TWI627953B

TWI627953B - 組合物用於製備調控血管新生之藥物的用途

Info

Publication number: TWI627953B
Application number: TW106120236A
Authority: TW
Inventors: 溫志宏; 宋秉鈞; 洪翰君
Original assignee: 國立中山大學
Priority date: 2015-12-04
Filing date: 2015-12-04
Publication date: 2018-07-01
Also published as: TW201735918A

Abstract

本發明提供一種組合物用於製備治療糖尿病患者上具有血管萎縮或壞死之傷口之藥物的用途，其中該組合物包含一皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B)。

Description

組合物用於製備調控血管新生之藥物的用途

本發明係關於一種珊瑚萃取物之新穎用途，尤其係關於該珊瑚萃取物用於製備治療糖尿病患者上具有血管萎縮或壞死之傷口之藥物的用途。

血管新生為生理上常見的現象之一，如傷口癒合、女性經期、胎兒生長發育等，均可觀察到血管新生的現象。而血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor；VEGF)已被認定為病理情況中血管生成現象多與寡之原發性刺激。

糖尿病與燙傷均會造成血管萎縮或壞死，這是導致傷口難以癒合的主要原因。臨床上，也常發現這種類型的傷口除伴隨持續發炎性反應外，也會有血管新生的缺陷。但現今治療傷口之藥物並未特別強調提高血管新生之功能。

異位性溼疹是一種過敏性皮膚疾病，一種與遺傳及環境有關的慢性、反覆發作、發癢的皮膚異常。目前的臨床方法是給予類固醇進行治療，但其會有許多嚴重地副作用，像是皮膚乾燥或白化等。許多研究也發現，異位性溼疹的皮膚血管新生會異常增加。在異位性濕疹時，前降解絲蛋白(pro-filaggrin)基因表現量也會大幅下降；而很多研究證實皮膚上表現的降解絲蛋白(filaggrin)與維持皮膚屏障功能息息相關，若過度減少時，會導致皮膚屏障受損與功能失調；進而增加水分經皮散失與過敏原入侵的機率；最終會導致許多皮膚疾病，像是異位性溼疹、魚鱗癬及乾癬。

因此，血管內皮細胞生長因子(VEGF)的表現與許多皮膚疾病有關，因此調控血管內皮細胞生長因子以發展作為皮膚相關疾病之治療標的。

在本發明中，證實從軟珊瑚(Briareum excavatum)所萃取之皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B，EXC-B)於加速糖尿病患者受傷之傷口或燙傷造成的慢性傷口之癒合上具有顯著的功效；而其主要的治療機制是透過提升血管內皮細胞生長因子(VEGF)之表現，以促進血管新生，來改善因慢性傷口所導致血管壞死或萎縮之情況。

此外，本發明證實皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)亦可治療異位性濕疹，可有效改善異位性濕疹之情況。本發明同時證實異位性濕疹會導致該處組織之血管內皮細胞生長因子(VEGF)大量分泌；但皮草珊瑚內酯-B可抑制因VEGF所導致之血管異常增生之情況。同時，皮草珊瑚內酯-B也可抑制發癢因子(如物質P(substance P))及促進皮膚屏障功能調節因子(如降解絲蛋白(filaggrin))分泌以改善異位性濕疹所產生之皮膚功能失調病況。

因此，皮草珊瑚內酯-B於慢性傷口及異位性濕疹上有不同的治療機制，當該處組織之VEGF表現下降時(如血管萎縮與壞死)，則皮草珊瑚內酯-B會調升該VEGF表現；或該處組織之VEGF表現上升時(如血管異常新生)，皮草珊瑚內酯-B則會調降該VEGF表現。是以，本發明證實皮草珊瑚內酯-B可調控血管內皮細胞生長因子(VEGF)之異常表現，可發展作為調控血管新生之藥物以治療血管新生異常之相關疾病，特別是改善皮膚上的狀況(如慢性傷口或異位性濕疹)。

本文中的用語「一」或「一種」係用以敘述本發明之元件及成分。此術語僅為了敘述方便及給予本發明之基本觀念。此敘述應被理解為包括一種或至少一種，且除非明顯地另有所指，表示單數時亦包括複數。於申請專利範圍中和”包含”一詞一起使用時，該用語「一」可意謂一個或超過一個。

本文中的用語「或」其意同「及/或」。

本發明提供一種組合物用於製備調控血管新生之藥物的用途，其中該組合物包含一皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B)。

本發明的該皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B，EXC-B)是從一軟珊瑚(Briareum excavatum)中萃取而來，其化學結構式如下：

其中R₁是C₃H₇；R₂是CH₃。

本文所提的「調控血管新生(regulating angiogenesis)」意指調升(up-regulate)及調降(down-regulate)血管新生之表現，以使症狀獲得改善。於一具體實施例中，該藥物是以任何習知技藝的方式進行局部或全身投藥。於一較佳具體實施例中，該藥物是以經皮投藥之方式予以投藥。於一更佳具體實施例中，該藥物是以每天一次或一次以上投藥。

於一具體實施例中，該藥物進一步包含一醫藥上可接受之載體(pharmaceutically acceptable carrier)。於一較佳具體實施例中，該醫藥上可接受之載體包含一皮膚學上可容許之介質。。「皮膚學上可容許之介質」係指在生物學上適切的物質，如鹽類、酯類及/或醯胺類之成份。也就是說這物質，其與所選擇之有效成份一起用時，在個體投與時不會引起不期望之生物學作用。另外，與含其之藥劑組成份中之任何成份都不會發生有害之交互作用之物質。同樣地，文中的「皮膚學上可容許的鹽」，或「皮膚學上可容許的酯」為在生物學上適切之鹽或酯。

於一具體實施例中，該調控血管新生係調控一個體內血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)之表現。於一較佳具體實施例中，該調控所述個體內VEGF之表現係指當所述個體之VEGF表現下降時，則該組合物會調升該VEGF表現；或當所述個體之VEGF表現上升時，該組合物調降該VEGF表現。

本文中用語「個體(subject)」一詞係指動物。於一較佳具體實施例中，該個體係指哺乳動物。於一更佳具體實施例中，該個體係指人類。

本文所用的「表現(expression)」一詞包含基因、RNA或蛋白質的表現量。

本發明之藥物之劑型的實施例為，於含局部適用的適當載體及技術上為人熟知之物質之局部用處方中添加有效成份。局部用的載體方面選用可提供該組合物所希望之形態之載體。於一具體實施例中，該藥物是選自於由下列所構成之群組的劑型：液態、半固態、固態以及噴霧劑型。於一較佳具體實施例中，該藥物的劑型為軟膏劑、乳霜、乳液、乳劑、微乳劑、凝膠劑或溶液劑。於一更佳具體實施例中，該藥物的劑型為一乳液或一凝膠。上述所選擇之載體必須對有效成分及該局部用組成中之其他成分無不良影響。

於一具體實施例中，該藥物用於治療一傷口，其中該藥物會改善該傷口所導致之所述個體之VEGF表現下降之情況。於一較佳具體實施例中，該傷口包含一慢性傷口及一急性傷口。於一更佳具體實施例中，該傷口包含一慢性傷口。臨床上傷口可根據其癒合與復原速度分為急性與慢性。急性傷口以一系列有序階段且在相對較短時間段內癒合；慢性傷口係癒合非常緩慢之長持續時間(例如，大於3個月)的傷口。最常見慢性傷口係靜脈潰瘍、糖尿病性潰瘍及壓迫性潰瘍。於另一具體實施例中，該慢性傷口為一燙傷所造成傷口或一糖尿病患者之傷口。

於一具體實施例中，該藥物用以促進皮膚傷口之癒合。該傷口係因物理性、化學性或機械性等因素所產生，其中該等因素包括但不限於：創傷、燒燙傷、化學性灼傷、輻射傷害以及生理病變。

於一具體實施例中，該藥物用於治療一異位性濕疹，其中該藥物會抑制該異位性濕疹所導致之所述個體之VEGF表現上升之情況。

於另一具體實施例中，該藥物會改善該異位性濕疹之病況，該病況包含該異位性濕疹的發癢及皮膚屏障失調之情況。於一較佳具體實施例中，該藥物透過抑制一發癢因子之表現以治療該異位性濕疹的發癢情況。於一更佳具體實施例中，該發癢因子包含一物質P(substance P)。

於一具體實施例中，該藥物透過提高一皮膚屏障功能調節因子之表現以治療該異位性濕疹的皮膚屏障失調之情況。皮膚屏障失調(因會使皮膚上有孔隙產生)會造成水分經皮散失增加，過敏原入侵機會增加；因此會造成皮膚乾燥、凹陷或細紋產生；嚴重時會造成異位性皮膚炎、乾癬、皮膚水泡症或過敏性接觸皮膚炎等疾病。因此該異位性濕疹所引起的皮膚屏障失調會使皮膚的保濕性降低；故於一具體實施例中，該皮膚屏障失調會降低皮膚的保濕性；於一較佳具體實施例中，該藥物具有提高皮膚的保濕性之功能。於另一具體實施例中，該皮膚屏障功能調節因子包含一前降解絲蛋白(pro-filaggrin)和一降解絲蛋白(filaggrin)。於一較佳具體實施例中，該皮膚屏障功能調節因子包含一降解絲蛋白(filaggrin)。

本文所用「治療」一詞意謂逆轉、減輕、抑制該術語所應用之病症或病狀或該病症或病狀之一或多種症狀的進程，或預防該病症或病狀或該病症或病狀之一或多種症狀。依據本發明之藥物，該有效劑量之皮草珊瑚內酯-B之範圍落在以藥物之總量為基礎之5μg/ml至2500μg/ml；較佳地，是範圍落在以該藥物之總量為基礎之25μg/ml至500μg/ml內的皮草珊瑚內酯-B；更佳地，是範圍落在以該藥物之總量為基礎之50μg/ml至250μg/ml內的皮草珊瑚內酯-B。該「有效量」意謂本發明之組合物/藥物有效預防或治療本文所提及之病理學病狀之量。

本發明又關於一種化妝品，其係包括如上所述的含有皮草珊瑚內酯-B之局部用藥學組成物。

本發明還關於一種保養品，其係包含如上所述的含有皮草珊瑚內酯-B之局部用藥學組成物。

本發明亦包含將上所述的含有皮草珊瑚內酯-B之局部用藥學組成物塗佈於皮膚之方法。

圖1為皮草珊瑚內酯-B對糖尿病割傷傷口癒合的影響之實驗結果。(A)至(H)為糖尿病割傷組；(I)至(P)為EXC-B治療組。比例尺為1cm。

圖2為皮草珊瑚內酯-B對糖尿病割傷傷口癒合的影響之傷口面積定量分析結果。

圖3為皮草珊瑚內酯-B對燙傷傷口的影響之實驗結果。(A)至(E)為燙傷組；(F)至(J)為乳液處理組；(K)至(O)為10μg EXC-B治療組；(P)至(T)為50μg EXC-B治療組。比例尺為1cm。

圖4為皮草珊瑚內酯-B對燙傷傷口癒合的影響之傷口面積定量分析圖。(A)為傷口面積(%)隨時間變化之曲線圖；(B)為曲線下的面積之分析圖。

圖5為皮草珊瑚內酯-B對燙傷傷口癒合影響之組織切片染色結果。(A)為燙傷組；(B)為乳液處理組；(C)為EXC-B治療組。比例尺為200μm。

圖6為皮草珊瑚內酯-B對燙傷傷口組織之血管內皮生長因子(VEGF)表現量及血管新生狀況(以vWF標記血管)的影響之染色結果。(A)為控制組(正常大鼠)；(B)為乳液處理組；(C)為EXC-B治療組；及(D)磺胺嘧啶銀治療組。比例尺為100μm。

圖7為皮草珊瑚內酯-B對異位性濕疹皮膚治療之實驗結果。(A)為控制組；(B)為異位性濕疹組；和(C)為EXC-B治療組。

圖8為皮草珊瑚內酯-B對異位性濕疹組織中血管內皮生長因子(VEGF)表現量之影響的染色結果。(A)為控制組；(B)為異位性濕疹組；和(C)為EXC-B治療組。比例尺為100μm。

圖9為皮草珊瑚內酯-B對治療異位性濕疹之發癢狀況(以物質P(substance P)做標記)之影響的染色結果。(A)為控制組；(B)為異位性濕疹組；和(C)為EXC-B治療組。比例尺為100μm。

圖10為皮草珊瑚內酯-B對異位性濕疹之皮膚屏障失調的治療之染色結果。(A)為異位性濕疹組；和(B)為EXC-B治療組。比例尺為100μm。

以下實施實例將進一步說明本發明。它們僅用於說明本發明，並闡明本發明特定實施例的各種優點，但不表示本發明僅局限於此種方式。

一、實驗方法與材料

(1)皮草珊瑚內酯-B之製備

本發明的皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B)主要是從軟珊瑚(Briareum excavatum)萃取而來，其化學結構式如下：

其中R₁是C₃H₇；R₂是CH₃。

(2)糖尿病傷口及燙傷傷口之治療實驗

(a)實驗動物準備與糖尿病割傷傷口製造

實驗動物為400-450克的雄性Wistar大白鼠。糖尿病的誘發為使用名蒙酸緩衝溶液配製鏈佐黴素(streptozotocin)(STZ,catalog No.85882 FLUKA,Sigma,St.Louis,MO,USA)，將大白鼠以2.5%異氟醚(isoflurane)麻醉下，以尾靜脈注射方式打入STZ(60mg/kg)。STZ誘發一周後，該大白鼠的血糖值超過250mg/dl，則代表誘發成功。將誘發成功的大白鼠以2.5%異氟醚再次麻醉後，於其背部上選定割傷位置及割傷範圍(一直徑為2公分之傷口位於腰椎中線)並將該處皮膚移除，以創造全層皮膚之割傷。於全層皮膚之割傷手術後，該大鼠隨機分成兩組：(1)糖尿病割傷組(塗抹純乳液)；和(2)EXC-B治療組(塗抹皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)混合乳液)。上述結果指出該EXC-B治療組係每天給予1mg/0.2ml皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide-B，EXC-B)混合乳液做為治療。

(b)實驗動物準備與燙傷傷口製造

實驗動物為400-450克的Wistar大白鼠公鼠，將大白鼠以2.5%異氟醚(isofurane)麻醉下，並於其背部上選定製造燒燙傷之四處位置(兩處位於肩胛骨下方，兩處位於腰椎中線)。將要燒燙傷的位置皮膚拉緊拉撐，將以乾浴槽預熱至175℃之銅塊(2x2公分)緊密接觸10秒以製造傷口，以形成全層皮膚之燒燙傷口。過程中適時移動銅塊確保有完整燙出四邊形，必須注意過程中勿額外施加壓力於銅塊上以確保每次給與壓力相同。

(c)傷口觀察與面積計算

於燒燙傷後，依實驗設計之日期將大鼠麻醉以進行拍攝。以數位相機(Coolpix P6000,Nikon,Japan)在相同條件下(光圈7.2、快門1/60秒)拍攝一系列照片。使用數位影像擷取系統軟體(Diagnostic Instruments,Inc.,Sterling Heights,MI,USA)，分析攝影所得傷口照片以計算傷口面積。各觀察時間點傷口面積的數據呈現部分，則是分別以相對於第0天傷口面積的百分比方式表現。同時測量大白鼠體重，並觀察大白鼠有無外觀或行為上明顯異樣。

(d)病理組織切片與HE染色

依實驗設計於受傷後特定天數將大白鼠予以人道犧牲後，以4℃含有肝素(0.2U/毫升)的PBS由主動脈灌流，直到靜脈流出不帶血色之PBS。再以4℃之4%仲甲醛(paraformaldehyde)灌流固定。最後用手術刀將受傷區域仔細取下，浸泡於10%福馬林固定液存放在4℃環境下固定數天。接下來進行固定組織進行脫水與滲蠟處理，利用組織自動處理系統將皮膚組織進行脫水及滲蠟，接著以石蠟組織包埋機將組織包埋成石蠟塊。然後以石蠟切片機進行組織切片後，使用蘇木紫-伊紅染色法(HE染色)進行組織切片染色。完成後以封片膠封片，再將完成的樣品玻片置於光學顯微鏡觀察，結合數位影像擷取系統拍攝和紀錄切片結果。

(3)誘發異位性濕疹模式與治療

(a)實驗動物準備與異位性濕疹誘發

實驗動物為balb/c小鼠；而誘發異位性濕疹方法：(1)以1：4之橄欖油與丙酮之比例配置成1% DNCB；及(2)分別在第1、3、9、11天將1% DNCB塗抹於已剃毛之balb/c小鼠背部。該balb/c小鼠隨機分成三組為：(A)控制組；(B)異位性濕疹組；及(C)EXC-B治療組。而治療組則是從第15天開始給予EXC-B做治療，為期七天。之後，藉由影像外觀分析，可評估治EXC-B治療異位性濕疹之療效。

(b)化學組織免疫染色

將小鼠以頸脫位法犧牲處死。收集背部皮膚組織，用福馬林緩衝液固定並以石蠟包埋。將2μm的石蠟組織玻片利用二甲苯進行脫蠟作用後，進行梯度濃度的酒精處理。再加以0.3%的過氧化氫處理30分鐘去除內生性過氧化酶。利用蛋白質基酶K(protein K))配置在4%磷酸鹽緩衝液的溶液對石蠟組織玻片在溫度37℃下作用20min後以4%磷酸鹽緩衝液進行清洗動作，再加入利用磷酸鹽緩衝液稀釋的馬血清進行覆蓋動作1小時後。再加入稀釋後的目標蛋白質抗體於4℃下進行18-20小時的反應作用並保持在一個潮濕的環境下。再回收抗體後，再利用馬血清進行覆蓋動作1小時後，加入相對應的二級抗體進行反應90分鐘。以ABC組的試劑進行反應，在利用DBA呈色的作用後，利用酒精梯度作用和加以風乾、封上蓋玻片。將完成樣本玻片置於光學顯微鏡(DM 6000,Leica Inc,Germany)和實體顯微鏡(APO Z16,Leica Inc.Singapore)下，用顯微鏡數位影像輸出系統(idea SPOT,Diagncstic instruments Inc.U.s.A.)拍攝和紀錄切片結果並針對切片進行分析。

(4)實驗數據分析

所有實驗數據以平均值±平均值標準誤差方式呈現。兩組間數據比較，依照t-測試進行統計分析。多組間數據比較，則利用單因素方差分析(ANOVA)進行數據統計分析，並根據鄧肯氏法進行多重組間差異性比較。當p值小於0.05時，表示有顯著差異。

二、實驗結果

(1)皮草珊瑚內酯-B對於糖尿病割傷傷口癒合測試

如圖1所示，圖1中(A)至(H)為糖尿病割傷組(塗抹純乳液)；而(I)至(P)為EXC-B治療組(給予1mg/0.2ml的皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)混合乳液治療)。利用影像攝影分析，其中(A)和(I)為割傷處理4天後之外觀；(B)和(J)為割傷處理7天後之外觀；(C)和(K)為割傷處理10天後之外觀；(D)和(L)為割傷處理14天後之外觀；(E)和(M)為割傷處理18天後之外觀；(F)和(N)為割傷處理21天後之外觀；(G)和(O)為割傷處理25天後之外觀；(H)和(P)為割傷處理28天後之外觀。於割傷處理後合併給予濃度1mg/0.2ml的EXC-B混合乳液之EXC-B治療組與糖尿病割傷組相比之下，有明顯改善傷口癒合之情形。

圖2為傷口恢復面積(%)隨時間變化之曲線圖。於割傷處理後合併給予濃度1mg/0.2ml的EXC-B混合乳液之EXC-B治療組和糖尿病割傷組比較下分析，隨時間變化於第7、21到28天，有顯著增加著傷口癒合之作用。

(2)皮草珊瑚內酯-B對燙傷傷口之治療測試

如圖3所示，圖3中(A)至(E)為燙傷組(無治療)；(F)至(J)為乳液處理組(塗抹純乳液)；(K)至(O)為10μg EXC-B治療組(以10μg/0.2ml之EXC-B混合乳液治療)；(P)至(T)為50μg EXC-B治療組(以50μg/0.2ml之EXC-B混合乳液治療)。利用影像攝影分析，(A)、(F)、(K)和(P)為燙傷處理2天後之外觀；(B)、(G)、(L)和(Q) 為燙傷處理8天後之外觀；(C)、(H)、(M)和(R)為燙傷處理14天後之外觀；(D)、(I)、(N)和(S)為燙傷處理18天後之外觀；(E)、(J)、(O)和(T)為燙傷處理24天後之外觀。根據上述結果，在燙傷處理後合併給予EXC-B混合乳液在濃度10μg/0.2ml(參見圖3中(K)至(O))和50μg/0.2ml(參見圖3中(P)至(T))下有明顯改善傷口癒合之情形。

圖4為EXC-B對於燙傷傷口癒合測試之傷口面積定量分析圖；其中圖4(A)為傷口恢復面積(%)隨時間變化之曲線圖；而圖4(B)為曲線下面積分析圖。根據該圖4之結果，10μg及50μg EXC-B治療組與燙傷組和乳液處理組相比較分析下，其隨時間變化可顯增加著傷口癒合之速度。

圖5為EXC-B對於燙傷傷口癒合測試之組織切片染色結果；其中(A)為燙傷組(不給予治療)；(B)為乳液處理組(塗抹純乳液)；(C)為EXC-B治療組(以EXC-B混合乳液治療)。在乳液處理組與燙傷組中，可明顯觀察到上皮層均有增厚、真皮組織受損與誘發嗜中性白血球浸潤之現象。但EXC-B治療組，即燙傷處理後合併使用EXC-B混合乳液治療，有顯著的改善燙傷後引起的組織改變的現象。

圖6為EXC-B對燙傷傷口組織之血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表現量與血管新生狀況(以vWF標記血管)之影響的染色結果；其中(A)為控制組(正常大鼠)；(B)為乳液處理組(塗抹純乳液)；(C)為EXC-B治療組(以EXC-B混合乳液治療)；及(D)磺胺嘧啶銀治療組(以磺胺嘧啶銀治療)。該乳液處理組與該控制組相比下，可明顯觀察VEGF的表現量會顯著下降；但給予EXC-B治療後，燙傷組織內VEGF表現會大幅提升，且效果較磺胺嘧啶銀好。利用血管性血友病因子(von Willebrand factor，vWF)標記血管，可以發現EXC-B治療組中血管增生的比例高於乳液處理組與磺胺嘧啶銀治療組。以上結果顯示EXC-B治療可以大幅提升血管增生，以促進傷口癒合之速度。故本結果明確地指出EXC-B這有效成分可以加速慢性傷口癒合的機制以促進血管已壞死或萎縮的傷口血管新生。

(3)皮草珊瑚內酯-B對治療異位性濕疹之治療測試

圖7為皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)對異位性濕疹皮膚之治療結果；其中(A)為控制組(正常小鼠)；(B)為異位性濕疹組(塗抹純凝膠)；和(C)為EXC-B治療組(以50μg/0.2ml Excavatolide B混合凝膠治療)。在異位性濕疹組與控制組比較下，可以觀察到其異位性濕疹組之皮膚具有嚴重發炎且有因反覆發癢而抓傷之傷口。再給予EXC-B治療後，明顯地發現皮膚狀況顯著地優於異位性濕疹之皮膚。故該結果顯示EXC-B對於異位性濕疹有相當良好之治療效果並改善其發炎與發癢狀況，且並未觀察到乾燥及白化等臨床治療的副作用。

圖8為皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)對異位性濕疹組織中血管內皮生長因子(VEGF)表現量之影響的染色結果；其中(A)為控制組(正常小鼠)；(B)為異位性濕疹組(塗抹純凝膠)；和(C)為EXC-B治療組(以50μg/0.2ml Excavatolide B混合凝膠治療)。在異位性濕疹中，可以觀察到皮膚組織的VEGF大量分泌。在給予EXC-B治療後，其VEGF的表現量可以被抑制。其結果顯示EXC-B可以抑制異位性濕疹所造成的血管新生異常增加。

異位性濕疹會導致皮膚分泌大量的發癢因子(如Substance P)進而導致持續抓癢的行為產生；故會造成皮膚皮層持續被破壞，導致皮層有裂隙引起皮膚保濕性大幅地下降，嚴重的則會造成傷口的產生。圖9為皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)對異位性濕疹的發癢因子(以物質P(substance P)做標記)之影響的染色結果；其中(A)為控制組(正常小鼠)；(B)為異位性濕疹組(塗抹純凝膠)；和(C)為EXC-B治療組(以50μg/0.2mlExcavatolide B混合凝膠治療)。在異位性濕疹組與控制組比較下，可以觀察到該異位性濕疹組之皮膚組織具有大量發癢因子(以substance P進行標記)表現，顯示其會導致反覆抓癢。然而，再給予EXC-B治療後，明顯地發現發癢因子(以substance P進行標記)顯著地被抑制。由此結果可以得知EXC-B可以藉由減少發癢因子之分泌以減少異位性濕疹之反覆性發癢，進一步地減少抓癢所導致的皮膚屏障破壞，達到改善異位性濕疹之病況。

失調的皮膚屏障(skin barrier)，也被認為是異位性濕疹最初發生的一種特徵。已有研究指出皮膚屏障出現異常與前降解絲蛋白(pro-filaggrin)基因有關，其為皮膚屏障功能調節因子。因此當異位性濕疹病變時，其表現量會大幅下降。圖10為皮草珊瑚內酯-B(EXC-B)對異位性濕疹之保濕性的影響之染色結果；其中(A)為異位性濕疹組(塗抹純凝膠)；和(B)為EXC-B治療組(以50μg/0.2ml Excavatolide B混合凝膠治療)。在異位性濕疹組中，可發現異位性濕疹會導致皮膚屏障功能調節因子(以降解絲蛋白(filaggrin)作標記)的下降；但再給予EXC-B治療後，可以發現原本皮膚屏障功能調節因子的下降表現可以被回復。由此結果可以得知EXC-B能夠改善異位性濕疹的皮膚屏障失調，使皮膚回復至屏障功能較佳之狀況，達到緩解異位性濕疹。

雖然本發明已以較佳實施例揭露如上，但其並非用以限定本發明。本領域的普通技術人員，在不脫離本發明的精神和範圍內，所作的改變或修飾，均屬本發明的保護範圍。

Claims

一種組合物用於製備治療糖尿病患者上具有血管萎縮或壞死之傷口之藥物的用途，其中該組合物包含一皮草珊瑚內酯-B(Excavatolide B)，其中該皮草珊瑚內酯-B透過促進血管新生以治療該糖尿病患者上具有血管萎縮或壞死之傷口。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該皮草珊瑚內酯-B係萃取自一軟珊瑚(Briareum excavatum)。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該促進血管新生係透過調升一血管內皮細胞生長因子(VEGF)之表現。