TWI411440B - 桂花萃取物在製備預防或治療憂鬱症藥物或保健食品之用途 - Google Patents
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Description
本發明係關於桂花的新用途,特別是桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途。
桂花(Osmanthus fragrans
),又名月桂、木樨。桂花香氣淡雅且持久,常作為庭園造景之用,其花部可作為茶葉或食品的香味添加物,用以增加香氣。
在中藥醫典記載,桂花之花部、果實及根部皆可入藥,其中,花部具有散寒破結,化痰止咳之作用,對食慾不振、痰飲咳喘、腸風血痢及經閉腹痛有一定療效,果實具有暖胃、平肝及散寒之作用,而根部具有祛風濕及散寒之作用。
請參照中華民國公告第I341205號「由桂花中萃取抗氣喘物質的方法」專利案,該專利案揭示桂花萃取物具有抗氣喘效果,能夠減緩呼吸道及肺部慢性發炎症狀,更能夠舒緩氣喘症狀,以預防及減少氣喘發作。目前未有任何研究資料證實桂花具有抗憂鬱之效用。
憂鬱症係一種精神官能症,患者通常會有失眠、食慾不振、體重減輕、注意力不集中、易怒、情緒低落不快樂、對生活不感興趣及生活常感無助、無盼望、有輕生的念頭,甚至有自殺的行為。根據世界衛生組織統計,全世界憂鬱症發病率約為3.1%,目前憂鬱症係全球排名第四大疾病,且預估在2025年,憂鬱症將躍升為全球第二大疾病。
目前臨床上治療憂鬱症的策略除了服用抗憂鬱藥物之外,患者應接受專業人員的心理諮商,較佳係二者同時進行,以掌控患者病情,並藉由諮商過程中逐量減少憂鬱症藥物之劑量。
憂鬱症藥物之作用機理係透過提高腦中的血清素(Serotonin)、正腎上腺素(Norepinephrine)或多巴胺(Dopamin)的濃度,使腦部的神經生長素(Brain-derived neurotrophic factor)增加,使腦部神經細胞增生更快且更強壯,避免腦部神經細胞萎縮,而容易產生憂鬱現象。
目前憂鬱症藥物中最廣為處方的係選擇性血清素回收抑制劑(SSRI),其他尚有三環抗憂鬱藥物、四環抗憂鬱藥物、可逆性單胺氧化酵素抑制劑(RIMA)及選擇性血清素新腎上腺素回收抑制劑(NRI)等,醫師可以考慮患者是否合併有其他身體疾病及其年齡來選擇適當之抗憂鬱藥物,以減低抗憂鬱藥物對患者產生之副作用。
不論是何種類型之抗憂鬱藥物,皆會對患者帶來許多副作用,例如口乾、便秘、嗜睡、排尿困難、頭暈、頭痛、心跳加速、腸胃不適、噁心、焦慮、食欲降低或性功能障礙等,這些副作用常會使患者不願意繼續服用藥物,或者將藥物用量降低。抗憂鬱藥物必須於治療時期內持續服用(服藥期間通常為3至6個月),使體內維持一定量的藥物作用濃度,才能夠有效抑制憂鬱症的發生,一旦患者自行將抗憂鬱藥物用量降低,抗憂鬱藥物無法達到所預期之效果,而無法改善憂鬱症的情形。
此外,憂鬱症係高復發的病症,約有50~80%的患者
至少會有一次的復發,通常在首次發作後的二至三年內再次復發。然而,目前為止並無一種能夠讓憂鬱症患者長期服用且不會產生副作用之抗憂鬱藥物或保健食品,使憂鬱症患者能夠藉以穩定控制病情,降低憂鬱症之復發率。
本發明之主要目的係提供一種桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途,一治療有效劑量之桂花萃取物係可用於製備治療或預防憂鬱症之藥物或保健食品。
為達到前述發明目的,本發明所運用之技術內容包含有:一種桂花萃取物在製備預防或治療憂鬱症藥物或保健食品之用途,該桂花萃取物係藉由下列步驟之方法而製得:一萃取步驟,將桂花浸泡於一溶劑中共同形成一萃取混合液,以該溶劑將該桂花中之抗氧化物質萃取至該萃取混合液中;一過濾步驟,將該萃取混合液之固體剩餘物去除,得到一萃取液;以及一乾燥步驟,取該萃取液進行乾燥處理後,以獲得乾燥後之桂花萃取物;其中,該桂花萃取物係具有提升個體總抗氧化力及麩胱甘肽含量之表現。
其中,該藥物或保健食品中的桂花萃取物含量為每公斤體重之個體投予0.01~6.0克。
為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂,下文特舉本發明之較佳實施例,並配合所附圖式,作詳細說明如下:
本發明係一種桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途,特別係將一治療有效量之桂花萃取物用於製備治療或預防憂鬱症之藥物或保健食品,該桂花萃取物係具有提升腦部與憂鬱相關腦區(如海馬迴區)之抗氧化能力,並促進腦區血液循環,幫助腦部抵抗自由基或其他氧化物之侵襲,以達到治療或預防憂鬱症。
該桂花萃取物係取金桂(Osmamthus fragrans
var.thunbergii
)、銀桂(Osmanthus fragrans
var.latifolius
)、四季桂(Osmanthus fragrans
var.semperflorens
)或丹桂(Osmanthus fragrans
var.aurantiacus
)等桂花之花部,特別係經過乾燥後之花部進行抗氧化物質之萃取,本實施例係取金桂之乾燥花部進行水萃法。
請參照第1圖所示,本發明萃取桂花之製備方法係包含一萃取步驟S1、一過濾步驟S2及一乾燥步驟S3。
該萃取步驟S1,係將桂花浸泡於一溶劑中共同形成一萃取混合液,以該溶劑將該桂花中之抗氧化物質萃取至該萃取混合液中,其中,該溶劑可以為水、甲醇、乙醇、丙酮、乙烷、丙烷、丁丙烷、己烷、石油醚或苯等溶劑,桂花與該溶劑之重量比例較佳為1:15至1:10。更詳言之,本實施例係以水做為溶劑,將桂花浸入水中15分鐘後,將該萃取混合液煮沸,進行萃取至少1小時,得該萃取混合液,該萃取步驟S1較佳係重複進行1~3次,以完全萃取出桂花中的抗氧化物質。本實施例係取9.8公斤之桂花,以150公升之沸水進行萃取1小時,再浸置1小時後,取出萃取過之桂花可再以100公升之沸水再進行一次萃取,
總共得到約185公升之萃取混合液。本實施例藉由水做為萃取溶劑,將桂花的抗氧化物質萃取至該萃取混合液中,能夠使該萃取混合液中保有較多的抗氧化物質。
該過濾步驟S2係將該萃取混合液之固體剩餘物去除,得到一萃取液。本實施例係將該萃取混合液中之固體剩餘物去除,以減壓濃縮法將該萃取液濃縮處理至便於進行滅菌之體積,例如以高溫高壓滅菌釜進行滅菌後,以便保存萃取得的抗氧化物質,遂進行該乾燥步驟S3。藉此,有助於保存該萃取液之抗氧化物質,並提升後續處理步驟之效率。
該乾燥步驟S3,取該萃取液進行乾燥處理後,以獲得乾燥後之桂花萃取物。更詳言之,該乾燥處理係可選擇以冷凍乾燥處理、噴霧乾燥處理、蒸發處理或加熱乾燥處理方式進行乾燥;本實施例係以冷凍乾燥方式進行乾燥處理。藉此,便可將桂花之抗氧化物質濃縮並乾燥,再依需求配製成所需濃度以進行後續試驗。
為證實本發明之桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途,取上述水萃法所得之桂花萃取物,進行下列試驗以說明該桂花萃取物對抑制憂鬱症之作用:(A)桂花萃取物之抗氧化物質含量測試、(B)桂花萃取物對於改善類憂鬱動物模式之憂鬱情形、(C)腦部及各臟器之抗氧化能力試驗及(D)海馬迴區之總抗氧化力及GSH含量。
(A)桂花萃取物之抗氧化物質含量測試
本實施例係以總抗氧化能力(Oxygen radical absorbance capacity,簡稱ORAC)及總酚含量作為抗氧化
能力之測定指標。該桂花萃取物之總抗氧化能力為18.8±0.8mM trolox equivalents,該桂花萃取物之總酚含量為65.7±0.77mg GAE/ml,證實本發明枝桂花萃取物確實含有抗氧化物質。
(B)桂花萃取物對於改善類憂鬱動物模式之憂鬱情形
(B1)建立類憂鬱動物模式(Maternal deprivation animal model)
本實施例係以早期隔離模式(Maternal deprivation model)提供一種類憂鬱動物模式以進行後續抑制憂鬱症之試驗。飼養妊娠SD大鼠(自樂斯科生物科技股份有限公司購得之SPF級Sprageu-Dawley rat,簡稱SD大鼠),將該妊娠SD大鼠分娩後第一天定為第0天(PND0),其中,該妊娠SD大鼠生產數隻雄性SD大鼠,並於其中隨機挑選實驗組及對照組之雄性SD大鼠。對照組之SD大鼠(簡稱CT鼠)係以正常方式與母鼠共同飼養;實驗組之SD大鼠(簡稱MD鼠)則自PND2起至PND14,每天將MD鼠與母鼠隔離1小時,固定於每日下午5~6點將該雄性SD幼鼠置於另一空間,使其不受外界環境干擾。
至該MD鼠斷奶後(PND23),將每四隻雄性SD幼鼠分為一籠,飼養於溫度(22±1℃)、光照(日照時間12小時)皆維持於正常範圍之環境,自由餵食飼料及水。直到PND28後,即可進行類憂鬱行為之動物試驗。
(B2)類憂鬱行為之動物試驗
根據Porsoltet al
.等人(1977)於《Nature》期刊所發表的研究指出,藉由老鼠於水中不動(Immobility)的情形可
以反應出老鼠的行為沮喪,即憂鬱傾向,特別係以在水中不動的時間長短可做為判定老鼠之憂鬱程度,目前的基礎醫學研究中,水中不動行為係作為老鼠的憂鬱重要指標。
依照上述(B1)所述之方式建立類憂鬱鼠以進行試驗(B2)水中不動實驗(the forced swim test),其試驗(B2)之條件:準備一水深為25公分之透明圓型水槽(水溫25℃),測試前一天需使老鼠熟悉水性,將老鼠置入水槽15分鐘後取出,並以60W燈泡照射30分鐘以烘乾老鼠,經24小時後進行水中不動實驗,將老鼠置入同樣條件之水槽中5分鐘,並計算老鼠於該5分鐘內的掙扎時間,由試驗時間5分鐘扣除其掙扎時間後,即可得到水中不動時間作為其憂鬱指標。
請參照第1表所示,本實施例係取1組CT鼠(第B0組)及6組MD鼠(分別為第B1至B6組,每組六隻MD鼠)進行桂花萃取物餵食實驗。其中,第B0及B1組係不餵食任何水或桂花萃取物,第B2組係僅餵食純水,第B3至B6組分別係以每公斤體重之個體餵食0.01克、0.1克、1克及6克之桂花萃取物,該桂花萃取物較佳係以水溶解後,以8公分餵食管進行強迫管餵,且持續餵食14天後,再進行水中不動試驗。本實施例係進行三重覆試驗後取平均值。
請參照第2圖所示,第B0組係正常狀態之CT鼠,其平均水中不動時間為125秒,第B1至B6組皆為類憂鬱鼠(MD鼠),其中,第B1及B2組的平均水中不動時間皆大於175秒,其憂鬱指數明顯較第B0組高,然而,第B3至B6組之MD鼠的水中不動時間皆與第B0組並無顯著差異(p
<0.05),表示服用每公斤體重0.01~6.0克桂花萃取物之類憂鬱鼠,其憂鬱指數與對照組(第B0組)相當,甚至比該對照組之憂鬱指數更低,証實餵食本發明之桂花萃取物確實具有改善類憂鬱鼠的憂鬱情形之功效。
(C)腦部及各臟器之抗氧化能力試驗
在試驗(B)結束後犧牲各組別之老鼠,並採集其肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及腦部。將腦部及各臟器以4℃之0.9%生理食鹽水進行清理,吸乾水分後稱重,將腦部及各臟器之組織均質化,再以紗布過濾去除結締組織,得到一組織均質液,將該組織均質液以一組織均質緩衝液(Potassium phosphate buffer,pH 7.4)定量至4倍體積後,置於-80℃冷凍保存,以進行後續(C1)腦部及各臟器的總抗氧化力(ORAC)及(C2)腦部及各臟器的麩胱甘肽含量等試驗。
請參照第2表所示係本實施例試驗(C1)之各組別來源,本實施例之各組別係來自試驗(B)中第B2組、第B5組及第B6組的腦部、心臟、肝臟、脾臟、肺臟及腎臟之組織均質液。
(C1)腦部及各臟器的總抗氧化力
由於憂鬱症的發生與腦部神經細胞受損有關,而腦部神經細胞受損的原因常常係來自自由基的攻擊,因此,藉由測定腦部之總抗氧化力,以了解本發明之桂花萃取物用於提升腦部抗氧化能力之效用。
腦部及各臟器的總抗氧化力(Oxygen radical absorbance capacity,簡稱ORAC)係根據Chung等人(2004)所建立之組織總氧化力測試方法加以修飾。
各組別之15μl組織均質液分別與100μl之藻紅素(β-phycoerythrin,0.1μM)及85μl之自由基誘導物(2,2’-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride,簡稱AAPH,75mM)混合均勻,得一ORAC測試液,再以波長為485nm之光源激發該ORAC測試液,量測該ORAC測試液於波長520nm之發散光,並以水溶性維生素E(Trolox)作為標準品,當ORAC值為1,其相當於1mM水溶性維生素E之抗氧化力。
請參照第3圖及第3表所示,第C1至C6組的總抗氧化力皆以CT鼠為最差,其次為餵食1.0克/每公斤體重之
組別,最佳係餵食6.0克/每公斤體重之組別,其中,又以第C1組的腦部組織所提升之總抗氧化力表現最佳,特別係第C1-1組與第C1-2組、第C1-3組皆具有顯著差異(p
<0.001)。
由試驗(C1)可知,本發明之桂花萃取物對於提升個體腦部及各臟器之總抗氧化力具有明顯之效用,且特別係提升腦部之總抗氧化力有明顯的效果。
(C2)腦部及各臟器的麩胱甘肽含量
由於麩胱甘肽(Glutathione,簡稱GSH)係具有清除自由基以保護腦部神經細胞之效用,因此,藉由測量本發明之桂花萃取物提升腦部神經細胞之GSH含量,證實本發明之桂花萃取物係能夠保護腦部神經細胞而達到抗憂鬱之效果。
試驗(C2)測量GSH係根據Anderson(1985)所提出之方法加以修飾。該GSH之測量原理係利用GSH能夠將一指示劑(5-5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid),簡稱DTNB)還原成2nitro-5-benzoic(簡稱TNB),以分光光度計測量各組別之TNB於波長為405nm處之吸光值,藉以判斷各組別之GSH含量。
本實施例係取如第2表所示,各組別150μl之組織均質液分別加入450μl之5%三氯醋酸溶液(簡稱TCA)均勻混合,得一TCA前處理液,以10000rpm離心10分鐘,取30μl之TCA前處理液與140μl之TRIS緩衝液及10μl之DTNB(0.01M)混合後靜置5分鐘後,測定各組別於405nm下之吸光值。
請參照第4圖及第3表所示,第C1至C6組的GHS含量皆以CT鼠為最少,其次為餵食1.0克/每公斤體重之組別,最佳係餵食6.0克/每公斤體重之組別,其中,又以
第C1至C3組的腦部、心臟及肝臟等組織中的GHS增加量最多,特別係第C1-1組分別與第C1-2及C1-3組皆具有顯著差異(p
<0.001)。
由試驗(C2)可知,本發明之桂花萃取物對於提升個體腦部及各臟器之GSH含量具有明顯之效用,且特別係提升腦部之GSH含量有明顯的效果。如此,係有助於改善類憂鬱鼠之憂鬱情形。
(D)海馬迴區之總抗氧化力及GSH含量
憂鬱症與腦部中各腦區之抗氧化能力衰退有關,其中,又以海馬迴區與憂鬱症之關係最為密切,根據Wu等人於2008年發表之研究(Behavioural Brain Research(193)183-191)指出,一旦海馬迴區之抗氧化能力變弱或GSH含量減少,則發生憂鬱症之情況將會大大提升。
請參照第4表所示,本實施例之各組別係來自試驗(B)中第B2至B5組的MD鼠腦部中的海馬迴區,其中,本實施例之第D1至D4組之海馬迴組織係來自於試驗(B)中未餵食任何水或桂花萃取物的MD鼠為第D1組,而第D2至D3組則分別為餵食0.01克、0.1克及1克桂花萃取物/每公斤體重之MD鼠,並以試驗(C1)及(C2)所述之方法分別測量第D1至D4組之總抗氧化力及GSH含量。
請參照第5及6圖所示,第D1至D4組的總抗氧化力及GSH含量皆以第D1組為最少,其次依序為第D2、D3及D4組,第D2至D4組與第D1組之間具有顯著差異,其中,又以每公斤體重餵食0.1克及1.0克之組別所測得之總抗氧化力為最高。
由試驗(D)可知,本發明之桂花萃取物對於提升個體腦部海馬迴區之總抗氧化力及GSH含量具有明顯之效用,該桂花萃取物確實係透過保護海馬迴區之神經細胞以達到抗憂鬱之功效。
本發明之桂花萃取物係能夠提升與憂鬱相關腦區之抗氧化能力,幫助腦部神經細胞抵抗自由基或其他氧化物之侵襲,將一治療或預防有效劑量之桂花萃取物用於製備治療或預防憂鬱症之藥物或保健食品,特別係與醫藥學上可接受之載劑或賦形劑組合形成一醫藥組合物,其中,該桂花萃取物係可以製備成任何方便食用之型式,如錠劑、膠囊、粉劑、粒劑或液劑等,或者將該桂花萃取物與其他食品或飲料組合,以一適於食用之樣態供生物體以口服方式服用。該醫藥組合物中,其桂花萃取物之劑量較佳係每單位體重之個體投予0.01至6.0克/公斤體重,且投予時間可持續14天,具有達到治療或預防憂鬱症之功效。
本發明之桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途,一治療有效劑量之桂花萃取物係可用於製備治療
或預防憂鬱症之藥物或保健食品,具有提供憂鬱症患者一種新的抗憂鬱藥物或保健食品之功效。
本發明桂花萃取物之製備方法,係用以提供一種桂花萃取物以製備治療或預防憂鬱症之藥物或保健食品,具有增進桂花之經濟價值之功效。
本發明之桂花萃取物在製備抗憂鬱藥物或保健食品之用途,其係可與醫藥學上可接受之載劑或賦形劑組合形成一醫藥組合物,用以治療憂鬱症之個體,具有改善憂鬱症患者憂鬱情形之功效。
雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示,然其並非用以限定本發明,任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內,相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇,因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
S1‧‧‧萃取步驟
S2‧‧‧過濾步驟
S3‧‧‧乾燥步驟
第1圖:本發明萃取桂花之製備方法的步驟方塊圖。
第2圖:本實施例水中不動試驗之長條圖。
第3圖:本實施例腦部及各臟器之總抗氧化力長條圖。
第4圖:本實施例腦部及各臟器之GSH含量長條圖。
第5圖:本實施例海馬迴區之總抗氧化力長條圖。
第6圖:本實施例海馬迴區之GSH含量長條圖。
S1‧‧‧萃取步驟
S2‧‧‧過濾步驟
S3‧‧‧乾燥步驟
Claims (2)
- 一種桂花萃取物在製備預防或治療憂鬱症藥物或保健食品之用途,該桂花萃取物係藉由下列步驟之方法而製得:一萃取步驟,將桂花浸泡於一溶劑中共同形成一萃取混合液,以該溶劑將該桂花中之抗氧化物質萃取至該萃取混合液中;一過濾步驟,將該萃取混合液之固體剩餘物去除,得到一萃取液;以及一乾燥步驟,取該萃取液進行乾燥處理後,以獲得乾燥後之桂花萃取物;其中,該桂花萃取物係具有提升個體總抗氧化力及麩胱甘肽含量之表現。
- 依申請專利範圍第1項所述之桂花萃取物在製備預防或治療憂鬱症藥物或保健食品之用途,其中,該藥物或保健食品中的桂花萃取物含量為每公斤體重之個體投予0.01~6.0克。
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