TW202400162A - 放射性醫藥複合物及組合 - Google Patents

放射性醫藥複合物及組合 Download PDF

Info

Publication number
TW202400162A
TW202400162A TW112118292A TW112118292A TW202400162A TW 202400162 A TW202400162 A TW 202400162A TW 112118292 A TW112118292 A TW 112118292A TW 112118292 A TW112118292 A TW 112118292A TW 202400162 A TW202400162 A TW 202400162A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
seq
tissue
antigen
psma
formula
Prior art date
Application number
TW112118292A
Other languages
English (en)
Inventor
克里斯托夫 沙茲
可貝 沙班 利特曼恩
阿斯蒙德 拉森
歐拉 Ｂ 萊恩
巴德 殷德佛
亞倫 卡斯柏森
羅傑 馬爾巴肯 查克
英格利 摩恩
伯納德 韓德勒
烏爾斯 比特 海格曼
Original Assignee
德商拜耳廠股份有限公司
挪威商拜耳公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP22173871.9A external-priority patent/EP4279092A1/en
Application filed by 德商拜耳廠股份有限公司, 挪威商拜耳公司 filed Critical 德商拜耳廠股份有限公司
Publication of TW202400162A publication Critical patent/TW202400162A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
    • A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
    • A61K51/1072—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell being from the reproductive system, e.g. ovaria, uterus, testes or prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
    • A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
    • A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
    • A61K51/1096—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies radioimmunotoxins, i.e. conjugates being structurally as defined in A61K51/1093, and including a radioactive nucleus for use in radiotherapeutic applications
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3069—Reproductive system, e.g. ovaria, uterus, testes, prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本發明係關於組織靶向化合物。特別地，本發明係關於組織靶向化合物，其包含對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。此外，本發明係關於組合，較佳醫藥組合，其包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑。該等組合可用於療法，較佳可用於治療過度增生性疾病，諸如癌症。

Description

放射性醫藥複合物及組合
本發明係關於組織靶向化合物。特別地，本發明係關於對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之包含單株抗體或其抗原結合片段之組織靶向化合物。此外，本發明係關於組合，較佳係包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之醫藥組合。該組織靶向化合物及/或組合可用於診斷及/或療法中，較佳可用於療法，更佳可用於治療過度增生性疾病，諸如癌症。
此外，本發明係關於一種用於製備該組織靶向化合物之方法及關於其於診斷及/或於治療疾病，較佳於治療疾病，特別是針對過度增生性疾病，特別是針對癌症之用途。
特定細胞殺死對於哺乳動物個體中之各種疾病之成功治療可能至關重要。其典型實例為惡性疾病(諸如肉瘤及癌)之治療。然而，某些細胞類型之選擇性消除亦可在治療其他疾病，尤其是增生性及腫瘤性疾病中發揮關鍵作用。
目前，選擇性治療之最常見的方法為手術及體外射束照射(external beam irradiation)。然而，靶向放射性核素療法係有前景且處於發展中之領域，其有可能特定地對與疾病相關之細胞類型遞送高度細胞毒性輻射。目前授權用於人類中之放射性藥物之最常見形式採用β發射及/或γ發射放射性核素。然而，對在療法中使用發射α之放射性核素產生一些興趣，此乃因其更有效之細胞殺死之潛力。
生理環境中典型α發射體之輻射範圍一般小於100微米，相當於僅幾個細胞直徑。此使得此等來源非常適合用於治療腫瘤，包括微轉移，因為其具有達到腫瘤內的相鄰細胞之範圍，但若其靶向良好，則將有極少輻射能量超出靶細胞。因此，並非需要靶向每個細胞但可最小化對周圍健康組織之損壞(參見Feinendegen等人，Radiat. Res. 148:195-201 (1997))。相對地，β粒子在水中具有1 mm或更大之範圍(參見Wilbur，Antibody Immunocon. Radiopharm. 4: 85-96 (1991))。
α-粒子輻射之能量與由β粒子、γ射線及X-射線所攜帶者相比很高，通常為5至8 MeV、或β粒子的5至10倍及γ射線之能量的20倍或更多倍。因此，此在極短距離內蓄積大量能量使α-輻射與γ及β輻射相比具有格外高的線性能量轉移(LET)、高相對生物功效(RBE)及低氧增強比(OER) (參見Hall，「Radiobiology for the radiologist」，第五版，Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia PA，USA，2000)。此解釋α發射放射性核素之異常細胞毒性且亦對此類同位素之生物靶向及對α發射放射性核素分佈之控制及研究層級提出嚴格的要求，此係為避免不可接受之副作用所必需的。
迄今，關於在放射免疫療法中之應用，主要注意力集中在211At、213Bi及225Ac且此三種核素已在臨床免疫療法試驗中探討。然而，儘管使用放射性核素之巨環複合物實施靶向放射療法已有一段時間，但目前使用的化合物(其通常採用巨環螯合劑DOTA (2,2′,2′′,2′′′-(1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四基)四乙酸))缺乏穩定性，導致放射性核素自螯合巨環解離，此導致降低之對靶向組織之選擇性及活性及增加之對非靶向組織之毒性。
例如，已報告將10之高螯合劑與抗原比(CAR；chelator-to-antigen)用於使用DOTA抗體螯合劑結合物(ACC)之一步式放射性標記程序之臨床前研究中(William F. Maguire、Michael R. McDevitt、Peter M. Smith-Jones、David A. Scheinberg. 「Efficient one-step radiolabeling of monoclonal antibodies to high specific activity with Actinium-225 for alpha-particle radioimmunotherapy of cancer」，J. Nucl. Med. 2014；55(9): 1492–1498)。然而，在37℃下標記2小時後，未達成定量標記，其隨後需要純化步驟以移除未標記之Ac-225。此與本發明之組織靶向化合物成對比，其中Ac-225可於室溫下在一小時後定量螯合從而獲得具有顯著更低的CAR比率(＜1)之複合物。
雖然較大巨環之使用已導致尤其較大尺寸的放射性核素之更穩定複合，但仍需要開發具有改良穩定性、選擇性及功效之靶向化合物，尤其是在過度增生性疾病諸如癌症領域中。對於某些類型之癌症，尤其是前列腺癌，患者最初對療法有反應但最終發展出抗性(Swami U、McFarland TR、Nussenzveig R、Agarwal N. Advanced Prostate Cancer: Treatment Advances and Future Directions. Trends Cancer2020； 6(8):702-15 doi 10.1016/j.trecan.2020.04.010)。因此，需要能夠在惡性疾病中選擇性靶向特定細胞及細胞類型之新藥劑，其為高度有效且減少、減輕及/或避免抗性之盛行。特別地，需要提供用於治療癌症且尤其是前列腺癌之新治療劑，前列腺癌係男性中最常見的癌症(Mattiuzzi C、Lippi G. Current Cancer Epidemiology. J Epidemiol Glob Health2019； 9(4):217-22 doi 10.2991/jegh.k.191008.001)。由FOLH1 (葉酸水解酶1)基因編碼之前列腺特異性膜抗原(PSMA)在前列腺癌細胞中高度表現，使得其成為放射療法之適宜標靶。
已驚人地發現，式(I)之組織靶向化合物及本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合顯示關於其穩定性、活性、功效及選擇性之有利性質。特別地，本發明之式(I)之組織靶向化合物在低螯合劑抗原(CAR)比及高單體純度下顯示免疫反應性分數(IRF)之高值，因此獲得更高分數之對PSMA具有親和力之放射性核素標記化合物。此外，本發明之式(I)之組織靶向化合物顯示有利之體內生物分佈及肝臟中之低積聚，此係放射性核素與螯合部分之解離減少且因此穩定性增加之跡象。與文獻中之先前報告的實例相反，本發明之式(I)之組織靶向化合物可在極溫和條件下且在降低之溫度(亦即室溫)下用放射性核素標記，藉此減少抗體變性及最終產物中非PSMA結合部分之量。因此，本發明之式(I)之組織靶向化合物顯示更好的腫瘤與肝臟比且可因此更有效且選擇性地治療疾病，減少對非靶向組織之損傷同時維持針對靶向組織中之癌細胞之高效力。與一或多種其他藥劑組合，可達成比單獨使用任一化合物時更大之治療功效。
在放射性醫藥領域中，對於提供在足夠的時間期內穩定，從而允許將其遞送至主治醫師及患者而不遭受放射性醫藥降解(例如，藉由將放射性核素自螯合劑去複合)之含放射性核素化合物及/或包含含放射性核素化合物之組合有增加的需求。從物流角度來看，特別期望增加含放射性核素化合物及/或包含含放射性核素化合物之組合中放射性藥物之穩定性，因為此將允許含放射性藥物之藥物產品跨國家及/或大陸之可靠輸送。期望可獲得含放射性核素化合物及/或包含含放射性核素化合物之組合，其穩定至少48小時，較佳96小時及/或其具有至少85%之單體含量持續至少48小時，較佳具有至少90%之單體含量持續至少48小時。本發明藉由提供式(I)之組織靶向化合物及包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合來解決此等問題。
特別地，本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合將用於： (1) 與任一單獨藥劑之投與相比，在減少腫瘤之生長或甚至消除腫瘤上產生更好的功效， (2) 提供較少量之所投與的靶向化合物及/或化學治療劑之投與， (3) 在患者中提供耐受良好之化療治療，其具有比利用單藥化療及某些其他組合療法所觀察到者少的有害藥理學併發症， (4) 提供哺乳動物(尤其是人類)中之更廣泛範圍之不同癌症類型之治療， (5)在所治療之患者間提供更高反應率， (6)在所治療之患者間提供與標準化療治療相比更長之存活時間， (7) 提供更長的直至發生腫瘤進展的時間，及/或 (8) 與其中其他癌症藥劑組合產生抑制效應之已知實例相比，產生至少與單獨使用的藥劑一樣好之功效及耐受性結果。
本發明係關於式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]係對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。 定義
術語「包含(comprising)」在本說明書中使用時包括「由...組成(consisting of)」。
若在本文中將任一項目稱為「如本文所提及的」，則其意指其可在本文的任何地方提及。
在本發明之背景內容中，「組織靶向」在本文中用於指示所述物質(亦即組織靶向化合物、組織靶向錒複合物及/或組織靶向部分，特別是當呈如本文所述的組織靶向複合物之形式時)用於優先地將自身定位(且特定言之將任何結合錒複合物定位)至期望其存在(例如遞送放射性衰變)的至少一個組織部位。因此，與不具有靶向部分之等效複合物之濃度相比，組織靶向化合物、複合物、基團或部分用於在投與至該個體後為個體體內的至少一個期望部位提供更大程度的定位。在本情況下，該靶向部分將較佳經選擇成特異性結合至與癌細胞相關之細胞表面受體或與腫瘤微環境相關之其他受體。
在本發明之背景內容中，術語「PSMA」係指由FOLH1 (葉酸水解酶1)基因(基因ID：2346)編碼之前列腺特異性膜抗原。
在本發明之背景內容中，術語TLX592及J592可互換使用且係指相同單株抗體，亦即，對由Telix Pharmaceuticals開發之抗原PSMA (抗-PSMA抗體)具有結合親和力之單株抗體，其已在例如WO2021/000018中進行描述。
TLX592 (或J592)包含SEQ ID NO. 19所示的重鏈序列及SEQ ID NO. 20所示的輕鏈序列。
此外，TLX592 (或J592)包含至少SEQ ID NO. 21、SEQ ID NO. 22及SEQ ID NO. 23所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 24、SEQ ID NO. 25及SEQ ID NO. 26所示之三個CDR輕鏈序列： TLX592 CDR重鏈序列 SEQ ID NO. 21：EYTIH SEQ ID NO. 22：N INPNNGGTTY NQKFED SEQ ID NO. 23：GW NFDY TLX592 CDR輕鏈序列 SEQ ID NO. 24：KASQDVG TAVD SEQ ID NO. 25：W ASTRHT SEQ ID NO. 26：QQ YNSYPLT
本發明之式(I)化合物包含含有複合錒原子(Ac)之螯合部分。在本發明之背景內容中，術語「Ac」意指至少一種發射α之錒同位素之離子。較佳地，該發射α之錒同位素為225Ac。較佳地，至少一種發射α之錒同位素之離子為具有三價正電荷之 225Ac，亦即 225Ac 3+。因此，在本發明之背景內容中，術語「Ac」較佳但非排他性地意指 225Ac 3+。
在本發明之式(I)化合物中，該錒(Ac)原子顯示為複合至巨環之四個氧原子及兩個氮原子以及兩個羧酸酯基。雖然此係錒原子之假定複合形式，但此種描述包括其中不存在該等鍵中之一者或多者，例如，其中該錒原子不結合至巨環之所有雜原子、或羧酸酯基等之所有可能及可設想之情況。
在本發明之背景內容中，術語IRF係指免疫反應性分數，亦即能夠結合至標靶(亦即PSMA)之標記產物(亦即本發明之式(I)化合物)之分數。Lindmo檢定(Lindmo T.等人，( 1984)，「Determination of the immunoreactive fraction of radiolabeled monoclonal antibodies by linear extrapolation to binding at infinite antigen excess.」 J. Immunol. Methods. 72，77–89)係用於評估免疫反應性分數之最常用的方法。
在本發明之背景內容中，術語CAR係指螯合劑與抗原比， 其係放射性標記化合物(例如本發明之式(I)化合物)之比活性之量度。
術語「多肽」及「蛋白質」在本文中可互換使用以指胺基酸殘基之聚合物。該等術語適用於其中一或多個胺基酸殘基為對應之天然存在之胺基酸之人工化學模擬物之胺基酸聚合物、以及天然存在之胺基酸聚合物及非天然存在之胺基酸聚合物。除非另有指示，否則特定多肽序列亦隱含地涵蓋其保守修飾之變體。
胺基酸可在本文中藉由其通常已知的三字母符號或藉由IUPAC-IUB生物化學命名委員會(the IUPAC-IUB Biochemical Nomenclature Commission)所建議的單字母符號來指稱。同樣地，核苷酸可藉由其普遍接受的單字母代碼來指稱。
術語「抗體」如本文所用旨在指免疫球蛋白分子，包括(但不限於)全長抗體及單價抗體。「全長抗體」較佳包含通常經二硫鍵互連之四個多肽鏈(兩個重(H)鏈及兩個輕(L)鏈)。每個重鏈包含重鏈可變區(在本文中縮寫為VH)及重鏈恆定區。該重鏈恆定區可包含例如三個域CH1、CH2及CH3。每個輕鏈包含輕鏈可變區(在本文中縮寫為VL)及輕鏈恒定區。該輕鏈恆定區包含一個域(CL)。該等VH及VL區可進一步再分為稱為互補決定區(CDR)之高變區，其內部分散有更加保守之稱為框架區(FR)之區域。每個VH及VL通常由自胺基端至羧基端例如以下列順序配置之三個CDR及多至四個FR組成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。「單價抗體」如本文所用較佳包含通常經二硫鍵互連之三個多肽鏈(兩個重(H)鏈及一個輕(L)鏈)。一個重鏈包含重鏈可變區(在本文中縮寫為VH)及重鏈恆定區。該重鏈恆定區可包含例如三個域CH1、CH2及CH3。另一重鏈僅包含重鏈恆定區。該輕鏈包含輕鏈可變區(本文中縮寫為VL)及輕鏈恒定區。該輕鏈恆定區包含一個域(CL)。該等VH及VL區可進一步再分為稱為互補決定區(CDR)之高變區，其內部分散有更加保守之稱為框架區(FR)之區域。每個VH及VL通常由自胺基端至羧基端例如以下列順序配置之三個CDR及多至四個FR組成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
如本文所用，術語「互補決定區」 (CDR；例如CDR1、CDR2及CDR3)係指抗體可變域之胺基酸殘基，其之存在為抗原結合所必需。每個可變域通常具有識別為CDR1、CDR2及CDR3之三個CDR區。每個互補決定區可包含來自如由Kabat所定義之「互補決定區」的胺基酸殘基(例如輕鏈可變域中之約殘基24至34 (L1)、50至56 (L2)及89至97 (L3)及重鏈可變域中之31至35 (H1)、50至65 (H2)及95至102 (H3)；(Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunolological Interest，第5版，Public Health Service，National Institutes of Health，Bethesda，MD. (1991))及/或來自「高變環(hypervariable loop)」之彼等殘基(例如輕鏈可變域中之約殘基26至32 (L1)、50至52 (L2)及91至96 (L3)及重鏈可變域中之26至32 (H1)、53至55 (H2)及96至101 (H3) (Chothia及Lesk；J Mol Biol 196: 901-917 (1987))。在一些情況下，互補決定區可包括來自根據Kabat所定義的CDR區、及高變環二者之胺基酸。
根據其重鏈之恆定域之胺基酸序列，可將完整抗體指派給不同「類別」。存在五大類別之完整抗體：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM，且此等中的幾種可進一步分為「亞類」 (同型物)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2。用於本發明之免疫球蛋白之較佳類別為IgG。
對應於不同類別之抗體之重鏈恆定域分別稱為[α]、[δ]、[ε]、[γ]及[μ]。熟知不同類別之免疫球蛋白之次單元結構及三維組態。如本文所用，抗體為習知的抗體及其功能性片段。
抗體/免疫球蛋白之「功能性片段」或「抗原結合抗體片段」本文中定義為保留抗原結合區之抗體/免疫球蛋白之片段(例如IgG之可變區)。抗體之「抗原結合區」通常存在於抗體之一或多個高變區，例如CDR1、-2及/或–3區；然而，該等可變「框架」區亦可在抗原結合中發揮重要作用，諸如藉由提供CDR之骨架。
本發明之「功能性片段」、「抗原結合抗體片段」或「抗體片段」包括(但不限於) Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab') 2及Fv片段；雙功能抗體(diabodies)；單域抗體(DAb)、線性抗體；單鏈抗體分子(scFv)；及自抗體片段形成之多特異性(諸如二特異性及三特異性)抗體(C. A. K Borrebaeck編(1995) Antibody Engineering (Breakthroughs in Molecular Biology)，Oxford University Press；R. Kontermann & S. Duebel編(2001) Antibody Engineering (Springer Laboratory Manual)，Springer Verlag)。除「多特異性」或「多功能」抗體以外的抗體應理解為其結合位點中之各者相同。該F(ab’) 2或Fab可經工程化以最小化或完全移除存在於CH1域與CL域之間之分子間二硫化物相互作用。
術語「Fc區」在本文中用於定義含有恆定區之至少一部分之免疫球蛋白重鏈之C端區。該術語包括天然序列Fc區及變體Fc區。在一個實施例中，人類IgG重鏈Fc區自Cys226或自Pro230延伸至重鏈的羧基端。然而，該Fc區之該C端離胺酸(Lys447)可存在或可不存在。除非本文另作指明，否則該Fc區或恆定區中胺基酸殘基之編號係根據EU編號系統，亦稱為EU指數，如Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service, National Institutes of Health，Bethesda，MD，1991中所述。
涵蓋於本發明中之抗體或抗原結合抗體片段之變體為其中維持該抗體或抗原結合抗體片段之結合活性之分子。
本發明中涵蓋的「結合蛋白質」為例如抗體模擬物，諸如親合體(Affibodies)、阿奈亭(Adnectins)、抗運載蛋白(Anticalins)、DARPins、艾菲爾親和聚體(Avimers)、奈米抗體(Nanobodies) (由Gebauer M.等人，Curr. Opinion in Chem. Biol. 2009；13:245-255；Nuttall S.D.等人，Curr. Opinion in Pharmacology 2008；8:608-617審查)。
「人類」抗體或其抗原結合片段在本文中定義為非嵌合(例如非「人源化」)且非來自於(全部或部分)非人類物種者。人類抗體或其抗原結合片段可衍生自人類或可為合成人類抗體。「合成人類抗體」在本文中定義為具有全部或部分電腦模擬衍生自基於已知人類抗體序列之分析之合成序列之序列之抗體。人類抗體序列或其片段之電腦模擬設計可例如藉由分析人類抗體或抗體片段序列之資料庫及利用自其獲得的資料設計多肽序列來達成。人類抗體或其抗原結合片段之另一個實例為由自人類來源之抗體序列之文庫(例如，此類文庫係基於取自人類天然來源之抗體)分離之核酸編碼者。人類抗體之實例包括如Söderlind等人，Nature Biotech. 2000，18:853-856中所述之抗體。
「人源化抗體」或其人源化抗原結合片段在本文中定義為如下者：(i)衍生自非人類來源(例如轉基因小鼠，其帶有異源免疫系統)，該抗體係基於人類生殖系序列；(ii)其中非人類抗體之該等框架區之胺基酸藉由基因工程部分交換為人類胺基酸序列或(iii) CDR-接枝，其中該可變域之該等CDR係來自非人類來源，而該可變域之一或多個框架係人類來源及該恆定域(若有的話)係人類來源。
「嵌合抗體」或其抗原結合片段在本文中定義為其中該等可變域係衍生自非人類來源及一些或全部恆定域係衍生自人類來源者。
術語「單株抗體」如本文所用係指自大致上同種抗體之群體獲得的抗體，亦即，除了可能少量存在的突變，例如天然存在之突變外，該等包含該群體之個別抗體係相同的。因此，術語「單株」指示抗體之特徵不為離散抗體之混合物。與通常包括針對於不同決定子(抗原決定基)之不同抗體之多株抗體製劑相反，單株抗體製劑之各單株抗體係針對於抗原上之單一決定子。除了其特異性之外，單株抗體製劑因為其通常不受其他免疫球蛋白污染而係有利的。術語「單株」不應被解釋為需要藉由任何特定方法產生抗體。術語單株抗體特定而言包括嵌合抗體、人源化抗體及人類抗體。
「分離」抗體為已經識別且自表現其的細胞之組分分離者。該細胞之污染物組分為將干擾抗體之診斷或治療用途之材料，且可包括酵素、激素及其他蛋白質或非蛋白質溶質。
「分離」核酸為已經識別且自其天然環境之組分分離者。分離核酸包括包含在通常含有核酸分子的細胞中之核酸分子，但該核酸分子係存在於染色體外或不同於其天然染色體位置之染色體位置。
如本文所用，抗體「特異性地結合至」、「對(to/for)所述抗原具有特異性」或「特異性識別」所述抗原，例如腫瘤相關多肽抗原標靶或抗原結合多肽標靶(作為例如抗原結合抗體)，係以足夠親和力結合抗原標靶，使得抗體可用作靶向表現抗原之細胞或組織之治療劑者，或係以足夠親和力結合抗原結合多肽標靶，使得抗體可用作逆轉劑以中和此抗原結合多肽(例如抗原結合抗體)之治療活性且不與其他蛋白質顯著交叉反應或不與除前述標靶之異種同源物及變體(例如突變體形式、剪接變體或蛋白水解截短形式)以外的蛋白質顯著交叉反應者。術語「特異性識別」或「特異性結合至」如本文所述的特定多肽標靶上的特定多肽或抗原決定基或「對其(to/for)具有特異性」可例如藉由對抗原具有小於約10 -4M，替代性地小於約10 -5M，替代性地小於約10 -6M，替代性地小於約10 -7M，替代性地小於約10 -8M，替代性地小於約10 -9M，替代性地小於約10 -10M，替代性地小於約10 -11M，替代性地小於約10 -12M、或更小之單價K D之抗體或其抗原結合片段展現出。若一抗體能夠區分一抗原與一或多種參考抗原，則該抗體「特異性結合至該抗原」、「對(to/for)該抗原具有特異性」或「特異性識別該抗原」。在其最一般形式中，「特異性結合」、「特異性結合至」、「對(to/for)...具有特異性」或「特異性識別」係指抗體區分所述抗原與非相關抗原之能力，例如，根據以下方法之一所確定。此類方法包括(但不限於)表面電漿子共振(SPR)、西方墨點法(Western blots)、ELISA-、RIA-、ECL-、IRMA-測試及肽掃描。例如，可進行標準ELISA檢定。該評分可藉由標準顯色法(standard color development) (例如二級抗體與辣根過氧化酶(horseradish peroxidase)及四甲基聯苯胺與過氧化氫)進行。某些孔中之反應藉由光學密度，例如，在450 nm下評分。典型背景(=負反應)可為0.1 OD；典型正反應可為1 OD。此意指正/負的差異超過5倍、10倍、50倍，且較佳超過100倍。通常，藉由不使用單一參考抗原，但使用一組約三個至五個的非相關抗原(諸如奶粉、BSA、運鐵蛋白或類似者)，來進行結合特異性之確定。
「結合親和力」或「親和力」係指分子之單一結合位點與其結合搭配物之間之非共價相互作用之總和之強度。除非另外指示，否則如本文所用，「結合親和力」係指反映結合對(例如抗體及抗原)之成員之間之1:1相互作用之內在結合親和力。解離常數「K D」通常用於描述分子(諸如抗體)與其結合搭配物(諸如抗原)之間之親和力，亦即配體結合至特定蛋白質之緊密程度。配體-蛋白質親和力受到該兩個分子間之非共價分子間相互作用的影響。親和力可藉由此項技術中已知的常用方法(包括彼等描述於本文中者)來測定。在一個實施例中，根據本發明之該「K D」或「K D值」係藉由使用表面電漿子共振檢定，使用適宜裝置，包括(但不限於)Biacore儀器(如Biacore T100、Biacore T200、Biacore 2000、Biacore 4000、Biacore 3000 (GE Healthcare Biacore, Inc.))或ProteOn XPR36儀器(Bio-Rad Laboratories, Inc.)來測定。
「抗體依賴性細胞介導之細胞毒性」或「ADCC」係指細胞毒性之形式，其中所分泌的Ig結合至存在於某些細胞毒性細胞(例如NK細胞、嗜中性白血球及巨噬細胞)上之Fc γ受體(FcγR)上使得此等細胞毒性效應細胞能夠特異性結合至帶有抗原之靶細胞且於隨後例如利用細胞毒素殺死靶細胞。為了評估所述抗體之ADCC活性，可進行體外ADCC檢定，諸如描述於美國專利第5,500,362號或第5,821,337號或美國專利第6,737,056號(Presta)中者。用於此類檢定之有用之效應細胞包括PBMC及NK細胞。
「補體依賴性細胞毒性」或「CDC」係指在補體存在下靶細胞之溶解。經典補體途徑之活化係藉由使該補體系統(C1q)之第一組分結合至(適宜亞類之)抗體(其結合至其同源抗原)來啟動。為了評估補體活化，可進行CDC檢定，例如，如Gazzano-Santoro等人，J. Immunol. Methods 202: 163 (1996)中所述。具有經改變之Fc區胺基酸序列及增加或減少之C1q結合之多肽變體(具有變體Fc區之多肽)描述於例如美國專利第6,194,551 Bl號及WO 1999/51642中。
關於參考聚核苷酸或多肽序列之「序列一致性百分比(%)」分別定義為在比對候選序列及參考序列且在必要時引入空位以達成最大序列一致性百分比之後，候選序列中之各別核酸或胺基酸殘基分別與參考聚核苷酸或多肽序列中之各別核酸或胺基酸殘基相同之百分比。保守性取代不被視為序列一致性之部分。較佳為無空位的比對。出於確定胺基酸序列一致性百分比之目的的比對可以在此項技術中的技能範圍內的各種方式來達成，例如，使用公開可得的電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign (DNASTAR)軟體。熟習此項技術者可確定用於比對序列之適宜參數，包括達成於經比較的序列之全長上之最大比對所需的任何演算法。
實質序列一致性/相似性可被視為具有與完整序列至少80%及/或與特定結合區(例如CDR區)至少90%之序列相似性/一致性。較佳的序列相似性或更佳的一致性可為至少92%、95%、97%、98%或99%。序列相似性及/或一致性可使用來自威斯康星大學(the University of Wisconsin)之遺傳學電腦組(the Genetics Computer Group)第10版套裝軟體之「BestFit」程式來確定。該程式使用Smith及Waterman的局部had演算法(local had algorithm)，預設值如下：空位產生罰分=8，空位擴展罰分=2，平均匹配=2.912，平均失配2.003。
術語「聚核苷酸」或「核酸」如本文中可互換使用係指任何長度之核苷酸鏈，且包括DNA及RNA。該等核苷酸可為去氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、經修飾之核苷酸或鹼基、及/或其類似物、或可藉由DNA或RNA聚合酶併入至鏈中之任何基質。聚核苷酸可包含經修飾之核苷酸，諸如甲基化核苷酸及其類似物。
「序列同源性」指示相同或表示保守性胺基酸取代之胺基酸之百分比。
此外，編碼重鏈及/或輕鏈之可變區之核酸序列可例如轉化為編碼全長抗體鏈之核酸序列、Fab片段或scFv。該VL-或VH-編碼DNA片段可經操作連接(使得由該兩個DNA片段編碼之胺基酸序列同框)至編碼例如抗體恆定區或可撓連接子之另一DNA片段。人類重鏈及輕鏈恆定區之序列係此項技術中已知的(參見例如Kabat, E. A.等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，U.S. Department of Health and Human Services，NIH公開案第91-3242號)及包含此等區之DNA片段可藉由標準PCR擴增來獲得。
為了建立編碼scFv之聚核苷酸序列，可將VH-及VL-編碼核酸操作連接至編碼可撓連接子之另一片段，使得該等VH及VL序列可表現為具有經可撓連接子接合之該等VL及VH區之連續單鏈蛋白質(參見例如Bird等人(1988) Science 242:423-426；Huston等人，(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883；McCafferty等人，Nature (1990) 348:552-554)。
為了表現該等抗體、其抗原結合片段或其變體，可使用標準重組DNA表現方法(參見，例如，Goeddel；Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185，Academic Press，San Diego，Calif. (1990))。例如，可將編碼所需多肽之DNA插入至表現載體中，然後將其轉染至適宜宿主細胞中。適宜宿主細胞為原核及真核細胞。原核宿主細胞之實例為例如細菌，真核宿主細胞之實例為酵母、昆蟲及昆蟲細胞、植物及植物細胞、轉基因動物或哺乳動物細胞。在一些實施例中，將該等編碼重鏈及輕鏈之DNA插入至個別載體中。在其他實施例中，將該編碼重鏈及輕鏈之DNA插入至相同載體中。應理解，表現載體之設計(包括調節序列之選擇)受到諸如宿主細胞之選擇、所需蛋白質之表現程度及表現是否為組成型或誘導型的因素影響。
用於細菌使用之有用表現載體係藉由將編碼所需蛋白質之DNA序列連同適宜轉譯引發及終止信號一起插入於具有功能性啟動子之可操作讀相(reading phase)中來建構。該載體將包含一或多個表型可選擇之標記及複製起點以確保維持載體且若需要則提供宿主內之擴增。用於轉化之適宜原核宿主包括(但不限於)大腸桿菌(E. coli)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、鼠傷寒沙門氏桿菌(Salmonella typhimurium)、及假單胞菌(Pseudomonas)屬、鏈黴菌(Streptomyces)及葡萄球菌(Staphylococcus)內之各種物種。
細菌載體可為例如基於噬菌體、基於質體或基於噬菌粒。此等載體可含有可選擇之標記及衍生自通常含有熟知選殖載體pBR322 (ATCC 37017)之元件之市售質體之細菌複製起點。在適宜宿主菌株之轉化及宿主菌株生長至適宜細胞密度之後，所選擇的啟動子藉由適宜手段(例如溫度變動或化學誘導)去抑制/誘導且培養細胞一段額外時間。細胞通常藉由離心收穫，藉由物理或化學手段破壞，且保留所得粗提取物用於進一步純化。
在細菌系統中，可根據所表現的蛋白質之預期用途而有利地選擇多種表現載體。例如，當欲產生大量此種蛋白質，用於產生抗體或篩選肽文庫時，例如，導引容易純化的高水平之融合蛋白產物之表現之載體可能係理想的。
本發明之抗體或其抗原結合片段或其變體包括天然純化產物、化學合成程序之產物、及藉由重組技術自原核宿主產生之產物，該原核宿主包括(例如)大腸桿菌、枯草桿菌、鼠傷寒沙門氏桿菌、及假單胞菌屬、鏈黴菌及葡萄球菌屬內之各種物種，較佳來自大腸桿菌細胞。
用於哺乳動物宿主細胞表現之較佳調節序列包括導引哺乳動物細胞中高水平之蛋白質表現之病毒元件，諸如衍生自巨細胞病毒(CMV) (諸如CMV啟動子/增強子)、猿猴病毒40 (SV40) (諸如SV40啟動子/增強子)、腺病毒(例如腺病毒主要晚期啟動子(AdMLP))及多瘤之啟動子及/或增強子。抗體之表現可為組成型或調節型(例如可藉由結合Tet系統添加或移除小分子誘導物(諸如四環素)而誘導)。關於病毒調節元件及其序列之進一步描述，參見例如Stinski之U.S. 5,168,062、Bell等人之U.S. 4,510,245及Schaffner等人之U.S. 4,968,615。該等重組表現載體亦可包括複製起點及可選擇之標記(參見例如U.S. 4,399,216、4,634,665及U.S. 5,179,017)。適宜之可選擇之標記包括賦予對藥物之抗性的基因，該等藥物諸如G418、嘌呤黴素(puromycin)、潮黴素(hygromycin)、殺稻瘟菌素(blasticidin)、吉歐黴素(zeocin)/博來黴素或胺甲喋呤，或在已引入載體之宿主細胞上利用營養缺陷(auxotrophies)之可選擇之標記(諸如麩醯胺酸合成酶) (Bebbington等人，Biotechnology (N Y). 1992年2月；10(2):169-75)。例如，二氫葉酸還原酶(DHFR)基因賦予對胺甲喋呤的抗性，neo基因賦予對G418之抗性，來自土麴菌(Aspergillus terreus)之bsd基因賦予對殺稻瘟菌素之抗性，嘌呤黴素N-乙醯基-轉移酶賦予對嘌呤黴素之抗性，Sh ble基因產物賦予對吉歐黴素之抗性，及大腸桿菌潮黴素抗性基因(hyg或hph)賦予對潮黴素之抗性。可選擇之標記，如DHFR或麩醯胺酸合成酶亦可結合MTX及MSX用於擴增技術。
將表現載體轉染至宿主細胞中可使用標準技術(諸如電穿孔、核轉染(nucleofection)、磷酸鈣沉澱、脂質轉染、基於多價陽離子之轉染諸如基於聚乙烯亞胺(PEI)之轉染及DEAE-聚葡萄糖轉染)進行。
用於表現本文所提供的抗體、其抗原結合片段或其變體之適宜哺乳動物宿主細胞包括(但不限於)中國倉鼠卵巢(CHO細胞)諸如CHO-K1、CHO-S、CHO-K1SV [包括描述於Urlaub及Chasin，(1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220及Urlaub等人，Cell. 1983年6月；33(2):405-12中的與例如如R. J. Kaufman及P. A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621中所述之DHFR可選擇之標記一起使用之dhfr - CHO細胞；及列舉於Fan等人，Biotechnol Bioeng. 2012年4月；109(4):1007-15中之其他敲除細胞]、NS0骨髓瘤細胞、COS細胞、HEK293細胞、HKB11細胞、BHK21細胞、CAP細胞、EB66細胞及SP2細胞。
表現亦可在表現系統(諸如HEK293、HEK293T、HEK293-EBNA、HEK293E、HEK293-6E、HEK293-Freestyle、HKB11、Expi293F、293EBNALT75、CHO Freestyle、CHO-S、CHO-K1、CHO-K1SV、CHOEBNALT85、CHOS-XE、CHO-3E7或CAP-T細胞)中為暫時穩定或半穩定(例如Durocher等人，Nucleic Acids Res. 2002年1月15;30(2):E9)。
在一些實施例中，表現載體係經設計成使得經表現之蛋白質被分泌至宿主細胞於其中生長之培養基中。該等抗體、其抗原結合片段或其變體可使用標準蛋白質純化方法自培養基回收。
本發明之抗體或其抗原結合片段或其變體可藉由熟知方法(包括(但不限於)硫酸銨或乙醇沉澱、酸萃取、蛋白質A層析、蛋白質G層析、陰離子或陽離子交換層析、磷基纖維素層析、疏水性相互作用層析、親和層析、羥磷灰石層析、混合模式層析及凝集素層析)自重組細胞培養物回收及純化。高效液相層析(「HPLC」)亦可用於純化。參見，例如，Colligan，Current Protocols in Immunology, or Current Protocols in Protein Science，John Wiley & Sons，NY，N.Y.，(1997-2001)，例如第1章、第4章、第6章、第8章、第9章、第10章，各者以引用之方式完全併入本文中。
本發明之抗體或其抗原結合片段或其變體包括天然純化產物、化學合成程序之產物、及藉由重組技術自真核宿主(包括(例如)酵母、較高級植物(higher plant)、昆蟲及哺乳動物細胞)產生之產物。根據重組生產程序中所使用的宿主，本發明之抗體可為糖基化或可為非糖基化。此類方法描述於許多標準實驗室手冊，諸如Sambrook，同上，Sections 17.37-17.42；Ausubel，同上，第10章、第12章、第13章、第16章、第18章及第20章中。
在較佳實施例中，該抗體經純化(1)至大於95重量%抗體，例如藉由勞里法(Lowry method)、UV-Vis光譜法或藉由SDS-毛細管凝膠電泳(例如在Caliper LabChip GXII、GX 90或Biorad生物分析儀裝置上)測定，且在其他較佳實施例中至大於99重量%、(2)至足以獲得N端或內部胺基酸序列之至少15個殘基的程度、或(3)至同質性，藉由SDS-PAGE，在還原或非還原條件下，使用考馬斯藍(Coomassie blue)或較佳銀染色。分離的天然存在之抗體包括原位在重組細胞內之抗體，因為該抗體的天然環境之至少一種組分將不會存在。然而，分離的抗體通常將藉由至少一個純化步驟來製備。
如本發明之背景內容中所用，術語「Ac225-Macropa-菲澤妥單抗(Pelgifatamab)」係指以下化合物： 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
如本發明之背景內容中所用，術語「Ac225-DOTA-菲澤妥單抗」係指以下化合物： 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
本發明包括包含如本文所述的式(I)之組織靶向化合物及一或多種較佳針對癌症(尤其是前列腺癌)具有生物活性之其他化合物(亦即另一藥劑)之組合。此等化合物藉由其類別定義，因此允許熟練技術者識別屬於該類別之此類化合物。
在本發明之背景內容中，非類固醇抗雄激素係指具有非類固醇化學結構之抗雄激素，其通常係選擇性的且係雄激素受體之完全或沉默拮抗劑。其實例包括(但不限於)達洛魯胺(darolutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、恩雜魯胺(enzalutamide)、阿帕魯胺(apalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)、托匹魯胺(topilutamide)、普沙魯胺(proxalutamide)或巴夫代加魯胺(bavdegalutamide)或其任何組合。在本發明之背景內容中，該非類固醇抗雄激素較佳係選自達洛魯胺及恩雜魯胺，更佳地，該非類固醇抗雄激素為達洛魯胺。在某些實施例中，該非類固醇抗雄激素為恩雜魯胺。在某些實施例中，該非類固醇抗雄激素為阿帕魯胺。在其他實施例中，該非類固醇抗雄激素為比卡魯胺、氟他胺或尼魯米特。在其他另外實施例中，該非類固醇抗雄激素為ARV-766、EPI-7386、CC-94676、AC-0176、HP-518或TAS-3681。較佳地，該非類固醇抗雄激素為達洛魯胺。
在本發明之背景內容中，類固醇抗雄激素係指具有類固醇化學結構之抗雄激素，其通常為雄激素受體之拮抗劑。其實例包括(但不限於)乙酸環丙孕酮(Cyproterone acetate)、烯丙雌醇(Allylestrenol)、乙酸氯地孕酮(Chlormadinone acetate)、乙酸地馬孕酮(Delmadinone acetate)、己酸孕諾酮(Gestonorone caproate)、己酸羥基孕酮(Hydroxyprogesterone caproate)、乙酸甲羥孕酮(Medroxyprogesterone acetate)、乙酸甲地孕酮(Megestrol acetate)、乙酸奧沙特隆(Osaterone acetate)、奧生多龍(Oxendolone)及螺內酯(Spironolactone)。在本發明中，該類固醇抗雄激素較佳為乙酸環丙孕酮。
在本發明之背景內容中，雄激素合成抑制劑係指阻止雄激素之生物合成之酵素抑制劑。其實例包括(但不限於)酮康唑(ketoconazole)、阿比特龍(abiraterone)、氨魯米特(aminoglutethimide)、戈舍瑞林(goserelin)及西維諾尼(seviteronel)。在本發明之背景內容中，該雄激素合成抑制劑較佳為阿比特龍(arbiraterone)或戈舍瑞林。
在本發明之背景內容中，抗促性腺激素係指抑制促性腺激素(gonadotropin)、濾泡刺激激素(follicle-stimulating hormone) (FSH)及黃體成長激素(luteinizing hormone) (LH)中之一者或二者之活性及/或下游效應之化合物。其實例包括(但不限於)阿巴瑞克(Abarelix)、達那唑(Danazol)、孕三烯酮(Gestrinone)、對羥苯丙酮(Paroxypropione)、西曲瑞克(Cetrorelix)、地加瑞克(Degarelix)、惡拉戈利(Elagolix)、加尼瑞克(Ganirelix)、利扎戈利(Linzagolix)及瑞盧戈利(Relugolix)。在本發明之背景內容中，該抗促性腺激素較佳為地加瑞克或瑞盧戈利。
在本發明之背景內容中，PARP抑制劑係指為酵素poly-ADP核糖聚合酶(PARP)之藥理學抑制劑之化合物。其實例包括(但不限於)奧拉帕尼(Olaparib)、蘆卡帕尼(Rucaparib)、維利帕尼(Veliparib)、尼拉帕尼(Niraparib)、他拉唑帕尼(Talazoparib)、帕米帕尼(Pamiparib)、CEP 9722、E7016及依尼帕尼(Iniparib)。在本發明之背景內容中，該PARP抑制劑較佳為奧拉帕尼或蘆卡帕尼。
在本發明之背景內容中，ATR抑制劑係指為酵素ATR絲胺酸/蘇胺酸-蛋白激酶(亦稱為共濟失調毛細血管擴張及Rad3-相關蛋白質或FRAP-相關蛋白質1 (FRP1))之藥理學抑制劑之化合物。其實例包括(但不限於)貝佐替布(Berzosertib)、BAY1895344 (伊利塞替布(Elimusertib))、AZD6738、M6620、AZ20及VE 821。在本發明之背景內容中，該PARP抑制劑較佳為貝佐替布或BAY1895344。
在本發明之背景內容中，ATM抑制劑係指為酵素ATM絲胺酸/蘇胺酸激酶之藥理學抑制劑之化合物。其實例包括(但不限於) AZD1390、KU-55933、KU-60019、KU-59403、CP-466722、AZ31/AZ32、AZD0156。
在本發明之背景內容中，DNA-PK抑制劑係指為DNA依賴性蛋白激酶(DNA-PK)之藥理學抑制劑之化合物。其實例包括(但不限於) AZD7648、尼瑟替布(Nedisertib)、VX-984、CC-115、沙托利塞(Samotolisib)及BAY-8400。在本發明之背景內容中，該DNA-PK抑制劑較佳為尼瑟替布或BAY-8400。
在本發明之背景內容中，AKT抑制劑係指為絲胺酸/蘇胺酸激酶AKT之藥理學抑制劑之化合物。其實例包括(但不限於)伊帕塔色替(Ipatasertib)、阿伏瑞替(afuresertib)、米然西布(miransertib)、卡帕塞替尼(capivasertib)、烏普替布(uprosertib)及MK2206。在本發明之背景內容中，該AKT抑制劑較佳為伊帕塔色替。
在本發明之背景內容中，Pi3K抑制劑係指能夠抑制磷酸肌醇3-激酶(PI3K)酵素中之一者或多者之化合物，該等磷酸肌醇3-激酶(PI3K)酵素為PI3K/AKT/mTOR途徑之一部分。其實例包括(但不限於)科帕利普(Copanlisib)、布帕里斯(Buparlisib)、度維里斯(Duvelisib)、艾代拉里斯(Idelalisib)、帕沙利司(Paxalisib)、贊得利司(Zandelisib)、伊那西布(Inavolisib)、度維里斯(Duvelisib)、阿培里斯(Alpelisib)及厄布利塞(Umbralisib)。在本發明之背景內容中，該Pi3K抑制劑較佳為科帕利普。
在本發明之背景內容中，PSMA靶向β發射體係指包含能夠發射β輻射之放射性核素之化合物。其實例包括(但不限於) (177Lu)-維匹泰德特雷昔坦(vipivotide tetraxetan) (Pluvicto)、177Lu-PSMA-I&T及PNT2002。
在本發明之背景內容中，免疫檢查點抑制劑係指能夠阻斷由一些類型之免疫系統細胞(諸如T細胞)及一些癌細胞製造的稱為檢查點之蛋白質之化合物。檢查點有助於防止免疫反應過強且有時可防止T細胞殺死癌細胞。其實例包括(但不限於)阿特珠單抗(Atezolizumab)、度伐魯單抗(Durvalumab)、阿維單抗(Avelumab)、納武單抗(Nivolumab)、帕姆單抗(Pembrolizumab)及易普利單抗(Ipilimumab)。
在本發明之背景內容中，α發射體係指包含能夠經歷放射性衰變之放射性核素之化合物，其中該放射性核素發射α粒子(氦核)且藉此轉化或「衰變」成不同原子核，其質量數減小4且原子序減小2。其實例包括(但不限於) 223Ra、J591-225Ac及PSMA-617-225Ac。
在本發明之背景內容中，疫苗係指適合於前列腺癌之基於細胞之癌症免疫療法之化合物。其實例包括(但不限於) 普列威(sipoleucel T)。
在本發明之背景內容中，化療劑係指適合於前列腺癌之化學療法之化合物。其實例包括(但不限於)太平洋紫杉醇(Paclitaxel)、多烯紫杉醇(Docetaxel)、伊沙匹隆(Ixabepilone)、長春瑞濱(Vinorelbine)、諾考達唑(Nocodazole)、長春新鹼(Vincristine)、秋水仙鹼(Colchicine)及艾日布林(Eribulin)。在本發明之背景內容中，該化療劑較佳為太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。
在本發明之背景內容中，體外放射療法(external beam radiotherapy)係指其中將外部電離輻射源指向及/或施加至個體身體之特定部分之輻射療法。
在本發明之背景內容中，術語「組合」不僅意指含有所有組分(亦即式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑，亦稱為固定劑量組合)及含有彼此分離之組分之組合包裝之劑型，而且意指同時或依次投與之組分，只要其用於預防或治療相同疾病即可。
所投與活性成分之量可根據諸如所採用的特定化合物及劑量單位、投與之模式及時間、治療期、受治療患者的年齡、性別及一般狀況、所治療病狀之性質及程度、藥物代謝及排泄之速率、可能藥物組合及藥物-藥物相互作用及類似者的考量而廣泛變化。
化合物
根據第一態樣，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段，其中[Ab]係經單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對選自菲澤妥單抗、J591及TLX592之前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段之抗-PSMA單株抗體。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對選自菲澤妥單抗及J591之前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為選自菲澤妥單抗及J591或其抗原結合片段之抗-PSMA單株抗體。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA) J591具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體J591或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)菲澤妥單抗具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)菲澤妥單抗具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含與SEQ ID NO.1具有序列相似性或一致性之重鏈核苷酸序列及與SEQ ID NO. 2具有序列相似性或一致性之輕鏈核苷酸序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 1所示之重鏈序列及SEQ ID NO. 2所示之輕鏈序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 1所示之重鏈序列及SEQ ID NO. 2所示之輕鏈序列，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之該三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之該三個CDR輕鏈序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7之該三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10之該三個CDR輕鏈序列，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO.1所示之重鏈序列： SEQ ID NO. 1 - 重鏈 及SEQ ID NO. 2所示之輕鏈序列： SEQ ID NO. 2 - 輕鏈
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含與SEQ ID NO. 3具有序列相似性或一致性之重鏈胺基酸序列及與SEQ ID NO. 4具有序列相似性或一致性之輕鏈胺基酸序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 3所示之重鏈胺基酸序列及SEQ ID NO. 4所示之輕鏈胺基酸序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 3所示之重鏈胺基酸序列： SEQ ID NO. 3 - 重鏈 及SEQ ID NO.4所示之輕鏈胺基酸序列： SEQ ID NO. 4 - 輕鏈
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含與顯示於圖1中之序列具有相似性或一致性之重鏈核苷酸序列及/或推導出的胺基酸序列及與顯示於圖2中之序列具有相似性或一致性之輕鏈核苷酸序列及/或推導出的胺基酸序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含顯示於圖1中之序列所示之重鏈核苷酸序列及/或推導出的胺基酸序列及顯示於圖2中之序列所示之輕鏈核苷酸序列及/或推導出的胺基酸序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少顯示於圖3中之序列所示之該三個CDR重鏈序列及該三個CDR輕鏈序列。
在另一個實施例中，本發明係關於一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少根據顯示於圖3中之序列之該三個CDR重鏈序列及該三個CDR輕鏈序列，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分。
本發明之式(I)之組織靶向化合物包含能夠結合錒之螯合部分。較佳地，該螯合部分包含18員螯合部分。較佳地，該螯合部分包含巨環螯合劑N,N′-雙[(6-羧基-2-吡啶(pyridil))甲基]-4,13-二氮雜-18-冠醚-6 (macropa)。
該巨環螯合劑macropa已描述於例如Thiele等人，Angew. Chem. Int. Ed. 2017，56(46)，14712及其中的參考文獻中。Macropa螯合劑及其衍生物亦已描述於WO2018/183906及WO2020/106886及其中的參考文獻中。
該錒-錯合螯合部分較佳終止於異硫氰酸酯或羧酸部分，以促進其與抗-PSMA抗體或其抗原結合片段偶聯。當使用macropa螯合劑時，該macropa螯合劑之吡啶環中之一者通常經取代，使得其可偶聯至該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段。此可為簡單官能基(例如羧酸-COOH)或較複雜的化學結構，只要其能夠偶聯至抗-PSMA抗體或其抗原結合片段。特別地，該macropa螯合劑之吡啶環上的取代基較佳終止於異硫氰酸酯或羧酸部分。
該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段較佳經由抗體之離胺酸殘基偶聯至形成本發明之組織靶向化合物之分子之其餘部分。因此，該錒-複合螯合部分及該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段可經由醯胺或硫脲部分偶聯。當使用該較佳巨環螯合劑macropa時，將末端異硫氰酸酯或羧酸部分與該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段中之離胺酸殘基之末端胺基偶聯，分別導致形成硫脲基或醯胺基。因此，該包含macropa螯合劑之較佳錒複合螯合部分經由衍生自抗-PSMA抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基之硫脲或醯胺鍵連接至該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段。
本發明之化合物中之較佳抗體或其抗原結合片段對PSMA (抗-PSMA抗體)具有結合親和力。前列腺特異性膜抗原(PSMA)為人類中由FOLH1 (葉酸水解酶1)基因編碼之酵素。特異性結合片段諸如Fab、Fab'、F(ab')2及單鏈特異性結合抗體為典型片段。特別地，較佳該抗-PSMA抗體係選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段。較佳地，該抗-PSMA抗體係選自菲澤妥單抗及J591或其抗原結合片段。更佳地，該抗-PSMA抗體為菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
菲澤妥單抗(CAS登錄號2414550-93-7，公開於WHO推薦清單86中之INN，WHO Drug Information，第35卷，No-3，2021)為對抗原PSMA (抗-PSMA抗體)具有結合親和力之單株抗體。其製備、分離及純化已描述於例如US8114965 (菲澤妥單抗=純系006)中。
菲澤妥單抗包含SEQ ID NO.1所示之重鏈核苷酸序列： SEQ ID NO. 1 - 重鏈 及SEQ ID NO. 2所示之輕鏈核苷酸序列： SEQ ID NO. 2 - 輕鏈
此外，菲澤妥單抗包含SEQ ID NO.3所示之重鏈胺基酸序列： SEQ ID NO. 3 - 重鏈 及SEQ ID NO.4所示之輕鏈胺基酸序列： SEQ ID NO. 4 - 輕鏈
此外，菲澤妥單抗包含顯示於圖1中之序列所示之重鏈核苷酸序列及顯示於圖2中之序列所示之輕鏈核苷酸序列。
此外，菲澤妥單抗包含顯示於圖1中之序列所示之重鏈胺基酸序列及顯示於圖2中之序列所示之輕鏈胺基酸序列。
此外，菲澤妥單抗包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列： 菲澤妥單抗CDR重鏈序列 SEQ ID NO. 5：RYGMH SEQ ID NO. 6：VIWYDGSNKYYADSVKG SEQ ID NO. 7：GGDFLYYYYYGMDV 菲澤妥單抗CDR輕鏈序列 SEQ ID NO. 8：RASQGISNYLA SEQ ID NO. 9：EASTLQS SEQ ID NO. 10：QNYNSAPFT
此外，菲澤妥單抗包含至少顯示於圖3中之序列所示之三個CDR重鏈序列及三個CDR輕鏈序列。
J591為對抗原PSMA (抗-PSMA抗體)具有結合親和力之單株抗體。其製備、分離及純化已描述於例如WO2002/098897及EP2277542中。
此外，J591包含SEQ ID NO.11所示之重鏈序列及SEQ ID NO.12所示之輕鏈序列： SEQ ID NO. 11： SEQ ID NO. 12：
此外，J591包含至少SEQ ID NO. 13、SEQ ID NO. 14及SEQ ID NO. 15所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 16、SEQ ID NO. 17及SEQ ID NO. 18所示之三個CDR輕鏈序列： J591CDR重鏈序列 SEQ ID NO. 13：YTIH SEQ ID NO. 14：N INPNNGGTTY NQKFED SEQ ID NO. 15：GW NFDY J591CDR輕鏈序列 SEQ ID NO. 16：KASQDVG TAVD SEQ ID NO. 17：W ASTRHT SEQ ID NO. 18：QQ YNSYPLT
TLX592為由Telix Pharmaceuticals開發的對抗原PSMA (抗-PSMA抗體)具有結合親和力之單株抗體，其已在例如WO2021/000018中進行描述。
TLX592包含SEQ ID NO. 19所示之重鏈序列及SEQ ID NO. 20所示之輕鏈序列： SEQ ID NO. 19： SEQ ID NO. 20：
此外，TLX592包含至少SEQ ID NO. 21、SEQ ID NO. 22及SEQ ID NO. 23所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 24、SEQ ID NO. 25及SEQ ID NO. 26所示之三個CDR輕鏈序列： TLX592 CDR重鏈序列 SEQ ID NO. 21：EYTIH SEQ ID NO. 22：N INPNNGGTTY NQKFED SEQ ID NO. 23：GW NFDY TLX592 CDR輕鏈序列 SEQ ID NO. 24：KASQDVG TAVD SEQ ID NO. 25：W ASTRHT SEQ ID NO. 26：QQ YNSYPLT 組合
在另一個態樣中，本發明係關於組合，較佳係包含如上所述的式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之醫藥組合。該等組合可用於療法，較佳可用於治療過度增生性疾病，諸如癌症。
包含有效量之如上所述的式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合達成比單獨使用任一化合物時更大之治療功效。
該組合中每種化合物之相對比率亦可基於其各自的作用機制及疾病生物學來選擇。每種化合物之相對比率可廣泛地變化。
該組合之一或多種藥劑之釋放亦可在適當情況下受控制，以在呈單一劑型、組合包裝、套組時或在呈個別獨立劑型時提供期望之治療活性。
一般而言，本發明之組合將用於： (1) 與任一單獨藥劑之投與相比，在減少腫瘤之生長或甚至消除腫瘤上產生更好的功效， (2) 提供較少量之所投與的靶向化合物及/或化學治療劑之投與， (3) 在患者中提供耐受良好之化療治療，其具有比利用單藥化療及某些其他組合療法所觀察到者少的有害藥理學併發症， (4) 提供哺乳動物(尤其是人類)中之更廣泛範圍之不同癌症類型之治療， (5) 在所治療之患者間提供更高反應率， (6)在所治療之患者間提供與標準化療治療相比更長之存活時間， (7) 提供更長的直至發生腫瘤進展的時間，及/或 (8) 與其中其他癌症藥劑組合產生抑制效應之已知實例相比，產生至少與單獨使用的藥劑一樣好之功效及耐受性結果。
該式(I)之組織靶向化合物為如本文所述之本發明化合物。
該另一藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
較佳地，該另一藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
更佳地，該另一藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、PSMA靶向β發射體、α發射體、疫苗及化療劑。
更佳地，該另一藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素及PARP抑制劑。
甚至更佳地，該另一藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑及抗促性腺激素。
甚至更佳地，該另一藥劑為非類固醇抗雄激素。
若該另一藥劑為非類固醇抗雄激素，則其較佳選自達洛魯胺、比卡魯胺、恩雜魯胺、阿帕魯胺、氟他胺、尼魯米特、托匹魯胺、普沙魯胺或巴夫代加魯胺或其任何組合。更佳地，該非類固醇抗雄激素係選自達洛魯胺及恩雜魯胺，最佳地，該非類固醇抗雄激素為達洛魯胺。在某些實施例中，該非類固醇抗雄激素為恩雜魯胺。在某些實施例中，該非類固醇抗雄激素為阿帕魯胺。在其他實施例中，該非類固醇抗雄激素為比卡魯胺、氟他胺或尼魯米特。在其他另外實施例中，該非類固醇抗雄激素為ARV-766、EPI-7386、CC-94676、AC-0176、HP-518或TAS-3681。較佳地，該非類固醇抗雄激素為達洛魯胺。
若該另一藥劑為類固醇抗雄激素，則其較佳選自乙酸環丙孕酮、烯丙雌醇、乙酸氯地孕酮、乙酸地馬孕酮、己酸孕諾酮、己酸羥基孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸奧沙特隆、奧生多龍及螺內酯。更佳地，該類固醇抗雄激素為乙酸環丙孕酮。
若該另一藥劑為雄激素合成抑制劑，則其較佳選自酮康唑、阿比特龍、氨魯米特、戈舍瑞林及西維諾尼。更佳地，該雄激素合成抑制劑為阿比特龍或戈舍瑞林。
若該另一藥劑為抗促性腺激素，則其較佳選自阿巴瑞克、達那唑、孕三烯酮、對羥苯丙酮、西曲瑞克、地加瑞克、惡拉戈利、加尼瑞克、利扎戈利及瑞盧戈利。更佳地，該抗促性腺激素為地加瑞克或瑞盧戈利。
若該另一藥劑為PARP抑制劑，則其較佳選自奧拉帕尼、蘆卡帕尼、維利帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼、帕米帕尼、CEP 9722、E7016及依尼帕尼。更佳地，該PARP抑制劑為奧拉帕尼或蘆卡帕尼。
若該另一藥劑為ATR抑制劑，則其較佳選自貝佐替布、BAY1895344、AZD6738、M6620、AZ20及VE 821。更佳地，該PARP抑制劑為貝佐替布或BAY1895344 (伊利塞替布)。
若該另一藥劑為ATM抑制劑，則其較佳選自AZD1390、KU-55933、KU-60019、KU-59403、CP-466722、AZ31/AZ32及AZD0156。
若該另一藥劑為DNA-PK抑制劑，則其較佳選自ZD7648、尼瑟替布、VX-984、CC-115、沙托利塞及BAY-8400。更佳地，該DNA-PK抑制劑為尼瑟替布或BAY-8400。
若該另一藥劑為AKT抑制劑，則其較佳選自伊帕塔色替、阿伏瑞替、米然西布、卡帕塞替尼、烏普替布及MK2206。更佳地，該AKT抑制劑為伊帕塔色替。
若該另一藥劑為Pi3K抑制劑，則其較佳選自科帕利普、布帕里斯、度維里斯、艾代拉里斯、帕沙利司、贊得利司、伊那西布、度維里斯、阿培里斯及厄布利塞。更佳地，該Pi3K抑制劑為科帕利普。
若該另一藥劑為PSMA靶向β發射體，則其較佳為(177Lu)-維匹泰德特雷昔坦(Pluvicto)、177Lu-PSMA-I&T及PNT2002。
若該另一藥劑為免疫檢查點抑制劑，則其較佳選自阿特珠單抗、度伐魯單抗、阿維單抗、納武單抗、帕姆單抗及易普利單抗。
若該另一藥劑為α發射體，則其較佳選自223Ra、J591-225Ac及PSMA-617-225Ac。
若該另一藥劑為疫苗，則其較佳為普列威(Sipoleucel T)。
若該另一藥劑為化療劑，則其較佳選自太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、伊沙匹隆、長春瑞濱、諾考達唑、長春新鹼、秋水仙鹼及艾日布林。更佳地，該化療劑為太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。
因此，在一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其中菲澤妥單抗或其抗原結合片段係經由單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基之末端胺基結合至分子之其餘部分，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 1所示之重鏈序列及SEQ ID NO. 2所示之輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO. 3所示之重鏈胺基酸序列及SEQ ID NO. 4所示之輕鏈胺基酸序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、PSMA靶向β發射體、α發射體、疫苗及化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素及PARP抑制劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑及抗促性腺激素。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    非類固醇抗雄激素。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (i)     一種藥劑，其選自：選自由達洛魯胺、比卡魯胺、恩雜魯胺、阿帕魯胺、氟他胺、尼魯米特及托匹魯胺組成之群之非類固醇抗雄激素；選自由乙酸環丙孕酮、烯丙雌醇、乙酸氯地孕酮、乙酸地馬孕酮、己酸孕諾酮、己酸羥基孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸奧沙特隆、奧生多龍及螺內酯組成之群之類固醇抗雄激素；選自由酮康唑、阿比特龍、氨魯米特、戈舍瑞林及西維諾尼組成之群之雄激素合成抑制劑；選自由阿巴瑞克、達那唑、孕三烯酮、對羥苯丙酮、西曲瑞克、地加瑞克、惡拉戈利、加尼瑞克、利扎戈利及瑞盧戈利組成之群之抗促性腺激素；選自由奧拉帕尼、蘆卡帕尼、維利帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼、帕米帕尼、CEP 9722、E7016及依尼帕尼組成之群之PARP抑制劑；PSMA靶向β發射體(177Lu)-維匹泰德特雷昔坦(Pluvicto)；選自由223Ra、J591-225Ac及PSMA-617-225Ac組成之群之α發射體；疫苗普列威(Sipoleucel T)及選自由太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、伊沙匹隆、長春瑞濱、諾考達唑、長春新鹼、秋水仙鹼及艾日布林組成之群化療劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自：選自由達洛魯胺、比卡魯胺、恩雜魯胺、阿帕魯胺、氟他胺、尼魯米特及托匹魯胺組成之群之非類固醇抗雄激素；選自由乙酸環丙孕酮、烯丙雌醇、乙酸氯地孕酮、乙酸地馬孕酮、己酸孕諾酮、己酸羥基孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸奧沙特隆、奧生多龍及螺內酯組成之群之類固醇抗雄激素；選自由酮康唑、阿比特龍、氨魯米特、戈舍瑞林及西維諾尼組成之群之雄激素合成抑制劑；選自由阿巴瑞克、達那唑、孕三烯酮、對羥苯丙酮、西曲瑞克、地加瑞克、惡拉戈利、加尼瑞克、利扎戈利及瑞盧戈利組成之群之抗促性腺激素及選自由奧拉帕尼、蘆卡帕尼、維利帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼、帕米帕尼、CEP 9722、E7016及依尼帕尼組成之群之PARP抑制劑。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自：選自由達洛魯胺、比卡魯胺、恩雜魯胺、阿帕魯胺、氟他胺、尼魯米特及托匹魯胺組成之群之非類固醇抗雄激素；選自由乙酸環丙孕酮、烯丙雌醇、乙酸氯地孕酮、乙酸地馬孕酮、己酸孕諾酮、己酸羥基孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸奧沙特隆、奧生多龍及螺內酯組成之群之類固醇抗雄激素；選自由酮康唑、阿比特龍、氨魯米特、戈舍瑞林及西維諾尼組成之群之雄激素合成抑制劑及選自由阿巴瑞克、達那唑、孕三烯酮、對羥苯丙酮、西曲瑞克、地加瑞克、惡拉戈利、加尼瑞克、利扎戈利及瑞盧戈利組成之群之抗促性腺激素。
在另一個實施例中，本發明係關於一種組合，其包含 (i)     一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7所示之三個CDR重鏈序列及SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10所示之三個CDR輕鏈序列，及 (ii)    一種藥劑，其選自非類固醇抗雄激素達洛魯胺、類固醇抗雄激素乙酸環丙孕酮、雄激素合成抑制劑阿比特龍或戈舍瑞林及抗促性腺激素地加瑞克或瑞盧戈利。 合成
在另一個態樣中，本發明係關於一種用於製備式(I)之組織靶向化合物之方法 其中[Ab]為對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段偶聯，且 (ii)    使該所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水性溶液接觸。
在另一個實施例中，本發明係關於一種用於製備式(I)之組織靶向化合物之方法 其中[Ab]為對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段經由該單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基偶聯，且 (ii)    使該所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水性溶液接觸。
在另一個實施例中，本發明係關於一種用於製備式(I)之組織靶向化合物之方法 其中[Ab]為抗-PSMA抗體，其選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段， 該方法包括： (i)     使式(II)之螯合部分 與選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段之抗-PSMA抗體經由該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基偶聯，及 (ii)    使該所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水性溶液接觸。
在另一個實施例中，本發明係關於一種用於製備式(I)之組織靶向化合物之方法 其中[Ab]為抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與該抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段經由該單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基偶聯，及 (ii)    使該所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水性溶液接觸。
在步驟(i)中，使式(II)之螯合部分 與對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段偶聯。較佳地，該抗-PSMA抗體係選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段。更佳地，該抗-PSMA抗體為菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
較佳地，使該式(II)之螯合部分經由該單株抗體之離胺酸殘基偶聯至該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段，從而形成將該螯合部分與該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段連接之硫脲部分。
較佳地，步驟(i)中之該偶聯係在鹼性pH下(亦即在高於7之pH下)進行。更佳地，步驟(i)中之該偶聯係在8至10之pH下，最佳在9之pH下進行。
在步驟(i)之後，產生式(III)之組織靶向螯合劑。因此，在其他實施例中，本發明係關於式(III)之組織靶向螯合劑 其中[Ab]為對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
較佳地，該抗-PSMA抗體或其抗原結合片段係選自菲澤妥單抗、J591及TLX592或其抗原結合片段。更佳地，該抗-PSMA抗體為菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
在步驟(ii)中，使由於步驟(i)中之該偶聯所產生之該產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水性溶液接觸。較佳地，該發射α之錒同位素為225Ac。較佳地，至少一種發射α之錒同位素之該離子為具有三價正電荷之 225Ac，亦即 225Ac 3+。本發明允許在室溫下，亦即在低於製備對應DOTA結合物(亦即Ac225-DOTA-菲澤妥單抗)所需者(其需要較高溫度(60℃))之溫度下執行步驟(ii)。 用途
在另一個態樣中，本發明之式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合可用於治療人類或非人類動物個體中之疾病。特別地，本發明之式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合可用於治療增生性及/或腫瘤性疾病，諸如癌症。已知有許多標靶與增生性及腫瘤性疾病相關。此等包括在患病細胞附近的細胞外基質中發現的某些受體、細胞表面蛋白質、跨膜蛋白質及蛋白質/肽。可與腫瘤性疾病相關之細胞表面受體及抗原之實例包括(但不限於) CD22、CD33、FGFR2 (CD332)、PSMA、HER2、GPC3及間皮素。在一個較佳實施例中，本發明之式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物之組合含有包含對PSMA具有特異性及/或結合親和力之單株抗體之組織靶向部分。此可例如藉由對表現PSMA之細胞比對非PSMA表現細胞具有大50或更多倍(較佳大至少100倍，更佳大至少300倍)之結合親和力來反映。咸信，PSMA在具有某些疾病狀態(如本文所示)之細胞中表現及/或過度表現且因此該PSMA特異性結合劑可用於使複合物靶向至此類受疾病影響的細胞。類似地，組織靶向部分可結合至存在於受疾病影響細胞附近的細胞上之細胞表面標記(例如PSMA受體)。PSMA細胞表面標記可在患病細胞表面上比在健康細胞表面上更重度表現或在細胞表面上在生長期或複製期期間比在休眠期期間更重度表現。在一個實施例中，PSMA特異性組織標靶結合劑可與疾病特異性細胞表面標記之另一結合劑組合使用，從而得到雙重結合複合物。如本文所討論，PSMA之組織靶向結合劑將通常為肽或蛋白質。
如本文所述的本發明各種態樣係關於疾病之治療，特別是用於患病組織之選擇性靶向，以及關於可用於此類方法中之複合物、結合物、藥劑、調配物、套組等。在所有態樣中，該患病組織可駐留在體內單個部位(例如在局限化實體腫瘤之情況)或可駐留在複數個部位(例如在關節炎中其中數個關節受到影響或在分散型或轉移型癌症性疾病之情況)。
待靶向的患病組織可在軟組織部位處、在鈣化組織部位處或可全部在軟組織中、全部在鈣化組織中之複數個部位處或可包括至少一個軟組織部位及/或至少一個鈣化組織部位。在一個實施例中，靶向至少一個軟組織部位。靶向部位及疾病起源部位可相同，但替代地可不同(諸如在特定靶向轉移性部位之情況)。在涉及多於一個部位時，此可包括起源部位或可為複數個次發部位。
術語「軟組織」在本文中用於指不具有「硬」礦化基質之組織。特別地，如本文所用的軟組織可為非骨骼組織之任何組織。相應地，「軟組織疾病」如本文所用指示發生於如本文所用的「軟組織」中之疾病。本發明特別適合於治療癌症及「軟組織疾病」，因此包涵癌、肉瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤及發生在任何「軟」 (亦即非礦化)組織中之混合型癌症、以及此種組織之其他非癌症性疾病。癌症性「軟組織疾病」包括發生在軟組織中之實體腫瘤以及轉移性及微轉移性腫瘤。事實上，該軟組織疾病可包含軟組織之原發性實體腫瘤及相同患者中軟組織之至少一種轉移性腫瘤。或者，該「軟組織疾病」可僅由原發性腫瘤或僅由原發性腫瘤為骨骼疾病之轉移組成。特別適合於本發明之所有適宜態樣中之治療及/或靶向的是血液學腫瘤且尤其是淋巴樣細胞之腫瘤性疾病(諸如淋巴瘤及淋巴樣白血病，包括非霍奇金氏淋巴瘤(Non-Hodgkin's Lymphoma))、B-細胞淋巴瘤之B-細胞瘤。類似地，骨髓、脊柱(尤其是脊髓)淋巴結及/或血液細胞之任何腫瘤性疾病適合於本發明之所有適宜態樣中之治療及/或靶向。
適合於本發明之適宜態樣中之治療及/或靶向之B-細胞疾病(例如腫瘤)之一些實例包括： 慢性淋巴球性白血病/小淋巴球性淋巴瘤、B細胞前淋巴球性白血病、淋巴漿細胞淋巴瘤(諸如華氏巨球蛋白血症(Waldenström macroglobulinemia))、脾臟緣帶淋巴瘤、漿細胞腫瘤(例如漿細胞骨髓瘤、漿細胞瘤、單株免疫球蛋白沉積性疾病、重鏈疾病)、節外緣帶B細胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、結節性緣帶B細胞淋巴瘤(NMZL)、濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤、血管內大B細胞淋巴瘤、原發性滲出性淋巴瘤及伯奇氏淋巴瘤(Burkitt lymphoma)/白血病。
本發明之式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合較佳含有包含對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體之組織靶向部分。腫瘤細胞中之PSMA表現已在不同類型之疾病(特別是過度增生性疾病，諸如癌症)中觀察到(Uijen等人，Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging 2021，48，4350，doi: 10.1007/s00259-021-05433-w)。適合於使用本發明之式(I)之較佳組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物之組合之治療之疾病及/或腫瘤之實例包括前列腺癌、唾液腺癌、神經膠質母細胞瘤、腦癌、甲狀腺癌、肝細胞癌及透明細胞腎癌。
在一些實施例中，本發明包括一種使用式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合於治療疾病(更佳係過度增生性疾病)之方法，更特定言之，其中該過度增生性疾病為癌症，且又甚至更特定言之，其中該癌症疾病為前列腺癌。在一些實施例中，本發明包括一種使用式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合於治療特徵在於腫瘤細胞中之PSMA過度表現之疾病(較佳係過度增生性疾病，更佳係癌症)之方法。
在一些實施例中，本發明包括一種治療過度增生性疾病，更特定言之癌症，更特定言之前列腺癌之方法，該方法包括對有需要的個體投與有效量之至少一種式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合。在一些實施例中，本發明包括一種治療特徵在於腫瘤細胞中PSMA之過度表現之過度增生性疾病之方法，更特定言之，其中該過度增生性疾病為癌症，更特定言之前列腺癌，該方法包括對有需要的個體投與有效量之至少一種式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合。
在一些實施例中，本發明提供如上所述的式(I)之組織靶向化合物及/或如上所述的本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於治療及/或預防疾病，特定言之過度增生性病症，更特定言之癌症，甚至更特定言之，其中該癌症疾病為前列腺癌。在一些實施例中，本發明包括如上所述的式(I)之組織靶向化合物及/或如上所述的本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於治療及/或預防特徵在於腫瘤細胞中PSMA之過度表現之過度增生性疾病。
在一些實施例中，本發明包括式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於抑制細胞之增殖及/或誘導細胞中凋亡之方法中，該方法包括使該細胞與式(I)之組織靶向化合物及/或與包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合接觸。在一些實施例中，本發明包括式(I)之組織靶向化合物及/或本發明之包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於抑制腫瘤細胞之增殖及/或誘導腫瘤細胞中凋亡之方法中，該方法包括使該腫瘤細胞與式(I)之組織靶向化合物及/或與包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合接觸，其中PSMA在該等腫瘤細胞中過度表現。
在一些實施例中，本發明包括式(I)之組織靶向化合物及/或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於治療過度增生性疾病之方法中，更特定言之，其中該過度增生性疾病為癌症，且又甚至更特定言之，其中該癌症疾病為前列腺癌。在一些實施例中，本發明包括式(I)之組織靶向化合物及/或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合，其用於治療特徵在於腫瘤細胞中PSMA之過度表現之過度增生性疾病之方法中。
在一些實施例中，本發明包括一種式(I)之組織靶向化合物及/或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合於製造用於治療及/或預防過度增生性疾病之藥物之用途。在一些實施例中，本發明包括一種式(I)之組織靶向化合物及/或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合於製造用於治療及/或預防特徵在於腫瘤細胞中PSMA之過度表現之過度增生性疾病之藥物之用途。
在一些實施例中，本發明包括一種式(I)之組織靶向化合物及/或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合於製造用於治療過度增生性疾病，特別是癌症且更特定言之前列腺癌之藥物之用途。 投與
在包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之組合中，該式(I)之組織靶向化合物及該另一藥劑可依序地(以任一順序)或同時地投與。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合可以任何形式藉由任何有效途徑，包括(例如)口服、非經腸、腸內、靜脈內、腹膜內、局部、經皮(例如使用任何標準貼劑)、經眼、經鼻、局部、非口服，諸如氣霧劑、吸入、皮下、肌肉內、口頰、舌下、直腸、陰道、動脈內及鞘內等投與。其可單獨地或以與任何成分(活性或非活性)組合方式投與。較佳地，該等式(I)之組織靶向化合物或本發明之組合係經靜脈內投與。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合可以已知方式轉化為尋常醫藥調配物，其可為液體或固體調配物，例如(但不限於)正常及腸溶性包衣錠劑、膠囊、丸劑、粉末、顆粒、酏劑、酊劑、溶液、懸浮液、糖漿、固體及液體氣霧劑及乳液。
包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合中每種化合物之相對比率亦可基於其各別作用機制及疾病生物學來選擇。每種化合物之相對比率可廣泛地變化。
包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合之一或多種藥劑之釋放亦可在適當情況下受控制，以在呈單一劑型、組合包裝、套組時或在呈個別獨立劑型時提供期望治療活性。
本發明包括包含醫藥上可接受之載劑及醫藥有效量之式(I)之組織靶向化合物或本發明之組合(亦即如上所述的式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑)之醫藥組合物。醫藥上可接受之載劑為在與活性成分之有效活性一致之濃度下對患者相對無毒且無害之任何載劑，使得可歸因於載劑之任何副作用不會損害活性成分之有益效應。化合物之醫藥有效量為於所治療的特定病狀上產生結果或產生影響之量。
對於口服投與，該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合可經調配成固體或液體製劑，諸如固體分散液、膠囊、丸劑、錠劑、片劑、口含錠、熔劑(melt)、粉末、溶液、懸浮液或乳液，且可根據此項技術已知用於製造醫藥組合物之方法來製備。該固體單位劑型可為膠囊，其可係尋常硬殼或軟殼明膠類型，其裝納例如表面活性劑、潤滑劑、及惰性填料諸如乳糖、蔗糖、磷酸鈣及玉米澱粉。
若呈錠劑之形式投與，則該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合可用習知錠劑基質(諸如乳糖、蔗糖及玉米澱粉)組合黏結劑(諸如阿拉伯膠(acacia)、玉米澱粉或明膠)、旨在輔助投與後錠劑之分解及溶解之崩解劑(諸如馬鈴薯澱粉、海藻酸、玉米澱粉、及瓜爾膠(guar gum)、黃蓍膠、阿拉伯膠)、旨在改良錠劑造粒之流動及防止錠劑材料黏著至錠劑模具及衝壓機(punch)之表面之潤滑劑(例如滑石、硬脂酸、或硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅)、旨在增強錠劑之美學品質且使得其為患者更可接受之染料、著色劑、及矯味劑(諸如歐薄荷(peppermint)、冬青油或櫻桃矯味)來製錠。用於口服液體劑型中之適宜賦形劑包括磷酸二鈣及添加或未添加醫藥上可接受之表面活性劑、懸浮劑或乳化劑之稀釋劑(諸如水及醇(例如乙醇、苄醇、及聚乙烯醇))。各種其他材料可以塗層存在或以其他方式修飾劑量單位之物理形式。例如，錠劑、丸劑或膠囊可經塗覆蟲膠、糖或二者。
可分散之粉末及顆粒適合於製備水性懸浮液。其提供與分散或潤濕劑、懸浮劑及一或多種防腐劑混合之活性成分。適宜分散或潤濕劑及懸浮劑以上文已經提及之彼等為例。亦可存在其他賦形劑，例如上述的彼等甜味劑、矯味劑及著色劑。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合亦可呈水包油型乳液之形式。該油相可為植物油，諸如液體石蠟或植物油之混合物。適宜乳化劑可為(1)天然存在之膠，諸如阿拉伯膠及黃蓍膠、(2)天然存在之磷脂質，諸如大豆及卵磷脂、(3)衍生自脂肪酸及己糖醇酐之酯或偏酯(partial ester)，例如山梨糖醇酐單油酸酯、(4)該等偏酯與環氧乙烷之縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。該等乳液亦可含有甜味劑及矯味劑。
油性懸浮液可藉由將活性成分懸浮於植物油(諸如(例如)花生油(arachis oil)、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(諸如液體石蠟)中來調配。該等油性懸浮液可含有增稠劑，諸如(例如)蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。該等懸浮液亦可含有一或多種防腐劑，例如乙基或正丙基對-羥基苯甲酸酯；一或多種著色劑；一或多種矯味劑；及一或多種甜味劑，諸如蔗糖或糖精。
糖漿及酏劑可用甜味劑(諸如(例如)甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖)來調配。此類調配物亦可含有緩和劑、及防腐劑(諸如甲基及丙基對羥基苯甲酸酯)及矯味及著色劑。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合亦可非經腸(亦即經皮下、經靜脈內、經眼內、經滑膜內、經肌肉內或經腹膜內)，呈該化合物含在具有可為無菌液體或液體(諸如水、鹽水、水性右旋糖及相關糖溶液、醇(諸如乙醇、異丙醇或十六烷基醇)、二醇(諸如丙二醇或聚乙二醇)、甘油縮酮(諸如2,2-二甲基-1,1-二氧戊環-4-甲醇)、醚諸如聚(乙二醇) 400、油、脂肪酸、脂肪酸酯或脂肪酸甘油酯、或乙醯化脂肪酸甘油酯)之混合物之醫藥載劑之生理上可接受之稀釋劑中之可注射之劑型，在添加或不添加醫藥上可接受之表面活性劑(諸如皂劑(soap)或清潔劑)、懸浮劑(諸如果膠、卡波姆(carbomer)、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素)或乳化劑及其他醫藥佐劑下投與。
較佳地，該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合係一起或分開經靜脈內及/或經口投與。較佳地，在包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合中，該式(I)之組織靶向化合物係經靜脈內投與，且該另一藥劑係經口投與。
可用於本發明之非經腸調配物中之油之示例為石油、動物、植物或合成來源者，例如，花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、礦脂及礦物油。適宜脂肪酸包括油酸、硬脂酸、異硬脂酸及肉豆蔻酸。適宜脂肪酸酯為例如油酸乙酯及肉豆蔻酸異丙酯。適宜皂劑包括脂肪酸鹼金屬、銨及三乙醇胺鹽，及適宜清潔劑包括陽離子清潔劑，例如二甲基二烷基銨鹵化物、烷基吡啶鎓鹵化物，及烷基胺乙酸鹽；陰離子清潔劑，例如烷基、芳基及烯磺酸酯，烷基、烯、醚及單甘油酯硫酸鹽，及磺基琥珀酸鹽；非離子清潔劑，例如脂肪胺氧化物、脂肪酸烷醇醯胺、及聚(氧伸乙基-氧伸丙基)，或環氧乙烷或環氧丙烷共聚物；及兩性清潔劑，例如烷基-β-胺基丙酸酯、及2-烷基咪唑啉四級銨鹽、以及混合物。
用於非經腸調配物中之表面活性劑之示例為聚乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類別，例如山梨糖醇酐單油酸酯，及環氧乙烷與由環氧丙烷與丙二醇縮合形成的疏水性鹼之高分子量加成物。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合可呈無菌可注射水性懸浮液之形式。此類懸浮液可根據已知方法調配，使用適宜分散或潤濕劑及懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠；分散或潤濕劑，其可為天然存在之磷脂質，諸如卵磷脂、環氧烷與脂肪酸之縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物(例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇)、環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇之偏酯之縮合產物(諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)、或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐之偏酯之縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯)。
該無菌可注射製劑亦可為含在非毒性非經腸可接受之稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液。可使用的稀釋劑及溶劑為(例如)水、林格氏溶液(Ringer’s solution)、等滲氯化鈉溶液及等滲葡萄糖溶液。此外，無菌固定油習知上用作溶劑或懸浮介質。為此目的，可使用任何溫和(bland)固定油，包括合成單-或二甘油酯。此外，脂肪酸(諸如油酸)可用於製備可注射劑(injectable)。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合亦可呈用於藥物之直腸投與之栓劑之形式投與。此等組合物可藉由將該藥物與適宜無刺激賦形劑混合來製備，該適宜無刺激賦形劑在尋常溫度下為固體但在直腸溫度下為液體且將因此在直腸中熔化以釋放該藥物。此種材料為例如可可脂及聚乙二醇。
用於非經腸投與之受控釋放型調配物包括此項技術中已知的脂質體、聚合微球及聚合凝膠調配物。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合亦可呈固體分散液之形式。該固體分散液可為固體溶液、玻璃溶液、玻璃懸浮液、含在結晶載劑(共晶或偏晶)中之非晶型沉澱、化合物或複合物形成及其組合。
該式(I)之組織靶向化合物或包含式(I)之組織靶向化合物及另一藥劑之本發明之組合亦可含有其他習知醫藥上可接受之複合成分，一般稱為載劑或稀釋劑，視需要或期望而定。可利用用於以適宜劑型製備此類組合物之習知程序。
可適當地用於調配用於其所欲投與途徑之組合物之常用醫藥成分包括： ● 酸化劑(實例包括(但不限於)乙酸、檸檬酸、富馬酸、鹽酸、硝酸)； ● 鹼化劑(實例包括(但不限於)氨溶液、碳酸銨、二乙醇胺、單乙醇胺、氫氧化鉀、硼酸鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、三乙醇胺(triethanolamine)、三乙醇胺(trolamine))； ● 吸附劑(實例包括(但不限於)粉末纖維素及活性木炭)； ● 氣霧劑推進劑(實例包括(但不限於)二氧化碳、CCl2F2、F2ClC-CClF2及CClF3) ● 空氣置換劑(實例包括(但不限於)氮氣及氬氣)； ● 抗真菌防腐劑(實例包括(但不限於)苯甲酸、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯甲酸鈉)； ● 抗微生物防腐劑(實例包括(但不限於)氯化苯二甲烴銨、氯苯索寧(benzethonium chloride)、苄醇、十六烷基吡啶鎓氯化物、氯丁醇、苯酚、苯基乙基醇、硝酸苯汞及硫柳汞(thimerosal))； ● 抗氧化劑(實例包括(但不限於)抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基苯甲醚、丁基化羥基甲苯、次亞磷酸(hypophosphorus acid)、單硫甘油、没食子酸丙酯、抗壞血酸鈉、亞硫酸氫鈉、甲醛次硫酸鈉、偏亞硫酸氫鈉)； ● 結合材料(實例包括(但不限於)嵌段聚合物、天然及合成橡膠、聚丙烯酸酯、聚胺甲酸酯、聚矽氧、聚矽氧烷及苯乙烯-丁二烯共聚物)； ● 緩衝劑(實例包括(但不限於)偏磷酸鉀、磷酸氫二鉀、乙酸鈉、無水檸檬酸鈉及檸檬酸鈉二水合物) ● 攜帶劑(實例包括(但不限於)阿拉伯糖漿、芳族糖漿、芳族酏劑、櫻桃糖漿、可可糖漿、橘子糖漿、糖漿、玉米油、礦物油、花生油、芝麻油、抑菌氯化鈉注射液及注射用抑菌水) ● 螯合劑(實例包括(但不限於)依地酸二鈉(edetate disodium)及依地酸(edetic acid)) ● 著色劑(實例包括(但不限於) FD&C Red No. 3、FD&C Red No. 20、FD&C Yellow No. 6、FD&C Blue No. 2、D&C Green No. 5、D&C Orange No. 5、D&C Red No. 8、焦糖及氧化鐵紅(ferric oxide red))； ● 澄清劑(實例包括(但不限於)膨潤土)； ● 乳化劑(實例包括(但不限於)阿拉伯膠、聚西托醇(cetomacrogol)、鯨蠟醇、甘油基單硬脂酸酯、卵磷脂、山梨糖醇酐單油酸酯、聚氧乙烯50單硬脂酸酯)； ● 封裝劑(實例包括(但不限於)明膠及乙酸鄰苯二甲酸纖維素) ● 矯味劑(實例包括(但不限於)洋茴香油、肉桂油、可可、薄荷醇、橙油、歐薄荷油及香草精)； ● 保濕劑(實例包括(但不限於)甘油、丙二醇及山梨糖醇)； ● 磨製劑(levigating agent) (實例包括(但不限於)礦物油及甘油)； ● 油類(實例包括(但不限於)花生油、礦物油、橄欖油、花生油、芝麻油及植物油)； ● 軟膏基質(實例包括(但不限於)羊毛脂(lanolin)、親水性軟膏、聚乙二醇軟膏、礦脂、親水性礦脂、白色軟膏、黃色軟膏及玫瑰水軟膏)； ● 穿透增強劑(經皮遞送) (實例包括(但不限於)單羥基或多羥基醇、單價或多價醇、飽和或不飽和脂肪醇、飽和或不飽和脂肪酯、飽和或不飽和二羧酸、精油(essential oil)、磷脂醯基衍生物、腦磷脂、萜烯、醯胺、醚、酮及尿素) ● 塑化劑(實例包括(但不限於)鄰苯二甲酸二乙酯及甘油)； ● 減少及/或防止輻射分解(radiolysis)之清除化合物； ● 溶劑(實例包括(但不限於)乙醇、玉米油、棉籽油、甘油、異丙醇、礦物油、油酸、花生油、純水、注射用水、無菌注射用水及無菌灌注用水)； ● 硬化劑(實例包括(但不限於)鯨蠟醇、鯨蠟酯蠟、微晶蠟、石蠟、硬脂醇、白蠟及黃蠟)； ● 栓劑基質(實例包括(但不限於)可可脂及聚乙二醇(混合物))； ● 表面活性劑(實例包括(但不限於)氯化苯二甲烴銨、壬基酚聚醚10 (nonoxynol 10)、辛苯聚醇9 (oxtoxynol 9)、聚山梨醇酯80、月桂基硫酸鈉及山梨糖醇酐單棕櫚酸鹽)； ● 懸浮劑(實例包括(但不限於)瓊脂、膨潤土、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、高嶺土、甲基纖維素、黃蓍膠及矽酸鎂鋁(veegum))； ● 甜味劑(實例包括(但不限於)阿斯巴甜(aspartame)、右旋糖、甘油、甘露醇、丙二醇、糖精鈉、山梨糖醇及蔗糖)； ● 錠劑抗黏劑(anti-adherent) (實例包括(但不限於)硬脂酸鎂及滑石)； ● 錠劑黏結劑(實例包括(但不限於)阿拉伯膠、海藻酸、羧甲基纖維素鈉、可壓縮糖、乙基纖維素、明膠、液態葡萄糖、甲基纖維素、非交聯聚乙烯吡咯啶酮及預糊化澱粉)； ● 錠劑及膠囊稀釋劑(實例包括(但不限於)磷酸氫鈣、高嶺土、乳糖、甘露醇、微晶纖維素、粉末纖維素、沉澱碳酸鈣、碳酸鈉、磷酸鈉、山梨糖醇及澱粉)； ● 錠劑塗覆劑(實例包括(但不限於)液體葡萄糖、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、乙酸鄰苯二甲酸纖維素及蟲膠)； ● 錠劑直接壓縮賦形劑(實例包括(但不限於)磷酸氫鈣)； ● 錠劑崩解劑(實例包括(但不限於)海藻酸、羧甲基纖維素鈣、微晶纖維素、泊拉可林鉀(polacrillin potassium)、交聯聚乙烯吡咯啶酮、海藻酸鈉、乙醇酸澱粉鈉及澱粉)； ● 錠劑滑動劑(實例包括(但不限於)膠態二氧化矽、玉米澱粉及滑石)； ● 錠劑潤滑劑(實例包括(但不限於)硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、礦物油、硬脂酸及硬脂酸鋅)； ● 錠劑/膠囊遮光劑(opaquant) (實例包括(但不限於)二氧化鈦)； ● 錠劑拋光劑(實例包括(但不限於)巴西棕櫚蠟(carnauba wax)及白蠟)； ● 增稠劑(實例包括(但不限於)蜂蠟、鯨蠟醇及石蠟)； ● 張力劑(實例包括(但不限於)右旋糖及氯化鈉)； ● 增加黏度之試劑(實例包括(但不限於)海藻酸、膨潤土、卡波姆、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、海藻酸鈉及黃蓍膠)；及 ● 濕潤劑(實例包括(但不限於)十七伸乙基氧基鯨蠟醇、卵磷脂、山梨糖醇單油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯及聚氧乙烯硬脂酸酯)。
熟習此項技術者利用前述資訊可最大限度地利用本發明。 實驗部分
化學名稱係使用來自Dassault Systèmes之BIOVIA Draw 2019產生。在一些情況下，使用市售試劑之一般認可之名稱來替代BIOVIA Draw產生的名稱。
下表1列出用於本段及實例部分中之縮寫，只要其未在正文內進行解釋。其他縮寫具有其本身為熟練技術者習知的含義。 表 1 . 縮寫
下表列出本文中使用的縮寫。 225Ac                 錒-225 Ac-225             錒-225 ACC                 抗體-螯合劑結合物 ACN                 乙腈 BCA                 二辛可寧酸(Bicinchoninic acid) BRFF-HPC1      無血清培養基 CAR                 螯合劑與抗體比 DCTA               1,2-二胺基環己烷四乙酸 DMA                N,N-二甲基乙醯胺 DMSO              二甲基亞碸 DOTA               1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸 ESI                   電噴霧電離 EtOH                乙醇 FBS                  胎牛血清 FPLC                快速蛋白質液相層析 HCl                  鹽酸 HPGe                高純度鍺 HPLC               高效液相層析 iTLC                 即時薄層層析 IRF                   免疫反應性分數 mAb                 單株抗體 MEM-NEAA     最小必需中等非必需胺基酸 min                   分鐘 MS                   質譜法 NaCl                 氯化鈉 nm                    奈米 nmol                 奈莫耳 pelgi                 菲澤妥單抗、前列腺特異性膜抗原IgG1抗體 菲澤妥單抗        前列腺特異性膜抗原IgG1抗體 PBS                  磷酸鹽緩衝鹽水 PSMA               前列腺特異性膜抗原 RAC                 放射性濃度 RCP                  放射化學純度 RPMI                Roswell Park Memorial Institute 1640培養基 SEC                  尺寸排除層析 TAC                 靶向錒結合物(Ac-225標記ACC) TFA                  三氟乙酸 TOF                  飛行時間 UPLC               超高效液相層析 UV                   紫外線
其合成未描述於實驗部分的所有試劑均為市售或已知化合物或可自已知化合物藉由已知方法由熟習此項技術者形成。
描述於本申請案中之本發明之各種態樣藉由以下實例來說明，該等實例無意以任何方式限制本發明。
本文所述的實例測試實驗用於說明本發明且本發明不受限於所給出的實例。 包含菲澤妥單抗之組織靶向化合物  藉由尺寸排除層析及質譜法之ACC表徵
藉由SEC-MS (連接至Waters XEVO TOF之Water Acquity HPLC；運行緩衝液：50/50/0.1 (v/v/v) ACN/水/TFA；流速：0.06 mL/min，用於在線去鹽之管柱：Waters Acquity BEH SEC，1.7 µm，2.1 x 150 mm；ESI+模式)，藉由使用MS峰高(以組分mAb、mAb + 1螯合劑、mAb + 2螯合劑、mAb + 3螯合劑等之主要峰高百分比計)，及使用式CAR = 總和(n*An)/總和An，測定ACC之CAR，其中n等於螯合劑數目及An等於具有n種螯合劑之抗體結合物之強度。ACC之純度及濃度藉由SEC-UV (Agilent 1260 Infinity HPLC系統，運行緩衝液：10% DMSO/PBS；流速：0.3 mL/min，管柱：Waters Acquity BEH SEC，1.7 µm，4.6 x 300 mm，偵測：UV，在280 nm下)測定。該方法將更高聚集體、二聚體及片段與ACC單體分離。 實例 1 ： macropa- 菲澤妥單抗 ACC 之製備
將溶解於DMA (728 µL)中之6-[[16-[(6-羧基-2-吡啶基)甲基]-1,4,10,13-四氧雜-7,16-二氮雜環十八烷-7-基]甲基]-4-[2-(4-異硫氰基苯基)乙氧基]吡啶-2-羧酸(5.8 mg，8.2 µmol)添加至含在PBS (25 mL)中之菲澤妥單抗(493 mg，3.3 µmol)。藉由添加1M碳酸鹽緩衝液，pH 9.5 (5 mL)將溶液調整至pH 9及將溶液振盪過夜。產物藉由FPLC (管柱：HiLoad 16/600 Superdex 200 pg管柱；運行緩衝液：100 mM乙酸鹽/100 mM NaCl 1:1，pH 5；流速：1 mL/min；偵測：UV 214/254 nm)純化以提供386 mg (77%產率)之含在100 mM乙酸鹽/100 mM NaCl 1:1 (2.3 mg/mL)中之macropa-菲澤妥單抗ACC。CAR藉由MS測定為0.8。單體純度藉由SEC-UV測定為99%。 實例2：DOTA-菲澤妥單抗ACC CAR 5.7之製備
將p-SCN-Bn-DOTA (Macrocyclics，B-205)於PBS中溶解至10 mg/mL。將261 µL添加至溶解於PBS中之990 µL菲澤妥單抗(10 mg/mL)。利用1M碳酸鹽緩衝液將該pH調整至9。將該混合物在熱混合器上在550 rpm、37℃下振盪培養2小時。使該結合物藉由FPLC (管柱：HiLoad 16/600 Superdex 200 pg管柱；運行緩衝液：100 mM乙酸鹽/100 mM NaCl 1:1，pH 5；流速：1 mL/min；偵測：UV 280 nm)純化。經組合之DOTA-菲澤妥單抗流份之濃度藉由SEC-UV測定為2.6 mg/mL。CAR藉由MS測定為5.7。單體純度藉由SEC-UV測定為99%。 實例3：DOTA-菲澤妥單抗ACC CAR 12.7之製備
將p-SCN-Bn-DOTA (Macrocyclics，B-205)於PBS中溶解至10 mg/mL。取470 µL添加至溶解於PBS中之990 µL菲澤妥單抗(10 mg/mL)。利用1M碳酸鹽緩衝液將pH調整至9。將該混合物在熱混合器上在550 rpm下在22℃下在黑暗中振盪培養過夜。使該結合物藉由FPLC (管柱：HiLoad 16/600 Superdex 200 pg管柱；運行緩衝液：100 mM乙酸鹽/100 mM NaCl 1:1，pH 5；流速：1 mL/min；偵測：UV 280 nm)純化。經組合之DOTA-菲澤妥單抗流份之濃度藉由BCA蛋白質檢定測定為2.5 mg/mL。CAR藉由MS測定為12.7。單體純度藉由SEC-UV測定為98%。 放射性標記
用在2 MBq/mg之比活性下之Ac-225放射性標記Macropa-菲澤妥單抗、DOTA-菲澤妥單抗CAR = 5.7及DOTA-菲澤妥單抗CAR = 12.7且用0.1 M乙酸鹽緩衝液pH 5稀釋至1.5 kBq/µL之放射性濃度。針對macropa-菲澤妥單抗在室溫下培養該混合物一小時同時在加熱塊上在60℃下培養該兩種DOTA-菲澤妥單抗ACC一小時。藉由即時薄層層析使用檸檬酸鹽緩衝液進行溶離來測定該等TAC之RCP，每個樣品重複三次。未標記之Ac-225在溶劑前鋒溶離而經放射性標記之化合物則不會自施覆部位移動。利用數位γ射線光譜儀(Digital Gamma-Ray Spectrometer) (DSPEC-50，Ortec)進行放射性之測定。在放射性標記後至少6小時測定活性以允許子核素與Ac-225處於平衡狀態。對於Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 5.7及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 12.7，該等樣品之RCP (定義為[(施覆部位之放射性)/(條上之總放射性)] x 100)分別為99.9% ± 0.013；99.2% ± 0.049及99.5% ± 0.110。
與DOTA結合之菲澤妥單抗-macropa及PSMA結合抗體J591均經錒-225標記。在室溫下進行標記。J591-DOTA亦在60℃下進行標記。放射化學純度藉由即時薄層層析(iTLC)測定。在鍺偵測器中使用錒-225特定能量線計數經標記及游離的錒-225。與鼠類單株PSMA抗體J591 (225Ac‑J591，圖8)之錒-225-標記相比，在室溫下菲澤妥單抗之錒-225-標記係有效的。在放射性標記後，藉由(iTLC)評估，225Ac-菲澤妥單抗之放射化學純度經測定為100%(圖8)。 TAC之尺寸排除層析
TAC之純度藉由SEC-UV來測定。該方法將更高聚集體、二聚體及片段與ACC單體分離。使用在30℃下操作的Acquity UPLC Protein BEH SEC，1.7 µm，200Å，4.6 x 300 mm管柱進行分離。移動相為170 mM乙酸銨及300 mM NaCl，其含有10% 2-丙醇及0.1 mM DCTA。流速為0.3 mL/min，且在UV 280 nm下偵測ACC。在Agilent 1200系列HPLC上利用35 µL注射液進行分析。 表2. TAC之純度，藉由SEC-UV
TAC 面積% (UV)
聚集體 二聚體 單體
Ac-225-macropa-菲澤妥單抗 ND 0.5 99.5
菲澤妥單抗-DOTA-Ac-225 CAR 5.7 18.4 3.0 78.6
菲澤妥單抗-DOTA-Ac-225 CAR 12.7 30.5 4.8 64.7
免疫反應性分數(IRF)
在放射性標記完成後不久，測定每種樣品對PSMA塗覆M-270-羧基Dynabeads之結合。簡言之，將250 µg珠粒放置於2 mL Eppendorf管內的50 µL緩衝液(PBS/3% BSA)中。將該等樣品以一式三份運行且包括經過量裸PSMA mAb阻斷之樣品。該阻斷步驟持續40分鐘，同時在熱混合器(Eppendorf)上在室溫下在750 rpm下振盪該等管。將該等放射性標記化合物在緩衝液中稀釋至5 Bq/µL且添加至各個含有珠粒之管。使該結合持續80分鐘同時在室溫下在750 rpm下振盪。在完成結合步驟之後，將40 µL緩衝液添加至每個管且使用磁鐵(DynaMag-2)以將珠粒與上清液的一半分離。使用數位γ射線光譜儀測定每個樣品之上清液及珠粒中之放射活性。在至少6小時後測定活性，以允許子核素與Ac-225處於平衡狀態。總結合定義為[(珠粒中之活性 - 上清液中之活性)/(總活性)] x 100。藉由自經阻斷之樣品之相同計算獲得非特異性結合，且IRF定義為[特異性結合 - 非特異性結合]。對於Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 5.7及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 12.7，該IRF分別為95%、92%及74% (圖11)。 流動式細胞測量術
在PSMA表現LNCaP前列腺癌細胞中評估完全人類PSMA-靶向抗體菲澤妥單抗、抗體螯合劑結合物(ACC)菲澤妥單抗-macropa及同型對照之體外結合性質。藉由流動式細胞測量術進行EC 50值及每個細胞所結合的抗體之測定。該PSMA靶向抗體菲澤妥單抗、macropa-菲澤妥單抗(非放射性標記ACC)及非放射性標記同型對照ACC對PSMA表現LNCaP前列腺癌細胞之結合藉由流動式細胞測量術來測定(圖9)。 內化
在2小時培養後使用LNCaP細胞測定 225Ac-菲澤妥單抗之內化。使用γ計數器(Wizard 2470，PerkinElmer)測定錒-225之細胞結合且內化之活性(圖10)。 細胞細胞毒性
在PSMA表現前列腺癌細胞系C4-2及MDA-PCa-2b中測定Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR=5.7及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR=12.7之體外細胞毒性。將細胞以適宜細胞密度接種於細胞培養基(分別為RPMI/10% FBS/1% HEPES/1% MEM NEAA/1% NaPyruvate/1% L-麩醯胺酸及BRFF-HPC1/20% FBS)中。在接種後一天，在2 MBq/mg之比活性下之該Ac-225標記化合物平行於在相同條件下放射性標記之相關陰性同型對照進行滴定。將細胞暴露於放射性配體兩小時。六天後使用CellTiterGlo (Promega)確定細胞存活率且在EnVision板式讀取器上測定冷光。在C4-2細胞中，對於Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 5.7及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 12.7，該等IC50值分別為0.09、0.15及0.29 kBq/ml (圖9)，及在MDA-PCa-2b細胞中，對於Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 5.7及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗CAR 12.7，分別為0.05、0.09及0.2 kBq/ml (圖10)。在C4-2細胞中，Ac-225-macropa-同型物之IC50值為約256 kBq/ml，及在MDA-PCa-2b細胞中，為3 kBq/ml (圖12+13)。 細胞細胞毒性
在表現不同水平之PSMA之前列腺癌細胞系中測定Ac-225-macropa-菲澤妥單抗之體外細胞毒性。將PC-3、DU-145、22Rv1、C4-2及LNCaP細胞分別以適宜細胞密度接種於以下細胞培養基中：DMEM/ Ham's F12 + 10% FCS；DMEM + 10% FCS；RPMI + 10% FCS；DMEM/ Ham's F12 + 10% FCS + 胰島素(人類) (5 µg/ml，Sigma #I9278)、運鐵蛋白(人類)；(最終：5 µg/ml)、D-生物素(0.25 µg/ml最終，Sigma:B4639)、腺嘌呤(最終：25 µg/ml，Sigma：A9795)、L-3,3',5-三碘甲狀腺素、鈉鹽，Sigma: T6397 (13.6 pg/ml最終)；RPMI + 20% FCS，由對應供應商所建議。在接種後一天，使在2 MBq/mg之比活性下之Ac-225-macropa-菲澤妥單抗平行於在相同條件下放射性標記之相關陰性同型對照進行滴定。將細胞處理5天且隨後使用CellTiterGlo (Promega)確定細胞存活率。在LNCaP、C4-2及22R1細胞中觀察到強細胞毒性，在PMSA陰性PC-3及DU-145細胞中細胞毒性很小(圖14)。 Ac-225-macropa-菲澤妥單抗之生物分佈研究
在PSMA-表現前列腺癌異種移植模型MDA PCa 2b中研究Ac-225-macropa-菲澤妥單抗之生物分佈。使雌性RJ:NMRI-Foxn1nu/nu小鼠經皮下植入睪固酮丸粒且在右脇接種1 × 10 6個MDA PCa 2b細胞。在熱給予前24小時用200 µg/小鼠之非特異性IgG2a抗體預處理動物。用300 kBq/kg Ac-225-macropa-菲澤妥單抗IV以0.75 mg/kg之總蛋白質劑量處理動物。在獨立的體內研究中，將該異種移植模型MDA PCa 2b用250 kBq/kg Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗以0.14 mg/kg之蛋白質劑量處理。在兩項研究中，在處理後72、168、336及504小時殺死動物且測定血液、腫瘤、肝臟、腎臟、脾臟及股骨中之225Ac。對於經Ac-225-macropa-菲澤妥單抗處理之動物，該數據指示強烈及持續之腫瘤積聚，而在正常器官中之積聚隨著時間推移的清除一般低且短暫。與經225Ac-DOTA-菲澤妥單抗處理之動物相比，看到自骨骼之改良之清除率、於肝臟中較低及隨時間降低之放射性及脾臟中之較少吸收(圖15)。此等數據可解釋為與DOTA相比，對於macropa，225Ac之體內複合穩定性改良。 比較Ac-225-macropa-菲澤妥單抗及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗之體內功效研究
使該等化合物Ac-225-macropa-菲澤妥單抗、Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗及同型物-macropa經225Ac標記。使經異種移植C4-2前列腺癌細胞之小鼠藉由300 kBq/kg之單次劑量IV以0.14 mg/kg之總抗體劑量處理。如圖16 (A)及(B)中所呈現，與Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗相比，看到Ac-225-macropa-菲澤妥單抗之更高抗腫瘤活性。對於所有靶向處理組，體重損失小於10%。在實驗結束時藉由WBC計數測定於造血系統上之效應(圖16 (C))。 免疫組織化學
在用120 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗(0.75 mg/kg之總抗體劑量)處理後24或96小時收穫C4-2腫瘤，且在石蠟包埋C4-2腫瘤(n = 3)之組織切片中評估磷酸化組蛋白蛋白質H2AX (γ-H2AX)之水平。藉由免疫組織化學測定的( 17A)未經處理之C4-2腫瘤及經100 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗處理( 17B)一天或( 17C)四天之C4-2腫瘤中之γH2AX表現之實例。比例尺指示200 μm。 17D.利用HSA軟體定量的未經處理之C4-2腫瘤(顯示於小圖A中)及經100 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗(n = 3)處理1天(顯示於小圖B中)或4天(顯示於小圖C中)之C4-2腫瘤中之γH2AX表現(圖17 A、B、C、D)。 LNCaP及KUCaP-1前列腺癌模型中 225Ac-菲澤妥單抗之體內抗腫瘤功效。
在LNCaP前列腺癌模型中評估225Ac-菲澤妥單抗之抗腫瘤功效：使雄性SCID小鼠(6週，22 g，Janvier Labs)經皮下植入睪固酮丸粒(12.5 mg，4 mm)且1至3天後，皮下接種5X10 6個LNCaP細胞。當腫瘤達到160 mm 3之平均尺寸時，將小鼠隨機分組(n = 10隻小鼠/組)，且兩天後，用媒劑或單次i.v.劑量之 225Ac-菲澤妥單抗(70、125或250 kBq/kg，總抗體劑量0.75 mg/kg)處理。在腫瘤細胞接種後第112天終止該研究。在該LNCaP模型中， 225Ac-菲澤妥單抗在70、125及250 kBq/kg (單次劑量)下顯示極強抗腫瘤功效，且在所有測試劑量下T/C 體積(處理組/對照組)比均為0.00 (圖18)。
在KUCaP-1功效研究中，使雄性scid/scid小鼠(8週，22 g，Janvier Labs)經皮下植入5x5x5 mm KUCaP-1腫瘤片段。當腫瘤達到220 mm 3之平均尺寸時，將小鼠隨機分組( n= 9至10隻小鼠/組)，且第二天，藉由媒劑或單次i.v.注射同型對照(300 kBq/kg，總抗體劑量0.14 mg/kg)或70、150或300 kBq/kg (總抗體劑量0.75 mg/kg)之 225Ac-菲澤妥單抗處理。此外，對於一個處理組，在用單次劑量之300 kBq/kg 225Ac- pelgi處理之前，允許腫瘤達到470 mm 3之尺寸。在腫瘤細胞接種後第72天終止該研究。在患者衍生之KuCaP模型中，75、150及300 kBq/kg (單次劑量)之 225Ac-菲澤妥單抗顯示劑量依賴性功效，獲得分別為0.55、0.44及0.26之T/C 體積比(圖19+21)。值得注意的是，單次劑量之300 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗甚至在具有大型腫瘤的小鼠中誘導腫瘤消退(圖20)。 包含TLX592/J592之組織靶向化合物  藉由尺寸排除層析及質譜法之ACC表徵
藉由LCMS測定ACC之CAR。對於Ac225-Macropa-J592 CAR為0.75及對於Ac225-DOTA-J592 CAR為6.7。 Macropa-NCS-J592
將6-[[16-[(6-羧基-2-吡啶基)甲基]-1,4,10,13-四氧雜-7,16-二氮雜環十八烷-7-基]甲基]-4-[2-(4-異硫氰基苯基)乙氧基]吡啶-2-羧酸於DMA中溶解至10 mg/ml。將抗-J592抗體於PBS中溶解至10 mg/mL且用1M碳酸鹽緩衝液將pH調整至9。將螯合劑及抗體混合且在熱混合器上在RT下在350 rpm下振盪培養一小時。藉由FPLC (管柱：Superdex® 200 Increase 10/300 GL；運行緩衝液：6 mM檸檬酸鹽/10 mM組胺酸/10 mM甘胺酸/100 mM NaCl；流速：1 mL/min；偵測：UV 214/254 nm)純化產物。濃度及單體純度藉由SEC-UV測定，CAR藉由SEC-MS，使用正電噴霧電離及以下方程式測定：CAR=[(A*An)/A]0，A=最大熵包絡(envelope)之全部信號之強度，An=含有螯合劑之最大熵包絡之信號。CAR經測定為0.8。 DOTA-NCS-J592
將p-SCN-Bn-DOTA (Macrocyclics，B-205)及抗-J592抗體於PBS中溶解至10 mg/mL。利用1M碳酸鹽緩衝液將抗體之pH調整至9。將p-SCN-Bn-DOTA添加至該抗體且將該混合物在熱混合器上振盪培養，在RT下在350 rpm下在熱混合器上振盪培養一小時。藉由FPLC (管柱：Superdex® 200 Increase 10/300 GL；運行緩衝液：6 mM檸檬酸鹽/10 mM組胺酸/10 mM甘胺酸/100 mM NaCl；流速：1 mL/min；偵測：UV 280 nm)純化該結合物。藉由SEC-UV測定經組合之DOTA-抗體流份之濃度及單體純度。藉由SEC-MS 使用正電噴霧電離及以下方程式測定CAR：CAR=[(A*An)/A]0，A=最大熵包絡之全部信號之強度，An=含有螯合劑之最大熵包絡之信號。CAR經測定為6.7。 緩衝液交換
使用Amicon Ultra-4 30K (Millipore，目錄號UFC803096，批號R4JA84392)來緩衝交換J592-DOTA及J592-Macropa。用3.5 mL 0.1M乙酸鹽緩衝液(ref J145-046，21Nov22AHJ)沖洗Amicon® Ultra-4裝置中之超濾膜。在7000 × g下旋轉2分鐘。移除乙酸鹽緩衝液。添加樣品及3.5 mL 0.1M乙酸鹽緩衝液，7000 × g旋轉10分鐘用於緩衝液交換。回收該等樣品且稀釋於0.5 mL 0.1M乙酸鹽緩衝液中。藉由SE-HPLC藉由比較來自先前pre-Amicon樣品之UV-信號與已知濃度來測定新濃度。 放射性標記
用在2 MBq/mg之比活性下之Ac-225放射性標記Macropa-J592 CAR 0.75及DOTA-J592 CAR 6.7且用0.1 M乙酸鹽緩衝液pH 5稀釋至1.5 kBq/µL之放射性濃度。針對J592-Macropa，在室溫下培養該混合物一小時同時在加熱塊上在60℃下培養DOTA-J592一小時。藉由即時薄層層析使用檸檬酸鹽緩衝液進行溶離來測定TAC之RCP，針對DOTA重複三次且針對Macropa一次。未標記之Ac-225在溶劑前鋒溶離而經放射性標記之化合物則未自施覆部位移動。用HPGe偵測器(DSPEC-50，Ortec)進行放射性之測定。在放射性標記後至少6小時測定活性以允許子核素與Ac-225處於平衡狀態。分析在0小時時及在室溫下儲存96小時後的兩個時間點。針對Ac-225-macropa-J592及Ac225-DOTA-J592，該等樣品之RCP (定義為[(施覆部位之放射性)/(條上之總放射性)] x 100)分別為99.9% (0小時)及99.8% (96小時)；99.5% ± 0.06 (0小時)及96.0% ± 0.35 (96小時)。此數據顯示，在t = 96小時時，Ac-225-macropa-J592釋放比Ac225-DOTA-J592少之225Ac且因此對於放射性核素洩露更為穩定。 TAC之尺寸排除層析
藉由SEC測定TAC之純度。該方法將更高聚集體、二聚體及片段與ACC單體分離。使用在30℃下操作的Acquity UPLC Protein BEH SEC，1.7 µm，200Å，4.6 x 300 mm管柱進行分離。移動相為200 mM乙酸銨及300 mM NaCl，其含有10% 2-丙醇及0.1 mM DCTA。流速為0.3 mL/min，且在UV 280 nm下偵測ACC。在Agilent 1200系列HPLC上利用40 µL注射液進行分析。 表3. TAC之純度，藉由SEC-UV
   面積% (UV)
0小時 96小時
聚集體 二聚體 單體 聚集體 二聚體 單體 片段化
Ac-225-Macropa -NCS-J592 0.0 0.1 99.9 0.7 7.7 91.4 0.2
Ac-225-DOTA -NCS-J592 0.8 4.2 99.8 2.5 12.0 85.7 0.2
表3之結果顯示當與其DOTA對應物相比時式(I)之組織靶向化合物之穩定性增加，藉由在96小時後存在較低量之副產物(亦即聚集體及二聚體)所指示。 iTLC (RFC)
進行游離螯合劑iTLC以測定隨時間推移結合物溶液中游離螯合劑之量。簡言之，切割iTLC.SG.板以獲得12 cm x 1 cm之條。分別在1 cm、4 cm及10 cm處標記為施覆點、切割點及運行結束點。將2 µL TAC樣品施覆於n = 3 iTLC條上以用新鮮製備的1:1 1M乙酸銨/100%甲醇移動相進行溶離。使該等條在LSC小瓶中之3 mL移動相中展開。當液體前鋒已到達標記終點時，將其自小瓶移出且放置在鋁箔上乾燥。在6小時後讀取該等樣品，以獲得樣品中之長期平衡(secular equilibrium)。使用來自Eckert & Siegler之iTLC掃描器AR-2000測定iTLC條，每個條在1000伏特下1秒。
圖26顯示當與其DOTA對應物相比時，式(I)之組織靶向化合物針對去複合之穩定性增加，藉由在96小時後存在較低量之游離螯合劑所指示。 225Ac-菲澤妥單抗與達洛魯胺之組合研究
在VCaP及22Rv1前列腺癌細胞中研究達洛魯胺及225Ac-菲澤妥單抗於體外對PSMA mRNA及蛋白質表現之效應。為了評估PSMA蛋白質表現，用0.08至5 μM達洛魯胺處理VCaP及22Rv1細胞7天且使用鼠類PSMA特異性單株抗體(mAb) J591 (內部製備)藉由流動式細胞測量術測定PSMA表現。為了評估FOLH1基因表現，用2 μM達洛魯胺及/或0.15 kBq/mL 225Ac-菲澤妥單抗處理22Rv1細胞24或48小時。利用RNeasy Plus Mini套組(Qiagen)萃取RNA，使用SuperScript IV VILO預混液(Master Mix) (Invitrogen)轉錄至cDNA，且藉由qPCR分析。
為了評估225Ac-菲澤妥單抗及達洛魯胺在體外之組合效應，用達洛魯胺、225Ac-菲澤妥單抗或其組合處理VCaP及22Rv1細胞5天。利用CellTiter-Glo® (Promega)確定細胞存活率。根據Chou-Talalay (8)之中位數效應模型計算組合指數(CI)，CI ＜ 0.9定義為協同效應。
在體外，達洛魯胺誘導雄激素依賴性VCaP及雄激素依賴性22Rv1細胞中PSMA分別大於10倍及2倍之表現(圖23)。
達洛魯胺及225Ac-菲澤妥單抗之組合處理顯示48小時處理後22Rv1細胞中之FOLH1基因表現增加76%(圖23)。利用各別單藥療法均未觀察到增加。
225Ac-菲澤妥單抗單藥療法及225Ac-菲澤妥單抗及達洛魯胺組合處理增加CDKN1A之RNA表現(圖23)且減少22Rv1細胞中XRCC2之表現 (圖23)。
達洛魯胺與225Ac-菲澤妥單抗組合之功效在VCaP及22Rv1 細胞中係協同的，其組合指數分別為0.34及0.38 (圖23)。
達洛魯胺增強PSMA表現且將其與225Ac-菲澤妥單抗組合導致於前列腺癌細胞中之功效增加。
藉由免疫組織化學(IHC)使用鼠類PSMA特異性單株抗體GCP-04 (Novus Biologicals)在福馬林固定石蠟包埋(FFPE)組織切片中測定經分離、未經治療的22Rv1及ST1273腫瘤中之PSMA表現。
在雄激素依賴性ST1273及雄激素獨立性22Rv1前列腺癌模型中在小鼠中研究225Ac-菲澤妥單抗與達洛魯胺組合之體內功效。
在ST1273研究中，將雌性NMRI裸小鼠(n=10隻/組)植入ST1273患者衍生之腫瘤片段，且在19天後，用媒劑(PEG400，丙二醇、葡萄糖；v/v % 50:30:20)、225Ac-菲澤妥單抗(75或150 kBq/kg，單次劑量，i.v.)、達洛魯胺(100 mg/kg，每天兩次(BID)持續34天，p.o.)或其組合進行處理。
在22Rv1研究中，向雄性NMRI裸小鼠(n=10隻/組)接種22Rv1細胞，且在15天後，用媒劑(乙酸鹽緩衝液)、225Ac-菲澤妥單抗(75 kBq/kg，單次劑量，i.v.；總抗體劑量75 mg/kg)、達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.)或其組合進行處理。
在經媒劑或達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o)處理18天之22Rv1載前列腺腫瘤雄性裸(nu/nu)小鼠中評估PSMA蛋白質之體內表現。提取(n=2)22Rv1腫瘤且使用J591抗體藉由流動式細胞測量術分析解離的腫瘤細胞。 將 225Ac- 菲澤妥單抗與達洛魯胺組合增強在雄激素依賴性 ST1273 前列腺癌 PDX 模型中之治療功效
在PSMA-表現(圖24A)、雄激素依賴性、患者衍生之ST1273模型中，單次i.v.注射75 或150 kBq/kg之225Ac-菲澤妥單抗導致治療/對照(T/C)比分別為0.22及0.05之高抗腫瘤功效。在100 mg/kg (BID，p.o.)下之達洛魯胺單藥療法顯示良好抗腫瘤功效，其T/C比為0.29 (圖24B至C，表4)。
值得注意的是，75或150 kBq/kg之225Ac-菲澤妥單抗與達洛魯胺(100 mg/kg)之組合導致兩種劑量之累加抗腫瘤功效，T/C比為0.01 (圖24B至C，表4)。此外，在單次225Ac-菲澤妥單抗注射後100天，5/10及6/10小鼠無腫瘤。
所有治療均耐受良好，藉由整個研究中之穩定體重所證實(圖24D)。
表4 .ST1273及22Rv1前列腺癌模型中 225Ac-菲澤妥單抗及達洛魯胺之體內功效。
模型 治療 T/C
ST1273    第 30 天
   媒劑 1.00
   225Ac-菲澤妥單抗(75 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.22 ***
   225Ac-菲澤妥單抗(150 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.05 ***
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) 0.29 ***
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) + 225Ac-菲澤妥單抗(75 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.01 ***， #
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) + 225Ac-菲澤妥單抗(150 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.01 ***， #
     
22Rv1    在第 16 天時
   媒劑 1.00
   同型對照(300 kBq/kg) 0.77
   225Ac-菲澤妥單抗(75 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.71
   225Ac-菲澤妥單抗(150 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.59 **
   225Ac-菲澤妥單抗(300 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.41 ***
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) 0.78
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) + 225Ac-菲澤妥單抗(75 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.38 ***
   達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.) + 225Ac-菲澤妥單抗(150 kBq/kg，單次劑量，i.v.) 0.20 ***， ###， §
T/C，治療/對照比，自腫瘤體積確定。 使用單向ANOVA，接著塔基檢驗，進行統計分析。 **，p＜0.01；***，p＜0.001，相對媒劑。 #，p＜0.05； ###，p＜0.001，相對達洛魯胺單藥療法。 §，p＜0.05，相對各別 225Ac-菲澤妥單抗單藥療法。 225Ac- 菲澤妥單抗之抗腫瘤功效亦在雄激素獨立性 22Rv1 前列腺癌模型中藉由達洛魯胺增強
在PSMA-表現(圖25A)、雄激素獨立性細胞系衍生之22Rv1模型中，單次i.v.劑量為150 kBq/kg之225Ac-菲澤妥單抗顯示T/C比為0.59之抗腫瘤功效(圖25B至C，表4)。達洛魯胺(100 mg/kg，p.o.，BID)單藥療法無效，藉由在第16天時T/C比為0.78證實。
值得注意的是，225Ac-菲澤妥單抗(150 kBq/kg)及達洛魯胺之組合導致功效增強，T/C比為0.20 (圖25B至C，表4)。
所有治療均耐受良好，藉由研究過程中之穩定體重所證實(圖25D)。
分離的22Rv1腫瘤之流動式細胞測量分析顯示與媒劑相比在達洛魯胺治療後PSMA表現增加50倍(圖25E)。
在雄激素獨立性前列腺癌模型22Rv1中評估 225Ac-pelgi與達洛魯胺組合之體內抗腫瘤功效。自在22Rv1腫瘤細胞接種後第15天開始藉由單次注射 225Ac-pelgi (75或150 kBq/kg，i.v.，總蛋白質劑量0.75 mg/kg)及/或達洛魯胺(100 mg/kg，BID, p.o.)來治療雄性裸小鼠(n = 10至12隻小鼠/組，裸(nu/nu))。與兩個單藥療法組相比，在組合組中抗腫瘤功效顯著改良(圖22)。
圖1. 菲澤妥單抗(IgG1重鏈cDNA基因)之重鏈核苷酸序列(SEQ ID NO. 1)及重鏈推導的胺基酸序列(SEQ ID NO. 2)。
圖2. 菲澤妥單抗(κ輕鏈cDNA基因)之輕鏈核苷酸序列(SEQ ID NO. 3)及輕鏈推導的胺基酸序列(SEQ ID NO. 4)。
圖3. 菲澤妥單抗之CDR重鏈序列(SEQ ID NO. 5、SEQ ID NO. 6及SEQ ID NO. 7)及CDR輕鏈序列(SEQ ID NO. 8、SEQ ID NO. 9及SEQ ID NO. 10)。
圖4. macropa-菲澤妥單抗ACC (抗體-螯合劑結合物) (CAR 0.8)之電噴霧質譜
圖5. DOTA-菲澤妥單抗ACC (抗體-螯合劑結合物) (CAR 5.7)之電噴霧質譜
圖6. DOTA-菲澤妥單抗ACC (抗體-螯合劑結合物) (CAR 12.7)之電噴霧質譜
圖7. 靶向錒結合物(TAC) Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)、Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 5.7)及Ac225-Macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)之尺寸排除層析。
圖8.定義為與錒-225-標記DOTA-J591相比結合至 225Ac-菲澤妥單抗之錒-225之量的放射化學純度，藉由即時薄層層析(iTLC)測定。
圖9. PSMA靶向抗體菲澤妥單抗、macropa-菲澤妥單抗(非放射性標記ACC)及非放射性標記同型對照ACC與PSMA表現LNCaP前列腺癌細胞之結合，藉由流動式細胞測量術測定。
圖10. LNCaP前列腺癌細胞中 225Ac-菲澤妥單抗之內化。
圖11. Ac225-Macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)、Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 5.7)及Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)之免疫反應性分數(IRF)。
圖12. Ac225-Macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)、Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 5.7)及Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)針對PSMA-表現前列腺癌細胞系C4-2之細胞細胞毒性。
圖13. Ac225-Macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)、Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 5.7)及Ac225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)針對PSMA表現前列腺癌細胞系MDA-PCa-2b之細胞細胞毒性。
圖14. 不同前列腺癌細胞系中Ac225-Macropa-菲澤妥單抗之細胞細胞毒性。
圖15. 前列腺癌異種移植模型MDA-PCA-2b中不同組織中Ac-225-macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)之生物分佈。動物經給予總抗體劑量0.75 mg/kg，250 kBq/kg單次劑量i.v.。
圖16. (a)前列腺癌異種移植模型C4-2中Balb/c雄性裸小鼠(單次i.v.注射300 kBq/kg，0.14 mg/kg總抗體)中Ac-225-macropa-菲澤妥單抗(CAR 0.8)及Ac-225-DOTA-菲澤妥單抗(CAR 12.7)之抗腫瘤活性 (b)體重變化(單位為百分比，%) (c)在實驗結束時之白血球計數。
圖17. C4-2模型中 225Ac-菲澤妥單抗之體內作用模式。藉由免疫組織化學測定的( A)未經處理之C4-2腫瘤及經100 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗處理( B)一天或( C)四天之C4-2腫瘤中之γH2AX表現之實例。比例尺表示200 μm。 D.利用HSA軟體定量的未經處理之C4-2腫瘤(顯示於小圖A中)及經100 kBq/kg 225Ac-菲澤妥單抗(n = 3)處理1天(顯示於小圖B中)或4天(顯示於小圖C中)之C4-2腫瘤中之γH2AX表現。
圖18. 經媒劑或 225Ac-菲澤妥單抗(70、125或250 kBq/kg；單次劑量，i.v.；0.75 mg/kg之總抗體劑量)處理之雄性SCID小鼠(n = 10/組)中LNCaP腫瘤之生長曲線。使用雙向ANOVA，接著是塔基檢驗(Tukey’s test)，進行統計分析。***， P＜0.001，相對媒劑(第0天至第40天)。
圖19. 經同型對照(300 kBq/kg；單次劑量，i.v.；總抗體劑量0.14 mg/kg)或 225Ac-菲澤妥單抗(70、150或300 kBq/kg；單次劑量，i.v.；總抗體劑量0.75 mg/kg)處理之雄性scid/scid小鼠(n = 9至10/組)中KUCaP-1腫瘤之生長曲線。使用雙向ANOVA，接著是塔基檢驗，進行統計分析。***， P＜0.001，相對媒劑(第0天至第21天)；###， P＜0.001，相對同型對照(第0天至第21天)；§§， P＜0.01；§§§， P＜0.001，相對 225Ac-菲澤妥單抗，300 kBq/kg (第0天至第21天)；$$$， P＜0.001，相對 225Ac-菲澤妥單抗，150 kBq/kg (第0天至第21天)。
圖20. 經媒劑或 225Ac-菲澤妥單抗(300 kBq/kg；單次劑量，i.v.；總抗體劑量0.75 mg/kg)處理之雄性scid/scid小鼠(n = 9至10/組)中大型KUCaP-1腫瘤(在治療開始時之平均體積470 mm 3)之生長曲線。
圖21. 在同型對照組的最後一天(第21天)時描述於(E)中之KUCaP-1腫瘤之體積。使用雙向ANOVA，接著是塔基檢驗，進行統計分析。***， P＜0.001，相對媒劑(第0天至第21天)；###， P＜0.001，相對同型對照(第0天至第21天)；§§， P＜0.01；§§§， P＜0.001，相對 225Ac-菲澤妥單抗，300 kBq/kg (第0天至第21天)；$$$， P＜0.001，相對 225Ac-菲澤妥單抗，150 kBq/kg (第0天至第21天)。
圖22. 經媒劑、達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.)及/或225Ac-菲澤妥單抗75 (A，上部小圖)或150 kBq/kg (B，下部小圖)，單次劑量，i.v.，總蛋白質劑量0.75 mg/kg)治療之22Rv1腫瘤之生長曲線。
圖23. 達洛魯胺增強PSMA表現且將其與225Ac-菲澤妥單抗組合導致在前列腺癌細胞中之增加功效。
A.至B. 經遞增濃度之達洛魯胺處理7天之(A) VCaP及(B) 22Rv1細胞中之細胞表面PSMA表現，藉由流動式細胞測量術測定。DMSO用作基線對照且用虛線描繪。
C.至H. 在利用2 μM達洛魯胺、0.15 kBq/mL 225Ac-菲澤妥單抗或其組合之24小時或48小時處理後22Rv1細胞中(C至D) FOLH1、(E至F) CDKN1A及(G至H) XRCC2之RNA表現，藉由RT-qPCR測定。使用單向方差分析(ANOVA)利用塔基多重比較檢驗(Tukey’s multiple comparisons test)及校正進行統計分析。*，p＜0.05；**，p＜0.01，與未經處理之細胞相比。
I.至J. 達洛魯胺及225Ac-菲澤妥單抗於(E) VCaP及(F) 22Rv1細胞之增殖上之組合效應之交互效應圖。CI，組合指數
圖24. ST1273前列腺癌PDX模型中225Ac-菲澤妥單抗及達洛魯胺之抗腫瘤功效。
A. ST1273腫瘤異種移植(未經處理)中之PSMA表現，藉由使用PSMA抗體GCP-04之IHC偵測。較深的顏色指示PSMA染色。比例尺50 μm。
B. 經媒劑、225Ac-菲澤妥單抗(單次劑量，75或150 kBq/kg，i.v.)、達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.)或其組合處理之小鼠中ST1273腫瘤之生長。
C. 在第30天時顯示於(B)中之個別ST1273腫瘤之體積。使用單向ANOVA，接著是塔基檢驗，進行統計分析。***，p＜0.001，相對媒劑。#，p＜0.05，相對達洛魯胺單藥療法。
D. 在研究過程中之顯示於(B)中之小鼠之相對體重變化。
圖25. 22Rv1前列腺癌模型中225Ac-菲澤妥單抗及達洛魯胺之抗腫瘤功效。
A. 22Rv1腫瘤異種移植(未經處理)中之PSMA表現，藉由使用PSMA抗體GCP-04之IHC偵測。較深的顏色指示PSMA染色。比例尺50 μm。
B. 經媒劑、同型對照(300 mg/kg，單次劑量，i.v.)、225Ac-菲澤妥單抗(75、150或300 kBq/kg，單次劑量，i.v.)、達洛魯胺(100 mg/kg，BID，p.o.)或其組合處理之小鼠中之22Rv1腫瘤之生長。
C. 在第16天時顯示於(B)中之個別22Rv1腫瘤之體積。使用單向ANOVA，接著是塔基檢驗，進行統計分析。**，p＜0.01；***，p＜0.001，相對媒劑。###，p＜0.001，相對達洛魯胺單藥療法。§，p＜0.05，相對相應的225Ac-菲澤妥單抗單藥療法。
D. 在研究過程中之顯示於(B)中之小鼠之相對體重變化。
E. 自在殺死前經媒劑或達洛魯胺處理18天之帶有22Rv1腫瘤小鼠(n=2)獲得之解離型22Rv1癌細胞中之PSMA表現，藉由流動式細胞測量術測定。
圖26. 顯示在t = 0小時時及在96小時後之放射性標記游離螯合劑(RFC)%之Ac-225-Macropa-J592及Ac-225-DOTA-J592放射性標記游離螯合劑iTLC。
TW202400162A_112118292_SEQL.xml

Claims (34)

  1. 一種式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
  2. 如請求項1之式(I)之組織靶向化合物，其中[Ab]為抗-PSMA-單株抗體菲澤妥單抗(Pelgifatamab)或其抗原結合片段、抗-PSMA-單株抗體J591或其抗原結合片段，或抗-PSMA-單株抗體TLX592或其抗原結合片段。
  3. 如請求項1之式(I)之組織靶向化合物，其中[Ab]為抗-PSMA-單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
  4. 如請求項1至3中任一項之式(I)之組織靶向化合物，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.7之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9及SEQ ID NO.10之三個CDR輕鏈序列。
  5. 如請求項1或2中任一項之式(I)之組織靶向化合物，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體J591或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14及SEQ ID NO.15之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17及SEQ ID NO.18之三個CDR輕鏈序列。
  6. 如請求項1或2中任一項之式(I)之組織靶向化合物，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體TLX592或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO. 21、SEQ ID NO. 22及SEQ ID NO. 23之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO. 24、SEQ ID NO. 25及SEQ ID NO. 26之三個CDR輕鏈序列。
  7. 一種用於製備式(I)之組織靶向化合物之方法 其中[Ab]為對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段偶聯，及 (ii)    使所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水溶液接觸。
  8. 如請求項7之方法，其中[Ab]為抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與該抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段經由該單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基偶聯，及 (ii)    使所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水溶液接觸。
  9. 如請求項7之方法，其中[Ab]為抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段， 該方法包括 (i)     使式(II)之螯合部分 與該抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段經由該單株抗體或其抗原結合片段之離胺酸殘基偶聯，及 (ii)    使所得產物與包含至少一種發射α之錒同位素之離子之水溶液接觸， 其中該抗-PSMA抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段包含至少根據SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.7之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9及SEQ ID NO.10之三個CDR輕鏈序列。
  10. 一種式(III)之組織靶向螯合劑 其中[Ab]為對PSMA具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段。
  11. 如請求項10之式(III)之組織靶向螯合劑，其中[Ab]為抗-PSMA-單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段、抗-PSMA-單株抗體J591或其抗原結合片段，或抗-PSMA-單株抗體TLX592或其抗原結合片段。
  12. 如請求項10之式(III)之組織靶向螯合劑，其中[Ab]為抗-PSMA-單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段。
  13. 如請求項10至12中任一項之式(III)之組織靶向螯合劑，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.7之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9及SEQ ID NO.10之三個CDR輕鏈序列。
  14. 如請求項10或11中任一項之式(III)之組織靶向螯合劑，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體J591或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14及SEQ ID NO.15之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.17及SEQ ID NO.18之三個CDR輕鏈序列。
  15. 如請求項10或11中任一項之式(III)之組織靶向螯合劑，其中[Ab]為抗-PSMA-抗體TLX592或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO. 21、SEQ ID NO. 22及SEQ ID NO. 23之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO. 24、SEQ ID NO. 25及SEQ ID NO. 26之三個CDR輕鏈序列。
  16. 一種如請求項10至15中任一項之式(III)之組織靶向螯合劑於製備如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物之用途。
  17. 一種組合，其包含 (i)     式(I)之組織靶向化合物 其中[Ab]為對前列腺特異性膜抗原(PSMA)具有結合親和力之單株抗體或其抗原結合片段，及 (ii)    藥劑，其選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素(antigonadotropin)、PARP抑制劑、ATR抑制劑、ATM抑制劑、DNA-PK抑制劑、AKT抑制劑、Pi3K抑制劑、PSMA靶向β發射體、免疫檢查點抑制劑、α發射體、疫苗及化療劑。
  18. 如請求項17之組合，其中[Ab]為抗-PSMA單株抗體菲澤妥單抗或其抗原結合片段，其包含至少根據SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.7之三個CDR重鏈序列及根據SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9及SEQ ID NO.10之三個CDR輕鏈序列。
  19. 如請求項17或18中任一項之組合，其中該藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑、抗促性腺激素、PARP抑制劑、PSMA靶向β發射體、α發射體、疫苗及化療劑。
  20. 如請求項17至19中任一項之組合，其中該藥劑係選自非類固醇抗雄激素、類固醇抗雄激素、雄激素合成抑制劑及抗促性腺激素。
  21. 如請求項17至20中任一項之組合，其中該藥劑係選自：非類固醇抗雄激素，選自由達洛魯胺(darolutamide)、比卡魯胺(bicalutamide)、恩雜魯胺(enzalutamide)、阿帕魯胺(apalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)及托匹魯胺(topilutamide)組成之群；類固醇抗雄激素，選自由乙酸環丙孕酮(Cyproterone acetate)、烯丙雌醇(Allylestrenol)、乙酸氯地孕酮(Chlormadinone acetate)、乙酸地馬孕酮(Delmadinone acetate)、己酸孕諾酮(Gestonorone caproate)、己酸羥基孕酮(Hydroxyprogesterone caproate)、乙酸甲羥孕酮(Medroxyprogesterone acetate)、乙酸甲地孕酮(Megestrol acetate)、乙酸奧沙特隆(Osaterone acetate)、奧生多龍(Oxendolone)及螺內酯(Spironolactone)組成之群；雄激素合成抑制劑，選自由酮康唑(ketoconazole)、阿比特龍(abiraterone)、氨魯米特(aminoglutethimide)、戈舍瑞林(goserelin)及西維諾尼(seviteronel)組成之群；抗促性腺激素，選自由阿巴瑞克(Abarelix)、達那唑(Danazol)、孕三烯酮(Gestrinone)、對羥苯丙酮(Paroxypropione)、西曲瑞克(Cetrorelix)、地加瑞克(Degarelix)、惡拉戈利(Elagolix)、加尼瑞克(Ganirelix)、利扎戈利(Linzagolix)及瑞盧戈利(Relugolix)組成之群；及PARP抑制劑，選自由奧拉帕尼(Olaparib)、蘆卡帕尼(Rucaparib)、維利帕尼(Veliparib)、尼拉帕尼(Niraparib)、他拉唑帕尼(Talazoparib)、帕米帕尼(Pamiparib)、CEP 9722、E7016及依尼帕尼(Iniparib)組成之群。
  22. 如請求項17至21中任一項之組合，其中該藥劑係選自：非類固醇抗雄激素，選自由達洛魯胺、比卡魯胺、恩雜魯胺、阿帕魯胺、氟他胺、尼魯米特及托匹魯胺組成之群；類固醇抗雄激素，選自由乙酸環丙孕酮、烯丙雌醇、乙酸氯地孕酮、乙酸地馬孕酮、己酸孕諾酮、己酸羥基孕酮、乙酸甲羥孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸奧沙特隆、奧生多龍及螺內酯組成之群；雄激素合成抑制劑，選自由酮康唑、阿比特龍、氨魯米特、戈舍瑞林及西維諾尼組成之群；及抗促性腺激素，選自由阿巴瑞克、達那唑、孕三烯酮、對羥苯丙酮、西曲瑞克、地加瑞克、惡拉戈利、加尼瑞克、利扎戈利及瑞盧戈利組成之群。
  23. 如請求項17至22中任一項之組合，其中該藥劑係選自非類固醇抗雄激素達洛魯胺、類固醇抗雄激素乙酸環丙孕酮、雄激素合成抑制劑阿比特龍或戈舍瑞林，及抗促性腺激素地加瑞克或瑞盧戈利。
  24. 如請求項17至23中任一項之組合，其中該藥劑為非類固醇抗雄激素達洛魯胺。
  25. 如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合，其用於治療疾病。
  26. 如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合，其用於如請求項25之用途，其中該疾病之特徵在於前列腺特異性膜抗原(PSMA)之過度表現。
  27. 如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合，其用於如請求項25或26中任一項之用途，其中該疾病為癌症，較佳係前列腺癌。
  28. 如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合，其用於治療疾病，較佳地其中該疾病為過度增生性疾病，更佳地其中該過度增生性疾病為癌症。
  29. 一種如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合於治療疾病之用途，較佳地其中該疾病為過度增生性疾病，更佳地其中該過度增生性疾病為癌症。
  30. 一種如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合於製備用於治療疾病之藥物之用途，較佳地其中該疾病為過度增生性疾病，更佳地其中該過度增生性疾病為癌症。
  31. 一種治療疾病之方法，較佳地其中該疾病為過度增生性疾病更佳地，其中該過度增生性疾病為癌症，該方法包括對該個體投與治療有效量之如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物或如請求項17至24中任一項之組合。
  32. 如請求項25至31中任一項之組織靶向化合物、組合、用途或方法，其中該疾病為前列腺癌。
  33. 一種組合物，其含有如請求項17至24中任一項之組合以及醫藥上可接受之成分。
  34. 一種套組，其包括以下之組合 如請求項1至6中任一項之式(I)之組織靶向化合物及藥劑； 及視情況一或多種其他藥劑； 其中，視情況，該式(I)之組織靶向化合物或該藥劑中之二者或任一者係呈備用於同時、並行(concurrently)、分開或依序地投與之醫藥調配物之形式。
TW112118292A 2022-05-17 2023-05-17 放射性醫藥複合物及組合 TW202400162A (zh)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP22173871.9A EP4279092A1 (en) 2022-05-17 2022-05-17 Radiopharmaceutical complexes targeting prostate-specific membrane antigen
EP22173871.9 2022-05-17
EP22199703 2022-10-05
EP22199703.4 2022-10-05
EP23164865 2023-03-29
EP23164865.0 2023-03-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202400162A true TW202400162A (zh) 2024-01-01

Family

ID=86609530

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW112118292A TW202400162A (zh) 2022-05-17 2023-05-17 放射性醫藥複合物及組合

Country Status (2)

Country Link
TW (1) TW202400162A (zh)
WO (1) WO2023222557A1 (zh)

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
IL85035A0 (en) 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
DE69233254T2 (de) 1991-06-14 2004-09-16 Genentech, Inc., South San Francisco Humanisierter Heregulin Antikörper
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
EP1068241B1 (en) 1998-04-02 2007-10-10 Genentech, Inc. Antibody variants and fragments thereof
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
JP4619651B2 (ja) 2001-06-01 2011-01-26 コーネル・リサーチ・ファンデーション・インコーポレイテッド 前立腺特異的膜抗原に対する修飾抗体およびその使用
AU2002356844C1 (en) * 2001-10-23 2010-03-04 Amgen Fremont Inc. PSMA antibodies and protein multimers
US11554182B2 (en) 2017-03-30 2023-01-17 Cornell University Macrocyclic complexes of alpha-emitting radionuclides and their use in targeted radiotherapy of cancer
MX2021005808A (es) 2018-11-20 2021-07-02 Univ Cornell Complejos macrociclicos de radionucleidos alfa-emisores y su uso en radioterapia focalizada de cancer.
MX2021015669A (es) 2019-07-02 2022-04-18 Telix Int Pty Ltd Anticuerpos para la unión a psma.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023222557A1 (en) 2023-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110300601B (zh) 吡咯并苯并二氮杂䓬-抗体缀合物
JP6730260B2 (ja) マクロピノサイトーシスによるヒト抗ｃｄ４６抗体及び標的とされた癌治療薬
JP4354280B2 (ja) Ｒｓ７抗体
KR101893720B1 (ko) 방사 면역 접합체 및 그 용도
JP2011144191A (ja) 抗ｃｄ１９抗体
US9782500B2 (en) Monoclonal antibody and derivatives
EP3683236A2 (en) Antibody against human dlk1 and use thereof
TW200920400A (en) Cancerous disease modifying antibodies
US20210017295A1 (en) Bispecific binding agents and uses thereof
TW201627286A (zh) 放射性醫藥複合物
EP4284446A2 (en) Immunoconjugates comprising kallikrein related peptidase 2 antigen binding domains and their uses
US20150071853A1 (en) Nucleotide and protein sequences of an antibody directed against an epitope common to human acidic and basic ferritins, monoclonal antibodies or antibody-like molecules comprising these sequences and use thereof
KR20240014479A (ko) 전립선암의 치료를 위한 조성물 및 방법
TW202400162A (zh) 放射性醫藥複合物及組合
CN116745323A (zh) Lrrc15抗体及其缀合物
TW200918559A (en) Cancerous disease modifying antibodies
EP4279092A1 (en) Radiopharmaceutical complexes targeting prostate-specific membrane antigen
EP2193147B1 (en) Nucleotide and protein sequences of an antibody directed against an epitope common to human acidic and basic ferritins, monoclonal antibodies or antibody-like molecules comprising these sequences and use thereof
US20230310636A1 (en) Combination therapies for treatment of cancer with therapeutic binding molecules
TW200927763A (en) Cancerous disease modifying antibodies
Singh et al. Development of a [89Zr] Zr-labeled human antibody using a novel phage-displayed human scFv library
CN117396234A (zh) 用于治疗前列腺癌的组合物和方法
US20060216234A1 (en) Cancerous disease modifying antibodies
EA045797B1 (ru) Радиоактивное мечение полипептидов
MOROZ PRECLINICAL TESTING OF NEW MODALITIES FOR PET VISUALIZATION AND TREATMENT OF RAS-DRIVEN CANCERS