TW202313008A - 稠合雜環衍生物(一) - Google Patents

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TW202313008A
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盧春亮
鄧剛
劉連柱
李曉宇
劉治國
唐冰清
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愛爾蘭商健生科學愛爾蘭無限公司
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
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Abstract

本申請描述了稠合雜環衍生物化合物、包含該等化合物之藥物組成物、用於製備該等化合物之化學方法、及其在治療與HBV感染相關的疾病中之用途。

Description

稠合雜環衍生物(一)
本申請關於稠合雜環衍生物化合物、包含該等化合物之藥物組成物、用於製備該等化合物之化學方法、及其在治療與HBV感染相關的疾病中之用途。
慢性B型肝炎病毒（HBV）感染係重大的全球健康問題，影響超過5%的世界人口（全球超過3.5億人，美國有125萬人）。
儘管有預防性HBV疫苗可供使用，但慢性HBV感染之負擔仍然是重大的未得到滿足的全球醫學問題，原因係發展中國家大多數地區之治療選擇並不理想，而且新感染率持續不變。目前的治療不能治癒，並僅限於兩類藥劑（干擾素α和核苷類似物/病毒聚合酶抑制劑）；抗藥性、療效低和耐受性問題限制了其影響。HBV之治癒率低至少部分歸因於用單一抗病毒劑難以完全抑制病毒產生之事實。然而，持續抑制HBV DNA減緩了肝臟疾病之進展並有助於預防肝細胞癌。目前HBV感染患者之治療目標係將血清HBV DNA降至低水平或不可檢測水平，並最終減少或預防肝硬化和肝細胞癌之發展。
HBV殼蛋白在病毒之生命週期中起著重要的作用。HBV殼體/核心蛋白形成亞穩病毒顆粒或蛋白質殼，其在細胞間傳代期間保護病毒基因組，並還在病毒複製過程（包括基因組殼體化、基因組複製以及病毒體形態發生和外排）中發揮核心作用。殼體結構還對環境提示作出響應，以便在病毒進入後允許脫殼。一致地，已經發現殼體組裝和拆卸之適當時機、適當的殼體穩定性和核心蛋白之功能對於病毒感染性係至關重要的。
HBV殼蛋白之關鍵功能對病毒殼蛋白序列施加了嚴格的進化約束，導致觀察到低序列可變性和高保守性。一致地，HBV殼體中破壞其組裝的突變係致命的，並且擾動殼體穩定性之突變會嚴重減弱病毒之複製。對多功能HBV核心/殼蛋白之高功能約束與高序列保守性一致，因為許多突變對功能有害。實際上，核心/殼蛋白序列在HBV基因型中之同一性 ＞ 90%，並且僅顯示少量的多態性殘基。因此，很難選擇對HBV核心/殼蛋白結合化合物之抗藥性，而不會對病毒複製適應性產生重大影響。
報導描述了結合病毒殼體並抑制HIV、鼻病毒和HBV複製之化合物，為病毒殼蛋白作為抗病毒藥物靶標之概念提供了強有力的藥理學證據。
本領域需要能夠增加對病毒產生的抑制並能夠治療、改善和/或預防HBV感染之治療劑。將此類治療劑作為單一療法或與其他HBV治療或輔助治療組合投與至HBV感染患者將導致顯著降低的病毒負荷量、改善的預後、減少的疾病進展和增強的血清轉化率。
鑒於HBV之臨床重要性，鑒定能夠增加對病毒產生之抑制並能夠治療、改善和/或預防HBV感染之化合物代表了開發新的治療劑之一個有吸引力的途徑。本文提供了此類化合物。
本揭露關於本文所附獨立請求項和從屬請求項分別限定的一般和較佳的實施方式，將其藉由引用併入本文。本揭露關於能夠調節殼體組裝之化合物。相對於先前技術之化合物，本揭露之化合物可以提供有利的特性平衡，例如它們可以表現出不同的特徵，表現出提高的溶解度等。
因此，特別地，本揭露關於具有式 (I) 之化合物：
Figure 02_image003
(I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中 R 1選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3組成之群組； R 2選自由H、CHF 2、CF 3、C 1-6烷基、C 1-6烷基OC 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； Q表示選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組之環； n表示0、1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自由以下組成之群組之取代基：CN、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、鹵代、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S，C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S中之每一個視需要地被1、2、3、4或5個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、羥基、C 1-6烷基和側氧基組成之群組；R S各自獨立地選自由H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 3-6環烷基組成之群組； R x和R y各自獨立地選自由氫、C 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； 或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
另外的實施方式包括具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽和溶劑合物，以及具有式 (I) 之化合物之立體異構形式和互變異構形式，以及其藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物係選自以下實施方式中所述或示例的那些種類之化合物。
本揭露還關於包含一或多種具有式 (I) 之化合物以及具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽和溶劑合物之藥物組成物。藥物組成物可以進一步包含一或多種藥學上可接受的賦形劑或一或多種其他的藥劑或治療劑。
本揭露還關於具有式 (I) 之化合物之使用方法或用途。在實施方式中，具有式 (I) 之化合物用於治療或改善B型肝炎病毒（HBV）感染、增加對HBV產生之抑制、干擾HBV殼體組裝或其他HBV病毒複製步驟或HBV產物。該等方法包括向需要這樣的方法之受試者投與有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物以及具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽和溶劑合物。治療方法之另外的實施方式在實施方式中進行了闡述。
根據這樣的揭露的以下詳細描述和藉由其實踐，本揭露之主題的另外的實施方式、特徵和優點將是顯而易見的。為了簡短起見，在本說明書中引用的出版物（包括專利）藉由引用併入本文。
在一個實施方式中，本文提供了具有式 (I) 之化合物，
Figure 02_image005
(I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中 R 1選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3組成之群組； R 2選自由H、CHF 2、CF 3、C 1-6烷基、C 1-6烷基OC 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； Q表示選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組之環； n表示0、1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自由以下組成之群組之取代基：CN、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、鹵代、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S，C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S中之每一個視需要地被1、2、3、4或5個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、羥基、C 1-6烷基和側氧基組成之群組；R S各自獨立地選自由H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 3-6環烷基組成之群組； R x和R y各自獨立地選自由氫、C 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； 或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
在一個實施方式中，以下化合物從本文的具有式 (I) 之化合物中排除：
Figure 02_image007
。
還排除以下化合物：
Figure 02_image009
。
在一個實施方式中，R 1選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組。在一個較佳的實施方式中，R 1選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、CN和CF 3組成之群組。
在一個實施方式中，R 1係選自由苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基組成之群組之環，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組。在一個較佳的實施方式中，R 1係選自由苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基組成之群組之環，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組；更較佳的是，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、CF 3、CN和CHF 2組成之群組；最較佳的是，選自由鹵代、CN和CF 3組成之群組。
在又一個較佳的實施方式中，R 1係苯基環。在另一實施方式中，R 1係苯基環，其被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、CN和CF 3組成之群組。
在一個實施方式中，R 1上取代基之數目係1或2，較佳的是2。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image011
滿足式 (Ia)
Figure 02_image013
(Ia)， 其中R 1a、R 1b和R 1c各自獨立地選自由氫、鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組，其中R 1a、R 1b和R 1c中之至少一個不是氫；
較佳的是，其中R 1a、R 1b和R 1c各自獨立地選自由氫、鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組，其中R 1a、R 1b和R 1c中之至少一個不是氫。
在一個較佳的實施方式中，R 1a係鹵代，R 1b選自由鹵代、CN、CHF 2和CF 3組成之群組，並且R 1c係氫。在另一實施方式中，R 1a係鹵代，R 1b係鹵代並且R 1c係氫。
較佳的是，鹵代係Cl。
在一個實施方式中，R 2選自由CHF 2、CF 3、C 1-6烷基、C 1-6烷基OC 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組；並且式 (I) 之結構具有式 (I-1) 或式 (I-2)
Figure 02_image015
(I-1)
Figure 02_image017
(I-2)。
在另一實施方式中，R 2係C 1-6烷基，較佳的是甲基或乙基。
在另一個實施方式中，R 2係H。
在一個實施方式中，Q表示選自由苯基和6員雜芳基組成之群組之環。在另一實施方式中，Q係6員雜芳基環，其選自由吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基組成之群組。
在另一個實施方式中，Q表示選自由5員雜芳基組成之群組之環。在一個具體實施方式中，Q係選自由吡唑基、咪唑基和噻唑基組成之群組之環。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ib)
Figure 02_image021
(Ib)， 其中 X 1、X 2、X 3、X 4和X 5均是CH。
在其中X 1、X 2、X 3、X 4和X 5均是CH之實施方式中，該環係苯基環。在這樣的實施方式中，一或多個R 3各自獨立地連接至X 1-X 5中之n個。較佳的是，n係1或2，並且一或多個R 3連接至X 1-X 5中之一或兩個。在其中n係1之一個具體實施方式中，R 3連接至X 3。在其中n係2之一個替代性實施方式中，R 3連接至X 1-X 5中之兩個。在其中n係2之一個示例性實施方式中，一個R 3連接至X 3並且另一個連接至X 1或X 2。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ib)
Figure 02_image021
(Ib)， 其中 X 1、X 2、X 3、X 4和X 5中之一或兩個係N，並且其餘係CH。
在其中X 1、X 2、X 3、X 4和X 5中之一或兩個係N並且其餘係CH的實施方式中，該環係6員雜芳基。在這樣的實施方式中，一或多個R 3各自獨立地連接至為CH的X 1-X 5中之n個。較佳的是，n係1或2，並且一或多個R 3連接至為CH的X 1-X 5中之一或兩個。在其中n係1之一個具體實施方式中，R 3連接至為CH的X 3。在其中n係2之一個替代性實施方式中，R 3連接至X 1-X 5中之兩個。在其中n係2之一個示例性實施方式中，一個R 3連接至X 3（其係CH），並且另一個連接至X 1（其係CH）、X 2（其係CH）、X 4（其係CH）或X 5（其係CH）。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個具體實施方式中，X 1-X 5中之一個係N，並且其餘係CH。在另一個具體實施方式中，X 1-X 5中之兩個係N，並且其餘係CH。
在一個特定實施方式中， X 1係N，並且X 2、X 3、X 4、X 5係CH；或者 X 2係N，並且X 1、X 3、X 4、X 5係CH；或者 X 3係N，並且X 1、X 2、X 4、X 5係CH；或者 X 1和X 2係N，並且X 3、X 4、X 5係CH；或者 X 1和X 3係N，並且X 2、X 4、X 5係CH；或者 X 1和X 4係N，並且X 2、X 3、X 5係CH；或者 X 1和X 5係N，並且X 2、X 3、X 4係CH；或者 X 2和X 3係N，並且X 1、X 4、X 5係CH；或者 X 2和X 4係N，並且X 1、X 3、X 5係CH。
在另一個特定實施方式中， X 1和X 2均是N，並且X 4和X 5係CH；或者 X 2和X 4均是N，並且X 1和X 5係CH；或者 X 1和X 4均是N，並且X 2和X 5係CH；或者 X 1和X 5均是N，並且X 2和X 4係CH。
在一個具體實施方式中，R 3連接至為CH的X 1-X 5中之一或兩個。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) 其中 X 1、X 2、X 4和X 5均是CH。
在一個具體實施方式中，X 1、X 2、X 4、X 5中之一或兩個視需要地被另外的R 3取代。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) 其中 X 2和X 4中之一個係N，並且另一個係CH。
在以上式 (Ic) 之一個具體實施方式中， i) X 1和X 5中之一個係N，並且其餘係CH；或者 ii) X 1和X 5均是CH。
在一個具體實施方式中，X 1、X 2、X 4、X 5（其係CH）中之一或兩個視需要地被另外的R 3取代。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) 其中 X 2和X 4均是N。
在以上式 (Ic) 之一個具體實施方式中， X 1和X 5均是CH。
在一個具體實施方式中，X 1、X 5（其係CH）中之一或兩個視需要地被另外的R 3取代。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) 其中 X 1和X 5中之一個係N，並且另一個係CH。
在以上式 (Ic) 之一個具體實施方式中， i) X 2和X 4中之一個係N，並且其餘係CH；或者 ii) X 2和X 4均是CH。
在一個具體實施方式中，X 1、X 2、X 4、X 5（其係CH）中之一或兩個視需要地被另外的R 3取代。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) 其中 X 1和X 5均是N。
在以上式 (Ic) 之一個具體實施方式中， X 2和X 4均是CH。
在一個具體實施方式中，X 2、X 4（其係CH）中之一或兩個視需要地被另外的R 3取代。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。
在一個實施方式中，式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic)， 其中 X 1、X 2、X 4和X 5均是CH；或者 X 2係N，並且X 1、X 4和X 5係CH；或者 X 1係N，並且X 2、X 4和X 5係CH。
在一個具體實施方式中，式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ic)
Figure 02_image025
(Ic) X 1和X 2均是N，並且X 4和X 5係CH；或者 X 2和X 4均是N，並且X 1和X 5係CH；或者 X 1和X 4均是N，並且X 2和X 5係CH；或者 X 1和X 5均是N，並且X 2和X 4係CH。
在一個實施方式中，本揭露之式 (I) 中之結構單元
Figure 02_image019
滿足式 (Ib’)
Figure 02_image035
(Ib’) 其中Y 1、Y 2、Y 3和Y 4中之一或兩個係N（或NH）或S，並且其餘係CH。
在一個具體實施方式中，Y 1、Y 2、Y 3和Y 4中之兩個係N（或NH）或S，並且其餘係CH。在一個較佳的實施方式中，Y 1和Y 2係N（或NH）。在另一個較佳的實施方式中，Y 1係N（或NH）並且Y 4係S；或者Y 1係S並且Y 4係N（或NH）。
在其中Y 1、Y 2、Y 3和Y 4中之一或兩個係N（或NH）或S並且其餘係CH的實施方式中，該環係5員雜芳基。在這樣的實施方式中，一或多個R 3各自獨立地連接至Y 1-Y 4中之一或多個。較佳的是，n係1或2，並且一或多個R 3連接至Y 1-Y 4中之一或兩個。
在其中n係1之一個實施方式中，R 3連接至Y 2。在其中n係1之一個實施方式中，R 3連接至Y 1。在另一個實施方式中，Y 1和Y 2係N（或NH）；或者Y 1或Y 2係N（或NH）；或者Y 1係N並且Y 4係S；或者Y 4係N並且Y 1係S。
在一個具體實施方式中，Q係環
Figure 02_image037
、
Figure 02_image039
、
Figure 02_image041
、
Figure 02_image043
、
Figure 02_image045
、
Figure 02_image047
、
Figure 02_image049
、
Figure 02_image051
或
Figure 02_image053
（其中由於取代或連接到分子之其他部分，H可能不存在），其被n個R 3取代。
在一個具體實施方式中，所描述的CH或NH部分可以視需要地被例如R 3取代。
應注意，當存在CH或NH部分時，例如在如苯基或雜芳基等環內時，「H」可能由於取代或連接到分子之其他部分而不存在。類似地，當提到C或N部分時，例如在如苯基或雜芳基等環內時，H可能存在，從而滿足穩定的化合物結構，並且相應的原子或基團可以僅描述為C或N。例如，在如 (I)、(I-1)、(I-2)、(Ib)、(Ib')、(Ic) 等式中，當X（例如，X 1、X 2、X 3、X 4、X 5）描述為CH或NH時，這意味著該基團未被取代或視需要地被取代或連接到分子之其他部分，條件係可獲得穩定的化合物。同樣地，當描述C或N時，可以添加「H」或視需要的取代/連接，從而滿足穩定的化合物。
在一個實施方式中，n係1、2或3，例如1或2。應注意，當存在超過一個R 3時，它們係獨立選擇的，因此可以相同或不同。當n係0時，表示Q未被取代或所有R 3基團都係H。
在一個實施方式中，鹵代係F、Cl或Br，較佳的是Cl。
在一個實施方式中，R 3獨立地表示選自由以下組成之群組之取代基：CN、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、4-8員雜環基、鹵代、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S，C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、4-8員雜環基、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S中之每一個視需要地被1、2、3、4或5個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、羥基和C 1-6烷基組成之群組。R S各自獨立地選自由H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 3-6環烷基組成之群組。
較佳的是，C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S中任一個上的取代基數目係1、2或3。
在一個具體實施方式中，R 3獨立地選自由鹵代、CH 3、
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、C(CH 3) 2OH、CH 2CF 3、CF 3、OCHF 2、SO 2CH 3、
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、OCH 3、CN、
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、
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、環丙基、NHCH 2CF 3、
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、
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、CHF 2和
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組成之群組。
在一個實施方式中，R x和R y中之一個係氫，並且另一個係C 1-6烷基或C 3-6環烷基，較佳的是甲基或C 3環烷基。在另一個實施方式中，R x和R y係氫。在又另一個實施方式中，R x和R y各自獨立地選自由C 1-6烷基、較佳的是甲基組成之群組。在又另一個實施方式中，R x和R y各自獨立地選自由C 1-6烷基（較佳的是甲基）和C 3-6環烷基（較佳的是C 3環烷基）組成之群組。
在一個實施方式中，雜芳基（如5員雜芳基或6員雜芳基）可以含有至少一個（例如，1、2或3個，較佳的是1或2個）獨立地選自由N、O和S、較佳的是N和S組成之群組之雜原子。
在一個實施方式中，雜環基（如4-8員雜環基）可以含有至少一個（例如，1、2或3個，較佳的是1或2個）獨立地選自由N、O和S、較佳的是N和S組成之群組之雜原子。
本揭露之另一實施方式係選自由以下組成之群組之化合物：下表1和表2中描述的化合物、其立體異構物或互變異構物、或其藥學上可接受的鹽。 [表1]
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[表2]
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藥物組成物
本文還揭露了藥物組成物，其包含 (A)      在以上定義的任一實施方式中之至少一種具有式 (I) 中任一者之化合物或其藥學上可接受的鹽，和 (B)      至少一種藥學上可接受的賦形劑。
在實施方式中，藥物組成物包含至少一種另外的活性劑或治療劑。另外的活性治療劑可以包括例如抗HBV劑（如HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、殼體組裝調節劑、反轉錄酶抑制劑、免疫調節劑（如TLR-促效劑）、或影響HBV生命週期和/或HBV感染的後果之任何其他藥劑）。本揭露之活性劑單獨或與一或多種另外的活性劑組合用於配製本揭露之藥物組成物。
如本文所用，術語「組成物」或「藥物組成物」係指可用於本揭露之至少一種化合物與藥學上可接受的載體之混合物。藥物組成物有助於將化合物向患者或受試者投與。本領域存在多種投與化合物之技術，該等技術包括但不限於靜脈內、口服、噴霧劑、腸胃外、眼部、肺部和局部投與。
如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」意指藥學上可接受的材料、組成物或載體，如液體或固體填充劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑或囊封材料，該等材料涉及將可用於本揭露之化合物在患者體內載運或輸送或載運或輸送到患者體內，使得它可以發揮預期功能。典型地，此類構建體從身體之一個器官或部分載運或輸送到身體之另一個器官或部分。每種載體在與配製物之其他成分（包括可用於本揭露之化合物）相容且對患者無害的意義上必須是「可接受的」。可充當藥學上可接受的載體的材料之一些實例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；澱粉，如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，如可可脂和栓劑蠟；油，如花生油、棉籽油、紅花子油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；界面活性劑；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；以及藥物配製物中使用的其他無毒相容物質。
如本文所用，「藥學上可接受的載體」還包括與可用於本揭露之化合物之活性相容並對於患者來說在生理上係可接受的任何和所有的塗層劑、抗菌劑和抗真菌劑以及吸收延遲劑等。補充活性化合物也可以摻入組成物中。可以包括在用於實踐本揭露之藥物組成物中之其他另外成分在本領域係已知的，並例如描述於Remington's Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學]（Genaro編輯, Mack Publishing Co.[馬克出版公司], 1985, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州），將其藉由引用併入本文。
「藥學上可接受的賦形劑」係指無毒的、生物學耐受的以及生物學上適於投與至受試者之物質（如惰性物質），將其添加到藥理學組成物中，或者用作媒介物、載體或稀釋劑以促進藥劑之投與並且與之相容。賦形劑之實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、多種糖和多種類型的澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。
含有一或多個活性劑劑量單位的藥物組成物之遞送形式可以使用合適的藥物賦形劑和熟悉該項技術者已知或可以獲得的混合技術製備。在本發明方法中，組成物可以藉由合適的遞送途徑投與，例如口服、腸胃外、直腸、局部或經眼途徑或者藉由吸入投與。
製劑可以為片劑、膠囊、囊袋、糖錠、粉劑、粒劑、錠劑、重構粉劑、液體製劑或栓劑之形式。較佳的是，組成物配製用於靜脈內輸注、局部投與或口服投與。
對於口服投與，可以將本揭露之化合物提供為片劑或膠囊之形式，或者為溶液、乳液或混懸液之形式。為製備口服組成物，可對化合物進行配製，以產生例如從約0.05至約100 mg/kg/天或從約0.05至約35 mg/kg/天或從約0.1至約10 mg/kg/天的劑量。例如，藉由每天一次、兩次、三次或四次給藥可實現每天約5 mg至5 g的每日總劑量。
口服片劑可以包括與藥學上可接受的賦形劑混合的根據本揭露之化合物，該等藥學上可接受的賦形劑如惰性稀釋劑、崩散劑、黏合劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、著色劑和防腐劑。合適的惰性填充劑包括碳酸鈉和碳酸鈣、磷酸鈉和磷酸鈣、乳糖、澱粉、糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、甘露醇、山梨醇等。示例性液體口服賦形劑包括乙醇、甘油、水等。澱粉、聚乙烯吡咯啶酮（PVP）、羥基乙酸澱粉鈉、微晶纖維素和藻酸係合適的崩散劑。黏合劑可以包括澱粉和明膠。潤滑劑（如果存在的話）可為硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。如果需要，片劑可用如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料進行包衣，以延緩在胃腸道中之吸收，或可用腸溶包衣進行包衣。
用於口服投與的膠囊包括硬明膠膠囊和軟明膠膠囊。為了製備硬明膠膠囊，可以將本揭露之化合物與固體、半固體或液體稀釋劑混合。可藉由將本揭露之化合物與水、油（如花生油或橄欖油）、液體石蠟、短鏈脂肪酸單甘油酯和短鏈脂肪酸雙甘油酯之混合物、聚乙二醇400、或丙二醇混合來製備軟明膠膠囊。
用於口服投與的液體可以呈混懸液、溶液、乳液或糖漿的形式，或可以被冷凍乾燥或在使用前以用水或其他合適的媒介物重構的乾燥產品之形式呈現。這樣的液體組成物可以視需要含有：藥學上可接受的賦形劑，如懸浮劑（例如，山梨醇、甲基纖維素、藻酸鈉、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠等）；非水性媒介物，例如油（例如，杏仁油或分餾椰子油）、丙二醇、乙醇或水；防腐劑（例如，對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯或山梨酸）；濕潤劑，如卵磷脂；以及調味劑和著色劑（如果需要）。
本揭露之活性劑還可以藉由非口服途徑投與。例如，可將組成物配製成栓劑用於直腸投與。對於腸胃外投與，包括靜脈內、肌內、腹膜內或皮下途徑，可以將本揭露之化合物提供在緩沖至適當pH和等滲性的無菌水溶液或混懸液中或者提供在腸胃外可接受的油中。合適的水性媒介物包括林格氏溶液和等滲氯化鈉。此類形式將以單位劑量形式（如安瓿或一次性注射裝置）、以多劑量形式（如從中可取出合適的劑量之小瓶）、或以可用於製備可注射配製物之固體形式或預濃縮物存在。與藥用載體經從幾分鐘至幾天範圍內的時間段混合的示例性輸注劑量可以在從約1至1000 μg/kg/分鐘範圍內的化合物。
對於局部投與，化合物可以在約0.1%至約10%（藥物比媒介物）的濃度與藥用載體混合。本揭露之化合物之另一種投與模式可利用貼劑配製物來影響透皮遞送。
可替代地，在本揭露之方法中，本揭露之化合物可以經鼻或口服途徑（例如以還含有適合載體之噴霧配製物形式）吸入投與。 使用方法
所揭露的化合物可用於預防或治療有需要的哺乳動物，更特別地有需要的人之HBV感染或HBV誘發的疾病。
在非限制性方面，該等化合物可以 (i) 調節或破壞HBV組裝和HBV複製或感染顆粒產生所必需的其他HBV核心蛋白功能，(ii) 抑制感染性病毒顆粒之產生或感染，或 (iii) 與HBV殼體相互作用，以影響作為殼體組裝調節劑之感染性或複製能力降低的缺陷病毒顆粒。特別地，並且在不受任何特定作用機制束縛的情況下，據信所揭露的化合物藉由破壞、加速、減少、延遲和/或抑制正常病毒殼體之組裝和/或不成熟或成熟顆粒之拆卸從而誘導異常的殼體形態導致抗病毒作用（如破壞病毒體之組裝和/或拆卸、病毒體成熟、病毒之外出和/或靶細胞之感染）而在HBV治療中係有用的。所揭露的化合物可以作為殼體組裝之干擾劑與成熟或不成熟病毒殼體相互作用以擾動殼體之穩定性，從而影響其組裝和/或拆卸。所揭露的化合物可以擾動病毒殼體之穩定性、功能和/或正常形態所需的蛋白質折疊和/或鹽橋，從而破壞和/或加速殼體之組裝和/或拆卸。所揭露的化合物可結合殼體並改變細胞多蛋白和先質之代謝，導致蛋白質單體和/或低聚物和/或異常顆粒之異常積聚，這引起經感染的細胞之細胞毒性和死亡。所揭露的化合物可以引起最佳穩定性殼體形成的失敗，影響病毒之有效脫殼和/或拆卸（例如，在感染期間）。當殼蛋白未成熟時，所揭露的化合物可以破壞和/或加速殼體組裝和/或拆卸。當殼蛋白成熟時，所揭露的化合物可以破壞和/或加速殼體組裝和/或拆卸。所揭露的化合物可以在病毒感染期間破壞和/或加速殼體組裝和/或拆卸，這可進一步減弱HBV病毒感染性和/或降低病毒負荷量。所揭露的化合物對殼體組裝和/或拆卸之破壞、加速、抑制、延遲和/或減少可以將病毒從宿主生物體中根除。藉由所揭露的化合物從受試者中根除HBV有利地消除慢性長期治療之需要和/或減少長期治療之持續時間。
本揭露之另一個實施方式係治療患有HBV感染的受試者之方法，該方法包括向需要這樣的治療的受試者投與有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中與HBV感染相關的病毒負荷量之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染復發之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
此外，HBV係D型肝炎病毒（HDV）之輔助病毒，並且據估計，全世界超過1500萬人可能是HBV/HDV共同感染的，與僅患有HBV之患者相比，具有增加的快速發展為肝硬化之風險和增加的肝代償能減退（Hughes, S.A.等人, Lancet [柳葉刀] 2011, 378, 73-85）。因此，HDV感染患有HBV感染之受試者。在一個特定實施方式中，本揭露之化合物可以用於治療和/或預防HBV/HDV共感染，或與HBV/HDV共感染相關的疾病。因此，在一個特定實施方式中，HBV感染特別地是HBV/HDV共感染，並且哺乳動物（特別是人）可為HBV/HDV共感染的，或處於HBV/HDV共感染風險下的。
在另一個方面，本文提供了抑制或減少有需要的個體中含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒的形成或存在之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的不良生理影響之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了誘導有需要的個體中HBV感染肝損傷緩解之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的長期抗病毒療法的生理影響之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了預防性地治療有需要的個體中HBV感染之方法，其中該個體患有潛伏性HBV感染，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，所揭露的化合物適用於單一療法。在實施方式中，所揭露的化合物有效地抵抗天然的或自然的HBV菌株。在實施方式中，所揭露的化合物有效地針對對目前已知藥物有抗性的HBV菌株。
在另一個實施方式中，本文提供的化合物可以用於調節（例如抑制或破壞）HBV cccDNA之活性、穩定性、功能和病毒複製特性之方法中。
在又另一個實施方式中，本揭露之化合物可以用於削弱或預防HBV cccDNA的形成之方法中。
在另一個實施方式中，本文提供的化合物可以用於調節（例如抑制或破壞）HBV cccDNA活性之方法中。
在又另一個實施方式中，本揭露之化合物可以用於削弱HBV cccDNA的形成之方法中。
在另一個實施方式中，所揭露的化合物可以用於調節、抑制或破壞HBV RNA顆粒從感染細胞內產生或釋放之方法中。
在另一實施方式中，對HBV RNA顆粒之總負擔（或濃度）進行了調節。在較佳的實施方式中，削弱了HBV RNA之總負擔。
在另一個實施方式中，與投與選自以下群組之化合物相比，本文提供的方法以更大的程度或以更快的速度減少該個體中之病毒負荷量，該群組由以下組成：HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的殼體組裝調節劑、不同或未知機制的抗病毒化合物、及其任何組合。
在另一個實施方式中，與投與選自以下群組之化合物相比，本文提供的方法使得病毒突變和/或病毒抗性之發生率更低，該群組由以下組成：HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的殼體組裝調節劑、不同或未知機制的抗病毒化合物、及其組合。
在另一個實施方式中，本文提供的方法進一步包括向該個體投與至少一種HBV疫苗、核苷HBV抑制劑、干擾素或其任何組合。
在一個方面，本文提供了治療有需要的個體中HBV感染之方法，該方法包括藉由以下方式減少HBV病毒負荷量：向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物，或其藥學上可接受的鹽，單獨地或與反轉錄酶抑制劑組合；並且向該個體進一步投與治療有效量的HBV疫苗。
本揭露之另一個實施方式係治療患有HBV感染的受試者之方法，該方法包括向需要這樣的治療的受試者投與有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中與HBV感染相關的病毒負荷量之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染復發之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了抑制或減少有需要的個體中含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒的形成或存在之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的不良生理影響之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了誘導有需要的個體中HBV感染肝損傷緩解之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的長期抗病毒療法的生理影響之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了預防性地治療有需要的個體中HBV感染之方法，其中該個體患有潛伏性HBV感染，該方法包括向該個體投與治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，本文提供的方法進一步包括監測受試者之HBV病毒負荷量，其中將該方法進行一段時間，使得HBV病毒不可檢測。 組合
本文提供了一或多種所揭露的化合物與至少一種另外的治療劑之組合。在實施方式中，本文提供的方法可以進一步包括向該個體投與至少一種另外的治療劑。在實施方式中，所揭露的化合物適用於在組合療法中使用。本揭露之化合物可以與用於治療HBV感染之一或多種另外的化合物組合使用。該等另外的化合物可以包括本揭露之化合物和/或已知用於治療、預防或減少HBV感染之症狀或影響之化合物。
在一個示例性實施方式中，另外的活性成分係已知的或被發現在治療涉及HBV感染的病症或障礙中有效的那些成分，如另一種HBV殼體組裝調節劑或針對與涉及HBV感染的特定疾病或障礙、或HBV感染本身相關的另一靶標之活性化合物。該組合可以用於增強療效（例如，藉由將化合物包括在組合中增強根據本揭露之活性劑之效力或有效性），減少一或多種副作用，或減少根據本揭露之活性劑之所需劑量。在另一實施方式中，與在預防性地治療有需要的個體之HBV感染中獲得相似結果所需的至少一種另外的治療劑之單獨投與相比，本文提供的方法允許以更低的劑量或頻率投與至少一種另外的治療劑。
此類化合物包括但不限於HBV複方藥物、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制劑、免疫調節劑、toll樣受體（TLR）調節劑、干擾素α受體配體、玻醣醛酸酶抑制劑、B型肝炎表面抗原（HBsAg）抑制劑、細胞毒性T淋巴球相關蛋白4（CTLA-4）抑制劑、親環蛋白抑制劑、HBV病毒進入抑制劑、反義寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干擾RNA（siRNA）和ddRNAi核酸內切酶調節劑、核糖核苷酸還原酶抑制劑、HBV E抗原抑制劑、共價閉合環狀DNA（cccDNA）抑制劑、類法尼醇X受體促效劑、HBV抗體、CCR2趨化介素拮抗劑、胸腺素促效劑、細胞介素、核蛋白調節劑、維生素A酸誘導基因1刺激物、NOD2刺激物、磷脂酸肌醇3-激酶（PI3K）抑制劑、吲哚胺-2,3-二氧酶（IDO）途徑抑制劑、PD-1抑制劑、PD-L1抑制劑、重組胸腺素α-1、布魯頓酪胺酸激酶（BTK）抑制劑、KDM抑制劑、HBV複製抑制劑、精胺酸酶抑制劑以及影響HBV生命週期和/或影響HBV感染後果之任何其他藥劑或其組合。
在實施方式中，本揭露之化合物可以與以下組合使用：HBV聚合酶抑制劑、免疫調節劑、干擾素（如聚乙二醇化干擾素）、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、殼體組裝調節劑、反轉錄酶抑制劑、親環蛋白/TNF抑制劑、免疫調節劑（如TLR-促效劑）、HBV疫苗和影響HBV生命週期和/或影響HBV感染後果之任何其他藥劑或其組合。特別地，本揭露之化合物可以與選自以下群組之一或多種藥劑（或其鹽）組合使用，該群組由以下組成： HBV反轉錄酶抑制劑，以及DNA和RNA聚合酶抑制劑，包括但不限於：拉米夫定（lamivudine）（3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir和Epivir-HBV）、恩替卡韋（entecavir）（Baraclude、Entavir）、阿德福韋酯（adefovir dipivoxil）（Hepsara、Preveon、雙-POM PMEA）、反丁烯二酸替諾福韋酯（tenofovir disoproxil fumarate）（Viread、TDF或PMPA）； 干擾素，包括但不限於干擾素α（IFN-α）、干擾素β（IFN-β）、干擾素λ（IFN-λ）、和干擾素γ（IFN-γ）； 病毒進入抑制劑； 病毒成熟抑制劑； 文獻描述的殼體組裝調節劑，如但不限於BAY 41-4109； 反轉錄酶抑制劑； 免疫調節劑，如TLR促效劑；以及 不同或未知機制的藥劑，如但不限於AT-61（(E)-N-(1-氯-3-側氧基-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲醯胺）、AT-130（(E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-側氧基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲醯胺）和類似的類似物。
在實施方式中，另外的治療劑係干擾素。術語「干擾素」或「IFN」係指抑制病毒複製和細胞增殖並調節免疫響應的高度同源物種特異性蛋白的家族中之任何成員。人干擾素分為三類：I型，其包括干擾素-α（IFN-α）、干擾素-β（IFN-β）和干擾素-ω（IFN-ω）；II型，其包括干擾素-γ（IFN-γ）；和III型，其包括干擾素-λ（IFN-λ）。如本文所用的術語「干擾素」包括已經開發並且可商購的干擾素之重組形式。如本文所用的術語「干擾素」也包括干擾素之亞型，如化學修飾或突變的干擾素。化學修飾的干擾素包括聚乙二醇化干擾素和糖基化干擾素。干擾素之實例還包括但不限於干擾素-α-2a、干擾素-α-2b、干擾素-α-n1、干擾素-β-1a、干擾素-β-1b、干擾素-λ-1、干擾素-λ-2和干擾素-λ-3。聚乙二醇化干擾素之實例包括聚乙二醇化干擾素-α-2a和聚乙二醇化干擾素α-2b。
因此，在一個實施方式中，具有式I之化合物可以與選自以下群組之干擾素組合投與，該群組由以下組成：干擾素α（IFN-α）、干擾素β（IFN-β）、干擾素λ（IFN-λ）和干擾素γ（IFN-γ）。在一個具體實施方式中，干擾素係干擾素-α-2a、干擾素-α-2b或干擾素-α-n1。在另一個具體實施方式中，干擾素-α-2a或干擾素-α-2b係聚乙二醇化的。在一個較佳的實施方式中，干擾素-α-2a係聚乙二醇化干擾素-α-2a（PEGASYS）。
在另一個實施方式中，另外的治療劑選自免疫調節劑或免疫刺激劑療法，其包括屬於干擾素類別的生物製劑。
此外，另外的治療劑可為破壞HBV複製或持久性所需的其他一或多種必需病毒蛋白或宿主蛋白的功能之藥劑。
在另一個實施方式中，另外的治療劑係阻斷病毒進入或成熟或靶向HBV聚合酶之抗病毒劑，如核苷或核苷酸或非核苷（核苷酸）聚合酶抑制劑。在組合療法之另一實施方式中，反轉錄酶抑制劑和/或DNA和/或RNA聚合酶抑制劑係齊多夫定、去羥肌苷、紮西他濱、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、恩曲他濱、恩替卡韋、阿立他濱、阿替韋拉平（Atevirapine）、利巴韋林、無環鳥苷、抗濾兒、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、替諾福韋、阿德福韋、PMPA、西多福韋、依法韋侖、奈韋拉平、地拉夫定或埃曲韋林。
在一個實施方式中，另外的治療劑係免疫調節劑，其誘導天然的有限的免疫響應，導致誘導針對不相關病毒的免疫響應。換言之，免疫調節劑可以影響抗原呈現細胞之成熟、T細胞之增殖和細胞介素釋放（例如，IL-12、IL-18、IFN-α、IFN-β和IFN-γ及TNF-α等）。
在另一實施方式中，另外的治療劑係TLR調節劑或TLR促效劑，如TLR-7促效劑或TLR-9促效劑。在組合療法之另一實施方式中，TLR-7促效劑選自由以下組成之群組：SM360320（9-苄基-8-羥基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤）和AZD 8848（[3-({[3-(6-胺基-2-丁氧基-8-側氧基-7,8-二氫-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-𠰌啉基)丙基]胺基}甲基)苯基]乙酸甲酯）。
在本文提供的任何方法中，該方法可進一步包括向該個體投與至少一種HBV疫苗、核苷HBV抑制劑、干擾素或其任何組合。在一個實施方式中，HBV疫苗係RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B中之至少一種。
在另一個方面，本文提供了治療有需要的個體中HBV感染之方法，該方法包括藉由以下方式減少HBV病毒負荷量：向該個體投與治療有效量的本揭露之化合物，單獨地或與反轉錄酶抑制劑組合；並且向該個體進一步投與治療有效量的HBV疫苗。反轉錄酶抑制劑可為齊多夫定、去羥肌苷、紮西他濱、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、恩曲他濱、恩替卡韋、阿立他濱、阿替韋拉平、利巴韋林、無環鳥苷、抗濾兒、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、替諾福韋、阿德福韋、PMPA、西多福韋、依法韋侖、奈韋拉平、地拉夫定或埃曲韋林中之一種。
對於本文描述的任何組合療法，例如可以使用合適的方法計算增效作用，例如，Sigmoid-E max方程（Holford和Scheiner, 19981, Clin. Pharmacokinet. [臨床藥物動力學] 6: 429-453）、Loewe可加性方程（Loewe和Muischnek, 1926, Arch. Exp. Pathol Pharmacol. [實驗病理學與藥理學文件案] 114: 313-326）和中值效應方程（Chou和Talalay, 1984, Adv. Enzyme Regul. [酶調控研究進展] 22: 27-55）。上面提到的每個方程都可以應用於實驗數據，以生成相應的圖表以説明評估藥物組合之效果。與上述方程相關的對應圖表分別是濃度-效應曲線、等效線圖曲線和聯合指數曲線。 有益效果
本發明化合物具有改善的人肝微粒體穩定性以及合理的抗HBV活性。與對比化合物相比，本發明化合物之半衰期（t1/2）顯著增加，這顯示出人體代謝穩定性之顯著改善。 方法
本揭露關於用於製備如本文所述之具有式 (I) 之化合物之方法。 在一個示例性實施方式中，該方法包括步驟： 1) 使具有式 (a)
Figure 02_image325
之化合物與具有式 (b)
Figure 02_image327
之化合物（其中PG係保護基團）反應，以得到具有式 (c)
Figure 02_image329
之化合物； 2) 使具有式 (c) 之化合物與具有式 (d)
Figure 02_image331
之化合物反應，以得到具有式 (e)
Figure 02_image333
之化合物； 3) 使具有式 (e) 之化合物與具有式 (f)
Figure 02_image335
之化合物反應，以得到具有式 (I) 之化合物， 其中R 1、R 2、R 3、Q、鹵代、n、R x和R y如本文所定義。
在一個實施方式中，可以對具有式 (I) 之化合物進行手性分離以得到單獨的鏡像異構物純的化合物。
在一個實施方式中，在步驟2) 中，對具有式 (c) 之化合物與具有式 (d) 之化合物之反應產物進行去保護和氧化，以得到具有式 (e) 之化合物。
PG係常規使用的保護基團，並且較佳的是TBDPS。
示例性方案如下。
Figure 02_image337
定義
下文列出了用於描述本揭露之各個術語之定義。該等定義適用於如它們在整個說明書和申請專利範圍中使用的術語，除非在特定情況下另行限制，單獨地或作為更大基團之一部分。
除非另有定義，否則本文使用的所有技術和科學術語通常具有與可應用領域普通技術者通常所理解的相同的含義。通常，本文使用的命名法和細胞培養、分子遺傳學、有機化學和肽化學中之實驗室程序係本領域眾所周知且常用的那些。
如本文所用，冠詞「一個/種（a和an）」係指一個/種或多於一個/種（即，至少一個/種）該冠詞之語法賓語。舉例來說，「一個元素」意指一個元素或多於一個元素。此外，術語「包括（including）」以及其他形式如「包括（include）」、「包括（includes）」和「包括（included）」之使用不是限制性的。
如本說明書和申請專利範圍中所用，術語「包含（comprising）」可以包括實施方式「由……組成」和「基本上由……組成」。如本文所用，術語「包含（comprise（s））」、「包括（include（s））」、「具有（having和has）」、「可以（can）」、「含有（contain（s））」及其變體意指要求命名的成分/步驟之存在並且允許其他成分/步驟之存在的開放性的過渡短語、術語、或詞語。然而，此類描述應被理解為，也將組成物或方法描述為「由以下組成」和「基本上由以下組成」：列舉的化合物，這允許僅存在命名的化合物、伴隨任何藥學上可接受的載體、以及排除其他化合物。本文揭露的所有範圍都是包括列舉的端點，並且獨立地可組合（例如，「從50 mg至300 mg」的範圍包括端點50 mg和300 mg，以及所有中間值）。本文揭露的範圍之端點和任何值都不限於精確範圍或值；它們不是足夠精確的，從而包括接近該等範圍和/或值之值。
如本文所用，可以將近似的語言應用於修飾可以變化而不導致其相關基本功能的改變之任何定量表示。因此，在一些情況下，由一或多個術語如「基本上」修飾的值不能限制為指定的精確值。在至少一些實例中，近似的語言可以對應於用於測量該值的儀器之精確度。
如本文所用，術語「至少一個/種」或「一或多個/一或多種」係指一個/種、兩個/種、三個/種、四個/種、五個/種、六個/種、七個/種、八個/種、九個/種或更多個/種。
作為基團或作為另一基團之一部分的術語「烷基」係指在鏈中具有碳和氫原子之直鏈或支鏈烷基基團。烷基之實例包括甲基（Me，其還可以由符號「/」在結構上表示）、乙基（Et）、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基（tBu）、戊基、異戊基、三級戊基、己基、異己基、以及根據熟悉該項技術者和本文提供的教導被認為等同於前述實例中任一項之基團。如本文所用的術語C 1- 4烷基係指在鏈中具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈烷基基團。如本文所用的術語C 1- 6烷基係指在鏈中具有1至6個碳原子之直鏈或支鏈烷基基團。
作為基團或作為另一基團之一部分的術語「烷氧基」係指經由氧與分子之其餘部分連接的烷基基團，其中烷基如本文所定義。如本文所用的術語C 1- 4烷氧基係指在鏈中具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈烷氧基基團。如本文所用的術語C 1- 6烷氧基係指在鏈中具有1至6個碳原子之直鏈或支鏈烷氧基基團。烷氧基基團之實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基、以及根據熟悉該項技術者和本文提供的教導被認為等同於前述實例中任一項之基團。
術語「C 3-6環烷基」係指具有3至6個環原子之飽和單環碳環。環烷基基團之示例性實例包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
術語「苯基」表示以下部分：
Figure 02_image339
。
本文中的表述「-NR xR y」單獨或在通式中係指「
Figure 02_image341
」。
本文所用的術語「雜芳基」係指具有5至10個環成員並含有碳原子以及1至4個獨立地選自由N、O和S組成之群組之雜原子的芳香族單環或二環芳香族環系統。術語雜芳基中包括具有5或6個成員之芳香族環，其中該環由碳原子組成並且具有至少一個（例如，1、2或3個，較佳的是1或2個）雜原子成員。合適的雜原子包括氮（N）、氧（S）和硫（S），較佳的是氮（N）。在5員環的情況下，雜芳基環較佳的是含有氮、氧或硫中之一個成員，以及另外最多3個另外的氮。在6員環的情況下，雜芳基環較佳的是含有1至4個（例如四唑基）、更特別地1至3個氮原子。對於6員環具有3個氮的情況，至多2個氮原子係相鄰的。雜芳基基團之實例包括但不限於呋喃基、噻吩基、吡咯基、㗁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、㗁唑基、噻唑基、㗁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基（pyridinyl/pyridyl）、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基、吲哚基、異吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并㗁唑基、苯并異㗁唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、喹啉基、異喹啉基和喹唑啉基。除非另有說明，否則雜芳基在產生穩定結構之任何雜原子或碳原子處附接至其懸基。
熟悉該項技術者將認識到，以上列舉或闡述的雜芳基基團種類並非詳盡的，還可以在該等定義的術語範圍內選擇另外種類。
術語「雜環基」表示具有例如4至8個環成員、更通常5至6個環成員之非芳香族單環或二環系統。單環基團之實例係含有4至8個環成員、更通常5或6個環成員之基團。含有選自氮、氧或硫（N、O、S）的至少一個雜原子之單環雜環基系統的非限制性實例包括但不限於4員至8員雜環基系統，如氧環丁烷基、吡咯啶基、四氫呋喃基、哌啶基、哌𠯤基、哌喃基、二氫哌喃基、四氫哌喃基、𠰌啉基、硫代𠰌啉基。除非另外說明，每個可以藉由任何可用的環碳原子或氮原子結合至具有分子之剩餘部分，並且在可能的情況下在根據實施方式的碳原子和/或氮原子上可以視需要地被取代。4員至8員單環雜環基之視需要取代基包括OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONHCH 3、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基和C 1-4烷基。
術語「氰基」係指基團-CN。
術語「鹵代」或「鹵素」表示氯（Cl）、氟（F）、溴（Br）或碘（I）。
術語「側氧基」表示=O。
術語「羥基」表示-OH。
術語「取代的」意指指定基團或部分中帶有一或多個取代基。術語「未取代的」意指指定基團不帶有取代基。術語「視需要地取代的」意指指定基團係未取代的或被一或多個取代基取代。在術語「取代的」用於描述結構體系時，意指取代發生在體系上任何價允許的位置上。在未明確注明指定部分或基團被指定取代基視需要地取代或取代的情況下，應當理解這樣的部分或基團意指未被取代的。
術語「對（para）」、「間（meta）」和「鄰（ortho）」具有本領域所理解的含義。因此，例如，完全取代的苯基基團在與苯環附接點相鄰的兩個「鄰」（ o）位、兩個「間」（ m）位和橫跨附接點的一個「對」（ p）位處具有取代基。為了進一步闡明取代基在苯環上的位置，將兩個不同的鄰位指定為鄰和鄰'，並將兩個不同的間位指定為間和間'，如下闡述。
Figure 02_image343
當提及吡啶基基團上的取代基時，術語「對」、「間」和「鄰」係指取代基相對於吡啶環的附接點之位置。例如，下面的結構被描述為3-吡啶基，其中X 1取代基位於鄰位，X 2取代基位於間位，並且X 3取代基位於對位：
Figure 02_image345
。
為了提供更簡潔的描述，本文給定的一些定量表達未用術語「約」限定。應當理解，無論是否明確地使用術語「約」，本文給出的每個量意指實際給出的值，並且還意指基於熟悉該項技術者合理推斷的此類給定值之近似值，包括由於針對這樣的給定值之實驗和/或測量條件導致的等價值和近似值。任何時候當產率以百分比給出時，這樣的產率係指相對於根據特定的化學計量條件可以獲得的相同實體之最大量，給出產率之實體質量。除非另外指明，否則以百分比給出的濃度係指質量比。
術語「緩衝溶液（buffered solution）」或「緩衝液（buffer solution）」在本文中根據其標準含義可互換地使用。緩衝溶液用於控制介質之pH，並且其選擇、用途和功能係熟悉該項技術者已知的。參見，例如，描述（尤其是）緩衝液以及緩衝液成分的濃度與緩衝液之pH如何關聯的G.D. Considine編輯, Van Nostrand’s Encyclopedia of Chemistry [範諾斯特蘭化學百科全書], 第261頁, 第5版 (2005)。例如，藉由將MgSO 4和NaHCO 3以10 : 1 w/w的比率添加到溶液中，以將溶液之pH保持在約7.5，來獲得緩衝溶液。
本文所給出的任何式旨在表示具有該結構式描繪的結構及其某些變化或某些形式之化合物。特別地，本文所給出的具有任何式之化合物可以具有不對稱中心，並且因此以不同的鏡像異構物形式存在。通式化合物之所有光學異構物及其混合物都認為在該式之範圍之內。因此，本文所給出的任何式旨在表示外消旋物、一或多種鏡像異構物形式、一或多種非鏡像異構物形式、一或多種構型異構物形式，及其混合物。此外，某些結構可以以幾何異構物（即順式和反式異構物）、互變異構物或構型異構物存在。
也應該理解，具有相同分子式但其原子鍵合之性質或順序或其原子在空間中之排列不同的化合物稱為「異構物」。
彼此不成鏡像的立體異構物稱為「非鏡像異構物」，並且彼此係不能重疊的鏡像之立體異構物稱為「鏡像異構物」。當化合物具有不對稱中心，例如，該不對稱中心鍵合到四個不同的基團時，並且可能有一對鏡像異構物。鏡像異構物可以由其不對稱中心之絕對組態來表徵，並由Cahn和Prelog之R-和 S-順序規則來描述，或由分子旋轉偏光平面之方式來描述，並指定為右旋或左旋（即，分別被指定為(+)-或(-)-異構物）。手性化合物可以作為單獨的鏡像異構物或作為其混合物存在。含有相同比例的鏡像異構物之混合物被稱為「外消旋混合物」。
「互變異構物」係指係特定化合物結構之可互換形式並且在氫原子和電子位移方面不同的化合物。因此，兩種結構可以藉由π電子和原子（通常係H）之運動處於平衡。例如，烯醇和酮係互變異構物，因為它們藉由用酸或鹼處理而快速地相互轉化。互變異構之另一實例係苯基硝基甲烷之酸形式和硝基形式，該實例同樣地藉由用酸或鹼處理形成。
互變異構形式可以與獲得目標化合物之最優化學反應性和生物活性相關。
本揭露之化合物可以具有一或多個不對稱中心；因此，此類化合物可以作為單獨的( R)-或( S)-立體異構物或作為其混合物產生。
除非另有說明，說明書和申請專利範圍中特定化合物之描述或命名旨在包括兩種單獨的鏡像異構物及其外消旋混合物或其他混合物。立體化學之測定方法和立體異構物之分離方法在本領域中係眾所周知的。
某些實例含有描繪為絕對鏡像異構物之化學結構，但旨在指示未知組態的鏡像異構物純的物質。在該等情況下，在名稱中用(R*)或(S*)或(*R)或(*S)指示對應立構中心之絕對立體化學係未知的。因此，指定為(R*)或(*R)之化合物係指絕對組態為(R)或(S)之鏡像異構物純的化合物。在絕對立體化學已被證實的情況下，使用(R)和(S)命名結構。
符號
Figure 02_image347
和
Figure 02_image349
用於意指本文所示化學結構中相同的空間排列。類似地，符號
Figure 02_image351
和
Figure 02_image353
用於意指本文所示化學結構中相同的空間排列。
某些具有式 (I) 之化合物或具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽可以作為溶劑合物獲得。溶劑合物包括由本揭露之化合物與一或多種溶劑在溶液中或以固體或晶體形式相互作用或錯合而形成的溶劑合物。在一些實施方式中，溶劑係水並且溶劑合物係水合物。
在本文中提及的化合物代表提及以下任一種：(a) 這樣的化合物之實際列舉形式，和 (b) 這樣的化合物在介質中之任何形式，在命名時即已考慮該化合物處於該介質中。例如，本文中對如R-COOH的化合物之提及涵蓋對例如以下任一項之提及：R-COOH (s)、R-COOH (sol)和R-COO - (sol)。在此實例中，R-COOH (s)係指固體化合物，因為其可例如存在於片劑或一些其他固體藥物組成物或製劑中；R-COOH (sol)指化合物在溶劑中之非解離形式；而R-COO - (sol)係指化合物在溶劑中之解離形式，如化合物在水性環境中之解離形式，無論這樣的解離形式係衍生自R-COOH、衍生自其鹽、或衍生自在所考慮的介質中解離後產生的R-COO -之任何其他實體。在另一實例中，如「將實體暴露於具有式R-COOH之化合物」之表達係指將該實體暴露於在進行這樣的暴露的介質中存在的化合物R-COOH之一或多種形式。在又另一實例中，如「使實體與具有式R-COOH之化合物反應」之表達係指，使 (a)（發生這樣的反應的介質中存在的一或多種化學相關形式的這樣的實體）與 (b)（發生這樣的反應的介質中所存在的一或多種化學相關形式的化合物R-COOH）反應。在這方面，如果這樣的實體例如處於水性環境中，應當理解，化合物R-COOH處於這樣的相同介質中，並且因此使該實體暴露於如R-COOH (aq)和/或R-COO - (aq)種類的介質中，其中下標「（aq）」根據其在化學和生物化學中之常規含義代表「水性」。在該等命名實例中選擇了羧酸官能基；然而，這一選擇並不旨在作為限制，而其僅是說明。應當理解，可以根據其他官能基提供類似的實例，包括但不限於羥基、鹼性氮成員（如在胺中之那些）、以及在含有化合物之介質中根據已知的方式相互作用或轉化的任何其他基團。此類相互作用和轉化包括但不限於解離、締合、互變異構、溶劑分解（包括水解）、溶劑化（包括水合）、質子化和去質子化。就此方面在本文中未進一步提供實例，這係因為該等在給定介質中之相互作用和轉化對於任何熟悉該項技術者係已知的。
在另一實例中，藉由參考已知形成兩性離子之化合物，在本文中涵蓋兩性離子化合物，即使沒有以其兩性離子形式進行明確命名。如一或多種兩性離子及其同義詞一或多種兩性離子化合物等術語係IUPAC認可的標準名稱，這種名稱係眾所周知的，並且係定義的科學名稱的標準集之一部分。在這方面，名稱兩性離子被Chemical Entities of Biological Interest（ChEBI）分子實體字典分配了名稱標識CHEBI：27369。如通常所熟知，兩性離子或兩性離子化合物係具有相反符號的形式單位電荷之中性化合物。有時，該等化合物參考術語「內鹽」。其他來源將該等化合物稱為「雙極離子」，雖然後面的術語被另一些其他來源認為是誤稱。作為一個具體實例，胺基乙酸（即胺基酸甘胺酸）具有式H 2NCH 2COOH，並且在一些介質中（在這個情況下係在中性介質中）以兩性離子 +H 3NCH 2COO -之形式存在。兩性離子、兩性離子化合物、內鹽和雙極離子以該等術語之已知和充分確定含義落入本揭露之範圍內，在任何情形中熟悉該項技術者都應當如此理解。因為不必命名熟悉該項技術者會認識到的每一個實施方式，因此本文中沒有明確給出與本揭露之化合物相關的兩性離子化合物之結構。但是其係本揭露實施方式之一部分。在此方面，本文中沒有提供進一步的實例，因為在給定介質中導致給定化合物的各種形式之相互作用和轉化係任何熟悉該項技術者已知的。
在本文中給出的任何式還旨在表示該等化合物之未標記形式以及同位素標記形式。除了一或多個原子被具有選擇的原子質量或原子數之原子替換外，同位素標記的化合物具有本文所給出的式描述的結構。可以摻入本揭露之化合物中的同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯以及碘之同位素，如分別是 2H、 3H、 11C、 13C、 14C、 15N、 18O、 17O、 31P、 32P、 35S、 18F、 36Cl、 125I。此類同位素標記化合物可用於代謝研究（較佳的是使用 14C）、反應動力學研究（使用例如氘（即，D或 2H）；或氚（即，T或 3H））、檢測或成像技術如正電子發射斷層攝影術（PET）或單光子發射電腦斷層掃描攝影術（SPECT），包括藥物或底物組織分佈測定，或用於患者之放射性治療。特別地， 18F或 11C標記的化合物可以特別較佳的是用於PET或SPECT之研究。此外，用較重的同位素如氘（即， 2H）進行取代可以賦予由更好的代謝穩定性引起的某些治療優勢（例如，增加的體內半衰期或降低的劑量需求）。本揭露之同位素標記化合物通常可以藉由進行以下方案或實例中揭露的程序、以及以下所述藉由容易獲得的同位素標記試劑取代非同位素標記的試劑來製備。
當涉及本文給出的任何式時，從指定變數之可能種類清單中進行的特定的部分之選擇並不旨在將在其他地方出現的該變數之種類限定為相同選擇。換言之，當變數出現不止一次時，除非另有說明，從指定列表中進行的種類選擇獨立於式中其他地方的相同變數之種類選擇。
根據上述對賦值和命名進行的解釋性說明，應當理解，在本文中對設定的明確涉及（其中在化學性質上有意義和除非另有說明），暗示了獨立地涉及這樣的設定的實施方式，和涉及所明確涉及的設定的子集之每種可能實施方式。
藉由關於取代基術語之第一實例，如果取代基S 1 實例係S 1和S 2中之一個，並且取代基S 2 實例係S 3和S 4中之一個，則該等分配係指根據以下選擇給出的本揭露之實施方式：S 1 實例係S 1並且S 2 實例係S 3；S 1 實例係S 1並且S 2 實例係S 4；S 1 實例係S 2並且S 2 實例係S 3；S 1 實例係S 2並且S 2 實例係S 4；以及此類選擇中每一個之等效物。為了簡潔起見，本文相應地使用較短的術語「S 1 實例係S 1和S 2中之一個，並且S 2 實例係S 3和S 4中之一個」，但並非以限制的方式。在通用術語中所述之以上關於取代基術語之笫一實例旨在闡述各種在本文中所述之取代基賦值。本文中給出的用於取代基之上述規則在適用時延伸至如R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、G 1、G 2、G 3、G 4、G 5、G 6、G 7、G 8、G 9、G 10、G 11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符號之成員。
此外，當將多於一種賦值給予任何成員或取代基時，本揭露之實施方式包含可以由所列舉的獨立採用的賦值及其等價賦值構成的各種組合。藉由關於取代基術語之第二實例，如果本文描述取代基S 實例係S 1、S 2和S 3中之一個，則此列表係指本揭露之實施方式，其中S 實例係S 1；S 實例係S 2；S 實例係S 3；S 實例係S 1和S 2中之一個；S 實例係S 1和S 3中之一個；S 實例係S 2和S 3中之一個；S 實例係S 1、S 2和S 3中之一個；並且S 實例係該等選擇中每一個之任何等效物。為了簡潔起見，本文相應地使用較短的術語「S 實例係S 1、S 2和S 3中之一個」，但並非以限制的方式。在通用術語中所述之以上關於取代基術語之笫二實例旨在闡述各種在本文中所述之取代基賦值。本文中給出的用於取代基之上述規則在適用時延伸至如R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、G 1、G 2、G 3、G 4、G 5、G 6、G 7、G 8、G 9、G 10、G 11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符號之成員。
命名「C i-j」，其中j ＞ i，當本文中將其應用於一類取代基時，意指本揭露實施方式，其中從i至j（包括i和j）的每一種數目的碳原子成員的獨立地實現。舉例來說，術語C 1-6獨立地係指具有一個碳成員（C 1）之實施方式、具有兩個碳成員（C 2）之實施方式、具有三個碳成員（C 3）之實施方式、以及具有四個碳成員（C 4）之實施方式、具有五個碳成員（C 5）之實施方式、以及具有六個碳成員（C 6）之實施方式。
術語C n-m烷基係指脂族鏈，無論是直鏈還是支鏈，鏈中碳成員之總數N滿足n ≤ N ≤ m，其中m ＞ n。本文提及的任何二取代基旨在涵蓋各種附接可能性，只要允許多於一種的這類可能性。例如，提及二取代基-A-B-（其中A ≠ B）在本文中係指A附接到第一取代成員上以及B附接到第二取代成員上的這樣的二取代基，並且其也指A附接到第二取代成員上以及B附接到第一取代成員上的這樣的二取代基。
本揭露還包括具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽，較佳的是上述那些和本文示例的特定化合物之鹽，以及使用此類鹽之治療方法。
術語「藥學上可接受的」意指由聯邦或州政府之監管機構或美國以外的國家之相應機構批准的或可批准的，或美國藥典中或其他公認藥典中列出的用於在動物（更特別地，在人中）中使用。
「藥學上可接受的鹽」旨在意指無毒的、生物學耐受的或以生物學適於投與至受試者的其他形式之由式 (I) 表示的化合物的游離酸或鹼之鹽。其應該具有親體化合物所需的藥理學活性。一般而言，參見，G.S.Paulekuhn,等人, 「Trends in Active Pharmaceutical Ingredient Salt Selection based on Analysis of the Orange Book Database [基於橙皮書數據庫分析的活性藥物成分鹽選擇趨勢]」, J. Med. Chem.[藥物化學雜誌], 2007, 50:6665-72；S.M.Berge,等人, 「Pharmaceutical Salts [藥用鹽]」, J Pharm Sci.[藥物科學雜誌], 1977, 66:1-19，以及 Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, Selection, and Use [ 藥用鹽、特性、選擇和使用手冊 ],Stahl和Wermuth編輯, Wiley-VCH和VHCA, 蘇黎世, 2002。藥學上可接受的鹽之實例係那些不具有過度毒性、刺激或過敏反應的藥理學有效且適於與患者組織接觸之鹽。具有式 (I) 之化合物可以具有足夠酸性的基團、足夠鹼性的基團或兩者的官能基，並且因此與多種無機鹼或有機鹼、以及無機酸和有機酸反應，以形成藥學上可接受的鹽。
如本文所用，術語「組成物」或「藥物組成物」係指本文提供的至少一種化合物與藥學上可接受的載體之混合物。藥物組成物有助於將化合物向患者或受試者投與。本領域存在多種投與化合物之技術，該等技術包括但不限於靜脈內、口服、噴霧劑、腸胃外、眼部、肺部和局部投與。
如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」意指藥學上可接受的材料、組成物或載體，如液體或固體填充劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑或囊封材料，該等材料涉及將本文提供的化合物在患者體內載運或輸送或載運或輸送到患者體內，使得它可以發揮預期功能。典型地，此類構建體從身體之一個器官或部分載運或輸送到身體之另一個器官或部分。每種載體在與配製物之其他成分（包括本文提供的化合物）相容且對患者無害的意義上必須是「可接受的」。可充當藥學上可接受的載體的材料之一些實例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；澱粉，如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，如可可脂和栓劑蠟；油，如花生油、棉籽油、紅花子油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；界面活性劑；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；以及藥物配製物中使用的其他無毒相容物質。如本文所用，「藥學上可接受的載體」還包括與本文提供的化合物之活性相容並對於患者來說在生理上係可接受的任何和所有的塗層劑、抗菌劑和抗真菌劑以及吸收延遲劑等。補充活性化合物也可以摻入組成物中。「藥學上可接受的載體」可以進一步包括本文提供的化合物之藥學上可接受的鹽。可以包括在本文提供的藥物組成物中之其他另外成分在本領域係已知的，並例如描述於Remington's Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學]（Genaro編輯, Mack Publishing Co. [馬克出版公司], 1985, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州），將其藉由引用併入本文。
如本文所用，術語「穩定劑」係指能夠化學上抑制或阻止本文揭露的化合物的降解之聚合物。將穩定劑添加至化合物之配製物中用來改善化合物之化學和物理穩定性。
如本文所用，術語「片劑」表示可以藉由常規壓片製程將原料藥或其藥學上可接受的鹽與合適的賦形劑（例如，填充劑、崩散劑、潤滑劑、助流劑和/或界面活性劑）一起壓縮而產生的可口服投與的單劑量固體劑型。
如本文所用，術語「膠囊」係指其中藥物被封閉在硬質或軟質可溶容器或「殼」內之固體劑型。容器或殼可以由明膠、澱粉和/或其他合適的物質形成。
如本文所用，術語「有效量」、「藥學有效量」和「治療有效量」係指無毒但足夠提供期望的生物學結果之藥劑量。該結果可為疾病徵象、症狀或原因之減少或減輕，或任何其他期望的生物學系統變化。熟悉該項技術者使用常規實驗可以確定任何個體情況下的適當治療量。
如本文所用，「組合」、「治療組合」、「藥物組合」、或「組合產物」係指組合投與的非固定的組合或成套套組，其中在時間間隔內，可以同時或分開地獨立投與兩種或更多種治療劑，尤其是其中該等時間間隔允許組合夥伴物顯示協作的，例如增效的效應。
術語「調節劑」包括抑制劑和活化劑兩者，其中「抑制劑」係指降低、預防、滅活、脫敏或下調HBV組裝以及其他HBV核心蛋白功能之化合物，該等功能係HBV複製或感染顆粒生成所必需的。
如本文所用，術語「殼體組裝調節劑」係指破壞或加速或抑制或阻礙或延遲或減少或修飾正常殼體組裝（例如，在成熟期間）或正常殼體拆卸（例如，在感染期間）或擾動殼體穩定性從而誘導異常的殼體形態和功能之化合物。在一個實施方式中，殼體組裝調節劑加速殼體組裝或拆卸，從而誘導異常的殼體形態。在另一個實施方式中，殼體組裝調節劑與主要的殼體組裝蛋白（CA）相互作用（例如在活性位點與其結合，在變構位點與其結合，修改和/或阻礙折疊等），從而破壞殼體組裝或拆卸。在又另一個實施方式中，殼體組裝調節劑引起CA之結構或功能（例如，CA組裝、拆卸、與底物結合、折疊成合適構象等的能力）之擾動，這減弱了病毒感染性和/或對病毒係致命的。
如本文所用，術語「治療（treatment或treating）」被定義為向患者應用或投與治療劑，即本揭露之化合物（單獨地或與另一種藥劑組合），或向來自患者的分離的組織或細胞系應用或投與治療劑（例如，用於診斷或離體應用），該患者患有HBV感染、有HBV感染之症狀或具有患上HBV感染之可能性，目的係治癒、痊癒、減輕、緩解、改變、補救、改善、改進或影響HBV感染、HBV感染之症狀或患上HBV感染之可能性。基於從藥物基因組學領域獲得的知識，此類治療可以特別定制或修改。
如本文所用，術語「預防（prevent或prevention）」意指沒有障礙或疾病發展（如果沒有發生障礙或疾病）、或沒有進一步的障礙或疾病發展（如果已經患上了該障礙或疾病）。還考慮到了預防與障礙或疾病相關的一些或全部症狀之能力。
如本文所用，術語「患者」、「個體」或「受試者」係指人或非人類哺乳動物。非人類哺乳動物包括例如家畜以及寵物，如綿羊、牛、豬、犬科動物、貓科動物和鼠科哺乳動物。較佳的是，該患者、受試者或個體係人。
在根椐本揭露之治療方法中，根據本揭露之有效量的藥劑被投與至患有或診斷為具有這樣的疾病、障礙或病症之受試者。「有效量」意指在需要這樣的治療的患者中對於指定的疾病、障礙或病症通常足以引起所需的治療或預防益處之量或劑量。本揭露之化合物之有效量或劑量可以藉由常規方法確定，如建模、劑量遞增研究或臨床試驗，並且考慮常規因素，例如投與或藥物遞送之模式或途徑，化合物之藥物動力學，疾病、障礙或病症之嚴重程度和過程，受試者之先前或正在進行的治療，受試者之健康狀況和對藥物之響應，以及治療醫師之判斷。劑量之實例在每天每公斤受試者體重從約0.001至約200 mg化合物的範圍內。化合物的劑量之實例係從約1 mg至約2,500 mg。
一旦患者之疾病、障礙或病症出現改善，可調整劑量，用於預防性或維持性治療。例如，隨著症狀變化，投與的劑量或頻率或兩者可以減少至維持所需的治療或預防作用之水平。當然，如果症狀已經被減輕到適當的水平，治療可以停止。然而，在有任何症狀復發時，患者可能需要長期的間歇治療。
可以根據揭露的方法進行治療之HBV感染包括HBV基因型A、B、C、和/或D感染。然而，在一個實施方式中，所揭露的方法可以治療任何HBV基因型（「泛基因型（pan-genotypic）治療」）。可以使用本領域已知的方法進行HBV基因分型，例如INNO-LIPA® HBV基因分型（Innogenetics N.V.公司，根特，比利時）。
為了幫助本申請之讀者，將說明書分隔為不同的段落或部分。該等分隔不應被視為一段或一部分之實質內容與另一段或另一部分之實質內容脫節。相反，本說明書涵蓋了可以考慮的各個部分、段落和句子之所有組合。
本文引用的所有參考文獻之每一相關揭露內容均藉由引用具體併入。以下實例係藉由說明的方式而不是藉由限制的方式提供的。 實例
現在將參考以下用於其一般製備之說明性合成方案和隨後的具體實例來描述可用於本揭露方法之示例性化合物。技術者將認識到，為了獲得本文中之各種化合物，可以適當地選擇起始材料，使得最終所需的取代基將在有或沒有合適的保護下藉由反應方案而被攜帶以產生所需產物。可替代地，可能有必要或希望使用合適的基團代替最終所需的取代基，該合適的基團可藉由反應方案被攜帶並適當地被所需的取代基代替。除非另有說明，否則變數如上文參考式 (I) 所定義。反應可以在溶劑之熔點和回流溫度之間進行，較佳的是在0°C和溶劑之回流溫度之間進行。可以採用常規加熱或微波加熱來加熱反應。反應也可以在高於溶劑之正常回流溫度之密封壓力容器中進行。
可使用熟悉該項技術者已知的方法將具有式 (I) 之任一種之化合物轉化為其相應鹽。例如，在如Et 2O、CH 2Cl 2、THF、MeOH、氯仿或異丙醇等溶劑中用三氟乙酸、HCl或檸檬酸處理具有式 (I) 之胺以提供相應的鹽形式。可替代地，藉由逆相HPLC純化條件，因此獲得三氟乙酸或甲酸鹽。從極性溶劑（包括極性溶劑之混合物和極性溶劑之水性混合物）或從非極性溶劑（包括非極性溶劑之混合物）中藉由重結晶以結晶形式獲得具有式 (I) 之化合物之藥學上可接受的鹽之結晶形式。
當根據本揭露之化合物具有至少一個手性中心時，它們可相應地作為鏡像異構物存在。當化合物具有兩個或更多個手性中心時，它們可以另外以非鏡像異構物存在。應當理解，所有此類異構物及其混合物都涵蓋在本揭露之範圍內。
表示為「立體異構物混合物」（指兩種或更多種立體異構物之混合物並且包括鏡像異構物、非鏡像異構物及其組合）之化合物藉由SFC拆分進行分離。
可以藉由形式特異性合成或藉由拆分獲得單一形式（如單一鏡像異構物）之化合物。化合物可以作為各種形式之混合物可替代地獲得，如外消旋（1 : 1）或非外消旋（非1 : 1）混合物。當獲得鏡像異構物之外消旋和非外消旋混合物時，可使用熟悉該項技術者已知的常規分離方法分離單一鏡像異構物，如手性層析、重結晶、非鏡像異構物之鹽形成、衍生為非鏡像異構物之加合物、生物轉化、或酶轉化。當獲得區域異構物或非鏡像異構物之混合物時，適用情況下，可以使用常規方法（如層析法或結晶法）對單個的異構物進行分離。 1. 通用資訊 化學名稱
使用化學軟體：ACD/ChemSketch生成化學名稱，並且化學名稱可以較佳的是遵循IUPAC規則。 用於 LCMS 方法之通用程序
使用LC泵、二極體陣列（DAD）或UV檢測器以及如在對應的方法中所指定的柱進行高效液相層析法（HPLC）測量。
將來自柱的流帶至配置有大氣壓離子源之質譜儀（MS）。設置調諧參數（例如掃描範圍、停留時間等）以便獲得允許鑒定化合物的標稱單一同位素分子量（MW）之離子在技術者之知識內。利用適當的軟體進行數據獲取。
藉由實驗滯留時間（Rt）和離子描述化合物。如果未不同地指定，那麼報導的分子離子對應於[M+H] +（質子化的分子）和/或[M-H] -（去質子的分子）。在化合物不是直接可電離的情況下，指定加合物之類型（即[M+NH 4] +、[M+HCOO] -等）。獲得的所有結果具有通常與所使用的方法相關的實驗不確定性。
下文中，「SQD」意指單四極檢測器，「MSD」質量選擇檢測器，「RT」室溫，「BEH」橋接的乙基矽氧烷/二氧化矽雜合物，「DAD」二極體陣列檢測器，「HSS」高強度二氧化矽，「Q-Tof」四極飛行時間質譜儀，「CLND」化學發光氮檢測器，「ELSD」蒸發光掃描檢測器。 NMR 分析
1H NMR譜記錄在1) Bruker DPX 400 MHz光譜儀上、或2) Bruker Avance 400 MHz光譜儀上、或c) Bruker Avance III 400 MHz光譜儀上、或d) Bruker Avance 600 MHz光譜儀上、或e) Bruker Avance NEO 400 MHz光譜儀上、或f) Bruker model AVIII 400光譜儀上、或g) ZKNJ BIXI-1 300 MHz，Bruker Avance III 400 MHz上、或h) Bruker AVANCE Neo 400 MHz上。
除非另外說明，否則在環境溫度下記錄NMR譜。數據報告如下：在規模、積分、多重性（s = 單峰、d = 雙重峰、t = 三重峰、q = 四重峰、quin = 五重峰、sext = 六重峰、sept = 七重峰、m = 多重峰、b = 寬峰或它們之組合）方面，化學位移相對於TMS（δ = 0 ppm）以百萬分率（ppm）為單位，偶合常數 J以赫茲（Hz）為單位。 MS 分析
除非另外指明，質譜在Shimadzu LCMS-2020 MSD或Agilent 1200/G6110A MSD上藉由在正模式下的電灑游離（ESI）獲得。 2. 縮寫[表3]
µw 微波
ADDP 1,1'-(偶氮二羰基)二哌啶
AlMe 3 三甲基鋁
aq. 水性
atm 大氣壓
Boc 2O 二碳酸二三級丁酯
BOC 三級丁氧基羰基
BODIPY 硼-二吡咯亞甲基
br 寬峰
CA 殼體組裝
DAST (二乙基胺基)三氟化硫
DBU 1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
dd 雙二重峰
DEA 二乙胺
DIPE 二異丙醚
DIPEA/DIEA N, N-二異丙基乙胺
DMF 二甲基甲醯胺
DMF-DMA 二甲基甲醯胺-二甲縮醛
DMSO 二甲亞碸
DNA 去氧核糖核酸
EDCI N-(3-二甲基胺基丙基)- N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽
ESI 電灑游離
Et 3N 三乙胺
Et 2O 乙醚（ether/diethyl ether）
EtOAc/EA 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
FCC 正相矽膠層析法
g 克
h/hr 小時
HBV B型肝炎病毒
HOAc 乙酸
HPLC 高效液相層析法
Hz 赫茲
i-PrNH 2 異丙胺
i-PrOH/IPA 異丙醇
KO tBu 三級丁醇鉀
LAH 鋁氫化鋰
LCMS 液相層析質譜法
LHMDS，LiHMDS 雙(三甲矽)胺基鋰
M 莫耳
m 多重峰
MeCN/ACN 乙腈
MeOH 甲醇
mg 毫克
MHz 百萬赫
min 分鐘
mL 毫升
µL 微升
mmol 毫莫耳
µmol 微莫耳
MS 質譜
MsCl 三甲基苯氯（mesityl chloride）
m/z 質荷比
N 正常
NaOAc/AcONa 乙酸鈉
NMR 核磁共振
o/n 過夜
PCR 聚合酶鏈反應
PE 石油醚
PMPA 9-(2-膦醯基-甲氧基丙基)腺嘌呤
ppm 百萬分率
ppt 沈澱物
Py 吡啶
RNA 核糖核酸
R t 滯留時間
rt 室溫
s 單峰
sat. 飽和的
SFC 超臨界流體層析法
t 三重峰
T 3P 丙烷膦酸酐
TBAI 碘化四丁銨
TBD 1,5,7-三氮雜雙環[4.4.0]癸-5-烯
TBDPSCl 三級丁基二苯基氯矽烷
TBDPS 三級丁基二苯基甲矽烷基
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TLC 薄層層析法
TLR Toll-樣受體
TNF 腫瘤壞死因子
V或體積 以毫升計的每克底物之溶劑體積
Δ 在回流下加熱
Cbz 苄氧羰基
實驗程序 中間體 Int A
Figure 02_image355
中間體 Int A-2 ： (R)- 苄基 (2,3- 二羥丙基 ) 胺基甲酸酯
在0°C在氮氣氣氛下，向(R)-3-胺基丙烷-1,2-二醇 Int A-1（5 g，54.9 mmol）在四氫呋喃（30 mL）和水（30 mL）中之溶液中添加碳酸鈉（8 g，75.5 mmol），並逐滴添加氯甲酸苄酯（8.3 mL，58.4 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物過濾，除去四氫呋喃并用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（11 g，由 1H NMR得到的純度為90%，80%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) 7.48 - 7.35 (m, 5H), 5.27 (br s, 1H), 5.16 (br s, 2H), 3.89 - 3.78 (m, 1H), 3.73 - 3.60 (m, 2H), 3.47 - 3.31 (m, 2H), 2.47 - 2.28 (m, 2H)。 中間體 Int A-3 ： (R)- 苄基 (3-(( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 )-2- 羥丙基 ) 胺基甲酸酯
在0°C，向(R)-苄基 (2,3-二羥丙基)胺基甲酸酯 Int A-2（11 g，90%純度，44.0 mmol）在二氯甲烷（110 mL）中之溶液中添加三乙胺（6.6 mL，78.3 mmol）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（247 mg，2.02 mmol）和三級丁基氯二苯基矽烷（12 mL，46.1 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物濃縮，過濾，並用二氯甲烷洗滌。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至2 : 1）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（17 g，由 1H NMR得到的純度為90%，75%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) 7.64 - 7.62 (m, 4H), 7.45 - 7.30 (m, 11H), 5.08 (s, 3H), 3.84 - 3.79 (m, 1H), 3.70 - 3.58 (m, 2H), 3.45 - 3.39 (m, 1H), 3.23 - 3.16 (m, 1H), 1.06 (s, 9H)。 中間體 Int A-4 ： (R)-5- 三級丁基 3- 乙基 2-((R)-10,10- 二甲基 -3- 側氧基 -1,9,9- 三苯基 -2,8- 二氧雜 -4- 氮雜 -9- 矽雜十一烷 -6- 基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3,5(4H)- 二甲酸酯
在0°C，向(R)-苄基 (3-((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2-羥丙基)胺基甲酸酯 Int A-3（17 g，90%純度，33.0 mmol）、(R)-5-三級丁基 3-乙基 6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯 （ 15 g，48.5 mmol）和三苯膦（17 g，64.8 mmol）在四氫呋喃（300 mL）中之溶液中添加偶氮二甲酸二三級丁酯（15 g，65.1 mmol）。在50°C攪拌過夜後，將混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至2 : 1）純化，以得到粗產物，將其進一步藉由C18柱（乙腈 : 水 = 95%至100%）純化，以得到呈淺黃色油狀物之標題化合物（21 g，由LCMS得到的純度為82%，69%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.40 min，C 42H 54N 4O 7Si之計算質量754.4，m/z實測值755.1 [M+H] +。 中間體 Int A-5 ： (3R,7S)- 三級丁基 7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯 ：
向(R)-5-三級丁基 3-乙基 2-((R)-10,10-二甲基-3-側氧基-1,9,9-三苯基-2,8-二氧雜-4-氮雜-9-矽雜十一烷-6-基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯 Int A-4（13 g，82%純度，14.1 mmol）在甲醇（150 mL）中之溶液中添加10%鈀/活性炭催化劑（1.5 g，1.41 mmol）。在室溫在氫氣氣氛下攪拌過夜後，將反應混合物過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至2 : 1）純化，以得到呈淺黃色固體之標題化合物（6.7 g，由 1H NMR得到的純度為100%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.03 min，C 32H 42N 4O 4Si之計算質量574.3，m/z實測值575.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) 8.13 (br s, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 4H), 7.48 - 7.40 (m, 6H), 4.90 (d, J =17.2 Hz, 1H), 4.77 - 4.65 (m, 1H), 4.58 - 4.54 (m, 1H), 4.12 - 3.83 (m, 4H), 3.71 - 3.65 (m, 1H), 2.83 (dd, J =15.6, 6.0 Hz, 1H), 2.56 (d, J =15.6 Hz, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.00 (d, J =6.8 Hz, 3H), 0.92 (s, 9H)。 中間體 Int A-6 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮鹽酸鹽
將(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 Int A-5（1.36 g，2.37 mmol）在於1,4-二㗁𠮿中之4 M鹽酸（20 mL）中之溶液在室溫攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.2 g，93%純度，92.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.34 min，C 27H 34N 4O 2Si之計算質量474.3，m/z實測值474.7 [M+H] +。 中間體 Int A ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A-6（1.5 g，97%純度，3.07 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）中之溶液中添加3,4-二氯苯甲酸（800 mg，4.19 mmol）、2-(7-氮雜-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（1.8 g，4.73 mmol）和三乙胺（1.5 mL，10.8 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。將混合物用水（50 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為6並用乙酸乙酯（80 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之 Int A（1.87 g，由LCMS得到的純度為100%，94.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.08 min，C 34H 36Cl 2N 4O 3Si之計算質量646.2，m/z實測值647.1 [M+H] +。 中間體 Int B
Figure 02_image357
中間體 Int B-2 ： (3S,4R,5S)-5-((S)-2,2- 二甲基 -1,3- 二氧戊環 -4- 基 )-3,4- 二羥基二氫呋喃 -2(3H)- 酮
在室溫，向L-(+)-古洛糖酸γ-內酯 Int B-1（30 g，168 mmol）在四氫呋喃（125 mL）和N,N-二甲基甲醯胺（125 mL）中之溶液中添加4-甲基苯磺酸水合物（3.2 g，16.8 mmol）和2,2-二甲氧基丙烷（23.0 g，221 mmol）。在室溫攪拌16小時後，添加碳酸鈉（30.0 g）並攪拌1小時。將所得混合物過濾，並將濾餅用四氫呋喃洗滌。將濾液在減壓下濃縮。將所得棕色固體用甲苯（300 mL）研磨，過濾，用甲苯（50 mL）洗滌，所得濾餅為呈黃色固體之標題產物（37.5 g，由 1H NMR得到的純度為85%，87%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 5.88 (d, J =7.2 Hz, 1 H), 5.44 (d, J =4.0 Hz, 1H), 4.44 - 4.41 (m, 1H), 4.30 - 4.25 (m, 2H), 4.22 - 4.19 (m, 1H), 4.07 (dd, J =8.8和6.4 Hz, 1H), 3.76(dd, J =8.8和6.4 Hz, 1H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H)。 中間體 Int B-3 ： (S)-2,2- 二甲基 -1,3- 二氧戊環 -4- 甲酸酯
在室溫，向碳酸氫鈉（27.0 g，321 mmol）在水（150 mL）中之溶液中分批添加在四氫呋喃（160 mL）和水（10 mL）中之高碘酸鈉（69.0 g，323 mmol）和(3S,4R,5S)-5-((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)-3,4-二羥基二氫呋喃-2(3H)-酮 Int B-2（36.0 g，85%純度，140 mmol）。在35°C攪拌4.5 h後，將反應混合物冷卻至5°C並保持在該溫度14 h。將固體藉由過濾除去並將濾餅用四氫呋喃（100 mL）洗滌，然後將水相用四氫呋喃（80 mL）萃取兩次並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾，濃縮，以得到呈無色油狀物之標題產物（18.0 g，由 1H NMR得到的純度為70%，69%產率），將其不經進一步純化。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.60 (d, J=1.2 Hz, 1H), 4.13 - 4.06 (m, 1H), 3.93 - 3.89 (m, 1H), 3.70 - 3.67 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H)。 中間體 Int B-5 ： (S)-N-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺
向1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙酮 Int B-4（25 g，134 mmol）和(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（33 g，272 mmol）在四氫呋喃（400 mL）中之溶液中添加四異丙醇鈦（83 mL，280 mmol）。在70°C攪拌24小時後，將反應混合物冷卻至0°C，然後添加硼氫化鈉（3.3 g，87.2 mmol）並在0°C攪拌2小時。將反應用鹽水（40 mL）淬滅並用矽藻土過濾。將濾餅用乙酸乙酯（200 mL）洗滌。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 3 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（20 g，由 1H NMR得到的純度為95%，48.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 13H 19F 2NO 2S之計算質量291.1，m/z實測值292.0 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：230 nm，R T= 5.250 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.35 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.10 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.50 (t, J =74.0 Hz, 1H), 4.57 - 4.52 (m, 1H), 3.38 (br s, 1H), 1.50 (d, J =6.4 Hz, 3H), 1.24 (s, 9H)。 中間體 Int B-6 ： (S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙胺
在0°C，向(S)-N-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺 Int B-5（20 g，95%純度，65.2 mmol）在甲醇（210 mL）中之溶液中緩慢添加在1,4-二㗁𠮿中之4 M鹽酸（70 mL）。在0°C攪拌2小時後，將混合物濃縮，以得到黃色殘餘物，將其溶解於水（200 mL）中，用乙酸乙酯（40 mL）萃取三次。將水層用飽和碳酸鈉水溶液鹼化至pH約為8，用乙酸乙酯（300 mL）萃取五次。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（10.5 g，得自 1H NMR的純度為90%，73.5%產率）。手性HPLC（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH : DEA = 85 : 15 : 0.2，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.084 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.35 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.08 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.49 (t, J =74.0 Hz, 1H), 4.13 (q, J =6.4 Hz, 1H), 1.79 - 1.72 (m, 2H), 1.38 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 Int B-7 ： (S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 )-N-(((R)-2,2- 二甲基 -1,3- 二氧戊環 -4- 基 ) 甲基 ) 乙胺
向(S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙胺 Int B-6（10.0 g，90%純度，48.1 mmol）在甲醇（50 mL）中之混合物中添加在四氫呋喃（50 mL）和乙酸（4 mL）中的(S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-甲酸酯 Int B-3（16.1 g，70%純度，86.6 mmol）。在室溫在氮氣氣氛下攪拌10分鐘後，添加氰基硼氫化鈉（7.6 g，121 mmol）並將混合物在室溫在氮氣氣氛下攪拌1小時。然後添加水（200 mL），並用乙酸乙酯（150 mL）萃取三次。將合併的有機層在減壓下濃縮。將所得殘餘物藉由C18（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨）= 10%至75%）純化，以得到呈無色油狀物之標題產物（10.0 g，100%純度，69%產率，97.9%立體純）。LC-MS（ESI）：R T= 1.64 min，C 15H 21F 2NO 3之計算質量301.2，m/z實測值302.0 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 98 : 2，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：214 nm，R T= 6.421 min）。 中間體 Int B-8 ： (R)-5-( 三級丁氧基羰基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸
在0°C，向(R)-5-三級丁基 3-乙基 6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯（20 g，90%純度，58.2 mmol）在甲醇（210 mL）中之溶液中添加在水（70 mL）中之氫氧化鈉（7.2 g，180 mmol）。在40°C攪拌12小時後，將水（80 mL）添加到反應混合物中並濃縮，以得到黃色殘餘物，將其添加到1 M鹽酸水溶液中直至沈澱出大量固體。過濾後，將濾餅用水（200 mL）洗滌並在真空乾燥箱中在50°C乾燥3小時，然後冷卻至室溫，以得到呈白色固體之標題化合物（17.2 g，由 1H NMR得到的純度為95%，99.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.16 min，C 13H 19N 3O 4之計算質量281.1，m/z實測值282.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.14 (s, 2H), 4.89 - 4.85 (m, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.03 - 3.99 (m, 1H), 2.83 (dd, J =15.6, 5.6 Hz, 1H), 2.54 (d, J =8.0 Hz, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.02 (d, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 Int B-9 ： (R)- 三級丁基 3-(((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )(((R)-2,2- 二甲基 -1,3- 二氧戊環 -4- 基 ) 甲基 ) 胺基甲醯基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5(4H)- 甲酸酯
在室溫，向(S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-N-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲基)乙胺 Int B-7（10.5 g，95%純度，33.1 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（350 mL）中之溶液中添加(R)-5-(三級丁氧基羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸 Int B-8（11.7 g，95%純度，39.5 mmol）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（12 g，98.2 mmol）、HATU（19 g，50.0 mmol）。在55°C攪拌12小時後，將混合物用水（1.2 L）稀釋並用乙酸乙酯（900 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（600 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（13 g，由 1H NMR得到的純度為95%，66.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.70 min，C 28H 38F 2N 4O 6之計算質量564.3，m/z實測值565.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.45 - 7.43 (m, 2H), 7.11 - 7.08 (m, 2H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 5.02 - 4.88 (m, 2H), 4.19 - 4.11 (m, 2H), 4.00 - 3.98 (m, 1H), 3.58 - 3.40 (m, 4H), 2.99 - 2.94 (m, 1H), 2.55 (d, J =16.0 Hz, 1H), 1.73 - 1.60 (m, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.39 - 1.24 (m, 6H), 1.13 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 Int B-10 ： (R)- 三級丁基 3-(((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )((R)-2,3- 二羥丙基 ) 胺基甲醯基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5(4H)- 甲酸酯
在室溫，向(R)-三級丁基 3-(((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲基)胺基甲醯基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯 Int B-9（11 g，95%純度，18.5 mmol）在甲醇（220 mL）和乙酸（110 mL）中之溶液。在60°C攪拌16小時後，將混合物濃縮並用飽和碳酸氫鈉水溶液調節至pH約為8，用乙酸乙酯（100 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（11 g，78%純度，88.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 25H 34F 2N 4O 6之計算質量524.2，m/z實測值525.2 [M+H] +。 中間體 Int B-11 ： (R)- 三級丁基 3-(((R)-3-(( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 )-2- 羥丙基 )((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基甲醯基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5(4H)- 甲酸酯
在0°C，向(R)-三級丁基 3-(((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)((R)-2,3-二羥丙基)胺基甲醯基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯 Int B-10（11 g，78%純度，16.4 mmol）在無水二氯甲烷（150 mL）中之溶液中添加三乙胺（4.8 mL，34.4 mmol）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（200 mg，1.64 mmol）和三級丁基氯二苯基矽烷（5.4 g，19.6 mmol）。在室溫攪拌16小時後，將混合物用二氯甲烷（150 mL）稀釋，並且用水（50 mL）洗滌兩次並用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（8.1 g，由LCMS得到的純度為100%，64.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.85 min，C 41H 52F 2N 4O 6Si之計算質量762.4，m/z實測值762.9 [M+H] +。 中間體 Int B-12 ： (3R,7S)- 三級丁基 7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C，向(R)-三級丁基 3-(((R)-3-((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2-羥丙基)((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基甲醯基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯 Int B-11（8.1 g，100%純度，10.6 mmol）在四氫呋喃（160 mL）中之溶液中添加三苯膦（5.5 g，21.0 mmol）和二氮烯-1,2-二甲酸二三級丁酯（5.2 g，22.6 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品，並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 2 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（8.2 g，95%純度，98.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.07 min，C 41H 50F 2N 4O 5Si之計算質量744.4，m/z實測值744.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.61 - 7.56 (m, 4H), 7.47 - 7.34 (m, 8H), 7.13 - 7.11 (m, 2H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.07 (q, J =6.8 Hz, 1H), 5.17 - 5.12 (m, 1H), 4.90 - 4.80 (m, 1H), 4.34 - 4.29 (m, 1H), 4.22 - 4.18 (m, 1H), 4.10 - 4.07 (m, 1H), 3.80 (t, J =9.6 Hz, 1H), 3.62 (dd, J =13.2和4.8 Hz, 1H), 3.34 (dd, J =13.2和4.4 Hz, 1H), 2.90 (dd, J =15.6和5.6 Hz, 1H), 3.62 (d, J =15.6 Hz, 1H), 1.53 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.07 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.03 (s, 9H)。 中間體 Int B ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 Int B-12（15.6 g，95%純度，19.9 mmol）在二氯甲烷（120 mL）中之溶液中添加三氟乙酸（30 mL）。在0°C攪拌3小時後，將混合物濃縮並用飽和碳酸氫鈉水溶液調節至pH約為8，用乙酸乙酯（150 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（9.7 g，由LCMS得到的純度為100%，75.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.99 min，C 36H 42F 2N 4O 3Si之計算質量644.3，m/z實測值645.2 [M+H] +。 化合物 1A 和 1B
Figure 02_image359
中間體 1-2 ： N- 甲氧基 -N,6- 二甲基嗒 𠯤 -3- 甲醯胺
在室溫在氮氣氣氛下，向6-甲基嗒𠯤-3-甲酸（3.5 g，25.340 mmol）、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽 1-1（3.7 g，37.932 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（4.8 g，35.523 mmol）和三乙胺（5.3 g，52.377 mmol）在二氯甲烷（20 mL）中之溶液中添加1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺（7.3 g，38.080 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（3 g，由 1H NMR得到的純度為90%，59%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.85 - 7.73 (m, 1H), 7.47 - 7.40 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.40 (br s, 3H), 2.78 (s, 3H)。 中間體 1-3 ： 1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙酮
在0°C，向N-甲氧基-N,6-二甲基嗒𠯤-3-甲醯胺 1-2（3 g，90%純度，14.901 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（19 mL，19 mmol）。將混合物在0°C攪拌1小時。將混合物用氯化銨水溶液（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（2 g，由 1H NMR得到的純度為90%，89%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.01 (d, J =8.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J =8.8 Hz, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.80 (s, 3H)。 中間體 1-4 ： 1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙酮 1-3（2 g，90%純度，13.221 mmol）在甲醇（15 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（750 mg，19.824 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液（10 mL）稀釋並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.9 g，由 1H NMR得到的純度為90%，94%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.44 (d, J =8.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.09 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 1.54 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 1-5 ： 3-(1- 溴乙基 )-6- 甲基嗒 𠯤
在0°C，向1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙醇 1-4（1.9 g，90%純度，12.376 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加三苯膦（5 g，19.063 mmol）和四溴甲烷（5 g，15.077 mmol）。在25°C攪拌12小時後，將混合物過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.5 g，由 1H NMR得到的純度為90%，54%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (d, J=  8.8 Hz, 1H), 7.38 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.46 (q, J=6.8 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.11 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 1-6 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（900 mg，87%純度，1.21 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中之溶液中添加氫化鈉（97 mg，純度60%，2.43 mmol）。將混合物在室溫攪拌0.5小時後，將3-(1-溴乙基)-6-甲基嗒𠯤 1-5（675 mg，90%純度，3.02 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中之溶液添加到反應混合物中。將所得反應混合物在室溫攪拌4小時。將反應混合物倒入10 mL冷水中並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（1.2 g，由LCMS得到的純度為46%，59%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.748 min，C 41H 44Cl 2N 6O 3Si之計算質量766.3，m/z實測值769.0 [同位素M+H] +。 中間體 1-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 1-6（1.2 g，46%純度，0.719 mmol）在四氫呋喃（8 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1 mL，1 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（410 mg，由LCMS得到的純度為88%，95%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.43 min，C 25H 26Cl 2N 6O 3之計算質量528.1，m/z實測值529.4 [M+H] +。 中間體 1-8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 1-7（410 mg，88%純度，0.682 mmol）、亞氯酸鈉（155 mg，1.371 mmol）和2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（220 mg，1.399 mmol）在乙腈（6 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（6 mL）和次氯酸鈉溶液（1 mL，10%水溶液，1.679 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1 N鹽酸酸化至pH為4，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 40%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（390 mg，由LCMS得到的純度為93%，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.22 min，C 25H 24Cl 2N 6O 4之計算質量542.1，m/z實測值543.2 [M+H] +。 化合物 1 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 1-8（220 mg，93%純度，0.377 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（8 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（50 mg，0.741 mmol）、苯并三唑-1-醇（100 mg，0.740 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（140 mg，0.730 mmol）和三乙胺（187 mg，1.848 mmol）。將混合物在室溫攪拌3小時。將混合物用水（10 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH為5並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至60%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（180 mg，由LCMS得到的純度為100%，86%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.38 min，C 26H 27Cl 2N 7O 3之計算質量555.2，m/z實測值556.5 [M+H] +。 化合物 1A 和 1B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (1A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(6- 甲基嗒 𠯤 -3- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (1B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(6-甲基嗒𠯤-3-基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 1（210 mg，100%純度，0.409 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB 5 µm 30 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 1A（57.5 mg，由LCMS得到的純度為99.0%，32%產率，100%立體純）和 化合物 1B（53.4 mg，由LCMS得到的純度為99.6%，30%產率，100%立體純）。 化合物 1A： LC-MS（ESI）：R T= 3.229 min，C 26H 27Cl 2N 7O 3之計算質量555.2，m/z實測值556.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.903 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.53 - 7.50 (m, 2H), 7.33 - 7.24 (m, 3H), 6.36 - 6.18 (m, 1H), 5.96 (br s, 1H), 5.67 - 5.15 (m, 1H), 4.90 - 4.88 (m, 1H), 4.74 - 4.28 (m, 2H), 4.15 - 4.03 (m, 2H), 3.17 - 2.92 (m, 1H), 2.73 - 2.67 (m, 7H), 1.76 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.28 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 化合物 1B： LC-MS（ESI）：R T= 3.251 min，C 26H 27Cl 2N 7O 3之計算質量555.2，m/z實測值556.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.563 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.51 - 7.48 (m, 2H), 7.44 - 7.35 (m, 1H), 7.31 - 7.29 (m, 1H), 7.25 - 7.22 (m, 1H), 6.09 - 5.83 (m, 2H), 5.70 - 5.22 (m, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.74 - 4.24 (m, 3H), 3.97 - 3.94 (m, 1H), 3.14 - 2.95 (m, 1H), 2.81 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.73 - 2.65 (m, 4H), 1.74 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.28 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 化合物 2A 和 2B
Figure 02_image361
中間體 2-2 ： 1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙醇
在0°C在氮氣氣氛下，向4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯甲醛 2-1（500 mg，2.89 mmol）在無水四氫呋喃（6 mL）中之溶液中逐滴添加在四氫呋喃中之1.0 M甲基溴化鎂（4 mL，4 mmol）。將反應混合物在20°C攪拌12小時。然後，將其用飽和氯化銨溶液（10 mL）淬滅，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1至2 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題產物（400 mg，由LCMS得到的純度為93%，68.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.09 min，C 10H 11N 3O之計算質量189.1，m/z實測值190.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.54 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.53 (d, J =8.4 Hz, 2H), 4.98 (q, J =6.4 Hz, 1H), 1.6 (s, 1H), 1.54 (d, J =6.0 Hz, 3H)。 中間體 2-3 ： 1-(4-(1- 溴乙基 ) 苯基 )-1H-1,2,4- 三唑
在0°C，向1-(4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)乙醇 2-2（100 mg，93%純度，0.49 mmol）在二氯甲烷（2 mL）中之溶液中逐滴添加在二氯甲烷（1 mL）中之三溴膦（300 mg，0.37 mmol）。將所得混合物在0°C攪拌3小時。將反應混合物在減壓下濃縮，以得到呈白色固體之粗產物（540 mg，由 1H NMR得到的純度為71%，72.6%產率）。將粗品不經純化而用於下一步驟。LC-MS（ESI）：R T= 1.65 min，C 10H 10BrN 3之計算質量251.0，m/z實測值252.0 [M+H] +。 中間體 2-4 ： (3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在25°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（400 mg，83%純度，0.51 mmol）和1-(4-(1-溴乙基)苯基)-1H-1,2,4-三唑 2-3（380 mg，65%純度，0.98 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中之溶液中添加氫氧化鈉（4 mL，50% wt.）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（10 mg，0.04 mmol）。將所得混合物在50°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗產物（600 mg，由LCMS得到的純度為61%，87.2%產率）。將粗品不經純化而用於下一步驟。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min和2.11 min，C 44H 45N 2Cl 7O 3Si之計算質量817.3，m/z實測值580.3 [M+H -TBDPS] +和818.5 [M+H] +。 中間體 2-5 ： (3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)乙基)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 2-4（600 mg，61%純度，0.34 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1.0 M四丁基氟化銨溶液（0.5 mL，0.5 mmol）。然後將反應混合物在20°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色固體之標題產物（160 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，55.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.44 min，C 28H 27Cl 2N 7O 3之計算質量579.2，m/z實測值580.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.61 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.82 - 7.69 (m, 2H), 7.66 (d, J =6.3 Hz, 1H), 7.59 - 7.49 (m, 3H ), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 6.28 - 6.06 (m, 1H), 5.93 - 5.33 (m, 1H), 5.29 - 4.77 (m, 1H), 4.74 - 4.40 (m, 2H), 4.37 - 4.25 (m, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 1H), 3.92 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.55 (m, 1H), 3.40 - 3.21 (m, 1H), 3.18 - 2.97 (m, 1H), 2.72 - 2.50 (m, 1H), 1.68 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.33 - 1.28 (m, 3H)。 中間體 2-6 ： (3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 2-5（160 mg，90%純度，0.25 mmol）在乙腈（1.4 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀（1.4 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（80 mg，0.51 mmol）、亞氯酸鈉（60 mg，0.53 mmol），並逐滴添加10%次氯酸鈉溶液（370 mg，0.34 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌14小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（2 mL）淬滅，用1.0 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮以得到殘餘物。將殘餘物用（石油醚 : 二氯甲烷 =10 : 1）研磨。將所得固體通過排沙漏斗過濾，用石油醚（3 × 5 mL）沖洗並收集，以得到呈白色固體之標題產物（160 mg，由LCMS得到的純度為92%，99.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25 min，C 28H 25Cl 2N 7O 4之計算質量593.1，m/z實測值594.2 [M+H] +。 化合物 2 ： (3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 2-6（160 mg，90%純度，0.24 mmol）、甲胺鹽酸鹽（50 mg，0.74 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（95 mg，0.5 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（68 mg，0.5 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（1.5 mL）中之溶液中逐滴添加在N,N-二甲基甲醯胺（0.5 mL）中之三乙胺（160 mg，1.58 mmol）。然後將反應混合物在20°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色固體之標題（80 mg，由LCMS得到的純度為94%，51.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.46 min，C 29H 28Cl 2N 8O 3之計算質量606.2，m/z實測值607.2 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.60 (d, J= 3.3 Hz,1H), 8.15 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.74 - 7.70 (m, 2H), 7.58 - 7.56 (m, 3H), 7.51 - 7.48(m, 1H), 7.33 - 7.32 (m, 1H), 6.24 - 5.99 (m, 2H), 5.82 - 5.24 (m, 1H), 5.50 - 4.81 (m, 1H), 4.73 - 4.31 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 1H), 3.47 (dd, J =13.5, 4.8 Hz, 1H), 3.24 (br s, 1H), 2.85 (d, J =4.5 Hz, 2H), 2.79 - 2.68 (m, 3H),1.69 - 1.66 (m, 3H), 1.36 - 1.31 (m, 3H)。 化合物 2A 和 2B ： (3R,7S)-9-((R*)-1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (2A) ， 以及 (3R,7S)-9-((S*)-1-(4-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (2B)
將(3R,7S)-9-(1-(4-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 2（130 mg，94%純度，0.2 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 µm 20 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 2A（32.3 mg，99.6%純度，26.3%產率，99.8%立體純）和 化合物 2B（66.7 mg，98.6%純度，52.2%產率，100%立體純）。 化合物 2A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.427 min，C 29H 28Cl 2N 8O 3之計算質量606.2，m/z實測值607.2 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 8.411 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.32 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.85 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.79 - 7.74 (m, 3H), 7.52 - 7.32 (m, 3H), 5.91 - 5.66 (m, 1H), 5.57 - 5.13 (m, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.70 - 4.40 (m, 1H), 4.32 - 4.13 (m, 1H), 4.09 - 3.94 (m, 1H), 3.44 - 3.33 (m, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.38 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.62 - 1.42 (m, 3H), 1.29 - 1.11 (m, 3H)。 化合物 2B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.416 min，C 29H 28Cl 2N 8O 3之計算質量606.2，m/z實測值607.3 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 11.881 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.30 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.08 - 7.98 (m,1H), 7.90 - 7.81 (m, 2H), 7.75 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.60 - 7.40 (m, 3H), 5.95 - 5.67 (m, 1H), 5.53 - 5.17 (m, 1H), 5.11 - 4.92 (m, 1H), 4.70 - 4.36 (m, 1H), 4.29 - 4.10 (m, 1H), 3.78 - 3.50 (m, 2H), 2.98 - 2.83 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 3H), 1.31 - 1.11 (m, 3H)。 化合物 3A 和 3B
Figure 02_image363
中間體 3-2 ： 甲基 5- 乙基吡啶甲酸酯
在0°C，向5-乙基吡啶甲酸 3-1（500 mg，3.31 mmol）和碳酸鉀（800 mg，5.79 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（8 mL）中之溶液中添加碘甲烷（800 mg，5.64 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌4小時，將反應混合物用水（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色油狀物之標題（280 mg，由LCMS得到的純度為100%，51.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.34 min，C 9H 11NO 2之計算質量165.1，m/z實測值166.1 [M+H] +。 中間體 3-3 ： 甲基 5-(1- 溴乙基 ) 吡啶甲酸酯
在25°C，向甲基 5-乙基吡啶甲酸酯 3-2（280 mg，100%產率，1.70 mmol）和1-溴吡咯啶-2,5-二酮（340 mg，1.91 mmol）在四氯甲烷（6 mL）中之溶液中添加過氧化二苯甲醯（50 mg，0.21 mmol）。將所得混合物在80°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中並用二氯甲烷（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色油狀物之標題（380 mg，由LCMS得到的純度為100%，91.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.42 min，C 9H 10BrNO 2之計算質量243.0，m/z實測值246.0 [M+H] +。 中間體 3-4 ： 甲基 5-(1-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 吡啶甲酸酯
在20°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（750 mg，90%純度，1.04 mmol）和甲基 5-(1-溴乙基)吡啶甲酸酯 3-3（330 mg，1.35 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之溶液中添加碳酸銫（900 mg，2.76 mmol）。然後將反應混合物在40°C攪拌4小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 60%-90%）純化，以得到呈白色固體之標題（710 mg，由LCMS得到的純度為98.2%，82.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.12 min和2.19 min，C 44H 49N 5Cl 2O 4Si之計算質量809.3，m/z實測值810.6 [M+H] +。 中間體 3-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C在氮氣下，向甲基 5-(1-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)吡啶甲酸酯 3-4（610 mg，98.2%純度，0.74 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加甲基溴化鎂（1.0 M，在四氫呋喃中，3 mL，3 mmol）。使所得混合物升溫至40°C並攪拌13小時。將反應混合物用飽和氯化銨溶液（10 mL）淬滅，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈: 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 70%-90%）純化，以得到呈白色固體之標題產物（400 mg，由LCMS得到的純度為81%，54.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.14 min和1.19 min，C 44H 49N 5Cl 2O 4Si之計算質量809.3，m/z實測值810.6 [M+H] +。 中間體 3-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-9-(1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 3-5（300 mg，81%純度，0.3 mmol）在四氫呋喃（3 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨溶液（0.3 mL，0.3 mmol）。然後將反應混合物在20°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色固體之標題產物（160 mg，由LCMS得到的純度為81%，75.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.45 min，C 28H 31Cl 2N 5O 4之計算質量571.2，m/z實測值572.2 [M+H] +。 中間體 3-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-9-(1-(6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 3-6（160 mg，81%純度，0.23 mmol）在乙腈（1.5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀（1.5 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（75 mg，0.48 mmol）、亞氯酸鈉（45 mg，0.50 mmol），並逐滴添加10%次氯酸鈉溶液（380 mg，0.51 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌14小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（2 mL）淬滅，用1.0 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮以得到殘餘物。將殘餘物藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 30%-50%）純化，以得到呈白色固體之標題產物（130 mg，由LCMS得到的純度為100%，97.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.23 min，C 28H 29Cl 2N 5O 5之計算質量585.2，m/z實測值586.3 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ 8.64 - 8.45 (m, 1H), 8.12 - 7.91 (m, 1H), 7.86 - 7.75 (m, 1H), 7.74 - 7.67 (m, 2H), 7.47 - 7.40 (m, 1H), 6.15 - 5.76 (m, 1H), 5.72 - 5.32 (m, 1H), 5.26 - 5.08 (m, 1H), 4.80 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.27 (m, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 1H), 3.88 - 3.67 (m, 1H), 3.35 - 3.23 (m, 1H), 3.15 - 2.99 (m, 1H), 2.85 - 2.63 (m, 1H), 1.77 - 1.65 (m, 3H), 1.62 (s, 3H), 1.58 (s, 3H), 1.43 - 1.33 (m, 3H)。 化合物 3 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 3-7（130 mg，74%純度，0.22 mmol）、甲胺鹽酸鹽（40 mg，0.59 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（100 mg，0.52 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（80 mg，0.59 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（1.5 mL）中之溶液中逐滴添加在N,N-二甲基甲醯胺（0.5 mL）中之三甲胺（140 mg，1.38 mmol）。然後將反應混合物在20°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色固體之標題（130 mg，由LCMS得到的純度為96 %，93.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.41 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.3 [M+H] +。 化合物 3A 和 3B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (3A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (3B)
將外消旋物(3R,7R)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(2-羥基丙-2-基)吡啶-3-基)乙基)-3,7-二甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 化合物 3（130 mg，96%純度，0.21 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 µm 20 * 250 mm；流動相：ACN : IPA : DEA = 70 : 30 : 0.2，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到均呈白色固體之 化合物 3A（25.8 mg，98.5%純度，20.4%產率，99.7%立體純）和 化合物 3B（50 mg，99.2%純度，39.7%產率，99.8%立體純）。 化合物 3A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.682 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.3 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA : DEA = 70 : 30 : 0.2，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 5.460 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.36 (s, 1H), 7.78 (dd, J =17.2和4.8 Hz, 3H), 7.60 (s, 2H), 7.46 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.88 - 5.63 (m, 1H), 5.49 - 5.24 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.97 (s, 1H), 4.70 - 4.37 (m, 1H), 4.30 - 4.13 (m, 1H), 4.09 - 3.92 (m, 1H), 3.81 - 3.52 (m, 1H), 2.96 - 2.84 (m, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.35 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.62 - 1.45 (m, 3H), 1.42 (s, 6H), 1.30 - 1.09 (m, 3H)。 化合物 3B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.761 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.2 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA : DEA = 70 : 30 : 0.2，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.106 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.46 (s, 1H), 8.07 - 7.98 (m, 1H), 7.74 (d, J =8.0 Hz, 3H), 7.60 - 7.56 (m, 1H), 7.45 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.88 - 5.60 (m, 1H), 5.51 - 5.33 (m, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 4.65 - 4.40 (m, 1H), 4.28 - 4.10 (m, 1H), 3.83 - 3.57 (m, 2H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.51 - 2.50 (m, 1H), 1.53 - 1.37 (m, 9H), 1.29 - 1.10 (m, 3H)。 化合物 4A 和 4B
Figure 02_image365
中間體 4-2 ： N- 甲氧基 -N- 甲基 -2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 甲醯胺
在0°C，向2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸 4-1（5.0 g，26.0 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（55 mL）中之溶液中添加N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽（5.1g，52.3 mmol）、苯并三唑-1-醇（7.1 g，52.5 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（10.1 g，52.7 mmol）和N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（20.5 g，158.6 mmol）。將混合物在室溫攪拌16小時。將混合物用水（100 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為5並用乙酸乙酯（100 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至60%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（5 g，由LCMS得到的純度為100%，81.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.40 min，C 8H 8F 3N 3O 2之計算質量235.1，m/z實測值236.1 [M+H] +。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) δ 9.24 (s, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.44 (s, 3H)。 中間體 4-3 ： 1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙酮
在0°C，向N-甲氧基-N-甲基-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲醯胺 4-2（5 g，100%純度，21.3 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中之溶液中逐滴添加在2-甲基四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（33.3 mL，33.3 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液（50 mL）中並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（4.5 g，由LCMS得到的純度為77%，85.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.36 min，C 7H 5F 3N 2O之計算質量190.0，m/z實測值189.0 [M-H] -。 中間體 4-4 ： 1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙酮 4-3（4.5 g，77%純度，18.2 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（1.54 g，40.7 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液（50 mL）淬滅，將其用乙酸乙酯（50 mL）稀釋，用水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並在真空下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18（乙腈 : 水 = 40%至65%）純化，以得到呈黃色油狀物之所需產物（2.3 g，90%純度，59.1%產率）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) δ 8.92 (s, 2H), 5.15 - 5.06 (m, 1H), 1.62 - 1.61 (m, 3H)。 中間體 4-5 ： 5-(1- 溴乙基 )-2-( 三氟甲基 ) 嘧啶
在0°C，向1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙醇 4-4（2 g，90%純度，9.37 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加三苯膦（5 g，19.1 mmol）和四溴甲烷（5 g，15.1 mmol）。在25°C攪拌0.5小時後，將混合物過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1 g，由 1H NMR得到的純度為90%，37.7%產率）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) δ 8.96 (s, 2H), 5.18 - 5.17 (m, 1H), 2.13 - 2.11 (m, 3H)。 中間體 4-6 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1 g，100%純度，1.54 mmol）、N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（2 mg，0.009 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)嘧啶 4-5（1 g，3.53 mmol）在2-甲基四氫呋喃（12 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（12 mL）。在30°C攪拌2小時後，將反應混合物用水（15 mL）稀釋並用乙酸乙酯（15 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.2 g，73%純度，69%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.94 min，C 41H 41Cl 2F 3N 6O 3Si之計算質量820.2，m/z實測值821.5 [M+H] +。 中間體 4-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 4-6（1.2 g，73%純度，1.07 mmol）在四氫呋喃（12 mL）中之溶液中添加1 M四丁基氟化銨溶液（1.6 mL）。在室溫攪拌1小時後，將混合物用水（20 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 20%至40%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（450 mg，97%純度，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 25H 23Cl 2F 3N 6O 3之計算質量582.1，m/z實測值583.4 [M+H] +。 中間體 4-8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 4-7（390 mg，97%純度，0.648 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀（5 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（203 mg，1.3 mmol）、亞氯酸鈉（147 mg，1.3mmol），並逐滴添加5.5%次氯酸鈉溶液（1.5 mL，1.39 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至35%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（311 mg，100%純度，80%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.28 min，C 25H 21Cl 2F 3N 6O 4之計算質量596.1，m/z實測值595.1 [M-H] -。 化合物 4 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 4-8（270 mg，100%純度，0.452 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（9 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（76 mg，1.13 mmol）、1-羥基苯并三唑（122 mg，0.903 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（173 mg，0.902 mmol）和三乙胺（0.4 mL，2.88 mmol）。將混合物在室溫攪拌3小時。將混合物用水（10 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為5並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至60%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物P1（210 mg，由LCMS得到的純度為100%，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.58 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.1，m/z實測值610.3 [M+H] +。 化合物 4A 和 4B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R)-1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (4A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S)-1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (4B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 化合物 4（280 mg，100%純度，0.104 mmol）藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IC 5 µm 20*250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 4A（33.8 mg，98.4%純度，17.6%產率，99.9%立體純）和呈白色固體之 化合物 4B（51.3 mg，99.3%純度，27%產率，100%立體純）。 化合物 4A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.233 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.1，m/z實測值610.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 5.195 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.83 (s, 2H), 7.53 - 7.51 (m, 2H), 7.27 - 7. 4 (m, 1H), 5.99 - 5.44 (m, 3H), 4.89 - 4.46 (m, 3H), 4.13 - 4.09 (m, 1H), 3.94 - 3.90 (m, 1H), 3.05 (br s, 1H), 2.74 - 2.68 (m, 4H), 1.72 - 1.70 (m, 3H), 1.32 - 1.30 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 70.22。 化合物 4B ：LC-MS（ESI）：R T= 2.978 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.1，m/z實測值610.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.976 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.92 (s, 2H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 6.09 (br s, 1H), 5.85 - 5.53 (m, 2H), 4.93 - 4.30 (m, 4H), 3.64 - 3.59 (m, 1H), 3.07 (br s, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 4H), 1.76 - 1.74 (m, 3H), 1.29 - 1.28 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 70.26。 化合物 5A 和 5B
Figure 02_image367
中間體 5-1 甲基 4-(1-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 苯甲酸酯
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.40 g，2.03 mmol）在二甲基甲醯胺（15 mL）中之溶液中添加氫化鈉（在礦物油中之60%分散體）（81 mg，2.03 mmol）。將混合物在0°C攪拌1小時。然後將甲基 4-(1-溴乙基)苯甲酸酯（490 mg，2.02 mmol）添加到混合物中。將反應混合物在0°C攪拌1小時。將反應混合物藉由飽和氯化銨（30 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL x 3）萃取。將合併的有機層藉由水（50 mL x 2）和鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（900 mg，由LCMS得到的純度為95%，產率52%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.77 min和1.81 min，C 44H 46Cl 2N 4O 5Si之計算質量808.3，m/z實測值808.9 [M+H] +； 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.04 - 7.92 (m, 2H), 7.65 - 7.32 (m, 14H), 7.24 - 7.21 (m, 1H), 6.01 - 5.40 (m, 2H), 4.82 - 4.29 (m, 3H), 4.08 - 4.03 (m, 1H), 3.92 - 3.89 (m, 3H), 3.86 - 3.30 (m, 3H), 3.10 - 2.91 (m, 1H), 2.64 - 2.53 (m, 1H), 1.56-1.55 (m, 3H), 1.21 (br s, 3H), 1.02 - 0.90 (m, 9H)。 中間體 5-2 (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
將甲基 4-(1-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)苯甲酸酯 5-1（750 mg，0.87 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液冷卻至0°C。然後在20 min內，逐滴添加在四氫呋喃中之甲基溴化鎂（1.0 M溶液）（4 mL，4.00 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌2小時。將反應混合物藉由飽和氯化銨水溶液（50 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL x 3）萃取。將合併的有機層藉由鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（540 mg，由LCMS得到的純度為92%，產率70%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.76 min和1.79 min，C 45H 50Cl 2N 4O 4Si之計算質量808.3，m/z實測值809.0 [M+H] +。 中間體 5-3 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-9-(1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
將(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 5-2（540 mg，0.610 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液冷卻至0°C。然後逐滴添加四丁基氟化銨（在THF中之1.0 M溶液）（1.0 mL，1.00 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌1小時。將反應混合物在減壓下濃縮並藉由矽膠柱（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 2）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（340 mg，由LCMS得到的純度為91%，產率88%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.32 min和1.35 min，C 29H 32Cl 2N 4O 4之計算質量570.2，m/z實測值553.3 [M+H-18] +。 中間體 5-4 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-9-(1-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 5-3（340 mg，0.54 mmol）在乙腈（4 mL）中之懸浮液中添加在水中之飽和磷酸二氫鉀溶液（4 mL）。將混合物冷卻至0°C。然後添加2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基（170 mg，1.09 mmol）、亞氯酸鈉（123 mg，1.09 mmol）和次氯酸鈉（0.65 mL，1.09 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌16小時。將反應混合物藉由在水中之1 M鹽酸溶液調節pH至5-6並用二氯甲烷（50 mL）萃取三次。將合併的有機層藉由鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（250 mg，由LCMS得到的純度為93%，產率73%）。LC-MS（ESI）：R T= 0.68 min，C 29H 30Cl 2N 4O 5之計算質量584.2，m/z實測值567.0 [M+H-18] +。 化合物 5 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 5-4（250 mg，0.40 mmol）和甲胺鹽酸鹽（54 mg，0.80 mmol）在二甲基甲醯胺（4 mL）中之混合物中添加1-羥基苯并三唑（108 mg，0.80 mmol）和1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（153 mg，0.80 mmol）。將混合物冷卻至0°C，並且在30 min內逐滴添加在二甲基甲醯胺（1 mL）中之三乙胺（121 mg，1.20 mmol）溶液。將反應混合物在0°C攪拌1小時。將反應混合物藉由飽和氯化銨水溶液（40 mL）淬滅並用乙酸乙酯（40 mL x 3）萃取。將合併的有機層藉由水（30 mL x 3）和鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 12 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（190 mg，由LCMS得到的純度為97%，產率78%）。LC-MS（ESI）：R T= 0.68 min，C 30H 33Cl 2N 5O 4之計算質量597.2，m/z實測值580.3 [M+H-18] + 化合物 5A 和 5B (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (5A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (5B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺（280 mg，0.47 mmol）之外消旋物 化合物 5（280 mg，0.47 mmol）藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IE 250 mm * 4.6 mm 5 µm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 5A（93.9 mg，99.0%純度，34.2%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 5B（68.5 mg，97.1%純度，24.5%產率，100%立體純）。 化合物 5A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.292 min，C 30H 33Cl 2N 5O 4之計算質量597.2，m/z實測值620.2 [M+Na] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 250 mm * 4.6 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.663 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.52 - 7.43 (m, 4H), 7.27 - 7.24 (m, 4H), 6.12 - 5.45 (m, 3H), 4.80 - 4.25 (m, 3H), 3.90 - 3.73 (m, 2H), 3.17 - 2.96 (m, 1H), 2.71 - 2.66 (m, 4H), 1.60 (s, 3H), 1.56 (s, 6H), 1.29 - 1.28 (m, 3H)。 化合物 5B ：LC-MS（ESI）：R T= 4.387 min，C 30H 33Cl 2N 5O 4之計算質量597.2，m/z實測值620.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 250 mm * 4.6 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 12.077 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.47 - 7.39 (m, 4H), 7.24 - 7.19 (m, 4H), 5.92 - 5.30 (m, 3H), 4.75 - 4.33 (m, 3H), 4.01 - 3.98 (m, 1H), 3.35 - 3.31 (m, 1H), 3.05 - 2.91 (m, 1H), 2.74 - 2.72 (m, 3H), 2.66 - 2.63 (m, 1H), 1.53-1.50 (m, 9H), 1.25 - 1.23 (m, 3H)。 化合物 6A 和 6B
Figure 02_image369
中間體 6-2 ： 1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙醇
向1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙酮 6-1 （1.2 g，95%純度，6.00 mmol）在四氫呋喃（24 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（320 mg，8.46 mmol）和甲醇（6 mL）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水淬滅，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將有機層合併，用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.1 g，由LCMS得到的純度為78%，74%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.063 min，C 7H 7F 3N 2O之計算質量192.05，m/z實測值193.2 [M+H] +。 中間體 6-3 ： 2-(1- 溴乙基 )-5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤
在0°C在氮氣氣氛下，向1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙醇 6-2（1.1 g，78%純度，4.47 mmol）在二氯甲烷（22 mL）中之溶液中添加四溴化碳（2.5 g，7.54 mmol）和三苯膦（2.0 g，7.63 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌1小時。TLC顯示 6-2被消耗。將反應混合物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1至5 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（920 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，73%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.89 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 5.29 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.13 (d, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 6-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（700 mg，90%純度，0.97 mmol）在2-甲基四氫呋喃（6 mL）和於水中之50% wt.氫氧化鈉（6 mL）中之溶液中添加2-(1-溴乙基)-5-(三氟甲基)吡𠯤 6-3（350 mg，90%純度，0.35 mmol）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（35 mg，0.15 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物用水（50 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.0 g，由LCMS得到的純度為67%，84%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.07 min，C 41H 41Cl 2F 3N 6O 3Si之計算質量820.23，m/z實測值821.2 [M+H] +。 中間體 6-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 6-4（1.5 g，67%純度，1.06 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.4 mL，1.4 mmol）和乙酸（130 mg，2.17 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌2小時。將飽和氯化銨水溶液（10 mL）添加到反應混合物中。將反應混合物用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（430 mg，由LCMS得到的純度為100%，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.61 min，C 25H 23Cl 2F 3N 6O 3之計算質量582.12，m/z實測值583.2 [M+H] +。 中間體 6-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 6-5（430 mg，100%純度，0.74 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀溶液（4 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（250 mg，1.60 mmol）、亞氯酸鈉（190 mg，1.68 mmol），並逐滴添加10%次氯酸鈉溶液（1.0 mL，1.68 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（20 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至45%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（380 mg，由LCMS得到的純度為97%，84%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.33 min，C 25H 21Cl 2F 3N 6O 4之計算質量596.10，m/z實測值595.2 [M-H] -。 化合物 6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 6-6（325 mg，97%純度，0.53 mmol）、甲胺鹽酸鹽（92 mg，1.36 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（210 mg，1.10 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（150 mg，1.11 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（8 mL）中之溶液中添加三甲胺（0.5 mL，3.61 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（25 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（235 mg，由LCMS得到的純度為100%，73%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.13，m/z實測值610.2 [M+H] +。 化合物 6A 和 6B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R)-1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (6A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S)-1-(5-( 三氟甲基 ) 吡 𠯤 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (6B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(5-(三氟甲基)吡𠯤-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 6（275 mg，100%純度，0.45 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以60 g/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 6A（68.1 mg，24.6%產率，99.5%純度，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 6B（89.9 mg，32.6%產率，99.7%純度，99.9%立體純）。 化合物 6A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.621 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.13，m/z實測值610.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，R T= 7.403 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.16 (s, 1H), 8.74 - 8.64 (m, 1H), 7.80 - 7.74 (m, 3H), 7.46 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.07 - 5.88 (m, 1H), 5.43 - 5.23 (m, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.62 - 4.40 (m, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 2H), 3.73 - 3.59 (m, 1H), 2.97 - 2.85 (m, 1H), 2.63 - 2.53 (m, 1H), 2.34 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.60 - 1.54 (m, 3H), 1.24 - 1.17 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.20。 化合物 6B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.704 min，C 26H 24Cl 2F 3N 7O 3之計算質量609.13，m/z實測值610.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，R T= 9.817 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.15 (s, 1H), 8.97 - 8.86 (m, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 2H), 7.45 - 7.42  (m, 1H), 5.86 - 5.77 (m, 1H), 5.39 - 5.10 (m, 2H), 4.53 - 4.11 (m, 2H), 3.93 (s, 2H), 2.98 - 2.84 (m, 1H), 2.65 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.59 - 2.55 (m, 1H), 1.62 - 1.48 (m, 3H), 1.23 - 1.11 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.13。 化合物 7A 和 7B
Figure 02_image371
中間體 7-2 ： 1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙醇
在0°C，向6-氯煙醛 7-1（1.8 g，12.7 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（25 mL，25 mmol）。將混合物在0°C攪拌1小時。將混合物用飽和氯化銨水溶液（30 mL）淬滅並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.8 g，90%純度，80.8%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.37 (d, J =6.4 Hz, 1H), 7.71 (dd, J =8.4和2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.03 - 4.94 (m, 1H), 1.97 (d, J=7.6 Hz, 1H), 1.52 (d, J =5.6 Hz, 3H)。 中間體 7-3 ： 5-(1- 溴乙基 )-2- 氯吡啶
在0°C，向1-(6-氯吡啶-3-基)乙醇 7-2（1.6 g，90%純度，9.14 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加三苯膦（4.8 g，18.3 mmol）和四溴甲烷（4.3 g，13.0 mmol）。在25°C攪拌4小時後，將混合物過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.6 ，由 1H NMR得到的純度為90%，62.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 7H 7BrClN之計算質量219.0，實測值219.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.42 (d, J =2.8 Hz, 1H), 7.77 (dd, J =8.0和2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.16 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.04 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 7-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（600 mg，90%純度，0.834 mmol）在2-甲基四氫呋喃（6 mL）和於水中之50% wt.氫氧化鈉（6 mL，150.0 mmol）中之溶液中添加5-(1-溴乙基)-2-氯吡啶 7-3（320 mg，90%純度，1.3 mmol）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（27 mg，0.119 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物用水（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（600 mg，51%純度，46.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.98 min，C 41H 42Cl 3N 5O 3Si之計算質量785.2，實測值786.4 [M+H] +。 中間體 7-5 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(6-氯吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 7-4（600 mg，51%純度，0.389 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.8 mL，0.8 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（200 mg，100%純度，93.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.56 min，C 25H 24Cl 3N 5O 3之計算質量547.1，m/z實測值548.2 [M+H] +。 中間體 7-6 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(6-氯吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 7-5（200 mg，100%純度，0.364 mmol）、亞氯酸鈉（80 mg，80%純度，0.708 mmol）和2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（115 mg，0.736 mmol）在乙腈（2 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（2 mL）和10%次氯酸鈉溶液（1 mL，1.68 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1N鹽酸酸化至pH約為4，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（170 mg，由LCMS得到的純度為100%，82.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.28 min，C 25H 22Cl 3N 5O 4之計算質量561.1，/z實測值562.1[M+H] +。 化合物 7 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(6-氯吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 7-6（170 mg，100%純度，0.302 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（117 mg，0.61 mmol）、甲胺鹽酸鹽（50 mg，0.741 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（85 mg，0.629 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.35 mL，1.97 mmol）。在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將其藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 45%至55%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（110 mg，100%純度，63.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.60 min和2.68 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.2 [M+H] +。 化合物 7A 和 7B ： (3R,7S)-9-((R*)-1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (7A) ，以及 (3R,7S)-9-((S*)-1-(6- 氯吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (7B)
將(3R,7S)-9-(1-(6-氯吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 化合物 7（140 mg，100%純度，0.243 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 30 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以30 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 7A（30.6 mg，99.6%純度，21.8%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 7B（19.0 mg，99.7%純度，13.5%產率，100%立體純）。 化合物 7A： LC-MS（ESI）：RT = 3.546 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.2 [M+H]+。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 5.415 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ  8.36 - 8.31 (m, 1H),  7.62 - 7.58 (m, 1H),  7.53 - 7.51 (m, 2H),  7.32 - 7.30 (m, 1H),  7.27 - 7.26 (m, 1H), 7.26 - 7.25 (m, 1H), 5.98 - 5.31 (m, 3H), 4.92 - 4.83 (m, 1H), 4.58 - 4.36 (m, 1H), 4.00 - 3.85 (m, 2H), 3.13 - 2.97 (m, 1H), 2.76 - 2.66 (m, 4H), 1.63 - 1.61 (m, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 7B： LC-MS（ESI）：RT = 3.635 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.2 [M+H]+。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 7.199 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3)- δ 8.44 - 8.36 (m, 1H), 7.72 - 7.61 (m, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 2H), 7.35 - 7.31 (m, 1H), 7.29 - 7.27 (m, 1H), 7.25 - 7.23 (m, 1H), 6.25 - 5.97 (m, 2H), 4.92 - 4.42 (m, 3H), 4.21 - 4.11 (m, 1H), 3.52 - 3.39 (m, 1H), 3.14 - 2.97 (m, 1H), 2.83 - 2.81 (m, 3H), 2.73 - 2.69 (m, 1H), 1.69 - 1.59 (m, 3H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 8A 和 8B
Figure 02_image373
中間體 8-2 ： 1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙醇
在-70°C，向6-(三氟甲基)煙醛（900 mg，5.14 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中逐滴添加在四氫呋喃中之3 M甲基溴化鎂（2.7 mL，8.10 mmol），持續2小時。將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液（40 mL）中並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（900 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，82%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.68 (br s, 1H), 7.93 - 7.91 (m, 1H), 7.67 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.07 - 5.02 (m, 1H), 2.64 (br s, 1H), 1.55 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 8-3 ： 5-(1- 溴乙基 )-2-( 三氟甲基 ) 吡啶
在0°C，向1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙醇 8-2（900 mg，90%純度，4.24 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加三苯膦（2.0 g，7.63 mmol）和四溴甲烷（2.1 g，6.33 mmol）。在25°C攪拌0.5小時後，將混合物過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（1.0 g，由 1H NMR得到的純度為90%，84%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.77 (br s, 1H), 7.98 - 7.95 (m, 1H), 7.68 (d, J =8.0, 1H), 5.24 - 5.18 (m, 1H), 2.80 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 8-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（500 mg，100%純度，0.77 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)吡啶 8-3（400 mg，100%純度，1.58 mmol）在2-甲基四氫呋喃（2.5 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（2.5 mL）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（25 mg，0.11 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將混合物用水（10 mL）稀釋並在室溫在減壓下濃縮，以除去揮發物。將剩餘的水層用1 M鹽酸水溶液（30 mL）酸化並用乙酸乙酯（60 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之粗化合物（730 mg，由LCMS得到的純度為84%，96.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.33 min，C 42H 42Cl 2F 3N 5O 3Si之計算質量819.2，m/z實測值820.2 [M+H] +。 中間體 8-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 8-4（730 mg，84%純度，0.75 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1 mL，1 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（430 mg，由LCMS得到的純度為100%，98.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 26H 24Cl 2F 3N 5O 3之計算質量581.1，m/z實測值582.0 [M+H] +。 中間體 8-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 8-5（430 mg，100%純度，0.74 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（240 mg，1.54 mmol）、亞氯酸鈉（160 mg，80%純度，1.42 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）和次氯酸鈉（0.9 mL，1.51 mmol）。在0°C攪拌過夜後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（10 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（390 mg，由LCMS得到的純度為100%，88.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.27 min和1.29 min，C 26H 22Cl 2F 3N 5O 4之計算質量595.1，m/z實測值596.0 [M+H] +。 化合物 8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C在氮氣氣氛下，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 8-6（270 mg，89%純度，0.403 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中添加草醯氯（173 mg，1.36 mmol）和N,N-二甲基甲醯胺（0.08 mL）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物濃縮，以得到粗產物，將其添加到在四氫呋喃（0.7 mL，1.4 mmol）中之1 M二甲胺和在二氯甲烷（5 mL）中之N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（176 mg，1.36 mmol）之混合物中。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱層析法（乙腈 : 水 = 40%至65%）和矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 100 : 1至10 : 1）純化，以得到呈灰白色固體之標題化合物（180 mg，由LCMS得到的純度為98%，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 28H 27Cl 2F 3N 6O 3之計算質量622.2，m/z實測值623.2 [M+H] +。 化合物 8A 和 8B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (8A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (8B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,N,3-三甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 8（180 mg，98%純度，0.283 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以18 mL min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈灰白色固體之 化 合物 8A（18.8 mg，由LCMS得到的純度為99%，10%產率，100%立體純）和 化合物 8B（53.8 mg，由LCMS得到的純度為99%，30%產率，100%立體純）。 化合物 8A ：LC-MS（ESI）：R T= 4.081 min，C 28H 27Cl 2F 3N 6O 3之計算質量622.2，m/z實測值623.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 8.426 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.68 (s, 1H), 7.84 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.22 - 6.06 (m, 1H), 5.78 - 5.18 (m, 2H), 4.85 - 4.30 (m, 2H), 3.98 - 3.95 (m, 1H), 3.27 - 3.24 (m, 1H), 3.10 - 2.91 (m, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.69 - 2.67 (m, 4H), 1.64 (d, J =6.4 Hz, 3H), 1.30 (d, J =5.2 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -67.92。 化合物 8B ：LC-MS（ESI）：R T= 4.214 min，C 28H 27Cl 2F 3N 6O 3之計算質量622.2，m/z實測值623.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 10.671 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (s, 1H), 7.86 -7.85 (m, 1H), 7.69 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.18 - 6.04 (m, 1H), 5.78 - 5.16 (m, 2H), 4.86 - 4.27 (m, 2H), 3.88 - 3.83 (m, 1H), 3.39 - 3.37 (m, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.04 - 2.95 (m, 4H), 2.70 - 2.65 (m, 1H), 1.63 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.27 - 1.25 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -67.93。 化合物 9A 和 9B
Figure 02_image375
中間體 9-2 ： 1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙醇
在0°C，向4-溴-2-(三氟甲基)吡啶 9-1（500 mg，2.21 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中緩慢添加異丙基氯化鎂（2 mL，2.60 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌30分鐘，然後添加乙醛（0.2 ml，3.56 mmol）並將所得混合物在0°C攪拌1小時。將其倒入飽和氯化銨水溶液（20 mL）中並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並將殘餘物藉由C18（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 30%至80%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（300 mg，由LCMS得到的純度為73%，52%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.33 min，C 8H 8F 3NO之計算質量191.1，m/z實測值192.1[M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.72 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.69 (d, J =4.8 Hz, 1H), 5.64 (br, s, 1H), 4.90 (q, J =6.4 Hz, 1H), 1.39 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 9-3 ： 4-(1- 溴乙基 )-2-( 三氟甲基 ) 吡啶
在0°C，向1-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)乙醇 9-2（1.7 g，73%純度，6.49 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中之溶液中緩慢添加四溴甲烷（4.3 g，12.9 mmol）。將反應混合物在室溫攪拌。然後添加三苯膦（3.4 g，12.9 mmol）並將反應混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物過濾。將濾液濃縮並將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 20 : 1至10 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.3 g，由NMR得到的純度為90%，71%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.54 (d, J =5.2 Hz, 1H), 5.12 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.05 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 9-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（800 mg，100%純度，1.24 mmol）、4-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)吡啶 9-3（520 mg，90%純度，1.84 mmol）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（45 mg，0.20 mmol）在2-甲基四氫呋喃（8 mL）和50% wt.氫氧化鈉溶液（4 mL）中之溶液中。然後將反應混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物用水（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗產物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（960 mg，由LCMS得到的純度為100%，95%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25 min，C 42H 42Cl 2F 3N 5O 3Si之計算質量819.2，m/z實測值820.2 [M+H] +。 中間體 9-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 9-4（960 mg，100%純度，1.17 mmol）在四氫呋喃（9 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（2.5 mL，2.5 mmol），然後將混合物在室溫攪拌3小時。將反應混合物倒入乙酸乙酯（30 mL）中並用水（20 mL）洗滌三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由柱凝膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 40 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（595 mg，由LCMS得到的純度為99%，86%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.736 min，C 26H 24Cl 2F 3N 5O 3之計算質量581.1，m/z實測值582.0 [M+H] +。 中間體 9-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 9-5（595 mg，99%純度，1.01 mmol）在乙腈（6 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（9 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（320 mg，2.05 mmol）、亞氯酸鈉（230 mg，純度80%，2.03 mmol）、5.5%次氯酸鈉溶液（1.2 mL，2.02 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌5小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（5 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（540 mg，由LCMS得到的純度為99.7%，87%產率）。LC-MS（ESI）：R T=1.18 min，C 26H 22Cl 2F 3N 5O 4之計算質量595.1，m/z實測值595.9 [M+H] +。 化合物 9 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 9-6（540 mg，99.7%純度，0.90 mmol）、甲胺鹽酸鹽（185 mg，2.74 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（347 mg，1.81 mmol）和1-羥基苯并三唑（245 mg，1.81 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（12 mL）中之溶液中添加三乙胺（1.3 ml，9.35 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫在氮氣氣氛下攪拌過夜後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（150 mg，由LCMS得到的純度為99.2%，27%產率）。LC-MS（ESI）：R T=1.297 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.0 [M+H] +。 化合物 9A 和 9B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (9A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(2-( 三氟甲基 ) 吡啶 -4- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (9B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 9（300 mg，98.9%純度，0.49 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IE，5 μm，20*250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以30 g/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 9A （ 89 mg，29%產率，由LCMS得到的純度為98.3%，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 9B（110 mg，37%產率，由LCMS得到的純度為99.8%，99.9%立體純）。 化合物 9A： LC-MS（ESI）：R T= 3.982 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.721 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.78 - 8.70 (m, 1H), 7.85 - 7.61 (m, 4H), 7.53 (br, s, 1H), 7.46 (d, J =8 Hz, 1H), 5.86 - 5.72 (m, 1H), 5.44 - 5.24 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.65 - 4.41 (m, 1H), 4.24 - 4.02 (m, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 1H), 2.96 - 2.85 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.40 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.64 - 1.47 (m, 3H), 1.30 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.28。 化合物 9B： LC-MS（ESI）：R T= 4.013 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 7.922 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.73 (s, 1H), 8.10 - 7.99 (m, 1H), 7.85 - 7.70 (m, 3H), 7.59 (br s, 1H), 7.44 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.81 - 5.56 (m, 1H), 5.50 - 5.16 (m, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.67 - 4.39 (m, 1H), 4.27 - 4.08 (m, 1H), 3.90 - 3.66 (m, 2H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 2.67 - 2.67 (m, 3H), 2.65 - 2.60 (m, 1H), 1.62 - 1.44 (m, 3H), 1.28 - 1.11 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.29。 化合物 10A 和 10B
Figure 02_image377
中間體 10-1 ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A-6（1.5 g，2.53 mmol，80%純度）、4-溴-3-氯苯甲酸（0.6 g，2.55 mmol）和O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（1.45 g，3.81 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中之混合物中添加三乙胺（0.8 g，7.91 mmol）。將混合物在20°C攪拌12小時。向反應混合物中添加水（80 mL）並用二氯甲烷（80 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 丙酮 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（1.6 g，82%產率，由 1H NMR得到的純度為90%）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.67 - 7.62 (m, 5H), 7.60 - 7.37 (m, 7H), 7.26 - 7.25 (m, 1H), 7.15 - 7.15 (m, 1H), 5.68 - 5.47 (m, 1H), 4.81 - 4.19 (m, 3H), 4.06 - 4.01 (m, 1H), 3.94 - 3.75 (m, 3H), 3.12 - 2.89 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 1.26 - 1.12 (m, 3H), 1.05 (s, 9H)。 中間體 10-2 ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-溴-3-氯苯甲醯基)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 10-1（700 mg，90%純度，0.91 mmol）、5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)吡啶 8-3（390 mg，90%純度，1.38 mmol）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（30 mg，0.13 mmol）在2-甲基四氫呋喃（7 mL）和50% wt.氫氧化鈉溶液（3.5 mL）中之溶液中。然後將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物用水（30 mL）淬滅並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（600 mg，由LCMS得到的純度為100%，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.34 min，C 42H 42BrClF 3N 5O 3Si之計算質量863.2，m/z實測值864.2 [M+H] +。 中間體 10-3 ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-2-(4-溴-3-氯苯甲醯基)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 10-2（600 mg，100%純度，0.69 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.5 mL，1.5 mmol），然後將混合物在室溫攪拌3小時。將反應混合物倒入水（20 mL）中並用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由柱凝膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 40 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（410 mg，由LCMS得到的純度為97%，91%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.426 min，C 26H 24BrClF 3N 5O 3之計算質量625.1，m/z實測值627.9 [M+H] +。 中間體 10-4 ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-溴-3-氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 10-3（410 mg，97%純度，0.63 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（6 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（200 mg，1.28 mmol）、亞氯酸鈉（145 mg，純度80%，1.28 mmol）、5.5%次氯酸鈉溶液（0.8 mL，1.34 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌5小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（5 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（300 mg，由LCMS得到的純度為97%，72%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.060 min，C 26H 22BrClF 3N 5O 4之計算質量639.1，m/z實測值639.9 [M+H] +。 化合物 10 ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-溴-3-氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 10-4（270 mg，97%純度，0.41 mmol）、甲胺鹽酸鹽（83 mg，1.23 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（157 mg，0.82 mmol）和1-羥基苯并三唑（111 mg，0.82 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.6 ml，4.32 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫在氮氣氣氛下攪拌過夜後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（155 mg，由LCMS得到的純度為100%，58%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.61 min，C 27H 25BrClF 3N 6O 3之計算質量652.1，m/z實測值653.3 [M+H] +。 化合物 10A 和 10B ： (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (10A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 溴 -3- 氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (10B)
將(3R,7S)-2-(4-溴-3-氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 10（170 mg，100%純度，0.26 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IE，5 μm，20 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以30 g/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 10A（34 mg，由LCMS得到的純度為99.5%，20%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 10B（91 mg，由LCMS得到的純度為99.5%，53%產率，99.7%立體純）。 化合物 10A： LC-MS（ESI）：R T= 3.771 min，C 27H 25BrClF 3N 6O 3之計算質量652.1，m/z實測值653.1 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 4.309 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.62 (s, 1H), 7.99 - 7.85 (m, 3H), 7.79 - 7.68 (m, 2H), 7.36 (d, J =7.6 Hz, 1H), 5.98 - 5.76 (m, 1H), 5.48 - 5.19 (m, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.67 - 4.43 (m, 1H), 4.25 - 3.38 (m, 2H), 3.48 - 3.38 (m, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.62 - 2.52 (m, 1H), 2.36 - 2.30 (m, 3H), 1.64 - 1.48 (m, 3H), 1.27 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.38。 化合物 10B： LC-MS（ESI）：R T= 3.855 min，C 27H 25BrClF 3N 6O 3之計算質量652.1，m/z實測值653.2 [M+H] +。手性分析：（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 4.752 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.80 - 8.68 (m, 1H), 8.04 (s, 2H), 7.94 - 7.83 (m, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.35 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.86 - 5.66 (m, 1H), 5.46 - 5.21 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.61 - 4.41 (m, 1H), 4.25 - 4.09 (m, 1H), 3.88 - 3.69 (m, 2H), 2.95 - 2.84 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.58 - 2.52 (m, 1H), 1.60 - 1.44 (m, 3H), 1.27 - 1.11 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -66.31。 化合物 11A 和 11B
Figure 02_image379
中間體 11-2 ： 甲基 6- 羥基菸鹼酸酯
在0°C，向6-羥基菸鹼酸 11-1（2.0 g，14.4 mmol）在甲醇（20 mL）中之溶液中添加二氯化硫（2 mL，27.6 mmol）。將混合物在75°C攪拌4小時。將混合物濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（2.18 g，由NMR得到的純度為90%，89.1%產率）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.59 (br s, 1H), 8.05 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.80 (dd, J =9.6, 1.8 Hz, 1H), 6.38 (d, J =9.6 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H)。 中間體 11-3 ： 甲基 6-( 二氟甲氧基 ) 菸鹼酸酯
向甲基 6-羥基菸鹼酸酯 11-2（1.18 g，90%純度，6.94 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中之溶液中添加碳酸銫（6.9 g，21.2 mmol）和2-氯-2,2-二氟乙酸鈉（2.1 g，13.8 mmol）。然後將混合物在95°C攪拌4小時。將混合物用水（100 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 4 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（500 mg，由NMR得到的純度為95%，33.7%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.84 (d, J =2.0 Hz, 1H), 8.32 (dd, J =8.4和2.4 Hz, 1H), 7.54 (t, J =72.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J =9.2 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H)。 中間體 11-4 ： 6-( 二氟甲氧基 ) 菸鹼酸
在0°C，向甲基 6-(二氟甲氧基)菸鹼酸酯 11-3（1.2 g，95%純度，5.61 mmol）在四氫呋喃（5 mL）和甲醇（5 mL）中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物（750 mg，17.9 mmol）在水（5 mL）中之溶液。在0°C攪拌1小時後，將混合物用0.1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.05 g，由LCMS得到的純度為100%，98.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.694 min，C 7H 5F 2NO 3之計算質量189.1，m/z實測值188.1 [M-H] -。 中間體 11-5 ： 6-( 二氟甲氧基 )-N- 甲氧基 -N- 甲基菸鹼醯胺
將6-(二氟甲氧基)菸鹼酸 11-4（1.05 g，100%純度，5.55 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（7.4 mL，44.8 mmol）、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽（1.17 g，12.0 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（1.7 g，8.87 mmol）和苯并三唑-1-醇（1.17 g，8.66 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之混合物在30°C在氮氣下攪拌14小時。將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（40 mL）洗滌三次並用鹽水（40 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 45%至75%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.12 g，由NMR得到的純度為90%，78.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.46 min，C 9H 10F 2N 2O 3之計算質量232.1，m/z實測值233.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.63 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.13 (dd, J =8.8和2.4 Hz, 1H), 7.52 (t, J =72.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J =8.8 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.39 (s, 3H)。 中間體 11-6 ： 1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙酮
在0°C，向6-(二氟甲氧基)-N-甲氧基-N-甲基菸鹼醯胺 11-5（1.12 g，90%純度，4.34 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中逐滴添加在四氫呋喃中之3 M甲基溴化鎂（3 mL，9.0 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液（30 mL）中並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（900 mg，由NMR得到的純度為90%，99.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 8H 7F 2NO 2之計算質量187.1，m/z實測值188.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.78 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.30 (dd, J =8.4和2.4 Hz, 1H), 7.54 (t, J =72.0 Hz, 1H), 6.98 (d, J =8.8 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H)。 中間體 11-7 ： 1-(6-( 二氟甲氧基 )-3- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(6-(二氟甲氧基)-3-基)乙酮 11-6（900 mg，90%純度，4.33 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（500 mg，13.2 mmol）。添加後，將混合物在室溫攪拌2小時。將混合物用水（30 mL）淬滅。將有機相分離，並將水相用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並且過濾並在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之所需產物（715 mg，90%純度，78.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.39 min，C 8H 9F 2NO 2之計算質量189.1，m/z實測值190.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.78 (dd, J =8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.45 (t, J =73.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J =8.8 Hz, 1H), 4.94 (q, J =6.4 Hz, 1H), 1.51 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 11-8 ： 5-(1- 溴乙基 )-2-( 二氟甲氧基 ) 吡啶
在0°C，向1-(6-(二氟甲氧基)-3-基)乙醇 11-7（715 mg，90%純度，3.4 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中添加三溴膦（0.2 mL，2.13 mmol）。在0°C攪拌0.5小時後，將混合物藉由添加水淬滅。將有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，經MgSO 4乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗化合物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（260 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，27.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.72 min，C 8H 8BrF 2NO之計算質量251.0，m/z實測值252.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.21 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.85 (dd, J =8.8, 2.8 Hz, 1H), 7.46 (t, J =72.8 Hz, 1H), 6.91 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.18 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.04 (d, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 11-9 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（600 mg，100%純度，0.926 mmol）在2-甲基四氫呋喃（6 mL）和於水中之50% wt.氫氧化鈉（6 mL，333 mmol）中之溶液中添加5-(1-溴乙基)-2-(二氟甲氧基)吡啶 11-8（525 mg，90%純度，1.87 mmol）和苄基三乙基氯化銨（30 mg，0.132 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（800 mg，73%純度，77%產率）。LC-MS（ESI）：R T=2.20 min，C 42H 43Cl 2F 2N 5O 4Si之計算質量817.2，m/z實測值818.5 [M+H] +。 中間體 11-10 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 11-9 （ 800 mg，73%純度，0.713 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.2 mL，1.2 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（380 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，82.6%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.27 - 8.23 (m, 1H), 7.81 - 7.71 (m, 1H), 7.60 - 7.49 (m, 3H), 6.94 (d, J =8.4 Hz , 1H), 6.20 - 5.96 (m, 1H), 5.26 - 4.85 (m, 1H), 4.56 - 4.13 (m, 3H), 4.09 - 3.79 (m, 2H), 3.74 - 3.53 (m, 1H), 3.37 - 3.02 (m, 2H).2.76 - 2.62 (m, 1H), 2.21 (s, 2H), 1.74 - 1.64 (m, 3H), 1.40 - 1.12 (m, 3H)。LC-MS（ESI）：R T=1.56 min，C 26H 25Cl 2F 2N 5O 4之計算質量579.1，m/z實測值 580.0 [M+H] +。 中間體 11-11 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 11-10（380 mg，90%純度，0.589 mmol）、亞氯酸鈉（90 mg，1.21 mmol）和2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（185 mg，1.18 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（5 mL）和10%次氯酸鈉水溶液（0.9 mL，1.24 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH約為4，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（300 mg，由LCMS得到的純度為100%，85.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.29 min，C 26H 23Cl 2F 2N 5O 5之計算質量593.1，m/z實測值594.0[M+H] +。 化合物 11 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 11-11（220 mg，100%純度，0.37 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（143 mg，0.746 mmol）、甲胺鹽酸鹽（55 mg，0.815 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（99 mg，0.733 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.4 mL，2.26 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨 = 45%至55%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，100%純度，88.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.54 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 4之計算質量606.1，m/z實測值607.4 [M+H] +。 化合物 11A 和 11B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (11A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (11B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 化合物 11（200 mg，100%純度，0.329 mmol）之溶液藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 30 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以9 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 11A（30.3 mg，99.4%純度，15.1%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 11B（72.9 mg，98.9%純度，36.0%產率，99.6%立體純）。 化合物 11A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.594 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 4之計算質量606.1，m/z實測值607.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.286 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.15 (s, 1H), 7.67 - 7.64 (m, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 3H), 7.30 - 7.27 (m, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 6.88 (d J =8.8 Hz, 1H), 6.01- 5.36 (m, 3H), 4.90 - 4.83 (m, 1H), 4.58 - 4.33 (m, 1H), 3.97 - 3.83 (m, 2H), 3.19 - 2.98 (m, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 4H), 1.68 - 1.60 (m, 3H), 1.33 - 1.26 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -88.37 - -89.62。 化合物 11B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.401 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 4之計算質量606.1，m/z實測值607.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.462 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.24 - 8.19 (m, 1H), 7.77 - 7.71 (m, 1H), 7.63 - 7.45 (m, 3H), 7.30 - 7.27 (m, 1H), 7.26 - 7.24 (m, 1H), 6.89 (d J =8.8 Hz, 1H), 6.14 - 5.55 (m, 3H), 4.88 - 4.82 (m, 1H), 4.61 - 4.42 (m, 1H), 4.19 - 4.09 (m, 1H), 3.47 - 3.39 (m, 1H), 3.12 - 2.96 (m, 1H), 2.80 (d, J =5.2 Hz, 3H), 2.73- 2.69 (m, 1H), 1.62 - 1.60 (m, 3H), 1.34 - 1.24 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 88.98 - - 89.18。 化合物 12A 和 12B
Figure 02_image381
化合物 12 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-甲基苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 11-11（400 mg，93%純度，0.626 mmol）、碳酸氫銨（100 mg，1.27 mmol）和二碳酸二三級丁酯（265 mg，1.21 mmol）在1,4-二㗁𠮿（9 mL）和N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）中之溶液中添加吡啶（100 mg，1.26 mmol）。在30°C在氮氣氣氛下攪拌1.5小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（340 mg，由LCMS得到的純度為100%，92%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.57 min，C 26H 24Cl 2F 2N 6O 4之計算質量592.1，m/z實測值593.1 [M+H] +。 化合物 12A 和 12B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (12A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6-( 二氟甲氧基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (12B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 化合物 12（340 mg，100%純度，0.573 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IC 5 µm 30 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化 合物 12A（44.4 mg，由LCMS得到的純度為98.2%，13%產率，99.2%立體純）和 化合物 12B（90.8 mg，由LCMS得到的純度為98.8%，26%產率，100%立體純）。 化合物 12A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.517 min，C 26H 24Cl 2F 2N 6O 4之計算質量592.1，m/z實測值593.1 [M+H] +。手性分析（Chiralpak IC 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 5.839 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.17 (s, 1H), 7.70 - 7.69 (m, 1H), 7.64 - 7.46 (m, 3H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.87 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.07 - 5.90 (m, 2H), 5.68 - 5.33 (m, 2H), 4.91 - 4.89 (m, 1H), 4.62 - 4.22 (m, 2H), 3.97 - 3.85 (m, 2H), 3.15 - 2.97 (m, 1H), 2.69 (d, J =16.4 Hz, 1H), 1.63 - 1.61 (m, 3H), 1.29 - 1.28 (m, 3H)。 化合物 12B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.750 min，C 26H 24Cl 2F 2N 6O 4之計算質量592.1，m/z實測值593.2 [M+H] +。手性分析（Chiralpak IC 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：ACN = 100，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 8.807 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.22 (s, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 3H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.89 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.22 - 5.93 (m, 2H), 5.76 - 5.28 (m, 2H), 4.89 (br s, 1H), 4.67 - 4.29 (m, 2H), 4.10 (d, J =13.6 Hz, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.15 - 2.87 (m, 1H), 2.70 (d, J =16.0 Hz, 1H), 1.63 - 1.62 (m, 3H), 1.28 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 13A 和 13B
Figure 02_image383
化合物 13 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 8-6（330 mg，100%純度，0.55 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（80 mg，1.19 mmol）、1-羥基苯并三唑（150 mg，1.11 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（210 mg，1.10 mmol）和三乙胺（0.6 mL，4.31 mmol）。將混合物在室溫攪拌16小時。將混合物用水（20 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為5並用乙酸乙酯（50 mL）兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（145 mg，由LCMS得到的純度為100%，43.0%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.1 [M+H] +。 化合物 13A 和 13B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (13A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (13B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 化合物 13（145 mg，100%純度，0.24 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 30 * 250 mm，流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到粗品P1和P2。將粗品P1藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之 化合物 13A（30 mg，98.2%純度，20.3%產率）和另一粗品峰，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之 化合物 13B（75 mg，98.6%純度，51.0%產率）。 化合物 13A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.146 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.0 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，RT = 6.292 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.66 (s, 1H), 7.83 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J =9.2 Hz, 2H), 7.27 - 7.27 (m, 1H), 7.26 - 7.25 (m, 1H), 5.97 - 5.43 (m, 3H), 4.89 - 4.29 (m, 3H), 4.03 - 3.89 (m, 2H), 3.05 (br s, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 4H), 1.67 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -67.90。 化合物 13B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.261 min，C 27H 25Cl 2F 3N 6O 3之計算質量608.1，m/z實測值609.0 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，RT = 8.681 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.74 (s, 1H), 7.88 (d, J =6.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.27 - 7.27 (m, 1H), 7.25 - 7.25 (m, 1H), 6.01 - 5.42 (m, 3H), 4.88 - 4.44 (m, 3H), 4.20 (d, J =11.2 Hz, 1H), 3.48 (dd, J =12.8和4.8 Hz, 1H), 3.04 (br s, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 4H), 1.69 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.33 - 1.25 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -67.96。 化合物 14A 和 14B
Figure 02_image385
中間體 14-2 ： 乙基 1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 甲酸酯
向乙基 吡唑-3-甲酸酯 14-1（2 g，14.3 mmol）和2-碘-1,1,1-三氟乙烷（2.4 mL，24.4 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中之溶液中添加碳酸鉀（6 g，43.4 mmol）。在100°C攪拌5小時後，將混合物冷卻，用水（80 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（1.68 g，由LCMS得到的純度為100%，53%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.47 min，C 8H 9F 3N 2O 2之計算質量222.1，m/z實測值223.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.56 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.91 (d, J =2.4 Hz, 1H), 4.81 (q, J =8.4 Hz, 2H), 4.42 (q, J =7.2 Hz, 2H), 1.41 (t, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 14-3 ： (1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 甲醇
在0°C，向乙基 1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-甲酸酯 14-2（1.6 g，90%純度，6.48 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加鋁氫化鋰（300 mg，7.90 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用硫酸鈉十水合物（800 mg）淬滅，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（1.1 g，由LCMS得到的純度為94%，89%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.96 min，C 6H 7F 3N 2O之計算質量180.1，m/z實測值181.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.47 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.36 (d, J =2.4 Hz, 1H), 4.71 - 4.64 (m, 4H), 2.21 (t, J =6.0 Hz, 1H)。 中間體 14-4 ： 1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 甲醛
在0°C，向(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)甲醇 14-3（1.1 g，94%純度，5.74 mmol）在二氯甲烷（20 mL）中之溶液中添加戴斯-馬丁過碘烷（3 g，7.07 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（20 mL）淬滅，並用二氯甲烷（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液（20 mL）和鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（1.8 g，由 1H NMR得到的純度為50%，88%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.00 (d, J =0.8 Hz, 1H), 7.59 (d, J =2.8 Hz, 1H), 6.90 (d, J =2.4 Hz, 1H), 4.82 (q, J =8.4 Hz, 2H)。 中間體 14-5 ： 1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙醇
在0°C在氮氣氣氛下，向1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-甲酸酯 14-4（1.8 g，50%純度，5.05 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加甲基溴化鎂（3.6 mL，3 M，在2-甲基四氫呋喃中，10.8 mmol）。使其逐漸升溫至室溫並攪拌3小時。將混合物用水（10 mL）淬滅，並用乙酸乙酯（15 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 20%至40%）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（570 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，52%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.32 (d, J =2.4 Hz, 1H), 4.96 (q, J =6.4 Hz, 1H), 4.66 (q, J =8.4 Hz, 2H), 2.30 (br s, 1H), 1.53 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 14-6 ： 3-(1- 溴乙基 )-1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑
在0°C，向1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)乙醇 14-5（500 mg，90%純度，2.32 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中添加三溴化磷（400 mg，1.48 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液（10 mL）淬滅，並用二氯甲烷（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（5 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈棕色油狀物之標題化合物（640 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，97%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.45 (d, J =1.6 Hz, 1H), 6.44 (d, J =2.4 Hz, 1H), 5.27 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 4.66 (dq, J =8.4, 1.2 Hz, 2H), 2.05 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 14-7 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A-6（650 mg，78%純度，1.07 mmol）和4-氯-3-(三氟甲基)苯甲酸（312 mg，1.39 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中之溶液中添加2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(V)（568 mg，1.50 mmol）和N,N-二異丙基乙胺（415 mg，3.21 mmol）。在25°C攪拌過夜後，將混合物濃縮，以得到殘餘物。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 100 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（700 mg，由LCMS得到的純度為94%，90%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.04 min，C 35H 36ClF 3N 4O 3Si之計算質量680.2，m/z實測值680.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) 8.18 - 8.12 (m, 1H), 7.92 - 7.79 (m, 3H), 7.56 - 7.40 (m, 10H), 5.43 - 5.24 (m, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 2H), 4.16 - 4.12 (m, 1H), 3.99 - 3.69 (m, 4H), 3.00 - 2.95 (m, 1H), 2.68 - 2.56 (m, 1H), 1.09 (br s, 3H), 0.92 (s, 9H)。 中間體 14-8 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（500 mg，100%純度，0.734 mmol）和3-(1-溴乙基)-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑 14-6（400 mg，90%純度，1.40 mmol）在2-甲基四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加50% wt.氫氧化鈉水溶液（5 mL）和苄基三乙基氯化銨（20 mg，0.088 mmol）。在20°C攪拌5小時後，將反應混合物用水（5 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（5 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（5 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體的P1和P2之混合物（800 mg，由LCMS得到的純度為55%，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.04 min和2.10 min，C 42H 43ClF 6N 6O 3Si之計算質量856.3，m/z實測值857.1 [M+H] +。 中間體 14-9 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-8（900 mg，55%純度，0.577 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加四丁基氟化銨溶液（1 mL，1 M，在四氫呋喃中，1 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物濃縮，並藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 =10 : 1）和C18柱（乙腈 : 水 = 50%至65%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（320 mg，由LCMS得到的純度為100%，90%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 26H 25ClF 6N 6O 3之計算質量618.2，m/z實測值619.0 [M+H] +。 中間體 14-10 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-9（320 mg，100%純度，0.517 mmol）、亞氯酸鈉（120 mg，1.06 mmol）和2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（160 mg，1.02 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（5 mL）和次氯酸鈉溶液（0.6 mL，10%水溶液，1.01 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1N鹽酸酸化至pH約為4，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 40%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（330 mg，由LCMS得到的純度為95%，96%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.31 min，C 26H 23ClF 6N 6O 4之計算質量632.1，m/z實測值633.0 [M+H] +。 化合物 14 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 14-10（330 mg，95%純度，0.495 mmol）和甲胺鹽酸鹽（80 mg，1.13 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.3 mL，2.16 mmol）、3-(乙基亞胺基亞甲基胺基)-N,N-二甲基丙-1-胺鹽酸鹽（150 mg，0.782 mmol）和1-羥基苯并三唑（110 mg，0.814 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物用水（10 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層濃縮，並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 45%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（150 mg，由LCMS得到的純度為92%，43%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.57 min，C 27H 26ClF 6N 7O 3之計算質量645.2，m/z實測值646.1 [M+H] +。 化合物 14A 和 14B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (14A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(1-(2,2,2- 三氟乙基 )-1H- 吡唑 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (14B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 化合物 14（150 mg，92%純度，0.214 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IA 5 um 30* 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以55 mL/min；柱溫：30°C；波長：230 nm）分離，以得到粗品P1和粗品P2。將粗品P1藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.2%碳酸氫銨）= 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之 化 合物 14A（35 mg，由LCMS得到的純度為99.5%，25%產率）。將粗品P2藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.2%碳酸氫銨）= 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之 化 合物 14B（65 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，47%產率）。 化合物 14A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.821 min，C 27H 26ClF 6N 7O 3之計算質量645.2，m/z實測值646.4 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：230 nm，R T= 4.742 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 7.46 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.26-7.25 (m, 1H), 6.21 (d, J =1.6 Hz, 1H), 6.10 - 5.42 (m, 3H), 4.86 - 4.33 (m, 4H), 4.01 - 3.88 (m, 2H), 3.08 (br s, 1H), 2.75 - 2.71 (m, 4H), 1.59 - 1.57 (m, 3H), 1.31 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.82, -71.64。 化合物 14B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.015 min，C 27H 26ClF 6N 7O 3之計算質量645.2，m/z實測值646.3 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：230 nm，R T= 6.612 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.53 (dd, J =8.0和1.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.26-7.25 (m, 1H), 6.27 (s, J =1H), 6.14 - 5.39 (m, 3H), 4.87 - 4.34 (m, 4H), 4.16 (d, J =12.8 Hz, 1H), 3.64 (dd, J =13.6和5.6 Hz, 1H), 3.07 (br s, 1H), 2.80 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.73 (d, J =16.0 Hz, 1H), 1.57 - 1.55 (m, 3H), 1.31 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.83, -71.76。 化合物 15A 和 15B
Figure 02_image387
中間體 15-1 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（500 mg，100%純度，0.73 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)吡啶 8-3（370 mg，100%純度，1.46 mmol）在2-甲基四氫呋喃（2.5 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（2.5 mL）和N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（25 mg，0.11 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將混合物用水（5 mL）稀釋並在室溫在減壓下濃縮，以除去揮發物。將剩餘的水層用1 M鹽酸水溶液（30 mL）酸化並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之粗化合物（760 mg，由LCMS得到的純度為81%，98.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.31 min，C 43H 42ClF 6N 5O 3Si之計算質量853.3，m/z實測值854.2 [M+H] +。 中間體 15-2 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 15-1（760 mg，81%純度，0.72 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1 mL，1 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（450 mg，由LCMS得到的純度為96%，97.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.62 min，C 27H 24ClF 6N 5O 3之計算質量615.2，m/z實測值616.0 [M+H] +。 中間體 15-3 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 15-2（450 mg，96%純度，0.70 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（230 mg，1.47 mmol）、亞氯酸鈉（160 mg，80%純度，1.42 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）和次氯酸鈉（0.9 mL，1.51 mmol）。在0°C攪拌過夜後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為100%，90.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.34 min，C 27H 22ClF 6N 5O 4之計算質量629.1，m/z實測值630.0 [M+H] +。 化合物 15 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 15-3（340 mg，100%純度，0.54 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（80 mg，1.19 mmol）、1-羥基苯并三唑（150 mg，1.11 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（220 mg，1.15 mmol）和三乙胺（0.6 mL，4.31 mmol）。將混合物在室溫攪拌16小時。將混合物用水（20 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為5並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物P1（175 mg，由LCMS得到的純度為100%，50.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.61 min，C 28H 25ClF 6N 6O 3之計算質量642.2，m/z實測值643.1 [M+H] +。 化合物 15A 和 15B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (15A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S)-1-(6-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (15B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 化合物 15（175 mg，100%純度，0.27 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 30 * 250 mm，流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到粗異構物，將其進一步藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之 化 合物 15A（30 mg，98.2%純度，16.8%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化 合物 15B（68 mg，98.5%純度，38.3%產率，99.6%立體純）。 化合物 15A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.962 min，C 28H 25ClF 6N 6O 3之計算質量642.2，m/z實測值643.3 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 5.031 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.66 (s, 1H), 7.83 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.78 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.67 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.61 - 7.53 (m, 2H), 7.26 - 7.25 (m, 1H), 5.96 - 5.46 (m, 3H), 4.90 - 4.31 (m, 2H), 4.03 - 3.89 (m, 2H), 3.06 (br s, 1H), 2.75 - 2.67 (m, 4H), 1.67 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.32 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 62.85, - 67.91。 化合物 15B ：LC-MS（ESI）：R T= 4.042 min，C 28H 25ClF 6N 6O 3之計算質量642.2，m/z實測值643.4 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，RT = 6.442 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.74 (s, 1H), 7.87 (d, J =6.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.68 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.61 - 7.53 (m, 2H), 7.26 - 7.25 (m, 1H), 6.01 - 5.45 (m, 3H), 4.88 - 4.46 (m, 2H), 4.20 (d, J =11.6 Hz, 1H), 3.48 (dd, J =4.4, 12.8 Hz, 1H), 3.05 (br s, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 4H), 1.69 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.84, -67.97。 化合物 16A 和 16B
Figure 02_image389
Figure 02_image391
中間體 16-1 ： 1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙醇
在0°C，向1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙酮 11-4（5.0 g，26.9 mmol）在甲醇（50 mL）中之溶液中緩慢添加硼氫化鈉（3.0 g，79.3 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將反應混合物用丙酮（50 mL）緩慢淬滅並濃縮，以得到殘餘物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯（50 mL）中，用鹽水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（5.3 g，由 1H NMR得到的純度為90%，94%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.38 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.10 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.50 (t, J =74.0 Hz, 1H), 4.91 (q, J =6.0 Hz, 1H), 1.80 (d, J =3.6 Hz, 1H), 1.49 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 16-2 ： 1-(1- 溴乙基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 苯
在0°C，向1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙醇 16-1（500 mg，90%純度，2.39 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中緩慢添加三溴化磷（III）（650 mg，2.40 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將反應混合物倒入冰水（20 mL）中並用二氯甲烷（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用飽和碳酸氫鈉溶液（50 mL x 2）、鹽水（50 mL x 2）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（590 mg，由 1H NMR得到的純度為95%，93%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.44 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.09 (d, J =8.8 Hz, 2H), 6.51 (t, J =73.6 Hz, 1H), 5.20 (q, J =7.2 Hz, 1H), 2.03 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 16-3 ： (3R,7S)- 三級丁基 7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C，向(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 Int A-5（1 g，100%純度，1.74 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中之溶液中添加1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 16-2（1.4 g，5.02 mmol）、N-苄基-N,N-二乙基乙烷氯化銨（198 mg，0.869 mmol）和在水中之50% wt.氫氧化鈉（4 mL）。在30°C攪拌2小時後，將混合物用水（8 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（8 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（940 mg，由LCMS得到的純度為100%，73%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.27 min和2.33 min，C 41H 50F 2N 4O 5Si之計算質量744.4，m/z實測值745.0 [M+H] +。 中間體 16-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮：
在0°C，向(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 16-3（940 mg，100%純度，1.26 mmol）在二氯甲烷（4 mL）中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸（2 mL）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液（10 mL）淬滅至pH = 10-11，並用二氯甲烷（15 mL）萃取三次。將有機層合併，用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（800 mg，由LCMS得到的純度為100%，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.77和0.82 min，C 36H 42F 2N 4O 3Si之計算質量644.3，m/z實測值645.5 [M+H] +。 中間體 16-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 16-4（100 mg，99%純度，0.15 mmol）、3,4-二氯苯甲酸（40 mg，0.21 mmol）和2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(V)（80 mg，0.21 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（1 mL）中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（70 mg，0.54 mmol）。然後將反應混合物在室溫在氮氣氣氛下攪拌2小時。將反應混合物濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（130 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，93%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.97和2.04 min，C 43H 44Cl 2F 2N 4O 4Si之計算質量816.24，m/z實測值816.8 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.60 - 7.49 (m, 5H), 7.46 - 7.29 (m, 10H), 7.11 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.12 - 5.92 (m, 1H), 5.70 - 5.39 (m, 1H), 4.78 - 4.31 (m, 3H), 4.11 - 4.01 (m, 1H), 3.82 - 3.73 (m, 1H), 3.63 - 3.53 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 1H), 3.02 - 2.60 (m, 2H), 1.56 - 1.52 (m, 3H), 1.24 - 1.12 (m, 3H), 1.03 (s, 6H), 0.94 (s, 3H)。 中間體 16-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 16-5（1 g，90%純度，1.10 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加1 M四丁基氟化銨（0.75 mL，0.75 mmol），然後將混合物在室溫攪拌1小時。將反應混合物倒入水（10 mL）中並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 50 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（670 mg，由LCMS得到的純度為95%，100%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.721 min，C 27H 26Cl 2F 2N 4O 4之計算質量578.13，m/z實測值578.9 [M+H] +。 中間體 16-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 16-6（555 mg，95%純度，0.91 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（4 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（285 mg，1.82 mmol）、亞氯酸鈉（210 mg，1.86 mmol）、5.5%次氯酸鈉溶液（1.1 mL，1.85 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫攪拌8小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（5 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，並用乙酸乙酯（15 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（5 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（480 mg，由LCMS得到的純度為100%，89%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.35 min，C 27H 24Cl 2F 2N 4O 5之計算質量592.1，m/z實測值592.7 [M+H] +。 化合物 16 ： (3R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 16-7（400 mg，100%純度，0.67 mmol）、甲胺鹽酸鹽（148 mg，2.19 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（246 mg，1.28 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（246 mg，1.82 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（7 mL）中之溶液中添加三乙胺（395 mg，3.90 mmol）。使反應混合物緩慢回到室溫。在室溫在氮氣氣氛下攪拌過夜後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（340 mg，由LCMS得到的純度為100%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.437 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量605.1，m/z實測值606.2 [M+H] +。 化合物 16A 、 16B 、 16C 和 16D ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (16A 和 16B) ， (3R,7R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (16C) ，以及 (3R,7R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (16D)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之混合物 化合物 16 （ 440 mg，96%純度，0.70 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 60 : 40，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 16C （3 mg，0.7%產率）和呈白色固體之 化合物 16D（4 mg，0.8%產率）以及呈白色固體之標題混合物 化合物 16A 和 16B（330 mg，78%產率，由LCMS得到的純度為100%）。 化合物 16A 和 16B ：LC-MS（ESI）：R T= 2.93 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量605.14，m/z實測值605.8 [M+H] +。 化合物 16C ：LC-MS（ESI）：R T= 1.65 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量605.14，m/z實測值622.8 [M+18] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.98 (s, 1H), 7.77 - 7.75 (m, 2H), 7.49 - 7.39 (m, 3H), 7.23 - 7.05 (m, 3H), 6.06 - 5.50 (m, 2H), 5.25 - 5.04 (m, 1H), 4.56 - 4.10 (m, 2H), 3.69 - 3.56 (m, 2H), 2.98 - 2.94 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.21 - 2.08 (m, 1H), 1.40 (s, 3H), 1.18 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ -82.08。 化合物 16D ：LC-MS（ESI）：R T= 1.62 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量605.14，m/z實測值622.8 [M+18] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.56 - 7.52 (m, 2H), 7.30 - 7.28 (m, 4H), 7.09 - 7.07 (m, 2H), 6.50 (t, J =74.0 Hz, 1H), 5.91 - 5.44 (m, 3H), 4.86 - 4.36 (m, 2H), 3.91 - 3.79 (m, 2H), 3.08 (br s, 1H), 2.71 - 2.67 (m, 4H), 1.68 - 1.61 (m, 3H), 1.26 - 1.25 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.85。 化合物 16A 和 16B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (16A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (16B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之混合物 化合物 16A 和 16B（330 mg，100%純度，0.544 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：HEX : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 16A（66.8 mg，20%產率，98.5%純度，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 16B（90.7 mg，27%產率，99.4%純度，99.9%立體純）。 化合物 16A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.366 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量606，m/z實測值607.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，Rt = 8.184 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.31 - 7.27 (m, 4H), 7.09 (d, J =8.8 Hz, 2H), 6.51 (t, J =74.0 Hz, 1H), 6.07 - 5.44 (m, 3H), 4.86 - 4.42 (m, 2H), 3.92 - 3.81 (m, 2H), 3.06 (br s, 1H), 2.73 - 2.67 (m, 4H), 1.60 - 1.58 (m, 3H), 1.30 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.83。 化合物 16B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.093 min，C 28H 27Cl 2F 2N 5O 4之計算質量606，m/z實測值607.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，Rt = 10.821 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.37 - 7.28 (m, 4H), 7.11 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 5.99 - 5.44 (m, 3H), 4.83 - 4.40 (m, 2H), 4.08 - 3.92 (m, 1H), 3.40 - 3.36 (m, 1H), 3.04 (br s, 1H), 2.80 - 2.69 (m, 4H), 1.58 - 1.56 (m, 3H), 1.30 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -81.03。 化合物 17
Figure 02_image393
中間體 17-1 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（200 mg，0.309 mmol，100%純度）和1-(溴甲基)-4-(二氟甲氧基)苯（130 mg，0.548 mmol）在2-甲基四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（5 mL）。在30°C攪拌2小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並在室溫在減壓下濃縮，以除去揮發物。將剩餘的水層用2 M鹽酸水溶液（20 mL）酸化，並且用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次並用鹽水（60 mL）萃取，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗品（300 mg，純度51%，60%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.30 min，C 42H 42Cl 2F 2N 4O 4Si之計算質量802.2，m/z實測值803.1 [M+H] +。 中間體 17-2 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 17-1（450 mg，51%純度，0.286 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1 mL，1 mmol）。在0°C攪拌4小時後，將混合物過濾並在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（170 mg，98%產率，93%純度）。LC-MS（ESI）：R T= 1.62 min，C 26H 24Cl 2F 2N 4O 4之計算質量564.1，m/z實測值565.1 [M+H] +。 中間體 17-3 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 17-2（170 mg，93%純度，0.280 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（90 mg，0.576 mmol）、次氯酸鈉（0.35 mL，0.588 mmol）、亞氯酸鈉（70 mg，0.619 mmol）、飽和磷酸二氫鈉水溶液（4 mL）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其溶解於乙腈（4 mL）中。在40°C攪拌1小時後，將混合物冷卻至室溫並過濾。藉由過濾收集白色固體，以得到標題化合物（160 mg，100%純度，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.32 min，C 26H 22Cl 2F 2N 4O 5之計算質量578.1，m/z實測值579.0 [M+H] +。 化合物 17 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 17-3（160 mg，0.276 mmol，純度100%）在N,N-二甲基甲醯胺（4 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（55 mg，0.774 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（70 mg，0.518 mmol）、N1-((乙基亞胺基)亞甲基)-N3,N3-二甲基丙烷-1,3-二胺鹽酸鹽（110 mg，0.574 mmol）和三乙胺（0.3 mL，2.08 mmol）。在0°C攪拌2小時後，向混合物中添加乙酸乙酯（50 mL），用水（50 mL）洗滌兩次，用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（70 mg，42.4%產率，99.1%純度）。LC-MS（ESI）：R T= 3.292 min，C 27H 25Cl 2F 2N 5O 4之計算質量591.1，m/z實測值592.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.53 - 7.51 (m, 2H), 7.32 - 7.30 (m, 2H), 7.27 - 7.26 (m, 1H), 7.25 - 7.24 (m, 1H), 7.09 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.49 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.14 - 6.32 (m, 2H), 4.90 - 4.42 (m, 4H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 3.87 (dd, J =13.2和4.0 Hz, 1H), 3.13 - 2.97 (m, 1H), 2.78 - 2.70 (m, 4H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.95。 化合物 18A 和 18B
Figure 02_image395
中間體 18-2 ： 1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇
將1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙烯酮 18-1（2.0 g，100%純度，10.1 mmol）溶解於四氫呋喃（10 mL）和甲醇（20 mL）中之混合物中，然後將溶液冷卻至0°C並添加硼氫化鈉（305 mg，8.06 mmol）。使反應升溫至室溫並攪拌2小時，然後藉由添加水淬滅並用乙酸乙酯（40 mL）萃取3次。將有機層合併，用鹽水洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並在減壓下濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（1.9 g，由 1H NMR得到的純度為95%，89%產率）。 1H NMR (DMSO -d 6 , 400 MHz) δ 7.87(d, J =8.8 Hz, 2H), 7.60 (d, J =8.0 Hz, 2H), 5.40 (d, J =4.0 Hz, 1H), 4.85 - 4.80 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 1.34(d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 18-3 ： 1-(1- 溴乙基 )-4-( 甲磺醯基 ) 苯
在室溫，向1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙醇 18-2（1.6 g，95%純度，7.59 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加四溴甲烷（4.5 g，13.6 mmol）和三苯膦（3.6 g，13.7 mmol）。在40°C在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將混合物在減壓下濃縮，然後藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1000 : 1至1 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.8 g，由 1H NMR得到的純度為95%，86%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ 7.92 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.78 (d, J =8.0 Hz, 2H), 5.58 (q, J =6.8 Hz, 1H), 3.23 (s, 3H), 2.00 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 18-4 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（600 mg，95%純度，0.880 mmol）和1-(1-溴乙基)-4-(甲磺醯基)苯 18-3（425 mg，95%純度，1.53 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中逐滴添加苄基三乙基氯化銨（208 mg，0.913 mmol）和飽和氫氧化鈉水溶液（4 mL）。在室溫攪拌2小時後，添加水（30 mL），用乙酸乙酯（60 mL）萃取。將合併的有機層在減壓下濃縮，將所得殘餘物藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 100 : 1至16 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為100%，77%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.49 min，C 27H 28Cl 2N 4O 5S之計算質量590.1，m/z實測值591.1 [M+H] +。 中間體 18-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 18-4（400 mg，100%純度，0.676 mmol）在乙腈（6.0 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（4.0 mL）、亞氯酸鈉（153 mg，1.35 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（213 mg，1.36 mmol）和次氯酸鈉水溶液（1.5 mL，1.39 mmol）。在0°C攪拌1小時並在室溫攪拌2小時後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（5 mL）稀釋，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 3並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到呈白色固體之所需產物（370 mg，由LCMS得到的純度為100%，90%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.30 min，C 27H 26Cl 2N 4O 6S之計算質量604.1，m/z實測值605.1 [M+H] +。 化合物 18 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 ’
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 18-5（320 mg，100%純度，0.528 mol）、甲胺鹽酸鹽（89 mg，1.32 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（203 mg，1.06 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（143 mg，1.06 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（4 mL）中之外消旋混合物中逐滴添加三甲胺（240 mg，2.37 mmol）。在室溫在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將混合物用1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 3並用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至80%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（270 mg，由LCMS得到的純度為100%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.40 min，C 28H 29Cl 2N 5O 5S之計算質量617.1，m/z實測值618.1 [M+H] +。 化合物 18A 和 18B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (18A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (18B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 1（300 mg，100%純度，0.485 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離方法：柱：Chiralpak IB，5 μm 30 * 250 mm；流動相：己烷 : 乙醇 = 30 : 70，以60 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題產物 18A（64.6 mg，98.9%純度，21%產率，100%立體純）和 18B（114.3 mg，99.0%純度，38%產率，100%立體純）。 18A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.424 min，C 28H 29Cl 2N 5O 5S之計算質量617.3，m/z實測值618.0 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : 乙醇 = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 5.628 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.91 (d, J =8.8 Hz, 2H), 7.57 - 7.47 (m, 4H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 6.12 - 5.31 (m, 3H), 4.99 - 4.24 (m, 3H), 4.02 - 3.83 (m, 2H), 3.16 - 2.98 (m, 4H), 2.77 - 2.72 (m, 1H), 2.69 (d, J =5.2 Hz, 3H), 1.64 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 18B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.199 min，C 28H 29Cl 2N 5O 5S之計算質量617.3，m/z實測值618.0 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : 乙醇 = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.082 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.93 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.62 - 7.50 (m, 4H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 6.26 - 5.29 (m, 3H), 4.85 - 4.26 (m, 3H), 4.12 (d, J =13.2 Hz, 1H), 3.43 (dd, J =13.2和4.8 Hz, 1H), 3.16 - 2.95 (m, 4H), 2.80 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.71 (d, J =16.0 Hz, 1H), 1.64 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 19A 和 19B
Figure 02_image397
中間體 19-1 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（3.2 g，100%純度，4.70 mmol）和1-(1-溴乙基)-4-(甲磺醯基)苯 18-3（2.28 g，95%純度，8.23 mmol）在四氫呋喃（30 mL）中之溶液中添加苄基三乙基氯化銨（1.1 g，4.83 mmol），並逐滴添加飽和氫氧化鈉水溶液（25 mL）。在室溫攪拌2小時後，向混合物中添加水（80 mL）並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層在減壓下濃縮。將所得殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至65%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.65 g，由LCMS得到的純度為96%，54%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.44 min和1.46 min，C 28H 28ClF 3N 4O 5S之計算質量係624.1，m/z實測值625.0 [M+H] +。 中間體 19-2 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 19-1（200 mg，97%純度，0.307 mmol）在乙腈（2.0 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（2.0 mL）、亞氯酸鈉（69 mg，0.610 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（97 mg，0.617 mmol）和次氯酸鈉水溶液（0.7 mL，0.646 mmol）。在0°C攪拌1小時並在室溫攪拌2小時後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（20 mL）稀釋。將混合物用1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 3並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體之所需產物（200 mg，由LCMS得到的純度為92%，94%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.08 min和2.11 min，C 28H 26ClF 3N 4O 6S之計算質量係638.1，m/z實測值639.0 [M+H] +。 化合物 19 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 19-2（200 mg，92%純度，0.288 mmol）、甲胺鹽酸鹽（47 mg，0.696 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（110 mg，0.574 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（78 mg，0.577 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（4 mL）中之混合物中逐滴添加三甲胺（131 mg，1.30 mmol）。在0°C在氮氣氣氛下攪拌1小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH = 5並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 05%至65%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（135 mg，由LCMS得到的純度為100%，72%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.70 min，C 29H 29ClF 3N 5O 5S之計算質量651.2，m/z實測值652.0 [M+H] +。 化合物 19A 和 19B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (19A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (19B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 19（170 mg，100%純度，0.261 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離方法：柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 30 * 250 mm；流動相：乙腈 : 異丙醇 : = 90 : 10，以60 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 19A（32.4 mg，96.6%純度，18%產率，99.9%立體純）和呈白色固體之 19B（82.9 mg，99.8%純度，49%產率，99.9%立體純）。 19A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.424 min，C 29H 29ClF 3N 5O 5S之計算質量651.2，m/z實測值652.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：乙腈 : 異丙醇 = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 3.730 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.91 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.77 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 4H), 6.17 - 5.35 (m, 3H), 4.93 - 4.34 (m, 3H), 3.99 - 3.86 (m, 2H), 3.18 - 2.98 (m, 4H), 2.81 - 2.64 (m, 4H), 1.64 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.32 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.84。 19B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.424 min，C 29H 29ClF 3N 5O 5S之計算質量651.2，m/z實測值652.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：乙腈 : 異丙醇 = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 4.882 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.93 (d, J =8.0 Hz, 2H), 7.77 (d, J =1.6 Hz, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 4H), 6.28 - 5.33 (m, 3H), 4.98 - 4.28 (m, 3H), 4.13(d, J =10.8 Hz, 1H), 3.44 (dd, J =13.2和4.8 Hz, 1H), 3.15 - 2.99 (m, 4H), 2.81 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.73 (d, J =15.6 Hz, 1H), 1.64 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.83。 化合物 20A 和 20B 以及 21
Figure 02_image399
中間體 20-2 ： 4-( 環丙基磺醯基 ) 苯甲醛
向4-氟苯甲醛 20-1（300 mg，2.42 mmol）在二甲亞碸（12 ml）中之溶液中添加環丙烷亞磺酸鈉鹽（370 mg，2.89 mmol）。將反應混合物置於微波輻射烘箱中並在140°C加熱1小時。將反應混合物用水（10 mL）淬滅，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題產物（500 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，88.5%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 10.17 (s, 1H), 8.18 - 8.06 (m, 4H), 2.60 - 2.47 (m, 1H), 1.50 - 1.39 (m, 2H), 1.19 - 1.06 (m, 2H)。 中間體 20-3 ： 1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇
在0°C在氮氣氣氛下，向4-(環丙基磺醯基)苯甲醛 20-2（400 mg，90%純度，1.71 mmol）在無水四氫呋喃（4 mL）中之溶液中逐滴添加在四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（4 mL，4 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將反應混合物用飽和氯化銨水溶液（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（400 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，92.9%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.92 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.62 (d, J =8.1 Hz, 2H), 5.09 - 5.03 (m, 1H), 2.60 - 2.44 (m, 1H), 1.84 - 1.67 (m, 1H), 1.58 (d, J =6.6 Hz, 3H), 1.47 - 1.36 (m, 2H), 1.10 - 1.08 (m, 2H)。 中間體 20-4 ： 1-(1- 溴乙基 )-4-( 環丙基磺醯基 ) 苯
在0°C，向1-(4-(環丙基磺醯基)苯基)乙-1-醇 20-3（450 mg，90%純度，1.79 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中逐滴添加在二氯甲烷（5 mL）中之三溴膦（450 mg，1.66 mmol）。將所得混合物在0°C攪拌2小時，然後倒入水（20 mL）中，並用二氯甲烷（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（500 mg，由 1H NMR得到的純度為80%，77.3%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.01 - 7.91 (m, 2H), 7.71 - 7.55 (m, 2H), 5.83 - 5.53 (m, 1H), 2.60 - 2.43 (m, 1H), 2.43 - 2.29 (m, 3H), 1.48 - 1.36 (m, 2H), 1.11 - 1.09 (m, 2H)。 中間體 20-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（420 mg，100%產率，0.62 mmol）和1-(1-溴乙基)-4-(環丙基磺醯基)苯 20-4（320 mg，80%純度，0.89 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中之溶液中添加在水中之氫氧化鈉（2 mL，50% wt）和苄基三乙基氯化銨（20 mg，0.09 mmol）。在50°C攪拌2小時後，將反應倒入水（10 mL）中，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（750 mg，由LCMS得到的純度為45%，61.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.58 min、2.08 min和2.16 min，C 46H 48ClF 3N 4O 5SSi之計算質量888.3，m/z實測值668.0 [M-TBDPS+H 3O] +，889.1 [M+H] +。 中間體 20-6 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(1-(4-(環丙基磺醯基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 20-5（750 mg，45%純度，0.38 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨溶液（0.4 mL，0.4 mmol）。在20°C攪拌2小時後，將反應倒入飽和氯化銨水溶液（10 mL）中，用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（220 mg，由LCMS得到的純度為100%，89.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.57 min，C 30H 30ClF 3N 4O 5S之計算質量650.2，m/z實測值668.0 [M+H 3O] +。 中間體 20-7 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(1-(4-(環丙基磺醯基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 20-6（220 mg，100%純度，0.34 mmol）在乙腈（2 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（2 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（110 mg，0.70 mmol）、亞氯酸鈉（80 mg，0.71 mmol），並逐滴添加10%次氯酸鈉水溶液（500 mg，0.67 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫攪拌3小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（2 mL）淬滅，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈: 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 35%-55%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（190 mg，由LCMS得到的純度為100%，84.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.31 min，C 30H 28ClF 3N 4O 6S之計算質量664.1，m/z實測值665.6 [M+H] +。 化合物 20 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(1-(4-(環丙基磺醯基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 20-7（190 mg，100%純度，0.29 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（110 mg，0.57 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（80 mg，0.59 mmol）和甲胺鹽酸鹽（60 mg，0.89 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中之溶液中逐滴添加在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中之三甲胺（190 mg，1.88 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物倒入水（10 mL）中，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（170 mg，由LCMS得到的純度為94%，82.5%產率）。注釋：手性顯示88.3% 20，以及11.7% 21 。LC-MS（ESI）：R T= 1.56 min，C 31H 31ClF 3N 5O 5S之計算質量677.2，m/z實測值676.6 [M-H] -。 化合物 20A 和 20B 以及 21 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (20A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (20B) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(4-( 環丙基磺醯基 ) 苄基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (21)
將外消旋物(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(1-(4-(環丙基磺醯基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺與(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(4-(環丙基磺醯基)苄基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 20（200 mg，94%純度，0.28 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 5 µm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 20A（47.5 mg，99.7%純度，25.2%產率，99.9%立體純）、 20B（71.2 mg，99.5%純度，37.7%產率，99.5%立體純）以及 21（12.5 mg，94.7%純度，6.4%產率）。 20A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.424 min，C 31H 31ClF 3N 5O 5S之計算質量677.2，m/z實測值678.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IBN-5 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 6.532 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.93 (s, 1H), 7.86 - 7.85 (m, 3H), 7.80 - 7.79 (m, 2H), 7.57 - 7.44 (m, 2H), 5.94 - 5.68 (m, 1H), 5.50 - 5.19 (m, 1H), 5.05 - 4.93 (m, 1H), 4.70 - 4.35 (m, 1H), 4.29 - 3.93 (m, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 1H), 2.98 - 2.81 (m, 2H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.36 (d, J =3.6 Hz, 3H), 1.63 - 1.43 (m, 3H), 1.30 - 1.17 (m, 3H), 1.12 - 1.11 (m, 2H), 1.04 - 1.02 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -61.31。 20B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.459 min，C 31H 31ClF 3N 5O 5S之計算質量677.2，m/z實測值678.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IBN-5 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 10.778 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.09 - 8.00 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 3H), 7.82 - 7.75 (m, 1H), 7.65 - 7.50 (m, 2H), 5.92 - 5.63 (m, 1H), 5.51 - 5.18 (m, 1H), 5.11 - 4.97 (m, 1H), 4.68 - 4.37 (m, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 1H), 3.78 - 3.56 (m, 2H), 2.98 - 2.78 (m, 2H), 2.64 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.61 - 2.51 (m, 1H), 1.55 - 1.38 (m, 3H), 1.30 - 1.18 (m, 3H), 1.15 - 1.09 (m, 2H), 1.04 - 1.02 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -61.34。 21 ：LC-MS（ESI）：R T= 3.553 min，C 30H 29ClF 3N 5O 5S之計算質量663.2，m/z實測值664.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.98 - 7.96 (m, 1H), 7.92 (d, J =1.6Hz, 1H), 7.86 - 7.79 (m, 4H), 7.57 - 7.41 (m, 2H), 5.52 - 5.18 (m, 1H), 5.12 - 4.91 (m, 2H), 4.65 - 4.32 (m, 2H), 4.26 - 4.04 (m, 2H), 3.81 - 3.63 (m, 1H), 2.94 (dd, J =16.4, 4.4 Hz, 1H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.64 - 2.51 (m, 4H), 1.30 - 1.15 (m, 3H), 1.14 - 1.08 (m, 2H), 1.07 - 0.97 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ - 61.33。 化合物 22A 和 22B
Figure 02_image401
中間體 22-2 ： 1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙 -1- 醇
在-78°C在氮氣氣氛下，向4-(甲磺醯基)苯甲醛 22-1（3.0 g，16.2 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之2.0 M乙基溴化鎂（12 mL，24 mmol）。將所得混合物攪拌2小時，將反應混合物用飽和氯化銨水溶液（100 mL）淬滅，用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈: 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 15%-30%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（2.0 g，由 1H NMR得到的純度為90%，51.5%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.93 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.56 (d, J =8.0 Hz, 2H), 4.76 - 4.72 (m, 1H), 3.05 (s, 3H), 1.99 - 1.97 (m, 1H), 1.84 - 1.75 (m, 2H), 0.95 (d, J =8.0 Hz, 3H)。 中間體 22-3 ： 1-(1- 溴丙基 )-4-( 甲磺醯基 ) 苯
在0°C在氮氣氣氛下，向1-(4-(甲磺醯基)苯基)丙-1-醇 22-2（1.5 g，90%純度，6.3 mmol）在二氯甲烷（40 mL）中之溶液中添加溴化磷(III)（3 g，11.1 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物在減壓下濃縮，以得到粗品，將粗品用乙酸乙酯（50 mL）稀釋然後飽和碳酸氫鈉溶液（50 mL）洗滌兩次並經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（600 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，31%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.93 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.59 (d, J =8.4 Hz, 2H), 4.88 (t, J =6.9 Hz, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.35 - 2.11 (m, 2H), 1.02 (t, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 22-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（800 mg，89%純度，1.10 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中之溶液中添加在礦物油中之60%氫化鈉（200 mg，4.58 mmol）。在0°C攪拌30分鐘後，將1-(1-溴丙基)-4-(甲磺醯基)苯 22-3（600 mg，90%純度，1.95 mmol）添加到混合物中。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之粗混合物化合物（1 g，由LCMS得到的純度為83%，89%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.45 min，C 44H 48Cl 2N 4O 5SSi之計算質量842.25，m/z實測值605.4 [M-OTBDPS] +。 中間體 22-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)丙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 22-4（1 g，83%純度，0.983 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.5 mL，1.5 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至3 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為86%，58%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.51 min，C 28H 30Cl 2N 4O 5S之計算質量604.13，m/z實測值605.0 [M+H] +。 中間體 22-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)丙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 22-5（400 mg，86%純度，0.568 mmol）在乙腈（10 mL）和飽和磷酸二氫鉀水溶液（10 mL）中之懸浮液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基（200 mg，1.28 mmol）、亞氯酸鈉（140 mg，1.24 mmol）和次氯酸鈉水溶液（0.8 mL，1.34 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物藉由1 M鹽酸水溶液調節PH至5-6並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之粗化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為87%，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25和1.27 mins，C 28H 28Cl 2N 4O 6S之計算質量618.11，m/z實測值619.8 [M+H] +。 化合物 22 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)丙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 22-6（400 mg，87%純度，0.562 mmol）、甲胺鹽酸鹽（130 mg，1.93 mmol）、1-羥基苯并三唑（200 mg，1.48 mmol）和1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（300 mg，1.57 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之溶液中逐滴添加三乙胺（0.7 mL，5.04 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 丙酮 = 20 : 1至5 : 1）純化，以得到呈白色固體之化合物（250 mg，由LCMS得到的純度為73%，51%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.48 min，C 29H 31Cl 2N 5O 5S之計算質量631.14，m/z實測值648.9 [M+H 2O] +。 化合物 22A 和 22B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (22A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(4-( 甲磺醯基 ) 苯基 ) 丙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (22B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(4-(甲磺醯基)苯基)丙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 22（250 mg，73%純度，0.289 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 250 mm*20 mm 5 μm；流動相：ACN : IPA = 90 : 10，以15 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，然後進一步藉由製備型HPLC（柱：Xbridge C18（5 μm 19 *150 mm），流動相A：水（+ 0.1%碳酸氫銨），流動相B：乙腈，UV：214 nm，流速：15 mL/min，梯度：30%-60%（%B））純化，以得到呈白色固體之標題化合物 22A（23.9 mg，99.7%純度，54%產率，99.9%立體純）和呈白色固體之標題化合物 22B（46.3 mg，99.8%純度，60%產率，99.5%立體純）。 22A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.349 min，C 29H 31Cl 2N 5O 5S之計算質量631.14，m/z實測值632.2 [M+H] +。手性分析（Chiralpak IB N-5 250 mm*4.6 mm 5μm；ACN : IPA = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 4.214 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.91 (d, J =8.0 Hz, 2H), 7.54 - 7.51 (m, 4H), 7.30 - 7.27 (m, 1H), 6.09 - 5.40 (m, 3H), 4.93 - 4.45 (m, 3H), 3.90 (d, J =4.0 Hz, 2H), 3.05 (s, 3H), 3.01 - 2.95 (m, 1H), 2.73 - 2.69 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.14 - 2.00 (m, 2H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.01 (t, J =6.4 Hz, 3H)。 22B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.404 min，C 29H 31Cl 2N 5O 5S之計算質量631.14，m/z實測值632.2 [M+H] +。手性分析（Chiralpak IB N-5 250 mm*4.6 mm 5μm；ACN : IPA = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 5.754 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.93 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.62 - 7.57 (m, 2H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.29 - 7.27 (m, 1H), 5.96 - 5.38 (m, 3H), 4.84 - 4.38 (m, 3H), 4.14 - 4.10 (m, 1H), 3.36 - 3.31 (m, 1H), 3.05 (s, 3H), 3.02 - 2.96 (m, 1H), 2.80 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.73 - 2.69 (m, 1H), 2.12 - 2.04 (m, 2H), 1.32 (d, J =7.2 Hz, 3H), 0.95 (t, J =7.2 Hz, 3H)。 化合物 23A 和 23B
Figure 02_image403
中間體 23-2 ： 4-(1- 溴乙基 ) 苯甲腈
將4-乙基苯甲腈 23-1（1.2 g，9.1 mmol）在四氯化碳（5.0 mL）中之溶液加熱至回流。然後在UV輻照下，經30分鐘緩慢添加溴（1.5 g，9.39 mmol）。使反應混合物回流4小時並冷卻至室溫。然後將混合物用二氯甲烷（50 mL）稀釋並用飽和碳酸氫鈉水溶液（50 mL）和鹽水（50 mL）洗滌。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並將溶劑在減壓下去除，以得到呈棕色液體之標題產物（2.0 g，由 1H NMR得到的純度為60%，62%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 - 7.63 (m, 2H), 7.55 - 7.53 (m, 2H), 5.16 (q, J =7.2 Hz, 1H), 2.04 (d, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 23-3 ： 4-(1-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 苯甲腈
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.0 g，90%純度，1.39 mmol）在2-甲基四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加苄基三乙基氯化銨（65 mg，0.285 mmol）、4-(1-溴乙基)苯甲腈 23-2（1.3 g，60%純度，3.71 mmol）和在水中之50% wt.氫氧化鈉（10 mL）。在室溫攪拌6小時後，將混合物用水（200 mL）稀釋，用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（250 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物的粗化合物（1.9 g，由LCMS得到的純度為45%，79%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 4.30 min和4.40 min，C 43H 43Cl 2N 5O 3Si之計算質量775.3，m/z實測值776.1 [M+H] +。 中間體 23-4 ： 4-(1-((3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 苯甲腈
在0°C，向4-(1-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)苯甲腈 23-3（1.9 g，45%純度，1.10 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（2.5 mL，2.5 mmol）。在0°C攪拌1小時並且然後在室溫攪拌1小時後，將混合物用飽和氯化銨（80 mL）淬滅，用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（乙酸乙酯 : 石油醚 = 1 : 1至5 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（628 mg，由LCMS得到的純度為72%，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.81 min和2.83 min，C 27H 25Cl 2N 5O 3之計算質量537.1，m/z實測值538.1 [M+H] +。 中間體 23-5 ： (3R,7S)-9-(1-(4- 氰基苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向4-(1-((3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)苯甲腈 23-4（307 mg，72%純度，0.411 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（150 mg，0.960 mmol）、亞氯酸鈉（120 mg，1.061 mmol），並逐滴添加5.5%次氯酸鈉水溶液（0.6 mL，1.01 mmol）。使反應緩慢冷卻至室溫。在室溫攪拌4小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（8 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液（約4 mL）酸化至pH 3-4，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並在室溫藉由用石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1（10 mL）研磨而純化。攪拌30分鐘後，將混合物過濾，以得到呈白色固體之標題化合物（225 mg，由LCMS得到的純度為90%，89%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.19 min和2.22 min，C 27H 23Cl 2N 5O 4之計算質量551.1，m/z實測值552.1 [M+H] +。 化合物 23 ： (3R,7S)-9-(1-(4- 氰基苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(4-氰基苯基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 23-5（225 mg，90%純度，0.367 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（150 mg，0.782 mmol）、1-羥基苯并三唑（100 mg，0.740 mmol）、甲胺鹽酸鹽（75 mg，1.11 mmol），並逐滴添加在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之三乙胺（0.4 mL，2.88 mmol）。在0°C攪拌10分鐘後，向混合物中添加水（50 mL），用乙酸乙酯（40 mL）萃取三次。將有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至65%）純化，得到呈白色固體之標題化合物（190 mg，由LCMS得到的94%純度，86%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.78 min和2.82 min，C 28H 26Cl 2N 6O 3之計算質量564.1，m/z實測值565.1 [M+H] +。 化合物 23A 和 23B ： (3R,7S)-9-((R *)-1-(4- 氰基苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (23A) ，以及 (3R,7S)-9-((S *)-1-(4- 氰基苯基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (23B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 23（325 mg，99%純度，0.569 mmol）藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IA 5 μm 30 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）純化，以得到呈白色固體之標題化合物 23A（100 mg，99.2%純度，31%產率，100%立體純）和呈白色固體之 23B（130 mg，98.5%純度，40%產率，100%立體純）。 23A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.714 min，C 28H 26Cl 2N 6O 3之計算質量564.1，m/z實測值565.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.044 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.90 - 7.76 (m, 5H), 7.53 - 7.35 (m, 3H), 5.89 - 5.64 (m, 1H), 5.47 - 5.11 (m, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.66 - 3.92 (m, 3H), 3.41 - 3.36 (m, 1H), 2.98 - 2.82 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 1H), 2.40 (d, J =4.0 Hz, 3H), 1.60 - 1.40 (m, 3H), 1.29 - 1.11 (m, 3H)。 23B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.763 min，C 28H 26Cl 2N 6O 3之計算質量564.1，m/z實測值565.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 9.973 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.03 (s, 1H), 7.89 - 7.70 (m, 4H), 7.59 - 7.38 (m, 3H), 5.89 - 5.60 (m, 1H), 5.49 - 5.14 (m, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.65 - 4.04 (m, 2H), 3.81 - 3.54 (m, 2H), 2.97 - 2.83 (m, 1H), 2.63 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.60 - 2.55 (m, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.26 - 1.11 (m, 3H)。 化合物 24A 和 24B
Figure 02_image405
中間體 24-2 ： 1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙酮
將1-(3-氟-4-羥基苯基)乙酮 24-1（1.5 g，9.73 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）和碳酸鉀（1.6 g，11.6 mmol）中之混合物在氮氣氣氛下攪拌10分鐘。添加2-氯-2,2-二氟乙酸鈉（1.8 g，11.8 mmol）並將混合物加熱至100°C過夜。將混合物冷卻至室溫並用水（30 mL）處理。將反應混合物用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10: 1）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（1.3 g，由 1H NMR得到的純度為100%，65.4%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.84 - 7.78 (m, 2H), 7.37 - 7.31 (m, 1H), 6.68 (t, J =72.6 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H)。 中間體 24-3 ： 1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙醇
在0°C，向1-(4-(二氟甲氧基)-3-氟苯基)乙酮 24-2（1.3 g，6.37 mmol）在甲醇（15 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（150 mg，3.97 mmol），然後將混合物攪拌2小時。將溶液用水（30 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次，用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題產物（1.3 g，由 1H NMR得到的純度為100%，99.0%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.31 - 7.23 (m, 2H), 7.16 (d, J =8.7 Hz, 1H), 6.58 (t, J =73.5 Hz, 1H), 4.93 (q, J =6.3 Hz, 1H), 1.99 (s, 1H), 1.52 (d, J =6.3 Hz, 3H)。 中間體 24-4 ： 4-(1- 溴乙基 )-1-( 二氟甲氧基 )-2- 氟苯
在0°C，向1-(4-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)苯基)乙醇 24-3（600 mg，100%純度，2.91 mmol）在二氯甲烷（6 mL）中之溶液中逐滴添加在二氯甲烷（4 mL）中之三溴膦（600 mg，2.22 mmol）。在0°C攪拌3小時後，將反應倒入水（10 mL）中，用二氯甲烷（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題產物（700 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，80.5%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.35 - 7.31 (m, 2H), 7.26 - 7.24(m, 1H), 6.60 (t, J =73.5 Hz, 1H), 5.18 (q, J =6.9 Hz, 1H), 2.23 (d, J =6.9 Hz, 3H)。 中間體 24-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在25°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（750 mg，100%產率，1.16 mmol）和4-(1-溴乙基)-1-(二氟甲氧基)-2-氟苯 24-4（700 mg，90%純度，2.34 mmol）在2-甲基四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在水中之氫氧化鈉（3 mL，50% wt）和苄基三乙基氯化銨（30 mg，0.13 mmol）。在50°C攪拌2小時後，將反應倒入水（10 mL）中，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗產物（1.6 g，由LCMS得到的純度為58%，95.9%產率）。將粗品不經進一步純化而用於下一步驟。LC-MS（ESI）：R T= 2.36 min，C 43H 43Cl 2F 3N 4O 4Si之計算質量834.2，m/z實測值835.4 [M+H] +。 中間體 24-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)-3-氟苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 24-5（1.6 g，58%純度，1.11 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨溶液（1.2 mL，1.20 mmol）。在20°C攪拌2小時後，將反應倒入水（20 mL）中，用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，然後藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至2 : 1）純化，以得到呈無色固體之標題產物（640 mg，由LCMS得到的純度為91%，87.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.67 min，C 27H 25Cl 2F 3N 4O 4之計算質量596.1，m/z實測值597.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 7.59 - 7.54 (m, 2H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 7.30 - 7.29 (m, 1H ), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 6.60 (t, J =72.9 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.89 - 5.24 (m, 1H), 5.09 - 4.22 (m, 3H), 4.09 - 3.99 (m, 1H), 3.95 - 3.74 (m, 1H), 3.68 - 3.50 (m, 1H), 3.36 - 3.19 (m, 1H), 3.15 - 2.96 (m, 1H),2.76 - 2.73 (m, 1H), 2.68 - 2.57 (m, 1H) 1.62 - 1.57 (m, 3H), 1.31 (d, J =5.7 Hz, 3H)。 中間體 24-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)-3-氟苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 24-6（300 mg，91%純度，0.46 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（150 mg，0.96 mmol）、亞氯酸鈉（85 mg，0.94 mmol），並逐滴添加10%次氯酸鈉水溶液（700 mg，0.94 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫攪拌4小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（7 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 4-5，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至40%）純化，得到呈白色固體之標題化合物（210 mg，由LCMS得到的100%純度，75.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.35 min，C 27H 23Cl 2F 3N 4O 5之計算質量610.1，m/z實測值611.1 [M+H] +。 化合物 24 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)-3-氟苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 24-7（210 mg，100%純度，0.34 mmol）在二氯甲烷（3 mL）中之溶液中逐滴添加草醯氯（130 mg，1.02 mmol）和N,N-二甲基甲醯胺（10 mg，0.14 mmol）。在20°C攪拌1小時後，將混合物冷卻至0°C，並且在0°C逐滴添加在四氫呋喃中之2 M甲胺溶液（1 mL，2.00 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（150 mg，1.16 mmol）。將所得混合物在20°C攪拌3小時，然後倒入水（10 mL）中，並用二氯甲烷（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液在真空中濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 40%-60%）純化，以得到呈無色固體之標題化合物（190 mg，由LCMS得到的純度為100%，88.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.63 min，C 28H 26Cl 2F 3N 5O 4之計算質量623.1，m/z實測值624.1 [M+H] +。 化合物 24A 和 24B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (24A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 )-3- 氟苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (24B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)-3-氟苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 24（190 mg，100%純度，0.25 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 µm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 2 4A（50.3 mg，99.4%純度，26.3%產率，100%立體純）和 化合物 2 4B（61.1 mg，99.6%純度，32.0%產率，99.9%立體純）。 化合物 24A ：LC-MS（ESI）：R T= 4.104 min，C 28H 26Cl 2F 3N 5O 4之計算質量623.1，m/z實測值624.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.463 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.83 (d, J =4.4 Hz, 1H),7.75 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.47 - 7.06 (m, 5H), 5.85 - 5.57 (m, 1H), 5.51 - 5.14 (m, 1H), 5.06 - 4.95 (m, 1H), 4.69 - 4.37 (m, 1H), 4.29 - 4.12 (m, 1H), 4.10 - 3.92 (m, 1H), 3.43 - 3.31 (m, 1H), 2.98 - 2.83 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 1H), 2.41 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.61 - 1.37 (m, 3H), 1.32 - 1.09 (m, 3H)。 19F NMR δ (376MHz, DMSO- d 6 ) δ -82.60, -130.84。 化合物 24B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.972 min，C 28H 26Cl 2F 3N 5O 4之計算質量623.1，m/z實測值624.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 9.853 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.02 (s, 1H),7.74 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.46 - 7.05 (m, 5H), 5.85 - 5.56 (m, 1H), 5.51 - 5.15 (m, 1H), 5.09 - 4.95 (m, 1H), 4.67 - 4.41 (m, 1H), 4.29 - 4.07 (m, 1H), 3.77 - 3.54 (m, 2H), 2.98 - 2.83 (m, 1H), 2.63 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 1.51 - 1.34 (m, 3H), 1.30 - 1.09 (m, 3H)。 19F NMR (376MHz, DMSO- d 6 ) δ -82.32, -130.74。 化合物 25
Figure 02_image407
中間體 25-2 ： 甲基 4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲酸酯
在0°C，向甲基 4-氯-3-甲醯基苯甲酸酯 25-1（200 mg，1.01 mmol）在二氯甲烷（2 mL）中之溶液中添加二乙基胺基三氟化硫（0.5 mL，3.79 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物用碳酸氫鈉水溶液（10 mL）淬滅，並用二氯甲烷（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na2SO4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（120 mg，由 1H NMR得到的純度為95%，51.3%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.34 (s, 1H), 8.09 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.96 (t, J= 54.8 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H)。 中間體 25-3 ： 4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲酸
在0°C，向甲基 4-氯-3-(二氟甲基)苯甲酸酯 25-2（200 mg，95%純度，0.86 mmol）在四氫呋喃（2 mL）和甲醇（2 mL）中之溶液中添加氫氧化鋰單水合物（120 mg，2.86 mmol）在水（2 mL）中之溶液。在0°C攪拌2小時後，將混合物用0.1 M鹽酸水溶液酸化至pH約為6並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（180 mg，得自 1H NMR的95%純度，96.1%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 13.47 (br s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.09 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.28 (t, J= 54.4 Hz, 1H)。 中間體 25-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int B（380 mg，82.2%純度，0.48 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加4-氯-3-(二氟甲基)苯甲酸 25-3（150 mg，95%純度，0.73 mmol）、2-(7-氮雜-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽水溶液（300 mg，0.79 mmol）和三甲胺（0.2 mL，1.44 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將混合物用水（30 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為6並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈: 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（330 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，73.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.13 min，C 44H 45ClF 4N 4O 4Si之計算質量832.3，m/z實測值833.3 [M+H] +。 中間體 25-5 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(二氟甲基)苯甲醯基)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 25-4（330 mg，90%純度，0.36 mmol）在四氫呋喃（3 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.2 mL，1.2 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至70%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，84.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 28H 27ClF 4N 4O 4之計算質量594.2，m/z實測值595.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 (s, 1H), 7.50 (s, 2H), 7.34 - 7.33 (m, 2H), 7.13 - 6.82 (m, 3H), 6.52 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.11 - 5.94 (m, 1H), 5.82 - 5.31 (m, 1H), 5.03 - 4.26 (m, 3H), 4.04 - 3.92 (m, 2H), 3.55 (t, J= 12.8 Hz, 1H), 3.20 - 2.96 (m, 3H), 2.72 - 2.59 (m, 1H), 1.74 - 1.57 (m, 3H), 1.28 - 1.24 (m, 3H)。 中間體 25-6 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(二氟甲基)苯甲醯基)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 25-5（200 mg，90%純度，0.30 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（95 mg，0.61 mmol）、亞氯酸鈉（90 mg，80%純度，0.62 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）和次氯酸鈉水溶液（0.70 mL，5.5%純度，0.65 mmol）。在20°C攪拌過夜後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（15 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18（乙腈 : 水 = 30%至55%）純化，以得到呈白色固體之所需產物（165 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，80.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.219 min，C 28H 25ClF 4N 4O 5之計算質量608.1，m/z實測值606.9 [M-H] -。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.73 (s, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 2H), 7.37 - 7.26 (m, 2H), 7.12 - 6.83 (m, 3H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.13 - 6.01 (m, 1H), 5.93 - 5.43 (m, 1H). 4.97 - 4.31 (m, 3H), 3.82 - 3.75 (m, 1H), 3.50 (dd, J =14.0, 4.8 Hz, 1H), 2.89 - 2.67 (m, 2H), 1.50 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.28 - 1.24 (m, 3H)。 化合物 25 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 二氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (25)在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(二氟甲基)苯甲醯基)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 25-6（165 mg，90%純度，0.24 mmol）、甲胺鹽酸鹽（40 mg，0.59 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（100 mg，0.52 mmol）和苯并三唑-1-醇（70 mg，0.52 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.2 mL，1.44 mmol）。在30°C在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH約為6並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至75%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（82.5 mg，98.6%純度，53.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 4.413 min，C 29H 28ClF 4N 5O 4之計算質量621.2，m/z實測值622.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.73 (s, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.11 - 7.10 (m, 2H), 6.97 (t, J=54.4 Hz, 1H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 5.99 (br s, 2H), 5.72 - 5.11 (m, 1H), 4.83 - 4.05 (m, 4H), 3.38 (dd, J =13.6, 4.8 Hz, 1H), 3.17 - 2.95 (m, 1H), 2.80 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.74 - 2.62 (m, 1H), 1.65 - 1.56 (m, 3H), 1.39 - 1.23 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.05。 化合物 26A 和 26B
Figure 02_image409
中間體 26-1 ： (3R,7S)- 三級丁基 7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C，向(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 IntA-5（1 g，100%純度，1.74 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中之溶液中添加1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 16-2（1.4 g，5.02mmol）、苄基三乙基氯化銨（198 mg，0.869 mmol）和在水中之50%氫氧化鈉（4 mL）。在30°C攪拌2小時後，將混合物用水（8 mL）稀釋，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（8 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（940 mg，由LCMS得到的純度為100%，73%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.27 min和2.33 min，C 41H 50F 2N 4O 5Si之計算質量744.4，m/z實測值745.0 [M+H] +。 中間體 26-2 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮：
在0°C，向(3R,7S)-三級丁基 7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 26-1（940 mg，100%純度，1.26 mmol）在二氯甲烷（4 mL）中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸（2 mL）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物用飽和碳酸氫鈉（10 mL）淬滅至pH = 10-11，用二氯甲烷（15 mL）萃取三次。將有機層合併，用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（800 mg，由LCMS得到的純度為100%，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.77和0.82 min，C 36H 42F 2N 4O 3Si之計算質量644.3，m/z實測值645.5 [M+H] +。 中間體 26-3 ： 5-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 )-2- 氯苯甲腈：
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 26-2（800 mg，100%純度，1.24 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（12 mL）中之溶液中添加4-氯-3-氰基苯甲酸（293 mg，1.61 mmol）、2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)（613 mg，1.61 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（0.8 mL，4.95 mmol）。在室溫攪拌過夜後，向混合物中添加水（50 mL），用乙酸乙酯（25 mL）萃取三次。將有機層用鹽水（25 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到呈淺黃色固體之標題化合物（900 mg，由LCMS得到的純度為99%，88%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.12 min和2.17 min，C 44H 44ClF 2N 5O 4Si之計算質量807.3，m/z實測值808.5 [M+H] +。 化合物 26-4 ： 2- 氯 -5-((3R,7S)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 ) 苯甲腈
在0°C，向5-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-羰基)-2-氯苯甲腈 26-3（900 mg，99%純度，1.10 mmol）在四氫呋喃（2 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.5 mL，1.5 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物用水（5 mL）稀釋並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈淺黃色固體之標題化合物（600 mg，由LCMS得到的純度為98%，94%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 28H 26ClF 2N 5O 4之計算質量569.2，m/z實測值570.2 [M+H] +。 中間體 26-5 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向2-氯-5-((3R,7S)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-羰基)苯甲腈 26-4（3 g，90%純度，4.74 mmol）在乙腈（25 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（25 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（1.5 g，9.60 mmol）、亞氯酸鈉（1.1 g，9.73 mmol），逐滴添加5.5%次氯酸鈉水溶液（11.3 mL，10.4 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（15 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4-5，用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至35%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（2.0 g，100%純度，72.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.31 min，C 28H 24ClF 2N 5O 5之計算質量583.1，m/z實測值583.9 [M+H] +。 化合物 26 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-N- 環丙基 -9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C在氮氣氣氛下，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 26-5（100 mg，100%純度，0.171 mmol）在二氯甲烷（2 mL）中之溶液中添加草醯氯（59 mg，0.465 mmol）和N,N-二甲基甲醯胺（5 mg，0.068 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物濃縮，以得到粗品 峰 1。向環丙胺（53 mg，0.928 mmol）和N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（60 mg，0.464 mmol）在二氯甲烷（2 mL）中之混合物中添加 峰 1。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（10 mL）稀釋並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（10 mL）洗滌三次並用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18（乙腈 : 水 = 40%至65%）純化，以得到呈白色固體之所需產物（65 mg，100%純度，60.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.59 min，C 31H 29ClF 2N 6O 4之計算質量622.2，m/z實測值622.9 [M+H] +。 化合物 26A 和 26B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-N- 環丙基 -9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (26A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-N- 環丙基 -9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (26B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-N-環丙基-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 26（65 mg，100%純度，0.104 mmol）藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 26A（6.4 mg，99.6%純度，9.8%產率，100%立體純）和呈白色固體之標題化合物 26B（13.1 mg，99.5%純度，20.1%產率，100%立體純）。 化合物 26A ：LC-MS（ESI）：R T= 9.516 min，C 31H 29ClF 2N 6O 4之計算質量622.2，m/z實測值623.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 9.561 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.31 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.10 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.51 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.18 - 5.91 (m, 2H), 5.47 (br s, 1H), 4.82 - 4.52 (m, 3H), 3.86 (s, 2H), 3.10 (br s, 1H), 2.74 - 2.70 (m, 1H), 2.54 (s, 1H), 1.59 - 1.58 (m, 3H), 1.30 - 1.29 (m, 3H), 0.74 - 0.72 (m, 2H), 0.36 - 0.26 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 80.87。 化合物 26B ：LC-MS（ESI）：R T= 9.737 min，C 31H 29ClF 2N 6O 4之計算質量622.2，m/z實測值623.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 13.489 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.36 - 7.34 (m, 2H), 7.10 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.13 - 6.00 (m, 2H), 5.50 (br s, 1H), 4.79 - 4.54 (m, 3H), 4.08 - 4.05 (m, 1H), 3.42 - 3.56 (m, 1H), 3.07 (br s, 1H), 2.74 - 2.65 (m, 2H), 1.59 - 1.58 (m, 3H), 1.30 - 1.29 (m, 3H), 0.81 - 0.76 (m, 2H), 0.41 - 0.37 (m, 2H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.62。 化合物 27A 和 27B
Figure 02_image411
化合物 27 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C在氮氣氣氛下，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 26-5（100 mg，100%純度，0.171 mmol）在二氯甲烷（2 mL）中之溶液中添加草醯氯（59 mg，0.465 mmol）和N,N-二甲基甲醯胺（5 mg，0.068 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物濃縮，以得到粗品 峰 1。向在四氫呋喃中之1 M二甲胺（1 mL，1 mmol）和在二氯甲烷（2 mL）中之N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（60 mg，0.464 mmol）之混合物中添加 峰 1。在0°C攪拌1小時後，將混合物用10 mL的水稀釋並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（10 mL）洗滌三次並用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18（乙腈 : 水 = 40%至65%）純化，以得到呈白色固體之所需產物（70 mg，100%純度，66.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.57 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4之計算質量610.2，m/z實測值610.8 [M+H] +。 化合物 27A 和 27B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((R)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4‘,3‘: 3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (27A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,N,3- 三甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (27B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,N,3-三甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 27（70 mg，100%純度，0.115 mmol）藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IA 5 μm 20 * 250 mm；流動相：CO 2: IPA（0.2% DEA）= 60 : 40，以30 g/min；柱溫：40°C；波長：254 nm，背壓：100巴）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 27A（13.8 mg，99.7%純度，19.7%產率，99.4%立體純）和呈白色固體之標題化合物 27B（22.9 mg，99.8%純度，32.6%產率，100%立體純）。 化合物 27A ：LC-MS（ESI）：R T= 9.422 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4之計算質量610.2，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: IPA（0.2% DEA）= 60 : 40，以3 g/min；溫度：40°C；波長：254 nm；背壓：100巴；R T= 6.4 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.63 - 7.58 (s, 2H), 7.31 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.53 (t, J=73.2 Hz, 1H), 5.97 (br s, 1H), 5.77 - 5.4 (m, 1H), 5.25 - 5.23 (m, 1H), 4.67 - 4.63 (m, 2H), 3.91 - 3.87 (m, 1H), 3.34 - 3.30 (m, 1H), 3.07 (br s , 1H), 2.73 - 2.69 (m ,7H), 1.56 - 1.53 (m, 3H), 1.33 - 1.32 (m ,3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.29。 化合物 27B ：LC-MS（ESI）：R T= 9.578 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4之計算質量610.2，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: IPA（0.2% DEA）= 60 : 40，以3 g/min；溫度：40°C；波長：254 nm；背壓：100巴；R T= 4.19 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.73 (s, 1H), 7.63 - 7.58 (s, 2H), 7.32 (m, 2H), 7.11 (d, J =8.4 Hz, 2H), 6.52 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.02 (br s, 1H), 5.78 - 5.38 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.80 - 4.56 (m, 2H), 3.79 - 3.74 (m, 1H), 3.37 - 3.32 (m, 1H), 3.11 - 3.03 (m, 7H), 2.72 - 2.68 (m,1H), 1.53 - 1.51 (m,3H), 1.30 - 1.28 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.22。 化合物 28
Figure 02_image413
中間體 28-1 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（200 mg，0.294 mmol，100%純度）和1-(溴甲基)-4-(二氟甲氧基)苯（130 mg，0.548 mmol）在2-甲基四氫呋喃（5 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（5 mL）。在30°C攪拌2小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並在室溫在減壓下濃縮以除去揮發物。將剩餘的水層用2 M鹽酸水溶液（20 mL）酸化，並且用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次並用鹽水（60 mL）萃取，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗品（250 mg，83%純度，84%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.27 min，C 43H 42ClF 5N 4O 4Si之計算質量836.3，m/z實測值837.2 [M+H] +。 中間體 28-2 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 28-1（370 mg，83%純度，0.367 mmol）在四氫呋喃（3 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.5 mL，0.5 mmol）。在0°C攪拌4小時後，將混合物過濾並在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（180 mg，95%純度，78%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.63 min，C 27H 24ClF 5N 4O 4之計算質量598.1，m/z實測值599.1 [M+H] +。 中間體 28-3 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3-氯-4-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 28-2（180 mg，95%純度，0.286 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（90 mg，0.576 mmol）、次氯酸鈉水溶液（0.35 mL，0.588 mmol）、亞氯酸鈉（65 mg，0.575 mmol）、飽和磷酸二氫鈉水溶液（4 mL）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（10 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到粗品。在40°C，將粗品溶解於乙腈（2 mL）中。在40°C攪拌1小時後，將反應混合物冷卻至室溫並過濾。藉由過濾收集白色固體，以得到標題化合物（150 mg，100%純度，86%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.32 min，C 27H 22ClF 5N 4O 5之計算質量612.1，m/z實測值613.0 [M+H] +。 化合物 28 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 28-3（150 mg，100%純度，0.245 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（50 mg，0.741 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（70 mg，0.518 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（100 mg，0.522 mmol）和三乙胺（0.2 mL，1.38 mmol）。在0°C攪拌2小時後，向混合物中添加乙酸乙酯（20 mL），用水（20 mL）洗滌兩次，並且然後用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（70 mg，98.4%純度，45%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.63 min，C 28H 25ClF 5N 5O 4之計算質量625.2，m/z實測值626.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 (s, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 2H), 7.31 (d, J =7.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J =8.0 Hz, 2H), 6.49 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.25 - 5.38 (m, 2H), 5.03 - 4.42 (m, 5H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 3.87 (dd, J =12.0和5.2 Hz, 1H), 3.19 - 2.95 (m, 1H), 2.78 - 2.71 (m, 4H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -62.84, - 80.98。 化合物 29A 和 29B
Figure 02_image415
中間體 29-2 ： 5-(4- 溴苯基 )-1- 甲基 -1H- 四唑
在25°C，向4-溴-N-甲基苯甲醯胺 29-1（2.0 g，9.34 mmol）在4-甲基吡啶（17 mL）中之溶液中添加疊氮磷酸二苯酯水溶液（10 mL，46.4 mmol）。在149°C攪拌21小時後，將反應混合物冷卻至室溫。將溶液倒入2 M鹽酸水溶液（40 mL）中並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液（30 mL）和鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗化合物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至55%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.23 g，由 1H NMR得到的純度為90%，49.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.42 min，C 8H 7BrN 4之計算質量238.0，m/z實測值239.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.73 (dd, J =6.4和1.6 Hz, 2H), 7.64 (dd, J =4.4和2.0 Hz, 2H), 4.18 (s, 3H)。 中間體 29-3 ： 5-(4-(1- 乙氧基乙烯基 ) 苯基 )-1- 甲基 -1H- 四唑
向5-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-四唑 29-2（1.23 g，90%純度，4.63 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（2 mL，5.92 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中之脫氣溶液中添加四(三苯膦)鈀（850 mg，0.74 mmol）。在80°C攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫並用氟化鉀水溶液（80 mL）處理。劇烈攪拌1小時後，將混合物用矽藻土過濾。將濾液用乙酸乙酯（50 mL）稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液（50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗品（1.1 g，67.5%純度，69.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.084 min，C 12H 14N 4O之計算質量230.0，m/z實測值231.2 [M+H] +。 中間體 29-4 ： 1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 酮
將5-(4-(1-乙氧基乙烯基)苯基)-1-甲基-1H-四唑 29-3（1.1 g，67.5%純度，3.23 mmol）在4 M鹽酸水溶液（10 mL，40 mmol）中之混合物在室溫攪拌2小時。然後將其用2 M氫氧化鈉水溶液調節至pH-7，用二氯甲烷（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（386 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，53.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.12 min，C 10H 10N 4O之計算質量202.2，m/z實測值203.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.15 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.89 (d, J =8.8 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H), 2.69 (s, 3H)。 中間體 29-5 ： 1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 醇
在0°C，向1-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙-1-酮 29-4（286 mg，90%純度，1.27mmol）在四氫呋喃（1.5 mL）和甲醇（0.5 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（100 mg，2.64 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（20 mL）淬滅。將有機相分離並將水相用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（300 mg，由 1H NMR得到的純度為80%，92.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.21 min，C 10H 12N 4O之計算質量204.2，m/z實測值205.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.51 (d, J =8.0 Hz, 2H), 4.94 (q, J =8.0 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 1.47 (d, J =6.0 Hz, 3H)。 中間體 29-6 ： 5-(4-(1- 溴乙基 ) 苯基 )-1- 甲基 -1H- 四唑
在0°C，向1-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙-1-醇 29-5（300 mg，80%純度，1.18 mmol）在二氯甲烷（1 mL）中之溶液中添加三溴膦（260 mg，0.96 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物藉由添加水淬滅。將有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 3: 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（138 mg，由 1H NMR得到的純度為85%，37.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.51 min，C 10H 11BrN 4之計算質量266.0，m/z實測值267.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 - 7.73 (m, 2H), 7.66 - 7.64 (m, 2H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 4.20 (d, J =3.6 Hz, 3H), 2.11 - 2.08 (m, 3H)。 中間體 29-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（250 mg，93%純度，0.36 mmol）和5-(4-(1-溴乙基)苯基)-1-甲基-1H-四唑 29-6（138 mg，85%純度，0.44 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中之溶液中緩慢添加苄基三乙基銨（15 mg，0.07 mmol）和在水中之50% wt.氫氧化鈉（4 mL）。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用水（30 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，由LCMS得到的純度為88.1%，82.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.49 min，C 28H 28Cl 2N 8O 3之計算質量594.1，m/z實測值595.2 [M+H] +。 中間體 29-8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基- 9-(1-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 29-7（200 mg，88%純度，0.30 mmol）在乙腈（2 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（95 mg，0.61 mmol）、亞氯酸鈉（68 mg，80%純度，0.60 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（2 mL）和次氯酸鈉水溶液（0.35 mL，10%純度，0.59 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，由LCMS得到的純度為85.6%，95.0%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.27 min，C 28H 26Cl 2N 8O 4之計算質量608.2，m/z實測值609.1 [M+H] +。 化合物 29 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 29-8（200 mg，85.6%純度，0.28 mmol）、甲胺鹽酸鹽（45 mg，0.67 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（115 mg，0.60 mmol）和苯并三唑-1-醇（95 mg，0.70 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中之混合物中添加三乙胺（0.25 mL，1.78 mmol）。在0°C在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至75%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（120 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，61.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.49 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.77 - 7.71 (m, 2H), 7.58 - 7.50 (m, 4H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 6.12 - 5.93 (m, 2H), 5.29 - 4.87 (m, 2H), 4.46 - 4.12 (m, 5H), 3.96 - 3.86 (m, 1H), 3.48 - 3.42 (m, 1H), 3.13 - 2.97 (m, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 4H), 1.65 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 29A 和 29B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (29A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(4-(1- 甲基 -1H- 四唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (29B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 29（120 mg，90%純度，0.17 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 20 * 250 mm；流動相：100% ACN，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 29A（30 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，27.7%產率，100%立體純）和 29B（40 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，37.0%產率，99.3%立體純）。 化合物 29A： LC-MS（ESI）：R T= 3.449 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：100% ACN，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 5.644 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.72 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.54 - 7.50 (m, 4H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 5.98 - 5.48 (m, 3H), 4.88 - 4.42 (m, 3H), 4.19 (s, 3H), 3.92 (d, J =4.0 Hz, 2H), 3.17 - 2.97 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 4H), 1.66 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 29B： LC-MS（ESI）：R T= 3.641 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：100% ACN，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 9.617 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 (d, J =8.0 Hz, 2H), 7.59 - 7.52 (m, 4H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 6.10 - 5.45 (m, 3H), 4.86 - 4.38 (m, 3H), 4.18 - 4.13 (m, 4H), 3.46 (dd, J =13.2, 4.8 Hz, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 1H), 2.81 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.74 - 2.70 (m, 1H), 1.65 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 30A 和 30B
Figure 02_image417
中間體 30-2 ： 1-(4-(5- 甲基 -2H- 四唑 -2- 基 ) 苯基 ) 乙 -1- 酮
將1-(4-氟苯基)乙-1-酮 30-1（3 g，21.7 mmol）、5-甲基-2H-四唑（2.4 g，28.5 mmol）和碳酸銫（14 g，43.0 mmol）在1-甲基吡咯啶-2-酮（30 mL）中之溶液在130°C攪拌48小時。然後，將混合物用水（100 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（50 mL）洗滌三次並用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至80%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（400 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，8%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.14 - 8.21 (m, 4H), 2.66 (s, 3H), 2.62 (s, 3H)。 中間體 30-3 ： (4-(1- 溴乙基 ) 苯基 )-5- 甲基 -2H- 四唑
在0°C，向1-(4-(5-甲基-2H-四唑-2-基)苯基)乙-1-酮 30-2（400 mg，90%純度，1.78 mmol）在甲醇（2 mL）和四氫呋喃（4 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（27 mg，0.714 mmol）。在0°C攪拌0.5小時後，將反應混合物用飽和氯化銨水溶液（2 mL）淬滅，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其用四氫呋喃（6 mL）稀釋，然後將三苯膦（607 mg，2.31 mmol）和四溴化碳（666 mg，2.01 mmol）添加到溶液中。在0°C在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將反應混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 =6 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（400 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，76%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.06 (d, J =8.8 Hz, 2H), 7.79 (d, J =8.8 Hz, 2H), 5.62 (q, J =6.8 Hz, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.03 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 30-4 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-(5- 甲基 -2H- 四唑 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（750 mg，100%純度，1.16 mmol）和2-(4-(1-溴乙基)苯基)-5-甲基-2H-四唑 30-3（400 mg，90%純度，1.35 mmol）在2-甲基四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加50% wt.氫氧化鈉水溶液（5 mL）和苄基三乙基氯化銨（53 mg，0.232 mmol）。在20°C攪拌2小時後，將混合物添加到水（50 mL）中並用二氯甲烷（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其在四氫呋喃（20 mL）中稀釋。將在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（2.5 mL，2.5 mmol）添加到混合物中。在20°C攪拌3小時後，將反應混合物用水（30 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次，並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（450 mg，由LCMS得到的純度為100%，65%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 28H 28Cl 2N 8O 3之計算質量594.2，mz實測值595.1[M+H] +。 化合物 30 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(4-(5- 甲基 -2H- 四唑 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(4-(5-甲基-2H-四唑-2-基)苯基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 30-4（300 mg，100%純度，0.504 mmol）在飽和磷酸二氫鉀水溶液（4.5 mL）和乙腈（4.5 mL）中之溶液中添加亞氯酸鈉（114 mg，80%純度，1.01 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（158 mg，1.01 mmol）和10%次氯酸鈉水溶液（0.6 mL，1.01 mmol）。在0°C攪拌4小時後，將反應混合物用0.1 M鹽酸水溶液（40 mL）稀釋並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其用（石油醚 : 乙酸乙酯，3 mL : 1 mL）洗滌並過濾，以得到殘餘物，將其用N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）稀釋。然後在0°C，將甲胺鹽酸鹽（61 mg，0.903 mmol）、苯并三唑-1-醇（97 mg，0.718 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（139 mg，0.725 mmol）和三乙胺（257 mg，2.54 mmol）添加到溶液中。在0°C攪拌2小時後，將混合物用0.05 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（60 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（60 mL）洗滌三次並用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（150 mg，100%純度，67%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，mz實測值622.1[M+H] +。 化合物 30A 和 30B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(4-(5- 甲基 -2H- 四唑 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (30A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(4-(5- 甲基 -2H- 四唑 -2- 基 ) 苯基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (30B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(4-(5-甲基-2H-四唑-2-基)苯基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 30（150 mg，100%純度，0.241 mmol）藉由手性HPLC（分離條件：柱Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：CAN : IPA = 70 : 30，以15 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 30A（31.1 mg，98.3%純度，20%產率，99.98%立體純）和呈白色固體之標題 化合物 30B（52.0 mg，99.2%純度，34%產率，99.9%立體純）。 化合物 30A： LC-MS（ESI）：R T= 3.700 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，mz實測值622.1[M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 8.617 min), 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.08 (d, J =8.8 Hz, 2H), 7.54 - 7.46 (m, 4H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 6.01 - 5.47 (m, 3H), 4.88 - 4.47 (m, 3H), 3.97 - 3.88 (m, 2H), 3.13 - 2.97 (m, 1H), 2.74 - 2.68 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 1.65 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.31 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。 化合物 30B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.772 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，mz實測值622.1[M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 10.642 min）。 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.08 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.54 - 7.52 (m, 4H), 7.28 - 7.27 (m, 1H), 6.08 - 5.39 (m, 3H), 4.85 - 4.38 (m, 3H), 4.14 - 4.10 (m, 1H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.13 - 2.98 (m, 1H), 2.80 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.74 - 2.68 (m, 1H), 2.64 (s, 3H), 1.64 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 31A 和 31B
Figure 02_image419
中間體 31-2 ： 1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙酮
在-78°C在氮氣氣氛下，向5-溴-2-甲氧基吡啶 31-1（8 g，42.5 mmol）在四氫呋喃（80 mL）中之溶液中逐滴添加在己烷中之2.5 M正丁基鋰（20 mL，50 mmol）。在-78°C攪拌0.5小時後，向混合物中添加N-甲氧基-N-甲基乙醯胺（9 mL，84.7 mmol）並將混合物保持在-78°C持續1小時。在室溫攪拌2小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液淬滅，用乙酸乙酯（80 mL）萃取三次。將有機層合併，用鹽水（80 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯= 40 : 1至10 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（4.7 g，由LCMS得到的純度為100%，69%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.30 min，C 8H 9NO 2之計算質量151.1，m/z實測值152.2 [M+H] +。 中間體 31-3 ： 1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙醇
向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙-1-酮 31-2 （2 g，95%純度，12.6 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（550 mg，14.5 mmol）和甲醇（5 mL）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液淬滅，用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將有機層合併，用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈無色油狀物之標題化合物（1.9 g，由NMR得到的純度為90%，89%產率）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.09 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.67 (dd, J =8.4和2.4 Hz, 1H), 6.76 (d, J =8.8 Hz, 1H), 5.16 (d, J =4.4 Hz, 1H), 4.74 - 4.68 (m,1H), 3.82 (s, 3H), 1.32 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 31-4 ： 5-(1- 氯乙基 )-2- 甲氧基吡啶
在0°C，向1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙醇 31-3（1.9 g，90%純度，11.2 mmol）在二氯甲烷（20 mL）中之溶液中添加亞硫醯氯（0.9 mL，12.4 mmol）。在40°C攪拌2小時後，去除溶劑。將混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化至pH 7-8，用二氯甲烷（20 mL）萃取兩次。將有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.4 g，由 1H NMR得到的純度為95%，69%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.15 (d, J =2.1 Hz, 1H), 7.68 (dd, J =8.7, 2.7 Hz, 1H), 6.76 (d, J =8.7 Hz, 1H), 5.09 (q, J =6.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 1.84 (d, J =6.6 Hz, 3H)。 中間體 31-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-9-(1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.7 g，83%純度，2.18 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）中之溶液中添加在礦物油中之60% wt.氫化鈉（170 mg，4.25 mmol）。在0°C攪拌30分鐘後，在0°C，向反應混合物中添加5-(1-氯乙基)-2-甲氧基吡啶 31-4（591 mg，95%純度，3.27 mmol）。在室溫（25°C）攪拌過夜後，將反應混合物用鹽水（40 mL）淬滅，用乙酸乙酯萃取（20 mL）三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到粗產物。在0°C，向在四氫呋喃（3 mL）中之粗產物中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.1 mL，1.1 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 丙酮 = 4 : 1至2 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（700 mg，由LCMS得到的純度為100%，59%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.54 min，C 26H 27Cl 2N 5O 4之計算質量543.1，m/z實測值544.3 [M+H] +。 中間體 31-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-9-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 31-5（700 mg，100%純度，1.29 mmol）在乙腈（7 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（7 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（448 mg，2.87 mmol）、亞氯酸鈉（340 mg，3.01 mmol），並逐滴添加5.5%次氯酸鈉水溶液（1.8 mL，3.02 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫攪拌4小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（14 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH 4-5，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並在室溫藉由用石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1（10 mL）研磨而純化。攪拌30分鐘後，將混合物過濾，以得到呈白色固體之標題化合物（700 mg，由LCMS得到的純度為78%，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.163 min，C 26H 25Cl 2N 5O 5之計算質量557.1，m/z實測值558.0 [M+H] +。 化合物 31 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 31-6（800 mg，78%純度，1.12 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（9 mL）中之溶液中添加1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（472 mg，2.46 mmol）、1-羥基苯并三唑（312 mg，2.31 mmol）、甲胺鹽酸鹽（192 mg，2.84 mmol），並逐滴添加（1.1 mL，7.91 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（9 mL）中之三乙胺。在0°C攪拌10分鐘後，向混合物中添加水（50 mL），用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至65%）純化，以得到呈淺黃色固體之標題化合物（600 mg，由LCMS得到的純度為96%，90%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 27H 28Cl 2N 6O 4之計算質量570.2，m/z實測值571.3 [M+H] +。 化合物 31A 和 31B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (31A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6- 甲氧基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (31B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 31（600 mg，96%純度，1.01 mmol）藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 30 * 250 mm；流動相：ACN - 100，以25 mL/ min；溫度：30°C；波長：214 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 31A（233 mg，由QC得到的純度為98.2%，40%產率，100%立體純）和呈白色固體之標題化合物 31B（355 mg，由QC得到的純度為99.7%，61%產率，99.9%立體純）。 化合物 31A ：LC-MS（ESI）：R T= 8.526 min，C 27H 28Cl 2N 6O 4之計算質量570.2，m/z實測值571.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN-100，以1 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 7.707 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.12 - 7.99 (m, 1H), 7.81 - 7.74 (m, 3H), 7.56 - 7.45 (m, 2H), 6.80 - 6.78 (m, 1H), 5.82 - 4.96 (m, 3H), 4.68 - 3.91 (m, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.43 - 3.32 (m, 1H), 2.99 - 2.82 (m, 1H), 2.67 - 2.50 (m, 1H), 2.37 (d, J =4.0 Hz, 3H), 1.50 - 1.17 (m, 6H)。 化合物 31B ：LC-MS（ESI）：R T= 8.819 min，C 27H 28Cl 2N 6O 4之計算質量570.2，m/z實測值571.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN-100，以1 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 10.316 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.21 - 8.02 (m, 2H), 7.76 - 7.44 (m, 4H), 6.87 - 6.73 (m, 1H), 5.85 - 4.94 (m, 3H), 4.64 - 4.07 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.76 - 3.47 (m, 2H), 2.96 - 2.84 (m, 1H), 2.63 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.58 - 2.51 (m, 1H), 1.47 - 1.12 (m, 6H)。 化合物 32A 和 32B
Figure 02_image421
中間體 32-2 ： 6- 環丙基煙醛
向6-溴煙醛 32-1（2.0 g，10.8 mmol）在1,4-二㗁𠮿（20 mL）中之溶液中添加環丙基硼酸（1.5 g，17.5 mmol）、碳酸銫（10.5 g，32.2 mmol）和(1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵)二氯化鈀(II)（200 mg）。將混合物在90°C在氮氣氣氛下攪拌過夜。然後將混合物用水（200 mL）稀釋，用乙酸乙酯（200 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在真空下濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（500 mg，由 1H NMR得到的純度為40%，13%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.02 (s, 1H), 8.86 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 1H), 7.29 (d, J =8.4 Hz, 1H), 2.16 - 2.10 (m, 1H), 1.20 - 1.10 (m, 4H)。 中間體 32-3 ： 1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙醇
在0°C在氮氣氣氛下，向6-環丙基煙醛 32-2（500 mg，40%純度，1.36 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（3.0 mL，3.0 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌1小時。將反應混合物用飽和氯化銨水溶液（15 mL）淬滅並將混合物用二氯甲烷（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾，濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1至2 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（150 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，61%產率）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.33 (d, J =2.0 Hz, 1H), 7.59 - 7.56 (m, 1H), 7.21 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.17 (d, J =4.4 Hz, 1H), 4.74 - 4.68 (m, 1H), 2.08 - 2.02 (m, 1H), 1.32 (d, J =6.4 Hz, 3H), 0.93 - 0.85 (m, 4H)。 中間體 32-4 ： 5-(1- 溴乙基 )-2- 環丙基吡啶
在0°C，向1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙醇 32-3（5.30 g，90%純度，29.2 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中之溶液中添加三苯膦（15.5 g，59.1 mmol）和四溴甲烷（14.5 g，43.7 mmol）。在室溫攪拌3小時後，將反應混合物濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 20 : 1至8 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.80 g，由 1H NMR得到的純度為70%，19%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.46 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.66 (dd, J =8.0和3.2 Hz, 1H), 7.13 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.21 - 5.15 (m, 1H), 2.4 -2.02 (m, 3H), 1.52 (d, J =6.0 Hz, 1H), 1.03 -1.00 (m, 4H)。 中間體 32-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（500 mg，90%純度，0.695 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-環丙基吡啶 32-4（360 mg，70%純度，1.11 mmol）在2-甲基四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加50% wt.氫氧化鈉水溶液（2 mL）和苄基三乙基氯化銨（110 mg，0.483 mmol）。在20°C攪拌4小時後，將混合物添加到水（10 mL）中並用二氯甲烷（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（10 mL）、鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 20%至95%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（340 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，56%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.00 min和2.13 min，C 44H 47Cl 2N 5O 3Si之計算質量791.3，m/z實測值792.4 [M +H] +。 中間體 32-6 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 32-5（340 mg，90%純度，0.386 mmol）在四氫呋喃（3 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.6 mL，0.6 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（DCM : MeOH = 20 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（210 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，88%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.57 min，C 28H 29Cl 2N 5O 3之計算質量553.2，m/z實測值554.3 [M+H] +。 中間體 32-7 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
向(3R,7S)-9-(1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 32-6（210 mg，90%純度，0.341 mmol）在乙腈（2 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（2 mL）、亞氯酸鈉（85 mg，80%純度，0.752 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（110 mg，0.704 mmol）和亞氯醯鈉（0.5 mL，10%純度，0.84 mmol）。在0°C攪拌過夜後，向反應混合物中添加水（10 mL）並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌然後經Na 2SO 4 （固體）乾燥，濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之標題產物（170 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，79%產率）。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.41 - 8.31 (m, 1H), 7.78 - 7.58 (m, 3H), 7.43 - 7.40 (m, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 1H), 5.97 - 5.36 (m, 2H), 4.70 - 4.36 (m, 2H), 3.95 - 3.58 (m, 4H), 3.07 - 2.97 (m, 1H), 2.78 - 2.63 (m, 1H), 1.69 - 1.31 (m, 6H), 1.10 - 0.97 (m, 4H)。 化合物 32 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 32-7 （ 235 mg，90%純度，0.372 mmol）、甲胺鹽酸鹽（90 mg，1.33 mmol）、1-羥基苯并三唑（175 mg，1.295 mmol）和1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（175 mg，0.913 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）中之混合物中逐滴添加三乙胺（0.3 mL，2.15 mmol）。在0°C在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（10 mL）洗滌三次並用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（150 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，52%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.43 (d, J =25.6 Hz, 1H), 7.54 - 7.44 (m, 3H), 7.27 - 7.24 (m, 1H), 7.12 (d, J =8.0 Hz, 1H), 5.96 - 5.28 (m, 3H), 5.12 - 4.22 (m, 3H), 4.11 - 4.09 (m, 1H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 3.42 - 3.38 (m, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.80 - 2.68 (m, 4H), 2.04 - 1.98 (m, 1H), 1.57 - 1.52 (m, 2H), 1.30 - 1.29 (m, 3H), 0.99 - 0.97 (m, 4H)。 化合物 32A 和 32B ： (3R,7S)-9-((R*)-1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (32A) ，以及 (3R,7S)-9-((S*)-1-(6- 環丙基吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (32B)
將(3R,7S)-9-(1-(6-環丙基吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 32（200 mg，90%純度，0.31 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 30 * 250 mm，流動相：ACN = 100%，以20 mL/min，溫度：30°C，波長：214 nm）分離，然後進一步藉由製備型HPLC（柱：sunfire waters C18（5 μm 19 * 150 mm），流動相A：水（0.1%碳酸氫銨），流動相B：乙腈，UV：214 nm，流速：15 mL/min，梯度：35%-85%（%B））純化，在減壓下濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物 32A（25.2 mg，99.5%純度，14%產率，100%立體純）和呈白色固體之標題化合物 32B（24.9 mg，99.5%純度，14%產率，99.9%立體純）。 化合物 32A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.696 min，C 29H 30Cl 2N 6O 3之計算質量580.2，m/z實測值581.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm，流動相：ACN = 100%，以1 mL/min，溫度：30°C，波長：254 nm，R T= 8.211 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.37 (s, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.47 (d, J =7.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 7.12 (d, J =8.4 Hz, 1H), 6.14 - 5.83 (m, 2H), 5.64 - 5.01 (m, 1H), 4.84 (t, J =4.4 Hz, 1H), 4.60 - 4.33 (m, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 2H), 3.14 - 2.96 (m, 1H), 2.73 - 2.68 (m, 4H), 2.07 - 2.01 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.05 - 0.97 (m, 4H)。 化合物 32B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.892 min，C 29H 30Cl 2N 6O 3之計算質量580.2，m/z實測值581.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm，流動相：ACN = 100%，以1 mL/min，溫度：30°C，波長：254 nm，R T= 10.881 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.43 (s, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 7.12 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.08 - 5.87 (m, 2H), 5.68 - 5.12 (m, 1H), 4.86 - 4.80 (m, 1H), 4.57 - 4.35 (m, 1H), 4.12 (d, J =14.4 Hz, 1H), 3.43 (dd, J =13.6 Hz, 5.2 Hz, 1H), 3.13 - 2.96 (m, 1H), 2.80 (d, J =5.2 Hz, 3H), 2.73 (d, J =16.4 Hz, 1H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.00 (d, J =6.8 Hz, 4H)。 化合物 33A 和 33B
Figure 02_image423
中間體 33-2 ： 甲基 6- 氟菸鹼酸酯
向6-氟菸鹼酸 33-1（3 g，21.30 mmol）和碳酸鉀（9 g，65.10 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（50 mL）中之溶液中添加碘甲烷（6 g，42.30 mmol）。將混合物在20°C攪拌3小時。將反應混合物倒入水（100 mL）中並用二氯甲烷（100 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌三次並在真空中濃縮，以得到呈黃色固體之所需化合物（3.3 g，90%產率，由 1H NMR得到的純度為90%）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.89 (s, 1H), 8.44 - 8.38 (m, 1H), 7.03 - 6.99 (m, 1H), 3.96 (s, 3H)。 中間體 33-3 ： 甲基 6-((2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 菸鹼酸酯
向甲基 6-氟菸鹼酸酯 33-2（3.3 g，19.10 mmol，90%純度）和2,2,2-三氟乙胺鹽酸鹽（14 g，103.00 mmol）在二甲亞碸（100 mL）中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（40 mL，242 mmol）。將混合物在120°C攪拌12小時。將反應混合物倒入水（150 mL）中並用二氯甲烷（100 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之所需化合物（3.4 g，75.8%產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.47 min，C 9H 9F 3N 2O 2之計算質量234.2，m/z實測值235.1 [M+H] +。 中間體 33-4 ： 甲基 6-(( 三級丁氧基羰基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 菸鹼酸酯
向甲基 6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)菸鹼酸酯 33-3（3.4 g，14.50 mmol，100%純度）和二碳酸二三級丁酯（4 g，18.30 mmol）在二氯甲烷（50 mL）中之溶液中添加三乙胺（3 g，29.60 mmol）和4-二甲基胺基吡啶（180 mg，1.47 mmol）。將混合物在20°C攪拌2小時。將反應混合物倒入水（100 mL）中並用二氯甲烷（100 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌並在真空中濃縮，以得到呈黃色固體之所需化合物（4.7 g，96.8%產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.87 min，C 14H 17F 3N 2O 4之計算質量334.3，m/z實測值335.2 [M+H] +。 中間體 33-5 ： 6-(( 三級丁氧基羰基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 菸鹼酸
向甲基 6-((三級丁氧基羰基)(2,2,2-三氟乙基)胺基)菸鹼酸酯 33-4（4.7 g，14.10 mmol，100%純度）在四氫呋喃（50 mL）和水（20 mL）中之溶液中添加氫氧化鋰水合物（1.2 g，28.60 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物用1 M鹽酸酸化至pH = 4並用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌並在真空中濃縮，以得到呈黃色固體之所需產物（4.1 g，91%產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.24 min，C 13H 15F 3N 2O 4之計算質量320.3，m/z實測值319.0 [M-H] -。 中間體 33-6 ： 三級丁基 (5-( 甲氧基 ( 甲基 ) 胺基甲醯基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
在室溫，向6-((三級丁氧基羰基)(2,2,2-三氟乙基)胺基)菸鹼酸 33-5（2.0 g，6.25 mmol，100%純度）、N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽（1.8 g，18.50 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（2.4 g，12.50 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（1.7 g，12.60 mmol）在二氯甲烷（40 mL）中之混合物中添加三乙胺（3.8 g，37.60 mmol）。將混合物在室溫攪拌12小時。向反應混合物中添加水（100 mL）並用二氯甲烷（100 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 7 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之所需化合物（1.9 g，83.7%產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.69 min，C 15H 20F 3N 3O 4之計算質量363.3，m/z實測值364.1 [M+H] +。 中間體 33-7 ： 三級丁基 (5- 乙醯基吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
在0°C，向三級丁基 (5-(甲氧基(甲基)胺基甲醯基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-6（1.9 g，5.23 mmol，100%純度）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（10 mL，10.00 mmol）。將混合物在0°C攪拌2小時。向反應混合物中添加氯化銨水溶液（60 mL）並用二氯甲烷（60 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（60 mL）洗滌並在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色固體之所需化合物（1.4 g，84 %產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.76 min，C 14H 17F 3N 2O 3之計算質量318.3，m/z實測值319.1 [M+H] +。 中間體 33-8 ： 三級丁基 (5-(1- 羥乙基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
向三級丁基 (5-乙醯基吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-7（1.4 g，100%純度，4.40 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（200 mg，5.29 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。向混合物中添加水（80 mL）並用乙酸乙酯（80 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌並濃縮，以得到呈黃色油狀物之所需化合物（1.4 g，94%產率，由 1H NMR得到的純度為95%）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.38 - 8.35 (m, 1H), 7.74 - 7.71 (m, 1H), 7.62 - 7.59 (m, 1H), 5.00 - 4.92 (m, 1H), 4.76 (q, J =8.7 Hz, 2H), 1.54 (s, 3H), 1.52 (s, 9H)。 中間體 33-9 ： 三級丁基 (5-(1- 溴乙基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
在0°C，向三級丁基 (5-(1-羥乙基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-8（1.4 g，95%純度，4.15 mmol）和四溴甲烷（2.1 g，6.33 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加三苯膦（1.64 g，6.25 mmol）。將混合物在室溫攪拌12小時。將混合物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.3 g，由 1H NMR得到的純度為90%，73.5%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.38 - 8.37 (m, 1H), 7.80 - 7.76 (m, 1H), 7.70 - 7.67 (m, 1H), 5.19 (q, J =6.9 Hz, 1H), 4.79 (q, J =8.7 Hz, 2H), 2.05 (d, J =6.9 Hz, 3H), 1.53 (s, 9H)。 中間體 33-10 ： 三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.5 g，100%純度，2.32 mmol）和三級丁基 (5-(1-溴乙基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-9（1.3 g，90%純度，3.05 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中之溶液中添加碳酸銫（2.3 g，7.06 mmol）。將混合物在30°C攪拌5小時。向混合物中添加水（80 mL）並用乙酸乙酯（80 mL）萃取三次。將合併的有機層用水（80 mL）、鹽水（80 mL）洗滌並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 丙酮 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（2 g，81.8%產率，由 1H NMR得到的純度為90%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.46 - 8.31 (m, 1H), 7.88 - 7.35 (m, 15H), 5.96 - 5.73 (m, 1H), 5.50 - 5.18 (m, 1H), 4.85 - 4.46 (m, 4H), 4.24 - 3.64 (m, 4H), 3.57 - 3.37 (m, 1H), 3.00 - 2.87 (m, 1H), 2.55 - 2.51 (m, 1H), 1.66 - 1.51 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.20 - 1.02 (m, 3H), 0.88 - 0.80 (m, 9H)。 中間體 33-11 ： 三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
向三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-10（2 g，90%純度，1.90 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加四丁基氟化銨（5 mL，5.00 mmol）。將混合物在室溫攪拌2小時。向混合物中添加水（50 mL）並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌並濃縮。將殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 丙酮 = 5 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（1.1 g，80%產率，由LCMS得到的純度為98%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.572 min，C 32H 35Cl 2F 3N 6O 5之計算質量710.2，m/z實測值712.0 [M+H] +。 中間體 33-12 ： (3R,7S)-9-(1-(6-(( 三級丁氧基羰基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向飽和磷酸二氫鉀水溶液（6 mL）、亞氯酸鈉（320 mg，80%純度，2.83 mmol）在乙腈（10 mL）和於水中之5.5%次氯酸鈉（6 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（440 mg，2.82 mmol）。然後將三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33-11（1.0 g，98%純度，1.38 mmol）添加到溶液中。在室溫攪拌5小時後，將反應混合物用水（80 mL）淬滅並用乙酸乙酯（100 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌並濃縮。將殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至80%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（930 mg，由LCMS得到的純度為94%，87%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.41 min，C 32H 33Cl 2F 3N 6O 6之計算質量724.2，m/z實測值725.4 [M+H] +。 中間體 33-13 ： 三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -7-( 甲基胺基甲醯基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 吡啶 -2- 基 )(2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基甲酸酯
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(6-((三級丁氧基羰基)(2,2,2-三氟乙基)胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 33-12（500 mg，0.65 mmol，94%純度）、甲胺鹽酸鹽（137 mg，2.03 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（253 mg，1.32 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（180 mg，1.33 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（12 mL）中之混合物中添加三乙胺（400 mg，3.95 mmol）。將混合物在室溫攪拌12小時。向反應混合物中添加水（50 mL）並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將有機相用鹽水（50 mL）洗滌並在真空中濃縮。將殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至80%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（320 mg，由LCMS得到的純度為100%，66.8%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.77 min，C 33H 36Cl 2F 3N 7O 5之計算質量737.2，m/z實測值738.3 [M+H] +。 中間體 33 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-((2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
向三級丁基 (5-(1-((3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-7-(甲基胺基甲醯基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)吡啶-2-基)(2,2,2-三氟乙基)胺基甲酸酯 33（320 mg，100%純度，0.43 mmol）在二氯甲烷（3 mL）中之溶液中添加2,2,2-三氟乙酸（1.5 mL）。將混合物在室溫攪拌2小時。將混合物用2 M碳酸氫鈉水溶液鹼化至pH = 8，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌並濃縮，以得到呈白色固體之所需產物（260 mg，94%產率，由LCMS得到的純度為100%）。LC-MS（ESI）：R T= 1.56 min，C 28H 28Cl 2F 3N 7O 3之計算質量637.2，m/z實測值638.2 [M+H] +。 化合物 33A 和 33B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(6-((2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (33A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(6-((2,2,2- 三氟乙基 ) 胺基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (33B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(6-((2,2,2-三氟乙基)胺基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋物 33（300 mg，100%純度，0.47 mmol）藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IC 5 μm 30 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 33A（35 mg，99.6%純度，11.6%產率，99.8%立體純）和 33B（152 mg，99.6%純度，50.4%產率，99.9%立體純）。 化合物 33A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.340 min，C 28H 28Cl 2F 3N 7O 3637.2，m/z實測值638.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 3.548 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.97 - 7.87 (m, 1H), 7.82 - 7.74 (m, 3H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 7.30 - 7.14 (m, 2H), 6.62 - 6.55 (m, 1H), 5.73 - 5.52 (m, 1H), 5.45 - 5.17 (m, 1H), 4.98 - 4.87 (m, 1H), 4.65 - 4.40 (m, 1H), 4.24 - 3.87 (m, 4H), 3.43 - 3.32 (m, 1H), 2.96 - 2.83 (m, 1H), 2.69 - 2.52 (m, 1H), 2.40 - 2.31 (m, 3H), 1.52 - 1.33 (m, 3H), 1.28 - 1.10 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -70.87。 化合物 33B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.355 min，C 28H 28Cl 2F 3N 7O 3637.2，m/z實測值638.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.013 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.06 - 7.94 (m, 2H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.46 - 7.31 (m, 2H), 7.22 - 7.13 (m, 1H), 6.65 - 6.54 (m, 1H), 5.74 - 5.54 (m, 1H), 5.46 - 5.18 (m, 1H), 5.06 - 4.95 (m, 1H), 4.61 - 4.43 (m, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 3H), 3.71 - 3.43 (m, 2H), 2.96 - 2.84 (m, 1H), 2.69 - 2.54 (m, 4H), 1.42 - 1.29 (m, 3H), 1.26 - 1.10 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -70.83。 化合物 34A 和 34B
Figure 02_image425
中間體 34-2 ： 1-(6- 溴吡啶 -3- 基 ) 乙醇
向1-(6-溴吡啶-3-基)乙-1-酮 34-1（1.0 g，5.00 mmol）在四氫呋喃（10 mL）和甲醇（1 mL）中之溶液中添加四氫硼化鈉（100 mg，2.64 mmol）。在25°C攪拌1小時後，將混合物用水淬滅，並用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.1 g，由LCMS得到的純度為87%，94.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T=1.27 min，C 7H 8BrNO之計算質量202.1，m/z實測值203.9 [M+H] +。 中間體 34-3 ： 2- 溴 -5-(1- 溴乙基 ) 吡啶
在0°C，向1-(6-溴吡啶-3-基)乙-1-醇 34-2 （ 1.1 g，87%純度，4.74 mmol）在二氯甲烷（10 mL）中之溶液中添加四溴甲烷（2.3 g，6.94 mmol）和三苯膦（1.8 g，6.86 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物用飽和碳酸氫鈉溶液（100 mL）淬滅，並用二氯乙烷（100 mL）萃取兩次。將有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.3 g，由LCMS得到的純度為85%，88%產率）。LC-MS（ESI）：R T=1.57 min，C 7H 7Br 2N之計算質量264.9，m/z實測值265.8 [M+H] +。 中間體 34-4 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 溴吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.3 g，2.01 mmol，100%純度）和2-溴-5-(1-溴乙基)吡啶 34-3（700 mg，純度90%，2.38 mmol）在2-甲基四氫呋喃（6 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（6 mL）。在0°C攪拌2小時後，將混合物用水（60 mL）稀釋並在室溫在減壓下濃縮，以除去揮發物。將剩餘的水層用乙酸乙酯（60 mL）萃取兩次並用鹽水（120 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨）= 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.4 g，100%純度，84%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.00 min，C 41H 42BrCl 2N 5O 3Si之計算質量829.2，m/z實測值830.2 [M+H] +。 中間體 34-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，將(3R,7S)-9-(1-(6-溴吡啶-3-基)乙基)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 34-4（400 mg，100%純度，0.481 mmol）、吡咯啶-2-酮（400 mg，4.70 mmol）、碳酸銫（300 mg，0.921 mmol）、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺（30 mg，0.340 mmol）和碘化銅(I)（24 mg，0.126 mmol）在1,4-二㗁𠮿（15 mL）和N,N-二甲基甲醯胺（1.5 mL）中混合。在80°C攪拌2小時後，將混合物過濾並濃縮，以得到粗品。將粗品用水（50 mL）稀釋，用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次，用鹽水（120 mL）萃取，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨）= 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（350 mg，98%純度，85%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.79 min和1.91 min，C 45H 48Cl 2N 6O 4Si之計算質量834.3，m/z實測值835.5 [M+H] +。 中間體 34-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(6-(2-側氧基吡咯啶-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 34-5（350 mg，98%純度，0.410 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.6 mL，0.6 mmol）。在0°C攪拌4小時後，將混合物過濾並在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨）= 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（220 mg，100%純度，90%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 29H 30Cl 2N 6O 4之計算質量596.2，m/z實測值597.3 [M+H] +。 中間體 34-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(6-(2-側氧基吡咯啶-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 34-6（220 mg，100%純度，0.368 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（120 mg，0.768 mmol）、次氯酸鈉水溶液（0.45 mL，0.756 mmol）、亞氯酸鈉（85 mg，0.752 mmol）、飽和磷酸二氫鈉水溶液（5 mL）。在25°C攪拌16小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到粗品（200 mg，82%純度，73%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.93 min，C 29H 30Cl 2N 6O 5之計算質量610.2，m/z實測值611.3 [M+H] +。 化合物 34 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(2-側氧基吡咯啶-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 34-7（200 mg，0.268 mmol，純度82%）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（50 mg，0.704 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（75 mg，0.56 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（100 mg，0.522 mmol）和三乙胺（0.3 mL，2.08 mmol）。在0°C攪拌2小時後，向混合物中添加乙酸乙酯（50 mL），用水（50 mL）洗滌兩次，用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨）= 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（120 mg，100%純度，72%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.48 min，C 30H 31Cl 2N 7O 4之計算質量623.2，m/z實測值624.5 [M+H] +。 化合物 34A 和 34B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (34A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(6-(2- 側氧基吡咯啶 -1- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (34B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(6-(2-側氧基吡咯啶-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 34（120 mg，0.192 mmol，100%純度）藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE，5 μm 30 * 250 mm，MeOH : DCM = 70 : 30，25 ml/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之所需產物 化合物 34A（40 mg，98.6%純度，33%產率，100%立體純）和 化合物 34B （ 40mg，98.8%純度，33%產率，100%立體純）。 化合物 34A ：LC-MS（ESI）：R T= 2.945 min，C 30H 31Cl 2N 7O 4之計算質量623.2，m/z實測值624.5 [M+H] +。 手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.513 min）。 1H NMR δ 8.38 (d, J =8.8 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.59 - 7.51 (m, 3H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 5.91 - 5.43 (m, 3H), 4.86 - 4.39 (m, 3H), 4.15 - 4.05 (m, 2H), 3.90 - 3.82 (m, 2H), 3.05 (br s, 1H), 2.73 - 2.64 (m, 6H), 2.17 - 2.09 (m, 2H), 1.61 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 34B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.065 min，C 30H 31Cl 2N 7O 4之計算質量623.2，m/z實測值624.5 [M+H] +。 手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 11.058 min）。 1H NMR δ 8.39 - 8.36 (m, 2H), 7.67 - 7.65 (m, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 5.99 - 5.36 (m, 3H), 4.83 - 4.35 (m, 3H), 4.14 - 4.02 (m, 3H), 3.43 - 3.38 (m, 1H), 3.14 - 2.96 (m, 1H), 2.80 - 2.73 (m, 3H), 2.68 - 2.64 (m, 3H), 2.17 - 2.10 (m, 2H), 1.60 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.30 - 1.29 (m, 3H)。 化合物 35A 和 35B
Figure 02_image427
中間體 35-2 ： 1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙酮
將5-乙醯基-2-溴吡啶（5.00 g，25.0 mmol）、(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)硼酸 35-1（4.00 g，28.4 mmol）、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物（2.00 g，2.45 mmol）和碳酸鉀（10.0 g，72.4 mmol）在1,4-二㗁𠮿（25 mL）和水（5 mL）中之溶液在90°C在氮氣氣氛下加熱過夜。將所得混合物冷卻並濃縮，將殘餘物藉由矽膠柱層析法（乙酸乙酯 : 石油醚 = 1 : 5）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（4.00 g，由 1H NMR得到的純度為90%，67%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.37 min，C 12H 12N 2O 2之計算質量216.1，m/z實測值217.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 9.23 (s, 1H), 8.36 - 8.32 (m, 1H),7.50 (d, J =8.4 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.69 (s, 3H), 2.53 (s, 3H)。 中間體 35-3 ： 1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(6-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)吡啶-3-基)乙烯酮 35-2（4.00 g，90%純度，0.807 mmol）在甲醇（4 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（100 mg，2.64 mmol）。在30°C攪拌3小時後，將混合物在0°C用飽和氯化銨水溶液（50 mL）淬滅，並用乙酸乙酯（100 mL）萃取兩次。將合併的有機層藉由鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（3.80 g，由LCMS得到的純度為79%，82%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.26 min，C 12H 14N 2O 2之計算質量218.1，m/z實測值219.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.70 (s, 1H), 7.84 (d, J =7.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J =8.1 Hz, 1H), 5.12 - 4.97 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.87 - 1.79 (m, 1H), 1.60 (d, J =6.3 Hz, 3H)。 中間體 35-4 ： 4-(5-(1- 溴乙基 ) 吡啶 -2- 基 )-3,5- 二甲基異㗁唑
在0°C，向1-(6-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)-3-基)乙醇 35-3（3.60 g，79%純度，12.9 mmol）在四氫呋喃（36 mL）中之溶液中添加三苯膦（5.50 g，21.0 mmol）和四溴甲烷（5.50 g，16.6 mmol）。在25°C攪拌2小時後，將反應濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 20 : 1至5 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之所需化合物（2.80 g，由 1H NMR得到的純度為90%，69%產率）。LC-MS（ESI）：R T=1.59 min，C 12H 13BrN 2O之計算質量280.0，m/z實測值281.0 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.74 (s, 1H), 7.88 (d, J =6.6 Hz, 1H), 7.36 (d, J =8.1 Hz, 1H), 5.31 - 5.24 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.13 (d, J =6.9 Hz, 3H)。 中間體 35-5 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（2.00 g，90%純度，2.78 mmol）和4-(5-(1-溴乙基)吡啶-2-基)-3,5-二甲基異㗁唑 35-4（2.00 g，90%純度，6.40 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中之混合物中添加碳酸銫（4.50 g，13.8 mmol）。在70°C加熱3小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 0 : 1）純化，以得到呈黃色固體之所需化合物（1.20 g，由LCMS得到的純度為60%，43%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.98 min和1.00 min，C 30H 30Cl 2N 6O 4之計算質量608.2，m/z實測值609.1 [M+H] +。 中間體 35-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)吡啶-3-基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 35-5（1.00 g，60%純度，0.984 mmol）在乙腈（13 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（13 mL）、亞氯酸鈉（300 mg，80%純度，2.65 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（500 mg，3.20 mmol）和次氯酸鈉水溶液（2 mL，10%純度，3.36 mmol）。在20°C攪拌4小時後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1 M鹽酸溶液酸化至pH = 4 - 5，用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（500 mg，由LCMS得到的純度為95%，77%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.31 min和1.34 min，C 30H 28Cl 2N 6O 5之計算質量622.1，m/z實測值623.1 [M+H] +。 化合物 35 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 35-6（400 mg，95%純度，0.609 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（150 mg，1.11 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（220 mg，1.15 mmol）和甲胺鹽酸鹽（120 mg，1.78 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（8 mL）中之溶液中添加三乙胺（150 mg，1.11 mol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為90%，93%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.53 min和1.56 min，C 31H 31Cl 2N 7O 4之計算質量635.2，m/z實測值636.1 [M+H] +。 化合物 35A 和 35B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (35A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6-(3,5- 二甲基異㗁唑 -4- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (35B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(3,5-二甲基異㗁唑-4-基)吡啶-3-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 35（400 mg，90%純度，0.566 mmol）藉由製備型HPLC（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 30%-50%）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 35A（39 mg，由HPLC得到的純度為97.4%，10.6%產率，97.4%立體純）和呈白色固體之 化合物 35B（79 mg，由HPLC得到的純度為98.6%，21.6%產率，98.6%立體純）。 化合物 35A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.559 min，C 31H 31Cl 2N 7O 4之計算質量635.2，m/z實測值636.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm，4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度30°C；波長：254 nm；R T= 7.922 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.61 (s, 1H), 7.69 (d, J =9.6 Hz, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.32 - 7.26 (m, 2H), 5.98 - 5.15 (m, 3H), 4.89 - 4.87 (m, 1H), 4.63 - 4.30 (m, 2H), 3.99 - 3.89 (m, 2H), 3.20 - 2.95 (m, 1H), 2.70 - 2.68 (m, 1H), 2.68 (d, J =5.2 Hz, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 1.66 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.31 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 化合物 35B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.596 min，C 31H 31Cl 2N 7O 4之計算質量635.2，m/z實測值636.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 µm，4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度30°C；波長：254 nm；R T= 10.583 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.69 (s, 1H), 7.74 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.33 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 6.03 - 5.20 (m, 3 H), 4.88 (s, 1H), 4.65 - 4.33 (m, 2H), 4.19 (d, J =13.2 Hz, 1H), 3.53 - 3.49 (m, 1H), 3.16 - 2.98 (m, 1H), 2.81 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.74 - 2.68 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 1.66 (d, J =7.6 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 36A 和 36B
Figure 02_image429
中間體 36-2 ： 1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙酮
向5-溴-2-(二氟甲基)吡啶 36-1（500 mg，2.40 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（1.0 mL，2.96 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之脫氣溶液中添加雙(三苯膦)氯化鈀(II)（20 mg，0.03 mmol）。在100°C攪拌2.5小時後，將反應混合物用乙醚（20 mL）稀釋並用氟化鉀水溶液（700 mg的氟化鉀，在20 mL水中）處理。劇烈攪拌1小時後，將混合物用矽藻土過濾。將濾液用乙酸乙酯（30 mL）稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液（30 mL）、鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到粗品。在室溫，向粗品在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加2M鹽酸水溶液（10 mL，20 mmol）。在室溫攪拌15分鐘後，將反應混合物用水（20 mL）淬滅，用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 4 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（400 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，87.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.30 min，C 8H 7F 2NO之計算質量171.1，m/z實測值172.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.18 (d, J =1.2 Hz, 1H), 8.38 (dd, J =8.0 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.69 (t, J =55.2 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H)。 中間體 36-3 ： 1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(6-(二氟甲基)-3-基) 36-2（400 mg，90%純度，2.10 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（160 mg，4.23 mmol）。添加後，將混合物在室溫攪拌2小時。將混合物用水（30 mL）淬滅。將有機相分離，並將水相用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至55%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（264 mg，由 1H NMR得到的純度為95%，68.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.14 min，C 8H 9F 2NO之計算質量173.1，m/z實測值174.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.64 (s, 1H), 7.88 (dd, J =8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.64 (t, J =55.6 Hz, 1H), 5.03 - 5.02 (m, 1H), 2.03 (d, J =3.2 Hz, 1H), 1.55 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 36-4 ： 5-(1- 溴乙基 )-2-( 二氟甲基 ) 吡啶
在0°C，向1-(6-(二氟甲基)-3-基)乙醇 36-3（500 mg，95%純度，2.74 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加三苯膦（1.2 g，4.58 mmol）和四溴甲烷（1.2 g，3.62 mmol）。在25°C攪拌1小時後，將混合物過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10: 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（520 mg，由 1H NMR得到的純度為95%，76.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 8H 8BrF 2N之計算質量235.0，m/z實測值236.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.69 (d, J =1.2 Hz, 1H), 7.94 (dd, J =8.0和2.0 Hz, 1H), 7.64 (d, J =8.0 Hz, 1H), 6.64 (t, J =55.2 Hz, 1H), 5.20 (q, J =7.2 Hz, 1H), 2.07 (d, J =7.2 Hz, 3H)。 中間體 36-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（250 mg，100%純度，0.39 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-(二氟甲基)吡啶 36-4（120 mg，95%純度，0.48 mmol）在2-甲基四氫呋喃（3 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（3 mL）。在30°C攪拌2小時後，將反應混合物用水（30 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之粗化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為72.5%，93.6%產率）。直接使用該粗品。LC-MS（ESI）：R T= 2.30 min和2.32 min，C 42H 43Cl 2F 2N 5O 3Si之計算質量801.3，m/z實測值802.3 [M+H] +。 中間體 36-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 36-5（400 mg，72.5%純度，0.36 mmol）在四氫呋喃（5 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1 mL，1 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 30%至70%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（210 mg，由LCMS得到的純度為96.4%，99.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.54 min，C 26H 25Cl 2F 2N 5O 3之計算質量563.1，m/z實測值564.2 [M+H] +。 中間體 36-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 36-6（210 mg，96.4%純度，0.36 mmol）在乙腈（3 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（115 mg，0.74 mmol）、亞氯酸鈉（80 mg，80%純度，0.71 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）和次氯酸鈉水溶液（0.8 mL，5.5%純度，0.74 mmol）。在20°C攪拌過夜後，將混合物用飽和亞硫酸鈉水溶液（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到粗品，將其藉由C18（乙腈 : 水 = 35%至55%）純化，以得到呈白色固體之所需產物（200 mg，由LCMS得到的純度為100%，96.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.29 min，C 26H 23Cl 2F 2N 5O 4之計算質量577.1，m/z實測值578.1 [M+H] +。 化合物 36 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 36-7（500 mg，84%純度，0.726 mmol）、甲胺鹽酸鹽（150 mg，2.22 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（280 mg，1.46 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（200 mg，1.48 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）中之混合物中添加三甲胺（0.6 mL，4.32 mmol）。在室溫在氮氣下攪拌過夜後，將混合物用0.5M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 05%至80%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（360 mg，100%純度，84%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.61 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 3之計算質量590.1，m/z實測值591.3 [M+H] +。 化合物 36A 和 36B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (36A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(6-( 二氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (36B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(6-(二氟甲基)吡啶-3-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 36（440 mg，100%純度，0.744 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離方法：柱：Chiralpak IB N-5，5 μm 30 * 250 mm；流動相：100% ACN，以60 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，背壓：100巴）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 36A（101.3 mg，97.6%純度，22%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 36B（178.1 mg，99.5%純度，40%產率，99.9%立體純）。 化合物 36A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.024 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 3之計算質量590.1，m/z實測值591.2 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：100% CH 3CN，以1.0 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm，背壓：100巴；R T= 4.974 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.59 (s, 1H), 7.79 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.64 (t, J =55.6 Hz, 1H), 6.07 - 5.29 (m, 3H), 4.89 - 4.29 (m, 3H), 4.00 - 3.89 (m, 2H), 3.17 - 2.98 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 4H), 1.65 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -115.81。 化合物 36B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.063 min，C 27H 26Cl 2F 2N 6O 3之計算質量590.1，m/z實測值591.2 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IB N-5，5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：100% CH 3CN，以1.0 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm，背壓：100巴；R T= 6.219 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.67 (s, 1H), 7.84 (d, J =6.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 6.63 (t, J =55.2 Hz, 1H), 6.19 - 5.28 (m, 3H), 4.95 - 4.31 (m, 3H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 3.45(dd, J =13.2, 4.8 Hz, 1H), 3.15 - 2.95(m, 1H), 2.81 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.73 - 2.69 (m,1H), 1.66 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -115.73。 化合物 37A 和 37B ：
Figure 02_image431
中間體 37-2 ： 2-(1- 溴乙基 ) 吡啶向2-乙基吡啶 37-1（2.0 g，18.7 mmol）、N-溴代琥珀醯亞胺（3.7 g，20.8 mmol）和2,2'-偶氮雙(2-甲基丙腈)（307 mg，1.87 mmol）在四氯化碳（50 mL）中之溶液中在90°C攪拌1小時後，將反應混合物用水（30 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1至50 : 1）純化，以得到呈紅色油狀物之標題化合物（2.4 g，由 1H NMR得到的純度為90%，62%產率）。 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.58 - 8.57 (m, 1H), 7.71 -7.67 (m, 1H), 7.46 - 7.44 (m, 1H), 7.22 -7.18 (m, 1H), 5.24 (q, J =7.2Hz, 1H), 2.08 (d, J =6.8 Hz, 3H) 中間體 37-3 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1.5 g，100%純度，2.32 mmol）和2-(1-溴乙基)吡啶 37-2（957 mg，90%純度，4.63 mmol）在2-甲基四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加50% wt.氫氧化鈉水溶液（15 mL）和苄基三乙基氯化銨（106 mg，0.465 mmol）。在20°C攪拌3小時後，將混合物添加到水（50 mL）中並用二氯甲烷（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其用四氫呋喃（20 mL）稀釋，將在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（2.3 mL，2.3 mmol）添加到溶液中。在20°C攪拌3小時後，將反應混合物用水（30 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次，用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至95%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（700 mg，由LCMS得到的純度為96%，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.319 min，C 25H 25Cl 2N 5O 3之計算質量513.1，m/z實測值514.2 [M+H] +。 中間體 37-4 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(吡啶-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 37-3（700 mg，96%純度，1.31 mmol）在乙腈（10 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（10 mL）、亞氯酸鈉（300 mg，80%純度，2.65 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（410 mg，2.62 mmol）和次氯酸鈉水溶液（1.6 mL，2.69 mmol）。在0°C至20°C攪拌14小時後，將反應混合物用0.1 M鹽酸水溶液（40 mL）稀釋並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 45%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（400 mg，由LCMS得到的純度為99%，57%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.126 min，C 25H 23Cl 2N 5O 4之計算質量527.1，m/z實測值528.0 [M+H] +。 化合物 37 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(吡啶-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 37-4（400 mg，99%純度，0.749 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）中之溶液中添加甲胺鹽酸鹽（127 mg，1.88 mmol）、苯并三唑-1-醇（203 mg，1.50 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（287 mg，1.50 mmol）和三乙胺（530 mg，5.24 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物用0.05 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（60 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（60 mL）洗滌三次並用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物。將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（300 mg，100%純度，74%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.45 min和1.47 min，C 26H 26Cl 2N 6O 3之計算質量540.1，m/z實測值541.3 [M+H] +。 化合物 37A 和 37B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (37A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (37B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(吡啶-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 37（300 mg，100%純度，0.554 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IH 5 μm 20 * 250 mm；流動相：CAN，以12 mL/min；溫度：30°C；波長：214 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 3 7-A（41.8 mg，97.3%純度，14%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 3 7-B（66.4 mg，98.5%純度，22%產率，100%立體純）。 化合物 3 7A： LC-MS（ESI）：R T= 3.346 min，C 26H 26Cl 2N 6O 3之計算質量540.1，m/z實測值541.2 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral I H 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN 100%，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 6.089 min）。 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.58 (d, J =4.4 Hz, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 7.54 -7.50 (m, 2H), 7.25 - 7.21 (m, 3H), 5.93 - 5.45 (m, 3H), 4.89 - 4.37 (m, 3H), 4.13 - 3.97 (m, 2H), 3.03 (br s, 1H), 2.73 - 2.69 (m, 1H), 2.65 (d, J =4.8 Hz, 3H),1.65 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 3 7B： LC-MS（ESI）：R T= 3.476 min，C 26H 26Cl 2N 6O 3之計算質量540.1，m/z實測值541.2 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IH 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN 100%，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 7.514 min）。 1H NMR(400 MHz, CDCl 3) δ 8.55 (d, J =4.0 Hz, 1H), 7.68 - 7.64 (m, 1H), 7.52 -7.49 (m, 2H), 7.34 - 7.32 (m, 1H), 7.25 - 7.17 (m, 2H), 6.03 - 5.30 (m, 3H), 4.86 - 4.31 (m, 4H), 3.80 - 3.73 (m, 1H), 3.02 (br s, 1H), 2.81 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.73 - 2.67 (m, 1H), 1.64 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 38A 和 38B
Figure 02_image433
中間體 38-2 ： 1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 醇
在0°C，向6-氯吡啶甲醛 38-1（1.0 g，7.06 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在2-甲基四氫呋喃中之1 M甲基溴化鎂（10 mL，10 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用氯化銨水溶液（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（35 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.0 g，98%純度，88%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.35 min，C 7H 8ClNO之計算質量157.0，m/z實測值158.3 [M+H] +。 中間體 38-3 ： 2-(1- 溴乙基 )-6- 氯吡啶
在0°C，向1-(6-氯吡啶-2-基)乙醇 38-2（150 mg，98%純度，0.933 mmol）在四氫呋喃（2 mL）中之溶液中添加三苯膦（441 mg，1.33 mmol）和四溴甲烷（441 mg，1.68 mmol）。在25°C攪拌4小時後，將混合物過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（190 mg，100%純度，92.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.62 min，C 7H 7BrClN之計算質量218.9，m/z實測值220.0 [M+H] +。 中間體 38-4 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-9-(1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（420 mg，90%純度，0.584 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）和於水中之50% wt.氫氧化鈉（4 mL，125.0 mmol）中之溶液中添加2-(1-溴乙基)-6-氯吡啶 38-3（190 mg，100%純度，0.862 mmol）和苄基三乙基氯化銨（21 mg，0.092 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（400 mg，88%純度，76.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.05 min和2.10 min，C 41H 42Cl 3N 5O 3Si之計算質量785.2，m/z實測值786.1 [M+H] +。 中間體 38-5 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在室溫，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-9-(1-(6-氯吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 38-4（400 mg，88%純度，0.447 mmol）在四氫呋喃（6 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.8 mL，0.8 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 乙酸乙酯 = 10 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（230 mg，100%純度，93.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 25H 24Cl 3N 5O 3之計算質量547.1，m/z實測值548.4 [M+H] +。 中間體 38-6 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R)-9-(1-(6-氯吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 38-5（280 mg，100%純度，0.510 mmol）、亞氯酸鈉（115 mg，1.02 mmol）和2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（160 mg，1.02 mmol）在乙腈（3 mL）和飽和磷酸二氫鉀水溶液（3 mL）中之溶液中添加次氯酸鈉水溶液（0.6 mL，1.01 mmol）。在室溫攪拌過夜後，將反應用飽和亞硫酸鈉水溶液（10 mL）淬滅，用1 M鹽酸酸化至pH約為4並用乙酸乙酯（15 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（250 mg，由LCMS得到的純度為100%，87.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.33 min，C 25H 22Cl 3N 5O 4之計算質量561.1，m/z實測值562.4 [M+H] +。 化合物 38 ： (3R,7S)-9-(1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(6-氯吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 38-6（250 mg，100%純度，0.444 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（170 mg，0.887 mmol）、甲胺鹽酸鹽（70 mg，1.04 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（125 mg，0.925 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（3 mL）中之溶液中添加三乙胺（0.5 mL，2.82 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物用氯化銨水溶液（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨 = 45%至55%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，100%純度，78.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.2 [M+H] +。 化合物 38A 和 38B ： (3R,7S)-9-((R*)-1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (38A) ， 以及 (3R,7S)-9-((S*)-1-(6- 氯吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (38B)
將(3R,7S)-9-(1-(6-氯吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 38（260 mg，100%純度，0.451 mmol）藉由手性製備型（柱：Chiralpak IC 5 μm 30 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以25 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 化合物 38A（59.6 mg，99.3%純度，22.8%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 38B（62.9 mg，99.5%純度，24.1%產率，99.9%立體純）。 化合物 38A ：LC-MS（ESI）：R T= 2.349 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 6.049 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 2H), 7.30 - 7.26 (m, 1H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 7.21 - 7.15 (m, 1H), 6.06 - 5.40 (m, 3H), 4.90 - 4.37 (m, 3H), 4.22 - 4.12 (m, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.18 - 2.96 (m, 1H), 2.77 - 2.62 (m, 4H), 1.63 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.38 - 1.22 (m, 3H)。 化合物 38B ：LC-MS（ESI）：R T= 2.515 min，C 26H 25Cl 3N 6O 3之計算質量574.1，m/z實測值575.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : EtOH = 50 : 50，以1 mL/ min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.141 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.54 - 7.47 (m, 2H), 7.25 - 7.20 (m, 3H), 6.10 - 5.72 (m, 2H), 5.63 - 5.23 (m, 1H), 5.03 - 4.62 (m, 2H), 4.52 - 4.20 (m, 2H), 3.96 - 3.86 (m, 1H), 3.18 - 2.96 (m, 1H), 2.81 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 1.62 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.34 - 1.25 (m, 3H)。 化合物 39A 和 39B
Figure 02_image435
中間體 39-2 ： 甲基 6-(1- 乙氧基乙烯基 ) 菸鹼酸酯
在室溫在氮氣氣氛下，向甲基 6-溴菸鹼酸酯 39-1（5.00 g，23.1 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（60 mL）中之溶液中添加四(三苯膦)鈀（1.40 g，1.21 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（10 mL，29.6 mmol）。在100°C在氮氣氣氛下攪拌過夜後，將混合物用飽和氟化鉀水溶液（100 mL）稀釋並過濾。將濾液用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 20 : 1）純化，以得到呈淺黃色固體之標題化合物（3.30 g，由 1H NMR得到的純度為90%，62%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.65 min，C 11H 13NO 3之計算質量207.1，m/z實測值208.4 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 9.24 - 9.21 (m, 1H), 8.37 - 8.33 (m, 1H), 7.83 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.66 - 5.63 (m, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 4.10 - 4.02 (m, 5H), 1.53 (t, J =6.9 Hz, 3H)。 中間體 39-3 ： 甲基 6- 乙醯基菸鹼酸酯
在室溫在氮氣氣氛下，向甲基 6-(1-乙氧基乙烯基)菸鹼酸酯 39-2（3.30 g，90%純度，14.3 mmol）在四氫呋喃（30 mL）中之溶液中添加2 M鹽酸水溶液（30 mL，60.0 mmol）。在室溫攪拌1小時後，向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液（100 mL）並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌然後經Na 2SO 4 （固體）乾燥，濃縮，以得到呈白色固體之標題化合物（2.80 g，由 1H NMR得到的純度為90%，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.38 min，C 9H 9NO 3之計算質量179.1，m/z實測值180.7 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 9.31 (s, 1H), 8.49 - 8.45 (m, 1H), 8.15 (d, J =9.9 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 2.81 (s, 3H)。 中間體 39-4 ： 甲基 6-(1- 羥乙基 ) 菸鹼酸酯
在0°C，向甲基 6-乙醯基菸鹼酸酯 39-3（7.60 g，57.5%純度，24.4 mmol）在甲醇（200 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（1.10 g，29.1 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液（50 mL）淬滅，然後用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（3.50 g，得自 1H NMR的純度為90%，71.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.17 min，C 9H 11NO 3之計算質量181.1，m/z實測值182.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 9.15 (d, J = J =1.2 Hz, 1H), 8.31 (dd, J =2.1 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.01 - 4.95 (m, 1H), 4.22 - 4.11 (m, 1H), 3.98 (s, 3H), 1.55 (d, J =6.6 Hz, 3H)。 中間體 39-5 ： 甲基 6-(1-(( 甲磺醯基 ) 氧基 ) 乙基 ) 菸鹼酸酯
在0°C在氮氣氣氛下，向甲基 6-(1-羥乙基)菸鹼酸酯 39-4（3.50 g，90%純度，8.94 mmol）在二氯甲烷（18 mL）中之溶液中添加三乙胺（5.20 g，51.4 mmol）和甲磺醯氯（3.00 g，26.2 mmol）。在室溫攪拌3小時後，向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液（40 mL）並用二氯甲烷（40 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌然後經Na 2SO 4 （固體）乾燥，濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（4.40 g，由 1H NMR得到的純度為90%，87.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.37 min，C 10H 13NO 5S之計算質量259.1，m/z實測值260.0 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 9.21 (d, J =1.5 Hz, 1H), 8.38 (dd, J =8.1和2.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.86 (d, J =6.6 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.04 (s, 3H), 1.80 (d, J =6.6 Hz, 3H)。 中間體 39-6 ： 甲基 6-(1-((3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -9(10H)- 基 ) 乙基 ) 菸鹼酸酯
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（500 mg，90%純度，0.695 mmol）和甲基 6-(1-((甲磺醯基)氧基)乙基)菸鹼酸酯 39-5（900 mg，3.12 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之混合物中添加碳酸銫（1.30 g，3.99 mmol）。在50°C攪拌3小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 50%-95%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（270 mg，由LCMS得到的純度為92.0%，44.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.25 min和2.34 min，C 43H 45Cl 2N 5O 5Si之計算質量809.3，m/z實測值810.2 [M+H] +。 中間體 39-7 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3': 3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在-30°C，向甲基 6-(1-((3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-9(10H)-基)乙基)菸鹼酸酯 39-6（600 mg，90%純度，0.667 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1M甲基溴化鎂（4 mL，4.00 mmol）。將混合物在-30°C攪拌2小時。將混合物用飽和氯化銨水溶液（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（650 mg，由LCMS得到的純度為59.8%，72.0%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.70 min和1.78 min，C 44H 49Cl 2N 5O 4Si之計算質量809.3，m/z實測值810.2 [M+H] +。 中間體 39-8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-9-(1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 39-7（600 mg，93.8%純度，0.694 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中之溶液中添加1 M四丁基氟化銨（2 mL，2 mmol）。然後將反應溶液在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時。將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%-95%）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（300 mg，由LCMS得到的純度為91.7%，69.2%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.44 min和1.47 min，C 28H 31Cl 2N 5O 4之計算質量571.2，m/z實測值572.1 [M+H] +。 中間體 39-9 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-9-(1-(5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 39-8（250 mg，91.7%純度，0.400 mmol）在乙腈（2.5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（2.5 mL）、亞氯酸鈉（75 mg，80%純度，0.663 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（125 mg，0.800 mmol）和次氯酸鈉水溶液（0.75 mL，10%純度，1.26 mmol）。在20°C攪拌16小時後，將反應混合物過濾，藉由乙腈（10 mL）洗滌，然後用飽和亞硫酸鈉水溶液（1 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH約為4，用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%-95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（170 mg，由LCMS得到的純度為90.3%，65.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.23 min，C 28H 29Cl 2N 5O 5之計算質量585.2，m/z實測值586.1 [M+H] +。 化合物 39 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 39-9（100 mg，90%純度，0.153 mmol）、甲胺鹽酸鹽（30 mg，0.444 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（60 mg，0.313 mmol）和1-羥基苯并三唑（45 mg，0.333 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中之溶液中緩慢添加三乙胺（100 mg，0.988 mmol）。在0°C在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（50 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，48.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min和1.62 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.2 [M+H] +。 化合物 39A 和 39B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (39A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(5-(2- 羥基丙 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (39B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(5-(2-羥基丙-2-基)吡啶-2-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 39（90 mg，90%純度，0.135 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IE 10 µm 30 mm * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 80 : 20，以30 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 39A（20 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，24.6%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 39B（17 mg，由LCMS得到的純度為99.5%，20.9%產率，99.2%立體純）。 化合物 39A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.278 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE；柱尺寸：5 µm 4.6 mm * 250 mm；流動相：己烷 : IPA = 80 : 20，以30 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 8.865 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.70 (s, 1H), 7.80 - 7.78 (m, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 2H), 7.25 - 7.22 (m, 2H), 6.18 - 5.89 (m, 3H), 4.84 - 4.00 (m, 5H), 3.08 - 2.65 (m, 5H), 1.61 (d, J =3.2 Hz, 9H), 1.29 (d, J =6.0 Hz, 3H)。 化合物 39B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.313 min，C 29H 32Cl 2N 6O 4之計算質量598.2，m/z實測值599.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE；柱尺寸：5 µm 4.6 mm * 250 mm；流動相：己烷 : IPA = 80 : 20，以30 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 10.729 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.67 (s, 1H), 7.81 - 7.78 (m, 1H), 7.52 - 7.47 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 7.24 - 7.22 (m, 1H), 6.11 - 5.53 (m, 3H), 4.89 - 3.73 (m, 5H), 3.13 - 2.66 (m, 5H), 1.68 - 1.58 (m, 9H), 1.29 (d, J =6.0 Hz, 3H)。 化合物 40A 和 40B
Figure 02_image437
中間體 40-2 ： 1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 酮
在室溫，向1-(5-氟吡啶-2-基)乙-1-酮 40-1（1.0 g，7.19 mmol）和1H-1,2,4-三唑（1.5 g，21.7 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中之溶液中添加碳酸銫（4.7 g，14.4 mmol）和N,N-二甲基吡啶-4-胺（0.9 g，7.37 mmol）。在80°C攪拌6小時後，將混合物用水（100 mL）稀釋並用乙酸乙酯（200 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 30%-40%）分離，以得到呈黃色固體之標題產物（900 mg，由LCMS得到的純度為100%，67%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.17 min，C 9H 8N 4O之計算質量188.1，m/z實測值189.1 [M+H] +。 中間體 40-3 ： 1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙 -1- 醇
在0°C，向1-(5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙-1-酮 40-2（800 mg，4.25 mmol）在四氫呋喃（24 mL）和甲醇（8 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（80 mg，2.12 mmol）。在0°C攪拌1小時後，向混合物中添加乙酸乙酯（80 mL），用水（16 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之粗標題化合物（800 mg，由LCMS得到的純度為100%，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.33 min，C 9H 10N 4O之計算質量190.1，m/z實測值191.1 [M+H] +。 中間體 40-4 ： 2-(1- 溴乙基 )-5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶
在0°C，向1-(5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙-1-醇 40-3（800 mg，100%純度，4.21 mmol）在四氫呋喃（16 mL）中之溶液中添加四溴甲烷（2.1 g，6.33 mmol）和三苯膦（2.2 g，8.39 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮並藉由C18層析法（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 45%-65%）分離，以得到呈白色固體之標題產物（450 mg，78%純度，33%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.39 min，C 9H 9BrN 4之計算質量252.0，m/z實測值253.0 [M+H] +。 中間體 40-5 ： (3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（670 mg，1.03 mmol）和2-(1-溴乙基)-5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶 40-4（450 mg，78%純度，1.39 mmol）在2-甲基四氫呋喃（7 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（7 mL）。在室溫攪拌3小時後，向混合物中添加乙酸乙酯（100 mL），用水（100 mL）洗滌兩次，用鹽水（200 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18層析法（乙腈: 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 45%-65%）純化，以得到呈白色固體之標題產物（210 mg，85%純度，30%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.52 min，C 27H 26Cl 2N 8O 3之計算質量580.2，m/z實測值581.0 [M+H] +。 中間體 40-6 ： (3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 40-5（210 mg，85%純度，0.31 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（96 mg，0.61 mmol）、次氯酸鈉水溶液（0.4 mL，0.67 mmol）、亞氯酸鈉（56 mg，0.62 mmol）、飽和磷酸二氫鈉水溶液（5 mL）。在0°C攪拌6小時後，將混合物用水（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到標題化合物（200 mg，83%純度，91%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.27 min，C 27H 24Cl 2N 8O 4之計算質量594.1，m/z實測值593.0 [M-H] -。 化合物 40 ： (3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，在60分鐘內，向(3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 40-6（200 mg，83%純度，0.28 mmol）、甲胺鹽酸鹽（47 mg，0.70 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（107 mg，0.558 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（76 mg，0.56 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之混合物中逐滴添加三乙胺（0.26 mL，2.00 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用水（30 mL）稀釋，用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（60 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 45%至60%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（140 mg，由LCMS得到的純度為100%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.44 min，C 28H 27Cl 2N 9O 3之計算質量607.2，m/z實測值608.6 [M+H] +。 化合物 40A 和 40B ： (3R,7S)-9-((R*)-1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (40A) ， 以及 (3R,7S)-9-((S*)-1-(5-(1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (40B)
將(3R,7S)-9-(1-(5-(1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 40（160 mg，100%純度，0.26 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 20 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 90 : 10，以15 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之 峰 1（50 mg，由SFC得到的純度為87.8%，27%產率）和 化合物 40B（65 mg，99.7%純度，41%產率，98.9%立體純）。將 峰 1藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 50 : 50，以15 mL/min；溫度：30°C；波長：230 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 化合物 40A（35 mg，99.6%純度，79%產率，100%立體純）。 化合物 40A ：LC-MS（ESI）：R T= 2.977 min，C 28H 27Cl 2N 9O 3之計算質量607.2，m/z實測值608.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 5.774 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.93 (d, J =2.4 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.00 - 7.98 (m, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.43 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 5.98 - 5.35 (m, 3H), 4.89 - 4.16 (m, 4H), 4.04 - 4.00 (m, 1H), 3.06 (s, 1H), 2.73 - 2.69 (m, 1H), 2.66 (d, J =4.8 Hz, 3H), 1.69 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 40B ：LC-MS（ESI）：R T= 2.972 min，C 28H 27Cl 2N 9O 3之計算質量607.2，m/z實測值608.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 90 : 10，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 9.858 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.91 (d, J =2.4 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.01 - 7.99 (m, 1H), 7.51 - 7.49 (m, 3H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 5.94 - 5.37 (m, 3H), 4.91 - 4.41 (m, 4H), 3.87 - 3.82 (m, 1H), 3.05 - 3.02 (m, 1H), 2.82 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.72 (d, J =16.4 Hz, 1H), 1.68 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.29 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 化合物 41A 和 41B
Figure 02_image439
中間體 41-2 ： N-(( 二甲基胺基 ) 亞甲基 ) 乙醯胺
在0°C，向乙醯胺 41-1（1.0 g，16.9 mmol）在1,4-二㗁𠮿（35 mL）中之溶液中添加1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺（3.4 ml，25.59 mmol）。然後將反應混合物在80°C在氮氣氣氛下攪拌2小時。將反應混合物濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（2.0 g，由LCMS得到的純度為96%，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.234 min，C 5H 10N 2O之計算質量114.1，m/z實測值115.1 [M+H] +。 中間體 41-4 ： 2- 溴 -5- 肼基吡啶
將6-溴吡啶-3-胺 41-3（8.00 g，90%純度，41.6 mmol）在6 M鹽酸水溶液（70 mL，420 mmol）中之溶液冷卻至0°C。經5分鐘，添加亞硝酸鈉（2.90 g，42.0 mmol）在預冷卻至0°C的水（120 mL）中之溶液並將反應混合物在0°C攪拌45分鐘。將二水氯化亞錫（24.0 g，106 mmol）懸浮於預冷卻至0°C的6 M鹽酸水溶液（70 mL，420 mmol）中。然後，經5分鐘，將其添加到反應混合物中。將反應混合物在0°C攪拌60分鐘。將反應經由添加40% w/w氫氧化鉀水溶液直至PH為12-14。將混合物用水和乙酸乙酯稀釋。將有機層分離，並將水層用乙酸乙酯（200 mL）萃取三次。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，以得到呈棕色固體之所需化合物（8.00 g，由LCMS得到的純度為65%，67%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.003 min，C 5H 6BrN 3之計算質量187.0，m/z實測值188.0 [M+H] +。 中間體 41-5 ： 2- 溴 -5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶
在室溫，向在乙酸（40 mL）中的2-溴-5-肼基吡啶 41-4（2.40 g，82%純度，10.5 mmol）中添加N-((二甲基胺基)亞甲基)乙醯胺 41-2（3.00 g，96%純度，25.1 mmol）。在90°C加熱2小時後，將混合物過濾並將濾液用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用水（50 mL）、鹽水（50 mL）洗滌並濃縮，以得到呈黃色固體之所需化合物（2.10 g，由LCMS得到的純度為56%，47%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.24 min，C 8H 7BrN 4之計算質量238.0，m/z實測值239.0 [M+H] +。 中間體 41-6 ： 2-(1- 乙氧基乙烯基 )-5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶
在氮氣氣氛下，向2-溴-5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶 41-5（8.20 g，50%純度，17.2 mmol）和三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（20 mL，59.2 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（160 mL）中之溶液中添加四(三苯膦)鈀（2.00 g，1.73 mmol）。在100°C加熱2小時後，將混合物用飽和氟化鉀水溶液（200 mL）稀釋並過濾。將濾液用乙酸乙酯（200 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18層析法（乙腈: 水（+ 0.02%碳酸氫銨）= 50%至70%）純化，以得到呈黃色固體之所需化合物（1.90 g，由LCMS得到的純度為92%，45%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.294 min，C 12H 14N 4O之計算質量230.1，m/z實測值231.2 [M+H] +。 中間體 41-7 ： 1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙酮
在0°C在氮氣氣氛下，向2-(1-乙氧基乙烯基)-5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶 41-6（2.00 g，100%純度，8.69 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加在水中之2 M鹽酸（20 mL，40 mmol）。在室溫攪拌2小時後，向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉水溶液（50 mL）並用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.80 g，由 1H NMR得到的純度為90%，92%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.055 min，C 10H 10N 4O之計算質量202.1，m/z實測值203.1 [M+H] +。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.91 (d, J =2.4 Hz, 1H), 8.26 (d, J =8.4 Hz, 1H), 8.05 - 8.02 (m, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.69 (s, 3H)。 中間體 41-8 ： 1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙酮 41-7（3.00 g，90%純度，13.4 mmol）在甲醇（40 mL）中之溶液中添加硼氫化鈉（500 mg，13.2 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將混合物用飽和氯化銨水溶液（50 mL）淬滅，用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 0 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（2.00 g，由 1H NMR得到的純度為90%，66%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (d, J =2.1 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.89 - 7.85 (m, 1H), 7.55 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.07 - 5.00 (m, 1H), 4.16 - 3.94 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 1.59 (d, J =6.6 Hz, 3H)。 中間體 41-9 ： 2-(1- 溴乙基 )-5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶
在0°C，向1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙醇 41-8（1.20 g，90%純度，5.29 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液中添加三苯膦（2.70 g，10.3 mmol）和四溴甲烷（3.00 g，9.05 mmol）。在25°C攪拌2小時後，將反應濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10 : 1至0 : 1）純化，以得到呈白色固體之所需化合物（1.00 g，由 1H NMR得到的純度為90%，64%產率）。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ 8.74 (d, J =2.4 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.90 - 7.86 (m, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 1H), 5.32 (q, J =13.8 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.14 (d, J =6.9 Hz, 3H)。 中間體 41-10 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（900 mg，90%純度，1.25 mmol）、苄基三乙基氯化銨（135 mg，0.593 mmol）和2-(1-溴乙基)-5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶 41-9（700 mg，90%純度，2.36 mmol）在2-甲基四氫呋喃（9 mL）中之溶液中緩慢添加在水中之50% wt.氫氧化鈉（9 mL）。在30°C攪拌4小時後，將反應混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（100 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.50 g，由LCMS得到的純度為33%，47%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.08 min和2.17 min，C 44H 46Cl 2N 8O 3Si之計算質量832.3，m/z實測值833.3 [M+H] +。 中間體 41-11 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 41-10（2.00 g，30%純度，0.720 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中之溶液中添加1 M四丁基氟化銨（2 mL，2 mmol）。在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（80 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%-95%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（480 mg，由LCMS得到的純度為88%，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.47 min，C 28H 28Cl 2N 8O 3之計算質量594.2，m/z實測值595.1 [M+H] +。 中間體 41-12 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 41-11（380 mg，88%純度，0.561 mmol）在乙腈（5 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（5 mL）、亞氯酸鈉（120 mg，80%純度，1.06 mmol）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（200 mg，1.28 mmol）和次氯酸鈉水溶液（0.8 mL，10%純度，1.25 mmol）。在20°C攪拌4小時後，將反應混合物藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%-95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（350 mg，由LCMS得到的純度為95%，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25 min，C 28H 26Cl 2N 8O 4之計算質量608.1，m/z實測值609.1 [M+H] +。 化合物 41 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-(1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 41-12（340 mg，90%純度，0.502 mmol）、1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（130 mg，0.962 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（190 mg，0.991 mmol）和甲胺鹽酸鹽（100 mg，1.48）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中之溶液中添加三乙胺（320 mg，3.16 mol）。在室溫攪拌4小時後，將反應混合物直接藉由C18柱（乙腈 : 水（0.1%碳酸氫銨）= 5%-95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（200 mg，由LCMS得到的純度為91%，58%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.43 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.1 [M+H] +。 化合物 41A 和 41B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((R*)-1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (41A) ， 以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -9-((S*)-1-(5-(5- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -1- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (41B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-9-(1-(5-(5-甲基-1H-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-2-基)乙基)-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 41（200 mg，91%純度，0.291 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IC 10 µm 30 mm * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以25 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 41A（40 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，22.0%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 41B（50 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，27.5%產率，100%立體純）。 化合物 41A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.237 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 µm，4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度30°C；波長：254 nm；R T= 6.179 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.80 - 7.77 (m, 1H), 7.54 - 7.43 (m, 3H), 7.27 - 7.25 (m, 1H), 6.02 - 4.49 (m, 6H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 4.03 - 3.98 (m, 1H), 3.14 - 2.98 (m, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.61 (s, 3H), 1.70 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.29 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 化合物 41B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.178 min，C 29H 29Cl 2N 9O 3之計算質量621.2，m/z實測值622.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 µm，4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度30°C；波長：254 nm；R T= 7.120 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.69 (d, J =2.4 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.83 - 7.80 (m, 1H), 7.52 - 7.50 (m, 3H), 7.26 - 7.23 (m, 1H), 5.95 - 4.45 (m, 7H), 3.89 - 3.84 (m, 1H), 3.13 - 2.70 (m, 5H), 2.57 (s, 3H), 1.69 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 化合物 42A 和 42B
Figure 02_image441
中間體 42-2 ： 2-(1- 乙氧基乙烯基 )-4- 氟吡啶
將2-溴-4-氟吡啶 42-1（2 g，11.4 mmol），三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷（7 ml，20.7 mmol）和四(三苯膦)鈀(0)（300 mg，0.26 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（20 ml）中之混合物在120°C在氮氣氣氛下攪拌8小時。在冷卻至室溫後，將反應混合物用飽和氟化鉀水溶液（30 mL）淬滅。將混合物在室溫攪拌1.5小時，並用乙酸乙酯（80 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1至10 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.52 g，由LCMS得到的純度為99%，79%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.626 min，C 9H 10FNO之計算質量167.1，m/z實測值168.2 [M+H] +。 中間體 42-3 ： 1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙酮
在0°C，向2-(1-乙氧基乙烯基)-4-氟吡啶 42-2（1.52 g，99%純度，9.00 mmol）在四氫呋喃（28 mL）中之溶液中添加在水中之1 M鹽酸水溶液（14 mL）。在室溫攪拌5小時後，將反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液酸化至pH = 8-9，並用二氯甲烷（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 丙酮 = 100 : 1 - 50 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.1 g，由LCMS得到的純度為71%，62%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.139 min，C 7H 6FNO之計算質量139.0，m/z實測值140.2 [M+H] +。 中間體 42-4 ： 1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙醇
在0°C，向1-(4-氟吡啶-2-基)乙酮 42-3（1.1 g，71%純度，5.61 mmol）在甲醇（12 mL）中之溶液中緩慢添加硼氫化鈉（215 mg，5.68 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將反應用丙酮（10 mL）逐滴淬滅並濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 100 : 1 - 50 : 1）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（365 mg，由LCMS得到的純度為99%，46%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 0.501 min，C 7H 8FNO之計算質量141.1，m/z實測值142.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.53 - 8.50 ( m, 1H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 5.51 - 5.50 (m, 1H), 4.77 - 4.71 (m, 1H), 1.37 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 中間體 42-5 ： 2-(1- 溴乙基 )-4- 氟吡啶
在0°C，向1-(4-氟吡啶-2-基)乙醇 42-4（565 mg，95%純度，3.80 mmol）在四氫呋喃（25 mL）中之溶液中添加三苯膦（1.8 g，6.86 mmol）和四溴甲烷（1.8 g，5.43 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1 - 60 : 1）純化，以得到呈無色油狀物之標題化合物（600 mg，由LCMS得到的純度為97%，75%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.318 min，C 7H 7BrFN之計算質量203.0，m/z實測值204.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.63 - 8.59 ( m, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 1H), 7.31 - 7.27 (m, 1H), 5.46 (q, J =7.2 Hz, 1H), 2.00 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 42-6 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（1 g，90%純度，1.39 mmol）、2-(1-溴乙基)-4-氟吡啶 42-5（400 mg，97%純度，1.90 mmol）和苄基三乙基氯化銨（65 mg，0.29 mmol）在2-甲基四氫呋喃（9 mL）和50% wt.氫氧化鈉水溶液（9 mL）中之溶液中。將反應混合物在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時，然後用水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（25 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（1.15 g，由LCMS得到的純度為86%，92%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.680 min，C 41H 42Cl 2FN 5O 3Si之計算質量770.8，m/z實測值771.0 [M+H] +。 中間體 42-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-氟吡啶-2-基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 42-6（1.15 g，86%純度，1.28 mmol）在四氫呋喃（12 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.2 mL，1.2 mmol），然後將混合物在室溫攪拌2小時。將反應混合物倒入乙酸乙酯（25 mL）中並用水（10 mL）洗滌三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 90 : 1 - 50 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（680 mg，由LCMS得到的純度為99%，99%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.457 min，C 25H 24Cl 2FN 5O 3之計算質量531.1，m/z實測值532.2 [M+H] +。 中間體 42-8 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-氟吡啶-2-基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 42-7（680 mg，99%純度，1.26 mmol）在乙腈（7 mL）中之溶液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（7 mL）、2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（403 mg，2.58 mmol）、亞氯酸鈉（295 mg，2.61 mmol）、次氯酸鈉水溶液（1.55 mL，2.60 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫攪拌過夜後，將反應混合物用飽和硫代硫酸鈉（15 mL）淬滅，用1 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6-7，並用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至90%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（580 mg，由LCMS得到的純度為99%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.404 min，C 25H 22Cl 2FN 5O 4之計算質量545.1，m/z實測值546.2 [M+H] +。 化合物 42 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-氟吡啶-2-基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 42-8（580 mg，99%純度，1.05 mmol）、甲胺鹽酸鹽（184 mg，2.73 mmol）、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（418 mg，2.18 mmol）和1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-醇（298 mg，2.21 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中之溶液中添加三乙胺（1 mL，7.21 mmol）。使反應緩慢回到室溫。在室溫在氮氣氣氛下攪拌3小時後，將反應混合物用水淬滅（10 mL）並用乙酸乙酯（25 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（370 mg，由LCMS得到的純度為100%，63%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.52 min，C 26H 25Cl 2FN 6O 3之計算質量558.1，m/z實測值559.4 [M+H] +。 化合物 42A 和 42B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (42A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4- 氟吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (42B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-氟吡啶-2-基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之混合物 42（350 mg，100%純度，0.626 mmol）藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以60 g/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 42A（79.5 mg，22.2%產率，97.7%純度，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 42B（80.9 mg，23%產率，99.7%純度，100%立體純）。 化合物 42A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.568 min，C 26H 25Cl 2FN 6O 3之計算質量558.1，m/z實測值559.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；R T= 7.629 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.60 - 8.56 (m, 1H), 7.88 (d, J =4.4 Hz, 1H), 7.76 - 7.74 (m, 2H), 7.46 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.29 - 7.26 (m, 1H), 7.08 (br s, 1H), 5.87 - 5.65 (m, 1H), 5.43 - 5.24 (m, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.61 - 4.42 (m, 1H), 4.26 - 4.00 (m, 2H), 3.70 - 3.57 (m, 1H), 2.93 - 2.89 (m, 1H), 2.63 - 2.54 (m, 1H), 2.42 (d, J =4.4 Hz, 3H), 1.54 - 1.49 (m, 3H), 1.23 - 1.17 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -103.37。 化合物 42B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.558 min，C 26H 25Cl 2FN 6O 3之計算質量558.1，m/z實測值559.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IE 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；R T= 9.002 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.57 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.75 - 7.72 (m, 2H), 7.46 - 7.26 (m, 3H), 5.75 - 5.65 (m, 1H), 5.41 - 5.23 (m, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.63 - 4.35 (m, 1H), 4.18 (br s, 1H), 3.82 (br s, 2H), 2.92 - 2.89 (m, 1H), 2.64 (d, J =4.4 Hz, 3H), 2.59 - 2.52 (m, 1H), 1.51 - 1.38 (m, 3H), 1.22 - 1.11 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ -103.07。 化合物 43A 和 43B
Figure 02_image443
中間體 43-1 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三
氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 14-7（1.5 g，90%純度，1.98 mmol）和5-(1-溴乙基)-2-(三氟甲基)嘧啶 4-5（750 mg，95%純度，2.79 mmol）在2-甲基四氫呋喃（15 mL）中之溶液中緩慢添加苄基三乙基氯化銨（75 mg，0.33 mmol）和在水中之50% wt.氫氧化鈉（7 mL）。在30°C攪拌1小時後，將反應混合物用水（50 mL）稀釋並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 90%至95%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（270 mg，由LCMS得到的純度為100%，15.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.94 min，C 42H 41ClF 6N 6O 3Si之計算質量854.3，m/z實測值855.6 [M+H] +。 中間體 43-2 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 43-1（320 mg，100%純度，0.37 mmol）在四氫呋喃（3 mL）中之溶液中添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（0.6 mL，0.6 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物在減壓下濃縮，以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 40%至55%）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（190 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，74.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.62 min，C 26H 23ClF 6N 6O 3之計算質量616.1，m/z實測值617.4 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.93 - 8.90 (m, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 2H), 6.21 - 6.03 (m, 1H), 5.69 - 5.30 (m, 1H), 4.78 - 4.25 (m, 3H), 4.07 - 3.66 (m, 3H), 3.46 - 3.24 (m, 1H), 3.16 - 2.49 (m, 3H), 1.73 (d, J =6.4 Hz, 3H), 1.28 - 1.24 (m, 3H)。 中間體 43-3 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 43-2（190 mg，90%純度，0.28 mmol）在乙腈（4 mL）中之溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶并氧基（90 mg，0.58 mmol）、亞氯酸鈉（65 mg，80%純度，0.58 mmol）、飽和磷酸二氫鉀水溶液（4 mL）和次氯酸鈉水溶液（0.33 mL，10%純度，0.55 mmol）。在0°C攪拌2小時後，將混合物用亞硫酸鈉飽和溶液（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（190 mg，由LCMS得到的純度為90.2%，99.0%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.33 min，C 26H 21ClF 6N 6O 4之計算質量630.1，m/z實測值631.3 [M+H] +。 化合物 43 ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 43-3（190 mg，90%純度，0.27 mmol）、甲胺鹽酸鹽（40 mg，0.59 mmol）、1-乙基-(3-(3-二甲基胺基)丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽（110 mg，0.57 mmol）和苯并三唑-1-醇（80 mg，0.59 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中之混合物中添加三甲胺（0.2 mL，1.42 mmol）。在0°C在氮氣氣氛下攪拌2小時後，將混合物用0.5 M鹽酸水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）洗滌三次並用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至75%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（97 mg，由LCMS得到的純度為100%，55.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.60 min，C 27H 24ClF 6N 7O 3之計算質量643.2，m/z實測值644.4 [M+H] +。 化合物 43A 和 43B ： (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (43A) ，以及 (3R,7S)-2-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(2-( 三氟甲基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (43B)
將(3R,7S)-2-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(2-(三氟甲基)嘧啶-5-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 43（97 mg，97.8%純度，0.21 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以25 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題 化合物 43A（20 mg，由LCMS得到的純度為99.6%，20.5%產率，100%立體純）和 化合物 43B（25 mg，由LCMS得到的純度為99.8%，25.7%產率，100%立體純）。 化合物 43A： LC-MS（ESI）：R T= 4.214 min，C 27H 24ClF 6N 7O 3之計算質量643.2，m/z實測值644.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex: EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 5.239 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.84 (s, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.59 - 7.55 (m, 2H), 5.99 - 5.50 (m, 3H), 4.94 - 4.88 (m, 1H), 4.78 - 4.30 (m, 2H), 4.12 - 4.09 (m, 1H), 3.95 - 3.90 (m, 1H), 3.15 - 2.99 (m, 1H), 2.76 - 2.68 (m, 4H), 1.71 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.33 (d, J =6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 62.85, - 70.25。 化合物 43B： LC-MS（ESI）：R T= 4.288 min，C 27H 24ClF 6N 7O 3之計算質量643.2，m/z實測值644.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex: EtOH = 30 : 70，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm；Rt = 8.959 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.92 (s, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 2H), 6.11 - 5.36 (m, 3H), 4.93 - 4.30 (m, 4H), 3.65 - 3.61 (m, 1H), 3.18 - 2.96 (m, 1H), 2.82 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.75 - 2.65 (m, 1H), 1.76 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.30 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 62.84, - 70.29。 化合物 44A 和 44B
Figure 02_image445
中間體 44-2 ： 1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙酮
將2-溴-4-(三氟甲基)噻唑 44-1（2.90 g，12.5 mmol）在四氫呋喃（40 mL）中之溶液冷卻至-60°C，然後在-60°C逐滴添加在四氫呋喃中之2.5 M正丁基鋰（6 mL，15.0 mmol）並將混合物在-60°C攪拌1小時。然後，在-60°C，逐滴添加N-甲氧基-N-甲基乙醯胺（1.90 g，18.4 mmol）。在-60°C攪拌2小時並在室溫攪拌16小時後，將反應混合物冷卻至0°C，並且藉由飽和氯化銨水溶液（100 mL）淬滅並用乙酸乙酯（100 mL）萃取三次。將合併的有機層藉由鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（2.00 g，由 1H NMR得到的純度為87%，71%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.07 - 8.05 (m, 1H), 2.75 (s, 3H)。 中間體 44-3 ： 1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙醇
將1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙酮 44-2（2.00 g，8.92 mmol）在甲醇（20 mL）中之溶液冷卻至0°C，然後添加硼氫化鈉（670 mg，17.7 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌2小時並藉由水（2 mL）淬滅並濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 15 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.70 g，由LCMS得到的純度為71%，69%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.05 min，C 6H 6F 3NOS之計算質量197.0，m/z實測值198.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.39 - 8.37 (m, 1H), 6.39 - 6.34 (m, 1H), 5.02 - 4.94 (m, 1H), 1.47 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 44-4 ： 2-(1- 溴乙基 )-4-( 三氟甲基 ) 噻唑
將1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙醇 44-3（1.20 g，71%純度，3.07 mmol）在二氯甲烷（20 mL）中之溶液冷卻至0°C。然後添加三苯膦（1.70 g，6.48 mmol）和四溴甲烷（2.10 g，6.33 mmol）。在0°C攪拌至室溫持續8小時後，將反應混合物濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（700 mg，由 1H NMR得到的純度為90%，56%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.79 - 7.78 (m, 1H), 5.44 - 5.38 (m, 1H), 2.16 (d, J =6.8 Hz, 3H)。 中間體 44-5 ： (3R,7S)-7-((( 三級丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 )-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在0°C，向2-(1-溴乙基)-4-(三氟甲基)噻唑 44-4（400 mg，1.38 mmol）和(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 Int A（950 mg，1.35 mmol）在2-甲基四氫呋喃（15 mL）和50% wt.氫氧化鈉水溶液（10 mL）中之混合物中添加苄基三乙基氯化銨（100 mg，0.42 mmol）。將反應混合物在0°C攪拌至室溫持續3小時。將反應混合物用乙酸乙酯（100 mL）稀釋並將有機層藉由飽和氯化銨水溶液（50 mL）和鹽水（50 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 12 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（1.20 g，由LCMS得到的純度為67%，70%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.895 min，C 40H 40Cl 2F 3N 5O 3SSi之計算質量825.2，m/z實測值825.9 [M+H] +。 中間體 44-6 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -9-(1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
將(3R,7S)-7-(((三級丁基二苯基甲矽烷基)氧基)甲基)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-9-(1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 44-5（1.20 g，67%純度，0.974 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中之溶液冷卻至0°C，然後逐滴添加在四氫呋喃中之1 M四丁基氟化銨（1.5 mL，1.50 mmol）。在0°C攪拌1小時後，將反應混合物在減壓下濃縮並藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 15 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（550 mg，由LCMS得到的純度為95%，91%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.44 min，C 24H 22Cl 2F 3N 5O 3S之計算質量587.1，m/z實測值587.9 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.81 - 7.76 (m, 1H), 7.53 - 7.50 (m, 2H), 7.25 - 7.24 (m, 1H), 6.36 - 5.38 (m, 2H), 4.87 - 4.32 (m, 3H), 4.08 - 4.00 (m, 1H), 3.98 - 3.72 (m, 3H), 3.66 - 3.59 (m, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 1H), 2.73 - 2.65 (m, 1H), 1.76 - 1.74 (m, 3H), 1.28 - 1.24 (m, 3H)。 中間體 44-7 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-(羥甲基)-3-甲基-9-(1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙基)-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 44-6（550 mg，95%純度，0.890 mmol）在乙腈（5 mL）中之懸浮液中添加飽和磷酸二氫鉀水溶液（5 mL）。將混合物冷卻至0°C，然後添加2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基（347 mg，2.22 mmol）、亞氯酸鈉（251 mg，2.22 mmol）和次氯酸鈉水溶液（1.3 mL，2.18 mmol）。在室溫攪拌16小時後，將反應混合物藉由1 M鹽酸水溶液調節pH至5-6並用二氯甲烷（50 mL）萃取三次。將合併的有機層藉由鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到殘餘物，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 5 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（480 mg，由LCMS得到的純度為92%，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.211 min，C 24H 20Cl 2F 3N 5O 4S之計算質量601.1，m/z實測值601.9 [M+H] +。 化合物 44 ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-(1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
向(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-10-側氧基-9-(1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 44-7（480 mg，92%純度，0.730 mmol）和甲胺鹽酸鹽（100 mg，1.48 mmol）在二甲基甲醯胺（8 mL）中之混合物中添加1-羥基苯并三唑（198 mg，1.47 mmol）和1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽（281 mg，1.47 mmol）。冷卻至0°C後，在30分鐘內，逐滴添加三乙胺（223 mg，2.20 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（1 mL）中之溶液。將反應混合物在0°C攪拌1小時。將反應混合物藉由飽和氯化銨水溶液（20 mL）淬滅並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層藉由水（50 mL）洗滌三次並用鹽水（50 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥，過濾並在減壓下濃縮，將其藉由矽膠柱（二氯甲烷 : 甲醇 = 12 : 1）純化，以得到呈黃色固體之標題化合物（350 mg，由LCMS得到的純度為98%，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.41 min，C 25H 23Cl 2F 3N 6O 3S之計算質量614.1，m/z實測值614.9 [M+H] +。 化合物 44A 和 44B ： (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((R*)-1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (44A) ，以及 (3R,7S)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -9-((S*)-1-(4-( 三氟甲基 ) 噻唑 -2- 基 ) 乙基 )-1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺 (44B)
將(3R,7S)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-N,3-二甲基-10-側氧基-9-(1-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基)乙基)-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺之外消旋混合物 44（350 mg，98%純度，0.560 mmol）藉由手性製備型HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，以得到呈白色固體之標題化合物 44A（87.4 mg，由LCMS得到的純度為96.2%，24.5%產率，100%立體純）和呈白色固體之 化合物 44B（116 mg，由LCMS得到的純度為98.9%，33.5%產率，99.9%立體純）。 化合物 44A ：LC-MS（ESI）：R T= 3.844 min，C 25H 23Cl 2F 3N 6O 3S之計算質量614.1，m/z實測值615.0 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.112 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 (s, 1H), 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.28 - 7.26 (m, 1H), 6.13 - 5.41 (m, 3H), 4.93 - 4.32 (m, 3H), 4.21 - 4.15 (m, 1H), 4.00 - 3.97 (m, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 1H), 2.78 - 2.71 (m, 4H), 1.77 - 1.75 (m, 3H), 1.32 - 1.30 (m, 3H)。 化合物 44B ：LC-MS（ESI）：R T= 3.916 min，C 25H 23Cl 2F 3N 6O 3S之計算質量614.1，m/z實測值615.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 30 : 70，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.405 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.52 - 7.50 (m, 2H), 7.25 - 7.23 (m, 1H), 6.23 - 5.35 (m, 3H), 4.95 - 4.38 (m, 4H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 3.15 - 2.94 (m, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 4H), 1.77 - 1.75 (m, 3H), 1.30 - 1.28 (m, 3H)。 化合物 45
Figure 02_image447
中間體 45-1 ： 三級丁基 (R)-3-(1H- 咪唑 -1- 羰基 )-6- 甲基 -2,4,6,7- 四氫 -5H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5- 甲酸酯
在0°C，向(R)-5-(三級丁氧基羰基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸 Int B-8（20 g，100%純度，71.1 mmol）在乙腈（250 mL）中之溶液中添加二(1H-咪唑-1-基)甲酮（12 g，74.0 mmol）。在0°C攪拌1小時後，向混合物中添加水（100 mL）和乙酸乙酯（200 mL）。將有機層藉由鹽水（200 mL）洗滌，經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈淺白色固體之標題化合物（21 g，100%純度，89.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 16H 21N 5O 3之計算質量331.4，m/z實測值332.1 [M+H] +。 中間體 45-2 ： 甲基 (R)-3-(((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 )-2- 羥基丙酸酯
在30°C在密封管中，向(S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙-1-胺 Int B-6（4.2 g，95%純度，21.3 mmol）在甲醇（40 mL）中之溶液中添加甲基 (R)-環氧乙烷-2-甲酸酯（2.28 g，23.3 mmol）。在60°C攪拌24小時後，LCMS顯示剩餘43%的起始材料。然後，在30°C，向混合物中添加甲基 (R)-環氧乙烷-2-甲酸酯（1.0 g，9.8 mmol）。在60°C攪拌19小時後，LCMS顯示剩餘34%的起始材料。將混合物在減壓下濃縮並向其中添加水（10 mL）。將水層用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（1.5 g，由LCMS得到的純度為50%，12%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.385 min，C 13H 17F 2NO 4之計算質量289.1，m/z實測值290.2 [M+H] +。 中間體 45-3 ： (R)-3-(((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 )-2- 羥基 -N- 甲基丙醯胺
在30°C，向甲基 (R)-3-(((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)-2-羥基丙酸酯 45-2（1.5 g，50%純度，2.59 mmol）中添加在四氫呋喃中之2 M甲胺（3 mL，6 mmol）。在70°C攪拌48小時後，將混合物在減壓下濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，以得到粗品，將其藉由柱凝膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 = 19 : 1）純化，以得到呈黃色油狀物之標題化合物（540 mg，由LCMS得到的純度為80%，58%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25 min，C 13H 18F 2N 2O 3之計算質量288.1，m/z實測值289.1 [M+H] +。 中間體 45-4 ： 三級丁基 (R)-3-(((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )((R)-2- 羥基 -3-( 甲基胺基 )-3- 側氧基丙基 ) 胺基甲醯基 )-6- 甲基 -2,4,6,7- 四氫 -5H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5- 甲酸酯
在0°C在氮氣氣氛下，向(R)-3-(((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)-2-羥基-N-甲基丙醯胺 45-3（440 mg，80%純度，1.22 mmol）在乙腈（9 mL）中之溶液中添加三級丁基 (R)-3-(1H-咪唑-1-羰基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯 45-1（485 mg，1.46 mmol）和碳酸銫（796 mg，2.44 mmol）。在45°C攪拌4小時後，將混合物濃縮，藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 =19 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（430 mg，由LCMS得到的純度為93%，59%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.15 min，C 26H 35F 2N 5O 6之計算質量551.3，m/z實測值552.2 [M+H] +。 中間體 45-5 ： 三級丁基 (3R,7S)-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -7-( 甲基胺基甲醯基 )-10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C在氮氣氣氛下，向三級丁基 (R)-3-(((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)((R)-2-羥基-3-(甲基胺基)-3-側氧基丙基)胺基甲醯基)-6-甲基-2,4,6,7-四氫-5H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸酯 45-4（430 mg，93%純度，0.73 mmol）在四氫呋喃（16 mL）中之溶液中添加三丁基膦（0.26 mL，1.04 mmol）和二異丙基 (E)-二氮烯-1,2-二甲酸酯（0.22 mL，1.12 mmol）。在室溫攪拌2小時後，將混合物濃縮，藉由矽膠柱層析法（二氯甲烷 : 甲醇 =20 : 1）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（340 mg，由LCMS得到的純度為98%，86%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.203 min，C 26H 33F 2N 5O 5之計算質量533.2，m/z實測值534.2 [M+H] +。 中間體 45-6 ： (3R,7S)-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4 ， 7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向三級丁基 (3R,7S)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-7-(甲基胺基甲醯基)-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 45-5（290 mg，98%純度，0.53 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中之溶液中添加在1,4-二㗁𠮿中之4 M鹽酸（2.5 mL，10 mmol）。在室溫攪拌1小時後，將反應混合物用飽和碳酸氫鈉洗滌並用二氯甲烷（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4 （固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體之標題化合物（200 mg，由 1H NMR得到的純度為95%，82%產率），將其藉由C18柱（乙腈 : 純水 = 5%至66%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（42.5 mg，由LCMS得到的純度為98%，22%產率，100%立體純）。LC-MS（ESI）：R T= 2.427 min，C 21H 25F 2N 5O 3之計算質量433.2，m/z實測值434.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN = 100%，以1 mL/min；柱溫：30°C；波長：254 nm，R T= 5.632 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 7.93 - 7.89 (m, 1H), 7.41 - 7.04 (m, 5H), 5.77 (q, J = J =6.8 Hz, 1H), 4.96 - 4.94 (m, 1H), 4.10 - 4.06 (m, 1H), 3.79 - 3.75 (m, 1H), 3.66 - 3.62 (m, 1H), 3.51- 3.46 (m, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 1H), 2.62 - 2.58 (m, 4H), 2.22 - 2.16 (m, 2H), 1.40 (d, J =7.2 Hz, 3H), 1.15 (d, J =6.0 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6 ) δ - 82.04。 化合物 45 ： (3R,7S)-2-(5- 氯 -6-( 三氟甲基 ) 吡啶甲醯基 )-9-((S)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4',3':3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在0°C，向(3R,7S)-9-((S)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4',3':3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 45-6（9 mg，99.3%純度，0.02 mmol）、5-氯-6-(三氟甲基)吡啶甲酸（6.5 mg，0.03 mmol）和HATU（12 mg，0.03 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（0.5 mL）中之混合物中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（0.01 mL，0.06 mmol）。在室溫攪拌1小時後，向反應混合物中添加水（1 mL）並用乙酸乙酯（2 mL）萃取三次。將有機層用鹽水（1 mL）洗滌，並且將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至95%）純化，以得到呈白色固體之標題化合物（4 mg，由LCMS得到的純度為97.7%，29.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 3.722 min，C 28H 26ClF 5N 6O 4之計算質量640.2，m/z實測值641.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.02 - 7.89 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.13 - 7.09 (m, 2H), 6.50 (t, J =73.6 Hz, 1H), 6.09 - 5.28 (m, 3H), 4.86 - 4.63 (m, 2H), 4.45 - 4.40 (m, 1H), 4.11 - 4.01 (m, 1H), 3.40 - 3.11 (m, 2H), 2.80 (d, J =4.8 Hz, 3H), 2.75 - 2.67 (m, 1H), 1.60 - 1.57 (m, 3H), 1.37 - 1.31 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 66.04, - 66.17, - 80.99, - 81.04。 生物學實例 具有式 (I) 之化合物之抗 HBV 活性 程序使用HepG2.117細胞系測量抗HBV活性，該細胞系係一種穩定的
誘導型HBV產生細胞系，其在去氧羥四環素缺乏下複製HBV（Tet-off系統）。HepG2細胞系可從ATCCR之編號HB-8065獲得。HepG2細胞系之轉染可為如Sun和Nassal在2006, Journal of Hepatology [肝臟病學雜誌] 45 (2006) 636-645 「Stable HepG2- and Huh7-based human hepatoma cell lines for efficient regulated expression of infectious hepatitis B virus [穩定的基於HepG2和Huh7的人肝癌細胞系用於有效調節感染性B型肝炎病毒之表現]」中所描述的。
對於抗病毒測定，誘導HBV複製，隨後用一系列稀釋的化合物在96孔板中進行處理。處理3天之後，藉由使用即時PCR和HBV特異引物集和探針進行胞內HBV DNA之定量來確定抗病毒活性。
正向引物 GTGTCTGCGGCGTTTTATCA SEQ ID. No: 1
反向引物 GACAAACGGGCAACATACCTT SEQ ID. No: 2
Taqman探針 CCTCTKCATCCTGCTGCTATGCCTCATC_FAM-BHQ1 SEQ ID. No: 3
該等化合物之細胞毒性係使用HepG2或HepG2.117細胞進行測試的，將該等細胞在化合物存在下孵育3或4天。使用珀金埃爾默公司（PERKIN ELMER）之ATPlite發光測定系統評估細胞之活力。 具有式 (I) 之化合物之人肝微粒體穩定性 t1/2 （ min ）程序
將混合的人肝微粒體（0.5 mg/mL）與1 µM測試化合物或對照化合物（維拉帕米、殺鼠靈和西立伐他汀）在含有1 mM MgCl 2之0.1 M磷酸鹽緩衝液（pH 7.4）中在37°C預孵育。DMSO和乙腈之最終濃度分別為0.05%和0.2%。每種化合物之所有孵育均單獨進行。添加NADPH以活化反應，其中最終濃度為1 mM，最終孵育體積為400 µL。
在6個時間點（0、5、10、20、40和60 min），藉由將50 μL的孵育混合物移入含有1 : 3（v : v）乙腈之板中來停止反應。將板在4°C以3000 rpm離心10 min以使蛋白質沈澱。在蛋白質沈澱之後，將樣本上清液合併在包含多達8種化合物之盒中。添加內標（1 : 1的上清液與內標溶液）並使用標準LC-MS條件分析樣本。
從ln峰面積比（化合物峰面積/內標峰面積）對時間的曲線圖，確定出跑道之梯度。隨後，使用以下方程計算半衰期： 消除速率常數（k）= (-梯度) 半衰期（t½）（min）= 0.693/k 結果CC50值：孵育3天，除非標有*（* = 孵育4天） [表4]
化合物編號 EC50（µM，平均值） CC50（µM，平均值） HLM代謝t 1/2（min）
1B 0.38 ＞ 50.0 ＞ 180
2A 0.042 ＞ 50.0 ＞ 180
2B 0.017 ＞ 50.0 ＞ 180
3B 0.051 ＞ 50.0 ＞ 180
4A 2.443 ＞ 50.0 ＞ 180
4B 0.16 ＞ 50.0 ＞ 180
5B 0.019 ＞ 50.0 86.2
6B 0.092 ＞ 50.0 ＞ 180
7B 0.049 ＞ 50.0 ＞ 180
8B 0.071 ＞ 50.0 ＞ 180
9B 0.061 ＞ 50.0 ＞ 180
10B 0.019 46.82 ＞ 180
11A 0.12 ＞ 50.0 ＞ 180
11B 0.052 23.42 ＞ 180
12A 0.059 24.43 ＞ 180
12B 0.027 27.38 ＞ 180
13A 0.34 ＞ 50.0 ＞ 180
13B 0.033 46.82 ＞ 180
14B 0.031 ＞ 50.0 ＞ 180
15A 0.086 ＞ 50.0 ＞ 180
15B 0.029 29.81 ＞ 180
16A 0.021 40.40 ＞ 180
16B 0.020 16.92 ＞ 180
17 0.036 39.06 ＞ 180
18A 0.597 ＞ 50.0 ＞ 180
18B 0.037 ＞ 50.0 ＞ 180
19A 0.120 ＞ 50.0 ＞ 180
19B 0.028 ＞ 50.0 ＞ 180
20A 0.089 ＞ 50.0 ＞ 180
20B 0.022 ＞ 50.0 ＞ 180
21 0.086 ＞ 50.0 ＞ 180
22A 0.270 ＞ 50.0 ＞ 180
22B 0.050 ＞ 50.0 ＞ 180
23A 0.060 ＞ 50.0 ＞ 180
23B 0.023 ＞ 50.0 ＞ 180
24A 0.054 20.58 ＞ 180
24B 0.013 25.53 ＞ 180
25 0.010 ＞ 50.0 77.9
26A 0.190 29.74 ＞ 180
26B 0.090 ＞ 50.0 67.2
27A 0.031 ＞ 50.0 ＞ 180
27B 0.046 ＞ 50.0 ＞ 180
28 0.019 29.53 ＞ 180
29A 0.820 ＞ 50.0 ＞ 180
29B 0.082 ＞ 50.0 ＞ 180
30A 0.016 ＞ 50.0 ＞ 180
30B 0.017 17.24 90.9
31A 0.066 ＞ 50.0 ＞ 180
31B 0.018 ＞ 50.0 ＞ 180
32A 0.055 ＞ 50.0 127
32B 0.011 48.69 ＞ 180
33A 0.062 ＞ 50.0 47.9
33B 0.055 ＞ 50.0 ＞ 180
34A 0.380 ＞ 50.0 110
34B 0.049 ＞ 50.0 ＞ 180
35A 0.390 ＞ 50.0 69.5
35B 0.082 ＞ 50.0 130
36A 0.086 ＞ 50.0 ＞ 180
36B 0.050 ＞ 50.0 ＞ 180
37A 0.089 ＞ 50.0 ＞ 180
37B 0.067 ＞ 50.0 ＞ 180
38A 0.068 ＞ 50.0 ＞ 180
38B 0.040 ＞ 50.0 144
39A 1.676 ＞ 50.0 ＞ 180
39B 0.120 ＞ 50.0 ＞ 180
40A 0.280 ＞ 50.0 ＞ 180
40B 0.097 ＞ 50.0 ＞ 180
41A 2.212 ＞ 50.0 ＞ 180
41B 0.100 ＞ 50.0 ＞ 180
42A 0.280 ＞ 50.0 ＞ 180
42B 0.020 ＞ 50.0 ＞ 180
43A 0.610 ＞ 50.0 ＞ 180
43B 0.057 ＞ 50.0 ＞ 180
44A 0.120 ＞ 50.0 ＞ 180
44B 0.091 ＞ 50.0 ＞ 180
45 0.067 49.8 ＞ 180
Ref 1 0.069 ＞ 50 15.4
Ref 2 0.026 19.84 7.05
Ref 3 0.072 ＞ 50 6.6
Ref 4 0.076 ＞ 50 13.5
Ref 5 0.022 ＞ 50 7.9
Figure 02_image449
Ref 1、Ref 2、Ref 3、Ref 4和Ref 5可以根據WO 2020/243135之程序製備。
根據實驗結果，本發明化合物顯示出改善的人肝微粒體穩定性以及適度的抗HBV活性。與對比化合物（例如，參考化合物1和2）相比，本發明化合物之半衰期（t 1/2）顯著增加，這表明人體代謝穩定性得到顯著改善。
所揭露的主題不被本文所述之具體實施方式和實例限於一定的範圍。實際上，從前述說明和附圖，除了所述之那些以外的本揭露之不同修改對於熟悉該項技術者而言將是顯而易見的。此類修改旨在落入所附申請專利範圍之範圍內。本文引用的所有參考文獻（例如，公開物或專利或專利申請）藉由引用以其全文併入本文，並且出於所有目的其程度正如將每個單獨的參考文獻（例如公開物或專利或專利申請）具體地且單獨地指明出於所有目的藉由引用以其全文併入。其他實施方式在以下申請專利範圍內。
無
無
無
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 111120400-A0101-11-0002-1

Claims (26)

  1. 一種具有式 (I) 之化合物，
    Figure 03_image001
    (I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中 R 1選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3組成之群組； R 2選自由H、CHF 2、CF 3、C 1-6烷基、C 1-6烷基OC 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； Q表示選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組之環； n表示0、1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自由以下組成之群組之取代基：CN、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、鹵代、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S，C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、C 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、4-8員雜環基、N(R S) 2、S(O)R S和S(O) 2R S中之每一個視需要地被1、2、3、4或5個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、羥基、C 1-6烷基和側氧基組成之群組；R S各自獨立地選自由H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 3-6環烷基組成之群組； R x和R y各自獨立地選自由氫、C 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； 其中排除以下化合物：
    Figure 03_image007
    Figure 03_image453
    ， 或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
  2. 如請求項1所述之化合物，其中R 1係選自由苯基、5員雜芳基和6員雜芳基組成之群組之環，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組； 較佳的是，R 1係選自由苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基組成之群組之環，其各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組。
  3. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中R 1係苯基或吡啶基，其被1、2或3個取代基取代，所述取代基中之每一個獨立地選自由鹵代、C 1-6烷基、CF 3、CN和CHF 2組成之群組。
  4. 如請求項1所述之化合物，其中式 (I) 中之結構單元
    Figure 03_image011
    滿足式 (Ia)
    Figure 03_image013
    (Ia)， 其中R 1a、R 1b和R 1c各自獨立地選自由氫、鹵代、C 1-6烷基、C 3-6環烷基、CF 3、CHF 2、OCHF 2、CN和OCF 3組成之群組，其中R 1a、R 1b和R 1c中之至少一個不是氫。
  5. 如請求項4所述之化合物，其中R 1a和R 1b獨立地選自由鹵代、CN、CHF 2和CF 3組成之群組，並且其中R 1c係氫。
  6. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中R 2選自由CHF 2、CF 3、C 1-6烷基、C 1-6烷基OC 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組； 式 (I) 之結構具有式 (I-1) 或式 (I-2)
    Figure 03_image457
    (I-1)
    Figure 03_image459
    (I-2)。
  7. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中R 2係甲基或乙基。
  8. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中Q係選自由苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基、吡唑基、咪唑基和噻唑基組成之群組之環。
  9. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中式 (I) 中之結構單元
    Figure 03_image019
    滿足式 (Ib)
    Figure 03_image021
    (Ib)， 其中 X 1、X 2、X 3、X 4和X 5均是CH；或者 X 1、X 2、X 3、X 4和X 5中之一或兩個係N，並且其餘係CH。
  10. 如請求項9所述之化合物，其中式 (I) 中之結構單元
    Figure 03_image019
    滿足式 (Ic)
    Figure 03_image025
    (Ic)， 其中 X 1、X 2、X 4和X 5均是CH； X 2係N，並且X 1、X 4和X 5係CH；或者 X 1係N，並且X 2、X 4和X 5係CH。
  11. 如請求項9所述之化合物，其中 X 1和X 2均是N，並且X 4和X 5係CH； X 2和X 4均是N，並且X 1和X 5係CH； X 1和X 4均是N，並且X 2和X 5係CH；或者 X 1和X 5均是N，並且X 2和X 4係CH。
  12. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中式 (I) 中之結構單元
    Figure 03_image019
    滿足式 (Ib’)
    Figure 03_image035
    (Ib’) 其中Y 1、Y 2、Y 3和Y 4中之一或兩個係S、N或NH，並且其餘係C。
  13. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中鹵代係F、Cl或Br。
  14. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中n係1或2。
  15. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中 R x和R y中之一個係氫，並且另一個係C 1-6烷基或C 3-6環烷基；或者 R x和R y均是H或C 1-6烷基；或者 R x和R y各自獨立地選自由C 1-6烷基和C 3-6環烷基組成之群組。
  16. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中一個R 3獨立地選自由鹵代、CH 3、
    Figure 03_image055
    、C(CH 3) 2OH、CH 2CF 3、CF 3、OCHF 2、SO 2CH 3、
    Figure 03_image057
    、OCH 3、CN、
    Figure 03_image059
    、
    Figure 03_image061
    、環丙基、NHCH 2CF 3、
    Figure 03_image063
    、
    Figure 03_image065
    、CHF 2和
    Figure 03_image067
    組成之群組。
  17. 一種化合物，其選自由以下化合物、 或其立體異構形式或互變異構形式組成之群組：
    Figure 03_image069
    Figure 03_image071
    Figure 03_image073
    Figure 03_image075
    Figure 03_image077
    Figure 03_image079
    Figure 03_image081
    Figure 03_image083
    Figure 03_image085
    Figure 03_image087
    Figure 03_image089
    Figure 03_image091
    Figure 03_image093
    Figure 03_image095
    Figure 03_image097
    Figure 03_image099
    Figure 03_image490
    Figure 03_image103
    Figure 03_image105
    Figure 03_image107
    Figure 03_image109
    Figure 03_image111
    Figure 03_image113
    Figure 03_image115
    Figure 03_image117
    Figure 03_image119
    Figure 03_image501
    Figure 03_image503
    Figure 03_image125
    Figure 03_image127
    Figure 03_image129
    Figure 03_image131
    Figure 03_image133
    Figure 03_image135
    Figure 03_image137
    Figure 03_image139
    Figure 03_image141
    Figure 03_image143
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    Figure 03_image147
    Figure 03_image149
    Figure 03_image151
    Figure 03_image153
    Figure 03_image155
    Figure 03_image157
    Figure 03_image159
    或其藥學上可接受的鹽、N-氧化物或溶劑合物。
  18. 一種化合物，其選自由以下化合物、 或其立體異構形式或互變異構形式組成之群組：
    Figure 03_image161
    Figure 03_image163
    Figure 03_image165
    Figure 03_image167
    Figure 03_image169
    Figure 03_image171
    Figure 03_image173
    Figure 03_image175
    Figure 03_image177
    Figure 03_image179
    Figure 03_image181
    Figure 03_image183
    Figure 03_image185
    Figure 03_image187
    Figure 03_image189
    Figure 03_image191
    Figure 03_image193
    Figure 03_image195
    Figure 03_image197
    Figure 03_image199
    Figure 03_image201
    Figure 03_image203
    Figure 03_image205
    Figure 03_image207
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    Figure 03_image211
    Figure 03_image213
    Figure 03_image215
    Figure 03_image217
    Figure 03_image219
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    Figure 03_image223
    Figure 03_image225
    Figure 03_image227
    Figure 03_image229
    Figure 03_image231
    Figure 03_image233
    Figure 03_image235
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    Figure 03_image241
    Figure 03_image243
    Figure 03_image245
    Figure 03_image247
    Figure 03_image249
    Figure 03_image251
    Figure 03_image253
    Figure 03_image570
    Figure 03_image572
    Figure 03_image259
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    Figure 03_image267
    Figure 03_image269
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    Figure 03_image277
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    Figure 03_image283
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    Figure 03_image293
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    Figure 03_image299
    Figure 03_image301
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    Figure 03_image307
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    Figure 03_image313
    Figure 03_image315
    Figure 03_image317
    Figure 03_image319
    Figure 03_image321
    Figure 03_image323
    或其藥學上可接受的鹽、N-氧化物或溶劑合物。
  19. 一種藥物組成物，該藥物組成物包含如請求項1至18中任一項所述之化合物並進一步包含至少一種藥學上可接受的賦形劑。
  20. 如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物，用作藥物。
  21. 如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物，用於預防或治療有需要的受試者之HBV感染或HBV誘發的疾病。
  22. 如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物，用於預防或治療慢性B型肝炎。
  23. 一種治療有需要的個體之HBV感染或HBV誘發的疾病之方法，該方法包括向該個體投與治療有效量的如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物。
  24. 一種產品，該產品包含第一化合物和第二化合物作為組合製劑用於在有需要的受試者之HBV感染或HBV誘發的疾病之預防或治療中同時、分開或順序使用，其中所述第一化合物不同於所述第二化合物，其中所述第一化合物係如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物，並且其中所述第二化合物係另一種HBV抑制劑。
  25. 如請求項24所述之產品，其中所述第二化合物係選自由以下組成之群組之另一種HBV抑制劑：選自HBV複方藥物之治療劑、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制劑、免疫調節劑、toll樣受體（TLR）調節劑、干擾素α受體配體、玻醣醛酸酶抑制劑、B型肝炎表面抗原（HBsAg）抑制劑、細胞毒性T淋巴球相關蛋白4（CTLA-4）抑制劑、親環蛋白抑制劑、HBV病毒進入抑制劑、反義寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干擾RNA（siRNA）和ddRNAi核酸內切酶調節劑、核糖核苷酸還原酶抑制劑、HBV E抗原抑制劑、共價閉合環狀DNA（cccDNA）抑制劑、類法尼醇X受體促效劑、HBV抗體、CCR2趨化介素拮抗劑、胸腺素促效劑、細胞介素、核蛋白調節劑、維生素A酸誘導基因1刺激物、NOD2刺激物、磷脂酸肌醇3-激酶（PI3K）抑制劑、吲哚胺-2,3-二氧酶（IDO）途徑抑制劑、PD-1抑制劑、PD-L1抑制劑、重組胸腺素α-1、布魯頓酪胺酸激酶（BTK）抑制劑、KDM抑制劑、HBV複製抑制劑、精胺酸酶抑制劑以及其他HBV藥物。
  26. 如請求項1至18中任一項所述之化合物或如請求項19所述之藥物組成物，用於預防或治療受試者之HBV感染或HBV誘發的疾病，其中該化合物或藥物組成物與另一種HBV抑制劑組合投與至該受試者。
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