TWI384067B - 快速篩選生醫材料對細胞影響之細胞培養盤 - Google Patents

Description

快速篩選生醫材料對細胞影響之細胞培養盤

本發明關於一種細胞培養盤，尤指具有特定排列方式之複數個生醫材料之多槽體之細胞培養盤，其可用於觀察細胞行為及篩選生醫材料。

生醫材料泛指可用以取代活體部分組織而可直接和活體接觸並執行該組織之功能者，此類物質多屬反應鈍性物質，不易和身體有免疫反應的產生，目前較常被使用的生醫材料，大致可分為：高分子(polymer)、複合材料(composite)、金屬(metal)、合金(alloy)或其組合。而臨床方面的生醫材料又可再分為二大類：合成材料和天然材料，其可應用於各種植入物或輔助材料，例如：人工心血管、縫線等，因此對於各種不同生醫材料於人體細胞、組織中的研究隨著科技進步而顯得越益重要。

目前雖已有許多研究著眼於生醫材料對生物體外之細胞行為的影響，例如：Young等人研究發現乙烯乙烯醇共聚物(poly(vinyl alcohol-co-ethylene),EVAL)可以誘導神經幹細胞分化[Young et el.,Biomaterials 26(2005)4291-4299]；Chen等人研究發現聚乳酸-甘醇酸(PLGA)和聚偏二氟乙烯(PVDF)等生醫材料所培養出的牙胚細胞具有不同的形態[Chen et al.,JBMR .Part A 83(2007)241-248]。

而Daniel G.等人在2005年及2009年提出，利用高傳輸量的方法(high throughput method)在玻璃板上 製造出一個高分子微陣列，並將人類胚胎幹細胞培養於此微陣列後，觀察細胞生長。[Daniel G.et al.,Biomaterials 26(2005)4892-4897,and Daniel G et al.,Comb Chen High Troughput Screen.12(2009)554-561]；雖此方式可以快速掃描出細胞與不同摻混比例之生醫材料間的行為，但是此技術在一般實驗室並不容易操作，無法將不同種之生醫材料依特定方式排列並篩選之。

綜上所述，發展一套可快速篩選具不同特性生醫材料之細胞培養盤，並可同時觀察不同特性生醫材料對細胞生長的影響之方法，實為一亟待開發的課題。

有鑑於先前技術之缺失，本發明之主要目的為提供一細胞培養盤，其係為一快速篩選生醫材料對細胞影響之細胞培養盤，其具有不同特性之生醫材料於其複數個槽體，且前述不同特性之生醫材料係以特殊規則排列。

本發明之又一目的，係在提供一種利用本發明細胞培養盤觀察細胞行為的方法，其可將細胞同時培養於各種不同特性之生醫材料，並同時觀察不同培養環境下的細胞之行為，以了解各種不同生醫材料對於細胞行為的影響。

本發明之再一目的，係在提供一種利用本發明細胞培養盤篩選生醫材料的方法，如前述觀察不同特性之生醫材料對細胞行為的影響後，再經由細胞觀察方法選出適合的生醫材料進行後續研究或細胞培養。

為達上述目的，本發明提供一細胞培養盤，其包含：一未經處理之細胞培養盤，其具有複數個槽體；複 數個生醫材料，其係置放於前述複數個槽體中；其中前述複數個生醫材料係包含：親疏水性材料、帶電性材料、生物可降解性材料、摻混材料、水膠材料或其組合；且前述複數個生醫材料係依下列方式排列於細胞培養盤：前述親疏水性材料係依其親疏水性之強弱依序排列；前述帶電性材料係依正負、負正或其組合之方式排列；前述生物可降解性材料係依其生物可降解性之強弱依序排列；前述摻混材料係依摻混比例之高低依序排列；且前述複數個生醫材料係可以行或列之方式排列於前述細胞培養盤上。

較佳地，前述細胞培養盤係用以觀察細胞行為。

較佳地，前述細胞培養盤係用以篩選生醫材料。

較佳地，前述親疏水性材料包含：聚偏二氟乙烯(poly(vinylidene difluoride)，下稱PVDF)或聚乙烯(poly(ethylene)，下稱PE)、乙烯乙烯醇共聚物-44((vinyl alcohol-co-ethylene)-44，下稱EVAL-44)、乙烯乙烯醇共聚物-38((vinyl alcohol-co-ethylene)-38，下稱EVAL-38)、乙烯乙烯醇共聚物-32((vinyl alcohol-co-ethylene)-32,下稱EVAL-32)、乙烯乙烯醇共聚物-27((vinyl alcohol-co-ethylene)-27，下稱EVAL-27)、聚乙烯醇(poly(vinyl alcohol)，下稱PVA)或其組合。

較佳地，前述帶電性材料包含：聚丙烯胺(poly(allylamine)，下稱PAA)、聚離胺酸(poly(D-lysine)，下稱PDL)、聚丙烯醯胺(Poly(acrlacid)，下稱PAAc)、玻尿酸(Hyaluronic acid，下稱HA)或其組合。

較佳地，前述生物可降解性材料包含：聚甘醇酸 (Poly(glycolic acid)，下稱PGA)、聚乳酸(poly(lactic acid)，下稱PLLA)、聚乳酸-甘醇酸(poly(DL-lactide-co-glycolide)，下稱PLGA)、聚[(R )-3-羥基丁酸](poly[(R )-3-hydroxybutyric acid]，下稱PHB)或其組合。

較佳地，前述摻混材料包含：聚己酸內酯(poly(caprolactone)，下稱PCL)、甲殼素或其組合。

較佳地，前述水膠材料包含：聚乙烯醇(poly(vinyl alcohol)，下稱PVA)、聚甲基丙烯酸乙酯(poly(2-hydroxyethyl methacrylate)，下稱pHEMA)、聚甲基丙烯酸丙酯(poly(2-hydroxypropyl methacrylate)，下稱pHPMA)、甲殼素(Chitosan)或其組合。

較佳地，前述細胞培養盤進一步包含一組織培養用聚苯乙烯(Tissue-culture polystyrene，下稱TCPS)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate，下稱PMMA)或其組合。

較佳地，前述且前述生醫材料之排列方式係為：第一列自左至右係為：聚偏二氟乙烯(PVDF)或聚乙烯(PE)、乙烯乙烯醇共聚物-44(EVAL-44)、乙烯乙烯醇共聚物-38(EVAL-38)、乙烯乙烯醇共聚物-32(EVAL-32)、乙烯乙烯醇共聚物-27(EVAL-27)及聚乙烯醇(PVA)；第二列自左至右係為：聚丙烯胺(PAA)、聚離胺酸(PDL)、聚丙烯醯胺(PAAc)、玻尿酸(HA)、組織培養用聚苯乙烯(TCPS)、聚甲基丙烯酸丙酯(pHPMA)；第三列自左至右係為：聚甘醇酸(PGA)、聚乳酸(PLLA)、聚乳酸-甘醇酸(PLGA)、聚[(R )-3-羥基丁酸](PHB)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚甲 基丙烯酸丙酯(pHPMA)；第四列自左至右係為：100%的聚己酸內酯(PCL)、80%的聚己酸內酯(PCL)和20%的甲殼素、60%的聚己酸內酯(PCL)和40%的甲殼素、40%的甲殼素和60%的聚己酸內酯(PCL)、20%的聚己酸內酯(PCL)和80%的甲殼素、100%的甲殼素。

本發明之又一目的為提供一種利用本發明細胞培養盤觀察細胞行為之方法，其包含：(a)取一本發明細胞培養盤；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為。

本發明之再一目的為提供一種利用本發明細胞培養盤篩選生醫材料之方法，其包含：(a)取一本發明細胞培養盤；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為；(d)篩選前述生醫材料。

較佳地，前述細胞係包含原生細胞、原核細胞、植物細胞、動物細胞、真菌細胞或其組合。

較佳地，前述細胞係為神經幹細胞、人類間葉幹細胞、人類牙胚細胞或其組合。

較佳地，前述步驟(c)之觀察係透過免疫染色法(Immunostaining method)、穿透光光學顯微鏡、掃描式電子顯微鏡、穿透式電子顯微鏡或其組合。

綜上所述，本發明之細胞培養盤具有不同特性之生醫材料於其複數個槽體中，且前述不同特性之生醫材料係以特殊規則排列，並可利用此細胞培養盤進行細胞行為觀察及篩選生醫材料。

本發明透過將各種不同特性之生醫材料分成各種 群組，如：親疏水性、表面帶電性、生物可降解性、摻混材料、水膠，而後再依特殊規則排列之，分別置放於未經處理之細胞培養盤上，得本發明細胞培養盤。將前述生醫材料置放於未經處理之細胞培養盤上之方法可用任何習知之方法，包括：塗佈(coating)、電漿嫁接(plasma graft)、放置薄膜等方法。

本發明之細胞培養盤之槽體個數可為一般市面上可購得之細胞培養盤槽體個數，即為96、48、24、12或6等槽體個數，亦可視需要開發任何槽體個數之細胞培養盤。

本發明之細胞培養盤上之生醫材料係包含：親疏水性材料、帶電性材料、生物可降解性材料、摻混材料、水膠材料或其組合；前述生醫材料係以下列規則排列：親疏水性材料係依其親疏水性之強弱依序排列；帶電性材料係依正負、負正或其組合之方式排列；生物可降解性材料係依其生物可降解性之強弱依序排列；摻混材料係依摻混比例之高低依序排列；且前述複數個生醫材料係可以行或列之方式排列於前述細胞培養盤上。

前述生醫材料之種類及排列方式可視情況調整，只要符合上述排列邏輯即可。

本發明親疏水性材料之親疏水性係指分子透過氫鍵和水形成短暫鍵結的物理性質之強弱，當一分子越容易與水形成短暫鍵結，則該分子之親水性越強，而本發明親疏水性材料即依其親水性自強至弱排列；本發明親疏水性材料包含，但不限於：聚偏二氟乙烯(PVDF)或聚乙烯(PE)、乙烯乙烯醇共聚物-44(EVAL-44)、乙烯乙烯醇共聚物-38(EVAL-38)、乙烯乙烯醇共聚物 -32(EVAL-32)、乙烯乙烯醇共聚物-27(EVAL-27)、聚乙烯醇(PVA)或其組合。

前述乙烯乙烯醇共聚物(EVAL)後方編號意為其結構(如化學式(I)所示)中n的值，代表疏水部份(乙烯結構)佔整體結構的莫耳百分比(mol%)，當此n值越大(即編號值越大)，表示乙烯乙烯醇共聚物(EVAL)疏水性越高；結構式(I)：

本發明帶電性材料之帶電性係指分子表面帶電性，當塗佈於細胞培養盤後，不會改變前述分子表面帶電性，而本發明表面帶電性材料係依其帶電性排列，其可為「連續正電或負電」排列，即將正電或負電連續排列，例如：「正正負負」或「負負正正」等；亦可為「正負交錯」排列，例如：「正負正負」、「負正負正」；或是其他各種組合，例如：「正負負正」或「負正正負」、「正正負正負負正」等態樣；前述帶電性材料之排列方式僅為示例性表示，而非用以限制本發明，其可視情況而做調整；本發明帶電性材料包含，但不限於：聚丙烯胺(PAA)、聚離胺酸(PDL)、聚丙烯醯胺(PAAc)、玻尿酸(HA)或其組合。

本發明生物可降解性材料之生物可降解性係指生醫材料在有足夠的濕度、氧氣含量與適當環境條件下，可被微生物或生物體所代謝分解產生水、二氧化碳或甲烷的特性，當前述代謝分解之時間越短，則前述生物可 降解性越強；本發明生物可降解性材料包含，但不限於：聚甘醇酸(PGA)、聚乳酸(PLLA)、聚乳酸-甘醇酸(PLGA)、聚[(R )-3-羥基丁酸](PHB)或其組合。

本發明摻混材料係指將二種以上不同材料依照不同比例相互混合後而得；本發明摻混材料包含，但不限於：聚己酸內酯(PCL)、甲殼素或其組合。

本發明水膠材料係指高分子鍊段經由化學或物理交聯後所形成之可吸水性膠體；本發明水膠材料包含，但不限於：聚乙烯醇(PVA)、聚甲基丙烯酸乙酯(pHEMA)、聚甲基丙烯酸丙酯(pHPMA)、甲殼素(Chitosan)。

本發明細胞培養盤可進一步包含一組織培養用聚苯乙烯(TCPS)，該生醫材料係為電漿改質過之聚苯乙烯，於較佳實施態樣中係作為對照組使用。當所使用細胞培養盤之材料為組織培養用聚苯乙烯(TCPS)時，即不需再塗佈任何生醫材料而直接培養細胞即可；此外，亦可進一步包含聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)，其係用於骨科手術時之骨水泥。

本發明之細胞培養盤100之較佳實施態樣之一可參考第一圖(此係以24個槽體之細胞培養盤為例)，該細胞培養盤100包含：複數個槽體；複數個生醫材料，其係置放於前述複數個槽體中；其中前述複數個生醫材料係包含：親疏水性材料10、帶電性材料20、生物可降解性材料30、摻混材料40、水膠材料50及組織培養用聚苯乙烯(TCPS)及聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)。其中前述各種生醫材料排列依下列方式：第一列係為前述親疏水性材料10，依其親水性自 弱至強、由左至右依序排列為：聚偏二氟乙烯(PVDF)或聚乙烯(PE)、乙烯乙烯醇共聚物-44(EVAL-44)、乙烯乙烯醇共聚物-38(EVAL-38)、乙烯乙烯醇共聚物-32(EVAL-32)、乙烯乙烯醇共聚物-27(EVAL-27)及聚乙烯醇(PVA)；第二列係為前述帶電性材料20，依其帶電性以「正電、正電、負電、負電」的順序、由左至右依序排列，其生醫材料排列為：聚丙烯胺(PAA)、聚離胺酸(PDL)、聚丙烯醯胺(PAAc)、玻尿酸(HA)；第三列係為前述生物可降解性材料30，依生物可降解性自強至弱、由左至右依序排列為：聚甘醇酸(PGA)、聚乳酸(PLLA)、聚乳酸-甘醇酸(PLGA)、聚[(R )-3-羥基丁酸](PHB)；第四列係為聚己酸內酯(PCL)和甲殼素這二種材料(摻混後即為本發明所述之摻混材料40)，依摻混比例之高低依序、由左至右排列為：100%的聚己酸內酯(PCL)、80%的聚己酸內酯(PCL)和20%的甲殼素、60%的聚己酸內酯(PCL)和40%的甲殼素、40%的甲殼素和60%的聚己酸內酯(PCL)、20%的聚己酸內酯(PCL)和80%的甲殼素、100%的甲殼素；最右行係為前述不同種類之水膠材料50，自上而下依序為：聚乙烯醇(PVA)、聚甲基丙烯酸乙酯(pHEMA)、聚甲基丙烯酸丙酯(pHPMA)、甲殼素(Chitosan)；而組織培養用聚苯乙烯(TCPS)排列於玻尿酸(HA)之右方，聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)排列於聚[(R )-3-羥基丁酸](PHB)之右方。

本發明之不同生醫材料各有多種特性，而非僅具有前述分類之特性，不同類之生醫材料亦可具有其他類之特性，此僅為示例性分類而非用以侷限本發明之實施態樣；舉例而言，本發明細胞培養盤100中，聚乙烯醇(PVA)屬於親疏水性材料10中的疏水性材料，亦屬於水膠材料50之一；而甲殼素(Chitosan)在本發明細胞培養盤100中作為摻混材料40之一，亦屬於水膠材料50之一。因此，適用於本發明之生醫材料當其具有多種特性時，其排列方式並不僅限於第一圖之實施態樣，而可視情況而調整，亦即，在一細胞培養盤中，可有二個以上的槽體置放相同的生醫材料。

利用本發明細胞培養盤100觀察細胞行為之方法，其包含下列步驟：(a)取本發明細胞培養盤100；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤100；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為。前述「細胞行為」(cell behavior)係指細胞懸浮(cell suspension)、細胞貼附(cell attachment)、細胞爬行(cell migration)、細胞分化(cell differentiation)、細胞生長(cell growth)、細胞侵潤(cell invasion)、細胞增生(cell proliferation)、細胞凋亡(cell apoptosis)、細胞壞死(cell necrosis)、細胞聚集(cell aggregation)等一般習知之細胞行為。

利用本發明細胞培養盤100篩選生醫材料之方法，其包含下列步驟：(a)取本發明細胞培養盤100；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤100；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為；(d)篩選細胞培養盤之生醫材料。前述「篩選」之方法係為透過依照觀察不同特性之生醫材料所培養出之特定細胞行為，選擇最為恰當的 生醫材料做後續研究，例如依照細胞之爬行、貼附、懸浮等等細胞行為，判斷何者為所欲研究的細胞行為，再選擇該生醫材料做後續培養。

前述觀察細胞行為或篩選生醫材料之方法中，細胞培養盤100可培養任何細胞，包含原生細胞、原核細胞、植物細胞、動物細胞、真菌細胞或其組合，舉例如：體細胞(soma cell)、癌細胞(cancer cell)、幹細胞(stem cell)、生殖細胞(germ cell)等，於較佳實施態樣中，前述細胞係為神經幹細胞。

前述觀察細胞行為或篩選生醫材料之方法中，其步驟(c)之「觀察」可透過任何習知之細胞行為觀察方法，例如：細胞一般形態學觀察法，其係利用普通顯微鏡或電子顯微鏡觀察細胞或組織樣本；免疫化學技術觀察法，其係透過螢光分子或酵素作為抗體進行細胞或組織樣本的標記，再使用螢光顯微鏡或普通顯微鏡觀察被標記之細胞或組織樣本；活細胞直接觀察法；培養細胞生物學性狀檢測，其係自細胞初代培養至繼代培養皆詳細紀錄細胞形態、增殖或特定細胞之行為；前述「觀察」亦可為前述各種細胞行為觀察方法之組合；其中細胞一般形態學觀察法和免疫化學技述觀察法如：免疫染色法(Immunostaining method)、穿透光光學顯微鏡、掃描式電子顯微鏡、穿透式電子顯微鏡或其組合；於本發明較佳實施態樣中，前述觀察係透過免疫螢光染色法(Immunofluorescence labeling method)。

將細胞培養於本發明細胞培養盤100上，藉由同時將細胞培養於各種不同特性之生醫材料上，同時觀察各種生長環境下的細胞行為，一般使用者在初始接觸某種 細胞時，可快速的了解其與各種不同特性之生醫材料的關係。不僅如此，可藉由觀察前述細胞與各種生醫材料之間的行為，篩選出最適合研究特定細胞或研究特定細胞行為之生醫材料，並進行後續研究或測試。

實施例一：製作本發明細胞培養盤

取一未經塗佈之細胞培養盤(市面上可購得之24個槽體的細胞培養盤，24-well tissue culture plate)，其材料係為組織培養用聚苯乙烯(TCPS)(廠牌：COSTAR 3524)，並取以下生醫材料，且依照下列順序塗佈至前述細胞培養盤之各槽體內。前述塗佈生醫材料之方式係以一般習知方式達成。

本實施例之細胞培養盤排列方式如前述第一圖所示。

實施例二：利用本發明細胞培養盤觀察細胞行為的方法

取前述實施例一之細胞培養盤，將神經幹細胞分別選擇培養於聚乙烯醇(PVA)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚離胺酸(PDL)和甲殼素之生醫材料中，其培養過程皆為放入無菌培養箱(37℃，含有5%CO₂ )，培養基為DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)/F12(廠商：GIBICO型號：10565)並含有N2添加劑(N2 supplement)(廠商：GIBICO，型號：17502-048)，其pH值為7.4，培養天數各如下表一：

將前述四組之神經幹細胞中的星狀細胞(Astrocytes)進行免疫螢光染色，其所使用之一級抗體為：抗神經膠質酸性蛋白(anti-Glial Fibrillary Acidic Protein，下稱GFAP)(廠牌：Millipore，型號：AB5804)，所使用之二級抗體為：螢光黃結合親合性純化二級抗體(Fluorescein conjugated affinity purified secondary antibody，廠牌：chemicon，型號：AP182F)，其染色結果顯示各如上表所載各圖所示。

觀察前述細胞免疫螢光染色結果，其當細胞培養於親水性高的聚乙烯醇(PVA)時，結果如第二A圖所示，觀察此時神經幹細胞會懸浮於此親水基材上；而當細胞培養於疏水性高之聚偏二氟乙烯(PVDF)上時，結果如第二B圖所示，神經幹細胞會貼附於此基材上，並開始有突觸向外生長。

當將神經幹細胞培養於帶正電性的聚離胺酸(PDL)上時，結果如第二C圖所示，神經幹細胞會貼附於基材上並開始分化。

當神經幹細胞培養於生物可降解性強的Chitosan上時，其結果如第二D圖所示，神經幹細胞會在基材上分化成星狀細胞，並開始向外爬出神經幹細胞球。

當觀察細胞行為後，可透過以上細胞行為篩選最為適當之生醫材料。例如：當欲研究神經幹細胞中星狀細胞的突觸生長狀況時，則取疏水性較高的聚偏二氟乙烯(PVDF)做生醫材料以培養細胞，進行後續研究；而 當欲研究神經幹細胞分化狀況時，則取聚離胺酸(PDL)做生醫材料以進行培養；當欲研究神經幹細胞之貼附行為時，取聚離胺酸(PDL)做生醫材料以培養細胞，當欲研究神經幹細胞之懸浮行為時，則以不塗佈任何生醫材料(細胞接觸之生醫材料為細胞培養盤之材料-組織培養用聚苯乙烯(TCPS))做細胞培養。

綜上所述，利用本發明細胞培養盤培養細胞，可同時觀察不同特性之生醫材料對於細胞行為的影響，並可進一步篩選特定的生醫材料做後續研究，著實縮短了研究人員在甫進入特定細胞研究領域時，了解細胞特性所必須花費的時間。

所屬領域之技術人員當可了解，在不違背本發明精神下，依據本案實施態樣所能進行的各種變化。因此，顯見所列之實施態樣並非用以限制本發明，而是企圖在所附申請專利範圍的定義下，涵蓋於本發明的精神與範疇中所做的修改。

10‧‧‧親疏水性材料

20‧‧‧帶電性材料

30‧‧‧生物可降解性材料

40‧‧‧摻混材料

50‧‧‧水膠材料

100‧‧‧細胞培養盤

第一圖係本發明之細胞培養盤較佳實施態樣之一。

第二A圖係為將神經胚胎幹細胞培養於聚乙烯醇(PVA)材料二天後之免疫螢光染色圖。

第二B圖係為將神經胚胎幹細胞培養於聚偏二氟乙烯(PVDF)材料三天後之免疫螢光染色圖。

第二C圖係為將神經胚胎幹細胞培養於聚離胺酸(PDL)材料三天後之免疫螢光染色圖。

第二D圖係為將神經胚胎幹細胞培養於甲殼素材料五天後之免疫螢光染色圖。

10‧‧‧親疏水性材料

20‧‧‧帶電性材料

30‧‧‧生物可降解性材料

40‧‧‧摻混材料

50‧‧‧水膠材料

100‧‧‧細胞培養盤

Claims (12)

1. 一種細胞培養盤，其包含：一未經處理之細胞培養盤，其具有複數個槽體；複數個生醫材料，其係置放於前述複數個槽體中；其中前述複數個生醫材料係包含：複數親疏水性材料、複數帶電性材料、複數生物可降解性材料、複數摻混材料、及複數水膠材料；且前述複數個生醫材料係依下列方式排列於前述細胞培養盤中：前述複數親疏水性材料係依其親疏水性之強弱依序排列；前述複數帶電性材料係依連續正電或負電、正負電交錯或其組合之方式排列；前述複數生物可降解性材料係依其生物可降解性之強弱依序排列；前述複數摻混材料係依摻混比例之高低依序排列；且前述複數個生醫材料係可以行或列之方式排列於前述細胞培養盤上，其中前述生醫材料之排列方式係為：第一列係親疏水性材料，其自左至右係為：聚偏二氟乙烯(PVDF)或聚乙烯(PE)、乙烯乙烯醇共聚物-44(EVAL-44)、乙烯乙烯醇共聚物-38(EVAL-38)、乙烯乙烯醇共聚物-32(EVAL-32)、乙烯乙烯醇共聚物-27(EVAL-27)及聚乙烯醇(PVA)；第二列係帶電性材料，其自左至右係為：聚丙烯胺(PAA)、聚離胺酸(PDL)、聚丙烯醯胺(PAAc)、玻尿酸(HA)、組織培養用聚苯乙烯(TCPS)、聚甲基丙烯酸丙酯(pHPMA)；第三列係生物可降解性材料，其自左至右係為：聚甘醇酸(PGA)、聚乳酸(PLLA)、聚乳酸-甘醇酸(PLGA)、 聚[(R )-3-羥基丁酸](PHB)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚甲基丙烯酸丙酯(pHPMA)；第四列係摻混材料，其自左至右係為：100%的聚己酸內酯(PCL)、80%的聚己酸內酯(PCL)和20%的甲殼素、60%的聚己酸內酯(PCL)和40%的甲殼素、40%的甲殼素和60%的聚己酸內酯(PCL)、20%的聚己酸內酯(PCL)和80%的甲殼素、100%的甲殼素。
2. 如申請專利範圍第1項所述之細胞培養盤，其係用以觀察細胞行為。
3. 如申請專利範圍第1項所述之細胞培養盤，其係用以篩選生醫材料。
4. 如申請專利範圍第1項所述之細胞培養盤，其進一步包含一組織培養用聚苯乙烯(Tissue-culture polystyrene,TCPS)、聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA)。
5. 一種利用申請專利範圍第1至4項中任一項所述之細胞培養盤觀察細胞行為之方法，其包含：(a)取一申請專利範圍第1至4項中任一項之細胞培養盤；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為。
6. 如申請專利範圍第5項所述之方法，其中前述細胞係包含原生細胞、原核細胞、植物細胞、動物細胞、真菌細胞或其組合。
7. 如申請專利範圍第5項所述之方法，其中前述細胞係為神經幹細胞、人類間葉幹細胞、人類牙胚細胞或其組合。
8. 如申請專利範圍第5項所述之方法，其中前述步驟(c) 之觀察係透過免疫染色法(Immunostaining method)、穿透光光學顯微鏡、掃描式電子顯微鏡、穿透式電子顯微鏡或其組合。
9. 一種利用申請專利範圍第1至4項中任一項所述之細胞培養盤篩選生醫材料之方法，其包含：(a)取一申請專利範圍第1至4項中任一項之細胞培養盤；(b)將細胞培養於前述細胞培養盤；(c)觀察前述步驟(b)之細胞行為；(d)篩選前述生醫材料。
10. 如申請專利範圍第9項所述之方法，其中前述細胞係包含原生細胞、原核細胞、植物細胞、動物細胞、真菌細胞或其組合。
11. 如申請專利範圍第9項所述之方法，其中前述細胞係為神經幹細胞、人類間葉幹細胞、人類牙胚細胞或其組合。
12. 如申請專利範圍第9項所述之方法，其中前述步驟(c)之觀察係透過免疫染色法(Immunostaining method)、穿透光光學顯微鏡、掃描式電子顯微鏡、穿透式電子顯微鏡或其組合。