TW202416970A

TW202416970A - Kras抑制劑

Info

Publication number: TW202416970A
Application number: TW112121679A
Authority: TW
Inventors: 馬修Ｌ康達克斯; 利塔Ｌ雪維羅; 瓊安Ｊ布朗森; 麥可Ｆ帕克
Original assignee: 美商必治妥美雅史谷比公司
Priority date: 2022-06-10
Filing date: 2023-06-09
Publication date: 2024-05-01

Abstract

本發明提供KRAS抑制劑。亦提供使用該等化合物治療癌症之方法。

Description

KRAS抑制劑

本發明提供KRAS抑制劑。亦提供使用該等抑制劑治療癌症之方法。

KRAS致癌基因為涉及諸多細胞傳訊過程之GTP酶之RAS家族的成員。KRAS突變為功能獲得性突變，存在於至多30%之所有腫瘤，包括多達90%之胰臟癌中。KRAS充當非活性(GDP結合)狀態與活性(GTP結合)狀態之間循環的分子開關，將接受自多種酪胺酸激酶之上游細胞信號轉導至下游效應物以調節廣泛多種過程，包括細胞增殖。在KRAS一級胺基酸序列之密碼子12及13處引起錯義突變的單核苷酸取代包含肺腺癌中之KRAS驅動突變的約40%，其中G12C轉換為最常見的活化突變。KRAS G12C突變發生於約13%之肺腺癌及約3%之結腸直腸腺癌中，且亦存在於乳癌、膀胱癌、子宮頸癌、卵巢癌、胰臟癌及子宮癌中。

儘管靶向KRAS的若干努力均不成功，但非常需要抑制KRAS活性之化合物，包括破壞諸如鳥嘌呤核苷酸交換因子之效應物及靶向KRAS G12C的彼等化合物。顯然，仍對開發KRAS抑制劑，尤其係活化KRAS突變體，諸如KRAS G12C之抑制劑存在持續關注及努力。

本發明部分地基於如下發現：不同於其他KRAS G12C抑制劑，本發明化合物靶向KRAS G12C蛋白質之活性KRAS G12C ^(ON)形式。藉由抑制KRAS G12C之G12C ^ON形式，預期所主張之化合物將降低癌症對KRAS G12C抑制之抗性及/或證明臨床中之效能提高。不受理論束縛，抑制KRAS G12C之G12C ^ON形式可為式(I)中吡啶并嘧啶環之位置4處之取代基的結果。

在第一態樣中，本發明提供式(I)化合物： (I)；或其醫藥學上可接受之鹽，其中：

U為鍵或NH；

Z為鍵、O、NR ^e或CR ^eR ^f，其中R ^e及R ^f獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基；

R ¹為芳基或雜芳基，其中芳基及雜芳基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基；

R ²及R ³獨立地選自氫、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、-C(O)NH ₂、-C(O)NH(C ₁-C ₃烷基)、-C(O)N(C ₁-C ₃烷基) ₂及羥基；

Y為鍵、O、NR ^g(CR ^eR ^f) _m、NR ^f或CR ^eR ^f，其中m為1、2或3，且其中R ^e、R ^f及R ^g獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基；

A為四員至十員含氮單環或雙環橋接、稠合或螺環飽和、不飽和或部分不飽和環系，其視情況含有一個或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子，其中環系視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基；

R'為鹵基；

R ⁴為芳基或雜芳基環；其中環視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；

X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基；

R ⁵選自氫、C ₁-C ₆烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆烷基、芳基、芳基C ₁-C ₆烷基、羧基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基、二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基、鹵基C ₁-C ₆烷基、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基、羥基C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基，其中芳基、芳基C ₁-C ₆烷基之芳基部分、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基之環烷基部分、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基之雜芳基部分、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基之雜環基部分視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₆烷基)胺基、(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、疊氮基C ₁-C ₆烷基、羧基、氰基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、雜芳基C ₁-C ₃烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；其中雜芳基C ₁-C ₃烷基之雜芳基部分、雜環基及雜環基C ₁-C ₃烷基之雜環基部分進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基及(NR ^xR ^y)C ₁-C ₃烷基；或

R ⁵及R ¹⁶與其所附接之氮原子一起形成雜環基，雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基；

R ^a及R ^b中之一者選自氫及C ₁-C ₃烷基且另一者選自氫、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基羰基、C ₁-C ₃烷基羰基、芳基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基及C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基；且

R ^x及R ^y中之一者為氫且另一者選自-C(O)C ₁-C ₆烷基雜環基，其中雜環基視情況經側氧基取代。

在一些態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中：

U為鍵或NH；

R'為鹵基；

X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基；

R ⁵選自氫、C ₁-C ₆烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆烷基、芳基、芳基C ₁-C ₆烷基、羧基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基、二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基、鹵基C ₁-C ₆烷基、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基、羥基C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基，其中芳基、芳基C ₁-C ₆烷基之芳基部分、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基之環烷基部分、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基之雜芳基部分、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基之雜環基部分視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₆烷基)胺基、(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羧基、氰基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；其中雜環基及雜環基C ₁-C ₃烷基之雜環基部分進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基及鹵基C ₁-C ₃烷基；或

R ⁵及R ¹⁶與其所附接之氮原子一起形成雜環基，雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基；且

R ^a及R ^b中之一者選自氫及C ₁-C ₃烷基且另一者選自氫、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基羰基、C ₁-C ₃烷基羰基、芳基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基及C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基。

U為鍵或NH；

A為四員至十員含氮單環或雙環橋接、稠合或螺環飽和、不飽和或部分不飽和環系，其視情況含有一個或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子，其中環系視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基；

R'為鹵基；

R ⁴為五員或六員芳環，視情況含有一個、兩個或三個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子；其中環視情況經一個、二個或三個獨立地選自以下之取代基取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；

X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基；

在一些態樣中，R ⁴為五員或六員芳環，視情況含有一個、兩個或三個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子。

在一些態樣中，Y為鍵。

在一些態樣中，Y為NR ^f。在某些態樣中，Y為NCH ₃。

在一些態樣中，A為四員至九員單環或雙環橋接、螺環或稠合飽和環系，視情況含有一個或兩個氮原子。

在一些態樣中，A-U為；其中表示與羰基之附接點；且表示與Y之附接點。

在一些態樣中，A-U為；其中：表示與羰基之附接點；且表示與Y之附接點。

在一些態樣中，R ²為氫或甲氧基。

在一些態樣中，R ³為鹵基。

在一些態樣中，R ⁴選自咪唑基、異噻唑基、異㗁唑基、㗁唑基、苯基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基及三唑基，其中各環視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基。在一些態樣中，R ⁴選自咪唑基、㗁唑基、吡𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑基及噻唑基，其中各環視情況經甲基或鹵基取代。

在一些態樣中，X為O。

在一些態樣中，R ⁵係選自：；其中各環視情況經1個、2個或3個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷基、苄基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基。

在一些態樣中，R ⁵為-(C ₁-C ₃烷基)-R ⁶，其中R ⁶為三員至五員單環系、八員或九員雙環稠合飽和環系或十員三環飽和環系，其中各環系視情況含有一個氮原子，且其中各環系視情況經一個或兩個獨立地選自C ₁-C ₃烷基、鹵基及(4員至6員雜環基)C ₁-C ₃烷基之基團取代；其中(4員至6員雜環基)C ₁-C ₃烷基之雜環基部分進一步視情況經鹵基取代。

在一些態樣中，R ⁵為；

其中表示與X之附接點。

在一些態樣中，R ⁵為；其中： n為0、1或2；各R ²⁰為鹵基；且表示與X之附接點。

在一些態樣中，Z為鍵。

在一些態樣中，R ¹為含有一個、兩個或三個氮原子之單環雜芳基環，其中環視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。

在一些態樣中，R ¹為；其中指示與母分子部分之附接點。

在一些態樣中，R ¹為含有一個、兩個或三個選自氮及硫之雜原子的雙環雜芳基環，其中環視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。

在一些態樣中，R ¹為苯環，視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。

在一些態樣中，R ¹為C ₆-C ₁₀芳基，視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。在一些態樣中，R ¹為萘基，其經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄炔基、鹵基及羥基。在一些態樣中，R ¹為萘基，其中萘基經一個、兩個或三個獨立地選自C ₂-C ₄炔基、鹵基及羥基之基團取代。

在一些態樣中，R ¹為；其中指示與母分子部分之附接點。

在一些態樣中，R'為氟。在一些態樣中，R'為氯。

在一些態樣中，本發明提供式(IC)化合物： (IC)；或其醫藥學上可接受之鹽，其中： R'為氯或氟； A-U為；且 R ⁴選自咪唑基、㗁唑基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基及噻唑基；其中各環視情況經鹵基或甲基取代。

在一些態樣中，本發明提供選自以下之化合物反式異構物1；反式異構物2；順式異構物1；順式異構物2；順式異構物1；順式異構物2；反式異構物1；反式異構物2；；或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些態樣中，本發明提供選自以下之化合物： (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氯-3-(嘧啶-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-3-(5-溴吡啶-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-N-((1R,4R)-2-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-4-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯胺； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (S,Z)-1-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-乙基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (S,Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)-5-胺基苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(3-羥苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-((2S,5R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(2-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(2-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(7-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (S,Z)-1-(4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； N-((1-(3-((S)-2-(((7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-5-((3aS,4S,6aR)-2-側氧基六氫-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊醯胺； 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-3-((7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (5,7-二氟-4-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯； 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈； 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氯-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 3-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈；及 3-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈；或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些態樣中，本發明提供先前態樣中之任一者之化合物的滯轉異構體。在某些態樣中，化合物為如本文中所描述之穩定滯轉異構體。

在一些態樣中，本發明提供醫藥組合物，其包含先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。

在一些態樣中，本發明提供口服劑型，其包含先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。

在一些態樣中，本發明提供治療有需要之個體之表現KRAS G12C、G12D及/或G12V突變之癌症的方法，方法包含向個體投與先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些態樣中，本發明提供治療有需要之個體之表現KRAS G12C突變之癌症的方法，方法包含向個體投與先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些態樣中，本發明提供用於治療有需要之個體中可感受KRAS G12C抑制性之癌症的方法，方法包含向個體投與先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些態樣中，本發明提供用於治療有需要之個體之癌症之方法，方法包含向個體投與先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中癌症為肺癌、大腸直腸癌、胰臟癌、乳癌、膀胱癌、子宮頸癌、卵巢癌、胃癌或子宮癌。

在一些態樣中，本發明提供用於治療有需要之個體之癌症之方法，方法包含向該個體投與先前態樣中之任一者之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中癌症為非小細胞肺癌。

在本方法之一些態樣中，化合物為先前態樣中之任一者之化合物的滯轉異構體。在某些態樣中，化合物為如本文中所描述之穩定滯轉異構體。

在另一態樣中，本發明提供用於抑制細胞中之KRAS G12C活性的方法，包含使細胞與治療有效量之如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。在一個態樣中，接觸為活體外的。在一個態樣中，接觸為活體內的。

在一些態樣中，本發明提供活體外或活體內抑制細胞增殖之方法，方法包含使細胞與治療有效量之如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物接觸。

在另一態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於抑制KRAS G12C。

在另一態樣中，本發明提供如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其醫藥組合物，其用於治療KRAS G12C相關疾病或失調症。

在另一態樣中，本發明提供如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造供治療癌症用之藥劑。在一些態樣中，癌症為肺癌。在一些態樣中，癌症為非小細胞肺癌。

在另一態樣中，本發明提供如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造供抑制KRAS G12C活性用之藥劑。

在另一態樣中，本發明提供如本文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其用於製造供治療KRAS G12C相關疾病或失調症用之藥劑。

相關申請案之交叉參考本申請案主張2023年2月1日申請之美國臨時申請案第63/482,726號及2022年6月10日申請之美國臨時申請案第63/351,132號之優先權，其各自以全文引用之方式併入本文中。

除非另有指示，否則具有不飽和價數之任何原子假定具有足以使價數飽和的氫原子。

除非上下文另外規定，否則單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數個參考物。

如本文所使用，除非明確指示諸如與術語「或(either)」、「除非(unless)」、「或者(alternatively)」以及類似效應之字詞一起使用，否則術語「或(or)」為邏輯析取(亦即，及/或)且並不指示排他性析取。

如本文所使用，片語「或其醫藥學上可接受之鹽(or a pharmaceutically acceptable salt thereof)」係指至少一種化合物，或化合物之至少一種鹽，或其組合。例如，「式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽」包括(但不限於)式(I)化合物、兩種式(I)化合物、式(I)化合物之醫藥學上可接受之鹽、式(I)化合物及式(I)化合物之一或多種醫藥學上可接受之鹽，及式(I)化合物之兩種或更多種醫藥學上可接受之鹽。

如本文所使用，術語「C ₂-C ₄烯基(C ₂-C ₄alkenyl)」係指衍生自含有二個至四個碳原子及一個雙鍵之直鏈或分支鏈烴的基團。

如本文所使用，術語「C ₁-C ₃烷氧基(C ₁-C ₃alkoxy)」係指經由氧原子附接至母分子部分之C ₁-C ₃烷基。

如本文所使用，術語「C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₆烷基(C ₁-C ₃alkoxyC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之C ₁-C ₃烷氧基。

如本文所使用，術語「C ₁-C ₃烷氧基羰基(C ₁-C ₃alkoxycarbonyl)」係指經由羰基附接至母分子部分之C ₁-C ₃烷氧基。

如本文所使用，術語「C ₁-C ₃烷基(C ₁-C ₃alkyl)」係指衍生自含有一個至三個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴之基團。

如本文所使用，術語「C ₁-C ₃烷基羰基(C ₁-C ₃alkylcarbonyl)」係指經由羰基附接至母分子部分之C ₁-C ₃烷基。

如本文所使用，術語「C ₂-C ₄炔基(C ₂-C ₄alkynyl)」係指衍生自含有二至四個碳原子及一個參鍵之直鏈或分支鏈烴的基團。

如本文所使用，術語「胺基(amino)」係指-NH ₂。

如本文所使用，術語「胺基C ₁-C ₃烷基(aminoC ₁-C ₃alkyl)」係指經由C ₁-C ₃烷基附接至母分子部分之胺基。

如本文所使用，術語「芳基(aryl)」係指苯基或雙環稠合環系，其中該等環中之一者或兩者為苯基。雙環稠合環系由苯基與四員至六員芳族或非芳族碳環稠合組成。本發明之芳基可經由基團中之任何可取代碳原子附近於母分子部分。芳基之代表性實例包括(但不限於)二氫茚基、茚基、萘基、苯基及四氫萘基。

如本文所使用，術語「芳基C ₁-C ₆烷基(arylC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之芳基。

如本文所使用，術語「疊氮基(azido)」係指-N ₃。

如本文所使用，術語「疊氮基C ₁-C ₆烷基(azidoC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之疊氮基。

如本文所使用，術語「羧基(carboxy)」係指-CO ₂H。

如本文所使用，術語「羧基C ₁-C ₆烷基(carboxyC ₁-C ₆alkyl)」係指經一個、兩個或三個羧基取代之C ₁-C ₆烷基。

如本文所使用，術語「C(O)-C ₁-C ₆烷基雜芳基(C(O)-C ₁-C ₆alkylheteroaryl)」係指經由羰基附接至母分子部分之雜芳基C ₁-C ₆烷基。

如本文所使用，術語「氰基(cyano)」係指-CN。

如本文所使用，術語「C ₃-C ₄環烷基」係指具有三個或四個碳原子及零個雜原子之飽和單環烴環系。

如本文所使用，術語「C ₃-C ₆環烷基(C ₃-C ₆cycloalkyl)」係指具有三個至六個碳原子及零個雜原子之飽和單環烴環系。

如本文所使用，術語「C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基(C ₃-C ₆cycloalkylC ₁-C ₆alky)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之C ₃-C ₆環烷基。

如本文所使用，術語「二(C ₁-C ₆烷基)胺基(di(C ₁-C ₆alkyl)amino)」係指-NR ^zR ^z'，其中R ^z及R ^z ^'為相同或不同的C ₁-C ₆烷基。

如本文所使用，術語「二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基(di(C ₁-C ₃alkyl)aminoC ₂-C ₆alkyl)」係指-(C ₂-C ₆烷基)NR ^zR ^z ^'，其中R ^z及R ^z'為相同或不同的C ₁-C ₃烷基。

如本文所使用，術語「鹵基(halo)」及「鹵素(halogen)」係指F、Cl、Br或I。

如本文中所用，術語「鹵基C ₁-C ₃烷氧基(haloC ₁-C ₃alkoxy)」係指經一個、兩個或三個鹵素原子取代之C ₁-C ₃烷氧基。

如本文所使用，術語「鹵基C ₁-C ₃烷基(haloC ₁-C ₃alkyl)」係指經一個、兩個或三個鹵素原子取代之C ₁-C ₃烷基。

如本文所使用，術語「鹵基C ₁-C ₆烷基(haloC ₁-C ₆alkyl)」係指經一個至六個鹵素原子取代之C ₁-C ₆烷基。

如本文所使用，術語「雜芳基(heteroaryl)」係指芳族五員或六員環，其中至少一個原子選自N、O及S，且其餘原子為碳。術語「雜芳基」亦包括雙環系，其中雜芳基環稠合至含有零個、一個或兩個選自N、O及S之額外雜原子的四員至六員芳環或非芳環；及三環系，其中雙環系稠合至含有零個、一個或兩個選自N、O及S之額外雜原子的四員至六員芳環或非芳環。雜芳基經由基團中之任何可取代碳或氮原子附接至母分子部分。雜芳基之代表性實例包括(但不限於)咯肼、苯并[1,2- d:4,5- d ']雙噻唑、苯并㗁二唑基、苯并㗁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、異㗁唑基、異喹啉基、異噻唑基、㖠啶基、㗁二唑基、㗁唑基、嘌呤、吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基、吡唑基、吡咯基、喹啉基、噻唑基、噻吩并吡啶基、噻吩基、三唑基、噻二唑基及三𠯤基。

在術語「雜芳基」包括雙環系之彼等態樣中，具有至少一個選自N、O及S之原子的芳族五員或六員環稠合至含有零個、一個或兩個選自N、O及S之額外雜原子的四員至六員芳環或非芳環。在術語「雜芳基」包括三環系之彼等態樣中，先前句子中定義之雙環系稠合至含有零個、一個或兩個選自N、O及S之額外雜原子的四員至六員芳環或非芳環。

如本文所使用，術語「雜芳基C ₁-C ₃烷基(heteroarylC ₁-C ₃alkyl)」係指經由C ₁-C ₃烷基附接至母分子部分之雜芳基。

如本文所使用，術語「雜芳基C ₁-C ₆烷基(heteroarylC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之雜芳基。

如本文所使用，術語「雜環基(heterocyclyl)」係指含有一個、兩個或三個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子的五員、六員、七員、八員、九員、十員、十一員或十二員飽和或部分不飽和環。術語「雜環基」亦包括其中雜環稠合至一個、兩個或三個四員至六員芳族或非芳族碳環之基團或單環雜環基。術語「雜環基」亦包括如上文所描述之單環或多環雜環基，其進一步經一或多個經由螺環碳附接至雜環基之螺環基團取代。雜環基之實例包括(但不限於)二氫-1'H,3'H,5'H-二螺[環丙烷-1,2'-吡-6',1''-環丙烷]、六氫-2H-1,4-二氧雜-2a1-氮雜環戊并[cd]并環戊二烯基、六氫吡基、吲哚啉基、嗎啉基、八氫吲哚𠯤基、八氫喹𠯤基、哌𠯤基、哌啶基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫哌喃基及硫代嗎啉基。

如本文所使用，術語「雜環基C ₁-C ₆烷基(heterocyclylC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之雜環基。

如本文所使用，術語「羥基(hydroxy)」係指-OH。

如本文所使用，術語「羥基C ₁-C ₃烷基(hydroxyC ₁-C ₃alkyl)」係指經由C ₁-C ₃烷基附接至母分子部分之羥基。

如本文所使用，術語「羥基C ₁-C ₆烷基(hydroxyC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分之羥基。

如本文所使用，術語「NR ^aR ^b-C(O)」係指經由羰基附接至母分子部分之NR ^aR ^b基團。

如本文所使用，術語「NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基(NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分的NR ^aR ^b-C(O)-基團。

如本文所用，術語「NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基(NR ^aR ^bC ₁-C ₆alkyl)」係指經由C ₁-C ₆烷基附接至母分子部分的NR ^aR ^b基團。

如本文所使用，術語「NR ^xR ^yC ₁-C ₃烷基(NR ^xR ^yC ₁-C ₃alkyl)」係指經由C ₁-C ₃烷基附接至母分子部分的NR ^xR ^y基團。

如本文所使用，術語「硝基(nitro)」係指-NO ₂。

如本文所使用，術語「側氧基(oxo)」係指=O。

本發明意欲包括存在於本發明化合物中之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子數但不同質量數之彼等原子。作為一般實例且非限制性地，氫之同位素包括氘及氚。碳之同位素包括 ¹³C及 ¹⁴C。本發明之同位素標記化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於本文所描述之方法，使用適當同位素標記試劑替代在其他情況下使用之未標記試劑來製備。此類化合物可具有多種潛在用途，例如作為測定生物活性之標準物及試劑。在穩定同位素之情況下，此類化合物可具有有利地改良生物學、藥理學或藥物動力學性質之潛能。

本文所描述之主題之額外態樣為所揭示之化合物作為放射性標記配位體用於配位體結合分析之開發或用於監測活體內吸收、代謝、分佈、受體結合或佔有率或化合物處置之用途。例如，本文所描述之化合物可使用放射性同位素製備且所得放射性標記化合物可用於開發結合分析或用於代謝研究。或者，且出於相同目的，可藉由使用熟習此項技術者已知之方法的催化性氚化將本文所描述之化合物轉化成放射性標記形式。

本發明之某些化合物以立體異構物之形式存在。應瞭解，當未指定立體化學時，本發明涵蓋所有立體化學異構物形式或其混合物，其具有抑制KRAS G12C之能力。化合物之個別立體異構物可自含有手性中心之市售起始材料以合成方式製備，或藉由製備鏡像異構產物之混合物繼之以分離，諸如轉化成非鏡像異構物之混合物繼之以分離或再結晶、層析技術或在手性層析管柱上直接分離鏡像異構物來製備。特定立體化學之起始化合物可市購或可藉由此項技術中已知之技術製備及解決。

本發明之某些化合物以滯轉異構體形式存在。術語「滯轉異構體(atropisomers)」係指當由於與分子之其他部分的空間相互作用而阻止或極大地減緩分子中圍繞單鍵之旋轉且單鍵兩端處之取代基不對稱(亦即，在不需要不對稱碳中心或立構中心之情況下產生光學活性)時產生的構形立體異構物。在圍繞單鍵之旋轉障壁足夠高且構形之間的相互轉化足夠慢之情況下，可允許異構物種之分離及隔離。滯轉異構體為不具有單一不對稱原子之鏡像異構物(或差向異構物)。

若相互轉化之障壁足夠高至允許滯轉異構體在室溫下經歷極少轉化或不經歷相互轉化至少一週，則滯轉異構體可視為穩定的。在一些態樣中，滯轉異構體在室溫下經歷極少或不經歷相互轉化至少一年。在一些態樣中，當滯轉異構化合物呈大體上純形式(其一般為固態)時，本發明之滯轉異構化合物在室溫下在一週期間不經受超過約5%相互轉化為其相反滯轉異構體。在一些態樣中，本發明之滯轉異構化合物在室溫(約25℃)下在一年期間不經受超過約5%相互轉化為其相反滯轉異構體。在一些態樣中，本發明之滯轉異構化合物足夠穩定以在保持在0℃下之水性醫藥調配物中至少一週經歷不超過約5%相互轉化。本發明之化學實體、醫藥組合物及方法意欲包括所有此類可能滯轉異構體，包括外消旋混合物、非鏡像異構混合物、差向異構混合物、單一滯轉異構體之光學純形式及中間物混合物。

滯轉異構體之熱外消旋化之能量障壁可藉由形成手性軸之一或多個鍵之自由旋轉的空間位阻來測定。某些聯芳基化合物在圍繞C2對稱性之環間鍵旋轉受限時展現滯轉異構現象。異構化(鏡像異構化)之自由能障壁為環間鍵之穩定性相對於旋轉的量度。光學及熱激發可促進此類異構物之外消旋化，視電子及空間因素而定。

鄰位取代之聯芳基化合物可表現此類型之構形、旋轉異構現象。此類聯芳基為鏡像異構、手性滯轉異構體，其中芳基環之間的sp ²-sp ²碳-碳環間鍵具有足夠高能量障壁以防止自由旋轉，且其中取代基W ¹≠ W ²及W ³≠ W ⁴顯現分子不對稱。

W ¹:W ³、W ¹:W ⁴及/或W ²:W ⁴、W ²:W ³之間的空間相互作用足夠大以使得平面構形達到能量最大值。兩個非平面、軸向手性鏡像異構物當其相互轉變足夠慢使得其可彼此獨立時則以滯轉異構體形式存在。上文所示之圖中之粗線及短劃線表示由於旋轉能量障壁而在空間上受限的彼等部分或分子之部分。粗線部分正交地存在於頁面之平面上方，且短劃線部分正交地存在於頁面之平面下方。分子之『平坦』部分(兩個所描繪之聯芳基中之各者中的左環)在頁面之平面中。

本發明之醫藥組合物可包括一或多種醫藥學上可接受之鹽。「醫藥學上可接受之鹽(pharmaceutically acceptable salt)」係指保留母化合物之所需生物活性且不賦予任何非所需毒理學效應之鹽(參見例如Berge, S.M.等人, J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977))。鹽可在本文所描述之化合物的最終分離及純化期間獲得，或分別使化合物之游離鹼官能基與適合酸反應或使化合物之酸基與適合鹼反應來獲得。酸加成鹽包括衍生自無毒無機酸，諸如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸亞磷酸及其類似物之彼等鹽，以及衍生自無毒有機酸，諸如脂族單甲酸及脂族二甲酸、經苯基取代之烷酸、羥基烷酸、芳族酸、脂族及芳族磺酸及其類似物之彼等鹽。鹼加成鹽包括衍生自鹼土金屬，諸如鈉、鉀、鎂、鈣及其類似物之彼等鹽，以及衍生自無毒有機胺，諸如N,N'-二苯甲基乙二胺、N-甲基葡糖胺(N-methylglucamine)、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、普魯卡因及其類似物之彼等鹽。 醫藥組合物

在另一態樣中，本發明提供組合物，例如醫藥組合物，其含有本發明內所描述之一種化合物或其組合，與醫藥學上可接受之載劑一起調配。本發明之醫藥組合物亦可在組合療法中投與，亦即與如本文所描述之其他劑組合投與。

如本文所使用，「醫藥學上可接受之載劑」包括生理學上相容之任何及所有溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑及其類似物。在一些態樣中，載劑適用於靜脈內、肌內、皮下、非經腸、脊椎或表皮投與(例如藉由注射或輸注)。視投與途徑而定，活性化合物可包覆於保護化合物免受可使化合物不活化之酸及其他天然條件作用的材料中。

本發明之醫藥組合物可經由一或多種投與途徑使用此項技術中已知之多種方法中之一或多者來投與。如熟習此項技術者應瞭解，投與途徑及/或模式將視所要結果而變化。在一些態樣中，本發明化合物之投與途徑包括靜脈內、肌內、皮內、腹膜內、皮下、脊椎或其他非經腸投與途徑，例如藉由注射或輸注。如本文所使用之片語「非經腸投藥(parenteral administration)」意謂除腸內及表面投與以外通常藉由注射進行之投與模式，且包括(但不限於)靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛膜下、脊柱內、硬膜外及胸骨內注射及輸注。

無菌可注射溶液可藉由視需要以所需量將活性化合物與上文所列舉之一種成分或成分組合一起併入適當溶劑中，繼而滅菌微過濾來製備。通常，藉由將活性化合物併入無菌媒劑中來製備分散液，該無菌媒劑含有基礎分散介質及來自上文所列舉之成分之其他所需成分。在用於製備無菌可注射溶液之無菌粉劑的情況下，一些製備方法為減壓乾燥及冷凍乾燥(凍乾)，其自先前無菌過濾溶液產生活性成分加任何額外所需成分之粉劑。

可用於本發明之醫藥組合物中之適合水性及非水性載劑的實例包括水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇及其類似物)及其適合混合物、植物油及可注射有機酯。可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣材料、藉由在分散液之情況下維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。

醫藥學上可接受之載劑包括無菌水溶液或分散液及用於即時製備無菌可注射溶液或分散液之無菌粉劑。此類介質及劑用於醫藥活性物質之用途為此項技術中已知的。除非任何習知介質或劑與活性化合物不相容，否則考慮將其用於本發明之醫藥組合物中。亦可在組合物中併入補充活性化合物。

治療性組合物在製造及儲存條件下通常必須為無菌及且穩定的。組合物可調配為溶液或具有適合於高藥物濃度之有序結構的液體。載劑可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇及液態聚乙二醇及其類似物)及其適合混合物之溶劑或分散介質。例如，可藉由使用諸如卵磷脂之包衣材料、藉由在分散液之情況下維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。在許多情況下，組合物中需要包括等張劑，例如糖、多元醇(諸如甘露醇、山梨醇)或氯化鈉。可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中包括延遲吸收之劑，例如單硬脂酸鹽及明膠來達成。

或者，本發明化合物可經由非非經腸途徑投與，諸如局部、表皮或經黏膜投與途徑，例如鼻內、經口、經陰道、經直腸、舌下或外用。

本文涵蓋之任何醫藥組合物均可例如經由任何可接受且適合之口服製劑經口遞送。例示性口服製劑包括(但不限於)例如錠劑、糖衣錠、口含錠、水性及油性懸浮液、可分散粉劑或粒劑、乳液、硬及軟膠囊、液體膠囊、糖漿及酏劑。意欲經口投與之醫藥組合物可根據此項技術中已知之用於製造意欲經口投與之醫藥組合物的任何方法製備。為了提供醫藥學上適口的製劑，根據本發明之醫藥組合物可含有至少一種選自甜味劑、調味劑、著色劑、緩和劑、抗氧化劑及防腐劑之劑。

錠劑可例如藉由摻合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種適用於製造錠劑之無毒的醫藥學上可接受之賦形劑來製備。

水性懸浮液可例如藉由摻合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種適用於製造水性懸浮液之賦形劑來製備，賦形劑包括(但不限於)例如懸浮劑，諸如(例如)羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、海藻酸、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或潤濕劑，例如天然存在之磷脂，例如卵磷脂；環氧烷與脂肪酸之縮合產物，諸如(例如)聚氧乙烯硬脂酸酯；環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物，諸如(例如)十七烷氧基鯨蠟醇(heptadecathylene-oxycetanol)；環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇之偏酯的縮合產物，諸如(例如)聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；及環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐之偏酯的縮合產物，諸如(例如)聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。水性懸浮液亦可含有至少一種防腐劑，諸如(例如)對羥基苯甲酸乙酯及對羥基苯甲酸正丙酯；至少一種著色劑；至少一種調味劑；及/或至少一種甜味劑，包括(但不限於)例如蔗糖、糖精及阿斯巴甜。

油性懸浮液可例如藉由使至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽懸浮於植物油諸如(例如)花生油、芝麻油及椰子油中或懸浮於礦物油諸如(例如)液體石蠟中來製備。油性懸浮液亦可含有至少一種增稠劑，諸如(例如)蜂蠟、硬石蠟及鯨蠟醇。為了提供適口的油性懸浮液，可將上文已描述之甜味劑中之至少一者及/或至少一種調味劑添加至油性懸浮液中。油性懸浮液可進一步含有至少一種防腐劑，包括(但不限於)例如抗氧化劑，諸如(例如)丁基化羥基大茴香醚及α-生育酚。

分散性粉劑及粒劑可例如藉由摻合至少一種式(I)化合物及/或至少一種其醫藥學上可接受之鹽與至少一種分散劑及/或濕潤劑、至少一種懸浮劑及/或至少一種防腐劑來製備。適合的分散劑、濕潤劑及懸浮劑已如上文所描述。例示性防腐劑包括(但不限於)例如抗氧化劑，例如抗壞血酸。另外，分散性粉劑及粒劑亦可含有至少一種賦形劑，包括(但不限於)例如甜味劑、調味劑及著色劑。

活性化合物可與將保護化合物免於快速釋放之載劑一起製備，該等載劑諸如控制釋放調配物，包括植入物、經皮貼劑及微膠囊化傳遞系統。可使用生物可降解的生物相容性聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯及聚乳酸。許多用於製備此類調配物之方法已獲得專利或為熟習此項技術者所熟知。參見例如Robinson, J.R.編, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., New York (1978)。

治療性組合物可用此項技術中已知之醫療裝置投與。例如，在一個態樣中，本發明之治療性組合物可用無針皮下注射裝置投與，諸如美國專利第5,399,163號、第5,383,851號、第5,312,335號、第5,064,413號、第4,941,880號、第4,790,824號或第4,596,556號中所揭示之裝置。可用於本發明之熟知植入物和模組的實例包括：美國專利第4,487,603號，其揭示一種用於以受控速率分配藥物的可植入微型輸注泵；美國專利第4,486,194號，其揭示一種通過皮膚投與藥物之治療性裝置；美國專利第4,447,233號，其揭示一種以精確輸注速率傳遞藥物之藥物輸注泵；美國專利第4,447,224號，其揭示一種用於連續藥物遞送之可變流量可植入輸注設備；美國專利第4,439,196號，其揭示一種具有多腔室隔室之滲透藥物遞送系統；及美國專利第4,475,196號，其揭示一種滲透藥物遞送系統。此等專利以引用之方式併入本文中。許多其他此類植入物、遞送系統及模組為熟習此項技術者已知的。

在某些態樣中，本發明化合物可非經腸投與，亦即藉由注射，包括(但不限於)靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛膜下、脊柱內、硬膜外及胸骨內注射及/或輸注。

在一些態樣中，本發明化合物可經口，亦即經由明膠膠囊、錠劑、硬或軟膠囊或液體膠囊投與。 KRAS 抑制劑之用途 / 治療方法

投與本文所描述之治療劑可包括投與治療有效量之治療劑。如本文所使用之術語「治療有效量(therapeutically effective amount)」係指(但不限於)治療可藉由投與包含本文所描述之KRAS抑制劑之組合物治療之病況的治療劑之量。該量為足以表現可偵測之治療性或改善性功效之量。功效可包括例如且不限於治療本文所列出之病況。用於個體之精確有效量將視以下而定：個體之大小及健康、所治療病況之性質及程度、治療醫師之建議及針對投與所選擇之治療法或治療法之組合。

對於投與本文所描述之化合物，劑量範圍介於宿主體重約0.0001至100 mg/kg，且更通常在0.01至40 mg/Kg之範圍內。例示性治療方案需要每天一次、一週兩次、一週三次、一週一次、每兩週一次、每三週一次、每四週一次、一月一次、每3個月一次或每三至6個月一次投與。

所揭示之化合物強烈抑制固著非依賴性細胞生長且因此具有抑制腫瘤轉移之潛能。因此，在另一態樣中，本發明提供用於抑制腫瘤轉移之方法，方法包含向有需要之個體投與有效量之醫藥組合物，該醫藥組合物包含本文所揭示之化合物中之任一者及醫藥學上可接受之載劑。

亦已在血液惡性腫瘤(例如影響血液、骨髓及/或淋巴結之癌症)中鑑別Ras突變，包括(但不限於) KRAS突變。因此，某些態樣針對向需要治療血液惡性腫瘤之患者投與所揭示之化合物(例如呈醫藥組合物形式)。此類惡性腫瘤包括(但不限於)白血病及淋巴瘤。例如，本發明所揭示之化合物可用於治療疾病，諸如急性淋巴母細胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴球性白血病(CLL)、小淋巴球性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性單核球性白血病(AMoL)及/或其他白血病。在其他態樣中，該等化合物適用於治療淋巴瘤，諸如霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkins lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤之所有亞型。

判定腫瘤或癌症是否包含KRAS突變可藉由評定編碼KRAS蛋白質之核苷酸序列、藉由評定KRAS蛋白質之胺基酸序列或藉由評定推定KRAS突變蛋白質之特徵來進行。野生型人類KRAS蛋白質之序列為此項技術中已知。

用於偵測KRAS突變之方法為熟習此項技術者已知。此等方法包括(但不限於)聚合酶鏈反應限制性片段長度多型性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism；PCR-RFLP)分析法、聚合酶鏈反應單股構形多型性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism；PCR-SSCP)分析法、實時PCR分析法、PCR定序、突變對偶基因特異性PCR擴增(mutant allelespecific PCR amplification；MASA)分析法、直接定序、引子延伸反應、電泳、寡核苷酸接合分析法、雜交分析法、塔克曼分析法(TaqMan assays)、SNP基因分型分析法、高解析度融熔分析法及微陣列分析。在一些態樣中，藉由實時PCR評估樣品之KRAS突變。在實時PCR中，使用對KRAS突變具有特異性的螢光探針。當存在突變時，探針結合且偵測到螢光。在一些態樣中，使用例如KRAS基因中特定區域(例如外顯子2及/或外顯子3)之直接定序方法鑑別KRAS突變。此技術將鑑別所定序區域中的所有可能突變。

用於偵測KRAS蛋白質中之突變的方法為熟習此項技術者已知。此等方法包括(但不限於)使用對突變蛋白質具有特異性之結合劑(例如抗體)、蛋白質電泳及西方墨點法、及直接肽定序偵測KRAS突變。

用於判定腫瘤或癌症是否包含KRAS突變之方法可使用多種樣品。在一些態樣中，樣品獲自患有腫瘤或癌症之個體。在一些態樣中，樣品獲自患有癌症或腫瘤之個體。在一些態樣中，樣品為新鮮腫瘤/癌症樣品。在一些態樣中，樣品為冷凍腫瘤/癌症樣品。在一些態樣中，樣品為經福馬林固定之石蠟包埋樣品。在一些態樣中，樣品處理為細胞溶胞物。在一些態樣中，樣品處理為DNA或RNA。本發明亦關於治療哺乳動物之過度增殖性失調症之方法，其包含向該哺乳動物投與治療有效量之本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、酯、前驅藥、溶劑合物、水合物或衍生物。在一些態樣中，該方法係關於治療癌症，諸如急性骨髓白血病、青少年之癌症、兒童腎上腺皮質癌、AIDS有關癌症(例如淋巴瘤及卡波西氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma))、肛門癌、闌尾癌、星細胞瘤、非常型畸胎樣、基底細胞癌、膽管癌、膀胱癌、骨癌、腦幹神經膠質瘤、腦瘤、乳癌、支氣管腫瘤、伯基特淋巴瘤(burkitt lymphoma)、類癌瘤、非常型畸胎樣、胚胎腫瘤、生殖細胞腫瘤、原發性淋巴瘤、子宮頸癌、兒童癌、脊索瘤、心臟腫瘤、慢性淋巴球性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性失調症、大腸癌、大腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、肝外乳腺管原位癌(DCIS)、胚胎腫瘤、CNS癌、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、敏感性神經胚細胞瘤、尤文氏肉瘤(ewing sarcoma)、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、眼癌、骨骼纖維組織細胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸道類癌瘤、胃腸道基質腫瘤(GIST)、生殖細胞腫瘤、妊娠期滋養層腫瘤、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝癌、何傑金氏淋巴瘤(hodgkin lymphoma)、下咽癌、眼內黑色素瘤、胰島細胞腫瘤、胰臟神經內分泌腫瘤、腎癌、喉癌、唇及口腔癌、肝癌、小葉原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、轉移性鱗狀頸癌伴隱匿原發性、中線道癌瘤、口腔癌、多發性內分泌瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣黴菌病、骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生性腫瘤、多發性骨髓瘤、梅克爾細胞癌(merkel cell carcinoma)、惡性間皮瘤、骨骼惡性纖維組織細胞瘤及骨肉瘤、鼻腔及鼻竇癌、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非何傑金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌(NSCLC)、口部癌、唇及口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰臟癌、乳頭狀瘤症、副神經節瘤、副鼻竇及鼻腔癌、副甲狀腺癌、陰莖癌、咽部癌、胸膜肺母細胞瘤、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、移行細胞癌、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌、胃(胃部)癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、T細胞淋巴瘤、睪丸癌、咽喉癌、胸腺瘤及胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及尿管移行細胞癌、滋養層腫瘤、不常見兒童癌、尿道癌、肉瘤、陰道癌、外陰癌或病毒誘發性癌。在一些態樣中，該方法係關於治療非癌性過度增生性失調症，諸如皮膚(例如牛皮癬)、再狹窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))之良性增生。

在某些態樣中，本發明係關於用於治療肺癌之方法，方法包含向有需要之個體投與有效量之上文所描述之化合物(或包含其之醫藥組合物)中之任一者。在某些態樣中，肺癌為非小細胞肺癌(NSCLC)，例如腺癌瘤、鱗狀細胞肺癌或大細胞肺癌。在其他態樣中，肺癌為小細胞肺癌。可用所揭示之化合物治療的其他肺癌包括(但不限於)腺腫瘤、類癌瘤及未分化癌瘤。根據本發明之方法，可用本發明化合物或該等化合物之醫藥學上可接受之鹽、酯、前驅藥、溶劑合物、互變異構物、水合物或衍生物治療之個體包括例如已經診斷為患有以下疾病之個體：急性骨髓白血病、急性骨髓白血病、青少年之癌症、兒童腎上腺皮質癌、AIDS有關癌症(例如淋巴瘤及卡波西氏肉瘤)、肛門癌、闌尾癌、星細胞瘤、非常型畸胎樣、基底細胞癌、膽管癌、膀胱癌、骨癌、腦幹神經膠質瘤、腦瘤、乳癌、支氣管腫瘤、伯基特淋巴瘤、類癌瘤、非常型畸胎樣、胚胎腫瘤、生殖細胞腫瘤、原發性淋巴瘤、子宮頸癌、兒童癌、脊索瘤、心臟腫瘤、慢性淋巴球性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性失調症、大腸癌、大腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、肝外乳腺管原位癌(DCIS)、胚胎腫瘤、CNS癌、子宮內膜癌、室管膜瘤、食道癌、敏感性神經胚細胞瘤、尤文氏肉瘤、顱外生殖細胞腫瘤、性腺外生殖細胞腫瘤、眼癌、骨骼纖維組織細胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸道類癌瘤、胃腸道基質腫瘤(GIST)、生殖細胞腫瘤、妊娠期滋養層腫瘤、毛細胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝癌、何傑金氏淋巴瘤、下咽癌、眼內黑色素瘤、胰島細胞腫瘤、胰臟神經內分泌腫瘤、腎癌、喉癌、唇及口腔癌、肝癌、小葉原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、轉移性鱗狀頸癌伴隱匿原發性、中線道癌瘤、口腔癌、多發性內分泌瘤症候群、多發性骨髓瘤/漿細胞贅瘤、蕈樣黴菌病、骨髓發育不良症候群、骨髓發育不良/骨髓增生性腫瘤、多發性骨髓瘤、梅克爾細胞癌、惡性間皮瘤、骨骼惡性纖維組織細胞瘤及骨肉瘤、鼻腔及鼻竇癌、鼻咽癌、神經母細胞瘤、非何傑金氏淋巴瘤、非小細胞肺癌(NSCLC)、口部癌、唇及口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰臟癌、乳頭狀瘤症、副神經節瘤、副鼻竇及鼻腔癌、副甲狀腺癌、陰莖癌、咽部癌、胸膜肺母細胞瘤、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、移行細胞癌、視網膜母細胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾液腺癌、皮膚癌、胃(胃部)癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、T細胞淋巴瘤、睪丸癌、咽喉癌、胸腺瘤及胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂及尿管移行細胞癌、滋養層腫瘤、不常見兒童癌、尿道癌、肉瘤、陰道癌、外陰癌或病毒誘發性癌。在一些態樣中，用本發明化合物治療之個體包括已診斷為患有非癌性過度增殖性失調症，諸如皮膚(例如牛皮癬)、再狹窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))之良性增生的個體。本發明進一步提供藉由使蛋白質與有效量之本發明化合物接觸來調節突變KRAS蛋白質活性之方法。調節可為抑制或活化蛋白質活性。在一些態樣中，本發明提供藉由使突變KRAS蛋白與有效量之本發明化合物在溶液中接觸來抑制蛋白質活性之方法。在一些態樣中，本發明提供藉由接觸表現所關注蛋白質之細胞、組織、器官來抑制突變KRAS蛋白質活性之方法。在一些態樣中，本發明提供藉由向個體投與有效量之本發明化合物來抑制包括(但不限於)嚙齒動物及哺乳動物(例如人類)之個體中之蛋白質活性的方法。在一些態樣中，調節百分比超過25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。在一些態樣中，抑制百分比超過25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%。在一些態樣中，本發明提供抑制KRAS在細胞中之活性的方法，其藉由使該細胞與足以抑制KRAS突變體在該細胞中之活性的本發明化合物之量接觸來進行。在一些態樣中，本發明提供抑制組織中之突變KRAS之方法，其藉由使該組織與足以抑制該組織中之突變KRAS活性之量的本發明化合物接觸來進行。在一些態樣中，本發明提供抑制KRAS在有機體中之活性的方法，其藉由使該有機體與足以抑制KRAS突變體在該有機體中之活性的本發明化合物之量接觸來進行。在一些態樣中，本發明提供抑制KRAS在動物中之活性的方法，其藉由使該動物與足以抑制KRAS在該動物中之活性的本發明化合物之量接觸來進行。在一些態樣中，本發明提供抑制KRAS之方法，包括在哺乳動物中藉由使該哺乳動物與足以抑制該哺乳動物中之KRAS活性之量的本發明化合物接觸來進行。在一些態樣中，本發明提供抑制KRAS在人類中之活性的方法，其藉由使該人類與足以抑制KRAS在該人類中之活性的本發明化合物之量接觸來進行。本發明提供治療需要此類治療之個體之由KRAS活性介導之疾病的方法。本發明亦提供組合療法之方法，其中已知調節其他路徑之劑或相同路徑之其他組分或甚至重疊目標酶組與本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽、酯、前驅藥、溶劑合物、互變異構物、水合物或衍生物組合使用。在一個態樣中，此類療法包括(但不限於)一或多種本發明化合物與化學治療劑、治療抗體及輻射治療之組合。

許多化學治療劑目前在此項技術中已知且可與本發明化合物組合使用。在一些態樣中，化學治療劑選自由以下組成之群：有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝物、嵌入抗生素(intercalating antibiotics)、生長因子抑制劑、細胞週期抑制劑、酶類、拓樸異構酶抑制劑、生物應答調節劑、抗激素、血管生成抑制劑及抗雄激素。

視所治療之病況而定，本文所描述之化合物可與本文所揭示之劑或其他適合劑組合使用。因此，在一些態樣中，一或多種本發明化合物將與如上文所描述之其他劑共同投與。當用於組合療法中時，本文所描述之化合物與第二劑同時或分開投與。此組合投與可包括兩種劑以同一劑型同時投與、以獨立劑型同時投與，及分開投與。亦即，本文所描述之化合物及上文所描述之劑中之任一者可一起調配於同一劑型中且同時投與。或者，本發明化合物及上文所描述之劑中之任一者可同時投與，其中兩種劑存在於獨立調配物中。在另一替代方案中，本發明化合物可僅在上文所描述之劑中之任一者之後投與，或反之亦然。在獨立投與方案之一些態樣中，本發明化合物及上文所描述之劑中之任一者相隔幾分鐘、或相隔幾小時、或相隔幾天投與。

化合物可藉由此項技術中已知之方法製備，包括下文所描述之彼等方法且包括此項技術內之變化形式之方法。一些試劑及中間物為此項技術中已知的。其他試劑及中間物可藉由此項技術中已知之方法使用可容易獲得之材料製備。用於描述化合物合成的任何變數(例如經編號之「R」取代基)僅意欲說明如何製備化合物且不與申請專利範圍或說明書之其他章節中所用之變數混淆。以下方法係出於說明之目的且並不意欲限制本發明之範圍。合成

本文所描述之態樣進一步定義於以下實例中。應理解僅作為說明而提供該等實例。根據以上論述及實例，熟習此項技術者可確定本文所描述之態樣的基本特徵，且在不背離其精神及範圍之情況下，可對其作出各種改變及修改以使其適應各種用途及條件。因此，本文所描述之態樣不受本文以下所闡述之例示性實例限制，而是由此處隨附之申請專利範圍定義。縮寫

以下縮寫用於以下實例部分及本文其他地方：AA代表乙酸銨；DMF代表N,N-二甲基甲醯胺；DMSO代表二甲亞碸；Et代表乙基；EtOAc代表乙酸乙酯；h代表小時；MeCN或CAN代表乙腈；MeOH代表甲醇；TFA代表三氟乙酸；且THF代表四氫呋喃。中間物1 (4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇)

此化合物根據WO 2021/041671中所描述之合成程序來製備。中間物2 4-(4-((1R,4R)-4-胺基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇

此化合物藉由類似於針對中間物1所描述之程序但替代為合適起始材料來製備。 製備雜芳基中間物 中間物 3 (Z)-2- 氟 -3-( 噻唑 -2- 基 ) 丙烯酸 步驟 1 ：製備 (E)-2- 氟 -3-( 噻唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(1.1 g，4.5 mmol)溶解於THF (25 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，0.18 g，4.5 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加噻唑-2-甲醛(0.51 g，4.5 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (150 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→60%丙酮/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸乙酯(10:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，620 mg，3.1 mmol，68%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₉FNO ₂S計算值為202.0；實驗值為202.2； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.94 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.34 (d, J=22.2 Hz, 1H), 4.43 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.41 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 噻唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸乙酯(620 mg，3.1 mmol)溶解於甲苯(15 mL)中且添加碘(39 mg，0.15 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸乙酯(509 mg，2.5 mmol，82%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₉FNO ₂S計算值為202.0；實驗值為202.0； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.96 (dd, J=3.2, 2.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J=3.2 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=33.3, 0.8 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.39 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 噻唑 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸乙酯(510 mg，2.5 mmol)溶解於MeOH (15 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，2.5 mL，2.5 mmol)。攪拌反應混合物5 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1.5 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，2.5 mL，2.5 mmol)。10分鐘後，沈澱出白色固體。藉由過濾收集固體且用MeCN洗滌。在真空下乾燥固體，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(337 mg，1.9 mmol，77%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₆H ₅FNO ₂S計算值為174.0；實驗值為173.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.04 (s, 2H), 7.29 (d, J=34.5 Hz, 1H)。中間物4 (Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (E)-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(1.5 g，6.2 mmol)溶解於THF (31 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，0.25 g，6.2 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加吡啶甲醛(0.66 g，6.2 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(15 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (100 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(3:1 E/Z混合物，如藉由 ¹H NMR所判斷，910 mg，4.6 mmol，75%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₁FNO ₂計算值為196.1；實驗值為196.1；報告之E異構物： ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.59 (dd, J=4.9, 1.8 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J=7.9, 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.21 (dd, J=7.6, 4.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J=20.4 Hz, 1H), 4.25 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.23 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(420 mg，2.1 mmol)溶解於甲苯(10 mL)中且添加碘(27 mg，0.15 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(240 mg，1.2 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₁FNO ₂計算值為196.1；實驗值為196.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.66 (ddd, J=5.0, 1.8, 0.8 Hz, 1H), 7.88 (ddd, J=8.0, 1.2, 0.8 Hz, 1H), 7.75 (ddd, J=8.0, 7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.25 (ddd, J=7.8, 5.0, 1.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J=34.9 Hz, 1H), 4.36 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(415 mg，2.1 mmol)溶解於MeOH (15 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，2.1 mL，2.1 mmol)。攪拌反應混合物5 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(2.0 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，2.1 mL，2.1 mmol)。10分鐘後，沈澱出白色固體。藉由過濾收集固體且用Et ₂O洗滌。在真空下乾燥固體，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(235 mg，1.4 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₇FNO ₂計算值為168.0；實驗值為167.8。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.66 (ddd, J=4.8, 1.8, 0.8 Hz, 1H), 7.89 (ddd, J=8.0, 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.81 (ddd, J=8.0, 1.1, 0.8 Hz, 1H), 7.40 (dd, J=7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 6.97 (d, J=35.3 Hz, 1H)。中間物5 (Z)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(4- 甲基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加2-甲醯基-4-甲吡啶(125 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，30 mm×100 mm，5 μm粒子；流動速率：42.5 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：95:5 H ₂O:MeCN:0.05% TFA→5:95 H ₂O:MeCN:0.05% TFA；λ=220 nm)純化粗殘餘物，得到(Z)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(32 mg，0.15 mmol，15%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₁H ₁₃FNO ₂計算值為210.2；實驗值為209.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.51 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.11 (d, J=35.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J=5.0 Hz, 2H), 4.35 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H), 1.37 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(4- 甲基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(32 mg，0.15 mmol)溶解於MeOH (1.5 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.15 mL，0.15 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1.0 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.15 mL，0.15 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(27 mg，0.15 mmol，假定全收量；含有1當量NaCl)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₈FNO ₂計算值為182.1；實驗值為182.1。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.51 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.24 (d, J=4.9 Hz, 1H), 6.94 (d, J=35.3 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H)。中間物6 (Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (E)-2- 氟 -3-( 㗁唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加㗁唑-2-甲醛(100 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸乙酯(6:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，165 mg，0.89 mmol，86%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₉FNO ₃計算值為186.0；實驗值為186.0；報導之E異構物： ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.69 (d, J=0.7 Hz, 1H), 7.25 (d, J=0.7 Hz, 1H), 6.62 (d, J=17.6 Hz, 1H), 4.35 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.32 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 㗁唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸乙酯(165 mg，0.89 mmol)溶解於甲苯(2 mL)中且添加碘(11 mg，0.045 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸乙酯(22 mg，0.12 mmol，13%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₉FNO ₃計算值為186.0；實驗值為185.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.77 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.96 (d, J=31.0 Hz, 1H), 4.37 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 㗁唑 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸乙酯(22 mg，0.12 mmol)溶解於MeOH (1 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.12 mL，0.12 mmol)。攪拌反應混合物4 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(0.3 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.12 mL，0.12 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸(18 mg，0.12 mmol，假定全收量；含有1當量NaCl)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₆H ₅FNO ₃計算值為158.0；實驗值為157.8； ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.30 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 6.90 (d, J=32.2 Hz, 1H)。 中間物 7(Z)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加1-甲基咪唑-2-甲醛(114 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，30 mm×100 mm，5 μm粒子；流動速率：42.5 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：95:5 H ₂O:MeCN:10 mM AA→100% 5:95 H ₂O:MeCN:10 nM AA；λ=220 nm)純化粗殘餘物，得到(Z)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙烯酸乙酯(16 mg，0.08 mmol，8%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₂FN ₂O ₂計算值為199.1；實驗值為198.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.22 (d, J=0.7 Hz, 1H), 6.94 (d, J=0.7 Hz, 1H), 6.84 (d, J=30.5 Hz, 1H), 4.33 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 1.35 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙烯酸乙酯(16 mg，0.08 mmol)溶解於MeOH (1 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.08 mL，0.08 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(0.3 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.08 mL，0.08 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙烯酸(13 mg，0.08 mmol，假定全收量；含有1當量NaCl)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₇H ₈FN ₂O ₂計算值為171.0；實驗值為170.9； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.31 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.87 (d, J=31.6 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H)。中間物8 (Z)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(5- 甲基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加5-甲基吡啶甲醛(125 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(15 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (100 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，30 mm×100 mm，5 μm粒子；流動速率：42.5 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：95:5 H ₂O:MeCN:0.05% TFA→100% 5:95 H ₂O:MeCN:0.05% TFA；λ=220 nm)純化粗殘餘物，得到(Z)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(12 mg，0.06 mmol，6%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₁H ₁₃FNO ₂計算值為210.2；實驗值為210.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCL ₃) δ 8.49 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.2, 1.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=35.3 Hz, 1H), 4.35 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.37 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(5- 甲基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(12 mg，0.06 mmol)溶解於MeOH (0.5 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.06 mL，0.06 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1.0 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.06 mL，0.06 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(10 mg，0.06 mmol，假定全收量；含有1當量NaCl)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₈FNO ₂計算值為182.1；實驗值為181.6； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.51 (s, 1H), 7.74 - 7.69 (m, 2H), 6.95 (d, J=35.4 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H)。中間物9 (Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸步驟 1 ：製備 (E)-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(1.6 g，6.6 mmol)溶解於THF (50 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，0.26 g，6.6 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加嘧啶-2-甲醛(0.71 g，6.6 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (150 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→90% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸乙酯(5:1 E/Z，如 ¹H NMR所判斷，592 mg，3.0 mmol，46%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀FN ₂O ₂計算值為197.2；實驗值為197.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.70 (d, J=4.9 Hz, 2H), 7.18 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J=17.5 Hz, 1H), 4.28 (q, J=7.2 Hz, 3H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸乙酯(592 mg，3.0 mmol)溶解於甲苯(15 mL)中且添加碘(38 mg，0.15 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸乙酯(253 mg，1.3 mmol，43%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀FN ₂O ₂計算值為197.2；實驗值為196.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.83 (d, J=4.9 Hz, 2H), 7.21 (t, J=4.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J=30.8 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸乙酯(253 mg，1.3 mmol)溶解於MeOH (10 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，1.3 mL，1.3 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1.0 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，2.5 mL，2.5 mmol)。10分鐘後，沈澱出白色固體。藉由過濾收集固體且在真空下乾燥，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(190 mg，1.1 mmol，88%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₇H ₆FN ₂O ₂計算值為169.1；實驗值為168.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.90 (d, J=4.9 Hz, 2H), 7.46 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.94 (d, J=31.5 Hz, 1H)。 中間物 10 (Z)-2- 氯 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸 步驟 1 ：製備 (Z)-2- 氯 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將2-氯-2-(二乙氧基磷醯基)乙酸乙酯(300 mg，1.2 mmol)溶解於THF (5.8 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，46 mg，1.2 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加吡啶甲醛(124 mg，1.2 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(15 mL)使混合物中止。用水(5 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(Z)-2-氯-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(79 mg，0.37 mmol，32%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₁ClNO ₂計算值為212.0；實驗值為211.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.62 (ddd, J=4.8, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 8.06 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.69 (ddd, J=8.0, 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.20 (ddd, J=7.6, 4.8, 1.0 Hz, 1H), 4.28 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.30 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氯 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氯-3-(吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(79 mg，0.37 mmol)溶解於MeOH (2 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.37 mL，0.37 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1.0 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.37 mL，0.37 mmol)。10分鐘後，直接濃縮溶液，得到呈白色固體之(Z)-2-氯-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(60 mg，0.33 mmol，88%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₇ClNO ₂計算值為184.0；實驗值為183.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.72 (ddd, J=4.8, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 8.08 (dt, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.96 (ddd, J=8.0, 7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.46 (ddd, J=7.6, 4.8, 1.0 Hz, 1H)。中間物11 (Z)-3-(5-溴吡啶-2-基)-2-氟丙烯酸步驟1：製備(Z)-2-氯-3-(5-溴吡啶-2-基)丙烯酸乙酯

在0℃下在THF (30 mL)中攪拌溴化(2-乙氧基-1-氟-2-氧代乙基)三苯基鏻(2.4 g，5.4 mmol，根據U.S.9,345,791中所描述之合成程序製備)。向混合物中逐滴添加nBuLi溶液(1.6 M於己烷中，3.4 mL，5.4 mmol)。攪拌混合物10分鐘且隨後添加呈固體之5-溴吡啶甲醛(1.0 g，5.4 mmol)。使反應混合物在兩小時內逐漸升溫至室溫。濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(5→100% EtOAc/己烷)直接純化殘餘物，得到呈E/Z異構物混合物形式之標題產物。隨後藉由HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：42.5 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)分離此等異構物，得到(Z)-2-氟-3-(5-溴吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(550 mg，2.0 mmol，34 mmol)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₀BrFNO ₂計算值為274.0；實驗值為273.6；NMR: ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.73 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=8.6, 2.3 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J=34.3 Hz, 1H), 4.37 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氯 -3-(5- 溴吡啶 -3- 基 ) 丙烯酸

使(Z)-2-氟-3-(5-溴吡啶-3-基)丙烯酸乙酯(250 mg，0.91 mmol)溶解於MeOH (10 mL)中且逐滴添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，910 μL，0.91 mmol)。攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物且用水(5 mL)稀釋。當添加鹽酸水溶液(1.0 M，910 μL，0.91 mmol)時，形成沈澱物。藉由過濾收集固體且真空乾燥，得到(Z)-2-氟-3-(5-溴吡啶-3-基)丙烯酸(217 mg，0.88 mmol，97%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₆BrFNO ₂計算值為246.0；實驗值為245.7；NMR: ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.79 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=8.4, 2.5 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J=34.6 Hz, 1H)。中間物12 (Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸步驟1：製備(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加6-甲基吡啶-2-甲醛(125 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，5 μm粒子；梯度：5:95 MeCN:H ₂O含有0.05% TFA→95:5 MeCN:H ₂O含有0.05% TFA；λ=220 nm)純化粗殘餘物，得到(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(31 mg，0.15 mmol，14%產率)；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₁H ₁₃FNO ₂計算值為210.1；實驗值為209.7；NMR: ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.71 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.63 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.11 (d, J=35.2 Hz, 1H), 4.34 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.36 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6- 甲基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(31 mg，0.15 mmol)溶解於MeOH (1.5 mL)中且逐滴添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，150 μ L，0.15 mmol)。攪拌混合物2 h。濃縮反應混合物，用水(1 mL)稀釋，且添加鹽酸溶液(1.0 M，150 μL，0.14 mmol)。凍乾此溶液且粗材料不經另外純化即使用(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₉FNO ₂計算值為182.1；實驗值為182.1；NMR: ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.80 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.94 (d, J=35.4 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H)。中間物13 (Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸步驟1：製備(E)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加4-溴噻唑-2-甲醛(198 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(5:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，168 mg，0.60 mmol，60%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₈BrFNO ₂S計算值為279.9；實驗值為279.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.41 (s, 1H), 7.28 (d, J=21.7 Hz, 2H), 4.43 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.41 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-3-(4- 溴噻唑 -2- 基 )-2- 氟丙烯酸乙酯

將(E)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(168 mg，0.6 mmol)溶解於甲苯(2 mL)中且添加碘(15 mg，0.06 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(148 mg，0.53 mmol，88%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₈BrFNO ₂S計算值為279.9；實驗值為279.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.44 (s, 1H), 7.38 (d, J=33.0 Hz, 1H), 4.38 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.38 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-3-(4- 溴噻唑 -2- 基 )-2- 氟丙烯酸

將(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(142 mg，0.51 mmol)溶解於MeOH (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.51 mL，0.51 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.51 mL，0.51 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₆H ₄BrFNO ₂S計算值為251.9；實驗值為251.7； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.13 (s, 1H), 7.28 (d, J=33.7 Hz, 1H)。 中間物 14(Z)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加嗒𠯤-3-甲醛(110 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸乙酯(3:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，168 mg，0.60 mmol，60%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀N ₂O ₂計算值為197.1；實驗值為196.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.11 (dd, J=5.0, 1.7 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.47 (dd, J=8.6, 5.0 Hz, 1H), 7.15 (d, J=19.9 Hz, 1H), 4.27 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-3-(4- 溴噻唑 -2- 基 )-2- 氟丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸乙酯(98 mg，0.5 mmol)溶解於甲苯(2 mL)中且添加碘(12 mg，0.05 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(58 mg，0.30 mmol，59%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀N ₂O ₂計算值為197.1；實驗值為196.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.12 (dd, J=4.9, 1.6 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=8.7, 4.9 Hz, 1H), 7.45 (d, J=34.7 Hz, 1H), 4.39 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 嗒𠯤 -3- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸乙酯(55 mg，0.28 mmol)溶解於MeOH (2 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.28 mL，0.28 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1 mL)且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.28 mL，0.28 mmol)。溶液經凍結且直接凍乾，得到呈白色固體之(Z)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₇H ₆FN ₂O ₂計算值為169.0；實驗值為168.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.21 (dd, J=4.9, 1.6 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.80 (dd, J=8.6, 4.9 Hz, 1H), 7.22 (d, J=34.7 Hz, 1H)。中間物15 (Z)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-甲醛(132 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層，且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即用於下一步驟中(6:1 E/Z，如藉由所假定之 ¹H全收量所判斷)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₁₀FN ₂O ₂S計算值為217.0；實驗值為216.8；報導之E異構物： ¹H NMR (500 MHz, CDCL ₃) δ 7.36 (d, J=21.0 Hz, 1H), 4.40 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.40 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(5- 甲基 -1,3,4- 噻二唑 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸乙酯(223 mg假定，1.0 mmol)溶解於甲苯(2 mL)中且添加碘(17 mg，0.07 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到(Z)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸乙酯(63 mg，0.29 mmol，經兩個步驟之產率29%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₁₀FN ₂O ₂S計算值為217.0；實驗值為216.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.52 (d, J=32.1 Hz, 1H), 4.39 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.85 (s, 3H), 1.39 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(5- 甲基 -1,3,4- 噻二唑 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸乙酯(63 mg，0.29 mmol)溶解於MeOH (2 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.29 mL，0.29 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1 mL)，且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.29 mL，0.29 mmol)。形成黃色沈澱物且藉由過濾收集。用乙醚(2×2 mL)濕磨固體且在真空下乾燥，得到(Z)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸(35 mg，0.18 mmol，63%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₆H ₆FN ₂O ₂S計算值為189.0；實驗值為188.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.38 (d, J=33.3 Hz, 1H), 2.80 (s, 3H)。中間物16 (Z)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加6-(甲氧基甲基)吡啶甲醛(156 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(10 mL)使混合物中止。用水(10 mL)及EtOAc (50 mL)稀釋溶液。分離各層，且用EtOAc (2×20 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到(E)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(3:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，120 mg，0.50 mmol，49%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₂H ₁₅FNO ₃計算值為240.1；實驗值為240.0；報導之E異構物： ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.68 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.88 (d, J=20.4 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.24 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.47 (s, 3H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6-( 甲氧基甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(120 mg，0.5 mmol)溶解於甲苯(10 mL)中且添加碘(6 mg，0.025 mmol)。在100℃下加熱反應混合物6天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到所需產物(59 mg，0.25 mmol，49%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₂H ₁₅FNO ₃計算值為240.1；實驗值為223.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.79 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.74 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.37 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.12 (d, J=35.0 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.33 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.47 (s, 3H), 1.35 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6-( 甲氧基甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(59 mg，0.25 mmol)溶解於MeOH (3 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.25 mL，0.25 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。添加額外的水(1 mL)，且將水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.28 mL，0.28 mmol)。溶液經冷凍且直接凍乾，得到呈白色固體之所需產物氯化鈉加合物(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₁FNO ₃計算值為212.1；實驗值為211.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.89 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.71 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.87 (d, J=35.6 Hz, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.37 (s, 3H)。中間物17 (Z)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(1.7 g，7.0 mmol)溶解於THF (35 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，280 mg，7.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加吡𠯤-2-甲醛(750 mg，7.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)使混合物中止。用水(50 mL)及EtOAc (100 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(6:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，930 mg，4.8 mmol，68%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀FN ₂O ₂計算值為197.1；實驗值為197.0；報導之E異構物： ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.78 (d, J=1.4 Hz, 1H), 8.56 (dd, J=2.5, 1.4 Hz, 1H), 8.49 (d, J=2.5 Hz, 1H), 6.86 (d, J=19.1 Hz, 1H), 4.27 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 吡𠯤 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯(930 mg，4.8 mmol)溶解於甲苯(50 mL)中且添加碘(240 mg，0.95 mmol)。在100℃下加熱反應混合物6天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到所需產物(710 mg，3.6 mmol，76%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀FN ₂O ₂計算值為197.1；實驗值為197.0； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.10 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.63 (dd, J=2.5, 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J=35.2 Hz, 1H), 4.39 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.40 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 吡𠯤 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯(710 mg，3.6 mmol)溶解於MeOH (25 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，3.6 mL，3.6 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。將所得水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，3.6 mL，3.6 mmol)，且形成沈澱物。攪拌10分鐘後，藉由過濾收集沈澱物且真空乾燥，得到所需產物(570 mg，3.4 mmol，94%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₇H ₆FN ₂O ₂計算值為169.0；實驗值為169.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.98 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.75 (dd, J=2.4, 1.1 Hz, 1H), 8.62 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.05 (d, J=34.9 Hz, 1H)。中間物18 (Z)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加6-甲氧基吡啶甲醛(140 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (10 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×5 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(6:1 E/Z，如藉由 ¹H NMR所判斷，170 mg，0.75 mmol，72%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₁H ₁₃FNO ₃計算值為226.1；實驗值為225.9。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(170 mg，0.75 mmol)溶解於甲苯(5 mL)中且添加碘(190 mg，0.75 mmol)。在100℃下加熱反應混合物7天。濃縮溶液且藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化，得到所需產物(75 mg，0.33 mmol，45%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₁H ₁₃FNO ₃計算值為226.1；實驗值為226.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCL ₃) δ 7.60 (dd, J=8.2, 7.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J=7.4 Hz, 1H), 6.98 (d, J=34.7 Hz, 1H), 6.70 (d, J=8.2 Hz, 1H), 4.35 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6- 甲氧基吡啶 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯(71 mg，0.32 mmol)溶解於MeOH (3 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.32 mL，0.32 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。將所得水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.32 mL，0.32 mmol)，且形成沈澱物。攪拌10分鐘後，藉由過濾收集沈澱物且真空乾燥，得到所需產物(42 mg，0.2 mmol，67%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₉FNO ₃計算值為198.0；實驗值為198.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.79 (dd, J=8.3, 7.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J=7.4 Hz, 1H), 6.89 (d, J=34.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J=8.3 Hz, 1H)。中間物19 (Z)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙烯酸步驟1：製備(Z)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(1.1 g，4.6 mmol)溶解於THF (11 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，185 mg，4.6 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加嘧啶-4-甲醛(250 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)使混合物中止。用水(20 mL)及EtOAc (10 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×5 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→15%丙酮/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(40 mg，0.2 mmol，產率9%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₉H ₁₀FN ₂O ₂計算值為197.1；實驗值為197.0； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.27 (d, J=1.3 Hz, 1H), 8.82 (d, J=5.4 Hz, 1H), 7.79 (dd, J=5.3, 1.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J=33.9 Hz, 1H), 4.39 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.40 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-( 嘧啶 -4- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙烯酸乙酯(20 mg，0.1 mmol)溶解於MeOH (1 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.1 mL，0.1 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。將所得水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.1 mL，0.1 mmol)。溶液經冷凍且直接凍乾，得到所需產物氯化鈉加合物(假設全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₇H ₆FN ₂O ₂計算值為169.0；實驗值為169.0。 中間物 20 2-((S)-4-(7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈步驟 1 ：製備 (S)-2-( 氰基甲基 )-4-(2,7- 二氯 -8- 氟吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(1.2 g，4.75 mmol)懸浮於DCM (24 mL)中，且使溶液冷卻至-40℃。逐滴添加DIPEA (1.2 mL，7.1 mmol)，繼之添加呈DCM(10 mL)中之溶液形式的(S)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(1.2 g，4.75 mmol)。攪拌反應混合物30分鐘，升溫至室溫且濃縮。藉由管柱層析(0→50% EtOAc/己烷)直接純化粗殘餘物，得到所需產物(2.2 g，4.64 mmol，97%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₁H ₁₈Cl ₂FN ₆O ₂計算值為475.1；實驗值為474.8； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.93 (s, 1H), 7.40 - 7.33 (m, 5H), 5.20 (d, J=12.3 Hz, 1H), 5.17 (d, J=12.3 Hz, 1H), 4.68 - 4.61 (m, 1H), 4.49 - 4.40 (m, 1H), 4.40 - 4.35 (m, 1H), 4.29 - 4.12 (m, 2H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 3.79 - 3.48 (m, 1H), 3.05 - 2.76 (m, 1H), 2.68 (dd, J=17.0, 5.0 Hz, 1H)。步驟 2 ：製備 (S)-4-(7- 氯 -8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-2-( 氰基甲基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將(S)-(1-甲基吡咯啶-2-基)甲醇(100 mg，0.88 mmol)溶解於THF (7.4 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，0.88 mL，0.88 mmol)，且攪拌所得混合物10分鐘。將(S)-2-(氰基甲基)-4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(350 mg，0.74 mmol)溶解於THF (2 mL)中且逐滴添加至溶液中。使反應混合物升溫至室溫且攪拌16 h。部分濃縮反應混合物，且隨後直接藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化，得到呈白色發泡體之所需產物(350 mg，0.63 mmol，85%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₃₀ClFN ₇O ₃計算值為554.2；實驗值為554.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.79 (s, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 5H), 5.22 - 5.16 (m, 2H), 4.66 (br s, 1H), 4.55 (dd, J=10.9, 4.8 Hz, 1H), 4.38 (dd, J=10.8, 6.1 Hz, 2H), 4.33 - 4.25 (m, 1H), 4.23 - 4.11 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 1H), 3.73 - 3.64 (m, 1H), 3.64 - 3.48 (m, 1H), 3.11 (br t, J=7.5 Hz, 1H), 3.00 - 2.77 (m, 1H), 2.74 - 2.65 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.33 - 2.25 (m, 1H), 2.08 - 2.00 (m, 1H), 1.90 - 1.72 (m, 3H)。步驟 3 ：製備 (S)-4-(7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-2-( 氰基甲基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(100 mg，0.19 mmol)、2-(8-氯萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(84 mg，0.29 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXiumRTM A Palladacycle Gen. 3] (7 mg, 9.6 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.9 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，0.3 mL，0.58 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物2 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(0→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(80 mg，0.12 mmol，61%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₆ClFN ₇O ₃計算值為680.3；實驗值為680.4。步驟 4 ：製備 2-((S)-4-(7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈

將(S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(80 mg，0.12 mmol)溶解於MeOH (2.4 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，63 mg，0.06 mmol)。使氫氣(膨脹體)鼓泡通過反應混合物5分鐘，且將反應混合物保持在氫氛圍下。30分鐘後，經由矽藻土墊(Celite®)過濾反應混合物且濃縮。含有所需產物及去鹵化產物(2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈之未定量混合物的粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₃₁ClFN ₇O計算值為546.2；實驗值為546.1。 中間物 21 (S)-7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶步驟 1 ：製備 4-(2,7- 二氯 -8- 氟吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(1 g，4.0 mmol)懸浮於DCM (20 mL)中，且使溶液冷卻至-40℃。添加DIPEA (1.0 mL，5.9 mmol)，繼之添加呈DCM (5 mL)中之溶液形式的哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(0.74 g，4.0 mmol)。在30分鐘之後，使反應混合物升溫至室溫且部分濃縮。藉由管柱層析(0→50% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(1.4 g，3.6 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₆H ₁₉Cl ₂FN ₅O ₂計算值為402.1；實驗值為401.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.87 (s, 1H), 4.09 - 4.02 (m, 4H), 3.72 - 3.64 (m, 4H), 1.50 (s, 9H)。步驟 2 ：製備 (S)-4-(7- 氯 -8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將(S)-(1-甲基吡咯啶-2-基)甲醇(0.6 g，5.2 mmol)溶解於THF (17.4 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，5.2 mL，5.2 mmol)，且攪拌所得混合物10分鐘。將4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(1.4 g, 3.5 mmol)懸浮於THF (10 mL)中且逐滴添加至溶液中。使反應混合物升溫至室溫且攪拌16 h。部分濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(1.5 g，3.1 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₂H ₃₁ClFN ₆O ₃計算值為481.2；實驗值為481.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.75 (s, 1H), 4.53 (dd, J=10.7, 4.6 Hz, 1H), 4.34 (dd, J=10.7, 6.7 Hz, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 4H), 3.69 - 3.60 (m, 4H), 3.12 - 3.07 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.28 (td, J=9.5, 6.9 Hz, 1H), 2.09 - 2.00 (m, 1H), 1.89 - 1.73 (m, 3H), 1.49 (s, 9H)。步驟 3 ：製備 (S)-4-(7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(145 mg，0.30 mmol)、2-(8-氯萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(105 mg，0.36 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXiumRTM A Palladacycle Gen. 3] (22 mg, 0.03 mmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(5 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，0.45 mL，0.90 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物2 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(0→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(84 mg，0.14 mmol，45%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₇ClFN ₆O ₃計算值為607.3；實驗值為607.2。步驟 4 ：製備 (S)-7-(8- 氯萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶

將(S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(15 mg, 0.025 mmol)溶解於DCM (1 mL)中，且添加TFA (0.25 mL，3.2 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₂₉ClFN ₆O計算值為507.2，實驗值為507.1。中間物22 2-((S)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-甲基哌𠯤-2-基)乙腈步驟 1 ：製備 (S)-2-( 氰基甲基 )-4-(8- 氟 -7-(2- 氟 -5- 羥苯基 )-2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(32 mg，0.058 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXiumRTM A Palladacycle Gen. 3] (4.2 mg, 5.8 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.9 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，0.1 mL，0.17 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物4 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(80→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷→20% MeOH/EtOAc含有5% Et ₃N)純化粗殘餘物，得到所需產物(30 mg，0.048 mmol，82%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₄F ₂N ₇O ₄計算值為630.3；實驗值為630.2； ¹H NMR (500 MHz, CDCL ₃) δ 8.93 (s, 1H), 7.43 - 7.30 (m, 6H), 7.05 - 6.86 (m, 3H), 5.19 (s, 2H), 4.71 - 4.56 (m, 2H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.40 - 4.32 (m, 1H), 4.28 - 4.18 (m, 1H), 4.15 - 3.96 (m, 1H), 3.70 - 3.54 (m, 2H), 3.50 - 3.39 (m, 1H), 3.36 - 3.23 (m, 1H), 3.04 - 2.93 (m, 1H), 2.87 - 2.72 (m, 1H), 2.70 - 2.61 (m, 4H), 2.54 - 2.44 (m, 1H), 2.15 - 2.08 (m, 1H), 2.05 - 1.83 (m, 3H)。步驟 2 ：製備 2-((S)-4-(8- 氟 -7-(2- 氟 -5- 羥苯基 )-2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(30 mg, 0.048 mmol)溶解於MeOH (1.0 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，25 mg，0.024 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下。30分鐘後，經由矽藻土墊矽藻土墊(Celite®)過濾反應混合物且直接濃縮，得到所需產物(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₅H ₂₈F ₂N ₇O ₂計算值為496.2；實驗值為496.3。 中間物 23 2-((S)-4-(7-(8- 乙基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈步驟 1 ：製備 (S)-2-( 氰基甲基 )-4-(8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 )-7-(8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(32 mg，0.058 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基矽烷([此材料根據WO 2022031678A1中詳述之程序製備]38 mg，0.087mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (4.2 mg, 5.8 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.9 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，90 μl，0.17 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物4 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(35 mg，0.04 mmol，73%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₈H ₅₆FN ₇O ₃Si計算值為826.4；實驗值為826.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.13 - 9.02 (m, 1H), 7.99 - 7.90 (m, 2H), 7.82 (d, J=6.7 Hz, 1H), 7.62 - 7.44 (m, 3H), 7.42 - 7.33 (m, 5H), 5.27 - 5.13 (m, 2H), 4.76 - 4.69 (m, 1H), 4.64 - 4.52 (m, 1H), 4.43 - 4.18 (m, 3H), 4.04 - 3.56 (m, 2H), 3.10 (br t, J=7.7 Hz, 1H), 2.89 - 2.55 (m, 3H), 2.51 - 2.46 (m, 3H), 2.33 - 2.23 (m, 1H), 2.10 - 2.01 (m, 1H), 1.91 - 1.71 (m, 4H), 0.95 - 0.82 (m, 18H), 0.61 - 0.49 (m, 3H)。步驟 2 ：製備 (S)-2-( 氰基甲基 )-4-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸苄酯

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(35 mg，0.042 mmol)溶解於THF (0.8 mL)且逐滴添加氟化四正丁基銨溶液(1.0 M於THF中，40 μL，0.04mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘。直接濃縮溶液，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇FN ₇O ₃計算值為670.3；實驗值為670.5。步驟 3 ：製備 2-((S)-4-(7-(8- 乙基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((S)-1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(28 mg假定, 0.042 mmol)溶解於MeOH (0.8 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，22 mg，0.021 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₅FN ₇O計算值為540.3；實驗值為540.4。中間物24 2-((S)-4-(7-(8-乙基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟 1 ：製備 (S)-7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(70 mg，0.15 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基矽烷(95 mg，0.22 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (11 mg，15 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(1.5 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，220 μl，0.44 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物4 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(100 mg，0.13 mmol，91%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₃H ₅₈FN ₆O ₃Si計算值為753.4；實驗值為753.4。步驟 2 ：製備 (S)-4-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將(S)-4-(8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.133 mmol)溶解於THF (1.3 mL)且逐滴添加氟化四正丁基銨溶液(1.0 M於THF中，160 μL，0.16 mmol)中。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘。直接濃縮溶液，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₈FN ₆O ₃計算值為597.3；實驗值為597.4。步驟 3 ：製備 (S)-7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-((1- 甲基吡咯啶 -2- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶

將(S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(10 mg, 0.017 mmol)溶解於MeCN (300 μL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，42 µL，0.168 mmol)且攪拌反應混合物1 h。用NaOH溶液(1.0 M，170 μL，0.17 mmol)使反應混合物中止且濃縮溶液。材料不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₀FN ₆O計算值為497.2；實驗值為497.3。中間物24A (Z)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸步驟1：製備(E)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯

將2-(二乙氧基磷醯基)-2-氟乙酸乙酯(250mg，1.0 mmol)溶解於THF (5 mL)中。將溶液冷卻至0℃。逐份添加呈固體之氫化鈉(60%於礦物油中之分散液，41 mg，1.0 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘且添加6-甲基吡𠯤-2-甲醛(125 mg，1.0 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。藉由添加飽和氯化銨水溶液(5 mL)使混合物中止。用水(5 mL)及EtOAc (10 mL)稀釋溶液。分離各層且用EtOAc (2×5 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鎂乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(＞15:1，如藉由 ¹H NMR所判斷，120 mg，0.56 mmol，55%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₂FN ₂O ₂計算值為211.1；實驗值為210.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.56 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 6.81 (d, J=19.1 Hz, 1H), 4.26 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.24 (t, J=7.1 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 丙烯酸乙酯

將(E)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯(120 mg，0.56 mmol)溶解於甲苯(7 mL)中且添加碘(14 mg，0.06 mmol)。在100℃下加熱反應混合物5天。濃縮溶液且藉由管柱層析(5→100% EtOAc/己烷)純化，得到所需產物(73 mg，0.35 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₀H ₁₂FN ₂O ₂計算值為211.1；實驗值為210.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.92 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.07 (d, J=35.6 Hz, 1H), 4.37 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (Z)-2- 氟 -3-(6- 甲基吡 𠯤 -2- 基 ) 丙烯酸

將(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸乙酯(73 mg，0.35 mmol)溶解於MeOH (3 mL)中。將溶液冷卻至0℃且添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.35 mL，3.5 mmol)。攪拌反應混合物2 h。濃縮溶液以移除甲醇。將所得水溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(1.0 M，0.35 mL，0.35 mmol)，且形成沈澱物。攪拌10分鐘後，藉由過濾收集沈澱物且真空乾燥，得到所需產物(34 mg，0.19 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₈H ₈FN ₂O ₂計算值為183.0；實驗值為182.8； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.79 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 6.98 (d, J=35.0 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H)。 中間物 25 5- 乙炔基 -6- 氟 -4-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 ) 萘 -2- 醇步驟 1 ：製備 4-(7- 氯 -8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇、HCl鹽(1.9 g，9.5 mmol)懸浮於THF (70 mL)中。將混合物冷卻至0℃且逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，22 mL，22 mmol)。一旦所有固體已變成溶液(5分鐘)，即添加呈於THF(10 mL)中之溶液形式的4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4, 3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(3.5 g，8.7 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌16 h。部分濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到呈白色發泡體之所需產物(3.0 g，5.7 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₄H ₃₂ClF ₂N ₆O ₃計算值為525.2；實驗值為525.5； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.74 (s, 1H), 0.00 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.26 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.18 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.99 - 3.89 (m, 4H), 3.69 - 3.59 (m, 4H), 3.31 - 3.12 (m, 3H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.25 - 2.18 (m, 1H), 2.14 (br dd, J=14.7, 4.1 Hz, 1H), 1.99 - 1.80 (m, 4H), 1.49 (s, 9H)。步驟 2 ：製備 4-(8- 氟 -7-(7- 氟 -3-( 甲氧基甲氧基 )-8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 )-2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.57 mmol)、((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(440 mg, 0.86 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[CataCXiumRTM A Pd G3] (21 mg, 0.029 mmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換；此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.9 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，860 µL，1.7 mmol)，且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(450 mg，0.51 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₇H ₆₂F ₃N ₆O ₅Si計算值為875.4；實驗值為875.8。步驟 3 ：製備 4-(7-(8- 乙炔基 -7- 氟 -3-( 甲氧基甲氧基 ) 萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(500 mg，0.57mmol)溶解於THF (5.7mL)中且將溶液冷卻至0 ℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，0.7 mL，0.7 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₁F ₃N ₆O ₅計算值為719.3；實驗值為719.6。步驟 4 ：製備 5- 乙炔基 -6- 氟 -4-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 ) 萘 -2- 醇

將4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(410 mg，0.57 mmol)溶解於MeCN (5.7mL)中且將溶液冷卻至0 ℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，1.4 mL，5.7 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。2小時後，添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，5.7 mL，5.7 mmol)，且濃縮溶液以移除揮發性有機物。所得水溶液經冷凍且直接凍乾，得到所需產物以及氯化鈉。材料具有足夠純度以不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₀F ₃N ₆O ₂計算值為575.2；實驗值為575.4。 中間物 26 7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-4-( 哌𠯤 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶步驟 1 ：製備 4-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-7-(8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(45 mg，0.086 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(41 mg，0.094 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (3.1 mg, 4.3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(900 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，130 µL，0.26 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(57 mg，0.072 mmol，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₅H ₅₉F ₂N ₆O ₃Si計算值為797.4；實驗值為797.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.05 (s, 1H), 7.96 (dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.81 (d, J=6.9 Hz, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 2H), 7.46 (t, J=7.7 Hz, 1H), 5.27 (d, J=55.2 Hz, 1H), 4.33 - 4.22 (m, 1H), 4.20 - 4.10 (m, 1H), 3.92 (br d, J=3.6 Hz, 4H), 3.76 - 3.58 (m, 4H), 3.28 - 3.14 (m, 2H), 2.97 (td, J=9.1, 5.5 Hz, 1H), 2.34 - 2.21 (m, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 2.01 - 1.82 (m, 3H), 1.24 (s, 9H), 0.87 (dd, J=10.2, 7.5 Hz, 18H), 0.61 - 0.49 (m, 3H)。步驟 2 ：製備 4-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(55 mg，0.069 mmol)且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，90 µL，0.09 mmol)且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(42 mg，0.066 mmol，95%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₉F ₂N ₆O ₃計算值為641.3；實驗值為641.3。步驟3：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(40 mg，0.062 mmol)溶解於MeCN (600 µL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，160 µl，0.62 mmol)。在2 h之後，藉由添加NaOH溶液(1.0 M，0.62 mL，0.62 mmol)使反應混合物中止且濃縮反應混合物。殘餘物與甲苯共沸且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₁F ₂N ₆O計算值為541.2；實驗值為541.3。中間物27 8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.095 mmol)、(5-甲基-1H-吲唑-4-基)硼酸(16.76 mg，0.095 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (6.9 mg，9.5 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(950 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，190 µL，0.26 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(9 mg，0.014 mmol，15%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₉F ₂N ₈O ₃計算值為621.3；實驗值為621.3。步驟2：製備8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(9 mg，0.014 mmol)溶解於MeCN(750 L)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，36 µl，0.15 mmol)。2 h後，濃縮反應混合物，且粗材料(呈HCl鹽形式)不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₃₁F ₂N ₈O計算值為521.3；實驗值為521.2。中間物28 7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備4-(8-氟-7-(7-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(171 mg，0.33 mmol)、((2-氟-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(98 mg，0.22 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (15.8 mg，22 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.2 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，430 µL，0.65 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(43 mg，0.053 mmol，24%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₅H ₅₈F ₃N ₆O ₃Si計算值為815.4；實驗值為815.9。步驟2：製備4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-7-(7-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(39 mg，0.048 mmol)溶解於THF (1.0 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，57 µL，0.057 mmol)且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(26 mg，0.039 mmol，82%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₈F ₃N ₆O ₃計算值為659.3；實驗值為659.8。步驟3：製備7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(27 mg，0.04 mmol)溶解於MeCN (500 µL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，100 µl，0.41 mmol)。2 h後，添加1-甲基咪唑(0.039 mL，0.49 mmol)，且濃縮溶液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₀F ₃N ₆O計算值為559.2；實驗值為559.4。中間物29 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇、HCl鹽(680 mg，3.5 mmol)懸浮於THF (16 mL)中。將混合物冷卻至0℃，且逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，7.3 mL，7.3 mmol)。一旦所有固體已變成溶液(5分鐘)，即添加呈於THF(10 mL)中之溶液形式的(S)-2-(氰基甲基)-4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(1.5 g，3.2 mmol)。使反應混合物升溫至室溫，隨後平緩地升溫至35℃持續4 h。部分濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到呈白色發泡體之所需產物(1.6 g，2.6 mmol，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₁ClF ₂N ₇O ₃計算值為598.2；實驗值為598.2； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.78 (s, 1H), 7.37 (d, J=1.4 Hz, 5H), 5.26 (d, J=55.8 Hz, 1H), 5.20 - 5.17 (m, 2H), 4.69 - 4.61 (m, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 1H), 4.32 - 4.24 (m, 2H), 4.22 - 4.13 (m, 2H), 3.97 - 3.82 (m, 1H), 3.74 - 3.63 (m, 1H), 3.61 - 3.44 (m, 1H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 3.17 - 3.13 (m, 1H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.91 - 2.77 (m, 1H), 2.72 - 2.64 (m, 1H), 2.29 - 2.06 (m, 3H), 1.98 - 1.80 (m, 3H)。步驟2：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(50 mg，0.084 mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(2-(三氟甲基)苯基)-1,3,2-二氧硼㖦(45.5 mg，0.167 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (3.0 mg，4 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.8 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，170 µL，0.33 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(58 mg，0.08 mmol，98%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₄F ₅N ₇O ₃計算值為708.3；實驗值為708.3； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.03 (s, 1H), 7.83 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 5H), 5.27 (d, J=53.9 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.74 - 4.66 (m, 1H), 4.53 - 4.43 (m, 1H), 4.41 - 4.34 (m, 1H), 4.30 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.21 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 1H), 3.94 - 3.79 (m, 1H), 3.75 - 3.65 (m, 1H), 3.63 - 3.46 (m, 1H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.79 (m, 1H), 2.78 - 2.69 (m, 1H), 2.31 - 2.09 (m, 3H), 2.00 - 1.81 (m, 3H)。步驟3：製備2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(58 mg，0.08 mmol)溶解於MeOH (0.8 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，18 mg，0.017 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₉F ₅N ₇O計算值為574.3；實驗值為574.2。 中間物 30 2-((S)-4-(7-( 苯并 [b] 噻吩 -3- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -2- 基 ) 乙腈步驟1：製備(S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(50 mg，0.084 mmol)、2-(苯并[b]噻吩-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(43.5 mg，0.167 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (3.0 mg，4 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.8 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，170 µL，0.33 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(57 mg，0.08 mmol，98%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₆F ₂N ₇O ₃S計算值為696.2；實驗值為696.2； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.13 (s, 1H), 8.48 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.12 (d, J=1.3 Hz, 1H), 7.95 - 7.92 (m, 1H), 7.47 - 7.35 (m, 7H), 5.28 (d, J=53.6 Hz, 1H), 5.22 - 5.19 (m, 2H), 4.74 - 4.67 (m, 1H), 4.49 (br d, J=12.6 Hz, 1H), 4.40 - 4.39 (m, 1H), 4.39 (br d, J=11.9 Hz, 1H), 4.32 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.27 - 4.18 (m, 1H), 4.23 (d, J=10.4 Hz, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 1H), 3.74 - 3.66 (m, 1H), 3.64 - 3.47 (m, 1H), 3.31 - 3.20 (m, 2H), 3.04 - 2.94 (m, 1H), 2.94 - 2.80 (m, 1H), 2.73 (dd, J=16.7, 5.6 Hz, 1H), 2.29 - 2.11 (m, 2H), 2.01 - 1.83 (m, 3H)。步驟2：製備2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(57 mg，0.082 mmol)溶解於MeOH (0.8 mmol)中且添加鈀/碳(10 wt%，17 mg，0.016 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₀F ₂N ₇OS計算值為562.2；實驗值為562.3。中間物31 2-((S)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(52 mg，0.094 mmol)、2-(7-氟萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦(33 mg，0.12 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (3.4 mg，5 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.9 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，140 µL，0.28 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(61 mg，0.09 mmol，98%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₆F ₂N ₇O ₃計算值為664.3；實驗值為664.5； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.19 (s, 1H), 8.02 - 7.96 (m, 1H), 7.96 - 7.89 (m, 1H), 7.74 - 7.71 (m, 1H), 7.62 - 7.54 (m, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 5H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 5.29 - 5.16 (m, 2H), 5.30 (d, J=66.2 Hz, 2H), 4.86 - 4.59 (m, 3H), 4.49 - 4.43 (m, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 1H), 4.11 - 4.01 (m, 1H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 3.89 - 3.82 (m, 1H), 3.74 - 3.50 (m, 2H), 3.13 - 3.04 (m, 3H), 3.00 - 2.83 (m, 2H), 2.45 - 2.33 (m, 2H), 2.28 - 2.17 (m, 1H), 2.13 - 2.09 (m, 1H)。步驟2：製備2-((S)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(61 mg，0.092 mmol)溶解於MeOH (2.0 mL)且添加鈀/碳(10 wt%，20 mg，0.018 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₀F ₂N ₇O計算值為530.2；實驗值為530.2。中間物32 8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(75 mg，0.13 mmol)、(1-甲基-1H-吲唑-7-基)硼酸(38 mg，0.21 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (10.4 mg，14 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(1.4 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，290 µL，0.33 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(29 mg，0.05 mmol，33%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₉F ₂N ₈O ₃計算值為621.3；實驗值為621.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.10 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.85 (dd, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J=1.2 Hz, 1H), 5.43 (d, J=51.9 Hz, 1H), 4.04 (br s, 4H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.73 - 3.69 (m, 4H), 3.68 - 3.65 (m, 1H), 3.52 - 3.04 (m, 4H), 2.66 - 2.02 (m, 6H), 1.50 (s, 9H)。步驟2：製備8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(29 mg，0.047 mmol)溶解於MeCN (1.0 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，120 µl，0.47 mmol)。2 h後，直接濃縮反應混合物，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₃₁F ₂N ₈O計算值為521.3；實驗值為521.3。中間物33 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.067 mmol)、(2,5-二氟苯基)硼酸(21 mg，0.134 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (2.4 mg，3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.7 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，100 µL，0.20 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(41 mg，0.061 mmol，91%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₄F ₄N ₇O ₃計算值為676.3；實驗值為676.5； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.06 (s, 1H), 7.38 (s, 6H), 7.20 - 7.13 (m, 2H), 5.27 (d, J=53.8 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.74 - 4.65 (m, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 4.40 - 4.34 (m, 1H), 4.31 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.22 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 3.94 - 3.81 (m, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 3.62 - 3.46 (m, 1H), 3.29 - 3.15 (m, 3H), 2.97 (td, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 2.93 - 2.77 (m, 1H), 2.71 (dd, J=16.7, 5.2 Hz, 1H), 2.27 - 2.08 (m, 3H), 2.00 - 1.82 (m, 3H)。步驟2：製備2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.059 mmol)溶解於MeOH (1.1 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，13 mg，0.012 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₂₈F ₄N ₇O計算值為542.2；實驗值為542.3。中間物34 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.067 mmol)、(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)硼酸(25 mg，0.13 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (2.4 mg，3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.7 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，100 µL，0.20 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(45 mg，0.064 mmol，95%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₅F ₅N ₇O ₃計算值為708.3；實驗值為708.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.05 (s, 1H), 7.84 (dd, J=8.5, 5.3 Hz, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 5H), 7.33 - 7.27 (m, 2H), 6.95 (t, J=55.3 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.6 Hz, 1H), 5.21 - 5.19 (m, 2H), 4.72 - 4.66 (m, 1H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 4.42 - 4.35 (m, 1H), 4.31 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.22 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.23 - 4.15 (m, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 1H), 3.71 (td, J=11.6, 3.9 Hz, 1H), 3.64 - 3.46 (m, 1H), 3.31 - 3.12 (m, 3H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.78 (m, 1H), 2.77 - 2.66 (m, 1H), 2.28 - 2.07 (m, 3H), 1.98 - 1.85 (m, 3H)。步驟2：製備2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.057 mmol)溶解於MeOH (1.1 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，12 mg，0.011 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₉F ₅N ₇O計算值為574.2；實驗值為574.3。中間物35 2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.067 mmol)、(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)硼酸(27.8 mg，0.134 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (2.4 mg，3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.7 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，100 µL，0.20 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(45 mg，0.062 mmol，93%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₄F ₆N ₇O ₃計算值為726.3；實驗值為726.6； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.02 (s, 1H), 7.83 (dd, J=8.8, 5.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.33 (m, 5H), 7.32 - 7.27 (m, 1H), 7.20 (dd, J=8.5, 2.4 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.3 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.76 - 4.64 (m, 1H), 4.53 - 4.34 (m, 2H), 4.30 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.21 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.24 - 4.10 (m, 1H), 4.00 - 3.82 (m, 1H), 3.77 - 3.67 (m, 1H), 3.65 - 3.42 (m, 1H), 3.31 - 3.15 (m, 3H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.77 (m, 1H), 2.72 (br dd, J=16.7, 5.3 Hz, 1H), 2.29 - 2.08 (m, 3H), 1.97 - 1.83 (m, 3H)。步驟2：製備2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.055 mmol)溶解於MeOH (1.1 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，12 mg，0.011 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₈F ₆N ₇O計算值為592.2；實驗值為592.3。中間物36 2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(40 mg，0.067 mmol)、(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)硼酸(30 mg，0.134 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (2.4 mg，3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.7 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，100 µL，0.20 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(24 mg，0.03 mmol，48%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₄ClF ₅N ₇O ₃計算值為742.2；實驗值為742.1； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.02 (s, 1H), 7.76 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.58 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.49 - 7.47 (m, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 5H), 5.27 (d, J=54.0 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.74 - 4.62 (m, 1H), 4.53 - 4.44 (m, 1H), 4.41 - 4.34 (m, 1H), 4.32 - 4.14 (m, 3H), 3.99 - 3.79 (m, 1H), 3.76 - 3.66 (m, 1H), 3.64 - 3.41 (m, 1H), 3.32 - 3.14 (m, 3H), 3.05 - 2.93 (m, 1H), 2.93 - 2.76 (m, 1H), 2.76 - 2.67 (m, 1H), 2.29 - 2.08 (m, 3H), 1.99 - 1.77 (m, 3H)。步驟2：製備2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(20 mg，0.027 mmol)溶解於MeOH (0.55 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，6 mg，0.027 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₈ClF ₅N ₇O計算值為608.2；實驗值為608.1。中間物37 8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈步驟1：製備4-(7-(8-氰基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.095 mmol)、8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘腈(35 mg，0.125 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (6.9 mg，9.5 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣THF (0.95 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，190 µL，0.29 mmol)且在65℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(14 mg，0.022 mmol，23%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₈F ₂N ₇O ₃計算值為642.3；實驗值為642.2。步驟2：製備8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈

將4-(7-(8-氰基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(14.1 mg，0.022 mmol)溶解於MeCN (1.0 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，55 µl，0.22 mmol)。2 h後，直接濃縮反應混合物，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₀H ₃₀F ₂N ₇O計算值為542.2；實驗值為542.5。中間物38 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(75 mg，0.125 mmol)、(1-甲基-1H-吲唑-7-基)硼酸(33 mg，0.19 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (9.1 mg，13 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(1.3 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，250 µL，0.20 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(59 mg，0.085 mmol，68%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₈F ₂N ₉O ₃計算值為694.3；實驗值為649.6。步驟2：製備2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(59 mg，0.085 mmol)溶解於MeOH (3.0 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，9 mg，0.008 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₂F ₂N ₉O計算值為560.3；實驗值為560.6。中間物39 5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇步驟1：製備4-(7-氯-8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將((4aS, 7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲醇(根據WO2022/192794中所描述之程序製備，126 mg，0.75 mmol)溶解於THF (2.5 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，720 µL，0.721 mmol)，且攪拌所得混合物10分鐘。添加呈固體之4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.5 mmol)。使混合物升溫至室溫且攪拌16 h。部分濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(240 mg，0.45 mmol，91%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₆H ₃₇ClFN ₆O ₃計算值為535.3；實驗值為535.6。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.74 (s, 1H), 4.48 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.28 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.98 - 3.90 (m, 4H), 3.69 - 3.63 (m, 4H), 2.71 (t, J=6.2 Hz, 1H), 2.58 (ddd, J=11.2, 7.2, 4.2 Hz, 1H), 2.32 - 2.29 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.89 - 1.60 (m, 10H), 1.50 (s, 9H)。步驟2：製備4-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(240 mg，0.449 mmol)、((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(440 mg，0.86 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Pd G3] (16 mg，0.022 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換；此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.2 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，670 µL，1.3 mmol)，且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₉H ₆₇F ₂N ₆O ₅Si計算值為885.5；實驗值為885.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.04 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.78 (dd, J=9.1, 5.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.33 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.29 (t, J=8.8 Hz, 1H), 5.31 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=7.0 Hz, 1H), 4.50 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.43 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.23 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 2H), 3.94 - 3.87 (m, 2H), 3.78 - 3.70 (m, 2H), 3.69 - 3.61 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 2.66 (t, J=5.5 Hz, 1H), 2.64 - 2.57 (m, 1H), 2.30 - 2.23 (m, 4H), 1.91 - 1.60 (m, 8H), 1.51 (s, 9H), 0.89 - 0.85 (m, 18H), 0.60 - 0.51 (m, 3H)。步驟3：製備4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(360 mg，0.407 mmol)溶解於THF (4.1 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，0.6 mL，0.6 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(250 mg，0.34 mmol，經兩個步驟之產率84%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₄₇F ₂N ₆O ₅計算值為729.4；實驗值為729.7； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 8.99 (s, 1H), 7.83 (dd, J=9.1, 5.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.37 (t, J=2.2 Hz, 1H), 7.29 (t, J=8.7 Hz, 1H), 5.32 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.30 (d, J=6.9 Hz, 1H), 4.49 (dd, J=10.7, 6.7 Hz, 1H), 4.30 (dd, J=10.7, 2.5 Hz, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 4H), 3.70 (br d, J=4.5 Hz, 4H), 3.52 (s, 3H), 2.81 (d, J=6.5 Hz, 1H), 2.70 (t, J=6.0 Hz, 1H), 2.31 - 2.28 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.90 - 1.64 (m, 11H), 1.51 (s, 9H)。步驟4：製備5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇

將4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aR)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.137 mmol)溶解於MeCN (1.4 mL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，0.34 mL，1.37 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。2 h後，添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，1.37 mL，1.37 mmol)，且濃縮溶液以移除揮發性有機物。所得水溶液經冷凍且直接凍乾，得到所需產物以及氯化鈉。材料具有足夠純度以不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₅F ₂N ₆O ₂計算值為585.3；實驗值為585.5。中間物40 2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(50 mg，0.084 mmol)、5-氟-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]㗁𠯤(26 mg，0.17mmol)及碳酸銫(82 mg，0.25 mmol)、BINAP (10.4 mg，0.017 mmol)及乙酸鈀(II)(1.9 mg，8 µmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.0 mL)且在100℃下於微波中加熱反應混合物16 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(15.8 mg，0.022 mmol，26%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₈F ₃N ₈O ₄計算值為715.3；實驗值為715.2。步驟2：製備2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將(S)-2-(氰基甲基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(16 mg, 0.022 mmol)溶解於MeOH (2.0 mL)中且添加鈀/碳(10 wt%，2 mg，0.002 mmol)。使氫氣鼓泡通過溶液5分鐘，然後使反應混合物保持在氫(膨脹體)氛圍下1.5 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾反應混合物且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₉H ₃₂F ₃N ₈O ₂計算值為581.3；實驗值為581.5。中間物41 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備(S)-4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(2.5 g，9.9 mmol)溶解於DCM (100 mL)中，且使溶液冷卻至-40℃。逐滴添加DIPEA (2.6 mL，15 mmol)，繼之添加(S) 3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(2.0 g，9.9 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌1 h。濃縮溶液，且藉由管柱層析(0→60%EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(3.7 g，8.8 mmol，89%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₇H ₂₁Cl ₂FN ₅O ₂計算值為416.1；實驗值為416.0； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.85 (s, 1H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 4.52 - 4.42 (m, 1H), 4.31 - 4.09 (m, 1H), 4.07 - 3.95 (m, 1H), 3.78 - 3.66 (m, 1H), 3.31 - 3.07 (m, 2H), 1.54 (d, J=6.8 Hz, 3H), 1.52 (s, 9H)。步驟2：製備(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇(1.61 g，10.1 mmol)溶解於THF (45 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，10.6 mL，10.6 mmol)，且攪拌所得混合物10分鐘。逐滴添加呈THF (50 mL)中之溶液形式的(S)-4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(3.7 g，8.8 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌16 h。部分濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到呈黃色發泡體之所需產物(4.55 g，8.4 mmol，96%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₅H ₃₄ClF ₂N ₆O ₃計算值為539.2；實驗值為539.5； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 8.70 (s, 1H), 0.00 (d, J=52.7 Hz, 1H), 4.78 (br s, 1H), 4.33 (br d, J=13.1 Hz, 1H), 4.25 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.15 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.26 - 3.82 (m, 2H), 3.67 - 3.56 (m, 1H), 3.28 - 2.94 (m, 6H), 2.29 - 2.09 (m, 3H), 1.99 - 1.82 (m, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.46 (d, J=6.7 Hz, 3H)。步驟 3 ：製備 (S)-4-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-7-(8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-3- 甲基哌 𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-三級丁酯(45 mg，0.083 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(54 mg，0.13 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (3.0 mg，4.2 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(400 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，125 µL，0.25 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(66 mg，0.081 mmol，97%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₆₁F ₂N ₆O ₃Si計算值為811.4；實驗值為811.4； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.07 - 8.96 (m, 1H), 7.99 - 7.89 (m, 2H), 7.84 - 7.77 (m, 1H), 7.60 - 7.51 (m, 2H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 5.35 - 5.20 (m, 1H), 5.05 - 4.67 (m, 1H), 4.55 - 3.70 (m, 6H), 3.58 - 2.95 (m, 6H), 2.34 - 2.09 (m, 3H), 1.97 - 1.84 (m, 3H), 1.55 - 1.49 (m, 12H), 0.91 - 0.83 (m, 18H), 0.60 - 0.48 (m, 3H)。步驟4：製備(S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(66 mg，0.081 mmol)溶解於THF (800 µL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，120 µL，0.12 mmol)且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(53 mg，0.08 mmol，99%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₁F ₂N ₆O ₃計算值為655.3；實驗值為655.4； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.01 - 8.93 (m, 1H), 8.01 - 7.93 (m, 2H), 7.77 - 7.73 (m, 1H), 7.63 - 7.55 (m, 2H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 5.28 (d, J=53.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.78 (m, 1H), 4.49 - 4.36 (m, 1H), 4.31 - 4.25 (m, 1H), 4.21 - 4.16 (m, 1H), 4.30 - 3.87 (m, 2H), 3.70 - 3.59 (m, 1H), 3.35 - 2.94 (m, 6H), 2.30 - 2.13 (m, 3H), 1.97 - 1.87 (m, 4H), 1.51 - 1.46 (m, 12H)。步驟5：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將(S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(59 mg，0.090 mmol)溶解於MeCN (900 µL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，230 µL，0.90 mmol)。2 h後，添加1-甲基咪唑(100 μL)，且濃縮反應混合物。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₃F ₂N ₆O計算值為555.3；實驗值為555.2。中間物42 5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇步驟1：製備(S)-4-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(100 mg，0.19 mmol)、((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(140 mg，0.28 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium ^®A Palladacycle Gen. 3] (6.8 mg，9.3 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(900 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，270 µL，0.54 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(160 mg，0.18 mmol，97%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₈H ₆₄F ₃N ₆O ₅Si計算值為889.5；實驗值為889.5。步驟2：製備(S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(160 mg，0.180 mmol)溶解於THF (1.8 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，180 µL，0.18 mmol)且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(128 mg，0.175 mmol，97%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₄₄F ₃N ₆O ₅計算值為733.3；實驗值為733.3； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.99 - 8.91 (m, 1H), 7.86 - 7.80 (m, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 7.39 - 7.35 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 5.32 (d, J=6.8 Hz, 1H), 5.29 (d, J=6.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.80 (m, 1H), 4.45 - 4.35 (m, 1H), 4.32 - 4.23 (m, 1H), 4.21 - 4.15 (m, 1H), 4.00 - 3.89 (m, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.34 - 3.04 (m, 5H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.31 - 2.11 (m, 3H), 1.99 - 1.84 (m, 5H), 1.52 - 1.45 (m, 12H)。步驟3：製備5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇

將(S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.164 mmol)溶解於MeCN (1.6 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，410 µL，1.6 mmol)。2 h後，添加1-甲基咪唑(200 μL)，且濃縮反應混合物。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₂F ₃N ₆O ₂計算值為589.2；實驗值為589.2。中間物43 (5,7-二氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-((2R,7aS) -2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯步驟1：製備4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(20 mg，0.038 mmol)、(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)硼酸(19 mg，0.057 mmol)[商用]及[(2-二-環己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)[BrettPhos Pd G3](3.5 mg，0.0038 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(400 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，60 µL，0.11 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(16 mg，0.020 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₄₃F ₄N ₈O ₅S計算值為775.3；實驗值為775.3； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.08 (s, 1H), 8.17 (br s, 1H), 6.95 (t, J=9.4 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.29 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.19 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 4H), 3.69 - 3.63 (m, 4H), 3.28 - 3.24 (m, 1H), 3.23 - 3.19 (m, 1H), 3.17 (s, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.30 - 2.11 (m, 3H), 1.99 - 1.85 (m, 3H), 1.54 (s, 9H), 1.50 (s, 9H)。步驟2：製備5,7-二氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

將4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(16 mg，0.021 mmol)溶解於MeCN (1.0 mL)中，且逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，50 μL，0.2mmol)。在室溫下攪拌反應混合物20 h。添加1-甲基咪唑(50 μL)，且濃縮溶液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₅F ₄N ₈O ₃S計算值為675.2；實驗值為675.2。步驟3：製備5,7-二氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

將5,7-二氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(13 mg，0.019 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(10 mg，0.06 mmol)作為固體合倂且溶解於MeCN (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(9 μL，0.19 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(36 mg，0.127 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₇F ₅N ₉O ₄S ₂計算值為830.2；實驗值為830.3。中間物44 (5,7-二氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯步驟1：製備4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(30 mg，0.057 mmol)、(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)硼酸(27 mg，0.086 mmol)[商用]及[(2-二環己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)[BrettPhos Pd G3](5.2 mg，0.0057 μmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(600 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，86 µL，0.17 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(25 mg，0.033 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₄₄F ₃N ₈O ₅S計算值為757.3；實驗值為757.6； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.08 (s, 1H), 8.17 (br s, 1H), 6.95 (t, J=9.4 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.29 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.19 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.00 - 3.93 (m, 4H), 3.69 - 3.63 (m, 4H), 3.28 - 3.24 (m, 1H), 3.23 - 3.19 (m, 1H), 3.17 (s, 1H), 3.03 - 2.92 (m, 1H), 2.30 - 2.11 (m, 3H), 1.99 - 1.85 (m, 3H), 1.54 (s, 9H), 1.50 (s, 9H)。步驟2：製備7-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

將4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(25 mg，0.033 mmol)溶解於MeCN (1.6 mL)中，且逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，83 μL，0.33 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2 h。添加1-甲基咪唑(50 μL)，且濃縮溶液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₆F ₃N ₈O ₃S計算值為657.3；實驗值為657.2。步驟3：製備7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

將7-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(21 mg，0.032 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(17 mg，0.096 mmol)作為固體合倂且溶解於MeCN (650 μL)中。添加1-甲基咪唑(15 μL，0.32 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(27 mg，0.096 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₈F ₄N ₉O ₄S ₂計算值為812.2；實驗值為812.2。中間物45 7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基))-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備(S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基))-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(25 mg，0.046 mmol)、((2-氟-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(31.5 mg，0.070 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (1.7 mg，2.1 µmol) 呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(400 µL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，70 µL，0.14 mmol)且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(30 mg，0.036 mmol，78%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₆₀F ₃N ₆O ₃Si計算值為829.4；實驗值為829.5； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.05 - 8.97 (m, 1H), 7.96 - 7.93 (m, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.59 - 7.51 (m, 2H), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 5.39 - 5.19 (m, 1H), 5.06 - 4.65 (m, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.32 - 3.69 (m, 4H), 3.65 - 3.48 (m, 1H), 3.44 - 2.91 (m, 6H), 2.34 - 2.10 (m, 3H), 1.97 - 1.85 (m, 3H), 1.52 - 1.49 (m, 12H), 0.89 - 0.85 (m, 18H), 0.61 - 0.50 (m, 3H)。步驟2：製備(S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基))吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(8-氟-7-(7-氟-8((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(30 mg，0.036 mmol)溶解於THF (400 µL)中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，54 µL，0.54 mmol)且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(24 mg，0.035 mmol，99%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₀F ₃N ₆O ₃計算值為673.3；實驗值為673.6； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.00 - 8.94 (m, 1H), 7.99 - 7.92 (m, 2H), 7.66 - 7.55 (m, 2H), 7.37 - 7.30 (m, 1H), 5.28 (d, J=53.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.76 (m, 1H), 4.52 - 3.86 (m, 5H), 3.73 - 3.55 (m, 1H), 3.34 - 2.83 (m, 7H), 2.35 - 2.10 (m, 3H), 2.00 - 1.81 (m, 3H), 1.52 - 1.49 (m, 12H)。步驟3：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基))-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將(S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基))吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(24 mg，0.036 mmol)溶解於MeCN (350 µL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，89 µL，0.36 mmol)。2 h後，添加1-甲基咪唑(50 μL)，且濃縮反應混合物。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₂F ₃N ₆O計算值為573.3；實驗值為573.2。中間物46 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(2-甲基吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺步驟1：製備2-甲基-3-(甲胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將2-甲基-3-側氧基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1 g，5.02 mmol)溶解於甲胺溶液(33 wt%於EtOH中，19 ml，151 mmol)中，且在室溫下攪拌反應混合物20 h。濃縮溶液，且將粗殘餘物再懸浮於MeOH (50 mL)中。添加鈀/碳(10 wt%，0.5 g，0.47 mmol)，且用氫氣(1 atm，膨脹體)充氣通過溶液5分鐘。在氫氛圍下攪拌反應混合物20 h。將黑色懸浮液經由矽藻土墊(Celite®)過濾，用額外MeOH溶離，且濃縮濾液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。步驟2：製備2,7-二氯-8-氟-N-甲基-N-(2-甲基吡咯啶-3-基)吡啶基[4,3-d]嘧啶-4-胺

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(1.2 g，4.75 mmol)懸浮於DCM (24 mL)中，且使混合物冷卻至-5℃ (濕冰/丙酮)。添加DIPEA (0.83 mL，4.75 mmol)，繼之添加2-甲基-3-(甲胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(1.0 g，4.75 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且濃縮。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。 LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₈H ₂₃Cl ₂FN ₅O ₂計算值為430.1；實驗值為430.1。步驟3：製備3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將3-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(2 g，4.65 mmol)及((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇(0.96 g，6.04 mmol)合併且溶解於THF (23 mL)中。將溶液冷卻至0℃且逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，11.6 mL，11.6 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌24 h。濃縮溶液，且藉由管柱層析(0→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化粗殘餘物，得到呈6:6:1:1順式:順式:反式:反式混合物非鏡像異構物形式之所需產物(1.1 g，2.0 mmol，43%產率)。(報導之順式非鏡像異構物)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₆H ₃₆ClF ₂N ₆O ₃計算值為553.2；實驗值為553.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.91 (s, 1H), 5.26 (d, J=55.0 Hz, 1H), 5.00 - 4.91 (m, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 1H), 4.36 - 4.13 (m, 2H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.45 - 3.32 (m, 2H), 3.27 - 3.11 (m, 3H), 3.02 - 2.92 (m, 1H), 2.51 - 2.26 (m, 1H), 2.27 - 2.06 (m, 3H), 1.97 - 1.79 (m, 3H), 1.49 - 1.47 (m, 9H), 1.03 (br d, J=6.4 Hz, 3H)。步驟4：製備3-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.45 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(295 mg，0.45 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (3.3 mg，4.5 µmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(2.2 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，680 µL，1.36 mmol)，且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₇H ₆₃F ₂N ₆O ₃Si計算值為825.5；實驗值為825.4。步驟5：製備3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將3-((-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(370 mg，0.448 mmol)溶解於THF (4.5 mL) 中且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，540 µL，0.540 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘後，濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到呈6:6:1:1順式:順式:反式:反式非鏡像異構物混合物(報導之順式非鏡像異構物)之所需產物(270 mg，0.404 mmol，經兩個步驟之產率90%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₃F ₂N ₆O ₃計算值為669.3；實驗值為669.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.19 - 9.15 (m, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 2H), 7.75 (br d, J=6.9 Hz, 1H), 7.65 - 7.56 (m, 2H), 7.46 (t, J=7.7 Hz, 1H), 0.00 (d, J=54.5 Hz, 1H), 5.10 - 4.89 (m, 1H), 4.66 - 4.52 (m, 1H), 4.38 - 4.15 (m, 2H), 3.66 - 3.60 (m, 1H), 3.59 - 3.54 (m, 3H), 3.43 - 3.38 (m, 1H), 3.29 - 3.20 (m, 2H), 3.18 - 3.15 (m, 1H), 3.00 - 2.94 (m, 1H), 2.57 - 2.53 (m, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 1H), 2.29 - 2.09 (m, 4H), 1.98 - 1.85 (m, 3H), 1.50 - 1.48 (m, 9H), 1.10 - 1.05 (m, 3H)。步驟6：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(2-甲基吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺

將3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(270 mg，0.404 mmol)溶解於MeCN (4.0 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，1.0 mL，4.0 mmol)。2 h後，添加1-甲基咪唑(500 μL)，且濃縮反應混合物。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₅F ₂N ₆O計算值為569.3；實驗值為569.3。中間物47 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備4-(2,7-二氯-8-氟-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將2,4,7-三氯-8-氟-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶(500 mg，1.770 mmol) [參見CN115304623]溶解於DCM (9.0 mL)中，且使溶液冷卻至-10℃ (濕冰/丙酮)。逐滴添加DIPEA (0.46 mL，2.7 mmol)，繼之添加呈固體之哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(330 mg，1.77 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌5分鐘。濃縮反應混合物，且粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₇H ₂₁Cl ₂FN ₅O ₃計算值為432.1；實驗值為432.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 4.09 (s, 3H), 3.75 - 3.66 (m, 4H), 3.61 - 3.56 (m, 4H), 1.48 (s, 9H)。步驟2：製備4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(2,7-二氯-8-氟-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(735 mg，1.70 mmol)懸浮於THF (8.5 mL)中，且添加((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇(406 mg，2.55 mmol)。將混合物冷卻至0℃，且逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，3.7 mL，3.7 mmol)。在添加之後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌24 h。濃縮溶液，且藉由管柱層析(0→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到呈淡黃色固體之所需產物(850 mg，1.53 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₅H ₃₄ClF ₂N ₆O ₃計算值為555.2；實驗值為555.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 5.23 (d, J=53.0 Hz, 1H), 4.20 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.63 - 3.58 (m, 4H), 3.57 - 3.52 (m, 4H), 3.25 - 3.07 (m, 3H), 2.94 (s, 1H), 2.27 - 2.07 (m, 3H), 1.97 - 1.80 (m, 3H), 1.47 (s, 9H)。步驟3：製備4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.090 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(39 mg，0.09 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (3.3 mg，4.5 µmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(0.45 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，130 µL，0.27 mmol)，且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(74 mg，0.089 mmol，99%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₆₁F ₂N ₆O ₄Si計算值為827.4；實驗值為827.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.95 - 7.89 (m, 2H), 7.80 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.61 - 7.54 (m, 2H), 7.47 - 7.43 (m, 1H), 5.24 (d, J=54.1 Hz, 1H), 4.24 (dd, J=10.5, 0.8 Hz, 1H), 4.10 (t, J=9.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.73 - 3.62 (m, 4H), 3.62 - 3.51 (m, 4H), 3.21 (s, 3H), 3.00 - 2.92 (m, 1H), 2.33 - 2.10 (m, 3H), 1.98 - 1.81 (m, 3H), 1.50 (s, 9H), 0.88 - 0.85 (m, 18H), 0.58 (spt, J=7.4 Hz, 3H)。步驟4：製備4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(74 mg，0.089 mmol)溶解於THF (0.9 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，89 µL，0.089 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(54 mg，0.081 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₁F ₂N ₆O ₄計算值為671.3；實驗值為671.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 7.99 - 7.92 (m, 2H), 7.75 (dd, J=7.2, 1.3 Hz, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 2H), 7.45 (dd, J=8.1, 7.3 Hz, 1H), 5.25 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.28 - 4.23 (m, 1H), 4.16 - 4.11 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.70 - 3.64 (m, 4H), 3.64 - 3.59 (m, 4H), 3.28 - 3.12 (m, 3H), 3.00 - 2.92 (m, 1H), 2.61 - 2.58 (m, 1H), 2.30 - 2.11 (m, 3H), 1.90 (s, 3H), 1.50 (s, 9H)。步驟5：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(54 mg，0.081 mmol)溶解於MeCN (0.8 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，200 μL，0.8 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。1.5 h之後，添加1-甲基咪唑(100 μL)，且濃縮溶液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₃F ₂N ₆O ₂計算值為571.3；實驗值為571.4。 中間物 48(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-8-氟-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇步驟1：製備(S)-(1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲醇

將(S)-吡咯啶-2-基甲醇(350 mg，3.46 mmol)溶解於MeCN (3.5 mL)中，且添加碳酸鉀(1.4 g，10.4 mmol)，繼之添加3-疊氮基丙基4-甲基苯磺酸酯(972 mg，3.81 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物20 h。經由矽藻土塞(Celite ^®)過濾混合物且濃縮。將粗殘餘物在EtOAc (100 mL)中振盪且用HCl (3×50 mL)萃取。用NaOH溶液(3 M，50 mL)中和經合併之水層，且凍乾溶液。將EtOAc (50 mL)添加至粗殘餘物，且過濾溶液且濃縮，得到所需產物(450 mg，2.4 mmol，71%產率)。 ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 3.65 - 3.57 (m, 1H), 3.41 - 3.30 (m, 3H), 3.20 - 3.11 (m, 1H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.61 - 2.54 (m, 1H), 2.58 (br s, 1H), 2.39 - 2.29 (m, 1H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 1.92 - 1.82 (m, 1H), 1.81 - 1.68 (m, 5H)。步驟2：製備(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(400 mg，0.994 mmol)懸浮於THF (5.0 mL)中，且添加(S)-(1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲醇(183 mg，0.994 mmol) 。將混合物冷卻至0℃，且逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，2.2 mL，2.2 mmol)。在添加之後，使反應混合物升溫至室溫且攪拌24 h。濃縮溶液，且藉由管柱層析(0→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(340 mg，0.62 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₄H ₃₄ClFN ₉O ₃計算值為550.2；實驗值為550.3。步驟3：製備(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(340 mg，0.618 mmol)、((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(475 mg，0.927 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[CataCXium A Palladacycle Gen. 3] (4.5 mg，6.2 µmol)呈固體合併入微波小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。此製程進行三次。添加脫氣二㗁烷(3.1 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，930 µL，1.85 mmol)，且在100℃下於微波中加熱反應混合物1.5 h。直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(20→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₇H ₆₄F ₂N ₉O ₅Si計算值為900.5；實驗值為900.5。步驟4：製備(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(550 mg, 0.61 mmol)溶解於THF (6.1 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，610 µL，0.61 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。5分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(400 mg，0.54 mmol，88%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₄F ₂N ₉O ₅計算值為744.3；實驗值為744.3。步驟5：製備(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-8-氟-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇

將(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(400 mg，0.538 mmol)溶解於MecN (5.4 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，1.3 mL，5.4 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。1 h之後，添加1-甲基咪唑(1 mL)，且濃縮溶液。粗殘餘物不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₂F ₂N ₉O ₂計算值為600.3；實驗值為600.2。中間物49 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇步驟1：製備8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇

4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(1.2 g，1.505 mmol)溶解於乙醇(10 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。添加水性氫氧化鈉溶液(1.0 M，4.5 mL，4.5 mmol)，繼之添加MeOH (一滴，約20 μL)。在70℃下加熱所得反應混合物3 h。用冰冷水(20 mL)使反應混合物中止且添加乙酸乙酯(50 mL)。分離各層且用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。粗殘餘物(900 mg)不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₄₃F ₂N ₄O ₂Si計算值為629.3；實驗值為629.0。步驟2：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇

將8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(900 mg，1.43 mmol)溶解於THF (20 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，2.9 mL，2.9 mmol)，且在0℃下攪拌所得反應混合物2 h。完成後，使反應混合物分配於EtOAc(50 mL)與水(50 mL)之間。分離各層且用EtOAc (2×30 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析純化粗殘餘物，得到所需產物(400 mg，0.84 mmol，經兩個步驟之產率56%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₂₃F ₂N ₄O ₂計算值為473.2；實驗值為473.0。

用於製備以下兩種中間物之通用流程：中間物50 4-(1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(100 mg，0.212 mmol)溶解於MeCN (5 mL)中，且添加1,4-二氮雜環庚烷(21 mg，0.21 mmol)，繼之添加DIPEA (0.11 mL，0.64 mmol)及PyBOP (220 mg，0.42 mmol)。在60℃下加熱所得反應混合物1 h。濃縮溶液，且藉由逆相管柱層析[Redisep 40gm C18，20-40微米，THF:水:ACN (50:20:30)作為稀釋劑及72%甲醇於10 mM碳酸氫銨中作為溶離劑]直接純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(14 mg，12%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₃F ₂N ₆O計算值為555.3；實驗值為555.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.10 (s, 1H), 8.17-8.12 (m, 2H), 7.74-7.68 (m, 2H), 7.60-7.55 (m, 2H), 5.28 (d, J = 53.60 Hz, 1H), 4.07-4.02 (m, 6H), 3.71 (d, J = 1.20 Hz, 1H), 3.35-3.02 (m, 6H), 2.87-2.83 (m, 3H), 2.05-1.77 (m, 8H)。中間物51 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aS)-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用(3as,6as)-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯替代1,4-二氮雜環庚烷製備此中間物。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.22 (s, 1H), 8.15 (t, J = 8.00 Hz, 2H), 7.75-7.69 (m, 2H), 7.61-7.57 (m, 2H), 5.29 (d, J = 53.60 Hz, 1H), 4.15-3.78 (m, 4H), 3.61 (s, 1H), 3.11-3.02 (m, 5H), 2.71-2.70 (m, 3H), 2.14-2.06 (m, 3H), 1.78-1.76 (m, 3H), 1.35-1.31 (m, 3H), 0.93-0.88 (m, 2H)。

用於製備以下中間物之通用流程：中間物52 4-((2R,5S)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備(2R,5S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(160 mg，0.34 mmol)溶解於MeCN (8 mL)中，且添加DIPEA (0.18 mL，1.02 mmol)及(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(72 mg，0.34 mmol)，繼之添加PyBOP (350 mg，0.68 mmol)。在60℃下加熱反應混合物1 h。濃縮溶液，且用正戊烷(2×20 mL)濕磨粗殘餘物且乾燥，得到呈棕色固體之所需產物(200 mg)，其不經另外純化即直接用於下一步驟中。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₃F ₂N ₆O ₃計算值為669.3；實驗值為669.2。步驟2：製備4-((2R,5S)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將(2R,5S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.299 mmol)溶解於MeCN (4 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，0.75 mL，3.0 mmol)，且使反應混合物升溫至室溫。2 h後，濃縮反應混合物，且藉由逆相管柱層析[Redisep 50gm C18，20-40微米，THF:水:ACN (50:20:30)作為稀釋劑及20%ACN於5 mM甲酸銨中作為溶離劑]純化粗殘餘物，得到呈其甲酸鹽形式之所需產物。將材料分配於EtOAc (20 mL)與飽和NaHCO ₃水溶液(10 mL)之間。分離各層，且有機相經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。凍乾殘餘物，得到呈棕色固體之所需產物(18 mg，0.032 mmol，經兩個步驟之產率9%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₅F ₂N ₆O計算值為569.3；實驗值為569.3； ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.04-8.98 (m, 1H), 8.20-8.16 (m, 2H), 7.86-7.70 (m, 2H), 7.64-7.56 (m, 2H), 5.28 (d, J = 56.00 Hz, 1H), 4.12-3.59 (m, 4H), 3.10-3.01 (m, 4H), 2.35-1.72 (m, 9H), 1.44-0.88 (m, 9H)。中間物53 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((R)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用(R)-3-甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此中間物。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₃F ₂N ₆O計算值為555.3；實驗值為555.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.04-8.97 (m, 1H), 8.15 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 7.74-7.68 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 1H), 5.28 (d, J = 56.00 Hz, 1H), 4.11-3.87 (m, 1H), 3.71-3.69 (m, 1H), 3.49-3.42 (m, 1H), 3.31-3.00 (m, 7H), 2.99-2.84 (m, 2H), 2.13-1.77 (m, 2H), 1.60-1.47 (m, 3H), 1.35-1.29 (m, 4H), 0.96-0.92 (m, 6H)。中間物54 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₅F ₂N ₆O計算值為581.3；實驗值為581.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 8.95 (s, 1H), 8.14 (dt, J = 0.80, 11.07 Hz, 1H), 7.72-7.67 (m, 1H), 7.56 (dd, J = 7.60, Hz, 1H), 5.27 (d, J = 54.40 Hz, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.11-3.98 (m, 5H), 3.71 (s, 1H), 3.31-3.01 (m, 3H), 2.83-2.82 (m, 1H), 2.69-2.55 (m, 5H), 2.12-2.11 (m, 1H), 2.04-2.03 (m, 1H), 1.85-1.73 (m, 10H)。中間物55 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aR)-六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用(3aR,6aR)-六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.21-9.18 (m, 1H), 8.15 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 7.75-7.68 (m, 2H), 7.62-7.58 (m, 2H), 5.28 (d, J = 56.00 Hz, 1H), 4.9-5.0 (m, 1H), 4.17-4.04 (m, 4H), 3.75-3.66 (m, 1H), 3.13-2.83 (m, 8H), 2.07-1.78 (m, 8H), 1.35-1.24 (m, 2H)。中間物56 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₅F ₂N ₆O計算值為581.3；實驗值為581.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.00 (s, 1H), 8.17-8.13 (m, 2H), 7.73-7.67 (m, 2H), 7.62-7.55 (m, 2H), 5.28 (d, J = 56.00 Hz, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.84 (s, 2H), 3.70 (s, 1H), 3.36-3.33 (m, 2H), 3.08-3.00 (m, 4H), 2.13-1.94 (m, 10H), 1.34-1.24 (m, 3H), 0.88-0.87 (m, 3H)。中間物57 4-((2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用(2R,5S)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯及BOP替代PyBOP製備此中間物。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₅F ₂N ₆O計算值為569.3；實驗值為569.3； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.08 (d, J = 21.20 Hz, 1H), 8.16 (t, J = 8.40 Hz, 2H), 7.71-7.74 (m, 2H), 7.56-7.62 (m, 2H), 5.30 (d, J = 52.00 Hz, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.07-4.18 (m, 3H), 3.73-3.78 (m, 1H), 3.43-3.58 (m, 3H), 2.52-3.05 (m, 5H), 1.80-2.15 (m, 7H), 1.50 (dd, J = 6.80, 25.20 Hz, 3H), 1.26 (dd, J = 6.80, 25.60 Hz, 3H)。中間物58 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶異構物1及異構物2

遵循上文通用程序使用1,6-二氮雜螺[3.4]辛烷-1-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此等中間物。另外，藉由此等步驟提供之初始材料藉由製備型SFC (管柱：Chiralcel AD-H，4.6 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：100 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：55% CO ₂:45% 1:1 MeCN/MeOH含有0.2%氨)進一步純化。

異構物1：LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.0； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.25-9.20 (m, 1H), 8.16-8.12 (m, 2H), 7.73-7.68 (m, 2H), 7.60-7.54 (m, 2H), 5.28 (d, J = 52.40 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.14-4.01 (m, 4H), 3.88-3.76 (m, 1H), 3.02-2.80 (m, 5H), 2.25-2.01 (m, 13H)。

異構物2：LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.25-9.20 (m, 1H), 8.14 (t, J = 8.00 Hz, 2H), 7.71-7.67 (m, 2H), 7.60-7.56 (m, 2H), 5.28 (d, J = 53.60 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.13-4.01 (m, 4H), 3.81-3.64 (m, 1H), 3.11-2.80 (m, 5H), 2.05-1.77 (m, 13H)。中間物59 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶異構物1及異構物2

遵循上文通用程序使用六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-甲酸三級丁酯替代(2S,5R)-2,5-二甲基哌𠯤-1-甲酸三級丁酯製備此等中間物。另外，藉由此等步驟提供之初始材料藉由製備型SFC (管柱：Chiralcel AD-H，4.6 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：100 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：55% CO ₂:45% 1:1 MeCN/MeOH含有0.2%氨)進一步純化，得到兩種異構物。

異構物1：LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.0。

異構物2：LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₂N ₆O計算值為567.3；實驗值為567.2。

用於製備以下中間物之通用流程：中間物60 7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶步驟1：製備4-氟-8-((三異丙基矽烷基)乙炔基)萘-1-醇

將4-氟萘-1-醇(1 g，6.17 mmol)及(溴甲基)三異丙基矽烷(1.93 g，7.40 mmol)溶解於DCE (15 mL)中。添加碳酸鉀(0.85 g，6.17 mmol)、醋酸鈉(0.10 g，1.23 mmol)及二氯(對異丙基甲苯)釕(II)二聚體(0.94 g，1.542 mmol)，且在40℃下加熱反應混合物16 h。經由矽藻土墊(Celite®)過濾反應混合物，用額外DCM (2×50 mL)溶離。在減壓下濃縮經合併之濾液。藉由管柱層析(0→10% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(1.5 g，4.38 mmol，71%產率)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 10.03 (s, 1H), 7.96 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 1.20, 7.20 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 7.20, 8.40 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.40, 10.40 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 4.80, 8.40 Hz, 1H), 1.14 (s, 21H)。步驟 2 ：製備 4- 氟 -8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基三氟甲烷磺酸酯

將4-氟-8-((三異丙基矽烷基)乙炔基)萘-1-醇(500 mg，1.460 mmol)溶解於DCM (10 mL)中，且添加DIPEA (0.765 mL，4.38 mmol)。將溶液冷卻至-40℃，且在此溫度下逐滴添加三氟甲磺酸酐(0.370 mL，2.190 mmol)。使反應混合物升溫至-20℃且攪拌1 h。用冷水(20 mL)使反應混合物中止，添加DCM (30 mL)。分離各層且用DCM (2×30 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(5% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈無色膠狀之所需產物(500 mg，1.01 mmol，69%產率)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (d, J = 8.80 Hz, 1H), 8.02 (dd, J = 1.20, 7.40 Hz, 1H), 7.78-7.74 (m, 2H), 7.58 (t, J = 8.80 Hz, 1H), 1.20-1.12 (m, 21H)。步驟3：製備((5-氟-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷

將4-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基三氟甲烷磺酸酯(500 mg，1.054 mmol)溶解於二㗁烷(10 mL)中且添加B ₂pin ₂(400 mg，1.56 mmol)及醋酸鉀(310 mg，3.16 mmol)。用氮氣充氣經由溶液5分鐘，且添加Pd(dppf)Cl ₂(77 mg，0.10 mmol)。在100℃下加熱反應混合物24 h。添加冷水(50 mL)及EtOAc (50 mL)，且分離各層。用EtOAc (2×50 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析純化粗殘餘物(用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取)。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾，且在減壓下濃縮濾液，得到粗產物。藉由管柱層析(5→10% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(400 mg，0.813 mmol，77%產率)。步驟 4 ：製備 4-( 8- 氟 -7-(4- 氟 -8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 ) -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.476 mmol)及((5-氟-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(539 mg，0.714 mmol)合併且溶解於二㗁烷(5 mL)中。添加磷酸鉀水溶液(2.0 M，0.95 mL，1.905 mmol)，且用氮重啟通過溶液5分鐘。添加CataCXium A Pd G3 (35 mg，0.048 mmol)，且在100℃下加熱反應混合物1 h。添加冷水(10 mL)及EtOAc (25 mL)，且分離各層。用EtOAc (25 mL)進一步萃取水相。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(400 mg，0.314 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₅H ₅₈F ₃N ₆O ₃Si計算值為815.4；實驗值為815.2。步驟5：製備4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

將4-(8-氟-7-(4-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(350 mg，0.275 mmol)溶解於THF (10 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，0.28 mL，0.28 mmol)，且攪拌反應混合物1 h。添加冷水(20 mL)及EtOAc (50 mL)，且分離各層。有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析在中性氧化鋁上(35% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(200 mg，0.18 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₈F ₃N ₆O ₃計算值為659.3；實驗值為659.2。步驟6：製備7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

將4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(200 mg，0.304 mmol)溶解於MeCN (5 mL)中，且將溶液冷卻至0℃。逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，0.076 mL，0.30 mmol)，且攪拌反應混合物2 h。濃縮反應混合物，且藉由製備型HPLC純化粗殘餘物，在0℃下添加4N HCl之1,4-二㗁烷溶液(0.076 mL，0.304 mmol)。在此溫度下攪拌反應混合物2 h。完成後，在減壓下濃縮混合物。藉由製備型HPLC[稀釋劑：THF:ACN:水(10:60:30)；管柱：X-Select C18 (150×19) mm，5微米；溫度：環境；流動相A：5MM甲酸銨；流動相B：乙腈；流率：15 mL/min]純化殘餘物，得到呈其甲酸鹽形式之所需產物。將此材料分配於EtOAc (20 mL)與飽和NaHCO ₃水溶液(10 mL)之間。分離各層，且有機相經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。凍乾殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(30 mg，0.054 mmol，16%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₀F ₃N ₆O計算值為559.2；實驗值為559.1； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.04 (s, 1H), 8.26 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.69 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 7.63 (t, J = 6.00 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 54.40 Hz, 1H), 4.01-4.15 (m, 2H), 3.88-3.93 (m, 4H), 3.82 (s, 1H), 2.84-3.08 (m, 9H), 2.01-2.14 (m, 3H), 1.77-1.83 (m, 3H)。 中間物 617-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用6,7-二氟萘-1-醇咯替代4-氟萘-1-醇製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₂₉F ₄N ₆O計算值為577.2；實驗值為577.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.05 (s, 1H), 8.28-8.16 (m, 4H), 7.75 (t, J = 8.00 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7.20 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 54.00 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.16-4.04 (m, 2H), 3.93-3.88 (m, 4H), 3.10-2.84 (m, 8H), 2.15-1.78 (m, 5H)。中間物62 7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶

遵循上文通用程序使用5-氟萘-1-醇替代4-氟萘-1-醇製備此中間物。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₀F ₃N ₆O計算值為559.2；實驗值為559.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.05 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 6.80 Hz, 1H), 7.84 (t, J = 0.80 Hz, 1H), 7.74-7.72 (m, 2H), 7.45 (q, J = 8.00 Hz, 1H), 5.22 (d, J = 52 Hz, 1H), 4.15-4.06 (m, 2H), 3.93-3.88 (m, 5H), 3.11-2.99 (m, 8H), 2.84 (d, J = 6.40 Hz, 1H), 2.14-2.01 (m, 2H), 1.83-0.78 (m, 3H)。 中間物 63 8-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-4-( 甲基 ((R)- 吡咯啶 -3- 基 ) 胺基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 )-1- 萘腈步驟1：製備(R)-3-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

在0℃下冷卻2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(320 mg，1.268 mmol)於DCM (10 mL)中之經攪拌溶液，且向其中添加DIPEA (0.487 mL，2.79 mmol)，繼之添加(R)-3-(甲胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(254 mg，1.268 mmol)於DCM(2 mL)中之溶液。在0℃下繼續攪拌1 h。使混合物升溫至室溫且濃縮。藉由急驟管柱層析(梯度5→100% EtOAc/己烷)純化所得殘餘物，得到所需產物(453 mg，1.088 mmol，86%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₇H ₂₀Cl ₂FN ₅O ₂計算值為416.1；實驗值為416.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.02 (s, 1H), 5.45 (br t, J=7.8 Hz, 1H), 3.86 (br t, J=9.6 Hz, 1H), 3.76-3.64 (m, 1H), 3.48-3.40 (m, 2H), 3.46 (s, 3H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 1.51 (s, 9H)。步驟 2 ：製備 (R)-3-((7- 氯 -8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯

向(R)-3-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(300 mg，0.72 mmol)及((2R，7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇、HCl (155 mg，0.79 mmol)於無水THF (5 mL)溶液之經攪拌溶液中經由注射器逐滴添加LiHMDS溶液(1.0 M於THF中，1.80 mL，1.80 mmol)。將混合物攪拌18 h，部分濃縮且藉由急驟管柱層析(梯度50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化，得到所需產物(256 mg，0.475 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₅H ₃₃ClF ₂N ₆O ₃計算值為539.2；實驗值為539.3； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.88 (s, 1H), 5.41 - 5.20 (m, 2H), 4.35 - 4.27 (m, 1H), 4.25 (s, 1H), 3.84 (dd, J=11.5, 8.1 Hz, 1H), 3.74 - 3.56 (m, 1H), 3.51 - 3.40 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.34 - 3.16 (m, 3H), 3.00 (br d, J=9.2 Hz, 1H), 2.38 - 2.08 (m, 5H), 2.02 - 1.84 (m, 3H), 1.51 (s, 9H)。步驟 3 ：製備 (R)-3-((7-(8- 氰基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(1.5 mL)中攪拌(R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(30 mg，0.056 mmol)、8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1-萘腈(23.30 mg，0.083 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.11 mL，0.167 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (4.05 mg，5.57 μmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由急驟管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(21 mg，0.032 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₉F ₂N ₇O ₃計算值為656.3；實驗值為656.3。步驟 4 ：製備 8-(8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-4-( 甲基 ((R)- 吡咯啶 -3- 基 ) 胺基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 )-1- 萘腈

向(R)-3-((7-(8-氰基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(21 mg，0.032 mmol)於乙腈(1 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.080 mL，0.320 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.038 mL，0.480 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₁F ₂N ₇O計算值為556.2；實驗值為556.2。 中間物 64 7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-N- 甲基 -N-((R)- 吡咯啶 -3- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 胺步驟 1 ：製備 (R)-3-((8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-7-(8-(( 三異丙基矽基 ) 乙炔基 ) 萘 -1- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(1.5 mL)中攪拌(R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.093 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(60.5 mg，0.139 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.19 mL，0.278 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3](4.8 mg，9.28 µmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(62 mg，0.076 mmol，82.0%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₆₀F ₂N ₆O ₃Si計算值為811.4；實驗值為811.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.22 (s, 1H), 8.01 - 7.97 (m, 1H), 7.95 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.83 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 2H), 7.48 (t, J=7.7 Hz, 1H), 5.32 (s, 3H), 4.65 - 4.40 (m, 1H), 3.97 - 3.86 (m, 1H), 3.84 - 3.51 (m, 3H), 3.38-3.02 (m, 2H), 2.69-2.36 (m, 3H), 2.30 - 2.05 (m, 3H), 1.80-1.55 (m, 5H), 1.51 (s, 9H), 1.19 - 1.11 (m, 2H), 0.93 - 0.83 (m, 18H), 0.58 (quin, J=7.4 Hz, 3H)。步驟 2 ：製備 (R)-3-((7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )( 甲基 ) 胺基 ) 吡咯啶 -1- 甲酸三級丁酯

向(R)-3-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(285 mg，0.351 mmol)於THF (3 mL)中之經攪拌溶液中添加TBAF (1M於THF中，0.422 mL，0.422 mmol)。攪拌混合物30分鐘。濃縮混合物且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(199 mg，0.304 mmol，86%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₀F ₂N ₆O ₃計算值為655.3；實驗值為655.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.14 (s, 1H), 8.05 - 7.92 (m, 2H), 7.77 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.65 - 7.56 (m, 2H), 7.47 (t, J=7.7 Hz, 1H), 5.44 - 5.15 (m, 2H), 4.45 - 4.23 (m, 2H), 3.93 - 3.83 (m, 1H), 3.76 - 3.53 (m, 1H), 3.43 (d, J=3.7 Hz, 4H), 3.36 - 3.15 (m, 3H), 3.07 - 2.93 (m, 1H), 2.60 (br d, J=7.7 Hz, 1H), 2.42 - 2.10 (m, 6H), 2.02 - 1.88 (m, 3H), 1.51 (s, 9H)。步驟 3 ：製備 7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-N- 甲基 -N-((R)- 吡咯啶 -3- 基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 胺

向(R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(140 mg，0.214 mmol)於乙腈(2 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.54 mL，2.140 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.26 mL，3.210 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₂F ₂N ₆O計算值為555.3；實驗值為555.4。中間物65 7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺步驟1：製備(R)-3-((8-氟-7-(7-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(1.5 mL)中攪拌(R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(31.8 mg，0.059 mmol)、((2-氟-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷(40 mg，0.088 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.12 mL，0.177 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3](4.3 mg，5.89 µmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(62 mg，0.076 mmol，82.0%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₅₉F ₃N ₆O ₃Si計算值為829.7；實驗值為829.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.30 - 9.15 (m, 1H), 7.97 (br d, J=8.0 Hz, 2H), 7.66 - 7.51 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 5.63 - 5.36 (m, 3H), 3.95 - 3.66 (m, 3H), 3.60 - 3.46 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.44 - 3.04 (m, 4H), 2.72 - 2.23 (m, 8H), 1.51 (s, 9H), 0.99 - 0.83 (m, 18H), 0.65 - 0.49 (m, 3H)。步驟2：製備(R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

向(R)-3-((8-氟-7-(7-氟-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.060 mmol)於THF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加TBAF (1M於THF中，0.072 mL，0.072 mmol)。攪拌混合物30分鐘。濃縮混合物且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(22 mg，0.033 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₉F ₃N ₆O ₃計算值為673.3；實驗值為673.3 步驟3：製備7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺

向(R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(22 mg，0.033 mmol)於乙腈(1 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.082 mL，0.327 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.039 mL，0.491 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₁F ₃N ₆O計算值為573.3；實驗值為573.4。中間物66 (5,7-二氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯步驟1：製備(3R)-3-((7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(1.0 mL)中攪拌(R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(33 mg，0.061 mmol)、(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)硼酸(20 mg，0.061 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.12 mL，0.182 mmol)之混合物。添加[(2-二-環己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]甲磺酸鈀(II)(BRETTPHOS PD G3) (5.5 mg，6.06 µmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在85℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(34 mg，0.043 mmol，71%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₄F ₄N ₈O ₅S計算值為789.3；實驗值為789.6。步驟2：(5,7-二氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

向(3R)-3-((7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(34 mg，0.043 mmol)於乙腈(1 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.108，0.431 mmol)。攪拌混合物1 h且藉由添加1-甲基咪唑(0.052 mL，0.646 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₄₄F ₄N ₈O ₅S計算值為689.3；實驗值為689.4。中間物67 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈步驟1：製備4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-氰基-7-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(2 mL)中攪拌(R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(50 mg，0.095 mmol)、(3-氰基-7-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(67 mg，0.162 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.19 mL，0.286 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3](6.9 mg，9.52 µmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物2小時，濃縮且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：95% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/5% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈黃色固體之所需產物(36.8 mg，0.470 mmol，49.5%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₃F ₃N ₈O ₅S計算值為781.3；實驗值為781.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.12 (m, 1H), 7.85 - 7.57 (m, 1H), 7.42 (t, J=8.3 Hz, 0.5H), 7.19 (t, J=8.6 Hz, 0.5H), 5.68 - 5.39 (m, 1H), 5.12 - 4.60 (m, 2H), 4.28 - 3.44 (m, 11H), 3.35 - 3.10 (m, 1H), 2.93 - 2.21 (m, 7H), 1.58 (s, 9H), 1.53 (s, 9H)。步驟2：製備2-胺基-7-氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈

向4-(7-(2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-氰基-7-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(13 mg，0.017 mmol)於乙腈(1 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.042 mL，0.166 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.020 mL，0.250 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂7F ₃N ₈OS計算值為581.2；實驗值為581.3。中間物68 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-N-((3S,4R)-4-氟吡咯啶-3-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺步驟1：製備(3S,4R)-3-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(375 mg，1.484 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液冷卻至0℃。向此溶液中添加DIPEA (0.570 mL，3.27 mmol)，繼之添加(3R,4S)-3-氟-4-(甲胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(如WO2022/173722中所描述來製備，324 mg，1.484 mmol)於2 mL CH2Cl2中之溶液。在0℃下攪拌反應混合物1 h。使混合物升溫至室溫，濃縮，且藉由管柱層析(5→100% EtOAc/己烷)直接純化，得到所需產物(415 mg，0.956 mmol，64%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₇H ₁₉Cl ₂F ₂N ₅O ₂計算值為434.1；實驗值為434.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.12 (s, 1H), 5.71 - 5.41 (m, 1H), 5.40 - 5.15 (m, 1H), 4.01 - 3.69 (m, 4H), 3.67 (s, 3H), 1.53 (s, 9H)。步驟2：製備(3S,4R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

向(3S,4R)-3-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(415 mg，0.956 mmol)及((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇、HCl (206 mg，1.051 mmol)於無水THF (15 mL)溶液之經攪拌溶液中在室溫下經由注射器逐滴添加LiHMDS溶液(1 M於THF中，2.389 mL，2.389 mmol)。將混合物攪拌18 h，濃縮且藉由管柱層析(梯度50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化，得到所需產物(271 mg，0.487 mmol，51%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₅H ₃₂ClF ₃N ₆O ₃計算值為557.2；實驗值為557.4； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.00 (s, 1H), 5.70-5.03 (m, 3H), 4.58 - 4.30 (m, 1H), 4.14 (q, J=7.1 Hz, 1H), 3.98 - 3.69 (m, 4H), 3.61 (s, 3H), 3.55 - 2.83 (m, 4H), 2.56 - 2.17 (m, 3H), 2.11-1.87 (m, 3H), 1.52 (s, 9H)。步驟3：製備(3S,4R)-3-氟-4-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(5 mL)中攪拌(3S,4R)-3-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(120 mg，0.215 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(140 mg，0.323 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.43 mL，0.646 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (15.7 mg，0.022 mmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(149 mg，0.180 mmol，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₆H ₅₉F ₃N ₆O ₃Si計算值為829.4；實驗值為829.7； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.42 - 9.22 (m, 1H), 8.04 - 7.90 (m, 2H), 7.88 - 7.78 (m, 1H), 7.66 - 7.57 (m, 2H), 7.48 (br d, J=3.2 Hz, 1H), 5.85 - 5.12 (m, 4H), 4.60 - 4.35 (m, 1H), 4.05-3.75 (m, 4H), 3.67 (br d, J=6.1 Hz, 3H), 3.55 - 2.96 (m, 4H), 2.15 - 2.00 (m, 3H), 1.92-1.63 (s, 3H), 1.54 (s, 9H), 0.96 - 0.81 (m, 18H), 0.70 - 0.54 (m, 3H)。步驟4：製備(3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-甲酸三級丁酯

將(3S,4R)-3-氟-4-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-甲酸三級丁酯(149 mg，0.180 mmol)溶解於THF (2 mL)中。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，0.216 mL，0.216 mmol)。30分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(97 mg，0.144 mmol，80%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₉F ₃N ₆O ₃計算值為673.3；實驗值為673.7； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.34 - 9.22 (m, 1H), 8.06 - 7.91 (m, 2H), 7.81 - 7.73 (m, 1H), 7.66 - 7.55 (m, 2H), 7.51 - 7.42 (m, 1H), 6.05 - 5.05 (m, 4H), 4.73 - 4.47 (m, 1H), 4.18 - 4.09 (m, 1H), 4.04 - 3.74 (m, 4H), 3.69 (d, J=6.6 Hz, 3H), 3.55 - 2.93 (m, 4H), 2.40 - 2.10 (m, 3H), 1.81-1.59 (m, 3H), 1.54 (s, 9H)。步驟5：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-N-((3S,4R)-4-氟吡咯啶-3-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺

向3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)氮雜環丁烷-1-甲酸三級丁酯(96 mg，0.143 mmol)於乙腈(2 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4 M於二㗁烷中，0.357 mL，1.427 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.171 mL，2.140 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₁F ₃N ₆O計算值為573.3；實驗值為573.4。中間物69 7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(哌啶-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺步驟1：製備4-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯

將2,4,7-三氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶(500 mg，1.981 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液冷卻至0℃。向此溶液中添加DIPEA (0.761 mL，4.36 mmol)，繼之添加4-(甲胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(424 mg，1.981 mmol)於2 mL CH ₂Cl ₂中之溶液。在0℃下攪拌反應混合物1 h。使混合物升溫至室溫，濃縮，且藉由管柱層析(5→100% EtOAc/己烷)直接純化，得到所需產物(758 mg，1.762 mmol，89%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₈H ₂₂Cl ₂FN ₅O ₂計算值為430.1；實驗值為434.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.99 (s, 1H), 4.92 (br s, 1H), 4.34 (br d, J=12.5 Hz, 2H), 4.14 (q, J=7.2 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.92 (br t, J=12.3 Hz, 2H), 1.92 (br d, J=11.7 Hz, 2H), 1.82 (qd, J=12.3, 4.4 Hz, 2H), 1.51 (s, 9H)。步驟2：製備4-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯

向4-((2,7-二氯-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(758 mg，1.762 mmol)及((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲醇、HCl (379 mg，1.938 mmol)於無水THF (15 mL)溶液之經攪拌溶液中在室溫下經由注射器逐滴添加LiHMDS溶液(1 M於THF中，4.4 mL，4.40 mmol)。將混合物攪拌18 h，濃縮且藉由管柱層析(梯度50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化，得到所需產物(606 mg，1.096 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₆H ₃₅ClF ₂N ₆O ₃計算值為553.2；實驗值為553.5； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.86 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.97 - 4.75 (m, 1H), 4.60 - 4.21 (m, 4H), 4.14 (q, J=7.1 Hz, 1H), 4.02 - 3.48 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.95 (s, 4H), 2.51 - 2.15 (m, 3H), 2.16 - 2.11 (m, 1H), 2.03 - 1.63 (m, 5H), 1.51 (s, 9H)。步驟3：製備4-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯

在壓力小瓶中於脫氣二㗁烷(5 mL)中攪拌4-((7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.271 mmol)、三異丙基((8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷(177 mg，0.407 mmol)及磷酸三鉀溶液(1.5 M於水中，0.54 mL，0.814 mmol)之混合物。添加甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物[cataCXium A Palladacycle Gen. 3] (19.8 mg，0.027 mmol)且密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換(3次)。在80℃下加熱混合物3小時，濃縮且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)直接純化，得到所需產物(173 mg，0.210 mmol，77%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₇H ₆₂F ₂N ₆O ₃Si計算值為825.5；實驗值為825.9； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.17 (d, J=1.4 Hz, 1H), 8.01 - 7.96 (m, 1H), 7.94 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.82 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.60 - 7.55 (m, 2H), 7.47 (t, J=7.7 Hz, 1H), 5.48 - 5.13 (m, 2H), 4.94 - 4.80 (m, 1H), 4.33 (m, 5H), 3.34 (d, J=3.8 Hz, 3H), 3.22-2.96 (m, 4H), 2.39 - 2.13 (m, 2H), 2.04 - 1.78 (m, 8H), 1.51 (s, 9H), 0.92 - 0.80 (m, 18H), 0.58 (quin, J=7.4 Hz, 3H)。步驟4：製備4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯

將4-((8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(173 mg，0.210 mmol)溶解於中THF (3 mL)中。逐滴添加TBAF溶液(1.0 M於THF中，0.252 mL，0.252 mmol)。30分鐘之後，直接濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(50→100% EtOAc含有5% Et ₃N/己烷)純化粗殘餘物，得到所需產物(93 mg，0.139 mmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₂F ₂N ₆O ₃計算值為669.3；實驗值為669.6； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.13 (s, 1H), 8.03 - 7.93 (m, 2H), 7.77 (dd, J=7.2, 1.3 Hz, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.51 - 7.42 (m, 1H), 5.59 - 5.24 (m, 1H), 5.06 - 4.73 (m, 2H), 4.65 - 4.21 (m, 5H), 3.39 (s, 3H), 3.33 (s, 1H), 3.10-2.89 (m, 3H), 2.70 (s, 1H), 2.22-2.10 (m, 2H), 2.03 - 1.60 (m, 8H), 1.55 - 1.48 (m, 9H)。步驟5：製備7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(哌啶-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺

向4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-甲酸三級丁酯(93 mg，0.139 mmol)於乙腈(2 mL)中之溶液中添加HCl溶液(4M於二㗁烷中，0.348 mL，1.391 mmol)。攪拌混合物1 h且隨後藉由添加1-甲基咪唑(0.166 mL，2.086 mmol)製成鹼性。濃縮溶液且不經另外純化即直接用於下一步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₄F ₂N ₆O計算值為569.7；實驗值為569.5。

用於製備以下中間物之通用流程：中間物70 2-((S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈步驟1：製備(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸酯

向(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(300 mg，0.502 mmol)於二㗁烷(3 mL)中之經攪拌溶液中添加(2-環丙基苯基)硼酸(163 mg，1.003 mmol)及磷酸鉀溶液(2.0 M，1.0 mL，2.007 mmol)。用氮氣充氣通過溶液5分鐘，且添加CataCXium A Pd G3 (36.5 mg，0.050 mmol)。在微波反應器中在100℃下加熱反應混合物2 h。完成後，用冷水(50 mL)使反應混合物中止且用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。合併之有機層經硫酸鈉乾燥、過濾且濃縮。藉由管柱層析(35% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(200 mg，0.229 mmol，45.7%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₀F ₂N ₇O ₃計算值為680.3；實驗值為680.2。步驟2：製備2-((S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

在室溫下向(S)-2-(氰基甲基)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸苄酯(200 mg，0.294 mmol)於乙醇(5 mL)經攪拌之溶液中添加Pd/C (157 mg, 0.147 mmol)。在氫氛圍(膨脹體)下攪拌所得懸浮液2 h。反應混合物經由矽藻土墊過濾，用DCM/MeOH (1:1，20 mL)墊溶離。濃縮濾液，且藉由逆相管柱層析[THF:水:ACN (50:20:30)作為稀釋劑及75% ACN於10 mM碳酸氫銨中作為溶離劑]純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體之所需產物(80 mg，0.142 mmol，48%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₀H ₃₄F ₂N ₇O計算值為546.3；實驗值為546.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.14 (s, 1H), 7.40-7.31 (m, 3H), 7.04 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 53.20 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 11.60, Hz, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.31 (m, 1H), 3.02-3.10 (m, 6H), 2.74-2.77 (m, 5H), 2.05-2.06 (m, 3H), 1.79-1.82 (m, 4H), 0.78 (dd, J = 2.00, 4.40 Hz, 2H), 0.63 (dd, J = 2.00, 5.00 Hz, 2H)。中間物71 2-((S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

遵循上文通用程序使用(2-環丁基苯基)硼酸替代(2-環丙基苯基)硼酸製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₆F ₂N ₇O計算值為560.3；實驗值為560.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.11 (s, 1H), 7.50-7.48 (m, 2H), 7.35-7.29 (m, 2H), 5.30-5.20 (m, 1H), 4.45-4.43 (m, 2H), 4.17-4.04 (m, 2H), 3.60 (m, 1H), 3.39 (m, 1H), 3.16-3.02 (m, 6H), 2.88-2.74 (m, 5H), 2.05-1.93 (m, 7H), 1.81-1.68 (m, 5H)。中間物72 2-((S)-4-(8-氟-7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

遵循上文通用程序使用3-氟-2-(三氟甲基)苯基硼酸替代(2-環丙基苯基)硼酸製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₈F ₆N ₇O計算值為592.2；實驗值為592.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.11 (s, 1H), 7.87-7.92 (m, 1H), 7.70 (t, J = 8.40 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 53.60 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 13.20 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 10.40 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 10.40 Hz, 1H), 3.40 (m, 1H), 3.07-3.17 (m, 6H), 2.74-2.82 (m, 5H), 2.05-2.14 (m, 3H), 1.77-1.85 (m, 3H)。中間物73 2-((S)-4-(7-(5-胺基-2-(三氟甲基)苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

遵循上文通用程序使用5-胺基-2-(三氟甲基)苯基硼酸替代(2-環丙基苯基)硼酸製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₉F ₅N ₈O計算值為589.2；實驗值為589.2； ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆): δ 9.07 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 2.00, 8.60 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 5.99 (s, 2H), 5.27 (d, J = 53.60 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 11.60 Hz, 1H), 4.10 (m, 2H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.16-3.01 (m, 6H), 2.87-2.74 (m, 5H), 2.15-2.00 (m, 3H), 1.85-1.77 (m, 3H)。中間物74 2-((S)-4-(7-(5-胺基-2-(三氟甲基)苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

遵循上文通用程序使用3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-4-(三氟甲基)酚替代(2-環丙基苯基)硼酸製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₉F ₅N ₇O ₂計算值為590.2；實驗值為590.2。 中間物 752-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(3-羥苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

遵循上文通用程序使用(3-羥苯基)硼酸替代(2-環丙基苯基)硼酸製備此中間物。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₇H ₃₀F ₂N ₇O ₂計算值為522.2；實驗值為522.2。中間物76 3-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈步驟 1 ：製備 3- 溴 -4- 氰基 -1H- 吲哚 -1- 甲酸三級丁酯

在40℃下加熱3-溴-1H-吲哚-4-甲腈(200 mg，0.905 mmol)、Et ₃N (0.265 mL，1.90 mmol)及二-二碳酸第三丁酯(0.231 mL，0.995 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液2 h。濃縮反應混合物，且藉由管柱層析(0→35% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈白色固體之所需產物(270 mg，0.84 mmol，93%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₁₄H ₁₄BrN ₂O ₂計算值為321.0；實驗值為321.0； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.50 (br d, J=8.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.67 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.44 (t, J=7.9 Hz, 1H), 1.70 (s, 9H)。步驟 2 ：製備 4- 氰基 -3-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧硼㖦 -2- 基 )-1H- 吲哚 -1- 甲酸三級丁酯

向3-溴-4-氰基-1H-吲哚-1-甲酸三級丁酯(250 mg，0.778 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(296 mg，1.168 mmol)及醋酸鉀(229 mg，2.335 mmol)於二㗁烷(10 mL)中之懸浮液中添加1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯鈀(II) (28.5 mg，0.039 mmol)。密封反應小瓶，隨後在90℃下加熱12小時。用EtOAc (20 mL)稀釋反應混合物且過濾。濃縮濾液，且藉由管柱層析(5→40% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈透明油狀物之所需產物(105 mg，0.29 mmol，37%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₀H ₂₆BN ₂O ₄計算值為369.2；實驗值為369.2； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 8.48 (d, J=8.6 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.65 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.38 (t, J=8.0 Hz, 1H), 1.70 (s, 9H), 1.45 (s, 12H)。步驟 3 ：製備 3-(4-(4-( 第三丁氧基羰基 ) 哌𠯤 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 )-4- 氰基 -1H- 吲哚 -1- 甲酸三級丁酯

將4-(7-氯-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-甲酸三級丁酯(150 mg，0.286 mmol)、4-氰基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼㖦-2-基)-1H-吲哚-1-甲酸三級丁酯(105 mg，0.286 mmol)及甲磺酸根基(二金剛烷基-n-丁基膦)-2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)二氯甲烷加合物(10.40 mg，0.014 mmol)呈固體合併入可密封反應小瓶中。密封小瓶。將氛圍蒙氣抽空且用氮氣替換。添加脫氣二㗁烷(2 mL)及磷酸鉀溶液(2.0 M於水中，0.43 mL，0.857 mmol)，且在100℃下加熱反應混合物2 h。用EtOAc (10 mL)稀釋反應混合物、過濾且濃縮。藉由管柱層析(0→100% EtOAc/己烷)純化粗殘餘物，得到呈白色蠟狀之所需產物(90 mg，0.13 mmol，44%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₄₅F ₂N ₈O ₅計算值為731.8；實驗值為731.5； ¹H NMR (500 MHz, CD ₃OD) δ 9.17 (s, 1H), 8.63 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.74 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.57 (t, J=7.9 Hz, 1H), 5.32 (d, J=52.2 Hz, 1H), 4.84 - 4.80 (m, 1H), 4.36 - 4.23 (m, 2H), 4.16 - 4.07 (m, 3H), 3.77 - 3.67 (m, 3H), 3.31 - 3.17 (m, 4H), 3.06 - 2.99 (m, 2H), 2.34 (d, J=4.4 Hz, 1H), 2.30 - 2.19 (m, 2H), 2.15 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 1.95 - 1.87 (m, 1H), 1.75 (s, 9H), 1.54 - 1.51 (m, 9H)。步驟4：製備3-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈

向3-(4-(4-(第三丁氧基羰基)哌𠯤-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-4-氰基-1H-吲哚-1-甲酸三級丁酯(85 mg，0.116 mmol)於二㗁烷(1 mL)中之室溫溶液中逐滴添加HCl溶液(4.0 M於二㗁烷中，0.3 mL，1.200 mmol)。在7 h之後，濃縮反應混合物。粗殘餘物不經另外純化即直接用於隨後步驟中(假定全收量)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₂₈H ₂₉F ₂N ₈O計算值為531.6；實驗值為531.3。製備KRAS抑制劑實例 1(Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(中間物1，8.6 mg，0.014 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(12.4 mg，0.072 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(11 μL，0.14 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(20 mg，0.072 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O 含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈淺棕色固體之所需產物(8.9 mg，0.012 mmol，82%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₃S計算值為756.2；實驗值為756.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.33 (br s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.05 - 8.01 (m, 2H), 7.98 (dd, J=9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.22 (d, J=33.9 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.37 - 5.20 (m, 1H), 4.84 (br s, 2H), 4.70 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.54 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.14 (dd, J=10.4, 2.3 Hz, 1H), 4.05 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.90 - 3.70 (m, 2H), 3.15 - 3.01 (m, 3H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.18 - 1.90 (m, 5H), 1.89 - 1.74 (m, 5H)。實例2 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(中間物1A，5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(5.6 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈灰白色固體之所需產物(5.9 mg，7.87 mmol，95%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₆F ₄N ₇O ₃計算值為750.2；實驗值為750.0； ¹H NMR: (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.20 (br s, 1 H), 9.08 (s, 1H), 8.66 (br d, J=4.7 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.1, 5.8 Hz, 1H), 7.90 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.22 - 7.13 (m, 1H), 6.82 (d, J=37.9 Hz, 1H), 5.38 - 5.19 (m, 1H), 4.70 (br d, J=12.0 Hz, 1H), 4.54 (br d, J=12.0 Hz, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 1H), 4.15 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 4.07 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.86 - 3.73 (m, 2H), 3.17 - 3.07 (m, 2H), 3.14 - 3.01 (m, 3H), 2.89 - 2.79 (m, 1H), 2.19 - 1.93 (m, 5H), 1.88 - 1.70 (m, 5H)。實例3 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(中間物1A，5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(6.0 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(3.6 mg，4.71 mmol，57%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₈F ₄N ₇O ₃計算值為764.3；實驗值為764.0； ¹H NMR: (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.22 (br s, 1 H) 9.08 (s, 1H), 8.51 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.98 (dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.22 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.78 (d, J=38.0 Hz, 1H), 5.43 - 5.17 (m, 1H), 4.83 (br s, 2H), 4.70 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 4.53 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 4.12 - 4.04 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 3.23 - 3.05 (m, 3H), 2.94 - 2.81 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.21 - 1.93 (m, 5H), 1.89 - 1.68 (m, 5H)。實例4 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸(5.2 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，5.54 µmol，67%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₄計算值為740.3；實驗值為740.0； ¹H NMR: (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.21 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.31 - 8.28 (m, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 6.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 2H), 7.40 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.81 (d, J=34.7 Hz, 1H), 5.37 - 5.19 (m, 1H), 4.88 - 4.77 (m, 2H), 4.69 (br d, J=12.0 Hz, 1H), 4.53 (br d, J=12.0 Hz, 1H), 4.15 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 4.06 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.89 - 3.69 (m, 2H), 3.18 - 3.02 (m, 3H) 2.87 - 2.81 (m, 1H), 2.18 - 1.91 (m, 5H), 1.89 - 1.73 (m, 5H)。實例5 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙烯酸(5.7 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：82% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/18% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，5.45 µmol，65%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₇F ₄N ₈O ₃計算值為753.3；實驗值為753.0； ¹H NMR: (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.22 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.39 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.80 (d, J=34.4 Hz, 1H), 5.37 - 5.20 (m, 1H), 4.86 - 4.78 (m, 2H), 4.69 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.54 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.14 (dd, J=10.4, 2.2 Hz, 1H), 4.05 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.15 - 3.01 (m, 3H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 4H), 1.90 - 1.72 (m, 6H)。實例6 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(6.0 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，5.37 µmol，64%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₈F ₄N ₇O ₃計算值為764.3；實驗值為764.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.19 (br s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.72 (s, 2H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.80 (d, J=38.2 Hz, 1H), 5.39 - 5.21 (m, 1H), 4.82 (br s, 2H), 4.69 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 4.53 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 4.23 - 4.13 (m, 1H), 4.13 - 4.02 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.86 - 3.69 (m, 2H), 3.15 - 3.01 (m, 3H), 2.92 - 2.78 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.22 - 1.92 (m, 5H), 1.90 - 1.74 (m, 5H)。實例7 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氯-3-(嘧啶-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(5.7 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.033 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：85% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/15% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(3.8 mg，5.06 µmol，61%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₈O ₃計算值為751.3；實驗值為751.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.90 (d, J=4.9 Hz, 2H), 7.97 (dd, J=9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 2H), 7.40 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.79 (d, J=34.2 Hz, 1H), 5.43 - 5.18 (m, 1H), 4.82 (br s, 2H), 4.69 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.54 (br d, J=13.3 Hz, 1H), 4.16 (br d, J=9.6 Hz, 1H), 4.07 (br d, J=9.6 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.87 - 3.72 (m, 2H), 3.14 - 3.01 (m, 3H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 5H), 1.90 - 1.74 (m, 5H)。實例8 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氯-3-(吡啶-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.6 mg，0.025 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4 μL，0.050 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.0 mg，0.025 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(50 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(5.5 mg，7.18 µmol，86%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₆ClF ₃N ₇O ₃計算值為766.3；實驗值為766.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.18 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.70 - 8.67 (m, J=4.7 Hz, 1H), 8.00 - 7.89 (m, 3H), 7.46 (t, J=9.2 Hz, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 5.46 - 5.26 (m, 1H), 4.82 - 4.45 (m, 4H), 4.36 - 4.04 (m, 2H), 3.91 (br s, 1H), 3.88 - 3.65 (m, 2H), 3.23 - 3.08 (m, 3H), 3.01 - 2.85 (m, 1H), 2.32 - 1.92 (m, 6H), 1.90 - 1.77 (m, 4H)。實例9 (Z)-3-(5-溴吡啶-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(7.0 mg，0.012 mmol)及(Z)-3-(5-溴吡啶-2-基)-2-氟丙烯酸(5.7 mg，0.023 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(9 μL，0.117 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'四甲基甲脒六氟磷酸酯(6.5 mg，0.023 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(5.4 mg，6.5 µmol，56%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₅BrF ₄N ₇O ₃計算值為828.2；實驗值為828.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.18 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.79 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.17 (dd, J=8.4, 2.1 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.77 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.18 (br s, 1H), 6.82 (d, J=37.2 Hz, 1H), 5.41 - 5.21 (m, 1H), 4.86 - 4.77 (m, 2H), 4.69 (br d, J=12.7 Hz, 1H), 4.53 (br d, J=12.7 Hz, 1H), 4.25 - 4.03 (m, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.86 - 3.71 (m, 2H), 3.22 - 3.06 (m, 3H), 2.94 - 2.84 (m, 1H), 2.21 - 1.92 (m, 5H), 1.90 - 1.78 (m, 5H)。實施例10 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(3.1 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(5.3 mg，6.9 µmol，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₈F ₄N ₇O ₃計算值為764.3；實驗值為764.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.19 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 1H), 7.78 (dd, J=7.9, 7.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 7.25 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.76 (d, J=38.0 Hz, 1H), 5.37 - 5.18 (m, 1H), 4.88 - 4.77 (m, 2H), 4.68 (br d, J=12.2 Hz, 1H), 4.52 (d, J=12.2 Hz, 1H), 4.14 (dd, J=10.5, 2.2 Hz, 1H), 4.05 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 3.18 - 3.03 (m, 3H), 2.87 - 2.78 (m, 1H), 2.49 (br s, 3H), 2.15 - 1.91 (m, 5H), 1.89 - 1.74 (m, 5H)。實例11 (Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-2-氟丙烯酸(4.2 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.7 mg，6.9 µmol，83%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₃BrF ₄N ₇O ₃S計算值為834.1；實驗值為833.9； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.98 (dd, J=9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.18 (br s, 1H), 7.20 (d, J=36.4 Hz, 1H), 5.41 - 5.21 (m, 1H), 4.86 - 4.78 (m, 2H), 4.73 - 4.64 (m, 1H), 4.58 - 4.48 (m, 1H), 4.23 - 4.14 (m, 1H), 4.13 - 4.01 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.88 - 3.67 (m, 2H), 3.21 - 3.02 (m, 3H), 2.94 - 2.81 (m, 1H), 2.23 - 1.91 (m, 5H), 1.90 - 1.74 (m, 5H)。實例12 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙烯酸(2.8 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：84% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/16% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.7 mg，6.3 µmol，75%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₈O ₃計算值為751.3；實驗值為751.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 10.18 (s, 1H), 9.23 - 9.18 (m, 1H), 9.09 - 9.04 (m, 1H), 8.07 (dd, J=8.7, 1.5 Hz, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 1H), 7.84 - 7.76 (m, 1H), 7.46 (t, J=9.1 Hz, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.06 (d, J=37.3 Hz, 1H), 5.38 - 5.20 (m, 1H), 4.88 - 4.80 (m, 2H), 4.74 - 4.66 (m, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 1H), 4.16 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 4.06 (br d, J=10.3 Hz, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 3.16 - 3.02 (m, 3H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 5H), 1.89 - 1.74 (m, 5H)。實例13 (Z)-N-((1R,4R)-2-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-4-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯胺

將4-(4-((1R,4R)-4-胺基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(3 mg，0.005 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(2.5 mg，0.015 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (300 μL)中。添加1-甲基咪唑(2 μL，0.030 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.2 mg，0.015 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(50 μL)且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(1.2 mg，1.6 µmol，32%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₆F ₄N ₇O ₃計算值為750.3；實驗值為750.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.21 - 10.12 (m, 1H), 9.28 - 9.22 (m, 1H), 9.18 - 8.99 (m, 1H), 8.71 - 8.60 (m, 1H), 8.01 - 7.95 (m, 1H), 7.93 - 7.87 (m, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.22 - 7.12 (m, 1H), 6.95 (d, J=36.8 Hz, 1H), 5.47 - 5.23 (m, 1H), 5.09 - 4.89 (m, 1H), 4.46 - 4.31 (m, 1H), 4.28 - 4.00 (m, 3H), 2.32 - 1.92 (m, 10H), 1.88 - 1.78 (m, 2H)。實例14 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(5甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙烯酸(3.1 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(3.0 mg，3.9 µmol，47%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₄N ₈O ₃S計算值為771.2；實驗值為771.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.97 (dd, J=8.5, 6.1 Hz, 1H), 7.46 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J=35.5 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 0.00 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.87 - 4.78 (m, 2H), 4.75 - 4.63 (m, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 1H), 4.21 - 4.12 (m, 1H), 4.12 - 4.04 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.88 - 3.70 (m, 2H), 3.20 - 3.02 (m, 4H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.20 - 1.97 (m, 4H), 1.89 - 1.75 (m, 5H)。實例15 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙烯酸、氯化鈉加合物(5 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.3 mg，5.4 µmol，65%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₃H ₃₉F ₄N ₇O ₄計算值為794.4；實驗值為794.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.21 (br s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.97 (br dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1H), 7.91 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.73 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 0.00 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.31 (d, J=53.7 Hz, 1H), 4.86 - 4.78 (m, 2H), 4.72 - 4.66 (m, 1H), 4.57 - 4.46 (m, 3H), 4.24 - 4.03 (m, 2H), 3.92 (br s, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 2H), 3.38 (br s, 3H), 3.22 - 3.04 (m, 4H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.19 - 1.97 (m, 4H), 1.90 - 1.78 (m, 5H)。實例16 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(25.0 mg，0.042 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸(21 mg，0.125 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(20 μL，0.250 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(35 mg，0.125 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(31.2 mg，0.027 mmol，65%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₈O ₃計算值為751.3；實驗值為751.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.18 (br s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.99 (d, J=1.4 Hz, 1H), 8.75 (dd, J=2.4, 1.6 Hz, 1H), 8.62 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.90 (d, J=37.7 Hz, 1H), -0.01 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.89 - 4.80 (m, 2H), 4.73 - 4.66 (m, 1H), 4.58 - 4.47 (m, 1H), 4.21 - 4.13 (m, 1H), 4.12 - 4.03 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.88 - 3.68 (m, 2H), 3.20 - 3.02 (m, 4H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.19 - 1.98 (m, 4H), 1.90 - 1.77 (m, 5H)。實例17 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙烯酸(3.1 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.083 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(4.3 mg，5.5 µmol，66%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₈F ₄N ₇O ₄計算值為780.3；實驗值為780.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.22 (br s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.00 - 7.92 (m, 1H), 7.79 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.45 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 2H), 7.18 (s, 1H), 6.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.74 (d, J=37.3 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.81 (br s, 2H), 4.72 - 4.65 (m, 1H), 4.56 - 4.48 (m, 1H), 4.15 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.05 (br d, J=10.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.84 - 3.70 (m, 2H), 3.20 - 3.01 (m, 4H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.18 - 1.97 (m, 4H), 1.89 - 1.74 (m, 5H)。實例18 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(5.0 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙烯酸(7.0 mg，0.042 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(2 μL，0.025 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.7 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：83% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/17% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(0.7 mg，0.9 µmol，11%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₈O ₃計算值為751.3；實驗值為751.2。實例19A及19B 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈及 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將含有不定量量2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈之2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(65 mg，0.12 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(60 mg，0.36 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.2 mL)中。添加1-甲基咪唑(57 μL，0.71 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(100 mg，0.36 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)繼之以製備型SFC (管柱：Chiralpak IH，21 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：85 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：70% CO ₂:30% iPrOH含有0.1% NH4OH)直接純化，得到兩種標題化合物。化合物19A：24 mg，0.03 mmol，29%產率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₄ClF ₂N ₈O ₂計算值為695.2；實驗值為695.2； ¹H NMR (600 MHz, CDCl ₃) δ 9.26 - 9.07 (m, 1H), 8.68 (br d, J=4.4 Hz, 1H), 8.05 - 7.38 (m, 9H), 7.03 - 6.54 (m, 2H), 5.06 - 4.85 (m, 1H), 4.80 - 4.68 (m, 1H), 4.60 - 3.55 (m, 5H), 3.37 - 3.24 (m, 1H), 3.15 - 2.87 (m, 3H), 2.62 (br s, 3H), 2.51 - 2.40 (m, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 1H), 1.98 - 1.76 (m, 4H)。化合物19B：13.6 mg，0.02 mmol，17%產率。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₅F ₂N ₈O ₂計算值為661.3；實驗值為661.3。實例20 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(7 mg，0.01 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(3.4 mg，0.02 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(9 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(6.1 mg，0.02 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：84% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/16% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(4.9 mg，0.007 mmol，64%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₃ClF ₂N ₉O ₂計算值為696.2；實驗值為696.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.31 - 9.15 (m, 1H), 8.93 - 8.84 (m, 2H), 8.16 (br d, J=15.2 Hz, 2H), 7.78 - 7.41 (m, 6H), 6.63 (d, J=35.1 Hz, 1H), 4.96 - 4.73 (m, 1H), 4.60 - 4.36 (m, 3H), 4.30 - 4.10 (m, 3H), 4.01 - 3.93 (m, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 1H), 3.21 - 3.09 (m, 1H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.64 - 2.55 (m, 1H), 2.39 - 2.33 (m, 3H), 2.22 - 2.13 (m, 1H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.73 - 1.58 (m, 3H)。實例21A及21B 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈及 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將含有不定量之量之2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈的2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(35 mg，0.06 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(33 mg，0.19 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.6 mL)中。添加1-甲基咪唑(31 μL，0.39 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(54 mg，0.19 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)繼之以製備型SFC (管柱：Chiralpak IH，21 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：85 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：70% CO ₂:30% iPrOH含有0.1% NH4OH)直接純化，得到兩種標題化合物。化合物21A：7.2 mg，0.01 mmol，16%產率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₂ClF ₂N ₈O ₂S計算值為701.2；實驗值為701.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.31 - 9.12 (m, 1H), 8.16 (s, 4H), 7.77 - 7.48 (m, 5H), 7.10 (d, J=38.9 Hz, 1H), 4.97 - 4.84 (m, 1H), 4.57 - 4.39 (m, 3H), 4.31 - 4.10 (m, 3H), 3.87 - 3.77 (m, 2H), 3.14 - 3.07 (m, 1H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.63 - 2.56 (m, 1H), 2.41 - 2.32 (m, 3H), 2.22 - 2.13 (m, 1H), 2.04 - 1.90 (m, 1H), 1.72 - 1.62 (m, 3H)。化合物21B：3.1 mg，0.005 mmol，7%產率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₃F ₂N ₈O ₂S計算值為667.2；實驗值為667.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.30 (s, 1H), 8.13 - 7.99 (m, 4H), 7.72 - 7.66 (m, 3H), 7.62 - 7.56 (m, 1H), 7.55 - 7.48 (m, 1H), 0.00 (d, J=38.3 Hz, 1H), 4.97 - 4.86 (m, 1H), 4.60 - 4.34 (m, 4H), 4.26 - 4.06 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.18 - 3.07 (m, 2H), 2.10 - 1.96 (m, 1H), 1.85 - 1.63 (m, 3H)。實例22 (S,Z)-1-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將(S)-7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，0.01 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(3.4 mg，0.02 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(8 μL，0.10 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(5.5 mg，0.02 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(5.3 mg，0.008 mmol，80%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₁ClF ₂N ₇O ₂S計算值為662.2；實驗值為662.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.30 - 9.12 (m, 1H), 8.26 - 7.96 (m, 4H), 7.80 - 7.47 (m, 4H), 7.10 (d, J=37.8 Hz, 1H), 4.49 - 4.36 (m, 1H), 4.29 - 4.21 (m, 1H), 4.19 - 4.12 (m, 4H), 4.03 - 3.86 (m, 4H), 2.99 - 2.90 (m, 1H), 2.64 - 2.57 (m, 1H), 2.39 - 2.33 (m, 3H), 2.22 - 2.14 (m, 1H), 1.99 - 1.92 (m, 1H), 1.73 - 1.58 (m, 3H)。實例23 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(24 mg，0.048 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(25 mg，0.15 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.0 mL)中。添加1-甲基咪唑(23 μL，0.29 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(41 mg，0.15 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加氫氧化鈉溶液(1.0 M，0.2 mL)，且再攪拌混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：91% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/9% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化溶液，得到所需產物(12.3 mg，0.018 mmol，38%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₁H ₃₀F ₃N ₈O ₃S計算值為651.2；實驗值為651.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.68 (br s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.05 - 7.98 (m, 2H), 7.18 (t, J=9.3 Hz, 1H), 0.00 (d, J=37.8 Hz, 1H), 7.04 - 7.00 (m, 1H), 6.94 - 6.90 (m, 1H), 4.98 - 4.81 (m, 1H), 4.58 - 4.40 (m, 3H), 4.32 - 4.22 (m, 1H), 4.16 - 4.04 (m, 2H), 3.87 - 3.72 (m, 2H), 3.12 - 3.04 (m, 2H), 3.01 - 2.94 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H), 1.74 - 1.61 (m, 3H)。實例24 2-((S)-4-(7-(8-乙基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(8-乙基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(24 mg，0.044 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(21 mg，0.13 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.9 mL)中。添加1-甲基咪唑(23 μL，0.27 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(37 mg，0.13 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(3.0 mg，0.004 mmol，經3個步驟之產率7%)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₇F ₂N ₈O ₂S計算值為695.3；實驗值為695.5； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (s, 1H), 8.13 - 7.90 (m, 3H), 7.63 - 7.37 (m, 5H), 7.10 (d, J=37.6 Hz, 1H), 4.95 - 4.85 (m, 1H), 4.60 - 4.28 (m, 4H), 4.11 (br s, 1H), 3.15 - 3.07 (m, 2H), 3.06 - 2.96 (m, 1H), 2.79 - 2.68 (m, 1H), 2.42 (br s, 3H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.75 - 1.62 (m, 3H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 0.93 (t, J=7.4 Hz, 2H), 0.85 (q, J=7.4 Hz, 3H)。實例25 (S,Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將(S)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-((-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(6 mg，0.012 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(6 mg，0.04 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(6 μL，0.072 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10 mg，0.036 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(3.1 mg，0.004，40%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₄F ₂N ₇O ₂計算值；實驗值為695.5； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (s, 1H), 8.13 - 7.90 (m, 3H), 7.63 - 7.37 (m, 5H), 7.10 (d, J=37.6 Hz, 1H), 4.95 - 4.85 (m, 1H), 4.60 - 4.28 (m, 4H), 4.11 (br s, 1H), 3.15 - 3.07 (m, 2H), 3.06 - 2.96 (m, 1H), 2.79 - 2.68 (m, 1H), 2.42 (br s, 3H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.75 - 1.62 (m, 3H), 1.61 - 1.50 (m, 1H), 0.93 (t, J=7.4 Hz, 2H), 0.85 (q, J=7.4 Hz, 3H)。實例26 (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(4-((1R,5S)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(10 mg，0.017 mmol)及(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸(6 mg，0.033 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(13 μL，0.17 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.3 mg，0.03 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O 含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(11.3 mg，0.014 mmol，89%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₆F ₄N ₈O ₃計算值為765.3；實驗值為765.2。實例27 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(20 mg，0.035 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(17 mg，0.10 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (350 μL)中。添加1-甲基咪唑(17 μL，0.17 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(29 mg，0.10 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(15.6 mg，0.021 mmol，61%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₃計算值為724.3；實驗值為724.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.65 (dd, J=4.4, 1.3 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.3, 6.0 Hz, 1H), 7.91 - 7.86 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 6.66 (d, J=38.7 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.18 - 4.03 (m, 7H), 3.97 (s, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 3.16 - 3.00 (m, 4H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.15 - 2.10 (m, 1H), 2.08 - 2.06 (m, 1H), 2.05 - 1.97 (m, 1H), 1.88 - 1.73 (m, 3H)。實例28 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(20 mg，0.035 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(18 mg，0.10 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (350 μL)中。添加1-甲基咪唑(17 μL，0.17 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(29 mg，0.10 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(11 mg，0.015 mmol，43%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₂F ₄N ₇O ₃S計算值為730.2；實驗值為730.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 3H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.11 (d, J=37.5 Hz, 1H), 0.00 (d, J=54.4 Hz, 1H), 4.22 - 4.04 (m, 7H), 3.97 (s, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 4H), 3.16 - 3.02 (m, 2H), 2.95 - 2.79 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 2H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.90 - 1.74 (m, 3H)。實例29 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(33 mg，0.06 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(20 mg，0.12 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (610 μL)中。添加1-甲基咪唑(29 μL，0.37 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(34 mg，0.12 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(23 mg，0.033 mmol，53%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₃N ₇O ₂計算值為690.3；實驗值為690.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 (s, 1H), 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.19 - 8.11 (m, 2H), 7.93 - 7.84 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.63 - 7.55 (m, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 1H), 6.66 (d, J=38.5 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.4 Hz, 1H), 4.19 - 4.08 (m, 5H), 4.00 - 3.82 (m, 4H), 3.71 (s, 1H), 3.13 - 3.01 (m, 4H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.15 - 2.11 (m, 1H), 2.07 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 3H)。實例30 (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶、HCl鹽(7 mg，0.013 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.5 mg，0.027 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(11 μL，0.13 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.6 mg，0.27 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：86% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/14% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.9 mg，0.009 mmol，65%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₅F ₃N ₉O ₂計算值為670.3；實驗值為670.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.12 (br s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.67 - 8.59 (m, 1H), 7.94 - 7.85 (m, 1H), 7.79 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.59 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 6.66 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.33 (d, J=54.9 Hz, 1H), 4.34 - 4.10 (m, 7H), 4.03 - 3.91 (m, 2H), 3.89 - 3.81 (m, 2H), 3.28 - 3.17 (m, 3H), 3.01 - 2.83 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.25 - 2.08 (m, 2H), 1.96 - 1.92 (m, 1H), 1.88 - 1.78 (m, 2H)。實例31 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(18 mg，0.032 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(22 mg，0.13 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(26 μL，0.32 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(36 mg，0.13 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(16.1 mg，0.022 mmol，70%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₂計算值為708.3；實驗值為708.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.14 (s, 1H), 8.65 (d, J=4.7 Hz, 1H), 8.26 - 8.18 (m, 2H), 7.93 - 7.85 (m, 1H), 7.82 - 7.76 (m, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.63 - 7.58 (m, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 1H), 6.66 (d, J=38.5 Hz, 1H), 5.33 (d, J=54.5 Hz, 1H), 4.27 - 4.07 (m, 8H), 4.05 (s, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 3H), 3.24 - 3.17 (m, 2H), 3.00 - 2.86 (m, 1H), 2.29 - 2.03 (m, 3H), 1.91 - 1.75 (m, 3H)。實例32 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(60 mg，0.105 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(73 mg，0.42 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (2.0 mL)中。添加1-甲基咪唑(67 μL，0.84 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(120 mg，0.42 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(69 mg，0.092 mmol，88%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₁F ₆N ₈O ₂S計算值為729.2；實驗值為729.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 2H), 7.94 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.87 - 7.81 (m, 1H), 7.80 - 7.73 (m, 1H), 7.59 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.09 (d, J=37.3 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.5 Hz, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 1H), 4.57 - 4.49 (m, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.19 - 4.07 (m, 1H), 4.08 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.87 - 3.74 (m, 2H), 3.14 - 3.06 (m, 6H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.17 - 2.10 (m, 1H), 2.08 - 2.03 (m, 1H), 2.02 - 1.97 (m, 1H), 1.87 - 1.74 (m, 3H)。實例33 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(22 mg，0.038 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(13 mg，0.08 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.4 mL)中。添加1-甲基咪唑(18 μL，0.23 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(22 mg，0.08 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(19 mg，0.026 mmol，68%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₃F ₆N ₈O ₂計算值為723.3；實驗值為723.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.19 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.3 Hz, 1H), 7.94 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.90 (td, J=7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.86 - 7.82 (m, 1H), 7.81 - 7.74 (m, 2H), 7.59 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=7.1, 5.2 Hz, 1H), 6.66 (d, J=39.0 Hz, 1H), 5.29 (d, J=55.4 Hz, 1H), 4.97 - 4.85 (m, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 1H), 4.26 - 4.03 (m, 3H), 3.87 - 3.73 (m, 2H), 3.27 - 3.15 (m, 3H), 3.15 - 3.03 (m, 3H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.22 - 1.97 (m, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 3H)。實例34 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(22 mg，0.039 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(14 mg，0.08 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.4 mL)中。添加1-甲基咪唑(19 μL，0.24 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(22 mg，0.08 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(10.4 mg，0.014 mmol，36%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₂F ₃N ₈O ₂S計算值為717.2；實驗值為717.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.28 (s, 1H), 8.39 (dd, J=6.4, 3.0 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.14 - 8.09 (m, 1H), 8.05 - 8.02 (m, 1H), 8.02 - 8.00 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.11 (d, J=36.7 Hz, 1H), 5.30 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 1H), 4.58 - 4.44 (m, 2H), 4.26 - 4.07 (m, 3H), 3.87 - 3.68 (m, 2H), 3.30 - 3.18 (m, 2H), 3.16 - 3.03 (m, 4H), 2.91 - 2.80 (m, 1H), 2.18 - 1.98 (m, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 3H)。實例35 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(22 mg，0.039 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(13 mg，0.08 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.4 mL)中。添加1-甲基咪唑(19 μL，0.24 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(22 mg，0.08 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(13.4 mg，0.019 mmol，48%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₄F ₃N ₈O ₂S計算值為711.3；實驗值為717.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.28 (s, 1H), 8.66 (br d, J=4.8 Hz, 1H), 8.39 (dd, J=6.0, 3.0 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.13 - 8.09 (m, 1H), 7.90 (td, J=7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.80 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.39 (dd, J=6.9, 4.9 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.1 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.4 Hz, 1H), 5.00 - 4.83 (m, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 2H), 4.19 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 1H), 4.10 (d, J=10.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.68 (m, 2H), 3.19 - 3.00 (m, 6H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 2.17 - 1.99 (m, 3H), 1.89 - 1.75 (m, 3H)。實例36 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(19 mg，0.036 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(12 mg，0.07 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.75 mL)中。添加1-甲基咪唑(29 μL，0.36 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(20 mg，0.07 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(14 mg，0.02 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₄F ₃N ₈O ₂計算值為679.3；實驗值為697.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 (s, 1H), 8.65 (br d, J=3.0 Hz, 1H), 8.19 - 8.13 (m, 2H), 7.93 - 7.87 (m, 1H), 7.80 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.76 (br d, J=6.9 Hz, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 6.68 (d, J=37.7 Hz, 1H), 5.00 - 4.84 (m, 1H), 4.59 - 4.48 (m, 2H), 4.44 (br dd, J=10.7, 4.7 Hz, 1H), 4.27 (dd, J=10.7, 6.1 Hz, 1H), 4.22 - 4.09 (m, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 3H), 3.13 - 3.09 (m, 1H), 2.99 - 2.92 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 1.99 - 1.92 (m, 1H), 1.71 - 1.60 (m, 3H)。實例37 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(19 mg，0.036 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(12 mg，0.07 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.75 mL)中。添加1-甲基咪唑(29 μL，0.36 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(20 mg，0.07 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(15.6 mg，0.02 mmol，64%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₂F ₃N ₈O ₂S計算值為685.3；實驗值為685.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 (s, 1H), 8.21 - 8.12 (m, 2H), 8.05 - 7.97 (m, 2H), 7.76 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.11 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.01 - 4.83 (m, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 2H), 4.44 (dd, J=10.7, 4.6 Hz, 1H), 4.27 (dd, J=10.7, 6.1 Hz, 1H), 4.22 - 4.09 (m, 1H), 3.88 - 3.78 (m, 2H), 3.15 - 3.09 (m, 2H), 3.01 - 2.93 (m, 2H), 2.66 - 2.57 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.23 - 2.15 (m, 1H), 2.00 - 1.93 (m, 1H), 1.73 - 1.60 (m, 3H)。實例38 (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(12 mg，0.023 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(7.7 mg，0.046 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(18 μL，0.23 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(13 mg，0.046 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(8.2 mg，0.012 mmol，53%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₅F ₃N ₉O ₂計算值為670.3；實驗值為670.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.25 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.94 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.91 - 7.87 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.48 (d, J=6.9 Hz, 1H), 7.38 (dd, J=7.2, 5.0 Hz, 1H), 7.28 (t, J=7.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.9 Hz, 1H), 5.33 (d, J=53.7 Hz, 1H), 4.28 - 4.07 (m, 7H), 4.00 - 3.83 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 3.24 - 3.18 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 1H), 2.94 - 2.83 (m, 1H), 2.25 - 2.03 (m, 3H), 1.95 - 1.75 (m, 3H)。實例39 (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(12 mg，0.023 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(8 mg，0.046 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(18 μL，0.23 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(13 mg，0.046 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(11 mg，0.016 mmol，70%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₃F ₃N ₉O ₂S計算值為676.2；實驗值為676.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.25 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.04 - 7.98 (m, 2H), 7.96 - 7.91 (m, 1H), 7.50 - 7.46 (m, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 0.00 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.30 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.27 - 4.06 (m, 7H), 4.00 - 3.84 (m, 4H), 3.64 (s, 3H), 3.15 - 3.01 (m, 2H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.22 - 2.01 (m, 3H), 1.90 - 1.74 (m, 3H)。實例40 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.028 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(9.3 mg，0.055 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.55 mL)中。添加1-甲基咪唑(13 μL，0.17 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(16 mg，0.055 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(11.3 mg，0.016 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₂F ₅N ₈O ₂計算值為691.3；實驗值為691.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.22 (s, 1H), 8.65 (br d, J=3.7 Hz, 1H), 7.93 - 7.86 (m, 1H), 7.79 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.56 - 7.50 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 0.00 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=55.0 Hz, 1H), 4.98 - 4.80 (m, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 1H), 4.17 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.14 - 4.05 (m, 2H), 4.09 (d, J=10.4 Hz, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 2H), 3.16 - 3.01 (m, 5H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.20 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 3H)。實例41 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.028 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(9.6 mg，0.055 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.55 mL)中。添加1-甲基咪唑(13 μL，0.17 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(16 mg，0.055 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(8 mg，0.015 mmol，56%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₀F ₅N ₈O ₂S計算值為697.2；實驗值為697.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.22 (s, 1H), 8.07 - 7.97 (m, 2H), 7.57 - 7.50 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.10 (d, J=38.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.95 - 4.81 (m, 1H), 4.58 - 4.48 (m, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 1H), 4.22 - 4.04 (m, 4H), 3.87 - 3.70 (m, 2H), 3.15 - 3.00 (m, 5H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.15 - 2.00 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H)。實例42 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.026 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(8.7 mg，0.052 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(13 μL，0.16 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.052 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：73% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/27% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(11.9 mg，0.016 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₃F ₆N ₈O ₂計算值為723.3；實驗值為723.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (s, 1H), 8.66 (br d, J=4.3 Hz, 1H), 7.93 - 7.87 (m, 2H), 7.82 - 7.74 (m, 1H), 7.60 - 7.51 (m, 2H), 7.39 (dd, J=6.9, 5.0 Hz, 1H), 7.03 (t, J=55.0 Hz, 1H), 6.66 (d, J=39.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.8 Hz, 1H), 4.97 - 4.81 (m, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 2H), 4.21 - 4.05 (m, 3H), 3.87 - 3.61 (m, 2H), 3.27 - 3.20 (m, 1H), 3.16 - 2.99 (m, 4H), 2.91 - 2.76 (m, 1H), 2.21 - 1.96 (m, 3H), 1.88 - 1.70 (m, 3H)。實例43 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.026 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(9.1 mg，0.052 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(13 μL，0.16 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.052 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(8.2 mg，0.011 mmol，43%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₁F ₆N ₈O ₂S計算值為729.2；實驗值為729.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (s, 1H), 8.05 - 7.97 (m, 2H), 7.94 - 7.84 (m, 1H), 7.61 - 7.49 (m, 2H), 7.10 (d, J=37.3 Hz, 1H), 7.03 (t, J=54.9 Hz, 1H), 5.28 (d, J=53.9 Hz, 1H), 5.00 - 4.84 (m, 1H), 4.51 (br s, 2H), 4.25 - 4.05 (m, 4H), 3.87 - 3.67 (m, 2H), 3.27 - 3.21 (m, 1H), 3.12 - 2.99 (m, 4H), 2.88 - 2.73 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 3H), 1.87 - 1.69 (m, 3H)。實例44 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.025 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(8.5 mg，0.052 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(12 μL，0.15 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(14 mg，0.051 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：73% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/27% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(14.1 mg，0.019 mmol，72%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₂F ₇N ₈O ₂計算值為741.3；實驗值為741.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.0 Hz, 1H), 8.03 (dd, J=8.9, 5.2 Hz, 1H), 7.93 - 7.85 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 1H), 7.56 (br d, J=7.5 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=6.9, 5.3 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.5 Hz, 1H), 5.29 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.98 - 4.83 (m, 1H), 4.60 - 4.49 (m, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.09 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.19 - 4.05 (m, 1H), 3.87 - 3.65 (m, 2H), 3.24 - 3.18 (m, 1H), 3.20 - 3.01 (m, 4H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.17 - 1.96 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H)。實例45 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.025 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(8.7 mg，0.051 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(12 μL，0.15 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(14 mg，0.051 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(13.7 mg，0.017 mmol，68%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₀F ₇N ₈O ₂S計算值為747.2；實驗值為747.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.08 - 7.98 (m, 3H), 7.69 - 7.60 (m, 1H), 7.58 - 7.53 (m, 1H), 7.10 (d, J=38.2 Hz, 1H), 5.27 (d, J=55.2 Hz, 1H), 4.95 - 4.84 (m, 1H), 4.52 (br d, J=13.0 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.08 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.20 - 4.05 (m, 1H), 3.89 - 3.70 (m, 2H), 3.15 - 3.00 (m, 6H), 2.87 - 2.78 (m, 1H), 2.18 - 1.95 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H)。實例46 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(15 mg，0.025 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(8.5 mg，0.049 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.2 mL)中。添加1-甲基咪唑(12 μL，0.15 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(14 mg，0.049 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：68% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/32% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(6 mg，0.017 mmol，30%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₀ClF ₆N ₈O ₂S計算值為763.2；實驗值為763.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.05 - 8.00 (m, J=6.3 Hz, 2H), 8.00 - 7.96 (m, 1H), 7.86 (br d, J=8.0 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.09 (d, J=36.6 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.99 - 4.84 (m, 1H), 4.57 - 4.50 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.17 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.09 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.20 - 4.05 (m, 1H), 3.88 - 3.70 (m, 2H), 3.25 - 2.96 (m, 6H), 2.86 - 2.77 (m, 1H), 2.18 - 1.98 (m, 3H), 1.89 - 1.74 (m, 3H)。實例47 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(10 mg，0.018 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(6.4 mg，0.037 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (930 μL)中。添加1-甲基咪唑(9 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10 mg，0.037 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(12 mg，0.017 mmol，92%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₂F ₃N ₇O ₂S計算值為696.2；實驗值為696.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 (s, 1H), 8.14 (dd, J=12.2, 8.3 Hz, 2H), 8.01 (br d, J=9.3 Hz, 2H), 7.74 - 7.66 (m, 2H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.11 (d, J=37.3 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.9 Hz, 1H), 4.19 - 3.91 (m, 9H), 3.71 (s, 1H), 3.08 (br d, J=11.9 Hz, 3H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.74 (m, 3H)。實例48 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(6 mg，0.011 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嗒𠯤-2-基)丙烯酸(3.7 mg，0.022 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (550 μL)中。添加1-甲基咪唑(5 μL，0.067 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(6.2 mg，0.022 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.9 mg，0.008 mmol，77%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₄F ₃N ₈O ₂計算值為691.3；實驗值為691.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.73 (br s, 1H), 8.61 (br s, 1H), 8.14 (br dd, J=11.8, 8.4 Hz, 2H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 7.65 - 7.51 (m, 2H), 6.75 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.8 Hz, 1H), 4.20 - 3.97 (m, 9H), 3.71 (s, 1H), 3.11 - 3.00 (m, 4H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.12 (br s, 1H), 2.07 (br d, J=2.9 Hz, 1H), 2.04 - 1.97 (m, 1H), 1.87 - 1.71 (m, 3H)。實例49 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈

將8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈(5 mg，9.2 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(3.1 mg，0.018 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.092 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(5.2 mg，0.018 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(4.7 mg，0.006 mmol，74%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₄F ₃N ₈O ₂計算值為691.3；實驗值為691.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.21 (s, 1H), 8.64 (br s, 1H), 8.46 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 8.32 - 8.27 (m, 1H), 8.14 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.86 (m, 1H), 7.86 - 7.82 (m, 1H), 7.81 - 7.77 (m, 2H), 7.77 - 7.71 (m, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 6.65 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.20 - 4.06 (m, 7H), 4.03 - 3.82 (m, 2H), 3.21 - 3.00 (m, 4H), 2.87 - 2.78 (m, 1H), 2.16 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 3H)。實例50 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈

將8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈(5 mg，9.2 µmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(3.2 mg，0.018 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.092 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(5.2 mg，0.018 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(5.3 mg，0.007 mmol，81%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₂F ₃N ₈O ₂S計算值為697.2；實驗值為697.0； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.21 (s, 1H), 8.46 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 8.29 (br d, J=7.9 Hz, 1H), 8.14 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 8.04 - 7.96 (m, 2H), 7.87 - 7.81 (m, 1H), 7.81 - 7.78 (m, 1H), 7.77 - 7.70 (m, 1H), 7.10 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.28 (d, J=53.9 Hz, 1H), 4.22 - 4.07 (m, 7H), 4.02 - 3.86 (m, 2H), 3.20 - 3.02 (m, 4H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.18 - 2.00 (m, 3H), 1.89 - 1.73 (m, 3H)。實例51 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(24 mg，0.043 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(14 mg，0.086 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.0 mL)中。添加1-甲基咪唑(34 μL，0.43 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(24 mg，0.086 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(16.9 mg，0.023 mmol，56%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₆F ₃N ₁₀O ₂計算值為709.3；實驗值為709.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.1 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.94 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.80 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 1H), 7.29 (t, J=7.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J=37.9 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.86 (m, 1H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 4.18 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.10 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 4.22 - 4.06 (m, 1H), 3.89 - 3.71 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.19 - 3.01 (m, 6H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.07 (br d, J=1.8 Hz, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H)。實例52 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(24 mg，0.043 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(15 mg，0.086 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.0 mL)中。添加1-甲基咪唑(34 μL，0.43 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(24 mg，0.086 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(20.5 mg，0.029 mmol，67%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₄F ₃N ₁₀O ₂S計算值為715.0；實驗值為715.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.05 - 7.99 (m, 2H), 7.94 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.29 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.11 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=53.9 Hz, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.60 - 4.53 (m, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 4.18 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.10 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 1H), 3.88 - 3.75 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.18 - 3.03 (m, 6H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.16 - 1.99 (m, 3H), 1.88 - 1.71 (m, 3H)。實例53 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，0.009 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(6.2 mg，0.036 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.09 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10 mg，0.036 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：73% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/27% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.3 mg，0.003 mmol，36%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₁F ₄N ₇O ₂S計算值為714.2；實驗值為714.3。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.13 (s, 1H), 8.26 - 8.16 (m, 2H), 7.73 - 7.64 (m, 2H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.11 (d, J=37.3 Hz, 1H), 5.31 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.25 - 4.07 (m, 8H), 4.05 (s, 1H), 4.02 - 3.86 (m, 4H), 3.14 - 3.01 (m, 2H), 2.93 - 2.81 (m, 1H), 2.23 - 2.00 (m, 3H), 1.90 - 1.68 (m, 3H)。實例54 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(5 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸(5.5 mg，0.035 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (300 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.6 μL，0.07 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.8 mg，0.035 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：84% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/16% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(5.6 mg，0.008 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₂F ₄N ₇O ₄計算值為714.2；實驗值為714.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.18 (br s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97 (dd, J=8.9, 6.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.40 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.72 (d, J=35.6 Hz, 1H), 5.30 (d, J=53.3 Hz, 1H), 4.22 - 4.06 (m, 8H), 3.97 (s, 1H), 3.95 - 3.90 (m, 2H), 3.15 - 3.04 (m, 3H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 2.05 - 2.00 (m, 1H), 1.89 - 1.72 (m, 3H)。實例55 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(5 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸(5.9 mg，0.035 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (300 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.6 μL，0.07 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.8 mg，0.035 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：87% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/13% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(6 mg，0.008 mmol，92%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₈O ₃計算值為725.3；實驗值為725.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.18 (br s, 1H), 9.20 (dd, J=4.9, 1.6 Hz, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.05 (dd, J=8.8, 1.4 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.79 (dd, J=8.5, 4.8 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.92 (d, J=38.2 Hz, 1H), 5.31 (d, J=55.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.00 (m, 10H), 3.97 (s, 1H), 3.95 - 3.90 (m, 1H), 3.15 - 3.04 (m, 2H), 2.94 - 2.82 (m, 1H), 2.20 - 2.09 (m, 2H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.89 - 1.71 (m, 3H)。實例56 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(5 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸(5.9 mg，0.035 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (300 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.6 μL，0.07 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.8 mg，0.035 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：85% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/15% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(6.1 mg，0.008 mmol，95%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₈O ₃計算值為725.3；實驗值為725.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.18 (br s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.73 (d, J=1.4 Hz, 1H), 8.61 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.97 (dd, J=9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 7.40 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.18 (m, 1H), 6.75 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.30 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.22 - 4.03 (m, 9H), 3.97 (s, 1H), 3.95 - 3.89 (m, 2H), 3.15 - 3.03 (m, 2H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.22 - 2.09 (m, 2H), 2.06 - 1.98 (m, 1H), 1.90 - 1.73 (m, 3H)。實例57 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(5 mg，0.008 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(5.9 mg，0.035 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (300 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.6 μL，0.07 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.8 mg，0.035 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：86% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/14% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(5.2 mg，0.007 mmol，82%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₈O ₃計算值為725.3；實驗值為725.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.19 (br s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.89 (d, J=4.8 Hz, 2H), 7.97 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.39 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.63 - 6.63 (m, 1H), 6.63 (d, J=35.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.20 - 3.99 (m, 9H), 3.97 (s, 1H), 3.13 - 3.05 (m, 2H), 3.04 - 2.99 (m, 1H), 2.87 - 2.76 (m, 1H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 2.08 - 2.05 (m, 1H), 2.04 - 1.98 (m, 1H), 1.87 - 1.73 (m, 3H)。實例58 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(40 mg，0.068 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(47 mg，0.27 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.4 mL)中。添加1-甲基咪唑(44 μL，0.55 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(77 mg，0.027 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：82% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/18% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(29.4 mg，0.04 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇F ₃N ₇O ₃S計算值為740.3；實驗值為740.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (br s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.03 - 7.94 (m, 3H), 7.46 (t, J=9.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J=37.6 Hz, 1H), 4.54 - 4.44 (m, 1H), 4.22 - 4.07 (m, 5H), 4.02 - 3.82 (m, 5H), 3.27 - 3.10 (m, 2H), 2.41 - 2.10 (m, 3H), 1.89 - 1.82 (m, 1H), 1.77 - 1.19 (m, 10H)。實例59 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(40 mg，0.068 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(46 mg，0.27 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1.4 mL)中。添加1-甲基咪唑(44 μL，0.55 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(77 mg，0.027 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且再攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：82% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/18% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(29.6 mg，0.04 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₃計算值為734.3；實驗值為734.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.17 (br s, 1H), 9.12 (s, 1H), 8.67 - 8.63 (m, 1H), 7.98 (dd, J=9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.92 - 7.87 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.20 (d, J=2.4 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.8 Hz, 1H), 4.67 - 4.33 (m, 1H), 4.25 - 4.05 (m, 5H), 4.02 - 3.79 (m, 5H), 3.58 - 3.39 (m, 4H), 2.40 - 2.12 (m, 1H), 1.88 - 1.33 (m, 10H)。實例60 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(5 mg，8.6 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(2.9 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.086 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.8 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到所需產物(1.8 mg，2 μmol，29%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₆F ₄N ₉O ₃計算值為730.3；實驗值為730.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.87 (s, 1H), 8.65 (br d, J=3.7 Hz, 1H), 7.92 - 7.86 (m, 1H), 7.78 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 7.03 - 6.97 (m, 1H), 6.78 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 6.76 - 6.70 (m, 1H), 6.64 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.77 (m, 1H), 4.47 - 4.40 (m, 1H), 4.38 - 4.31 (m, 1H), 4.30 - 4.23 (m, 1H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 4.15 - 3.87 (m, 6H), 3.79 - 3.54 (m, 4H), 3.13 - 3.01 (m, 3H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.13 - 1.98 (m, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 3H)。實例61 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(5 mg，8.6 µmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(3.0 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.086 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(4.8 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到所需產物(2.3 mg，3 μmol，36%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₄F ₄N ₉O ₃S計算值為736.2；實驗值為736.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.87 (s, 1H), 8.04 - 7.99 (m, J=6.2 Hz, 2H), 7.08 (d, J=37.2 Hz, 1H), 7.03 - 6.97 (m, 1H), 6.80 - 6.71 (m, 2H), 5.27 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.92 - 4.82 (m, 1H), 4.43 (br d, J=14.0 Hz, 1H), 4.39 - 4.30 (m, 1H), 4.29 - 4.23 (m, 1H), 4.22 - 4.17 (m, 1H), 4.15 - 4.10 (m, 2H), 4.07 - 4.02 (m, 2H), 4.02 - 3.97 (m, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 2H), 3.78 - 3.60 (m, 3H), 3.13 - 3.03 (m, 3H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.12 - 1.99 (m, 3H), 1.85 - 1.78 (m, 3H)。實例62 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(25 mg，0.045 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(23 mg，0.14 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(22 μL，0.27 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(38 mg，0.14 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(17 mg，0.024 mmol，52%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₅F ₃N ₇O ₂S計算值為710.3；實驗值為710.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.10 - 9.01 (m, 1H), 8.19 - 8.10 (m, 2H), 8.07 - 7.95 (m, 2H), 7.77 - 7.66 (m, 2H), 7.65 - 7.55 (m, 2H), 7.09 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.27 (d, J=53.9 Hz, 1H), 5.09 - 4.84 (m, 1H), 4.52 - 4.31 (m, 1H), 4.25 - 3.91 (m, 5H), 3.85 - 3.67 (m, 3H), 3.12 - 2.99 (m, 2H), 2.88 - 2.77 (m, 2H), 2.15 - 1.97 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.52 - 1.39 (m, 3H)。實例63 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(25 mg，0.045 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(22 mg，0.14 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(22 μL，0.27 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(38 mg，0.14 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：73% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/27% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(20.4 mg，0.029 mmol，64%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為704.3；實驗值為704.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.13 - 8.95 (m, 1H), 8.70 - 8.58 (m, 1H), 8.24 - 8.09 (m, 2H), 7.96 - 7.85 (m, 1H), 7.83 - 7.76 (m, 1H), 7.74 - 7.68 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.38 (dd, J=7.7, 5.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J=38.3 Hz, 1H), 5.27 (d, J=53.6 Hz, 1H), 5.09 - 4.83 (m, 1H), 4.53 - 4.31 (m, 1H), 4.28 - 3.93 (m, 5H), 3.83 - 3.64 (m, 3H), 3.12 - 3.01 (m, 3H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.19 - 1.94 (m, 3H), 1.87 - 1.73 (m, 3H), 1.53 - 1.38 (m, 3H)。實例64 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(25 mg，0.042 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(22 mg，0.127 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(20 μL，0.26 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(36 mg，0.127 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(17.4 mg，0.023 mmol，55%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₄F ₄N ₇O ₃S計算值為744.2；實驗值為744.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.11 - 9.00 (m, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 3H), 7.49 - 7.38 (m, 2H), 7.22 - 7.17 (m, 1H), 7.15 - 7.02 (m, 1H), 5.27 (d, J=54.1 Hz, 1H), 5.10 - 4.82 (m, 1H), 4.51 - 4.31 (m, 1H), 4.26 - 3.78 (m, 8H), 3.13 - 3.01 (m, 4H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.17 - 1.95 (m, 3H), 1.87 - 1.71 (m, 3H), 1.51 - 1.37 (m, 3H)。實例65 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(25 mg，0.042 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(21 mg，0.127 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(20 μL，0.26 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(36 mg，0.127 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(17.1 mg，0.023 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₄N ₇O ₃計算值為738.3；實驗值為738.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.10 - 8.99 (m, 1H), 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.03 - 7.95 (m, 1H), 7.92 - 7.85 (m, 1H), 7.85 - 7.76 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 2H), 7.24 - 7.14 (m, 1H), 6.63 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.27 (d, J=55.0 Hz, 1H), 5.08 - 4.81 (m, 1H), 4.52 - 4.32 (m, 1H), 4.27 - 3.76 (m, 6H), 3.14 - 2.98 (m, 4H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.15 - 1.95 (m, 3H), 1.87 - 1.73 (m, 3H), 1.50 - 1.38 (m, 3H)。實例66 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將5-乙炔基-6-氟-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)萘-2-醇(25 mg，0.042 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(21 mg，0.127 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(20 μL，0.26 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(36 mg，0.127 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(3.8 mg，0.005 mmol，12%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₄N ₈O ₃計算值為739.3；實驗值為739.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 - 9.00 (m, 1H), 8.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 8.03 - 7.93 (m, 1H), 7.51 - 7.38 (m, 3H), 7.25 - 7.16 (m, 1H), 6.60 (d, J=35.2 Hz, 1H), 5.27 (d, J=53.6 Hz, 1H), 5.11 - 4.86 (m, 1H), 4.51 - 4.31 (m, 1H), 4.19 - 4.01 (m, 3H), 4.00 - 3.87 (m, 2H), 3.85 - 3.73 (m, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 4H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.15 - 1.95 (m, 3H), 1.87 - 1.72 (m, 3H), 1.52 - 1.35 (m, 3H)。實例67 (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將(5,7-二氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(16 mg，0.019 mmol)溶解於DCM (200 μL)及TFA (200 μL)中。在室溫下攪拌反應混合物4 h且藉由製備型HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到所需產物(4.2 mg，0.005 mmol，29%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₂₉F ₅N ₉O ₂S ₂計算值為730.2；實驗值為730.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.07 (br s, 2H), 8.03 - 7.97 (m, 2H), 7.15 (t, J=9.9 Hz, 1H), 7.10 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.8 Hz, 1H), 4.22 - 4.03 (m, 6H), 4.01 - 3.81 (m, 4H), 3.13 - 3.01 (m, 3H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.15 - 1.95 (m, 3H), 1.87 - 1.73 (m, 3H)。實例68 (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將(7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(26 mg，0.032 mmol)溶解於DCM (300 μL)及TFA (300 μL)中。在室溫下攪拌反應混合物4 h且藉由製備型HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈雙三氟乙酸鹽形式之所需產物(27 mg，0.029 mmol，90%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₂H ₃₀F ₄N ₉O ₂S ₂計算值為712.2；實驗值為712.2。實例69 (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(20 mg，0.035 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(18 mg，0.11 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(17 μL，0.35 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(29 mg，0.11 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(9 mg，0.012 mmol，35%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₄F ₄N ₇O ₂S計算值為728.2；實驗值為728.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 - 9.00 (m, 1H), 8.31 - 8.16 (m, 2H), 8.07 - 7.94 (m, 2H), 7.75 - 7.57 (m, 3H), 7.17 - 7.01 (m, 1H), 5.37 - 5.18 (m, 1H), 5.09 - 4.82 (m, 1H), 4.49 - 3.73 (m, 9H), 3.13 - 2.98 (m, 3H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.17 - 1.95 (m, 3H), 1.86 - 1.78 (m, 3H), 1.54 - 1.36 (m, 3H)。實例70 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)-5-胺基苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(7-(5-胺基-2-(三氟甲基)苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.017 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(3 mg，0.017 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.085 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(5 mg，0.017 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(12 mg，0.016 mmol，94%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₂F ₆N ₉O ₂S計算值為744.2；實驗值為744.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.14 (s, 1H), 8.07 - 7.97 (m, 2H), 7.48 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.10 (d, J=38.1 Hz, 1H), 6.76 (br d, J=7.9 Hz, 1H), 6.58 - 6.54 (m, 1H), 6.00 (br s, 2H), 5.28 (d, J=54.5 Hz, 1H), 4.94 - 4.84 (m, 1H), 4.55 - 4.49 (m, 1H), 4.46 - 4.40 (m, 1H), 4.16 (br d, J=10.2 Hz, 1H), 4.08 (br d, J=10.2 Hz, 1H), 3.84 - 3.79 (m, 4H), 3.13 - 3.01 (m, 5H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.15 - 1.97 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H)。實例71 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.017 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(9 mg，0.051 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(7 μL，0.085 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(14 mg，0.051 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(8.9 mg，0.012 mmol，70%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₀F ₇N ₈O ₂S計算值為744.2；實驗值為744.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.19 (s, 1H), 8.07 - 7.99 (m, 2H), 7.93 - 7.87 (m, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.43 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.10 (d, J=37.4 Hz, 1H), 5.28 (d, J=53.4 Hz, 1H), 4.93 - 4.83 (m, 1H), 4.56 - 4.50 (m, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.18 - 4.14 (m, 1H), 4.08 (d, J=10.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.61 (m, 4H), 3.12 - 3.01 (m, 5H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.15 - 1.96 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H)。實例72 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(3-羥苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(3-羥苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.019 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(10 mg，0.058 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(7.6 μL，0.096 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(16 mg，0.058 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：83% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/17% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(4.2 mg，6.12 µmol，32%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₂F ₃N ₈O ₃S計算值為677.2；實驗值為677.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (s, 1H), 8.10 - 7.97 (m, 2H), 7.51 - 7.45 (m, 2H), 7.36 (t, J=8.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J=37.9 Hz, 1H), 6.95 - 6.88 (m, 1H), 5.29 (d, J=54.4 Hz, 1H), 4.95 - 4.85 (m, 1H), 4.55 - 4.48 (m, 1H), 4.47 - 4.40 (m, 1H), 4.18 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.10 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 4H), 3.13 - 3.02 (m, 5H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.18 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.77 (m, 3H)。實例 73 ，反式異構物 1 實例 73 ，反式異構物 2 實施例 73 ， 順式異構物 1 實施例 73 ， 順式異構物 2(Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(2-甲基吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(95 mg，0.167 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(58 mg，0.334 mmol)呈固體合併且溶解於MeCN (800 μL)中。添加1-甲基咪唑(40 μL，0.5 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(94 mg，0.334 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：83% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/17% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到兩種分離物：第一分離物(70.3 mg，0.097 mmol，58%產率)為順式異構物之混合物及第二分離物(7.3 mg，0.010 mmol，6.0%產率)為反式異構物之混合物。

藉由製備型SFC (管柱：Chiralcel OD-H，30 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：100 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：60% CO ₂:40% MeOH含有20 mM氨)進一步純化反式異構物之混合物，得到兩種標題反式異構物。

反式異構物1 (第一溶離)：1.8 mg，0.002 mmol，45%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇F ₃N ₇O ₂S計算值為724.3；實驗值為724.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.28 - 9.14 (m, 1H), 8.19 - 8.10 (m, 2H), 8.04 - 7.96 (m, 2H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.63 - 7.53 (m, 2H), 7.19 (d, J=36.9 Hz, 1H), 5.34 (d, J=54.0 Hz, 1H), 5.18 - 5.03 (m, 1H), 4.43 - 3.92 (m, 3H), 3.90 (s, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.19 - 3.01 (m, 4H), 2.87 - 2.78 (m, 1H), 2.46 - 2.25 (m, 2H), 2.16 - 1.98 (m, 3H), 1.91 - 1.74 (m, 3H), 1.47 - 1.35 (m, 3H)。

反式異構物2 (第二溶離)：1.2 mg，0.0015 mmol，32%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇F ₃N ₇O ₂S計算值為724.3；實驗值為724.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.25 - 9.17 (m, 1H), 8.18 - 8.10 (m, 2H), 8.04 - 7.98 (m, 2H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.19 (d, J=36.8 Hz, 1H), 5.26 (d, J=54.5 Hz, 1H), 5.19 - 5.04 (m, 1H), 4.41 - 4.03 (m, 3H), 3.90 (s, 1H), 3.79 - 3.72 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.19 - 3.01 (m, 4H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.46 - 2.24 (m, 2H), 2.18 - 1.97 (m, 3H), 1.90 - 1.75 (m, 3H), 1.48 - 1.36 (m, 3H)。

藉由製備型SFC (管柱：Chiralcel OD-H，30 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：100 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：80% CO ₂:20% MeOH含有20 mM氨)進一步純化順式異構物之混合物，得到兩種標題順式異構物。

順式異構物1 (第一溶離)：19.8 mg，0.027 mmol，56%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇F ₃N ₇O ₂S計算值為724.3；實驗值為724.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 (s, 1H), 8.18 - 8.12 (m, 2H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.75 - 7.65 (m, 2H), 7.65 - 7.55 (m, 2H), 7.22 (d, J=36.8 Hz, 1H), 5.39 - 4.79 (m, 3H), 4.69 - 4.55 (m, 2H), 4.23 - 4.03 (m, 2H), 3.98 - 3.83 (m, 2H), 3.62 (br s, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 3H), 2.67 - 2.55 (m, 1H), 2.42 - 2.33 (m, 1H), 2.18 - 1.91 (m, 3H), 1.85 - 1.68 (m, 3H), 1.50 - 1.35 (m, 3H)。

順式異構物2 (第二溶離)：10.9 mg，0.015 mmol，31%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₇F ₃N ₇O ₂S計算值為724.3；實驗值為724.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 (s, 1H), 8.17 - 8.12 (m, 2H), 8.04 - 7.98 (m, 2H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.63 - 7.55 (m, 2H), 7.22 (d, J=36.6 Hz, 1H), 5.35 - 4.79 (m, 3H), 4.70 - 4.45 (m, 2H), 4.20 - 4.01 (m, 2H), 4.01 - 3.87 (m, 2H), 3.62 (br s, 3H), 3.15 - 2.72 (m, 3H), 2.66 - 2.54 (m, 1H), 2.42 - 2.33 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 3H), 1.8501.68 (m, 3H)。實例 74 順式異構物 1 實例 74 順式異構物 2 實例 74 反式異構物 1 實例 74 反式異構物 2(Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(2-甲基吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(95 mg，0.167 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(56 mg，0.334 mmol)呈固體合併且溶解於MeCN (800 μL)中。添加1-甲基咪唑(40 μL，0.5 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(94 mg，0.334 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到兩種分離物：第一分離物(98.6 mg，0.137 mmol，82%產率)為順式異構物之混合物及第二分離物(12.1 mg，0.017 mmol，10%產率)為反式異構物之混合物。

藉由製備型SFC (管柱：Chiralpak IH，21 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：75 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：80% CO ₂:20% MeOH含有20 mM氨)進一步純化順式異構物之混合物，得到兩種標題順式異構物。

順式異構物1 (第一溶離)：35.3 mg，0.048 mmol，71%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 - 9.22 (m, 1H), 8.64 (br d, J=4.7 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=10.9, 8.8 Hz, 2H), 7.93 - 7.84 (m, 1H), 7.77 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 6.81 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.47 - 4.77 (m, 3H), 4.26 - 3.94 (m, 3H), 3.91 - 3.73 (m, 2H), 3.61 (br d, J=4.6 Hz, 3H), 3.20 - 2.79 (m, 4H), 2.43 - 2.31 (m, 1H), 2.17 - 1.59 (m, 7H), 1.22 - 1.07 (m, 3H)。

順式異構物2 (第二溶離)：38.3 mg，0.051 mmol，75%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.25 - 9.17 (m, 1H), 8.18 - 8.10 (m, 2H), 8.04 - 7.98 (m, 2H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.19 (d, J=36.8 Hz, 1H), 5.26 (d, J=54.5 Hz, 1H), 5.19 - 5.04 (m, 1H), 4.41 - 4.03 (m, 3H), 3.90 (s, 1H), 3.79 - 3.72 (m, 1H), 3.45 (s, 3H), 3.19 - 3.01 (m, 4H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.46 - 2.24 (m, 2H), 2.18 - 1.97 (m, 3H), 1.90 - 1.75 (m, 3H), 1.48 - 1.36 (m, 3H)。

藉由製備型SFC (管柱：Chiralcel OD-H，30 mm×250 mm，5 μm粒子；流動速率：100 mL/min；管柱溫度：40℃；等度：80% CO ₂:20% MeOH含有20 mM氨)進一步純化反式異構物之混合物，得到兩種標題反式異構物。

反式異構物1 (第一溶離)：3.9 mg，0.0056 mmol，63%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.32 - 9.15 (m, 1H), 8.71 - 8.58 (m, 1H), 8.15 (dd, J=11.3, 8.4 Hz, 2H), 7.94 - 7.85 (m, 1H), 7.83 - 7.77 (m, 1H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.44 - 7.34 (m, 1H), 6.80 (d, J=37.9 Hz, 1H), 5.47 - 5.24 (m, 1H), 5.21 - 5.07 (m, 1H), 4.43 - 4.00 (m, 4H), 3.97 - 3.83 (m, 2H), 3.83 - 3.73 (m, 1H), 3.46 (s, 3H), 3.20 - 2.83 (m, 3H), 2.43 - 2.03 (m, 5H), 1.94 - 1.81 (m, 3H), 1.50 - 1.42 (m, 3H)。

反式異構物2 (第二溶離)：3.3 mg，0.0049 mmol，54%回收率；LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.30 - 9.18 (m, 1H), 8.65 (br d, J=4.1 Hz, 1H), 8.19 - 8.10 (m, 2H), 7.94 - 7.86 (m, 1H), 7.83 - 7.78 (m, 1H), 7.76 - 7.68 (m, 2H), 7.63 - 7.54 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 1H), 6.80 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.35 (d, J=50.7 Hz, 1H), 5.21 - 5.05 (m, 1H), 4.42 - 4.01 (m, 3H), 3.97 - 3.85 (m, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.24 - 3.02 (m, 2H), 3.01 - 2.84 (m, 1H), 2.16 (br s, 6H), 2.00 - 1.84 (m, 3H), 1.49 - 1.42 (m, 3H)。實例75 (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((R)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7.5 mg，0.014 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(6.8 mg，0.041 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.5 μL，0.081 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.041 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.6 mg，0.004 mmol，27%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為704.3；實驗值為704.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.09 - 9.01 (m, 1H), 8.68 - 8.62 (m, 1H), 8.15 (dd, J=11.8, 8.5 Hz, 2H), 7.92 - 7.86 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 2H), 7.63 - 7.54 (m, 2H), 7.38 (dd, J=6.8, 4.9 Hz, 1H), 6.63 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.27 (d, J=53.9 Hz, 1H), 5.09 - 4.83 (m, 1H), 4.50 - 4.31 (m, 1H), 4.26 - 4.03 (m, 4H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 3.74 - 3.69 (m, 1H), 3.10 - 3.02 (m, 4H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.16 - 1.96 (m, 3H), 1.84 - 1.73 (m, 3H), 1.51 - 1.38 (m, 3H)。實例76 (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((R)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7.5 mg，0.014 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(7.0 mg，0.041 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (500 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.5 μL，0.081 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.041 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(3.2 mg，0.005 mmol，33%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₅F ₃N ₇O ₂S計算值為710.3；實驗值為710.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.10 - 8.99 (m, 1H), 8.23 - 8.11 (m, 2H), 8.05 - 7.95 (m, 2H), 7.77 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.16 - 7.03 (m, 1H), 5.39 - 5.19 (m, 1H), 5.08 - 4.81 (m, 1H), 4.50 - 4.32 (m, 1H), 4.26 - 4.01 (m, 4H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 1H), 3.73 - 3.67 (m, 1H), 3.12 - 3.00 (m, 4H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.13 - 1.97 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.51 - 1.39 (m, 3H)。實例77 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(6 mg，0.011 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(5.4 mg，0.032 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.2 μL，0.065 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.1 mg，0.032 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，0.006 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為704.3；實驗值為704.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.21 - 9.06 (m, 1H), 8.66 - 8.54 (m, 1H), 8.14 (t, J=9.2 Hz, 2H), 7.90 - 7.80 (m, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 3H), 7.66 - 7.52 (m, 2H), 7.35 (dd, J=7.3, 4.8 Hz, 1H), 6.51 - 6.27 (m, 1H), 5.35 - 5.07 (m, 1H), 4.43 - 3.99 (m, 7H), 3.93 - 3.85 (m, 1H), 3.77 - 3.61 (m, 2H), 3.11 - 2.96 (m, 4H), 2.87 - 2.75 (m, 1H), 2.31 - 1.93 (m, 4H), 1.88 - 1.61 (m, 4H)。實例78 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-(1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(6 mg，0.011 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(5.6 mg，0.032 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.2 μL，0.065 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.1 mg，0.032 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.2 mg，0.003 mmol，29%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₅F ₃N ₇O ₂S計算值為710.3；實驗值為710.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 - 9.01 (m, 1H), 8.19 (br d, J=1.8 Hz, 2H), 8.02 - 7.94 (m, 2H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 7.65 - 7.53 (m, 2H), 7.00 - 6.77 (m, 1H), 5.36 - 5.12 (m, 1H), 4.41 - 3.95 (m, 8H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.75 - 3.61 (m, 1H), 3.11 - 2.94 (m, 4H), 2.84 - 2.77 (m, 1H), 2.29 - 1.91 (m, 4H), 1.87 - 1.62 (m, 4H)。實例79 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.018 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(9.2 mg，0.055 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(8.8 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.055 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(9.5 mg，0.014 mmol，75%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₈F ₃N ₈O ₂計算值為695.3；實驗值為695.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.22 (s, 1H), 8.69 - 8.62 (m, 1H), 7.95 - 7.86 (m, 1H), 7.80 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.26 (m, 2H), 7.04 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J=39.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.8 Hz, 1H), 4.99 - 4.85 (m, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 2H), 4.16 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.08 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.24 - 4.01 (m, 1H), 3.88 - 3.70 (m, 2H), 3.19 - 3.16 (m, 1H), 3.14 - 3.01 (m, 5H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.15 - 1.97 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 4H), 0.77 (br d, J=8.3 Hz, 2H), 0.63 (br d, J=4.2 Hz, 2H)。實例80 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.018 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(9.5 mg，0.055 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(8.8 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.055 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：73% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/27% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(9.1 mg，0.013 mmol，71%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₆F ₃N ₈O ₂S計算值為701.3；實驗值為701.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.22 (s, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.42 - 7.38 (m, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 7.10 (d, J=39.4 Hz, 1H), 7.05 - 7.03 (m, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.08 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 4.24 - 4.04 (m, 1H), 3.87 - 3.72 (m, 2H), 3.18 - 3.17 (m, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 5H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.17 - 1.96 (m, 3H), 1.88 - 1.74 (m, 4H), 0.77 (br d, J=8.3 Hz, 2H), 0.63 (br d, J=5.0 Hz, 2H)。實例81 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.018 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(9.0 mg，0.054 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(8.8 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.054 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：69% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/31% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(11.9 mg，0.017 mmol，94%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₄₀F ₃N ₈O ₂計算值為709.3；實驗值為709.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.65 (br d, J=3.7 Hz, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 1H), 7.80 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.40 - 7.29 (m, 3H), 6.66 (d, J=38.1 Hz, 1H), 5.28 (d, J=55.0 Hz, 1H), 4.98 - 4.83 (m, 1H), 4.56 - 4.49 (m, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.16 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 4.08 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.21 - 4.05 (m, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 2H), 3.63 - 3.59 (m, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 5H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.18 - 1.92 (m, 7H), 1.87 - 1.61 (m, 6H)。實例82 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(10 mg，0.018 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(8.8 μL，0.11 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(15 mg，0.054 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：68% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/32% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(12 mg，0.017 mmol，94%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₈F ₃N ₈O ₂S計算值為715.3；實驗值為715.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.02 (dd, J=6.4, 2.5 Hz, 2H), 7.53 - 7.46 (m, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.10 (d, J=39.4 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.1 Hz, 1H), 4.96 - 4.84 (m, 1H), 4.52 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.08 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.24 - 4.03 (m, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 2H), 3.65 - 3.58 (m, 1H), 3.14 - 3.02 (m, 5H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.17 - 1.92 (m, 7H), 1.88 - 1.63 (m, 6H)。實例83 (Z)-1-((2S,5R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-((2R,5S)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7.5 mg，0.013 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(6.6 mg，0.040 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.3 μL，0.079 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：69% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/31% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.3 mg，0.003 mmol，24%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₉F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.11 - 8.99 (m, 1H), 8.69 - 8.61 (m, 1H), 8.23 - 8.10 (m, 2H), 7.96 - 7.86 (m, 1H), 7.81 - 7.76 (m, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 6.74 - 6.53 (m, 1H), 5.28 (d, J=54.5 Hz, 1H), 5.08 - 4.45 (m, 2H), 4.44 - 4.33 (m, 1H), 4.24 - 4.02 (m, 2H), 3.97 - 3.80 (m, 3H), 3.20 - 3.01 (m, 4H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 2.19 - 1.97 (m, 3H), 1.88 - 1.74 (m, 3H), 1.51 - 1.25 (m, 6H)。實例84 (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將4-((2R,5S)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7.5 mg，0.013 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(6.7 mg，0.040 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.3 μL，0.079 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.5 mg，0.003 mmol，26%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₈F ₃N ₈O ₂計算值為719.3；實驗值為719.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 - 8.99 (m, 1H), 8.89 (d, J=4.7 Hz, 2H), 8.21 - 8.10 (m, 2H), 7.76 - 7.68 (m, 2H), 7.65 - 7.55 (m, 2H), 7.45 (t, J=4.8 Hz, 1H), 6.71 - 6.49 (m, 1H), 5.28 (d, J=53.6 Hz, 1H), 5.09 - 4.81 (m, 1H), 4.76 - 4.36 (m, 2H), 4.16 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 4.07 (d, J=10.2 Hz, 1H), 3.99 - 3.91 (m, 1H), 3.89 - 3.72 (m, 2H), 3.03 (br s, 4H), 2.83 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 2.18 - 1.97 (m, 3H), 1.87 - 1.74 (m, 3H), 1.49 - 1.25 (m, 6H)。實例85 (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aR)-六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(11 mg，0.019 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(9.3 μL，0.12 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(16 mg，0.058 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：78% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/22% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(10.9 mg，0.014 mmol，72%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 - 9.17 (m, 1H), 8.70 - 8.54 (m, 1H), 8.14 (br t, J=9.5 Hz, 2H), 7.92 - 7.68 (m, 4H), 7.60 - 7.32 (m, 3H), 6.86 - 6.66 (m, 1H), 5.39 - 5.14 (m, 1H), 5.05 - 4.90 (m, 1H), 4.53 - 4.26 (m, 1H), 4.26 - 3.99 (m, 5H), 3.93 - 3.63 (m, 3H), 3.14 - 2.95 (m, 4H), 2.90 - 2.75 (m, 1H), 2.30 - 1.97 (m, 5H), 1.85 - 1.62 (m, 3H)。實例86 (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aR)-六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(11 mg，0.019 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(9.7 mg，0.058 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(9.3 μL，0.12 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(16 mg，0.058 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(10.9 mg，0.014 mmol，72%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₃N ₈O ₂計算值為717.3；實驗值為717.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 - 9.17 (m, 1H), 8.94 - 8.80 (m, 2H), 8.14 (br s, 2H), 7.75 - 7.65 (m, 2H), 7.56 (br s, 2H), 7.47 - 7.38 (m, 1H), 6.84 - 6.61 (m, 1H), 5.37 - 5.18 (m, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 1H), 4.46 - 4.35 (m, 2H), 4.20 - 4.00 (m, 5H), 3.88 - 3.78 (m, 2H), 3.14 - 2.95 (m, 4H), 2.88 - 2.73 (m, 1H), 2.30 - 2.00 (m, 5H), 1.83 - 1.72 (m, 3H)。實例 87 (Z)-1-(4-(7-(8- 乙炔基 -4- 氟萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 基 )-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.95 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.5 mg，0.027 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.3 μL，0.054 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.5 mg，0.027 mmol)攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.6 mg，6.50 mmol，73%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₂計算值為708.3；實驗值為708.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.2 Hz, 1H), 8.26 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 7.94 - 7.86 (m, 1H), 7.85 - 7.77 (m, 2H), 7.69 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.66 - 7.61 (m, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 1H), 7.38 (dd, J=7.1, 5.2 Hz, 1H), 6.66 (d, J=39.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.8 Hz, 1H), 4.20 - 3.86 (m, 9H), 3.82 (s, 1H), 3.13 - 3.01 (m, 4H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.15 - 1.96 (m, 3H), 1.83 - 1.72 (m, 3H)。實例 88 (Z)-1-(4-(7-(8- 乙炔基 -4- 氟萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 ) 哌𠯤 -1- 基 )-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.95 µmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(4.5 mg，0.027 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (40 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.3 μL，0.054 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.5 mg，0.027 mmol)攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.3 mg，6.0 µmol，67%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₈O ₂計算值為709.3；實驗值為709.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.11 (s, 1H), 8.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 8.26 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.69 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.65 - 7.60 (m, 1H), 7.56 (br dd, J=9.8, 8.7 Hz, 1H), 7.44 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.63 (d, J=34.9 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.3 Hz, 1H), 4.19 - 3.83 (m, 10H), 3.81 (s, 1H), 3.14 - 3.01 (m, 3H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.17 - 1.94 (m, 3H), 1.88 - 1.75 (m, 3H)。實例 89 (Z)-1-((S)-4-(7-(8- 乙炔基 -7- 氟萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-3- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(9 mg，0.016 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(7.9 mg，0.047 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(7.5 μL，0.094 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(13 mg，0.047 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(6.1 mg，8.4 µmol，53%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₄N ₇O ₂計算值為722.3；實驗值為722.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 - 9.00 (m, 1H), 8.71 - 8.57 (m, 1H), 8.31 - 8.16 (m, 2H), 7.99 - 7.85 (m, 1H), 7.84 - 7.76 (m, 1H), 7.73 - 7.56 (m, 3H), 7.42 - 7.33 (m, 1H), 6.72 - 6.54 (m, 1H), 5.27 (d, J=53.7 Hz, 1H), 5.10 - 4.84 (m, 1H), 4.53 - 4.31 (m, 1H), 4.26 - 3.99 (m, 7H), 3.90 (s, 1H), 3.13 - 3.00 (m, 3H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 2.19 - 1.94 (m, 3H), 1.87 - 1.69 (m, 3H), 1.53 - 1.35 (m, 3H)。實例 90 (Z)-1-((S)-4-(7-(8- 乙炔基 -7- 氟萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-3- 甲基哌 𠯤 -1- 基 )-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((S)-2-甲基哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(9 mg，0.016 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(7.9 mg，0.047 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(7.5 μL，0.094 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(13 mg，0.047 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.6 mg，7.7 µmol，49%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₄N ₈O ₂計算值為723.3；實驗值為723.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 - 9.01 (m, 1H), 8.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 8.31 - 8.16 (m, 2H), 7.73 - 7.57 (m, 3H), 7.45 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.74 - 6.52 (m, 1H), 5.28 (d, J=54.2 Hz, 1H), 5.10 - 4.86 (m, 1H), 4.51 - 4.32 (m, 1H), 4.21 - 4.01 (m, 5H), 3.97 - 3.75 (m, 2H), 3.13 - 2.99 (m, 4H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.20 - 1.95 (m, 3H), 1.87 - 1.69 (m, 3H), 1.52 - 1.38 (m, 3H)。實例91 (Z)-1-(2-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-2,7- 二氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.6 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.3 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(3.4 mg，4.6 µmol，54%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₉F ₃N ₇O ₂算值為730.3；實驗值為730.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.96 (s, 1H), 8.63 (br d, J=4.8 Hz, 1H), 8.18 - 8.11 (m, 2H), 7.87 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.71 (s, 2H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 7.36 (dd, J=6.7, 4.9 Hz, 2H), 6.51 (d, J=39.2 Hz, 1H), 5.35 (d, J=53.9 Hz, 1H), 4.74 - 4.58 (m, 2H), 4.13 (br s, 4H), 3.74 - 3.58 (m, 6H), 3.01 - 2.91 (m, 1H), 2.35 - 2.02 (m, 3H), 1.97 - 1.81 (m, 8H)。實例92 (Z)-1-(2-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-2,7- 二氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 基 )-2- 氟 -3-( 嘧啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.6 µmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(4.3 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(3.2 mg，4.3 µmol，50%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₈F ₃N ₈O ₂計算值為731.3；實驗值為731.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.94 (br s, 1H), 8.85 - 8.81 (m, 2H), 8.20 - 8.05 (m, 2H), 7.77 - 7.65 (m, 2H), 7.62 - 7.52 (m, 2H), 7.40 (td, J=4.9, 1.6 Hz, 1H), 6.47 (d, J=35.8 Hz, 1H), 5.38 (d, J=53.3 Hz, 1H), 4.76 - 4.54 (m, 2H), 4.37 - 4.17 (m, 4H), 3.56 - 3.33 (m, 7H), 3.09 - 2.92 (m, 1H), 2.31 - 1.81 (m, 11H)。實例 93 (Z)-1-(7-(7-(8- 乙炔基萘 -1- 基 )-8- 氟 -2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-2,7- 二氮雜螺 [3.5] 壬 -2- 基 )-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.6 µmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.3 mg，3.10 µmol，36%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₂H ₃₉F ₃N ₇O ₂算值為730.3；實驗值為730.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.02 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.7 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=11.6, 8.0 Hz, 2H), 7.88 (td, J=7.7, 1.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.38 (ddd, J=7.4, 4.8, 0.8 Hz, 1H), 6.85 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.35 (d, J=53.2 Hz, 1H), 4.39 - 3.82 (m, 10H), 3.21 - 3.10 (m, 3H), 3.02 - 2.86 (m, 1H), 2.31 - 1.81 (m, 11H)。實例94 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(5 mg，8.48 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.2 mg，0.025 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(3.5 μL，0.042 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.1 mg，0.025 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈灰白色固體之所需產物(1.9 mg，2.5 µmol，29%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₁F ₆N ₈O ₃S計算值為739.2；實驗值為739.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.62 (br s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.5 Hz, 1H), 7.90 (td, J=7.8, 1.3 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=7.2, 4.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J=9.1, 1.9 Hz, 1H), 6.86 (d, J=2.1 Hz, 1H), 6.66 (d, J=39.5 Hz, 1H), 5.30 (d, J=56.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.81 (m, 1H), 4.61 - 4.38 (m, 2H), 4.27 - 4.04 (m, 3H), 4.01 - 3.67 (m, 3H), 3.21 - 3.05 (m, 5H), 2.94 - 2.80 (m, 1H), 2.23 - 1.99 (m, 3H), 1.89 - 1.76 (m, 3H)。實例95 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(5 mg，8.48 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.025 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(3.5 μL，0.042 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.1 mg，0.025 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(1.8 mg，2.303 µmol，27%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₁F ₆N ₈O ₃S計算值為745.2；實驗值為745.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 10.63 (br s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.02 (dd, J=6.9, 2.7 Hz, 2H), 7.71 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J=39.0 Hz, 1H), 7.09 - 7.04 (m, 1H), 6.86 (d, J=2.0 Hz, 1H), 5.36 (d, J=52.7 Hz, 1H), 4.98 - 4.79 (m, 1H), 4.61 - 4.38 (m, 2H), 4.247 - 4.04 (m, 3H), 3.89 - 3.69 (m, 3H), 3.25 - 3.08 (m, 5H), 3.02 - 2.90 (m, 1H), 2.31 - 2.03 (m, 3H), 2.00 - 1.92 (m, 1H), 1.90 - 1.79 (m, 2H)。實例96 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7 mg，0.013 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.0 μL，0.075 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.038 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，5.8 µmol，46%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₇O ₂計算值為708.3；實驗值為708.6； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.14 (s, 1H), 8.65 (br d, J=5.1 Hz, 1H), 8.32 - 8.26 (m, 1H), 7.89 (td, J=7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.85 - 7.65 (m, 4H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.38 (dd, J=7.1, 5.1 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.32 (d, J=52.4 Hz, 1H), 4.22 - 3.91 (m, 10H), 3.71 (s, 1H), 3.23 - 3.09 (m, 3H), 3.00 - 2.83 (m, 1H), 2.26 - 2.01 (m, 3H), 1.89 - 1.75 (m, 3H)。實例97 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(7 mg，0.013 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(6.3 mg，0.038 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (600 μL)中。添加1-甲基咪唑(6.0 μL，0.075 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.038 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.1 mg，2.8 µmol，22%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₈O ₂計算值為709.3；實驗值為709.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.14 (s, 1H), 8.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 8.30 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.83 (dd, J=8.3, 7.6 Hz, 1H), 7.77 - 7.71 (m, 2H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 6.64 (d, J=35.1 Hz, 1H), 5.35 (d, J=54.1 Hz, 1H), 4.31 - 3.93 (m, 9H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.21 - 3.09 (m, 3H), 2.99 - 2.88 (m, 1H), 2.29 - 2.01 (m, 3H), 1.97 - 1.81 (m, 3H)。實例98 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.67 µmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.3 mg，0.026 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.0 mg，5.4 µmol，62%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₂F ₅N ₈O ₂計算值為727.3；實驗值為727.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.12 (s, 1H), 8.89 (d, J=4.9 Hz, 2H), 8.30 - 8.23 (m, 1H), 8.16 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.75 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.44 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.63 (d, J=35.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J=53.6 Hz, 1H), 4.25 (s, 1H), 4.20 - 3.85 (m, 10H), 3.18 - 3.02 (m, 3H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.17 - 1.98 (m, 3H), 1.94 - 1.69 (m, 3H)。實例99 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.67 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(7.3 mg，0.026 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.5 mg，6.1 µmol，71%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₃F ₅N ₇O ₂計算值為726.3；實驗值為726.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.13 (s, 1H), 8.65 (br s, 1H), 8.27 (br dd, J=10.6, 9.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.89 (td, J=7.8, 1.7 Hz, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.75 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.66 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 7.38 (ddd, J=7.5, 4.8, 0.8 Hz, 1H), 6.66 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.29 (d, J=54.0 Hz, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.20 - 3.88 (m, 10H), 3.15 - 3.04 (m, 3H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.22 - 1.98 (m, 3H), 1.90 - 1.74 (m, 3H)。實例100 (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aS)-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.8 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(1.9 mg，2.6 µmol，30%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 (br s, 1H), 8.63 (br d, J=4.9 Hz, 1H), 8.18 - 8.08 (m, 2H), 7.91 - 7.86 (m, 1H), 7.77 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.36 (dd, J=7.4, 5.5 Hz, 1H), 6.80 (d, J=37.7 Hz, 1H), 5.50 - 5.22 (m, 1H), 4.40 - 3.54 (m, 11H), 3.23 - 3.08 (m, 6H), 2.33 - 1.73 (m, 6H)。實例101 (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-((3aR,6aS)-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(5 mg，8.8 µmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：85% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/15% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(1.3 mg，1.7 µmol，20%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₃N ₈O ₂計算值為717.3；實驗值為717.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 (br s, 1H), 8.87 (d, J=4.8 Hz, 2H), 8.18 - 8.10 (m, 2H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.57 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.43 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J=34.4 Hz, 1H), 5.40 (d, J=57.7 Hz, 1H), 4.53 - 3.63 (m, 10H), 3.25 - 3.03 (m, 7H), 2.41 - 1.84 (m, 6H)。實例102 (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(中間物58異構物1，5 mg，8.8 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.9 mg，4.1 µmol，46%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 - 9.21 (m, 1H), 8.64 (br d, J=4.2 Hz, 1H), 8.14 (t, J=9.5 Hz, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 1H), 7.77 - 7.67 (m, 3H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.36 (dd, J=7.3, 4.9 Hz, 1H), 6.81 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.9 Hz, 1H), 4.82 - 4.55 (m, 1H), 4.46 (br d, J=5.5 Hz, 2H), 4.31 - 4.17 (m, 1H), 4.16 - 4.00 (m, 3H), 3.78 - 3.57 (m, 1H), 3.11 - 3.02 (m, 3H), 2.89 - 2.78 (m, 2H), 2.68 - 2.57 (m, 1H), 2.47 - 2.27 (m, 3H), 2.19 - 1.98 (m, 3H), 1.86 - 1.74 (m, 3H)。實例103 (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(中間物58異構物1，5 mg，8.8 µmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(4.6 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.0 mg，5.5 µmol，63%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₃N ₇O ₂S計算值為722.3；實驗值為722.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 - 9.20 (m, 1H), 8.14 (t, J=9.4 Hz, 2H), 8.04 - 7.96 (m, 2H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.61 - 7.54 (m, 2H), 7.13 (d, J=36.3 Hz, 1H), 5.27 (d, J=53.9 Hz, 1H), 4.81 - 4.55 (m, 1H), 4.47 (br s, 2H), 4.34 - 3.98 (m, 4H), 3.79 - 3.57 (m, 1H), 3.13 - 2.99 (m, 3H), 2.90 - 2.80 (m, 2H), 2.69 - 2.59 (m, 1H), 2.49 - 2.42 (m, 2H), 2.38 - 2.29 (m, 1H), 2.20 - 1.96 (m, 3H), 1.88 - 1.71 (m, 3H)。實例104 (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(中間物58異構物2，5 mg，8.8 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.7 mg，7.8 µmol，88%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.31 - 9.14 (m, 1H), 8.63 (br d, J=4.8 Hz, 1H), 8.14 (t, J=9.3 Hz, 2H), 7.87 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.76 - 7.65 (m, 4H), 7.62 - 7.53 (m, 3H), 7.37 (dd, J=6.9, 4.9 Hz, 1H), 6.81 (d, J=37.4 Hz, 1H), 5.28 (d, J=52.9 Hz, 1H), 4.81 - 4.54 (m, 1H), 4.53 - 4.38 (m, 2H), 4.34 - 3.91 (m, 4H), 3.81 - 3.63 (m, 1H), 3.15 - 3.14 (m, 1H), 3.17 - 3.01 (m, 3H), 2.93 - 2.78 (m, 2H), 2.67 - 2.59 (m, 1H), 2.47 - 2.39 (m, 1H), 2.36 - 2.26 (m, 1H), 2.17 - 2.00 (m, 3H), 1.87 - 1.74 (m, 3H)。實例105 (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(1,6-二氮雜螺[3.4]辛-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(中間物58異構物2，5 mg，8.8 µmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.6 mg，3.6 µmol，41%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₃N ₈O ₂計算值為717.3；實驗值為717.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.27 - 9.21 (m, 1H), 8.87 (d, J=4.8 Hz, 2H), 8.14 (t, J=9.5 Hz, 2H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.63 - 7.53 (m, 2H), 7.43 (t, J=4.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J=34.0 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.6 Hz, 1H), 4.81 - 4.52 (m, 1H), 4.45 (br d, J=2.9 Hz, 2H), 4.36 - 3.97 (m, 4H), 3.80 - 3.55 (m, 1H), 3.15 - 3.00 (m, 3H), 2.93 - 2.77 (m, 2H), 2.67 - 2.58 (m, 1H), 2.48 - 2.40 (m, 2H), 2.38 - 2.30 (m, 1H), 2.16 - 1.99 (m, 3H), 1.87 - 1.75 (m, 3H)。實例106 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈

將2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈(6.5 mg，0.011 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(5.3 mg，0.032 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(5.1 μL，0.064 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.9 mg，0.032 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(2.6 mg，3.4 µmol，32%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₃F ₆N ₁₀O ₂計算值為763.3；實驗值為763.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 13.67 (br s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.2 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.90 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.39 (dd, J=7.1, 5.3 Hz, 1H), 6.67 (d, J=38.2 Hz, 1H), 5.27 (d, J=54.1 Hz, 1H), 4.97 - 4.81 (m, 1H), 4.53 (br d, J=12.9 Hz, 1H), 4.49 - 4.38 (m, 1H), 4.16 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.09 (br d, J=10.6 Hz, 1H), 4.27 - 4.03 (m, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 2H), 3.15 - 3.01 (m, 6H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.16 - 1.95 (m, 3H), 1.88 - 1.74 (m, 3H)。實例107 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶((中間物59，異構物1，5 mg，8.82 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.7 mg，7.8 µmol，88%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.32 - 9.17 (m, 1H), 8.71 - 8.58 (m, 1H), 8.21 - 8.09 (m, 2H), 7.94 - 7.86 (m, 1H), 7.84 - 7.79 (m, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 2H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 6.84 (d, J=36.6 Hz, 1H), 5.28 (d, J=54.0 Hz, 1H), 5.19 - 4.73 (m, 1H), 4.25 - 3.95 (m, 5H), 3.83 - 3.61 (m, 2H), 3.12 - 3.01 (m, 4H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.41 - 2.15 (m, 4H), 2.15 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 3H)。實例108 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶((中間物59，異構物2，5 mg，8.82 µmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.4 mg，0.026 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (400 μL)中。添加1-甲基咪唑(4.1 μL，0.052 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11 mg，0.040 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(5.7 mg，7.8 µmol，88%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₇F ₃N ₇O ₂計算值為716.3；實驗值為716.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.28 - 9.17 (m, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.19 - 8.07 (m, 2H), 7.93 - 7.85 (m, 1H), 7.83 - 7.78 (m, 1H), 7.77 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.42 - 7.33 (m, 1H), 6.83 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.28 (d, J=56.5 Hz, 1H), 5.17 - 4.71 (m, 1H), 4.28 - 3.95 (m, 5H), 3.81 - 3.64 (m, 2H), 3.12 - 2.99 (m, 4H), 2.91 - 2.78 (m, 1H), 2.39 - 2.19 (m, 4H), 2.15 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H)。實例109 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡 -7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(22 mg，0.039 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(19 mg，0.12 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(18 μL，0.23 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(33 mg，0.12 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：65% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/35% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(18.8 mg，0.026 mmol，68%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₇F ₃N ₇O ₃計算值為720.3；實驗值為720.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.68 - 8.61 (m, 1H), 8.17 - 8.11 (m, 2H), 7.93 - 7.86 (m, 1H), 7.81 - 7.76 (m, 1H), 7.76 - 7.72 (m, 1H), 7.71 - 7.68 (m, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 1H), 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 1H), 6.61 (d, J=38.8 Hz, 1H), 5.32 (d, J=53.8 Hz, 1H), 4.29 - 4.02 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.88 - 3.73 (m, 9H), 3.28 - 3.04 (m, 3H), 2.96 - 2.82 (m, 1H), 2.27 - 1.97 (m, 3H), 1.91 - 1.71 (m, 3H)。實例110 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(22 mg，0.039 mmol)及(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(20 mg，0.12 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (700 μL)中。添加1-甲基咪唑(18 μL，0.23 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(33 mg，0.12 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：65% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/35% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(16.7 mg，0.023 mmol，60%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₅F ₃N ₇O ₃S計算值為726.2；實驗值為726.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.16 - 8.11 (m, 2H), 8.03 - 7.97 (m, 2H), 7.75 - 7.72 (m, 1H), 7.72 - 7.67 (m, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 1H), 7.57 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.07 (d, J=37.8 Hz, 1H), 5.30 (d, J=55.1 Hz, 1H), 4.28 - 4.01 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.90 - 3.71 (m, 9H), 3.23 - 3.01 (m, 3H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 2.21 - 1.99 (m, 3H), 1.91 - 1.71 (m, 3H)。實例111 (S,Z)-1-(4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將(S)-4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-8-氟-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-5-乙炔基-6-氟萘-2-醇(320 mg，0.534 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(178 mg，1.07 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (5.3 mL)中。添加1-甲基咪唑(210 μL，2.67 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(300 mg，1.07 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。添加氫氧化銨溶液(100 μL)及氫氧化鈉溶液(100 μL)，且攪拌混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：100% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/0% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(160 mg，0.21 mmol，40%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₆F ₃N ₁₀O ₃計算值為749.3；實驗值為749.3。實例112 N-((1-(3-((S)-2-(((7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-5-((3aS,4S,6aR)-2-側氧基六氫-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊醯胺

將(S,Z)-1-(4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮(30 mg，0.040 mmol)及5-((3aS,4S,6aR)-2-側氧基六氫-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-N-(丙-2-炔-1-基)戊醯胺(33.8 mg，0.120 mmol)合併且溶解於MeOH (400 μL)中。逐滴添加硫酸銅(II)溶液(50 mg/mL於水中，40 μL，8.0 µmol)，繼之添加抗壞血酸鈉(12 mg，0.06 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。添加飽和氫氧化銨水溶液(100 μL)，且攪拌混合物10分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：86% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/14% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化反應混合物，得到呈棕色固體之所需產物(14 mg，0.013 mmol，33%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₅₂H ₅₅F ₃N ₁₃O ₅S計算值為1030.4；實驗值為1030.4。實例113 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈

向8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈(8 mg，0.014 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(4.81 mg，0.029 mmol)及1-甲基咪唑(0.017 mL，0.216 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.08 mg，0.029 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：82% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/18% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.5 mg，0.006 mmol，43%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₃N ₈O ₂計算值為705.3；實驗值為705.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.30 (br d, J=7.8 Hz, 1H), 8.15 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 7.98 - 7.65 (m, 5H), 7.38 (br d, J=4.7 Hz, 1H), 6.80 (br d, J= 37.6 Hz, 1H), 5.39 - 5.14 (m, 3H), 4.33 - 3.74 (m, 5H), 3.70 - 3.52 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.13 - 2.72 (m, 3H), 2.45 - 2.23 (m, 1H), 2.20 - 1.66 (m, 7H)。實例114 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈

向8-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈(8 mg，0.014 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(4.99 mg，0.029 mmol)及1-甲基咪唑(0.017mL，0.216mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.08 mg，0.029 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：79% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/21% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(6.6 mg，0.009 mmol，62%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₃F ₃N ₈O ₂S計算值為711.2；實驗值為711.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.29 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.15 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 8.01 (br d, J=9.1 Hz, 2H), 7.88 - 7.78 (m, 2H), 7.75 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.21 (br d, J=36.6 Hz, 1H), 5.50 - 5.08 (m, 3H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 4.22 - 4.05 (m, 2H), 4.03 - 3.76 (m, 2H), 3.70 - 3.52 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.12 - 2.96 (m, 2H), 2.87 - 2.73 (m, 1H), 2.45 - 2.21 (m, 2H), 2.17 - 1.94 (m, 3H), 1.88 - 1.66 (m, 3H)。實例115 (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(19 mg，0.034 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(11.45 mg，0.069 mmol)及1-甲基咪唑(0.041 mL，0.514 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(19.22 mg，0.069 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(8.8 mg，0.013 mmol，37%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₆F ₃N ₇O ₂計算值為704.3；實驗值為704.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.11 (br d, J=7.1 Hz, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.06 (dd, J=11.7, 8.2 Hz, 2H), 7.85 - 7.76 (m, 1H), 7.73 - 7.66 (m, 1H), 7.65 - 7.58 (m, 2H), 7.56 - 7.44 (m, 2H), 7.33 - 7.24 (m, 1H), 6.73 (m, d, J=37.7Hz, 1H), 5.32 - 4.98 (m, 2H), 4.37 - 3.39 (m, 7H), 3.37 (s, 3H), 3.35 - 3.23 (m, 1H), 3.04 - 2.51 (m, 3H), 2.36 - 2.17 (m, 2H), 2.12 - 1.85 (m, 3H), 1.81 - 1.49 (m, 3H)。實例116 (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(19 mg，0.034 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(11.9 mg，0.069 mmol)及1-甲基咪唑(0.041 mL，0.514 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(19.2 mg，0.069 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(14 mg，0.020 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₄F ₃N ₇O ₂S計算值為710.3；實驗值為710.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.19 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=11.6, 8.2 Hz, 2H), 8.01 (br d, J=11.0 Hz, 2H), 7.76 - 7.66 (m, 2H), 7.65 - 7.50 (m, 2H), 7.21 (d, J=36.7 Hz 1H), 5.42 - 5.10 (m, 2H), 4.29 (br d, J=6.2 Hz, 1H), 4.19 - 3.50 (m, 6H), 3.46 (s, 3H), 3.43 - 3.30 (m, 1H), 3.20 - 2.91 (m, 2H), 2.79 (br d, J=5.5 Hz, 1H), 2.46 - 2.22 (m, 2H), 2.20 - 1.93 (m, 3H), 1.89 - 1.60 (m, 3H)。實例117 (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(9 mg，0.016 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(5.3 mg，0.031 mmol)及1-甲基咪唑(0.019 mL，0.236 mmol)於DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.8 mg，0.031 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：76% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/24% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(7.4 mg，0.010 mmol，65%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₇O ₂計算值為722.3；實驗值為722.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.20 (br d, J=7.0 Hz, 1H), 8.65 (br t, J=6.2 Hz, 1H), 8.27 - 8.12 (m, 2H), 7.96 - 7.84 (m, 1H), 7.84 - 7.75 (m, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.61 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.82 (d, J=38.2 Hz, 1H), 5.38 - 5.11 (m, 2H), 4.28 (br d, J=7.7 Hz, 1H), 4.19 - 3.51 (m, 6H), 3.47 (s, 3H), 3.41-4.30 (m, 1H), 3.14 - 2.71 (m, 3H), 2.44 - 2.23 (m, 2H), 2.20 - 1.93 (m, 3H), 1.88 - 1.61 (m, 3H)。實例118 (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-((R)-吡咯啶-3-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(9 mg，0.016 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(5.4 mg，0.031 mmol)及1-甲基咪唑(0.019 mL，0.236 mmol)於DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.8 mg，0.031 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(6.2 mg，0.009 mmol，54%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₇O ₂S計算值為728.2；實驗值為728.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.23 (br d, J=6.7 Hz, 1H), 8.29 - 8.15 (m, 2H), 8.01 (br d, J=10.8 Hz, 2H), 7.76 - 7.65 (m, 2H), 7.61 (t, J=9.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J=36.6 Hz, 1H), 5.57 - 5.22 (m, 2H), 4.52 - 4.21 (m, 2H), 4.17 - 3.52 (m, 5H), 3.49 (s, 3H), 3.38 (br d, J=16.3 Hz, 1H), 3.20 - 2.67 (m, 3H), 2.48 - 1.68 (m, 8H)。實例119 (Z)-1-((3R)-3-((7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向(5,7-二氟-4-(-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(14 mg，0.020 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(6.8 mg，0.041 mmol)及1-甲基咪唑(0.024 mL，0.305 mmol)於DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11.4 mg，0.041 mmol)。攪拌混合物1 h。濃縮溶劑。在CH ₂Cl ₂(0.5 mL)中將所得深色殘餘物及三氟乙酸(0.1 mL)攪拌30分鐘。濃縮溶劑，溶解於乙腈中，用1-甲基咪唑(0.014 mL，0.180 mmol)製成鹼性，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(6.4 mg，0.009 mmol，49%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₅H ₃₂F ₅N ₉O ₂S計算值為738.2；實驗值為738.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.21 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.02 (s, 2H), 7.88 - 7.79 (m, 1H), 7.74 (br t, J=7.9 Hz, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 1H), 7.10 (br t, J=9.9 Hz, 1H), 6.77 (d, J=35.2 Hz, 1H), 5.35 - 4.97 (m, 2H), 4.30 - 3.90 (m, 4H), 3.82 - 3.44 (m, 2H), 3.38 (s, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.08 - 2.89 (m, 2H), 2.83 - 2.62 (m, 1H), 2.38 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 1.58 (m, 6H)。實例120 (5,7-二氟-4-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯

向(5,7-二氟-4-(-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(甲基((R)-吡咯啶-3-基)胺基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯(14 mg，0.020 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(7.0 mg，0.041 mmol)及1-甲基咪唑(0.024 mL，0.305 mmol)於DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(11.4 mg，0.041 mmol)。攪拌混合物1 h。濃縮溶劑。在CH ₂Cl ₂(0.5 mL)中將所得深色殘餘物及三氟乙酸(0.1 mL)攪拌30分鐘。濃縮溶劑，溶解於乙腈中，用1-甲基咪唑(0.014 mL，0.180 mmol)製成鹼性，且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(7.4 mg，0.010 mmol，55%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₃H ₃₀F ₅N ₉O ₂S ₂計算值為744.2；實驗值為744.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.26 (s, 1H), 8.06 (s, 2H), 8.01 (br d, J=10.2 Hz, 2H), 7.20 (d, J=36.7 Hz,1H), 7.18 - 7.09 (m, 1H), 5.47 - 5.11 (m, 2H), 4.47 - 3.92 (m, 5H), 3.87 - 3.51 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.12 - 2.73 (m, 3H), 2.42 - 2.21 (m, 2H), 2.14 - 1.61 (m, 6H)。實例121 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈

向2-胺基-7-氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(9 mg，0.016 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(5.2 mg，0.031 mmol)及1-甲基咪唑(0.019 mL，0.233 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(8.7 mg，0.031 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：80% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/20% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(4.7 mg，0.006 mmol，40%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₁F ₄N ₉O ₂S計算值為730.2；實驗值為730.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.65 (br d, J=4.8 Hz, 1H), 8.09 (bs, 2H), 7.94 - 7.85 (m, 1H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.44 - 7.27 (m, 2H), 7.16 (t, J=8.9 Hz, 1H), 6.67 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.42 - 5.08 (m, 2H), 4.14 (s, 6H), 3.91 (s, 4H), 3.43 - 3.01 (m, 2H), 2.92 - 2.76 (m, 1H), 2.23 - 1.97 (m, 3H), 1.90 - 1.68 (m, 3H)。實例122 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈

向2-胺基-7-氟-4-(8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(10 mg，0.017 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(6.0 mg，0.034 mmol)及1-甲基咪唑(0.021 mL，0.258 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(9.7 mg，0.034 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：82% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/18% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(7.3 mg，0.010 mmol，58%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₂₉F ₄N ₉O ₂S ₂計算值為736.2；實驗值為736.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.09 (s, 2H), 8.04 - 7.91 (m, 2H), 7.41 (dd, J=8.4, 5.3 Hz, 1H), 7.20 - 7.12 (m, 1H), 7.11 (d, J=37.6Hz, 1H), 5.44 - 5.12 (m, 2H), 4.26 - 3.69 (m, 10H), 3.32 - 2.99 (m, 2H), 2.93 - 2.69 (m, 1H), 2.27 - 1.93 (m, 3H), 1.90 - 1.68 (m, 3H)。實例123 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(50 mg，0.09 mmol)及(Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸(31 mg，0.19 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1 mL)中。添加1-甲基咪唑(111 μL，1.4 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(52 mg，0.19 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：81% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/19% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(22 mg，0.031 mmol，34%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₃N ₈O ₂計算值為691.3；實驗值為691.4； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.13 (s, 1H), 8.90 (d, J=4.7 Hz, 2H), 8.15 (dd, J=12.0, 8.2 Hz, 2H), 7.77 - 7.68 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.45 (t, J=4.9 Hz, 1H), 6.64 (d, J=35.2 Hz, 1H), 5.28 (d, J=51.3 Hz, 1H), 4.29 - 4.09 (m, 5H), 4.09 - 3.76 (m, 6H), 3.72 (s, 1H), 3.12 - 3.05 (m, 2H), 3.03 (br s, 1H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 3H), 1.88 - 1.73 (m, 3H)。實例124 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

將7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(10 mg，0.018 mmol)及(Z)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙烯酸(8.3 mg，0.037 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (1 mL)中。添加1-甲基咪唑(22 μL，0.277 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10.4 mg，0.037 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化，得到呈棕色固體之所需產物(8.4 mg，0.012 mmol，67%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₇H ₃₂F ₃N ₇O ₃計算值為680.3；實驗值為680.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.16 - 9.08 (m, 1H), 8.30 - 8.24 (m, 1H), 8.15 (dd, J=12.3, 8.1 Hz, 2H), 7.79 - 7.66 (m, 2H), 7.64 - 7.52 (m, 2H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 6.72 (d, J=35.7, 1H), 5.48 - 5.11 (m, 2H), 4.28 - 3.61 (m, 11H), 3.13 - 2.98 (m, 2H), 2.88 - 2.70 (m, 1H), 2.19 - 2.03 (m, 3H), 1.88-1.76 (m, 3H)。實例125 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(10 mg，0.018 mmol)、(Z)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙烯酸(6.7 mg，0.037 mmol)及1-甲基咪唑(0.022 mL，0.277 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10.4 mg，0.037 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：74% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/26% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(9.3 mg，0.013 mmol，71%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₅F ₃N ₈O ₂計算值為705.3；實驗值為705.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.97 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.00 (dd, J=12.3, 8.2 Hz, 2H), 7.64 - 7.51 (m, 2H), 7.50 - 7.31 (m, 2H), 6.55 (d, J=38.5, 1H), 5.45 - 5.22 (m, 1H), 5.27 - 4.97 (m, 2H), 4.10 - 3.76 (m, 10H), 3.55 (s, 1H), 3.02 (s 3H), 2.96 - 2.78 (m, 2H), 2.73 - 2.60 (m, 1H), 2.05 - 1.80 (m, 3H), 1.73 - 1.51 (m, 3H)。實例126 (Z)-2-氯-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(10 mg，0.018 mmol)、(Z)-2-氯-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(9.7 mg，0.037 mmol)及1-甲基咪唑(0.022 mL，0.277 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10.4 mg，0.037 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(13.1 mg，0.019 mmol，100%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄ClF ₂N ₇O ₂計算值為706.2；實驗值為706.1； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.14 (s, 1H), 8.68 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=12.7, 8.2 Hz, 2H), 7.96 - 7.89 (m, 2H), 7.77 - 7.67 (m, 2H), 7.63 - 7.53 (m, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 5.54 - 5.08 (m, 2H), 4.36 - 3.72 (m, 9H), 3.72 - 3.64 (m, 1H), 3.46 - 3.06 (m, 3H), 2.99 - 2.80 (m, 1H), 2.39 - 1.96 (m, 4H), 1.87 - 1.68 (m, 2H)。實例127 (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶(10 mg，0.018 mmol)、(Z)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙烯酸(6.2 mg，0.037 mmol)及1-甲基咪唑(0.022 mL，0.277 mmol)於DMF (1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(10.4 mg，0.037 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：95% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/5% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(6.1 mg，0.009 mmol，48%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₃N ₈O ₂計算值為691.3；實驗值為691.1； ¹H NMR (500 MHz, CDCl ₃) δ 9.15 (dd, J=5.0, 1.7 Hz, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.05 - 7.93 (m, 3H), 7.77 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.56 (dd, J=8.6, 5.0 Hz, 1H), 7.48 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.13 (d, J=37.7 Hz, 1H), 5.64 - 5.40 (m, 1H), 5.18 - 4.97 (m, 1H), 4.79 - 4.54 (m, 1H), 4.27 - 3.99 (m, 10H), 3.64 - 3.43 (m, 1H), 3.37 - 3.19 (m, 1H), 2.93 - 2.17 (m, 7H)。實例128 (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-N-((3S,4R)-4-氟吡咯啶-3-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(27 mg，0.047 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(15.76 mg，0.094 mmol)及1-甲基咪唑(0.056 mL，0.707 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(26.5 mg，0.094 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：71% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/29% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(20.5 mg，0.028 mmol，60.2%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₀H ₃₅F ₄N ₇O ₂計算值為722.3；實驗值為722.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.32 - 9.18 (m, 1H), 8.67 (br d, J=4.1 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=12.2, 8.2 Hz, 2H), 7.97 - 7.87 (m, 1H), 7.81 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 7.76 - 7.66 (m, 2H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.40 (br t, J=6.4 Hz, 1H), 6.88 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.90 - 5.61 (m, 1H), 5.51 - 5.05 (m, 2H), 4.71 - 4.36 (m, 1H), 4.33 - 4.01 (m, 4H), 3.91 (s, 1H), 3.83 - 3.52 (m, 3H), 3.38 (br d, J=2.8 Hz, 2H), 3.10 - 2.75 (m, 3H), 2.30 - 1.42 (m, 6H)。實例129 (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-N-((3S,4R)-4-氟吡咯啶-3-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(27 mg，0.047 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(16.33 mg，0.094 mmol)及1-甲基咪唑(0.056 mL，0.707 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(26.5 mg，0.094 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：70% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/30% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(21 mg，0.029 mmol，61%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₈H ₃₃F ₄N ₇O ₂S計算值為728.2；實驗值為728.3； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.25 (d, J=14.7 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=12.2, 8.2 Hz, 2H), 8.03 (br d, J=7.8 Hz, 2H), 7.80 - 7.67 (m, 2H), 7.65 - 7.48 (m, 2H), 7.26 (d, J=35.5 Hz, 1H), 6.02 - 5.53 (m, 1H), 5.46 - 4.96 (m, 2H), 4.67 - 4.32 (m, 1H), 4.36 - 4.00 (m, 3H), 3.91 (s, 1H), 3.84 - 3.78 (m, 1H), 3.72 - 3.27 (m, 2H), 3.18 (d, J=5.1 Hz, 3H), 3.10 - 2.66 (m, 3H), 2.38 - 1.64 (m, 6H)。實例130 (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-N-((3S,4R)-4-氟吡咯啶-3-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(27 mg，0.047 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙烯酸(15.85 mg，0.094 mmol)及1-甲基咪唑(0.056 mL，0.707 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(26.5 mg，0.094 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：77% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/23% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(22 mg，0.030 mmol，63.4%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₄F ₄N ₈O ₂計算值為723.3；實驗值為723.3；1HNMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.31 - 9.18 (m, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.15 (dd, J=12.2, 8.2 Hz, 2H), 7.80 - 7.67 (m, 2H), 7.65 - 7.44 (m, 2H), 6.97 (d, J=37.3, 1H), 5.97 - 5.58 (m, 1H), 5.51 - 4.92 (m, 2H), 4.67 - 4.37 (m, 1H), 4.32 - 3.94 (m, 2H), 3.82 (s, 1H), 3.76 - 3.42 (m, 4H), 3.35 (s, 3 H), 2.55 (s, 3H), 2.33 - 1.62 (m, 6H)。實例131 (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(哌啶-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(26 mg，0.046 mmol)、(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(15.3 mg，0.091 mmol)及1-甲基咪唑(0.055 mL，0.686 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(25.7 mg，0.091 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：75% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/25% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到呈棕色固體之所需產物(19.8 mg，0.028 mmol，60.3%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₄₁H ₃₈F ₃N ₇O ₂計算值為718.3；實驗值為718.3；1HNMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.17 (s, 1H), 8.65 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.23 - 8.07 (m, 2H), 7.89 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.71 (dd, J=16.2, 7.7 Hz, 2H), 7.62 - 7.51 (m, 2H), 7.37 (ddd, J=7.5, 4.8, 1.1 Hz, 1H), 6.59 (d, J=39.2, 1H), 5.53 - 5.15 (m, 1H), 5.08 - 4.78 (m, 1H), 4.63 - 4.35 (m, 1H), 4.33 - 3.99 (m, 3H), 3.76 (s, 1H), 3.48 - 3.32 (m, 3H), 3.17 (d, J=5.2 Hz, 3H), 3.08 - 2.57 (m, 3H), 2.33 - 1.55 (m, 10H)。實例132 (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮

向7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-N-甲基-N-(哌啶-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-胺(26 mg，0.046 mmol)、(Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯酸(15.8 mg，0.091 mmol)及1-甲基咪唑(0.055 mL，0.686 mmol)於乙腈(1 mL)中之經攪拌溶液中添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(25.7 mg，0.091 mmol)。攪拌混合物15分鐘且藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：72% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/28% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)純化，得到所需產物(17.9 mg，0.025 mmol，54.1%產率)。LC/MS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₉H ₃₆F ₃N ₇O ₂S計算值為724.3；實驗值為724.3；1HNMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.22 - 8.06 (m, 2H), 8.03 - 7.94 (m, 2H), 7.79 - 7.67 (m, 2H), 7.64 - 7.52 (m, 2H), 7.06 (d, J=38.3 Hz 1H), 5.49 - 5.14 (m, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.60 - 4.30 (m, 1H), 4.29 - 3.96 (m, 3H), 3.76 (br d, J=1.7 Hz, 1H), 3.64 - 3.28 (m, 3H), 3.18 (d, J=5.1 Hz, 3H), 2.99 - 2.54 (m, 3H), 2.40 - 1.44 (m, 10H)。實例133 3-(8- 氟 -4-(4-((Z)-2- 氟 -3-( 吡啶 -2- 基 ) 丙烯醯基 ) 哌𠯤 -1- 基 )-2-(((2R,7aS)-2- 氟四氫 -1H- 吡 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 ) 吡啶并 [4,3-d] 嘧啶 -7- 基 )-1H- 吲哚 -4- 甲腈將

3-(8-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈(20 mg，0.033 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(17 mg，0.1 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(14 μL，0.2 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(28 mg，0.1 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：100% 5:95 MeCN:H ₂O含有0.1% TFA/0% 95:5 MeCN:H ₂O含有0.1% TFA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有0.1% TFA；λ=220 nm)直接純化，得到呈雙三氟乙酸鹽形式之棕色固體所需產物(13.2 mg，0.014 mmol，44%產率)直接純化溶液。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₆H ₃₃F ₃N ₉O ₂計算值為680.3；實驗值為680.2；1HNMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.36 (br s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.65 (br d, J=5.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.89 (br d, J=8.1 Hz, 2H), 7.79 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 6.67 (d, J=38.6 Hz, 1H), 5.58 (d, J=52.3 Hz, 1H), 4.68 - 4.58 (m, 2H), 4.24 - 4.10 (m, 4H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 3.88 - 3.71 (m, 5H), 3.24 - 3.17 (m, 2H), 2.39 - 1.97 (m, 5H)。實例134 3-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈

將3-(8-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-4-(哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈(20 mg，0.033 mmol)及(Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯酸(17 mg，0.1 mmol)呈固體合併且溶解於DMF (0.5 mL)中。添加1-甲基咪唑(14 μL，0.2 mmol)，繼之添加氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸酯(28 mg，0.1 mmol)。攪拌反應混合物5分鐘。藉由逆相HPLC (管柱：Xbridge C18，19 mm×200 mm，5 μm粒子；流動速率：20 mL/min；管柱溫度：25℃；梯度：87% 5:95 MeCN:H ₂O含有10 mM AA/13% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA→100% 95:5 MeCN:H ₂O含有10 mM AA；λ=220 nm)直接純化溶液，得到呈棕色固體之所需產物(4.1 mg，0.006 mmol，21%產率)。LCMS (ESI) m/z：[M+H] ⁺，對於C ₃₄H ₃₁F ₃N ₉O ₂S計算值為686.3；實驗值為686.2； ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d ₆) δ 12.29 (br s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.08 (d, J=2.3 Hz, 1H), 8.03 - 7.97 (m, 2H), 7.88 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.35 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J=37.5 Hz, 1H), 5.31 (d, J=54.9 Hz, 1H), 4.22 - 4.05 (m, 6H), 4.03 - 3.80 (m, 4H), 3.18 - 3.02 (m, 3H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 1.96 (s, 6H)。生物活性 KRAS ^G12CRAF破壞分析法

此為量測化合物對KRAS-G12C ^(ON)，亦即KRAS G12C之活性形式之活性的功能性分析法。在室溫下在分析緩衝液(50 mM Tris pH 7.5，100 mM NaCl，1 mM MgCl ₂，1 mM DTT，100 ug/ml BSA)中用化合物治療重組GMPPNP負載之KRAS G12C (5 nM)持續20分鐘。添加重組GST-RAF1 RBD (9 nM)，且培育反應混合物20分鐘。添加SA-Tb (0.25 nM)，且培育反應混合物3小時。量測HTRF信號(珀金埃爾默設想(PerkinElmer Envision))，計算信號比(λ _em520/λ _em495)，且由劑量-反應曲線計算IC ₅₀值。

本文所描述之化合物的IC ₅₀值展示於表1中。表1

實例編號	KRASG12C RAF 破壞分析法 (IC ₅₀)
1	27 nM
2	32 nM
3	19 nM
4	260 nM
5	79 nM
6	45 nM
7	16 nM
8	1300 nM
9	350 nM
10	24 nM
11	450 nM
12	11 nM
13	38 nM
14	22 nM
15	60 nM
16	180 nM
17	2600 nM
18	25 nM
19A	59 nM
19B	270 nM
20	89 nM
21A	67 nM
21B	330 nM
22	1900 nM
23	180 nM
24	110 nM
25	290 nM
26	170 nM
27	3 nM
28	4 nM
29	100 nM
30	470 nM
31	64 nM
32	76 nM
33	75 nM
34	400 nM
35	430 nM
36	150 nM
37	130 nM
38	4700 nM
39	5100 nM
40	880 nM
41	760 nM
42	760 nM
43	1100 nM
44	360 nM
45	460 nM
46	390 nM
47	100 nM
48	780 nM
49	800 nM
50	840 nM
51	360 nM
52	430 nM
53	44 nM
54	5 nM
55	2 nM
56	6 nM
57	4 nM
58	2 nM
59	2 nM
60	180 nM
61	300 nM
62	300 nM
63	180 nM
64	7 nM
65	4.5nM
66	＜2 nM
67	41 nM
68	220 nM
69	300 nM
70	26 nM
71	40 nM
72	440 nM
73反式異構物1	1600 nM
73反式異構物2	5700 nM
73順式異構物1	110 nM
73順式異構物2	1800 nM
74反式異構物1	2.5 nM
74反式異構物2	110 nM
74順式異構物1	1000 nM
74順式異構物2	910 nM
75	57 nM
76	590 nM
77	120 nM
78	120 nM
79	65 nM
80	30 nM
81	57 nM
82	62 nM
83	2600 nM
84	3500 nM
85	110 nM
86	110 nM
87	1600 nM
88	1000 nM
89	37 nM
90	110 nM
91	5000 nM
92	24000 nM
93	3300 nM
94	34 nM
95	14 nM
96	110 nM
97	550 nM
98	91 nM
99	70 nM
100	5300 nM
101	12000 nM
102	87 nM
103	620 nM
104	16000 nM
105	9700 nM
106	1600 nM
107	5600 nM
108	4300 nM
109	240 nM
110	180 nM
111	11 nM
112	＜2 nM
113	156 nM
114	719 nM
115	14 nM
116	27 nM
117	9 nM
118	30 nM
119	5 nM
120	30 nM
121	8 nM
122	6 nM
123	187 nM
124	540 nM
125	480 nM
126	47000 nM
127	10 nM
128	30 nM
129	200 nM
130	60 nM
131	4200 nM
132	16800 nM
133	890 nM
134	970 nM

應瞭解，實施方式部分而非發明內容及發明摘要部分意欲用以解釋申請專利範圍。發明內容及發明摘要部分可闡述如由諸位發明人涵蓋之本發明之一或多個而非所有例示性態樣，且因此不意欲以任何方式限制本發明及隨附申請專利範圍。

上文已藉助說明特定功能及其關係之實施的功能建構區塊來描述本發明。為了便於描述，本文已任意地界定此等功能建構區塊之邊界。只要適當地執行指定功能及其關係，便可界定替代邊界。

本文中所引用之所有參考文獻均以全文引用之方式併入本文中。

因此，對特定態樣之前述描述將充分揭示本發明之一般性質：在不脫離本發明之一般概念的情況下，其他人可藉由應用熟習此項技術者所瞭解之知識針對各種應用而容易地修改及/或調適此類特定態樣，而無需進行過度實驗。因此，基於本文中所呈現之教示及指導，此等調適及修改意欲在所揭示態樣之等效者的涵義及範圍內。應理解，本文中之措辭或術語係出於描述而非限制之目的，因此本說明書之術語或措辭應由熟習此項技術者按照該等教示及指導進行解釋。

本發明之範圍及範疇不應由上述例示性態樣中之任一者限制，而應僅根據以下申請專利範圍及其等效物進行界定。

Claims

一種式(I)化合物， (I)；或其醫藥學上可接受之鹽，其中： U為鍵或NH； Z為鍵、O、NR ^e或CR ^eR ^f，其中R ^e及R ^f獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； R ¹為芳基或雜芳基，其中該芳基及雜芳基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基； R ²及R ³獨立地選自氫、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、-C(O)NH ₂、-C(O)NH(C ₁-C ₃烷基)、-C(O)N(C ₁-C ₃烷基) ₂及羥基； Y為鍵、O、NR ^g(CR ^eR ^f) _m、NR ^f或CR ^eR ^f，其中m為1、2或3，且其中R ^e、R ^f及R ^g獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； A為四員至十員含氮單環或雙環橋接、稠合或螺環飽和、不飽和或部分不飽和環系，其視情況含有一個或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子，其中該環系視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基； R'為鹵基； R ⁴為芳基或雜芳基環；其中該環視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基； X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基； R ⁵選自氫、C ₁-C ₆烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆烷基、芳基、芳基C ₁-C ₆烷基、羧基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基、二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基、鹵基C ₁-C ₆烷基、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基、羥基C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基，其中該芳基、該芳基C ₁-C ₆烷基之該芳基部分、該C ₃-C ₆環烷基、該C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基之該環烷基部分、該雜芳基、該雜芳基C ₁-C ₆烷基之該雜芳基部分、該雜環基、該雜環基C ₁-C ₆烷基之該雜環基部分視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₆烷基)胺基、(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、疊氮基C ₁-C ₆烷基、羧基、氰基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、雜芳基C ₁-C ₃烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；其中該雜芳基C ₁-C ₃烷基之該雜芳基部分、該雜環基及該雜環基C ₁-C ₃烷基之該雜環基部分進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基及(NR ^xR ^y)C ₁-C ₃烷基；或 R ⁵及R ¹⁶與其所附接之氮原子一起形成雜環基，該雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基； R ^a及R ^b中之一者選自氫及C ₁-C ₃烷基且另一者選自氫、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基羰基、C ₁-C ₃烷基羰基、芳基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基及C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基；且 R ^x及R ^y中之一者為氫且另一者選自-C(O)C ₁-C ₆烷基雜環基，其中該雜環基視情況經側氧基取代。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： U為鍵或NH； Z為鍵、O、NR ^e或CR ^eR ^f，其中R ^e及R ^f獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； R ¹為芳基或雜芳基，其中該芳基及該雜芳基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基； R ²及R ³獨立地選自氫、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、-C(O)NH ₂、-C(O)NH(C ₁-C ₃烷基)、-C(O)N(C ₁-C ₃烷基) ₂及羥基； Y為鍵、O、NR ^g(CR ^eR ^f) _m、NR ^f或CR ^eR ^f，其中m為1、2或3，且其中R ^e、R ^f及R ^g獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； A為四員至十員含氮單環或雙環橋接、稠合或螺環飽和、不飽和或部分不飽和環系，其視情況含有一個或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子，其中該環系視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基； R'為鹵基； R ⁴為芳基或雜芳基環；其中該環視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基； X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基； R ⁵選自氫、C ₁-C ₆烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆烷基、芳基、芳基C ₁-C ₆烷基、羧基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基、二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基、鹵基C ₁-C ₆烷基、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基、羥基C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基，其中該芳基、該芳基C ₁-C ₆烷基之該芳基部分、該C ₃-C ₆環烷基、該C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基之該環烷基部分、該雜芳基、該雜芳基C ₁-C ₆烷基之該雜芳基部分、該雜環基、該雜環基C ₁-C ₆烷基之該雜環基部分視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₆烷基)胺基、(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羧基、氰基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；其中該雜環基及該雜環基C ₁-C ₃烷基之該雜環基部分進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基及鹵基C ₁-C ₃烷基；或 R ⁵及R ¹⁶與其所附接之氮原子一起形成雜環基，該雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基；且 R ^a及R ^b中之一者選自氫及C ₁-C ₃烷基且另一者選自氫、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基羰基、C ₁-C ₃烷基羰基、芳基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基及C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： U為鍵或NH； Z為鍵、O、NR ^e或CR ^eR ^f，其中R ^e及R ^f獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； R ¹為芳基或雜芳基，其中該芳基及該雜芳基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基； R ²及R ³獨立地選自氫、C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、-C(O)NH ₂、-C(O)NH(C ₁-C ₃烷基)、-C(O)N(C ₁-C ₃烷基) ₂及羥基； Y為鍵、O、NR ^g(CR ^eR ^f) _m、NR ^f或CR ^eR ^f，其中m為1、2或3，且其中R ^e、R ^f及R ^g獨立地為氫或C ₁-C ₃烷基； A為四員至十員含氮單環或雙環橋接、稠合或螺環飽和、不飽和或部分不飽和環系，其視情況含有一個或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子，其中該環系視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、氰基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基； R'為鹵基； R ⁴為五員或六員芳環，視情況含有一個、兩個或三個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子；其中該環視情況經一個、二個或三個獨立地選自以下之取代基取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷基、氰基、氰基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基； X為O或NR ¹⁶，其中R ¹⁶為氫或C ₁-C ₃烷基； R ⁵選自氫、C ₁-C ₆烷氧基C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆烷基、芳基、芳基C ₁-C ₆烷基、羧基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基、C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基、二(C ₁-C ₃烷基)胺基C ₂-C ₆烷基、鹵基C ₁-C ₆烷基、雜芳基、雜芳基C ₁-C ₆烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₆烷基、羥基C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^b-C(O)-C ₁-C ₆烷基、NR ^aR ^bC ₁-C ₆烷基，其中該芳基、該芳基C ₁-C ₆烷基之該芳基部分、該C ₃-C ₆環烷基、該C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基之該環烷基部分、該雜芳基、該雜芳基C ₁-C ₆烷基之該雜芳基部分、該雜環基、該雜環基C ₁-C ₆烷基之該雜環基部分視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₆烷基)胺基、(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羧基、氰基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基、二(C ₁-C ₆烷基)胺基C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、雜環基、雜環基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基；其中該雜環基及該雜環基C ₁-C ₃烷基之該雜環基部分進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基及鹵基C ₁-C ₃烷基；或 R ⁵及R ¹⁶與其所附接之氮原子一起形成雜環基，該雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基烷基、C ₁-C ₃烷基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基；且 R ^a及R ^b中之一者選自氫及C ₁-C ₃烷基且另一者選自氫、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基羰基、C ₁-C ₃烷基羰基、芳基C ₁-C ₆烷基、C ₃-C ₆環烷基及C ₃-C ₆環烷基C ₁-C ₆烷基。
如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁴為五員或六員芳環，其視情況含有一個、兩個或三個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子。
如請求項1至4中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Y為鍵。
如請求項1至4中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Y為NR ^f。
如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Y為NCH ₃。
如請求項1至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A為四員至九員單環或雙環橋接、螺環或稠合飽和環系，其視情況含有一個或兩個氮原子。
如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A-U為其中 * 表示與羰基之附接點；且表示與Y之附接點。
如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A-U為；其中 * 表示與羰基之附接點；且表示與Y之附接點。
如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A-U為其中 * 表示與羰基之附接點；且表示與Y之附接點。
如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ²為氫或甲氧基。
如請求項1至12中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ³為鹵基。
如請求項1至13中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁴選自咪唑基、異噻唑基、異㗁唑基、㗁唑基、苯基、吡𠯤基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、噻二唑基及三唑基，其中各環視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C ₂-C ₄烯基、C ₁-C ₃烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷氧基、鹵基C ₁-C ₃烷基、硝基及側氧基。
如請求項1至14中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁴選自咪唑基、㗁唑基、嗒𠯤基、吡啶基、嘧啶基及噻唑基，其中各環視情況經甲基或鹵基取代。
如請求項1至15中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為O。
如請求項1至16中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁵係選自：；其中各環視情況經1個、2個或3個獨立地選自以下之基團取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷基、苄基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基、羥基C ₁-C ₃烷基及側氧基。
如請求項1至16中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁵為-(C ₁-C ₃烷基)-R ⁶，其中R ⁶為三員至五員單環系、八員或九員雙環稠合飽和環系或十員三環飽和環系，其中各環系視情況含有一個氮原子，且其中各環系視情況經一個或兩個獨立地選自C ₁-C ₃烷基、鹵基及(4員至6員雜環基)C ₁-C ₃烷基之基團取代；其中該(4員至6員雜環基)C ₁-C ₃烷基之該雜環基部分進一步視情況經鹵基取代。
如請求項1至18中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁵為；且表示與X之附接點。
如請求項1至18中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ⁵為；其中n為0、1或2；各R ²⁰為鹵基；且表示與X之附接點。
如請求項1至20中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中Z為鍵。
如請求項1至21中任一項之化合物，其中R ¹為含有一個、兩個或三個氮原子之單環雜芳基環，其中該環視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。
如請求項1至21中任一項之化合物，其中R ¹為含有一個、兩個或三個選自氮及硫之雜原子的雙環雜芳基環，其中該環視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。
如請求項1至21中任一項之化合物，其中R ¹為苯環，其視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。
如請求項1至21中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ¹為C ₆-C ₁₀芳基，其視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄烯基、C ₂-C ₄炔基、胺基、胺基C ₁-C ₃烷基、氰基、C ₃-C ₄環烷基、鹵基、鹵基C ₁-C ₃烷基、羥基及羥基C ₁-C ₃烷基。
如請求項1至21及25中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ¹為萘基，其經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：C ₁-C ₃烷基、C ₂-C ₄炔基、鹵基及羥基。
如請求項1至21、25及26中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ¹為萘基，其中該萘基經一個、兩個或三個獨立地選自C ₂-C ₄炔基、鹵基及羥基之基團取代。
如請求項1至21及25至27中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ¹為；其中指示與母分子部分之附接點。
如請求項1至21中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ¹為；其中指示與母分子部分之附接點。
如請求項1至29中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R'為氟。
如請求項1至29中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R'為氯。
一種化合物，其選自由以下組成之群：反式異構物1；反式異構物2；順式異構物1；順式異構物2；順式異構物1；順式異構物2；反式異構物1；反式異構物2；；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種化合物，其選自由以下組成之群： (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(4-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氯-3-(嘧啶-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-3-(5-溴吡啶-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-3-(4-溴噻唑-2-基)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-N-((1R,4R)-2-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-4-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯胺； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(嘧啶-4-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (S,Z)-1-(4-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(2-氟-5-羥苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(8-乙基萘-1-基)-8-氟-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (S,Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((1R,5S)-3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(苯并[b]噻吩-3-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(7-氟萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯啶-2-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氟-1-(4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2,5-二氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(7-(2-(二氟甲基)-5-氟苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 8-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(1-甲基-1H-吲唑-7-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((4aS,7aS)-1-甲基八氫-4aH-環戊并[b]吡啶-4a-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)-4-(8-氟-7-(5-氟-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]㗁𠯤-4-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(2-胺基-7-氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)-5-胺基苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基-4-(8-氟-7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(3-羥苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮順式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物1； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮反式異構物2； (Z)-1-(3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-2-甲基吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,4-二氮雜環庚烷-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丙基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((2S)-4-(7-(2-環丁基苯基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-((2S,5R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aR)-1-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-4-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((S)-4-(7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(2-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(2-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-7-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(7-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-羥基-2-(三氟甲基)苯基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-5-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基-6,7-二氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3aR,6aS)-5-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(6-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1,6-二氮雜螺[3.4]辛-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； 2-((S)-4-(8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-6-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-2-基)乙腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡咯并[3,2-b]吡咯-1(2H)-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)-5-甲氧基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (S,Z)-1-(4-(2-((1-(3-疊氮基丙基)吡咯啶-2-基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； N-((1-(3-((S)-2-(((7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯啶-1-基)丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-5-((3aS,4S,6aR)-2-側氧基六氫-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊醯胺； 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； 8-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1-萘腈； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((R)-3-((7-(8-乙炔基-7-氟萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3R)-3-((7-(2-胺基-5,7-二氟苯并[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (5,7-二氟-4-(8-氟-4-(((R)-1-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)吡咯啶-3-基)(甲基)胺基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯； 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈； 2-胺基-7-氟-4-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嘧啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(㗁唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(6-甲基吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-2-氯-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-(7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)哌𠯤-1-基)-2-氟-3-(嗒𠯤-3-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-((3S,4R)-3-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)-4-氟吡咯啶-1-基)-2-氟-3-(吡𠯤-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮； (Z)-1-(4-((7-(8-乙炔基萘-1-基)-8-氟-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)(甲基)胺基)哌啶-1-基)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙-2-烯-1-酮； 3-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(吡啶-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈；及 3-(8-氟-4-(4-((Z)-2-氟-3-(噻唑-2-基)丙烯醯基)哌𠯤-1-基)-2-(((2R,7aS)-2-氟四氫-1H-吡-7a(5H)-基)甲氧基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-7-基)-1H-吲哚-4-甲腈；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
一種口服劑型，其包含如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。
一種治療有需要之個體之表現KRAS G12C突變之癌症之方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
一種治療有需要之個體之表現KRAS G12C突變之癌症之方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
一種治療有需要之個體中可感受KRAS G12C抑制性之癌症之方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
一種治療有需要之個體之癌症之方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症為肺癌、大腸直腸癌、胰臟癌、乳癌、膀胱癌、子宮頸癌、卵巢癌、胃癌或子宮癌。
一種治療有需要之個體之癌症之方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至33中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該癌症為非小細胞肺癌。