TW202237836A - 工程化之第2類第v型crispr系統 - Google Patents
工程化之第2類第v型crispr系統 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202237836A TW202237836A TW110145073A TW110145073A TW202237836A TW 202237836 A TW202237836 A TW 202237836A TW 110145073 A TW110145073 A TW 110145073A TW 110145073 A TW110145073 A TW 110145073A TW 202237836 A TW202237836 A TW 202237836A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- seq
- grna
- type
- sequence
- nucleic acid
- Prior art date
Links
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 title claims 89
- 108020005004 Guide RNA Proteins 0.000 claims abstract 104
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract 72
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract 62
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract 62
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract 42
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 claims abstract 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims 120
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims 120
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 60
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 claims 40
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 claims 40
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims 40
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims 40
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 34
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 34
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims 30
- 238000010362 genome editing Methods 0.000 claims 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 23
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 22
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 20
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 20
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 19
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 18
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims 17
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 14
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims 14
- 102100035102 E3 ubiquitin-protein ligase MYCBP2 Human genes 0.000 claims 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 11
- 201000003426 X-linked dystonia-parkinsonism Diseases 0.000 claims 9
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 claims 9
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 7
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 6
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims 6
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 6
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 5
- 229940122426 Nuclease inhibitor Drugs 0.000 claims 5
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 4
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 claims 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims 3
- 208000009869 Neu-Laxova syndrome Diseases 0.000 claims 3
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 claims 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims 3
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 3
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 claims 3
- JTIJZYSPRDTGGH-UHFFFAOYSA-L disodium;2-nitro-5-sulfonatosulfanylbenzoate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC(SS([O-])(=O)=O)=CC=C1[N+]([O-])=O JTIJZYSPRDTGGH-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims 3
- 230000009438 off-target cleavage Effects 0.000 claims 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims 3
- 102200027950 rs17856697 Human genes 0.000 claims 3
- 102220014894 rs76757102 Human genes 0.000 claims 3
- 102220087845 rs869025455 Human genes 0.000 claims 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims 3
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical class CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 claims 2
- 241001655883 Adeno-associated virus - 1 Species 0.000 claims 2
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 claims 2
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 claims 2
- 241000580270 Adeno-associated virus - 4 Species 0.000 claims 2
- 241001634120 Adeno-associated virus - 5 Species 0.000 claims 2
- 241000972680 Adeno-associated virus - 6 Species 0.000 claims 2
- 241001164823 Adeno-associated virus - 7 Species 0.000 claims 2
- 241001164825 Adeno-associated virus - 8 Species 0.000 claims 2
- 241000649045 Adeno-associated virus 10 Species 0.000 claims 2
- 238000010354 CRISPR gene editing Methods 0.000 claims 2
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims 2
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 2
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 claims 2
- 101710170658 Endogenous retrovirus group K member 10 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 101710186314 Endogenous retrovirus group K member 21 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 101710162093 Endogenous retrovirus group K member 24 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 101710094596 Endogenous retrovirus group K member 8 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 101710177443 Endogenous retrovirus group K member 9 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 239000004214 Fast Green FCF Substances 0.000 claims 2
- 101710177291 Gag polyprotein Proteins 0.000 claims 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims 2
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 claims 2
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 claims 2
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 claims 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 claims 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 2
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 claims 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 claims 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 claims 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 claims 2
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 claims 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims 2
- 230000006780 non-homologous end joining Effects 0.000 claims 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 claims 2
- 102220197841 rs1057519729 Human genes 0.000 claims 2
- 102220054484 rs3180515 Human genes 0.000 claims 2
- 102220014893 rs397517289 Human genes 0.000 claims 2
- 102220098139 rs878852992 Human genes 0.000 claims 2
- 230000010415 tropism Effects 0.000 claims 2
- JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N (2r)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrobromide Chemical compound Br.OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(O)=O JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N 0.000 claims 1
- 102220615430 40S ribosomal protein S13_K88Q_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 241000649046 Adeno-associated virus 11 Species 0.000 claims 1
- 241000649047 Adeno-associated virus 12 Species 0.000 claims 1
- 102220614024 Angiotensin-converting enzyme 2_K31Y_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220567620 BICD family-like cargo adapter 2_L100A_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220540906 C-X-C chemokine receptor type 3_Y29F_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 101100540108 Catharanthus roseus V19H gene Proteins 0.000 claims 1
- 102220545991 Cell division cycle 5-like protein_W82G_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 claims 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 claims 1
- 102220497066 DNA dC->dU-editing enzyme APOBEC-3C_L72D_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 claims 1
- 102220626226 DNA-directed primase/polymerase protein_M112T_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220485974 Dihydropteridine reductase_S51T_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220531902 Gelsolin_E98D_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220576080 HLA class I histocompatibility antigen, B alpha chain_S48T_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220476535 Interleukin-18_L41A_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220624589 Kelch repeat and BTB domain-containing protein 3_K20D_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220625058 Kelch repeat and BTB domain-containing protein 3_K27R_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220477668 Mitochondrial inner membrane protease subunit 2_K84R_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims 1
- 102220526247 NACHT, LRR and PYD domains-containing protein 6_R42E_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 102220492970 Nuclear RNA export factor 1_L22D_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 108010081143 P8 peptide Proteins 0.000 claims 1
- 102220479495 Pantetheinase_K11T_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims 1
- 101800004193 Peptide P3 Proteins 0.000 claims 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims 1
- 101800001494 Protease 2A Proteins 0.000 claims 1
- 101800001066 Protein 2A Proteins 0.000 claims 1
- 101800001065 Protein 2B Proteins 0.000 claims 1
- 102220607241 Protein inscuteable homolog_K97D_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220517643 Ras-related protein Rab-33B_Q92A_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 claims 1
- 102220637987 Retinol-binding protein 1_K41L_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220580831 Serine/threonine-protein kinase STK11_K96R_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 102220483418 Tensin-2_E98G_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220581386 Transcription factor E2F6_L68E_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220473352 Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D3_D87P_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220514520 Vitronectin_T76E_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 102220532013 WW domain-binding protein 11_K84Y_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims 1
- 102220431586 c.104A>C Human genes 0.000 claims 1
- 102220354962 c.208C>G Human genes 0.000 claims 1
- 102220364503 c.245T>C Human genes 0.000 claims 1
- 102220354772 c.254G>T Human genes 0.000 claims 1
- 102220364010 c.53A>T Human genes 0.000 claims 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims 1
- 210000001043 capillary endothelial cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001196 cardiac muscle myoblast Anatomy 0.000 claims 1
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 claims 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 claims 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims 1
- 230000005782 double-strand break Effects 0.000 claims 1
- 230000034431 double-strand break repair via homologous recombination Effects 0.000 claims 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 claims 1
- 108010044804 gamma-glutamyl-seryl-glycine Proteins 0.000 claims 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims 1
- 108700026078 glutathione trisulfide Proteins 0.000 claims 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims 1
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 claims 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 claims 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims 1
- 210000005033 mesothelial cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 claims 1
- -1 nuclease inhibitor Substances 0.000 claims 1
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims 1
- 101800002729 p12 Proteins 0.000 claims 1
- XZKAKQROJCKAOP-YWZUXTQFSA-N p20 peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(C)C)C1=CC=CC=C1 XZKAKQROJCKAOP-YWZUXTQFSA-N 0.000 claims 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 claims 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 claims 1
- 210000002706 plastid Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 claims 1
- 102220012991 rs111033344 Human genes 0.000 claims 1
- 102220009232 rs111430410 Human genes 0.000 claims 1
- 102200029238 rs118203979 Human genes 0.000 claims 1
- 102200008028 rs121912294 Human genes 0.000 claims 1
- 102200081271 rs137852836 Human genes 0.000 claims 1
- 102220280409 rs139727620 Human genes 0.000 claims 1
- 102220226367 rs140441011 Human genes 0.000 claims 1
- 102220036761 rs143914387 Human genes 0.000 claims 1
- 102220133209 rs147559626 Human genes 0.000 claims 1
- 102200061836 rs1553565143 Human genes 0.000 claims 1
- 102220276862 rs1553624812 Human genes 0.000 claims 1
- 102220276847 rs1553628364 Human genes 0.000 claims 1
- 102200088871 rs1554884979 Human genes 0.000 claims 1
- 102200051507 rs1555689937 Human genes 0.000 claims 1
- 102220045892 rs370359540 Human genes 0.000 claims 1
- 102220223774 rs375605948 Human genes 0.000 claims 1
- 102220011920 rs386134158 Human genes 0.000 claims 1
- 102220004985 rs387906536 Human genes 0.000 claims 1
- 102220011159 rs397516790 Human genes 0.000 claims 1
- 102220044570 rs587781404 Human genes 0.000 claims 1
- 102220044582 rs587781412 Human genes 0.000 claims 1
- 102220046137 rs587782675 Human genes 0.000 claims 1
- 102200131511 rs59065411 Human genes 0.000 claims 1
- 102200114229 rs797045192 Human genes 0.000 claims 1
- 102200000823 rs863225430 Human genes 0.000 claims 1
- 102220146158 rs886059141 Human genes 0.000 claims 1
- 230000005783 single-strand break Effects 0.000 claims 1
- 210000004683 skeletal myoblast Anatomy 0.000 claims 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 claims 1
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 claims 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 claims 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/102—Mutagenizing nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/111—General methods applicable to biologically active non-coding nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
- C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
- C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/20—Type of nucleic acid involving clustered regularly interspaced short palindromic repeats [CRISPRs]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2800/00—Nucleic acids vectors
- C12N2800/80—Vectors containing sites for inducing double-stranded breaks, e.g. meganuclease restriction sites
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本文提供適用於編輯目標核酸之工程化之第2類第V型核酸酶及導引RNA。亦提供製造及使用此類變異體以修飾核酸之方法。
Description
細菌及古菌(archaea)之CRISPR-Cas系統賦予針對噬菌體及病毒之後天性免疫形式。過去十年之密集研究未覆蓋此等系統之生物化學。CRISPR-Cas系統由Cas蛋白及CRISPR陣列組成,Cas蛋白涉及外來DNA或RNA之獲取、靶向及裂解,CRISPR陣列包括側接將Cas蛋白導引至其目標的短間隔序列之直接重複序列。第2類CRISPR-Cas為流線型型式,其中結合於RNA之單一Cas蛋白負責結合於靶向序列及裂解該靶向序列。此等最小系統之可程式化性質已促進其作為使基因體操縱領域革命化的通用技術的用途。
迄今為止,僅已發現已廣泛使用之少數第2類CRISPR/Cas系統。其中,第V型獨特之處在於其利用單個統一RuvC樣核酸內切酶(RuvC)域,該域識別不同於由Cas9識別之3' PAM序列之5' PAM序列,且在目標核酸中形成具有5、7或10個nt 5'突出端的交錯裂解(Yang等人, PAM-dependent target DNA recognition and cleavage by C2c1 CRISPR-Cas endonuclease. Cell 167:1814 (2016))。然而,第V型野生型Cas及導引序列具有低編輯效率。因此,此項技術中需要額外第2類第V型CRISPR/Cas系統(例如Cas蛋白加導引RNA組合),其已經最佳化及/或提供對用於多種治療、診斷及研究應用之早期產生系統之改良。
本發明係關於用於修飾真核細胞中之基因之目標核酸的導引核糖核酸(gRNA)、工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及導引核糖核酸(gRNA)之系統。在一些實施例中,本發明提供工程化之第2類第V型蛋白,其相對於參考CasX之域包含一或多個修飾且與SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白相比展現一或多個改良之特徵。在其他實施例中,本發明提供CasX變異蛋白之工程化序列變異體,諸如CasX 491 (SEQ ID NO: 336)或CasX 515 (SEQ ID NO: 416),其中第2類第V型蛋白相對於CasX變異體之域包含至少一個修飾且與CasX變異蛋白相比展現一或多個改良特徵。在一些實施例中,第2類、第V類變異體能夠與導引核糖核酸(gRNA)形成複合物,其中該複合物可以結合及裂解目標核酸,其中目標核酸包含非目標股及目標股。
在一些實施例中,本發明提供能夠結合第2類第V型變異蛋白之導引核糖核酸(gRNA),包括單一導引組合物,其中gRNA與SEQ ID NO: 2238或SEQ ID NO: 2239之gRNA相比在區域中包含至少一個修飾。在一些實施例中,gRNA之支架之經修飾區包括:(a)延伸莖環;(b)支架莖環;(c)三聯體;及(d)假結。在一些情況下,變異體gRNA之支架延伸莖進一步包含對泡狀結構(bubble)之修飾。在其他情況下,gRNA之支架進一步包含對三聯體環區之修飾。在其他情況下,變異體gRNA之支架進一步包含延伸莖中之異源RNA,包括髮夾序列。
在一些實施例中,本發明提供包含本文所描述之實施例中之任一者之工程化之第2類第V型蛋白及gRNA變異體的基因編輯對,其中該基因編輯對與包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA的基因編輯對相比展現至少一個改良之特徵。在特定實施例中,工程化之第2類第V型蛋白包含選自由以下組成之群的序列:如表3中所闡述之SEQ ID NO: 247-592及1147-1231之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列,且gRNA為選自由以下組成之群的序列:如表2中所闡述之SEQ ID NO: 2101-2332及2353-2398之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。在特定實施例中,工程化之第2類第V型蛋白包含選自由以下組成之群的序列:SEQ ID NO: 270-592及1147-1231之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列,且gRNA為選自由以下組成之群的序列:SEQ ID NO: 2238-2332及2353-2398之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。在特定實施例中,工程化之第2類第V型蛋白包含選自由以下組成之群的序列:SEQ ID NO: 415-592及1147-1231之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列,且gRNA為選自由以下組成之群的序列:SEQ ID NO: 2281-2332及2353-2398之序列,或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。
在一些實施例中,本發明提供編碼本文所描述之工程化之第2類第V型變異蛋白、gRNA變異體及基因編輯對的多核苷酸及載體。在一些實施例中,載體為病毒載體,諸如腺相關病毒(AAV)載體。在其他實施例中,載體為包含基因編輯對之RNP之CasX遞送粒子,稱為XDP。
在一些實施例中,本發明提供包含本文所描述之多核苷酸、載體、工程化之第2類第V型蛋白及gRNA之細胞。在其他實施例中,本發明提供包含藉由本文所描述之編輯實施例之方法編輯之目標核酸的細胞。
在一些實施例中,本發明提供套組,其包含本文所描述之多核苷酸、載體、工程化之第2類第V型蛋白、gRNA及基因編輯對。
在一些實施例中,本發明提供編輯目標核酸之方法,其包含使目標核酸與本文所描述之第2類第V型蛋白及gRNA變異體接觸,其中該接觸引起目標核酸之編輯或修飾。
在一些實施例中,本發明提供編輯細胞群中之目標核酸之方法,該方法包含使細胞與本文所描述之基因編輯對中之一或多者接觸,其中該接觸引起細胞群中之目標核酸之編輯或修飾。
在其他實施例中,本發明提供治療有需要之個體之方法,其包含投與本文所描述之任一實施例之基因編輯對或包含或編碼該基因編輯對之載體。
在另一態樣中,本文提供用作藥劑之基因編輯對、包含基因編輯對之組合物,或包含或編碼基因編輯對之載體。
在另一態樣中,本文提供用於治療方法之基因編輯對、包含基因編輯對之組合物或包含或編碼基因編輯對之載體,其中該方法包含編輯或修飾目標核酸;視情況其中編輯發生於在基因之對偶基因中具有突變之個體中,其中該突變引起個體之疾病或病症,較佳其中該編輯改變針對基因之野生型對偶基因的突變,或敲落或剔除引起個體之疾病或病症之基因的對偶基因。
相關申請的交叉引用本申請案主張於2020年12月3日提交之美國臨時專利申請案第63/121,196號、2021年3月17日提交之第63/162,346號及2021年6月9日提交之第63/208,855號之優先權,該等申請案中之各者之內容以全文引用之方式併入本文中。
通過引用序列表併入在此以電子方式提交之文本文件的內容以全文引用之方式併入本文中:序列表之電腦可讀形式複本(文件名:SCRB_031_03TW_SeqList_ST25,記錄日期:2021年12月1日,文件大小5.61百萬位元組)。
通過引用併入本說明書中所提及之所有公開案、專利及專利申請案均以引用之方式併入本文中,其引用的程度如同各個別公開案、專利或專利申請案經特定及個別地指示以引用的方式併入一般。WO 2020/247882、WO 2020/247883及WO 2021/113772之內容(其揭示CasX變異體及gRNA變異體)及其遞送方法以全文引用之方式併入本文中。
儘管本文已展示及描述本發明之較佳實施例,但熟習此項技術者將明白,此類實施例僅藉助於實例提供。熟習此項技術者可在不背離本發明之情況下想到許多變化形式、改變及取代。應瞭解,本文所描述之本發明實施例的各種替代方案可用於實施本發明。希望以下申請專利範圍限定本發明之範圍,且從而涵蓋此申請專利範圍及其等效物之範圍內的方法及結構。
除非另外定義,否則本文所使用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域中之普通技術人員通常所理解之含義相同之含義。儘管類似或等效於本文所描述之彼等方法及材料可用於實踐或測試本發明實施例,但合適的方法及材料描述如下。在衝突之情況下,將以專利說明書(包括定義)為凖。另外,材料、方法及實例僅為說明性的,且不意欲為限制性的。熟習此項技術者可在不背離本發明之情況下想到許多變化形式、改變及取代。
定義
術語「多核苷酸」及「核酸」在本文中可互換使用,係指任何長度之核苷酸(核糖核苷酸或去氧核糖核苷酸)之聚合形式。因此,術語「多核苷酸」及「核酸」涵蓋單股DNA;雙股DNA;多股DNA;單股RNA;雙股RNA;多股RNA;基因體DNA;cDNA;DNA-RNA混合物;及包含嘌呤及嘧啶鹼基或其他天然、化學或生物化學修飾、非天然或衍生之核苷酸鹼基的聚合物。
「可雜交」或「互補」可互換使用,意謂核酸(例如RNA、DNA)包含使其能夠在溫度及溶液離子強度之適當活體外及/或活體內條件下以序列特異性、反向平行方式(亦即,核酸特異性結合於互補核酸)與另一核酸非共價結合(亦即形成沃森-克里克(Watson-Crick)鹼基對及/或G/U鹼基對)、「黏接」或「雜交」的核苷酸序列。應理解,多核苷酸之序列不必與待特異性雜交之目標核酸序列100%互補;其可具有至少約70%、至少約80%、或至少約90%、或至少約95%序列一致性且仍與目標核酸序列雜交。此外,多核苷酸可在一或多個片段上雜交以使得中間或鄰近片段不參與雜交事件(例如環結構或髮夾結構、『凸起』、『泡狀結構』及其類似物)。
出於本發明之目的,「基因」包括編碼基因產物(例如蛋白質、RNA)之DNA區域,以及調節基因產物生產之所有DNA區域,無論此類調節序列是否鄰近編碼序列及/或轉錄序列。因此,基因可包括輔助元件序列,其包括但未必限於啟動子序列、終止子、轉譯調節序列(諸如核糖體結合位點及內部核糖體進入位點)、強化子、沉默子、絕緣子、邊界元件、複製起點、基質附著位點及基因座控制區。編碼序列編碼轉錄或轉錄及轉譯後之基因產物;本發明之編碼序列可包含片段且無需含有全長開放閱讀框。基因可以包括經轉錄之股以及含有反密碼子之互補股兩者。
術語「下游」係指位於參考核苷酸序列之3'處之核苷酸序列。在某些實施例中,下游核苷酸序列與轉錄起始點之後的序列相關。舉例而言,基因之轉譯起始密碼子位於轉錄起始位點下游。
術語「上游」係指位於參考核苷酸序列之5'處之核苷酸序列。在某些實施例中,上游核苷酸序列與位於編碼區或轉錄起始點之5'側上之序列相關。舉例而言,大部分啟動子位於轉錄起始位點上游。
關於多核苷酸或胺基酸序列之術語「鄰近」係指多核苷酸或多肽中相互緊靠或鄰接的序列。熟練技術人員應瞭解,兩個序列可視為彼此鄰近且仍涵蓋有限量之插入序列,例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個核苷酸或胺基酸。
術語「輔助元件」在本文中可與術語「輔助序列」互換使用且意欲尤其包括多腺苷酸化信號(聚(A)信號)、強化子元件、內含子、轉錄後調節元件(PTRE)、核定位信號(NLS)、去胺酶、DNA醣苷酶抑制劑、額外啟動子、刺激CRISPR介導之同源定向修復(例如以順式或反式)之因子、轉譯之活化子或抑制劑、自裂解序列及融合域,例如與CRISPR蛋白融合之融合域。應理解,適當的一或多種輔助元件之選擇將視待表現之編碼組分(例如蛋白質或RNA)而定或核酸是否包含需要不同聚合酶或不意欲表現為融合蛋白之多個組分。
術語「啟動子」係指含有轉錄起始位點及促進聚合酶結合及轉錄之額外序列的DNA序列。例示性真核啟動子包括諸如TATA盒之元件及/或B識別元件(BRE),且幫助或促進相關可轉錄多核苷酸序列及/或基因(或轉殖基因)之轉錄及表現。啟動子可以合成方式產生或可衍生自已知或天然存在之啟動子序列或另一啟動子序列。啟動子可在待轉錄之基因近端或遠端。啟動子亦可包括嵌合啟動子,其包含兩個或兩個以上異源序列之組合以賦予某些特性。本發明之啟動子可包括與本文已知或提供之其他啟動子序列在組成上類似,但與其不相同的啟動子序列之變異體。啟動子可根據與相關編碼或轉錄序列或可操作地連接於啟動子之基因(諸如組成性、發育、組織特異性、誘導型等)之表現模式相關的準則分類。啟動子亦可根據其強度分類。如啟動子之上下文中所用,「強度」係指藉由啟動子控制之基因的轉錄速率。「強」啟動子意謂轉錄速率較高,而「弱」啟動子意謂轉錄速率相對較低。
本發明之啟動子可為聚合酶II (Pol II)啟動子。聚合酶II轉錄所有蛋白質編碼及許多非編碼基因。代表性Pol II啟動子包括核心啟動子,該核心啟動子為圍繞轉錄起始位點約100個鹼基對之序列,且充當Pol II聚合酶及相關通用轉錄因子之結合平台。啟動子可含有一或多個核心啟動子元件,諸如TATA盒、BRE、引發劑(INR)、模體十元件(MTE)、下游核心啟動子元件(DPE)、下游核心元件(DCE),儘管缺乏此等元件之核心啟動子為此項技術中已知的。
本發明之啟動子可為聚合酶III (Pol III)啟動子。Pol III轉錄DNA以合成小核糖體RNA,諸如5S rRNA、tRNA及其他小RNA。代表性Pol III啟動子使用內部控制序列(基因之轉錄片段內的序列)來支援轉錄,但有時亦使用諸如TATA盒之上游元件。所有Pol III啟動子均設想在本發明之範疇內。
術語「強化子」係指當與稱為轉錄因子之特異性蛋白質結合時,調節相關基因之表現的調節DNA序列。強化子可位於基因之內含子中,或基因編碼序列之5'或3'中。強化子可在基因近端(亦即,在啟動子之幾十或數百個鹼基對(bp)內),或可位於基因遠端(亦即,與啟動子相距數千個bp、數十萬個bp或甚至數百萬個bp)。單一基因可藉由超過一種強化子調節,其均被設想為在本發明之範疇內。
如本文所用,「轉錄後調節元件(PRE)」,諸如肝炎PRE,係指在轉錄時產生能夠展現轉錄後活性以增強或促進與其可操作地連接之相關基因表現的三級結構的DNA序列。
如本文所用,「轉錄後調節元件(PTRE)」,諸如肝炎PTRE,係指當轉錄時產生能夠展現轉錄後活性以增強或促進與其可操作地連接之相關基因表現的三級結構的DNA序列。
如本文所用,「重組」意謂特定核酸(DNA或RNA)為選殖、限制及/或連接步驟之各種組合的產物,產生具有與天然系統中發現之內源核酸可區分之結構性編碼或非編碼序列的構築體。一般而言,編碼結構編碼序列之DNA序列可自cDNA片段及短寡核苷酸連接子或自一系列合成寡核苷酸組裝,以提供能夠自細胞中或無細胞轉錄及轉譯系統中所含之重組轉錄單元表現的合成核酸。此類序列可以未經內部非轉譯序列,或內含子(其通常存在於真核基因中)間斷之開放閱讀框的形式提供。包含相關序列之基因體DNA亦可用於形成重組基因或轉錄單元。非轉譯DNA之序列可存在於開放閱讀框之5'或3',其中此類序列不干擾編碼區之操縱或表現,且可實際上用於藉由各種機制調節所需產物之生產(參見上文之「強化子」及「啟動子」)。
術語「重組多核苷酸」或「重組核酸」係指一種非天然存在,例如藉由經由人工干預將序列之兩個其他分離片段人工組合而製得。此人工組合通常藉由化學合成手段或藉由人工操縱核酸之分離片段,諸如藉由基因工程化技術來實現。通常進行此類操作以用編碼相同或保守胺基酸,同時典型地引入或移除序列識別位點之冗餘密碼子來替換密碼子。或者,進行其以將具有所需功能之核酸區段連接在一起以產生功能之所需組合。此人工組合通常藉由化學合成手段或藉由人工操縱核酸之分離片段,諸如藉由基因工程化技術來實現。
類似地,術語「重組多肽」或「重組蛋白」係指並非天然存在之多肽或蛋白質,例如藉由經由人工干預將胺基序列之兩個其他分離片段人工組合而製得。因此,例如包含異源胺基酸序列之蛋白質為重組的。
如本文所用,術語「接觸(contacting)」意謂在兩個或兩個以上實體之間建立物理連接。舉例而言,使目標核酸與導引核酸接觸意謂使目標核酸及導引核酸共用實體連接;例如若序列共用序列相似性,則可雜交。
「解離常數」或「K
d」可互換使用且意謂配位體「L」與蛋白質「P」之間的親和力;亦即配位體與特定蛋白質結合之緊密程度。其可使用式K
d=[L][P]/[LP]計算,其中[P]、[L]及[LP]分別表示蛋白質、配位體及複合物之莫耳濃度。
本發明提供適用於編輯目標核酸序列之系統及方法。如本文所用,「編輯」可與「修飾」互換使用,且包括但不限於裂解、切割、缺失、敲入、剔除及其類似者。
「裂解」,其意謂目標核酸分子(例如RNA、DNA)之共價主鏈的斷裂。裂解可藉由多種方法,包括但不限於磷酸二酯鍵之酶或化學水解引發。單股裂解及雙股裂解均為可能的,且雙股裂解可由於兩個獨特單股裂解事件而出現。
術語「剔除」係指基因之消除或基因之表現。舉例而言,基因可藉由缺失或添加導致閱讀框破壞之核苷酸序列來剔除。作為另一實例,基因可藉由用無關序列置換一部分基因而剔除。如本文所用,術語「減弱」係指基因或其基因產物之表現減少。由於基因減弱,蛋白質活性或功能可減弱或蛋白質水準可降低或消除。
如本文所用,「同源定向修復」(HDR)係指在修復細胞中之雙股斷裂期間發生之DNA修復形式。此過程需要核苷酸序列同源性,且使用供體模板修復或剔除目標DNA,且導致遺傳資訊自供體轉移至目標。若供體模板不同於目標DNA序列且供體模板之部分或全部序列併入至目標DNA中,則同源定向修復可藉由插入、缺失或突變引起目標序列之序列改變。
如本文所用,「非同源末端連接」(NHEJ)係指藉由斷裂末端彼此直接連接而修復DNA中之雙股斷裂,而無需同源模板(相比於同源定向修復,其需要同源序列來導引修復)。NHEJ通常引起雙股斷裂位點附近核苷酸序列之損失(缺失)。
如本文所用,「微同源性介導之末端連接」(MMEJ)係指突變DSB修復機制,其始終與側接斷裂位點之缺失相關而無需同源模板(與同源定向修復形成對比,其需要同源序列來導引修復)。MMEJ通常引起雙股斷裂位點附近核苷酸序列之損失(缺失)。多核苷酸或多肽與另一多核苷酸或多肽具有一定百分比「序列相似性」或「序列一致性」,意謂當比對時,當比較兩個序列時,該等百分比之鹼基或胺基酸相同且在相同相對位置。序列類似性(有時稱為百分比類似性、百分比一致性或同源性)可以多種不同方式確定。為確定序列類似性,序列可使用此項技術中已知之方法及電腦程式比對,該等方法及電腦程式包括BLAST,其可在全球資訊網內在ncbi.nlm.nih.gov/BLAST處獲得。核酸內之核酸序列之特定伸長部之間的百分比互補性可使用任何便利方法確定。例示性方法包括BLAST程式(基本局部比對檢索工具)及PowerBLAST程式(Altschul等人, J. Mol. Biol., 1990, 215, 403-410;Zhang and Madden, Genome Res., 1997, 7, 649-656)或藉由使用Gap程式(威斯康星序列分析封裝,Unix之版本8,遺傳學電腦組,大學研究園,Madison Wis),例如使用預設應用程式,其使用史密斯及德曼之算法(Adv. Appl. Math., 1981, 2, 482-489)。
術語「多肽」及「蛋白質」在本文中可互換使用,且係指任何長度之胺基酸之聚合形式,其可包括編碼及非編碼胺基酸、化學或生物化學修飾或衍生之胺基酸及具有經修飾之肽主鏈之多肽。該術語包括融合蛋白,包括但不限於具有異源胺基酸序列之融合蛋白。
「載體」或「表現載體」為複製子,諸如質體、噬菌體、病毒或黏質體,另一DNA片段(亦即「插入物」)可與其附接,以引起細胞中經附接片段之複製或表現。
應用於核酸、多肽、細胞或生物體的如本文所用之術語「天然存在之」或「未修飾」或「野生型」係指自然界中發現之核酸、多肽、細胞或生物體。
如本文所用,相比於野生型或參考胺基酸序列或野生型或參考核苷酸序列,「突變」係指一或多個胺基酸或核苷酸的插入、缺失、取代、複製或逆轉。
如本文所用,術語「經分離」意欲描述處於與多核苷酸、多肽或細胞天然存在之環境不同的環境中的多核苷酸、多肽或細胞。經分離之遺傳修飾宿主細胞可存在於遺傳修飾宿主細胞之混合群體中。
如本文所用,「宿主細胞」指示真核細胞、原核細胞或來自多細胞生物體(例如細胞株)之細胞,該等真核或原核細胞係用作核酸之受體(例如表現載體),且包括已藉由核酸遺傳修飾的原始細胞之後代。應理解,單細胞之後代可歸因於天然、偶發或故意突變而不一定與原始親本細胞具有完全相同之形態或基因體或總DNA補體。「重組宿主細胞」(亦稱為「遺傳修飾之宿主細胞」)為已引入異源核酸(例如表現載體)之宿主細胞。
如本文所用,術語「向性」係指病毒樣粒子(XDP,有時在本文中亦稱為XDP)優先進入某些細胞或組織類型及/或與細胞表面優先相互作用,其有助於進入某些細胞或組織類型,視情況且較佳接著表現(例如轉錄及視情況轉譯)由XDP攜帶之序列進入細胞中。
如本文所用,術語「假模式化(pseudotype/pseudotyping)」係指已經具有較佳特徵之另一病毒的病毒包膜蛋白取代的病毒包膜蛋白。舉例而言,HIV可經水泡性口炎病毒G蛋白(VSV-G)包膜蛋白(尤其,本文中下文所描述)假模式化,其使得HIV感染更寬範圍之細胞,因為HIV包膜蛋白主要將病毒靶向至CD4+呈現細胞。
如本文所用,術語「向性因子」係指整合至XDP表面中之組分,其為某一細胞或組織類型提供向性。向性因子之非限制性實例包括醣蛋白、抗體片段(例如scFv、奈米抗體、線性抗體等)、受體及配位體以靶向細胞標誌物。
「目標細胞標誌物」係指由目標細胞表現之分子,包括但不限於細胞表面受體、細胞介素受體、抗原、腫瘤相關抗原、醣蛋白、寡核苷酸、酶受質、抗原決定子或結合位點,其可存在於可充當抗體片段或醣蛋白向性因子之配位體的目標組織或細胞的表面上。
術語「保守胺基酸取代」係指具有類似側鏈之胺基酸殘基之蛋白質中之互換性。舉例而言,具有脂族側鏈之胺基酸之群由甘胺酸、丙胺酸、纈胺酸、白胺酸及異白胺酸組成;具有脂族羥基側鏈之胺基酸之群由絲胺酸及蘇胺酸組成;具有含醯胺側鏈之胺基酸之群由天冬醯胺及麩醯胺酸組成;具有芳族側鏈之胺基酸之群由苯丙胺酸、酪胺酸及色胺酸組成;具有鹼性側鏈之胺基酸之群由離胺酸、精胺酸及組胺酸組成;且具有含硫側鏈之胺基酸之群由半胱胺酸及甲硫胺酸組成。例示性保守胺基酸取代群為:纈胺酸-白胺酸-異白胺酸、苯丙胺酸-酪胺酸、離胺酸-精胺酸、丙胺酸-纈胺酸及天冬醯胺-麩醯胺酸。
如本文所用,術語「抗體」涵蓋各種抗體結構,包括(但不限於)單株抗體、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)、奈米抗體、單域抗體(諸如VHH抗體)及抗體片段,只要其展現所需抗原結合活性或免疫活性即可。抗體表示包括若干類型之分子的大型分子家族,諸如IgD、IgG、IgA、IgM及IgE。
「抗體片段」係指除完整抗體之外之分子,其包含完整抗體之一部分,且結合完整抗體所結合之抗原。抗體片段之實例包括(但不限於)Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、雙功能抗體、單鏈雙功能抗體、線性抗體、單域抗體、單域駱駝抗體、單鏈可變片段(scFv)抗體分子及由抗體片段形成之多特異性抗體。
如本文所用,「治療(treatment)」或「治療(treating)」在本文中可互換使用,且係指獲得有益或所需結果,包括但不限於治療益處及/或預防益處之方法。治療效益意謂根除或改善所治療之潛在病症或疾病。治療效益亦可藉由根除或改善症狀中之一或多者或改善與潛在疾病相關之一或多個臨床參數來實現,使得在個體中觀測到改善,儘管個體仍可能罹患潛在病症。
如本文所用,術語「治療有效量」及「治療有效劑量」係指當以一個或重複劑量向個體(諸如人類或實驗動物)投與時能夠對任何症狀、態樣、所量測之疾病狀態或病狀之參數或特徵具有任何可偵測、有益作用的單獨或作為組合物之一部分的藥物或生物製劑之量。此類作用不必絕對有益。
如本文所用,投與下表意謂向個體給予一定劑量之化合物(例如本發明之組合物)或組合物(例如醫藥組合物)的方法。
「個體」係哺乳動物。哺乳動物包括但不限於馴養動物、非人類靈長類動物、人類、狗、兔、小鼠、大鼠及其他嚙齒動物。
本說明書中所提及之所有公開案、專利及專利申請案均以引用之方式併入本文中,其引用的程度如同各個別公開案、專利或專利申請案經特定及個別地指示以引用的方式併入一般。
I. 通用方法
除非另外規定,否則本發明之實踐採用免疫學、生物化學、化學、分子生物學、微生物學、細胞生物學、基因體學及重組DNA之習知技術,其可見於諸如以下之標準教科書:Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 第3版(Sambrook等人, Harbor Laboratory Press 2001);Short Protocols in Molecular Biology, 第4版(Ausubel等人編, John Wiley & Sons 1999);Protein Methods (Bollag等人, John Wiley & Sons 1996);Nonviral Vectors for Gene Therapy (Wagner等人編, Academic Press 1999);Viral Vectors (Kaplift及Loewy編, Academic Press 1995);Immunology Methods Manual (I. Lefkovits編, Academic Press 1997);及Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures in Biotechnology (Doyle及Griffiths, John Wiley & Sons 1998),該等文獻之揭示內容以引用的方式併入本文中。
當提供值的範圍時,應理解除非上下文另外明確指示,否則包括終點且涵蓋在該範圍之上限與下限之間的各個中間值(至下限之單位的十分之一)及在該指定範圍內之任何其他指定值或中間值。亦涵蓋可獨立地包括於較小範圍中之此等小範圍之上限及下限,在指定範圍內受到任何特定排他性限制。在指定範圍包括限制中之一或兩者時,亦包括排除彼等所包括之限制之任一者或兩者的範圍。
除非另外定義,否則本文所使用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域中之普通技術人員通常所理解之含義相同之含義。本文所提及之所有公開案以引用之方式併入本文中以結合該等公開案所列舉之方法及/或材料來揭示且描述。
必須注意,除非上下文另外清楚地指示,否則如本文及所附申請專利範圍中所使用之單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數個提及物。
應瞭解,出於明晰之目的而在獨立實施例之背景下描述之本發明之某些特徵亦可以組合形式提供於單獨實施例中。在其他情況下,為簡潔起見而在單個實施例之背景下描述之本發明之各種特徵亦可分別或以任何適合之子組合提供。關於本發明之實施例之所有組合意欲由本發明特定涵蓋且在本文中揭示,如同單獨且明確地揭示每一組合一般。另外,各種實施例及其要素之所有子組合亦由本發明特定涵蓋且在本文中揭示,如同單獨且明確地在本文中揭示每一此類子組合一般。
II. 基因編輯及基因編輯對之系統
在第一態樣中,本發明提供包含第2類第V型CRISPR核酸酶蛋白及一或多種導引核酸(例如gRNA)的系統,其用於修飾或編輯基因之目標核酸,包括編碼及非編碼區。一般而言,基因之任何部分均可使用本文所提供之可程式化系統及方法靶向。如本文所用,「系統」,諸如包含CRISPR核酸酶蛋白及本發明之一或多個gRNA作為基因編輯對,以及編碼CRISPR核酸酶蛋白及gRNA之核酸及包含本發明之核酸或CRISPR核酸酶蛋白及一或多個gRNA的載體的系統與術語「組合物」可互換使用。
在一些實施例中,本發明提供系統,其經特定設計以在真核細胞中修飾基因之目標核酸;或在個體之活體外、離體或活體內。一般而言,基因之任何部分均可使用本文所提供之可程式化系統及方法靶向。在一些實施例中,CRISPR核酸酶為第2類第V型核酸酶。儘管第2類第V型CRISPR-Cas核酸酶之成員具有差異,但其共有區分其與Cas9系統之一些共同特徵。首先,第V型核酸酶具有含有RuvC域但無HNH域之RNA導引之單一效應子,且其識別非靶向股上目標區域上游之TC模體PAM 5',其不同於依賴於目標序列之3'側之富含G之PAM的Cas9系統。第V型核酸酶產生在PAM序列遠端之交錯雙股斷裂,不同於Cas9,其在接近PAM之近端位點產生鈍端。另外,第V型核酸酶在由目標dsDNA活化時降解呈反式之ssDNA或呈順式之ssDNA結合。在一些實施例中,本發明提供第2類第V型核酸酶,其選自由以下組成之群:Cas12a、Cas12b、Cas12c、Cas12d (CasY)、Cas12j、Cas12k、C2c4、C2c8、C2c5、C2c10、C2c9、CasZ及CasX。在一些實施例中,本發明提供系統,其包含一或多個CasX變異蛋白及一或多個導引核酸(gRNA)變異體作為CasX:gRNA系統。
本文提供包含第2類第V型蛋白質及gRNA變異體之系統,在本文中稱為基因編輯對。在一些實施例中,第2類第V型變異體為CasX變異體,諸如但不限於SEQ ID NO: 416之序列。術語CasX變異蛋白及CasX變異體在本文中可互換使用。在一些實施例中,gRNA為另一gRNA之變異體,諸如但不限於SEQ ID NO: 2238及2239之序列。gRNA及CasX蛋白可經由非共價相互作用結合在一起以形成基因編輯對複合物,在本文中稱為核糖核蛋白(RNP)複合物。在一些實施例中,使用預複合之CasX:gRNA RNP賦予將系統組分遞送至細胞或目標核酸以編輯目標核酸之優點。在RNP中,gRNA可藉由包括具有與目標核酸序列互補之核苷酸序列的靶向序列(或「間隔子」)而為RNP複合物提供目標特異性。在RNP中,預複合之CasX:gRNA之CasX蛋白提供位點特異性活性且導引至待藉助於與gRNA之結合修飾之目標核酸序列內之目標位點(且在目標位點處進一步穩定)。RNP複合物之CasX變異蛋白提供複合物之位點特異性活性,諸如藉由CasX蛋白結合、裂解或切割目標序列。本文提供包含本文所描述之CasX變異體及gRNA變異體實施例之任何組合之CasX變異蛋白、gRNA變異體及CasX:gRNA基因編輯對的系統及細胞,以及包含CasX:gRNA之遞送模式。此等組分中之每一者及其用於編輯基因之目標核酸的用途描述於下文中。
在一些實施例中,本發明提供包含CasX變異蛋白之基因編輯對的系統,該CasX變異蛋白選自以下中之任一者:表3之CasX變異蛋白(SEQ ID NO: 247-592及1147-1231、或與其具有至少約85%、至少約90%、或至少約95%、或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性之序列,而gRNA為如本文所描述之gRNA變異體(例如表2中所闡述之SEQ ID NO: 2101-2332及2353-2398)、或與其具有至少60%、或至少70%、至少約80%、或至少約90%、或至少約95%序列一致性之序列,其中gRNA包含與目標核酸互補之目標序列。在一些實施例中,本發明提供基因編輯對之系統,其包含選自表3之CasX變異蛋白(SEQ ID NO: 270-592及1147-1231)中之任一者的CasX變異蛋白,而gRNA為如本文所描述之gRNA變異體(例如SEQ ID NO: 2238-2332及2353-2398),其中gRNA包含與目標核酸互補之靶向序列。在一些實施例中,本發明提供基因編輯對之系統,其包含選自表3之CasX變異蛋白(SEQ ID NO: 415-592及1147-1231)中之任一者的CasX變異蛋白,而gRNA為如本文所描述之gRNA變異體(例如SEQ ID NO: 2281-2332及2353-2398),其中gRNA包含與目標核酸互補之靶向序列。在其他實施例中,本發明提供基因編輯對之系統,其包含如本文所描述之CasX變異蛋白、第一gRNA變異體;例如表2中所闡述之具有靶向序列之SEQ ID NO: 2101-2332或2353-2398),及第二gRNA變異體,其中第二gRNA變異體具有與第一gRNA之靶向序列相比不同或重疊的目標核酸部分互補之靶向序列。在其他實施例中,本發明提供基因編輯對之系統,其包含如本文所描述之CasX變異蛋白、第一gRNA變異體;例如具有靶向序列之SEQ ID NO: 2101-2332或2353-2398),及第二gRNA變異體,其中第二gRNA變異體具有與第一gRNA之靶向序列相比不同或重疊的目標核酸部分互補之靶向序列。在其他實施例中,本發明提供基因編輯對之系統,其包含如本文所描述之CasX變異蛋白、第一gRNA變異體;例如具有靶向序列之SEQ ID NO: 2281-2332或2353-2398),及第二gRNA變異體,其中第二gRNA變異體具有與第一gRNA之靶向序列相比不同或重疊的目標核酸部分互補之靶向序列。在本發明之CasX:gRNA基因編輯對之一些實施例中,CasX變異蛋白係選自由表3之CasX變異蛋白515、528、529、534-539、668、672及678 (SEQ ID NO: 416、428、434-439、567、570及576)組成之群,且sgRNA變異體係選自由表2之gRNA變異體229-237 (SEQ ID NO: 2286-2294)組成之群。在特定實施例中,基因編輯對包含選自以下中之任一者之CasX變異蛋白,CasX變異蛋白668 (SEQ ID NO: 567)、672 (SEQ ID NO: 570)或676 (SEQ ID NO: 574)及gRNA變異體235 (SEQ ID NO: 2292)。
在一些實施例中,基因編輯對能夠締合在一起以形成核糖核蛋白複合物(RNP)。在其他實施例中,基因編輯對在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。在一些實施例中,基因編輯對之RNP能夠結合及裂解目標核酸之雙股,包括編碼序列、編碼序列之互補序列、非編碼序列及調節元件。在一些實施例中,基因編輯對之RNP能夠結合目標核酸且在目標核酸中產生一或多個單股切口。在一些實施例中,基因編輯對之RNP能夠結合目標核酸,但不能夠裂解目標核酸。
在一些實施例中,與包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 4之參考gRNA的參考基因編輯對相比,變異體基因編輯對具有一或多個經改良之特徵。在其他實施例中,與包含衍生變異體之CasX變異體(例如CasX 515,SEQ ID NO: 416)及衍生變異體之gRNA變異體(例如gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)或175(SEQ ID NO: 2239)之基因編輯對相比,CasX變異體及gRNA變異體之變異體基因編輯對具有一或多個經改良之特徵。在前述實施例中,可在活體外分析中在基因編輯對及參考CasX及參考gRNA的可比條件下分析一或多個經改良之特徵。如本文所描述之例示性經改良之特徵在一些實施例中可包括CasX:gRNA RNP複合物穩定性、CasX與gRNA之間提高之結合親和力、RNP複合物形成之經改良之動力學、較高百分比之裂解勝任型RNP、增加之RNP對目標核酸之結合親和力、目標核酸之展開、增加之編輯活性、提高之編輯功效、針對目標核酸之增強的編輯特異性、減少之脫靶編輯或裂解、增加之核酸酶活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切口之目標股負載、增加之DNA的非目標股結合或增加之對核酸酶活性之抗性。在前述實施例中,與參考CasX蛋白及參考gRNA對之特徵相比,或與衍生基因編輯對之CasX變異體及gRNA變異體之特徵相比,改良為至少約2倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約50倍、至少約100倍、至少約500倍、至少約1000倍、至少約5000倍、至少約10,000倍或至少約100,000倍。在其他情況下,一或多個經改良之特徵可改良約1.1至100,00倍、約1.1至10,00倍、約1.1至1,000倍、約1.1至500倍、約1.1至100倍、約1.1至50倍、約1.1至20倍、約10至100,00倍、約10至10,00倍、約10至1,000倍、約10至500倍、約10至100倍、約10至50倍、約10至20倍、約2至70倍、約2至50倍、約2至30倍、約2至20倍、約2至10倍、約5至50倍、約5至30倍、約5至10倍、約100至100,00倍、約100至10,00倍、約100至1,000倍、約100至500倍、約500至100,00倍、約500至10,00倍、約500至1,000倍、約500至750倍、約1,000至100,00倍、約10,000至100,00倍、約20至500倍、約20至250倍、約20至200倍、約20至100倍、約20至50倍、約50至10,000倍、約50至1,000倍、約50至500倍、約50至200倍或約50至100倍,相對於參考基因編輯對,或相對於衍生基因編輯對之CasX變異體及gRNA變異體之特徵改良。在其他情況下,一或多個經改良之特徵相對於參考基因編輯對,或相對於衍生基因編輯對之CasX變異體及gRNA變異體之特徵可改良約1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、16倍、17倍、18倍、19倍、20倍、25倍、30倍、40倍、45倍、50倍、55倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、110倍、120倍、130倍、140倍、150倍、160倍、170倍、180倍、190倍、200倍、210倍、220倍、230倍、240倍、250倍、260倍、270倍、280倍、290倍、300倍、310倍、320倍、330倍、340倍、350倍、360倍、370倍、380倍、390倍、400倍、425倍、450倍、475倍或500倍或更多倍。
在一些實施例中,其中基因編輯對包含如本文所描述之CasX變異蛋白及gRNA變異體,基因編輯對之一或多個特徵改良超出可藉由單獨改變CasX蛋白或gRNA達成之程度。在一些實施例中,CasX變異蛋白及gRNA變異體額外作用以改良基因編輯對之一或多個特徵。在一些實施例中,CasX變異蛋白及gRNA變異體協同地起作用以改良基因編輯對之一或多個特徵。在前述實施例中,與參考CasX蛋白及參考gRNA對之特徵相比,或與衍生基因編輯對之CasX變異體及gRNA變異體之特徵相比,改良為至少約2倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約50倍、至少約100倍、至少約500倍、至少約1000倍、至少約5000倍、至少約10,000倍或至少約100,000倍。
在一些實施例中,本發明提供本文中所揭示之實施例中之任一者之基因編輯對的組合物,其用作用於治療患有疾病之個體的藥劑。
在其他實施例中,本發明之系統包含一或多個CasX變異蛋白、一或多個導引核酸(gRNA)及一或多個供體模板核酸,該一或多個供體模板核酸包含編碼基因之一部分的核酸,其中供體模板核酸包含用於校正突變之野生型序列,或與用於減弱或剔除基因之野生型基因體核酸序列相比包含一或多個核苷酸之缺失、插入或突變。
在其他實施例中,本發明提供編碼或包含CasX變異體、gRNA變異體及視情況用於產生及/或遞送CasX:gRNA系統之供體模板的載體。本文亦提供製備CasX變異蛋白及gRNA變異體之方法,以及使用CasX變異體及gRNA變異體之方法,包括基因編輯方法及治療方法。CasX:gRNA系統之CasX變異蛋白及gRNA變異體組分及其特徵以及遞送模式及系統之使用方法在下文更充分地描述。
CasX:gRNA系統之供體模板係取決於以下各者而設計:其是否用於校正目標基因中之突變或在基因體中之不同基因座處插入轉殖基因(「基因敲入」),或用於破壞異常基因產物之表現;例如其包含一或多個降低基因產物之表現或使蛋白質功能異常之突變(「基因敲落」或「基因剔除」)。在一些實施例中,供體模板為單股DNA模板或單股RNA模板。在其他實施例中,供體模板為雙股DNA模板。在一些實施例中,用於編輯目標核酸之CasX:gRNA系統包含供體模板,其將基因之開放閱讀框的全部或至少一部分插入目標核酸中以便插入校正性、野生型序列以校正缺陷蛋白。在其他情況下,供體模板包含用於在基因體中之不同基因座處插入以表現基因產物之野生型基因的全部或一部分。在其他情況下,基因之一部分可插入目標核酸中之突變之上游('5),其中供體模板基因部分跨越至基因之C端或跨越至具有突變之序列之3'末端,在其插入目標核酸中時,導致功能性基因產物之表現。
在一些實施例中,供體模板序列包含非同源序列,其側接位於目標核酸之斷裂位點(亦即同源臂)之5'及3'之同源性的兩個區域,促進非同源序列在目標區域插入,該目標區域可藉由同源定向修復(HDR)或同源非依賴性靶向整合(HITI)介導。藉由HITI插入之外源性供體模板可為任何長度,例如長度在10個與50個核苷酸之間之相對短序列,或長度為約50-1000個核苷酸之較長序列。不具有同源性可例如為不具有大於20-50%序列一致性及/或不具有低嚴格度下之特異性雜交。在其他情況下,缺乏同源性可進一步包括具有不超過5、6、7、8或9 bp一致性之準則。在此類情況下,使用同源臂促進在由核酸酶引入之斷裂位點處之非同源序列插入。在一些實施例中,供體模板多核苷酸包含至少約10、至少約50、至少約100、或至少約200、或至少約300、或至少約400、或至少約500、或至少約600、或至少約700、或至少約800、或至少約900、或至少約1000、或至少約10,000、或至少約15,000個核苷酸。在其他實施例中,供體模板包含至少約10至約15,000個核苷酸、或至少約100至約10,000個核苷酸、或至少約400至約8,000個核苷酸、或至少約600至約5000個核苷酸、或至少約1000至約2000個核苷酸。供體模板序列可包含相比於基因體序列之某些序列差異;例如限制位點、核苷酸多形性、可選標誌物(例如耐藥性基因、螢光蛋白、酶等)等,其可用於評定供體核酸於裂解位點處之成功插入,或在一些情況下可用於其他目的(例如表示靶向基因體基因座處之表現)。或者,此等序列差異可包括側接重組序列,諸如FLP、loxP序列或其類似物,其可在稍後經活化以移除標誌物序列。
III. 用於基因編輯之系統之導引核酸
在另一態樣中,本發明係關於專門設計之導引核糖核酸(gRNA),其包含與當與CRISPR核酸酶複合時在細胞中之目標核酸之基因體編輯中具有效用的基因之目標核酸序列互補(且因此能夠與其雜交)的靶向序列(在本文中亦稱為間隔子)。設想在一些實施例中,在用於修飾目標核酸之系統中遞送多個gRNA。舉例而言,當各自與CRISPR核酸酶複合時,可使用相對於目標核酸序列之不同或重疊區域之具有靶向序列的一對gRNA,以便在基因內之兩個不同或重疊位點處結合及裂解,該等位點隨後藉由非同源末端連接(NHEJ)、同源定向修復(HDR)、同源非依賴性靶向整合(HITI)、微同源介導之末端連接(MMEJ)、單股退火(SSA)或鹼基切除修復(BER)。
在一些實施例中,本發明提供用於系統中之gRNA,其在基因體編輯真核細胞中之基因中具有效用。在特定實施例中,系統之gRNA能夠與CRISPR核酸酶形成複合物;下文更充分描述之核糖核蛋白(RNP)複合物。
a. 參考 gRNA 及 gRNA 變異體
如本文所用,「參考gRNA」係指包含天然存在之gRNA之野生型序列的CRISPR導引核酸。在一些實施例中,本發明之參考gRNA可經歷一或多種突變誘發方法,諸如本文實例(例如實例13,以及PCT/US20/36506及WO2020247883A2,其以引用之方式併入本文中)中所描述之突變誘發方法,其可包括深度突變演進(DME)、深度突變掃描(DMS)、易錯PCR、卡匣突變誘發、隨機突變誘發、交錯延伸PCR、基因改組或域交換,以便產生一或多個導引核酸變異體(在本文中稱為「gRNA變異體」),其中相對於參考gRNA具有增強或變化之特性。gRNA變異體亦包括包含一或多個外源序列,例如融合至5'或3'末端,或內部插入之變異體。參考gRNA或衍生其之變異體之活性可用作比較gRNA變異體之活性的基準,藉此量測gRNA變異體之功能或其他特徵之改良。在其他實施例中,參考gRNA或gRNA變異體可經歷一或多種有意的特異性靶向突變以產生gRNA變異體;例如經合理設計之變異體。
本發明之gRNA包含兩個片段:靶向序列及蛋白質結合片段。gRNA之靶向片段包括下文更充分描述之核苷酸序列(可互換地稱為導引序列、間隔子、靶向子或靶向序列),其與目標核酸序列(例如目標ssRNA、目標ssDNA、雙股目標DNA之股等)內之特定序列(目標位點)互補(且因此與其雜交)。gRNA之靶向序列能夠結合至目標核酸序列,包括編碼序列、編碼序列之互補序列、非編碼序列及調節元件。蛋白質結合片段(或「活化子」或「蛋白質結合序列」)作為複合物與CasX蛋白相互作用(例如與其結合),形成RNP (更充分地描述於下文)。蛋白質結合片段在本文中替代地稱為「支架」,其包含下文更充分地描述之若干區域。
就雙導引RNA (dgRNA)而言,靶向子及活化子部分各具有雙螺旋形成片段,其中靶向子之雙螺旋形成片段及活化子之雙螺旋形成片段彼此具有互補性且彼此雜交以形成雙股雙螺旋體(用於gRNA之dsRNA雙螺旋體)。當gRNA為gRNA時,術語「靶向子」或「靶向子RNA」在本文中用於指CasX雙導引RNA之crRNA樣分子(crRNA:「CRISPR RNA」) (且因此指當「活化子」及「靶向子」連接在一起時,CasX單導引RNA之crRNA樣分子,例如藉由插入核苷酸)。crRNA具有與tracrRNA退火之5'區域,隨後為靶向序列之核苷酸。因此,舉例而言,導引RNA (dgRNA或sgRNA)包含導引序列及crRNA之雙螺旋形成片段,其亦可稱為crRNA重複序列。相對應的tracrRNA樣分子(活化子)亦包含雙螺旋體形成之核苷酸片段,其形成導引RNA之蛋白質結合片段之另一半dsRNA雙螺旋體。因此,作為相對應的對之靶向子及活化子雜交以形成雙導引RNA,其在本文中稱為「雙分子gRNA」、「dgRNA」、「雙分子導引RNA」或「雙分子導引RNA」。藉由CasX蛋白之目標核酸序列(例如基因體DNA)之位點特異性結合及/或裂解可發生在藉由gRNA之靶向序列與目標核酸序列之間的鹼基配對互補測定之一或多個位置(例如目標核酸之序列)處。因此,舉例而言,本發明之gRNA具有與鄰近與TC PAM模體或PAM序列(諸如ATC、CTC、GTC或TTC)互補之序列的目標核酸互補且因此可與該目標核酸雜交的序列。因為與目標核酸序列之序列雜交的導引序列之靶向序列,所以只要考慮PAM序列之位置,靶向子可由使用者修飾以與特異性目標核酸序列雜交。因此,在一些情況下,靶向子之序列可為非天然存在之序列的互補序列。在其他情況下,靶向子之序列可為天然存在之序列,其衍生自待編輯之基因序列之互補序列。在其他實施例中,gRNA之活化子及靶向子彼此共價連接(並非彼此雜交)且包含單分子,其在本文中稱為「單分子gRNA」、「單導引RNA」、「單分子導引RNA」、「單分子導引RNA」或「sgRNA」。在一些實施例中,sgRNA包括「活化子」或「靶向子」且因此可分別為「活化子-RNA」及「靶向子-RNA」。在一些實施例中,gRNA為核糖核酸分子(「gRNA」),且在其他實施例中,gRNA為嵌合體,且包含DNA及RNA兩者。如本文所用,術語gRNA涵蓋天然存在之分子,以及序列變異體(例如非天然存在之經修飾之核苷酸)。
總體而言,本發明之經組裝之gRNA包含四個不同區域或域:RNA三聯體、支架莖、延伸莖及靶向序列,在本發明之實施例中,該靶向序列對目標核酸具有特異性且位於gRNA之3'末端上。RNA三聯體、支架莖及延伸莖共同稱為gRNA之「支架」(gRNA支架)。本發明之gRNA支架可包含RNA或RNA及DNA。gRNA支架可含有尿嘧啶(U),且一或多個尿嘧啶可經胸腺嘧啶(T)置換。
b. RNA 三聯體
在本文提供之導引RNA之一些實施例中,gRNA包含RNA三聯體,在一些情況下,其包含UUU--N
X(~4-15)--UUU莖環(SEQ ID NO: 241)之序列,其在2個中間莖環(支架莖環及延伸莖環)之後以AAAG結束,形成亦可延伸穿過三聯體進入雙螺旋假結中之假結。三聯體之UU-UUU-AAA序列在靶向序列、支架莖及延伸莖之間形成連接。在例示性gRNA中,UUU-環-UUU區域首先經編碼,接著為支架莖環,且接著為延伸莖環,其由四環連接,且接著AAAG封閉三聯體,隨後變為靶向序列。
c. 支架莖環
在本發明之gRNA之一些實施例中,三聯體區之後為支架莖環。支架莖環為當形成RNP時藉由CasX蛋白(諸如參考或CasX變異蛋白)結合之gRNA區域。在一些實施例中,支架莖環為相當短且穩定的莖環,且增加gRNA之總體穩定性。在一些情況下,支架莖環不耐受許多變化,且需要一些形式之RNA泡狀結構。在一些實施例中,支架莖為gRNA功能所需。儘管gRNA之支架莖可能與Cas9導引物之連接莖類似地作為重要莖環,但在一些實施例中,其具有與CRISPR/Cas系統中發現之許多其他莖環不同的所需凸起(RNA泡狀結構)。在一些實施例中,此凸出部分之存在在與不同CasX蛋白相互作用之gRNA中保守。gRNA之支架莖環序列之例示性序列包含序列CCAGCGACUAUGUCGUAUGG (SEQ ID NO: 242)。
d. 延伸莖環
在本發明之gRNA之一些實施例中,支架莖環之後為延伸莖環。在一些實施例中,延伸莖包含主要未藉由CasX蛋白結合之合成tracr及crRNA融合物。在一些實施例中,延伸莖環可為高度展性的。在一些實施例中,藉由延伸莖環中tracr與crRNA之間的GAAA四環連接子或GAGAAA連接子製得單導引gRNA。在一些情況下,sgRNA之靶向子及活化子藉由中間核苷酸彼此連接,且連接子之長度可為3至20個核苷酸。在本發明之sgRNA之一些實施例中,延伸莖為位於核糖核蛋白複合物中之CasX蛋白外部的大32-bp環。參考gRNA之延伸莖環序列之例示性序列包含序列GCGCUUAUUUAUCGGAGAGAAAUCCGAUAAAUAAGAAGC (SEQ ID NO: 15)。
e. 靶向序列
在本發明之gRNA之一些實施例中,延伸莖環後接形成三聯體之一部分的區域,及隨後為在gRNA之3'末端的靶向序列(或「間隔子」)。靶向序列使CasX核糖核蛋白全複合物靶向待修飾之基因之目標核酸序列的特定區域。因此,舉例而言,當TC PAM模體或PAM序列TTC、ATC、GTC或CTC中之任一者位於與目標序列互補之非目標股序列5'之1個核苷酸時,本發明之gRNA靶向序列與真核細胞中之目標核酸中的一部分基因(例如真核染色體、染色體序列等)具有序列互補性,且因此可與其雜交,作為RNP之組分。gRNA之靶向序列可經修飾以使得gRNA可靶向任何所需目標核酸序列之所需序列,只要考慮PAM序列位置即可。在一些實施例中,gRNA支架為靶向序列之5',其中靶向序列位於gRNA之3'末端上。在一些實施例中,藉由RNP之核酸酶識別之PAM模體序列為TC。在其他實施例中,藉由RNP之核酸酶識別之PAM序列為NTC;亦即ATC、CTC、GTC或TTC。
在一些實施例中,本發明提供gRNA,其中gRNA之靶向序列與待修飾之基因之目標核酸序列互補。在一些實施例中,出於用本發明之CasX:gRNA系統編輯包含突變之序列的目的,gRNA之靶向序列與同野生型基因序列相比包含一或多種突變之基因的目標核酸序列互補。在此類情況下,由CasX:gRNA系統實現之修飾可校正或補償突變或可阻斷突變基因產物之減弱或剔除表現。在其他實施例中,出於編輯序列以引入具有本發明之CasX:gRNA系統之突變以便阻斷基因減弱或剔除之目的,gRNA之靶向序列與野生型基因之目標核酸序列互補。在一些實施例中,gRNA之靶向序列經設計以對目標核酸之基因之外顯子具有特異性。在其他實施例中,gRNA之靶向序列經設計以對目標核酸之基因之內含子具有特異性。在其他實施例中,gRNA之靶向序列經設計以對目標核酸之基因之內含子-外顯子接合具有特異性。在其他實施例中,gRNA之靶向序列經設計以對目標核酸之基因之調節元件具有特異性。在一些實施例中,gRNA之靶向序列經設計以與包含目標核酸之基因中之一或多種單核苷酸多型性(SNP)之序列互補。在編碼序列內或非編碼序列內之SNP均在本發明之範疇內。在其他實施例中,gRNA之靶向序列經設計以與目標核酸之基因之基因間區域的序列互補。
在一些實施例中,靶向序列對調節基因產物之表現的調節元件具有特異性。此類調節元件包括但不限於啟動子區、強化子區、基因間區、5'非轉譯區(5' UTR)、3'非轉譯區(3' UTR)、保守元件及包含順式調節元件之區域。啟動子區意欲涵蓋編碼序列之起始點之5 kb內的核苷酸,或在基因強化子元件或保守元件的情況下,可與目標核酸之基因之編碼序列相距數千bp、數十萬bp或甚至數百萬bp。在前述內容中,目標為其中目標之編碼基因意欲經剔除或減弱,使得基因產物在細胞中不表現或以較低水準表現之彼等目標。
在一些實施例中,gRNA之靶向序列具有14至35個連續核苷酸。在一些實施例中,gRNA之靶向序列具有10至30個連續核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個連續核苷酸。在一些實施例中,gRNA之靶向序列由20個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列由19個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列由18個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列由17個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列由16個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列由15個連續核苷酸組成。在一些實施例中,靶向序列具有10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個連續核苷酸且靶向序列相對於目標核酸序列可包含0至5、0至4、0至3或0至2個錯配且保留足夠結合特異性,使得包含含有靶向序列之gRNA之RNP可相對於目標核酸形成互補鍵。
在一些實施例中,CasX:gRNA系統包含第一gRNA且進一步包含第二(及視情況第三、第四、第五或更多) gRNA,其中與第一gRNA之靶向序列相比,第二gRNA或額外gRNA具有與目標核酸序列之不同或重疊部分互補之靶向序列,使得目標核酸中之多個點被靶向,且例如藉由CasX將多個斷裂引入目標核酸中。應瞭解,在此類狀況下,第二或額外gRNA與CasX蛋白之額外複本複合。藉由選擇gRNA之靶向序列,可使用本文所描述之CasX:gRNA系統修飾或編輯包含突變之目標核酸序列之限定區域,包括在例如突變重複出現之情況下或在移除包含突變之外顯子之情況下促進插入供體模板或切除裂解位點之間的DNA使得功能性基因產物表現。
f. gRNA支架
除靶向序列區域以外,gRNA之其餘區域在本文中稱為支架。在一些實施例中,gRNA支架衍生自天然存在之序列,在下文描述為參考gRNA。在其他實施例中,gRNA支架為其他gRNA變異體之變異體,其中引入突變、插入、缺失或域取代以賦予gRNA所需特性。
在一些實施例中,參考gRNA包含分離或衍生自
δ 變形菌綱之序列。在一些實施例中,序列為CasX tracrRNA序列。分離或衍生自
δ 變形菌綱之例示性參考tracrRNA序列可包括:ACAUCUGGCGCGUUUAUUCCAUUACUUUGGAGCCAGUCCCAGCGACUAUGUCGUAUGGACGAAGCGCUUAUUUAUCGGAGA (SEQ ID NO: 6)及ACAUCUGGCGCGUUUAUUCCAUUACUUUGGAGCCAGUCCCAGCGACUAUGUCGUAUGGACGAAGCGCUUAUUUAUCGG (SEQ ID NO: 7)。分離或衍生自
δ 變形菌綱之例示性crRNA序列可包含序列CCGAUAAGUAAAACGCAUCAAAG (SEQ ID NO: 243)。
在一些實施例中,參考導引RNA包含分離或衍生自浮黴菌門(
Planctomycetes)之序列。在一些實施例中,序列為tracrRNA序列。分離或衍生自
浮黴菌門之例示性參考tracrRNA序列可包括:UACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGGAGA (SEQ ID NO: 8)及UACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGG (SEQ ID NO: 9)。分離或衍生自
浮黴菌門之例示性crRNA序列可包含序列UCUCCGAUAAAUAAGAAGCAUCAAAG (SEQ ID NO: 244)。
在一些實施例中,參考gRNA包含分離或衍生自宋氏細菌候選種(
Candidatus Sungbacteria)之序列。分離或衍生自宋氏細菌候選種之例示性CasX參考tracrRNA序列可包含以下序列:GUUUACACACUCCCUCUCAUAGGGU (SEQ ID NO: 10)、GUUUACACACUCCCUCUCAUGAGGU (SEQ ID NO: 11)、UUUUACAUACCCCCUCUCAUGGGAU (SEQ ID NO: 12)及GUUUACACACUCCCUCUCAUGGGGG (SEQ ID NO: 13)。
表1提供參考gRNA tracr、cr及支架序列之序列。在一些實施例中,本發明提供gRNA變異體序列,其中gRNA具有包含相對於具有表1之SEQ ID NO: 4-16中之任一者之序列的參考gRNA序列具有至少一個核苷酸修飾之序列的支架。應瞭解,在其中載體包含編碼gRNA之序列之DNA或其中gRNA為RNA及DNA之嵌合體之彼等實施例中,胸腺嘧啶(T)鹼基可取代本文所描述之gRNA序列實施例中之任一者之尿嘧啶(U)鹼基。
表1.參考gRNA tracr、cr及支架序列
g. gRNA變異體
SEQ ID NO. | 核苷酸序列 |
4 | ACAUCUGGCGCGUUUAUUCCAUUACUUUGGAGCCAGUCCCAGCGACUAUGUCGUAUGGACGAAGCGCUUAUUUAUCGGAGAGAAACCGAUAAGUAAAACGCAUCAAAG |
5 | UACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGGAGAGAAAUCCGAUAAAUAAGAAGCAUCAAAG |
6 | ACAUCUGGCGCGUUUAUUCCAUUACUUUGGAGCCAGUCCCAGCGACUAUGUCGUAUGGACGAAGCGCUUAUUUAUCGGAGA |
7 | ACAUCUGGCGCGUUUAUUCCAUUACUUUGGAGCCAGUCCCAGCGACUAUGUCGUAUGGACGAAGCGCUUAUUUAUCGG |
8 | UACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGGAGA |
9 | UACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGG |
10 | GUUUACACACUCCCUCUCAUAGGGU |
11 | GUUUACACACUCCCUCUCAUGAGGU |
12 | UUUUACAUACCCCCUCUCAUGGGAU |
13 | GUUUACACACUCCCUCUCAUGGGGG |
14 | CCAGCGACUAUGUCGUAUGG |
15 | GCGCUUAUUUAUCGGAGAGAAAUCCGAUAAAUAAGAAGC |
16 | GGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGGA |
在另一態樣中,本發明係關於gRNA變異體,其相對於參考gRNA支架包含一或多個修飾或衍生自另一gRNA變異體。如本文所用,「支架」係指針對除靶向序列之外的gRNA功能所需的gRNA之所有部分。
在一些實施例中,gRNA變異體相對於本發明之參考gRNA序列包含一或多個核苷酸取代、插入、缺失或交換或替代區。在一些實施例中,突變可發生於參考gRNA支架之任何區域中以產生gRNA變異體。在一些實施例中,gRNA變異體序列之支架與SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列具有至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%或至少70%、至少80%、至少85%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性。在其他實施例中,gRNA變異體相對於本發明之gRNA變異體序列包含一或多個核苷酸取代、插入、缺失或交換或替代區。在一些實施例中,gRNA變異體序列之支架與SEQ ID NO: 2238或SEQ ID NO: 2239之序列具有至少50%、至少60%或至少70%、至少80%、至少85%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性。
在一些實施例中,gRNA變異體包含參考gRNA支架之一或多個區域內之一或多個核苷酸變化,其改良參考gRNA之特徵。在其他實施例中,gRNA變異體包含衍生其之gRNA變異體支架之一或多個區域內之一或多個核苷酸變化,該等核苷酸變化相對於彼gRNA改良特徵。例示性區域包括RNA三聯體、假結、支架莖環及延伸莖環。在一些情況下,變異支架莖進一步包含泡狀結構。在其他情況下,變異支架進一步包含三螺旋環區。在其他情況下,變異支架進一步包含5'非結構化區域。在一些實施例中,gRNA變異支架包含與SEQ ID NO: 14具有至少60%序列一致性、至少70%序列一致性、至少80%序列一致性、至少90%序列一致性、至少95%序列一致性或至少99%序列一致性之支架莖環。在其他實施例中,gRNA變異體包含具有序列CCAGCGACUAUGUCGUAGUGG (SEQ ID NO: 245)之支架莖環。在其他實施例中,本發明提供一種gRNA支架,其相對於SEQ ID NO: 5包含C18G取代、G55插入、U1缺失及經修飾之延伸莖環中之一或多者,其中原始6 nt環及13個最近環鹼基對(總計32個核苷酸)經Uvsx髮夾(4 nt環及5個近環鹼基對;總計14個核苷酸)置換且將延伸莖之遠環鹼基藉由A99之缺失及G65U之取代轉變為與新的Uvsx髮夾連續的完全鹼基配對的莖。在前述實施例中,gRNA支架為gRNA變異體174且包含序列ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG (SEQ ID NO: 2238)。
將當變異gRNA與參考gRNA或經突變誘發以產生本文所描述之新gRNA變異體的gRNA變異體相比時具有一或多個經改良之特徵或添加一或多種新功能之所有gRNA變異體設想為在本發明之範疇內。此類gRNA變異體之代表性實例為導引物235 (SEQ ID NO: 2292),其設計描述於實例中。在一些實施例中,gRNA變異體將新功能添加至包含gRNA變異體之RNP。在一些實施例中,gRNA變異體具有選自以下之改良特徵:增加之穩定性;增加之gRNA的轉錄;增加之對核酸酶活性的抗性;增加之gRNA的摺疊率;摺疊期間減少之副產物形成;增加之生產性摺疊;增加之對CasX蛋白的結合親和力;當與CasX蛋白複合時增加之對目標核酸的結合親和力;當與CasX蛋白複合時增加之基因編輯;當與CasX蛋白複合時增加之目標核酸之編輯的特異性;當與CasX蛋白複合時減少之脫靶編輯;以及當與CasX蛋白複合時提高之在目標核酸的編輯中利用較大範圍一或多個PAM序列的能力,包括ATC、CTC、GTC或TTC,及其任何組合。在一些情況下,gRNA變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gRNA或相對於gRNA變異體174或175增加至少約1.1至約100,000倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gRNA或相對於gRNA變異體174或175增加至少約1.1、至少約10、至少約100、至少約1000、至少約10,000、至少約100,000倍或更多倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gRNA或相對於gRNA變異體174或175增加約1.1至100,00倍、約1.1至10,00倍、約1.1至1,000倍、約1.1至500倍、約1.1至100倍、約1.1至50倍、約1.1至20倍、約10至100,00倍、約10至10,00倍、約10至1,000倍、約10至500倍、約10至100倍、約10至50倍、約10至20倍、約2至70倍、約2至50倍、約2至30倍、約2至20倍、約2至10倍、約5至50倍、約5至30倍、約5至10倍、約100至100,00倍、約100至10,00倍、約100至1,000倍、約100至500倍、約500至100,00倍、約500至10,00倍、約500至1,000倍、約500至750倍、約1,000至100,00倍、約10,000至100,00倍、約20至500倍、約20至250倍、約20至200倍、約20至100倍、約20至50倍、約50至10,000倍、約50至1,000倍、約50至500倍、約50至200倍或約50至100倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gRNA或相對於gRNA變異體174或175增加約1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、16倍、17倍、18倍、19倍、20倍、25倍、30倍、40倍、45倍、50倍、55倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、110倍、120倍、130倍、140倍、150倍、160倍、170倍、180倍、190倍、200倍、210倍、220倍、230倍、240倍、250倍、260倍、270倍、280倍、290倍、300倍、310倍、320倍、330倍、340倍、350倍、360倍、370倍、380倍、390倍、400倍、425倍、450倍、475倍或500倍。
在一些實施例中,可如下產生gRNA變異體:藉由使參考gRNA或gRNA變異體經受一或多種突變誘發方法,諸如本文所描述之突變誘發方法,在下文實例中,其可包括深度突變演進(DME)、深度突變掃描(DMS)、易錯PCR、卡匣突變誘發、隨機突變誘發、交錯延伸PCR、基因改組或域交換,以便產生本發明之gRNA變異體。參考gRNA或gRNA變異體經受突變誘發之活性可用作比較gRNA變異體之活性的基準,藉此量測gRNA變異體之功能的改良。在其他實施例中,參考gRNA或gRNA可經受一或多個有意的靶向突變、取代或域交換以產生gRNA變異體,例如經合理設計之變異體。藉由此類方法產生之例示性gRNA變異體描述於實例中且gRNA支架之代表性序列呈現於表2中。
在一些實施例中,gRNA變異體與參考gRNA或gRNA變異體支架序列相比包含一或多個修飾,其中該一或多個修飾係選自:gRNA區域中之至少一個核苷酸取代;gRNA區域中之至少一個核苷酸缺失;gRNA區域中之至少一個核苷酸插入;gRNA區域之全部或一部分之取代;gRNA區域之全部或一部分之缺失;或前述任何組合。在一些情況下,修飾為gRNA之一或多個區域中1至15個連續或非連續核苷酸之取代。在其他情況下,修飾為在gRNA中在一或多個區域中缺失1至10個連續或非連續核苷酸。在其他情況下,修飾為在gRNA中在一或多個區域中插入1至10個連續或非連續核苷酸。在其他情況下,修飾為具有RNA莖環序列之支架莖環或延伸莖環的取代,該RNA莖環序列來自具有近端5'及3'末端之異源RNA來源。在一些情況下,本發明之gRNA變異體相對於參考gRNA或gRNA變異體在一個區域中包含兩個或兩個以上修飾。在其他情況下,本發明之gRNA變異體在兩個或兩個以上區域中包含修飾。在其他情況下,gRNA變異體包含此段落中所描述之前述修飾之任何組合。
在一些實施例中,相對於原始gRNA,向gRNA變異體序列中添加5' G以活體內表現,因為自U6啟動子之轉錄更高效且在+1核苷酸為G時相對於起始位點更一致。在其他實施例中,添加兩個5' G以產生用於活體外轉錄之gRNA變異體序列以提高產生效率,因為T7聚合酶在+1位強偏好G且在+2位強偏好嘌呤。在一些情況下,將5' G鹼基添加至表1之參考支架。在其他情況下,將5' G鹼基添加至表2之變異支架。
表2提供例示性gRNA變異支架序列。在一些實施例中,gRNA變異支架包含如表2中所列之序列SEQ ID NO: 2101-2332或2353-2398中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%序列一致性的序列。在一些實施例中,gRNA變異支架包含序列SEQ ID NO: 2238-2332或2353-2398中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%序列一致性的序列。在一些實施例中,gRNA變異支架包含序列SEQ ID NO: 2281-2332或2353-2398中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%序列一致性的序列。應瞭解,在其中載體包含編碼gRNA之序列之DNA或其中gRNA為RNA及DNA之嵌合體之彼等實施例中,胸腺嘧啶(T)鹼基可取代本文所描述之gRNA序列實施例中之任一者之尿嘧啶(U)鹼基。
表2:例示性gRNA變異支架序列
SEQ ID NO: | 名稱 | 核苷酸序列或修飾之描述 |
2101 | ND | 噬菌體複製穩定 |
2102 | ND | 吻環_b1 |
2103 | ND | 吻環_a |
2104 | ND | 32: uvsX髮夾 |
2105 | ND | PP7 |
2106 | ND | 64:三聯體突變,延伸莖截短 |
2107 | ND | 超穩定四環 |
2108 | ND | C18G |
2109 | ND | U17G |
2110 | ND | CUUCGG環 |
2111 | ND | MS2 |
2112 | ND | -1, A2G, -78, G77U |
2113 | ND | QB |
2114 | ND | 45,44髮夾 |
2115 | ND | U1A |
2116 | ND | A14C, U17G |
2117 | ND | 經修飾之CUUCGG環 |
2118 | ND | 吻環_b2 |
2119 | ND | -76:78,-83:87 |
2120 | ND | -4 |
2121 | ND | 延伸莖截短 |
2122 | ND | C55 |
2123 | ND | 三聯體突變 |
2124 | ND | -76:78 |
2125 | ND | -1:5 |
2126 | ND | -83:87 |
2127 | ND | =+G28,A82U,-84, |
2128 | ND | =+51U |
2129 | ND | -1:4,+G5A,+G86, |
2130 | ND | =+A94 |
2131 | ND | =+G72 |
2132 | ND | 縮短正面,經修飾之CUUCGG環。延伸之延伸 |
2133 | ND | A14C |
2134 | ND | -1:3,+G3 |
2135 | ND | =+C45,+U46 |
2136 | ND | 經修飾之CUUCGG環,fun開始 |
2137 | ND | -93:94 |
2138 | ND | =+U45 |
2139 | ND | -69,-94 |
2140 | ND | -94 |
2141 | ND | 修飾之CUUCGG,在第1個三聯體中減去U |
2142 | ND | -1:4, +C4, A14C, U17G, +G72, -76:78, -83:87 |
2143 | ND | U1C, -73 |
2144 | ND | 支架uuCG、莖uuCG。莖交換減少,t縮短 |
2145 | ND | 支架uuCG、莖uuCG。莖交換 |
2146 | ND | =+G60 |
2147 | ND | 無莖支架uuCG |
2148 | ND | 無莖支架uuCG,fun開始 |
2149 | ND | 支架uuCG,莖uuCG,fun開始 |
2150 | ND | 假結 |
2151 | ND | 支架uuCG,莖uuCG |
2152 | ND | 支架uuCG,莖uuCG,無開始 |
2153 | ND | 支架uuCG |
2154 | ND | =+GCUC36 |
2155 | ND | G四螺旋體端粒籃+端 |
2156 | ND | G四螺旋體M3q |
2157 | ND | G四螺旋體端粒籃無端 |
2158 | ND | 45,44髮夾(舊型式) |
2159 | ND | 帚麴菌素-蓖麻毒素(Sarcin-ricin)環 |
2160 | ND | uvsX,C18G |
2161 | ND | 截短莖環,C18G,三聯體突變(U10C) |
2162 | ND | 短噬菌體rep,C18G |
2163 | ND | 噬菌體rep環,C18G |
2164 | ND | =+G18,堆疊至64上 |
2165 | ND | 截短莖環,C18G,-1 A2G |
2166 | ND | 噬菌體rep環,C18G,三聯體突變(U10C) |
2167 | ND | 短噬菌體rep,C18G,三聯體突變(U10C) |
2168 | ND | uvsX,三聯體突變(U10C) |
2169 | ND | 截短莖環 |
2170 | ND | =+A17,堆疊至64上 |
2171 | ND | 3'HDV基因體核糖核酸酶 |
2172 | ND | 噬菌體rep環,三聯體突變(U10C) |
2173 | ND | -79:80 |
2174 | ND | 短噬菌體rep,三聯體突變(U10C) |
2175 | ND | 額外截短莖環 |
2176 | ND | U17G,C18G |
2177 | ND | 短噬菌體rep |
2178 | ND | uvsX,C18G,-1 A2G |
2179 | ND | uvsX,C18G,三聯體突變(U10C),-1 A2G,HDV -99 G65U |
2180 | ND | 3' HDV反基因體核糖核酸酶 |
2181 | ND | uvsX,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV AA(98:99)C |
2182 | ND | 3'HDV核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu) |
2183 | ND | TAC(1:3) GA,堆疊於64上 |
2184 | ND | uvsX,-1 A2G |
2185 | ND | 截短莖環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV -99 G65U |
2186 | ND | 短噬菌體rep,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV -99 G65U |
2187 | ND | 3' sTRSV WT病毒錘頭狀核糖核酸酶 |
2188 | ND | 短噬菌體rep,C18G,-1 A2G |
2189 | ND | 短噬菌體rep,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,3'基因體HDV |
2190 | ND | 噬菌體rep環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV -99 G65U |
2191 | ND | 3'HDV核糖核酸酶(Owen Ryan,Jamie Cate) |
2192 | ND | 噬菌體rep環,C18G,-1 A2G |
2193 | ND | 0.14 |
2194 | ND | -78, G77U |
2195 | ND | ND |
2196 | ND | 短噬菌體rep,-1 A2G |
2197 | ND | 截短莖環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2198 | ND | -1,A2G |
2199 | ND | 截短莖環,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2200 | ND | uvsX,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2201 | ND | 噬菌體rep環,-1 A2G |
2202 | ND | 噬菌體rep環,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2203 | ND | 噬菌體rep環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2204 | ND | 截短莖環,C18G |
2205 | ND | uvsX,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2206 | ND | 截短莖環,-1 A2G |
2207 | ND | 短噬菌體rep,三聯體突變 (U10C),-1 A2G |
2208 | ND | 5'HDV核糖核酸酶(Owen Ryan,Jamie Cate) |
2209 | ND | 5'HDV基因體核糖核酸酶 |
2210 | ND | 截短莖環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV AA(98:99)C |
2211 | ND | 5'env25手槍核糖核酸酶(具有添加之CUUCGG環) |
2212 | ND | 5'HDV反基因體核糖核酸酶 |
2213 | ND | 3'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu)導引支架疤痕 |
2214 | ND | =+A27,堆疊至64上 |
2215 | ND | 5'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu)較小疤痕 |
2216 | ND | 噬菌體rep環,C18G,三聯體突變 (U10C),-1 A2G,HDV AA(98:99)C |
2217 | ND | -27,堆疊至64上 |
2218 | ND | 3'手斧 |
2219 | ND | 3'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu) |
2220 | ND | 5'手斧 |
2221 | ND | 5'HDV核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu) |
2222 | ND | 5'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu) |
2223 | ND | 3'HH15最小錘頭狀核糖核酸酶 |
2224 | ND | 5'RBMX招募模體 |
2225 | ND | 3'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu)較小疤痕 |
2226 | ND | 3'env25手槍核糖核酸酶(具有添加之CUUCGG環) |
2227 | ND | 3'Env -9絞扭器 |
2228 | ND | =+AUUAUCUCAUUACU25 |
2229 | ND | 5' Env-9絞扭器 |
2230 | ND | 3'絞扭姐妹1 |
2231 | ND | 無莖 |
2232 | ND | 5'HH15最小錘頭狀核糖核酸酶 |
2233 | ND | 5'錘頭狀核糖核酸酶(Lior Nissim,Timothy Lu)導引支架疤痕 |
2234 | ND | 5'絞扭姐妹1 |
2235 | ND | 5'sTRSV WT病毒錘頭狀核糖核酸酶 |
2236 | ND | 148: =+G55,堆疊至64上 |
2237 | ND | 158: 103+148(+G55) -99,G65U |
2238 | 174 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2239 | 175 | ACUGGCGCCUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2240 | 176 | GCUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2241 | 177 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2242 | 181 | ACUGGCGCCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2243 | 182 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2244 | 183 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2245 | 184 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2246 | 185 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2247 | 186 | ACUGGCGCCUUUAUCAUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2248 | 187 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCGCCCUCUUCGGAGGGAAGCAUCAAAG |
2249 | 188 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2250 | 189 | ACUGGCACUUUUACCUGAUUACUUUGAGAGCCAACACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2251 | 190 | ACUGGCACUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2252 | 191 | ACUGGCCCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2253 | 192 | ACUGGCGCUUUUACCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2254 | 193 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAACACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2255 | 195 | ACUGGCACCUUUACCUGAUUACUUUGAGAGCCAACACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2256 | 196 | ACUGGCACCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2257 | 197 | ACUGGCCCCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2258 | 198 | ACUGGCGCCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAACACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2259 | 199 | GCUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2260 | 200 | GACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2261 | 201 | ACUGGCGCCUUUAUCUGAUUACUUUGGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2262 | 202 | ACUGGCGCAUUUAUCUGAUUACUUUGUGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2263 | 203 | ACUGGCGCCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2264 | 204 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2265 | 205 | ACUGGCGCAUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2266 | 206 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGUGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2267 | 207 | ACUGGCGCUUUUAUUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2268 | 208 | ACGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2269 | 209 | ACUGGCGCUUUUAUAUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2270 | 210 | ACUGGCGCUUUUAUCUUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2271 | 211 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAGCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2272 | 212 | ACUGGCGCUGUUAUCUGAUUACUUCGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCGAAG |
2273 | 213 | ACUGGCGCUCUUAUCUGAUUACUUCGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCGAAG |
2274 | 214 | ACUGGCGCUUGUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAGAG |
2275 | 215 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAGAG |
2276 | 216 | ACUGGCGCUUUGAUCUGAUUACCUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAGG |
2277 | 217 | ACUGGCGCUUUCAUCUGAUUACCUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAGG |
2278 | 218 | ACUGGCGCUGUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2279 | 219 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCGAAG |
2280 | 220 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUCGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAG |
2281 | 221 | ACUGGCACUUCUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2282 | 222 | ACUGGCACUUCUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAGAG |
2283 | 223 | ACUGGCACCUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAAAG |
2284 | 224 | ACUGGCACUUGUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2285 | 225 | ACUGGCACUUGUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAGAG |
2332 | 226 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2286 | 229 | ACUGGCACUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAG |
2287 | 230 | ACUGGCACUUCUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAGAG |
2288 | 231 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2289 | 232 | ACUGGCACUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2290 | 233 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2291 | 234 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGGAGCAUCAGAG |
2292 | 235 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2293 | 236 | ACGGGACUUUCUAUCUGAUUACUCUGAAGUCCCUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2294 | 237 | ACCUGUAGUUCUAUCUGAUUACUCUGACUACAGUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2295 | 238 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGUGCAGCAUCAAAG |
2296 | 239 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGUGCAGCAUCAAAG |
2297 | 240 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGUGCAGCAUCAAAG |
2298 | 241 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGUGCAGCAUCAAAG |
2299 | 242 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGGUGGGCGCAGCUUCGGCUGACGGUACACCGUGCAGCAUCAAAG |
2300 | 243 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACCUAGCGGAGGCUAGGUGCAGCAUCAAAG |
2301 | 244 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACCUCGGCUUGCUGAAGCGCGCACGGCAAGAGGCGAGGUGCAGCAUCAAAG |
2302 | 245 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACCUCUCUCGACGCAGGACUCGGCUUGCUGAAGCGCGCACGGCAAGAGGCGAGGGGCGGCGACUGGUGAGUACGCCAAAAAUUUUGACUAGCGGAGGCUAGAAGGAGAGAGGUGCAGCAUCAAAG |
2303 | 246 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGUGCCCGUCUGUUGUGUCGAGAGACGCCAAAAAUUUUGACUAGCGGAGGCUAGAAGGAGAGAGAUGGGUGCCGUGCAGCAUCAAAG |
2304 | 247 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACAUGGAGAGGAGAUGUGCAGCAUCAAAG |
2305 | 248 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACAUGGAGAUGUGCAGCAUCAAAG |
2306 | 249 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAAGCAUCAAAG |
2307 | 250 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2308 | 251 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCUCAUGAGGAUCACCCAUGAGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2309 | 252 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2310 | 253 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCAAACAUGGCAGUCCUAAGGACGCGGGUUUUGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2311 | 254 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2312 | 255 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAAGGAGUUUAUAUGGAAACCCUUAGUGCAGCAUCAAAG |
2313 | 256 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUGAGCAUCAAAG |
2314 | 257 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGCCCUGAAGAAGGGCGUGCAGCAUCAAAG |
2315 | 258 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGCUCGUGUAGCUCAUUAGCUCCGAGCCGUGCAGCAUCAAAG |
2316 | 259 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACCCGUGUGCAUCCGCAGUGUCGGAUCCACGGGUGCAGCAUCAAAG |
2317 | 260 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACGGAAUCCAUUGCACUCCGGAUUUCACUAGGUGCAGCAUCAAAG |
2318 | 261 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACAUGCAUGUCUAAGACAGCAUGUGCAGCAUCAAAG |
2319 | 262 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACAAAACAUAAGGAAAACCUAUGUUGUGCAGCAUCAAAG |
2320 | 263 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2321 | 264 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGGUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUACCCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2322 | 265 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUACCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2323 | 266 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGGGAGCAUCAAAG |
2324 | 267 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGUAUGGGCGCAGCUCAUGAGGAUCACCCAUGAGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUACCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2325 | 268 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUAUGGGCGCAGCUCAUGAGGAUCACCCAUGAGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGGGAGCAUCAAAG |
2326 | 269 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUACCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2327 | 270 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUAGGGAGCAUCAAAG |
2328 | 271 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGUAUGGGCGCAGCAAACAUGGCAGUCCUAAGGACGCGGGUUUUGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUACCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2329 | 272 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUAUGGGCGCAGCAAACAUGGCAGUCCUAAGGACGCGGGUUUUGCUGACGGUACAGGCCACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUGGUAUAGGGAGCAUCAAAG |
2330 | 273 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGUAUGGGCGCAGACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUACCGUAAGAGGCAUCAGAG |
2331 | 274 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUAUGGGCGCAGACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGGGAGCAUCAAAG |
2353 | 275 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACCUGAGGAUCACCCAGGUGCUGACGGUACAGGCCACCUGAGGAUCACCCAGGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2354 | 276 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGCAUGAGGAUCACCCAUGCGCUGACGGUACAGGCCGCAUGAGGAUCACCCAUGCGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2355 | 277 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGCCUGAGGAUCACCCAGGCGCUGACGGUACAGGCCGCCUGAGGAUCACCCAGGCGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2356 | 278 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGCCUGAGCAUCAGCCAGGCGCUGACGGUACAGGCCGCCUGAGCAUCAGCCAGGCGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2357 | 279 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGCAUCAGCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGCAUCAGCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2358 | 280 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGUAUCAACCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGUAUCAACCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2359 | 281 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGAAUCAGCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGAAUCAGCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2360 | 282 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCCCUUGAGGAUCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCCCUUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2361 | 283 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACUUGAGGAUCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACUUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2362 | 284 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACCUGAGGAUCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACCUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2363 | 285 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGAUCACCUAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCUAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2364 | 286 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUUAGGAUCACCAAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUUAGGAUCACCAAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2365 | 287 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUUAGGAUCACCGAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUUAGGAUCACCGAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2366 | 288 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUUAGGAUCACCUAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUUAGGAUCACCUAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2367 | 289 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGAUUACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUUACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2368 | 290 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGAUAACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUAACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2369 | 291 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGAUGACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUGACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2370 | 292 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGACCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGACCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2371 | 293 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCAGAUGAGGAUCACCCAUGGGCUGACGGUACAGGCCAGAUGAGGAUCACCCAUGGGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2372 | 294 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGGGGAUCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGGGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2373 | 295 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCACAUGAGGAUCACCCAUGUGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAAAG |
2374 | 296 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACCUGAGGAUCACCCAGGUGAGCAUCAAAG |
2375 | 297 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCGCAUGAGGAUCACCCAUGCGAGCAUCAAAG |
2376 | 298 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCGCCUGAGGAUCACCCAGGCGAGCAUCAAAG |
2377 | 299 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCGCCUGAGCAUCAGCCAGGCGAGCAUCAAAG |
2378 | 300 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGCAUCAGCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2379 | 301 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGUAUCAACCAUGUGAGCAUCAAAG |
2380 | 302 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGAAUCAGCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2381 | 303 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCCCUUGAGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2382 | 304 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACUUGAGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2383 | 305 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACCUGAGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2384 | 306 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUCACCUAUGUGAGCAUCAAAG |
2385 | 307 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUUAGGAUCACCAAUGUGAGCAUCAAAG |
2386 | 308 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUUAGGAUCACCGAUGUGAGCAUCAAAG |
2387 | 309 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUUAGGAUCACCUAUGUGAGCAUCAAAG |
2388 | 310 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUUACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2389 | 311 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUAACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2390 | 312 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUGACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2391 | 313 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGACCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2392 | 314 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCAGAUGAGGAUCACCCAUGGGAGCAUCAAAG |
2393 | 315 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGGGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAAAG |
2394 | 317 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUCACAUGAGGAUCACCCAUGUGAGCAUCAGAG |
2395 | 318 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAGAG |
2396 | 319 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGCUCAUGAGGAUCACCCAUGAGCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAGAG |
2397 | 320 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGCGCAGACAUGGCAGUCGUAACGACGCGGGUCUGACGGUACAGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUAUAGUGCAGCAUCAGAG |
2398 | 321 | ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCUGCACUAUGGGGCCACAUGAGGAUCACCCAUGUGGUGUACAGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGAUAGUGCAGCAUCAAAG |
在一些實施例中,sgRNA變異體包含對表2之序列SEQ ID NO: 2238、SEQ ID NO: 2239、SEQ ID NO: 2240、SEQ ID NO: 2241、SEQ ID NO: 2243、SEQ ID NO: 2256、SEQ ID NO: 2274、SEQ ID NO: 2275、SEQ ID NO: 2279、SEQ ID NO: 2281、SEQ ID NO: 2285、SEQ ID NO: 2289、SEQ ID NO: 2292或SEQ ID NO: 2308的一或多個額外修飾。
在本發明之gRNA變異體之一些實施例中,gRNA變異體相比於SEQ ID NO:5之參考導引支架包含至少一個修飾,其中至少一個修飾係選自以下各項中之一或多者:(a)三聯體環中之C18G取代;(b)莖泡中之G55插入;(c)U1缺失;(d)延伸莖環中之修飾,其中(i) 6 nt環及13個近環鹼基對由Uvsx髮夾置換;及(ii)A99之缺失及G65U之取代,其導致完全鹼基配對的遠環鹼基。
在一些實施例中,gRNA變異體包含具有長非編碼RNA (lncRNA)之外源性莖環。如本文所用,lncRNA係指長度長於大約200 bp之非編碼RNA。在一些實施例中,外源性莖環之5'及3'末端為鹼基配對的;亦即相互作用以形成雙螺旋RNA之區域。在一些實施例中,外源性莖環之5'及3'末端為鹼基配對的,且外源性莖環之5'及3'末端之間的一或多個區域不為鹼基配對的,從而形成環。
在某些實施例中,本發明提供相對於參考gRNA具有核苷酸修飾之gRNA變異體,該gRNA變異體具有:(a)一或多個區域之gRNA變異體中1至15個連續或非連續核苷酸之取代;(b)一或多個區域之gRNA變異體中1至10個連續或非連續核苷酸之缺失;(c)一或多個區域之gRNA變異體中1至10個連續或非連續核苷酸之插入;(d)用來自具有近端5'及3'末端之異源RNA來源的RNA莖環序列取代支架莖環或延伸莖環;或(a)-(d)之任何組合。本文所描述之取代、插入及缺失中之任一者可經組合以產生本發明之gRNA變異體。舉例而言,gRNA變異體可相對於參考gRNA包含至少一個取代及至少一個缺失、相對於參考gRNA包含至少一個取代及至少一個插入、相對於參考gRNA包含至少一個插入及至少一個缺失或相對於參考gRNA包含至少一個取代、一個插入及一個缺失。
在一些實施例中,本發明之sgRNA變異體包含一或多個對先前產生之變異體之序列的修飾,先前產生之變異體自身充當待修飾之序列。在一些情況下,將一或多個修飾引入支架之假結區中。在其他情況下,將一或多個修飾引入支架之三聯體區中。在其他情況下,將一或多個修飾引入支架泡狀結構中。在其他情況下,將一或多個修飾引入支架之延伸莖區。在其他情況下,將修飾中之一者引入前述區域中之兩者或更多者中。此類修飾可包含一或多個核苷酸在前述區域中之插入、缺失或取代或其任何組合。用於產生及評定修飾之例示性方法描述於實例15中。
在一些實施例中,sgRNA變異體包含對序列SEQ ID NO: 2238、SEQ ID NO: 2239、SEQ ID NO: 2240、SEQ ID NO: 2241、SEQ ID NO: 2241、SEQ ID NO: 2274、SEQ ID NO: 2275、SEQ ID NO: 2279或SEQ ID NO: 2285、SEQ ID NO: 2289、SEQ ID NO: 2292或SEQ ID NO: 2308之一或多個修飾。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體174 (SEQ ID NO: 2238)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本174相比經改良之功能性特徵。在其他例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體175 (SEQ ID NO: 2239)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本175相比經改良之功能性特徵。舉例而言,具有修飾gRNA變異體175之三聯體環的變異體展示相對於175支架之較高富集,尤其對C15或C17之突變。另外,在G7與A29之間的假結莖中預測對的任一成員的改變均相對於175支架高度富集,其中將A29轉化為C或T以形成典型沃森-克里克配對(G7:C29),且其中的第二者將形成GU擺動對(G7:C29),其兩者可預期相對於G:A對增加螺旋線的穩定性。另外,在導引支架175中之位置54處插入C引起富集修飾。
在一些實施例中,本發明提供gRNA變異體,其包含一或多個對選自由表19之修飾組成之群的gRNA支架變異體174 (SEQ ID NO: 2238)的修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本174相比經改良之功能性特徵。在一些實施例中,經改良之功能性特徵為選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸之莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之對第2類第V型CRISPR蛋白之結合親和力。在前述實施例中,包含對選自由表16之修飾組成之群的gRNA支架變異體174之一或多個修飾(具有連接靶向序列且與第2類第V型CRISPR蛋白複合)的gRNA展現與活體外分析中之SEQ ID NO: 2238之gRNA支架之分數相比提高高至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5之富集分數(log
2)。
在一些實施例中,本發明提供gRNA變異體,其包含一或多個對選自由表20之修飾組成之群的gRNA支架變異體175 (SEQ ID NO: 2239)的修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本175相比經改良之功能性特徵。在一些實施例中,經改良之功能性特徵為選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸之莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之對第2類第V型CRISPR蛋白之結合親和力。在前述實施例中,包含對選自由表16之修飾組成之群的gRNA支架變異體175之一或多個修飾(具有連接靶向序列且與第2類第V型CRISPR蛋白複合)的gRNA展現與活體外分析中之SEQ ID NO: 2239之gRNA支架之分數相比提高至少約1.2、至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5或更多之富集分數(log
2)。
在特定實施例中,gRNA支架變異體174之一或多個修飾係選自由以下組成之群:核苷酸位置U11、U24、A29、U65、C66、C68、A69、U76、G77、A79及A87。在特定實施例中,gRNA支架變異體174之修飾為U11C、U24C、A29C、U65C、C66G、C68U,在位置69處插入ACGGA,在位置76、G77A處插入UCCGU、在位置79、A87G處插入GA。在另一特定實施例中,gRNA支架變異體175之修飾係選自由核苷酸位置C9、U11、C17、U24、A29、G54、C65、A89及A96組成之群。在特定實施例中,gRNA支架變異體174之修飾為C9U、U11C、C17G、U24C、A29C,在位置54處插入G,在位置65、A89G及A96G處插入C。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體215 (SEQ ID NO: 2275)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本215相比經改良之功能性特徵。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體221 (SEQ ID NO: 2281)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本221相比經改良之功能性特徵。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體225 (SEQ ID NO: 2285)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本225相比經改良之功能性特徵。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體235 (SEQ ID NO: 2292)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本225相比經改良之功能性特徵。
在例示性實施例中,gRNA變異體相對於gRNA支架變異體251 (SEQ ID NO: 2308)包含一或多個修飾,其中當在可比條件下在活體外或活體內分析中評定時,所得gRNA變異體展現與親本251相比經改良之功能性特徵。
在前述實施例中,經改良之功能性特徵包括但不限於以下各項中之一或多者:增加之穩定性、增加之gRNA轉錄、增加之對核酸酶活性之抗性、增加之gRNA摺疊率、摺疊期間減少之副產物形成、增加之生產性摺疊、增加之對CasX蛋白的結合親和力、當與CasX蛋白複合時增加之對目標核酸的結合親和力、當與CasX蛋白複合時增加之基因編輯、當與CasX蛋白複合時增加之編輯的特異性、當與CasX蛋白複合時減少之脫靶編輯;以及當與CasX蛋白複合時提高之在目標核酸的修飾中利用較大範圍一或多個PAM序列的能力,包括ATC、CTC、GTC或TTC。在一些情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於衍生其之gRNA改良至少約1.1至約100,000倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於衍生其之gRNA改良至少約1.1、至少約10、至少約100、至少約1000、至少約10,000、至少約100,000倍或更多倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於衍生其之gRNA改良約1.1至100,00倍、約1.1至10,00倍、約1.1至1,000倍、約1.1至500倍、約1.1至100倍、約1.1至50倍、約1.1至20倍、約10至100,00倍、約10至10,00倍、約10至1,000倍、約10至500倍、約10至100倍、約10至50倍、約10至20倍、約2至70倍、約2至50倍、約2至30倍、約2至20倍、約2至10倍、約5至50倍、約5至30倍、約5至10倍、約100至100,00倍、約100至10,00倍、約100至1,000倍、約100至500倍、約500至100,00倍、約500至10,00倍、約500至1,000倍、約500至750倍、約1,000至100,00倍、約10,000至100,00倍、約20至500倍、約20至250倍、約20至200倍、約20至100倍、約20至50倍、約50至10,000倍、約50至1,000倍、約50至500倍、約50至200倍或約50至100倍。在其他情況下,gRNA變異體之一或多個經改良之特徵相對於衍生其之gRNA改良約1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、16倍、17倍、18倍、19倍、20倍、25倍、30倍、40倍、45倍、50倍、55倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、110倍、120倍、130倍、140倍、150倍、160倍、170倍、180倍、190倍、200倍、210倍、220倍、230倍、240倍、250倍、260倍、270倍、280倍、290倍、300倍、310倍、320倍、330倍、340倍、350倍、360倍、370倍、380倍、390倍、400倍、425倍、450倍、475倍或500倍。
在一些實施例中,gRNA變異體包含外源延伸莖環,其中與參考gRNA之此類差異描述如下。在一些實施例中,外源延伸莖環與本文所揭示之參考莖環區(例如SEQ ID NO: 15)具有極小一致性或無一致性。在一些實施例中,外源莖環為至少10 bp、至少20 bp、至少30 bp、至少40 bp、至少50 bp、至少60 bp、至少70 bp、至少80 bp、至少90 bp、至少100 bp、至少200 bp、至少300 bp、至少400 bp、至少500 bp、至少600 bp、至少700 bp、至少800 bp、至少900 bp、至少1,000 bp、至少2,000 bp、至少3,000 bp、至少4,000 bp、至少5,000 bp、至少6,000 bp、至少7,000 bp、至少8,000 bp、至少9,000 bp、至少10,000 bp、至少12,000 bp、至少15,000 bp或至少20,000 bp。在一些實施例中,gRNA變異體包含延伸莖環區,其包含至少10、至少100、至少500、至少1000或至少10,000個核苷酸。在一些實施例中,異源莖環增加gRNA之穩定性。在一些實施例中,異源RNA莖環能夠結合蛋白質、RNA結構、DNA序列或小分子。在一些實施例中,置換莖環之外源莖環區包含RNA莖環或髮夾,其中所得gRNA具有增加之穩定性且視環之選擇而定可與某些細胞蛋白質或RNA相互作用。此類外源延伸莖環可包含例如熱穩定RNA,諸如MS2髮夾(ACAUGAGGAUCACCCAUGU (SEQ ID NO: 1137))、Qβ髮夾(UGCAUGUCUAAGACAGCA (SEQ ID NO: 32))、U1髮夾II (AAUCCAUUGCACUCCGGAUU (SEQ ID NO: 33))、Uvsx (CCUCUUCGGAGG (SEQ ID NO: 34))、PP7髮夾(AGGAGUUUCUAUGGAAACCCU (SEQ ID NO: 35))、噬菌體複製環(AGGUGGGACGACCUCUCGGUCGUCCUAUCU (SEQ ID NO: 36))、吻環_a (UGCUCGCUCCGUUCGAGCA (SEQ ID NO: 37))、吻環_b1 (UGCUCGACGCGUCCUCGAGCA (SEQ ID NO: 38))、吻環_b2 (UGCUCGUUUGCGGCUACGAGCA (SEQ ID NO: 39))、G四螺旋體M3q (AGGGAGGGAGGGAGAGG (SEQ ID NO: 40))、G四螺旋體端粒籃(GGUUAGGGUUAGGGUUAGG (SEQ ID NO: 41))、帚麴菌素-蓖麻毒素環(CUGCUCAGUACGAGAGGAACCGCAG (SEQ ID NO: 42))或假結(UACACUGGGAUCGCUGAAUUAGAGAUCGGCGUCCUUUCAUUCUAUAUACUUUGGAGUUUUAAAAUGUCUCUAAGUACA (SEQ ID NO: 43))。在一些實施例中,前述髮夾序列中之一者併入至莖環中以幫助當對應物配位體併入至XDP之Gag多聚蛋白中時將gRNA (及RNP複合物中之相關CasX)轉運併入至出芽XDP中(更充分地描述於下文)。
在一些實施例中,gRNA變異體包含末端融合搭配物。術語gRNA變異體包括含有外源序列(諸如末端融合物)或內部插入之變異體。例示性末端融合物可包括gRNA與自裂解核糖核酸酶或蛋白質結合模體之融合物。如本文所用,「核糖核酸酶」係指具有一或多種與蛋白質酶類似之催化活性的RNA或其片段。例示性核糖核酸酶催化活性可包括例如RNA之裂解及/或連接、DNA之裂解及/或連接或肽鍵形成。在一些實施例中,此類融合可改良支架摺疊或募集DNA修復機構。舉例而言,gRNA可在一些實施例中融合至D型肝炎病毒(HDV)反基因體核糖核酸酶、HDV基因體核糖核酸酶、手斧核糖核酸酶(來自宏基因體資料)、env25手槍核糖核酸酶(來自Aliistipes putredinis的代表)、HH15最小錘頭狀核糖核酸酶、菸草環斑病毒(TRSV)核糖核酸酶、WT病毒錘頭狀核糖核酸酶(及合理變異體)或絞扭姐妹1或RBMX招募模體。錘頭狀核糖核酸酶為在RNA分子內之特定位點處催化可逆裂解及連接反應的RNA模體。錘頭狀核糖核酸酶包括I型、II型及III型錘頭狀核糖核酸酶。HDV、手槍及手斧核糖核酸酶具有自裂解活性。包含一或多種核糖核酸酶之gRNA變異體可允許相比於gRNA參考擴展之gRNA功能。舉例而言,在一些實施例中,包含自裂解核糖核酸酶之gRNA可轉錄及加工為成熟gRNA,作為多順反子轉錄物之一部分。此類融合物可出現於gRNA之5'或3'末端。在一些實施例中,gRNA變異體包含5'末端及3'末端兩者處之融合物,其中各融合物獨立地如本文所描述。
在gRNA變異體之實施例中,gRNA變異體進一步包含位於gRNA之3'末端處之間隔子(或靶向序列)區,其能夠與包含至少14至約35個核苷酸之目標核酸雜交,其中間隔子經設計成具有與目標核酸互補之序列。在一些實施例中,所編碼之gRNA變異體包含與目標核酸互補之至少10至20個核苷酸之靶向序列。在一些實施例中,靶向序列具有14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸。在一些實施例中,所編碼之gRNA變異體包含具有20個核苷酸之靶向序列。在一些實施例中,靶向序列具有25個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有24個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有23個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有22個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有21個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有20個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有19個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有18個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有17個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有16個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有15個核苷酸。在一些實施例中,靶向序列具有14個核苷酸。
h. 與第2類第V型蛋白質形成複合物
在某些實施例中,當表現時,gRNA變異體作為RNP與第2類第V型蛋白質複合,包括包含以下之CasX變異蛋白:表3之序列SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約91%、至少約92%、至少約93%、至少約94%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性的序列。在一些實施例中,當表現時,gRNA變異體作為RNP與CasX變異蛋白複合,該CasX變異蛋白包含序列SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約91%、至少約92%、至少約93%、至少約94%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性的序列。在一些實施例中,當表現時,gRNA變異體作為RNP與CasX變異蛋白複合,該CasX變異蛋白包含序列SEQ ID NOS: 415-592或1147-1231中之任一者,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約91%、至少約92%、至少約93%、至少約94%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性的序列。
在一些實施例中,如實例中所描述,當與參考gRNA相比時,gRNA變異體具有改良之與CasX變異蛋白形成複合物之能力,藉此改良其與CasX蛋白形成裂解勝任型核糖核蛋白(RNP)複合物之能力。在一些實施例中,改良核糖核蛋白複合物形成可提高組裝功能性RNP之效率。在一些實施例中,大於90%、大於93%、大於95%、大於96%、大於97%、大於98%或大於99%包含gRNA變異體及靶向序列之RNP能勝任目標核酸之基因編輯。
在一些實施例中,可改良gRNA變異體與CasX蛋白形成複合物之能力的例示性核苷酸變化可包括用熱穩定莖環置換支架莖。不希望受任何理論束縛,用熱穩定莖環置換支架莖可增加gRNA變異體與CasX蛋白之總體結合穩定性。或者或另外,移除大部分莖環可改變gRNA變異體摺疊動力學,且例如藉由減輕gRNA變異體可使其自身「纏結」之程度而使功能性摺疊gRNA更容易且更快速地結構化組裝。在一些實施例中,支架莖環序列之選擇可隨用於gRNA之不同靶向序列而變化。在一些實施例中,支架序列可根據靶向序列且因此目標序列來定製。生物化學分析可用於評估CasX蛋白與gRNA變異體結合以形成RNP之結合親和力,包括實例之分析。舉例而言,一般技術者可量測結合至固定CasX蛋白之螢光標記gRNA之量的變化,作為對增加額外未標記之「冷競爭者」gRNA之濃度的反應。或者或另外,可監測螢光信號或查看其如何變化,因為不同量的經螢光標記之gRNA流經固定CasX蛋白。或者,形成RNP之能力可使用活體外裂解分析針對所定義之目標核酸序列來評定,如實例中所描述。
i. 經化學修飾之gRNA
在一些實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA。在一些實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA,其具有導引NA功能且對藉由核酸酶裂解之易感性降低。包含除四種典型核糖核苷酸A、C、G及U或去氧核苷酸以外的任何核苷酸之gRNA為經化學修飾之gRNA。在一些情況下,經化學修飾之gRNA包含除天然磷酸二酯核苷酸間鍵以外的任何主鏈或核苷酸間鍵。在某些實施例中,保留功能包括經修飾之gRNA結合至本文所描述之任一實施例之CasX的能力。在某些實施例中,保留功能包括經修飾之gRNA結合至目標核酸序列之能力。在某些實施例中,保留功能包括靶向CasX蛋白或預複合之RNP結合至目標核酸序列之能力。在某些實施例中,保留功能包括藉由CasX-gRNA切割目標多核苷酸之能力。在某些實施例中,保留功能包括藉由CasX-gRNA裂解目標核酸序列之能力。在某些實施例中,保留功能為gRNA於具有本發明之實施例之CasX嵌合體蛋白的重組系統中之任何其他已知功能。
在一些實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA,其中核苷酸糖修飾係併入至選自由以下組成之群的gRNA中:2'-O-C
1-4烷基(諸如2'-O-甲基(2'-OMe))、2'-去氧基(2'-H)、2'-O-C
1-3烷基-O-C
1-3烷基(諸如2'-甲氧基乙基(「2'-MOE」))、2'-氟(「2'-F」)、2'-胺基(「2'-NH
2」)、2'-阿拉伯糖基(「2'-阿糖」)核苷酸、2'-F-阿拉伯糖基(「2'-F-阿糖」)核苷酸、2'-鎖定核酸(「LNA」)核苷酸、2'-解鎖核酸(「ULNA」)核苷酸、L形式之糖(「L-糖」)及4'-硫代核糖基核苷酸。在其他實施例中,併入至導引RNA中之核苷酸間鍵修飾係選自由以下組成之群:硫代磷酸酯「P(S)」 (P(S))、膦醯基羧酸酯(P(CH
2)
nCOOR)(諸如膦醯基乙酸酯「PACE」(P(CH
2COO
−))、硫代膦醯基羧酸酯((S)P(CH
2)
nCOOR)(諸如硫代膦醯基乙酸酯「thioPACE」((S)P(CH
2)
nCOO
−))、膦酸烷基酯(P(C
1-3烷基)(諸如甲基膦酸酯-P (CH
3)、硼烷磷酸酯(P(BH
3))及二硫代磷酸酯(P(S)
2)。
在某些實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA,其中核鹼基(「鹼基」)修飾係併入至選自由以下組成之群的gRNA中:2-硫尿嘧啶(「2-thioU」)、2-硫胞嘧啶(「2-thioC」)、4-硫尿嘧啶(「4-thioU」)、6-硫鳥嘌呤(「6-thioG」)、2-胺基腺嘌呤(「2-aminoA」)、2-胺基嘌呤、假尿嘧啶、次黃嘌呤、7-去氮鳥嘌呤、7-去氮-8-氮鳥嘌呤、7-去氮腺嘌呤、7-去氮-8-氮腺嘌呤、5-甲基胞嘧啶(「5-methylC」)、5-甲基尿嘧啶(「5-methylU」)、5-羥甲基胞嘧啶、5-羥甲基尿嘧啶、5,6-去氫尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、5-乙炔基尿嘧啶、5-烯丙基尿嘧啶(「5-allylU」)、5-烯丙基胞嘧啶(「5-allylC」)、5-胺基烯丙基尿嘧啶(5-aminoallylU)、5-胺基烯丙基-胞嘧啶(「5-aminoallylC」)、脫鹼基核苷酸、Z鹼基、P鹼基、非結構化核酸(「UNA」)、異鳥嘌呤(「isoG」)、異胞嘧啶(「isoC」)、5-甲基-2-嘧啶、x(A,G,C,T)及y(A,G,C,T)。
在其他實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA,其中在核苷酸糖、核鹼基、磷酸二酯鍵及/或核苷酸磷酸酯上引入一或多種同位素修飾,包括包含一或多種
15N、
13C、
14C、氘、
3H、
32P、
125I、
131I原子或用作示蹤劑之其他原子或元素的核苷酸。
在一些實施例中,併入至gRNA中之「末端」修飾係選自由以下組成之群:PEG (聚乙二醇)、烴連接子(包括:雜原子(O,S,N)-經取代之烴間隔子;經鹵基取代之烴間隔子;酮基-、羧基-、醯胺基-、亞硫醯基-、胺基-、胺甲醯基-、含硫羰基胺甲醯基之烴間隔子)、精胺連接子、附接至連接子(諸如6-螢光素-己基)的染料,包括螢光染料(例如螢光素、若丹明(rhodamines)、花青)、淬滅劑(例如dabcyl、BHQ)及其他標記(例如生物素、地高辛(digoxigenin)、吖啶、鏈黴抗生物素蛋白、抗生物素蛋白、肽及/或蛋白質)。在一些實施例中,「末端」修飾包含將gRNA接合(或連接)至包含去氧核苷酸及/或核糖核苷酸之寡核苷酸的另一分子、肽、蛋白質、糖、寡醣、類固醇、脂質、葉酸、維生素及/或其他分子。在某些實施例中,本發明提供經化學修飾之gRNA,其中「末端」修飾(上文所描述)經由連接子,諸如2-(4-丁基醯胺基螢光素)丙烷-1,3-二醇雙(磷酸二酯)連接子位於gRNA序列內部,其作為磷酸二酯鍵併入且可併入gRNA中之兩個核苷酸之間的任何位置。
在一些實施例中,本發明提供經化學修飾之具有末端修飾之gRNA,該末端修飾包含端官能基,諸如胺、硫醇(或硫氫基)、羥基、羧基、羰基、亞硫醯基、硫羰基、胺甲醯基、硫代胺甲醯基、磷醯基、烯烴、炔、鹵素或官能基封端之連接子,其可隨後接合於選自由以下組成之群的所需部分:螢光染料、非螢光標記、標記(對於
14C,實例生物素、抗生物素蛋白、鏈黴抗生物素蛋白或含有同位素標記(諸如
15N、
13C、氘,
3H、
32P、
125I及類似者)之部分)、寡核苷酸(包含去氧核苷酸及/或核糖核苷酸,包括適體)、胺基酸、肽、蛋白質、糖、寡醣、類固醇、脂質、葉酸及維生素。接合採用此項技術中熟知之正規化學方法,包括但不限於經由N-羥基丁二醯亞胺、異硫氰酸酯、DCC (或DCI)偶合,及/或如「Bioconjugate Techniques」, Greg T. Hermanson, Publisher Eslsevier Science, 第3版(2013)中所描述之任何其他標準方法,該文獻之內容以全文引用的方式併入本文中。
IV. 用於修飾目標核酸之第2類第V型CRISPR蛋白
本發明提供包含CRISPR核酸酶之系統,其在真核細胞之基因體編輯中具有效用。在一些實施例中,基因體編輯系統中所採用之CRISPR核酸酶為第2類第V型核酸酶。儘管第2類第V型CRISPR-Cas系統之成員具有差異,但其共有區分其與Cas9系統之一些共同特徵。首先,第2類第V型核酸酶具有含有單一RNA導引之RuvC域之效應子但無HNH域,且其識別非靶向股上目標區域上游之TC模體PAM 5',其不同於依賴於目標序列之3'側之富含G之PAM的Cas9系統。第V型核酸酶產生在PAM序列遠端之交錯雙股斷裂,不同於Cas9,其在接近PAM之近端位點產生鈍端。另外,第V型核酸酶在由目標dsDNA活化時降解呈反式之ssDNA或呈順式之ssDNA結合。在一些實施例中,實施例之V型核酸酶識別5'-TC PAM模體且產生僅僅由RuvC域裂解之交錯末端。在一些實施例中,第V型核酸酶係選自由以下組成之群:Cas12a、Cas12b、Cas12c、Cas12d (CasY)、Cas12j、Cas12k、C2c4、C2c8、C2c5、C2c10、C2c9、CasZ及CasX。在一些實施例中,本發明提供系統,其包含經專門設計以修飾真核細胞中之目標核酸序列的CasX變異蛋白及一或多種gRNA變異體(CasX:gRNA系統)。
如本文所用,術語「CasX蛋白」係指蛋白質家族,且涵蓋與天然存在之CasX蛋白共有至少50%一致性的所有天然存在之CasX蛋白,以及相對於天然存在之參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體具有一或多個經改良之特徵的CasX變異體。
本發明之CasX蛋白包含以下域中之至少一者:非目標股結合(NTSB)域、目標股負載(TSL)域、螺旋形I域(其進一步劃分成螺旋形I-I及I-II子域)、螺旋形II域、寡核苷酸結合域(OBD,其進一步劃分成OBD-I及OBD-II子域)及RuvC DNA裂解域(其進一步劃分成RuvC-I及II子域)。可在催化性死亡CasX變異體中修飾或缺失RuvC域,下文更充分地描述。
在一些實施例中,CasX蛋白可在由相關gRNA靶向之特異性序列處結合及/或修飾(例如,切割、催化雙股斷裂、甲基化、去甲基化等)目標核酸,該目標核酸雜交至目標核酸序列內之序列。
a. 參考CasX蛋白
本發明提供天然存在之CasX蛋白(在本文中稱為「參考CasX蛋白」),其隨後經修飾以產生本發明之CasX變異體。舉例而言,參考CasX蛋白可與天然存在之原核生物分離,諸如δ變形菌綱
( Deltaproteobacteria )、浮黴菌門(
Planctomycetes)或宋氏細菌候選種物種。參考CasX蛋白為屬於CasX (可互換稱為Cas12e)蛋白家族之II型CRISPR/Cas核酸內切酶,其與導引RNA相互作用以形成核糖核蛋白(RNP)複合物。
本發明提供參考CasX蛋白之第2類第V型CasX變異體或衍生自其他CasX變異體之變異體(參見例如圖44) (在本文中可互換地稱為「第2類第V型CasX變異體」、「CasX變異體」或「CasX變異蛋白」),其中第2類第V型CasX變異體相對於參考CasX蛋白在至少一個域中包含至少一個修飾,包括但不限於SEQ ID NO: 1-3之序列,或相對於另一CasX變異體包含至少一個修飾。參考CasX蛋白或引起CasX蛋白之經改良之特徵之另一CasX變異蛋白之胺基酸序列的任何變化視為本發明之CasX變異蛋白。舉例而言,相對於參考CasX蛋白序列,CasX變異體可包含一或多個胺基酸取代、插入、缺失或交換域,或其任何組合。
與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白或衍生其之變異體;例如CasX 491 (SEQ ID NO: 336)或CasX 515 (SEQ ID NO: 416)相比,本發明之CasX變異體具有一或多個經改良之特徵。CasX變異體實施例之例示性經改良之特徵包括但不限於改良之變異體摺疊、增加之對gRNA的結合親和力、增加之對目標核酸的結合親和力、提高之在編輯及/或結合目標核酸中利用較大範圍PAM序列之能力、經改良之目標DNA展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、增加之對目標核酸的編輯特異性、減少之脫靶編輯或裂解、提高之可有效編輯之真核基因體的百分比、增加之核酸酶的活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切割之目標股負載、增加之DNA之非目標股結合、增加之蛋白質穩定性、增加之蛋白質:gRNA (RNP)複合物穩定性及經改良之融合特徵。在前述實施例中,當以可比方式分析時,CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3或CasX 491 (SEQ ID NO: 336)或CasX 515(SEQ ID NO: 416)之參考CasX蛋白改良至少約1.1至約100,000倍。在其他實施例中,當以可比方式分析時,與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3或CasX 491或CasX 515之參考CasX蛋白相比,改良至少約1.1倍、至少約2倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約50倍、至少約100倍、至少約500倍、至少約1000倍、至少約5000倍、至少約10,000倍或至少約100,000倍。在其他情況下,CasX變異體及gRNA變異體之RNP之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及表1之gRNA之RNP或CasX 491或CasX 515與gRNA 174,改良至少約1.1、至少約10、至少約100、至少約1000、至少約10,000、至少約100,000倍或更多倍。在其他情況下,當以可比方式分析時,CasX變異體及gRNA變異體之RNP之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及表1之gRNA之RNP或CasX 491或CasX 515與gRNA 174,改良約1.1至100,00倍、約1.1至10,00倍、約1.1至1,000倍、約1.1至500倍、約1.1至100倍、約1.1至50倍、約1.1至20倍、約10至100,00倍、約10至10,00倍、約10至1,000倍、約10至500倍、約10至100倍、約10至50倍、約10至20倍、約2至70倍、約2至50倍、約2至30倍、約2至20倍、約2至10倍、約5至50倍、約5至30倍、約5至10倍、約100至100,00倍,約100至10,00倍、約100至1,000倍、約100至500倍、約500至100,00倍、約500至10,00倍、約500至1,000倍、約500至750倍、約1,000至100,00倍、約10,000至100,00倍、約20至500倍、約20至250倍、約20至200倍、約20至100倍、約20至50倍、約50至10,000倍、約50至1,000倍、約50至500倍、約50至200倍或約50至100倍。在其他情況下,當以可比方式分析時,CasX變異體及gRNA變異體之RNP之一或多個經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及表1之gRNA之RNP或CasX 491或CasX 515與gRNA 174,改良約1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、1.6倍、1.7倍、1.8倍、1.9倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、16倍、17倍、18倍、19倍、20倍、25倍、30倍、40倍、45倍、50倍、55倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、110倍、120倍、130倍、140倍、150倍、160倍、170倍、180倍、190倍、200倍、210倍、220倍、230倍、240倍、250倍、260倍、270倍、280倍、290倍、300倍、310倍、320倍、330倍、340倍、350倍、360倍、370倍、380倍、390倍、400倍、425倍、450倍、475倍或500倍。
在一些實施例中,CasX變異體之修飾為參考CasX之一或多個胺基酸中之突變。在其他實施例中,修飾為來自不同CasX蛋白之一部分或所有域之插入或取代。在特定實施例中,除本文所描述之選擇域中之個別修飾之外,SEQ ID NO: 415-592及1147-1231之CasX變異體具有SEQ ID NO: 1之NTSB及螺旋1B域,而其他域衍生自SEQ ID NO: 2。可將突變引入參考CasX蛋白之任何一或多個域中或CasX變異體中,得到CasX變異體,且可包括例如部分或所有一或多個域之缺失,或參考CasX蛋白或衍生其之CasX變異體之任何域中之一或多個胺基酸取代、缺失或插入。CasX蛋白之域包括非目標股結合(NTSB)域、目標股負載(TSL)域、螺旋形I域、螺旋形II域、寡核苷酸結合域(OBD)及RuvC DNA裂解域。不受理論或機制束縛,CasX中之NTSB域可與非目標核酸股結合且可輔助非目標股及目標股之展開。假定NTSB域負責呈展開狀態之非目標核酸股之展開或捕捉。例示性NTSB域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸100-190或SEQ ID NO: 2之胺基酸102-191。在一些實施例中,參考CasX蛋白之NTSB域包含四股β片。在一些實施例中,TSL用以將處於摺疊狀態之靶向股置放或捕捉,該摺疊狀態將目標股DNA主鏈之易裂開磷酸鹽置於RuvC活性位點處。例示性TSL包含SEQ ID NO: 1之胺基酸824-933或SEQ ID NO: 2之胺基酸811-920。不希望受理論所束縛,認為在一些情況下,螺旋形I域可有助於原間隔子相鄰模體(PAM)之結合。在一些實施例中,參考CasX蛋白之螺旋形I域包含一或多個α螺旋。例示性螺旋形I_I及I-II域分別包含SEQ ID NO: 1之胺基酸56-99及191-331,或分別包含SEQ ID NO: 2之胺基酸58-101及192-332。螺旋形II域負責與導引RNA支架莖環以及結合DNA結合。例示性螺旋形II域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸332-508或SEQ ID NO: 2之胺基酸333-500。OBD大部分結合導引RNA支架之RNA三聯體。OBD亦可負責與原間隔子相鄰模體(PAM)結合。例示性OBD I及II域分別包含SEQ ID NO: 1之胺基酸1-55及509-659,或分別包含SEQ ID NO: 2之胺基酸1-57及501-646。RuvC具有負責裂解DNA之兩個股(一個接一個地,最可能首先為靶向序列中11-14個核苷酸(nt)處之非目標股,且隨後為目標序列之後2-4個核苷酸處之目標股)之DED模體活性位點。特定言之,在CasX中,RuvC域的獨特之處在於其亦負責結合對CasX功能重要之導引RNA支架莖環。例示性RuvC I及II域分別包含SEQ ID NO: 1之胺基酸660-823及934-986,或分別包含SEQ ID NO: 2之胺基酸647-810及921-978,而CasX變異體可包含下文所描述之相對於SEQ ID NO: 2在位置I658及A708處之突變,或CasX 515之突變。
在一些實施例中,CasX變異蛋白包含在至少1個域中、在至少2個域中之每一者中、在至少3個域中之每一者中、在至少4個域中之每一者中或在參考CasX蛋白之至少5個域中之每一者中的至少一個修飾,包括SEQ ID NO: 1-3之序列。在一些實施例中,CasX變異蛋白在參考CasX蛋白之至少一個域中包含兩個或兩個以上修飾。在一些實施例中,CasX變異蛋白包含參考CasX蛋白之至少一個域中之至少兩個修飾、參考CasX蛋白之至少一個域中之至少三個修飾或參考CasX蛋白之至少一個域中之至少四種或四種以上修飾。在一些實施例中,其中CasX變異體與參考CasX蛋白相比包含兩個或兩個以上修飾,且各修飾在獨立地選自由以下組成之群的域中進行:NTSB、TSL、螺旋形I域、螺旋形II域、OBD及RuvC DNA裂解域。在一些實施例中,其中CasX變異體與參考CasX蛋白相比包含兩個或兩個以上修飾,在兩個或兩個以上域中進行修飾。在一些實施例中,CasX變異蛋白之至少一個修飾包含SEQ ID NO: 1-3之參考CasX蛋白之一個域之至少一部分的缺失。在一些實施例中,缺失係在NTSB域、TSL域、螺旋形I域、螺旋形II域、OBD或RuvC DNA裂解域中。
在一些情況下,本發明之CasX變異體包含可涵蓋一或多個域之結構區域中之修飾。在一些實施例中,CasX變異體包含CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該等胺基酸殘基形成通道,其中發生gRNA:目標核酸與CasX變異體複合。在其他實施例中,CasX變異體包含形成與gRNA結合之界面之CasX變異體之非連續胺基酸殘基之區域之至少一個修飾。在其他實施例中,CasX變異體包含CasX變異體之非連續胺基酸殘基之區域之至少一個修飾,該等胺基酸殘基形成與非目標股DNA結合之通道。在其他實施例中,CasX變異體包含CasX變異體之非連續胺基酸殘基之區域之至少一個修飾,該等胺基酸殘基形成與目標核酸之原間隔子相鄰模體(PAM)結合之界面。在其他實施例中,CasX變異體包含CasX變異體之非連續表面暴露之胺基酸殘基之區域的至少一個修飾。在其他實施例中,CasX變異體包含至少一個非連續胺基酸殘基之區域之修飾,該等胺基酸殘基經由CasX變異體之域中之疏水性填充形成核。在該段之前述實施例中,區域之修飾可以包含區域之一或多個胺基酸的缺失、插入或取代中之一或多者;或CasX變異體之區域的2至15個胺基酸殘基之間經帶電荷胺基酸取代;或CasX變異體之區域的2至15個胺基酸殘基之間經極性胺基酸取代;或CasX變異體之區域的2至15個胺基酸殘基經堆疊的胺基酸取代,或與DNA或RNA鹼基具有親和力。
在其他實施例中,本發明提供CasX變異體,其中CasX變異體相對於另一個CasX變異體包含至少一個修飾;例如CasX變異體515及527為CasX變異體491之變異體,且CasX變異體668及672為CasX 535之變異體(參見圖44)。在一些實施例中,至少一個修飾係選自由以下組成之群:胺基酸插入、缺失或取代。當與參考CasX蛋白或衍生其之變異體相比,設想改良CasX變異蛋白之一或多種功能或特徵之所有變異體屬於本發明之範疇內。如實例中所描述,CasX變異體可經突變誘發以產生另一CasX變異體。在特定實施例中,本發明在實例14中提供CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之變異體,其藉由將修飾引入編碼序列中,在一或多個域中之一或多個位置處產生胺基酸取代、缺失或插入而產生。
用於產生本發明之CasX變異蛋白之適合的突變誘發方法可包括例如深度突變演進(DME)、深度突變掃描(DMS)、易錯PCR、卡匣突變誘發、隨機突變誘發、交錯延伸PCR、基因改組或域交換(描述於PCT/US20/36506及WO2020247883A2中,以引用之方式併入本文中)。在一些實施例中,例如藉由使用實例中所描述之分析選擇經鑑別之CasX變異體中之多個所需突變來設計CasX變異體。在某些實施例中,使用在突變誘發之前參考CasX或CasX變異蛋白之活性作為基準,針對此基準比較一或多個所得CasX變異體之活性,藉此量測新CasX變異體之功能的改良。
在本文所描述之CasX變異體之一些實施例中,至少一個修飾包含:(a)與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3之參考CasX、CasX變異體491 (SEQ ID NO: 336)或CasX變異體515 (SEQ ID NO: 416)相比,CasX變異體中之1至100個連續或非連續胺基酸的取代;(b)與參考CasX或衍生其之變異體相比,CasX變異體中之1至100個連續或非連續胺基酸的缺失;(c)與參考CasX或衍生其之變異體相比,CasX中之1至100個連續或非連續胺基酸的插入;或(d) (a)-(c)之任何組合。在一些實施例中,至少一個修飾包含:(a)與SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3之參考CasX或衍生其之變異體相比,CasX變異體中之1-10個連續或非連續胺基酸的取代;(b)與參考CasX或衍生其之變異體相比,CasX變異體中之1-5個連續或非連續胺基酸的缺失;(c)與參考CasX或衍生其之變異體相比,CasX中之1-5個連續或非連續胺基酸的插入;或(d) (a)-(c)之任何組合。
在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3之序列、CasX 491或CasX 515包含具有至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少20、至少30、至少40、至少50、至少60、至少70、至少80、至少90或至少100個改變的序列或由其組成。在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於CasX 491或SEQ ID NO: 336包含一或多個取代。在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於CasX 515或SEQ ID NO: 416包含一或多個取代。此等改變可為胺基酸插入、缺失、取代或其任何組合。變化可在CasX變異體之一個域中或在任何域中或域之任何組合中。任何胺基酸可在本文所描述之取代中取代任何其他胺基酸。取代可為保守取代(例如鹼性胺基酸取代另一鹼性胺基酸)。取代可為非保守取代(例如鹼性胺基酸經酸性胺基酸取代或反之亦然)。舉例而言,參考CasX蛋白中之脯胺酸可取代以下中之任一者以產生本發明之CasX變異蛋白:精胺酸、組胺酸、離胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、半胱胺酸、甘胺酸、丙胺酸、異白胺酸、白胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、色胺酸、酪胺酸或纈胺酸。
本文所描述之取代、插入及缺失實施例之任何排列可經組合以產生本發明之CasX變異蛋白。舉例而言,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白序列或CasX 491或CasX 515之序列可包含至少一個取代或至少一個缺失,相對於參考CasX蛋白序列或CasX 491或CasX 515之序列包含至少一個取代或至少一個插入,相對於參考CasX蛋白序列或CasX 491或CasX 515之序列包含至少一個插入或至少一個缺失,或相對於參考CasX蛋白序列或CasX 491或CasX 515之序列包含至少一個取代、一個插入及一個缺失。
在一些實施例中,CasX變異蛋白包含400至2000個胺基酸、500至1500個胺基酸、700至1200個胺基酸、800至1100個胺基酸或900至1000個胺基酸。
在一些實施例中,CasX變異蛋白包含如表3中所闡述之SEQ ID NO: 247-592或1147-1231之序列。在一些實施例中,CasX變異蛋白由如表3中所闡述之SEQ ID NO: 247-592或1147-1231之序列組成。在其他實施例中,CasX變異蛋白包含與如表3中所闡述之SEQ ID NO: 247-592及1147-1231之序列至少60%一致、至少65%一致、至少70%一致、至少75%一致、至少80%一致、至少81%一致、至少82%一致、至少83%、至少84%一致、至少85%一致、至少86%一致、至少86%一致、至少87%一致、至少88%一致、至少89%一致、至少89%一致、至少90%一致、至少91%一致、至少92%一致、至少93%一致、至少94%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致、至少99%一致、至少99.5 %一致的序列。在一些實施例中,CasX變異蛋白包含SEQ ID NO: 270-592或1147-1231之序列或由其組成。在其他實施例中,CasX變異蛋白包含與SEQ ID NO: 270-592或1147-1231之序列至少60%一致、至少65%一致、至少70%一致、至少75%一致、至少80%一致、至少81%一致、至少82%一致、至少83%、至少84%一致、至少85%一致、至少86%一致、至少86%一致、至少87%一致、至少88%一致、至少89%一致、至少89%一致、至少90%一致、至少91%一致、至少92%一致、至少93%一致、至少94%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致、至少99%一致、至少99.5 %一致的序列。在一些實施例中,CasX變異蛋白包含SEQ ID NO: 415-592或1147-1231之序列或由其組成。在其他實施例中,CasX變異蛋白包含與SEQ ID NO: 416-592或1147-1231之序列至少60%一致、至少65%一致、至少70%一致、至少75%一致、至少80%一致、至少81%一致、至少82%一致、至少83%、至少84%一致、至少85%一致、至少86%一致、至少86%一致、至少87%一致、至少88%一致、至少89%一致、至少89%一致、至少90%一致、至少91%一致、至少92%一致、至少93%一致、至少94%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致、至少99%一致、至少99.5 %一致的序列。(ND=未描述,或以其他方式未提供)。
表 3 : CasX 變異體序列
c. 具有來自多個來源蛋白質之域的 CasX 變異蛋白
SEQ ID NO | 變異體 | 胺基酸序列或變異體之描述 |
247 | ND | 來自SEQ ID NO:2之TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:1之NTSB域 |
248 | ND | 來自SEQ ID NO:2之NTSB、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:1之TSL域。 |
249 | ND | 來自SEQ ID NO:1之TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:2之NTSB域 |
250 | ND | 來自SEQ ID NO:1之NTSB、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:2之TSL域。 |
251 | ND | 來自SEQ ID NO:2之NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II及OBD域,及來自第二CasX蛋白之外源RuvC域或其一部分。 |
252 | ND | 無描述 |
253 | ND | 來自SEQ ID NO:2之NTSB、TSL、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:1之螺旋形I域 |
254 | ND | 來自SEQ ID NO:2之NTSB、TSL、螺旋形I、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO:1之螺旋形II域 |
255 | ND | 來自第一CasX蛋白之NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II及RuvC域,及來自第二CasX蛋白之外源OBD或其部分 |
256 | ND | 無描述 |
257 | ND | 無描述 |
258 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、C477K之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及T620P之取代 |
259 | ND | SEQ ID NO:2之M771A之取代。 |
260 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及D732N之取代。 |
261 | ND | SEQ ID NO:2之W782Q之取代。 |
262 | ND | SEQ ID NO:2之M771Q之取代 |
263 | ND | R458I之取代及SEQ ID NO:2之A739V之取代。 |
264 | ND | SEQ ID NO:2之L379R、A708K之取代、位置793處P之缺失及M771N之取代。 |
265 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及A739T之取代。 |
266 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、C477K之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及D489S之取代。 |
267 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、C477K之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及D732N之取代。 |
268 | ND | SEQ ID NO:2之V711K之取代。 |
269 | ND | SEQ ID NO:2之L379R之取代、C477K之取代、A708K之取代、位置793處P之缺失及Y797L之取代。 |
270 | 119 | ND |
283 | 429 | ND |
284 | 430 | ND |
285 | 431 | ND |
286 | 432 | ND |
287 | 433 | ND |
288 | 434 | ND |
289 | 435 | ND |
290 | 436 | ND |
291 | 437 | ND |
292 | 438 | ND |
293 | 439 | ND |
294 | 440 | ND |
295 | 441 | ND |
296 | 442 | ND |
297 | 443 | ND |
298 | 444 | ND |
299 | 445 | ND |
300 | 446 | ND |
301 | 447 | ND |
302 | 448 | ND |
303 | 449 | ND |
304 | 450 | ND |
305 | 451 | ND |
306 | 452 | ND |
307 | 453 | ND |
308 | 454 | ND |
309 | 455 | ND |
310 | 456 | ND |
311 | 457 | ND |
312 | 458 | ND |
313 | 459 | ND |
314 | 460 | ND |
315 | 278 | ND |
316 | 279 | ND |
317 | 280 | ND |
318 | 285 | ND |
319 | 286 | ND |
320 | 287 | ND |
321 | 288 | ND |
322 | 290 | ND |
323 | 291 | ND |
324 | 293 | ND |
325 | 300 | ND |
326 | 492 | ND |
327 | 493 | ND |
328 | 387 | ND |
329 | 395 | ND |
330 | 485 | ND |
331 | 486 | ND |
332 | 487 | ND |
333 | 488 | ND |
334 | 489 | ND |
335 | 490 | ND |
336 | 491 | ND |
337 | 494 | ND |
411 | 328 | ND |
412 | 388 | ND |
413 | 389 | ND |
414 | 390 | ND |
415 | 514 | ND |
416 | 515 | ND |
417 | 516 | ND |
418 | 517 | ND |
419 | 518 | ND |
420 | 519 | ND |
421 | 520 | ND |
422 | 522 | ND |
423 | 523 | ND |
424 | 524 | ND |
425 | 525 | ND |
426 | 526 | ND |
427 | 527 | ND |
428 | 528 | ND |
429 | 529 | ND |
430 | 530 | ND |
431 | 531 | ND |
432 | 532 | ND |
433 | 533 | ND |
434 | 534 | ND |
435 | 535 | ND |
436 | 536 | ND |
437 | 537 | ND |
438 | 538 | ND |
439 | 539 | ND |
440 | 540 | ND |
441 | 541 | ND |
442 | 542 | ND |
443 | 543 | ND |
444 | 544 | ND |
445 | 545 | ND |
446 | 546 | ND |
447 | 547 | ND |
448 | 548 | ND |
449 | 550 | ND |
450 | 551 | ND |
451 | 552 | ND |
452 | 553 | ND |
453 | 554 | ND |
454 | 555 | ND |
455 | 556 | ND |
456 | 557 | ND |
457 | 558 | ND |
458 | 559 | ND |
459 | 560 | ND |
460 | 561 | ND |
461 | 562 | ND |
462 | 563 | ND |
563 | 564 | ND |
464 | 565 | ND |
465 | 566 | ND |
466 | 567 | ND |
467 | 568 | ND |
468 | 569 | ND |
469 | 570 | ND |
470 | 571 | ND |
471 | 572 | ND |
472 | 573 | ND |
473 | 574 | ND |
474 | 575 | ND |
475 | 576 | ND |
476 | 577 | ND |
477 | 578 | ND |
478 | 579 | ND |
479 | 580 | ND |
480 | 581 | ND |
481 | 582 | ND |
482 | 583 | ND |
483 | 584 | ND |
484 | 585 | ND |
485 | 586 | ND |
486 | 587 | ND |
487 | 588 | ND |
488 | 589 | ND |
489 | 590 | ND |
490 | 591 | ND |
491 | 592 | ND |
492 | 593 | ND |
493 | 594 | ND |
494 | 595 | ND |
495 | 596 | ND |
496 | 597 | ND |
497 | 598 | ND |
498 | 599 | ND |
499 | 600 | ND |
500 | 601 | ND |
501 | 602 | ND |
502 | 603 | ND |
503 | 604 | ND |
504 | 605 | ND |
505 | 606 | ND |
506 | 607 | ND |
507 | 608 | ND |
508 | 609 | ND |
509 | 610 | ND |
510 | 611 | ND |
511 | 612 | ND |
512 | 613 | ND |
513 | 614 | ND |
514 | 615 | ND |
515 | 616 | ND |
516 | 617 | ND |
517 | 618 | ND |
518 | 619 | ND |
519 | 620 | ND |
520 | 621 | ND |
521 | 622 | ND |
522 | 623 | ND |
523 | 624 | ND |
524 | 625 | ND |
525 | 626 | ND |
526 | 627 | ND |
527 | 628 | ND |
528 | 629 | ND |
529 | 630 | ND |
530 | 631 | ND |
531 | 632 | ND |
532 | 633 | ND |
533 | 634 | ND |
534 | 635 | ND |
535 | 636 | ND |
536 | 637 | ND |
537 | 638 | ND |
538 | 639 | ND |
539 | 640 | ND |
540 | 641 | ND |
541 | 642 | ND |
542 | 643 | ND |
543 | 644 | ND |
544 | 645 | ND |
545 | 646 | ND |
546 | 647 | ND |
547 | 648 | ND |
548 | 649 | ND |
549 | 650 | ND |
550 | 651 | ND |
551 | 652 | ND |
552 | 653 | ND |
553 | 654 | ND |
554 | 655 | ND |
555 | 656 | ND |
556 | 657 | ND |
557 | 658 | ND |
558 | 659 | ND |
559 | 660 | ND |
560 | 661 | ND |
561 | 662 | ND |
562 | 663 | ND |
563 | 664 | ND |
564 | 665 | ND |
565 | 666 | ND |
566 | 667 | ND |
567 | 668 | ND |
568 | 669 | ND |
569 | 671 | ND |
570 | 672 | ND |
571 | 673 | ND |
572 | 674 | ND |
573 | 675 | ND |
574 | 676 | ND |
575 | 677 | ND |
576 | 678 | ND |
577 | 679 | ND |
578 | 680 | ND |
579 | 681 | ND |
580 | 682 | ND |
581 | 683 | ND |
582 | 684 | ND |
583 | 685 | ND |
584 | 686 | ND |
585 | 687 | ND |
586 | 688 | ND |
587 | 689 | ND |
588 | 690 | ND |
589 | 691 | ND |
590 | 692 | ND |
591 | 693 | ND |
592 | 694 | ND |
1147 | 701 | ND |
1148 | 702 | ND |
1149 | 703 | ND |
1150 | 704 | ND |
1151 | 705 | ND |
1152 | 706 | ND |
1153 | 707 | ND |
1154 | 708 | ND |
1155 | 709 | ND |
1156 | 710 | ND |
1157 | 711 | ND |
1158 | 712 | ND |
1159 | 713 | ND |
1160 | 714 | ND |
1161 | 715 | ND |
1162 | 716 | ND |
1163 | 717 | ND |
1164 | 718 | ND |
1165 | 719 | ND |
1166 | 720 | ND |
1167 | 721 | ND |
1168 | 722 | ND |
1169 | 723 | ND |
1170 | 724 | ND |
1171 | 725 | ND |
1172 | 726 | ND |
1173 | 727 | ND |
1174 | 728 | ND |
1175 | 729 | ND |
1176 | 730 | ND |
1177 | 731 | ND |
1178 | 732 | ND |
1179 | 733 | ND |
1180 | 734 | ND |
1181 | 735 | ND |
1182 | 736 | ND |
1183 | 737 | ND |
1184 | 738 | ND |
1185 | 739 | ND |
1186 | 740 | ND |
1187 | 741 | ND |
1188 | 742 | ND |
1189 | 743 | ND |
1190 | 744 | ND |
1191 | 745 | ND |
1192 | 746 | ND |
1193 | 747 | ND |
1194 | 748 | ND |
1195 | 749 | ND |
1196 | 750 | ND |
1197 | 751 | ND |
1198 | 752 | ND |
1199 | 753 | ND |
1200 | 754 | ND |
1201 | 755 | ND |
1202 | 756 | ND |
1203 | 757 | ND |
1204 | 758 | ND |
1205 | 759 | ND |
1206 | 760 | ND |
1207 | 761 | ND |
1208 | 762 | ND |
1209 | 763 | ND |
1210 | 764 | ND |
1211 | 765 | ND |
1212 | 766 | ND |
1213 | 767 | ND |
1214 | 768 | ND |
1215 | 769 | ND |
1216 | 770 | ND |
1217 | 777 | ND |
1218 | 778 | ND |
1219 | 779 | ND |
1220 | 780 | ND |
1221 | 781 | ND |
1222 | 782 | ND |
1223 | 783 | ND |
1224 | 784 | ND |
1225 | 785 | ND |
1226 | 786 | ND |
1227 | 787 | ND |
1228 | 788 | ND |
1229 | 789 | ND |
1230 | 790 | ND |
1231 | 791 | ND |
在某些實施例中,本發明提供嵌合CasX蛋白,其包含來自兩種或兩種以上不同CasX蛋白之蛋白域,諸如兩種或兩種以上天然存在之CasX蛋白,或兩種或兩種以上如本文所描述之CasX變異蛋白序列。如本文所用,「嵌合CasX蛋白」係指含有至少兩個分離或衍生自不同來源,諸如兩種天然存在之蛋白質之域的CasX,在一些實施例中,該兩種蛋白質可分離自不同物種。舉例而言,在一些實施例中,嵌合CasX蛋白包含來自第一CasX蛋白之第一域及來自不同的第二CasX蛋白之第二域。在一些實施例中,第一域可選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。在一些實施例中,第二域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,其中第二域不同於前述第一域。在特定實施例中,514-791 (SEQ ID NO: 415-592及1147-1231)之CasX變異體具有衍生自SEQ ID NO: 1之序列之NTSB及螺旋形1B域,而其他域衍生自SEQ ID NO: 2,應理解,變異體在所選位置具有額外胺基酸變化。
d. gRNA 之蛋白質親和力
在一些實施例中,CasX變異蛋白對gRNA之親和力相對於參考CasX蛋白改良,使得形成核糖核蛋白複合物(RNP)。CasX變異蛋白對gRNA之親和力增加可例如導致產生RNP複合物之較低K
d,其在一些情況下可導致更穩定的核糖核蛋白複合物形成。在一些實施例中,當遞送至人類細胞時,CasX變異蛋白對gRNA之親和力增加導致核糖核蛋白複合物之穩定性增加。此增加之穩定性可影響複合物在個體之細胞中之功能及效用,以及在遞送至個體時引起血液中之改良之藥物動力學特性。在一些實施例中,CasX變異蛋白增加之親和力,及核糖核蛋白複合物增加之所得穩定性允許向個體或細胞遞送較低劑量之CasX變異蛋白,同時仍具有所需活性,例如活體內或活體外基因編輯。在一些實施例中,當CasX變異蛋白及gRNA均保持於RNP複合物中時,CasX變異蛋白對gRNA之較高親和力(更緊密結合)允許編輯事件之量更大。增加之編輯事件可使用諸如本文所描述之tdTom編輯分析之編輯分析評定。在一些實施例中,gRNA之CasX變異蛋白之K
d相對於參考CasX蛋白增加至少約1.1、至少約1.2、至少約1.3、至少約1.4、至少約1.5、至少約1.6、至少約1.7、至少約1.8、至少約1.9、至少約2、至少約3、至少約4、至少約5、至少約6、至少約7、至少約8、至少約9、至少約10、至少約15、至少約20、至少約25、至少約30、至少約35、至少約40、至少約45、至少約50、至少約60、至少約70、至少約80、至少約90或至少約100之因子。在一些實施例中,CasX變異體與SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白相比具有增加約1.1至約10倍之gRNA之結合親和力。
在一些實施例中,CasX變異蛋白對gRNA之親和力增加在遞送至哺乳動物細胞時導致核糖核蛋白複合物之穩定性增加,包括活體內遞送至個體。此增加之穩定性可影響複合物在個體之細胞中之功能及效用,以及在遞送至個體時引起血液中之改良之藥物動力學特性。在一些實施例中,CasX變異蛋白增加之親和力,及核糖核蛋白複合物增加之所得穩定性允許向個體或細胞遞送較低劑量之CasX變異蛋白,同時仍具有所需活性;例如活體內或活體外基因編輯。可使用分析,諸如本文實例中所描述之活體外裂解分析來評定增強的形成RNP及將其保持於穩定形式之能力。在一些實施例中,包含本發明之CasX變異體之RNP能夠在複合為RNP時達成k
裂解速率,該RNP與包含SEQ ID NO: 1-3之參考CasX之RNP相比高至少2倍、至少5倍或至少10倍。
在一些實施例中,當CasX變異蛋白及gRNA均保持於RNP複合物中時,CasX變異蛋白對gRNA之較高親和力(更緊密結合)允許編輯事件之量更大。增加之編輯事件可使用諸如本文所描述之分析之編輯分析評定。
不希望受理論束縛,在一些實施例中,螺旋形I域中之胺基酸變化可增加CasX變異蛋白與gRNA靶向序列之結合親和力,而螺旋形II域中之變化可增加CasX變異蛋白與gRNA支架莖環之結合親和力,且寡核苷酸結合域(OBD)中之變化增加CasX變異蛋白與gRNA三聯體之結合親和力。
量測CasX蛋白對gRNA之結合親和力之方法包括使用純化CasX蛋白及gRNA之活體外方法。若gRNA或CasX蛋白係用螢光團標記,則可藉由螢光偏振量測對參考CasX及變異蛋白之結合親和力。或者或另外,結合親和力可藉由生物層干涉量測法、電泳遷移率變動分析(EMSA)或過濾結合量測。定量RNA結合蛋白,諸如本發明之參考CasX及變異蛋白對特定gRNA,諸如參考gRNA及其變異體之絕對親和力的額外標準技術包括但不限於等溫量熱法(ITC)及表面電漿子共振(SPR),以及實例之方法。
在一些實施例中,CasX變異蛋白在形成通道之非連續殘基區域中包含一或多個修飾,在該通道中發生gRNA:目標核酸複合。在一些實施例中,CasX變異蛋白包含一或多個包含形成與gRNA結合之界面之非連續殘基之區域的修飾。舉例而言,在參考CasX蛋白、螺旋形I、螺旋形II及OBD域之一些實施例中,全部接觸或接近gRNA:t目標核酸複合物,且對此等域中之任一者內之非連續殘基之一或多個修飾可改良CasX變異蛋白之功能。
在一些實施例中,CasX變異蛋白在形成與非目標股DNA結合之通道的非連續殘基區域中包含一或多個修飾。舉例而言,CasX變異蛋白可包含對NTSB域之非連續殘基之一或多個修飾。在一些實施例中,CasX變異蛋白在形成與PAM結合之界面的非連續殘基區域中包含一或多個修飾。舉例而言,CasX變異蛋白可包含對螺旋形I域或OBD之非連續殘基的一或多個修飾。在一些實施例中,CasX變異蛋白包含一或多個包含非連續表面暴露殘基區域的修飾。如本文所用,「表面暴露殘基」係指CasX蛋白之表面上的胺基酸,或其中胺基酸之至少一部分,諸如主鏈或一部分側鏈在蛋白質之表面上的胺基酸。暴露於細胞內環境水溶液之細胞蛋白質(諸如CasX)之表面暴露殘基通常選自帶正電親水性胺基酸,例如精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸、組胺酸、離胺酸、絲胺酸及蘇胺酸。因此,舉例而言,在本文所提供之變異體之一些實施例中,與參考CasX蛋白相比,表面暴露殘基之區域包含一或多個插入、缺失或取代。在一些實施例中,一或多個帶正電殘基取代一或多個其他帶正電殘基,或帶負電殘基,或不帶電殘基,或其任何組合。在一些實施例中,一或多個用於取代之胺基酸殘基為接近結合核酸,例如接觸目標核酸之RuvC域或螺旋形I域中之殘基,或OBD或結合gRNA之螺旋形II域中之殘基可經一或多個帶正電或極性胺基酸取代。
在一些實施例中,CasX變異蛋白包含非連續殘基區域中之一或多個修飾,該等非連續殘基經由參考CasX蛋白之域中之疏水性填充形成核。不希望受任何理論束縛,經由疏水性填充形成核心之區域富含疏水性胺基酸,諸如纈胺酸、異白胺酸、白胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、色胺酸及半胱胺酸。舉例而言,在一些參考CasX蛋白中,RuvC域包含鄰近活性位點之疏水性凹穴。在一些實施例中,區域之2至15個殘基帶電荷、極性或鹼基堆疊。帶電胺基酸(有時在本文中稱為殘基)可包括例如精胺酸、離胺酸、天冬胺酸及麩胺酸,且此等胺基酸之側鏈可形成鹽橋,其限制條件為亦存在橋接搭配物(參見圖14)。極性胺基酸可包括例如麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸及半胱胺酸。在一些實施例中,極性胺基酸可視其側鏈之身分而定形成氫鍵作為質子供體或受體。如本文所用,「鹼基堆疊」包括胺基酸殘基(諸如色胺酸、酪胺酸、苯丙胺酸或組胺酸)之芳族側鏈與核酸中堆疊之核苷酸鹼基之相互作用。在空間上緊鄰以形成CasX變異蛋白之功能性部分的對非連續胺基酸區域之任何修飾係設想為在本發明之範疇內。
e. 具有來自多個來源蛋白質之域的CasX變異蛋白
在某些實施例中,本發明提供嵌合CasX變異蛋白,其包含來自兩種或兩種以上不同CasX蛋白之蛋白域,諸如兩種或兩種以上天然存在之CasX蛋白,或兩種或兩種以上如本文所描述之CasX變異蛋白序列。如本文所用,「嵌合CasX蛋白」係指含有至少兩個分離或衍生自不同來源,諸如兩種天然存在之蛋白質之域的CasX,在一些實施例中,該兩種蛋白質可分離自不同物種。舉例而言,在一些實施例中,嵌合CasX蛋白包含來自第一CasX蛋白之第一域及來自不同的第二CasX蛋白之第二域。在一些實施例中,第一域可選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。在一些實施例中,第二域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域,其中第二域不同於前述第一域。舉例而言,嵌合CasX蛋白可包含來自SEQ ID NO: 2之CasX蛋白之NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD域及來自SEQ ID NO: 1之CasX蛋白之RuvC域,或反之亦然。作為另一實例,嵌合CasX蛋白可包含來自SEQ ID NO: 2之CasX蛋白之NTSB、TSL、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自SEQ ID NO: 1之CasX蛋白之螺旋形I域,或反之亦然。因此,在某些實施例中,嵌合CasX蛋白可包含來自第一CasX蛋白之NTSB、TSL、螺旋形II、OBD及RuvC域,及來自第二CasX蛋白之螺旋形I域。在嵌合CasX蛋白之一些實施例中,第一CasX蛋白之域衍生自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之序列,且第二CasX蛋白之域來源於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之序列,且第一及第二CasX蛋白不相同。在一些實施例中,第一CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 1之序列且第二CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 2之序列。在一些實施例中,第一CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 1之序列且第二CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 3之序列。在一些實施例中,第一CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 2之序列且第二CasX蛋白之域包含衍生自SEQ ID NO: 3之序列。作為前述之實例,嵌合RuvC域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸660至823及SEQ ID NO: 2之胺基酸921至978。作為前述之替代實例,嵌合RuvC域包含SEQ ID NO: 2之胺基酸647至810及SEQ ID NO: 1之胺基酸934至986。在一些實施例中,至少一個嵌合域包含嵌合螺旋形I域,其中嵌合螺旋形I域包含SEQ ID NO: 1之胺基酸56-99及SEQ ID NO: 2之胺基酸192-332。在一些實施例中,嵌合CasX變異體經進一步修飾,包括選自由以下組成之群的CasX變異體:SEQ ID NO: 270、SEQ ID NO: 328、SEQ ID NO: 336、SEQ ID NO: 780、SEQ ID NO: 412、SEQ ID NO: 413、SEQ ID NO: 414、SEQ ID NO: 416、SEQ ID NO: 435、SEQ ID NO: 329、SEQ ID NO: 781、SEQ ID NO: 330、SEQ ID NO: 782、SEQ ID NO: 331、SEQ ID NO: 783、SEQ ID NO: 332、SEQ ID NO: 784、SEQ ID NO: 333、SEQ ID NO: 785、SEQ ID NO: 334、SEQ ID NO: 786、SEQ ID NO: 335、SEQ ID NO: 567、SEQ ID NO: 570、SEQ ID NO: 574、SEQ ID NO: 787及SEQ ID NO: 788之序列。在一些實施例中,一或多種額外修飾包含如本文所描述之插入、取代或缺失。
在諸如螺旋形I、RuvC及OBD之分裂或非連續域之情況下,非連續域之一部分可經來自任何其他來源之對應部分置換。舉例而言,SEQ ID NO: 2中之螺旋形I-I域(有時稱為螺旋形I-α)可經來自SEQ ID NO: 1之對應螺旋形I序列置換,及其類似者。來自參考CasX蛋白之域序列及其座標展示於表4中。嵌合CasX蛋白之代表性實例包括CasX 472-483、485-491及515之變異體,其序列闡述於表3中。
表4.參考CasX蛋白中之域座標
* OBD I及II、螺旋形I及I-II,以及RuvC I及II在本文中亦稱為OBD a及b、螺旋形I a及b以及RuvC a及b。
域名稱 | SEQ ID NO: 1中之座標 | SEQ ID NO: 2中之座標 |
OBD-I | 1-55 | 1-57 |
螺旋形I-I | 56-99 | 58-101 |
NTSB | 100-190 | 102-191 |
螺旋形l I-II | 191-331 | 192-332 |
螺旋形II | 332-508 | 333-500 |
OBD-II | 509-659 | 501-646 |
RuvC-I | 660-823 | 647-810 |
TSL | 824-933 | 811-920 |
RuvC-II | 934-986 | 921-978 |
例示性域序列提供於下表5中。
表5.例示性域序列
δ變形菌綱物種(SEQ ID NO: 1之參考CasX) | ||
SEQ ID | 域 | 序列 |
2333 | OBD-I | EKRINKIRKKLSADNATKPVSRSGPMKTLLVRVMTDDLKKRLEKRRKKPEVMPQ |
2334 | 螺旋形I-I | VISNNAANNLRMLLDDYTKMKEAILQVYWQEFKDDHVGLMCKFA |
2335 | NTSB | QPASKKIDQNKLKPEMDEKGNLTTAGFACSQCGQPLFVYKLEQVSEKGKAYTNYFGRCNVAEHEKLILLAQLKPEKDSDEAVTYSLGKFGQ |
2336 | 螺旋形I-II | RALDFYSIHVTKESTHPVKPLAQIAGNRYASGPVGKALSDACMGTIASFLSKYQDIIIEHQKVVKGNQKRLESLRELAGKENLEYPSVTLPPQPHTKEGVDAYNEVIARVRMWVNLNLWQ KLKLSRDDAKPLLRLKGFPSF |
2337 | 螺旋形II | PVVERRENEVDWWNTINEVKKLIDAKRDMGRVFWSGVTAEKRNTILEGYNYLPNENDHKKREGSLENPKKPAKRQFGDLLLYLEKKYAGDWGKVFDEAWERIDKKIAGLTSHIEREEARNAEDAQSKAVLTDWLRAKASFVLERLKEMDEKEFYACEIQLQKWYGDLRG NPFAVEAE |
2338 | OBD-II | NRVVDISGFSIGSDGHSIQYRNLLAWKYLENGKREFYLLMNYGKKGRIRFTDGTDIKKSGKWQGLLYGGGKAKVIDLTFDPDDEQLIILPLAFGTRQGREFIWNDLLSLETGLIKLANGRVIEKTIYNKKIG RDEPALFVALTFERREVVD |
2339 | RuvC-I | PSNIKPVNLIGVDRGENIPAVIALTDPEGCPLPEFKDSSGGPTDILRIGEGYKEKQRAIQAAKEVEQRRAGGYSRKFASKSRNLADDMVRNSARDLFYHAVTHDAVLVFENLSRGFGRQGKRTFMTERQYTKMEDWLTAKLAYEGLTSKTYLSKTLAQYTSKTC |
2340 | TSL | SNCGFTITTADYDGMLVRLKKTSDGWATTLNNKELKAEGQITYYNRYKRQTVEKELSAELDRLSEESGNNDISKWTKGRRDEALFLLKKRFSHRPVQEQFVCLDCGHEVH |
2341 | RuvC-II | ADEQAALNIARSWLFLN SNSTEFKSYKSGKQPFVGAWQAFYKRRLKEVWKPNA |
浮黴菌門物種(SEQ ID NO: 2之參考CasX) | ||
SEQ ID | 域 | 序列 |
2342 | OBD-I | QEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGPMKTLLVRVMTPDLRERLENLRKKPENIPQ |
2343 | 螺旋形I-II | PISNTSRANLNKLLTDYTEMKKAILHVYWEEFQKDPVGLMSRVA |
2344 | NTSB | QPAPKNIDQRKLIPVKDGNERLTSSGFACSQCCQPLYVYKLEQVNDKGKPHTNYFGRCNVSEHERLILLSPHKPEANDELVTYSLGKFGQ |
2345 | 螺旋形I-II | RALDFYSIHVTRESNHPVKPLEQIGGNSCASGPVGKALSDACMGAVASFLTKYQDIILEHQKVIKKNEKRLANLKDIASANGLAFPKITLPPQPHTKEGIEAYNNVVAQIVIWVNLNLWQKLKIGRDEAKPLQRLKGFPSF |
2346 | 螺旋形II | PLVERQANEVDWWDMVCNVKKLINEKKEDGKVFWQNLAGYKRQEALLPYLSSEEDRKKGKKFARYQFGDLLLHLEKKHGEDWGKVYDEAWERIDKKVEGLSKHIKLEEERRSEDAQSKAALTDWLRAKASFVIEGLKEADKDEFCRCELKLQKWYGDLRGKPFAIEAE |
2347 | OBD-II | NSILDISGFSKQYNCAFIWQKDGVKKLNLYLIINYFKGGKLRFKKIKPEAFEANRFYTVINKKSGEIVPMEVNFNFDDPNLIILPLAFGKRQGREFIWNDLLSLETGSLK LANGRVIEKTLYNRRTRQDEPALFVALTFERREVLD |
2348 | RuvC-I | SSNIKPMNLIGIDRGENIPAVIALTDPEGCPLSRFKDSLGNPTHILRIGESYKEKQRTIQAAKEVEQRRAGGYSRKYASKAKNLADDMVRNTARDLLYYAVTQDAMLIFENLSRGFGRQGKRTFMAERQYTRMEDWLTAKLAYEGLPSKTYLSKTLAQYTSKTC |
2349 | TSL | SNCGFTITSADYDRVLEKLKKTATGWMTTINGKELKVEGQITYYNRYKRQNVVKDLSVELDRLSEESVNNDISSWTKGRSGEALSLLKKRFSHRPVQEKFVCLNCGFETH |
2350 | RuvC-II | ADEQAALNIARSWLFLRSQEYKKYQTNKTTGNTDKRAFVETWQSFYRKKLKEVWKPAV |
另一例示性螺旋形II域序列提供為SEQ ID NO: 2351,且另一例示性RuvC域序列提供為SEQ ID NO: 2352。
在其他實施例中,CasX變異蛋白包含如表3中所闡述之序列SEQ ID NO: 247-592或1147-1231,且進一步包含處於或接近N端、C端或兩者處之一或多個本文所揭示之NLS。在其他實施例中,CasX變異蛋白包含SEQ ID NO: 270-592及1147-1231之序列,且進一步包含處於或接近N端、C端或兩者處之一或多個本文所揭示之NLS。在其他實施例中,CasX變異蛋白包含SEQ ID NO: 415-592及1147-1231之序列,且進一步包含處於或接近N端、C端或兩者處之一或多個本文所揭示之NLS。應瞭解,在一些情況下,表中之CasX變異體之N端甲硫胺酸在轉譯後修飾期間自經表現CasX變異體移除。一般技術者應瞭解,靠近蛋白質之N端或C端之NLS可在N端或C端之1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、20或20個胺基酸內。
f. 衍生自其他CasX變異體之CasX變異體
在變異蛋白之產生之其他迭代中,可利用變異蛋白產生本發明之額外CasX變異體。舉例而言,且如圖44中所示,CasX 119 (SEQ ID NO: 270)、CasX 491 (SEQ ID NO: 336)及CasX 515 (SEQ ID NO: 416)為例示性變異蛋白,其經修飾以產生相對於衍生其之參考CasX或CasX變異體具有改良或其他特性的本發明之額外CasX變異體。CasX 119含有SEQ ID NO: 2之L379R之取代、A708K之取代及位置793處P之缺失。CasX 491含有來自SEQ ID NO: 1之NTSB及螺旋形1B交換。CasX 515藉由在位置793 (相對於SEQ ID NO: 2)處插入P而衍生自CasX 491,且用於產生實例13及14中所描述之CasX變異體。舉例而言,CasX 668在位置26處插入R且相對於CasX 515具有G223S之取代。CasX 672相對於CasX 515具有L169K及G223S之取代。CasX 676相對於CasX 515具有L169K及G223S之取代及在位置26處插入R。
用於產生及評估衍生自其他CasX變異體之CasX變異體之例示性方法描述於實例中,其藉由將修飾引入編碼序列,在CasX變異體之一或多個域中之一或多個位置處產生胺基酸取代、缺失或插入而產生。特定言之,實例14及實例15描述用於產生CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之變異體的方法,隨後分析該等變異體以確定當藉由胺基酸插入、缺失或取代修飾時導致分析中之富集或改良之序列中之彼等位置。在一些情況下,分析之結果用於產生圖34-36之熱圖,其提供在藉由該等方法修飾之給定胺基酸位置處之定性及定量資料。出於本發明之目的,CasX 515之域之序列提供於表4中且包括具有SEQ ID NO: 2342之序列之OBD-I域、具有SEQ ID NO: 2347之序列之OBD-II域、具有SEQ ID NO: 2335之序列之NTSB域、具有SEQ ID NO: 2343之序列之螺旋形I-I域、具有SEQ ID NO: 2336之序列之螺旋形I-II域、具有SEQ ID NO: 2351之序列之螺旋形II域、具有SEQ ID NO: 2352之序列之RuvC-I域、具有SEQ ID NO: 2350之序列之RuvC-II域及具有SEQ ID NO: 2349之序列之TSL域。藉由本發明之方法,修飾、分析CasX 515之域中的個別位置,且相對於其在各域或子域中之位置提供導致隨後之富集或改良的所得位置及例示性修飾。在一些情況下,此類位置揭示於實例之表21-24中。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,其在NTSB域中之一或多個胺基酸位置處包含相對於SEQ ID NO: 2335之一或多個修飾(亦即插入、缺失或取代),該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:P2、S4、Q9、E15、G20、G33、L41、Y51、F55、L68、A70、E75、K88及G90,其中該修飾相對於CasX 515導致經修飾之特徵。在特定實施例中,在NTSB域中相對於SEQ ID NO: 2335之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:^G2、^I4、^L4、Q9P、E15S、G20D、[S30]、G33T、L41A、Y51T、F55V、L68D、L68E、L68K、A70Y、A70S、E75A、E75D、E75P、K88Q及G90Q (其中「^」表示且插入及「[]」表示彼位置處之缺失。) 在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,該等變異體包含在螺旋形I-II域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2336之一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I24、A25、Y29、G32、G44、S48、S51、Q54、I56、V63、S73、L74、K97、V100、M112、L116、G137、F138及S140,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在一特定實施例中,在螺旋Ito II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:^T24、^C25、Y29F、G32Y、G32N、G32H、G32S、G32T、G32A、G32V、[G32]、G32S、G32T、G44L、G44H、S48H、S48T、S51T、Q54H、I56T、V63T、S73H、L74Y、K97G、K97S、K97D、K97E、V100L、M112T、M112W、M112R、M112K、L116K、G137R、G137K、G137N、^Q138及S140Q。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,該等變異體包含在螺旋形II域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2351之一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:L2、V3、E4、R5、Q6、A7、E9、V10、D11、W12、W13、D14、M15、V16、C17、N18、V19、K20、L22、I23、E25、K26、K31、Q35、L37、A38、K41、R42、Q43、E44、L46、K57、Y65、G68、L70、L71、L72、E75、G79、D81、W82、K84、V85、Y86、D87、I93、K95、K96、E98、L100、K102、I104、K105、E109、R110、D114、K118、A120、L121、W124、L125、R126、A127、A129、I133、E134、G135、L136、E138、D140、K141、D142、E143、F144、C145、C147、E148、L149、K150、L151、Q152、K153、L158、E166及A167,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在特定實施例中,一或多個位於螺旋形II域中之一或多個胺基酸位置處的修飾係選自由以下組成之群:^A2、^H2、[L2]+[V3]、V3E、V3Q、V3F、[V3]、^D3、V3P、E4P、[E4]、E4D、E4L、E4R、R5N、Q6V、^Q6、^G7、^H9、^A9、VD10、^T10、[V10]、^F10、^D11、[D11]、D11S、[W12]、W12T、W12H、^P12、^Q13、^G12、^R13、W13P、W13D、^D13、W13L、^P14、^D14、[D14]+[M15]、[M15]、^T16、^P17、N18I、V19N、V19H、K20D、L22D、I23S、E25C、E25P、^G25、K26T、K27E、K31L、K31Y、Q35D、Q35P、^S37、[L37]+[A38]、K41L、^R42、[Q43]+[E44]、L46N、K57Q、Y65T、G68M、L70V、L71C、L72D、L72N、L72W、L72Y、E75F、E75L、E75Y、G79P、^E79、^T81、^R81、^W81、^Y81、^W82、^Y82、W82G、W82R、K84D、K84H、K84P、K84T、V85L、V85A、^L85、Y86C、D87G、D87M、D87P、I93C、K95T、K96R、E98G、L100A、K102H、I104T、I104S、I104Q、K105D、^K109、E109L、R110D、[R110]、D114E、^D114、K118P、A120R、L121T、W124L、L125C、R126D、A127E、A127L、A129T、A129K、I133E、^C133、^S134、^G134、^R135、G135P、L136K、L136D、L136S、L136H、[E138]、D140R、^D140、^P141、^D142、[E143]+[F144]、^Q143、F144K、[F144]、[F144]+[C145]、C145R、^G145、C145K、C147D、^V148、E148D、^H149、L149R、K150R、L151H、Q152C、K153P、L158S、E166L及^F167。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,其在RuvC-I域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2352包含一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I4、K5、P6、M7、N8、L9、V12、G49、K63、K80、N83、R90、M125及L146,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在特定實施例中,在RuvC -I域中之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:^I4、^S5、^T6、^N6、^R7、^K7、^H8、^S8、V12L、G49W、G49R、S51R、S51K、K62S、K62T、K62E、V65A、K80E、N83G、R90H、R90G、M125S、M125A、L137Y、^P137、[L141]、L141R、L141D、^Q142、^R143、^N143、E144N、^P146、L146F、P147A、K149Q、T150V、^R152、^H153、T155Q、^H155、^R155、^L156、[L156]、^W156、^A157、^F157、A157S、Q158K、[Y159]、T160Y、T160F、^I161、S161P、T163P、^N163、C164K及C164M。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,其在OBD-I域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2342包含一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I4、K5、P6、M7、N8、L9、V12、G49、K63、K80、N83、R90、M125及L146,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在特定實施例中,在OBD-I域中之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:^G3、I3G、I3E、^G4、K4G、K4P、K4S、K4W、K4W、R5P、^P5、^G5、R5S、^S5、R5A、R5P、R5G、R5L、I6A、I6L、^G6、N7Q、N7L、N7S、K8G、K15F、D16W、^F16、^F18、^P27、M28P、M28H、V33T、R34P、M36Y、R41P、L47P、^P48、E52P、^P55、[P55]+[Q56]、Q56S、Q56P、^D56、^T56及Q56P。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,其在OBD-II域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2347包含一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I4、K5、P6、M7、N8、L9、V12、G49、K63、K80、N83、R90、M125及L146,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在特定實施例中,在OBD -I域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:[S2], I3R, I3K, [I3]+[L4], [L4], K11T, ^P24, K37G, R42E, ^S53, ^R58, [K63], M70T, I82T, Q92I, Q92F, Q92V, Q92A, ^A93, K110Q, R115Q, L121T, ^A124, ^R141, ^D143, ^A143, ^W144及^A145。在一些實施例中,本發明提供衍生自CasX 515之CasX變異體,該等變異體在TSL域中之一或多個胺基酸位置處相對於SEQ ID NO: 2349包含一或多個修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:S1、N2、C3、G4、F5、I7、K18、V58、S67、T76、G78、S80、G81、E82、S85、V96及E98,其中該修飾相對於CasX 515產生經改良之特徵。在特定實施例中,OBD-I域中之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:^M1、[N2]、^V2、C3S、^G4、^W4、F5P、^W7、K18G、V58D、^A67、T76E、T76D、T76N、G78D、[S80]、[G81]、^E82、^N82、S85I、V96C、V96T及E98D。應理解,可將一段之相同前述修飾中之任一者之組合類似地引入本發明之CasX變異體中,得到具有經改良之特徵之CasX變異體。舉例而言,在一個實施例中,本發明提供CasX變異體535 (SEQ ID NO: 435),其相對於CasX 515具有G223S之單一突變。在另一實施例中,本發明提供CasX變異體668 (SEQ ID NO: 567),其相對於CasX 515在位置26處插入R且取代G223S。在另一實施例中,本發明提供CasX 672 (SEQ ID NO: 570),其相對於CasX 515具有L169K及G223S之取代。在另一實施例中,本發明提供CasX 676 (SEQ ID NO: 574),其相對於CasX 515具有L169K及G223S之取代且在位置26處插入R。相對於CasX 515具有經改良之特徵之CasX變異體包括表3之變異體。
相對於參考CasX蛋白中之相同特徵或相對於衍生其之CasX變異體在CasX變異蛋白中改良之例示性特徵包括但不限於增加之變異體摺疊、增加之對gRNA的結合親和力、增加之對目標核酸的結合親和力、提高之在編輯及/或結合目標核酸中利用較大範圍PAM序列之能力、經改良之目標DNA展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、增加之對目標核酸的編輯特異性、減少之脫靶編輯或裂解、提高之可有效編輯之真核基因體的百分比、增加之核酸酶的活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切割之目標股負載、增加之DNA之非目標股結合、增加之蛋白質穩定性、增加之蛋白質gRNA (RNP)複合物穩定性及經改良之融合特徵。在特定實施例中,如實例中所描述,此類經改良之特徵可包括但不限於在具有TTC、ATC及CTC PAM序列之目標核酸中改良之裂解活性、增加之目標核酸序列裂解特異性及減少之目標核酸之脫靶裂解。
表6:CasX 515域序列
域 | SEQ ID NO | 胺基酸序列 |
ODB-I | 2342 | QEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGPMKTLLVRVMTPDLRERLENLRKKPENIPQ |
螺旋形I-I | 2343 | PISNTSRANLNKLLTDYTEMKKAILHVYWEEFQKDPVGLMSRVA |
NTSB | 2335 | QPASKKIDQNKLKPEMDEKGNLTTAGFACSQCGQPLFVYKLEQVSEKGKAYTNYFGRCNVAEHEKLILLAQLKPEKDSDEAVTYSLGKFGQ |
螺旋形I-II | 2336 | RALDFYSIHVTKESTHPVKPLAQIAGNRYASGPVGKALSDACMGTIASFLSKYQDIIIEHQKVVKGNQKRLESLRELAGKENLEYPSVTLPPQPHTKEGVDAYNEVIARVRMWVNLNLWQKLKLSRDDAKPLLRLKGFPSF |
螺旋形II | 2351 | PLVERQANEVDWWDMVCNVKKLINEKKEDGKVFWQNLAGYKRQEALRPYLSSEEDRKKGKKFARYQLGDLLLHLEKKHGEDWGKVYDEAWERIDKKVEGLSKHIKLEEERRSEDAQSKAALTDWLRAKASFVIEGLKEADKDEFCRCELKLQKWYGDLRGKPFAIEAE |
OBD-II | 2347 | NSILDISGFSKQYNCAFIWQKDGVKKLNLYLIINYFKGGKLRFKKIKPEAFEANRFYTVINKKSGEIVPMEVNFNFDDPNLIILPLAFGKRQGREFIWNDLLSLETGSLKLANGRVIEKTLYNRRTRQDEPALFVALTFERREVLD |
RuvC-I | 2352 | SSNIKPMNLIGVDRGENIPAVIALTDPEGCPLSRFKDSLGNPTHILRIGESYKEKQRTIQAKKEVEQRRAGGYSRKYASKAKNLADDMVRNTARDLLYYAVTQDAMLIFENLSRGFGRQGKRTFMAERQYTRMEDWLTAKLAYEGLPSKTYLSKTLAQYTSKTC |
TSL | 2349 | SNCGFTITSADYDRVLEKLKKTATGWMTTINGKELKVEGQITYYNRYKRQNVVKDLSVELDRLSEESVNNDISSWTKGRSGEALSLLKKRFSHRPVQEKFVCLNCGFETH |
RuvC-II | 2350 | ADEQAALNIARSWLFLRSQEYKKYQTNKTTGNTDKRAFVETWQSFYRKKLKEVWKPAV |
本文所描述之實施例之CasX變異體能夠與本文所揭示之gRNA形成RNP複合物。在一些實施例中,包含本發明之CasX變異蛋白及gRNA之RNP在20 pM或更少之濃度下能夠以至少80%之效率裂解雙股DNA目標。在一些實施例中,RNP在20 pM或更少之濃度下能夠以至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%之效率裂解雙股DNA目標。在一些實施例中,RNP在50 pM或更少、40 pM或更少、30 pM或更少、20 pM或更少、10 pM或更少或5 pM或更少之濃度下能夠以至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%之效率裂解雙股DNA目標。此等經改良之特徵更詳細地描述於下文中。
g. 蛋白質穩定性
在一些實施例中,本發明提供相對於參考CasX蛋白具有經改良之穩定性之CasX變異蛋白。在一些實施例中,CasX變異蛋白之經改良之穩定性引起蛋白質之較高穩態表現,其改良編輯效率。在一些實施例中,CasX變異蛋白之經改良之穩定性產生較大分率之CasX蛋白,該CasX蛋白在功能構形中保持摺疊且提高編輯效率或改良出於製造目的之純化能力。如本文所用,「功能構形」係指在蛋白質能夠結合gRNA及目標核酸之構形中的CasX蛋白。在其中CasX變異體不攜帶一或多個使得其催化死亡之突變的實施例中,CasX變異體能夠在與具有能夠與目標核酸雜交之靶向序列之gRNA複合時裂解、切割或以其他方式修飾目標核酸。CasX之功能構形係指「裂解勝任型」構形。在一些例示性實施例中,包括其中CasX變異蛋白產生較大分率的以功能構形保持摺疊之CasX蛋白之彼等實施例中,與參考CasX蛋白相比,諸如基因編輯之應用需要較低濃度之CasX變異體。因此,在一些實施例中,具有經改良之穩定性之CasX變異體與一或多種基因編輯情形中之參考CasX相比具有經改良之效率。
在一些實施例中,本發明相對於參考CasX蛋白:gRNA複合物提供具有改良之CasX變異蛋白之穩定性的CasX變異蛋白:gRNA RNP複合物,使得RNP保持呈功能形式。穩定性改良可包括增加之熱穩定性、對蛋白分解降解之抗性、增強之藥物動力學特性、跨越一系列pH條件之穩定性、鹽條件及滲性。在一些實施例中,複合物之經改良之穩定性可導致經改良之編輯效率。在一些實施例中,CasX變異體及gRNA變異體之RNP與SEQ ID NO: 1-3之參考CasX及表1之SEQ ID NO: 4或5之gRNA之RNP相比具有至少2倍、至少3倍或至少4倍更高百分比之裂解勝任型RNP。增加之裂解勝任型RNP之例示性資料提供於實例中。
在一些實施例中,CasX變異蛋白之經改良之穩定性包含CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白之經改良之摺疊動力學。在一些實施例中,相對於參考CasX蛋白,CasX變異蛋白之摺疊動力學改良至少約5倍、至少約10倍、至少約50倍、至少約100倍、至少約500倍、至少約1,000倍、至少約2,000倍、至少約3,000倍、至少約4,000倍、至少約5,000倍或至少約10,000倍改良。在一些實施例中,相對於參考CasX蛋白,CasX變異蛋白之摺疊動力學改良至少約1 kJ/mol、至少約5 kJ/mol、至少約10 kJ/mol、至少約20 kJ/mol、至少約30 kJ/mol、至少約40 kJ/mol、至少約50 kJ/mol、至少約60 kJ/mol、至少約70 kJ/mol、至少約80 kJ/mol、至少約90 kJ/mol、至少約100 kJ/mol、至少約150 kJ/mol、至少約200 kJ/mol、至少約250 kJ/mol、至少約300 kJ/mol、至少約350 kJ/mol、至少約400 kJ/mol、至少約450 kJ/mol或至少約500 kJ/mol。
相對於參考CasX蛋白,可增加CasX變異蛋白之穩定性的例示性胺基酸變化可包括但不限於以下胺基酸變化:增加CasX變異蛋白內之氫鍵數目、增加CasX變異蛋白內之二硫橋鍵數目、增加CasX變異蛋白內之鹽橋數目、增強CasX變異蛋白之部分之間的相互作用、增加CasX變異蛋白之埋入疏水表面積或其任何組合。
h. gRNA之蛋白質親和力
在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體具有經改良之gRNA親和力,使得形成核糖核蛋白複合物。CasX變異蛋白對gRNA之親和力增加可例如導致產生RNP複合物之較低K
d,其在一些情況下可導致更穩定的RNP複合物形成。在一些實施例中,當遞送至人類細胞時,CasX變異蛋白對gRNA之親和力增加導致RNP複合物之穩定性增加。此增加之穩定性可影響複合物在個體之細胞中之功能及效用,以及在遞送至個體時引起血液中之改良之藥物動力學特性。在一些實施例中,CasX變異蛋白增加之親和力,及RNP複合物增加之所得穩定性允許向個體或細胞遞送較低劑量之CasX變異蛋白,同時仍具有所需活性,例如活體內或活體外基因編輯。
在一些實施例中,當CasX變異蛋白及gRNA均保持於RNP複合物中時,CasX變異蛋白對gRNA之較高親和力(更緊密結合)允許編輯事件之量更大。增加之編輯事件可使用本文所描述之編輯分析評定。
在一些實施例中,gRNA之CasX變異蛋白之K
d相對於參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體增加至少約1.1、至少約1.2、至少約1.3、至少約1.4、至少約1.5、至少約1.6、至少約1.7、至少約1.8、至少約1.9、至少約2、至少約3、至少約4、至少約5、至少約6、至少約7、至少約8、至少約9、至少約10、至少約15、至少約20、至少約25、至少約30、至少約35、至少約40、至少約45、至少約50、至少約60、至少約70、至少約80、至少約90或至少約100之因子。在一些實施例中,CasX變異體與SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白相比具有增加約1.1至約10倍之gRNA之結合親和力。
不希望受理論束縛,在一些實施例中,螺旋形I域中之胺基酸變化可增加CasX變異蛋白與gRNA靶向序列之結合親和力,而螺旋形II域中之變化可增加CasX變異蛋白與gRNA支架莖環之結合親和力,且寡核苷酸結合域(OBD)中之變化增加CasX變異蛋白與gRNA三聯體之結合親和力。
量測CasX蛋白對gRNA之結合親和力之方法包括使用純化CasX蛋白及gRNA之活體外方法。若gRNA或CasX蛋白係用螢光團標記,則可藉由螢光偏振量測對參考CasX及變異蛋白之結合親和力。或者或另外,結合親和力可藉由生物層干涉量測法、電泳遷移率變動分析(EMSA)或過濾結合量測。定量RNA結合蛋白,諸如本發明之參考CasX及變異蛋白對特定gRNA,諸如參考gRNA及其變異體之絕對親和力的額外標準技術包括但不限於等溫量熱法(ITC)及表面電漿子共振(SPR),以及實例之方法。
i. 對目標核酸之親和力
在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白或相對於衍生其之另一CasX變異體對目標核酸之結合親和力具有增加之對目標核酸之結合親和力。在一些實施例中,對其目標核酸具有較高親和力之CasX變異體比對目標核酸不具有增加之親和力之參考CasX蛋白更快速地裂解目標核酸序列。
在一些實施例中,對目標核酸改良之親和力包含對目標核酸之目標序列或前間隔序列改良之親和力、對PAM序列改良之親和力、改良之搜尋DNA之目標序列的能力,或其任何組合。不希望受理論束縛,認為CRISPR/Cas系統蛋白,諸如CasX可藉由沿DNA分子之一維擴散發現其目標序列。認為該方法包括(1)核糖核蛋白與DNA分子之結合,接著(2)在目標序列處停止,在一些實施例中,其中任一者可受目標核酸序列之CasX蛋白之親和力改良影響,藉此與參考CasX蛋白相比改良CasX變異蛋白之功能。
在一些實施例中,具有經改良之目標核酸親和力之CasX變異蛋白具有增加之對除由SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白識別之典型TTC PAM之外的特定PAM序列之親和力或利用該等特定PAM序列之能力,包括選自由以下組成之群的PAM序列:TTC、ATC、GTC及CTC,藉此與野生型CasX核酸酶或CasX 199或491相比增加可編輯之目標核酸的量。不希望受理論束縛,此等蛋白質變異體可與DNA整體更強地相互作用且可具有增加之進入及編輯目標核酸內之序列的能力,因為能夠利用超出CasX 199或491之野生型參考CasX或核酸酶之彼等序列的額外PAM序列,藉此允許目標序列之CasX蛋白之更有效的搜索方法。在一些實施例中,較高的DNA總親和力亦可提高CasX蛋白可有效開始及結束結合及展開步驟之頻率,藉此促進目標股侵入及R環形成,且最終促進目標核酸序列裂解。
不希望受理論束縛,NTSB域中增加展開或捕捉呈未展開狀態之非目標核酸股之效率的胺基酸變化可能會增加CasX變異蛋白對目標核酸之親和力。或者或另外,提高NTSB域在展開期間使DNA穩定之能力的NTSB域之胺基酸變化可增加CasX變異蛋白對目標核酸之親和力。或者或另外,OBD中之胺基酸變化可增加CasX變異蛋白結合至前間隔子相鄰模體(PAM)之親和力,藉此增加CasX變異蛋白對目標核酸之親和力。或者或另外,螺旋形I及/或II、RuvC及TSL域中增加CasX變異蛋白對目標核酸股之親和力的胺基酸變化可增加CasX變異蛋白對目標核酸之親和力。
在一些實施例中,本發明之CasX變異蛋白對目標核酸分子之結合親和力相對於參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體增加至少約1.1、至少約1.2、至少約1.3、至少約1.4、至少約1.5、至少約1.6、至少約1.7、至少約1.8、至少約1.9、至少約2、至少約3、至少約4、至少約5、至少約6、至少約7、至少約8、至少約9、至少約10、至少約15、至少約20、至少約25、至少約30、至少約35、至少約40、至少約45、至少約50、至少約60、至少約70、至少約80、至少約90或至少約100之因子。在一些實施例中,CasX變異蛋白對目標核酸之結合親和力與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白或與CasX 491及515變異體相比增加約1.1至約100倍。
在一些實施例中,CasX變異蛋白對目標核酸之非目標股之結合親和力增加。如本文所用,術語「非目標股」係指DNA目標核酸序列之股,其不與gRNA中之靶向序列形成沃森及克里克鹼基對,且與目標核酸股互補。在一些實施例中,CasX變異蛋白對目標核酸之非目標股之結合親和力與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白或SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之CasX變異體相比增加約1.1至約100倍。
量測CasX蛋白(諸如參考或變異體)對目標及/或非目標核酸分子之親和力之方法可包括電泳遷移率變動分析(EMSA)、過濾結合、等溫量熱法(ITC)及表面電漿子共振(SPR)、螢光偏振及生物層干涉量測術(BLI)。量測CasX蛋白對目標之親和力之其他方法包括量測隨時間推移之DNA裂解事件的活體外生物化學分析。
j. 目標位點之經改良之特異性
在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體具有經改良之目標核酸序列特異性。如本文所用,「特異性」,有時稱為「目標特異性」係指CRISPR/Cas系統核糖核蛋白複合物裂解與目標核酸序列類似但不一致的脫目標序列的程度;例如具有較高特異性程度之CasX變異體RNP將展現序列相對於參考CasX蛋白之減少的脫靶裂解。CRISPR/Cas系統蛋白質之特異性及潛在有害之脫靶效應之減少可為極其重要的,以便達成用於哺乳動物個體之可接受治療指數。
在一些實施例中,CasX變異蛋白對與gRNA之靶向序列互補之目標序列內之目標位點的特異性改良。如上文所描述,與經改良之特異性相關的係減少之脫靶編輯。在一些實施例中,CasX變異蛋白展現目標序列內與作為RNP之CasX變異體複合之gRNA之靶向序列100%互補的目標位點的減少之脫靶編輯或裂解。不希望受理論束縛,可能的係螺旋形I及II域中增加CasX變異蛋白對目標核酸股之特異性的胺基酸變化可增加CasX變異蛋白對目標核酸之總體特異性。在一些實施例中,增加CasX變異蛋白對目標核酸之特異性之胺基酸變化亦可引起CasX變異蛋白對DNA之親和力降低。
測試CasX蛋白(諸如變異體或參考)目標特異性之方法可包括導引及環化以藉由定序活體外報導裂解效應(CIRCLE-seq),或類似方法。簡言之,在CIRCLE-seq技術中,基因體DNA經剪切且藉由連接莖-環銜接子而環化,該等銜接子在莖-環區域中帶切口以暴露4個核苷酸回文突出物。此隨後為剩餘線性DNA之分子內接合及降解。含有CasX裂解位點之環狀DNA分子隨後用CasX線性化,且將銜接子連接至暴露端,隨後進行高通量定序以產生含有關於脫目標位點之資訊的配對末端讀數。可用於偵測脫靶事件,且因此偵測CasX蛋白質特異性之額外分析包括用於偵測及定量彼等所選脫目標位點處形成之插入缺失(插入及缺失)的分析,諸如失配偵測核酸酶分析及次世代定序(NGS)。例示性失配偵測分析包括核酸酶分析,其中來自用CasX及sgRNA處理之細胞的基因體DNA經PCR擴增、變性及再雜交以形成雜雙螺旋DNA,其含有一個野生型股及一個具有插入缺失之股。藉由失配檢測核酸酶(諸如Surveyor核酸酶或T7核酸內切酶I)識別及裂解失配。評估CasX變異體之特異性的方法以及支援表明CasX變異體之實施例的經改良之特異性的資料描述於實例中。
k. 前間隔子及PAM序列
本文中,前間隔子定義為與導引RNA之靶向序列互補之DNA序列,且與該序列互補之DNA分別稱為目標股及非目標股。如本文所用,PAM為靠近原間隔子的核苷酸序列,該核苷酸序列結合gRNA之靶向序列幫助原間隔股之潛在裂解的CasX的取向及定位。
PAM序列可簡併,且特定RNP構築體可具有支援不同裂解效率之不同較佳及容許之PAM序列。除非另外說明,否則根據慣例,本發明係指PAM及原間隔序列兩者以及其根據非目標股之定向的方向性。此不意味著非目標股,而非目標股之PAM序列決定裂解或在機制上涉及目標識別。舉例而言,當參考TTC PAM時,其實際上可為目標裂解所需之互補GAA序列,或其可為來自兩股之核苷酸的某一組合。在本文中所揭示之CasX蛋白的情況下,PAM位於原間隔子之5',其中單核苷酸自原間隔子之第一個核苷酸分離PAM。因此,在參考CasX之情況下,TTC PAM應理解為意謂遵循式5'-…NNTTCN(前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 19)之序列,其中『N』為任一DNA核苷酸且『(前間隔子)』為與導引RNA之靶向序列具有一致性之DNA序列。在具有擴展之PAM識別之CasX變異體的情況下,TTC、CTC、GTC或ATC PAM應理解為意謂遵循該式之序列:5'-…NNTTCN (前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 19);5'-…NNCTCN (前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 20);5'-…NNGTCN(前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 21);或5'-…NNATCN (前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 22)。或者,TC PAM應理解為意謂遵循以下式之序列:5'-…NNNTCN (前間隔子)NNNNNN…3' (SEQ ID NO: 23)。
另外,當與作為RNP之gRNA複合時,與參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP或衍生其之另一CasX變異體(諸如CasX 491及gRNA 174)相比,利用PAM TC模體,包括選自TTC、ATC、GTC或CTC之PAM序列(呈5'至3'定向),本發明之CasX變異蛋白具有增強之有效編輯及/或結合目標核酸的能力。在前述內容中,與在可比較的分析系統中包含參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP之編輯效率及/或結合相比,在分析系統中PAM序列位於具有與gRNA之靶向序列之一致性的原間隔子之非目標股的至少1個核苷酸5'處。在一個實施例中,CasX變異體及gRNA變異體之RNP在可比較的分析系統中與包含參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP (或衍生其之另一CasX變異體(諸如CasX 491及gRNA 174)之RNP)相比展現目標核酸中之更大編輯效率及/或目標序列之結合,其中目標DNA之PAM序列為TTC。在另一實施例中,CasX變異體及gRNA變異體之RNP在可比較的分析系統中與包含參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP (或衍生其之另一CasX變異體(諸如CasX 491及gRNA 174)之RNP)相比展現目標核酸中之更大編輯效率及/或目標序列之結合,其中目標DNA之PAM序列為ATC。在前述之特定實施例中,其中CasX變異體展現用ATC PAM增強之編輯,CasX變異體為528 (SEQ ID NO: 428)。在另一實施例中,CasX變異體及gRNA變異體之RNP在可比較的分析系統中與包含參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP (或衍生其之另一CasX變異體(諸如CasX 491及gRNA 174)之RNP)相比展現目標核酸中之更大編輯效率及/或目標序列之結合,其中目標DNA之PAM序列為CTC。在另一實施例中,CasX變異體及gRNA變異體之RNP在可比較的分析系統中與包含參考CasX蛋白及參考gRNA之RNP (或衍生其之另一CasX變異體及gRNA 174之RNP)相比展現目標核酸中之更大編輯效率及/或目標序列之結合,其中目標DNA之PAM序列為GTC。在前述實施例中,一或多個PAM序列之提高之編輯效率及/或結合親和力與SEQ ID NO: 1-3之CasX蛋白中之任一者及表1之gRNA之RNP的編輯效率及/或結合親和力相比大至少1.5倍、至少2倍、至少4倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或至少40倍。顯示經改良之編輯的例示性分析描述於本文實例中(參見例如圖41)。在一些實施例中,CasX蛋白可結合及/或修飾(例如裂解、切割、甲基化、去甲基化等)目標核酸及/或與目標核酸相關之多肽(例如組蛋白尾部之甲基化或乙醯化)。在一些實施例中,CasX蛋白為催化死亡的(dCasX),但保留結合目標核酸之能力。
l. DNA之展開
在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白具有經改良之展開DNA之能力。較差dsDNA展開已展示先前削弱或防止CRISPR/Cas系統蛋白AnaCas9或Cas14裂解DNA之能力。因此,不希望受任何理論束縛,可能藉由本發明之一些CasX變異蛋白增加DNA裂解活性至少部分歸因於增加在目標位點發現及展開dsDNA之能力。量測CasX蛋白(諸如變異體或參考)展開DNA之能力之方法包括但不限於觀測螢光偏振或生物層干涉量測術中dsDNA目標增加之速率的活體外分析。
不希望受理論束縛,認為NTSB域之胺基酸變化可產生具有增加之DNA展開特徵之CasX變異蛋白。或者或另外,與PAM相互作用之OBD或螺旋形域區域中之胺基酸變化亦可產生具有增加之DNA展開特徵的CasX變異蛋白。
量測CasX蛋白(諸如變異體或參考)展開DNA之能力之方法包括但不限於觀測螢光偏振或生物層干涉量測術中dsDNA目標增加之速率的活體外分析。
m. 催化活性
本文所揭示之CasX:gRNA系統之核糖核蛋白複合物包含CasX變異體與結合至目標核酸且在一些情況下裂解目標核酸之gRNA變異體複合。在一些實施例中,CasX變異蛋白相對於參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體具有經改良之催化活性。不希望受理論束縛,認為在一些情況下,目標股之裂解可為產生dsDNA斷裂之Cas12樣分子之限制因素。在一些實施例中,CasX變異蛋白改良DNA之目標股之彎曲及此股之裂解,從而藉由CasX核糖核蛋白複合物裂解改良dsDNA之總效率。
在一些實施例中,CasX變異蛋白與參考CasX蛋白或衍生其之另一CasX變異體相比具有經增加之核酸酶活性。具有增加之核酸酶活性的變異體可例如經由RuvC核酸酶域中之胺基酸變化產生。在一些實施例中,CasX變異體包含具有切口酶活性之RuvC核酸酶域。在前述內容中,CasX:gRNA系統之CasX切口酶在非目標股中之PAM位點之10-18個核苷酸3'內產生單股斷裂。在其他實施例中,CasX變異體包含具有雙股裂解活性之RuvC核酸酶域。在前述內容中,CasX:gRNA系統之CasX在目標股上之18-26個核苷酸5'及非目標股上之10-18個核苷酸3'內產生雙股斷裂。可藉由多種方法,包括實例之彼等方法分析核酸酶活性。在一些實施例中,與參考CasX相比,CasX變異體之K
裂解常數大至少2倍,或至少3倍,或至少4倍,或至少5倍,或至少6倍,或至少7倍,或至少8倍,或至少9倍,或至少10倍。
在一些實施例中,如實例中所描述,CasX變異蛋白與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及gRNA之RNP相比具有形成具有gRNA之RNP的經改良之特徵,其產生較高百分比之裂解勝任型RNP。藉由裂解勝任型,意謂所形成之RNP具有裂解目標核酸之能力。在一些實施例中,CasX變異體及gRNA之RNP與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及表2之gRNA之RNP相比展現至少2倍、或至少3倍、或至少4倍、或至少5倍、或至少10倍裂解速率。在前述實施例中,經改良之勝任率可在活體外分析中證實,諸如實例中所描述。
在一些實施例中,與參考CasX相比,CasX變異蛋白增加用於雙股裂解之目標股負載。具有增加之目標股負載活性之變異體可例如經由TLS域中之胺基酸變化來產生。不希望受理論束縛,TSL域中之胺基酸變化可產生具有經改良之催化活性之CasX變異蛋白。或者或另外,RNA:DNA雙螺旋體之結合通道周圍之胺基酸變化亦可增加CasX變異蛋白之催化活性。
在一些實施例中,CasX變異蛋白與參考CasX蛋白相比具有增加之附帶裂解活性。如本文所用,「附帶裂解活性」係指在識別及裂解目標核酸之後,核酸之額外非靶向裂解。在一些實施例中,CasX變異蛋白與參考CasX蛋白相比具有降低之附帶裂解活性。
用於表徵CasX蛋白之催化活性之例示性方法可包括但不限於活體外裂解分析,包括以下實例之彼等。在一些實施例中,DNA產物於瓊脂糖凝膠上之電泳可查詢股裂解之動力學。
n. 針對目標RNA之親和力
在一些實施例中,包含參考CasX蛋白或其變異體之核糖核蛋白複合物結合於目標RNA且裂解目標核酸。在一些實施例中,當與參考CasX蛋白相比時,參考CasX蛋白之變異體增加CasX變異蛋白對目標RNA之特異性,且增加CasX變異蛋白對於目標RNA之活性。舉例而言,當與參考CasX蛋白相比時,CasX變異蛋白可顯示增加之對目標RNA之結合親和力,或增加之目標RNA裂解。在一些實施例中,包含CasX變異蛋白之核糖核蛋白複合物結合於目標RNA及/或裂解目標RNA。在一些實施例中,與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白或SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之CasX變異體相比,CasX變異體對目標核酸之結合親和力增加至少約兩倍至約10倍。
o. 催化死亡CasX變異體
在一些實施例中,例如涵蓋如下應用之彼等實施例,其中目標核酸序列之裂解並非所需結果,改良CasX變異蛋白之催化活性包含改變、降低或消除CasX變異蛋白之催化活性。在一些實施例中,本發明提供催化死亡之CasX變異蛋白,當與具有與目標核酸互補之靶向序列之gRNA複合時,其能夠結合目標核酸,不能夠裂解目標核酸。例示性催化死亡之CasX蛋白在CasX蛋白之RuvC域之活性位點中包含一或多種突變。在一些實施例中,催化死亡之CasX變異蛋白相對於SEQ ID NO: 1在殘基672、769及/或935處包含取代。在一個實施例中,催化死亡之CasX變異蛋白相對於SEQ ID NO: 1之參考CasX蛋白包含D672A、E769A及/或D935A之取代。在其他實施例中,催化死亡之CasX變異蛋白相對於SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白在胺基酸659、756及/或922處包含取代。在一些實施例中,催化死亡之CasX變異蛋白相對於SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白包含D659A、E756A及/或D922A之取代。在一些實施例中,催化死亡之CasX變異體527、668及676蛋白質包含消除核酸內切酶活性之D660A、E757A及D922A修飾。在其他實施例中,催化死亡之CasX蛋白包含CasX蛋白之全部或一部分RuvC域之缺失。應瞭解,相同的前述取代可類似地引入至本發明之CasX變異體中,產生催化死亡之CasX (dCasX)變異體。在一個實施例中,RuvC域之全部或一部分自CasX變異體缺失,得到dCasX變異體。在一些實施例中,催化無活性dCasX變異蛋白可用於鹼基編輯或表觀遺傳修飾。在一些實施例中,在對DNA具有較高親和力之情況下,催化無活性dCasX變異蛋白相對於催化活性CasX可更快地發現其目標核酸在較長時段內保持結合於目標核酸,以更穩定方式結合目標核酸或其組合,藉此與保留其裂解能力之CasX變異體相比,改良催化死亡之CasX變異蛋白之此等功能。例示性dCasX變異體序列揭示為如表7中所闡述之SEQ ID NO: 44-62及1232-1235。在一些實施例中,dCasX變異體與SEQ ID NO: 44-62或1232-1235之序列至少80%一致、至少85%一致、至少90%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致或至少99%一致且保留dCasX變異蛋白之功能特性。在一些實施例中,dCasX變異體包含SEQ ID NO: 44-62或1232-1235之序列。
表 7 : 催化死亡之 CasX 變異蛋白
p. CasX融合蛋白
構築體 | SEQ ID NO |
CAS100 | 44 |
CAS098 | 45 |
CAS085 | 46 |
CAS087 | 47 |
CAS086 | 48 |
CAS083 | 49 |
CAS082 | 50 |
CAS069 | 51 |
CAS068 | 52 |
CAS070 | 53 |
CAS071 | 54 |
CAS072 | 55 |
CAS073 | 56 |
CAS074 | 57 |
CAS075 | 58 |
CAS076 | 59 |
CAS077 | 60 |
CAS078 | 61 |
CAS081 | 62 |
CAS096 | 1232 |
CAS401 | 1233 |
CAS142 (dCasX527) | 1234 |
CAS402 (dCasX676) | 1235 |
在一些實施例中,本發明提供包含與CasX融合之異源蛋白之CasX變異蛋白,包括本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體。此包括包含CasX與異源蛋白或其域之N端、C端或內部融合的CasX變異體。
在一些實施例中,CasX融合蛋白包含變異體SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者或表3之序列,其融合至具有不同感興趣之活性之一或多種蛋白質或其域,從而產生融合蛋白。在一些實施例中,CasX融合蛋白包含變異體SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,其融合至具有不同感興趣之活性之一或多種蛋白質或其域。在一些實施例中,CasX融合蛋白包含變異體SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,其融合至具有不同感興趣之活性之一或多種蛋白質或其域。舉例而言,在一些實施例中,CasX變異蛋白與抑制轉錄、修飾目標核酸或修飾與核酸相關之多肽(例如組蛋白修飾)的蛋白質(或其域)融合。
在一些實施例中,異源多肽(或異源胺基酸,諸如半胱胺酸殘基或非天然胺基酸)可插入CasX蛋白內之一或多個位置以產生CasX融合蛋白。在其他實施例中,半胱胺酸殘基可插入CasX蛋白內之一或多個位置,接著接合下文所描述之異源多肽。在一些替代實施例中,異源多肽或異源胺基酸可在參考或CasX變異蛋白之N端或C端處添加。在其他實施例中,異源多肽或異源胺基酸可內部插入於CasX蛋白之序列內。
在一些實施例中,CasX變異融合蛋白保留RNA導引序列特異性目標核酸結合及裂解活性。在一些情況下,CasX變異融合蛋白具有(保留) 50%或更多之不插入異源蛋白之對應CasX變異蛋白之活性(例如裂解及/或結合活性)。在一些情況下,CasX變異融合蛋白保留不插入異源蛋白之對應CasX蛋白之活性(例如裂解及/或結合活性)的至少約60%、或至少約70%、至少約80%、或至少約90%、或至少約92%、或至少約95%、或至少約98%、或約100%。
在一些情況下,相對於不具有插入之異源胺基酸或異源多肽之CasX蛋白之活性,參考CasX或CasX變異融合蛋白保留(具有)目標核酸結合活性。在一些情況下,參考CasX或CasX變異融合蛋白保留不具有異源蛋白插入之對應CasX蛋白之結合活性的至少約60%、或至少約70%、至少約80%、或至少約90%、或至少約92%、或至少約95%、或至少約98%、或約100%。
在一些情況下,相對於不具有插入之異源胺基酸或異源多肽之CasX蛋白之活性,CasX變異融合蛋白保留(具有)目標核酸結合及/或裂解活性。舉例而言,在一些情況下,CasX變異融合蛋白具有(保留)對應親本CasX蛋白(不具有插入之CasX蛋白)之結合及/或裂解活性的50%或更大。舉例而言,在一些情況下,CasX變異融合蛋白具有(保留)對應CasX親本蛋白(不具有插入之CasX蛋白)之結合及/或裂解活性的60%或更大(70%或更大、80%或更大、90%或更大、92%或更大、95%或更大、98%或更大、或100%)。量測CasX蛋白及/或CasX融合蛋白之裂解及/或結合活性的方法將為一般熟習此項技術者已知,且可使用任何便利方法。
多種異源多肽適合包括於本發明CasX變異融合蛋白中。在一些情況下,融合搭配物可調節目標核酸之轉錄(例如抑制轉錄、增加轉錄)。舉例而言,在一些情況下,融合搭配物為抑制轉錄之蛋白質(或來自蛋白質之域)(例如轉錄抑制因子,一種經由募集轉錄抑制劑蛋白、修飾目標核酸(諸如甲基化)、募集DNA修飾劑、調節與目標核酸相關之組蛋白、募集組蛋白修飾劑(諸如修飾組蛋白之乙醯化及/或甲基化之彼等)及其類似者起作用之蛋白質)。在一些情況下,融合搭配物為增加轉錄之蛋白質(或來自蛋白質之域)(例如轉錄活化子,一種經由募集轉錄活化子蛋白、修飾目標核酸(諸如去甲基化)、募集DNA修飾劑、調節與目標核酸相關之組蛋白、募集組蛋白修飾劑(諸如修飾組蛋白之乙醯化及/或甲基化之彼等)及其類似者起作用之蛋白質)。
在一些情況下,融合搭配物具有酶活性,其修飾目標核酸序列;例如核酸酶活性、甲基轉移酶活性、去甲基酶活性、DNA修復活性、DNA損傷活性、去胺活性、岐化酶活性、烷基化活性、去嘌呤活性、氧化活性、嘧啶二聚體形成活性、整合酶活性、轉座酶活性、重組酶活性、聚合酶活性、連接酶活性、解旋酶活性、光裂合酶活性或醣苷酶活性。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者及具有甲基轉移酶活性、去甲基酶活性、乙醯基轉移酶活性、去乙醯酶活性、激酶活性、磷酸酶活性、泛素連接酶活性、去泛素化活性、腺苷酸化活性、去腺苷酸化活性、SUMO化活性、去SUMO化活性、核糖基化活性、去核糖基化活性、豆蔻醯化活性或去豆蔻醯化活性之多肽。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者及如上文所描述之多肽。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者及如上文所描述之多肽。
可用作融合搭配物以提高轉錄之蛋白質(或其片段)之實例包括但不限於:轉錄活化子,諸如VP16、VP64、VP48、VP160、p65子域(例如來自NFkB)及EDLL及/或TAL活化域(例如植物活性)之活化域;組蛋白離胺酸甲基轉移酶,諸如SET1A、SET1B、MLL1至5、ASH1、SYMD2、NSD1及其類似物;組蛋白離胺酸去甲基酶,諸如JHDM2a/b、UTX、JMJD3及其類似物;組蛋白乙醯基轉移酶,諸如GCN5、PCAF、CBP、p300、TAF1、TIP60/PLIP、MOZ/MYST3、MORF/MYST4、SRC1、ACTR、P160、CLOCK及其類似物;以及DNA去甲基酶,諸如十-十一易位(TET)二氧酶1 (TET1CD)、TET1、DME、DML1、DML2、ROS1及其類似物。
可用作融合搭配物以減少轉譯之蛋白質(或其片段)之實例包括但不限於:轉錄抑制因子,諸如Kruppel相關盒(KRAB或SKD);KOX1抑制域:Mad mSIN3相互作用域(SID);ERF抑制因子域(ERD)、SRDX抑制域(例如用於抑制植物)及其類似物;組蛋白離胺酸甲基轉移酶,諸如Pr-SET7/8、SUV4-20H1、RIZ1及其類似物;組蛋白離胺酸去甲基酶,諸如JMJD2A/JHDM3A、JMJD2B、JMJD2C/GASC1、JMJD2D、JARID1A/RBP2、JARID1B/PLU-1、JARID 1C/SMCX、JARID1D/SMCY及其類似物;組蛋白離胺酸去乙醯酶,諸如HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC8、HDAC4、HDAC5、HDAC7、HDAC9、SIRT1、SIRT2、HDAC11及其類似物;DNA甲基化酶,諸如HhaI DNA m5c-甲基轉移酶(M.HhaI)、DNA甲基轉移酶1 (DNMT1)、DNA甲基轉移酶3a (DNMT3a)、DNA甲基轉移酶3b (DNMT3b)、METI、DRM3 (植物)、ZMET2、CMT1、CMT2(植物)及其類似物;以及周邊補充元件,諸如核片層蛋白A、核片層蛋白B及其類似物。
在一些情況下,CasX變異體之融合搭配物具有修飾目標核酸(例如ssRNA、dsRNA、ssDNA、dsDNA)之酶活性。可藉由融合搭配物提供之酶活性之實例包括但不限於:諸如由限制酶(例如FokI核酸酶)提供之核酸酶活性;諸如由甲基轉移酶(例如Hhal DNA m5c-甲基轉移酶(M.Hhal)、DNA甲基轉移酶1 (DNMT1)、DNA甲基轉移酶3a (DNMT3a)、DNA甲基轉移酶3b (DNMT3b)、METI、DRM3 (植物)、ZMET2、CMT1、CMT2 (植物)及其類似物)提供之甲基轉移酶活性;諸如由去甲基酶(例如十-十一易位(TET)二氧酶1 (TET 1 CD)、TET1、DME、DML1、DML2、ROS1及其類似物)提供之去甲基酶活性;DNA修復活性;DNA損傷活性;諸如由去胺酶(例如胞嘧啶去胺酶,例如APOBEC蛋白,諸如大鼠脂蛋白元B mRNA編輯酶、催化多肽1 {APOBEC1})提供之去胺活性;岐化酶活性;烷基化活性;去嘌呤活性;氧化活性;嘧啶二聚體形成活性;諸如由整合酶及/或解離酶提供之整合酶活性(例如Gin轉化酶,諸如Gin轉化酶之高度活化突變、GinH106Y;人類免疫缺乏病毒1型整合酶(IN);Tn3解離酶;及其類似物);轉座酶活性;諸如由重組酶(例如Gin重組酶之催化域)提供之重組酶活性;聚合酶活性;連接酶活性;解旋酶活性;光裂合酶活性及醣苷酶活性)。
在一些情況下,本發明之CasX變異蛋白與選自以下之多肽融合:增加轉錄之域(例如VP16域、VP64域)、減少轉錄之域(例如KRAB域,例如來自Kox1蛋白)、組蛋白乙醯基轉移酶(例如組蛋白乙醯基轉移酶p300)之核心催化域、提供可偵測信號之蛋白質/域(例如螢光蛋白,諸如GFP)、核酸酶域(例如Fokl核酸酶)及鹼基編輯劑(例如諸如APOBEC1之胞嘧啶核苷去胺酶)。
在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,或表3之序列,其與選自由以下組成之群的多肽融合:用於減少轉錄之域、具有酶活性之域、組蛋白乙醯基轉移酶之核心催化域、提供可偵測信號之蛋白質/域、核酸酶域及鹼基編輯劑。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,其與選自由以下組成之群的多肽融合:用於減少轉錄之域、具有酶活性之域、組蛋白乙醯基轉移酶之核心催化域、提供可偵測信號之蛋白質/域、核酸酶域及鹼基編輯劑。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,其與上文所描述之多肽融合。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,其與上文所描述之多肽融合。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 760-789中之任一者,其與選自由以下組成之群的多肽融合:用於減少轉錄之域、具有酶活性之域、組蛋白乙醯基轉移酶之核心催化域、提供可偵測信號之蛋白質/域、核酸酶域及鹼基編輯劑。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 411-592中之任一者,其與選自由以下組成之群的多肽融合:用於減少轉錄之域、具有酶活性之域、組蛋白乙醯基轉移酶之核心催化域、提供可偵測信號之蛋白質/域、核酸酶域及鹼基編輯劑。
在一些情況下,本發明之參考CasX蛋白或CasX變異體與鹼基編輯劑融合。鹼基編輯劑包括可改變核苷或核苷酸上之鳥嘌呤、腺嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶鹼基之彼等。鹼基編輯劑包括但不限於腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶(例如APOBEC1)及鳥嘌呤氧化酶。因此,本文提供之CasX變異體中之任一者可包含鹼基編輯劑(亦即,與其融合);舉例而言,本發明之CasX變異體可與腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶融合。在例示性實施例中,包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者之本發明之CasX變異體融合至腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。在其他例示性實施例中,包含SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者之本發明之CasX變異體融合至腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。在其他例示性實施例中,包含SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者之本發明之CasX變異體融合至腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。
在一些情況下,CasX變異體之融合搭配物具有酶活性,該酶活性修飾與目標核酸(例如ssRNA、dsRNA、ssDNA、dsDNA)相關之蛋白質(例如組蛋白、RNA結合蛋白、DNA結合蛋白及其類似物)。可由與CasX變異體之融合搭配物提供之酶活性(修飾與目標核酸相關之蛋白質)之實例包括但不限於:甲基轉移酶活性,諸如由組蛋白甲基轉移酶(HMT) (例如雜色(variegation) 3-9同源物1之抑制劑(SUV39H1,亦稱為KMT1A)、真染色質組蛋白離胺酸甲基轉移酶2 (G9A,亦稱為KMT1C及EHMT2)、SUV39H2、ESET/SETDB 1及其類似物、SET1A、SET1B、MLL1至5、ASH1、SMYD2、NSD1、DOT1樣組蛋白離胺酸甲基轉移酶(DOT1L)、Pr-SET7/8、離胺酸甲基轉移酶5B (SUV4-20H1)、zeste 2多蜂房蛋白抑制複合物2次單位之強化子(EZH2)、PR/SET域2 (RIZ1)提供;去甲基酶活性,諸如由組蛋白去甲基酶(例如離胺酸去甲基酶1A (KDM1A,亦稱為LSD1)、JHDM2a/b、JMJD2A/JHDM3A、JMJD2B、JMJD2C/GASC1、JMJD2D、JARID1A/RBP2、JARID1B/PLU-1、JARID1C/SMCX、JARID1D/SMCY、UTX、JMJD3及其類似物)提供;乙醯基轉移酶活性,諸如由組蛋白乙醯酶轉移酶(例如人類乙醯基轉移酶p300、GCN5、PCAF、CBP、TAF1、TIP60/PLIP、MOZ/MYST3、MORF/MYST4、HB01/MYST2、HMOF/MYST1、SRC1、ACTR、P160、CLOCK及其類似物之催化核心/片段)提供;去乙醯基酶活性,諸如由組蛋白去乙醯基酶(例如HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC8、HDAC4、HDAC5、HDAC7、HDAC9、SIRT1、SIRT2、HDAC11及其類似物)提供;激酶活性、磷酸酶活性、泛素連接酶活性、去泛素化活性、腺苷酸化活性、去腺苷酸化活性、SUMO化活性、去SUMO化活性、核糖基化活性、去核糖基化活性、豆蔻醯化活性及去豆蔻醯化活性。
適合於CasX變異體之融合搭配物之額外實例為(i)二氫葉酸還原酶(DHFR)去穩定域(例如,以產生可化學控制的個體RNA導引多肽)及(ii)葉綠體輸送肽。
在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者或表3之序列,以及葉綠體輸送肽,包括但不限於:MASMISSSAVTTVSRASRGQSAAMAPFGGLKSMT GFPVRKVNTDITSITSNGGR VKCMQVWPPIGKKKFETLSYLPPLTRDSRA (SEQ ID NO: 338);MASMISSSAVTTVSRASRGQSAAMAPFGGLKS MTGFPVRKVNTDITSITSNGGRVKS (SEQ ID NO: 339);MASSMLSSATMVASPAQATMVAPFNGLKSSAAFPATRKANNDITSITSNGGRVNCMQV WPPIEKKKFETLSYLPDLTDSGGRVNC (SEQ ID NO: 340);MAQVSRICNGVQNPSLISNLSKSSQRKSPLSVSLKTQQHPRAYPISSSWGLKKSGMTLIG SELRPLKVMSSVSTAC (SEQ ID NO: 341);MAQVSRICNGVWNPSLISNLSKSSQRKSPLSVSLKTQQHPRAYPISSSWGLKKSGMTLIG SELRPLKVMSSVSTAC (SEQ ID NO: 342);MAQINNMAQGIQTLNPNSNFHKPQVPKSSSFLVFGSKKLKNSANSMLVLKKDSIFMQLF CSFRISASVATAC (SEQ ID NO: 343);MAALVTSQLATSGTVLSVTDRFRRPGFQGLRPRNPADAALGMRTVGASAAPKQSRKPH RFDRRCLSMVV (SEQ ID NO: 344);MAALTTSQLATSATGFGIADRSAPSSLLRHGFQGLKPRSPAGGDATSLSVTTSARATPKQ QRSVQRGSRRFPSVVVC (SEQ ID NO: 345);MASSVLSSAAVATRSNVAQANMVAPFTGLKSAASFPVSRKQNLDITSIASNGGRVQC (SEQ ID NO: 346);MESLAATSVFAPSRVAVPAARALVRAG TVVPTRRTSSTSGTSGVKCSAAVTPQASPVIS RSAAAA (SEQ ID NO: 347);及MGAAATSMQSLKFSNRLVPPSRRLSPVPNNVTCNN LPKSAAPVRTVKCCASSWNSTINGAAATTNGASAASS (SEQ ID NO: 348)。
在一些情況下,本發明之CasX變異蛋白可包括內體逃逸肽。在一些情況下,內體逃脫多肽包含胺基酸序列GLFXALLXLLXSLWXLLLXA (SEQ ID NO: 349),其中各X獨立地選自離胺酸、組胺酸及精胺酸。在一些情況下,內體逃逸多肽包含胺基酸序列GLFHALLHLLHSLWHLLLHA (SEQ ID NO: 350)或HHHHHHHHH (SEQ ID NO: 351)。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,或表3之序列,及內體逃逸多肽之序列。
適合於CasX變異體以供靶向ssRNA目標核酸時使用之融合搭配物之非限制性實例包括(但不限於):剪接因子(例如RS域);蛋白質轉譯組分(例如轉譯起始、伸長及/或釋放因子;例如真核轉譯起始因子4γ {eIF4G});RNA甲基化酶;RNA編輯酶(例如RNA去胺酶,例如作用於RNA之腺苷去胺酶(ADAR),包括A至I及/或C至U編輯酶);解旋酶;RNA結合蛋白;及其類似物。應理解,異源多肽可包括整個蛋白質或在一些情況下可包括蛋白質之片段(例如,功能域)。
在一些實施例中,SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,或表3之序列之CasX變異體包含能夠與ssRNA相互作用之任一域之融合搭配物(出於本發明之目的,其包括分子內及/或分子間二級結構,例如雙股RNA雙螺旋體,諸如髮夾、莖-環等),無論瞬時或不可逆地、直接地或間接地,包括但不限於選自包含以下之群之效應子域:核酸內切酶(例如來自諸如SMG5及SMG6之蛋白質的RNase III、CRR22 DYW域、Dicer及PIN (PilT N端)域);負責刺激RNA裂解(例如裂解及多腺苷酸化特定因子{CPSF}、裂解刺激因子{CstF}、CFIm及CFIIm)之蛋白或蛋白域;核酸外切酶(例如染色質結合核酸外切酶XRN1 (XRN-1)或核酸外切酶T);去腺苷化酶(例如DNA 5'-單磷酸腺苷羥化酶{HNT3});負責無義介導之RNA衰變(例如UPF1 RNA解旋酶及ATP酶{UPF1}、UPF2、UPF3、UPF3b、RNP SI、RNA結合模體蛋白8A {Y14}、DEK原癌基因{DEK}、RNA加工蛋白REF2 {REF2}及絲胺酸-精胺酸重複矩陣1 {SRm160})之蛋白或蛋白域;負責穩定RNA (例如聚(A)結合蛋白細胞質1 {PABP})之蛋白或蛋白域;負責抑制轉譯(例如阿爾古(argonaute)RISC催化組分2{Ago2}及Ago4)之蛋白或蛋白域;負責刺激轉譯(例如Staufen)之蛋白或蛋白域;負責(例如能夠調節轉譯(轉譯因子,諸如起始因子、伸長因子、釋放因子等,例如eIF4G))之蛋白或蛋白域;負責RNA之多腺苷酸化(例如聚(A)聚合酶(PAP1)、含PAP相關域之蛋白質;聚(A)RNA聚合酶gld-2 {GLD-2}及Star-PAP)之蛋白或蛋白域;負責RNA之聚尿苷化(例如末端尿苷醯基轉移酶{CID1}及末端尿苷酸轉移酶之蛋白或蛋白域;負責RNA定位(例如根據胰島素樣生長因子2 mRNA結合蛋白1 {IMP1}、Z-DNA結合蛋白1 {ZBP1}、She2p、She3p及雙尾-D)之蛋白或蛋白域;負責RNA之核保留(例如Rrp6)之蛋白或蛋白域;負責RNA之核導出(例如核RNA導出因子1{TAP}、核RNA導出因子1 {NXF1}、THO複合物{THO}、TREX、REF及Aly/REF導出因子{Aly})之蛋白或蛋白域;負責抑制RNA剪接(例如多嘧啶束結合蛋白1 {PTB}、含信號轉導相關1 Sam68}之KH RNA結合及異質核核糖核蛋白A1 {hnRNP A1})之蛋白或蛋白域;負責刺激RNA剪接(例如富絲胺酸/精胺酸(SR)域)之蛋白或蛋白域;負責降低轉錄效率之蛋白或蛋白域(例如FUS RNA結合蛋白{FUS (TLS)});以及負責刺激轉錄(例如週期蛋白依賴性激酶7 {CDK7}及HIV Tat)之蛋白或蛋白域。或者,效應子域可選自包含以下之群:核酸內切酶;能夠刺激RNA裂解之蛋白及蛋白域;核酸外切酶;去腺苷化酶;具有無義介導之RNA衰變活性之蛋白及蛋白域;能夠穩定RNA之蛋白及蛋白域;能夠抑制轉譯之蛋白及蛋白域;能夠刺激轉譯之蛋白及蛋白域;能夠調節轉譯之蛋白及蛋白域(例如轉譯因子,諸如起始因子、伸長因子、釋放因子等,例如eIF4G);能夠對RNA進行多腺苷酸化之蛋白及蛋白域;能夠對RNA進行聚尿苷化之蛋白及蛋白域;具有RNA定位活性之蛋白及蛋白域;能夠對RNA進行核保留之蛋白及蛋白域;具有RNA核導出活性之蛋白及蛋白域;能夠抑制RNA剪接之蛋白及蛋白域;能夠刺激RNA剪接之蛋白及蛋白域;能夠降低轉錄效率之蛋白及蛋白域;及能夠刺激轉錄之蛋白及蛋白域。另一適合異源多肽為PUF RNA結合域,其更詳細地描述於WO2012068627中,其以全文引用之方式併入本文中。
可用作(以整體或其片段形式)與CasX變異體之融合搭配物的一些RNA剪接因子具有模組化組織,其具有獨立的序列特異性RNA結合模組及剪接效應子域。舉例而言,富絲胺酸/精胺酸(SR)之蛋白家族之成員含有結合於前mRNA中之外顯子剪接強化子(ESE)的N端RNA識別模體(RRM)及促進外顯子包括之C端RS域。作為另一實例,hnRNP蛋白hnRNP A1經由其RRM域結合於外顯子剪接沉默子(ESS),且經由C端富甘胺酸之域抑制外顯子包括。一些剪接因子可藉由結合於兩個替代性位點之間的調節序列來調節剪接位點(ss)之替代用途。舉例而言,ASF/SF2可識別ESE且促進使用內含子近端位點,而hnRNP A1可結合於ESS且使剪接轉向使用內含子遠端位點。此類因素之一個應用為產生調節內源性基因、尤其疾病相關基因之替代性剪接的ESF。舉例而言,BCL2樣1 (Bcl-x)前mRNA產生具有兩個替代5'剪接位點之兩種剪接同種型,以編碼具有相反功能之蛋白質。長剪接同種型Bcl-xL為強力細胞凋亡抑制劑,其表現於長壽命的有絲分裂後細胞中且在許多癌細胞中上調,保護細胞免受凋亡信號影響。短同種型Bcl-xS為促凋亡同種型且以高水準在細胞中以高周轉率(例如顯現淋巴球)表現。藉由位於核外顯子區域或外顯子延伸區域(亦即,在兩個替代5'剪接位點之間)中之多個cc-元件調節兩種Bcl-x剪接同種型之比。對於更多實例,參見WO2010075303,其以全文引用之方式併入本文中。
其他適合之供與CasX變異體一起使用之融合搭配物包括但不限於為邊界元件之蛋白質(或其片段) (例如CTCF)、提供周邊補充之蛋白質及其片段(例如核片層蛋白A、核片層蛋白B等)及蛋白質對接元件(例如FKBP/FRB、Pill/Abyl等)。
另外或替代地,本發明之CasX變異蛋白可與多肽滲透域融合以促進細胞吸收。多種滲透域為此項技術中已知且可用於本發明之非整合多肽中,包括肽、肽模擬物及非肽載劑。舉例而言,以全文引用的方式併入本文中之WO2017/106569及US20180363009A1描述Cas蛋白與一或多個核定位序列(NLS)融合以促進細胞吸收。在其他實施例中,滲透劑肽可衍生自黑腹果蠅(
Drosophila melanogaster)轉錄因子Antennapaedia (稱為穿膜肽)之第三α螺旋,其包含胺基酸序列RQIKIWFQNRRMKWKK (SEQ ID NO: 398)。作為另一實例,滲透肽包含HIV-1 tat鹼性區域胺基酸序列,其可包括例如天然存在之tat蛋白之胺基酸49-57。其他滲透域包括聚精胺酸模體,例如HIV-1 rev蛋白質、九精胺酸、八-精胺酸及其類似者之胺基酸34-56之區。進行融合之位點可經選擇以最佳化多肽之生物活性、分泌或結合特徵。最佳位點將藉由常規實驗確定。
在一些情況下,供與CasX變異體一起使用之異源多肽(融合搭配物)提供次細胞定位,亦即異源多肽含有次細胞定位序列(例如用於靶向至細胞核之核定位信號(NLS);保持融合蛋白在細胞核之外的序列,例如核導出序列(NES);保持融合蛋白留存於細胞質中之序列;用於靶向至粒線體之粒線體定位信號;用於靶向至葉綠體之葉綠體定位信號;ER保留信號;及其類似物)。在一些實施例中,主題RNA導引多肽或條件活性RNA導引多肽及/或主題CasX融合蛋白不包括NLS,以使得蛋白質不靶向至細胞核,其可為有利的;例如當目標核酸為存在於胞溶質中之RNA時。在一些實施例中,融合搭配物可提供標籤(亦即,異源多肽為可偵測標記)以易於追蹤及/或純化(例如螢光蛋白,例如綠色螢光蛋白(GFP)、黃色螢光蛋白(YFP)、紅色螢光蛋白(RFP)、強化型藍螢光蛋白(CFP)、mCherry、tdTomato及其類似物;組胺酸標籤,例如6×His標籤;血球凝集素(HA)標籤;FLAG標籤;Myc標籤;及其類似物)。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: XX-XX中之任一者及次細胞定位序列或標籤。
在一些情況下,參考或CasX變異蛋白包括(融合至)核定位信號(NLS)。適合於供與CasX變異體一起使用之NLS之非限制性實例包括具有至少約80%、至少約90%,或至少約95%一致性之序列或與衍生自以下之序列一致:SV40病毒大型T抗原之NLS、具有胺基酸序列PKKKRKV (SEQ ID NO: 352);來自核質蛋白之NLS (例如具有序列KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)之核質蛋白二分體NLS);具有胺基酸序列PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354))或RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)之c-Myc NLS;具有序列NQSSNFGPMKGGNFGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)之hRNPAl M9 NLS;來自內輸蛋白-α之IBB域之序列RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV (SEQ ID NO: 357);肌瘤T蛋白之序列VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)及PPKKARED (SEQ ID NO: 359);人類p53之序列PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360);小鼠c-abl IV之序列SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361);流感病毒NS1之序列DRLRR (SEQ ID NO: 362)及PKQKKRK (SEQ ID NO: 363);肝炎病毒δ抗原之序列RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364);小鼠Mxl蛋白之序列REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365);人類聚(ADP-核糖)聚合酶之序列KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366);類固醇激素受體(人類)糖皮質激素之序列RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367);博爾納病毒P蛋白(BDV-P1)之序列PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368);C型肝炎病毒非結構蛋白(HCV-NS5A)之序列PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369);LEF1之序列NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370);ORF57 simirae之序列RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371);EBV LANA之序列KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372);A型流感蛋白之序列KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373);人類RNA解旋酶A (RHA)之序列PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374);核仁RNA解旋酶II之序列KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375);TUS蛋白之序列KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376);與內輸蛋白α相關之序列PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377);來自HTLV-1中之Rex蛋白之序列PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378);來自秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegan)之EGL-13蛋白之序列SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379);及序列KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 388)、PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)、PAKRARRGYKC (SEQ ID NO: 63)、KLGPRKATGRW (SEQ ID NO: 64)、PRRKREE (SEQ ID NO: 65)、PYRGRKE (SEQ ID NO:66 )、PLRKRPRR (SEQ ID NO: 67)、PLRKRPRRGSPLRKRPRR (SEQ ID NO:68 )、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKV (SEQ ID NO: 69)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAA (SEQ ID NO: 70)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAAA KEAAAKA (SEQ ID NO: 71)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVPG (SEQ ID NO: 72)、KRKGSPERGERKRHW (SEQ ID NO: 73)、KRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO: 74)及PKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO: 75)。在一些實施例中,一或多個NLS利用連接肽與CRISPR蛋白連接或與相鄰NLS連接,其中連接肽係選自由以下組成之群:RS、(G)n (SEQ ID NO: 1023)、(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)、(GGGS)n (SEQ ID NO: 401)、GGSG (SEQ ID NO: 402)、GGSGG (SEQ ID NO: 403)、GSGSG (SEQ ID NO: 404)、GSGGG (SEQ ID NO: 405)、GGGSG (SEQ ID NO: 406)、GSSSG (SEQ ID NO: 407)、GPGP (SEQ ID NO: 408)、GGP、PPP、PPAPPA (SEQ ID NO: 409)、PPPG (SEQ ID NO: 24)、PPPGPPP (SEQ ID NO: 410)、PPP(GGGS)n (SEQ ID NO: 25)、(GGGS)nPPP (SEQ ID NO: 26)、AEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 1025)及TPPKTKRKVEFE (SEQ ID NO: 27),其中n為1至5。一般而言,NLS (或多個NLS)具有足以驅動CasX變異融合蛋白在真核細胞之細胞核中之積聚的強度。可藉由任何適合之技術進行細胞核中之積聚的偵測。舉例而言,可偵測標誌物可與CasX變異融合蛋白融合,使得可觀測到細胞內之位置。細胞核亦可自細胞分離,其內容物可隨後藉由任何適合用於偵測蛋白質之方法,諸如免疫組織化學、西方墨點法或酶活性分析來分析。亦可間接地確定細胞核中之積聚。
本發明涵蓋多個呈各種組態之NLS組裝以連接至CRISPR蛋白。在一些實施例中,1、2、3、4或更多個NLS藉由連接肽連接至CRISPR蛋白之N端。在其他實施例中,1、2、3、4或更多個NLS藉由連接肽連接至CRISPR蛋白之C端。在一些實施例中,連接至CRISPR蛋白之N端之NLS與連接至C端之NLS相同。在其他實施例中,連接至CRISPR蛋白之N端的NLS與連接至C端的NLS不同。在一些實施例中,連接至CRISPR蛋白之N端的NLS係選自由如表8中所闡述之N端序列組成之群。在一些實施例中,連接至CRISPR蛋白之C端的NLS係選自由如表8中所闡述之C端序列組成之群。可藉由任何適合之技術進行細胞核中之積聚的偵測。舉例而言,可偵測標誌物可與參考或CasX變異融合蛋白融合,使得可觀測到細胞內之位置。細胞核亦可自細胞分離,其內容物可隨後藉由任何適合用於偵測蛋白質之方法,諸如免疫組織化學、西方墨點法或酶活性分析來分析。亦可間接地確定細胞核中之積聚。
表8:NLS序列
N 端序列 | SEQ ID NO | C端序列 | SEQ ID NO |
PKKKRKVGGSPKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 219 | TLESPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDTLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1236 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 220 | TLESKRPAATKKAGQAKKKKTLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1237 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 221 | TLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKTLESPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKV | 1238 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 222 | TLEGGSPKKKRKVTLESPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKV | 1239 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 223 | TLEGGSPKKKRKVTLESPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLD | 1240 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 224 | TLEGGSPKKKRKVTLESPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLD | 1241 |
KRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 225 | TLEGGSPKKKRKVTLESKRPAATKKAGQAKKKK | 1242 |
KRPAATKKAGQAKKKKSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 226 | TLEGGSPKKKRKVTLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1243 |
KRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 227 | TLEGGSPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1244 |
KRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 228 | TLEGGSPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1244 |
KRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 229 | TLEGGSPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1244 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 230 | TLEGGSPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1244 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 230 | TLEGGSPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1244 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 231 | TLEVGPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1245 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 232 | TLEVGGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1246 |
KRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 225 | TLEVAEAAAKEAAAKEAAAKAKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1247 |
KRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 227 | TLEVGPPKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEGGSPKKKRKV | 1248 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGGSSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 233 | TLEVGPAEAAAKEAAAKEAAAKAPAAKRVKLDTLEGGSPKKKRKV | 1249 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVPPPPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 234 | TLEVGPGGGSGGGSGGGSPAAKRVKLDTLEVGPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1250 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAAPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 235 | TLEVGPPKKKRKVPPPPAAKRVKLDTLEVGGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1251 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGGGSGGGSPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 236 | TLEVGPPAAKRVKLDTLEVAEAAAKEAAAKEAAAKAKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1252 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVPGGGSGGGSPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 239 | TLEVGPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEVGPPKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1253 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAAAKEAAAKAPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 983 | TLEVGGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVTLEVGPAEAAAKEAAAKEAAAKAPAAKRVKLD | 1254 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 984 | GSKRPAATKKAGQAKKKKTLEVGPGGGSGGGSGGGSPAAKRVKLD | 1255 |
PAAKRVKLDGGSPKKKRKVGGSSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 985 | GSKRPAATKKAGQAKKKKTLEVGPPKKKRKVPPPPAAKRVKLD | 1256 |
PAAKRVKLDPPPPKKKRKVPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 986 | GSKRPAATKKAGQAKKKKTLEVGPPAAKRVKLD | 1257 |
PAAKRVKLDPGRSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 987 | GSPKKKRKVTLEVGPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1258 |
PKKKRKVSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 988 | GSKRPAATKKAGQAKKKKTLEVGGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1259 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGGSSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 233 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1260 |
PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGGGSGGGSPGSRDISRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 236 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1261 |
PKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 989 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1262 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 220 | GSPKKKRKVGSPKKKRKV | 1263 |
PKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 221 | GGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1264 |
PAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 990 | GPPKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1265 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 222 | TGGGPGGGAAAGSGSPKKKRKVGSGSGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1266 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 223 | GPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1267 |
PAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 224 | AEAAAKEAAAKEAAAKAKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKVGSPKKKRKV | 1268 |
KRPAATKKAGQAKKKKSRQEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGP | 226 | GPPKKKRKVPPPPAAKRVKLDGGGSGGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1269 |
TSPKKKRKVALEYPYDVPDYA | 991 | GSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGPPKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1270 |
TLESKRPAATKKAGQAKKKKAPGEYPYDVPDYA | 992 | GSPAAKRVKLGGSPAAKRVKLGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVTGGGPGGGAAAGSGSPKKKRKVGSGS | 1271 |
GSKRPAATKKAGQAKKKKYPYDVPDYA | 993 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGPKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1272 |
TLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKAPGEYPYDVPDYATSPKKKRKVALEYPYDVPDYA | 1274 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKAEAAAKEAAAKEAAAKAKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV | 1273 |
TLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKTSPKKKRKVALEYPYDVPDYA | 1275 | GPPKKKRKVPPPPAAKRVKLD | 1018 |
TLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKTSPKKKRKVALEYPYDVPDYA | 1276 | GSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLD | 1019 |
TLESPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVTLESKRPAATKKAGQAKKKKAPGEYPYDVPDYA | 1277 | GSPAAKRVKLGGSPAAKRVKLGGSPKKKRKVGGSPKKKRKV | 1020 |
TLESPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGGSPKKKRKVGSKRPAATKKAGQAKKKKYPYDVPDYA | 1278 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1021 |
TLESPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDGGSPAAKRVKLDTLESKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKKAPGEYPYDVPDYA | 1279 | GSKRPAATKKAGQAKKKKGGSKRPAATKKAGQAKKKK | 1021 |
在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NOS: 415-592或1147-1231中之任一者,或表3之序列,其融合至SEQ ID NO: 63-75、219-236、239、352-389、983-1021、1237-1278中之任一者或表8之序列中之任一者的一或多個NLS。在一些實施例中,一或多個NLS融合至或靠近CasX變異體之N端。在一些實施例中,一或多個NLS融合至或靠近CasX變異體之C端。在一些實施例中,一或多個NLS融合至CasX變異體之N端及C端兩者。在一些實施例中,NLS藉由連接子連接至另一個NLS。
在一些情況下,參考或CasX變異融合蛋白包括「蛋白質轉導域」或PTD (亦稱為CPP-細胞穿透肽),其係指促進穿越脂質雙層、膠束、細胞膜、細胞器膜或囊泡膜之蛋白質、多核苷酸、碳水化合物或有機或無機化合物。附接至可在小極性分子至較大大分子及/或奈米粒子範圍內之另一分子的PTD有助於分子穿越膜,例如自胞外空間進入胞內空間,或自胞溶質進入胞器內。在一些實施例中,PTD共價連接至參考或CasX變異融合蛋白之胺基端。在一些實施例中,PTD共價連接至參考或CasX變異融合蛋白之羧基端。在一些情況下,在內部將PTD在適合的插入位點插入參考或CasX變異融合蛋白之序列中。在一些情況下,參考或CasX變異融合蛋白包括(接合至、融合至)一或多個PTD (例如兩個或兩個以上、三個或三個以上、四個或四個以上PTD)。在一些情況下,PTD包括一或多個核定位信號(NLS)。PTD之實例包括但不限於HIV TAT之肽轉導域,其包含YGRKKRRQRRR (SEQ ID NO: 390)、RKKRRQRR (SEQ ID NO: 391);YARAAARQARA (SEQ ID NO: 392);THRLPRRRRRR (SEQ ID NO: 393);及GGRRARRRRRR (SEQ ID NO: 394);聚精胺酸序列,其包含足以直接引入至細胞之多個精胺酸(例如3、4、5、6、7、8、9、10或10-50個精胺酸,SEQ ID NO: 1026);VP22域(Zender等人. (2002) Cancer Gene Ther. 9(6):489-96);果蠅屬觸角足蛋白質轉導域(Noguchi等人. (2003) Diabetes 52(7): 1732-1737);截短人類降鈣素肽(Trehin等人. (2004) Pharm. Research 21 :1248-1256);多離胺酸(Wender等人. (2000) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 13003-13008);RRQRRTSKLMKR (SEQ ID NO: 395);運輸蛋白GWTLNSAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO: 396);KALAWEAKLAKALAKALAKHLAKALAKALKCEA (SEQ ID NO: 397);及RQIKIWFQNRRMKWKK (SEQ ID NO: 398)。在一些實施例中,PTD為可活化CPP (ACPP) (Aguilera等人. (2009) Integr Biol (Camb) June;1(5-6): 371-381)。ACPP包含經由可裂解連接子連接至匹配聚陰離子(例如Glu9或「E9」)之聚陽離子CPP (例如Arg9或「R9」),其將淨電荷降低至接近零且由此抑制黏附及吸收至細胞中。在連接子裂解之後,聚陰離子釋放,局部揭露聚精胺酸及其固有黏附性,因此「活化」ACPP以穿越膜。在一些實施例中,CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者,或SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者,或表3之序列及PTD。
在一些實施例中,CasX變異融合蛋白可包括經由連接子多肽(例如一或多個連接子多肽)連接至內部插入之異源胺基酸或異源多肽(異源胺基酸序列)的CasX蛋白。在一些實施例中,參考或CasX變異融合蛋白可在C端及/或N端處經由連接子多肽(例如一或多個連接子多肽)連接至異源多肽(融合搭配物)。連接子多肽可具有多種胺基酸序列中之任一者。蛋白質可藉由一般具有可撓性性質之間隔子肽連接,但不排除其他化學鍵。適合之連接子包括長度為4個胺基酸至40個胺基酸,或長度為4個胺基酸至25個胺基酸之多肽。此等連接子一般係藉由使用合成的連接子編碼之寡核苷酸偶合蛋白質而產生。可使用具有一定程度之可撓性的肽連接子。連接肽可具有幾乎任何胺基酸序列,應記住,較佳連接子將具有產生總體可撓性肽之序列。使用小胺基酸,諸如甘胺酸及丙胺酸在產生可撓性肽中有用。此類序列之產生為熟習此項技術者常規的。多種不同連接子為市售的且被視為適合使用。例示性連接子多肽包括甘胺酸聚合物(G) n、甘胺酸-絲胺酸聚合物(包括例如(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)及(GGGS)n (SEQ ID NO: 401),其中n為至少一個之整數)、甘胺酸-丙胺酸聚合物、丙胺酸-絲胺酸聚合物、甘胺酸-脯胺酸聚合物、脯胺酸聚合物及脯胺酸-丙胺酸聚合物。實例連接子可包含胺基酸序列,該等胺基酸序列包括但不限於RS、(G)n、(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)、(GGGS)n (SEQ ID NO: 401)、GGSG (SEQ ID NO: 402)、GGSGG (SEQ ID NO: 403)、GSGSG (SEQ ID NO: 404)、GSGGG (SEQ ID NO: 405)、GGGSG (SEQ ID NO: 406)、GSSSG (SEQ ID NO: 407)、GPGP (SEQ ID NO: )408、GGP、PPP、PPAPPA (SEQ ID NO: 409)、PPPG (SEQ ID NO: 24)、PPPGPPP (SEQ ID NO: 410)、PPP(GGGS)n (SEQ ID NO: 25)、(GGGS)nPPP (SEQ ID NO: 26)、AEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 1025)及TPPKTKRKVEFE (SEQ ID NO: 27),其中n為1至5。一般熟習此項技術者應認識到,結合至上文所描述之任何元件之肽的設計可包括完全或部分可撓性的連接子,以使得連接子可包括可撓性連接子以及一或多個賦予較不可撓結構之部分。
V. 製造CasX變異蛋白及gRNA變異體之方法
如本文所描述之CasX變異蛋白及gRNA變異體可經由多種方法構築。此類方法可包括例如在下文及實例中所描述以及以引用之方式併入本文中之申請案PCT/US20/36506及WO2020247883A2中的深度突變演進(DME)。
a. 深度突變演進(DME)
在一些實施例中,DME用於鑑別具有經改良之功能的CasX蛋白及sgRNA支架變異體。在一些實施例中,DME方法包含構建及測試全面的突變集合以起始生物分子,以產生生物分子變異體庫;舉例而言,CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體之庫。DME可涵蓋進行胺基酸(在蛋白質的情況下)或核苷酸(在RNA或DNA的情況下)之所有可能的取代,以及所有可能的小插入,及所有可能的缺失以起始生物分子。圖16中展示說明DME方法之示意圖。在一些實施例中,DME包含所有此類可能取代、插入及缺失之子集。在DME之某些實施例中,構築一或多個變異體庫,針對功能改變進行評估,且此資訊用於構築一或多個額外庫。變異體之此類迭代構築及評估可例如使得鑑別引起某些功能結果之突變主題,諸如當以某些方式突變時使得一或多種功能改良的蛋白質或RNA之區域。此類經鑑別突變之分層可隨後進一步改良功能,例如經由加成或協同相互作用。DME包含庫設計、庫構築及庫篩選。在一些實施例中,進行多輪設計、構築及篩選。
b. 庫設計
DME方法產生生物分子之變異體,其為許多單體之聚合物。在一些實施例中,生物分子包含蛋白質或核糖核酸(RNA)分子,其中單體單元分別為胺基酸或核糖核苷酸。生物分子突變之基本單元包含:(1)將一個單體更換為不同身分之另一單體(取代);(2)在生物分子中插入一或多個額外單體(插入);或(3)自生物分子移除一或多個單體(缺失)。包含單獨或呈組合形式的對本文所描述之任何生物分子內之任何一或多種單體之取代、插入及缺失的DME庫被視為在本發明之範疇內。
在一些實施例中,DME用於構築及測試對生物分子之全面一組突變,涵蓋所有可能的取代,以及胺基酸(在蛋白質之情況下)或核苷酸(在RNA之情況下)之小插入及缺失。此等突變之構築及功能讀出可藉由多種確立之分子生物學方法來達成。在一些實施例中,庫包含對單體之所有可能的修飾之子集。舉例而言,在一些實施例中,庫共同地表示生物分子中一個單體之單一修飾,總單體位置之至少10%,其中各單一修飾係選自由取代、單一插入及單一缺失組成之群。在一些實施例中,庫共同地表示對一種單體之單一修飾,針對起始生物分子中之總單體位置的至少5%、至少10%、至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或至多100%。在某些實施例中,針對起始生物分子中之總單體位置的某一百分比,庫共同地表示一種單體之每種可能的單一修飾,諸如藉由19種其他天然存在之胺基酸(針對蛋白質)或3種其他天然存在之核糖核苷酸(針對RNA)之所有可能的取代、20種天然存在之胺基酸(針對蛋白質)或4種天然存在之核糖核苷酸(針對RNA)之插入或單體之缺失。在其他實施例中,各位置處之插入獨立地為大於一個單體,例如插入兩個或兩個以上、三個或三個以上或四個或四個以上單體之插入,或一至四個、二至四個或一至三個單體之插入。在其他實施例中,位置處之缺失獨立地超過一個單體,例如兩個或兩個以上、三個或三個以上或四個或四個以上單體之缺失,或一至四個、二至四個或一至三個單體之缺失。CasX變異體及gRNA變異體之此類庫之實例分別描述於實例14及15中。
在一些實施例中,生物分子為蛋白質且個別單體為胺基酸。在生物分子為蛋白之彼等實施例中,蛋白中各單體(胺基酸)位置處可能的DME突變之數目包含19個胺基酸取代、20個胺基酸插入及1個胺基酸缺失,使得蛋白質中每一胺基酸產生總共40種可能的突變。
在一些實施例中,包含插入之CasX變異蛋白之DME庫為1個胺基酸插入庫、2個胺基酸插入庫、3個胺基酸插入庫、4個胺基酸插入庫、5個胺基酸插入庫、6個胺基酸插入庫、7個胺基酸插入庫、8個胺基酸插入庫、9個胺基酸插入庫或10個胺基酸插入庫。在一些實施例中,包含插入之CasX變異蛋白之DME庫包含1至4個胺基酸插入。
在一些實施例中,生物分子為RNA。在其中生物分子為RNA之彼等實施例中,RNA中各單體(核糖核苷酸)位置處之可能的DME突變之數目包含3個核苷酸取代、4個核苷酸插入及1個核苷酸缺失,使得每一核苷酸產生總共8種可能的突變。
在一些實施例中,DME庫設計包含列舉生物分子中一或多個目標單體中之每一者的所有可能的突變。如本文所用,「目標單體」係指定為以本文所描述之取代、插入及缺失靶向DME之生物分子聚合物中之單體。舉例而言,目標單體可為蛋白質中之指定位置處之胺基酸,或RNA中之指定位置處之核苷酸。生物分子可具有至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、100個或更多個經系統突變以產生生物分子變異體之DME庫的目標單體。在一些實施例中,生物分子中之每一單體為目標單體。舉例而言,在其中存在兩種目標胺基酸之蛋白質的DME中,DME庫設計包含計數兩種目標胺基酸中之每一者處之40種可能的DME突變。在另一實例中,在其中存在四種目標核苷酸之RNA的DME中,DME庫設計包含計數四種目標核苷酸中之每一者處之8種可能的DME突變。在一些實施例中,生物分子之各目標單體係獨立地藉由有意設計隨機選擇或選擇。因此,在一些實施例中,DME庫包含隨機變異體,或經設計之變異體,或在單一生物分子內包含隨機突變及經設計突變之變異體,或其任何組合。
在DME方法之一些實施例中,DME突變併入編碼生物分子之雙股DNA中。此DNA可在標準選殖載體,例如細菌質體(在本文中稱為目標質體)中維持及複製。例示性目標質體含有編碼將經歷DME之起始生物分子、細菌複製起點及適合抗生素抗性表現卡匣的DNA序列。在一些實施例中,抗生素抗性卡匣賦予針對康黴素、安比西林、大觀黴素、博萊黴素、鏈黴素、紅黴素、四環素或氯黴素之抗性。在一些實施例中,抗生素抗性卡匣賦予針對康黴素之抗性。
可以多種方式構築包含該等變異體之庫。在某些實施例中,質體重組工程化用於構築庫。此類方法可使用編碼一或多種突變之DNA寡核苷酸將該等突變併入至編碼參考生物分子之質體中。對於具有複數個突變之生物分子變異體,在一些實施例中,使用超過一個寡核苷酸。在一些實施例中,DNA寡核苷酸編碼一或多種突變,其中突變區由10至100個與目標質體具有同源性之核苷酸側接,在突變之5'及3'兩者處。在一些實施例中,此類寡核苷酸可商業上合成且用於PCR擴增。編碼突變之寡核苷酸的例示性模板提供於下:
5 '- (N)
10-100- 突變- (N')
10-100- 3'
在此例示性寡核苷酸設計中,N表示與目標質體相同之序列,在本文中稱為同源臂。當生物分子中之特定單體靶向突變時,此等同源臂直接側接目標質體中編碼單體之DNA。在其中經歷DME之生物分子為蛋白質的一些例示性實施例中,使用相同組同源臂之40種不同寡核苷酸用於針對DME靶向的蛋白質中之各胺基酸殘基編碼列舉之40種不同胺基酸突變。當突變具有單個胺基酸時,編碼所需一或多種突變之區域包含編碼胺基酸(取代或單一插入)或零個核苷酸(用於缺失)之三個核苷酸。在一些實施例中,寡核苷酸編碼大於一個胺基酸之插入。舉例而言,在寡核苷酸編碼X胺基酸之插入的情況下,編碼所需突變之區域包含編碼X胺基酸之3*X個核苷酸。在一些實施例中,突變區域編碼超過一個突變,例如對生物分子之兩個或更多個單體之突變,該等單體為極為貼近的(例如相互緊靠地,或在彼此之1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個或更多個單體內)。
在其中經歷DME之生物分子為RNA的一些例示性實施例中,使用相同組同源臂之8種不同寡核苷酸用於針對DME靶向的RNA中之各核苷酸編碼8種不同的單一核苷酸突變。當突變為單一核糖核苷酸時,編碼該等突變之寡核苷酸區域可由以下核苷酸序列組成:一個指定核苷酸之核苷酸(用於取代或插入),或零個核苷酸(用於缺失)。在一些實施例中,寡核苷酸經合成為單股DNA寡核苷酸。在一些實施例中,彙集靶向經受DME之生物分子之特定胺基酸或核苷酸的所有寡核苷酸。在一些實施例中,彙集靶向經受DME之生物分子的所有寡核苷酸。可在DME庫中同時產生之突變的類型或數目不受限制。
c. 庫篩選
篩選或選擇DME庫之任何適當方法係設想為在本發明之範疇內。可使用高通量方法評估具有數千個別突變之大型庫。在一些實施例中,庫篩選或選擇分析之通量具有數百萬個個別細胞之通量。在一些實施例中,使用活細胞之分析較佳,因為表現型及基因型藉由包含於相同脂質雙層內之性質而在活細胞中物理關聯。活細胞亦可用於直接擴大總庫之亞群。在其他實施例中,在DME方法中使用較小分析,例如篩選經由多輪突變及評估研發之聚焦庫。篩選庫之例示性方法描述於實例14及15中。
在一些實施例中,進一步表徵已針對高度功能性變異體篩選或選擇之DME庫。在一些實施例中,進一步表徵DME庫包含經由定序,諸如桑格定序(Sanger sequencing)個別地分析DME變異體,以鑑別產生高度功能性變異體之一或多個特異性突變。生物分子之個別突變變異體可經由標準分子生物學技術分離,以用於隨後功能分析。在一些實施例中,進一步表徵DME庫包含I庫及高度功能性變異體之一或多個庫之高通量定序。在一些實施例中,此方法可允許快速鑑別與初始DME庫相比在高度功能性變異體之一或多個庫中過度表示的突變。不希望受任何理論束縛,在高度功能性變異體之一或多個庫中過度表現之突變可能引起高度功能性變異體之活性。在一些實施例中,進一步表徵DME庫包含個別變異體之定序以及初始庫及高度功能性變異體之一或多個庫之高通量定序。
高通量定序可產生指示庫成員之功能效應的高通量資料。在其中一或多個庫表示每一單體位置之每一可能突變的實施例中,此類高通量定序可評估每一可能DME突變之功能效應。此類定序亦可用於評估給定庫之一或多個高度功能性亞群,其在一些實施例中可使得鑑別產生經改良之功能之突變。深度突變掃描
在一些實施例中,深度突變掃描(DMS)用於鑑別具有改良功能之CasX變異蛋白。深度突變掃描評定蛋白質可塑性,因為其係關於功能。在DMS方法中,蛋白質之每一胺基酸改變為每一其他胺基酸且分析絕對蛋白質功能。舉例而言,CasX蛋白中之每一胺基酸可變為每隔一個胺基酸,且分析突變之CasX蛋白結合或裂解DNA之能力。可用於表徵DMS CasX變異蛋白之集合的例示性分析,諸如CRISPRi分析或基於細菌之裂解分析描述於Oakes等人(2016) 「Profiling of engineering hotspots identifies an allosteric CRISPR-Cas9 switch」 Nat Biotechnol 34(6):646-51及Liu等人(2019) 「CasX enzymes comprise a distinct family of RNA-guided genome editors」 Nature doi.org/10.1038/s41586-019-0908中;其內容以引用的方式併入本文中。
在一些實施例中,DMS用於鑑別具有經改良之DNA結合活性的CasX蛋白。在一些實施例中,使用CRISPRi分析來分析DNA結合活性。在CRISPRi分析之非限制性、例示性實施例中,使用FACS分析表現螢光蛋白,諸如綠色螢光蛋白(GFP)或紅色螢光蛋白(RFP)之細胞,以鑑別能夠以sgRNA依賴性方式抑制螢光蛋白表現之CasX變異體。在此實例中,催化死亡CasX (dCasX)用於產生所分析DMS突變體之集合。野生型CasX蛋白結合至其同源sgRNA且形成蛋白質-RNA複合物。複合物藉由sgRNA與DNA目標之間的沃森-克里克鹼基配對結合至特定DNA目標,在此情況下,編碼螢光蛋白之DNA序列。在野生型CasX之情況下,DNA將由於CasX蛋白之核酸酶活性而裂解。然而,不希望受理論束縛,可能的係dCasX仍能夠與sgRNA形成複合物且結合於特定DNA目標。當蛋白質編碼區發生dCasX之靶向時,其阻斷RNA聚合酶II及轉錄物起始及/或伸長,引起可藉由FAC偵測之螢光蛋白表現降低。
在一些實施例中,DMS用於鑑別具有經改良之DNA裂解活性的CasX蛋白。分析CasX變異蛋白之DNA裂解效率之方法將為一般熟習此項技術者顯而易見。舉例而言,可使用與sgRNA複合之CasX蛋白與與特定目標核酸序列互補之間隔子來在適合細胞類型活體外或活體內裂解DNA目標序列,且分析裂解位點處之插入及缺失頻率。不希望受理論束縛,藉由CasX之裂解或切割在DNA中產生雙股斷裂,其藉由非同源末端連接路徑(NHEJ)之後續修復引起雙股斷裂位點處之小插入或缺失(插入缺失)。CasX裂解位點處之插入缺失頻率可使用目標序列之高通量或桑格定序來量測。或者或另外,藉由目標序列之CasX裂解產生插入缺失之頻率可使用失配分析,諸如T7核酸內切酶I (T7EI)或Surveyor失配分析量測。
在一些實施例中,在DMS之後,產生與DMS突變體之所得表現型相關之基因型圖(例如熱圖)且用於表徵蛋白質之基本原理。將所有可能的突變表徵為產生功能性或非功能性蛋白質產物,以確立蛋白質之功能景觀。
d. 易錯PCR
在一些實施例中,易錯PCR用於產生具有經改良之功能之CasX蛋白或sgRNA支架變異體。複製DNA之聚合酶具有不同保真度水準。將隨機突變引入至基因之一種方法為經由將在一定頻率範圍內併入不正確核苷酸之易錯聚合酶。此頻率可取決於所需結果而調變。在一些實施例中,將用於聚合酶活性之聚合酶及條件選擇為使得核苷酸變化頻率在蛋白質序列中平均產生n 1-4個胺基酸變化。例示性易錯聚合酶包含Agilent's GeneMorphII套組。GeneMorphII套組可用於根據製造商之方案擴增編碼野生型CasX蛋白(例如SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之蛋白)之DNA序列,由此對蛋白質進行無偏隨機突變誘發且產生CasX變異蛋白之多樣群體。CasX變異蛋白之此多樣群體可接著使用與針對DMS在上文所描述相同的分析進行分析,以觀測基因型之變化與表現型之變化如何相關。
e. 卡匣突變誘發
在一些實施例中,卡匣突變誘發用於產生具有經改良之功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體。卡匣突變誘發利用經變性核苷酸置換之獨特限制酶位點在諸如CasX蛋白或sgRNA支架之感興趣之基因之所選區域中產生具有高多樣性之小區域。在例示性卡匣突變誘發方案中,限制酶用於在編碼適合載體中所含之CasX蛋白或sgRNA支架之DNA分子上定為突變誘發之目標的序列附近裂解。此步驟移除定為突變誘發之目標的序列及限制位點之間的一切。接著,含有所需突變及與限制消化末端互補之末端的合成雙股DNA分子經連接,替代已藉由限制消化移除之序列,且諸如大腸桿菌(
E. coli)之適合之細胞經連接載體轉型。在一些實施例中,卡匣突變誘發可用於在CasX蛋白或sgRNA支架中產生一或多個特異性突變。在一些實施例中,卡匣突變誘發可用於產生可使用本文所描述之方法篩選或選擇以改良功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體庫。舉例而言,在使用卡匣突變誘發產生CasX變異體中,非目標股結合(NTSB)域之一部分可經簡併核苷酸之序列置換。簡併核苷酸之序列可高度定位於CasX蛋白之區域,例如感興趣之NTSB區域,因為其高度移動元件或其與DNA之直接接觸。經由卡匣突變誘發產生之CasX變異蛋白之庫可接著使用本文所描述之分析篩選DME、DMS及易錯PCR,且可選擇變異體以改良功能。
f. 隨機突變誘發
在一些實施例中,隨機突變誘發用於產生具有經改良之功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體。隨機突變誘發為不偏改變DNA之方式。隨機突變誘發之例示性方法將為一般熟習此項技術者已知,且包括暴露於化學物質、UV光、X射線或使用不穩定細胞株。不同突變誘發劑產生不同類型的突變,且通常,熟習此項技術者將能夠選擇適當試劑以產生所需類型之突變。舉例而言,甲磺酸乙酯(EMS)及N-乙基-硝基異脲(ENU)可用於產生單一鹼基對變化,而X射線通常引起缺失及總體染色體重排。UV光暴露在DNA之相鄰嘧啶之間產生二聚體,其可引起點突變、缺失及重排。易錯細胞株亦可用於引入突變,例如在包含本發明之CasX蛋白或sgRNA支架的質體上。編碼CasX蛋白(例如,SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之蛋白質)或sgRNA支架之DNA分子群體可暴露於誘變劑以產生CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體之集合,且可使用本文所描述之分析中之任一者分析此等集合之功能改良。
g. 交錯延伸方法(StEP)
在一些實施例中,交錯延伸方法(StEP)用於產生具有經改良之功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體。交錯延伸方法為允許在PCR反應期間使蛋白質之多個變異體育種之專用PCR方案。StEP利用具有低持續合成能力之聚合酶(例如Taq或Vent聚合酶)產生兩個或兩個以上具有顯著序列類似性水準之不同模板股的短引子。短引子接著持續短時間間隔延伸,允許模板股改組。此方法亦可用作堆疊DME變異體之手段。例示性StEP方案由Zhao, H.等人(1998) 「Molecular evolution by staggered extension process (StEP) in vitro recombination」 Nature Biotechnology 16: 258-261描述,其內容以全文引用之方式併入本文中。StEP可用於產生CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體之集合,且可使用本文中所描述之分析中之任一者分析此等集合之經改良之功能。
h. 基因改組
在一些實施例中,基因改組用於產生具有經改良之功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體。在一些實施例中,基因改組用於組合(在本文中有時稱為「堆疊」)經由本文所描述之其他方法產生之變異體,諸如質體重組工程。在例示性基因改組方案中,DNA酶,例如DNA酶I用於將一組親本基因剪切為長度為50-100個鹼基對(bp)的片段。在一些實施例中,此等親本基因包含CasX變異蛋白,其具有使用本文所描述之方法產生及分離之經改良之功能。在一些實施例中,此等親本基因包含sgRNA支架變異體,其具有使用本文所描述之方法產生及分離之改良功能。接著在無引子下進行聚合酶鏈反應(PCR)之後進行DNA酶片段化。具有足夠重疊同源序列之DNA片段將彼此黏接且接著藉由DNA聚合酶延伸。若不同片段包含不同突變退火,則結果為組合彼等兩種突變之新變異體。在一些實施例中,無引子之PCR之後為PCR延伸,及已達到親本基因(例如編碼CasX蛋白或sgRNA支架之序列)大小的改組DNA分子之純化。此等基因可接著藉由另一PCR擴增,例如藉由添加與經歷改組之基因之5'及3'端互補的PCR引子。在一些實施例中,引子可具有添加至其5'端之額外序列,諸如連接至選殖載體中必需之限制酶識別位點的序列。
i. 域交換
在一些實施例中,域交換用於產生具有經改良之功能之CasX變異蛋白或sgRNA支架變異體。為了產生CasX變異蛋白,工程化域交換可用於將部分與其他蛋白質及CRISPR分子混合及匹配。舉例而言,CRISPR蛋白具有保守RuvC域,因此CasX RuvC域可與其他CRISPR蛋白之域交換,且使用本文所描述之分析來分析所得蛋白質經改良之DNA裂解。對於sgRNA,支架莖、延伸莖或環可與其他RNA中發現之結構交換,例如sgRNA之支架莖及延伸莖可與來自其他RNA之熱穩定莖環交換,且所得變異體使用本文所描述之分析針對經改良之功能進行分析。在一些實施例中,域交換可用於將新域插入至CasX蛋白或sgRNA中。在將域交換應用於蛋白質的一些例示性實施例中,插入域包含整個第二蛋白質。
j. CasX及gRNA變異體之生產
可藉由真核細胞或藉由用編碼載體轉型之原核細胞(下文所描述),使用標準選殖及分子型生物學技術或如實例中所描述活體外生產本發明之CasX變異蛋白。製備之特定次序及方式將由便利性、經濟因素、所需之純度及其類似者決定。在一些實施例中,首先製備含有編碼CasX變異體之DNA序列之構築體。製備此類構築體之例示性方法描述於實例中。在一些實施例中,編碼CasX蛋白之核苷酸序列對於預期宿主細胞經密碼子最佳化。構築體接著用於產生適合於轉化宿主細胞,諸如用於表現及回收蛋白質之原核或真核宿主細胞的表現載體。必要時,宿主細胞為大腸桿菌。在其他實施例中,宿主細胞為真核細胞。真核宿主細胞可選自嬰兒倉鼠腎纖維母細胞(BHK)細胞、人類胚胎腎293 (HEK293)、人類胚胎腎293T (HEK293T)、NS0細胞、SP2/0細胞、YO骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6細胞、融合瘤細胞、NIH3T3細胞、起點具有SV40基因物質之CV-1 (猿猴)(COS)細胞、HeLa、中國倉鼠卵巢(CHO)或酵母細胞,或此項技術中已知適合於生產重組產物的其他真核細胞。
必要時,可在合成期間或在表現期間將各種基團引入序列中,其允許連接至其他分子或表面。因此,半胱胺酸可用於製造硫醚、組胺酸以連接至金屬離子錯合物、羧基以形成醯胺或酯、胺基以形成醯胺及其類似者。亦可根據重組合成之習知方法分離及純化本發明之CasX變異蛋白。可製備表現宿主之溶解物,且使用高效液相層析(HPLC)、排阻層析、凝膠電泳、親和層析或其他純化技術純化溶解物。大部分地,相對於涉及產物製備及其純化方法之污染物,所使用之組合物將佔所需產物之重量的80%或更大,更通常90重量%或更大,較佳95重量%或更大,且出於治療目的,通常99.5重量%或更大。
在產生本發明之gRNA的情況下,編碼gRNA之重組表現載體可例如使用T7啟動子調節序列及T7聚合酶活體外轉錄以產生gRNA,其可隨後藉由習知方法回收;例如如實例中所描述經由凝膠電泳純化。在合成之後,gRNA可用於基因編輯對中以直接接觸目標核酸或可藉由用於將核酸引入細胞中(例如顯微注射、電穿孔、轉染等)之熟知技術中之任一者引入細胞中。
VI. 多核苷酸及載體
在另一態樣中,本發明係關於編碼第2類第V型核酸酶及gRNA之多核苷酸,其在編輯細胞中之目標核酸中具有效用。在一些實施例中,本發明提供編碼本文所描述之CasX:gRNA系統實施例中之任一者之CasX蛋白之多核苷酸及gRNA之多核苷酸。
在一些實施例中,本發明提供編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體的多核苷酸序列,包括如表3中所描述之SEQ ID NO: 247-592或1147-1231之CasX蛋白質變異體或與表3之SEQ ID NO: 247-592及1147-1231之序列具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%,或至少約99%序列一致性之序列。在一些實施例中,本發明提供編碼SEQ ID NO: 270-592或1147-1231中之任一者之CasX變異體的多核苷酸序列或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%序列一致性之序列。在一些實施例中,本發明提供編碼SEQ ID NO: 415-592或1147-1231中之任一者之CasX變異體的多核苷酸序列或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%序列一致性之序列。在一些實施例中,本發明提供編碼本文所描述之實施例中之任一者之gRNA變異體序列的經分離之多核苷酸序列,包括表2之SEQ ID NO: 2101-2332及2353-2398之序列,以及能夠與待修飾之目標核酸雜交的靶向序列。在一些實施例中,本發明提供編碼SEQ ID NO: 2238-2332或2353-2398中之任一者之gRNA變異體序列的經分離之多核苷酸序列,以及能夠與待修飾之目標核酸雜交的靶向序列。在一些實施例中,本發明提供編碼SEQ ID NO: 2281-2332或2353-2398中之任一者之gRNA變異體序列的經分離之多核苷酸序列,以及能夠與待修飾之目標核酸雜交的靶向序列。
在一些實施例中,本發明提供編碼待修飾之基因之部分或全部的供體模板多核苷酸。在一些實施例中,供體模板意圖用於基因編輯結合CasX:gRNA系統且包含待修飾之基因之至少一部分。在其他實施例中,供體序列包含編碼待修飾之基因之外顯子之至少一部分的序列。在其他實施例中,供體模板具有編碼待修飾之基因之內含子之至少一部分的序列。在其他實施例中,供體模板具有編碼待修飾之基因之內含子-外顯子接合點之至少一部分的序列。在其他實施例中,供體模板具有編碼待修飾之基因之基因間區域之至少一部分的序列。在其他實施例中,供體模板具有編碼待修飾之基因之調節元件之至少一部分的序列。在一些情況下,供體模板為編碼待修飾之基因之至少一部分的野生型序列。在其他情況下,供體模板序列包含相對於待減弱或剔除之野生型基因的一或多個突變。在此類情況下,供體模板將相對於野生型序列具有至少1至5個或更多個突變。在前述實施例中,供體模板為至少10個核苷酸、至少100個核苷酸、至少200個核苷酸、至少300個核苷酸、至少400個核苷酸、至少500個核苷酸、至少600個核苷酸、至少700個核苷酸、至少800個核苷酸、至少900個核苷酸、至少1,000個核苷酸、至少2,000個核苷酸、至少3,000個核苷酸、至少4,000個核苷酸、至少5,000個核苷酸、至少6,000個核苷酸、至少7,000個核苷酸、至少8,000個核苷酸、至少9,000個核苷酸、至少10,000個核苷酸、至少12,000個核苷酸或至少15,000個核苷酸。在一些實施例中,供體模板包含至少約10至約15,000個核苷酸。在一些實施例中,供體模板為單股DNA模板。在其他實施例中,供體模板為單股RNA模板。在其他實施例中,供體模板為雙股DNA模板。在一些實施例中,供體模板可以系統中之裸核酸形式提供以編輯基因且不需要併入載體中。在其他實施例中,供體模板可併入載體中以促進其遞送至細胞;例如病毒載體中。
在其他態樣中,本發明係關於產生編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體或gRNA之多核苷酸序列的方法,包括其同源變異體,以及表現由多核苷酸序列表現之蛋白質或由多核苷酸序列轉錄之RNA的方法。一般而言,方法包括產生編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體或gRNA的多核苷酸序列且將編碼基因併入至適合於宿主細胞之表現載體中。分子生物學中之標準重組技術可用於製造本發明之多核苷酸及表現載體。為了產生本文所描述之實施例中之任一者之編碼的參考CasX、CasX變異體或gRNA,該等方法包括用包含編碼多核苷酸的表現載體轉化適當的宿主細胞,且在導致或允許本文所描述之任何實施例中之任一者的所得參考CasX、CasX變異體或gRNA在經轉化之宿主細胞中表現或轉錄的條件下培養宿主細胞,從而產生CasX變異體或gRNA,其藉由本文所描述之方法或此項技術中已知的或如實例中所描述的標準純化方法回收。
根據本發明,編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體或gRNA (或其互補序列)的核酸序列用於產生導引適當宿主細胞中之表現的重組DNA分子。若干選殖策略適合於進行本發明,其中之許多用於產生包含編碼本發明組合物之基因的構築體,或其補體。在一些實施例中,選殖策略用於產生編碼構築體之基因,該構築體包含編碼用於轉化宿主細胞以表現組合物之CasX變異體或gRNA之核苷酸。
在一些方法中,首先製備含有編碼CasX變異體或gRNA之DNA序列的構築體。製備此類構築體之例示性方法描述於實例中。隨後使用構築體產生適用於轉化宿主細胞,諸如用於表現及回收蛋白質構築體之原核或真核宿主細胞(在CasX或gRNA之情況下)的表現載體。必要時,宿主細胞為大腸桿菌。在其他實施例中,宿主細胞為真核細胞。真核宿主細胞可選自嬰兒倉鼠腎纖維母細胞(BHK)細胞、人類胚胎腎293 (HEK293)、人類胚胎腎293T (HEK293T)、NS0細胞、SP2/0細胞、YO骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6細胞、融合瘤細胞、NIH3T3細胞、起點具有SV40基因物質之CV-1 (猿猴)(COS)細胞、HeLa、中國倉鼠卵巢(CHO)或酵母細胞,或此項技術中已知適合於生產重組產物的其他真核細胞。用於產生表現載體、轉化宿主細胞以及表現及回收CasX變異體及gRNA之例示性方法描述於實例中。
編碼CasX變異體或gRNA構築體之基因可在一或多個步驟中進行,完全以合成方式或藉由與酶方法(諸如限制酶介導之選殖、PCR及重疊延伸)組合之合成,包括更全面描述於實例中之方法。本文所揭示之方法可用於例如連接編碼所需序列之各種組分(例如,CasX及gRNA)基因之多核苷酸的序列。編碼多肽組合物之基因係使用基因合成之標準技術自寡核苷酸組裝。
在一些實施例中,編碼CasX蛋白之核苷酸序列對於預期宿主細胞經密碼子最佳化。此類型最佳化可能需要編碼核苷酸序列之突變來模仿預期宿主生物體或細胞之密碼子偏好,同時編碼相同CasX蛋白。因此,密碼子可改變,但經編碼之蛋白質或gRNA保持不變。舉例而言,若CasX蛋白之預期目標細胞為人類細胞,則可使用人類密碼子最佳化之編碼CasX之核苷酸序列。作為另一非限制性實例,若預期宿主細胞為小鼠細胞,則可產生小鼠密碼子最佳化之編碼CasX之核苷酸序列。基因設計可使用使適合於宿主細胞之密碼子使用及胺基酸組成最佳化的算法進行,該宿主細胞用於產生參考CasX或CasX變異體。在一種本發明方法中,編碼構築體之組分的多核苷酸庫經產生且接著組裝,如上文所描述。隨後組裝所得基因,且所得基因用於轉化宿主細胞且產生及回收CasX變異體,或用於評估其特性之gRNA組合物,如本文所描述。
本發明提供含有複製及控制序列之質體表現載體之用途,該等複製及控制序列與宿主細胞相容且由宿主細胞識別且可操作地連接於編碼多肽之基因以控制多肽之表現或RNA之轉錄。此類載體序列對於各種細菌、酵母菌及病毒而言為熟知的。可用之適用表現載體包括例如染色體、非染色體及合成DNA序列之片段。「表現載體」係指含有可操作地連接於適合之對照序列之DNA序列的DNA構築體,該對照序列能夠影響適合之宿主中編碼多肽之DNA的表現。要求為載體在所選宿主細胞中為可重複及可存活的。可按需要使用低複本數或高複本數載體。載體之控制序列包括實現轉錄之啟動子、視情況存在之控制此類轉錄之操縱序列、編碼適合之mRNA核糖體結合位點之序列及控制轉錄及轉譯終止之序列。在一些實施例中,編碼gRNA之核苷酸序列可操作地連接於控制元件,例如轉錄控制元件,諸如啟動子。在一些實施例中,編碼CasX蛋白之核苷酸序列可操作地連接於控制元件;例如轉錄控制元件,諸如啟動子。在其他情況下,編碼CasX及gRNA之核苷酸連接且可操作地連接於單個控制元件。啟動子可為任何DNA序列,其於所選宿主細胞中表明轉錄活性且可衍生自編碼與宿主細胞同源或異源之蛋白質之基因。例示性調節元件包括轉錄啟動子、轉錄強化子元件、轉錄終止信號、內部核糖體進入位點(IRES)或P2A肽以允許多個基因自單一轉錄物轉譯;多腺苷酸化序列,其用以促進下游轉錄終止;用於使轉譯起始最佳化之序列;及轉譯終止序列。在一些情況下,啟動子為組成性活化啟動子。在一些情況下,啟動子為可調節啟動子。在一些情況下,啟動子為誘導型啟動子。在一些情況下,啟動子為組織特異性啟動子。在一些情況下,啟動子為細胞類型特異性啟動子。在一些情況下,轉錄控制元件(例如啟動子)在目標細胞類型或目標細胞群體中起作用。舉例而言,在一些情況下,轉錄控制元件可在真核細胞中起作用,例如用於病毒或XDP載體之封裝細胞、造血幹細胞(HSC)、造血前驅細胞(HPC)、CD34+細胞、間葉幹細胞(MSC)、胚胎幹(ES)細胞、誘導性多潛能幹細胞(iPSC)、共同骨髓前驅細胞、前紅血球母細胞及紅血球母細胞。
Pol II啟動子之非限制性實例包括但不限於EF-1α、EF-1α核心啟動子、Jens Tornoe (JeT)、來自巨細胞病毒之啟動子(CMV)、即刻早期CMV (CMVIE)、CMV強化子、單純疱疹病毒(HSV)、胸苷激酶、早期及晚期猿猴病毒40 (SV40)、SV40強化子、來自反轉錄病毒之長末端重複序列(LTR)、小鼠金屬硫蛋白-I、腺病毒主要晚期啟動子(Ad MLP)、CMV啟動子全長啟動子、最小CMV啟動子、雞Œ≤-肌蛋白啟動子(CBA)、CBA雜種(CBh)、具有巨細胞病毒強化子之雞Œ≤-肌蛋白啟動子(CB7)、雞β-肌動蛋白啟動子及兔β-球蛋白剪接受體位點融合(CAG)、勞氏肉瘤病毒(RSV)啟動子、HIV-Ltr啟動子、hPGK啟動子、HSV TK啟動子、7SK啟動子、Mini-TK啟動子、賦予神經元特異性表現之人類突觸蛋白I (SYN)啟動子、β-肌蛋白啟動子、超核心啟動子1 (SCP1)、用於神經元中之選擇性表現之Mecp2啟動子、最小IL-2啟動子、勞氏肉瘤病毒強化子/啟動子(單個)、脾病灶形成病毒長末端重複序列(LTR)啟動子、TBG啟動子、來自人類甲狀腺素結合球蛋白基因之啟動子(肝特異性)、PGK啟動子、人類泛素C啟動子(UBC)、UCOE啟動子(HNRPA2B1-CBX3之啟動子)、合成CAG啟動子、組蛋白H2啟動子、組蛋白H3啟動子、U1a1小細胞核RNA啟動子(226 nt)、U1a1小細胞核RNA啟動子(226 nt)、U1b2小細胞核RNA啟動子(246 nt)、GUSB啟動子、CBh啟動子、視紫質(Rho)啟動子、易沉默脾病灶形成病毒(SFFV)啟動子、人類H1啟動子(H1)、POL1啟動子、TTR最小強化子/啟動子、b-驅動蛋白啟動子、小鼠乳房腫瘤病毒長末端重複序列(LTR)啟動子、人類真核起始因子4A (EIF4A1)啟動子、ROSA26啟動子、甘油醛3-磷酸去氫酶(GAPDH)啟動子、tRNA啟動子及前述之截短形式及序列變異體。在特定實施例中,pol II啟動子為EF-1α,其中該啟動子增強轉染效率、轉殖基因轉錄或CRISPR核酸酶之表現、在長期培養中表現陽性純系之比例及附加型載體之複本數。
pol III啟動子之非限制性實例包括但不限於U6、微型U6、U6截短型啟動子、7SK及H1變異體、BiH1 (雙向H1啟動子)、BiU6、Bi7SK、BiH1 (雙向U6、7SK及H1啟動子)、大猩猩U6、恆河猴U6、人類7SK、人類H1啟動子及其序列變異體。在前述實施例中,pol III啟動子增強gRNA之轉錄。
適當載體及啟動子之選擇完全在一般技術者之水準內,與其控制表現相關,例如用於修飾基因。表現載體亦可含有用於轉譯起始及轉錄終止之核糖體結合位點。表現載體亦可包括用於擴增表現之適當的序列。表現載體亦可包括編碼可融合至CasX蛋白之蛋白質標籤(例如6×His標籤、血球凝集素標籤、螢光蛋白等)之核苷酸序列,因此產生用於純化或偵測之嵌合CasX蛋白。
本發明之重組表現載體亦可包含促進本發明之CasX蛋白及gRNA之穩固表現的元件。舉例而言,重組表現載體可包括多腺苷酸化信號(聚(A))、內含子序列或轉錄後調節元件(諸如土拔鼠肝炎轉錄後調節元件(WPRE))中之一或多者。例示性聚A序列包括hGH聚(A)信號(短)、HSV TK聚(A)信號、合成多腺苷酸化信號、SV40聚(A)信號、β-球蛋白聚(A)信號及其類似物。一般熟習此項技術者將能夠選擇本文所描述之重組表現載體中包括之適合元件。
在一些實施例中,本發明提供一或多個重組表現載體,其包含以下各項中之一或多者:(i)供體模板核酸之核苷酸序列,其中供體模板包含與目標核酸之目標基因座(例如,目標基因體)的序列具有同源性的核苷酸序列;(ii)核苷酸序列,其編碼與可操作地連接於啟動子之靶向基因體(例如經組態為單或雙導引RNA)之基因座的目標序列的gRNA,該啟動子在諸如真核細胞之目標細胞中可操作;及(iii)核苷酸序列,其編碼可操作地連接於在諸如真核細胞之目標細胞中可操作的啟動子之CasX蛋白。在一些實施例中,編碼供體模板、gRNA及CasX蛋白之序列處於不同重組表現載體中,且在其他實施例中,一或多個多核苷酸序列(用於供體模板、CasX及gRNA)處於相同重組表現載體中。
藉由多種程序將多核苷酸序列插入至載體中。一般而言,DNA係使用此項技術中已知之技術插入至適當限制性核酸內切酶位點中。載體組分一般包括但不限於以下中之一或多者:信號序列、複製起點、一或多個標誌物基因、強化子元件、啟動子及轉錄終止序列。含有此等組分中之一或多者之適合之載體的構築採用熟習此項技術者已知之標準連接技術。此類技術為此項技術中熟知且詳盡描述於科學及專利文獻中。各種載體為公開可用的。載體可例如呈可便利地經受重組DNA程序之質體、黏質體、病毒粒子或噬菌體形式,且載體之選擇將通常取決於其所引入之宿主細胞。因此,載體可為自主複製載體,亦即以染色體外實體形式存在之載體,載體複製獨立於染色體複製,例如質體。或者,載體可為當引入宿主細胞中時整合至宿主細胞基因體中且連同其已整合之染色體進行複製之載體。一旦引入適合之宿主細胞中,可使用此項技術中已知之任何核酸或蛋白質分析測定涉及抗原處理、抗原呈現、抗原識別及/或抗原反應之蛋白質表現。舉例而言,參考CasX或CasX變異體之經轉錄之mRNA的存在可藉由習知雜交分析(例如北方墨點分析法)、擴增程序(例如RT-PCR)、SAGE(美國專利第5,695,937號)及基於陣列之技術(參見例如美國專利第5,405,783號、第5,412,087號及第5,445,934號),使用與任何多核苷酸區域互補之探針來偵測和及/或定量。
多核苷酸及重組表現載體可藉由多種方法遞送至目標宿主細胞。此類方法包括(但不限於)病毒感染、轉染、脂質體轉染、電穿孔、磷酸鈣沈澱、聚乙烯亞胺(PEI)介導之轉染、DEAE-聚葡萄糖介導之轉染、顯微注射、脂質體介導之轉染、粒子槍技術、核轉染、藉由融合至或募集供體DNA之細胞穿透CasX蛋白質之直接添加、細胞擠壓、磷酸鈣沈澱、直接顯微注射、奈米粒子介導之核酸遞送,及使用來自Qiagen之市售TransMessenger®反應劑、來自Stemgent之StemfectTM RNA轉染套組,及來自Mirus Bio LLC之TransIT®-mRNA轉染套組、龍沙核轉染、Maxagen電穿孔及其類似方法。
重組表現載體序列可封裝至病毒或類病毒粒子(在本文中亦稱為「粒子」或「病毒粒子」)中以用於細胞之後續感染及離體、活體外或活體內轉化。此類粒子或病毒粒子將通常包括衣殼化或封裝載體基因體之蛋白質。適合表現載體可包括基於以下之病毒表現載體:痘瘡病毒;脊髓灰白質炎病毒;腺病毒;反轉錄病毒載體(例如,鼠白血病病毒)、脾壞死病毒,及衍生自反轉錄病毒(諸如勞氏肉瘤病毒、哈維肉瘤病毒、禽類白血病病毒、慢病毒、人類免疫缺乏病毒、骨髓增生肉瘤病毒及乳房腫瘤病毒)之載體;及其類似者。在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組腺相關病毒(AAV)載體。在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組慢病毒載體。在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組反轉錄病毒載體。
在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組腺相關病毒(AAV)載體。在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組慢病毒載體。在一些實施例中,本發明之重組表現載體為重組反轉錄病毒載體。
AAV為小(20 nm)非病原病毒,其適用於在使用病毒載體活體內或離體遞送至細胞(諸如真核細胞)以製備用於向個體投與之細胞的情形下治療人類疾病。產生構築體,例如編碼如本文所描述之CasX蛋白質及/或CasX gRNA實施例中之任一者的構築體,且側接AAV反向末端重複序列(ITR)序列,藉此使得能夠將AAV載體封裝至AAV病毒粒子中。
「AAV」載體可指天然存在之野生型病毒自身或其衍生物。該術語涵蓋所有亞型、血清型及假型,及天然存在之及重組形式,除了另外要求時。如本文所用,術語「血清型」係指基於衣殼蛋白與界定抗血清之反應性鑑別且區別於其他AAV之AAV,例如存在許多已知的靈長類動物AAV血清型。在一些實施例中,AAV載體係選自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV 44.9、AAV-Rh74 (恆河猴衍生之AAV)及AAVRh10,及此等血清型之經修飾衣殼。舉例而言,血清型AAV-2用於指含有自AAV-2之cap基因編碼之衣殼蛋白及含有來自相同AAV-2血清型之5'及3' ITR序列之基因體的AAV。假模式化AAV係指含有來自一種血清型之衣殼蛋白及包括第二血清型之5'-3' ITR之病毒基因體的AAV。將預期假模式化rAAV具有衣殼血清型之細胞表面結合特性及與ITR血清型一致之遺傳特性。假模式化重組AAV(rAAV)使用此項技術中所描述之標準技術產生。如本文所用,舉例而言,rAAV1可用於指衣殼蛋白及5'-3' ITR均來自相同血清型之AAV,或其可指具有來自血清型1之衣殼蛋白及來自不同AAV血清型(例如AAV血清型2)之5'-3' ITR的AAV。對於本文中說明之各實例,載體設計及生產之規格描述衣殼及5'-3' ITR序列之血清型。
「AAV病毒」或「AAV病毒粒子」係指由至少一種AAV衣殼蛋白(較佳野生型AAV之所有衣殼蛋白)及衣殼化多核苷酸構成之病毒粒子。若粒子另外包含異源多核苷酸(亦即,除待遞送至哺乳動物細胞之野生型AAV基因體以外的多核苷酸),則其通常稱為「rAAV」。例示性異源多核苷酸為包含本文所描述之任一實施例之CasX蛋白及/或sgRNA及視情況存在之供體模板的多核苷酸。
「腺相關病毒反向末端重複序列」或「AAV ITR」意指AAV基因體之各端處發現的此項技術中公認的區域,其順式充當DNA複製起點且充當病毒之封裝信號。AAV ITR連同AAV rep編碼區提供自插入兩個側接ITR之間的核苷酸序列之有效切除及解救,及將該核苷酸序列整合至哺乳動物細胞基因體中。
已知AAV ITR區域之核苷酸序列。參見例如Kotin, R.M. (1994) Human Gene Therapy 5:793-801; Berns, K. I. 「Parvoviridae and their Replication」, Fundamental Virology, 第2版, (B. N. Fields及D. M. Knipe編)。如本文所用,AAV ITR無需具有所描繪之野生型核苷酸序列,而是可例如藉由插入、缺失或取代核苷酸來改變。另外,AAV ITR可衍生自若干AAV血清型中之任一者,包括但不限於AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV-Rh74及AAVRh10,及此等血清型之經修飾衣殼。此外,側接AAV載體中之所選核苷酸序列的5'及3' ITR不必相同或衍生自相同AAV血清型或分離株,只要其如所預期地起作用,亦即允許自宿主細胞基因體或載體切除及解救所關注序列,及允許將異源序列整合至受體細胞基因體中(當AAV Rep基因產物存在於細胞中時)。使用AAV血清型將異源序列整合至宿主細胞中為此項技術中已知的(參見例如WO2018195555A1及US20180258424A1,其以引用之方式併入本文中)。
「AAV rep編碼區」意指編碼複製蛋白Rep 78、Rep 68、Rep 52及Rep 40之AAV基因體之區域。此等Rep表現產物已展示出具有許多功能,包括識別、結合及切割DNA複製之AAV起點、DNA解旋酶活性及調節AAV (或其他異源)啟動子之轉錄。複製AAV基因體總體需要Rep表現產物。「AAV cap編碼區」意謂編碼衣殼蛋白VP1、VP2及VP3,或其功能同源物之AAV基因體區域。此等Cap表現產物提供封裝病毒基因體總體需要之封裝功能。
在一些實施例中,用於將針對CasX及gRNA及視情況存在之DMPK供體模板核苷酸之編碼序列遞送至宿主細胞的AAV衣殼可衍生自若干AAV血清型中之任一者,包括但不限於AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV 44.9、AAV-Rh74 (恆河猴衍生之AAV)及AAVRh10,及衍生自AAV血清型2之AAV ITR。在特定實施例中,AAV1、AAV7、AAV6、AAV8或AAV9用於將CasX、gRNA及視情況存在之供體模板核苷酸遞送至宿主肌肉細胞。
為了產生rAAV病毒粒子,使用已知技術,諸如藉由轉染將AAV表現載體引入至適合之宿主細胞中。封裝細胞通常用於形成病毒粒子;此類細胞包括HEK293細胞(及此項技術中已知之其他細胞),其封裝腺病毒。多種轉染技術為此項技術中總體已知的;參見例如Sambrook等人(1989) Molecular Cloning, a laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratories, New York。尤其適合之轉染方法包括磷酸鈣共沈澱、直接顯微注射至經培養細胞中、電穿孔、脂質體介導之基因轉移、脂質介導之轉導及使用高速微彈之核酸遞送。
在本發明之rAAV構築體之優勢中,第2類第V型CRISPR核酸酶之較小尺寸;例如實施例之CasX變異體允許將所有必需編輯及輔助表現組分納入轉殖基因中,使得單一rAAV粒子可將此等組分以導致能夠有效修飾目標細胞之目標核酸之CRISPR核酸酶及gRNA表現的形式遞送及轉導至目標細胞中。此類構築體之代表性示意圖呈現於圖13中。此與其他CRISPR系統(諸如Cas9)明顯對比,其中通常採用雙粒子系統以將必要編輯組分遞送至目標細胞。因此,在rAAV系統之一些實施例中,本發明提供:i)第一質體,包含ITR、編碼CasX變異體之序列、編碼一或多個gRNA之序列、可操作地連接於CasX之第一啟動子及可操作地連接於gRNA之第二啟動子,及視情況存在之一或多個強化子元件;ii)第二質體,其包含rep及cap基因;及iii)第三質體,包含輔助基因,其中在轉染適合之封裝細胞後,該細胞能夠產生rAAV,該rAAV具有將能夠表現CasX核酸酶的序列及具有編輯目標細胞之目標核酸的能力的gRNA遞送至單一粒子中之目標細胞的能力。在rAAV系統之一些實施例中,編碼CRISPR蛋白之序列及編碼至少第一gRNA之序列的長度少於約3100個、少於約3090個、少於約3080個、少於約3070個、少於約3060個、少於約3050個或少於約3040個核苷酸,使得編碼第一及第二啟動子之序列及視情況存在之一或多個強化元件可具有至少約1300個、至少約1350個、至少約1360個、至少約1370個、至少約1380個、至少約1390個、至少約1400個、至少約1500個、至少約1600個核苷酸,至少1650個、至少約1700個、至少約1750個、至少約1800個、至少約1850個或至少約1900個核苷酸之合併長度。在rAAV系統之一些實施例中,編碼第一啟動子及至少一個輔助元件之序列具有大於至少約1300個、至少約1350個、至少約1360個、至少約1370個、至少約1380個、至少約1390個、至少約1400個、至少約1500個、至少約1600個核苷酸、至少1650個、至少約1700個、至少約1750個、至少約1800個、至少約1850個或至少約1900個核苷酸之合併長度。在rAAV系統之一些實施例中,編碼第一及第二啟動子及至少一個輔助元件之序列具有大於至少約1300個、至少約1350個、至少約1360個、至少約1370個、至少約1380個、至少約1390個、至少約1400個、至少約1500個、至少約1600個核苷酸、至少1650個、至少約1700個、至少約1750個、至少約1800個、至少約1850個或至少約1900個核苷酸合併長度。
在一些實施例中,經上述AAV表現載體轉染之宿主細胞使得能夠提供AAV輔助功能,以便複製及衣殼化由AAV ITR側接之核苷酸序列,以產生rAAV病毒粒子。AAV輔助功能通常為AAV衍生之編碼序列,其可經表現以提供AAV基因產物,該等AAV基因產物又在反式起作用以用於產生性AAV複製。AAV輔助功能在本文中用於補充自AAV表現載體缺失之必需AAV功能。因此,AAV輔助功能包括一種或兩種編碼rep及cap編碼區之AAV ORF (開放閱讀框),或其功能同源物。可使用熟習此項技術者已知之方法將輔助功能引入至宿主細胞中且接著表現於宿主細胞中。通常,輔助功能係藉由用無關的輔助病毒感染宿主細胞來提供。在一些實施例中,輔助功能係使用輔助功能載體提供。取決於所利用之宿主/載體系統,多種適合之轉錄及轉譯控制元件(包括組成型及誘導型啟動子、轉錄強化子元件、轉錄終止子等)中之任一者可用於表現載體中。在一些實施例中,本發明提供包含本文所揭示之實施例之AAV載體的宿主細胞。
在其他實施例中,適合之載體可包括病毒樣粒子(VLP)。病毒樣粒子(VLP)為與病毒緊密相似但不含病毒基因物質且因此為非感染性的粒子。在一些實施例中,VLP包含編碼所感興趣之轉殖基因(例如,封裝有一或多種病毒結構蛋白之CasX蛋白及/或gRNA實施例中之任一者,及視情況存在之本文所描述之供體模板多核苷酸)之多核苷酸。
在其他實施例中,本發明提供活體外產生之CasX遞送粒子(XDP),其包含CasX:gRNA RNP複合物及視情況存在之供體模板。來自不同病毒之結構蛋白之組合可用於產生XDP,包括來自病毒家族之組分,包括微小病毒科(例如腺相關病毒)、反轉錄病毒科(例如α反轉錄病毒屬、β反轉錄病毒屬、γ反轉錄病毒屬、δ反轉錄病毒屬、ε反轉錄病毒屬或慢病毒屬)、黃病毒科(例如C型肝炎病毒)、副黏液病毒科(例如立百(Nipah))及噬菌體(例如Qβ、AP205)。在一些實施例中,本發明提供使用反轉錄病毒之組分設計之XDP系統,該等反轉錄病毒包括慢病毒屬(諸如HIV)及α反轉錄病毒屬、β反轉錄病毒屬、γ反轉錄病毒屬、δ反轉錄病毒屬、ε反轉錄病毒屬,其中將包含編碼各種組分之多核苷酸的個別質體引入至封裝細胞中,該封裝細胞又產生XDP。在一些實施例中,本發明提供包含以下之一或多種組分的XDP:i)蛋白酶、ii)蛋白酶裂解位點、iii)選自以下之Gag多聚蛋白之一或多種組分:基質蛋白(MA)、核衣殼蛋白(NC)、衣殼蛋白(CA)、p1肽、p6肽、P2A肽、P2B肽、P10肽、p12肽、PP21/24肽、P12/P3/P8肽及P20肽;v) CasX;vi) gRNA,及vi)靶向醣蛋白及抗體片段,其中所得XDP粒子衣殼化CasX:gRNA RNP。編碼Gag、CasX及gRNA之多核苷酸可進一步包含成對組分,其經設計以輔助組分遷移出宿主細胞之細胞核且促進將複合之CasX:gRNA募集至出芽XDP中。此類組分之非限制性實例包括髮夾RNA,諸如MS2髮夾、PP7髮夾、Qβ髮夾及U1髮夾II,其作為結合搭配物併入至gRNA中,該等髮夾RNA對於封裝募集劑MS2外殼蛋白、PP7外殼蛋白、Qβ外殼蛋白及U1A信號識別粒子分別具有融合至Gag多聚蛋白之結合親和力。已發現,將所插入之結合搭配物併入導引RNA中且將封裝募集劑併入包含Gag多肽之核酸中有助於將XDP粒子封裝,此部分歸因於gRNA之CasX的親和力,產生RNP,使得在XDP之衣殼化過程期間gRNA及CasX兩者與Gag相關,從而與缺乏結合搭配物及封裝募集劑之構築體相比增加包含RNP之XDP的比例。在其他實施例中,gRNA可包含與Rev具有結合親和力之Rev反應元件(RRE)或其部分,該Rev反應元件可連接於Gag多聚蛋白。在其他實施例中,gRNA可包含一或多個RRE及一或多個MS2髮夾序列。RRE可選自由以下組成之群:Rev反應元件(RRE)之莖IIB、RRE之莖II-V、RRE之莖II、莖IIB之Rev結合元件(RBE)及全長RRE。在前述實施例中,組分包括序列UGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACA (莖IIB,SEQ ID NO: 1280)、GCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGAC GCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGC (莖II,SEQ ID NO: 1281)、CAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUC AAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUG (莖II-V,SEQ ID NO: 1282)、GCUGACGGUACAGGC (RBE,SEQ ID NO: 1284)及AGGAGCUUUGUUCCUUGGGUUCUUGGGAGCAGCAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUGGCUGUGGAAAGAUACCUAAAGGAUCAACAGCUCCU (全長RRE,SEQ ID NO: 1283)。在其他實施例中,gRNA可包含一或多個RRE及一或多個MS2髮夾序列。在特定實施例中,gRNA包含MS2髮夾變異體,其經最佳化以增加與MS2外殼蛋白之結合親和力,進而增強gRNA及相關CasX併入至出芽XDP中。在一些實施例中,包含MS2髮夾變異體及RRE之gRNA變異體包括gRNA變異體275-315 (SEQ ID NO: 2353-2393),其包含如表36中所闡述之MS2序列。在一些實施例中,本發明提供gRNA變異體,其包含一或多個MS2髮夾序列變異體,其中該變異體表現出小於100 nM、小於50 nM、小於35 nM、小於10 nM、小於3 nM或小於2 nM之對其MS2外殼蛋白配位體之K
D,且包含gRNA變異體之XDP在活體外細胞分析中表現出針對目標核酸之提高之編輯活性,其中EC
50係小於10
8,或小於10
7,或小於10
6個粒子,以在50%之細胞中達成編輯。在表面上之靶向醣蛋白或抗體片段,其將XDP之向性提供至目標細胞,其中在投與及進入目標細胞後,RNP分子自由輸送至細胞之細胞核中。包膜醣蛋白可衍生自此項技術中已知賦予XDP向性之任何包膜病毒,包括但不限於由以下組成之群;阿艮亭鹼出血熱病毒、澳大利亞蝙蝠病毒、加洲苜蓿夜蛾多核多角體病毒、禽類白血病病毒、狒狒內源性病毒、玻利維亞出血熱病毒、博納病病毒、布里達病毒、布尼安維拉病毒、金迪普拉病毒、屈公病毒、克里米亞-岡果出血熱病毒、登革熱病毒、杜文海格病毒病毒、東部馬腦炎病毒、埃博拉出血熱病毒、埃博拉紮伊爾病毒、腸腺病毒、暫時熱病毒、艾伯斯坦-巴病毒(EBV)、歐洲蝙蝠病毒1、歐洲蝙蝠病毒2、Fug合成gP融合、長臂猿白血病病毒、漢坦病毒、亨德拉病毒、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、D型肝炎病毒、E型肝炎病毒、G型肝炎病毒(GB病毒C)、1型單純疱疹病毒、2型單純疱疹病毒、人類巨細胞病毒(HHV5)、人類泡沫病毒、人類疱疹病毒(HHV)、人類疱疹病毒7、6型人類疱疹病毒、8型人類疱疹病毒、人類免疫缺乏病毒1 (HIV-1)、人類間質肺炎病毒、人類T淋巴細胞病毒1、A型流感、B型流感、C型流感病毒、日本腦炎病毒、卡堡氏肉瘤相關疱疹病毒(HHV8)、Kaysanur森林病病毒、拉克羅斯病毒、拉各斯蝙蝠病毒、拉沙熱病毒、淋巴球性脈絡叢腦膜炎病毒(LCMV)、馬丘波病毒、馬堡出血熱病毒、麻疹病毒、中東呼吸症候群相關冠狀病毒、莫科拉病毒、莫洛尼鼠類白血病病毒、猴痘病毒、小鼠乳房腫瘤病毒、腮腺炎病毒、鼠γ疱疹病毒、新城雞瘟病毒、立百病毒、立百病毒、諾沃克病毒、鄂木斯克出血熱病毒、乳頭狀瘤病毒、小病毒、假性狂犬病病毒、昆倫佛病毒、狂犬病病毒、RD114內源性貓科動物反轉錄病毒、呼吸道融合病毒(RSV)、東非瑞夫特河谷羊熱病病毒、羅斯河病毒、輪狀病毒、勞氏肉瘤病毒、德國麻疹病毒、薩比亞相關出血熱病毒、SARS相關冠狀病毒(SARS-CoV)、仙台病毒、塔卡里伯病毒、托高土病毒、蜱傳腦炎病毒、水痘帶狀疱疹病毒(HHV3)、水痘帶狀疱疹病毒(HHV3)、重型天花病毒、小型天花病毒、委內瑞拉馬腦炎病毒、委內瑞拉出血熱病毒、水泡性口炎病毒(VSV)、VSV-G、水泡病毒、西尼羅河病毒、西部馬腦炎病毒及茲卡病毒。
在其他實施例中,本發明提供前述XDP且進一步包含pol多聚蛋白(例如蛋白酶)之一或多種組分,及視情況,第二CasX或供體模板。本發明涵蓋經編碼組分之配置的多個組態,包括一些經編碼組分之複本。前述提供優於此項技術中之其他載體的優點在於,分裂及非分裂細胞之病毒轉導係有效的,且XDP遞送逃離個體之免疫監督機制之強效及短壽命之RNP,否則該免疫監督機制會偵測外源蛋白。非限制性例示性XDP系統描述於PCT/US20/63488及WO2021113772A1中,其以引用之方式併入本文中。在一些實施例中,本發明提供包含編碼前述XDP實施例中之任一者之多核苷酸或載體的宿主細胞。
在產生及回收包含本文所描述之實施例中之任一者之CasX:gRNA RNP的XDP後,XDP可用於藉由投與此類XDP編輯個體之目標細胞之方法中,如以下更充分描述。
對於非病毒遞送,載體亦可經遞送,其中編碼CasX變異體及gRNA之一或多個載體係在奈米粒子中調配,其中涵蓋之奈米粒子包括但不限於奈米球、脂質體、脂質奈米粒子、量子點、聚乙二醇粒子、水凝膠及膠束。脂質奈米粒子一般由可離子化陽離子脂質及三種或三種以上額外組分(諸如膽固醇、DOPE、聚乳酸-共-乙醇酸及含有脂質之聚乙二醇(PEG))構成。在一些實施例中,本文所揭示之實施例之CasX變異體係在脂質奈米粒子中調配。在一些實施例中,脂質奈米粒子包含本文所揭示之實施例之gRNA。在一些實施例中,脂質奈米粒子包含與gRNA複合之CasX變異體之RNP。在一些實施例中,系統包含脂質奈米粒子,該脂質奈米粒子包含編碼CasX變異體及gRNA之核酸,及視情況存在之供體模板核酸。在一些實施例中,CasX:gRNA系統之組分調配於用於遞送至細胞或向有需要之個體投與之獨立脂質奈米粒子中。
VII. 用於修飾目標核酸之方法
本文所提供之CRISPR蛋白質、導引物、核酸及其變異體以及編碼此類組分之載體適用於各種應用,包括治療學、診斷學及研究。
在一些實施例中,為了影響本發明之用於細胞中之目標核酸之基因編輯及修飾之方法,本文提供可程式化的第2類第V型CasX變異體及gRNA變異體編輯對(CasX:gRNA)。本文所提供之對的可程式化性質允許精確靶向以在基因目標核酸中之一或多個預定感興趣區處達成所需修飾。可採用多種策略及方法使用本文所提供之系統修飾細胞中之目標核酸序列。如本文所用,「修飾」包括但不限於裂解、切割、編輯、缺失、剔除、減弱、突變、校正、外顯子跳躍及其類似者。如本文所述,引入目標核酸之雙股裂解之CasX變異體在目標股上之PAM 5'之18-26個核苷酸及在非目標股上之3'之10-18個核苷酸內產生雙股斷裂。所得修飾可藉由非同源DNA末端連接(NHEJ)修復機制在彼等區域中引起一或多個核苷酸之隨機插入或缺失(插入缺失)或取代、重複、移碼或反轉。
在一些實施例中,本發明提供修飾細胞中之目標核酸的方法,該方法包含使細胞之目標核酸與以下各者接觸:i)第2類第V型CRISPR蛋白及gRNA (CasX:gRNA)編輯對,其包含本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異體及gRNA變異體;ii) CasX:gRNA編輯對,以及本文所描述之實施例中之任一者之供體模板;iii)核酸,其編碼CasX及gRNA編輯對,且視情況包含供體模板;iv)載體,其包含上述(iii)之核酸;v) XDP,其包含本文所描述之實施例中之任一者之CasX:gRNA編輯對;或vi) (i)至(v)之兩個或兩個以上之組合,其中使目標核酸與CasX蛋白及gRNA基因編輯對及視情況存在之供體模板接觸修飾目標核酸。在一些情況下,修飾引起細胞中突變之校正或補償,從而產生經編輯之細胞,使得可出現功能性基因產物之表現。在該方法之其他實施例中,修飾包含藉由基因之減弱或剔除抑制或消除基因產物之表現。
在修飾細胞中之目標核酸序列之方法的一些實施例中,其中該方法包含使細胞之目標核酸與CasX:gRNA編輯對接觸,其中該編輯對包含選自由如表3中所闡述之SEQ ID NO: 247-592及1147-1231組成之群的CasX變異體;選自由SEQ ID NO: 270-592及1147-1231組成之群的CasX變異體;選自由SEQ ID NO: 415-592及1147-1231組成之群的CasX變異體;或與其至少60%一致、至少70%一致、至少80%一致、至少81%一致、至少82%一致、至少83%一致、至少84%一致、至少85%一致、至少86%一致、至少86%一致、至少87%一致、至少88%一致、至少89%一致、至少89%一致、至少90%一致、至少91%一致、至少92%一致、至少93%一致、至少94%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致、至少99%一致或至少99.5 %一致之變異體序列,gRNA支架包含選自由如表2中所闡述之SEQ ID NO: 2101-2332及2353-2398組成之群的序列,gRNA支架包含選自由SEQ ID NO: 2238-2332及2353-2398組成之群的序列,RNA支架包含選自由SEQ ID NO: 2281-2332及2353-2398組成之群的序列,或與其至少65%一致、至少70%一致、至少75%一致、至少80%一致、至少81%一致、至少82%一致、至少83%一致、至少84%一致、至少85%一致、至少86%一致、至少86%一致、至少87%一致、至少88%一致、至少89%一致、至少89%一致、至少90%一致、至少91%一致、至少92%一致、至少93%一致、至少94%一致、至少95%一致、至少96%一致、至少97%一致、至少98%一致、至少99%一致、至少99.5 %一致之序列,且gRNA包含與目標核酸互補之靶向序列且能夠與目標核酸雜交。
在一些實施例中,CasX:gRNA基因編輯對能夠在核糖核蛋白複合物(RNP)中結合在一起。在一些實施例中,CasX:gRNA基因編輯對在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。在一些實施例中,RNP能夠結合目標核酸且在目標核酸中產生雙股斷裂,其在目標核酸中產生永久性插入缺失或突變。在其他實施例中,RNP能夠結合目標核酸且在目標核酸中產生一或多個單股切口,其在目標核酸中產生永久性插入缺失或突變。在其他實施例中,RNP能夠結合目標核酸,但不能夠裂解目標核酸;亦即含有dCasX變異體。在該方法之一些實施例中,CasX變異蛋白可以可視情況與增加產物溶解度之多肽域融合的多肽形式提供至細胞。域可經由限定蛋白酶裂解位點連接至多肽;例如TEV序列,其藉由TEV蛋白酶裂解。連接子亦可包括一或多個可撓性序列;例如1至10個甘胺酸殘基。在一些實施例中,融合蛋白之裂解係在維持產物之溶解度的緩衝液中進行;例如在0.5至2 M脲存在下、在增加溶解度之多肽及/或多核苷酸存在下及其類似者。感興趣域可包括核內體裂解域;例如流感HA域;及幫助生產之其他多肽,例如IF2域、GST域、GRPE域及其類似物。多肽可調配用於改良穩定性。舉例而言,肽可經聚乙二醇化,其中聚伸乙基氧基在血流中提供增強之壽命。
在修飾細胞中之目標核酸序列之方法的其它實施例中,該方法包含使目標核酸序列與複數個RNP接觸,該等RNP具有靶向不同或重疊基因部分之第一、第二或複數個gRNA,其中CasX蛋白在目標核酸中引入多個斷裂,其引起目標核酸中之永久性插入缺失或突變,如本文所描述,或切除斷裂之間的插入序列,其中相應調節基因產物之功能中之表現或改變,籍此產生經修飾之細胞。
在一些實施例中,修飾目標核酸之方法包含使目標核酸與如本文所描述之CasX:gRNA基因編輯對及供體模板接觸。因此,在一些情況下,如本文所提供之方法包括使目標核酸與供體多核苷酸接觸(例如,藉由將供體多核苷酸引入細胞中),其中供體多核苷酸、供體多核苷酸之一部分、供體多核苷酸之複本或供體多核苷酸之複本之一部分整合至目標核酸中。舉例而言,外源性供體模板可包含待藉由上游序列及引入細胞中之目標核酸序列中之下游序列整合側接之校正性序列。在其他情況下,供體模板可相對於基因體序列含有一或多個單一鹼基變化、插入、缺失、反轉或重組,其限制條件為存在與目標核酸序列之充足同源性以支援其整合至目標核酸中,其可導致移碼或其他突變,或目標核酸序列之彼部分經細胞中之有缺陷的基因之相應減弱或剔除置換。相對於裂解位點之上游及下游序列與目標核酸中之整合位點之任一側(亦即同源臂)共享序列相似性,從而促進插入。在其他情況下,外源性供體模板插入由同源非依賴性靶向整合(HITI)機制之CasX裂解產生之末端之間。藉由HITI插入之外源性序列可為任何長度,例如長度在10個與50個核苷酸之間之相對短序列,或長度為約50-1000個核苷酸之較長序列。不具有同源性可例如為不具有大於20-50%序列一致性及/或不具有低嚴格度下之特異性雜交。在其他情況下,缺乏同源性可進一步包括具有不超過5、6、7、8或9 bp一致性之準則。在一些實施例中,供體模板多核苷酸包含至少約10、至少約50、至少約100、或至少約200、或至少約300、或至少約400、或至少約500、或至少約600、或至少約700、或至少約800、或至少約900、或至少約1000、或至少約10,000、或至少約15,000個核苷酸。在其他實施例中,供體模板包含至少約10至約15,000個核苷酸、或至少約100至約10,000個核苷酸、或至少約400至約8,000個核苷酸、或至少約600至約5000個核苷酸、或至少約1000至約2000個核苷酸。在一些實施例中,供體模板為單股DNA模板或單股RNA模板。在其他實施例中,供體模板為雙股DNA模板。供體模板序列可包含相比於基因體序列之某些序列差異,例如限制位點、核苷酸多形性、可選標誌物(例如耐藥性基因、螢光蛋白、酶等)等,其可用於評定供體核酸於裂解位點處之成功插入,或在一些情況下可用於其他目的(例如表示靶向基因體基因座處之表現)。或者,此等序列差異可包括側接重組序列,諸如FLP、loxP序列或其類似者。
在一些實施例中,本發明提供修飾細胞之目標核酸序列的方法,該方法包含使該細胞之目標核酸與本文所描述之實施例中之任一者的一或多個多核苷酸接觸,其中多核苷酸編碼CasX:gRNA基因編輯對,其中gRNA包含與目標核酸序列互補且因此能夠與其雜交之靶向序列,且其中接觸引起目標核酸之修飾。將核酸(例如包含供體多核苷酸序列之核酸、編碼如本文所描述之CasX變異蛋白及gRNA變異體之一或多個核酸)引入細胞中之方法為此項技術中已知的,且可使用任何便利方法。適合之方法包括病毒感染、轉染、脂質體轉染、電穿孔、磷酸鈣沈澱、聚乙二亞胺(PEI)介導之轉染、DEAE-聚葡萄糖介導之轉染、脂質體介導之轉染、粒子槍技術、核轉染、電穿孔、藉由與供體DNA融合或募集供體DNA之細胞穿透CasX蛋白直接添加、細胞擠壓、磷酸鈣沈澱、直接顯微注射、奈米粒子介導之核酸遞送。可使用充分發展的轉染技術,及獲自Qiagen之市售TransMessenger®試劑、獲自Stemgent之Stemfect™ RNA轉染套組及獲自Mirus Bio LLC之TransIT®-mRNA轉染套組、Lonza核轉染、Maxagen電穿孔及其類似者將核酸提供至細胞。包含編碼CasX變異蛋白之核苷酸序列的核酸在一些情況下為RNA。因此,在一些實施例中,CasX變異蛋白可以RNA形式引入至細胞中。將RNA引入至細胞中之方法為此項技術中已知的,且可包括例如直接注射、轉染或用於引入DNA之任何其他方法。
在其他實施例中,本發明提供修飾細胞之目標核酸序列的方法,該方法包含使該細胞與本文所描述之實施例中之任一者之載體接觸,該載體包含編碼包含本文所描述之實施例中之任一者之CasX變異蛋白及gRNA變異體的CasX:gRNA基因編輯對的核酸,及視情況存在之供體模板,其中gRNA包含與目標核酸序列互補且因此能夠與其雜交之目標序列,其中該接觸引起目標核酸中之修飾。將重組表現載體引入至細胞中可在任何適合培養基中且在促進細胞存活之任何適合培養條件下發生。將重組表現載體引入至目標細胞中可活體內、活體外或離體進行。
在一些實施例中,載體可直接提供至目標宿主細胞。舉例而言,細胞可與包含個體核酸(例如具有供體模板序列及編碼gRNA變異體及CasX變異蛋白之重組表現載體)之載體接觸,使得載體由細胞吸收。使細胞與為質體之核酸載體接觸之方法包括電穿孔、氯化鈣轉染、顯微注射及脂質體轉染,為此項技術中熟知的。對於病毒載體遞送,可使細胞與包含個體病毒表現載體之病毒粒子接觸;例如載體為病毒粒子,諸如包含編碼CasX:gRNA組分之多核苷酸的AAV或VLP。對於非病毒遞送,載體或CasX:gRNA組分亦可經調配以遞送於脂質奈米粒子中,其中所涵蓋之脂質奈米粒子包括但不限於奈米球、脂質體、量子點、聚乙二醇粒子、水凝膠及微胞。
在一些實施例中,目標核酸之編輯係在細胞內部,例如在細胞培養系統中活體外發生。在一些實施例中,編輯在個體之細胞內活體內進行,例如在動物細胞中。在一些實施例中,該細胞為真核細胞。例示性真核細胞可包括選自由以下組成之群的細胞:小鼠細胞、大鼠細胞、豬細胞、狗細胞及非人類靈長類細胞。在一些實施例中,細胞為人類細胞。細胞之非限制性實例包括胚胎幹細胞、誘導性多潛能幹細胞、生殖細胞、纖維母細胞、寡樹突神經膠質細胞、膠細胞、造血幹細胞、神經元先驅細胞、神經元、肌細胞、骨細胞、肝細胞、胰臟細胞、視網膜細胞、癌細胞、T細胞、B細胞、NK細胞、胎兒心肌細胞、肌纖維母細胞、間葉系幹細胞、自體移植擴增心肌細胞、脂肪細胞、分化全能細胞、多潛能細胞、血液幹細胞、肌母細胞、成體幹細胞、骨髓細胞、間葉細胞、實質細胞、上皮細胞、內皮細胞、間皮細胞、纖維母細胞、骨母細胞、軟骨細胞、外源細胞、內源細胞、幹細胞、造血幹細胞、骨髓衍生之先驅細胞、心肌細胞、骨骼細胞、胎兒細胞、未分化細胞、多潛能先驅細胞、單潛能先驅細胞、單核球、心肌母細胞、骨骼肌母細胞、巨噬細胞、毛細管內皮細胞、異種細胞、同種異體細胞或產後幹細胞。在替代實施例中,細胞為原核細胞。
在活體外或離體修飾細胞之目標核酸以誘導對目標核酸之裂解或任何所需修飾之方法的一些實施例中,向細胞提供本發明之gRNA變異體及CasX變異蛋白及視情況存在之供體模板序列,無論其係作為核酸或多肽、經複合之RNP、載體或XDP引入,持續約30分鐘至約24小時,或至少約1小時、1.5小時、2小時、2.5小時、3小時、3.5小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時、12小時、16小時、18小時、20小時,或約30分鐘至約24小時之其他時段,其可以約每天至約每4天,例如每1.5天、每2天、每3天之頻率,或約每天至約每四天之任何其他頻率重複。藥劑可提供至個體細胞一或多次,例如一次、兩次、三次或超過三次,且在各接觸事件之後使細胞與藥劑一起培育一定時間量;例如30分鐘至約24小時。在基於活體外之方法中之情況下,在CasX及gRNA(及視情況存在之供體模板)之培育期之後,將培養基更換為新鮮培養基且進一步培養細胞。
在一些實施例中,該方法包含向個體投與治療有效劑量之經修飾之細胞群以校正或補償基因突變。在一些實施例中,投與經修飾之細胞使得野生型或功能性基因產物在個體中表現。在該方法之一些實施例中,總細胞之劑量在呈或約10
4與呈或約10
9個細胞/公斤(kg)體重之間的範圍內,諸如10
5與10
6個細胞/公斤體重之間,例如呈或約1×10
5個細胞/公斤、1.5×10
5個細胞/公斤、2×10
5個細胞/公斤或1×10
6個細胞/公斤體重。舉例而言,在一些實施例中,細胞以呈或約10
4與呈或約10
9個細胞/公斤(kg)體重之間,諸如10
5與10
6個細胞/公斤體重之間(例如呈或約1×10
5個細胞/公斤、1.5×10
5個細胞/公斤、2×10
5個細胞/公斤或1×10
6個細胞/公斤體重)的誤差或在其某一範圍內投與。在一個實施例中,細胞相對於待投與細胞之個體為自體的。在另一實施例中,細胞相對於待投與細胞之個體為同種異體的。在一些情況下,個體係選自由小鼠、大鼠、豬及非人類靈長類組成之群。在其他情況下,個體為人類。
VIII. 治療方法
在另一態樣中,本發明係關於治療有需要之個體中之疾病或病症的方法。多種治療策略已用於設計用於治療患有與基因突變相關之疾病或病症之個體的方法中的系統。在一些實施例中,目標核酸之修飾發生於在基因之對偶基因中具有突變之個體中,其中該突變在個體中引起疾病或病症。在一些實施例中,目標核酸之修飾將突變改變為基因之野生型對偶基因或引起功能性基因產物之表現。在一些實施例中,目標核酸之修飾阻斷減弱或剔除引起個體中之疾病或病症之基因的對偶基因的表現。
在一些實施例中,該方法包含向個體投與治療有效劑量之系統,該系統包含第2類第V型CRISPR核酸酶變異體之基因編輯對及本文所揭示之導引RNA變異體。在一些實施例中,治療之方法包含向個體投與治療有效劑量之:i) CasX:gRNA系統,其包含本文所描述之實施例中之任一者之第一CasX變異體及第一gRNA變異體(其中靶向序列與待修飾之目標核酸互補);ii) CasX:gRNA,其包含第一CasX蛋白及具有與目標核酸與供體模板互補之靶向序列的第一gRNA;iii)編碼(i)或(ii)之CasX:gRNA系統之核酸;iv)載體,其包含(iii)之核酸,其可為本文所描述之實施例中之任一者之AAV;v) XDP,其包含(i)或(ii)之CasX:gRNA系統;或vi) (i)-(v)中之兩者或更多者之組合,其中1)藉由第一gRNA靶向之個體之細胞之基因經CasX蛋白(及視情況存在之供體模板)修飾(例如減弱或剔除);或2)藉由第一gRNA靶向之個體之細胞之基因經CasX蛋白(及視情況存在之供體模板)校正或修飾,使得表現功能性基因產物。在一些實施例中,治療方法進一步包含投與第二或複數個gRNA或編碼第二或複數個gRNA之核酸,其中第二或複數個gRNA與第一gRNA相比具有與目標核酸序列之不同或重疊部分互補的靶向序列。應理解,在前述內容中,各不同gRNA與CasX蛋白配對。在其中將兩個或兩個以上基因編輯對提供至細胞(例如包含兩個包含兩個或兩個以上與相同或不同目標核酸內之不同序列互補之不同間隔子的gRNA)的實施例中,基因對可同時提供(例如兩個RNPS及/或載體)或同時遞送。或者,其可連續提供,例如首先提供第一基因編輯對,接著提供第二基因編輯對,或反之亦然。
在一些實施例中,治療方法包含投與治療有效劑量之編碼CasX:gRNA系統之AAV載體,且以至少約1×10
5載體基因體/公斤(vg/kg)、至少約1×10
6vg/kg、至少約1×10
7vg/kg、至少約1×10
8vg/kg、至少約1×10
9vg/kg、至少約1×10
10vg/kg、至少約1×10
11vg/kg、至少約1×10
12vg/kg、至少約1×10
13vg/kg、至少約1×10
14vg/kg、至少約1×10
15vg/kg或至少約1×10
16vg/kg之劑量向個體投與。在該方法之其他實施例中,AAV載體以至少約1×10
5vg/kg至約1×10
16vg/kg、至少約1×10
6vg/kg至約1×10
15vg/kg、或至少約1×10
7vg/kg至約1×10
14vg/kg之劑量向個體投與。在前述內容中,AAV載體係選自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV-Rh74或AAVRh10。在其他實施例中,治療方法包含向個體投與治療有效劑量之包含CasX:gRNA系統之RNP之XDP。在一個實施例中,以至少約1×10
5個粒子/公斤、至少約1×10
6個粒子/公斤、至少約1×10
7個粒子/公斤、至少約1×10
8個粒子/公斤、至少約1×10
9個粒子/公斤、至少約1×10
10個粒子/公斤、至少約1×10
11個粒子/公斤、至少約1×10
12個粒子/公斤、至少約1×10
13個粒子/公斤、至少約1×10
14個粒子/公斤、至少約1×10
15個粒子/公斤、至少約1×10
16個粒子/公斤之劑量向個體投與XDP。在另一實施例中,以至少約1×10
5個粒子/公斤至約1×10
16個粒子/公斤、或至少約1×10
6個粒子/公斤至約1×10
15個粒子/公斤、或至少約1×10
7個粒子/公斤至約1×10
14個粒子/公斤之劑量向個體投與XDP。可藉由選自由以下組成之群的投與途徑投與載體或XDP:腦實質內、靜脈內、動脈內、肌內、皮下、腦室內、腦池內、鞘內、顱內、玻璃體內、視網膜下、囊內及腹膜內途徑或其組合,其中投與方法係注射、輸注或植入。投與可為一次、兩次或可使用每週、每兩週、每月、每季度、每六個月、一年一次或每2或3年之方案時程多次投與。在一些情況下,個體係選自由小鼠、大鼠、豬及非人類靈長類組成之群。在其他情況下,個體為人類。
在該方法之一些實施例中,修飾包含在個體之目標細胞之目標核酸中引入單股斷裂。在其他情況下,修飾包含在個體之目標細胞之目標核酸中引入雙股斷裂。在一些實施例中,修飾在目標核酸中引入一或多種突變,諸如基因中一或多個核苷酸之插入、缺失、取代、複製或反轉,其中基因產物在個體之經修飾之細胞中之表現與未經修飾之細胞相比減少至少約10%、至少約20%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%或至少約90%。在一些情況下,個體之經修飾之細胞之基因經修飾使得至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%之經修飾之細胞不表現可偵測水準之基因產物。在一些實施例中,向患有疾病之個體投與治療有效量之CasX:gRNA系統以減弱或剔除基因產物之表現使得預防或改善潛在疾病,使得在個體中觀測到改良,儘管個體仍可能罹患潛在疾病。在其他實施例中,基因可藉由NHEJ宿主修復機制修飾,或結合藉由HDR或HITI機制插入以切除、校正或補償個體細胞中之突變的供體模板利用,使得動物型或功能性基因產物在經修飾之細胞中之表現與未經修飾之細胞相比增加至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約95%。在一些實施例中,投與治療有效量之CasX-gRNA系統使得疾病之至少一個臨床相關參數得到改善。
在一些情況下,本發明之核酸(例如,本發明之重組表現載體)或CasX變異體或gRNA變異體可在類似膠束、脂質體或脂質奈米粒子之組織化結構中用脂質覆蓋。在組織化結構與DNA複合時其稱為脂複合體。存在三種類型之脂質:陰離子型(帶負電)、中性或陽離子型(帶正電)。利用陽離子脂質的脂複合體已證實可用於基因轉移。陽離子型脂質由於其正電荷而天然地與帶負電DNA複合。亦由於其電荷,其與細胞膜相互作用。接著發生脂複合體之內飲作用,且DNA釋放至細胞質中。陽離子型脂質亦保護DNA免於被細胞降解。
在一些情況下,本發明之核酸(例如表現載體)包括用於感興趣之導引序列之插入位點。舉例而言,核酸可包括感興趣之導引序列之插入位點,其中插入位點緊鄰編碼當導引序列變化以與所需目標序列雜交時不變化之gRNA變異體(例如支架區)之部分的核苷酸序列。因此,在一些情況下,表現載體包括編碼gRNA之核苷酸序列,但編碼gRNA之間隔序列部分的部分為插入序列(插入位點)。插入位點為用於將間隔子插入所需序列中之任何核苷酸序列。與各種技術一起使用之「插入位點」為一般熟習此項技術者已知且可使用任何適宜插入位點。插入位點可用於操縱核酸序列之任何方法。舉例而言,在一些情況下,插入位點為多選殖位點(MCS)(例如包括一或多個限制酶識別序列之位點)、用於連接非依賴性選殖之位點、用於基於重組(例如基於ATT位點之重組)之選殖的位點、藉由基於CRISPR/Cas (例如Cas9)之技術識別之核苷酸序列及其類似物。
IX. 細胞
在其他實施例中,本文提供包含本文所描述之CasX:gRNA系統中之任一者之組分的細胞。在一些實施例中,細胞包含如本文所描述之gRNA變異體實施例中之任一者,且進一步包含與目標核酸互補之間隔子。在一些實施例中,細胞進一步包含如本文所描述之CasX變異體(例如表3及7之序列)。在其他實施例中,細胞包含本文所描述之CasX:gRNA實施例中之任一者之RNP。在其他實施例中,本發明提供包含編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX:gRNA系統之載體的細胞。在其他實施例中,細胞包含已藉由本文所描述之CasX:gRNA實施例編輯之目標核酸;以校正突變(敲入)或減弱或剔除缺陷基因。
在一些實施例中,細胞為經修飾之細胞(例如經遺傳修飾之細胞),其包含有包含編碼本發明之CasX變異蛋白之核苷酸序列的核酸。在一些實施例中,經遺傳修飾之細胞經包含編碼CasX變異蛋白之核苷酸序列的mRNA遺傳修飾。在一些實施例中,細胞經重組表現載體遺傳修飾,該重組表現載體包含:a)編碼本發明之CasX變異蛋白之核苷酸序列;及b)編碼本發明之gRNA之核苷酸序列,且視情況包含含有供體模板之核苷酸序列。在一些情況下,此類細胞用於產生用於編輯目標核酸之CasX:gRNA系統之個別組分或RNP。在其他情況下,已以此方式遺傳修飾之細胞可出於諸如基因療法之目的向個體投與;例如治療由基因突變或缺陷引起之疾病或病況。
可充當本發明之CasX變異蛋白及/或gRNA之受體的細胞及/或包含編碼CasX變異蛋白及/或gRNA變異體之核苷酸序列之核酸可為多種細胞中之任一者,包括例如活體外細胞;活體內細胞;離體細胞;原代細胞;永生化細胞株之細胞;癌細胞;動物細胞;植物細胞;藻類細胞;真菌細胞等。細胞可為本發明之CasX RNP之受體。細胞可為本發明之CasX系統之單一組分的受體。細胞可為編碼本文所描述之實施例中之任一者之CasX、gRNA及視情況存在之CasX:gRNA系統之供體模板的載體之受體。
可充當用於產生本文所揭示之CasX:gRNA系統之宿主細胞之細胞的非限制性實例包括原核細胞(例如大腸桿菌)及真核細胞(例如嬰兒倉鼠腎纖維母細胞(BHK)、人類胚胎腎293 (HEK293)細胞、人類胚胎腎293T (HEK293T)細胞、NS0細胞、SP2/0細胞、YO骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6細胞、融合瘤細胞、NIH3T3細胞、起點具有SV40基因物質之CV-1 (猿猴)(COS)細胞、HeLa、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或酵母細胞,或此項技術中已知適合於生產重組產物之其他真核細胞。
在一些實施例中,本發明提供經修飾用於向個體投與以治療疾病或病症的細胞群。此類細胞可相對於待投與該(等)細胞之個體為自體的。在其他實施例中,細胞相對於待投與該(等)細胞之個體可為同種異體的。細胞可為動物細胞或衍生自動物細胞。細胞可為哺乳動物細胞或衍生自哺乳動物細胞。細胞可為嚙齒動物細胞或衍生自嚙齒動物細胞,諸如大鼠或小鼠。細胞可為非人類靈長類細胞或衍生自非人類靈長類細胞。細胞可為人類細胞或衍生自人類細胞。在一些實施例中,適合之細胞可包括幹細胞(例如胚胎幹(ES)細胞、誘導性多潛能幹(iPS)細胞;生殖細胞(例如卵母細胞、精子、卵原細胞、精原細胞等);體細胞,例如纖維母細胞、寡樹突神經膠質細胞、膠細胞、造血幹細胞、神經元先驅細胞、神經元、肌細胞、骨細胞、肝細胞、胰臟細胞、視網膜細胞、癌細胞、T細胞、B細胞、胎兒心肌細胞、肌纖維母細胞、間葉系幹細胞、自體移植擴增心肌細胞、脂肪細胞、分化全能細胞、多潛能細胞、血液幹細胞、肌母細胞、成體幹細胞、骨髓細胞、間葉細胞、實質細胞、上皮細胞、內皮細胞、間皮細胞、纖維母細胞、骨母細胞、軟骨細胞、外源細胞、內源細胞、幹細胞、造血幹細胞、骨髓衍生之先驅細胞、心肌細胞、骨骼細胞、胎兒細胞、未分化細胞、多潛能先驅細胞、單潛能先驅細胞、單核球、心肌母細胞、骨骼肌母細胞、巨噬細胞、毛細管內皮細胞、異種細胞、同種異體細胞及產後幹細胞。在一些實施例中,細胞為免疫細胞。在一些情況下,免疫細胞係T細胞、B細胞、單核球、自然殺傷細胞、樹突狀細胞或巨噬細胞。在一些情況下,免疫細胞為細胞毒性T細胞。在一些情況下,免疫細胞為輔助T細胞。在一些情況下,免疫細胞係調節T細胞(Treg)。在一些情況下,細胞表現嵌合抗原受體(Car-T)。在一些實施例中,細胞為幹細胞。幹細胞可包括例如成體幹細胞。成體幹細胞亦可稱為體幹細胞。在一些實施例中,幹細胞為造血幹細胞(HSC)、神經幹細胞或間葉幹細胞。在其他實施例中,幹細胞為間葉幹細胞(MSC)。最初衍生自胚胎中胚層且自成年骨髓分離之MSC可分化形成肌肉、骨骼、軟骨、脂肪、骨髓基質及肌腱。分離MSC之方法為此項技術中已知的;且任何已知方法可用於獲得MSC。
X. 套組及製品
在另一態樣中,本文提供套組,其包含本發明之實施例中之任一者的CasX蛋白及一或複數個gRNA及適合容器(例如管、小瓶或培養盤)。在一些實施例中,套組包含本發明之gRNA變異體,或SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 4之參考gRNA。可包括之例示性gRNA變異體包含如表2中所闡述之SEQ ID NO: 2238-XX中之任一者的序列。
在一些實施例中,套組包含本發明之CasX變異蛋白(例如表3及7之序列)或SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白。在例示性實施例中,本發明之套組包含SEQ ID NO: 247-592及1147-1231中之任一者之CasX變異體。在其他例示性實施例中,本發明之套組包含SEQ ID NO: 270-592及1147-1231中之任一者之CasX變異體。在其他例示性實施例中,本發明之套組包含SEQ ID NO: 415-592及1147-1231中之任一者之CasX變異體。
在一些實施例中,套組包含gRNA或編碼gRNA之載體,其中gRNA包含選自由SEQ ID NO: 2101-2332及2353-2398組成之群的序列。在一些實施例中,gRNA包含選自由SEQ ID NO: 2238-2332及2353-2398組成之群的序列。在一些實施例中,gRNA包含選自由SEQ ID NO: 2281-2332及2353-2398組成之群的序列。在一些實施例中,gRNA包含選自由SEQ ID NO: 2236、2237、2238、2241、2244、2248、2249及2259-2280組成之群的序列。在一些實施例中,gRNA包含選自由表2中所闡述之序列中之任一者組成之群的序列。
在某些實施例中,本文提供包含CasX蛋白及gRNA編輯對之套組,該CasX蛋白及gRNA編輯對包含表3及7之CasX變異蛋白及如本文所描述之gRNA變異體(例如表2之序列)。在例示性實施例中,本發明之套組包含CasX及gRNA編輯對,其中CasX變異體包含SEQ ID NO: 247-592或1147-1231中之任一者。在其他例示性實施例中,本發明之套組包含CasX及gRNA編輯對,其中CasX變異體包含SEQ ID NO: 270-592及1147-1231中之任一者。在其他例示性實施例中,本發明之套組包含CasX及gRNA編輯對,其中CasX變異體包含SEQ ID NO: 415-592及1147-1231中之任一者。在一些實施例中,基因編輯對之gRNA包含SEQ ID NO: 2101-2332或2353-2398中之任一者。在一些實施例中,基因編輯對之gRNA包含SEQ ID NO: 2238-2332或2353-2398中之任一者。在一些實施例中,基因編輯對之gRNA包含SEQ ID NO: 2281-2332或2353-2398中之任一者。在一些實施例中,基因編輯對之gRNA包含SEQ ID NO: 2236、2237、2238、2241、2244、2248、2249或2259-2280中之任一者。
在一些實施例中,套組進一步包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。在一些實施例中,套組進一步包含醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
在一些實施例中,套組包含用於基因編輯應用之適當對照組合物,及使用說明書。
在一些實施例中,套組包含載體,該載體包含編碼本發明之CasX變異蛋白、本發明之gRNA變異體、視情況存在之供體模板或其組合之序列。
本說明書闡述大量例示性組態、方法、參數及其類似者。然而,應認識到,此類描述並不意欲作為本發明之範疇的限制,而是替代地作為例示性實施例之描述而提供。上文所描述之本發明主題之實施例可單獨或與一或多個其他態樣或實施例組合為有益的。在不限制前述說明書之情況下,本發明之某些非限制性實施例提供於下文中。如熟習此項技術者在閱讀本發明時將顯而易見,經單獨編號之實施例中之每一者可使用或與之前或之後經單獨編號之實施例中之任一者組合。此意欲提供對實施例之所有此等組合的支援且不限於下文明確提供之實施例的組合:
列舉之實施例
本發明可參考以下所列舉之說明性實施例而定義。
第I組
實施例1。一種參考CasX蛋白之變異體(CasX變異體),其中:
a.該CasX變異體在該參考CasX蛋白中包含至少一個修飾;且
b.與該參考CasX蛋白相比,該CasX變異體展現至少一個經改良之特徵,視情況其中該變異體包含選自表3及8中所提供之彼等序列的序列。
實施例2。如實施例1之CasX變異體,其中該CasX變異體之該經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之該CasX變異體之摺疊;增加之對導引核酸(gNA)之結合親和力;增加之對目標DNA之結合親和力;提高之在目標DNA之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;經改良之該目標DNA展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之脫靶裂解;經改良之非目標DNA股之結合;增加之蛋白質穩定性;增加之蛋白質溶解度;增加之蛋白質:gRNA複合物(RNP)穩定性;增加之蛋白質:gRNA複合物溶解度;增加之蛋白質產率;經改良之蛋白質表現;經改良之融合特徵或其組合。
實施例3。如實施例1或2之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸取代;
b.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸缺失;
c.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸插入;
d.來自不同CasX之域之全部或一部分之取代;
e.該CasX變異體之域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例4。如實施例1至3中任一項之CasX變異體,其中該參考CasX蛋白包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之序列。
實施例5。如實施例1至4中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾在選自以下之域中:
a.非目標股結合(NTSB)域;
b.目標股負載(TSL)域;
c.螺旋形I域;
d.螺旋形II域;
e.寡核苷酸結合域(OBD);或
f.RuvC DNA裂解域。
實施例6。如實施例5之CasX變異體,其在該NTSB域中包含至少一個修飾。
實施例7。如實施例5之CasX變異體,其在該TSL域中包含至少一個修飾。
實施例8。如實施例5之CasX變異體,其在該螺旋形I域中包含至少一個修飾。
實施例9。如實施例5至8中任一項之CasX變異體,其在該螺旋形II域中包含至少一個修飾。
實施例10。如實施例5之CasX變異體,其在該OBD域中包含至少一個修飾。
實施例11。如實施例5之CasX變異體,其在該RuvC DNA裂解域中包含至少一個修飾。
實施例12。如實施例5至11中任一項之CasX變異體,其中該修飾使得編輯該目標DNA之能力提高。
實施例13。如實施例1至12中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體能夠與導引核酸(gNA)形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
實施例14。如實施例1至13中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX中1至100個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例15。如實施例14之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中5-10個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至5個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX變異體中1-5個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例16。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在一個域中包含兩個或兩個以上修飾。
實施例17。如實施例1至16中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在兩個或兩個以上域中包含修飾。
實施例18。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成其中發生gNA:目標DNA與該CasX變異體複合之通道。
實施例19。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該gNA結合之界面的CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例20。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成與該非目標股DNA結合之通道。
實施例21。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該目標DNA之原間隔子相鄰模體(PAM)結合之界面的該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例22。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續表面暴露胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例23。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含經由該CasX變異體之域中之疏水性填充形成核心的非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例24。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該修飾為該區域之一或多個胺基酸之缺失、插入或取代中之一或多者。
實施例25。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經帶電胺基酸取代。
實施例26。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經極性胺基酸取代。
實施例27。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經與DNA或RNA鹼基堆疊之胺基酸取代。
實施例28。如實施例1至5中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體具有選自由以下組成之群的序列:表3之序列或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%,或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性之序列。
實施例29。如實施例1至5中任一項之CasX變異體,其進一步包含來自不同CasX之NTSB及/或螺旋形1b域之取代。
實施例30。如實施例29之CasX變異體,其中經取代之NTSB及/或該螺旋形1b域來自SEQ ID NO: 1之參考CasX。
實施例31。如實施例1至30中任一項之CasX變異體,其進一步包含一或多個核定位信號(NLS)。
實施例32。如實施例31之CasX變異體,其中該一或多個NLS係選自由以下組成之序列群:PKKKRKV (SEQ ID NO: 352)、KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)、PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354)、RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)、NQSSNFGPMKGGNF GGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)、RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV (SEQ ID NO: 357)、VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)、PPKKARED (SEQ ID NO: 35()、PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360)、SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361)、DRLRR (SEQ ID NO: 362)、PKQKKRK (SEQ ID NO: 363)、RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364)、REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365)、KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366)、RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367)、PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368)、PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369)、NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370)、RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371)、KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372)、KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373)、PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374)、KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375)、KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377)、PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378)、SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379)、KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)及PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)。
實施例33。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例34。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之N端或其附近。
實施例35。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其包含至少兩個NLS,其中該等至少兩個NLS位於N端或其附近及位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例36。如實施例2至35中任一項之CasX變異體,其中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白,該CasX變異體之經改良之特徵中之至少一或多者改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例37。如實施例2至35之CasX變異體,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之參考CasX蛋白改良至少約1.1、至少約2、至少約10、至少約100倍或更多倍。
實施例38。如實施例2至37中任一項之CasX變異體,其中該經改良之特徵包含編輯效率,且該CasX變異體與SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之該參考CasX蛋白相比包含編輯效率之1.1至100倍的改良。
實施例39。如實施例1至38中任一項之CasX變異體,其中與在可比較的分析系統中包含參考CasX蛋白之RNP之編輯效率及/或結合相比,當該等PAM序列TTC、ATC、GTC或CTC中之任一者位於距與該gRNA之靶向序列具有一致性之原間隔子之非目標股之5'為1個核苷酸處時,包含該CasX變異體之RNP在細胞分析系統中展現該目標DNA中目標序列之較大編輯效率及/或結合。
實施例40。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為TTC。
實施例41。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為ATC。
實施例42。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為CTC。
實施例43。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為GTC。
實施例44。如實施例39中任一項之CasX變異體,其中相對於包含該參考CasX之RNP,包含該CasX變異體之RNP之編輯效率及/或與該目標DNA之結合改良至少約1.1至約100倍。
實施例45。如實施例1至44中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含介於400與2000個之間的胺基酸。
實施例46。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有切口酶活性之核酸酶域。
實施例47。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有雙股裂解活性之核酸酶域。
實施例48。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX蛋白為無催化活性CasX (dCasX)蛋白,且其中該dCasX及該gNA保留結合於該目標DNA之能力。
實施例49。如實施例48之CasX變異體,其中該dCasX包含以下殘基處之突變:
a.對應於SEQ ID NO: 1之CasX蛋白的D672及/或E769及/或D935;或
b.對應於SEQ ID NO: 2之CasX蛋白的D659及/或E756及/或D922。
實施例50。如實施例49之CasX變異體,其中該突變為丙胺酸對該殘基之取代。
實施例51。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含來自第一CasX蛋白之第一域及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二域。
實施例52。如實施例51之CasX變異體,其中該第一域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例53。如實施例51之CasX變異體,其中該第二域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例54。如實施例51至53中任一項之CasX變異體,其中該第一及第二域不為相同域。
實施例55。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含至少一個嵌合域,該嵌合域包含來自第一CasX蛋白之第一部分及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二部分。
實施例56。如實施例55之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例57。如實施例56之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域包含嵌合RuvC域。
實施例58。如實施例1至57中任一項之CasX變異體,其包含融合至該CasX之異源蛋白或其域。
實施例59。如實施例58之CasX變異體,其中該異源蛋白或其域為鹼基編輯劑。
實施例60。如實施例59之CasX變異體,其中該鹼基編輯劑為腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。
實施例61。一種能夠結合參考CasX蛋白或CasX變異體之參考導引核酸支架(gNA變異體)之變異體,其中:
a.該gNA變異體與該參考導引核酸支架序列相比包含至少一個修飾;且
b.該gNA變異體與該參考導引核酸支架相比展現一或多個經改良之特徵。
實施例62。如實施例61之gNA變異體,其中該一或多個經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之穩定性;經改良之溶解度;經改良之該gNA之轉錄;經改良之核酸酶活性抗性;增加之該gNA之摺疊速率;摺疊期間減少之副產物形成;增加之生產性摺疊;經改良之對CasX蛋白之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之對目標DNA之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之基因編輯;當與該CasX蛋白複合時,經改良之編輯特異性;及當與該CasX蛋白複合時,經改良之在目標DNA之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力。
實施例63。如實施例61或62之gNA變異體,其中該參考導引支架包含選自由SEQ ID NO: 4-16或SEQ ID NO: 2238或SEQ ID NO: 2239之序列組成之群的序列。
實施例64。如實施例61至63中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸取代;
b.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸缺失;
c.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸插入;
d.該gNA變異體之區域之全部或一部分之取代;
e.該gNA變異體之區域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例65。如實施例64之gNA變異體,其中該gNA變異體之區域係選自由以下組成之群:延伸莖環、支架莖環、三聯體及假結。
實施例66。如實施例65之gNA變異體,其中該支架莖進一步包含泡狀結構。
實施例67。如實施例65或實施例66之gNA變異體,其中該支架進一步包含三聯體環區。
實施例68。如實施例65至67中任一項之gNA變異體,其中該支架進一步包含5'非結構化區域。
實施例69。如實施例64至68中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.一或多個區域中之該gNA變異體之1至15個連續或非連續核苷酸之取代;
b.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之缺失;
c.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之插入;
d.用來自異源RNA來源之RNA莖環序列取代支架莖環或延伸莖環,該異源RNA來源具有近端5'及3'末端;或
e.(a)-(d)之任何組合。
實施例70。如實施例61至69中任一項之gNA變異體,其包含延伸莖環區,該延伸莖環區包含至少10、至少100、至少500、至少1000或至少10,000個核苷酸。
實施例71。如實施例69之gNA變異體,其中該異源RNA莖環序列增加該gNA之穩定性。
實施例72。如實施例71之gNA變異體,其中該異源RNA莖環能夠結合蛋白質、RNA結構、DNA序列或小分子。
實施例73。如實施例71或實施例72之gNA變異體,其中該異源RNA莖環序列係選自MS2、Qβ、U1髮夾II、Uvsx或PP7莖環。
實施例74。如實施例61至73中任一項之gNA變異體,該gNA變異體包含一個區域中之兩個或兩個以上修飾。
實施例75。如實施例61至74中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體包含兩個或兩個以上區域中之修飾。
實施例76。如實施例61至75中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體進一步包含靶向序列,其中該靶向序列與該目標DNA序列互補。
實施例77。如實施例76之gNA變異體,其中該靶向序列具有14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35個核苷酸。
實施例78。如實施例76或實施例77中任一項之gNA變異體,其中該靶向序列具有20個核苷酸。
實施例79。如實施例76至78中任一項之gNA變異體,其中該gNA為包含與該靶向序列連接之該支架序列的單導引gNA。
實施例80。如實施例61至79中任一項之gNA變異體,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gNA改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例81。如實施例61至79中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 2238、SEQ ID NO: 2239、變異支架174 (表2)或變異支架175 (表2)之參考gNA改良至少約1.1、至少約2、至少約10或至少約100倍或更多倍。
實施例82。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其包含與不包括延伸莖區之SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5具有至少60%序列一致性之支架區。
實施例83。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其包含與SEQ ID NO: 14具有至少60%序列一致性之支架莖環。
實施例84。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架與SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 2238、SEQ ID NO: 2239之序列、變異支架174 (表2)或變異支架175 (表2)具有至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%,或至少70%、至少80%、至少85%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性。
實施例85。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,該gNA變異體序列之支架包含選自SEQ ID NO: 2101-2285或4433-4437之序列之群的序列,或與其具有至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%一致性的序列。
實施例86。如實施例85之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架由選自由SEQ ID NO: 2101-2285或4433-4437之序列之群的序列組成。
實施例87。如實施例61至86中任一項之gNA變異體,其進一步包含一或多種核酶。
實施例88。如實施例87之gNA變異體,其中該一或多種核酶獨立地與該gNA變異體之末端融合。
實施例89。如實施例87或實施例88之gNA變異體,其中該一或多種核酶中之至少一者為D型肝炎病毒(HDV)核糖核酸酶、錘頭狀核糖核酸酶、手槍核糖核酸酶、手斧核糖核酸酶或菸草環斑病毒(TRSV)核糖核酸酶。
實施例90。如實施例61至89中任一項之gNA變異體,其進一步包含蛋白質結合模體。
實施例91。如實施例61至90中任一項之gNA變異體,其進一步包含熱穩定莖環。
實施例92。如實施例61至91中任一項之gNA變異體,其中該gNA經化學修飾。
實施例93。如實施例61至92中任一項之gNA變異體,其中該gNA包含來自第一gNA之第一區域及來自與該第一gNA不同之第二gNA之第二區域。
實施例94。如實施例93之gNA變異體,其中該第一區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例95。如實施例93或實施例94之gNA變異體,其中該第二區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例96。如實施例93至95中任一項之gNA變異體,其中該第一及第二區域不為相同區域。
實施例97。如實施例93至95中任一項之gNA變異體,其中該第一gNA包含SEQ ID NO: 4之序列且該第二gNA包含SEQ ID NO: 5之序列。
實施例98。如實施例61至97中任一項之gNA變異體,其包含至少一個嵌合區,該嵌合區包含來自第一gNA之第一部分及來自第二gNA之第二部分。
實施例99。如實施例98之gNA變異體,其中該至少一個嵌合區係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例100。如實施例61之gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 2101-2285中任一項之序列。
實施例101。一種基因編輯對,其包含CasX蛋白及第一gNA。
實施例102。如實施例101之基因編輯對,其中該CasX及該gNA能夠在核糖核蛋白複合物(RNP)中結合在一起。
實施例103。如實施例101之基因編輯對,其中該CasX及該gNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
實施例104。如實施例101至103中任一項之基因編輯對,其中該第一gNA包含如實施例76至100中任一項之gNA變異體、靶向序列,其中該靶向序列與該目標DNA互補。
實施例105。如實施例101至104中任一項之基因編輯對,其中該CasX包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例106。如實施例101至105中任一項之基因編輯對,其包含:
a.如實施例76至100中任一項之gNA變異體,及
b.如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例107。如實施例106之基因編輯對,其中該CasX變異體及該gNA變異體之基因編輯對與包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 4、5、2238或2239之參考導引核酸的基因編輯對相比具有一或多個經改良之特徵。
實施例108。如實施例107之基因編輯對,其中該一或多個經改良之特徵包含經改良之CasX:gNA (RNP)複合物穩定性、經改良之該CasX與gNA之間的結合親和力、經改良之RNP複合物形成之動力學、較高百分比之裂解勝任型RNP、增加之RNP對目標DNA之結合親和力、利用增加範圍之PAM序列之能力、經改良之該目標DNA之展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、經改良之編輯特異性、增加之核酸酶活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切口之目標股負載、減少之脫靶裂解、增加之DNA的非目標股結合或增加之對核酸酶活性之抗性。
實施例109。如實施例107或實施例108之基因編輯對,其中相對於該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之基因編輯對,該經改良之特徵中之至少一或多者改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例110。如實施例107或108之基因編輯對,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之基因編輯對改良至少約1.1倍、至少約2倍、至少約10倍或至少約100倍或更多倍。
實施例111。如實施例107或實施例108之基因編輯對,其中該經改良之特徵包含與SEQ ID NO: 2及SEQ ID NO: 5之參考編輯對相比編輯活性增加4至9倍。
實施例112。一種組合物,其包含如實施例101至111中任一項之基因編輯對,其包含:
a.第二基因編輯對,其包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體;及
b.如實施例61至100中任一項之第二gNA變異體,其中該第二gNA變異體具有與該第一gNA之該靶向序列相比與該目標DNA之不同或重疊部分互補的靶向序列。
實施例113。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中與參考CasX蛋白及參考導引核酸之RNP相比,該CasX變異體及該gNA變異體之該RNP具有較高百分比之裂解勝任型RNP。
實施例114。如實施例101至113中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合及裂解目標DNA。
實施例115。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標DNA,但不能夠裂解該目標DNA。
實施例116。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標DNA且在該目標DNA中產生一或多個單股切口。
實施例117。一種CasX變異體,其包含SEQ ID NO: 4416-4432中之任一者之胺基酸序列。
實施例118。一種gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 4433-4437中之任一者之胺基酸序列。
第II組
實施例1。一種參考CasX蛋白之變異體(CasX變異體),其中:
a.該CasX變異體在該參考CasX蛋白中包含至少一個修飾;且
b.與該參考CasX蛋白相比,該CasX變異體展現至少一個經改良之特徵,視情況其中該變異體包含選自表3及8中所提供之彼等序列的序列。
實施例2。如實施例1之CasX變異體,其中該CasX變異體之該經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之該CasX變異體之摺疊;增加之對導引核酸(gNA)之結合親和力;增加之對目標DNA之結合親和力;提高之在目標DNA之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;經改良之該目標DNA展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之脫靶裂解;經改良之非目標DNA股之結合;增加之蛋白質穩定性;增加之蛋白質溶解度;增加之蛋白質:gNA複合物(RNP)穩定性;增加之蛋白質:gNA複合物溶解度;增加之蛋白質產率;經改良之蛋白質表現;經改良之融合特徵或其組合。
實施例3。如實施例1或2之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸取代;
b.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸缺失;
c.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸插入;
d.來自不同CasX之域之全部或一部分之取代;
e.該CasX變異體之域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例4。如實施例1至3中任一項之CasX變異體,其中該參考CasX蛋白包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之序列。
實施例5。如實施例1至4中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾在選自以下之域中:
a.非目標股結合(NTSB)域;
b.目標股負載(TSL)域;
c.螺旋形I域;
d.螺旋形II域;
e.寡核苷酸結合域(OBD);或
f.RuvC DNA裂解域。
實施例6。如實施例5之CasX變異體,其在該NTSB域中包含至少一個修飾。
實施例7。如實施例5之CasX變異體,其在該TSL域中包含至少一個修飾。
實施例8。如實施例5之CasX變異體,其在該螺旋形I域中包含至少一個修飾。
實施例9。如實施例5至8中任一項之CasX變異體,其在該螺旋形II域中包含至少一個修飾。
實施例10。如實施例5之CasX變異體,其在該OBD域中包含至少一個修飾。
實施例11。如實施例5之CasX變異體,其在該RuvC DNA裂解域中包含至少一個修飾。
實施例12。如實施例5至11中任一項之CasX變異體,其中該修飾使得編輯該目標DNA之能力提高。
實施例13。如實施例1至12中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體能夠與導引核酸(gNA)形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
實施例14。如實施例1至13中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX中1至100個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例15。如實施例14之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中5-10個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至5個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX變異體中1-5個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例16。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在一個域中包含兩個或兩個以上修飾。
實施例17。如實施例1至16中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在兩個或兩個以上域中包含修飾。
實施例18。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成其中發生gNA:目標DNA與該CasX變異體複合之通道。
實施例19。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該gNA結合之界面的CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例20。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成與該非目標股DNA結合之通道。
實施例21。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該目標DNA之原間隔子相鄰模體(PAM)結合之界面的該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例22。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續表面暴露胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例23。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含經由該CasX變異體之域中之疏水性填充形成核心的非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例24。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該修飾為該區域之一或多個胺基酸之缺失、插入或取代中之一或多者。
實施例25。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經帶電胺基酸取代。
實施例26。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經極性胺基酸取代。
實施例27。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經與DNA或RNA鹼基堆疊之胺基酸取代。
實施例28。如實施例1至5中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體具有選自由以下組成之群的序列:表3之序列或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%,或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性之序列。
實施例29。如實施例1至5中任一項之CasX變異體,其進一步包含來自不同CasX之NTSB及/或螺旋形1b域之取代。
實施例30。如實施例29之CasX變異體,其中經取代之NTSB及/或該螺旋形1b域來自SEQ ID NO: 1之參考CasX。
實施例31。如實施例1至30中任一項之CasX變異體,其進一步包含一或多個核定位信號(NLS)。
實施例32。如實施例31之CasX變異體,其中該一或多個NLS係選自由以下組成之序列群:PKKKRKV (SEQ ID NO: 352)、KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)、PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354)、RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)、NQSSNFGPMKGGNFGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)、RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV (SEQ ID NO: 357)、VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)、PPKKARED (SEQ ID NO: 35()、PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360)、SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361)、DRLRR (SEQ ID NO: 362)、PKQKKRK (SEQ ID NO: 363)、RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364)、REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365)、KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366)、RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367)、PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368)、PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369)、NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370)、RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371)、KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372)、KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373)、PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374)、KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375)、KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377)、PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378)、SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379)、KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)、PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)、PAKRARRGYKC (SEQ ID NO: 4599)、KLGPRKATGRW (SEQ ID NO: 4600)、PRRKREE (SEQ ID NO: 4601)、PYRGRKE (SEQ ID NO: 4602)、PLRKRPRR (SEQ ID NO: 4603)、PLRKRPRRGSPLRKRPRR (SEQ ID NO: 4604)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKV (SEQ ID NO: 4605)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAA (SEQ ID NO: 4606)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 4607)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVPG (SEQ ID NO: 4608)、KRKGSPERGERKRHW (SEQ ID NO: 4609)、KRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO: 4610)及PKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO: 4611)。
實施例33。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例34。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之N端或其附近。
實施例35。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其包含至少兩個NLS,其中該等至少兩個NLS位於N端或其附近及位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例36。如實施例2至35中任一項之CasX變異體,其中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白,該CasX變異體之經改良之特徵中之至少一或多者改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例37。如實施例2至35之CasX變異體,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之CasX蛋白改良至少約1.1、至少約2、至少約10、至少約100倍或更多倍。
實施例38。如實施例2至37中任一項之CasX變異體,其中該經改良之特徵包含編輯效率,且該CasX變異體與SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之該CasX蛋白相比包含編輯效率之1.1至100倍的改良。
實施例39。如實施例1至38中任一項之CasX變異體,其中與在可比較的分析系統中包含參考CasX蛋白之RNP之編輯效率及/或結合相比,當該等PAM序列TTC、ATC、GTC或CTC中之任一者位於距與該gNA之靶向序列具有一致性之原間隔子之非目標股之5'為1個核苷酸處時,包含該CasX變異體之RNP在細胞分析系統中展現該目標DNA中目標序列之較大編輯效率及/或結合。
實施例40。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為TTC。
實施例41。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為ATC。
實施例42。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為CTC。
實施例43。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為GTC。
實施例44。如實施例39中任一項之CasX變異體,其中相對於包含該參考CasX之RNP,包含該CasX變異體之RNP之編輯效率及/或與該目標DNA之結合改良至少約1.1至約100倍。
實施例45。如實施例1至44中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含介於400與2000個之間的胺基酸。
實施例46。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有切口酶活性之核酸酶域。
實施例47。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有雙股裂解活性之核酸酶域。
實施例48。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX蛋白為無催化活性CasX (dCasX)蛋白,且其中該dCasX及該gNA保留結合於該目標DNA之能力。
實施例49。如實施例48之CasX變異體,其中該dCasX包含以下殘基處之突變:
a.對應於SEQ ID NO: 1之CasX蛋白的D672及/或E769及/或D935;或
b.對應於SEQ ID NO: 2之CasX蛋白的D659及/或E756及/或D922。
實施例50。如實施例49之CasX變異體,其中該突變為丙胺酸對該殘基之取代。
實施例51。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含來自第一CasX蛋白之第一域及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二域。
實施例52。如實施例51之CasX變異體,其中該第一域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例53。如實施例51之CasX變異體,其中該第二域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例54。如實施例51至53中任一項之CasX變異體,其中該第一及第二域不為相同域。
實施例55。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含至少一個嵌合域,該嵌合域包含來自第一CasX蛋白之第一部分及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二部分。
實施例56。如實施例55之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例57。如實施例56之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域包含嵌合RuvC域。
實施例58。如實施例1至57中任一項之CasX變異體,其包含融合至該CasX之異源蛋白或其域。
實施例59。如實施例58之CasX變異體,其中該異源蛋白或其域為鹼基編輯劑。
實施例60。如實施例59之CasX變異體,其中該鹼基編輯劑為腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。
實施例61。一種能夠結合參考CasX蛋白或CasX變異體之參考導引核酸支架(gNA變異體)之變異體,其中:
a.該gNA變異體與該參考導引核酸支架序列相比包含至少一個修飾;且
b.該gNA變異體與該參考導引核酸支架相比展現一或多個經改良之特徵。
實施例62。如實施例61之gNA變異體,其中該一或多個經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之穩定性;經改良之溶解度;經改良之該gNA之轉錄;經改良之核酸酶活性抗性;增加之該gNA之摺疊速率;摺疊期間減少之副產物形成;增加之生產性摺疊;經改良之對CasX蛋白之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之對目標DNA之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之基因編輯;當與該CasX蛋白複合時,經改良之編輯特異性;及當與該CasX蛋白複合時,經改良之在目標DNA之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力。
實施例63。如實施例61或62之gNA變異體,其中該參考導引支架包含選自由SEQ ID NO: 4-16之序列組成之群的序列。
實施例64。如實施例61至63中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸取代;
b.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸缺失;
c.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸插入;
d.該gNA變異體之區域之全部或一部分之取代;
e.該gNA變異體之區域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例65。如實施例64之gNA變異體,其中該gNA變異體之區域係選自由以下組成之群:延伸莖環、支架莖環、三聯體及假結。
實施例66。如實施例65之gNA變異體,其中該支架莖進一步包含泡狀結構。
實施例67。如實施例65或實施例66之gNA變異體,其中該支架進一步包含三聯體環區。
實施例68。如實施例65至67中任一項之gNA變異體,其中該支架進一步包含5'非結構化區域。
實施例69。如實施例64至68中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.一或多個區域中之該gNA變異體之1至15個連續或非連續核苷酸之取代;
b.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之缺失;
c.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之插入;
d.用來自異源RNA來源之RNA莖環序列取代支架莖環或延伸莖環,該異源RNA來源具有近端5'及3'末端;或
e.(a)-(d)之任何組合。
實施例70。如實施例61至69中任一項之gNA變異體,其包含延伸莖環區,該延伸莖環區包含至少10、至少100、至少500、至少1000或至少10,000個核苷酸。
實施例71。如實施例69之gNA變異體,其中該異源RNA莖環序列增加該gNA之穩定性。
實施例72。如實施例71之gNA變異體,其中該異源RNA莖環能夠結合蛋白質、RNA結構、DNA序列或小分子。
實施例73。如實施例71或實施例72之gNA變異體,其中該異源RNA莖環序列係選自MS2、Qβ、U1髮夾II、Uvsx或PP7莖環。
實施例74。如實施例61至73中任一項之gNA變異體,該gNA變異體包含一個區域中之兩個或兩個以上修飾。
實施例75。如實施例61至74中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體包含兩個或兩個以上區域中之修飾。
實施例76。如實施例61至75中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體進一步包含靶向序列,其中該靶向序列與該目標DNA序列互補。
實施例77。如實施例76之gNA變異體,其中該靶向序列具有14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35個核苷酸。
實施例78。如實施例76或實施例77中任一項之gNA變異體,其中該靶向序列具有20個核苷酸。
實施例79。如實施例76至78中任一項之gNA變異體,其中該gNA為包含與該靶向序列連接之該支架序列的單導引gNA。
實施例80。如實施例61至79中任一項之gNA變異體,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gNA改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例81。如實施例61至79中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4之參考gNA、SEQ ID NO: 5之參考gNA、變異支架SEQ ID NO: 2238或變異支架SEQ ID NO: 2239改良至少約1.1、至少約2、至少約10或至少約100倍或更多倍。
實施例82。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其包含與不包括延伸莖區之SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5具有至少60%序列一致性之支架區。
實施例83。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其包含與SEQ ID NO: 14具有至少60%序列一致性之支架莖環。
實施例84。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架與SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 2238或SEQ ID NO: 2239之序列具有至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%或至少70%、至少80%、至少85%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性。
實施例85。如實施例61至81中任一項之gNA變異體,該gNA變異體序列之支架包含選自SEQ ID NO: 2101-2280或4433-4446之序列之群的序列,或與其具有至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%一致性的序列。
實施例86。如實施例85之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架由選自由SEQ ID NO: 2101-2280或4433-4446之序列之群的序列組成。
實施例87。如實施例61至86中任一項之gNA變異體,其進一步包含一或多種核酶。
實施例88。如實施例87之gNA變異體,其中該一或多種核酶獨立地與該gNA變異體之末端融合。
實施例89。如實施例87或實施例88之gNA變異體,其中該一或多種核酶中之至少一者為D型肝炎病毒(HDV)核糖核酸酶、錘頭狀核糖核酸酶、手槍核糖核酸酶、手斧核糖核酸酶或菸草環斑病毒(TRSV)核糖核酸酶。
實施例90。如實施例61至89中任一項之gNA變異體,其進一步包含蛋白質結合模體。
實施例91。如實施例61至90中任一項之gNA變異體,其進一步包含熱穩定莖環。
實施例92。如實施例61至91中任一項之gNA變異體,其中該gNA經化學修飾。
實施例93。如實施例61至92中任一項之gNA變異體,其中該gNA包含來自第一gNA之第一區域及來自與該第一gNA不同之第二gNA之第二區域。
實施例94。如實施例93之gNA變異體,其中該第一區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例95。如實施例93或實施例94之gNA變異體,其中該第二區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例96。如實施例93至95中任一項之gNA變異體,其中該第一及第二區域不為相同區域。
實施例97。如實施例93至95中任一項之gNA變異體,其中該第一gNA包含SEQ ID NO: 4之序列且該第二gNA包含SEQ ID NO: 5之序列。
實施例98。如實施例61至97中任一項之gNA變異體,其包含至少一個嵌合區,該嵌合區包含來自第一gNA之第一部分及來自第二gNA之第二部分。
實施例99。如實施例98之gNA變異體,其中該至少一個嵌合區係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例100。如實施例61之gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 2101-2280或4433-4446中之任一者之序列。
實施例101。一種基因編輯對,其包含CasX蛋白及第一gNA。
實施例102。如實施例101之基因編輯對,其中該CasX及該gNA能夠在核糖核蛋白複合物(RNP)中結合在一起。
實施例103。如實施例101之基因編輯對,其中該CasX及該gNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
實施例104。如實施例101至103中任一項之基因編輯對,其中該第一gNA包含如實施例76至100中任一項之gNA變異體、靶向序列,其中該靶向序列與該目標DNA互補。
實施例105。如實施例101至104中任一項之基因編輯對,其中該CasX包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例106。如實施例101至105中任一項之基因編輯對,其包含:
a.如實施例76至100中任一項之gNA變異體,及
b.如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例107。如實施例106之基因編輯對,其中該CasX變異體及該gNA變異體之基因編輯對與包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 4或5之參考導引核酸的基因編輯對相比具有一或多個經改良之特徵。
實施例108。如實施例107之基因編輯對,其中該一或多個經改良之特徵包含經改良之CasX:gNA (RNP)複合物穩定性、經改良之該CasX與gNA之間的結合親和力、經改良之RNP複合物形成之動力學、較高百分比之裂解勝任型RNP、增加之RNP對目標DNA之結合親和力、利用增加範圍之PAM序列之能力、經改良之該目標DNA之展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、經改良之編輯特異性、增加之核酸酶活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切口之目標股負載、減少之脫靶裂解、增加之DNA的非目標股結合或增加之對核酸酶活性之抗性。
實施例109。如實施例107或實施例108之基因編輯對,其中相對於該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之基因編輯對,該經改良之特徵中之至少一或多者改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例110。如實施例107或108之基因編輯對,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之基因編輯對改良至少約1.1倍、至少約2倍、至少約10倍或至少約100倍或更多倍。
實施例111。如實施例107或實施例108之基因編輯對,其中該經改良之特徵包含與SEQ ID NO: 2及SEQ ID NO: 5之參考編輯對相比編輯活性增加4至9倍。
實施例112。一種組合物,其包含如實施例101至111中任一項之基因編輯對,其包含:
a.第二基因編輯對,其包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體;及
b.如實施例61至100中任一項之第二gNA變異體,其中該第二gNA變異體具有與該第一gNA之該靶向序列相比與該目標DNA之不同或重疊部分互補的靶向序列。
實施例113。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中與參考CasX蛋白及參考導引核酸之RNP相比,該CasX變異體及該gNA變異體之該RNP具有較高百分比之裂解勝任型RNP。
實施例114。如實施例101至113中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合及裂解目標DNA。
實施例115。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標DNA,但不能夠裂解該目標DNA。
實施例116。如實施例101至112中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標DNA且在該目標DNA中產生一或多個單股切口。
實施例117。一種CasX變異體,其包含SEQ ID NO: 4416-4432或4597-4598中之任一者之胺基酸序列。
實施例118。一種gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 4433-4446中之任一者之胺基酸序列。
第III組
實施例1。一種參考CasX蛋白之變異體(CasX變異體),其中:
a.該CasX變異體在該參考CasX蛋白中包含至少一個修飾;且
b.其中相比於該參考CasX蛋白,該CasX變異體展現至少一個經改良之特徵,
視情況其中該變異體包含選自由SEQ ID NO: 89-101、247-337、411-592及760-982組成之群的序列。
實施例2。如實施例1之CasX變異體,其中該CasX變異體之該經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之該CasX變異體之摺疊;增加之對導引核酸(gNA)之結合親和力;增加之對目標核酸之結合親和力;提高之在目標核酸之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;經改良之該目標核酸展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之脫靶裂解;經改良之非目標核酸股之結合;增加之蛋白質穩定性;增加之蛋白質溶解度;增加之蛋白質:gNA複合物(RNP)穩定性;增加之蛋白質:gNA複合物溶解度;增加之蛋白質產率;經改良之蛋白質表現;經改良之融合特徵或其組合。
實施例3。如實施例1或2之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸取代;
b.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸缺失;
c.該CasX變異體之域中之至少一個胺基酸插入;
d.來自不同CasX之域之全部或一部分之取代;
e.該CasX變異體之域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例4。如實施例1至3中任一項之CasX變異體,其中該參考CasX蛋白包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之序列。
實施例5。如實施例1至4中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾在選自以下之域中:
a.非目標股結合(NTSB)域;
b.目標股負載(TSL)域;
c.螺旋形I域;
d.螺旋形II域;
e.寡核苷酸結合域(OBD);或
f. RuvC DNA裂解域。
實施例6。如實施例5之CasX變異體,其在該NTSB域中包含至少一個修飾。
實施例7。如實施例5之CasX變異體,其在該TSL域中包含至少一個修飾。
實施例8。如實施例5之CasX變異體,其在該螺旋形I域中包含至少一個修飾。
實施例9。如實施例5至8中任一項之CasX變異體,其在該螺旋形II域中包含至少一個修飾。
實施例10。如實施例5之CasX變異體,其在該OBD域中包含至少一個修飾。
實施例11。如實施例5之CasX變異體,其在該RuvC DNA裂解域中包含至少一個修飾。
實施例12。如實施例5至11中任一項之CasX變異體,其中該修飾使得編輯該目標核酸之能力提高。
實施例13。如實施例1至12中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體能夠與導引核酸(gNA)形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
實施例14。如實施例1至13中任一項之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至100個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX中1至100個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例15。如實施例14之CasX變異體,其中該至少一個修飾包含:
a.該CasX變異體中5-10個連續或非連續胺基酸之取代;
b.該CasX變異體中1至5個連續或非連續胺基酸之缺失;
c.該CasX變異體中1-5個連續或非連續胺基酸之插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例16。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在一個域中包含兩個或兩個以上修飾。
實施例17。如實施例1至16中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體在兩個或兩個以上域中包含修飾。
實施例18。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成其中發生gNA:目標核酸與該CasX變異體複合之通道。
實施例19。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該gNA結合之界面的CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例20。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾,該區域形成與該非目標股DNA結合之通道。
實施例21。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含形成與該目標核酸之原間隔子相鄰模體(PAM)結合之界面的該CasX變異體之非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例22。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含該CasX變異體之非連續表面暴露胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例23。如實施例1至15中任一項之CasX變異體,其包含經由該CasX變異體之域中之疏水性填充形成核心的非連續胺基酸殘基區域之至少一個修飾。
實施例24。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該修飾為該區域之一或多個胺基酸之缺失、插入或取代中之一或多者。
實施例25。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經帶電胺基酸取代。
實施例26。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經極性胺基酸取代。
實施例27。如實施例18至23中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體之區域之2至15個胺基酸殘基經與DNA或RNA鹼基堆疊之胺基酸取代。
實施例28。如實施例1至5中任一項之CasX變異體,其進一步包含來自不同CasX之NTSB及/或螺旋形1b域之取代。
實施例29。如實施例28之CasX變異體,其中經取代之NTSB及/或該螺旋形1b域來自SEQ ID NO: 1之參考CasX。
實施例30。如實施例1至29中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體具有選自由以下組成之群的序列:SEQ ID NO: 89-101、247-337、411-592及760-982,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%,或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。
實施例31。如實施例1至30中任一項之CasX變異體,其進一步包含一或多個核定位信號(NLS)。
實施例32。如實施例31之CasX變異體,其中該一或多個NLS係選自由以下組成之序列群:PKKKRKV (SEQ ID NO: 352)、KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)、PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354)、RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)、NQSSNFGPMKGGNFGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)、RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILK RRNV (SEQ ID NO: 357)、VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)、PPKKARED (SEQ ID NO: 359)、PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360)、SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361)、DRLRR (SEQ ID NO: 362)、PKQKKRK (SEQ ID NO: 363)、RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364)、REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365)、KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366)、RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367)、PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368)、PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369)、NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370)、RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371)、KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372)、KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373)、PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374)、KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375)、KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377)、PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378)、SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379)、KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)、PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)、PAKRARRGYKC (SEQ ID NO: 63)、KLGPRKATGRW (SEQ ID NO: 64)、PRRKREE (SEQ ID NO: 65)、PYRGRKE (SEQ ID NO: 66)、PLRKRPRR (SEQ ID NO: 67)、PLRKRPRRGSPLRKRPRR (SEQ ID NO:68)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKV (SEQ ID NO:69)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAA (SEQ ID NO:70)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAA AKEAAAKA (SEQ ID NO:71)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFE SPKKKRKVPG (SEQ ID NO:72)、KRKGSPERGERKRHW (SEQ ID NO:73)、KRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:74)及PKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:75),且視情況該一或多個NLS利用連接肽與該CasX變異體連接或與相鄰NLS連接,其中該連接肽係選自由以下組成之群:(G)n (SEQ ID NO: 1023)、(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)、(GGGS)n (SEQ I DNO: 401)、GGSG (SEQ ID NO: 402)、GGSGG (SEQ ID NO: 403)、GSGSG (SEQ ID NO: 404)、GSGGG (SEQ ID NO: 405)、GGGSG (SEQ ID NO: 406)、GSSSG (SEQ ID NO: 407)、GPGP (SEQ ID NO: 408)、GGP、PPP、PPAPPA (SEQ ID NO: 409)、PPPG (SEQ ID NO: 24)、PPPGPPP (SEQ ID NO: 410)、PPP(GGGS)n (SEQ ID NO: 25)、(GGGS)nPPP (SEQ ID NO: 26)、AEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 1025)及TPPKTKRKVEFE (SEQ ID NO: 27),其中n為1至5。
實施例33。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例34。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其中該一或多個NLS位於該CasX蛋白之N端或其附近。
實施例35。如實施例31或實施例32之CasX變異體,其包含至少兩個NLS,其中該等至少兩個NLS位於N端或其附近及位於該CasX蛋白之C端或其附近。
實施例36。如實施例2至35中任一項之CasX變異體,其中當在活體外分析中在類似條件下比較時,該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例37。如實施例2至35之CasX變異體,其中當在活體外分析中在類似條件下比較時,該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之CasX蛋白改良至少約1.1、至少約2、至少約10、至少約100倍或更多倍。
實施例38。如實施例2至37之CasX變異體,其中當在活體外分析中在類似條件下比較時,該經改良之特徵包含編輯效率,且該CasX變異體與SEQ ID NO: 270或SEQ ID NO: 336之該CasX蛋白相比包含該目標核酸之編輯效率改良1.1至100倍。
實施例39。如實施例1至38中任一項之CasX變異體,其中與在可比較的分析系統中包含參考CasX蛋白之RNP之編輯效率及/或結合相比,當該等PAM序列TTC、ATC、GTC或CTC中之任一者位於距與活體外細胞分析系統中之該gNA之靶向序列具有一致性之原間隔子之非目標股之5'為1個核苷酸處時,包含該CasX變異體之RNP展現該目標核酸中序列之較大編輯效率及/或結合。
實施例40。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為TTC。
實施例41。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為ATC。
實施例42。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為CTC。
實施例43。如實施例39之CasX變異體,其中該PAM序列為GTC。
實施例44。如實施例39至43中任一項之CasX變異體,其中包含該CasX變異體之RNP對該目標核酸之改良之編輯效率及/或結合相對於包含該參考CasX之RNP改良至少約1.1至約100倍。
實施例45。如實施例1至44中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含介於400與2000個之間的胺基酸。
實施例46。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有切口酶活性之核酸酶域。
實施例47。如實施例1至45中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異蛋白包含具有雙股裂解活性之核酸酶域。
實施例48。如實施例1至37中任一項之CasX變異體,其中該CasX蛋白為無催化活性CasX (dCasX)蛋白,且其中該dCasX及該gNA保留結合於該目標核酸之能力,且視情況其中該dCasX蛋白包含SEQ ID NO: 44-62之序列。
實施例49。如實施例48之CasX變異體,其中該dCasX包含以下殘基處之突變:
a.對應於SEQ ID NO: 1之CasX蛋白的D672及/或E769及/或D935;或
b.對應於SEQ ID NO: 2之CasX蛋白的D659及/或E756及/或D922。
實施例50。如實施例49之CasX變異體,其中該突變為丙胺酸對該殘基之取代。
實施例51。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含來自第一CasX蛋白之第一域及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二域。
實施例52。如實施例51之CasX變異體,其中該第一域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例53。如實施例51之CasX變異體,其中該第二域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例54。如實施例51至53中任一項之CasX變異體,其中該第一及第二域不為相同域。
實施例55。如實施例1至50中任一項之CasX變異體,其中該CasX變異體包含至少一個嵌合域,該嵌合域包含來自第一CasX蛋白之第一部分及來自與該第一CasX蛋白不同之第二CasX蛋白之第二部分。
實施例56。如實施例55之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域係選自由以下組成之群:NTSB、TSL、螺旋形I、螺旋形II、OBD及RuvC域。
實施例57。如實施例56之CasX變異體,其中該至少一個嵌合域包含嵌合RuvC域。
實施例58。如實施例1至57中任一項之CasX變異體,其包含融合至該CasX之異源蛋白或其域。
實施例59。如實施例58之CasX變異體,其中該異源蛋白或其域為鹼基編輯劑。
實施例60。如實施例59之CasX變異體,其中該鹼基編輯劑為腺苷去胺酶、胞嘧啶去胺酶或鳥嘌呤氧化酶。
實施例61。一種能夠結合參考CasX蛋白或CasX變異體之參考導引核酸支架(gNA變異體)之變異體,其中:
a.該gNA變異體與該參考導引核酸支架序列相比包含至少一個修飾;且
b.該gNA變異體與該參考導引核酸支架相比展現一或多個經改良之特徵,
視情況其中該變異體包含選自由SEQ ID NO: 2101-2332組成之群的序列。
實施例62。如實施例61之gNA變異體,其中該一或多個經改良之特徵係選自由以下組成之群:經改良之穩定性;經改良之溶解度;經改良之該gNA之轉錄;經改良之核酸酶活性抗性;增加之該gNA之摺疊速率;摺疊期間減少之副產物形成;增加之生產性摺疊;經改良之對CasX蛋白之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之對目標核酸之結合親和力;當與該CasX蛋白複合時,經改良之基因編輯;當與該CasX蛋白複合時,經改良之編輯特異性;及當與該CasX蛋白複合時,形成裂解勝任型RNP之經改良之能力。
實施例63。如實施例61或62之gNA變異體,其中該參考導引支架包含選自由SEQ ID NO: 4-16之序列組成之群的序列。
實施例64。如實施例61至63中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸取代;
b.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸缺失;
c.該gNA變異體之區域中之至少一個核苷酸插入;
d.該gNA變異體之區域之全部或一部分之取代;
e.該gNA變異體之區域之全部或一部分之缺失;或
f.(a)-(e)之任何組合。
實施例65。如實施例64之gNA變異體,其中該gNA變異體之區域係選自由以下組成之群:延伸莖環、支架莖環、三聯體及假結。
實施例66。如實施例65之gNA變異體,其中該支架莖進一步包含泡狀結構。
實施例67。如實施例65或實施例66之gNA變異體,其中該支架進一步包含三聯體環區。
實施例68。如實施例65至67中任一項之gNA變異體,其中該支架進一步包含5'非結構化區域。
實施例69。如實施例64至68中任一項之gNA變異體,其中該至少一個修改包含:
a.一或多個區域中之該gNA變異體之1至15個連續或非連續核苷酸之取代;
b.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之缺失;
c.一或多個區域中之該gNA變異體之1至10個連續或非連續核苷酸之插入;
d.用來自異源RNA來源之RNA莖環序列取代支架莖環或延伸莖環,該異源RNA來源具有近端5'及3'末端;或
e.(a)-(d)之任何組合。
實施例70。如實施例61至69中任一項之gNA變異體,該gNA變異體包含一個區域中之兩個或兩個以上修飾。
實施例71。如實施例61至69中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體包含兩個或兩個以上區域中之修飾。
實施例72。如實施例61至71中任一項之gNA變異體,其包含延伸莖環區,該延伸莖環區包含至少10、至少100、至少500、至少1000或至少10,000個核苷酸。
實施例73。如實施例72之gNA變異體,其中該異源RNA莖環序列增加該gNA之穩定性。
實施例74。如實施例72或實施例73之gNA變異體,其中該異源RNA莖環能夠結合蛋白質、RNA結構、DNA序列或小分子。
實施例75。如實施例74之gNA變異體,其中插入該延伸莖環中之異源RNA莖環序列係選自MS2髮夾、Qβ髮夾、U1髮夾II、Uvsx髮夾或PP7髮夾,其中該異源莖環能夠分別結合MS2外殼蛋白、Qβ外殼蛋白、U1A信號識別粒子、T4噬菌體之Uvsx蛋白或PP7外殼蛋白。
實施例76。如實施例61至75中任一項之gNA變異體,其中該修飾包含在該延伸莖環中插入選自由以下組成之群的一或多個組分:
a.Rev反應元件(RRE)之莖IIB,
b.RRE之莖II-V;
c.RRE之莖II;
d.莖IIB之Rev結合元件(RBE);及
e.及全長RRE,
其中該一或多個組分能夠結合Rev。
實施例77。如實施例61至76中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體進一步包含靶向序列,其中該靶向序列與該目標核酸序列互補。
實施例78。如實施例77之gNA變異體,其中該靶向序列具有14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35個核苷酸。
實施例79。如實施例78之gNA變異體,其中該靶向序列具有18、19或20個核苷酸。
實施例80。如實施例79之gNA變異體,其中當在類似條件下在活體外基於細胞之分析中進行分析時,包含具有18個核苷酸之靶向序列的gNA變異體之RNP與包含具有20個核苷酸之靶向序列的gNA變異體之RNP相比展現至少2倍、至少3倍或至少4倍之更大的編輯效率。
實施例81。如實施例79之gNA變異體,其中當在類似條件下在活體外基於細胞之分析中進行分析時,包含具有19個核苷酸之靶向序列的gNA變異體之RNP與包含具有20個核苷酸之靶向序列的gNA變異體之RNP相比展現至少2倍、至少3倍或至少4倍之更大的編輯效率。
實施例82。如實施例77至79中任一項之gNA變異體,或其中該靶向序列具有20個核苷酸。
實施例83。如實施例77至80中任一項之gNA變異體,其中該gNA為包含與該靶向序列連接之該支架序列的單導引gNA。
實施例84。如實施例61至83中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之參考gNA改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例85。如實施例61至83中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於SEQ ID NO: 4之參考gNA、SEQ ID NO: 5之參考gNA、變異支架SEQ ID NO: 2238、變異支架SEQ ID NO: 2239、變異支架174 (SEQ ID NO: 2238)或變異支架175 (SEQ ID NO: 2239)改良至少約1.1倍、至少約2倍、至少約10倍或至少約100倍或更多倍。
實施例86。如實施例61至85中任一項之gNA變異體,其包含與不包括延伸莖區之SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5具有至少60%序列一致性之支架區。
實施例87。如實施例61至85中任一項之gNA變異體,其包含與SEQ ID NO: 14具有至少60%序列一致性之支架莖環。
實施例88。如實施例61至85中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架與SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 2238或SEQ ID NO: 2239之序列具有至少20%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%或至少70%、至少80%、至少85%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%一致性。
實施例89。如實施例61至85中任一項之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架包含選自由SEQ ID NO: 2101-2332之序列組成之群的序列,或與其具有至少約80%、至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%一致性的序列。
實施例90。如實施例89之gNA變異體,其中該gNA變異體序列之支架由選自由SEQ ID NO: 2101-2332組成之群的序列組成。
實施例91。如實施例61至90中任一項之gNA變異體,其進一步包含一或多種核酶。
實施例92。如實施例91之gNA變異體,其中該一或多種核酶獨立地與該gNA變異體之末端融合。
實施例93。如實施例91或實施例92之gNA變異體,其中該一或多種核酶中之至少一者為D型肝炎病毒(HDV)核糖核酸酶、錘頭狀核糖核酸酶、手槍核糖核酸酶、手斧核糖核酸酶或菸草環斑病毒(TRSV)核糖核酸酶。
實施例94。如實施例61至93中任一項之gNA變異體,其進一步包含熱穩定莖環。
實施例95。如實施例61至94中任一項之gNA變異體,其中該gNA經化學修飾。
實施例96。如實施例61至95中任一項之gNA變異體,其中該gNA包含來自第一gNA之第一區域及來自與該第一gNA不同之第二gNA之第二區域。
實施例97。如實施例96之gNA變異體,其中該第一區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例98。如實施例96或實施例97之gNA變異體,其中該第二區域係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例99。如實施例96至98中任一項之gNA變異體,其中該第一及第二區域不為相同區域。
實施例100。如實施例96至98中任一項之gNA變異體,其中該第一gNA包含SEQ ID NO: 4之序列且該第二gNA包含SEQ ID NO: 5之序列。
實施例101。如實施例61至100中任一項之gNA變異體,其包含至少一個嵌合區,該嵌合區包含來自第一gNA之第一部分及來自第二gNA之第二部分。
實施例102。如實施例101之gNA變異體,其中該至少一個嵌合區係選自由以下組成之群:三聯體區、支架莖環及延伸莖環。
實施例103。如實施例61之gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 2101-2332中任一項之序列。
實施例104。一種基因編輯對,其包含CasX變異蛋白及第一gNA變異體。
實施例105。如實施例104之基因編輯對,其中該CasX變異蛋白及該gNA變異體能夠在核糖核蛋白複合物(RNP)中結合在一起。
實施例106。如實施例104之基因編輯對,其中該CasX變異體及該gNA變異體在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
實施例107。如實施例104至107中任一項之基因編輯對,其中該第一gNA包含如實施例77至103中任一項之gNA變異體,及靶向序列,其中該靶向序列與該目標核酸互補。
實施例108。如實施例104至107中任一項之基因編輯對,其中該CasX變異體包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例109。如實施例104至108中任一項之基因編輯對,其包含:
a.如實施例77至103中任一項之gNA變異體,及
b.如實施例1至60中任一項之CasX變異體。
實施例110。如實施例109之基因編輯對,其中該CasX變異體及該gNA變異體之基因編輯對與包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 4或5之參考導引核酸的基因編輯對相比具有一或多個經改良之特徵。
實施例111。如實施例110之基因編輯對,其中該一或多個經改良之特徵包含經改良之CasX:gNA (RNP)複合物穩定性、經改良之該CasX與gNA之間的結合親和力、經改良之RNP複合物形成之動力學、較高百分比之裂解勝任型RNP、增加之RNP對目標核酸之結合親和力、利用增加範圍之PAM序列之能力、經改良之該目標核酸之展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、經改良之編輯特異性、增加之核酸酶活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切口之目標股負載、減少之脫靶裂解、增加之DNA的非目標股結合或增加之對核酸酶活性之抗性。
實施例112。如實施例110或實施例111之基因編輯對,其中經改良之特徵為與包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3或CasX變異體119或491之參考CasX蛋白及SEQ ID NO: 4或5之參考導引核酸或gNA變異體174 (SEQ ID NO: 2238)之基因編輯對相比,利用ATC、GTC或CTC之非典型PAM序列之目標核酸的編輯效率增強。
實施例113。如實施例110之基因編輯對,其中相對於該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之基因編輯對,該經改良之特徵中之至少一或多者改良至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例114。如實施例110之基因編輯對,其中該CasX變異體之經改良之特徵中之一或多者相對於該參考CasX蛋白之基因編輯對及該參考導引核酸或gNA變異體174 (SEQ ID NO: 2238)改良至少約1.1、至少約2、至少約4、至少約6、至少約6、至少約10或至少約100倍或更多倍。
實施例115。如實施例110之基因編輯對,其中當在類似條件下在活體外分析中進行分析時,該經改良之特徵包含與SEQ ID NO: 2及SEQ ID NO: 5之參考編輯對或gNA變異體174 (SEQ ID NO: 2238)相比編輯效率增加4至9倍。
實施例116。如實施例104至115中任一項之基因編輯對,其中與參考CasX蛋白及參考導引核酸之RNP相比,該CasX變異體及該gNA變異體之該RNP具有較高百分比之裂解勝任型RNP。
實施例117。如請求項116之基因編輯對,其中與該參考CasX蛋白及該參考導引核酸之該RNP相比,該CasX變異體及該gNA變異體之該RNP具有至少2倍、至少3倍、至少4倍或至少5倍更高百分比之裂解勝任型RNP。
實施例118。如實施例104至117中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合及裂解目標核酸。
實施例119。如實施例104至118中任一項之基因編輯對,其中當在類似條件下在活體外分析中分析靶上/脫靶編輯時,該CasX變異體及該gNA變異體之該RNP與SEQ ID NO: 2及SEQ ID NO: 5之參考編輯對或gNA變異體174 (SEQ ID NO: 2238)相比展現至少10%、或至少15%、或至少20%內之特異性比率。
實施例120。如實施例104至111中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標核酸,但不能夠裂解該目標核酸。
實施例121。如實施例104至117中任一項之基因編輯對,其中該RNP能夠結合目標核酸且在該目標核酸中產生一或多個單股切口。
實施例122。一種組合物,其包含如實施例104至119中任一項之基因編輯對,其包含:
a.第二基因編輯對,其包含如實施例1至60中任一項之CasX變異體;及
b.如實施例61至103中任一項之第二gNA變異體,其中該第二gNA變異體具有與該第一gNA之該靶向序列相比與該目標核酸之不同或重疊部分互補的靶向序列。
實施例123。一種CasX變異體,其包含SEQ ID NO: 89-101、247-337、411-592或760-982中之任一者之胺基酸序列。
實施例124。一種gNA變異體,其包含SEQ ID NO: 2101-2332中之任一者之胺基酸序列。
實施例125。如實施例104至121中任一項之基因編輯對,其用作治療患有疾病之個體之藥物。
第IV組
實施例1。一種導引RNA (gRNA)支架,其包含與選自由SEQ ID NO: 2292、2291、2307、2281-2290、2293-2306、2308-2332及2353-2398組成之群的序列中之任一者具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%序列一致性的序列。
實施例2。如實施例1之gRNA支架,其包含選自由SEQ ID NO: 2292、2291、2307、2281-2290、2293-2306、2308-2332及2353-2398組成之群的序列。
實施例3。如實施例1之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2238具有一或多個修飾之序列,其中該一或多個修飾產生經改良之特徵。
實施例4。如實施例3之gRNA支架,其中該一或多個修飾包含如表19中所闡述之一或多個核苷酸取代、插入及/或缺失。
實施例5。如實施例3或實施例4之gRNA支架,其中該經改良之特徵係視情況在活體外分析中選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之與第2類第V型CRISPR蛋白的結合親和力。
實施例6。如實施例3至5中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架在活體外分析中與SEQ ID NO: 2238之gRNA支架之分數相比展現高至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5之提高的富集分數(log
2)。
實施例7。如實施例1之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239具有一或多個修飾之序列,其中該一或多個修飾產生經改良之特徵。
實施例8。如實施例7之gRNA支架,其中該一或多個修飾包含如表20中所闡述之一或多個核苷酸取代、插入及/或缺失。
實施例9。如實施例7或實施例8之gRNA支架,其中該經改良之特徵係視情況在活體外分析中選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之與第2類第V型CRISPR蛋白的結合親和力。
實施例10。如實施例7至9中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架展現與活體外分析中之SEQ ID NO: 2239之gRNA支架之分數相比提高高至少約1.2、至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5之富集分數(log
2)。
實施例11。如實施例1之gRNA支架,其在相對於SEQ ID NO: 2239之序列之位置處包含一或多個修飾,該等位置選自由C9、U11、C17、U24、A29、U54、G64、A88及A95組成之群。
實施例12。如實施例11之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239之序列之一或多個修飾,該一或多個修飾選自由以下組成之群:C9U、U11C、C17G、U24C、A29C、位置54處G之插入,位置64處C之插入、A88G及A95G。
實施例13。如實施例12之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239之序列的修飾,該等修飾由C9U、U11C、C17G、U24C、A29C、位置54處G之插入、位置64處C之插入、A88G及A95G組成。
實施例14。如實施例7至13中任一項之gRNA支架,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群:假結莖穩定性、三聯體區穩定性、支架泡狀結構穩定性、延伸莖穩定性及與第2類第V型CRISPR蛋白之結合親和力。
實施例15。如實施例14之gRNA支架,其中相對於SEQ ID NO: 2239之序列在位置64處插入C及A88G取代解決該延伸莖之不對稱凸出元件,從而增強該gRNA支架之該延伸莖的穩定性。
實施例16。如實施例14之gRNA支架,其中U11C、U24C及A95G之取代增加該gRNA支架之三聯體區之穩定性。
實施例17。如實施例14之gRNA支架,其中該A29C之取代增加該假結莖之穩定性。
實施例18。如實施例1或實施例2之gRNA支架,其中該gRNA支架在該延伸莖中包含一或多個異源RNA序列。
實施例19。如實施例18之gRNA支架,其中該異源RNA係選自由以下組成之群:MS2髮夾、Qβ髮夾、U1髮夾II、Uvsx髮夾及PP7莖環或其序列變異體。
實施例20。如實施例18或實施例19之gRNA支架,其中該異源RNA序列增加該gRNA之穩定性。
實施例21。如實施例18或實施例19之gRNA支架,其中該異源RNA能夠結合蛋白質、RNA、DNA或小分子。
實施例22。如實施例18至21中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架包含Rev反應元件(RRE)或其部分。
實施例23。如實施例22之gRNA支架,其中該RRE或其部分係選自由以下組成之群:具有序列UGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACA (SEQ ID NO: 1280)之RRE之莖IIB、具有序列CAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCA AUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUG (SEQ ID NO: 1282)之RRE之莖II-V、具有序列GCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGC (SEQ ID NO: 1281)之RRE之莖II、具有序列GCUGACGGUACAGGC (SEQ ID NO: 1284)之莖IIB之Rev結合元件(RBE),及具有序列AGGAGCUUUGUUCCUUGGGUUCU UGGGAGCAGCAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUGGCUGUGGAAAGAUACCUAAAGGAUCAACAGCUCCU (SEQ ID NO: 1283)之全長RRE。
實施例24。如實施例1至23中任一項之gRNA,其中該gRNA支架包含一或多個胸腺嘧啶(T)。
實施例25。一種gRNA,其包含如實施例1至24中任一項之gRNA支架,及在該gRNA支架之3'端處與目標核酸序列互補之靶向序列。
實施例26。如實施例25之gRNA,其中該靶向序列具有10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸。
實施例27。如實施例26之gRNA,其中該靶向序列具有18、19或20個核苷酸。
實施例28。如實施例25至27中任一項之gRNA,其中該gRNA能夠與第2類第V型CRISPR蛋白形成核糖核蛋白(RNP)複合物。
實施例29。一種工程化之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含:
a.NTSB域,其包含QPASKKIDQNKLKPEMDEKGNLTTAGFA CSQCGQPLFVYKLEQVSEKGKAYTNYFGRCNVAEHEKLILLAQLKPEKDSDEAVTYSLGKFGQ (SEQ ID NO: 2335)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列;
b.螺旋形I-II域,其包含RALDFYSIHVTKESTHPVKPLAQIAG NRYASGPVGKALSDACMGTIASFLSKYQDIIIEHQKVVKGNQKRLESLRELAGKENLEYPSVTLPPQPHTKEGVDAYNEVIARVRMWVNLNLWQKLKLSRDDAKPLLRLKGFPSF (SEQ ID NO: 2336)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列;
c.螺旋形II域,其包含PLVERQANEVDWWDMVCNVKKLINEK KEDGKVFWQNLAGYKRQEALRPYLSSEEDRKKGKKFARYQLGDLLLHLEKKHGEDWGKVYDEAWERIDKKVEGLSKHIKLEEERRSEDAQSKAALTDWLRAKASFVIEGLKEADKDEFCRCELKLQKWYGDLRGKPFAIEAE (SEQ ID NO: 2351)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列;及
d. RuvC-I域,其包含SSNIKPMNLIGVDRGENIPAVIALTDPEG CPLSRFKDSLGNPTHILRIGESYKEKQRTIQAKKEVEQRRAGGYSRKYASKAKNLADDMVRNTARDLLYYAVTQDAMLIFENLSRGFGRQGKRTFMAERQYTRMEDWLTAKLAYEGLPSKTYLSKTLAQYTSKTC (SEQ ID NO: 2352)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例30。如實施例29之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含OBD-I域,該OBD-I域包含QEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGKTGPMKTLLVRVMTPDLRERLENLRKKPENIPQ (SEQ ID NO: 2342)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例31。如實施例29或實施例30之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含OBD-II域,該OBD-II域包含NSILDISGFSKQYNCAFIWQKDGVKKLNLYLIINYFKGGKLRFKKIKPEAFEANRFYTVINKKSGEIVPMEVNFNFDDPNLIILPLAFGKRQGREFIWNDLLSLETGSLKLANGRVIEKTLYNRRTRQDEPALFVALTFERREVLD (SEQ ID NO: 2347)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例32。如實施例29至31中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含螺旋形I-I域,該螺旋形I-I域包含PISNTSRANLNKLLTDYTEMKKAILHVYWEEFQKDPVGLMSRVA (SEQ ID NO: 2343)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例33。如實施例29至32中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含TSL域,該TSL域包含SNCGFTITSADYDRVLEKLKKTATGWMTTINGKELKVEGQITYYNRYKRQNVVKDLSVELDRLSEESVNNDISSWTKGRSGEALSLLKKRFSHRPVQEKFVCLNCGFETH (SEQ ID NO: 2349)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例34。如實施例29至33中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含RuvC-II域,該RuvC-II域包含ADEQAALNIARSWLFLRSQEYKKYQTNKTTGNTDKRAFVETWQSFYRKKLKEVWKPAV (SEQ ID NO: 2350)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例35。如實施例34之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含SEQ ID NO: 416之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
實施例36。如實施例29至35中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白包含一或多個域中之至少一個修飾。
實施例37。如實施例36之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該至少一個修飾包含:
a.域中之至少一個胺基酸取代;
b.域中之至少一個胺基酸缺失;
c.域中之至少一個胺基酸插入;或
d.(a)-(c)之任何組合。
實施例38。如實施例36或實施例37之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該NTSB域中相對於SEQ ID NO: 2335的一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:P2、S4、Q9、E15、G20、G33、L41、Y51、F55、L68、A70、E75、K88及G90。
實施例39。如實施例38之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2335,在該NTSB域中之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處G之插入、位置4處I之插入、位置4處L之插入、Q9P、E15S、G20D、位置30處S之缺失、G33T、L41A、Y51T、F55V、L68D、L68E、L68K、A70Y、A70S、E75A、E75D、E75P、K88Q及G90Q。
實施例40。如實施例36至39中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該螺旋形I-II域中相對於SEQ ID NO: 2336的一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I24、A25、Y29、G32、G44、S48、S51、Q54、I56、V63、S73、L74、K97、V100、M112、L116、G137、F138及S140。
實施例41。如實施例40之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2336,該螺旋形I-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置24處T之插入、位置25處C之插入、Y29F、G32Y、G32N、G32H、G32S、G32T、G32A、G32V、位置32處G之缺失、G32S、G32T、G44L、G44H、S48H、S48T、S51T、Q54H、I56T、V63T、S73H、L74Y、K97G、K97S、K97D、K97E、V100L、M112T、M112W、M112R、M112K、L116K、G137R、G137K、G137N、位置138處Q之插入及S140Q。
實施例42。如實施例36至41中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該螺旋形II域中相對於SEQ ID NO: 2351的一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:L2、V3、E4、R5、Q6、A7、E9、V10、D11、W12、W13、D14、M15、V16、C17、N18、V19、K20、L22、I23、E25、K26、K31、Q35、L37、A38、K41、R 42、Q43、E44、L46、K57、Y65、G68、L70、L71、L72、E75、G79、D81、W82、K84、V85、Y86、D87、I93、K95、K96、E98、L100、K102、I104、K105、E109、R110、D114、K118、A120、L121、W124、L125、R126、A127、A129、I133、E134、G135、L136、E138、D140、K141、D142、E143、F144、C145、C147、E148、L149、K150、L151、Q152、K153、L158、E166及A167。
實施例43。如實施例42之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2351,該螺旋形II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處A之插入、位置2處H之插入、位置2處L之缺失及位置3處V之缺失、V3E、V3Q、V3F、位置3處V之缺失、位置3處D之插入、V3P、E4P、位置4處E之缺失、E4D、E4L、E4R、R5N、Q6V、位置6處Q之插入、位置7處G之插入、位置9處H之插入、位置9處A之插入、VD10、位置0處T1之插入、位置10處V之缺失、位置10處F之插入、位置11處D之插入、位置11處D之缺失、D11S、位置12處W之缺失、W12T、W12H、位置12處P之插入、位置13處Q之插入、位置12處G之插入、位置13處R之插入、W13P、W13D、位置13處D之插入、W13L、位置14處P之插入、位置14處D之插入、位置14處D之缺失及位置15處M之缺失、位置15處M之缺失、位置16處T之插入、位置17處P之插入、N18I、V19N、V19H、K20D、L22D、I23S、E25C、E25P、位置25處G之插入、K26T、K27E、K31L、K31Y、Q35D、Q35P、位置37處S之插入、位置37處L之缺失及位置38處A之缺失、K41L、位置42處R之插入、位置43處Q之缺失及位置44處E之缺失、L46N、K57Q、Y65T、G68M、L70V、L71C、L72D、L72N、L72W、L72Y、E75F、E75L、E75Y、G79P、位置79處E之插入、位置81處T之插入、位置81處R之插入、位置81處W之插入、位置81處Y之插入、位置82處W之插入、位置82處Y之插入、W82G、W82R、K84D、K84H、K84P、K84T、V85L、V85A、位置85處L之插入、Y86C、D87G、D87M、D87P、I93C、K95T、K96R、E98G、L100A、K102H、I104T、I104S、I104Q、K105D、位置109處K之插入、E109L、R110D、位置110處R之缺失、D114E、位置114處D之插入、K118P、A120R、L121T、W124L、L125C、R126D、A127E、A127L、A129T、A129K、I133E、位置133處C之插入、位置134處S之插入、位置134處G之插入、位置135處R之插入、G135P、L136K、L136D、L136S、L136H、位置138處E之缺失、D140R、位置140處D之插入、位置141處P之插入、位置142處D之插入、位置143處E之缺失+位置144處F之缺失、位置143處Q之插入、F144K、位置144處F之缺失、位置144處F之缺失及位置145處C之缺失、C145R、位置145處G之插入、C145K、C147D、位置148處V之插入、E148D、位置149處H之插入、L149R、K150R、L151H、Q152C、K153P、L158S、E166L及位置167處F之插入。
實施例44。如實施例36至43中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該RuvC-I域中相對於SEQ ID NO: 2352之一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I4、K5、P6、M7、N8、L9、V12、G49、K63、K80、N83、R90、M125及L146。
實施例45。如實施例44之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2351,該RuvC-I域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置4處I之插入、位置5處S之插入、位置6處T之插入、位置6處N之插入、位置7處R之插入、位置7處K之插入、位置8處H之插入、位置8處S之插入、V12L、G49W、G49R、S51R、S51K、K62S、K62T、K62E、V65A、K80E、N83G、R90H、R90G、M125S、M125A、L137Y、位置137處P之插入、位置141處L之缺失、L141R、L141D、位置142處Q之插入、位置143處R之插入、位置143處N之插入、E144N、位置146處P之插入、L146F、P147A、K149Q、T150V、位置152處R之插入、H153之插入、T155Q、位置155處H之插入、位置155處R之插入、位置156處L之插入、位置156處L之缺失、位置156處W之插入、位置157處A之插入、位置157處F之插入、A157S、Q158K、位置159處Y之缺失、T160Y、T160F、位置161處I之插入、S161P、T163P、位置163處N之插入、C164K及C164M。
實施例46。如實施例36至45中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該OBD-I域中相對於SEQ ID NO: 2342之一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:I3、K4、R5、I6、N7、K8、K15、D16、N18、P27、M28、V33、R34、M36、R41、L47、R48、E52、P55及Q56。
實施例47。如實施例46之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2342,該OBD-I域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置3處G之插入、I3G、I3E、位置4處G之插入、K4G、K4P、K4S、K4W、K4W、R5P、位置5處P之插入、位置5處G之插入、R5S、位置5處S之插入、R5A、R5P、R5G、R5L、I6A、I6L、位置6處G之插入、N7Q、N7L、N7S、K8G、K15F、D16W、位置16處F之插入、F18之插入、位置27處P之插入、M28P、M28H、V33T、R34P、M36Y、R41P、L47P、位置48處P之插入、E52P、位置55處P之插入、位置55處P之缺失及位置56處Q之缺失、Q56S、Q56P、位置56處D之插入、位置56處T之插入及Q56P。
實施例48。如實施例36至47中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該OBD-II域中相對於SEQ ID NO: 2347之一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:S2、I3、L4、K11、V24、K37、R42、A53、T58、K63、M70、I82、Q92、G93、K110、L121、R124、R141、E143、V144及L145。
實施例49。如實施例48之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2342,該OBD-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處S之缺失、I3R、I3K、位置3處I之缺失及L4之缺失、位置4處L之缺失、K11T、位置24處P之插入、K37G、R42E、位置53處S之插入、位置58處R之插入、位置63處K之缺失、M70T、I82T、Q92I、Q92F、Q92V、Q92A、位置93處A之插入、K110Q、R115Q、L121T、位置124處A之插入、位置141處R之插入、位置143處D之插入、位置143處A之插入、位置144處W之插入及位置145處A之插入。
實施例50。如實施例36至49中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該TSL域中相對於SEQ ID NO: 2349之一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:S1、N2、C3、G4、F5、I7、K18、V58、S67、T76、G78、S80、G81、E82、S85、V96及E98。
實施例51。如實施例50之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2349,該OBD-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置1處M之插入、位置2處N之缺失、位置2處V之插入、C3S、位置4處G之插入、位置4處W之插入、F5P、位置7處W之插入、K18G、V58D、位置67處A之插入、T76E、T76D、T76N、G78D、位置80處S之缺失、位置81處G之缺失、位置82處E之插入、位置82處N之插入、S85I、V96C、V96T及E98D。
實施例52。如實施例29至51中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其相對於SEQ ID NO: 2展現經改良之特徵,其中該經改良之特徵包含增加之對gRNA之結合親和力、增加之對該目標核酸之結合親和力、提高之在編輯該目標核酸中利用較大範圍PAM序列之能力、經改良之該目標核酸之展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、經改良之裂解該目標核酸之編輯特異性、減少之脫靶編輯或裂解該目標核酸、增加之可編輯之真核基因體之百分比、增加之該核酸酶之活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切割之目標股負載、增加之DNA之非目標股結合、增加之蛋白質穩定性、增加之蛋白質:gRNA (RNP)複合物穩定性及經改良之融合特徵。
實施例53。如實施例52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含TTC、ATC、GTC或CTC PAM序列之目標核酸序列處增加之裂解活性。
實施例54。如實施例53之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含相對於SEQ ID NO: 416之序列的裂解活性,在包含ATC或CTC PAM序列之目標核酸序列處增加之裂解活性。
實施例55。如實施例54之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列的分數相比,增加之裂解活性為至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5、至少約6、至少約7、至少約8或更大的富集分數(log
2)。
實施例56。如實施例54之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含CTC PAM序列之目標核酸序列處相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之裂解活性。
實施例57。如實施例56之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列的分數相比,該增加之裂解活性為至少約2、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6或更大的富集分數(log
2)。
實施例58。如實施例53之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含TTC PAM序列之目標核酸序列處相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之裂解活性。
實施例59。如實施例58之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列相比,該增加之裂解活性為至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6 log
2或更大的富集分數。
實施例60。如實施例52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之對該目標核酸序列裂解之特異性。
實施例61。如實施例60之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列相比,該增加之特異性為至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6 log
2或更大的富集分數。
實施例62。如實施例52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含減少之該目標核酸序列之脫靶裂解。
實施例63。如實施例29至62中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白具有選自由以下組成之群的序列:如表3中所闡述之SEQ ID NO: 415-592及1147-1231之序列,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%,或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。
實施例64。如實施例29至62中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表3中所闡述之選自由SEQ ID NO: 415-592及1147-1231組成之群的序列。
實施例65。如實施例29至64中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含一或多個核定位信號(NLS)。
實施例66。如實施例65之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS係選自由以下組成之序列群:PKKKRKV (SEQ ID NO: 352)、KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)、PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354)、RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)、NQSSNFGPMKGGNFGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)、RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV (SEQ ID NO: 357)、VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)、PPKKARED (SEQ ID NO: 359)、PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360)、SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361)、DRLRR (SEQ ID NO: 362)、PKQKKRK (SEQ ID NO: 363)、RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364)、REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365)、KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366)、RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367)、PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368)、PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369)、NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370)、RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371)、KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372)、KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373)、PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374)、KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375)、KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377)、PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378)、SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379)、KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)、PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)、PAKRARRGYKC (SEQ ID NO: 63)、KLGPRKATGRW (SEQ ID NO: 64)、PRRKREE (SEQ ID NO: 65)、PYRGRKE (SEQ ID NO: 66)、PLRKRPRR (SEQ ID NO: 67)、PLRKRPRRGSPLRKRPRR (SEQ ID NO:68)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKV (SEQ ID NO:69)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAA (SEQ ID NO:70)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAAAKE AAAKA (SEQ ID NO:71)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESP KKKRKVPG (SEQ ID NO:72)、KRKGSPERGERKRHW (SEQ ID NO:73)、KRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:74)及PKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:75),且視情況其中該一或多個NLS利用連接肽與該第2類第V型CRISPR蛋白連接或與相鄰NLS連接,其中該連接肽係選自由以下組成之群:SR、RS、(G)n (SEQ ID NO: 1023)、(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)、(GGGS)n (SEQ I DNO: 401)、GGSG (SEQ ID NO: 402)、GGSGG (SEQ ID NO: 403)、GSGSG (SEQ ID NO: 404)、GSGGG (SEQ ID NO: 405)、GGGSG (SEQ ID NO: 406)、GSSSG (SEQ ID NO: 407)、GPGP (SEQ ID NO: 408)、GGP、PPP、PPAPPA (SEQ ID NO: 409)、PPPG (SEQ ID NO: 24)、PPPGPPP (SEQ ID NO: 410)、PPP(GGGS)n (SEQ ID NO: 25)、(GGGS)nPPP (SEQ ID NO: 26)、AEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 1025)及TPPKTKRKVEFE (SEQ ID NO: 27),其中n為1至5。
實施例67。如實施例65或實施例66之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS定位於蛋白質之C端處或其附近。
實施例68。如實施例65或實施例66之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS定位於蛋白質之N端處或其附近。
實施例69。如實施例65或實施例66之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含至少兩個NLS,其中該至少兩個NLS定位於該蛋白質之N端處或其附近及定位於C端處或其附近。
實施例70。如實施例29至69中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白能夠與gRNA形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
實施例71。如實施例70之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP與SEQ ID NO: 1-3中之任一者之參考蛋白與SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP相比展現至少一或多個經改良之特徵。
實施例72。如實施例71之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群:增加之對導引核酸(gRNA)之結合親和力;增加之對目標核酸之結合親和力;提高之在目標核酸之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;經增加之該目標核酸展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之該目標核酸之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之該目標核酸之脫靶裂解;增加之非目標核酸股之結合;及增加之蛋白質:gRNA複合物(RNP)穩定性。
實施例73。如實施例71或實施例72之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP之經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP增加至少約1.1至約100,000倍。
實施例74。如實施例71或實施例72之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP之經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及SEQ ID NO: 4或5之gRNA之RNP增加至少約10倍、至少約100倍、至少約1,000倍或至少約10,000倍。
實施例75。如實施例71至74中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中與SEQ ID NO: 2之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或5之gRNA之RNP相比,該RNP之經改良之特徵包含在編輯效率方面提高1.1至100倍。
實施例76。一種基因編輯對,其包含gRNA及第2類第V型CRISPR蛋白,該對包含:
a. 如實施例25至28中任一項之gRNA;及
b. 如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
實施例77。如實施例76之基因編輯對,其中該gRNA及該第2類第V型CRISPR蛋白能夠形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
實施例78。如實施例76或實施例77之基因編輯對,其中該gRNA及該第2類第V型CRISPR蛋白作為核糖核蛋白複合物(RNP)締合在一起。
實施例79。如實施例77或實施例78之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之RNP與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列之gRNA之RNP相比展現至少一或多個經改良之特徵。
實施例80。如實施例79之基因編輯對,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群中的一或多者:增加之該第2類第V型CRISPR蛋白與該gRNA之結合親和力;增加之對目標核酸之結合親和力;提高之在目標核酸之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;增加之該目標核酸展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之該目標核酸之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之該目標核酸之脫靶裂解;增加之非目標核酸股之結合;增加之蛋白質:gRNA複合物(RNP)穩定性;及增加之融合特徵。
實施例81。如實施例79或實施例80之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之RNP之經改良之特徵在可比較的活體外分析系統中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列的gRNA之RNP增加至少約1.1至約100倍或更多倍。
實施例82。如實施例79或實施例80之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白之經改良之特徵在可比較的活體外分析系統中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之該參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列的該gRNA增加至少約1.1、至少約2、至少約10、至少約100倍或更多倍。
實施例83。如實施例77至82中任一項之基因編輯對,其中與在可比較的分析系統中包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及參考gRNA之RNP的編輯效率及/或結合相比,當PAM序列TTC、ATC、GTC、或CTC中之任一者位於距與該gRNA之靶向序列具有一致性之原間隔子之非目標股之5'為1個核苷酸處時,包含該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP在細胞分析系統中展現更大的編輯效率及/或該目標核酸中之目標核酸序列之結合。
實施例84。如實施例83之基因編輯對,其中該PAM序列為TTC。
實施例85。如實施例83之基因編輯對,其中該PAM序列為ATC。
實施例86。如實施例83之基因編輯對,其中該PAM序列為CTC。
實施例87。如實施例83之基因編輯對,其中該PAM序列為GTC。
實施例88。如實施例83至87中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,包含該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP與SEQ ID NO:1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP的結合親和力相比展現大至少1.5倍、至少2倍、至少4倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或至少40倍之增加之對該一或多個PAM序列之結合親和力。
實施例89。如實施例77至88中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP與SEQ ID NO: 1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP的編輯效率相比展現大至少1.5倍、至少2倍、至少4倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或至少40倍的提高之編輯效率。
實施例90。如實施例77至89中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NOS: 1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP相比,該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA能夠形成具有高至少約5%、至少約10%、至少約15%,或至少約20%百分比之裂解勝任型構形的RNP。
實施例91。如實施例77至90中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NO: 1-3中之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA的RNP相比,包含該第2類第V型CRISPR及該gRNA之該RNP在定時活體外分析中展現出對該目標核酸高至少約5倍、至少約10倍或至少約20倍之裂解速率。
實施例92。如實施例77至91中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NO: 1-3中之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA的RNP相比,包含該第2類第V型CRISPR及該gRNA之該RNP在定時活體外分析中展現高至少約5倍、至少約l0倍、至少約20倍或至少約100倍之較高的該目標核酸編輯百分比。
實施例93。一種催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表7中所闡述之選自由SEQ NO: 44-62及1232-1235組成之群的序列或與其具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%序列一致性之序列。
實施例94。一種催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表7中所闡述之選自由SEQ NO: 44-62及1232-1235組成之群的序列。
實施例95。如實施例93或實施例94之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白及如實施例25至28中任一項之gRNA之RNP保留結合目標核酸的能力。
實施例96。一種核酸,其包含編碼如實施例1至24中任一項之gRNA支架或如實施例25至28中任一項之gRNA的序列。
實施例97。一種核酸,其包含編碼如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白的序列。
實施例98。如實施例97之核酸,其中編碼該第2類第V型CRISPR蛋白之序列經密碼子最佳化以表現於真核細胞中。
實施例99。一種載體,其包含如實施例25至28中任一項之gRNA、如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白或如實施例96至98中任一項之核酸。
實施例100。如實施例99之載體,其中該載體包含啟動子。
實施例101。如實施例99或實施例100之載體,其中該載體係選自由以下組成之群:反轉錄病毒載體、慢病毒載體、腺病毒載體、腺相關病毒(AAV)載體、單純疱疹病毒(HSV)載體、CasX遞送粒子(XDP)、質體、微型環、奈米質體、DNA載體及RNA載體。
實施例102。如實施例101之載體,其中該載體為AAV載體。
實施例103。如實施例102之載體,其中該AAV載體係選自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV-Rh74或AAVRh10。
實施例104。如實施例101之載體,其中該載體係反轉錄病毒載體。
實施例105。如實施例101之載體,其中該載體為包含gag多聚蛋白之一或多種組分的XDP。
實施例106。如實施例105之載體,其中該gag多聚蛋白之一或多種組分係選自由以下組成之群:基質蛋白(MA)、核衣殼蛋白(NC)、衣殼蛋白(CA)、p1肽、p6肽、P2A肽、P2B肽、P10肽、p12肽、PP21/24肽、P12/P3/P8肽、P20肽及蛋白酶裂解位點。
實施例107。如實施例105或實施例106之載體,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA在RNP中締合在一起。
實施例108。如實施例105至107中任一項之載體,其包含醣蛋白向性因子。
實施例109。如實施例108之載體,其中該醣蛋白向性因子對目標細胞之細胞表面標誌物具有結合親和力且促進該XDP進入該目標細胞中。
實施例110。如實施例99至109中任一項之載體,其包含該供體模板。
實施例111。一種宿主細胞,其包含如實施例99至110中任一項之載體。
實施例112。如實施例111之宿主細胞,其中該宿主細胞係選自由以下組成之群:嬰兒倉鼠腎纖維母細胞(BHK)細胞、人類胚胎腎293 (HEK293)細胞、人類胚胎腎293T (HEK293T)細胞、NS0細胞、SP2/0細胞、YO骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6細胞、融合瘤細胞、NIH3T3細胞、起點具有SV40基因物質之CV-1 (猿猴)(COS)細胞、HeLa、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或酵母細胞。
實施例113。一種修飾細胞中之目標核酸之方法,其包含使該細胞之該目標核酸與以下接觸:i)實施例76至92中任一項之基因編輯對;ii)實施例76至92中任一項之基因編輯對以及供體模板;iii)一或多個編碼(i)或(ii)之該基因編輯對之核酸;iv)包含(iii)之該核酸之載體;v)包含(i)或(ii)之該基因編輯對之XDP;或vi) (i)至(v)中之兩者或更多者之組合,其中該目標核酸之接觸修飾該目標核酸。
實施例114。如實施例113之方法,其包含使該目標與包含第一及第二或複數個gRNA之複數個基因編輯對接觸,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
實施例115。如實施例113之方法,其包含使該目標與複數個編碼基因編輯對之核酸接觸,該等基因編輯對包含第一及第二或複數個gRNA,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
實施例116。如實施例113之方法,其包含使該目標與包含基因編輯對之複數個XDP接觸,該等基因編輯對包含第一及第二或複數個gRNA,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
實施例117。如實施例113之方法,其中該接觸包含使該目標核酸與該基因編輯對結合及在該目標核酸中引入一或多個單股斷裂,其中該修飾包含在該目標核酸中引入突變、插入或缺失。
實施例118。如實施例113至116中任一項之方法,其中該接觸包含結合該目標核酸及在該目標核酸中引入一或多個雙股斷裂,其中該修飾包含在該目標核酸中引入突變、插入或缺失。
實施例119。如實施例113至118中任一項之方法,其包含使該目標核酸與供體模板核酸之核苷酸序列接觸,其中該供體模板包含與該目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
實施例120。如實施例119之方法,其中該供體模板包含該供體模板之5'及3'端上之同源臂。
實施例121。如實施例119或實施例120之方法,其中該供體模板藉由同源定向修復在該斷裂位點處插入該目標核酸中。
實施例122。如實施例121之方法,其中該供體模板藉由非同源末端連接(NHEJ)或微同源末端連接(MMEJ)在該斷裂位點處插入該目標核酸中。
實施例123。如實施例113至122中任一項之方法,其中該細胞之修飾發生在活體外。
實施例124。如實施例113至122中任一項之方法,其中該細胞之修飾發生在活體內。
實施例125。如實施例113至124中任一項之方法,其中該細胞為真核細胞。
實施例126。如實施例125之方法,其中該真核細胞係選自由以下組成之群:嚙齒動物細胞、小鼠細胞、大鼠細胞、靈長類動物細胞及非人類靈長類動物細胞。
實施例127。如實施例125之方法,其中該真核細胞為人類細胞。
實施例128。如實施例113至127中任一項之方法,其中該細胞係選自由以下組成之群:胚胎幹細胞、誘導性多潛能幹細胞、生殖細胞、纖維母細胞、寡樹突神經膠質細胞、膠細胞、造血幹細胞、神經元先驅細胞、神經元、肌細胞、骨細胞、肝細胞、胰臟細胞、視網膜細胞、癌細胞、T細胞、B細胞、NK細胞、胎兒心肌細胞、肌纖維母細胞、間葉系幹細胞、自體移植擴增心肌細胞、脂肪細胞、分化全能細胞、多潛能細胞、血液幹細胞、肌母細胞、成體幹細胞、骨髓細胞、間葉細胞、實質細胞、上皮細胞、內皮細胞、間皮細胞、纖維母細胞、骨母細胞、軟骨細胞、外源細胞、內源細胞、幹細胞、造血幹細胞、骨髓衍生之先驅細胞、心肌細胞、骨骼細胞、胎兒細胞、未分化細胞、多潛能先驅細胞、單潛能先驅細胞、單核球、心肌母細胞、骨骼肌母細胞、巨噬細胞、毛細管內皮細胞、異種細胞、同種異體細胞、自體細胞或產後幹細胞。
實施例129。如實施例124至128中任一項之方法,其中該細胞在個體中。
實施例130。如實施例129之方法,其中該修飾發生於基因之對偶基因中具有突變的該個體之該細胞中,其中該突變在該個體中引起疾病或病症。
實施例131。如實施例130之方法,其中該修飾將該突變變為該基因之野生型對偶基因或引起功能性基因產物之表現。
實施例132。如實施例130之方法,其中該修飾減弱或剔除引起該個體中之疾病或病症之基因的對偶基因。
實施例133。如實施例129至132中任一項之方法,其中該細胞相對於該個體為自體的。
實施例134。如實施例129至132中任一項之方法,其中該細胞相對於該個體為同種異體自體的。
實施例135。如實施例113至134中任一項之方法,其中該載體為腺相關病毒(AAV)載體。
實施例136。如實施例135之方法,其中該AAV為AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV-Rh74或AAVRh10。
實施例137。如實施例113之方法,其中該載體為慢病毒載體。
實施例138。如實施例113至137中任一項之方法,其中該載體係使用治療有效劑量向有需要之個體投與。
實施例139。如實施例138之方法,其中該個體係選自由小鼠、大鼠、豬及非人類靈長類動物組成之群。
實施例140。如實施例138之方法,其中該個體為人類。
實施例141。如實施例138至140中任一項之方法,其中該載體係以至少約1×10
5載體基因體/kg (vg/kg)、至少約1×10
6vg/kg、至少約1×10
7vg/kg、至少約1×10
8vg/kg、至少約1×10
9vg/kg、至少約1×10
10vg/kg、至少約1×10
11vg/kg、至少約1×10
12vg/kg、至少約1×10
13vg/kg、至少約1×10
14vg/kg、至少約1×10
15vg/kg或至少約1×10
16vg/kg之劑量向該個體投與。
實施例142。如實施例138至140中任一項之方法,其中該載體係以至少約1×10
5vg/kg至約1×10
16vg/kg、至少約1×10
6vg/kg至約1×10
15vg/kg、或至少約1×10
7vg/kg至約1×10
14vg/kg之劑量向該個體投與。
實施例143。如實施例113之方法,其中該載體為XDP。
實施例144。如實施例143之方法,其中該XDP係使用治療有效劑量向該個體投與。
實施例145。如實施例144之方法,其中該XDP係以至少約1×10
5個粒子/公斤、至少約1×10
6個粒子/公斤、至少約1×10
7個粒子/公斤、至少約1×10
8個粒子/公斤、至少約1×10
9個粒子/公斤、至少約1×10
10個粒子/公斤、至少約1×10
11個粒子/公斤、至少約1×10
12個粒子/公斤、至少約1×10
13個粒子/公斤、至少約1×10
14個粒子/公斤、至少約1×10
15個粒子/公斤、至少約1×10
16個粒子/公斤之劑量向該個體投與。
實施例146。如實施例143之方法,其中該XDP係以至少約1×10
5個粒子/公斤至約1×10
16個粒子/公斤、或至少約1×10
6個粒子/公斤至約1×10
15個粒子/公斤、或至少約1×10
7個粒子/公斤至約1×10
14個粒子/公斤之劑量向該個體投與。
實施例147。如實施例138至146中任一項之方法,其中該載體係藉由選自由以下組成之群的投與途徑投與:腦實質內、靜脈內、動脈內、腦室內、腦池內、鞘內、顱內及腹膜內途徑,其中投與方法為注射、輸注或植入。
實施例148。如實施例141至147中任一項之方法,其中該載體係根據包含一或多個連續劑量之治療方案,使用治療有效劑量之該載體向該個體投與。
實施例149。如實施例148之方法,其中該治療有效劑量係以經至少兩週、或至少一個月、或至少兩個月、或至少三個月、或至少四個月、或至少五個月、或至少六個月、或一年一次、或每2或3年之時段向該個體投與兩次或兩次以上劑量。
實施例150。一種細胞,其包含經如實施例76至92中任一項之基因編輯對修飾之目標核酸。
實施例151。一種細胞,其藉由如實施例113至149中任一項之方法編輯。
實施例152。如實施例150或151之細胞,其中該細胞為原核細胞。
實施例153。如實施例150或151之細胞,其中該細胞為真核細胞。
實施例154。如實施例153之方法,其中該真核細胞係選自由以下組成之群:嚙齒動物細胞、小鼠細胞、大鼠細胞、靈長類動物細胞及非人類靈長類動物細胞。
實施例155。如實施例153之細胞,其中該真核細胞為人類細胞。
實施例156。一種組合物,其包含如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
實施例157。如實施例156之組合物,其包含如實施例25至28中任一項之gRNA。
實施例158。如實施例157之組合物,其中該蛋白質及該gRNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
實施例159。如實施例156至158中任一項之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
實施例160。如實施例156至159中任一項之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例161。一種組合物,其包含如實施例1至24中任一項之gRNA支架或如實施例25至28中任一項之gRNA。
實施例162。如實施例161之組合物,其包含如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
實施例163。如實施例162之組合物,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
實施例164。如實施例161至163中任一項之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
實施例165。如實施例161至164中任一項之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例166。一種組合物,其包含如實施例76至92中任一項之基因編輯對。
實施例167。如實施例166之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
實施例168。如實施例166或實施例167之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例169。一種套組,其包含如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白及容器。
實施例170。如實施例169之套組,其包含如實施例1至24中任一項之gRNA支架或如實施例25至28中任一項之gRNA。
實施例171。如實施例169或實施例170之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸之目標核酸序列具有同源性之核苷酸序列。
實施例172。如實施例169至171中任一項之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例173。一種套組,其包含如實施例1至24中任一項之gRNA支架或如實施例25至28中任一項之gRNA。
實施例174。如實施例173之套組,其包含如實施例29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
實施例175。如實施例173或實施例174之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸之目標核酸序列具有同源性之核苷酸序列。
實施例176。如實施例173至175中任一項之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例177。一種套組,其包含如實施例76至92中任一項之基因編輯對。
實施例178。如實施例177之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
實施例179。如實施例177或實施例178之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
實施例180。一種工程化之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含表3中所列之序列中之任一者。
實施例181。一種gRNA,其包含表2中所列之gRNA支架變異體序列中之任一者。
實施例182。如實施例181之gRNA,其中表2序列之gRNA支架變異體之一或多個尿嘧啶(U)經胸腺嘧啶(T)置換。
實施例183。如實施例182之gRNA,其包含與目標核酸互補之至少10至30個核苷酸之靶向序列。
實施例184。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有20個核苷酸。
實施例185。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有19個核苷酸。
實施例186。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有18個核苷酸。
實施例187。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有17個核苷酸。
實施例188。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有16個核苷酸。
實施例189。如實施例183之gRNA,其中該靶向序列具有15個核苷酸。
實施例190。一種治療有需要之個體中之疾病的方法,其包含向該個體投與治療有效量之組合物,該組合物包含:(a)如實施例29至75及180中任一項之工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及(b)如實施例25至28及181至189中任一項之gRNA。
實施例191。一種組合物,其包含:(a)如實施例29至75及180中任一項之工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及(b)如實施例25至28及181至189中任一項之gRNA,其用作治療患有疾病之個體的藥物。
以下實例僅為例示性的且不意欲以任何方式限制本發明之任何態樣。
實例
實例 1 : 產生 CasX 變異體構築體
為了產生CasX 488構築體(表9中之序列),使用標準選殖方法將密碼子最佳化之CasX 119構築體(根據CasX Stx2構築體,編碼具有胺基酸取代及缺失之浮黴菌門CasX SEQ ID NO: 2,)選殖至目的地質體(pStX)中。為了產生CasX 491構築體(表9中之序列),使用標準選殖方法將密碼子最佳化之CasX 484構築體(根據CasX Stx2構築體,編碼具有某些胺基酸之取代及缺失之浮黴菌門CasX SEQ ID NO: 2,具有融合NLS及連接導引及非靶向序列)選殖至目的地質體(pStX)中。使用標準選殖方法將構築體CasX 1 (CasX SEQ ID NO: 1)選殖至目的地載體中。為了建立CasX 488,使用Q5 DNA聚合酶根據製造商方案,使用通用適當引子在兩個反應中對CasX 119構築體DNA進行PCR擴增。為了建立CasX 491,密碼子最佳化之CasX 484構築體DNA在兩個反應中根據製造商方案使用Q5 DNA聚合酶使用適當引子進行PCR擴增。根據製造商方案,使用Q5 DNA聚合酶、通用適當引子在兩個反應中對CasX 1構築體進行PCR擴增。根據製造商方案,使用Zymoclean凝膠DNA回收套組藉由自1%瓊脂糖凝膠(Gold Bio Cat# A-201-500)進行凝膠萃取來純化PCR產物中之每一者。隨後使用Gibson組件(新英格蘭生物實驗室Cat# E2621S),遵循製造商方案將相應片段拼接在一起。將pStx1中的組合產品轉化為化學勝任型Turbo勝任型
大腸桿菌細菌細胞,接種於含有卡那黴素的LB-瓊脂盤上。選取個別菌落且使用Qiagen spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確裝配。隨後使用限制酶選殖將恰當純系次選殖至哺乳動物表現載體pStx34中。pStx34主鏈及pStx1中之CasX 488及491純系分別用XbaI及BamHI消化。根據製造商方案,藉由使用Zymoclean凝膠DNA回收套組自1%瓊脂糖凝膠(Gold Bio Cat# A-201-500)進行凝膠萃取來純化經消化主鏈及各別插入片段。隨後根據製造商方案,使用T4接合酶(新英格蘭生物實驗室Cat# M0202L)將乾淨主鏈及插入物連接在一起。將連接產物轉化為化學勝任型Turbo
大腸桿菌細菌細胞,接種於含有卡本西林之LB-瓊脂盤上。選取個別菌落且使用Qiagen spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確裝配。
為了構建CasX 515 (表9中之序列),根據製造商方案,使用Q5 DNA聚合酶使用適當引子在兩個反應中對CasX 491構築體DNA進行PCR擴增。為了構建CasX 527 (表9中之序列),根據製造商方案,使用Q5 DNA聚合酶使用適當引子在兩個反應中對CasX 491構築體DNA進行PCR擴增。根據製造商方案,使用Zymoclean凝膠DNA回收套組藉由自1%瓊脂糖凝膠進行凝膠萃取來純化PCR產物。使用XbaI及SpeI消化pStX主鏈以移除質體pStx56中兩個位點之間的2931鹼基對DNA片段。經消化之主鏈片段係藉由使用Zymoclean凝膠DNA回收套組根據製造商方案自1%瓊脂糖凝膠進行凝膠萃取來純化。隨後使用Gibson組件(新英格蘭生物實驗室Cat# E2621S),遵循製造商方案將插入物及主鏈片段拼接在一起。將pStx56中的組合產品轉化為化學勝任型Turbo勝任型
大腸桿菌細菌細胞,接種於含有卡那黴素的LB-瓊脂盤上。選取個別菌落且使用Qiagen spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確裝配。pStX34包括用於蛋白質之EF-1α啟動子以及用於嘌呤黴素及卡本西林兩者之選擇標誌物。pStX56包括用於蛋白質之EF-1α啟動子以及用於編碼靶向感興趣之基因之靶向序列的嘌呤黴素及卡那黴素序列之選擇標誌物基於CasX PAM位置設計。靶向序列DNA排序為由此序列之靶向序列及反向互補序列組成之單股DNA (ssDNA)寡核苷酸(Integrated DNA Technologies)。將此兩種寡核苷酸黏接在一起且藉由Golden Gate裝配使用T4 DNA接合酶及質體之適當限制酶個別地或整體選殖至pStX中。將Golden Gate產物轉化為化學或電勝任型細胞,諸如NEB Turbo勝任型
大腸桿菌(NEB Cat #C2984I),接種於含有適當抗生素之LB-瓊脂盤。選取個別菌落且使用Qiaprep spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確連接。
為了構建CasX 535-537 (表9中之序列),根據製造商方案使用Q5 DNA聚合酶在兩個反應中對CasX 515構築體DNA進行PCR擴增。對於CasX 535,使用適當引子進行擴增。對於CasX 536,使用適當引子。對於CasX 537,使用適當引子。根據製造商方案,使用Zymoclean凝膠DNA回收套組藉由自1%瓊脂糖凝膠進行凝膠萃取來純化PCR產物。使用XbaI及SpeI消化pStX主鏈以移除質體pStx56中兩個位點之間的2931鹼基對DNA片段。經消化之主鏈片段係藉由使用Zymoclean凝膠DNA回收套組根據製造商方案自1%瓊脂糖凝膠進行凝膠萃取來純化。接著遵循製造商方案,將插入物及主鏈片段拼接在一起。將pStx56中的組合產品轉化為化學勝任型Turbo勝任型
大腸桿菌細菌細胞,接種於含有卡那黴素的LB-瓊脂盤上。選取個別菌落且使用Qiagen spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確裝配。pStX34包括用於蛋白質之EF-1α啟動子以及用於嘌呤黴素及卡本西林兩者之選擇標誌物。pStX56包括用於蛋白質之EF-1α啟動子以及用於嘌呤黴素及卡那黴素兩者之選擇標誌物。編碼靶向所關注基因之靶向序列的序列係基於CasX PAM位置而設計。靶向序列DNA排序為由此序列之靶向序列及反向互補序列組成之單股DNA (ssDNA)寡核苷酸(Integrated DNA Technologies)。將此兩種寡核苷酸黏接在一起且藉由Golden Gate裝配使用T4 DNA接合酶及質體之適當限制酶個別地或整體選殖至pStX中。將Golden Gate產物轉化為化學或電勝任型細胞,諸如NEB Turbo勝任型大腸桿菌,接種於含有適當抗生素之LB-瓊脂盤。選取個別菌落且使用Qiaprep spin Miniprep套組遵循製造商方案進行小規模純化。使用桑格定序對所得質體進行定序以確保正確連接。
使用與上文所描述相同之方法使用Gibson裝配以及突變特異性內部引子及通用正向及反向引子選殖所有後續CasX變異體,諸如CasX 544及CasX 660-664、668、670、672、676及677 (其中差異為經設計之突變特異性引子以及使用CasX鹼基構築體)。SaCas9及SpyCas9對照質體係與上文所描述之pStX質體類似地製備,其中pStX之蛋白質及導引區交換各別蛋白質及導引物。SaCas9及SpyCas9之靶向序列獲自文獻或根據確立方法合理地設計。
使用標準方法進行CasX構築體之表現及回收且概述如下:
純化:
冷凍樣品在4℃下在磁性攪拌下解凍隔夜。藉由音波處理降低所得裂解物之黏度,且藉由在20 k PSI下使用NanoDeBEE (BEE國際)均勻化兩次完成裂解。藉由在50,000×g、4℃下離心30分鐘來澄清裂解物且收集上清液。使用AKTA純FPLC (Cytiva)將經澄清上清液施用於肝素6快速流柱(Cytiva)。用5 CV肝素緩衝液A (50 mM HEPES-NaOH、250 mM NaCl、5 mM MgCl2、0.5 mM TCEP、10%甘油,pH 8)洗滌管柱,接著用3 CV肝素緩衝液B (具有調節至500 mM之NaCl濃度的緩衝液A)洗滌管柱。蛋白質用1.75 CV肝素緩衝液C (具有調節至1 M之NaCl濃度的緩衝液A)溶離。使用FPLC將溶離液施加至StrepTactin HP管柱(Cytiva)。用10 CV之Strep緩衝液(50 mM HEPES-NaOH、500 mM NaCl、5 mM MgCl2、0.5 mM TCEP、10%丙三醇,pH 8)洗滌管柱。使用1.65 CV之Strep緩衝液用添加之2.5 mM去硫生物素自管柱溶離蛋白質。彙集含CasX之部分,使用50 kDa截斷旋轉濃縮器(Amicon)在4℃下濃縮,且藉由Superdex 200 pg管柱(Cytiva)上之尺寸排阻層析純化。管柱用SEC緩衝液(25 mM磷酸鈉、300 mM NaCl、1 mM TCEP、10%丙三醇,pH 7.25)平衡且藉由FPLC操作。彙集在適當分子量下溶離之含CasX之溶離份,使用50 kDa截止旋轉濃縮器在4℃下濃縮,等分,且在液氮中急凍,隨後儲存於-80℃下。
CasX變異體488:在98.8%純度下平均產量為2.7 mg經純化之CasX蛋白/公升培養物,如藉由膠態考馬斯(Coomassie)染色所評估。
CasX變異體491:在99.4%純度下平均產量為12.4 mg經純化之CasX蛋白/公升培養物,如藉由膠態考馬斯染色所評估。
CasX變異體515:在90%純度下平均產量為7.8 mg經純化之CasX蛋白/公升培養物,如藉由膠態考馬斯染色所評估。
CasX變異體526:在93%純度下平均產量為13.79毫克/公升培養物。藉由膠態考馬斯染色評估純度。
CasX變異體668:在93%純度下平均產量為3.32毫克/公升培養物。藉由膠態考馬斯染色評估純度。
CasX變異體672:在88%純度下平均產量為6.50毫克/公升培養物。藉由膠態考馬斯染色評估純度。
CasX變異體676:在92%純度下平均產量為5.05毫克/公升培養物。藉由膠態考馬斯染色評估純度。
CasX變異體677:在81%純度下平均產量為2.93毫克/公升培養物。藉由膠態考馬斯染色評估純度。
表9:CasX變異體DNA及胺基酸序列
實例 2 : 產生 RNA 導引物
構築體 | DNA SEQ ID NO | 胺基酸SEQ ID NO |
CasX 488 | 1027 | 1045 |
CasX 491 | 1028 | 1046 |
CasX 515 | 1029 | 1047 |
CasX 527 | 1030 | 1048 |
CasX 535 | 1031 | 1049 |
CasX 536 | 1032 | 1050 |
CasX 537 | 1033 | 1051 |
CasX 583 | 1034 | 1052 |
CasX 660 | 1035 | 1053 |
CasX 661 | 1036 | 1054 |
CasX 662 | 1037 | 1055 |
CasX 663 | 1038 | 1056 |
CasX 664 | 1039 | 1057 |
CasX 668 | 1040 | 1058 |
CasX 670 | 1041 | 1059 |
CasX 672 | 1042 | 1060 |
CasX 676 | 1043 | 1061 |
CasX 677 | 1044 | 1062 |
為了產生RNA單一導引物及靶向序列,藉由用Q5聚合酶、用於各主鏈之模板引子及具有T7啟動子及靶向序列之擴增引子進行PCR來產生用於活體外轉錄之模板。T7啟動子之DNA引子序列、導引序列及靶向序列之導引序列及靶向序列呈現於下表10中。sg1、sg2、sg32、sg64、sg174及sg235導引分別對應於SEQ ID NO: 4、5、2104、2106、2238及2292,除了sg2、sg32及sg64經額外5' G修飾以提高轉錄效率(比較表10與表2中之序列)。7.37靶向序列靶向β2-微球蛋白(B2M)。在PCR擴增之後,模板經清潔且藉由酚-氯仿-異戊醇萃取分離,接著進行乙醇沈澱。
在含有50 mM Tris pH 8.0、30 mM MgCl
2、0.01% Triton X-100、2 mM亞精胺、20 mM DTT、5 mM NTP、0.5 µM模板及100 µg/mL T7 RNA聚合酶之緩衝液中進行活體外轉錄。將反應物在37℃下培育隔夜。每1 mL轉譯體積添加20個DNA酶I單位(Promega #M6101))且培育一小時。RNA產物經由使PAGE變性來純化,乙醇沈澱,且再懸浮於1×磷酸鹽緩衝鹽水中。為使sgRNA摺疊,將樣品加熱至70℃持續5 min,且隨後冷卻至室溫。將反應物補充至1 mM最終MgCl
2濃度,加熱至50℃後維持續5 min且接著冷卻至室溫。將最終RNA導引產物儲存於-80℃。
表10. T7啟動子之DNA引子序列、用於導引之導引及靶向序列
實例 3 : 評定與導引 RNA 之結合親和力
引子 | SEQ ID NO | |
T7啟動子引子 | GAAATTAATACGACTCACTATA (用於所有) | 169 |
RNA 產物 | ||
sg2主鏈正向 | GGUACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUAUUUAUCGGAGAGAAAUCCGAUAAAUAAGAAGCAUCAAAGGGCCGAGAUGUCUCGCUCCG | 1063 |
sg2主鏈反向 | ||
sg2.7.37間隔子引子 | ||
sg32主鏈正向 | GGUACUGGCGCUUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCCCUCUUCGGAGGGAAGCAUCAAAGGGCCGAGAUGUCUCG | 1064 |
sg32主鏈反向 | ||
sg32.7.37間隔子引子 | ||
sg64主鏈正向 | GGUACUGGCGCCUUUAUCUCAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAUGGGUAAAGCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAAGCAUCAAAGGGCCGAGAUGUCUCGCUCCG | 1065 |
sg64主鏈反向 | ||
sg64.7.37間隔子引子 | ||
sg174主鏈正向 | ACUGGCGCUUUUAUCUgAUUACUUUGAGAGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAgUGGGUAAAGCUCCCUCUUCGGAGGGAGCAUCAAAGGGCCGAGAUGUCUCGCUCCG | 1066 |
sg174主鏈反向 | ||
sg174.7.37間隔子引子 | ||
sg235主鏈正向 | ACUGGCGCUUCUAUCUGAUUACUCUGAGCGCCAUCACCAGCGACUAUGUCGUAGUGGGUAAAGCCGCUUACGGACUUCGGUCCGUAAGAGGCAUCAGAG | 1067 |
sg235主鏈反向 | ||
sg235.7.37間隔子引子 |
經純化之野生型及經改良之CasX將在含有氯化鎂以及肝素之低鹽緩衝液中與含有3' Cy7.5部分之合成單導引RNA一起培育,以防止非特異性結合及聚集。sgRNA將維持在10 pM之濃度,同時蛋白質將在分開的結合反應中自1 pM滴定至100 µM。在允許反應達到平衡之後,樣品將穿過具有硝化纖維素膜及帶正電耐綸膜之真空歧管過濾器-結合分析,該等膜分別結合蛋白質及核酸。膜將經成像以鑑別導引RNA,且將藉由針對各蛋白質濃度在硝化纖維素相對於耐綸膜上之螢光的量來確定結合相對於未結合RNA之分率,以計算蛋白質-sgRNA複合物之解離常數。亦將用經改良之sgRNA變異體進行實驗以測定此等突變是否亦影響導引針對野生型及突變蛋白質之親和力。吾人亦將進行電遷移率變動分析以與過濾器-結合分析定性比較,及確認可溶性結合而非聚集為蛋白質-RNA結合之主要貢獻因素。
實例 4 : 評定對目標 DNA 之 結合親和力
將經純化之野生型及經改良之CasX與帶有與目標核酸互補之靶向序列之單導引RNA複合。在含有氯化鎂以及肝素的低鹽緩衝液中,將RNP複合物與含有PAM及適當的目標核酸序列的雙股目標DNA一起溫育,所述目標核酸序列在目標股上具有5' Cy7.5標記,以防止非特異性結合及聚集。目標DNA將維持於1 nM之濃度,而RNP將在獨立結合反應中自1 pM滴定至100 µM。在允許反應平衡之後,樣品將在天然5%聚丙烯醯胺凝膠上操作以分離結合及未結合之目標DNA。凝膠將經成像以鑑別目標DNA之遷移率變動,且將對於各蛋白質濃度計算結合相對於未結合DNA之分率,以確定RNP-目標DNA三元複合物之解離常數。
實例 5 : 評定活體外差異 PAM 識別。 [ 將 SCRB-038 用於圖 #]1. 參考及CasX變異體之比較
基本上如實例8中所描述,使用與sg174.7.37複合之CasX2、CasX119及CasX438進行活體外裂解分析。使用具有7.37間隔子及TTC、CTC、GTC或ATC PAM之經螢光標記之dsDNA (序列在表11中)。在0.25、0.5、1、2、5、10、30及60分鐘時獲取時間點。凝膠藉Cytiva Typhoon成像且使用IQTL 8.2軟體定量。針對各目標上之各CasX:sgRNA複合物測定非目標股裂解(k
裂解)之表觀一級速率常數。具有非TTC PAM之目標的速率常數係與TTC PAM目標相比,以確定在給定CasX蛋白變異體中各PAM之相對偏好是否改變。
對於所有變異體,TTC目標支援最高裂解率,隨後為ATC,隨後為CTC,且最後為GTC目標(圖10A-D,表12)。對於CasX變異體及NTC PAM之各組合,展示裂解速率k
裂解。對於所有非NTC PAM,與該變異體之TTC速率相比的相對裂解速率係在圓括號中示出。所有非TTC PAM展現大體上降低之裂解速率(全部>10倍)。指定非TTC PAM之裂解速率與特定變異體之TTC PAM之間的比率在所有變異體中保持大體上恆定。相對於TTC目標之速度,CTC目標以3.5-4.3%支援裂解;GTC目標以1.0-1.4%支援裂解;且ATC目標以6.5-8.3%支援裂解。異常為491,其中在TTC PAM下裂解動力學太快以致不能準確量測,人工減少TTC與非TTC PAM之間的表觀差異。比較在GTC、CTC及ATC PAM上491之相對速率(其處於可量測範圍內)在跨越非TTC PAM進行比較時產生與其他變異體之比率相當的比率,與以串聯方式遞增之速率一致。總體而言,變體之間的差異實質上並不足以表明已變更對各種NTC PAM之相對偏好。然而,變異體之較高基礎裂解速率允許具有ATC或CTC PAM之目標在10分鐘內幾乎完全裂解,且表觀k
裂解與TTC PAM上之CasX2之k
裂解相當或比其更大(表12)。此增加之裂解速率可跨越人類細胞中有效基因體編輯所必需之臨限值,解釋了此等變異體之PAM可撓性之明顯增加。
表11:用於活體外PAM裂解分析之DNA受質之序列
*各自之PAM序列加粗。TS-目標股。NTS-非目標股。
表12:針對NTC PAM之CasX變異體之表觀裂解速率
2. 使用單一CasX變異體之PAM識別之比較
導引 * | DNA 序列 | SEQ ID NO |
7.37 TTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GAATGCTGTCAGCTTCA | 1068 |
7.37 TTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA TTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1069 |
7.37 CTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GAGTGCTGTCAGCTTCA | 1070 |
7.37 CTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA CTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1071 |
7.37 GTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GACTGCTGTCAGCTTCA | 1072 |
7.37 GTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA GTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1073 |
7.37 ATC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GATTGCTGTCAGCTTCA | 1074 |
7.37 ATC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA ATCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1075 |
變異體 | TTC | CTC | GTC | ATC |
2 | 0.267 min -1 | 9.29E-3 min -1(0.035) | 3.75E-3 min -1(0.014) | 1.87E-2 min -1(0.070) |
119 | 8.33 min -1 | 0.303 min -1(0.036) | 8.64E-2 min -1(0.010) | 0.540 min -1(0.065) |
438 | 4.94 min -1 | 0.212 min -1(0.043) | 1.31E-2 min -1(0.013) | 0.408 min -1(0.083) |
491 | 16.42 min -1 | 8.605 min -1(0.524) | 2.447 min -1(0.149) | 11.33 min -1(0.690) |
材料及方法:使用具有7.37間隔子及TTC、CTC、GTC、ATC、TTT、CTT、GTT或ATT PAM之經螢光標記之dsDNA目標(序列在表13中)。將寡核苷酸用5'胺基修飾排序且用目標股寡核苷酸之Cy7.5 NHS酯及非目標股寡核苷酸之Cy5.5 NHS酯標記。藉由以1:1比率在1×裂解緩衝液(20 mM Tris HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM TCEP、5%甘油、10 mM MgCl2)中混合寡核苷酸,加熱至95℃持續10分鐘,且使溶液冷卻至室溫來形成dsDNA目標。
CasX變異體491與sg174.7.37複合。導引物在1×裂解緩衝液中稀釋至1.5 μM之最終濃度,且接著添加蛋白質至1 μM之最終濃度。RNP在37℃下培育10分鐘且接著置於冰上。
裂解分析係藉由在裂解緩衝液中稀釋RNP達到200 nM之最終濃度且添加dsDNA目標達到10 nM之最終濃度來進行。在0.25、0.5、1、2、5及10分鐘獲取時間點且藉由添加至相等體積之95%甲醯胺及20 mM EDTA來淬滅。裂解產物藉由在10%脲-PAGE凝膠上運行來解析。凝膠藉由Amersham Typhoon成像且使用IQTL 8.2軟體定量。使用GraphPad稜鏡測定各目標之非目標股裂解(k裂解)之表觀一級速率常數。
結果:
研究各個PAM上491.174 RNP之相對裂解速率。除幫助預測細胞中之目標及潛在脫靶之裂解效率以外,此等資料亦將允許吾等調節合成目標之裂解速率。在自限制AAV載體(其中可在載體內添加新原間隔子以允許自靶向)的情況下,吾等推論可藉由改變PAM來上調或下調游離基因體裂解速率。
吾等測試RNP針對除PAM以外之序列相同的各種dsDNA受質之裂解速率。此實驗設置應允許分離PAM本身之作用,而非將PAM識別與由間隔區序列及基因體情形產生之作用進行卷積。測試所有NTC及NTT PAM。如所預期,RNP用TTC PAM最快速地裂解目標,將其基本上全部轉化為第一時間點之產物(圖11A)。儘管快速裂解TTC使得在此等分析條件下測定精確k裂解變得困難,但CTC之裂解速度大致為快速裂解的一半,該等分析條件經最佳化以捕獲較寬裂解速率陣列(圖11A,表14)。GTC目標在NTC PAM中裂解最緩慢,裂解速率比TTC目標慢大致六倍。所有NTT PAM比所有NTC PAM更緩慢地裂解,其中TTT最高效切割,隨後GTT (圖11B,表14)。與所有NTC PAM相比GTC切割的低速率相比,所有NTT PAM中GTT切割的相對效率證明單個PAM核苷酸的識別係上下文依賴性的,其中PAM中一個位置處的核苷酸一致性影響其它位置處的序列偏好。
此處測試之PAM序列產生跨越三個數量級之裂解速率,同時仍維持相同間隔序列之裂解活性。此等資料表明,給定合成目標之裂解速率可容易地藉由改變相關PAM進行修飾,允許調整自裂解活性以允許在裂解及消除AAV游離基因體之前有效靶向基因體目標。
表13:用於活體外PAM裂解分析之DNA受質之序列*
*展示用於產生各dsDNA受質之DNA序列。各自之PAM序列加粗。TS-目標股。NTS-非目標股。
表14:CasX 491.174針對NTC及NTT PAM之表觀裂解速率
*TTC裂解之速率超過此分析之解析度,因此所得k
裂解應視為下限。
實例 6 :評定用於雙股裂解之核酸酶活性
PAM &股 | 間隔子及PAM序列 | SEQ ID NO |
7.37 TTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GAATGCTGTCAGCTTCA | 1068 |
7.37 TTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA TTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1069 |
7.37 CTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GAGTGCTGTCAGCTTCA | 1070 |
7.37 CTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA CTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1071 |
7.37 GTC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GACTGCTGTCAGCTTCA | 1072 |
7.37 GTC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA GTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1073 |
7.37 ATC PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC GATTGCTGTCAGCTTCA | 1074 |
7.37 ATC PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA ATCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1075 |
7.37 TTT PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC AAATGCTGTCAGCTTCA | 1076 |
7.37 TTT PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA TTTGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1077 |
7.37 CTT PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC TAGTGCTGTCAGCTTCA | 1078 |
7.37 CTT PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA CTTGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1079 |
7.37 GTT PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC TACTGCTGTCAGCTTCA | 1080 |
7.37 GTT PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA GTTGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1081 |
7.37 ATT PAM TS | AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCC TATTGCTGTCAGCTTCA | 1082 |
7.37 ATT PAM NTS | TGAAGCTGACAGCA ATTGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT | 1083 |
PAM | TTC | ATC | CTC | GTC | TTT | ATT | CTT | GTT |
K 裂解(min -1) | 15.6* | 6.66 | 9.45 | 2.52 | 1.33 | 0.0675 | 0.0204 | 0.330 |
純化野生型及工程化之CasX變異體將與攜有固定HRS靶向序列之單導引RNA複合。RNP複合物將以100 nM之最終濃度添加至含有MgCl2之緩衝液且以10 nM之濃度與在目標或非目標股上具有5' Cy7.5標記之雙股目標DNA一起培育。將在固定時間點獲取反應之等分試樣且藉由添加相等體積之50 mM EDTA及95%甲醯胺來淬滅。樣品將在變性聚丙烯醯胺凝膠上運行,以分離裂解及未裂解之DNA受質。將觀測結果且將確定目標及非目標股藉由野生型及工程化之變異體之裂解速率。為了更清楚地區分目標結合之變化相對於核分解反應本身之催化速率,將在10 nM至1 uM範圍內滴定蛋白質濃度且將在各濃度下測定裂解速率以產生pseudo-Michaelis-Menten擬合且測定kcat*及KM*。KM*之變化指示改變之結合,而kcat*之變化指示改變之催化。
實例 7 : PASS 分析鑑別不同 PAM 序列特異性之 CasX 蛋白變異體。
進行實驗以鑑別CasX蛋白2 (SEQ ID NO: 2)、491、515、533、535、668及672之PAM序列特異性。為了實現此目的,在至少兩個重複實驗中用以上CasX蛋白處理HEK293細胞株PASS_V1.01或PASS_V1.02,且在其既定目標位點使用各種間隔子進行下一代定序(NGS)以計算編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體。簡言之,產生兩個彙集之HEK293細胞株且稱為PASS_V1.01及PASS_V1.02。池內之各細胞含有與特定目標位點配對之基因體整合單導引RNA (sgRNA)。在轉染蛋白質表現構築體之後,藉由特異性間隔子在特異性目標處編輯可藉由NGS定量。各導引-目標對設計成提供與CasX導引RNP複合物之活性、特異性及可靶向性相關的資料。
藉由Twist Biosciences合成配對之間隔子目標序列且獲得為等莫耳量之寡核苷酸。此池藉由PCR擴增且藉由Golden Gate選殖來產生命名為p77之質體的最終庫。各質體含有sgRNA表現元件及目標位點以及GFP表現元件。sgRNA表現元件由U6啟動子驅動gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)轉錄組成,繼之以間隔序列,該間隔序列將使導引物及CasX變異體之RNP靶向既定目標位點。設計及合成250種可能的獨特配對間隔子-目標合成序列。慢病毒庫隨後根據製造商說明書使用LentiX生產系統(Takara Bio USA, Inc)自此質體庫產生。隨後藉由qPCR定量所得病毒製劑且以低感染倍率轉導至標準HEK293細胞株中以便產生單一複本整合。所得細胞株隨後藉由螢光活化細胞分選(FACS)純化以完成PASS_V1.01或PASS_V1.02之生產。接著以六孔盤格式接種細胞株且用水一式兩份處理或用2 μg質體p67轉染,根據製造商說明書藉由脂質體轉染劑(賽默飛世爾(ThermoFisher))遞送。質體p67含有驅動經SV40核定位序列標記之CasX蛋白之表現的EF-1α啟動子。兩天之後,收集經處理之細胞,裂解且使用基因體DNA分離套組提取基因體DNA (Zymo研究)。基因體DNA隨後用定製引子進行PCR擴增以產生與Illumina NGS相容的擴增子且在NextSeq儀器上定序。將樣品讀數分用且過濾以獲得品質。隨後在經處理之樣品中定量各間隔子-目標合成序列之編輯結果度量值(具有插入缺失之讀數部分)。
為了評定CasX蛋白之PAM序列特異性,對四種不同PAM序列之編輯結果度量值進行分類。對於TTC PAM目標位點,對48個不同間隔子-目標對進行定量;對於ATC、CTC及GTC PAM目標位點,分別對14、22及11個個別目標位點進行定量。對於一些CasX蛋白,重複實驗在數月內重複十幾次。對於此等實驗中之每一者,計算上文所描述之間隔子中之每一者的平均編輯效率。隨後自所有此類實驗計算跨越四類PAM序列之平均編輯效率,以及此等量測之標準差。
結果:表15列出跨越PAM類別及跨越CasX蛋白變異體之平均編輯效率以及此等量測之標準差。亦指示用於每一類別之量測數目。此等資料指示工程化之CasX變異體491及515對典型PAM序列TTC具有特異性,而CasX之其他工程化之變異體在所測試之PAM序列上表現得或多或少有效。特定言之,CasX 491之PAM偏好之平均等級順序為CasX 515之TTC >> ATC > CTC > GTC或TTC >> ATC > GTC > CTC,而野生型CasX 2展現TTC >> GTC > CTC > ATC之平均等級順序。應注意,對於較低編輯PAM序列,此等平均量測之誤差較高。相比之下,CasX變異體535、668及672具有顯著較寬PAM識別,其中等級順序為TTC > CTC > ATC > GTC。最後,CasX 533展現相對於WT CasX之完全重新排序等級,ATC > CTC >> GTC > TTC。此等資料可用於對感興趣之目標DNA序列之近似活性治療性CasX分子進行工程化。
在實驗條件下,鑑別在與序列TTC、ATC、CTC或GTC之PAM相關之目標DNA序列下人類細胞中雙股DNA裂解改良之一組CasX蛋白,其支援相對具有改變之PAM特異性譜的CasX變異體
表15:在與TTC、ATC、CTC或GTC之PAM序列相關之間隔子處的所選CasX蛋白的平均編輯
實例 8 : CasX:gRNA 活體外裂解分析1. RNP之裝配
CasX 名稱 | PAM 序列 | 平均編輯百分比 | 標準差 | 量測次數 |
2 | ATC | 0.40 | 1.35 | 336 |
2 | CTC | 0.46 | 2.29 | 528 |
2 | GTC | 0.69 | 6.27 | 264 |
2 | TTC | 5.28 | 7.34 | 1152 |
491 | ATC | 6.86 | 8.29 | 364 |
491 | CTC | 4.54 | 6.40 | 572 |
491 | GTC | 3.40 | 6.68 | 286 |
491 | TTC | 40.41 | 23.13 | 1248 |
515 | ATC | 4.47 | 5.49 | 252 |
515 | CTC | 3.36 | 4.80 | 396 |
515 | GTC | 3.65 | 10.75 | 198 |
515 | TTC | 36.75 | 24.89 | 864 |
533 | ATC | 47.50 | 15.86 | 96 |
533 | CTC | 25.90 | 14.74 | 28 |
533 | GTC | 6.34 | 8.36 | 44 |
533 | TTC | 0.87 | 3.05 | 22 |
535 | ATC | 9.70 | 10.20 | 56 |
535 | CTC | 11.77 | 13.59 | 88 |
535 | GTC | 7.62 | 15.04 | 44 |
535 | TTC | 29.29 | 18.78 | 192 |
668 | ATC | 44.69 | 24.40 | 56 |
668 | CTC | 46.14 | 26.57 | 88 |
668 | GTC | 30.48 | 24.06 | 44 |
668 | TTC | 55.34 | 28.59 | 192 |
672 | ATC | 25.51 | 20.85 | 56 |
672 | CTC | 30.05 | 22.95 | 88 |
672 | GTC | 14.21 | 13.38 | 44 |
672 | TTC | 52.36 | 27.64 | 192 |
CasX及單導引RNA (sgRNA)之純化野生型及RNP係在即將進行實驗之前製備,或經製備且在液氮中急凍且儲存於-80℃以便後續使用。為了製備RNP複合物,將CasX蛋白與sgRNA以1:1.2莫耳比一起培育。簡言之,將sgRNA添加至緩衝液#1 (25 mM NaPi、150 mM NaCl、200 mM海藻糖、1 mM MgCl2)中,隨後將CasX添加至sgRNA溶液中,緩慢旋轉,且在37℃培育10 min以形成RNP複合物。在使用之前經由0.22 μm Costar 8160過濾器過濾RNP複合物,該等過濾器用200 μl緩衝液#1預潤濕。必要時,RNP樣品用0.5 ml超100-Kd截止過濾器濃縮,(Millipore部分#UFC510096),直至得到所需體積。如下文所述評定勝任型RNP之形成。
2.測定蛋白變異體與野生型參考CasX相比之裂解勝任型部分
使用活體外裂解分析確定與參考CasX相比,CasX變異體形成活性RNP之能力。如下產生用於裂解分析之β-2微球蛋白(B2M) 7.37目標。具有序列TGAAGCTGACAGCATTCGGGCCGAGATG TCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT (非目標股,NTS (SEQ ID NO: 1069))及AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGG AGCGAGACATCTCGGCCCGAATGCTGTCAGCTTCA (目標股,TS (SEQ ID NO: 1068))之DNA寡核苷酸用5'螢光標記(分別為LI-COR IRDye 700及800)。藉由以1:1比率在1×裂解緩衝液(20 mM Tris HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM TCEP、5%甘油、10 mM MgCl
2)中混合寡核苷酸,加熱至95℃持續10分鐘,且使溶液冷卻至室溫來形成dsDNA目標。
在移動至冰之前,除非在37℃下在1×裂解緩衝液(20 mM Tris HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM TCEP、5%甘油、10 mM MgCl
2)中另外規定,否則在1 µM 1.5倍過量之指定導引物之最終濃度下用所指示的CasX及導引物(參見圖)重構CasX RNP持續10 min。使用7.37目標,以及具有與7.37目標互補之間隔子的sgRNA。
製備最終RNP濃度為100 nM且最終目標濃度為100 nM之裂解反應物。在37℃下進行反應且藉由添加7.37目標DNA來起始。在5、10、30、60及120分鐘處獲取等分試樣且藉由添加至95%甲醯胺,20 mM EDTA中來淬滅。樣品藉由在95℃下加熱10分鐘來變性且在10%脲-PAGE凝膠上操作。凝膠用LI-COR Odyssey CLx成像且使用LI-COR圖像攝影軟體定量或用Cytiva Typhoon成像且使用Cytiva IQTL軟體定量。使用Prism繪製及分析所得資料。吾人假設CasX在分析條件下基本上以單周轉酶形式起作用,如由以下觀測結果指示:亞化學計算量之酶即使在擴展時間標度下亦無法裂解大於化學計算量之目標,且替代地接近隨著存在之酶的量縮放之平穩段。因此,在長時間標度上藉由等莫耳量之RNP裂解的目標之分數指示RNP之多少分數恰當地形成且對裂解具有活性。用雙相速率模型擬合裂解跡線,因為裂解反應在此濃度範圍內明顯偏離單相,且對於三個獨立複本中之每一者確定平穩段。計算平均值及標準差以測定活性部分(表16)。
如圖1中所展示,測定CasX2+導引物174+7.37間隔子、CasX119+導引物174+7.37間隔子、CasX457+導引物174+7.37間隔子、CasX488+導引物174+7.37間隔子及CasX491+導引物174+7.37間隔子形成之RNP之表觀活性(勝任型)分數。所測定之活性部分展示於表16中。所有CasX變異體比野生型CasX2具有更高的活性部分,表明工程化之CasX變異體在測試條件下與野生型CasX相比,用相同導引物形成顯著更高活性及穩定的RNP。此可歸因於對sgRNA增加之親和力、在sgRNA存在下增加之穩定性、或溶解度或工程化之CasX:sgRNA複合物之裂解勝任型構形的更大穩定性。藉由當將CasX457、CasX488或CasX491添加至sgRNA (與CasX2相比)時觀測到的所形成之沈澱物顯著降低來指示RNP溶解度提高。
3.活體外裂解分析-測定單一導引變異體相對於參考單一導引物之裂解勝任型部分部分
如圖2及表16中所示,使用CasX2.2.7.37、CasX2.32.7.37、CasX2.64.7.37及CasX2.174.7.37之相同方案亦測定裂解勝任型部分為16%±3%、13±3%、5±2%及22±5%。
在不同條件下測試第二組導引物以更好地分離導引物對RNP形成之貢獻。使具有7.37間隔子之導引物174、175、185、186、196、214及215在1 µM導引物及1.5 µM蛋白質之最終濃度下與CasX 491混合,而非如前所描述與過量導引物混合。結果展示於圖3及表16中。許多此等導引物展現優於174之額外改良,其中在此等導引限制條件下,185及196分別達成91±4%及91±1%勝任型部分,相比之下,174達成80±9%。
資料指示相比於野生型CasX及野生型sgRNA,CasX變異體及sgRNA變異體均能夠藉由導引RNA形成較高程度的活性RNP。
使用活體外螢光分析針對目標7.37之裂解確定CasX變異體119、457、488及491相比於野生型參考CasX之表觀裂解速率。
4.活體外裂解分析-確定CasX變異體相比於野生型參考CasX之k
裂解
在移動至冰之前,在37℃下在1×裂解緩衝液(20 mM Tris HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM TCEP、5%甘油、10 mM MgCl
2)中,在1 µM 1.5倍過量之指定導引物之最終濃度下用所指示的CasX (參見圖4)重構CasX RNP持續10 min。以200 nM之最終RNP濃度及10 nM之最終目標濃度建立裂解反應。在37℃下進行反應,除非另外說明且藉由添加目標DNA來起始。以0.25、0.5、1、2、5及10分鐘獲取等分試樣且藉由添加至95%甲醯胺、20 mM EDTA來淬滅。樣品藉由在95℃下加熱10分鐘來變性且在10%脲-PAGE凝膠上操作。凝膠用LI-COR Odyssey CLx成像且使用LI-COR圖像攝影軟體定量或用Cytiva Typhoon成像且使用Cytiva IQTL軟體定量。使用Prism繪製及分析所得資料,且針對各CasX:sgRNA組合複本個別地確定非目標股裂解之表觀一階速率常數(k
裂解)。具有獨立擬合之三個複本的平均值及標準差呈現於表16中,且裂解跡線展示於圖5中。
藉由用於各分析之導引物174及間隔子7.37測定野生型CasX2及CasX變異體119、457、488及491之表觀裂解速率常數(參見表16及圖4)。所有CasX變異體相對於野生型CasX2具有經改良之裂解速率。即使如上文所測定具有較高勝任型部分,CasX 457比119更緩慢地裂解。CasX 488及CasX 491具有較大界限之最高裂解速率;因為目標在第一時間點幾乎完全裂解,所以真實裂解速率超過此分析之解析度,且所報導之k
裂解應視為下限。
資料表明CasX變異體具有較高水準之活性,其中與野生型CasX2相比,k
裂解速率達到至少高30倍。
5.活體外裂解分析:將導引變異體與野生型導引物進行比較
亦藉由野生型參考CasX2及參考導引物2與導引變異體32、64及174相比進行裂解分析,以確定變異體是否改良裂解。如上文所描述進行實驗。由於許多所得RNP在測試時間內未接近目標之完全裂解,吾人決定初始反應速度(V
0)而非一階速率常數。前兩個時間點(15及30秒)與各CasX:sgRNA組合及重複之線擬合。確定三個複本之斜率的平均值及標準差。
在分析條件下,具有導引物2、32、64及174之CasX2的V0為20.4±1.4 nM/min、18.4±2.4 nM/min、7.8±1.8 nM/min及49.3±1.4 nM/min (參見表16及圖5及圖6)。雖然導引物32及64與導引物2類似或比導引物2更壞地執行,導引物174展示所得RNP之裂解速率之實質性改良(相對於2約2.5倍,參見圖6)。值得注意地,導引物64支援低於導引物2之裂解速率,但在活體內表現好得多(資料未示出)。以涉及三聯體形成之核苷酸為代價,產生導引物64之一些序列變化可能改善活體內轉錄。導引物64改良之表現可能解釋其改良的活體內活性,而其降低的穩定性可導致不當活體外摺疊。
用具有間隔子7.37及CasX 491之導引物174、175、185、186、196、214及215進行其他實驗以測定相對裂解速率。為了將裂解動力學降低至用吾等分析可量測之範圍,在10℃下培育裂解反應物。結果在圖7及表16中。在此等條件下,215為支援比174更快之裂解速率的唯一導引物。196,其在導引限制條件下展現RNP之最高活性部分,具有基本上與174相同之動力學,再次突出顯示不同變異體引起相異特徵之改良。
資料支援在分析條件下使用具有CasX之大部分導引變異體產生比野生型導引物之活性水準高的RNP,其中初始裂解速度改良在約2倍至>6倍範圍內。表16中之數字自左至右指示RNP構築體之CasX變異體、sgRNA支架及間隔序列。在下表中之RNP構築體名稱中,CasX蛋白變異體、導引支架及間隔子自左至右指示。
6.活體外裂解分析:針對參考2.2比較515.174及526.174之裂解速率及勝任型部分。
吾人希望將工程化之蛋白CasX變異體515及526與工程化之單一導引變異體174針對參考野生型蛋白質2 (SEQ ID NO: 2)及最小程度工程化之導引變異體2 (SEQ ID NO: 5)進行比較。如上文所描述裝配RNP複合物,其具有1.5倍過量導引物。如上文所描述進行用於測定k
裂解及勝任型部分之裂解分析,其中兩者均在37℃下進行,且其中不同時間點用於測定歸因於接近完成反應所需之顯著不同時間的野生型對比工程化之RNP的勝任型部分。
所得資料清楚地表明藉由工程化蛋白質及導引物兩者對RNP活性作出顯著改良。515.174及526.174之RNP的勝任型部分與2.2之16%相比分別為76%及91% (圖8,表16)。在動力學分析中,515.174及526.174兩者藉由第一時間點基本上切割所有目標DNA,超出分析解析度且分別產生17.10及19.87 min
-1之估計裂解速率(圖9,表16)。相比之下,2.2之RNP藉由最終10分鐘時間點平均切割小於目標DNA之60%,且具有比工程化之RNP低接近兩個數量級之估計k
裂解。對蛋白質及導引物進行之修飾已產生更穩定、更可能形成活性粒子之RNP,且同樣在每個粒子基礎上更有效地切割DNA。
表16:裂解及RNP形成分析之結果
*平均值及標準差
**速率超過分析解析度
實例 9 : 間隔子長度對活體外裂解動力學之測試作用
RNP 構築體 | K 裂解* | 初始速度* | 勝任型部分 |
2.2.7.37 | 20.4 ± 1.4 nM/min | 16 ± 3% | |
2.32.7.37 | 18.4 ± 2.4 nM/min | 13 ± 3% | |
2.64.7.37 | 7.8 ± 1.8 nM/min | 5 ± 2% | |
2.174.7.37 | 0.51 ± 0.01 min -1 | 49.3 ± 1.4 nM/min | 22 ± 5% |
119.174.7.37 | 6.29 ± 2.11 min -1 | 35 ± 6% | |
457.174.7.37 | 3.01 ± 0.90 min -1 | 53 ± 7% | |
488.174.7.37 | 15.19 min -1 | 67% | |
491.174.7.37 | 16.59 min -1/ 0.293 min -1(10° C) | 83% /17% (導引限制) | |
491.175.7.37 | 0.089 min -1(10° C) | 5% (導引限制) | |
491.185.7.37 | 0.227 min -1(10° C) | 44% (導引限制) | |
491.186.7.37 | 0.099 min -1(10° C) | 11% (導引限制) | |
491.196.7.37 | 0.292 min -1(10° C) | 46% (導引限制) | |
491.214.7.37 | 0.284 min -1(10° C) | 30% (導引限制) | |
491.215.7.37 | 0.398 min -1(10° C) | 38% (導引限制) | |
515.174.7.37 | 17.10 min -1** | 76% | |
526.174.7.37 | 19.87 min -1** | 91% |
測試兩個CasX變異體及具有不同長度間隔子之導引RNA之核糖核蛋白複合物(RNP)的活體外裂解活性以確定何種間隔子長度支援目標核酸之最有效裂解及間隔子長度偏好是否隨蛋白質而變化。
方法:
測試CasX及具有不同長度之間隔子之導引RNA之核糖核蛋白複合物(RNP)的活體外裂解活性以確定何種間隔子長度支援目標核酸之最有效裂解。
如上文所描述純化CasX變異體515及526。具有支架174之導引物(SEQ ID NO: 2238)藉由活體外轉錄(IVT)來製備。根據推薦方案,藉由PCR使用Q5聚合酶(NEB M0491)、各支架主鏈模板寡核苷酸及具有T7啟動子及7.37間隔子(GGCCGAGATGTCTCGCTCCG (SEQ ID NO: 1084);靶向tdTomato)之20個核苷酸或自3'端截短至18或19個核苷酸之擴增引子產生IVT模板。用於產生各模板之間隔序列以及寡核苷酸展示於表17中。根據標準方案,所得模板接著與T7 RNA聚合酶一起使用以產生RNA導引物。使用變性聚丙烯醯胺凝膠電泳純化導引物且在使用之前再摺疊。
藉由在1×裂解緩衝液(20 mM Tris HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM TCEP、5%甘油、10 mM MgCl
2)中將CasX稀釋至1 μM且添加sgRNA至1.2 μM且在37℃下培育10 min,隨後移動至冰直至準備使用為止來重構CasX RNP。購買經螢光標記之7.37目標DNA作為來自整合DNA技術之個別寡核苷酸(表17中之序列),且dsDNA目標藉由在1×裂解緩衝液中加熱兩個互補股之等莫耳混合物且緩慢冷卻至室溫來製備。
將RNP在裂解緩衝液中稀釋至200 nM之最終濃度且在不振盪的情況下在10℃下培育。藉由添加7.37目標DNA至10 nM之最終濃度起始裂解反應。在0.25、0.5、1、2、5、10及30分鐘處獲取時間點。藉由添加等體積之95%甲醯胺、20 mM EDTA來淬滅時間點。樣品藉由在95℃下加熱10分鐘來變性且在10%脲-PAGE凝膠上操作。凝膠用Amersham Typhoon成像且用IQTL軟體分析。使用Prism繪製及分析所得資料。非目標股之裂解與單一指數函數擬合以確定表觀一級速率常數(k
裂解)。
結果:
比較在具有18、19或20個核苷酸間隔子之sgRNA的複合物中CasX變異體515及526之裂解速率以確定何種間隔子長度引起各蛋白變異體之最有效裂解。與用活體外轉錄之sgRNA進行之其他實驗一致,18 nt間隔子導引物對於兩種蛋白變異體表現最佳(圖12A及B,表18)。18 nt間隔子比蛋白質515之20 nt間隔子快1.4倍,且其比蛋白質526之20 nt間隔子快3倍。19 nt間隔子對於兩種蛋白質具有中等活性,但同樣,變異體526差異更明顯。一般而言,已觀測到短於20 nt之間隔子在一系列蛋白質、間隔子及遞送方法中具有增加之活性,但改良程度及最佳間隔子長度有所變化。此等資料展示,兩個序列相當類似(僅兩個殘基不同)之工程化之蛋白質由於在方向上類似但在程度上實質上不同之間隔子長度而具有活性變化。
表17:相關序列及寡核苷酸
表18:具有截短間隔子之RNP之裂解速率
實例10:評定與導引RNA之結合親和力
7.37目標序列非目標股 | IR700-TGAAGCTGACAGCATTCGGGCCGAGATGTCTCGCTCCGTGGCCTTAGCTGTGCTCGCGCT (SEQ ID NO:1069) |
7.37目標序列目標股 | IR800-AGCGCGAGCACAGCTAAGGCCACGGAGCGAGACATCTCGGCCCGAATGCTGTCAGCTTCA (SEQ ID NO: 1068) |
20-nt間隔子序列 | GGCCGAGATGTCTCGCTCCG (SEQ ID NO:1085) |
18-nt間隔子序列 | GGCCGAGATGTCTCGCTC (SEQ ID NO: 1086) |
19-nt間隔子序列 | GGCCGAGATGTCTCGCTCC (SEQ ID NO: 1087) |
支架174模板正向 | GAAATTAATACGACTCACTATAACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCT (SEQ ID NO: 1088) |
支架174模板反向 | CTTTGATGCTCCCTCCGAAGAGGGAGCTTTACCCACTACGACATAGTCGC (SEQ ID NO: 1089) |
T7擴增引子 | GAAATTAATACGACTCACTATA (SEQ ID NO: 169) |
支架174 20-nt間隔子引子 | CGGAGCGAGACATCTCGGCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1090) |
支架174 18-nt間隔子引子 | GAGCGAGACATCTCGGCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1091) |
支架174 19-nt間隔子引子 | GGAGCGAGACATCTCGGCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1092) |
間隔子長度 | 515 k 裂解(min -1) | 526 k 裂解(min -1) |
18 | 0.215 | 0.427 |
19 | 0.182 | 0.282 |
20 | 0.150 | 0.143 |
經純化之野生型及經改良之CasX將在含有氯化鎂以及肝素之低鹽緩衝液中與含有3' Cy7.5部分之合成單導引RNA一起培育,以防止非特異性結合及聚集。sgRNA將維持在10 pM之濃度,同時蛋白質將在分開的結合反應中自1 pM滴定至100 µM。在允許反應達到平衡之後,樣品將穿過具有硝化纖維素膜及帶正電耐綸膜之真空歧管過濾器-結合分析,該等膜分別結合蛋白質及核酸。膜將經成像以鑑別導引RNA,且將藉由針對各蛋白質濃度在硝化纖維素相對於耐綸膜上之螢光的量來確定結合相對於未結合RNA之分率,以計算蛋白質-sgRNA複合物之解離常數。亦將用經改良之sgRNA變異體進行實驗以測定此等突變是否亦影響導引針對野生型及突變蛋白質之親和力。吾人亦將進行電遷移率變動分析以與過濾器-結合分析定性比較,及確認可溶性結合而非聚集為蛋白質-RNA結合之主要貢獻因素。
實例11:評定對目標DNA之結合親和力
將經純化之野生型及經改良之CasX與帶有與目標核酸互補之靶向序列之單導引RNA複合。在含有氯化鎂以及肝素的低鹽緩衝液中,將RNP複合物與含有PAM及適當的目標核酸序列的雙股目標DNA一起溫育,所述目標核酸序列在目標股上具有5' Cy7.5標記,以防止非特異性結合及聚集。目標DNA將維持於1 nM之濃度,而RNP將在獨立結合反應中自1 pM滴定至100 µM。在允許反應平衡之後,樣品將在天然5%聚丙烯醯胺凝膠上操作以分離結合及未結合之目標DNA。凝膠將經成像以鑑別目標DNA之遷移率變動,且將對於各蛋白質濃度計算結合相對於未結合DNA之分率,以確定RNP-目標DNA三元複合物之解離常數。預期實驗表明包含CasX變異體及gRNA變異體之RNP與包含參考CasX及參考gRNA之RNP相比經改良之結合親和力。
實例 12 : 評定用於 RNP 產生之 CasX 變異體之改良之表現及溶解度特徵
野生型及經修飾之CasX變異體將在BL21 (DE3)大腸桿菌中在相同條件下表現。所有蛋白質均將處於IPTG-誘導型T7啟動子的控制下。細胞將在37℃下在TB培養基中生長至0.6之OD,此時生長溫度將降低至16℃且表現將藉由添加0.5 mM IPTG誘導。將在表現18小時之後收集細胞。可溶蛋白質部分將經萃取且在SDS-PAGE凝膠上分析。可溶CasX表現之相對水準將藉由考馬斯染色鑑別。蛋白質將根據以上方案並行純化,且將比較純蛋白質之最終產量。為了測定純化蛋白質之溶解度,構築體將在儲存緩衝液中濃縮,直至蛋白質開始沈澱。沈澱之蛋白質將藉由離心移除且將量測可溶蛋白質之最終濃度以確定各變異體之最大溶解度。最後,CasX變異體將與單導引RNA複合且濃縮直至沈澱開始。沈澱之RNP將藉由離心移除,且量測可溶RNP之最終濃度以當結合於導引RNA時測定各變異體之最大溶解度。
實例 13 : 導引 RNA 導引支架平台演進
進行實驗以鑑別展現改良之雙股DNA (dsDNA)裂解之活性的導引RNA導引支架變異體。為實現此目的,針對人類細胞中之報導基因之功能性剔除,以彙集方式設計且測試支架變異體之大規模庫。引起剔除改良之支架變異體係藉由定序池內之功能元件且隨後計算分析來確定。
材料及方法
庫設計
評定RNA二級結構穩定性
RNAfold (v2.4.14) (Lorenz R等人,ViennaRNA Package 2.0. Algorithms Mol Biol.6:26 (2011))用於預測RNA序列之二級結構穩定性,類似於Jarmoskaite I.等人,A quantitative and predictive model for RNA binding by human pumilio proteins. Mol Cell. 74(5):966 (2019)中所進行。為了評定∆∆G_BC值,計算不受限集合之總體自由能(∆G),接著計算受限集合之總體自由能(∆G)。∆∆G_BC係受限及不受限∆G值之間的差值。使用反映假結莖、支架莖及延伸莖之鹼基配對的限制串列,且需要三聯體之鹼基為不成對的。
計算假結莖二級結構穩定性
使用來自導引支架175之三聯體環序列,針對整個莖-環跨越位置3-33計算假結結構穩定性。此外,產生能加強假結鹼基之配對及三聯體環中之鹼基之不配對的限制串列。穩定性變化因此僅可歸因於假結莖之序列的差異。舉例而言,假結序列AAAACG_CGTTTT藉由插入三聯體環序列CUUUAUCUCAUUACUUUGA (SEQ ID NO: 158)而變為莖-環序列,以使得最終序列為AAAACGCUUUAUCUCAUUACUUU GACGTTTT (SEQ ID NO: 159),且限制串列為:「((((((xxxxxxxxxxxxxxxxxxx))))))」 (SEQ ID NO: 160,其中x=n)。
分子生物學
庫構築之分子生物學
合成導引RNA支架變異體之經設計之庫且自Twist Biosciences獲得,隨後藉由具有對庫具有特異性之引子的PCR擴增。此等引子擴增庫之5'及3'端處之額外序列,以引入限制酶SapI之序列識別位點。用Q5 DNA聚合酶(新英格蘭生物實驗室)進行PCR且根據製造商說明書進行。典型PCR條件為:10 ng之模板庫DNA、1×Q5 DNA聚合酶緩衝液、300 nM dNTP、300 nM各引子、50 µl反應中0.25 µl之Q5 DNA聚合酶。在熱循環儀上,典型程序將為:在95℃下循環5 min;隨後在20個98℃循環15秒,65℃循環20秒,72℃循環1 min;且在72℃下最終延伸2 min。用DNA清潔及濃縮器套組純化所擴增之DNA產物(Zymo研究)。此PCR擴增子以及質體pKB4隨後用限制酶SapI (新英格蘭生物實驗室)消化,且兩者獨立地藉由瓊脂糖凝膠電泳、接著根據製造商說明書進行凝膠萃取(Zymo)來純化。隨後使用T4 DNA接合酶(新英格蘭生物實驗室)連接庫,用DNA清潔及濃縮器套組(Zymo)純化,且全部根據製造商說明書轉化為MegaX DH10B T1R Electrocomp細胞(賽默飛世爾)。經轉化之庫在SOC培養基中復原一小時,隨後在37℃下在5 mL之2xyt培養基中震盪下生長隔夜。隨後自培養物(QIAGEN)小量製備質體DNA。質體DNA隨後藉由用限制酶Esp3I (新英格蘭生物實驗室)消化來進一步選殖,隨後與具有互補單股DNA突出物及用於靶向GFP之所需間隔序列的退火寡核苷酸連接。該等寡核苷酸具有5'磷酸化修飾,且藉由加熱至95℃持續1 min,繼而使溫度每分鐘降低兩度直至達到最終溫度25℃來進行退火。連接作為Golden Gate裝配反應進行,其中典型反應條件由以下組成:1 µg預消化質體庫、1 µM退火之寡核苷酸、2 µL T4 DNA連接酶、2 µL Esp3I及1×T4 DNA連接酶緩衝液,總體積為40 µL水。將反應物在37℃持續3分鐘與16℃持續5分鐘之間循環25次。如上文所描述,庫經純化、轉化、生長隔夜且小量製備。所得質體庫隨後用於產生慢病毒。
庫篩選
LV生產
慢病毒粒子係藉由在70-90%匯合之前經轉染LentiX HEK293T細胞,接種24小時產生。將含有彙集庫之質體引入無血清培養基中含有封裝及具有聚伸乙亞胺之VSV-G包膜質體的第二代慢病毒系統中。對於粒子產生,轉染後培養基改變12小時,且轉染後36-48小時收集病毒。適當時,使用0.45 µm PES膜過濾器過濾病毒上清液且在添加至目標細胞之前,在細胞培養基中稀釋。
過濾後72小時,藉由TaqMan qPCR滴定慢病毒上清液之等分試樣。使用酚氯仿萃取(TRIzol)分離病毒基因體RNA,隨後進行醇沈澱。藉由nano-drop讀取來評估萃取之品質及數量。任何殘餘質體DNA隨後在藉由ThermoFischer SuperScript IV逆轉錄酶生產cDNA之前用DNA酶I消化。病毒cDNA經由1:1000經受連續稀釋且在qPCR之前藉由Bio-Rad CFX96與基於WPRE之引子及TaqMan主混合物組合。一式兩份地添加所有樣品稀釋液且在力價計算之前針對已知之基於質體之標準曲線平均化。始終量測水作為陰性對照。
LV篩選(轉導、維持、閘控、分選、gDNA分離)
目標報導細胞在轉導之前24-48 h通過以確保發生細胞分裂。在轉導時,使細胞胰蛋白酶化,計數且稀釋至適當密度。將細胞在無處理、庫或含對照純慢病毒上清液之情況下以低MOI (藉由病毒基因體,0.1-5)再懸浮以將雙慢病毒整合降至最低。在37℃,5% CO
2下培育之前,以40-60%匯合接種慢病毒細胞混合物。選擇細胞用於在用1-3 μg/ml嘌呤黴素轉導後48 h成功轉導4-6天,隨後在HEK或Fb培養基中恢復。
選擇後,將細胞懸浮於4',6-二甲脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中。接著藉由康寧(Corning)過濾器帽FACS管(Prod. 352235)過濾細胞且在Sony MA900上分類。除經由標準方法閘控單一活細胞以外,針對螢光報導子之減弱分選細胞。裂解來自實驗之經分選細胞,且使用Zymo Quick-DNA Miniprep Plus遵循製造商之方案來萃取基因體。
用於下一代定序(NGS)之處理
基因體DNA經由PCR用對導引RNA編碼之DNA具有特異性的引子擴增,形成目標擴增子。此等引子在5'端含有額外序列以引入Illumina讀段及2個序列。典型PCR條件將為:2 µg之gDNA、1×Kapa Hifi緩衝液、300 nM dNTP、300 nM各引子、50 µl反應中之0.75 µl之Kapa Hifi Hotstart DNA聚合酶。在熱循環儀上,95℃循環5 min;接著15個98℃循環15 s,62℃循環20 s,72℃循環1 min;且在72℃最終延伸2 min。用Ampure XP DNA清除套組純化所擴增之DNA產物。藉由索引銜接子進行第二PCR步驟以允許Illumina平台上之多重化。20 µl來自前一步驟之純化產物與1× Kapa GC緩衝液、300 nM dNTPs、200 nM之各引子、0.75 µl Kapa Hifi Hotstart DNA聚合酶於50 µl反應物中組合。在熱循環儀上,95℃循環5 min;接著5-16個98℃循環15 s、65℃循環15 s、72℃循環30 s;且在72℃最終延伸2 min。用Ampure XP DNA清除套組純化所擴增之DNA產物。使用Fragment Analyzer DNA分析儀套組(Agilent,dsDNA 35-1500bp)評估擴增子之品質及定量。根據製造商說明書,在Illumina Miseq (v3,單一端定序之150個循環)上對擴增子進行定序。
NGS分析(樣品處理及資料分析)
用cutadapt (2.1版)微調銜接子序列之讀數,且提取各讀數之導引序列(包含支架序列及間隔序列) (亦使用cutadapt v 2.1連接之銜接子提取上游與下游擴增子序列之間的序列)。計數獨特導引RNA序列,且接著將各支架序列與經設計之序列之清單及導引支架174 (SEQ ID NO: 2238)及175 (SEQ ID NO: 2239)之序列相比以確定各者之一致性。
使用平均正規化,針對定序深度對各獨特導引RNA序列之讀數計數進行正規化。藉由用各GFP-樣品中之正規化讀數計數除以相關未處理樣品中之正規化讀數計數來計算各序列之富集。對於兩種選擇(R2及R4),在三個獨立日處理GFP-及未經處理之群體的NGS,一式三份地形成各支架之富集值。在一式三份對未經處理及GFP-樣品之讀數計數求和之後,計算每個支架之總富集分數。
來自不同選擇之兩個富集分數藉由個別log
2富集分數之加權平均值組合,由其在初始群體內之相對表示加權。
計算一式三份樣品中平均富集分數上之95%信賴區間的log
2富集分數上的誤差。此等誤差在組合兩次單獨選擇之富集值時傳播。
結果與討論
庫設計、排序及選殖
導引RNA變異體之庫經設計而以無偏方式及以集中於RNA支架內之關鍵模組的靶向方式測試RNA支架之變異。
在庫之無偏部分中,所有單核苷酸取代、插入及缺失均經設計成導引支架174 (SEQ ID NO: 2238)及175 (SEQ ID NO: 2239)之各殘基(約2800個個別序列)。雙重突變體經設計以特異性聚焦於可能相互作用之區域;因此若在CryoEM結構(PDBid: 6NY2)中,則兩個殘基參與典型或非典型鹼基配對相互作用,或兩個殘基預測為在藉由RNAfold (v2.4.14)預測之低級能量結構中成對,接著使導引支架174及174中之對應殘基突變(包括兩個殘基之所有可能的取代、插入及缺失)。亦使鄰近於此等「相互作用」殘基之殘基發生突變;然而,僅包括兩個殘基中之每一者的此等取代。在最終庫中,設計相對於導引支架174或175具有兩個突變的約27K序列。
在致力於RNA支架之關鍵區域之特異性突變誘發的庫部分中,修飾經設計成:假結區域、三聯體區域、支架泡狀結構及延伸莖(參見圖18之區域鑑別)。在庫之此等靶向部分中之每一者中,以假設驅動方式使整個域突變誘發(圖19)。作為實例,對於三聯體區域,將包含三聯體之鹼基三聯體中之每一者突變誘發成不同三聯體形成模體(參見圖20)。此類型之突變誘發不同於支架莖泡狀結構中所採用之突變誘發,其中泡狀結構周圍之鹼基的所有可能取代均突變誘發(亦即相對於導引序列174或175具有至多5個突變)。相比之下,5個包含假結莖之鹼基對經交替沃森-克里克(Watson-Crick)配對序列(至多10個不同的鹼基突變誘發)完全置換。
庫之最終靶向部分意欲針對更可能形成能夠結合蛋白質之二級結構的序列進行最佳化。簡而言之,在兩個條件下預定序列之二級結構穩定性:1)在不存在任何限制的情況下,2)受限使得形成諸如假結莖、支架莖及延伸莖之關鍵二級結構元件(參見材料及方法)。吾人之假設為此等兩種條件之間的穩定性差異(在本文中稱為∆∆G_BC)對於更適合於蛋白質結合之序列將為最小的,且因此吾人應搜尋其中此差異最小的序列)。
自Twist (約40K不同序列)分選經設計之庫,且經合成以包括用於選殖至慢病毒質體骨架中之黃金門閘位點,慢病毒質體骨架亦表現蛋白質STX119 (參見材料及方法)。將靶向GFP基因之間隔序列選殖至庫載體中,有效地自各RNA支架變異體產生單導引RNA以靶向GFP基因。藉由下一代定序評定所設計庫變異體之表示(參見材料及方法)。
庫篩選及評定
將含有導引RNA變異體及單一CasX蛋白之質體庫(119版)製成慢病毒粒子(參見材料及方法);使用qPCR分析基於病毒基因體之複本數滴定粒子(參見材料及方法)。用慢病毒粒子庫以較低感染倍率(MOI)轉導穩定表現GFP之細胞株,以迫使各細胞整合至多一個庫成員。選擇細胞池僅保留具有基因體整合之細胞。最後,根據GFP表現分選細胞群體,且獲得GFP陰性細胞群體。此等GFP陰性細胞含有將CasX RNP有效地靶向GFP蛋白質的庫成員,引起插入缺失及隨後功能喪失。
處理自未分選細胞群體(「未經處理」)之基因體DNA及GFP陰性群體以分離各細胞中之導引RNA庫成員之序列。為確定未經處理及GFP陰性群體中之導引RNA之表示,進行下一代定序。藉由將庫成員在GFP群體中之表示除以其在未經處理之群體中之表示來計算富集分數:高富集分數指示在活性GFP陰性群體中比在起始池中更頻繁的庫成員,且因此係能夠有效地在GFP基因內產生插入缺失的活性變異體(富集值>1,log
2富集>0)。低富集分數指示與未經處理相比活性GFP-群體耗乏之庫成員,且因此在形成插入缺失時無效(富集值<1,log
2富集<0)。作為比較之最終統計量,相對富集值計算為庫成員之富集(在GFP陰性對未經處理之群體中),除以參考支架序列之富集(在GFP陰性對未經處理之群體中)。(在對數空間中,僅僅減去此等值)。參考支架序列之富集值展示於圖21中)。
進行多次篩選,其中獨立產生慢病毒粒子、轉導細胞、選擇及分選以獲得未經處理及GFP陰性群體,及定序以學習各庫成員之富集值。此等篩選稱為R2及R4,且主要再生在導引支架174及175上單個核苷酸變異體所獲得之富集值(圖22)。篩選能夠鑑別功能性GFP-群體中富集之突變之許多可能組合,且因此可產生功能性RNP。相比之下,不富集含有非靶向間隔子之導引物,證實富集為選擇性截止(資料未示出)。經富集之導引支架174及175上之全突變組分別提供於表19及20中。此等清單揭示仍能夠實現靶向功能性RNP之序列多樣性。
單一核苷酸突變指示支架之可突變區域:
為了確定相對於導引支架174及175產生類似或改良之活性的支架突變,繪製單一核苷酸取代、插入或缺失之富集值(圖23)。一般而言,174之單一核苷酸變化比175更耐受,可能在此情形下反映174之較高活性且因此反映對減弱活性之突變的較高耐受性(圖21及圖24)。在絕大部分情況下,175上之有利的單一核苷酸突變在174情形下亦為有利的(圖24),且因此支架175上之突變的值視為突變作用之更嚴格的讀數。關鍵可突變區由此分析揭露,如以下段落中所描述:
最值得注意的特徵為延伸莖,其展示與參考序列174或參考序列175類似的富集值,表明支架可容許此區域中之變化,類似於過去可見之變化且將藉由其中可見延伸莖與蛋白質幾乎不接觸之CasX RNP之結構分析來預測。
三聯體環為展示相對於參考支架之高富集的另一區域,尤其當在導引支架175中進行時(例如尤其對C15或C17之突變)。值得注意的係,175中之C17位置已突變成支架174中之G,其係支架175之此位置處的兩個高度富集突變中之一者。
G7與A29之間的假結莖中之預測對的任一成員的改變均相對於參考高度富集,尤其在導引支架175中。此對係兩個導引支架174及175兩者中之非典型G:A配對。此等位置處之最強富集突變係在導引支架175中,將A29轉化為C或T;其中之第一者將形成典型沃森-克里克配對(G7:C29),且其中之第二者將形成GU擺動對(G7:U29)。可預期兩者均相對於G:A對增加螺旋之穩定性。將G7轉化成T亦高度富集,其將在此位置形成典型對(U7:A29)。顯然,此等位置有利於更穩定配對。一般而言,5'端為可突變的,其中少數變化導致去富集。
最後,在導引支架175中之位置54處插入C高度富集,而在導引支架174中之類似位置處的A或插入G之缺失均具有與參考類似的富集值。綜合而言,導引支架可偏好在此支架莖泡中具有兩個核苷酸,但其可不為強偏好。在以下部分中進一步檢測此等結果。
假結莖穩定性與支架活性整合
為進一步探究假結莖對支架活性之影響,假結莖以以下方式修飾:(1)莖內之鹼基對經改組,使得各新假結具有鹼基對之相同組成,但莖內呈不同順序;(2)鹼基對經隨機WC配對序列完全置換。測試291個假結莖。第一組序列之分析展示G-A對相對於其他可能的位置(2-6;在野生型序列中,其在位置5中;圖25)在假結莖之第一位置中的強偏好,儘管結果證實在假結莖中之位置2-6中之每一者處具有GA對一般係不利的,其中平均富集較低。在位置1處具有G-A鹼基可能藉由允許螺旋之其餘部分僅由堆疊、沃森-克里克對形成而使假結莖穩定。此結果進一步支援支架偏好完全配對之假結莖。
相當大數目個假結序列具有陽性log
2富集,表明用替代鹼基對置換此序列通常為容許的(圖26中之假結結構)。為進一步測試假結莖中更穩定螺旋將產生更具活性之支架之假設,計算各假結莖之二級結構穩定性(材料及方法)。觀測到假結穩定性與富集之間的強關係,且因此觀測到活性(圖27:具有穩定假結莖之活性更大的支架,其具有穩定假結莖(<-7 kcal/mol)之導引支架,該等導引支架具有高富集及具有具有極低富集之去穩定假結莖(≥-3 kcal/mol)之導引支架。
雙重突變指示導引支架之可突變區域:
檢查針對各參考導引支架之雙重突變以進一步鑑別支架內之可變異區域,及改良支架活性之潛在突變。聚焦在預測形成假結莖中之非典型G:A對之僅僅一對位置-位置7及29上且支援突變誘發(參見上述部分)-吾人可繪製此對位置之所有64個雙重突變(圖28)。典型對在此等兩個位置(例如位置7處之C及位置29處之G的取代產生G:C對且經富集;位置7處之C的取代及位置29處之G的插入類似地產生G:C對,位置7處之A及位置29處之U的取代產生A:U對)處係有利的。無插入對富集,此可能係因為在此插入典型對不足以使螺旋穩定,考慮到G:A對在螺旋中向上移動一個位置且不全部移除。出人意料地,若干富集之雙重突變不形成典型對;例如位置7處之U及位置29處之C的取代(其形成非典型U:C對)、位置7處之U及位置29處之U的取代(形成U:U對),以及少數其他對(圖28)。可能的係嘌呤:嘌呤對與其他非典型對相比實質上更具破壞性。實際上,位置7處之A及位置29處之G之取代再次形成A:G對,其在此位置不富集。
導引支架175之關鍵結構元件中之每一者內的雙重取代之富集值係自熱圖判定,其中各位置可具有至多三個取代。確定支架莖至少耐受突變,表明此區域中緊密受限之序列。
結果表明,導引支架可發生實質性變化,當用於編輯分析中時,導引支架仍可導致功能性基因剔除。特定言之,結果展現可用於經由導引支架中之修飾來改良活性之關鍵位置,包括支架內之假結莖之增加的二級結構穩定性。
表19:導引174突變及所得相對富集
*突變序列為「;」-每個序列之經分離及多個突變為「,」-經分離
表20:導引175突變及所得相對富集
*突變序列為「;」-每個序列之經分離及多個突變為「,」-經分離
實例 14 : CcdB 選擇分析鑑別在 TTC 、 ATC 及 CTC PAM 序列處具有經改良之 dsDNA 裂解或經改良之間隔子特異性的 CasX 蛋白變異體。
Log 2富集 | gRNA支架174* (SEQ ID NO: 2238)上之突變 |
3.25至3.5 | G79A,A80G; T34A,G78T; G7T,G75A; G78A,A80T; ^C2,A33T; ^A1,C68T; TG3CT,CGC6TAG,GAG28CTA,CA32AG; TG3CA,GC7AA,GA28TT,CA32TG; ^C4,C6G,T12_,G17C,GAG28CCC,C32G,A80C; T9C,T14A,T71A,C73A; C70A,G77T |
3.0至3.25 | A29T,G78T; T9C,G17C,A27T,G79_; C2G,A21G; ^A81,^C81; T71A,C73A; T14C,T16G; ^T64,^G81; T9C,G17C,^TG65; C2G,T16A; G7C,TC14AT,G17A,T34A; G75A,G77A; G7C,A21T; T-.3.CA,GC.7.-T,G28_,-A.33.TG,^T84; T65C,C82T; GCTCCC63_,^AATGAAAA70,^TTTTCATT76,GGGAGC77_; ^C2,G7A,A27T; T9C,G17C,C67G; ^A78,^T78; T3C,GCG5AGA,AGC29GCT,A33G; T9C,G17C,G78C; T3C,GC5TG,AGC29CAA,A33G; T9A,^T68,G77A; G7A,T9G; T65A,^G77; ^G70,^C75; C2T,G79C; ^C66,G78A; A29C,G75A; C15A,A60G; C67G,^A78; T14C,G17T,G40A,A76G; T34A,CT64TC; ^A69,T69A; T45G,G79T; T69C,^C76; C2A,G54C; A13C,C15A,G74C; C70G,^A75; A76G,G77C; C67T,G78C; TG3CC,A29C,CA32GG; ^T7,A29C; C2A,T34A; ^A66,^A66; C66T,A80C; ^G17; ^C76,^A76; A29C; C15G,C67G,T72G; ^T70,^A70; C15G,T16G; C64T,C66A; T69G,G74C; ^A3,G74C; ^T65,^T80 |
2.9至3.0 | A29C,A33T; C64T,G78A; ^C64,A80T; ^A74; T65A,^A80; ^T69,G75T; ^C79,^A79; A29G,T59A; T69G,G75C,G78A; ^G70,^A70; G7A,TC14CG,G17A,C64T; ^T69,^A76; T9C,G17C,C68T,T72C; ^T69,A76G; A33T,C66G; C66T,C67G; TTC71ACA,^GGATGT75; A13G,T14A; T69A,G74C; G74T,A76G; G77C,G78A; A27C,T84G; C2_,C66G; T71C,G75C; TC14AG,G78A; T3G,A33T; T9C,G28A; ^A1,C2T; C68T,T72C; TGGC3CCAG,C8A,GA26_,--A.33.TGG; C64T,C66G; ^A67,C67G; C68T,G74A,G77C; G7T; C2T,G78T; C68_,G77T; T25C,A29C; ^A78,G78A; ^C78,G78C; G7C,A60G; T34A,T45A; T3_,G7A,^A9,^T28,A29G,A33_; ^CAG70,T72G,G--.74.AGT; A27G,A29C; T9C,G17C,T47C; ^T19; ^A65,^T65; C67G,C68T |
2.8至2.9 | T3C,G5T,C8G,GA28CC,CCA31AAG; T69C,A76G; C66T,A80T; ^G13; C2_,T65G; G7C,T9G; T9C,G17C,TT71AC; C6G,A29T; ^C66,^C79; C70A,A76T; T3A,CG6AC,AG29GT,A33G; ^T7,T12_; ^T69,^A76,A88C; C35G,G58C; ^A79,^T79; T16_,C67T,G79_; G7T,T9A; A29T,C37T,C66G,^G77; C2_,G81A; C15G,T34G; T3_,^T9,^C28,A29C,C32_; ^T76,^A76; G7C,A27T; C2_,G79C; TGGC3ACAG,GA26_,--A.33.TGT; ^G65,^G77; ^AC1,GC5_,C8T,GA26_,G30A,^GT34; T9C,G17C,C66T,A80T; T71G,T72G; G4C,CT8GC,G17C,GA28AC,C32G,T69C,G75C; C41A,G51T; ^T78; T9C,G17C,T65A,A80C; AG29CA,C82G; T9G,C82T; T45A,T47C; C2T,T3A; T65A,A80G; C2G,G4A,C32T; G7C,T59G; T9C,T14G; C2G,A29C,T52A; T9C,G17C,-A.53.CC; T9C,T69_,A76_; C68A,G75C; A1G,A33T; T3_,^T9,G28_,^G32; ^G70,G75C; ^C54,G54C; ^T79,G79A; G17C,C70T,A76G; G77A; ^T69,A76C; T65A,^C80; ^A66,G79_; T9G,^G85; ^TGGAAGAT63,C---.66.TCGG,C68A,GGAGGGAG74_,^A83; ^T2; G7A,A29C; ^A69,^C76; C6A,A29C; C2_,T9C,G17C,GA79TG |
2.7至2.8 | T34A,^T37; A36T,T65C; C2_,T69G; C73A,G74C; G17_; ^G65,^A65; ^T67,C67T; C2G,A29T; T9C,G17C,^C66,^G74; C70A,T71C; T14A,C15T; G4C,C32G,G78C; T9C,G17C,T34A; ^A66,^C79; AGT53GTG; G79_; T9G,T14A; ^C64,^C80; T65C,^G66; ^GT1,G7A,T9C; A60T,G78T; T9C,G17C,C67A,G79A; TC65CG,A80G; T14C,T16C; T3_; ^CGAAC70,T71A,G74C; G7T,C8G; T3A,GC7CG,GA28CG,A33T; C66T,G78T; A1G,T9C,G17C; T69C,C70A; C70T,T72G; T69C,T71G,A80T; T16G,A29C; T11G,A29C; G17A,^TA75,A88C; G7T,G40A,A61G; ^AC81,A88C; ^A71; G5C,C8G,GA28AC,C31G,C73T; G74T,A76C; ^T68,^A76; C2_,C70A; T9C,G28T; G28T,A29C; ^C29; A29C,GA75AC; ^T52,G54C; G7A,T9C,G17C; T9C,G17C,G79A; --A.29.CAC; ^A68,G77A; ^T69; G7C,T9C; A80C,C82T; ^C75,G75T; T14A,A29C; T72C,C73A; T9C,G17C,C66A,G79_; C2_,A33T; ^T2,C64T; ^AT79,A88C; C66G,A80C; ^A67,^T78; ^G67,G78A; ^A76; A21G,^C66,^T77; C2A,A36G,T69A; G63T,T71C; T9C,G17C,-G.77.CT; ^T2,T34A; C68T,^C77; T9C,G17C,T72C; T69A,C70T; CT15TA,A18T; TGG3ACA,C8G,GA28CC,CCA31TGT; T9C,A29C; C6G,G30C; -T.3.AA,C67G; C73_; ^G68,^A76; T69C,^A76; A80G; T69C,A76_; ^G68,^T77 |
2.6至2.7 | T9A,A29C; A76G; T9C,G17C,AG76CC; T9C,^A13; ^A67,^T78,A88C; C70A,T72A; C66G,^T79; ^T64,C64T; ^A70,C70G; ^G65,A80C; T9C,G17C,C66T,G78C; C2_,T9G; T69_,A76T; T3A,G7A,A29T,A33G; T45G,C68A; ^T65,^T80,A88C; C66G; C64T,T71G; C2G,G54T; A1G,T3A; ^G70,G75T; T65A,^T80; -T.3.AC,GC.7.A-,GAG28TGC,CA32GG,T72A,^G74,A76G; A21C; T69G,^A76; C68G,C70A; C67T,A80T; ^A70,^C75; T9A,T14C; T3A,CGC6TCT,GAG28AGA,A33T; G54_; C68T; ^T65,G79C; C2_; C67G,G79T; CT2TG,G7A,G77C; T71G,G74A; C66T,G81A; A29T; --A.29.CAT,A88C; T69_,^C76; T9C,G17C,^G68; ^A69,T69C; A29C,G30T; T69_; G17C; ^A67,G78C; T65A; ^G79,^T79; A76G,G77T; ^GC1,A88C; A27T,A29C; ^CA79,A88C; T69_,G75T; C38G,^C56,G77A; C68T,G77C; A29C,AG39GT,T52C; G79T,A80T; G7T,A61T; T16C; ^A13; G7C,C15G; G5C,C8G,GA28AC,C31G; C2_,G77C; A29C,T52A; G75C,A76G; T9C,G17C,^C76; C8G,A29C; TGG3GTC,C8G,GA28AC,CCA31GAC; C64_,^GTG67,C68A,G77T,^CAC79,G81_; ^T68,G79_; ^A70,C70A; T65A,AG76GA; ^C70,^C70; C68G,G77T; C6T,A29T; ^T81; ^G67,^A67; TGG3GCA,C8A,A29C,CCA31TGC; G7A,A27C,A29G,A80G; G78A; T52G,G54C; T9C,G17C,T65A,C67T; A1C,^C64,^T81; ^T80,A80C; C67A,C73T; C73T,A80C; C67A,T69C; G7A,A76T,A80G; C2_,C15G; T69C,G77T; CT2_,G79T; G7C,^G28; ^C79; ^A80; ^G1,^C1; ^G65,A80T; G7T,A29_; -T.3.AC,GC.7.A-,GAG28TGC,CA32GG,T65A; T9C,^T14,G17C,^C29; A29T,T69C; T9C,A29G; C64T,T65C; ^TG70,T71A,C73_,G75T; T65G,C66T; T59C,^C66; T72A,G74A; C2T,T72C; T71C,A76G; T65G,A80T; TG3_,^TG7,GA26_,^AG33 |
2.5至2.6 | T9C,G17C,^G81; --A.29.CAT; C68T,A76G; A29C,G79A; G17C,C67G,C70T; ^G66,C66G; A29T,G63A,C66A; G28C,A29C; T3G,C67A; T69C,T71C; T3A,GC7CA,GA28TG,A33G; C70G,G74A; ^C2,G4C,C8_,^CGC28,CCA31_; C2_,C68T; C66A,A80T; T3A,G5C,GC7AA,GA28TT,C31G,A33T; T9C,G17C,T72G; T9C,G17C,A29C; ^C70,G75T; C66T; C66T,G78A; A36T,G54C,C68T; ^G9,A29T; A76C; T69C,G77C; ^A77,^G77; T71G,G74C; C67T; C73G; T71G,AG76GA; ^C64,T65C; T3G,C68A; G74C; C67T,T69A; ^A69; ^A66,C66T; T71C; T14G,T16C; T9C,G79T; T65C; ^C15,G17C; ^T65,^C79; C70G,T71G; G74C,G75T; C2_,C68G; G7T,A27G; ^CA76,A88C; ^T65,^A65; T9C,G17C,T45A; A18C,^A66; A80C; G7C,TC14CT,G17A; TG3GC,G7A,A29T,CA32GC; T16G,A29C,G63T,T71C; C2A,G54T,T71C; ^T8,A29C; T9C,TG16GC; C70T,G77T; G75T,A76G; T69A; T16A,A18G; G77A,G78C; A1_,T59C; T14G,T16G; ^A60,G81A; A29G,A83G; T34A,GA79TC; T69C,G75A; G7T,T59A; G7T,C82G; A36T,G81T; C2_,G81T; T14C,T72_; --A.29.CAC,A88C; TGG3_,^AAG9,GA28CT,C31G,A33G; G17C,A18G; C66G,G77A; ^C5,C6T,C8_,G28C,GC30CG; C82T; G54A,^G56; C2_,C66T; G17C,A18C; G17C,G54_; G28A,T65C; C6T,A29C; G7A,T9C,^T79; T9C,GA17CT; G74A,G75T; C68A,C70G; G42C,C50G; ^C70,^C75; ^T66,^C66; T3C,CGC6GCT,G28_,^A32,A33G; C73A,G74A; TG3AC,C6A,AG29CT,CA32GG; C67A,G79A; A76_; C73G,G74T; TG3CA,GC7AG,GA28CG,CA32TG; T9C,T14C,T71A,C73A; G81C; A1G,T16A; T69A,^G74; C68_; C2A,A60C; T9C,G54T; T14C,C15G; ^G66,^G66; T16C,A18G; ^G68,G77C; A29T,-G.78.CC; G7T,^T61; CT2_,T72G; A1G; T65C,C66A; G7C,T34A; ^C35,T59G; ^AG77,A88C; ^TG67,A88C; |
2.4至2.5 | G54C,T59A; T69G,G75C; C68A,A76G; ^AT65,A88C; C68T,G77T; G7T,A29C; T65A,T71A,G74A; T16A; ^C65,^A65; ^T67,G79_; ^G71; ^C18; ^C29,A29T; G79A; T69G,T71A; T71C,T72C; C2_,T3_; ^T67,G78T; CTCCCTCT64_,C73G,AGG76TTC,^TCCCA82; T65A,A83G; C70A,G74A; G7C,TC14AT,G17A,T34C; G7T,A33C,A36C,A76G; T-.3.CA,GC.7.A-,AG29GC,CA32TG; C2_,A80G; -T.3.AC,C6T,C8_,G28C,G30C,CA32GT; G7C,A83G; C2_,C67A; T3G,A29C,T34G,G77A; C2G,A21G,T65C; G40A,T59A; ^A66,^G66; G81A; C2_,A29G; ^T64,G81A; ^CGC2,CGC6_,GAG28_,^AGG33; ^C77; T69A,A76G; ^T78,^T78; C66A,^C79; C2_,G7A,T34A; T3C,C6T,G30A,A33G,^C55; GC7CG,GA28AG; T3C,G5C,GC7TA,G28T,C31G,A33G; ^T68,^C77; ^T77,G77A; A27G,^GT77; ^G66,^T79,A88C; T9C,^G69,^A76; C68T,G75C; ^T81,^T81; ^C66; T9C,G28C; T14A,A29C,C66T; ^A65; T3A,G5C,C8A,A29C,C31G,A33T; CT2_,T71A; G7C,C15G,A33T; G77A,^T78; G63T,C82A; G7A,C15G,G54A,A60C,G79T; ^A13,^G13; T72G,C73T; A36C,G54T; T3G,G7T; ^G65,T65C; T65G,C66G; G77C; T45G; C15A; C41T,G51A; T14A; C2T,G54T; A76T; T71A,A76G; ^G66,^T79; ^A7,A29C; TGG3AAC,C8G,GA28CC,CCA31GTG; ^A1; ^T29; T71G,G74T; T45A; ^AT78,A88C; ^A3,GG4CC,C8_,GA28CG,CCA31GAT; C66T,C70G; C2_,^A66,^C79; ^TA76,A88C; TG3GA,CG6GA,AG29TC,CA32TC; ^C80,A80G; G79C; C67G,^G77; ^C66,G79A; G7A,T16C,^T68; G7C,T9C,G17C,G75C; C2_,^T58; ^A65,^C80; A1G,-C.68.GA; G17C,T65G; TG3CC,C6T,C8G,GAG28ACA,CA32GG; T72C,G75A; C64G,A80T; G7A,C66T; C66G,^C79; C15A,G17A; ^AG66,A88C; A36_; G79T; T9C,G17C,^T58; T10G,A29T; ^G69,^C76; ^A69,A76_; G7A,A29G; A53_; T65G,^A80; C70A,C73A; T59C,G74T; C67A; G54T,^G56; ^G66; C2_,A29C; C38_,G54_; T3_,C6T,^C8,^G28,G30A,A33_; -TG.3.ACC,C6A,C8_,^CTC28,A29G,CCA31_; T9C,T14A; C64_; T14G,G54A; T71C,C73G,A83C; T9C,G17C; A53G,G54T; C66A,A80G; ^G63,^G81; ^G1; ^C78,^C78 |
2.3至2.4 | G7A,T9C; ^T67,^G67; C2_,C67T; A80_; ^G1,A13C; ^G66,G79C; T69A,A76T; T9C,T14C; A76G,G78C; T16G,G17T; T69C,G77A; T65_,A80G; G7C,T14C,T34G; C66T,C67T; A53G,-A.80.TC; C67T,G77C; C73A,G74T; A36G,C68G; T9C,G17C,^C78; TGG3GCT,C8G,^AC28,CA32_; ^T18; ^C29,^T29; ^GGGCG63,C68T,TTCGGA71_,^CCGCC82; T9C,G17C,C66T,A80G; ^A67,^G67; C2_,G79T; T3A,CGC6GAT,GAG28ATC,A33T; C2_,A21G,G79C; C2_,A21G; C64T,G77A; C8A,G79C; C67G,^A78,A80C; T69C,^A70; G74T,G75C; ^T76,A76G; A76T,A80G; ^C64; ^C29,C50T; ^AGCTTA65,^ATTG68,T69A,T72C,G77T,GA--.79.AGCT; A29T,G30A; T65C,A80C; ^C76,^T76; T9C; ^G67,G79_; C68T,G79T; ^CTCA3,GCGC5_,^CAT28,CCA31_; ^GA70,A88C; -T.3.AC,GC.7.A-,GAG28TGC,CA32GG; A21G; ^G69,T69C; G7A,^C66,^G74; ^T65,^A79; T65G; G74A,A76C; G74T,G75A; ^G68,G77T; T9G,G79T; ^AG67,A88C; ^C81; ^A67,G78T; C37A,G57T; G54C,G79T; G75T,G77A; G40A,TAG52CCT; ^G15; C67A,C68A; A36T,^C55; A36T,T59A,T65C; C67T,^G68; T71C,A76C; G7C,A29G,T65A; ^A78; T69C,G75T; ^TC66,A88C; CT2_,T59A; T9C,G17C,T65G; C70G,G75T; C2_,C73T,G75A; TG3CC,C6G,C8T,G28A,G30C,CA32GG; C64G,C66T; T11C,A29C; T9C,^G15,G17C,T65C; T69G,G74T; ^GA65,A88C; G7C,A61G; ^T65,^A80; C68_,^C79; G7A,^T29,G79T; A27T; A1_,T9G,T59C; T14G,-G.79.TT; T14C,T16A; C70A,G74T; T65A,G78A; ^T65,^G77; T9C,G17C,^G68,G77C; C66A,^A79; G7T,T9C,G17C; ^G69,A76T; C2_,A21C; ^T29,A29T; ^G69,^T69; C6T,T10C,T84G; T65C,C67T; C15T; G78C; G7T,A27G,C44T; ^C68,^A68; A1G,T9C,G17C,A76G; A36T,T59A; T14A,T16A; ^C66,G79_; -T.3.AA,G7_,AG29GC,CA32TG; C8G,^A70,^T75; C66A; ^C64,A80_; T69C; T71G,A76T; CT68TC,G74A; G54C,C68T; T9C,G17C,G81T; C2_,A13G; T65A,^C81; ^C66,^A78; ^C70,^A75; ^T68,G77T; A29T,C50T,A53G,G79T; C68T,A76T; T16C,A18T,A80C; ^TGGAAGAT63,C---.66.TCGG,C68A,GGAGGGAG74_,^A83,A86C; -T.3.AA,G7_,AG29GC,CA32TT; T9G,A29G; C68A; A27C,A29T; A36T,G54C; ^A4; ^A73 |
2.2至2.3 | ^C66,A76_; ^G65; ^T1,T59C; A36T; T3C,GCG5CGA,AGC29TCG,A33G; T9C,TG16GC,C68T,G79A; G7A,T14A,G17A,T34A; T65G,G79T; G7C,TC14CT,G17A,T34A; T3C,C67A; G77C,G78T; C2T,^G56; C6T,A83G; G7T,C8A; C66G,G79_; TG3_,C--.8.TCG,^C28,^C30,CA32_; C67T,T69G; CT2_,T9C; G78T,G79A; C2_,T9C,C15A,G17C; T9C,G17C,^TG67; G75T,A76C; ^C76; G79A,A80T; TT71GG,G74C; C70_,G75C; ^G66,G79T; T34A,A60G; A29T,C64T,C66A; ^CT29,A88C; ^G69; A53C,G79T; ^T80,A80G; ^G67,C67A; C67A,G78C; T9C,G17C,C70T,T72A; -T.3.AC,GC.7.A-,A29_,A-.33.GT; C2G,^T58; A27G,^A70; A39G,G78C; -G.78.AA,A80C; C66G,C67A; ^G68,^A68; T69C,T71A; G7T,G40C,AG53GA; T9C,G17C,G79T; C8A,C66T; G74T,A80C; G7C,T14G; ^C77,G77T; G58T,G79C; T14C; ^T65,^A80,A88C; C68A,^C77; GC--.63.ATTA,CCC66ATT,G--GG.77.AATAT,GC81AT; T11G,A29T; T14A,T16G; T71C,G75A; ^T67,^C78; T65C,G81A; G79C,A80T; ^C66,^G74; A53C,G54A; ^C66,^C79,A88C; G79C,A80G; T9C,G17C,^C66,^G74,A88C; C2_,T16C; T69G; ^G68,^A76,A88C; T71A,G74C; G74T; G7T,C37A; ^CA68,A88C; ^T12,^G12; A29T,C64T,C70T; G7C,A29G; G7A,T14A; T69C,C70G; G79T,A80C; C2T,G54C; ^T58; G7T,G30A,G81T; A29C,A83G; C2_,T69C; T3C,G5C,G7C,A29G,C31G,A33G; T72G; C64A; T34G,T59C; A1G,A60C; T65A,G79A; A27T,^C29; ^G67,^G77; ^G68,C68A; C64G; C66T,G77A; ^C64,^A80; C2_,C73T; A29G; ^T7; A1_,A46C,T59C; T9C,G17C,A76T; G78C,A80G; ^C66,A76C; ^T29,^T29; A27T,CT68TC,G74A; G75C,A76C; ^TT81,A88C; ^G77,A80G; ^C5,G7T; ^C66,T69C; C15A,T16A; C73T; ^A65,^A80; ^T65,G79_; G40A,T52C; G7T,A60T; TG3GA,GC7CA,A29G,CA32TC; ^TA70,A88C; ^C66,^A66; ^G67; A36C,^T55,C68T; T65_; G63_,C82_; C2A,A29G |
2.1至2.2 | A83G; G75_; C68_,G79_; C2_,A46C; ^C4; ^A69,^A69; G42A,C50T; A53G,^T55; A36G,^C58; TG3AC,C8A,GA28TC,CA32GG,T59C,C66A; C2_,A46C,C66T; C64T,G81T; ^A68,G77T; ^T80,A80T; T25G,A29T; G4A,C32T,G54_; ^T68; A76C,G78A; T9C,T14C,G17C; CT2_,A33C; ^CA65,A88C; A60C; ^A69,^T69; T9C,G17C,-T.65.GC; A18C,A61G,A80C; CT15TG,A21C; T72G,A76T; G7C,A29C; ^G79,^C79; T69G,^T76; C70A,G74C; T9G,A29C; C2_,G54A; C15G,T72A,G74A; ^A75; T3_,C6T,^C8,A29_,C32A,^C34; ^C29,A80C; G74A,A76T; C68T,T69C; T3_,C64T; A80T; CT2_,T9A; ^C29,A36C; ^GA67,A88C; T9C,G17C,T59A; A60T,C64T; T65A,G79T; A29C,T65C; ^T7,A13C; C8A,C82T; A76G,^C77; T3G,GC7CT,GA28AG,CA32AC; ---TT.71.AAGAA,G75_; G7T,C15G; ^C79,^C79; TG3GA,CG6AC,A29G,CA32TC,C68T,T72C; T72C; G63C,C82T; ^TG56,G57T; T14C,A29T,A36T; ^T68,^T68; T69G,T71G; ^G66,C66T; ^G68,G77A; G54C,G79A; G7T,C67G; C66G,G78A; A60C,A76G,A80G; G40A,-A.76.CC; C2T,C67A,^T78; T9C,G17C,G77A,G79T; G77T,G78A; ^T78,^C78; ^T68,G77C; ^A67,^G77; C73T,G75A; A29T,C66A,G74T; C2G,A36G; T3G,G5A,GC7CA,A29G,C31T,A33C; T69A,T71C; ^CG2,G5_,C8_,--G.28.CGC,CA32_; ^GT79,A88C; C68A,G77T; C64T; G40A,G77C; C68G,C70G; C2T,G78A; T9C,G17C,^C66,A76C; G7T,A29G,C82T; C2_,T65G,A80G; TGG3GCT,C8G,^CC28,CC31_; A29G,T69C,A80G; T34A,A36_; T9C,G17C,A27G; C15T,T16C; G7T,T9C,G17C,G40A,TA52AT; A36G,T71A; C6T; ^G69,A76_; C66A,G79A; ^C68,^T68; A21T,C67A; A21C,T72G,G77T; T71G,A76G; C2T,G54A; T71G,G77A; T9C,G17C,A29G,G81A; G7A,A36T,G54C,C68T; T3A,T59A; ^G70; ^T77; ^T68,^C77,A88C; TC14GT,T72C; T9C,G17C,T72_; ^C73; G7C,T14C; A36T,^T58; G54T; T59C; A29C,C50T,A60T; G54A,C70G,^T75; ^C66,G77C; C15G,G17C; C64G,^C81; T3A,G5C,GC7AG,GA28CT,C31G,A33G; A29C,C32A; ^G28; A21G,A53G; G75A,A76T; G7C,TC14CT,G17C,T34A; G28A |
Log 2 富集 | 支架175* (SEQ ID NO: 2239) 上之突變 |
3.2至3.5 | C73A,^T78; C6T,A29C,G71C,^G80 |
3.1至3.2 | C17G,A87C; T3G,CGC6ACT,GAG28AGT,A33C; G7T,C9T,C17G,CG81GA; T16G,A29C; C9T,C17G,C65A,A87G |
3.0至3.1 | A68T,T83G; A27G,T92C; TGG3ATC,GC7AG,GA28CT,CCA31GAT; ^C65,A87G; G7T,A29T; T3G,GC7AA,GA28TT,A33C; C9T,C17G,C65_; G7T,T14G; ^G54,G78T; C9T,C17G,^A80; TC16AT,G64C |
2.9至3.0 | C15T,T34A; C9T,C17G,A88T; G7A,C15G; ^C76,^G76; CT2_,C15_,T58A; C2_,C15G; C9T,A29C; C9T,C17G,A85T,A88T; C9T,C17G,^CA63; G7T,C9G; A87T,A88C; C73G,G78A; A29T,A91G; TG3GA,G7A,A29G,CA32TC; ^G14,A29T,A87G; C9T,C17G,T74C; C2_,^A53 |
2.8至2.9 | C9T,A33T; G7T,T67G,G82C; ^T5,C9_,GAGC28CGCA; G7T,^A68,^A82; G7T,^C60; T14G,A29C; A29T,T66A; T3A,CG6TC,AG29GA,A33T; C2T,TC75AT; ^CG76,A88C; G7T,T14A,T83_; -T.3.GA,C6T,C9_,G28C,G30C,CA32TC; CT2_,C15T; TG3_,^GT8,G30C,C32G; T14_,A29C; C9G,C17G,A29C,T79G; TG3AC,G7C,A29G,CA32GT,G86C,A88C; T3A,GC7CA,A29G,A33T; G7C,C80A |
2.7至2.8 | G7T,A91C; ^C2,G4C,G7_,A29_,C32G,^G34; CT2_,A88C; C65G,A88C; G7T,-T.79.AA; A29C; T3A,GC7CA,A29G; C8G,A29C,A88_; A29T; C2_,A29C; A29C,C31T,A33G; T14G,C15T; C9T,C15A; ^GA1,G7A,C15A,C17G; C15A,T16A; CT2_,A29C; C9T,C17G,G78_; C9T,C17G,G-.78.AT; C73T,C76G |
2.6至2.7 | C9T,C17G,C65_,^A84; C9T,C17G,G70T,C81A; T74A,T79A; T3C,C6T,AG29CA,A33G; G7A,^T29; C76G,G77C; GG77CA,A87G; T16G,A29T; T3A,G5A,A29C,C31T,A33G; C9T,C17G,^AA53; TG3CA,GC7AA,GA28TT,CA32TG; G7A,A29C; T3G,G7T; CT2_,A68G; T14_,A29T; C2_,C9T,C17G; ^G3,GC.7.-T,G28_,^C34; G7T,^T92; G7T,^G69,G82T; ^GGCAGATCTGA64,T66C,A68C,GA71AG,^C75,G77T,T79C,CGTAAGAA81_; T3A,C6G,AG29CC,A33T; C80T,^A81; C81T; CT2_,C17A; C15A,T16G; C2_,T16G; G71_,C80T; TG3AC,GC7AG,GA28CT,CA32GG; T3A,G5C,G7T,C31G,A33T; T3G,G7T,C9T,C17G; G64T,A85T; G7C,T14_; C9T,A29T; G7T,^G14; A88G,^C89; CT2_,A33T; C81T,^A82; C9T,C17G,A29C,C32A; C9T,C17G,^GA77 |
2.5至2.6 | G7C,C15G; C9T,C17G,TC75GT; TG3CA,CG6GA,AG29TC,CA32GG; G7T; T14A,T16G; G7T,C9T,G71_,^T79; C15A; CT2_,A33T,C73_; C2A,C9T,C17G; CGC6TCA,GAG28TGA; C15G,A29C; C2_,T16G,A91C; ^T81,C81T; TG3AA,A29C,CA32TG; G4A,G7T,C32T; T3C,CGC6GCT,GAG28AGC,A33G; T3A,G7A,A29T,A33G; -G.4.CC,G7_,AGCC29GCGG; C65T,G86_; C9T,^A16; A36G,^C57; A1_,T16G; C6T,G7T; ^G14,A29T; ^AT16,A88C; C8G,A29C; ^G64,A87C; ^G70,^T79; T16A,^C29; TG3GA,C6G,C8T,GAG28ACC,CA32TC,G71T; G7T,A29C; T3G,GCG5AGT,GC30CT,A33C; ^C2,^T14,A29T; C9T,C17G,A88_; C9T,T16A |
2.4至2.5 | TGG3ACA,A29C,CCA31TGT; T3_,G5A,G7C,^G9,^C28,A29G,C31T,A33_; C15A,A29T; G64A,^T65; CT2_,A27G; ^A16,^T16; G7T,C15A; G7T,C9T,C17G; C2G,A29T,T66A; TG3GA,CGC6TTA,G28T,G30A,CA32TC; A1C,G82C; A27C,A29C; C9T,C17G,^GA71; T3C,^T6,CC.8.T-,C17G,GAG28AGA,A33G,^G54; ^T16,A27T,A29C; G64C,^A87; ^C14,A29C; ^A65,^T65; C2T,C9T,C17G; C9T,C17A; G70A,C81A; C2G,A36T; G5C,C8G,GA28CC,CC31GA; C6T,A29C; C80T,^G81; T-.3.CA,G7_,AG29GC,CA32TG; ^C78,G78A; G7A,T14_,CT65TC; -T.3.AA,G7_,AG29GC,CA32TG; ^C29,A29T; G7A,A29T; TG3GA,GC7CA,A29G,CA32TC; ^T64,G64A; C15A,A29C; T75A,G77T; ^A3,^T3; A27T,A29C; T14A,A29C; T74C,G77A; G7C,A29G; C9T,C17_; G5A,G7A,A29T,C31T; ^C63,^A63; G7T,A91G |
2.3至2.4 | CT2_,G64T,T66G; G28T,A29C; T3G,G5T,GC7CG,GA28CG,C31A; TG3AC,G7C,A29G,CA32GT; C9T,C15A,C17G,A29C,^TG55,G57A; ^C14,A29T; C9T,C17G,GC64TG; G7A,^T29,A36C; ^T16,^G54; TG3CA,C8A,GA28TC,CA32GG; G7T,C9T,C69G; C9T,C17G,^A70; A72_,T79G; T3A,G5T,C8T,GA28AC,C31A,A33T; C9T,C17G,A29C; ^G54; G7A,TC14CT,C17A; C9T,C17G; ^G70,^T79,A88C; ^A64,^G64; T14G,A29T; C9T,T16_; ^A14,^T14; ^AC1,GCG.5.--T,GC30_,^GT34; A29C,A91G; C2_,T14A; C9T,^A17; C9T,C17G,G78A; T3G,G5A,A29C,C31T,A33C; C9T,^G17; G7T,A29G; TG3GA,C6G,C8T,GAG28ACC,CA32TC; ^T1,CG6TC,C9T,C17G; C17A; ^T17,^A17; T3A,G5C,GC7AG,GA28CT,C31G,A33G; ^GC72,A88C; T3G,G7T,A33C; TG3CA,CG6GA,AG29TC,CA32TG; T3G,G5C,C8G,GA28CC,C31G,A33C; ^T3,C80G; C9T,C17G,T45G,^G54; C9T,C17G,A72C,T74G; G5C,C8G,GA28AC,C31G; A29T,G56T; G7T,C63A |
2.2至2.3 | A36T,A85C,A87T; T14A,C17G; C9T,C17G,^G54; G4C,C8G,GA28AC,C32G,A87G; ^T72; A85C,A87C; G7T,T92C; C9T,C17G,^C63; TG3AA,C6T,AG29CA,CA32TT; C9T,C17G,A85G,A88G; G64C,^G88; G7A,^T29,A68C; ^A13,T14C; C9T,C17G,^G54,A85C,A88C; -GG.4.CAT,C9_,GAGCC28CGATG; TG3AC,C6A,AG29CT,CA32GG; C9T,^C63; C9T,A88C; A27T,A29T; C9T,C17G,^G54,A91C; G86A,A88T; TG3CA,GC7AA,GA28TT,CA32TG,C69T; T74G,G77T; TGG3ACA,C8G,GA28CC,CCA31TGG; G7A,C17A,^G81; G7T,A59G; ^A65,^G86; C73T,G78T; ^C72,^T79; A1G,C9T,C17G; ^G1,C9T,C17G; ^G72,^C72; C2_,A29T; ^T14,A29T; ^G64,^T87; ^A65; ^C18,^T18; ^G64,A88C; C9A,A29C,G57T; G7C,^G28; G77A; G7A,TC14CT,C17G; C2_; G7C,T14A,^T86; C9T,C17G,A53G; T3G,GC7CT,GA28AG,G86T; C9T,C17G,A29C,A91G; C9T,T16_,A91C; CT2_,^G64,C65A; C15_; T16G,C17T; G7T,G28A |
2.1至2.2 | C9T,C17G,A29T; A87C; ^CT18,A88C; C9T,C17G,^G64; C17G; C15T; ^T16,T79C; ^A64,G64A; A1C,T3G,C9T,C17G; GA28CC,^T65; C15A,C17A; G78C,T79G; A29C,T58G; C2_,G7A,-C.65.AA; CT2_,A29T; T3A,A33T; G4A,CGC6GTA,G28T,G30C,C32T,T67_; C9T,C17G,C65_,A91C; ^T65,A87G; A88_; G7T,C9A; C9T,C17G,C65A; TG3GC,C6T,AG29CA,C32G; G7T,T16A; G7T,G70C,C80A; G7T,T14A; TG3AA,GC7CG,GA28CG,CA32TG; ^G54,A91C; C73_,G78_; T3C,GC5TG,C8T,GA26_,G30A,^CG34; ^CT3,A29C; C2T,T14G; G7C,A29T; C9T,TC16GG; T3G,C8T,GA28AC,A33C; ^G16,^T16; C9T,C17G,A36C; TGG3AAC,C8G,GAG28_,A---.33.GGGT; C9T,C17G,A87G; ^T72,T79G; ^G17,C17T; CT2_,A39C,A88C; T3G,A33C; T3_,A33G; C-.2.TG,TC75CA; G7C,C9T,C17G,^G92; C9T,C17G,G82C; C9A,A29C; C2_,C9T,C17G,A91C; C2_,A29C,A91C; CT2_,C9T,C17G; G7T,A60G; ^C71,^T71; C2_,G77T,A91C; C2_,A29G; ^T71,C80G; T3A,G7A,A29G,A33T; C9T,A29G |
2.0至2.1 | C65T,^A66; CT2_,C15_,T58A,A72C; C9T,C17G,C73A,C76A; C2_,A91C; C80T; T3A,G7C,C9T,C17G; ^C63,^G88; G7T,A61T; GC62_,C65G,T67G,A72T,T79A,AAGA.84.---C,G89C; T3G,C9T; T16A,C17A; C6T,A29T; T3C,GC5CG,C8T,GAGC28ACCG,A33G; G7A,C15T; ^T2; C15G; C9G,A29T; C15T,A29T; G7T,^C14; ^A64,A88T; A29C,G30A; C2_,A29C,A46C; C9T,C17G,A72T,G78A; ^A87,^T87; C9T,A59C; TG3AC,C8A,GA28TC,CA32GG; C9T,C17G,^G64,^G88; A29C,G71A,C80T; T3C,A29T,AC68TA; ^A17; C9T,C17G,G64T,T66C; G7A,T16G; C17T,C65G,G86C; C69T,G82C; A1T,C2A; T14A,^C29; ^A15,C15T; G7T,T16G; T3A,GC7CA,GA28TG,A33G; ^T81; T16C,A29C; A29C,A91C; G71A,A88T; ^C65,A87G,A91C; C9T,C17G,A29T,^A53; G71T; ^A80,^A80; C9T,C17G,A36G; C9T,C17G,T--.54.CTG; T16A,A29T; ^G77,T79C; C9T,C17G,G64C; TG3AC,CG6GA,AG29TC,CA32GG; A36T,C37T; A29C,^C65,A85_; C15G,A29T; ^A70,C81T; A29T,A33G; C73A,C80T; C9T,C17G,G82_; C9T; C69T,A84G; C2_,C9T,C17G,A46C |
1.9至2.0 | C2_,A29G,A91C; A68G,T83C; C9T,T14A,C17A,^AG85; ^T66,^G85; G62T,CT65_,C69A,G71A,C80T,G82T,A85C,AGC88_; T3_,G5T,^A8,-A.29.TC,C31A,A33_; G7A,T14C,C17A; T3G,CG6TC,AG29GA; ^T54; ^C8,^T8; G7T,AA87TG; A72C,C73A; C2_,C6T; ^C29; G71C,C81_; C9T,C17G,G64_,A88_; C2_,A88T; T3G,G5C,GC7TG,G28C,C31G; C9T,C15T,C17G,A36C; G7T,T34G; T14A; ^T73,^C78; ^G64; ^G15,C15T; A36C,^A57; A-.72.GC,^T79; T16A,A29C,^A58; C9T,C17G,^T52; C2_,A85T; ^C29,A29G; G7T,T14C; C2A,^T57; G7T,C15G,T34G; T14G,C17T; T14C,C15T; T3G,G5A,GC7TA,G28T,C31T,A33C; ^C71,^T79; ^T14,A29C; ^A1,A36C; ^C63,^G89; G7C,A91G; T14C,A29C; C9T,C17G,G78T,C80T; ^G69,G82C; TGG3GCA,G7T,CCA31TGC; C6T,A29C,G71C,^G80,A91C; A13C,A29C; ^C63,A88T; G7T,T14_; C2_,GG77AA; C9T,C17G,T58A; C2_,G77T; C2_,T3_; C9T,C17G,^AA53,A88C; G7T,C9T; G7A; CG6GC,AG29GC,C32A; C63T,TTA66GCC,GA71_,TC79_,TAA83GGC,A87C,G89_; G7C,C17G; C2_,A46C; C9G,A29T,C37T,^A56 |
1.8至1.9 | ^G69,A72C,G82C; ^G70,T79G; G7A,C15A; ^T36,^A57; ^G70,^C79; TGGCG3CACAT,GCCA30TGTG; G71A; TG3AC,C8A,A29C,CA32GT; T10G,A29C; ^A65,G77A,^G86; C9T,C17G,A88_,A91C; ^C78,^A78; G7T,C90T; T3G,G5A,GC7TG,G28C,C31T,A33C; G7T,C9G,G86T; A29C,C31T,A33C; A29C,G70A; A-.88.GC,A91C; ^A17,A36C; T3C,GCG5TGA,AGC29TCA,A33G; T3C,CGC6GCT,GAG28AGA,A33G,A88C; C35G,^C58; T74A,G78C; C9T,CA17GT; G7A,C17G; C9T,C17G,^GT70; CTG2_,A29C; C2_,A68G; ^T64,^T88; T3G,A33T; C2_,T16G,A29C; ^A1; A36T,^G55; C9T,C17G,C63A; C9T,A18G; C2T,A36T; ^A81,^A81; C9T,T14G,C17G; -A.72.CC,A91C; A29T,T79G; G7A,A29T,A59G; G7C,^C78; ^AG64,A88C; CT2_,C9T,C17G,C69T; C2_,A46C,A91C; ^C89,A91C; ^C29,A68C; C2_,G64T; -C.15.GT,A27C; CT2_,T10G,A88C; T14C,A29T; C9T,C17G,C76T; A84G,A87C; G7C,C9T,T14A,C17G,T34A; G70T,C81A; T14G; ^T3,A29T; G7T,^T29; A29T,C65A,T67G; G64C,A87G; C9T,T14A,C17G; ^T57,A87G; TGG3ATC,A29C,CCA31GAT |
1.7至1.8 | C2_,G70A; C9T,C17G,^GA77,A88C; C9G,C17G,A29C; ^T70,^T81; G7C,C9T,C17G; T3G,CGC6TTG,G28C,G30A,A33C; ^A16,A68T; C9T,C17G,T67C; G7T,^C14,A33C; G7A,T14_; ^C14,^T14; C9T,C17G,GG77TT; C2T,C80T; ^T64,A88_; ^G54,A68C; G7T,CT9AG; C9T,C17G,T79G; T79G,C80T; ^AT3,A88C; ^AG54,A88C; C2G,A33C; C2_,A88T,A91C; C9T,C17G,T58C; C2_,C73T; TGG3CCC,C8G,GA28CC,CCA31GGG; G7T,T10G; C9T,C17G,^A80,A91C; ^T64; T14_,A29C,A91C; G7A,G28T,AAAGCGCTTA59_; G7T,G71_; ^A17,^A17; T14_,A29T,A91C; C17G,A72G,T74C; ^T88; CT2_,A94C; A27G,A29C; A85T,A87G; C9T,C17G,^AA79; C9T,T14A,C17G,T34A,^G64,G86T; C9T,C17G,T45G; C2_,C9T,C17G,C65T; ^G3,G5C,C9_,GA28CG,C32A; T74G,G78T; TG3_,--C.8.GCT,G28_,^G33; A39T,T54A; C2_,A72G; C9T,C15T,C17G; TG3CA,CG6GA,AG29GC,CA32TG; G64C,A88G; C15A,C17G; C2_,C65A; ^G64,G86A; ^C29,A36C; G64T,T66A; TG3GT,A29C,C32A; ^A64; C81G; C9T,A72T,T79C; C9T,C17G,G77T |
1.6至1.7 | A72G; ^C14,A29C,A36C; T3C,C9T,C17G; G4C,C8G,GA28AC,C32G; C2_,G71C,^G80; C76T; C9T,T14A; C2G,C9T,C17G; G70T,C81G; C17G,^T54; A72C; C2_,C9G,C17G; TG3GC,C8T,GA28AC,C32G; TGG3GCT,C8G,^CC28,CC31_; C9T,C17G,A39T,A-.53.GC; ^T16; T67C,A87C; ^G81,C81T; C76G,G78C; A1C,G56A; TG3CA,GC7AG,GA28CT,CA32GG; C9T,C17G,C65G,^A87; G86A,A88C; G7T,C9T,C17G,^A72,G78A; ^G70,C80A; ^A17,A68C; C2_,C80G; ^C71,^T79,A88C; C9T,C17G,^T57; ^T2,C9T,C17G; T45G; G64C; T14_; C65T,G86A; C69T; ^C65; G64T,C65A; T3G,GC7CT,GA28AG; ^A1,^A53; T3A,G5C,GC7AT,GA28AT,C31G,A33T; C9T,C17G,^CA72; C9T,C17G,C73A,T79A; C2_,A53G; TGG3GTC,C8G,GA28CC,CC31GA; ^C5,G7T,C9T,C17G; G71T,C80T; C15T,T16G; G7C,C9T,C17G,C76A,G78T; G64T,T66C; ^C65,A91C; C73T; A72C,G78T; ^C63; A68G,C81T; ^GT87,A88C; C9T,C17G,^A78; T3A,GC5AG,C8T,GAGC28ACCT,A33T; ^A1,^T54; A29C,G56A; C2_,C80T; ^TA17,A88C; A72G,C73T; A29C,C31T,T83C; G7T,A27T; T3C,G7T,G40A,^T54; A88C; ; G64T,A87C; T3_,^T9,G28_,^G32; ^GT16,A88C; -T.3.AC,G7A,C9_,GAG28TGC,CA32GG,A84C,G86T; ^T65; C76A,G77T; ^G14,A29C; G64C,A88C; A72_,T79G,A91C; ^C29,A68C,A72C; TG3AT,GC7TT,G28A,CA32AT; C9T,C17G,T--.54.CTG,A88C; G7T,A59C; CC8GT,C17G; G7C,T14C,^T86; ^CA3,GC5_,C8G,GA26_,G30C,^TG34 |
1.5至1.6 | T3A,^A5,G7_,AGC29GCT,A33G; C9T,C17G,^C73,G78C; G71A,A72G; AG27TA,A88T; G7T,A91T; ^T57,A91C; ^T2,A68C; ^T2,A36C; G7T,T10C; ^A64,A88G; TG3CA,C6T,C8T,GAG28ACA,CA32TG; ^T54,A68C,A72C; G7T,A61G; GCGC5CAAG,GAGC28CTTG; C6T,CT9TC,C17G,A29C; ^CA63,A88C; C2_,C9T,C17G,A36C; ^G64,^G86; ^CGGCAGAT65,T67G,^GC69,G70T,A72G,^GCTC75,G77T,T79C,CGTAA81_; C73T,^G74; T14G,T16A; ^AT14,A88C; G64C,A88T; C2_,A39T,^A55; C2_,C15T; ^G70,C81T; ^A81,C81T; ^T72,A72T; C2_,C69T; T75G,T79G; A88_,A91C; ^T7,G7T; G7A,A29T,^A77; CC8AT,C17G; C2_,T52C; G7A,C9T,TC16CG; G70A; C9T,C17G,AA87TC; ^A53,A91C; T3A,G5C,GC7CT,GA28AG,C31G,A33T; ^G70,^C79,A88C; ^T72,^G77; C9T,C17G,C69T; T-.3.CA,G7A,C9_,AG29GC,CA32TG; TGG.3.-AA,^G9,^CGC28,A29T,CCA31_; GCGC.62.--AA,T67C,C69A,GA71AC,TC79GT,G82T,AAGA.84.---G,GC89TT; A85G,A87G; TG3_,C--.8.TCG,GAG28CGA,C32G; T66C,A85G; ^A16,G86T,A88T; TT74GG,G--.77.AAC; C2_,T79C; C9T,^A13,C17G,^G54; ^C63,G64T; C2_,T83C; ^C73,^C73; -T.3.AA,G7_,A29_,A-.33.GT,G70A; ^T16,A91C; ^T64,^G64; T79C; C9T,C17G,G77A; ^T64,^T64; C2_,G71A; T14C,C17G; G7C,TC14CA,C17G; A85C,A88C; ^A3,GG4TC,C9_,GA28CG,CCA31AAT; --C.63.TTT,C65_,CGGA.69.T---,TCCG.79.---A,G86C,G89A; C9T,C17G,^C57; C15G,T16A; C9T,C17G,^CA64; AG39TA,T52C,T54A; C2A,A87G |
1.4至1.5 | -C.15.GT,A36C; A29C,T83C; G7T,A27G; ^C29,^C29; ^T80,^C80; TGGC3ACAG,GA26_,--A.33.TGG; A72G,^T73; C9T,C17G,T66A,A85G; ^C15,^G15; TG3_,--C.8.GCT,GAG28CGC,C32G; ^T19; G28A,A29C; ^G70,^G80; CT2_,A36C,A39C; C9T,C17G,^CC79; ^G54,A68C,A72C; ^CT78,A88C; T74G,G78C; TTC74AGG,^AT78; C9T,C17G,C76G; ^GGCAGCTCTGA64,T66C,A68C,GA71AG,^C75,G77T,T79C,CGTAAGAA81_; ^A1,A68C; ^A4; A72G,G78C; T3G,C8T,GA28CC,A33C; G7C,-C.80.AT; C9T,C17G,A59T; G26C,C93G; G7C,T14A,^T86,A91C; ^G64,^T87,A88C; A1G,A29C; C9T,C17G,^AT78; G28T,GCCA30TTTG; C2_,T75A,G78A; TG3GA,CG6AC,AG29GT,CA32TC; A36G,^C57,A91C; ^C72,A72C; C9T,C17G,^G82; A27T; TG3CC,CGC6TTG,G28C,G30A,CA32GG,C80G; ^A1,^A53,A88C; A72C,C80A; G7T,C73G; ^A15,A87G; T14_,^C29; G7A,T14_,A91C; C15T,T16A; C15T,C17G; C65_,A88_,A94C; ^A16; C9T,C17G,^G54,A68C; -T.3.AC,G5A,C9_,GAG28CGT,CA32GG; ^T15,^C15; C9T,T14A,C17G,T34C,^G64,G86T; ^T71,C80G,A91C; -C.15.GT,A68C; ^G87,^T87; C73_,G78_,A94C; C2G; G77C,T79A; G70C; A68G; ^T81,A91C; C9T,C17G,T79A; ^T72,^T72 |
1.3至1.4 | T66A,A88C; C76G,G77T; A53G,A59C; CTG2_,G7T; A72_,^T79; ^AA80,A88C; TGG3CAA,C8G,GA28CC,CCA31TGG; ^C78,^T78; --G.28.TGA,T79C; ^T72,^G77,A88C; A72G,^C79; T3G,G5A,G7A,A29G,C31T,A33C; T14G,A21G; ^T2,A72C; G7T,T14G,^CG64; T3G,G71A; G64A,A87G; T3C,C6T,AG29CC,A33G; T45A; G7A,C9T,T14A,C17G; TG3CT,CGC6TAT,GAG28ATA,CA32AG; C9T,C17G,^T83; G7T,C9T,A53T; C9T,C17G,T75G; G7C,T14C,A72_; ^A65,A87G,^C89; C9T,C17G,G70C,C81G; G7T,A59T; AG29CA,A72T,^G77; T74C,G78A; C2A; C9T,C17G,C73T,T75G; ^G54,A72C; ^AA81,A88C; ^T54,A68C; C65A,G86A; ^A1,A72C; T3G,C9T,C17G; C2_,A33T; A87T; ^A65,^T86; A53G; A85G,A87C; T3G,G5C,GC7TG,G28C,C31G,TC75_; -T.3.AC,G7A,C9_,GAG28TGC,CA32GG,G71T; G7C,C15A; G64A,A85G,A88_; ^A74; ^TG64,A88C; A29C,A60T; C9T,C17G,C80G; ^T64,^A87; G7T,^A59; G77C,G78C; A72C,^T79; ^T73,^C78,A88C; ^C29,A91C; ^A64,A88C; ^G54,T58A; TGGCG3CACTT,GCCA30AGTG; C9T,C17G,A21T; G4C,C8G,GA28AC,C32G,^G82; A36C,A53G; C9T,C17G,G71T; C9T,CA17GT,T45A,G70C; ^A81; G7A,A72T; CT2_,T10G; G64T,A87G; ^G70,T79A; C2_,C9T,C17G,T52C; C2_,T45C; C9T,C17G,^C35,A36G; G7T,T58A; ^A73,^C73 |
1.2至1.3 | C2G,C73G; G7T,^T14; T75C,C76T; ^A80,^C80; A1_,A46C; C9T,C17_,A91C; C35G,^C58,A68C; C2T,T3A; ^C29,A72C; T79G,C80A; G71A,C81_; G7T,G28T; CT2_,T45G; A29C,^G92; C9T,C17G,T67C,A84G; T3C,^T6,C9_,GAG28AGA,A33G; A36T; A85C,A88T; TG3GC,C6A,C8T,GAG28ACT,CA32GC; T10C,A29C; A1_,C2_; ^C65,A87T; A72T,C81T; C15A,T79A; ^GA1,G7A,C15A,C17G,A88C; ^A16,T16A; A29T,A60C; C76A,G78A; A29T,C31T; A29C,G86C; ^G70,T79G,A91C; ^T54,A72C; ^GAAC73,T74A,GG.77.C-; T14_,A29C,A46C; C9T,C17G,^A72,^A78; T14C,C15A; ^A17,^G17; C9T,C17G,CG76AC; T74C,T79C; G7A,TC14AA,C17A; ^T64,^A64; ^T81,^A81; C2A,A36T; C9T,C17G,G82T; T74A,G77A; ^A1,A33C,A36C; G7C,TC14CT,T34A; A36T,A53G; ^A65,^A84; A1_; G7T,^T60; T3A,G5C,G7T,C31G,A33T,T52G,^C54; T75G,G77T; G5C,G7A,A29T,C31T; TGGC3CCAG,C8T,GA26_,G30A,--A.33.TGG; C9T,^C17; C2_,T14A,A91C; G77A,G78T; ^G64,G86A,A91C; T16A,C17G; C9T,C17G,T34A; A87G; A39G,-T.54.GC; A39G,-T.54.GC,A91C; ^A5,C6T,C9_,G28C,GC30CT; A72C,G77A; C2_,A91C,A94C; C2_,G7C; A84G; C73A,G78T; ^T78,^A78; TGG3GTC,C8G,GA28AC,CCA31GAC; G7A,^G14; C76T,G77A; C2_,G7T; G7A,T14A; ^A17,A68C,A72C; TGG3CCA,GC7CG,GA28CG,CCA31TGG; T79G; ^A72,^C78; C15G,A29T,G57C,A59T; T14A,^G74; G7T,C65T,A87C; C9T,C17G,G70T |
進行實驗以鑑別來源於CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之一組變異體,該等變異體係生物化學勝任型且展現與雙股DNA (dsDNA)裂解在與TTC或ATC或CTC之PAM序列相關之目標DNA序列處之CasX 515相比改良之活性或改良之間隔子特異性。為實現此目的,首先,在CcdB選擇實驗中使用CasX 515及導引支架174鑑別具有高於背景水準之存活率的一組間隔子。其次,用此等間隔子進行CcdB選擇以確定衍生自在典型「野生型」PAM序列TTC處針對dsDNA裂解係生物化學勝任型之CasX 515的一組變異體。第三,進行CcdB選擇實驗以確定在ATC型或CTC型之PAM序列下使得dsDNA裂解能夠改良之CasX 515的一組變異體。第四,進行質體反選擇實驗以確定衍生自產生經改良之間隔子特異性之CasX 515的一組變異體。
材料及方法:
對於CcdB選擇實驗,將300 ng表現指定CasX蛋白(或庫)及sgRNA之質體DNA (p73)電穿孔至含有表現CcdB毒性蛋白質之質體的大腸桿菌菌株BW25113中。在轉化之後,使培養物在37℃下在振盪下在富含葡萄糖之培養基中回收20分鐘,其後添加IPTG至最終濃度1 mM且再培育培養物40分鐘。隨後在含有對質體具有選擇性的抗生素的LB瓊脂盤(Teknova Cat# L9315)上滴定所回收之培養物。細胞在含有葡萄糖(不表現CcdB毒素)或阿拉伯糖(表現CcdB毒素)之培養盤上滴定,且計算相對存活率且繪製,如圖32中所示。接著,如上電穿孔培養物且回收,且保存一部分回收物用於滴定。回收培養物之剩餘部分在回收時段之後分裂,且在含有葡萄糖或阿拉伯糖之培養基中生長,以分別在不選擇或具有強選擇之情況下收集混合庫之樣品。收集此等培養物且存活質體池使用質體小量製備套組(QIAGEN)根據製造商說明書萃取。重複整個過程,總共三輪選擇。
分離最終質體池且使用對獨特分子標識符(UMI)具有特異性之引子進行p73質體之PCR擴增。此等UMI序列已經設計使得各特異性UMI與CasX 515蛋白之一個及僅一個單一突變相關。典型PCR條件用於擴增在稱為深度突變演進(DME)之方法中,CasX 515之變異體池含有許多可能的胺基酸取代,以及可能的插入及單一胺基酸缺失。用Ampure XP DNA清除套組來純化經擴增之DNA產物,其中在30 µl的水中溶離。隨後製備擴增子用於用第二PCR定序以根據製造商說明書將與下一代定序(NGS)相容之銜接子序列添加至MiSeq儀器或NextSeq儀器(Illumina)上。進行所製備樣品之NGS。返回的原始資料檔案處理如下:(1)針對品質及針對銜接子序列微調序列;(2)將來自讀數1及讀數2之序列合併至單個插入序列中;及(3)針對含有與突變相關之UMI,相對於CasX 515之參考序列定量各序列。對個別突變相對於CasX 515之發病率進行計數。選擇後突變計數除以選擇前突變計數,且十隻假結用於產生「富集分數」。計算此分數之對數基二(log
2)且以圖33-36中描繪之熱圖形式繪圖。指示單個間隔子之生物複本,且此等複本之平均值經計算且繪製為總富集分數。對於描繪於圖33中之實驗,使用一式三份進行之兩個TTC PAM間隔子經由CcdB選擇(間隔子23.2 AGAGCGTGATATTACCCTGT,SEQ ID NO: 161及23.13 CCCTTTGACGTTGGAGTCCA,SEQ ID NO: 162)及一個兩次重複進行之TTC PAM間隔子(間隔子23.11 TCCCCGATATGCACCACCGG,SEQ ID NO: 154),且成一式三份量測之平均值在log
2富集標度上繪製為經量測之CasX 515變異體之熱圖。與CasX 515相比保留全部裂解能力之CasX 515之變異體展現約零之log
2富集值;裂解功能缺失之變異體展現小於零之log
2值,而使用此選擇改良裂解之變異體產生與CasX 515之值相比大於零之log
2值。用以產生圖34-36之熱圖之實驗使用以下單一間隔子(分別為11.2 AAGTGGCTGCGTACCACACC,SEQ ID NO: 163;23.27 GTACATCCACAAACAGACGA,SEQ ID NO: 164及23.19 CCGATATGCACCACCGGGTA,SEQ ID NO: 157)進行選擇。
對於質體反選擇實驗,對由使用TTC PAM間隔子之CcdB選擇產生之最終質體池進行額外輪的細菌選擇。反選擇之總體方案為允許僅複製大腸桿菌之彼等細胞,該等細胞同時含有兩個質體群體。第一質體(p73)表現CasX蛋白(在由ATc誘導之表現下)及sgRNA (組成性表現)以及抗生素抗性基因(氯黴素)。應注意,此質體亦可用於標準正向選擇分析,諸如CcdB,且間隔序列按實驗需要完全自由地變化。第二質體(p74)僅用以表現抗生素抗性基因(卡那黴素),但已經修飾以含有(或不含)匹配p73中編碼之間隔子的目標位點。此外,此等目標位點可經設計以併入相對於間隔序列之「錯配」,其由間隔子之RNA與目標位點之DNA之間的非典型沃森-克里克鹼基配對組成。若自p73表現之RNP能夠裂解p74中之目標位點,則細胞將僅對氯黴素具有抗性。相比之下,若RNP無法裂解目標位點,則細胞將對氯黴素及卡那黴素兩者保持抗性。最後,上文所描述之雙質體複製系統可以兩種方式實現。在依序方法中,任一質體可首先遞送至細胞,其後使菌株具有電能力且遞送第二質體(均藉由電穿孔)。先前研究已展示質體遞送之任一次序對於成功反選擇係足夠的,且進行兩種方案:在命名為篩選5之實驗中,p73電穿孔至含有p74之勝任型細胞中,而在篩選6中,相反為真。培養物經電穿孔、回收、滴定且如上文針對單輪在選擇性條件下生長,且亦如上進行質體回收,隨後擴增、NGS及富集計算。
最後,以類似方式進行額外CcdB選擇,但其中使用導引支架235且使用替代啟動子WGAN45、Ran2及Ran4,所有均靶向具有間隔子23.2之毒性CcdB質體。預期此等啟動子與以上CcdB選擇相比更微弱地表現導引RNA,且因此預期降低細菌細胞中之CasX RNP之總濃度。此生理效應應降低選擇性分析中之細菌細胞之總存活率,由此增加富集分數之動態範圍且更精確地與TTC PAM間隔子23.2處之RNP核酸酶活性相關。對於各啟動子,如上一式三份地進行三輪選擇,且各組實驗產生如上之富集資料。此等實驗在下文被稱作篩選7。
結果:
結果描繪於圖32中,表明當使用靶向與TTC PAM序列相關之DNA序列之間隔子靶向時,與導引支架174複合之CasX 515能夠裂解CcdB表現質體。相比之下,利用替代PAM序列之間隔子展現更加可變的存活率。ATC PAM間隔子(下文所列)之存活率範圍為百分之幾至遠小於0.1%,而CTC PAM間隔子(下文所列)之存活率能夠在>50%至小於1%範圍內。最後,GTC PAM間隔子(下文所列)僅使得存活期能夠等於或低於0.1%。此等基準標記資料支援此選擇管線之實驗設計且展現CcdB細菌分析之穩定選擇能力。具體而言,無法裂解雙股DNA之CasX蛋白去富集至少四個數量級,而裂解之生物化學勝任型CasX蛋白將在分析中存活。
圖33之熱圖用於鑑別在與TTC PAM序列相關之目標DNA序列處的dsDNA裂解具有生物化學勝任型之CasX 515的一組變異體,圖34及圖35之熱圖用於鑑別在與CTC PAM序列(間隔子11.2及23.27)相關之目標DNA序列處展現dsDNA裂解改良之彼等變異體,而圖36之熱圖由與ATC (間隔子(23.19)之PAM序列相關之間隔子的相同變異體組產生。
圖33A-E之結果鑑別及分類在三個TTC PAM目標位點處編輯之CasX 515勝任型之變異體。此等三個資料集單獨或組合表示變異體之間的潛在生物化學差異且鑑別用於人類基因體編輯之改良之CasX治療劑之未來工程化的感興趣區。如對此之證據,內部對照均一地包括為未經處理之庫的一部分,諸如在整個蛋白質中之各位置存在終止密碼子。始終觀測到此等終止密碼子在各輪選擇中丟失,與部分截短之CasX 515不應允許dsDNA裂解的期望相符。類似地,觀測到熱圖資料中反映之活動損失的變異體在選擇期間已變得耗乏,且因此在此分析中具有雙股DNA裂解之嚴重損失。然而,相對於生物化學裂解,具有一或多個之富集值(及零或大於零之對應log
2富集值)的變異體最少為中性的。重要的係,若此特定變異體子集中鑑別之突變中之一或多者展現治療分子之所需特性,則此等突變建立展示與生物化學功能相容之結構函數關係。更特定言之,此等突變可影響特性,諸如CasX蛋白轉錄、轉譯、摺疊、穩定性、核糖核蛋白(RNP)形成、PAM識別、雙股DNA展開、非目標股裂解及目標股裂解。
圖34A-E、圖35A-E以及圖36A-E用於鑑別及分類在與CTC及ATC PAM序列相關之序列處裂解的變異體勝任型。此等資料集中之富集變異體(富集>1,等效於大致0之值的log
2富集)表示特異性改良CTC或ATC PAM目標位點之裂解的突變。符合此等標準之突變可以兩種一般方式進一步次分類:突變藉由提高PAM (1型)之識別而提高裂解速率,或突變改良分子之總體裂解速率而與PAM序列(2型)無關。
作為第一種類型之實例,發現位置223處之取代突變在所有測試樣品中富集數百倍。此位置編碼野生型參考CasX蛋白CasX 1及2兩者中之甘胺酸,其自CasX 1之公開CryoEM結構(PDB ID: 6NY2)中之DNA非目標股之4個核苷酸位置量測為6.34埃。因此,位置223處之此等取代突變在實體上接近新穎PAM之改變之核苷酸,且可能直接與DNA相互作用。進一步支援此結論,許多經富集取代編碼之胺基酸能夠相對於經置換胺基酸(甘胺酸)形成額外氫鍵。此等發現證明,藉由引入與一或兩個DNA股相互作用之突變(尤其當實體上接近PAM DNA序列時(在十埃內)),可在CasX蛋白中實現改良之新穎PAM序列識別。圖34-36中之熱圖之額外特徵可表示使得能夠識別非典型PAM序列增加之突變,但尚未研究其作用機制。
作為第二類型突變之實例,圖34A-E、35A-E及36A-E熱圖之結果用於鑑別與CasX 515相比改良總裂解速率,但未必特異性識別DNA之PAM序列的突變。舉例而言,由位置27處之精胺酸插入組成之CasX 515之變異體經量測以具有大於選擇間隔子11.2 (CTC PAM)及間隔子23.19 (ATC PAM)中之富集值的富集值。此變異體先前已藉由對CTC PAM間隔子之可比選擇鑑別,其中此突變富集數量級(資料未示出)。此胺基酸突變之位置在物理上接近以上結構模型中位置-1處之DNA目標股(9.29埃)。此等洞察表明如下機制:其中藉由CasX RNP與雙股DNA形成之成熟R-環可能藉由帶正電側鏈與DNA目標股之帶負電主鏈之離子相互作用穩定於精胺酸之側鏈。此類相互作用對於整體裂解動力學有益而不改變PAM特異性。此等資料支援以下結論:圖34A-E、35A-E及36A-E中所示之一些富集突變表示藉由當物理上接近其(在十埃內)時與DNA股中之任一者或兩者物理相互作用而改良CasX 515之整體裂解活性的變異體。
資料支援以下結論:在由圖34A-E、35A-E及36A-E中之熱圖鑑別之CTC或ATC PAM序列相關之序列處量測許多突變以改良裂解可分類為上文指定之兩種類型突變中之任一者。對於一型之突變,由在CTC PAM下測試之間隔子中之至少一者中具有較大富集分數之位置223之突變組成的變異體列於表21中,其中具有相關最大富集分數。對於二型之突變,較小的突變清單系統性地選自數千個富集變異體。為了鑑定彼等突變與CasX 515相比高度可能改良整體裂解活性,採取以下方法。首先,針對在CTC或ATM PAM間隔子中最一致地富集之突變過濾突變。定義各間隔子之各突變之富集分數的下限(LB)。LB定義為跨越生物一式三份的組合log
2富集分數減去個別複本之log
2富集分數的標準差。第二,獲取此等突變之子集,其中對於三個獨立實驗資料集中至少兩個LB>1 (一個ATC PAM選擇及兩個CTC PAM選擇)。第三,藉由排除在三個TTC PAM選擇中之任一者中量測陰性log
2富集的突變來進一步減少此突變子集。最後,在至少一個實驗中,基於結構特徵之組合及強富集分數手動選擇個別突變。符合此等準則之所得274個突變與來自圖34A-E、35A-E及36A-E之熱圖中表示的兩個CTC或一個ATC PAM實驗的最大觀測到的log
2富集分數以及突變所位於之域一起列於表22中。
相比於I類突變,存在另一類別之突變,如藉由間隔序列(稱為II類)所測定,提高CasX RNP在基因體DNA中之靶上與脫靶位點之間的區別之能力,其提高CasX蛋白之核酸酶活性之間隔子特異性。進行兩個其他實驗以特異性鑑別II類突變,其中此等實驗由質體反選擇組成且產生富集分數,該等富集分數表示所產生變異體與CasX 515相比對導引RNA與預定目標DNA之間隔序列之間的單一錯配之敏感性。針對所有觀測到之突變跨越實驗資料對所得富集分數分級,且進行以下分析以鑑別可能改良CasX蛋白之間隔子特異性而實質上不降低所需靶上位點處之核酸酶活性的突變子集。首先,使用間隔子23.2藉由其跨越三個技術複本之平均富集分數對來自篩選5之突變進行分級。移除物理接近核苷酸錯配之彼等突變,如自發佈之結合於目標位點(PDB ID: 6NY2)之CasX RNP模型所推斷,以捨棄僅可賦予對間隔子23.2之特異性之改良而非普遍跨間隔子的彼等II類突變。最後,若此等II類突變在靶上TTC PAM位點處之裂解活性受到突變不利影響,則若其來自三個TTC PAM CcdB選擇之平均log2富集小於零,則丟棄該等突變。滿足此等細菌之所得突變,以及來自篩選5及突變所位於之域的所觀測到之log
2富集分數列於表23中。另外,自反選擇實驗篩選6鑑別II類突變。此等突變藉由其平均富集分數類似地分級,但應用不同過濾步驟。特定言之,自以下類別中之每一者鑑別出突變:具有來自間隔子23.2、間隔子23.11或間隔子23.13之最高平均富集分數之彼等;具有來自間隔子23.2及間隔子23.11之最高組合平均富集分數之彼等;具有來自間隔子23.11及間隔子23.13之最高組合平均富集分數之彼等;或具有來自篩選5中之間隔子23.2及篩選6中之間隔子23.2之最高組合富集平均分數之彼等。此等所得突變,以及來自篩選6及突變所位於之域的所觀測到之log
2富集分數列於表23中。
除了I類或II類突變之外,亦存在另一類別的突變,已直接觀測到該等突變改良dsDNA在TTC PAM序列下之編輯活性。此等突變(稱為III類突變)藉助於展現在使用篩選7中之間隔子23.2靶向CcdB質體時大於CasX 515之富集分數展現經改良之核酸酶活性。計算過濾步驟用於鑑別備受關注之此等富集之突變的子集。特定言之,鑑別對於所測試之三種啟動子中之每一者具有大於零的跨越三個複本之平均富集值的突變。最後,使用跨越胺基酸序列之富集分數之特徵鑑別富集位置處之額外突變。感興趣之例示性特徵包括以下:在蛋白質域的連接處插入或缺失以促進拓樸改變;用胺基酸取代脯氨酸以扭接多肽主鏈;將胺基酸取代為帶正電胺基酸,以便在蛋白質及導引RNA或目標DNA的任一條鏈的帶負電核酸主鏈之間添加離子鍵結;胺基酸之缺失,其中連續缺失均為高度富集的;對一個含有許多高度富集取代之位置的取代;用胺基酸取代在蛋白質之最N端高度富集的胺基酸。此等所得突變,以及來自篩選6及突變所位於之域的所觀測到之log
2富集分數列於表24中。
表21:藉由與DNA之PAM核苷酸物理相互作用改良CTC PAM序列處之裂解活性的CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之突變
表22:自所有資料集系統地鑑別之CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之突變以提高ATC及CTC PAM序列處之裂解活性
表23:自所有資料集系統地鑑別之CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之突變以提高間隔子特異性
表24:自所有資料集系統地鑑別之CasX 515 (SEQ ID NO: 416)之突變以提高TTC PAM序列處之裂解活性
實例 15 : 當作為 RNP 遞送時細胞中之編輯上的間隔子長度之評估
位置 | 參考 | 替代 | Ccdb 選擇中觀測到之最大log 2 富集 | 域 |
223 | G | Y | 4.6 | 螺旋形I-II |
223 | G | N | 5.7 | 螺旋形I-II |
223 | G | H | 4.2 | 螺旋形I-II |
223 | G | S | 4.6 | 螺旋形I-II |
223 | G | T | 3.8 | 螺旋形I-II |
223 | G | A | 6.3 | 螺旋形I-II |
223 | G | V | 3.6 | 螺旋形I-II |
位置 | 參考 | 替代 | CcdB 選擇中觀測到之最大log 2 富集 | 域 |
3 | - | G | 3.0 | OBD-I |
3 | I | G | 3.5 | OBD-I |
3 | I | E | 4.5 | OBD-I |
4 | - | G | 2.5 | OBD-I |
4 | K | G | 2.5 | OBD-I |
4 | K | P | 3.1 | OBD-I |
4 | K | S | 3.3 | OBD-I |
4 | K | W | 2.8 | OBD-I |
5 | - | P | 3.5 | OBD-I |
5 | - | G | 3.1 | OBD-I |
5 | R | S | 3.7 | OBD-I |
5 | - | S | 2.2 | OBD-I |
5 | R | A | 3.2 | OBD-I |
5 | R | P | 3.6 | OBD-I |
5 | R | G | 3.2 | OBD-I |
5 | R | L | 2.7 | OBD-I |
6 | I | A | 3.3 | OBD-I |
6 | - | G | 3.7 | OBD-I |
7 | N | Q | 3.1 | OBD-I |
7 | N | L | 2.7 | OBD-I |
7 | N | S | 3.7 | OBD-I |
8 | K | G | 3.3 | OBD-I |
15 | K | F | 3.0 | OBD-I |
16 | D | W | 2.8 | OBD-I |
16 | - | F | 4.2 | OBD-I |
18 | - | F | 3.5 | OBD-I |
28 | M | H | 2.5 | OBD-I |
33 | V | T | 2.0 | OBD-I |
34 | R | P | 3.6 | OBD-I |
36 | M | Y | 2.4 | OBD-I |
41 | R | P | 2.2 | OBD-I |
47 | L | P | 2.2 | OBD-I |
52 | E | P | 3.2 | OBD-I |
55 | - | P | 2.7 | OBD-I |
55 | PQ | -- | 3.0 | OBD-I |
56 | Q | S | 1.9 | OBD-I |
56 | - | D | 2.5 | OBD-I |
56 | - | T | 2.8 | OBD-I |
56 | Q | P | 3.9 | OBD-I |
58 | - | A | 2.2 | 螺旋形I-I |
63 | R | S | 3.0 | 螺旋形I-I |
63 | R | Q | 2.7 | 螺旋形I-I |
72 | D | E | 2.7 | 螺旋形I-I |
81 | L | V | 2.8 | 螺旋形I-I |
81 | L | T | 2.7 | 螺旋形I-I |
85 | W | G | 3.2 | 螺旋形I-I |
85 | W | F | 2.7 | 螺旋形I-I |
85 | W | E | 2.9 | 螺旋形I-I |
85 | W | D | 3.1 | 螺旋形I-I |
85 | W | A | 2.8 | 螺旋形I-I |
85 | W | Q | 3.0 | 螺旋形I-I |
85 | W | R | 3.7 | 螺旋形I-I |
88 | F | M | 2.4 | 螺旋形I-I |
89 | Q | D | 2.5 | 螺旋形I-I |
93 | V | L | 1.9 | 螺旋形I-I |
109 | Q | P | 1.8 | NTSB |
115 | E | S | 1.8 | NTSB |
120 | G | D | 2.4 | NTSB |
133 | G | T | 2.2 | NTSB |
141 | L | A | 2.2 | NTSB |
168 | L | K | 3.1 | NTSB |
170 | A | Y | 2.7 | NTSB |
170 | A | S | 1.7 | NTSB |
175 | E | A | 2.0 | NTSB |
175 | E | D | 2.8 | NTSB |
175 | E | P | 3.8 | NTSB |
223 | G | - | 1.4 | 螺旋形I-II |
223 | G | S | 8.8 | 螺旋形I-II |
223 | G | T | 3.7 | 螺旋形I-II |
242 | S | T | 1.9 | 螺旋形I-II |
247 | I | T | 1.8 | 螺旋形I-II |
254 | V | T | 2.5 | 螺旋形I-II |
265 | L | Y | 1.9 | 螺旋形I-II |
288 | K | G | 4.2 | 螺旋形I-II |
288 | K | S | 4.0 | 螺旋形I-II |
291 | V | L | 2.6 | 螺旋形I-II |
303 | M | T | 2.3 | 螺旋形I-II |
303 | M | W | 2.7 | 螺旋形I-II |
328 | G | N | 3.3 | 螺旋形I-II |
331 | S | Q | 2.7 | 螺旋形I-II |
334 | - | A | 2.3 | 螺旋形II |
334 | LV | -- | 3.0 | 螺旋形II |
335 | V | E | 2.8 | 螺旋形II |
335 | V | Q | 2.7 | 螺旋形II |
335 | V | F | 2.5 | 螺旋形II |
335 | V | - | 3.2 | 螺旋形II |
336 | E | P | 2.9 | 螺旋形II |
336 | E | - | 3.1 | 螺旋形II |
336 | E | D | 2.7 | 螺旋形II |
336 | E | L | 2.4 | 螺旋形II |
336 | E | R | 2.7 | 螺旋形II |
337 | R | N | 2.5 | 螺旋形II |
338 | Q | V | 2.5 | 螺旋形II |
338 | - | Q | 3.0 | 螺旋形II |
339 | - | G | 2.6 | 螺旋形II |
341 | - | H | 2.9 | 螺旋形II |
341 | - | A | 2.0 | 螺旋形II |
342 | V | D | 2.7 | 螺旋形II |
342 | - | T | 2.3 | 螺旋形II |
342 | V | - | 3.0 | 螺旋形II |
342 | - | F | 2.5 | 螺旋形II |
343 | - | D | 3.3 | 螺旋形II |
343 | D | - | 2.0 | 螺旋形II |
344 | W | - | 3.1 | 螺旋形II |
344 | W | T | 2.8 | 螺旋形II |
344 | W | H | 2.8 | 螺旋形II |
344 | - | P | 3.0 | 螺旋形II |
344 | - | G | 2.6 | 螺旋形II |
345 | - | R | 3.2 | 螺旋形II |
345 | W | P | 3.1 | 螺旋形II |
345 | W | D | 2.3 | 螺旋形II |
345 | - | D | 2.9 | 螺旋形II |
345 | W | L | 2.3 | 螺旋形II |
346 | - | P | 2.4 | 螺旋形II |
346 | - | D | 2.9 | 螺旋形II |
347 | M | - | 2.6 | 螺旋形II |
348 | - | T | 3.3 | 螺旋形II |
350 | N | I | 2.3 | 螺旋形II |
351 | V | N | 2.8 | 螺旋形II |
351 | V | H | 3.1 | 螺旋形II |
352 | K | D | 2.2 | 螺旋形II |
354 | L | D | 3.1 | 螺旋形II |
355 | I | S | 2.6 | 螺旋形II |
357 | E | C | 2.1 | 螺旋形II |
357 | E | P | 2.8 | 螺旋形II |
358 | K | T | 2.8 | 螺旋形II |
359 | K | E | 2.7 | 螺旋形II |
363 | K | L | 3.3 | 螺旋形II |
363 | K | Y | 2.2 | 螺旋形II |
367 | Q | D | 2.8 | 螺旋形II |
367 | Q | P | 3.0 | 螺旋形II |
369 | - | S | 2.6 | 螺旋形II |
369 | LA | -- | 2.4 | 螺旋形II |
373 | K | L | 2.2 | 螺旋形II |
374 | - | R | 2.0 | 螺旋形II |
397 | Y | T | 2.5 | 螺旋形II |
400 | G | M | 2.0 | 螺旋形II |
402 | L | V | 2.4 | 螺旋形II |
403 | L | C | 2.3 | 螺旋形II |
404 | L | D | 2.5 | 螺旋形II |
404 | L | N | 2.5 | 螺旋形II |
404 | L | W | 2.3 | 螺旋形II |
404 | L | Y | 2.1 | 螺旋形II |
407 | E | F | 2.6 | 螺旋形II |
407 | E | L | 2.2 | 螺旋形II |
407 | E | Y | 2.6 | 螺旋形II |
411 | G | P | 2.6 | 螺旋形II |
411 | - | E | 3.2 | 螺旋形II |
413 | - | T | 2.7 | 螺旋形II |
413 | - | R | 2.4 | 螺旋形II |
413 | - | W | 3.0 | 螺旋形II |
413 | - | Y | 3.7 | 螺旋形II |
414 | - | W | 2.6 | 螺旋形II |
414 | - | Y | 3.1 | 螺旋形II |
414 | W | G | 3.0 | 螺旋形II |
414 | W | R | 2.6 | 螺旋形II |
416 | K | D | 2.7 | 螺旋形II |
416 | K | H | 2.0 | 螺旋形II |
416 | K | P | 2.6 | 螺旋形II |
416 | K | T | 2.3 | 螺旋形II |
417 | V | L | 2.6 | 螺旋形II |
417 | V | A | 2.5 | 螺旋形II |
418 | Y | C | 2.7 | 螺旋形II |
419 | D | G | 3.2 | 螺旋形II |
419 | D | M | 2.4 | 螺旋形II |
419 | D | P | 2.4 | 螺旋形II |
425 | I | C | 2.2 | 螺旋形II |
427 | K | T | 2.4 | 螺旋形II |
428 | K | R | 2.5 | 螺旋形II |
430 | E | G | 1.9 | 螺旋形II |
432 | L | A | 1.9 | 螺旋形II |
434 | K | H | 2.2 | 螺旋形II |
436 | I | T | 2.4 | 螺旋形II |
436 | I | S | 3.0 | 螺旋形II |
436 | I | Q | 2.7 | 螺旋形II |
437 | K | D | 3.1 | 螺旋形II |
442 | R | D | 2.5 | 螺旋形II |
442 | R | - | 2.7 | 螺旋形II |
446 | D | E | 2.3 | 螺旋形II |
446 | - | D | 2.3 | 螺旋形II |
450 | K | P | 2.3 | 螺旋形II |
452 | A | R | 2.0 | 螺旋形II |
453 | L | T | 3.2 | 螺旋形II |
456 | W | L | 2.2 | 螺旋形II |
457 | L | C | 2.2 | 螺旋形II |
459 | A | L | 2.0 | 螺旋形II |
461 | A | T | 2.7 | 螺旋形II |
461 | A | K | 2.1 | 螺旋形II |
465 | I | E | 3.1 | 螺旋形II |
465 | - | C | 2.9 | 螺旋形II |
466 | - | S | 3.5 | 螺旋形II |
466 | - | G | 2.5 | 螺旋形II |
467 | - | R | 2.4 | 螺旋形II |
467 | G | P | 2.0 | 螺旋形II |
468 | L | K | 3.6 | 螺旋形II |
468 | L | D | 3.2 | 螺旋形II |
468 | L | S | 3.0 | 螺旋形II |
468 | L | H | 3.3 | 螺旋形II |
470 | E | - | 2.4 | 螺旋形II |
472 | D | R | 2.2 | 螺旋形II |
472 | - | D | 2.4 | 螺旋形II |
473 | - | P | 2.6 | 螺旋形II |
474 | - | D | 2.7 | 螺旋形II |
475 | EF | -- | 2.8 | 螺旋形II |
475 | - | Q | 2.7 | 螺旋形II |
476 | F | K | 2.8 | 螺旋形II |
476 | F | - | 2.2 | 螺旋形II |
477 | - | G | 2.8 | 螺旋形II |
479 | C | D | 3.1 | 螺旋形II |
480 | - | V | 2.2 | 螺旋形II |
480 | E | D | 2.3 | 螺旋形II |
481 | - | H | 2.2 | 螺旋形II |
481 | L | R | 2.9 | 螺旋形II |
482 | K | R | 2.1 | 螺旋形II |
483 | L | H | 2.7 | 螺旋形II |
484 | Q | C | 2.1 | 螺旋形II |
485 | K | P | 3.0 | 螺旋形II |
490 | L | S | 2.8 | 螺旋形II |
498 | E | L | 2.1 | 螺旋形II |
499 | - | F | 1.6 | 螺旋形II |
511 | K | T | 6.8 | OBD-II |
524 | - | P | 2.4 | OBD-II |
553 | - | S | 2.4 | OBD-II |
558 | - | R | 1.9 | OBD-II |
570 | M | T | 2.7 | OBD-II |
582 | I | T | 1.9 | OBD-II |
592 | Q | I | 2.1 | OBD-II |
592 | Q | F | 2.8 | OBD-II |
592 | Q | V | 2.0 | OBD-II |
592 | Q | A | 2.9 | OBD-II |
641 | - | R | 2.3 | OBD-II |
643 | - | D | 2.7 | OBD-II |
644 | - | W | 2.5 | OBD-II |
645 | - | A | 2.4 | OBD-II |
650 | - | I | 2.5 | RuvC-I |
651 | - | S | 2.4 | RuvC-I |
652 | - | T | 2.4 | RuvC-I |
652 | - | N | 2.3 | RuvC-I |
653 | - | R | 2.3 | RuvC-I |
653 | - | K | 2.2 | RuvC-I |
654 | - | H | 2.2 | RuvC-I |
654 | - | S | 2.3 | RuvC-I |
658 | V | L | 1.9 | RuvC-I |
695 | G | W | 1.4 | RuvC-I |
695 | G | R | 3.5 | RuvC-I |
708 | K | S | 3.0 | RuvC-I |
708 | K | T | 2.9 | RuvC-I |
708 | K | E | 3.1 | RuvC-I |
711 | V | A | 1.6 | RuvC-I |
726 | K | E | 2.0 | RuvC-I |
729 | N | G | 2.8 | RuvC-I |
736 | R | H | 2.7 | RuvC-I |
736 | R | G | 2.4 | RuvC-I |
771 | M | S | 3.7 | RuvC-I |
771 | M | A | 3.3 | RuvC-I |
792 | L | F | 2.5 | RuvC-I |
868 | V | D | 1.9 | TSL |
877 | - | A | 2.0 | TSL |
886 | T | E | 1.8 | TSL |
886 | T | D | 2.5 | TSL |
886 | T | N | 1.6 | TSL |
888 | G | D | 2.5 | TSL |
890 | S | - | 3.0 | TSL |
891 | G | - | 2.7 | TSL |
892 | - | E | 2.0 | TSL |
892 | - | N | 2.9 | TSL |
895 | S | I | 1.7 | TSL |
908 | E | D | 1.7 | TSL |
932 | S | M | 2.5 | RuvC-II |
932 | S | V | 2.6 | RuvC-II |
944 | - | L | 1.4 | RuvC-II |
947 | - | G | 1.9 | RuvC-II |
949 | T | - | 1.9 | RuvC-II |
951 | G | I | 3.7 | RuvC-II |
位置 | 參考 | 替代 | 在反選擇中觀測到之最大log 2 富集 | 域 |
6 | I | L | 2.25 | OBD-I |
48 | - | P | 2 | OBD-I |
87 | - | G | 3.96 | 螺旋形I-I |
90 | K | V | 4.84 | 螺旋形I-I |
155 | F | V | 2.13 | NTSB |
215 | - | T | 2.03 | 螺旋形I-II |
216 | - | C | 3.03 | 螺旋形I-II |
220 | Y | F | 2.1 | 螺旋形I-II |
264 | S | H | 3.16 | 螺旋形I-II |
329 | - | Q | 2.71 | 螺旋形I-II |
343 | D | S | 2.69 | 螺旋形II |
346 | DM | -- | 2.96 | 螺旋形II |
349 | - | P | 2.06 | 螺旋形II |
357 | - | G | 2.11 | 螺旋形II |
375 | QE | -- | 2.34 | 螺旋形II |
378 | L | N | 2.38 | 螺旋形II |
389 | K | Q | 2.29 | 螺旋形II |
417 | - | L | 2.75 | 螺旋形II |
441 | E | L | 2.36 | 螺旋形II |
458 | R | D | 2.2 | 螺旋形II |
459 | A | E | 2.65 | 螺旋形II |
476 | FC | -- | 2.34 | 螺旋形II |
503 | IL | -- | 2.15 | OBD-II |
537 | K | G | 2.85 | OBD-II |
621 | L | T | 2.45 | OBD-II |
624 | - | A | 3 | OBD-II |
783 | L | Y | 2.08 | RuvC-I |
783 | - | P | 2.6 | RuvC-I |
787 | L | - | 2.49 | RuvC-I |
787 | L | R | 3.58 | RuvC-I |
787 | L | D | 5.58 | RuvC-I |
788 | - | Q | 2.65 | RuvC-I |
789 | - | R | 2.5 | RuvC-I |
789 | - | N | 2.71 | RuvC-I |
790 | E | N | 2.45 | RuvC-I |
792 | - | P | 2.85 | RuvC-I |
793 | P | A | 2.93 | RuvC-I |
795 | K | Q | 2.45 | RuvC-I |
796 | T | V | 2.75 | RuvC-I |
798 | - | R | 4.07 | RuvC-I |
799 | - | H | 2.79 | RuvC-I |
801 | T | Q | 3.16 | RuvC-I |
801 | - | H | 3.34 | RuvC-I |
801 | - | R | 2.86 | RuvC-I |
802 | - | L | 2.88 | RuvC-I |
802 | L | - | 2.87 | RuvC-I |
802 | - | W | 3.08 | RuvC-I |
803 | - | A | 3.19 | RuvC-I |
803 | - | F | 3.14 | RuvC-I |
803 | A | S | 5.79 | RuvC-I |
804 | Q | K | 3.05 | RuvC-I |
805 | Y | - | 3.29 | RuvC-I |
806 | T | Y | 3.07 | RuvC-I |
806 | T | F | 2.49 | RuvC-I |
807 | - | I | 3.21 | RuvC-I |
807 | S | P | 2.61 | RuvC-I |
809 | T | P | 3.2 | RuvC-I |
809 | - | N | 3.1 | RuvC-I |
810 | C | K | 3.19 | RuvC-I |
810 | C | M | 3.08 | RuvC-I |
811 | - | M | 2.51 | TSL |
812 | N | - | 3.07 | TSL |
812 | - | V | 2.68 | TSL |
813 | C | S | 2.3 | TSL |
814 | - | G | 3.15 | TSL |
814 | - | W | 3.04 | TSL |
815 | F | P | 3.09 | TSL |
817 | - | W | 2.87 | TSL |
828 | K | G | 1.99 | TSL |
906 | V | C | 2.01 | TSL |
位置 | 參考 | 替代 | Ccdb 選擇中觀測到之最大 log 2 富集 | 域 |
4 | K | W | 3.51 | OBD-I |
5 | R | P | 4.01 | OBD-I |
27 | - | P | 4.69 | OBD-I |
28 | M | P | 3.69 | OBD-I |
56 | Q | P | 3.78 | OBD-I |
85 | W | A | 3.96 | 螺旋形I-I |
102 | - | G | 4.75 | NTSB |
104 | - | I | 4.43 | NTSB |
104 | - | L | 4.52 | NTSB |
130 | S | - | 4.02 | NTSB |
151 | Y | T | 3.46 | NTSB |
168 | L | D | 3.32 | NTSB |
168 | L | E | 4.08 | NTSB |
188 | K | Q | 4.96 | NTSB |
190 | G | Q | 4.1 | NTSB |
223 | G | - | 1.63 | 螺旋形I-II |
235 | G | L | 4.64 | 螺旋形I-II |
235 | G | H | 4.97 | 螺旋形I-II |
239 | S | H | 3.93 | 螺旋形I-II |
239 | S | T | 4.97 | 螺旋形I-II |
245 | Q | H | 5 | 螺旋形I-II |
288 | K | D | 5.08 | 螺旋形I-II |
288 | K | E | 4.79 | 螺旋形I-II |
303 | M | R | 3.71 | 螺旋形I-II |
303 | M | K | 3.29 | 螺旋形I-II |
307 | L | K | 3.55 | 螺旋形I-II |
328 | G | R | 3.91 | 螺旋形I-II |
328 | G | K | 4.58 | 螺旋形I-II |
334 | - | H | 5.65 | 螺旋形II |
335 | - | D | 5.5 | 螺旋形II |
335 | V | P | 5.1 | 螺旋形II |
345 | - | Q | 5.22 | 螺旋形II |
441 | - | K | 5.07 | 螺旋形II |
477 | C | R | 2.94 | 螺旋形II |
477 | C | K | 3.49 | 螺旋形II |
502 | S | - | 4.04 | OBD-II |
503 | I | R | 3.72 | OBD-II |
503 | I | K | 未偵測到 | OBD-II |
504 | L | - | 4.24 | OBD-II |
542 | R | E | 4.54 | OBD-II |
563 | K | - | 3.25 | OBD-II |
593 | - | A | 1.83 | OBD-II |
610 | K | Q | 3.46 | OBD-II |
615 | R | Q | 3.67 | OBD-II |
643 | - | A | 2.42 | OBD-II |
697 | S | R | 2.67 | RuvC-I |
697 | S | K | 2.55 | RuvC-I |
906 | V | T | 4.65 | TSL |
實驗目的為確定間隔子(靶向序列)長度對藉由CasX及胞內遞送之導引物之RNP編輯目標核酸之影響。
如上文所描述純化CasX變異體491。具有支架174之導引RNA藉由活體外轉錄(IVT)製備。IVT模板由PCR根據建議方案使用Q5聚合酶(NEB M0491)、各支架主鏈之模板寡核苷酸及具有T7啟動子及15.3 (CAAACAAATGTGTCACAAAG,SEQ ID NO: 165)或15.5 (GGAATAATGCTGTTGTTGAA,SEQ ID NO: 166)間隔子之擴增引子在全長(20個核苷酸)或藉由來自各別間隔子(表26中之序列)之3'端的一或兩個核苷酸截短來產生。用於產生IVT模板之引子的序列展示於表25中。根據標準方案,所得模板接著與T7 RNA聚合酶一起使用以產生RNA導引物。使用變性聚丙烯醯胺凝膠電泳純化導引物且在使用之前再摺疊。藉由將蛋白質與1.2倍莫耳過量之導引物在含有25 mM磷酸鈉緩衝液(pH 7.25)、300 mM NaCl、1 mM MgCl2及200 mM海藻糖之緩衝液中混合來裝配個別RNP。將RNP在37℃下培育10分鐘,且隨後經由尺寸排阻層析純化且交換成含有25 mM磷酸鈉緩衝液(pH 7.25)、150 mM NaCl、1 mM MgCl2及200 mM海藻糖(緩衝液1)之緩衝液。在純化之後使用Pierce 660 nm蛋白質分析測定RNP之濃度。
測試純化RNP在Jurkat細胞中之T細胞受體α (TCRα)基因座處之編輯。藉由電穿孔使用龍沙4-D核轉染器系統遞送RNP。將700,000個細胞再懸浮於20 μL龍沙緩衝液SE中且添加至在緩衝液1中稀釋之RNP中至適當濃度及2 μL之最終體積。使用龍沙96孔穿梭系統,使用方案CL-120使細胞電穿孔。在37℃下在預平衡RPMI中回收細胞,且接著將各電穿孔條件分成96孔盤之三個孔。在核轉染之後一天,將細胞交換至新鮮RPMI中。在核轉染後三天,細胞用Alexa Fluor 647標記之針對TCRα/β (BioLegend)之抗體染色且使用Attune Nxt流式細胞儀評估表面TCRα/β之損失。一部分Jurkat細胞在無編輯存在下不對TCRα/β染色呈陽性。為了對此作出解釋且估計經由編輯剔除TCRα之細胞的實際百分比,應用式TCR
KO=(TCR-
obs-TCR-
neg)/(1-TCR-
neg),其中TCR
KO為TCRα之估測剔除比率,TCR-
obs為實驗樣品中TCR染色呈陰性之細胞的觀測部分,且TCR-
neg為無RNP對照樣品中TCR染色呈陰性之細胞的部分。此公式假定並不表現TCRα/β之細胞以相同速率編輯。使用Prism針對RNP之濃度繪製經校正之TCRα剔除細胞部分。對於各間隔子,使用除EC50以外之共用參數,三個間隔子長度符合劑量反應曲線。報導p值為20-nt間隔子之劑量曲線及比較截短間隔子之劑量曲線可藉由相同EC50參數建模的機率。
表25:用於產生IVT模板之寡核苷酸
表26:間隔子序列
構築體 | DNA序列 |
支架174模板正向 | GAAATTAATACGACTCACTATAACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCT (SEQ ID NO: 1088) |
支架174模板反向 | CTTTGATGCTCCCTCCGAAGAGGGAGCTTTACCCACTACGACATAGTCGC (SEQ ID NO: 1089) |
T7擴增引子 | GAAATTAATACGACTCACTATA (SEQ ID NO: 169) |
15.3 20-nt間隔子引子 | CTTTGTGACACATTTGTTTGCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1093) |
15.3 19-nt間隔子引子 | TTTGTGACACATTTGTTTGCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1094) |
15.3 18-nt間隔子引子 | TTGTGACACATTTGTTTGCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1095) |
15.5 20-nt間隔子引子r | TTCAACAACAGCATTATTCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1096) |
15.5 19-nt間隔子引子 | TCAACAACAGCATTATTCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1097) |
15.5 18-nt間隔子引子 | CAACAACAGCATTATTCCCTTTGATGCTCCCTCC (SEQ ID NO: 1098) |
構築體 | RNA序列 |
15.3 20-nt間隔子 | CAAACAAAUGUGUCACAAAG (SEQ ID NO: 1099) |
15.3 19-nt間隔子 | CAAACAAAUGUGUCACAAA (SEQ ID NO: 1100) |
15.3 18-nt間隔子 | CAAACAAAUGUGUCACAA (SEQ ID NO: 1101) |
15.5 20-nt間隔子 | GGAAUAAUGCUGUUGUUGAA (SEQ ID NO: 1102) |
15.5 19-nt間隔子 | GGAAUAAUGCUGUUGUUGA (SEQ ID NO: 1103) |
15.5 18-nt間隔子 | GGAAUAAUGCUGUUGUUG (SEQ ID NO: 1104) |
結果:使用CasX變異體491及由具有間隔子15.3或15.5之支架174構成之導引物裝配CasX RNP,二者靶向TCRα基因之恆定區。測試具有全長20-nt間隔子以及截短19-nt及18-nt間隔子之導引物以確定在預裝配之RNP經核轉染用於離體編輯時是否使用支援增加編輯之較短間隔子。在22 μL核轉染反應中以在0.3125 μM至2.5 μM範圍內之2倍稀釋液測試RNP。在核轉染之後三天藉由流動式細胞測量術評定編輯。對於兩個間隔子序列,具有截短間隔子之RNP基本上比具有跨越劑量範圍之20-nt間隔子的彼等RNP更有效地編輯(圖37A-B,劑量反應曲線)。對於間隔子15.3,與對於20-nt間隔子之1.414 μM (二者截短之p<0.0001;額外平方和F測試)相比,18-nt及19-nt間隔子之EC50值分別為0.225 μM及0.299 μM。對於間隔子15.5,18-nt間隔子之EC50為0.519 μM,而20-nt間隔子之EC50為0.938 μM (p=0.0001),而19-nt間隔子更類似於20-nt間隔子,其中EC50為0.808 μM (p=0.0762)。儘管實情為19-nt 15.3間隔子具有類似於18-nt間隔子之編輯,而19-nt 15.5間隔子更緊密類似於所測試之兩個間隔子之對應20-nt間隔子,然而,趨勢方向保持恆定且表明,當CasX編輯分子作為預裝配之RNP遞送時,使用具有18-nt間隔子之導引物可為用於增加編輯之普遍適用的策略,且表明與具有20個鹼基之間隔子相比,具有18或19個鹼基之較短間隔子支援活性增加。
實例 16 : 分析鑑別具有新穎 PAM 序列特異性之 CasX 蛋白變異體
實驗之目的為鑑別CasX蛋白515 (SEQ ID NO: 416)之序列變異體的PAM序列特異性。為了實現此目的,用CasX蛋白491 (SEQ ID NO: 336)或515或515之變異體以及導引件174 (SEQ ID NO: 2238)處理HEK293細胞株PASS_V1.01且進行下一代定序(NGS)以計算多種間隔子及相關目標位點之編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體。簡言之,產生彙集HEK細胞株且稱為PASS_V1.01。池內之各細胞含有與特定目標位點配對之基因體整合單導引RNA (sgRNA)。在轉染蛋白質表現構築體之後,藉由特異性間隔子在特異性目標處編輯可藉由NGS定量。各導引-目標對設計成提供與CasX導引RNP複合物之活性、特異性及可靶向性相關的資料。
藉由Twist Biosciences合成配對之間隔子目標序列且獲得為等莫耳量之寡核苷酸。此池藉由PCR擴增且藉由Golden Gate選殖來產生命名為p77之質體的最終庫。各質體含有sgRNA表現元件及目標位點以及GFP表現元件。sgRNA表現元件由驅動gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)轉錄之U6啟動子組成,隨後為間隔序列,其將使導引物及CasX變異體之RNP靶向成對目標位點。設計及合成250種可能的獨特配對間隔子-目標合成序列。慢病毒庫隨後根據製造商說明書使用LentiX生產系統(Takara Bio USA, Inc)自此質體庫產生。隨後藉由qPCR定量所得病毒製劑且以低感染倍率轉導至標準HEK293細胞株中以便產生單一複本整合。所得細胞株隨後藉由螢光活化細胞分選(FACS)純化以完成PASS_V1.01之生產。接著以六孔盤格式接種此細胞株且用水一式兩份處理或用2 μg質體p67轉染,根據製造商說明書藉由脂質體轉染劑(賽默飛世爾)遞送。質體p67含有驅動經SV40核定位序列標記之CasX蛋白之表現的EF-1a啟動子。兩天之後,收集經處理之PASS_V1.01細胞,裂解且使用基因體DNA分離套組提取基因體DNA (Zymo研究)。基因體DNA隨後用定製引子進行PCR擴增以產生與Illumina NGS相容的擴增子且在NextSeq儀器上定序。將樣品讀數分用且過濾以獲得品質。隨後在經處理之樣品中定量各間隔子-目標合成序列之編輯結果度量值(具有插入缺失之讀數部分)。
為了評定分子之PAM序列特異性,對四種不同PAM序列之編輯結果度量值進行分類。對於TTC PAM目標位點,對48個不同間隔子-目標對進行定量;對於ATC、CTC及GTC PAM目標位點,分別對14、22及11個個別目標位點進行定量。計算此等間隔子中之每一者的兩個生物複本之平均編輯效率及平均值之標準誤差。亦計算跨越四類PAM序列之平均編輯效率,以及平均值之標準誤差。
結果:表27列出以CasX蛋白變異體515為目標時上文所描述之間隔子之平均編輯效率,計算為兩個實驗之平均值。指示間隔子名稱及相關PAM序列。表28列出CasX蛋白變異體534之相同資料。另外,計算四個類別PAM序列中之每一者的平均編輯效率。
表27:具有與TTC、ATC、CTC或GTC之PAM序列相關之間隔子的CasX 515的平均編輯
表28:在與TTC、ATC、CTC或GTC之PAM序列相關之間隔子處的CasX 534的平均編輯
間隔子名稱 | TTC PAM 平均編輯百分比 | ATC PAM 平均編輯百分比 | CTC PAM 平均編輯百分比 | GTC PAM 平均編輯百分比 |
Rho_11.2 | 32.60 | 3.03 | 0.00 | 4.01 |
Rho_11.24 | 44.61 | 0.49 | 2.55 | 0.13 |
SOD1_8.89 | 18.29 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
SOD1_8.57 | 25.65 | 6.34 | 9.01 | 2.52 |
DMD_16.30 | 36.53 | 3.24 | 0.68 | 1.07 |
DMD_16.32 | 33.76 | 1.20 | 0.01 | 2.21 |
BCL11A_21.1 | 38.17 | 5.19 | 11.24 | 22.85 |
PCSK9_6.8 | 28.94 | 5.48 | 9.84 | 2.35 |
B2M_7.37 | 48.25 | 4.31 | 3.27 | 4.24 |
CD70_26.3 | 23.89 | 1.71 | 4.96 | 0.33 |
DMD_16.29 | 1.29 | - | - | - |
DMD_16.31 | 21.69 | - | - | - |
HTT_5.1 | 32.77 | - | - | - |
DMPK_20.7 | 19.89 | - | - | - |
B2M_7.9 | 42.44 | - | - | - |
CD70_26.5 | 27.52 | - | - | - |
FSHD_25.1 | 17.74 | - | - | - |
PMP22_18.22 | 19.65 | - | - | - |
PTBP1_28.1 | 4.00 | - | - | - |
VCV000162497_alt | 11.40 | - | - | - |
VCV000037426_alt | 7.00 | - | - | - |
VCV000052759_alt | 13.14 | - | - | - |
VCV000031157_alt | 0.00 | - | - | - |
VCV000217157_alt | 17.94 | - | - | - |
VCV000048146_alt | 18.05 | - | - | - |
VCV000039614_alt | 33.14 | - | - | - |
VCV000217646_alt | 37.75 | - | - | - |
VCV000408199_alt | 27.21 | - | - | - |
VCV000431973_alt | 16.05 | - | - | - |
VCV000004193_alt | 2.85 | - | - | - |
VCV000003920_alt | 34.92 | - | - | - |
VCV000224616_alt | 36.90 | - | - | - |
VCV000004787_alt | 34.83 | - | - | - |
VCV000013115_alt | 26.04 | - | - | - |
VCV000195355_alt | 32.05 | - | - | - |
VCV000190123_alt | 36.17 | - | - | - |
VCV000048535_alt | 21.74 | - | - | - |
VCV000468648_alt | 49.12 | - | - | - |
VCV000000908_alt | 32.78 | - | - | - |
VCV000066016_alt | 20.45 | - | - | - |
VCV000184702_alt | 14.97 | - | - | - |
VCV000003825_alt | 27.40 | - | - | - |
VCV000014243_alt | 32.03 | - | - | - |
VCV000046102_alt | 41.95 | - | - | - |
VCV000050962_alt | 47.92 | - | - | - |
VCV000011908_alt | 38.86 | - | - | - |
VCV000252575_alt | 24.77 | - | - | - |
SOD1_G93A_alt | 22.54 | - | - | - |
C9orf72_29.1 | - | 20.52 | - | - |
VCV000092361_alt | - | 6.13 | - | - |
VCV000096602_alt | - | 0.56 | - | - |
DUX4_25.3_alt | - | 4.02 | - | - |
VCV000012379_alt | - | - | 0.52 | - |
VCV000067838_alt | - | - | 0.64 | - |
VCV000246282_alt | - | - | 0.00 | - |
VCV000000157_alt | - | - | 2.01 | - |
VCV000550954_alt | - | - | 1.58 | - |
VCV000189075_alt | - | - | 4.63 | - |
VCV000006756_alt | - | - | 2.61 | - |
VCV000100629_alt | - | - | 3.39 | - |
VCV000372498_alt | - | - | 2.97 | - |
VCV000002019_alt | - | - | 1.56 | - |
HTT_slot_1_alt | - | - | 3.13 | - |
HTT_slot_2_alt | - | - | 0.00 | - |
HTT_slot_3_alt | - | - | - | 2.00 |
間隔子名稱 | TTC PAM 平均編輯百分比 | ATC PAM 平均編輯百分比 | CTC PAM 平均編輯百分比 | GTC PAM 平均編輯百分比 |
Rho_11.2 | 0.70 | 0.24 | 0.25 | 8.00 |
Rho_11.24 | 2.49 | 3.16 | 5.29 | 11.50 |
SOD1_8.89 | 0.06 | 0.04 | 0.00 | 0.00 |
SOD1_8.57 | 12.46 | 8.04 | 6.30 | 17.45 |
DMD_16.30 | 0.14 | 4.80 | 0.93 | 6.86 |
DMD_16.32 | 0.60 | 0.58 | 0.02 | 1.64 |
BCL11A_21.1 | 3.28 | 10.46 | 17.16 | 38.28 |
PCSK9_6.8 | 1.73 | 7.44 | 11.18 | 29.00 |
B2M_7.37 | 1.48 | 19.34 | 6.92 | 5.26 |
CD70_26.3 | 0.08 | 3.13 | 8.24 | 12.89 |
DMD_16.29 | 0.02 | - | - | - |
DMD_16.31 | 0.11 | - | - | - |
HTT_5.1 | 0.80 | - | - | - |
DMPK_20.7 | 0.37 | - | - | - |
B2M_7.9 | 8.14 | - | - | - |
CD70_26.5 | 5.92 | - | - | - |
FSHD_25.1 | 0.27 | - | - | - |
PMP22_18.22 | 0.07 | - | - | - |
PTBP1_28.1 | 0.03 | - | - | - |
VCV000162497_alt | 0.03 | - | - | - |
VCV000037426_alt | 3.75 | - | - | - |
VCV000052759_alt | 0.00 | - | - | - |
VCV000031157_alt | 48.50 | - | - | - |
VCV000217157_alt | 2.26 | - | - | - |
VCV000048146_alt | 0.14 | - | - | - |
VCV000039614_alt | 0.27 | - | - | - |
VCV000217646_alt | 0.72 | - | - | - |
VCV000408199_alt | 0.59 | - | - | - |
VCV000431973_alt | 0.13 | - | - | - |
VCV000004193_alt | 0.01 | - | - | - |
VCV000003920_alt | 1.40 | - | - | - |
VCV000224616_alt | 0.20 | - | - | - |
VCV000004787_alt | 0.35 | - | - | - |
VCV000013115_alt | 0.00 | - | - | - |
VCV000195355_alt | 0.05 | - | - | - |
VCV000190123_alt | 0.68 | - | - | - |
VCV000048535_alt | 1.10 | - | - | - |
VCV000468648_alt | 2.69 | - | - | - |
VCV000000908_alt | 0.86 | - | - | - |
VCV000066016_alt | 0.00 | - | - | - |
VCV000184702_alt | 0.02 | - | - | - |
VCV000003825_alt | 1.40 | - | - | - |
VCV000014243_alt | 0.94 | - | - | - |
VCV000046102_alt | 0.66 | - | - | - |
VCV000050962_alt | 0.08 | - | - | - |
VCV000011908_alt | 1.05 | - | - | - |
VCV000252575_alt | 1.41 | - | - | - |
SOD1_G93A_alt | 5.13 | - | - | - |
C9orf72_29.1 | - | 17.85 | - | - |
VCV000092361_alt | - | 1.82 | - | - |
VCV000096602_alt | - | 1.22 | - | - |
DUX4_25.3_alt | - | 5.50 | - | - |
VCV000012379_alt | - | - | 1.32 | - |
VCV000067838_alt | - | - | 0.88 | - |
VCV000246282_alt | - | - | 0.00 | - |
VCV000000157_alt | - | - | 3.17 | - |
VCV000550954_alt | - | - | 3.12 | - |
VCV000189075_alt | - | - | 4.87 | - |
VCV000006756_alt | - | - | 2.53 | - |
VCV000100629_alt | - | - | 2.60 | - |
VCV000372498_alt | - | - | 3.67 | - |
VCV000002019_alt | - | - | 3.86 | - |
HTT_slot_1_alt | - | - | 4.53 | - |
HTT_slot_2_alt | - | - | 0.03 | - |
HTT_slot_3_alt | - | - | - | 4.21 |
圖38為展示PAM類別及CasX蛋白變異體之平均編輯效率的條形圖,其中兩個實驗之平均值之標準誤差繪製為誤差條。此等資料指示CasX 491及515均對典型PAM序列TTC具有特異性,而CasX之其他變異體在所測試之PAM序列上表現得或多或少有效。特定言之,觀測到在CasX位置223處經取代之不同胺基酸有利於緊鄰PAM核苷酸序列之5'位置處的不同鹼基。列出具有最高編輯活性之CasX變異體用於表29中之此等四種PAM序列中之每一者。對於指定PAM序列,相對於CasX 515,指定變異體名稱及胺基酸取代以及編輯倍數改良。此等資料表明,在此位置處之胺基酸側鏈之身分對於PAM識別至關重要。可能四個核苷酸中之每一者與此CasX蛋白區域中之鍵或化學環境之不同網路最互補。此等資料可用於對感興趣之目標DNA序列之近似活性治療性CasX分子進行工程化。
在實驗條件下,鑑別在與序列TTC、ATC、CTC或GTC之PAM相關之目標DNA序列處人類細胞中雙股DNA裂解改良之一組CasX蛋白515變異體,其支援相對於野生型CasX可產生具有增加之PAM特異性光譜的CasX變異體。
表29:在NTC PAM序列處改良裂解活性之CasX 515的突變
實例 17 : PASS 分析比較在 TTC 、 ATC 、 CTC 或 GTC 之 PAM 序列處具有改良之編輯效率的 CasX 蛋白變異體
CasX 蛋白 | 位置 | 參考 | 替代 | PAM 序列 | 相對於 515 之改良倍數 |
515 | 223 | G | N/A | TTC | 1.0 |
528 | 223 | G | Y | ATC | 6.7 |
535 | 223 | G | S | CTC | 5.2 |
534 | 223 | G | H | GTC | 3.2 |
實驗的目的為利用CasX蛋白2 (SEQ ID NO: 2)之工程化及新穎變異體比較人類細胞中之基因體編輯效率。為了實現此目的,用野生型參考CasX蛋白2或工程化變異體119 (SEQ ID NO: 270)、491 (SEQ ID NO: 336)及515 (SEQ ID NO: 416)或515之序列變異體處理HEK293細胞株PASS_V1.00,且進行下一代定序(NGS)以計算多種間隔子及相關目標位點之編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體。簡言之,產生彙集HEK細胞株且稱為PASS_V1.00。池內之各細胞含有與特異性目標位點配對之基因體整合單導引RNA (sgRNA; SEQ ID NO: 2238)。在轉染蛋白質表現構築體之後,藉由特異性間隔子在特異性目標處編輯可藉由NGS定量。各導引-目標對設計成提供與CasX導引RNP複合物之活性、特異性及可靶向性相關的資料。
藉由Twist Biosciences合成配對之間隔子目標序列且獲得為等莫耳量之寡核苷酸。此池藉由PCR擴增且藉由Golden Gate選殖來產生命名為p66之質體的最終庫。各質體含有sgRNA表現元件及目標位點,以及GFP表現元件及潮黴素表現元件。sgRNA表現元件由驅動gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)轉錄之U6啟動子組成,隨後為間隔序列,其將使導引物及CasX變異體之RNP靶向成對目標位點。設計及合成250種可能的獨特配對間隔子-目標合成序列。慢病毒庫隨後根據製造商說明書使用LentiX生產系統(Takara Bio USA, Inc)自此質體庫產生。隨後藉由qPCR定量所得病毒製劑且以低感染倍率轉導至標準HEK293細胞株中以便產生單一複本整合。所得細胞株隨後藉由螢光活化細胞分選(FACS)純化以完成PASS_V1.00之生產。接著以六孔盤格式接種此細胞株且用水處理或用2 μg質體p67轉染,根據製造商說明書藉由脂質體轉染劑(賽默飛世爾)遞送。質體p67含有驅動經SV40核定位序列標記之CasX蛋白之表現的EF-1a啟動子。五天之後,收集經處理之PASS_V1.00細胞,裂解且使用基因體DNA分離套組提取基因體DNA (Zymo研究)。基因體DNA隨後用定製引子進行PCR擴增以產生與Illumina NGS相容的擴增子且在NextSeq儀器上定序。將樣品讀數分用且過濾以獲得品質。隨後在經處理之樣品中定量各間隔子-目標合成序列之編輯結果度量值(具有插入缺失之讀數部分)。
為了評定分子之編輯效率,對四種不同PAM序列之編輯結果度量值進行分類。對於TTC PAM目標位點,對48個不同間隔子-目標對進行定量;對於ATC、CTC及GTC PAM目標位點,分別對14、22及11個個別目標位點進行定量。計算此等間隔子中之每一者的編輯效率且藉由減去經水處理之樣品中所觀測到的編輯而針對背景信號正規化。
結果:圖30為展示跨越PAM類別及跨越CasX蛋白變異體之編輯效率的小提琴曲線。個別間隔子之編輯效率展示為點,且平均編輯效率用水平條指示。用任何核酸酶脂質轉染之細胞在TTC PAM目標位點(水平柱)處展示出比野生型核酸酶Cas 2 (除Cas 528之外) (SEQ ID NO: 428)高的平均編輯。四種不同PAM序列之任何給出核酸酶的相對偏好亦由小提琴圖表示。CasX核酸酶527 (SEQ ID NO: 427)、528 (SEQ ID NO: 428)及529 (SEQ ID NO: 429)展現與野生型核酸酶CasX 2相比實質上不同的PAM偏好。此等資料表明CasX胺基酸序列之某些區域對於PAM識別至關重要,且此等資料可用於工程化感興趣目標DNA序列之最大活性治療性CasX分子。
在實驗條件下,鑑別工程化之CasX變異體119、491及515或515之序列變異體,與WT CasX 2蛋白質相比,其在與序列TTC、ATC、CTC或GTC之PAM相關的目標DNA序列處改良人類細胞中之雙股DNA裂解。此等資料支援可產生相對於野生型參考CasX具有增加之PAM特異性光譜的CasX變異體。
實例 18 : PASS 分析比較在 TTC 、 ATC 、 CTC 或 GTC 之 PAM 序列處具有改良之編輯效率的 CasX 蛋白變異體
實驗的目的為比較CasX蛋白變異體以測定在TTC、ATC、CTC或GTC之PAM序列處用於選擇目標核酸序列之最大編輯效率。為了實現此目的,將HEK293細胞株PASS_V1.00用工程化之CasX蛋白491 (SEQ ID NO: 336)或進一步工程化之變異體532 (SEQ ID NO: 432)或533 (SEQ ID NO: 433)處理,且進行下一代定序(NGS)以計算在多種間隔子及相關目標核酸位點處之編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體。簡言之,產生彙集HEK細胞株且稱為PASS_V1.00。池內之各細胞含有與特定目標位點配對之基因體整合單導引RNA (sgRNA)。在轉染蛋白質表現構築體之後,藉由特異性間隔子在特異性目標處編輯可藉由NGS定量。各導引-目標對設計成提供與CasX導引RNP複合物之活性、特異性及可靶向性相關的資料。
藉由Twist Biosciences合成配對之間隔子目標序列且獲得為等莫耳量之寡核苷酸。此池藉由PCR擴增且藉由Golden Gate選殖來產生命名為p66之質體的最終庫。各質體含有sgRNA表現元件及目標位點,以及GFP表現元件及潮黴素表現元件。sgRNA表現元件由驅動gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)轉錄之U6啟動子組成,隨後為間隔序列,其將使導引物及CasX變異體之RNP靶向成對目標位點。設計及合成250種可能的獨特配對間隔子-目標合成序列。慢病毒庫隨後根據製造商說明書使用LentiX生產系統(Takara Bio USA, Inc)自此質體庫產生。隨後藉由qPCR定量所得病毒製劑且以低感染倍率轉導至標準HEK293細胞株中以便產生單一複本整合。所得細胞株隨後藉由螢光活化細胞分選(FACS)純化以完成PASS_V1.00之生產。接著以六孔盤格式接種此細胞株且用水一式兩份處理或用2 μg質體p67轉染,根據製造商說明書藉由脂質體轉染劑(賽默飛世爾)遞送。質體p67含有驅動經SV40核定位序列標記之CasX蛋白之表現的EF-1a啟動子。五天之後,收集經處理之PASS_V1.00細胞,裂解且使用基因體DNA分離套組提取基因體DNA (Zymo研究)。基因體DNA隨後用定製引子進行PCR擴增以產生與Illumina NGS相容的擴增子且在NextSeq儀器上定序。將樣品讀數分用且過濾以獲得品質。隨後在經處理之樣品中定量各間隔子-目標合成序列之編輯結果度量值(具有插入缺失之讀數部分)。
為了評定分子之編輯效率,對四種不同PAM序列之編輯結果度量值進行分類。對於TTC PAM目標位點,對48個不同間隔子-目標對進行定量;對於ATC、CTC及GTC PAM目標位點,分別對14、22及11個個別目標位點進行定量。計算此等間隔子中之每一者的編輯效率且藉由減去經水處理之樣品中所觀測到的編輯而針對背景信號正規化。隨後計算兩個生物複本之平均值,以及平均值之標準誤差(SEM)。最後,對於每一PAM類別(TTC、ATC、CTC或GTC),計算所有間隔子之平均編輯效率,以及傳播SEM。
結果:圖31為展示跨越PAM類別及跨越CasX蛋白變異體之編輯效率的條形圖。用Cas 532或533對細胞進行脂質轉染展示比在PAM序列中之每一者處之CasX 491 (除在TTC PAM目標位點處之Cas 533之外)更高的平均編輯。此等資料表明CasX變異體532或533可改良感興趣治療目標處之編輯活性。
當目標DNA序列與序列TTC、ATC、CTC或GTC之PAM相關時,鑑別工程化之CasX變異體532及533以在人類細胞中具有與CasX 491相比改良之編輯效率。此等資料支援CasX變異體532及533與CasX 491相比可改良感興趣治療目標之編輯效率,尤其對於與非典型PAM序列相關之彼等目標。
實例 19 : PASS 分析鑑別相對於 CasX 491 或 CasX 119 具有增強之編輯活性的 CasX 蛋白變異體
實驗的目的為鑑別相對於CasX 491或119具有人類細胞中之改良的CasX變異體。為了實現此目的,用野生型CasX蛋白2或用工程化之CasX蛋白變異體119或491 (SEQ ID NO: 336)或另一個CasX蛋白變異體處理HEK293細胞株PASS_V1.01,且進行下一代定序(NGS)以計算多種間隔子及相關目標位點處之編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體。簡言之,產生彙集HEK細胞株且稱為PASS_V1.01。池內之各細胞含有與特定目標位點配對之基因體整合單導引RNA (sgRNA: SEQ ID NO: 2238) (列於表30中)。在轉染蛋白質表現構築體之後,藉由特異性間隔子在特異性目標處編輯可藉由NGS定量。各導引-目標對設計成提供與CasX導引RNP複合物之活性、特異性及可靶向性相關的資料。
藉由Twist Biosciences合成配對之間隔子目標序列且獲得為等莫耳量之寡核苷酸。此池藉由PCR擴增且藉由Golden Gate選殖來產生命名為p77之質體的最終庫。各質體含有sgRNA表現元件及目標位點以及GFP表現元件。sgRNA表現元件由驅動gRNA支架174 (SEQ ID NO: 2238)轉錄之U6啟動子組成,隨後為間隔序列,其將使導引物及CasX變異體之RNP靶向成對目標位點。設計及合成250種可能的獨特配對間隔子-目標合成序列。慢病毒庫隨後根據製造商說明書使用LentiX生產系統(Takara Bio USA, Inc)自此質體庫產生。隨後藉由qPCR定量所得病毒製劑且以低感染倍率轉導至標準HEK293細胞株中以便產生單一複本整合。所得細胞株隨後藉由螢光活化細胞分選(FACS)純化以完成PASS_V1.01之生產。接著以六孔盤格式接種此細胞株且一式兩份或作為單個樣品用水處理或用2 μg質體p67轉染,根據製造商說明書藉由脂質體轉染劑(賽默飛世爾)遞送。質體p67含有驅動經SV40核定位序列標記之CasX蛋白之表現的EF-1a啟動子以及嘌呤黴素抗性基因。一天後,將細胞轉移至對嘌呤黴素抗性(Sigma)具有選擇性的培養基。再過四天之後,收集經處理之PASS_V1.01細胞,裂解且使用基因體DNA分離套組提取基因體DNA (Zymo研究)。基因體DNA隨後用定製引子進行PCR擴增以產生與Illumina NGS相容的擴增子且在NextSeq儀器上定序。將樣品讀數分用且過濾以獲得品質。隨後在經處理之樣品中定量各間隔子-目標合成序列之編輯結果度量值(具有插入缺失之讀數部分)。
為了評定人類目標位點處CasX核酸酶之編輯活性,對48個TTC PAM目標位點進行定量。計算其中指定之此等間隔子中之每一者的兩個生物複本之平均編輯效率及平均值之標準誤差。在指定情況下,亦計算跨越48個間隔子之平均編輯效率,以及平均值的所傳播之標準誤差。
結果:圖39為展示在人類細胞中之48個不同TTC PAM目標位點處之所選CasX核酸酶相對於CasX 491之平均編輯效率的條形圖。將兩個實驗之平均值的所傳播的標準誤差繪製為誤差條。此等資料表明CasX 119及491均實質上比野生型CasX 2更有效。另外,CasX 515與CasX 491之編輯效率相比無顯著差異。出人意料地,CasX 527在TTC PAM序列下展現與491相比經改良之效率(P=0.0000635,藉由Welch's雙尾t測試)。CasX核酸酶527經工程化以在ATC、CTC或GTC之PAM序列處展現經改良之編輯效率,可能藉由使具有非典型PAM序列之雙股DNA目標位點之CasX核糖核蛋白(RNP)之R-環結構穩定來達成。CasX 527由在CasX 491之位置26處插入之精胺酸胺基酸組成。此位置在物理上接近CasX PAM識別環(胺基酸位置223)與DNA非目標股(NTS)之PAM核苷酸之相互作用。
圖40圖示PAM識別環及CasX 527突變之位置、在公開的同源參考CasX蛋白1之CryoEM結構(SEQ ID NO: 1;蛋白質資料庫標識編號:6NY2)上之位置26。可能的係,所插入之精胺酸與DNA NTS之間的額外離子相互作用有助於在PAM序列TTC、ATC、CTC或GTC中之任一者處的經改良之穩定性,使得此等間隔子處的總體編輯效率改良。
圖41為比較CasX 2及CasX 527之編輯效率以選擇48 TTC PAM間隔子之CasX 515變異體的小提琴曲線,其中中值編輯效率表示為水平條。如上文所論述,先前觀測到CasX 527具有等於或優於CasX 491之編輯效率,且此處觀測到若干新穎CasX變異體具有相對於CasX 527進一步改良之編輯效率。出乎意料地,CasX 583之編輯速率尤其均勻且較高。此可為R-環結構穩定性的較大改良的結果,使得通常在間隔子之間觀測到之編輯變化大部分被克服。支援此假設,CasX 583不同於CasX 515,因為蛋白質之非目標股結合域(NTSB)中之帶正電離胺酸之取代位置168處的疏水性白胺酸,從而可促進與目標DNA之NTS的額外離子鍵。此區域在上文所論述之CryoEM結構中未經結構化且為了清楚起見已標記NTSB域。表30列出48 TTC PAM間隔子在以CasX蛋白變異體527或583作為目標時之編輯效率,表明在大部分目標處之CasX 583在分析條件下之編輯效率增強。指示間隔子名稱及相關PAM序列。
圖42為展示在人類細胞中之48個不同TTC PAM目標位點處之所選CasX核酸酶相對於CasX 491之平均編輯效率的條形圖。將兩個實驗之平均值的所傳播的標準誤差繪製為誤差條。灰色虛線指示CasX 119之編輯活性。此等資料指示429至458之CasX變異體展現相對於CasX 119之變化編輯效率,且在一些情況下展現相對於CasX 119經改良之編輯效率,其相對於CasX 491編輯為70.8%。特定言之,CasX 450實質上比CasX 119更有效,相對於CasX 491編輯為95.9%,且由相對於CasX 119序列之四個取代突變組成。此等四個取代突變如下:D732N、E385P、Y857R、I658V。重要的係,CasX 449由相同序列組成,減去I658V取代,且相對於CasX 491在僅58.1%下編輯顯著較低效。此比較表明此突變對於活性增加至關重要。此等資料顯示當發生CasX119之取代突變組合時,可達成改良之編輯活性。值得注意地,此等活性增強與觀測到由同源CasX蛋白序列之間的域交換引起之增強不同。具體而言,CasX 484與CasX 491之區別僅在於用發現的CasX 1置換CasX 2域NTSB及螺旋形Ib,其中活性相應地從62.0%增加至100.0%。此等資料展示可藉由個別取代突變之組合或藉由與同源CasX蛋白之域交換來增強CasX 119核酸酶活性。
在實驗條件下,鑑別在與序列TTC之PAM相關之目標DNA序列處人類細胞中雙股DNA裂解改良之一組CasX蛋白491或515之變異體,且提供特定位置或位置組合之證據,該等突變可用以進一步工程化對於感興趣目標DNA序列具有增強之活性的CasX變異體分子。
表30:與TTC PAM序列相關之48個間隔子處的CasX 527或CasX 583之編輯百分比
實例 20 : PASS 分析鑑別相對於 CasX 491 具有增強特異性之 CasX 蛋白變異體
間隔子名稱 | CasX 527 編輯百分比 | CasX 583 編輯百分比 |
Rho_11.24 | 26.0 | 38.9 |
SOD1_8.89 | 25.9 | 38.9 |
SOD1_8.57 | 42.4 | 22.2 |
DMD_16.29 | 5.0 | 0.0 |
DMD_16.30 | 33.0 | 62.5 |
DMD_16.31 | 44.1 | 70.3 |
DMD_16.32 | 19.1 | 66.3 |
BCL11A_21.1 | 53.1 | 74.0 |
PCSK9_6.8 | 25.9 | 57.9 |
HTT_5.1 | 45.3 | 74.6 |
DMPK_20.7 | 19.9 | 56.3 |
B2M_7.9 | 53.9 | 72.7 |
B2M_7.37 | 32.5 | 59.9 |
CD70_26.5 | 37.7 | 66.0 |
CD70_26.3 | 27.2 | 78.0 |
FSHD_25.1 | 19.4 | 0.0 |
PMP22_18.22 | 31.9 | 66.4 |
PTBP1_28.1 | 17.4 | 0.0 |
Rho_11.2 | 32.4 | 59.5 |
VCV000162497_alt | 22.6 | 27.4 |
VCV000037426_alt | 34.7 | 34.7 |
VCV000052759_alt | 43.8 | 84.8 |
VCV000031157_alt | 27.5 | 0.0 |
VCV000217157_alt | 17.7 | 21.4 |
VCV000048146_alt | 36.8 | 53.3 |
VCV000039614_alt | 42.9 | 73.1 |
VCV000217646_alt | 39.7 | 81.8 |
VCV000408199_alt | 28.5 | 64.2 |
VCV000431973_alt | 40.6 | 62.2 |
VCV000004193_alt | 18.7 | 15.8 |
VCV000003920_alt | 31.1 | 68.1 |
VCV000224616_alt | 20.6 | 58.9 |
VCV000004787_alt | 37.9 | 61.7 |
VCV000013115_alt | 0.0 | 100.0 |
VCV000195355_alt | 45.3 | 83.3 |
VCV000190123_alt | 49.1 | 78.1 |
VCV000048535_alt | 32.9 | 61.2 |
VCV000468648_alt | 38.4 | 77.9 |
VCV000000908_alt | 30.7 | 64.3 |
VCV000066016_alt | 0.0 | 0.0 |
VCV000184702_alt | 41.8 | 8.1 |
VCV000003825_alt | 30.2 | 55.7 |
VCV000014243_alt | 36.2 | 77.9 |
VCV000046102_alt | 47.3 | 74.6 |
VCV000050962_alt | 24.9 | 67.4 |
VCV000011908_alt | 30.0 | 64.8 |
VCV000252575_alt | 17.9 | 38.3 |
SOD1_G93A_alt | 37.5 | 80.2 |
實驗的目的為鑑別CasX之變異體,該等CasX變異體對人類細胞中之靶上位點相對於脫靶位點處之裂解具有改良之特異性。為了實現此目的,用野生型CasX蛋白2或用工程化之CasX蛋白變異體119或491 (SEQ ID NO: 336)或另一個CasX蛋白變異體以及單導引RNA (sgRNA;SEQ ID NO: 2238)處理HEK293細胞株PASS_V1.01,且進行下一代定序(NGS)以計算多種間隔子及相關目標位點處之編輯百分比。
材料及方法:採用多重彙集方法以使用PASS系統分析純系蛋白變異體,如實例19中所描述。
為了評定人類目標位點處CasX核酸酶之編輯活性以及特異性,對兩組目標位點進行定量。首先,對48 TTC PAM目標位點進行定量,且針對此等間隔子中之每一者計算兩個生物複本之平均值編輯效率及平均值的標準誤差。亦計算跨越48個間隔子之平均編輯效率,以及平均值的所傳播之標準誤差。其次,對28組兩個TTC PAM間隔子-目標位點對進行定量。各組間隔子-目標對由固定間隔序列及兩個不同目標位點組成。兩個目標位點在目標位點之二十個位置中之一者處相差單個核苷酸錯配。一個目標位點(靶上間隔子-目標對)與間隔子序列完美互補,而另一(脫靶間隔子-目標對)由間隔子之RNA與DNA目標股之間的錯配組成。計算此等間隔子中之每一者的兩個生物複本之平均編輯效率及平均值之標準誤差。針對此等28個目標位點組中之每一者,計算脫靶位點與靶上位點之間的編輯效率之比率,以及平均值之所傳播的標準誤差。此度量值定義為特異性比率。最後,計算跨越28個目標位點組之平均特異性比率,以及平均值之所傳播的標準誤差。
結果:圖43為展示平均編輯效率相對於CasX 491以及精選CasX核酸酶之平均特異性比率之條形圖。將兩個實驗之平均值的所傳播的標準誤差繪製為誤差條。此等資料表明,與CasX 2 (CasX 2之平均特異性比率為0.171,相對於CasX 119之0.182)相比,CasX 119及491均實質上比野生型CasX 2更有效,且CasX 119對間隔子內之單一核苷酸錯配保留特異性(低特異性比率)。相比之下,CasX 491在此等條件下已失去針對單核苷酸錯配之大量特異性(平均特異性比率為0.446)。產生CasX 515之CasX 491(位置793處脯胺酸之插入)之其他突變略微改良分子之特異性,但此結果在統計學上不顯著。此外,在CasX 491之位置26處插入精胺酸以產生CasX 527,顯著且實質上惡化分子之特異性(平均特異性比率為0.839)。然而重要的係,CasX 515之額外單一突變進一步改良分子之特異性。CasX 535、537、542、543及544全部顯著改良特異性。CasX 544改良最大特異性至0.183之平均特異性比率,其與野生型CasX 2之特異性比率未顯著不同。同時,CasX 544與CasX 491相比維持97.7%之平均編輯效率且未顯著不同。此等資料表明,當編輯人類細胞中之靶向DNA序列時,CasX 491或515發生之單一突變可改變核酸酶之活性或特異性或兩者。圖68為說明測試之突變組合之間的定性關係及其對活性及特異性兩者之影響的流程圖。表31量化在28組靶上或脫靶間隔子-目標對處CasX 491之平均編輯百分比,說明靶上對脫靶編輯效率的平均比率。表32將選擇CasX變異體相對於CasX 2或CasX變異體491之平均編輯活性以及各變異體之平均特異性比率量化為零與一之間的絕對值。在所有情況下,工程化之變異體與參考CasX 2 (SEQ ID NO: 2)相比展示經改良之編輯效率,在分析條件下4倍至接近7倍編輯,而CasX 527 (SEQ ID NO: 427)及532 (SEQ ID NO: 432)展示相對於CasX 491 (SEQ ID NO: 336)之改良。CasX 542 (SEQ ID NO: 442)、543(SEQ ID NO: 443)及544(SEQ ID NO: 444)基本上與CasX 491一樣具有活性,但保留與參考CasX 2相當之特異性。
在實驗條件下,鑑別在與序列TTC之PAM相關之目標DNA序列處人類細胞中雙股DNA裂解改良之一組CasX蛋白491或515之變異體。另外,此等蛋白質變異體之特異性係藉由量測靶上對脫靶位點處之編輯來定量。此等資料可用於對感興趣之目標DNA序列之最大活性及最大特異性治療性CasX變異體分子進行工程化。
表31:28組靶上或脫靶間隔子-目標對處CasX 491之平均編輯百分比
表31:CasX蛋白之活性及特異性
實例 21 : 經改良之導引 RNA 變異體展現小鼠及人類 RHO 外顯子 1 基因座活體外增強之脫靶活性
間隔子名稱 | CasX 491 平均靶上編輯百分比 | CasX 491 平均脫靶編輯百分比 |
VCV000162497_alt | 15.4 | 2.0 |
VCV000037426_alt | 21.9 | 0.1 |
VCV000052759_alt | 35.4 | 25.8 |
VCV000031157_alt | 12.8 | 5.4 |
VCV000217157_alt | 11.7 | 6.9 |
VCV000048146_alt | 21.8 | 0.3 |
VCV000039614_alt | 38.0 | 13.3 |
VCV000217646_alt | 38.2 | 9.2 |
VCV000408199_alt | 31.2 | 47.5 |
VCV000431973_alt | 35.7 | 0.0 |
VCV000004193_alt | 7.4 | 0.2 |
VCV000003920_alt | 32.0 | 24.2 |
VCV000224616_alt | 33.1 | 30.7 |
VCV000004787_alt | 41.8 | 32.7 |
VCV000013115_alt | 16.2 | 43.7 |
VCV000195355_alt | 42.6 | 10.6 |
VCV000190123_alt | 39.1 | 6.0 |
VCV000048535_alt | 31.9 | 6.6 |
VCV000468648_alt | 35.7 | 35.1 |
VCV000000908_alt | 45.2 | 10.6 |
VCV000066016_alt | 40.6 | 1.8 |
VCV000184702_alt | 16.8 | 0.0 |
VCV000003825_alt | 29.9 | 27.1 |
VCV000014243_alt | 37.0 | 5.9 |
VCV000046102_alt | 38.1 | 17.0 |
VCV000050962_alt | 31.6 | 8.5 |
VCV000011908_alt | 43.5 | 7.3 |
VCV000252575_alt | 21.3 | 44.1 |
CasX 蛋白 | 相對於CasX 2 之平均編輯效率(%) | 相對於CasX 491 之平均編輯效率(%) | 平均特異性比率 |
2 | 100 | 17 | 0.17 |
119 | 429 | 71 | 0.18 |
491 | 606 | 100 | 0.45 |
515 | 602 | 99 | 0.37 |
527 | 694 | 115 | 0.84 |
532 | 677 | 112 | 0.63 |
535 | 541 | 89 | 0.27 |
536 | 513 | 85 | 0.29 |
537 | 470 | 78 | 0.25 |
542 | 575 | 95 | 0.19 |
543 | 539 | 89 | 0.17 |
544 | 592 | 98 | 0.18 |
進行實驗以鑑別在不同基因體目標,包括治療相關小鼠及人類Rho外顯子1具有增加之活性的新穎工程化之導引RNA變異體。先前的分析鑑別出支架序列內保持可顯著增加編輯效率以及特異性(表33中之序列)之許多不同的「熱點」區域(例如莖環)。另外,進行篩選以鑑別將增加吾等CRISPR系統在AAV載體中跨越多個不同PAM-間隔子組合之總體活性而不觸發脫靶或非特異性編輯的支架變異體。達成與當前基準載體相比提高之編輯效率將允許降低病毒載體劑量用於活體內研究,從而改良AAV介導之CasX導引系統之安全性。
材料及方法:
將新CasX變異體序列及gRNA支架變異體插入AAV轉殖基因構築體中用於質體及病毒載體驗證。吾人概念上將ITR之間的AAV轉殖基因分解成不同部分,其由與哺乳動物細胞中之表現相關的治療性負荷(CasX及gRNA變異體+間隔子)及輔助元件(例如啟動子、NLS、聚(A))組成。AAV基因體中之各部分由限制酶位點間隔開以允許模組選殖。部分經定序為來自Twist之基因片段,進行PCR擴增且用相應限制酶消化、清潔,隨後連接至經相同酶消化之載體中。接著將新AAV構築體轉化成化學勝任型之大腸桿菌(Turbos或Stbl3s),在37℃下回收1小時之後將其接種在卡那黴素LB-瓊脂盤上。選取單一菌落,小量製備且進行桑格定序。接著將序列驗證構築體與間隔子12.7 (靶向tdTomato: CTGCATTCTAGTTGTGGTTT,SEQ ID NO: 194)選殖至BbsI Golden-Gate裝配中。藉由使兩種寡核苷酸退火且在水中稀釋來製造間隔子。接著重複轉型及小型製備方案,且再次對間隔子選殖之載體進行序列驗證。證實構築體為大量製備的。為評定大量製備之品質,用XmaI (其在ITR中之每一者中之若干位點處切割)及XhoI (其在AAV基因體中切割一次)在兩個獨立消化物中處理構築體。此等消化物及未切割之構築體隨後在1%瓊脂糖凝膠上運作且成像於ChemiDoc上。若質體>90%超螺旋,則為恰當尺寸,且ITR完整,將構築體移動以經由核轉染測試且隨後使用AAV載體生產。
表33:選殖至p59.491.U6.X.Y.質體中之導引序列。(X=導引物;Y=間隔子)
報導細胞株:
導引構築體 | 間隔子序列 | 導引序列 | 導引物+間隔子序列 |
174.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 194) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 702) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 727) |
229.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCACTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 703) | ACTGGCACTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 728) |
230.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAGA (SEQ ID NO: 704) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 729) |
231.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 705) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 730) |
232.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 706) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 731) |
233.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 707) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 732) |
234.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGGAGCATCAGAG (SEQ ID NO: 708) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGGAGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 733) |
235.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 709) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 734) |
236.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACGGGACTTTCTATCTGATTACTCTGAAGTCCCTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 710) | ACGGGACTTTCTATCTGATTACTCTGAAGTCCCTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 735) |
237.12.7 | CTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 195) | ACCTGTAGTTCTATCTGATTACTCTGACTACAGTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 711) | ACCTGTAGTTCTATCTGATTACTCTGACTACAGTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGCTGCATTCTAGTTGTGGTT (SEQ ID NO: 736) |
174.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 702) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 737) |
229.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCACTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 703) | ACTGGCACTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAAAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 738) |
230.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAGA (SEQ ID NO: 704) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAAGCATCAGAAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 739) |
231.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 705) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 740) |
232.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 706) | ACTGGCACTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 741) |
233.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 707) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 742) |
234.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGGAGCATCAGAG (SEQ ID NO: 708) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCGCCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGGAGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 743) |
235.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 709) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 744) |
236.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACGGGACTTTCTATCTGATTACTCTGAAGTCCCTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 710) | ACGGGACTTTCTATCTGATTACTCTGAAGTCCCTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 745) |
237.11.30 | AAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 204) | ACCTGTAGTTCTATCTGATTACTCTGACTACAGTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 711) | ACCTGTAGTTCTATCTGATTACTCTGACTACAGTCACCAGCGACTATGTCGTATGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 746) |
174.11.31 | AAGTGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 215) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAgTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 702) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAgTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAGAAGTGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 747) |
235.11.31 | AAG TGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 215) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 709) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAG TGGCTCCGCACCACGCC (SEQ ID NO: 748) |
174.11.1 | AAGGGGCTGCGTACCACACC (SEQ ID NO: 216) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAG (SEQ ID NO: 702) | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTCTTCGGAGGGAGCATCAAAGAAGGGGCTGCGTACCACACC (SEQ ID NO: 749) |
235.11.1 | AAGGGGCTGCGTACCACACC (SEQ ID NO: 216) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 709) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGAAGGGGCTGCGTACCACACC (SEQ ID NO: 750) |
235.NT | GGGTCTTCGAGAAGACCC (SEQ ID NO: 218) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAG (SEQ ID NO: 709) | ACTGGCGCTTCTATCTGATTACTCTGAGCGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCCGCTTACGGACTTCGGTCCGTAAGAGGCATCAGAGGGGTCTTCGAGAAGACCC (SEQ ID NO: 751) |
在預平衡之mNPC培養基(具有GlutaMax之DMEM/F12、10mM HEPES、1×MEM非必需胺基酸、1×青黴素/鏈黴素、1:1000 2-巰基乙醇、1×B-27補充劑、減維生素A、具有補充生長因子bFGF及EGF之1×N2)中在懸浮液中培養自Ai9-tdTomato分離之永生化神經前驅細胞。測試之前,使用阿庫酶在平緩再懸浮下提昇細胞,監測神經球完全分離。細胞隨後用培養基淬滅,短暫離心且再懸浮於新鮮培養基中。在AAV轉導之前2天,對細胞進行計數且直接用於核轉染或10,000個細胞在塗佈有PLF (1×聚-DL-鳥胺酸氫溴酸鹽、10 mg/mL無菌二H20、1×層連結蛋白,及1×纖維連接蛋白)之96孔盤中培育。
HEK293T雙報導子細胞株係藉由將兩個轉基因卡匣敲入HEK293T細胞中來產生,該等轉基因卡匣組成性表現連接於GFP之人類RHO基因之外顯子1及連接於mscarlet之人類P23H.RHO基因之外顯子1。經修飾之細胞每3-5天藉由連續繼代擴增,且維持於由以下各者組成之纖維母細胞(FB)培養基中:達爾伯克氏改良伊格爾培養基(DMEM;Corning Cellgro, #10-013-CV),補充有10%胎牛血清(FBS;Seradigm, #1500-500)及100單位/毫升青黴素及100 mg/mL鏈黴素(100×-青黴素-鏈黴素;GIBCO #15140-122),且可另外包括丙酮酸鈉(100×,Thermofisher #11360070)、非必需胺基酸(100× Thermofisher #11140050)、HEPES緩衝液(100× Thermofisher #15630080)及2-巰基乙醇(1000× Thermofisher #21985023)。將細胞在37℃及5% CO2下培育。在1-2週之後,將GFP+/mscarlet+細胞批量分選至FB培養基中。報導株每3-5天藉由連續繼代擴增且在培育箱中在37℃及5% CO2下維持於FB培養基中。報導純系藉由限制稀釋法來產生。經由流式細胞測量術、基因體定序及使用先前證實之靶向CasX分子之RHO進行RHO基因座之功能修飾來表徵純系細胞株。最佳報導株經鑑別為i)每個細胞具有WTRHO.GFP之單個複本及每細胞恰當整合之mutRHO.mscarlet,ii)維持與未經修飾之細胞相當的倍增時間,及iii)當使用下文描述之方法分析時,在RHO基因破壞時導致GFP及mscarlet螢光降低。
核轉染:
驅動CasX-支架-導引系統之表現的AAV順式質體使用龍沙P3原代細胞96孔核轉染套組在mNPC中經核轉染。對於ARPE-19線,使用龍沙SF溶液及補充劑。將質體稀釋至200 ng/μl、100 ng/μL之濃度。將每個構築體5 µL之DNA添加至分別含有200,000 tdTomato mNPC或ARPE-19細胞之P3或SF溶液中。根據製造商指導原則,使用龍沙4D核轉染系統進行組合溶液核轉染。在核轉染之後,用適當培養基淬滅溶液。接著將溶液在96孔盤中一式三份地等分(大致67,000個細胞/孔)。轉染之後48小時,用含有生長因子之新鮮mNPC培養基補充經處理之細胞。轉染後5天,提昇tdTomato mNPC且藉由FACS評定活性。
AAV生產:
懸浮液HEK293T細胞自親本HEK293T調適且在自由式293培養基中生長。出於篩選目的,在轉染當天將小規模培養物(在125 mL愛倫美氏燒瓶中培養20-30 mL且以110 rpm攪拌)稀釋至1.5e+6個細胞/毫升之密度。具有由ITR重複序列側接之轉殖基因的無內毒素pAAV質體經提供腺病毒輔助基因之質體共轉染,以用於複製及使用無血清之OPTIMEM培養基中之PEIMax (Polysciences)的AAV rep/cap基因體。轉染後3小時,培養物補充有10% CDM4HEK293 (HyClone)。三天後,培養物在1000 rpm下離心10分鐘以自細胞集結粒分離上清液。使上清液與40% PEG 2.5 M NaCl (8%最終濃度)混合且在冰上培育至少2小時以使AAV病毒粒子沈澱。將含有大部分AAV載體之細胞集結粒再懸浮於溶解培養基(0.15 M NaCl、50 mM Tris HCl、0.05% Tween,pH 8.5)中,在冰上用音波處理(15秒,30%振幅)且在37℃下用核酸酶(250 U/µL,Novagen)處理30分鐘。粗溶解物及經PEG處理之上清液隨後在4℃下以4000 rpm旋轉20分鐘,以將PEG沈澱之AAV (集結粒)與無細胞碎片粗溶解物(上清液)再懸浮。進一步使用0.45 µm過濾器澄清。
為了確定病毒基因體力價,來自粗溶解物病毒之1 µL用DNA酶及ProtK,接著定量PCR消化。在25 μL qPCR反應中使用5 μL消化之病毒,該反應由IDT黃金時段主混合物及一組引子及6'FAM/Zen/IBFQ探針(IDT)構成,該探針經設計以擴增CMV啟動子區(正向5'-CATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCA-3' (SEQ ID NO: 752);反向5'-GAAATCCCCGTGAGTCAAACC-3' (SEQ ID NO: 753)、探針5'-TCAATGGGCGTGGATAG-3' ( SEQ ID NO: 754))或位於AAV2-ITR (正向5'-GGAACCCCTAGTGATGGAGTT -3' (SEQ ID NO: 755);反向5'-CGGCCTCAGTGAGCGA-3' (SEQ ID NO: 756)、探針5'-CACTCCCTCTCTGCGCGCTCG-3' (SEQ ID NO: 757))中之62 bp片段。AAV ITR質體之十倍連續稀釋(5 µl 2e+9至2e+4 DNA複本/毫升中之每一者)用作參考標準以計算病毒樣品之力價(病毒基因體(vg)/mL)。QPCR程式設定為:在95℃下初始變性步驟5分鐘,接著在95℃下40個變性循環1 min及在60℃下退火/延伸1 min。
AAV轉導:
在AAV轉導之前48小時,將10,000個細胞/mNPC孔接種於96孔盤中之經PLF塗佈之孔上。所有病毒感染條件一式三份地進行,其中實驗載體中vg之正規化數目,感染倍率(MOI)之一系列3倍稀釋度在約1.0e+6至1.0e+4 vg/細胞範圍內。計算係基於在轉染時20,000個細胞/孔之估測數目。最終體積為50 µL之AAV載體應用於各孔,該等AAV載體在補充有bFGF/EGF生長因子(20 ng/ml最終濃度)之預平衡mNPC培養基中稀釋。轉染後48小時,用補充有生長因子之新鮮培養基進行完全培養基變化。轉染後5天,藉由FACS評定編輯活性(tdt+細胞定量)。
藉由FACS評定編輯活性:
在轉染之後5天,用dPBS洗滌96孔盤中之經處理之tdTomato mNPC或ARPE-19細胞且分別用50 µL TrypLE及胰蛋白酶(0.25%)處理15及5分鐘。在細胞解離之後,用含有DMEM、10% FBS及1×青黴素/鏈黴素之培養基淬滅經處理之孔。再懸浮細胞轉移至圓底96孔盤中且在1000 g下離心5 min。細胞集結粒隨後用含有1×DAPI之dPBS再懸浮,且將盤裝載至Attune NxT流式細胞儀自動進樣器中。使用以下門控參數進行Attune NxT流式細胞儀:FSC-A×SSC-A選擇細胞,FSC-H×FSC-A選擇單細胞,FSC-A×VL1-A選擇DAPI-陰性存活細胞,及FSC-A×YL1-A選擇tdTomato陽性細胞。
mRHO外顯子1基因座處之插入缺失的NGS分析:
在轉染之後5天,用dPBS洗滌96孔盤中之經處理之tdTomato mNPC且分別用50 µL TrypLE及胰蛋白酶(0.25%)處理15及5分鐘。在細胞解離之後,用含有DMEM、10% FBS及1×青黴素/鏈黴素之培養基淬滅經處理之孔。接著,使細胞短暫離心且用PBS洗滌所得細胞集結粒,隨後根據製造商說明使用Zymo微型DNA套組處理其以提取gDNA。為了評定小鼠RHO外顯子1基因座處發生之編輯水準,擴增子用一組引子(正向5'-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCC GATCTNNNNNNNGCAGCCTTGGTCTCTGTCTACG-3' (SEQ ID NO: 758);反向5'-GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC TGCCCCAGTCTCTCTGCTCATACC-3' (SEQ ID NO: 759))自200 ng之gDNA擴增,珠粒純化(Beckman coulter,Agencourt Ampure XP),且隨後再擴增以合併Illumina銜接子序列及16 nt獨特分子標識符(UMI)。使用Fragment Analyzer DNA分析儀套組(Agilent,dsDNA 35-1500bp)評估擴增子之品質及定量。根據製造商之說明書在Illumina Miseq上定序擴增子。按以下處理來自定序之原始fastq檔案:(1)使用程式cutadapt (v. 2.1)針對品質及針對銜接子序列微調序列;(2)使用程式flash2 (v2.2.00)將來自讀數1及讀數2之序列合併成單個插入序列;及(3)經由程式CRISPResso2 (v 2.0.29),連同預期擴增子序列及間隔序列運作共同插入序列。此程式對在間隔子之3'端周圍之窗口中經修飾之讀數的百分比進行定量(來自間隔子之3'端,以-3 bp為中心之30 bp窗口)。CasX活性定量為此窗內任何地方含有插入、取代及/或缺失之讀段的總百分比。
結果:
進行不同編輯實驗以量化由CasX 491介導之與具有靶向感興趣之多基因體基因座的不同間隔子的新穎gRNA支架變異體(導引物174 & 229-237)配對的靶上裂解。構築體經選殖至AAV主鏈p59中,側接ITR2序列,從而驅動蛋白質Cas 491在CMV啟動子控制下之表現以及在人類U6啟動子控制下之支架-間隔子。mNPC-tdT報導子細胞株用於評定由tdTomato基因座處之單個間隔子(間隔子12.7,TTC PAM)以及內源性小鼠RHO外顯子1基因座處之單個切割效率(間隔子11.30,CTCN PAM)介導之雙重切割效率。整合於ARPE19衍生之細胞株中之雙報導子系統亦用於評定外源表現之人類WT Rho基因座處之靶上編輯(間隔子11.1、CTC PAM)。
經由小鼠NPC細胞株中之核轉染以圖14及圖15中所指示之兩個不同劑量分別測試具有間隔子12.7及11.30之gRNA支架變異體。構築體與當前基準gRNA支架174活性相比。在兩個靶向基因座處,以高於含有支架174之構築體的水準進行導引支架變異體231、233、234及235之構築體。支架235展現mRHO外顯子1基因座處之活性與支架174相比增加2倍。吾等進一步證實,支架235在藉由具有構築體p59.491.174.11.1及p59.491.235.11.1以及非目標間隔子對照之核轉染雙報導子ARPE-19細胞株之情況下一致地改良活性而不增加脫靶裂解。間隔子11.1靶向外源表現之mRHO-GFP基因。支架235展示與174相比增加3倍的活性(分別為Rho-GFP-細胞之9%對3%)。通過查看序列與WT相差1bp的P23H-RHO-Scarlett細胞群體的百分比來評定對偶基因特異性。
最後,吾人設法證明此等支架變異體有效封裝於AAV中且在以病毒方式遞送時保持穩定。用表現具有間隔子11.30 (在目標上,小鼠WT RHO)及11.31 (脫靶,小鼠P23 RHO)之導引支架變異體174及235的AAV載體轉導的mNPC展示與在靶上基因座上之支架174相比,在3.0e+5 MOI下含有235個支架變異體之構築體的活性增加(增加>5倍,圖45A及B),而無脫靶插入缺失為可偵測的。
結果支援具有新穎結構突變之支架變異體可在具有諸如小鼠及人類RHO外顯子1基因座之治療相關基因體目標之雙報導子系統中以增加之活性工程化。此外,雖然新表徵之支架展示活性整體增加>2倍,但未偵測到使用1-bp錯配間隔子區域之脫靶裂解。此與諸如adRP P23H Rho之對偶基因特異性治療策略有關,該突變對偶基因與WT序列相差1個由間隔子11.31靶向之核苷酸。此研究進一步驗證導引支架235在經設計用於P23H RHO救援及基因毒性研究之AAV載體中以及用於其他治療性目標之用途。
實例 22 : 論證催化死亡之 CasX 在活體外內源性 B2M 基因座處不編輯
將進行實驗以表明催化死亡之CasX無法在活體外編輯內源性基因β-2-微球蛋白(B2M)。
材料及方法:
催化死亡之CasX (dCasX)構築體及選殖之產生:
具有支架變異體174之CasX變異體491、527、668及676將用於此等實驗。亦將包括Cas9及適當導引物之陽性對照。為了產生催化死亡之CasX 491 (dCasX491;CAS096;SEQ ID NO: 1107)及催化死亡之CasX 527 (dCasX527;CAS142;SEQ ID NO: 1109),CasX變異體491之RuvC域之D659、E756、D921催化殘基,及CasX變異體527之RuvC域之D660、E757及D922催化殘基將突變至丙胺酸以消除核酸內切酶活性。類似地,CasX變異體668及676之RuvC域內催化殘基處的D660、E757、D923-至-丙胺酸突變將經設計以產生催化死亡之CasX 668 (dCasX668;CAS401;SEQ ID NO: XX)及催化死亡之CasX 676 (dCasX676;CAS402;SEQ ID NO: XX)。所得質體(表7中所列之dCasX變異體胺基酸序列)將含有具有以下組態之構築體:Ef1α-SV40NLS-dCasX變異體-SV40NLS。質體亦將含有編碼具有靶向內源性B2M基因座之間隔子(間隔子7.37;GGCCGAGAUGUCUCGCUCCG,SEQ ID NO: 1105)或非靶向對照(間隔子0.0;CGAGACGUAAUUACGUCUCG;SEQ ID NO: 1106)的gRNA支架變異體174的序列。
將含有編碼dCasX491、dCasX527、dCasX668及dCasX676之序列的構築體排序為寡核苷酸且藉由重疊延伸PCR裝配,隨後等溫裝配以構建編碼催化死亡之CasX變異體之質體。在等溫裝配之後,所得質體將轉化成化學勝任型之大腸桿菌細胞,其將在37℃下回收1小時之後塗覆於卡那黴素LB-瓊脂盤上。將挑選單一菌落進行群落PCR且進行桑格定序。經序列驗證之構築體將經midi製備以便隨後轉染至HEK293T細胞中。
將質體轉染至HEK293T細胞中:
HEK293T細胞將以30,000個細胞之密度接種於96孔盤之各孔中。次日,各孔將使用具有100 ng催化死亡之變異體質體之脂染胺瞬時轉染,該質體含有編碼CasX變異體491、dCasX491、dCasX527、dCasX668或dCasX676 (表7中之序列)之CasX:gRNA構築體,其中gRNA具有非靶向間隔子0.0或靶向間隔子7.37至B2M基因座。將一式三份地測試各構築體。轉染後24小時,將用2 μg/mL嘌呤黴素選擇細胞。轉染之後六天,將收集細胞用於經由B2M免疫染色,接著流動式細胞測量術藉由下一代定序(NGS)及B2M蛋白質表現分析進行編輯分析。B2M之表現將藉由使用將偵測細胞表面上表現之B2M依賴性HLA蛋白質的抗體(BioLegend)測定。HLA+細胞將使用Attune NxT流式細胞儀量測。
NGS處理及分析:
來自所收穫細胞之基因體DNA (gDNA)將使用Zymo Quick-DNA Miniprep Plus套組遵循製造商說明書提取。目標擴增子將藉由用一組對人類B2M基因座具有特異性之引子擴增來自200 ng所提取之gDNA的感興趣區域而形成。此等基因特異性引子在5'端含有另一序列以引入Illumina銜接子及16-核苷酸獨特分子標識符。擴增DNA產物將用Ampure XP DNA清除套組純化。將使用Fragment Analyzer DNA分析儀套組(Agilent,dsDNA 35-1500bp)評估擴增子之品質及定量。擴增子將根據製造商說明書對Illumina Miseq進行定序。來自定序之原始fastq檔案將為品質受控的且使用cutadapt v2.1、flash2 v2.2.00及CRISPResso2 v2.0.29處理。在間隔子3'端周圍的窗口(以間隔子3'端-3bp為中心的30 bp窗口)中,對各序列進行定量以含有相對於參考序列的插入或缺失(插入缺失)。CasX活性將定量為各樣品之此窗口內任何地方含有插入、取代及/或缺失之讀數的總百分比。
結果:
預期實驗表明在由催化活性之CasX 491介導之B2M基因座處的編輯,其將導致B2M蛋白質表現降低。另一方面,預期dCasX491、dCasX527、dCasX668及dCasX676均未展示B2M基因座處之編輯。鑒於B2M基因座處之轉錄起始位點處催化死亡之CasX分子之預期位阻,酶惰性CasX分子預期具有B2M蛋白質表現中之輕微抑制。
實例 23 : 改良 MS2 髮夾結合親和力增強 XDP 編輯效能
進行實驗以確定XDP之編輯效能是否可使用募集策略改良,藉此CasX:gRNA RNP複合物中之gRNA含有具有對Gag-MS2 RNA-結合蛋白(RBP)具有高親和力之MS2髮夾之功能化RNA延伸莖。RNA髮夾與MS2 RBP之結合使得能夠將CasX RNP負荷募集至XDP粒子。在將XDP遞送至目標細胞進行編輯之後,預期此RNA髮夾-MS2 RBP解離,使得CasX易位至細胞核。因此,增加MS2蛋白質-RNA複合物之穩定性支援XDP形成,其可藉由改變MS2 RNA-結合蛋白或RNA髮夾序列以增加此等組分之間的結合親和力來達成。
進一步探究此原理,使用高通量活體外生物化學分析評估併入對MS2 RBP具有不同親和力之RNA髮夾變異體的gRNA以評定平衡結合及解離動力學(Buenrostro等人., Quantitative analysis of RNA-protein interactions on a massively parallel array reveals biophysical and evolutionary landscapes. Nat Biotechnol. 32(6):562 (2014))。gRNA髮夾變異體及其相關K
D(解離常數)值列舉於表34中;編碼不同MS2 RNA髮夾變異體之導引質體之序列提供於表35中且MS2髮夾之序列提供於表36中。進行實驗以調查含有具有改良之結合親和力之MS2髮夾變異體之gRNA是否將增強XDP形成或編輯效能。特定言之,評定多種具有不同平衡結合親和力之MS2髮夾變異體對XDP效能及力價之影響。此等實驗中亦包括若干非結合變異體。
表34。含有具有不同親和力及其解離常數值(K
D)之MS2髮夾變異體的gRNA支架。指定核苷酸突變之特定位置係指圖48中描繪之鹼基MS2髮夾(支架188)之位置
表35. XDP質體之序列
表36:MS2髮夾變異體序列
材料及方法:
支架編號 | MS2 髮夾 ( 支架 188) 內指定核苷酸變化之位置 | K D(nM) | K OFF(1/s) | - ∆log(K OFF)/- ∆∆G |
高親和力MS2髮夾變異體 | ||||
188 | 2.558 | 0.001 | ||
251 | 2.558 | |||
296 | -13C, 1G | 1.881 | 0.001 | 0.510 |
297 | -15G, 3C | 2.112 | 0.001 | 0.062 |
298 | -15G, -13C, 1G, 3C | |||
299 | -15G, -13C, -8C, -3G, 1G, 3C | |||
300 | -8C, -3G | 2.686 | 0.002 | >1 |
中高親和力MS2髮夾變異體 | ||||
304 | -13U | 9.346 | 0.002 | 0.286 |
307 | -11U, -1A | 9.226 | 0.003 | 0.579 |
313 | -6C | 9.274 | 0.002 | 0.400 |
中等親和力MS2髮夾變異體 | ||||
301 | -8U, -3A | 34.084 | 0.007 | 0.654 |
303 | -15C, -13U | 0.002 | 0.089 | |
305 | -13C | 17.634 | 0.002 | 0.163 |
306 | -1U | 0.015 | 0.854 | |
310 | -5U | 36.912 | 0.016 | 0.910 |
314 | -14G, 3G | 0.002 | 0.120 | |
中低親和力MS2髮夾變異體 | ||||
308 | -11U, -1G | 77.562 | 0.018 | 0.754 |
低親和力MS2髮夾變異體 | ||||
309 | -11U, -1U | 453.563 | N/A | N/A |
311 | -5A | 415.477 | N/A | N/A |
302 | -8A, -3G | 1489.244 | N/A | N/A |
無親和力MS2髮夾變異體 | ||||
312 | -5G | 12506.440 | N/A | N/A |
315 | -10G | 18018.92728 | N/A | N/A |
質體 ID | 描述 | DNA 序列或 SEQ ID NO |
pXDP161 | Gag-(-1)-PR | 1111 |
pXDP164 | Gag-MS2 | 1112 |
pXDP353 | Gag-MS2(N55K) | 1113 |
pXDP344 | CasX 491 NLS 240 | 1114 |
pSG50 | 支架188 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGATCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 1115) |
pSG73 | 支架251 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTGCACTATGGGCGCAGCTCATGAGGATCACCCATGAGCTGACGGTACAGGCCACATGAGGATCACCCATGTGGTATAGTGCAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTT (SEQ ID NO: 1116) |
pSG170 | 支架296 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACCTGAGGATCACCCAGGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1117) |
pSG171 | 支架297 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCGCATGAGGATCACCCATGCGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1118) |
pSG172 | 支架298 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCGCCTGAGGATCACCCAGGCGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1119) |
pSG173 | 支架299 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCGCCTGAGCATCAGCCAGGCGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1120) |
pSG174 | 支架300 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGCATCAGCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1121) |
pSG175 | 支架301 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGTATCAACCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1122) |
pSG176 | 支架302 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGAATCAGCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1123) |
pSG177 | 支架303 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCCCTTGAGGATCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1124) |
pSG178 | 支架304 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACTTGAGGATCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1125) |
pSG179 | 支架305 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACCTGAGGATCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1126) |
pSG180 | 支架306 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGATCACCTATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1127) |
pSG181 | 支架307 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATTAGGATCACCAATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1128) |
pSG182 | 支架308 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATTAGGATCACCGATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1129) |
pSG183 | 支架309 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATTAGGATCACCTATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1130) |
pSG184 | 支架310 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGATTACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1131) |
pSG185 | 支架311 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGATAACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1132) |
pSG186 | 支架312 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGATGACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1133) |
pSG187 | 支架313 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGAGGACCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1134) |
pSG188 | 支架314 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCAGATGAGGATCACCCATGGGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1135) |
pSG189 | 支架315 | ACTGGCGCTTTTATCTGATTACTTTGAGAGCCATCACCAGCGACTATGTCGTAGTGGGTAAAGCTCACATGGGGATCACCCATGTGAGCATCAAAGCTGCATTCTAGTTGTGGTTTTTTTTT (SEQ ID NO: 1136) |
支架編號 | MS2 序列 | SEQ ID NO |
188 | ACAUGAGGAUCACCCAUGU | 1137 |
251 | ||
296 | ACCUGAGGAUCACCCAGGU | 1138 |
297 | GCAUGAGGAUCACCCAUGC | 1139 |
298 | GCCUGAGGAUCACCCAGGC | 1140 |
299 | GCCUGAGCAUCAGCCAGGC | 1141 |
300 | ACAUGAGCAUCAGCCAUGU | 1142 |
304 | ACUUGAGGAUCACCCAUGU | 1143 |
307 | ACAUUAGGAUCACCAAUGU | 1144 |
313 | ACAUGAGGACCACCCAUGU | 1145 |
所有編碼CasX蛋白之質體涉及CasX變異體491。所有XDP用10% VSV-G (VSV-G質體相對於其他XDP結構質體之百分比)假模式化。RNA摺疊結構由RNAfold網頁服務器及VARNA軟體產生。產生XDP之方法描述於本文中以及WO2021113772A1中,其以全文引用之方式併入本文中。
結構質體選殖:
簡言之,為了產生XDP結構質體,遵循製造商方案,自pXDP1 (UC Berkeley)移除Gag-pol序列,且使用In-Fusion HD純系套組(Takara)將編碼CasX 491、HIV-1或MS2 CP組分之擴增及純化片段選殖入質體骨架中。將經裝配產物轉化為化學勝任型Turbo勝任型大腸桿菌細胞,接種在37℃下回收之後的含有安比西林之LB-瓊脂盤上。選取個別菌落、小量製備及桑格定序以用於裝配驗證。質體序列列於表35中。
導引質體選殖:
含有MS2 RNA髮夾變異體之所有導引質體併入tdTomato靶向間隔子12.7 (CUGCAUUCUAGUUGUGGUUU; SEQ ID NO: 1146)。如先前所描述選殖tdTomato靶向間隔子。簡言之,間隔子藉由使兩種寡核苷酸退火且經由Golden Gate裝配用適當限制酶選殖至具有替代支架之pSG質體中來製成。使選殖間隔子經受轉化、小量製備及桑格定序以用於驗證。
pGP2醣蛋白質體選殖:
簡言之,編碼VSV-G醣蛋白及CMV啟動子之序列及獲自耐卡那黴素質體之主鏈如先前所描述經擴增及純化。此等構築體遵循製造商方案使用In-Fusion® HD純系套組(Takara)選殖至質體骨架中。將組合產物轉化為化學勝任型Turbo勝任型大腸桿菌細胞,接種於含有卡那黴素之LB-瓊脂盤上且在37℃下培育。選取個別菌落、小量製備及桑格定序以用於裝配驗證。
XDP生產:
簡言之,在轉染達到70%-90%匯合之前24小時,在15 cm培養皿中以20×10
6個細胞/培養皿接種HEK293T Lenti-X細胞。次日,使用PEI Max (Polypus):XDP結構質體(亦編碼CasX變異體)、導引質體變異體及pGP2,用以下質體轉染Lenti-X細胞以用於XDP假模式化。轉染後24小時,經培養基更換為Opti-MEM (賽默飛世爾)。在轉染後72小時收集含XDP之培養基且經由0.45 μm PES過濾器過濾。將上清液濃縮且經由離心純化。將XDP再懸浮於500 μL補充有Glutamax、HEPES、NEAA、Pen/Strep、2-巰基乙醇、無維生素A之B-27及N2的DMEM/F12中。
tdTomato神經先驅細胞(NPC)之XDP轉導:
tdTomato NPC在補充有Glutamax、HEPES、NEAA、Pen/Strep、2-巰基乙醇、無維生素A之B-27及N2的DMEM/F12中生長。使用StemPro阿庫酶細胞解離劑收集細胞且接種於塗有PLF之96孔盤上。48小時後,用含有tdTomato靶向間隔子之XDR轉導細胞,以純再懸浮之病毒開始且進行5次半對數稀釋。細胞接著在1000×g下離心15分鐘。使轉導之NPC生長96小時,隨後藉由流動式細胞測量術分析tdTomato螢光作為tdTomato基因座之編輯標誌物,其中EC50測定為達成細胞之50%中之編輯所需的XDP粒子之數目,如藉由流動式細胞測量術所測定。對具有類似結果之各樣品進行分析2-3次。
結果:
產生具有原始MS2 (MS2 WT)或MS2高親和力變異體(MS2 353)之由Gag-MS2、Gag-pro、CasX、gRNA支架變異體及VSV-G構成之XDP。隨後評估所產生之XDP在NPC中之tdTomato基因座處之編輯效率。圖49展示在tdTomato基因座處之編輯百分比,如藉由tdTomato螢光使用流動式細胞測量術所量測,此時使用0.007 µL之濃縮XDP製劑轉導NPC。除了鹼基對照gRNA支架188及251以外,高親和力支架變異體296及298在MS2 WT及MS2 353兩者下展示增強之效能,其中K
D值在1.8至2.1 nM範圍內。此外,K
D值在9.2至36.9 nM範圍內之中等親和力支架變異體303、304、305、307、310及313產生有前景的編輯效率。圖50說明跨越併入MS2 WT及MS 353組態之不同gRNA支架的EC50結果。支架變異體296、297及305展現與支架188相比稍微較高效能,此為MS2 353組態下更明顯之優點。圖51展示gRNA MS2髮夾之親和力(K
D)與所得XDP效能(EC50)之間的明顯相關性,R
2值為0.81 (p<0.001)。包含MS2、親和力<35 nM之XDP引起CasX RNP有效募集且封裝至XDP中。然而,在此等實驗之條件下,gRNA MS2髮夾之親和力(K
D)與所得XDP力價之間未觀測到相關性(圖52)。
本發明之新穎特徵在隨附申請專利範圍中具體闡述。將參考闡述利用本發明原理之說明性實施例及其隨附圖式的以下詳細描述來獲得對本發明之特徵及優勢的較佳理解:
圖1為用於定量由sgRNA174 (SEQ ID NO: 2238)及CasX變異體119、457、488及491形成之RNP之活性部分的分析結果的圖表,如實例8中所描述。對應於sgRNA及CasX變異體之序列分別提供於表2及3中。將等效莫耳量之RNP及目標共培育且在指定時間點處測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差。展示合併複本之雙相擬合。「2」係指SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白。
圖2展示由CasX2 (SEQ ID NO: 2之參考CasX蛋白)及經修飾之sgRNA形成之RNP之活性部分之定量,如實例8中所描述。將等效莫耳量之RNP及目標共培育且在指定時間點處測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差。展示合併複本之雙相擬合。
圖3展示在導引限制條件下由CasX 491及經修飾之sgRNA形成之RNP之活性部分的定量,如實例8中所描述。將等效莫耳量之RNP及目標共培育且在指定時間點處測定裂解目標之量。展示資料之雙相擬合。
圖4展示藉由sgRNA174及CasX變異體形成之RNP之裂解速率的定量,如實例8中所描述。將目標DNA與20倍過量之指定RNP一起培育,且在指定時間點測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差,除488及491之外,其中展示單個複本。展示合併複本之單相擬合。
圖5展示藉由CasX2及sgRNA變異體形成之RNP之裂解速率的定量,如實例8中所描述。將目標DNA與20倍過量之指定RNP一起培育,且在指定時間點測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差。展示合併複本之單相擬合。
圖6展示藉由CasX2及sgRNA變異體形成之RNP之裂解速度的定量,如實例8中所描述。先前裂解實驗之前兩個時間點與線性模型擬合以確定初始裂解速度。
圖7展示藉由CasX491及sgRNA變異體形成之RNP之裂解速率的定量,如實例8中所描述。將目標DNA與20倍過量之指定RNP在10℃下一起培育,且在指定時間點測定裂解目標之量。展示時間點之單相擬合。
圖8展示使用等效莫耳量之指定RNP及互補目標,相比於與gRNA 2複合之參考CasX 2之RNP,與gRNA變異體174複合之CasX變異體515及526之RNP之勝任型部分的定量,如實例8中所描述。展示各時程或組合複本組之雙相擬合。
圖9展示使用20倍過量之指定RNP,相比於與gRNA 2複合之參考CasX 2之RNP,與gRNA變異體174複合之CasX變異體515及526之RNP之裂解速率的定量,如實例8中所描述。
圖10A展示CasX變異體在TTC PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。將具有相同間隔子及指定PAM序列之目標DNA受質與20倍過量之指定RNP在37℃下一起培育,且在指定時間點處測定裂解目標之量。展示單個複本之單相擬合。
圖10B展示CasX變異體在CTC PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。將具有相同間隔子及指定PAM序列之目標DNA受質與20倍過量之指定RNP在37℃下一起培育,且在指定時間點處測定裂解目標之量。展示單個複本之單相擬合。
圖10C展示CasX變異體在GTC PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。將具有相同間隔子及指定PAM序列之目標DNA受質與20倍過量之指定RNP在37℃下一起培育,且在指定時間點處測定裂解目標之量。展示單個複本之單相擬合。
圖10D展示CasX變異體在ATC PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。將具有相同間隔子及指定PAM序列之目標DNA受質與20倍過量之指定RNP在37℃下一起培育,且在指定時間點處測定裂解目標之量。展示單個複本之單相擬合。
圖11A展示CasX變異體491及導引物174之RNP在NTC PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。獲取時間點歷經2分鐘之時程,且對裂解分率繪製各目標及時間點的圖,但為了清楚起見僅展示前兩分鐘時程。
圖11B展示CasX變異體491及導引物174之RNP在NTT PAM上之裂解速率的定量,如實例5中所描述。獲取時間點歷經10分鐘之時程,且對裂解分率繪製各目標及時間點的圖。
圖12A展示使用18、19或20個核苷酸之間隔子長度,藉由sgRNA174及CasX變異體515形成之RNP進行裂解的定量,如實例9中所描述。將目標DNA與20倍過量之指定RNP一起培育,且在指定時間點測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差。展示合併複本之單相擬合。
圖12B展示使用18、19或20個核苷酸之間隔子長度,藉由sgRNA174及CasX變異體526形成之RNP進行裂解的定量,如實例9中所描述。將目標DNA與20倍過量之指定RNP一起培育,且在指定時間點測定裂解目標之量。針對各時間點展示三個獨立複本之平均值及標準差。展示合併複本之單相擬合。
圖13為展示腺相關病毒(AAV)中封裝之CasX蛋白及支架DNA序列之實例的示意圖。AAV反向末端重複序列(ITR)之間的DNA片段包含編碼CasX之DNA及其啟動子,且編碼支架之DNA及其啟動子在AAV生產期間封裝於AAV衣殼內。
圖14展示比較gRNA支架229-237與支架174在自Ai9-tdtomato轉殖基因小鼠分離之小鼠神經前驅細胞(mNPC)中的編輯分析之結果,如實例21中所描述。用指定劑量之編碼CasX 491、支架及靶向mRHO之間隔子11.30 (5' AAGGGGCUCCGCACCACGCC 3',SEQ ID NO: 17)之p59質體對細胞進行核轉染。藉由NGS轉染後5天評定mRHO基因座處之編輯,且展示用具有支架230、231、234及235之構築體編輯與在兩個劑量下具有支架174之構築體相比展現更大編輯。
圖15展示比較gRNA支架229-237與支架174在mNPC細胞中之編輯分析的結果,如實例21中所描述。用指定劑量之編碼CasX 491、支架及靶向阻止tdTomato螢光蛋白表現之重複元件的間隔子12.7 (5' CUGCAUUCUAGUUGUGGUUU 3',SEQ ID NO: 1146)之p59質體對細胞進行核轉染。藉由FACS轉染後5天評定編輯,定量tdTomato陽性細胞之分數。與具有支架174之構築體相比,在高劑量下用支架231-235對細胞進行核轉染顯示大大致35%的編輯,且在低劑量下顯示大大致25%的編輯。
圖16為展示使用深度突變演進(DME)製造本發明之CasX蛋白及導引RNA變異體之例示性方法的圖式。在一些例示性實施例中,DME在生物分子及其組合/倍數中構建及測試幾乎每一可能突變、插入及缺失,且提供對朝向所需結果的序列空間中生物分子及路徑之健康景觀之近似全面及無偏評定。如本文所描述,DME可以應用於CasX蛋白及導引RNA兩者。
圖17A描繪δ變形菌綱(
Deltaproteobacteria) CasX蛋白:sgRNA RNP複合物(PDB id:6YN2)之CryoEM結構,包括兩個莖環、假結及三聯體,如實例13中所描述。
圖17B描繪使用工具RNAPDBee 2.0 (rnapdbee.cs.put. poznan.pl/,使用工具3DNA/DSSR,及使用VARNA可視化工具)自(A)中所示之結構鑑別之SEQ ID NO: 4之sgRNA的二級結構。指示RNA區域。在PDB晶體結構檔案中不明顯的殘基係藉由純文本字母(亦即,未圈出)指示,且不包括於殘基編號中。
圖18為用於設計支架庫之導引RNA之區域及域的示意圖,如實例13中所描述。
圖19為具有所指定的無偏(雙重突變及單一突變)及靶向突變(朝向三聯體、支架莖泡、假結及延伸莖及環)之支架庫之相對分佈及設計的餅圖,如實例13中所描述。
圖20為經設計以特異性地將替代形成三聯體之鹼基對併入至三聯體中的三聯體突變誘發之示意圖,如實例13中所描述。實線指示三股螺旋中之沃森-克里克(Watson-Crick)對;第三股核苷酸指示為表示與雙螺旋體之嘌呤之非典型相互作用的虛線。在庫中,所指示之5個位置中之每一者經所有可能三聯體模體(G:GC、T:AT、G:GC) =243個序列置換。序列ACUGGCGCUUUUAUCUGAUUACUUUGAGAGCCAUCANNNAUCAAAG (SEQ ID NO: 1022)。
圖21為各篩選中參考導引支架174及175之富集值之結果的條形圖,如實例13中所描述。
圖22為展示各所量測之單個核苷酸取代、缺失或插入之log
2富集值的散點圖,如在用於導引支架174及175之突變庫的兩個獨立篩選中之每一者中所量測,如實例13中所描述。
圖23為導引支架174及175中之單個突變體之熱圖,其展示跨序列之支架中之特異性可突變區域,如實例13中所描述。黃色色調反映具有類似於參考支架之富集度的值;紅色色調指示富集度增加,且因此相對於參考支架活性增加;藍色色調指示相對於野生型支架之活性損失;白色指示遺漏資料(或將產生野生型序列之取代)。
圖24為比較參考導引支架174及175上之單個核苷酸突變之log
2富集度的散點圖,如實例13中所描述。僅展示類似於174與175之間的位置的彼等突變。結果表明,總體上,導引支架174比175更耐受變化。
圖25為展示一組支架之平均(及95%信賴區間) log
2富集值的條形圖,其中假結對已經改組,使得各新假結具有相同的鹼基對組成,但在莖內具有不同順序,如實例13中所描述。各條形表示具有所指定的G:A (或A:G)對位置的支架組(參見右圖)。測試291個假結莖;條柱上的數字指示在各位置具有G:A (或A:G)對之莖數目。
圖26為圖55及56的假結序列的示意圖,給出5'至3',其中兩個股序列由下劃線分隔開。
圖27為展示支架之平均(及95%信賴區間) log
2富集值除以假結莖區之預測二級結構穩定性的條形圖,如實例13中所描述。具有極穩定莖之支架(例如∆G < -7 kcal/mol)平均具有高富集值,而具有去穩定化莖之支架(∆G ≥ -5 kcal/mol)平均具有低富集值。
圖28為支架175中位置7及29之所有雙重突變體的熱圖,如實例13中所描述。在右側給出假結序列5'至3'。
圖29A展示與具有靶向Rho基因座之P23位點之11.1間隔子(具有CasX 491)的174相比,使用工程化之導引235之ARPE-19核轉染細胞之編輯結果,展現235變異體之經改良之活性,在WT外源RHO下具有增加的靶上活性,而在突變RHO報導基因處無脫靶裂解(藉由非靶向間隔子),如實例21中所描述。
圖29B為展示用1000 ng各質體進行核轉染之ARPE-1細胞中相對於基準p59.491.174.11.1水準(設定成值1.0)正規化之p59.491.235.11.1的編輯水準的倍數變化的條形圖,如實例21中所描述。
圖30展示比較自定義HEK293細胞株PASS_V1.01中之Cas核酸酶2、119、491、515、527、528、529、530及531之編輯分析之結果,如實例17中所描述。用2 µg編碼指定Cas蛋白之p67質體脂質轉染細胞。五天之後,提取細胞基因體DNA。進行PCR擴增及下一代定序以分離且定量自定義設計之靶上編輯位點處的經編輯細胞之部分。對於各樣品,在由以下PAM序列組成之目標位點(個別點)評估編輯:48 TTC、14 ATC、22 CTC、11 GTC個別位點,且編輯百分比相對於媒劑對照正規化。用任何核酸酶脂質轉染之細胞在TTC PAM目標位點(水平柱)處展示出比野生型核酸酶Cas 2 (除Cas 528之外)高的平均編輯。四種不同PAM序列之任何給出核酸酶的相對偏好亦由小提琴圖表示。特定言之,Cas核酸酶527、528及529展現與野生型核酸酶Cas 2之PAM偏好實質上不同的PAM偏好。
圖31展示比較經改良之Cas核酸酶491與經改良之核酸酶532及533在自定義HEK293細胞株PASS_V1.01中之編輯分析的結果,如實例18中所描述。將細胞一式兩份地用2 µg編碼指定Cas蛋白之p67質體及嘌呤黴素抗性基因進行脂質轉染,且在嘌呤黴素選擇下生長。三天之後,提取細胞基因體DNA。進行PCR擴增及下一代定序以分離且定量自定義設計之靶上編輯位點處的經編輯細胞之部分。對於各樣品,在由以下PAM序列組成之目標位點評估編輯:48 TTC、14 ATC、22 CTC、11 GTC個別位點,且編輯分率相對於媒劑對照正規化。用Cas 532或533對細胞進行脂質轉染展示比在PAM序列中之每一者處之Cas 491 (除在TTC PAM目標位點處之Cas 533之外)更高的平均編輯。誤差條表示n=2個生物樣品之平均值的標準誤差。
圖32為存活率分析圖,用以測定當藉由CasX蛋白515及支架174靶向時CcdB選擇對不同間隔子之選擇性嚴格度,如實例14中所描述。
圖33A-E為展示TTC PAM目標位點處各突變體之中性或改良之生物化學裂解作為三個間隔子之平均值的CasX 515之變異體的熱圖,如實例14中所描述。該等圖展示跨越CasX 515序列之全長的結果。
圖34A-E為展示CTC PAM目標位點處各突變體之中性或改良之生物化學裂解作為單一間隔子處三個生物複本之平均值的CasX 515之變異體的熱圖,如實例14中所描述。該等圖展示跨越CasX 515序列之全長的結果。
圖35A-E為展示CTC PAM目標位點處各突變體之中性或改良之生物化學裂解作為單一間隔子處三個生物複本之平均值的CasX 515之變異體的熱圖,如實例14中所描述。該等圖展示跨越CasX 515序列之全長的結果。
圖36A-E為展示ATC PAM目標位點處各突變體之中性或改良之生物化學裂解作為單一間隔子處三個生物複本之平均值的CasX 515之變異體的熱圖,如實例14中所描述。該等圖展示跨越CasX 515序列之全長的結果。
圖37A為展示間隔子長度對在Jurkat細胞中用RNP編輯目標核酸之能力的影響的圖式,如實例15中所描述,針對間隔子15.3。
圖37B為展示間隔子長度對在Jurkat細胞中用RNP編輯目標核酸之能力的影響的圖式,如實例15中所描述,針對間隔子15.5。
圖38為精選CasX變異蛋白及其在四種不同PAM序列(TTC、ATC、CTC及GTC)下之編輯效率的條形圖,如實例16中所描述。資料呈現為編輯+/-SD百分比。
圖39為展示平均編輯效率相對於48個不同TTC PAM目標位點處之精選CasX核酸酶之CasX 491的條形圖,如實例19中所描述。將兩個實驗之平均值的所傳播的標準誤差繪製為誤差條。星號表明CasX 527與CasX 491之間的顯著差異(P=0.0000635,藉由Welch's雙尾t測試)。
圖40為根據同源參考CasX 1 (SEQ ID NO: 1;蛋白質資料庫標識號:6NY2)之公開的CryoEM結構的圖式,展示目標DNA PAM序列、PAM相互作用環、NTSB域及胺基酸位置26之物理位置,如實例19中所描述。
圖41為精選CasX變異蛋白及其在48 TTC PAM目標位點處之編輯效率的小提琴圖,如實例19中所描述。
圖42為精選CasX變異蛋白及其相對於48 TTC PAM目標位點處之CasX 491之編輯效率之條形圖,如實例19中所描述。資料呈現為平均相對編輯效率,其中1.0等於CasX 491編輯。灰色虛線說明CasX 119之編輯效率。誤差為一式兩份樣品的+/-所傳播SEM。
圖43為展示平均編輯效率相對於CasX 491以及精選CasX核酸酶之平均特異性比率之條形圖,如實例20中所描述。
圖44為說明測試之突變組合之間的定性關係及其對所得CasX變異體之活性及特異性之影響的流程圖,如實例21中所描述。
圖45A展示相比於在MOI範圍內mNPC中之內源性小鼠Rho外顯子1基因座處之gRNA支架235與支架174及導引11.30及11.31的AAV介導之編輯分析之結果,如實例21中所描述。
圖45B展示在5.0e+5 MOI處感染之細胞中,支架235相對於具有間隔子11.30之導引物174 (設定成1.0)之編輯水準的倍數變化的編輯結果,如實例21中所描述。
圖46為展示在併入至gRNA變異體235中之gRNA變異體175中之延伸莖環中進行之修飾的示意圖。sgRNA 175延伸莖環:SEQ ID NO: 1285;sgRNA 325延伸莖環:SEQ ID NO: 1286。
圖47為gRNA變異體235之示意圖,其指示相對於gRNA變異體174及175,三聯體、支架莖泡及延伸莖環之修飾。假結及三聯體:SEQ ID NO: 1287;支架莖及延伸莖:SEQ ID NO: 1288。
圖48為說明鹼基在MS2髮夾內之位置之示意圖,如實例23中所描述。圖中的MS2序列:SEQ ID NO: 1289。
圖49為藉由tdTomato螢光所量測的封裝有指定支架變異體之XDP在tdTomato基因座處之編輯百分比的圖,其中gRNA支架188及251充當鹼基變異體,如實例23中所描述。使用兩種MS2型式(MS2 353及MS2 WT)。
圖50展示對於用指定gRNA支架變異體封裝的XDP,使用NanoSight測定的在NPC中的tdTomato基因座處編輯的EC50值相對於力價的改良,其中支架188及251充當鹼基對照,如實例23中所描述。使用兩種MS2型式,MS2 353及MS2野生型(WT)。
圖51展示用所描繪之gRNA支架變異體封裝之XDP之MS2髮夾親和力(K
D)與EC50之間的相關性,如實例23中所描述。
圖52展示用所描繪之gRNA支架變異體封裝之XDP之MS2髮夾親和力(K
D)與力價之間的相關性,如實例23中所描述。
<![CDATA[<110> 美商斯奎柏治療公司(Scribe Therapeutics Inc.)]]> <![CDATA[<120> 工程化之第2類第V型CRISPR系統]]> <![CDATA[<130> SCRB-031/03TW 333322-2157]]> <![CDATA[<140> TW 110145073]]> <![CDATA[<141> 2021-12-02]]> <![CDATA[<150> US 63/208,855]]> <![CDATA[<151> 2021-06-09]]> <![CDATA[<150> US 63/162,346]]> <![CDATA[<151> 2021-03-17]]> <![CDATA[<150> US 63/121,196]]> <![CDATA[<151> 2020-12-03]]> <![CDATA[<160> 2398 ]]> <![CDATA[<170> PatentIn version 3.5]]> <![CDATA[<210> 1]]> <![CDATA[<211> 986]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> δ變形菌綱物種]]> <![CDATA[<400> 1]]> Met Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Lys Lys Leu Ser Ala Asp Asn 1 5 10 15 Ala Thr Lys Pro Val Ser Arg Ser Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val 20 25 30 Arg Val Met Thr Asp Asp Leu Lys Lys Arg Leu Glu Lys Arg Arg Lys 35 40 45 Lys Pro Glu Val Met Pro Gln Val Ile Ser Asn Asn Ala Ala Asn Asn 50 55 60 Leu Arg Met Leu Leu Asp Asp Tyr Thr Lys Met Lys Glu Ala Ile Leu 65 70 75 80 Gln Val Tyr Trp Gln Glu Phe Lys Asp Asp His Val Gly Leu Met Cys 85 90 95 Lys Phe Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys 100 105 110 Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys 115 120 125 Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser 130 135 140 Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala 145 150 155 160 Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp 165 170 175 Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Val Val Glu Arg 325 330 335 Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile Asn Glu Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val Phe Trp Ser Gly Val 355 360 365 Thr Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly Tyr Asn Tyr Leu Pro 370 375 380 Asn Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser Leu Glu Asn Pro Lys 385 390 395 400 Lys Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Leu Glu Lys 405 410 415 Lys Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp Glu Ala Trp Glu Arg 420 425 430 Ile Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His Ile Glu Arg Glu Glu 435 440 445 Ala Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Val Leu Thr Asp Trp 450 455 460 Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg Leu Lys Glu Met Asp 465 470 475 480 Glu Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu Gln Lys Trp Tyr Gly 485 490 495 Asp Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala Glu Asn Arg Val Val 500 505 510 Asp Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly Ser Asp Gly His Ser Ile Gln Tyr 515 520 525 Arg Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Arg Glu Phe 530 535 540 Tyr Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys Lys Gly Arg Ile Arg Phe Thr Asp 545 550 555 560 Gly Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly Lys Trp Gln Gly Leu Leu Tyr Gly 565 570 575 Gly Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp Leu Thr Phe Asp Pro Asp Asp Glu 580 585 590 Gln Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Thr Arg Gln Gly Arg Glu 595 600 605 Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Leu Ile Lys Leu 610 615 620 Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Ile Tyr Asn Lys Lys Ile Gly 625 630 635 640 Arg Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu 645 650 655 Val Val Asp Pro Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile Gly Val Asp 660 665 670 Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly 675 680 685 Cys Pro Leu Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro Thr Asp Ile 690 695 700 Leu Arg Ile Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala Ile Gln Ala 705 710 715 720 Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Phe 725 730 735 Ala Ser Lys Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Ser Ala 740 745 750 Arg Asp Leu Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val Leu Val Phe 755 760 765 Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met 770 775 780 Thr Glu Arg Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu 785 790 795 800 Ala Tyr Glu Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala 805 810 815 Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Thr 820 825 830 Ala Asp Tyr Asp Gly Met Leu Val Arg Leu Lys Lys Thr Ser Asp Gly 835 840 845 Trp Ala Thr Thr Leu Asn Asn Lys Glu Leu Lys Ala Glu Gly Gln Ile 850 855 860 Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Thr Val Glu Lys Glu Leu Ser 865 870 875 880 Ala Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Gly Asn Asn Asp Ile Ser 885 890 895 Lys Trp Thr Lys Gly Arg Arg Asp Glu Ala Leu Phe Leu Leu Lys Lys 900 905 910 Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Gln Phe Val Cys Leu Asp Cys 915 920 925 Gly His Glu Val His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg 930 935 940 Ser Trp Leu Phe Leu Asn Ser Asn Ser Thr Glu Phe Lys Ser Tyr Lys 945 950 955 960 Ser Gly Lys Gln Pro Phe Val Gly Ala Trp Gln Ala Phe Tyr Lys Arg 965 970 975 Arg Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Asn Ala 980 985 <![CDATA[<210> 2]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 浮黴菌門物種]]> <![CDATA[<400> 2]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 3]]> <![CDATA[<211> 855]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 宋氏細菌候選種]]> <![CDATA[<400> 3]]> Met Asp Asn Ala Asn Lys Pro Ser Thr Lys Ser Leu Val Asn Thr Thr 1 5 10 15 Arg Ile Ser Asp His Phe Gly Val Thr Pro Gly Gln Val Thr Arg Val 20 25 30 Phe Ser Phe Gly Ile Ile Pro Thr Lys Arg Gln Tyr Ala Ile Ile Glu 35 40 45 Arg Trp Phe Ala Ala Val Glu Ala Ala Arg Glu Arg Leu Tyr Gly Met 50 55 60 Leu Tyr Ala His Phe Gln Glu Asn Pro Pro Ala Tyr Leu Lys Glu Lys 65 70 75 80 Phe Ser Tyr Glu Thr Phe Phe Lys Gly Arg Pro Val Leu Asn Gly Leu 85 90 95 Arg Asp Ile Asp Pro Thr Ile Met Thr Ser Ala Val Phe Thr Ala Leu 100 105 110 Arg His Lys Ala Glu Gly Ala Met Ala Ala Phe His Thr Asn His Arg 115 120 125 Arg Leu Phe Glu Glu Ala Arg Lys Lys Met Arg Glu Tyr Ala Glu Cys 130 135 140 Leu Lys Ala Asn Glu Ala Leu Leu Arg Gly Ala Ala Asp Ile Asp Trp 145 150 155 160 Asp Lys Ile Val Asn Ala Leu Arg Thr Arg Leu Asn Thr Cys Leu Ala 165 170 175 Pro Glu Tyr Asp Ala Val Ile Ala Asp Phe Gly Ala Leu Cys Ala Phe 180 185 190 Arg Ala Leu Ile Ala Glu Thr Asn Ala Leu Lys Gly Ala Tyr Asn His 195 200 205 Ala Leu Asn Gln Met Leu Pro Ala Leu Val Lys Val Asp Glu Pro Glu 210 215 220 Glu Ala Glu Glu Ser Pro Arg Leu Arg Phe Phe Asn Gly Arg Ile Asn 225 230 235 240 Asp Leu Pro Lys Phe Pro Val Ala Glu Arg Glu Thr Pro Pro Asp Thr 245 250 255 Glu Thr Ile Ile Arg Gln Leu Glu Asp Met Ala Arg Val Ile Pro Asp 260 265 270 Thr Ala Glu Ile Leu Gly Tyr Ile His Arg Ile Arg His Lys Ala Ala 275 280 285 Arg Arg Lys Pro Gly Ser Ala Val Pro Leu Pro Gln Arg Val Ala Leu 290 295 300 Tyr Cys Ala Ile Arg Met Glu Arg Asn Pro Glu Glu Asp Pro Ser Thr 305 310 315 320 Val Ala Gly His Phe Leu Gly Glu Ile Asp Arg Val Cys Glu Lys Arg 325 330 335 Arg Gln Gly Leu Val Arg Thr Pro Phe Asp Ser Gln Ile Arg Ala Arg 340 345 350 Tyr Met Asp Ile Ile Ser Phe Arg Ala Thr Leu Ala His Pro Asp Arg 355 360 365 Trp Thr Glu Ile Gln Phe Leu Arg Ser Asn Ala Ala Ser Arg Arg Val 370 375 380 Arg Ala Glu Thr Ile Ser Ala Pro Phe Glu Gly Phe Ser Trp Thr Ser 385 390 395 400 Asn Arg Thr Asn Pro Ala Pro Gln Tyr Gly Met Ala Leu Ala Lys Asp 405 410 415 Ala Asn Ala Pro Ala Asp Ala Pro Glu Leu Cys Ile Cys Leu Ser Pro 420 425 430 Ser Ser Ala Ala Phe Ser Val Arg Glu Lys Gly Gly Asp Leu Ile Tyr 435 440 445 Met Arg Pro Thr Gly Gly Arg Arg Gly Lys Asp Asn Pro Gly Lys Glu 450 455 460 Ile Thr Trp Val Pro Gly Ser Phe Asp Glu Tyr Pro Ala Ser Gly Val 465 470 475 480 Ala Leu Lys Leu Arg Leu Tyr Phe Gly Arg Ser Gln Ala Arg Arg Met 485 490 495 Leu Thr Asn Lys Thr Trp Gly Leu Leu Ser Asp Asn Pro Arg Val Phe 500 505 510 Ala Ala Asn Ala Glu Leu Val Gly Lys Lys Arg Asn Pro Gln Asp Arg 515 520 525 Trp Lys Leu Phe Phe His Met Val Ile Ser Gly Pro Pro Pro Val Glu 530 535 540 Tyr Leu Asp Phe Ser Ser Asp Val Arg Ser Arg Ala Arg Thr Val Ile 545 550 555 560 Gly Ile Asn Arg Gly Glu Val Asn Pro Leu Ala Tyr Ala Val Val Ser 565 570 575 Val Glu Asp Gly Gln Val Leu Glu Glu Gly Leu Leu Gly Lys Lys Glu 580 585 590 Tyr Ile Asp Gln Leu Ile Glu Thr Arg Arg Arg Ile Ser Glu Tyr Gln 595 600 605 Ser Arg Glu Gln Thr Pro Pro Arg Asp Leu Arg Gln Arg Val Arg His 610 615 620 Leu Gln Asp Thr Val Leu Gly Ser Ala Arg Ala Lys Ile His Ser Leu 625 630 635 640 Ile Ala Phe Trp Lys Gly Ile Leu Ala Ile Glu Arg Leu Asp Asp Gln 645 650 655 Phe His Gly Arg Glu Gln Lys Ile Ile Pro Lys Lys Thr Tyr Leu Ala 660 665 670 Asn Lys Thr Gly Phe Met Asn Ala Leu Ser Phe Ser Gly Ala Val Arg 675 680 685 Val Asp Lys Lys Gly Asn Pro Trp Gly Gly Met Ile Glu Ile Tyr Pro 690 695 700 Gly Gly Ile Ser Arg Thr Cys Thr Gln Cys Gly Thr Val Trp Leu Ala 705 710 715 720 Arg Arg Pro Lys Asn Pro Gly His Arg Asp Ala Met Val Val Ile Pro 725 730 735 Asp Ile Val Asp Asp Ala Ala Ala Thr Gly Phe Asp Asn Val Asp Cys 740 745 750 Asp Ala Gly Thr Val Asp Tyr Gly Glu Leu Phe Thr Leu Ser Arg Glu 755 760 765 Trp Val Arg Leu Thr Pro Arg Tyr Ser Arg Val Met Arg Gly Thr Leu 770 775 780 Gly Asp Leu Glu Arg Ala Ile Arg Gln Gly Asp Asp Arg Lys Ser Arg 785 790 795 800 Gln Met Leu Glu Leu Ala Leu Glu Pro Gln Pro Gln Trp Gly Gln Phe 805 810 815 Phe Cys His Arg Cys Gly Phe Asn Gly Gln Ser Asp Val Leu Ala Ala 820 825 830 Thr Asn Leu Ala Arg Arg Ala Ile Ser Leu Ile Arg Arg Leu Pro Asp 835 840 845 Thr Asp Thr Pro Pro Thr Pro 850 855 <![CDATA[<210> 4]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 參考sgRNA]]> <![CDATA[<400> 4]]> acaucuggcg cguuuauucc auuacuuugg agccaguccc agcgacuaug ucguauggac 60 gaagcgcuua uuuaucggag agaaaccgau aaguaaaacg caucaaag 108 <![CDATA[<210> 5]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 參考sgRNA]]> <![CDATA[<400> 5]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 6]]> <![CDATA[<211> 81]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 6]]> acaucuggcg cguuuauucc auuacuuugg agccaguccc agcgacuaug ucguauggac 60 gaagcgcuua uuuaucggag a 81 <![CDATA[<210> 7]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 7]]> acaucuggcg cguuuauucc auuacuuugg agccaguccc agcgacuaug ucguauggac 60 gaagcgcuua uuuaucgg 78 <![CDATA[<210> 8]]> <![CDATA[<211> 80]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 8]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga 80 <![CDATA[<210> 9]]> <![CDATA[<211> 77]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 9]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucgg 77 <![CDATA[<210> 10]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 10]]> guuuacacac ucccucucau agggu 25 <![CDATA[<210> 11]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 11]]> guuuacacac ucccucucau gaggu 25 <![CDATA[<210> 12]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 12]]> uuuuacauac ccccucucau gggau 25 <![CDATA[<210> 13]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> tracrRNA序列]]> <![CDATA[<400> 13]]> guuuacacac ucccucucau ggggg 25 <![CDATA[<210> 14]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 參考sgRNA]]> <![CDATA[<400> 14]]> ccagcgacua ugucguaugg 20 <![CDATA[<210> 15]]> <![CDATA[<211> 39]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 延伸莖環]]> <![CDATA[<400> 15]]> gcgcuuauuu aucggagaga aauccgauaa auaagaagc 39 <![CDATA[<210> 16]]> <![CDATA[<211> 74]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 參考sgRNA]]> <![CDATA[<400> 16]]> ggcgcuuuua ucucauuacu uugagagcca ucaccagcga cuaugucgua uggguaaagc 60 gcuuauuuau cgga 74 <![CDATA[<210> 17]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 17]]> aaggggcucc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 18]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 18]]> aaggggcugc guaccacacc 20 <![CDATA[<210> 19]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> TTC原間隔子相鄰模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(2)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (6)..(47)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (21)..(41)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 19]]> nnttcnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnn 47 <![CDATA[<210> 20]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CTC原間隔子相鄰模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(2)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (6)..(47)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (21)..(41)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 20]]> nnctcnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnn 47 <![CDATA[<210> 21]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> GTC原間隔子相鄰模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(2)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (6)..(47)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (21)..(41)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 21]]> nngtcnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnn 47 <![CDATA[<210> 22]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> ATC原間隔子相鄰模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(2)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (6)..(47)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (21)..(41)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 22]]> nnatcnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnn 47 <![CDATA[<210> 23]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> TC原間隔子相鄰模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(3)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (6)..(47)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (21)..(41)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 23]]> nnntcnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnn 47 <![CDATA[<210> 24]]> <![CDATA[<211> 4]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 24]]> Pro Pro Pro Gly 1 <![CDATA[<210> 25]]> <![CDATA[<211> 23]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (8)..(11)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (12)..(15)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (16)..(19)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (20)..(23)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 25]]> Pro Pro Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 20 <![CDATA[<210> 26]]> <![CDATA[<211> 23]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (1)..(4)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (5)..(8)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (9)..(12)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (13)..(16)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 26]]> Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser Pro Pro Pro 20 <![CDATA[<210> 27]]> <![CDATA[<211> 12]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 27]]> Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu 1 5 10 <![CDATA[<210> 28]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 28]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 29]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 29]]> tgtggtcggg gtagcggctg 20 <![CDATA[<210> 30]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 30]]> tcaagtccgc catgcccgaa 20 <![CDATA[<210> 31]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 31]]> acaugaggau uacccaugu 19 <![CDATA[<210> 32]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 32]]> ugcaugucua agacagca 18 <![CDATA[<210> 33]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 33]]> aauccauugc acuccggauu 20 <![CDATA[<210> 34]]> <![CDATA[<211> 12]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 34]]> ccucuucgga gg 12 <![CDATA[<210> 35]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 35]]> aggaguuucu auggaaaccc u 21 <![CDATA[<210> 36]]> <![CDATA[<211> 30]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 36]]> aggugggacg accucucggu cguccuaucu 30 <![CDATA[<210> 37]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 37]]> ugcucgcucc guucgagca 19 <![CDATA[<210> 38]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 38]]> ugcucgacgc guccucgagc a 21 <![CDATA[<210> 39]]> <![CDATA[<211> 22]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 39]]> ugcucguuug cggcuacgag ca 22 <![CDATA[<210> 40]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 40]]> agggagggag ggagagg 17 <![CDATA[<210> 41]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 41]]> gguuaggguu aggguuagg 19 <![CDATA[<210> 42]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 42]]> cugcucagua cgagaggaac cgcag 25 <![CDATA[<210> 43]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 外源莖環區]]> <![CDATA[<400> 43]]> uacacuggga ucgcugaauu agagaucggc guccuuucau ucuauauacu uuggaguuuu 60 aaaaugucuc uaaguaca 78 <![CDATA[<210> 44]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 44]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 45]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 45]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 46]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 46]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Asn Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 47]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 47]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Tyr Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 48]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 48]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Trp Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 49]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 49]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 50]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 50]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 51]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 51]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 52]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 52]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 His Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 53]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 53]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn His Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 54]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 54]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Ala 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 55]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 55]]> Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Ala Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala 225 230 235 240 Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val 245 250 255 Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly 260 265 270 Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His 275 280 285 Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg 290 295 300 Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp 305 310 315 320 Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu 325 330 335 Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn 340 345 350 Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp 355 360 365 Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu 370 375 380 Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln 385 390 395 400 Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp 405 410 415 Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu 420 425 430 Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp 435 440 445 Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser 450 455 460 Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg 465 470 475 480 Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro 485 490 495 Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser 500 505 510 Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys 515 520 525 Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg 530 535 540 Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr 545 550 555 560 Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe 565 570 575 Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys 580 585 590 Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr 595 600 605 Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr 610 615 620 Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr 625 630 635 640 Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn 645 650 655 Leu Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu 660 665 670 Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly 675 680 685 Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln 690 695 700 Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly 705 710 715 720 Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met 725 730 735 Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp 740 745 750 Ala Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly 755 760 765 Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp 770 775 780 Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 56]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 56]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Gln Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 57]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 57]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Thr Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 58]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 58]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Arg Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 59]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 59]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Tyr Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 60]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 60]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 His Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 61]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 61]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Ala Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 62]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 催化死亡之CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 62]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 63]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 63]]> Pro Ala Lys Arg Ala Arg Arg Gly Tyr Lys Cys 1 5 10 <![CDATA[<210> 64]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 64]]> Lys Leu Gly Pro Arg Lys Ala Thr Gly Arg Trp 1 5 10 <![CDATA[<210> 65]]> <![CDATA[<211> 7]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 65]]> Pro Arg Arg Lys Arg Glu Glu 1 5 <![CDATA[<210> 66]]> <![CDATA[<211> 7]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 66]]> Pro Tyr Arg Gly Arg Lys Glu 1 5 <![CDATA[<210> 67]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 67]]> Pro Leu Arg Lys Arg Pro Arg Arg 1 5 <![CDATA[<210> 68]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 68]]> Pro Leu Arg Lys Arg Pro Arg Arg Gly Ser Pro Leu Arg Lys Arg Pro 1 5 10 15 Arg Arg <![CDATA[<210> 69]]> <![CDATA[<211> 29]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 69]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 20 25 <![CDATA[<210> 70]]> <![CDATA[<211> 37]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 70]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ile His 20 25 30 Gly Val Pro Ala Ala 35 <![CDATA[<210> 71]]> <![CDATA[<211> 46]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 71]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Glu Ala 20 25 30 Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala 35 40 45 <![CDATA[<210> 72]]> <![CDATA[<211> 31]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 72]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Gly 20 25 30 <![CDATA[<210> 73]]> <![CDATA[<211> 15]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 73]]> Lys Arg Lys Gly Ser Pro Glu Arg Gly Glu Arg Lys Arg His Trp 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 74]]> <![CDATA[<211> 28]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 74]]> Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg 1 5 10 15 Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 20 25 <![CDATA[<210> 75]]> <![CDATA[<211> 38]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 75]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser 1 5 10 15 Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro 20 25 30 Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 <![CDATA[<210> 76]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 76]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg catcgaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggtacaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 77]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 77]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggtacaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 78]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 78]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 79]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 79]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattctgctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctg gacctgtggg caaagccctg tccgatgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactga gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 80]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 80]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctcttccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 81]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 81]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctaccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 82]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 82]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctgccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 83]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 83]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat taagctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 84]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 84]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccaacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 85]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 85]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttcag cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 86]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 86]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaaaacga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctga agcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttcag cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agaccctgct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 87]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 87]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccaacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 88]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 88]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaccc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 89]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 89]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 90]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 90]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 91]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 91]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 92]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 92]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 93]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 93]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 94]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 94]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Thr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 95]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 95]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ala Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 96]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 96]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 97]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 97]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 98]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 98]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 99]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 99]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 100]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 100]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 101]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 101]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 102]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 102]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 103]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 103]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 104]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 104]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 105]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 105]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgagtgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 106]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 106]]> tgaagctgac agcactcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 107]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 107]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgactgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 108]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 108]]> tgaagctgac agcagtcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 109]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 109]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgattgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 110]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 110]]> tgaagctgac agcaatcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 111]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 111]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 112]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 112]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 113]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 113]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgagtgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 114]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 114]]> tgaagctgac agcactcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 115]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 115]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgactgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 116]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 116]]> tgaagctgac agcagtcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 117]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 117]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgattgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 118]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 118]]> tgaagctgac agcaatcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 119]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 119]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccaaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 120]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 120]]> tgaagctgac agcatttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 121]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 121]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctagtgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 122]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 122]]> tgaagctgac agcacttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 123]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 123]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctactgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 124]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 124]]> tgaagctgac agcagttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 125]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 125]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctattgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 126]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 活體外裂解分析目標]]> <![CDATA[<400> 126]]> tgaagctgac agcaattggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 127]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 127]]> gggtcggcat ggcatctcca cctcctcgcg gtccgacctg ggcatccgaa ggaggacgca 60 cgtccactcg gatggctaag ggagagcca 89 <![CDATA[<210> 128]]> <![CDATA[<211> 86]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 128]]> ggccggcatg gtcccagcct cctcgctggc gccggctggg caacattccg aggggaccgt 60 cccctcggta atggcgaatg ggaccc 86 <![CDATA[<210> 129]]> <![CDATA[<211> 69]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 129]]> gatggccggc atggtcccag cctcctcgct ggcgccggct gggcaacacc ttcgggtggc 60 gaatgggac 69 <![CDATA[<210> 130]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 130]]> ttttggccgg catggtccca gcctcctcgc tggcgccggc tgggcaacat gcttcggcat 60 ggcgaatggg accccggg 78 <![CDATA[<210> 131]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 131]]> cattcctcag aaaatgacaa acctgtgggg cgtaagtaga tcttcggatc tatgatcgtg 60 cagacgttaa aatcaggt 78 <![CDATA[<210> 132]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 132]]> cgtggttagg gccacgttaa atagttgctt aagccctaag cgttgatctt cggatcaggt 60 gcaa 64 <![CDATA[<210> 133]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 133]]> gggagccccg ctgatgaggt cggggagacc gaaagggact tcggtcccta cggggctccc 60 <![CDATA[<210> 134]]> <![CDATA[<211> 52]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 134]]> cctgtcaccg gatgtgcttt ccggtctgat gagtccgtga ggacgaaaca gg 52 <![CDATA[<210> 135]]> <![CDATA[<211> 63]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 135]]> cgactactga tgagtccgtg aggacgaaac gagtaagctc gtctagtcgc gtgtagcgaa 60 gca 63 <![CDATA[<210> 136]]> <![CDATA[<211> 49]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 136]]> cgactactga tgagtccgtg aggacgaaac gagtaagctc gtctagtcg 49 <![CDATA[<210> 137]]> <![CDATA[<211> 63]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 137]]> ccagtactga tgagtccgtg aggacgaaac gagtaagctc gtctactggc gcttttatct 60 cat 63 <![CDATA[<210> 138]]> <![CDATA[<211> 77]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 138]]> acccgcaagg ccgacggcat ccgccgccgc tggtgcaagt ccagccgccc cttcgggggc 60 gggcgctcat gggtaac 77 <![CDATA[<210> 139]]> <![CDATA[<211> 76]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 139]]> ggcaataaag cggttacaag cccgcaaaaa tagcagagta atgtcgcgat agcgcggcat 60 taatgcagct ttattg 76 <![CDATA[<210> 140]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 5’或3’ gNA延伸]]> <![CDATA[<400> 140]]> ccacccccac caccaccccc acccccacca ccaccc 36 <![CDATA[<210> 141]]> <![CDATA[<211> 40]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR1正向引子]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (34)..(40)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<400> 141]]> acactctttc cctacacgac gctcttccga tctnnnnnnn 40 <![CDATA[<210> 142]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2反向引子]]> <![CDATA[<400> 142]]> gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atct 34 <![CDATA[<210> 143]]> <![CDATA[<211> 52]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2正向引子]]> <![CDATA[<400> 143]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact ctttccctac acgacgctct tc 52 <![CDATA[<210> 144]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2反向v1 001引子]]> <![CDATA[<400> 144]]> caagcagaag acggcatacg agatcgtgat gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 145]]> <![CDATA[<211> 168]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 來自質體骨架之浮黴菌門參考導引支架]]> <![CDATA[<400> 145]]> tgacagctag ctcagtccta ggtataatac tagttactgg cgcttttatc tcattacttt 60 gagagccatc accagcgact atgtcgtatg ggtaaagcgc ttatttatcg gagagaaatc 120 cgataaataa gaagcatcaa agctggagtt gtcccaattc ttctagag 168 <![CDATA[<210> 146]]> <![CDATA[<211> 82]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR引子SAH24]]> <![CDATA[<400> 146]]> ttcaggttgg accggtgcca ccatggcccc aaagaagaag cggaaggtca gccaagagat 60 caagagaatc aacaagatca ga 82 <![CDATA[<210> 147]]> <![CDATA[<211> 28]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR引子SAH25]]> <![CDATA[<400> 147]]> ttttggacta gtcacggcgg gcttccag 28 <![CDATA[<210> 148]]> <![CDATA[<211> 37]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR引子oIC539]]> <![CDATA[<400> 148]]> atggccccaa agaagaagcg gaaggtctct agacaag 37 <![CDATA[<210> 149]]> <![CDATA[<211> 32]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR引子oIC540]]> <![CDATA[<400> 149]]> tacctttctc ttcttttttg gactagtcac gg 32 <![CDATA[<210> 150]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子4.76]]> <![CDATA[<400> 150]]> uguggucggg guagcggcug 20 <![CDATA[<210> 151]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子4.77]]> <![CDATA[<400> 151]]> ucaaguccgc caugcccgaa 20 <![CDATA[<210> 152]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子8.2]]> <![CDATA[<400> 152]]> auguucauga guuuggagau 20 <![CDATA[<210> 153]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子8.4]]> <![CDATA[<400> 153]]> ucgccauaac ucgcuaggcc 20 <![CDATA[<210> 154]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子23.11]]> <![CDATA[<400> 154]]> tccccgatat gcaccaccgg 20 <![CDATA[<210> 155]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子23.2]]> <![CDATA[<400> 155]]> agagcgtgat attaccctgt 20 <![CDATA[<210> 156]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子23.1]]> <![CDATA[<400> 156]]> cgctctagaa tgcgacgggt 20 <![CDATA[<210> 157]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔子23.19]]> <![CDATA[<400> 157]]> ccgatatgca ccaccgggta 20 <![CDATA[<210> 158]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 三聯體環]]> <![CDATA[<400> 158]]> cuuuaucuca uuacuuuga 19 <![CDATA[<210> 159]]> <![CDATA[<211> 31]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 159]]> aaaacgcuuu aucucauuac uuugacgttt t 31 <![CDATA[<210> 160]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環上之限制串列]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (1)..(19)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<400> 160]]> nnnnnnnnnn nnnnnnnnn 19 <![CDATA[<210> 161]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 23.2間隔子]]> <![CDATA[<400> 161]]> agagcgtgat attaccctgt 20 <![CDATA[<210> 162]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 23.13間隔子]]> <![CDATA[<400> 162]]> ccctttgacg ttggagtcca 20 <![CDATA[<210> 163]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 11.2間隔子]]> <![CDATA[<400> 163]]> aagtggctgc gtaccacacc 20 <![CDATA[<210> 164]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 23.27間隔子]]> <![CDATA[<400> 164]]> gtacatccac aaacagacga 20 <![CDATA[<210> 165]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3間隔子]]> <![CDATA[<400> 165]]> caaacaaatg tgtcacaaag 20 <![CDATA[<210> 166]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5間隔子]]> <![CDATA[<400> 166]]> ggaataatgc tgttgttgaa 20 <![CDATA[<210> 167]]> <![CDATA[<211> 87]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板正向引子]]> <![CDATA[<400> 167]]> gaaattaata cgactcacta taactggcgc ttttatctga ttactttgag agccatcacc 60 agcgactatg tcgtagtggg taaagct 87 <![CDATA[<210> 168]]> <![CDATA[<211> 50]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板反向引子]]> <![CDATA[<400> 168]]> ctttgatgct ccctccgaag agggagcttt acccactacg acatagtcgc 50 <![CDATA[<210> 169]]> <![CDATA[<211> 22]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> T7擴增引子]]> <![CDATA[<400> 169]]> gaaattaata cgactcacta ta 22 <![CDATA[<210> 170]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 20-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 170]]> ctttgtgaca catttgtttg ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 171]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 19-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 171]]> tttgtgacac atttgtttgc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 172]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 18-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 172]]> ttgtgacaca tttgtttgct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 173]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 20-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 173]]> ttcaacaaca gcattattcc ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 174]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 19-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 174]]> tcaacaacag cattattccc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 175]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 18-nt間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 175]]> caacaacagc attattccct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 176]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 20-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 176]]> caaacaaaug ugucacaaag 20 <![CDATA[<210> 177]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 19-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 177]]> caaacaaaug ugucacaaa 19 <![CDATA[<210> 178]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.3 18-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 178]]> caaacaaaug ugucacaa 18 <![CDATA[<210> 179]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 20-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 179]]> ggaauaaugc uguuguugaa 20 <![CDATA[<210> 180]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 19-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 180]]> ggaauaaugc uguuguuga 19 <![CDATA[<210> 181]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 15.5 18-nt間隔子]]> <![CDATA[<400> 181]]> ggaauaaugc uguuguug 18 <![CDATA[<210> 182]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 7.37間隔子]]> <![CDATA[<400> 182]]> ggccgagatg tctcgctccg 20 <![CDATA[<210> 183]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 7.37目標序列非目標股]]> <![CDATA[<400> 183]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 184]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 7.37目標序列目標股]]> <![CDATA[<400> 184]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 185]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 20-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 185]]> ggccgagatg tctcgctccg 20 <![CDATA[<210> 186]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 18-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 186]]> ggccgagatg tctcgctc 18 <![CDATA[<210> 187]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 19-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 187]]> ggccgagatg tctcgctcc 19 <![CDATA[<210> 188]]> <![CDATA[<211> 87]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板正向]]> <![CDATA[<400> 188]]> gaaattaata cgactcacta taactggcgc ttttatctga ttactttgag agccatcacc 60 agcgactatg tcgtagtggg taaagct 87 <![CDATA[<210> 189]]> <![CDATA[<211> 50]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板反向]]> <![CDATA[<400> 189]]> ctttgatgct ccctccgaag agggagcttt acccactacg acatagtcgc 50 <![CDATA[<210> 190]]> <![CDATA[<211> 22]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> T7擴增引子]]> <![CDATA[<400> 190]]> gaaattaata cgactcacta ta 22 <![CDATA[<210> 191]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174 20-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 191]]> cggagcgaga catctcggcc ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 192]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174 18-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 192]]> gagcgagaca tctcggccct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 193]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174 19-nt間隔子序列]]> <![CDATA[<400> 193]]> ggagcgagac atctcggccc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 194]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 194]]> ctgcattcta gttgtggttt 20 <![CDATA[<210> 195]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 195]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 196]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 196]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 197]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 197]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 198]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 198]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 199]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 199]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 200]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 200]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 201]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 201]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 202]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 202]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 203]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 203]]> ctgcattcta gttgtggtt 19 <![CDATA[<210> 204]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 204]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 205]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 205]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 206]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 206]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 207]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 207]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 208]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 208]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 209]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 209]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 210]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 210]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 211]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 211]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 212]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 212]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 213]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 213]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 214]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 214]]> aaggggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 215]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 215]]> aagtggctcc gcaccacgcc 20 <![CDATA[<210> 216]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 216]]> aaggggctgc gtaccacacc 20 <![CDATA[<210> 217]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 217]]> aaggggctgc gtaccacacc 20 <![CDATA[<210> 218]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 218]]> gggtcttcga gaagaccc 18 <![CDATA[<210> 219]]> <![CDATA[<211> 46]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 219]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys 1 5 10 15 Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu 20 25 30 Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 35 40 45 <![CDATA[<210> 220]]> <![CDATA[<211> 66]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 220]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys 1 5 10 15 Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 20 25 30 Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile 35 40 45 Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr 50 55 60 Gly Pro 65 <![CDATA[<210> 221]]> <![CDATA[<211> 86]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 221]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys 1 5 10 15 Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 20 25 30 Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 35 40 45 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 50 55 60 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 65 70 75 80 Ala Gly Lys Thr Gly Pro 85 <![CDATA[<210> 222]]> <![CDATA[<211> 50]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 222]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile 20 25 30 Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr 35 40 45 Gly Pro 50 <![CDATA[<210> 223]]> <![CDATA[<211> 74]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 223]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 20 25 30 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Gln 35 40 45 Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser 50 55 60 Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 <![CDATA[<210> 224]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 224]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 20 25 30 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 35 40 45 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 50 55 60 Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile 65 70 75 80 Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr 85 90 95 Gly Pro <![CDATA[<210> 225]]> <![CDATA[<211> 49]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 225]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg 20 25 30 Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly 35 40 45 Pro <![CDATA[<210> 226]]> <![CDATA[<211> 45]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 226]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val 20 25 30 Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 35 40 45 <![CDATA[<210> 227]]> <![CDATA[<211> 68]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 227]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 20 25 30 Lys Lys Lys Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn 35 40 45 Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly 50 55 60 Lys Thr Gly Pro 65 <![CDATA[<210> 228]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 228]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 20 25 30 Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly 35 40 45 Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys 50 55 60 Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln 65 70 75 80 Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser 85 90 95 Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 100 105 <![CDATA[<210> 229]]> <![CDATA[<211> 144]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 229]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 20 25 30 Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly 35 40 45 Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys 50 55 60 Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala 65 70 75 80 Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys 85 90 95 Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ser 100 105 110 Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg 115 120 125 Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 130 135 140 <![CDATA[<210> 230]]> <![CDATA[<211> 70]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 230]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys 1 5 10 15 Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 20 25 30 Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 35 40 45 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 50 55 60 Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 <![CDATA[<210> 231]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 231]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 20 25 30 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Asp 35 40 45 Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu 50 55 60 Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 75 <![CDATA[<210> 232]]> <![CDATA[<211> 102]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 232]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 20 25 30 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 35 40 45 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 50 55 60 Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 65 70 75 80 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 85 90 95 Ala Gly Lys Thr Gly Pro 100 <![CDATA[<210> 233]]> <![CDATA[<211> 65]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 233]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser 20 25 30 Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg 35 40 45 Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly 50 55 60 Pro 65 <![CDATA[<210> 234]]> <![CDATA[<211> 67]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 234]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro 20 25 30 Pro Gly Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys 35 40 45 Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys 50 55 60 Thr Gly Pro 65 <![CDATA[<210> 235]]> <![CDATA[<211> 72]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 235]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ile His 20 25 30 Gly Val Pro Ala Ala Pro Gly Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile 35 40 45 Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr 50 55 60 Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 <![CDATA[<210> 236]]> <![CDATA[<211> 72]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 236]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Gly 20 25 30 Ser Gly Gly Gly Ser Pro Gly Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile 35 40 45 Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr 50 55 60 Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 <![CDATA[<210> 237]]> <![CDATA[<211> 26]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 例示性參考sgRNA之支架莖環]]> <![CDATA[<400> 237]]> ccaucaccag cgacuauguc guaugg 26 <![CDATA[<210> 238]]> <![CDATA[<211> 46]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 例示性參考sgRNA之延伸莖環序列]]> <![CDATA[<400> 238]]> guaaacgcuu auuuaucgga gagaaauccg auaaauaaga agcauc 46 <![CDATA[<210> 239]]> <![CDATA[<211> 73]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 239]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Gly Gly 20 25 30 Gly Ser Gly Gly Gly Ser Pro Gly Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu 35 40 45 Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn 50 55 60 Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 65 70 <![CDATA[<210> 240]]> <![CDATA[<211> 31]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (4)..(28)]]> <![CDATA[<223> n為任何核糖核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (8)..(28)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 240]]> uuunnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnuu u 31 <![CDATA[<210> 241]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (4)..(18)]]> <![CDATA[<223> n為任何核糖核苷酸]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (8)..(18)]]> <![CDATA[<223> 個別核苷酸可存在]]> <![CDATA[<400> 241]]> uuunnnnnnn nnnnnnnnuu u 21 <![CDATA[<210> 242]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gNA之支架莖環序列]]> <![CDATA[<400> 242]]> ccagcgacua ugucguaugg 20 <![CDATA[<210> 243]]> <![CDATA[<211> 23]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> crRNA序列]]> <![CDATA[<400> 243]]> ccgauaagua aaacgcauca aag 23 <![CDATA[<210> 244]]> <![CDATA[<211> 26]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> crRNA序列]]> <![CDATA[<400> 244]]> ucuccgauaa auaagaagca ucaaag 26 <![CDATA[<210> 245]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架莖環]]> <![CDATA[<400> 245]]> ccagcgacua ugucguagug g 21 <![CDATA[<210> 246]]> <![CDATA[<211> 4]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 鋅/指/帶模體]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (2)..(3)]]> <![CDATA[<223> Xaa為任何胺基酸]]> <![CDATA[<400> 246]]> Cys Xaa Xaa Cys 1 <![CDATA[<210> 247]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 247]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile 245 250 255 Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala 260 265 270 Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 248]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 248]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Thr Ala Asp Tyr Asp Gly Met Leu Val Arg Leu Lys Lys Thr Ser 820 825 830 Asp Gly Trp Ala Thr Thr Leu Asn Asn Lys Glu Leu Lys Ala Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Thr Val Glu Lys Glu 850 855 860 Leu Ser Ala Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Gly Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Lys Trp Thr Lys Gly Arg Arg Asp Glu Ala Leu Phe Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Gln Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asp Cys Gly His Glu Val His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 249]]> <![CDATA[<211> 985]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 249]]> Met Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Lys Lys Leu Ser Ala Asp Asn 1 5 10 15 Ala Thr Lys Pro Val Ser Arg Ser Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val 20 25 30 Arg Val Met Thr Asp Asp Leu Lys Lys Arg Leu Glu Lys Arg Arg Lys 35 40 45 Lys Pro Glu Val Met Pro Gln Val Ile Ser Asn Asn Ala Ala Asn Asn 50 55 60 Leu Arg Met Leu Leu Asp Asp Tyr Thr Lys Met Lys Glu Ala Ile Leu 65 70 75 80 Gln Val Tyr Trp Gln Glu Phe Lys Asp Asp His Val Gly Leu Met Cys 85 90 95 Lys Phe Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile 100 105 110 Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys 115 120 125 Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn 130 135 140 Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser 145 150 155 160 Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn 165 170 175 Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu 180 185 190 Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys 195 200 205 Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly 210 215 220 Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser 225 230 235 240 Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn 245 250 255 Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu 260 265 270 Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly 275 280 285 Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn 290 295 300 Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro 305 310 315 320 Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Val Val Glu Arg Arg 325 330 335 Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile Asn Glu Val Lys Lys Leu 340 345 350 Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val Phe Trp Ser Gly Val Thr 355 360 365 Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly Tyr Asn Tyr Leu Pro Asn 370 375 380 Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser Leu Glu Asn Pro Lys Lys 385 390 395 400 Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Leu Glu Lys Lys 405 410 415 Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile 420 425 430 Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His Ile Glu Arg Glu Glu Ala 435 440 445 Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Val Leu Thr Asp Trp Leu 450 455 460 Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg Leu Lys Glu Met Asp Glu 465 470 475 480 Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp 485 490 495 Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala Glu Asn Arg Val Val Asp 500 505 510 Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly Ser Asp Gly His Ser Ile Gln Tyr Arg 515 520 525 Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Arg Glu Phe Tyr 530 535 540 Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys Lys Gly Arg Ile Arg Phe Thr Asp Gly 545 550 555 560 Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly Lys Trp Gln Gly Leu Leu Tyr Gly Gly 565 570 575 Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp Leu Thr Phe Asp Pro Asp Asp Glu Gln 580 585 590 Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Thr Arg Gln Gly Arg Glu Phe 595 600 605 Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Leu Ile Lys Leu Ala 610 615 620 Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Ile Tyr Asn Lys Lys Ile Gly Arg 625 630 635 640 Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val 645 650 655 Val Asp Pro Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg 660 665 670 Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys 675 680 685 Pro Leu Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro Thr Asp Ile Leu 690 695 700 Arg Ile Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala Ile Gln Ala Ala 705 710 715 720 Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Phe Ala 725 730 735 Ser Lys Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Ser Ala Arg 740 745 750 Asp Leu Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val Leu Val Phe Glu 755 760 765 Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Thr 770 775 780 Glu Arg Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala 785 790 795 800 Tyr Glu Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln 805 810 815 Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Thr Ala 820 825 830 Asp Tyr Asp Gly Met Leu Val Arg Leu Lys Lys Thr Ser Asp Gly Trp 835 840 845 Ala Thr Thr Leu Asn Asn Lys Glu Leu Lys Ala Glu Gly Gln Ile Thr 850 855 860 Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Thr Val Glu Lys Glu Leu Ser Ala 865 870 875 880 Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Gly Asn Asn Asp Ile Ser Lys 885 890 895 Trp Thr Lys Gly Arg Arg Asp Glu Ala Leu Phe Leu Leu Lys Lys Arg 900 905 910 Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Gln Phe Val Cys Leu Asp Cys Gly 915 920 925 His Glu Val His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser 930 935 940 Trp Leu Phe Leu Asn Ser Asn Ser Thr Glu Phe Lys Ser Tyr Lys Ser 945 950 955 960 Gly Lys Gln Pro Phe Val Gly Ala Trp Gln Ala Phe Tyr Lys Arg Arg 965 970 975 Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Asn Ala 980 985 <![CDATA[<210> 250]]> <![CDATA[<211> 986]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 250]]> Met Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Lys Lys Leu Ser Ala Asp Asn 1 5 10 15 Ala Thr Lys Pro Val Ser Arg Ser Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val 20 25 30 Arg Val Met Thr Asp Asp Leu Lys Lys Arg Leu Glu Lys Arg Arg Lys 35 40 45 Lys Pro Glu Val Met Pro Gln Val Ile Ser Asn Asn Ala Ala Asn Asn 50 55 60 Leu Arg Met Leu Leu Asp Asp Tyr Thr Lys Met Lys Glu Ala Ile Leu 65 70 75 80 Gln Val Tyr Trp Gln Glu Phe Lys Asp Asp His Val Gly Leu Met Cys 85 90 95 Lys Phe Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys 100 105 110 Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys 115 120 125 Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser 130 135 140 Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala 145 150 155 160 Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp 165 170 175 Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Val Val Glu Arg 325 330 335 Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile Asn Glu Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val Phe Trp Ser Gly Val 355 360 365 Thr Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly Tyr Asn Tyr Leu Pro 370 375 380 Asn Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser Leu Glu Asn Pro Lys 385 390 395 400 Lys Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Leu Glu Lys 405 410 415 Lys Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp Glu Ala Trp Glu Arg 420 425 430 Ile Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His Ile Glu Arg Glu Glu 435 440 445 Ala Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Val Leu Thr Asp Trp 450 455 460 Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg Leu Lys Glu Met Asp 465 470 475 480 Glu Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu Gln Lys Trp Tyr Gly 485 490 495 Asp Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala Glu Asn Arg Val Val 500 505 510 Asp Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly Ser Asp Gly His Ser Ile Gln Tyr 515 520 525 Arg Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Arg Glu Phe 530 535 540 Tyr Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys Lys Gly Arg Ile Arg Phe Thr Asp 545 550 555 560 Gly Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly Lys Trp Gln Gly Leu Leu Tyr Gly 565 570 575 Gly Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp Leu Thr Phe Asp Pro Asp Asp Glu 580 585 590 Gln Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Thr Arg Gln Gly Arg Glu 595 600 605 Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Leu Ile Lys Leu 610 615 620 Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Ile Tyr Asn Lys Lys Ile Gly 625 630 635 640 Arg Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu 645 650 655 Val Val Asp Pro Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile Gly Val Asp 660 665 670 Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly 675 680 685 Cys Pro Leu Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro Thr Asp Ile 690 695 700 Leu Arg Ile Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala Ile Gln Ala 705 710 715 720 Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Phe 725 730 735 Ala Ser Lys Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Ser Ala 740 745 750 Arg Asp Leu Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val Leu Val Phe 755 760 765 Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met 770 775 780 Thr Glu Arg Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu 785 790 795 800 Ala Tyr Glu Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala 805 810 815 Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser 820 825 830 Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly 835 840 845 Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile 850 855 860 Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser 865 870 875 880 Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser 885 890 895 Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys 900 905 910 Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys 915 920 925 Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg 930 935 940 Ser Trp Leu Phe Leu Asn Ser Asn Ser Thr Glu Phe Lys Ser Tyr Lys 945 950 955 960 Ser Gly Lys Gln Pro Phe Val Gly Ala Trp Gln Ala Phe Tyr Lys Arg 965 970 975 Arg Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Asn Ala 980 985 <![CDATA[<210> 251]]> <![CDATA[<211> 921]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 251]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro 675 680 685 Thr Asp Ile Leu Arg Ile Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Phe Ala Ser Lys Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Ser Ala Arg Asp Leu Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val 740 745 750 Leu Val Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Thr Glu Arg Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala 915 920 <![CDATA[<210> 252]]> <![CDATA[<211> 920]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 252]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala 915 920 <![CDATA[<210> 253]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 253]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Asn Ala Ala 50 55 60 Asn Asn Leu Arg Met Leu Leu Asp Asp Tyr Thr Lys Met Lys Glu Ala 65 70 75 80 Ile Leu Gln Val Tyr Trp Gln Glu Phe Lys Asp Asp His Val Gly Leu 85 90 95 Met Cys Lys Phe Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 254]]> <![CDATA[<211> 986]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 254]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Val Val Glu 325 330 335 Arg Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile Asn Glu Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val Phe Trp Ser Gly 355 360 365 Val Thr Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly Tyr Asn Tyr Leu 370 375 380 Pro Asn Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser Leu Glu Asn Pro 385 390 395 400 Lys Lys Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Leu Glu 405 410 415 Lys Lys Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His Ile Glu Arg Glu 435 440 445 Glu Ala Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Val Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg Leu Lys Glu Met 465 470 475 480 Asp Glu Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys 805 810 815 Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg 820 825 830 Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile 835 840 845 Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg 850 855 860 Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg 865 870 875 880 Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly 885 890 895 Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg 900 905 910 Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 915 920 925 Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 930 935 940 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 945 950 955 960 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 965 970 975 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 980 985 <![CDATA[<210> 255]]> <![CDATA[<211> 925]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 255]]> Met Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp 1 5 10 15 Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe 20 25 30 Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro 35 40 45 Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu 50 55 60 Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu 65 70 75 80 Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr 85 90 95 Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu 100 105 110 Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser 115 120 125 Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val 130 135 140 Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly 145 150 155 160 Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys 165 170 175 Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu 180 185 190 Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu 195 200 205 Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu 210 215 220 Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val 225 230 235 240 Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu 245 250 255 Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe 260 265 270 Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp 275 280 285 Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp 290 295 300 Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala 305 310 315 320 Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys 325 330 335 Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys 340 345 350 His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile 355 360 365 Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu 370 375 380 Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu 385 390 395 400 Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys 405 410 415 Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp 420 425 430 Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Arg Val Val Asp 435 440 445 Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly Ser Asp Gly His Ser Ile Gln Tyr Arg 450 455 460 Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr Leu Glu Asn Gly Lys Arg Glu Phe Tyr 465 470 475 480 Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys Lys Gly Arg Ile Arg Phe Thr Asp Gly 485 490 495 Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly Lys Trp Gln Gly Leu Leu Tyr Gly Gly 500 505 510 Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp Leu Thr Phe Asp Pro Asp Asp Glu Gln 515 520 525 Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Thr Arg Gln Gly Arg Glu Phe 530 535 540 Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Leu Ile Lys Leu Ala 545 550 555 560 Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Ile Tyr Asn Lys Lys Ile Gly Arg 565 570 575 Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val 580 585 590 Val Asp Pro Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg 595 600 605 Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys 610 615 620 Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu 625 630 635 640 Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys 645 650 655 Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala 660 665 670 Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg 675 680 685 Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu 690 695 700 Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala 705 710 715 720 Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala 725 730 735 Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr 740 745 750 Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp 755 760 765 Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met 770 775 780 Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr 785 790 795 800 Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu 805 810 815 Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp 820 825 830 Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe 835 840 845 Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe 850 855 860 Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp 865 870 875 880 Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr 885 890 895 Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe 900 905 910 Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 915 920 925 <![CDATA[<210> 256]]> <![CDATA[<211> 975]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 256]]> Met Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Lys Lys Leu Ser Ala Asp Asn 1 5 10 15 Ala Thr Lys Pro Val Ser Arg Ser Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val 20 25 30 Arg Val Met Thr Asp Asp Leu Lys Lys Arg Leu Glu Lys Arg Arg Lys 35 40 45 Lys Pro Glu Val Met Pro Gln Val Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn 50 55 60 Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu 65 70 75 80 His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser 85 90 95 Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile 100 105 110 Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys 115 120 125 Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn 130 135 140 Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser 145 150 155 160 Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn 165 170 175 Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu 180 185 190 Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys 195 200 205 Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly 210 215 220 Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr 225 230 235 240 Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn 245 250 255 Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu 260 265 270 Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly 275 280 285 Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn 290 295 300 Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro 305 310 315 320 Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln 325 330 335 Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu 340 345 350 Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala 355 360 365 Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu 370 375 380 Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu 385 390 395 400 Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr 405 410 415 Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys 420 425 430 His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys 435 440 445 Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu 450 455 460 Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys 465 470 475 480 Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu 485 490 495 Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn 500 505 510 Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr 515 520 525 Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile 530 535 540 Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys 545 550 555 560 Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp 565 570 575 Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg 580 585 590 Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys 595 600 605 Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr 610 615 620 Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg 625 630 635 640 Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile 645 650 655 Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu 660 665 670 Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His 675 680 685 Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln 690 695 700 Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys 705 710 715 720 Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr 725 730 735 Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile 740 745 750 Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe 755 760 765 Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys 770 775 780 Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala 785 790 795 800 Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser 805 810 815 Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly 820 825 830 Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile 835 840 845 Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser 850 855 860 Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser 865 870 875 880 Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys 885 890 895 Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys 900 905 910 Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg 915 920 925 Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn 930 935 940 Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln 945 950 955 960 Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 257]]> <![CDATA[<211> 982]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 257]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Arg Val Val Asp Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly 500 505 510 Ser Asp Gly His Ser Ile Gln Tyr Arg Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr 515 520 525 Leu Glu Asn Gly Lys Arg Glu Phe Tyr Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys 530 535 540 Lys Gly Arg Ile Arg Phe Thr Asp Gly Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly 545 550 555 560 Lys Trp Gln Gly Leu Leu Tyr Gly Gly Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp 565 570 575 Leu Thr Phe Asp Pro Asp Asp Glu Gln Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala 580 585 590 Phe Gly Thr Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser 595 600 605 Leu Glu Thr Gly Leu Ile Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys 610 615 620 Thr Ile Tyr Asn Lys Lys Ile Gly Arg Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val 625 630 635 640 Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Val Asp Pro Ser Asn Ile Lys 645 650 655 Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val 660 665 670 Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp 675 680 685 Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys 690 695 700 Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg 705 710 715 720 Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala 725 730 735 Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val 740 745 750 Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly 755 760 765 Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met 770 775 780 Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn 805 810 815 Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys 820 825 830 Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu 835 840 845 Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln 850 855 860 Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu 865 870 875 880 Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu 885 890 895 Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu 900 905 910 Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln 915 920 925 Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu 930 935 940 Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg 945 950 955 960 Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu 965 970 975 Val Trp Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 258]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 258]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 259]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 259]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Ala Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala <![CDATA[<210> 260]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 260]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 261]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 261]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Gln Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 262]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 262]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Gln Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 263]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 263]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Ile Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 264]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 264]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 265]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 265]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Thr Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 266]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 266]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 267]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 267]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 268]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 268]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Lys Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 269]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 269]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 270]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 270]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 271]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 271]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 272]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 272]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Ser Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 273]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 273]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 274]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 274]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Asp Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 275]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 275]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Phe Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 276]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 276]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 277]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 277]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 278]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 278]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 279]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 279]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 280]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 280]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Lys Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 281]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 281]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Asn Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 282]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 282]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Met Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 283]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 283]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 284]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 284]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 285]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 285]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 286]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 286]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 287]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 287]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Val 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile 245 250 255 Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala 260 265 270 Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 288]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 288]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 289]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 289]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 290]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 290]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 291]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 291]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 292]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 292]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 293]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 293]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 294]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 294]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 295]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 295]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 296]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 296]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 297]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 297]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 298]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 298]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 299]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 299]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 300]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 300]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 301]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 301]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 302]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 302]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 303]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 303]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 304]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 304]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 305]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 305]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 306]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 306]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 307]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 307]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 308]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 308]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 309]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 309]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 310]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 310]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 311]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 311]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 312]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 312]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 313]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 313]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 314]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 314]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 315]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 315]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys 245 250 255 Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly 260 265 270 Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 316]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 316]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 317]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 317]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 318]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 318]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 319]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 319]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 320]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 320]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 321]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 321]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Met Ser Ser Gly 115 120 125 Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu 130 135 140 Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys 145 150 155 160 Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro 165 170 175 Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile 245 250 255 Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala 260 265 270 Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 322]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 322]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 323]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 323]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 324]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 324]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 325]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 325]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 326]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 326]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 327]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 327]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 328]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 328]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 329]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 329]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 330]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 330]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 331]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 331]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 332]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 332]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 333]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 333]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 334]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 334]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 335]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 335]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 336]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 336]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 337]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 337]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 338]]> <![CDATA[<211> 84]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 338]]> Met Ala Ser Met Ile Ser Ser Ser Ala Val Thr Thr Val Ser Arg Ala 1 5 10 15 Ser Arg Gly Gln Ser Ala Ala Met Ala Pro Phe Gly Gly Leu Lys Ser 20 25 30 Met Thr Gly Phe Pro Val Arg Lys Val Asn Thr Asp Ile Thr Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Asn Gly Gly Arg Val Lys Cys Met Gln Val Trp Pro Pro Ile 50 55 60 Gly Lys Lys Lys Phe Glu Thr Leu Ser Tyr Leu Pro Pro Leu Thr Arg 65 70 75 80 Asp Ser Arg Ala <![CDATA[<210> 339]]> <![CDATA[<211> 57]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 339]]> Met Ala Ser Met Ile Ser Ser Ser Ala Val Thr Thr Val Ser Arg Ala 1 5 10 15 Ser Arg Gly Gln Ser Ala Ala Met Ala Pro Phe Gly Gly Leu Lys Ser 20 25 30 Met Thr Gly Phe Pro Val Arg Lys Val Asn Thr Asp Ile Thr Ser Ile 35 40 45 Thr Ser Asn Gly Gly Arg Val Lys Ser 50 55 <![CDATA[<210> 340]]> <![CDATA[<211> 85]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 340]]> Met Ala Ser Ser Met Leu Ser Ser Ala Thr Met Val Ala Ser Pro Ala 1 5 10 15 Gln Ala Thr Met Val Ala Pro Phe Asn Gly Leu Lys Ser Ser Ala Ala 20 25 30 Phe Pro Ala Thr Arg Lys Ala Asn Asn Asp Ile Thr Ser Ile Thr Ser 35 40 45 Asn Gly Gly Arg Val Asn Cys Met Gln Val Trp Pro Pro Ile Glu Lys 50 55 60 Lys Lys Phe Glu Thr Leu Ser Tyr Leu Pro Asp Leu Thr Asp Ser Gly 65 70 75 80 Gly Arg Val Asn Cys 85 <![CDATA[<210> 341]]> <![CDATA[<211> 76]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 341]]> Met Ala Gln Val Ser Arg Ile Cys Asn Gly Val Gln Asn Pro Ser Leu 1 5 10 15 Ile Ser Asn Leu Ser Lys Ser Ser Gln Arg Lys Ser Pro Leu Ser Val 20 25 30 Ser Leu Lys Thr Gln Gln His Pro Arg Ala Tyr Pro Ile Ser Ser Ser 35 40 45 Trp Gly Leu Lys Lys Ser Gly Met Thr Leu Ile Gly Ser Glu Leu Arg 50 55 60 Pro Leu Lys Val Met Ser Ser Val Ser Thr Ala Cys 65 70 75 <![CDATA[<210> 342]]> <![CDATA[<211> 76]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 342]]> Met Ala Gln Val Ser Arg Ile Cys Asn Gly Val Trp Asn Pro Ser Leu 1 5 10 15 Ile Ser Asn Leu Ser Lys Ser Ser Gln Arg Lys Ser Pro Leu Ser Val 20 25 30 Ser Leu Lys Thr Gln Gln His Pro Arg Ala Tyr Pro Ile Ser Ser Ser 35 40 45 Trp Gly Leu Lys Lys Ser Gly Met Thr Leu Ile Gly Ser Glu Leu Arg 50 55 60 Pro Leu Lys Val Met Ser Ser Val Ser Thr Ala Cys 65 70 75 <![CDATA[<210> 343]]> <![CDATA[<211> 72]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 343]]> Met Ala Gln Ile Asn Asn Met Ala Gln Gly Ile Gln Thr Leu Asn Pro 1 5 10 15 Asn Ser Asn Phe His Lys Pro Gln Val Pro Lys Ser Ser Ser Phe Leu 20 25 30 Val Phe Gly Ser Lys Lys Leu Lys Asn Ser Ala Asn Ser Met Leu Val 35 40 45 Leu Lys Lys Asp Ser Ile Phe Met Gln Leu Phe Cys Ser Phe Arg Ile 50 55 60 Ser Ala Ser Val Ala Thr Ala Cys 65 70 <![CDATA[<210> 344]]> <![CDATA[<211> 69]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 344]]> Met Ala Ala Leu Val Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Gly Thr Val Leu 1 5 10 15 Ser Val Thr Asp Arg Phe Arg Arg Pro Gly Phe Gln Gly Leu Arg Pro 20 25 30 Arg Asn Pro Ala Asp Ala Ala Leu Gly Met Arg Thr Val Gly Ala Ser 35 40 45 Ala Ala Pro Lys Gln Ser Arg Lys Pro His Arg Phe Asp Arg Arg Cys 50 55 60 Leu Ser Met Val Val 65 <![CDATA[<210> 345]]> <![CDATA[<211> 77]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 345]]> Met Ala Ala Leu Thr Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Ala Thr Gly Phe 1 5 10 15 Gly Ile Ala Asp Arg Ser Ala Pro Ser Ser Leu Leu Arg His Gly Phe 20 25 30 Gln Gly Leu Lys Pro Arg Ser Pro Ala Gly Gly Asp Ala Thr Ser Leu 35 40 45 Ser Val Thr Thr Ser Ala Arg Ala Thr Pro Lys Gln Gln Arg Ser Val 50 55 60 Gln Arg Gly Ser Arg Arg Phe Pro Ser Val Val Val Cys 65 70 75 <![CDATA[<210> 346]]> <![CDATA[<211> 57]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 346]]> Met Ala Ser Ser Val Leu Ser Ser Ala Ala Val Ala Thr Arg Ser Asn 1 5 10 15 Val Ala Gln Ala Asn Met Val Ala Pro Phe Thr Gly Leu Lys Ser Ala 20 25 30 Ala Ser Phe Pro Val Ser Arg Lys Gln Asn Leu Asp Ile Thr Ser Ile 35 40 45 Ala Ser Asn Gly Gly Arg Val Gln Cys 50 55 <![CDATA[<210> 347]]> <![CDATA[<211> 65]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 347]]> Met Glu Ser Leu Ala Ala Thr Ser Val Phe Ala Pro Ser Arg Val Ala 1 5 10 15 Val Pro Ala Ala Arg Ala Leu Val Arg Ala Gly Thr Val Val Pro Thr 20 25 30 Arg Arg Thr Ser Ser Thr Ser Gly Thr Ser Gly Val Lys Cys Ser Ala 35 40 45 Ala Val Thr Pro Gln Ala Ser Pro Val Ile Ser Arg Ser Ala Ala Ala 50 55 60 Ala 65 <![CDATA[<210> 348]]> <![CDATA[<211> 72]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 葉綠體轉運肽]]> <![CDATA[<400> 348]]> Met Gly Ala Ala Ala Thr Ser Met Gln Ser Leu Lys Phe Ser Asn Arg 1 5 10 15 Leu Val Pro Pro Ser Arg Arg Leu Ser Pro Val Pro Asn Asn Val Thr 20 25 30 Cys Asn Asn Leu Pro Lys Ser Ala Ala Pro Val Arg Thr Val Lys Cys 35 40 45 Cys Ala Ser Ser Trp Asn Ser Thr Ile Asn Gly Ala Ala Ala Thr Thr 50 55 60 Asn Gly Ala Ser Ala Ala Ser Ser 65 70 <![CDATA[<210> 349]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 內體逃逸肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (4)..(4)]]> <![CDATA[<223> Xaa為Lys、His或Arg]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (8)..(8)]]> <![CDATA[<223> Xaa為Lys、His或Arg]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (11)..(11)]]> <![CDATA[<223> Xaa為Lys、His或Arg]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (15)..(15)]]> <![CDATA[<223> Xaa為Lys、His或Arg]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (19)..(19)]]> <![CDATA[<223> Xaa為Lys、His或Arg]]> <![CDATA[<400> 349]]> Gly Leu Phe Xaa Ala Leu Leu Xaa Leu Leu Xaa Ser Leu Trp Xaa Leu 1 5 10 15 Leu Leu Xaa Ala 20 <![CDATA[<210> 350]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 內體逃逸肽]]> <![CDATA[<400> 350]]> Gly Leu Phe His Ala Leu Leu His Leu Leu His Ser Leu Trp His Leu 1 5 10 15 Leu Leu His Ala 20 <![CDATA[<210> 351]]> <![CDATA[<211> 9]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 內體逃逸肽]]> <![CDATA[<400> 351]]> His His His His His His His His His 1 5 <![CDATA[<210> 352]]> <![CDATA[<211> 7]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> β多瘤病毒恆河獼猴多瘤病毒1]]> <![CDATA[<400> 352]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 1 5 <![CDATA[<210> 353]]> <![CDATA[<211> 16]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 353]]> Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 354]]> <![CDATA[<211> 9]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 354]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 1 5 <![CDATA[<210> 355]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 355]]> Arg Gln Arg Arg Asn Glu Leu Lys Arg Ser Pro 1 5 10 <![CDATA[<210> 356]]> <![CDATA[<211> 38]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 356]]> Asn Gln Ser Ser Asn Phe Gly Pro Met Lys Gly Gly Asn Phe Gly Gly 1 5 10 15 Arg Ser Ser Gly Pro Tyr Gly Gly Gly Gly Gln Tyr Phe Ala Lys Pro 20 25 30 Arg Asn Gln Gly Gly Tyr 35 <![CDATA[<210> 357]]> <![CDATA[<211> 42]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 357]]> Arg Met Arg Ile Glx Phe Lys Asn Lys Gly Lys Asp Thr Ala Glu Leu 1 5 10 15 Arg Arg Arg Arg Val Glu Val Ser Val Glu Leu Arg Lys Ala Lys Lys 20 25 30 Asp Glu Gln Ile Leu Lys Arg Arg Asn Val 35 40 <![CDATA[<210> 358]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 358]]> Val Ser Arg Lys Arg Pro Arg Pro 1 5 <![CDATA[<210> 359]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 359]]> Pro Pro Lys Lys Ala Arg Glu Asp 1 5 <![CDATA[<210> 360]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 360]]> Pro Gln Pro Lys Lys Lys Pro Leu 1 5 <![CDATA[<210> 361]]> <![CDATA[<211> 12]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 小家鼠]]> <![CDATA[<400> 361]]> Ser Ala Leu Ile Lys Lys Lys Lys Lys Met Ala Pro 1 5 10 <![CDATA[<210> 362]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> α型流感病毒A型流感病毒]]> <![CDATA[<400> 362]]> Asp Arg Leu Arg Arg 1 5 <![CDATA[<210> 363]]> <![CDATA[<211> 7]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> α型流感病毒A型流感病毒]]> <![CDATA[<400> 363]]> Pro Lys Gln Lys Lys Arg Lys 1 5 <![CDATA[<210> 364]]> <![CDATA[<211> 10]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> δ病毒D型肝炎病毒]]> <![CDATA[<400> 364]]> Arg Lys Leu Lys Lys Lys Ile Lys Lys Leu 1 5 10 <![CDATA[<210> 365]]> <![CDATA[<211> 10]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 小家鼠]]> <![CDATA[<400> 365]]> Arg Glu Lys Lys Lys Phe Leu Lys Arg Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 366]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 366]]> Lys Arg Lys Gly Asp Glu Val Asp Gly Val Asp Glu Val Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Ser Lys Lys 20 <![CDATA[<210> 367]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 367]]> Arg Lys Cys Leu Gln Ala Gly Met Asn Leu Glu Ala Arg Lys Thr Lys 1 5 10 15 Lys <![CDATA[<210> 368]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 哺乳動物正RNA病毒1正RNA病毒]]> <![CDATA[<400> 368]]> Pro Arg Pro Arg Lys Ile Pro Arg 1 5 <![CDATA[<210> 369]]> <![CDATA[<211> 9]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> C型肝炎病毒]]> <![CDATA[<400> 369]]> Pro Pro Arg Lys Lys Arg Thr Val Val 1 5 <![CDATA[<210> 370]]> <![CDATA[<211> 12]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 370]]> Asn Leu Ser Lys Lys Lys Lys Arg Lys Arg Glu Lys 1 5 10 <![CDATA[<210> 371]]> <![CDATA[<211> 10]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 371]]> Arg Arg Pro Ser Arg Pro Phe Arg Lys Pro 1 5 10 <![CDATA[<210> 372]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 淋巴潛隱病毒人γ疱疹病毒4]]> <![CDATA[<400> 372]]> Lys Arg Pro Arg Ser Pro Ser Ser 1 5 <![CDATA[<210> 373]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> α型流感病毒A型流感病毒]]> <![CDATA[<400> 373]]> Lys Arg Gly Ile Asn Asp Arg Asn Phe Trp Arg Gly Glu Asn Glu Arg 1 5 10 15 Lys Thr Arg <![CDATA[<210> 374]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 智人]]> <![CDATA[<400> 374]]> Pro Arg Pro Pro Lys Met Ala Arg Tyr Asp Asn 1 5 10 <![CDATA[<210> 375]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 375]]> Lys Arg Ser Phe Ser Lys Ala Phe 1 5 <![CDATA[<210> 376]]> <![CDATA[<211> 9]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 376]]> Lys Leu Lys Ile Lys Arg Pro Val Lys 1 5 <![CDATA[<210> 377]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 377]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val 1 5 10 15 Lys Leu Asp <![CDATA[<210> 378]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 逆轉錄病毒人嗜T淋巴細胞病毒1]]> <![CDATA[<400> 378]]> Pro Lys Thr Arg Arg Arg Pro Arg Arg Ser Gln Arg Lys Arg Pro Pro 1 5 10 15 Thr <![CDATA[<210> 379]]> <![CDATA[<211> 24]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 秀麗隱桿線蟲]]> <![CDATA[<400> 379]]> Ser Arg Arg Arg Lys Ala Asn Pro Thr Lys Leu Ser Glu Asn Ala Lys 1 5 10 15 Lys Leu Ala Lys Glu Val Glu Asn 20 <![CDATA[<210> 380]]> <![CDATA[<211> 16]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 380]]> Lys Thr Arg Arg Arg Pro Arg Arg Ser Gln Arg Lys Arg Pro Pro Thr 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 381]]> <![CDATA[<211> 13]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 381]]> Arg Arg Lys Lys Arg Arg Pro Arg Arg Lys Lys Arg Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 382]]> <![CDATA[<211> 14]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 382]]> Pro Lys Lys Lys Ser Arg Lys Pro Lys Lys Lys Ser Arg Lys 1 5 10 <![CDATA[<210> 383]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 383]]> His Lys Lys Lys His Pro Asp Ala Ser Val Asn Phe Ser Glu Phe Ser 1 5 10 15 Lys <![CDATA[<210> 384]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 384]]> Gln Arg Pro Gly Pro Tyr Asp Arg Pro Gln Arg Pro Gly Pro Tyr Asp 1 5 10 15 Arg Pro <![CDATA[<210> 385]]> <![CDATA[<211> 16]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 385]]> Leu Ser Pro Ser Leu Ser Pro Leu Leu Ser Pro Ser Leu Ser Pro Leu 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 386]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 386]]> Arg Gly Lys Gly Gly Lys Gly Leu Gly Lys Gly Gly Ala Lys Arg His 1 5 10 15 Arg Lys <![CDATA[<210> 387]]> <![CDATA[<211> 14]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 387]]> Pro Lys Arg Gly Arg Gly Arg Pro Lys Arg Gly Arg Gly Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 388]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 388]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val 1 5 10 15 Lys Leu Asp <![CDATA[<210> 389]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 389]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys 1 5 10 15 Val <![CDATA[<210> 390]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 慢病毒人類免疫缺乏病毒]]> <![CDATA[<400> 390]]> Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 391]]> <![CDATA[<211> 8]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 慢病毒人類免疫缺乏病毒]]> <![CDATA[<400> 391]]> Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg 1 5 <![CDATA[<210> 392]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 慢病毒人類免疫缺乏病毒]]> <![CDATA[<400> 392]]> Tyr Ala Arg Ala Ala Ala Arg Gln Ala Arg Ala 1 5 10 <![CDATA[<210> 393]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 慢病毒人類免疫缺乏病毒]]> <![CDATA[<400> 393]]> Thr His Arg Leu Pro Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 394]]> <![CDATA[<211> 11]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 慢病毒人類免疫缺乏病毒]]> <![CDATA[<400> 394]]> Gly Gly Arg Arg Ala Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 395]]> <![CDATA[<211> 12]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 肽轉導域]]> <![CDATA[<400> 395]]> Arg Arg Gln Arg Arg Thr Ser Lys Leu Met Lys Arg 1 5 10 <![CDATA[<210> 396]]> <![CDATA[<211> 27]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 肽轉導域]]> <![CDATA[<400> 396]]> Gly Trp Thr Leu Asn Ser Ala Gly Tyr Leu Leu Gly Lys Ile Asn Leu 1 5 10 15 Lys Ala Leu Ala Ala Leu Ala Lys Lys Ile Leu 20 25 <![CDATA[<210> 397]]> <![CDATA[<211> 33]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 未知]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 肽轉導域]]> <![CDATA[<400> 397]]> Lys Ala Leu Ala Trp Glu Ala Lys Leu Ala Lys Ala Leu Ala Lys Ala 1 5 10 15 Leu Ala Lys His Leu Ala Lys Ala Leu Ala Lys Ala Leu Lys Cys Glu 20 25 30 Ala <![CDATA[<210> 398]]> <![CDATA[<211> 16]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<223> 黑腹果蠅]]> <![CDATA[<400> 398]]> Arg Gln Ile Lys Ile Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met Lys Trp Lys Lys 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 399]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (6)..(10)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (11)..(15)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (16)..(20)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (21)..(25)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 399]]> Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Ser Gly Gly Ser Gly Ser Gly Gly Ser 20 25 <![CDATA[<210> 400]]> <![CDATA[<211> 30]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (7)..(12)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (13)..(18)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (19)..(24)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (25)..(30)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 400]]> Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly 1 5 10 15 Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser 20 25 30 <![CDATA[<210> 401]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (5)..(8)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (9)..(12)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (13)..(16)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (17)..(20)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 401]]> Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15 Gly Gly Gly Ser 20 <![CDATA[<210> 402]]> <![CDATA[<211> 4]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 402]]> Gly Gly Ser Gly 1 <![CDATA[<210> 403]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 403]]> Gly Gly Ser Gly Gly 1 5 <![CDATA[<210> 404]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 404]]> Gly Ser Gly Ser Gly 1 5 <![CDATA[<210> 405]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 405]]> Gly Ser Gly Gly Gly 1 5 <![CDATA[<210> 406]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 406]]> Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 <![CDATA[<210> 407]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 407]]> Gly Ser Ser Ser Gly 1 5 <![CDATA[<210> 408]]> <![CDATA[<211> 4]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 408]]> Gly Pro Gly Pro 1 <![CDATA[<210> 409]]> <![CDATA[<211> 6]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 409]]> Pro Pro Ala Pro Pro Ala 1 5 <![CDATA[<210> 410]]> <![CDATA[<211> 7]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子多肽]]> <![CDATA[<400> 410]]> Pro Pro Pro Gly Pro Pro Pro 1 5 <![CDATA[<210> 411]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 411]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Gly Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 412]]> <![CDATA[<211> 986]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 412]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Val Val Glu 325 330 335 Arg Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile Asn Glu Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val Phe Trp Ser Gly 355 360 365 Val Thr Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly Tyr Asn Tyr Leu 370 375 380 Pro Asn Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser Leu Glu Asn Pro 385 390 395 400 Lys Lys Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu Tyr Leu Glu 405 410 415 Lys Lys Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His Ile Glu Arg Glu 435 440 445 Glu Ala Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Val Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg Leu Lys Glu Met 465 470 475 480 Asp Glu Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys 805 810 815 Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg 820 825 830 Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile 835 840 845 Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg 850 855 860 Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg 865 870 875 880 Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly 885 890 895 Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg 900 905 910 Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 915 920 925 Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 930 935 940 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 945 950 955 960 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 965 970 975 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 980 985 <![CDATA[<210> 413]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 413]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro 675 680 685 Thr Asp Ile Leu Arg Ile Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Phe Ala Ser Lys Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Ser Ala Arg Asp Leu Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val 740 745 750 Leu Val Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Thr Glu Arg Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 414]]> <![CDATA[<211> 972]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 414]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Asn Ser Asn Ser Thr Glu Phe Lys Ser 930 935 940 Tyr Lys Ser Gly Lys Gln Pro Phe Val Gly Ala Trp Gln Ala Phe Tyr 945 950 955 960 Lys Arg Arg Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Asn Ala 965 970 <![CDATA[<210> 415]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 415]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 His Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 416]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 416]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 417]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 417]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn His Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 418]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 418]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Ala 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 419]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 419]]> Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Ala Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala 225 230 235 240 Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val 245 250 255 Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly 260 265 270 Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His 275 280 285 Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg 290 295 300 Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp 305 310 315 320 Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu 325 330 335 Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn 340 345 350 Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp 355 360 365 Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu 370 375 380 Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln 385 390 395 400 Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp 405 410 415 Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu 420 425 430 Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp 435 440 445 Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser 450 455 460 Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg 465 470 475 480 Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro 485 490 495 Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser 500 505 510 Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys 515 520 525 Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg 530 535 540 Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr 545 550 555 560 Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe 565 570 575 Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys 580 585 590 Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr 595 600 605 Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr 610 615 620 Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr 625 630 635 640 Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn 645 650 655 Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu 660 665 670 Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly 675 680 685 Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln 690 695 700 Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly 705 710 715 720 Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met 725 730 735 Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp 740 745 750 Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly 755 760 765 Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp 770 775 780 Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 420]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 420]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Gln Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 421]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 421]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Thr Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 422]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 422]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Arg Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 423]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 423]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Tyr Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 424]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 424]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 His Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 425]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 425]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Ala Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 426]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 426]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 427]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 427]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 428]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 428]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 429]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 429]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Asn Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 430]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 430]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Trp Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 431]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 431]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Tyr Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 432]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 432]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 433]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 433]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 434]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 434]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 435]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 435]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 436]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 436]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Thr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 437]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 437]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ala Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 438]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 438]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Val Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 439]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 439]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Leu Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 440]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 440]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asn Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 441]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 441]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gln Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 442]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 442]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Ser Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 443]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 443]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Ala Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 444]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 444]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 445]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 445]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Thr Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 446]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 446]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 447]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 447]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu His 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 448]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 448]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Glu Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 449]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 449]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Ile Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 450]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 450]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Phe Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 451]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 451]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Trp Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 452]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 452]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Asp Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 453]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 453]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Thr Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 454]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 454]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Asp Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 455]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 455]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Pro Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 456]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 456]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Lys Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 457]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 457]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Lys Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 458]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 458]]> Gln Glu Gly Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 459]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 459]]> Gln Glu Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 460]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 460]]> Gln Glu Ile Gly Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 461]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 461]]> Gln Glu Ile Gly Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 462]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 462]]> Gln Glu Ile Ser Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 463]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 463]]> Gln Glu Ile Lys Gly Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 464]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 464]]> Gln Glu Ile Lys Ser Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 465]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 465]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ala Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 466]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 466]]> Gln Glu Ile Lys Arg Gly Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 467]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 467]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Ser Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 468]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 468]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Gly Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 469]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 469]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Phe 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 470]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 470]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Phe Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 471]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 471]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Pro Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 472]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 472]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Pro Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 473]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 473]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 474]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 474]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Pro Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 475]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 475]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Ser Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 476]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 476]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Gln Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 477]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 477]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Thr His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 478]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 478]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Gly Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 479]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 479]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Asp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 480]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 480]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Ala Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 481]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 481]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Arg Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 482]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 482]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 483]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 483]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Tyr Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 484]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 484]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ser Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 485]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 485]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Pro Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 486]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 486]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly 245 250 255 Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn 260 265 270 Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 487]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 487]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 488]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 488]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Gly 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 489]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 489]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Ser 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 490]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 490]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Leu Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 491]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 491]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Thr Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 492]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 492]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Trp Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 493]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 493]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Asn Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 494]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 494]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Gln Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 495]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 495]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Ala Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 496]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 496]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 497]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 497]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Pro 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 498]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 498]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 499]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 499]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Leu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 500]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 500]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Arg 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 501]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 501]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 502]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 502]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn His Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 503]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 503]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Ala Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 504]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 504]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 505]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 505]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Pro Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 506]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 506]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Thr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 507]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 507]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Met 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 508]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 508]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Asn His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 509]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 509]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Trp His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 510]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 510]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Tyr Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 511]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 511]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Pro Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 512]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 512]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Glu Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 513]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 513]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Arg Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 514]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 514]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Trp Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 515]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 515]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Tyr Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 516]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 516]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Tyr Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 517]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 517]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Arg Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 518]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 518]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Asp 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 519]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 519]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Pro 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 520]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 520]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Leu Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 521]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 521]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Gly Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 522]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 522]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Gln Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 523]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 523]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Asp Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 524]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 524]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Thr Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 525]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 525]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Thr Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 526]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 526]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Lys Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 527]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 527]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Glu Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 528]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 528]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Ser Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 529]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 529]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Arg Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 530]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 530]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Lys Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 531]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 531]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Ser Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 532]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 532]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 533]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 533]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Gln Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 534]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 534]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Lys Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 535]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 535]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Asp Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 536]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 536]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Val 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 537]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 537]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Asp 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 538]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 538]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Arg Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 539]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 539]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys His Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 540]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 540]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Pro Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 541]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 541]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Thr Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 542]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 542]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Phe 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 543]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 543]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Val 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 544]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 544]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 545]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 545]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Thr Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 546]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 546]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Asn Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 547]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 547]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Arg Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 548]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 548]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Ser Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 549]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 549]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Trp Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 550]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 550]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Arg Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 551]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 551]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ser Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 552]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 552]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val His 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 553]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 553]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Ser Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 554]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 554]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Ala Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 555]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 555]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Asp Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 556]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 556]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Asn Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 557]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 557]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Val Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 558]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 558]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Ile Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 559]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 559]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 560]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 560]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 561]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 561]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 562]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 562]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 563]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 563]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 564]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 564]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Asp Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 565]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 565]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys His Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 566]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 566]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 567]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 567]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 568]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 568]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 569]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 569]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 570]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 570]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 571]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 571]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 572]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 572]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 573]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 573]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 574]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 574]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 575]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 575]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 576]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 576]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 577]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 577]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 578]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 578]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 579]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 579]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 580]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 580]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 581]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 581]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 582]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 582]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 583]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 583]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 584]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 584]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 585]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 585]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 586]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 586]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 587]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 587]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 588]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 588]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 589]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 589]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 590]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 590]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Tyr 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 591]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 591]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 592]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 592]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser His Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 593]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_002]]> <![CDATA[<400> 593]]> caagcagaag acggcatacg agatacatcg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 594]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_003]]> <![CDATA[<400> 594]]> caagcagaag acggcatacg agatgcctaa gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 595]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_004]]> <![CDATA[<400> 595]]> caagcagaag acggcatacg agattggtca gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 596]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_005]]> <![CDATA[<400> 596]]> caagcagaag acggcatacg agatcactgt gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 597]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_006]]> <![CDATA[<400> 597]]> caagcagaag acggcatacg agatattggc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 598]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_007]]> <![CDATA[<400> 598]]> caagcagaag acggcatacg agatgatctg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 599]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_008]]> <![CDATA[<400> 599]]> caagcagaag acggcatacg agattcaagt gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 600]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_009]]> <![CDATA[<400> 600]]> caagcagaag acggcatacg agatctgatc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 601]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_010]]> <![CDATA[<400> 601]]> caagcagaag acggcatacg agataagcta gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 602]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_011]]> <![CDATA[<400> 602]]> caagcagaag acggcatacg agatgtagcc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 603]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_012]]> <![CDATA[<400> 603]]> caagcagaag acggcatacg agattacaag gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 604]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_013]]> <![CDATA[<400> 604]]> caagcagaag acggcatacg agatttgact gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 605]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_014]]> <![CDATA[<400> 605]]> caagcagaag acggcatacg agatggaact gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 606]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_015]]> <![CDATA[<400> 606]]> caagcagaag acggcatacg agattgacat gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 607]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_016]]> <![CDATA[<400> 607]]> caagcagaag acggcatacg agatggacgg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 608]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_017]]> <![CDATA[<400> 608]]> caagcagaag acggcatacg agatctctac gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 609]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_018]]> <![CDATA[<400> 609]]> caagcagaag acggcatacg agatgcggac gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 610]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_019]]> <![CDATA[<400> 610]]> caagcagaag acggcatacg agattttcac gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 611]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_020]]> <![CDATA[<400> 611]]> caagcagaag acggcatacg agatggccac gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 612]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_021]]> <![CDATA[<400> 612]]> caagcagaag acggcatacg agatcgaaac gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 613]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_022]]> <![CDATA[<400> 613]]> caagcagaag acggcatacg agatcgtacg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 614]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_023]]> <![CDATA[<400> 614]]> caagcagaag acggcatacg agatccactc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 615]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_024]]> <![CDATA[<400> 615]]> caagcagaag acggcatacg agatgctacc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 616]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_025]]> <![CDATA[<400> 616]]> caagcagaag acggcatacg agatatcagt gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 617]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_026]]> <![CDATA[<400> 617]]> caagcagaag acggcatacg agatgctcat gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 618]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_027]]> <![CDATA[<400> 618]]> caagcagaag acggcatacg agataggaat gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 619]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_028]]> <![CDATA[<400> 619]]> caagcagaag acggcatacg agatcttttg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 620]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_029]]> <![CDATA[<400> 620]]> caagcagaag acggcatacg agattagttg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 621]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_030]]> <![CDATA[<400> 621]]> caagcagaag acggcatacg agatccggtg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 622]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_031]]> <![CDATA[<400> 622]]> caagcagaag acggcatacg agatatcgtg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 623]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_032]]> <![CDATA[<400> 623]]> caagcagaag acggcatacg agattgagtg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 624]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_033]]> <![CDATA[<400> 624]]> caagcagaag acggcatacg agatcgcctg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 625]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_034]]> <![CDATA[<400> 625]]> caagcagaag acggcatacg agatgccatg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 626]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_035]]> <![CDATA[<400> 626]]> caagcagaag acggcatacg agataaaatg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 627]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_036]]> <![CDATA[<400> 627]]> caagcagaag acggcatacg agattgttgg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 628]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_037]]> <![CDATA[<400> 628]]> caagcagaag acggcatacg agatattccg gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 629]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_038]]> <![CDATA[<400> 629]]> caagcagaag acggcatacg agatagctag gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 630]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_039]]> <![CDATA[<400> 630]]> caagcagaag acggcatacg agatgtatag gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 631]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_040]]> <![CDATA[<400> 631]]> caagcagaag acggcatacg agattctgag gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 632]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_041]]> <![CDATA[<400> 632]]> caagcagaag acggcatacg agatgtcgtc gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 633]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_042]]> <![CDATA[<400> 633]]> caagcagaag acggcatacg agatcgatta gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 634]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_043]]> <![CDATA[<400> 634]]> caagcagaag acggcatacg agatgctgta gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 635]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_044]]> <![CDATA[<400> 635]]> caagcagaag acggcatacg agatattata gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 636]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_045]]> <![CDATA[<400> 636]]> caagcagaag acggcatacg agatgaatga gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 637]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_046]]> <![CDATA[<400> 637]]> caagcagaag acggcatacg agattcggga gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 638]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_047]]> <![CDATA[<400> 638]]> caagcagaag acggcatacg agatcttcga gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 639]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v1_048]]> <![CDATA[<400> 639]]> caagcagaag acggcatacg agattgccga gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg 60 atct 64 <![CDATA[<210> 640]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_001]]> <![CDATA[<400> 640]]> caagcagaag acggcatacg agataaccgc gggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 641]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_002]]> <![CDATA[<400> 641]]> caagcagaag acggcatacg agatggttat aagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 642]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_003]]> <![CDATA[<400> 642]]> caagcagaag acggcatacg agatccaagt ccgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 643]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_004]]> <![CDATA[<400> 643]]> caagcagaag acggcatacg agatttggac ttgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 644]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_005]]> <![CDATA[<400> 644]]> caagcagaag acggcatacg agatcagtgg atgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 645]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_006]]> <![CDATA[<400> 645]]> caagcagaag acggcatacg agattgacaa gcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 646]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_007]]> <![CDATA[<400> 646]]> caagcagaag acggcatacg agatctagct tggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 647]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_008]]> <![CDATA[<400> 647]]> caagcagaag acggcatacg agattcgatc cagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 648]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_009]]> <![CDATA[<400> 648]]> caagcagaag acggcatacg agatcctgaa ctgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 649]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_010]]> <![CDATA[<400> 649]]> caagcagaag acggcatacg agatttcagg tcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 650]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_011]]> <![CDATA[<400> 650]]> caagcagaag acggcatacg agatagtaga gagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 651]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_012]]> <![CDATA[<400> 651]]> caagcagaag acggcatacg agatgacgag aggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 652]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_013]]> <![CDATA[<400> 652]]> caagcagaag acggcatacg agatagactt gggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 653]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_014]]> <![CDATA[<400> 653]]> caagcagaag acggcatacg agatgagtcc aagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 654]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_015]]> <![CDATA[<400> 654]]> caagcagaag acggcatacg agatcttaag ccgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 655]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_016]]> <![CDATA[<400> 655]]> caagcagaag acggcatacg agattccgga ttgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 656]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_017]]> <![CDATA[<400> 656]]> caagcagaag acggcatacg agatctgtat tagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 657]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_018]]> <![CDATA[<400> 657]]> caagcagaag acggcatacg agattcacgc cggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 658]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_019]]> <![CDATA[<400> 658]]> caagcagaag acggcatacg agatacttac atgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 659]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_020]]> <![CDATA[<400> 659]]> caagcagaag acggcatacg agatgtccgt gcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 660]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_021]]> <![CDATA[<400> 660]]> caagcagaag acggcatacg agataaggta ccgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 661]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_022]]> <![CDATA[<400> 661]]> caagcagaag acggcatacg agatggaacg ttgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 662]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_023]]> <![CDATA[<400> 662]]> caagcagaag acggcatacg agataattct gcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 663]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_024]]> <![CDATA[<400> 663]]> caagcagaag acggcatacg agatggcctc atgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 664]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_025]]> <![CDATA[<400> 664]]> caagcagaag acggcatacg agatatctta gtgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 665]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_026]]> <![CDATA[<400> 665]]> caagcagaag acggcatacg agatgctccg acgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 666]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_027]]> <![CDATA[<400> 666]]> caagcagaag acggcatacg agatatacca aggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 667]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_028]]> <![CDATA[<400> 667]]> caagcagaag acggcatacg agatgcgttg gagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 668]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_029]]> <![CDATA[<400> 668]]> caagcagaag acggcatacg agatcttcac gggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 669]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_030]]> <![CDATA[<400> 669]]> caagcagaag acggcatacg agattcctgt aagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 670]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_031]]> <![CDATA[<400> 670]]> caagcagaag acggcatacg agatagaatg ccgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 671]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_032]]> <![CDATA[<400> 671]]> caagcagaag acggcatacg agatgaggca ttgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 672]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_033]]> <![CDATA[<400> 672]]> caagcagaag acggcatacg agatcctcgg tagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 673]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_034]]> <![CDATA[<400> 673]]> caagcagaag acggcatacg agatttctaa cggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 674]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_035]]> <![CDATA[<400> 674]]> caagcagaag acggcatacg agatatgagg ctgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 675]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_036]]> <![CDATA[<400> 675]]> caagcagaag acggcatacg agatgcagaa tcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 676]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_037]]> <![CDATA[<400> 676]]> caagcagaag acggcatacg agatcactac gagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 677]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_038]]> <![CDATA[<400> 677]]> caagcagaag acggcatacg agattgtcgt aggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 678]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_039]]> <![CDATA[<400> 678]]> caagcagaag acggcatacg agataccact tagtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 679]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_040]]> <![CDATA[<400> 679]]> caagcagaag acggcatacg agatgttgtc cggtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 680]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_041]]> <![CDATA[<400> 680]]> caagcagaag acggcatacg agatatccat atgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 681]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_042]]> <![CDATA[<400> 681]]> caagcagaag acggcatacg agatgcttgc gcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 682]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_043]]> <![CDATA[<400> 682]]> caagcagaag acggcatacg agatagtatc ttgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 683]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_044]]> <![CDATA[<400> 683]]> caagcagaag acggcatacg agatgacgct ccgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 684]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_045]]> <![CDATA[<400> 684]]> caagcagaag acggcatacg agatcatgcc atgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 685]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_046]]> <![CDATA[<400> 685]]> caagcagaag acggcatacg agattgcatt gcgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 686]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_047]]> <![CDATA[<400> 686]]> caagcagaag acggcatacg agatattgga acgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 687]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_Rvs_v2_048]]> <![CDATA[<400> 687]]> caagcagaag acggcatacg agatgccaag gtgtgactgg agttcagacg tgtgctcttc 60 c 61 <![CDATA[<210> 688]]> <![CDATA[<211> 58]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v1_univ]]> <![CDATA[<400> 688]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact ctttccctac acgacgctct tccgatct 58 <![CDATA[<210> 689]]> <![CDATA[<211> 52]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_univ]]> <![CDATA[<400> 689]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact ctttccctac acgacgctct tc 52 <![CDATA[<210> 690]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_001]]> <![CDATA[<400> 690]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacaca gcgctagaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 691]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_002]]> <![CDATA[<400> 691]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacg atatcgaaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 692]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_003]]> <![CDATA[<400> 692]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacc gcagacgaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 693]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_004]]> <![CDATA[<400> 693]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact atgagtaaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 694]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_005]]> <![CDATA[<400> 694]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacaca ggtgcgtaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 695]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_006]]> <![CDATA[<400> 695]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacg aacatacaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 696]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_007]]> <![CDATA[<400> 696]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacaca catagcgaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 697]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_008]]> <![CDATA[<400> 697]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacg tgcgataaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 698]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_009]]> <![CDATA[<400> 698]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacc caacagaaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 699]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_010]]> <![CDATA[<400> 699]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact tggtgagaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 700]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_011]]> <![CDATA[<400> 700]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacacc gcggttcaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 701]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> PCR2_fwd_v2_012]]> <![CDATA[<400> 701]]> aatgatacgg cgaccaccga gatctacact ataacctaca ctctttccct acacgacgct 60 cttc 64 <![CDATA[<210> 702]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 702]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaag 89 <![CDATA[<210> 703]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 703]]> actggcactt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaaag 97 <![CDATA[<210> 704]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 704]]> actggcactt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaga 96 <![CDATA[<210> 705]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 705]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 706]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 706]]> actggcactt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 707]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 707]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 708]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 708]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgccttac ggacttcggt ccgtaaggag catcagag 98 <![CDATA[<210> 709]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 709]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagag 99 <![CDATA[<210> 710]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 710]]> acgggacttt ctatctgatt actctgaagt ccctcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 711]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 711]]> acctgtagtt ctatctgatt actctgacta cagtcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 712]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 712]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaag 89 <![CDATA[<210> 713]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 713]]> actggcactt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaaag 97 <![CDATA[<210> 714]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 714]]> actggcactt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaga 96 <![CDATA[<210> 715]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 715]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 716]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 716]]> actggcactt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 717]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 717]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 718]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 718]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgccttac ggacttcggt ccgtaaggag catcagag 98 <![CDATA[<210> 719]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 719]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagag 99 <![CDATA[<210> 720]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 720]]> acgggacttt ctatctgatt actctgaagt ccctcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 721]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 721]]> acctgtagtt ctatctgatt actctgacta cagtcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagag 98 <![CDATA[<210> 722]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 722]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaag 89 <![CDATA[<210> 723]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 723]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagag 99 <![CDATA[<210> 724]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 724]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaag 89 <![CDATA[<210> 725]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 725]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagag 99 <![CDATA[<210> 726]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 導引支架序列]]> <![CDATA[<400> 726]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagag 99 <![CDATA[<210> 727]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 727]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaagc tgcattctag ttgtggttt 109 <![CDATA[<210> 728]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 728]]> actggcactt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaaagctg cattctagtt gtggttt 117 <![CDATA[<210> 729]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 729]]> actggcactt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcagagctg cattctagtt gtggttt 117 <![CDATA[<210> 730]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 730]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagct gcattctagt tgtggttt 118 <![CDATA[<210> 731]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 731]]> actggcactt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagct gcattctagt tgtggttt 118 <![CDATA[<210> 732]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 732]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagct gcattctagt tgtggttt 118 <![CDATA[<210> 733]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 733]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgccttac ggacttcggt ccgtaaggag catcagagct gcattctagt tgtggttt 118 <![CDATA[<210> 734]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 734]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagagc tgcattctag ttgtggtt 118 <![CDATA[<210> 735]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 735]]> acgggacttt ctatctgatt actctgaagt ccctcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagct gcattctagt tgtggtt 117 <![CDATA[<210> 736]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 736]]> acctgtagtt ctatctgatt actctgacta cagtcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagct gcattctagt tgtggtt 117 <![CDATA[<210> 737]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 737]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaaga aggggctccg caccacgcc 109 <![CDATA[<210> 738]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 738]]> actggcactt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcaaagaag gggctccgca ccacgcc 117 <![CDATA[<210> 739]]> <![CDATA[<211> 116]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 739]]> actggcactt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgcttacg gacttcggtc cgtaagaagc atcagaaagg ggctccgcac cacgcc 116 <![CDATA[<210> 740]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 740]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagag ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 741]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 741]]> actggcactt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 742]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 742]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 743]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 743]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agcgccttac ggacttcggt ccgtaaggag catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 744]]> <![CDATA[<211> 119]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 744]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagaga aggggctccg caccacgcc 119 <![CDATA[<210> 745]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 745]]> acgggacttt ctatctgatt actctgaagt ccctcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 746]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 746]]> acctgtagtt ctatctgatt actctgacta cagtcaccag cgactatgtc gtatgggtaa 60 agccgcttac ggacttcggt ccgtaagagg catcagagaa ggggctccgc accacgcc 118 <![CDATA[<210> 747]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 747]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaaga agtggctccg caccacgcc 109 <![CDATA[<210> 748]]> <![CDATA[<211> 119]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 748]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagaga agtggctccg caccacgcc 119 <![CDATA[<210> 749]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 749]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctc ttcggaggga gcatcaaaga aggggctgcg taccacacc 109 <![CDATA[<210> 750]]> <![CDATA[<211> 119]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 750]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagaga aggggctgcg taccacacc 119 <![CDATA[<210> 751]]> <![CDATA[<211> 117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> gRNA]]> <![CDATA[<400> 751]]> actggcgctt ctatctgatt actctgagcg ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagccgctta cggacttcgg tccgtaagag gcatcagagg ggtcttcgag aagaccc 117 <![CDATA[<210> 752]]> <![CDATA[<211> 29]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CMV正向引子]]> <![CDATA[<400> 752]]> catctacgta ttagtcatcg ctattacca 29 <![CDATA[<210> 753]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CMV 反向引子]]> <![CDATA[<400> 753]]> gaaatccccg tgagtcaaac c 21 <![CDATA[<210> 754]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CMV探針]]> <![CDATA[<400> 754]]> tcaatgggcg tggatag 17 <![CDATA[<210> 755]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> AAV2 ITR正向引子]]> <![CDATA[<400> 755]]> ggaaccccta gtgatggagt t 21 <![CDATA[<210> 756]]> <![CDATA[<211> 16]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> AAV2 ITR 反向引子]]> <![CDATA[<400> 756]]> cggcctcagt gagcga 16 <![CDATA[<210> 757]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> AAV2 ITR探針]]> <![CDATA[<400> 757]]> cactccctct ctgcgcgctc g 21 <![CDATA[<210> 758]]> <![CDATA[<211> 62]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> Rho正向引子]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (34)..(40)]]> <![CDATA[<223> n為任何核苷酸]]> <![CDATA[<400> 758]]> acactctttc cctacacgac gctcttccga tctnnnnnnn gcagccttgg tctctgtcta 60 cg 62 <![CDATA[<210> 759]]> <![CDATA[<211> 57]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> Rho 反向引子]]> <![CDATA[<400> 759]]> gtgactggag ttcagacgtg tgctcttccg atctgcccca gtctctctgc tcatacc 57 <![CDATA[<210> 760]]> <![CDATA[<211> 1039]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 與N末端NLS融合之SEQ ID NO: 2的CasX構築體WT CasX序列]]> <![CDATA[<400> 760]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Gln Glu Ile Lys Arg Ile 1 5 10 15 Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr Pro 35 40 45 Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile 50 55 60 Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu 65 70 75 80 Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu 85 90 95 Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln Pro 100 105 110 Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly 115 120 125 Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln 130 135 140 Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro 145 150 155 160 His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu 165 170 175 Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile 195 200 205 His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile 210 215 220 Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp 225 230 235 240 Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile 245 250 255 Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala 260 265 270 Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile 275 280 285 Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn 290 295 300 Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln 305 310 315 320 Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys 325 330 335 Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp 340 345 350 Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys 355 360 365 Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln 370 375 380 Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly 385 390 395 400 Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu 405 410 415 Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu 435 440 445 Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala 465 470 475 480 Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Ala Pro Lys Lys Lys 980 985 990 Arg Lys Val Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser Ala Trp Ser His 995 1000 1005 Pro Gln Phe Glu Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly 1010 1015 1020 Ser Ala Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Arg Gly Ser Gly 1025 1030 1035 Cys <![CDATA[<210> 761]]> <![CDATA[<211> 1040]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 119]]> <![CDATA[<400> 761]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Gln Glu Ile Lys Arg Ile 1 5 10 15 Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr Pro 35 40 45 Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile 50 55 60 Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu 65 70 75 80 Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu 85 90 95 Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln Pro 100 105 110 Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly 115 120 125 Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln 130 135 140 Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro 145 150 155 160 His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu 165 170 175 Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile 195 200 205 His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile 210 215 220 Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp 225 230 235 240 Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile 245 250 255 Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala 260 265 270 Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile 275 280 285 Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn 290 295 300 Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln 305 310 315 320 Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys 325 330 335 Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp 340 345 350 Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys 355 360 365 Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln 370 375 380 Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly 385 390 395 400 Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu 405 410 415 Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu 435 440 445 Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala 465 470 475 480 Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys 805 810 815 Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg 820 825 830 Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile 835 840 845 Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg 850 855 860 Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg 865 870 875 880 Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly 885 890 895 Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg 900 905 910 Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 915 920 925 Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 930 935 940 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 945 950 955 960 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 965 970 975 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Pro Pro Ala Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser Ala Trp Ser 995 1000 1005 His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly 1010 1015 1020 Gly Ser Ala Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Arg Gly Ser 1025 1030 1035 Gly Cys 1040 <![CDATA[<210> 762]]> <![CDATA[<211> 1040]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 438]]> <![CDATA[<400> 762]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Gln Glu Ile Lys Arg Ile 1 5 10 15 Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr Pro 35 40 45 Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile 50 55 60 Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu 65 70 75 80 Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu 85 90 95 Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln Pro 100 105 110 Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly 115 120 125 Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln 130 135 140 Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro 145 150 155 160 His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu 165 170 175 Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile 195 200 205 His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile 210 215 220 Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp 225 230 235 240 Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile 245 250 255 Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala 260 265 270 Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile 275 280 285 Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn 290 295 300 Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln 305 310 315 320 Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys 325 330 335 Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp 340 345 350 Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys 355 360 365 Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln 370 375 380 Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly 385 390 395 400 Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Lys His Leu Glu 405 410 415 Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu 435 440 445 Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala 465 470 475 480 Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys 805 810 815 Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg 820 825 830 Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile 835 840 845 Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg 850 855 860 Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg 865 870 875 880 Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly 885 890 895 Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg 900 905 910 Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 915 920 925 Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 930 935 940 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 945 950 955 960 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 965 970 975 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Pro Pro Ala Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser Ala Trp Ser 995 1000 1005 His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly 1010 1015 1020 Gly Ser Ala Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Arg Gly Ser 1025 1030 1035 Gly Cys 1040 <![CDATA[<210> 763]]> <![CDATA[<211> 1040]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 457]]> <![CDATA[<400> 763]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Gln Glu Ile Lys Arg Ile 1 5 10 15 Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr Pro 35 40 45 Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile 50 55 60 Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu 65 70 75 80 Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu 85 90 95 Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln Pro 100 105 110 Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly 115 120 125 Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln 130 135 140 Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro 145 150 155 160 His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu 165 170 175 Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile 195 200 205 His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile 210 215 220 Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp 225 230 235 240 Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile 245 250 255 Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala 260 265 270 Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile 275 280 285 Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn 290 295 300 Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln 305 310 315 320 Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys 325 330 335 Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp 340 345 350 Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys 355 360 365 Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln 370 375 380 Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly 385 390 395 400 Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu 405 410 415 Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu 420 425 430 Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu 435 440 445 Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp 450 455 460 Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala 465 470 475 480 Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr 485 490 495 Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile 500 505 510 Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp 515 520 525 Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr 530 535 540 Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe 545 550 555 560 Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile 565 570 575 Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile 580 585 590 Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn 595 600 605 Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg 610 615 620 Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro 625 630 635 640 Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser 645 650 655 Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn 660 665 670 Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser 675 680 685 Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly 690 695 700 Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val 705 710 715 720 Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala 725 730 735 Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu 740 745 750 Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser 755 760 765 Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln 770 775 780 Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly 785 790 795 800 Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys 805 810 815 Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg 820 825 830 Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile 835 840 845 Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg 850 855 860 Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg 865 870 875 880 Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly 885 890 895 Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg 900 905 910 Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 915 920 925 Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 930 935 940 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 945 950 955 960 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 965 970 975 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Pro Pro Ala Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val Ser Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly Ser Ala Trp Ser 995 1000 1005 His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly 1010 1015 1020 Gly Ser Ala Trp Ser His Pro Gln Phe Glu Lys Gly Arg Gly Ser 1025 1030 1035 Gly Cys 1040 <![CDATA[<210> 764]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 119]]> <![CDATA[<400> 764]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys 245 250 255 Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly 260 265 270 Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 765]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 457]]> <![CDATA[<400> 765]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Lys Lys Val Ile Lys Lys 245 250 255 Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly 260 265 270 Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Pro 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 766]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 438]]> <![CDATA[<400> 766]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu 100 105 110 Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala 165 170 175 Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala 180 185 190 Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val 195 200 205 Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val 210 215 220 Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu 225 230 235 240 Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys 245 250 255 Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly 260 265 270 Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu 275 280 285 Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val 290 295 300 Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys 305 310 315 320 Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg 325 330 335 Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys 340 345 350 Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu 355 360 365 Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu 370 375 380 Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp 385 390 395 400 Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val 405 410 415 Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser 420 425 430 Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser 435 440 445 Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile 450 455 460 Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu 465 470 475 480 Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile 485 490 495 Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr 500 505 510 Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu 515 520 525 Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys 530 535 540 Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn 545 550 555 560 Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp 565 570 575 Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly 580 585 590 Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu 595 600 605 Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg 610 615 620 Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg 625 630 635 640 Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly 645 650 655 Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro 660 665 670 Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr 675 680 685 His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile 690 695 700 Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg 705 710 715 720 Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn 725 730 735 Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu 740 745 750 Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr 755 760 765 Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala 770 775 780 Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 767]]> <![CDATA[<211> 987]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 278]]> <![CDATA[<400> 767]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp 115 120 125 Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys 130 135 140 Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys 145 150 155 160 Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser 195 200 205 Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln 210 215 220 Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser 225 230 235 240 Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp 245 250 255 Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu 260 265 270 Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys 275 280 285 Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr 290 295 300 Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp 305 310 315 320 Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu 325 330 335 Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val 340 345 350 Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys 355 360 365 Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg 370 375 380 Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys 385 390 395 400 Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu 405 410 415 Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp 420 425 430 Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu 435 440 445 Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr 450 455 460 Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu 465 470 475 480 Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp 485 490 495 Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser 500 505 510 Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile 515 520 525 Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn 530 535 540 Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala 545 550 555 560 Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu 565 570 575 Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile 580 585 590 Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp 595 600 605 Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly 610 615 620 Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu 625 630 635 640 Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp 645 650 655 Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu 660 665 670 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 675 680 685 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 690 695 700 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 705 710 715 720 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 725 730 735 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 740 745 750 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 755 760 765 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 770 775 780 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 785 790 795 800 Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 980 985 <![CDATA[<210> 768]]> <![CDATA[<211> 986]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 279]]> <![CDATA[<400> 768]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 980 985 <![CDATA[<210> 769]]> <![CDATA[<211> 996]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 280]]> <![CDATA[<400> 769]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 770]]> <![CDATA[<211> 1006]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 285]]> <![CDATA[<400> 770]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro His Lys Lys 980 985 990 Lys His Pro Asp Ala Ser Val Asn Phe Ser Glu Phe Ser Lys 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 771]]> <![CDATA[<211> 1007]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 286]]> <![CDATA[<400> 771]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Gln Arg Pro 980 985 990 Gly Pro Tyr Asp Arg Pro Gln Arg Pro Gly Pro Tyr Asp Arg Pro 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 772]]> <![CDATA[<211> 1005]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 287]]> <![CDATA[<400> 772]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Leu Ser Pro 980 985 990 Ser Leu Ser Pro Leu Leu Ser Pro Ser Leu Ser Pro Leu 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 773]]> <![CDATA[<211> 1008]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 288]]> <![CDATA[<400> 773]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Met Ser Ser Gly 115 120 125 Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu 130 135 140 Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys 145 150 155 160 Asn Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro 165 170 175 Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile 245 250 255 Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala 260 265 270 Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Arg Gly 980 985 990 Lys Gly Gly Lys Gly Leu Gly Lys Gly Gly Ala Lys Arg His Arg Lys 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 774]]> <![CDATA[<211> 1013]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 290]]> <![CDATA[<400> 774]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Ser Arg Arg 980 985 990 Arg Lys Ala Asn Pro Thr Lys Leu Ser Glu Asn Ala Lys Lys Leu Ala 995 1000 1005 Lys Glu Val Glu Asn 1010 <![CDATA[<210> 775]]> <![CDATA[<211> 998]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 291]]> <![CDATA[<400> 775]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala 980 985 990 Lys Arg Val Lys Leu Asp 995 <![CDATA[<210> 776]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 293]]> <![CDATA[<400> 776]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Lys Arg Ser 980 985 990 Phe Ser Lys Ala Phe 995 <![CDATA[<210> 777]]> <![CDATA[<211> 1008]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 300]]> <![CDATA[<400> 777]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Lys Arg Gly 980 985 990 Ile Asn Asp Arg Asn Phe Trp Arg Gly Glu Asn Glu Arg Lys Thr Arg 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 778]]> <![CDATA[<211> 1007]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 492]]> <![CDATA[<400> 778]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Met Gln Glu Ile Lys 1 5 10 15 Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys 20 25 30 Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met 35 40 45 Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu 50 55 60 Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys 65 70 75 80 Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr 85 90 95 Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala 100 105 110 Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys 115 120 125 Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys 130 135 140 Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly 145 150 155 160 Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu 165 170 175 Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu 210 215 220 Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg 260 265 270 Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro 275 280 285 Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala 290 295 300 Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 779]]> <![CDATA[<211> 1009]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX構築體CasX 493]]> <![CDATA[<400> 779]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Met Gln Glu Ile Lys 1 5 10 15 Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys 20 25 30 Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met 35 40 45 Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu 50 55 60 Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys 65 70 75 80 Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr 85 90 95 Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala 100 105 110 Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys 115 120 125 Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys 130 135 140 Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly 145 150 155 160 Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu 165 170 175 Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu 210 215 220 Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg 260 265 270 Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro 275 280 285 Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala 290 295 300 Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 995 1000 1005 Asp <![CDATA[<210> 780]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 387構築體]]> <![CDATA[<400> 780]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu 210 215 220 Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg 260 265 270 Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro 275 280 285 Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala 290 295 300 Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 781]]> <![CDATA[<211> 1005]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 395構築體]]> <![CDATA[<400> 781]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp 115 120 125 Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys 130 135 140 Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys 145 150 155 160 Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser 195 200 205 Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln 210 215 220 Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser 225 230 235 240 Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp 245 250 255 Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu 260 265 270 Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser 275 280 285 Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr 290 295 300 Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp 305 310 315 320 Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu 325 330 335 Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val 340 345 350 Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys 355 360 365 Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg 370 375 380 Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys 385 390 395 400 Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu 405 410 415 Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp 420 425 430 Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu 435 440 445 Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr 450 455 460 Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu 465 470 475 480 Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp 485 490 495 Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser 500 505 510 Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile 515 520 525 Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn 530 535 540 Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala 545 550 555 560 Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu 565 570 575 Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile 580 585 590 Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp 595 600 605 Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly 610 615 620 Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu 625 630 635 640 Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp 645 650 655 Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu 660 665 670 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 675 680 685 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 690 695 700 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 705 710 715 720 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 725 730 735 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 740 745 750 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 755 760 765 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 770 775 780 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 785 790 795 800 Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 995 1000 1005 <![CDATA[<210> 782]]> <![CDATA[<211> 996]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 485構築體]]> <![CDATA[<400> 782]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp 115 120 125 Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys 130 135 140 Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys 145 150 155 160 Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser 195 200 205 Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln 210 215 220 Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser 225 230 235 240 Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp 245 250 255 Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu 260 265 270 Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser 275 280 285 Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr 290 295 300 Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp 305 310 315 320 Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu 325 330 335 Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val 340 345 350 Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys 355 360 365 Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg 370 375 380 Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys 385 390 395 400 Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu 405 410 415 Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp 420 425 430 Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu 435 440 445 Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr 450 455 460 Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu 465 470 475 480 Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp 485 490 495 Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser 500 505 510 Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile 515 520 525 Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn 530 535 540 Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala 545 550 555 560 Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu 565 570 575 Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile 580 585 590 Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp 595 600 605 Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly 610 615 620 Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu 625 630 635 640 Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp 645 650 655 Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu 660 665 670 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 675 680 685 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 690 695 700 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 705 710 715 720 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 725 730 735 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 740 745 750 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 755 760 765 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 770 775 780 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 785 790 795 800 Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 783]]> <![CDATA[<211> 996]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 486構築體]]> <![CDATA[<400> 783]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp 115 120 125 Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys 130 135 140 Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys 145 150 155 160 Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser 195 200 205 Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln 210 215 220 Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser 225 230 235 240 Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp 245 250 255 Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu 260 265 270 Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser 275 280 285 Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr 290 295 300 Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp 305 310 315 320 Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu 325 330 335 Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val 340 345 350 Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys 355 360 365 Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg 370 375 380 Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys 385 390 395 400 Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Lys His Leu 405 410 415 Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp 420 425 430 Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu 435 440 445 Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr 450 455 460 Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu 465 470 475 480 Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp 485 490 495 Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser 500 505 510 Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile 515 520 525 Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn 530 535 540 Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala 545 550 555 560 Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu 565 570 575 Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile 580 585 590 Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp 595 600 605 Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly 610 615 620 Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu 625 630 635 640 Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp 645 650 655 Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu 660 665 670 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 675 680 685 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 690 695 700 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 705 710 715 720 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 725 730 735 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 740 745 750 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 755 760 765 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 770 775 780 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 785 790 795 800 Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 784]]> <![CDATA[<211> 996]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 487構築體]]> <![CDATA[<400> 784]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys Asp 115 120 125 Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Cys 130 135 140 Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly Lys 145 150 155 160 Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu Arg 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu Val 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser 195 200 205 Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln 210 215 220 Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser 225 230 235 240 Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp 245 250 255 Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu 260 265 270 Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser 275 280 285 Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr 290 295 300 Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp 305 310 315 320 Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu 325 330 335 Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val 340 345 350 Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys 355 360 365 Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg 370 375 380 Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys 385 390 395 400 Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu 405 410 415 Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp 420 425 430 Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu 435 440 445 Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr 450 455 460 Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu 465 470 475 480 Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp 485 490 495 Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser 500 505 510 Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile 515 520 525 Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn 530 535 540 Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala 545 550 555 560 Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu 565 570 575 Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile 580 585 590 Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp 595 600 605 Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly 610 615 620 Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu 625 630 635 640 Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp 645 650 655 Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu 660 665 670 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 675 680 685 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 690 695 700 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 705 710 715 720 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 725 730 735 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 740 745 750 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 755 760 765 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 770 775 780 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 785 790 795 800 Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser 805 810 815 Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp 820 825 830 Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr 835 840 845 Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn 850 855 860 Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp 865 870 875 880 Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys 885 890 895 Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His 900 905 910 Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr 915 920 925 His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe 930 935 940 Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly 945 950 955 960 Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg 965 970 975 Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys Lys 980 985 990 Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 785]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 488構築體]]> <![CDATA[<400> 785]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala 210 215 220 Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg 260 265 270 Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro 275 280 285 Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala 290 295 300 Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 786]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 489構築體]]> <![CDATA[<400> 786]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala 210 215 220 Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg 260 265 270 Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro 275 280 285 Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala 290 295 300 Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 787]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 490構築體]]> <![CDATA[<400> 787]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala 210 215 220 Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg 260 265 270 Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro 275 280 285 Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala 290 295 300 Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Lys His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 788]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 491構築體]]> <![CDATA[<400> 788]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro Val Lys Pro Leu Ala 210 215 220 Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe Leu Ser Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys Gly Asn Gln Lys Arg 260 265 270 Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu Asn Leu Glu Tyr Pro 275 280 285 Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Val Asp Ala 290 295 300 Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala Lys Pro Leu Leu Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 789]]> <![CDATA[<211> 997]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 494構築體]]> <![CDATA[<400> 789]]> Met Ala Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg Val Met Thr 35 40 45 Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg Lys Lys Pro Glu Asn 50 55 60 Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu 65 70 75 80 Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp 85 90 95 Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala Gln 100 105 110 Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met Asp 115 120 125 Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys Gly 130 135 140 Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly Lys 145 150 155 160 Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu Lys 165 170 175 Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu Ala 180 185 190 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg Ala Leu Asp Phe Tyr 195 200 205 Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro Val Lys Pro Leu Glu 210 215 220 Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro Val Gly Lys Ala Leu 225 230 235 240 Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe Leu Thr Lys Tyr Gln 245 250 255 Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys Lys Asn Glu Lys Arg 260 265 270 Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn Gly Leu Ala Phe Pro 275 280 285 Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys Glu Gly Ile Glu Ala 290 295 300 Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp Val Asn Leu Asn Leu 305 310 315 320 Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala Lys Pro Leu Gln Arg 325 330 335 Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu 340 345 350 Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu 355 360 365 Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys 370 375 380 Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys 385 390 395 400 Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His 405 410 415 Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala 420 425 430 Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys 435 440 445 Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu 450 455 460 Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys 465 470 475 480 Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys 485 490 495 Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu Asn 500 505 510 Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala Phe 515 520 525 Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile Ile 530 535 540 Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro Glu 545 550 555 560 Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser Gly 565 570 575 Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn Leu 580 585 590 Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe Ile 595 600 605 Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala Asn 610 615 620 Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln Asp 625 630 635 640 Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val Leu 645 650 655 Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly 660 665 670 Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro 675 680 685 Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg 690 695 700 Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys 705 710 715 720 Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser 725 730 735 Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp 740 745 750 Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn 755 760 765 Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu 770 775 780 Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr 785 790 795 800 Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 805 810 815 Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr 820 825 830 Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr 835 840 845 Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr 850 855 860 Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu 865 870 875 880 Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr 885 890 895 Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser 900 905 910 His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu 915 920 925 Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu 930 935 940 Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr 945 950 955 960 Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr 965 970 975 Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val Thr Ser Pro Lys 980 985 990 Lys Lys Arg Lys Val 995 <![CDATA[<210> 790]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 790]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 791]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 791]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Ala Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 792]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 792]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 793]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 793]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Gln Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 794]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 794]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Gln Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 795]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 795]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Ile Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 796]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 796]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 797]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 797]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Thr Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 798]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 798]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 799]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 799]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 800]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 800]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Lys Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 801]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 801]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 802]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 802]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 803]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 803]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 804]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 804]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Ser Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 805]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 805]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 806]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 806]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Asp Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 807]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 807]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Phe Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 808]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 808]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 809]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 809]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 810]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 810]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 811]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 811]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Asn Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 812]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 812]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Lys Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 813]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 813]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Asn Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 814]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 814]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Met Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 815]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 815]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Met Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 816]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 816]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Arg Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 817]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 817]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 818]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 818]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 819]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 819]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Ala Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 820]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 820]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 821]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 821]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Asn Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 822]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 822]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Gly Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 823]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 823]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 824]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 824]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Lys Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 825]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 825]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Asn Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 826]]> <![CDATA[<211> 980]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 826]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Ala Ser Tyr Leu 785 790 795 800 Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly 805 810 815 Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys 820 825 830 Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys 835 840 845 Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val 850 855 860 Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val 865 870 875 880 Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu 885 890 895 Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe 900 905 910 Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala 915 920 925 Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys 930 935 940 Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe 945 950 955 960 Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp 965 970 975 Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 827]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 827]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe His Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 828]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 828]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 829]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 829]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Trp Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 830]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 830]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 831]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 831]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 832]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 832]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Met Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 833]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 833]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 834]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 834]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 835]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 835]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Gln Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 836]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 836]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Lys Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 837]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 837]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 838]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 838]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Gln Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 839]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 839]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Ala Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 840]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 840]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 841]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 841]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 842]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 842]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Met Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 843]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 843]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Thr Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 844]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 844]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Gln Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 845]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 845]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 846]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 846]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Ser Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 847]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 847]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Ser Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 848]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 848]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Lys Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 849]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 849]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 850]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 850]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 851]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 851]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Arg Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 852]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 852]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Thr Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 853]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 853]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Arg Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 854]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 854]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Glu 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 855]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 855]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 856]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 856]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Lys Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 857]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 857]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile His Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 858]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 858]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Lys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Thr Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 859]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 859]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Arg Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 860]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 860]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Lys Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 861]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 861]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Arg Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 862]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 862]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Arg Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 863]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 863]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Met Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 864]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 864]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 865]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 865]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Ser Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 866]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 866]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Thr Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 867]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 867]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Gln Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 868]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 868]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Arg Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 869]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 869]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 870]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 870]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Trp Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 871]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 871]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 872]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 872]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Phe Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 873]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 873]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Lys Ile Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 874]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 874]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Glu Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 875]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 875]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Ala Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 876]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 876]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 877]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 877]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Gln Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 878]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 878]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 879]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 879]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Lys Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 880]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 880]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Arg Lys Thr Leu Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 881]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 881]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Met Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 882]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 882]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Lys Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 883]]> <![CDATA[<211> 980]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 883]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ala Ser Pro Ser Lys Thr Tyr Leu 785 790 795 800 Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly 805 810 815 Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys 820 825 830 Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys 835 840 845 Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val 850 855 860 Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val 865 870 875 880 Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu 885 890 895 Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe 900 905 910 Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala 915 920 925 Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys 930 935 940 Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe 945 950 955 960 Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp 965 970 975 Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 884]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 884]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Gly Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 885]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 885]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 886]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 886]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Lys Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 887]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 887]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Arg Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 888]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 888]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Lys Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 889]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 889]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Arg Lys Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 890]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 890]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Gln Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 891]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 891]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asn Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 892]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 892]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Arg Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 893]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 893]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile His Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 894]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 894]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Lys Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 895]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 895]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Glu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 896]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 896]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Arg Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 897]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 897]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro Asp Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 898]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 898]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Gly Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 899]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 899]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Pro Pro Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 900]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 900]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Phe Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 901]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 901]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Met Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 902]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 902]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Arg Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 903]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 903]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Arg Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 904]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 904]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Gly Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 905]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 905]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Val Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 906]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 906]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Gly 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 907]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 907]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Glu Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 908]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 908]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Lys Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 909]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 909]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Gln Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 910]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 910]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Phe Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 911]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 911]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Gln Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 912]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 912]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Lys Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 913]]> <![CDATA[<211> 980]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 913]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Ala Ser Thr Tyr Leu 785 790 795 800 Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly 805 810 815 Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys 820 825 830 Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys 835 840 845 Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val 850 855 860 Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val 865 870 875 880 Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu 885 890 895 Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe 900 905 910 Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala 915 920 925 Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys 930 935 940 Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe 945 950 955 960 Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp 965 970 975 Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 914]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 914]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Glu Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 915]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 915]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Ala Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 916]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 916]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Glu Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 917]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 917]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Gln Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 918]]> <![CDATA[<211> 980]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 918]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Ala Ser Lys Thr Tyr Leu 785 790 795 800 Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly 805 810 815 Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys 820 825 830 Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys 835 840 845 Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val 850 855 860 Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val 865 870 875 880 Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu 885 890 895 Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe 900 905 910 Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala 915 920 925 Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys 930 935 940 Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe 945 950 955 960 Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp 965 970 975 Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 919]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 919]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Gln Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 920]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 920]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Lys Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 921]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 921]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Ile Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 922]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 922]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asp 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 923]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 923]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Met Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 924]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 924]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Ser Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 925]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 925]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Lys Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ser Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 926]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 926]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Ile Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 927]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 927]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Gln Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 928]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 928]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asp Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 929]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 929]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Met Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 930]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 930]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Asp Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 931]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 931]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Leu Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 932]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 932]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ala Ser Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 933]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 933]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Ser Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 934]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 934]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Trp Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 935]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 935]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ser Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 936]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 936]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Arg Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 937]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 937]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Lys Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 938]]> <![CDATA[<211> 980]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 938]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Ala Ser Lys Thr Tyr Leu 785 790 795 800 Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly 805 810 815 Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys 820 825 830 Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys 835 840 845 Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val 850 855 860 Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val 865 870 875 880 Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu 885 890 895 Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe 900 905 910 Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala 915 920 925 Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys 930 935 940 Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe 945 950 955 960 Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp 965 970 975 Lys Pro Ala Val 980 <![CDATA[<210> 939]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 939]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Tyr Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 940]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 940]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Arg Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 941]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 941]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Asp Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 942]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 942]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Glu 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 943]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 943]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Ile Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 944]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 944]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Arg Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 945]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 945]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Pro Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 946]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 946]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Leu Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 947]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 947]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Asp Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 948]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 948]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Lys 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 949]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 949]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Arg Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 950]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 950]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Lys 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 951]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 951]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Val Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 952]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 952]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Glu Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 953]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 953]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Thr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 954]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 954]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Ser Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 955]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 955]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Glu Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 956]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 956]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Thr Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 957]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 957]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asn Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 958]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 958]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Phe His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 959]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 959]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Ser Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 960]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 960]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Ala Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 961]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 961]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Asn Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 962]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 962]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Arg Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 963]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 963]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Pro Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 964]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 964]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Ile Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 965]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 965]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Thr Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 966]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 966]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Gly Arg Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 967]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 967]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Asn Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 968]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 968]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Pro Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 969]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 969]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Arg Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 970]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 970]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Gly Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 971]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 971]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Met Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 972]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 972]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys Arg Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 973]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 973]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ser Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 974]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 974]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Lys 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 975]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 975]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Asn Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 976]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 976]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu Arg Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 977]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 977]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Ile Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Ala Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Asp Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ser Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Pro Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 978]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 978]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile His Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 979]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 979]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Val Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 980]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 980]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Asp Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 981]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 981]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Ala Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 982]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX蛋白變異體]]> <![CDATA[<400> 982]]> Met Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys 1 5 10 15 Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys 100 105 110 Leu Ile Pro Val Lys Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Asn Asp Lys Gly Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ser Glu His Glu Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu 165 170 175 Ala Asn Asp Glu Leu Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Pro Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile Lys 245 250 255 Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala Asn 260 265 270 Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Ala Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 983]]> <![CDATA[<211> 81]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 983]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Glu Ala 20 25 30 Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala Pro Gly 35 40 45 Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg 50 55 60 Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly 65 70 75 80 Pro <![CDATA[<210> 984]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 984]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Lys Arg Thr Ala Asp 1 5 10 15 Gly Ser Glu Phe Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Gly Ser 20 25 30 Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg 35 40 45 Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 50 55 60 <![CDATA[<210> 985]]> <![CDATA[<211> 55]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 985]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys 1 5 10 15 Arg Lys Val Gly Gly Ser Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys 20 25 30 Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys 35 40 45 Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 50 55 <![CDATA[<210> 986]]> <![CDATA[<211> 54]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 986]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Pro Pro Pro Pro Lys Lys Lys 1 5 10 15 Arg Lys Val Pro Gly Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 20 25 30 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 35 40 45 Ala Gly Lys Thr Gly Pro 50 <![CDATA[<210> 987]]> <![CDATA[<211> 45]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 987]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Pro Gly Arg Ser Arg Asp Ile 1 5 10 15 Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val 20 25 30 Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 35 40 45 <![CDATA[<210> 988]]> <![CDATA[<211> 40]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 988]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Asp Ile Ser Arg Gln Glu Ile 1 5 10 15 Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr 20 25 30 Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro 35 40 <![CDATA[<210> 989]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 989]]> Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn 1 5 10 15 Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly 20 25 30 Lys Thr Gly Pro 35 <![CDATA[<210> 990]]> <![CDATA[<211> 38]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 990]]> Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Ser Arg Gln Glu Ile Lys Arg 1 5 10 15 Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp Ser Asn Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Lys Thr Gly Pro 35 <![CDATA[<210> 991]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 991]]> Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Leu Glu Tyr Pro Tyr Asp 1 5 10 15 Val Pro Asp Tyr Ala 20 <![CDATA[<210> 992]]> <![CDATA[<211> 33]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 992]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Ala Pro Gly Glu Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr 20 25 30 Ala <![CDATA[<210> 993]]> <![CDATA[<211> 27]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 993]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala 20 25 <![CDATA[<210> 994]]> <![CDATA[<211> 52]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 994]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ala Pro Gly Glu Tyr Pro Tyr Asp Val 35 40 45 Pro Asp Tyr Ala 50 <![CDATA[<210> 995]]> <![CDATA[<211> 77]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 995]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr 35 40 45 Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro 50 55 60 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 65 70 75 <![CDATA[<210> 996]]> <![CDATA[<211> 115]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 996]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr 35 40 45 Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro 50 55 60 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser 65 70 75 80 Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 85 90 95 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 100 105 110 Lys Lys Lys 115 <![CDATA[<210> 997]]> <![CDATA[<211> 41]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 997]]> Thr Leu Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 20 25 30 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 998]]> <![CDATA[<211> 49]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 998]]> Thr Leu Glu Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 20 25 30 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 35 40 45 Asp <![CDATA[<210> 999]]> <![CDATA[<211> 73]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 999]]> Thr Leu Glu Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 20 25 30 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 35 40 45 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 50 55 60 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 65 70 <![CDATA[<210> 1000]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1000]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys 20 <![CDATA[<210> 1001]]> <![CDATA[<211> 39]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1001]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 35 <![CDATA[<210> 1002]]> <![CDATA[<211> 13]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1002]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 1 5 10 <![CDATA[<210> 1003]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1003]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr 1 5 10 15 Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg 20 25 30 Lys Val <![CDATA[<210> 1004]]> <![CDATA[<211> 40]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1004]]> Thr Leu Glu Val Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala 1 5 10 15 Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe 20 25 30 Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 1005]]> <![CDATA[<211> 49]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1005]]> Thr Leu Glu Val Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu 1 5 10 15 Ala Ala Ala Lys Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro 20 25 30 Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys 35 40 45 Val <![CDATA[<210> 1006]]> <![CDATA[<211> 44]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1006]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser 1 5 10 15 Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg 20 25 30 Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 1007]]> <![CDATA[<211> 32]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1007]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala 1 5 10 15 Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 20 25 30 <![CDATA[<210> 1008]]> <![CDATA[<211> 27]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1008]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly 1 5 10 15 Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 20 25 <![CDATA[<210> 1009]]> <![CDATA[<211> 25]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1009]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 20 25 <![CDATA[<210> 1010]]> <![CDATA[<211> 15]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1010]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 1 5 10 15 <![CDATA[<210> 1011]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1011]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys <![CDATA[<210> 1012]]> <![CDATA[<211> 9]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1012]]> Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 1 5 <![CDATA[<210> 1013]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1013]]> Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His 1 5 10 15 Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys 20 25 30 Lys Arg Lys Val 35 <![CDATA[<210> 1014]]> <![CDATA[<211> 40]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1014]]> Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala 1 5 10 15 Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe 20 25 30 Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 1015]]> <![CDATA[<211> 26]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1015]]> Thr Gly Gly Gly Pro Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Ser Gly Ser Pro 1 5 10 15 Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Gly Ser 20 25 <![CDATA[<210> 1016]]> <![CDATA[<211> 30]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1016]]> Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr 1 5 10 15 Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 20 25 30 <![CDATA[<210> 1017]]> <![CDATA[<211> 45]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1017]]> Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 10 15 Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys 20 25 30 Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 45 <![CDATA[<210> 1018]]> <![CDATA[<211> 21]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1018]]> Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp 20 <![CDATA[<210> 1019]]> <![CDATA[<211> 71]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1019]]> Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala 1 5 10 15 Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val 20 25 30 Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly 35 40 45 Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala 50 55 60 Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 65 70 <![CDATA[<210> 1020]]> <![CDATA[<211> 41]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1020]]> Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Gly Gly Ser Pro Ala Ala 1 5 10 15 Lys Arg Val Lys Leu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 20 25 30 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 1021]]> <![CDATA[<211> 37]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1021]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln 20 25 30 Ala Lys Lys Lys Lys 35 <![CDATA[<210> 1022]]> <![CDATA[<211> 46]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 三聯體環]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> misc_feature]]> <![CDATA[<222> (37)..(39)]]> <![CDATA[<223> n為任何核糖核苷酸]]> <![CDATA[<400> 1022]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucannna ucaaag 46 <![CDATA[<210> 1023]]> <![CDATA[<211> 5]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (2)..(5)]]> <![CDATA[<223> 個別胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 1023]]> Gly Gly Gly Gly Gly 1 5 <![CDATA[<210> 1024]]> <![CDATA[<211> 10]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (3)..(4)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (5)..(6)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (7)..(8)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (9)..(10)]]> <![CDATA[<223> 分組胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 1024]]> Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ser 1 5 10 <![CDATA[<210> 1025]]> <![CDATA[<211> 17]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 連接子]]> <![CDATA[<400> 1025]]> Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 10 15 Ala <![CDATA[<210> 1026]]> <![CDATA[<211> 50]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 肽轉導域]]> <![CDATA[<220>]]> <![CDATA[<221> SITE]]> <![CDATA[<222> (4)..(50)]]> <![CDATA[<223> 個別胺基酸殘基可存在或不存在]]> <![CDATA[<400> 1026]]> Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 1 5 10 15 Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 20 25 30 Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg 35 40 45 Arg Arg 50 <![CDATA[<210> 1027]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 488變異體]]> <![CDATA[<400> 1027]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg catcgaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggtacaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1028]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 491變異體]]> <![CDATA[<400> 1028]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggtacaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1029]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 515變異體]]> <![CDATA[<400> 1029]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1030]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 527變異體]]> <![CDATA[<400> 1030]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattctgctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctg gacctgtggg caaagccctg tccgatgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactga gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1031]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 535]]> <![CDATA[<400> 1031]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctcttccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1032]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 536變異體]]> <![CDATA[<400> 1032]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctaccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1033]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 537變異體]]> <![CDATA[<400> 1033]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctgccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1034]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 583變異體]]> <![CDATA[<400> 1034]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat taagctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1035]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 660變異體]]> <![CDATA[<400> 1035]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccaacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1036]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 661]]> <![CDATA[<400> 1036]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttcag cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1037]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 662變異體]]> <![CDATA[<400> 1037]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaaaacga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagttcggc 1200 gacctgctga agcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttcag cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agaccctgct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1038]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 663變異體]]> <![CDATA[<400> 1038]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccaacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1039]]> <![CDATA[<211> 2931]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 664變異體]]> <![CDATA[<400> 1039]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat tctgctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctctggac ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gccccgagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaccc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgagca agacctacct gtccaaaaca 2400 ctggcccagt atacctccaa gacctgcagc aattgcggct tcaccatcac cagcgccgac 2460 tacgacagag tgctggaaaa gctcaagaaa accgccaccg gctggatgac caccatcaac 2520 ggcaaagagc tgaaggttga gggccagatc acctactaca acaggaggaa gaggcagaac 2580 gtcgtgaagg atctgagcgt ggaactggac agactgagcg aagagagcgt gaacaacgac 2640 atcagcagct ggacaaaggg cagatcaggc gaggctctga gcctgctgaa gaagaggttt 2700 agccacagac ctgtgcaaga gaagttcgtg tgcctgaact gcggcttcga gacacacgcc 2760 gatgaacagg ctgccctgaa cattgccaga agctggctgt tcctgagaag ccaagagtac 2820 aagaagtacc agaccaacaa gaccaccggc aacaccgaca agagggcctt tgtggaaacc 2880 tggcagagct tctacagaaa aaagctgaaa gaagtctgga agcccgccgt g 2931 <![CDATA[<210> 1040]]> <![CDATA[<211> 2937]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 668變異體]]> <![CDATA[<400> 1040]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattctgctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctt cccctgtggg caaagccctg tccgatgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactgc ccagcaagac ctacctgtcc 2400 aaaacactgg cccagtatac ctccaagacc tgcagcaatt gcggcttcac catcaccagc 2460 gccgactacg acagagtgct ggaaaagctc aagaaaaccg ccaccggctg gatgaccacc 2520 atcaacggca aagagctgaa ggttgagggc cagatcacct actacaacag gtacaagagg 2580 cagaacgtcg tgaaggatct gagcgtggaa ctggacagac tgagcgaaga gagcgtgaac 2640 aacgacatca gcagctggac aaagggcaga tcaggcgagg ctctgagcct gctgaagaag 2700 aggtttagcc acagacctgt gcaagagaag ttcgtgtgcc tgaactgcgg cttcgagaca 2760 cacgccgatg aacaggctgc cctgaacatt gccagaagct ggctgttcct gagaagccaa 2820 gagtacaaga agtaccagac caacaagacc accggcaaca ccgacaagag ggcctttgtg 2880 gaaacctggc agagcttcta cagaaaaaag ctgaaagaag tctggaagcc cgccgtg 2937 <![CDATA[<210> 1041]]> <![CDATA[<211> 2937]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 670變異體]]> <![CDATA[<400> 1041]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattctgctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctt cccctgtggg caaagccctg tccggcgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactgc ccagcaagac ctacctgtcc 2400 aaaacactgg cccagtatac ctccaagacc tgcagcaatt gcggcttcac catcaccagc 2460 gccgactacg acagagtgct ggaaaagctc aagaaaaccg ccaccggctg gatgaccacc 2520 atcaacggca aagagctgaa ggttgagggc cagatcacct actacaacag gtacaagagg 2580 cagaacgtcg tgaaggatct gagcgtggaa ctggacagac tgagcgaaga gagcgtgaac 2640 aacgacatca gcagctggac aaagggcaga tcaggcgagg ctctgagcct gctgaagaag 2700 aggtttagcc acagacctgt gcaagagaag ttcgtgtgcc tgaactgcgg cttcgagaca 2760 cacgccgatg aacaggctgc cctgaacatt gccagaagct ggctgttcct gagaagccaa 2820 gagtacaaga agtaccagac caacaagacc accggcaaca ccgacaagag ggcctttgtg 2880 gaaacctggc agagcttcta cagaaaaaag ctgaaagaag tctggaagcc cgccgtg 2937 <![CDATA[<210> 1042]]> <![CDATA[<211> 2934]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 672變異體]]> <![CDATA[<400> 1042]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacaggccc catgaaaacc ctgctcgtca gagtgatgac ccctgacctg 120 agagagcggc tggaaaacct gagaaagaag cccgagaaca tccctcagcc tatcagcaac 180 accagcaggg ccaacctgaa caagctgctg accgactaca ccgagatgaa gaaagccatc 240 ctgcacgtgt actgggaaga gttccagaaa gaccccgtgg gcctgatgag cagagttgct 300 cagcctgcca gcaagaagat cgaccagaac aagctgaagc ccgagatgga cgagaagggc 360 aatctgacca cagccggctt tgcctgctct cagtgtggcc agcctctgtt cgtgtacaag 420 ctggaacagg tgtccgagaa aggcaaggcc tacaccaact acttcggcag atgtaacgtg 480 gccgagcacg agaagctgat taagctggcc cagctgaaac ctgagaagga ctctgatgag 540 gccgtgacct acagcctggg caagtttgga cagagagccc tggacttcta cagcatccac 600 gtgaccaaag aaagcacaca ccccgtgaag cccctggctc agatcgccgg caatagatac 660 gcctcttccc ctgtgggcaa agccctgtcc gatgcctgca tgggaacaat cgccagcttc 720 ctgagcaagt accaggacat catcatcgag caccagaagg tggtcaaggg caaccagaag 780 agactggaaa gcctgaggga gctggccggc aaagagaacc tggaataccc cagcgtgacc 840 ctgcctcctc agcctcacac aaaagaaggc gtggacgcct acaacgaagt gatcgccaga 900 gtgagaatgt gggtcaacct gaacctgtgg cagaagctga aactgtccag ggacgacgcc 960 aagcctctgc tgagactgaa gggcttccct agcttccctc tggtggaaag acaggccaat 1020 gaagtggatt ggtgggacat ggtctgcaac gtgaagaagc tgatcaacga gaagaaagag 1080 gatggcaagg ttttctggca gaacctggcc ggctacaaga gacaagaagc cctgaggcct 1140 tacctgagca gcgaagagga ccggaagaag ggcaagaagt tcgccagata ccagctgggc 1200 gacctgctgc tgcacctgga aaagaagcac ggcgaggact ggggcaaagt gtacgatgag 1260 gcctgggaga gaatcgacaa gaaggtggaa ggcctgagca agcacattaa gctggaagag 1320 gaaagaagga gcgaggacgc ccaatctaaa gccgctctga ccgattggct gagagccaag 1380 gccagctttg tgatcgaggg cctgaaagag gccgacaagg acgagttctg cagatgcgag 1440 ctgaagctgc agaagtggta cggcgatctg agaggcaagc ccttcgccat tgaggccgag 1500 aacagcatcc tggacatcag cggcttcagc aagcagtaca actgcgcctt catttggcag 1560 aaagacggcg tcaagaaact gaacctgtac ctgatcatca attacttcaa aggcggcaag 1620 ctgcggttca agaagatcaa acccgaggcc ttcgaggcta acagattcta caccgtgatc 1680 aacaaaaagt ccggcgagat cgtgcccatg gaagtgaact tcaacttcga cgaccccaac 1740 ctgattatcc tgcctctggc cttcggcaag agacagggca gagagttcat ctggaacgat 1800 ctgctgagcc tggaaaccgg ctctctgaag ctggccaatg gcagagtgat cgagaaaacc 1860 ctgtacaaca ggagaaccag acaggacgag cctgctctgt ttgtggccct gaccttcgag 1920 agaagagagg tgctggacag cagcaacatc aagcccatga acctgatcgg cgtggaccgg 1980 ggcgagaata tccctgctgt gatcgccctg acagaccctg aaggatgccc actgagcaga 2040 ttcaaggact ccctgggcaa ccctacacac atcctgagaa tcggcgagag ctacaaagag 2100 aagcagagga caatccaggc caagaaagag gtggaacaga gaagagccgg cggatactct 2160 aggaagtacg ccagcaaggc caagaatctg gccgacgaca tggtccgaaa caccgccaga 2220 gatctgctgt actacgccgt gacacaggac gccatgctga tcttcgagaa tctgagcaga 2280 ggcttcggcc ggcagggcaa gagaaccttt atggccgaga ggcagtacac cagaatggaa 2340 gattggctca cagctaaact ggcctacgag ggactgccca gcaagaccta cctgtccaaa 2400 acactggccc agtatacctc caagacctgc agcaattgcg gcttcaccat caccagcgcc 2460 gactacgaca gagtgctgga aaagctcaag aaaaccgcca ccggctggat gaccaccatc 2520 aacggcaaag agctgaaggt tgagggccag atcacctact acaacaggta caagaggcag 2580 aacgtcgtga aggatctgag cgtggaactg gacagactga gcgaagagag cgtgaacaac 2640 gacatcagca gctggacaaa gggcagatca ggcgaggctc tgagcctgct gaagaagagg 2700 tttagccaca gacctgtgca agagaagttc gtgtgcctga actgcggctt cgagacacac 2760 gccgatgaac aggctgccct gaacattgcc agaagctggc tgttcctgag aagccaagag 2820 tacaagaagt accagaccaa caagaccacc ggcaacaccg acaagagggc ctttgtggaa 2880 acctggcaga gcttctacag aaaaaagctg aaagaagtct ggaagcccgc cgtg 2934 <![CDATA[<210> 1043]]> <![CDATA[<211> 2937]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 676變異體]]> <![CDATA[<400> 1043]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattaagctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctt cccctgtggg caaagccctg tccgatgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactgc ccagcaagac ctacctgtcc 2400 aaaacactgg cccagtatac ctccaagacc tgcagcaatt gcggcttcac catcaccagc 2460 gccgactacg acagagtgct ggaaaagctc aagaaaaccg ccaccggctg gatgaccacc 2520 atcaacggca aagagctgaa ggttgagggc cagatcacct actacaacag gtacaagagg 2580 cagaacgtcg tgaaggatct gagcgtggaa ctggacagac tgagcgaaga gagcgtgaac 2640 aacgacatca gcagctggac aaagggcaga tcaggcgagg ctctgagcct gctgaagaag 2700 aggtttagcc acagacctgt gcaagagaag ttcgtgtgcc tgaactgcgg cttcgagaca 2760 cacgccgatg aacaggctgc cctgaacatt gccagaagct ggctgttcct gagaagccaa 2820 gagtacaaga agtaccagac caacaagacc accggcaaca ccgacaagag ggcctttgtg 2880 gaaacctggc agagcttcta cagaaaaaag ctgaaagaag tctggaagcc cgccgtg 2937 <![CDATA[<210> 1044]]> <![CDATA[<211> 2937]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 677變異體]]> <![CDATA[<400> 1044]]> caagagatca agagaatcaa caagatcaga aggagactgg tcaaggacag caacacaaag 60 aaggccggca agacacgggg ccccatgaaa accctgctcg tcagagtgat gacccctgac 120 ctgagagagc ggctggaaaa cctgagaaag aagcccgaga acatccctca gcctatcagc 180 aacaccagca gggccaacct gaacaagctg ctgaccgact acaccgagat gaagaaagcc 240 atcctgcacg tgtactggga agagttccag aaagaccccg tgggcctgat gagcagagtt 300 gctcagcctg ccagcaagaa gatcgaccag aacaagctga agcccgagat ggacgagaag 360 ggcaatctga ccacagccgg ctttgcctgc tctcagtgtg gccagcctct gttcgtgtac 420 aagctggaac aggtgtccga gaaaggcaag gcctacacca actacttcgg cagatgtaac 480 gtggccgagc acgagaagct gattaagctg gcccagctga aacctgagaa ggactctgat 540 gaggccgtga cctacagcct gggcaagttt ggacagagag ccctggactt ctacagcatc 600 cacgtgacca aagaaagcac acaccccgtg aagcccctgg ctcagatcgc cggcaataga 660 tacgcctctt cccctgtggg caaagccctg tccggcgcct gcatgggaac aatcgccagc 720 ttcctgagca agtaccagga catcatcatc gagcaccaga aggtggtcaa gggcaaccag 780 aagagactgg aaagcctgag ggagctggcc ggcaaagaga acctggaata ccccagcgtg 840 accctgcctc ctcagcctca cacaaaagaa ggcgtggacg cctacaacga agtgatcgcc 900 agagtgagaa tgtgggtcaa cctgaacctg tggcagaagc tgaaactgtc cagggacgac 960 gccaagcctc tgctgagact gaagggcttc cctagcttcc ctctggtgga aagacaggcc 1020 aatgaagtgg attggtggga catggtctgc aacgtgaaga agctgatcaa cgagaagaaa 1080 gaggatggca aggttttctg gcagaacctg gccggctaca agagacaaga agccctgagg 1140 ccttacctga gcagcgaaga ggaccggaag aagggcaaga agttcgccag ataccagctg 1200 ggcgacctgc tgctgcacct ggaaaagaag cacggcgagg actggggcaa agtgtacgat 1260 gaggcctggg agagaatcga caagaaggtg gaaggcctga gcaagcacat taagctggaa 1320 gaggaaagaa ggagcgagga cgcccaatct aaagccgctc tgaccgattg gctgagagcc 1380 aaggccagct ttgtgatcga gggcctgaaa gaggccgaca aggacgagtt ctgcagatgc 1440 gagctgaagc tgcagaagtg gtacggcgat ctgagaggca agcccttcgc cattgaggcc 1500 gagaacagca tcctggacat cagcggcttc agcaagcagt acaactgcgc cttcatttgg 1560 cagaaagacg gcgtcaagaa actgaacctg tacctgatca tcaattactt caaaggcggc 1620 aagctgcggt tcaagaagat caaacccgag gccttcgagg ctaacagatt ctacaccgtg 1680 atcaacaaaa agtccggcga gatcgtgccc atggaagtga acttcaactt cgacgacccc 1740 aacctgatta tcctgcctct ggccttcggc aagagacagg gcagagagtt catctggaac 1800 gatctgctga gcctggaaac cggctctctg aagctggcca atggcagagt gatcgagaaa 1860 accctgtaca acaggagaac cagacaggac gagcctgctc tgtttgtggc cctgaccttc 1920 gagagaagag aggtgctgga cagcagcaac atcaagccca tgaacctgat cggcgtggac 1980 cggggcgaga atatccctgc tgtgatcgcc ctgacagacc ctgaaggatg cccactgagc 2040 agattcaagg actccctggg caaccctaca cacatcctga gaatcggcga gagctacaaa 2100 gagaagcaga ggacaatcca ggccaagaaa gaggtggaac agagaagagc cggcggatac 2160 tctaggaagt acgccagcaa ggccaagaat ctggccgacg acatggtccg aaacaccgcc 2220 agagatctgc tgtactacgc cgtgacacag gacgccatgc tgatcttcga gaatctgagc 2280 agaggcttcg gccggcaggg caagagaacc tttatggccg agaggcagta caccagaatg 2340 gaagattggc tcacagctaa actggcctac gagggactgc ccagcaagac ctacctgtcc 2400 aaaacactgg cccagtatac ctccaagacc tgcagcaatt gcggcttcac catcaccagc 2460 gccgactacg acagagtgct ggaaaagctc aagaaaaccg ccaccggctg gatgaccacc 2520 atcaacggca aagagctgaa ggttgagggc cagatcacct actacaacag gtacaagagg 2580 cagaacgtcg tgaaggatct gagcgtggaa ctggacagac tgagcgaaga gagcgtgaac 2640 aacgacatca gcagctggac aaagggcaga tcaggcgagg ctctgagcct gctgaagaag 2700 aggtttagcc acagacctgt gcaagagaag ttcgtgtgcc tgaactgcgg cttcgagaca 2760 cacgccgatg aacaggctgc cctgaacatt gccagaagct ggctgttcct gagaagccaa 2820 gagtacaaga agtaccagac caacaagacc accggcaaca ccgacaagag ggcctttgtg 2880 gaaacctggc agagcttcta cagaaaaaag ctgaaagaag tctggaagcc cgccgtg 2937 <![CDATA[<210> 1045]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 488變異體]]> <![CDATA[<400> 1045]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Ile Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1046]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 491變異體]]> <![CDATA[<400> 1046]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1047]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 515變異體]]> <![CDATA[<400> 1047]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1048]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 527變異體]]> <![CDATA[<400> 1048]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1049]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 535]]> <![CDATA[<400> 1049]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1050]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 536變異體]]> <![CDATA[<400> 1050]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Thr Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1051]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 537變異體]]> <![CDATA[<400> 1051]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ala Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1052]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 583變異體]]> <![CDATA[<400> 1052]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1053]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 660變異體]]> <![CDATA[<400> 1053]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1054]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 661]]> <![CDATA[<400> 1054]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1055]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 662變異體]]> <![CDATA[<400> 1055]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Asn Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Phe Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Lys His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Ser Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Leu Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1056]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 663變異體]]> <![CDATA[<400> 1056]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asn Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1057]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 664變異體]]> <![CDATA[<400> 1057]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Pro Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Pro Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Arg Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1058]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 668變異體]]> <![CDATA[<400> 1058]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1059]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 670變異體]]> <![CDATA[<400> 1059]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1060]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 672變異體]]> <![CDATA[<400> 1060]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1061]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 676變異體]]> <![CDATA[<400> 1061]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1062]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX 677變異體]]> <![CDATA[<400> 1062]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Gly Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1063]]> <![CDATA[<211> 130]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA]]> <![CDATA[<400> 1063]]> gguacuggcg cuuuuaucuc auuacuuuga gagccaucac cagcgacuau gucguauggg 60 uaaagcgcuu auuuaucgga gagaaauccg auaaauaaga agcaucaaag ggccgagaug 120 ucucgcuccg 130 <![CDATA[<210> 1064]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA]]> <![CDATA[<400> 1064]]> gguacuggcg cuuuuaucuc auuacuuuga gagccaucac cagcgacuau gucguauggg 60 uaaagcgccc ucuucggagg gaagcaucaa agggccgaga ugucucg 107 <![CDATA[<210> 1065]]> <![CDATA[<211> 120]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA]]> <![CDATA[<400> 1065]]> gguacuggcg ccuuuaucuc auuacuuuga gagccaucac cagcgacuau gucguauggg 60 uaaagcgcuu acggacuucg guccguaaga agcaucaaag ggccgagaug ucucgcuccg 120 <![CDATA[<210> 1066]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA]]> <![CDATA[<400> 1066]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaagg gccgagaugu cucgcuccg 109 <![CDATA[<210> 1067]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA]]> <![CDATA[<400> 1067]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cggacuucgg uccguaagag gcaucagag 99 <![CDATA[<210> 1068]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1068]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1069]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1069]]> tgaagctgac agcattcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1070]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1070]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgagtgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1071]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1071]]> tgaagctgac agcactcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1072]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1072]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgactgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1073]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1073]]> tgaagctgac agcagtcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1074]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1074]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccgattgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1075]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1075]]> tgaagctgac agcaatcggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1076]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1076]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg cccaaatgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1077]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1077]]> tgaagctgac agcatttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1078]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1078]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctagtgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1079]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1079]]> tgaagctgac agcacttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1080]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1080]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctactgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1081]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1081]]> tgaagctgac agcagttggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1082]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1082]]> agcgcgagca cagctaaggc cacggagcga gacatctcgg ccctattgct gtcagcttca 60 <![CDATA[<210> 1083]]> <![CDATA[<211> 60]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 裂解受質]]> <![CDATA[<400> 1083]]> tgaagctgac agcaattggg ccgagatgtc tcgctccgtg gccttagctg tgctcgcgct 60 <![CDATA[<210> 1084]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1084]]> ggccgagatg tctcgctccg 20 <![CDATA[<210> 1085]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1085]]> ggccgagatg tctcgctccg 20 <![CDATA[<210> 1086]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1086]]> ggccgagatg tctcgctc 18 <![CDATA[<210> 1087]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1087]]> ggccgagatg tctcgctcc 19 <![CDATA[<210> 1088]]> <![CDATA[<211> 87]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板正向引子]]> <![CDATA[<400> 1088]]> gaaattaata cgactcacta taactggcgc ttttatctga ttactttgag agccatcacc 60 agcgactatg tcgtagtggg taaagct 87 <![CDATA[<210> 1089]]> <![CDATA[<211> 50]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174模板反向引子]]> <![CDATA[<400> 1089]]> ctttgatgct ccctccgaag agggagcttt acccactacg acatagtcgc 50 <![CDATA[<210> 1090]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 1090]]> cggagcgaga catctcggcc ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 1091]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 1091]]> gagcgagaca tctcggccct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 1092]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架174間隔子引子]]> <![CDATA[<400> 1092]]> ggagcgagac atctcggccc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 1093]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1093]]> ctttgtgaca catttgtttg ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 1094]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1094]]> tttgtgacac atttgtttgc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 1095]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1095]]> ttgtgacaca tttgtttgct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 1096]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1096]]> ttcaacaaca gcattattcc ctttgatgct ccctcc 36 <![CDATA[<210> 1097]]> <![CDATA[<211> 35]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1097]]> tcaacaacag cattattccc tttgatgctc cctcc 35 <![CDATA[<210> 1098]]> <![CDATA[<211> 34]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1098]]> caacaacagc attattccct ttgatgctcc ctcc 34 <![CDATA[<210> 1099]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1099]]> caaacaaaug ugucacaaag 20 <![CDATA[<210> 1100]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1100]]> caaacaaaug ugucacaaa 19 <![CDATA[<210> 1101]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1101]]> caaacaaaug ugucacaa 18 <![CDATA[<210> 1102]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1102]]> ggaauaaugc uguuguugaa 20 <![CDATA[<210> 1103]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1103]]> ggaauaaugc uguuguuga 19 <![CDATA[<210> 1104]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1104]]> ggaauaaugc uguuguug 18 <![CDATA[<210> 1105]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1105]]> ggccgagaug ucucgcuccg 20 <![CDATA[<210> 1106]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> sgRNA間隔子]]> <![CDATA[<400> 1106]]> cgagacguaa uuacgucucg 20 <![CDATA[<210> 1107]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCas096變異體]]> <![CDATA[<400> 1107]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1108]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCas401變異體]]> <![CDATA[<400> 1108]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1109]]> <![CDATA[<211> 972]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCas142變異體]]> <![CDATA[<400> 1109]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu 965 970 <![CDATA[<210> 1110]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCas402變異體]]> <![CDATA[<400> 1110]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1111]]> <![CDATA[<211> 1763]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> Gag-(-1)-PR]]> <![CDATA[<400> 1111]]> atgggtgcga gagcgtcagt attaagcggg ggagaattag atcgatggga aaaaattcgg 60 ttaaggccag ggggaaagaa aaaatataaa ttaaaacata tagtatgggc aagcagggag 120 ctagaacgat tcgcagttaa tcctggcctg ttagaaacat cagaaggctg tagacaaata 180 ctgggacagc tacaaccatc ccttcagaca ggatcagaag aacttagatc attatataat 240 acagtagcaa ccctctattg tgtgcatcaa aggatagaga taaaagacac caaggaagct 300 ttagacaaga tagaggaaga gcaaaacaaa agtaagaaaa aagcacagca agcagcagct 360 gacacaggac acagcaatca ggtcagccaa aattacccta tagtgcagaa catccagggg 420 caaatggtac atcaggccat atcacctaga actttaaatg catgggtaaa agtagtagaa 480 gagaaggctt tcagcccaga agtgataccc atgttttcag cattatcaga aggagccacc 540 ccacaagatt taaacaccat gctaaacaca gtggggggac atcaagcagc catgcaaatg 600 ttaaaagaga ccatcaatga ggaagctgca gaatgggata gagtgcatcc agtgcatgca 660 gggcctattg caccaggcca gatgagagaa ccaaggggaa gtgacatagc aggaactact 720 agtacccttc aggaacaaat aggatggatg acacataatc cacctatccc agtaggagaa 780 atctataaaa gatggataat cctgggatta aataaaatag taagaatgta tagccctacc 840 agcattctgg acataagaca aggaccaaag gaacccttta gagactatgt agaccgattc 900 tataaaactc taagagccga gcaagcttca caagaggtaa aaaattggat gacagaaacc 960 ttgttggtcc aaaatgcgaa cccagattgt aagactattt taaaagcatt gggaccagga 1020 gcgacactag aagaaatgat gacagcatgt cagggagtgg ggggacccgg ccataaagca 1080 agagttttgg ctgaagcaat gagccaagta acaaatccag ctaccataat gatacagaaa 1140 ggcaatttta ggaaccaaag aaagactgtt aagtgtttca attgtggcaa agaagggcac 1200 atagccaaaa attgcagggc ccctaggaaa aagggctgtt ggaaatgtgg aaaggaagga 1260 caccaaatga aagattgtac tgagagacag gctaattttt tagggaagat ctggccttcc 1320 cacaagggaa ggccagggaa ttttcttcag agcagaccag agccaacagc cccaccagaa 1380 gagagcttca ggtttgggga agagacaaca actccctctc agaagcagga gccgatagac 1440 aaggaactgt atcctttagc ttccctcaga tcactctttg gcagcgaccc ctcgtcacaa 1500 taaagatagg ggggcaatta aaggaagctc tattagatac aggagcagat gatacagtat 1560 tagaagaaat gaatttgcca ggaagatgga aaccaaaaat gataggggga attggaggtt 1620 ttatcaaagt aagacagtat gatcagatac tcatagaaat ctgcggacat aaagctatag 1680 gtacagtatt agtaggacct acacctgtca acataattgg aagaaatctg ttgactcaga 1740 ttggctgcac tttaaatttt taa 1763 <![CDATA[<210> 1112]]> <![CDATA[<211> 1902]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> Gag-MS2]]> <![CDATA[<400> 1112]]> gccaccatgg gtgcgagagc gtcagtatta agcgggggag aattagatcg atgggaaaaa 60 attcggttaa ggccaggggg aaagaaaaaa tataaattaa aacatatagt atgggcaagc 120 agggagctag aacgattcgc agttaatcct ggcctgttag aaacatcaga aggctgtaga 180 caaatactgg gacagctaca accatccctt cagacaggat cagaagaact tagatcatta 240 tataatacag tagcaaccct ctattgtgtg catcaaagga tagagataaa agacaccaag 300 gaagctttag acaagataga ggaagagcaa aacaaaagta agaaaaaagc acagcaagca 360 gcagctgaca caggacacag caatcaggtc agccaaaatt accctatagt gcagaacatc 420 caggggcaaa tggtacatca ggccatatca cctagaactt taaatgcatg ggtaaaagta 480 gtagaagaga aggctttcag cccagaagtg atacccatgt tttcagcatt atcagaagga 540 gccaccccac aagatttaaa caccatgcta aacacagtgg ggggacatca agcagccatg 600 caaatgttaa aagagaccat caatgaggaa gctgcagaat gggatagagt gcatccagtg 660 catgcagggc ctattgcacc aggccagatg agagaaccaa ggggaagtga catagcagga 720 actactagta cccttcagga acaaatagga tggatgacac ataatccacc tatcccagta 780 ggagaaatct ataaaagatg gataatcctg ggattaaata aaatagtaag aatgtatagc 840 cctaccagca ttctggacat aagacaagga ccaaaggaac cctttagaga ctatgtagac 900 cgattctata aaactctaag agccgagcaa gcttcacaag aggtaaaaaa ttggatgaca 960 gaaaccttgt tggtccaaaa tgcgaaccca gattgtaaga ctattttaaa agcattggga 1020 ccaggagcga cactagaaga aatgatgaca gcatgtcagg gagtgggggg acccggccat 1080 aaagcaagag ttttggctga agcaatgagc caagtaacaa atccagctac cataatgata 1140 cagaaaggca attttaggaa ccaaagaaag actgttaagt gtttcaattg tggcaaagaa 1200 gggcacatag ccaaaaattg cagggcccct aggaaaaagg gctgttggaa atgtggaaag 1260 gaaggacacc aaatgaaaga ttgtactgag agacaggcta attttttagg gaagatctgg 1320 ccttcccaca agggaaggcc agggaatttt cttcagagca gaccagagcc aacagcccca 1380 ccagaagaga gcttcaggtt tggggaagag acaacaactc cctctcagaa gcaggagccg 1440 atagacaagg aactgtatcc tttagcttcc ctcagatcac tctttggcag cgacccctcg 1500 tcacaaatgg cgtcaaactt cacgcagttt gtcctcgttg acaacggggg gactggcgat 1560 gtcacagtgg ctcccagtaa cttcgcgaat ggcgtcgccg aatggatcag cagtaactct 1620 cggtctcagg catacaaggt cacctgttcc gtgcgccaat catctgccca gaacaggaaa 1680 tacaccatta aggtggaggt gccaaaggtc gccacccaga ctgtgggagg ggtggagctg 1740 cctgtggccg cctggaggtc atacctcaac atggagctca ccatacctat attcgcaacc 1800 aattccgact gcgaattgat cgtcaaagcg atgcagggcc tcctgaagga tggtaaccca 1860 attccgagtg caatcgcagc taacagcggc atttacttat aa 1902 <![CDATA[<210> 1113]]> <![CDATA[<211> 1902]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> Gag-MS2 N55K]]> <![CDATA[<400> 1113]]> gccaccatgg gtgcgagagc gtcagtatta agcgggggag aattagatcg atgggaaaaa 60 attcggttaa ggccaggggg aaagaaaaaa tataaattaa aacatatagt atgggcaagc 120 agggagctag aacgattcgc agttaatcct ggcctgttag aaacatcaga aggctgtaga 180 caaatactgg gacagctaca accatccctt cagacaggat cagaagaact tagatcatta 240 tataatacag tagcaaccct ctattgtgtg catcaaagga tagagataaa agacaccaag 300 gaagctttag acaagataga ggaagagcaa aacaaaagta agaaaaaagc acagcaagca 360 gcagctgaca caggacacag caatcaggtc agccaaaatt accctatagt gcagaacatc 420 caggggcaaa tggtacatca ggccatatca cctagaactt taaatgcatg ggtaaaagta 480 gtagaagaga aggctttcag cccagaagtg atacccatgt tttcagcatt atcagaagga 540 gccaccccac aagatttaaa caccatgcta aacacagtgg ggggacatca agcagccatg 600 caaatgttaa aagagaccat caatgaggaa gctgcagaat gggatagagt gcatccagtg 660 catgcagggc ctattgcacc aggccagatg agagaaccaa ggggaagtga catagcagga 720 actactagta cccttcagga acaaatagga tggatgacac ataatccacc tatcccagta 780 ggagaaatct ataaaagatg gataatcctg ggattaaata aaatagtaag aatgtatagc 840 cctaccagca ttctggacat aagacaagga ccaaaggaac cctttagaga ctatgtagac 900 cgattctata aaactctaag agccgagcaa gcttcacaag aggtaaaaaa ttggatgaca 960 gaaaccttgt tggtccaaaa tgcgaaccca gattgtaaga ctattttaaa agcattggga 1020 ccaggagcga cactagaaga aatgatgaca gcatgtcagg gagtgggggg acccggccat 1080 aaagcaagag ttttggctga agcaatgagc caagtaacaa atccagctac cataatgata 1140 cagaaaggca attttaggaa ccaaagaaag actgttaagt gtttcaattg tggcaaagaa 1200 gggcacatag ccaaaaattg cagggcccct aggaaaaagg gctgttggaa atgtggaaag 1260 gaaggacacc aaatgaaaga ttgtactgag agacaggcta attttttagg gaagatctgg 1320 ccttcccaca agggaaggcc agggaatttt cttcagagca gaccagagcc aacagcccca 1380 ccagaagaga gcttcaggtt tggggaagag acaacaactc cctctcagaa gcaggagccg 1440 atagacaagg aactgtatcc tttagcttcc ctcagatcac tctttggcag cgacccctcg 1500 tcacaaatgg cgtcaaactt cacgcagttt gtcctcgttg acaacggggg gactggcgat 1560 gtcacagtgg ctcccagtaa cttcgcgaat ggcgtcgccg aatggatcag cagtaactct 1620 cggtctcagg catacaaggt cacctgttcc gtgcgccaat catctgccca gaagaggaaa 1680 tacaccatta aggtggaggt gccaaaggtc gccacccaga ctgtgggagg ggtggagctg 1740 cctgtggccg cctggaggtc atacctcaac atggagctca ccatacctat attcgcaacc 1800 aattccgact gcgaattgat cgtcaaagcg atgcagggcc tcctgaagga tggtaaccca 1860 attccgagtg caatcgcagc taacagcggc atttacttat aa 1902 <![CDATA[<210> 1114]]> <![CDATA[<211> 3117]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 具有NLS之CasX 491變異體]]> <![CDATA[<400> 1114]]> gccaccatgc ccgcggccaa aagggtgaaa ttggacggag ggaagcgcac ggccgacggc 60 agtgaattcg agtctccaaa gaagaagcgc aaagttggtg gcggctccgg cggtggatct 120 cccggctcta gagatatctc tagacaagag atcaagagaa tcaacaagat cagaaggaga 180 ctggtcaagg acagcaacac aaagaaggcc ggcaagacag gccccatgaa aaccctgctc 240 gtcagagtga tgacccctga cctgagagag cggctggaaa acctgagaaa gaagcccgag 300 aacatccctc agcctatcag caacaccagc agggccaacc tgaacaagct gctgaccgac 360 tacaccgaga tgaagaaagc catcctgcac gtgtactggg aagagttcca gaaagacccc 420 gtgggcctga tgagcagagt tgctcagcct gccagcaaga agatcgacca gaacaagctg 480 aagcccgaga tggacgagaa gggcaatctg accacagccg gctttgcctg ctctcagtgt 540 ggccagcctc tgttcgtgta caagctggaa caggtgtccg agaaaggcaa ggcctacacc 600 aactacttcg gcagatgtaa cgtggccgag cacgagaagc tgattctgct ggcccagctg 660 aaacctgaga aggactctga tgaggccgtg acctacagcc tgggcaagtt tggacagaga 720 gccctggact tctacagcat ccacgtgacc aaagaaagca cacaccccgt gaagcccctg 780 gctcagatcg ccggcaatag atacgcctct ggacctgtgg gcaaagccct gtccgatgcc 840 tgcatgggaa caatcgccag cttcctgagc aagtaccagg acatcatcat cgagcaccag 900 aaggtggtca agggcaacca gaagagactg gaaagcctga gggagctggc cggcaaagag 960 aacctggaat accccagcgt gaccctgcct cctcagcctc acacaaaaga aggcgtggac 1020 gcctacaacg aagtgatcgc cagagtgaga atgtgggtca acctgaacct gtggcagaag 1080 ctgaaactgt ccagggacga cgccaagcct ctgctgagac tgaagggctt ccctagcttc 1140 cctctggtgg aaagacaggc caatgaagtg gattggtggg acatggtctg caacgtgaag 1200 aagctgatca acgagaagaa agaggatggc aaggttttct ggcagaacct ggccggctac 1260 aagagacaag aagccctgag gccttacctg agcagcgaag aggaccggaa gaagggcaag 1320 aagttcgcca gataccagct gggcgacctg ctgctgcacc tggaaaagaa gcacggcgag 1380 gactggggca aagtgtacga tgaggcctgg gagagaatcg acaagaaggt ggaaggcctg 1440 agcaagcaca ttaagctgga agaggaaaga aggagcgagg acgcccaatc taaagccgct 1500 ctgaccgatt ggctgagagc caaggccagc tttgtgatcg agggcctgaa agaggccgac 1560 aaggacgagt tctgcagatg cgagctgaag ctgcagaagt ggtacggcga tctgagaggc 1620 aagcccttcg ccattgaggc cgagaacagc atcctggaca tcagcggctt cagcaagcag 1680 tacaactgcg ccttcatttg gcagaaagac ggcgtcaaga aactgaacct gtacctgatc 1740 atcaattact tcaaaggcgg caagctgcgg ttcaagaaga tcaaacccga ggccttcgag 1800 gctaacagat tctacaccgt gatcaacaaa aagtccggcg agatcgtgcc catggaagtg 1860 aacttcaact tcgacgaccc caacctgatt atcctgcctc tggccttcgg caagagacag 1920 ggcagagagt tcatctggaa cgatctgctg agcctggaaa ccggctctct gaagctggcc 1980 aatggcagag tgatcgagaa aaccctgtac aacaggagaa ccagacagga cgagcctgct 2040 ctgtttgtgg ccctgacctt cgagagaaga gaggtgctgg acagcagcaa catcaagccc 2100 atgaacctga tcggcgtgga ccggggcgag aatatccctg ctgtgatcgc cctgacagac 2160 cctgaaggat gcccactgag cagattcaag gactccctgg gcaaccctac acacatcctg 2220 agaatcggcg agagctacaa agagaagcag aggacaatcc aggccaagaa agaggtggaa 2280 cagagaagag ccggcggata ctctaggaag tacgccagca aggccaagaa tctggccgac 2340 gacatggtcc gaaacaccgc cagagatctg ctgtactacg ccgtgacaca ggacgccatg 2400 ctgatcttcg agaatctgag cagaggcttc ggccggcagg gcaagagaac ctttatggcc 2460 gagaggcagt acaccagaat ggaagattgg ctcacagcta aactggccta cgagggactg 2520 agcaagacct acctgtccaa aacactggcc cagtatacct ccaagacctg cagcaattgc 2580 ggcttcacca tcaccagcgc cgactacgac agagtgctgg aaaagctcaa gaaaaccgcc 2640 accggctgga tgaccaccat caacggcaaa gagctgaagg ttgagggcca gatcacctac 2700 tacaacaggt acaagaggca gaacgtcgtg aaggatctga gcgtggaact ggacagactg 2760 agcgaagaga gcgtgaacaa cgacatcagc agctggacaa agggcagatc aggcgaggct 2820 ctgagcctgc tgaagaagag gtttagccac agacctgtgc aagagaagtt cgtgtgcctg 2880 aactgcggct tcgagacaca cgccgatgaa caggctgccc tgaacattgc cagaagctgg 2940 ctgttcctga gaagccaaga gtacaagaag taccagacca acaagaccac cggcaacacc 3000 gacaagaggg cctttgtgga aacctggcag agcttctaca gaaaaaagct gaaagaagtc 3060 tggaagcccg ccgtgactct cgaggggggt agcccaaaaa agaagagaaa ggtatga 3117 <![CDATA[<210> 1115]]> <![CDATA[<211> 116]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1115]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggatcacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttt 116 <![CDATA[<210> 1116]]> <![CDATA[<211> 175]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1116]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctgcact atgggcgcag ctcatgagga tcacccatga gctgacggta caggccacat 120 gaggatcacc catgtggtat agtgcagcat caaagctgca ttctagttgt ggttt 175 <![CDATA[<210> 1117]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1117]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacct gaggatcacc caggtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1118]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1118]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcgcat gaggatcacc catgcgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1119]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1119]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcgcct gaggatcacc caggcgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1120]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1120]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcgcct gagcatcagc caggcgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1121]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1121]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gagcatcagc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1122]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1122]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gagtatcaac catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1123]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1123]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gagaatcagc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1124]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1124]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctccctt gaggatcacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1125]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1125]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcactt gaggatcacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1126]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1126]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacct gaggatcacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1127]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1127]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggatcacc tatgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1128]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1128]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat taggatcacc aatgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1129]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1129]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat taggatcacc gatgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1130]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1130]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat taggatcacc tatgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1131]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1131]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggattacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1132]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1132]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggataacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1133]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1133]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggatgacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1134]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1134]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat gaggaccacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1135]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1135]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcagat gaggatcacc catgggagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1136]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> DNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架序列]]> <![CDATA[<400> 1136]]> actggcgctt ttatctgatt actttgagag ccatcaccag cgactatgtc gtagtgggta 60 aagctcacat ggggatcacc catgtgagca tcaaagctgc attctagttg tggttttttt 120 tt 122 <![CDATA[<210> 1137]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1137]]> acaugaggau cacccaugu 19 <![CDATA[<210> 1138]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1138]]> accugaggau cacccaggu 19 <![CDATA[<210> 1139]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1139]]> gcaugaggau cacccaugc 19 <![CDATA[<210> 1140]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1140]]> gccugaggau cacccaggc 19 <![CDATA[<210> 1141]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1141]]> gccugagcau cagccaggc 19 <![CDATA[<210> 1142]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1142]]> acaugagcau cagccaugu 19 <![CDATA[<210> 1143]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1143]]> acuugaggau cacccaugu 19 <![CDATA[<210> 1144]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1144]]> acauuaggau caccaaugu 19 <![CDATA[<210> 1145]]> <![CDATA[<211> 19]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2髮夾序列]]> <![CDATA[<400> 1145]]> acaugaggac cacccaugu 19 <![CDATA[<210> 1146]]> <![CDATA[<211> 20]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 間隔序列]]> <![CDATA[<400> 1146]]> cugcauucua guugugguuu 20 <![CDATA[<210> 1147]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1147]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Ala 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1148]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1148]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Val Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1149]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1149]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Gly Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1150]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1150]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu His Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1151]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1151]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Cys Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1152]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1152]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Val Cys Asn Val Lys Lys Leu 340 345 350 Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn Leu Ala 355 360 365 Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu 370 375 380 Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu 385 390 395 400 Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr 405 410 415 Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys 420 425 430 His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys 435 440 445 Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu 450 455 460 Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys 465 470 475 480 Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu 485 490 495 Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn 500 505 510 Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr 515 520 525 Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile 530 535 540 Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys 545 550 555 560 Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp 565 570 575 Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg 580 585 590 Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys 595 600 605 Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr 610 615 620 Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg 625 630 635 640 Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val 645 650 655 Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu 660 665 670 Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His 675 680 685 Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln 690 695 700 Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys 705 710 715 720 Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr 725 730 735 Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile 740 745 750 Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe 755 760 765 Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys 770 775 780 Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 1153]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1153]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Gly Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1154]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1154]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Leu Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1155]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1155]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Gln Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1156]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1156]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Ser Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1157]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1157]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Glu Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1158]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1158]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Thr Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1159]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1159]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Asn Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1160]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1160]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Leu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1161]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1161]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Arg Cys Glu Leu Lys 465 470 475 480 Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu 485 490 495 Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn 500 505 510 Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr 515 520 525 Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile 530 535 540 Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys 545 550 555 560 Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp 565 570 575 Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg 580 585 590 Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys 595 600 605 Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr 610 615 620 Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg 625 630 635 640 Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val 645 650 655 Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu 660 665 670 Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His 675 680 685 Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln 690 695 700 Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys 705 710 715 720 Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr 725 730 735 Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile 740 745 750 Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe 755 760 765 Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys 770 775 780 Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 1162]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1162]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser Glu Glu 370 375 380 Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly Asp Leu 385 390 395 400 Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys Val Tyr 405 410 415 Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu Ser Lys 420 425 430 His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln Ser Lys 435 440 445 Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Ile Glu 450 455 460 Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu Leu Lys 465 470 475 480 Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala Ile Glu 485 490 495 Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn 500 505 510 Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr 515 520 525 Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile 530 535 540 Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys 545 550 555 560 Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp 565 570 575 Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg 580 585 590 Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys 595 600 605 Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr 610 615 620 Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg 625 630 635 640 Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val 645 650 655 Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu 660 665 670 Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His 675 680 685 Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln 690 695 700 Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys 705 710 715 720 Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr 725 730 735 Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile 740 745 750 Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe 755 760 765 Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys 770 775 780 Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 1163]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1163]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Gln Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1164]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1164]]> Gln Glu Ile Lys Arg Leu Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1165]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1165]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Asp Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1166]]> <![CDATA[<211> 976]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1166]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn 500 505 510 Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr 515 520 525 Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile 530 535 540 Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys 545 550 555 560 Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp 565 570 575 Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg 580 585 590 Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys 595 600 605 Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr 610 615 620 Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg 625 630 635 640 Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val 645 650 655 Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu 660 665 670 Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His 675 680 685 Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln 690 695 700 Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys 705 710 715 720 Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr 725 730 735 Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile 740 745 750 Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe 755 760 765 Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys 770 775 780 Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu 785 790 795 800 Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr 805 810 815 Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr 820 825 830 Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln 835 840 845 Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu 850 855 860 Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile 865 870 875 880 Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys 885 890 895 Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn 900 905 910 Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala 915 920 925 Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr 930 935 940 Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp 945 950 955 960 Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 965 970 975 <![CDATA[<210> 1167]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1167]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Val Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1168]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1168]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Gly Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1169]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1169]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Phe Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1170]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1170]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Tyr Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1171]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1171]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Pro Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1172]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1172]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Thr Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1173]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1173]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Cys Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1174]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1174]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Pro 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1175]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1175]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Gly Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1176]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1176]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1177]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1177]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ile Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1178]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1178]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Lys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1179]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1179]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Gln Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1180]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1180]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Tyr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1181]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1181]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Lys Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1182]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1182]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ala Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1183]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1183]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1184]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1184]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1185]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1185]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Trp Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1186]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1186]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 His Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1187]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1187]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Pro Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1188]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1188]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1189]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1189]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1190]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1190]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Phe Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1191]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1191]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Asn Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1192]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1192]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Pro Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1193]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1193]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Trp Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1194]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1194]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Met Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1195]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1195]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1196]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1196]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Val Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1197]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1197]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Pro Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1198]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1198]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Pro Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1199]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1199]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Met Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1200]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1200]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Arg Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1201]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1201]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Phe Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1202]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1202]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1203]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1203]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Gln Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1204]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1204]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Asn Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1205]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1205]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu His Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1206]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1206]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Val Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1207]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1207]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Gln Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1208]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1208]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Pro Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1209]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1209]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Arg Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1210]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1210]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Trp Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1211]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1211]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Asn Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1212]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1212]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Ser Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1213]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1213]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ser Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1214]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1214]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Arg Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1215]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1215]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Arg Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1216]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1216]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Asp Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1217]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1217]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Gln Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1218]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1218]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Met Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1219]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1219]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Ile Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1220]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1220]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Val Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1221]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1221]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Glu Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1222]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1222]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Met Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1223]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1223]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Gln Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1224]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1224]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Ile Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1225]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1225]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Asn Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1226]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1226]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Gly Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1227]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1227]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Met Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1228]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1228]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Gln Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1229]]> <![CDATA[<211> 978]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1229]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Glu Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro 965 970 975 Ala Val <![CDATA[<210> 1230]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1230]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Ser Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1231]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1231]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Asp Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Glu Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Lys Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1232]]> <![CDATA[<211> 977]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1232]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala 50 55 60 Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile 65 70 75 80 Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met 85 90 95 Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu 100 105 110 Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala 115 120 125 Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val 130 135 140 Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val 145 150 155 160 Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys 165 170 175 Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln Arg 180 185 190 Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His Pro 195 200 205 Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly Pro 210 215 220 Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser Phe 225 230 235 240 Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val Lys 245 250 255 Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys Glu 260 265 270 Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr Lys 275 280 285 Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met Trp 290 295 300 Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp Ala 305 310 315 320 Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val Glu 325 330 335 Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val Lys 340 345 350 Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln Asn 355 360 365 Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser Ser 370 375 380 Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu Gly 385 390 395 400 Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly Lys 405 410 415 Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly Leu 420 425 430 Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala Gln 435 440 445 Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val 450 455 460 Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys Glu 465 470 475 480 Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe Ala 485 490 495 Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln 500 505 510 Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn 515 520 525 Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys 530 535 540 Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile 545 550 555 560 Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe 565 570 575 Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln 580 585 590 Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser 595 600 605 Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg 610 615 620 Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu 625 630 635 640 Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile 645 650 655 Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp 660 665 670 Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro 675 680 685 Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr 690 695 700 Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser 705 710 715 720 Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg 725 730 735 Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met 740 745 750 Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg 755 760 765 Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr 770 775 780 Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr 785 790 795 800 Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile 805 810 815 Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala 820 825 830 Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly 835 840 845 Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys Asp 850 855 860 Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp 865 870 875 880 Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu 885 890 895 Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu 900 905 910 Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile 915 920 925 Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln 930 935 940 Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr 945 950 955 960 Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala 965 970 975 Val <![CDATA[<210> 1233]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1233]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1234]]> <![CDATA[<211> 972]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1234]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys 785 790 795 800 Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe Thr 805 810 815 Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys Thr 820 825 830 Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val Glu 835 840 845 Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val Lys 850 855 860 Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn Asn 865 870 875 880 Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser Leu 885 890 895 Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val Cys 900 905 910 Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu Asn 915 920 925 Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr 930 935 940 Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu 945 950 955 960 Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu 965 970 <![CDATA[<210> 1235]]> <![CDATA[<211> 979]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> dCasX變異體]]> <![CDATA[<400> 1235]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Arg Gly Pro Met Lys Thr Leu 20 25 30 Leu Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu 35 40 45 Arg Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg 50 55 60 Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala 65 70 75 80 Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu 85 90 95 Met Ser Arg Val Ala Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys 100 105 110 Leu Lys Pro Glu Met Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe 115 120 125 Ala Cys Ser Gln Cys Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln 130 135 140 Val Ser Glu Lys Gly Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn 145 150 155 160 Val Ala Glu His Glu Lys Leu Ile Lys Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu 165 170 175 Lys Asp Ser Asp Glu Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 180 185 190 Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 195 200 205 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Ser 210 215 220 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 225 230 235 240 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 245 250 255 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 260 265 270 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 275 280 285 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 290 295 300 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 305 310 315 320 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe Pro Leu Val 325 330 335 Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val Cys Asn Val 340 345 350 Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val Phe Trp Gln 355 360 365 Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro Tyr Leu Ser 370 375 380 Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg Tyr Gln Leu 385 390 395 400 Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu Asp Trp Gly 405 410 415 Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Val Glu Gly 420 425 430 Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser Glu Asp Ala 435 440 445 Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe 450 455 460 Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe Cys Arg Cys 465 470 475 480 Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Lys Pro Phe 485 490 495 Ala Ile Glu Ala Glu Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys 500 505 510 Gln Tyr Asn Cys Ala Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu 515 520 525 Asn Leu Tyr Leu Ile Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe 530 535 540 Lys Lys Ile Lys Pro Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val 545 550 555 560 Ile Asn Lys Lys Ser Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn 565 570 575 Phe Asp Asp Pro Asn Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg 580 585 590 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 595 600 605 Ser Leu Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn 610 615 620 Arg Arg Thr Arg Gln Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 625 630 635 640 Glu Arg Arg Glu Val Leu Asp Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu 645 650 655 Ile Gly Val Ala Arg Gly Glu Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr 660 665 670 Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn 675 680 685 Pro Thr His Ile Leu Arg Ile Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg 690 695 700 Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr 705 710 715 720 Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val 725 730 735 Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala 740 745 750 Met Leu Ile Phe Ala Asn Leu Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys 755 760 765 Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser 785 790 795 800 Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr Ser Lys Thr Cys Ser Asn Cys Gly Phe 805 810 815 Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu Glu Lys Leu Lys Lys 820 825 830 Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly Lys Glu Leu Lys Val 835 840 845 Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys Arg Gln Asn Val Val 850 855 860 Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser Glu Glu Ser Val Asn 865 870 875 880 Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser Gly Glu Ala Leu Ser 885 890 895 Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val Gln Glu Lys Phe Val 900 905 910 Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His Ala Ala Glu Gln Ala Ala Leu 915 920 925 Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys 930 935 940 Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val 945 950 955 960 Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys 965 970 975 Pro Ala Val <![CDATA[<210> 1236]]> <![CDATA[<211> 150]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1236]]> Thr Leu Glu Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 20 25 30 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 35 40 45 Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 50 55 60 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro 65 70 75 80 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser 85 90 95 Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 100 105 110 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 115 120 125 Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly 130 135 140 Gln Ala Lys Lys Lys Lys 145 150 <![CDATA[<210> 1237]]> <![CDATA[<211> 135]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1237]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys 20 25 30 Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala 35 40 45 Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg 50 55 60 Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly 65 70 75 80 Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys 85 90 95 Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 100 105 110 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 115 120 125 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 130 135 <![CDATA[<210> 1238]]> <![CDATA[<211> 80]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1238]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Thr Leu Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg 35 40 45 Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro 50 55 60 Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 65 70 75 80 <![CDATA[<210> 1239]]> <![CDATA[<211> 54]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1239]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg 20 25 30 Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro 35 40 45 Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 <![CDATA[<210> 1240]]> <![CDATA[<211> 62]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1240]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala 20 25 30 Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys 35 40 45 Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 50 55 60 <![CDATA[<210> 1241]]> <![CDATA[<211> 86]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1241]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala 20 25 30 Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys 35 40 45 Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly 50 55 60 Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala 65 70 75 80 Lys Arg Val Lys Leu Asp 85 <![CDATA[<210> 1242]]> <![CDATA[<211> 33]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1242]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys 20 25 30 Lys <![CDATA[<210> 1243]]> <![CDATA[<211> 52]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1243]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys 20 25 30 Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 35 40 45 Lys Lys Lys Lys 50 <![CDATA[<210> 1244]]> <![CDATA[<211> 26]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1244]]> Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu 1 5 10 15 Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 20 25 <![CDATA[<210> 1245]]> <![CDATA[<211> 47]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1245]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr 1 5 10 15 Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg 20 25 30 Lys Val Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 45 <![CDATA[<210> 1246]]> <![CDATA[<211> 53]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1246]]> Thr Leu Glu Val Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala 1 5 10 15 Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe 20 25 30 Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys 35 40 45 Lys Lys Arg Lys Val 50 <![CDATA[<210> 1247]]> <![CDATA[<211> 62]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1247]]> Thr Leu Glu Val Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu 1 5 10 15 Ala Ala Ala Lys Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro 20 25 30 Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys 35 40 45 Val Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 60 <![CDATA[<210> 1248]]> <![CDATA[<211> 57]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1248]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser 1 5 10 15 Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg 20 25 30 Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu Gly 35 40 45 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 <![CDATA[<210> 1249]]> <![CDATA[<211> 45]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1249]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala 1 5 10 15 Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 20 25 30 Thr Leu Glu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 45 <![CDATA[<210> 1250]]> <![CDATA[<211> 61]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1250]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly 1 5 10 15 Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Thr Leu Glu Val Gly 20 25 30 Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys 35 40 45 Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 60 <![CDATA[<210> 1251]]> <![CDATA[<211> 65]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1251]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Thr Leu Glu Val Gly Gly Gly 20 25 30 Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro 35 40 45 Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys 50 55 60 Val 65 <![CDATA[<210> 1252]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1252]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Thr 1 5 10 15 Leu Glu Val Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala 20 25 30 Ala Ala Lys Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro 35 40 45 Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 60 <![CDATA[<210> 1253]]> <![CDATA[<211> 78]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1253]]> Thr Leu Glu Val Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr 1 5 10 15 Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg 20 25 30 Lys Val Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 35 40 45 Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr 50 55 60 Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 65 70 75 <![CDATA[<210> 1254]]> <![CDATA[<211> 72]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1254]]> Thr Leu Glu Val Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala 1 5 10 15 Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe 20 25 30 Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu Val Gly Pro Ala Glu 35 40 45 Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala Pro 50 55 60 Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 65 70 <![CDATA[<210> 1255]]> <![CDATA[<211> 45]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1255]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Thr Leu Glu Val Gly Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 20 25 30 Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 35 40 45 <![CDATA[<210> 1256]]> <![CDATA[<211> 43]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1256]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro 20 25 30 Pro Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp 35 40 <![CDATA[<210> 1257]]> <![CDATA[<211> 33]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1257]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Thr Leu Glu Val Gly Pro Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 20 25 30 Asp <![CDATA[<210> 1258]]> <![CDATA[<211> 43]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1258]]> Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu Val Gly Pro Lys 1 5 10 15 Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys 20 25 30 Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 35 40 <![CDATA[<210> 1259]]> <![CDATA[<211> 58]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1259]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Thr Leu Glu Val Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg 20 25 30 Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val 35 40 45 Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 <![CDATA[<210> 1260]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1260]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 20 25 30 Lys Lys Lys Lys 35 <![CDATA[<210> 1261]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1261]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 20 25 30 Lys Lys Lys Lys 35 <![CDATA[<210> 1262]]> <![CDATA[<211> 36]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1262]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 20 25 30 Lys Lys Lys Lys 35 <![CDATA[<210> 1263]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1263]]> Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg 1 5 10 15 Lys Val <![CDATA[<210> 1264]]> <![CDATA[<211> 54]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1264]]> Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His 1 5 10 15 Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys 20 25 30 Lys Arg Lys Val Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly 35 40 45 Gln Ala Lys Lys Lys Lys 50 <![CDATA[<210> 1265]]> <![CDATA[<211> 58]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1265]]> Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala 1 5 10 15 Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe 20 25 30 Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr 35 40 45 Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 50 55 <![CDATA[<210> 1266]]> <![CDATA[<211> 44]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1266]]> Thr Gly Gly Gly Pro Gly Gly Gly Ala Ala Ala Gly Ser Gly Ser Pro 1 5 10 15 Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Gly Ser Gly Ser Lys Arg Pro Ala 20 25 30 Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 35 40 <![CDATA[<210> 1267]]> <![CDATA[<211> 48]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1267]]> Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr 1 5 10 15 Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser 20 25 30 Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 35 40 45 <![CDATA[<210> 1268]]> <![CDATA[<211> 54]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1268]]> Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 10 15 Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys 20 25 30 Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Pro 35 40 45 Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 <![CDATA[<210> 1269]]> <![CDATA[<211> 57]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1269]]> Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Pro Pro Pro Pro Ala Ala Lys 1 5 10 15 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Lys Arg Thr 20 25 30 Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu 35 40 45 Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 50 55 <![CDATA[<210> 1270]]> <![CDATA[<211> 111]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1270]]> Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala 1 5 10 15 Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val 20 25 30 Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly 35 40 45 Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala 50 55 60 Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Pro Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 65 70 75 80 Gly Gly Ser Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr Pro Pro Lys 85 90 95 Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val 100 105 110 <![CDATA[<210> 1271]]> <![CDATA[<211> 67]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1271]]> Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Gly Gly Ser Pro Ala Ala 1 5 10 15 Lys Arg Val Lys Leu Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 20 25 30 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Gly Gly Gly Pro Gly Gly 35 40 45 Gly Ala Ala Ala Gly Ser Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 50 55 60 Ser Gly Ser 65 <![CDATA[<210> 1272]]> <![CDATA[<211> 67]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1272]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln 20 25 30 Ala Lys Lys Lys Lys Gly Pro Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser 35 40 45 Thr Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys 50 55 60 Arg Lys Val 65 <![CDATA[<210> 1273]]> <![CDATA[<211> 82]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1273]]> Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys 1 5 10 15 Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln 20 25 30 Ala Lys Lys Lys Lys Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 35 40 45 Glu Ala Ala Ala Lys Ala Lys Arg Thr Ala Asp Ser Gln His Ser Thr 50 55 60 Pro Pro Lys Thr Lys Arg Lys Val Glu Phe Glu Pro Lys Lys Lys Arg 65 70 75 80 Lys Val <![CDATA[<210> 1274]]> <![CDATA[<211> 73]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1274]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ala Pro Gly Glu Tyr Pro Tyr Asp Val 35 40 45 Pro Asp Tyr Ala Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Leu Glu 50 55 60 Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala 65 70 <![CDATA[<210> 1275]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1275]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr 35 40 45 Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro 50 55 60 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Thr Ser Pro 65 70 75 80 Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Leu Glu Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp 85 90 95 Tyr Ala <![CDATA[<210> 1276]]> <![CDATA[<211> 136]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1276]]> Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala 1 5 10 15 Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala 20 25 30 Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr 35 40 45 Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro 50 55 60 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser 65 70 75 80 Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys 85 90 95 Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys 100 105 110 Lys Lys Lys Thr Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Ala Leu Glu Tyr 115 120 125 Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala 130 135 <![CDATA[<210> 1277]]> <![CDATA[<211> 74]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1277]]> Thr Leu Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 20 25 30 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro 35 40 45 Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ala Pro Gly 50 55 60 Glu Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala 65 70 <![CDATA[<210> 1278]]> <![CDATA[<211> 68]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1278]]> Thr Leu Glu Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys 1 5 10 15 Lys Lys Arg Lys Val Gly Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly 20 25 30 Gly Ser Pro Lys Lys Lys Arg Lys Val Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala 35 40 45 Thr Lys Lys Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Tyr Pro Tyr Asp Val 50 55 60 Pro Asp Tyr Ala 65 <![CDATA[<210> 1279]]> <![CDATA[<211> 101]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 核定位信號]]> <![CDATA[<400> 1279]]> Thr Leu Glu Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser 1 5 10 15 Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys 20 25 30 Arg Val Lys Leu Asp Gly Gly Ser Pro Ala Ala Lys Arg Val Lys Leu 35 40 45 Asp Thr Leu Glu Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys Ala Gly Gln 50 55 60 Ala Lys Lys Lys Lys Gly Gly Ser Lys Arg Pro Ala Ala Thr Lys Lys 65 70 75 80 Ala Gly Gln Ala Lys Lys Lys Lys Ala Pro Gly Glu Tyr Pro Tyr Asp 85 90 95 Val Pro Asp Tyr Ala 100 <![CDATA[<210> 1280]]> <![CDATA[<211> 31]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 1280]]> ugggcgcagc gucaaugacg cugacgguac a 31 <![CDATA[<210> 1281]]> <![CDATA[<211> 66]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 1281]]> gcacuauggg cgcagcguca augacgcuga cgguacaggc cagacaauua uugucuggua 60 uagugc 66 <![CDATA[<210> 1282]]> <![CDATA[<211> 167]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 1282]]> caggaagcac uaugggcgca gcgucaauga cgcugacggu acaggccaga caauuauugu 60 cugguauagu gcagcagcag aacaauuugc ugagggcuau ugaggcgcaa cagcaucugu 120 ugcaacucac agucuggggc aucaagcagc uccaggcaag aauccug 167 <![CDATA[<210> 1283]]> <![CDATA[<211> 234]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 1283]]> aggagcuuug uuccuugggu ucuugggagc agcaggaagc acuaugggcg cagcgucaau 60 gacgcugacg guacaggcca gacaauuauu gucugguaua gugcagcagc agaacaauuu 120 gcugagggcu auugaggcgc aacagcaucu guugcaacuc acagucuggg gcaucaagca 180 gcuccaggca agaauccugg cuguggaaag auaccuaaag gaucaacagc uccu 234 <![CDATA[<210> 1284]]> <![CDATA[<211> 15]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 莖環序列]]> <![CDATA[<400> 1284]]> gcugacggua caggc 15 <![CDATA[<210> 1285]]> <![CDATA[<211> 29]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 延伸莖環]]> <![CDATA[<400> 1285]]> gcgcuuacgg acuucggucc guaacaagc 29 <![CDATA[<210> 1286]]> <![CDATA[<211> 29]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 延伸莖環]]> <![CDATA[<400> 1286]]> gccgcuuacg gacuucggcc guaagaggc 29 <![CDATA[<210> 1287]]> <![CDATA[<211> 33]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 假結]]> <![CDATA[<400> 1287]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg cca 33 <![CDATA[<210> 1288]]> <![CDATA[<211> 66]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架及延伸莖]]> <![CDATA[<400> 1288]]> ucaccagcga cuaugucgua guggguaaag ccgcuuacgg aguucggucc guaagaggca 60 ucagag 66 <![CDATA[<210> 1289]]> <![CDATA[<211> 18]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> MS2序列]]> <![CDATA[<400> 1289]]> acaugaggau cacccugu 18 <![CDATA[<210> 1290]]> <![CDATA[<400> 1290]]> 000 <![CDATA[<210> 1291]]> <![CDATA[<400> 1291]]> 000 <![CDATA[<210> 1292]]> <![CDATA[<400> 1292]]> 000 <![CDATA[<210> 1293]]> <![CDATA[<400> 1293]]> 000 <![CDATA[<210> 1294]]> <![CDATA[<400> 1294]]> 000 <![CDATA[<210> 1295]]> <![CDATA[<400> 1295]]> 000 <![CDATA[<210> 1296]]> <![CDATA[<400> 1296]]> 000 <![CDATA[<210> 1297]]> <![CDATA[<400> 1297]]> 000 <![CDATA[<210> 1298]]> <![CDATA[<400> 1298]]> 000 <![CDATA[<210> 1299]]> <![CDATA[<400> 1299]]> 000 <![CDATA[<210> 1300]]> <![CDATA[<400> 1300]]> 000 <![CDATA[<210> 1301]]> <![CDATA[<400> 1301]]> 000 <![CDATA[<210> 1302]]> <![CDATA[<400> 1302]]> 000 <![CDATA[<210> 1303]]> <![CDATA[<400> 1303]]> 000 <![CDATA[<210> 1304]]> <![CDATA[<400> 1304]]> 000 <![CDATA[<210> 1305]]> <![CDATA[<400> 1305]]> 000 <![CDATA[<210> 1306]]> <![CDATA[<400> 1306]]> 000 <![CDATA[<210> 1307]]> <![CDATA[<400> 1307]]> 000 <![CDATA[<210> 1308]]> <![CDATA[<400> 1308]]> 000 <![CDATA[<210> 1309]]> <![CDATA[<400> 1309]]> 000 <![CDATA[<210> 1310]]> <![CDATA[<400> 1310]]> 000 <![CDATA[<210> 1311]]> <![CDATA[<400> 1311]]> 000 <![CDATA[<210> 1312]]> <![CDATA[<400> 1312]]> 000 <![CDATA[<210> 1313]]> <![CDATA[<400> 1313]]> 000 <![CDATA[<210> 1314]]> <![CDATA[<400> 1314]]> 000 <![CDATA[<210> 1315]]> <![CDATA[<400> 1315]]> 000 <![CDATA[<210> 1316]]> <![CDATA[<400> 1316]]> 000 <![CDATA[<210> 1317]]> <![CDATA[<400> 1317]]> 000 <![CDATA[<210> 1318]]> <![CDATA[<400> 1318]]> 000 <![CDATA[<210> 1319]]> <![CDATA[<400> 1319]]> 000 <![CDATA[<210> 1320]]> <![CDATA[<400> 1320]]> 000 <![CDATA[<210> 1321]]> <![CDATA[<400> 1321]]> 000 <![CDATA[<210> 1322]]> <![CDATA[<400> 1322]]> 000 <![CDATA[<210> 1323]]> <![CDATA[<400> 1323]]> 000 <![CDATA[<210> 1324]]> <![CDATA[<400> 1324]]> 000 <![CDATA[<210> 1325]]> <![CDATA[<400> 1325]]> 000 <![CDATA[<210> 1326]]> <![CDATA[<400> 1326]]> 000 <![CDATA[<210> 1327]]> <![CDATA[<400> 1327]]> 000 <![CDATA[<210> 1328]]> <![CDATA[<400> 1328]]> 000 <![CDATA[<210> 1329]]> <![CDATA[<400> 1329]]> 000 <![CDATA[<210> 1330]]> <![CDATA[<400> 1330]]> 000 <![CDATA[<210> 1331]]> <![CDATA[<400> 1331]]> 000 <![CDATA[<210> 1332]]> <![CDATA[<400> 1332]]> 000 <![CDATA[<210> 1333]]> <![CDATA[<400> 1333]]> 000 <![CDATA[<210> 1334]]> <![CDATA[<400> 1334]]> 000 <![CDATA[<210> 1335]]> <![CDATA[<400> 1335]]> 000 <![CDATA[<210> 1336]]> <![CDATA[<400> 1336]]> 000 <![CDATA[<210> 1337]]> <![CDATA[<400> 1337]]> 000 <![CDATA[<210> 1338]]> <![CDATA[<400> 1338]]> 000 <![CDATA[<210> 1339]]> <![CDATA[<400> 1339]]> 000 <![CDATA[<210> 1340]]> <![CDATA[<400> 1340]]> 000 <![CDATA[<210> 1341]]> <![CDATA[<400> 1341]]> 000 <![CDATA[<210> 1342]]> <![CDATA[<400> 1342]]> 000 <![CDATA[<210> 1343]]> <![CDATA[<400> 1343]]> 000 <![CDATA[<210> 1344]]> <![CDATA[<400> 1344]]> 000 <![CDATA[<210> 1345]]> <![CDATA[<400> 1345]]> 000 <![CDATA[<210> 1346]]> <![CDATA[<400> 1346]]> 000 <![CDATA[<210> 1347]]> <![CDATA[<400> 1347]]> 000 <![CDATA[<210> 1348]]> <![CDATA[<400> 1348]]> 000 <![CDATA[<210> 1349]]> <![CDATA[<400> 1349]]> 000 <![CDATA[<210> 1350]]> <![CDATA[<400> 1350]]> 000 <![CDATA[<210> 1351]]> <![CDATA[<400> 1351]]> 000 <![CDATA[<210> 1352]]> <![CDATA[<400> 1352]]> 000 <![CDATA[<210> 1353]]> <![CDATA[<400> 1353]]> 000 <![CDATA[<210> 1354]]> <![CDATA[<400> 1354]]> 000 <![CDATA[<210> 1355]]> <![CDATA[<400> 1355]]> 000 <![CDATA[<210> 1356]]> <![CDATA[<400> 1356]]> 000 <![CDATA[<210> 1357]]> <![CDATA[<400> 1357]]> 000 <![CDATA[<210> 1358]]> <![CDATA[<400> 1358]]> 000 <![CDATA[<210> 1359]]> <![CDATA[<400> 1359]]> 000 <![CDATA[<210> 1360]]> <![CDATA[<400> 1360]]> 000 <![CDATA[<210> 1361]]> <![CDATA[<400> 1361]]> 000 <![CDATA[<210> 1362]]> <![CDATA[<400> 1362]]> 000 <![CDATA[<210> 1363]]> <![CDATA[<400> 1363]]> 000 <![CDATA[<210> 1364]]> <![CDATA[<400> 1364]]> 000 <![CDATA[<210> 1365]]> <![CDATA[<400> 1365]]> 000 <![CDATA[<210> 1366]]> <![CDATA[<400> 1366]]> 000 <![CDATA[<210> 1367]]> <![CDATA[<400> 1367]]> 000 <![CDATA[<210> 1368]]> <![CDATA[<400> 1368]]> 000 <![CDATA[<210> 1369]]> <![CDATA[<400> 1369]]> 000 <![CDATA[<210> 1370]]> <![CDATA[<400> 1370]]> 000 <![CDATA[<210> 1371]]> <![CDATA[<400> 1371]]> 000 <![CDATA[<210> 1372]]> <![CDATA[<400> 1372]]> 000 <![CDATA[<210> 1373]]> <![CDATA[<400> 1373]]> 000 <![CDATA[<210> 1374]]> <![CDATA[<400> 1374]]> 000 <![CDATA[<210> 1375]]> <![CDATA[<400> 1375]]> 000 <![CDATA[<210> 1376]]> <![CDATA[<400> 1376]]> 000 <![CDATA[<210> 1377]]> <![CDATA[<400> 1377]]> 000 <![CDATA[<210> 1378]]> <![CDATA[<400> 1378]]> 000 <![CDATA[<210> 1379]]> <![CDATA[<400> 1379]]> 000 <![CDATA[<210> 1380]]> <![CDATA[<400> 1380]]> 000 <![CDATA[<210> 1381]]> <![CDATA[<400> 1381]]> 000 <![CDATA[<210> 1382]]> <![CDATA[<400> 1382]]> 000 <![CDATA[<210> 1383]]> <![CDATA[<400> 1383]]> 000 <![CDATA[<210> 1384]]> <![CDATA[<400> 1384]]> 000 <![CDATA[<210> 1385]]> <![CDATA[<400> 1385]]> 000 <![CDATA[<210> 1386]]> <![CDATA[<400> 1386]]> 000 <![CDATA[<210> 1387]]> <![CDATA[<400> 1387]]> 000 <![CDATA[<210> 1388]]> <![CDATA[<400> 1388]]> 000 <![CDATA[<210> 1389]]> <![CDATA[<400> 1389]]> 000 <![CDATA[<210> 1390]]> <![CDATA[<400> 1390]]> 000 <![CDATA[<210> 1391]]> <![CDATA[<400> 1391]]> 000 <![CDATA[<210> 1392]]> <![CDATA[<400> 1392]]> 000 <![CDATA[<210> 1393]]> <![CDATA[<400> 1393]]> 000 <![CDATA[<210> 1394]]> <![CDATA[<400> 1394]]> 000 <![CDATA[<210> 1395]]> <![CDATA[<400> 1395]]> 000 <![CDATA[<210> 1396]]> <![CDATA[<400> 1396]]> 000 <![CDATA[<210> 1397]]> <![CDATA[<400> 1397]]> 000 <![CDATA[<210> 1398]]> <![CDATA[<400> 1398]]> 000 <![CDATA[<210> 1399]]> <![CDATA[<400> 1399]]> 000 <![CDATA[<210> 1400]]> <![CDATA[<400> 1400]]> 000 <![CDATA[<210> 1401]]> <![CDATA[<400> 1401]]> 000 <![CDATA[<210> 1402]]> <![CDATA[<400> 1402]]> 000 <![CDATA[<210> 1403]]> <![CDATA[<400> 1403]]> 000 <![CDATA[<210> 1404]]> <![CDATA[<400> 1404]]> 000 <![CDATA[<210> 1405]]> <![CDATA[<400> 1405]]> 000 <![CDATA[<210> 1406]]> <![CDATA[<400> 1406]]> 000 <![CDATA[<210> 1407]]> <![CDATA[<400> 1407]]> 000 <![CDATA[<210> 1408]]> <![CDATA[<400> 1408]]> 000 <![CDATA[<210> 1409]]> <![CDATA[<400> 1409]]> 000 <![CDATA[<210> 1410]]> <![CDATA[<400> 1410]]> 000 <![CDATA[<210> 1411]]> <![CDATA[<400> 1411]]> 000 <![CDATA[<210> 1412]]> <![CDATA[<400> 1412]]> 000 <![CDATA[<210> 1413]]> <![CDATA[<400> 1413]]> 000 <![CDATA[<210> 1414]]> <![CDATA[<400> 1414]]> 000 <![CDATA[<210> 1415]]> <![CDATA[<400> 1415]]> 000 <![CDATA[<210> 1416]]> <![CDATA[<400> 1416]]> 000 <![CDATA[<210> 1417]]> <![CDATA[<400> 1417]]> 000 <![CDATA[<210> 1418]]> <![CDATA[<400> 1418]]> 000 <![CDATA[<210> 1419]]> <![CDATA[<400> 1419]]> 000 <![CDATA[<210> 1420]]> <![CDATA[<400> 1420]]> 000 <![CDATA[<210> 1421]]> <![CDATA[<400> 1421]]> 000 <![CDATA[<210> 1422]]> <![CDATA[<400> 1422]]> 000 <![CDATA[<210> 1423]]> <![CDATA[<400> 1423]]> 000 <![CDATA[<210> 1424]]> <![CDATA[<400> 1424]]> 000 <![CDATA[<210> 1425]]> <![CDATA[<400> 1425]]> 000 <![CDATA[<210> 1426]]> <![CDATA[<400> 1426]]> 000 <![CDATA[<210> 1427]]> <![CDATA[<400> 1427]]> 000 <![CDATA[<210> 1428]]> <![CDATA[<400> 1428]]> 000 <![CDATA[<210> 1429]]> <![CDATA[<400> 1429]]> 000 <![CDATA[<210> 1430]]> <![CDATA[<400> 1430]]> 000 <![CDATA[<210> 1431]]> <![CDATA[<400> 1431]]> 000 <![CDATA[<210> 1432]]> <![CDATA[<400> 1432]]> 000 <![CDATA[<210> 1433]]> <![CDATA[<400> 1433]]> 000 <![CDATA[<210> 1434]]> <![CDATA[<400> 1434]]> 000 <![CDATA[<210> 1435]]> <![CDATA[<400> 1435]]> 000 <![CDATA[<210> 1436]]> <![CDATA[<400> 1436]]> 000 <![CDATA[<210> 1437]]> <![CDATA[<400> 1437]]> 000 <![CDATA[<210> 1438]]> <![CDATA[<400> 1438]]> 000 <![CDATA[<210> 1439]]> <![CDATA[<400> 1439]]> 000 <![CDATA[<210> 1440]]> <![CDATA[<400> 1440]]> 000 <![CDATA[<210> 1441]]> <![CDATA[<400> 1441]]> 000 <![CDATA[<210> 1442]]> <![CDATA[<400> 1442]]> 000 <![CDATA[<210> 1443]]> <![CDATA[<400> 1443]]> 000 <![CDATA[<210> 1444]]> <![CDATA[<400> 1444]]> 000 <![CDATA[<210> 1445]]> <![CDATA[<400> 1445]]> 000 <![CDATA[<210> 1446]]> <![CDATA[<400> 1446]]> 000 <![CDATA[<210> 1447]]> <![CDATA[<400> 1447]]> 000 <![CDATA[<210> 1448]]> <![CDATA[<400> 1448]]> 000 <![CDATA[<210> 1449]]> <![CDATA[<400> 1449]]> 000 <![CDATA[<210> 1450]]> <![CDATA[<400> 1450]]> 000 <![CDATA[<210> 1451]]> <![CDATA[<400> 1451]]> 000 <![CDATA[<210> 1452]]> <![CDATA[<400> 1452]]> 000 <![CDATA[<210> 1453]]> <![CDATA[<400> 1453]]> 000 <![CDATA[<210> 1454]]> <![CDATA[<400> 1454]]> 000 <![CDATA[<210> 1455]]> <![CDATA[<400> 1455]]> 000 <![CDATA[<210> 1456]]> <![CDATA[<400> 1456]]> 000 <![CDATA[<210> 1457]]> <![CDATA[<400> 1457]]> 000 <![CDATA[<210> 1458]]> <![CDATA[<400> 1458]]> 000 <![CDATA[<210> 1459]]> <![CDATA[<400> 1459]]> 000 <![CDATA[<210> 1460]]> <![CDATA[<400> 1460]]> 000 <![CDATA[<210> 1461]]> <![CDATA[<400> 1461]]> 000 <![CDATA[<210> 1462]]> <![CDATA[<400> 1462]]> 000 <![CDATA[<210> 1463]]> <![CDATA[<400> 1463]]> 000 <![CDATA[<210> 1464]]> <![CDATA[<400> 1464]]> 000 <![CDATA[<210> 1465]]> <![CDATA[<400> 1465]]> 000 <![CDATA[<210> 1466]]> <![CDATA[<400> 1466]]> 000 <![CDATA[<210> 1467]]> <![CDATA[<400> 1467]]> 000 <![CDATA[<210> 1468]]> <![CDATA[<400> 1468]]> 000 <![CDATA[<210> 1469]]> <![CDATA[<400> 1469]]> 000 <![CDATA[<210> 1470]]> <![CDATA[<400> 1470]]> 000 <![CDATA[<210> 1471]]> <![CDATA[<400> 1471]]> 000 <![CDATA[<210> 1472]]> <![CDATA[<400> 1472]]> 000 <![CDATA[<210> 1473]]> <![CDATA[<400> 1473]]> 000 <![CDATA[<210> 1474]]> <![CDATA[<400> 1474]]> 000 <![CDATA[<210> 1475]]> <![CDATA[<400> 1475]]> 000 <![CDATA[<210> 1476]]> <![CDATA[<400> 1476]]> 000 <![CDATA[<210> 1477]]> <![CDATA[<400> 1477]]> 000 <![CDATA[<210> 1478]]> <![CDATA[<400> 1478]]> 000 <![CDATA[<210> 1479]]> <![CDATA[<400> 1479]]> 000 <![CDATA[<210> 1480]]> <![CDATA[<400> 1480]]> 000 <![CDATA[<210> 1481]]> <![CDATA[<400> 1481]]> 000 <![CDATA[<210> 1482]]> <![CDATA[<400> 1482]]> 000 <![CDATA[<210> 1483]]> <![CDATA[<400> 1483]]> 000 <![CDATA[<210> 1484]]> <![CDATA[<400> 1484]]> 000 <![CDATA[<210> 1485]]> <![CDATA[<400> 1485]]> 000 <![CDATA[<210> 1486]]> <![CDATA[<400> 1486]]> 000 <![CDATA[<210> 1487]]> <![CDATA[<400> 1487]]> 000 <![CDATA[<210> 1488]]> <![CDATA[<400> 1488]]> 000 <![CDATA[<210> 1489]]> <![CDATA[<400> 1489]]> 000 <![CDATA[<210> 1490]]> <![CDATA[<400> 1490]]> 000 <![CDATA[<210> 1491]]> <![CDATA[<400> 1491]]> 000 <![CDATA[<210> 1492]]> <![CDATA[<400> 1492]]> 000 <![CDATA[<210> 1493]]> <![CDATA[<400> 1493]]> 000 <![CDATA[<210> 1494]]> <![CDATA[<400> 1494]]> 000 <![CDATA[<210> 1495]]> <![CDATA[<400> 1495]]> 000 <![CDATA[<210> 1496]]> <![CDATA[<400> 1496]]> 000 <![CDATA[<210> 1497]]> <![CDATA[<400> 1497]]> 000 <![CDATA[<210> 1498]]> <![CDATA[<400> 1498]]> 000 <![CDATA[<210> 1499]]> <![CDATA[<400> 1499]]> 000 <![CDATA[<210> 1500]]> <![CDATA[<400> 1500]]> 000 <![CDATA[<210> 1501]]> <![CDATA[<400> 1501]]> 000 <![CDATA[<210> 1502]]> <![CDATA[<400> 1502]]> 000 <![CDATA[<210> 1503]]> <![CDATA[<400> 1503]]> 000 <![CDATA[<210> 1504]]> <![CDATA[<400> 1504]]> 000 <![CDATA[<210> 1505]]> <![CDATA[<400> 1505]]> 000 <![CDATA[<210> 1506]]> <![CDATA[<400> 1506]]> 000 <![CDATA[<210> 1507]]> <![CDATA[<400> 1507]]> 000 <![CDATA[<210> 1508]]> <![CDATA[<400> 1508]]> 000 <![CDATA[<210> 1509]]> <![CDATA[<400> 1509]]> 000 <![CDATA[<210> 1510]]> <![CDATA[<400> 1510]]> 000 <![CDATA[<210> 1511]]> <![CDATA[<400> 1511]]> 000 <![CDATA[<210> 1512]]> <![CDATA[<400> 1512]]> 000 <![CDATA[<210> 1513]]> <![CDATA[<400> 1513]]> 000 <![CDATA[<210> 1514]]> <![CDATA[<400> 1514]]> 000 <![CDATA[<210> 1515]]> <![CDATA[<400> 1515]]> 000 <![CDATA[<210> 1516]]> <![CDATA[<400> 1516]]> 000 <![CDATA[<210> 1517]]> <![CDATA[<400> 1517]]> 000 <![CDATA[<210> 1518]]> <![CDATA[<400> 1518]]> 000 <![CDATA[<210> 1519]]> <![CDATA[<400> 1519]]> 000 <![CDATA[<210> 1520]]> <![CDATA[<400> 1520]]> 000 <![CDATA[<210> 1521]]> <![CDATA[<400> 1521]]> 000 <![CDATA[<210> 1522]]> <![CDATA[<400> 1522]]> 000 <![CDATA[<210> 1523]]> <![CDATA[<400> 1523]]> 000 <![CDATA[<210> 1524]]> <![CDATA[<400> 1524]]> 000 <![CDATA[<210> 1525]]> <![CDATA[<400> 1525]]> 000 <![CDATA[<210> 1526]]> <![CDATA[<400> 1526]]> 000 <![CDATA[<210> 1527]]> <![CDATA[<400> 1527]]> 000 <![CDATA[<210> 1528]]> <![CDATA[<400> 1528]]> 000 <![CDATA[<210> 1529]]> <![CDATA[<400> 1529]]> 000 <![CDATA[<210> 1530]]> <![CDATA[<400> 1530]]> 000 <![CDATA[<210> 1531]]> <![CDATA[<400> 1531]]> 000 <![CDATA[<210> 1532]]> <![CDATA[<400> 1532]]> 000 <![CDATA[<210> 1533]]> <![CDATA[<400> 1533]]> 000 <![CDATA[<210> 1534]]> <![CDATA[<400> 1534]]> 000 <![CDATA[<210> 1535]]> <![CDATA[<400> 1535]]> 000 <![CDATA[<210> 1536]]> <![CDATA[<400> 1536]]> 000 <![CDATA[<210> 1537]]> <![CDATA[<400> 1537]]> 000 <![CDATA[<210> 1538]]> <![CDATA[<400> 1538]]> 000 <![CDATA[<210> 1539]]> <![CDATA[<400> 1539]]> 000 <![CDATA[<210> 1540]]> <![CDATA[<400> 1540]]> 000 <![CDATA[<210> 1541]]> <![CDATA[<400> 1541]]> 000 <![CDATA[<210> 1542]]> <![CDATA[<400> 1542]]> 000 <![CDATA[<210> 1543]]> <![CDATA[<400> 1543]]> 000 <![CDATA[<210> 1544]]> <![CDATA[<400> 1544]]> 000 <![CDATA[<210> 1545]]> <![CDATA[<400> 1545]]> 000 <![CDATA[<210> 1546]]> <![CDATA[<400> 1546]]> 000 <![CDATA[<210> 1547]]> <![CDATA[<400> 1547]]> 000 <![CDATA[<210> 1548]]> <![CDATA[<400> 1548]]> 000 <![CDATA[<210> 1549]]> <![CDATA[<400> 1549]]> 000 <![CDATA[<210> 1550]]> <![CDATA[<400> 1550]]> 000 <![CDATA[<210> 1551]]> <![CDATA[<400> 1551]]> 000 <![CDATA[<210> 1552]]> <![CDATA[<400> 1552]]> 000 <![CDATA[<210> 1553]]> <![CDATA[<400> 1553]]> 000 <![CDATA[<210> 1554]]> <![CDATA[<400> 1554]]> 000 <![CDATA[<210> 1555]]> <![CDATA[<400> 1555]]> 000 <![CDATA[<210> 1556]]> <![CDATA[<400> 1556]]> 000 <![CDATA[<210> 1557]]> <![CDATA[<400> 1557]]> 000 <![CDATA[<210> 1558]]> <![CDATA[<400> 1558]]> 000 <![CDATA[<210> 1559]]> <![CDATA[<400> 1559]]> 000 <![CDATA[<210> 1560]]> <![CDATA[<400> 1560]]> 000 <![CDATA[<210> 1561]]> <![CDATA[<400> 1561]]> 000 <![CDATA[<210> 1562]]> <![CDATA[<400> 1562]]> 000 <![CDATA[<210> 1563]]> <![CDATA[<400> 1563]]> 000 <![CDATA[<210> 1564]]> <![CDATA[<400> 1564]]> 000 <![CDATA[<210> 1565]]> <![CDATA[<400> 1565]]> 000 <![CDATA[<210> 1566]]> <![CDATA[<400> 1566]]> 000 <![CDATA[<210> 1567]]> <![CDATA[<400> 1567]]> 000 <![CDATA[<210> 1568]]> <![CDATA[<400> 1568]]> 000 <![CDATA[<210> 1569]]> <![CDATA[<400> 1569]]> 000 <![CDATA[<210> 1570]]> <![CDATA[<400> 1570]]> 000 <![CDATA[<210> 1571]]> <![CDATA[<400> 1571]]> 000 <![CDATA[<210> 1572]]> <![CDATA[<400> 1572]]> 000 <![CDATA[<210> 1573]]> <![CDATA[<400> 1573]]> 000 <![CDATA[<210> 1574]]> <![CDATA[<400> 1574]]> 000 <![CDATA[<210> 1575]]> <![CDATA[<400> 1575]]> 000 <![CDATA[<210> 1576]]> <![CDATA[<400> 1576]]> 000 <![CDATA[<210> 1577]]> <![CDATA[<400> 1577]]> 000 <![CDATA[<210> 1578]]> <![CDATA[<400> 1578]]> 000 <![CDATA[<210> 1579]]> <![CDATA[<400> 1579]]> 000 <![CDATA[<210> 1580]]> <![CDATA[<400> 1580]]> 000 <![CDATA[<210> 1581]]> <![CDATA[<400> 1581]]> 000 <![CDATA[<210> 1582]]> <![CDATA[<400> 1582]]> 000 <![CDATA[<210> 1583]]> <![CDATA[<400> 1583]]> 000 <![CDATA[<210> 1584]]> <![CDATA[<400> 1584]]> 000 <![CDATA[<210> 1585]]> <![CDATA[<400> 1585]]> 000 <![CDATA[<210> 1586]]> <![CDATA[<400> 1586]]> 000 <![CDATA[<210> 1587]]> <![CDATA[<400> 1587]]> 000 <![CDATA[<210> 1588]]> <![CDATA[<400> 1588]]> 000 <![CDATA[<210> 1589]]> <![CDATA[<400> 1589]]> 000 <![CDATA[<210> 1590]]> <![CDATA[<400> 1590]]> 000 <![CDATA[<210> 1591]]> <![CDATA[<400> 1591]]> 000 <![CDATA[<210> 1592]]> <![CDATA[<400> 1592]]> 000 <![CDATA[<210> 1593]]> <![CDATA[<400> 1593]]> 000 <![CDATA[<210> 1594]]> <![CDATA[<400> 1594]]> 000 <![CDATA[<210> 1595]]> <![CDATA[<400> 1595]]> 000 <![CDATA[<210> 1596]]> <![CDATA[<400> 1596]]> 000 <![CDATA[<210> 1597]]> <![CDATA[<400> 1597]]> 000 <![CDATA[<210> 1598]]> <![CDATA[<400> 1598]]> 000 <![CDATA[<210> 1599]]> <![CDATA[<400> 1599]]> 000 <![CDATA[<210> 1600]]> <![CDATA[<400> 1600]]> 000 <![CDATA[<210> 1601]]> <![CDATA[<400> 1601]]> 000 <![CDATA[<210> 1602]]> <![CDATA[<400> 1602]]> 000 <![CDATA[<210> 1603]]> <![CDATA[<400> 1603]]> 000 <![CDATA[<210> 1604]]> <![CDATA[<400> 1604]]> 000 <![CDATA[<210> 1605]]> <![CDATA[<400> 1605]]> 000 <![CDATA[<210> 1606]]> <![CDATA[<400> 1606]]> 000 <![CDATA[<210> 1607]]> <![CDATA[<400> 1607]]> 000 <![CDATA[<210> 1608]]> <![CDATA[<400> 1608]]> 000 <![CDATA[<210> 1609]]> <![CDATA[<400> 1609]]> 000 <![CDATA[<210> 1610]]> <![CDATA[<400> 1610]]> 000 <![CDATA[<210> 1611]]> <![CDATA[<400> 1611]]> 000 <![CDATA[<210> 1612]]> <![CDATA[<400> 1612]]> 000 <![CDATA[<210> 1613]]> <![CDATA[<400> 1613]]> 000 <![CDATA[<210> 1614]]> <![CDATA[<400> 1614]]> 000 <![CDATA[<210> 1615]]> <![CDATA[<400> 1615]]> 000 <![CDATA[<210> 1616]]> <![CDATA[<400> 1616]]> 000 <![CDATA[<210> 1617]]> <![CDATA[<400> 1617]]> 000 <![CDATA[<210> 1618]]> <![CDATA[<400> 1618]]> 000 <![CDATA[<210> 1619]]> <![CDATA[<400> 1619]]> 000 <![CDATA[<210> 1620]]> <![CDATA[<400> 1620]]> 000 <![CDATA[<210> 1621]]> <![CDATA[<400> 1621]]> 000 <![CDATA[<210> 1622]]> <![CDATA[<400> 1622]]> 000 <![CDATA[<210> 1623]]> <![CDATA[<400> 1623]]> 000 <![CDATA[<210> 1624]]> <![CDATA[<400> 1624]]> 000 <![CDATA[<210> 1625]]> <![CDATA[<400> 1625]]> 000 <![CDATA[<210> 1626]]> <![CDATA[<400> 1626]]> 000 <![CDATA[<210> 1627]]> <![CDATA[<400> 1627]]> 000 <![CDATA[<210> 1628]]> <![CDATA[<400> 1628]]> 000 <![CDATA[<210> 1629]]> <![CDATA[<400> 1629]]> 000 <![CDATA[<210> 1630]]> <![CDATA[<400> 1630]]> 000 <![CDATA[<210> 1631]]> <![CDATA[<400> 1631]]> 000 <![CDATA[<210> 1632]]> <![CDATA[<400> 1632]]> 000 <![CDATA[<210> 1633]]> <![CDATA[<400> 1633]]> 000 <![CDATA[<210> 1634]]> <![CDATA[<400> 1634]]> 000 <![CDATA[<210> 1635]]> <![CDATA[<400> 1635]]> 000 <![CDATA[<210> 1636]]> <![CDATA[<400> 1636]]> 000 <![CDATA[<210> 1637]]> <![CDATA[<400> 1637]]> 000 <![CDATA[<210> 1638]]> <![CDATA[<400> 1638]]> 000 <![CDATA[<210> 1639]]> <![CDATA[<400> 1639]]> 000 <![CDATA[<210> 1640]]> <![CDATA[<400> 1640]]> 000 <![CDATA[<210> 1641]]> <![CDATA[<400> 1641]]> 000 <![CDATA[<210> 1642]]> <![CDATA[<400> 1642]]> 000 <![CDATA[<210> 1643]]> <![CDATA[<400> 1643]]> 000 <![CDATA[<210> 1644]]> <![CDATA[<400> 1644]]> 000 <![CDATA[<210> 1645]]> <![CDATA[<400> 1645]]> 000 <![CDATA[<210> 1646]]> <![CDATA[<400> 1646]]> 000 <![CDATA[<210> 1647]]> <![CDATA[<400> 1647]]> 000 <![CDATA[<210> 1648]]> <![CDATA[<400> 1648]]> 000 <![CDATA[<210> 1649]]> <![CDATA[<400> 1649]]> 000 <![CDATA[<210> 1650]]> <![CDATA[<400> 1650]]> 000 <![CDATA[<210> 1651]]> <![CDATA[<400> 1651]]> 000 <![CDATA[<210> 1652]]> <![CDATA[<400> 1652]]> 000 <![CDATA[<210> 1653]]> <![CDATA[<400> 1653]]> 000 <![CDATA[<210> 1654]]> <![CDATA[<400> 1654]]> 000 <![CDATA[<210> 1655]]> <![CDATA[<400> 1655]]> 000 <![CDATA[<210> 1656]]> <![CDATA[<400> 1656]]> 000 <![CDATA[<210> 1657]]> <![CDATA[<400> 1657]]> 000 <![CDATA[<210> 1658]]> <![CDATA[<400> 1658]]> 000 <![CDATA[<210> 1659]]> <![CDATA[<400> 1659]]> 000 <![CDATA[<210> 1660]]> <![CDATA[<400> 1660]]> 000 <![CDATA[<210> 1661]]> <![CDATA[<400> 1661]]> 000 <![CDATA[<210> 1662]]> <![CDATA[<400> 1662]]> 000 <![CDATA[<210> 1663]]> <![CDATA[<400> 1663]]> 000 <![CDATA[<210> 1664]]> <![CDATA[<400> 1664]]> 000 <![CDATA[<210> 1665]]> <![CDATA[<400> 1665]]> 000 <![CDATA[<210> 1666]]> <![CDATA[<400> 1666]]> 000 <![CDATA[<210> 1667]]> <![CDATA[<400> 1667]]> 000 <![CDATA[<210> 1668]]> <![CDATA[<400> 1668]]> 000 <![CDATA[<210> 1669]]> <![CDATA[<400> 1669]]> 000 <![CDATA[<210> 1670]]> <![CDATA[<400> 1670]]> 000 <![CDATA[<210> 1671]]> <![CDATA[<400> 1671]]> 000 <![CDATA[<210> 1672]]> <![CDATA[<400> 1672]]> 000 <![CDATA[<210> 1673]]> <![CDATA[<400> 1673]]> 000 <![CDATA[<210> 1674]]> <![CDATA[<400> 1674]]> 000 <![CDATA[<210> 1675]]> <![CDATA[<400> 1675]]> 000 <![CDATA[<210> 1676]]> <![CDATA[<400> 1676]]> 000 <![CDATA[<210> 1677]]> <![CDATA[<400> 1677]]> 000 <![CDATA[<210> 1678]]> <![CDATA[<400> 1678]]> 000 <![CDATA[<210> 1679]]> <![CDATA[<400> 1679]]> 000 <![CDATA[<210> 1680]]> <![CDATA[<400> 1680]]> 000 <![CDATA[<210> 1681]]> <![CDATA[<400> 1681]]> 000 <![CDATA[<210> 1682]]> <![CDATA[<400> 1682]]> 000 <![CDATA[<210> 1683]]> <![CDATA[<400> 1683]]> 000 <![CDATA[<210> 1684]]> <![CDATA[<400> 1684]]> 000 <![CDATA[<210> 1685]]> <![CDATA[<400> 1685]]> 000 <![CDATA[<210> 1686]]> <![CDATA[<400> 1686]]> 000 <![CDATA[<210> 1687]]> <![CDATA[<400> 1687]]> 000 <![CDATA[<210> 1688]]> <![CDATA[<400> 1688]]> 000 <![CDATA[<210> 1689]]> <![CDATA[<400> 1689]]> 000 <![CDATA[<210> 1690]]> <![CDATA[<400> 1690]]> 000 <![CDATA[<210> 1691]]> <![CDATA[<400> 1691]]> 000 <![CDATA[<210> 1692]]> <![CDATA[<400> 1692]]> 000 <![CDATA[<210> 1693]]> <![CDATA[<400> 1693]]> 000 <![CDATA[<210> 1694]]> <![CDATA[<400> 1694]]> 000 <![CDATA[<210> 1695]]> <![CDATA[<400> 1695]]> 000 <![CDATA[<210> 1696]]> <![CDATA[<400> 1696]]> 000 <![CDATA[<210> 1697]]> <![CDATA[<400> 1697]]> 000 <![CDATA[<210> 1698]]> <![CDATA[<400> 1698]]> 000 <![CDATA[<210> 1699]]> <![CDATA[<400> 1699]]> 000 <![CDATA[<210> 1700]]> <![CDATA[<400> 1700]]> 000 <![CDATA[<210> 1701]]> <![CDATA[<400> 1701]]> 000 <![CDATA[<210> 1702]]> <![CDATA[<400> 1702]]> 000 <![CDATA[<210> 1703]]> <![CDATA[<400> 1703]]> 000 <![CDATA[<210> 1704]]> <![CDATA[<400> 1704]]> 000 <![CDATA[<210> 1705]]> <![CDATA[<400> 1705]]> 000 <![CDATA[<210> 1706]]> <![CDATA[<400> 1706]]> 000 <![CDATA[<210> 1707]]> <![CDATA[<400> 1707]]> 000 <![CDATA[<210> 1708]]> <![CDATA[<400> 1708]]> 000 <![CDATA[<210> 1709]]> <![CDATA[<400> 1709]]> 000 <![CDATA[<210> 1710]]> <![CDATA[<400> 1710]]> 000 <![CDATA[<210> 1711]]> <![CDATA[<400> 1711]]> 000 <![CDATA[<210> 1712]]> <![CDATA[<400> 1712]]> 000 <![CDATA[<210> 1713]]> <![CDATA[<400> 1713]]> 000 <![CDATA[<210> 1714]]> <![CDATA[<400> 1714]]> 000 <![CDATA[<210> 1715]]> <![CDATA[<400> 1715]]> 000 <![CDATA[<210> 1716]]> <![CDATA[<400> 1716]]> 000 <![CDATA[<210> 1717]]> <![CDATA[<400> 1717]]> 000 <![CDATA[<210> 1718]]> <![CDATA[<400> 1718]]> 000 <![CDATA[<210> 1719]]> <![CDATA[<400> 1719]]> 000 <![CDATA[<210> 1720]]> <![CDATA[<400> 1720]]> 000 <![CDATA[<210> 1721]]> <![CDATA[<400> 1721]]> 000 <![CDATA[<210> 1722]]> <![CDATA[<400> 1722]]> 000 <![CDATA[<210> 1723]]> <![CDATA[<400> 1723]]> 000 <![CDATA[<210> 1724]]> <![CDATA[<400> 1724]]> 000 <![CDATA[<210> 1725]]> <![CDATA[<400> 1725]]> 000 <![CDATA[<210> 1726]]> <![CDATA[<400> 1726]]> 000 <![CDATA[<210> 1727]]> <![CDATA[<400> 1727]]> 000 <![CDATA[<210> 1728]]> <![CDATA[<400> 1728]]> 000 <![CDATA[<210> 1729]]> <![CDATA[<400> 1729]]> 000 <![CDATA[<210> 1730]]> <![CDATA[<400> 1730]]> 000 <![CDATA[<210> 1731]]> <![CDATA[<400> 1731]]> 000 <![CDATA[<210> 1732]]> <![CDATA[<400> 1732]]> 000 <![CDATA[<210> 1733]]> <![CDATA[<400> 1733]]> 000 <![CDATA[<210> 1734]]> <![CDATA[<400> 1734]]> 000 <![CDATA[<210> 1735]]> <![CDATA[<400> 1735]]> 000 <![CDATA[<210> 1736]]> <![CDATA[<400> 1736]]> 000 <![CDATA[<210> 1737]]> <![CDATA[<400> 1737]]> 000 <![CDATA[<210> 1738]]> <![CDATA[<400> 1738]]> 000 <![CDATA[<210> 1739]]> <![CDATA[<400> 1739]]> 000 <![CDATA[<210> 1740]]> <![CDATA[<400> 1740]]> 000 <![CDATA[<210> 1741]]> <![CDATA[<400> 1741]]> 000 <![CDATA[<210> 1742]]> <![CDATA[<400> 1742]]> 000 <![CDATA[<210> 1743]]> <![CDATA[<400> 1743]]> 000 <![CDATA[<210> 1744]]> <![CDATA[<400> 1744]]> 000 <![CDATA[<210> 1745]]> <![CDATA[<400> 1745]]> 000 <![CDATA[<210> 1746]]> <![CDATA[<400> 1746]]> 000 <![CDATA[<210> 1747]]> <![CDATA[<400> 1747]]> 000 <![CDATA[<210> 1748]]> <![CDATA[<400> 1748]]> 000 <![CDATA[<210> 1749]]> <![CDATA[<400> 1749]]> 000 <![CDATA[<210> 1750]]> <![CDATA[<400> 1750]]> 000 <![CDATA[<210> 1751]]> <![CDATA[<400> 1751]]> 000 <![CDATA[<210> 1752]]> <![CDATA[<400> 1752]]> 000 <![CDATA[<210> 1753]]> <![CDATA[<400> 1753]]> 000 <![CDATA[<210> 1754]]> <![CDATA[<400> 1754]]> 000 <![CDATA[<210> 1755]]> <![CDATA[<400> 1755]]> 000 <![CDATA[<210> 1756]]> <![CDATA[<400> 1756]]> 000 <![CDATA[<210> 1757]]> <![CDATA[<400> 1757]]> 000 <![CDATA[<210> 1758]]> <![CDATA[<400> 1758]]> 000 <![CDATA[<210> 1759]]> <![CDATA[<400> 1759]]> 000 <![CDATA[<210> 1760]]> <![CDATA[<400> 1760]]> 000 <![CDATA[<210> 1761]]> <![CDATA[<400> 1761]]> 000 <![CDATA[<210> 1762]]> <![CDATA[<400> 1762]]> 000 <![CDATA[<210> 1763]]> <![CDATA[<400> 1763]]> 000 <![CDATA[<210> 1764]]> <![CDATA[<400> 1764]]> 000 <![CDATA[<210> 1765]]> <![CDATA[<400> 1765]]> 000 <![CDATA[<210> 1766]]> <![CDATA[<400> 1766]]> 000 <![CDATA[<210> 1767]]> <![CDATA[<400> 1767]]> 000 <![CDATA[<210> 1768]]> <![CDATA[<400> 1768]]> 000 <![CDATA[<210> 1769]]> <![CDATA[<400> 1769]]> 000 <![CDATA[<210> 1770]]> <![CDATA[<400> 1770]]> 000 <![CDATA[<210> 1771]]> <![CDATA[<400> 1771]]> 000 <![CDATA[<210> 1772]]> <![CDATA[<400> 1772]]> 000 <![CDATA[<210> 1773]]> <![CDATA[<400> 1773]]> 000 <![CDATA[<210> 1774]]> <![CDATA[<400> 1774]]> 000 <![CDATA[<210> 1775]]> <![CDATA[<400> 1775]]> 000 <![CDATA[<210> 1776]]> <![CDATA[<400> 1776]]> 000 <![CDATA[<210> 1777]]> <![CDATA[<400> 1777]]> 000 <![CDATA[<210> 1778]]> <![CDATA[<400> 1778]]> 000 <![CDATA[<210> 1779]]> <![CDATA[<400> 1779]]> 000 <![CDATA[<210> 1780]]> <![CDATA[<400> 1780]]> 000 <![CDATA[<210> 1781]]> <![CDATA[<400> 1781]]> 000 <![CDATA[<210> 1782]]> <![CDATA[<400> 1782]]> 000 <![CDATA[<210> 1783]]> <![CDATA[<400> 1783]]> 000 <![CDATA[<210> 1784]]> <![CDATA[<400> 1784]]> 000 <![CDATA[<210> 1785]]> <![CDATA[<400> 1785]]> 000 <![CDATA[<210> 1786]]> <![CDATA[<400> 1786]]> 000 <![CDATA[<210> 1787]]> <![CDATA[<400> 1787]]> 000 <![CDATA[<210> 1788]]> <![CDATA[<400> 1788]]> 000 <![CDATA[<210> 1789]]> <![CDATA[<400> 1789]]> 000 <![CDATA[<210> 1790]]> <![CDATA[<400> 1790]]> 000 <![CDATA[<210> 1791]]> <![CDATA[<400> 1791]]> 000 <![CDATA[<210> 1792]]> <![CDATA[<400> 1792]]> 000 <![CDATA[<210> 1793]]> <![CDATA[<400> 1793]]> 000 <![CDATA[<210> 1794]]> <![CDATA[<400> 1794]]> 000 <![CDATA[<210> 1795]]> <![CDATA[<400> 1795]]> 000 <![CDATA[<210> 1796]]> <![CDATA[<400> 1796]]> 000 <![CDATA[<210> 1797]]> <![CDATA[<400> 1797]]> 000 <![CDATA[<210> 1798]]> <![CDATA[<400> 1798]]> 000 <![CDATA[<210> 1799]]> <![CDATA[<400> 1799]]> 000 <![CDATA[<210> 1800]]> <![CDATA[<400> 1800]]> 000 <![CDATA[<210> 1801]]> <![CDATA[<400> 1801]]> 000 <![CDATA[<210> 1802]]> <![CDATA[<400> 1802]]> 000 <![CDATA[<210> 1803]]> <![CDATA[<400> 1803]]> 000 <![CDATA[<210> 1804]]> <![CDATA[<400> 1804]]> 000 <![CDATA[<210> 1805]]> <![CDATA[<400> 1805]]> 000 <![CDATA[<210> 1806]]> <![CDATA[<400> 1806]]> 000 <![CDATA[<210> 1807]]> <![CDATA[<400> 1807]]> 000 <![CDATA[<210> 1808]]> <![CDATA[<400> 1808]]> 000 <![CDATA[<210> 1809]]> <![CDATA[<400> 1809]]> 000 <![CDATA[<210> 1810]]> <![CDATA[<400> 1810]]> 000 <![CDATA[<210> 1811]]> <![CDATA[<400> 1811]]> 000 <![CDATA[<210> 1812]]> <![CDATA[<400> 1812]]> 000 <![CDATA[<210> 1813]]> <![CDATA[<400> 1813]]> 000 <![CDATA[<210> 1814]]> <![CDATA[<400> 1814]]> 000 <![CDATA[<210> 1815]]> <![CDATA[<400> 1815]]> 000 <![CDATA[<210> 1816]]> <![CDATA[<400> 1816]]> 000 <![CDATA[<210> 1817]]> <![CDATA[<400> 1817]]> 000 <![CDATA[<210> 1818]]> <![CDATA[<400> 1818]]> 000 <![CDATA[<210> 1819]]> <![CDATA[<400> 1819]]> 000 <![CDATA[<210> 1820]]> <![CDATA[<400> 1820]]> 000 <![CDATA[<210> 1821]]> <![CDATA[<400> 1821]]> 000 <![CDATA[<210> 1822]]> <![CDATA[<400> 1822]]> 000 <![CDATA[<210> 1823]]> <![CDATA[<400> 1823]]> 000 <![CDATA[<210> 1824]]> <![CDATA[<400> 1824]]> 000 <![CDATA[<210> 1825]]> <![CDATA[<400> 1825]]> 000 <![CDATA[<210> 1826]]> <![CDATA[<400> 1826]]> 000 <![CDATA[<210> 1827]]> <![CDATA[<400> 1827]]> 000 <![CDATA[<210> 1828]]> <![CDATA[<400> 1828]]> 000 <![CDATA[<210> 1829]]> <![CDATA[<400> 1829]]> 000 <![CDATA[<210> 1830]]> <![CDATA[<400> 1830]]> 000 <![CDATA[<210> 1831]]> <![CDATA[<400> 1831]]> 000 <![CDATA[<210> 1832]]> <![CDATA[<400> 1832]]> 000 <![CDATA[<210> 1833]]> <![CDATA[<400> 1833]]> 000 <![CDATA[<210> 1834]]> <![CDATA[<400> 1834]]> 000 <![CDATA[<210> 1835]]> <![CDATA[<400> 1835]]> 000 <![CDATA[<210> 1836]]> <![CDATA[<400> 1836]]> 000 <![CDATA[<210> 1837]]> <![CDATA[<400> 1837]]> 000 <![CDATA[<210> 1838]]> <![CDATA[<400> 1838]]> 000 <![CDATA[<210> 1839]]> <![CDATA[<400> 1839]]> 000 <![CDATA[<210> 1840]]> <![CDATA[<400> 1840]]> 000 <![CDATA[<210> 1841]]> <![CDATA[<400> 1841]]> 000 <![CDATA[<210> 1842]]> <![CDATA[<400> 1842]]> 000 <![CDATA[<210> 1843]]> <![CDATA[<400> 1843]]> 000 <![CDATA[<210> 1844]]> <![CDATA[<400> 1844]]> 000 <![CDATA[<210> 1845]]> <![CDATA[<400> 1845]]> 000 <![CDATA[<210> 1846]]> <![CDATA[<400> 1846]]> 000 <![CDATA[<210> 1847]]> <![CDATA[<400> 1847]]> 000 <![CDATA[<210> 1848]]> <![CDATA[<400> 1848]]> 000 <![CDATA[<210> 1849]]> <![CDATA[<400> 1849]]> 000 <![CDATA[<210> 1850]]> <![CDATA[<400> 1850]]> 000 <![CDATA[<210> 1851]]> <![CDATA[<400> 1851]]> 000 <![CDATA[<210> 1852]]> <![CDATA[<400> 1852]]> 000 <![CDATA[<210> 1853]]> <![CDATA[<400> 1853]]> 000 <![CDATA[<210> 1854]]> <![CDATA[<400> 1854]]> 000 <![CDATA[<210> 1855]]> <![CDATA[<400> 1855]]> 000 <![CDATA[<210> 1856]]> <![CDATA[<400> 1856]]> 000 <![CDATA[<210> 1857]]> <![CDATA[<400> 1857]]> 000 <![CDATA[<210> 1858]]> <![CDATA[<400> 1858]]> 000 <![CDATA[<210> 1859]]> <![CDATA[<400> 1859]]> 000 <![CDATA[<210> 1860]]> <![CDATA[<400> 1860]]> 000 <![CDATA[<210> 1861]]> <![CDATA[<400> 1861]]> 000 <![CDATA[<210> 1862]]> <![CDATA[<400> 1862]]> 000 <![CDATA[<210> 1863]]> <![CDATA[<400> 1863]]> 000 <![CDATA[<210> 1864]]> <![CDATA[<400> 1864]]> 000 <![CDATA[<210> 1865]]> <![CDATA[<400> 1865]]> 000 <![CDATA[<210> 1866]]> <![CDATA[<400> 1866]]> 000 <![CDATA[<210> 1867]]> <![CDATA[<400> 1867]]> 000 <![CDATA[<210> 1868]]> <![CDATA[<400> 1868]]> 000 <![CDATA[<210> 1869]]> <![CDATA[<400> 1869]]> 000 <![CDATA[<210> 1870]]> <![CDATA[<400> 1870]]> 000 <![CDATA[<210> 1871]]> <![CDATA[<400> 1871]]> 000 <![CDATA[<210> 1872]]> <![CDATA[<400> 1872]]> 000 <![CDATA[<210> 1873]]> <![CDATA[<400> 1873]]> 000 <![CDATA[<210> 1874]]> <![CDATA[<400> 1874]]> 000 <![CDATA[<210> 1875]]> <![CDATA[<400> 1875]]> 000 <![CDATA[<210> 1876]]> <![CDATA[<400> 1876]]> 000 <![CDATA[<210> 1877]]> <![CDATA[<400> 1877]]> 000 <![CDATA[<210> 1878]]> <![CDATA[<400> 1878]]> 000 <![CDATA[<210> 1879]]> <![CDATA[<400> 1879]]> 000 <![CDATA[<210> 1880]]> <![CDATA[<400> 1880]]> 000 <![CDATA[<210> 1881]]> <![CDATA[<400> 1881]]> 000 <![CDATA[<210> 1882]]> <![CDATA[<400> 1882]]> 000 <![CDATA[<210> 1883]]> <![CDATA[<400> 1883]]> 000 <![CDATA[<210> 1884]]> <![CDATA[<400> 1884]]> 000 <![CDATA[<210> 1885]]> <![CDATA[<400> 1885]]> 000 <![CDATA[<210> 1886]]> <![CDATA[<400> 1886]]> 000 <![CDATA[<210> 1887]]> <![CDATA[<400> 1887]]> 000 <![CDATA[<210> 1888]]> <![CDATA[<400> 1888]]> 000 <![CDATA[<210> 1889]]> <![CDATA[<400> 1889]]> 000 <![CDATA[<210> 1890]]> <![CDATA[<400> 1890]]> 000 <![CDATA[<210> 1891]]> <![CDATA[<400> 1891]]> 000 <![CDATA[<210> 1892]]> <![CDATA[<400> 1892]]> 000 <![CDATA[<210> 1893]]> <![CDATA[<400> 1893]]> 000 <![CDATA[<210> 1894]]> <![CDATA[<400> 1894]]> 000 <![CDATA[<210> 1895]]> <![CDATA[<400> 1895]]> 000 <![CDATA[<210> 1896]]> <![CDATA[<400> 1896]]> 000 <![CDATA[<210> 1897]]> <![CDATA[<400> 1897]]> 000 <![CDATA[<210> 1898]]> <![CDATA[<400> 1898]]> 000 <![CDATA[<210> 1899]]> <![CDATA[<400> 1899]]> 000 <![CDATA[<210> 1900]]> <![CDATA[<400> 1900]]> 000 <![CDATA[<210> 1901]]> <![CDATA[<400> 1901]]> 000 <![CDATA[<210> 1902]]> <![CDATA[<400> 1902]]> 000 <![CDATA[<210> 1903]]> <![CDATA[<400> 1903]]> 000 <![CDATA[<210> 1904]]> <![CDATA[<400> 1904]]> 000 <![CDATA[<210> 1905]]> <![CDATA[<400> 1905]]> 000 <![CDATA[<210> 1906]]> <![CDATA[<400> 1906]]> 000 <![CDATA[<210> 1907]]> <![CDATA[<400> 1907]]> 000 <![CDATA[<210> 1908]]> <![CDATA[<400> 1908]]> 000 <![CDATA[<210> 1909]]> <![CDATA[<400> 1909]]> 000 <![CDATA[<210> 1910]]> <![CDATA[<400> 1910]]> 000 <![CDATA[<210> 1911]]> <![CDATA[<400> 1911]]> 000 <![CDATA[<210> 1912]]> <![CDATA[<400> 1912]]> 000 <![CDATA[<210> 1913]]> <![CDATA[<400> 1913]]> 000 <![CDATA[<210> 1914]]> <![CDATA[<400> 1914]]> 000 <![CDATA[<210> 1915]]> <![CDATA[<400> 1915]]> 000 <![CDATA[<210> 1916]]> <![CDATA[<400> 1916]]> 000 <![CDATA[<210> 1917]]> <![CDATA[<400> 1917]]> 000 <![CDATA[<210> 1918]]> <![CDATA[<400> 1918]]> 000 <![CDATA[<210> 1919]]> <![CDATA[<400> 1919]]> 000 <![CDATA[<210> 1920]]> <![CDATA[<400> 1920]]> 000 <![CDATA[<210> 1921]]> <![CDATA[<400> 1921]]> 000 <![CDATA[<210> 1922]]> <![CDATA[<400> 1922]]> 000 <![CDATA[<210> 1923]]> <![CDATA[<400> 1923]]> 000 <![CDATA[<210> 1924]]> <![CDATA[<400> 1924]]> 000 <![CDATA[<210> 1925]]> <![CDATA[<400> 1925]]> 000 <![CDATA[<210> 1926]]> <![CDATA[<400> 1926]]> 000 <![CDATA[<210> 1927]]> <![CDATA[<400> 1927]]> 000 <![CDATA[<210> 1928]]> <![CDATA[<400> 1928]]> 000 <![CDATA[<210> 1929]]> <![CDATA[<400> 1929]]> 000 <![CDATA[<210> 1930]]> <![CDATA[<400> 1930]]> 000 <![CDATA[<210> 1931]]> <![CDATA[<400> 1931]]> 000 <![CDATA[<210> 1932]]> <![CDATA[<400> 1932]]> 000 <![CDATA[<210> 1933]]> <![CDATA[<400> 1933]]> 000 <![CDATA[<210> 1934]]> <![CDATA[<400> 1934]]> 000 <![CDATA[<210> 1935]]> <![CDATA[<400> 1935]]> 000 <![CDATA[<210> 1936]]> <![CDATA[<400> 1936]]> 000 <![CDATA[<210> 1937]]> <![CDATA[<400> 1937]]> 000 <![CDATA[<210> 1938]]> <![CDATA[<400> 1938]]> 000 <![CDATA[<210> 1939]]> <![CDATA[<400> 1939]]> 000 <![CDATA[<210> 1940]]> <![CDATA[<400> 1940]]> 000 <![CDATA[<210> 1941]]> <![CDATA[<400> 1941]]> 000 <![CDATA[<210> 1942]]> <![CDATA[<400> 1942]]> 000 <![CDATA[<210> 1943]]> <![CDATA[<400> 1943]]> 000 <![CDATA[<210> 1944]]> <![CDATA[<400> 1944]]> 000 <![CDATA[<210> 1945]]> <![CDATA[<400> 1945]]> 000 <![CDATA[<210> 1946]]> <![CDATA[<400> 1946]]> 000 <![CDATA[<210> 1947]]> <![CDATA[<400> 1947]]> 000 <![CDATA[<210> 1948]]> <![CDATA[<400> 1948]]> 000 <![CDATA[<210> 1949]]> <![CDATA[<400> 1949]]> 000 <![CDATA[<210> 1950]]> <![CDATA[<400> 1950]]> 000 <![CDATA[<210> 1951]]> <![CDATA[<400> 1951]]> 000 <![CDATA[<210> 1952]]> <![CDATA[<400> 1952]]> 000 <![CDATA[<210> 1953]]> <![CDATA[<400> 1953]]> 000 <![CDATA[<210> 1954]]> <![CDATA[<400> 1954]]> 000 <![CDATA[<210> 1955]]> <![CDATA[<400> 1955]]> 000 <![CDATA[<210> 1956]]> <![CDATA[<400> 1956]]> 000 <![CDATA[<210> 1957]]> <![CDATA[<400> 1957]]> 000 <![CDATA[<210> 1958]]> <![CDATA[<400> 1958]]> 000 <![CDATA[<210> 1959]]> <![CDATA[<400> 1959]]> 000 <![CDATA[<210> 1960]]> <![CDATA[<400> 1960]]> 000 <![CDATA[<210> 1961]]> <![CDATA[<400> 1961]]> 000 <![CDATA[<210> 1962]]> <![CDATA[<400> 1962]]> 000 <![CDATA[<210> 1963]]> <![CDATA[<400> 1963]]> 000 <![CDATA[<210> 1964]]> <![CDATA[<400> 1964]]> 000 <![CDATA[<210> 1965]]> <![CDATA[<400> 1965]]> 000 <![CDATA[<210> 1966]]> <![CDATA[<400> 1966]]> 000 <![CDATA[<210> 1967]]> <![CDATA[<400> 1967]]> 000 <![CDATA[<210> 1968]]> <![CDATA[<400> 1968]]> 000 <![CDATA[<210> 1969]]> <![CDATA[<400> 1969]]> 000 <![CDATA[<210> 1970]]> <![CDATA[<400> 1970]]> 000 <![CDATA[<210> 1971]]> <![CDATA[<400> 1971]]> 000 <![CDATA[<210> 1972]]> <![CDATA[<400> 1972]]> 000 <![CDATA[<210> 1973]]> <![CDATA[<400> 1973]]> 000 <![CDATA[<210> 1974]]> <![CDATA[<400> 1974]]> 000 <![CDATA[<210> 1975]]> <![CDATA[<400> 1975]]> 000 <![CDATA[<210> 1976]]> <![CDATA[<400> 1976]]> 000 <![CDATA[<210> 1977]]> <![CDATA[<400> 1977]]> 000 <![CDATA[<210> 1978]]> <![CDATA[<400> 1978]]> 000 <![CDATA[<210> 1979]]> <![CDATA[<400> 1979]]> 000 <![CDATA[<210> 1980]]> <![CDATA[<400> 1980]]> 000 <![CDATA[<210> 1981]]> <![CDATA[<400> 1981]]> 000 <![CDATA[<210> 1982]]> <![CDATA[<400> 1982]]> 000 <![CDATA[<210> 1983]]> <![CDATA[<400> 1983]]> 000 <![CDATA[<210> 1984]]> <![CDATA[<400> 1984]]> 000 <![CDATA[<210> 1985]]> <![CDATA[<400> 1985]]> 000 <![CDATA[<210> 1986]]> <![CDATA[<400> 1986]]> 000 <![CDATA[<210> 1987]]> <![CDATA[<400> 1987]]> 000 <![CDATA[<210> 1988]]> <![CDATA[<400> 1988]]> 000 <![CDATA[<210> 1989]]> <![CDATA[<400> 1989]]> 000 <![CDATA[<210> 1990]]> <![CDATA[<400> 1990]]> 000 <![CDATA[<210> 1991]]> <![CDATA[<400> 1991]]> 000 <![CDATA[<210> 1992]]> <![CDATA[<400> 1992]]> 000 <![CDATA[<210> 1993]]> <![CDATA[<400> 1993]]> 000 <![CDATA[<210> 1994]]> <![CDATA[<400> 1994]]> 000 <![CDATA[<210> 1995]]> <![CDATA[<400> 1995]]> 000 <![CDATA[<210> 1996]]> <![CDATA[<400> 1996]]> 000 <![CDATA[<210> 1997]]> <![CDATA[<400> 1997]]> 000 <![CDATA[<210> 1998]]> <![CDATA[<400> 1998]]> 000 <![CDATA[<210> 1999]]> <![CDATA[<400> 1999]]> 000 <![CDATA[<210> 2000]]> <![CDATA[<400> 2000]]> 000 <![CDATA[<210> 2001]]> <![CDATA[<400> 2001]]> 000 <![CDATA[<210> 2002]]> <![CDATA[<400> 2002]]> 000 <![CDATA[<210> 2003]]> <![CDATA[<400> 2003]]> 000 <![CDATA[<210> 2004]]> <![CDATA[<400> 2004]]> 000 <![CDATA[<210> 2005]]> <![CDATA[<400> 2005]]> 000 <![CDATA[<210> 2006]]> <![CDATA[<400> 2006]]> 000 <![CDATA[<210> 2007]]> <![CDATA[<400> 2007]]> 000 <![CDATA[<210> 2008]]> <![CDATA[<400> 2008]]> 000 <![CDATA[<210> 2009]]> <![CDATA[<400> 2009]]> 000 <![CDATA[<210> 2010]]> <![CDATA[<400> 2010]]> 000 <![CDATA[<210> 2011]]> <![CDATA[<400> 2011]]> 000 <![CDATA[<210> 2012]]> <![CDATA[<400> 2012]]> 000 <![CDATA[<210> 2013]]> <![CDATA[<400> 2013]]> 000 <![CDATA[<210> 2014]]> <![CDATA[<400> 2014]]> 000 <![CDATA[<210> 2015]]> <![CDATA[<400> 2015]]> 000 <![CDATA[<210> 2016]]> <![CDATA[<400> 2016]]> 000 <![CDATA[<210> 2017]]> <![CDATA[<400> 2017]]> 000 <![CDATA[<210> 2018]]> <![CDATA[<400> 2018]]> 000 <![CDATA[<210> 2019]]> <![CDATA[<400> 2019]]> 000 <![CDATA[<210> 2020]]> <![CDATA[<400> 2020]]> 000 <![CDATA[<210> 2021]]> <![CDATA[<400> 2021]]> 000 <![CDATA[<210> 2022]]> <![CDATA[<400> 2022]]> 000 <![CDATA[<210> 2023]]> <![CDATA[<400> 2023]]> 000 <![CDATA[<210> 2024]]> <![CDATA[<400> 2024]]> 000 <![CDATA[<210> 2025]]> <![CDATA[<400> 2025]]> 000 <![CDATA[<210> 2026]]> <![CDATA[<400> 2026]]> 000 <![CDATA[<210> 2027]]> <![CDATA[<400> 2027]]> 000 <![CDATA[<210> 2028]]> <![CDATA[<400> 2028]]> 000 <![CDATA[<210> 2029]]> <![CDATA[<400> 2029]]> 000 <![CDATA[<210> 2030]]> <![CDATA[<400> 2030]]> 000 <![CDATA[<210> 2031]]> <![CDATA[<400> 2031]]> 000 <![CDATA[<210> 2032]]> <![CDATA[<400> 2032]]> 000 <![CDATA[<210> 2033]]> <![CDATA[<400> 2033]]> 000 <![CDATA[<210> 2034]]> <![CDATA[<400> 2034]]> 000 <![CDATA[<210> 2035]]> <![CDATA[<400> 2035]]> 000 <![CDATA[<210> 2036]]> <![CDATA[<400> 2036]]> 000 <![CDATA[<210> 2037]]> <![CDATA[<400> 2037]]> 000 <![CDATA[<210> 2038]]> <![CDATA[<400> 2038]]> 000 <![CDATA[<210> 2039]]> <![CDATA[<400> 2039]]> 000 <![CDATA[<210> 2040]]> <![CDATA[<400> 2040]]> 000 <![CDATA[<210> 2041]]> <![CDATA[<400> 2041]]> 000 <![CDATA[<210> 2042]]> <![CDATA[<400> 2042]]> 000 <![CDATA[<210> 2043]]> <![CDATA[<400> 2043]]> 000 <![CDATA[<210> 2044]]> <![CDATA[<400> 2044]]> 000 <![CDATA[<210> 2045]]> <![CDATA[<400> 2045]]> 000 <![CDATA[<210> 2046]]> <![CDATA[<400> 2046]]> 000 <![CDATA[<210> 2047]]> <![CDATA[<400> 2047]]> 000 <![CDATA[<210> 2048]]> <![CDATA[<400> 2048]]> 000 <![CDATA[<210> 2049]]> <![CDATA[<400> 2049]]> 000 <![CDATA[<210> 2050]]> <![CDATA[<400> 2050]]> 000 <![CDATA[<210> 2051]]> <![CDATA[<400> 2051]]> 000 <![CDATA[<210> 2052]]> <![CDATA[<400> 2052]]> 000 <![CDATA[<210> 2053]]> <![CDATA[<400> 2053]]> 000 <![CDATA[<210> 2054]]> <![CDATA[<400> 2054]]> 000 <![CDATA[<210> 2055]]> <![CDATA[<400> 2055]]> 000 <![CDATA[<210> 2056]]> <![CDATA[<400> 2056]]> 000 <![CDATA[<210> 2057]]> <![CDATA[<400> 2057]]> 000 <![CDATA[<210> 2058]]> <![CDATA[<400> 2058]]> 000 <![CDATA[<210> 2059]]> <![CDATA[<400> 2059]]> 000 <![CDATA[<210> 2060]]> <![CDATA[<400> 2060]]> 000 <![CDATA[<210> 2061]]> <![CDATA[<400> 2061]]> 000 <![CDATA[<210> 2062]]> <![CDATA[<400> 2062]]> 000 <![CDATA[<210> 2063]]> <![CDATA[<400> 2063]]> 000 <![CDATA[<210> 2064]]> <![CDATA[<400> 2064]]> 000 <![CDATA[<210> 2065]]> <![CDATA[<400> 2065]]> 000 <![CDATA[<210> 2066]]> <![CDATA[<400> 2066]]> 000 <![CDATA[<210> 2067]]> <![CDATA[<400> 2067]]> 000 <![CDATA[<210> 2068]]> <![CDATA[<400> 2068]]> 000 <![CDATA[<210> 2069]]> <![CDATA[<400> 2069]]> 000 <![CDATA[<210> 2070]]> <![CDATA[<400> 2070]]> 000 <![CDATA[<210> 2071]]> <![CDATA[<400> 2071]]> 000 <![CDATA[<210> 2072]]> <![CDATA[<400> 2072]]> 000 <![CDATA[<210> 2073]]> <![CDATA[<400> 2073]]> 000 <![CDATA[<210> 2074]]> <![CDATA[<400> 2074]]> 000 <![CDATA[<210> 2075]]> <![CDATA[<400> 2075]]> 000 <![CDATA[<210> 2076]]> <![CDATA[<400> 2076]]> 000 <![CDATA[<210> 2077]]> <![CDATA[<400> 2077]]> 000 <![CDATA[<210> 2078]]> <![CDATA[<400> 2078]]> 000 <![CDATA[<210> 2079]]> <![CDATA[<400> 2079]]> 000 <![CDATA[<210> 2080]]> <![CDATA[<400> 2080]]> 000 <![CDATA[<210> 2081]]> <![CDATA[<400> 2081]]> 000 <![CDATA[<210> 2082]]> <![CDATA[<400> 2082]]> 000 <![CDATA[<210> 2083]]> <![CDATA[<400> 2083]]> 000 <![CDATA[<210> 2084]]> <![CDATA[<400> 2084]]> 000 <![CDATA[<210> 2085]]> <![CDATA[<400> 2085]]> 000 <![CDATA[<210> 2086]]> <![CDATA[<400> 2086]]> 000 <![CDATA[<210> 2087]]> <![CDATA[<400> 2087]]> 000 <![CDATA[<210> 2088]]> <![CDATA[<400> 2088]]> 000 <![CDATA[<210> 2089]]> <![CDATA[<400> 2089]]> 000 <![CDATA[<210> 2090]]> <![CDATA[<400> 2090]]> 000 <![CDATA[<210> 2091]]> <![CDATA[<400> 2091]]> 000 <![CDATA[<210> 2092]]> <![CDATA[<400> 2092]]> 000 <![CDATA[<210> 2093]]> <![CDATA[<400> 2093]]> 000 <![CDATA[<210> 2094]]> <![CDATA[<400> 2094]]> 000 <![CDATA[<210> 2095]]> <![CDATA[<400> 2095]]> 000 <![CDATA[<210> 2096]]> <![CDATA[<400> 2096]]> 000 <![CDATA[<210> 2097]]> <![CDATA[<400> 2097]]> 000 <![CDATA[<210> 2098]]> <![CDATA[<400> 2098]]> 000 <![CDATA[<210> 2099]]> <![CDATA[<400> 2099]]> 000 <![CDATA[<210> 2100]]> <![CDATA[<400> 2100]]> 000 <![CDATA[<210> 2101]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2101]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggu gggacgaccu cucggucguc cuaucugaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2102]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2102]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcugcu cgacgcgucc ucgagcagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2103]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2103]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcugcu cgcuccguuc gagcagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2104]]> <![CDATA[<211> 91]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2104]]> guacuggcgc uuuuaucuca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcccu cuucggaggg aagcaucaaa g 91 <![CDATA[<210> 2105]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2105]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcagga guuucuaugg aaacccugaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2106]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2106]]> guacuggcgc cuuuaucuca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua cggacuucgg uccguaagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2107]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2107]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcugcg cuugcgcaga agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2108]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2108]]> uacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2109]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2109]]> uacuggcgcu uuuaucgcau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2110]]> <![CDATA[<211> 110]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2110]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga cuucgguccg auaaauaaga agcaucaaag 110 <![CDATA[<210> 2111]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2111]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcacau gaggauuacc caugugaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2112]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2112]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucgugaga aauccgauaa auaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2113]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2113]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcugca ugucuaagac agcagaagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2114]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2114]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggg cuucggccga agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2115]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2115]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaauc cauugcacuc cggauugaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2116]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2116]]> uacuggcgcu uuucucgcau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2117]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2117]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggacu ucgguccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2118]]> <![CDATA[<211> 100]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2118]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcugcu cguuugcggc uacgagcaga agcaucaaag 100 <![CDATA[<210> 2119]]> <![CDATA[<211> 100]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2119]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucgagag auaaauaaga agcaucaaag 100 <![CDATA[<210> 2120]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2120]]> uacggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucggagag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2121]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2121]]> uacuggcgcc uuuuaucuca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua cggacuucgg uccguaagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2122]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2122]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaucggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2123]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2123]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggacu ucgguccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2124]]> <![CDATA[<211> 105]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2124]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucgagaa auccgauaaa uaagaagcau caaag 105 <![CDATA[<210> 2125]]> <![CDATA[<211> 103]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2125]]> gcgcuuuuau cucauuacuu ugagagccau caccagcgac uaugucguau ggguaaagcg 60 cuuauuuauc ggagagaaau ccgauaaaua agaagcauca aag 103 <![CDATA[<210> 2126]]> <![CDATA[<211> 103]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2126]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gagauaaaua agaagcauca aag 103 <![CDATA[<210> 2127]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2127]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuuggag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag aguauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2128]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2128]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu ucguaugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2129]]> <![CDATA[<211> 105]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2129]]> agcgcuuuua ucucauuacu uugagagcca ucaccagcga cuaugucgua uggguaaagc 60 gcuuauuuau cggagagaaa ugccgauaaa uaagaagcau caaag 105 <![CDATA[<210> 2130]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2130]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2131]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2131]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uguaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2132]]> <![CDATA[<211> 102]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2132]]> gcgcuuuuau cucauuacuu ugagagccau caccagcgac uaugucguau ggguaaagcg 60 cuuauuuauc ggacuucggu ccgauaaaua agcgcaucaa ag 102 <![CDATA[<210> 2133]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2133]]> uacuggcgcu uuucucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2134]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2134]]> guggcgcuuu uaucucauua cuuugagagc caucaccagc gacuaugucg uauggguaaa 60 gcgcuuauuu aucggagaga aauccgauaa auaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2135]]> <![CDATA[<211> 110]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2135]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgaccuuau gucguauggg 60 uaaagcgcuu auuuaucgga gagaaauccg auaaauaaga agcaucaaag 110 <![CDATA[<210> 2136]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2136]]> gauggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucggacuu cgguccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2137]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2137]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2138]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2138]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgaucuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2139]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2139]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aaggcuuauu uaucggagag aaauccgaua aaaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2140]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2140]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaaaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2141]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2141]]> uacuggcgcu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucggacuu cgguccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2142]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2142]]> cggcgcuuuu cucgcauuac uuugagagcc aucaccagcg acuaugucgu auggguaaag 60 cgcuuauugu aucgagagau aaauaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2143]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2143]]> cacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuucggagag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2144]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2144]]> uacuggcgcu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuucggu cguaugggua 60 aagcgcuuau guaucggcuu cggccgauac auaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2145]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2145]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuucgg ucguaugggu 60 aaagcgcuua uguaucggcu ucggccgaua cauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2146]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2146]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggug 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2147]]> <![CDATA[<211> 64]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2147]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuucgg ucguaugggu 60 aaag 64 <![CDATA[<210> 2148]]> <![CDATA[<211> 62]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2148]]> gaugggcuuu uaucucauua cuuugagagc caucaccagc gacuucgguc guauggguaa 60 ag 62 <![CDATA[<210> 2149]]> <![CDATA[<211> 105]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2149]]> gaugggcuuu uaucucauua cuuugagagc caucaccagc gacuucgguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucggcuuc ggccgauaaa uaagaagcau caaag 105 <![CDATA[<210> 2150]]> <![CDATA[<211> 156]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2150]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuaca cugggaucgc ugaauuagag aucggcgucc uuucauucua uauacuuugg 120 aguuuuaaaa ugucucuaag uacagaagca ucaaag 156 <![CDATA[<210> 2151]]> <![CDATA[<211> 103]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2151]]> ggcgcuuuua ucucauuacu uugagagcca ucaccagcga cuucggucgu auggguaaag 60 cgcuuauuua ucggcuucgg ccgauaaaua agaagcauca aag 103 <![CDATA[<210> 2152]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2152]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuucggu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggcuu cggccgauaa auaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2153]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2153]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuucgg ucguaugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2154]]> <![CDATA[<211> 112]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2154]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaugcucc accagcgacu augucguaug 60 gguaaagcgc uuauuuaucg gagagaaauc cgauaaauaa gaagcaucaa ag 112 <![CDATA[<210> 2155]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2155]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgggguu aggguuaggg uuagggaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2156]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2156]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcggaggg agggagggag agggaaagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2157]]> <![CDATA[<211> 101]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2157]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcguuggg uuaggguuag gguuagggaa aagcaucaaa g 101 <![CDATA[<210> 2158]]> <![CDATA[<211> 91]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2158]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggg cuucggccgg aagcaucaaa g 91 <![CDATA[<210> 2159]]> <![CDATA[<211> 103]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2159]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgccugc ucaguacgag aggaaccgca ggaagcauca aag 103 <![CDATA[<210> 2160]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2160]]> uacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcccuc uucggaggga agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2161]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2161]]> uacuggcgcc uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2162]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2162]]> uacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcggac gaccucucgg ucguccgaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2163]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2163]]> uacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggu gggacgaccu cucggucguc cuaucugaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2164]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2164]]> uacuggcgcc uuuaucugca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua cggacuucgg uccguaagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2165]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2165]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2166]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2166]]> uacuggcgcc uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggu gggacgaccu cucggucguc cuaucugaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2167]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2167]]> uacuggcgcc uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcggac gaccucucgg ucguccgaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2168]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2168]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcccuc uucggaggga agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2169]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2169]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2170]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2170]]> uacuggcgcc uuuaucauca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua cggacuucgg uccguaagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2171]]> <![CDATA[<211> 194]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2171]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaaggg ccggcauggu 120 cccagccucc ucgcuggcgc cggcugggca acauuccgag gggaccgucc ccucgguaau 180 ggcgaauggg accc 194 <![CDATA[<210> 2172]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2172]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcaggu gggacgaccu cucggucguc cuaucugaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2173]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2173]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga aauccgauaa auaagaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2174]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2174]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcggac gaccucucgg ucguccgaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2175]]> <![CDATA[<211> 92]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2175]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgccgga cuucgguccg gaagcaucaa ag 92 <![CDATA[<210> 2176]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2176]]> uacuggcgcu uuuaucggau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2177]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2177]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcggac gaccucucgg ucguccgaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2178]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2178]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcccucu ucggagggaa gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2179]]> <![CDATA[<211> 88]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2179]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcucccucu ucggagggag caucaaag 88 <![CDATA[<210> 2180]]> <![CDATA[<211> 197]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2180]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaaggg gucggcaugg 120 caucuccacc uccucgcggu ccgaccuggg cauccgaagg aggacgcacg uccacucgga 180 uggcuaaggg agagcca 197 <![CDATA[<210> 2181]]> <![CDATA[<211> 88]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2181]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcccucu ucggagggcg caucaaag 88 <![CDATA[<210> 2182]]> <![CDATA[<211> 186]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2182]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaaguu uuggccggca 120 uggucccagc cuccucgcug gcgccggcug ggcaacaugc uucggcaugg cgaaugggac 180 cccggg 186 <![CDATA[<210> 2183]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2183]]> gauggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2184]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2184]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcccucu ucggagggaa gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2185]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2185]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcucuuacg gacuucgguc cguaagagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2186]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2186]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcucggacg accucucggu cguccgagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2187]]> <![CDATA[<211> 160]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2187]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagcc ugucaccgga 120 ugugcuuucc ggucugauga guccgugagg acgaaacagg 160 <![CDATA[<210> 2188]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2188]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcggacg accucucggu cguccgaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2189]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2189]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcggacg accucucggu cguccgaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2190]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2190]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcucaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2191]]> <![CDATA[<211> 177]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2191]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagga uggccggcau 120 ggucccagcc uccucgcugg cgccggcugg gcaacaccuu cggguggcga augggac 177 <![CDATA[<210> 2192]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2192]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2193]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2193]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguacugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2194]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2194]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucgugag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2195]]> <![CDATA[<211> 109]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2195]]> guacuggcgc uuuuaucuca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua uuuaucggag agaaauccga uaaauaagaa gcaucaaag 109 <![CDATA[<210> 2196]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2196]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcggacg accucucggu cguccgaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2197]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2197]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2198]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2198]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuauu uaucggagag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2199]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2199]]> gcuggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2200]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2200]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcccucu ucggagggaa gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2201]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2201]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2202]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2202]]> gcuggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2203]]> <![CDATA[<211> 107]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2203]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugaagc aucaaag 107 <![CDATA[<210> 2204]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2204]]> uacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2205]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2205]]> gcuggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcccucu ucggagggaa gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2206]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2206]]> gcuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2207]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2207]]> gcuggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcggacg accucucggu cguccgaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2208]]> <![CDATA[<211> 177]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2208]]> gauggccggc auggucccag ccuccucgcu ggcgccggcu gggcaacacc uucggguggc 60 gaaugggacu acuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc 120 guauggguaa agcgcuuauu uaucggagag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 177 <![CDATA[<210> 2209]]> <![CDATA[<211> 194]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2209]]> ggccggcaug gucccagccu ccucgcuggc gccggcuggg caacauuccg aggggaccgu 60 ccccucggua auggcgaaug ggacccuacu ggcgcuuuua ucucauuacu uugagagcca 120 ucaccagcga cuaugucgua uggguaaagc gcuuauuuau cggagagaaa uccgauaaau 180 aagaagcauc aaag 194 <![CDATA[<210> 2210]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2210]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagcgca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2211]]> <![CDATA[<211> 172]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2211]]> cgugguuagg gccacguuaa auaguugcuu aagcccuaag cguugaucuu cggaucaggu 60 gcaauacugg cgcuuuuauc ucauuacuuu gagagccauc accagcgacu augucguaug 120 gguaaagcgc uuauuuaucg gagagaaauc cgauaaauaa gaagcaucaa ag 172 <![CDATA[<210> 2212]]> <![CDATA[<211> 197]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2212]]> gggucggcau ggcaucucca ccuccucgcg guccgaccug ggcauccgaa ggaggacgca 60 cguccacucg gauggcuaag ggagagccau acuggcgcuu uuaucucauu acuuugagag 120 ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa agcgcuuauu uaucggagag aaauccgaua 180 aauaagaagc aucaaag 197 <![CDATA[<210> 2213]]> <![CDATA[<211> 171]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2213]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagcc aguacugaug 120 aguccgugag gacgaaacga guaagcucgu cuacuggcgc uuuuaucuca u 171 <![CDATA[<210> 2214]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2214]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuuagag agccaucacc agcgacuaug ucguaugggu 60 aaagcgcuua cggacuucgg uccguaagaa gcaucaaag 99 <![CDATA[<210> 2215]]> <![CDATA[<211> 157]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2215]]> cgacuacuga ugaguccgug aggacgaaac gaguaagcuc gucuagucgu acuggcgcuu 60 uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa agcgcuuauu 120 uaucggagag aaauccgaua aauaagaagc aucaaag 157 <![CDATA[<210> 2216]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2216]]> gcuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcaggug ggacgaccuc ucggucgucc uaucugcgca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2217]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2217]]> uacuggcgcc uuuaucucau uacuuuagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2218]]> <![CDATA[<211> 186]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2218]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagca uuccucagaa 120 aaugacaaac cuguggggcg uaaguagauc uucggaucua ugaucgugca gacguuaaaa 180 ucaggu 186 <![CDATA[<210> 2219]]> <![CDATA[<211> 171]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2219]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagcg acuacugaug 120 aguccgugag gacgaaacga guaagcucgu cuagucgcgu guagcgaagc a 171 <![CDATA[<210> 2220]]> <![CDATA[<211> 186]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2220]]> cauuccucag aaaaugacaa accugugggg cguaaguaga ucuucggauc uaugaucgug 60 cagacguuaa aaucagguua cuggcgcuuu uaucucauua cuuugagagc caucaccagc 120 gacuaugucg uauggguaaa gcgcuuauuu aucggagaga aauccgauaa auaagaagca 180 ucaaag 186 <![CDATA[<210> 2221]]> <![CDATA[<211> 186]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2221]]> uuuuggccgg caugguccca gccuccucgc uggcgccggc ugggcaacau gcuucggcau 60 ggcgaauggg accccgggua cuggcgcuuu uaucucauua cuuugagagc caucaccagc 120 gacuaugucg uauggguaaa gcgcuuauuu aucggagaga aauccgauaa auaagaagca 180 ucaaag 186 <![CDATA[<210> 2222]]> <![CDATA[<211> 171]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2222]]> cgacuacuga ugaguccgug aggacgaaac gaguaagcuc gucuagucgc guguagcgaa 60 gcauacuggc gcuuuuaucu cauuacuuug agagccauca ccagcgacua ugucguaugg 120 guaaagcgcu uauuuaucgg agagaaaucc gauaaauaag aagcaucaaa g 171 <![CDATA[<210> 2223]]> <![CDATA[<211> 168]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2223]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaaggg gagccccgcu 120 gaugaggucg gggagaccga aagggacuuc ggucccuacg gggcuccc 168 <![CDATA[<210> 2224]]> <![CDATA[<211> 144]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2224]]> ccacccccac caccaccccc acccccacca ccacccuacu ggcgcuuuua ucucauuacu 60 uugagagcca ucaccagcga cuaugucgua uggguaaagc gcuuauuuau cggagagaaa 120 uccgauaaau aagaagcauc aaag 144 <![CDATA[<210> 2225]]> <![CDATA[<211> 157]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2225]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagcg acuacugaug 120 aguccgugag gacgaaacga guaagcucgu cuagucg 157 <![CDATA[<210> 2226]]> <![CDATA[<211> 172]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2226]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagcg ugguuagggc 120 cacguuaaau aguugcuuaa gcccuaagcg uugaucuucg gaucaggugc aa 172 <![CDATA[<210> 2227]]> <![CDATA[<211> 184]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2227]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaaggg caauaaagcg 120 guuacaagcc cgcaaaaaua gcagaguaau gucgcgauag cgcggcauua augcagcuuu 180 auug 184 <![CDATA[<210> 2228]]> <![CDATA[<211> 122]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2228]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuauuauc ucauuacuuu gagagccauc accagcgacu 60 augucguaug gguaaagcgc uuauuuaucg gagagaaauc cgauaaauaa gaagcaucaa 120 ag 122 <![CDATA[<210> 2229]]> <![CDATA[<211> 184]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2229]]> ggcaauaaag cgguuacaag cccgcaaaaa uagcagagua augucgcgau agcgcggcau 60 uaaugcagcu uuauuguacu ggcgcuuuua ucucauuacu uugagagcca ucaccagcga 120 cuaugucgua uggguaaagc gcuuauuuau cggagagaaa uccgauaaau aagaagcauc 180 aaag 184 <![CDATA[<210> 2230]]> <![CDATA[<211> 185]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2230]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaagac ccgcaaggcc 120 gacggcaucc gccgccgcug gugcaagucc agccgccccu ucgggggcgg gcgcucaugg 180 guaac 185 <![CDATA[<210> 2231]]> <![CDATA[<211> 63]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2231]]> uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aag 63 <![CDATA[<210> 2232]]> <![CDATA[<211> 168]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2232]]> gggagccccg cugaugaggu cggggagacc gaaagggacu ucggucccua cggggcuccc 60 uacuggcgcu uuuaucucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 120 aagcgcuuau uuaucggaga gaaauccgau aaauaagaag caucaaag 168 <![CDATA[<210> 2233]]> <![CDATA[<211> 171]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2233]]> ccaguacuga ugaguccgug aggacgaaac gaguaagcuc gucuacuggc gcuuuuaucu 60 cauuacuggc gcuuuuaucu cauuacuuug agagccauca ccagcgacua ugucguaugg 120 guaaagcgcu uauuuaucgg agagaaaucc gauaaauaag aagcaucaaa g 171 <![CDATA[<210> 2234]]> <![CDATA[<211> 185]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2234]]> acccgcaagg ccgacggcau ccgccgccgc uggugcaagu ccagccgccc cuucgggggc 60 gggcgcucau ggguaacuac uggcgcuuuu aucucauuac uuugagagcc aucaccagcg 120 acuaugucgu auggguaaag cgcuuauuua ucggagagaa auccgauaaa uaagaagcau 180 caaag 185 <![CDATA[<210> 2235]]> <![CDATA[<211> 160]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2235]]> ccugucaccg gaugugcuuu ccggucugau gaguccguga ggacgaaaca gguacuggcg 60 cuuuuaucuc auuacuuuga gagccaucac cagcgacuau gucguauggg uaaagcgcuu 120 auuuaucgga gagaaauccg auaaauaaga agcaucaaag 160 <![CDATA[<210> 2236]]> <![CDATA[<211> 100]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2236]]> guacuggcgc cuuuaucuca uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaguggg 60 uaaagcgcuu acggacuucg guccguaaga agcaucaaag 100 <![CDATA[<210> 2237]]> <![CDATA[<211> 91]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2237]]> guacuggcgc uuuuaucuga uuacuuugag agccaucacc agcgacuaug ucguaguggg 60 uaaagcuccc ucuucggagg gagcaucaaa g 91 <![CDATA[<210> 2238]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2238]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2239]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2239]]> acuggcgccu uuaucucauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2240]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2240]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2241]]> <![CDATA[<211> 88]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2241]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcucccucu ucggagggag caucaaag 88 <![CDATA[<210> 2242]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2242]]> acuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2243]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2243]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2244]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2244]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2245]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2245]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2246]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2246]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2247]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2247]]> acuggcgccu uuaucaucau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguaugggua 60 aagcgcuuac ggacuucggu ccguaagaag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2248]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2248]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcgcccuc uucggaggga agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2249]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2249]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggaucacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2250]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2250]]> acuggcacuu uuaccugauu acuuugagag ccaacaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2251]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2251]]> acuggcacuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2252]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2252]]> acuggcccuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2253]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2253]]> acuggcgcuu uuaccugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2254]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2254]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaacaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2255]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2255]]> acuggcaccu uuaccugauu acuuugagag ccaacaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2256]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2256]]> acuggcaccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2257]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2257]]> acuggccccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2258]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2258]]> acuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaacaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2259]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2259]]> gcuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2260]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2260]]> gacuggcgcu uuuaucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguagugggu 60 aaagcucccu cuucggaggg agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2261]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2261]]> acuggcgccu uuaucugauu acuuuggaga gccaucacca gcgacuaugu cguagugggu 60 aaagcucccu cuucggaggg agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2262]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2262]]> acuggcgcau uuaucugauu acuuugugag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2263]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2263]]> acuggcgccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2264]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2264]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuuggaga gccaucacca gcgacuaugu cguagugggu 60 aaagcucccu cuucggaggg agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2265]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2265]]> acuggcgcau uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2266]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2266]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugugag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2267]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2267]]> acuggcgcuu uuauucugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguagugggu 60 aaagcucccu cuucggaggg agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2268]]> <![CDATA[<211> 88]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2268]]> acggcgcuuu uaucugauua cuuugagagc caucaccagc gacuaugucg uaguggguaa 60 agcucccucu ucggagggag caucaaag 88 <![CDATA[<210> 2269]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2269]]> acuggcgcuu uuauaugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2270]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2270]]> acuggcgcuu uuaucuugau uacuuugaga gccaucacca gcgacuaugu cguagugggu 60 aaagcucccu cuucggaggg agcaucaaag 90 <![CDATA[<210> 2271]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2271]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccagcaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2272]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2272]]> acuggcgcug uuaucugauu acuucgagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucgaag 89 <![CDATA[<210> 2273]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2273]]> acuggcgcuc uuaucugauu acuucgagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucgaag 89 <![CDATA[<210> 2274]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2274]]> acuggcgcuu guaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucagag 89 <![CDATA[<210> 2275]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2275]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucagag 89 <![CDATA[<210> 2276]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2276]]> acuggcgcuu ugaucugauu accuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaagg 89 <![CDATA[<210> 2277]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2277]]> acuggcgcuu ucaucugauu accuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaagg 89 <![CDATA[<210> 2278]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2278]]> acuggcgcug uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2279]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2279]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucgaag 89 <![CDATA[<210> 2280]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2280]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuucgagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucaaag 89 <![CDATA[<210> 2281]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2281]]> acuggcacuu cuaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2282]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2282]]> acuggcacuu cuaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucagag 89 <![CDATA[<210> 2283]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2283]]> acuggcaccu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2284]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2284]]> acuggcacuu guaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2285]]> <![CDATA[<211> 89]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2285]]> acuggcacuu guaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuc uucggaggga gcaucagag 89 <![CDATA[<210> 2286]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2286]]> acuggcacuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2287]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2287]]> acuggcacuu cuaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgcuuacg gacuucgguc cguaagaagc aucagag 97 <![CDATA[<210> 2288]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2288]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagag ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2289]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2289]]> acuggcacuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2290]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2290]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2291]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2291]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agcgccuuac ggacuucggu ccguaaggag caucagag 98 <![CDATA[<210> 2292]]> <![CDATA[<211> 99]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2292]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cggacuucgg uccguaagag gcaucagag 99 <![CDATA[<210> 2293]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2293]]> acgggacuuu cuaucugauu acucugaagu cccucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2294]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2294]]> accuguaguu cuaucugauu acucugacua cagucaccag cgacuauguc guauggguaa 60 agccgcuuac ggacuucggu ccguaagagg caucagag 98 <![CDATA[<210> 2295]]> <![CDATA[<211> 113]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2295]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg ugcagcauca aag 113 <![CDATA[<210> 2296]]> <![CDATA[<211> 143]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2296]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 120 cgguacaccg ugcagcauca aag 143 <![CDATA[<210> 2297]]> <![CDATA[<211> 173]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2297]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 120 cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg ugcagcauca aag 173 <![CDATA[<210> 2298]]> <![CDATA[<211> 203]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2298]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 120 cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 180 cgguacaccg ugcagcauca aag 203 <![CDATA[<210> 2299]]> <![CDATA[<211> 233]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2299]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 120 cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga 180 cgguacaccg gugggcgcag cuucggcuga cgguacaccg ugcagcauca aag 233 <![CDATA[<210> 2300]]> <![CDATA[<211> 97]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2300]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacc uagcggaggc uaggugcagc aucaaag 97 <![CDATA[<210> 2301]]> <![CDATA[<211> 118]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2301]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacc ucggcuugcu gaagcgcgca cggcaagagg cgaggugcag caucaaag 118 <![CDATA[<210> 2302]]> <![CDATA[<211> 192]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2302]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacc ucucucgacg caggacucgg cuugcugaag cgcgcacggc aagaggcgag 120 gggcggcgac uggugaguac gccaaaaauu uugacuagcg gaggcuagaa ggagagaggu 180 gcagcaucaa ag 192 <![CDATA[<210> 2303]]> <![CDATA[<211> 156]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2303]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gugcccgucu guugugucga gagacgccaa aaauuuugac uagcggaggc 120 uagaaggaga gagaugggug ccgugcagca ucaaag 156 <![CDATA[<210> 2304]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2304]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcaca uggagaggag augugcagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2305]]> <![CDATA[<211> 91]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2305]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcaca uggagaugug cagcaucaaa g 91 <![CDATA[<210> 2306]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2306]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcuugggc gcagcgucaa ugacgcugac gguacaagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2307]]> <![CDATA[<211> 145]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2307]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgucaaugac gcugacggua caggccacau gaggaucacc 120 caugugguau agugcagcau caaag 145 <![CDATA[<210> 2308]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2308]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cucaugagga ucacccauga gcugacggua caggccacau 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2309]]> <![CDATA[<211> 151]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2309]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgucaaugac gcugacggua caggccacau ggcagucgua 120 acgacgcggg ugguauagug cagcaucaaa g 151 <![CDATA[<210> 2310]]> <![CDATA[<211> 172]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2310]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag caaacauggc aguccuaagg acgcggguuu ugcugacggu 120 acaggccaca uggcagucgu aacgacgcgg gugguauagu gcagcaucaa ag 172 <![CDATA[<210> 2311]]> <![CDATA[<211> 159]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2311]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag acauggcagu cguaacgacg cgggucugac gguacaggcc 120 acaugaggau cacccaugug guauagugca gcaucaaag 159 <![CDATA[<210> 2312]]> <![CDATA[<211> 108]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2312]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu aaggaguuua uauggaaacc cuuagugcag caucaaag 108 <![CDATA[<210> 2313]]> <![CDATA[<211> 242]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2313]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucagga agcacuaugg gcgcagcguc aaugacgcug acgguacagg ccagacaauu 120 auugucuggu auagugcagc agcagaacaa uuugcugagg gcuauugagg cgcaacagca 180 ucuguugcaa cucacagucu ggggcaucaa gcagcuccag gcaagaaucc ugagcaucaa 240 ag 242 <![CDATA[<210> 2314]]> <![CDATA[<211> 98]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2314]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg cccugaagaa gggcgugcag caucaaag 98 <![CDATA[<210> 2315]]> <![CDATA[<211> 111]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2315]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gcucguguag cucauuagcu ccgagccgug cagcaucaaa g 111 <![CDATA[<210> 2316]]> <![CDATA[<211> 113]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2316]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacc cgugugcauc cgcagugucg gauccacggg ugcagcauca aag 113 <![CDATA[<210> 2317]]> <![CDATA[<211> 112]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2317]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacg gaauccauug cacuccggau uucacuaggu gcagcaucaa ag 112 <![CDATA[<210> 2318]]> <![CDATA[<211> 103]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2318]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcaca ugcaugucua agacagcaug ugcagcauca aag 103 <![CDATA[<210> 2319]]> <![CDATA[<211> 106]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2319]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcaca aaacauaagg aaaaccuaug uugugcagca ucaaag 106 <![CDATA[<210> 2320]]> <![CDATA[<211> 153]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2320]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cggacuaugg gcgcagcguc aaugacgcug acgguacagg ccagacaauu 120 auugucuggu auaguccgua agaggcauca gag 153 <![CDATA[<210> 2321]]> <![CDATA[<211> 147]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2321]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgggugggcg cagcgucaau gacgcugacg guacaggcca gacaauuauu 120 gucugguacc cguaagaggc aucagag 147 <![CDATA[<210> 2322]]> <![CDATA[<211> 153]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2322]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgguaugggc gcagcgucaa ugacgcugac gguacaggcc acaugaggau 120 cacccaugug guauaccgua agaggcauca gag 153 <![CDATA[<210> 2323]]> <![CDATA[<211> 143]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2323]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccua ugggcgcagc gucaaugacg cugacgguac aggccacaug aggaucaccc 120 augugguaua gggagcauca aag 143 <![CDATA[<210> 2324]]> <![CDATA[<211> 163]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2324]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgguaugggc gcagcucaug aggaucaccc augagcugac gguacaggcc 120 acaugaggau cacccaugug guauaccgua agaggcauca gag 163 <![CDATA[<210> 2325]]> <![CDATA[<211> 153]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2325]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccua ugggcgcagc ucaugaggau cacccaugag cugacgguac aggccacaug 120 aggaucaccc augugguaua gggagcauca aag 153 <![CDATA[<210> 2326]]> <![CDATA[<211> 159]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2326]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgguaugggc gcagcgucaa ugacgcugac gguacaggcc acauggcagu 120 cguaacgacg cgggugguau accguaagag gcaucagag 159 <![CDATA[<210> 2327]]> <![CDATA[<211> 149]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2327]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccua ugggcgcagc gucaaugacg cugacgguac aggccacaug gcagucguaa 120 cgacgcgggu gguauaggga gcaucaaag 149 <![CDATA[<210> 2328]]> <![CDATA[<211> 180]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2328]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgguaugggc gcagcaaaca uggcaguccu aaggacgcgg guuuugcuga 120 cgguacaggc cacauggcag ucguaacgac gcggguggua uaccguaaga ggcaucagag 180 <![CDATA[<210> 2329]]> <![CDATA[<211> 170]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2329]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccua ugggcgcagc aaacauggca guccuaagga cgcggguuuu gcugacggua 120 caggccacau ggcagucgua acgacgcggg ugguauaggg agcaucaaag 170 <![CDATA[<210> 2330]]> <![CDATA[<211> 167]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2330]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagccgcuua cgguaugggc gcagacaugg cagucguaac gacgcggguc ugacgguaca 120 ggccacauga ggaucaccca ugugguauac cguaagaggc aucagag 167 <![CDATA[<210> 2331]]> <![CDATA[<211> 157]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2331]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccua ugggcgcaga cauggcaguc guaacgacgc gggucugacg guacaggcca 120 caugaggauc acccaugugg uauagggagc aucaaag 157 <![CDATA[<210> 2332]]> <![CDATA[<211> 141]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2332]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgucaaugac gcugacggua caggccagac aauuauuguc 120 ugguauagug cagcaucaaa g 141 <![CDATA[<210> 2333]]> <![CDATA[<211> 54]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2333]]> Glu Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Lys Lys Leu Ser Ala Asp Asn Ala 1 5 10 15 Thr Lys Pro Val Ser Arg Ser Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu Val Arg 20 25 30 Val Met Thr Asp Asp Leu Lys Lys Arg Leu Glu Lys Arg Arg Lys Lys 35 40 45 Pro Glu Val Met Pro Gln 50 <![CDATA[<210> 2334]]> <![CDATA[<211> 44]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2334]]> Val Ile Ser Asn Asn Ala Ala Asn Asn Leu Arg Met Leu Leu Asp Asp 1 5 10 15 Tyr Thr Lys Met Lys Glu Ala Ile Leu Gln Val Tyr Trp Gln Glu Phe 20 25 30 Lys Asp Asp His Val Gly Leu Met Cys Lys Phe Ala 35 40 <![CDATA[<210> 2335]]> <![CDATA[<211> 91]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2335]]> Gln Pro Ala Ser Lys Lys Ile Asp Gln Asn Lys Leu Lys Pro Glu Met 1 5 10 15 Asp Glu Lys Gly Asn Leu Thr Thr Ala Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys 20 25 30 Gly Gln Pro Leu Phe Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Ser Glu Lys Gly 35 40 45 Lys Ala Tyr Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ala Glu His Glu 50 55 60 Lys Leu Ile Leu Leu Ala Gln Leu Lys Pro Glu Lys Asp Ser Asp Glu 65 70 75 80 Ala Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 85 90 <![CDATA[<210> 2336]]> <![CDATA[<211> 141]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2336]]> Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Lys Glu Ser Thr His 1 5 10 15 Pro Val Lys Pro Leu Ala Gln Ile Ala Gly Asn Arg Tyr Ala Ser Gly 20 25 30 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Thr Ile Ala Ser 35 40 45 Phe Leu Ser Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Ile Glu His Gln Lys Val Val 50 55 60 Lys Gly Asn Gln Lys Arg Leu Glu Ser Leu Arg Glu Leu Ala Gly Lys 65 70 75 80 Glu Asn Leu Glu Tyr Pro Ser Val Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 85 90 95 Lys Glu Gly Val Asp Ala Tyr Asn Glu Val Ile Ala Arg Val Arg Met 100 105 110 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Leu Ser Arg Asp Asp 115 120 125 Ala Lys Pro Leu Leu Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe 130 135 140 <![CDATA[<210> 2337]]> <![CDATA[<211> 177]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2337]]> Pro Val Val Glu Arg Arg Glu Asn Glu Val Asp Trp Trp Asn Thr Ile 1 5 10 15 Asn Glu Val Lys Lys Leu Ile Asp Ala Lys Arg Asp Met Gly Arg Val 20 25 30 Phe Trp Ser Gly Val Thr Ala Glu Lys Arg Asn Thr Ile Leu Glu Gly 35 40 45 Tyr Asn Tyr Leu Pro Asn Glu Asn Asp His Lys Lys Arg Glu Gly Ser 50 55 60 Leu Glu Asn Pro Lys Lys Pro Ala Lys Arg Gln Phe Gly Asp Leu Leu 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Glu Lys Lys Tyr Ala Gly Asp Trp Gly Lys Val Phe Asp 85 90 95 Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys Ile Ala Gly Leu Thr Ser His 100 105 110 Ile Glu Arg Glu Glu Ala Arg Asn Ala Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala 115 120 125 Val Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys Ala Ser Phe Val Leu Glu Arg 130 135 140 Leu Lys Glu Met Asp Glu Lys Glu Phe Tyr Ala Cys Glu Ile Gln Leu 145 150 155 160 Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly Asn Pro Phe Ala Val Glu Ala 165 170 175 Glu <![CDATA[<210> 2338]]> <![CDATA[<211> 151]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2338]]> Asn Arg Val Val Asp Ile Ser Gly Phe Ser Ile Gly Ser Asp Gly His 1 5 10 15 Ser Ile Gln Tyr Arg Asn Leu Leu Ala Trp Lys Tyr Leu Glu Asn Gly 20 25 30 Lys Arg Glu Phe Tyr Leu Leu Met Asn Tyr Gly Lys Lys Gly Arg Ile 35 40 45 Arg Phe Thr Asp Gly Thr Asp Ile Lys Lys Ser Gly Lys Trp Gln Gly 50 55 60 Leu Leu Tyr Gly Gly Gly Lys Ala Lys Val Ile Asp Leu Thr Phe Asp 65 70 75 80 Pro Asp Asp Glu Gln Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Thr Arg 85 90 95 Gln Gly Arg Glu Phe Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly 100 105 110 Leu Ile Lys Leu Ala Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Ile Tyr Asn 115 120 125 Lys Lys Ile Gly Arg Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe 130 135 140 Glu Arg Arg Glu Val Val Asp 145 150 <![CDATA[<210> 2339]]> <![CDATA[<211> 164]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2339]]> Pro Ser Asn Ile Lys Pro Val Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu 1 5 10 15 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 20 25 30 Pro Glu Phe Lys Asp Ser Ser Gly Gly Pro Thr Asp Ile Leu Arg Ile 35 40 45 Gly Glu Gly Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Ala Ile Gln Ala Ala Lys Glu 50 55 60 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Phe Ala Ser Lys 65 70 75 80 Ser Arg Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Ser Ala Arg Asp Leu 85 90 95 Phe Tyr His Ala Val Thr His Asp Ala Val Leu Val Phe Glu Asn Leu 100 105 110 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Thr Glu Arg 115 120 125 Gln Tyr Thr Lys Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 130 135 140 Gly Leu Thr Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 145 150 155 160 Ser Lys Thr Cys <![CDATA[<210> 2340]]> <![CDATA[<211> 110]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2340]]> Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Thr Ala Asp Tyr Asp Gly Met Leu 1 5 10 15 Val Arg Leu Lys Lys Thr Ser Asp Gly Trp Ala Thr Thr Leu Asn Asn 20 25 30 Lys Glu Leu Lys Ala Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys 35 40 45 Arg Gln Thr Val Glu Lys Glu Leu Ser Ala Glu Leu Asp Arg Leu Ser 50 55 60 Glu Glu Ser Gly Asn Asn Asp Ile Ser Lys Trp Thr Lys Gly Arg Arg 65 70 75 80 Asp Glu Ala Leu Phe Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val 85 90 95 Gln Glu Gln Phe Val Cys Leu Asp Cys Gly His Glu Val His 100 105 110 <![CDATA[<210> 2341]]> <![CDATA[<211> 53]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2341]]> Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 1 5 10 15 Asn Ser Asn Ser Thr Glu Phe Lys Ser Tyr Lys Ser Gly Lys Gln Pro 20 25 30 Phe Val Gly Ala Trp Gln Ala Phe Tyr Lys Arg Arg Leu Lys Glu Val 35 40 45 Trp Lys Pro Asn Ala 50 <![CDATA[<210> 2342]]> <![CDATA[<211> 56]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2342]]> Gln Glu Ile Lys Arg Ile Asn Lys Ile Arg Arg Arg Leu Val Lys Asp 1 5 10 15 Ser Asn Thr Lys Lys Ala Gly Lys Thr Gly Pro Met Lys Thr Leu Leu 20 25 30 Val Arg Val Met Thr Pro Asp Leu Arg Glu Arg Leu Glu Asn Leu Arg 35 40 45 Lys Lys Pro Glu Asn Ile Pro Gln 50 55 <![CDATA[<210> 2343]]> <![CDATA[<211> 44]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2343]]> Pro Ile Ser Asn Thr Ser Arg Ala Asn Leu Asn Lys Leu Leu Thr Asp 1 5 10 15 Tyr Thr Glu Met Lys Lys Ala Ile Leu His Val Tyr Trp Glu Glu Phe 20 25 30 Gln Lys Asp Pro Val Gly Leu Met Ser Arg Val Ala 35 40 <![CDATA[<210> 2344]]> <![CDATA[<211> 90]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2344]]> Gln Pro Ala Pro Lys Asn Ile Asp Gln Arg Lys Leu Ile Pro Val Lys 1 5 10 15 Asp Gly Asn Glu Arg Leu Thr Ser Ser Gly Phe Ala Cys Ser Gln Cys 20 25 30 Cys Gln Pro Leu Tyr Val Tyr Lys Leu Glu Gln Val Asn Asp Lys Gly 35 40 45 Lys Pro His Thr Asn Tyr Phe Gly Arg Cys Asn Val Ser Glu His Glu 50 55 60 Arg Leu Ile Leu Leu Ser Pro His Lys Pro Glu Ala Asn Asp Glu Leu 65 70 75 80 Val Thr Tyr Ser Leu Gly Lys Phe Gly Gln 85 90 <![CDATA[<210> 2345]]> <![CDATA[<211> 141]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2345]]> Arg Ala Leu Asp Phe Tyr Ser Ile His Val Thr Arg Glu Ser Asn His 1 5 10 15 Pro Val Lys Pro Leu Glu Gln Ile Gly Gly Asn Ser Cys Ala Ser Gly 20 25 30 Pro Val Gly Lys Ala Leu Ser Asp Ala Cys Met Gly Ala Val Ala Ser 35 40 45 Phe Leu Thr Lys Tyr Gln Asp Ile Ile Leu Glu His Gln Lys Val Ile 50 55 60 Lys Lys Asn Glu Lys Arg Leu Ala Asn Leu Lys Asp Ile Ala Ser Ala 65 70 75 80 Asn Gly Leu Ala Phe Pro Lys Ile Thr Leu Pro Pro Gln Pro His Thr 85 90 95 Lys Glu Gly Ile Glu Ala Tyr Asn Asn Val Val Ala Gln Ile Val Ile 100 105 110 Trp Val Asn Leu Asn Leu Trp Gln Lys Leu Lys Ile Gly Arg Asp Glu 115 120 125 Ala Lys Pro Leu Gln Arg Leu Lys Gly Phe Pro Ser Phe 130 135 140 <![CDATA[<210> 2346]]> <![CDATA[<211> 168]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2346]]> Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val 1 5 10 15 Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val 20 25 30 Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Leu Pro 35 40 45 Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg 50 55 60 Tyr Gln Phe Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu 65 70 75 80 Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys 85 90 95 Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser 100 105 110 Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys 115 120 125 Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe 130 135 140 Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly 145 150 155 160 Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu 165 <![CDATA[<210> 2347]]> <![CDATA[<211> 146]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2347]]> Asn Ser Ile Leu Asp Ile Ser Gly Phe Ser Lys Gln Tyr Asn Cys Ala 1 5 10 15 Phe Ile Trp Gln Lys Asp Gly Val Lys Lys Leu Asn Leu Tyr Leu Ile 20 25 30 Ile Asn Tyr Phe Lys Gly Gly Lys Leu Arg Phe Lys Lys Ile Lys Pro 35 40 45 Glu Ala Phe Glu Ala Asn Arg Phe Tyr Thr Val Ile Asn Lys Lys Ser 50 55 60 Gly Glu Ile Val Pro Met Glu Val Asn Phe Asn Phe Asp Asp Pro Asn 65 70 75 80 Leu Ile Ile Leu Pro Leu Ala Phe Gly Lys Arg Gln Gly Arg Glu Phe 85 90 95 Ile Trp Asn Asp Leu Leu Ser Leu Glu Thr Gly Ser Leu Lys Leu Ala 100 105 110 Asn Gly Arg Val Ile Glu Lys Thr Leu Tyr Asn Arg Arg Thr Arg Gln 115 120 125 Asp Glu Pro Ala Leu Phe Val Ala Leu Thr Phe Glu Arg Arg Glu Val 130 135 140 Leu Asp 145 <![CDATA[<210> 2348]]> <![CDATA[<211> 164]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2348]]> Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Ile Asp Arg Gly Glu 1 5 10 15 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 20 25 30 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 35 40 45 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Ala Lys Glu 50 55 60 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 65 70 75 80 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 85 90 95 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 100 105 110 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 115 120 125 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 130 135 140 Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 145 150 155 160 Ser Lys Thr Cys <![CDATA[<210> 2349]]> <![CDATA[<211> 110]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2349]]> Ser Asn Cys Gly Phe Thr Ile Thr Ser Ala Asp Tyr Asp Arg Val Leu 1 5 10 15 Glu Lys Leu Lys Lys Thr Ala Thr Gly Trp Met Thr Thr Ile Asn Gly 20 25 30 Lys Glu Leu Lys Val Glu Gly Gln Ile Thr Tyr Tyr Asn Arg Tyr Lys 35 40 45 Arg Gln Asn Val Val Lys Asp Leu Ser Val Glu Leu Asp Arg Leu Ser 50 55 60 Glu Glu Ser Val Asn Asn Asp Ile Ser Ser Trp Thr Lys Gly Arg Ser 65 70 75 80 Gly Glu Ala Leu Ser Leu Leu Lys Lys Arg Phe Ser His Arg Pro Val 85 90 95 Gln Glu Lys Phe Val Cys Leu Asn Cys Gly Phe Glu Thr His 100 105 110 <![CDATA[<210> 2350]]> <![CDATA[<211> 58]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2350]]> Ala Asp Glu Gln Ala Ala Leu Asn Ile Ala Arg Ser Trp Leu Phe Leu 1 5 10 15 Arg Ser Gln Glu Tyr Lys Lys Tyr Gln Thr Asn Lys Thr Thr Gly Asn 20 25 30 Thr Asp Lys Arg Ala Phe Val Glu Thr Trp Gln Ser Phe Tyr Arg Lys 35 40 45 Lys Leu Lys Glu Val Trp Lys Pro Ala Val 50 55 <![CDATA[<210> 2351]]> <![CDATA[<211> 168]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2351]]> Pro Leu Val Glu Arg Gln Ala Asn Glu Val Asp Trp Trp Asp Met Val 1 5 10 15 Cys Asn Val Lys Lys Leu Ile Asn Glu Lys Lys Glu Asp Gly Lys Val 20 25 30 Phe Trp Gln Asn Leu Ala Gly Tyr Lys Arg Gln Glu Ala Leu Arg Pro 35 40 45 Tyr Leu Ser Ser Glu Glu Asp Arg Lys Lys Gly Lys Lys Phe Ala Arg 50 55 60 Tyr Gln Leu Gly Asp Leu Leu Leu His Leu Glu Lys Lys His Gly Glu 65 70 75 80 Asp Trp Gly Lys Val Tyr Asp Glu Ala Trp Glu Arg Ile Asp Lys Lys 85 90 95 Val Glu Gly Leu Ser Lys His Ile Lys Leu Glu Glu Glu Arg Arg Ser 100 105 110 Glu Asp Ala Gln Ser Lys Ala Ala Leu Thr Asp Trp Leu Arg Ala Lys 115 120 125 Ala Ser Phe Val Ile Glu Gly Leu Lys Glu Ala Asp Lys Asp Glu Phe 130 135 140 Cys Arg Cys Glu Leu Lys Leu Gln Lys Trp Tyr Gly Asp Leu Arg Gly 145 150 155 160 Lys Pro Phe Ala Ile Glu Ala Glu 165 <![CDATA[<210> 2352]]> <![CDATA[<211> 164]]> <![CDATA[<212> PRT]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> CasX域序列]]> <![CDATA[<400> 2352]]> Ser Ser Asn Ile Lys Pro Met Asn Leu Ile Gly Val Asp Arg Gly Glu 1 5 10 15 Asn Ile Pro Ala Val Ile Ala Leu Thr Asp Pro Glu Gly Cys Pro Leu 20 25 30 Ser Arg Phe Lys Asp Ser Leu Gly Asn Pro Thr His Ile Leu Arg Ile 35 40 45 Gly Glu Ser Tyr Lys Glu Lys Gln Arg Thr Ile Gln Ala Lys Lys Glu 50 55 60 Val Glu Gln Arg Arg Ala Gly Gly Tyr Ser Arg Lys Tyr Ala Ser Lys 65 70 75 80 Ala Lys Asn Leu Ala Asp Asp Met Val Arg Asn Thr Ala Arg Asp Leu 85 90 95 Leu Tyr Tyr Ala Val Thr Gln Asp Ala Met Leu Ile Phe Glu Asn Leu 100 105 110 Ser Arg Gly Phe Gly Arg Gln Gly Lys Arg Thr Phe Met Ala Glu Arg 115 120 125 Gln Tyr Thr Arg Met Glu Asp Trp Leu Thr Ala Lys Leu Ala Tyr Glu 130 135 140 Gly Leu Pro Ser Lys Thr Tyr Leu Ser Lys Thr Leu Ala Gln Tyr Thr 145 150 155 160 Ser Lys Thr Cys <![CDATA[<210> 2353]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2353]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag caccugagga ucacccaggu gcugacggua caggccaccu 120 gaggaucacc caggugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2354]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2354]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgcaugagga ucacccaugc gcugacggua caggccgcau 120 gaggaucacc caugcgguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2355]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2355]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgccugagga ucacccaggc gcugacggua caggccgccu 120 gaggaucacc caggcgguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2356]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2356]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgccugagca ucagccaggc gcugacggua caggccgccu 120 gagcaucagc caggcgguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2357]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2357]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagca ucagccaugu gcugacggua caggccacau 120 gagcaucagc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2358]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2358]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagua ucaaccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaguaucaac caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2359]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2359]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagaa ucagccaugu gcugacggua caggccacau 120 gagaaucagc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2360]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2360]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cccuugagga ucacccaugu gcugacggua caggccccuu 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2361]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2361]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacuugagga ucacccaugu gcugacggua caggccacuu 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2362]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2362]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag caccugagga ucacccaugu gcugacggua caggccaccu 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2363]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2363]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga ucaccuaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggaucacc uaugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2364]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2364]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacauuagga ucaccaaugu gcugacggua caggccacau 120 uaggaucacc aaugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2365]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2365]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacauuagga ucaccgaugu gcugacggua caggccacau 120 uaggaucacc gaugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2366]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2366]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacauuagga ucaccuaugu gcugacggua caggccacau 120 uaggaucacc uaugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2367]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2367]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga uuacccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggauuacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2368]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2368]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga uaacccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggauaacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2369]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2369]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga ugacccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggaugacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2370]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2370]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga ccacccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggaccacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2371]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2371]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cagaugagga ucacccaugg gcugacggua caggccagau 120 gaggaucacc caugggguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2372]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2372]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugggga ucacccaugu gcugacggua caggccacau 120 ggggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2373]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2373]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cacaugagga ucacccaugu gcugacggua caggccacau 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau caaag 155 <![CDATA[<210> 2374]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2374]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucaccu gaggaucacc caggugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2375]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2375]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucgcau gaggaucacc caugcgagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2376]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2376]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucgccu gaggaucacc caggcgagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2377]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2377]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucgccu gagcaucagc caggcgagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2378]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2378]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gagcaucagc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2379]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2379]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaguaucaac caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2380]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2380]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gagaaucagc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2381]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2381]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucccuu gaggaucacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2382]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2382]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacuu gaggaucacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2383]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2383]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucaccu gaggaucacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2384]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2384]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggaucacc uaugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2385]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2385]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau uaggaucacc aaugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2386]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2386]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau uaggaucacc gaugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2387]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2387]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau uaggaucacc uaugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2388]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2388]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggauuacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2389]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2389]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggauaacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2390]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2390]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggaugacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2391]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2391]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggaccacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2392]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2392]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucagau gaggaucacc caugggagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2393]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2393]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau ggggaucacc caugugagca ucaaag 96 <![CDATA[<210> 2394]]> <![CDATA[<211> 96]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2394]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcucacau gaggaucacc caugugagca ucagag 96 <![CDATA[<210> 2395]]> <![CDATA[<211> 145]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2395]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cgucaaugac gcugacggua caggccacau gaggaucacc 120 caugugguau agugcagcau cagag 145 <![CDATA[<210> 2396]]> <![CDATA[<211> 155]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2396]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag cucaugagga ucacccauga gcugacggua caggccacau 120 gaggaucacc caugugguau agugcagcau cagag 155 <![CDATA[<210> 2397]]> <![CDATA[<211> 159]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2397]]> acuggcgcuu cuaucugauu acucugagcg ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu augggcgcag acauggcagu cguaacgacg cgggucugac gguacaggcc 120 acaugaggau cacccaugug guauagugca gcaucagag 159 <![CDATA[<210> 2398]]> <![CDATA[<211> 145]]> <![CDATA[<212> RNA]]> <![CDATA[<213> 人工序列]]> <![CDATA[<220> ]]> <![CDATA[<223> 支架變異體]]> <![CDATA[<400> 2398]]> acuggcgcuu uuaucugauu acuuugagag ccaucaccag cgacuauguc guagugggua 60 aagcugcacu auggggccac augaggauca cccauguggu guacagcgca gcgucaauga 120 cgcugacgau agugcagcau caaag 145
Claims (191)
- 一種導引RNA (gRNA)支架,其包含與選自由SEQ ID NO: 2292、2291、2307、2281-2290、2293-2306、2308-2332及2353-2398組成之群的序列中之任一者具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%序列一致性的序列。
- 如請求項1之gRNA支架,其包含選自由SEQ ID NO: 2292、2291、2307、2281-2290、2293-2306、2308-2332及2353-2398組成之群的序列。
- 如請求項1之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2238具有一或多個修飾之序列,其中該一或多個修飾產生經改良之特徵。
- 如請求項3之gRNA支架,其中該一或多個修飾包含如表19中所闡述之一或多個核苷酸取代、插入及/或缺失。
- 如請求項3或請求項4之gRNA支架,其中該經改良之特徵係視情況在活體外分析中選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之與第2類第V型CRISPR蛋白的結合親和力。
- 如請求項3至5中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架在活體外分析中與SEQ ID NO: 2238之gRNA支架之分數相比展現高至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5之提高的富集分數(log 2)。
- 如請求項1之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239具有一或多個修飾之序列,其中該一或多個修飾產生經改良之特徵。
- 如請求項7之gRNA支架,其中該一或多個修飾包含如表20中所闡述之一或多個核苷酸取代、插入及/或缺失。
- 如請求項7或請求項8之gRNA支架,其中該經改良之特徵係視情況在活體外分析中選自由以下組成之群的一或多種功能特性:增加之編輯活性、增加之假結莖穩定性、增加之三聯體區穩定性、增加之支架莖穩定性、延伸莖穩定性、減少之脫靶摺疊中間物及增加之與第2類第V型CRISPR蛋白的結合親和力。
- 如請求項7至9中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架在活體外分析中與SEQ ID NO: 2239之gRNA支架之分數相比展現高至少約1.2、至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3或至少約3.5之提高的富集分數(log 2)。
- 如請求項1之gRNA支架,其在相對於SEQ ID NO: 2239之序列之位置處包含一或多個修飾,該等位置選自由C9、U11、C17、U24、A29、U54、G64、A88及A95組成之群。
- 如請求項11之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239之序列之一或多個修飾,該一或多個修飾選自由以下組成之群:C9U、U11C、C17G、U24C、A29C、位置54處G之插入、位置64處C之插入、A88G及A95G。
- 如請求項12之gRNA支架,其包含相對於SEQ ID NO: 2239之序列的修飾,該等修飾由C9U、U11C、C17G、U24C、A29C、位置54處G之插入、位置64處C之插入、A88G及A95G組成。
- 如請求項7至13中任一項之gRNA支架,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群:假結莖穩定性、三聯體區穩定性、支架泡狀結構穩定性、延伸莖穩定性及與第2類第V型CRISPR蛋白之結合親和力。
- 如請求項14之gRNA支架,其中相對於SEQ ID NO: 2239之序列的該位置64處C之插入及該A88G取代解決該延伸莖之不對稱凸出元件,從而增強該gRNA支架之該延伸莖的穩定性。
- 如請求項14之gRNA支架,其中U11C、U24C及A95G之取代增加該gRNA支架之三聯體區之穩定性。
- 如請求項14之gRNA支架,其中該A29C之取代增加該假結莖之穩定性。
- 如請求項1或請求項2之gRNA支架,其中該gRNA支架在該延伸莖中包含一或多個異源RNA序列。
- 如請求項18之gRNA支架,其中該異源RNA係選自由以下組成之群:MS2髮夾、Qβ髮夾、U1髮夾II、Uvsx髮夾及PP7莖環或其序列變異體。
- 如請求項18或請求項19之gRNA支架,其中該異源RNA序列增加該gRNA之穩定性。
- 如請求項18或請求項19之gRNA支架,其中該異源RNA能夠結合蛋白質、RNA、DNA或小分子。
- 如請求項18至21中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架包含Rev反應元件(RRE)或其部分。
- 如請求項22之gRNA支架,其中該RRE或其部分係選自由以下組成之群:具有序列UGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACA (SEQ ID NO: 1280)之RRE之莖IIB、具有序列CAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUG (SEQ ID NO: 1282)之RRE之莖II-V、具有序列GCACUAUGGGCGCAGCGUCAAU GACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGC (SEQ ID NO: 1281)之RRE之莖II、具有序列GCUGACGGUACAGGC (SEQ ID NO: 1284)之莖IIB之Rev結合元件(RBE),及具有序列AGGAGCUUUGUUCCUUGGGUUCUUGGGAGCAGCAGGAAGCACUAUGGGCGCAGCGUCAAUGACGCUGACGGUACAGGCCAGACAAUUAUUGUCUGGUAUAGUGCAGCAGCAGAACAAUUUGCUGAGGGCUAUUGAGGCGCAACAGCAUCUGUUGCAACUCACAGUCUGGGGCAUCAAGCAGCUCCAGGCAAGAAUCCUGGCUGUGGAAAGAUACCUAAAGGAUCAACAGCUCCU (SEQ ID NO: 1283)之全長RRE。
- 如請求項1至23中任一項之gRNA支架,其中該gRNA支架包含一或多個胸腺嘧啶(T)。
- 一種gRNA,其包含如請求項1至24中任一項之gRNA支架,及在該gRNA支架之3'端處與目標核酸序列互補之靶向序列。
- 如請求項25之gRNA,其中該靶向序列具有10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30個核苷酸。
- 如請求項26之gRNA,其中該靶向序列具有18、19或20個核苷酸。
- 如請求項25至27中任一項之gRNA,其中該gRNA能夠與第2類第V型CRISPR蛋白形成核糖核蛋白(RNP)複合物。
- 一種工程化之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含: a.NTSB域,其包含QPASKKIDQNKLKPEMDEKGNLTT AGFACSQCGQPLFVYKLEQVSEKGKAYTNYFGRCNVAEHEKLILLAQLKPEKDSDEAVTYSLGKFGQ (SEQ ID NO: 2335)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列; b.螺旋形I-II域,其包含RALDFYSIHVTKESTHPVKPLAQIA GNRYASGPVGKALSDACMGTIASFLSKYQDIIIEHQKVVKGNQKRLESLRELAGKENLEYPSVTLPPQPHTKEGVDAYNEVIARVRMWVNLNLWQKLKLSRDDAKPLLRLKGFPSF (SEQ ID NO: 2336)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列; c.螺旋形II域,其包含PLVERQANEVDWWDMVCNVKKLIN EKKEDGKVFWQNLAGYKRQEALRPYLSSEEDRKKGKKFARYQLGDLLLHLEKKHGEDWGKVYDEAWERIDKKVEGLSKHIKLEEERRSEDAQSKAALTDWLRAKASFVIEGLKEADKDEFCRCELKLQKWYGDLRGKPFAIEAE (SEQ ID NO: 2351)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列;及 d.RuvC-I域,其包含SSNIKPMNLIGVDRGENIPAVIALTDP EGCPLSRFKDSLGNPTHILRIGESYKEKQRTIQAKKEVEQRRAGGYSRKYASKAKNLADDMVRNTARDLLYYAVTQDAMLIFENLSRGFGRQGKRTFMAERQYTRMEDWLTAKLAYEGLPSKTYLSKTLAQYTSKTC (SEQ ID NO: 2352)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含OBD-I域,該OBD-I域包含QEIKRINKIRRRLVKDSNTKKAGK TGPMKTLLVRVMTPDLRERLENLRKKPENIPQ (SEQ ID NO: 2342)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29或請求項30之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含OBD-II域,該OBD-II域包含NSILDISGFSKQYNCA FIWQKDGVKKLNLYLIINYFKGGKLRFKKIKPEAFEANRFYTVINKKSGEIVPMEVNFNFDDPNLIILPLAFGKRQGREFIWNDLLSLETGSLKLANGRVIEKTLYNRRTRQDEPALFVALTFERREVLD (SEQ ID NO: 2347)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29至31中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含螺旋形I-I域,該螺旋形I-I域包含PISNTSRANLNKLLTDYTEMKKAILHVYWEEFQKDPVGLMSRVA (SEQ ID NO: 2343)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29至32中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含TSL域,該TSL域包含SNCGFTITSADYDRVLEK LKKTATGWMTTINGKELKVEGQITYYNRYKRQNVVKDLSVELDRLSEESVNNDISSWTKGRSGEALSLLKKRFSHRPVQEKFVCLNCGFETH (SEQ ID NO: 2349)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29至33中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該CRISPR蛋白包含RuvC-II域,該RuvC-II域包含ADEQAALNIARSWL FLRSQEYKKYQTNKTTGNTDKRAFVETWQSFYRKKLKEVWKPAV (SEQ ID NO: 2350)之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項34之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含SEQ ID NO: 416之序列,或與其具有至少80%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%一致性之序列。
- 如請求項29至35中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白包含一或多個域中之至少一個修飾。
- 如請求項36之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該至少一個修飾包含: a.域中之至少一個胺基酸取代; b.域中之至少一個胺基酸缺失; c.域中之至少一個胺基酸插入;或 d.(a)-(c)之任何組合。
- 如請求項36或請求項37之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該NTSB域中相對於SEQ ID NO: 2335的一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:P2、S4、Q9、E15、G20、G33、L41、Y51、F55、L68、A70、E75、K88及G90。
- 如請求項38之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2335,在該NTSB域中之一或多個胺基酸位置處的一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處G之插入、位置4處I之插入、位置4處L之插入、Q9P、E15S、G20D、位置30處S之缺失、G33T、L41A、Y51T、F55V、L68D、L68E、L68K、A70Y、A70S、E75A、E75D、E75P、K88Q及G90Q。
- 如請求項36至39中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該螺旋形I-II域中相對於SEQ ID NO: 2336的一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I24、A25、Y29、G32、G44、S48、S51、Q54、I56、V63、S73、L74、K97、V100、M112、L116、G137、F138及S140。
- 如請求項40之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2336,該螺旋形I-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置24處T之插入、位置25處C之插入、Y29F、G32Y、G32N、G32H、G32S、G32T、G32A、G32V、位置32處G之缺失、G32S、G32T、G44L、G44H、S48H、S48T、S51T、Q54H、I56T、V63T、S73H、L74Y、K97G、K97S、K97D、K97E、V100L、M112T、M112W、M112R、M112K、L116K、G137R、G137K、G137N、位置138處Q之插入及S140Q。
- 如請求項36至41中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該螺旋形II域中相對於SEQ ID NO: 2351的一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:L2、V3、E4、R5、Q6、A7、E9、V10、D11、W12、W13、D14、M15、V16、C17、N18、V19、K20、L22、I23、E25、K26、K31、Q35、L37、A38、K41、R 42、Q43、E44、L46、K57、Y65、G68、L70、L71、L72、E75、G79、D81、W82、K84、V85、Y86、D87、I93、K95、K96、E98、L100、K102、I104、K105、E109、R110、D114、K118、A120、L121、W124、L125、R126、A127、A129、I133、E134、G135、L136、E138、D140、K141、D142、E143、F144、C145、C147、E148、L149、K150、L151、Q152、K153、L158、E166及A167。
- 如請求項42之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2351,該螺旋形II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處A之插入、位置2處H之插入、位置2處L之缺失及位置3處V之缺失、V3E、V3Q、V3F、位置3處V之缺失、位置3處D之插入、V3P、E4P、位置4處E之缺失、E4D、E4L、E4R、R5N、Q6V、位置6處Q之插入、位置7處G之插入、位置9處H之插入、位置9處A之插入、VD10、位置0處T1之插入、位置10處V之缺失、位置10處F之插入、位置11處D之插入、位置11處D之缺失、D11S、位置12處W之缺失、W12T、W12H、位置12處P之插入、位置13處Q之插入、位置12處G之插入、位置13處R之插入、W13P、W13D、位置13處D之插入、W13L、位置14處P之插入、位置14處D之插入、位置14處D之缺失及位置15處M之缺失、位置15處M之缺失、位置16處T之插入、位置17處P之插入、N18I、V19N、V19H、K20D、L22D、I23S、E25C、E25P、位置25處G之插入、K26T、K27E、K31L、K31Y、Q35D、Q35P、位置37處S之插入、位置37處L之缺失及位置38處A之缺失、K41L、位置42處R之插入、位置43處Q之缺失及位置44處E之缺失、L46N、K57Q、Y65T、G68M、L70V、L71C、L72D、L72N、L72W、L72Y、E75F、E75L、E75Y、G79P、位置79處E之插入、位置81處T之插入、位置81處R之插入、位置81處W之插入、位置81處Y之插入、位置82處W之插入、位置82處Y之插入、W82G、W82R、K84D、K84H、K84P、K84T、V85L、V85A、位置85處L之插入、Y86C、D87G、D87M、D87P、I93C、K95T、K96R、E98G、L100A、K102H、I104T、I104S、I104Q、K105D、位置109處K之插入、E109L、R110D、位置110處R之缺失、D114E、位置114處D之插入、K118P、A120R、L121T、W124L、L125C、R126D、A127E、A127L、A129T、A129K、I133E、位置133處C之插入、位置134處S之插入、位置134處G之插入、位置135處R之插入、G135P、L136K、L136D、L136S、L136H、位置138處E之缺失、D140R、位置140處D之插入、位置141處P之插入、位置142處D之插入、位置143處E之缺失+位置144處F之缺失、位置143處Q之插入、F144K、位置144處F之缺失、位置144處F之缺失及位置145處C之缺失、C145R、位置145處G之插入、C145K、C147D、位置148處V之插入、E148D、位置149處H之插入、L149R、K150R、L151H、Q152C、K153P、L158S、E166L及位置167處F之插入。
- 如請求項36至43中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該RuvC-I域中相對於SEQ ID NO: 2352之一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置選自由以下組成之群:I4、K5、P6、M7、N8、L9、V12、G49、K63、K80、N83、R90、M125及L146。
- 如請求項44之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2351,該RuvC-I域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置4處I之插入、位置5處S之插入、位置6處T之插入、位置6處N之插入、位置7處R之插入、位置7處K之插入、位置8處H之插入、位置8處S之插入、V12L、G49W、G49R、S51R、S51K、K62S、K62T、K62E、V65A、K80E、N83G、R90H、R90G、M125S、M125A、L137Y、位置137處P之插入、位置141處L之缺失、L141R、L141D、位置142處Q之插入、位置143處R之插入、位置143處N之插入、E144N、位置146處P之插入、L146F、P147A、K149Q、T150V、位置152處R之插入、H153之插入、T155Q、位置155處H之插入、位置155處R之插入、位置156處L之插入、位置156處L之缺失、位置156處W之插入、位置157處A之插入、位置157處F之插入、A157S、Q158K、位置159處Y之缺失、T160Y、T160F、位置161處I之插入、S161P、T163P、位置163處N之插入、C164K及C164M。
- 如請求項36至45中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該OBD-I域中相對於SEQ ID NO: 2342之一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:I3、K4、R5、I6、N7、K8、K15、D16、N18、P27、M28、V33、R34、M36、R41、L47、R48、E52、P55及Q56。
- 如請求項46之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2342,該OBD-I域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置3處G之插入、I3G、I3E、位置4處G之插入、K4G、K4P、K4S、K4W、K4W、R5P、位置5處P之插入、位置5處G之插入、R5S、位置5處S之插入、R5A、R5P、R5G、R5L、I6A、I6L、位置6處G之插入、N7Q、N7L、N7S、K8G、K15F、D16W、位置16處F之插入、F18之插入、位置27處P之插入、M28P、M28H、V33T、R34P、M36Y、R41P、L47P、位置48處P之插入、E52P、位置55處P之插入、位置55處P之缺失及位置56處Q之缺失、Q56S、Q56P、位置56處D之插入、位置56處T之插入及Q56P。
- 如請求項36至47中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該OBDII域中相對於SEQ ID NO: 2347之一或多個胺基酸位置處的修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:S2、I3、L4、K11、V24、K37、R42、A53、T58、K63、M70、I82、Q92、G93、K110、L121、R124、R141、E143、V144及L145。
- 如請求項48之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2342,該OBD-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置2處S之缺失、I3R、I3K、位置3處I之缺失及L4之缺失、位置4處L之缺失、K11T、位置24處P之插入、K37G、R42E、位置53處S之插入、位置58處R之插入、位置63處K之缺失、M70T、I82T、Q92I、Q92F、Q92V、Q92A、位置93處A之插入、K110Q、R115Q、L121T、位置124處A之插入、位置141處R之插入、位置143處D之插入、位置143處A之插入、位置144處W之插入及位置145處A之插入。
- 如請求項36至49中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含在該TSL域中相對於SEQ ID NO: 2349之一或多個胺基酸位置處之修飾,該一或多個胺基酸位置係選自由以下組成之群:S1、N2、C3、G4、F5、I7、K18、V58、S67、T76、G78、S80、G81、E82、S85、V96及E98。
- 如請求項50之第2類第V型CRISPR蛋白,其中相對於SEQ ID NO: 2349,該OBD-II域中之一或多個胺基酸位置處之一或多個修飾係選自由以下組成之群:位置1處M之插入、位置2處N之缺失、位置2處V之插入、C3S、位置4處G之插入、位置4處W之插入、F5P、位置7處W之插入、K18G、V58D、位置67處A之插入、T76E、T76D、T76N、G78D、位置80處S之缺失、位置81處G之缺失、位置82處E之插入、位置82處N之插入、S85I、V96C、V96T及E98D。
- 如請求項29至51中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其相對於SEQ ID NO: 2展現經改良之特徵,其中該經改良之特徵包含增加之對gRNA之結合親和力、增加之對該目標核酸之結合親和力、提高之在編輯該目標核酸中利用較大範圍PAM序列之能力、經改良之該目標核酸之展開、增加之編輯活性、提高之編輯效率、經改良之裂解該目標核酸之編輯特異性、減少之脫靶編輯或裂解該目標核酸、增加之可編輯之真核基因體之百分比、增加之核酸酶之活性、增加之用於雙股裂解之目標股負載、減少之用於單股切割之目標股負載、增加之DNA之非目標股結合、增加之蛋白質穩定性、增加之蛋白質:gRNA (RNP)複合物穩定性及經改良之融合特徵。
- 如請求項52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含TTC、ATC、GTC或CTC PAM序列之目標核酸序列處增加之裂解活性。
- 如請求項53之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含相對於SEQ ID NO: 416之序列的裂解活性,在包含ATC或CTC PAM序列之目標核酸序列處增加之裂解活性。
- 如請求項54之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列的分數相比,該增加之裂解活性為至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5、至少約6、至少約7、至少約8或更大的富集分數(log 2)。
- 如請求項54之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含CTC PAM序列之目標核酸序列處相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之裂解活性。
- 如請求項56之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列的分數相比,該增加之裂解活性為至少約2、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6或更大的富集分數(log 2)。
- 如請求項53之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含在包含TTC PAM序列之目標核酸序列處相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之裂解活性。
- 如請求項58之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列相比,該增加之裂解活性為至少約1.5、至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6 log 2或更大的富集分數。
- 如請求項52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含相對於SEQ ID NO: 416之序列增加之對該目標核酸序列裂解之特異性。
- 如請求項60之第2類第V型CRISPR蛋白,其中在活體外分析中,與SEQ ID NO: 416之序列相比,該增加之特異性為至少約2.0、至少約2.5、至少約3、至少約3.5、至少約4、至少約4.5、至少約5或至少約6 log 2或更大的富集分數。
- 如請求項52之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該經改良之特徵包含減少之該目標核酸序列之脫靶裂解。
- 如請求項29至62中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白具有選自由以下組成之群的序列:如表3中所闡述之SEQ ID NO: 415-592及1147-1231之序列,或與其具有至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%,或至少約95%、或至少約96%、或至少約97%、或至少約98%、或至少約99%序列一致性的序列。
- 如請求項29至62中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表3中所闡述之選自由SEQ ID NO: 415-592及1147-1231組成之群的序列。
- 如請求項29至64中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含一或多個核定位信號(NLS)。
- 如請求項65之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS係選自由以下組成之序列群:PKKKRKV (SEQ ID NO: 352)、KRPAATKKAGQAKKKK (SEQ ID NO: 353)、PAAKRVKLD (SEQ ID NO: 354)、RQRRNELKRSP (SEQ ID NO: 355)、NQSSNFGPMKGGN FGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY (SEQ ID NO: 356)、RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV (SEQ ID NO: 357)、VSRKRPRP (SEQ ID NO: 358)、PPKKARED (SEQ ID NO: 359)、PQPKKKPL (SEQ ID NO: 360)、SALIKKKKKMAP (SEQ ID NO: 361)、DRLRR (SEQ ID NO: 362)、PKQKKRK (SEQ ID NO: 363)、RKLKKKIKKL (SEQ ID NO: 364)、REKKKFLKRR (SEQ ID NO: 365)、KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK (SEQ ID NO: 366)、RKCLQAGMNLEARKTKK (SEQ ID NO: 367)、PRPRKIPR (SEQ ID NO: 368)、PPRKKRTVV (SEQ ID NO: 369)、NLSKKKKRKREK (SEQ ID NO: 370)、RRPSRPFRKP (SEQ ID NO: 371)、KRPRSPSS (SEQ ID NO: 372)、KRGINDRNFWRGENERKTR (SEQ ID NO: 373)、PRPPKMARYDN (SEQ ID NO: 374)、KRSFSKAF (SEQ ID NO: 375)、KLKIKRPVK (SEQ ID NO: 376)、PKKKRKVPPPPAAKRVKLD (SEQ ID NO: 377)、PKTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 378)、SRRRKANPTKLSENAKKLAKEVEN (SEQ ID NO: 379)、KTRRRPRRSQRKRPPT (SEQ ID NO: 380)、RRKKRRPRRKKRR (SEQ ID NO: 381)、PKKKSRKPKKKSRK (SEQ ID NO: 382)、HKKKHPDASVNFSEFSK (SEQ ID NO: 383)、QRPGPYDRPQRPGPYDRP (SEQ ID NO: 384)、LSPSLSPLLSPSLSPL (SEQ ID NO: 385)、RGKGGKGLGKGGAKRHRK (SEQ ID NO: 386)、PKRGRGRPKRGRGR (SEQ ID NO: 387)、PKKKRKVPPPPKKKRKV (SEQ ID NO: 389)、PAKRARRGYKC (SEQ ID NO: 63)、KLGPRKATGRW (SEQ ID NO: 64)、PRRKREE (SEQ ID NO: 65)、PYRGRKE (SEQ ID NO: 66)、PLRKRPRR (SEQ ID NO: 67)、PLRKRPRRGSPLRKRPRR (SEQ ID NO:68)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKV (SEQ ID NO:69)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVGIHGVPAA (SEQ ID NO:70)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEFESPKKKRKVAEAAAKEAAA KEAAAKA (SEQ ID NO:71)、PAAKRVKLDGGKRTADGSEF ESPKKKRKVPG (SEQ ID NO:72)、KRKGSPERGERKRHW (SEQ ID NO:73)、KRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:74)及PKKKRKVGGSKRTADSQHSTPPKTKRKVEFEPKKKRKV (SEQ ID NO:75),且視情況其中該一或多個NLS利用連接肽與該第2類第V型CRISPR蛋白連接或與相鄰NLS連接,其中該連接肽係選自由以下組成之群:SR、RS、(G)n (SEQ ID NO: 1023)、(GS)n (SEQ ID NO: 1024)、(GSGGS)n (SEQ ID NO: 399)、(GGSGGS)n (SEQ ID NO: 400)、(GGGS)n (SEQ I DNO: 401)、GGSG (SEQ ID NO: 402)、GGSGG (SEQ ID NO: 403)、GSGSG (SEQ ID NO: 404)、GSGGG (SEQ ID NO: 405)、GGGSG (SEQ ID NO: 406)、GSSSG (SEQ ID NO: 407)、GPGP (SEQ ID NO: 408)、GGP、PPP、PPAPPA (SEQ ID NO: 409)、PPPG (SEQ ID NO: 24)、PPPGPPP (SEQ ID NO: 410)、PPP(GGGS)n (SEQ ID NO: 25)、(GGGS)nPPP (SEQ ID NO: 26)、AEAAAKEAAAKEAAAKA (SEQ ID NO: 1025)及TPPKTKRKVEFE (SEQ ID NO: 27),其中n為1至5。
- 如請求項65或請求項66之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS定位於該蛋白質之C端處或其附近。
- 如請求項65或請求項66之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該一或多個NLS定位於該蛋白質之N端處或其附近。
- 如請求項65或請求項66之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含至少兩個NLS,其中該至少兩個NLS定位於該蛋白質之N端處或其附近及定位於C端處或其附近。
- 如請求項29至69中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該第2類第V型CRISPR蛋白能夠與gRNA形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
- 如請求項70之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP與SEQ ID NO: 1-3中之任一者之參考蛋白與SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP相比展現至少一或多個經改良之特徵。
- 如請求項71之第2類第V型CRISPR蛋白質,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群:增加之對導引核酸(gRNA)之結合親和力;增加之對目標核酸之結合親和力;提高之在目標核酸之編輯中利用較大範圍之一或多種PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;經增加之該目標核酸展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之該目標核酸之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之該目標核酸之脫靶裂解;增加之非目標核酸股之結合;及增加之蛋白質:gRNA複合物(RNP)穩定性。
- 如請求項71或請求項72之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP之經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP增加至少約1.1至約100,000倍。
- 如請求項71或請求項72之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該RNP之經改良之特徵相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及SEQ ID NO: 4或5之gRNA之RNP增加至少約10倍、至少約100倍、至少約1,000倍或至少約10,000倍。
- 如請求項71至74中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白,其中與SEQ ID NO: 2之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或5之gRNA之RNP相比,該RNP之經改良之特徵包含在編輯效率方面提高1.1至100倍。
- 一種基因編輯對,其包含gRNA及第2類第V型CRISPR蛋白,該對包含: a.如請求項25至28中任一項之gRNA;及 b.如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
- 如請求項76之基因編輯對,其中該gRNA及該第2類第V型CRISPR蛋白能夠形成核糖核蛋白複合物(RNP)。
- 如請求項76或請求項77之基因編輯對,其中該gRNA及該第2類第V型CRISPR蛋白作為核糖核蛋白複合物(RNP)締合在一起。
- 如請求項77或請求項78之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之RNP與SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列之gRNA之RNP相比展現至少一或多個經改良之特徵。
- 如請求項79之基因編輯對,其中該經改良之特徵係選自由以下組成之群中之一或多者:增加之該第2類第V型CRISPR蛋白與該gRNA之結合親和力;增加之對目標核酸之結合親和力;提高之在目標核酸之編輯中利用較大範圍之一或多個PAM序列,包括ATC、CTC、GTC或TTC的能力;增加之該目標核酸展開;增加之編輯活性;提高之編輯效率;增加之該目標核酸之編輯特異性;增加之核酸酶活性;增加之用於雙股裂解之目標股負載;減少之用於單股切割之目標股負載;減少之該目標核酸之脫靶裂解;增加之非目標核酸股之結合;增加之蛋白質:gRNA複合物(RNP)穩定性;及增加之融合特徵。
- 如請求項79或請求項80之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之RNP之該經改良之特徵在可比較的活體外分析系統中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列的gRNA之RNP增加至少約1.1至約100倍或更多倍。
- 如請求項79或請求項80之基因編輯對,其中該第2類第V型CRISPR蛋白之該經改良之特徵在可比較的活體外分析系統中相對於SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及包含SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之序列的gRNA增加至少約1.1、至少約2、至少約10、至少約100倍或更多倍。
- 如請求項77至82中任一項之基因編輯對,其中與在可比較的分析系統中包含SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO: 3之參考蛋白及參考gRNA之RNP的編輯效率及/或結合相比,當PAM序列TTC、ATC、GTC、或CTC中之任一者位於距與該gRNA之靶向序列具有一致性之原間隔子之非目標股之5'為1個核苷酸處時,包含該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP在細胞分析系統中展現更大的編輯效率及/或該目標核酸中之目標核酸序列之結合。
- 如請求項83之基因編輯對,其中該PAM序列為TTC。
- 如請求項83之基因編輯對,其中該PAM序列為ATC。
- 如請求項83之基因編輯對,其中該PAM序列為CTC。
- 如請求項83之基因編輯對,其中該PAM序列為GTC。
- 如請求項83至87中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,包含該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP與SEQ ID NO:1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP的結合親和力相比展現大至少1.5倍、至少2倍、至少4倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或至少40倍之增加之對該一或多個PAM序列之結合親和力。
- 如請求項77至88中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA之該RNP與SEQ ID NO: 1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP的編輯效率相比展現大至少1.5倍、至少2倍、至少4倍、至少10倍、至少20倍、至少30倍或至少40倍的提高之編輯效率。
- 如請求項77至89中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NOS: 1-3之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA之RNP相比,該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA能夠形成具有高至少約5%、至少約10%、至少約15%,或至少約20%百分比之裂解勝任型構形的RNP。
- 如請求項77至90中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NO: 1-3中之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA的RNP相比,包含該第2類第V型CRISPR及該gRNA之該RNP在定時活體外分析中展現出對該目標核酸高至少約5倍、至少約10倍或至少約20倍之裂解速率。
- 如請求項77至91中任一項之基因編輯對,其中當在可比較的活體外分析系統中評定時,與SEQ ID NO: 1-3中之參考蛋白中之任一者及SEQ ID NO: 4或SEQ ID NO: 5之gRNA的RNP相比,包含該第2類第V型CRISPR及該gRNA之該RNP在定時活體外分析中展現高至少約5倍、至少約l0倍、至少約20倍或至少約100倍之較高的該目標核酸編輯百分比。
- 一種催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表7中所闡述之選自由SEQ NO: 44-62及1232-1235組成之群的序列或與其具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%序列一致性之序列。
- 一種催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含如表7中所闡述之選自由SEQ NO: 44-62及1232-1235組成之群的序列。
- 如請求項93或請求項94之第2類第V型CRISPR蛋白,其中該催化死亡之第2類第V型CRISPR蛋白及如請求項25至28中任一項之gRNA之RNP保留結合目標核酸的能力。
- 一種核酸,其包含編碼如請求項1至24中任一項之gRNA支架或如請求項25至28中任一項之gRNA的序列。
- 一種核酸,其包含編碼如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白的序列。
- 如請求項97之核酸,其中編碼該第2類第V型CRISPR蛋白之序列經密碼子最佳化以表現於真核細胞中。
- 一種載體,其包含如請求項25至28中任一項之gRNA、如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白或如請求項96至98中任一項之核酸。
- 如請求項99之載體,其中該載體包含啟動子。
- 如請求項99或請求項100之載體,其中該載體係選自由以下組成之群:反轉錄病毒載體、慢病毒載體、腺病毒載體、腺相關病毒(AAV)載體、單純疱疹病毒(HSV)載體、CasX遞送粒子(XDP)、質體、微型環、奈米質體、DNA載體及RNA載體。
- 如請求項101之載體,其中該病毒載體為AAV載體。
- 如請求項102之載體,其中該AAV載體係選自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV-Rh74或AAVRh10。
- 如請求項101之載體,其中該載體係反轉錄病毒載體。
- 如請求項101之載體,其中該載體為包含gag多聚蛋白之一或多種組分的XDP。
- 如請求項105之載體,其中該gag多聚蛋白之一或多種組分係選自由以下組成之群:基質蛋白(MA)、核衣殼蛋白(NC)、衣殼蛋白(CA)、p1肽、p6肽、P2A肽、P2B肽、P10肽、p12肽、PP21/24肽、P12/P3/P8肽、P20肽及蛋白酶裂解位點。
- 如請求項105或請求項106之載體,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA在RNP中締合在一起。
- 如請求項105至107中任一項之載體,其包含醣蛋白向性因子。
- 如請求項108之載體,其中該醣蛋白向性因子對目標細胞之細胞表面標誌物具有結合親和力且促進該XDP進入該目標細胞中。
- 如請求項99至109中任一項之載體,其包含供體模板。
- 一種宿主細胞,其包含如請求項99至110中任一項之載體。
- 如請求項111之宿主細胞,其中該宿主細胞係選自由以下組成之群:嬰兒倉鼠腎纖維母細胞(BHK)細胞、人類胚胎腎293 (HEK293)細胞、人類胚胎腎293T (HEK293T)細胞、NS0細胞、SP2/0細胞、YO骨髓瘤細胞、P3X63小鼠骨髓瘤細胞、PER細胞、PER.C6細胞、融合瘤細胞、NIH3T3細胞、起點具有SV40基因物質之CV-1 (猿猴)(COS)細胞、HeLa、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或酵母細胞。
- 一種修飾細胞中之目標核酸之方法,其包含使該細胞之該目標核酸與以下接觸:i)如請求項76至92中任一項之基因編輯對;ii)如請求項76至92中任一項之基因編輯對以及供體模板;iii)一或多個編碼(i)或(ii)之該基因編輯對之核酸;iv)包含(iii)之該核酸之載體;v)包含(i)或(ii)之該基因編輯對之XDP;或vi) (i)至(v)中之兩者或更多者之組合,其中該目標核酸之該接觸修飾該目標核酸。
- 如請求項113之方法,其包含使該目標與包含第一及第二或複數個gRNA之複數個基因編輯對接觸,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
- 如請求項113之方法,其包含使該目標與複數個編碼基因編輯對之核酸接觸,該等基因編輯對包含第一及第二或複數個gRNA,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
- 如請求項113之方法,其包含使該目標與包含基因編輯對之複數個XDP接觸,該等基因編輯對包含第一及第二或複數個gRNA,該等gRNA包含與該目標核酸之不同或重疊區域互補之靶向序列。
- 如請求項113之方法,其中該接觸包含使該目標核酸與該基因編輯對結合及在該目標核酸中引入一或多個單股斷裂,其中該修飾包含在該目標核酸中引入突變、插入或缺失。
- 如請求項113至116中任一項之方法,其中該接觸包含結合該目標核酸及在該目標核酸中引入一或多個雙股斷裂,其中該修飾包含在該目標核酸中引入突變、插入或缺失。
- 如請求項113至118中任一項之方法,其包含使該目標核酸與供體模板核酸之核苷酸序列接觸,其中該供體模板包含與該目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項119之方法,其中該供體模板包含該供體模板之5'及3'端上之同源臂。
- 如請求項119或請求項120之方法,其中該供體模板藉由同源定向修復在該斷裂位點處插入該目標核酸中。
- 如請求項121之方法,其中該供體模板藉由非同源末端連接(NHEJ)或微同源末端連接(MMEJ)在該斷裂位點處插入該目標核酸中。
- 如請求項113至122中任一項之方法,其中該細胞之修飾發生在活體外。
- 如請求項113至122中任一項之方法,其中該細胞之修飾發生在活體內。
- 如請求項113至124中任一項之方法,其中該細胞為真核細胞。
- 如請求項125之方法,其中該真核細胞係選自由以下組成之群:嚙齒動物細胞、小鼠細胞、大鼠細胞、靈長類動物細胞及非人類靈長類動物細胞。
- 如請求項125之方法,其中該真核細胞為人類細胞。
- 如請求項113至127中任一項之方法,其中該細胞係選自由以下組成之群:胚胎幹細胞、誘導性多潛能幹細胞、生殖細胞、纖維母細胞、寡樹突神經膠質細胞、膠細胞、造血幹細胞、神經元先驅細胞、神經元、肌細胞、骨細胞、肝細胞、胰臟細胞、視網膜細胞、癌細胞、T細胞、B細胞、NK細胞、胎兒心肌細胞、肌纖維母細胞、間葉系幹細胞、自體移植擴增心肌細胞、脂肪細胞、分化全能細胞、多潛能細胞、血液幹細胞、肌母細胞、成體幹細胞、骨髓細胞、間葉細胞、實質細胞、上皮細胞、內皮細胞、間皮細胞、纖維母細胞、骨母細胞、軟骨細胞、外源細胞、內源細胞、幹細胞、造血幹細胞、骨髓衍生之先驅細胞、心肌細胞、骨骼細胞、胎兒細胞、未分化細胞、多潛能先驅細胞、單潛能先驅細胞、單核球、心肌母細胞、骨骼肌母細胞、巨噬細胞、毛細管內皮細胞、異種細胞、同種異體細胞、自體細胞或產後幹細胞。
- 如請求項124至128中任一項之方法,其中該細胞在個體中。
- 如請求項129之方法,其中該修飾發生於基因之對偶基因中具有突變的該個體之該細胞中,其中該突變在該個體中引起疾病或病症。
- 如請求項130之方法,其中該修飾將該突變變為該基因之野生型對偶基因或引起功能性基因產物之表現。
- 如請求項130之方法,其中該修飾減弱或剔除引起該個體中之該疾病或病症之該基因的該對偶基因。
- 如請求項129至132中任一項之方法,其中該細胞相對於該個體為自體的。
- 如請求項129至132中任一項之方法,其中該細胞相對於該個體為同種異體自體的。
- 如請求項113至134中任一項之方法,其中該載體為腺相關病毒(AAV)載體。
- 如請求項135之方法,其中該AAV為AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV-Rh74或AAVRh10。
- 如請求項113之方法,其中該載體為慢病毒載體。
- 如請求項113至137中任一項之方法,其中該載體係使用治療有效劑量向有需要之個體投與。
- 如請求項138之方法,其中該個體係選自由小鼠、大鼠、豬及非人類靈長類動物組成之群。
- 如請求項138之方法,其中該個體為人類。
- 如請求項138至140中任一項之方法,其中該載體以至少約1×10 5載體基因體/kg (vg/kg)、至少約1×10 6vg/kg、至少約1×10 7vg/kg、至少約1×10 8vg/kg、至少約1×10 9vg/kg、至少約1×10 10vg/kg、至少約1×10 11vg/kg、至少約1×10 12vg/kg、至少約1×10 13vg/kg、至少約1×10 14vg/kg、至少約1×10 15vg/kg或至少約1×10 16vg/kg之劑量向該個體投與。
- 如請求項138至140中任一項之方法,其中該載體以至少約1×10 5vg/kg至約1×10 16vg/kg、至少約1×10 6vg/kg至約1×10 15vg/kg、或至少約1×10 7vg/kg至約1×10 14vg/kg之劑量向該個體投與。
- 如請求項113之方法,其中該載體為XDP。
- 如請求項143之方法,其中該XDP係使用治療有效劑量向該個體投與。
- 如請求項144之方法,其中該XDP以至少約1×10 5個粒子/公斤、至少約1×10 6個粒子/公斤、至少約1×10 7個粒子/公斤、至少約1×10 8個粒子/公斤、至少約1×10 9個粒子/公斤、至少約1×10 10個粒子/公斤、至少約1×10 11個粒子/公斤、至少約1×10 12個粒子/公斤、至少約1×10 13個粒子/公斤、至少約1×10 14個粒子/公斤、至少約1×10 15個粒子/公斤、至少約1×10 16個粒子/公斤之劑量向該個體投與。
- 如請求項143之方法,其中該XDP係以至少約1×10 5個粒子/公斤至約1×10 16個粒子/公斤、或至少約1×10 6個粒子/公斤至約1×10 15個粒子/公斤、或至少約1×10 7個粒子/公斤至約1×10 14個粒子/公斤之劑量向該個體投與。
- 如請求項138至146中任一項之方法,其中該載體係藉由選自由以下組成之群的投與途徑投與:腦實質內、靜脈內、動脈內、腦室內、腦池內、鞘內、顱內及腹膜內途徑,其中投與方法為注射、輸注或植入。
- 如請求項141至147中任一項之方法,其中該載體係根據包含一或多個連續劑量之治療方案,使用治療有效劑量之該載體向該個體投與。
- 如請求項148之方法,其中該治療有效劑量係以經至少兩週、或至少一個月、或至少兩個月、或至少三個月、或至少四個月、或至少五個月、或至少六個月、或一年一次、或每2或3年之時段向該個體投與兩次或兩次以上劑量。
- 一種細胞,其包含經如請求項76至92中任一項之基因編輯對修飾之目標核酸。
- 一種細胞,其藉由如請求項113至149中任一項之方法編輯。
- 如請求項150或151之細胞,其中該細胞為原核細胞。
- 如請求項150或151之細胞,其中該細胞為真核細胞。
- 如請求項153之方法,其中該真核細胞係選自由以下組成之群:嚙齒動物細胞、小鼠細胞、大鼠細胞、靈長類動物細胞及非人類靈長類動物細胞。
- 如請求項153之細胞,其中該真核細胞為人類細胞。
- 一種組合物,其包含如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
- 如請求項156之組合物,其包含如請求項25至28中任一項之gRNA。
- 如請求項157之組合物,其中該蛋白質及該gRNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
- 如請求項156至158中任一項之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項156至159中任一項之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種組合物,其包含如請求項1至24中任一項之gRNA支架或如請求項25至28中任一項之gRNA。
- 如請求項161之組合物,其包含如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
- 如請求項162之組合物,其中該第2類第V型CRISPR蛋白及該gRNA在核糖核蛋白複合物(RNP)中締合在一起。
- 如請求項161至163中任一項之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項161至164中任一項之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種組合物,其包含如請求項76至92中任一項之基因編輯對。
- 如請求項166之組合物,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項166或請求項167之組合物,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種套組,其包含如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白及容器。
- 如請求項169之套組,其包含如請求項1至24中任一項之gRNA支架或如請求項25至28中任一項之gRNA。
- 如請求項169或請求項170之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸之目標核酸序列具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項169至171中任一項之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種套組,其包含如請求項1至24中任一項之gRNA支架或如請求項25至28中任一項之gRNA。
- 如請求項173之套組,其包含如請求項29至75中任一項之第2類第V型CRISPR蛋白。
- 如請求項173或請求項174之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸之目標核酸序列具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項173至175中任一項之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種套組,其包含如請求項76至92中任一項之基因編輯對。
- 如請求項177之套組,其包含供體模板核酸,其中該供體模板包含與目標核酸具有同源性之核苷酸序列。
- 如請求項177或178之套組,其包含緩衝劑、核酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、脂質體、治療劑、標記、標記觀測試劑或前述之任何組合。
- 一種工程化之第2類第V型CRISPR蛋白,其包含表3中所列之序列中之任一者。
- 一種gRNA,其包含表2中所列之gRNA支架變異體序列中之任一者。
- 如請求項181之gRNA,其中表2序列之gRNA支架變異體之一或多個尿嘧啶(U)經胸腺嘧啶(T)置換。
- 如請求項182之gRNA,其包含與目標核酸互補之至少10至30個核苷酸之靶向序列。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有20個核苷酸。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有19個核苷酸。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有18個核苷酸。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有17個核苷酸。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有16個核苷酸。
- 如請求項183之gRNA,其中該靶向序列具有15個核苷酸。
- 一種治療有需要之個體中之疾病的方法,其包含向該個體投與治療有效量之組合物,該組合物包含:(a)如請求項29至75及180中任一項之工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及(b)如請求項25至28及181至189中任一項之gRNA。
- 一種組合物,其包含:(a)如請求項29至75及180中任一項之工程化之第2類第V型CRISPR蛋白及(b)如請求項25至28及181至189中任一項之gRNA,其用作治療患有疾病之個體的藥物。
Applications Claiming Priority (6)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US202063121196P | 2020-12-03 | 2020-12-03 | |
US63/121,196 | 2020-12-03 | ||
US202163162346P | 2021-03-17 | 2021-03-17 | |
US63/162,346 | 2021-03-17 | ||
US202163208855P | 2021-06-09 | 2021-06-09 | |
US63/208,855 | 2021-06-09 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW202237836A true TW202237836A (zh) | 2022-10-01 |
Family
ID=80050633
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW110145073A TW202237836A (zh) | 2020-12-03 | 2021-12-02 | 工程化之第2類第v型crispr系統 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20240026385A1 (zh) |
EP (1) | EP4256054A1 (zh) |
JP (1) | JP2023552374A (zh) |
KR (1) | KR20230128289A (zh) |
AU (1) | AU2021392719A1 (zh) |
CA (1) | CA3201258A1 (zh) |
CL (1) | CL2023001594A1 (zh) |
GB (1) | GB2616584A (zh) |
MX (1) | MX2023006566A (zh) |
PE (1) | PE20231178A1 (zh) |
TW (1) | TW202237836A (zh) |
WO (1) | WO2022120095A1 (zh) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2600274A (en) | 2019-06-07 | 2022-04-27 | Scribe Therapeutics Inc | Engineered CasX systems |
US20230033866A1 (en) | 2019-12-06 | 2023-02-02 | Scribe Therapeutics Inc. | Compositions and methods for the targeting of rhodopsin |
WO2022261150A2 (en) | 2021-06-09 | 2022-12-15 | Scribe Therapeutics Inc. | Particle delivery systems |
IL311610A (en) | 2021-09-21 | 2024-05-01 | Scribe Therapeutics Inc | Engineered CASX suppressor systems |
WO2023235818A2 (en) | 2022-06-02 | 2023-12-07 | Scribe Therapeutics Inc. | Engineered class 2 type v crispr systems |
WO2023235888A2 (en) | 2022-06-03 | 2023-12-07 | Scribe Therapeutics Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR CpG DEPLETION |
WO2023240027A1 (en) | 2022-06-07 | 2023-12-14 | Scribe Therapeutics Inc. | Particle delivery systems |
WO2023240074A1 (en) | 2022-06-07 | 2023-12-14 | Scribe Therapeutics Inc. | Compositions and methods for the targeting of pcsk9 |
WO2023240076A1 (en) | 2022-06-07 | 2023-12-14 | Scribe Therapeutics Inc. | Compositions and methods for the targeting of pcsk9 |
WO2023240162A1 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Scribe Therapeutics Inc. | Aav vectors for gene editing |
WO2023240157A2 (en) | 2022-06-08 | 2023-12-14 | Scribe Therapeutics Inc. | Compositions and methods for the targeting of dmd |
CN116676291B (zh) * | 2022-08-22 | 2024-02-27 | 华中农业大学 | 核酸内切酶Genie scissor及其介导的基因编辑系统 |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5143854A (en) | 1989-06-07 | 1992-09-01 | Affymax Technologies N.V. | Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof |
US5412087A (en) | 1992-04-24 | 1995-05-02 | Affymax Technologies N.V. | Spatially-addressable immobilization of oligonucleotides and other biological polymers on surfaces |
US5695937A (en) | 1995-09-12 | 1997-12-09 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Method for serial analysis of gene expression |
WO2010075303A1 (en) | 2008-12-23 | 2010-07-01 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Splicing factors with a puf protein rna-binding domain and a splicing effector domain and uses of same |
WO2012068627A1 (en) | 2010-11-24 | 2012-05-31 | The University Of Western Australia | Peptides for the specific binding of rna targets |
WO2017083722A1 (en) | 2015-11-11 | 2017-05-18 | Greenberg Kenneth P | Crispr compositions and methods of using the same for gene therapy |
US11118194B2 (en) | 2015-12-18 | 2021-09-14 | The Regents Of The University Of California | Modified site-directed modifying polypeptides and methods of use thereof |
AU2017335890B2 (en) * | 2016-09-30 | 2024-05-09 | The Regents Of The University Of California | RNA-guided nucleic acid modifying enzymes and methods of use thereof |
WO2018195555A1 (en) | 2017-04-21 | 2018-10-25 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Crispr/cas 9-mediated integration of polynucleotides by sequential homologous recombination of aav donor vectors |
WO2019084148A1 (en) * | 2017-10-25 | 2019-05-02 | Monsanto Technology Llc | TARGETED RNA GUIDED ENDONUCLEASE ENDONUCLEASE ACTIVITY IN EUKARYOTES |
US20210309981A1 (en) * | 2018-08-22 | 2021-10-07 | Junjie Liu | Variant type v crispr/cas effector polypeptides and methods of use thereof |
GB2600274A (en) | 2019-06-07 | 2022-04-27 | Scribe Therapeutics Inc | Engineered CasX systems |
WO2020247883A2 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | Scribe Therapeutics Inc. | Deep mutational evolution of biomolecules |
AU2020398658A1 (en) * | 2019-12-06 | 2022-07-07 | Scribe Therapeutics Inc. | Particle delivery systems |
EP4069846A1 (en) * | 2019-12-07 | 2022-10-12 | Scribe Therapeutics Inc. | Compositions and methods for the targeting of htt |
MX2022011460A (es) * | 2020-03-18 | 2022-12-15 | Scribe Therapeutics Inc | Composiciones y métodos para el direccionamiento de c9orf72. |
-
2021
- 2021-12-02 PE PE2023001812A patent/PE20231178A1/es unknown
- 2021-12-02 CA CA3201258A patent/CA3201258A1/en active Pending
- 2021-12-02 JP JP2023533837A patent/JP2023552374A/ja active Pending
- 2021-12-02 US US18/039,858 patent/US20240026385A1/en active Pending
- 2021-12-02 EP EP21848320.4A patent/EP4256054A1/en active Pending
- 2021-12-02 TW TW110145073A patent/TW202237836A/zh unknown
- 2021-12-02 MX MX2023006566A patent/MX2023006566A/es unknown
- 2021-12-02 AU AU2021392719A patent/AU2021392719A1/en active Pending
- 2021-12-02 GB GB2309876.7A patent/GB2616584A/en active Pending
- 2021-12-02 WO PCT/US2021/061673 patent/WO2022120095A1/en active Application Filing
- 2021-12-02 KR KR1020237022313A patent/KR20230128289A/ko unknown
-
2022
- 2022-01-10 US US17/572,208 patent/US20230054437A1/en active Pending
-
2023
- 2023-06-02 CL CL2023001594A patent/CL2023001594A1/es unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2023552374A (ja) | 2023-12-15 |
US20230054437A1 (en) | 2023-02-23 |
GB2616584A (en) | 2023-09-13 |
CL2023001594A1 (es) | 2024-01-05 |
MX2023006566A (es) | 2023-08-07 |
PE20231178A1 (es) | 2023-08-01 |
US20240026385A1 (en) | 2024-01-25 |
KR20230128289A (ko) | 2023-09-04 |
AU2021392719A1 (en) | 2023-06-22 |
CA3201258A1 (en) | 2022-06-09 |
WO2022120095A1 (en) | 2022-06-09 |
GB202309876D0 (en) | 2023-08-16 |
EP4256054A1 (en) | 2023-10-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TW202237836A (zh) | 工程化之第2類第v型crispr系統 | |
US11560555B2 (en) | Engineered proteins | |
JP2022188070A (ja) | CRISPR関連方法および支配gRNAのある組成物 | |
US11976277B2 (en) | Particle delivery systems | |
US20240026386A1 (en) | Compositions and methods for the targeting of bcl11a | |
CA3201392A1 (en) | Aav vectors for gene editing | |
WO2023141602A2 (en) | Engineered retrons and methods of use | |
US20240016934A1 (en) | Compositions and Methods for Reducing MHC Class II in a Cell | |
CA3153563A1 (en) | Novel crispr enzymes, methods, systems and uses thereof | |
WO2022204268A2 (en) | Novel crispr enzymes, methods, systems and uses thereof | |
CN117120607A (zh) | 工程化2类v型crispr系统 | |
US20230405116A1 (en) | Vectors, systems and methods for eukaryotic gene editing | |
IL303360A (en) | CRISPR systems engineered class 2 V type | |
TW202413631A (zh) | 用於基因體編輯之組成物及方法 | |
WO2023137233A2 (en) | Compositions and methods for editing genomes | |
WO2024081383A2 (en) | Compositions and methods for targeting, editing, or modifying genes |