TW202412807A

TW202412807A - 貝魯舒地爾(belumosudil)之液體調配物

Info

Publication number: TW202412807A
Application number: TW111135811A
Authority: TW
Inventors: 奧莉維耶舒爾勒; 蓋里特雷吉維
Original assignee: 美商凱德蒙有限責任公司
Filing date: 2022-09-21
Publication date: 2024-04-01

Abstract

本公開文本提供了一種包含貝魯舒地爾的液體調配物，一種用於製備貝魯舒地爾的液體調配物的方法，以及可用於治療個體的包含貝魯舒地爾的液體醫藥組合物。

Description

貝魯舒地爾(BELUMOSUDIL)之液體調配物

本公開文本涉及包含2-{3-[4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-喹唑啉基]苯氧基}-N-(丙-2-基)乙醯胺（也稱為貝魯舒地爾(Belumosudil)）的液體調配物。本公開文本還涉及製備包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法和用液體調配物治療個體（包括成人和兒科群體）的方法。

貝魯舒地爾是一種口服選擇性的rho相關含捲曲螺旋的蛋白激酶-2（ROCK2）抑制劑。ROCK2抑制作用於失調的適應性免疫系統和因異常組織修復而發生的纖維化。貝魯舒地爾抑制ROCK2和ROCK1，IC ₅₀值分別為約100 nM和3 μM。

化合物貝魯舒地爾具有化學名稱：2-{3-[4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-喹唑啉基]苯氧基}-N-(丙-2-基)乙醯胺，並且由下式I表示： (I)。

貝魯舒地爾也稱為KD025。

貝魯舒地爾的甲磺酸鹽目前在美國和其他國家以商品名REZUROCK®（Kadmon Corp./Sanofi）銷售，用於治療患有慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的患者，在一些情況下在至少兩種先前全身治療線失敗後使用。REZUROCK®的活性藥物成分是貝魯舒地爾甲磺酸鹽，其分子式為C ₂₇H ₂₈N ₆O ₅S，分子量為548.62 g/mol，並且化學名稱為2-{3-[4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-喹唑啉基]苯氧基}-N-(丙-2-基)乙醯胺甲磺酸鹽（1:1）。

貝魯舒地爾甲磺酸鹽的化學結構如下：

貝魯舒地爾結合並抑制ROCK1和ROCK2的絲胺酸/蘇胺酸激酶活性。貝魯舒地爾在離體或體外人T細胞測定中藉由調節STAT3/STAT5磷酸化和改變Th17/Treg平衡來下調促炎反應。貝魯舒地爾還在體外抑制異常的促纖維化信號傳導。在體內，貝魯舒地爾在cGVHD的動物模型中顯示出活性。因此，貝魯舒地爾可用於治療由ROCK調節的疾病、障礙和病症，尤其包括自身免疫性和纖維化障礙、急性和慢性GVHD、特發性肺纖維化和中度至重度乾癬等適應症。

在美國專利8,357,693（‘693專利）中，具體地在其實例82中揭露了製備貝魯舒地爾的方法。在‘693專利中揭露的方法提供了作為粗固體產物的貝魯舒地爾，其藉由高效液相層析（HPLC）純化。貝魯舒地爾和製備所述化合物的方法也描述於美國專利號9,815,820、美國專利號10,183,931和美國專利號10,696,660中。

目前投予貝魯舒地爾的方法包括將貝魯舒地爾的甲磺酸鹽配製成用於口服投予的醫藥上可接受的膠囊和片劑。然而，可能受益於貝魯舒地爾治療的某些患者不能或難以和/或不喜歡吞咽固體劑型，例如某些成人患者、吞咽困難患者和/或兒科患者。因此，貝魯舒地爾的液體調配物可用於將化合物投予更廣泛的患者群體。液體調配物還可以在增強藥物投予方式的靈活性方面提供優勢。

液體調配物還可以在使得能夠根據體重向患者靈活投予臨床推薦劑量方面提供優勢。例如，對於液體調配物，可根據患者的體重按比例（on a sliding scale）調節待投予的藥物的量。相比之下，對於目前市售的固體口服劑型，每個片劑包含200 mg貝魯舒地爾。

然而，貝魯舒地爾是幾乎不溶於水的弱鹼性化合物。貝魯舒地爾也不溶於或幾乎不溶於藥物開發中常用的許多其他溶劑或載劑。貝魯舒地爾的低溶解度在開發液體調配物方面提出了挑戰。因此，仍然需要可以解決這些挑戰的包含貝魯舒地爾的調配物以及投予貝魯舒地爾的液體調配物的方法。

在一態樣，本公開文本提供了包含2-{3-[4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-喹唑啉基]苯氧基}-N-(丙-2-基)乙醯胺（貝魯舒地爾）的液體調配物。在一個實施例中，液體調配物包含懸浮在與懸浮劑和增稠劑組合的稀釋劑中的噴射研磨或針研磨的貝魯舒地爾。包含貝魯舒地爾的液體調配物還可包含防腐劑、達到約2.5至4.0範圍內的pH所需的pH調節劑、以及甜味劑和/或調味劑。

本公開文本的另一態樣提供了藉由在媒劑中混合噴射研磨或針研磨的貝魯舒地爾產生的貝魯舒地爾的液體調配物，其中所述媒劑在稀釋劑中至少包含懸浮劑和增稠劑。

在另一個實施例中，本公開文本提供了一種套組，其包含製備為乾粉的噴射研磨或針研磨的貝魯舒地爾，並且提供有在稀釋劑中至少包含懸浮劑和增稠劑的重構媒劑，其中貝魯舒地爾可以在使用之前用重構媒劑重構。本公開文本還提供用於製備貝魯舒地爾的液體調配物的方法，如文中進一步所述。

在另一個實施例中，本公開文本提供了包含有效量的貝魯舒地爾的液體調配物的醫藥組合物，其可用於治療如本文進一步描述的由ROCK調節的疾病、障礙和病症。

定義

如本文所用的“約”包括由術語約修飾的精確量以及預期在實驗誤差內（例如在15%、10%或5%內）的量，這取決於上下文。例如，“約200 mg”意指“200 mg”以及在實驗誤差（例如加或減200 mg的15%、10%或5%）內的mg範圍。如本文所用，術語“約”可用於修飾範圍以及特定值。

如本文所用的“投予（Administering）”或“投予至（administered to）”（例如，就投予貝魯舒地爾或含有貝魯舒地爾的液體調配物而言）是指規定含有貝魯舒地爾的一種或多種藥物用於個體在治療期間服用的行為、規定要由個體服用的藥物方案的行為、將一種或多種藥物分配給個體的行為、在液體調配物中重構粉末狀貝魯舒地爾的行為和/或物理地接受或攝取一種或多種藥物的行為。因此，貝魯舒地爾可以由開具貝魯舒地爾處方的醫師或其他醫學專業人員；和/或由填寫所述處方的藥師，和/或由使用粉末狀貝魯舒地爾製備重構液體調配物的人；和/或由攝取貝魯舒地爾的患者或個體和/或將貝魯舒地爾遞送至個體的所述個體的伴侶或照顧者“投予”。

“API”意指“活性藥物成分”，其在本文中與貝魯舒地爾（或KD025）的定義同義。

“同種異體造血幹細胞移植（異體HSCT）”也稱為骨髓移植或幹細胞移植，或“同種異體造血細胞移植（異體HCT）”是指將來自供體的造血細胞移植到並非單卵雙生的受體體內的程式。用於同種異體移植的造血幹細胞的來源可以是外周血幹細胞（PBSC）或骨髓（BM）。在一些情況下，可以使用臍帶血。供體和受體可以在人白細胞抗原（HLA）基因處匹配，如同胞。供體和受體可以是僅半匹配（單倍體相同）的父母和孩子。

除非上下文另有明確說明，否則本文所用的“貝魯舒地爾”可涵蓋呈任何形式的化合物貝魯舒地爾及其醫藥上可接受的鹽。術語“貝魯舒地爾”既是指化合物貝魯舒地爾（例如，呈游離鹼形式、無定形形式或結晶形式），是指貝魯舒地爾的醫藥上可接受的鹽，例如，如在REZUROCK®中使用的甲磺酸鹽形式，也是指可用於製備用於向患者投予所述化合物的液態調配物或醫藥組合物的貝魯舒地爾的任何形式。

“臨床終點”或“研究終點”是指臨床試驗中的事件或結局，其可被客觀測量以確定如臨床試驗中設計的藥物或投予方案的結局和潛在有益效果。臨床終點的例子包括以下。總體反應率（ORR）是研究或治療組中在一定時間內對治療具有部分反應（PR）或完全反應（CR）的人的百分比。無失敗存活期（FFS）意指從貝魯舒地爾的第一劑量到失敗事件的時間，或者在貝魯舒地爾開始與添加新的cGVHD療法、基礎疾病的復發或非復發死亡（NRM）之間的間隔。總存活期（OS）意指從診斷日期或疾病治療開始的時間長度。反應持續時間（DOR）意指從初始反應（例如，PR或CR）的時間直到記錄的從cGVHD的最佳反應進展、從初始反應到開始另外的全身性cGVHD治療或死亡的時間。到下一次治療的時間（TTNT）意指到開始後一全身cGVHD療法的時間。

“臨床推薦量”或“臨床推薦劑量”是指已被推薦和/或批准由藥物化學領域的技術人員投予於個體以在臨床試驗後治療所討論的疾病狀態的貝魯舒地爾的量或劑量，例如，如出版物、臨床試驗結果和批准的藥物標籤中所述。在一個實施例中，如在貝魯舒地爾的藥物標籤上所指示的，在不投予CYP3A誘導劑或PPI的情況下，貝魯舒地爾的臨床推薦劑量是200 mg，每天一次。

如本文所用的關於貝魯舒地爾與其他物質（例如，CYP3A誘導劑和/或PPI）的投予的“共投予”、“與…組合”和/或“共同投予”意指在用貝魯舒地爾治療患者的過程期間，患者還正在接受一個或多個劑量的一種或多種其他治療。化合物不需要與貝魯舒地爾同時或在同一天投予才被視為本定義下的“共同投予”。

“高脂肪、高熱量膳食”是指含有約800至1,000卡路里的膳食，其中大約50%的膳食總卡路里來自脂肪食物。例如，在一個實施例中，高脂肪早餐可以由土豆餅、培根、煎蛋、白麵包和240 mL全脂牛奶組成。

“均質器”是指一件用於各種類型的材料（例如賦形劑、稀釋劑和API）的均質化的實驗室或工業設備。本領域技術人員將理解存在許多不同類型的均質化設備，包括細胞溶解器、分散器、高剪切混合器、均質器、Polytron、轉子定子均質器、聲波器、掌上型組織勻漿機等。有利的均質器是SILVERSON®均質器。

“免疫抑制療法”（IST）是指通常在異體HSCT後投予至少6個月以試圖預防GVHD的療法。IST的例子包括西羅莫司(sirolimus)、潑尼松(prednisone)和鈣調磷酸酶抑制劑如他克莫司(tacrolimus)和環孢菌素。

“標籤要求”是指與批准的藥物標籤中所指示相對應的API的量或劑量。例如，在美國，目前批准的REZUROCK®的藥物標籤陳述，推薦劑量為200 mg，每日一次與食物一起口服；並且當與強CYP3A誘導劑和PPI共同投予時為200 mg，每日兩次。液體調配物中貝魯舒地爾的等效劑量（對應於200 mg標籤劑量）計算為40 mg/mL游離鹼，當用1.2124鹽校正因子調整時，其等效於48.496 mg/mL貝魯舒地爾甲磺酸鹽。

Lee症狀量表（LSS）總結得分測量對患者功能和健康的影響。Lee症狀量表是為測量cGVHD症狀而開發的30項量表，並在Lee SJ等人, Development and validation of a scale to measure symptoms of chronic graft-versus host disease. Biol Blood Marrow Transplant 2002; 8:444-452中描述。

“治療線”或“療法線”描述了當患者的疾病進展時向患者給予不同療法的順序或次序。初始治療（一線療法）可能無效或在一段時間後停止起作用。在停止一線治療後，可以給予第二種不同的治療（二線療法）。當二線療法無效或停止起作用時，可以給予隨後的療法線。一些患者可能在疾病過程中被投予多個療法線。

美國國立衛生研究院（NIH）定義的中度至重度慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的一線療法可以是單獨的皮質類固醇或者與西羅莫司或鈣調磷酸酶抑制劑組合的皮質類固醇。（Carpenter PA等人: A phase II/III randomized, multicenter trial of prednisone/sirolimus versus prednisone/sirolimus/calcineurin inhibitor for the treatment of chronic graft-versus-host disease: BMT CTN 0801. Haematologica 103:1915-1924, 2018）。

用於治療cGVHD的皮質類固醇療法的例子包括但不限於潑尼松、潑尼松龍(presnisolone)、甲潑尼松龍和布地奈德(budesonide)。用於治療cGVHD的先前全身性療法的例子包括但不限於潑尼松、他克莫司、體外光化學療法（ECP）、西羅莫司、伊布替尼(ibruitinib)、盧梭利替尼(ruxolitinib)、黴酚酸酯（MMF）、利妥昔單抗(rituximab)、甲胺蝶呤（MTX）、環孢黴素、伊馬替尼(imatinib)、伊沙佐米(ixazomib)和奧法木單抗(ofatumumab)。

如本文所用的“液體調配物”或“液體”意指調配物基本上呈液態而非固態（或氣態），並且包括懸浮液，其中固體顆粒（例如，貝魯舒地爾顆粒）遍佈液體中而沒有溶解於其中。

“清髓性移植”是指在移植自體或同種異體造血幹細胞之前使用非常高劑量的化療或輻射的移植方法。非清髓性移植或減低強度移植涉及在移植同種異體造血幹細胞之前進行較低強度化療的患者。

“NIH肺症狀得分”或“NIH cGVHD肺得分”是範圍為0至3的基於臨床症狀的得分。得分0用於無症狀，得分1用於上樓梯時呼吸短促的症狀，得分2用於在平地上呼吸短促的症狀，並且得分3用於在靜止時呼吸短促或需氧。

除非上下文另有要求，否則“或”以包含的含義使用（等同於“和/或”）。

如本文所用的“患者”或“個體”包括動物或人；在一個實施例中，術語“患者”是指人類個體。

如本文所用的“兒科患者”是指非成人患者（即小於18歲）；在一個實施例中，其意指小於12歲的患者；在另一個實施例中，它是指3個月與12歲之間的患者。

“醫藥上可接受的鹽”是指貝魯舒地爾的無毒的無機和有機酸加成鹽。在一個實施例中，本文的貝魯舒地爾的醫藥上可接受的鹽是甲磺酸鹽。

“聚維酮（Povidone）”是指由單體N-乙烯基吡咯啶酮製成的水溶性聚合物，通常也稱為聚乙烯吡咯啶酮或聚維酮（polyvidone）。聚維酮的分子式為(C ₆H ₉NO) _n，呈白色至微灰白色粉末。與聚維酮名稱相關的k數指聚維酮的平均分子量。因此，聚維酮90具有比聚維酮K30更高的分子量。

如本文所用的“方案”是指用於向需要治療的個體投予貝魯舒地爾的方法或計畫。術語“方案”旨在涵蓋對患者的整體、詳細護理計畫，以及作為整體計畫的一部分的單獨或部分步驟。例如，方案可以包括患者將（或正在）接受的貝魯舒地爾的劑量、患者接受的藥物的組合、貝魯舒地爾的投予的時機和方法（例如，考慮DDI、食物效應以及不同配方或遞送模式可能對吸收和生物利用度產生的影響）、和副作用的管理、以及涵蓋一起考慮的所述劑量、組合、投予的時機和方法以及副作用的整體計畫。

“質子泵抑制劑”或“PPI”是指抑制胃的H ⁺/K ⁺ATP酶質子泵並引起胃酸產生減少的藥物。由於PPI減少胃酸產生，因此它們可以增加胃的pH，這影響口服遞送的藥物的溶解度和潛在的生物利用度。PPI的例子包括奧美拉唑、蘭索拉唑、右蘭索拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、雷貝拉唑和艾普拉唑。

本文所用的“二氧化矽”或“二氧化矽試劑”是指可用作助流劑和/或抗結塊劑的任何二氧化矽產品，例如二氧化矽、氣相二氧化矽、膠態水合二氧化矽、沈澱二氧化矽和矽酸鋁鎂，並且包括以商品名SYLOID®和AEROSIL®出售的二氧化矽產品。

AEROSIL® 200是含有大於99.8% SiO ₂且比表面積為200 m2/g的親水性氣相二氧化矽產品。

SYLOID® 244 FP是以無定形白色自由流動粉末形式出售的替代性二氧化矽（SiO ₂）產品，其可購自W.R. Grace & Co.（美國康涅狄格州）。SYLOID® 244 FP二氧化矽是一種具有大內表面積的高孔體積矽膠。它對水分和有機基液體具有強親和力。SYLOID® 244 FP二氧化矽每克可以吸附多達1.6 ml液體。SYLOID® 244 FP二氧化矽作為用於藥物和個人護理產品的助流劑、壓片助劑和載劑是有利的。

“類固醇難治性”（SR）cGVHD定義為服用類固醇或皮質類固醇時（在一個實施例中，在服用潑尼松時）的cGVHD進展。

“懸浮液”是指精細分佈的固體在液體中的混合物，其中所述固體不溶於所述液體中。本文所用的術語“液體調配物”或“調配物”包括懸浮液。例如，術語“包含貝魯舒地爾的液體調配物”、“貝魯舒地爾的液體調配物”和/或“貝魯舒地爾液體調配物”旨在涵蓋貝魯舒地爾的懸浮液或其中固體貝魯舒地爾顆粒分佈在液體中但不溶解於其中的異質或均質混合物。

API的“治療有效量”是指當投予於人以治療疾病（例如，cGVHD）時足以達到對所治療的疾病狀態的治療的量。當應用於人的cGVHD時，“治療（treating）”或“治療（treatment）”包括 (1) 降低患上cGVHD的風險和/或抑制cGVHD，即阻止或降低cGVHD或其臨床症狀的發展；以及 (2) 緩解cGVHD，即引起cGVHD的消退、逆轉或改善，或者降低其臨床症狀的數量、頻率、持續時間或嚴重程度。

API的治療有效量可根據待治療的個體的健康和身體狀況、疾病進展程度、醫學狀況的評估和其他相關因素而變化。預期治療有效量可落入可藉由試驗和藉由參考臨床試驗資料和結果確定的範圍內，例如，如本文實例和科學文獻中所述。

如本文所用的短語“醫藥上可接受的載劑”意指醫藥上可接受的材料、組合物或媒劑，諸如固體填充劑、稀釋劑、賦形劑或製造助劑。在與調配物的其他成分相容並且對患者無害的意義上，每種載劑必須是“可接受的”。概述

本公開文本提供了一種滿足可接受的目標產品品質概況（QTPP）的包含貝魯舒地爾的有用的液體調配物，其用於以不需要吞咽固體劑型的方式向患者投予貝魯舒地爾。

為了提供如本文所公開的包含貝魯舒地爾的液體調配物，研究了各種賦形劑，包括粘度調節劑、防腐劑、懸浮劑、pH調節劑、甜味劑和增稠劑。隨著時間並且在各種溫度和pH系統下研究了所述藥劑遇到的物理穩定性問題。申請人發現，在滿足使用膠態二氧化矽系統時對應於成人標籤要求和用於兒科群體的濃度的合適的包含水準下，可以達到貝魯舒地爾的令人滿意的分散和再懸浮性。

用懸浮劑/增稠劑、防腐劑、甜味劑和調味劑的組合評估調配物以鑑定對於包含貝魯舒地爾的液體調配物的最有利的系統。

還對噴射研磨和針研磨的貝魯舒地爾進行了評估，以選擇用於包含貝魯舒地爾的液體調配物的最合適的輸入材料。用貝魯舒地爾的替代研磨技術製造的調配物的比較初步表明，針研磨的API將提供用於所述調配物中的最合適的材料，並且噴射研磨的API是有問題的並且呈現各種障礙。然而，在進一步研究後申請人發現，噴射研磨的API提供了獲得均勻均質性且滿足QTPP的優選形式。

對貝魯舒地爾在液體中的行為的瞭解結合對所述成分的重要性的理解在這種穩定的調配物的開發中起重要作用。噴射研磨的API可以代替針研磨的API用於該調配物中以降低沈降和起泡的量。

另外，可以使用懸浮劑，例如二氧化矽或膠態二氧化矽以使沈積最小化並且與聚維酮（或聚乙烯吡咯啶酮[PVP]）組合以改善分散。聚維酮是可有助於保持介質粘度的聚合物和增稠劑。

另外，可以使用防腐劑。事實上，如本文所公開，發現使用防腐劑在保護包含貝魯舒地爾的液體調配物方面提供了優勢。在實驗後，選擇苯甲酸鈉作為在調配物中使用的有效防腐劑。苯甲酸鈉歸因於未解離的苯甲酸而具有抑菌和抗真菌兩種特性。因此，不使用防腐劑方法的貝魯舒地爾的液體調配物對於製備即用型液體藥物調配物將是不太有利的。

在一個實施例中，可使用均質化步驟來改善調配物的均勻性。

當與未調味和未加糖的對照系統相比時，顯示出改善的適口性的調味劑和甜味劑組合是從人類志願者味覺研究中鑑定的，並且進行開發活動以優化用於貝魯舒地爾的增稠劑/懸浮系統。

用於包含貝魯舒地爾的液體調配物的藥劑和賦形劑是可商購的。例如，以商品名SYLOID®銷售的二氧化矽懸浮劑可購自W.R. Grace & Co.（美國康涅狄格州）；以商品名AEROSIL®銷售的二氧化矽產品可購自Evonik Degussa（德國埃森）和/或Azelis Ltd（英國赫特福德）；增稠劑聚維酮K30和聚維酮K90F可購自BASF Corp.（美國新澤西州的弗洛勒姆派克）；三氯蔗糖和苯甲酸鈉可購自Merck KGaA（德國達姆施塔特）；並且調味劑如檸檬和熱帶水果混合調味劑可購自Givaudan International SA（瑞士）和/或IMCD Group。

鑑定出替代調配物，並在穩定性試驗後選擇了主調配物。調配物的穩定性是其在實際應用中的可行性的重要屬性，特別是在目標是以預製備的液體形式遞送包含貝魯舒地爾的調配物的情況下。為此，申請人評估了各種替代貝魯舒地爾調配物以評估它們的化學穩定性（沒有降解）；溶液穩定性（pH隨時間變化有限）；物理穩定性（不存在不可逆沈降或藉由攪拌重構調配物的能力）；和微生物穩定性（使用防腐劑以確保無微生物/細菌生長）。

本文公開的貝魯舒地爾調配物藉由使得能夠根據患者的年齡和/或體重容易地改變劑量體積而使得能靈活用劑。在一個實施例中，貝魯舒地爾以基於體重的用劑方案投予，其中個體以mg/kg計接受大致相同的劑量。這種基於體重的用劑方案不適用於固定劑量片劑。

根據本文公開文本的包含貝魯舒地爾的液體調配物適用於所有年齡的患者，包括成人和兒童，包括不能、難以或不喜歡吞咽固體口服劑型的成人和兒童。例如，考慮適用於3個月至12歲或3個月至18歲的兒童的包含貝魯舒地爾的液體調配物。液體調配物可以大規模製造用於銷售和相對生物利用度評估，並與批准銷售的固體口服劑型如200 mg片劑進行比較。

在一個實施例中，本公開文本提供了貝魯舒地爾的液體懸浮液形式，其可以藉由口服途徑投予例如不能、難以和/或不喜歡吞咽口服片劑或膠囊的成年患者和/或兒科患者。

在一個實施例中，本文所公開的包含貝魯舒地爾的液體調配物可以以即用液體形式提供，其中貝魯舒地爾已經分佈遍及液體媒劑。在其他實施例中，貝魯舒地爾可以作為乾粉製備和製造，並作為具有重構媒劑的套組來提供，其中貝魯舒地爾在使用前用所述媒劑重構。 示例性實施例

在一個實施例中，提供了具有表1中列出的組分的液體調配物。表1：調配物組分

組分	% w/w
貝魯舒地爾(API)	2-8
防腐劑	0.02-0.08
甜味劑	0.1-0.4
懸浮劑	0.206-0.824
增稠劑	2.061-8.247
pH調節劑	適量添加至pH 2.5至4.0
稀釋劑	適量添加至體積

在一個實施例中，貝魯舒地爾甲磺酸鹽用於表1中所述的調配物中。在一個實施例中，貝魯舒地爾甲磺酸鹽已經被噴射研磨和/或針研磨。在一些實施例中，貝魯舒地爾（或貝魯舒地爾甲磺酸鹽）已經被噴射研磨。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的防腐劑是苯甲酸鈉。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的甜味劑是三氯蔗糖。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的懸浮劑是選自膠態二氧化矽、二氧化矽和氣相二氧化矽的二氧化矽產品。在另一個實施例中，懸浮劑是膠態二氧化矽；在一個實施例中，懸浮劑是SYLOID ®244FP。在另一個實施例中，懸浮劑是AEROSIL® 200。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的增稠劑是由單體N-乙烯基吡咯啶酮製成的水溶性聚合物。在另一個實施例中，增稠劑是聚維酮。在另一個實施例中，增稠劑選自聚維酮K30和聚維酮90F。在另一個實施例中，增稠劑是聚維酮90F。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的pH調節劑是酒石酸。在另一個實施例中，添加pH調節劑以達到3.0±0.5範圍內的pH。

在另一個實施例中，表1調配物中使用的稀釋劑是無菌沖洗用水。

在一個實施例中，向表1所述的調配物中加入調味劑。在一個實施例中，當製備液體調配物時，將調味劑與其他賦形劑和/或成分一起加入其中。在另一個實施例中，將調味劑儲存和/或提供在單獨的容器中，並且任選地根據需要和/或期望在大約投予點加入液體調配物中。

在一個實施例中，調味劑選自可商購的並且適用於藥物的那些。

在另一個實施例中，調味劑選自熱帶水果混合調味劑、檸檬調味劑和橙調味劑；在另一個實施例中，調味劑是熱帶水果混合調味劑。

在一個實施例中，調味劑是可購自IMCD Group的檸檬調味劑PHS-135460；在另一個實施例中，調味劑是可購自IMCD Group的熱帶水果混合調味劑PHS-145298。表2：貝魯舒地爾懸浮液調配物組分

組分	功能	% w/w	mg/ 5mL 劑量	每 2600g 批料的量 (g)
貝魯舒地爾甲磺酸鹽	藥物物質	4.75	242.48 ^a(200 mg游離鹼)	123.63
苯甲酸鈉	防腐劑	0.05	2.50	1.27
三氯蔗糖	甜味劑	0.15	7.50	3.82
SYLOID ®244FP	懸浮劑	0.49	25.00	12.74
聚維酮90F	增稠劑	4.90	250.00	127.45
酒石酸	pH 調節	適量添加至pH 3 ±0.5	適量添加至pH 3 ±0.5	適量添加至pH 3 ±0.5
無菌沖洗用水	媒劑	適量添加至100.00	適量添加至 5.10g	適量添加至2600.00
總計	-	100.00	5100.00	2600.00

^a藥物物質量(mg)係以貝魯舒地爾甲磺酸鹽給予，括號內為游離鹼等同物。標籤劑量係基於游離鹼明定。若需要時，可進行效力調整。

在另一個實施例中，提供具有表1中的組分並且滿足目標產品品質概況（QTPP）的液體調配物，其具有以下要求：200 mg藥物劑量（游離鹼當量），單一口服5 mL劑量（劑量表示為游離鹼當量並基於1.2124的鹽校正因子，其中200 mg游離鹼相當於242.48 mg甲磺酸鹽）；沒有味道/口感問題，顏色均勻；以及用於包裝和分配的足夠保質期，任選地進行冷藏（在一些實施例中，在2ºC-8ºC下）。

在一個實施例中，本公開文本提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其中貝魯舒地爾的濃度相當於約40 mg/mL游離鹼。在另一個實施例中，提供更稀的調配物以促進更低劑量的投予（例如，經由高濃度調配物投予低劑量會需要低體積，可能更難以測量）。在另一個實施例中，提供更濃縮的調配物以促進更高劑量的投予（例如，經由低濃度調配物投予高劑量會需要更高體積，患者可能更難以接受）。

因此，在一個實施例中，調配物每5 mL液體調配物包含約242 mg貝魯舒地爾。在另一個實施例中，將調配物稀釋以提供每10 mL液體調配物約242 mg原料藥。在一個實施例中，5 mL劑量包含約100 mg游離鹼貝魯舒地爾的等效劑量。在另一個實施例中，將調配物進一步稀釋以提供每20 mL液體調配物約242 mg原料藥。在一個實施例中，5 mL劑量包含約50 mg游離鹼貝魯舒地爾的等效劑量。

在另一個實施例中，用均質化步驟加工表1中所述的調配物。在一個實施例中，使用混合容器製備調配物，並且將容器置於均質器中，在調配物製備的至少一個步驟期間操作均質器以均質化內容物。

在另一個實施例中，提供了藉由在媒劑中混合噴射研磨或針研磨的貝魯舒地爾（在一個實施例中，貝魯舒地爾甲磺酸鹽）的方法製備的調配物，其中該媒劑在稀釋劑中包含懸浮劑和增稠劑。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其具有滿足具有以下要求的QTPP的組分：200 mg藥物劑量（作為游離鹼當量），單一口服5 mL劑量（劑量表示為游離鹼當量並基於1.2124的鹽校正因子，其中200 mg游離鹼相當於242.48 mg甲磺酸鹽）；沒有味道/口感問題，顏色均勻；以及用於包裝和分配的足夠保質期，任選地進行冷藏（在一些實施例中，在2ºC-8ºC下）。

在另一個實施例中，向調配物中加入調味劑。在一個實施例中，當製備液體調配物時，將調味劑與其他賦形劑和/或成分一起加入其中。在另一個實施例中，將調味劑儲存和/或提供在單獨的容器中，並且任選地根據需要和/或期望在大約投予點加入液體調配物中。

在另一個實施例中，調味劑選自適用於藥物的市售調味劑。在一些實施例中，調味劑選自熱帶水果混合調味劑和檸檬調味劑。在另一個實施例中，其為熱帶水果混合調味劑。

在一個實施例中，提供了根據以下步驟製備包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法：(a) 將第一部分的稀釋劑分配到合適地定尺寸的混合容器中；(b) 將防腐劑、懸浮劑、增稠劑和任選的甜味劑和/或調味劑分配並混合到混合容器中；(c) 任選地，在每次添加賦形劑後進行目視檢查；(d) 將混合容器轉移至均質器並將調配物均質化；(e) 任選地，進行目視檢查；(f) 將一定量的貝魯舒地爾甲磺酸鹽加入到均質化的溶液中並混合；(g) 任選地，進行目視檢查；(h) 測量調配物的pH；(i) 如果需要，將pH調節劑以等分樣品加入調配物中並混合直至達到期望的pH；以及 (j) 加入最後部分的稀釋劑以產生貝魯舒地爾調配物。此後，可以將包含貝魯舒地爾的液體調配物均質化和/或使其靜置直到任何氣泡或泡沫消散，並且此後，可以任選地對其進行目視檢查。可以將調配物按重量分配到最終的容器封閉件中並貼上標籤。

在另一個實施例中，提供了根據前一段落所述的步驟製備的包含貝魯舒地爾的液體調配物。

在另一個實施例中，提供了根據以下步驟製備包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法：(a) 將第一部分的無菌沖洗用水分配到合適地定尺寸的混合容器中；(b) 將苯甲酸鈉、三氯蔗糖、水合二氧化矽膠體和聚維酮分配並混合到混合容器中；(c) 任選地，在每次添加賦形劑後進行目視檢查；(d) 將混合容器轉移至均質器並將調配物均質化；(e) 任選地，進行目視檢查；(f) 將一定量的貝魯舒地爾甲磺酸鹽加入到均質化的溶液中並混合；(g) 任選地，進行目視檢查；(h) 測量調配物的pH；(i) 將酒石酸以等分樣品加入調配物中並混合直至達到期望的pH；以及 (j) 加入最後部分的無菌沖洗用水以產生貝魯舒地爾調配物。此後，可以將包含貝魯舒地爾的液體調配物均質化和/或使其靜置直到任何氣泡或泡沫消散，並且此後，可以任選地對其進行目視檢查。可以將調配物按重量分配到最終的容器封閉件中並貼上標籤。

在另一個實施例中，提供了使用前一段落所述的步驟製備的包含貝魯舒地爾的液體調配物。

在一個實施例中，使用表1中列出的每種賦形劑和成分的重量百分比進行前述步驟。

在另一個實施例中，使用以下重量百分比向調配物中添加賦形劑和成分：約2至8重量百分比貝魯舒地爾、約0.02至0.08重量百分比防腐劑；約0.1至0.4重量百分比甜味劑；約0.2至0.8重量百分比懸浮劑；以及約1至8重量百分比增稠劑。

在另一個實施例中，使用以下重量百分比向調配物中添加賦形劑和成分：(a) 對於貝魯舒地爾，約2至6重量百分比貝魯舒地爾，在另一個實施例中，約3至5重量百分比貝魯舒地爾（或任選地，約4.5至5重量百分比貝魯舒地爾，或任選地，約4.75重量百分比貝魯舒地爾）；(b) 對於防腐劑，約0.35至1.0重量百分比防腐劑（或任選地，約0.05重量百分比防腐劑）；(c) 對於甜味劑，約0.1至0.2重量百分比甜味劑（或任選地，約0.15重量百分比甜味劑）；(d) 對於懸浮劑，約0.3至1重量百分比懸浮劑，任選地，約0.4至0.6重量百分比懸浮劑（或任選地，約0.5懸浮劑）；以及 (e) 對於增稠劑，約4至6重量百分比增稠劑；或任選地，約4.5至5.5重量百分比增稠劑；或者，在另一個實施例中，約4.9重量百分比增稠劑。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其包含約2至8重量百分比貝魯舒地爾；在另一個實施例中，約2至6重量百分比貝魯舒地爾。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其包含約0.02至0.08重量百分比苯甲酸鈉作為防腐劑；在另一個實施例中，包含約0.35至1.0重量百分比苯甲酸鈉。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其包含約0.1至0.4重量百分比三氯蔗糖作為甜味劑；在另一個實施例中，包含約0.1至0.2重量百分比三氯蔗糖。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其包含約0.2至0.8重量百分比膠態二氧化矽作為懸浮劑；在另一個實施例中，包含約0.4至0.6重量百分比膠態二氧化矽。

在另一個實施例中，提供了包含貝魯舒地爾的液體調配物，其包含約1至8重量百分比聚維酮作為增稠劑。在另一個實施例中，液體調配物包含約4%至6%聚維酮。在某些實施例中，所述聚維酮是聚維酮90F。

在另一個實施例中，在添加到調配物中（例如，按照上述方法中的步驟[f]）之前，針研磨或噴射研磨貝魯舒地爾。在另一個實施例中，向調配物中加入噴射研磨的貝魯舒地爾甲磺酸鹽。

在另一個實施例中，向調配物中加入調味劑。在另一個實施例中，在步驟 (b) 期間將調味劑與防腐劑、甜味劑、懸浮劑和增稠劑一起加入。

在一個實施例中，使用反相梯度HPLC方法分析貝魯舒地爾的液體調配物。在一個實施例中，在液體調配物的製造期間對其進行分析測試（例如，在一個實施例中，藉由HPLC）。在一個實施例中，對在製造期間填充的第一瓶、中間瓶和最後一瓶進行分析測試。

在一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物配製為在約5 mL的體積中遞送200 mg貝魯舒地爾（以游離鹼當量計）的單劑量。在另一個實施例中，將液體貝魯舒地爾配製為在約1至10 mL的單體積劑量中（在另一個實施例中，在約5 mL的體積中）遞送12至200 mg（以游離鹼當量計）範圍內的單劑量。

在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物配製為在約1至10 mL的單體積劑量中（在另一個實施例中，在約5 mL的單體積劑量中）遞送10至400 mg（以游離鹼當量計）範圍內的單劑量。

在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物配製為在約1至10 mL的體積中（在另一個實施例中，在約5 mL的體積中）遞送約50至200 mg（游離鹼當量）範圍內的API的單劑量。在另一個實施例中，將貝魯舒地爾配製為在約1至10 mL的體積中遞送約50、100或200 mg（游離鹼當量）的API的劑量。

在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物製備為在約5 mL的單體積劑量中遞送約50、100、200或400 mg（以游離鹼當量計）的API的劑量。

在一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物提供在含有10至100 mL調配物的瓶子中；在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物提供在含有20至60 mL液體調配物的瓶子中。在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物提供在含有約30 mL ± 2 mL調配物的瓶子中；在一些實施例中，包含貝魯舒地爾的液體調配物的瓶子包括總共約5-6個單位劑量。

在一個實施例中，用合適地定尺寸的口服注射器提供包含貝魯舒地爾的液體調配物，並且在用劑前將單個單位劑量測量至注射器中。在一個實施例中，將注射器合適地定尺寸以抽取1至10 mL包含貝魯舒地爾的液體調配物用於用劑。在另一個實施例中，將注射器定尺寸以抽取多達5 mL液體調配物用於單位用劑。

在另一個實施例中，用合適地定尺寸的用劑杯提供包含貝魯舒地爾的液體調配物，並且在投予前將單個單位劑量測量至用劑杯中。在一個實施例中，將用劑杯定尺寸以容納1至10 mL包含貝魯舒地爾的液體調配物用於用劑。在另一個實施例中，用劑杯含有填充線，反映了填充用劑杯至約5 mL液體調配物用於單位用劑的所需水準。

在一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物包裝到藥用瓶中。在另一個實施例中，用於包裝包含貝魯舒地爾的液體調配物的瓶子含有防兒童開啟蓋或帽。在另一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物包裝到有色瓶（例如琥珀瓶或藍色瓶）中，和/或是不透明的高密度聚乙烯塑膠瓶。在一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物包裝到具有防撬帽的合適地定尺寸的III型琥珀色玻璃容器中。在一個實施例中，瓶子設置有聚乙烯帽。在一個實施例中，將包含貝魯舒地爾的液體調配物包裝到含有聚乙烯襯裡的藥用瓶中。

在一個實施例中，將液體調配物在2ºC-8ºC範圍內的溫度下冷藏。在一個實施例中，在冷藏溫度下儲存的液體調配物附有說明書，其說明所述調配物應在產品呈其最終劑型時的指定時間段內投予。

在另一個實施例中，將液體調配物儲存在環境溫度下，例如約15ºC-25ºC。在一個實施例中，在環境溫度下儲存的液體調配物附有說明書，其說明所述調配物應在被重構和/或處於其最終形式的指定時間段內投予。

在另一個實施例中，液體調配物附有說明書，其說明一旦將液體調配物吸移或吸入至注射器中，所述調配物應在指定的時間段內（在一個實施例中，在4小時內）使用或丟棄。 醫藥組合物、用途和用劑

在一個態樣，本發明提供了醫藥上可接受的液體組合物，其包含在液體稀釋劑中與一種或多種醫藥上可接受的賦形劑一起配製的治療有效量的貝魯舒地爾。

在一個實施例中，本公開文本提供了一種以每天一次200 mg的等效劑量向具有約等於或大於40 kg體重的患者（包括成人患者）投予包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法。在另一個實施例中，本公開文本提供了一種以每天兩次200 mg或每天一次400 mg的等效劑量向具有約等於或大於40 kg體重的患者（包括成人患者）投予包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法。

在一個實施例中，本公開文本提供了一種以每天一次投予的約50 mg的等效劑量向體重在約10 kg至小於20 kg範圍內的兒科患者投予包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法；在另一個實施例中，本公開文本提供了一種以每天一次約100 mg的等效劑量向體重在約20 kg至小於40 kg範圍內的兒科患者投予包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法；以及在另一個實施例中，本公開文本提供了一種以每天一次200 mg的等效劑量向體重約等於或大於40 kg的兒科患者投予包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法。

本文公開的液體調配物和醫藥組合物可用於抑制ROCK1和/或ROCK2酶，優先抑制ROCK2，並且因此可用於治療由ROCK酶調節的疾病，諸如自身免疫性障礙和/或纖維化障礙，尤其包括GVHD（慢性和急性）、肺纖維化、特發性肺纖維化、囊性纖維化、輻射誘導的纖維化、或者動脈、心臟、心內膜心肌、腎或肝纖維化；中度至重度乾癬、類風濕性關節炎、多發性硬化、系統性紅斑狼瘡（SLE）、克羅恩病(Crohn’s disease)、皮炎（例如，特應性皮炎）和濕疹等適應症。

液體調配物還可用於治療閉塞性細支氣管炎症候群（BOS），一種肺或同種異體造血幹細胞移植（異體HSCT）後的潛在嚴重併發症。

以下縮寫可用於考慮本文的公開文本。表2：縮寫

ADI	可接受的每日限值
ADR	藥物不良反應
AE	不良事件
同種異體HCT	同種異體造血細胞移植
AUC	血漿濃度-時間曲線下面積
BID	每日兩次(每天兩次)
BM	骨髓；
CDC	疾病控制和預防中心(美國)
cGVHD	慢性移植物抗宿主病
Cmax	最大預測血漿濃度
CMC	羧甲基纖維素
CMV	巨細胞病毒
C _opt	光學濃度
CR	完全反應
DDI	藥物-藥物相互作用
DOR	反應持續時間
FFS	無失敗存活期
HLA	人白細胞抗原
IMP	研究藥物產品
IST	免疫抑制療法
LSS	Lee症狀量表
NLT	不小於
NMT	不超過
NT	未測試
ORR	總反應率
OS	總存活期
PET	防腐功效測試
PBPK	基於生理學的藥動學
PBSC	外周血幹細胞
PK	藥動學
PopPK	群體藥動學
PPI	質子泵抑制劑
PR	部分反應
PSD	粒徑分佈
PVP	聚乙烯吡咯啶酮或聚維酮
QOL	生活品質
RH	相對濕度
RRT	相對保留時間
RSD	相對標準差
SD	標準差
SR	類固醇難治性
TEAE	治療中出現的不良事件
TTNT	到下一次治療的時間
QD	每日；每天
Q.S.	適量(足量)
QTDD	目標產品品質概況

實例實例 1 ： 賦形劑和防腐劑選擇

最初，針對可能包含在貝魯舒地爾調配物中鑑定下文表3中所列的賦形劑。在探索這些賦形劑的使用時，考慮它們在兒科患者群體中的適用性，例如查閱與用於3個月至12歲目標年齡組中兒童的年齡適合的賦形劑有關的法規。表3：研究的賦形劑

目的/功能	研究的賦形劑
pH調節	無水檸檬酸
馬來酸
酒石酸
檸檬酸鈉
鹽酸
懸浮劑/助流劑	黃原膠(Xantural 75)
羥乙基纖維素(Natrosol 250HX)
羥丙甲纖維素(K4M)
羧甲基纖維素鈉(Blanose CMC 7H3SXF)
無水膠體二氧化矽(AEROSIL ®200)
二氧化矽(SYLOID® 244 FP二氧化矽)
潤濕劑	十二烷基硫酸鈉(SLS)-Kolliphor細粉級SLS
表面活性劑	聚山梨醇酯20(吐溫)
聚山梨醇酯80(吐溫)
甜味劑	糖精鈉
三氯蔗糖
乙醯磺胺酸鉀
調味劑	香蕉501013調味劑AP0551
柳丁調味劑501071 AP0551
柳丁調味劑SC611927
香草調味劑SC750589
柳丁Flexarome調味劑880021 TFS0504
香蕉調味劑580033 TP0904
防腐劑	苯甲酸鈉
山梨酸鉀
羥基苯甲酸甲酯鈉
羥基苯甲酸乙酯鈉
羥基苯甲酸丙酯鈉
對羥基苯甲酸乙酯
稀釋劑	無菌沖洗用水
麥芽糊精(Kleptose Linecaps)
Pearlitol 200 SD(甘露醇)
微晶纖維素
共溶劑	甘油
增稠劑/粘合劑	聚維酮(K30/90)

表3中列出的所有賦形劑最初被鑑定為適於評價。香蕉501013 AP0551調味劑是被鑑定為不可用於兒科調配物的唯一賦形劑，因為其包含殘餘量的苯甲醇，這在沒有充分理由的情況下被認為對於兒科人群是不可接受的。

某些賦形劑被鑑定為具有指定的可接受的每日攝入（ADI）水準。在考慮ADI水準時，根據2000年美國CDC生長圖（代表3個月至12歲的目標年齡組的最低體重），考慮3個月齡女童的預期的最大日劑量和平均體重（5.5 kg），計算包含在貝魯舒地爾兒科調配物中的最大水準。

還對與貝魯舒地爾組合的表3中列出的賦形劑進行了相容性測試。貝魯舒地爾和選擇的賦形劑的二元混合物以貝魯舒地爾與賦形劑的1:1比率製備，但是含有調味劑或防腐劑的二元混合物以10:1比率製備。在2ºC-8ºC（對照儲存條件）和40ºC/75% RH下儲存14天和28天後，分析乾燥二元混合物的外觀和相關物質。還在初始混合時測試二元混合物的視覺外觀。

該相容性研究的結果證實，在2ºC-8ºC和40ºC/75% RH下在14天時間段內，貝魯舒地爾與鹽酸和馬來酸不相容。因此，沒有進一步評價鹽酸和馬來酸包含在液體調配物中。

當與以下防腐劑組合時，T=14天賦形劑相容性資料還顯示在已知雜質與貝魯舒地爾之間的不良層析分離：羥基苯甲酸甲酯鈉、羥基苯甲酸乙酯鈉、羥基苯甲酸丙酯鈉和對羥基苯甲酸乙酯。因此，沒有進一步評價這些防腐劑在製備液體調配物中的使用。

T=28天賦形劑相容性資料顯示山梨酸鉀樣品與以RRT 0.96洗脫的未知相關物質的小相互作用，所述未知相關物質在40ºC/75% RH下具有0.09%的面積%。然後進行pH防腐劑穩定性篩選研究以鑑定適於包含在待開發的未來調配物中的合適目標pH、pH調節劑和防腐劑體系。例如，製備用於評價的樣品，其包括以下組分： 1.1 貝魯舒地爾和水（對照）； 1.2 山梨酸鉀（無pH調節劑）； 1.3 苯甲酸鈉（無pH調節劑）； 1.4 苯甲酸鈉（用檸檬酸調節至pH 3）； 1.5 苯甲酸鈉（用酒石酸調節至pH 3）； 1.6 苯甲酸鈉（用0.1 M檸檬酸鹽緩衝液調節至pH 3.0）； 1.7 山梨酸鉀（用0.1 M檸檬酸鹽緩衝液調節至pH 5.4）；以及 1.8 苯甲酸鈉（用0.1 M檸檬酸鹽緩衝液調節至pH 4.0）。

將上述樣品（1.1-1.8）儲存在2ºC-8ºC、25ºC/60% RH和40ºC/75% RH下，用於在T = 0（僅視覺外觀和pH）、14天和28天進行測試。儲存後，評估所有樣品的視覺外觀、pH和/或相關物質和測定。

結果證實，在40ºC/75% RH下儲存14天後，在含有2.0 mg/mL山梨酸鉀且不含pH調節劑的樣品1.2中觀察到化學相互作用，並且所述化學相互作用顯示截至28天的顯著增加。因此不建議將該pH防腐劑體系包含在未來的調配物原型中。

另外，樣品1.7（含有用0.1 M檸檬酸鹽緩衝液調節至pH5.4的山梨酸鉀）和樣品1.8（含有用0.1 M檸檬酸鹽緩衝液調節至pH4.0的苯甲酸鈉）不易藉由手動攪拌分散，並且在25ºC/60% RH和40ºC/75% RH下儲存長達28天後，在目視觀察時表現出明顯的物理變化。這些樣品（1.7和1.8）不能藉由搖動分散，因此在開發貝魯舒地爾調配物的進一步研究過程中不作考慮。所有其他樣品都易於藉由手動攪拌分散以形成具有黃色泡沫的黃色不透明分散體，並且被認為適合於包含在未來的調配物原型中。實例 2 ：使用 pH 調節劑的穩定性研究

使用選擇的pH調節劑和防腐劑以達到3.0-5.0的pH範圍，進行pH防腐劑穩定性篩選研究以評價貝魯舒地爾在選擇的水性液體製劑中的穩定性。製備含有苯甲酸鈉作為防腐劑並用檸檬酸或酒石酸調節pH的樣品，將其與不含pH調節劑的樣品進行比較。表4描述了本研究中使用的樣品。表4： pH穩定性研究中使用的樣品

樣品	組分	防腐劑 /pH 調節劑	時間點 / 條件	樣本量和數量
2.1	貝魯舒地爾（KD025）	NA	N/A	約2g
2.2	貝魯舒地爾 48.496mg/mL分散體	苯甲酸鈉無pH調節劑	T = 28天 40ºC/75%RH	約10 mL
2.3	貝魯舒地爾 48.496mg/mL分散體	苯甲酸鈉用檸檬酸調節至pH 3.5	T = 28天 40ºC/75%RH	約10 mL
2.4	貝魯舒地爾 48.496mg/mL分散體	苯甲酸鈉用酒石酸調節至pH 3.5	T = 28天 40ºC/75%RH	約10 mL
2.5	貝魯舒地爾 48.496mg/mL分散體	苯甲酸鈉，用檸檬酸鹽緩衝液調節至pH 3	T = 28天 40ºC/75%RH	約10 mL
2.6	貝魯舒地爾 48.496mg/mL分散體	山梨酸鉀用檸檬酸鹽緩衝液調節至pH 5.4	T = 28天 40ºC/75%RH	約10 mL

在三個步驟中製備上述樣品用於XRPD分析：藉由以3000 rpm離心20分鐘來分離固體；傾析上清液；並將樣品在環境溫度下真空乾燥18-24小時過夜。獲得固體樣品的XRPD資料。XRPD資料表明，API（貝魯舒地爾）在調配物中是穩定的，這是提供穩定調配物的正指標。XRPD資料表明，對於從含有苯甲酸鈉且不含pH調節劑的樣品和含有苯甲酸鈉且用檸檬酸或酒石酸調節pH的樣品中分離的固體，存在一致的額外峰，這是有希望的。

然而，在所述研究期間，對於含有山梨酸鉀和檸檬酸鹽緩衝液的樣品，觀察到pH向下漂移以及顯著的物理變化。從含有檸檬酸鹽緩衝液的調配物獲得的固體樣品（表4中的樣品2.5和2.6）的XRPD資料顯示如XRPD中所示的變化。基於觀察到的這些變化，不選擇檸檬酸鹽緩衝液用於所述調配物中。實例 3 ： 使用聚維酮的針研磨與噴射研磨

對於懸浮液調配物，達到API顆粒均勻地分散遍及液體介質中存在挑戰。以關於最初製備時和隨時間變化的調配物的粒徑分佈和均質化的評估研究了噴射研磨和針研磨形式的貝魯舒地爾在液體介質中的使用。 (a) 在水中對針研磨和噴射研磨的比較

為了研究針研磨和噴射研磨的貝魯舒地爾在無菌沖洗用水中的分散體，藉由將一部分API稱重到透明玻璃瓶中並添加無菌沖洗用水至40 mg/mL來製備樣品。

使用Sympatec Helos粒徑分析儀，使用用於濕分散體的通用方法來評估樣品，如下文所概述： - R5透鏡和R3透鏡 - 添加樣品直至達到10-15% C _opt- 產生3個重複的方法運行（在整個測量運行中對樣品進行攪拌和超聲處理）

使用R3和R5透鏡獲得的針研磨的API在無菌沖洗用水中的粒徑分佈（PSD）資料分別呈現於圖2A和圖2B中。使用R5透鏡和R3透鏡二者，針研磨的API的結果在重複之間顯示再現性。重複測試後，PSD資料與原始評估不具有可比性。獲得10-15%的起始C _opt存在困難（可能是由於API的較差分散所致）；因此，加入另外的樣品以獲得所需的C _opt。

使用噴射研磨的貝魯舒地爾對濕分散體的評估得到較差結果，其讀數在測量運行之間不一致。這被認為是由於API的較差分散所致。這些結果反映，噴射研磨的材料的使用可能是有問題的並且限制了調配物開發。為了進一步使用噴射研磨的材料，必須解決在穩定調配物和改善噴射研磨的材料的分散方面的另外的障礙。 (b) 使用各種懸浮劑對針研磨和噴射研磨的比較

為了在開發液體調配物方面進一步評估和比較針研磨和噴射研磨方法，製備了11種不同的調配物，它們的組成詳情如下文表5、表6、表7和表8中所示。在表5、表6、表7和表8的每一個中，加入48.496 mg/mL的貝魯舒地爾甲磺酸鹽，其在用1.2124鹽校正因子調節時相當於40 mg/mL游離鹼。表5：針研磨API的調配物（樣品1A-3A）的詳情

樣品	1A	2A	3A
組分	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL
貝魯舒地爾	48.496	2.42	48.496	2.42	48.496	2.42
苯甲酸鈉	0.50	0.025	0.50	0.025	0.50	0.025
黃原膠 (Xantural 75)	n/a	n/a	3.00	0.15	n/a	n/a
羥乙基纖維素(Natrosol 250HX)	n/a	n/a	n/a	n/a	3.00	0.15
羥丙甲纖維素K4M	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
羧甲基纖維素鈉 (Blanose CMC 7H3SXF)	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
聚維酮K30	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
酒石酸(適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至：體積/mL)	1	50	1	50	1	50

表6：針研磨API的調配物（樣品4A-6A）的詳情

樣品	4A	5A	6A
組分	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL
貝魯舒地爾	48.496	2.42	48.496	2.42	48.496	2.42
苯甲酸鈉	0.50	0.025	0.50	0.025	0.50	0.025
黃原膠(Xantural 75)	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
羥乙基纖維素(Natrosol 250HX)	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
羥丙甲纖維素K4M	3.00	0.15	n/a	n/a	n/a	n/a
羧甲基纖維素鈉	n/a	n/a	3.00	0.15	n/a	n/a
聚維酮K30	n/a	n/a	n/a	n/a	3.00	0.15
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至：體積/mL)	1	50	1	50	1	50

表7：噴射研磨API的調配物（樣品1B-3B）的詳情

樣品	1B	2B	3B
組分	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL
貝魯舒地爾	48.496	2.42	48.496	2.42	48.496	2.42
苯甲酸鈉	0.50	0.025	0.50	0.025	0.50	0.025
黃原膠(Xantural 75)	n/a	n/a	3.00	0.15	n/a	n/a
羥乙基纖維素(Natrosol 250HX)	n/a	n/a	n/a	n/a	3.00	0.15
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至體積/mL)	1	50	1	50	1	50

表8：噴射研磨API的調配物（樣品4B-5B）的詳情

樣品	4B (3 mg/mL 羥丙甲纖維素 K4M)	5B (3 mg/mL 聚維酮 K30)
組分	mg/mL	g/50mL	mg/mL	g/50mL
貝魯舒地爾(噴射研磨)	48.496	2.42	48.496	2.42
苯甲酸鈉	0.50	0.025	0.50	0.025
羥丙甲纖維素K4M	3.00	0.15	n/a	n/a
聚維酮K30	n/a	n/a	3.00	0.15
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至：體積/mL)	1	50	1	50

在製備表5、表6、表7和表8中所述的調配物時，使用以下步驟： 1. 向預先校準的燒杯中加入約40 mL無菌水用於沖洗； 2. 在攪拌時，加入苯甲酸鈉並混合直至溶解； 3. 加入懸浮劑並混合直至看到均勻的混合物； 4. 在混合時，加入貝魯舒地爾並混合直到看到均勻的混合物； 5. 測量pH，並且如果需要，以等分樣品添加酒石酸直至達到pH 3.5±0.2； 6. 加入無菌水以補足用於沖洗的體積並記錄pH；以及 7. 將包含貝魯舒地爾的液體調配物轉移至60 mL透明玻璃瓶中。

評估樣品的API易分散性、沈降水準以及任何沈降物的易再分散性。

對於樣品1A（針研磨）（表5）和1B（噴射研磨）（表7），API容易分散，且沒有懸浮劑。約24小時後，觀察到少量絮凝，但這容易在搖動下再懸浮。針研磨和噴射研磨的API都在搖動時起泡，但噴射研磨的API（樣品G）的泡沫不太明顯，在約30秒後只有一小層上層泡沫。

相反，API不容易分散在含有黃原膠（Xantural 75）的批料中（即分別為樣品2A和2B/表5和表7）。這些樣品需要均質化以説明API的分散，並且兩種批料即使在均質化之後也沒有表現為均質調配物。從該觀察結果得出結論，黃原膠不是理想的懸浮劑。含有羧甲基纖維素鈉的樣品5A（表6）顯示出嚴重的絮凝，並且即使均質化也難以分散API。在將玻璃燒杯的內容物轉移到玻璃瓶之後，在玻璃燒杯的底部還觀察到大量的殘餘物。

對於使用針研磨和噴射研磨以及羥乙基纖維素（Natrosol 250HX）（樣品3A和3B）；羥丙甲纖維素K4M（樣品4A和4B）和聚維酮K30（樣品6A和5B）的其他樣品，API容易使用磁力攪拌器分散以形成黃色不透明懸浮液，且在批料之間未觀察到差異。當從燒杯轉移到瓶子中時，觀察到作為殘餘物的未分散材料的小聚集體，表明可能仍然需要均質化。總之，觀察到聚維酮的使用提供了改善的結果。

對於含有噴射研磨的API的樣品4B和5B（表8），僅使用磁力攪拌器容易地分散API以形成黃色不透明懸浮液。在樣品之間沒有觀察到差異。這些觀察結果與先前針對摻入針研磨的API的等效批料（即，樣品4A和6A [表6]，它們分別含有羥丙甲纖維素K4M和聚維酮K30）所記錄的那些一致。

在環境溫度下在4天和2周內監測表5、表6、表7和表8中的所有樣品並評估視覺外觀。樣品4B和5B（表8）在所有其他樣品之後大約1周製造，因此僅在T=4天時進行評估。結果概述於表9（針研磨API）和表10（噴射研磨API）中。表9：針研磨調配物在4天和2周後的目測觀察結果

	1A ( 沒有懸浮劑 )	2A (3.0 mg/mL Xantural 75)	3A ( 3.0mg/mL Natrosol 250HX)	4A ( 3.0mg/mL 羥丙甲纖維素 K4M )	5A ( 3.0mg/mL Blanose CMC )	6A ( 3.0mg/mL 聚維酮 K30 )
初始	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	黃色不透明懸浮液，API看起來未均勻分散	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	顯著程度的API絮凝和分離	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散
4 天	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝	黃色不透明固體結構(倒置時未流出)	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	顯著程度的API絮凝和分離	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散
約 2 周	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝。與澄清液體中的固體凝膠狀結構分離	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝	黃色不透明固體結構(倒置時未流出 )	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散*	顯著程度的絮凝	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散

*在環境溫度下20天後，樣品轉化為固體凝膠狀調配物。表10：噴射研磨調配物在4天和2周後的目測觀察結果

	1B ( 沒有懸浮劑 )	2B ( 3.0 mg/mL xantural 75)	3B ( 3.0 mg/mL Natrosol 250HX)	4B ( 3.0 mg/mL 羥丙甲纖維素 K4M)	5B ( 3.0 mg/mL 聚維酮 K30 )
初始	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	黃色不透明懸浮液，API看起來未均勻分散	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散(沒有可用的照片)	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散
4 天	黃色不透明懸浮液，API看起來在視覺上分散	觀察到與固體黃色結構和透明液體層分離	黃色不透明固體結構(倒置時未流出)	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散	黃色不透明懸浮液，API在視覺上分散
約 2 周	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝	黃色不透明懸浮液，觀察到API絮凝	黃色不透明固體結構(倒置時未流出)	未測試	未測試

觀察結果表明，不含懸浮劑、含有Natrosol 250HX、Xantural 75或羧甲基纖維素鈉的樣品（用噴射研磨的API和針研磨的API製造）均顯示出分離、絮凝或固化的各種跡象。儘管在環境溫度下儲存4天和/或2周後觀察到摻入羥丙甲纖維素K4M的樣品（樣品4A和4B）為黃色不透明懸浮液，且API在視覺上分散，但樣品4A（3 mg/mL羥丙甲纖維素K4M和針研磨的API）在環境溫度下20天後觀察時，已變成固體凝膠狀材料。當搖動以液化和再分散時，API開始在調配物中聚集。因此，確定羥丙甲纖維素K4M不是用於進一步開發的最佳選擇。

使用聚維酮K30的樣品（用噴射研磨的API和針研磨的API製造）在環境溫度下儲存4天之後（也在約2周之後）保持黃色不透明懸浮液，且API在視覺上分散。從該研究中，認為聚維酮K30是用於進一步評價的主懸浮劑。實例 4 ： 粒徑分佈分析

基於實例3中的目視觀察分析結果，選擇四種包含貝魯舒地爾的液體調配物用於關於其粒徑分佈的進一步評估。對以下四種調配物進行測量：樣品3A（具有羥乙基纖維素的針研磨調配物）；樣品3B（具有羥乙基纖維素的噴射研磨調配物）；樣品4A（具有羥丙甲纖維素K4M的針研磨調配物）；和樣品6A（具有聚維酮的針研磨調配物）。

使用Sympatec Helos粒徑分析儀評估樣品，加入樣品直至達到10-15% C _opt。使用兩種不同的透鏡元件，得到以下粒徑評估範圍：R3透鏡（0.5-175 μm）和R5透鏡（4.8-875 μm）。作為測量運行的一部分，進行三次重複，且作為方法的一部分對樣品進行攪拌和超聲處理。

對於樣品3A和3B，使用R5透鏡進行評估。結果示於圖3A（樣品3A）和圖3B（樣品3B）中。結果表明，儘管記錄的粒徑大於預期（當與研磨API的乾燥PSD相比時），但兩種批料獲得一致的重複。經研究發現，含有Natrosol 250HX的調配物在用水稀釋時形成固體聚集體，而不是分散。

這可能是嚴重絮凝的結果，這與給出意外地高的值的PSD測量一致，比較兩種API樣品，該影響對於噴射研磨的樣品（樣品3B）特別差。

對於樣品4A（針研磨的羥丙甲纖維素K4M調配物），使用R5和R3兩種透鏡評估PSD。當使用R3透鏡時獲得最一致的重複，並且結果示於圖3C中。觀察到許多較大尺寸處的峰，並認為是由於氣泡引起的。將攪拌器速度從80%降低至50%以最小化摻氣和氣泡的產生，以達到一致的重複。

對於樣品6A（具有聚維酮的針研磨調配物），使用R5和R3兩種透鏡評估樣品。與樣品4A一樣，當使用R3透鏡時獲得最一致的重複；結示於圖3D中。對於該調配物，沒有觀察到在具有Natrosol 250HX的樣品3A和3B中存在的絮凝/聚集體。

樣品6A的D10、D50和D90值與樣品4A的所述值一致，兩種樣品均使用針研磨的貝魯舒地爾製造。結果為所述方法能夠對這兩種調配物原型產生準確一致的結果提供了信心。

總之，當測試樣品3A和3B（含有羥乙基纖維素/Natrosol 250HX）時，當在混合罐中用水稀釋時觀察到聚集體，導致重複之間的資料不一致。因此，結果不代表API的預期粒徑分佈。在針研磨和噴射研磨的API之間觀察到差異，與樣品3A（使用針研磨）相比，使用噴射研磨的API製造的樣品3B觀察到更大的聚集體和絮凝。該觀察結果證實了實例3的結論，即噴射研磨的材料可能是有問題的並且在調配物開發中存在障礙。

當分析樣品4A和6A（具有羥丙甲纖維素K4M和聚維酮K30的針研磨調配物）時，當使用R3透鏡時以及在將攪拌速度從80%降低至50%之後，獲得一致的重複。觀察到較大值處的偶見峰，將其歸因於氣泡。樣品4A和6A二者的結果相似。這表明，與僅API在水中的濕分散體的粒徑評估相比，這些調配物原型允許更一致的PSD結果，如圖2A和圖2B所示以及上文在實例3（章節 (a)）中所討論。根據該評估，認為針研磨方法適用於開發包含貝魯舒地爾的液體調配物。實例 5 ： 黃原膠和 CMC 鈉增稠劑體系研究

在實例3中，顯示含有3 mg/mL黃原膠（Xantural 75）（樣品2A）和3 mg/mL CMC鈉（Blanose CMC 7H3SXF）（樣品5A）的樣品顯示出嚴重的絮凝和難以分散API。在該實驗中，研究了四種另外的調配物以確定是否可以藉由以下方式解決絮凝： - 在API完全分散後加入懸浮劑； - 降低黃原膠和CMC鈉的水準； - 包括二氧化矽產品（即AEROSIL® 200和SYLOID® 244 FP）以防止結塊和幫助再懸浮。

樣品7A、8A、9A和10A根據表11中給出的組成詳情以50 mL批量大小製造。

根據以下步驟計畫調配物製備：(1) 向合適的燒杯中加入約40 mL無菌水；(2) 在使用磁力攪拌器混合的同時，加入苯甲酸鈉並混合直至溶解；(3) 在混合的同時，加入貝魯舒地爾（針研磨）並混合15分鐘，直到獲得均勻的分散體；(4) 混合時，加入Xantural 75或Blanose CMC 7H3SXF，混合30分鐘直至均勻；(5) 測量pH，並且如果需要，加入酒石酸以調節至pH 3.5 ± 0.2；以及 (6) 加入無菌水以補足體積並將調配物混合15分鐘直至均勻。表11：用於黃原膠和CMC鈉實驗的調配物*

樣品	7A	8A	9A	10A
組分	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL	mg/mL	g/50 mL
貝魯舒地爾 (針研磨)	48.496*	2.42	48.496*	2.42	48.496*	2.42	48.496*	2.42
苯甲酸鈉	0.50	0.025	0.50	0.025	0.50	0.025	0.50	0.025
黃原膠(Xantural 75)	1.50	0.075	3.00	0.15	n/a	n/a	n/a	n/a
CMC鈉	n/a	n/a	n/a	n/a	3.00	0.15	1.50	0.075
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至:體積/mL)	1	50	1	50	1	50	1	50

* 以 1.2124 校正因子調整， 48.496 mg/mL 相當於 40 mg/mL 。

然而，在添加API（步驟4）後，所有樣品（7A、8A、9A和10A）均顯示絮凝跡象，如先前在實例3中看到的。使用配備有通用崩解頭的Silverson均質器將含有黃原膠的樣品7A和8A均質化約1分鐘。仍然觀察到先前看到的嚴重絮凝。由於嚴重絮凝，在步驟4之後停止製造。

該實驗表明，改變添加順序不會防止如先前所見的絮凝材料。減少懸浮劑確實顯示出一些改進，但仍發生絮凝和增稠，並且因此停止了所有四種調配物的製造。基於這些觀察結果，排除了黃原膠和CMC鈉作為用於貝魯舒地爾藥物調配物的合適的懸浮劑。實例 6 ： 聚維酮懸浮劑體系實驗

製備如下概述的另外的調配物，其摻入各種水準的聚維酮K30作為主懸浮劑。將AEROSIL® 200和SYLOID® 244 FP摻入這些調配物中以評估它們對防止結塊的影響。使用針研磨的API和噴射研磨的API二者以100 mL批量大小製造每種調配物，以允許對兩者的比較性評估。組成詳情示於表12A和表12B（針研磨API）以及表13A和表13B（噴射研磨API）中。在表12A、表12B、表13A和表13B的每一個中，以48.496 mg/mL加入貝魯舒地爾甲磺酸鹽，其在用1.2124鹽校正因子調節時相當於40 mg/mL游離鹼。表12A：用於聚維酮研究的針研磨調配物（樣品11A-13A）

樣品	11A	12A	13A
組分	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL
貝魯舒地爾	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮K30	3.00	0.30	6.00	0.60	9.00	0.90
AEROSIL ® 200	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
SYLOID ®244 FP	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
酒石酸(適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至：體積/mL)	1	100	1	100	1	100

表12B：用於聚維酮研究的針研磨調配物（樣品14A-16A）

樣品	14A	15A	16A*
組分	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL
貝魯舒地爾	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮K30	6.00	0.60	6.00	0.60	n/a	n/a
AEROSIL ® 200	5.00	0.50	n/a	n/a	n/a	n/a
SYLOID ®244 FP	n/a	n/a	5.00	0.50	n/a	n/a
酒石酸(適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水 (至：體積/mL)	1	100	1	100	1	100

表13A：用於聚維酮研究的噴射研磨調配物（樣品11B-13B）

樣品	11B	12B	13B
組分	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL
貝魯舒地爾	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮K30	3.00	0.30	6.00	0.60	9.00	0.90
AEROSIL ®200	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
SYLOID ®244 FP	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水(至：體積/mL)	1	100	1	100	1	100

表13B：用於聚維酮研究的噴射研磨調配物（樣品14B-16B）

樣品	14B	15B	16B*
組分	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL	mg/mL	g/100 mL
貝魯舒地爾	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮K30	6.00	0.60	6.00	0.60	n/a	n/a
AEROSIL ®200	5.00	0.50	n/a	n/a	n/a	n/a
SYLOID ®244 FP	n/a	n/a	5.00	0.50	n/a	n/a
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水(至：體積/mL)	1	100	1	100	1	100

表12A-表12B和表13A-表13B中的調配物用以下步驟製備： 1. 向合適的燒杯中加入占總量約80%的無菌水用於沖洗； 2. 在使用磁力攪拌器混合時，加入苯甲酸鈉並混合直至溶解； 3. 在混合時，加入聚維酮K30並混合30分鐘直至均勻； 4. 在混合時，加入貝魯舒地爾（針研磨或噴射研磨）並混合15分鐘，直到獲得均勻的分散體； 5. 測量pH。如果需要，使用酒石酸以調整至pH 3.5 ± 0.2 6. 用無菌沖洗用水補足體積，並混合15分鐘直至均勻。

將每種調配物的12 mL部分轉移到15 mL塑膠離心管中以測試沈降速率。還將每種調配物的單獨30 mL部分轉移到60 mL玻璃瓶中以在環境溫度和50ºC下儲存7天。儲存後，評估所有樣品的視覺外觀、沈降水準、易再懸浮性和pH。 (a) 初始沈降和外觀測試

在以下時間點記錄在環境溫度下儲存的15 mL離心管中的樣品的視覺外觀和沈降物水準；1小時、2小時和24小時、4天和7天。結果呈現於表14（針研磨調配物）和表15（噴射研磨調配物）中。在表14中，“疏堆積的”材料只能藉由照射光線穿過樣品才能看到。表14：不同聚維酮水準下隨時間變化的沈降物水準（針研磨）

樣品	11A	12A	13A	14A	15A	16A
詳情	3 mg/mL聚維酮K30	6 mg/mL聚維酮K30	9 mg/mL聚維酮K30	6 mg/mL聚維酮K30 + 5 mg/mL Aerosil 200	3 mg/mL聚維酮K30 + 5mg/mL Syloid 244FP	沒有懸浮劑，對照
時間點	沈降物
初始	無	無	無	無	無	無
15分鐘	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物
30分鐘	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物
1小時	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物	＜0.1 mL硬沈降物
2小時	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.25 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.75 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.25 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 4.5 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 4.5 mL疏堆積的	*參見注釋1
24小時	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.0 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.25 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.75 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.5 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.75 mL疏堆積的	**參見注釋2
4天	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.0 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.25 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.75 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.5 mL疏堆積的	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.5 mL疏堆積的	**參見注釋2
7天	＜0.1 mL硬沈降物+ 1.75 mL疏堆積的在25次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.25 mL疏堆積的在22次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物+ 2.75 mL疏堆積的在17次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.5 mL疏堆積的在15次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物+ 3.5 mL疏堆積的在7次倒置中分散	**參見注釋2

*注釋1：樣品開始增稠；溫和地傾斜時明顯， **注釋2：樣品增稠明顯；溫和地傾斜時注意到。表15：不同聚維酮水準下隨時間變化的沈降物水準（噴射研磨）

樣品	11B	12B	13B	14B	15B	16B
詳情	3 mg/mL聚維酮K30	6 mg/mL聚維酮K30	9 mg/mL聚維酮K30	6 mg/mL聚維酮K30 + 5 mg/mL Aerosil 200	3 mg/mL聚維酮K30 + 5mg/mL Syloid 244FP	沒有懸浮劑，對照
時間點	沈降物 / 上清液
初始	無	無	無	無	無	無
15分鐘	＜0.1 mL硬沈降物 0.3 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.25 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.2 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋1
30分鐘	＜0.1 mL硬沈降物 0.35 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.25 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.2 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	＜0.1 mL硬沈降物 0.3 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋1
1小時	＜0.1 mL硬沈降物 0.5 ml第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.4 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.3 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	＜0.1 mL硬沈降物 0.55 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋1
2小時	＜0.1 mL硬沈降物 0.5 ml第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.4 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.3 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	＜0.1 mL硬沈降物 0.55 mL第二層 *參見注釋1	***參見注釋3
24小時	＜0.1 mL硬沈降物 0.8ml第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.6 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.5 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	***參見注釋3
4天	＜0.1 mL硬沈降物 1.5ml第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.8mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 0.6 mL第二層 *參見注釋1	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	＜0.1 mL硬沈降物 *參見注釋2	***參見注釋3
7天	＜0.1 mL硬沈降物 1.5ml第二層在25次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物 1.0 mL第二層在20次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物 1.0 mL第二層在17次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物 2.0 mL第二層在17次倒置中分散	＜0.1 mL硬沈降物 2.0 mL第二層在10次倒置中分散	***參見注釋3

*注釋1：固體材料粘附在離心機壁上的跡象。 **注釋2：大量固體材料粘附到離心機壁上；難以確定沈降物的量 **注釋3：樣品增稠並變成固體狀。可以倒持並保持凝膠狀材料。

如表14和表15中所反映，在含有針研磨API和噴射研磨API的樣品之間觀察到沈降行為的差異。對於針研磨的API，隨著聚維酮K30的水準增加，沈降材料的量也增加。包含AEROSIL® 200和SYLOID® 244 FP似乎降低沈降速率。似乎優於AEROSIL®。對於含有噴射研磨的API的樣品，隨著聚維酮K30的水準增加以及AEROSIL® 200或SYLOID® 244 FP的添加，第二層沈降物減少。

根據該實驗，得到了重要的觀察結果，即包括膠態二氧化矽在防止結塊和使得易於再分散方面是有益的，其中含有SYLOID® 244FP的樣品完全再分散API需要的倒置次數最少。

還在環境溫度下24小時後和7天後以及在50ºC下經7天記錄在環境溫度下儲存在30 mL玻璃瓶中的樣品的視覺外觀。升高的溫度（50ºC）用於加速條件和對調配物施加應力。藉由使用卡尺測量玻璃瓶中沈降物的高度（mm）和總體積（mm）來計算“沈降物%”。結果呈現於表16（針研磨）和表17（噴射研磨）中。表16：環境溫度下隨時間變化的視覺外觀（針研磨和噴射研磨）

樣品	24 小時後	7 天後	易再分散性
11A	黃色懸浮液， 15.7%沈降物	黃色懸浮液， 14.7%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
12A	黃色懸浮液， 23.9%沈降物	黃色懸浮液， 21.5%沈降物	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
13A	黃色懸浮液， 28.5%沈降物	黃色懸浮液， 25.2%沈降物	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
14A	黃色懸浮液， 34.8%沈降物	黃色懸浮液， 30.5%沈降物	在約3次倒置中再分散。
15A	黃色懸浮液， 33.9%沈降物	黃色懸浮液， 34.7%沈降物	在約3次倒置中再分散。
16A	黃色懸浮液，略微增稠無明顯沈降物	黃色懸浮液，凝膠狀，幾乎是固體。	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
11B	黃色懸浮液，無明顯沈降物	黃色懸浮液， 14.1%沈降物	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
12B	黃色懸浮液，無明顯沈降物	黃色懸浮液， 12.9%沈降物	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
13B	黃色懸浮液，無明顯沈降物	黃色懸浮液， 14.1%沈降物	溫和攪拌。 10秒內倒置約15次。
14B	黃色懸浮液，無明顯沈降物	黃色懸浮液， 22.4%沈降物	在約3次倒置中再分散。
15B	黃色懸浮液，無明顯沈降物	黃色懸浮液， 23.6%沈降物	在約3次倒置中再分散。
16B	黃色懸浮液，高粘性，固體狀凝膠。	黃色，凝膠固體狀結構。	需要劇烈的攪拌以再分散。

表17： 50ºC下經7天的視覺外觀（針研磨和噴射研磨）

樣品	50ºC 下 7 天後的觀察結果	易再分散性
11A	黃色懸浮液，固體絮凝材料粘附在瓶壁上。 31.5%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
12A	黃色懸浮液，固體絮凝材料粘附在瓶壁上。 29.9%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
13A	黃色懸浮液，固體絮凝材料粘附在瓶壁上。 33.0%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
14A	黃色懸浮液，固體絮凝材料粘附在瓶壁上。 42.1%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
15A	黃色懸浮液，固體絮凝材料粘附在瓶壁上。 42.0%沈降物	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
16A	黃色懸浮液，凝膠狀，幾乎是固體。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
11B	黃色懸浮液，大量固體絮凝材料粘附在瓶壁上。22.2%沈降物。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
12B	黃色懸浮液，大量固體絮凝材料粘附在瓶壁上。難以定量沈降物。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
13B	黃色懸浮液，大量固體絮凝材料粘附在瓶壁上。難以定量沈降物。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
14B	黃色懸浮液，大量固體絮凝材料粘附在瓶壁上。難以定量沈降物。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
15B	黃色懸浮液，大量固體絮凝材料粘附在瓶壁上。難以定量沈降物。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。
16B	黃色，凝膠固體狀結構。	溫和攪拌。 15秒內倒置約30次。

(b) 隨時間變化的重複沈降測試和測定結果

為了證實目測鑑定的沈降趨勢和速率，使用先前在表12A-表12B（針研磨）和表13A-表13B（噴射研磨）中描述的以下六種樣品進行重複沈降測試：

樣品13A和13B（9.0 mg/mL聚維酮K30-針研磨和噴射研磨）；樣品14A和14B（6.0 mg/mL聚維酮K30和5.0 mg/mL AEROSIL®，針研磨和噴射研磨）；以及樣品15A和15B（6.0 mg/mL聚維酮K30和5.0 mg/mL SYLOID® 244 FP，針研磨和噴射研磨）。

對先前裝入60 mL透明玻璃瓶中的上述樣品（樣品約14日齡）進行所述重複測試。在研究開始前24小時，劇烈搖動樣品以再懸浮任何沈降物。

在分析當天，將每種調配物劇烈搖動20秒（在30 cm距離中每秒豎直搖動兩次）並靜置沈降5分鐘，以消除調配物的一些泡沫和摻氣。在樣品沈降後，藉由使用自動移液管，尖端在懸浮液表面下方5-10 mm處吸取5.0 mL並稱量至200 mL燒瓶中。然後用稀釋劑（50:50 MeCN:H ₂O）將其填充至約180 mL，並超聲處理10分鐘。使樣品平衡至室溫，然後補足體積。

在T=0、4小時和24小時測試樣品。在T=4小時或T=24小時時間點不搖動樣品，以觀察從調配物中沈降出來的貝魯舒地爾的量。在取T=24小時樣品後，再次搖動剩餘的樣品並取樣，以觀察貝魯舒地爾是否確實再懸浮。未針對樣品重量校正的測定結果示於表18中並繪製於圖4中。表18：樣品13-15A/B隨時間變化的沈降測定結果

	T = 0	T = 4	T = 24	搖動後 T = 24
樣品	測定 mg/mL	% 標籤要求	測定 mg/mL	% 標籤要求	測定 mg/mL	% 標籤要求	測定 mg/mL	% 標籤要求
13A	39.25	98.1	23.44	58.6	7.47	18.7	45.06	112.7
14A	40.05	100.1	24.41	61.0	15.38	38.4	43.26	108.2
15A	36.63	91.6	33.54	83.9	10.72	26.8	45.81	114.5
13B	38.01	95.0	36.14	90.4	27.96	69.9	41.21	103.0
14B	36.69	91.7	35.55	88.9	32.78	81.9	41.36	103.4
15B	39.27	98.2	37.96	94.9	21.13	52.8	46.43	116.1

初始取樣：初始取樣階段（T=0）的結果顯示，對於所有調配物，在40 mg/mL的標籤要求（或目標濃度）的90-110%的建議規格限值內的結果。這些結果表明，樣品中的大部分（如果不是全部的話）沈降物被破碎和再懸浮。

樣品15A和14B在初始時間點具有出乎意料低的測定值。這些結果表明，貝魯舒地爾可能粘在瓶壁上泡沫已乾處，且可能未完全再分散。即使初始值低，它們也提供基線以指示24小時測試期間的沈降速率。

初始搖動後，所有樣品產生的泡沫量相似。然而，在最初的5分鐘之後，噴射研磨的API樣品幾乎沒有泡沫，而針研磨的樣品有大量泡沫粘附到移液管尖端，而不得不在轉移樣品之前去除。儘管較早的結果表明噴射研磨的調配物可能是有問題的，但減少噴射研磨的樣品的泡沫是有利的。

T = 4 小時：根據測定結果，與含有針研磨的API的樣品在58-84%之間的測定值範圍相比，噴射研磨的API保持更好的懸浮，且測定值大於88%。僅含有聚維酮K30（13A）的針研磨樣品具有最低的測定值，這證實了向貝魯舒地爾的懸浮液中添加膠態二氧化矽助劑是有益的。在所有樣品中，含有SYLOID®的噴射研磨樣品的測定值最高。

靜置4小時後，針研磨樣品中的泡沫仍然可見，但更容易取樣，大多數泡沫粘附在瓶壁上而不是移液管尖端。在4小時時，噴射研磨的樣品中的泡沫極少，這反映了在T = 0和T = 4小時時噴射研磨的調配物的泡沫的一致減少。

T = 24 小時：在24小時時間點，所有調配物測定低於85%，但是使用噴射研磨的API製造的樣品仍具有比使用針研磨的API的樣品更高的測定結果。與T = 4小時樣品一樣，與僅含有聚維酮K30的樣品相比，含有SYLOID®和AREOSIL®的調配物具有更高的測定值，這證實了在24小時時加入膠態二氧化矽有助於懸浮貝魯舒地爾。在24小時時間點，與具有SYLOID®的調配物相比，在僅聚維酮調配物中含有噴射研磨API的樣品提供更高的測定結果，表明在含有SYLOID®的樣品中具有更高沈降速率。然而，先前的沈降試驗表明，該沈降物更疏鬆地堆積。

靜置24小時後，針研磨樣品的泡沫已經完全粘附到瓶壁上，並且調配物在API沈降物與媒劑之間清晰地分離；對於噴射研磨的樣品，分層不那麼清晰。

T = 24 小時（搖動再分散後）：在24小時時間點搖動後的結果顯示高測定值，超出了目標濃度的90-110%的建議規格限值。這歸因於T = 4小時和T = 24小時時間點的測定值低，意味著在更小體積中有更多的API要被再分散。儘管這些結果超出了規格限值，但確實表明貝魯舒地爾易於在搖動下再懸浮於媒劑中。

還在環境溫度和50ºC下7天後記錄樣品11A至16A和11B至16B的pH。在環境溫度下7天後，在任何樣品中均未觀察到顯著變化（在初始測試和7天後，pH值均在3.2至3.6的範圍內）。在50ºC下7天後，觀察到pH下降，即所有樣品的pH範圍為2.7至2.9。

從該研究得出結論，在儲存7天後，含有二氧化矽的樣品在易再懸浮性方面表現最好。儘管測定結果表明，AEROSIL®在降低沈降速率方面提供相對於SYLOID® 244 FP的一定益處，但顯示含有SYLOID® 244FP的樣品結塊更少且更容易再懸浮。由於所有樣品都具有隨時間變化的視覺上的低粘度和高沈降速率，因此認為易再分散性是重要特徵，特別是當考慮具有較長保質期的產品時。SYLOID® 244FP還在製造期間的易處理性方面提供相對於AEROSIL® 200的益處。由於這些原因，認為總體SYLOID® 244FP是更好的選擇。

確定聚維酮水準需要精確的平衡。需要較高水準的聚維酮K30以減少沈降；然而，聚維酮K30的最大包含水準受該化合物按重量計50 mg/kg的可接受的每日限值（ADI）的影響，因此，需要使水準與投予至個體的用劑方案一致。

針研磨API與噴射研磨API的選擇還涉及許多複雜因素的考慮。如實例3、4和5中所討論的，各種實驗表明針研磨是優選的。針研磨比噴射研磨API更容易處理，觀察到更好的流動性。針研磨API也更容易潤濕。當發生絮凝時，在含有噴射研磨API的樣品中更嚴重，並且觀察到噴射研磨API粘附到離心機壁上。

針研磨和噴射研磨樣品都容易再分散，API之間沒有顯著差異。7天後，在含有噴射研磨API的批料中觀察到更少量的沈降物。

一旦攪拌，在含有針研磨和噴射研磨API的樣品中產生泡沫。含有噴射研磨API的樣品看起來泡沫稍少。

因此，有許多原因得出最初結論，針研磨API將是藥物開發的優選選項。然而，本申請人發現，尤其鑒於噴射研磨產品的長期穩定性因素和較低沈降量（這可能僅在更長的儲存時間段內更明顯），噴射研磨是用於藥物開發的優選方法。 (c) 進一步的聚維酮比較測試

如以上實例6（a）和（b）中所示，含有聚維酮K30的調配物具有相對高的沈降速率。在該研究中，研究了更長鏈PVP聚維酮90F以確定其是否可提供更高粘度的懸浮液以降低沈降速率。為此，製備具有表19所示組成的調配物。表19：添加熱帶水果混合調味劑的聚維酮90樣品的組成

樣品	16-01	16-02	16-03	16-04
組分	mg/mL	g/100 mL 批料	mg/mL	g/100 mL 批料	mg/mL	g/100 mL 批料	mg/mL	g/100 mL 批料
貝魯舒地爾（針研磨）	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮90 F	3.00	0.30	6.00	0.60	9.00	0.90	9.00	0.90
SYLOID® 244 FP	5.00	0.50	5.00	0.50	5.00	0.50	n/a	n/a
AEROSIL® 200	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	5.00	0.50
三氯蔗糖	1.50	0.15	1.50	0.15	1.50	0.15	1.50	0.15
熱帶水果混合調味劑	4.00	0.40	4.00	0.40	4.00	0.40	4.00	0.40
酒石酸 (適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌沖洗用水 (至體積/mL)	1	100	1	100	1	100	1	100

使用以下步驟製備表19的調配物： 1. 向預先校準的燒杯中加入約80 mL無菌沖洗用水； 2. 在攪拌時，加入苯甲酸鈉、三氯蔗糖和熱帶水果混合調味劑並混合直至溶解； 3. 在混合時，加入聚維酮90F並混合直至觀察到均勻的混合物； 4. 如果需要，在混合時加入AEROSIL® 200或SYLOID® 244FP並混合直至均勻； 5. 在混合時，加入貝魯舒地爾並混合直到觀察到均勻的混合物； 6. 測量pH，並且如果需要，以等分樣品添加酒石酸直至達到pH 3.5 ± 0.2；以及 7. 加入無菌沖洗用水以補足體積並記錄最終pH。

測試樣品16-01至16-04的沈降。將2 mL各樣品加入15 mL塑膠離心管中，並在室溫下監測沈降7天。記錄初始時、2小時後和24小時後的沈降結果。

該沈降測試的結果概述於表20中。包括樣品14A和15A（上表14）的先前結果用於比較。表20：含有聚維酮90的調配物的沈降結果

樣品	16-01	16-02	16-03	16-04	15A*	14A*
詳情	3 mg/mL聚維酮90F + 5 mg/mL Syloid 244FP	6 mg/mL聚維酮90F + 5 mg/mL Syloid 244FP	9 mg/mL聚維酮90F + 5 mg/mL Syloid 244FP	3 mg/mL聚維酮90F + 5 mg/mL Aerosil 200	6 mg/mL聚維酮K30 + 5 mg/mL Syloid 244FP	6 mg/mL聚維酮K30 + 5 mg/mL Aerosil 200
時間	沈降物水準
初始	無	無	無	無	無	無
2 小時	9.25 mL疏堆積的沈降物， 2.75 mL上清液	10.25 mL疏堆積的沈降物， 1.75 mL上清液	11.75 mL疏堆積的沈降物， 0.25 mL上清液	11.75 mL疏堆積的沈降物， 0.25 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 4.5 mL疏堆積的沈降物， 7.5 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 4.5 mL疏堆積的沈降物， 7.5 mL上清液
24 h	7.5 mL疏堆積的沈降物， 4.5 mL上清液	8 mL疏堆積的沈降物， 4 mL上清液	8.5 mL疏堆積的沈降物， 3.5 mL上清液	10 mL疏堆積的沈降物， 2 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 3.75 mL疏堆積的沈降物， 8.25 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 3.5 mL疏堆積的沈降物， 8.5 mL上清液
7 天	7 mL疏堆積的沈降物， 5 mL上清液	7.25 mL疏堆積的沈降物， 4.75 mL上清液	7.5 mL疏堆積的沈降物， 4.5 mL上清液	9 mL疏堆積的沈降物， 3 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 3.5 mL疏堆積的沈降物， 8.5 mL上清液	＜0.1 mL硬沈降物。 3.5 mL疏堆積的沈降物， 8.5 mL上清液
倒置以重構	在10次倒置中充分分散	在10次倒置中充分分散	在6次倒置中充分分散	在10次倒置中充分分散	在7次倒置中充分分散	在15次倒置中充分分散

先前獲得並報告於表14中的結果；此處包括其用於比較。

沈降測試表明，當與聚維酮K30樣品（樣品14A和15A）相比時，使用聚維酮90F降低了沈降水準，在環境溫度下長達7天後大部分保持懸浮。

當與包含AEROSIL®200的樣品16-04相比時，包含SYLOID® 244 FP的樣品16-03在環境溫度下7天後需要更少的倒置以再分散沈降物，這在更長期儲存中可能更有益。因此，認為SYLOID® 244FP是用於包含在貝魯舒地爾調配物中的優選二氧化矽。

還在加速儲存條件下隨時間進一步評價樣品16-01至16-04。將30 mL各樣品轉移至2×60 mL玻璃瓶中，並在環境溫度和40ºC/75% RH下儲存，7天後測試視覺外觀、沈降水準、任何沈降物的再分散和pH。藉由該研究發現，當在環境溫度下儲存T=7天時，儲存在含有聚維酮90F的60 mL透明玻璃瓶中的所有4個樣品都容易藉由溫和搖動約10秒來重構。在環境溫度下儲存7天後，在再分散後觀察到起泡，即使含有調味劑的樣品也如此。

對於在40ºC/75%RH下T=7的樣品，含有聚維酮90F的所有4個樣品在40ºC/75%RH下儲存後看起來更粘稠，但在溫和搖動約10秒後再分散。沒有觀察到起泡。

最後，選擇四個樣品進行XRPD分析研究，特別是樣品15A和16A（表12B）、樣品17（表21）和樣品16-03（表19）。在初始時以及在環境溫度和加速儲存條件（即50ºC）下7天後，將30 mL各樣品轉移至1×60 mL玻璃瓶中用於分析測試（攪拌樣品以再分散任何沈降物）。分離樣品用於XRPD分析。XRPD資料表明所有樣品與API的原始形式一致，並且pH漂移與API形式的變化無關。以0.5 mg/mL包括的苯甲酸鈉水準不存在問題。實例 7 ： 防腐劑和苯甲酸鈉水準

基於API在水中約pH3的低天然pH和在實例1中描述的含有山梨酸鉀的樣品中觀察到的不穩定性，選擇苯甲酸鈉作為防腐劑的優選選擇。

製備四種調配物以評估調整苯甲酸鈉水準的影響並選擇用於貝魯舒地爾調配物的優選水準。具體地，製備表21中描述的四個樣品17至20，其包括高、中等和低水準的苯甲酸鈉與9 mg/mL聚維酮K30和5 mg/mL SYLOID® 244FP的組合，後者已基於先前實例3（聚維酮）和6（SYLOID® 244FP）中的發現被鑑定為優選的懸浮劑。製備不含防腐劑的樣品20作為參考。表21：用於評估苯甲酸鈉水準的調配物

樣品	17	18	19	20
描述	高水準苯甲酸鈉	中等水準苯甲酸鈉	低水準苯甲酸鈉	無苯甲酸鈉
組分	mg/mL	g/150 mL批料	mg/mL	g/150 mL批料	mg/mL	g/150 mL批料	mg/mL	g/150 mL批料
貝魯舒地爾(針研磨)	48.496*	7.27	48.496*	7.27	48.496*	7.27	48.496*	7.27
苯甲酸鈉	1.00	0.15	0.50	0.075	0.25	0.0375	n/a	n/a
聚維酮K30	9.00	1.35	9.00	1.35	9.00	1.35	9.00	1.35
SYLOID ®244 FP	5.00	0.75	5.00	0.75	5.00	0.75	5.00	0.75
酒石酸(適量)	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5	至pH3.5
無菌水(至體積/mL)	1	150	1	150	1	150	1	150

* 以 1.2124 鹽校正因子調整， 48.496 mg/mL 相當於 40 mg/mL 游離鹼

使用以下製造步驟將以上調配物（樣品17-20）製備成150 mL的體積： 1. 向250 mL玻璃燒杯中加入130 mL無菌沖洗用水； 2. 當使用磁力攪拌器攪拌時，加入苯甲酸鈉並混合直至完全溶解； 3. 當攪拌時，加入聚維酮K30並混合直至完全溶解； 4. 當攪拌時，加入SYLOID®244 FP並混合直至分散並獲得均勻的混合物； 5. 當攪拌時，加入貝魯舒地爾（針研磨）並混合直至分散並獲得均勻的混合物； 6. 記錄pH，並且如果需要，加入酒石酸調整以達到3.5 ± 0.2的目標pH； 7. 加入無菌沖洗用水以補足體積並混合調配物直至均勻。

對樣品17至20進行PET測試。結果表明，含有所有水準（0.25 mg/mL、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL）苯甲酸鈉的所有批料均提供合適的防腐功效。結果證實，苯甲酸鈉的所有水平均可被認為是替代選項，並且0.50 mg/mL的中間水準將是苯甲酸鈉的合適含量（以允許苯甲酸鈉對更長期穩定性的任何潛在劣化。）不含苯甲酸鈉的樣品20未能提供針對微生物生長的足夠保護。因此，在包含貝魯舒地爾的即用型液體調配物中包含防腐劑是有利的。實例 8 ： 甜味劑和調味劑的影響

開發了一系列包括甜味劑和調味劑的媒劑，以鑑定適於貝魯舒地爾在瓶中的重構以及對個體的可能投予的那些。以最多100 mL的小規模批料進行初始調配物開發研究。首先，根據表22A-表22B和表23A-表23B中呈現的組成詳情製造媒劑。

基於以下發現來選擇甜味劑水準：API具有苦味特徵，需要改善調配物的適口性才能有效地讓個體接受。藉由以下方式製備媒劑：(a) 將所需量的無菌沖洗用水加入125 mL透明玻璃瓶中；(2) 加入所需量的甜味劑，並使用旋渦混合器混合直至目測溶解；以及 (3) 添加所需量的調味劑（在適用的情況下）並使用旋渦混合器混合直至目測溶解。表22A：含有三氯蔗糖的媒劑的組成詳情（媒劑1-3）

組分	媒劑 01	媒劑 02	媒劑 03
%w/w	%w/w	%w/w
三氯蔗糖	0.15	0.30	0.15
柳丁Flexarome調味劑880021 TFS504	n/a	n/a	0.40
熱帶水果混合調味劑PGS-145298	n/a	n/a	n/a
檸檬PS PHS-135460	n/a	n/a	n/a
柳丁調味劑SC611927	n/a	n/a	n/a
無菌沖洗用水 (至體積/mL)	至100	至100	至100

表22B：含有三氯蔗糖的媒劑的組成詳情（媒劑4-6）

組分	媒劑 04	媒劑 05	媒劑 06
%w/w	%w/w	%w/w
三氯蔗糖	0.15	0.15	0.15
柳丁Flexarome調味劑880021 TFS504	n/a	n/a	n/a
熱帶水果混合調味劑PGS-145298	0.40	n/a	n/a
檸檬PS PHS-135460	n/a	0.40	n/a
柳丁調味劑SC611927	n/a	n/a	0.40
無菌沖洗用水 (至體積/mL)	至100	至100	至100

表23A：含有乙醯磺胺酸鉀的媒劑的組成詳情（媒劑7-9）

組分	媒劑 07	媒劑 08	媒劑 09
%w/w	%w/w	%w/w
乙醯磺胺酸鉀	0.45	0.90	0.45
柳丁Flexarome調味劑880021 TFS504	n/a	n/a	0.40
熱帶水果混合調味劑PGS-145298	n/a	n/a	n/a
檸檬PS PHS-135460	n/a	n/a	n/a
柳丁調味劑SC611927	n/a	n/a	n/a
無菌沖洗用水	至100	至100	至100

表23B：含有乙醯磺胺酸鉀的媒劑的組成詳情（媒劑10-12）

組分	媒劑 10	媒劑 11	媒劑 12
%w/w	%w/w	%w/w
乙醯磺胺酸鉀	0.45	0.45	0.45
柳丁Flexarome調味劑880021 TFS504	n/a	n/a	n/a
熱帶水果混合調味劑PGS-145298	0.40	n/a	n/a
檸檬PS PHS-135460	n/a	0.40	n/a
柳丁調味劑SC611927	n/a	n/a	0.40
無菌沖洗用水	至100	至100	至100

各自表徵媒劑01-12的視覺外觀和pH。媒劑01-02（含有三氯蔗糖）和媒劑07-08（含有乙醯磺胺酸鉀）在視覺上觀察為透明無色溶液。含有甜味劑和調味劑組合的媒劑的視覺外觀不同，除了含有橙色調味劑的媒劑（媒劑06和12）為灰白色不透明液體外，所有批料均觀察為渾濁液體。媒劑的pH範圍從低到4.3（媒劑03和09），到高到7.0（媒劑01和02），均落在建議的驗收標準範圍內。

然後製備重構的貝魯舒地爾樣品以評估媒劑01-12的性能。為了在瓶中製備重構的貝魯舒地爾，將727.44 mg貝魯舒地爾甲磺酸鹽（600 mg貝魯舒地爾游離鹼）轉移到60 mL III型透明玻璃瓶中。向所述瓶中加入15 mL表22A-表22B和表23A-表23B中所列的媒劑中的每一種，並攪拌樣品以重構。

所有樣品藉由溫和攪拌10秒來重構。含有乙醯磺胺酸鉀的所有樣品（使用媒劑07-12）在約5分鐘後顯示出絮凝跡象並明顯增稠。因此，認為含有乙醯磺胺酸鉀的所有樣品不適用於貝魯舒地爾調配物。含有三氯蔗糖的樣品（使用媒劑01-06）的視覺外觀是不透明的黃色分散體，並沒有顯示絮凝的跡象。因此，認為這些含有三氯蔗糖的媒劑適用於調配物。此外，使用媒劑01-06重構的樣品的pH落在3.1至3.2的範圍內，這是無需pH調整即適合於最終調配物的pH。

進一步開展工作以研究向貝魯舒地爾調配物中加入調味劑對攪拌後起泡的影響。選擇熱帶水果混合調味劑用於該評估，並且使用先前製備的樣品11A（表12A）和樣品12B（表13A）（在以上實例6中）進行實驗。每個樣品包括作為防腐劑的苯甲酸鈉和聚維酮K30且不添加二氧化矽/懸浮劑，其中樣品11A包括針研磨的貝魯舒地爾，樣品12B包括噴射研磨的藥物。

對於每個樣品，將約30 mL轉移到60 mL玻璃瓶中。為了評估起泡和對添加調味劑的影響，進行以下實驗。 1. 藉由搖動將每個樣品攪動30秒（每秒倒置約2次）並記錄視覺外觀和起泡； 2. 保持每個樣品不受干擾，直到不存在泡沫/摻氣； 3. 將0.12 g熱帶水果混合調味劑（約0.4%w/v）加入每個樣品中，使用渦旋混合器混合以溶解。

表24概述了加入調味劑後的組成。表24：添加調味劑後樣品11A和12B的組成

樣品	11A- 具有調味劑	12B- 具有調味劑
組分	mg/mL	g/30 mL 批料	mg/mL	g/30 mL 批料
貝魯舒地爾(針研磨)	48.496	4.8496	n/a	n/a
貝魯舒地爾(噴射研磨)	n/a	n/a	48.496	4.8496
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.50	0.05
聚維酮K30	3.00	0.30	6.00	0.60
酒石酸	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5
無菌沖洗用水(至體積/mL)	1	30	1	100
熱帶水果調味劑	4.00	0.12	4.00	0.12

注意以下觀察結果。

在沒有調味劑的情況下，在攪拌30秒後可以看到大量的泡沫和摻氣。在無干擾靜置5分鐘後，當沒有加入調味劑時，針研磨和噴射研磨API的起泡存在顯著差異。與樣品12B（噴射研磨API）相比，樣品11A（針研磨API）具有更持久的泡沫。

加入調味劑後，在攪拌30秒後僅觀察到非常少量的摻氣。一旦加入熱帶水果混合調味劑，與噴射研磨API相比，在含有針研磨的樣品中泡沫或摻氣量沒有顯著差異。因此，得出結論，熱帶水果混合調味劑適用於貝魯舒地爾調配物，並且基於這些調味劑的先前觀察結果，預期表22A和表22B中列出的其他替代調味劑將對起泡具有類似的影響。實例 9 ： 按比例放大的比較分析和均質化步驟

對含有9 mg/mL聚維酮90F的按比例放大的系統和含有6 mg/mL聚維酮K30和針研磨API的替代系統以及含有9 mg/mL聚維酮90F的系統（使用噴射研磨API以允許與針研磨API進行比較）進行比較分析。在所有調配物中，SYLOID® 244FP以5 mg/mL用作懸浮劑，以0.5 mg/mL包括苯甲酸鈉以提供防腐功效，並使用檸檬調味劑。

本研究中使用的組成的詳情進一步顯示在表25中。表25：比較和穩定性研究的組成詳情

樣品	21	22	23
組分	mg/mL *	g/2500g	mg/mL *	g/2500g	mg/mL *	g/2500g
貝魯舒地爾(針研磨)	48.496*	118.875	48.496*	118.875	n/a	n/a
貝魯舒地爾(噴射研磨)	n/a	n/a	n/a	n/a	48.496*	118.875
苯甲酸鈉	0.500	1.225	0.500	1.225	0.500	1.225
聚維酮K30	6.00	14.700	n/a	n/a	n/a	n/a
聚維酮90 F	n/a	n/a	9.00	22.050	9.00	22.050
Syloid 244 FP	5.00	12.250	5.00	12.250	5.00	12.250
三氯蔗糖	1.500	3.675	1.500	3.675	1.500	3.675
檸檬調味劑PHS-135460	4.000	9.800	4.000	9.800	4.000	9.800
酒石酸	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5
無菌沖洗用水	至1 mL	至2500g	至1 mL	至2500g	至1 mL	至2500g

如下分析樣品21-23的整體均質性。在取樣前藉由倒置10次溫和攪動調配物，以確保在測試前重懸浮任何沈降物。

從每個瓶中取出兩個重複樣品以提供n=6。將1.00 mL懸浮液加入200 mL容量瓶中，並用稀釋劑（50:50 MeCN:H ₂O）補足至約180 mL並超聲處理10分鐘。使樣品平衡至室溫，然後用稀釋劑補足體積。然後將樣品藉由0.45 μm PTFE過濾器過濾，棄去前2 mL廢液，然後裝入小瓶以供分析。

收集來自整體均質性的初始評估的苯甲酸鈉和貝魯舒地爾二者的測定值。結果示於表26中。表26：樣品21-23按比例放大的整體均質性資料

		苯甲酸鈉	貝魯舒地爾
樣品	填充位置	測定 (mg/mL)	% 標籤要求	%RSD	測定 (mg/mL)	% 標籤要求	%RSD
21	開始	0.519	103.7%	3.88	52.143	130.36%	3.89
0.505	101.0%	51.660	129.15%
中間	0.529	105.9%	50.108	125.27%
0.565	113.0%	55.181	137.95%
結束	0.517	103.5%	49.941	124.85%
0.528	105.7%	53.591	133.98%
22	開始	0.509	101.7%	2.62	46.459	116.15%	38.82
0.489	97.8%	47.251	118.13%
中間	0.481	96.3%	84.259	210.65%
0.518	103.6%	86.023	215.06%
結束	0.499	99.9%	38.683	96.71%
0.501	100.1%	39.153	97.88%
23	開始	0.523	104.6%	3.45	32.020	80.05%	46.83
0.491	98.3%	42.039	105.10%
中間	0.487	97.4%	37.177	92.94%
0.518	103.6%	37.907	94.77%
結束	0.484	96.8%	87.665	219.16%
0.488	97.6%	82.389	205.97%

整體均質性資料表明，所有批料的苯甲酸鈉測定含量均符合RSD ≤ 6%的規格限值。然而，對於樣品21，貝魯舒地爾測定含量顯著高於90-100%的驗收標準，並且在樣品22和23中顯示出顯著差異，其水準不符合RSD ≤ 6%的規格限值。

還使用Brookfield DV1 LV錐板式粘度計，使用心軸CP41在30 RPM下在20ºC下對樣品21-23進行粘度測試。結果示於表27中。表27：按比例放大的比較樣品21-23的粘度測試結果

樣品	21	22	23
RPM	100	100	100
粘度(cps)	6.02	4.82	5.53
扭矩(%)	52.3	41.9	48.0
溫度(ºC)	20	20	20

記錄的粘度值出乎意料地非常低，特別是對於含有聚維酮90F的樣品22。先前已經觀察到體系隨時間增稠，但是這在樣品21-23中未觀察到。

雖然僅使用頂置式混合在較小規模上成功地製造了批料，但根據本研究確定，對於按比例放大，頂置式混合不足以充分分散API並形成均質懸浮液，這導致了本實例中的測定結果差異很大。確定在按比例放大時有利地包括均質化步驟以獲得均質懸浮液。進一步的研究證實使用Silverson均質器改善了API均質性。實例 10 ： 體系優化和有利的參數

按照實例9中的按比例放大工作，製備另外的比較樣品並分析，初始假設是增加體系的粘度，然後降低PVP/調配物體系中的沈降速率。研究了兩種優化體系的方法： 1. 增加聚維酮90F的水準：已顯示PVP有效潤濕API且可用作增稠劑。然而，根據藥物開發和控制策略計畫，基於3個月齡女童的平均體重（5.5 kg），聚維酮90F將增加至不高於可接受的ADI的水準。PVP的ADI為50 mg/kg體重，因此不得超過275 mg/劑（基於1劑/天） 2. 添加methocel K4M與聚維酮K30組合：先前，觀察到含有PVP的替代懸浮劑的樣品隨時間明顯膠凝化並明顯聚集。因為PVP有助於潤濕API，所以開展工作以研究替代懸浮劑與聚維酮K30組合的使用（基於可用資訊，即與聚維酮90F相比，更短鏈PVP更可能有助於潤濕）。選擇Methocel K4M作為替代增稠劑，因為與測試的其他懸浮劑相比，它顯示出與貝魯舒地爾的物理不相容性最低。

為了研究這些方法，以200 g規模製備具有表28A和表28B中概述的組成詳情的四種調配物。將樣品置於短期穩定性研究中並在25ºC/60%RH和40ºC/75%RH下在T=14天和T=1個月時評估其視覺外觀、測定、pH和粘度。表28A：按比例放大優化研究中的調配物使用（樣品24-01和24-02）

樣品	24-01	24-02
組分	mg/mL	%w/w	g/200 g 批料	mg/mL	%w/w	g/200 g 批料
貝魯舒地爾(針研磨)	48.496	4.75	9.51	48.496	4.75	9.51
貝魯舒地爾(噴射研磨)	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.10	0.50	0.05	0.10
Kollidon 90F	30.00	2.94	5.88	50.00	4.90	9.80
Kollidon K30	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
Methocel K4M	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
SYLOID® 244 FP	5.00	0.49	0.98	5.00	0.49	0.98
三氯蔗糖	1.500	0.147	0.294	1.500	0.147	0.294
檸檬調味劑	4.00	0.39	0.78	4.00	0.39	0.78
酒石酸	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5
無菌沖洗用水	1	100	200	1	100	200
總計	1020**	100	200	1020**	100	200
注釋	將聚維酮90F增加至30 mg/mL 相當於150 mg PVP/5 mL劑量。	將聚維酮90F增加至50 mg/mL。相當於250 mg PVP/5 mL劑量

表28B：按比例放大優化研究中的調配物使用（樣品24-03和24-04）

批料	24-03	24-04
組成	mg/mL	%w/w	g/200 g 批料	mg/mL	%w/w	g/200 g 批料
貝魯舒地爾(針研磨)	48.496	4.75	9.51	n/a	n/a	n/a
貝魯舒地爾(噴射研磨)	n/a	n/a	n/a	48.496	4.75	9.51
苯甲酸鈉	0.50	0.05	0.10	0.50	0.05	0.10
Kollidon 90F	n/a	n/a	n/a	30.00	2.94	5.88
Kollidon K30	10.00	0.98	1.96	n/a	n/a	n/a
Methocel K4M	5.00	0.49	0.98	n/a	n/a	n/a
SYLOID® 244 FP	5.00	0.49	0.98	5.00	0.49	0.98
三氯蔗糖	1.500	0.147	0.294	1.500	0.147	0.294
檸檬調味劑	4.00	0.39	0.78	4.00	0.39	0.78
酒石酸	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5	適量添加至pH 3.5
無菌沖洗用水	1	100	200	1	100	200
總計	1020**	100	200	1020**	100	200
注釋	10 mg/mL Kollidon K30用於API潤濕 5 mg/mL Methocel K4M作為增稠劑	將聚維酮90F增加至30 mg/mL 相當於150 mg PVP/5 mL劑量。使用噴射研磨API製備。

所有四種體系（24-01至24-04）看起來比用先前調配物所看到的更粘稠。在初始混合時，所有四種體系都是可流動的並且API很好地潤濕。靜置24小時後，含有methocel K4M的樣品24-03變成半固體，但在搖動10秒後變成流體狀態。一周後，樣品24-01、24-02和24-04均有一些沈降。當與樣品24-02（含有較高水準的聚維酮90F）和樣品24-04（含有相同水準的聚維酮90F，但使用噴射研磨API製備）相比時，樣品24-01似乎具有最高量的沈降物。樣品24-03未顯示沈降跡象，但為半固體。

在T=14天和T=28天時，重新評估樣品的視覺外觀。樣品24-03保持高度粘稠，不透明的黃色和凝膠狀，但藉由搖動容易液化以形成不透明的黃色液體。系統24-01、24-02和24-04是可流動的不透明黃色液體，具有少量沈降，藉由搖動再分散。

注意到在API粘附到玻璃瓶壁上的地方觀察到“條帶”。有趣且令人驚訝的是，與噴射研磨API（即，樣品24-03和24-04）相比，看到含有針研磨API的系統有更多的API粘附到壁上。因此，得出以下結論： 1. 含有Methocel K4M的系統24-03形成固體/凝膠狀結構。然而，這容易搖動以再次形成液體。這保持液體狀，但在24小時後恢復其結構。 2. 在其餘樣品中，具有30 mg/mL聚維酮90F並使用噴射研磨API的24-04具有最低量的沈降物。含有30 mg/mL聚維酮90F並使用針研磨API的樣品24-01具有最高的沈降速率並且最可能粘附到玻璃瓶上。 3. 與樣品24-01相比，使用針研磨API製造的含有50 mg/mL聚維酮90F的樣品24-02具有降低的沈降速率。

根據該研究，確定了使用噴射研磨的貝魯舒地爾的包含聚維酮90F的體系（樣品24-04）出乎意料地在視覺檢查中提供了最佳結果，其沈降量最低。

還藉由苯甲酸鈉和貝魯舒地爾測定分析了所有四個樣品。對於所有樣品，貝魯舒地爾和苯甲酸鈉二者的測定資料彼此相當。用推入式瓶適配器（PIBA）獲得的樣品提供了與使用自動移液管取得的樣品相當的結果，表明任一樣品轉移方法都適用。

兩種儲存條件下的樣品24-02至24-04和25ºC/60%RH下的樣品24-01對貝魯舒地爾和苯甲酸鈉二者的測定值均在標籤要求的90-110%的規格限值內。對於樣品24-02至24-04，與初始和14天時間點相比時，測定資料沒有顯著變化。

四個樣品在25ºC/60%RH和40ºC/75%RH下在初始、T=2周和T=1個月時的pH值概述於表29中。表29：體系優化的pH結果（樣品24-01至24-04）

樣品	24-01	24-02	24-03	24-04
時間點	pH
初始	3.6	3.6	3.7	3.4
T = 2周，25ºC/60%RH	3.2	3.3	3.4	3.2
T = 2周，40ºC/75%RH	3.0	2.9	3.1	2.8
T = 4周，25ºC/60%RH	3.1	3.1	3.4	3.0
T = 4周，40ºC/75%RH	2.9	2.8	3.1	2.7

在所有體系中均觀察到pH向下漂移，在40ºC/75%RH下觀察到最大變化。初始pH防腐劑穩定性工作表明，在觀察到pH漂移的樣品中，pH傾向於下降至約pH 2.9。苯甲酸在pH 3下最有效，因此即使向下漂移，該pH對於防腐功效也是可接受的。pH防腐劑穩定性研究表明，在該pH下沒有發生化學變化。XRPD分析表明，pH 3的樣品沒有形式變化，除非存在如實例2所述的檸檬酸鹽緩衝液。

由於觀察到pH隨時間向約pH 3.0漂移，然後保持在該近似pH值的趨勢，並且考慮到貝魯舒地爾在該值的穩定性，pH 3.0 ± 0.5被靶向為對於包含貝魯舒地爾的液體調配物合適的pH範圍。

還使用Brookfield錐板式粘度計，心軸CP52在20ºC下測試四個體系的粘度。在測試之前將樣品劇烈搖動10秒以分散任何沈降物。表30概述了在25ºC/60%RH和40ºC/75%RH下在初始、T=2周和T=4周時的粘度數據。表30：在初始、T=14天和T=28天時樣品24-01至24-04的粘度數據

樣品	24-01	24-02	24-03	24-04
時間點	在 30 rpm(20ºC) 下的粘度 (cp)
初始	31.0	64.5	192.3	40.0
T = 2周，25ºC/60%RH	45.3	79.4	221.7	36.1
T = 2周，40ºC/75%RH	45.6	64.8	258.0	32.0
T = 4周，25ºC/60%RH	57.4	59.2	268.9	39.5
T = 4周，40ºC/75%RH	53.3	83.1	256.8	27.5

可以看到，觀察到粘度的輕微變化，但是在25ºC/60%RH和40ºC/75%RH下從初始和2周和4周後沒有顯著變化。體系之間的趨勢在所有時間點保持相同，最粘稠的是含有10 mg/mL聚維酮K30+5 mg/mL Methocel K4M的樣品24-03（具有噴射研磨API），最不粘稠的是含有30 mg/mL聚維酮90F的樣品24-01。令人驚訝地，如最初所提出的，樣品24-03的較高粘度與降低的沈降速率不相關。如上所述，在所有樣品中，具有30 mg/mL聚維酮90F並使用噴射研磨API的24-04具有最低量的沈降物，但也具有較低粘度率之一。

總之，藉由比較分析，樣品24-02（50 mg/mL聚維酮90F）提供最一致的測定結果，特別是與也使用針研磨API的樣品24-01（30 mg/mL聚維酮90F）相比。樣品24-03顯示出如過去所見的增稠/凝膠化，但當搖動時更容易液化，並且在搖動後不顯示與先前在含有methocel K4M但不含聚維酮K30的批料中所見相同的團聚物。

然而，還觀察到與針研磨相比，使用噴射研磨API顯示出在減少玻璃瓶上的API“條帶”和降低沈降速率方面的改進。在均含有30 mg/mL聚維酮90F的樣品24-01（針研磨）和24-04（噴射研磨）之間進行了比較，觀察到了這一點。藉由製備按比例放大的開發樣品和增加PVP水準，沒有觀察到當使用噴射研磨的API時在早期開發中注意到的團聚。因此，從該研究得出結論，對於用於包含貝魯舒地爾的液體調配物，噴射研磨的貝魯舒地爾將是最有利的。

在總結這些結論和提供關於液體調配物的組分的詳情時參考表表31：調配物組分和分析

組分	mg/mL	%w/w	注釋
貝魯舒地爾(噴射研磨)	48.496	4.755	使用1.2124的因子調整，相當於40 mg/mL。基於當使用噴射研磨的API時觀察到的更低沈降速率以及在減少粘附到容器壁上的API時觀察到的改進，噴射研磨的API優於針研磨的API。
苯甲酸鈉	0.500	0.049	基於沒有防腐劑的樣品的PET結果，苯甲酸鈉對於防腐是重要的。苯甲酸鈉具有歸因於未解離的苯甲酸的抑菌和抗真菌兩種性質；因此，在pH 2-5的溶液中，防腐功效最好。JECFA (1996)將ADI設定為高達5 mg/kg體重。
三氯蔗糖	1.500	0.147	基於味道評估期間的適口性，三氯蔗糖可以以1.5 mg/mL被包括。 2000年將ADI設定為高達15 mg/kg體重。2016年，EFSA得出結論，所提出的擴展三氯蔗糖在食物中的使用，用於年齡為1至3歲的幼兒的特殊醫療用途，不會引起安全問題。
SYLOID® 244FP (膠態二氧化矽)	5.000	0.490	實驗表明，與不含膠態二氧化矽的樣品相比，以5 mg/mL包括SYLOID ®244FP對防止結塊和易重構性具有有益效果。在歐盟(EU)，根據關於食品添加劑的第1333/2008號法規(EC)的附錄II和附錄III，二氧化矽(E 551)被授權作為食品添加劑，並且具體純度標準在第231/2012號委員會條例(EU)中定義。如根據SCF (1991)和WHO食品添加劑系列第5期 (1985) 所分類“未指定的”ADI。在EFSA (2017) 將二氧化矽(E 551)再次評價為食品添加劑時，由於可用資料的限制，專家小組無法確認當前ADI是“未指定的”。
聚維酮90F	50.000	4.902	聚維酮90F可以以50 mg/mL的較高水準被包括，以賦予粘度以降低沈降速率，從而有助於改善更長期穩定性。聚維酮90F以如下所需的水準被包括：增加粘度以有助於更長期的物理穩定性，但是保持盡可能地低，並且對於給定的年齡組，保持低於用於預期劑量調整的ADI。聚維酮90F(聚乙烯吡咯啶酮(PVP))：JECFA已授權PVP的0-50 mg/kg/天的ADI(進一步詳情於PDCSP中) WHO體重-年齡圖*表示第3百分位中3月齡女童的體重為4.6 kg，相當於230 mg/天的用於PVP的ADI。對於3個月齡-6個月齡，預期18-23 mg API的預測劑量。對於40 mg/mL調配物，這相當於約0.5 mL/劑。假設1劑/天，PVP的口服攝入量將為25 mg，低於該年齡組的ADI。 WHO體重-年齡圖表示第3百分位中10歲女童的體重為23.5 kg，相當於1175 mg/天的用於PVP的ADI。對於12歲-17歲，預期167 mg API的預測劑量。對於用於計算PVP攝入量的“最差情況”，如果在該年齡組提供完整的200 mg成人劑量，則對於40 mg/mL調配物，這相當於5 mL劑量。假設1劑/天，PVP的口服攝入量將為250 mg，低於該年齡組的ADI
酒石酸	適量添加至pH 3.0 ± 0.5	適量添加至pH 3.0 ± 0.5	在較高pH值下觀察到pH向下漂移至約pH 2.8。對於用酒石酸調整的先前使用的批料，沒有觀察到XRPD的變化，所述批料顯示pH隨時間而降低。提出可以使用酒石酸調整至pH 3.0 ± 0.5的初始目標pH；在另一個實施例中，調整至pH 3.0 ± 0.2。 1990年，食品科學委員會(SCF，現為EFSA)確立了用於L(+)-酒石酸(E 334)及其鉀鹽和鈉鹽(E 335-337，354)的30 mg/kg體重的ADI組。在新評價中，EFSA決定，關於全身生物利用度的可用資料足夠穩健，可將所述組ADI增加至240 mg/kg體重(以酒石酸計)。
無菌沖洗用水	至1 mL	至100	稀釋劑
總計	1020	100.000	-

實例 11 ： 味道和生物利用度研究

在如前所述開發包含貝魯舒地爾的液體調配物之後，進行研究以 (i) 評價包含貝魯舒地爾的液體調配物的味道屬性（氣味、甜味、苦味、風味、口感/質地、砂礫感和回味）和總體可接受性；(ii) 確定包含貝魯舒地爾的液體調配物與貝魯舒地爾口服片劑相比在進食狀態下的相對生物利用度；以及 (iii) 確定在投予包含貝魯舒地爾的液體調配物後，食物對貝魯舒地爾的PK的影響。

本研究的第一部分涉及“啜飲和吐出”味道評估以剖析調配物的味道特徵並鑑定合適的風味體系。然後將味道研究的結果納入下一部分的考慮，所述下一部分用於液體調配物與口服片劑相比的相對生物利用度評估。對於該研究，使用48.496 mg/mL貝魯舒地爾液體調配物（40 mg/mL游離鹼）。選擇該濃度以使之後在健康志願者中進行的相對生物利用度研究中投予的體積最小化（5 mL以投予200 mg劑量）並且便於與參考片劑（200 mg）進行比較。 (a) 第 I 部分 - 味道研究

該第一項研究的目的是鑑定最佳的調味劑和甜味劑組合，以促進或改善用於向年齡為3個月至12歲的目標患者群體口服投予藥物的貝魯舒地爾液體調配物的適口性。 (i). 方法

12名健康成年男性個體（平均年齡35.3歲，最小23歲，最大52歲）入組本研究的味道特徵部分。個體在產品投予（第1天）前一天入住，並在第2天離開。在第1天，個體被隨機化以根據6個治療順序（ABFCED、BCADFE、CDBEAF、DECFBA、EFDACB和FAEBDC）中的1個接受總共6種包含貝魯舒地爾的液體調配物，其中每個治療順序分配兩名個體。

每個單獨治療（例如，A、B、C、D等）涉及單一40 mg/mL（5 mL中200 mg）口服劑量的貝魯舒地爾。如下使用瓶裝調配物和6種不同方案媒劑：A=無菌水（媒劑1），B=低三氯蔗糖（媒劑2），C=高三氯蔗糖（媒劑3），D=橙低三氯蔗糖（媒劑4），E=熱帶水果混合低三氯蔗糖（媒劑5），並且F=檸檬低三氯蔗糖（媒劑6）。

在包含貝魯舒地爾的液體調配物的第一次投予（第1天或在第1天早餐完成之前[劑量前]）之前，給予個體使用示例性流體（例如橙汁/果汁）的訓練問卷。個體根據隨機化時間表按瓶方案接受測試貝魯舒地爾。

個體在第1天早晨食用標準早餐後2小時接受其方案的第一單一口服劑量。每個方案遵循相同的研究設計：個體接受瓶中單劑量的貝魯舒地爾液體調配物，將其在口中保持大約1分鐘，之後吐出。

在吐出後，個體立即單獨地且私下地完成問卷，考慮7個關鍵味道特徵（氣味、甜味、苦味、風味、口感/質地、砂礫感和回味），使用9分Likert量表，對總體可接受性進行評級。具體地，根據該量表的評級如下：1=極度厭惡，2=非常厭惡，3=中度厭惡，4=略微厭惡，5=既不喜歡也不厭惡，6=略微喜歡，7=中度喜歡，8=非常厭惡，以及9=極度喜歡。

對6個方案中的每一個完成該過程。不吞咽貝魯舒地爾。在品嘗每個方案之間有大約30分鐘的洗脫（包括味覺淨化）。在此期間，個體在進一步品嘗之前使用自來水（以50 mL等分樣品自由投予）和餅乾淨化他們的味覺。所有方案在同一天品嘗。

在最終劑量後大約1小時（在從臨床單位離開之前）取單個血漿PK樣品。僅在個體意外吞咽調配物的情況下和/或為了研究被認為與IMP相關的治療中出現的不良事件（TEAE）的目的，才保留該樣品用於分析。在研究第1部分中，沒有個體報告意外吞咽調配物和/或被認為與IMP相關的TEAE；因此，不需要分析任何個體的血漿PK樣本，並將其銷毀。

個體留在現場，直至最終味道/適口性評估後1小時。為了確保個體持續健康，在最終劑量後3至7天撥打隨訪電話。 (ii) 結果

每個味道/適口性屬性的中值（最小值-最大值）得分總結於表32中。中值差異資料總結於表33中。表32：貝魯舒地爾口服液體調配物的第一部分味道研究中各屬性的最小值-最大值得分

味道屬性	測試治療 ( 方案 )
無菌水 (A) 媒劑 1	低三氯蔗糖 (B) 媒劑 2	高三氯蔗糖 (C) 媒劑 3	橙低三氯蔗糖 (D) 媒劑 4	熱帶水果混合低三氯蔗糖 (E) 媒劑 5	檸檬低三氯蔗糖 (F) 媒劑 6
中值得分 ( 最小值 - 最大值 )	中值得分 ( 最小值 - 最大值 )	中值得分 ( 最小值 - 最大值 )	中值得分 ( 最小值 - 最大值 )	中值得分 ( 最小值 - 最大值 )	中值得分 ( 最小值 - 最大值 )
氣味	5.0 (4 – 6)	5.0 (5 – 8)	5.0 (5 – 8)	6.0 (5 – 8)	7.0 (5 – 8)	6.0 (5 – 8)
甜味	4.5 (1 – 6)	6.0 (3 – 8)	6.5 (5 – 9)	7.0 (5 – 9)	7.0 (5 – 9)	8.0 (5 – 8)
苦味	4.0 (1 – 6)	5.0 (2 – 8)	5.0 (3 – 8)	5.0 (4 – 8)	5.0 (5 – 8)	5.5 (2 – 8)
風味	3.5 (1 – 5)	6.0 (4 – 7)	6.0 (4 – 8)	6.5 (4 – 9)	7.0 (4 – 9)	7.0 (6 – 9)
口感 / 質地	3.0 (1 – 6)	4.5 (2 – 7)	4.0 (1 – 8)	4.5 (1 – 8)	5.0 (2 – 9)	5.0 (1 – 6)
砂礫感	3.5 (1 – 6)	4.0 (2 – 7)	4.0 (1 – 8)	4.0 (1 – 8)	4.5 (3 – 9)	5.5 (2 – 7)
回味	4.0 (1 – 6)	4.5 (2 – 7)	5.0 (1 – 6)	5.5 (1 – 8)	6.0 (2 – 9)	6.0 (3 – 7)
總體	3.0 (1 – 6)	6.0 (3 – 8)	6.0 (2 – 8)	6.5 (2 – 8)	7.0 (4 – 8)	7.0 (4 – 8)

表33：貝魯舒地爾口服液體調配物的第一部分味道研究的中值差異結果

	中值差異
方案	三氯蔗糖	調味劑	總體可接受性	甜味	調味劑
A	-	-	-	-	-
B	低	-	2.5	2	3
C	高	-	2	2	3
D	低	橙	2.5	2	3.5
E	低	熱帶	3.5	2.5	4
F	低	檸檬	3	3.5	3.5

媒劑1（無菌水-參考）是得分最低的媒劑，總體可接受性的中值得分為3.0，表明個體小組中度厭惡產品。調味方案（媒劑4[橙低三氯蔗糖]、5[熱帶水果混合低三氯蔗糖]和6[檸檬低三氯蔗糖]）分別達到6.5、7.0和7.0的中值得分，表明添加調味劑改善了IMP的總體味道/適口性特徵。

媒劑1的具有最低中值得分的味道/適口性屬性為風味、口感/質地和砂礫感（分別為3.5、3.0和3.5），表明這些是厭惡的原因。在添加調味的低三氯蔗糖媒劑（媒劑4、5和6）的情況下，這些屬性中每一個的中值得分增加，風味的範圍為6.5至7.0，口感/質地的範圍為4.5至5.0，並且砂礫感的範圍為4.0至5.5。在添加調味的低三氯蔗糖媒劑的情況下，所有其他味道/適口性屬性的中值得分也有所提高，表明個體更喜歡這些媒劑的味道特徵。

對於每種味道屬性，Friedman檢驗在5%顯著性水準下具有統計學顯著性，表明至少一種調配物的味道得分明顯不同於其他處理（對於總體可接受性、氣味、甜味、苦味、風味和口感/質地，p ＜ 0.001，對於砂礫感和回味，分別為p = 0.041和p = 0.001）。

對於所有成對比較和味道屬性，成對差異的中值是正的，表明與參考媒劑無菌水相比，甜味劑和/或調味劑的使用顯示出改善的可接受性。

在所有味道屬性中，與參考媒劑相比，熱帶水果混合低三氯蔗糖或檸檬低三氯蔗糖媒劑顯示出最大的改善或聯合最大的改善（基於成對差異的中值）。增加媒劑的三氯蔗糖含量未顯示有益。 (b) 第 2 部分 - 生物利用度 (i) 方法

第2部分是一項單中心、開放標籤、隨機化、三階段設計，用於在18名健康男性個體中評估選擇的貝魯舒地爾液體調配物與貝魯舒地爾口服片劑相比的相對生物利用度和食物對包含貝魯舒地爾的液體調配物的影響。個體在篩選訪視時（第2部分的第-28天至第-2天）接受初步篩選程式以確定其對於研究第2部分的合格性。允許參加研究第1部分的個體參加第2部分。

個體在3個階段內接受200 mg貝魯舒地爾的單一口服劑量。在三個階段內使用三種不同的方案（G、H和I）。在方案G中，貝魯舒地爾以片劑形式投予（參考）；並且在方案H和I中，貝魯舒地爾以口服液體調配物的形式投予。

在第1階段，第1天：在投予第一劑量的IMP之前，將個體隨機化至6個治療順序（GHI、HIG、IGH、IHG、GIH和HGI）中的1個，其中每個治療順序分配3名個體。在每個研究階段（第1、2和3階段）的第1天，個體接受表34中的方案：表34：生物利用度/後續味道研究中使用的方案

階段	方案	IMP	劑量 ^a	投予途徑
1、2和3(隨機化)	G	貝魯舒地爾片劑(參考)	200 mg	口服，進食
H	貝魯舒地爾液體調配物	200 mg	口服，空腹
I	貝魯舒地爾液體調配物	200 mg	口服，進食

將方案H作為無調味劑低三氯蔗糖液體調配物在空腹狀態下投予個體，並且將方案G和I在進食狀態下投予個體。以總共240 mL水投予方案G。對於方案H和I，在IMP投予後，個體立即飲水達到240 mL的總體積（包括用劑體積）。

每個研究階段遵循相似設計。在早晨第一次IMP投予前將個體收入臨床單位（第1階段的第-1天）,用於合格性確認和基線程式。僅對於方案H，在IMP投予之前給予個體使用示例性流體（例如橙汁/果汁）的訓練問卷，以顯示應如何完成問卷。這在第-1天（僅適用於在第2或3階段投予方案H的情況）或在第1天用劑之前（劑量前）進行。最初計畫在第2部分的方案H中使用根據第1部分確定為最有利的調味劑體系（檸檬調味劑和低三氯蔗糖溶液），然而，使用無調味劑低三氯蔗糖口服液體調配物來代替。

個體在第1天早晨在最少10小時的空腹過夜後（方案H，空腹狀態）或在標準早餐後（方案G和I，進食狀態）接受單劑量的IMP。以規律間隔收集血樣用於PK分析。投予方案H後，個體單獨地且私下地完成書面味道/適口性問卷。

個體在臨床單位連續入住10晚，覆蓋所有3個治療階段。所有個體留在現場直至最終劑量後72小時，進行安全性和PK評估。每次IMP投予之間有最少3天的洗脫。為了確保個體持續健康，在最終劑量後3至7天撥打隨訪電話。如果個體在離開後報告了任何表示引起關注的原因的AE，則他們需要到臨床單位進行隨訪評估。這將是計畫外訪視。 (ii) 結果a. 味道/適口性

總之，大多數個體將口服液體調配物（方案H）評級為5級（“既不喜歡也不厭惡”）、6級（“略微喜歡”）或7級（“中度喜歡”）。方案H的總體味道特徵得分與第1部分中使用相同甜味劑組合（即低三氯蔗糖）的方案B相當。 b. 生物利用度

與作為片劑參照投予的貝魯舒地爾（中值Tmax 3 h）相比，在包含貝魯舒地爾的液體調配物的單一口服投予後，貝魯舒地爾的吸收更快（中值Tmax 2 h）。

貝魯舒地爾作為參考片劑在進食狀態下投予。貝魯舒地爾被吸收的中值Tmax出現在劑量後3.00小時，隨後濃度展現快速下降，得到9.393小時的幾何平均T1/2，類似於先前觀察到的那些。與暴露相關的個體間變異性（Cmax和AUC）為中等，為26.1%-39.6%。投予貝魯舒地爾片劑後KD025m1和KD025m2的中位Tmax分別與劑量後2.00 h和3.00 h的貝魯舒地爾相似。KD025m1的濃度很少是可定量的，並且僅對2名個體的終末半衰期進行了可靠估計。KD025m2的幾何平均T1/2為2.466 h，對18名個體中的8名進行了可靠估計。與親本相比，兩種代謝物與暴露相關的個體間變異性更高，KD025m1和KD025m2分別為37.9%-63.9%和52.5%-75.3%。

在用貝魯舒地爾用劑後血漿貝魯舒地爾的關鍵幾何平均（幾何變異係數[CV%]）PK參數匯總於下表35中。表35：片劑與液體調配物投予的血漿貝魯舒地爾的比較PK參數

方案劑量水準狀態	G 200 mg 片劑進食	H 200 mg 液體調配物空腹	I 200 mg 液體調配物進食
個體數量參數	N = 18	N = 18	N = 18
Tlag ^a(h)	0.500 (0.00-2.00)	0.00 (0.00-0.00)	0.00 (0.00-0.00)
Tmax ^a(h)	3.00 (1.00-5.00)	1.50 (1.00-4.00)	2.00 (1.00-3.03)
Cmax (ng/mL)	1930 (26.1%)	1550 (33.3%)	1790 (25.1%)
AUC(0-24) (ng.h/mL)	9310 (37.5%)	7620 (44.9%)	9340 (34.6%)
AUC(0-最後) (ng.h/mL)	9720 (39.3%)	8010 (48.4%)	9570 (37.6%)
AUC(0-inf) (ng.h/mL)	10200 (39.6%) [n = 16]	8430 (46.4%) [n = 13]	9500 (40.9%) [n = 15]
AUC%外推 (%)	2.601 (44.8%) [n = 16]	2.785 (50.4%) [n = 13]	1.918 (34.9%) [n = 15]
T1/2 (h)	9.393 (57.7%) [n = 16]	9.499 (43.5%) [n = 13]	6.788 (49.2%) [n = 15]
λ-z (1/h)	0.074 (57.7%) [n = 16]	0.073 (43.5%) [n = 13]	0.102 (49.2%) [n = 15]
CL/F (mL/min)	326 (39.6%) [n = 16]	395 (46.4%) [n = 13]	351 (40.9%) [n = 15]
Vz/F (L)	265 (62.6%) [n = 16]	325 (47.9%) [n = 13]	206 (27.6%) [n = 15]

n：具有觀察結果的個體數量；N：資料集中的個體數量；NC：未計算 ^a中值（範圍）

在進食狀態下貝魯舒地爾作為片劑參考對健康男性志願者的單一口服投予後（方案G），在所有個體中貝魯舒地爾的濃度在0.5小時與3小時之間是明顯的。在空腹和進食狀態下用包含貝魯舒地爾的液體調配物用劑後（方案H和I），在所有個體中從0.5小時起濃度是明顯的。最大血漿濃度出現在劑量後1小時與5小時之間。

然後，濃度以雙相方式下降，並且保持可定量直至劑量後24小時與72小時之間。所得消除半衰期的範圍分別在4.84 h與33.02 h之間、5.36 h與23.76 h之間以及2.38 h與15.73 h之間。幾何平均半衰期的範圍為6.788 h至9.499 h。

用貝魯舒地爾用劑後血漿KD025m1和KD025m2的關鍵幾何平均（幾何變異係數[CV%]）PK參數分別總結於下表36和表37中。表36：片劑與液體調配物投予的血漿KD025m1的比較PK參數

方案劑量水準狀態	G 200 mg 片劑進食	H 200 mg 液體調配物空腹	I 200 mg 液體調配物進食
個體數量參數	N = 18	N = 18	N = 18
Tlag ^a(h)	1.00 (0.500-2.00)	0.00 (0.00-1.00) [n = 17]	0.500 (0.00-1.00) [n = 17]
Tmax ^a(h)	2.00 (1.00-4.03)	1.00 (0.500-1.50) [n = 17]	1.50 (0.500-3.00) [n = 17]
Cmax (ng/mL)	22.3 (37.9%)	19.0 (41.7%) [n = 17]	19.4 (27.6%) [n = 17]
AUC(0-24) (ng.h/mL)	45.3 (63.9%) [n = 15]	34.9 (104.8%) [n = 12]	49.4 (83.1%) [n = 17]
AUC(0-最後) (ng.h/mL)	42.7 (50.7%) [n = 15]	30.3 (70.9%) [n = 12]	37.9 (53.2%) [n = 17]
T1/2 (h)	1.81, 2.88 [n = 2]	2.28, 2.67 [n = 2]	2.128 [n = 1]
λ-z (1/h)	0.24, 0.38 [n = 2]	0.26, 0.30 [n = 2]	0.326 [n = 1]
MPR Cmax	0.013 (40.6%)	0.014 (36.0%) [n = 17]	0.012 (31.7%) [n = 17]
MPR AUC(0-24)	0.005 (62.0%) [n = 15]	0.005 (87.7%) [n = 12]	0.006 (78.3%) [n = 17]
MPR AUC(0-最後)	0.004 (52.1%) [n = 15]	0.004 (59.9%) [n = 12]	0.004 (49.9%) [n = 17]

表37：片劑與液體調配物投予的血漿KD025m2的比較PK參數

方案劑量水準狀態	G 200 mg片劑進食	H 200 mg液體調配物空腹	I 200 mg液體調配物進食
個體數量參數	N = 18	N = 18	N = 18
Tlag ^a(h)	1.00 (0.500-2.00)	0.00 (0.00-0.00)	0.00 (0.00-1.00)
Tmax ^a(h)	3.00 (1.50-5.00)	1.50 (1.00-3.02)	2.00 (1.00-3.03)
Cmax (ng/mL)	406 (52.5%)	372 (56.4%)	319 (57.9%)
AUC(0-24) (ng.h/mL)	1280 (62.9%)	1130 (61.8%)	1180 (58.1%)
AUC(0-最後) (ng.h/mL)	1200 (65.7%)	1080 (62.2%)	1120 (59.5%)
AUC(0-inf) (ng.h/mL)	1180 (75.3%) [n = 8]	1030 (59.8%) [n = 10]	926 (56.0%) [n = 10]
AUC%外推 (%)	5.607 (49.8%) [n = 8]	4.453 (60.7%) [n = 10]	5.388 (43.1%) [n = 10]
T1/2 (h)	2.466 (43.1%) [n = 8]	2.506 (87.4%) [n = 10]	2.539 (56.5%) [n = 10]
λ-z (1/h)	0.281 (43.1%) [n = 8]	0.277 (87.4%) [n = 10]	0.273 (56.5%) [n = 10]
MPR Cmax	0.232 (42.1%)	0.264 (44.1%)	0.196 (45.6%)
MPR AUC(0-24)	0.151 (40.2%)	0.164 (45.1%)	0.139 (37.7%)
MPR AUC(0-最後)	0.136 (42.6%)	0.149 (47.0%)	0.129 (38.1%)
MPR AUC(0-inf)	0.136 (42.7%) [n = 7]	0.139 (49.0%) [n = 6]	0.117 (40.2%) [n = 7]

與進食狀態下的相同劑量相比，在空腹狀態下投予包含貝魯舒地爾的液體調配物顯示較早的中值Tmax（1.5 h）。

對於進食狀態下的貝魯舒地爾液體調配物與進食狀態下的片劑，與峰值（Cmax）和總暴露（AUC(0-最後)和AUC(0-inf)）水準相關的GMR的比較表明，液體調配物的貝魯舒地爾和KD025ml的峰值和總暴露的水準在很大程度上與片劑參照相似，每個參數的90% CI包括100%。峰值暴露的90% CI上限略低於100%（CI上限為94.39%）；儘管它確實排除了統一性，但這表明任何真正的差異可能極小，並且不太可能具有臨床意義。另外，調配物的變化導致AUC幾乎沒有變化，表明調配物的變化對貝魯舒地爾或其兩種已知代謝物的總暴露沒有顯著影響。

對於進食與空腹的口服液體調配物，與峰值和總暴露相關的GMR的比較表明，在進食方案後，貝魯舒地爾的暴露略微增加，比針對空腹方案所觀察到的高平均15%至19%。對於KD025m1，觀察到總暴露的中度增加，但由於在所有方案中，KD025m1參數估計的可用資料相對稀少，因此應謹慎解釋該增加。每個參數的90% CI的下限超過100%。對於KD025m2沒有觀察到基於食物效應的顯著變化。

總之，與作為片劑參考投予的貝魯舒地爾（中值Tmax 3 h）相比，在包含貝魯舒地爾的液體調配物的單一口服投予後，貝魯舒地爾的吸收更快（中值Tmax 2 h）。

與片劑參考（分別為2 h和3 h）相比，在作為液體調配物投予後，KD025m1和KD025m2的中值Tmax類似地更快（分別為1.5 h和2 h）。

與片劑參考相比，作為口服液體調配物投予（都在進食狀態下進行）後的最大（Cmax）和總體（AUC）貝魯舒地爾暴露在調配物變化後沒有顯示變化。

在液體調配物和片劑之間，對於貝魯舒地爾和代謝物（KD025m1和KD025m2），藉由Cmax和AUC測量的生物利用度是相似的。實例 12 ： 兒科劑量研究

在該研究中，使用兩種模型，群體藥動學（PopPK）模型和基於生理學的藥動學（PBPK）模型，估計與成人200 mg每天一次（QD）劑量的貝魯舒地爾後的AUC相匹配的貝魯舒地爾的推薦兒科劑量。 (a) PopPK 模型

在應用該模型時，採取以下步驟：(a) 針對在10 kg（2歲的第3百分位數）與88 kg（18歲的第97百分位數）之間的兒童和青少年體重決定體重箱（bin）；(b) 在穩態下在24小時內進行預測；(c) 對於每名個體考慮GVHD對清除率的影響；(d) 假設PPI並非對任何虛擬個體共同投予；(e) 分配給每個群體50%男性；以及 (f) 將最終暴露預測與虛擬成人組進行比較，其中所有成人都被投予200 mg KD025 QD。

在鑑定適當的體重箱時，採取以下步驟：(a) 將兒童和青少年體重範圍（10 kg至88 kg）分為3 kg箱，每箱中的體重範圍內有1000名虛擬個體；(b) 預測50 mg、100 mg和200 mg QD劑量後個體中的AUC；(c) 預測在200 mg QD劑量後5000名虛擬個體的成人群體中的AUC；(d) 將成人的第25百分位數AUC與每個體重箱中的第50百分位數AUC進行比較，並且對於每個劑量，將具有較高中值AUC的箱合併成一個更大的體重箱。

成人體重範圍為40 kg至126 kg。以下體重箱用於最終暴露預測以使用劑與成人一致並便於用劑： • 10 kg至＜20 kg - 50 mg QD • 20 kg至＜40 kg - 100 mg QD • ≥ 40 kg - 200 mg QD

應用該模型，最終預測的體重箱和劑量被確定為：(1) 對於稱重10 kg至＜19 kg的患者-50 mg QD；(2) 對於呈重19 kg至＜49 kg的患者-100 mg QD；以及 (3) 對於稱重49 kg至＜88 kg的患者-200 mg QD。貝魯舒地爾口服液體調配物按年齡組和體重估計的每天一次（QD）和每天兩次（BID）劑量在下表38至表41中更詳細地闡述。表38：貝魯舒地爾按年齡組估計的兒科QD劑量

年齡組	最小體重 (kg)	最大體重 (kg)	預設值 (mg)
3 m至＜6 m	6.286	8.18	24
6m至＜12m	7.967	10.85	35
12m至＜24m	10.29	13.43	48
24m至＜72m (＞2但＜6 y)	12.86	22.41	69
72m至＜144m (＞6但＜12 y)	22.32	46.96	110
144m至＜216m (＞12但＜18 y)	45.91	74.17	173

表39：貝魯舒地爾按體重估計的兒科QD劑量

體重組	最小年齡 ( 月數 )	最大年齡 ( 月數 )	預設值 (mg)
6 kg至＜8 kg	3.002	6.998	24
8 kg至＜10 kg	5.012	11.97	33
10 kg至＜13 kg	9.007	24.95	45
13 kg至＜20 kg	21.01	61.9	64
20 kg至＜40kg	60.02	131	97
＞=40 kg	127.1	216	167

表40：貝魯舒地爾按年齡估計的兒科BID劑量

年齡組	最小體重 (kg)	最大體重 (kg)	預設值 (mg)
3 m至＜6 m	6.286	8.176	12
6m至＜12m	7.967	10.85	17
12m至＜24m	10.29	13.43	24
24m至＜72m (＞2但＜6 y)	12.86	22.41	34
72m至＜144m (＞6但＜12 y)	22.32	46.96	55
144m至＜216m (＞12但＜18 y)	45.91	74.17	87

表41. 貝魯舒地爾按體重估計的兒科BID劑量

體重組	最小年齡 ( 月數 )	最大年齡 ( 月數 )	預設值 (mg)
6 kg至＜8 kg	3.002	6.998	12
8 kg至＜10 kg	5.012	11.97	16
10 kg至＜13 kg	9.007	24.95	22
13 kg至＜20 kg	21.01	61.9	32
20 kg至＜40 kg	60.02	131	48
＞=40 kg	127.1	216	83

(b) PBPK 模型

貝魯舒地爾（KD025）及其主要代謝物KD025m2（具有化學名稱2-(3-(4-(1H-吲唑-5-基胺基)喹唑啉-2-基)苯氧基)乙酸）（也稱為“M2”）的基於生理學的藥動學（PBPK）模型先前藉由併入來自健康志願者的體外、非臨床和臨床藥動學研究的資料而開發。參見例如，Schueller, O.等人, “A Phase I Pharmacokinetic Drug Interaction Study of Belumosudil Coadministered With CYP3A4 Inhibitors and Inducers and Proton Pump Inhibitors,” Clinical Pharmacology in Drug Development, 2022, 11 (7) 795-806。

在本實例中，為了支持劑量選擇，將先前開發的KD025和M2的PBPK模型應用於預測兒童（3個月-11歲）和青少年（12-17歲）中KD025的全身暴露。

藉由以下四個步驟應用開發的PBPK模型： 1. 在2.7 mg/kg QD KD025（200 mg等效成人劑量）的多個口服劑量後，預測健康成年個體中KD025和M2的血漿濃度。 2. 在2.7 mg/kg QD KD025的多個口服劑量後，預測健康兒科個體中KD025和M2的血漿濃度（對於0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲年齡組）。 3. 基於模擬兒科:成人KD025 AUC _0-t,SS比率（由步驟1和2計算）調整KD025的初始2.7 mg/kg劑量。 4. 在KD025的調整劑量的多個口服劑量後，預測兒科個體中KD025和M2的血漿濃度（對於0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲年齡組）。

為了比較，還使用200 mg成人日劑量基於體重研究異速縮放，以預測在嬰兒和兒童（0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲）中的KD025劑量。

步驟1. 對在 KD025 的多個口服劑量（ 2.7 mg/kg QD ，相當於 200 mg QD ）後健康成人中 KD025 和 M2 的血漿濃度 - 時間曲線的類比

使用Sim-健康志願者群體庫產生20名年齡為20-50歲的健康成年個體（50%女性）的10項虛擬試驗。“Simcyp兒科模擬器”允許在新生兒、嬰兒和兒童中對藥動學行為進行建模。Simcyp模擬器包括完整的PBPK模型以及關於兒科人口學（年齡、身高、體重、BSA[體表面積]）、發育生理學（肝大小、腎功能、肝血流量）和生物化學（白蛋白、CYP個體發育）的擴展庫。描述這些變化的演算法描述於文獻中。（參見例如，Johnson and Rostami-Hodjegan, Resurgence in the Use of Physiologically Based Pharmacokinetic Models in Pediatric Clinical Pharmacology, Pediatr Anesth. 21: 291-301 [2011]）。

使用73.84 kg的模擬平均成人體重將感興趣的成人劑量（200 mg）轉化為2.7 mg/kg的劑量。虛擬個體接受2.7 mg/kg KD025 QD的多個口服劑量，持續8天，並且在第8天（模擬第168-192小時）對AUC _0-t,SS的模擬個體值進行積分。

計算200 mg QD KD025多次口服用劑8天後的平均模擬血漿KD025和M2濃度。KD025和M2在第8天的預測平均C _max和AUC值示於表42中。

表42：健康成年個體中KD025和M2的預測幾何平均C _max、t _max和AUC值。

	第8天
	t _max(h)	C _max(ng/mL)	AUC (h*ng/mL)
KD025 GM 90 % CI	2.25 (1.26 4.35)	1796 (1697 – 1902)	7907 (7540 – 8293)
M2 GM 90 % CI	2.35 (1.50 – 4.55)	300 (287 – 314)	1060 (1016 – 1105)

步驟2. 對在 KD025 的多個口服劑量（ 2.7 mg/kg QD ）後兒科個體（ 3 個月 -17 歲）中 KD025 和 M2 的血漿濃度 - 時間曲線的類比。

將兒科個體分為以下年齡段；0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲。使用默認的Sim-兒科群體庫產生每個年齡段接受2.7 mg/kg QD（200 mg成人等效物）KD025的20名兒科個體（50%女性）的10項虛擬試驗。使用Upreti和Wahlstrom, Meta-Analysis of Hepatic Cytochrome P450 Ontogeny to Underwrite the Prediction of Pediatric Pharmacokinetics Using Physiologically Based Pharmacokinetic Modelling,J Clin Pharmacol. 56: 266-283 (2016)的CYP3A4個體發育概況進行模擬。

虛擬個體接受KD025的多個口服日劑量，持續8天，並且在第8天（模擬第168-192小時）對AUC _0-t,ss的模擬個體值進行積分。對於每個年齡組，以mg為單位的等效劑量指定於下表43中。

將兒科個體分為以下年齡段；0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲。使用默認的Sim-兒科群體庫產生每個年齡段接受KD025的調整的多個口服劑量的20名兒科個體（50%女性）的10項虛擬試驗。使用Upreti Wahlstrom 2016 CYP3A4個體發育概況進行所有模擬。

虛擬個體接受KD025的多個口服日劑量，持續8天，並且在第8天（模擬第168-192小時）對AUC _0-t,ss的模擬個體值進行積分。對於每個年齡組，以mg為單位的調整劑量和等效劑量指定於表43中。表43： 用於每個兒科年齡組的調整劑量（ Mg/Kg ）和以 Mg 為單位的等效劑量。

年齡 ( 歲 )	平均模擬體重 (kg)	初始劑量 (mg) ^a,b	調整劑量 (mg/kg)	調整劑量 (mg) ^b
0.25 – 0.5	6.6	18	3.5	23
0.5 – 1	9.0	24	3.5	31
1 – 2	11.5	31	3.5	40
2 – 5	15.4	42	3.6	55
6 – 11	27.6	75	3.5	97
12 – 17	53.9	146	3.1	167

^a 相當於2.7 mg/kg ^b 僅供參考（使用以mg/kg為單位的劑量進行類比）

使用Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育概況，計算在年齡為0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲的兒科中，在2.7 mg/kg的多個口服劑量後，KD025和M2的預測血漿濃度-時間曲線，對於每個類比使用代表總虛擬群體（n=200）的平均值的濃度-時間曲線。預測的第8天的平均KD025和M2 AUC _0-t,SS值示於表44中。表44： 在成人和兒科個體中在 KD025 的多個口服劑量（ 2.7 mg/kg ；成人等效 200 mg 劑量 QD ）後， KD025 和 M2 的預測平均血漿 AUC _0-t,SS 值。

	Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育	Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育
年齡 ( 歲 )	幾何平均 *KD025 AUC _0-t,SS(hng/mL)**	KD025 相對於成人的 AUC _0-t,SS	幾何平均 M2 *AUC _0-t,SS(hng/mL)**	相對於成人的 M2 AUC _0-t,SS
20 - 50(成人)	7907	1.00	1060	1.00
0.25 – 0.5 0.5 – 1 1 – 2 2 – 5 6 – 11 12 - 17	6208 6097 5963 5835 6007 6896	0.79 0.77 0.75 0.74 0.76 0.87	726 751 760 767 762 834	0.68 0.71 0.72 0.72 0.72 0.79

步驟3. 基於模擬兒科 / 成人 KD025 AUC _0-t,SS 比率調整 KD025 的初始 2.7 mg/kg 劑量

基於計算的兒科/成人KD025 AUC _0-t,SS比率（在上述步驟1和2中描述的模擬），從2.7 mg/kg的初始值調整兒科劑量，如等式 (1) 所示。

等式 (1)

在以下年齡範圍內計算調整劑量（mg/kg）；0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲，並描述於表43中。

還在計算的調整劑量左右（在2.7-3.6 mg/kg 範圍內）的幾個劑量下對每個兒科年齡組進行了敏感性分析，以確認應用調整劑量在兒科和成人群體中導致類似的KD025和M2暴露。

使用Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育概況，基於計算的兒科/成人KD025 AUC _0-t,SS比率（在步驟1和2和表44中描述的模擬），從2.7 mg/kg的初始值調整兒科劑量。調整劑量在上表43中給出。

步驟4. 對在 KD025 的調整的多個口服劑量的後兒科個體（ 3 個月 -17 歲）中 KD025 和 M2 的血漿濃度 - 時間曲線的類比。

虛擬個體接受KD025的多個口服日劑量，持續8天，並且在第8天（模擬第168-192小時）對AUC _0-t,SS的模擬個體值進行積分。對於每個年齡組，以mg為單位的調整劑量和等效劑量指定於表43中。

使用Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育概況，計算在年齡為0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲的兒科中，在劑量調整後，KD025和M2的預測血漿濃度-時間曲線，包括對於每個類比，代表總虛擬群體（n=200）的平均值的濃度-時間曲線。調整劑量和第8天的相關預測平均KD025和M2 AUC _0-t,SS值示於表45中。

使用以mg/kg為單位的劑量進行類比。表45：使用 Upreti Wahlstrom (2016) 個體發育，在劑量調整後，兒科個體中在多個口服劑量後 KD025 和 M2 的預測平均血漿 AUC _0-t,SS 值。

	Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育	Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育
年齡 ( 歲 )	調整劑量 (mg/kg)	調整劑量 (mg 等效量 )	幾何平均 *KD025 AUC _0-t,SS(hng/mL)**	KD025 相對於成人的 AUC _0-t,SS	幾何平均 M2 *AUC _0-t,SS(hng/mL)**	相對於成人的 M2 AUC _0-t,SS
20 - 50(成人)	2.7	200	7907	1.00	1060	1.00
0.25 – 0.5 0.5 – 1 1 – 2 2 – 5 6 – 11 12 - 17	3.5 3.5 3.5 3.6 3.5 3.1	23 31 40 55 97 167	7999 8032 7851 8090 7883 7964	1.01 1.02 0.99 1.02 1.00 1.01	928 966 980 1007 981 953	0.88 0.91 0.92 0.95 0.93 0.90

使用四分之三冪模型（three quarter power model），基於體重（BW）進行異速縮放，如等式 (2) 中所示。

等式 (2)

在以下年齡範圍內計算劑量；0.25-0.5歲、0.5-1歲、1-2歲、2-5歲、6-11歲和12-17歲。將兒科和成人BW作為各年齡段的平均模擬值（表43）。

使用200 mg成人日劑量在年齡為3個月至17歲的兒科個體中進行的異速劑量預測提供於表46中。

表46： 年齡為 3 個月至 17 歲的兒科個體中的異速劑量預測

年齡 ( 歲 )	平均模擬體重 (kg)	兒科劑量 (mg)	兒科劑量 (mg/kg)
0.25 – 0.5 0.5 – 1 1 – 2 2 – 5 6 – 11 12 - 17	6.6 9 11.5 15.4 27.6 53.9	33 41 50 62 96 158	5.0 4.6 4.3 4.0 3.5 2.9

本實例中使用Upreti Wahlstrom (2016) CYP3A4個體發育概況進行的模擬結果表明，當基於mg/kg用劑時，與成人相比，兒科個體的KD025和M2暴露存在小差異（分別在KD025和M2的成人AUC _0-t,SS的30%和1.5倍內）。

資料的簡單異速縮放可能導致對最年輕年齡組（5歲及以下）的所需劑量的過高估計。對於年齡較大的組（年齡6-17歲），異速法得到與Upreti Wahlstrom個體發育推導的PBPK預測類似的劑量調整。

無

圖1是說明製備貝魯舒地爾的液體調配物的方法的流程圖。

圖2A-圖2B顯示了如實例3所述的針研磨的貝魯舒地爾在無菌沖洗用水中的粒徑分佈（PSD）資料。

圖3A顯示了具有Natrosol的針研磨的貝魯舒地爾液體調配物（實例4的樣品3A）的PSD資料。

圖3B顯示了具有Natrosol的噴射研磨的貝魯舒地爾液體調配物（實例4的樣品3B）的PSD資料。

圖3C顯示了具有羥丙甲纖維素K4M的針研磨的貝魯舒地爾液體調配物（實例4的樣品4A）的PSD資料。

圖3D顯示了具有聚維酮的針研磨的貝魯舒地爾液體調配物（實例4的樣品6A）的PSD資料。

圖4顯示了如實例6所述的從六種包含貝魯舒地爾的液體調配物獲得的樣品的沈降測定結果，所述樣品包括三種包含針研磨的貝魯舒地爾的調配物（樣品13A-15A）和三種包含噴射研磨的貝魯舒地爾的調配物（樣品13B-15B）。

Claims

一種液體調配物，其在與懸浮劑和增稠劑組合的稀釋劑中包含2-{3-[4-(1H-吲唑-5-基胺基)-2-喹唑啉基]苯氧基}-N-(丙-2-基)乙醯胺（貝魯舒地爾(belumosudil)）。
如請求項1所述的液體調配物，其進一步包含防腐劑、達到約2.5至4.0範圍內的pH所需的pH調節劑和甜味劑中的一種或多種。
如請求項1或2所述的液體調配物，其中所述貝魯舒地爾是噴射研磨的或針研磨的。
如請求項1或2所述的液體調配物，其中所述貝魯舒地爾包含噴射研磨的貝魯舒地爾甲磺酸鹽。
如請求項2至4中任一項所述的液體調配物，其中所述防腐劑是苯甲酸鈉，所述懸浮劑是膠態二氧化矽，所述增稠劑為聚維酮，所述pH調節劑為酒石酸，並且所述甜味劑為三氯蔗糖。
如請求項1至5中任一項所述的液體調配物，其中所述增稠劑是聚維酮90F。
如請求項1至6中任一項所述的液體調配物，其中所述稀釋劑是無菌沖洗用水。
如請求項1至7中任一項所述的液體調配物，其進一步包含調味劑。
如請求項8所述的液體調配物，其中所述調味劑是熱帶水果混合調味劑或檸檬調味劑。
如請求項1至9中任一項所述的液體調配物，其中所述液體調配物被均質化。
如請求項2至4中任一項所述的液體調配物，其包含約2至8重量百分比貝魯舒地爾、約0.02至0.08重量百分比防腐劑、約0.1至0.4重量百分比甜味劑、約0.2至0.8重量百分比懸浮劑、以及約1至8重量百分比增稠劑。
如請求項2至4中任一項所述的液體調配物，其包含約3至5重量百分比貝魯舒地爾、約0.35至1.0重量百分比防腐劑、約0.1至0.2重量百分比甜味劑、約0.4至0.6重量百分比懸浮劑、以及約4至6重量百分比增稠劑。
如請求項2至4中任一項所述的液體調配物，其包含如下重量百分比的貝魯舒地爾、防腐劑、懸浮劑、增稠劑和甜味劑：約4.75%貝魯舒地爾甲磺酸鹽；約0.35至1.00%防腐劑；約0.15%懸浮劑；約0.5%增稠劑；以及約0.15%甜味劑。
如請求項11至13中任一項所述的液體調配物，其中所述懸浮劑是膠態二氧化矽，所述增稠劑是聚維酮90F，所述甜味劑是三氯蔗糖，並且所述pH調節劑根據需要是酒石酸。
如請求項14所述的液體調配物，其進一步包含調味劑。
如請求項15所述的液體調配物，其中所述調味劑是熱帶水果混合調味劑或檸檬調味劑。
如請求項1至10中任一項所述的液體調配物，其被配製為以約1至10 mL的體積向患者遞送約50至400 mg範圍內的劑量的貝魯舒地爾。
如請求項1至10中任一項所述的液體調配物，其被配製為以約5 mL的單體積劑量向患者遞送50至200 mg範圍內的單劑量。
一種用於向個體投予的醫藥組合物，其包含治療有效量的如請求項1至18中任一項所述的液體調配物。
一種用於向個體投予的醫藥組合物，其包含治療有效量的如請求項1至18中任一項所述的液體調配物。
一種用於治療個體中的移植物抗宿主疾病的方法，其包括向所述個體投予治療有效量的如請求項1至18中任一項所述的液體調配物。
如請求項21所述的方法，其中所述個體是年齡為3個月至小於或等於18歲的兒科患者。
如請求項21或22所述的方法，其中將所述液體調配物以基於所述患者體重調整的貝魯舒地爾的劑量向所述個體投予。
如請求項23所述的方法，其中將所述液體調配物基於所述患者的體重如下投予所述患者：(1) 對於稱重10 kg至＜ 20 kg的患者，每天投予一次約50 mg貝魯舒地爾；(2) 對於稱重20 kg至＜ 40 kg的患者，每天投予一次約100 mg貝魯舒地爾；以及 (3) 對於稱重40 kg或更多的患者，每天投予一次約200 mg貝魯舒地爾。
一種製備包含貝魯舒地爾的液體調配物的方法，其包括在具有懸浮劑和增稠劑的稀釋劑中混合噴射研磨和/或針研磨的貝魯舒地爾。
如請求項25所述的方法，其包括以下步驟： (a) 將所述稀釋劑的第一部分分配到容器中； (b) 將防腐劑、甜味劑、所述懸浮劑和所述增稠劑分配到所述容器中； (c) 混合所述容器的內容物； (d) 將所述容器轉移至均質器； (e) 操作所述均質器以均質化所述容器的內容物； (f) 向所述容器中加入一定量的貝魯舒地爾並混合其內容物以形成懸浮液； (g) 測量所述懸浮液的pH； (h) 將pH調節劑以足以獲得約2.5至約4.0的pH的量在混合下加入所述懸浮液中；以及 (i) 將所述稀釋劑的第二部分加入所述容器中以達到預定體積，從而提供包含貝魯舒地爾的所述液體調配物。
如請求項26所述的方法，其中所述防腐劑是苯甲酸鈉，所述甜味劑是三氯蔗糖，所述懸浮劑是二氧化矽，所述增稠劑為聚維酮90F，所述pH調節劑為酒石酸，並且所述稀釋劑是無菌水。
如請求項26所述的方法，其還包括，在步驟 (i) 之後的以下步驟：(j) 使所述懸浮液靜置直至任何氣泡或泡沫消散，以及 (k) 將包含貝魯舒地爾的所述液體調配物分配到容器中。
如請求項26所述的方法，其還包括在步驟 (c) 至 (i) 中的一個或多個之後目視檢查所述容器的內容物和/或所述懸浮液。
如請求項26所述的方法，其還包括在步驟 (c)、步驟 (e)、步驟 (f) 和步驟 (j) 之後目視檢查所述懸浮液的起泡和/或沈降。
如請求項27所述的方法，其中根據考慮預定體積計算的以下重量百分比將所述貝魯舒地爾、苯甲酸鈉、三氯蔗糖、二氧化矽和聚維酮添加到所述容器中：約3至5重量百分比貝魯舒地爾、約0.35至1.0重量百分比苯甲酸鈉、約0.1至0.2重量百分比三氯蔗糖、約0.4至0.6重量百分比二氧化矽和約4至6重量百分比聚維酮90F。
如請求項26至31中任一項所述的方法，其中加入所述調配物中的所述貝魯舒地爾是噴射研磨的貝魯舒地爾甲磺酸鹽。
一種藉由如請求項25至32中任一項所述的方法產生的包含貝魯舒地爾的液體調配物。
一種用於製備貝魯舒地爾的液體調配物的套組，所述套組包含 (a) 在第一容器中的一定量的貝魯舒地爾；以及 (b) 在第二容器中，在稀釋劑中含有懸浮劑和增稠劑的重構媒劑。
如請求項34所述的套組，其中所述第一容器中的貝魯舒地爾呈粉末形式；並且 (b) 所述懸浮劑是二氧化矽並且所述增稠劑是聚維酮。
如請求項34或35所述的套組，其還在所述重構媒劑中包含甜味劑。