TWI457144B - Fibroblast proliferator - Google Patents
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Description
本發明係關於一種纖維母細胞增殖劑,更詳細而言,係關於一種亦可促進老化纖維母細胞之增殖之纖維母細胞增殖劑、以及含有其之皮膚外用劑。
近年來,無論男女老幼,保持健康且美麗之肌膚已成為至關重要之事項。皮膚主要可分為表皮、真皮及皮下組織三層,該等中,真皮於維持皮膚構造之方面極為重要。真皮係具有主要由纖維母細胞、膠原纖維(膠原蛋白纖維)、彈性纖維(彈力蛋白)等複合展開成三維狀之構造之結締組織,構成該等纖維之膠原蛋白等蛋白質係由纖維母細胞所產生,纖維母細胞保持該等蛋白質之合成與分解之平衡而維持結締組織之狀態,藉此保持皮膚之強度、伸展性及彈性等。
由於老化等內在因素或紫外線、活性氧等外在因素,真皮之結締組織減少,皮膚原本所維持之收縮性、柔軟性、保濕性等功能衰退,而出現皺紋或鬆弛之產生、緊致感或彈性下降等各種肌膚問題。一般認為此種皮膚之老化症狀之重要原因在於:皮膚真皮之纖維母細胞之數量減少及功能下降,進而由纖維母細胞所產生之基質纖維減少。因此,為獲得對皮膚老化具有防止改善作用之抗老化皮膚外用劑,正在嘗試檢索及調配對纖維母細胞具有增殖促進作用之成分。
例如,於引用文獻1及2中報告,扁豆(Lens esculenta)、蓽撥(Piper longum)、雷公根(Centella asiatica)、九層塔(Ocimum sanctum、Ocimum tenuiflorum、Ocimum album)等植物之萃取物或木槿萃取物等具有纖維母細胞增殖活性,且報告有將該等物質調配於抗老化之化粧料等中。
然而,於皮膚老化過程中存在由纖維母細胞之分裂速度下降等老化所引起的纖維母細胞之增殖能力之衰退,先前之纖維母細胞增殖劑對年輕纖維母細胞較為有效,但存在對老化纖維母細胞無法發揮充分之增殖促進效果之問題,因而強烈期望開發出可提高老化纖維母細胞之增殖之新穎物質。
已知,酵母萃取液或酵母萃取物具有膠原蛋白產生促進作用(專利文獻3)、保濕效果(專利文獻4)、細胞活化作用、玻尿酸產生促進作用(專利文獻5)等,因而被調配於化粧料等皮膚外用劑中。
紅花萃取液或紅花萃取物在中草藥或中國醫學中已知有血改善作用,以美容為目的而被用於全身發冷之改善(皮膚末梢血流之改善)或痤瘡之改善、進而被用於異位性皮膚疾病之治療等(專利文獻6)。進而,已報告紅花萃取物具有彈性蛋白酶抑制活性(專利文獻7),而且被調配於抗老化用皮膚外用劑等中以用於使細胞活化(專利文獻8)。
[專利文獻1] 日本專利特開2008-184441號公報
[專利文獻2] 日本專利第3748941號公報
[專利文獻3] 國際公開第2004/075621號小冊子
[專利文獻4] 日本專利特公平6-23088號公報
[專利文獻5] 日本專利特開平8-163983號公報
[專利文獻6] 日本專利第3839438號公報
[專利文獻7] 日本專利特開2000-319189號公報
[專利文獻8] 日本專利第3641699號公報
鑒於如上所述之情況,本發明之目的在於提供一種不僅可提高年輕纖維母細胞而且亦可提高老化纖維母細胞之增殖的安全且有效之纖維母細胞增殖劑。
本發明者發現,藉由將酵母萃取液與紅花萃取液組合,對老化纖維母細胞亦可顯著地促進細胞增殖,從而完成了本發明。例如,如上述專利文獻8所記載,酵母萃取液及紅花萃取液均係作為細胞活化活性劑而為人所知,但其對由於老化而增殖能力衰退之纖維母細胞之效果卻完全未有報告。令人驚訝的是,藉由將該等2個成分組合,可相乘地提高老化纖維母細胞之增殖。
本發明之纖維母細胞增殖劑之特徵在於含有酵母萃取液與紅花萃取液作為有效成分。
本發明之使纖維母細胞增殖之方法之特徵在於使用酵母萃取液及紅花萃取液。
又,本發明之皮膚抗老化劑之特徵在於含有酵母萃取液與紅花萃取液作為有效成分。
對於酵母萃取液及紅花萃取液而言,若分別單獨使用則無法對老化細胞帶來充分之增殖促進效果,但藉由將該等2個成分組合,可與對年輕纖維母細胞同等地對老化纖維母細胞亦帶來較高之細胞增殖促進效果,因此可有效地防止皮膚老化。
本發明中所謂「老化纖維母細胞」,係指由於年齡增長、或者由於紫外線或活性氧等之影響而增殖能力或細胞外基質產生能力等功能下降之纖維母細胞。
酵母萃取液較好的是由在含有葡糖胺聚醣之營養培養基中加以培養且受到紫外線照射、過氧化氫處理或該等兩方之處理的酵母所製備者。已知,藉由在紫外線及/或過氧化氫之壓力的存在下於含有葡糖胺聚醣之營養培養基中培養酵母,會產生細胞保護成分,藉由使用由此種酵母培養物所製備之酵母萃取液,可使纖維母細胞更有效地增殖。
本案發明之皮膚外用劑之特徵在於含有上述纖維母細胞增殖劑。例如,藉由將本發明之纖維母細胞增殖劑調配於化粧料等皮膚外用劑中,可防止或改善由老化等引起之真皮之結締組織中的纖維母細胞之減少或功能下降,從而可有效地防止或改善皺紋或鬆弛之產生、緊致感或彈性下降等皮膚老化症狀。
本發明藉由將酵母萃取液與紅花萃取液組合,不僅對年輕纖維母細胞而且對老化纖維母細胞亦可帶來較高之細胞增殖促進效果,而且對皮膚無不良影響,可安全且有效地於老化皮膚之真皮中使纖維母細胞增加而提高皮膚之緊致感或彈性。因此,可將本案發明之纖維母細胞增殖劑或含有其之皮膚外用劑應用於皮膚,來有效地防止或改善皺紋或鬆弛之產生、緊致感或彈性下降等皮膚老化症狀。
本發明之纖維母細胞增殖劑等含有酵母萃取液與紅花萃取液作為有效成分。酵母萃取液可使用:酵母之利用極性溶劑所得之萃取物;對藉由自我分解、酸水解、酵素水解等而使酵母溶菌之酵母分解物加以過濾所得者;或者將上述酵母分解物加以乾燥後進一步進行極性溶劑萃取等所得者等。
作為用以製備酵母萃取液之菌體,可較好地使用:單囊黴(Eremascus)屬、內孢黴(Endomyces)屬等屬於內孢黴(Endomycetaceae)科之酵母;或裂殖酵母(Schizosaccharomyces)屬、拿遜酵母(Nadsonia)屬、類酵母(Saccharomycodes)屬、孢漢遜酵母(Hanseniaspora)屬、威克酵母(Wickerhamia)屬、釀母菌(Saccharomyces)屬、克魯維酵母(Kluyveromyces)屬、路德酵母(Lodderomyces)屬、溫酵母(Wingea)屬、擬內孢黴(Endomycopsis)屬、畢赤酵母(Pichia)屬、漢森酵母(Hansenula)屬、管囊酵母(Pachysolen)屬、固囊酵母(Citeromyces)屬、德巴利酵母(Debaryomyces)屬、許旺酵母(Schwanniomyces)屬、德克酵母(Dekkera)屬、扣囊複膜孢酵母(Saccharomycopsis)屬、油脂酵母(Lipomyces)屬等屬於釀母菌(Saccharomycetaceae)科之酵母;蝕精黴(Spermophthora)屬、假囊酵母(Eremothecium)屬、多囊黴(Crebrothecium)屬、阿舒囊黴(Ashbya)屬、針孢酵母(Nematospora)屬、美極梅齊酵母(Metschnikowia)屬、球蟲(Coccidiascus)屬等屬於蝕精黴(Spermophthoraceae)科之酵母等子囊菌酵母。其中,就容易獲取等觀點而言,較好的是由釀母菌屬(Saccharomyces)之酵母例如啤酒酵母、清酒酵母、麵包酵母等菌體而製備者。又,本發明中可使用作為「酵母萃取液」而市售者。
作為萃取所使用之溶劑,可使用:水、生理食鹽水、磷酸緩衝液、磷酸緩衝生理食鹽水,甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇等低級醇,1,3-丁二醇、丙二醇、二丙二醇、甘油等多元醇,二乙醚、二丙醚等醚類,乙酸乙酯、乙酸丁酯等酯類,丙酮、乙基甲基酮等酮類等極性有機溶劑,可自該等中選擇並使用1種或2種以上。於進行溶劑萃取之情形時,可將酵母或酵母分解物加以冷凍乾燥及/或粉碎之後供於萃取,且亦可於萃取溶劑中進行均質化、或進行超音波破碎。作為萃取溫度,通常為0℃左右至萃取溶劑之沸點以下之溫度,又,萃取時間係根據萃取溶劑之種類或萃取溫度而不同,通常為1小時~5日左右。
作為酵母萃取液,本發明中可較好地使用由在含有葡糖胺聚醣之營養培養基中加以培養且受到紫外線照射、過氧化氫處理或該等兩方之處理之酵母而製備者。已知,藉由在紫外線或過氧化氫等之壓力存在下對酵母進行培養,會產生保護細胞不受壓力影響之細胞保護成分,進而,藉由在此時將營養蛋白腖類或葡糖胺聚醣等添加至培養基中,可提高對壓力之反應。該製法等例如於美國專利第6461857號說明書中有所記載。例如,於添加有非動物性來源之葡糖胺聚醣之營養培養基中對作為麵包酵母之一種的啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)進行培養,於培養物中添加亞致死量例如培養物之總質量之約0.1~2質量%的過氧化氫,進而任意照射亞致死照射量之紫外線(例如以31.5mJ/cm2
之強度進行UVA/UVB照射)由此加載壓力,使所得培養物藉由自我分解或酸水解等而溶解之後,進行乾燥、水萃取、過濾等,藉此可製備酵母萃取液。又,由在含有非動物性來源之葡糖胺聚醣之培養基中加以培養且受到紫外線照射及過氧化氫處理的酵母所製備之酵母萃取液,係由Arch Personal Care Products L.P.公司以「Biodynes EMPP(商標)」之商品名而銷售。
紅花萃取液可藉由對紅花(Carthamus tinctorius L.)進行溶劑萃取而製備。可使用紅花之花、葉、莖、根莖、根等各部位或全體,較好的是使用作為生藥「紅花」而利用之紅花之花。
可將生紅花直接供於萃取操作,但考慮到萃取效率,較好的是進行切碎、乾燥、粉碎等處理之後進行萃取。萃取係浸漬於萃取溶劑中而進行。為提高萃取效率,亦可進行攪拌、或於萃取溶劑中進行均質化。作為萃取溫度,通常為5℃左右至萃取溶劑之沸點以下之溫度,又,萃取時間通常為4小時~14日左右。
作為萃取溶劑,可使用:水、生理食鹽水、磷酸緩衝液、磷酸緩衝生理食鹽水,甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等低級醇,1,3-丁二醇、丙二醇、二丙二醇、1,2-戊二醇、甘油等多元醇,乙醚、丙醚等醚類,乙酸乙酯、乙酸丁酯等酯類,丙酮、乙基甲基酮等酮類等極性有機溶劑,或該等中之2種以上之混合溶劑等。
例如,本發明中可較好地使用藉由50%之1,3-丁二醇對紅花之花進行萃取及過濾者。又,本發明中亦可使用作為紅花萃取液而市售者。
本發明之纖維母細胞增殖劑等可直接使用酵母萃取液及紅花萃取液,亦可添加適當之載體、賦形劑、穩定劑、緩衝劑、pH調整劑、溶劑等及任意之助劑而以溶液、懸濁液、乳濁液、霜劑、軟膏劑、凝膠劑、粉末劑等任意形態來使用。又,亦可內包於脂質體或微膠囊等中。進而,於本發明之纖維母細胞增殖劑等中,只要不損及本發明之效果,則除上述必需成分以外亦可添加抗氧化劑、防腐劑、紫外線吸收劑等穩定劑或吸收促進劑等。
可使本發明之纖維母細胞增殖劑等含有於外用劑基劑等中而製備皮膚外用劑。
本發明之皮膚外用劑中的酵母萃取液及紅花萃取液之調配量只要可達成本發明之效果則並無限定,相對於外用劑總質量,酵母萃取液之調配量較好的是0.00001質量%~10質量%,更好的是0.001質量%~5質量%,進而好的是0.005質量%~1質量%。又,紅花萃取液之調配量較好的是0.00001質量%~10質量%,更好的是0.001質量%~5質量%,進而好的是0.01質量%~1質量%。
本發明之皮膚外用劑包括化粧料、醫藥品、準藥品等,更合適的是可廣泛地應用於化粧料中。其劑型亦包括水溶液系、可溶系、乳化系,油液系、凝膠系、糊劑系、軟膏系、氣溶膠系、水-油二層系、水-油-粉末三層等任意者。又,亦包括承載於片狀基劑上者。
又,本發明之皮膚外用劑可採用之製品形態及用途亦係只要可達成本發明之效果則包括任意者,例如可應用:洗面乳、化粧水、粧前飾底用乳或霜、乳液、乳霜、凝膠、精華液(美容液)、敷劑、面膜等基礎化粧料,粉底等彩粧化粧料,防曬乳或霜等防曬化粧料,護手乳或霜、美腿乳或霜、身體乳或霜等身體化粧料,美體皂、肥皂等盥洗製品等。
對於本發明之皮膚外用劑而言,除上述必需構成成分以外可視需要適當調配通常化粧品或醫藥品等皮膚外用劑中所使用之其他任意成分,並根據目標劑型利用通常方法來製造。例如,視需要可適當調配美白劑、保濕劑、抗氧化劑、油性成分、紫外線吸收劑、界面活性劑、增稠劑、醇類、粉末成分、有色材料、水性成分、水、各種皮膚營養劑等。進而亦可適當調配:依地酸二鈉、依地酸三鈉、檸檬酸鈉、聚磷酸鈉、偏磷酸鈉、葡萄糖酸等之金屬螯合劑、咖啡因、單寧、維拉帕米、傳明酸及其衍生物、甘草萃取物、光甘草啶、火棘之果實之熱水萃取物、各種生藥、生育醇乙酸酯、甘草酸及其衍生物或其鹽等藥劑、維生素C、抗壞血酸磷酸鎂、抗壞血酸葡糖苷、熊果苷、麴酸等其他美白劑,葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖等糖類等。
[實施例]
以下,列舉實施例對本發明加以具體說明,但本發明不限定於下述實施例。又,於下述實施例中,使用Biodynes EMPP(商標)(Arch Personal Care Products L.P.公司)作為酵母萃取液,且使用Pharcolex紅花B(Ichimaru Pharcos(股))作為紅花萃取液。
「年輕細胞」係使用源自新生兒包皮之纖維母細胞,「老化細胞」係使用源自70多歲之女性皮膚真皮之纖維母細胞。
將各纖維母細胞於含有10% FBS(Fetal Bovine Serum,胎牛血清)之DMEM培養基中培養24小時後,換成添加有0.1%之紅花萃取液、或0.01%之酵母萃取液、或者0.1%之紅花萃取液與0.01%之酵母萃取液的含有0.5% FBS之DMEM培養基,進一步培養48小時。另外,作為對照,使用未添加試驗物質之含有0.5% FBS之DMEM培養基同樣地進行培養。培養結束時,以Alamar Blue試劑來測定細胞之呼吸活性,作為細胞增殖之指標。將對照情況下之呼吸活性設為100%而求出相對之細胞增殖(%)。
將結果示於圖1。單獨使用紅花萃取液時,對於年輕纖維母細胞及老化纖維母細胞均係僅稍提高細胞增殖,增殖促進效果較低。又,單獨使用酵母萃取液時,年輕細胞之增殖可顯著提高,但對老化細胞之增殖促進效果較低。另一方面,藉由組合添加紅花萃取液與酵母萃取液,尤其可相乘地提高對老化細胞之增殖促進效果,可與年輕細胞同等地提高老化細胞之增殖。
藉由組合紅花萃取液與酵母萃取液,由於老化而增殖能力下降之老化纖維母細胞之增殖亦可顯著提高,其啟示:對於老化皮膚亦提高纖維母細胞增殖,從而可有效地防止或改善皺紋或鬆弛之產生、緊致感或彈性下降等皮膚老化症狀。
以下表示含有本發明之纖維母細胞增殖劑的皮膚外用劑之配方例。又,調配量全部係以相對於組合物總量之質量%來表示。
該等配方例之皮膚外用劑均可應用於老化皮膚而帶來優異之皺紋改善效果。
圖1係表示藉由將紅花萃取液與酵母萃取液組合而帶來之對年輕或老化纖維母細胞之增殖的效果之圖表。
(無元件符號說明)
Claims (9)
- 一種纖維母細胞增殖劑,其含有酵母萃取液與紅花萃取液作為有效成分,上述酵母萃取液係由在含有葡糖胺聚醣之營養培養基中加以培養且受到紫外線照射、過氧化氫處理或該等兩方之處理的酵母所製備者,上述紅花萃取液為紅花之花的溶劑萃取物。
- 如請求項1之纖維母細胞增殖劑,其中用於紅花之花的溶劑萃取之溶劑包含1,3-丁二醇。
- 如請求項1之纖維母細胞增殖劑,其中上述纖維母細胞為老化纖維母細胞。
- 一種皮膚外用劑,其含有如請求項1至3中任一項之纖維母細胞增殖劑。
- 如請求項4之皮膚外用劑,其為化粧料。
- 一種使纖維母細胞增殖之方法,其使用酵母萃取液及紅花萃取液,上述酵母萃取液係由在含有葡糖胺聚醣之營養培養基中加以培養且受到紫外線照射、過氧化氫處理或該等兩方之處理的酵母所製備者,上述紅花萃取液為紅花之花的溶劑萃取物。
- 如請求項6之方法,其中用於紅花之花的溶劑萃取之溶劑包含1,3-丁二醇。
- 如請求項6之方法,其中上述纖維母細胞為老化纖維母細胞。
- 一種皮膚抗老化劑,其含有酵母萃取液與紅花萃取液作為有效成分,上述酵母萃取液係由在含有葡糖胺聚醣之 營養培養基中加以培養且受到紫外線照射、過氧化氫處理或該等兩方之處理的酵母所製備者,上述紅花萃取液為紅花之花的溶劑萃取物。
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Citations (2)
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JP2002356435A (ja) * | 2001-05-29 | 2002-12-13 | Noevir Co Ltd | 皮膚外用剤 |
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Patent Citations (2)
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US6461857B1 (en) * | 2000-07-19 | 2002-10-08 | Arch Personal Care Products, L.P. | Producing water-soluble yeast extract by adding peroxide to growing yeast cells |
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