TW202308635A - 治療與監測帕金森氏病之方法 - Google Patents

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維奈 Ｍ 達里亞尼
羅德里格斯 莎拉 亨特沃克
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Abstract

本發明係關於用本文所提供之化合物治療個體之帕金森氏病的方法，包含該化合物之醫藥組合物，以及監測個體對該治療之反應的方法。

Description

治療與監測帕金森氏病之方法
本發明係關於用於治療及/或監測帕金森氏病之方法。
組合基因及生物化學證據表明神經退化性病症之發病機制中的某些激酶作用(Christensen, K.V. (2017) Progress in Medicinal Chemistry56:37-80；Fuji, R.N.等人 (2015) Sci. Transl. Med.7(273):ra15；Taymans, J.M.等人 (2016) Curr. Neuropharm.14(3):214-225)。帕金森氏病為影響神經系統呈現運動及非運動症狀之神經退化性疾病。儘管帕金森氏病之確切病因尚未知，但咸信基因及環境因素之組合促成了該疾病之病因。涉及帕金森氏病之基因為Park8，其編碼富含白胺酸之重複激酶2 (LRRK2)，一種為帕金森氏病(PD)之關鍵治療目標的複合傳訊蛋白。在帕金森氏病之家族性及非家族性(偶發性)形式中均發現了Park8之突變，且LRRK2之增加激酶活性涉及帕金森氏病之發病機制。LRRK2基因之突變為家族性帕金森氏病之最頻繁基因學病因及溶酶體功能障礙之主要驅動者，其促使形成帕金森氏病發病機制及神經退化。(Chai C等人. Curr Genomics.2013;14:464-471；Healy DG等人. Lancet Neurol. 2008;7:583-590；Henry AG等人. Human Mol. Gen.2015;24:6013-6028；Cookson MR等人. Nat. Rev. Neurosci.2016;11:791-797)。LRRK2調節溶酶體生成及功能，其在帕金森氏病中減弱且可藉由LRRK2抑制恢復，藉此可能積極地改變具有基因LRRK2突變之患者以及患有偶發性帕金森氏病之患者的疾病進展。
組合基因及生物化學證據支持其中LRRK2激酶功能有關聯地涉及PD之偶發性及家族性形式之發病機制的模型，且因此LRRK2激酶抑制劑似乎適用於治療(Christensen, K.V. (2017) Progress in Medicinal Chemistry56:37-80)。抑制LRRK2之激酶活性作為帕金森氏病之治療正在研究中(Fuji等人, 2015；Taymans, J.M.等人 (2016) Current Neuropharmacology14(3):214-225)。
已研究LRRK2激酶抑制劑以用於治療阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病、ALS及其他神經退化性疾病(Estrada, A.A.等人 (2015) Jour. Med. Chem.58(17): 6733-6746；Estrada, A.A.等人 (2013) Jour. Med. Chem.57:921-936；Chen, H.等人 (2012) Jour. Med. Chem. 55:5536-5545；Estrada, A.A.等人 (2015) Jour. Med. Chem. 58:6733-6746；Chan, B.K.等人 (2013) ACS Med. Chem. Lett. 4:85-90；US 8354420；US 8569281；US 8791130；US 8796296；US 8802674；US 8809331；US 8815882；US 9145402；US 9212173；US 9212186；US 9932325；WO 2011/151360；WO 2012/062783；WO 2013/079493)。
已知投與各種LRRK2激酶抑制劑會誘導溶酶體形態及與溶酶體相關之脂質之組織含量變化。因此，在猴中投與LRRK2抑制劑GNE-7915及GNE-0877使得尿液二-22:6-BMP減少(Fuji RN等人 (2015) Sci. Transl. Med.7(273):273ra215；Baptista MA, et al Baptista等人, (2020) Sci. Transl. Med.12(540))。
二-22:6-BMP為通常位於溶酶體及晚期胞內體之內部膜中之磷脂，且負責溶酶體降解。亦在LRRK2基因剔除小鼠腎臟之近端小管中觀測到具有經堆疊輪狀膜及脂質之溶酶體的數目擴大且增加(Herzig MC等人 (2011) Hum. Mol. Genet.20(21):4209-4223)，暗示溶酶體中之累積磷脂膜。藥物誘導之磷脂病(PLD)為後天性溶酶體貯積病，其特徵在於磷脂及藥物在不同組織(諸如腎臟、心臟及肺)中之溶酶體中過量累積(Shayman JA等人 (2013) Biochim. Biophys. Acta.1831(3):602-611；Atashrazm, F. (2016) Clinical Pharmacology: Advances and Applications8:177-189)。
需要用於治療及/或監測帕金森氏病之治療進程的方法。
以下簡要概述並非意欲包括本發明之所有特徵及態樣，亦不暗示本發明必須包括此概述中論述之所有特徵及態樣。
本發明係關於用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至約800毫克/天之間的化合物I，N2-(3-(2-(2H-1,2,3-三唑-2-基)丙-2-基)-1-環丙基-1H-吡唑-5-基)-N4-乙基-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺：
Figure 02_image003
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在另一態樣中，提供一種治療帕金森氏病之方法，該方法包含向有需要之個體投與醫藥組合物，其包含約70至約800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image005
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
在一個態樣中，本發明提供用約70至約225毫克/天之化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物治療帕金森氏病之方法。
在另一態樣中，本發明係關於用用約70至約80毫克/天之化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物治療帕金森氏病之方法。
在其他態樣中，向個體投與約70 mg、約75 mg、約80 mg、約105 mg、約130 mg、約150 mg、約225 mg、約250 mg、約300 mg或約400 mg。
在一個態樣中，經口投與化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一個態樣中，化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物係每天投與一次。
在另一態樣中，化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物係每天投與兩次。
在其他態樣中，本文所提供之方法係用於治療人類。在又其他態樣中，該等方法用於治療家族性帕金森氏病。在又一態樣中，該等方法用於治療偶發性帕金森氏病。
在又一態樣中，該方法使得個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)減少。
在又一態樣中，該方法使得個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)減少。
在又一態樣中，該方法使得個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)減少。
在另一態樣中，提供用於一種減少患有帕金森氏病之個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一個態樣中，pS935減少了至少41%至97%。
在又一態樣中，提供一種減少患有帕金森氏病之個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一個態樣中，pRab10減少了至少44%至97%。
在另一態樣中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一個態樣中，BMP(22:6/22:6)或BMP(22:6/22:6)/肌酐減少了22%至86%或至少40%。
在另一態樣中，提供LRRK2抑制劑用於治療帕金森氏病之用途，其中該抑制劑以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一個態樣中，提供LRRK2抑制劑在製造用於治療帕金森氏病之藥劑中的用途，其中該抑制劑以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在另一態樣中，提供藉由偵測患者樣本中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)、磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)或溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)之減少來評估治療的方法。
在一個態樣中，提供一種監測個體對本文所提供之治療方法之反應的方法，該方法包含：(a)量測用約70至800毫克/天之間的化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物治療之個體的測試樣本中之一或多個pS935、pRab10及/或BMP物種之量；(b)比較在(a)中量測之一或多個pS935、pRab10及/或BMP物種與一或多個參考值之間的量差；及(c)根據該比較判定化合物、醫藥組合物或其給藥方案是否提高一或多個pS935、pRab10及/或BMP物種含量以用於治療帕金森氏病。
在另一態樣中，該方法進一步包含改變化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物之給藥劑量或頻率，或向患者投與之療法過程。
在又一態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含70至800 mg之化合物I，
Figure 02_image007
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
在另一態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含約70至225 mg之化合物I。
在又一態樣中，本發明係關於化合物I之醫藥組合物，其適用於投與約225毫克/天或高達800毫克/天。
在又其他態樣中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包含約70 mg、約75 mg、約80 mg、約105 mg、約130 mg、約150 mg、約225 mg、約250 mg、約300 mg或約400 mg之化合物I。
在另一態樣中，本發明係關於化合物I之醫藥組合物，其適用於經口投與。
在其他態樣中，本發明係關於化合物I之醫藥組合物，其適用於每天投與一次、兩次或三次。
本發明之特徵及優勢將自本發明之較佳實施例動以下更特定描述顯而易見，如附圖中所示，其中在不同視圖中，相同參考字符係指相同部分。圖式未必按比例繪製，實際上重點一般放在說明本發明之原理上。
相關申請案之交叉參考本申請案主張2021年4月30日申請之美國臨時申請案第63/182,207號根據35U.S.C.§119(e)之權益，該申請案以全文引用的方式併入本文中。
定義除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所瞭解相同的含義。雖然可在本發明之實踐或測試中使用類似或等效於本文所述之方法及材料的任何方法及材料，但現在描述較佳的方法及材料。一般而言，與細胞及分子生物學及化學結合使用之命名法且其技術為此項技術中熟知且常用的彼等命名法。非具體限定之某些實驗技術一般根據此項技術中熟知之習知方法及如本說明書通篇中所引用且論述之各個通用及較特定之參考文獻中所述來進行。出於清楚起見，以下術語定義如下。
字詞「包含(comprise/comprising)」、「包括(include/including/includes)」用於本說明書及技術方案中時意欲指定所述特徵、整體、組分或步驟之存在，但其並不排除一或多種其他特徵、整體、組分、步驟或其群組之存在或添加。
術語「治療(treat)」及「治療(treatment)」係指治療性治療及防治性或預防性量測兩者，其中目標為預防或減緩(減輕)不當的生理變化或病症，諸如溶酶體功能障礙病症之生長、發展或擴散。出於本發明之目的，有益或所要臨床結果包括(但不限於)症狀緩解、疾病程度減輕、疾病病況穩定(亦即不惡化)、疾病進展延緩或減緩、疾病病況改善或減輕及病徵緩解(部分或完全)，該等結果為可偵測或不可偵測的。「治療」亦可意謂與未接受治療時之預計存活期相比延長的存活期。需要治療之彼等患者包括已患有病況或病症之彼等患者，以及易於患有病況或病症之彼等者，或體內病況或病症待預防之彼等患者。
術語「約」指示值包括用於測定值之方法的固有誤差變化或實驗中存在之變化。術語「約」可指+/-10%之變化。
術語「量」係指分子、化合物或試劑(例如，pS935、pRab10或BMP分子)之含量或濃度。術語包括絕對量或濃度以及相對量或濃度。在一些實施例中，參考標準(例如，內部pS935、pRab10或BMP標準)用於校準以便測定(例如，樣本中)所存在之分子、化合物或試劑之絕對量或濃度及/或相對於對照標準化以便測定所存在之分子、化合物或試劑之相對量或濃度。
片語「治療有效量」意謂本發明化合物之如下量，其(i)治療特定疾病、病狀或病症；(ii)減輕、改善或消除特定疾病、病狀或病症之一或多種症狀；或(iii)預防或延遲本文所述之特定疾病、病狀或病症之一或多種症狀發作。可例如藉由評定疾病進展時間(TTP)及/或測定反應率(RR)來量測療效。
術語「偵測」包括任何偵測方式，包括直接及間接偵測。
生物標記之狀態之「變化」或「調節」，包括LRRK2突變或BMP之量(當其在活體外或活體內發生時)藉由使用在確定藥效動力學中通常採用之一或多種方法分析生物樣本來偵測，該等方法包括：(1)定序生物樣本之基因體DNA或反轉錄PCR產物，藉此偵測一或多個突變；(2)藉由定量訊息含量或估計複本數來評估基因表現量；及(3)藉由免疫組織化學、免疫細胞化學、ELISA、或質譜分析來分析蛋白質，藉此偵測蛋白質之降解、穩定化或轉譯後修飾，諸如磷酸化或泛素化。
術語「個體」包括但不限於人類、小鼠、大鼠、天竺鼠、猴、狗、貓、馬、牛、豬及綿羊。在一些實施例中，個體為人類。
術語「視情況存在」或「視情況」意謂隨後所描述之事件或情形可發生或可不發生，且該描述包括該事件或情形發生之情況及該事件或情形不發生之情況。
術語「藥品說明書」用以指治療產品之商業包裝中通常包括之說明書，其含有關於適應症、用法、劑量、投藥、禁忌及/或關於使用此類治療產品之警告的資訊。
本文中所給出之任何化合物或結構亦意欲表示該等化合物之未經標記形式以及經同位素標記形式。除一或多個原子由具有所選擇之原子質量或質量數之原子置換以外，經同位素標記之化合物具有本文中所描繪之結構。可併入至本發明化合物中之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟、氯及碘之同位素，分別諸如 2H、 3H、 11C、 13C、 14C、 13N、 15N、 15O、 17O、 18O、 31P、 32P、 35S、 18F、 36Cl、 123I及 125I。本發明之各種經同位素標記之化合物，例如併入諸如 3H、 13C及 14C之放射性同位素的彼等化合物。此類經同位素標記之化合物可適用於代謝研究、反應動力學研究、偵測或成像技術(諸如正電子發射斷層攝影法(PET)或單光子發射電腦斷層攝影法(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析)或用於患者之放射性治療。
本發明亦包括本文中所描述之化合物的「氘化類似物」，其中連接至碳原子之1至n個氫經氘置換，其中n為分子中氫之數目。此類化合物展現增加之代謝抗性，且因此當向哺乳動物(尤其人類)投與時，適用於增加任何化合物之半衰期。參見例如，Foster, 「Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism」, Trends Pharmacol. Sci. 5(12):524-527 (1984). 此類化合物藉由此項技術中熟知之手段來合成，例如藉由採用其中一或多個氫已經氘置換之起始物質。
本發明的經氘標記或取代之治療性化合物可具有經改良之DMPK (藥物代謝及藥物動力學)特性，該等特性與分佈、代謝及排泄(ADME)相關。用較重同位素(諸如氘)取代可得到由更大代謝穩定性產生之某些治療性優點，例如增加之活體內半衰期、降低之劑量需求及/或治療指數改良。經 18F、 3H、 11C標記之化合物可適用於PET或SPECT或其他成像研究。本發明之經同位素標記之化合物通常可藉由進行流程中或下文所描述之實例及製備中所揭示之程序，藉由用可容易獲得的經同位素標記之試劑取代未經同位素標記之試劑來製備。應理解，在此上下文中，氘視為本文所描述之化合物的取代基。
可藉由同位素增濃因素來定義此類較重同位素(具體為氘)之濃度。在本發明之化合物中，未具體指定為特定同位素之任何原子意欲表示彼原子之任何穩定同位素。除非另外陳述，否則當位置經具體指定為「H」或「氫」時，應理解該位置在其天然豐度同位素組成中具有氫。因此，在本發明之化合物中，具體指定為氘(D)之任何原子意欲表示氘。
在多數情況下，本發明之化合物能夠藉助於胺基及/或羧基或與其類似之基團的存在而形成酸鹽及/或鹼鹽。
亦提供本文中所描述之化合物的醫藥學上可接受之鹽。「醫藥學上可接受」或「生理學上可接受」係指化合物、鹽、組合物、劑型及其他物質適用於製備適用於獸醫學或人類醫藥用途之醫藥組合物。
如本文中所用，片語「醫藥學上可接受之鹽」係指本發明之化合物的醫藥學上可接受之有機或無機鹽。例示性鹽包括但不限於硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸性磷酸鹽、異菸鹼酸鹽、乳酸鹽、柳酸鹽、酸性檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、丹寧酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、丁二酸鹽、順丁烯二酸鹽、龍膽酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、葡糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲磺酸鹽(methanesulfonate/mesylate)、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及雙羥萘酸鹽(亦即1,1'-亞甲基-雙(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。其他鹽包括酸鹽，諸如上文所描述之共晶形成物。醫藥學上可接受之鹽可涉及包括另一分子，諸如乙酸根離子、丁二酸根離子或其他相對離子。相對離子可為使母化合物上之電荷穩定之任何有機或無機部分。此外，醫藥學上可接受之鹽在其結構中可具有超過一個帶電原子。多個帶電原子為醫藥學上可接受之鹽之一部分的情況可具有多個相對離子。因此，醫藥學上可接受之鹽可具有一或多個帶電原子及/或一或多個相對離子。
可藉由此項技術中可用之任何適合方法來製備所需醫藥學上可接受之鹽。舉例而言，用無機酸或用有機酸處理游離鹼，該等無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物，該等有機酸諸如乙酸、順丁烯二酸、丁二酸、杏仁酸、甲磺酸、反丁烯二酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、哌喃糖酸(諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(諸如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(諸如天冬胺酸或麩胺酸)、芳族酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(諸如對甲苯磺酸或乙磺酸)或其類似物。通常視為適用於由基礎醫藥化合物形成醫藥學上適用或可接受之鹽的酸論述於例如Stahl PH, Wermuth CG 編輯，Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use，第2修訂版(International Union of Pure and Applied Chemistry). 2012, New York: Wiley-VCH；S. Berge等人, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1 19；P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201 217；Anderson等人, The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York；Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版, (1995) Mack Publishing Co., Easton PA及The Orange Book (網站上之Food & Drug Administration, Washington, D.C.)中。此等揭示內容以引用之方式併入本文中。
片語「醫藥學上可接受」指示物質組成必須與構成調配物之其他成分及/或正用其治療之哺乳動物在化學上及/或毒理學上相容。
如本文中所使用，「醫藥學上可接受之載劑」或「醫藥學上可接受之賦形劑」或「賦形劑」包括任何及所有溶劑、分散介質、包衣、抗細菌及抗真菌劑、等滲及吸收延遲劑及類似物。此類介質及藥劑在醫藥學活性物質中之用途在此項技術中眾所周知。除非任何習知介質或試劑與活性成分不相容，否則考慮將其用於治療性組合物中。補充活性成分亦可併入組合物中。
LRRK2 活性之目標及路徑生物標記溶酶體功能障礙為具有及不具有帕金森氏病(PD)之已知基因驅動子之患者中PD之中央病理生理學。增加之LRRK2激酶活性削弱了溶酶體功能且驅動家族性PD。LRRK2抑制可恢復(PD)模型中之正常溶酶體功能且降低毒性。LRRK2之抑制可為許多形式之PD，包括特發性PD的治療學有益途徑。LRRK2致病突變增加激酶活性。
可藉由量測(例如，樣本、細胞、組織及/或個體中)磷酸化LRRK2 (pS935)、磷酸化ras相關蛋白質Rab 10 (pRab10)或雙(單醯基甘油)磷酸酯(BMP)之豐度來測定LRRK2依賴性溶酶體功能之水準。
BMPBMP為具有下式的(例如，在通常存在於溶酶體內之pH下)帶負電之甘油磷脂：
Figure 02_image009
BMP分子包含兩個脂肪酸側鏈。上式中之R及R'表示獨立選擇之飽和或不飽和脂族鏈，其中之每一者通常含有14、16、18、20或22個碳原子。當脂肪酸側鏈為不飽和時，其可含有1、2、3、4、5、6或更多個碳-碳雙鍵。此外，BMP分子可含有一或兩個烷基醚取代基，其中一或兩個脂肪酸側鏈之羰基氧經兩個氫原子置換。
本文中用以描述特定BMP物種之命名係指具有兩個脂肪酸側鏈之物種，其中脂肪酸側鏈之結構指示於BMP格式中之括弧內(例如，BMP(18:1_18:1))。標號遵循「脂肪酸碳原子數:雙鍵數」之標準脂肪酸符號格式。「e-」字首用於指示烷基醚取代基之存在，其中脂肪酸側鏈之羰基氧經兩個氫原子置換。舉例而言，「BMP(16:0e_18:0)」中之「e」表示具有16個碳原子之側鏈為烷基醚取代基。
BMP為異常的，原因在於其具有在其他甘油磷脂中未觀測到之sn-1;sn-1'結構性組態(亦即，基於磷酸酯連接之甘油碳)。BMP之合成涉及多個醯化及二醯化步驟且涉及轉醯酶活性，其使甘油主鏈再定向且產生異常結構性組態。咸信sn-1;sn-1'組態有助於BMP抵抗被許多磷脂酶裂解及其在晚期胞內體及溶酶體中之穩定性。雖然在許多不同細胞類型中發現低量之BMP，但BMP含量在巨噬細胞以及肝臟及其他組織類型中之溶酶體中顯著較高。
與其作為消化細胞器之功能一致，在酸性pH (亦即，約4.6至約5之pH)下，溶酶體含有大量水解酶。藉由細胞表面上之受體捕獲各種細胞成分及外來抗原以吸收且遞送至溶酶體。在細胞內，諸如甘露糖-6-磷酸受體之受體結合來自生物合成路徑之水解酶且將其轉移至溶酶體。所捕獲之分子穿過稱為胞內體之中間異質細胞器組，該等胞內體充當分選站，其中受體在水解酶之前再循環且將其他材料導引至溶酶體。在此情況下，水解酶經活化且消化非所要材料。特定言之，成熟或「晚期」胞內體及溶酶體之內部膜含有大量BMP。
在溶酶體pH下帶負電，BMP可與酸性pH下帶正電且需要水-脂質界面以供活化之內腔酸水解酶對接。藉由以此方式結合，BMP可刺激多種溶酶體脂質降解酶，包括酸性神經磷脂酶、酸性神經醯胺酶、酸性磷脂酶A2及能夠水解三醯甘油及膽固醇酯之酸性脂肪酶。
核內體膜為溶酶體膜之延續部分，且其用以將材料分類且再循環回至質膜及內質網。因此，在肝臟中內化之低密度脂蛋白(LDL)到達晚期胞內體，其中成分膽固醇酯藉由酸性膽固醇酯水解酶而水解。晚期胞內體內含有的富含BMP之膜的特徵網路為膽固醇內穩定之重要要素，因為其藉由充當游離膽固醇之收集及再分配點來調節膽固醇轉運。舉例而言，當溶酶體膜與抗BMP抗體一起培育時，會積聚大量膽固醇。
在本發明之方法的一些實施例中，量測單一BMP物種之豐度。在一些實施例中，量測兩種或更多種BMP物種之豐度。在一些實施例中，量測至少兩種、三種、四種、五種或更多種BMP物種之豐度。當量測兩種或更多種BMP物種之豐度時，可使用不同BMP物種之任何組合。
在一些情況下，當與另一諸如基於細胞之樣本(例如，經培養細胞)與基於組織之樣本或血液樣本相比時，一種類型之樣本中可差異性表現(例如，大體上充足的)一或多種BMP物種。因此，在一些實施例中，一或多種BMP物種之選擇(亦即，豐度之量測)取決於樣本類型。在一些實施例中，例如當樣本(例如，測試樣本及/或參考樣本)為骨髓衍生之巨噬細胞(BMDM)時，一或多種BMP物種包含BMP(18:1_18:1)。在其他實施例中，例如當樣本包含組織(例如，腦組織、肝臟組織)或血漿、尿液或CSF時，一或多種BMP物種包含BMP(22:6_22:6)。
在一些實施例中，內部BMP標準(例如，BMP(14:0_14:0))用於量測樣本中一或多種BMP物種之豐度及/或測定參考值(例如，量測參考樣本中一或多種BMP物種之豐度)。舉例而言，可將已知量之內部BMP標準添加至樣本(例如，測試樣本及/或參考樣本)中一充當校準點，使得可測定存在於樣本中之一或多種BMP物種之量。在一些實施例中，用於自樣本萃取或分離BMP之試劑(例如，甲醇)經「摻入」有內部BMP標準。通常，內部BMP標準將為並非天然存在於個體中之BMP標準。
通常，將測試樣本中一或多種BMP物種中之每一者的豐度與一或多個參考值(例如，對應參考值)進行比較。在一些實施例中，在治療前且在治療後之一或多個時間點量測BMP值。在稍後時間點獲得之豐度值可與在治療前之值以及對照值(諸如健康或患病對照之值)進行比較，以確定個體如何對療法有反應。一或多個參考值可來自測試樣本之對應於細胞、組織或流體之不同細胞、組織或流體。
在一些實施例中，參考值為參考樣本中量測之一或多種BMP物種之豐度。參考值可為所量測之豐度值(例如，參考樣本中量測之豐度值)或可由所量測之豐度值推導或外推。在一些實施例中，例如當參考值獲自複數個樣本或個體群時，參考值為一系列值。此外，參考值可呈現為單一值(例如，所量測之豐度值、均值或中位值)或一系列值，具有或不具有標準差或誤差標準。
在一些實施例中，第一測試樣本及第二測試樣本均獲自個體(例如，目標個體)已經治療之後的個體，亦即與第二測試樣本相比，第一測試樣本係在治療期間之較早時間點獲自個體。在一些實施例中，在用LRRK2抑制劑治療個體之帕金森氏病之前獲得第一測試樣本且在用LRRK2抑制劑治療個體之病症之後獲得第二測試樣本(亦即，治療後測試樣本)。在一些實施例中，自個體獲得超過一個(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多個)治療前及/或治療後測試樣本。此外，獲得的治療前及治療後測試樣本之數目不必相同。
二-二十二碳六烯醯基(22:6)雙(單醯基甘油)磷酸酯(二-22:6-BMP)為溶酶體功能及功能障礙之LRRK2依賴性指示物(Fuji等人. 2015；Liu, N.等人, (2014) Toxicol. Appl. Pharmacol. 279:467-476；US 8313949)，其具有以下結構：
Figure 02_image011
； 且命名為：(4E,7E,10E,13E,16E,19E)-二十二碳-4,7,10,13,16,19-六烯酸1-(((1-(((4E,7E,10E,13E,16E,19E)-二十二碳-4,7,10,13,16,19-六烯醯基)氧基)-2-羥基乙氧基)(l1-氧烷基)磷醯基)氧基)-3-羥基丙-2-基酯。該類甘油磷酸酯脂質容易發生快速醯基遷移，導致磷酸酯交換及立構中心之外消旋化。
pRab10在帕金森氏病(PD)之家族性及非家族性(偶發性)形式中均發現了編碼富含白胺酸之重複激酶2 (LRRK2)之基因的突變。若干不同突變已鑑別為病原性突變，包括突變11122V、Nl437H、Rl441C/G/H、RI 728H、Rl628P、Yl699C、G2019S、12020T、T2031S及G2385R，且LRRK2中之其他突變與PD易感性相關。已發現LRRK2中之至少一些已知病原性突變會影響其激酶活性，且因此，已提出LRRK2抑制劑作為PD之治療。
若干蛋白質已鑑別為LRRK2之可能生理受質，包括Rab10，其為Rab GTP酶家族之成員。在過度表現LRRK2及Rab10之人類細胞中偵測到Rab蛋白質之磷酸化。此外，相對於野生型LRRK2，在不同的PD相關LRRK2突變體中偵測到Rab10之磷酸化增加。在存在LRRK2變異體的情況下增強之Rab10磷酸化表明活體內病原性變異體中存在增加之LRRK2激酶活性。因此，在一些實施例中，Rab10之磷酸化表示適用於鑑別LRRK2中具有病原性突變之患者的臨床標記：諸如11122V、Nl437H、Rl441C/G/H、RI 728H、Rl628P、Yl699C、G2019S、I2020T、T2031S或G2385R突變，及在另一實施例中，Rl441C、Rl441G、Yl699C、G2019S或I2020T突變。
已產生特異性結合至磷酸化Rab10蛋白質之單株抗體，該磷酸化Rab10蛋白質內源性表現於人類生物樣本，諸如人類周邊血液單核細胞中。參見2018年6月15日申請且在2018年12月20日作為WO 2018/232278公佈之PCT/US2018/037809，其出於所有目的以全文引用之方式併入本文中。相比之下，回應於用LRRK2抑制劑治療，已知抗磷酸化Rab10或磷酸化Rab8a之多株抗體並不展現可偵測磷酸化Rab10之顯著減少。亦已發現回應於用LRRK2抑制劑治療，磷酸化Rab10及磷酸化Rab8a蛋白質之含量以劑量依賴型方式降低，如使用抗磷酸化Rab10單株抗體所量測。
pS935上文提及之G2019S突變處於LRRK2之活化環中且為PD之最常見遺傳學病因。G2019S引起LRRK2激酶活性增加，從而產生毒性。LRRK2活性之標記為絲胺酸935 (pS935)之磷酸化。pS935回應於所有已知的LRRK2激酶抑制劑而減少且因此為其適用之生物標記。
BMP 偵測技術：在一些實施例中，使用質譜分析(MS)來根據本發明之方法偵測及/或量測一或多個BMP物種之豐度。質譜分析為已確立的技術，其中化合物經離子化，且藉由其質荷比(簡稱為m/Q、m/q、m/Z或m/z)分選所得離子。可以氣體、液體或固體形式存在之樣本(例如，包含BMP分子)經離子化，且所得離子接著加速通過電場及/或磁場，使其藉由其質荷比分離。該等離子最終撞擊離子偵測器且產生質譜圖。所偵測離子之質荷比以及其相對豐度可用於有時藉由使(例如，整個或完整分子之)已知質量與所偵測離子之質量相關聯及/或藉由識別在質譜圖中偵測到之模式來鑑別出一或多種母化合物。
在一些實施例中，高效液相層析(HPLC)與質譜分析組合使用。HPLC藉由在壓力下迫使移動相中之分析物通過固定相(通常為密集填充管柱)來提供高度分離。在已確立之LC/MS技術中，HPLC充當分離前端且質譜分析充當特徵化後端。
pRab10 及 pS935 偵測如上文針對BMP所論述，亦可使用MS偵測pRab10及pS935。然而，在本發明之一個實施例中，如以下實例中所描述，使用對彼等分子具有特異性之抗體偵測pRab10及pS935。彼等抗體可用於免疫分析中之偵測。一種此類市售分析由Rockville, Maryland之Meso Scale Diagnostics, LLC. (MSD)出售。
用於治療帕金森氏病之方法用於治療至少部分由LRRK2介導之疾病或病狀的方法一般描述於美國專利第10,590,114號中，且該等方法中使用之化合物描述於美國專利第9,932,325號中，該等專利均出於所有目的以全文引用之方式併入本文中。
提供一種用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的LRRK2抑制劑，亦即
Figure 02_image013
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
日劑量可描述為每劑量或每天投與之化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物的總量。化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物之日劑量可在約70至800 mg之間、在約70至225毫克/天之間或在約70與80毫克/天之間。
在特定實施例中，劑量可為70、75、80、105、130、150、225、250、300或400 mg。在一些實施例中，化合物或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物可投與每天一次(QD)。在其他實施例中，投與為每天兩次(BID)。
在一些實施例中，提供一種醫藥組合物，其包含約75 mg之呈錠劑形式之化合物I。
在一些實施例中，向有需要之個體投與兩個各自包含約75 mg之化合物I的錠劑。在一些實施例中，每天一次向有需要之個體投與兩個各自包含約75 mg之化合物I的錠劑，總劑量為約150毫克/天。
在一些實施例中，向有需要之個體投與三個各自包含約75 mg之化合物I的錠劑。在一些實施例中，每天一次向有需要之個體投與三個各自包含約75 mg之化合物I的錠劑，總劑量為約225毫克/天。
在其他實施例中，本發明之化合物可與具有用於治療帕金森氏病之活性的額外藥劑組合投與。舉例而言，在一些實施例中，化合物可與適用於治療帕金森病之一或多種額外治療劑組合投與。在一些實施例中，額外治療劑為左旋多巴(例如，Sinemet®)、多巴胺能促效劑(例如，羅賓奈索(Ropinerol)或普拉克索(Pramipexole))、兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)抑制劑(例如恩他卡朋(Entacapone))、L-單胺氧化酵素(MAO)抑制劑(例如，司來吉蘭(selegiline)或雷沙吉蘭(rasagiline))或增加多巴胺釋放之藥劑(例如，唑尼沙胺(Zonisamide))。
用 LRRK2 抑制劑治療帕金森氏病之方法在一個實施例中，提供一種用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含一天一次向有需要之個體投與約75至225 mg之間的化合物I：
Figure 02_image015
。
在另一實施例中，提供一種用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含一天一次向有需要之個體投與一種醫藥組合物，其包含約75至225 mg之間的化合物I：
Figure 02_image017
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
用於減少患有帕金森氏病之個體之全血中之磷酸化 S935 LRRK2 ( PS935) 的 方法在一個實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image019
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在另一實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)的方法，該方法包含向有需要之個體投與一種醫藥組合物，其包含約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image021
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
用於減少患有帕金森氏病之個體之周邊血液單核細胞 (PBMC) 中之 磷酸化 RAS 相關蛋白質 RAB10 (PRAB10) 的 方法在一個實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image023
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在另一實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)的方法，該方法包含向有需要之個體投與一種醫藥組合物，其包含約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image025
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
用於減少患有帕金森氏病之個體之尿液中之溶酶體脂質 22:6- 雙 [ 單醯基甘油 ] 磷酸酯 (BMP) 的 方法在一個實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image027
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在另一實施例中，提供一種用於減少患有帕金森氏病之個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)的方法，該方法包含向有需要之個體投與一種醫藥組合物，其包含約70至800毫克/天之間的化合物I：
Figure 02_image029
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
LRRK2 抑制劑用於治療帕金森氏病之用途提供LRRK2抑制劑用於治療帕金森氏病之用途，其中該抑制劑以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為
Figure 02_image031
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
LRRK2 抑制劑在製造由於治療帕金森氏病之藥劑中的用途提供LRRK2抑制劑在製造用於治療帕金森氏病之藥劑中的用途，其中該抑制劑以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為
Figure 02_image033
或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
用於監測對 LRRK2 抑制劑化合物之反應的方法提供一種用於監測個體對本文所提供之治療方法之反應的方法，該方法包含： (a)    量測患有帕金森氏病之個體之測試樣本中之一或多個pS935、pRab10或BMP物種的量，其中該測試樣本或個體已用約70至800毫克/天之間的化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物治療； (b)    比較在(a)中量測之一或多個BMP物種於一或多個參考值之間的量差；及 (c)    根據該比較判定LRRK2抑制劑化合物或其醫藥組合物或其給藥方案是否提高一或多個BMP物種含量以用於治療帕金森氏病。
在一個實施例中，該方法進一步包含 (d)    維持或調節向測試樣本或個體投與之化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物的量或頻率；及 (e)    向測試樣本或個體投與化合物或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一例示性實施例中，一或多個BMP物種包含BMP(22:6_22:6)。
在一例示性實施例中，LRRK2抑制劑為化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
在一例示性實施例中，一或多個BMP物種包含BMP(22:6_22:6)。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，在自參考個體或參考個體群獲得之參考樣本中量測參考值。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，參考個體或參考個體群為健康對照。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，參考個體或參考個體群不具有溶酶體功能障礙病症或降低含量之pS935、pRab10或BMP。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，相比於健康對照或與帕金森氏病無關之對照，患有帕金森氏病或處於患有帕金森氏病風險下之個體在骨髓衍生之巨噬細胞中具有增加之pS935、pRab10或BMP物種含量。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，相比於健康對照或與帕金森氏病無關之對照，患有帕金森氏病或處於患有帕金森氏病風險下之個體在肝臟、大腦、腦脊髓液、血漿或尿液中具有降低之pS935、pRab10或BMP物種含量。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，患有帕金森氏病或處於患有帕金森氏病風險下之個體之測試樣本中的pS935、pRab10或BMP物種之量與對照(諸如健康對照或與帕金森氏病無關之對照)之參考值具有至少約1.2倍、1.5倍或2倍差異。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，患有帕金森氏病或處於患有帕金森氏病風險下之個體之測試樣本中的pS935、pRab10或BMP物種之量與對照(諸如健康對照或與溶酶體功能障礙病症無關之對照)之參考值相比為約1.2倍至約4倍差異。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，參考值為治療之前的pS935、pRab10或BMP物種值。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，相對於對照(諸如健康對照或與溶酶體功能障礙病症無關之對照)之參考值，減少之pS935、pRab10或BMP物種含量比治療之前的pS935、pRab10或BMP物種含量有所提高。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，減少之pS935、pRab10或BMP物種含量具有5%至90%，較佳地約50%至70%，大於約50%或大於約70%之與對照相比的差異。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，測試或參考樣本或一或多個參考值包含或係關於細胞、組織、全血、血漿、血清、腦脊髓液、間質液、痰、尿液、淋巴或其組合。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，細胞為周邊血液單核細胞(PBMC)、骨髓衍生之巨噬細胞(BMDM)、視網膜色素上皮(RPE)細胞、血球、紅血球、白血球、神經細胞、微膠質細胞、腦細胞、大腦皮質細胞、脊髓細胞、骨髓細胞、肝細胞、腎細胞、脾細胞、肺細胞、眼睛細胞、絨毛膜細胞、肌肉細胞、皮膚細胞、纖維母細胞、心臟細胞、淋巴結細胞或其組合。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，細胞為經培養細胞。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，組織包含腦組織、大腦皮質組織、脊髓組織、肝臟組織、腎臟組織、肌肉組織、心臟組織、眼睛組織、視網膜組織、淋巴結、骨髓、皮膚組織、血管組織、肺組織、脾臟組織、瓣膜組織或其組合。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，測試樣本包含胞內體、溶酶體、胞外囊泡、胞泌體、小胞或其組合。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，一或多個pS935、pRab10或BMP物種包含兩個或更多個pS935、pRab10或BMP物種。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，測試樣本包含血漿、尿液、腦脊髓液(CSF)及/或大腦或肝臟組織，且一或多個BMP物種包含BMP(22:6_22:6)。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，測試樣本包含CSF或尿液且一或多個BMP物種包含BMP(22:6_22:6)。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，使用液相層析-質譜法(LC-MS)、液相層析-串聯質譜法(LC-MS/MS)、氣相層析-質譜法(GC-MS)、氣相層析-串聯質譜法(GC-MS/MS)、酶聯免疫吸附分析(ELISA)或其組合來量測一或多個pS935、pRab10或BMP物種之豐度。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，當量測一或多個pS935、pRab10或BMP物種之量時，使用內部pS935、pRab10或BMP標準。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，內部pS935、pRab10或BMP標準包含並非天然存在於個體及/或參考個或體參考個體群中之pS935、pRab10或BMP物種。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，內部BMP標準包含BMP(14:0_14:0)。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，溶酶體功能障礙病症為與BMP表現、加工、醣基化、細胞吸收、運輸及/或功能相關之病症。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，個體在LRRK2表現基因中具有一或多個突變。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，病症與組織中降低之BMP含量相關。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，病症與尿液中增加之BMP含量相關。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，病症與尿液中增加之BMP含量相關。
在上文所描述之方法之例示性實施例中，個體及/或參考個體為人類、非人類靈長類、嚙齒動物、狗或豬。
醫藥組合物及投藥模式本文提供含有化合物I或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物以及一或多種選自載劑、佐劑及賦形劑的醫藥學上可接受之媒劑的醫藥組合物。適合之醫藥學上可接受之媒劑可包括例如惰性固體稀釋劑及填充劑、稀釋劑(包括無菌水溶液及各種有機溶劑)、滲透增強劑、增溶劑及佐劑。此類組合物以醫藥學技術中熟知之方式製備。參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co., Philadelphia, Pa 第17版 (1985)；及Modern Pharmaceutics, Marcel Dekker, Inc. 第3版 (G.S. Banker及C.T. Rhodes編)。
經口投與可經由例如膠囊或錠劑進行。在製造醫藥組合物中，活性成分通常藉由賦形劑稀釋及/或密封於此類載劑內，其可呈膠囊、藥囊、紙或其他容器形式。當賦形劑用作稀釋劑時，其可以呈固體、半固體或液體材料形式，其充當活性成分之媒劑、載劑或介質。適合的賦形劑之一些實例包括例如乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、澱粉、阿拉伯膠(gum acacia)、磷酸鈣、海藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、纖維素、無菌水、糖漿及甲基纖維素。調配物可另外包括：潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鎂及礦物油；濕潤劑；乳化劑及懸浮劑；防腐劑，諸如羥基苯甲酸甲酯及羥基苯甲酸丙酯；甜味劑；以及調味劑。
實例將結合以下實例更佳的理解本發明之組合物及製程，該等實例僅意欲說明且不限制本發明之範疇。熟習此項技術者將清楚所揭示實施例之各種改變及修改，且可在不脫離本發明精神及所附申請專利範圍之範疇之情況下做出此類改變及修改，包括但不限於與本發明之製程、調配物及/或方法相關的彼等改變及修改。
疾病概述  PD為第二最常見的神經退化性疾病，影響大致1%至2%之65歲或超過65歲的人(de Rijk MD等人, J Neurol Neurosurg Psychiatry. 1997;62(1):10-5；Blin P等人, Eur J Neurol. 2015;22(3):464-71)，且預測發病率大體上隨全球人口年齡而增加(Dorsey ER等人, Neurology.2007;68(5):384-6)。歐洲及北美洲之PD發病率估計分別介於66至12,500/100,000 (von Campenhausen等人, Eur Neuropsychopharmacol. 2005;15(4):473-90)之間及572/100,000 (Marras等人, NPJ Parkinsons Dis. 2018;4:21)。PD之發病率隨著年齡增長而增加，年齡在50歲之前很少見(de Lau及Breteler, Lancet Neurol. 2006;5(6):525−35；Twelves等人, Mov Disord. 2003;18(1):19−31)。可預期35%的患者中在發病5年內、65%的患者在發病10年內且80%的患者在發病15年內嚴重失能或死亡(Poewe, J Neurol. 2006;253，增刊7:VII2-6；Schrag及Bank, Mov Disord. 2006;21(11):1839−43； Mov Disord. 2010;25，增刊1:S131−5)。
當前批准用於PD之治療改善運動症狀但並不解決疾病之根本病因。隨時間推移，此等症狀療法失去有效性其與副作用(諸如運動困難及幻覺)之增加頻率及嚴重程度相關。另外，非運動症狀，包括抑鬱、焦慮、睡眠障礙、認知障礙及癡呆，為PD之失能及共同特徵，但當前療法不能充分解決(Aarsland等人, Arch Neurol. 1996;53(6):538−42；Truong等人, J Neurol Sci. 2008;266(1-2):216−28；Lyons及Pahwa, Am J Manag Care. 2011;17，增刊12:S308−14；Khoo等人, Neurology. 2013;80(3):276−81；Seppi等人, Mov Disord. 2019;34(2):180−98；FDA 2016)。因此，PD患者在伴隨該疾病生活數年至數十年內，必然經歷日益嚴重的失能(Hely等人, Mov Disord. 2005;20(2):190−9)。因此，存在對預防不能由當前療法解決之進展性運動及非運動失能之有效疾病緩解療法的顯著需求。
LRRK2突變為已確立的PD病因，佔大致4%至5%的家族性PD(Healy等人, Lancet Neurol.2008;7(7):583-90；Chai C等人, Curr Genomics2013;14(8):486-501)。家族性LRRK2突變係以具有不完全外顯性之體染色體顯性遺傳模式傳輸(Marder等人, Neurology2015;85(1):89-95)。另外， LRRK2基因內之變異體為遺傳危險因素且佔1%至2%之「偶發性」PD病例(Healy , 2008；Chai等人, Curr Genomics2013;14(8):486-501；Hernandez等人, J Neurochem2016;139(增刊1):50-74；Cookson, Biochem Soc Trans.2016;44(6):1603-10)。
用研究性藥劑治療疾病之基本原理  化合物1為用於治療患有PD之患者的選擇性的、經口生物可用第、CNS滲透的、可逆的LRRK2抑制劑。LRRK2激酶(一種以基因方式驗證之目標)之抑制改善LRRK2-PD中以及iPD中潛在的溶酶體功能。化合物1可干預PD之重要疾病路徑且防止或阻止界定PD進展之運動及非運動失能的累積。
LRRK2編碼含有鳥苷三磷酸酶(GTP酶)域、激酶域及若干潛在蛋白質-蛋白質相互作用域的多域蛋白質。LRRK2中之大多數經鑑別之病原突變位於其催化域內，包括與LRRK2-PD相關之最常見突變G2019S。此等突變經由激酶域內之直接機制或經由間接機制增加LRRK2激酶活性(West等人, Human Mol Gen.2007;16(2):223-32；Sheng等人, Sci Transl Med. 2012;4(164):164ra161)。G2019S點突變使LRRK2活性增加大致2倍，且保護性LRRK2變異體與LRRK2激酶活性之細微降低相關，從而表明LRRK2激酶活性之適當變化促成PD之壽命風險(Khan等人, Brain. 2005;128(Pt 12):2786−96；Jaleel等人, Biochem J. 2007;405(2):307−17；West等人, Human Mol Gen. 2007;16(2):223-32；Sheng等人, Sci Transl Med. 2012;4(164):164ra161；Steger等人, eLife. 2016;5:e12813；Ross等人, Lancet Neurol. 2011;10(10):898−908)。
儘管確切的病原機制仍未知，但咸信LRRK2在內溶酶體系統中起胞內運輸之作用(Henry等人，2015；Cookson等人, 2015)。活化激酶之LRRK2突變之直接效應為增加Rab GTP酶之磷酸化、胞內運輸之重要調節子(Steger等人, 2016)。據認為Rab磷酸化促進非活性Rab累積於溶酶體膜中且因此干擾囊泡運輸。溶酶體功能及細胞功能兩者之改變與LRRK2突變相關。細胞資料展示細胞中G2019S突變LRRK2活性之抑制會逆轉溶酶體異常(Khan等人, 2005；West等人, 2007；Sheng等人, 2012；Steger等人, 2016；Schapansky等人, Neurobiol Dis. 2018;111:26-35；Hockey等人, J Cell Sci.2015;128(2):232-8；Henry等人, 2015；Wallings等人, Hum Mol Genet.2019a;28(16):2696-710；Rivero-Ríos等人, J Biol Chem.2019;294(13):4738-58)。
當前證據支持用於校正疾病相關之溶酶體功能障礙的LRRK2抑制與LRRK2突變狀態無關。如藉由pS1292 LRRK2及Rab10蘇胺酸73磷酸化(pT73 Rab10)所量測之LRRK2活性在患有iPD之患者死後收集之大腦黑質中增加，從而表明LRRK2過度活性可驅動非LRRK2攜帶者群體中PD之發病機制(Di Maio等人, Sci Transl Med.2018;10(451): eaar5429)。溶酶體功能障礙可為胞內蛋白質累積之主要機制，從而導致𝛼-突觸核蛋白之累積及路易體之形成(iPD之主要病理學特徵) (Dehay等人, Mov Disord.2013;28(6):725-32；Tofaris, Mov Disord.2012;27(11):1364-9)。藉由活體外及活體內研究表明LRRK2在𝛼-突觸核蛋白累積及隨之而來的病變中之作用。表現G2019S-LRRK2之主要神經元培養物產生可藉由LRRK2抑制劑治療減少之𝛼-突觸核蛋白內含物。用過度表現𝛼-突觸核蛋白之病毒活體內感染PD之轉殖基因G2019S-LRRK2大鼠模型可誘導多巴胺能神經元神經退化，且此退化可藉由LRRK2抑制劑治療減輕(Daher等人, J Biol Chem. 2015;290(32):19433-44；Volpicelli-Daley等人. J Neurosci. 2016;36(28):7415-27)。此進一步藉由展示當過度表現病原性𝛼-突觸核蛋白之PD鼠類模型中之LRRK2蛋白質含量減少50%時的顯著病變預防之資料支持(Zhao等人. Mol Ther Nucleic Acids. 2017;8:508−19)。此等資料強烈地支持一下概念：LRRK2高度活化可對溶酶體功能有影響且促成iPD中之神經元退化，且高度激酶抑制劑具有恢復溶酶體功能且改良iPD之情形中之患者結果的潛能。
另外，LRRK2抑制可校正與PD關聯之其他基因變異體相關的疾病相關溶酶體功能障礙。LRRK2激酶抑制可校正傳訊缺陷，包括與溶酶體運輸分子VPS35及Rab29中之PD關聯突變相關的磷酸化Rab10增加(Purlyte等人, EMBO J. 2018;37(1):1−18；Mir等人, Biochem J. 2018;475(11):1861−83)。此外，編碼葡糖神經醯胺酶β( GBA)之基因中攜帶同型接合功能損失型突變之患者患有溶酶體貯積病高歇氏病，而 GBA中含有異型接合突變之個體具有增加之PD風險。在來源於高歇氏病患者之纖維母細胞中，存在可藉由LRRK2抑制部分校正之幾乎完全喪失的溶酶體蛋白質轉換活性因此，抑制LRRK2激酶活性增加可緩解LRRK2介導之發病機制，包括溶酶體功能障礙以及與LRRK2過度活性無關之溶酶體功能障礙，從而支持化合物I在廣泛患有PD之患者群中的治療潛力(Di Maio等人, 2018，Ysselstein等人, Nat Commun. 2019;10(1):55702019，Sanyal等人, Front Neurosci. 2020;14:442)。
總之，LRRK2活性經由其在溶酶體功能中之作用於PD (iPD及LRRK2-PD)病變之中心機制相關，且諸如化合物I之LRRK2激酶抑制劑代表一種新穎類別之治療劑，其具有解決具有及不具有LRRK2突變之患者中PD之基礎生物學的潛力。
實例 1 ： 化合物 I 1 期 研究中之 LRRK2 激酶抑制在健康志願者之1期研究中，參與者之人口統計資料如下： ●  在以下研究部分中，用單個或多個每天一次(QD)或每天兩次(BID)劑量治療184名HV (145名活性劑，39名安慰劑)長達28天： ○  部分A (SAD；青年人HV；n=48)：100%男性且中值年齡為25 (範圍，18至50)歲； ○  部分B (10天MAD；青年人HV；n=80)：99%男性且中值年齡為26.5 (範圍，18至50)歲； ○  部分C (SAD；老年人HV；n=8)：50%男性且中值年齡為69 (範圍，67至74)歲； ○  部件D (28天MAD；青年人HV；n=17)：100%男性且中值年齡為29 (18至39)歲；及部分E (14天MAD；青年人HV；n=31)：100%男性且中值年齡30 (範圍18至50)歲。
實例 2 ： 帕金森氏病及 LRRK2 風險變異體中之激酶活性當前證據表明，LRRK2激酶活性之降低為治療患有PD之患者的可行治療策略，無論是否與家族性LRRK2病原突變相關。LRRK2中大部分鑑別之病原突變經由激酶域內之直接機制或經由間接機制增加LRRK2激酶活性(West等人，2007；Sheng等人，2012)。如藉由pS1292 LRRK2及pT73 Rab10所量測，LRRK2激酶活性在患有iPD之患者死後收集的大腦黑質中增加，從而表明大腦中之LRRK2激酶過度活性可驅動非LRRK2突變攜帶者群體中PD之發病機制(Di Maio等人，2018)。另外，當前證據表明LRRK2抑制可校正疾病相關之溶酶體功能障礙，諸如與LRRK2突變狀態無關的經降低之GBA活性(Ysselstein等人，2019)。因此，諸如化合物I之LRRK2激酶抑制劑表示一種新穎類別之治療劑，其具有解決具有及不具有LRRK2突變之患者中PD之基礎生物學的潛能。
LRRK2之最常見致病變異體(G2019S)使得LRRK2激酶活性增加大致2倍；因此，正規化可預期LRRK2激酶活性降低50%。
LRRK2 激酶抑制之藥效動力學標記物 pS935 LRRK2全血中中之pS935 LRRK2為用於定量化合物I臨床研究中之LRRK2抑制的主要藥效動力學標記物。已證明pS935 LRRK2對LRRK2激酶之藥理學抑制敏感(Fell等人, J Pharmacol Exp Ther. 2015;355(3):397−409；Fuji等人, 2015；Henderson等人, J Med Chem. 2015;58(1):419−32)，且可在用LRRK2抑制劑治療後的人類個體之全血中量測pS935 LRRK2之減少。此外，在動物研究中，周邊pS935 LRRK2之暴露反應緊密地對應於CNS之暴露反應(例如，周邊pS935 LRRK2平均減少50%對應於中央減少大致50%)，從而證實周邊LRRK2抑制有可能反映人類個體之大腦中之抑制。
由於PD之主要病理學研究結果在大腦中，所以直接定量CNS中之LRRK2抑制將優於定量周邊LRRK2抑制作為藥效動力學量測。因此，該領域中之研究者正在研發用於定量CSF (一種將反映大腦中之LRRK2抑制)中之LRRK2磷酸化的分析。隨著此等分析發展，其將在臨床研究中實施以定量CNS中之LRRK2抑制且量測人類個體中之周邊與中央LRRK2抑制之間的關係。
基於與LRRK2 G2019S點突變相關之激酶活性增加2倍，在＞50%的研究個體中，在低谷下全血pS935 LRRK2減少≥50%表示最小藥效動力學目標。在迄今為止的臨床研究中，已證明導致pS935 LRRK2平均減少85%至90%的暴露在健康個體及患有PD之個體中為安全的且通常具有良好耐受性。特定言之，針對長達28天之暴露，潛在LRRK2中靶腎或肺部功能無明顯變化。
藉由 LRRK2 活性調節之溶酶體生物標記物 BMP在尿液中量測之溶酶體脂質BMP 22:6/22:6 (在整個文獻中稱為「BMP」)表示校正LRRK2之下游溶酶體路徑的機理性標記物。BMP為僅在晚期胞內體及溶酶體之管腔內囊泡上發現之溶酶體磷脂(Bissig及Gruenberg, Cold Spring Harb Perspect Biol. 2013;5(10):a016816)。患有遺傳性或藥物誘導之溶酶體功能病症之個體，包括具有G2019S LRRK2突變之彼等個體具有增加含量之尿液BMP (Lecommandeur等人, J Lipid Res. 2017;58(7):1306−14；Alcalay等人, Mov Disord. 2013;28(14):1966−71)。已在動物模型及人類兩者中展示LRRK2抑制會減少尿液BMP (Fuji等人. 2015；Alcalay等人, 2020；圖4A、圖6A、圖7A、圖7B)。
溶酶體功能障礙為PD之常見標誌，且假設旨在改良溶酶體穩態中之PD相關缺陷的治療方法，包括LRRK2抑制可有意義地影響疾病進展(Wallings等人, Trends Neurosci. 2019b;42(12):899−912)。儘管未必需要，但尿液BMP減少可指示調節患有PD之患者中有缺陷的溶酶體路徑。PD之主要病理學研究結果在CNS中，因此，治療功效有可能需要調節CNS中之溶酶體路徑。雖然有證據表明尿液BMP為溶酶體功能之量度，但此為外周標記物且因此將研究CNS中LRRK2路徑活性及溶酶體功能之額外生物標記物以進一步研究尿液BMP與中央溶酶體功能之間的關聯。
實例 3 ： 臨床安全性首先在健康個體中之1期人類研究及在患有PD之個體中之1b期研究的安全性資料概述於下文中。
健康個體中之 1 期 、安全性、耐受性、藥物動力學及藥效動力學研究此為經設計以測定化合物I在健康個體中之安全性、耐受性、PK及藥效動力學的1期隨機化安慰劑對照的雙盲FIH研究。來自多劑量群組(部分B、D及E)之非盲安全性資料概述於下文中。
在部分 B 中之多劑量之後的健康個體中之 安全性及耐受性此研究之部分B係由連續多個遞增劑量(MAD)群組構成。健康個體登記在8個群組(群組B1至B8；n = 10/群組)中且經投與化合物I 15、30、45、70、105、150、225或300 mg或安慰劑(4:1比率) QD，持續10天。
在部分B中，在健康個體中，化合物I以高達300 mg QD之多個劑量持續10天通常具有良好耐受性。未報導引起研究藥物中斷之死亡、其他SAE (嚴重不良事件)、AESI (特殊關注之不良事件)或治療突發不良事件(TEAE)。A 總共有56名(86.2%)化合物I治療之個體及13名(86.7%)安慰劑治療之個體經歷≥ 1個TEAE (圖9)。化合物I治療之個體中最常見的TEAE為頭痛(29名[45%]個體)；手術相關(32名[49%]個體)；疲乏(6名[9.2%]個體)；及噁心(6名[9.2%]個體)。在化合物I治療之個體中，55名(84.6%)經歷≥ 1個輕度TEAE，9名(13.8%)個體經歷≥ 1個中度TEAE，且沒有個體經歷嚴重TEAE。
未觀測到安全實驗室、生命體徵、ECG、神經檢查、肺部功能測試(PFT)或哥倫比亞自殺嚴重程度評定量表(Columbia-Suicide Severity Rating Scale；C-SSRS)結果在臨床上地顯著變化。
對 pS935 及 pRab10 之治療效果用於全血中之pS935及PBMC中之pRab10的程序：
樣本製備 用於 pS935 分析之全血製備 ：將冷凍對人類全血樣本解凍且直接溶解於96孔盤(100 μl全血樣本與100 μl溶解緩衝液)中。在MSD分析之前將樣本短暫離心(在4℃下，2,500× g持續20分鐘)。
用於 pRab10 分析之 PBMC 製備：將血液收集至CPT-肝素鈉導管(BD BDAM362780)中且接著遵循製造商之方案分離PBMC。藉由在最高速度下離心使PBMC沈澱且接著將其再懸浮於PBMC溶解緩衝液(具有PhosSTOP磷酸酶抑制劑[Roche 04906837001]、完整蛋白酶抑制劑[Roche 04693159001]及核酸酶[Sigma E8263]之1×細胞溶解緩衝液[CST目錄#9803])中。將溶解物在冰上保持20分鐘，接著在4℃下以最高速度離心20分鐘。將上清液等分且儲存於-80℃下以用於之後的免疫檢定分析。
MSD 分析 使用EZ-Link™ NHS-LC-LC-Biotin(Thermo Fisher，#21343)對捕捉抗體進行生物素標記，且使用Sulfo-TAG NHS-酯(MSD，R31AA-1)結合偵測抗體。在室溫下在700 rpm振盪(針對384孔，1000 rpm)下用25 µl (或針對384孔盤為15 µl)稀釋於稀釋劑100 (MSD，R50AA-2)中之捕捉抗體塗佈96孔(或384孔) MSD GOLD小點鏈黴抗生物素蛋白培養盤(MSD L45SSA-1) 1小時。在TBST洗滌(3×)之後，將25 µl樣本添加至各孔中(針對384孔為10 µl)且在4℃下在700 rpm之攪拌下培育隔夜。在TBST洗滌(3×)之後，將25 µl偵測抗體(針對384孔為15 µl)添加各孔中，連同兔(Rockland Antibodies D610-1000)及小鼠γ球蛋白溶離份(D609-0100)稀釋於含有25% MSD阻斷劑A (MSD R93AA-1)之TBST中。在室溫下在700 rpm下培育1小時之後，接著TBST洗滌(3×)，添加150 µl MSD讀取緩衝液(MSD R92TC，用水1:1稀釋) (針對384孔為35 µl)，且在MSD Sector S 600上讀取培養盤。 表 1. MSD 分析中使用之抗體。
分析 抗體類型 目標 供應商 目錄號 濃度(µg/mL)
pS935 LRRK2 捕捉 pS935 LRRK2 Abcam ab133450 0.5
偵測 Total LRRK2 BioLegend 808201 1
pT73 Rab10 捕捉 pT73 Rab10 Denali 19-4 1
偵測 Total Rab10 Abcam ab181367 2
圖4展示在低谷(給藥前)下在穩定狀態(群組B之第10天、群組D之第28天、群組E之第14天)下，相比於基線，化合物I治療引起在最高劑量下≥80%之pS935穩固減少及在最低的臨床相關劑量下≥50%減少。
圖5展示在低谷(給藥前)下，化合物I在穩定狀態(群組B之第10天、群組D之第28天、群組E之第14天)下以最高劑量使得HV中之周邊單核細胞(PBMC)中的Rab10之磷酸化(pRab10) (LRRK2激酶之直接受質)減少≥70%。
在部分 D 中之多劑量之後的健康個體中之 安全性及耐受性部分D係由經投與化合物I 225mg (n = 13)或安慰劑(n = 4) QD持續28天之健康個體的多劑量群組(群組D1)構成。
在部分D中，在健康個體中，化合物I以225 mg QD之劑量持續28天通常具有良好耐受性。未報導死亡、其他SAE或AESI。在第七劑量之後，安慰劑組中之一名個體經歷TEAE，導致研究藥物中斷(轉胺酶增加；研究者認為嚴重程度適中且與研究藥物無關)。一名個體在第八劑量之後出於個人原因撤回同意書且被替換。總共有化合物I 225-mg QD組中之10名(77%)個體及安慰劑組中之2名(50%)個體經歷≥ 1個TEAE (圖9)。化合物I治療之個體中最常見的TEAE為頭痛(3名[23%]個體)及手術相關(3名[23%]個體)。在化合物I治療之個體中，10名(77%)經歷≥ 1個輕度TEAE且沒有個體經歷中度或重度TEAE。
未觀測到安全實驗室、生命體徵、ECG、神經檢查、PFT或C-SSRS結果在臨床上地其他顯著變化。
在部分 E 中之多劑量之後的健康個體中之 安全性部分E係由連續MAD群組構成。向群組E1中之健康個體投與化合物I 150 mg或安慰劑BID (4:1比率)持續14天(n=9)且向群組E2中之個體投與化合物I 250 mg或安慰劑BID (4:1比率)持續14天(n =11)。向持續群組E3中之個體投與化合物I 400 mg或安慰劑BID (4:1比率)持續14天。群組E1及E2之非盲安全性資料概述於下文中。
基於群組E1及E2之非盲安全性資料，在健康個體中，化合物I以150及250 mg BID持續14天通常具有良好耐受性。未報導SAE或AESI。在部分E中出現兩個研究藥物相關之中斷：一名個體伴有中度噁心、頭痛、注意力不集中及腹瀉(250 mg BID)；第二名個體伴有嚴重頭痛及伴有中度噁心之不適感(400 mg)。一名個體(250 mg BID)提前中斷研究；個體在第3天由於噁心、頭痛、注意力紊亂及腹瀉之中度TEAE而撤回同意書，其皆在發作當天用乙醯胺苯酚治療後消退且研究者認為與研究藥物相關。
所有25名(100.0%)化合物I治療之個體及6名(100.0%)安慰劑治療之個體在研究中經歷≥ 1個TEAE。化合物I治療之個體中最常見的TEAE為頭痛(21名[84%]個體對比4名[67%]安慰劑個體)。據報導大部分TEAE之嚴重程度為輕度或中度。一名個體(250 mg BID)經歷嚴重TEAE (手術性頭痛；研究者認為與研究藥物無關)。報導接受化合物I 250 mg BID之2名個體的中度TEAE：頭痛(n = 1)及頭痛、噁心、注意力紊亂及腹瀉(n = 1)。兩名個體中報導有嚴重TEAE：手術性頭痛(n=1；250 mg BID)；頭痛及不適感(n=1；40 mg BID)。
未觀測到生命體徵、ECG、遙測統計學、安全實驗室(包括肝臟及腎功能測試)、PFT、神經檢查或C-SSRS結果在臨床上地顯著變化。
實例 4 ： 患有帕金森氏病之個體的 1b 期 、安全性、耐受性、藥物動力學及藥效動力學研究 參與者之人口統計資料總共36名患有PD之患者(26名活性劑，10名安慰劑)用高達300 mg QD治療28天(圖8)。
此為經設計以測定化合物I在患有PD之個體中之安全性、耐受性、PK及藥效動力學的1b期隨機化安慰劑對照雙盲研究。已完成此研究之實施且臨床研究報導正在進行中。在部分1中，向個體投與化合物I 80 mg或安慰劑QD (1:1比率)持續28天(n = 8)。在部分2中，向個體投與化合物I 80或130 mg或安慰劑QD (1:2:1比率)持續28天(n = 17)。在部分3中，向個體投與化合物I 300 mg或安慰劑QD (4:1比率)持續28天(n = 11)。
基於非盲安全性資料，在患有PD之個體中，化合物I以80、130或300 mg QD持續28天通常具有良好耐受性(概述於圖10中)。未報導SAE或AESI。兩名(5.6%)個體由於第一劑量之後的低血壓TEAE而中斷研究。對於此等個體中之一者(130 mg QD)，事件無症狀且研究者認為係嚴重的且與研究藥物無關。該個體服用他蘇洛辛(tamsulosin)直至事件之前的一天且記錄自主神經失調病史。對於第二名個體(300 mg QD)，事件在站立時為輕度症狀且研究者認為係輕度的且與研究藥物相關。兩名額外個體經歷輕度起立性低血壓(80 mg QD)及輕度低血壓加起立性低血壓(300 mg QD)之TEAE ，其在服用研究藥物時消退。
圖6展示在低谷(給藥前)下在穩定狀態(第28天)下，化合物I治療在研究之所有劑量下使得全血中之pS935穩固減少。在低谷(給藥前)下，化合物I在穩定狀態下在所有劑量下減少患有PD之患者中PBMC中之pRab10。
總共有23名(88.5%)化合物I治療之個體及5名(50%)安慰劑治療之個體在研究中經歷≥ 1個TEAE (圖10)。化合物I治療之個體中最常見的TEAE為頭痛(11名[42%]個體對比2名[20%]安慰劑個體)。大部分TEAE之嚴重程度為輕度或中度。兩名個體經歷嚴重TEAE：一名個體伴有低血壓(130 mg QD；由於預先存在的靜態平衡而認為與研究藥物無關)且一名個體伴有頭痛(300 mg QD；認為與腰椎穿刺手術相關且與研究藥物無關)。5名(19%)化合物I治療之個體及1名(10.0%)安慰劑治療之個體經歷中度TEAE：帕金森氏症(帕金森氏症狀減小) (80 mg QD；n = 1)真菌皮膚感染(130 mg QD；n= 1)、頸強直(130 mg QD；n = 1)、頭痛(130及300 mg QD；n= 2)、肌痛(300 mg QD；n = 1)及便秘(安慰劑QD；n = 1)。
未觀測到安全實驗室(包括肝臟及腎功能測試)、ECG、神經評估、生命體徵、PFT或C-SSRS結果在臨床上地相對於基線之其他顯著變化或顯著傾向。
用於進一步研究之劑量選擇係基於在證實為安全且具有良好耐受性的暴露下，化合物I血漿濃度與經證實之目標接合生物標記物的群體PK/藥效動力學關係。
結論 安全性：在HV及患有PD之患者中，化合物I以廣泛範圍之劑量持續長達28天通常具有良好耐受性。化合物I治療之參與者中最常見的TEAE為頭痛。在肺部或腎功能中不存在臨床上有意義的變化。
藥物動力學 ：基於CSF/未結合之血漿比率，化合物I展現出高CSF滲透。在HV及患有PD之患者中，用化合物I治療在通常具有良好耐受性的劑量下達成穩固目標接合及路徑接合。
藥效動力學 ：在HV及患有PD之患者兩者中，藉由化合物I治療達成穩固目標及路徑接合。另外，HV及患有PD之患者兩者中的化合物I治療引起尿液中之溶酶體脂質BMP 22:6 (一種溶酶體功能之標記物)的劑量依賴性減少。
迄今為止，未觀測到劑量依賴性重要安全性問題，其中發現在超過200名個體中，對於健康志願者以高達400 mg每天兩次(BID)之劑量持續14天或對於225 mg之劑量持續28天，化合物I為安全的且通常具有良好耐受性。
實例 5 ：醫藥組合物以乾式造粒法製備含有與下表中所示之各組分混合之75 mg 化合物I的立即釋放錠劑形式。 表 2
成分 重量 / 重量 %
化合物I (75 mg) 20
粒內   
微晶纖維素 67.5
聚維酮 3
交聯羧甲基纖維素鈉 2.5
滑石 1
膠態二氧化矽 0.5
硬脂酸鎂 0.5
粒外   
交聯羧甲基纖維素鈉 2.5
滑石 1
膠態二氧化矽 0.5
硬脂酸鎂 1
包衣   
Opadry® White 03F580030 3
本文中所提及之專利及科學文獻建立熟習此項技術者可獲得之知識。本文中所引用之所有美國專利及公開或未公開之美國專利申請案均以引用的方式併入。本文中所引用之所有公開的外國專利及專利申請案特此以引用之方式併入。本文中所引用之所有其他公開之參考文獻、文獻、稿圖及科學文獻特此以引用的方式併入本文中。
儘管出於清楚理解之目的，已藉助於說明及實例相當詳細地描述前述本發明，但描述及實例不應解釋為限制本發明之範疇。因此，全部適合修正及等效物可認為屬於如隨附申請專利範圍所定義的本發明之範疇。
本專利案或申請案檔案含有至少一張彩圖。在申請且支付必要費用後，專利局將提供附有彩圖之此專利或專利申請公開案之複本。 圖1展示所提出之LRRK2作用機制，比較帕金森氏病細胞與經LRRK2抑制劑治療之細胞。aSyn= 𝛼-突觸核蛋白；GBA= 𝛽-葡萄糖腦苷脂酶；LRRK2 =富含白胺酸之重複激酶2；Rabs = Rab GTP酶。 圖2展示1期研究設計。此雙盲、安慰劑對照1期研究包含健康志願者中之單一遞增劑量(SAD)及10天、14天及28天多重遞增劑量(MAD)部分。BID =每天兩次；PBO =安慰劑；QD =每天一次。 圖3展示1b期研究設計。此研究為雙盲、安慰劑對照、平行設計的1b期研究，其具有28天給藥，在帕金森氏病患者中每天投與一次。 圖4A及圖4B展示1期研究中之目標接合。BL =基線；IQR =四分位數範圍；MAD =多重遞增劑量。圖4A展示全血pS935之減少百分比(基線至第10天)。圖4B展示全血pS935之減少百分比(基線至第14天)。縮寫：IQR =四分位數範圍；pS935 LRRK2 =富含白胺酸之重複激酶2絲胺酸935磷酸化；QD =每天一次；BID-每天兩次。 圖5A及圖5B展示1期研究中之路徑接合。圖5A展示來自PBMC之pRab10的減少百分比(基線至第10天)。圖5B展示來自PBMC之pRab10的減少百分比(基線至第14天)。 圖6A及圖6B展示1b期研究中之目標及路徑接合。圖6A展示全血pS935之減少百分比(基線至第28天)。圖6B展示來自PBMC之pRab10的減少百分比(基線至第28天)。 圖7A及圖7B展示化合物I之1/1b期研究中之溶酶體接合。圖7A展示I期健康志願者(部分B、D及E MAD群組)中BMP(22:6/22:6)之減少百分比(基線至第10天[部分B]、第28天[部分D]及第14天[部分E])。圖7B展示患有帕金森氏病之1b期患者中之尿液BMP(22:6/22:6)/肌酐之減少百分比(基線至第10天[部分B]、第28天[部分D]、及第14天[部分E])。BMP濃度相對於肌酐濃度標準化(ng/mg)。 圖8展示1b期研究中患有帕金森氏病之患者的人口統計資料及臨床特徵。H&Y，Hoehn及Yahr；MDS-UDPRS III，運動障礙協會-統一帕金森氏病評定量表；MAO-B，單胺氧化酶；PD，帕金森氏病；QD，每天一次。 圖9展示健康志願者之1期研究中MAD群組中之治療引發不良事件。*手術相關包括(以頻率順序)：手術性疼痛、手術性頭痛、手術後併發症、穿刺部位疼痛、穿刺部位癢、導管部位疼痛、手術後不適、醫療器件皮炎、導管部位紅斑。在≥1個TEAE之獨立分析中，每個治療組中≥2名個體包括以下未列於上文之額外TEAE：耳痛(n=2；105 mg QD 10天群組)；鼻咽炎(n=2；225 mg QD 28天群組)；無症狀COVID-19 (n=2；400 mg BID14天群組)；嗜睡(n=2；250 mg BID14天群組)。2名個體亦經歷與腰椎穿刺相關之暈厥前兆(150及225 mg QD28天群組各一名)。 圖10展示帕金森氏病患者之1b期研究中之治療引發不良事件。GERD，胃食道逆流病；TEAE，治療引發不良事件。 a手術相關包括(以頻率順序)：手術性疼痛、手術後挫傷、手術後血腫及手術性頭痛； b相同兩名患者中出現之低血壓及起立性低血壓。
Figure 111116487-A0101-11-0001-1

Claims (52)

  1. 一種用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
    Figure 03_image001
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  2. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約70至225毫克之間的該化合物。
  3. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約70與80 mg之間的該化合物。
  4. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約70 mg之該化合物。
  5. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約75 mg之該化合物。
  6. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約80 mg之該化合物。
  7. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約105 mg之該化合物。
  8. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約130 mg之該化合物。
  9. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約150 mg之該化合物。
  10. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約225 mg之該化合物。
  11. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約250 mg之該化合物。
  12. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約300 mg之該化合物。
  13. 如請求項1之方法，其中向該個體投與約400 mg之該化合物。
  14. 如前述請求項中任一項之方法，其中該化合物係經口投與。
  15. 如前述請求項中任一項之方法，其中該化合物係每天投與一次。
  16. 如前述請求項中任一項之方法，其中該化合物係每天投與兩次。
  17. 如前述請求項中任一項之方法，其中該方法使得該個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)減少。
  18. 如前述請求項中任一項之方法，其中該方法使得該個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)減少。
  19. 如前述請求項中任一項之方法，其中該方法使得該個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)減少。
  20. 一種用於治療帕金森氏病之方法，該方法包含一天一次向有需要之個體投與約75至225 mg之間的化合物I：
    Figure 03_image036
    。
  21. 如請求項20之方法，其中向該個體投與約75 mg之該化合物。
  22. 如請求項20或21之方法，其中向該個體投與約150 mg之該化合物。
  23. 如請求項20至22中任一項之方法，其中向該個體投與約225 mg之該化合物。
  24. 一種用於減少患有帕金森氏病之個體之全血中之磷酸化S935 LRRK2 (pS935)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
    Figure 03_image038
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  25. 如請求項24之方法，其中該pS935減少了41%至97%。
  26. 一種用於減少患有帕金森氏病之個體之周邊血液單核細胞(PBMC)中之磷酸化ras相關蛋白質Rab10 (pRab10)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
    Figure 03_image040
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  27. 如請求項26之方法，其中該pRab10減少了44%至97%。
  28. 一種用於減少患有帕金森氏病之個體之尿液中之溶酶體脂質22:6-雙[單醯基甘油]磷酸酯(BMP)的方法，該方法包含向有需要之個體投與約70至800毫克/天之間的化合物I：
    Figure 03_image042
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  29. 如請求項28之方法，其中BMP(22:6/22:6)/或BMP(22:6/22:6)//肌酐減少了22%至86%。
  30. 如前述請求項中任一項之方法，其中該個體為人類。
  31. 如前述請求項中任一項之方法，其中該帕金森氏病為家族性的。
  32. 如前述請求項中任一項之方法，其中該帕金森氏病為偶發性的。
  33. 一種LRRK2抑制劑用於治療帕金森氏病之用途，其中該抑制劑係以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為
    Figure 03_image044
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  34. 一種LRRK2抑制劑在製造用於治療帕金森氏病之藥劑中的用途，其中該抑制劑係以約70至800毫克/天向有需要之個體投與且為
    Figure 03_image046
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物。
  35. 一種醫藥組合物，其包含70至800毫克之化合物I
    Figure 03_image048
    或其醫藥學上可接受之鹽或氘化類似物，及醫藥學上可接受之載劑。
  36. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約70至225 mg之化合物I。
  37. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於投與約800毫克/天。
  38. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於投與約225毫克/天。
  39. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約70 mg之化合物I。
  40. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約75 mg之化合物I。
  41. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約80 mg之化合物I。
  42. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約105 mg之化合物I。
  43. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約130 mg之化合物I。
  44. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約150 mg之化合物I。
  45. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約225 mg之化合物I。
  46. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約250 mg之化合物I。
  47. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約300 mg之化合物I。
  48. 如請求項35之醫藥組合物，其包含約400 mg之化合物I。
  49. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於經口投與。
  50. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於每天投與一次。
  51. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於每天投與兩次。
  52. 如請求項35之醫藥組合物，其適用於每天投與三次。
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