TW202237617A - 稠合雜環衍生物 - Google Patents

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劉治國
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堤姆 喬克斯
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史考特 庫杜克
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Abstract

本申請描述了稠合雜環衍生物化合物、包含該等化合物的藥物組成物、用於製備該等化合物之化學方法、及其在治療與HBV感染相關的疾病中之用途。

Description

稠合雜環衍生物
本申請關於稠合雜環衍生物化合物、包含該等化合物的藥物組成物、用於製備該等化合物之化學方法、及其在治療與HBV感染相關的疾病中之用途。
慢性B型肝炎病毒（HBV）感染係重大全球健康問題，影響超過5%的世界人口（全球超過3.5億人，美國有125萬人）。
儘管有預防性HBV疫苗可供使用，但慢性HBV感染的負擔仍然是重大的未得到滿足之全球醫學問題，原因係發展中國家大多數地區之治療選擇並不理想，而且新感染率持續不變。目前的治療不能治癒，並僅限於兩類藥劑（干擾素α和核苷類似物/病毒聚合酶抑制劑）；抗藥性、療效低和耐受性問題限制了其影響。HBV的治癒率低至少部分歸因於用單一抗病毒劑難以完全抑制病毒產生之事實。然而，持續抑制HBV DNA減緩了肝臟疾病的進展並有助於預防肝細胞癌。目前HBV感染患者的治療目標係將血清HBV DNA降至低水平或不可檢測水平，並最終減少或預防肝硬化和肝細胞癌之發展。
HBV衣殼蛋白在病毒的生命週期中起著重要作用。HBV衣殼/核心蛋白形成亞穩病毒顆粒或蛋白質殼，其在細胞間傳代期間保護病毒基因組，並還在病毒複製過程中發揮核心作用，包括基因組衣殼化、基因組複製和病毒體形態發生和外出。衣殼結構還對環境提示作出反應，以便在病毒進入後允許不包被。一致地，已經發現衣殼組裝和拆卸的適當時機、適當的衣殼穩定性和核心蛋白的功能對於病毒感染性係至關重要的。
HBV衣殼蛋白的關鍵功能對病毒衣殼蛋白序列施加了嚴格的進化約束，導致觀察到低序列可變性和高保守性。一致地，HBV衣殼中破壞其組裝的突變係致命的，並且擾動衣殼穩定性的突變會嚴重減弱病毒的複製。對多功能HBV核心/衣殼蛋白的高功能約束與高序列保守性一致，因為許多突變對功能有害。實際上，核心/衣殼蛋白序列在HBV基因型中的一致性＞90%，並且僅顯示少量的多態性殘基。因此，很難選擇對HBV核心/衣殼蛋白結合化合物的抗藥性，而不會對病毒複製適應性產生重大影響。
報導描述了結合病毒衣殼和抑制HIV、鼻病毒和HBV複製的化合物，為病毒衣殼蛋白作為抗病毒藥物靶點的概念提供了強有力之藥理學證據。
本領域需要能夠增加對病毒產生的抑制並能夠治療、改善和/或預防HBV感染的治療劑。將此類治療劑作為單一療法或與其他HBV治療或輔助治療組合施用至HBV感染患者將導致顯著降低的病毒載量、改善的預後、減少的疾病進展和增強的血清轉化率。
鑒於HBV之臨床重要性，鑒定能夠增加對病毒產生的抑制並能夠治療、改善和/或預防HBV感染的化合物代表了開發新的治療劑的一個有吸引力之途徑。本文提供了此類化合物。
本揭露涉及本文所附獨立請求項和從屬請求項分別限定的一般和較佳的實施方式，將其藉由引用併入本文。本發明涉及能夠調節衣殼組裝的化合物。相對於先前技術的化合物，本發明之化合物可以提供有利的特性平衡，例如，它們可以表現出不同的特徵，表現出提高的溶解度等。因此，特別地，本揭露涉及具有式 (I) 之化合物：
Figure 02_image001
(I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中， R 1選自由以下組成之群組：苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基，該等基團各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自由以下組成之群組：鹵基、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3； R 2為氫或選自以下群組的取代基，該群組由以下組成：CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基和C 3-6環烷基； Q表示選自以下群組的環，該群組由以下組成：苯基、五員芳族雜環和六員芳族雜環； n表示1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自以下群組的取代基，該群組由以下組成：CF 3、CHF 2、CH 2F、C 1-6烷基、OC 1-6烷基、OCF 3、OCF 2H和C 3-6環烷基； 在n表示2或3的情況下，相鄰環原子上的兩個R 3與所述環原子一起視需要形成5員環或6員環，所述環視需要包含各自獨立地選自N、O和S的1、2或3個雜原子，所述環視需要帶有一個或多個氟或側氧基取代基； W係CHR 4並且X係CHR 5，其中R 4和R 5各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、CONR 6R 7、苯基、5員雜環基、6員雜環基、5員雜芳基、6員雜芳基、C 3-6環烷基、C 1-4烷基、被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 8R 9NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基；其中R 4和R 5不皆為氫； R 6和R 7各自獨立地選自由以下組成之群組：氫；C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基；或者R 6和R 7與R 6和R 7所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 8和R 9各自獨立地選自由以下組成之群組：氫，C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基，或者R 8和R 9與R 8和R 9所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或者W和X合起來係CR 10=N或CR 11=CR 12； R 10、R 11和R 12各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、鹵基、CONR 13R 14、苯基、5員雜環基、6員雜環基、5員雜芳基、6員雜芳基、C 3-6環烷基、C 1-4烷基和視需要被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 15R 16、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基； R 13和R 14各自獨立地選自氫、C 1-4烷基、C 3-6環烷基，或者R 13和R 14與R 13和R 14所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 15和R 16各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、C 1-4烷基和C 3-6環烷基，或者R 15和R 16與R 15和R 16所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
進一步的實施方式包括具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑化物，以及具有式 (I) 之化合物的立體異構形式和互變異構形式，以及其藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物係選自以下具體實施方式中所述或者示例的那些種類的化合物。
本揭露還關於包含一種或多種具有式 (I) 之化合物以及具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑化物的藥物組成物。藥物組成物可以進一步包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑或一種或多種其他的藥劑或療法。
本揭露還關於具有式 (I) 之化合物之使用方法或用途。在實施方式中，具有式 (I) 之化合物用於治療或改善B型肝炎病毒（HBV）感染、增加對HBV產生的抑制、干擾HBV衣殼組裝或其他HBV病毒複製步驟或HBV產物。該方法包括向需要這樣之方法的受試者施用有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物以及具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽和溶劑化物。治療方法的另外的實施方式在具體實施方式中進行了闡述。
根據這樣的揭露之以下具體實施方式和藉由其實踐，本揭露之主題的另外的實施方式、特徵和優點將是顯而易見的。為了簡短起見，在本說明書中引用的出版物（包括專利）藉由引用併入本文。
在一個實施方式中，本文提供了具有式 (I) 之化合物，
Figure 02_image003
(I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中， R 1選自由以下組成之群組：苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基，該等基團各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自由以下組成之群組：鹵基、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3； R 2為氫或選自以下群組的取代基，該群組由以下組成：CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基和C 3-6環烷基； Q表示選自以下群組的環，該群組由以下組成：苯基、五員芳族雜環和六員芳族雜環； n表示1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自以下群組的取代基，該群組由以下組成：CF 3、CHF 2、CH 2F、C 1-6烷基、OC 1-6烷基、OCF 3、OCHF 2和C 3-6環烷基； 在n表示2或3的情況下，相鄰環原子上的兩個R 3與所述環原子一起視需要形成5員環或6員環，所述環視需要包含各自獨立地選自N、O和S的1、2或3個雜原子，所述環視需要帶有一個或多個氟或側氧基取代基； W係CHR 4並且X係CHR 5，其中R 4和R 5各自獨立地選自由以下組成之群組：氫；CONR 6R 7；苯基；5員雜環基；6員雜環基；5員雜芳基；6員雜芳基；C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 8R 9、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基；其中R 4和R 5不皆為氫； R 6和R 7各自獨立地選自由以下組成之群組：氫；C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基，或者R 6和R 7與R 6和R 7所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 8和R 9各自獨立地選自由以下組成之群組：氫；C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基，或者R 8和R 9與R 8和R 9所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或者W和X合起來係CR 10=N或CR 11=CR 12；其中 R 10、R 11和R 12各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、鹵基、CONR 13R 14、苯基、5員雜環基、6員雜環基、5員雜芳基、6員雜芳基、C 3-6環烷基、C 1-4烷基和被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 15R 16、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基； R 13和R 14各自獨立地選自氫、C 1-4烷基、C 3-6環烷基，或者R 13和R 14與R 13和R 14所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 15和R 16各自獨立地選自氫、C 1-4烷基、C 3-6環烷基，或者R 15和R 16與R 15和R 16所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
在另外的實施方式中，本揭露提供了具有式 (IA) 之化合物，及其立體異構物或互變異構物，及其藥學上可接受的鹽，如本文所述：
Figure 02_image005
(IA)， 其中R 1a、R 1b和R 1c各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、鹵基、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3，其中R 1a、R 1b和R 1c中的至少一個不為氫，並且其中R 2、W、X、Q、R 3和n如式 (I) 所定義。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (IB) 之化合物，及其立體異構物或互變異構物，及其藥學上可接受的鹽，如本文所述：
Figure 02_image007
(IB)， 其中R 1a、R 1b和R 1c、W、X、R 2、R 3和n如式 (IA) 所定義。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (IC) 之化合物，及其立體異構物或互變異構物，及其藥學上可接受的鹽，如本文所述：
Figure 02_image009
(IC)， 其中R 1、W、X、R 2、R 3和n如式 (I) 所定義。
在又一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (ID) 之化合物，及其立體異構物或互變異構物，及其藥學上可接受的鹽，如本文所述：
Figure 02_image011
(ID)， 其中R 1、W、X、R 2和R 3如式 (I) 所定義。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (IE) 之化合物，及其立體異構物或互變異構物，及其藥學上可接受的鹽，如本文所述：
Figure 02_image013
(IE)， 其中R 1a、R 1b、R 1c、W、X、R 2和R 3如式 (IA) 所定義。
在另一個實施方式中，本揭露提供如上定義的具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID) 或 (IE) 中任一者的化合物，其中R 4和R 5之一係H，且另一個選自由以下組成之群組：CONHC 1-4烷基、C 1-4烷基、被OH取代的C 1-4烷基和被NHCOC 1-4烷基取代的C 1-4烷基。
在另一個實施方式中，本揭露提供如上定義的具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID) 或 (IE) 中任一者的化合物，其中W和X合起來係CH=N或CH=CH。
在另一個實施方式中，本揭露提供如上定義的具有式 (IA)、(IB) 或 (IE) 中任一者的化合物，其中R 1a係鹵基如氯，R 1b選自由以下組成之群組：鹵基如氯、和氰基，並且其中R 1c係氫。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID) 或 (IE) 中任一者的化合物，其中一個R 3係OCHF 2。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (I)、(IA)、(IB) 或 (IC) 中任一者的化合物，其中n係1。
在另一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (I)、(IA)、(IB) 或 (IC) 中任一者的化合物，其中n係1並且其中R 3係OCHF 2。
在一個實施方式中，本揭露提供了具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID) 或 (IE) 中任一者的化合物，其中R 2係H或CH 3。
本揭露之另一個實施方式係選自以下群組的化合物，該群組由以下組成：下表1中描述的化合物、其立體異構物或互變異構物、或其藥學上可接受的鹽。 [表1]
Figure 02_image015
Figure 02_image017
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Figure 02_image028
Figure 02_image029
  
藥物組成物
本文還揭露了藥物組成物，其包含 (A)      在以上定義的任一實施方式中的至少一種具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID) 或 (IE) 中任一者的化合物或其藥學上可接受的鹽，和 (B)      至少一種藥學上可接受的賦形劑。
在實施方式中，藥物組成物包含至少一種另外的活性劑或治療劑。另外的活性治療劑可以包括例如抗HBV劑（如HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、衣殼組裝調節劑、逆轉錄酶抑制劑、免疫調節劑（如TLR-促効劑）、或影響HBV生命週期和/或HBV感染的後果的任何其他藥劑）。本揭露之活性劑單獨或者與一種或者多種另外的活性劑組合用於配製本揭露之藥物組成物。
如本文所用，術語「組成物」或「藥物組成物」係指可用於本揭露之至少一種化合物與藥學上可接受的載體的混合物。藥物組成物有助於將化合物向患者或受試者施用。本領域存在多種施用化合物的技術，該等技術包括但不限於靜脈內、口服、氣霧劑、腸胃外、眼部、肺部和局部施用。
如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」意指藥學上可接受的材料、組成物或載體，如液體或固體填充劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑或囊封材料，該等材料涉及將可用於本揭露之化合物在患者體內載運或輸送或載運或輸送到患者體內，使得它可以發揮預期功能。典型地，此類構建體從身體的一個器官或部分載運或輸送到身體的另一個器官或部分。每種載體在與配製物的其他成分（包括可用於本揭露之化合物）相容且對患者無害的意義上必須是「可接受的」。可充當藥學上可接受的載體的材料的一些實例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；澱粉，如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，如可可脂和栓劑蠟；油，如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；表面活性劑；海藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；以及藥物配製物中使用的其他無毒相容物質。
如本文所用，「藥學上可接受的載體」還包括與可用於本揭露之化合物的活性相容並對於患者來說在生理上係可接受的任何和所有的塗層劑、抗細菌劑和抗真菌劑以及吸收延遲劑等。補充活性化合物也可以摻入組成物中。可以包括在用於實踐本揭露之藥物組成物中的其他另外成分在本領域係已知的，並例如描述於Remington’s Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學]（Genaro編輯, Mack Publishing Co. [馬克出版公司], 1985, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州），將其藉由引用併入本文。
「藥學上可接受的賦形劑」係指無毒的、生物學耐受的以及生物學上適於施用至受試者的物質（如惰性物質），將其添加到藥理學組成物中，或者用作媒介物、載體或者稀釋劑以促進藥劑的施用並且與之相容。賦形劑的實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、多種糖和多種類型的澱粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。
含有一個或者多個活性劑劑量單位的藥物組成物的遞送形式可以使用適合的藥物賦形劑和熟悉該項技術者已知或者可以獲得的混合技術製備。在本發明方法中，組成物可以藉由適合的遞送途徑施用，例如口服、腸胃外、直腸、局部或者經眼途徑或者藉由吸入施用。
該製劑可以為片劑、膠囊、小袋、糖錠、粉劑、粒劑、錠劑、重構粉劑、液體製劑或者栓劑的形式。較佳的是，組成物配製用於靜脈內輸注、局部施用或者口服施用。
對於口服施用，可以將本揭露化合物提供為片劑或者膠囊的形式，或者為溶液、乳液或者混懸液的形式。為製備口服組成物，可對化合物進行配製，以產生例如從約0.05至約100 mg/kg/天或從約0.05至約35 mg/kg/天或從約0.1至約10 mg/kg/天的劑量。例如，藉由每天一次、兩次、三次或四次給藥可實現每天約5 mg至5 g的每日總劑量。
口服片劑可以包括與藥學上可接受的賦形劑混合的根據本揭露之化合物，該藥學上可接受的賦形劑如惰性稀釋劑、崩散劑、粘合劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、著色劑和防腐劑。合適的惰性填充劑包括碳酸鈉和碳酸鈣、磷酸鈉和磷酸鈣、乳糖、澱粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、甘露醇、山梨醇等。液體口服賦形劑的例子包括乙醇、甘油、水等。澱粉、聚乙烯吡咯啶酮（PVP）、羥基乙酸澱粉鈉、微晶纖維素和海藻酸係合適的崩散劑。粘合劑可以包括澱粉和明膠。潤滑劑（如果存在的話）可以是硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。如果需要，片劑可用如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料進行包衣，以延緩在胃腸道中的吸收，或可用腸溶包衣進行包衣。
用於口服施用的膠囊包括硬明膠膠囊和軟明膠膠囊。為了製備硬明膠膠囊，可以將本揭露之化合物與固體、半固體或者液體稀釋劑混合。可藉由將本揭露之化合物與水、油（如花生油、橄欖油）、液體石蠟、短鏈脂肪酸單甘油酯和短鏈脂肪酸雙甘油酯的混合物、聚乙二醇400、或丙二醇混合來製備軟膠囊。
口服施用的液體可以呈懸浮液、溶液、乳液或糖漿的形式，或可以被凍乾或在使用前以用水或其他合適的媒介物重構的乾燥產品的形式呈現。這樣的液體組成物可以視需要含有：藥學上可接受的賦形劑，如懸浮劑（例如，山梨醇、甲基纖維素、海藻酸鈉、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠等）；非水性媒介物，例如油（例如，杏仁油或分餾椰子油）、丙二醇、乙醇或水；防腐劑（例如，對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸）；濕潤劑，如卵磷脂；以及調味劑和著色劑（如果需要）。
本揭露之活性劑還可以藉由非口服途徑施用。例如，可將組成物配製成栓劑用於直腸施用。對於腸胃外施用，包括靜脈內、肌內、腹膜內或者皮下途徑，可以將本揭露之化合物提供在緩沖至適當pH和等滲性的無菌水性溶液或者懸浮液中或者提供在腸胃外可接受的油中。適合的水性媒介物包括林格氏溶液和等滲氯化鈉。此類形式將以單位劑量形式（如安瓿或一次性注射裝置）、以多劑量形式（如從中可取出合適的劑量的小瓶）、或以可用於製備可注射配製物的固體形式或預濃縮物存在。與藥用載體經從幾分鐘至幾天範圍內的時間段混合的示例性輸注劑量可以在從約1至1000 μg/kg/分鐘範圍內的化合物。
對於局部施用，化合物可以在約0.1%至約10%（藥物比媒介物）的濃度與藥用載體混合。本揭露化合物的另一種施用模式可利用貼片配製物來影響透皮遞送。
可替代地，在本揭露之方法中，本揭露之化合物可以經鼻或口服途徑（例如以還含有適合載體的噴霧配製物形式）吸入施用。 使用方法
所揭露之化合物可用於預防或治療有需要的哺乳動物，更特別地有需要的人的HBV感染或HBV誘發的疾病。
在非限制性方面，該等化合物可以 (i) 調節或破壞HBV組裝和HBV複製或感染顆粒產生所必需的其他HBV核心蛋白功能，(ii) 抑制感染性病毒顆粒的產生或感染，或 (iii) 與HBV衣殼相互作用，以影響作為衣殼組裝調節劑的感染性或複製能力降低的缺陷病毒顆粒。特別地，並且在不受任何特定作用機制束縛的情況下，據信所揭露之化合物藉由破壞、加速、減少、延遲和/或抑制正常病毒衣殼的組裝和/或不成熟或成熟顆粒的拆卸從而誘導異常的衣殼形態導致抗病毒作用（如破壞病毒體的組裝和/或拆卸、病毒體成熟、病毒的外出和/或靶細胞的感染）而在HBV治療中係有用的。所揭露之化合物可以作為衣殼組裝的干擾劑與成熟或不成熟病毒衣殼相互作用以擾動衣殼的穩定性，從而影響其組裝和/或拆卸。所揭露之化合物可以擾動病毒衣殼的穩定性、功能和/或正常形態所需的蛋白質折疊和/或鹽橋，從而破壞和/或加速衣殼的組裝和/或拆卸。所揭露之化合物可結合衣殼並改變細胞多蛋白和先質的代謝，導致蛋白質單體和/或低聚物和/或異常顆粒的異常積聚，這引起經感染的細胞的細胞毒性和死亡。所揭露之化合物可以引起最佳穩定性衣殼形成的失敗，影響病毒的有效脫殼和/或拆卸（例如，在感染期間）。當衣殼蛋白未成熟時，所揭露之化合物可以破壞和/或加速衣殼組裝和/或拆卸。當衣殼蛋白成熟時，所揭露之化合物可以破壞和/或加速衣殼組裝和/或拆卸。所揭露之化合物可以在病毒感染期間破壞和/或加速衣殼組裝和/或拆卸，這可進一步減弱HBV病毒感染性和/或降低病毒載量。所揭露之化合物對衣殼組裝和/或拆卸的破壞、加速、抑制、延遲和/或減少可以將病毒從宿主生物體中根除。藉由所揭露之化合物從受試者中根除HBV有利地消除慢性長期治療的需要和/或減少長期治療的持續時間。
本揭露之另一個實施方式係治療患有HBV感染的受試者之方法，該方法包括向需要這樣的治療的受試者施用有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中與HBV感染相關的病毒載量之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染復發之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
此外，HBV係D型肝炎病毒（HDV）的輔助病毒，並且據估計，全世界超過1500萬人可能是HBV/HDV共同感染的，與僅患有HBV的患者相比，具有增加的快速發展為肝硬化的風險和增加的肝代償失調（Hughes, S.A.等人, Lancet [柳葉刀] 2011, 378, 73-85）。因此，HDV感染患有HBV感染的受試者。在一個特別的實施方式中，本發明之化合物可以用於治療和/或預防HBV/HDV共感染，或與HBV/HDV共感染相關的疾病。因此，在一個特別的實施方式中，該HBV感染特別地是HBV/HDV共感染，並且該哺乳動物（特別是人）可以是HBV/HDV共感染的，或處於HBV/HDV共感染風險下的。
在另一個方面，本文提供了抑制或減少有需要的個體中含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒的形成或存在之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染不良生理影響之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了誘導有需要的個體中HBV感染肝損傷緩解之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的長期抗病毒療法的生理影響之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了預防性地治療有需要的個體中HBV感染之方法，其中該個體患有潛伏性HBV感染，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，所揭露之化合物適用於單一療法。在實施方式中，所揭露之化合物有效的抵抗天然的或自然的HBV菌株。在實施方式中，所揭露之化合物有效地針對對目前已知藥物有抗性的HBV菌株。
在另一個實施方式中，本文提供的化合物可以用於調節（例如抑制或破壞）HBV cccDNA的活性、穩定性、功能和病毒複製特性之方法中。
在又另一個實施方式中，本揭露之化合物可以用於削弱或預防HBV cccDNA的形成之方法中。
在另一個實施方式中，本文提供的化合物可以用於調節（例如抑制或破壞）HBV cccDNA活性之方法中。
在又另一個實施方式中，本揭露之化合物可以用於削弱HBV cccDNA的形成之方法中。
在另一個實施方式中，所揭露之化合物可以用於調節、抑制或破壞HBV RNA顆粒從感染細胞內產生或釋放之方法中。
在另一實施方式中，對HBV RNA顆粒的總負擔（或濃度）進行了調節。在較佳的實施方式中，削弱了HBV RNA的總負擔。
在另一個實施方式中，與施用選自以下群組的化合物相比，本文提供之方法以更大的程度或以更快的速度減少該個體中的病毒載量，該群組由以下組成：HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的衣殼組裝調節劑、不同或未知機制的抗病毒化合物、及其任何組合。
在另一個實施方式中，與施用選自以下群組的化合物相比，本文提供之方法使得病毒突變和/或病毒抗性的發生率更低，該群組由以下組成：HBV聚合酶抑制劑、干擾素、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、不同的衣殼組裝調節劑、不同或未知機制的抗病毒化合物、及其組合。
在另一個實施方式中，本文提供之方法進一步包括向該個體施用至少一種HBV疫苗、核苷HBV抑制劑、干擾素或其任何組合。
在一個方面，本文提供了治療有需要的個體中HBV感染之方法，該方法包括藉由以下方式減少HBV病毒載量：向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物，或其藥學上可接受的鹽，單獨地或與逆轉錄酶抑制劑組合；並且向該個體進一步施用治療有效量的HBV疫苗。
本揭露之另一個實施方式係治療患有HBV感染的受試者之方法，該方法包括向需要這樣的治療的受試者施用有效量的至少一種具有式 (I) 之化合物。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中與HBV感染相關的病毒載量之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染復發之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了抑制或減少有需要的個體中含HBV DNA顆粒或含HBV RNA顆粒的形成或存在之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染不良生理影響之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了誘導有需要的個體中HBV感染肝損傷緩解之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了減少有需要的個體中HBV感染的長期抗病毒療法的生理影響之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，本文提供了預防性地治療有需要的個體中HBV感染之方法，其中該個體患有潛伏性HBV感染，該方法包括向該個體施用治療有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在實施方式中，本文提供之方法進一步包括監測受試者的HBV病毒載量，其中將該方法進行一段時間，使得HBV病毒不可檢測。 組合
本文提供了一種或多種所揭露之化合物與至少一種另外的治療劑的組合。在實施方式中，本文提供之方法可以進一步包括向該個體施用至少一種另外的治療劑。在實施方式中，所揭露之化合物適用於在組合療法中使用。本揭露之化合物可以與用於治療HBV感染的一種或多種另外的化合物組合使用。該等另外的化合物可以包括本揭露之化合物和/或已知用於治療、預防或減少HBV感染的症狀或影響的化合物。
在示例性實施方式中，另外的活性成分係已知的或被發現在治療涉及HBV感染的病症或障礙中有效的那些成分，如另一種HBV衣殼組裝調節劑或針對與涉及HBV感染的特定疾病或障礙、或HBV感染本身相關的另一靶標的活性化合物。該組合可以用於增強療效（例如，藉由將化合物包括在組合中增強根據本揭露之活性劑的效力或者有效性）、減少一種或者多種副作用或者減少根據本揭露之活性劑的所需劑量。在另一實施方式中，與在預防性地治療有需要的個體的HBV感染中獲得相似結果所需的至少一種另外的治療劑的單獨施用相比，本文提供之方法允許以更低的劑量或頻率施用至少一種另外的治療劑。
此類化合物包括但不限於，HBV複方藥物、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制劑、免疫調節劑、toll樣受體（TLR）調節劑、干擾素α受體配位基、透明質酸酶抑制劑、B型肝炎表面抗原（HBsAg）抑制劑、細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4（CTLA-4）抑制劑、親環蛋白抑制劑、HBV病毒進入抑制劑、反義寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干擾RNA（siRNA）和ddRNAi內切核酸酶調節劑、核糖核苷酸還原酶抑制劑、HBV E抗原抑制劑、共價閉合環狀DNA（cccDNA）抑制劑、類菌綠烯醇X受體促効劑、HBV抗體、CCR2趨化因子拮抗劑、胸腺肽促効劑、細胞介素、核蛋白調節劑、維甲酸誘導基因1刺激因子、NOD2刺激因子、磷脂醯肌醇3-激酶（PI3K）抑制劑、吲哚胺-2,3-雙加氧酶（IDO）途徑抑制劑、PD-1抑制劑、PD-L1抑制劑、重組胸腺肽α-1、布魯頓酪胺酸激酶（BTK）抑制劑、KDM抑制劑、HBV複製抑制劑、精胺酸酶抑制劑以及影響HBV生命週期和/或影響HBV感染後果的任何其他藥劑或其組合。
在實施方式中，本揭露之化合物可以與以下組合使用：HBV聚合酶抑制劑、免疫調節劑、干擾素（如聚乙二醇化干擾素）、病毒進入抑制劑、病毒成熟抑制劑、衣殼組裝調節劑、逆轉錄酶抑制劑、親環蛋白/TNF抑制劑、免疫調節劑（如TLR-促効劑）、HBV疫苗和影響HBV生命週期和/或影響HBV感染後果的任何其他藥劑或其組合。特別地，本揭露之化合物可以與選自以下群組的一種或多種藥劑（或其鹽）組合使用，該群組由以下組成： HBV逆轉錄酶抑制劑，以及DNA和RNA聚合酶抑制劑，包括但不限於：拉米夫定（3TC、Zeffix、Heptovir、Epivir和Epivir-HBV）、恩替卡韋（Baraclude、Entavir）、阿德福韋酯（Hepsara、Preveon、bis-POM PMEA）、富馬酸替諾福韋酯（Viread、TDF或PMPA）； 干擾素，包括但不限於干擾素α（IFN-α）、干擾素β（IFN-β）、干擾素λ（IFN-λ）、和干擾素γ（IFN-γ）； 病毒進入抑制劑； 病毒成熟抑制劑； 文獻描述的衣殼組裝調節劑，如但不限於BAY 41-4109； 逆轉錄酶抑制劑； 免疫調節劑，如TLR促効劑；以及 不同或未知機制的藥劑，如但不限於AT-61（(E)-N-(1-氯-3-側氧基-1-苯基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)苯甲醯胺）、AT-130（(E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧基苯基)-3-側氧基-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基苯甲醯胺）和類似的類似物。
在實施方式中，另外的治療劑係干擾素。術語「干擾素」或「IFN」係指抑制病毒複製和細胞增殖並調節免疫應答的高度同源物種特異性蛋白的家族中的任何成員。人干擾素分為三類：I型，其包括干擾素-α（IFN-α）、干擾素-β（IFN-β）和干擾素-ω（IFN-ω）；II型，其包括干擾素-γ（IFN-γ）；和III型，其包括干擾素-λ（IFN-λ）。如本文所用的術語「干擾素」包括已經開發並且可商購的干擾素的重組形式。如本文所用的術語「干擾素」也包括干擾素的亞型，如化學修飾或突變的干擾素。化學修飾的干擾素包括聚乙二醇化干擾素和糖基化干擾素。干擾素的實例還包括但不限於干擾素-α-2a、干擾素-α-2b、干擾素-α-n1、干擾素-β-1a、干擾素-β-1b、干擾素-λ-1、干擾素-λ-2和干擾素-λ-3。聚乙二醇化干擾素的實例包括聚乙二醇化干擾素-α-2a和聚乙二醇化干擾素α-2b。
因此，在一個實施方式中，具有式I的化合物可以與選自由以下組成之群組的干擾素組合施用：干擾素α（IFN-α）、干擾素β（IFN-β）、干擾素λ（IFN-λ）和干擾素γ（IFN-γ）。在一個具體實施方式中，干擾素係干擾素-α-2a、干擾素-α-2b或干擾素-α-n1。在另一個具體實施方式中，干擾素-α-2a或干擾素-α-2b係聚乙二醇化的。在一個較佳的實施方式中，干擾素-α-2a係聚乙二醇化干擾素-α-2a（PEGASYS）。
在另一個實施方式中，另外的治療劑選自免疫調節劑或免疫刺激劑療法，其包括屬於干擾素類別的生物製劑。
此外，另外的治療劑可以是破壞HBV複製或持久性所需的其他一種或多種必需病毒蛋白或宿主蛋白的功能的藥劑。
在另一個實施方式中，另外的治療劑係阻斷病毒進入或成熟或靶向HBV聚合酶的抗病毒劑，如核苷或核苷酸或非核苷（核苷酸）聚合酶抑制劑。在組合療法的另一實施方式中，逆轉錄酶抑制劑和/或DNA和/或RNA聚合酶抑制劑係齊多夫定、去羥肌苷、紮西他濱、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、恩曲他濱、恩替卡韋、阿立他濱、阿替韋拉平（Atevirapine）、病毒唑、阿昔洛韋、泛昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、替諾福韋、阿德福韋、PMPA、西多福韋、依法韋侖、奈韋拉平、地拉夫定或埃曲韋林。
在一個實施方式中，另外的治療劑係免疫調節劑，其誘導天然的有限的免疫應答，導致誘導針對不相關病毒的免疫應答。換句話說，免疫調節劑可以影響抗原呈遞細胞的成熟、T細胞的增殖和細胞介素釋放（例如，IL-12、IL-18、IFN-α、IFN-β和IFN-γ及TNF-α等）。
在另外的實施方式中，另外的治療劑係TLR調節劑或TLR促効劑，如TLR-7促効劑或TLR-9促効劑。在組合療法的另外的實施方式中，TLR-7促効劑選自由以下組成之群組：SM360320（9-苄基-8-羥基-2-(2-甲氧基-乙氧基)腺嘌呤）和AZD 8848（[3-({[3-(6-胺基-2-丁氧基-8-側氧基-7,8-二氫-9H-嘌呤-9-基)丙基][3-(4-𠰌啉基)丙基]胺基}甲基)苯基]乙酸甲酯）。
在本文提供的任何方法中，該方法可進一步包括向該個體施用至少一種HBV疫苗、核苷HBV抑制劑、干擾素或其任何組合。在一個實施方式中，HBV疫苗係RECOMBIVAX HB、ENGERIX-B、ELOVAC B、GENEVAC-B或SHANVAC B中的至少一種。
在另一個方面，本文提供了治療有需要的個體中HBV感染之方法，該方法包括藉由以下方式減少HBV病毒載量：向該個體施用治療有效量的本揭露之化合物，單獨地或與逆轉錄酶抑制劑組合；並且向該個體進一步施用治療有效量的HBV疫苗。逆轉錄酶抑制劑可以是齊多夫定、去羥肌苷、紮西他濱、ddA、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韋、恩曲他濱、恩替卡韋、阿立他濱、阿替韋拉平、病毒唑、阿昔洛韋、泛昔洛韋、伐昔洛韋、更昔洛韋、纈更昔洛韋、替諾福韋、阿德福韋、PMPA、西多福韋、依法韋侖、奈韋拉平、地拉夫定或埃曲韋林中的一種。
對於本文描述的任何組合療法，可以使用合適之方法計算協同效應，例如，Sigmoid-E max方程（Holford和Scheiner, 19981, Clin. Pharmacokinet. [臨床藥物動力學] 6: 429-453）、Loewe可加性方程（Loewe和Muischnek, 1926, Arch. Exp. Pathol Pharmacol. [實驗病理學與藥理學檔案] 114: 313-326）和median-effect方程（Chou和Talalay, 1984, Adv.Enzyme Regul. [酶調控研究進展] 22: 27-55）。上面提到的每個方程都可以應用於實驗數據，以生成相應的圖表以説明評估藥物組合的效果。與上述方程相關的對應圖表分別是濃度-效應曲線、等效線圖曲線和聯合指數曲線。 方法
本申請關於用於製備如本文所描述的具有式 (I) 之化合物之方法。
該方法包括步驟a)、b)、c)、d)、e) 和f) 中的至少一個步驟： a) 使具有式 (II) 之化合物，
Figure 02_image030
(II)，與具有式 (III) 之化合物，
Figure 02_image032
，在NaBH 3CN的存在下反應，以形成具有式 (IV) 之化合物，
Figure 02_image034
(IV) 其中 G 1係取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基； G 3係氫、選自CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團； G 4係取代的苯基、或6或5員芳族雜環； b) 使具有式 (V) 之化合物，
Figure 02_image036
(V)，與具有式 (VI) 之化合物，
Figure 02_image038
，在碘化鉀（KI）的存在下反應，以形成具有式 (VII) 之化合物，
Figure 02_image040
(VII)， 其中    G 1係取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基或吡𠯤基； G 5係氫或選自CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團； G 6係取代的苯基、或5員或6員芳族雜環； c) 使具有式 (VIII) 之化合物，
Figure 02_image042
(VIII) 與1,5,7-三氮雜雙環[4.4.0]癸-5-烯（TBD）或三甲基鋁（Al(CH 3) 3），視需要在1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯（DBU）的存在下反應，以形成具有式 (IX) 之化合物，
Figure 02_image044
(IX)，其中 R係氫；或
Figure 02_image046
G 1係取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基、吡𠯤基或三級-丁氧基； G 7係取代的苯基、或5員或6員芳族雜環； G 8係氫、CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基或C 3-6環烷基； d) 使具有式 (X) 之化合物，
Figure 02_image048
(X) 與具有式 (XI) 之化合物，
Figure 02_image050
在非親核鹼，更特別地碳酸銫(Cs 2CO 3)、氫化鈉(NaH)、氫氧化鈉或氫氧化鈉/苄基三乙基氯化銨的存在下反應，以形成具有式 (XII) 之化合物，
Figure 02_image052
(XII)， 其中    G 1係取代的苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基或吡𠯤基； G 9係氫、CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基或C 3-6環烷基, G 10係取代的苯基、或5員或6員芳族雜環； L係溴化物、氯化物或碘化物； W和X如式 (I)-(IC) 中所定義； e) 使具有式 (XIII) 之化合物，
Figure 02_image054
(XIII) 與強酸，更特別地鹽酸（HCl）或三氟乙酸（TFA）反應，以形成具有式 (XIV) 之化合物，
Figure 02_image056
(XIV)， 其中    G 11係H、取代的苯基或5員或6員芳族雜環； f) 使具有式 (XIV) 之化合物，
Figure 02_image058
(XIV)，與具有式 (XV) 之化合物，
Figure 02_image060
，在非親核鹼，更特別地碳酸鈉（Na 2CO 3）、三乙胺（Et 3N）、二異丙基乙胺（DIPEA）的存在下反應，以形成具有式 (XVI) 之化合物，
Figure 02_image062
(XVI)， 其中R 1如對具有式 (I)-(IC) 之化合物所定義且其中G 11已在步驟e) 中定義， 前提係 當該方法包括步驟a時，該方法進一步包括步驟c， 當該方法包括步驟b時，該方法進一步包括步驟c，並且 當該方法包括步驟e時，該方法進一步包括步驟f。 定義
下文列出了用於描述本揭露之各個術語的定義。該等定義適用於如它們在整個說明書和申請專利範圍中使用的術語，除非在特定情況下另行限制，單獨地或作為更大基團的一部分。
除非另有定義，否則本文使用的所有技術和科學術語通常具有與可應用領域普通技術人員通常所理解的相同含義。通常，本文使用的命名法和細胞培養、分子遺傳學、有機化學和肽化學中的實驗室程序係本領域眾所周知且常用的那些。
如本文所用，冠詞「一個/種（a和an）」係指一個/種或多於一個/種（即，至少一個/種）該冠詞的語法賓語。舉例來說，「一個元素」意指一個元素或多於一個元素。此外，術語「包括（including）」以及其他形式如「包括（include）」、「包括（includes）」和「包括（included）」的使用不是限制性的。
如本說明書和申請專利範圍中所用，術語「包含（comprising）」可以包括實施方式「由……組成」和「基本上由……組成」。如本文所用，術語「包含（comprise(s)）」、「包括（include（s））」、「具有（having和has）」、「可以（can）」、「含有（contain（s））」及其變體意指要求命名的成分/步驟的存在並且允許其他成分/步驟的存在的開放性的過渡短語、術語、或詞語。然而，此類描述應被理解為，也將組成物或方法描述為「由以下組成」和「基本上由以下組成」：列舉的化合物，這允許僅存在命名的化合物、伴隨任何藥學上可接受的載體、以及排除其他化合物。本文揭露之所有範圍皆為包括列舉的端點，並且獨立地可組合（例如，「從50 mg至300 mg」的範圍包括端點50 mg和300 mg，以及所有中間值）。本文揭露之範圍的端點和任何值都不限於精確範圍或值；它們不是足夠精確的，從而包括接近該等範圍和/或值的值。
如本文所用，可以將近似的語言應用於修飾可以變化而不導致其相關基本功能的改變的任何定量表示。因此，在一些情況下，由一個或多個術語如「基本上」修飾的值不能限制為指定的精確值。在至少一些實例中，近似的語言可以對應於用於測量該值的儀器的精確度。
作為基團或作為另一基團的一部分的術語「烷基」係指在鏈中具有碳和氫原子的直鏈或者支鏈烷基基團。烷基的實例包括甲基（Me，其還可以由符號「/」在結構上表示）、乙基（Et）、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、二級丁基、三級丁基（tBu）、戊基、異戊基、三級戊基、己基、異己基、和根據熟悉該項技術者和本文提供的觀點被認為等同於任何上述實例中的任一項的基團。如本文所用的術語C 1- 4烷基係指在鏈中具有1至4個碳原子的直鏈或者支鏈烷基基團。如本文所用的術語C 1- 6烷基係指在鏈中具有1至6個碳原子的直鏈或者支鏈烷基基團。
術語「C 3-6環烷基」係指具有3至6個環原子的飽和單環碳環。環烷基基團的示例性實例包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
術語「苯基」表示以下部分：
Figure 02_image064
。
術語「雜芳基」係指具有5至10個環成員並含有碳原子和從1至4個獨立地選自由N、O和S組成的群組的雜原子的芳香族單環或雙環芳香族環系統。術語雜芳基中包括具有5或6個成員的芳香族環，其中該環由碳原子組成並且具有至少一個雜原子成員。合適的雜原子包括氮、氧和硫。在5員環的情況下，雜芳基環較佳的是包含氮、氧或硫中的一個，以及另外最多3個氮。在6員環的情況下，雜芳基環較佳的是包含1至4個（例如四唑基），更特別地1至3個氮原子。對於6員環具有3個氮的情況，至多2個氮原子係相鄰的。雜芳基的實例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、㗁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、㗁唑基、噻唑基、㗁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、嗒𠯤基、嘧啶基、吡𠯤基、吲哚基、異吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并㗁唑基、苯并異㗁唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、喹啉基、異喹啉基和喹唑啉基。除非另有說明，否則雜芳基在產生穩定結構的任何雜原子或碳原子處連接至其側基。
熟悉該項技術者將認識到，以上列舉或者闡述的雜芳基基團種類並非詳盡的，還可以在該等定義的術語範圍內選擇另外種類。
術語「雜環基」表示具有例如4個至8個環成員，更通常是5個至6個環成員的非芳香族單環或二環系統。單環基團的實例係含有4個至8個環成員，更通常是5個或6個環成員的基團。含有選自氮、氧或硫（N、O、S）的至少一個雜原子的單環雜環基系統的非限制性實例包括，但不限於4員至8員雜環基系統，如氧雜環丁烷基、吡咯啶基、四氫呋喃基、哌啶基、哌𠯤基、哌喃基、二氫哌喃基、四氫哌喃基、𠰌啉基、硫代𠰌啉基。除非另外說明，每個可以藉由任何可用的環碳原子或氮原子結合至具有分子的剩餘部分，並且在可能的情況下在根據實施方式的碳原子和/或氮原子上可以視需要被取代。4員至8員單環雜環基的視需要取代基包括OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONHCH 3、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基和C 1-4烷基。
術語「氰基」係指基團-CN。
術語「鹵基」或「鹵素」表示氯、氟、溴或者碘。
術語「側氧基」表示=O。
術語「經取代的」意指指定基團或部分中帶有一個或者多個取代基。術語「未取代的」意指指定基團不帶有取代基。術語「視需要取代的」意指指定基團係未取代的或被一個或多個取代基取代。在術語「取代的」用於描述結構系統時，意指取代發生在系統上任何化合價允許的位置上。在未明確注明指定部分或基團被指定取代基視需要取代或取代的情況下，應當理解這樣的部分或基團意指未被取代的。
術語「對（para）」、「間（meta）」和「鄰（ortho）」具有本領域所理解的含義。因此，例如，完全取代的苯基基團在與苯環附接點相鄰的兩個「鄰」（ o）位、兩個「間」（ m）位和橫跨附接點的一個「對」（ p）位處具有取代基。為了進一步闡明取代基在苯環上的位置，將兩個不同的鄰位指定為鄰和鄰’，並將兩個不同的間位指定為間和間’，如下闡述。
Figure 02_image066
當提及吡啶基基團上的取代基時，術語「對」、「間」和「鄰」係指取代基相對於吡啶環的附接點的位置。例如，下面的結構被描述為3-吡啶基，其中X 1取代基位於鄰位，X 2取代基位於間位，並且X 3取代基位於對位：
Figure 02_image067
。
為了提供更簡潔的描述，本文給定的一些定量表達未用術語「約」限定。應當理解，無論是否明確地使用術語「約」，本文給出的每個量意指實際給出的值，並且還意指基於熟悉該項技術者合理推斷的此類給定值的近似值，包括由於針對這樣的給定值的實驗和/或測量條件導致的等價值和近似值。任何時候當產率以百分比給出時，這樣的產率係指相對於根據特定的化學計量條件可以獲得相同實體的最大量給出產率的實體質量。以百分比給出的濃度，除非另外指明，係指質量比。
術語「緩衝的（buffered）」溶液或「緩衝（buffer）」溶液在本文中根據其標準含義可互換地使用。緩衝溶液用於控制介質的pH，並且其選擇、用途和功能係熟悉該項技術者已知的。參見，例如，描述了（尤其是）緩衝溶液以及緩衝液成分的濃度與緩衝液的pH如何關聯的G.D. Considine編輯, Van Nostrand’s Encyclopedia of Chemistry [範諾斯特蘭化學百科全書], 第261頁, 第5版 (2005)。例如，藉由將MgSO 4和NaHCO 3以10 : 1 w/w的比率添加到溶液中，以將溶液的pH保持在約7.5，來獲得緩衝溶液。
本文所給出的任何式旨在表示具有該結構式描繪的結構及其某些變化或某些形式的化合物。特別地，本文所給出的任何式的化合物可具有不對稱中心，並且因此以不同的鏡像異構物形式存在。通式化合物的所有旋光異構物及其混合物都認為在該式的範圍之內。因此，本文所給出的任何式旨在表示外消旋物、一種或多種鏡像異構物形式、一種或多種非鏡像異構物形式、一種或多種阻轉異構物形式，及其混合物。此外，某些結構可以以幾何異構物（即順式和反式異構物）、互變異構物或阻轉異構物存在。
也應該理解，具有相同分子式但其原子鍵合的性質或順序或者其原子在空間中的排列不同的化合物稱為「異構物」。
彼此不成鏡像的立體異構物稱為「非鏡像異構物」，並且彼此係不能重疊的鏡像的立體異構物稱為「鏡像異構物」。當化合物具有不對稱中心，例如，該不對稱中心鍵合到四個不同的基團時，並且可能有一對鏡像異構物。鏡像異構物可以由其不對稱中心的絕對組態來表徵，並由Cahn和Prelog的R-和 S-順序規則來描述，或由分子旋轉偏振光平面的方式來描述，並指定為右旋或左旋（即，分別被指定為 (+)- 或 (-)-異構物）。手性化合物可以作為單獨的鏡像異構物或作為其混合物存在。含有相同比例的鏡像異構物的混合物被稱為「外消旋混合物」。
「互變異構物」係指係特定化合物結構的可互換形式並且在氫原子和電子位移方面不同的化合物。因此，兩種結構可以藉由π電子和原子（通常是H）的運動處於平衡。例如，烯醇和酮係互變異構物，因為它們藉由用酸或鹼的處理而快速地相互轉化。另一互變異構的實例係苯基硝基甲烷的酸-和硝基-形式，該實例同樣地藉由用酸或鹼處理形成。
互變異構形式可以與獲得目標化合物的最優化學反應性和生物活性相關。
本揭露之化合物可以具有一個或多個不對稱中心；因此，此類化合物可以作為單獨的( R)-或( S)-立體異構物或作為其混合物產生。
除非另有說明，說明書和申請專利範圍中特定化合物的描述或命名旨在包括兩種單獨的鏡像異構物及其外消旋混合物或其他混合物。立體化學的測定方法和立體異構物的分離方法在本領域中係眾所周知的。
某些實例含有描繪為絕對鏡像異構物的化學結構，但旨在指示未知組態的鏡像異構物純的物質。在該等情況下，在名稱中用（R*）或（S*）或（*R）或（*S）指示對應立體中心的絕對立體化學係未知的。因此，指定為（R*）或（*R）的化合物係指絕對組態為（R）或（S）的鏡像異構物純的化合物。在絕對立體化學已被證實的情況下，使用（R）和（S）命名結構。
符號
Figure 02_image069
和
Figure 02_image071
用於意指本文所示化學結構中相同的空間排列。類似地，符號
Figure 02_image073
和
Figure 02_image075
用於意指本文所示化學結構中相同的空間排列。
某些具有式 (I) 之化合物或具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽，可以作為溶劑化物獲得。溶劑化物包括由本揭露化合物與一種或多種溶劑在溶液中或以固體或晶體形式相互作用或錯合而形成的溶劑化物。在一些實施方式中，該溶劑係水並且溶劑化物係水合物。
在本文中涉及的化合物代表涉及以下任一種：(a) 這樣的化合物的實際列舉形式，和 (b) 這樣的化合物在介質中的任何形式，在命名時即已考慮該化合物處於該介質中。例如，本文中對如R-COOH的化合物的提及涵蓋對例如以下任一項的提及：R-COOH (s)、R-COOH (sol)和R-COO - (sol)。在此實例中，R-COOH (s)係指固體化合物，因為其可例如存在於片劑或一些其它固體藥物組成物或製劑中；R-COOH (sol)指化合物在溶劑中的非解離形式；而R-COO - (sol)係指化合物在溶劑中的解離形式，如化合物在水性環境中的解離形式，無論這樣的解離形式係衍生自R-COOH、衍生自其鹽、或衍生自在所考慮的介質中解離後產生的R-COO -的任何其他實體。在另一實例中，如「將實體暴露於具有式R-COOH的化合物」的表達係指將該實體暴露於在進行這樣的暴露的介質中存在的化合物R-COOH的一種或多種形式。在又另一個實例中，如「使實體與具有式R-COOH化合物反應」的表達係指，使 (a) 處於發生這樣的反應的介質中存在的一種或多種化學相關形式的這樣的實體與 (b) 處於發生這樣的反應的介質中所存在的一種或多種化學相關形式的化合物R-COOH反應。在這方面，如果這樣的實體例如處於水性環境中，應當理解，化合物R-COOH處於這樣的相同介質中，並且因此使該實體暴露於如R-COOH (aq)和/或R-COO - (aq)種類的介質中，其中下標「（aq）」根據其在化學和生物化學中的常規含義代表「水性」。在該等命名實例中選擇了羧酸官能基；然而，這一選擇並不旨在作為限制，而其僅是說明。應當理解，可以根據其它官能基提供類似的實例，包括但不限於羥基、鹼性氮成員（如在胺中的那些）、和在含有化合物的介質中根據已知的方式相互作用或者轉化的任何其它基團。此類相互作用和轉化包括但不限於離解、締合、互變異構、溶劑分解（包括水解）、溶劑化（包括水合）、質子化和去質子化。就此方面在本文中未進一步提供實例，這係因為該等在給定介質中的相互作用和轉化對於任何熟悉該項技術者係已知的。
在另一實例中，藉由參考已知形成兩性離子的化合物，在本文中涵蓋兩性離子化合物，即使沒有以其兩性離子形式進行明確命名。如一種或多種兩性離子及其同義詞一種或多種兩性離子化合物的術語係IUPAC認可的標準名稱，這種名稱係眾所周知的，並且是定義的科學名稱的標準集的一部分。在這方面，名稱兩性離子被Chemical Entities of Biological Interest（ChEBI）分子實體字典分配了名稱標識CHEBI：27369。如通常所熟知，兩性離子或者兩性離子化合物係具有相反符號的形式單位電荷的中性化合物。有時，該等化合物參考術語「內鹽」。其他來源將該等化合物稱為「偶極離子」，雖然後面的術語被另一些其他來源認為係誤稱。作為具體的實例，胺基乙酸（即胺基甘胺酸）式為H 2NCH 2COOH，並且在一些介質中（在這個情況下是在中性介質中）以兩性離子 +H 3NCH 2COO -的形式存在。兩性離子、兩性離子化合物、內鹽和偶極離子以該等術語的已知和充分確定含義落入本揭露之範圍內，在任何情形中熟悉該項技術者都應當如此理解。因為不必命名熟悉該項技術者會認識到的每一個實施方式，因此本文中沒有明確給出與本揭露化合物相關的兩性離子化合物的結構。但是其係本揭露實施方式的一部分。在此方面，本文中沒有提供進一步的實例，因為在給定介質中導致給定化合物的各種形式的相互作用和轉化係任何熟悉該項技術者已知的。
在本文中給出的任何式還旨在表示該等化合物的未標記形式以及同位素標記形式。除了一個或多個原子被具有選擇的原子質量或原子數的原子替換外，同位素標記的化合物具有本文所給出的式描述的結構。可以摻入本揭露之化合物中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯以及碘的同位素，如分別是 2H、 3H、 11C、 13C、 14C、 15N、 18O、 17O、 31P、 32P、 35S、 18F、 36Cl、 125I。此類同位素標記化合物可用於代謝研究（較佳的是使用 14C）、反應動力學研究（使用例如氘（即，D或 2H）；或氚（即，T或 3H））、檢測或成像技術如正電子發射斷層掃描（PET）或單光子發射電腦斷層掃描（SPECT），包括藥物或底物組織分佈測定，或用於患者的放射性治療。特別地， 18F或 11C標記的化合物可以特別較佳的是用於PET或SPECT的研究。此外，用較重的同位素如氘（即， 2H）進行取代可以賦予由更好的代謝穩定性引起的某些治療優勢（例如，增加的體內半衰期或降低的劑量需求）。本揭露之同位素標記化合物通常可以藉由進行以下方案或者實例中揭露之程序、以及以下所述藉由容易獲得的同位素標記試劑取代非同位素標記的試劑來製備。
當涉及本文給出的任何式時，從指定變數的可能種類清單中進行的特定的部分的選擇並不旨在將在其它地方出現的該變數的種類限定為相同選擇。換言之，當變數出現不止一次時，除非另有說明，從指定列表中進行的種類選擇獨立於式中其它地方的相同變數的種類選擇。
根據上述對賦值和命名進行的解釋性說明，應當理解，在本文中對設定的明確涉及（其中在化學性質上有意義和除非另有說明），暗示了獨立地涉及這樣的設定的實施方式，和涉及所明確涉及的設定的子集的每種可能實施方式。
藉由關於取代基術語的第一實例，如果取代基S 1 實例係S 1和S 2中的一個，並且取代基S 2 實例係S 3和S 4中的一個，則該等分配係指根據以下選擇給出的本揭露之實施方式：S 1 實例係S 1並且S 2 實例係S 3；S 1 實例係S 1並且S 2 實例係S 4；S 1 實例係S 2並且S 2 實例係S 3；S 1 實例係S 2並且S 2 實例係S 4；以及此類選擇中每一個的等效物。為了簡潔起見，本文相應地使用較短的術語「S 1 實例係S 1和S 2中的一個，並且S 2 實例係S 3和S 4中的一個」，但並非以限制的方式。在通用術語中所述之以上關於取代基術語的笫一實例旨在闡述各種在本文中所述之取代基賦值。本文中給出的用於取代基的上述規則在適用時延伸至如R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、G 1、G 2、G 3、G 4、G 5、G 6、G 7、G 8、G 9、G 10、G 11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符號的成員。
此外，當將多於一種賦值給予任何成員或者取代基時，本揭露之實施方式包含可以由所列舉的獨立採用的賦值及其等價賦值構成的各種組合。藉由關於取代基術語的第二實例，如果本文描述取代基S 實例係S 1、S 2和S 3中的一個，則此列表係指本揭露之實施方式，其中S 實例係S 1；S 實例係S 2；S 實例係S 3；S 實例係S 1和S 2中的一個；S 實例係S 1和S 3中的一個；S 實例係S 2和S 3中的一個；S 實例係S 1、S 2和S 3中的一個；並且S 實例係該等選擇中每一個的任何等效物。為了簡潔起見，本文相應地使用較短的術語「S 實例係S 1、S 2和S 3中的一個」，但並非以限制的方式。在通用術語中所述之以上關於取代基術語的笫二實例旨在闡述各種在本文中所述之取代基賦值。本文中給出的用於取代基的上述規則在適用時延伸至如R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、G 1、G 2、G 3、G 4、G 5、G 6、G 7、G 8、G 9、G 10、G 11、n、L、R、T、Q、W、X、Y和Z以及本文中使用的任何其他通用取代基符號的成員。
命名「C i-j」，其中j ＞ i，當本文中將其應用於一類取代基時，意指本揭露實施方式，其中從i至j（包括i和j）的每一種數目的碳原子成員的獨立地實現。舉例來說，術語C 1-4獨立地是指具有一個碳原子成員（C 1）的實施方式、具有兩個碳原子成員（C 2）的實施方式、具有三個碳原子成員（C 3）的實施方式和具有四個碳原子成員（C 4）的實施方式。
術語C n-m烷基係指脂族鏈，無論是直鏈還是支鏈，鏈中碳成員的總數N滿足n ≤ N ≤ m，其中m ＞ n。本文提及的任何二取代基旨在涵蓋各種附接可能性，只要允許多於一種的這類可能性。例如，提及二取代基-A-B-（其中A ≠ B）在本文中係指A附接到第一取代成員上以及B附接到第二取代成員上的這樣的二取代基，並且其也指A附接到第二取代成員上以及B附接到第一取代成員上的這樣的二取代基。
本揭露還包括具有式 (I) 之化合物的藥學上可接受的鹽，較佳的是上述那些和本文示例的特定化合物的鹽，以及使用此類鹽的治療方法。
術語「藥學上可接受的」意指由聯邦或州政府的監管機構或美國以外的國家的相應機構批准的或可批准的，或者美國藥典中或其他公認藥典中列出的用於在動物（更特別地，在人中）中使用。
「藥學上可接受的鹽」旨在意指無毒的、生物學耐受的或者以生物學適於施用至受試者的其它形式的由式 (I) 表示的化合物的游離酸或者鹼的鹽。其應該具有親本化合物所需的藥理學活性。一般而言，參見，G.S.Paulekuhn,等人, 「Trends in Active Pharmaceutical Ingredient Salt Selection based on Analysis of the Orange Book Database [基於橙皮書數據庫分析的活性藥物成分鹽選擇趨勢]」, J. Med. Chem. [藥物化學雜誌], 2007, 50:6665-72，S.M.Berge, 等人, 「Pharmaceutical Salts [藥用鹽]」, J Pharm Sci. [藥物科學雜誌], 1977, 66:1-19，以及 Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, Selection, and Use [ 藥用鹽、特性、選擇和使用手冊 ],Stahl和Wermuth編輯, Wiley-VCH and VHCA, 蘇黎世, 2002。藥學上可接受的鹽的實例係那些不具有過度毒性、刺激或者變態反應的藥理學有效且適於與患者組織接觸的鹽。具有式 (I) 之化合物可以具有足夠酸性的基團、足夠鹼性的基團或者兩種的官能基，並且因此與多種無機或者有機鹼、和無機和有機酸反應，以形成藥學上可接受的鹽。
如本文所用，術語「組成物」或「藥物組成物」係指本文提供的至少一種化合物與藥學上可接受的載體的混合物。藥物組成物有助於將化合物向患者或受試者施用。本領域存在多種施用化合物的技術，該等技術包括但不限於靜脈內、口服、氣霧劑、腸胃外、眼部、肺部和局部施用。
如本文所用，術語「藥學上可接受的載體」意指藥學上可接受的材料、組成物或載體，如液體或固體填充劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、稀釋劑、賦形劑、增稠劑、溶劑或囊封材料，該等材料涉及將本文提供的化合物在患者體內載運或輸送或載運或輸送到患者體內，使得它可以發揮預期功能。典型地，此類構建體從身體的一個器官或部分載運或輸送到身體的另一個器官或部分。每種載體在與配製物的其他成分（包括本文提供的化合物）相容且對患者無害的意義上必須是「可接受的」。可充當藥學上可接受的載體的材料的一些實例包括：糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；澱粉，如玉米澱粉和馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，如可可脂和栓劑蠟；油，如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，如氫氧化鎂和氫氧化鋁；表面活性劑；海藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；以及藥物配製物中使用的其他無毒相容物質。如本文所用，「藥學上可接受的載體」還包括與本文提供的化合物的活性相容並對於患者來說在生理上係可接受的任何和所有的塗層劑、抗細菌劑和抗真菌劑以及吸收延遲劑等。補充活性化合物也可以摻入組成物中。「藥學上可接受的載體」可以進一步包括本文提供的化合物的藥學上可接受的鹽。可以包括在本文提供的藥物組成物中的其他另外成分在本領域係已知的，並例如描述於Remington’s Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學]（Genaro編輯, Mack Publishing Co. [馬克出版公司], 1985, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州），將其藉由引用併入本文。
如本文所用，術語「穩定劑」係指能夠化學上抑制或阻止本文揭露之化合物的降解的聚合物。將穩定劑添加至化合物的配製物中用來改善化合物的化學和物理穩定性。
如本文所用，術語「片劑」表示可以藉由常規壓片製程將原料藥或其藥學上可接受的鹽與合適的賦形劑（例如，填充劑、崩散劑、潤滑劑、助流劑和/或表面活性劑）一起壓縮而產生的可口服施用的單劑量固體劑型。
如本文所用，術語「膠囊」係指其中藥物被封閉在硬質或軟質可溶容器或「殼」內的固體劑型。容器或殼可以由明膠、澱粉和/或其他合適的物質形成。
如本文所用，術語「有效量」、「藥學有效量」和「治療有效量」係指無毒但足夠提供期望的生物學結果的藥劑量。該結果可以是疾病徵象、症狀或原因的減少或減輕，或任何其他期望的生物學系統變化。熟悉該項技術者使用常規實驗可以確定任何個體情況下的適當治療量。
如本文所用，「組合」、「治療組合」、「藥物組合」、或「組合產物」係指組合施用的非固定的組合或成套套組（kit），其中在時間間隔內，可以同時或分開地獨立施用兩種或更多種治療劑，尤其是其中該等時間間隔允許組合夥伴物顯示協作的，例如協同的效應。
術語「調節劑」包括抑制劑和激活劑兩者，其中「抑制劑」係指降低、預防、滅活、脫敏或下調HBV組裝以及其他HBV核心蛋白功能的化合物，該等功能係HBV複製或感染顆粒生成所必需的。
如本文所用，術語「衣殼組裝調節劑」係指破壞或加速或抑制或阻礙或延遲或減少或修飾正常衣殼組裝（例如，在成熟期間）或正常衣殼拆卸（例如，在感染期間）或擾動衣殼穩定性從而誘導異常的衣殼形態和功能的化合物。在一個實施方式中，衣殼組裝調節劑加速衣殼組裝或拆卸，從而誘導異常的衣殼形態。在另一個實施方式中，衣殼組裝調節劑與主要的衣殼組裝蛋白（CA）相互作用（例如在活性位點與其結合，在變構位點與其結合，修改和/或阻礙折疊等），從而破壞衣殼組裝或拆卸。在又另一個實施方式中，衣殼組裝調節劑引起CA的結構或功能（例如，CA組裝、拆卸、與底物結合、折疊成合適構象等的能力）的擾動，這減弱了病毒感染性和/或對病毒係致命的。
如本文所用，術語「治療（treatment或treating）」被定義為向患者應用或施用治療劑，即本揭露之化合物（單獨地或與另一種藥劑組合），或向來自患者的分離的組織或細胞系應用或施用治療劑（例如，用於診斷或離體應用），該患者患有HBV感染、有HBV感染的症狀或具有患上HBV感染的可能性，目的是治癒、痊癒、減輕、緩解、改變、補救、改善、改進或影響HBV感染、HBV感染的症狀或患上HBV感染的可能性。基於從藥物基因組學領域獲得的知識，此類治療可以特別定製或修改。
如本文所用，術語「預防（prevent或prevention）」意指沒有障礙或疾病發展（如果沒有發生障礙或疾病）、或沒有進一步的障礙或疾病發展（如果已經患上了該障礙或疾病）。還考慮到了預防與障礙或疾病相關的一些或全部症狀的能力。
如本文所用，術語「患者」、「個體」或「受試者」係指人或非人類哺乳動物。非人類哺乳動物包括例如家畜以及寵物，如綿羊、牛、豬、犬科動物、貓科動物和鼠科哺乳動物。較佳的是，該患者、受試者或個體係人。
在根椐本揭露之治療方法中，根據本揭露之有效量的藥劑被施用至患有或診斷為具有這樣的疾病、障礙或者病症的受試者。「有效量」意指在需要這樣的治療的患者中對於指定的疾病、障礙或者病症通常足以引起所需的治療或者預防益處的量或者劑量。本揭露化合物的有效量或者劑量可以藉由常規方法確定，如建模、劑量升級研究或者臨床試驗，並且考慮常規因素，例如施用或者藥物遞送的模式或者途徑，化合物的藥物動力學，疾病、障礙或者病症的嚴重程度和過程，受試者的先前或者正在進行的治療，受試者的健康狀況和對藥物的響應，和治療醫師的判斷。劑量的實例在每天每公斤受試者體重從約0.001至約200 mg化合物的範圍內。化合物的劑量的實例係從約1 mg至約2,500 mg。
一旦患者的疾病、障礙或者病症出現改善，可調整劑量，用於預防性或維持性治療。例如，隨著症狀變化，施用的劑量或頻率或兩者可以減少至維持所需的治療或預防作用的水平。當然，如果症狀已經被減輕到適當的水平，治療可以停止。然而，在有任何症狀復發時，患者可能需要長期的間歇治療。
可以根據揭露之方法進行治療的HBV感染包括HBV基因型A、B、C、和/或D感染。然而，在實施方式中，揭露之方法可以治療任何HBV基因型（「泛基因型（pan-genotypic）治療」）。可以使用本領域已知之方法進行HBV基因分型，例如INNO-LIPA® HBV基因分型（Innogenetics N.V.公司，根特，比利時）。
為了幫助本申請書的讀者，將說明書分隔為不同的段落或部分。該等分隔不應被視為一段或一部分的實質內容與另一段或另一部分的實質內容脫節。相反，本說明書涵蓋了可以考慮的各個部分、段落和句子的所有組合。
本文引用的所有參考文獻的每一相關揭露內容均藉由引用具體併入。以下實例係藉由說明的方式而不是藉由限制的方式提供的。 實例
現在將參考以下用於其一般製備的說明性合成方案和隨後的具體實例來描述可用於本揭露方法的示例性化合物。技術人員將認識到，為了獲得本文中的各種化合物，可以適當地選擇起始材料，使得最終所需的取代基將在有或沒有合適的保護下藉由反應方案而被攜帶以產生所需產物。可替代地，可能有必要或希望使用合適的基團代替最終所需的取代基，該合適的基團可藉由反應方案被攜帶並適當地被所需的取代基代替。除非另有說明，否則變數如上文參考式 (I) 和式 (Ia) 所定義。反應可以在溶劑的熔點和回流溫度之間進行，較佳的是在0°C和溶劑的回流溫度之間進行。可以採用常規加熱或微波加熱來加熱反應。反應也可以在高於溶劑的正常回流溫度的密封壓力容器中進行。
可以使用熟悉該項技術者已知之方法將具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID, (ID) 和 (IE) 中任一者的化合物轉化為其相應鹽。例如，在如Et 2O、CH 2Cl 2、THF、MeOH、氯仿或異丙醇的溶劑中用三氟乙酸、HCl或檸檬酸處理具有式 (I) 之胺以提供相應的鹽形式。可替代地，藉由反相HPLC純化條件，因此獲得三氟乙酸或甲酸鹽。從極性溶劑（包括極性溶劑的混合物和極性溶劑的水性混合物）或從非極性溶劑（包括非極性溶劑的混合物）中藉由重結晶以結晶形式獲得具有式 (I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID, (ID) 和 (IE) 之化合物的藥學上可接受的鹽的結晶形式。
當根據本揭露之化合物具有至少一個手性中心時，它們可相應地作為鏡像異構物存在。當化合物具有兩個或更多個手性中心時，它們可以另外以非鏡像異構物存在。應當理解，所有此類異構物及其混合物都涵蓋在本揭露之範圍內。
表示為「立體異構物混合物」（指兩種或更多種立體異構物的混合物並且包括鏡像異構物、非鏡像異構物及其組合）的化合物藉由SFC拆分進行分離。
可以藉由形式特異性合成或藉由拆分獲得單一形式（如單一鏡像異構物）的化合物。化合物可以作為各種形式的混合物可替代地獲得，如外消旋（1 : 1）或非外消旋（非1 : 1）混合物。當獲得鏡像異構物的外消旋和非外消旋混合物時，可使用熟悉該項技術者已知的常規分離方法分離單一鏡像異構物，如手性層析、重結晶、非鏡像異構物的鹽形成、衍生為非鏡像異構物的加合物、生物轉化、或酶轉化。當獲得區域異構物或者非鏡像異構物的混合物時，適用情況下，可以使用常規方法（如層析法或者結晶法）對單個的異構物進行分離。 1. 一般資訊 化學名稱
使用化學軟體：ACD/ChemSketch生成化學名稱，並且化學名稱可以較佳的是遵循IUPAC規則。 用於 LCMS 方法的通用程序
使用LC泵、二極體陣列（DAD）或UV檢測器以及如在對應之方法中所指定的柱進行高效液相層析法（HPLC）測量。
將來自柱的流帶至配置有大氣壓離子源的質譜儀（MS）。設置調諧參數（例如掃描範圍、停留時間等）以便獲得允許鑒定化合物的標稱單一同位素分子量（MW）的離子在技術人員的知識內。利用適當的軟體進行數據獲取。
藉由實驗保留時間（Rt）和離子描述化合物。如果未不同地指定，那麼報導的分子離子對應於[M+H] +（質子化的分子）和/或[M-H] -（去質子的分子）。在化合物不是直接可電離的情況下，指定加合物的類型（即[M+NH 4] +、[M+HCOO] -等）。獲得的所有結果具有通常與所使用之方法相關的實驗不確定性。
下文中，「SQD」意指單四極檢測器，「MSD」質量選擇檢測器，「RT」室溫，「BEH」橋接的乙基矽氧烷/二氧化矽雜合物，「DAD」二極體陣列檢測器，「HSS」高強度二氧化矽，「Q-Tof」四極飛行時間質譜儀，「CLND」化學發光氮檢測器，「ELSD」蒸發光掃描檢測器。 NMR 分析
1H NMR譜記錄在1) Bruker DPX 400 MHz光譜儀上、或2) Bruker Avance 400 MHz光譜儀上、或c) Bruker Avance III 400 MHz光譜儀上、或d) Bruker Avance 600 MHz光譜儀上、或e) Bruker Avance NEO 400 MHz光譜儀上、或f) Bruker model AVIII 400光譜儀上、或g) ZKNJ BIXI-1 300 MHz, Bruker Avance III 400 MHz上、或h) Bruker AVANCE Neo 400 MHz上。
除非另有說明，否則在環境溫度下記錄NMR譜。數據包告如下：在規模、積分、多重性（s = 單峰、d = 雙重峰、t = 三重峰、q = 四重峰、quin = 五重峰、sext = 六重峰、sept = 七重峰、m = 多重峰、b = 寬峰或它們的組合）方面，化學位移相對於TMS（δ = 0 ppm）以百萬分率（ppm）為單位，偶聯常數 J以赫茲（Hz）計。 質譜（ MS ）分析
除非另外指明，質譜在Shimadzu LCMS-2020 MSD或Agilent 1200/G6110A MSD上藉由在正模式下的電噴霧電離（ESI）獲得。 2. 縮寫[表7]
µw 微波
ADDP 1,1’-(偶氮二羰基)二哌啶
AlMe 3 三甲基鋁
aq. 水性
atm 大氣壓
Boc 2O 二碳酸二三級丁酯
BOC 三級丁氧基羰基
BODIPY 硼-聯吡咯甲烷
br 寬峰
CA 衣殼組裝
DAST (二乙胺基)三氟化硫
DBU 1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
dd 雙二重峰
DEA 二乙胺
DIPE 二異丙醚
DIPEA/DIEA N, N-二異丙基乙胺
DMF 二甲基甲醯胺
DMF-DMA 二甲基甲醯胺-二甲基縮醛
DMSO 二甲亞碸
DNA 去氧核糖核酸
EDCI N-（3-二甲基胺基丙基）-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽
ESI 電噴霧電離
Et 3N 三乙胺
Et 2O 乙醚（Ether）、乙醚（diethyl ether）
EtOAc/EA 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
FCC 正相矽膠層析法
g 克
h/hr 小時
HBV B型肝炎病毒
HOAc 乙酸
HPLC 高效液相層析法
Hz 赫茲
i-PrNH 2 異丙胺
i-PrOH/IPA 異丙醇
KO tBu 三級丁醇鉀
LAH 氫化鋁鋰
LCMS 液相層析質譜法
LHMDS，LiHMDS 雙(三甲基矽基)胺基鋰
M 莫耳
m 多重峰
MeCN/ACN 乙腈
MeOH 甲醇
mg 毫克
MHz 兆赫
min 分鐘
mL 毫升
µL 微升
mmol 毫莫耳
µmol 微莫耳
MS 質譜
MsCl 三甲基苯氯（mesityl chloride）
m/z 質荷比
N 正常
NaOAc/AcONa 乙酸鈉
NMR 核磁共振
o/n 過夜
PCR 聚合酶鏈式反應
PE 石油醚
PMPA 9-(2-膦醯基-甲氧基丙基)腺嘌呤
ppm 百萬分率
ppt 沈澱物
Py 吡啶
RNA 核糖核酸
R t 保留時間
rt 室溫
s 單峰
sat. 飽和的
SFC 超臨界流體層析法
t 三重峰
T 3P 丙烷膦酸酐
TBAI 四丁基碘化銨
TBD 1,5,7-三氮雜雙環[4.4.0]癸-5-烯
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TLC 薄層層析法
TLR Toll-樣受體
TNF 腫瘤壞死因子
V、或體積 以毫升計的每克底物的溶劑體積
Δ 回流加熱
實驗程序 中間體 Int A
Figure 02_image077
中間體 Int A-1: (R)- 乙基 6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯鹽酸鹽
將(R)-5-三級丁基3-乙基6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯（10.0 g，100%純度，32.3 mmol）在二㗁𠮿（100 mL）中的4 M鹽酸鹽中的混合物在氮氣氛下在室溫下攪拌2小時。將混合物在減壓下濃縮，得到呈黃色固體的標題化合物（8.0 g，由HNMR得到的95%純度，96%產率），未經進一步純化。LC-MS（ESI）：R T= 0.5 min，C 10H 15N 3O 2的計算質量209.1，m/z實測值210.2 [M+H] +。 1HNMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.68 (br s, 1H), 9.50 (br s, 1H), 4.36 - 4.17 (m, 5H), 3.75 - 3.50 (m, 1H), 3.05 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 2.75 - 2.69 (m, 1H), 1.45 - 1.37 (m, 3H), 1.34 - 1.26 (m, 3H)。 中間體 Int A ： (R)- 乙基 5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯
在0°C下向4-氯-3-氰基苯甲酸（5.9 g，100%純度，32.5 mmol）在二氯甲烷（60 mL）中的混合物中逐滴添加N,N-二甲基甲醯胺（235 mg，3.22 mmol）和草醯二氯（4 mL，47.3 mmol）。在氮氣氛下在室溫下攪拌2小時後，將混合物在減壓下濃縮。在0°C下將所得殘餘物和(R)-乙基6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯鹽酸鹽 Int A-1（8.0 g，95%純度，30.9 mmol）溶解在二氯甲烷（60 mL）中，隨後逐滴添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（16 mL，96.8 mmol）。攪拌1小時後，將混合物倒入水（60 mL）中，並用1 M鹽酸鹽水溶液調節至pH 5-6，並用二氯甲烷（60 mL）萃取兩次。將合併的有機層減壓濃縮。所得殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨） = 10%至75%）進行純化以給出呈黃色固體的標題化合物（9.3 g，90%純度，69.1%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.38 min，C 18H 17ClN 4O 3的計算質量372.1，m/z實測值373.1 [M+H] +。 1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 10.81 (br s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 5.76 - 5.36 (m, 1H), 4.82 - 4.17 (m, 4H), 3.19 - 2.95 (m, 1H), 2.71 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.26 (s, 3H)。 中間體 Int B
Figure 02_image079
中間體 Int B-1 ： (R)- 乙基 5-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯
中間體 Int B-1以類似於中間體 Int A 的方式合成。 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.55 (br s, 1H), 7.76-7.73 (m, 2H), 7.45 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 5.52 - 5.14 (m, 1H), 4.59 - 4.01 (m, 4H), 2.98 (app s, 1H), 2.74-2.51 (m, 1H), 1.45 - 0.99 (m, 6H)。 中間體 Int B ： (R)-5-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸
在室溫下，向(R)-乙基5-(3,4-二氯苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯 Int B-1（2.0 g，100%純度，5.23 mmol）在甲醇（30 mL）中的混合物中添加在水（6 mL）中的氫氧化鈉（525 mg，13.1 mmol）。在50°C下攪拌8小時後，將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物用水（20 mL）稀釋，用1 M鹽酸鹽水溶液調節至pH 4-5，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（40 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到呈白色固體的所需產物（1.8 g，95%純度，92.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.25 min，C 15H 13Cl 2N 3O 3的計算質量353.0，m/z實測值354.3 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.25 (br s, 2H), 7.75 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.46 (dd, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 5.39 - 5.22 (m, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 2.99 - 2.90 (m, 1H), 2.55 - 2.45 (m, 1H), 1.10 (s, 3H)。 化合物 1B 和 1D
Figure 02_image081
中間體 1-3 ： 2-((1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 )-3- 羥基丙酸甲酯
向(S)-甲基2-胺基-3-羥基丙酸酯鹽酸鹽 1-1（6 g，50.4 mmol）在甲醇（50 mL）中的溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（8.5 mL，51.43 mmol）。在室溫下攪拌30分鐘後，在室溫下添加1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙酮 1-2（4.6 g，24.7 mmol）和氰基硼氫化鈉（2.4 g，38.2 mmol）。在50°C下攪拌過夜後，將混合物用0.5 M鹽酸鹽水溶液（30 mL）淬滅，並用乙酸乙酯（60 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（60 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 55%至60%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（2.5 g，90%純度，31.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.49 min，C 13H 17F 2NO 4的計算質量289.3，m/z實測值290.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.09 - 7.06 (m, 2H), 6.49 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 3.84 - 3.80 (m, 1H), 3.78 - 3.71 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.62 - 3.48 (m, 2H), 3.36 - 3.34 (m, 0.6H), 3.20 - 3.17 (m, 0.4H), 2.78 (br s, 0.5 H), 2.47 (br s, 0.5 H), 1.37 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。 中間體 1-4 ： (6R)-5- 三級丁基 3- 乙基 2-(2-((1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 )-3- 甲氧基 -3- 側氧基丙基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3,5(4H)- 二甲酸酯
在0°C下向2-((1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)-3-羥基丙酸甲酯 1-3（2.4 g，90%純度，7.47 mmol）和三苯基膦（4.9 g，18.7 mmol）在四氫呋喃（50 mL）中的混合物中添加(E)-二三級丁基二氮烯-1,2-二甲酸酯（4.3 g，18.7 mmol），隨後添加(R)-5-三級丁基3-乙基6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯（3.0 g，92%純度，8.92 mmol）。在40°C下攪拌過夜後，將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮，得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水= 50%至75%）純化，得到呈黃色油狀物的標題化合物（1.5 g，100%純度，34.6%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.89 min，C 28H 38F 2N 4O 7的計算質量580.6，m/z實測值581.0 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.21 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.96 - 6.94 (m, 2H), 6.47 (t, J= 74 Hz, 1H), 5.05 (br s, 1H), 4.91 - 4.65 (m, 3H), 4.41 - 4.23 (m, 2H), 4.15 - 4.09 (m, 2H), 3.76 - 3.46 (m, 5H), 3.00 - 2.89 (m, 1H), 2.58 - 2.54 (m, 1H), 1.51 - 1.49 (m, 9H), 1.40 - 1.35 (m,3H), 1.26 - 1.23 (m, 3H), 1.16 - 1.09 (m, 3H)。 中間體 1-5 ： (6R)-5-( 三級丁氧基羰基 )-2-(2- 羧基 -2-((1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 ) 胺基 ) 乙基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸
在0°C下向(6R)-5-三級丁基3-乙基2-(2-((1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)-3-甲氧基-3-側氧基丙基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯 1-4（1.5 g，100%純度，2.58 mmol）在甲醇（4 mL）和四氫呋喃（12 mL）中的溶液中添加水（4 mL）中的氫氧化鋰水合物（589 mg，14.0 mmol）。在30°C下攪拌1小時後，將混合物用水（15 mL）稀釋，用0.5 M鹽酸鹽水溶液酸化至pH約5，並用乙酸乙酯（15 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物的標題化合物（1.2 g，98%純度，84.5%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.29 min，C 25H 32F 2N 4O 7的計算質量538.5，m/z實測值537.0 [M-H] -。 中間體 1-6 ： (3R)-2-( 三級丁氧基羰基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 甲酸
在30°C下將(6R)-5-(三級丁氧基羰基)-2-(2-羧基-2-((1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)胺基)乙基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸 1-5（1.2 g，98%純度，2.18 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（1.5 g，11.6 mmol）、2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽（V）（1.1 g，2.89 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（70 mL）中的溶液攪拌14小時。將混合物用鹽酸鹽水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（3次）、鹽水洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物，將該殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 40%至60%）進行純化，得到呈黃色油狀物的標題化合物（700 mg，94%純度，71%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.34 min，C 25H 30F 2N 4O 6的計算質量520.5，m/z實測值519.0 [M-H] -。 中間體 1-7 ： (3R)- 三級丁基 9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C下向(3R)-2-(三級丁氧基羰基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-甲酸 1-6（700 mg，94%純度，1.26 mmol）和4-甲基𠰌啉（612 mg，6.05 mmol）在四氫呋喃（15 mL）中的溶液中添加氯甲酸異丁酯（500 mg，3.66 mmol）。在0°C下攪拌1小時後，添加硼氫化鈉（229 mg，6.05 mmol）並繼續攪拌1小時。混合物用飽和氯化銨水溶液（15 mL）淬滅，用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，用水（15 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並在真空下濃縮，得到殘餘物。將殘餘物藉由C18（乙腈 : 水 = 40%至65%）進行純化以得到呈黃色油狀物的所需產物（350 mg，97%純度，53%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.63 min，C 25H 32F 2N 4O 5的計算質量506.5，m/z實測值507.1 [M+H] +。 中間體 1-8 ： (3R)- 三級丁基 9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -8-((( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 甲基 )-10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C下向(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 1-7（350 mg，97%純度，0.670 mmol）在二氯甲烷（10 mL）中的溶液中添加三乙胺（210 mg，2.08 mmol）和甲磺醯氯（120 mg，1.05 mmol）。將反應在室溫攪拌14小時。將混合物用二氯甲烷（10 mL）稀釋，並用水（25 mL）洗滌。將有機層用鹽水（25 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並在真空下濃縮，得到殘餘物，將該殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 45% - 70%）純化，得到呈黃色固體的所需產物（300 mg，97%純度，74.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.70 min，C 26H 34F 2N 4O 7S的計算質量584.6，m/z實測值585.0 [M+H] +。 中間體 1-9 ： (3R)- 三級丁基 8-( 胺基甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
向(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-8-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 1-8（300 mg，97%純度，0.498 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（12 mL）中的溶液中添加疊氮化鈉（100 mg，1.54 mmol）。在50°C下攪拌36小時後，將反應混合物冷卻至室溫，用水（2 mL）和四氫呋喃（10 mL）稀釋，隨後添加三苯基膦（485 mg，1.85 mmol）。攪拌1小時後，將混合物用乙酸乙酯（15 mL）稀釋，用水（15 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並在真空下濃縮，得到殘餘物。粗殘餘物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 10: 1到二氯甲烷 :  甲醇 = 10 : 1）純化，得到呈白色固體的標題化合物（195 mg，78%純度，60.4%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.55 min，C 25H 33F 2N 5O 4的計算質量505.6，m/z實測值506.3 [M+H] +。 中間體 1-10 ： (3R)- 三級丁基 8-( 乙醯胺基甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C下向(3R)-三級丁基8-(胺基甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 1-9（195 mg，78%純度，0.301 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中的溶液中添加乙酸酐（160 mg，1.57 mmol）和三乙胺（160 mg，1.58 mmol）。在該溫度下攪拌1小時後，將反應混合物倒入水（10 mL）中，用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（15 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥，並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 =1 : 1到二氯甲烷 : 甲醇 = 10 : 1）純化，得到呈白色固體的標題化合物（150 mg，由LCMS得到的100%純度，74.7%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.63 min，C 27H 35F 2N 5O 5的計算質量547.6，m/z實測值548.0 [M+H] +。 中間體 1-11 ： N-(((3R)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺鹽酸鹽
在0°C下向(3R)-三級丁基8-(乙醯胺基甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 1-10（150 mg，100%純度，0.274 mmol）在1,4-二㗁𠮿（0.5 mL）中的溶液中添加二㗁𠮿（3 mL）中的4 M鹽酸鹽。在0°C下攪拌4小時後，將反應混合物濃縮以得到呈白色油狀物的標題化合物（150 mg，由LCMS得到的86%純度，97.3%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.47 min，C 22H 28ClF 2N 5O 3的計算質量483.9，m/z實測值448.0 [M+H] +。 化合物 1 ： N-(((3R)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺
在30°C下將N-(((3R)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-基)甲基)乙醯胺鹽酸鹽 1-11（150 mg，86%純度，0.267 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（180 mg，1.39 mmol）、4-氯-3-氰基苯甲酸（84 mg，0.463 mmol）、2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽（V）（204 mg，0.537 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中的混合物攪拌14小時。將混合物用鹽酸鹽水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水、鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物，將該殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 40%至60%）進行純化，得到呈白色固體的標題化合物（165 mg，100%純度，88.9%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.58 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量611.0，m/z實測值611.0 [M+H] +。 化合物 1B 和 1D ： N-(((3R,8R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 （ 1B ）， 和 N-(((3R,8S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺 （ 1D ）
將N-(((3R)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-基)甲基)乙醯胺 化合物 1（187 mg，100%純度，0.306 mmol）的外消旋物藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IA 5 μm 20 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH（0.2% DEA） = 65 : 35，以3.0 mL/min；柱溫：40°C；波長：214 nm，背壓：100巴）分離，得到呈白色固體的 化合物 1C（18.5 mg，99.6%純度，9.9%產率，97.7%立體純），呈白色固體的 化合物 1D（20.4 mg，98.3%純度，10.7%產率，98.3%立體純）和包括兩個峰的片段（60 mg）。將片段（60 g）再次藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IB 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 50 : 50，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的 化合物 1A（6.8 mg，99.9%純度，3.6%產率，98.4%立體純）和呈白色固體的 化合物 1B（9.3 mg，99.5%純度，4.9%產率，100.0%立體純）。 化合物 1A ：
LC-MS（ESI）：R T= 3.534 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量611.0，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH（0.2% DEA） = 65 : 35，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm；背壓：100巴；R T= 2.63 min）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) 7.74 (s, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 4H), 7.14 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.52 (t, J= 76.8 Hz, 1H), 5.94 (br s, 1H), 5.44 - 5.41 (m, 1H), 4.90 - 4.41 (m, 3H), 4.36 - 4.16 (m, 3H), 3.11 (br s, 1H), 2.79 - 2.55 (m, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.67 - 1.65 (m, 3H), 1.27 - 1.26 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 81.00 (s, 1F), - 81.05 (s, 1F)。 化合物 1B ：
LC-MS（ESI）：R T= 3.590 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量611.0，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH（0.2% DEA） = 65 : 35，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm；背壓：100巴；R T= 2.98 min）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) 7.75 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.41 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 76.4 Hz, 1H), 5.99 (br s, 1H), 5.83 - 5.80 (m, 1H), 5.40 - 4.53 (m, 3H), 4.22 - 4.19 (m, 1H), 3.85 - 3.76 (m, 3H), 3.08 (br s, 1H), 2.79 - 2.64 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.83 - 1.81 (m, 3H), 1.28 - 1.26 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 81.12 (s, 2F)。 化合物 1C ：
LC-MS（ESI）：R T= 3.628 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量611.0，m/z實測值611.3 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH（0.2% DEA） = 65 : 35，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm；背壓：100巴；R T= 4.12 min）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.43 - 7.41 (m, 2H), 7.10 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 70.8 Hz, 1H), 6.00 (br s, 1H), 5.82 - 5.79 (m, 1H), 5.70 - 5.42 (m, 1H), 4.62 - 4.29 (m, 2H), 4.22 - 4.18 (m, 1H), 3.87 - 3.84 (m, 1H), 3.79 - 3.68 (m, 2H), 3.02 (br s, 1H), 2.77 - 2.65 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.83 - 1.81 (m, 3H), 1.30 - 1.29 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 81.10 (s, 2F)。 化合物 1D ：
LC-MS（ESI）：R T= 3.534 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量611.0，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Chiralpak IA 5 um 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH（0.2% DEA） = 65 : 35，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm；背壓：100巴；R T= 5.81 min）。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) 7.74 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.56 (br s, 2H), 7.14 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.53 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.93 (br s, 1H), 5.70 - 5.39 (m, 2H), 4.63 - 4.41 (m, 3H), 4.22 - 4.16 (m, 2H), 3.04 (br s, 1H), 2.74 - 2.58 (m, 3H), 1.86 (s, 3H), 1.69 - 1.67 (m, 3H), 1.29 - 1.27 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) - 81.03 (s, 2F)。 化合物 2B
Figure 02_image083
中間體 2-1 ： (3R)- 三級丁基 9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -8-( 甲基胺基甲醯基 )-10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在氮氣下在0°C下將(3R)-2-(三級丁氧基羰基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-甲酸 1-6（1.2 g，64%純度，1.48 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（1.71 g，13.2 mmol）、甲基胺鹽酸鹽（300 mg，4.44 mmol）、和2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽（V）（842 mg，2.21 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（15 mL）中的混合物攪拌2小時。將混合物用0.05 M鹽酸鹽水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（60 mL）（三次）和鹽水（60 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至65%）純化以得到呈白色固體的標題化合物（570 mg，由HNMR得到的90%純度，65%產率）。 1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.48 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.36 - 7.33 (m, 1H), 7.17 - 7.12 (m, 2H), 6.52 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 6.23 - 6.11 (m, 1H), 5.27 - 4.64 (m, 4H), 4.31 - 4.16 (m, 2H), 4.04 - 3.92 (m, 1H), 2.98 - 2.86 (m, 1H), 2.86 - 2.77 (m, 2H), 2.59 - 2.54 (m, 1H), 2.26 - 2.22 (m, 1H), 1.60 - 1.59 (m, 3H), 1.50 (s, 9H), 1.14 - 1.05 (m, 3H)。 中間體 2-2 ： (3R)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 甲醯胺鹽酸鹽
在20°C下將(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-8-(甲基胺基甲醯基)-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 2-1（400 mg，90%純度，0.675 mmol）在二㗁𠮿（20 mL，80 mmol）中的4 M鹽酸鹽（g）中的溶液攪拌2小時。將混合物濃縮，以得到呈黃色固體的標題產物（320 mg，由LCMS得到的98%純度，99%產率）。R T= 1.26 min和1.33 min，C 21H 26ClF 2N 5O 3的計算質量433.2，m/z實測值434.2[M+H] +。 化合物 2 ： (3R)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 甲醯胺
在氮氣下在30°C下將(3R)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-甲醯胺鹽酸鹽 2-2（320 mg，98%純度，0.667 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（776 mg，6.00 mmol）、4-氯-3-氰基苯甲酸（133 mg，0.732 mmol）、和2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽（V）（381 mg，1.00 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（6 mL）中的混合物攪拌14小時。將混合物用0.05 M鹽酸鹽水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（30 mL）（三次）和鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液減壓濃縮，得到殘餘物，將該殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 65%至70%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（280 mg，由LCMS得到的98%純度，69%產率）。R T= 1.59 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.0 [M+H] +。 化合物 2B ： (3R,8S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 甲醯胺（ 2B ）
將(3R)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-8-甲醯胺 化合物 2（280 mg，98%純度，0.460 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak OA 5 µm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以12 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的 化合物 2A（9.6 mg，98.3%純度，3.4%收率，100%立體純）、 化合物 2B（26.1 mg，99.1%純度，9.4%產率，99.9%立體純）、 化合物 2C（29.4 mg，98.6%純度，10.5%產率，99.4%立體純）和 化合物 2D（17.9 mg，98.0%純度，6.4%產率，96.7%立體純）。 化合物 2A ：
R T= 8.234 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 4.938 min）。 1HNMR(400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.18 - 8.10 (m, 1H), 7.87 - 7.83 (m, 2H), 7.57 (br s, 1H), 7.41 - 7.01 (m, 5H), 5.77 - 5.68 (m, 1H), 5.53 - 5.20 (m, 1H), 4.53 - 4.33 (m, 3H), 4.30 - 4.08 (m, 2H)，3.00 - 2.81 (m, 1H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.57 - 1.50 (m, 3H), 1.20 - 1.09 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 82.33 (s, 2F)。 化合物 2B ：
R T= 3.349 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.1 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 7.687 min）。 1HNMR(400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.20 - 8.11 (m, 2H), 7.87 - 7.82 (m, 2H), 7.41 (br s, 2H), 7.24 - 7.05 (m, 3H), 5.84 - 5.69 (m, 1H), 5.53 - 5.19 (m, 1H), 4.56 - 4.10 (m, 5H), 2.95 - 2.83 (m, 1H), 2.68 - 2.61 (m, 1H), 2.58 (d, J= 4.4 Hz, 3H), 1.38 (br s, 3H), 1.22 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 82.11 (s, 2F)。 化合物 2C ：
R T= 3.550 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 9.817 min）。 1HNMR(400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.20 - 8.10 (m, 2H), 7.85 (br s, 2H), 7.46 (br s, 2H), 7.42 - 7.05 (m, 3H), 5.81 - 5.66 (m, 1H), 5.44 - 5.24 (m, 1H), 4.60 - 4.12 (m, 5H), 3.02 - 2.85 (m, 1H), 2.67 - 2.56 (m, 4H), 1.38 - 1.31 (m, 3H), 1.20 -1.13 (m, 3H). 19FNMR(376 MHz, DMSO- d 6) δ - 82.10 (s, 2F)。 化合物 2D ：
R T= 4.0390 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 12.279 min）。 1HNMR(400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.21 - 8.13 (m, 1H), 7.84 (br s, 2H), 7.57 (br s, 1H), 7.41 - 7.38 (m, 2H), 7.20 - 7.01 (m, 3H), 5.79 - 5.68 (m, 1H), 5.44 - 5.25 (m, 1H), 4.96 - 4.10 (m, 5H), 3.01 - 2.84 (m, 1H), 2.50 - 2.39 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.57 (s, 3H), 1.22 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 82.32 (s, 2F)。 化合物 3A
Figure 02_image085
化合物 3A ： (3R,8R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 甲醯胺
化合物 3以與 化合物 2類似的方式合成。將 化合物 2（240 mg，100%純度，0.41 mmol）藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB 5 μm 30 * 250 mm，流動相：Hex : EtOH = 60 : 40，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，然後進一步藉由製備型HPLC（柱：X-bridge C18；柱尺寸：（5 μm 19 * 150 mm）；流動相A：水（+ 0.1%碳酸氫銨），流動相B：乙腈，梯度：5 - 95% (% B)，UV：254 nm，15 mL/min）純化，得到呈白色固體的 化合物 3A（43 mg，99.7%純度，17.9%產率，100%立體純）和呈白色固體的 化合物 3B（88 mg，99.7%純度，36.6%產率，100%立體純）。 化合物 3A ：
LC-MS（ESI）：R T= 8.524 min，C 28H 25ClF 2N 6O 4的計算質量582.2，m/z實測值583.2 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IB 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 60 : 40，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 8.430 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.31 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 5.75 - 5.38 (m, 3H), 4.85 (d, J= 13.2 Hz, 1.3H), 4.57 - 4.08 (m, 4.7H), 3.05 (br s, 1H), 2.73 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 2.69 - 2.65 (m, 1H), 1.31 - 1.20 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.31 (s, 2F)。 化合物 3B ：
LC-MS（ESI）：R T= 8.671 min，C 28H 25ClF 2N 6O 4的計算質量582.2，m/z實測值583.1 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IB 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 60 : 40，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 12.580 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 7.13 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.92 - 5.31 (m, 3H), 4.88 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 4.67 - 3.89 (m, 5H), 3.02 (br s, 1H), 2.73 (d, J= 4.4 Hz, 3H), 2.69 - 2.65 (m, 1H), 1.33 - 1.23 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.29 (s, 2F)。 化合物 4
Figure 02_image087
中間體 4-1 ： (3R)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8-( 羥甲基 )-3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮鹽酸鹽
在0°C下向(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 1-7（40 mg，100%純度，0.079 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2 mL）中的溶液中添加二㗁𠮿（0.5 mL）中的4 M鹽酸鹽。在0°C下攪拌4小時後，將反應混合物濃縮以得到呈油狀物的標題化合物（35 mg，76%純度，76%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.410 min，C 20H 25ClF 2N 4O 3的計算質量442.9，m/z實測值407.0 [M-HCl+H] +。 化合物 4 ： 2- 氯 -5-((3R)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 ) 苄腈
在30°C下將(3R)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-(羥甲基)-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮鹽酸鹽 4-1（35 mg，76%純度，0.06 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（49 mg，0.379 mmol）、4-氯-3-氰基苯甲酸（16 mg，0.09 mmol）、2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽（V）（36 mg，0.095 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中的混合物攪拌14小時。將混合物用鹽酸鹽水溶液酸化至pH = 6並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用水（10 mL）（三次）和鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液減壓濃縮，得到殘餘物，將其藉由製備型HPLC（柱：sunfire Xbrige C18（5 μm 19 * 150 mm），流動相A：水（+ 0.1% NH 4HCO 3），流動相B：乙腈，UV：214 nm，流速：15 mL/min，梯度：30% - 60%（%B））純化，得到呈白色固體的標題化合物（10.1 mg，99.5%純度，29%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 3.439 min，C 28H 26ClF 2N 5O 4的計算質量569.2，m/z實測值570.1 [M+H] +。 1H NMR (400 M Hz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.47 - 7.33 (m, 2H), 7.14 - 7.12 (m, 2H), 6.52 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 5.97 (br s, 1H), 5.71 - 5.42 (m, 1H), 4.88 - 4.18 (m, 4H), 3.87 - 3.78 (m, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 3.09 - 3.04 (m, 1.6H), 2.70 - 2.66 (m, 1.4H), 1.66 - 1.65 (m, 3H), 1.30 - 1.27 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.17 - - 81.23 (m, 2F)。 化合物 5
Figure 02_image089
中間體 5-2 ： (S)- 甲基 4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 )-5-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 戊酸酯
在0°C下(S)-甲基4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-羥基戊酸酯 5-1（1.0 g，4.04 mmol）、三級丁基氯二苯基矽烷（1.5 g，5.46 mmol）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（100 mg，0.819 mmol）和1H-咪唑（500 mg，7.35 mmol）在二氯甲烷（20 mL）中的溶液。在0°C下攪拌4小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（2.0 g，由HNMR得到的95%純度，97%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 - 7.62 (m, 4H), 7.45 - 7.36 (m, 6H), 4.67 - 4.65 (m, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 6H), 2.36 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.94 -1.79 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.07 (s, 9H)。 中間體 5-3 ： (S)-4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 )-5-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 戊酸
在氮氣氛下在0°C下向(S)-甲基4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-((三級丁基二苯基矽基)氧基)戊酸酯 5-2（1.9 g，95%純度，3.72 mmol）在甲醇（15 mL）和水（10 mL）中的溶液中添加氫氧化鈉（450 mg，11.3 mmol）。在室溫下攪拌2小時後，將混合物用水（30 mL）稀釋，在減壓下在室溫下濃縮以去除揮發物。剩餘的水層用1 M鹽酸鹽水溶液（12 mL）酸化並用乙酸乙酯（30 mL）（兩次）和鹽水（60 mL）萃取，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮以得到呈黃色油狀物的標題化合物（1.8 g，由HNMR得到的95%純度，95%產率）。
1HNMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 12.0 (s, 1H), 7.63 - 7.61 (m, 4H), 7.48 - 7.38 (m, 6H), 6.61 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.59 - 3.49 (m, 3H), 2.29 - 2.15 (m, 2H), 1.88 - 1.76 (m, 1H), 1.57 - 1.48 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 0.99 (s, 9H)。 中間體 5-4 ： (S)- 三級丁基 (1-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 )-5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊烷 -2- 基 ) 胺基甲酸酯
在0°C下(S)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)-5-((三級丁基二苯基矽基)氧基)戊酸 5-3（1.8 g，95%純度，3.37 mmol）、甲基胺鹽酸鹽（200 mg，6.44 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（200 mg，6.44 mmol）和O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（2 g，5.26 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中的溶液。在30°C下攪拌16小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物。將粗殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（1.5 g，由HNMR得到的95%純度，87%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 - 7.63 (m, 4H), 7.47 - 7.38 (m, 6H), 6.47 (br s, 1H), 4.84 - 4.82 (m, 1H), 3.71 - 3.56 (m, 3H), 2.80 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 2.27 - 2.15 (m, 2H), 1.87 - 1.82 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.07 (s, 9H)。 中間體 5-5 ： (S)-4- 胺基 -5-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 )-N- 甲基戊醯胺鹽酸鹽
向(S)-三級丁基(1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊烷-2-基)胺基甲酸酯 5-4（1.57 g，3.08 mmol）在二氯甲烷中的溶液（10 mL）中添加2,2,2-三氟乙酸（5 mL），在室溫下攪拌2小時。將混合物在真空下濃縮以得到粗品。然後，用碳酸氫鈉水溶液將混合物調節至pH約8，用二氯甲烷（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈淺黃色油狀物的標題化合物（1.2 g，由HNMR得到的95%純度，96%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 - 7.63 (m, 4H), 7.49 - 7.45 (m, 6H), 6.99 (br s, 2H), 3.68 - 3.56 (m, 2H), 3.17 - 3.12 (m, 1H), 2.55 (d, J= 4.4 Hz, 3H), 2.16 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.87 - 1.66 (m, 2H), 1.02 (s, 9H)。 中間體 5-7 ： (S)- 三級丁基 (1-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 )-5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊烷 -2- 基 )(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 ) 胺基甲酸酯
向4-胺基-5-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-N-甲基戊醯胺 5-5（1.2 g，95%純度，2.96 mmol）和4-(二氟甲氧基)苯甲醛 5-6（1.5 g，8.71 mmol）在甲醇（20 mL）中的混合物中添加乙酸（0.5 mL）。在30°C下攪拌2小時後，將反應混合物冷卻至0°C，隨後添加氰基硼氫化鈉（500 mg，7.96 mmol），並在室溫下攪拌1小時。將該反應用水（5 mL）淬滅，並通過celite墊過濾。將濾餅用乙酸乙酯（30 mL）洗滌。濃縮濾液以得到殘餘物。在0°C下向四氫呋喃（10 mL）和水（10 ml）中的粗產物添加三乙胺（500 mg，4.94 mmol）和二碳酸二三級丁酯（1.0 g，4.58 mmol）。在30°C下攪拌1小時後，將反應混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈黃色油狀物的標題化合物（1.5 g，80%純度，75%產率）。
R T= 1.94 min，C 35H 46F 2N 2O 5Si的計算質量640.3，m/z實測值640.9 [M+H] +。 中間體 5-8 ： (S)- 三級丁基 4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 (1- 羥基 -5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊烷 -2- 基 ) 胺基甲酸酯
在0°C下向四氫呋喃（10 mL）中的(S)-三級丁基(1-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊烷-2-基)(4-(二氟甲氧基)苄基)胺基甲酸酯 5-7（1.5 g，80％純度，1.87 mmol）添加四氫呋喃（2 mL，2 mmol）中的1 M四丁基氟化銨。在0°C下攪拌4小時後，將混合物過濾並在減壓下濃縮以得到殘餘物。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈黃色油狀物的標題化合物（800 mg，由HNMR得到的90%純度，96%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.31 - 7.29 (m, 2H), 7.09 - 7.07 (m, 2H), 6.50 (t, J= 74.0 Hz, 1H), 5.74 - 5.24 (m, 1H), 4.51 - 4.30 (m, 2H), 3.85 - 3.57 (m, 3H), 3.36 - 3.19 (m, 1H), 2.77 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 2.17 - 2.10 (m, 1.5H), 1.99 - 1.85 (m, 2.5H), 1.43 (s, 9H)。 中間體 5-9 ： (R)- 乙基 2-((S)-2-(( 三級丁氧基羰基 )(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 ) 胺基 )-5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊基 )-5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯
在0°C下向(R)-乙基5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯 int A（500 mg，95%純度，1.27 mmol）、(S)-三級丁基4-(二氟甲氧基)苄基(1-羥基-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊烷-2-基)胺基甲酸酯 5-8（700 mg，1.74 mmol）和三苯基膦（700 mg，2.67 mmol）在四氫呋喃（10 mL）中的溶液中添加二氮烯-1,2-二甲酸二三級丁酯（600 mg，2.61 mmol）。在50°C下攪拌4小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（550 mg，100%純度，57%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.67 min和1.70 min，C 37H 43ClF 2N 6O 7的計算質量756.3，m/z實測值756.9 [M+H] +。 中間體 5-10 ： (R)-2-((S)-2-(( 三級丁氧基羰基 )(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 ) 胺基 )-5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊基 )-5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸
在氮氣氛下在0°C下向((R)-乙基2-((S)-2-((三級丁氧基羰基)(4-(二氟甲氧基)苄基)胺基)-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊基)-5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯 5-9（500 mg，100%純度，0.66 mmol）在甲醇（5 mL）和水（5 mL）中的溶液中添加氫氧化鈉（100 mg，2.50 mmol）。在室溫下攪拌2小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋，在減壓下濃縮以去除揮發物。剩餘的水層用1 M鹽酸鹽水溶液（3 mL）酸化，用乙酸乙酯（40 mL）萃取兩次，用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈黃色油狀物的標題化合物（400 mg，97%純度，81%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.37 min，C 35H 39ClF 2N 6O 7的計算質量728.3，m/z實測值728.8 [M+H] +。 中間體 5-11 ： (R)-5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-2-((S)-2-((4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 ) 胺基 )-5-( 甲基胺基 )-5- 側氧基戊基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸
在0°C下將(R)-2-((S)-2-((三級丁氧基羰基)(4-(二氟甲氧基)苄基)胺基)-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊基)-5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸 5-10（400 mg，97%純度，0.532 mmol）在1,4-二㗁𠮿（4 mL）中的4 M鹽酸鹽中的溶液攪拌1小時。將混合物在減壓下濃縮以得到呈白色固體的標題化合物（330 mg，94%純度，88%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.31 min，C 30H 31ClF 2N 6O 5的計算質量628.2，m/z實測值628.9 [M+H] +。 化合物 5 ： 3-((3R,8S)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -8- 基 )-N- 甲基丙醯胺
在0°C下向(R)-5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-2-((S)-2-((4-(二氟甲氧基)苄基)胺基)-5-(甲基胺基)-5-側氧基戊基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸 5-11（330 mg，94%純度，0.466 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（400 mg，3.10 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中的溶液中添加O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（280 mg，0.736 mmol）。在30°C下攪拌16小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : : 水（+ 0.02%乙酸銨） = 5%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（150 mg，98.3%純度，60%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 3.291 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4的計算質量610.2，m/z實測值611.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.62 - 7.51 (m, 2H), 7.36 - 7.34 (m, 2H), 7.08 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.49 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.79 - 5.39 (m, 3H), 4.85 - 3.81 (m, 6H), 3.15 - 2.99 (m, 1H), 2.83 - 2.65 (m, 4H), 2.31 - 2.23 (m, 1H), 2.15 - 2.03 (m, 2H), 1.85 - 1.76 (m, 1H), 1.28 - 1.26 (m, 3H)。
19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.998 (s, 2F)。 化合物 6
Figure 02_image091
化合物 6A 和 6B ： (3R,8R*)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3,8- 二甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮（ 6A ）和 (3R,8S*)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(4-( 二氟甲氧基 ) 苄基 )-3,8- 二甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮（ 6B ）
(3R)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(4-(二氟甲氧基)苄基)-3,8-二甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 化合物 6（160 mg，100%純度，0.291 mmol）以與 化合物 2類似的方式合成。將 化合物 6藉由手性製備型HPLC（分離方法：柱：Chiralpak IA 5 μm 30 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH（0.2% DEA）=60 : 40，以60 g/min；柱溫：40°C；波長：214 nm，背壓：100巴）分離，然後進一步藉由C18純化（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨） = 5%至95%)，得到呈白色固體的 化合物 6A（45.6 mg，99.8%純度，28%產率，100%立體純）和呈白色固體的 化合物 6B（38.1 mg，99.5%純度，24%產率，100%立體純）。 化合物 6A ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.544 min，C 26H 24Cl 2F 2N 4O 3的計算質量548.1，m/z實測值549.1 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH（0.2% DEA）= 60 : 40，以1.20 mL/min；溫度：40°C；波長：254 nm，背壓：100巴；R T= 7.36 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.54 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 3H), 7.11 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.50 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.87 - 5.41 (m, 1H), 5.37 (d, J= 15.2 Hz, 1H), 4.83 - 4.36 (m, 2H), 4.27 (dd, J= 13.6, 4.4 Hz, 1H), 4.13(d, J= 13.2 Hz, 1H), 4.08 - 3.86 (m, 1H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 3.18 - 2.93 (m, 1H), 2.77 - 2.60 (m, 1H), 1.27 (d, J= 6.4 Hz, 6H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.03 (s, 2F)。 化合物 6B ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.587 min，C 26H 24Cl 2F 2N 4O 3的計算質量548.1，m/z實測值549.1 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH（0.2% DEA）= 60 : 40，以1.20 mL/min；溫度：40°C；波長：254 nm，背壓：100巴；R T= 9.57 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.54 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.34 - 7.25 (m, 3H), 7.10 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.50 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 5.96 - 5.20 (m, 2H), 5.02 - 4.32 (m, 2H), 4.27 (dd, J= 12.8, 4.4 Hz, 1H), 4.13 (dd, J= 13.2, 2.4 Hz, 1H), 4.02 (d, J= 14.8, 1H), 3.86 - 3.76 (m, 1H), 3.21 - 2.95 (m, 1H), 2.67 (d, J= 15.6 Hz, 1H), 1.36 - 1.20 (m, 6H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.03 (s, 2F)。 化合物 7
Figure 02_image093
中間體 7-2 ： 1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙醇
在0°C下向1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙酮 7-1（5.0 g，26.9 mmol）在甲醇（50 mL）中的溶液中緩慢添加硼氫化鈉（3.0 g，79.3 mmol）。在室溫下攪拌3小時後，將反應用丙酮（50 mL）逐滴淬滅並濃縮以得到殘餘物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯（50 mL）中，用鹽水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮以得到呈無色油狀物的標題化合物（5.3 g，由HNMR得到的90%純度，94%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.38 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.10 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.50 (t, J= 74.0 Hz, 1H), 4.91 (q, J= 6.0 Hz, 1H), 1.80 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 1.49 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。 中間體 7-3 ： 1-(1- 溴乙基 )-4-( 二氟甲氧基 ) 苯
在0°C下，向1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙醇 7-2（500 mg，90%純度，2.39 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中的溶液中緩慢添加三溴化磷（III）（650 mg，2.40 mmol）。在室溫下攪拌2小時後，將反應混合物倒入冰水（20 mL）中並用二氯甲烷（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用飽和碳酸氫鈉溶液（50 mL，兩次）、鹽水（50 mL，兩次）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物的標題化合物（590 mg，由HNMR得到的95%純度，93%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.44 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.20 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 2.03 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。 中間體 7-4 ： (R)- 三級丁基 -3-( 肼羰基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -5(4H)- 甲酸酯
在室溫下向(R)-5-三級丁基3-乙基6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯（2.0 g，92%純度，6.47 mmol）在乙醇（20 mL）中的溶液中添加一水合肼（4 mL）。在85°C下攪拌16小時後，將混合物在減壓下濃縮。將所得殘餘物用乙酸乙酯（40 mL）溶解，用鹽水（20 mL）洗滌，並經Na 2SO 4（固體）乾燥。將有機層濃縮，得到呈白色固體的所需產物（2.0 g，92%純度，100%產率）。LC-MS（ESI）：RT = 1.36 min，C 13H 21N 5O 3的計算質量295.2，m/z實測值296.2 [M+H] +。 中間體 7-5 ： (R)- 三級丁基 -8- 甲基 -1- 側氧基 -1,2,7,8- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -9(10H)- 甲酸酯
在室溫下向(R)-三級丁基3-(肼羰基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-甲酸酯 7-4（2.0 g，92%純度，6.23 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）和乙酸（5 mL）中的溶液中添加三乙氧基甲烷（6.69 g，45.1 mmol）。在80°C下攪拌16小時後，將混合物用飽和碳酸鈉溶液（50 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（100 mL）萃取。將有機層用鹽水（80 mL）洗滌三次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並在真空下濃縮以得到殘餘物。將粗產物藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 5 : 1至3 : 1）純化，得到呈白色固體的標題化合物（1.3 g，由HNMR得到的95%純度，98%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.53 (br s, 1H), 8.32 (s, 1H), 5.31 - 5.23 (m, 1H), 5.03 - 4.91 (m, 1H), 4.37 (d, J= 18.0 Hz, 1H), 3.10 (dd, J= 16.4 and 6.4 Hz, 1H), 2.77 (d, J= 16.4 Hz, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.14 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。 中間體 7-6 ： (8R)- 三級丁基 2-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -1- 側氧基 -1,2,7,8- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -9(10H)- 甲酸酯
在室溫下向(R)-三級丁基8-甲基-1-側氧基-1,2,7,8-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-9(10H)-甲酸酯 7-5（100 mg，95%純度，0.311 mmol）、1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 7-3（100 mg，95%純度，0.378 mmol）在2-甲基四氫呋喃（1 mL）中的溶液中添加50%氫氧化鈉水溶液（1 mL）。在50°C下攪拌2小時後，將反應混合物用冰水（10 mL）淬滅並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到粗品，將該粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 60%至80%）純化，得到呈無色油狀物的標題化合物（160 mg，由HNMR得到的90%純度，97%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.32 (s, 1H), 7.48 (t, J= 8.8 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.48 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.21 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 5.30 - 5.25 (m, 1H), 4.99 - 4.90 (m, 1H), 4.39 - 4.32 (m, 1H), 3.10 - 3.05 (m, 1H), 2.75 - 2.71 (m, 1H), 1.77 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.49 (d, J= 2.0 Hz, 9H), 1.13 - 1.09 (m, 3H)。 中間體 7-7 ： (8R)-2-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5- d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮鹽酸鹽
在0°C下向(8R)-三級丁基2-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-甲基-1-側氧基-1,2,7,8-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-9(10H)-甲酸酯 7-6（160 mg，90%純度，0.303 mmol）在二氯甲烷（5 mL）中的溶液中添加1,4-二㗁𠮿（2.0 mL，4.0 mmol）中的2 M鹽酸鹽。在室溫下攪拌3小時後，將混合物在減壓下濃縮，得到呈白色固體的標題化合物（145 mg，由HNMR得到的80%純度，93%產率）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.69 (br s, 2H), 9.06 (s, 1H), 7.44 - 7.41 (m, 2H), 7.21 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.09 (q, J= 5.6 Hz, 1H), 4.53 - 4.42 (m, 2H), 3.71 - 3.65 (m, 1H), 3.23 - 3.19 (m, 1H), 2.94 - 2.87 (m, 1H), 1.70 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.44 - 1.42 (m, 3H)。 化合物 7 ： (8R)-9-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-2-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮
在0°C下向(8R)-2-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-甲基-7,8,9,10-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-1(2H)-酮鹽酸鹽 7-7（145 mg，80%純度，0.282 mmol）、4-氯-3-(三氟甲基)苯甲酸（100 mg，0.445 mmol）和N,N-二異丙基乙胺（0.3 mL，1.82 mmol）在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中的溶液中添加1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓-3-氧化物六氟磷酸鹽（200 mg，0.526 mmol）。在室溫下攪拌16小時後，將反應混合物用水（50 mL）淬滅並用乙酸乙酯（20 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌兩次，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮，得到呈白色固體的標題化合物（180 mg，由LCMS得到的89%純度，98%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.74 min，C 26H 21ClF 5N 5O 3的計算質量581.1，m/z實測值582.2 [M+H] +。 化合物 7A 和 7B ： (R)-9-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-2-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮（ 7A ）和 (R)-9-(4- 氯 -3-( 三氟甲基 ) 苯甲醯基 )-2-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮（ 7B ）
將(8R)-9-(4-氯-3-(三氟甲基)苯甲醯基)-2-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-甲基-7,8,9,10-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-1(2H)-酮 7（180 mg，89%純度，0.275 mmol）的外消旋物藉由手性製備型HPLC（分離方法：柱：Chiralpak IC 5 μM 30 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 50 : 50，以30 mL/min；柱溫：40°C；波長：214 nm，背壓：100巴）分離，得到呈白色固體的 化合物 7A（40.0 mg，99.9%純度，25%產率，100%立體純）和呈白色固體的 化合物 7B（50.2 mg，99.7%純度，31%產率，99.9%立體純）。 化合物 7A ：
LC-MS（ESI）：R T= 8.944 min，C 26H 21ClF 5N 5O 3的計算質量581.1，m/z實測值582.1 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 50 : 50，以1.00 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，背壓：98巴；Rt = 6.729 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.00 (br s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.86 - 7.81 (m, 2H), 7.49 - 7.34 (m, 2.2H), 7.20 - 7.01 (m, 2.8H), 6.21 - 5.96 (m, 1H), 5.66 - 5.25 (m, 1H), 4.85 - 4.18 (m, 2H), 3.21 - 3.02 (m, 1H),  2.91 - 2.64 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.32 - 1.06 (m, 3H)。
19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 61.33 (s, 3F), - 81.93 (s, 2F)。 化合物 7B ：
LC-MS（ESI）：R T= 9.105 min，C 26H 21ClF 5N 5O 3的計算質量581.1，m/z實測值582.1 [M+H] +。手性分析（柱：Superchiral IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 50 : 50，以1.00 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，背壓：98巴；Rt = 8.213 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.01 (br s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.87 - 7.82 (m, 2H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.21 (t, J= 74.4 Hz, 1H),  7.14 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 6.22 - 5.92 (m, 1H), 5.67- 5.20 (m, 1H), 4.84 - 4.12 (m, 2H), 3.23 - 3.03 (m, 1H),  2.89 - 2.63 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.32 - 1.01 (m, 3H)。
19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 61.31 (s, 3F), - 81.95 (s, 2F)。 化合物 8A
Figure 02_image095
化合物 8A 和 8B ： (R)-9-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-2-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮（ 8A ）和 (R)-9-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-2-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -7,8,9,10- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -1(2H)- 酮（ 8B ）
(8R)-9-(3,4-二氯苯甲醯基)-2-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-甲基-7,8,9,10-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-1(2H)-酮 8（410 mg，95%純度，0.710 mmol）以與 化合物 7類似的方式合成。 化合物 8藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IC 5 μm 30 * 250 mm，Hex : EtOH = 40 : 60，30 ml/min，254 nm；柱溫：30°C）分離，進一步藉由C18柱純化（乙腈 : 水（+ 0.02%乙酸銨） = 5%至100%)，得到呈白色固體的 化合物 8A（120 mg，99.8%純度，70%產率，100%立體純）和 化合物 8B（150 mg，99.9%純度，78.9%產率，99.9%立體純）。 化合物 8A ：
LC-MS（ESI）：R T= 4.167 min，C 25H 21Cl 2F 2N 5O 3的計算質量547.1，m/z實測值548.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 8.702 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.00 (s, 1H), 7.78 - 7.74 (m, 2H), 7.49 - 7.39 (m, 3.3H), 7.20 - 7.02 (m, 2.7 H), 6.13 - 6.00 (m, 1H), 5.58 - 5.27 (m, 1H), 4.74 - 4.24 (m, 2H), 3.16 3.04 (m, 1H), 2.86 - 2.67 (m, 1H),1.74 - 1.62 (m, 3H), 1.20 - 1.15 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 81.92 (s, 2F)。 化合物 8B ：
LC-MS（ESI）：R T= 4.223 min，C 25H 21Cl 2F 2N 5O 3的計算質量547.1，m/z實測值548.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 40 : 60，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；Rt = 10.917 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.01 (s, 1H), 7.80 - 7.75 (m, 2H), 7.50 - 7.39 (m, 3.3H), 7.21 - 7.02 (m, 2.7 H), 6.11 - 6.00 (m, 1H), 5.58 - 5.29 (m, 1H), 4.67 - 4.26 (m, 2H), 3.18 3.12 (m, 1H), 2.84 - 2.67 (m, 1H),1.69 (br s, 3H), 1.19 - 1.12 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) δ - 81.95 (s, 2F)。 化合物 9A 和化合物 9B
Figure 02_image097
化合物 9A 和化合物 9B ： 2- 氯 -5-((R)-2-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -1- 側氧基 -1,2,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -9- 羰基 ) 苄腈（ 9A ）和 2- 氯 -5-((R)-2-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-8- 甲基 -1- 側氧基 -1,2,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-d][1,2,4] 三 𠯤 -9- 羰基 ) 苄腈（ 9B ）
2-氯-5-((8R)-2-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-8-甲基-1-側氧基-1,2,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-d][1,2,4]三𠯤-9-羰基)苄腈 9（140 mg，90%純度，0.234 mmol）以與 化合物 7類似的方式合成。將 化合物 9藉由手性製備型HPLC分離條件：（柱：Chiralpak IA 5 μm 20 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的 化合物 9A（18.4 mg，99.2%純度，14.5%產率，99.3%立體純）和呈白色固體的 化合物 9B（22.2 mg，99.5%純度，17.5%產率，99.8%立體純）。 化合物 9A ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.569 min，C 26H 21ClF 2N 6O 3的計算質量538.9，m/z實測值539.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 4.247 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.35 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.47 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.08 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.48 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.15 (br s, 1H), 5.44 (br s, 1H), 4.91 - 4.58 (m, 2H), 3.17 (br s, 1H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 1.76 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.26 - 1.25 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 80.97 (s, 2F)。 化合物 9B ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.579 min，C 26H 21ClF 2N 6O 3的計算質量538.9，m/z實測值539.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：ACN : IPA = 70 : 30，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 6.917 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.35 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.48 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.48 (t, J= 77.2 Hz, 1H), 6.16 (br s, 1H), 5.45 (br s, 1H), 4.93 - 4.61 (m, 2H), 3.17 (br s, 1H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 1.76 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.26 - 1.25 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 80.97 (s, 2F)。 化合物 10A 和化合物 10B
Figure 02_image099
中間體 10-1 ： (R)-5-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-N-(2,2- 二甲氧基乙基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲醯胺
在室溫下向(R)-5-(3,4-二氯苯甲醯基)-6-甲基4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3c]吡啶-3-甲酸 Int B（1.0 g，90%純度，2.54 mmol）在乙腈（10 mL）中的溶液中添加二(1H-咪唑-1-基)甲酮（600 mg，3.70 mmol）。在60°C下攪拌2小時後，將2,2-二甲氧基乙胺（350 mg，3.33 mmol）添加到反應中。在60°C下將反應混合物攪拌3小時，然後冷卻至室溫並濃縮。將粗殘餘物用水（20 mL）稀釋並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮，以得到呈白色固體的標題化合物（1.0 g，由LCMS得到的93%純度，83%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.52 min，C 19H 22Cl 2N 4O 4的計算質量440.1，m/z [M-H] -實測值439.1。 中間體 10-2 ： (3R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-7- 羥基 -3- 甲基 -1,2,3,4,8,9- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(7H)- 酮
在30°C下將(R)-5-(3,4-二氯苯甲醯基)-N-(2,2-二甲氧基乙基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲醯胺（1.0 g，93%純度，0.612 mmol）在5 M鹽酸鹽水溶液（20 mL，100 mmol）中的溶液攪拌16小時。將反應混合物用水（50 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（30 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到粗品，將該粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（600 mg，由 1HNMR得到的90%純度，65%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.45 min，C 17H 16Cl 2N 4O 3的計算質量394.1，m/z [M+H] +實測值395.0。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 8.21 - 8.10 (m, 1H), 7.77 - 7.73 (m, 2H), 7.46 (t, J= 6.4 Hz, 1H), 7.14 - 7.09 (m, 1H), 5.68 (br s, 1H), 5.50 - 5.20 (m, 1H), 4.59 - 4.37 (m, 1H), 4.24 - 4.11 (m, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.02 - 2.89 (m, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 1.13 - 1.06 (m, 3H)。 中間體 10-3 ： (R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-3- 甲基 -1,2,3,4- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(9H)- 酮
在室溫下向(3R)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-7-羥基-3-甲基-1,2,3,4,8,9-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(7H)-酮 10-2（400 mg，95%純度，0.880 mmol）在甲苯（30 mL）中的混合物中添加氯化亞碸（sulfurous dichloride）（230 mg，1.93 mmol），隨後添加N,N-二甲基乙醯胺（0.05 mL）。在50°C下攪拌12小時後，將反應混合物冷卻至室溫，並且然後在減壓下濃縮以得到粗品，將其藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 3 : 1至1 : 1）純化，得到呈棕色固體的標題化合物（270 mg，由 1HNMR得到的90%純度，73%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.50 min，C 17H 14Cl 2N 4O 2的計算質量376.1，m/z實測值377.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.99 - 9.25 (m, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 2H), 7.41 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 7.29 - 7.28 (m, 1H), 6.61 (br s, 1H), 5.97 - 5.74 (m, 0.4H), 5.55 - 5.38 (m, 0.6H), 5.04 - 4.39 (m, 2H), 3.16 (br s, 1H), 2.80 - 2.76 (m, 1H), 1.31 - 1.21 (m, 3H)。 化合物 10 ： (3R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(9H)- 酮
在室溫下向(R)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(9H)-酮 10-3（270 mg，90%純度，0.644 mmol）、1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 7-3（270 mg，90%純度，0.968 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中的溶液中添加50%氫氧化鈉（2 mL）和苄基三乙基氯化銨（20 mg，0.088 mmol）。在氮氣氛下在60°C下攪拌2小時後，將反應用水（30 mL）淬滅，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，經無水Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液在減壓下蒸發以得到黃色粗固體，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至60%）純化，得到呈棕色固體的標題化合物（250 mg，由 1HNMR得到的90%純度，64%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.77 min，C 26H 22Cl 2F 2N 4O 3的計算質量546.1，m/z實測值547.1 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 - 7.68 (m, 3H), 7.51 - 7.28 (m, 3.4H), 7.22 - 7.17 (m, 2.6H), 7.04 - 691 (m, 1H), 6.21 - 5.96 (m, 1H), 5.65 - 5.53 (m, 0.5H), 5.35 - 5.17 (m, 0.5H), 4.73 - 4.60 (m, 0.7H), 4.36 - 4.20 (m, 1.3H), 3.12 - 2.99 (m, 1H), 2.78 - 2.58 (m, 1H), 1.76 - 1.64 (m, 3H), 1.16 - 1.10 (m, 3H)。 化合物 10A 和 10B ： (R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(9H)- 酮 （ 10A ） 和 (R)-2-(3,4- 二氯苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -1,2,3,4- 四氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -10(9H)- 酮 （ 10B ）
將(3R)-2-(3,4-二氯苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-10(9H)-酮 化合物 10（200 mg，90%純度，0.329 mmol）的外消旋混合物藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IC 5 μm 20 * 250 mm；流動相：Hex : EtOH = 50 : 50，以30 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的 化合物 10A（47 mg，25.5%產率，由LCMS得到的97.7%純度，100%立體純）和呈白色固體的 化合物 10B（41 mg，22.4%產率，由LCMS得到的98.5%純度，100%立體純）。 化合物 10A ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.127 min，C 26H 22Cl 2F 2N 4O 3的計算質量546.1，m/z實測值547.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：HEX : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 8.351 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.77 - 7.68 (m, 3H), 7.48 - 7.36 (m, 3.3H), 7.22 - 7.03 (m, 2.7H), 7.00 - 6.89 (m, 1H), 6.18 - 6.06 (m, 0.7H), 6.02 - 5.94 (m, 0.3H), 5.65 - 5.50 (m, 0.6H), 5.30 - 5.27 (m, 0.4H), 4.68 - 4.63 (m, 0.7H), 4.31 - 4.19 (m, 1.3H), 3.11 - 3.00 (m, 1H), 2.78 - 2.60 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.23 - 1.10 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) - 82.08 (s, 2F)。 化合物 10B ：
LC-MS（ESI）：R T= 7.180 min，C 26H 22Cl 2F 2N 4O 3的計算質量546.1，m/z實測值547.1 [M+H] +。手性分析（柱：Chiralpak IC 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：HEX : EtOH = 50 : 50，以1 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm；R T= 10.356 min）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.78 - 7.74 (m, 2H), 7.70 - 7.68 (m, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 3.2H), 7.22 - 7.17 (s, 2.5H), 7.04 - 6.96 (m, 1.3H), 6.15 - 5.98 (m, 1H), 5.63 - 5.22 (m, 0.6H), 5.34 - 5.22 (m, 0.4H), 4.73 - 4.59 (m, 0.7H), 4.39 - 4.14 (m, 1.3H), 3.14 - 2.99 (m, 1H), 2.80 - 2.60 (m, 1H), 1.72 (br s, 3H), 1.23 - 1.08 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, DMSO- d 6) - 82.11 (s, 2F)。 化合物 11B
Figure 02_image101
中間體 11-2 (3-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 )-2- 羥丙基 ) 胺基甲酸三級丁酯
在0°C下向(2,3-二羥丙基)胺基甲酸三級丁酯 11-1（8 g，41.8 mmol）在乾燥二氯甲烷（150 mL）中的溶液中添加三乙胺（9 g，88.9 mmol）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（400 mg，3.27 mmol）和三級丁基氯二苯基矽烷（12 g，43.7 mmol）。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用二氯甲烷（100 mL）稀釋，並用水（150 mL）（兩次）和鹽水（200 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液藉由矽膠層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 100 : 1至50 : 1）純化，得到呈淺黃色油狀物的標題化合物（14 g，由HNMR得到的95%純度，74%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.65 - 7.63 (m, 4H), 7.46 - 7.37 (m, 6H), 4.84 (br s, 1H), 3.83 - 3.77 (m, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 2H), 3.36 - 3.33 (m, 1H), 3.17 - 3.11 (m, 1H), 2.91 - 2.90 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.07 (s, 9H)。 中間體 11-3 ： 1- 胺基 -3-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 丙 -2- 醇三氟乙酸酯
在0°C下向(3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-羥丙基)胺基甲酸三級丁酯 11-2（4.5 g，95%純度，9.95 mmol）在二氯甲烷（50 mL）中的溶液中添加三氟乙酸（20 mL）。在0°C下攪拌4小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到呈黃色固體的標題化合物（4.5 g，95%純度，93%產率）。R T= 1.55 min，C 19H 27NO 2Si的計算質量329.2，m/z實測值330.5 [M+H] +。 中間體 11-4 ： (3-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 )-2- 羥丙基 ) 胺基甲酸苄酯
在氮氣氛下在0°C下向1-胺基-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)丙-2-醇三氟乙酸酯 11-3（4.5 g，95%純度，9.44 mmol）和飽和碳酸氫鈉水溶液（20 mL）在四氫呋喃（20 mL）中的溶液中逐滴添加氯甲酸苄酯（2 mL，14.1 mmol）。在室溫下攪拌過夜後，將混合物在減壓下濃縮以去除四氫呋喃，隨後添加水（50 mL），並用乙酸乙酯（50 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 4 : 1）純化，得到呈無色油狀物的標題化合物（4 g，由HNMR得到的95%純度，87%產率）。
1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.64 - 7.63 (m, 4H), 7.45 - 7.29 (m, 11H), 5.08 (s, 2H), 3.88 - 3.77 (m, 1H), 3.70 - 3.67 (m, 1H), 3.62 - 3.58 (m, 1H), 3.44 - 3.39 (m, 1H), 3.23 - 3.16 (m, 1H), 2.85 - 2.66 (m, 1H), 1.06 (s, 9H)。 中間體 11-5 ： (6R)-5- 三級丁基 3- 乙基 2-(10,10- 二甲基 -3- 側氧基 -1,9,9- 三苯基 -2,8- 二氧雜 -4- 氮雜 -9- 矽雜十一烷 -6- 基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3,5(4H)- 二甲酸酯
在0°C下向(3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-羥丙基)胺基甲酸苄酯 11-4（2.5 g，95%純度，5.12 mmol）和(R)-5-三級丁基3-乙基6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯（1.8 g，5.53 mmol，純度95%）的四氫呋喃溶液（40 mL）中添加三苯基膦（2.7 g，10.3 mmol）和二氮烯-1,2-二甲酸二三級丁酯（2.3 g，9.99 mmol）。在50°C下攪拌4小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物。將粗殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化以得到呈白色固體的標題化合物（3 g，由HNMR得到的95%純度，74%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.66 - 7.32 (m, 15H), 5.73 - 5.65 (m, 0.8H), 5.30 - 4.57 (m, 5.2H), 4.35 - 3.72 (m, 6H), 3.17 - 2.82 (m, 1H), 2.67 - 2.45 (m, 1H), 1.51 - 1.33 (m, 12H), 1.11 - 0.92 (m, 12H)。 中間體 11-6 ： (3R)- 三級丁基 7-((( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在室溫下向(6R)-5-三級丁基3-乙基2-(10,10-二甲基-3-側氧基-1,9,9-三苯基-2,8-二氧雜-4-氮雜-9-矽雜十一烷-6-基)-6-甲基-6,7-二氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3,5(4H)-二甲酸酯 11-5（1 g，95%純度，1.26 mmol）的甲醇溶液（20 mL）中添加10%鈀/活性炭（100 mg）。在15 psi氫氣氛下在45°C下攪拌過夜後，將混合物過濾並濃縮以得到呈淺黃色油狀物的標題化合物（700 mg，由HNMR得到的95%純度，92%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.69 - 7.30 (m, 10H), 5.72 - 5.51 (m, 1H), 5.10 - 4.77 (m, 2H), 4.54 - 3.76 (m, 6H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 1.49 - 1.46 (m, 9H), 1.09 - 0.81 (m, 12H)。 中間體 11-7 (3R)- 三級丁基 9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在30°C下向(3R)-三級丁基7-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 11-6（1.7 g，2.81 mmol，95%純度）和1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 7-3（1.2 g，4.78 mmol）在2-甲基四氫呋喃（8 mL）中的溶液中緩慢添加水（8 mL）中的50%氫氧化鈉。在30°C下攪拌2小時後，將混合物用水（50 mL）稀釋，並在減壓下在室溫下濃縮以去除揮發物。將剩餘水層用2 M鹽酸鹽水溶液（50 mL）酸化，並用乙酸乙酯（50 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮以得到粗品。然後在0°C下將粗產物溶解於四氫呋喃（15 mL）中，隨後添加四氫呋喃（5 mL，5 mmol）中的1 M四丁基氟化銨。在0°C下攪拌4小時後，將混合物過濾並在減壓下濃縮以得到粗品。將粗品藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化以得到呈黃色油狀物的標題化合物（1.2 g，由HNMR得到的95%純度，80%產率）。R T= 1.65 min，C 25H 32F 2N 4O 5的計算質量506.2，m/z實測值507.1 [M+H] +。 中間體 11-8 ： (3R)-2-( 三級丁氧基羰基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲酸
在氮氣氛下在0°C下向(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 11-7（1.2 g，2.25 mmol，95%純度）在二氯甲烷（20 mL）中的溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（2 g，4.72 mmol）。在30°C下攪拌2小時後，將混合物用碳酸氫鈉水溶液調節至pH約8，並用二氯甲烷（40 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（80 mL）洗滌，並且經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（500 mg，93%純度，40%產率）。R T= 1.35 min，C 25H 30F 2N 4O 6的計算質量520.2，m/z實測值521.1 [M+H] +。 中間體 11-9 ： (3R)- 三級丁基 9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -7-( 甲基胺基甲醯基 )-10- 側氧基 -3,4,7,8,9,10- 六氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2(1H)- 甲酸酯
在0°C下向(3R)-2-(三級丁氧基羰基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲酸 11-8（500 mg，93%純度，0.893 mmol）的N,N-二甲基甲醯胺溶液（5 mL）中添加甲胺鹽酸鹽（130 mg，1.93 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（450 mg，3.48 mmol）和O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（850 mg，2.24 mmol）。在30°C下攪拌16小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物。將粗殘餘物藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化以得到呈白色固體的標題化合物（400 mg，由HNMR得到的90%純度，76%產率）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.41 - 7.37 (m, 1.3H), 7.33 - 7.28 (m, 0.7H), 7.12 - 7.08 (m, 2H), 6.70 - 6.32 (m, 1H), 6.05 - 5.88 (m, 2H), 5.27 - 5.16 (m, 1H), 4.98 - 4.81 (m, 2H), 4.31 - 4.21 (m, 1H), 4.08 - 4.04 (m, 0.6H), 3.91 - 3.80 (m, 0.7H), 3.44 - 3.35 (m, 0.7H), 3.04 - 2.93 (m, 1H), 2.79 - 2.77 (m, 2H), 2.67 - 2.59 (m, 2H), 1.59 - 1.56 (m, 3H), 1.50 - 1.46 (m, 9H), 1.18 - 1.11 (m, 3H)。 化合物 11 ： (3R)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺
在25°C下將(3R)-三級丁基9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-7-(甲基胺基甲醯基)-10-側氧基-3,4,7,8,9,10-六氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2(1H)-甲酸酯 11-9（400 mg，0.675 mmol，90%純度）在二㗁𠮿（5 mL，20 mmol）中的4 M鹽酸鹽中的溶液攪拌3小時。然後將反應混合物濃縮以得到殘餘物。在0°C下向粗殘餘物的N,N-二甲基甲醯胺溶液（4 mL）中添加4-氯-3-氰基苯甲酸（200 mg，1.10 mmol）、N-乙基-N-異丙基丙-2-胺（500 mg，3.87 mmol）和O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽（600 mg，1.58 mmol）。在30°C下攪拌2小時後，將混合物在減壓下濃縮以得到粗殘餘物，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 5%至100%）純化以得到呈白色固體的標題化合物（320 mg，75%產率，95%純度）。R T= 1.61 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值596.9 [M+H] +。 化合物 11A和 11B和 11C和 11D ： (3R,7R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺（ 11A ）和 (3R,7R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺（ 11B ）和 (3R,7S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺（ 11C ）和 (3R,7S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-N,3- 二甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 甲醯胺（ 11D ）
將(3R)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-N,3-二甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-甲醯胺 化合物 11（400 mg，95%純度，0.637 mmol）的外消旋物藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IA, 5 μm 30 * 250 mm，MeOH : DCM = 80 : 20，25 ml/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的所需的 級分 A（100 mg， 化合物 11A和 化合物 11B的混合物）、 化合物 11C（77 mg，99.9%純度，20.3%產率，99.8%立體純）和 化合物 11D（40 mg，99.8%純度，10.5%產率，99.6%立體純）。將 級分 A（100 mg）藉由手性HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IE, 5 μm 30 * 250 mm，Hex : EtOH = 40 : 60，20 ml/min；柱溫：30°C；波長：254 nm）分離，得到呈白色固體的所需產物 化合物 11A（25 mg，96.8%純度，6.37%產率，100%立體純）和 化合物 11B（25 mg，99.0%純度，6.51%產率，100%立體純）。 化合物 11A：
R T= 2.206 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。
手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 10.639 min）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.30 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.51 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.10 - 5.40 (m, 3H), 4.85 - 4.26 (m, 3H), 3.91 - 3.81 (m, 2H), 3.17 - 2.97 (m, 1H), 2.76 - 2.68 (m, 4H), 1.68 - 1.57 (m, 3H), 1.32 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。 1F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 80.89 (s, 2F)。 化合物 11B：
R T= 3.584 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.1 [M+H] +。
手性HPLC（柱：Chiralpak IE 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：己烷 : EtOH = 40 : 60，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 13.735 min）。
1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.35 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.11 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.50 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.98 - 5.36 (m, 3H), 4.83 - 4.51 (m, 3H), 4.09 - 4.06 (m, 1H), 3.39 (dd, J= 13.6, 5.2 Hz, 1H), 3.13 - 2.99 (m, 1H), 2.81 - 2.72 (m, 4H), 1.58 - 1.57 (m, 3H), 1.32 (d, J= 6.8 Hz, 3H)。 1F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -81.11 (s, 2F)。 化合物 11C：
R T= 2.604 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。
手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 80 : 20，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 5.941 min）。 1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.78 (s, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 2H), 7.38 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.50 (t, J= 74.0 Hz, 1H), 5.96 - 5.43 (m, 3H), 4.83 - 4.30 (m, 3H), 4.09 (dd, J= 13.6, 3.2 Hz, 1H), 3.43 (dd, J= 13.6, 4.8 Hz, 1H), 3.21 - 3.04 (m, 1H), 2.79 (d, J= 4.8 Hz, 3H), 2.71 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 1.56 - 1.55 (m, 3H), 1.27 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。 1F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.09 (s, 2F)。 化合物 11D：
R T= 2.405 min，C 29H 27ClF 2N 6O 4的計算質量596.2，m/z實測值597.2 [M+H] +。
手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 µm 4.6 * 250 mm；流動相：MeOH : DCM = 80 : 20，以1.0 mL/min；溫度：30°C；波長：254 nm，R T= 13.281 min）。 1HNMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.77 (s, 1H), 7.65 - 7.60 (m, 2H), 7.29 - 7.26 (m, 2H), 7.08 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.50 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 5.95 - 5.33 (m, 3H), 4.86 - 4.30 (m, 3H), 3.92 - 3.80 (m, 2H), 3.21 - 2.97 (m, 1H), 2.73 - 2.68 (m, 4H), 1.60 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.27 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。 1F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 80.89 (s, 2F)。 化合物 12 、 13B 和 13D
Figure 02_image103
中間體 12-1 ： (6R)- 乙基 5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-6- 甲基 -2-(2,2,11,11- 四甲基 -9- 側氧基 -3,3- 二苯基 -4,10- 二氧雜 -8- 氮雜 -3- 矽雜十二烷 -6- 基 )-4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯
向(R)-乙基5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯 Int A（1.5 g，90%純度，3.62 mmol）、(3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2-羥丙基)胺基甲酸三級丁酯 11-2（2 g，95%純度，4.42 mmol）和三苯基膦（1.35 g，5.15 mmol）在四氫呋喃（20 mL）中的溶液中添加偶氮二甲酸二三級丁酯（1.2 g，5.21 mmol）。在50°C下攪拌過夜後，將反應冷卻至室溫。將反應混合物倒入水（30 mL）中並用乙酸乙酯（30 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 3 : 1）純化，得到呈白色固體的標題化合物（2.2 g，由LCMS得到的97%純度，75%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.18, 2.23 min，C 42H 50ClN 5O 6Si的計算質量783.3，m/z實測值784.0 [M+H] +。 中間體 12-2 ： (6R)- 乙基 2-(1- 胺基 -3-(( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 丙 -2- 基 )-5-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-6- 甲基 -4,5,6,7- 四氫 -2H- 吡唑并 [4,3-c] 吡啶 -3- 甲酸酯
向(6R)-乙基5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-2-(2,2,11,11-四甲基-9-側氧基-3,3-二苯基-4,10-二氧雜-8-氮雜-3-矽雜十二烷-6-基)-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯 12-1（2.2 g，97%純度，2.84 mmol）在二氯甲烷（10 mL）中的溶液中添加三氟乙酸（5 mL）。在0°C下攪拌1小時後，將混合物在減壓下濃縮，得到呈無色油狀物的標題化合物（2.3 g，由LCMS得到的94%純度，95%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.26 min和1.39 min，C 37H 42ClN 5O 4Si的計算質量683.3，m/z實測值684.1 [M+H] +。 中間體 12-3 ： 5-((3R)-7-((( 三級丁基二苯基矽基 ) 氧基 ) 甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 )-2- 氯苄腈
向(6R)-乙基2-(1-胺基-3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)丙-2-基)-5-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-6-甲基-4,5,6,7-四氫-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-3-甲酸酯三氟乙酸酯 12-2（2.3 g，94%純度，2.71 mmol）在1,4-二㗁𠮿（100 mL）中的溶液中添加1,5,7-三氮雜雙環[4.4.0]癸-5-烯（1.9 g，13.7 mmol）。在100°C下攪拌2小時後，將反應混合物冷卻，濃縮，倒入水（30 mL）中，並用乙酸乙酯（20 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 90%至100%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（1.7 g，由LCMS得到的86%純度，85%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.35 min和1.40 min，C 35H 36ClN 5O 3Si的計算質量637.2，m/z實測值638.4 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 - 7.55 (m, 7H), 7.47 - 7.34 (m, 6H), 6.13 - 5.32 (m, 2H), 4.80 - 4.19 (m, 3H), 4.08 - 4.02 (m, 1H), 3.94 - 3.78 (m, 2H), 3.21 - 2.87 (m, 1H), 2.66 - 2.62 (m, 1H), 1.32 - 1.16 (m, 3H), 1.07 - 1.05 (m, 9H)。 化合物 12 ： 2- 氯 -5-((3R)-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-7-( 羥甲基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 ) 苄腈
向5-((3R)-7-(((三級丁基二苯基矽基)氧基)甲基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-羰基)-2-氯苄腈 12-3（200 mg，86%純度，0.269 mmol）和1-(1-溴乙基)-4-(二氟甲氧基)苯 7-3（100 mg，90%純度，0.358 mmol）在2-甲基四氫呋喃（4 mL）中的溶液中添加50%氫氧化鈉水溶液（2 mL）和苄基三乙基氯化銨（6 mg，0.026 mmol）。在50°C下攪拌2小時後，將反應混合物冷卻至室溫，用水（10 mL）稀釋，濃縮以去除2-甲基四氫呋喃，並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥，過濾。濃縮濾液以得到黃色殘餘物。向四氫呋喃（0.6 mL）中的上述黃色殘餘物添加四氫呋喃（0.6 mL，0.6 mmol）中的1 M四丁基氟化銨。在室溫下攪拌1小時後，將反應混合物用水（5 mL）稀釋並用乙酸乙酯（10 mL）萃取兩次。將合併的有機層用鹽水（10 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由C18柱（乙腈 : 水 = 60%至75%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（120 mg，由LCMS得到的98.0%純度，66%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 2.868 min, 3.055 min, 3.202 min, 3.315 min，C 28H 26ClF 2N 5O 4的計算質量569.2，m/z實測值570.2 [M+H] +。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.43 - 7.29 (m, 2H), 7.17 - 7.08 (m, 2H), 6.73 - 6.33 (m, 1H), 6.17 - 5.25 (m, 2H), 4.90 - 4.22 (m, 3H), 4.04 - 3.88 (m, 1H), 3.83 - 3.23 (m, 2H), 3.19 - 2.91 (m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 1H), 1.61 - 1.53 (m, 3H), 1.35 - 1.22 (m, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ - 81.11 - -81.24 (m, 2F)。 中間體 13-1 ： 5-((3R)-7-( 胺基甲基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -2- 羰基 )-2- 氯苄腈
在0°C下向2-氯-5-((3R)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-7-(羥甲基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-羰基)苄腈 化合物 12（1.1 g，93%純度，1.80 mmol）在二氯甲烷（12 mL）中的溶液中添加甲磺醯氯（0.2 mL，2.62 mmol）和三乙胺（0.8 mL，5.76 mmol）。在室溫下攪拌30分鐘後，將反應混合物用水（10 mL）淬滅，用乙酸乙酯（15 mL）萃取兩次。將合併的有機層經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。濃縮濾液以得到殘餘物。向上述殘餘物在N,N-二甲基甲醯胺（14 mL）中的溶液中添加疊氮化鈉（800 mg，12.3 mmol）。在50°C下攪拌24小時後，將反應混合物冷卻至室溫，用水（14 mL）和四氫呋喃（14 mL）稀釋，隨後添加三苯基膦（6.4 g，2.44 mmol）。在攪拌1小時後，將反應混合物用乙酸乙酯（15 mL）萃取三次。將合併的有機層經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 =1 : 1到二氯甲烷 : 甲醇 = 10 : 1）純化，得到呈黃色固體的標題化合物（1.1 g，由LCMS得到的33%純度，36%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.65 min，C 28H 27ClF 2N 6O 3的計算質量568.2，m/z實測值568.9 [M+H] +。 化合物 13 ： N-(((3R)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-(1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺
在0°C下向5-((3R)-7-(胺基甲基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-2-羰基)-2-氯苄腈 13-1（1.1 g，33%純度，0.638 mmol）在二氯甲烷（8 mL）中的溶液中添加乙酸酐（100 mg，0.882 mmol）和三乙胺（0.2 mL，1.44 mmol）。在該溫度下攪拌1小時後，將反應混合物倒入水（5 mL）中並用乙酸乙酯（10 mL）萃取三次。將合併的有機層用鹽水（5 mL）洗滌，經Na 2SO 4（固體）乾燥並過濾。將濾液濃縮並藉由矽膠柱層析法（石油醚 : 乙酸乙酯 = 1 : 1到二氯甲烷 : 甲醇 = 10 : 1）純化以得到粗品，將其藉由C18柱（乙腈 : 水 = 50%至65%）純化，得到呈白色固體的標題化合物（220 mg，由LCMS得到的97%純度，55%產率）。LC-MS（ESI）：R T= 1.54 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4S的計算質量610.2，m/z實測值610.9 [M+H] +。 化合物 13A 和 13B 和 13C 和 13D ： N-(((3R,7R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺（ 13A ）和 N-(((3R,7R*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺（ 13B ）和 N-(((3R,7S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((R*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺（ 13C ）和 N-(((3R,7S*)-2-(4- 氯 -3- 氰基苯甲醯基 )-9-((S*)-1-(4-( 二氟甲氧基 ) 苯基 ) 乙基 )-3- 甲基 -10- 側氧基 -1,2,3,4,7,8,9,10- 八氫吡啶并 [4’,3’:3,4] 吡唑并 [1,5-a] 吡 𠯤 -7- 基 ) 甲基 ) 乙醯胺（ 13D ）
將N-(((3R)-2-(4-氯-3-氰基苯甲醯基)-9-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)乙基)-3-甲基-10-側氧基-1,2,3,4,7,8,9,10-八氫吡啶并[4’,3’:3,4]吡唑并[1,5-a]吡𠯤-7-基)甲基)乙醯胺 化合物 13（220 mg，97%純度，0.349 mmol）的外消旋物藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IA 5 μm 30 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH = 60 : 40，以25 g/min；柱溫：40°C；波長：214 nm）分離，得到 級分 I和兩種粗品純手性異構物，將其用C18柱進一步純化（乙腈 : 水（+ 0.2%碳酸氫銨） = 5%至95%)，得到呈白色固體的 化合物 13A（15 mg，由LCMS得到的98.6%純度，7%產率，100%立體純）和 化合物 13D（12 mg，由LCMS得到的98.8%純度，6%產率，97.8%立體純）。 級分 I藉由手性製備型HPLC（分離條件：柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 30 * 250 mm；流動相：CO 2: MeOH = 75 : 25，以25 g/min；柱溫：40°C；波長：214 nm）分離以得到另外兩種粗品純手性異構物，將其藉由C18柱純化（乙腈 : 水（+ 0.2%碳酸氫銨） = 5%至95%），得到呈白色固體的 化合物 13B（26 mg，由LCMS得到的99.9%純度，12%產率，100%立體純）和 化合物 13C（31 mg，由LCMS得到的99.6%純度，14%產率，100%立體純）。 化合物 13A ：
LC-MS（ESI）：R T= 4.023 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4S的計算質量610.2，m/z實測值611.3 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH = 60 : 40，以3 g/min；溫度：40°C；波長：230 nm），R T= 5.15 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.39 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.17 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.54 (t, J= 73.2 Hz, 1H), 6.16 - 5.95 (m, 1H), 5.84 - 5.23 (m, 2H), 4.94 - 4.36 (m, 3H), 3.64 - 3.60 (m, 1H), 3.38 (s, 2H), 3.12 - 2.99 (m, 2H), 2.68 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 1.89 (s, 3H), 1.59 - 1.57 (m, 3H), 1.29 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -81.32 (s, 2F)。 化合物 13B ：
LC-MS（ESI）：R T= 4.039 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4S的計算質量610.2，m/z實測值611.3 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO2 : MeOH = 75 : 25，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm），R T= 6.73 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 (s, 1H), 7.60 (s, 2H), 7.32 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.11 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.52 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.40 (br s, 1H), 5.98 (br s, 1H), 5.53 - 4.35 (m, 3H), 4.16 (s, 1H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 3.41 (dd, J= 13.2, 10.0 Hz, 1H), 3.26 (dd, J= 13.2, 4.4 Hz, 1H), 3.08 (br s, 1H), 2.69 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.59 - 1.56 (m, 3H), 1.30 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -81.01 (s, 2F)。 化合物 13C ：
LC-MS（ESI）：R T= 4.124 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4S的計算質量610.2，m/z實測值611.3 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IB N-5 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO2 : MeOH = 75 : 25，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm），R T= 7.78 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.74 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.34 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 2H),  6.53 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.37 - 6.30 (m, 1H), 5.98 (br s, 1H), 5.83 - 5.31 (m, 1H), 4.83 - 4.31 (m, 2H), 4.22 - 4.12 (m, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 1H), 3.60 - 3.48 (m, 1H), 3.41 (dd, J= 12.8, 10.4 Hz, 1H), 3.27 (dd, J= 12.8, 4.4 Hz, 1H), 3.08 (br s, 1H), 2.70 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.55 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.30 (d, J= 6.4 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -80.99 (s, 2F)。 化合物 13D ：
LC-MS（ESI）：R T= 3.556 min，C 30H 29ClF 2N 6O 4S的計算質量610.2，m/z實測值611.2 [M+H] +。手性HPLC（柱：Chiralpak IA 5 μm 4.6 * 250 mm；流動相：CO 2: EtOH = 60 : 40，以3 g/min；溫度：40°C；波長：214 nm），R T= 8.23 min）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.75 (s, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.36 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.15 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.53 (t, J= 73.6 Hz, 1H), 6.03 (br s, 1H), 5.79 - 5.25 (m, 2H), 4.87 - 4.33 (m, 3H), 3.59 (dd, J= 13.2, 4.4 Hz, 1H), 3.53 - 3.30 (m, 2H), 3.06 (dd, J= 13.2, 7.2 Hz, 2H), 2.68 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.65 - 1.53 (m, 3H), 1.28 (d, J= 6.0 Hz, 3H)。 19F NMR (376 MHz, CDCl 3) δ -81.30 (s, 2F)。 具有式 (I) 之化合物的抗 HBV 活性 程序
使用HepG2.117細胞系測量抗HBV活性，該細胞系係一種穩定的誘導型HBV產生細胞系， 其在多西環素缺乏下複製HBV（Tet-off系統）。HepG2細胞系可從ATCCR獲得，編號HB-8065。HepG2細胞系的轉染可以是如Sun和Nassal在2006, Journal of Hepatology [肝臟病學雜誌] 45 (2006) 636-645「 Stable HepG2- and Huh7-based human hepatoma cell lines for efficient regulated expression of infectious hepatitis B virus[穩定的基於HepG2-和Huh7的人肝癌細胞系用於有效調節感染性B型肝炎病毒的表現]」中所描述的。
對於抗病毒測定，HBV複製被誘導，隨後用一系列稀釋的化合物在96孔板中進行處理。處理3天之後，藉由使用即時PCR和HBV特異引物集和探針進行胞內HBV DNA的定量來確定抗病毒活性。
該等化合物的細胞毒性係使用HepG2或HepG2.117細胞進行測試的，將該等細胞在化合物存在下孵育3或4天。使用珀金埃爾默公司（PERKIN ELMER）的ATPlite發光測定系統（Luminescence Assay System）」評估細胞的活力。 結果
N.D = 未確定
CC50值：孵育3天，除非標有*（* = 孵育4天）
化合物編號 EC50（µM，平均值） CC50（µM，平均值）
1B 1.477 ＞ 50.0
1D 0.491 ＞ 50.0
2B 0.183 ＞ 50.0
3A 0.427 ＞ 50.0
4 0.227 25.0
5 0.414 ＞ 50.0
6A 0.032 4.5
7A 0.194 46.3
7B 0.262 ＞ 50.0
8A 0.067 ＞ 50.0
9A 0.553 ＞ 50.0
9B 0.13 ＞ 50.0
10A 0.072 32.8
10B 0.294 ＞ 50.0
11B 0.058 ＞ 50.0
12 0.068 24.9
13B 0.167 ＞ 50.0
13D 0.344 ＞ 50.0
誘導或不誘導 HBc 斑點
將HepG2.117細胞在DMSO或測試化合物的存在下、在多西環素缺乏下培養。
在甲醛固定和Triton-X-100透化後，用抗HBc一抗免疫標記B型肝炎病毒核心蛋白（HBc）。將ALEXA 488綴合的二抗用於螢光檢測原發性HBV核心信號。將CELLMASK Deep Red和HOECHST 33258分別用於細胞質和細胞核的檢測，這允許細胞區室的分割。
將允許檢測不同形態表型的圖像分析軟體用於確定細胞質或細胞核中HBV核心的水平（高含量成像分析）。
無
無
無

Claims (21)

  1. 一種具有式 (I) 之化合物，
    Figure 03_image105
    (I) 或其立體異構形式或互變異構形式，其中， R 1選自由以下組成之群組：苯基、吡啶基、嘧啶基、嗒𠯤基和吡𠯤基，該等基團各自被1、2或3個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自由以下組成之群組：鹵基、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3； R 2為氫或選自由以下組成之群組的取代基：CHF 2、CF 3、C 1-4烷基、C 1-4烷基OC 1-4烷基和C 3-6環烷基； Q表示選自由以下組成之群組的環：苯基、五員芳族雜環和六員芳族雜環； n表示1、2或3； 每個R 3獨立地表示選自由以下組成之群組的取代基：CF 3、CHF 2、CH 2F、C 1-6烷基、OC 1-6烷基、OCF 3、OCHF 2和C 3-6環烷基； 在n表示2或3的情況下，相鄰環原子上的兩個R 3與所述環原子一起視需要形成5員環或6員環，所述環視需要包含各自獨立地選自N、O和S的1、2或3個雜原子，所述環視需要帶有一個或多個氟或側氧基取代基； W係CHR 4並且X係CHR 5，其中R 4和R 5各自獨立地選自由以下組成之群組：氫；CONR 6R 7；苯基；5員雜環基；6員雜環基；5員雜芳基；6員雜芳基；C 3-6環烷基；C 1-4烷基；和被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 8R 9NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、5員雜芳基、6員雜芳基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基；其中R 4和R 5不皆為氫； R 6和R 7各自獨立地選自氫，C 3-6環烷基，C 1-4烷基，被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基，或者R 6和R 7與R 6和R 7所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 8和R 9各自獨立地選自氫，C 3-6環烷基，C 1-4烷基，被鹵基、OH或OC 1-4烷基取代的C 1-4烷基，或者R 8和R 9與R 8和R 9所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或者W和X合起來係CR 10=N或CR 11=CR 12； R 10、R 11和R 12各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、鹵基、CONR 13R 14、苯基、5員雜環基、6員雜環基、5員雜芳基、6員雜芳基、C 3-6環烷基、C 1-4烷基和被以下取代的C 1-4烷基：OH、OC 1-4烷基、鹵基、COOH、CONR 15R 16、NHCOC 1-4烷基、NHCOC 3-6環烷基、SO 2NHC 1-4烷基、SO 2NHC 3-6環烷基、NHSO 2C 1-4烷基或NHSO 2C 3-6環烷基； R 13和R 14各自獨立地選自氫、C 1-4烷基、C 3-6環烷基，或者R 13和R 14與R 13和R 14所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； R 15和R 16各自獨立地選自氫、C 1-4烷基、C 3-6環烷基，或者R 15和R 16與R 15和R 16所附接的氮一起形成視需要取代的4員至8員單環雜環基； 或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
  2. 如請求項1所述之化合物，其中，具有式 (I) 之結構滿足式 (IA)
    Figure 03_image107
    (IA)， 其中R 1a、R 1b和R 1c各自獨立地選自由以下組成之群組：氫、鹵基、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、CN、CF 3、CHF 2、OCHF 2和OCF 3，其中R 1a、R 1b和R 1c中的至少一個不為氫。
  3. 如請求項2所述之化合物，其中，具有式 (IA) 之結構滿足式 (IB)
    Figure 03_image007
    。
  4. 如請求項3所述之化合物，其中，具有式 (IB) 之結構滿足式 (IE)
    Figure 03_image013
    (IE)。
  5. 如請求項1所述之化合物，其中，具有式 (I) 之結構滿足式 (IC)
    Figure 03_image009
    (IC)。
  6. 如請求項5所述之化合物，其中，具有式 (IC) 之結構滿足式 (ID)
    Figure 03_image011
    (ID)。
  7. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中，R 4和R 5之一係H，且另一個選自由以下組成之群組：CONHC 1-4烷基、C 1-4烷基、被OH取代的C 1-4烷基和被NHCOC 1-4烷基取代的C 1-4烷基。
  8. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中，W和X合起來係CH=N或CH=CH。
  9. 如請求項2至4中任一項所述之化合物，其中，R 1a係鹵基，R 1b選自由鹵基和氰基組成之群組，並且其中R 1c係氫。
  10. 如請求項9所述之化合物，其中，鹵基係氯。
  11. 如請求項1、2、3或5中任一項所述之化合物，其中，n係1。
  12. 如前述請求項中任一項所述之化合物，其中，一個R 3係OCHF 2。
  13. 一種化合物，該化合物選自由以下組成之群組：下列化合物1-13或其立體異構形式或互變異構形式：
    Figure 03_image015
    Figure 03_image017
          
    Figure 03_image018
    Figure 03_image020
          
    Figure 03_image021
    ，
    Figure 03_image022
    ，
    Figure 03_image023
    ，
    Figure 03_image024
    ，
    Figure 03_image025
    ，
    Figure 03_image026
    ，  
    Figure 03_image027
    ，
    Figure 03_image028
    、和
    Figure 03_image029
    ，      
    或其藥學上可接受的鹽、N-氧化物或溶劑化物。
  14. 一種藥物組成物，該藥物組成物包含如請求項1至13中任一項所述之化合物並進一步包含至少一種藥學上可接受的賦形劑。
  15. 如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物，其用作藥物。
  16. 如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物，其用於預防或治療有需要的受試者的HBV感染或HBV誘發的疾病。
  17. 如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物，其用於預防或治療慢性B型肝炎。
  18. 一種治療有需要的個體的HBV感染或HBV誘發的疾病之方法，該方法包括向該個體施用治療有效量的如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物。
  19. 一種產品，該產品包含第一化合物和第二化合物作為組合製劑用於在有需要的受試者的HBV感染或HBV誘發的疾病的預防或治療中同時、分開或順序使用，其中所述第一化合物不同於所述第二化合物，其中所述第一化合物係如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物，並且其中所述第二化合物係另一種HBV抑制劑。
  20. 如請求項19所述之產品，其中，所述第二化合物係選自以下群組的另一種HBV抑制劑，該群組由以下組成：選自HBV複方藥物的治療劑、HBV疫苗、HBV DNA聚合酶抑制劑、免疫調節劑、toll樣受體（TLR）調節劑、干擾素α受體配位基、透明質酸酶抑制劑、B型肝炎表面抗原（HBsAg）抑制劑、細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4（CTLA-4）抑制劑、親環蛋白抑制劑、HBV病毒進入抑制劑、反義寡核苷酸靶向病毒mRNA、短干擾RNA（siRNA）和ddRNAi內切核酸酶調節劑、核糖核苷酸還原酶抑制劑、HBV E抗原抑制劑、共價閉合環狀DNA（cccDNA）抑制劑、類菌綠烯醇X受體促効劑、HBV抗體、CCR2趨化因子拮抗劑、胸腺肽促効劑、細胞介素、核蛋白調節劑、維甲酸誘導基因1刺激因子、NOD2刺激因子、磷脂醯肌醇3-激酶（PI3K）抑制劑、吲哚胺-2,3-雙加氧酶（IDO）途徑抑制劑、PD-1抑制劑、PD-L1抑制劑、重組胸腺肽α-1、布魯頓酪胺酸激酶（BTK）抑制劑、KDM抑制劑、HBV複製抑制劑、精胺酸酶抑制劑以及其他HBV藥物。
  21. 如請求項1至13中任一項所述之化合物或如請求項14所述之藥物組成物，其用於預防或治療受試者的HBV感染或HBV誘發之疾病，其中該化合物或藥物組成物與另一種HBV抑制劑組合施用至該受試者。
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