TW518321B - Compounds used in diabetes remedy, carcinostatic agent, apoptosis inducing agent, anti-pathogenic microbe agent, anti-rheumatism agent, hyperlipaemia remedy, immune modulator, anti-allergy agent, or the optically active substances or the salts thereof - Google Patents

Description

518321 A7 B7 五、發明説明（f ) 技術領域 本發明為有關醫藥上有用之具有制癌作用等生理活性 之化合物，及其製法。 以往技術 以往臨床治療所用藥物有烷化劑，代謝阻礙劑，植物 生物鹼等之制癌劑，抗生物質，免疫促進劑，免/疫調節 劑等，但這些藥物療法尚未完成。 其中天然物由來之前列腺素中，在5員璟有α、 β -不飽和羰基之前列腺素Α及J類抑制D Ν Α合成而以安全 性高當作制癌劑之報告，並合成各種衍生物（特開昭62 -96438)〇 所欲解決之課題 本發明之目的乃開發具有制癌作用等生理作用之化合 物，其製法及含該化合物之醫藥。 解決課題之手^ 本發明者們為達成此目的而致力撿討之結果，發現呈 式[I]化合物（以下稱本發明化合物）可由式[IV] 4, 5-二 羥基-2-環戊烯_卜_ (以下稱璟戊烯酮）與含SH基化合物 反應來生成，及本發明化合物有種種強力生理活性而可 用以防治對此化合物有種種強力生理活性而可用以防治 對此化合物有感受性之疾病，終於完成本發明。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 概略而言，本發明之第1發明為有關如下式[I]化合物 或其光學活性體或這些之鹽

X

(式中5員璟内之虛線乃示該5員環可為有雙鍵之璟戊 烯環或其飽和之璟戊烷環，若為璟戊烯環時，X為0H, Y^O，Z為H,右為環戊院時，X為==〇, Y為0H, 7 為ΠΗ. R為從会SH某：卜仝物丰除硓甚^ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX 297公嫠） 518321 ΑΊ Β7 五、發明説明（ 式 下 如 為 榡 態 之 明鹽 發之 1 些 第這 此或 體 性 舌 ^V1 學 光 其 或 物 合 化

〇 除 去 物 合 化 基 Η S 含 從 為 R 但 式 下 如 為 4Ι1Κ 榜 態 一 鹽 ΠΡ 之 之些 明這 發或 1 體 第性 活 學 光 其 或 物 )ο合 基化 殘η 之II 基丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 〇人 R — S·

r—〇H -OH 【m】 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (但R為從含SH基化合物去除SH基之殘基）。 第2發明為有關第1發明之式[I]化合物或其光學活 性體或這些之鹽之製法，其特激為令如下式[IV]4, 5 -二 翔基-2-璟戊烯棊-卜酮或其光學活性體或這些之鹽所選 出之化合物與含SH基之α胺基酸或胺基酸殘基數小於5之 含SH基之肽反應。 〇人 -ΟΗ -ΟΗ 【IV】 第3發明爲有關以第1發明之式〔I〕化合物或其光學活 性體或這些之鹽所選出之至少一種化合物爲有效成分之醫 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 518321 A7 _ B7 五、發明説明（◊) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 藥組成物，其係用以作爲活體防禦劑（如免疫調節劑’抗過敏 劑，抗風濕劑），糖尿病治療劑，高脂血症治療劑，制癌劑， 細胞自滅（Apoptosis)誘發劑，或抗病原微生物劑（如抗病毒 劑，抗菌劑）。 圖式之簡單說明 第1圖乃示CM1之質譜。 第2圖乃示CM1之1 H-NMR。 第3圖乃示CM1之UV吸收質譜。 第4圖乃示CM2之1 H-NMR。 第5圖乃示C Μ 1之g C - N M R。 第6圖乃示CM之I R。 第7圖乃示留存時間與吸光度之關傺。 第8圖乃示GM之1 H-NMR。 第9圖乃示GM之Bc-NMR。 第1 0圖乃示G Μ之質譜。 第11圖乃示GM之UV。 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 樣 式 出 溶 之 例 1 之 物 生 衍 硫 R0酮 1 之戊Μ環 G 示示 乃乃 圖圖 2 3 1 1 第第 在 5 Ο 與21析 間在層 時與之 應時物 反應應 之反反 時之之 酸時例 胺 酞 一 胱甘之 半胱明 L-麩 發 用用本 示。示 示 乃偽乃 乃 圖關圖 。圖 14之15像16 第度第關第 光 之 吸 度 光 吸 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（4 ) 第17圖乃示第4圖之2.99分之峰之質譜。 第18圖乃示溶解即後反應液之UV。 第19圖乃示反應50分後之反應液之UV。 第20圖乃示用麩胱甘酞時溶解即後之反應液之UV。 第21圖乃示用麩胱甘酞時反應50分後反應液之UV。 第22圖乃示反應物之13C-NMR。 第23圖乃示留存時間與吸光度之關係。 第24圖乃示GD之1H-NMR。 第25圖乃示GD之1 3C-NMR。 第26圖乃示GD之質譜。 第27圖乃示GD之IR。 第28圖乃示CM之抑制癌細胞增殖之活性，且示作爲制 癌劑、細胞自滅誘發劑之有效性。 _ 第29圖乃示GM之抑制癌細胞增殖之活性，且示作爲制 癌劑、細胞自滅誘發劑之有效性。 第30圖乃示GM量與腫瘤壞死因子產生量之關係，且示 作爲需抑制腫瘤壞死因子產生之疾病用之活體防禦劑之有 效性。 第31圖乃示GM量與足浮腫增加率之關係，且示作爲活 體防禦劑，特別是作爲抗風濕劑之有效性。 第32圖乃示培養液中GM濃度與NO厂濃度之關係，且 示作爲需抑制ΝΟΓ產生之疾病用之活體防禦劑之有效性。 第33圖乃示培養時間與活細胞數之關係，且示藉由GM 可抑制LPS細胞障礙，以作爲由LPS引起之疾病用之活體 防禦劑之有效性。 第34圖乃示對Jiarkat細胞增殖之GM之影響，且示作爲 制癌劑、特別是作爲抗白血病劑之有效性。 第35圖乃示對Molt-3細胞增殖之GM之影響，且示作 爲制癌劑、特別是作爲抗白血病劑之有效性。 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 請 先 閲· 讀 背 面 之 注 意 事 項 再

訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Lk 518321 A7 B7 五、發明説明（f) 第36圖乃示藉由添加GM於Molt-3細胞呈現之fas抗原， 且示作爲抗白血病劑之有效性。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 第37圖乃示藉由添加GM於Jurk at細胞呈現之fas抗原， 且示作爲抗白血病劑之有效性。 第38圖乃示藉由添加GM fas抗原呈現細胞之比率變化， 且示作爲抗白血病劑之有效性。 第39圖乃示GM投與量與血糖値之關係，且示作爲糖尿病 治療劑之有效性。 第40圖乃示投與量與血淸胰島素値之關係，且示作爲 糖尿病治療劑之有效性。 第41圖乃示GM投與量與血淸胰島素値之關係，且示作 爲高血脂症治療劑之有效性。 第42圖乃示GM投與量與血淸三甘油酯値之關係，且示 作爲高血脂症治療劑之有效性。 第43圖乃示投與量與血淸游離脂肪酸値之關係，且 示作爲高血脂症治療劑之有效性。 第44圖乃示GM濃度與細胞生存率之關係，且示作爲抗 病毒劑之有效性。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 第45圖乃示GM濃度與p2 4產生量之關係，且示作爲抗 病毒劑之有效性。 第46圖乃示GM之遲延型過敏反應抑制作用，且示作爲 抗過敏劑之有效性。 第47圖乃示（·）體環戊烯酮之對二甲胺基苄醯基衍生物 之CD及（-)體環戊烯酮之立體構造。 第48圖乃示（+ )體環戊烯酮之對二甲胺基苄醃基衍生物 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明)

之CD及（+ )體環戊烯酮之立體構造。 化合物代號及構造式之說明 CM1、CM2爲2-羥基-4·半胱胺酸-S·基-2-環戊烯-1-酮非 對映體，其中之一係表爲式[VIII]之構造，而另一者係表 爲式[IX]之構造。 0H Η

【W】 (請先閱讀背面之注意事項 本I) ΗΤ •c"··Ah

OH

ο 【κ】 CM爲2-羥基-4_半胱胺酸-S-基-2-環戊烯-1-酮，係表爲 式[VII]之構造。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

0H

〇 NH 【W】 GM爲2-羥基-4-麩胱甘肽-S-基-2-環戊烯-1-酮，係表爲 式[VIII ]之構造。 • 7 A · 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（α

OH

Η 【vm】 Αη2 GD爲2,3-二羥基-4·麩胱甘肽-S-基·2-環戊烯酮，係表 爲式[X]之構造。 7Ϊοοη

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) [X] 發明實施形態 以下具體說明本發明。 本發明中所用式[IV]環戊烯酮包括4位及5位羥基之 立體組態爲順及反式異構物。本發明可用順體，也可用 反體，也可用兩體之混合物，又可用這些之光學活性體。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 順體環戊嫌酮可依化學合成法而得[Helvetica Chiraica Acta,第55卷，第2838〜2844頁（19 72 )]。反體環戊烯 酮也可依化學合成法〔Carbohydrate Res.第247卷， 第21 7〜222頁（1993)〕，也可將糖醛酸，如葡萄糖醛酸， 糖醛酸衍生物，如葡萄糖醛酸內酯，或這些之含有物等加 熱處理而得（PCT/ JP97/ 03052 )。本發明也可用含有環戊 烯酮之這些之加熱處理物，其部分精製物及精製物。

例如糖醛酸採用D-葡萄糖醛酸，將其 ％溶液在121°C -7B - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（) 加熱處理4小時而生成環戊烯酮。將此加熱處理物中之 環戊烯酮以溶劑萃取而濃縮，在矽膠層析，濃縮而以氯 仿萃取，予以順相柱層析來單離環戊烯酮。 璟戊烯酮之物性如下。環戊烯酮之質量分析使用DX 302 質量分析計（日本電子公司）。用重氫氯仿溶劑之N M R測定 乃用JNM-A500(日本電子公司）。比旋光度用DIP-370型 旋光計（日本分光公司），UV吸收譜用UV-2500分光光度 計（島津製作所公司），紅外線吸收譜（IR)用FTIR-8000 紅外線分光光度計（島製作所公司）來測定。 MS τη/ ζ 1 1 5 [Μ+Η] + *H-NMR (CDC 1 3 ) δ 4. 2 0 ( 1 Η, d, J - 2. 4Hz, 5 — Η)、4. 8 3 ( 1 Η, m, 4 -Η)、6· 30 (1 Η, d d , J = l. 2，6 . 1Hz，2 — Η)、7· 48 (1 Η, d d, J = 2· 1, 6. 1 Η ζ, 3—Η) 但1 Η _ Ν Μ R化學移位值以C Η C 1 3之化學移位值為7 . 2 6 PPffi表示。 旋光度··〔ct〕D 2° 0° (! 1 · 3、水） UV:又 max 215nm (水） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) IR(KBr 法）：3400、1715、1630、1115、1060、1 0 2 5 cm"1 〇 將單離之環戊烯酮予以光學分割，得（-)-4,5 -二羥基 -2 -環戊稀-1-酮及（ + )- 4,5 -二經基-2-環戊稀-1-酮。當 然依合成方法所得之環戊烯酮也可光學分割。 例如，將環戊烯酮溶在乙醇，加己烷/乙醇（94/6) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（フ） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 來調製環戊烯酮溶液，將此試料溶液例如用Chiral pack A S ( D a i c e 1化學工業）柱，柱溫：4 0 °C，移動相：己烷/ 乙醇（94/6)予以HPLC,使環戊烯酮光學分割。 所分割之（-)-反-4，5 -二羥基-2 -環戊烯-1 -酮〔以下 稱（-)體環戊烯國〕之旋光度為[cr]咨-105° (C 0.30, 乙醇），（ + )-反-4 ,5 -二羥基-2-環戊烯-卜酮〔以下稱（+ ) 體環戊烯酮〕之旋光度為[σ]咨+104° (c 0·53，乙醇） 旋光度乃用前述DIP-370型旋光計（日本分光公司製造） 來測定。 次將（-)體環戊烯酮及（+ )體環戊烯酮之各質量分析， 依NMR之構造解析，UV之測定，IR之測定仿上述方法施 行。結果，兩光學活性體呈與光學分割前之環戊烯酮一 致。 所光學分割之（-)體及（+ )體環戊烯酮各當作對二甲胺 基苄醯基衍生物，用J-720型圓偏光二色分散計（日本分 光公司）測定圓偏光二色性譜（CD)，結果適用於二苄酸 酯對掌性規則〔J.Am· Chem. Soc·，第91卷，第3989〜 頁 態 組 體 立 定 決 來 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 及 D C 之 物 生 衍 基 0 苄 基 胺 甲 二 對 之 3¾ 烯 戊 璟 體 偏式 圓下 耳如 莫以 為造 軸構 縱體 中立 圖述 0上 圖將 7 4 0 第 E 如(η 造長 構波 體為 立 軸 之橫 酮 ， 烯性 戊色 環二 體光 示 表

Η 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7

五、發明説明（ (+ )體環戊烯酮之對二甲胺基节醯基衍生物之CD及（+ ) 體環戊烯酮之立體構造如第48圖。圖中縱軸為莫耳圓偏 光二色性，橫軸為波長Urn)。將上述立體構造以如下式 [V I ]表示： 0 【VI】 第47，48圖及式[V】及[VI]所示，（-)體環戊烯酮為（-） -(4β，5S)_反-4,5-二羥基-2-環戊烯-l-酬，（ + )體環戊 烯酮為（ + )- (4R，5S) -反-4,5-二羥基-2-璟戊烯-卜酮。 本發明所用之璟戊烯酮或其光學活性體可用任何方法 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 合學 可 合 合式 氫等 法光 ， 化 化得 ，物 方其 鹽 基 基， 醇生 成及 許 s S 應 硫衍 合物 容 含 含反 丁酸 學合 藥 與 與下 ，基 化混 醫 鹽 鹽性。醇胺 依之 為 其 其酸¾)硫之 可些 鹽 或 或在 W 甲基 也這 之 \1\ 物 Μ 如SH ，， 0 及”及生 W為含 造體 性 體bD體衍®可， 製順 活 性：：性其 ，酸0-法，。學 活[1活或_定基-1 方體明光 學式學酸 特胺 之反發其 光之光基ffi無之 文之本或。其明其胺 物H» 本酮於_換，發，之 ^合“ 依烯用烯轉酮本酮基(P化含 可戊可戊法烯得烯SH物之 ， 也璟也環方戊 ，戊含合基醇 ，而體於知環應環如l^SH乙 造，性至習將反又 ，1]含基 製成活 依 物 物[1硫 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 kl 五、發明説明（9 ) 。含SH基之胺基酸可為半胱胺酸，高氫半胱胺酸等。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 含S Η基之胺基酸衍生物可為上述胺基酸衍生物，如半 胱胱酸衍生物，含半胱胺酸胜肽，含半胱胺酸衍生物胜 肽。含半胱胺酸之胜呔只要為胜肽中有半胱胺酸為構成 之成分即可，並無特定。本發明之含半胱胺酸之胜肽包 含寡肽，如麩光甘呔等低分子物至如蛋白質等高分子物 。又含半胱胺酸或高半胱胺酸之胜肽也在反應中成為含 半胱胺酸或高半胱胺酸之條件下，例如由組合還原處理 而可當作本發明之含半胱胺酸或高半胱胺酸之胜肽使用 。又含半胱胺酸之胜呔包括含有糖質，脂質等之含半胱 胺酸之胜肽。也可為上述各種物質之鹽，酐，酯等。如 上，璟戊烯酮與含SH基之化合物在酸性下反應而形成環 戊烯酮硫基衍生物。 環戊烯酮，其光學活性體及/或這些之鹽與含SH基之 化合物，如含SH基之胺基酸或其衍生物反應所生成之璟 戊烯酮硫基衍生物或其光學活性體之精製單離手段可用 化學物理之方法等習知之精製之手段即可，可組合凝顧 過濾法，分子量分劃膜之分劃法，溶劑萃取法，分餾法 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 單些 這 製或 精體 來性 法活 製學 精光 知其 習或 之物 等生 法衍 析酮 層烯與 種戊酮 各環烯 之之戊 等中璟 脂物令 樹成 換生 交應 子反 佳隹 δα 鹽 之 如 例 在 酸 胺 胱 半 環 ]F烯 II戊 [V璟 式離 下單 如製 成精 生而 中析 液層 應柱 反相 在順 則經 時物 小生 6 1 衍 基 硫 酮 烯 戊 物 生 衍 基 硫 酮 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（ HOOC — CH — CH2·

0H

VII

NH 2

又如環戊烯酮與麩胱甘呔在酸性下反應而生成如下式 [VIII】璟戊烯酮硫基衍生物，而予以逆相柱層析等來精 製單離該環戊烯酮硫基衍生物。 H9N-CH — CH?-CH2 —C — NH-CH — C一NH-CH2 —COOH

COOH ϋ OH ch2

VIII (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 基， 物化 化性等分層 SH應 合基 基活法之種 含反 化SHSH學方膜各 與性 基含 含光之割之 鹽中)oSH與 與其理分等 之在物含鹽 鹽或物量脂 — 些物生述之 之物，子樹 這生衍前些 些生學分換 或衍基為這 這衍化，交 • \ 其硫可或 或基用法子 及或酮 ，\ \ 硫可濾離 S 體酸戊定及。及酮段過， 性基璟特體行體戊手膠法 活胺稱無性進性璟離凝餾 學之下物活性活之單合分 光基以合學中學成製配 ， 其SH^(化光PH光生精，法 ，含 Μ 之其在其所之段取 酮如 ^基，宜，，鹽手萃 烯 ，HSH酮應酮應之製劑 戊物II含烯反烯反些精溶 璟合[1述戊之戊之這之 ， 含化式上璟物璟物或知法 之得 。合 合體習劃 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公犛） 518321 A7 B7

IX 五、發明説明（ 析法等之習知精製法來精製單離。 例如令璟戊烯國與半胱胺酸在PH7, 37 °C反應30分而 生成如下式[IX]環戊酮硫基衍生物後，予以逆相柱層析 來精製單離璟戊酮硫基衍生物。 Η

I

HOOC-C一CH2 -S I _ νη2 又例如將璟戊烯酬與麩胱甘肽在中性反應而生成如下 式[X〗璟戊酮硫基衍生物後，予以逆相柱層析等來精製 單離該璟戊酮硫基衍生物。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

I COOH II 〇

ΟΗ ΟΗ

X 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 機之分 等 ， 之物之 析 法 物合析 層 方 旋化層 層 之 C 消接由 薄 相等 混色， ， 定離 由或割 析 固分 可鹽分 層 掌之 離體學 體 對體 分映力 液 用映 之對動 ，。採對 體非之 析可用非 性為物 層即可為3-活作生 體相割作 Ϊ 學，徹 氣定分， 光法素 用固學法 之晶酵 可掌光方 物析， 離對之之 合先割 分之析液 化優分。之合層離 明，來行析適體溶 發割化施層用液掌 本分晶等由各依對 械結割 ， 用 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（p) 對掌固定相可用醯胺条固定相，脲糸固定相，配基交 換型固定相，多糖·多糖衍生物固定相，蛋白質固定相 ，聚甲基丙烯酸酯固體相，聚甲基丙烯醯胺固定相等。 溶離液可用己烷条，醇条，水（緩衝液）糸等，與上述 固定相之組合適當地使用。 本發明化合物或其光學活性體之鹽為醫藥容許鹽，可 依習知方法轉換。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽具有制癌， 抑制癌細胞增殖，誘發細胞自滅，抑制異構酶II，誘導 癌細胞分化，抗風濕，抑制慢性關節風濕，誘導fas抗 原産生，抗菌，抗病毒，改善肝功能，誘導熱休克蛋白 ，血液成分正常化，增強癌免疫，消炎，抑制腫瘤壞死 因子産生，抑制NO産生，調節免疫，如抑制延遲型過敏 反應，抑制淋巴球幼化反應，抑制混合淋巴球反應， 抑制IgE産生，抑制角叉菜膠浮腫等活性之生理活性， 由於這些活性，本發明化合物或其光學活性體或這些之 鹽所選出之至少一種化合物為有效成分而成之醫藥可當 作例如作用於活體防禦機構之醫藥，作用於如抗體産生 機構之製劑，消炎劑，抗過敏劑，抗風濕劑，干擾素誘 發劑，作用於糖代謝之醫藥，如糖尿病治療劑，作用於 病原生物之醫藥，如抗菌劑，抗病毒劑等。故本發明所 得之醫藥可當作對本發明化合物或其光學活性體或這些 之鹽有_受性之疾病，例如癌，病毒性疾病，風濕，糖 尿病，過敏，自體免疫病，炎症等疾病之治療或預防用 -1 4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） A7 518321 B7 五、發明説明（Μ ) 醫藥。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽對例如人前 骨髄性白血病細胞HL-60,人急性淋巴芽球性白血病細 胞M0LT-3,肺癌細胞A-549, SV40轉形肺細胞WI-38VA13 ，肝癌細胞Hep G2,結腸癌細胞HCT 116，人結腸癌細 胞SW 4 8 0，人結腸癌細胞WiDr,胃癌細胞AGS，脊髓瘤細 胞等癌細胞有抑制細胞增殖作用，制癌活性，而可當作 制癌劑之有效成分。又這些化合物具有對癌細胞誘發細 胞自滅作用。本發明化合物之抑制癌細胞增殖作用之機 制並不限制本發明，例如對癌細胞有誘發細胞自滅作用 ，抑制異構酶II作用等也包括在本發明之制癌作用。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 以具有制癌作用之本發明化合物或其光學活性體或這 些之鹽所選出之至少一種以上化合物為有效成分，配合 習知之醫藥用載體來製劑化，刖可製造制癌劑。該載體 為藥學上容許之液體或固體載劑，必要時更可配合溶劑 ，分散劑，乳化劑，緩衝劑，安定劑，賦形劑，粘合劑 ，崩散劑，滑劑等，錠劑，顆粒劑，散劑，粉末劑，膠 囊劑等固形劑，通常液劑，懸浮劑，乳劑等液劑。也可 製成乾燥品而用前加適當載體來作成液狀。 醫藥用載體可依上述投與形態及劑型而選擇，若為口 服劑時，可用如澱粉，乳糖，白糖，甘露糖，羧甲基纖 維素，玉米澱粉，無機鹽等。更可配合粘合劑，崩散劑 界面活性劑，潤澤劑，流動性促進劑，矯味劑，著色劑 ，香料等。 -1 5- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（α) 若為非口服劑時，可依常法將本發明之有效成分之化 合物或其光學活性體或這些之鹽選出之至少一種化合物 用稀釋劑，如注射用蒸餾水，生理食鹽水，葡萄糖水溶 液，注射用植物油，胡麻油，花生油，大豆油，玉米油 ,丙二醇，聚乙二醇等來溶解或懸浮，必要時加殺菌劑 ，安定劑，等張劑，無痛化劑等來調製。 本發明之制癌劑乃依製劑形態之適當投與途徑投與。 投與方法無特定，可外用，内服及注射。注射劑可為如 靜脈，肌肉，皮下，皮内等之注射，外用劑也包括座劑 等。 制癌劑之投與量乃依製劑形態，投與方#，目的及病 人之年齡，體重，症狀而適當地決定，一般在製 劑中本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所 選出之至少一種化合物之含量為成人每日0.1/i g/ 2 0 0 mg/kg。當然會隨種種條件而變動，比上述投與量少 即足，也有須超過之情形。本藥劑除口服外，也可加在 任意飲食品而日常攝取。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽雖有制癌 作用，低濃度則有誘導癌細胞之分化，故亦可當作癌細 胞之分化誘導劑（脫癌劑），將由此選出之至少一種化合 物為有效成分之癌細胞分化誘導可仿上述制癌劑來製劑 化，並仿制癌劑之方法投與。 癌細胞分化誘導劑之投與量乃依其製劑形態，投與方 法，使用目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定 ，一般，製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） I ——；-----------IT------#♦- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 518321 A7 B7 五、發明説明（π ) 些之鹽所選出之至少一種化合物之量對成人每日0.1/i g 〜100mg/kg。當然隨種種條件而變動，有比上述投與量 少即足，也有須超過之情形。本藥劑除就此口服外，也 可加在任意飲食品,而日常攝取。 上述癌細胞分化誘導劑可用於癌細胞分化誘導方法。 即將本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出 之至少一種化合物為有效成分來分化癌細胞，此方法可 用以鮮明癌細胞之分化誘導機構及分化誘導劑之篩選等。 本發明之化合物或其光學活性體或其鹽具有抗菌作用 ，以由此選出之至少一種化合物為有效成分而與習知之 醫藥載體配合來製劑化，則可製造抗舗劑。該製劑可仿 上述製癌劑來製劑化，而仿制癌劑投與。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 抗菌劑之投與量乃隨製劑形態，投與方法，使用目的 及病人之年齡，體重，症狀而異，一般，在製劑中含本 發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少一 種化合物之量在成人每日1 0 # g〜2 0 m g / k g。當然隨種種 條件而變動，有比上述為少即足，也有須超過之情形。 本藥劑可就此口服，也可加在任意飲食品而日常攝取。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽也可當作抗 菌用飲食品之原料，也可與乙醇，甘胺酸，乙酸鈉，抗 壞血酸，甘油脂肪酸酯，食鹽，EDTA等其他抗菌性物質 配合使用。 本發明之抗菌劑可以本發明化合物或其光學活性體或 這些之鹽所選出之至少一種化合物為有效成分而當作提 -17- ， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（4) 高食品或飲料保存性之防腐劑，也可用以加在食品或飲 料來將食品或飲料防腐之方法。本發明化合物對食品或 飲料之添加量乃隨食品或飲料乏種類而異，可添加依其 目的之量。 本發明抗菌劑之用法乃以適合於食品或飲料之方法添 加。通常之方法為在食品或飲料之製程中添加，也可於 含本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽之溶液中將 食品浸漬一定時間。又可併用添加在食品中之方法及浸 漬方法。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 將本發明之抗菌劑當作防腐劑，刖更提高食品或飲料 之保存性。又在冷凍食品或果凍等，其冷凍前之加工工 程中可抑制污染徹生物之増殖，可得衛生上極佳之結果 。本發明之抗«劑兼具對革蘭陽性及陰性細菌之效果， 例如甲基青黴素耐性黃色葡萄球菌等耐藥性菌，沙門氏 _，腸毒素生産性黃色葡萄球菌，喔吐型之蠟狀芽孢桿 M ( Bacillus c e r i u s ),下痢型蠟狀芽孢桿0,腸出血 性大腸菌0-157等食中毒菌極為有效。且對火落菌亦有 效。又對細菌起因性疾病之病原菌，如退伍軍人病之親 肺列吉菌（Legionella pneumophila )，食中毒病原菌之 副溶血弧_ ( Vibrio parahaemolyticus ),潰瘍病原菌 之幽門螺桿蘭，胃腸炎病原g之空腸彎曲桿菌 (Campylobacter jejuni )等，如親肺列吉菌（ATCC 33153) ，副溶血弧菌（ATCC 17802)，幽門螺桿®(HCTC 11637) ，空腸彎曲桿_( ATCC 29428)等有抗菌作用，又對酵母 -1 8 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（17 ) ，霉等徹生物也有效。又可用本發明抗菌劑來使衣服， 床單等殺菌，散布本發明抗菌劑，擦拭本發明抗菌劑等 來使目的物除®或殺«。例如添加在大樓之冷氣用水 預防退伍軍人病。 本發明之抗_劑對齲齒菌或牙周病®亦有抗0.活性， 可提供含本發明抗菌劑之口内劑，其劑型可為液狀，蕾 狀等習知者。口内劑可為刷牙劑，而可為液狀或膏狀或 粉末等習知形狀。刷牙劑中本發明化合物或其光學活性 體或這些之鹽之含量無特定，只要含有對齲齒菌或牙周 病Μ有效濃度即可。在刷牙劑中可添加習知之添加劑， 如濕潤劑，界面活性劑，粘合劑，香料，甜味料等。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 用本發明抗菌劑可提供抗菌性化粧料，將有效量本發 明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少一種 化合物製成如乳霜，乳液，洗液，洗臉料，粉餅等基礎 化粧料；如口紅，粉底等完粧料；如沐浴精，肥皂等形 態。又對頭髮也有效，可當作如髮蠟，髮液，定髮液， 吹髮劑，髮霜，髮覆劑等髮用品；或如洗髮精，潤絲精 ，調髮劑等護髮品之形態。對化粧料之配合量可依抗菌 力而適當地決定。化粧料之其他成分可配合於通常化粧 料來使用。抗菌性化粧料對異位性皮膚炎之病原菌亦有 效，而對其改善及預防有著效。 用本發明抗_劑可提供浴用劑。本發明之浴用劑可製 成含有效量本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽 所選出之至少一種化合物之粉末浴用劑，穎粒浴用劑， -1 9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 518321 kl B7 五、發明説明（d ) 固形浴用劑，液狀浴用劑等形態。對浴用劑之配合量乃 依所望抗Μ力而適當地決定。浴用劑之其他成分可用配 合於一般浴用劑者。本發明之浴用劑對異位性皮虜炎之 病原_也有效，對其改善及預防有箸效。又從浴場驅 除病原蘭也有效。 又含本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出 之至少一種化合物之食品或飲料對食中毒，胃腸炎等之 改善及/或預防極為有用。 本發明之細胞自滅誘發劑可以具有細胞自滅誘發性之 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少 一種化合物為有效成分，仿上述制癌劑來製劑化，而仿 制癌劑之方法投與。 細胞自滅誘發劑之投與量乃依劑型，投與方法，使用 目的及病人之年齡，體重，症狀而異，一般，在製劑中 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少 一種化合物之含量為成人每日0.1// g〜lOOmg/kg。當然 投與量乃依種種條件而變動，有比上述投與量少即足， 也有須超過之情形。本發明之藥劑可就此口服之外，也 可加在任意飲食品而日常攝取。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 又細胞自滅乃與病理細胞死之壞死不同，係在細胞本 身之基因原先就有者。即某種外部或内部之要因成為板 機使编碼細胞自滅之基因被活性化，以此基因為基礎生 合成程序死基因蛋白，由所生成之程序死蛋白質而使細 胞本身分解乃至於死。 一 2 0 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（、9 ) 本發明之細胞自滅誘發劑能將這種細胞自滅呈現在所 望之組織及細胞，將不要或病原細胞以自然之形態從活 體排除，故極為有用。 本發明之細胞自滅誘發劑可用於細胞自滅誘發方法， 即以本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之 至少一種化合物為有效成分來誘發細胞自滅，此方法對 細胞自滅誘發機構之解明，細胞自滅誘發劑，細胞自滅 誘發抑制劑之篩選等有用。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽具有抗風 濕作用，以由此選出之至少一種化合物為有效成分而以 習知之翳藥載體配合來製劑化，則可製造制風濕劑。該 製劑可仿上述制癌劑來製劑化，而仿制癌劑投與。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之抗_劑之投與量乃依其製劑形態，投與方 法，使用目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定 ，一般，製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這 些之鹽所選出之至少一種化合物之量對成人每日g 〜2d〇!ng/kg。當然隨種種條件而變動，有比上述投與量 少即足，也有須超過之情形。本藥劑除就此口服外，也 可加在任意飲食品。而日常攝取。也可以本發明化合物 等為翳藥之原料。 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽具有對關節 炎等抗炎症，抑制角叉菜_浮腫，抑制腫瘤壞死因子産 生，增強間白素-10産生，抑制NO産生，誘導Fas抗原産生 ，調節免疫，抑制如延遲型過敏反應，抑制淋巴球幼化 -2 1 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 B7 五、發明説明（>^ ) 反應，抑制混合淋巴球反應，抑制IgE産生等作用之多 樣生理活性，可將以本發明化合物或其光學活性體或這 些之鹽所S出之至少一種化合物為有效成分之抗炎症劑 或炎症預防劑，腫瘤壞死因子産生抑制劑或腫瘤壞死因 子産生預防劑間白素-10産生增強劑，免疫調節劑，NO産 生抑制劑，Fas抗原産生誘導劑，IgE産生抑制劑，延遲 型過敏反應抑制劑，抗過敏劑等醫藥彷上述抗風濕劑來 製劑化，而仿上述醫藥之方法投與。 這些製劑之投與量乃依其製劑形態，投與方法，使用 目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定，一般， 製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所 選出之至少一種化合物之量對成人每日0.1# g〜200mg/kg 。當然隨種種條件而變動，有比上述投與量少即足，也 有須超過之情形。例如抗炎症劑，腫瘤壞死因子産生抑 制劑中含有本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所 選出之至少一種化合物之量對成人每日宜l〇pg/5f)mg/kg ，N 0産生抑制劑則宜0 . 1 #〜2 0 m g / k g ,可依使用目的調 節有效成分量〇本藥劑除就此口服外，也可加在任意飲 食品。而日常攝取。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 風濕為在骨膜細胞或軟骨細胞引起障礙之自體免疫病 ，故本發明之抗風濕劑也可當作自體免疫病治療劑。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽在慢性關 節風濕等臓器特異之自體免疫病或炎症性疾病可抑制被 視為直接引起炎症之腫瘤壞死因子之産生，增強靥於Thl -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 Μ Β7 五、發明説明（d ) 抑制細胞激肽之間白素-10之産生，故能改善炎症，例如 屬於臟器特異自體免疫病之風濕，尤其慢性關節風濕之 症狀，使屬於炎症標識之C反應蛋白（CRP)值，類風濕 因子（R · F ·)值，紅血球沈降速度（血沈）值激減，步行困 難等合併症狀也顯著改善。 腫瘤壞死因子乃以在腫瘤部位誘導出血性壞死之因子 被發現，但現在認為廣泛涉及以炎症為基本之活體防禦 免疫機構之細胞激肽。此腫瘤壞死因子之産生調節機構 之破瘰對宿主帶來種種不適，腫瘤壞死因子之過度或未 調節之産生關連慢性關節風濕，風濕性脊髓炎，變形性 關節炎，痛風性關節炎，敗血症，敗血性休克，内毒素 休克革蘭陰性_敗血症，毒性休克症候群，腦性瘧疾， 慢性肺炎，移植片對宿主反應，同種移植片排斥反應， 由於如流行性感冒等感染症之發熱及肌肉痛，對感染或 惡性腫瘤之次發性惡液質，對愛滋病之次發性惡液質， 愛滋病及其關連症候群，斑痕形成，潰瘍性大腸炎，多 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 體纟腫介學分本 一 自 之媒光成有少 等 t 明子其效含至 瘡 S 發因或有供之 痕 W 本死物為提出 性罾。壞合物又選 斑 e， 1 瘤化合，所 紅1Π6)腫明化法鹽 身1C99由發種方之 全ed(l療本一節些 及 Μ 頁治以少調這 病ar89以供至之或 尿 U1 用提之生體 3 糖ec~ 可又出産性-2 疫0182劑明選子活 免！！11制發所因學 體病第抑本鹽死光 自疾 ，生 。之壞其 ，種頁産狀些瘤或 症多20子症這腫物 化等10因之或之合 硬病 ~ 死化體用化 性疫10壞惡性使明 發免10瘤或活來發 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 Μ Β7 五、發明説明（ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 疾弛 6 性抑生等，，管， 之究物 生毒No這處率 之肌52活之産療病病血病， 出研之 産内泌或LpS存 化滑 ~ 學分No治疫腸臟疾69選以構No加分體:IL生 惡平24光成制肽免性心之10所用機 對添而性 0 胞 或管^5其效抑激體症，生50鹽可生 鹽株S)活+ 細 介血第或有須胞自炎傷新8-之劑産 之胞No學。而 媒之，物為中細，，損管，。些制No些細is(光産性 子 來 Ϊ 合物明種降病織血88病這抑與 這噬成其No活 因由32化合發某下尿組伴52疾或生參 或巨或φίιΝ礙 死 胞第明化本或應糖，隨50之體産選 體在 ο 物 障 壞細，發種。克反，張 ，9-載性_篩 性如㈣合”胞 瘤皮re本一藥休壓炎擴血，記活之及 活例#化|細_ 腫内tu以少醫性血節管絶24報學分， 學明用之4-由。為Na供至治毒，關血腦45公光成序 光用 I 發作N0-2 防料0)t 提之防由降性性 ，50各其效機 其作¾本 S 於 預飲SN體明出病如下濕因症9-49或有用 或之卩在“由 或或本發選疾有壓風病敏平88物為作 物生)M若令 ， 善品 U 之本所之，血，，過表50合物No合産PS但下時 改食“?)。鹽須定性炎全烕特6-化合及 化NOL，存生 而之氮DR1之所特身節不痛括，明化構 之制 _ 中共産 物狀化(E7)些生無全關能，包18發種機 明抑 基之No 合症氣子98這産病之，機血 ，23本一生 發有旨養鹽導 化之一因(1或No疾致症管絶等51以少産。本胞(B培之誘 種病 緩頁體制之所炎血条癌8-至No質 細素在些理 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（W ) L 鹽 但之 ,些 降這 下或 體 性 活 學 光 其 或 物 合 化 明 發 本 加 添 時 mi 1 理 處 少 減 也 礙 障 之 胞 細 對 而 降 下 生 産 之 ο N 則 增要 皮重 内演 管扮 血程 而過 ，此 須對 必η 為EG V 生ί 新子 管因 血進 ，亢 大性 增過 之透 癌管 形血 固 \ 於子 對因 殖 或 V 物之 合胞 化細 之癌 明制 發抑 本來 0 生 導産 誘No No制 被抑 GF鹽 E V 之 胞些 細這 癌或 種體 I U匕 種性 在活 。學 色光 角其 移或 胞物 細合 癌化 將明 〇 發 生本 新與 管投織 血鼠組 制白癌 抑小刖 邊之 ， 周瘤鹽 織腫之 組形些 癌固這 在成或 ，形體 果而性 結下活 ， 皮學 生在光 産棺其 不 成 形 管 血 之 邊 周 知 已 物 合 化 群 1 之 基 硝 亞 加 附 胺 級 二 。在 落為 脱胺 癌基 而硝 分亞 充 性 癌 發 呈 物 33 對 而 傷 損 加 附 A N D 在 為 數 多 其 種 百 數 有 酸也 硝下 亞件 令條 中理 胃生 在性 常中 Η 通 Ρ ，在 關No 相 。 深胺 深基 也硝 癌亞 發成 之生 人而 對應 胺反 基胺 硝與 亞鹽 之本 高與 偽投 關故 之 0 癌進 與亢 上生 學産 疫No 在其 又者 〇 患 胺變 基硬 胺肝 亞或 成者 生患 而染 應感 反蟲 胺吸 與肝 之之 生明 産發 No本 止 ， 防述 來所 鹽上 之如 些 。 這癌 或發 體之 性組 活險 學危 光高 其防 或預 物能 合尤 化而 明進 發亢 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 癌 在 及 癌 發 制 〇 抑用 以作 乃癌 鹽制 之呈 些段 這階 或二 體之 性礙 活阻 學生 光新 其管 或血 物之 合織 化組 過 透er 管nc 血ca 發 f 誘ο 卩 1 倉 a η ， Γ i;1u Bio 浮J 之se 變ne 病pa 性Ja 症 · 炎等 在田 徵 α刖 特G 發用 誘作 又進 Norc 性 4 成 9 V 9 合 (1生 頁之 34類 3 m 1 腺5-3 _~ 2 3 另 I 第 1刖 ，之 85介 第仲 ，性 rch病 a 炎 Θ 5 於 Θ R 屬 進 亢 能 又 Θ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（4) 等，Proceedings of National Academy of Science, USA，第90卷第7240〜7244頁（1993)〕。他方面，NO與 超氣化物根迅速反應而生成超氧氛化物，此被認為引起 炎症性細胞及組織之障礙。 被活化之免疫細胞進入臟器而放出細胞激呔則誘導N 0 之産生。胰島素依賴型糖尿病為胰島A細胞專一破隳所 引起之疾病，視為由N0之破壞。又慢性關節性風濕，變 形性關節風濕，痛風性關節炎，隨伴別氏病之關節炎患 者之病變部之關節液比同患者之正常關節及健常人之關 節液含較高濃度之N0,對這些患者投與本發明化合物或 其光學活性體或這些之鹽，則抑制病變部之㈣産生而改 善症狀。 腦絶血中及再灌流後N0産生増大，隨箸腦組織受損。 腦絶血時投與木發明化合物或其光學活性體或這些之鹽 ，刖減輕腦組織之損傷而改善癒後。 稱為Fas抗原（AP0-1抗原，CD95)之細胞表面抗原為誘 導 細 胞自滅 之分子頗受矚目 C Ce 11,第 66卷， 第2 3 3 2 4 3頁（1 9 9 1 ), J . Exp .Med · 第 1 6 9卷 ，第 17 47〜 17 56 頁 (1 9 8 3 ), J . B i ο 1 . C h e ffi . 第2 67卷， 第1 07 09〜 10 7 15 頁 (1 9 9 2 ), J . I in m u η ο logy ， 第 184卷 ,第 12 7 4〜 12 7 9 頁 (1 9 9 2 ) 〇 Fa s抗原乃呈 現 於胸 腺細胞 ,τ 細胞 ，細 胞 傷害 性 Τ細 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 胞，B細胞或NK細胞等免疫条細胞。免疫条在外來之非 自己抗原之侵入時，引起免疫反應來排除非自己抗原。 -26-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明 ( ) 1 1 但 對 白 己 抗 原 不 呈 免 疫 反 m 而 成 立 白 己 寬 容 〇 此 乃 由 於 1 1 具 有 白 己 反 應 性 之 淋 巴 球 % 幹 細 胞 接 受 去 除 克 隆 之 陰 選 1 1 擇 藉 細 胞 白 滅 之 細 胞 死 來 排 除 〇 但 由 於 Fa s抗原之基因 請 J 先 1 欠 陷 等 活 體 某 種 異 常 而 這 些 細 胞 不 接 受 細 胞 白 滅 時 9 例 閱 讀 1 如 白 己 反 應 性 T 細 胞 蓄 積 在 末 梢 〇 又 在 正 常 活 體 $ 對 屬 月 1 I 之 1 I 於 免 疫 承 擔 細 胞 之 B 細 胞 亦 成 立 白 己 寬 容 此 白 己 反 應 注 意 1 I 事 1 性 B 細 胞 也 通 常 因 細 胞 白 滅 而 致 死 9 但 若 白 己 反 應 性 B 項 再 1, I 細 胞 由 於 F a s抗原之基因缺陷等異常而不接受細胞自滅 填 寫 1 争 I 時 白 己 反 應 性 B 細 胞 蓄 積 在 末 梢 〇 又 在 關 節 風 濕 時 9 本 頁 上 述 白 己 反 應 性 淋 巴 球 之 異 常 $ 滑 膜 細 胞 之 翻 轉 異 常 成 1 1 為 病 因 之 一 〇 1 1 以 本 發 明 化 合 物 或 其 光 學 活 性 體 或 這 些 之 鹽 所 選 出 之 1 訂 至 少 一 種 化 合 物 為 有 效 成 分 之 Fa S抗原産生誘導劑對由 1 I 於 白 己 反 應 性 淋 巴 球 及 翻 轉 異 常 而 不 能 從 活 體 排 除 之 無 1 1 用 活 體 構 成 細 胞 之 細 胞 白 滅 誘 導 有 用 可 用 於 Fa S抗原 1 I 産 生 誘 導 方 法 〇 又 可 當 作 以 本 發 明 化 合 物 或 其 光 學 活 性 1 1 線 _ 體 或 這 些 之 鹽 所 選 出 之 至 少 一 種 化 合 物 為 有 效 成 分 之 隨 伴 Fa ,s抗原産生異常之疾病防治劑， 本發明中該疾病雖 1 I 無 特 定 9 然 例 如 由 白 己 反 m 性 T 細 胞 白 己 反 應 性 B 細 1 1 胞 引 起 之 白 己 免 疫 疾 病 9 關 節 風 濕 等 W0 丨97/ 0 S 丨65記 載 J 之 疾 病 均 包 括 在 内 〇 1 本 發 明 化 合 物 或 其 光 學 活 性 體 或 這 些 之 鹽 具 有 間 白 素 1 1 -1 0産生增強作用， 延遅型過敏反應抑制作用， I gE産 生 1 | 抑 制 作 用 $ 混 合 淋 巴 球 反 應 抑 制 作 用 角 叉 菜 m 浮 腫 抑 1 I 讎2 ；7- 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（4) 制作用等免疫調節作用，以本發明化合物或其光學活性 體或這些之鹽所選出之至少一種化合物為有效成分之免 疫調節劑可當作這些免疫条，免疫因子異常所致疾病之 防治劑。 即間白素-10之産生降下使Thl活性化，引起Thl優勢 之自體免疫之炎症，此炎症參與腎炎，肝炎等臟器專一 之自體免疫病，及移植片排斥反應或過敏性接觸性皮膚 炎等疾病。本發明之免疫調節劑增強間白素-10之産生， 抑制Thl之活性而可用以防治這些疾病。 又淋巴球幼化反應乃有絲分裂原舆淋巴球表面之受體 結合，使淋巴球活性化，促進其分裂及增殖之反應。混 合淋巴球反應僳將得自同種異条之動物之淋巴球混合培養 來誘導因主要組鏃適合抗原不一致所致淋巴球活性化， 促進淋巴球分裂及增殖之反應。上述免疫調節劑抑制這 些反應，尤其可用以防治淋巴球異常亢進所致自體免疫 性疾病，如慢性腎炎，慢性大腸炎，I型糖尿病，慢性 關節風濕等慢性疾病，又可用以抑制移植片排斥反應。 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 角叉菜顧足浮腫乃將發炎劑角叉菜謬在踱部皮下注射 來誘導巨噬細胞及嗜中球等炎症細胞，從這些細胞産生 之炎症性因子使血管透過性亢進，引起浮腫之反應。上 述免疫調節劑之浮腫抑制作用可用以防治須控制血管透 過性亢進之疾病，如慢性關節風濕。 在以氣喘及異位性皮虜炎所代表之過敏性疾病由肥大 細胞放出化學仲介體對過敏反應扮演重大角色。此反應 -2 8 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（>7 ) 乃IgE結合在細胞膜上之受體，架橋而引起，本發明之 免疫調節劑抑制IgE之産生，可用 IgE産生而媒介或 惡化之症狀，如IgE引起之過敏病，如枝氣管氣喘，過 敏性箅炎，異位性皮慮炎，過敏性結膜炎，蓉麻疹，過 敏休克等症狀之改善及/或預防。又本發明之免疫調節 劑抑制延遲型過敏反應，隨伴延遲型過敏反應之疾病， 如接觸性過敏症，過敏性接觸性皮慮炎，細_過敏，真 B過敏，病毒過敏，藥物過敏，甲狀腺炎，過敏性腦炎 等之防治有用。 近年從糖尿病之病理研究結果得知，正常之脂肪細胞 有使全身之胰島素作用正常之重要角色，為使糖代謝順 利進行，須正常之脂肪細胞〔實驗醫學，第1 4卷，第6 1 〜68頁（1 9 9 6 )〕。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽具有前驅 脂肪細胞，如纖維芽前驅細胞之分化誘導能力，將細胞 向脂肪細胞分化誘導。故攝取本發明化合物或其光學活 性體或這呰之鹽所選出之至少一種化合物來增加正常之 脂肪細胞，改善糖尿病之症狀。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽具有降血 糖作用，可供製作以本發明化合物或其光學活性體或這 些之鹽所選出之至少一種化合物為有效成分之糖尿病防 治劑。 即以本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出 之至少一種化合物為有效成分而與習知之醫藥用載體組 -2 9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（W ) 合而製劑化，則可製造糖尿病防治劑，此製劑可仿前述 制癌劑來製劑化，可仿前述翳藥之方法投與。 糖尿病防治劑之投與量乃依其製劑形態，投與方法， 使用目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定，一 般，製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這些之 鹽所選出之至少一種化合物之量對成人每日1 0 P g〜2 0 0 ffig/kg。當然隨種種條件而變動，有比上逑投與量少即 足，也有須超過之情形。本藥劑除就此口服外，也可加 在任意飲食品。而13常攝取。 本發明之化合物等也可當作糖尿病改善或預防飲食品 之原料，以改善糖尿病，性功能下降等合併症及高脂血 病，並使尿糖量遽減。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽具有高脂 血症改善作用，即降血清總膽固醇作用，降血清三甘油酯 作用及降血清游離脂肪酸作用，以具有這些作用之本發 明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少一種 化合物為有效成分，與習知醫藥用載體組合製劑化，貝(J 可製造高血脂症治療劑或預防劑。此製劑之製造可仿上 述糖尿病防治劑施行，又可仿糖尿病防治劑之方法投 與。又可將本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽當 作高血症改善或預防用飲食品之原料，將其含有物攝取 來改善高脂血症，並使血中脂質量激減。 又以具有前驅脂肪細胞砬脂肪細胞之分化誘導能力 之本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽為有效成分 -3 0 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I--.------------1T-------i·— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 518321 A7 B7 五、發明説明（) ，與習知之翳藥用載體組合來製劑化，則可製造前驅脂肪 細胞往脂肪細胞之分化誘導劑。其製造可仿上述糖尿病 防治劑施行，可仿其方法投與。 木發明化合物或其光學活性體或這呰之鹽呈腫瘤壞死 因子産生抑制作用，可用以防治以腫瘤壞死因子為原因 之胰島素非依賴型糖尿病〔Nautre,第389卷，第610-6 1 4 頁(1 9 9 7 ) ] 0 本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽具有抗病毒 作用，以其至少一種化合物為有效成分與習知之醫藥用 載體配合來製劑化，則可製造抗病毒劑，此可仿上述制 癌劑來製劑化，可仿上述醫藥之方法投與。 抗病毒劑之投與量乃依其製劑形態，投與方法，使用 目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定，一般， 製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所 選出之至少一種化合物之量對成人每曰0.1// g〜2〇mg/kg 。當然隨種種條件而變動，有比上述投與量少即足，也 有須超過之情形。本藥劑除就此口服外，也可加在任意 飲食品。而日常攝取。本發明之化合物等也可當作抗病 毒飲食品之原料。 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽對DNA病 毒，R N A病毒，逆轉錄病毒及類病毒呈抗病毒活性。 故可當作人用抗病毒劑，如家畜及家禽等非人動物用 杭病毒劑，對如魚蝦等養殖動物之病毒病有效之抗病毒 劑，對如花卉及蔬菜等農園藝作物之病毒病有效之抗病 一 3 1 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 ΑΊ • Β7 五、發明説明（V ) 毒劑，及有用生物用之抗病毒劑。 感染動物之DNA病毒有如痘病毒，疱疹病毒，腺病毒， B型肝炎病毒，乳頭狀瘤病毒，多瘤病毒，愛滋斯坦-巴爾病毒，杆狀病毒等，威染植物之DN A病毒有如花椰 菜花葉病毒等。感染動物之RN A病毒有如輪狀病毒，風 疹病毒，日本腦炎病毒，登革熱病毒，新城瘟病毒，麻 疹病毒，德國麻疹病毒，犬瘟熱病毒，流行性感冒病毒 ，水疱性口内炎病毒，人小兒麻痺病毒，A型肝炎病毒 ,C型肝炎病毒；絨染植物之RH A病毒有如菸草花葉病 毒，麥類矮病毒，稻紋祜病毒，菸草輪點病毒。逆轉錄 病毒有如成人T細胞白血病病毒，人愛滋病病毒，類病 毒有如馬鈐薯紡錘塊莖類病毒。 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽對非人哺 乳類，如雞及火雞等鳥類，如魚等冷血動物之病毒病之 防治有效，對下列非人病毒有抗病毒活性：Silurid疱 疹病毒1型，羊疱疹病毒1型，拉加莫夫疱疹病毒1型 ,家禽疱疹病毒1型及2型，火雞疱疹病毒1型， Anatid疱疹1型，鯰疱疹病毒1型，馬疱疹病毒1, 2及 3型，Bovid疱疹病毒1, 3及4型，豬疱疹病毒1及2 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 型，Murid疱疹病毒1型，Sepid疱疹病毒1及2型， Tupaid疱疹病毒1型，犬疱疹病毒1型，Hiline疱疹病 毒1型。 將本發明之抗病毒劑注射在鳥類或添加在鈣料或飲料 水等之獸醫術及飼育術上依習知之方法，使馬列克氏病 -32-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 kl B7 五、發明説明（W ) 等之鳥類病毒性疾病用本發明化合物來防治。又在池塘 經濟部中央標準局員工消費合作社印袈 合毒鉞域，出海布之範及 地 制現。 之 胞 克 化病毒區病性，拉等規類 著 抑呈滅 Μ 明 細 休 明類病小死毒病之钟確種 顯 鹽而死 Μ 發 U 從 熱 發疹因狹壞病腫等河正療 而 之成擇 W 本 U 以 導 本疱等中器之囊魚虎之治 康 些合選|1£。?®得 誘 者 使 將治毒域血鳟巴目，時， 健 這之胞 \ 染 I, 及 串」 邊 等防病領造虹淋比病劑性 持 或組細^感 力 用 水可克養性，之，死毒要 保 體因染 g 胞，能 作 海也納飼染病魚病壞病必 因 性基感 W細te毒 能 及樣史或傳死種死肝抗關 物。活毒毒 P 分 ί 病 功 水同門槽之壞種壞胰物相 動等學病病IV部HI抗 肝 之則羅持類臓，球性合體 人率光制些KH僅之導 善 域，所保魚胰病血毒化檢 非卵其抑這 π 實胞誘 改3- 領中，，科性毒紅病明被 之産或也使rf，細胞 有- 養料毒槽鮭染病性之發値 劑，物，能 πΙν染細 具 飼飼病水如傳春毒等本各 毒率合成又 uSHlig 染 等 或在疹，，或之病魚與療 病長化合。病 W 此烕 物 槽混疱塘病症鯉之幼投治 C 抗成之之用滋 f 制未 合 皆 持或，池毒染，魚鮒又被斷明，用白作愛 抑對 化 保加毒於病威症河，。於判發率所蛋毒人 ® 邊， 之 ，添病息之毒血朔病等決之本存明毒病在_劑滅VO明 槽接鯰棲類病敗，毒病取者與生發病抗如 f 毒死HT發 水直如之魚疹性魚病白然養投善本些力例 0 病擇除本 ，物，染内疱血産多 口當飼 改 這強CD抗選去 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 518321 A7 ________B7__ 五、發明説明（Ρ ) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 蛋白作用，以本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽 所選出之至少一種化合物為有效成分之肝功能改善劑及 熱休克蛋白誘導劑可仿前述抗病毒劑來製劑化，而仿抗 病毒劑之方法投與。 肝功能改善劑或熱休克蛋白誘導劑之投與量乃依其製 劑形態，投與方法，使用目的及病人之年齡，髏重及症 狀而適當地設定，一般，製劑中所含本發明化合物或其 光學活性體或這些之鹽所選出之至少一種化合物之量對 成人每日〇 · 1 # g〜2 0 in g / k g。當然隨種種條件而變動， 有比上述投與量少即足，也有須超過之情形。本藥劑除 就此口服外，也可加在任意飲食品而日常攝取。本發明 之化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之至少一種 化合物也可當作肝功能改善用或熱休克蛋白誘導用飲食 品之原料。 攝取本發明之化合物等可改善肝功能障礙，使G0T, β P T正常化。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明之化合物或其光學活性體或這些之鹽具有70fc 道爾頓（H S P 7 0 )等熱休克蛋白誘導活性，對肝炎病毒， 愛滋病病毒，流行性感冒病毒，水疱性口内炎病毒，疱 彥病毒等之RNA病毒及DNA病毒有抗病毒作用。又熱休克 蛋白參與癌免疫，這些化合物對癌免疫也有效。又具有 抗炎症等活體防禦作用。攝取本發明之化合物等可防治 因流行性感冒病毒之病毒性疾病。 至於熱休克蛋白乃指細胞或館體急激接受比常溫高5 -34- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2Η)Χ297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（衫） 〜10之溫度變化時誘導合成之蛋白總稱，從原核生物至 高等真核生物廣泛分布，至於真核生物之熱休克蛋白已 知 HSP90, HSP70,泛素（ubiquitin), HSP26等。其中 HSP70為分子寫別龍之一種，結合於折叠未完了或不完 全之蛋白以肋立體構造之形成。熱休克蛋白之胺基酸序 列在進化過程保存良好，HSP70與大腸桿薗之Dnak蛋白 相同。人有約10個H SP基因存在。但這些有些以構成呈 現，有些由種種剌激而誘導。熱休克蛋白之合成除熱休 克之外，由種種化學物質，氧化窘迫等細胞障礙也被誘 導。 據 C· Amici等〔Journal of Virology，第 68卷，第 6890〜6899頁（1994)〕，在具有办-不飽和羰基之 前列腺素》1之存在下培養戲染仙台病毒之動物細胞， 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 則誘導HSP70及HSP90之合成，而HSP70之合成尚在誘導 之期間，病毒蛋白之合成被抑制。又據A. Rossi等〔The Journal of Biological Chemistry,第 271 卷，第 32192 〜32196頁（1996)〕，2-環戊烯-1-酮舆前列腺素Ai —樣 地誘導HSP70之合成，而抑制水疱性口内炎病毒蛋白之合 成。 由本發明化合物之HSP70誘導能力見於ΙΟ/iM,於20〜30/iM 成最大，與2-環戊烯-卜_誘導113?70須數百；uM之濃度相 較可謂極高誘導能力。 本發明之化合物等具有如此高熱休克誘導作用，故對 DNA病毒，RNA病毒，逆轉錄病毒及類病毒有抗病毒活性 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 Α7 Β7 五、發明説明（从） 。這些病毒及類病毒有上述各例示。 本發明之化合物等對人基因轉形之癌細胞也有増殖抑 制活性，而有防止由癌基因之發癌作用。 例如乳頭狀瘤病毒為屬於Papovaviridae科, Paillotnavirns屬之DNA病毒。人乳頭狀瘤病毒（HPV)已 知如成為子宮頸癌等原因之Η P V 1 6型。本發明之化合物 或其光學活性體或其鹽韵ΉΡνΐ6型之癌基因Ε 7而癌化之細 胞有增殖抑制效果，以本發明化合物或其光學活性體或 這些之鹽所選出之至少一種化合物為有效成分而提供病 毒發癌細胞增殖抑制劑，可防止由癌基因之發癌。 又本發明之化合物等具有引發劑及促進劑之2階段發 癌抑制作用，可提供以選自這些化合物之至少一種化合 物為有效成分之化學發癌抑制劑。 故提供含有本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽 所選出之至少一種化合物之發癌預防用食品或飲料。 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之化合物或其光學活性體或其鹽具有IgE産生 抑制作用及延遲型過敏抑制作用，以由此選出之至少一 種化合物為有效成分\與習知之翳藥用載體配合來製劑 化，則可製造抗過敏劑，其製造可仿制癌劑來製劑化。 又本發明之抗過敏劑可隨製劑形態而以適當投與途徑投 與。投與方法無特定，可内服，外用及注射。例如以錠 劑，九，賴粒，散，液劑，懸浮劑，糖漿劑，_囊來口 服。注射劑可如靜脈。肌肉内，皮下，皮内等來投與。 軟音，乳霜劑等可經皮投與。座劑可直腸投與。又可製 -3 6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（/) 成水性或非水性點眼劑，如眼軟膏劑，塗布劑，散布劑 ，插入劑等。又為供吸入，可用有效成分與習用製藥賦 形劑之溶液或懸浮液，例如當作吸入用氣溶膠噴劑。又 可將乾燥粉末狀之有效成分以能與肺直接接觸之吸入器 或其他裝置來投與。 抗過敏劑之投與量乃依其製劑形態，投與方法，使用 目的及病人之年齡，體重及症狀而適當地設定，一般， 製劑中所含本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所 選出之至少一種化合物之量對成人每日IQpg〜5Qmg/kg。 當然隨種種條件而變動，有比上述投與量少即足，也有 須超過之情形。本藥劑除就此口服外，也可加在任意飲 食品而日常攝取。 以本發明化合物或其光學活性體或這些之鹽所選出之 至少一種化合物為有效成分可製造I g E産生抑制劑，延 遲型過敏反應抑制劑。這些製劑可仿上述抗過敏劑來製 劑化，可仿上述抗過敏之方法投與。 本發明之化合物等可當作抗過敏用食品或飲料之原料 。由其攝取而顯著地改善IgE産生，延遲性過敏反應所 起因之疾病之症狀，且其預防效果也優。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之抗過敏劑抑制IgE之産生，對由IgE産生所媒 介或惡化之症狀，如I g E引起之過敏症，如枝氣管氣喘 ，過敏性#炎，異位性皮慮炎，過敏性結膜炎，奪麻疹 ,過敏休克等症狀之改善及/或預防極為有用。又可抑 制延遲型過敏反應而防治隨伴延遲型過敏反應之疾病， -3 7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 Α7 Β7 五、發明説明（从） 如接觸性過敏症，過敏性接觸性皮膚炎，細«過敏，真 舗過敏，病毒過敏，藥物過敏，甲狀腺炎，過敏性腦炎 等。 本發明之化合物等具有制癌活性，癌細胞増殖抑制活 性，細胞自滅誘發活性，異構酶11抑制活性，癌細胞分 化誘導活性，抗風濕活性，慢性關節風濕抑制活性，F a s 抗原産生誘導活性，抗Μ活性，抗病毒活性，肝功能改 善活性，熱休克蛋白誘導活性，血液成分正常化活性， 癌免疫增強活性，抗炎症活性，腫瘤壞死因子産生抑制 活性，Ν 0産生抑制活性，免疫調節活性，如延遲型過敏 反應抑制活性，淋巴球幼化反應抑制活性，混合淋巴球 反應抑制活性，I g Ε産生抑制活性，角叉菜膠浮腫抑制 活性等生理活性，由於這些活性，含有本發明化合物或 其光學活性體或這些之鹽所選出之至少一種化合物之食 品或飲料可當作具有上述種種生理活性之機能性食品或 飲料。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 製造本發明之食品或飲料時，用含有璟戊烯酮之加熱 處理物，從此加熱處理物之部分精製環戊烯酮及精製璟戊 烯酮及含Sli基化合物，製程中生成之本發明化合物也可 使用。 也即將含有璟戊烯酮之加熱處理物，從此加熱處理物 之部分精璟戊烯酮及精製璟戊烯酮及含S Η基化合物之本 發明化合物或其光學活性體或這呰之鹽所選出之至少一 種化合物含有，稀釋及/或添加而成之食品或飲料也包 _ 3 8 _ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（Μ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 工飲性 在可品來是 細機之限口 活用等 ，感效健 加或活 而卽食中於 ，理出無可 學作用病有善之 ，品學 ，應將物 C 用生選狀之 光 ί固作尿等改用 理食光' 理反可理次 作等所形狀 其抗善糖物能有 調之其。處物也處數。蘭用鹽其形 或，改，合功康 為成或可熱合。熱 ~ 料抗作之則等 物用能病化肝健 可製物即加化物加次飲，善些 ，_ 合作功疾明或腸 ，在合物行基理之 1 或用改這釋溶 化癌肝性發果胃 定而化合程SH處物作品作能或稀， 之制，毒本效持 特，明化製含熱合可食癌功體或膠 明，用病對防保 無法發種意與加化加之制肝性 \ 凝 發性作，等預其 法製本一任，之明添用有，活及， 本活毒果病，尤 。製之之少在酮物發此作具用學加囊 有理病效疾果 ， 料之料用至可烯合本。理將·作光添_ 含生抗制性效性 飲料飲作之 ，戊化含物生料毒其，， 料由，抑疫善常 或飲或理出時璟明在合穎飲病或有粒 飲種用癌免改恆 品或品生選料有發加化新或抗物含顆 或其作，體狀體 食品食有所飲含本料明有品，合物， 品由發防自症活 之食之具鹽或中含原發具食性化合狀 C 食，誘預，之持 明之用量之品物加其本造之發明化錠物之鹽滅癌敏病維 發明使效些食理添或中製明誘發種為狀明其自發過疾傺 木發般有這造處可料其地發滅本一可形發或胞有，之 ， 在本一含或製熱也飲釋便本自之少，之本體細而濕性等 含 及料體 加，或稀簡 胞能至定服 性，，風受果 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210Χ297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（ο ) 康食品或飲料。又因其抗®力而為保存性極佳之食品或 飲料。 本發明之化合物等投與其生理活性有效量也無毒性。 例如口服時，將式[V I I】，[V I I I】，[I X ]，[ X ]化合物或 其光學活性體或這些之鹽對老鼠單次口服lGI30nig/kg，均 不見死之例。 如上所述，本發明之化合物或其光學活性體或其鹽由 於其種種生理功能，在醫藥。食品，飲料等廣泛領域極 為有用。此本發明化合物以與環戊烯酮，含S Η基化合物 ，如含SH胺基酸，或其誘導物，如含半胱胺酸之胺基酸 衍生物之反應物生成於食品及飲料中，人為地生成之這 些化合物之使用也包括在本發明。 實施例 下面與實施例具體說明本發明，但不限於此，其中％ 乃指重量％。 參考例1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 將】η克I)-葡萄糖醛酸（細馬公司，9 5 2 6 9 )溶在1公升 水，加熱1 2 1 °C 4小時後，減壓濃縮至約1 0 m 1 ,加乙酸 丁酯：乙酸：水=3: 2: 2混液之上層40ηι]而混合後， 離心而將上清減壓濃縮至約1 0 ffl 1。 將上述萃取依在矽膠BW-300SP(2X28cffi，富士 Silicia 化學公司）柱層析（乙酸丁酯：乙酸：水=3: 2: 2之上 層為溶離液），以壓縮壓縮加壓為0 . 2 k g / c hi 2 ,以每分 5 m 1之流速分離。分1 0 in 1分劃，取出各劃份之一部分來 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（Μ ) 薄層層析，則在第6 1〜8 0劏份含高純度之環戊烯酮。收 集這些劃份而減壓濃縮後，以4 0 m 1氯仿萃取而減壓濃縮 ，得1 G Q m g環戊稀酬。 將此劃份用P a 1 p a c k型S柱（寶酒造公司）以順相Η P L C 分離，以2 1 5 τι ϋ V檢出，則純度為9 8 %。 將上逑璟戊烯酮】113. 9mg溶在乙醇2.85ml，加己烷/ 乙醇（ 9 4 / 6 ) 3.8 5 ml,得】7m g/ ml環戊烯酮溶液。將此 以0.5# m濾器過濾，作為光學分割HPLC試料溶液。 將此試料溶液在下列條件進行光學分割Η P L C，將前峰 之（-)體璟戊烯酬及後峰之（+ )體環戊烯酮之部分分別收 集而減壓乾涸，各得（-)體環戊烯酮43 · 2rog及（+ )體璟戊 烯酮 43.0fflg。 光學分割Η P L C條件

柱：對掌裝 AS(Daice]化學工業）2.t)cniX2 5.0cni 柱溫：4 0 °C 移動相：己烷/乙醇（9 4 / 6 ) 流速：1 4 . (1 m 1 /分 檢出:ϋV 21Onm 試料注入量；150>u 1(2.5 5 mg) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 所得（-)體及（+ )體環戊烯酮兩者均含約1 %對掌體， 故再以上述條件光學分割，結果從前峰之（-)體璟戊烯 酮3G · Omg得19 · 7tng不含對掌對之（-)體，從後峰之（+ )體 璟戊烯酮37.4mg得27.7rog不含對掌體之（+ )體：（-)體及 (+ )體環戊烯酮之光學分割HPLC之溶出時間分別為33分 -4 1 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 ΒΊ 五、發明説明（P ) 及4 0分。 實施例1 (1)混合1M環戊烯酮水溶液100// 1及以NaOH調為pH4之 1 M L -半胱胺酸鹽酸鹽（中瀨T e X公司製造，1 0 3 - 1 3 ) 1 0 0 a 1 ，在6 0 °C反應1 6小時後，濾經0 · 5 # m C 〇 s m ο n i c e濾器（ 中瀨Tex公司製造，440-84)後，以0.1%三氟乙酸（中瀨 T e X公司製造，3 4 9 - 0 1 )水溶液為移動相，以每分0 . 5 m 1 之流速，用膠囊裝柱C18SG120(6minX 250roro,資生堂公 司製造）予以HPLC,以210ΠΪΠ之吸光度檢出，在19.1分及 19 .5分呈主峰，分取而減壓蒸乾，單離2種非對映體CM 1 (1 9 · 1 分）及 C Μ 2 ( 1 9 · 5 分）。 (2 )環戊烯酮與L -半胱胺酸之反應物之構造 將實施例1-U)單離之CM1及CM2之質量分析用DX3G2質 量分析計（日本電子公司製造）施行。又溶在m之I) C 1 重水溶液，依NMR解析其構造。NMR裝置乃用JNM-A500 (日本電子公司）。U V則用U V - 2 5 0 0分光光度計（島津製作 所製造）測定。結果如下。 CM 1 FAB-MS m/z 218 f M + Η ] + 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

基質用甘油 !H —NMR δ 2. 3 2 (1 H, d d, J = = 2 0. 0, 1 . 5 H z， 5 —H)、2· 8 9( 1 H, d d, J = 2 0. 〇， 6 . 0 H z , 5 -H)、3 · 0 1 ( 1 H, d d, J =15. 0, 7 . 0 H z # ，1 y —H)、3 · 0 9 ( 1 H， d d，J = 1 5 . 0, -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（〜） 4 . (5 Hz, 1 ’ 一Η)、4 · 0 1 (III, m, 4 - Η)、4 · 16 (1Η, d d， J =7 . 0, 4 . 5 Η ζ , 2, —Η)、6· 4 9 ( 1 Η, d, J ~ 3 . OH z , 3 -Η) U V : λ m. * n m 2 5 0 n m (水) CM 2

FAB -MS m/z 218〔M + H〕+ 基質用甘油 ^-NMR ό 2 • 3 1 ( 1 H, d d 3 J = 2 0· 1 . 5 Η ζ , 5 — Η)、2. 8 7( 1 Η, d d, J =20 .0 ， 6 . OH ζ , 5 -Η) Λ 3. 0 1 (1 H, d d，J 二 15 • 〇, 6 .5 H z , 1 ，-H) 、3· 11 (1 Η， d d ，J = 1 5 · 0， 4 .5 Η z , 1 ’一 H)、 4 .0 0 ( 1 H, m, 4 一 Η) 、4 • 20(1 H, d d ，J = 6 . 5 ，4. 5 H z ,2,—] Η), 6. 4 6 (1 H, d，J = 3 .OH ζ ，3 — H) 但 1 H -N M R.化學 移 位值以 Η 0 D化學移位值 為.4 .6 5 p p m 表示 ο CM 1 溶在1 D . 1 N D C 1 重 水溶液 、用 JNM- A 5 〇 〇測定 13 C- N M R o "c —1 NMR δ 3 0_ 3 ( 1，一 c) 3 9.4 (4 一 C)， 4 2 . 0 (5-C), 5 3 . 4 (2, 一 C) ,13 2. 8 (3 - C) ，1 5 4 . 6 (2 一 c) ,17 1. 1( 3 ，一彳 C) 丨， 2 0 5 . 5( 1 —c) 但 s 13 C -N M R化學 移 位值以 二Β咢 烷之 化 學； 移位 值為 6 7 . 4 p p ro 〇 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1 H-NMIi、GC-NMR之峰之歸屬番號如下式[VII]。 -4 3- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 Α7 Β7

OH

I 五、發明説明（β 【w】 νη2

CM1與CM2之等量混合物（CM)之（IR)用FTIR-8000PC紅 外分光光度計（島津製作所製）測定。結果如下 I R v KBr c m'1 3000, 1705,1625, 1 2 0 1 依擴散反射法施行，得知 C Μ 1舆C Μ 2之一方呈式[V T I I ]構造、他方呈式[I X ]。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Η Αη2 0Η

【Vin】 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

OH

【K】 Η Τ H00CI…“ C·.·_·I CH? nh2 第1圖為CM1之質譜，第2圖為其1 H-NMR，第3圖為 CHi之UV，第4圖為CM2之1 H-HMR，第5圖為CM1之 13 C-NMR ,第6圖為CM2之I R。第1画中橫軸為ιη/ζ值， -44-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X29*7公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（β) 縱軸為相對強度（％ ),第2 ，4及5圖中；橫軸為化學 移位值（PPffl),縱軸為信號之強度。第3圖中橫軸為波 長（nm),縱軸為吸光度。第6圖中橫軸為波數（cur1)， 縱軸為透過率（％ )。 實施例2 (1 )混合環戊烯酮1 Μ水溶液1 0 0 // 1及2 0 0 m Μ麩胱甘肽（ 還原型：中瀨Tex公司：170-10)水溶液（pH3.0)500>u 1 ，在6 0 °C反應5小時後，濾經0 · 5 # in C 〇 s m ο n i c e濾器， 依下列條件作Η P L C。 柱:T S K g e 1 0DS-80Ts(5>u m)、 2 . 0 mm X 2 5cm 移動相：A Π · 1 % T F A水溶液 fi 0 · 1 % T F A / 5 i)乙睛水溶液 流速：7 . 5 m 1 /分 梯度：1 〇分間移動相A— 5 5分移動相A至A : B = 1 : 1 —]5分移動相A : B = 1 : 1至移動相B 檢出：2 2 0 nm之吸光度 將上述反應液2 0 0 /i 1予以Η P L C，分取留存時間3 5 . 7分 及3 6 分之峰，分別減壓蒸乾，單離2種非對映體G Μ 1 (2 · 5 m g )及 G Μ 2 ( 3 . 0 m g ) 0 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 其層析如第7圖，表示留存時間與吸光度之關傺，橫 軸為留存時間（分），縱軸為在22Gnro之吸光度。

(2)解析實施例2-(〗）製備之GM1與GM2之等量混合物 (簡稱GM)之構造。NMR以JNM-A500(日本電子公司），質 譜（MS)以DX302質量分析計（日本電子公司），UV以UV 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 kl B7 五、發明説明（44 ) 2 5 0 Q分光光度計（島津製作所製造），I R以F T I R - 8 0 0 P C紅 外線光光度計（島津製作所製造）測定，結果如下： 1 Η 一 NMR 一 δ 2 .0 9 (2 H, m J 5 , 一 H) J 2 . 2 8 ( 1 H，d d ,J = 1 3 . 〇, 2 0 . OH z , δ -H) 1 2 . .4 4 (2 H, m ,4, · -H) > 2 . 7 8(1 H， d d， J = 8. 5, 14 • 〇, 1 ,- -H)， 2 , ,85 或2 • 8 9(] ί H， d d J = 3 . 〇, 6. OH Z ，5 一 H) 2 . 9 2 或 2 · 9 5 (1 H, d d ，J = 1 . 〇, 5. 5 H z , 1 J H), 3 • 8 6 (2H, s, 9 ，一 H) ，3 .9 5 (2H， m, 4 -H, 6 y H)， 4 .4 6 (1 H, m, 2 ，一 H) ，6 .4 7 或 6 . 4 9 ( 1 H, d ，J =3 . 0 μ z 1 3 -H) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 試料溶在〇 · 1 N D C 1重水溶液、Η 0 D化學移位值以 4·65ρριπ表示 〇

,3C-NMR <5 2 6. 3 (5，—C), 31. 7 (4，一 C), 31· 9 或 32· 1 ( 1 ，一 C), 39· 3 (4—C), 41· 9 (9，-C), 42· 2 或 42. 3 (5-C), 53· 3 (6’-C), 54. 1 (2’—C), 13 3. 5 (3- C) , 15 4· 4 ( 2 — C)，1 7 3 付近（3 ’ 一 C，Ί、一 C.、8 ’ 一 C· 1 Ο ’ 一 C) , 2 Ο 5 . 8 ( 1 —C) 試料溶在〇 · 1 N I) C 1重水溶液、二鸣烷之化學移位值以 6 7 . 4 p p m 〇 1 13 h-nmr, C-NMR之峰之歸屬之號碼如下式〔X〕 一 4 6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（Μ )

H2 N-CH-CHτΊ COOH

ίο COOH 【X】 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 FAB—MS m/z 4 0 4 (M + H) + , 4 2 6 (M + N a) + 以甘油為基質 UV λ m. x 2 5 1 n m (水） 1 R vKBr …cm-，2949，1710, 1 6 6 0, 1539，140 1,1203 依擴散反射法施行。 結果如第8圖〜第12圖、第8圖為GM之1 H-NMR，橫 軸為化學移位值（P P 1R )、縱軸為信號強度。第9圖為G Μ 之13 C- N M R、橫軸為化學移位倌（p p in ),縱軸為信號之強 度。第1 G圖為G Μ之質譜、橫軸為m / z值、縱軸為相對強 度（％ )。第1 1圖為G Μ之U V、橫軸為波長（n m )，縱軸為吸 光度。第12圖為GM之IR、橫軸為波數（d1)，縱軸為透 過率（％ )。 由以上結果得知G Μ 1、G Μ 2為2 -羥基-4 -麩胱甘肽-S -基 - 2 -環戊烯酮非對映體，其一呈式[XI]、他方呈式[XII】 4 7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 518321 A7 B7 五、發明説明（4 (L) (L) H2N — CH — CH2 —CH2 —C一NH — CH-C-NH-CH2 —COOH I II COOH 〇

【XI】 h2n」L(?h-ch2-ch2-c-nh-(L(Ui-nh-ch2-co〇h COOH . II 〇

【X u (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 實施例3 (1)將璟戊烯酮及L-半胱胺酸鹽酸鹽（中瀨Tex公司製 造，103-13)使各濃度為10m Μ溶在磷酸緩衝食鹽水（pH 7 · 2 )，在3 7 °C反應3 0分後，濾經0 · 5 // m C 〇 s m ο n i c e濾器 (中瀨T e x公司製造，4 4 0 - 8 4 )，以0 . 1 %三氟乙酸（中瀨 T e X公司製造，3 4 9 - 0 1 )水溶液為移動相，以每分1 m 1之 流速，用 TSK-Gel ODS 80Ts(4.6niinX 250inffl，東曹公司） 進行HPLC ,以2 10nm之吸光度檢出結果，環戊烯_與L-半胱胺酸之峰減少，在4 . 0分及4 . 3分出現新主峰。 結果如第13画，表示溶出時間舆在21Gnm之吸光度之 關俗，橫軸為溶出時間（分），縱軸為在210nm之吸光度^ 第13圖中3. 1分為L-半胱胺酸之溶出位置，4. 9分為璟 -48-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 Α7 Β7 五、發明説明（π ) 戊烯國之溶出位置。 (2 )將璟戊烯刚及L -半胱胺酸鹽酸鹽各以濃度1 ϋ G // Μ 溶在磷酸緩衝食鹽水（ΡΗ7.2),在37°C 2l5nm之吸光度 之經時變化用ϋ V - 2 2 G (1分光光度計（島津製作所製造）測 定。結果與反應時間一起吸光度下降，從5 0 0秒後起大 致一定。結果如第14圖，表示用L-半胱胺酸時，反.應時 間與215nra之吸光度之關傺，橫軸為反應時間（秒），縱 軸為在2 1 5Π!»之吸光度。 次將L-半胱胺酸鹽酸鹽代之以麩胱甘肽（還原型，中 瀨T e X公司製作，1 7 0 - 1 0 )仿上操作，結果與反應時間一 起在215nm之吸光度下降，從20GQ秒起大致一定。其結 果如第1 F5圖，表示用麩胱甘呔時，反應時間與在2 1 5 n m 之吸光度之關偽，橫軸為反應時間（秒），縱軸為在215ϋΐη 之吸光度。 (3)令璟戊烯酮與L-半胱甘肽鹽酸鹽各以濃度1(1 m Μ溶 在磷酸緩衝食鹽水（Ρ Η 7 . 2 )，在3 7 °C反應3 0分後，濾經 0.5#«1(：〇8«1〇11〗〇6濾器，以0.1%乙酸水溶液為移動相 以每分 Iffll 之流速，用 TSK-Gel ODS 80Ts(4.6fflfliX 250inffi 及A P I 3 Ο (3 ( S a i X公司製造）施行高速液體層析質量分析 (正離子態），結果呈現m / z = 2 3 6 · 1 [ M + Η ] +信號，反應 所産生之物質之分子量為235。 結果如第16及17圖。第16圖為上述本發明之一例之反 應物之層析圖，横軸為留存時間（分），縱軸為全離子強 度（相對值）。第17圖為第16圖之在2. 99分溶出之劃分之 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（21〇Χ297公釐） I--·------------1Τ------ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 518321 A7 B7 五、發明説明（4) 質譜，橫軸為m/z，縱軸為離子強度（相對值）。在第16 圖之3 . 1 5分及3 . 2 4分分別溶出之劃分之質譜也呈現m / z =2 3 6 . 1 丨 M + Η ] + 信號。 (4 )將環戊烯酮及L -半胱胺酸鹽酸鹽各以濃度1 0 0 /i Μ 溶在磷酸緩衝食鹽水（Ρ Η 7 . 2 ),在3 7 °C反應5 0分。反應 前後之ϋ V以f) V - 2 2 0 0分光光度計（島津製作所製造）測定。 結果如第18及19圖。第18圖為溶解即後之反應液之UV ，第19圖為反應50分後之UV。其中橫軸為波長（nm),縱 軸為吸光度。 仿上，惟L -半胱胺酸鹽酸鹽代之以麩胱甘肽。 結果如第2 0及2 1圖。第2 0圖為用麩胱甘肽時溶解即後 之反應液之ϋ V，第2 1圖為用麩胱晳肽時反應5 G分後之U V 。其中橫軸為波長（nm)，縱軸為吸光度。 (5 )混合fi (1 v ] 1 . 4 Μ環戊烯酮重水溶液，8 0 /i 1 - 1 Μ L-半胱胺酸重水溶液，及以160/il重水調製之磷酸緩衝 食鹽水（P Η 7 . 2 )，在3 7 °C反應3小時後，其13 C-N M R以 J Ν Μ - A 5 0 0 (日本電子公司製造）測定，結果如下。 13 C-NMR. 占 3 3 附近（1 ’ - C )，4 3 附近（4 - C 與 5 - C )， 5 5 附近（2 ' - C )， 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 7 5附近與7 8附近（3 - C )，8 G附近與8 1附近（2 _ C )，1 7 3附近 (3 ’ - C )，2 1 5 附近與 2 1 7 附近（1 - C ) □ C-NMR峰之歸屬之番號如下式[XIII] -50-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（β

OH OH 【XIII】 Η (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 3/ h/ i

HOOC — C一CH2 —S

I NH2 此反應物之EC-NMR如第22圖，其中橫軸為化學移位 值（P P in)，縱軸為信號之強度。 此反應之生成物為4種非對映體之混合物，故各就碳 原子呈最大4個信號，生成之反應物之化學構造為如前 式[I X 1環戊酮硫基衍生物。 由以上結果，璟戊烯酮與半胱胺酸反應生成之以第1 3 圖之溶出時間4 . fl〜4 . 3分為峰之反應物，得如前式[I X ] 璟戊酮硫基衍生物（以下稱C D )。 實施例4 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (1.)混合璟戊烯酮1 . 4 Μ水溶液6 0 # 1，2 0 ϋ m Μ麩胱甘肽 (還原型，中瀨Tex公司製造，170-10)水溶液（以NaOH調 為ρΗ7·0)600#1及磷酸緩衝食鹽水（ΡΗ7·2)1340// 1，在 3 7 °C反應1小時，此反應液7 0 0 # 1濾經0 · 5 # m C 〇 s m ο n i c e 濾器，以如下條件將環戊烯酮與麩胱甘肽之反應物（以 下稱G D 1 )以H P L C分離。 柱：TSKge] 0DS - 80Ts(5/iffl)、20ramX2 5cm(東曹公司） 移動相：Α Π·1%三氟乙酸（TFA、黙克公司、8262)水 溶液 B 0.1%TFA/50乙腈（中瀨Tex公司製造、 -5 1 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（作） 0 · 0 4 - 3 (])水溶液 流速：9 m 1 /分 梯度：40分間移動相A— 40分移動相A至A : ►以後

移動相B 撿出：2 2 0 n m之吸光度 將上述反應液5 0 0 # 1予以Η P L C ,分取留存時間2 7 . 7分 之峰，凍乾而單離5mg GD。 其層析如第23圖，第23圖表示留存時間與吸光度之關 傺，橫軸為留存時間（分），縱軸為在2 2 0 ηπι之吸光度。 (2)解析實施例4-U)製備之GDI之構造。NMR用JNM -A500(日本電子公司製造），質譜（MS)以DX302質量分析 計（日本電子公司製造），UV以UV-2500分光光度計（島津 製作所製造），1卩用？11卜80(3〇(：紅外光光度計（島津製 作所製造）測定，結果如下：

!H-NMR δ 2. 07 (2Η, m, 5，一 Η)，2· 17 ( 1 Η, d - t，J = 20· 0, 11. OHz, 5 — H)，2. 4 5 ( 2 H, m, 4’—H), 2· 88 (1H， 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) m，1，一H)，2· 9 5 ( 1 H，m，5—H)，3· 08 (1H, m, 1’ — H)，3. 1 9 ( 1 H，m，4 —H)，3 · 7 6 ( 1 H, m，3 -H) ,3.8 6 (3H，m, 6，一H，9，一 H)，4. 0 9 (1 H, d, J = 10· 5 II z ，2—H)，4· 4 9 (1 H，m，2’ -H) 試料溶在重水、H 0 D化學移位以4 . 6 5 p p m表示。 -52- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321

A7 B7 五、發明説明（w)

,3C-NMR 6 2 6. 4 (5’一〇, 31. 7 (4’一〇, 33· 3 (l’-C), 41 • 9 (9，一 C)，42. 4 或 42. 6 (4—C)，4 2. 8 (5 - C)，5 3· 4 (6，一 C) , 5 4· 1 (2，一C) , 7 9 . 4 或 7 ί) · β ( Π - C) ，81. 1 (2—C), 17 3 付近（3，一C，7，一C, 8，一C, 10，一 C)，2 1 4 · 9 (1 —C) 試料溶在重水、二鸣烷之化學移位值以6 7 . 4 ppm表示。 iH-NMR、13C-NMR峰之歸屬之番號如下式[XIV] 6# 5# 〆 3' ϊ I 〆 1〇#

H2 N-CH - CH2 — CH2 — C 一NH — CH — C 一NH - CH2 — COOH

17' II COOH 0 [XIV] (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T

FAB—MS m/ z 4 2 2 [Μ + Η] + 以甘油為基質 U V 末端吸収 I R S: 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 3 2 7 5, 1 7 4 9, 1 6 5 4, 1 5 4 1, 1 2 0 3, 1 4 5 依擴散反射法施行。 結果如第，2 4圖〜第27圖、第2 4圖為60之1}]-!^!^,橫 軸為化學移位值（ppm)、縱軸為信號之強度。第25圖為GD -5 3 - v KBr m.* cm 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） 518321 ΑΊ B7 五、發明説明（t> ) 之13 c- N M R、橫軸為化學移位值（P p m )，縱軸為信號之強 度〇第26圖為GD之質譜、橫軸為m/z值、縱軸為相對強 度（％ >。第2 7圖為G D之I R、橫軸為波數（c πΤ1 )，縱軸為 透過率（％ )。 由以上結果得知，GJ)為呈前式[X]之2, 3 -二翔基-4-黎 胱甘肽-S -基-璟戊酮。G D為4種非對映體之混合物，由 G D分離各非對映體。 實施例5 (!)於含2.5Χ 1G5個前骨髓性白血病細胞《丨/60細胞 (ATCC CCL-240)之 4.5ml 含 10% 牛胎兒血清之 RpMI 1640 培養基添加 〇·2ηιΜ CM, 0·8ιηΜ CM 或 1·6βϊΜ CM 各 〇.5rol, 在5 % C Ο 2之存在下3 7 °C培養2 4或4 8小時後，測定活細 胞數。 結果CM呈強力抑制癌細胞增殖之活性。在各細胞增殖 抑制濃度，於細胞形成細胞自滅小體。 結果如第28圖，表示所添加試料，即CM之培養液中濃 度與活細胞數之關係，且表示CM作爲制癌劑、細胞自滅誘 發.劑之有效成份之有效性，於第28圖中，橫軸爲CM濃度（μΜ)，縱 軸爲培養液5rol中所含活細胞數（Xl05/5rol)。另外，第28圖白四角 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (□)為添加CM培養2 4小時，黑四角（)為為添加CM培養 4 8小時。白三角（△>為無添加試料培養2 4小時，黑三角 為無添加試料培養4 8小時。 (2 )將8，4 0，2 0 0或1 0 0 0 # Μ之G Μ水溶液，或當作對照 之水10/il加在96穴微板之各穴，在含10 %牛胎兒血清之 RPMI 1640培養基懸浮 HL-60(ATCC CCL-240)5X104 値 /祖1 -54-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（0) ，而在上述徹板之各穴分注90/^1，在5%C02存在下37°C 培養4 8小時後，加5 m g / m 1溴化3 - ( 4，5 -二甲基ϊί唑-2 -基） 2, 5 -二苯基四銼（ΜΤΤ,細馬公司）磷酸緩衝食鹽水溶液 ]0 A ]，繼續培養4小時後，以顯微鏡觀察細胞之生育 狀態。又加0.04N HC1之2 -丁醇100//1而充分攪拌後， 測定在59Qnm之吸光度。 結果在40# Μ之GM添加部分（最後濃度4.0// M)不見細 胞增殖。故得知GM以4.G//M濃度完全抑制HL-60細胞之 増殖。又在各細胞增殖抑制濃度於細胞形成細胞自滅小 體。 (3 )將1 0 0，2 0 0或4 0 0 a Μ之G Μ或C Μ水溶液，或當作對 照之水1 0 A 1加在9 6穴徹板之各穴，仿實施例5 - ( 2 )測定 H L - 6 ϋ増殖抑制活性。但細胞増殖之程度以試料添加區 在590 n m之吸光度與對照之水添加區之5 9 On®之吸光度之 比率（％ )表示，結果如表1。 表 1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、11 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 GM CM 4〇 μ η 3 . 2 2 . 8 20 Μ Η 1 . 8 16.1 1 0 /i Μ 14.8 48.9 (4)在含56 °C處理30分之牛眙兒血清（Gibco公司）10% -55- k··. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（付） 之R Ρ Μ I 1. 6 4 0培養基（日水公司）3 7 °C培養之H L - 6 0細胞 (ATCC CCL 240)以2.5X10S個懸浮在上逑培養 基，而添加1 〇 A M G Μ水溶液0 · 5 m 1 (最後濃度1 〇 A Μ ),在 5 % C 0 2之存在下3 7 °C培養2 4，4 8及7 2小時。 將培養細胞以錐籃染色來計數活與死之細胞數/，則1 0 A M G Μ添加區比對照之水添加區其活細胞數及細胞存活 率顯箸地減少。將培養細胞以光學顯撤鏡觀察，確認核 之凝縮，細胞之縮小，細胞自滅小體之形成。又從細胞 萃取D N A ,予以洋菜糖凝_電泳，確認以染色質單位之 D N A Μ段化，在對照之水添加區則無這些現象。 結果如第29圖，表示在HL-60之培養液加1〇mM GM時之培養時 間與培養液中活細胞數之關係，且表示GM作爲制癌劑、細胞自滅誘 發劑之有效成份之有效性。又，於第29圖中，橫軸爲培養時間（小 時），縱軸爲培養液中之活細胞數（Χ105個/5ral)。另外，第29圖 中白四角（□)爲ΙΟμΜ GM添加，白圓（Ο)爲加水之對照。 (5 )將 4，】2，〗2 · 3 , 3 7 · 0， 1 1 1 , 3 3 3 或 1 0 0 0 D 之 G Μ 水溶液，或當作對照之水10# 1加在96穴徹板之各穴，

在含10%牛眙兒血清之RPMI 164Q培養基懸浮HL-60(ATCC C C L - 2 4 0 ) 5 X 1 0 ^ β / m 1 ,而在上述徹板之各穴分注9G A 1 ，在5 % C 0 2存在下3 7 °C培養4 8小時後，加5 m g / ® 1溴化3 一 (4，5 -二甲基B塞唑-2 -基）-2，5 -二苯基四銼（Μ T T ,細馬公 司）磷酸緩衝食鹽水溶液1 0 // 1 ,繼續培養4小時後，以 顯微鏡觀察細胞之生育狀態。又加0.04Ν HC1之2 -丁醇 1 〇 〇 # 1而充分攪拌後，測定在5 9 0 n m之吸光度。 -56- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、\一5 518321 A7 B7 五、發明説明（π) 結果在37.0# Μ之GD添加部分（最後濃度3.70# Μ)不見 細胞增殖。故得知GD以3. 70// Μ濃度完全抑制HL-60細胞 之增殖。又在各細胞增殖抑制濃度於細胞形成細胞自滅 小體。 (6)於磷酸緩衝食鹽水（ρΗ7·3)溶解璟戊烯酮55πιΜ及L -半胱胺酸鹽酸鹽80πιΜ,在ΡΗ7.2, 37°C反應15分後，取 出一部分於以0.1 %三氟乙酸水溶液為移動本，以每分 1 ra 1 之流速，用 T S K g e 1 0 D S - 8 0 T s ( 4 · 6 m m X 2 5 0 m in ,東槽 公司）柱之逆相HPLC分析，結果不見璟戊烯酮。此反應 溶液為含5 5 m M G D溶液。 仿實施例5 - ( 4 )測定各1 ϋ 0，2 0 0或4 0 0 a M G D或C D水溶 液之癌細胞增殖抑制活性。細胞增殖程度以試料添加區 在5 90ηπι之吸光度與對照之水添加區在590n m吸光度之比 率（％)表不。結果如表2〇 表2 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、\呑 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 GD CD 4 0 Μ 2 . 1 5 . 3 2 0 ^ Μ 5 . 8 5 6.2 1 0 // Μ 4 7.2 89.0 如表2所示，GD及CD呈現癌細胞增殖抑制活性。又在 各細胞增殖抑制濃度於細胞形成細胞自滅小體。 -57- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4現格（210X297公釐） -ΛΨ. 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（μ ) 以上如實施例5所示，各化合物呈示癌細胞增殖抑制活性及細 胞自滅誘發活性。各非對映體也呈示同樣效果。此結果可顯示本 發明化合物作爲制癌劑、細胞自滅誘發劑之有效成份之有效性。 實施例6 將GM以生理食鹽水稀釋成所定濃度來作如下試驗。 (1)將Meth A細胞（2X 1〇6細胞/小白鼠）在8週齡 雌B A L B / e小白鼠（體重約2 0克）之腹部皮下注射後，繼 於同處皮下注射G Μ ( 5 m g / k g /日）連續5日。對照群則將 生理食鹽水同樣皮下注射。2週後，摘出形成於小白鼠腹 部之癌組織，測定其重量。與對照群相較，GM投與群有 顯著之癌增殖抑制作用。CM, CD, GD也得同樣結果。 (2 )將小白鼠白血病P - 3 8 8 ( 1 · 1 X 1 0 6細胞/小白鼠） 在7週齡雌DBA/ 2小白鼠（體重約20克）腹腔内注射後 ，連續5日腹腔内注射GM，CM, GD或CD(10mg/kg /日） 。對照群則將生理食鹽水同樣腹腔内注射。計算2群各 8隻之小白鼠之生存數，平均生存曰數及延命率。各試 料投與群比對照群延長平均生存日數，延命效果顯著。 在用肉瘤-180/ICR糸，IMC/CDF条及EAC/DDY条小白 鼠也有同樣延命效果。 以上如實施例6所示，GM，CM，GD或CD均呈制癌效果。各 非對映體也得同樣結果。此結果顯示本發明化合物作爲制癌 劑之有效成份之有效性。 實施例7 將祜草桿菌IF03021在感受性培養基（日水公司）培養 一夜（種培養測定在6 0 0 ηιο之及光度，從預先作成之 活菌數與在600 nm吸光度之關俗之檢量線算出活菌數。 -58- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X29*7公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} 、·1Τ 518321 A7 B7 五、發明説明（θ) 以新鮮之感受性肉汁培養基稀釋種培養液至IX 1〇6個 /»1而注在96穴微板之各穴各180>ul,各穴加GM 4Bg/ffll 及2Bg/Bl水溶液或水各20#1,在37°C靜置培養1夜（本 培養）。另將種培養之一部分以滅菌水稀釋，塗在烕受 性肉汁洋菜平板培養基，在37°C培養一夜後，計數菌落 而測定正確之活菌數。 將各穴之培養液以滅菌水稀釋而塗在威受性肉汁洋菜 平板培養基，在37Ό培養一夜後，計數菌落而測定正確 之活菌數。 結果，4»g/al GM添加區（最後濃度4 0 0 >ug/Bl>之活 菌數為4.4X107個/ »1,比水添加區之1.3X108値/扭1 減少。故於400/ig/Bl呈現對上述被檢菌有增殖抑制 作用。CM, GD, CD或此等之各非對映體，GM之非對映體 也得同樣結果。這些化合物對其他細胞也有同樣抗菌活性。此結果 顯示本發明化合物作爲抗病原微生物劑之有效成份之有效性。 實施例8 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (1)用8週齡雌CDF1条小白鼠（從日本SLC公司購入7週 齡，體重20克者而預備飼養1週），在腹腔投舆（l〇#g /条白鼠）LPS(脂多糖，細馬公司）來製作内毒素休克模式 。GM乃LPS投舆30分前分別以100, l〇〇〇Bg/kg之用量口 •服。LPS投與之1小時後，採血而分離血清，血清中腫 瘤壞死因子-cr量以市售之ELISA套組（Endogen公司）測 定，結果如表3。與投與蒸皤水之對照群相較，GM 1000 *g/kg投與群顯著地抑制腫瘤壞死因之産生。 -59-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（2丨〇'乂 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（以） 表 3 群 投與量 (mg/kg) 血清腫瘤壞死因子量 (ng/ffll)平均土 SE 對照群 4 2 · 3 2 土 0 · 1 5 G Μ投與群 10 0 0 5 1 · 1 6 ± 0 · 2 6 10 0 5 2 · 2 2 士 0.26 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (2 )在8週齡雌C D F 1条小白鼠之腹腔内投與石蠟油 (Cosmobio公司）2ml來誘導腹腔巨噬細胞（M0)。投與 1週後，在腹腔内注入RPMI-1640培養基（Gibco公司）4inl 並充分按摩後，回收而得腹腔細胞。 腹腔細胞以R Ρ Μ卜1 6 4 Q培養基洗2次後，懸浮於含1 0 % 牛眙兒血清（FCS， Hiclone公司）之RPMI-1640培養基， 調整細胞濃度為lx 106細胞/ ml。將此細胞液lml播種 在2 4穴板，在3 7 °C C 0 2保溫箱培養2小時後，去除上 清中非接著細胞，將接著細胞當作腹腔Μ多。 於板之各穴加含有10% FCS之RPMI-1640培養基800/i 1 ,次加溶在生理食鹽水（大塚製藥公司）之1， 10, 100， 1 0 0 0 A Μ之G Μ 1 0 0 // 1，在3 7 °C C 0 2保溫箱培養1小時。 培養後，加l〇〇ng/ml LPS(細馬公司）100//1。培養24 小時後，回收培養上清，所産生之腫瘤壞死因子-cr量 以市售之ELISA套組定量。 一 6 0 _ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7__ 五、發明説明（巧） 結果如第30圖，表示GM量與腫瘤壞死因子產生量之關 係，且表示GM作爲透過抑制腫瘤壞死因子產生之活體防禦 劑有效成份之有效性。圖中，縱軸爲腫瘤壞死因子產生量 (pg/ral)，橫軸爲GM濃度（μΜ)。棒圖乃示無添加GM之對照。 GM以10 μ Μ以上之濃度顯著地抑制從LPS誘發之小白鼠 腹腔巨噬細胞之腫瘤壞_死因子產生。 以上如實施例8所示，GM有抑制腫瘤壞死因子產生之 作用。又CM，GM，CD或這些之各非對映體，GM之各非對 映體也得同樣之結果。此結果顯示本發明化合物作爲透過 抑制腫瘤壞死因子產生之活體防禦劑、特別是作爲抗風濕 劑之有效成份之有效性。 實施例9 用6週齡雄路易士鼠（購自Seac吉富公司，5週齡， 體重約130克者而預備飼養1週）如下製作慢性關節風濕 動物之角叉菜膠誘發足浮腫模式來評價被驗藥。 於實驗開始1 8小時前斷食之老鼠口服以蒸餾水（大塚 製藥公司）調製成10, lOOmg/ml之GM lOml/kg。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 被驗藥投與〇 . 5小時後，將懸浮於生理食鹽水（大塚製 藥公司）調成1 %濃度之角叉菜膠（和光公司）在老鼠右足 踱注射1 0 0 # 1 /老鼠來引起足浮腫。注射3小時後，右 足容積以老鼠足容積測定裝置（Ugovagil公司）測定。測 定值乃由角叉菜膠投與前測定之各鼠之右足容積算定 增加率表示。 結果如第31圖，表示GM量與足浮腫增加率之關係，且 表示GM作爲活體防禦劑、特別是作爲抗風濕劑之有效成份之有 效性。圖中，縱軸爲增加率（％)，橫軸爲GM投與量（mg/kg)。 GM從100mg/kg之投與量有顯著抑制作用。 CM，GD，CD或這些之各非對映體，GM之各非對映體也得 ~ 6 1 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（Μ ) 同樣結果。此結果顯示本發明化合物作爲需抑制浮腫之疾病 用之活體防禦劑、特別是作爲抗風濕劑之有效成份之有效性。 實施例1〇 將GM之N0産生抑制活性及細胞障礙抑制活性用小白鼠 巨噬細胞株RAW 264.7細胞（ATCC TIB71)及LPS來測定： 將含1.5X106個RAW 2 6 4 . 7細胞之含5ml 10%,牛胎兒 血清（Gibco公司），不含酚紅，含2mM L -麩胺醯胺（Lifetec Oriental公司，25030-149)之 Dulbeco 改良 Eagle培養基 (Lifetec Oriental 公司，11054-020)在 6 穴組織培養 板 5 % C0 2 3 7 °C 培養 1 2 小時後，加 5 0 # 1 5 0 /i g / m 1

LPS(細馬公司，L-2012),在各穴各加50// 1 250#M GM 或100 A M GM，培養12小時後，測定NO在培養基中氧化 成N 0 及活細胞數。為對照設定不加L P S區及不加G Μ區。 測定Ν 0 2_時，從各穴分離1 〇 〇 # 1培養上清，加1 0 # 1 50 // g/ ml 2，3 -二胺基萘（同仁化學研究所公司，3 4 1 -0 7 0 2 1 )溶液（0.62N鹽酸溶液），在室溫放置15分後，加 5χ/1 2.8N NaOH水，所生成之萘基三唑之螢光用滴定螢 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 光掃描器11(大日本製藥公司發售），以勵起波長3 5 5 nm ，測定波長460ηηι作螢光測定。實驗均作2連，從此平 均值扣除無添加L P S之對照值，以對L P S添加區之值之各 區相對值比較。 結果GM抑制由LPS誘導在RAW 264.7細胞之NO產生， 又抑制由LPS對RAW 26 4.7細胞之細胞障礙。 結果如第32及33圖，第32圖乃示培養液中GM濃度與N02 一 濃度之關係，且表示GM作爲透過抑制NO產生之活體防禦劑之有 -62- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（4 / ) 效成份之有效性。圖中，縱軸爲NO 2 —濃度之相對値（％)。第33 圖乃示GM存在下培養時間與活細胞數之關係，且表示GM作爲 由LPS引起之疾病用活體防禦劑之有效成份之有效性。圖中， 橫軸爲培養時間（小時），縱軸爲含在培養液5m 1中之活細胞數（X 105/5rol)。第33圖中白四角（□)爲LPS無添加，白菱形（◊)爲 1^5添加，白圓（〇)爲添加2.5//8101»，白三角（八)爲添加2.5从 M GM+LPS，黑四角（)爲添加 leM GM+LPS。 如上所述，GM有NO產生抑制作用，又CM，GD，CD，或 這些之各非對映體，GM之各非對映體也得同樣結構。此結 果顯示本發明化合物作爲需抑制NO產生之疾病用活體防禦劑 之有效成份之有效性。 實施例11 將從慢性關節風濕患者之滑膜樹立之纖維芽細胞株DSEK 細胞（埼玉醫科大學總合醫療中心第2內科保存細胞株）用 含10%牛胎兒血淸（FBS，Gibco公司，26140-079 )之 iscob 修飾 Dulbeco 培養基（IMDM，Gibco 公司，12440-053 )在5%C02 37°C培養至共融，以胰蛋白酶-EDTA(Gibco 公司，25300 -054 )剝集細胞，而在上述培養基懸浮該細胞 2 50 00個/ml，在96穴微板之各穴注100//1。培養5日 後，大致共融時棄除培養基，加令2.5，5，10，20或30 //M GM之上述培養基，培養24，48或72小時後，力口 1〇// 1 Prernix WST-1(寶酒造公司，ΜΚ400)，在37°C反應4小 時，從在450nro之吸光度（A45。）扣除在650nro之吸光度（A 650 ) 之値爲細胞增殖度。結果如表4。 -63- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 518321 A7 B7 五、發明説明（β) 表4 濃度 (Μ H) Α 45 0 - Α 650 2 4小時 4 8小時 0 0.846 1.270 2 . 5 0.768 1.133 5 0.621 0.942 10 0.420 0.486 2 0 0.238 0.185 3 0 0.241 0.196 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 培養2 4及4 8小時均在添加5 a M G Μ區比加水之對照抑 制細胞增殖，在1〇 A M GM添加區見到細胞自滅小體之 形成。2G/iM以上GM添加區幾乎不見活細胞。 如上所述，GM對滑膜細胞有細胞自滅誘發作用，增殖 抑制作用。又CM ’ GD，CD或這些之各非對映體，GM之各 非對映體也得同樣結果。此結果顯示本發明化合物作爲需 抑制滑膜細胞增殖之疾病用活體防禦劑、特別是作爲抗風濕 劑之有效成份之有效性。 實施例1 2 (1)將人T細胞性白血病株Jurkat細胞（ATCC TIB-152) 及Molt-3細胞（ATCC CRL-1552)在含10%牛胎兒血清（FCS ,Biowitaker 公司）之 RPMI 1640 培養基（Gibco BRL 公司） 5 % CO 2 37 °C培養，在含0，5, 10或20//M GM之上述培 -64-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 Α7 Β7 五、發明説明（η ) 養基懸浮使細胞為5χ 1〇5個/ Bl而培養24小時。細胞 增殖度依 MTT法〔Hosaann等，J.lKffiunol· Methods,第 65卷，第55〜63頁（1983)〕以在560nm之吸光度來測定。 結果，與加水之對照相較，兩細胞株均在10//M 6M添 加區有約5fl%，在2G>uM GM添加區有75%以上之細胞增 殖被抑制。添加Μ以下之GM對細胞增殖無顯著影 可見GM將T細胞性白血病細胞株Jurkat細胞及Molt-3 細胞之增殖依濃度而抑制。 結果如第34及35圖，第34圖爲對Jurkat細胞增殖之 GM之影響，第35圖乃示對Mol t-3細胞增殖之GM之影響’ 且表示GM作爲制癌劑之有效成份之有效性。於第34及35 圖中，橫軸爲GM之濃度（从M)，縱軸爲在560n ro之吸光度。

(2)在Jurkat細胞及Molt-3細胞對Fas抗原呈現（産生 誘導）之GM之影繼測定如下。在含〇, 1，5, 10或20//M 環戊烯酮或GM之含10%FCS之RPMI 1640培養基將5Xl〇s 値/»1之Jurkat細胞或Molt-3細胞在5% C02，37 °C培養 24 小時，依 Hunker R 之方法〔Ann，Heaatol:第 卷 ，第15〜17頁（ 1 9 9 5 )〕，用抗Fas抗體（百萑佳公司）作 2步驟免疫染色。 所染色之細胞IX 1〇4傾之螢光強度用螢光計（ orthocytoron; Ortho-Diagnostick Syste 祖 s 公司）測定 ，將呈一定值以上螢光強度之細胞當作Fas抗原呈現細 胞計算其比率。 結果在兩細胞株，添加9M時在1〜10//M範圍Fas抗原 呈現細胞之比率隨濃度上舁，添加20# Μ時舆10# Μ略同。 -6 5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、\\δ 518321 A7 B7 五、發明説明U〆） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 結果如第36及37圖，第36圖爲Molt-3而第37圖爲 Jurkat細胞呈現Fas抗原之圖，且表示GM作爲透過誘導Fas 抗原產生以抑制白血病細胞增殖之作用。於第36及37圖 中，橫軸爲GM之濃度（μΜ)’縱軸爲Fas抗原呈現細胞之 比率（％)，確認由GM之Fas抗原產生誘導作用。 (3)添加10 μ M GM而依實施例12-(2)之條件將Mol t-3 細胞培養1，3，6，1 2或24小時，仿實施例1 2 · ( 2)測定 Fas抗原呈現細胞之比率。 結果，添加1〇μΜ GM時，Fas抗原呈現細胞之比率在 培養12小時後上昇，2 4小時更上昇。 結果如第38圖，表示在Molt ·3細胞加10 μ M GM培養時 之Fas抗原呈現細胞之比率變化，且表示GM作爲透過誘導 Fas抗原產生以抑制白血病細胞增殖，橫軸爲培養時間（小 時），縱軸爲Fas抗原呈現細胞之比率（％)。 以上如實施例12所述確認由GM之Fas抗原產生誘導作 用。又CM，GD，CD，或這些之各非對映體，GM之各非對映 體也得同樣結果。此結果顯示本發明化合物作爲制癌劑、 細胞自滅誘發劑之有效成份之有效性6 實施例1 3 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 將KK-A小白鼠（雄，4週齡）從日本Clea公司購入， 飼養至10週齡後，口服GM21日來檢討對血糖，血中胰島 素及脂質之影響。GM用30，100，300rng/kg，血糖値在GM 投與之各群下降（第39圖血淸胰島素値在GM投與之各 群下降（第40圖）。對血淸脂質，血淸總膽固醇値在GM投 與群下降（第41圖），血淸三甘油酯値在GIM投與群下降（第 42圖），血淸游離脂肪酸値在GM投與群下降（第43圖）。 第39圖乃示GM投與量與血糖値之關係，且表示GM作爲 糖尿病治療劑之有效成份之有效性，圖中縱軸爲血淸葡萄 -66- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明Ur) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 糖値（〇^/(11)，橫軸爲01^投與量（心/1^)。第40圖乃示0^1 投與量與血淸胰島素値之關係，且表示GM作爲糖尿病有效 成份之有效性，圖中縱軸爲血淸胰島素値（#U/ml)，橫軸 爲GM投與量（rog/kg)。第41圖乃示GM投與量與血淸總膽 固醇値之關係，且表示GM作爲高血脂症治療劑之有效成份 之有效性，圖中縱軸爲血淸總膽固醇値（rag/dl)，橫軸爲GM 投與量（mg/kg)。第42圖乃示GM投與量與血淸三甘油酯値 之關係，且表示GM作爲高血脂症治療劑之有效成份之有效 性，圖中縱軸爲血淸三甘油酯値（mg/di)，橫軸爲GM投與 量（mg/kg)。第43圖乃示GM投與量與血淸游離脂肪酸値之 關係，且表示GM作爲高血脂症治療劑之有效成份之有效 性，圖中縱軸爲血淸游離脂肪酸値（MEq/Ι)，橫軸爲GM投 與量（rng/kg)。圖中*乃示依Turkys多重比較試驗中對GM 無投與群之顯著性？<0.05,:^爲p<0_01。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 動物分爲生理食鹽水（5rol/kg)，GM之30，100，300 mg/5rol/kg之4群，各群爲10例，各試驗物質每日1次 口服21日，在最後投與日，投與試驗物質之4小時後予 以乙醚麻醉，從下腹部大靜脈採血。血淸胰島素乃依酵素-免疫法（市售套組：Glyzyrae胰島素-EIATEST，和光純藥公 司）測定。血淸中之糖，三甘油酯及游離脂肪酸各依 He;cokinase-G6PDH 法，GPO · OAOS 法及 ACS · ACOD 法用自 動分析裝置（ 7070型，日立製作所）測定。血淸總膽固醇値 乃依膽固醇氧化酶· DAOS法用自動分析裝置（7070型，日 立製作所）測定。 由以上結果確認GM有血糖，胰島素及脂質之下降效果 。又CM，GD，CD，或這些之各非對映體，GM之各非對映 體也得同樣結果。此結果顯示本發明化合物作爲糖尿病治 療劑、高血脂病治療劑之有效成份之有效性。 -67- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 518321 五、發明説明uo 實施例1 4 (1)將含 2X105 細胞 / ml之 HL-60(ATCC CCL-240)之 含10%牛胎兒血清之RPMI 1640培養基注入6穴板之各 穴，在3 7 °C 5 % C 0 培養2 4小時後，加G Μ使其最後濃 度為 0，0 · 5，1 · 0 , 3 · 0 , 5 · 0 , 1 0 · 0， 20 · 〇 A Μ ,,再培養 8小時。 培養終了後，計測細胞數，離心收集細胞，以P B s 洗淨，得G Μ處理細胞。又在4 5 °C熱處理1 0分後，同樣調 製培養細胞。 用這些處理細胞，依分子選植〔冷泉港實驗室U 9 8 9 ) 之方法予以S D S - P A G E。處理細胞以2 · 5 X 1 0 6細胞/ m 1 懸浮於S D S - P A G E樣品緩衝液。在1 0 fl°C處理1 0分後，分 5//]在2HSDS-PAGE凝膠（5%堆集凝膠，10%分離凝膠） 行電泳。一方之凝膠以苦馬西鮮藍R 2 5 0染色，他方墨漬 在聚二氟乙烯轉移膜〔IfflinobilonTM : Millipore公司 Cat#IPVH000-10〕，將此膜以Block Ace(大日本製藥公 司 Cat#UK-B25)在 4°C 遮斷一夜。 於此遮斷膜反應以能與熱誘導之7〇kD a熱休克蛋白專 一地反應之單株抗體HSP 72/73(Ab-l)〔 Oncogene Research Proclucts 公司 Cat.#HSP01〕，以含 〇·〇5% Tween20之TBS洗淨，再以TBS洗淨。次與過氧化酶複合 二次抗體HRP-免抗小白鼠IgG(H + L)〔ZYMED實驗公司 Cat.#61-6520〕反應後，仿上洗淨。如此與一次及二次 抗體反應之膜與化學螢光試劑RENAISSANCE™ 〔 DuP〇nt 一 6 8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公嫠） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、\呑

I 518321 A7 B7 五、發明説明（W ) N E N公司C a t · # N E L _ 1 Ο Ο〕反應後，以X光底Η感光而撿 出70kDa熱休克蛋白之誘導。 結果，確認由GM之添加而誘導70kDa之熱休克蛋白。 其誘導之強弱如表5。表中+表示誘導之強度，+越多 ，誘導越強。-為無誘導，士為誘導僅微。 表5 處理細胞 熱休克蛋白誘導 4 5 °C 1 0分間熱處理 + + + 0 ^ M GM — 0 · 5 # M GM 士 1 . 0 /i M GM 土 3 . 0 ^ M GH + 5 · 0 # M GM + 10 μ M GM + + 20 μ M GM + + 如表5所示，G Μ顯然有H S P 7 0之誘導能力。 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) (2 )於培養細胞加C Μ使最後濃度為Ο， 1 0，2 0， 3 0，4 0 ，5 0 # Μ，仿實施例1 4 - ( 1 )測定H S Ρ 7 0之呈現。 結果確認由C Μ誘導7 0 k D a熱休克蛋白。其誘導之強弱 如表6，其中+為誘導之強度，+越多誘導越強。一為 無誘導，士為誘導僅微。 -6 9 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X 297公釐） 518321 Α7 Β7 五、發明説明（w) 表6 處理細胞 熱休克蛋白誘導 4 5 °C 1 0分間熱處理 + + + 0 ^ M C Μ — 5 // M CM 一 10 ^ M CM + 20 μ W CM 十+ 30 /i M CM + + 40 μ W CM + 50 /i M CM + (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 以上如實施例14所示，GM，CM有熱休克蛋白誘導作用 ，GD，CD或這些之各非對映體，GM，CM之各非對映體也 得同樣結果。此結果證明本發明化合物透過熱休克蛋白質 誘導作用以作爲抗病毒劑之有效成份之有效性。 實施例1 5 於 2X 10s 個/ml CEM + SS細胞（ATCC CCL-119)及 _ 染 Η I V -〗111B，之CEM-SS細胞（細胞之90%以上感染HIV-1 ，簡稱CEM-3B)加0，4, 8， 16//M之GM而培養1日，計 數活細胞數及死細胞數，算出細胞生存率。結果添加GM 為0，4, 8/iM時，CEM-SS細胞生存率不下降，反觀CEM -3 B細胞則隨GM之濃度而生存率顯箸下降。添加16# Μ時 ,CEM-SS細胞之生存率也下降，惟CEM-3B細胞之生存率 -70-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X29?公釐） 518321 A7 B7 __ 五、發明説明u?) 下降更顯著。即GM有抗HTV作用。 結果如第44圖，表示添加之GM濃度與細胞生存率之關係， 且表示GM作爲抗病毒劑之有效成分之有效性，橫軸爲添加之 GM濃度（//M)，縱軸爲培養1日後之細胞生存率（％)。白四角 爲用CEM-SS時之結果，黑圓爲用CEM-3B細胞之結果。 (2)將實施例15-(1)之CEM-3B細胞培養1日後，測定 培養上淸中含有p24抗原之濃度。結果隨添加之GM濃度 而P24濃度下降，確認抗HIV作用。結果如第45圖，表示 添加GM濃度與培養上淸中p24生產量之關係，且表示GM 作爲抗病毒劑之有效成份之有效性，橫軸爲gra添加量（μ M)， 縱軸爲ρ24生產量（ng/ml)。 以上如實施例15所示，GM對HIV感染細胞有選擇性殺 細胞效果，對HIV有抗病毒作用。CM，GD，CD或這些之各 非對映體，GM之各非對映體也得同樣結果。此結果顯示本 發明化合物作爲抗病毒劑之有效成份之有效性。 實施例16 (1)用表示G418耐性基因之控制質體pcD2-Y〔Mol.Cell. Biol·第 7 卷，第 2745 〜2752 頁（ 1987)〕，及能將 HPV16 型E7及G418耐性基因雙方皆表現之質體pcD2-16E7〔 Jpn. J. Cancer Res.第 82 卷，第 1 340 - 1 343 頁（1991)〕轉形 大腸桿菌HB101，用L-肉汁培養基培養，從收集之菌體萃 取質體，以氯化鉋密度梯度超離心來精製，作成基因導入 用載體質體。 NIH3T3細胞在37°C，5% C02條件下含10%小牛血淸 之Dulbeco修飾Eagle培養基中培養。 將精製之質體lOyg用陽離子微脂粒（Trans IT LT-1 -71 · 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 518321 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（π) ，寶酒公司）導入NIH3T3細胞，在37°C，5% C02條件 下，在含 G418(Gibco)0.4fflg/ffll 之 10% 小牛血清之 Dulbeco 修飾之Eagle培養基選擇2週，將所得菌落選植，由導 入控制載體之NIH3T3細胞及由HPV16型E7癌化之NIH3T3 細胞各樹立9株。 令導人控制載體之細胞株為ΝΪΗ3Τ3/ Y-1〜NIH3T3/ Y ~ 9 〇 令導入E7之細胞株為NIH3T3/E7-1〜NIH3T3/E7-9。 (2)令MIH3T3細胞，導入控制載體之細胞株，及導入 E 7之細胞株在1 0 0 ffl m組織培養板以含1 11 %小牛血清之

Dulbeco修飾Eagle培養基增殖至50〜70%共融，以PBS 洗淨後，以〇 · 2 5 %胰蛋白酶-E D T A溶液剝取細胞，懸浮 在含10%小牛血清之Dulbeco修飾Eagle培養基5ml。 取出一部分懸浮液，用血球計算板計算細胞密度。以 所得數字為基本，用含1 〇 %小牛血清之D u 1 b e c 〇修飾E a g 1 e 培養基稀釋，在直徑組織培養板播種成200細胞/ 板，在3 m 1培養基中開始培養。從開始培養至2 4小時# ，添加G Μ為5 a Μ。再2 4小時後，更新培養基而添加G M 至 5 # Μ 〇 以後每2〜3日，更換培養基，添加G Μ至5 // Μ。對照S 驗區則準備無添加GM之板，同樣培養。各行3 '連® 。 培養9日後，以甲醇固定，以Giemsa液（Gibco)染菌落。 另用 NIH3T3, NIH3T3/Y-1 及 NIH3T3/E7-2來評價。 染色_落之計數結果如表7。導入E 7之細胞與對照細 -7 2 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 口 -Φ. 518321 A7 ___B7 _ 五、發明説明（V) 胞相較對GM之感受性高，GM對癌基因轉形細胞選擇地作 用。CM，GM，CD，或這些之各非對映體，GM之各非對映體 也得同樣結果。此結果顯示對於癌基因轉形細胞，本發明 作爲制癌劑之有效成份之有效性。 表7 細胞 菌落數（平均土 S D ) 對照 G Μ處理 N I Η 3 T 3 ΝΙΗ3Τ3/Υ-1 ΝΙΗ3Τ3/Ε7-2 91·7± 11.9 79·0±2·6 83.3±8.4 72.0±9.5 67.3 ±3·2 13·3±3·2 實施例17 (1 )混合異構酶I I〔 Τ ο ρ 〇 G E N公司，2單位/ # ]〕2 1 ,1 〇 倍濃度緩衝液〔Ο · 5 Μ T r i s - H C 1 ( ρ Η 8 · Ο )，1 . 2 Μ K C 1， Ο · 1 Μ Μ g C 1 2，5 m Μ腺甘三磷酸，5 m Μ二硫蘇糖醇〕2 # 1 ，Ο · 1 %牛血清蛋白素（寶酒造公司）2 // 1 ,蒸餾水1 1 a 1 及對照蒸餾水或試料（5 0， 1 0 0 , 2 0 0 , 5 0 0， 1 0 0 0或 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 2500#Μ2 6Μ)2#1，加 0.25#g/>ul pBR322 DMA(寶酒 造公司）1 # 1 ,在3 7 °C反應3 0分後，加1 %十二基硫酸鈉 ，5 0 %甘油及0 · 0 2 %溴酚藍水溶液2 /i 1停止反應。 用洋菜糖L03(寶酒造公司）及TAE緩衝液〔40ιηΜ Tris ，5mM乙酸鈉，ΙπιΜ EDTA,以乙酸調為PH7.8〕製作1% 洋菜糖凝膠施加上述反應液2 Ο # 1，在T A Ε緩衝液中電泳 -73- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（π)

I 後，將凝膠浸漬於2 // g / m 1乙基溴水溶液，照射紫外線 ，觀察1) N A電泳式樣。在加水之對照則D N A從超螺旋型完 全變化成弛緩型，但異構酶I I活性受阻礙，則從超螺旋 型至弛緩型之變化有部分或完全受阻礙。 結果如表8。 表8 反應液中之濃度（#M) 阻害活性 0 一 5 — 10 + 2 0 + + 5 0 + + 10 0 + + + 2 5 0 + + + 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 加水之對照雖D N A從超螺旋型完全變化為弛緩型，但 10// Μ以上之GM濃度DNA從超螺旋型至弛緩型之變化有部 分或完全被阻礙，確認G Μ之異構酶I I抑制活性。表8中 ，一為超螺旋型至弛緩型完全變化，+為中程度，+ + 為大半之超螺旋型殘留，+ + +為超螺旋型完全無減少。 (2 )仿實施例1 7 ( 1 )测定G Μ之異構酶I抑制活性，惟異 構酶I I代之以異構酶I〔 Τ ο ρ 〇 G Ε Ν公司，0 . 0 1單位/ m 1〕 -7 4 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 518321 A 7 B7 五、發明説明（w) ，10倍濃度緩衝液採用ΙΟΟιηΜ EDTA， linM精胺質，50% 甘油。試料乃加G Μ至最後濃度為1 m Μ。 結果1 m M G Μ抑制異構酶I。 可見在正常細胞僅在分裂期一過性地表現，但對因癌化 而全細胞周期高表現之異構酶II及因癌化而表現量及活 性增大之異構酶I，GM呈抑制活性。CM，GM，CD，或這些 之各非對映體，GM之各非對映體也得同樣結果。此結果顯 示本發明化合物透過異構酶阻礙作用以作爲制癌劑之有效 成份之有效性。 實施例1 8 將C57BL/6小白鼠（雌，5週齡，體重約20克）從日 本SLC購入，預備飼養一週後供實驗。將延遲型過敏反 應之引起抗原線羊紅血球（清水實驗材料）以生理食鹽水 (大塚製藥）洗3次來製備1 X 1 〇 9細胞/ m 1而在腹腔内 注射2 0 0 m 1來起敏抗原。 從起敏5日後，將同樣調製之抗原4 0 # 1注射在右足 摭來誘發抗原，引起足浮腫。G Μ乃於1群5隻小白鼠從 抗原起每日起每日一次，連續3日在腹腔内投與30或 300rag/kg〇 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 從抗原誘發2日後，用足浮腫測定裝置（ugobagil公 司測定右足容積當作延遲型過敏反應之指檫。測定值乃 由抗原誘發前測定之右足容積之增加率算定來表示。 結果如第46圖，表示GM之延遲型過敏反應抑制作用， 且表示GM作爲活體防禦劑、特別是作爲抗過敏劑之有效成份 之有效性，縱軸爲增加率（％)，橫軸爲GM投與量（mg/kg)。 GM以30，300mg/kg投與呈現顯著之延遲型過敏反應抑 制作用。CM，GD，CD，或這些之各非對映體，GM之各非對 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公餐） 518321 A7 B7 發明説明（％ ) 映體也得同樣結果。此結果顯示本發明化合物可用以作爲 活體防禦劑、特別是作爲抗過敏劑之有效成份。 實施例1 9 於1群5隻5週齡Wister糸雌鼠（日本SLC公司）腹腔 内投與卵白蛋白素（細馬公司）之0 · 0 1 %生理食鹽水1 0 0 ^ 及明礬〔商品名Imject Alum, Pias公司〕100#,1來起 敏，1 4日後從腹主靜脈採血而離心（2 0 0 r p m， 5分）分離 血漿，以4 8小時鼠被動皮膚過敏（P C A )反應測定抗原專 一性IgE量。 即用生理食鹽水製作血漿之稀釋糸列（4〜64倍），而 在剃毛7週齡W i s t e r条雄鼠背部皮内各注射〇 · 1 ® 1，4 8 小時後，從尾靜脈注射0 · 0 5 %卵白蛋白素及0 · 5 % E v a η 藍（中瀨tex公司）之混液lml，其30分後，斷頭放血致死 ，觀察出現在背部之籃色斑，以直徑5mro以上之斑為陽 性，最高稀釋度以I g E力價表示。 G Μ投與群乃從抗原起敏日3日每日一次腹腔内投與3 或3 0m g/kg之GM。對照群則同樣腹腔内投與蒸餾水。結 果如表9。 表 9

IX (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 I g E力價 對照群 6 4 GM 3rog/kg/曰 3 2 GM 3()fflg/kg /曰 8 -76- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210 X 297公釐） 518321 A7 B7 五、發明説明（π) . 由卵白蛋白素起敏之抗原專一性IgE量之上昇乃隨,用量受 GM投與而抑制。CM，GD，CD，或這些之各非對映體，GM之各非 對映體也確認同樣之IgE產生抑制活性。此結果顯示本發明化 合物可用以作爲活體防禦劑、特別是作爲抗過敏劑之有效成份。 實施例2 ϋ 注射劑 (1) 於生理食鹽液（日本藥典）以1%濃度加CM型成注射 劑〇 (2) 於生理食鹽水（同前）加GM及甘草酸分別為〇·5%及 0.1%之濃度製成注射劑。 實施例21 錠劑 (1) 調製含lOOmg CD及適量微晶纖維素之錠劑而加糖 -ί 衣，得糖衣錠。 (2) 調製含GD，甘草酸二鉀10eg及撤晶纖維素 適量之錠劑而加糖衣，得糖衣錠。 實施例22 軟膏 GH 1克 吸水軟膏（日本藥典） 99克 将GM先與少量吸水軟音充分捏合，次將剩餘吸水軟蕾 徐徐加入，均勻捏合，得軟苷。每日4〜5次塗在患部。 發明之效果 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明提供具有制癌，抑制癌細胞增殖，誘導癌細胞 分化，誘發細胞自滅，抗菌，抗病毒，改善肝功能，抑 制腫瘤壞死因子産生，抑制N〇産生，抗風濕等作用之種 種生理活性之本發明化合物或其光學活性體或其鹽，並 提供以由此選出之至少一種化合物為有效成分之醫藥， -77- 本紙張尺度適财國國家標準（CNS ) A4規格（21GX 297公楚） 518321 A7 B7 五、發明説明（外 當劑免 活化異功有自飲飲 可療； 理些制肝具胞或或 其治劑 生這抑善料細品品 尤病 _ 具於 ，改飲發食食 ，尿抗 有由化，或誘康之 劑糖， 含。分菌品，健質 治 ，劑 量鹽導抗食菌之物 防劑毒 適其誘，之抗能性 之濕病 中或，毒供，機能 病風抗 料體癌病提病性機 疾抗如 飲性制抗明疾常之 性，， 或活 ，，發性恆度 受劑劑 品學性滅本毒體健 18 敏物 食光活自故病活腸 有過生 在其理胞，防維胃 物抗徹 可或生細用預纖持 合如原 也物種發作，能保 化，病 ，合種誘等癌為加 此二劑抗。明化之 ，疫制而添 這禦 ，等發明有殖免 ，，供 對防劑劑本發具增節癌果提 作體癌節依本所胞調發效又 當活制調又之物細，防等 ，。 可作，疫 性合常能預滅料料 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X 297公麓）

Claims (1)

1. 518321 六、申請專利範圍 桌87103045號「用於糖尿病治療劑、制癌劑、細胞自滅誘發劑、 抗病原微生物劑、抗風濕劑、高血脂症治療劑、免疫調節劑、抗 過敏劑之化合物或其光學活性體或其等之鹽、其等之製造方法及 其等之醫藥組成物」專利案 (91年月18日修正） 六申請專利範圍： 丨 1 . 一種如下式[I ]化合物或其光學活性體或其等之鹽，

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊院環，若爲環戊烯環時，X 爲OH’Y^O’Z爲Η’右爲戊丨τπί哀時’X爲=〇’ Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數卜5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數I-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]° 2 .如申請專利範圍第1項之化合物或其光學活性體或 其等之鹽，係呈如下式[11 ]

   [II] 518321 六、申請專利範圍 [但R爲從含SH基之α -胺基酸（此處α -胺基酸爲 碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數1 - 5 之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 3 ·如申請專利範圍第1項之化合物或其光學活性體或 其等之鹽，係呈如下式[III]

   [但R爲從含SH基之胺基酸（此處α -胺基酸爲碳 Μ 1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數1 _ 5 之胺基酸）殘基數1 - 5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 4.如申請專利範圍第丨〜3項中任一項之化合物或其 光學活性體或其等之鹽，其中含SH基之胺基酸或胺 基酸殘基數1 — 5之含SH基之肽爲半胱胺酸或麩胱甘 肽。 5 . ~ ®如下式[I ]化合物或其光學活性體或其等之鹽之 製法，

   R—S Ζ 518321 六、申請專利範圍 [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲OH’Y^O’Z爲Η’若爲環戊院環時，X爲=〇， γ爲OH，Ζ爲〇H ’ R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]，其特徵爲令如下式[IV]4,5_ 二羥基-2 -環戊烯基-1 -酮或其光學活性體或其等之 鹽所選出之化合物與含SH基之α-胺基酸（此處 胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸 爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之肽反 應； Ο、人 ίΐ^ \|~〇ΗJ-L〇h 【w】 o 6 ·如申請專利範圍第5項之化合物或其光學活性體或 其等之鹽之製法，其中式[I ]化合物係呈如下式[丨π OH

   R—S-l- [但R爲從含S H基之a -胺基酸（此處a -胺基酸爲 碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數5 518321 六、申請專利範圍 之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 7 .如申請專利範圍第6項之製法，其係在酸性下反 應。 8 ·如申請專利範圍第5項之化合物或其光學、活性體或 其等之鹽之製法，其中式[I]化合物，係呈如下式 [III]

   [但R爲從含SH基之α-胺基酸（此處α-胺基酸爲碳 數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數1 - 5 之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 9 .如申請專利範圍第8項之製法，其係在中性下反 應。 1 〇 .如申請專利範圍第5〜9項中任一項之製法.，其中 含SH基之胺基酸或胺基酸殘基數1-5之含SH基之 肽爲半胱胺酸或麩胱甘肽。 11.一種用於防禦由於NO產生引起之疾病之醫藥組成 物，其特徵爲含有效成分係至少一種選自如下式Π] -4- 518321 六、申请專利範圍 化合物或其光學活性體或其等之鹽

   R—S — [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲〇H，Y=〇，Z爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇， Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 2 . —種用以作爲糖尿病治療劑之醫藥組成物，其特徵 爲含有效成分係至少一種選自如下式[Π化合物或其 光學活性體或其等之鹽

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊嫌環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲〇Η，Υ=0’Ζ爲Η’若爲環戊院環時’X爲=〇’ γ爲〇Η，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 518321 六、申請專利範圍 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數卜5之胺基酸）殘基數1 - 5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 3 . —種用以作爲制癌劑之醫藥組成物’其特徵爲含有 效成分係至少一種選自如下式[I ]化合物或其光學活 性體或其等之鹽

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲ΟΗ，Υ=〇，Ζ爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇, Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）殘基數1 - 5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 4 . 一種用以作爲細胞自滅誘發劑之醫藥組成物，其特 徵爲含有效成分係至少一種選自如下式Π ]化合物或 其光學活性體或其等之鹽

   518321 六、申請專利範圍 [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲〇H，Y=〇，z爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇， Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 5 · —種用以作爲抗病原微生物劑之醫藥組成物，其特 徵爲含有效成分係至少一種選自如下式[I ]化合物或 其光學活性體或其等之鹽

   R —S -— Ζ [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲0Η，Υ=0，Ζ爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇， Υ爲OH’Z爲OH’R爲從含SH基之胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）殘基數1 - 5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 6 . —種用以作爲抗風濕劑之醫藥組成物，其特徵爲含 有效成分係至少一種選自如下式[Π化合物或其光學 518321 六、申請專利範圍 活性體或其等之鹽

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲0Η，Υ=0，Ζ爲Η，若爲環戊烷環時’X爲=〇， Υ爲OH，Ζ爲OH，R.爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 7 . —種用以作爲高血脂症治療劑之醫藥組成物’其特 徵爲含有效成分係至少一種選自如下式[I ]化合物或 其光學活性體或其等之鹽 X

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊院環’若爲環戊烯環時’ X 爲ΟΗ，Υ二〇’Ζ爲Η’若爲環戊院環時’X爲=〇， γ爲〇Η，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此

   518321 六、申請專利範圍 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 8 . —種用以作爲免疫調節劑之醫藥組成物，其特徵爲 含有效成分係至少一種選自如下式[I ]化合物或其光 學活性體或其等之鹽

   [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲ΟΗ，Υ二0，Ζ爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇， Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α ·胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 1 9 · 一種用以作爲抗過敏劑之醫藥組成物，其特徵爲含 有效成分係至少一種選自如下式[I ]化合物或其光學 活性體或其等之鹽

   R—S Ζ 518321 六、申請專利範圍 [式中5員環內之虛線乃示該5員環可爲有雙鍵之 環戊烯環或其飽和之環戊烷環，若爲環戊烯環時，X 爲OH，Y=〇，Z爲Η，若爲環戊烷環時，X爲=〇， Υ爲OH，Ζ爲OH，R爲從含SH基之α -胺基酸（此 處α -胺基酸爲碳數1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺 基酸爲碳數1-5之胺基酸）殘基數1-5之含SH基之 肽去除SH基之殘基]。 20 ·如申請專利範圍第1 1〜1 9項中任一項之醫藥組成 物，其中有效成分爲如下式[I I ]化合物或其光學活 性體或其等之鹽 ΟΗ cin R—S J-- [R爲從含SH基之a -胺基酸（此處a -胺基酸爲碳數‘ 1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數丨-5之胺 基酸）殘基數1-5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 2 1 ·如申請專利範圍第1 1〜1 9項中任一項之醫藥組成 物，其中有效成分爲如下式〔Π I〕化合物或其光學 活性體或其等之鹽 〇 R—sJ-L〇h [I U ]

   -10- 518321 六、申請專利範圍 [R爲從含SH基之α-胺基酸（此處α-胺基酸爲碳數 1 - 5之胺基酸）或胺基酸（此處胺基酸爲碳數1 _ 5之胺 基酸）殘基數1-5之含SH基之肽去除SH基之殘 基]。 22 .如申請專利範圍第1 1〜1 9項中任一項之醫藥組成 物，其中含SH基之胺基酸或胺基酸殘基數b 5之含 SH基之肽爲半胱胺酸或麩胱甘肽。 23 .如申請專利範圍第1 5項之醫藥組成物，其中抗病 原微生物劑爲抗菌劑。 24 ·如申請專利範圍第15項之醫藥組成物，其中抗病 原微生物劑爲抗病毒劑。 25. 如申請專利範圍第24項之醫藥組成物，其中病毒 爲人後天性免疫不全病毒或C型肝炎病毒。 26. 如申請專利範圍第24項之醫藥組成物，其中抗病 毒劑爲人用抗病毒劑，非人動物用抗病毒劑或植物 用抗病毒劑。

   -11- 518321

   ……--------------—1 第871 〇3〇45號專利案補充實例（中文本） (88年7月29日補充） 補充藥理試驗 實例：進行流行性感冒病毒之老鼠感染實驗，以調查GM之治療 效果。 各將1X104FFU之以雞蛋培養之人流行性感冒病毒A1/FM/1/47 (ATCC VR-97)，以經鼻方式使4週大之雌性BALB/c老鼠受感染。 於老鼠受感染後，將3毫克/公斤或30毫克/公斤之GM單 次投與至受流行性感冒病毒感染之老鼠腹腔內。又，係以投與磷 酸緩衝生理食鹽水作爲對照組。 結果顯示，相對於對照組中，Η隻有4隻於16日後死亡，而 於投與3毫克/公斤GM之組中，11隻僅有1隻死亡，於投與30 毫克/公斤之組中，10隻僅有1隻死亡，故可認定藉由投與GM 可獲致抗流行性感冒病毒之作用。 上述內容係顯示GM使老鼠產生之抗病毒作用。另外，CM、 GD、CD或此等之各非對映體均可獲致相同結果。此結果顯示本 發明化合物作爲抗病毒劑之有效成份之有效性。