TWI419694B - 利用ｊｕｎ ｎ-端激酶抑制劑以治療青光眼 - Google Patents

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Description

利用JUN N－端激酶抑制劑以治療青光眼 發明背景
本申請案是2005年10月26日提申的序列號碼11/259,566之部分延續申請案，其主張2004年10月29日提申的美國申請案序列號碼60/623,755之優先權。
發明領域
本發明大體而言有關青光眼的領域以及，更特別地，有關JunN－端激酶(JNK)的抑制劑對罹患青光眼的病人降低眼內壓且提供神經保護之用途。
 相關技藝的描述
許多眼睛上病理的變化，譬如：青光眼、急性缺血性視神經病變、黃斑退化、視網膜色素變性、視網膜剝離、視網膜裂孔(tear)或裂孔(hole)，以及其他的缺血性視網膜疾病或視神經病變，造成視網膜神經元的受傷或死亡，其導致視力的喪失。舉例而言，原發性隅角開放型青光眼(POAG)是一種進行性的疾病，其導致視神經損傷以及最終地盲目。此疾病的原因已經是許多年廣大研究的主題，但是仍然未被完全瞭解。青光眼導致視網膜和視神經的神經元退化。即使在最佳的醫療照顧和外科治療下，其仍然相關於視網膜神經節細胞(RGC)的逐步喪失，其造成視覺功能的衰退(Van Buskirk等人(1993)；Schumer等人(1994))。
眼內壓(IOP)不正常的增加是青光眼的一個主要危險因子。目前，青光眼唯一可利用的治療是藉由藥物或手術去降低IOP。降低IOP在延緩POAG的發展和延遲其損害效力是有效的。但是，青光眼病人視野的喪失並不總是相關聯於IOP，以及單獨降低IOP不完全地阻止疾病進程。
沒有一個機轉似乎單獨地足以解釋通常於青光眼病人體內觀察到的廣泛的病理上的變化之範圍與型態。可能青光眼涉及多於一種病因學以及不同的機轉係顯露於不同的病人及/或疾病不同的階段。較重要的提議之一些是：神經滋養因子的剝奪、血管的不正常(局部缺血)，以及穀胺酸毒性。此等機轉最終導致RGC的凋亡(apoptosis)(Clark & Pang(2002))。
相同的機轉已經被提議涉及於其他的眼睛疾病。舉例而言，神經滋養因子的降低係相關於視網膜色素變性的大鼠模型(Amendola等人(2003))。某些神經滋養因子的導入至視網膜能降低有關視網膜色素變性之視網膜(Tao等人(2002))，視網膜剝離(Hisatomi等人,(2002)；Lewis等人(1999))，以及實驗性黃斑退化(Yamada等人(2001))的損害。視網膜的局部缺血係涉及急性缺血性視神經病變、黃斑退化(Harris等人(1999))，以及其他的缺血性視網膜疾病或者視神經病變。同樣地，穀胺酸毒性可以促成視網膜剝離中所見的視網膜的損害(Sherry & Townes－Anderson(2000))。
美國專利申請案案號US2005/0069893說明JNK基因表現的測量作為診斷青光眼的一種方法，但是未討論JNK的抑制劑對一個罹患青光眼的病人降低眼內壓或提供神經保護之用途。
目前，沒有青光眼的療法尋求要中斷眼睛的組織於疾病進程中被損壞的機轉。而且，縱然各種的治療劑已經被提議為具有降低高眼壓的能力，許多此等製劑具有可以使得其等做為眼睛的治療劑非所欲的之相關的副作用。需要的是一種青光眼治療，其對付潛在的疾病之病理上的原因以及藉此提供IOP的下降和神經保護而不導致典型地相關於用來降低IOP的製劑之非所欲的副作用。
 發明概要
本發明克服先前技藝的此等和其他的缺點，其係藉由提供用於對罹患青光眼的病人降低高眼壓症和提供神經保護之組成物和方法。該等組成物和方法包含至少一種JNK抑制劑以降低IOP以及提供神經保護。
圖式簡單說明
下列的圖示形成本說明書的一部份以及被包括以進一步展示本發明的某些態樣。本發明可以藉由參照此等圖示結合於此出現的特定的實施例之詳細說明而更被瞭解。
第1圖：SP600125對於來自經培養的人類小樑網(GTM－3)細胞的上清液中之TGFβ2－刺激的(24 h)纖維網蛋白位準的上升之劑量依隨效應；第2圖：對於一種選擇性、細胞－可滲透的呔抑制劑(JNKi－III；Calbiochem cat.# 420130)之反應相對於一種細胞－可滲透陰性的(拼湊的序列(scrambled sequence))對照呔(Calbiochem,cat.# 420131)之反應。二種製劑均被測試對於來自經培養的人類小樑網(GTM－3)細胞的上清液中之TGFβ2－刺激的(24 h)纖維網蛋白位準的上升之效應；第3圖：帶有或不帶有滋養因子、帶有或不帶有穀胺酸(100 μM)之SP600125對於大鼠RGC存活之效應。該等細胞係以各別的條件予以培養歷時3天。存活係藉由計數全部的Thy－1陽性的健康細胞而定量；第4圖：SP600125對於局部缺血/再灌流－誘導的視神經病變之效應。1的視神經損傷得分表示無損害，以及5的得分表示完全的損害。＊ ：藉由獨立t檢定(Student T－Test)，相對於載體處理組，p<0.05；第5圖：SP600125對於經培養的成年大鼠RGC的存活之效應。該等細胞係以穀胺酸(100 μM)、帶有或不帶有SP600125予以處理歷時3天；第6圖：SP600125對於經培養的成年大鼠RGC的存活之效應。除了對照之外，經選擇的滋養因子(bFGF,BDNF,CNTF)自全部的井中予以移除。該等細胞係以指出的濃度之SP600125予以處理歷時3天。(TF＝滋養因子)。
 較佳實施例的詳細說明
本發明係針對用於對罹患青光眼的病人降低高眼壓症、降低眼內壓及/或提供神經保護之組成物和方法。該等組成物包含一或多個於一種藥學上可接受的載體中之JNK抑制劑。
Jun N－端激酶(JNK)是一種壓力活化蛋白激酶的家族，其包含藉由衍生自3個基因：JNK1、JNK2，和JNK3的mRNA轉錄品的選擇性剪接(alternative splicing)而創造出之至少10種同質體(isoform)(Gupta等人(1996))。JNK的活化對於某些形式的壓力誘導凋亡是必須的(Tournier等人(2000))，其導致一些轉錄因子和細胞蛋白的磷酸化，特別地相關於凋亡的那些(例如：Bcl2,Bcl－XL ,p53，等等)。於細胞培養物中，JNK的活化關聯於由各種傷害誘導的神經元凋亡(Xia等人(1995)；Le－Niculescu等人(1999))。JNK3對於在滋養因子的撤回之後的交感神經元死亡是必須的(Bruckner等人(2001))。缺乏JNK3的小鼠對於藉由紅藻胺酸(kainic acid)誘導的海馬的神經毒性是抵抗的(Yang等人(1997))。因為此等神經保護作用，JNK的抑制劑已經被提議作為腦部退化性疾病的治療，舉例而言，阿茲海默氏病(Alzheimer’s desease)、帕金森氏症(Parkinson’s desease)、中風，以及局部缺血誘導的腦部機能障礙。此外，因為JNK的訊息傳導途徑也調控一些涉及發炎的分子之活性和代謝(Manning & Mercurio(1997))，JNK抑制劑被提議作為免疫疾病的治療，譬如：類風濕性關節炎、氣喘、慢性移植排斥、發炎性腸病，以及多發性硬化。其他的研究進一步指出JNK抑制劑在作為肥胖、第二型糖尿病(Hirosumi等人(2002))，以及癌症(Adjei(2001))之潛在的治療劑可以是有用的。
JNK抑制劑，即使帶有如上列出的藥理作用，在降低眼內壓與提供神經保護上是有用的是非顯而易見地。以上提及的疾病一個也沒有已經顯示出是相關於青光眼、上升的眼內壓，或視覺神經保護。而且，一種藥物的有效並不預期其於眼睛的有效，因為對腦部退化性疾病有用的治療劑並不總是使得免受RGC的青光眼凋亡或其他的眼睛疾病。發炎、免疫不正常、糖尿病、肥胖，或者癌症並未廣泛地被接受為青光眼、上升的眼內壓或視覺神經保護的一種病因學。
未料到地，本發明人已經發現Jun N－端激酶(JNKi)的抑制顯著地降低轉形生長因子－貝他2(TGFβ2)誘導的一種人類小樑網(TM)細胞株之纖維網蛋白表現(第1圖和第2圖)。纖維網蛋白被知道是TM的細胞外基質(ECM)之一種組份，以及ECM於TM區域的過度堆積是許多形式的青光眼之一種標誌。此等增加據信導致對水流出之上升的阻力，藉此提升眼內壓(IOP)。JNK也已經牽連在TGFβ－媒介的結締組織生長因子(CTGF)的產生之訊息傳導途徑之中(Utsugi等人2003)。CTGF可以於IOP的提升上扮演一種角色，因為其被瞭解會增加各種ECM組份的堆積，包括纖維網蛋白。
已經顯示出一種非呔JNK抑制劑，SP－600125，是可保護不受穀胺酸誘導的或者滋養因子的撤回所誘導的培養物中之大鼠視網膜的神經元，RGC，的死亡(參見共審查美國申請案序列號碼11/259.566)。該化合物亦被發現可保護不受於大鼠體內之局部缺血/再灌流－誘導的視神經病變。既然滋養因子的剝奪、局部缺血，以及穀胺酸毒性被提議為青光眼和各種眼睛疾病之潛在的機轉，此等數據指出非呔JNK抑制劑作為對於提供眼睛組織的神經保護之治療劑是有用的。
如於此所使用的，“JNK的抑制劑”係有關於該等能減少JNK的活性至對照值的50%或更低之化合物。化合物對於JNK的活性之潛在的抑制效應能容易地被那些本技藝中具有技藝者評估。許多JNK的活性分析套組係商業上可得的，例如：Stratagene catalog # 205140,Upstate catalog # 17－166，等等。於較佳的態樣中，供使用於本發明的組成物和方法之中的JNK抑制劑可以是小分子、呔、擬呔(peptidomimetics)、抗體，等等。最佳地，該等JNK抑制劑將是小分子。
於本發明的方法和組成物中預期會是有用的JNK抑制劑之實例包括，但不限於，SP600125和被揭露於以下的藥學上活性化合物，專利申請案案號：WO200035906,WO200035909,WO200035921,WO200064872,WO200112609,WO200112621,WO200123378,WO200123379,WO200123382,WO200147920,WO200191749,WO2002046170,WO2002062792,WO2002081475,WO2002083648,WO2003024967；其等之全部藉由參考而藉此被併入。
於本發明的方法和組成物中預期會是有用的額外較佳的JNK抑制劑包括：
該等方法包含投藥一或多個JNK抑制劑至一個人類病人以降低高眼壓症，或降低眼內壓以及提供神經保護。
本發明的該等JNK抑制劑可以被包含於各種的類型的藥學組成物中，依照那些本技藝中具有技藝者所知道的配方技術。一般而言，該等JNK抑制劑將被配方於用於局部的眼藥或眼內投藥的溶液或懸浮液，或者作為用於全身投藥的錠劑、膠囊或溶液(例如：口腔或靜脈內)。
由於容易投藥，JNK抑制劑的口服配方是較佳的。口服配方可以是以液體或固體形式。一般而言，口服配方總是包括該活性JNK抑制劑與惰性賦形劑。一般而言，固體錠劑或膠囊劑量總是含有各種的賦形劑譬如：蓬鬆劑、黏合劑、定時釋放塗層(time release coatings)，等等。液體劑量總是含有載劑、緩衝液、張力劑(tonicity agent)、溶解劑，等等。
一般而言，使用來以上說明的目的之劑量將會變化，但是會是以一有效量以抑制或改善視網膜的神經病變。如於此所使用的，術語“藥學有效量”係有關於降低眼內壓與抑制或改善視網膜的神經病變之量。該等JNK抑制劑按慣例將以自大約0.01至大約10.0的重量/百分比的量被包含於此等配方中。較佳的濃度係落在自大約0.1至大約5.0重量/百分比。關於局部投藥，此等配方被投遞至該疾病位置一天1至6次，端視具有技藝之臨床醫師的例行考慮而定。以對於治療有用的錠劑或液體形式之全身投藥，舉例而言，將含有大約10－1000 mg的一種JNK抑制劑，以及能被服用每天1－4次，端視具有技藝之臨床醫師的例行考慮而定。
如於此所使用的，術語“藥學上可接受的載體”係有關於任何配方，其係安全的，以及對於本發明的至少一種有效量的JNK抑制劑之投藥的所欲途徑提供適當的投遞。
下列的實例係被包括以展現本發明的較佳實施例。那些本技藝中具有技藝者應該瞭解於該等實例中遵循之所揭露的技術係代表由本發明人發現的技術，其等於本發明的實施中作用良好，以及因而能被認為要構成其實施的較佳模式。然而，那些本技藝中具有技藝者應該，按照本揭示，明瞭許多變化能於特定的實施例中被做到，該等實施例係為揭示的以及仍然獲得一種相像或相似的結果而不背離本發明的精神和範疇。
實施例1
纖維網蛋白分析 經培養的轉形的人類TM細胞係被使用於此等研究中。GTM－3轉形的細胞株之產生與特徵化已經在之前被說明。[Pang IH,等人,Curr Eye Res.1994；13：51－63]。維持生長培養基係由帶有Glutamax I(Gibco/BRL,Grand Island,NY)、補充10%的胎牛血清(Hyclone,Logan,UT)和50 μg/mL的健大黴素(gentamicin)(Gibco/BRL)的杜貝可氏改良的依格氏培養基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)所構成。關於分析，培養物予以胰蛋白酶化(trypsinized)且被播種於24－井的平盤(Corning Costar,Acton,MA)，以及允許生長直到單層達到大概90%的群集。培養基接而以0.25 mL的含有適當的測試化合物之無血清和無抗生素的培養基予以置換。細胞被培養24 h，在5% CO2 和37℃下。培養上清液的分裝部分接而藉由ELISA而被分析纖維網蛋白成分。
於評估該JNK抑制劑，SP600125，之效力的實驗中，該等細胞係同時地與該化合物和TGFβ2(5 ng/mL)一起培養。TGFβ2是一種已知的TM細胞的纖維網蛋白生產誘導劑。SP600125造成於TGFβ2－處理的GTM－3細胞上清液中之纖維網蛋白的位準之一種劑量依隨減少。此等結果係被圖示於第1圖中。JNK的角色係藉由一種選擇性、細胞可滲透的JNK呔抑制劑之使用而進一步被闡明。當具有SP600125時，與該呔抑制劑一起的共培養造成於TGFβ2－處理的GTM－3細胞上清液中的纖維網蛋白位準的一種劑量依隨減少。此等結果對比於一種細胞可滲透的陰性(拼湊的序列(scrambled sequence))對照呔的缺少效力，因而證實JNK於此等研究中的核心角色。帶有此等呔的結果係被圖示於第2圖中。
實施例2
下列的實施例展現一種JNK抑制劑對抗對於視網膜的細胞之細胞毒性傷害之保護效力。
大鼠視網膜神經節細胞存活分析 成年史普拉格－多雷(Sprague－Dawley)大鼠藉由CO2 窒息而被安樂死。其等之眼睛被摘出且被放置於杜貝可氏改良的依格氏培養基：營養混合物F12(1：1；DMEM/F12)中。視網膜被培養於一種木瓜蛋白酶溶液中，其含有木瓜蛋白酶(34 units/mL)、DL－半胱胺酸(3.3 mM)，以及牛血清白蛋白(0.4 mg/ml)於DMEM/F12中，在37℃下歷時25 min。視網膜的碎片接而被磨碎直到細胞被分散為止。細胞懸浮液(1.5 ml；含有大概4.5 x 106 個細胞)被放置於多－D－離胺酸塗覆的玻璃底部培養皿的各個中。該等細胞在37℃下於95%大氣/5%CO2 中被培養於之前由Barres等人(1988)說明的一種培養基內歷時3天。
於評估穀胺酸對於細胞存活的毒性的實驗中，該等細胞係與100 μM穀胺酸一起培養歷時3天。於評估神經滋養因子的撤回對於細胞存活的不利的效應之實驗中，鹼性成纖維細胞生長因子、腦－衍生的滋養因子，以及睫狀體－衍生的神經滋養因子自該培養基被移除以及細胞被培養歷時3天。於評估一種JNK抑制劑，SP600125，的潛在保護效力之實驗中，該等細胞與該化合物在穀胺酸的存在下或在所指出的滋養因子不存在下予以一起培養歷時3天。在3天的培養期間的結尾，該等細胞係以Thy－1，一種RGC的細胞表面標誌，予以免疫染色，以及於一個螢光顯微鏡下觀察。Thy－1－陽性的細胞係被計數以及被平均。該等結果係被圖示於第3圖中。
第3圖圖示RGC的存活端視指出的神經滋養因子的存在而定，藉此神經滋養因子自該培養基的移除(TF的撤回)造成RGC的死亡至大概對照組的50%。該等細胞與SP600125一起培養顯著且完全地保護細胞不受此等傷害。第3圖亦顯示出穀胺酸對RGC是有毒的，因100 μM穀胺酸的添加至該培養基減少細胞存活大概50%。再次地，該等細胞與SP600125一起培養亦顯著且完全地保護細胞不受此細胞毒性。
實施例3
下列的實施例展現一種JNK抑制劑對抗對於大鼠體內之局部缺血誘導的視神經病變之保護效力。
於大鼠體內之局部缺血/再灌流－誘導的視神經病變 成年的威斯達(Wistar)大鼠被安樂死以及各動物的一隻眼睛的前房被插管。該插管被予以連接至一種升高的食鹽水儲存器，其之高度被調整以產生高於該動物的收縮壓之眼睛壓力，其，藉由中止視網膜的血流，產生視網膜的局部缺血。在60分鐘的局部缺血之後，眼內的插管被移除以允許視網膜的再灌流。二週後，該等大鼠被安樂死，其等之視神經被分離，於配於0.1M的二甲基次砷酸(cacodylate)緩衝溶液之內的2%的仲甲醛(paraformaldehyde)，2.5%的戊二醛(glutaraldehyde)中予以固定，切片，以及於配於異丙醇：甲醇(1：1)中的1%的對苯二胺予以染色，如由Hollander和Vaaland(1968)說明的。各視神經切片的視神經損傷係藉由Pang等人先前報告的一種視神經損傷分數(1999)予以分級。於此分級系統中，1的分數表示無損害，以及5的分數表示完全的損害。
為了測試SP600125的潛在保護效應，被選出的動物係以予以處理一天腹膜內SP600125(30 mg/kg)的注射歷時16連續天，其開始於局部缺血被誘導之前2天。該等結果係被圖示於第4圖中。
第4圖顯示出局部缺血/再灌流對視神經造成顯著的損害，如由視神經損傷分數之戲劇性的增加所指出的。其亦顯示SP600125的全身投藥能保護對抗對視網膜的此種缺血性傷害，如由視神經損傷分數之顯著的減少所顯示的。
實施例4
一種JNK抑制劑，SP600125，係於經培養的成年大鼠視網膜神經節細胞(RGC)內予以測試。其係顯示保護不受穀胺酸誘導和滋養因子的撤回誘導的細胞毒性二者。
方法A.RGC培養成年史普拉格－多雷(Sprague－Dawley)大鼠藉由CO2 窒息而被安樂死。其等之眼睛被摘出且視網膜被分離。視網膜的細胞係以木瓜蛋白酶溶液在37℃下予以處理歷時25 min，接而以5 mL RGC培養基(帶有各種的營養補充品＋1%胎牛血清的Neurobasal培養基)予以清洗3次。視網膜的細胞藉由磨碎而被分散。細胞懸浮液被放置於多－D－離胺酸－和基膜素(laminin)塗覆的8－井的腔培養玻片上。該等細胞接而在37℃下被培養於95%大氣/5% CO2 中。
B.細胞毒性傷害關於穀胺酸誘導毒性研究，細胞係以載體或指出的化合物予以預處理歷時30分鐘，接著100 μM穀胺酸歷時3天。
關於滋養因子的撤回研究，3種滋養因子，鹼性成纖維細胞生長因子，腦－衍生的神經滋養因子，以及睫狀體神經滋養因子係自該培養基被移除。細胞與該等指出的化合物予以培養於此培養基內歷時3天。
C.細胞存活的定量在培養期間的結尾，該等細胞被固定且以Thy－1，一種RGC的標誌，藉由免疫細胞化學予以標示。細胞存活係藉由手動地計數各井中的Thy－1－陽性的健康細胞予以定量。
結果A. SP600125對於大鼠RGC內之穀胺酸誘導的毒性之效應之前已經顯示出穀胺酸對大鼠RGC是有毒的；只有50－70%的細胞在3天的100μM的穀胺酸處理之後存活。此等細胞中穀胺酸誘導的毒性能藉由以MK801予以預處理而被預防。SP600125係以一種劑量依隨的方式而保護不受此傷害(第5圖)。
B. SP600125對於RGC內之滋養因子的撤回誘導的毒性之效應之前，顯示出3種滋養因子歷時3天的移除造成大概40－50%細胞的死亡。SP600125係以一種劑量依隨的方式而保護不受此傷害(第6圖)。
實施例5
對於治療青光眼和其他的眼睛疾病有用的局部組成物：
以上的配方係藉由以下方式予以製備：首先放置一部分的純水至一個燒杯中以及加熱至90℃。羥丙基甲基纖維素(HPMC)接而被添加至加熱的水中以及藉由激烈的渦流攪拌予以混合直到全部的HPMC被分散。接而允許形成的混合物冷卻，然而進行混合俾以水合HPMC。形成的溶液接而藉由於一種容器中高壓消毒而被無菌化，該容器具有一種液體入口和一種疏水、無菌的排氣孔濾器。
氯化鈉和乙酸乙二胺二鈉接而被添加至純水的第二部分且予以溶解。氯化苯二甲烴銨接而被添加至該溶液，以及該溶液的pH值係以0.1M NaOH/HCl予以調整至7.4。該溶液接而藉由過濾而被無菌化。
SP600125係藉由乾熱或環氧乙烷而被無菌化。設若選擇環氧乙烷滅菌，在50℃下換氣至少72小時是必須的。滅菌的化合物被無菌地秤重以及被放置於一種加壓的球形研磨容器中。滅菌的玻璃球接而被添加至該容器以及該容器容納的東西在225 rpm被無菌地予以研磨歷時16小時，或者直到全部的粒子係落在大概5微米的範圍內。
在無菌條件下，藉由之前的步驟形成的微粉化的藥物懸浮液或溶液接而伴隨混合而被傾倒至該HPMC溶液中。該球形研磨容器和該處包含的球接而以含有氯化鈉、乙酸乙二胺二鈉和氯化苯二甲烴銨的溶液的一部份沖洗。沖洗接而無菌地被添加至該HPMC溶液。該溶液的的最終體積接而以純水予以調整以及，設若需要的話，該溶液的pH以NaOH/HCl被調整至pH 7.4。
實施例6
用於局部的投藥的較佳配方：
實施例7
口部投藥的配方： 錠劑：帶有非活性組份，譬如：澱粉、乳糖和硬脂酸錳的1－1000 mg的一種JNK抑制劑能根據錠劑配方的技藝中具有技藝的那些人所知道程序予以配方。
所有於此揭露且主張的組成物及/或方法能按照本揭示做到與實施，而不需過度實驗。縱然本發明的組成物和方法已經在較佳實施例方面予以說明，變化可以被施加至於此說明的該等組成物及/或方法和該方法的步驟或步驟的順序，而不背離本發明的概念、精神和範疇，對於那些本技藝中具有技藝者是明顯的。更特別地，明顯地，某些化學上和結構上相關的製劑可以被用來取代於此說明的該等製劑以達到相似的結果。對於那些本技藝中具有技藝者明顯的全部的此等取代和修飾被視為落在由附隨的申請專利範圍所定義的本發明的精神、範疇和概念內。
參考資料
下列的參考資料，其等提供例示程序的或其他的細節至對於於此提出的補充的程度，係具體地於此被併入以作為參考資料。
專利和公開的專利申請案WO200035906 WO200035909 WO200035921 WO200064872 WO200112609 WO200112621 WO200123378 WO200123379 WO200123382 WO200147920 WO200191749 WO2002046170 WO2002062792 WO2002081475 WO2002083648 WO2003024967
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第1圖：SP600125對於來自經培養的人類小樑網(GTM－3)細胞的上清液中之TGFβ2－刺激的(24 h)纖維網蛋白位準的上升之劑量依隨效應；第2圖：對於一種選擇性、細胞－可滲透的呔抑制劑(JNKi－III；Calbiochem cat.# 420130)之反應相對於一種細胞－可滲透陰性的(拼湊的序列(scrambled sequence))對照呔(Calbiochem,cat.# 420131)之反應。二種製劑均被測試對於來自經培養的人類小樑網(GTM－3)細胞的上清液中之TGFβ2－刺激的(24 h)纖維網蛋白位準的上升之效應；第3圖：帶有或不帶有滋養因子、帶有或不帶有穀胺酸(100 μM)之SP600125對於大鼠RGC存活之效應。該等細胞係以各別的條件予以培養歷時3天。存活係藉由計數全部的Thy－1陽性的健康細胞而定量；第4圖：SP600125對於局部缺血/再灌流－誘導的視神經病變之效應。1的視神經損傷得分表示無損害，以及5的得分表示完全的損害。＊ ：藉由獨立t檢定(Student T－Test)，相對於載體處理組，p<0.05；第5圖：SP600125對於經培養的成年大鼠RGC的存活之效應。該等細胞係以穀胺酸(100μM)、帶有或不帶有SP600125予以處理歷時3天；第6圖：SP600125對於經培養的成年大鼠RGC的存活之效應。除了對照之外，經選擇的滋養因子(bFGF,BDNF,CNTF)自全部的井中予以移除。該等細胞係以指出的濃度之SP600125予以處理歷時3天。(TF＝滋養因子)。

Claims (3)

  1. 一種包含一有效量的JNK抑制劑和一藥學上可接受的載體之組成物之用途，其係用於製備降低鑑定為具有青光眼的人類患者中之高眼壓症的藥物，其中該JNK抑制劑係
  2. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該組成物是一種口服配方。
  3. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該組成物係為一種局部的眼藥、外科沖洗溶液或一種眼內配方。
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