TWI458714B - 苯并咪唑化合物及其用途 - Google Patents

苯并咪唑化合物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TWI458714B
TWI458714B TW098142356A TW98142356A TWI458714B TW I458714 B TWI458714 B TW I458714B TW 098142356 A TW098142356 A TW 098142356A TW 98142356 A TW98142356 A TW 98142356A TW I458714 B TWI458714 B TW I458714B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
arh
compound
nmr
ppm
benzimidazole
Prior art date
Application number
TW098142356A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201120012A (en
Inventor
Chih Shiang Chang
Jih Hwa Guh
Che Ming Teng
Shiow Lin Pan
Wei Ling Chang
Ju Fang Liu
kai wei Chang
Sheng Chu Kuo
Original Assignee
Univ China Medical
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ China Medical filed Critical Univ China Medical
Priority to TW098142356A priority Critical patent/TWI458714B/zh
Publication of TW201120012A publication Critical patent/TW201120012A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI458714B publication Critical patent/TWI458714B/zh

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

苯并咪唑化合物及其用途
本發明係關於一種式(I)之苯并咪唑化合物及其醫療用途。
微管是由α-及β-微管蛋白所構成之胞內管。身為細胞骨架之重要組成份，其在，例如，細胞分裂中扮演重要角色，而細胞分裂在癌症之進程中極為重要。因此，就作為癌症療法之目標而言，微管之微管蛋白已吸引極多之注意。
DNA是治療癌症之另一治療目標。已知DNA損傷可經由細胞凋亡(apoptosis)而誘發細胞死亡。可誘發DNA損傷之試劑因此可作為抗癌藥物。
本發明係基於非可預期地發現部分苯并咪唑化合物具有強抗癌活性、抗血小板活性、及抗血栓活性，以及用於治療心血管及腦血管疾病之治療功效。
因此，本發明係關於苯并咪唑化合物及其用於治療癌症、以及心血管及腦血管疾病之用途。此外，茲發現該等化合物具有抗血小板活性及抗血栓活性。
在一態樣中，本發明提供一種式(I)之苯并咪唑化合物：
在式(I)中，各個係單鍵或雙鍵，惟如一係雙鍵，其毗鄰之則非雙鍵；X係CR’、NR”、N、O、或S、其中R’係H、烷基、羥基、烷氧基、環烷基、雜環烷基、芳基、或雜芳基，且R”係芳基磺醯基；Y係(CH2 )n (其中n係1、2、3、或4)、C(O)、SO、SO2 、或NR’’’(其中R’’’係H或烷基)；各個Z1 及Z2 係CH或刪除，惟最多僅刪除Z1 及Z2 中之一；各個R1 及R2 獨立係H、鹵原子、烷基、羥基、烷氧基、環烷基、雜環烷基、芳基、或雜芳基；或者R1 及R2 與其所連結之C原子共同係芳基或雜芳基；各個R3 及R4 獨立係H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、雜芳基、鹵原子、硝基、氰基、胺基、羥基、烷氧基、芳氧基、SRa 、C(O)Ra 、或C(O)ORa ，其中Ra 係H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基，惟最多僅有R3 及R4 中之一係H；且R5 係烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、及雜芳基。
其中一組上述苯并咪唑化合物之亞群為該等其中Y係CH2 者。在此等化合物中，X可為CR’，且各個Z1 及Z2 可為CH；X可為NR”，且Z1 及Z2 中之一可為CH且另一可刪除；X可為N，且Z1 及Z2 可為CH；各個R’、R1 、及R2 可為烷氧基(如，甲氧基)；R3 及R4 中之一可為H且另一可為烷基、鹵原子、烷氧基、環烷基、雜環烷基、芳基、或雜芳基；R5 可為環烷基、雜環烷基、芳基(如，苯基)、或雜芳基(如，呋喃基或噻吩基)；或者R1 及R2 與其所連結之C原子共同可為芳基。
上述苯并咪唑化合物之另一亞群為該等其中Y係CO者。在此等化合物中，X可為CR’，且Z1 及Z2 可為CH；X可為O或S，且Z1 及Z2 中之一可為CH且另一可刪除；或者R5 可為烷基或芳基。
上述苯并咪唑化合物之又另一亞群包括該等其中Y係SO2 者。
術語「烷基」係指直鏈或支鏈之單價烴，除非另有明示，其含有1-20個碳原子(如，C1 -C10 )。烷基之實例包括，但不限於，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基。術語「烯基」係指直鏈或支鏈之單價烴，其含有2-20個碳原子(如，C2 -C10 )以及一或多個雙鍵。烯基之實例包括，但不限於，乙烯基、丙烯基、異丙基、烯丙基、及1,4-丁二烯基。術語「炔基」係指直鏈或支鏈之單價烴，其含有2-20個碳原子(如，C2 -C10 )以及一或多個三鍵。炔基之實例包括，但不限於，乙炔基、1-丙炔基、1-及2-丁炔基、以及1-甲基-2-丁炔基。術語「烷氧基」係指-O-烷基基團。烷氧基之實例包括，但不限於，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、及第三丁氧基。術語「醯氧基」係指－O-C(O)-R基團，其中R可為H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基。術語「胺基」係指NH2 、烷胺基、或芳胺基。術語「烷胺基」係指－N(R)-烷基基團，其中R可為H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基。術語「胺醯基」及「胺基甲醯胺基」分別係指-NRC(O)R’及-C(O)NRR’基團，其中各個R及R’獨立可為H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基。
術語「環烷基」係指單價之飽和烴環系統，其具有3-30個碳原子(如，C3 -C12 )。環烷基之實例包括，但不限於，環丙基、環丁基、環戊基、環己基、1,4-環己烯、環庚基、環辛基、及金剛烷基。術語「環烯基」係指單價之非芳族烴環系統，其具有3-30個碳原子(如，C3 -C12 )以及一或多個雙鍵。環烯基之實例包括環戊烯基、環己烯基、及環庚烯基。術語「雜環烷基」係指單價之非芳族5-8員單環、8-12員雙環、或11-14員三環的環系統，其具有一或多個雜原子(諸如，O、N、S、或Se)。雜環烷基之實例包括，但不限於，哌嗪基、吡咯啶基、二噁烷基、嗎啉基、及四氫呋喃基。術語「雜環烯基」係指單價之非芳族5-8員單環、8-12員雙環、或11-14員三環的環系統，其具有一或多個雜原子(諸如，O、N、S、或Se)以及一或多個雙鍵。
術語「芳基」係指單價之6-碳單環、10-碳雙環、或14-碳三環的芳環系統。芳基之實例包括，但不限於，苯基、萘基、及蒽基。術語「芳氧基」係指-O-芳基。術語「芳胺基」係指-N(R)-芳基，其中R可為H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基。術語「芳基磺醯基」係指-SO2 -芳基。術語「雜芳基」係指單價之芳族5-8員單環、8-12員雙環、或11-14員三環的環系統，其具有一或多個雜原子(諸如，O、N、S、或Se)。雜芳基之實例包括吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、及噻唑基。
上述之烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、胺基、芳基、及雜芳基包括經取代及未經取代之基團。胺基、環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、芳基、及雜芳基之可能取代基包括，但不限於，C1 -C10 烷基、C2 -C10 烯基、C2 -C10 炔基、C3 -C20 環烷基、C3 -C20 環烯基、C1 -C20 雜環烷基、C1 -C20 雜環烯基、C1 -C10 烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、胺基、C1 -C10 烷胺基、芳胺基、羥基、鹵原子、氧代(O=)、硫代(S=)、硫代、矽烷基、C1 -C10 烷硫基、芳硫基、C1 -C10 烷基磺醯基、芳基磺醯基、醯基胺基、胺基醯基、胺基硫代醯基、脒基、巯基、醯胺基、硫脲基、硫氰酸基、磺醯胺基、胍、脲基、氰基、硝基、醯基、硫代醯基、醯氧基、胺基甲醯胺基、胺基甲醯基(-C(O)NH2 )、羧基(-COOH)、及羧基酯。另一方面，烷基、烯基、炔基、或伸烷基上之可能取代基包括除C1 -C10 烷基外之所有上述取代基。環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、及雜芳基亦可彼此融合。
本文所述之苯并咪唑化合物包括該等化合物本身，以及其鹽、其溶劑化物、及其前藥，如適用。鹽，舉例而言，可在陰離子及苯并咪唑化合物上帶正電之基團(如，胺基)間形成。適當之陰離子包括氯、溴、碘、硫酸根、硫酸氫根、胺基磺酸根、硝酸根、磷酸根、檸檬酸根、甲基磺酸根、三氟乙酸根、麩胺酸根、葡糖醛酸根、戊二酸根、蘋果酸根、馬來酸根、琥珀酸根、富馬酸根、酒石酸根、甲苯磺酸根、水楊酸根、乳酸根、萘磺酸根、及醋酸根。同樣，鹽亦可在陽離子及苯并咪唑化合物上帶負電之基團(如，羧酸)間形成。適當之陽離子包括鈉離子、鉀離子、鎂離子、鈣離子、以及銨陽離子(諸如，四甲基銨離子)。該等苯并咪唑化合物亦包括含有四級氮原子之鹽。前藥之實例包括酯及其他醫藥可接受之衍生物，其在投與至對象體內時可提供活性之苯并咪唑化合物。
在另一態樣中，本發明係關於一種治療癌症之方法，其係對需要該治療之對象投與有效量之式(I)苯并咪唑化合物：
在此式中，各個係單鍵或雙鍵，惟如一個為雙鍵，則其接鄰之則非雙鍵；X係CR’、NR”、N、O、或S，其中R’係H、烷基、羥基、烷氧基、環烷基、雜環烷基、芳基、或雜芳基，且R”係芳基磺醯基；Y係(CH2 )n (其中n係1、2、3、或4)、C(O)、SO、SO2 、或NR’’’(其中R’’’係H或烷基)；Z1 及Z2 各係CH或經刪除，惟至多僅可刪除中之一；R1 及R2 各獨立係H、鹵原子、烷基、羥基、烷氧基、環烷基、雜環烷基、芳基、或雜芳基；或者R1 及R2 與其所連附之C原子共同為芳基或雜芳基；R3 及R4 各獨立係H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、雜芳基、鹵原子、硝基、氰基、胺基、羥基、烷氧基、芳氧基、SRa 、C(O)Ra 、或C(O)ORa ，其中Ra 係H、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基；且R5 係烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基、或雜芳基。
參照式(I)，其中一次群之前述苯并咪唑化合物包括該等其中Y係CH2 者。在此等化合物中，X可為CR’，且Z1 及Z2 各可為CH；X可為NR”，且Z1 及Z2 中之一者可為CH而另一者則可經刪除；X可為N，且Z1 及Z2 可為CH；R’、R1 、及R2 各可為烷氧基(如，甲氧基)；R3 及R4 中之一者可為H且另一者可為烷基、鹵原子、烷氧基、環烷基、芳基、或雜芳基；R5 可為環烷基、雜環烷基、芳基(如，苯基)、或雜芳基(如，呋喃基或噻吩基)；或者R1 及R2 與其所連附之C原子共同可為芳基。
另一次群之此等苯并咪唑化合物包括該等其中Y係CO者。在此等化合物中，X可為CR’，且Z1 及Z2 可為CH；X可為O或S，且Z1 及Z2 中之一者可為CH而另一者則可經刪除；或者R5 可為烷基或芳基。
又另一次群之式(I)化合物包括該等其中Y係SO2 者。
本發明之範圍中亦包括一種醫藥組合物，其含有一或多種上述之苯并咪唑化合物，以作為抗血小板或抗血栓劑，或用於治療癌症、心血管或是腦血管疾病，以及此種治療用途，以及該等化合物於製造抗血小板或抗血栓劑，或是用於治療癌症、心血管或腦血管疾病之藥物的用途。
本發明一或多個具體實例之細節示於下文之敘述。本發明之其他特徵、標的、及優點將可由該敘述以及申請專利範圍而得悉。
下文顯示例示性之本文所述化合物：
本文所述之苯并咪唑化合物可以習知之化學轉化作用(包括保護基方法學)製備，如，該等述於R. Larock,Comprehensive Organic Transformations ,VCH Publishers(1989);T.W. Greene and P.G.M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed.,John Wiley and Sons(1999);L. Fieser and M. Fieser,Fieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis ,John Wiley and Sons(1994)；以及L. Paquette,ed.,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis ,John Wiley and Sons(1995)及其後續版本中者。
流程1中所示之途徑例示部分本發明苯并咪唑化合物(R3 及R5 如上所定義)之合成。該5-經取代之2-硝基苯胺1與醯氯2反應而產生化合物3。還原化合物3中之硝基(鐵粉，NH4 Cl，100℃，或是次硫酸鈉，於乙醇中，回流溫度)以提供苯胺4。將Schiff鹼5(使化合物4與3,4,5-三甲氧基苯甲醛在甲醇中反應而形成)在室溫下以硼氫化鈉處理以產生化合物6。於甲醇中，在4N HCl之存在下，進行化合物6之環化，即產生終化合物7。
反應試劑及條件：(i)吡啶，CH2 Cl2 ，rt；(ii)Fe，NH4 Cl，IPA，100 ℃；或Na2 S2 O4 ，乙醇，回流溫度；(iii)3,4,5-三甲氧基苯甲醛，MeOH，rt；(iv)NaBH4 ，MeOH；(v)MeOH/4N HCl(2:1)，50 ℃。
可以閃蒸管柱層析、高效液相層析、結晶、或任何其他適當之方法，進一步純化如此合成之苯并咪唑化合物。
本文所述及之苯并咪唑化合物可含有非芳族之雙鍵或是一或多個不對稱中心。因此，其可以外消旋異構物或外消旋混合物、單一鏡像異構物、個別非鏡像異構物、非鏡像異構混合物、以及順或反式異構物之形式存在。所有此等異構形式皆可為預期。
本發明之範圍亦包括(1)一種醫藥組合物，其含有有效量之至少一種本發明之苯并咪唑化合物及醫藥可接受之載體，以及(2)一種治療癌症之方法，其係對需要此治療之對象投與有效量之此種苯并咪唑化合物。
在本文中，名辭「治療」係指對具有癌症，或是具有其症狀或具有朝向其之易感性的對象，以預防、治癒、療癒、減輕、緩解、改變、補救、改善、改良、或影響該病症、其症狀、或是朝向癌症之易感性之目的，投與苯并咪唑化合物。名辭「有效量」係指欲在該對象體內造成所欲之治療效應所需的活性劑量。如熟習技藝者可知，根據投與之途徑、賦形劑之使用、以及共同使用其他藥劑之可能性，有效量可各有不同。
可以本發明之方法治療之癌症包括各種器官之實體及血液學性腫瘤。實體腫瘤之實例包括胰臟癌；膀胱癌；結腸直腸癌；乳癌，包括轉移性乳癌；前列腺癌，包括雄激素相關性及非雄激素相關性前列腺癌；腎癌，包括，如，轉移性腎細胞癌；肝細胞癌；肺癌，包括，如，非小細胞肺癌(NSCLC)、細支氣管肺泡癌(BAC)、及肺腺癌；卵巢癌，包括，如，進行性上皮性或原發性腹膜癌；子宮頸癌；胃癌；食道癌；頭及頸癌，包括，頭及頸之鱗狀細胞癌；黑素瘤；神經內分泌癌，包括轉移性神經內分泌腫瘤；腦癌，包括，如，神經膠質瘤、退行性寡樹突膠質細胞瘤、成人多形性膠質母細胞瘤、以及成人退行性星狀細胞瘤；骨癌；及軟組織肉瘤。惡性血液疾病之實例包括急性骨髓性白血病(AML)；慢性骨髓性白血病，包括慢性粒细胞白血病(CML)，包括加速期CML及CML急變期(CML-BP)；急性淋巴母細胞性白血病(ALL)；慢性淋巴細胞性白血病(CLL)；何杰金氏症(Hodgkin’s disease)(HD)；非何杰金氏淋巴瘤(NHL)，包括濾泡性淋巴瘤及被套細胞淋巴瘤；B細胞淋巴瘤；T細胞淋巴瘤；多發性骨髓瘤(MM)；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血症(Waldenstrom’s macroglobulinemia)；骨髓增生不良症候群(MDS)，包括頑固性貧血(RA)、伴有環狀含鐵紅血球母細胞之頑固性貧血(RARS)、過量芽細胞頑固性貧血(RAEB)、及RAEB合併急性轉化(RAEB-T)；以及骨髓增生性症候群。
為實施本發明之方法，可將上述之醫藥組合物以口服、腸外、藉由吸入噴霧、局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道、或經由植入貯器之方式進行投與。名辭「腸外」在本文中包括皮下、皮內、靜脈內、肌內、關節內、動脈內、滑膜腔內、胸骨內、椎管內、病灶內、及顱內之注射或灌流技術。
可使用適當之分散或溼潤劑(諸如，Tween 80)以及懸浮劑，根據技藝中已知之技術，調配無菌可注射性組合物，如，無菌可注射性水性或油性懸浮液。無菌可注射性製備物亦可為無毒性腸外可接受性稀釋劑或溶劑中之無菌可注射性溶液或懸浮液，諸如，1,3-丁二醇中之溶液。可予使用之可接受性載劑或溶劑包括甘露糖醇、水、林格氏溶液、及等滲氯化鈉溶液。此外，無菌、非揮發性油類亦習知可作為溶劑或懸浮基質(如，合成性之單或雙甘油酯)。脂肪酸，諸如，油酸及其甘油酯衍生物，可用於製備可注射物，天然之醫藥可接受性油類亦然，諸如，橄欖油或蓖麻油，特別係其聚氧乙烯化產物。此等油溶液或懸浮液可亦含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，或是羧甲基纖維素或類似之分散劑。常用於製造醫藥可接受性固體、異體、或其他劑形之其他常用界面活性劑，諸如，Tweens或Spans，或是其他類似之乳化劑或生物可利用率增進劑，亦可為調配目的而使用。
口服投與用之組合物可為任何口服可接受性劑形，其包括，但不限於，膠囊、錠劑、乳液、及水性懸浮液、分散液、及溶液。就口服用途之錠劑而言，常用之載體包括乳糖及玉米澱粉。在口服投與水性懸浮液或乳液時，該活性成分可結合乳化劑或懸浮劑而懸浮或溶於油相中。如需要，可加入某些甜味、調味、或著色劑。可根據醫藥調配技藝中所熟知之技術製備鼻氣溶膠或吸入組合物。亦可以直腸投與用之栓劑形式投與含有苯并咪唑化合物之組合物。
醫藥組合物中之載體必須為「可接受」，意為其可與該調配物之活性成分相容(且較佳可安定之)且不會對該待治療對象有害。可使用能夠與該活性苯并咪唑化合物形成更具可溶性之複合物的一或多種助溶劑(如，環糊精)作為醫藥載體以傳遞該等活性化合物。其他載體之形式包括膠態二氧化矽、硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、以及D＆C黃色10號。
可使用適當之試管內分析以初步評估該等苯并咪唑化合物在抗癌活性方面之功效，諸如，抑制腫瘤細胞生長。可進一步檢驗該等化合物在治療癌症方面之功效。舉例而言，可對具有癌症之動物(如，小鼠模型)投與化合物，接著評估其治療效應。根據該等結果，亦可判定適當之劑量範圍及投藥途徑。
在不須進一步詳盡闡述之情形下，咸信上文之敘述已適當使本發明可據以實施。因此，下述之實例僅被視為說明，且不以任何方式限制本揭示內容之其他部分。所有本文所引述之刊物因此以其全文併入本文作為參考。
實施例1：5-甲基-2-苯基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1H -苯并[d ]咪唑(化合物5)之合成
N -(5-甲基-2-硝基苯基)苯甲醯胺： 在5-甲基-2-硝基苯胺(4 mmol)及吡啶(8 mmol)於無水二氯甲烷(15 mL)中之攪拌溶液中，逐滴加入苯甲醯氯(8 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物8 h。在真空下蒸發溶劑，再在矽膠上，使用己烷及CH2 Cl2 之混合物(7:3)作為溶析液，對該殘餘物進行閃蒸層析，以產生呈固體之N -(5-甲基-2-硝基苯基)苯甲醯胺。
N -(2-胺基-5-甲基苯基)苯甲醯胺： 在N -(5-甲基-2-硝基苯基)苯甲醯胺(3 mmol)於異丙醇(150 mL)中之懸浮液中，加入鐵粉(2 g)及氯化銨(0.3 mmol)。在100 ℃加熱該反應混合物12 h。過濾該熱混合物並蒸發濾液。在矽膠上，使用己烷及CH2 Cl2 之混合物(9:1)作為溶析液，對該殘餘物進行閃蒸層析，以產生呈白灰色固體之N -(2-胺基-5-甲基苯基)苯甲醯胺。
( E )- N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺： 將N -(2-胺基-5-甲基苯基)苯甲醯胺(2 mmol)及3,4,5-三甲氧基苯甲醛(3 mmol)於甲醇中之混合物，在室溫下攪拌12 h。過濾該懸浮液，並以甲醇清洗該固體，以產生呈黃色固體之(E )-N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺。
N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺： 將(E )-N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺(3 mmol)於甲醇中之懸浮液以冰浴冷卻。加入硼氫化鈉直到顏色轉為白色為止。加入蒸餾水以淬滅過量之硼氫化鈉。以乙酸乙酯萃取該所得之混合物(50 mL x 3)。以鹽水輕洗結合之有機液，以無水MgSO4 去水，再在真空下濃縮，以產生呈固體之N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺。
5-甲基-2-苯基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1 H -苯并[ d ]咪唑： 在N -(5-甲基-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺於乙醇(20 mL)中之懸浮液中，加入4 N HCl。在50 ℃加熱該反應混合物5 h，接著冷卻至室溫。以氫氧化銨中和過量之酸，再以乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取該所得之混合物。以鹽水清洗結合之有機物，以無水MgSO4 去水，再在真空下濃縮。在矽膠上對該殘餘物進行閃蒸層析，以取得呈固體之5-甲基-2-苯基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1H -苯并[d ]咪唑。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.83-7.79(m,3H,4,2’,6’-H),7.48-7.37(m,4H,7,3’,4’,5’-H),7.07(dd,J =8,2 Hz,1H,6H),6.29(s,2H,2”,6”-H),5.34(s,2H,CH2 ),3.57(s,9H,OCH3 ),2.40(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 164.6,162.1,153.5,153.5,152.8,143.4,137.1,134.5,133.0,131.9,131.9,127.4,124.6,119.5,116.3,119.6,111.2,104.1,104.1,60.4,56.2,56.2,48.0,21.6;EIMS: m/z 388(M+ )。
實施例2：2-(2-氟苯基)-5-甲基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物30)之合成
化合物30係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.68-7.62(m,2H,4,6’-H),7.52-7.37(m,4H,7,3’,4’,5’-H),7.10(dd,J =8,2 Hz,1H,6-H),6.25(s,2H,2”,6”-H),5.27(s,2H,CH2 ),3.57(s,3H,OCH3 ),3.55(s,6H,OCH3 ),2.41(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 161.3,158.9,153.3,153.3,148.6,143.6,137.3,133.7,132.9,132.8,131.8,125.5,124.5,119.6,116.8,116.6,111.3,104.7,104.7,60.2,56.5,56.5,47.9,21.6;EIMS: m/z 406(M+ )。
實施例3：2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物45)之合成
化合物45係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.67-7.60(m,2H,4,7-H),7.54-7.48(m,4H,3’,4’,5’,6’-H),7.10(dd,J =8,2 Hz,1H,6H),6.26(s,2H,2”,6”-H),5.19(s,2H,CH2 ),3.58(s,3H,OCH3 ),3.54(s,3H,OCH3 ),2.41(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 153.3,153.3,150.7,143.4,137.2,133.7,133.3,133.1,132.4,132.4,132.3,131.7,130.3,127.9,124.7,119.6,111.3,104.8,104.8,60.3,56.2,56.2,47.9,21.6;EIMS: m/z 422(M+ )。
實施例4：2-(2-乙氧基苯基)-5-甲基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物48)之合成
化合物48係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.52-7.44(m,5H,4,7,3’,4,5’,6’-H),7.20(d,J =8 Hz,1H,4’H),7.10(t,J =7 Hz,1H,5’-H),7.05(d,J =8 Hz,1H,3’H),6.25(s,2H,2”,6”-H),5.19(s,2H,CH2 ),4.10(q,J =7 Hz,3H,OCH2 ) 3.59(s,6H,OCH3 ),3.56(s,3H,OCH3 ),2.40(s,3H,CH3 ),1.20(t,J =7 Hz,3H,OCH2 CH 3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 156.6,153.2,153.2,151.9,143.8,137.2,133.6,132.9,132.9,132.1,131.1,124.1,121.1,120.4,119.3,113.1,111.0,105.0,105.0,64.1,60.4,56.2,56.2,48.0,21.6,14.9;EIMS: m/z 432(M+ )。
實施例5：2-(2-羥基苯基)-5-甲基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物53)之合成
化合物53係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.62(s,1H,4-H),7.41(d,J =8 Hz,1H,6-H),7.28-7.13(m,4H,7,3’,4’,6’-H),6.82(t,J =6 Hz,1H,5’-H),6.34(s,2H,2”,6”-H),5.45(s,2H. CH2 ) 3.81(s,3H,OCH3 ),3.7(s,6H,OCH3 ),2.5(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 159.1,154.6,154.6,152.3,140.5,138.2,134.3,134.0,132.6,131.9,127.9,126.1,119.6,119.0,,118.6,113.0,110.5,103.6,103.6,61.5,56.8,56.8,50.1,22.2;EIMS:m/z 404(M+ )。
實施例6：5-甲基-2-(2-吡啶-4-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物70)之合成
化合物70係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 8.74(d,J =6 Hz,1H,2’,6’-H),7.76(d,J =6 Hz,1H,3’,5’-H),7.54-7.51(m,2H,4,7-H),7.13(d,J =8 Hz,1H,6-H),6.28(s,2H,2”,6”-H),5.52(s,2H,CH2 ) 3.57(s,9H,OCH3 ),2.42(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 153.0,153.0,150.5,150.2,150.2,142.8,137.7,136.7,134.3,132.3,131.7,124.9,123.2,123.2,119.3,110.9,103.7,103.7,59.9,55.7,55.7,47.6,21.1;EIMS: m/z 389.0(M+ )。
實施例7：5-甲基-2-丙基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物71)之合成
化合物71係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.35(d,J =2 Hz,1H,4-H),7.31(d,J =8 Hz,1H,7-H),6.96(dd,J =8,2 Hz,1H,6-H),6.40(s,2H,2”,6”-H),5.33(s,2H,CH2 ),3.63(s,6H,OCH3 ),3.60(s,3H,OCH3 ),2.81(t,J =7 Hz,2H,CH2 ),2.36(s,3H,CH3 ),1.78-1.72(m,2H,CH2 ),0.94(t,J =7 Hz,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 154.8,153.0,153.0,142.7,136.7,133.3,132.8,130.1,122.9,122.9,118.3,118.3,115.3,111.4,109.6,109.6,105.3,103.9,103.9,59.9,55.8,55.8,46.1,28.4,21.1,20.4,13.7;EIMS: m/z 354.0(M+ )。
實施例8 ：2-(1-金剛烷基)-5-甲基-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物72)之合成
化合物72係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.36(s,1H,4-H),6.99(d,J =8 Hz,1H,6-H),6.90(d,J =8 Hz,1H,7-H),6.25(s,2H,2”,6”-H),5.61(s,2H,CH2 ),3.58(s,9H,OCH3 ),2.35(s,3H,CH3 ),2.13(br s,6H,CH2 ),2.02(br s,3H,CH),1.79-1.69(m,6H,CH2 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 171.0,171.0,154.7,139.2,139.2,126.1,126.1,125.5,125.5,124.7,124.7,123.6,122.3,116.0,116.0,35.4,35.4,29.6,28.1,27.4,27.4,21.8,21.8,21.8,21.2,21.2,13.7,13.7;EIMS: m/z 446.0(M+ )。
實施例9：5-甲基-2-(1'-萘基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物73)之合成
化合物73係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 8.13(d,J =8 Hz,1H,8’-H),8.04(d,J =8 Hz,1H,2’-H),7.76(t,J =8 Hz,2H,7’,6’-H),7.67(t,J =8 Hz,1H,3’-H),7.58-7.50(m,4H,4,7,4’,5’-H),7.12(d,J =8 Hz,1H,6-H),6.10(s,2H,2”,6”-H),5.22(s,2H,CH2 ),3.47(s,3H,OCH3 ),3.41(s,6H,OCH3 ),2.44(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 153.2,153.2,152.1,143.6,137.1,133.7,132.5,132.2,131.7,130.6,129.2,128.9,128.2,127.6,127.0,125.8,125.7,124.6,119.6,111.3,104.8,104.8,60.3,56.0,56.0,47.9,21.7;EIMS: m/z 438(M+ )。
實施例10：5-甲基-2-(2'-萘基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物74)之合成
化合物74係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 8.33(d,J =2 Hz,1H,1’-H),8.07(d,J =8 Hz,1H,4-H),8.00-7.79(m,2H,5,8-H),7.89(dd,J =8,2 Hz,1H,3’-H),7.61-7.52(m,4H,4,7,6’,7’-H),7,11(d,J =8 Hz,1H,6-H) 6.30(s,2H,2”,6”-H),5.54(s,2H,CH2 ),3.55(s,6H,OCH3 ),3.50(s,3H,OCH3 ),2.43(s,3H,CH3 );13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 153.1,152.9,152.9,143.1,136.7,134.2,133.0,132.6,132.5,131.3,128.8,128.3,128.3,127.9,127.6,127.3,126.8,126.3,124.2,118.9,110.7,103.9,103.9,59.9,55.6,55.6,47.6,21.2;EIMS: m/z 455(M+ )。
實施例11：2-苯基-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1H -苯并[d ]咪唑(化合物55)之合成
2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯胺： 在壓力容器中，使5-氯-2-硝基苯胺(1.73 g,10 mmol)與吡咯啶(1.42 g,20 mmole)之混合物進行回流6 h。蒸發溶劑，並以乙酸乙酯稀釋該殘餘物。以NaHCO3 水溶液(5%)及蒸餾水清洗該所得之混合物，以MgSO4 去水，再進行濃縮，以產生呈固體之2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯胺(93%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ(ppm): 7.80(d,J =8 Hz,1H,3-H),7.22(s,2H,NH2 ),6.05(dd,J =8,2 Hz,1H,4-H),5.81(d,J =2 Hz,1H,6-H),3.30-3.27(m,4H,2’,5’-H),1.97-1.91(m,4H,3’,4’-H).13 C NMR(100 MHz,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 151.9,148.3,127.4,122.1,104.7,94.5,47.3,47.3,24.8,24.8;EIMS: m/z 207(M+ )。
N -(2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺： 在2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯胺(4 mmol)及吡啶(8 mmol)於無水二氯甲烷(15 mL)中之攪拌溶液中，逐滴加入苯甲醯氯(8 mmol)。在室溫下攪拌該反應混合物8 h。在真空下蒸發溶劑，再在矽膠上，使用己烷及CH2 Cl2 之混合物作為溶析液，對該殘餘物進行閃蒸層析，以產生呈固體之N -(2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺。
N -(2-胺基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺： 使N -(2-硝基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺及低亞硫酸鈉(9 mmol)(3 mmol)於乙醇(150 mL)中之混合物進行回流1 h。在冷卻至室溫後，以乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取該混合物。以鹽水輕洗結合之有機液，以無水MgSO4 去水，再在真空下濃縮，以產生粗製之N -(2-胺基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺。
( E )- N -(5-(吡咯啶-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺： 將N -(2-胺基-5-(吡咯啶-1-基)苯基)苯甲醯胺(2 mmol)及3,4,5-三甲氧基苯甲醛(3 mmol)於甲醇中之混合物，在室溫下攪拌12 h。過濾該懸浮液，並以甲醇清洗該固體，以產生呈黃色固體之(E )-N -(5-(吡咯啶-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺。
N -(5-(吡咯啶-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺： 將化合物(E )-N -(5-(吡咯啶-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基胺基亞苄基胺基)苯基)苯甲醯胺(3 mmol)於甲醇中之懸浮液以冰浴冷卻。加入硼氫化鈉直到顏色轉為白色為止。加入蒸餾水以淬滅過量之硼氫化鈉。以乙酸乙酯萃取該所得之混合物(50 mL x 3)。以鹽水輕洗結合之有機液，以無水MgSO4 去水，再在真空下濃縮，以產生呈固體之N -(5-(吡咯吱-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺。
2 -苯基-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1 H -苯并[ d ]咪唑： 在N -(5-(吡咯啶-1-基)-2-(3,4,5-三甲氧基苄基胺基)苯基)苯甲醯胺於乙醇(20 mL)中之懸浮液中，加入4 N HCl。在50℃加熱該反應混合物5 h，接著冷卻至室溫。以氫氧化銨中和過量之酸，再以乙酸乙酯(50 mL x 3)萃取該所得之混合物。以鹽水清洗結合之有機物，以無水MgSO4 去水，再在真空下濃縮。在矽膠上對該殘餘物進行閃蒸層析，以取得呈固體之2-苯基-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1H -苯并[d ]咪唑。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 7.75-7.72(m,2H,2’,6’-H),7.55-7.50(m,3H,3’,4’,5’-H),7.34(d,J =8 Hz,1H,7-H),7.75(d,J =2 Hz,1H,4-H),6.60(dd,J =8,2 Hz,1H,6-H),6.29(s,2H,2”,6”-H),5.38(s,2H,CH2 ),3.56(s,9H,OCH3 ),3.25-3.22(m,4H,2’,5’-H),1.97-1.94(m,4H,3’,4’-H);13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ(ppm): 152.9,152.9,152.5,144.8,144.0,136.6,132.7,130.7,129.4,128.9,128.9,128.7,128.7,127.9,111.1,109.9,103.7,103.7,99.9,59.8,55.7,55.7,47.9,47.9,47.7,24.8,24.8;EIMS: m/z 443(M+ )。
實施例12：2-(2-乙氧基苯基)-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物64)之合成
化合物64係以類似實施例11中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.58-7.44(m,2H,4,7-H),7.13-7.08(m,4H,3’,4’,5’,6’-H),6.64(d,J =9 Hz,1H,6-H),6.18(s,2H,2”,6”-H),5.16(s,2H,CH2 ),4.08-3.85(m,2H,OCH2 ),3.76(s,3H,OCH3 ),3.69(s,6H,OCH3 ),3.34-3.28(m,4H,CH2 ),2.04-1.97(m,4H,CH2 ),1.27-1.18(m,3H,OCH2 OCH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 156.5,153.2,153.2,150.5,145.3,142.9,137.2,132.5,131.7,126.6,120.8,119.0,112.3,110.8,110.1,103.9,103.9,99.8,64.5,64.1,60.7,55.9,55.9,48.5,48.3,48.3,25.3,25.3,14.1;EIMS:m/z 487(M+ )。
實施例13：2-(呋喃-2-基)-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)苯并咪唑(化合物77)之合成
化合物77係以類似實施例11中所述之方式製備。
1 H-NMR(400 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.56(s,1H,4-H),7.50(d,J =9 Hz,1H,3’-H),7.14(s,J =9 Hz,1H,7-H),6.90(s,1H,5’-H),6.6(dd,J =9,2Hz,1H,6-H),6.56-6.55(m,1H,4’-H),6.40(s,2H,2”,6”-H),5.57(s,2H,CH2 ),3.78(s,3H,OCH3 ),3.69(s,6H,OCH3 ),3.30-3.27(m,5H,CH2 ),1.99-1.97(m,3H,CH2 );13 C-NMR(100MHz,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 159.1,154.6,154.6,152.3,140.5,138.2,134.3,134.0,132.6,131.9,127.9,126.1,119.6,119.0,118.6,113.0,110.5,103.6,103.6,61.5,56.8,56.8,50.1,22.2;EIMS:m/z 433(M+ )。
實施例14：5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-2-(噻吩-2-基)苯并咪唑(化合物78)之合成
化合物78係以類似實施例11中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.87-7.83(m,1H,3’-H),7.47-7.42(m,2H,4’,5’-H),7.07(s,1H,7-H),7.06-7.03(m,1H,4-H),6.63(dd,J =9,2,1H,6-H),6.31(s,2H,2”,6”-H),5.43(s,2H,CH2 ),3.80(s,3H,OCH3 ),3.69(s,6H,OCH3 ),3.29-3.09(m,5H,CH2 ),2.02-1.98(m,3H,CH2 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 153.8,147.4,145.6,144.3,137.3,132.4,132.1,128.4,127.8,127.2,116.9,110.5,110.1,102.7,100.4,93.8,60.8,56.1,56.1,48.3,48.3,29.7,25.4,25.4,14.2;EIMS:m/z 449(M+ )。
實施例15：5,6-二甲基-2-苯基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物105)之合成
化合物105係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.00(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.70-7.58(m,5H,ArH),7.47-7.34(m,5H,ArH),7.24-7.13(m,4H,ArH),7.00(s,1H,ArH),5.48(s,2H,CH2 ),2.38(s,3H,CH3 ),2.32(s,3H,CH3 ),2.31(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 151.6,145.1,138.4,135.5,134.7,133.5,133.4,133.2,130.6,129.9,129.9,129.1,129.1,129.0,129.0,128.3,127.8,126.7,126.7,125.5,123.9,123.7,118.9,118.9,117.9,114.1,110.6,41.6,21.5,20.6,20.2;ESI: m/z 506(M+1)+ 。
實施例16：6-甲基-2-苯基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物106)之合成
化合物106係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.01(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.76(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.66(dd,J =8,1 Hz,2H,ArH),7.59(d,J =8 Hz,2H,ArH),7.48-7.21(m,6H,ArH),7.16-7.13(m,4H,ArH),6.98(s,1H,ArH),5.44(s,2H,CH2 ),2.41(s,3H,CH3 ),2.32(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 152.9,145.1,140.6,135.9,134.8,133.4,130.0,129.8,129.5,129.5,129.0,129.0,128.8,128.8,128.4,126.7,126.7,125.5,125.5,124.7,123.9,123.6,119.5,119.0,118.6,114.1,110.0,41.3,21.8,21.5;ESI: m/z 492(M+1)+ 。
實施例17：2-(2-甲氧基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物107)之合成
化合物107係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.93(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.85(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.59-7.47(m,4H,ArH),7.31-7.24(m,2H,ArH),7.16-7.09(m,7H,ArH),7.04-6.95(m,2H,ArH),5.30(s,2H,CH2 ),3.61(s,3H,OCH3 ),2.32(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 157.5,151.6,145.0,142.8,135.1,134.8,134.8,132.3,132.3,131.9,129.8,129.8,128.9,126.7,126.7,125.1,124.5,123.4,122.7,122.4,121.0,119.9,119.0,117.8,113.8,111.1,110.4,55.4,40.6,21.5;ESI: m/z 508(M+1)+ 。
實施例18：2-(2-甲氧基苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物108)之合成
化合物108係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.92(d,J =8Hz,1H,ArH),7.60-7.51(m,3H,ArH),7.46-7.38(m,2H,ArH),7.33-7.20(m,2H,ArH),7.15-7.06(m,4H,ArH),7.03-6.90(m,4H,ArH),5.24(s,2H,CH2 ),3.56(s,3H,O CH3 ),2.45(s,3H,CH3 ),2.29(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHz,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 157.3,156.8,151.6,144.9,143.4,135.0,134.7,133.0,132.0,131.6,129.7,129.7,128.9,126.5,126.5,124.9,124.3,123.9,123.3,120.8,119.6,119.2,119.0,118.0,113.7,110.9,109.7,55.2,40.4,21.4,21.4;ESI: m/z 522(M+1)+ 。
實施例19：2-(2-乙氧基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物109)之合成
化合物109係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.92-7.82(m,2H,ArH),7.59-7.53(m,3H,ArH),7.50-7.41(m,2H,ArH),7.29-7.21(m,2H,ArH),7.16-7.06(m,7H,ArH),7.03-6.96(m,1H,ArH),5.34(d,J =1 Hz,2H,CH2 ),3.99(q,J =7 Hz,2H,OCH2 CH3 ),2.32(s,3H,CH3 ),1.18(t,J =7 Hz,3H,OCH2 CH3 );13 C-NMR(50 MHz,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 156.8,151.5,145.0,141.7,135.1,134.8,134.4,132.4,132.2,129.8,129.8,128.8,126.7,126.7,125.1,124.6,123.4,122.9,122.7,121.0,119.6,118.9,118,5,117.4,113.8,112.2,110.5,64.2,40.7,21.5,14.5;ESI: m/z 522(M+1)+ 。
實施例20：2-(3-甲氧基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物110)之合成
化合物110係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.99(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.88(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.56(d,J =8Hz,2H,ArH),7.37-7.28(m,3H,ArH),7.26-7.18(m,6H,ArH),7.14-7.18(m,3H,ArH),7.02-6.96(m,1H,ArH),5.50(d,J =1Hz,2H,CH2 ),2.32(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 159.8,153.4,145.1,142.6,135.6,135.4,134.6,130.7,129.8,129.8,129.8,128.4,126.7,126.7,125.4,124.0,123.6,123.2,122.9,121.1,120.0,119.0,118.5,116.7,114.1,113.9,110.2,55.1,41.2,21.5;ESI: m/z 508(M+1)+ 。
實施例21：2-(2-氯苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物111)之合成
化合物111係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.93-7.84(m,2H,ArH),7.58(d,J =8 Hz,2H,ArH),7.45-7.36(m,4H,ArH),7.32-7.22(m,4H,ArH),7.17-7.06(m,5H,ArH),5.33(s,2H,CH2 ),2.31(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 150.9,145.0,142.6,135.1,134.7,134.1,134.1,132.0,131.5,129.8,129.8,129.8,129.5,128.6,126.9,126.6,126.6,125.1,124.3,123.4,123.2,122.7,120.2,118.8,117.3,113.8,110.4,40.3,21.5;ESI: m/z 512 M+ 。
實施例22：2-(3-氯苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物112)之合成
化合物112係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.00(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.88(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.73-7.71(m,1H,ArH),7.59-7.49(m,3H,ArH),7.45-7.24(m,6H,ArH),7.21(d,J =1 Hz,2H,ArH),7.17(s,1H,ArH),7.13(d,J =1 Hz,2H,ArH),5.48(d,J =1 Hz,2H,CH2 ),2.32(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 151.6,145.2,141.6,135.5,135.4,135.1,134.6,130.5,130.2,129.9,129.9,129.3,128.3,127.1,126.7,126.7,125.6,124.9,124.0,123.9,123.7,123.6,119.9,118.9,117.9,114.2,110.5,41.4,21.6;ESI: m/z 512 M+ 。
實施例23：2-(4-氯苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物113)之合成
化合物113係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.01(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.88(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.63-7.55(m,4H,ArH),7.44-7.28(m.5H,ArH),7.26-7.12(m,6H,ArH),5.46(s,2H,CH2 ),2.34(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 152.2,145.2,142.2,136.6,135.6,134.7,130.3,129.9,129.9,129.2,129.2,128.3,128.3,127.7,126.7,126.7,125.6,124.0,123.7,123.7,123.4,119.9,118.9,118.9,118.2,114.2,110.3,41.4,21.5;ESI: m/z 512 M+ 。
實施例24：2-(4-甲氧基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物114)之合成
化合物114係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.00(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.90(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.68-7.56(m,4H,ArH),7.37-7.26(m,4H,ArH),7.24-7.13(m,5H,ArH),6.93(d,J =2 Hz,1H,ArH),6.90(d,J =2 Hz,1H,ArH),5.49(d,J =1 Hz,2H,CH2 ),3.82(s,3H,OCH3 ),2.33(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 161.5,153.1,145.1,141.0,135.6,135.1,134.7,130.8,130.8,130.3,129.9,129.9,128.4,126.8,126.8,125.6,124.1,123.7,123.5,120.5,119.3,118.9,118.1,114.5,114.5,114.2,110.3,55.4,41.6,21.6;ESI: m/z 508(M+1)+ 。
實施例25：2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物115)之合成
化合物115係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.99(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.68(s,1H,ArH),7.59(d,J =8Hz,2H,ArH),7.37-7.08(m,9H,ArH),7.08-6.97(m,3H,ArH),5.49(s,2H,CH2 ),3.60(s,3H,OCH3 ),2.50(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 );13 C-NMR(100 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 159.8,153.3,145.1,142.8,135.5,134.7,133.7,132.8,130.8,129.8,129.8,129.8128.5,126.7,126.7,125.4,124.8,124.1,123.6,121.1,119.7,119.0,118.6,116.6,114.1,114.0,109.9,55.1,41.3,21.5,21.5;ESI: m/z 522(M+1)+ 。
實施例26：2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物116)之合成
化合物116係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.99(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.67-7.57(m,6H,ArH),7.38-7.31(m,1H,ArH),7.19-7.13(m,4H,ArH),7.05(s,2H,ArH),6.89(d,J =8Hz,2H,ArH),5.47(s,2H,CH2 ),2.48(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 );ESI: m/z 522(M+1)+ 。
實施例27：2-(2-乙氧基苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物117)之合成
化合物117係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.90(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.6(s,1H,ArH),7.60-7.49(m,3H,ArH),7.45-7.41(m,2H,ArH),7.22-7.13(m,3H,ArH),7.09-6.96(m,6H,ArH),5.32(s,2H,CH2 ),3.99(q,J =7 Hz,2H,OCH2 CH3 ),2.47(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 ),1.18(t,J =7 Hz,3H,OCH2 CH3 );ESI: m/z 536(M+1)+ 。
實施例28：5-氯-2-(2-甲氧基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物118)之合成
化合物118係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.95(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.85(d,J =2 Hz,1H,ArH),7.59-7.46(m,4H,ArH),7.33-7.26(m,1H,ArH),7.17-7.07(m,5H,ArH),7.06-6.94(m,4H,ArH),5.29(s,2H,CH2 ),3.65(s,3H,OCH3 ),2.35(s,3H,CH3 );13 C-NMR(100 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 157.5,152.8,145.2,143.1,135.2,134.9,133.3,132.4,132.4,132.2,129.9,129.9,128.8,128.3,126.7,126.7,125.3,124.6,123.6,123.3,121.2,119.5,118.9,117.3,114.0,111.2,111.2,55.5,41.0,21.6;ESI: m/z 543(M+1)+ 。
實施例29：2-(4-氯苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物119)之合成
化合物119係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.08(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.22-7.62(m,5H,ArH),7.47-7.37(m,3H,ArH),7.35-7.26(m,3H,ArH),7.20-7.18(m,2H,ArH),7.14(d,J =1 Hz,1H,ArH),5.45(d,J =1 Hz,2H,CH2 ),2.49(s,3H. CH3 ),2.34(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 151.7,145.2,141.6,136.7,135.6,134.7,133.5,130.4,130.4,129.9,129.9,129.9,129.2,129.2,128.2,127.2,127.2,126.7,125.6,125.4,124.0,123.7,119.3,118.1,118.9,114.2,109.9,41.5,21.6,21.6;ESI: m/z 549(M+23)+ 。
實施例30：2-(3-氯苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物120)之合成
化合物120係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.99(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.69-7.66(m,2H,ArH),7.58(d,J =8 Hz,3H,ArH),7.52-7.39(m,3H,ArH),7.35-7.29(m,2H,ArH),7.20-7.13(m,3H,ArH),7.08(s,2H,ArH),5.44(s,2H,CH2 ),2.50(s,3H,CH3 ),2.22(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 151.9,145.1,143.0,135.5,134.9,134.6,132.8,132.2,131.5,130.0,130.0,129.8,129.8,129.2,128.3,126.8,126.8,126.6,125.5,125.0,124.0,123.6,119.9,118.9,118.4,114.1,109.8,41.2,21.5,21.5;ESI: m/z 526(M+1)+ 。
實施例31：5-甲基-2-(4-甲基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物121)之合成
化合物121係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.00(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.65-7.53(m,6H,ArH),7.38-7.34(m,1H,ArH),7.24-7.14(m,6H,ArH),7.03(s,2H,ArH),5.44(s,2H,CH2 ),2.49(s,3H,CH3 ),2.37(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 153.6,145.0,142.7,140.3,135.6,134.7,133.6,132.7,129.8,129.8,129.6,129.6,128.9,128.9,128.5,126.7,126.7,126.5,125.4,124.6,124.0,123.6,119.6,119.0,118.6,114.1,109.7,41.3,22.0,21.6,21.4;ESI: m/z 506(M+1)+ 。
實施例32：5-甲基-2-(2-甲基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物122)之合成
化合物122係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.93(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.58(d,J =8 Hz,2H,ArH),7.47-7.32(m,3H,ArH),7.30-7.24(m,2H,ArH),7.18-7.07(m,6H,ArH),7.02-7.00(m,2H,ArH),5.24(s,2H,CH2 ),2.47(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 ),2.09(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 153.2,151.0,145.0,138.1,134.7,132.2,130.6,130.1,130,1,130.0,129.8,129.8,129.4,128.6,126.7,126.7,125.9,125.7,125.2,124.4,124.1,123.4,119.6,118.9,117.8,113.8,109.8,40.0,21.5,21.5,19.6;ESI: m/z 506(M+1)+ 。
實施例33：5-甲基-2-(2-甲基苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物123)之合成
化合物123係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MRZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.00(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.67(s,1H,ArH),7.60-7.56(m,2H,ArH),7.52(s,1H,ArH),7.41-7.33(m,2H,ArH),7.31-7.22(m,4H,ArH),7.19-7.12(m,4H,ArH),7.05(s,2H,ArH),5.46(s,2H,CH2 ),2.50(s,3H,CH3 ),2.32(s,3H,CH3 ),2.20(s,3H,CH3 );ESI: m/z 506(M+1)+ 。
實施例34：2-(2-氯苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物124)之合成
化合物124係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.91(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.67-7.57(m,3H,ArH),7.51-7.38(m,3H,ArH),7.31-7.22(m,2H,ArH),7.18-7.12(m,2H,ArH),7.14-7.03(m,5H,ArH),5.31(s,2H,CH2 ),2.49(s,3H,CH3 ),2.33(s,3H,CH3 );ESI: m/z 526(M+1)+ 。
實施例35：5-甲腈-2-苯基-3-((1-對甲苯磺醯基-1H-吲哚-3-基)申基)苯并咪唑(化合物125)之合成
化合物125係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(400 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.04(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.97(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.76-7.75(m,2H,ArH),7.60-7.54(m,5H,ArH),7.48-7.37(m,4H,ArH),7.26-7.24(m,3H,ArH),7.16(s,1H,ArH),5.56(s,2H,CH2 ),2.37(s,3H. CH3 );ESI: m/z 503(M+1)+ 。
實施例36：2-(2-氟苯基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物126)之合成
化合物126係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(400 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.91(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.65(s,1H,ArH),7.62-7.57(m,3H,ArH),7.48-7.44(m,2H,ArH),7.28-7.19(m,1H,ArH),7.17-7.14(m,4H,ArH),7.11-7.08(m,2H,ArH),7.08(s,1H,ArH),7.01-6.99(m,1H,ArH),5.36(s,2H,CH2 ),2.47(s,3H,CH3 ),2.32(s,3H,CH3 );13 C-NMR(100 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 161.5,161.3,158.8,148.4,145.0,143.2,142.7,135.1,134.7,133.0,132.7,132.4,132.2,129.9,129.8,128.6,126.7,125.2,124.9,124.8,124.4,123.5,119.7,118.8,117.4,113.8,110.1,408,21.5,21.5;ESI: m/z 510(M+1)+ 。
實施例37：5-甲基-2-苯基-1-((1-苯基磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物127)之合成
化合物127係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.02(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.78(s,1H,ArH),7.74-7.70(m,4H,ArH),7.58-7.50(m,2H,ArH),7.48-7.46(m,2H,ArH),7.42-7.32(m,5H,ArH),7.22(s,2H,ArH),7.19(d,J =7 Hz,2H,ArH),7.11(s,2H,ArH),5.52(s,2H,CH2 ),2.49(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 152.4,137.6,135.5,134.0,134.0,132.8,130.9,129.3,129.3,129.3,129.3,129.1,129.1,129.1,128.3,127.6,126.7,126.7,126.7,125.7,125.7,124.1,123.8,118.9,118.0,114.1,110.1,41.7,21.6;ESI: m/z 478(M+1)+ 。
實施例38：5-甲基-2-苯基-1-((1-甲基磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物128)之合成
化合物128係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.87(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.27-7.66(m,2H,ArH),7.64(d,J =1 Hz,1H,ArH),7.45-7.44(m,2H,ArH),7.43-7.37(m,2H,ArH),7.34-7.28(m,2H,ArH),7.24-7.17(m,1H,ArH),7.09(d,J =1 Hz,ArH),7.04(s,1H,ArH),5.51(s,2H,CH2 ),2.97(s,3H,CH3 ),2.47(s,3H,CH3 );13 C-NMR(50 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 153.4,143.0,135.2,133.7,132.6,130.0,129.8,129.0,129.0,128.8,128.8,128.3,125.6,124.7,123.7,123.7,119.7,119.2,117.9,113.3,109.6,40.9,40.7,21.5;ESI: m/z 416(M+1)+ 。
實施例39：2-(呋喃-2-基)-5-甲基-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物129)之合成
化合物129係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.94(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.60-7.51(m,4H,ArH),7.36-7.31(m,2H,ArH),7.21-7.12(m,5H,ArH),7.07-7.02(m,2H,ArH),6.54-6.52(m,1H,ArH),5.72(S,2H,CH2 ),2.47(s,3H,CH3 ),2.30(s,3H,CH3 );ESI: m/z 482(M+1)+ 。
實施例40：5-甲基-2-(噻吩-2-基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物130)之合成
化合物130係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.03-7.99(m,1H,ArH),7.90-7.86(m,1H,ArH),7.54(d,J =8 Hz,ArH),7.48-7.37(m,3H,ArH),7.35-7.21(m,5H,ArH),7.10(d,J =8 Hz,3H,ArH),7.03-6.97(m,1H,ArH),5.61(s,2H,CH2 ),2.31(s,3H,CH3 );ESI: m/z 484(M+1)+ 。
實施例41：2-(呋喃-2-基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物131)之合成
化合物131係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(200 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 7.94(d,J =8Hz,1H,ArH),7.86(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.53(d,J =8Hz,3H,ArH),7.35-7.24(m,5H,ArH),7.21-7.18(m,2H,ArH),7.14-7.08(m,2H,ArH),6.57(dd,J =3,2 Hz,1H,ArH),5.78(s,2H,CH2 ),2.30(s,3H,CH3 );13 C-NMR(100 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 145.0,144.5,144.2,143.4,135.4,135.0,134.7,129.8,129.8,129.8,128.7,126.7,126.7,126.7,125.3,124.3,123.7,123.6,119.5,119.0,117.9,114.3,114.1,112.3,110.0,41.0,21.5;ESI: m/z 468(M+1)+ 。
實施例42：2-(2-(二乙基胺基)苯基)-1-((1-對甲苯磺醯基-吲哚-3-基)甲基)苯并咪唑(化合物132)之合成
化合物132係以類似實施例1中所述之方式製備。
1 H-NMR(400 MHZ ,CDCl3 -d 1 )δ(ppm): 8.19(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.76-7.68(m,2H,ArH),7.63(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.60-7.56(m,2H,ArH),7.48-7.33(m,5H,ArH),7.26-7.25(m,1H,ArH),7.24-7.19(m,2H,ArH),7.10(d,J =8 Hz,1H,ArH),7.05-7.01(m,1H,ArH),6.72(s,1H,ArH),3.45(q,J =7 Hz,4H,NCH2 CH3 ),2.33(s,3H,CH3 ),1.24(t,J =7 Hz,NCH2 CH3 );ESI: m/z 599(M+1)+ 。
實施例43：對於細胞增殖及細胞週期行進之效應
該等苯并咪唑化合物之抗癌活性藉由測試其對於哺乳動物癌細胞增殖及細胞週期行進之效應而評估。
i) SRB分析
NCI/ADR-RES細胞係取自DTP人類腫瘤細胞系篩選(Human Tumor Cell Line Screen)(藥物發展計畫(Developmental Therapeutics Program),NCI)。其他癌細胞系(A549、Hep G2、Hep 3B、DU-145、LNCaP、及PC-3)則係取自美國形態培養物保藏中心(American Type Culture Collection)(Rockville,MD)。在含有10%(v/v)胎牛血清(FBS)以及青黴素(100 units/mL)/鏈黴素(100 g/mL)之RPMI1640培養基中培養此等癌細胞。將培養物維持在5% CO2 /95%空氣、37℃之溼式培養箱中。
將細胞播種於96孔試驗盤之含5% FBS的培養基中24 hrs。接著使其與作為控制組之載劑(0.1% DMSO)或試驗化合物進一步進行共置48 hrs或72 hrs。以10 % TCA固定該等經控制組或化合物處理之細胞，並在1 %醋酸中以0.4 %(w/v)之SRB染色。以1 %醋酸洗去未連結之SRB，再以10 mM Trizma鹼溶解連結SRB之細胞。
使用吸收值(515 nm)之量測，取得時間零點(T0 )、控制組(C)、以及在試驗化合物存在下(Tx)之可指出細胞數目的細胞蛋白量。針對各個化合物濃度量計算生長百分比。生長抑制百分比係如下計算：100-[(Tx-T0 )/(C-T0 )]x 100。試驗化合物之50%生長抑制(IC50 )係定義為可造成經控制組處理之細胞中總蛋白量減少50%的化合物濃度。
茲試驗化合物1-63、68-77、88-93、107-114、及129。意外發現在該等試驗化合物中，共有23種在人類非小細胞肺癌A549細胞中具有低於10 μM之IC50 值，10種在肝細胞癌HepG2細胞中具有低於10 μM之IC50 值，10種在肝細胞癌Hep3B細胞中具有低於10 μM之IC50 值，且42種在前列腺癌PC-3細胞中具有低於20 μM之IC50 值(其中20種具有低於10 μM之IC50 值)。亦意外發現，化合物55之之IC50 值在A549、HepG2、Hep3B、PC-3、DU-145、LNCaP、及富含P-糖蛋白(P-gp)之乳癌NCI/ADR-RES細胞中分別為2.4、3.3、2.4、2.3、2.3、1.7、及3.7 μM。
ii) FACScan流式細胞計數分析
以化合物55(不同濃度：1 μM、3 μM、及10 μM)對PC-3細胞進行處理0 hr、6 hrs、12 hrs、18 hrs、24 hrs、36 hrs、及48 hrs。處理後，以冰PBS清洗細胞兩次，離心收集，並在4 ℃下以70%(v/v)乙醇固定30 min。接著，以0.2 ml之緩衝液(含有0.2 M Na2 HPO4 以及0.1 M檸檬酸緩衝液，pH 7.8)處理細胞30 min，離心，再接著在37 ℃下置於1 mL之碘化丙啶(PI)染色緩衝液(PBS中之0.1% Triton X-100，100 μg/mL RNase A，80 μg/mL碘化丙啶)中30 min。使用細胞螢光測量儀偵測細胞，並以FACScan及CellQuest程式(Becton Dickinson)分析。
意外發現，化合物55可誘發G2/M期之細胞族群增加，其接著會產生細胞週期中亞二倍體(亞-G1，凋亡)族群之增加。
iii)　對於細胞週期調控因子之表現/活化的西方點漬分析
使PC-3細胞與作為控制組之載劑(0.1% DMSO)或化合物55(10 μM)共置30 min、45 min、60 min、及120 min以試驗Ras；或是共置6 hrs、12 hrs、18 hrs、及24 hrs以試驗Raf-1、Phospho-MEK、MEK、and GAPDH。處理後，以冰PBS清洗細胞兩次，再以100 μL之裂解緩衝液(20 mM Tris，pH 7.5，1 mM MgCl2 ，125 mM NaCl，1% Triton X-100，1 mM苯甲基磺醯氟，10 μg/mL亮抑酶肽(leupeptin)，10 μg/mL抑肽酶(aprotinin)，25 mM β-甘油磷酸酯，50 mM NaF，及100μM原釩酸鈉)進行裂解。接著，以西方點漬偵測上述蛋白之表現。意外發現，該等結果指出化合物55可對Ras、Raf-1、及MEK產生正調節。
亦以西方點漬分析檢驗細胞週期調控因子。以10或15%之聚丙烯醯胺凝膠進行電泳，分離裂解物(40 μg)中之蛋白，將其轉移至硝化纖維膜，並與對抗Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1、Cdk1、Cdk2、p27、MPM2、及GAPDH之個別抗體進行免疫反應。該等結果說明，化合物55可正調節細胞週期蛋白B1並負調節細胞週期蛋白E及細胞週期蛋白A。同時，p27(一種Cdk抑制劑)之表現亦因化合物55而減少。此等數據建議，化合物55可誘發PC-3細胞之Cdk1活化及有絲分裂停止。
實施例44：微管蛋白聚合作用之抑制 i)　試管內之微管蛋白濁度分析
使用CytoDYNAMIX Screen 03套組(Cytoskeleton,Inc.,Denver,CO)偵測苯并咪唑化合物對於微管蛋白聚合作用之效應。
使微管蛋白(>99%純度)在有或無試驗化合物之情形下懸浮於含有80 mM PIPES、2 mM MgCl2 、0.5 mM EDTA、及1.0 mM GTP(pH 6.9)、及5%甘油之G-PEM緩衝液中。接著，將該混合物轉移至96孔試驗盤中，並在340 nm(37 ℃)測量吸收值60 min(SpectraMAX Plus,Molecular Devices Inc.,Sunnyvale,CA)。
微管蛋白之聚合程度係藉著檢驗該微管蛋白懸浮液之濁度而測定。將該懸浮液於340 nm之吸收值以時間之函數作圖。因此，測定測定出微管蛋白聚合作用之速度及量。
茲試驗化合物55。意外發現，化合物55可以劑量相關之方式抑制微管蛋白之聚合作用。
ii)　原位微管蛋白分析
在PC-3細胞中進行免疫螢光顯微檢驗，偵測微管之組織及形成。
將PC-3播種於8孔腔室玻片中，並與載劑(0.1% DMSO，控制組)、化合物55(10 μM)、紫杉醇(0.1 μM)、或長春新鹼(0.1 μM)共置18至24 h。接著，在-20℃下以100%甲醇固定細胞5 min，並在37℃下置於含有0.1% Triton X-100之1%牛血清白蛋白(BSA)中30 min。接著以PBS清洗細胞5 min兩次，再在37℃下，以對於β-微管蛋白具有專一性之一級抗體進行染色1 h。之後，使用經FITC標記之二級抗體(染色係在37℃下進行40 min，綠色螢光)，再使用雷射共軛焦顯微鏡系統(Leica TCS SP2)偵測蛋白。核可由DAPI染色(1 mg/mL DAPI，藍色螢光)顯像。
微管蛋白及染色體之原位標記顯示，在經紫杉醇處理之細胞中形成多極紡錘體及多細胞核，而在經長春新鹼處理之細胞中則觀察到多極紡錘體及染色體凝集。不同且意外者，大部分在經化合物55處理之細胞中所形成的紡錘體則為單極性。
實施例45：對於誘發凋亡之效應
苯并咪唑化合物對於誘發凋亡之效應係藉著試驗其對於Bcl-2家族成員蛋白、半胱天冬胺酸酶(caspase)、及c-Jun N-端激酶(JNK)之表現/活化的效應而評估。蛋白Bcl-2家族係涉及粒線體之凋亡性細胞死亡中最為重要的調控因子。破壞粒線體需要促凋亡性成員Bax、Bak、及Bad；而抗凋亡性之Bcl-2、Bcl-xL、及Mcl-1則可藉由拮抗該等促凋亡性成員而防止凋亡。
使PC-3細胞與載劑(0.1% DMSO)或化合物55(10 μM)共置0 hr、6 hrs、12 hrs、18 hrs、24 hrs、及36 hrs。接著，收集該等細胞並進行裂解，以藉由西方點漬分析利用專一性抗體偵測蛋白表現。為進行西方點漬，以10或15%之聚丙烯醯胺凝膠進行電泳，分離裂解物中之蛋白(40 μg)(包括磷酸-Bcl-2、Bcl-2、磷酸-Bcl-xL、Bcl-xL、Mcl-1、Bax、Bak、Bad、GAPDH、經切割Bad、半胱天冬胺酸酶-9、經切割半胱天冬胺酸酶-9、半胱天冬胺酸酶-3、經切割半胱天冬胺酸酶-3、聚-(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、經切割PARP、及GAPDH)，將其轉移至硝化纖維膜，並與特定抗體進行免疫反應。
茲試驗Bcl-2家族之抗凋亡性及促凋亡性成員，而該等結果顯示，意外發現化合物55可誘發Bcl-2 and Bcl-xL之磷酸化及降解，以及減少Mcl-1表現。此外，意外發現化合物55可誘發促凋亡性Bad切割成為15-kDa之片段。此種結果建議，化合物55可啟動PC-3細胞之凋亡。接著，以西方點漬分析測定經化合物55處理之細胞中各種半胱天冬胺酸酶的含量。該等結果顯示，半胱天冬胺酸酶-9、半胱天冬胺酸酶-3、及PARP受到切割產生催化活性片段，因此建議此等半胱天冬胺酸酶之活化。
同時，亦評估苯并咪唑化合物對於JNK活化之效應。以載劑(0.1% DMSO)、化合物55(10 μM)、或是化合物55及SP600125(20 μM，一種專一性之JNK抑制劑)處理PC-3細胞12 hrs、24 hrs、及36 hrs。接著，固定該等細胞並以碘化丙啶染色，以藉由FACScan流式細胞計數器分析DNA內容。
該等結果顯示，SP600125可在PC-3細胞中顯著抑制由化合物55所誘發之凋亡，因此指出由化合物55所誘發之凋亡係由JNK中介。同時，該等可由SP600125逆轉之細胞族群轉變為細胞週期之G2/M期，因此指出由JNK中介之凋亡係發生在G2/M期的檢查點停滯之後。
其他具體實例
所有揭示於此說明書中之特徵可以任何方式組合。各個揭示於此說明書中之特徵可以另一提供相同、相當、或類似目的之替代手段取代。因此，除非另有明示，各例示之特徵僅係一總括系列之相當或類似特徵中之一例。
由上文之敘述，熟習技藝者可輕易確認本發明之必要特徵，且在不偏離本發明精神及範圍之情形下，熟習技藝者可實施本發明之各種不同變化及修飾，以使其適用於各種用途及條件。因此，其他具體實例亦涵括於申請專利範圍中。

Claims (9)

  1. 一種式(I)化合物或其鹽： 其中各個係單鍵或雙鍵，惟如一係雙鍵，其毗鄰之則非雙鍵；X係CR’且各個Z1 及Z2 係CH；Y係CH2 ；各個R’、R1 及R2 獨立係甲氧基；R3 係一單價非芳香族5-8員單環，具有一或多個選自由N及O所組成之群組之雜原子；R4 係H、烷基或鹵原子；且R5 係芳基或雜芳基。
  2. 根據申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中R5 係苯基或呋喃基。
  3. 根據申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中R3 係哌嗪基(piperazinyl)、吡咯啶基(pyrrolidinyl)、二氧雜環己烷基(dioxanyl)、嗎啉基(morpholinyl)或四氫呋喃基(tetrahydrofuranyl)。
  4. 根據申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中R3 係吡咯啶基(pyrrolidinyl)。
  5. 根據申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中該化合物係2-苯基-5-(吡咯啶-1-基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-1H -苯并[d ]咪唑。
  6. 根據申請專利範圍第1項之化合物或其鹽，其中該化合物係2-呋喃基-5-(吡咯啶基)-1-(3,4,5-三甲氧基苄基)-苯并咪唑。
  7. 一種醫藥組合物，其包含根據申請專利範圍1至6項中任一項之化合物，以及醫藥可接受之載體。
  8. 一種申請專利範圍1至6項中任一項之化合物或其鹽用於製備抑制癌細胞生長的藥物之用途。
  9. 根據申請專利範圍第8項之用途，其中該癌細胞係人類非小細胞肺癌細胞、人類肝細胞肝癌細胞或人類前列腺癌細胞。
TW098142356A 2009-12-10 2009-12-10 苯并咪唑化合物及其用途 TWI458714B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TW098142356A TWI458714B (zh) 2009-12-10 2009-12-10 苯并咪唑化合物及其用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TW098142356A TWI458714B (zh) 2009-12-10 2009-12-10 苯并咪唑化合物及其用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201120012A TW201120012A (en) 2011-06-16
TWI458714B true TWI458714B (zh) 2014-11-01

Family

ID=45045027

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW098142356A TWI458714B (zh) 2009-12-10 2009-12-10 苯并咪唑化合物及其用途

Country Status (1)

Country Link
TW (1) TWI458714B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0882718A1 (en) * 1995-12-28 1998-12-09 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Benzimidazole derivatives
WO2002046168A1 (en) * 2000-12-07 2002-06-13 Astrazeneca Ab Therapeutic benzimidazole compounds

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0882718A1 (en) * 1995-12-28 1998-12-09 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Benzimidazole derivatives
WO2002046168A1 (en) * 2000-12-07 2002-06-13 Astrazeneca Ab Therapeutic benzimidazole compounds

Also Published As

Publication number Publication date
TW201120012A (en) 2011-06-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102134204B1 (ko) 신규 화합물
CN102816175B (zh) 一种杂环并吡啶酮类化合物,其中间体、制备方法和用途
KR102341637B1 (ko) 5-[[4-[[모르폴린-2-일]메틸아미노]-5-(트리플루오로메틸)-2-피리딜]아미노]피라진-2-카보니트릴 및 그의 치료적 용도
JP5781934B2 (ja) チロシンキナーゼ阻害剤としての融合２環および３環ピリミジン化合物
CN105315285B (zh) 2,4‑二取代7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶衍生物、其制法与医药上的用途
EP2861590B1 (en) Compound as wnt signaling inhibitor, composition, and use thereof
CN109790169A (zh) 具有作为usp30抑制剂活性的氰基吡咯烷衍生物
EP2004653B1 (en) 3-substituted n-(aryl- or heteroaryl)-pyrazo[1,5-a]pyrimidines as kinase inhibitors
US20130281398A1 (en) Treatment of diseases by epigenetic regulation
KR20070097493A (ko) 키나제 억제제로서의 이치환된 우레아
JP2010501593A (ja) イソキノリン、キナゾリンおよびフタラジン誘導体
HUE029275T2 (en) Phthalazinone ketone derivative, method of preparation and therapeutic use
JP2005529954A (ja) 化学プロセス
JP2013500255A (ja) 自食作用の強力な小分子阻害剤、およびそれの使用方法
AU2007316180A1 (en) 3-aminocarbonyl-substituted fused pyrazolo-derivatives as protein kinase modulators
TW200303863A (en) Substituted indazoles, compositions comprising them, manufacturing process and use
EP2025678A1 (en) Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds and their use as modulators of protein kinase
CN101679426A (zh) 9-(吡唑-3-基)-9H-嘌呤-2-胺和3-(吡唑-3-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-胺衍生物和它们治疗癌症的用途
EP2397471A1 (en) Benzimidazole compounds and their use
AU2020271855A1 (en) Heterocyclic compounds as kinase inhibitors for therapeutic uses
US8501957B2 (en) Benzimidazole compounds and their use as anticancer agents
JP6426745B2 (ja) 配座固定されたＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲ阻害剤
CN103936762B (zh) 吗啉并喹啉类化合物，其制备方法和用途
JP2007511571A (ja) 癌およびアテローム性動脈硬化症のような疾患の治療において有用な置換イソキノリン
JP2009532400A (ja) キナーゼ阻害剤としての３−非置換Ｎ−（アリール−もしくはヘテロアリール）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees