TWI432208B - 增進緊密連接通透性的新穎胜肽 - Google Patents

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Description

增進緊密連接通透性的新穎胜肽
本發明提供增進緊密連接通透性的新穎胜肽及其用作治療劑之用途及其在促進治療劑傳遞之材料及方法中的用途。在有些實施例中，增進緊密連接通透性的新穎胜肽(亦即胜肽緊密連接促效劑)用於組合物中以促進治療劑越過生物障壁(包含緊密連接)被吸收。在有些實施例中，該等胜肽緊密連接促效劑用於組合物中以調節個體之免疫反應。在有些實施例中，該等胜肽緊密連接促效劑用於組合物中以增強對抗抗原的免疫反應。
本申請案主張美國臨時申請案第60,952,144號(2007年7月26日申請)、美國臨時申請案第60/953,398號(2007年8月1日)、美國臨時申請案第60/953,403號(2007年8月1日申請)及美國臨時申請案第60/953,405號(2007年8月1日申請)之優先權，上述每一申請案以引用方式全文併入本文中。
緊密連接(tj)或閉鎖小帶(zonula occludens；ZO)為吸收性上皮及分泌性上皮之標誌之一(Madara,J.Clin.Invest.,83：1089－1094(1989)；及Madara,Textbook of Secretory Diarrhea,Lebenthal等人編，第11章，第125－138頁(1990))。緊密連接充當頂端代謝區與基底外側代謝區之間的障壁，選擇性調控離子及水溶性溶質經由旁細胞(細胞之間)途徑之被動擴散(Gumbiner,Am.J.Physiol.,253(Cell Physiol.22)：C749－C758(1987))。該障壁維持由與跨細胞 途徑相關之途徑之活性所形成的任何梯度(Diamond,Physiologist,20：10－18(1977))。
由於腸上皮質膜之電阻相對較高，因此跨上皮細胞導電率之變化一般可歸於旁細胞途徑之通透性之變化(Madara，同上)。ZO在此旁細胞途徑中代表主要障壁，且如藉由冷凍斷裂電子顯微鏡所觀測，上皮組織之電阻似乎取決於跨膜蛋白股之數量及其在ZO中之複雜度(Madara等人，J.Cell Biol.,101：2124－2133(1985))。
由霍亂弧菌 (Vibrio cholerae )產生的閉鎖小帶毒素(ZOT)已由Fasano等人表徵(Proc.Natl Acad.Sci.,USA,8：5242－5246(1991))，且序列已經測定(GenBank寄存第A43864號)。ZOT為一種緊密連接促效劑且藉由調節細胞間緊密連接之結構來增強兔迴腸黏膜之腸通透性。美國專利第5,827,534號、第5,665,389號、第5,908,825號揭示ZOT促進治療劑之吸收的用途。美國專利公開案第US－2006－0276403－A1號及第US 2006－0165722 A1號及申請案第11/673,192號揭示可用於促進治療劑之吸收的胜肽緊密連接促效劑。
藥物傳遞
有效治療藥物之低生物可用率(BA)仍為藥物開發之主要阻礙且在諸多情況下可能為是否開發成有效藥劑的決定性因素。多種治療劑經口投與之後，因不良吸收或易經受首次代謝而經歷低BA。增強胃腸吸收該等藥物的方法將大大擴展其治療有用性，同時降低產生功效所需的劑量。
已使用吸收增強劑(包括界面活性劑、脂肪酸及聚葡萄胺糖衍生物)，藉由細胞膜分裂或調節緊密連接(TJ)來改進生物可用率。一般而言，最佳吸收增強劑應具有以下性質：其作用應為可逆的；其對腸細胞膜應提供快速的通透增強作用；其在有效濃度水準下應具有非細胞毒性，對緊密連接之細胞膜或細胞骨架不具有有害及/或不可逆效應。閉鎖小帶毒素(Zot)(位於菌株霍亂弧菌 之細胞包膜中的44.8 kDa蛋白質(399個胺基酸；AA))能夠可逆地開放細胞之間的緊密連接並以無毒方式增強多種藥物之旁細胞轉運。有效地將胰島素與Zot一起經口投與患糖尿病大鼠之報導引發了對作為吸收增強劑之Zot之生物活性的深入研究。最近，Zot之更小12 kDa片段(AA 265－399)(稱之為delta G(△G))作為Zot之生物活性片段問世。Zot活性片段與閉合小帶蛋白(Zonulin)之間的胺基酸比較以及定點誘變實驗證明靠近經處理之Zot之胺基末端存在八胜肽受體結合域。
本申請人揭示增強緊密連接通透性的新穎胜肽及提高治療藥物之生物可用率的方法。新穎胜肽促進治療藥物轉運越過生物障壁(其通透性藉由緊密連接調控)，且從而可提高該等藥物之生物可用率。本發明之新穎胜肽的優點在於，其為無毒的，其作用為可逆的，其不具有內毒素污染，易合成且製備及純化費用低。
疫苗
疫苗已經證明為預防傳染性疾病的成功且高度可接受之 方法。其成本低，且不誘導針對標靶病原體的抗生素抗性或不影響宿主中存在的正常菌群。在很多情況下，諸如當誘導抗病毒免疫性時，疫苗可預防無可行治療或改善療法可處理的疾病。
如此項技術中所熟知，疫苗之功能為引發免疫系統建立對免疫原性劑或抗原(抗原劑)(通常為以非傳染形式或非病原形式引入機體內的傳染性有機體或其一部分)之反應。一旦免疫系統經有機體"預致敏"或致敏，則免疫系統日後暴露於作為傳染性病原體的此有機體會引起快速且強烈的免疫反應，在傳染性病原體在宿主有機體中增殖且感染足夠細胞而導致疾病症狀之前，此免疫反應將病原體摧毀。用於誘導免疫系統之試劑或抗原可為呈較低傳染性狀態之完整有機體(稱為減毒有機體)，或在有些情況下，可為有機體之組分，諸如代表有機體之各種結構性組分的碳水化合物、蛋白質或胜肽。
在很多情況下，必需增強針對存在於疫苗中之抗原的免疫反應，以便刺激免疫系統至足夠程度以使得疫苗有效，亦即賦予免疫性。單獨投與的多種蛋白質及大部分胜肽及碳水化合物抗原無法誘發可賦予免疫性的足夠抗體反應。該等抗原需要以其被視為外來物且誘發免疫反應的方式呈現至免疫系統。為此，已設計出刺激免疫反應的佐劑。
熟知的佐劑弗氏完全佐劑(Freund's complete adjuvant)係由分枝桿菌於油/水乳液中之混合物組成。弗氏佐劑以兩種方式起作用：第一，增強細胞介導之免疫性及體液介導 之免疫性；及第二，阻斷抗原激發之快速消散("儲存效應")。然而，由於對於此物質的中毒生理反應及免疫反應時常發生，因此弗氏佐劑無法用於人類。經證明具有免疫刺激或佐劑活性之另一種分子為內毒素，亦稱為脂多醣(LPS)。LPS藉由引發"先天"免疫反應(一種已進化至能夠使有機體識別內毒素(及其中內毒素為一組分的侵入細菌))的反應而無需有機體預先暴露來刺激免疫系統。雖然LPS毒性太強而非可行的佐劑，但在結構上與內毒素相關的分子(諸如單磷醯基脂質A("MPL"))正作為佐劑在臨床試驗中測試。然而，目前獲FDA批准用於人類的佐劑僅為鋁鹽(Alum)，其藉由使抗原沈澱來用於"儲存"抗原。Alum亦刺激針對抗原的免疫反應。
因此，此項技術中公認需要可與抗原共同投與以便刺激免疫系統形成比抗原單獨注射或與Alum一起注射所見之抗體反應更強之抗體反應的化合物。此外，由於開發黏膜疫苗需要使用特異性佐劑，因此對於全身性免疫起作用的佐劑(諸如Alum)對於黏膜免疫通常無效。儘管最近十年中對黏膜疫苗之佐劑進行深入研究，但迄今尚無用於人類用途之佐劑得到註冊。佐劑研究中之主要問題為功效及毒性，且候選黏膜佐劑不完全符合高功效及無毒性之標準。此外，大部分所提出之黏膜佐劑為作用機制不瞭解的複雜分子。本申請人在本文中提供一種用於誘導針對抗原之免疫反應的無毒替代性胜肽緊密連接促效劑佐劑。
來自霍亂弧菌 之閉鎖小帶毒素(ZOT)經鑑定為用於黏膜 疫苗接種的佐劑(Infect.Immun.1999,67：1287；Infect.Immun.2003,71：1897)。將ZOT與可溶性抗原一起鼻內投與小鼠可刺激對抗原卵白蛋白有特異性的全身性體液介導之反應及細胞介導之反應以及黏膜反應(Infect.Immun.2003,71：1897)。ZOT為一種結合上皮細胞上之受體且調節緊密連接從而誘導黏膜障壁通透性增強的44.8 kDa蛋白質。ZOT對緊密連接之作用為可逆的且不會引起組織損傷(J.Clin.Invest.1995,96：710)。上皮細胞上供ZOT結合之受體已部分得到表徵且最近已鑑別出與ZOT同源的哺乳動物蛋白質且取名為閉合小帶蛋白。有趣地是，此蛋白質經證明為緊密連接之內源調節劑，其係由上皮細胞釋放且結合ZOT所用的同一受體(Ann.NY.Acad Sci.2000,915：214)。ZOT用作佐劑之機制可包括：結合其在鼻黏膜上之受體，調節黏膜下層中之緊密連接及抗原通道，隨後暴露於免疫系統之細胞。
非常需要開發用於預防傳染性疾病之黏膜疫苗。黏膜疫苗接種具有若干優於非經腸疫苗接種的優點。黏膜免疫接種在感染部位(局部)誘導免疫反應。此外，由於黏膜免疫系統之內在性質，在一個黏膜部位之免疫接種可在遠隔部位(局部)誘導特異性反應。此靈活性對於解決疫苗接種之文化及宗教障礙很重要，此係由於隨後可以實用方式於隔離之黏膜部位中誘導保護性免疫(例如防治性傳播疾病)。除誘導對抗黏膜獲得性病原體的局部反應外，黏膜疫苗亦誘導全身性免疫，包括體液介導之反應及細胞介導之反 應。因此，黏膜疫苗接種可用於對抗經由其他途徑(亦即血液或皮膚)獲得之感染。最後，投與黏膜疫苗不需要使用針，此增強疫苗順應性且打消對血液可傳遞感染的疑慮。出於以上所有原因，亦可以預防性或治療性疫苗接種方式使用黏膜疫苗對抗癌症。該等疫苗可防治由傳染劑(諸如幽門螺桿菌 (Helicobacter pylori)、乳頭狀瘤病毒 、疱疹病毒 )所引起之癌症與不同病源學之癌症(諸如黑色素瘤、結腸癌及其他癌症)。
有趣的是，大部分人類病原體係經由黏膜途徑獲得，然而目前幾乎不使用黏膜疫苗。在目前所用彼等疫苗當中，疫苗係基於活的減毒微生物。此外，純化抗原當在黏膜表面傳遞時，本身無法刺激/誘導免疫反應。因此，該等疫苗需要使用特異性佐劑。遺憾的是，開發黏膜疫苗迄今受到缺乏如上所述之安全及有效佐劑之牽制。有效的黏膜佐劑容許抗原(Ag)通過黏膜障壁且促進誘導Ag特異性免疫反應。
本申請人揭示增強緊密連接通透性之新穎胜肽，及將抗原連同該等胜肽一起進行黏膜傳遞以誘導對抗原有特異性之全身反應及/或黏膜反應的方法。新穎胜肽促進抗原通過黏膜傳遞且誘導針對抗原之全身反應及黏膜反應。本發明之新穎胜肽的優點在於：無毒，作用為可逆的，不具有內毒素污染，易於合成且製備及純化費用低。
此項技術中仍需要調節免疫反應且促進治療劑傳遞的物質及方法。本發明滿足此需要及其他需要。
本發明提供新穎胜肽緊密連接促效劑(誘導劑)。通常，胜肽緊密連接促效劑包含相對於SEQ ID NO：1具有至少一個胺基酸缺失、插入或取代或至少一個化學修飾的SEQ ID NO：1之胺基酸序列。舉例而言，胜肽緊密連接促效劑可具有相對於SEQ ID NO：1之一至五個胺基酸取代，同時維持其作為具有緊密連接通透性之促效劑(誘導劑)的活性。在某些實施例中，緊密連接促效劑在對應於SEQ ID NO：1之位置2的位置處具有烯丙基Gly。
本發明之該等胜肽緊密連接促效劑長度可不等。在有些實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可具有約三至約十個胺基酸長度。在有些實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成，或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：2－90組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：2－90組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在有些實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由SEQ ID NO：2之胺基酸序列組成或由SEQ ID NO：2之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：5－21組成之群的之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：5－21組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包 含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：22－38組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：22－38組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：39－54組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：39－54組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：55－72組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：55－72組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：73－90組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：73－90組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。在有些實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：15、23、25、26、27、29、30及42組成之群的胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：15、23、25、26、27、29、30及42組成之群的胺基酸序列組成的胜肽。本發明之其他緊密連接促效劑係如隨同本文同時所申請之序列表中所示。
本發明亦提供包含一或多種本發明之胜肽緊密連接促效 劑的組合物，例如醫藥組合物。適用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑包括(但不限於)包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成的胜肽緊密連接促效劑：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：2－90組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：2－90組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在有些實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由SEQ ID NO：2之胺基酸序列組成或由SEQ ID NO：2之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：5－21組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：5－21組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：22－38組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：22－38組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：39－54組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：39－54組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由 以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：55－72組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：55－72組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在其他實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑可包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：73－90組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：73－90組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。在有些實施例中，用於本發明之組合物中的胜肽緊密連接促效劑包括(但不限於)包含、基本上由以下胜肽組成或由以下胜肽組成的胜肽緊密連接促效劑：包含、基本上由選自由SEQ ID NO：15、23、25、26、27、29、30及42組成之群之胺基酸序列組成或由選自由SEQ ID NO：15、23、25、26、27、29、30及42組成之群之胺基酸序列組成的胜肽。本發明之組合物可進一步包含一或多種其他活性劑。其他活性劑通常可為治療劑、成像劑及/或免疫原性劑。適當之其他治療劑之實例包括(但不限於)葡萄糖代謝劑(例如胰島素)、抗生素、抗腫瘤劑、抗高血壓劑、抗癲癇劑、中樞神經系統藥劑及免疫系統抑制劑。適當之其他免疫原性劑之實例包括(但不限於)抗原。適當的其他成像劑包括(但不限於)包含一或多個放射性原子之試劑。本發明之醫藥組合物可包含一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
本發明之組合物(例如醫藥組合物)可經調配成供任何類型之傳遞使用。舉例而言，本發明之組合物可經調配成供 經腸傳遞，例如可為延遲釋放型組合物。本發明之組合物亦可經調配成供經肺傳遞、經口傳遞及/或經皮傳遞。
在一實施例中，本發明提供一種治療有此需要之個體之疾病的方法。本發明之方法可包含將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑及一或多種其他治療劑的醫藥組合物投與個體。在一實施例中，本發明提供一種治療有此需要之個體之糖尿病的方法。在另一實施例中，本發明提供一種治療有此需要之個體之過度或非所要免疫反應的方法。在另一實施例中，本發明提供一種治療有此需要之個體之炎症的方法。在特定實施例中，本發明提供治療有此需要之個體之炎症性腸病的方法。可使用本發明之方法治療的炎症性腸病可為克羅恩氏病(Crohn's disease)或潰瘍性結腸炎。在另一實施例中，本發明提供一種治療有此需要之個體之癌症的方法。
在某些實施例中，本發明之醫藥組合物可包含一或多種胰島素及/或其衍生物。在其他實施例中，本發明之醫藥組合物可包含一或多種消炎劑。在其他實施例中，本發明之醫藥組合物可包含一或多種免疫抑制性藥物，例如環孢菌素A(cyclosporin A)。在另一實施例中，本發明之醫藥組合物可包含一或多種抗癌劑。
 緊密連接促效劑
如本文中所使用，"緊密連接促效劑"為一種介導或誘導或促進或加強緊密連接(例如相鄰上皮細胞之間的緊密連 接)之生理性瞬時開放的化合物。緊密連接促效劑之實例為由霍亂弧菌 產生的閉鎖小帶毒素(ZOT)。ZOT受體促效劑為一種據信經由ZOT所用之同一受體介導緊密連接開放的化合物。在有些實施例中，緊密連接促效劑可包含胜肽。
如本文中所使用，個體為本發明之方法可實施且/或本發明之物質可投與的任何動物，例如哺乳動物，個體包括(但不限於)人類。
本發明之緊密連接促效劑可包含胜肽緊密連接促效劑。示範性胜肽緊密連接促效劑為包含胺基酸序列Phe Cys Ile Gly Arg Leu(SEQ ID NO：1)之胜肽。本發明之胜肽緊密連接促效劑之其他實例包括(但不限於)其中SEQ ID NO：1之一或多個胺基酸已經不同胺基酸取代的胜肽。
在某些實施例中，SEQ ID NO：1之位置2經取代。在較佳實施例中，SEQ ID NO：1之位置2處的半胱胺酸(Cys或C)殘基經烯丙基Gly殘基置換。在該等較佳實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列Phe－烯丙基Gly－Ile－Gly－Arg－Leu。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之一個以上位置經取代。可在SEQ ID NO：2之位置1、3、4、5或6中之任意處形成取代。在有些實施例中，在SEQ ID NO：2之位置1處形成取代。在有些實施例中，在SEQ ID NO：2之位置3處形成取代。在有些實施例中，在SEQ ID NO：2之位置4處形成取代。在有些實施例中，在SEQ ID NO：2之位置5處形成取代。在有些實施 例中，在SEQ ID NO：2之位置6處形成取代。在有些實施例中，可在SEQ ID NO：2之位置1、3、4、5及6處形成其他取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置1經另一天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置1經一非天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置3經另一天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置3經一非天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置4經另一天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置4經一非天然存在之胺基酸(例如非遺傳編碼)取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置5經另一天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置5經一非天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置6經另一天然存在之胺基酸取代。在有些實施例中，SEQ ID NO：2之位置6經一非天然存在之胺基酸取代。本發明之非天然存在之胺基酸列於表7中。在有些實施例中，胜肽緊密連接促效劑可包含一或多個D－胺基酸。
當緊密連接促效劑為胜肽時，可使用任何長度之胜肽。一般而言，胜肽緊密連接促效劑之尺寸可在以下長度範圍內：約3至約100、約3至約90、約3至約80、約3至約70、約3至約60、約3至約50、約3至約40、約3至約30、約3至約25、約3至約20、約3至約15、約3至約10、約3至約9、約3至約8、約3至約7、約3至約6、約3至約5或約3至約4個 胺基酸。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之約10%範圍內。本發明之胜肽緊密連接促效劑可為約3、4、5、6、7、8、9、10或10以上個胺基酸之長度。
該等胜肽緊密連接促效劑可使用熟知技術(諸如High Performance Liquid Chromatography of Peptides and Proteins.Separation Analysis and Conformation ,Mant等人編，C.R.C.Press(1991)中所述)及胜肽合成儀(諸如Symphony(Protein Technologies,Inc))加以化學合成且純化；或藉由使用重組DNA技術來合成，亦即，其中將編碼胜肽之核苷酸序列插入適當表現載體(例如大腸桿菌 或酵母表現載體)內，在相應宿主細胞中加以表現，且使用熟知技術自其中純化。固相合成本發明之示範性緊密連接促效劑之示意圖展示於圖1中。
如本文中所使用，術語"胜肽"包括具有習知胜肽骨架的分子以及具有經修飾之骨架的胜肽模擬物。該等修飾包括(但不限於)環化作用、N－末端修飾及C－末端修飾(包括鹼性基團(諸如胺)之添加或修飾)、胜肽鍵修飾，包括但不限於含有CH2 －NH、CH2 －S、CH2 －S－O、O＝C－NH、CH2 －O、CH2 －CH2 、S＝C－NH、CH＝CH或CF＝CH的骨架。製備胜肽模擬物化合物之方法在此項技術中已熟知且明確說明於Quantitative Drug Design,C.A.Ramsden Gd.，第17.2章，F.Choplin Pergamon Press(1992)中，該文獻以引用方式併入本文中。
組合物
通常，組合物(諸如醫藥組合物)包含胜肽緊密連接促效劑及視需要一或多種其他活性劑。胜肽緊密連接促效劑可以足以促進緊密連接(例如相鄰上皮細胞之間的緊密連接)開放之量存在；或以足以調節針對抗原之免疫反應的量存在；或以足以減輕有此需要之個體之炎症的量存在。在任何給定組合物中所用促效劑(例如胜肽緊密連接促效劑)之量可根據諸如個體之病況、年齡、性別及體重因素而變。給藥方案可經調整以提供最佳治療反應。舉例而言，可單次大丸劑投與，可分若干次劑量隨時間投與，或依治療情況之緊急需要指示，可按比例地減少或增加劑量。
一般而言，本發明之醫藥組合物包含胜肽緊密連接促效劑之量在1 μg至約1 g、較佳約1 mg至約1000 mg、約10 mg至約100 mg、約10 mg至約50 mg或約10 mg至約25 mg胜肽緊密連接促效劑之範圍內。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。
以組合物總重量計，本發明之組合物可包含以下範圍內之量的一或多種胜肽緊密連接促效劑：約0.1 wt%至約20 wt%、約0.1 wt%至約18 wt%、約0.1 wt%至約16 wt%、約0.1 wt%至約14 wt%、約0.1 wt%至約12 wt%、約0.1 wt%至約10 wt%、約0.1 wt%至約8 wt%、約0.1 wt%至約6 wt%、約0.1 wt%至約4 wt%、約0.1 wt%至約2 wt%、約0.1 wt%至約1 wt%、約0.1 wt%至約0.9 wt%、約0.1 wt%至約0.8 wt%、約0.1 wt%至約0.7 wt%、約0.1 wt%至約0.6 wt%、約0.1 wt%至約0.5 wt%、約0.1 wt%至約0.4 wt%、約0.1 wt% 至約0.3 wt%或約0.1 wt%至約0.2 wt%。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。以組合物總重量計，本發明之組合物可包含約0.1 wt%、約0.2 wt%、約0.3 wt%、約0.4 wt%、約0.5 wt%、約0.6 wt%、約0.7 wt%、約0.8 wt%或約0.9 wt%之量的一或多種胜肽緊密連接促效劑。
以組合物總重量計，本發明之組合物可包含以下範圍內之量的一或多種胜肽緊密連接促效劑：約1 wt%至約20 wt%、約1 wt%至約18 wt%、約1 wt%至約16 wt%、約1 wt%至約14 wt%、約1 wt%至約12 wt%、約1 wt%至約10 wt%、約1 wt%至約9 wt%、約1 wt%至約8 wt%、約1 wt%至約7 wt%、約1 wt%至約6 wt%、約1 wt%至約5 wt%、約1 wt%至約4 wt%、約1 wt%至約3 wt%或約1 wt%至約2 wt%。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。以組合物總重量計，本發明之組合物可包含約1 wt%、約2 wt%、約3 wt%、約4 wt%、約5 wt%、約6 wt%、約7 wt%、約8 wt%或約9 wt%之量的一或多種胜肽緊密連接促效劑。
包含一或多種胜肽緊密連接促效劑及一或多種其他活性劑的本發明之組合物(例如醫藥組合物)可經調配以供肺部傳遞(例如可為經肺傳遞劑型)。通常，該等組合物可以醫藥氣溶膠(例如溶液氣溶膠或粉末氣溶膠)之形式提供。熟習此項技術者瞭解用於形成醫藥氣溶膠的諸多不同方法及裝置，例如以下文獻中所揭示之彼等方法及裝置：Sciarra 及Sciarra,Aerosols， 於Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第 20版，第50章；Gennaro等人編，Lippincott,Williams and Wilkins Publishing Co.,(2000)。
在一實施例中，該等劑型呈粉末氣溶膠(亦即包含顆粒)之形式。該等形式尤其適合供吸入傳遞系統使用。粉末可包含適於投與肺之任何粒徑的顆粒。
粉末調配物視需要可含有至少一種為熟習此項技術者所知的醫藥學上可接受之顆粒載劑。適當醫藥載劑之實例包括(但不限於)醣，包括單醣、二醣、多醣及糖醇，諸如阿拉伯糖、葡萄糖、果糖、核糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖、乳糖、麥芽糖、澱粉、葡聚糖、甘露糖醇或山梨糖醇。在一實施例中，粉末調配物可包含乳糖作為載劑。
粉末調配物可包含於熟習此項技術者所知的任何容器中。用於乾粉吸入裝置中的容器可為例如明膠或塑料之膠囊，或例如鋁或塑料之發泡包裝。在有些實施例中，容器中調配物之總重量可為約5 mg至約50 mg。在其他實施例中，粉末調配物可包含於多劑量乾粉吸入裝置之儲槽中，該裝置經調適可每次致動時傳遞適當量。
粉末調配物通常包含小顆粒。適當顆粒可使用此項技術中已知的任何方法製備，例如藉由在氣噴磨、球磨或振動磨中研磨、過篩、微量沈澱、噴霧乾燥、冷凍乾燥或控制結晶加以製備。通常，粒徑為約10微米或小於10微米。用於本發明之組合物的顆粒可具有以下範圍內之粒徑：約 0.1微米至約10微米、約0.1微米至約9微米、約0.1微米至約8微米、約0.1微米至約7微米、約0.1微米至約6微米、約0.1微米至約5微米、約0.1微米至約4微米、約0.1微米至約3微米、約0.1微米至約2微米、約0.1微米至約1微米、約0.1微米至約0.5微米、約1微米至約10微米、約1微米至約9微米、約1微米至約8微米、約1微米至約7微米、約1微米至約6微米、約1微米至約5微米、約1微米至約4微米、約1微米至約3微米、約1微米至約2微米、約2微米至約10微米、約2微米至約9微米、約2微米至約8微米、約2微米至約7微米、約2微米至約6微米、約2微米至約5微米、約2微米至約4微米或約2微米至約3微米。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。在有些實施例中，用於本發明的顆粒可具有約1微米、約2微米、約3微米、約4微米、約5微米、約6微米、約7微米、約8微米、約9微米或約10微米之粒徑。
在一實施例中，該等劑型呈溶液氣溶膠(亦即包含液滴)之形式。通常，液滴具有約10微米或小於10微米之直徑。用於本發明之組合物的液滴可具有以下範圍內之直徑：約0.1微米至約10微米、約0.1微米至約9微米、約0.1微米至約8微米、約0.1微米至約7微米、約0.1微米至約6微米、約0.1微米至約5微米、約0.1微米至約4微米、約0.1微米至約3微米、約0.1微米至約2微米、約0.1微米至約1微米、約0.1微米至約0.5微米、約1微米至約10微米、約1微米至約9微米、約1微米至約8微米、約1微米至約7微米、約1微米 至約6微米、約1微米至約5微米、約1微米至約4微米、約1微米至約3微米、約1微米至約2微米、約2微米至約10微米、約2微米至約9微米、約2微米至約8微米、約2微米至約7微米、約2微米至約6微米、約2微米至約5微米、約2微米至約4微米或約2微米至約3微米。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。在有些實施例中，用於本發明的顆粒及/或液滴可具有約1微米、約2微米、約3微米、約4微米、約5微米、約6微米、約7微米、約8微米、約9微米或約10微米之直徑。
本發明之組合物可經調配以供經腸傳遞，例如可包含一或多層膜衣，包括例如含有一或多種腸溶劑的緩釋型膜衣。緩釋型膜衣通常在胃液中大體穩定且在小腸液中大體不穩定(例如快速溶解或物理上不穩定)，從而使組合物在十二指腸或空腸中大體釋放出胜肽緊密連接促效劑及/或活性劑。
術語"在胃液中穩定"係指組合物在pH值為5或小於5之胃液中或在pH值為5或小於5之模擬胃液中在約六十分鐘內釋放出組合物中之全部胜肽緊密連接促效劑及/或活性劑之30 wt%或30 wt%以下。模擬胃液及模擬腸液之實例包括(但不限於)2005 Pharmacopeia 23NF/28USP之Test Solutions第2858頁中所揭示的彼等物，及/或熟習此項技術者已知的其他模擬胃液及模擬腸液，例如酶不存在下所製備的模擬胃液及/或模擬腸液。
本發明之組合物在pH值為5或小於5之胃液中或在pH值 為5或小於5之模擬胃液中在約六十分鐘內可釋放出組合物中之全部胜肽緊密連接促效劑及/或活性劑之約0 wt%至約30 wt%、約0 wt%至約25 wt%、約0 wt%至約20 wt%、約0 wt%至約15 wt%、約0 wt%至約10 wt%、約5 wt%至約30 wt%、約5 wt%至約25 wt%、約5 wt%至約20 wt%、約5 wt%至約15 wt%、約5 wt%至約10 wt%。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。本發明之組合物在pH值為5或小於5之胃液中或在pH值為5或小於5之模擬胃液中可釋放出組合物中之全部胜肽緊密連接促效劑之約1 wt%、約2 wt%、約3 wt%、約4 wt%、約5 wt%、約6 wt%、約7 wt%、約8 wt%、約9 wt%或約10 wt%。
術語"在腸液中不穩定"係指組合物在腸液或模擬腸液中在約六十分鐘內釋放出組合物中之全部胜肽緊密連接促效劑及/或活性劑之70 wt%或70 wt%以上。術語"在近中性至鹼性環境下不穩定"係指組合物在pH值為5或大於5之腸液中或在pH值為5或大於5之模擬腸液中在約九十分鐘內釋放出組合物中之緊密連接促效劑及/或活性劑之總量之70 wt%或70 wt%以上。舉例而言，在近中性或鹼性環境下不穩定之組合物在具有大於約5之pH值的流體中(例如具有約5至約14、約6至約14、約7至約14、約8至約14、約9至約14、約10至約14或約11至約14之pH值的流體)在約5分鐘至約90分鐘、約10分鐘至約90分鐘、約15分鐘至約90分鐘、約20分鐘至約90分鐘、約25分鐘至約90分鐘、約30分鐘至 約90分鐘、約5分鐘至約60分鐘、約10分鐘至約60分鐘、約15分鐘至約60分鐘、約20分鐘至約60分鐘、約25分鐘至約60分鐘或約30分鐘至約60分鐘內可釋放出70 wt%或70 wt%以上的緊密連接促效劑及/或活性劑。如本文中所使用，用於修飾數值的"約"意謂在該值之10%範圍內。
本發明之組合物可經調配以供經皮傳遞(例如可為經皮傳遞劑型)。該等組合物通常以局部溶液及/或凝膠之形式提供。熟習此項技術者瞭解用於形成局部藥劑的諸多不同方法及裝置，例如以下文獻所揭示之彼等方法及裝置：Block,Medicated Topicals, 於Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第 20版，第44章，Gennaro等人編，Lippincott,Williams and Wilkins Publishing Co.,(2000)。
其他活性劑
除包含一或多種胜肽緊密連接促效劑外，本發明之組合物可進一步包含一或多種其他活性劑，例如治療劑、免疫原性劑及/或成像劑。
可用於本發明之組合物中的其他治療劑包括作用於機體之任何器官(諸如心臟、腦、腸或腎)的藥劑。適當的其他治療劑包括(但不限於)葡萄糖代謝劑(例如胰島素)、抗生素、抗腫瘤劑、抗高血壓劑、抗癲癇劑、中樞神經系統藥劑、消炎劑及免疫系統抑制劑。
可用於本發明之組合物中的其他治療劑包括免疫抑制劑。本發明之方法及組合物中所用的該等免疫抑制劑可為 傾向於減弱體液或細胞免疫系統之活性的任何藥劑。特定而言，在一態樣中，本發明包含組合物，其中免疫抑制劑係選自由以下各者組成之群：環孢菌素A、FK506、潑尼松(prednisone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、沙力度胺(thalidomide)、硫唑嘌呤(azathioprine)及達利珠單抗(daclizumab)、酸漿果紅素B(physalin B)、酸漿果紅素F、酸漿果紅素G、由苦蘵(Physalis angulata L.)純化所得之開環類固醇(secosteroids)、15－去氧斯匹胍素(15－deoxyspergualin)(DSG，15－dos)、MMF、雷帕黴素(rapamycin)及其衍生物、CCI－779、FR 900520、FR 900523、NK86－1086、酯肽黴素(depsidomycin)、康樂黴素－C(kanglemycin－C)、精胍菌素(spergualin)、靈菌紅素25－c(prodigiosin25－c)、康姆黴素(cammunomicin)、德美黴素(demethomycin)、四抗菌素(tetranactin)、曲尼司特(tranilast)、斯特黴素(stevastelins)、多球殼菌素(myriocin)、膠黏毒素(gliooxin)、FR 651814、SDZ214－104、布雷迪寧(bredinin)、WS9482、黴酚酸(mycophenolic acid)、咪嗎立賓(mimoribine)、米索前列醇(misoprostol)、OKT3、抗－IL－2受體抗體、紮斯普寧(azasporine)、來氟米特(leflunomide)、咪唑立賓(mizoribine)、紮斯普胺(azaspirane)(SKF 105685)、紫杉醇(paclitaxel)、六甲蜜胺(altretamine)、白消安(busulfan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、異環磷醯胺(ifosfamide)、氮芥 (mechlorethamine)、美法侖(melphalan)、噻替派(thiotepa)、克拉屈濱(cladribine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟尿苷(floxuridine)、吉西他賓(gemcitabine)、硫鳥嘌呤(thioguanine)、噴司他丁(pentostatin)、甲胺喋呤(methotrexate)、6－巰基嘌呤(6－mercaptopurine)、阿糖胞苷(cytarabine)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈尿黴素(streptozotocin)、卡鉑(carboplatin)、順鉑(cisplatin)、奧賽力鉑(oxaliplatin)、異丙鉑(iproplatin)、四氯環己鉑(tetraplatin)、洛鉑(lobaplatin)、JM216、JM335、氟達拉濱(fludarabine)、胺魯米特(aminoglutethimide)、氟他胺(flutamide)、戈舍瑞林(goserelin)、亮丙立德(leuprolide)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)、乙酸環丙孕酮(cyproterone acetate)、他莫昔芬(tamoxifen)、安美達錠(anastrozole)、比卡魯胺(bicalutamide)、地塞米松(dexamethasone)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、博萊黴素(bleomycin)、更生黴素(dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、羥道諾紅黴素(doxirubicin)、伊達比星(idarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、洛索蒽醌(losoxantrone)、絲裂黴素－c(mitomycin－c)、普卡黴素(plicamycin)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他賽(docetaxel)、拓朴替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、9－胺基喜樹鹼(9－amino camptothecan)、9－硝基喜樹鹼、GS－211、依託泊苷(etoposide)、替尼泊甙(teniposide)、長春鹼 (vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春瑞賓(vinorelbine)、丙卡巴肼(procarbazine)、天門冬醯胺酶(asparaginase)、培門冬酶(pegaspargase)、奧曲肽(octreotide)、雌莫司汀(estramustine)及羥基脲(hydroxyurea)，及其組合。在一更特定之態樣中，免疫抑制劑為環孢菌素A。
此外，其他治療劑可選自由以下各者組成之群：化學治療劑、基因治療載體、生長因子、造影劑、血管生成因子、放射性核素、抗感染劑、抗腫瘤化合物、受體結合劑、激素、類固醇、蛋白質、錯合劑、聚合物、凝血抑制劑、抗凝血劑、組織纖維蛋白溶酶原活化劑、血栓溶解劑、纖維蛋白溶解劑、血管痙攣抑制劑、鈣離子通道阻斷劑、硝酸鹽、氧化氮促進劑、血管擴張劑、抗高血壓劑、抗微生物劑、抗生素、醣蛋白IIb/IIIa抑制劑、表面醣蛋白受體抑制劑、抗血小板劑、抗有絲分裂劑、微管抑制劑、類視色素、抗分泌劑、肌動蛋白抑制劑、重塑抑制劑、反義核苷酸、分子遺傳介入劑、抗代謝物、抗增殖劑、抗癌劑、地塞米松衍生物、消炎類固醇、非類固醇消炎劑、免疫抑制劑、PDGF拮抗劑、生長激素拮抗劑、生長因子抗體、抗生長因子抗體、生長因子拮抗劑、多巴胺促效劑、放射冶療劑、含碘化合物、含鋇化合物、起造影劑作用之重金屬、胜肽、蛋白質、酶、細胞外基質組分、細胞組分、血管緊張素轉化酶抑制劑、21－胺基類固醇、自由基清除劑、鐵螯合劑、抗氧化劑、性激素、抗聚合酶、抗病 毒劑、對抗銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A且可與A431表皮樣癌細胞反應的IgG2抗體、對抗與沙泊寧(saporin)結合之去甲腎上腺素能酶多巴胺β－羥化酶的單株抗體或靶向治療劑的其他抗體、基因治療劑、前藥、光動力治療劑及用於治療良性前列腺肥大(BHP)之藥劑、上述任意者之14 C放射性標記形式、3 H放射性標記形式、131 I放射性標記形式、32 P放射性標記形式或36 S放射性標記形式或其他放射性標記形式，及其組合。
更特定而言，其他治療劑可選自由以下各者組成之群：甲狀旁腺激素、肝素、人類生長激素、共價肝素、水蛭素(hirudin)、水蛭肽(hirulog)、阿加曲班(argatroban)、D－苯丙胺醯基－L－聚－L－精胺醯基氯甲基酮、尿激酶、鏈激酶、氧化氮、噻氯匹定(triclopidine)、阿司匹林(aspirin)、秋水仙鹼(colchicine)、二甲亞碸、細胞鬆弛素(cytochalasin)、去氧核糖核酸、甲胺喋呤、檸檬酸它莫西芬(tamoxifen citrate)、地塞米松(dexamethasone)、地塞米松磷酸鈉(dexamethasone sodium phosphate)、醋酸地塞米松(dexamethasone acetate)、環孢菌素、曲匹達(trapidal)、血管抑肽(angiopeptin)、血管生長素、多巴胺、60 Co、192 Ir、32 P、111 In、90 Y、99m Tc、甲磺酸培高利特(pergolide mesylate)、甲磺酸溴麥角環肽(bromocriptine mesylate)、金、鉭、鉑、鎢、卡托普利(captopril)、依那普利(enalapril)、抗環血酸、α－生育酚、超氧化物歧化酶、去鐵胺(deferoxamine)、雌激素、疊氮胸苷(azidothymidine) (AZT)、阿昔洛韋(acyclovir)、泛昔洛韋(famciclovir)、鹽酸金剛乙胺(rimantadine hydrochloride)、更昔洛韋鈉(ganciclovir sodium)、5－胺基乙醯丙酸(5－aminolevulinic acid)、四間羥基苯基二氫卟酚(meta－tetrahydroxyphenylchlorin)、十六氟鋅酞菁(hexadecafluoro zinc phthalocyanine)、四甲基血卟啉(tetramethyl hematoporphyrin)及若丹明123(rhodamine 123)，及其組合。
本發明之組合物可包含一或多種免疫原性劑，例如抗原。可用於本發明之組合物(例如免疫原性及/或疫苗組合物)中之抗原之實例包括胜肽、蛋白質、微生物(例如減毒微生物及/或重組微生物)、細胞(例如癌細胞及/或重組細胞)及病毒(例如減毒病毒及/或重組病毒)。胜肽抗原之實例包括腸產毒性大腸桿菌 之熱不穩定腸毒素之B亞單元、霍亂毒素之B亞單元、腸病原體之莢膜抗原、腸病原體之纖毛或菌毛、HIV表面抗原、癌症抗原(例如包含抗原、經分離之抗原等的癌細胞)、粉塵過敏原及蜱蟎過敏原。亦可使用此項技術中已知的其他免疫原性化合物。
可用於本發明之組合物(疫苗組合物)中之減毒微生物及減毒病毒之實例包括腸產毒性大腸桿菌 、腸病原性大腸桿菌 、霍亂弧菌 、弗氏志賀菌 (Shigella flexneri )、傷寒沙門氏菌 (Salmonella typhi )及輪狀病毒 (rotavirus)之彼等物(Fasano等人，於：Le Vaccinazioni in Pediatria,Vierucci等人編，CSH,Milan,pages 109－121(1991)；Guandalini等 人，於：Management of Digestive and Liver Disorders in Infants and Children,Elsevior,Butz等人編，Amsterdam,Chapter 25(1993)；Levine等人，Sem.Ped.Infect.Dis.,5.243－250(1994)；及Kaper等人，Clin.Micrbiol.Rev.,8：48－86(1995)，該等文獻各自以引用方式全文併入本文中)。
能夠誘導保護性免疫反應的任何抗原可用於本發明之疫苗組合物中。適當抗原之實例包括(但不限於)麻疹病毒抗原、腮腺炎病毒抗原、風疹病毒抗原、白喉棒狀桿菌 (Corynebacterium diphtheriae )抗原、百日咳桿菌 (Bordetella pertussis )抗原、破傷風梭菌 (Clostridium tetani )抗原、炭疽桿菌 (Bacillus anthracis )抗原、流感嗜血桿菌 (Haemophilus influenzae )抗原、天花病毒抗原及流感病毒抗原。
本發明之組合物可進一步包含一或多種蛋白酶抑制劑。可使用任何蛋白酶抑制劑，包括但不限於蛋白酶抑制劑、胜肽酶抑制劑、內胜肽酶抑制劑或外胜肽酶抑制劑。亦可使用抑制劑之混合物。或者，蛋白酶抑制劑可選自由以下各者組成之群：貝他定(bestatin)、L－反－3－羧基氧－2－羰基－L－白胺醯基胍丁胺、乙二胺四乙酸(EDTA)、苯基甲基磺醯氟(PMSF)、抑肽酶(aprotinin)、類澱粉蛋白前驅物(APP)、類澱粉β前驅蛋白、α1－蛋白酶抑制劑、膠原VI、牛胰腺胰蛋白酶抑制劑(BPTI)、4－(2－胺基乙基)－苯磺醯氟(AEBSF)、抗痛素(antipain)、苯甲脒、抑糜蛋白酶素 (chymostatin)、ε－胺基己酸酯、N－乙基順丁烯二醯亞胺、亮抑蛋白酶肽(leupeptin)、胃酶抑素A(pepstatin A)、磷醯胺素(phosphoramidon)，及其組合。亦可使用新穎蛋白酶抑制劑。實際上，蛋白酶抑制劑可經特別設計或選擇以減少緊密連接促效劑及/或治療劑之蛋白水解作用。
本發明之組合物亦可包含一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。適當賦形劑包括(但不限於)緩衝劑、緩衝鹽、增積劑、鹽、表面活性劑、酸、鹼、糖、黏合劑及其類似物。
治療方法
本發明之胜肽緊密連接促效劑及醫藥組合物可用於治療、改善及/或預防疾病。可藉由選擇適當活性劑(例如治療劑及/或免疫原性劑)，使用本發明之組合物治療任何疾病。在一實施例中，本發明提供一種藉由投與包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及一或多種胰島素及/或其衍生物的組合物來治療個體(例如哺乳動物，諸如人類)之糖尿病反應的方法。在另一實施例中，本發明提供一種藉由投與包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及一或多種免疫抑制性藥物(可包括例如環孢菌素A)的組合物來抑制個體之過度或非所要免疫反應的方法。
可使用本發明之組合物治療之疾病之實例包括(但不限於)癌症、自體免疫疾病、血管病、細菌感染、胃炎、胃癌、膠原性結腸炎、炎症性腸病、骨質疏鬆症、全身性紅斑狼瘡、食物過敏、哮喘及大腸急躁症。舉例而言，為治療炎症性腸病，可將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑之 組合物投與有此需要之個體(例如哺乳動物，諸如人類)。
在另一實例中，為治療結腸或直腸區域之癌症，可將包含治療有效量之Erbitux(西妥昔單抗(Cetuximab))以及吸收強化量之一或多種胜肽緊密連接促效劑的組合物投與有此需要之個體(例如哺乳動物，諸如人類)。在另一實例中，為治療乳癌，可將包含治療有效量之Herceptin(曲妥珠單抗(Trastuzumab))以及吸收強化量之一或多種胜肽緊密連接促效劑的組合物投與有此需要之個體(例如哺乳動物，諸如人類)。在另一實例中，為治療各類癌症，可將包含治療有效量之Avastin(貝伐單抗(Bevacizumab))以及吸收強化量之一或多種胜肽緊密連接促效劑的組合物投與有此需要之個體(例如哺乳動物，諸如人類)。另一實例包括藉由將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及治療有效量之Fosamax(阿侖膦酸鹽(Alendronate))的組合物投與有此需要之個體來治療骨質疏鬆症。另一實例包括藉由將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及治療有效量之環孢菌素A的組合物投與有此需要之個體來治療移植物排斥反應。另一實例包括藉由將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及治療有效量之促紅細胞生成素的組合物投與有此需要之個體來治療貧血。另一實例包括藉由將包含一或多種胜肽緊密連接促效劑以及治療有效量之凝血因子VIII的組合物投與有此需要之個體來治療血友病。
在有些實施例中，本發明之組合物(例如醫藥組合物)可在延長時期內重複給與，亦即可長期投與。通常，組合物 可以適於預防、降低潛伏疾病病狀(例如糖尿病、癌症、移植物排斥反應等)發作之可能性或降低潛伏疾病病狀(例如糖尿病、癌症、移植物排斥反應等)發作之嚴重程度之量每天投與一或多次。該等組合物可長期(例如，多日)每日投與一或多次。
在有些實施例中，本發明之組合物(例如醫藥組合物)可用於治療潛伏疾病(例如糖尿病、癌症、移植物排斥反應等)之急性發作。通常，此類實施例需要將本發明之組合物以適於減輕疾病發作之嚴重程度的量投與經歷疾病發作的個體。可使用一或多種投藥法。
在有些實施例中，本發明之胜肽緊密連接促效劑可用於製備上述方法中使用的組合物及醫藥組合物。
以下實例僅為說明目的而提供，且決非意欲限定本發明之範疇。
實例 實例1
量測跨上皮電阻(TEER)及螢光標記螢光黃之上皮通量
CaCo2細胞形成在相鄰細胞之間呈現緊密連接的單層。緊密連接促效劑可藉由其提高化合物(例如離子、螢光黃)通過包含緊密連接之細胞單層的能力加以鑑別；或藉由其減小橫越包含緊密連接之細胞單層之TEER的能力加以鑑別。用胜肽FCIGRL(SEQ ID NO：1)處理CaCo2單層使螢光黃通過CaCo2單層之通透性與單獨媒劑相比增強51倍。此外，圖7展示在螢光黃(LY)通透性檢定中，SEQ ID NO：2 之緊密連接促效劑之劑量反應曲線。
用胜肽FCIGRL處理CaCo2單層使得橫越CaCo2單層之TEER與單獨媒劑相比減小16倍。
可使用以下方法鑑別並測試緊密連接促效劑：
測定TEER及螢光黃通量
藉由獲得1 L瓶之HBSS(移除10 ml HBSS且將其用10 ml HEPES緩衝劑(pH 7.0)置換)來製備經修改之漢氏(Hank)平衡鹽溶液(MHBSS)。使用濃NaOH(10 N)將pH值調整至7.4±0.1。
將CaCo－2細胞自恆溫箱中移除，使其生長於12孔、3.0 μM聚碳酸酯Transwell濾膜(Corning)上且記錄接種繼代數#、細胞接種日期及日齡。
自頂端(AP)與底外側(BL)代謝區吸出細胞培養基，分別用0.5 ml MHBSS及1.5 ml MHBSS置換。將細胞在37℃下培育30分鐘。
使用MilliCell－ERS儀器(Millipore)量測且記錄橫越各濾膜的跨上皮電阻(TEER)並記錄。
自各濾膜(每種狀況下，n＝3)之頂端代謝區吸出溶液，且用0.5 ml含有螢光黃及測試化合物(若適當)的對照及測試溶液置換。
將所有培養盤在設定於37℃(±0.2)、50 RPM(±5)的恆溫箱中置放總共180分鐘。
在t＝30、60、120及180分鐘時，使用MilliCell－ERS儀器量測且記錄橫越各濾膜的跨上皮電阻(TEER)。
在t＝60、120及180分鐘時，自各底外側代謝區移除100 μl溶液且將其置於96孔盤中供螢光黃分析，用100 μl MHBSS置換。
在以下稀釋濃度(7500 μM、3750 μM、750 μM、375 μM、75 μM、37.5 μM、7.5 μM、3.75 μM、0.75 μM)下形成螢光黃標準曲線且各吸移100 μL至96孔盤中(除外上述前三種標準濃度(其需要1：10稀釋後再移入96孔盤中))。
收穫殘餘起始溶液及各頂端代謝區中之殘餘物，將其置於1.5 ml小瓶中。在－20℃下冷凍以供將來分析用。
使用Magellan，在485及535 nm下，以Tecan Spectra Fluor Plus分析各96孔盤。
材料：
細胞：使繼代40－60次的CaCo－2細胞在Transwell盤上生長21－28天
培養基：補充有10%胎牛血清、1% NEAA、1% Penn/Strep的DMEM
緩衝劑：無鈣及鎂之漢氏平衡鹽溶液(HBSS)
燒瓶：100×20 mm組織培養碟Falcon
培養盤：12孔聚碳酸酯Transwell濾膜；0.3 μM孔徑。
實例2
使用即時細胞電子感測術(RT－CES)鑑別緊密連接促效劑
IEC6細胞形成在相鄰細胞之間呈現緊密連接的單層。緊密連接促效劑可藉由其誘導包含緊密連接之細胞單層中之細胞形態發生變化的能力加以鑑別。IEC6細胞形態之該等 變化可使用如下所述的即時細胞電子感測方案加以量測。
緊密連接促效劑可使用以下方法鑑別：
材料：細胞：繼代30－5次之IEC6；培養基：無鈣無鎂之10% DMEM，每ml牛胰島素0.1單位的胎牛血清；緩衝劑：無鈣無鎂的磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)；胰蛋白酶：於無鈣無鎂之HBSS中的0.25%豬胰蛋白酶；燒瓶：100×20 mm組織培養碟Falcon；培養盤：16x E－盤；儀器：RT－CESTM 16x系統(ACEA Biosciences,Inc.,San Diego,California)
用25 ml PBS將長滿IEC6細胞之75 cm2 燒瓶洗滌兩次。
向燒瓶中添加2.5 ml胰蛋白酶且放回於37℃之恆溫箱內。
用含有培養基之10 ml血清洗滌燒瓶表面之細胞以中止胰蛋白酶。
藉由以1500 rpm離心5分鐘使細胞成團，吸出培養基。
將細胞團再懸浮於10 ml不含血清的培養基中且以1500 rpm離心5分鐘，吸出培養基且反覆洗滌共5次。
取100 μl細胞且將其與100 μl錐蟲藍(trypan blue)混合。
將細胞計數四次且使用平均細胞濃度。
將細胞稀釋至每ml無血清培養基中1×106 個細胞。
將100 μl無血清培養基添加至待使用之ACEA盤之各孔中。
將ACEA盤插入且按下掃描。
運作程式之步驟1以量測本底。
將50 μl細胞添加至ACEA盤之各孔中，將盤之每側輕拍10次且將細胞於實驗台上置放15分鐘以使細胞沈澱。
將ACEA盤插入且運作掃描步驟以檢查連接，且運作步驟2－1及2－2隔夜。
步驟2－1每2分鐘抽樣30次。
步驟2－2每15分鐘抽樣100次。
隔夜運作之後，細胞指數應在6－10之間，且應達到平穩階段。
自各孔小心移除100 μl培養基。
補充待測試之化合物，以使得50 μl溶液含有2倍所要最後濃度的化合物。
將50 μl化合物添加至指定孔中。
掃描盤以檢查連接。
運作步驟3－1及3－2。
步驟3－1每2分鐘抽樣30次。
步驟3－2每15分鐘抽樣100次。
圖2展示指定緊密連接促效劑之ACEA數據對比。
實例3
緊密連接促效劑誘導之細胞骨架重排檢定
經肽酶胃蛋白酶及胰蛋白酶處理的麥膠蛋白(稱為PT－麥膠蛋白或PTG)誘導單層生長之CaCo2細胞中的細胞骨架排列。此重排可使用Nikon－TE2000落謝螢光顯微鏡及40倍物鏡及特異性結合F－肌動蛋白的Alexa Fluor 555結合毒傘素(Invitrogen,Carlsbad,CA)顯現。對照之暴露時間與經促效 劑處理樣本之暴露時間相同。圖式係使用Adobe Photoshop CS2 v 9.0.2產生。促效劑濃度如所指示。如藉由胜肽FCIGRL(一種已知的緊密連接促效劑)之作用所證明，緊密連接促效劑可藉由其誘導細胞骨架重排之能力加以鑑別。圖3－6及8－11展示由本發明之示範性緊密連接促效劑所誘導的細胞骨架重排(包括關於F－肌動蛋白及緊密連接蛋白ZO－1之分布)。
其他結果提供於下表中。表之第一行提供胜肽之SEQ ID NO：，第二行提供所測試之胜肽之序列，第三行提供指定檢定(亦即ACEA、TEER減小或螢光黃通量)之結果。
在下表中，＋指示觀測到緊密連接之通透性增強，且－指示未觀測到通透性增強。
本說明書中所提及之全部公開案、專利及專利申請案代 表熟習本發明相關技術者之技能水準，且以引用方式併入本文中，其併入程度如同各個別公開案、專利或專利申請案經特別且單獨指示以引用方式併入一般。
圖1為展示固相合成本發明之示範性緊密連接促效劑所包括之步驟的示意圖。
圖2為展示即時細胞電子感測檢定之結果的條形圖，其比較各種本發明之化合物與已知緊密連接促效劑胜肽FCIGRL(SEQ ID NO：1)之活性。
圖3為緊密連接促效劑FCIGRL(SEQ ID NO：1)對以單層生長且F－肌動蛋白(F－actin)經染色之IEC6細胞之作用的螢光顯微分析。
圖4為PT－麥膠蛋白(PT－gliadin)、緊密連接促效劑FCIGRL(SEQ ID NO：1)及不同劑量之緊密連接促效劑FCIGR對以單層生長且F－肌動蛋白經染色之IEC6細胞之作用的螢光顯微分析。
圖5為緊密連接促效劑FCIGRL(SEQ ID NO：1)對以單層生長且緊密連接蛋白ZO－1經染色之CaCo－2細胞之作用的螢光顯微分析。使細胞在6孔過濾器中生長21天且用連接促效劑(頂端及基底外側)處理3小時。
圖6為緊密連接促效劑FCIGR對以單層生長且緊密連接蛋白ZO－1經染色之CaCo－2細胞之作用的螢光顯微分析。
圖7為如實例1中所述之螢光黃(LY)通透性檢定中之SEQ ID NO：2之緊密連接促效劑的劑量反應曲線。
圖8為比較緊密連接促效劑FCIGRL(SEQ ID NO：1)與F－(烯丙基)GIGRL(SEQ ID NO：2)對以單層生長且緊密連接蛋白ZO－1經染色之CaCo－2細胞之作用的螢光顯微分析。使細胞在6孔過濾器中生長21天且用連接促效劑(頂端及基底外側)處理3小時。
圖9為展示F－(烯丙基)GIGRL(SEQ ID NO：2)對ZO－1在以單層生長之CaCo－2 BBE(刷狀緣表現)細胞中之再分布之劑量反應的螢光顯微分析。
圖10為展示15分鐘及60分鐘之後，FCIGRL(SEQ ID NO：1)與F－(烯丙基)GIGRL(SEQ ID NO：2)對海拉細胞中肌動蛋白重排之作用的螢光顯微分析。
圖11為圖10中之60分鐘圖之放大版，其展示在緊密連接促效劑FCIGRL(SEQ ID NO：1)及F－(烯丙基)GIGRL(SEQ ID NO：2)存在下肌動蛋白細胞骨架重排至細胞之界線。
<110> 美商艾爾巴治療股份有限公司<120> 增進緊密連接通透性的新穎胜肽<130> ALBA－001/04TW <140> 07128712 <141> 2008－07－29 <15０> US 60/952,144 <151> 2007－07－26 <150> US 60/953,398 <151> 2007－08－01 <150> US 60/953,403 <151> 2007－08－01 <150> US 60/953,405 <151> 2007－08－01 <160> 274 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 1<210> 2 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－OH部分修飾<400> 2<210> 3 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 3<210> 4 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為D－烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 4<210> 5 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> 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胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 33<210> 34 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 34<210> 35 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 35<210> 36 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 36<210> 37 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 37<210> 38 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> 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胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 66<210> 67 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 67<210> 68 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 68<210> 69 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 69<210> 70 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 70<210> 71 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 71<210> 72 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 72<210> 73 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> His經C末端－NH2部分修飾<400> 73<210> 74 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> mise_feature <222> (6)..(6) <223> Asp經C末端－NH2部分修飾<400> 74<210> 75 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 75<210> 76 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Phe經C末端－NH2部分修飾<400> 76<210> 77 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Ala經C末端－NH2部分修飾<400> 77<210> 78 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Gly經C末端－NH2部分修飾<400> 78<210> 79 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Gln經C末端－NH2部分修飾<400> 79<210> 80 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Glu經C末端－NH2部分修飾<400> 80<210> 81 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Thr經C末端－NH2部分修飾<400> 81<210> 82 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Tyr經C末端－NH2部分修飾<400> 82<210> 83 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Ser經C末端－NH2部分修飾<400> 83<210> 84 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Asn經C末端－NH2部分修飾<400> 84<210> 85 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Met經C末端－NH2部分修飾<400> 85<210> 86 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Lys經C末端－NH2部分修飾<400> 86<210> 87 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Ile經C末端－NH2部分修飾<400> 87<210> 88 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Trp經C末端－NH2部分修飾<400> 88<210> 89 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Pro經C末端－NH2部分修飾<400> 89<210> 90 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為烯丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Val經C末端－NH2部分修飾<400> 90<210> 91 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 91<210> 92 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 92<210> 93 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 93<210> 94 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 94<210> 95 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 95<210> 96 <211> 7 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 96<210> 97 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 97<210> 98 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 98<210> 99 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 99<210> 100 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 100<210> 101 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 101<210> 102 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 102<210> 103 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 103<210> 104 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 104<210> 105 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 105<210> 106 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 106<210> 107 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 107<210> 108 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 108<210> 109 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 109<210> 110 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 110<210> 111 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 111<210> 112 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 112<210> 113 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 113<210> 114 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 114<210> 115 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 115<210> 116 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Phe經C末端－NH2部分修飾<400> 116<210> 117 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 117<210> 118 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－(2－吡啶基)－丙胺酸<400> 118<210> 119 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑 <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<400> 119<210> 120 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－α－胺基丁酸<400> 120<210> 121 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－甲硫胺酸－亞碸<400> 121<210> 122 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－甲硫胺酸－碸<400> 122<210> 123 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <400> 123<210> 124 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為正纈胺酸<400> 124<210> 125 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－正白胺酸<400> 125<210> 126 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸 <400> 126<210> 127 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<400> 127<210> 128 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<400> 128<210> 129 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<400> 129<210> 130 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－S－苄基－半胱胺酸<400> 130<210> 131 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－S－第三丁基硫基－半胱胺酸<400> 131<210> 132 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－苯基甘胺酸<400> 132<210> 133 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Val<400> 133<210> 134 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－環己基－丙胺酸<400> 134<210> 135 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－第三丁基甘胺酸<400> 135<210> 136 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－1,4－二胺基丁酸<400> 136<210> 137 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－(R,S)－3,4－順－甲醇基脯胺酸<400> 137<210> 138 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－1,3－二胺基丙酸<400> 138<210> 139 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－S－乙醯胺基甲基－青黴胺<400> 139<210> 140 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高半胱胺酸<400> 140<210> 141 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－(2－吡啶基)－丙胺酸<400> 141<210> 142 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 142<210> 143 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 143<210> 144 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Phe經C末端－NH2部分修飾<400> 144<210> 145 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> miac_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－α－胺基丁酸(二聚物)<400> 145<210> 146 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為去氫白胺酸或L－4,5－去氫白胺酸<400> 146<210> 147 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 147<210> 148 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> May be D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 148<210> 149 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 149<210> 150 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高絲胺酸<220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <400> 150<210> 151 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－4－氰基－苯丙胺酸<400> 151<210> 152 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－3－甲基－苯丙胺酸<400> 152<210> 153 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－環丙基－丙胺酸<400> 153<210> 154 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－炔丙基甘胺酸<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 154<210> 155 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－(2－呋喃基)－丙胺酸<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 155<210> 156 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為1,2,3,4－四氫哈爾滿鹼－3－甲酸<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Arg經C末端－NH2部分修飾<400> 156<210> 157 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－苯乙烯基－丙胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 157<210> 158 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223>胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為高瓜胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 158<210> 159 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為1,2,3,4－四氫哈爾滿鹼－3－甲酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 159<210> 160 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa為L－β－(2－呋喃基)－丙胺酸<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 160<210> 161 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 161<210> 162 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 162<210> 163 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 163<210> 164 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 164<210> 165 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 165<210> 166 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 166<210> 167 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 167<210> 168 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 168<210> 169 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 169<210> 170 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 170<210> 171 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 171<210> 172 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 172<210> 173 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Ala <400> 173<210> 174 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 174<210> 175 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 175<210> 176 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <400> 176<210> 177 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 177<210> 178 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 178<210> 179 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 179<210> 180 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Ala <400> 180<210> 181 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 181<210> 182 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Gly經C末端－NH2部分修飾<400> 182<210> 183 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 183<210> 184 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 184<210> 185 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 185<210> 186 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 186<210> 187 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 187<210> 188 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 188<210> 189 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 189<210> 190 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 190<210> 191 <211> 7 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 191<210> 192 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 192<210> 193 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 193<210> 194 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 194<210> 195 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 195<210> 196 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 196<210> 197 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Ala經乙醯化<400> 197<210> 198 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 198<210> 199 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Ala經乙醯化<400> 199<210> 200 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Ala經乙醯化<400> 200<210> 201 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<400> 201<210> 202 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 202<210> 203 <211> 4 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 203<210> 204 <211> 4 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 204<210> 205 <211> 7 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 205<210> 206 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 206<210> 207 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 207<210> 208 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 208<210> 209 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Phe經乙醯化<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Leu經C末端－NH2部分修飾<400> 209<210> 210 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 210<210> 211 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為肌胺酸<400> 211<210> 212 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－β－環丙基－丙胺酸<400> 212<210> 213 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為α－胺基異丁酸<400> 213<210> 214 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－第三丁基甘胺酸<400> 214<210> 215 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為正纈胺酸<400> 215<210> 216 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為高絲胺酸<400> 216<210> 217 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為正纈胺酸<400> 217<210> 218 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為β－丙胺酸<400> 218<210> 219 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－第三白胺酸<400> 219<210> 220 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－N－甲基－丙胺酸<400> 220<210> 221 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－α－胺基丁酸<400> 221<210> 222 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為α－胺基異丁酸<400> 222<210> 223 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－β－環丙基－丙胺酸<400> 223<210> 224 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－α－胺基丁酸<400> 224<210> 225 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為Orn <400> 225<210> 226 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa為瓜胺酸<400> 226<210> 227 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－4－硝基－苯丙胺酸<400> 227<210> 228 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－4－氯苯丙胺酸<400> 228<210> 229 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－4－氯苯丙胺酸<400> 229<210> 230 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－4－硝基－苯丙胺酸<400> 230<210> 231 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為1,2,3,4－四氫異喹啉－3－甲酸<400> 231<210> 232 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> Xaa為N－甲基化異白胺酸<400> 232<210> 233 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－β－(2－噻吩基)－丙胺酸<400> 233<210> 234 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa為L－β－(2－噻吩基)－丙胺酸<400> 234<210> 235 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為L－1,2,3,4－四氫異喹啉－3－甲酸<400> 235<210> 236 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 236<210> 237 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 237<210> 238 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 238<210> 239 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 239<210> 240 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 240<210> 241 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 241<210> 242 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 242<210> 243 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 243<210> 244 <211> 4 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 244<210> 245 <211> 5 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 245<210> 246 <211> 4 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 246<210> 247 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <400> 247<210> 248 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <400> 248<210> 249 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <400> 249<210> 250 <211> 6 <212> PRT <213> 未知 <220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <400> 250<210> 251 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa為D－Leu <400> 251<210> 252 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 252<210> 253 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <400> 253<210> 254 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 254<210> 255 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 255<210> 256 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 256<210> 257 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 257<210> 258 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<400> 258<210> 259 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <400> 259<210> 260 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <400> 260<210> 261 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> 可為D－Ile <400> 261<210> 262 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <400> 262<210> 263 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 263<210> 264 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Leu <400> 264<210> 265 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <400> 265<210> 266 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Leu <400> 266<210> 267 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Leu <400> 267<210> 268 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Phe <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (6).(6) <223> 可為D－Leu <400> 268<210> 269 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> 可為D－Ile <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Leu <400> 269<210> 270 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Cys <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Arg <400> 270<210> 271 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <400> 271 <210> 272 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <400> 272<210> 273 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> 可為D－Phe <400> 273<210> 274 <211> 6 <212> PRT <213> 未知<220> <223> 胜肽緊密連接促效劑<220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> 可為D－Leu <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> 可為D－Arg <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> 可為D－Cys <400> 274
(無元件符號說明)

Claims (9)

  1. 一種包含SEQ ID NO：1之胺基酸序列的胜肽緊密連接促效劑，其限制條件為該胺基酸序列相對於SEQ ID NO：1具有2或3個胺基酸取代，其中：對應於SEQ ID NO：1之位置1的位置為Phe，對應於SEQ ID NO：1之位置2的位置為烯丙基Gly(AllylGly)，且該促效劑具有自6至10個胺基酸之長度。
  2. 如請求項1之緊密連接促效劑，其中該緊密連接促效劑具有一末端鹼性基團。
  3. 如請求項2之緊密連接促效劑，其中該鹼性基團為胺。
  4. 如請求項1之胜肽緊密連接促效劑，其中該胜肽包含選自由SEQ ID NO：23、25、26、27、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、42、45、46、47、48、52、53、56、59、62及70組成之群的胺基酸序列。
  5. 一種胜肽緊密連接促效劑，其包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列。
  6. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至5中任一項之胜肽緊密連接促效劑及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
  7. 如請求項6之醫藥組合物，其進一步包含至少一種額外活性劑。
  8. 如請求項7之醫藥組合物，其中該額外活性劑係選自由以下各者組成之群：治療劑、成像劑及免疫原性劑。
  9. 如請求項8之醫藥組合物，其中該組合物經調配為經腸遞送。
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