TW385335B - ""Hon Cha Ku"" beverage-producing strains and their use in processes of fermentative production of ""Hon Cha Ku"" beverage - Google Patents

Description

五、發明説明（了 發明目的 ^ 紅茶菇是一種傳統之茶'菌健康飲料，曾經在中國大 陸、蘇聯、日本等地風行，傳說據有預防癌症，延長壽命 及防止老化等作用。傳統的製作方法係取前次培養所產生 之菌膜來接種含有蔗糖的紅茶液，經靜置醱酵3_5天，待 氽液面長出一層菌膜後再飲用，菌膜作爲下次接種用。此 ' 種製作方法因在開放空間操作易污染雑菌，有害健康，且 醱酵時間長，不易快速大量生產，因此本發明之目的在於 將傳統紅茶菇飲料中的茶菌分離純化出來，利用純化出的 菌種，在三角搖瓶或醱酵槽中進行紅茶菇飲料之醱酵生 產，可在短時間（1_2天）內得到風味純正，品質良好，符 合健康之紅茶菇飲料。 發明之構成 醱酵用微生物之記載 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明係將由北、中、南各處收集來的紅茶菇樣本，利 用特殊之分離培養基分離純化出五株菌，並於84年2月15日寄 存於食品工業發展硏究所，其包括二株醋酸菌園之Acetobacter pasteurianus A1(CCRC 910025) ' Acetobacter aceti A2(CCRC 910026)， 和三株酵母菌包括啤酒酵母菌屬之Sacchaxomvces cerevisiae Y1(CCRC 920003)、酒香酵母菌屬之 Brettanomvces bruxellensis Y2(CCRC 920004)與接合酵母菌屬之 Zvgosaccharomvces bailii Y3(CCRC 920005)。本發明菌株之分離、純化程序及所使用之 培養基組成將於實施例中詳加敘述。 紅茶菇之成份分析 83.3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

五、發明説明（了 發明目的 ^ 紅茶菇是一種傳統之茶'菌健康飲料，曾經在中國大 陸、蘇聯、日本等地風行，傳說據有預防癌症，延長壽命 及防止老化等作用。傳統的製作方法係取前次培養所產生 之菌膜來接種含有蔗糖的紅茶液，經靜置醱酵3_5天，待 氽液面長出一層菌膜後再飲用，菌膜作爲下次接種用。此 ' 種製作方法因在開放空間操作易污染雑菌，有害健康，且 醱酵時間長，不易快速大量生產，因此本發明之目的在於 將傳統紅茶菇飲料中的茶菌分離純化出來，利用純化出的 菌種，在三角搖瓶或醱酵槽中進行紅茶菇飲料之醱酵生 產，可在短時間（1_2天）內得到風味純正，品質良好，符 合健康之紅茶菇飲料。 發明之構成 醱酵用微生物之記載 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本發明係將由北、中、南各處收集來的紅茶菇樣本，利 用特殊之分離培養基分離純化出五株菌，並於84年2月15日寄 存於食品工業發展硏究所，其包括二株醋酸菌園之Acetobacter pasteurianus A1(CCRC 910025) ' Acetobacter aceti A2(CCRC 910026)， 和三株酵母菌包括啤酒酵母菌屬之Sacchaxomvces cerevisiae Y1(CCRC 920003)、酒香酵母菌屬之 Brettanomvces bruxellensis Y2(CCRC 920004)與接合酵母菌屬之 Zvgosaccharomvces bailii Y3(CCRC 920005)。本發明菌株之分離、純化程序及所使用之 培養基組成將於實施例中詳加敘述。 紅茶菇之成份分析 83.3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 五、發明説明（3 ) 0712, pH 3.5-3.8)、甘露醇洋菜培養基(mannitol agar 含2.5%甘露醇’ Ό_5%酵母萃取物，〇_3% ,1.5%洋 菜膠）。挑選具有代表性的菌落至適當之培養基，經反復 純化後得醋酸菌分離株Al、Α2及酵母酸菌分離株Υ1、 Υ2、Υ3，利用20%甘油在-8(TC冷藏庫中保存。 鑑定及菌學特性： 細菌之鑑定係將分離株與食品工業發展硏究所菌種保 存及研究中心之標準醋酸菌屬進行比對實驗，依伯吉氏的 細菌鑑定專書（Bergey's manual of systematic bacter+iology)之 建議，進行生理、生化測試，來鑑定種屬名（如表7:)。 分離株A1 與標準菌株Jce 有相同之生理、生化反應，故鑑定其種屬名爲 jpaWez/r/仙z/i· A1，而分離株A2與標準菌· 株如eiohcier 有相同之生理、生化反應，故鑑 定其種屬名爲acei/ A2。 醋酸菌分離株在Manni tol培養基生長三天之形態及運動性觀 察，分離株儿仰A1大小約0_6 X1.2(z;m) ’桿狀’ 不能運動，菌體呈單一或多個聚成長鍊狀。分離株儿see" 大 小約0 6 X 1.4( ym)，桿狀，不能運動，單一或長鍊狀。 (請先聞讀背面之注項再填寫本頁) 裝· 訂_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 83. 3.10,000 經濟部中央摞準局貝工消費合作社印製 A7 ______B7 _ 五、發明説明（2 ) 利用高性能液相層析犠（HPLC)及示差曲折度檢測 器（RI detector)測定紅茶菇之主成份。 紅茶菇之快速生產方法 利用三角搖瓶或醱酵槽，改變操作條件，添加菌 種之種類或添加適當成份，以減少醱酵時間及調整紅 茶菇成份之分配比例，將以實施例詳述之。 發明之功效 本發明中醱酵生產紅茶菇之分離菌株，係生產紅茶菇 飮料之關鍵菌株，可製造與傳統紅茶菇口味相當之飮料， 而生產紅茶菇飮料之方法可利用分離出來的醋酸菌及酵母 菌，在三角搖瓶或醱酵槽中，快速生產衛生無虞且口味良 好之紅茶菇飮料。本發明生產紅茶菇之微生物及其用於醱 酵生產紅茶菇飮料之方法，有關發明步驟及內容說明，除 上述外，將以下述實施例予以更具體說明，但本發明不限 於這些實施例。 實施例1.生產紅茶菇菌種之分離鑑定及保存 分離：

菌種之分離係取10g之菌膜和茶液，加入90ml 水，利用均質機（Osterizer blender)均質後，取0.1ml 經適當稀釋之紅茶菇均質液塗佈在下列分離培養基：胰蛋 白大洋菜培養基（tryptic soy agar,TSA, Difco 0369)、營養洋菜培養基（nutrient agar, ΝΑ, Difco • 0001)、 MRS洋菜培養基（Difco 0881，另外添加20mg/L 放線菌酮（cycloheximide))、YM洋菜培養基（Difco _____5__ 本紙張XJL逋用中關家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐一 ~83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫木頁) -裝- 訂一 β. r

五、發明説明（3-2) 酵母菌之鑑定是依伯聶特氏（Barnett)等人發展之 系統，進行生理生化測試後將結果輸入酵母菌鑑定程式 (Yeast Identification Program)，並佐以形態特性（表 7.1)鑑定至種屬名。根據生理生化測試之結果（表8.表9) 鑑定酵母菌分離株Y1，Y2，Y3分別屬於 cerevisiae, Bre11anomyces bruxe11ensis,

Zygosaccharomyces bai1ii. 表7.1.酵母菌分離株在GYP%咅養基生長三天之形態觀察 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 特徵 分離株 大小(Mm) 分裂方式 形態' 細胞排列子囊形態 方式 Y1 (3.2-7.2) X (3.2-8.8) 多邊出芽 圓桂或 橢圓形 單一或成 雙 圓形 Y2 (2.4-4.8) X (4.0-6.4) 多邊出芽 圓柱或 橢圓形 單一或成 串 to子囊 /、、、J Y3 (3.2-5.6)X (4.8-9.6) 多邊出芽 橢圓或 卵形 單一或成 雙 圓形 a: GYP培養基含0.5%葡萄糖，0.5%凍，和0.3%酵母萃取物 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000

經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 五、發明説明（3 ) 0712, pH 3.5-3.8)、甘露醇洋菜培養基(mannitol agar 含2.5%甘露醇’ Ό_5%酵母萃取物，〇_3% ,1.5%洋 菜膠）。挑選具有代表性的菌落至適當之培養基，經反復 純化後得醋酸菌分離株Al、Α2及酵母酸菌分離株Υ1、 Υ2、Υ3，利用20%甘油在-8(TC冷藏庫中保存。 鑑定及菌學特性： 細菌之鑑定係將分離株與食品工業發展硏究所菌種保 存及研究中心之標準醋酸菌屬進行比對實驗，依伯吉氏的 細菌鑑定專書（Bergey's manual of systematic bacter+iology)之 建議，進行生理、生化測試，來鑑定種屬名（如表7:)。 分離株A1 與標準菌株Jce 有相同之生理、生化反應，故鑑定其種屬名爲 jpaWez/r/仙z/i· A1，而分離株A2與標準菌· 株如eiohcier 有相同之生理、生化反應，故鑑 定其種屬名爲acei/ A2。 醋酸菌分離株在Manni tol培養基生長三天之形態及運動性觀 察，分離株儿仰A1大小約0_6 X1.2(z;m) ’桿狀’ 不能運動，菌體呈單一或多個聚成長鍊狀。分離株儿see" 大 小約0 6 X 1.4( ym)，桿狀，不能運動，單一或長鍊狀。 (請先聞讀背面之注項再填寫本頁) 裝· 訂_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 83. 3.10,000 1丨彡Ά .. ·. '一 A7 B7 五、發明説明（6 ) 飮料在含醋酸8〇〇-l〇〇〇ppm、酒精5000-8400 ppm及還原糖 8.8%時，有最好的整體接受性. 實施例6. . 轉速對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶菇之影響。 表4..轉速對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶菇之影響 一.. 濃度 (PPm) 轉速（rpm)_ 檸檬酸 甘油 醋酸 酒精 0 340 640 2216 3887 50 420 684 3215 3910 100 930 87 4545 772 150 2222 82 1159 · 241 如表4所示: 1發現在靜置或50rpm之轉速下: _可得到最 高之酒精及醋酸產量，而隨轉速提高，檸檬酸產量會提 高，而酒精產量會降低。 實施例7.溫度對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶糖液之 影響 表5.溫度對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶糖液之影響* ---------裝------訂—----nyrae^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 溫度（。〇 濃度 (ppm) 棒檬酸 甘油 醋酸 酒精 20 562 743 3457 3043 30 420 684 3216 3911 40 348 672 3951 8874 在設定温度與50rpm下，培養36小時 14 83. 3.10,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） 五、發明説明（3^ ) A7B7 表7.醋酸菌分離株與標準醋酸菌屬之生理、生化比對表2

Strain 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 酒精之養化c 由下列成份產酸 酒精 蔗糖 甘露醇 阿拉伯糖醇 肌醇 果糖 . 赤蘚糖醇 甘油 麥芽糖 核糖 木糖， 在GYC培養基產生 色素 由下列成份產_反應 甘油 山梨糖醇 甘露醇 由下列成份產生氯化 亞鐵反應 葡萄糖 果糖 還原硝酸鹽 格蘭氏染色 可在甘露醇洋菜培養 基生長 過氧化氫反應 ίι*1+ *iM2 + 標準 標準 標準 標準 分離 分離 醋酸 醋酸 醋酸 醋酸 ^A1 ftA2 菌3 + 菌4 + 菌5 + 菌6 + + + + + + + + + - + + + - .+ - + - + - - - - + + - - - - - + + - - + + + - + - - - + - + - + - + - + - + - + - - _ - - + - - + - + + + + - - _ _ + + - - - - - - _ _ + • + + + + + + + + + - - + - - - - .- - - + + + + + + + + + + + a +,正反應;負反應 h V. A. aceti; 2: A. liquefaciens; 3\A. pasteurianus; 4: A. hansenii; 5: A. xylinum; 6:G. oxydans. e生長但不產氣 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉Α4規格（210Χ297公釐) 83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝. 訂· r

五、發明説明（3-2) 酵母菌之鑑定是依伯聶特氏（Barnett)等人發展之 系統，進行生理生化測試後將結果輸入酵母菌鑑定程式 (Yeast Identification Program)，並佐以形態特性（表 7.1)鑑定至種屬名。根據生理生化測試之結果（表8.表9) 鑑定酵母菌分離株Y1，Y2，Y3分別屬於 cerevisiae, Bre11anomyces bruxe11ensis,

Zygosaccharomyces bai1ii. 表7.1.酵母菌分離株在GYP%咅養基生長三天之形態觀察 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂 特徵 分離株 大小(Mm) 分裂方式 形態' 細胞排列子囊形態 方式 Y1 (3.2-7.2) X (3.2-8.8) 多邊出芽 圓桂或 橢圓形 單一或成 雙 圓形 Y2 (2.4-4.8) X (4.0-6.4) 多邊出芽 圓柱或 橢圓形 單一或成 串 to子囊 /、、、J Y3 (3.2-5.6)X (4.8-9.6) 多邊出芽 橢圓或 卵形 單一或成 雙 圓形 a: GYP培養基含0.5%葡萄糖，0.5%凍，和0.3%酵母萃取物 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 A7B7 五、發明説明（3-3 ) 表8.酵母菌分離株在各種碳源氮源之生長情形 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 分離株Y1 分離株Y2 分離株Y3 碳源 D-葡萄糖 + + + D-半乳糖 十 + - 山梨糖 - - + D-葡萄糖氨 - - - D-核糖 - - - D-木糖 - L-阿拉伯糖 - - - D-阿拉伯糖 - - - D-鼠李糖 - - - 蔗糖 - - - 麥芽糖 - + + α，α-菌藻糖 - + - α-甲基-D-葡萄糖 - + - 纖維雙糖 - - - 柳素 - - - 熊果葉素 - - - 木蜜雙糖 - - - 乳糖 - - - 木蜜糖 + - - 落葉松糖 - + - 菊糖 - - - 澱粉 - - - 甘油 - - + 赤蘚糖醇 - - - 核糖醇 - - + 木糖醇 - - + L-阿拉伯糖醇 - - D-葡萄糖醇 - - + D-甘露醇 - - + 半乳糖醇 - - - 肌醇 - - - D-葡萄糖酸內脂 - + + 2-葡萄糖酮酸 - - + D-葡萄糖酸 - - - D-葡萄糖醛酸 - - - D,L-乳酸 - - _ 蘋果酸 - - .- 檸檬酸 - - - 甲醇 - - - 乙醇 + + + 氮源 硝酸鹽 - + - 亞硝酸鹽 - + - 乙氨 - + + L-離氨酸 - + + 五乙烯二氨 - + + +，正反應;負反應 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝· 訂 _9_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 A7 B7 五、發明説明（3-4 ) _表9·酵母菌分離株之生理生化測試_ 酵母菌分離株Y1酵母菌分離株Y2酵母菌分離株Ή 發酵試驗 ' '： D-葡萄糖 + + + D-半乳糖 + - - 麥芽糖 + + - α-甲基-D-葡萄糖 - + - 蔗糖 + + α，α-菌藻糖 - + 木蜜雙糖 - - - 乳糖 - - 纖維雙糖 - - - 落葉松糖 - - - 木蜜雙糖 + + - 菊糖' -. _ _ 澱粉 - - - D-木糖 - - - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 佌 維 沒 在 生 τ· 供 提 生 T- 度 溫 列 下 在 P pppp p P 5 0 5 7 2 0 0 2 3 3 3 4 5 6

+ + + W 尿素之利用 抗生素之耐性 0.01%放線菌酮 0.1%放線菌酮 + +

IT-----M 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 +,正反應;負反應;W,弱反應 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 83. 3.10,000 A7 B7 五、發明説明（3-5 ) 醋酸菌之活化及接種係將-80°C保存之甘油管，塗 佈至甘露醇洋菜培養基上在30°C培養2天後，接種至 HS培養液（2%葡萄糖，0.5%酵母萃取物，0.5 % ，0.27%磷酸鈉，0.12%檸檬酸鈉），於30°C, 150rpm培養18小時後，再接種至紅茶糖液（10%二級 砂糖，0.33%紅茶萃取物或相同濃度之紅茶液），進行釀 酵。酵母菌之活化係將-80°C保存之甘油管，塗佈至YM 洋菜培養基上，於30°C，培養2天後，接種至YM液體培 養基，30°C,100 rpm培養18小時，再接種至紅茶糖液 進行醱酵。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝· 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 _U_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明（a ) 實施例2.醋酸菌和酵母菌分離株在紅茶糖液之產物成份 將醋酸菌分離株Al、A2與酵母菌分離株Yl、Y2、 Y3，分別接種至滅菌後之紅茶糖液，經30°C，50 rpm振 盪培養36小時，發現分離株A1及A2，·可產生檸檬酸 (citric acid)，而分離株Y1及Y3會產生一定量之檸檬 酸、甘油、酒精以及少量之醋酸，其中Y3之紅茶液還 有濃郁之水果香味，而Y2可產生一定量之檸檬酸、醋 酸及酒精，其成份如表1所示。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 表1.各別分離株醱酵紅茶糖液之各成份表 濃度 (ppm) 分離株 檸檬酸 甘油 醋酸 酒精 A1 636 0 0 0 A2 454 0 74 86 Y1 217 290 203 2162 Y2 212 0 563 434 Y3 273 427 141 3491 實施例3. 於紅茶糖液中添加1〇〇〇 ppm醋酸對酵母菌分離株發 酵紅茶菇飮料之影響 表2.醋酸對酵母菌分離株醱酵紅茶菇之影響 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 83. 3.10,000 -裝------訂---------------------- A7 B7 五、發明説明（5 ) 分離株 濃度(ppm) • 讎酸 甘油 醋酸 酒精 Y1 132 (217)* 244 (290) 904 (203) 3836(2162) Y2 217(212) 0⑼ 1752 (563) 641 (434) Y3 244 (273) 405 (427) 765(141) 5539(3491) *括號內爲未添加醋酸之醱酵結果 如表2所示，添加1000 ppm醋酸可剌激酵母菌分離株產 生較多之酒精。 實施例4. 於紅茶糖液中添加1000 ppm酒精對醋酸菌分離株醱 酵紅茶菇飮料之影響 表3.添加酒精對醋酸菌分離株醱酵紅茶菇飮料之影響 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) I I I I I ^1. 一 I .Ί—n ^ ϋ n n ϋ I ^ . 濃度 (ppm) 分離株 謂酸 甘油 醋酸 酒精 A1 480 (636)* 0 (〇) 521 (0) 65 (0) A2 400(454) 0 (〇) 839 (74) 409 (86) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 *括號內爲未添加酒精之醱酵結果 如表3所示，添加lOOOppm酒精，可促進醋酸菌分離株 生產較多之醋酸。 實施例5. 最佳口感之紅茶菇成份 利用傳統之紅茶菇製作方法製作出不同醱酵程度之產 品，經過30位品評者品評，發現經醱酵80小時，紅茶链 ________〇__!_ 本紙張肢適用中國國家標準（CNS ) A4祕（210X297公釐） 83. 3.10,000 ^^^^1 ^^^1 ϋ ^^^^1 ^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 ϋ.— 1_>1 B^i^i ^^^1 1丨彡Ά .. ·. '一 A7 B7 五、發明説明（6 ) 飮料在含醋酸8〇〇-l〇〇〇ppm、酒精5000-8400 ppm及還原糖 8.8%時，有最好的整體接受性. 實施例6. . 轉速對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶菇之影響。 表4..轉速對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶菇之影響 一.. 濃度 (PPm) 轉速（rpm)_ 檸檬酸 甘油 醋酸 酒精 0 340 640 2216 3887 50 420 684 3215 3910 100 930 87 4545 772 150 2222 82 1159 · 241 如表4所示: 1發現在靜置或50rpm之轉速下: _可得到最 高之酒精及醋酸產量，而隨轉速提高，檸檬酸產量會提 高，而酒精產量會降低。 實施例7.溫度對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶糖液之 影響 表5.溫度對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶糖液之影響* ---------裝------訂—----nyrae^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 溫度（。〇 濃度 (ppm) 棒檬酸 甘油 醋酸 酒精 20 562 743 3457 3043 30 420 684 3216 3911 40 348 672 3951 8874 在設定温度與50rpm下，培養36小時 14 83. 3.10,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明（7 ) 如表5所示，發現在40°C培養時有最高之酒精及醋酸 之產量，而檸檬酸和甘油之產量隨溫度上升而降低，酒精 之產量隨溫度之上升而提高。 實施例8. 於紅茶糖液中添加維生素對分離株Al、Yl、Y2混合 醱酵紅茶糖液之影響 表6.維生素對分離株Al、Yl、Y2混合醱酵紅茶糖液之影響* —維生素 濃度 (ppm) 檸檬酸 甘 油 醋 酸 酒 精 維生素C . 586 958 2550 6444 汎酸 584 932 2224 8397 葉酸 594 940 2385 6662 菸鹼酸 613 906 2746 7730 維生素B6 409 924 2514 7680 維生素B2 699 835 3770 8054 維生素B1 643 713 1091 5541 空白 623 948 2920 7712 *維生素添加量200 ug/1 如表6所示，發現汎酸對酒精之生產有促進之作用，而 維生素B2對醋酸之生產有促進之作用。 實施例9. 利用醱酵槽來生產紅茶菇飮料，接種Al、Y1二種分 離株至含有紅茶糖液的醱酵槽，起始操作條件爲30°C， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) n^i m He k · 訂 A7 B7 經濟部中夬標準局員工消費合作社印裂 五、發明説明（π ) 5〇 rpm，不通氣，待24小時後，用1 I/min之通氣量及 200rpm之轉速，再醱酵2小時，即可得到風味良好之紅 茶菇飮料，其醱酵過程中各成份之變化情形如圖丨所示。 此法較傳統醱酵方法縮短一倍以上的時間，且健康無虞。 實施例10 利用醱酵槽來生產紅茶菇飮料，接種A2、Y1、Y2三 株分離株至含有紅茶糖液之醱酵槽，起始操作條件爲30 °C，5〇 rpm，不通氣，待24·小時後，再用0.3 i/min之通 氣量及200 rpm之轉速醱酵6小時，即可得到風味良好之 紅茶菇飮料，其醱酵過程中各成份之變化情形如圖2所 示。 實施例11 利用醱酵槽生產紅茶菇飮料，接種Al、A2、Y2、Y3 四株分離株至含有紅茶糖液之醱酵槽，起始操作條件爲 4〇°C，5〇 rpm，不通氣，待24小時後，再用0·3 Ι/miti之通 氣量、200卬m之轉速、在3〇°C醱酵6小時，即可得到 風味良好之紅茶菇飮料，其醱酵過程各成份之變化情形如 圖3所示。 (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) 、τ --. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 385^85 a? B7 五、發明説明（9 ) 圖示之簡要說明 圖1 .分離株A1，Y1合倂醱酵生產紅茶菇之各成份變化情形 圖2 .分離株A2 , Y1 , Y2合倂醱酵生產紅茶菇之各成份變化 情形 圖3 .分離株Al，A2 , Y2，Y3合倂醱酵生產紅茶菇之各成份 變化情形 IU------裝-- (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 ί-線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉Α4規格（210Χ297公釐） 83.3.10,000

Claims (1)

1. 手月曰 38.12, 14- 補充 A 8 B8 CS D8 申請專利範圍 公告本 第84101663號「生產紅之菌株j用於醱酵製備紅茶菇飲料 之方法」（88年 11月修正） 1. —種醋酸菌株，係 jceioiacierA1 (CCRC 910025)。 2. —種醋酸菌株，係 jcefohcfer acert Α2 (CCRC 910026)。 3. —種酵母菌株，係《Sacc/jarowy/ces cerev/iiae Y1 (CCRC 920003)。 4. —種酵母菌株.，係 5reiia«o/w少cei 6n/xe"e««_i Y2 (CCRC 920004)。 5. —種酵母菌株，係办gosace/iaro/Mjcei 6cn7i/Y3 (CCRC 920005)。 6. 如申請專利範圍第1或2項之菌株]該菌株在紅茶糖液中醱酵苛產 生檸檬酸，在含乙醇之紅茶糖液中酸'酵可產生醋酸。 7. 如申請專利範圍第3項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、甘油、醋酸及酒精。 8. 如申請專利^圍第4項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、醋酸及酒精。 9·如申請專利範園第5項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、甘油、酒fS、醋酸及特殊水果風味。 1P.—種生產紅茶菇飲料之方法，包括將生產紅茶菇之菌群混合紅茶 糖液在20-40°C之溫度及30-200 rpm之轉速下，培養26-30小 時，以得風味良好之紅茶菇飲料；該菌群係由經分離純化之菌株 所組成，包括選自 Zceioftacierpasiewr/a/iMi A1(CCRC 910025) 及4^^〇仏~^〇<^/人2((：01€91〇{)26)之醋酸菌株及選自 Saccharomyces cerevisiae Y1(CCRC 920003) > Brettanomyces Y2(CCRC 920004).及Z_ygosacc/jar〇/M_vcei έαζ·/" Y3(CCRC 920(505)之酵母菌株。 H.如申請專利範圍第10項之方法，其培養係採二段式操作，前期 不通氣並在30-40°C，低速攪拌（3〇_5〇 rpm)下培養24小時， 然後於後期通氣（l-3vvm)並攪拌（l〇〇-20〇rpm)，在30-40°C 培養2-6小時。 18 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ϋ ϋ n n I n n IΛ n Γ— n SI I- I (請先閲讀背面之注意事項#(填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 手月曰 38.12, 14- 補充 A 8 B8 CS D8 申請專利範圍 公告本 第84101663號「生產紅之菌株j用於醱酵製備紅茶菇飲料 之方法」（88年 11月修正） 1. —種醋酸菌株，係 jceioiacierA1 (CCRC 910025)。 2. —種醋酸菌株，係 jcefohcfer acert Α2 (CCRC 910026)。 3. —種酵母菌株，係《Sacc/jarowy/ces cerev/iiae Y1 (CCRC 920003)。 4. —種酵母菌株.，係 5reiia«o/w少cei 6n/xe"e««_i Y2 (CCRC 920004)。 5. —種酵母菌株，係办gosace/iaro/Mjcei 6cn7i/Y3 (CCRC 920005)。 6. 如申請專利範圍第1或2項之菌株]該菌株在紅茶糖液中醱酵苛產 生檸檬酸，在含乙醇之紅茶糖液中酸'酵可產生醋酸。 7. 如申請專利範圍第3項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、甘油、醋酸及酒精。 8. 如申請專利^圍第4項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、醋酸及酒精。 9·如申請專利範園第5項之菌株，該菌株在紅茶糖液中醱酵可生 產檸檬酸、甘油、酒fS、醋酸及特殊水果風味。 1P.—種生產紅茶菇飲料之方法，包括將生產紅茶菇之菌群混合紅茶 糖液在20-40°C之溫度及30-200 rpm之轉速下，培養26-30小 時，以得風味良好之紅茶菇飲料；該菌群係由經分離純化之菌株 所組成，包括選自 Zceioftacierpasiewr/a/iMi A1(CCRC 910025) 及4^^〇仏~^〇<^/人2((：01€91〇{)26)之醋酸菌株及選自 Saccharomyces cerevisiae Y1(CCRC 920003) > Brettanomyces Y2(CCRC 920004).及Z_ygosacc/jar〇/M_vcei έαζ·/" Y3(CCRC 920(505)之酵母菌株。 H.如申請專利範圍第10項之方法，其培養係採二段式操作，前期 不通氣並在30-40°C，低速攪拌（3〇_5〇 rpm)下培養24小時， 然後於後期通氣（l-3vvm)並攪拌（l〇〇-20〇rpm)，在30-40°C 培養2-6小時。 18 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ϋ ϋ n n I n n IΛ n Γ— n SI I- I (請先閲讀背面之注意事項#(填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 会I C8 D8 六、申請專利範圍 12. 如申請專利範圍第10項之方法，其中加快該轉速以提高該紅茶 菇飮料之醋酸及檸檬酸之含量》 13. 如申請專卸範圍第10項之方法，其中提高該溫度至40°C以加 速該紅茶菇飲料中醋酸及酒精之生成。 14. 如申請專利範圍第10至13任一項之方法，其中進一步於該紅 茶糖政中添加酒精以促進該菌群中之醋酸菌株生產醋酸。 15. 如申請專利範圍第10至13任一項之方法，其中進一步於該紅 茶糖液中添加醋酸以促進該菌群中之酵母菌株生產酒精》 16. 如申請專利範圔第10至13任一項之方法，其中進一步於該紅 茶糖液中添加維生素B2以促進醋酸之生成。 17. 如申請專利範圍第10至13任一項之方法，其中進一步於該紅 茶糖液中添加汎酸以促進酒精之生成。 18. —種紅茶菇飮料，係利用申請專利範圍第1至5任一項之菌株 製得。 19. 一種紅茶菇飲料，係依申請專利範圍第1〇至17任一項之方法 製得。 經濟部中央標準局員工消費合作社印褽 適 度 尺 一張 紙 準 |標 i家 I國 國 ο 2 釐 公 7 9 2