心10分鐘，並取得一上清液，以作為明膠萃取液；最後再如步驟S15所述，對該明膠萃取液進行冷凍乾燥程序，以製成一冷凍乾燥之明膠粉末。透過前述經過擠壓處理後再萃取之製備方法所取得的明膠，可明顯提高其總蛋白及胺基酸的含量，且在人類表皮角質細胞株(HaCaT)的實驗中，以本案之擠壓製備萃取所取得的明膠顯著具備促進細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護效果及傷口癒合的功效，是可以將此製備方法所取得的明膠用於促進傷口癒合及對抗氧化之用途，並可廣泛運用、以作為醫藥品止血劑、傷口癒合劑、生物科技材料及美妝保養品之素材...等。

接著，本案針對前述步驟S11中，以三種不同之實施態樣對魚鱗碎片或薄片進行水分調整的前處理程序，並再經過同樣的擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、加熱萃取及冷凍乾燥程序，以取得三種不同的明膠樣品，以進行後續之胺基酸組成分析、對HaCaT細胞附著能力分析、對HaCaT細胞增生能力分析、對HaCaT細胞對抗氧化傷害之保護作用之分析、對HaCaT細胞傷口癒合測試分析、提高HaCaT細胞附著及增生之活性分析，進而以佐證本案之擠壓製備萃取所取得的明膠顯著具備促進細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護效果及傷口癒合的功效。

其中，實施態樣一係為將步驟S10中乾燥、粉碎後取得之魚鱗碎片或薄片，搭配一定重量之二次水進行混合，以完成步驟S11所述之水分調整的前處理程序，且其後經過相同條件之擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥程序，並取得明膠樣品A。

實施態樣二則為將步驟S10中乾燥、粉碎後取得之魚鱗碎片或薄片，搭配一定重量之檸檬酸溶液進行混合，且於此實施態樣中，檸檬酸溶液之濃度係為1.26%，但不以此為限；藉以完成步驟S11所述之水分調整的前處理程序，爾後經過相同條件之擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥程序，並取得明膠樣品B。

實施態樣三為將步驟S10中乾燥、粉碎後取得之魚鱗碎片或薄片，搭配一定重量之醋酸溶液進行混合，於實施態樣三中，醋酸溶液之濃度係為9.37%，亦不以此為限；進而完成步驟S11所述之水分調整的前處理程序，並經過與前兩實施態樣相同條件之擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥程序，以取得明膠樣品C。

經前述三種不同實施態樣所取得的明膠樣品A、B、C，首先比對其萃取率，該三種明膠樣品A、B、C之萃取物相對於魚鱗重量萃取率(g/100g，以乾重計)之結果係如下表一所示。

由此表一結果可見，透過本案先進行水分調整前處理，後採以擠壓製備、擠出物粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥程序而取得的明膠粉末相較於該台灣鯛魚鱗之重量萃取率係介於8~11%之間，而傳統未經擠壓方式直接萃取之萃取率係介於2.5~6.7%，相較之下，本案所採用之製備方法係可提高1.5~3.5倍之萃取率。換言之，本案經水分調整前處理、擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥等程序之製備方法係可明顯提升明膠之萃取率。

接著，再將前述三實施態樣之明膠樣品A、B、C經過酸水解、鹼水解及過甲酸水解後，再以高效能液相層析(HPLC)進行胺基酸組成分析，其分析結果係如下表二所示。

明膠之特有胺基酸組成可以由甘胺酸(glycine)、脯胺酸(proline)、羥賴氨酸(hydroxylysine)及羥脯胺酸(hydroxyproline)作為代表。由表二所載之胺基酸組成分析可見，明膠樣品C的甘胺酸(glycine)含量高於未擠壓製備明膠樣品；明膠樣品B及C的脯胺酸(proline)含量高於未擠壓製備明膠樣品；明膠樣品C的羥賴氨酸(hydroxylysine)含量高於未擠壓製備明膠樣品；明膠樣品B的羥脯胺酸(hydroxyproline)含量高於未擠壓製備明膠樣品，此等甘胺酸(glycine)、脯胺酸(proline)、羥賴氨酸(hydroxylysine)及羥脯胺酸(hydroxyproline)之含量與增強抗氧化之效果及促進角質細胞HaCaT在細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護與傷口癒合的反應有關。換言之，本案經三種不同之實施態樣對魚鱗碎片或薄片進行水分調整的前處理程序及擠壓製備有利於提昇明膠特有胺基酸的含量與明膠生理活性。

關於此三種實施態樣所取得的明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞附著能力之分析，請同時參閱第2A圖、第2B圖、第2C圖及第3圖，其中第2A圖係為明膠樣品A對HaCaT細胞附著能力之影像圖片、第2B圖係為明膠樣品B對HaCaT細胞附著能力之影像圖片、第2C圖係為明膠樣品C對HaCaT細胞附著能力之影像圖片、第3圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞附著能力之分析圖。於此細胞附著能力實驗中，其係將明膠樣品A、B、C分別以不同濃度(0、125、250、375、500、625、750、875、1000、1125、1250ng/cm2)之條件，在培養基下培養45分鐘後，並以顯微鏡觀察染色過之細胞附著能力。由第2A、第2B及第2C圖可見，無論是明膠樣品A、B、C均有明顯促進HaCaT細胞的貼附能力，且隨著濃度不同及萃取條件不同的明膠樣品A、B、C，其對於促進HaCaT細胞的貼附也有些微不同的差異性。

且此等不同濃度及不同實施態樣之明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞附著能力之分析結果係如第3圖所示，其中明膠樣品A之最佳濃度係為625ng/cm2，且其貼附度百分比為142%；明膠樣品B之最佳濃度係為875ng/cm2，且其貼附度百分比為158%；明膠樣品C之最佳濃度係為375ng/cm2，且其貼附度百分比為136%，然無論是採以何種濃度，其均有明顯促進HaCaT細胞貼附之效果，且由此實驗數據看來，明膠樣品B在不同濃度下促進HaCaT細胞貼附的結果更具有顯著性差異。

至於此三種實施態樣所取得的明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞增生能力之分析，請參閱第4圖，其係為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞增生能力之分析圖。於此細胞附著能力之實驗中係將明膠樣品A、B、C分別以不同濃度(0、5、10、50、75、100、125、150、200、300μg/ml)之條件，在培養基下培養24小時後，再透過細胞存活率分析(MTT assay)，以進行細胞增生能力分析。由第4圖所示之分析結果看來，明膠樣品A之最佳濃度係為75μg/ml，且其細胞增生百分比為131%；明膠樣品B之最佳濃度係為75μg/ml，且其貼附度百分比為133%；明膠樣品C之最佳濃度係為75μg/ml，且其貼附度百分比為131%，且無論是採以何種濃度，其均有明顯促進HaCaT細胞增生之效果；以及，由此實驗數據看來，三種明膠樣品A、B、C在不同濃度下促進HaCaT細胞增生的效果均具有顯著性差異。

關於明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞對抗氧化傷害之保護作用之分析，請參閱第5圖，其係為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞經過過氧化氫24小時誘導的毒性作用結果之分析圖。於此實驗中，主要係將明膠樣品A、B、C 分別以不同濃度(0、10、15、25、50、75、100、125、150、200、250μg/ml)之條件，在培養基下培養24小時後，再加入至最終濃度150μM的過氧化氫(H2O2)培養24小時後，其中此150μM之過氧化氫(H2O2)之濃度係為經實驗後找出可抑制50%HaCaT細胞凋亡之劑量；最後，再透過細胞存活率分析(MTT assay)，以檢視HaCaT細胞的存活率，以進行其對抗氧化傷害之保護作用的分析。由第5圖所示之分析結果可見，其明膠樣品A、B、C之濃度為0之對照組之HaCaT細胞的存活率分別為：54.0%、51.3%及54.5%。然而，經採用此三種態樣所產出的明膠樣品A、B、C進行保護後，HaCaT細胞的存活率均有明顯之提升，且其中明膠樣品A之最佳濃度係為100μg/ml，且其細胞存活率為74.4%；明膠樣品B之最佳濃度係為125μg/ml，且細胞存活率為79.3%；明膠樣品C之最佳濃度係為75μg/ml，且其細胞存活率為76.6%；由此實驗結果可見，本案經水份調整前處理、擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥等程序而製備出之明膠可有效降低過氧化氫(H2O2)誘導之細胞凋亡，即本案所製備之明膠具有對抗氧化傷害的保護效果。

至於明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞傷口癒合測試之分析，請參閱第6A圖、第6B圖及第7圖，第6A圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞傷口癒合12小時之測試影像圖片、第6B圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT細胞傷口癒合24小時之測試影像圖片、第7圖為明膠樣品A、B、C對HaCaT傷口癒合測試結果之分析圖。於此傷口癒合實驗中，主要係利用細胞遷移的能力來模擬傷口癒合，透過將長滿細胞的培養皿以尖端劃過，模擬皮膚表皮受損的情形，再使用不同濃度(0、50、100、150μg/ml)的明膠樣品A、B、C處理，並以顯微鏡觀察其分別在12小時後、及24小時候細胞遷移之狀態。

由第6A圖、第6B圖及第7圖所示之分析結果可見，於處理12小時之後，該明膠樣品A、B、C濃度為0之對照組的細胞癒合百分比為30.8%，明膠樣品A之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為45.7%；明膠樣品B 之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為55.0%；明膠樣品C之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為50.8%；而於處理24小時之後，該明膠樣品A、B、C濃度為0之對照組的細胞癒合百分比為59.9%，明膠樣品A之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為82.6%；明膠樣品B之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為88.0%；明膠樣品C之最佳濃度係為150μg/ml，且其細胞癒合百分比為83.9%。由此結果可見，三種明膠樣品A、B、C均具有促使細胞增生遷移，以達到傷口癒合的效果，且濃度越高，相較於對照組，更可明顯達到促進細胞癒合的效果。若以此三種明膠樣品A、B、C相互比對，則其中明膠樣品B更可顯著促使細胞增生遷移，進而達到傷口癒合的效果。

綜上所述，透過前述諸多實驗證明，本案所採用台灣鯛魚鱗經水份調整前處理、擠壓製備、魚鱗擠出物乾燥、粉碎及過篩、熱水萃取及冷凍乾燥等程序而製備出之明膠，不僅可有效提升明膠之萃取率，同時更顯著地提升明膠內總蛋白及胺基酸的含量，進而可達到促進細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護效果及傷口癒合的功效，並可進一步應用，以作為醫藥品止血劑、傷口癒合劑、生物科技材料及美妝保養品之素材...等眾多使用，同時亦提升了廢棄水產品的附加價值，減少廢棄物的耗費，更能開啟有價值的醫藥用途及生物科技材料。故本案極具產業價值，爰依法提出專利申請。

本案得由熟習此技術之人士任施匠思而為諸般修飾，然皆不脫如附申請專利範圍所欲保護者。

Claims

一種用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，該製備方法係包含下列步驟：(a)以一台灣鯛魚鱗為原料，經乾燥及粉碎取得一魚鱗碎片或薄片；(b)對該魚鱗碎片或薄片進行一水份調整之前處理，以調整為濕重27%；(c)以單軸擠壓機擠壓水分調整後之該魚鱗碎片或薄片，並取得一魚鱗擠出物；(d)對該魚鱗擠出物進行乾燥、粉碎及過篩，以取得一魚鱗擠出物粉末；(e)將該魚鱗擠出物粉末加入該魚鱗擠出物粉末之重量的10倍體積量(W：V=1：10)的二次水，以50℃熱水水浴振盪1小時進行萃取，再以10,200g離心10分鐘，取一上清液，即為一明膠萃取液；以及(f)將該明膠萃取液進行冷凍乾燥，以製成一明膠粉末，該明膠粉末相較於該台灣鯛魚鱗原料之重量萃取率介於8~11%之間，且透過該明膠粉末具備之特有胺基酸含量及明膠生理活性，以促進人類表皮角質細胞之細胞附著、細胞增生、氧化傷害保護及傷口癒合。
如申請專利範圍第1項所述之用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，其中步驟(a)中係以一熱風乾操機以50℃之溫度將該台灣鯛魚鱗乾燥至水分含量低於15%，並以一大型粉碎機進行粉碎，以取得該魚鱗碎片或薄片。
如申請專利範圍第1項所述之用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，其中步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之二次水與魚鱗粉混合而成，並調整為濕重27%。
如申請專利範圍第1項所述之用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，其中步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之檸檬酸溶液與魚鱗粉混合而成，並調整為濕重27%，且該檸檬酸溶液之濃度係為1.26%。
如申請專利範圍第1項所述之用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，其中步驟(b)中之該水分調整之前處理係採以一定重量之醋酸溶液與魚鱗粉混合而成，並調整為濕重27%，且該醋酸溶液之濃度係為9.37%。
如申請專利範圍第1項所述之用以促進傷口癒合及對抗氧化之明膠之製備方法，其中步驟(d)之該魚鱗擠出物粉末之粒徑係小於40網目。