TWI530284B

TWI530284B - 馬替麥考酚酯或其鹽類用於製備抗流感病毒之藥物的用途

Info

Publication number: TWI530284B
Application number: TW102110346A
Authority: TW
Inventors: 李安榮; 朱紀洪; 張溫良; 姚振文; 黃文鑫; 鮑力恒
Original assignee: 當代綠能科技股份有限公司
Priority date: 2013-03-22
Filing date: 2013-03-22
Publication date: 2016-04-21
Also published as: TW201436793A

Description

馬替麥考酚酯或其鹽類用於製備抗流感病毒之藥物的用途

本發明係關於一種馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥理上可接受之鹽類等用於製備抗流感病毒之藥物的用途。

流行性感冒病毒(簡稱流感病毒)是人類生命中最具威脅性的病毒之一，自20世紀就發生四次流行性感冒大流行，分別是1918~1919年(西班牙流感，H1N1)、1957年(亞洲流感，H2N2)、1968年(香港流感，H3N2)及1977年(俄羅斯流感，H1N1)。其中，又以1918年西班牙流感最為嚴重，其H1N1病毒株是由禽流感以及人類流感病毒突變而成，在全世界造成2~4千萬人的死亡。而，2009年墨西哥爆發新型H1N1流感疫情，已懷疑有一百多萬人感染，造成一萬多人的喪命，目前也持續蔓延中(Neumann,G.；Noda,T.；Kawaoka,Y.Emergence and Pandemic Potential of Swine-Origin H1N1 Influenza Virus.Nature.459：931-939,2009)。另外，在2010年全國流感防控會中提出要特別注意季節性A型H3N2流感的侵襲，此病毒株也在過去造成不少的傷亡。

流感病毒是一種造成人類與動物患流行性感冒的負鏈單股RNA病毒，是屬於正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)，依據病毒核蛋白、遺傳物質、基質蛋白抗原特性的不同，可分為A、B、C三個血清型。其中，A型流感病毒會導致不同宿主間的流行性感冒，因其病毒外表的兩種抗原血凝素(hemagglutinin,HA)及神經胺酸酶(neuraminidase,NA)為多型性，目前已發現16種HA(H1~16)及9種NA(N1~N9)，可發生遺傳性抗原變異；B型流感病毒抗原變異較少只會引起地區性感染，C型流感病毒主要是以豬為宿主，對人體的感染較少見，因此上述所說的世界性大流感就是由A型流感病毒所導致的疫情。

A型流感病毒結構自外而內可分為外膜、基質蛋白及核心三個部分。外膜有約500個放射狀向外排列的突起，為上述兩種抗原類型：柱狀突起(HA)及蘑菇狀突起(NA)。HA能與多種動物紅血球的表面受體吸附引起凝集，經裂解後可分為重鏈及輕鏈，使得病毒與宿主細胞相互融合；NA主要具有水解唾液酸的活性，切斷病毒與宿主細胞最後的聯繫，使病毒從吸附的紅血球脫落，防止病毒的聚集，促進在黏液中的移動。基質蛋白是由M1、M2所組成，有保護病毒核心及維繫病毒的結構。另外核心是由8個負鏈單股RNA片段所組成，其與核蛋白(NP)及RNA聚合酶(PB1、PB2及PA)相結合纏繞成核糖核蛋白體。而流感病毒之所以會造成人們的恐慌主要是由於它的變異方式會產生新的亞型而讓我們措手不及，其突變方式有兩種，一為抗原飄移(antigenic drift)，其是指流感病毒亞型的抗原(NA)胺基酸序列的點突變所產生小變異；另一個為抗原轉變(antigenic shift)，是流感病毒變異最常見的類型，每隔十年就會發生一次抗原性大變異，造成的原因是由於宿主同時受到兩種不同病毒株感染，病毒RNA進行基因重組而產生新的病毒株，影響甚大(陳鴻珊，張興權，抗病毒藥物及其研究方法，化學工業出版社，328-331,2006.)。

流行性感冒大多發生在秋冬、早春，其侵襲的目標為呼吸道黏膜上皮細胞，並在宿主細胞內繁殖，導致黏膜充血、水腫及細胞變性、脫落等病變。潛伏期通常1至3天，開始出現發燒、發冷、頭痛、鼻塞、全身痠痛等徵狀，當蔓延至下呼吸道，則可能引起支氣管炎和間質性肺炎，由於流感病毒會降低呼吸道黏膜上皮細胞清除和黏附異物的能力，因此經常造成繼發性肺炎感染，是其主要造成流感疾病死亡原因之一(Morens,D.M；Taubenberger,J.K.；Fauci,A.S.Predominant Role of Bacterial Pneumonia as a Cause of Death in Pandemic Influenza：Implications for Pandemic Influenza Preparedness.J.Infect.Dis.198：962-970,2008)。

目前，對於流感的防疫與治療大多採取社區隔離及支持性藥物治療，而使用治療預防方式分為疫苗和抗病毒藥物。但是對於日趨變異的病毒，疫苗防護還是有風險性；而目前抗病毒藥物主要有三種，第一種為M2抑制劑(M2 protein inhibitor)，作用於病毒穿膜蛋白M2離子通道，阻礙H⁺進入病毒內部，使得病毒外膜無法與核內體(endosome)融合，病毒便無法釋放RNA，這類藥物為金剛烷(Adamantan)衍生物，如金剛烷胺(amantadine)、金剛乙胺(rimantadine)；第二種為神經胺酸酶(NA)抑制劑(neuraminidase inhibitors)，作用在神經胺酸酶，使病毒無法水解唾液酸，進而無法離開宿主細胞，阻止病毒擴散，這類藥物有奧司他韋(oseltamivir，克流感)、札那米韋(zanamivir，瑞樂沙)、帕拉米韋(peramivir)和環戊烷(cyclopentane)或咯啶衍生物(pyrrolidine derivatives)；第三種為RNA聚合酶(RNA polymerase)抑制劑，主要抑制RNA聚合酶(PB1、PB2、PA)合成病毒蛋白質的路徑，藥物有2'-脫氧-2'-氟鳥苷(2'-deoxy-2'-fluoroguanosine,FdG)、T-705；另外也有利用干擾素及SiRNA(small interfering RNAs)等治療方式來防止病毒的感染(Clercq,E.D.Antiviral Agents Active against Influenza A Viruses.Nat.Rev.Drug.Discov.5：1015-1025,2006)。

然而，上述的藥物皆無法達到全面抑制各種類型的流感病毒，且有抗藥性及藥物副作用的缺失。A型流感病毒的抗原變異性大，傳染性強，每年全球約有5億人感染流感，常造成很高的死亡率，對於社會產生巨大的負擔和經濟損失，因此積極開發新的抗流感藥物實為一重要課題。

本發明首次提出以馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其鹽類等具有對抗流感病毒之功效。

因此在一方面，本發明提供一種馬替麥考酚酯或其藥理上可接受之鹽類等用於製備抗流感病毒之藥物的用途。

在本發明之一較佳實施例中，該藥物可接受之鹽類等可為鹽酸鹽、溴酸鹽或有機酸鹽等。

另一方面，本發明之藥物可與一或多種抗流感病毒藥劑併用，其中該藥劑選自由M2抑制劑、NA抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、干擾素及SiRNA所組成之群。

在本發明之一較佳實施例中，該藥劑可為(3R,4R,5S)-4-乙醯胺-5-氨基-3-(1-乙基丙氧基)-1-環己烷)-1-羧酸(奧司他韋，oseltamivir phosphate；克流感，Tamiflu)。

另一方面，本發明非可預期的發現馬替麥考酚酯或其鹽類具有抑制抗藥表現型之流感病毒之功效，因此，本發明提供一種馬替麥考酚酯或其藥理上可接受之鹽類用於製備對抗抗藥表現型流感病毒之藥物的用途。

其中，該抗藥表現型之流感病毒可為H1N1或H3N2具抗藥性之變種病毒株，在本發明之一較佳實施例中，該抗藥表現型流感病毒為克流感抗藥性流感病毒株。

本發明之其他特徵將經由以下詳細說明、各個具體實例及申請專利範圍而清楚呈現。

本發明說明中之用詞通常具有在本技術領域中、在本發明內容中、及各用語所在之特定內容中的原始意義。

本文所使用的「一」乙詞，如未特別指明，係指至少一個(一個或一個以上)之數量。

本文中所述之「流感病毒」係為流行性感冒病毒之簡稱，係為一種造成人類與動物患流行性感冒的負鏈單股RNA病毒，是屬於正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)，依據病毒核蛋白、遺傳物質、基質蛋白抗原特性的不同，可分為A型流感病毒、B型流感病毒及C型流感病毒，再根據血凝素和神經胺酸酶的抗原性分為不同的亞型。根據世界衛生組織(WHO)流感病毒株的命名包含6個要素：型別/宿主/分離地區/毒株序號/分離年份(HnNn)，其中對於人類流感病毒，省略宿主信息，對於乙型和丙型流感病毒省略亞型信息。本發明中所稱之流感病毒包括A型流感病毒、B型流感病毒及C型流感病毒。在一特定實施例中，流感病毒特別為H1N1、H3N2或其具抗藥性之變種病毒株，尤指對克流感(Tamiflu)具抗藥性之變種病毒株。

根據本發明，未可預期地發現馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥物可接受之鹽類等具有對抗流感病毒之功效，因此提供一種馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥理上可接受之鹽類用於製備抗流感病毒之藥物的用途。

本文中所述之「馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)」係指2-嗎啉乙基(E)-6-(1,3-二氫-4-羥基-6-甲氧基-7-甲基-3-氧代-5-異苯并呋喃)-4-甲基-4-己烯酸乙酯(2-morpholinoethyl(E)-6-(1,3-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-7-methyl-3-oxo-5-isobenzofuranyl)-4-methyl-4-hexenoate)，具有下列結構式：

本文所使用之「藥理上可接受之鹽類」係指對於人類或哺乳動物服用具安全性且有效之鹽類化合物，具有其所需之生物活性。藥物上可接受之鹽類包括但不限於本發明之馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)的酸性或鹼性鹽類，例如與鹽酸、氫溴酸、碘酸、硝酸、硫酸、硫酸氫鈉、磷酸、磷酸酯、醋酸、乳酸、水楊酸、檸檬酸、酒石酸、泛酸、重酒石酸、抗壞血酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、葡萄糖酸、甲酸、苯甲酸、谷氨酸、甲基磺酸、對甲苯磺酸合成的鹼性鹽；或與鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅和二乙醇胺鹽合成的鹼性鹽。

在本發明之一較佳具體實施例中，該藥理上可接受之鹽可為鹽酸鹽。

另一方面，該藥物可與一或多種抗流感病毒之藥劑併用，包含但不限於M2抑制劑(M2 protein inhibitor)，如金剛烷衍生物之金剛烷胺(amantadine)與金剛乙胺(rimantadine)；神經胺酸酶(NA)抑制劑，如有奧司他韋(oseltamivir，克流感)、札那米韋(zanamivir，瑞樂沙)、帕拉米韋(peramivir)和環戊烷(cyclopentane)或咯啶衍生物(pyrrolidine derivatives)；RNA聚合酶(RNA polymerase)抑制劑，如2'-脫氧-2'-氟鳥苷(2'-deoxy-2'-fluoroguanosine,FdG)、T-705；以及干擾素或SiRNA等。

在本發明之另一較佳具體實施例中，前述抗流感病毒之藥劑為克流感(Tamiflu)，即(3R,4R,5S)-4-乙醯胺-5-氨基-3-(1-乙基丙氧基)-1-環己烷)-1-羧酸((3R,4R,5S)-4-acetamido-5-amino-3-(1-ethylpropoxy)-1-cyclohexane-1-carboxylic acid；oseltamivir phosphate)。

根據本發明，該藥物可以包括但不限於非經腸道或口服投藥。非經腸道投藥之藥物其形式包括溶液、懸浮液、乳液，及可在使用前刻溶解或懸浮於溶劑中之固體可注射組合物。可藉由溶解、懸浮或乳化一或多活性成分於稀釋劑中來製備該注射液。前述稀釋劑之實例為用於注射之蒸餾水、生理鹽水、植物油、醇類及其組合。又，該注射液可含有安定劑、助溶劑、懸浮劑、乳化劑、平滑劑、緩衝液、保存劑等。該等注射液係在最終製劑步驟中滅菌或以無菌程序製備。本發明之藥物亦可被製劑成無菌固體配製品，例如，藉由冷凍乾燥，並可在使用前刻滅菌或溶解於無菌可注射水或其他無菌稀釋劑。該藥物亦可經口投藥，其中該組合物可為固體或液體形式。固體組合物包括錠劑、丸劑、膠囊、分散性粉劑、顆粒及其類似物。口服組合物亦包括漱口藥及舌下片劑。膠囊包括硬膠囊及軟膠囊。在此類口服固體組合物中，一或多活性化合物可自行混合，或與稀釋劑、結合劑、散解劑、潤滑劑、安定劑、助溶劑混合，接著以習知方法製劑成配製品。當需要時，此等配製品可以塗佈劑塗佈，或可以二或多種塗佈層塗佈。另一方面，口服液體組合物包括醫藥上可接受之液態溶液、懸浮液、乳液、糖漿、藥酒，及類似物。在此類組合物中，一或多活性化合物可被溶解、懸浮或乳化在通用稀釋劑中(如純化水、乙醇或其等之混合物等等)。除了此類稀釋劑，前述組合物亦可含有潤濕劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、香料、保存劑及緩衝液及其類似物。

根據本發明，未可預期地發現馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥物可接受之鹽類具有對抗抗藥表現型流感病毒之功效，因此提供一種馬替麥考酚酯或其藥理上可接受之鹽類用於製備對抗抗藥表現型流感病毒之藥物的用途。

無須進一步的闡述，咸相信本發明所屬技術領域中具有通常知識者基於前述說明即可利用本發明至最廣的程度。下述實施例僅僅是作為例示說明之用，而非以任何方式限制其餘的揭露內容。

[實施例] 細胞藥理實驗及免疫染色材料

細胞株(Cell line)：MDCK：Madin-Darby canine kidney cells(Madin-Darby氏狗腎小管細胞株)。

細胞培養液：1. 10% Fetal bovine serum(FBS)；2. TPCK培養液(tosylsulfonyl phenylalanyl chloromethyl ketone-treated trypsin)；3. DMEM(Dulbecco’s modified Eagle medium)。

細胞生理緩衝液：Phosphate-buffered saline(PBS)。

病毒株：Influenza A(H1N1/H3N2)(來源：姚振文教授，三軍總醫院病理部)。

ELISA讀數測定儀：BIOTEK CERES 900 EIR READER。以 MTT方法評估宿主細胞的存活率

動物實驗材料

雄性6週齡之BALB/c小鼠係購自樂斯科生物科技股份有限公司

實施例1. 馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil,MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)之製備

馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)可依下述方法製備：於冰浴中之麥考酚酸(mycophenolic acid)3.2 g(10 mmol)溶於30 ml之二氯甲烷(dichloromethane)溶液中，加入草醯氯(oxalyl chloride)1.5 ml(17.5 mmol)及二甲基甲醯胺(dimethylformamide)2滴，在室溫下攪拌該混和液3小時。真空下蒸發該混和液而得11b化合物。製備反應流程如下：

將11b化合物溶於20 ml之乙酸乙酯(ethyl acetate)溶液中，加入4-(2-羥乙基)嗎啉(4-(2-hydroxyethyl)morpholine)2.6 ml(20 mmol)，在室溫下攪拌該混和液30分鐘，真空下蒸發該混和液而得馬替麥考酚酯粗產物，接著添加50 ml水並以0.1 N鹽酸中和至pH 7.0以促進馬替麥考酚酯純化合物之沉澱(4.7 g,81.0%,mp.95-96℃)。

馬替麥考酚酯之鹽酸鹽(Mycophenolate Mofetil hydrochloride)可依下述方法製備：於室溫下將馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)2 g(4.61 mmol)溶於50 ml之乙酸乙酯溶液中，攪拌該溶液並加入0.3 ml(1.2當量)之醋酸及0.7 ml(1.2當量)之三甲基氯矽烷(trimethylchlorosilane)，攪拌該混和液1小時並過濾沉澱物，將固態物質於室溫下以乙酸乙酯洗滌三次並於真空下蒸發而獲得2.11 g之馬替麥考酚酯鹽酸鹽(97.6%,mp.157.2℃)。

實施例2. 純化物之最小抑制濃度及藥物毒性實驗

抗病毒活性試驗是以病毒宿主細胞的存活率來評估宿主細胞感染病毒的程度，而宿主細胞的存活率是以細胞存活率分析(MTT assay)的方法。原理為四甲基偶氮唑鹽(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)黃色水溶液固體可被活細胞的粒腺體(mitochondria)中的脫氫酵素(dehydrogenase)代謝，將tetrazolium ring還原呈紫色不溶性沉澱物formazan(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-formazan)而堆積在細胞中，因活細胞的粒線體酵素才具有催化活性，故所測得的吸光值會與活細胞數量成正比關係，因此本實施例係利用formazan產量的多寡來評估細胞的存活率。

具體地說明，本實施例選用H1N1及H3N2的病毒株進行抗流感病毒之活性試驗，其細節如下：一、細胞培養

細胞解凍後培養在37℃、5%二氧化碳培養箱中，等至細胞長滿八成左右時，以磷酸緩衝液(PBS)清洗細胞，加入胰蛋白脢(trypsin)反應5分鐘，使貼附在培養皿的細胞脫落，加入細胞培養基(DMEM)中和trypsin的反應，離心(1200 rpm、5分鐘)，吸除上清液，以少量培養基混勻細胞，計數細胞後加入細胞培養液(DMEM)稀釋成實驗所需的細胞濃度，以便進行抗流感病毒活性篩選。

二、實驗步驟

1.將細胞稀釋至指定濃度(2×10⁴ cells/well)植入96個培養皿(96-well plate)中，於37℃、5%二氧化碳培養箱(incubator)培養20~24小時；2.每個well的細胞以100 μl的細胞生理緩衝液(PBS)清洗兩次，最後一次加入100 μg/well的TPCK培養液，置入培養箱，待測藥物稀釋完成後再給藥； 3.給藥條件分為D+V、D、V、對照組(Mock)和空白組(Blank)給藥，於37℃、5%二氧化碳培養箱(incubator)培養48小時；4.兩天後以顯微鏡觀察細胞凋亡情形；接著進行MTT檢測，分別在D+V、D、V、Mock和Blank組中加入MTT試劑20 μl(5 mg/ml)，等待5小時；5.吸去培養液，在D+V、D、V、Mock和Blank中加入25 μl glycine緩衝液以及100 μl二甲基亞碸(dimethyl sulfoxide,DMSO)。

6.進行讀盤，測量波長540 nm吸光值。

三、給藥條件

1. D+V：同時給予50 μl不同濃度待測藥物和50 μl流感病毒(0.01 MOI)；2. D：給予50 μl不同濃度待測藥物和50 μl TPCK培養液；3. V：給予50 μl流感病毒(0.01 MOI)和50 μl TPCK培養液；4. Mock：含MDCK細胞和100 μl TPCK培養液；5. Blank：不含MDCK細胞和TPCK培養液。

四、流感病毒(H1N1/H3N2/WSN)感染量

施予0.01 MOI(multiplicity of infection)的流感病毒株。

五、待測藥物濃度

純化物：100 μg/ml、50 μg/ml、25 μg/ml、12.5 μg/ml、6.25 μg/ml、1.563 μg/ml、0.391 μg/ml及0.098 μg/ml八種濃度。

六、陽性對照組

抗病毒藥物Ribavirin。

七、MTT檢測結果讀取

1.細胞存活率： 2.0~25%細胞存活率(cell survival)紀錄為+/-；25~50% cell survival紀錄為+；50~75% cell survival紀錄為++；75~100% cell survival紀錄為+++；>100% cell survival紀錄為++++。

其中，待測藥物對於病毒造成細胞凋亡現象有回復作用者，+++以上為有效藥物，且有效藥物必須有兩次或以上的相同結果。

請參閱表1，在抗H1N1流感病毒活性試驗中，馬替麥考酚酯(MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)由高濃度(100 μg/ml)至低濃度(0.391 μg/ml)同時給予待測藥物與H1N1流感病毒時，均可使MDCK細胞存活率達75%，顯示具有抗流感病毒活性，並且對細胞無藥物毒性。

又如表2所示，在抗H3N2流感病毒活性試驗中，馬替麥考酚酯(MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)於濃度50 μg/ml至濃度1.563 μg/ml具有較佳的抗流感病毒活性，但於較高濃度(100 μg/ml)及濃度低於0.391 μg/ml時則無抑制作用。

此外，表3為抗病毒活性試驗中不同濃度之馬替麥考酚酯(MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)對於WSN流感病毒之抑制效果，結果顯示由高濃度(100 μg/ml)至低濃度(0.098 μg/ml)均具有抗流感病毒活性。

實施例3. 對抗藥性病毒之最小抑制濃度

依前述方法檢測下列化合物針對流感病毒之抗藥變種的最小抑制濃度(MIC)：MPM：馬替麥考酚酯

MPM-N：馬替麥考酚酯之鹽酸鹽

受測流感病毒株包括：H1N1 T.R.-H1N1克流感(Tamiflu)抗性病毒株：A型流感病毒(H1N1)經變種，此一病毒株經定序後近似於Influenza A/Taiwan/937/2009

H3N2-A型流感病毒株(H3N2)：經定序後近似於Influenza A/New York/469/2004

WSN-Influenza A/WSN/33(H1N1)：經定序後近似於Influenza A/Hon kong/470/97

Influenza B-B型流感病毒株

H1N1-A型流感病毒株(H1N1)

表4之結果顯示馬替麥考酚酯(MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)對於具有抗藥性之各流感病毒株其最小抑制濃度均優於對照組之Ribavirin。

根據表5的結果證實，馬替麥考酚酯(MPM)及其鹽酸鹽(MPM-N)具有對抗具抗藥性之流感病毒株之功效。

實施例4. MPM-N有效抑制Tamiflu抗藥性流感病毒株rWSN ^H274Y

為評估馬替麥考酚酯鹽酸鹽(MPM-N)對於抗藥性流感病毒株之功效，使用細胞螢光免疫染色法偵測病毒核蛋白以確認是否有效抑制病毒感染。具體地說明，本實施例選用對Tamiflu具有抗藥性之H1N1病毒株rWSN^H274Y進行試驗。

請參閱圖1，如螢光免疫染色之結果所示，需使用100 μM之Ribavirin以抑制Tamiflu抗藥性病毒株rWSN^H274Y，相較於此，馬替麥考酚酯鹽酸鹽(MPM-N)之濃度達5 μM即可抑制病毒感染，優於Ribavirin。

實施例5. MPM-N之單獨或合併使用有效增加流感病毒感染小鼠之存活率

以流感病毒感染之小鼠動物模式分析存活率，評估各化合物抗流感病毒之功效本實施例選用H1N1WSN病毒株進行抗流感病毒之動物試驗，將雄性6週大之BALB/c小鼠以舒泰(Zoletil)麻醉後以鼻腔內注射(i.n.)之方式感染1×103 PFU之病毒，而後以口服給藥。給藥條件分為(1)控制組：僅病毒感染；(2)病毒感染並投予Tamiflu，0.1 mg/Kg，連續7天；(3)病毒感染並投予Tamiflu，1 mg/Kg，連續7天；(4)病毒感染並投予MPM-N，0.3 mg，連續7天；(5)病毒感染並投予Tamiflu 0.1 mg/Kg及MPM-N 0.3 mg，連續7天。

於流感病毒感染後觀察小鼠之存活率並測量體重變化，其結果如圖2(A)及(B)所示。研究結果證實，未服用任何藥物之小鼠於感染後存活率僅餘5.4%(2/37)，若單獨投予MPM-N小鼠存活率提高至23.3%(7/30)，單獨投予低劑量之Tamiflu(0.1 mg/Kg)，小鼠存活率為46.7%(14/30)，若投予高劑量之Tamiflu(1 mg/Kg)其存活率可達100%(13/13)，而當合併投予低劑量Tamiflu(0.1 mg/Kg)及MPM-N(0.3 mg)時，小鼠存活率大幅提升為93.3%(28/30)。亦即藉由單獨投予或合併他種藥物使用，MPM-N均展現對抗流感病毒之絕佳功效。

雖然本發明以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習本發明技術者，當可在不脫離本發明之精神和範圍內，作些許之更動與潤飾，則應屬本發明申請專利範圍所界定之保護範圍。

前文之所述以及實施方式可藉由附加之圖式達到更好的說明效果。為了加強本發明之說明，將適當的實施例之圖式列舉於此。

圖1係以螢光免疫染色法偵測不同濃度藥物對抗抗藥性流感病毒株之功效的螢光免疫染色結果圖。

圖2係為以小鼠動物模式分析各化合物對抗流感病毒之功效的結果圖，其中(A)顯示不同條件下小鼠之存活率；(B)為小鼠之體重變化圖。

Claims

一種馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥理上可接受之鹽類用於製備抗流感病毒之藥物的用途，其中該流感病毒為H1N1、H3N2或其具抗藥性之變種病毒株。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該藥理上可接受之鹽類為鹽酸鹽。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該藥物可與一或多種抗流感病毒藥劑併用，該藥劑選自由M2抑制劑、NA抑制劑、RNA聚合酶抑制劑、干擾素及SiRNA所組成之群。
如申請專利範圍第3項所述之用途，其中該藥劑為(3R,4R,5S)-4-乙醯胺-5-氨基-3-(1-乙基丙氧基)-1-環己烷)-1-羧酸(磷酸奧司他韋)。
一種馬替麥考酚酯(Mycophenolate Mofetil)或其藥理上可接受之鹽類用於製備對抗抗藥表現型流感病毒之藥物的用途，其中該抗藥表現型流感病毒為H1N1或H3N2具抗藥性之變種病毒株。
如申請專利範圍第5項所述之用途，其中該藥理上可接受之鹽類為鹽酸鹽。
如申請專利範圍第5項所述之用途，其中該抗藥表現型流感病毒為對(3R,4R,5S)-4-乙醯胺-5-氨基-3-(1-乙基丙氧基)-1-環己烷)-1-羧酸(磷酸奧司他韋)具抗藥性的流感病毒株。